FI111724B - Menetelmä taksaanijohdanaisten fosfono-oksimetyylieettereiden valmistamiseksi - Google Patents

Menetelmä taksaanijohdanaisten fosfono-oksimetyylieettereiden valmistamiseksi Download PDF

Info

Publication number
FI111724B
FI111724B FI935821A FI935821A FI111724B FI 111724 B FI111724 B FI 111724B FI 935821 A FI935821 A FI 935821A FI 935821 A FI935821 A FI 935821A FI 111724 B FI111724 B FI 111724B
Authority
FI
Finland
Prior art keywords
process according
hydroxy
paclitaxel
prepared
hydrogen
Prior art date
Application number
FI935821A
Other languages
English (en)
Swedish (sv)
Other versions
FI935821A0 (fi
FI935821A (fi
Inventor
John F Kadow
John J Wright
John K Thottathil
Wen-Sen Li
Jerzy Golik
Murray A Kaplan
Robert K Perrone
Dolatrai Vyas
Henry Wong
Original Assignee
Squibb Bristol Myers Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Squibb Bristol Myers Co filed Critical Squibb Bristol Myers Co
Publication of FI935821A0 publication Critical patent/FI935821A0/fi
Publication of FI935821A publication Critical patent/FI935821A/fi
Application granted granted Critical
Publication of FI111724B publication Critical patent/FI111724B/fi

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D407/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00
    • C07D407/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00 containing two hetero rings
    • C07D407/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D305/00—Heterocyclic compounds containing four-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atoms
    • C07D305/14—Heterocyclic compounds containing four-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atoms condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D409/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F7/00—Compounds containing elements of Groups 4 or 14 of the Periodic Table
    • C07F7/02—Silicon compounds
    • C07F7/08—Compounds having one or more C—Si linkages
    • C07F7/18—Compounds having one or more C—Si linkages as well as one or more C—O—Si linkages
    • C07F7/1804—Compounds having Si-O-C linkages
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
    • C07F9/655—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom having oxygen atoms, with or without sulfur, selenium, or tellurium atoms, as the only ring hetero atoms
    • C07F9/6551—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom having oxygen atoms, with or without sulfur, selenium, or tellurium atoms, as the only ring hetero atoms the oxygen atom being part of a four-membered ring
    • C07F9/65512—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom having oxygen atoms, with or without sulfur, selenium, or tellurium atoms, as the only ring hetero atoms the oxygen atom being part of a four-membered ring condensed with carbocyclic rings or carbocyclic ring systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
    • C07F9/6558—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing at least two different or differently substituted hetero rings neither condensed among themselves nor condensed with a common carbocyclic ring or ring system
    • C07F9/65586—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing at least two different or differently substituted hetero rings neither condensed among themselves nor condensed with a common carbocyclic ring or ring system at least one of the hetero rings does not contain nitrogen as ring hetero atom
    • H—ELECTRICITY
    • H01—ELECTRIC ELEMENTS
    • H01L—SEMICONDUCTOR DEVICES NOT COVERED BY CLASS H10
    • H01L21/00—Processes or apparatus adapted for the manufacture or treatment of semiconductor or solid state devices or of parts thereof
    • H01L21/02—Manufacture or treatment of semiconductor devices or of parts thereof
    • H01L21/04—Manufacture or treatment of semiconductor devices or of parts thereof the devices having potential barriers, e.g. a PN junction, depletion layer or carrier concentration layer
    • H01L21/48—Manufacture or treatment of parts, e.g. containers, prior to assembly of the devices, using processes not provided for in a single one of the subgroups H01L21/06 - H01L21/326
    • H01L21/4814—Conductive parts
    • H01L21/4821—Flat leads, e.g. lead frames with or without insulating supports
    • H01L21/4839—Assembly of a flat lead with an insulating support, e.g. for TAB

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Condensed Matter Physics & Semiconductors (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Manufacturing & Machinery (AREA)
  • Computer Hardware Design (AREA)
  • Microelectronics & Electronic Packaging (AREA)
  • Power Engineering (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Epoxy Compounds (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)

Description

111724
Menetelmä taksaanijohdannaisten fosfono-oksimetyylieette-reiden valmistamiseksi
Keksinnön tausta 5 1. Keksinnön kenttä Tämä keksintö koskee yhdisteitä, joilla on kasvain-tenvastaisia vaikutuksia. Tarkemmin tämä keksintö koskee uusia taksaanijohdannaisia.
