FI115953B - Stabiileja mikrokuplasuspensioita vahvistusaineiksi ultraäänikaikukuvausta varten - Google Patents
Stabiileja mikrokuplasuspensioita vahvistusaineiksi ultraäänikaikukuvausta varten Download PDFInfo
- Publication number
- FI115953B FI115953B FI943167A FI943167A FI115953B FI 115953 B FI115953 B FI 115953B FI 943167 A FI943167 A FI 943167A FI 943167 A FI943167 A FI 943167A FI 115953 B FI115953 B FI 115953B
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- gas
- microbubbles
- phospholipids
- surfactant
- microbubble
- Prior art date
Links
- 239000000725 suspension Substances 0.000 title claims abstract description 87
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 title claims description 18
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 title claims description 10
- 239000012744 reinforcing agent Substances 0.000 title 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 claims abstract description 104
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 31
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 26
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 claims abstract description 16
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 15
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 12
- 239000008365 aqueous carrier Substances 0.000 claims abstract description 9
- 239000002872 contrast media Substances 0.000 claims abstract description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 47
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 claims description 45
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 20
- 239000002502 liposome Substances 0.000 claims description 19
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 claims description 15
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 12
- DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N Tert-Butanol Chemical group CC(C)(C)O DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- -1 disethylphosphate Chemical compound 0.000 claims description 11
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 claims description 11
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 10
- 239000000654 additive Substances 0.000 claims description 8
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 claims description 8
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims description 8
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 8
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 7
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 7
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 claims description 7
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 claims description 7
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 claims description 7
- PORPENFLTBBHSG-MGBGTMOVSA-N 1,2-dihexadecanoyl-sn-glycerol-3-phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC PORPENFLTBBHSG-MGBGTMOVSA-N 0.000 claims description 6
- MSXVEPNJUHWQHW-UHFFFAOYSA-N 2-methylbutan-2-ol Chemical compound CCC(C)(C)O MSXVEPNJUHWQHW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 6
- GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N d-alpha-tocopherol Natural products OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 150000003905 phosphatidylinositols Chemical class 0.000 claims description 6
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 claims description 6
- 235000010384 tocopherol Nutrition 0.000 claims description 6
- 229960001295 tocopherol Drugs 0.000 claims description 6
- 229930003799 tocopherol Natural products 0.000 claims description 6
- 239000011732 tocopherol Substances 0.000 claims description 6
- GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N α-tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N 0.000 claims description 6
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 claims description 5
- ATBOMIWRCZXYSZ-XZBBILGWSA-N [1-[2,3-dihydroxypropoxy(hydroxy)phosphoryl]oxy-3-hexadecanoyloxypropan-2-yl] (9e,12e)-octadeca-9,12-dienoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(=O)OCC(O)CO)OC(=O)CCCCCCC\C=C\C\C=C\CCCCC ATBOMIWRCZXYSZ-XZBBILGWSA-N 0.000 claims description 5
- AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N alpha-glycerophosphate Natural products OCC(O)COP(O)(O)=O AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N phosphatidylcholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N 0.000 claims description 5
- 230000004044 response Effects 0.000 claims description 5
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N Glycolic acid Chemical compound OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 claims description 4
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 4
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 claims description 4
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 claims description 4
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 claims description 4
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 claims description 4
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 claims description 4
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 claims description 4
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 4
- JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylethanolamin Natural products NCCOP(O)(=O)OCC(O)CO JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 claims description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 claims description 3
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 claims description 3
- 150000008104 phosphatidylethanolamines Chemical class 0.000 claims description 3
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 claims description 3
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 claims description 3
- 238000000527 sonication Methods 0.000 claims description 3
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 claims description 3
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 claims description 3
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 claims description 3
- 238000003860 storage Methods 0.000 claims description 3
- KZJWDPNRJALLNS-VPUBHVLGSA-N (-)-beta-Sitosterol Natural products O[C@@H]1CC=2[C@@](C)([C@@H]3[C@H]([C@H]4[C@@](C)([C@H]([C@H](CC[C@@H](C(C)C)CC)C)CC4)CC3)CC=2)CC1 KZJWDPNRJALLNS-VPUBHVLGSA-N 0.000 claims description 2
- CSVWWLUMXNHWSU-UHFFFAOYSA-N (22E)-(24xi)-24-ethyl-5alpha-cholest-22-en-3beta-ol Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)C=CC(CC)C(C)C)C1(C)CC2 CSVWWLUMXNHWSU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- OILXMJHPFNGGTO-UHFFFAOYSA-N (22E)-(24xi)-24-methylcholesta-5,22-dien-3beta-ol Natural products C1C=C2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)C=CC(C)C(C)C)C1(C)CC2 OILXMJHPFNGGTO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- RQOCXCFLRBRBCS-UHFFFAOYSA-N (22E)-cholesta-5,7,22-trien-3beta-ol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)C=CCC(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 RQOCXCFLRBRBCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N (S)-malic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 2
- KLEXDBGYSOIREE-UHFFFAOYSA-N 24xi-n-propylcholesterol Natural products C1C=C2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)CCC(CCC)C(C)C)C1(C)CC2 KLEXDBGYSOIREE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- OQMZNAMGEHIHNN-UHFFFAOYSA-N 7-Dehydrostigmasterol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)C=CC(CC)C(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 OQMZNAMGEHIHNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- LPZCCMIISIBREI-MTFRKTCUSA-N Citrostadienol Natural products CC=C(CC[C@@H](C)[C@H]1CC[C@H]2C3=CC[C@H]4[C@H](C)[C@@H](O)CC[C@]4(C)[C@H]3CC[C@]12C)C(C)C LPZCCMIISIBREI-MTFRKTCUSA-N 0.000 claims description 2
- ARVGMISWLZPBCH-UHFFFAOYSA-N Dehydro-beta-sitosterol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)CCC(CC)C(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 ARVGMISWLZPBCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- DNVPQKQSNYMLRS-NXVQYWJNSA-N Ergosterol Natural products CC(C)[C@@H](C)C=C[C@H](C)[C@H]1CC[C@H]2C3=CC=C4C[C@@H](O)CC[C@]4(C)[C@@H]3CC[C@]12C DNVPQKQSNYMLRS-NXVQYWJNSA-N 0.000 claims description 2
- BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N alpha-hydroxysuccinic acid Natural products OC(=O)C(O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- MJVXAPPOFPTTCA-UHFFFAOYSA-N beta-Sistosterol Natural products CCC(CCC(C)C1CCC2C3CC=C4C(C)C(O)CCC4(C)C3CCC12C)C(C)C MJVXAPPOFPTTCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- LGJMUZUPVCAVPU-UHFFFAOYSA-N beta-Sitostanol Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)CCC(CC)C(C)C)C1(C)CC2 LGJMUZUPVCAVPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- NJKOMDUNNDKEAI-UHFFFAOYSA-N beta-sitosterol Natural products CCC(CCC(C)C1CCC2(C)C3CC=C4CC(O)CCC4C3CCC12C)C(C)C NJKOMDUNNDKEAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 claims description 2
- 238000000576 coating method Methods 0.000 claims description 2
- DNVPQKQSNYMLRS-SOWFXMKYSA-N ergosterol Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@H](CC[C@]3([C@H]([C@H](C)/C=C/[C@@H](C)C(C)C)CC[C@H]33)C)C3=CC=C21 DNVPQKQSNYMLRS-SOWFXMKYSA-N 0.000 claims description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000004676 glycans Polymers 0.000 claims description 2
- 235000011090 malic acid Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000001630 malic acid Substances 0.000 claims description 2
- 125000001095 phosphatidyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 claims description 2
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 claims description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 2
- KZJWDPNRJALLNS-VJSFXXLFSA-N sitosterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CC[C@@H](CC)C(C)C)[C@@]1(C)CC2 KZJWDPNRJALLNS-VJSFXXLFSA-N 0.000 claims description 2
- 229950005143 sitosterol Drugs 0.000 claims description 2
- NLQLSVXGSXCXFE-UHFFFAOYSA-N sitosterol Natural products CC=C(/CCC(C)C1CC2C3=CCC4C(C)C(O)CCC4(C)C3CCC2(C)C1)C(C)C NLQLSVXGSXCXFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 235000015500 sitosterol Nutrition 0.000 claims description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 2
- 229940102213 injectable suspension Drugs 0.000 claims 11
- 229920001477 hydrophilic polymer Polymers 0.000 claims 3
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 claims 3
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 claims 3
- XPCTZQVDEJYUGT-UHFFFAOYSA-N 3-hydroxy-2-methyl-4-pyrone Chemical compound CC=1OC=CC(=O)C=1O XPCTZQVDEJYUGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 claims 2
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 claims 2
- BQPPJGMMIYJVBR-UHFFFAOYSA-N (10S)-3c-Acetoxy-4.4.10r.13c.14t-pentamethyl-17c-((R)-1.5-dimethyl-hexen-(4)-yl)-(5tH)-Delta8-tetradecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren Natural products CC12CCC(OC(C)=O)C(C)(C)C1CCC1=C2CCC2(C)C(C(CCC=C(C)C)C)CCC21C BQPPJGMMIYJVBR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- CHGIKSSZNBCNDW-UHFFFAOYSA-N (3beta,5alpha)-4,4-Dimethylcholesta-8,24-dien-3-ol Natural products CC12CCC(O)C(C)(C)C1CCC1=C2CCC2(C)C(C(CCC=C(C)C)C)CCC21 CHGIKSSZNBCNDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- XYTLYKGXLMKYMV-UHFFFAOYSA-N 14alpha-methylzymosterol Natural products CC12CCC(O)CC1CCC1=C2CCC2(C)C(C(CCC=C(C)C)C)CCC21C XYTLYKGXLMKYMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- DJMUYABFXCIYSC-UHFFFAOYSA-N 1H-phosphole Chemical compound C=1C=CPC=1 DJMUYABFXCIYSC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- FPTJELQXIUUCEY-UHFFFAOYSA-N 3beta-Hydroxy-lanostan Natural products C1CC2C(C)(C)C(O)CCC2(C)C2C1C1(C)CCC(C(C)CCCC(C)C)C1(C)CC2 FPTJELQXIUUCEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000004322 Butylated hydroxytoluene Substances 0.000 claims 1
- NLZUEZXRPGMBCV-UHFFFAOYSA-N Butylhydroxytoluene Chemical compound CC1=CC(C(C)(C)C)=C(O)C(C(C)(C)C)=C1 NLZUEZXRPGMBCV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- BKLIAINBCQPSOV-UHFFFAOYSA-N Gluanol Natural products CC(C)CC=CC(C)C1CCC2(C)C3=C(CCC12C)C4(C)CCC(O)C(C)(C)C4CC3 BKLIAINBCQPSOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- QAQJMLQRFWZOBN-LAUBAEHRSA-N L-ascorbyl-6-palmitate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O QAQJMLQRFWZOBN-LAUBAEHRSA-N 0.000 claims 1
- 239000011786 L-ascorbyl-6-palmitate Substances 0.000 claims 1
- LOPKHWOTGJIQLC-UHFFFAOYSA-N Lanosterol Natural products CC(CCC=C(C)C)C1CCC2(C)C3=C(CCC12C)C4(C)CCC(C)(O)C(C)(C)C4CC3 LOPKHWOTGJIQLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- HYMLWHLQFGRFIY-UHFFFAOYSA-N Maltol Natural products CC1OC=CC(=O)C1=O HYMLWHLQFGRFIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- CAHGCLMLTWQZNJ-UHFFFAOYSA-N Nerifoliol Natural products CC12CCC(O)C(C)(C)C1CCC1=C2CCC2(C)C(C(CCC=C(C)C)C)CCC21C CAHGCLMLTWQZNJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 claims 1
- 235000010385 ascorbyl palmitate Nutrition 0.000 claims 1
- 235000010354 butylated hydroxytoluene Nutrition 0.000 claims 1
- 229940095259 butylated hydroxytoluene Drugs 0.000 claims 1
- QBSJHOGDIUQWTH-UHFFFAOYSA-N dihydrolanosterol Natural products CC(C)CCCC(C)C1CCC2(C)C3=C(CCC12C)C4(C)CCC(C)(O)C(C)(C)C4CC3 QBSJHOGDIUQWTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- ZGSPNIOCEDOHGS-UHFFFAOYSA-L disodium [3-[2,3-di(octadeca-9,12-dienoyloxy)propoxy-oxidophosphoryl]oxy-2-hydroxypropyl] 2,3-di(octadeca-9,12-dienoyloxy)propyl phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].CCCCCC=CCC=CCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCC=CCC=CCCCCC)COP([O-])(=O)OCC(O)COP([O-])(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCC=CCC=CCCCCC)COC(=O)CCCCCCCC=CCC=CCCCCC ZGSPNIOCEDOHGS-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims 1
- 239000000428 dust Substances 0.000 claims 1
- 239000002198 insoluble material Substances 0.000 claims 1
- CAHGCLMLTWQZNJ-RGEKOYMOSA-N lanosterol Chemical compound C([C@]12C)C[C@@H](O)C(C)(C)[C@H]1CCC1=C2CC[C@]2(C)[C@H]([C@H](CCC=C(C)C)C)CC[C@@]21C CAHGCLMLTWQZNJ-RGEKOYMOSA-N 0.000 claims 1
- 229940058690 lanosterol Drugs 0.000 claims 1
- 229940043353 maltol Drugs 0.000 claims 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims 1
- 229920001515 polyalkylene glycol Polymers 0.000 claims 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims 1
- 150000004804 polysaccharides Polymers 0.000 claims 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 claims 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 claims 1
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims 1
- 239000002195 soluble material Substances 0.000 claims 1
- 229940067631 phospholipid Drugs 0.000 description 91
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 40
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 27
- LZLVZIFMYXDKCN-QJWFYWCHSA-N 1,2-di-O-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC LZLVZIFMYXDKCN-QJWFYWCHSA-N 0.000 description 17
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 12
- 229910018503 SF6 Inorganic materials 0.000 description 10
- SFZCNBIFKDRMGX-UHFFFAOYSA-N sulfur hexafluoride Chemical compound FS(F)(F)(F)(F)F SFZCNBIFKDRMGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 9
- SORGEQQSQGNZFI-UHFFFAOYSA-N [azido(phenoxy)phosphoryl]oxybenzene Chemical group C=1C=CC=CC=1OP(=O)(N=[N+]=[N-])OC1=CC=CC=C1 SORGEQQSQGNZFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 8
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 8
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 8
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 7
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 6
- 238000010908 decantation Methods 0.000 description 6
- 210000005240 left ventricle Anatomy 0.000 description 6
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 description 6
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 5
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 5
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 5
- NRJAVPSFFCBXDT-HUESYALOSA-N 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC NRJAVPSFFCBXDT-HUESYALOSA-N 0.000 description 4
- BIABMEZBCHDPBV-MPQUPPDSSA-N 1,2-palmitoyl-sn-glycero-3-phospho-(1'-sn-glycerol) Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@@H](O)CO)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC BIABMEZBCHDPBV-MPQUPPDSSA-N 0.000 description 4
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 4
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 4
- 241000714177 Murine leukemia virus Species 0.000 description 4
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 4
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 4
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 4
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 4
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 4
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 4
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 4
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 4
- 210000005241 right ventricle Anatomy 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- KILNVBDSWZSGLL-KXQOOQHDSA-N 1,2-dihexadecanoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC KILNVBDSWZSGLL-KXQOOQHDSA-N 0.000 description 3
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 3
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 3
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 229940039231 contrast media Drugs 0.000 description 3
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 3
- 239000010408 film Substances 0.000 description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 3
- 238000012800 visualization Methods 0.000 description 3
- TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoserine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@H](N)C(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 0.000 description 2
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylserin Natural products OC(=O)C(N)COP(O)(=O)OCC(O)CO ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 2
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 2
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 2
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 2
- 229920001971 elastomer Polymers 0.000 description 2
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 2
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N hexadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000002433 hydrophilic molecules Chemical class 0.000 description 2
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012216 imaging agent Substances 0.000 description 2
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 description 2
- VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N methane Chemical compound C VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002503 polyoxyethylene-polyoxypropylene Polymers 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 2
- 238000000859 sublimation Methods 0.000 description 2
- 230000008022 sublimation Effects 0.000 description 2
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 2
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YKIOPDIXYAUOFN-UHFFFAOYSA-N 2,3-di(icosanoyloxy)propyl 2-(trimethylazaniumyl)ethyl phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCCCC YKIOPDIXYAUOFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M Bicarbonate Chemical compound OC([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 241001655327 Micrococcales Species 0.000 description 1
- 235000021314 Palmitic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920002004 Pluronic® R Polymers 0.000 description 1
- 239000004142 Polyoxypropylene-polyoxyethylene polymer Substances 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000013011 aqueous formulation Substances 0.000 description 1
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000000149 argon plasma sintering Methods 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 238000006664 bond formation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N choline Chemical compound C[N+](C)(C)CCO OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001231 choline Drugs 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- HPXRVTGHNJAIIH-UHFFFAOYSA-N cyclohexanol Chemical compound OC1CCCCC1 HPXRVTGHNJAIIH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001687 destabilization Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 239000002961 echo contrast media Substances 0.000 description 1
- 238000002592 echocardiography Methods 0.000 description 1
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 1
- 230000009881 electrostatic interaction Effects 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- GCFHZZWXZLABBL-UHFFFAOYSA-N ethanol;hexane Chemical compound CCO.CCCCCC GCFHZZWXZLABBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002191 fatty alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 150000002314 glycerols Chemical class 0.000 description 1
- 150000002334 glycols Chemical class 0.000 description 1
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 125000001145 hydrido group Chemical group *[H] 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 125000001165 hydrophobic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 239000005414 inactive ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000007972 injectable composition Substances 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N isomaltotriose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O)O1 FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 230000005923 long-lasting effect Effects 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- VQHSOMBJVWLPSR-WUJBLJFYSA-N maltitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]([C@H](O)CO)O[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O VQHSOMBJVWLPSR-WUJBLJFYSA-N 0.000 description 1
- 239000000845 maltitol Substances 0.000 description 1
- 235000010449 maltitol Nutrition 0.000 description 1
- 229940035436 maltitol Drugs 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 239000011325 microbead Substances 0.000 description 1
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 1
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 239000012452 mother liquor Substances 0.000 description 1
- WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N n-Pentadecanoic acid Natural products CCCCCCCCCCCCCCC(O)=O WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 108010014241 oxypolygelatine Proteins 0.000 description 1
- 229940068004 oxypolygelatine Drugs 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 229920001583 poly(oxyethylated polyols) Polymers 0.000 description 1
- 239000004417 polycarbonate Substances 0.000 description 1
- 229920000515 polycarbonate Polymers 0.000 description 1
- 239000010695 polyglycol Substances 0.000 description 1
- 229920000151 polyglycol Polymers 0.000 description 1
- 235000019338 polyoxypropylene-polyoxyethylene polymer Nutrition 0.000 description 1
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 1
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 230000007425 progressive decline Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000008707 rearrangement Effects 0.000 description 1
- 210000002254 renal artery Anatomy 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 229960000909 sulfur hexafluoride Drugs 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 229920001059 synthetic polymer Polymers 0.000 description 1
- 229910052715 tantalum Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000010409 thin film Substances 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 238000012285 ultrasound imaging Methods 0.000 description 1
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 description 1
- 230000002861 ventricular Effects 0.000 description 1
- 210000001835 viscera Anatomy 0.000 description 1
- 238000009736 wetting Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/22—Echographic preparations; Ultrasound imaging preparations ; Optoacoustic imaging preparations
- A61K49/222—Echographic preparations; Ultrasound imaging preparations ; Optoacoustic imaging preparations characterised by a special physical form, e.g. emulsions, liposomes
- A61K49/225—Microparticles, microcapsules
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/22—Echographic preparations; Ultrasound imaging preparations ; Optoacoustic imaging preparations
- A61K49/222—Echographic preparations; Ultrasound imaging preparations ; Optoacoustic imaging preparations characterised by a special physical form, e.g. emulsions, liposomes
- A61K49/223—Microbubbles, hollow microspheres, free gas bubbles, gas microspheres
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Acoustics & Sound (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Radiology & Medical Imaging (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Surgical Instruments (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Aeration Devices For Treatment Of Activated Polluted Sludge (AREA)
- Physical Or Chemical Processes And Apparatus (AREA)
- Ultra Sonic Daignosis Equipment (AREA)
- Physical Water Treatments (AREA)
- Manufacturing Of Micro-Capsules (AREA)
- Apparatuses For Generation Of Mechanical Vibrations (AREA)
- Colloid Chemistry (AREA)
- Cosmetics (AREA)
- Amplifiers (AREA)
Description
11E553
Stabiileja mikrokuplasuspensioita vahvistusaineiksi ultra-äänikaikukuvausta varten
Tekninen kenttä 5 Keksintö koskee injektoitavissa olevia suspensioi ta, jotka sisältävät kaasulla täytettyjä mikrokuplia vesipitoisessa kantajassa, joka käsittää amfipaattisia yhdisteitä, joista vähintään yksi on fosfolipidistabilointiai-ne, joka estää mikrokuplien kokoonpainumista ajan mittaan 10 ja paineen vaikutuksesta. Fosfolipidistabilointiaine voi olla lamellaarisessa tai laminaarisessa muodossa. Keksintö käsittää myös menetelmän stabiilien mikrokuplasuspensioi-den valmistamiseksi, jotka ovat käyttökelpoisia varjoaineina ultraäänikaikukuvauksessa.
