FI113183B - Förfarande för att framställa fusionsproteiner - Google Patents

Förfarande för att framställa fusionsproteiner Download PDF

Info

Publication number
FI113183B
FI113183B FI920923A FI920923A FI113183B FI 113183 B FI113183 B FI 113183B FI 920923 A FI920923 A FI 920923A FI 920923 A FI920923 A FI 920923A FI 113183 B FI113183 B FI 113183B
Authority
FI
Finland
Prior art keywords
plasmid
oligonucleotide
gene
sequence
protein
Prior art date
Application number
FI920923A
Other languages
English (en)
Finnish (fi)
Other versions
FI920923A0 (fi
Inventor
Paul Habermann
Eugen Uhlmann
Brian Seed
Wolfgang Ulmer
Siegfried Stengelin
Original Assignee
Gen Hospital Corp
Aventis Pharma Gmbh
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Gen Hospital Corp, Aventis Pharma Gmbh filed Critical Gen Hospital Corp
Publication of FI920923A0 publication Critical patent/FI920923A0/fi
Application granted granted Critical
Publication of FI113183B publication Critical patent/FI113183B/sv

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K14/00Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575Hormones
    • C07K14/62Insulins
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/62DNA sequences coding for fusion proteins
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K2319/00Fusion polypeptide
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K2319/00Fusion polypeptide
    • C07K2319/01Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
    • C07K2319/02Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif containing a signal sequence
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K2319/00Fusion polypeptide
    • C07K2319/35Fusion polypeptide containing a fusion for enhanced stability/folding during expression, e.g. fusions with chaperones or thioredoxin
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K2319/00Fusion polypeptide
    • C07K2319/70Fusion polypeptide containing domain for protein-protein interaction
    • C07K2319/74Fusion polypeptide containing domain for protein-protein interaction containing a fusion for binding to a cell surface receptor
    • C07K2319/75Fusion polypeptide containing domain for protein-protein interaction containing a fusion for binding to a cell surface receptor containing a fusion for activation of a cell surface receptor, e.g. thrombopoeitin, NPY and other peptide hormones

Claims (17)

1. Förfarande för att framställa fusionsproteiner, som inne-häller ett önskat protein och en bärardel, kännetecknat där-5 av, att man (a) konstruerar en blandad oligonukleotid, som kodar för nämnda bärardel, väri nämnda oligonukleotid innehäller DNA-sekvensen (kodande kedja) 10 (DCD)x i vilken D är A, G eller T och x är 4-12, (b) ligerar den nämnda blandade oligonukleotiden i en vek- 15 tor sä att den blir funktionellt kopplad tili en regler- ingsregion och tili den strukturella genen som kodar för nämnda önskade protein, (c) transformerar en värdcell med den sä erhällna vektor- 20 populationen och .* (d) väljer frän transformanter en eller flera kloner, som ·, uttrycker fusionsproteinet med ett högt utbyte. 25 2. Förfarande enligt patentkravet 1, kännetecknat därav, att nämnda oligonukleotid i 3’-ändan av sin kodande kedja kodar ;V. för en aminosyra eller en grupp av aminosyror, vilket möjlig- .gör en lätt klyvning av det önskade proteinet frän nämnda bä-rardel. 30
3. Förfarande enligt patentkravet 2, kännetecknat därav, att *·;*' nämnda klyvning är en enzymatisk klyvning. 113183
4. Förfarande enligt patentkravet 1, kännetecknat därav, att nämnda oligonukleotid konstrueras sä att den leder tili ett fusionsprotein, som är lösligt eller som kan lätt göras lös-ligt. 5
5. Förfarande enligt patentkravet 1, kännetecknat därav, att nämnda oligonukleotid konstrueras sä att bärardelen inte stör vikning av nämnda önskade protein. 10 6. Förfarande enligt patentkravet 1, kännetecknat därav, att x är 4-8.
7. Förfarande enligt patentkravet 5, kännetecknat därav, att nämnda oligonukleotid har sekvensen (kodande kedjan) 15 ATG (DCD)y (NNN)Z i vilken N betecknar identiska eller olika nukleotider, ute-slutande stopkodoner för NNN, z är 1-4, och y + z är 6-12, 20 medan y är minst 4. Γ ,1 8. Förfarande enligt patentkravet 7, kännetecknat därav, att f I •V . y + z är 6 -10 . i · < f > < 1 ] 25 9. Förfarande enligt patentkravet 7, kännetecknat därav, att I t I y är 5-8 och z är 1. -1·, 10. Förfarande enligt patentkravet 1, kännetecknat därav, att nämnda oligonukleotid har sekvensen (kodande kedjan) 30 ;·’ ATG GCW (DCD)4-8 CGW i i vilken W är A eller T. 11318?
11. Förfarande enligt patentkravet 10, kännetecknat därav, att nämnda oligonukleotid har sekvensen ATG GCA (DCD)4-7 CGW. 5
12. Förfarande enligt patentkravet 1, kännetecknat därav, att det nämnda önskade proteinet är proinsulin och att nämnda oligonukleotid (kodande kedjan) är
10 ATG GCW (DCD)y. ACG CGW eller ATG GCD (DCD) y> ACG CGT, i vilken D är A, G eller T, W är A eller T, och y' är 3-6. 15 13. Förfarande enligt patentkravet 12, kännetecknat därav, att y' är 4-6.
14. Förfarande enligt patentkravet 2, kännetecknat därav, att det önskade proteinet är proinsulin. 20
15. Förfarande enligt patentkravet 14, kännetecknat därav, λ.’ att proinsulinet har en C-kedja, som är olik människoproinsu- linets C-kedja. ./ 25 16. Förfarande enligt patentkravet 15, kännetecknat därav, att C-kedjans gen konstrueras sä att C-kedjan kan klyvas bort :v. tillsammans med nämnda bärardel. > » i »
17. Förfarande enligt patentkravet 16, kännetecknat därav, 30 att C-kedjan innehäller arginin. * i 1 5 » I I
FI920923A 1989-08-29 1992-02-28 Förfarande för att framställa fusionsproteiner FI113183B (sv)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US39987489A 1989-08-29 1989-08-29
US39987489 1989-08-29
US9004840 1990-08-28
PCT/US1990/004840 WO1991003550A1 (en) 1989-08-29 1990-08-28 Fusion proteins, their preparation and use