2. Tunnettu tekniikka 10 Taksoli (TaxolR, paklitakseli) on luonnontuote, joka on uutettu länsivaltioissa kasvavasta marjakuusen, Taxus brevifolia, kaarnasta. On todettu, että sillä on erinomaisia kasvaintenvastaisia vaikutuksia in vivo eläinmalleissa, ja uusimmat tutkimukset ovat paljastaneet 15 sen ainutlaatuisen vaikutusmekanismin, joka käsittää tubuliinin epänormaalin polymeroitumisen ja mitoosin eston. Sillä suoritetaan parhaillaan kliinisiä tutkimuksia munasarjasyöpää, rintasyöpää ja muita syöpämuotoja vastaan Yhdysvalloissa ja Ranskassa, ja ensi käden tiedot ovat 20 varmistaneet, että se on erittäin lupaava kemoterapeuttinen aine. Paklitakselin kliinisten tutkimusten tulokset on esitetty katsauksessa Rowinsky ja Donehower, "The Clinical '· ' Pharmacology and Use of Antimicrotubule Agents in Cancer
Chemotherapeutics" Pharm. Ther., 52: 35 - 84, 1991.
25 Hiljattain on myös paklitakselin puolisynteettisen ' ' : analogin nimeltään taksoteeri (TaxotereR) todettu omaavan ; ; ; hyvän kasvaimenvastaisen vaikutusmekanismin eläinmalleissa.
Myös TaxotereaR testataan parhaillaan kliinisesti Euroopassa ja Yhdysvalloissa. Paklitakselin ja TaxotereR:n ,··· 30 rakenteet esitetään alla; paklitakselin tavanomainen Y numerointisysteemi esitetään.
111724
R,°x P OH
RCO.NH n \
Ph^^r^O"-63 VC. .. si 5 HÖ /v°
HO i AcO
PhC(0)Ö
TaxolR: R = Ph; R' = asetyyli 10 TaxotereR: R = t-butoksi; R' = vety
Yksi paklitakselin haittapuoli on sen hyvin rajoitettu vesiliukoisuus, minkä vuoksi se on formuloitava ei-vesipitoisten farmaseuttisten kantajien kanssa. Usein 15 käytetty kantaja on Cremophor EL, jossa itsessään voi olla ei-toivottuja vaikutuksia ihmisessä. Vastaavasti on joukko tutkimusryhmiä valmistanut paklitakselin vesiliukoisia johdannaisia, joita kuvataan seuraavissa viitteissä: (a) Haugwitz et ai. US-patentti 4 942 184; 20 (b) Kingston et ai. US-patentti 5 059 699; , (c) Stella et ai. US-patentti 4 960 790;
1 M M
(d) EP-hakemusjulkaisu 0 558 959 AI, julkaistu '< i 8.9.1993 ·.*'.* (e) Vyas et ai. Bioorganic & Medicinal Chemistry 25 Letters, (1993) 3: 1357 - 1360, ja : ·’: (f) Nicolau et ai. Nature, 1993, 364: 464 - 466.
Keksinnön mukaiset yhdisteet ovat taksaanijoh-dannaisten fosfono-oksimetyylieettereitä ja niiden farma-seuttisesti hyväksyttäviä suoloja. Suolojen vesiliukoisuus ,··^ 30 edesauttaa farmaseuttisten koostumusten valmistamista.
• · * • , t t » | 3 111724
Keksinnön yhteenveto
Keksintö koskee menetelmää taksaanijohdannaisten valmistamiseksi, joilla on kaava (A): 5 _ η T- 0CH2(0CH2)m0P(0)(0H)2 (A)
Jn jossa T on taksaaniryhmä, jonka Cl3-hiilessä on substituoitu 10 3-amino-2-hydroksipropanoyylioksiryhmä; n on 1, 2 tai 3; m on 0 tai kokonaisluku 1-6 mukaan lukien; tai niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi.
Keksinnön toinen näkökohta koskee menetelmää taksaani j ohdannaisten valmistamiseksi, joilla on kaava (B): 15 Τ'- OCH2(OCH2)mSCH3 n (B) jossa Τ' on T, jossa reagoimattomat hydroksiryhmät on 20 suojattu, m ja n ovat kuten on määritelty kaavan (A) . yhteydessä.