15 Keksinnön tausta
On alalla hyvin tunnettua käyttää kaasumikrokuplien suspensioita kantajanesteessä tehokkaina ultraääntä heijastavina aineina. Mikrokuplasuspensioiden kehittäminen farmaseuttisiksi kaikuaineiksi ultraäänikuvauksen tehosta-20 miseksi seurasi varhaisia havaintoja, joiden mukaan nopeasti annetut laskimonsisäiset injektiot voivat aiheuttaa ; liuenneiden kaasujen poistumista liuoksesta ja kuplien muodostumista. Koska näiden verisuonten sisällä olevien * kaasukuplien akustinen impedanssi on olennaisesti erilai- ' « · 25 nen kuin veren, niiden havaitaan olevan erinomaisia ultraäänen heijastajia. Kantajanesteeseen valmistettujen kaasu-mikrokuplasuspensioiden injektointi elävien organismien •: verenkiertoon vahvistaa voimakkaasti ultraäänikaikukuvaa ja edistää siten sisäelinten visualisointia. Koska elinten : 30 ja syvällä olevien kudosten kuvantaminen voi olla ratkai-
I > t I
sevaa lääketieteellisen diagnoosin tekemisessä, on tehty paljon työtä stabiilien, pitoisuudeltaan suurten kaasumik-rokuplasuspensioiden kehittämiseksi, jotka olisivat saman-aikaisesti yksinkertaisia valmistaa ja antaa, sisältäisi-; 35 vät mahdollisimman vähän inaktiivisia spesieksiä ja olisi- 115953 2 vat pitkäaikaisesti säilyviä ja yksinkertaisesti toimitettavissa. On tehty monia yrityksiä nämä kriteerit täyttävän ratkaisun löytämiseksi, mutta yksikään ei ole antanut täysin tyydyttävää tulosta.
5 EP-hakemusjulkaisun 0 077 752 (Schering) perusteel la on tunnettua, että kaasumikrokuplasuspensioita voidaan valmistaa sekoittamalla pinta-aktiivisuusaineen vesiliuos stabilointiaineena toimivan viskositeettia parantavan aineen liuoksen kanssa. Kaasukuplat tuodaan liuokseen pakot-10 tantalla reagenssien ja ilman seos pienen aukon läpi. C02-mikrokuplasuspensio voidaan valmistaa lisäämällä happoa seokseen, joka saadaan pinta-aktiivisuusainetta ja nat-riumvetykarbonaattia sisältävästä liuoksesta ja viskositeettia parantavan aineen liuoksesta. Komponenttien se-15 koittaminen on kuitenkin tehtävä juuri ennen käyttöä ja liuos on käytettävä/injektoitava välittömästi valmistuksen jälkeen. Esitetyt pinta-aktiivisuusaineet (tensidit) käsittävät lesitiinejä; rasvahappojen ja rasva-alkoholien estereitä ja eettereitä polyoksieteenin ja polyoksietyloi-20 tujen polyolien, kuten sorbitolin, glykolien ja glyserolien ja kolesterolin, kanssa; ja polyoksieteeni-polyoksi-• ‘.(i propeenipolymeerej ä. Suspension esitetty tensidipitoisuus . ,·, on 0,01 - 10 paino-%, ja edullisen alueen väitetään olevan 0,5 - 5 %. Viskositeettia parantaviin ja stabiloiviin yh-... 25 disteisiin kuuluvat esimerkiksi mono- ja polysakkaridit (glukoosi, laktoosi, sakkaroosi, dekstraani, sorbitoli); • polyolit, esimerkiksi glyseroli ja polyglykolit; ja poly- ’·' * peptidit, kuten proteiinit, gelatiini, oksipolygelatiini, plasmaproteiini yms. Viskositeettia parantavan aineen ko-j 30 konaismäärä on rajoitettu alueelle 0,5 - 50 %. On myös : : esitetty polyoksipropeeni-polyoksieteenipolymeerien (esi- < merkiksi Pluronic* F-68) käyttöä viskositeettia parantavana I" aineena. Edullisessa esimerkissä ravistellaan yhtä suuria ;·’ tilavuuksia tensidiä, 0,5 paino-% PluronicR F-68:aa (poly- : ; ; 35 oksipropeeni-polyoksieteenikopolymeeri) sisältävää vesi- 3 115953 liuosta ja viskositeetin parantajaa (10-%:inen laktoosi-liuos) voimakkaasti keskenään steriileissä olosuhteissa, jolloin saadaan mikrokuplasuspensio. Saatu suspensio kesti yli 2 min ja sisälsi lähes 50 % kuplia, joiden koko oli 5 alle 50 pm. Kyseisen julkaisun mukaan voidaan käyttää korkeintaan 50 % pinta-aktiivisuusaineita ja/tai viskositeettia parantavia aineita; erityisesimerkeissä käytetään kuitenkin 1 - 4 % Pluronic" F-68:aa.
Helposti valmistettavia vesisuspensioita, jotka 10 ovat käyttökelpoisia kuvantamisaineina ultraäänikaikuku-vauksessa, esitetään julkaisussa WO-91/15 244 (Schneider et ai.). Nämä suspensiot sisältävät laminaarisessa ja/tai lamellaarisessa muodossa olevia kalvon muodostavia pinta-aktiivisuusaineita ja mahdollisesti hydrofiilisiä stabi-15 lointiaineita. Laminarisoidut pinta-aktiivisuusaineet voivat olla liposomien, ts. mikroskooppisten rakkuloiden muodossa, jotka ovat yleensä pallomaisia. Nämä rakkulat muodostuvat yleensä yhdestä tai useammasta samankeskisesti järjestyneestä kaksimolekyylikerroksesta, jotka koostuvat 20 amfipaattisista yhdisteistä, ts. hydrofiilisen ja hydrofobisen ryhmittymän sisältävistä yhdisteistä. Molekyylit ;·, ovat järjestyneinä kaksoiskerroksissa sillä tavalla, että * . hydrofobiset ryhmittymät ovat vastakkain ja hydrofiiliset ryhmittymät suuntautuvat vesifaasia kohden. Suspensioita ,, 25 saadaan saattamalla laminarisoidut pinta-aktiivisuusaineet * · · ilman tai kaasun vaikutuksen alaisiksi ennen sekoittamistaan vesifaasin kanssa tai sen jälkeen. Kalvon muodosta-ν’ ·' vien pinta-aktiivisuusaineiden muuttaminen lamellaariseen muotoon tehdään erilaisin liposominmuodostusmenetelmin, i :: 30 mukaan luettuna korkeapainehomogenointi tai äänikäsittely akustisilla tai ultraäänitaajuuksilla. Patenttivaatimusten mukainen fosfolipidipitoisuus on 0,01 - 20 % ja mikrokup-;;; lapitoisuus 108 - 109 kuplaa/ml. Nämä mikrokuplasuspensiot pysyivät stabiileina kuukausia. Fosfolipidipitoisuus on : 35 0,5 % esimerkissä 1.
4 1155-53
Julkaisussa WO-92/11 873 (Beller et ai. ) esitetään yksi yritys stabiilin, kaiun synnyttävän suspension aikaansaamiseksi. Vesivalmisteita, jotka on suunniteltu absorboimaan ja stabiloimaan kaikukuvausvarjoaineena käytet-5 täviksi tarkoitettuja mikrokuplia, valmistetaan käyttämällä polyoksieteeni-polyoksipropeenipolymeerejä ja negatiivisesti varautuneita fosfolipidejä, kuten fosfatidyyligly-serolia, fosfatidyyli-inositolia, fosfatidyylietanoliamii-nia, fosfatidyyliseriiniä samoin kuin niiden lysomuotoja. 10 Valmisteiden fosfolipidipitoisuus voi olla alueella 0,01 -5 til-% tai paino-%; erityisesti esitettyjä ja patenttivaatimusten mukaisia ovat kuitenkin valmisteet, jotka sisältävät 1 % dipalmitoyylifosfatidyyliglyserolia (DPPG). Negatiivisesti varautuneiden fosfolipidien lisäksi koostu-15 musten täytyy sisältää 0,1 - 10 % polymeeristä materiaalia (PluronicR F-68). Liuenneiden aineiden kokonaisosuus on näissä valmisteissa 5,1 - 10,4 %. Mikrokuplapitoisuutta ei ilmoiteta; annettujen tulosten mukaan sen voidaan kuitenkin arvioida olevan noin 107 kuplaa/ml. Suspensioiden sta-20 biiliuden ilmoitetaan olevan parempi kuin EP-hakemusjulkaisun 0 077 752 mukaisen suspension.
Vaikka tekniikan tasoa vastaavilla koostumuksilla , on etunsa, ne kärsivät silti muutamista epäkohdista, jotka haittavat niiden käyttöä. Joillakin tekniikan tasoa vas-25 taavilla koostumuksilla on ensinnäkin suhteellisen lyhyt : ·’ elinikä ja toiseksi niiden lähtökuplaluku on suhteellisen alhainen, esimerkiksi 104 - 105 kuplaa/ml. Tämä tekee mai-v : nitunlaisilla koostumuksilla tehtyjen kaikukuvaustestien toistamisen ja analysoinnin melko vaikeaksi. Lisäksi jot-: 30 kut menetelmät antavat tulokseksi kuplia, joiden läpimitta vaihtelee laajalla alueella (50 pm;iin asti), mikä estää niiden käytön kaikukuvausaineina tietyissä sovelluksissa (esimerkiksi sydämen vasemman puoliskon kaikukuvauksessa). *··* Tarvetta saada aikaan stabiileja mikrokuplaformu- 35 loita, jotka kestävät verenkierrossa esiintyviä paineen- 5 115953 vaihteluita ja joilla on hyvä säilyvyys, lisää edelleen joidenkin tekniikan tasoa vastaavien koostumusten heikko stabiilius. Mikrokuplaformulat, joiden jakelussa ja varastoinnissa ei esiintyisi ongelmia, ovat erityisen tärkeitä.
5 Yksi muu epäkohta on, että monet tähän asti tunne tuista koostumuksista sisältävät suuren määrän erilaisia liuenneita aineita, kuten polymeerejä, fosfolipidejä, elektrolyyttejä ja muita aineita, jotka tekevät koostumuksen käytöstä käytännössä yhä vaikeampaa. Tiedetään esimer-10 kiksi, että polyoksieteeni-polyoksipropeenikopolymeerien (PluronicR) käyttö voi määrätyillä potilailla aiheuttaa epämiellyttäviä sivuvaikutuksia [katso esimerkiksi G. M. Vercellotti et ai.. Blood 59 (1982) 1299]. Runsaasti fosfolipidejä sisältävät valmisteet voivat myös olla tietyis-15 sä tapauksissa epätoivottavia. Joka tapauksessa koostumuksia, jotka sisältävät runsaasti erilaisia liuenneita aineita, annetaan vastahakoisesti ja niiden laajaa käyttöä aletaan pitää epätoivottavana. Lääketeollisuuden piirissä on itse asiassa suuntauksena aktiivisten ja inaktiivisten 20 aineosien pitoisuuksien vähentäminen mahdollisimman pieniksi erilaisissa lääketieteellisissä tai farmaseuttisissa ;-i formuloissa ja kaiken sellaisen eliminointi valmisteista, joka ei ole välttämätöntä. Vaihtoehtoisten menetelmien löytäminen ja tehokkaampien koostumusten formulointi on 25 edelleen tärkeää. Tämä pätee erityisesti kaikukuvauksessa ·' .* käytettäviin mikrokuplasuspensioihin, sillä aineosilla ei ole niiden yhteydessä parantavaa vaikutusta, ja niiden tu-v lisi johtaa mahdollisimman vähäisiin jälkiseurauksiin. Ku ten edellä mainittiin, tekniikan tasoa vastaavat valmis-• 30 teet, joissa tyypilliset pitoisuudet ovat alueella 1 - 4 paino-%, ja niistä saadut kokemukset eivät kuitenkaan ·, rohkaise käyttämään pienennettyjä määriä fosfolipidejä ja muita ei-fosfolipidilisäaineita. Tähän on todennäköisimmin '··’ syynä se, että rutiininomaisten kokeiden edetessä aine- : 35 osien pitoisuuden pienentäminen edelleen ei ole milloin- 6 115953 kaan antanut tulokseksi suspensioita, jotka olisivat käytännössä kyllin stabiileja ollakseen käyttökelpoisia tai rohkaisisivat jatkamaan kokeiluja tunnetun alueen alapäässä.
5 Yhteenveto keksinnöstä Tämä keksintö perustuu siihen odottamattomaan havaintoon, että voidaan valmistaa kaasulla täytettyjen mik-rokuplien hyvin stabiileja suspensioita, jotka sisältävät vähintään 107 mikrokuplaa millilitraa kohden, käyttämällä 10 fosfolipidejä stabilointiaineina, vaikka niitä käytetään hyvin pieninä pitoisuuksina. Suspensioita, jotka ovat käyttökelpoisia varjoaineina ultraäänikaikukuvauksessa, saadaan suspendoimalla vesikantajaan vähintään yhtä fosfo-lipidiä stabilointiaineeksi ajan mittaan ja paineen vaiku-15 tuksesta tapahtuvaa mikrokuplien kokoonpainumista vastaan, kun fosfolipidipitoisuus on pienempi kuin 0,01 paino-%, mutta vähintään pitoisuus, jonka vallitessa fosfolipidimo-lekyylejä on läsnä vain mikrokuplan ja nesteen välisellä rajapinnalla.