Publications (2)

Publication Number Publication Date
FI920923A0 FI920923A0 (fi) 1992-02-28
FI113183B true FI113183B (sv) 2004-03-15

Family

ID=23581315

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI920923A FI113183B (sv) 1989-08-29 1992-02-28 Förfarande för att framställa fusionsproteiner

Country Status (20)

Country Link
EP (1) EP0489780B1 (sv)
JP (1) JP3043803B2 (sv)
KR (1) KR0159786B1 (sv)
AT (1) ATE173018T1 (sv)
AU (1) AU638277B2 (sv)
CA (1) CA2065146C (sv)
CY (1) CY2168B1 (sv)
DE (1) DE69032743T2 (sv)
DK (1) DK0489780T3 (sv)
ES (1) ES2124216T3 (sv)
FI (1) FI113183B (sv)
GR (1) GR1005153B (sv)
HK (1) HK1012026A1 (sv)
HU (1) HU216069B (sv)
IE (1) IE903120A1 (sv)
IL (1) IL95495A (sv)
NO (1) NO308667B1 (sv)
PT (1) PT95111B (sv)
WO (1) WO1991003550A1 (sv)
ZA (1) ZA906839B (sv)

Families Citing this family (35)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5426036A (en) * 1987-05-05 1995-06-20 Hoechst Aktiengesellschaft Processes for the preparation of foreign proteins in streptomycetes
DK0600372T3 (da) * 1992-12-02 1997-08-11 Hoechst Ag Fremgangsmåde til fremstilling af proinsulin med korrekt forbundne cystinbroer.
EP0622376B1 (de) * 1993-04-27 2001-08-08 Hoechst Aktiengesellschaft Amorphe monosphärische Formen von Insulinderivaten
EP0672753B1 (en) * 1993-10-05 2008-01-02 Asahi Glass Company Ltd. Multicloning vector, expression vector, and production of foreign protein with expression vector
US6001604A (en) * 1993-12-29 1999-12-14 Bio-Technology General Corp. Refolding of proinsulins without addition of reducing agents
DE4405179A1 (de) * 1994-02-18 1995-08-24 Hoechst Ag Verfahren zur Gewinnung von Insulin mit korrekt verbundenen Cystinbrücken
US5683987A (en) * 1994-07-12 1997-11-04 The Board Of Regents Of The University Of Nebraska Therapeutic oligonucleotides targeting the human MDR1 and MRP genes
ES2218622T3 (es) 1996-07-26 2004-11-16 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Derivados de insulina con actividad de union al zinc incrementada.
DE19735711C2 (de) 1997-08-18 2001-04-26 Aventis Pharma Gmbh Verfahren zur Herstellung eines Vorläufers von Insulin oder Insulinderivaten mit korrekt verbundenen Cystinbrücken
DE19825447A1 (de) 1998-06-06 1999-12-09 Hoechst Marion Roussel De Gmbh Neue Insulinanaloga mit erhöhter Zinkbildung
DE19915938A1 (de) 1999-04-09 2000-10-19 Aventis Pharma Gmbh Herstellung von pankreatischer Procarboxypeptidase B, Isoformen und Muteinen davon und ihre Verwendung
DE19930676B4 (de) 1999-07-02 2006-01-19 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Verfahren zur Stabilisierung von Insulin, Insulinderivaten und/oder deren Vorläufer in komplexen Mischungen bei deren Lagerung in wäßrigen Lösungsmitteln
US7202059B2 (en) 2001-02-20 2007-04-10 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Fusion proteins capable of being secreted into a fermentation medium
US7638618B2 (en) 2001-02-20 2009-12-29 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Nucleic acids encoding a hirudin and pro-insulin as superscretable peptides and for parallel improvement of the exported forms of one or more polypeptides of interest