*»·«·
Keksinnön yksityiskohtainen kuvaus * · · *· Tässä patenttihakemuksessa pätevät seuraavat määri- ν’.' telmät ellei muuta nimenomaan sanota tai muuta käy ilmi f,· · 25 asiayhteydestä. "Alkyyli" tarkoittaa haarautunutta tai haarautumatonta tyydyttynyttä hiiliketjua, jossa on 1 - 6 ;’j1j hiiliatomia; esimerkkejä ovat metyyli, etyyli, n-propyyli, isopropyyli, n-butyyli, sek-butyyli, iso-butyyli, t- butyyli, n-pentyyli, sek-pentyyli, iso-pentyyli ja n-30 heksyyli. "Alkenyyli" tarkoittaa haarautunutta tai haa- » 1
* I
* 1 I » » » » » 4 111724 rautumatonta hiiliketjua, jossa on vähintään yksi hiili-hiili-kaksoissidos ja 2 - 6 hiiliatomia; esimerkkejä ovat etenyyli, propenyyli, isopropenyyli, butenyyli, iso- butenyyli, pentenyyli ja heksenyyli. "Alkynyyli" tarkoittaa 5 haarautunutta tai haarautumatonta hiiliketjua, jossa on vähintään yksi hiili-hiili-kolmoisssidos ja 2 - 6 hiiliatomia; esimerkkejä ovat etynyyli, propynyyli, butynyyli ja heksynyyli.
"Aryyli" tarkoittaa aromaattista hiilivetyä, jossa 10 on 6 10 hiiliatomia; esimerkkejä ovat fenyyli ja naftyyli. "Substituoitu aryyli" tarkoittaa aryyliä, joka on substituoitu vähintään yhdellä ryhmällä, joka on valittu ryhmästä Ci-6-alkanoyylioksi, hydroksi, halogeeni, Ci-6-alkyyli, trif luorimetyyli, Ci-6-alkoksi, aryyli, C2-6-15 alkenyyli, Ci-6-alkanoyyli, nitro, amino ja amido. "Halogeeni" tarkoittaa fluoria, klooria, bromia ja jodia.
"Fosfono-" tarkoittaa ryhmää -P(O)(OH)2 ja "fosfono-oksimetoksi" tai "fosfono-oksimetyylieetteri" tarkoittaa geneerisesti ryhmää -00¾ (OCH2) mOP (O) (OH) 2 -20 " (Metyylitio)tiokarbonyyli" tarkoittaa ryhmää -C(S)SCH3.
"Metyylitiometyyli" (lyhennetään myös MTM) tarkoittaa geneerisesti ryhmää -CH2SCH3.
·.'·1 "Taksaaniryhmä" (lyhennetään myös txn) tarkoittaa ryhmiä, jotka sisältävät taksaanirungon kaksikymmentä hii- • · : : : 25 liatomia, ja jota esitetään alla olevalla rakenne- :1·1; kaaviolla, jossa on absoluuttinen konfiguraatio.
: 4 « · 19 1 4¾ f 3 ·...' 13\ 1/ 116 : 14 ~T ‘ ' H f H CH3 : : 20 » · » » »1 · » 5 111724
Edellä esitettyä numerointisysteemiä käytetään tavanomaisessa taksaaninomenklatuurissa ja sitä seurataan koko tässä hakemuksessa. Esimerkiksi merkintä Cl tarkoittaa sitä hiiliatomia, jonka nimityksenä on "1"; C5-C20- 5 oksetaani tarkoittaa oksetaanirengasta, joka muodostuu hiiliatomeista, joiden nimityksenä on 4, 5 ja 20 yhdessä happiatomin kanssa; ja C9-oksi tarkoittaa happiatomia, joka on kiinnittynyt hiiliatomiin, jonka nimityksenä on "9", jolloin mainittu happiatomi myös voi olla oksoryhmä, a- tai 10 β-hydroksi, tai a~ tai β-asyylioksi.
"Substituoitu 3-amino-2-hydroksipropanoyylioksi" tarkoittaa tähdettä, jota esitetään kaavalla X~ = H 9 15 J: ÖX' (X on muu ryhmä kuin vety ja X' on vety tai muu ryhmä kuin 20 vety). Tämän tähteen stereokemia on sama kuin pakli-takselisivuketjussa. Tätä ryhmää kutsutaan tässä hake- • » ♦ « · muksessa joskus C13-sivuketjuksi".
• # ·.*·; "Taksaani johdannainen" (lyhennetään T) tarkoittaa yhdistettä, jossa on C13-sivuketjulia varustettu taksaani- » | [ : ; 2 5 ryhmä.