20 Oli sangen odottamatonta havaita, että näin mität tömät määrät fosfolipidipinta-aktiivisuusaineita (käytet-tyinä yksinään tai yhdessä suhteellisen pienten osuuksien • * · kanssa muita amfifiileja) pystyvät niin tehokkaasti stabi-’·**’ loimaan mikrokuplia. Oletuksena on, että muiden amfipaat- 25 tisten yhdisteiden (kuten Pluronic*) läsnä ollessa stabi-: lointiainemolekyylien keskinäinen koheesio heikkenee ja fosfolipidiyksimolekyylikalvojen muodostuminen estyy. Kun : : läsnä ei ole suuria määriä muita amfifiilisia aineita, fosfolipidimolekyylien estämättömät molekyylienväliset • 30 sidosvoimat (sähköstaattinen vuorovaikutus ja vetysidosten muodostuminen) ovat kuitenkin riittäviä takaamaan stabii- * » lien kalvomaisten rakenteiden muodostumisen, jotka stabi-'···' loivat kuplia kokoonpainumista tai yhteensulautumista vas- •.,. taan.
* .
7 115953
Keksinnön mukaisesti voidaan valmistaa suspensioita, joissa mikrokuplapitoisuus on suuri ja jotka ovat hyvin stabiileja, pitkäaikaisesti säilyviä ja helppoja valmistaa, vaikka pinta-aktiivisuusaineiden ja muiden lisäai-5 neiden pitoisuudet suspensioissa pidetään selvästi tekniikan tasoa vastaavissa formuloissa käytettävien pitoisuuksien alapuolella. Keksinnön mukaisissa koostumuksissa käytettävä fosfolipidimäärä voi olla niinkin pieni kuin suunnilleen määrä, joka juuri riittää yhden pinta-aktiivisuus-10 aineyksimolekyylikerroksen muodostamiseen kaasumikrokup- lien ympärille, samalla kun kuplapitoisuus suspensiossa pidetään suurempana kuin 107 mikrokuplaa millilitraa kohden. Tämä keksinnön yhteydessä ei todennäköisesti esiinny eikä ole havaittu mikrokuplia, joilla on liposomimainen 15 pinta-aktiivisuusainekaksoiskerros (kaasulla täytettyjä liposomeja).
Suspensioita, joissa mikrokuplapitoisuudet ovat suuria, esimerkiksi 109 - 1010 kuplaa/ml, ja joilla on suhteellisen hyvä stabiilius ja säilyvyys, voidaan valmistaa, 20 vaikka fosfolipidipinta-aktiivisuusainepitoisuus pidetään selvästi alalla tunnettujen pitoisuuksien alapuolella. Suspensioita, jotka sisältävät niinkin vähän kuin 1 pg * I t fosfolipidejä millilitraa kohden, voidaan valmistaa, kun- * ' · ' \ hän käytettävä pinta-aktiivisuusainemäärä ei ole pienempi 25 kuin määrä, joka tarvitaan yhden lipidiyksimolekyyliker- ·' roksen muodostamiseen kaasumikrokuplien ympärille, ja sus- pensiot valmistetaan jollakin tässä esitetyistä menetel-: : mistä.
Laskelmat ovat osoittaneet, että kuplapitoisuuden ; 30 ollessa 108 kuplaa/ml tämä pitoisuus voi olla mikrokuplien kokojakautumasta riippuen niinkin pieni kuin 1 pg/ml eli 0,0001 %, mutta alueella 0,0002 - 0,01 % olevat fosfolipi-’··’·* dipitoisuudet ovat edullisia. Fosfolipidipitoisuus keksin- nön mukaisissa stabiileissa mikrokuplasuspensioissa on 35 edullisemmin 0,001 - 0,009 %. Vaikka suspensiossa olevan 8 115953 fosfolipidimäärän pienentäminen edelleen on mahdollista, suspensiot, jotka on valmistettu käyttämällä pienempää osuutta kuin 0,0001 paino-%, ovat epästabiileja, niiden kokonaiskuplamäärä on pieni, eikä niiden kaikukuvausvaste 5 injektoinnin jälkeen ole tyydyttävä. Toisaalta suspensiot, jotka on valmistettu käyttämällä yli 0,01 % fosfolipidejä, eivät injektoituina toimi paremmin, ts. niiden stabiilius ja kaikukuvausvaste eivät enää parane pitoisuuden myötä. Niinpä suuremmat pitoisuudet saattavat vain suurentaa tek-10 niikan tason käsittelyn yhteydessä esitettyjen epätoivottavien sivuvaikutusten todennäköisyyttä. Alustavasti otaksutaan, että vain ne pinta-aktiivisuusaineiden osat, jotka ovat lamellaarisessa tai laminaarisessa muodossa, voivat tehokkaasti vapauttaa kuplien stabiloimisen kannalta sopi-15 vasti järjestyneitä molekyylejä. Tämä saattaa selittää, miksi pinta-aktiivisuusainepitoisuus voi olla niin pieni kaasukuplien stabiiliuden heikentymättä.
Keksinnön mukaiset suspensiot eivät tarjoa tärkeitä etuja tekniikan tasoa vastaaviin koostumuksiin nähden pel-20 kästään alhaisen fosfolipidipitoisuuden ansiosta vaan myös siitä syystä, että injektoitavien liuenneiden aineiden, ts. lipidien ja/tai synteettisten polymeerien ja muiden * / lisäaineiden, kokonaismäärä on 1 000 - 50 000 kertaa pie- • » · nempi kuin tähän asti. Tämä saadaan aikaan ilman minkään-‘ ’ 25 laisia häviöitä mikrokuplapitoisuuden, ts. tuotteen eko- : '.· geenisyyden tai stabiiliuden, suhteen. Liuenneiden ainei- den hyvin pienen pitoisuuden lisäksi tämä keksintö tarjoaa ! : : käyttöön suspensioita, jotka voivat sisältää pelkästään mikrokuplia, joiden myötävaikutus kaikukuvaussignaaliin on 30 suhteellisen merkittävä, ts. suspensioita, jotka eivät si-··. säilä mikrokuplia, jotka eivät osallistu aktiivisesti ku- vannusprosessiin.
’·!·’ On tarpeetonta mainita, että liuenneiden aineiden pitoisuuksien ollessa näin pieniä keksinnön mukaisessa in-35 jektoitavissa olevassa koostumuksessa epätoivottavien si- 9 115953 vuvaikutusten todennäköisyys pienenee suuresti ja injektoidun aineen eliminoituminen paranee merkittävästi.
Keksinnön mukaisia mikrokuplasuspensioita, joiden fosfolipidipitoisuus on pieni, voidaan valmistaa kalvon 5 muodostavista fosfolipideistä, joiden rakennetta on muunnettu jollakin kätevällä tavalla, esimerkiksi kylmäkuivaa-malla tai suihkukuivaamalla raakafosfolipidien liuoksia sopivassa liuotteessa. Ennen suspension muodostamista tekemällä dispergointi vesipitoiseen kantajaan kylmäkuivatut 10 tai suihkukuivat fosfolipidijauheet saatetaan kosketukseen ilman tai jonkin muun kaasun kanssa. Saatettaessa jauhemaiset fosfolipidit, joiden rakenne on rikottu, kosketukseen vesipitoisen kantajan kanssa fosfolipidit muodostavat lamellarisoituneita tai laminarisoituneita osia, jotka 15 stabiloivat dispergoituja kaasumikrokuplia. Tämän keksinnön mukaisia suspensioita, joiden fosfolipidipitoisuus on pieni, voidaan valmistaa kätevästi myös käyttämällä fosfo-lipidejä, jotka on lamellarisoitu tai laminarisoitu ennen saattamistaan kosketukseen ilman tai muun kaasun kanssa.
20 Niinpä fosfolipidien saattaminen kosketukseen ilman tai muun kaasun kanssa voidaan toteuttaa fosfolipidien ollessa kuivan jauheen muodossa tai laminarisoitujen fosfolipidien • ** dispersiona vesipitoisessa kantajassa.
• * · '·!* Termi lamellaarinen tai laminaarinen muoto tarkoit- :* · 25 taa, että pinta-aktiivisuusaineet ovat ohuiden kalvojen 4 · * • ',· tai levyjen muodossa, joissa on yksi tai useampia molekyyli* likerroksia. Tässä muodossa ollessaan pinta-aktiivisuusai- ;T: nemolekyylit järjestyvät rakenteiksi, jotka ovat samankal taisia kuin liposomirakkuloissa esiintyvät. Kuten julkai- ; 30 sussa WO-A-91/15 244 kuvataan, kalvon muodostavien pinta- ··· aktiivisuusaineiden muuttaminen lamellaariseen muotoon
* I
voidaan tehdä helposti millä tahansa liposominmuodostusme-netelmällä, esimerkiksi korkeapainehomogenoinnilla tai akustisilla tai ultraäänitaajuuksilla tehtävällä äänikä-35 sittelyllä. Muuttaminen lamellaariseen muotoon voidaan 115953 10 tehdä myös päällystämällä vesiliukoisesta kiinteästä kantajasta (NaCl, sakkaroosi, laktoosi tai muut hiilihydraatit) koostuvat mikrohiukkaset (korkeintaan 10 pm) fosfoli-pidillä ja liuottamalla sitten päällystetty kantaja vesi-5 faasiin. Liukenemattomia hiukkasia, esimerkiksi lasi- tai hartsimikrohelmiä, voidaan samoin päällystää kostuttamalla ne orgaaniseen liuotteeseen valmistetussa fosfolipidi-liuoksessa, minkä jälkeen liuote haihdutetaan. Lipidipääl-lysteiset mikrohelmet saatetaan sen jälkeen kosketukseen 10 vesipitoisen kantajafaasin kanssa, jolloin kantajafaasiin muodostuu liposomirakkuloita. Fosfolipidejä voidaan lamel-larisoida myös kuumentamalla ne hieman kriittisen lämpötilan (Te) yläpuolelle ja sekoittamalla varovasti. Kriittinen lämpötila on fosfolipidien geeli-nestemuutoslämpötila. 15 Keksinnön mukaisten fosfolipidipitoisuudeltaan pienten suspensioiden tuottamiseksi voidaan käytännössä lähteä liposomisuspensioista tai -liuoksista, jotka on valmistettu millä tahansa tunnetulla menetelmällä, kunhan liposomirakkulat ovat "kuormittamattomia", ts. niihin ei 20 ole koteloituneena muuta vierasta materiaalia kuin itse liuoksen vesifaasia.
Ilman tai kaasun syöttäminen liposomiliuokseen voi-: '* daan tehdä tavanomaisin keinoin, injektoimalla, ts. pakot- tamalla ilmaa tai kaasua pienten aukkojen kautta liposomi-'“· 25 liuokseen, tai yksinkertaisesti liuottamalla kaasua liuok- • '_* seen paineen avulla ja vapauttamalla paine sitten äkilli- ;:· sesti. Yksi muu tapa on sekoittaa tai äänikäsiteliä lipo- somiliuosta ilman tai muun fysiologisesti hyväksyttävän kaasun läsnä ollessa. Voidaan myös muodostaa kaasua itse ; ,30 liposomiliuoksessa, esimerkiksi kemiallisella reaktiolla, ·« jossa vapautuu kaasua, esimerkiksi hajottamalla liuennutta karbonaattia tai vetykarbonaattia hapolla.
t
Otaksutaan, että kun laminarisoituja pinta-aktiivi- i i < suusaineita suspendoidaan vesipitoiseen nestemäiseen kan-, /, 35 tajaan ja syötetään ilmaa tai muuta kaasua mikrokuplien 11 1 15953 muodostamiseksi, mikrokuplat tulevat vähitellen ympäröidyiksi ja stabiloiduiksi pinta-aktiivisuusainemolekyyleis-tä koostuvalla yksimolekyylikerroksella eikä kaksoisker-roksella kuten liposomirakkuloiden ollessa kyseessä. Tämä 5 pinta-aktiivisuusainemolekyylien rakenteellinen uudelleen- järjestyminen voidaan aktivoida mekaanisesti (sekoittamalla) tai termisesti. Tarvittava energia on pienempi koheesiota vähentävien aineiden, kuten PluronicinR, läsnä ollessa. Toisaalta koheesiota vähentävien aineiden läsnäolo 10 mikrokuplaformuloissa heikentää fosfolipidimolekyylien välistä luontaista affiniteettia, minkä suorana seurauksena on mikrokuplien heikentynyt kyky kestää ulkopuolista painetta [esimerkiksi yli 2,7 - 4,0 kPa (20 - 30 torria)].
Kuten jo mainittiin, keksinnön mukaisten fosfolipi-15 dipitoisuudeltaan alhaisten suspensioiden valmistamiseksi voidaan fosfolipidiliuosten sijasta lähteä kuivista fosfo-lipideistä, jotka voivat olla lamellarisoituja tai lamel-larisoimattomia. Mainitunlaisia lamellarisoituja fosfoli-pidejä voidaan valmistaa esimerkiksi poistamalla vettä 20 liposomeista, ts. dehydratoimalla tavanomaisin keinoin liposomeja, joita on valmistettu tavanomaisin menetelmin vesiliuosten muodossa. Yksi menetelmistä liposomien dehyd-: '· ratoimiseksi on kylmäkuivaus (lyofilisointi), ts. edulli- sesti hydrofiilisiä yhdisteitä sisältävän liposomiliuoksen * i ‘'i 25 pakastaminen ja kuivaus haihduttamalla (sublimoimalla) alipaineessa.
Yhden toisen lähestymistavan mukaan voidaan valmis-\ taa lamellarisoimattomia tai laminarisoimattomia fosfoli- pidejä liuottamalla fosfolipidi orgaaniseen liuotteeseen . 30 ja kuivaamalla liuos käymättä läpi liposomien muodostusta.
W ‘ Tämä voidaan toisin sanoen tehdä liuottamalla fosfolipidit t t sopivaan orgaaniseen liuotteeseen yhdessä hydrofiilisen ' /. stabiloivan aineen, esimerkiksi polymeerin, kuten PVP:n, PVA:n, PEG:n jne., tai sekä orgaaniseen liuotteeseen että ’ 35 veteen liukenevan yhdisteen kanssa ja kylmäkuivaamalla tai 12 115553 suihkukuivaamalla liuos. Muita esimerkkejä veteen ja orgaaniseen liuotteeseen liukenevista hydrofiilisistä stabiloivista yhdisteistä ovat omenahappo, glykolihappo, maltoit yms. Mitä tahansa sopivaa orgaanista liuotetta voidaan 5 käyttää, kunhan sen kiehumispiste on riittävän alhainen ja sulamispiste riittävän korkea myöhemmän kuivauksen helpottamiseksi. Tyypillisiä orgaanisia liuotteita olisivat esimerkiksi dioksaani, sykloheksanoli, tertiaarinen butanoli, tetraklooridifluorieteeni (C2C14F2) tai 2-metyyli-2-butano-10 li; edullisia ovat kuitenkin tertiaarinen butanoli, 2-me-tyyli-2-butanoli ja C2C14F2. Tässä variaatiossa hydrofiili-sen stabilointiaineen valintakriteerinä on liukoisuus valittuun orgaaniseen liuotteeseen. Mainitunlaisista jauheista valmistetaan mikrokuplasuspensioita käyttämällä sa-15 moja vaiheita kuin laminarisoiduista fosfolipideistä koostuvien jauheiden yhteydessä.
Ennen ennalta lamellarisoidun tai laminarisoidun fosfolipidin liuoksen kylmäkuivausta liuotetaan siihen vastaavasti hydrofiilistä stabiloivaa yhdistettä. Hydro-20 fiilisten stabilointiaineiden valikoima on tällöin kuitenkin paljon suurempi, sillä voidaan käyttää hiilihydraattia, kuten laktoosia tai sakkaroosia, samoin kuin hydro-,·. fiilistä polymeeriä, kuten dekstraania, tärkkelystä, PVPrtä, PVA:ta. PEG:tä yms. Tämä on hyödyllistä tämän kek- , . 25 sinnön yhteydessä, sillä mainitunlaiset hydrofiiliset yh- » · * ' ; disteet auttavat myös mikrokuplien kokojakautuman homoge- ·;** noinnissa ja parantavat stabiiliutta varastoinnin aikana.
'·’ ‘ Itse asiassa kylmäkuivattujen fosfolipidien hyvin laimei den vesiliuosten (0,0001 - 0,01 paino-%) valmistaminen, ·,· 30 jotka on stabiloitu esimerkiksi polyeteeniglykolilla, jota : : käytetään painosuhteessa 10:1 - 1 000:1 lipidiin nähden, [ antaa mahdollisuuden valmistaa stabiileja mikrokuplavesi- suspensioita, jotka sisältävät 109 - 1010 kuplaa/ml (koko- I | *; jakautuma pääasiassa alueella 0,5 - 10 pm) ja joissa ei 35 tapahdu merkitsevää havaittavissa olevaa muutosta pitkään- 115953 13 kään säilytettäessä. Tämä saadaan aikaan yksinkertaisesti liuottamalla ilmassa säilytetyt kuivatut laminarisoidut fosfolipidit ilman ravistelua tai muuta voimakasta sekoitusta. Alipaineessa tehtävä kylmäkuivaus on hyvin käyttö-5 kelpoinen menetelmä, koska se mahdollistaa kuivattujen jauheiden yllä vallitsevan paineen palauttamisen käyttämällä mitä tahansa fysiologisesti hyväksyttävää kaasua, ts. typpeä, C02:a, argonia, metaania, freoneja, SF6:a, CF4:a jne., jolloin tällaisissa olosuhteissa käsiteltyjen 10 fosfolipidien uudelleendispergoinnin jälkeen saadaan edellä mainittuja kaasuja sisältäviä mikrokuplasuspensioita.