DE10235168A1 (de) * 2002-08-01 2004-02-12 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Verfahren zur Reinigung von Preproinsulin
WO2004044206A1 (en) * 2002-11-12 2004-05-27 Ckd Bio Corp. Plasmids expressing human insulin and the preparation method for human insuling thereby
DK2229407T3 (en) 2008-01-09 2017-02-27 Sanofi Aventis Deutschland NEW INSULIN DERIVATIVES WITH EXTREMELY DELAYED TIME / EFFECTS PROFILE
DE102008003568A1 (de) 2008-01-09 2009-07-16 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Neue Insulinderivate mit extrem verzögertem Zeit-/ Wirkungsprofil
BRPI0907119A2 (pt) 2008-01-09 2015-07-14 Sanofi Aventis Deutschland Derivados de insulina tendo um perfil de ação de tempo extremamente retardado
DE102008025008A1 (de) 2008-05-24 2009-11-26 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Neue Insulinderivate mit extrem verzögertem Zeit-/ Wirkungsprofil
DE102008003566A1 (de) 2008-01-09 2009-07-16 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Neue Insulinderivate mit extrem verzögertem Zeit-/ Wirkungsprofil
DE102008025007A1 (de) 2008-05-24 2009-11-26 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Neue Insulinderivate mit extrem verzögertem Zeit-/ Wirkungsprofil
WO2010043566A2 (de) 2008-10-17 2010-04-22 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Kombination von einem insulin und einem glp-1-agonisten
US9707176B2 (en) 2009-11-13 2017-07-18 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Pharmaceutical composition comprising a GLP-1 agonist and methionine
ES2855146T3 (es) 2009-11-13 2021-09-23 Sanofi Aventis Deutschland Composición farmacéutica que comprende un agonista de GLP-1, una insulina y metionina
PT2611458T (pt) 2010-08-30 2016-12-16 Sanofi Aventis Deutschland Utilização de ave0010 para o fabrico de um medicamento para o tratamento da diabetes mellitus tipo 2
DK2739646T3 (en) 2011-05-10 2018-02-26 Stefan Hermann COMPREHENSIVE BUFFER SYSTEM FOR RENATURING HUMAN PROINSULIN OR PROINSULIN DERIVATIVES
US9821032B2 (en) 2011-05-13 2017-11-21 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Pharmaceutical combination for improving glycemic control as add-on therapy to basal insulin
PT2750699E (pt) 2011-08-29 2015-11-03 Sanofi Aventis Deutschland Acelerómetro pendular
TWI559929B (en) 2011-09-01 2016-12-01 Sanofi Aventis Deutschland Pharmaceutical composition for use in the treatment of a neurodegenerative disease
JP5858945B2 (ja) 2012-03-15 2016-02-10 アークレイ株式会社 酵素を用いた測定方法
CN107206058A (zh) 2014-12-12 2017-09-26 赛诺菲-安万特德国有限公司 甘精胰岛素/利西拉来固定比率配制剂
TWI748945B (zh) 2015-03-13 2021-12-11 德商賽諾菲阿凡提斯德意志有限公司 第2型糖尿病病患治療
TW201705975A (zh) 2015-03-18 2017-02-16 賽諾菲阿凡提斯德意志有限公司 第2型糖尿病病患之治療
US20220154192A1 (en) * 2019-02-19 2022-05-19 The Trustees Of Princeton University System and method for light-regulated oligomerization and phase separation of folded domains and rna granule-associated protein domains for drug- based screening applications