"Heteroaryyli" tarkoittaa viisi- tai kuusijäsenistä * · aromaattista rengasta, joka sisältää ainakin yhden ja jopa neljä ei-hiiliatomia, valittuina ryhmästä, jonka muodostavat happi, rikki ja typpi. Esimerkkejä heteroaryy-30 leistä ovat mm. tienyyli, furyyli, pyrrolyyli, imid- t · t t 6 Ί11724 atsolyyli, pyratsolyyli, tiatsolyyli, isotiatsolyyli, oksatsolyyli, isoksatsolyyli, triatsolyyli, tiadiatsolyyli, oksadiatsolyyli, tetratsolyyli, tiatriatsolyyli, oksatriat-solyyli, pyridyyli, pyrimidyyli, pyratsinyyli, pyridat-5 sinyyli, triatsinyyli, tetratsinyyli ja niiden kaltaiset renkaat.
"Fosfonosuojaryhmät" tarkoittaa ryhmiä, joita voidaan käyttää blokeeraamaan tai suojaamaan funktionaalista fosfonoryhmää; nämä suojaryhmät ovat edulli-10 sesti sellaisia, että niitä voidaan poistaa menetelmin, jotka eivät merkittävissä määrin vaikuta molekyylin muuhun osaan. Sopivat fosfonosuojaryhmät ovat alan ammattimiehelle hyvin tunnettuja ja niihin kuuluvat esim. bentsyyli- ja allyyliryhmät.
15 "Hydroksisuojaryhmiin" kuuluvat, näihin rajoittu matta, eetterit, kuten metyyli-, t-butyyli-, bentsyyli-, p-metoksibentsyyli-, p-nitrometoksibentsyyli-, allyyli-, trityyli-, metoksimetyyli-, metoksietoksimetyyli-, etoksi-etyyli-, tetrahydropyranyyli-, tetrahydrotiopyranyyli-, ja 20 trialkyylisilyylieetterit, kuten trimetyylisiiyylieetteri ja t-butyylidimetyylisilyylieetteri; esterit, kuten ' * bentsoyyli, asetyyli, fenyyliasetyyli, formyyli, mono-, di- .’·· ja trihaloasetyyli, kuten klooriasetyyli, diklooriasetyyli, : : : triklooriasetyyli, trifluoriasetyyli; ja karbonaatit, kuten • :*: 25 metyyli, etyyli, 2,2,2-trikloorietyyli, allyyli, bentsyyli ja p-nitrofenyyli.
Lisää esimerkkejä hydroksi- ja fosfonosuojaryhmistä voidaan löytää tavallisista hakuteoksista, kuten Greene ja .. . Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, toinen 30 painos, 1991, John Wiley & Sons, ja McOmnie, Protective
Groups in Organic Chemistry, 1975, Plenum Press. Menetel-
«tl I
7 111724 mät suojaryhmien viemiseksi molekyyliin ja niiden poistamiseksi siitä löytyvät myös tällaisista oppikirjoista.
"Farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat" tarkoittaa happaman fosfonoryhmän metalli- tai amiinisuolaa, jossa 5 kationi ei merkittävissä määrin vaikuta aktiivisen yhdisteen myrkyllisyyteen tai biologisiin vaikutuksiin. Sopivia metallisuoloja ovat litium-, natrium-, kalium-, kalsium, barium-, magnesium-, sinkki- ja alumiinisuolat. Edullisia metallisuoloja ovat natrium ja kaliumsuolat. Sopivista 10 amiinisuoloista voidaan mainita esim. ammonium-, trometa-miini- (TRIS), trietyyliamiini-, prokaiini-, bentsatiini-, dibentsyyliamiini-, klooriprokaiini-, koliini-, dietanoli-amiini-, trietanoliamiini-, etyleenidiamiini-, glukamii-ni-, N-metyyliglukamiini-, lysiini-, arginiini- ja etano-15 liamiinisuolat. Edullisia amiinisuoloja ovat lysiini-, arginiini- ja N-metyyliglukamiinisuolat.
Selityksessä ja patenttivaatimuksissa termillä -0CH2(0CH2)1B0P(0)(0H)2 tarkoitetaan sekä vapaata happoa että sen farmaseuttisesti hyväksyttäviä suoloja, ellei asiayh-20 teydestä nimenomaan käy ilmi, että tarkoitetaan vapaata happoa.