On havaittu, että tämän keksinnön yhteydessä kätevät pinta-aktiivisuusaineet voidaan valita amfapaattisten yhdisteiden joukosta, joilla on kyky muodostaa stabiileja 15 kalvoja veden ja kaasujen läsnä ollessa. Edullisiin pinta-aktiivisuusaineisiin kuuluvat lesitiinit (fosfatidyyliko-liini) ja muut fosfolipidit, mm. fosfatidiinihappo (PA), fosfatidyyli-inositoli, fosfatidyylietanoliamiini (PE), fosfatidyyliseriini (PS), fosfatidyyliglyseroli (PG), kar-20 diolipiini (CL) ja sfingomyeliinit. Esimerkkejä sopivista fosfolipideistä ovat luonnon tai synteettiset lesitiinit, kuten kananmuna- tai soiijapapulesitiini, tai tyydyttyneet ·, synteettiset lesitiinit, kuten dimyristoyylifosfatidyyli- \ koliini, dipalmitoyylifosfatidyylikoliini, distearoyyli- 25 fosfatidyylikoliini tai diarakidoyylifosfatidyylikoliini, ' tai tyydyttymättömät synteettiset lesitiinit, kuten diole- yylifosfatidyylikoliini tai dilinoleyylifosfatidyylikolii-’·’ * ni, joista edullisia ovat tyydyttyneet lesitiinit.
Lisäaineita, kuten kolesterolia ja muita aineita, ·,* ; 30 voidaan lisätä yhteen tai useampaan edellä mainituista * lipideistä osuudeksi 0-50 paino-%. Mainitunlaisiin lisä- ’· aineisiin voivat kuulua muut ei-fosfolipidipinta-aktiivi- .'!! suusaineet, joita voidaan käyttää seoksena kalvon muodos- ;· tavien pinta-aktiivisuusaineiden kanssa ja joista useimmat 35 ovat tunnettuja. Esimerkkejä ovat sellaiset yhdisteet kuin 115953 14 polyoksipropeeniglykoli ja polyoksieteeniglykoli samoin kuin niiden erilaiset kopolymeerit, fosfatidyyliglyseroli, fosfatidiinihappo, disetyylifosfaatti, rasvahapot, ergo-steroli, fytosteroli, sitosteroli, lanosteroli, tokofero-5 li, propyyligallaatti, askorbyylipalmitaatti ja butyloity hydroksitolueeni. Näiden kalvoa muodostamattomien pinta-aktiivisuusaineiden määrä on tavallisesti korkeintaan 50, mutta edullisesti 0-30 paino-% pinta-aktiivisuusaineiden kokonaismäärästä. Tämäkin merkitsee sitä, että erilaisten 10 lisäaineiden pitoisuus keksinnön mukaisissa vähän fosfoli-pidejä sisältävissä suspensioissa on alueella 0 - 0,05 %, mikä on yli sata kertaa vähemmän kuin tähän asti tunnetuissa koostumuksissa.
Tulisi myös mainita, että keksinnön mukaisten sus-15 pensioiden yhtenä muuna piirteenä on mikrokuplien suhteellisen "korkea" kaasunsitomiskapasiteetti, ts. pinta-aktii-visuusaineen määrän ja sisään suljetun kaasun kokonaismäärän edullinen suhde. Niinpä alustavasti arvioidaan, että sellaisten suspensioiden ollessa kyseessä, joissa mikro-20 kuplien koko on alueella 1-5 pm, kaasukuplan ja nesteen rajapinnalla olevien fosfolipidien painon suhde sisään :\ suljetun kaasun tilavuuteen on standardiolosuhteissa 0,1 - 100 mg/ml.
» » · Käytännössä kaikkien injektiokoostumusten tulisi 25 olla myös mahdollisimman isotonisia veren kanssa. Niinpä keksinnön mukaisiin suspensioihin voidaan ennen injektoin-.; tia lisätä pieniä määriä isotonisia aineita. Isotoniset ’ ’ aineet ovat lääketieteessä yleisesti käytettäviä fysio logisia liuoksia ja niihin kuuluvat ruokasuolan vesi-: : , 30 liuos (0,9 % NaCl:a), 2,6-%:inen glyseroliliuos, 5-%:inen dekstroosiliuos jne.
Keksintö koskee lisäksi menetelmää patenttivaati-;;; muksen 1 mukaisten stabiilien mikrokuplasuspensioiden val- mistamiseksi, jotka ovat käyttökelpoisia varjoaineina ult-: 35 raäänikaikukuvauksessa. Periaatteessa menetelmä käsittää 115953 15 fosfolipidipitoisuuden säätämisen mainituilla fosfolipi-deillä stabiloidussa mikrokuplasuspensiossa valittuun, patenttivaatimuksissa esitettyjen rajojen sisällä olevaan arvoon. Tavallisesti lähdetään mikrokuplasuspensiosta, jo-5 ka sisältää haluttua enemmän fosfolipidejä, ja pienennetään mainittujen fosfolipidien määrää suhteessa mikrokup-lien sisään suljetun kaasun tai ilman tilavuuteen pienentämättä olennaisesti kaiun synnyttävien kuplien lukumäärää. Tämä voidaan tehdä esimerkiksi poistamalla kantaja-10 nesteestä osia, jotka sisältävät fosfolipidejä, jotka eivät suoraan ole mukana ilman ja nesteen välisellä rajapinnalla, ja laimentamalla suspensiota tuoreella kantajanes-teellä. Tämän tekemiseksi suspensioon voidaan muodostaa alue (a), jolle kaiun synnyttävät kuplat kerääntyvät, ja 15 alue (b), joka on olennaisesti laimentunut mainittujen suhteen. Alueella (b) olevaa nestettä voidaan sitten poistaa tekemällä erotus tavanomaisin keinoin (dekantointi, juoksutus lapolla jne.), ja suspensioon lisätään täydennykseksi vertailukelpoinen määrä tuoretta kantajanestettä. 20 Tämä toimenpide voidaan toistaa kerran tai useammin, jolloin kuplien stabilointiin suoraan osallistumattomien fosfolipidien pitoisuus laskee progressiivisesti.
• ·
Yleensä ei ole toivottavaa saada aikaan niiden fos-folipidimolekyylien täydellistä poistumista, jotka eivät ,, 25 ole kuplan kaasu-nesterajapinnalla, koska tuloksena voi • ·’ olla jonkinasteinen poikkeaminen tasapainotilasta, ts. jos ·*.; poisto viedään liian pitkälle, voivat jotkut kaasu-neste- ·.* * rajapinnalla olevat pinta-aktiivisuusainemolekyylit irro ta, mistä on seurauksena kuplan destabiloituminen. Kokeet j :: 30 ovat osoittaneet, että kantajanesteen fosfolipidipitoisuus voidaan alentaa lähelle patenttivaatimuksissa esitettyä alarajaa ilman merkittäviä ominaisuusmuutoksia ja haitta-;;; vaikutuksia. Tämä tarkoittaa, että optimaalisen fosfolipi- ’···’ dipitoisuuden (annettujen rajojen sisällä) sanelee ennem- 35 minkin käytön tyyppi, ts. jos suhteellisen suuret fosfoli- 16 1 15953 pidipitoisuudet ovat hyväksyttäviä, ihanteellinen pitoisuus on lähellä alueen ylärajaa. Jos diagnosoitavan potilaan tilan mukaisesti fosfolipidien absoluuttista määrää täytyy toisaalta pienentää edelleen, tämä voidaan tehdä 5 ilman haittavaikutuksia mikrokuplien lukumäärään ja eko-geenisyystehoon.
Keksinnön yksi suoritusmuoto käsittää kalvon muodostavan pinta-aktiivisuusaineen valitsemisen ja sen muuttamisen lamellaariseen muotoon käyttämällä jotakin alalla 10 tunnetuista tai edellä esitetyistä menetelmistä. Pinta-ak-tiivisuusaine saatetaan sitten kosketukseen ilman tai muun kaasun kanssa ja sekoitetaan vesipitoisen nestemäisen kantajan kanssa suljetussa säiliössä, jolloin muodostuu mik-rokuplasuspensio. Suspension annetaan seistä hetki ja muo-15 dostuneita kaasun täyttämiä mikrokuplia sisältävän kerroksen annetaan nousta säiliön yläosaan. Sitten poistetaan alempi osa emäliuoksesta ja mikrokuplasupernatanttikerros pestään mikrokuplien valmistukseen käytetyllä kaasulla kyllästetyllä vesiliuoksella. Tämä pesu voidaan toistaa 20 muutamia kertoja, kunnes suurin piirtein kaikki käyttämättömät eli vapaat pinta-aktiivisuusainemolekyylit on pois-·, tettu. Käyttämättömät eli vapaat molekyylit tarkoittaa kaikkia pinta-aktiivisuusainemolekyylejä, jotka eivät osallistu stabiloivan yksimolekyylikerroksen muodostami-25 seen kaasumikrokuplien ympärille.
• ·' Sen lisäksi, että tällä pesumenetelmällä saadaan fosfolipidipitoisuudeltaan pieniä suspensioita, se tarjoaa v · sen lisäedun, että se mahdollistaa keksinnön mukaisten suspensioiden puhdistamiseen edelleen poistamalla kaikki i : : 30 tai lähes kaikki mikrokuplat, joiden myötävaikutus injek- toidun suspension kaikukuvausvasteeseen on suhteellisen merkityksetön. Puhdistus antaa siten tulokseksi suspen-;;; sioita, jotka käsittävät vain varta vasten valittuja mik- ·;*’ rokuplia, ts. mikrokuplia, jotka injektoinnin jälkeen : ! : 35 osallistuvat yhtä hyvin kaikukuvaussignaalien heijasta- 17 1 15953 miseen. Tämä johtaa suspensioihin, jotka eivät pelkästään sisällä hyvin pienenä pitoisuutena fosfolipidejä ja muita lisäaineita vaan ovat myös vapaita mahdollisista mikrokup-lista, jotka eivät aktiivisesti osallistu kuvantamispro-5 sessiin.
Tämä menetelmän yhdessä variaatiossa pinta-aktiivi-suusaine, joka voi mahdollisesti olla lamellaarisessa muodossa, sekoitetaan vesipitoisen nestemäisen kantajan kanssa ennen saattamistaan kosketukseen ilman tai muun kaasun 10 kanssa.
Piirustusten lyhyt kuvaus
Kuvio 1 on graafinen esitys kaikukuvausvasteista mikrokuplapitoisuuden funktiona juuri valmistetun keksinnön mukaisen suspension ollessa kyseessä.
15 Suspensioita ja menetelmää keksinnön mukaisten fos- folipidipitoisuudeltaan alhaisten suspensioiden valmistamiseksi valaistaan lisää seuraavin esimerkein.
Esimerkki 1
Valmistettiin multilamellaarisia rakkuloita (MLV; 20 multilamellar vesicle) liuottamalla 240 mg diarakidoyyli-fosfatidyylikoliinia (DAPC, Avanti Polar Lipids) ja 10 mg dipalmitoyylifosfatidiinihappoa (DPPA, happomuoto, Avanti Polar Lipids) 50 ml:aan heksaanin ja etanolin seosta (tilavuussuhteessa 8:2) ja haihduttamalla sitten liuotteet 25 kuiviin pyöreäpohjaisessa pullossa käyttämällä pyöröhaihdutinta. Jäljelle jäänyt lipidikalvo kuivattiin vakuumiek-sikkaattorissa. Kun oli lisätty vettä (5 ml), suspensiota v ·' inkuboitiin 30 min lämpötilassa 90 °C sekoittaen. Tulokse na olevat MLV:t suulakepuristettiin lämpötilassa 85 °C ; 30 0,8 pm polykarbonaattisuodattimen (NucleporeR) läpi . Li- sättiin 2,6 ml tuloksena olevaa MLV-valmistetta 47,4 ml:aan liuosta, joka sisälsi 167 mg/ml dekstraania (M = 10 000, Fluka) vedessä. Tuloksena oleva liuos sekoitettiin ’·»·* perusteellisesti, siirrettiin 500 ml:n pyöreäpohjäiseen : 35 pulloon, pakastettiin lämpötilassa -45 °C ja kylmäkuivat- 18 11E9E3 tiin paineen 13 Pa (0,1 torria) alaisena. Jään täydellinen sublimoituminen saatiin aikaan kuivaamalla yön yli. Sen jälkeen tyhjäksi imettyyn säiliöön palautettiin paine ilmalla. Erilaisia määriä tuloksena olevaa jauhetta laitet-5 tiin lasipulloihin (katso taulukko) ja pullot suljettiin kumitulpilla. Pulloista poistettiin ilma alipaineen avulla tulpan läpi työnnetyn neulan kautta. Ilman poistamisen jälkeen jauhe saatettiin rikkiheksafluoridikaasun, SF6, vaikutuksen alaiseksi.
10 Kuplasuspensioita valmistettiin injektoimalla ku hunkin pulloon (tulpan kautta) 10 ml liuosta, joka sisälsi 3 % glyserolia vedessä, minkä jälkeen tehtiin varovainen sekoitus. Tuloksena oleville mikrokuplasuspensioille tehtiin laskenta käyttämällä hemasytometriä. Keskimääräinen 15 kuplakoko (tilavuuden mukaan määritettynä) oli 2,2 pm.
Kuivapaino Fosfolipidipitoisuus Pitoisuus (mg/ml) (pg/ml) (kuplaa/ml) 20 0,5 8 9,0«106 1 16 1,3»107 5 81 7,0·107 10 161 1,4.10® 25 Valmisteita injektoitiin kaniineihin (kaulalaskimon kautta) samoin kuin pienikokoisiin sikoihin (korvalaskimon kautta) annostuksen ollessa 1 ml/5 kg. Tehtiin in vivo V ‘ -kaikukuvausmittauksia käyttämällä Acuson XP128 -ultraää ni järjestelmää (Acuson Corp., USA) ja 7 MHz:n sektoriantu-30 ria. Eläimet nukutettiin ja anturi sijoitettiin ja kiinnitettiin paikalleen rinnan vasemmalle puolelle, niin että saatiin kuva sydämen oikeasta ja vasemmasta kammiosta kaniinien ollessa kyseessä ja pituussuuntainen nelikammioku-va pienikokoisen sian ollessa kyseessä. Valmiste, jossa 35 kuiva-ainepitoisuus oli 0,5 mg/ml, antoi tulokseksi oikean 19 115953 samoin kuin vasemman kammion lievän opasiteetin kasvun kaniineissa ja pienikokoisissa sioissa. Opasiteetin kasvu oli kuitenkin parempi valmisteilla, joissa pitoisuudet olivat 1, 5 ja 10 mg/ml.
5 Esimerkki 2
Valmistettiin esimerkissä 1 kuvatulla tavalla lyo-filisaatteja käyttämällä ilmaa (SF6:n sijasta) kaasufaasissa. Lyofilisaatit suspendoitiin sitten 0,9-%:iseen keitto-suolaliuokseen (3-%risen glyseroliliuoksen sijasta). Saa-10 tiin samanlaisia kuplapitoisuuksia. Kaniiniin tai pienikokoiseen sikaan injektoinnin jälkeen vaikutuksen kesto oli kuitenkin lyhyempi, esimerkiksi 10 - 20 s 120 s:n sijasta. Lisäksi vasemman kammion opasiteetin kasvu oli pienikokoisessa siassa heikkoa jopa valmisteella, jossa pitoisuus 15 oli 10 mg/ml.
Esimerkki 3
Valmistettiin MLV-liposome ja esimerkissä 1 kuvatulla tavalla käyttämällä 240 mg DAPCrtä ja 10 mg DPPArta (moolisuhde 95:5). Lisättiin 1 ml tätä valmistetta 20 20 ml:aan polyeteeniglykoli (PEG 2000) -liuosta (82,5 mg/ml). Kun oli sekoitettu 10 min huoneenlämpötilassa, tuloksena oleva liuos pakastettiin pitämällä sitä 5 min lämpötilassa -45 °C ja kylmäkuivattiin 5 tuntia paineen 20 Pa (0,2 mbar) alaisena. Saatu jauhe (1,6 g) siirrettiin kumitul-25 palla varustettuun lasipulloon. Jauhe saatettiin SF6:n vaikutuksen alaiseksi (esimerkissä 1 kuvatulla tavalla) ja liuotettiin sitten 20 ml:aan tislattua vettä. Saadun sus-pension kuplapitoisuus oli 5·109 kuplaa/ml ja kuplien tila-vuusmediaaninen läpimitta oli 5,5 pm. Tämä suspensio lai-• 30 tettiin 20 ml:n ruiskuun, ruisku suljettiin ja jätettiin vaakasuoraan asentoon 24 tunniksi. Ruiskussa olevan liuoksen pinnalla oli nähtävissä valkoinen kuplakerros. Suurin osa nestefaasista (noin 16 - 18 ml) poistettiin pitäen '···’ ruisku vaaka-asennossa ja lisättiin vastaava määrä tuoret- 35 ta SF6:lla kyllästettyä vettä. Ruiskua ravistettiin sitten 20 1 15953 hetki kuplien homogenoimiseksi vesifaasiin. Tehtiin toinen dekantointi samoissa olosuhteissa 8 tunnin kuluttua, minkä jälkeen tehtiin vielä kolme dekantointia 4 tunnin välein. Lopullinen kuplafaasi (erä P145) suspendoitiin 3 ml:aan 5 tislattua vettä. Se sisälsi 1,8·109 kuplaa/ml, ja kuplien tilavuusmediaaninen läpimitta oli 6,2 pm. Annos tätä suspensiota (2 ml) kylmäkuivattiin 6 tunnissa paineen 20 Pa (0,2 mbar) alaisena. Tuloksena oleva jauhe liuotettiin 0,2 ml:aan tetrahydrofuraanin ja veden seosta (tilavuus-10 suhteessa 9:1) ja tässä liuoksessa olevat fosfolipidit analysoitiin HPLC:llä käyttämällä valonsirotusdetektoria. Tämä liuos sisälsi 0,7 mg/ml DAPC:tä, mikä vastaa fosfoli-pidimäärää 3,9 pg/108 kuplaa. Erän P145 todellisen kuplakoko j akautuman analysointi Coulter-laskurilla antoi koko-15 naispinta-alaksi 4,6·107 pm2/108 kuplaa. Kun oletetaan, että yhden DAPC-molekyylin viemä pinta-ala on 50 A2, voidaan laskea, että tarvittaisiin 1,3 pg DAPC:tä 108 kuplaa kohden fosfolipidiyksimolekyylikerroksen muodostamiseksi kunkin kuplan ympärille. P145-suspensio jätettiin sitten seiso-20 maan lämpötilassa 4 °C ja mitattiin kaasukuplapitoisuutta säännöllisesti. Tuote näytti 10 vuorokauden kuluttua yhtä hyvältä kuin valmistuksensa jälkeen ja sisälsi vielä , (1 - 1,2)·109 kuplaa/ml. Poikkeuksellinen stabiilius ha- *’ vaittiin hyvin yllättäväksi, kun otetaan huomioon fosfoli- 25 pidien äärimmäisen pieni määrä suspensiossa.