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4366246A (en) * 1977-11-08 1982-12-28 Genentech, Inc. Method for microbial polypeptide expression
US4431739A (en) * 1979-11-05 1984-02-14 Genentech, Inc. Transformant bacterial culture capable of expressing heterologous protein
US4769326A (en) * 1980-02-29 1988-09-06 The Regents Of The University Of California Expression linkers
US4652639A (en) * 1982-05-06 1987-03-24 Amgen Manufacture and expression of structural genes
JPS61264000A (ja) * 1985-03-21 1986-11-21 イミユネツクス コ−ポレイシヨン 標識ペプチドによるタンパク質の合成
DE3526995A1 (de) * 1985-07-27 1987-02-05 Hoechst Ag Fusionsproteine, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung

Also Published As

Publication number Publication date
JP3043803B2 (ja) 2000-05-22
ES2124216T3 (es) 1999-02-01
HK1012026A1 (en) 1999-07-23
DE69032743D1 (de) 1998-12-10
NO308667B1 (no) 2000-10-09
EP0489780B1 (en) 1998-11-04
CA2065146A1 (en) 1991-03-01
FI920923A0 (fi) 1992-02-28
JPH05501799A (ja) 1993-04-08
IL95495A0 (en) 1991-06-30
WO1991003550A1 (en) 1991-03-21
NO920774L (no) 1992-04-28
PT95111B (pt) 1998-10-30
EP0489780A1 (en) 1992-06-17
AU6287290A (en) 1991-04-08
ATE173018T1 (de) 1998-11-15
DE69032743T2 (de) 1999-06-17
HUT60327A (en) 1992-08-28
IL95495A (en) 1996-10-16
DK0489780T3 (da) 1999-07-19
EP0489780A4 (en) 1992-08-12
CA2065146C (en) 2002-07-23
CY2168B1 (en) 2002-08-23
AU638277B2 (en) 1993-06-24
GR1005153B (el) 2006-03-13
NO920774D0 (no) 1992-02-27
IE903120A1 (en) 1991-03-13
HU9200674D0 (en) 1992-08-28
ZA906839B (en) 1991-06-26
GR900100635A (el) 1991-12-30
PT95111A (pt) 1991-05-22
HU216069B (hu) 1999-04-28
KR0159786B1 (ko) 1998-11-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
FI113183B (sv) Förfarande för att framställa fusionsproteiner
US5358857A (en) Method of preparing fusion proteins
US5227293A (en) Fusion proteins, their preparation and use
AU615760B2 (en) Insulin analogues
FI102182B (sv) Förfarande för framställning av mänskliga insulinanaloger
CA1340823C (en) Insulin precursors, process for their preparation and process for the preparation of human insulin
CA1340371C (en) Methods and products for facile microbial expression of dna sequences
SK278576B6 (en) Expression vectors for increased production polypeptides, plasmides containing these vectors, host cells containing these plasmides, gained products, connecting methods and use
CA2223272A1 (en) Single chain insulin with high bioactivity
JP4624495B2 (ja) ヒト・インスリンの生成
US4828988A (en) Hybrid polypeptides comprising somatocrinine and alpha1 -antitrypsin, method for their production from bacterial clones and use thereof for the production of somatocrinine
CA1338900C (en) Escherichia coli plasmid vector with lipoprotein promoter and modified shine-dalgarno sequence
Mayne et al. Direct expression of human growth in Escherichia coli with the lipoprotein promoter
US6054291A (en) Expression vectors for enhanced production of polypeptides, plasmids containing the vectors, hosts containing the plasmids, products manufactured thereby and related methods
KR100381494B1 (ko) 인간인슐린의제조방법
JPH08140679A (ja) 微生物によるラットβ2−マイクログロブリン生産