•-•f Esillä olevan keksinnön eräs näkökohta koskee tak- : saanijohdannaista, jonka kaava on (A) 25 T- Γ0CH2(0CH2)m0P(0)(0H)2l (A) : L Jn t t · -t;* jossa T on taksaaniryhmä, jonka C13-hiilessä on substi- ’·' tuoitu 3-amino-2-hydroksipropanoyylioksiryhmä; n on 1, 2 tai 3; m on 0 tai kokonaisluku 1-6 mukaan lukien; tai : \* 30 sen farmaseuttisesti hyväksyttävää suolaa.
* » *
Eräässä suoritusmuodossa taksaaniryhmä sisältää ;vähintään seuraavat funktionaalisuudet: Cl hydroksiryhmän, * ► * , ·, C2 bentsoyylioksiryhmän, C4 asetyylioksiryhmän, C5-C20
* I
oksetaaniryhmän, C9 oksiryhmän ja C11-C12 kaksoissidoksen.
β 111724
Eräässä edullisessa suoritusmuodossa taksaaniryhmä on johdettu tähteestä, jonka kaava on f36 F^e R7e R2e 5 /—! ,.'R2e 10 H0 OCOPh jossa R2® on vety ja R2* on vety, hydroksi, -0C(0)Rx tai -0C(0)0Rx; tai R2e on vety ja R2e’ on fluori? R3e on vety, hydroksi, -0C(0)Rx, C^-alkyylioksi tai -0C(0)0Rx; toinen 15 symboleista R6® ja R7e on vety ja toinen on hydroksi tai -0C(0)Rx; tai R6* ja R7® muodostavat yhdessä oksoryhmän; Rx on määritelty jäljempänä.
Toisessa suoritusmuodossa C13-sivuketju on johdettu tähteestä, jonka kaava on 20 R4(0)„C0blH 0 .
Λ-χΑ.,| bR1e 25 * 1 · :v.* jossa R1* on vety, -C(0)Rx tai -C(0)0Rx? R4 ja R5 ovat itse- • * ' näisesti C^-alkyyli, C2.6-alkenyyli, C2.6-alkynyyli tai -Z-R6; Z on suora sidos, C^-alkyyli tai C2.6-alkenyyli; R6 on aryyli, substituoitu aryyli, C3.6-sykloalkyyli tai hete- * *’ 30 roaryyli; ja R" on C^g-alkyyli, joka mahdollisesti on subs- tituoitu yhdestä kuuteen samanlaisella tai erilaisella halo-J geeniatomilla, C3_6-sykloalkyyli, C2.6-alkenyyli, tai radi- ,···' kaali, jonka kaava on
* I
9 111724
Ra jossa D on sidos tai C^-alkyyli; ja R“, Rb ja Rc ovat itsenäisesti vety, amino, C^-alkyyliamino, di-C^-alkyyliami-no, halogeeni, Cx_6-alkyyli tai C^-alkoksi; p on 0 tai 1. 10 Eräässä edullisessa suoritusmuodossa R4 on C1.6-al- kyyli ja p on 1, tai R4 on -Z-R6 ja p on 0. Edullisemmin R4(0)p on t-butoksi, fenyyli, isopropyylioksi, n-propyyli-oksi tai n-butoksi.
Toisessa edullisessa suoritusmuodossa R5 on C2_6-al-15 kenyyli tai -Z-R6 ja Z ja R6 ovat kuten aikaisemmin on määritelty. Edullisemmin R5 on fenyyli, 2-furyyli, 2-tienyyli, isobutenyyli, 2-propenyyli tai C3.6-sykloalkyyli.
Toisessa suoritusmuodossa kaavan (A) mukainen yhdiste voidaan tarkemmin esittää kaavalla (I) 20 vSf * .
R«(0)pC0NH O \ ) λ| L'R2 (I) R1 7^-v/ 25 OCOPh jossa R1 on hydroksi, -0CH2(0CH2)B0P(0)(0H)2, -0C(0)Rx tai -0C(0)0Rx; R2' on vety, ja R2 on vety, hydroksi, -0CH2- (0CH2)b0P(O)(OH)2 tai -0C(0)0Rx; tai R2' on fluori, ja R2 on 30 vety; R3 on vety, hydroksi, asetoksi, -0CH2(0CH2)„0P(0)(0H)2 tai -0C(0)0Rx; toinen symboleista R6 ja R7 on vety ja toinen . on hydroksi, C^-alkanGyylioksi tai -0CH2(0CH2)B0P(0)(0H)2; , , tai R6 ja R7 muodostavat yhdessä oksiryhmän; sillä edelly tyksellä, että vähintään yksi symboleista R1, R2, R3, R6 tai 35 R7 on -0CH2(0CH2)b0P(O)(OH)2; R4, R5, Rx, m ja p ovat kuten 10 111724 aikaisemmin on määritelty; tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävä suola.