Edellä kuvattu koe toistettiin toisella mikrokupla-' * * erällä käyttämällä lyhyempää dekantointiaikaa ensisijai- : sesti suurempien kuplien saamiseksi talteen (erä P132).
Tilavuusmediaaninen läpimitta oli 8,8 pm ja Coulter-lasku-: 30 rilla määritetty kokonaispinta-ala 22· 10® pm2/108 kuplaa.
.·' . Laskelmat osoittivat, että tarvittaisiin 6 pg DAPC:tä 108 ^ kuplaa kohden tämän kuplapopulaation peittämiseksi DAPC- yksimolekyylikerroksella. Todellinen DAPC-määrä oli HPLC:llä määritettynä 20 pg/108 kuplaa. Kun otetaan huo-·'; 35 mioon, miten vaikea on saada tarkkoja arvioita kuplapopu- 21 1 15953 laation kokonaispinta-alasta, näyttää siltä, että saadut tulokset sopivat kokeellisen virheen puitteissa yhteen sen kanssa, että mikrokuplia peittää yksi fosfolipidikerros.
Erilaisilla pestyillä kuplavalmisteilla tehdyt kai-5 kukuvausmittaukset osoittivat, että alempi faasi antaa erotuksen jälkeen paljon heikomman kaikukuvaussignaalin kuin ylempi faasi tai juuri valmistettu näyte. Ensi silmäyksellä tämä näytti normaalilta, koska ruiskun yläosassa oleva valkea kerros sisälsi joka tapauksessa pääosan kaa-10 sumikrokuplista. Kuten kuvio 1 osoittaa, kuplamäärä osoitti kuitenkin yllättävän suuren mikrokuplapopulaation olemassaolon myös alemmassa kerroksessa. Vasta Coulter-mit-tauksessa kävi ilmi, että mikrokuplien koko oli alle 0,5 pm, mikä osoittaa, että pienten kuplien yhteydessä ei 15 tapahdu ultraäänisignaalin riittävää heijastusta, vaikka kuplapitoisuus olisi suurikin.
Valmistetta P132 injektoitiin nelinkertaisena laimennoksena 3-%:isessa glyseroliliuoksessa pienikokoiseen sikaan (0,2 ml/kg). Pestyjä kuplia käsittävä valmiste, jo-20 ka sisälsi 2,5·107 kuplaa/ml ja 5 pg/ml fosfolipidejä, antoi tulokseksi erinomaisen opasiteetin kasvun vasemmassa ja oikeassa kammiossa ja sydämensisäisten rajojen erinomaisen näkymisen. Hyvä opasiteetin kasvu saatiin aikaan myös injektoimalla pienoissikaan annos valmistetta P145 l| ' 25 (laimennettuna 3-%:isella glyseroliliuoksella), joka vas tasi fosfolipidimäärää 0,2 pg/kg. Kontrasti oli havaitta-vissa vasemmassa kammiossa jopa annoksen 0,02 pg/kg injek-; : toinnin jälkeen. Lisäksi kontrastivaikutuksen olemassaolo oli havaittavissa pulssi-Dopplerilla munuaisvaltimossa 30 niinkin pienillä fosfolipidiannoksilla kuin 0,005 pg/kg.
Voidaan päätellä, että kunhan laminarisoidut fosfo- t I i < lipidit ovat järjestyneinä yhdeksi yksimolekyylikerroksek- » » * ’si kaasumikrokuplien ympärille, saaduilla suspensioilla on ·... riittävä stabiilius. Siten saadaan selitys keksinnön mu- \ 35 kaiselle odottamattomalle havainnolle ja osoitetaan, ettei 22 1 15953 fosfolipidimäärän tarvitse olla suurempi kuin määrä, joka tarvitaan yksimolekyylikerroksen muodostamiseen suspensiossa olevien mikrokuplien ympärille.
Esimerkki 4 5 Valmistettiin liuos, joka sisälsi 48 mg DAPCrtä ja 2 mg DPPArta, heksaanin ja etanolin seokseen (tilavuussuhde 8:2) ja haihdutettiin liuote kuiviin (esimerkissä 1 kuvatulla tavalla). Liuotettiin 5 mg tuloksena olevaa jauhetta ja 375 mg polyeteeniglykolia 5 g:aan t-butanolia 10 lämpötilassa 60 °C. Kirkas liuos jäähdytettiin sitten nopeasti lämpötilaan -45 °C ja kylmäkuivattiin. 80 mg lyofi-lisaattia laitettiin lasipulloon ja jauhe saatettiin SF6:n vaikutuksen alaiseksi (katso esimerkki 1). Sitten pulloon lisättiin 3-%:ista glyseroliliuosta (10 ml) ja lyofili-15 saatti liuotettiin varovasti pyörittäen. Tuloksena olevassa suspensiossa oli 1,5·108 kuplaa/ml, ja kuplien tilavuus-mediaaninen läpimitta oli 9,5 pm. Tämä liuos injektoitiin kaniiniin, jolloin saatiin erinomaisia kuvia oikeasta ja vasemmasta kammiosta. Tämä suspensio paransi voimakkaasti 20 kontrastia jopa kymmenkertaisesti laimennettuna.
Esimerkki 5
Toistettiin esimerkin 4 mukainen menettely, paitsi '* että jätettiin pois alussa tehty fosfolipidien liuotus • ·’ heksaani-etanoliliuokseen. Raakafosfolipidit liuotettiin * ‘ 25 toisin sanoen yhdessä polyeteeniglykolin kanssa t-butano- liin ja liuos kylmäkuivattiin; jäännös suspendoitiin sen , J* jälkeen veteen. Näissä kokeissa tutkittiin muutamia fosfo- ; : lipidejä ja fosfolipidien yhdistelmiä muiden lipidien kanssa. Seuraavassa taulukossa esitettävien tulosten ol-30 lessa kyseessä fosfolipidit liuotettiin t-butanoliliuok-, , seen, joka sisälsi 100 mg/ml PEG 2000:a. Kylmäkuivausjään nökset kyllästettiin SF6:lla (katso esimerkki 1) ja liuo-' tettiin sitten tislattuun veteen siten, että kuiva-ainepi- ·...· toisuudeksi tuli 100 mg/ml.
115953 23
Lipidiseos Pitoisuus t- Kuplapi- Mediaani- (painosuhde) butanolissa toisuus läpimitta (mg/ml) (‘109/ml) (pm) 5 DSPC 2 1,3 10 DAPC/DPPC (100:4) 2 3,8 7 DSPC/kol. (2:1) 6 0,1 40 DAPC/Plur. F68 (2:1) 6 0,9 15 DAPC/palm.h. (60:1) 2 0,6 11 10 DAPC/DPPA (100:4) 1 2,6 8 DAPC/kol./DPPA (8:1:1) 8 1,2 19 DAPC/DPPA (100:4)* 5 2,4 18
Selitys: 15 DAPC = diarakidoyylifosfatidyylikoliini DSPC = distearoyylifosfatidyylikoliini DPPG = dipalmitoyylifosfatidyyliglyseroli (happomuoto) DPPA = dipalmitoyylifosfatidiinihappo kol. = kolesteroli 20 palm.h. = palmitiinihappo
Plur. F68 = PluronicR F-68 * Tässä kokeessa käytettiin CF4:a kaasuna SF6:n sijasta » · ·' Saatujen suspensioiden mikrokuplapitoisuus oli kai- • 25 kissa tapauksissa suuri, mikä osoittaa, ettei fosfolipi- dien muuttaminen alussa liposomeiksi ollut välttämätöntä. Nämä suspensiot laimennettiin NaCl-liuoksella (1,15 mol/1) ja niitä injektoitiin pienikokoisiin sikoihin esimerkissä 3 kuvatulla tavalla. Kaikissa tapauksissa saatiin aikaan : 30 erinomainen opasiteetin kasvu oikeassa ja vasemmassa kam miossa samoin kuin sydämensisäisten rajojen erinomainen näkyminen lipidiannoksen ollessa 10 - 50 pg/painokilo tai * > * ' : pienempi.
2i 1 ΐΓοκχ
Esimerkki 6 PEG 2000 (2 g), DAPC (9,6 mg) ja DPPA (0,4 mg) liuotettiin 20 ml:aan t-butanolia ja liuosta kylmäkuivat-tiin yön yli paineen 20 Pa (0,2 mbar) alaisena. Saatu jau-5 he saatettiin SF6:n vaikutuksen alaiseksi ja liuotettiin sitten 20 ml:aan tislattua vettä. Suspensio, joka sisälsi 1,4·109 kuplaa/ml (määritettynä hemasytometrisesti), laitettiin ruiskuun, joka suljettiin ja jätettiin vaaka-asentoon 16 tunniksi. Liuoksen pinnalla oli nähtävissä valkoi-10 nen kuplakerros. Alempi faasi (16 - 18 ml) poistettiin pitäen ruisku vaaka-asennossa. Ruiskuun imettiin yhtä suuri tilavuus tuoretta SF6:lla kyllästettyä tislattua vettä ja kuplat homogenoitiin vesifaasiin sekoittamalla. Saatiin kaksi erilaista mikrokuplapopulaatiota, ts. kooltaan suu-15 ria ja keskinkertaisia kuplia, toistettaessa dekantointeja lyhyen ajan kuluessa; suuria kuplia saatiin talteen vain 10 - 15 min:n kuluttua ja keskikokoisia kuplia 30 - 45 min:n kuluttua. Näitä dekantointeja toistettiin 10 kertaa näiden kahden populaatiotyypin kapeiden kuplakokojakautu- 20 mien aikaansaamiseksi ja kaikkien mikrokupliin liittymättömien fosfolipidien poistamiseksi. Kaikki suuria kuplia sisältävät faasit yhdistettiin ("suuret kuplat"). Vastaavasti yhdistettiin keskikokoisia kuplia sisältävät fraktiot ("keskikokoiset kuplat"). Osia näistä kahdesta kup-25 lapopulaatiosta kylmäkuivattiin ja analysoitiin sitten ; ' HPLC:llä kussakin fraktiossa läsnä olevien fosfolipidien määrän määrittämiseksi. Suuria kuplia käsittävä fraktio v : sisälsi 2,5·107 kuplaa/ml, joiden lukumediaaninen läpimitta 011 3,1 pm, ja 1,6 pg fosfolipidejä 107 kuplaa kohden. Vii- • ; : 30 meksi mainittu arvo sopii jälleen erinomaisesti yhteen : ; teoreettisen määrän, 1,35 pg 107 kuplaa kohden, kanssa.
Nämä tulokset osoittavat lisäksi, että tässä esitettyjen I > i mikrokuplasuspensioiden stabiilius johtuu todennäköisesti *··’ fosfolipidiyksimolekyylikerrosten muodostumisesta mikro- 35 kuplien ympärille.
Claims (22)
1. Injektoitavissa oleva, kaasulla täytettyjä mik-rokuplia vesipitoisessa kantajanesteessä sisältävä suspen- 5 sio, joka on käyttökelpoinen varjoaineena ultraäänikaikuku-vauksessa ja käsittää vähintään 107 mikrokuplaa millilitraa kohden ja amfipaattisia yhdisteitä, joista vähintään yksi on mikrokuplien kokoonpainumista estävä fosfolipidistabi-lointiaine, tunnettu siitä, että kantajanesteen 10 fosfolipidipitoisuus on pienempi kuin 0,01 paino-% ja vähintään pitoisuus, jonka vallitessa fosfolipidimolekyylejä on läsnä vain kaasumikrokuplan ja nesteen välisellä rajapinnalla.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen injektoitavissa 15 oleva suspensio, tunnettu siitä, että mikrokupla- pitoisuus on 108 - 1010 kuplaa millilitraa kohden.
3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen injektoitavissa oleva suspensio, tunnettu siitä, että fosfolipidipitoisuus on yli 0,00013 paino-%.
4. Minkä tahansa edeltävän patenttivaatimuksen mu kainen injektoitavissa oleva suspensio, tunnettu : ·.. siitä, että nestemäinen kantaja käsittää lisäksi vesi- t : liukoisia poly- ja oligosakkarideja, sokereita ja hydrofii- lisiä polymeerejä, kuten polyeteeniglykoleja, stabilointi-25 aineina.
^ 5. Minkä tahansa edeltävän patenttivaatimuksen mu- ·;;; kainen injektoitavissa oleva suspensio, tunnettu • siitä, että fosfolipidit ovat ainakin osittain lamellaari-sessa tai laminaarisessa muodossa ja niinä tulevat kysee- • · i.i i 30 seen lesitiinit, kuten fosfatidiinihappo, fosfatidyyliko- • ♦ f liini, fosfatidyylietanoliamiini, fosfatidyyliseriini, fos-. fatidyyliglyseroli, fosfatidyyli-inositoli, kardiolipiini ,···, ja sfingomyeliini.
6. Patenttivaatimuksen 4 tai 5 mukainen injektoita-35 vissa oleva suspensio, tunnettu siitä, että se si- •*it/ sältää lisäksi aineita, jotka vaikuttavat fosfolipideihin 115953 ja joina tulevat kyseeseen fosfatidyyliglyseroli, fosfati-diinihappo, disetyylifosfaatti, kolesteroli, ergosteroli, fytosteroli, sitosteroli, lanosteroli, tokoferoli, propyy-ligallaatti, askorbyylipalmitaatti ja butyloitu hydroksito-5 lueeni.
7. Patenttivaatimuksen 1, 2 tai 3 mukainen injek toitavissa oleva suspensio, tunnettu siitä, että fosfolipidit ovat kylmäkuivauksella tai suihkukuivauksella saatujen jauheiden muodossa.
8. Patenttivaatimuksen 1 mukainen injektoitavissa oleva suspensio, tunnettu siitä, että se sisältää noin 108 - 109 mikrokuplaa millilitraa kohden ja mikrokup-lien koko on 0,5 - 10 pm ja muuttuu vähän tai ei muutu ollenkaan säilytyksen aikana.
9. Patenttivaatimuksen 1 mukainen injektoitavissa oleva suspensio, tunnettu siitä, että nestemäinen kantaja käsittää lisäksi korkeintaan 50 paino-% ei-laminaarisia pinta-aktiivisuusaineita, joina tulevat kyseeseen rasvahapot, rasvahappojen ja alkoholien esterit ja 20 eetterit polyolien, kuten polyalkeeniglykolien, polyalky- lenoitujen sokereiden ja muiden hiilihydraattien, kanssa ja polyalkylenoitu glyseroli.
10. Minkä tahansa edeltävän patenttivaatimuksen mu-...j kainen injektoitavissa oleva suspensio, tunnettu 25 siitä, että mikrokuplat täytetään SFörlla, CF^lla, freo- * · i!t neilla tai ilmalla.
'!)! 11. Menetelmä minkä tahansa patenttivaatimuksen 1 - * 10 mukaisien ilmalla tai kaasulla täytettyjä mikrokuplia sisältävien suspensioiden valmistamiseksi, jossa valitaan • · •M : 30 vähintään yksi kalvon muodostava pinta-aktiivisuusaine, :li(: muutetaan pinta-aktiivisuusaine jauheeksi, saatetaan jauhe . .·. kosketukseen ilman tai muun kaasun kanssa ja sekoitetaan jauhemainen pinta-aktiivisuusaine vesipitoisen nestemäisen kantajan kanssa, tunnettu siitä, että laitetaan 35 suspensio säiliöön, muodostetaan kaasulla täytettyjä mikro-• : kuplia käsittävä kerros säiliön yläosaan, erotetaan muodos- 115953 tettu mikrokuplakerros ja pestään mikrokuplat mikrokuplien sisältämällä kaasulla kyllästetyllä vesiliuoksella.
12. Patenttivaatimuksen 11 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että ennen muuttamistaan jauheeksi 5 kalvon muodostava pinta-aktiivisuusaine lamellarisoidaan ainakin osittain.
13. Patenttivaatimuksen 12 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että ennen saattamistaan kosketukseen ilman tai muun kaasun kanssa osittain lamellarisoitu 10 pinta-aktiivisuusaine sekoitetaan vesipitoisen nestemäisen kantajan kanssa.