Kaavan (I) mukaisissa yhdisteissä esimerkkejä symbolista Rx ovat mm. metyyli, etyyli, n-propyyli, isopropyy-5 li, n-butyyli, iso-butyyli, kloorimetyyli, 2,2,2-trikloo-rietyyli, syklopropyyli, syklobutyyli, syklopentyyli, syk-loheksyyli, etenyyli, 2-propenyyli, fenyyli, bentsyyli, bromifenyyli, 4-aminofenyyli, 4-metyyliaminofenyyli, 4-metyylifenyyli, 4-metoksifenyyli ja vastaavat. Esimerkkejä 10 symboleista R4 ja R5 ovat 2-propenyyli, isobutenyyli, 3-fu-ranyyli (3-furyyli), 3-tienyyli, fenyyli, naftyyli, 4-hyd-roksifenyyli, 4-metoksifenyyli, 4-fluorifenyyli, 4-tri-fluorimetyylifenyyli, metyyli, etyyli, n-propyyli, isopro-pyyli, n-butyyli, iso-butyyli, t-butyyli, etenyyli, 2-pro-15 penyyli, 2-propynyyli, bentsyyli, fenetyyli, fenyyliete-nyyli, 3,4-dimetoksifenyyli, 2-furanyyli (2-furyyli), 2-tienyyli, 2-(2-furanyyli)etenyyli, 2-metyylipropyyli, syklopropyyli, syklobutyyli, syklopentyyli, sykloheksyyli, sykloheksyylimetyyli, sykloheksyylietyyli ja vastaavat.
20 Eräässä edullisessa suoritusmuodossa esillä oleva keksintö koskee kaavan (I) mukaisia yhdisteitä, joissa R5 ;··; on C2_6-alkenyyli tai -Z-R6 ja Z ja R6 ovat kuten edellä on määritelty. Edullisemmin R5 on fenyyli, 3-furyyli, 3-tie- # · nyyli, 2-propenyyli, isobutenyyli, 2-furyyli, 2-tienyyli * < · : ,·, 25 tai C3_6-sykloalkpyyli.
f I ·
Toisessa edullisessa suoritusmuodossa R4 on kaavan • » » * · (I) mukaisissa yhdisteissä C^-alkyyli, jolloin p on 1; tai R4 on -Z-R6 ja Z ja R6 ovat kuten edellä on määritelty, jossa tapauksessa p on 0. Edullisemmin R4(0)p- on t-butoksi, : 30 fenyyli, isopropyylioksi, n-propyylioksi tai n-butoksi.
* J I
Toisessa edullisessa suoritusmuodossa esillä oleva ; .·. keksintö koskee kaavan (I) mukaisia yhdisteitä, joissa R1 on -0CH2(0CH2)m0P(0)(0H)2. Edullisemmassa suoritusmuodossa R2 on hydroksi, -0CH2(0CH2)B0P(0)(0H)2 tai -0C(0)Rx, ja Rx on 11 111724 edullisesti C1.6-alkyyli. Toisessa edullisessa suoritusmuodossa R3 on hydroksi tai asetoksi.
Toisessa edullisessa suoritusmuodossa esillä oleva keksintö koskee kaavan (I) mukaisia yhdisteitä, joissa R2 5 on -0CH2(0CH2)1B0P(0)(0H)2; R1 on hydroksi tai -0C(0)Rx; ja R3 on vety, hydroksi, asetoksi, -0CH2(0CH2)B10P(0)(0H)2 tai -0C(0)Rx; ja Rx on kuten edellä on määritelty. Edullisemmassa suoritusmuodossa R1 on hydroksi tai -0C(0)0Rx, ja Rx on edullisesti C^-alkyyli; ja R3 on hydroksi tai asetoksi. 10 Toisessa edullisessa suoritusmuodossa esillä oleva keksintö koskee kaavan (1) mukaisia yhdisteitä, joissa R3 on -0CH2(0CH2)m0P(0) (OH)2; R1 on hydroksi tai -0C(0)0Rx; R2 on vety, ja R2 vety, hydroksi tai -0C(0)0Rx; tai R2 on fluori ja R2 on vety; ja Rx on kuten edellä on määritelty. 15 Edullisemmassa suoritusmuodossa R1 on hydroksi tai -0C(0)0-
Rx, ja Rx on edullisesti C^-alkyyli; toisessa edullisemmassa suoritusmuodossa R2 on hydroksi.
Toisessa edullisessa suoritusmuodossa m on 0 tai 1, kun fosfono-oksimetoksiryhmä on läsnä kohdassa C7 taksaa-20 niryhmässä.
Kaavan (A) mukaisen yhdisteen edulliset farmaseut-:·· tisesti hyväksyttävät suolat ovat alkalimetallisuoloja, joihin kuuluvat litium-, natrium- ja kaliumsuolat; ja amiinisuolat, joihin kuuluvat trietyyliamiini-, trietano- : 25 liamiini-, etanoliamiini-, arginiini-, lysiini- ja N-me-
* » I
Y.’ tyyliglukamiinisuolat. Vieläkin edullisempia suoloja ovat arginiini-, lysiini- ja N-metyyliglukamiinisuolat.
• ' Kaavan (A) mukaisten taksaanijohdannaisten edulli- simpiin suoritusmuotoihin kuuluvat seuraavat yhdisteet: > I * .· 30 (1) 7-0-fosfono-oksimetyylipaklitakseli; » I ♦ (2)2' -0-(etyylioksikarbonyyli )-7-0-fosfono-oksime- : tyylipaklitakseli; ,(3) 2 '-O-fosfono-oksimetyylipaklitakseli; (4) 2 ’ , 7-bis-0-( fosfono-oksimetyyli )paklitakseli; • » i2 111724 (5) 3'-N-debentsoyyli-3'-desfenyyli-3'-N-(t-butyy-lioksikarbonyyli)—3 * —(2-furyyli)-2'-O-etyylioksikarbonyy-li-7-O-fosfono-oksimetyylipaklitakseli; (6) 3'-N-debentsoyyli-3'-desfenyyli-3’-N-(t-butyy- 5 lioksikarbonyyli )-3 ' - (2-tienyyli )-2 * -O-etyylioksikarbonyy- li-7-0-fosfono-oksimetyylipaklitakseli; (7) 10-desasetyyli-3'-N-debentsoyyli-3'-N-(t-butyy-lioksikarbonyyli)-10-0-(fosfono-oksimetyyli)paklitakseli; (8) 2'-O-fosfono-oksimetoksimetyylipaklitakseli ja 10 niiden vastaavat farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat, erityisesti natrium-, kalium-, arginiini-, lysiini-, N-me-tyyliglukamiini-, etanoliamiini-, trietyyliamiini- ja tri-etanoliamiinisuolat.
Kaavan (A) mukaiset yhdisteet voidaan valmistaa 15 käyttäen lähtöaineena taksaanijohdannaista T-[0H]n, jossa T ja n on määritelty edellä. Yhdisteen T-[0H)n rakennetta ei ole erityisesti rajoitettu niin kauan kuin siinä on vähintään yksi reaktiivinen hydroksiryhmä läsnä joko taksaa-niryhmässä tai C13-sivuketjussa, mikä mahdollistaa fosfo-20 no-oksimetoksimetyylieetterisidoksen muodostumisen. On ymmärrettävä, että reaktiivinen hydroksiryhmä voi olla : I liitettynä suoraan C13-propanoyylioksiketjuun (esim. pak- :*·,· litakselin 2'-hydroksiryhmä) tai taksaanirakenteeseen (esim. paklitakselin 7-hydroksiryhmä); tai se voi olla : 25 läsnä C13-sivuketjussa olevassa substituentissa, tai tak- saaniryhmässä olevassa substituentissa. Kaaviossa I esi-tettyä reaktiojärjestystä voidaan käyttää kaavan (A) mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi.