14. Patenttivaatimuksen 12 tai 13 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että nestemäinen kantaja sisältää lisäksi stabiloivia yhdisteitä, joina tulevat kysee- 15 seen vesiliukoiset proteiinit, polypeptidit, sokerit, pölyjä oligosakkaridit ja hydrofiiliset polymeerit.
15. Patenttivaatimuksen 12 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että muuttaminen tehdään päällystämällä liukoisista tai liukenemattomista materiaaleista 20 koostuvat hiukkaset pinta-aktiivisuusaineella, jättämällä päällystetyt hiukkaset hetkeksi ilman tai kaasun vaikutuk-: ·.. sen alaisiksi ja sekoittamalla päällystetyt hiukkaset vesi- : pitoisen nestemäisen kantajan kanssa.
16. Patenttivaatimuksen 12 mukainen menetelmä, 25 tunnettu siitä, että muuttaminen tehdään äänikäsit- y telemällä tai homogenoimalla korkean paineen alaisena kal- von muodostavien lipidien vesiliuos, joka toimenpide johtaa • ainakin osittain liposomien muodostumiseen.
17. Patenttivaatimuksen 16 mukainen menetelmä, • · h: : 30 tunnettu siitä, että ennen ainakin osittain lamel- ·,,,' larisoidun pinta-aktiivisuusaineen saattamista kosketukseen . ilman tai muun kaasun kanssa liposomeja sisältävä liuos ,<»*, kylmäkuivataan.
18. Patenttivaatimusten 16 ja 17 mukainen menetel- 35 mä, tunnettu siitä, että kalvon muodostavien lipi- jj dien vesiliuos sisältää myös viskositeettia parantavia 115953 aineita tai stabilointiaineita, joina tulevat kyseeseen hydrofiiliset polymeerit ja hiilihydraatit ja joiden painosuhde lipideihin on 10:1 - 1 000:1.
19. Menetelmä minkä tahansa patenttivaatimuksen 1 -5 10 mukaisen ilmalla tai kaasulla täytettyjä mikrokuplia si sältävän suspension valmistamiseksi, joka suspensio käsittää kalvon muodostavaa pinta-aktiivisuusainetta, hydrofii-listä stabilointiainetta ja vesipitoista nestemäistä kantajaa, tunnettu siitä, että kalvon muodostava pinta-10 aktiivisuusaine ja hydrofiilinen stabilointiaine liuotetaan orgaaniseen liuotteeseen, kylmäkuivataan liuos, niin että muodostuu kuiva jauhe, saatetaan jauhe kosketukseen ilman tai muun kaasun kanssa ja sekoitetaan mainittu jauhe vesipitoisen kantajan kanssa.
20. Patenttivaatimuksen 19 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että hydrofiilinen stabilointiaine on polyeteeniglykoli, polyvinyylipyrrolidoni, polyvinyyli-alkoholi, glykolihappo, omenahappo tai maltoli.
21. Patenttivaatimuksen 19 tai 20 mukainen menetel-20 mä, tunnettu siitä, että orgaaninen liuote on ter- tiaarinen butanoli, 2-metyyli-2-butanoli tai C2C14F2.
22. Menetelmä patenttivaatimuksen 1 mukaisen, kaa- : sulia täytettyjä mikrokuplia sisältävän, injektoitavissa olevan suspension valmistamiseksi, tunnettu siitä, 25 että suspendoidaan vesipitoiseen nestemäiseen kantajaan la-minarisoidut fosfolipidit ja mahdollisesti muut lisäaineet, jotka mainitut fosfolipidit ovat olleet kosketuksessa mai-* ’ nitun kaasun kanssa ennen suspendointia tai sen jälkeen, sellaisissa olosuhteissa että suspensioon muodostuu mainit-: 30 tujen mikrokuplien pitoisuus, joka on riittävä kaikukuvaus- ί.,,·’ vasteen aikaansaantiin, annetaan osan mainituista fosfoli- . .·, pideistä muodostaa stabiloiva kerros mainittujen kuplien ... ympärille ja poistetaan sen jälkeen kanta j anesteestä yli- määräiset fosfolipidit, jotka eivät osallistu mikrokuplien ’·,·,· 35 stabilointiin. 29 1 15953
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP92810837 | 1992-11-02 | ||
| EP92810837 | 1992-11-02 | ||
| PCT/EP1993/002915 WO1994009829A1 (en) | 1992-11-02 | 1993-10-21 | Stable microbubble suspensions as enhancement agents for ultrasound echography |
| EP9302915 | 1993-10-21 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI943167A0 FI943167A0 (fi) | 1994-07-01 |
| FI943167A FI943167A (fi) | 1994-07-01 |
| FI115953B true FI115953B (fi) | 2005-08-31 |
Family
ID=8212014
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI943167A FI115953B (fi) | 1992-11-02 | 1994-07-01 | Stabiileja mikrokuplasuspensioita vahvistusaineiksi ultraäänikaikukuvausta varten |
Country Status (22)
| Country | Link |
|---|---|
| US (7) | US5445813A (fi) |
| EP (1) | EP0619743B1 (fi) |
| JP (1) | JP3135919B2 (fi) |
| KR (1) | KR100216138B1 (fi) |
| CN (1) | CN1069838C (fi) |
| AT (1) | ATE146972T1 (fi) |
| AU (3) | AU666238B2 (fi) |
| CA (1) | CA2125027C (fi) |
| DE (2) | DE69307124T2 (fi) |
| DK (1) | DK0619743T3 (fi) |
| ES (1) | ES2097548T3 (fi) |
| FI (1) | FI115953B (fi) |
| GR (1) | GR3022826T3 (fi) |
| HU (1) | HU227043B1 (fi) |
| IL (1) | IL107453A (fi) |
| IS (1) | IS1625B (fi) |
| LU (1) | LU90837I2 (fi) |
| NL (1) | NL300061I2 (fi) |
| NO (1) | NO308830B1 (fi) |
| NZ (2) | NZ257115A (fi) |
| WO (1) | WO1994009829A1 (fi) |
| ZA (1) | ZA938117B (fi) |
Families Citing this family (180)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6001335A (en) | 1989-12-22 | 1999-12-14 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Contrasting agents for ultrasonic imaging and methods for preparing the same |
| US5469854A (en) | 1989-12-22 | 1995-11-28 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Methods of preparing gas-filled liposomes |
| US6146657A (en) | 1989-12-22 | 2000-11-14 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Gas-filled lipid spheres for use in diagnostic and therapeutic applications |
| US5705187A (en) | 1989-12-22 | 1998-01-06 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Compositions of lipids and stabilizing materials |
| US5352435A (en) * | 1989-12-22 | 1994-10-04 | Unger Evan C | Ionophore containing liposomes for ultrasound imaging |
| US5542935A (en) | 1989-12-22 | 1996-08-06 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Therapeutic delivery systems related applications |
| US5776429A (en) * | 1989-12-22 | 1998-07-07 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Method of preparing gas-filled microspheres using a lyophilized lipids |
| US5656211A (en) | 1989-12-22 | 1997-08-12 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Apparatus and method for making gas-filled vesicles of optimal size |
| US5733572A (en) | 1989-12-22 | 1998-03-31 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Gas and gaseous precursor filled microspheres as topical and subcutaneous delivery vehicles |
| US5585112A (en) | 1989-12-22 | 1996-12-17 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Method of preparing gas and gaseous precursor-filled microspheres |
| US6088613A (en) | 1989-12-22 | 2000-07-11 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Method of magnetic resonance focused surgical and therapeutic ultrasound |
| US5922304A (en) | 1989-12-22 | 1999-07-13 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Gaseous precursor filled microspheres as magnetic resonance imaging contrast agents |
| US5305757A (en) | 1989-12-22 | 1994-04-26 | Unger Evan C | Gas filled liposomes and their use as ultrasonic contrast agents |
| US5773024A (en) | 1989-12-22 | 1998-06-30 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Container with multi-phase composition for use in diagnostic and therapeutic applications |
| US5580575A (en) | 1989-12-22 | 1996-12-03 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Therapeutic drug delivery systems |
| US6551576B1 (en) | 1989-12-22 | 2003-04-22 | Bristol-Myers Squibb Medical Imaging, Inc. | Container with multi-phase composition for use in diagnostic and therapeutic applications |
| US7083778B2 (en) * | 1991-05-03 | 2006-08-01 | Bracco International B.V. | Ultrasound contrast agents and methods of making and using them |
| US5578292A (en) | 1991-11-20 | 1996-11-26 | Bracco International B.V. | Long-lasting aqueous dispersions or suspensions of pressure-resistant gas-filled microvesicles and methods for the preparation thereof |
| US6613306B1 (en) | 1990-04-02 | 2003-09-02 | Bracco International B.V. | Ultrasound contrast agents and methods of making and using them |
| US6989141B2 (en) * | 1990-05-18 | 2006-01-24 | Bracco International B.V. | Ultrasound contrast agents and methods of making and using them |
| US20040208826A1 (en) * | 1990-04-02 | 2004-10-21 | Bracco International B.V. | Ultrasound contrast agents and methods of making and using them |
| US5445813A (en) * | 1992-11-02 | 1995-08-29 | Bracco International B.V. | Stable microbubble suspensions as enhancement agents for ultrasound echography |
| US20010024638A1 (en) * | 1992-11-02 | 2001-09-27 | Michel Schneider | Stable microbubble suspensions as enhancement agents for ultrasound echography and dry formulations thereof |
| IN172208B (fi) | 1990-04-02 | 1993-05-01 | Sint Sa | |
| USRE39146E1 (en) | 1990-04-02 | 2006-06-27 | Bracco International B.V. | Long-lasting aqueous dispersions or suspensions of pressure-resistant gas-filled microvesicles and methods for the preparation thereof |
| US20030194376A1 (en) * | 1990-05-18 | 2003-10-16 | Bracco International B.V. | Ultrasound contrast agents and methods of making and using them |
| AU636481B2 (en) * | 1990-05-18 | 1993-04-29 | Bracco International B.V. | Polymeric gas or air filled microballoons usable as suspensions in liquid carriers for ultrasonic echography |
| GB9106686D0 (en) * | 1991-03-28 | 1991-05-15 | Hafslund Nycomed As | Improvements in or relating to contrast agents |
| US5205290A (en) | 1991-04-05 | 1993-04-27 | Unger Evan C | Low density microspheres and their use as contrast agents for computed tomography |
| US5874062A (en) | 1991-04-05 | 1999-02-23 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Methods of computed tomography using perfluorocarbon gaseous filled microspheres as contrast agents |
| US5409688A (en) * | 1991-09-17 | 1995-04-25 | Sonus Pharmaceuticals, Inc. | Gaseous ultrasound contrast media |
| US6723303B1 (en) | 1991-09-17 | 2004-04-20 | Amersham Health, As | Ultrasound contrast agents including protein stabilized microspheres of perfluoropropane, perfluorobutane or perfluoropentane |
| US6875420B1 (en) | 1991-09-17 | 2005-04-05 | Amersham Health As | Method of ultrasound imaging |
| MX9205298A (es) | 1991-09-17 | 1993-05-01 | Steven Carl Quay | Medios gaseosos de contraste de ultrasonido y metodo para seleccionar gases para usarse como medios de contraste de ultrasonido |
| GB9200388D0 (en) * | 1992-01-09 | 1992-02-26 | Nycomed As | Improvements in or relating to contrast agents |
| IL104084A (en) | 1992-01-24 | 1996-09-12 | Bracco Int Bv | Sustainable aqueous suspensions of pressure-resistant and gas-filled blisters, their preparation, and contrast agents containing them |
| IL108416A (en) | 1993-01-25 | 1998-10-30 | Sonus Pharma Inc | Colloids with phase difference as contrast ultrasound agents |
| NZ262237A (en) * | 1993-01-25 | 1997-06-24 | Sonus Pharma Inc | Ultrasound contrast agents comprising phase shift colloids having a boiling point below the body temperature of the animal it is used in |
| US5558855A (en) * | 1993-01-25 | 1996-09-24 | Sonus Pharmaceuticals | Phase shift colloids as ultrasound contrast agents |
| US5695740A (en) * | 1993-05-12 | 1997-12-09 | The Board Of Regents Of The University Of Nebraska | Perfluorocarbon ultrasound contrast agent comprising microbubbles containing a filmogenic protein and a saccharide |
| US5701899A (en) * | 1993-05-12 | 1997-12-30 | The Board Of Regents Of The University Of Nebraska | Perfluorobutane ultrasound contrast agent and methods for its manufacture and use |
| US5798091A (en) * | 1993-07-30 | 1998-08-25 | Alliance Pharmaceutical Corp. | Stabilized gas emulsion containing phospholipid for ultrasound contrast enhancement |
| PT711179E (pt) * | 1993-07-30 | 2005-03-31 | Imcor Pharmaceutical Company | Composicoes de microbolhas estabilizadas para ultra-som |
| ES2192572T3 (es) * | 1993-12-15 | 2003-10-16 | Bracco Research Sa | Medios de contraste de ultrasonidos, agentes de contraste que contienen los medios, y metodo. |
| DE4406474A1 (de) | 1994-02-23 | 1995-08-24 | Schering Ag | Gas enthaltende Mikropartikel, diese enthaltende Mittel, deren Verwendung in der Ultraschalldiagnostik, sowie Verfahren zur Herstellung der Partikel und Mittel |
| US5736121A (en) | 1994-05-23 | 1998-04-07 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Stabilized homogenous suspensions as computed tomography contrast agents |
| US5540909A (en) * | 1994-09-28 | 1996-07-30 | Alliance Pharmaceutical Corp. | Harmonic ultrasound imaging with microbubbles |
| US6743779B1 (en) | 1994-11-29 | 2004-06-01 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Methods for delivering compounds into a cell |
| US5830430A (en) | 1995-02-21 | 1998-11-03 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Cationic lipids and the use thereof |
| US5997898A (en) | 1995-06-06 | 1999-12-07 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Stabilized compositions of fluorinated amphiphiles for methods of therapeutic delivery |
| US6033645A (en) | 1996-06-19 | 2000-03-07 | Unger; Evan C. | Methods for diagnostic imaging by regulating the administration rate of a contrast agent |
| US6231834B1 (en) | 1995-06-07 | 2001-05-15 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Methods for ultrasound imaging involving the use of a contrast agent and multiple images and processing of same |
| WO2004073750A1 (en) * | 1995-06-07 | 2004-09-02 | Harald Dugstad | Improvements in or relating to contrast agents |
| US6521211B1 (en) | 1995-06-07 | 2003-02-18 | Bristol-Myers Squibb Medical Imaging, Inc. | Methods of imaging and treatment with targeted compositions |
| US5897851A (en) * | 1995-06-07 | 1999-04-27 | Sonus Pharmaceuticals, Inc. | Nucleation and activation of a liquid-in-liquid emulsion for use in ultrasound imaging |
| US5804162A (en) * | 1995-06-07 | 1998-09-08 | Alliance Pharmaceutical Corp. | Gas emulsions stabilized with fluorinated ethers having low Ostwald coefficients |
| US6139819A (en) | 1995-06-07 | 2000-10-31 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Targeted contrast agents for diagnostic and therapeutic use |
| US5648098A (en) * | 1995-10-17 | 1997-07-15 | The Board Of Regents Of The University Of Nebraska | Thrombolytic agents and methods of treatment for thrombosis |
| DE19602930A1 (de) * | 1996-01-18 | 1997-07-24 | Schering Ag | Poröse Matrices aus niedermolekularen Substanzen zur Genierung stabiler Gasblasensuspensionen, deren Verwendung als Ultraschallkontrastmittel sowie Verfahren zu deren Herstellung |
| ES2197986T3 (es) * | 1996-02-19 | 2004-01-16 | Amersham Health As | Mejoras introducidas en o relacionadas con agentes de contraste. |
| US5611344A (en) * | 1996-03-05 | 1997-03-18 | Acusphere, Inc. | Microencapsulated fluorinated gases for use as imaging agents |
| CZ281298A3 (cs) * | 1996-03-05 | 1999-01-13 | Acusphere, Inc. | Fluorované plyny v mikrokapslích jako zobrazující činidla pro ultrazvukové vyšetření |
| US6245747B1 (en) | 1996-03-12 | 2001-06-12 | The Board Of Regents Of The University Of Nebraska | Targeted site specific antisense oligodeoxynucleotide delivery method |
| WO1997040679A1 (en) | 1996-05-01 | 1997-11-06 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Methods for delivering compounds into a cell |
| US5849727A (en) * | 1996-06-28 | 1998-12-15 | Board Of Regents Of The University Of Nebraska | Compositions and methods for altering the biodistribution of biological agents |
| US5837221A (en) * | 1996-07-29 | 1998-11-17 | Acusphere, Inc. | Polymer-lipid microencapsulated gases for use as imaging agents |
| ATE411055T1 (de) * | 1996-08-02 | 2008-10-15 | Ge Healthcare As | Verbesserungen für oder in bezug auf kontrastmittel |
| US6414139B1 (en) | 1996-09-03 | 2002-07-02 | Imarx Therapeutics, Inc. | Silicon amphiphilic compounds and the use thereof |
| US5846517A (en) | 1996-09-11 | 1998-12-08 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Methods for diagnostic imaging using a renal contrast agent and a vasodilator |
| ES2189974T3 (es) | 1996-09-11 | 2003-07-16 | Imarx Pharmaceutical Corp | Procedimientos mejorados para la obtencion de imagenes de diagnostico usando un agente de contraste y un vasodilatador. |
| US6143276A (en) | 1997-03-21 | 2000-11-07 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Methods for delivering bioactive agents to regions of elevated temperatures |
| US6120751A (en) | 1997-03-21 | 2000-09-19 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Charged lipids and uses for the same |
| US6090800A (en) | 1997-05-06 | 2000-07-18 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Lipid soluble steroid prodrugs |
| US6537246B1 (en) | 1997-06-18 | 2003-03-25 | Imarx Therapeutics, Inc. | Oxygen delivery agents and uses for the same |
| US5962015A (en) * | 1997-05-02 | 1999-10-05 | Kobo Products S.A.R.L. | Stabilized liposomes |
| US6416740B1 (en) | 1997-05-13 | 2002-07-09 | Bristol-Myers Squibb Medical Imaging, Inc. | Acoustically active drug delivery systems |
| GB9717588D0 (en) | 1997-08-19 | 1997-10-22 | Nycomed Imaging As | Improvements in or relating to contrast agents |
| GB9717542D0 (en) | 1997-08-19 | 1997-10-22 | Nycomed Imaging As | Process |
| US6548047B1 (en) | 1997-09-15 | 2003-04-15 | Bristol-Myers Squibb Medical Imaging, Inc. | Thermal preactivation of gaseous precursor filled compositions |
| ZA9811087B (en) * | 1997-12-04 | 1999-06-03 | Bracco Research Sa | Automatic liquid injection system and method |
| US6123923A (en) | 1997-12-18 | 2000-09-26 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Optoacoustic contrast agents and methods for their use |
| US20010003580A1 (en) | 1998-01-14 | 2001-06-14 | Poh K. Hui | Preparation of a lipid blend and a phospholipid suspension containing the lipid blend |
| AU753196B2 (en) * | 1998-02-09 | 2002-10-10 | Bracco Research S.A. | Targeted delivery of biologically active media |
| DE19840532A1 (de) | 1998-08-28 | 2000-03-09 | Schering Ag | Mit Ultraschallkonstrastmittel gefüllte Spritze mit einer mechanischen Bewegungsvorrichtung |
| DE19840536A1 (de) | 1998-08-28 | 2000-03-09 | Schering Ag | Mit Ultraschallkontrastmittel gefüllte Spritze mit einer magnetischen Bewegungsvorrichtung |
| US6187665B1 (en) * | 1999-01-14 | 2001-02-13 | Lucent Technologies, Inc. | Process for deuterium passivation and hot carrier immunity |
| US6575930B1 (en) | 1999-03-12 | 2003-06-10 | Medrad, Inc. | Agitation devices and dispensing systems incorporating such agitation devices |
| FR2791249B1 (fr) | 1999-03-25 | 2001-06-15 | Edap Technomed | Milieu de couplage pour ultrasons de puissance |
| US6514209B1 (en) | 1999-06-07 | 2003-02-04 | Drexel University | Method of enhancing ultrasonic techniques via measurement of ultraharmonic signals |
| US6210611B1 (en) * | 1999-11-30 | 2001-04-03 | Duke University | Methods for producing gas microbubbles having lipid-containing shells formed thereon |
| EP2286843A3 (en) | 2000-06-02 | 2011-08-03 | Bracco Suisse SA | Compounds for targeting endothelial cells |
| EP1387637B1 (en) * | 2001-04-06 | 2007-10-31 | Bracco Research S.A. | Apparatus for measuring local physical parameters in a fluid filled cavity |
| US6855561B2 (en) * | 2001-09-10 | 2005-02-15 | Quidel Corporation | Method for adding an apparent non-signal line to a lateral flow assay |
| US8623822B2 (en) | 2002-03-01 | 2014-01-07 | Bracco Suisse Sa | KDR and VEGF/KDR binding peptides and their use in diagnosis and therapy |
| ES2506142T3 (es) | 2002-03-01 | 2014-10-13 | Dyax Corp. | Péptidos de unión a KDR y a VEGF/KDR y su uso en diagnóstico |
| EP1587944A4 (en) | 2002-03-01 | 2007-03-21 | Dyax Corp | KDR AND VEGF / KDR BINDING PEPTIDES AND THEIR USE FOR DIAGNOSTIC AND THERAPEUTIC PURPOSES |
| US7261876B2 (en) | 2002-03-01 | 2007-08-28 | Bracco International Bv | Multivalent constructs for therapeutic and diagnostic applications |
| US7794693B2 (en) | 2002-03-01 | 2010-09-14 | Bracco International B.V. | Targeting vector-phospholipid conjugates |
| US7211240B2 (en) | 2002-03-01 | 2007-05-01 | Bracco International B.V. | Multivalent constructs for therapeutic and diagnostic applications |
| US20040126400A1 (en) * | 2002-05-03 | 2004-07-01 | Iversen Patrick L. | Delivery of therapeutic compounds via microparticles or microbubbles |
| CA2532324A1 (en) * | 2002-07-11 | 2004-01-22 | Targeson, Llc | Microbubble compositions, and methods for preparing and using same |
| US7931595B2 (en) | 2002-11-29 | 2011-04-26 | Ge Healthcare As | Ultrasound triggering method to reduce cardiac arrhythmia |
| US20070128117A1 (en) * | 2003-02-04 | 2007-06-07 | Bracco International B.V. | Ultrasound contrast agents and process for the preparation thereof |
| DE602004029010D1 (de) * | 2003-02-04 | 2010-10-21 | Bracco Suisse Sa | Ultraschall kontrastmittel und verfahren zur erstellung |
| JP2006517558A (ja) | 2003-02-13 | 2006-07-27 | ブラッコ イメージング エッセ ピ ア | コントラスト増強ｘ線位相画像診断 |
| DK2284180T3 (en) | 2003-03-03 | 2015-12-21 | Dyax Corp | Uses of peptides that specifically bind to the HGF receptor (cMET) |
| ITFI20030077A1 (it) * | 2003-03-26 | 2004-09-27 | Actis Active Sensors S R L | Metodo per l'indagine ecografica tramite mezzi di contrasto |
| US8021303B2 (en) | 2003-06-12 | 2011-09-20 | Bracco Research Sa | System for extracting morphological information through a perfusion assessment process |
| WO2004110279A1 (en) | 2003-06-12 | 2004-12-23 | Bracco Research Sa | Blood flow estimates through replenishment curve fitting in ultrasound contrast imaging |
| EP1701745B1 (en) * | 2003-12-22 | 2014-12-10 | Bracco Suisse S.A. | Gas-filled microvesicle assembly for contrast imaging |
| AU2004308757B2 (en) * | 2003-12-22 | 2010-06-17 | Bracco Suisse S.A. | Assembly of gas-filled microvesicle with active component for contrast imaging |
| US20080281205A1 (en) * | 2004-01-16 | 2008-11-13 | Morteza Naghavi | Methods and Apparatuses For Medical Imaging |
| EP1715897B2 (en) | 2004-01-20 | 2013-10-30 | Sunnybrook and Women's College Health Sciences Centre | High frequency ultrasound imaging using contrast agents |
| US8012457B2 (en) | 2004-06-04 | 2011-09-06 | Acusphere, Inc. | Ultrasound contrast agent dosage formulation |
| GB2445322B (en) | 2004-08-13 | 2008-08-06 | Stichting Tech Wetenschapp | Intravasular ultrasound techniques |
| US9248204B2 (en) | 2004-08-18 | 2016-02-02 | Bracco Suisse S.A. | Gas-filled microvesicles composition for contrast imaging |
| EP1833373B1 (en) | 2004-12-23 | 2015-12-16 | Bracco Suisse SA | A perfusion assessment method and system based on bolus administration |
| EP1853333A1 (en) * | 2004-12-23 | 2007-11-14 | Bracco Research S.A. | Liquid transfer device for medical dispensing containers |
| US7846100B2 (en) | 2005-03-03 | 2010-12-07 | Bracco International Bv | Medical imaging system based on a targeted contrast agent |
| EP1714642A1 (en) * | 2005-04-18 | 2006-10-25 | Bracco Research S.A. | Pharmaceutical composition comprising gas-filled microcapsules for ultrasound mediated delivery |
| CA2624608C (en) | 2005-11-10 | 2016-06-07 | Bracco Research Sa | Detection of immobilized contrast agent in medical imaging applications based on flow dynamics analysis |
| EP1952349B1 (en) | 2005-11-10 | 2018-10-17 | Bracco Suisse SA | Instantaneous visualization of contrast agent concentration in imaging applications |
| CA2826960A1 (en) | 2005-12-09 | 2007-06-14 | Bracco Suisse Sa | Targeting vector-phospholipid conjugates |
| EP1797919A1 (en) * | 2005-12-16 | 2007-06-20 | Bracco Research S.A. | Liquid transfer device for medical dispensing containers |
| US7967753B2 (en) * | 2006-08-01 | 2011-06-28 | Stichting Voor de Technische Wetenschappen of Van Vollenhovenlaan | Pulse inversion sequences for nonlinear imaging |
| ITBO20060593A1 (it) * | 2006-08-04 | 2008-02-05 | Francesca Cavalieri | Microbolle realizzate in alcol polivinilico e relativo caricamento delle stesse con ossido di azoto |
| WO2008028917A1 (en) | 2006-09-05 | 2008-03-13 | Bracco Research Sa | Gas-filled microvesicles with polymer-modified lipids |
| EP2117603A2 (en) * | 2006-12-19 | 2009-11-18 | Bracco International B.V. | Targeting and therapeutic compounds and gas-filled microvesicles comprising said compounds |
| JP5313915B2 (ja) | 2006-12-21 | 2013-10-09 | ブラッコ・シュイス・ソシエテ・アノニム | 医用画像用途における固定化された造影剤の脱離の検知 |
| US10130342B2 (en) | 2007-12-28 | 2018-11-20 | Bracco Suisse Sa | Initialization of fitting parameters for perfusion assessment based on bolus administration |
| CN101917908B (zh) | 2007-12-28 | 2012-10-03 | 博莱科瑞士股份有限公司 | 医学成像应用中对固定造影剂的量化分析 |
| EP2090322A1 (en) | 2008-02-18 | 2009-08-19 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | Use of fsh receptor ligands for diagnosis and therapy of cancer |
| GB0811856D0 (en) * | 2008-06-27 | 2008-07-30 | Ucl Business Plc | Magnetic microbubbles, methods of preparing them and their uses |
| CA2748995C (en) | 2008-10-07 | 2018-01-16 | Bracco Suisse Sa | Targeting construct comprising anti-polymer antibody and liposomes or microvesicles binding to the same |
| EP2189112A1 (en) | 2008-11-24 | 2010-05-26 | Bracco Research S.A. | Real-time perfusion imaging and quantification |
| EP2376145B1 (en) | 2008-12-16 | 2013-10-16 | Bracco Suisse SA | Device for bolus administration |
| CA2761596C (en) | 2009-06-08 | 2017-11-07 | Bracco Suisse S.A. | Auto-scaling of parametric images |
| TWI551343B (zh) * | 2009-08-06 | 2016-10-01 | Ligaric Co Ltd | Composition and method for producing the same |
| AU2010291254B2 (en) | 2009-09-01 | 2016-08-11 | Bracco Suisse Sa | Parametric images based on dynamic behavior over time |
| EP2335675B1 (de) | 2009-12-10 | 2015-02-18 | Neubourg Skin Care GmbH & Co. KG | Emulgatorfreie, Polymer-stabilisierte Schaumformulierungen |
| EP2345732A1 (en) | 2010-01-19 | 2011-07-20 | Universite Paris Descartes | Methods for intracellular delivery of nucleic acids |
| EP2544593B1 (en) | 2010-03-09 | 2014-12-31 | Bracco Suisse SA | Initialization of fitting parameters for perfusion assessment based on bolus administration |
| CN103079599B (zh) | 2010-08-09 | 2017-05-10 | 博莱科瑞士股份有限公司 | 靶向气体填充微囊 |
| RU2013105016A (ru) | 2010-08-09 | 2014-09-20 | Инсэрм (Институт Насьональ Де Ла Сант Эт Де Ла Решерш Медикаль) | Способы и фармацевтические композиции для лечения глазного заболевания у субъекта |
| WO2012085072A1 (en) | 2010-12-24 | 2012-06-28 | Bracco Suisse Sa | Gas-filled microvesicles for use as vaccine |
| EP2474327A1 (en) | 2011-01-07 | 2012-07-11 | RWTH Aachen | Microdosing of ultrasound contrast agents |
| CA2829791A1 (en) | 2011-03-28 | 2012-10-04 | Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem Ltd. | Sustained-release injectable formulation |
| WO2012136813A2 (en) | 2011-04-07 | 2012-10-11 | Universitetet I Oslo | Agents for medical radar diagnosis |
| EP2545908A1 (en) | 2011-07-11 | 2013-01-16 | RWTH Aachen | Medium for microbubbles or microparticles and preparation thereof |
| EP2934740B1 (en) | 2012-12-21 | 2019-12-11 | Bracco Suisse SA | Gas-filled microvesicles |
| US9734584B2 (en) | 2012-12-21 | 2017-08-15 | Bracco Suisse Sa | Segmentation in diagnostic imaging applications based on statistical analysis over time |
| US20160030603A1 (en) | 2013-03-15 | 2016-02-04 | Westfaelische Wilhelms-Universitaet Muenster | Detection of acute renal allograft rejection |
| WO2015000953A1 (en) | 2013-07-03 | 2015-01-08 | Bracco Suisse S.A. | Devices and methods for the ultrasound treatment of ischemic stroke |
| WO2015155380A1 (en) | 2014-04-07 | 2015-10-15 | Bracco Suisse Sa | Estimation of acoustic level in-situ with non-fundamental analysis |
| SG11201704165VA (en) | 2014-12-18 | 2017-07-28 | Bracco Suisse Sa | Targeted gas-filled microvesicles formulation |
| WO2016102515A1 (en) | 2014-12-22 | 2016-06-30 | Bracco Suisse Sa | Gas-filled microvesicles for use as vaccine |
| EP3240579B1 (en) | 2014-12-31 | 2022-07-27 | Lantheus Medical Imaging, Inc. | Lipid-encapsulated gas microsphere compositions and related methods |
| JP7534839B2 (ja) | 2015-12-09 | 2024-08-15 | コーニンクレッカ フィリップス エヌ ヴェ | 超音波血栓溶解用及び血管音響共振器を介した他の治療用のインターリーブビームパターン |
| CN108289654B (zh) | 2015-12-10 | 2021-03-30 | 博莱科瑞士股份有限公司 | 通过动态阈值化来检测固定化造影剂 |
| BR112018015143A2 (pt) | 2016-02-09 | 2018-12-18 | Bracco Suisse Sa | proteína quimérica recombinante para direcionamento de selectinas |
| CN107233582B (zh) * | 2016-03-29 | 2020-04-24 | 北京飞锐达医疗科技有限公司 | 一种基于叔丁醇/水混合溶剂制备超声造影剂的方法 |
| CN107233583B (zh) * | 2016-03-29 | 2020-04-24 | 北京飞锐达医疗科技有限公司 | 一种具有超长持续时间的超声造影剂及其制备方法 |
| TWI832081B (zh) | 2016-05-04 | 2024-02-11 | 美商藍瑟斯醫學影像公司 | 用於形成充氣微球體及成像個體之方法、震盪裝置及電腦可讀軟體 |
| US9789210B1 (en) | 2016-07-06 | 2017-10-17 | Lantheus Medical Imaging, Inc. | Methods for making ultrasound contrast agents |
| EP3817777A1 (en) * | 2018-07-06 | 2021-05-12 | Bracco Suisse SA | Freeze-dried formulation for gas-filled microvesicles |
| US10335502B1 (en) | 2019-01-29 | 2019-07-02 | Bracco Suisse Sa | Freeze-dried formulation for gas-filled microvesicles |
| US10232061B1 (en) | 2018-07-06 | 2019-03-19 | Bracco Suisse Sa | Freeze-dried formulation for gas-filled microvesicles |
| US20210389320A1 (en) | 2018-12-21 | 2021-12-16 | Bracco Suisse Sa | Gas-filled microvesicles with ligand |
| US11717570B2 (en) | 2019-05-15 | 2023-08-08 | Bracco Suisse Sa | Gas-filled microvesicles |
| US20200360289A1 (en) | 2019-05-15 | 2020-11-19 | Bracco Suisse Sa | Freeze-dried product and gas-filled microvesicles suspension |
| GB201908352D0 (en) | 2019-06-11 | 2019-07-24 | Innovation Ulster Ltd | Sonodynamic therapy |
| US12005130B2 (en) | 2019-10-16 | 2024-06-11 | Agitated Solutions Inc. | Generating microbubbles for bubble studies |
| JP6760630B1 (ja) * | 2019-10-29 | 2020-09-23 | 学校法人 愛知医科大学 | 微小気泡含有電解質液の製造方法および微小気泡含有電解質液の調製に用いる微小気泡含有溶媒の製造方法 |
| EP4103152A1 (en) | 2020-02-11 | 2022-12-21 | Bracco Suisse SA | Gas-filled microvesicles for therapeutic use |
| GB202004629D0 (en) | 2020-03-30 | 2020-05-13 | Innovation Ulster Ltd | Therapy |
| US11191888B1 (en) | 2020-05-18 | 2021-12-07 | Agitated Solutions Inc. | Syringe-based microbubble generator |
| CN113440627B (zh) * | 2021-07-30 | 2022-11-25 | 北京诺康达医药科技股份有限公司 | 一种冻干粉末及其制备方法与应用 |
| CN114177317A (zh) * | 2021-11-03 | 2022-03-15 | 深圳奥祺生物医药有限公司 | 一种用于超声造影的微泡冻干制剂、造影剂及制备方法 |
| WO2024133827A1 (en) | 2022-12-21 | 2024-06-27 | Bracco Suisse Sa | Gas-filled microvesicles with perfluoro olefin |
| US11833224B1 (en) | 2023-02-08 | 2023-12-05 | Leuvian Llc | Lyoprotectant compositions and uses thereof |
Family Cites Families (79)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3968203A (en) * | 1965-10-01 | 1976-07-06 | Jerome G. Spitzer | Aerosol astringent composition |
| US3615972A (en) * | 1967-04-28 | 1971-10-26 | Dow Chemical Co | Expansible thermoplastic polymer particles containing volatile fluid foaming agent and method of foaming the same |
| US3650831A (en) * | 1969-03-10 | 1972-03-21 | Armour Dial Inc | Method of cleaning surfaces |
| US3900420A (en) * | 1970-05-18 | 1975-08-19 | Felix Sebba | Microgas emulsions and method of forming same |
| US4027007A (en) * | 1970-12-09 | 1977-05-31 | Colgate-Palmolive Company | Antiperspirants formulated with borax |
| GB1575343A (en) * | 1977-05-10 | 1980-09-17 | Ici Ltd | Method for preparing liposome compositions containing biologically active compounds |
| CH624011A5 (fi) * | 1977-08-05 | 1981-07-15 | Battelle Memorial Institute | |
| CH621479A5 (fi) * | 1977-08-05 | 1981-02-13 | Battelle Memorial Institute | |
| US4235871A (en) * | 1978-02-24 | 1980-11-25 | Papahadjopoulos Demetrios P | Method of encapsulating biologically active materials in lipid vesicles |
| US4256251A (en) * | 1978-04-24 | 1981-03-17 | Lawrence M. Smith | Surgical staplers and staple |
| US4192859A (en) * | 1978-09-29 | 1980-03-11 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Contrast media containing liposomes as carriers |
| US4587545A (en) * | 1978-12-20 | 1986-05-06 | At&T Bell Laboratories | High voltage dielectrically isolated remote gate solid-state switch |
| US4276885A (en) * | 1979-05-04 | 1981-07-07 | Rasor Associates, Inc | Ultrasonic image enhancement |
| US4265251A (en) * | 1979-06-28 | 1981-05-05 | Rasor Associates, Inc. | Method of determining pressure within liquid containing vessel |
| US4316391A (en) * | 1979-11-13 | 1982-02-23 | Ultra Med, Inc. | Flow rate measurement |
| US4442843A (en) * | 1980-11-17 | 1984-04-17 | Schering, Ag | Microbubble precursors and methods for their production and use |
| US4657756A (en) * | 1980-11-17 | 1987-04-14 | Schering Aktiengesellschaft | Microbubble precursors and apparatus for their production and use |
| US4681119A (en) * | 1980-11-17 | 1987-07-21 | Schering Aktiengesellschaft | Method of production and use of microbubble precursors |
| DE3141641A1 (de) * | 1981-10-16 | 1983-04-28 | Schering Ag, 1000 Berlin Und 4619 Bergkamen | Ultraschall-kontrastmittel und dessen herstellung |
| US4718433A (en) * | 1983-01-27 | 1988-01-12 | Feinstein Steven B | Contrast agents for ultrasonic imaging |
| US4572203A (en) * | 1983-01-27 | 1986-02-25 | Feinstein Steven B | Contact agents for ultrasonic imaging |
| GB2135647A (en) * | 1983-02-15 | 1984-09-05 | Squibb & Sons Inc | Method of preparing liposomes and products produced thereby |
| DE3313946A1 (de) * | 1983-04-15 | 1984-10-18 | Schering AG, 1000 Berlin und 4709 Bergkamen | Mikropartikel und gasblaeschen enthaltende ultraschall-kontrastmittel |
| US5141738A (en) * | 1983-04-15 | 1992-08-25 | Schering Aktiengesellschaft | Ultrasonic contrast medium comprising gas bubbles and solid lipophilic surfactant-containing microparticles and use thereof |
| DE3313947A1 (de) * | 1983-04-15 | 1984-10-18 | Schering AG, 1000 Berlin und 4709 Bergkamen | Mikropartikel und gasblaeschen enthaltende ultraschall-kontrastmittel |
| US4900540A (en) * | 1983-06-20 | 1990-02-13 | Trustees Of The University Of Massachusetts | Lipisomes containing gas for ultrasound detection |
| US4544545A (en) * | 1983-06-20 | 1985-10-01 | Trustees University Of Massachusetts | Liposomes containing modified cholesterol for organ targeting |
| DE3324754A1 (de) * | 1983-07-06 | 1985-01-17 | Schering AG, 1000 Berlin und 4709 Bergkamen | Ultraschallkontrastmittel sowie dessen herstellung |
| US5618514A (en) * | 1983-12-21 | 1997-04-08 | Nycomed Imaging As | Diagnostic and contrast agent |
| GB8504916D0 (en) * | 1985-02-26 | 1985-03-27 | Isc Chemicals Ltd | Emulsions of perfluorocarbons in aqueous media |
| DE3529195A1 (de) * | 1985-08-14 | 1987-02-26 | Max Planck Gesellschaft | Kontrastmittel fuer ultraschalluntersuchungen und verfahren zu seiner herstellung |
| US4684479A (en) * | 1985-08-14 | 1987-08-04 | Arrigo Joseph S D | Surfactant mixtures, stable gas-in-liquid emulsions, and methods for the production of such emulsions from said mixtures |
| US4927623A (en) * | 1986-01-14 | 1990-05-22 | Alliance Pharmaceutical Corp. | Dissolution of gas in a fluorocarbon liquid |
| DE3637926C1 (de) * | 1986-11-05 | 1987-11-26 | Schering Ag | Ultraschall-Manometrieverfahren in einer Fluessigkeit mittels Mikroblaeschen |
| FR2608942B1 (fr) * | 1986-12-31 | 1991-01-11 | Centre Nat Rech Scient | Procede de preparation de systemes colloidaux dispersibles d'une substance, sous forme de nanocapsules |
| US5283067A (en) * | 1987-01-30 | 1994-02-01 | Ciba-Geigy Corporation | Parenteral suspensions |
| US5089181A (en) * | 1987-02-24 | 1992-02-18 | Vestar, Inc. | Method of dehydrating vesicle preparations for long term storage |
| CH672733A5 (fi) * | 1987-05-22 | 1989-12-29 | Bracco Ind Chimica Spa | |
| DE3741201A1 (de) * | 1987-12-02 | 1989-06-15 | Schering Ag | Ultraschallarbeitsverfahren und mittel zu dessen durchfuehrung |
| US4844882A (en) * | 1987-12-29 | 1989-07-04 | Molecular Biosystems, Inc. | Concentrated stabilized microbubble-type ultrasonic imaging agent |
| US5425366A (en) * | 1988-02-05 | 1995-06-20 | Schering Aktiengesellschaft | Ultrasonic contrast agents for color Doppler imaging |
| EP0586875A1 (de) * | 1988-02-05 | 1994-03-16 | Schering Aktiengesellschaft | Ultraschallkontrastmittel, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung als Diagnostika und Therapeutika |
| US5730954A (en) * | 1988-08-23 | 1998-03-24 | Schering Aktiengesellschaft | Preparation comprising cavitate- or clathrate-forming host/guest complexes as contrast agent |
| DE3828905A1 (de) * | 1988-08-23 | 1990-03-15 | Schering Ag | Mittel bestehend aus cavitate oder clathrate bildenden wirt/gast-komplexen als kontrastmittel |
| US4957656A (en) * | 1988-09-14 | 1990-09-18 | Molecular Biosystems, Inc. | Continuous sonication method for preparing protein encapsulated microbubbles |
| DE3934656A1 (de) * | 1989-10-13 | 1991-04-18 | Schering Ag | Verfahren zur herstellung von waessrigen dispersionen |
| US5776429A (en) * | 1989-12-22 | 1998-07-07 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Method of preparing gas-filled microspheres using a lyophilized lipids |
| US5088499A (en) * | 1989-12-22 | 1992-02-18 | Unger Evan C | Liposomes as contrast agents for ultrasonic imaging and methods for preparing the same |
| US5209720A (en) * | 1989-12-22 | 1993-05-11 | Unger Evan C | Methods for providing localized therapeutic heat to biological tissues and fluids using gas filled liposomes |
| US5123414A (en) * | 1989-12-22 | 1992-06-23 | Unger Evan C | Liposomes as contrast agents for ultrasonic imaging and methods for preparing the same |
| US5149319A (en) * | 1990-09-11 | 1992-09-22 | Unger Evan C | Methods for providing localized therapeutic heat to biological tissues and fluids |
| SE465300B (sv) * | 1989-12-29 | 1991-08-26 | Sjoeberg John Anitec Ab | Anordning vid stickkniv foer urtagning av blod fraan slaktdjur |
| DE4004430A1 (de) * | 1990-02-09 | 1991-08-14 | Schering Ag | Aus polyaldehyden aufgebaute kontrastmittel |
| GB9003821D0 (en) * | 1990-02-20 | 1990-04-18 | Danbiosyst Uk | Diagnostic aid |
| EP0522081A4 (en) * | 1990-03-30 | 1993-06-16 | Smithkline Beecham Corporation | Inhibition of disease associated with immunodeficiency virus infection |
| US5556610A (en) * | 1992-01-24 | 1996-09-17 | Bracco Research S.A. | Gas mixtures useful as ultrasound contrast media, contrast agents containing the media and method |
| IN172208B (fi) * | 1990-04-02 | 1993-05-01 | Sint Sa | |
| US5445813A (en) * | 1992-11-02 | 1995-08-29 | Bracco International B.V. | Stable microbubble suspensions as enhancement agents for ultrasound echography |
| US5190982A (en) * | 1990-04-26 | 1993-03-02 | Hoechst Aktiengesellschaft | Ultrasonic contrast agents, processes for their preparation and the use thereof as diagnostic and therapeutic agents |
| US5205287A (en) * | 1990-04-26 | 1993-04-27 | Hoechst Aktiengesellschaft | Ultrasonic contrast agents, processes for their preparation and the use thereof as diagnostic and therapeutic agents |
| US5137928A (en) * | 1990-04-26 | 1992-08-11 | Hoechst Aktiengesellschaft | Ultrasonic contrast agents, processes for their preparation and the use thereof as diagnostic and therapeutic agents |
| AU636481B2 (en) * | 1990-05-18 | 1993-04-29 | Bracco International B.V. | Polymeric gas or air filled microballoons usable as suspensions in liquid carriers for ultrasonic echography |
| DE4100470A1 (de) * | 1991-01-09 | 1992-07-16 | Byk Gulden Lomberg Chem Fab | Echokontrastmittel |
| GB9106686D0 (en) * | 1991-03-28 | 1991-05-15 | Hafslund Nycomed As | Improvements in or relating to contrast agents |
| GB9106673D0 (en) * | 1991-03-28 | 1991-05-15 | Hafslund Nycomed As | Improvements in or relating to contrast agents |
| US5874062A (en) * | 1991-04-05 | 1999-02-23 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Methods of computed tomography using perfluorocarbon gaseous filled microspheres as contrast agents |
| GB9107628D0 (en) * | 1991-04-10 | 1991-05-29 | Moonbrook Limited | Preparation of diagnostic agents |
| US5147631A (en) * | 1991-04-30 | 1992-09-15 | Du Pont Merck Pharmaceutical Company | Porous inorganic ultrasound contrast agents |
| US5364612A (en) * | 1991-05-06 | 1994-11-15 | Immunomedics, Inc. | Detection of cardiovascular lesions |
| DE4127442C2 (de) * | 1991-08-17 | 1996-08-22 | Udo Dr Gros | Wäßrige Dispersion Fluorcarbon enthaltender Phospholipid-Vesikel und ein Verfahren zu ihrer Herstellung |
| CZ286149B6 (cs) * | 1991-09-17 | 2000-01-12 | Sonus Pharmaceuticals, Inc. | Plynná prostředí pro zvýšení kontrastnosti obrazu, získaného ultrazvukem a způsob výběru plynů pro toto použití |
| US5409688A (en) * | 1991-09-17 | 1995-04-25 | Sonus Pharmaceuticals, Inc. | Gaseous ultrasound contrast media |
| GB9200388D0 (en) * | 1992-01-09 | 1992-02-26 | Nycomed As | Improvements in or relating to contrast agents |
| IL104084A (en) * | 1992-01-24 | 1996-09-12 | Bracco Int Bv | Sustainable aqueous suspensions of pressure-resistant and gas-filled blisters, their preparation, and contrast agents containing them |
| WO1994009703A1 (en) * | 1992-11-02 | 1994-05-11 | Drexel University | Surfactant-stabilized microbubble mixtures, process for preparing and methods of using the same |
| US5716597A (en) * | 1993-06-04 | 1998-02-10 | Molecular Biosystems, Inc. | Emulsions as contrast agents and method of use |
| IL110185A (en) * | 1993-07-02 | 1999-05-09 | Molecular Biosystems Inc | Method for making encapsulated gas microspheres from heat denatured protein in the absence of oxygen gas |
| PT711179E (pt) * | 1993-07-30 | 2005-03-31 | Imcor Pharmaceutical Company | Composicoes de microbolhas estabilizadas para ultra-som |
| US5601085A (en) * | 1995-10-02 | 1997-02-11 | Nycomed Imaging As | Ultrasound imaging |
-
1993
- 1993-10-12 US US08/134,671 patent/US5445813A/en not_active Expired - Lifetime
- 1993-10-21 CA CA002125027A patent/CA2125027C/en not_active Expired - Lifetime
- 1993-10-21 NZ NZ257115A patent/NZ257115A/en not_active IP Right Cessation
- 1993-10-21 JP JP06507577A patent/JP3135919B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1993-10-21 DK DK93923522.2T patent/DK0619743T3/da active
- 1993-10-21 NZ NZ280615A patent/NZ280615A/en not_active IP Right Cessation
- 1993-10-21 HU HU9401409A patent/HU227043B1/hu active Protection Beyond IP Right Term
- 1993-10-21 DE DE69307124T patent/DE69307124T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1993-10-21 KR KR1019940702306A patent/KR100216138B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1993-10-21 DE DE2001199055 patent/DE10199055I2/de active Active
- 1993-10-21 AT AT93923522T patent/ATE146972T1/de active
- 1993-10-21 ES ES93923522T patent/ES2097548T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1993-10-21 EP EP93923522A patent/EP0619743B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1993-10-21 WO PCT/EP1993/002915 patent/WO1994009829A1/en active IP Right Grant
- 1993-10-21 AU AU53362/94A patent/AU666238B2/en not_active Expired
- 1993-10-28 IS IS4089A patent/IS1625B/is unknown
- 1993-10-29 ZA ZA938117A patent/ZA938117B/xx unknown
- 1993-11-01 IL IL107453A patent/IL107453A/en not_active IP Right Cessation
- 1993-11-02 CN CN93114131A patent/CN1069838C/zh not_active Expired - Lifetime
-
1994
- 1994-06-30 NO NO942476A patent/NO308830B1/no not_active IP Right Cessation
- 1994-07-01 FI FI943167A patent/FI115953B/fi not_active IP Right Cessation
-
1995
- 1995-03-31 US US08/414,718 patent/US5597549A/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-04-12 US US08/420,677 patent/US5686060A/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-10-17 AU AU34317/95A patent/AU681812B2/en not_active Expired
-
1997
- 1997-03-17 GR GR970400500T patent/GR3022826T3/el unknown
- 1997-06-20 AU AU26181/97A patent/AU704954B2/en not_active Expired
- 1997-06-26 US US08/883,592 patent/US5908610A/en not_active Expired - Lifetime
-
1998
- 1998-09-11 US US09/151,651 patent/US6187288B1/en not_active Expired - Lifetime
-
2000
- 2000-12-15 US US09/736,361 patent/US20010001279A1/en not_active Abandoned
-
2001
- 2001-09-19 LU LU90837C patent/LU90837I2/fr unknown
- 2001-09-21 NL NL300061C patent/NL300061I2/nl unknown
-
2003
- 2003-01-31 US US10/355,052 patent/US20030129137A1/en not_active Abandoned
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI115953B (fi) | Stabiileja mikrokuplasuspensioita vahvistusaineiksi ultraäänikaikukuvausta varten | |
| US5531980A (en) | Stable microbubbles suspensions injectable into living organisms | |
| HU225495B1 (en) | Gas mixtures useful as ultrasound contrast media | |
| US20060257321A1 (en) | Ultrasound contrast agents and methods of making and using them | |
| US6613306B1 (en) | Ultrasound contrast agents and methods of making and using them | |
| US20040180004A1 (en) | Stable microbubble suspensions as enhancement agents for ultrasound echography and dry formulations thereof | |
| US20060034771A1 (en) | Ultrasound contrast agents and methods of making and using them | |
| US20010008626A1 (en) | Ultrasound contrast agents and methods of making and using them | |
| US20030185759A1 (en) | Ultrasound contrast agents and methods of making and using them | |
| US20030194376A1 (en) | Ultrasound contrast agents and methods of making and using them | |
| US20010012507A1 (en) | Ultrasound contrast agents and methods of making and using them |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| FG | Patent granted |
Ref document number: 115953 Country of ref document: FI |
|
| SPCF | Supplementary protection certificate application filed | ||
| SPCG | Supplementary protection certificate granted |
Spc suppl protection certif: 265 Extension date: 20160326 |
|
| PC | Transfer of assignment of patent |
Owner name: BRACCO SUISSE S.A. Free format text: BRACCO SUISSE S.A. |
|
| MA | Patent expired |