« * 13 Ί11724
Kaavio I
T—lOHJn -► T—[OCH2(OCH2)rnSCH3]n (Aa) (B) 5 T—[OCH^OCH^OPiOXORVjJn (C) Ί ίο w
Kaaviossa I Τ' on taksaanijohdannainen, jossa ei-reaktiiviset hydroksiryhmät on blokeerattu; RT on fosfono-suojaryhmä; n ja m ovat kuten on määritelty edellä. Siten sopivasti suojattu Τ', jossa on yksi tai useampia reak-15 tiivisia hydroksiryhmiä, muutetaan ensin vastaavaksi kaavan (B) mukaiseksi metyylitiometyylieetteriksi. Käyttämällä takselia esimerkkinä, Τ' voi olla paklitakseli itse (2',7'-bismetyylitiometyloinnin aikaansaamiseksi), 7-0- trietyylisilyylipaklitakseli, tai 2'-O-etoksikarbonyyli-20 paklitakseli. Kaavan (B) mukainen yhdiste, jossa m on 0, voidaan valmistaa käsittelemällä T'-[0H]n dimetyylisulfok-sidi/etikkahappoanhydridiseoksella tai dimetyylisulfidillä : ja orgaanisella peroksidilla. Näitä reaktioita käsitellään .1 tarkemmin jäljempänä.
; 25 MTM-eetteri, jossa on välissä oleva metyleenioksi- * yksikkö (so. kaavan (B) mukaiset yhdisteet, joissa m = 1) *’ 1 voidaan valmistaa käyttäen useaa eri menetelmää. Erään me netelmän mukaan kaavan (B) mukainen yhdiste, jossa m 1 0, saatetaan reagoimaan N-jodisukkinimidin (NIS) ja metyyli-30 tiometanolin kanssa ketjun pidentämiseksi yhdellä metylee- ; nioksiyksiköllä.
« f f » » ;;:,' T—[OCHjSCHJh + n CH3SCHj—OH - ^ » T—[OCHjOCHjSCHjJn
» I
» i * t * 1 14 111724
Metyylitiometanoli ja sen valmistus kuvataan julkaisussa Syn. Comm., 1986, 16 (13): 1607 - 1610.
Vaihtoehtoisen menetelmän mukaan T-alkoksidi (Ad), joka valmistetaan käsittelemällä kaavan (Aa) mukaista yh-5 distettä emäksellä, kuten n-butyylilitiumilla, litiumdi- isopropyyliamidilla tai litiumheksametyylidisilatsidilla, saatetaan reagoimaan kloorimetyylimetyylitiometyylieette-rin kanssa, jolloin saadaan kaavan (B) mukainen yhdiste, jossa m = 1.
10 Τ'—(0]n + n CHjSCHf—OCH2CI -► Τ’—(OCH2OCH2SCH3]n (Ad) (Ae)
Yhdiste (Ae) valmistetaan saattamalla metyylitiome-toksidi (valmistetaan metyylitiometanolista käsittelemällä 15 emäksellä, kuten n-butyylilitiumilla, litiumdi-isopropyy- liamidilla tai litiumheksametyylidisilatsidilla) reagoimaan kloorijodimetaanin kanssa. Yhdiste (Ae) voidaan myös valmistaa käsittelemällä 1,1'-diklooridimetyylieetteriä (C1CH20CH2C1) stökiometrisellä tai pienemmällä määrällä 20 (esim. noin 0,8 ekvivalenttia) natriumjodidia sekä nat-riumtiometoksidilla. 1,1’-diklooridimetyylieetteri kuva- ...j taan julkaisussa Ind. J. Chem., 1989, 28B, 454 - 456.
. \ ; Toisen menetelmän mukaan kaavan (Aa) mukainen yh diste saatetaan reagoimaan bis(MTM)eetterin, CH3SCH20CH2S-. . 25 CH3:n ja NIS:n kanssa, jolloin sadaan kaavan (B) mukainen yhdiste, jossa m = 1.
;':'. Τ’—[OH]n + n CH3SCH2OCH2SCH3--- T—[OCH2OCH2SCHj]n ♦
Bis(MTM)eetteri valmistetaan saattamalla 1,1'-di-: .· 30 klooridimetyylieetteri reagoimaan natriumjodidin sekä tio- ' metoksidin kanssa.
: , , Edellä kuvattua menetelmää, jossa käytetään metyy- t "t litiometanolia ja NIS:ia, voidaan käyttää minkä tahansa t t reagenssin kanssa, jossa on MTM-ryhmä, ketjun pidentämi-35 seksi yhdellä metyleenioksiyksiköllä kerralla. Esim. kaa-
* I
15 111724 van (B) mukainen yhdiste, jossa m = 1, voidaan saattaa reagoimaan metyylitiometanolin ja NIS:n kanssa, jolloin saadaan kaavan (B) mukainen yhdiste, jossa m = 2. Menetelmä voidaan toistaa, jolloin saadaan kaavan (B) mukaisia 5 yhdisteitä, joissa m on 3, 4, 5 tai 6.
Kaavion I mukaisessa toisessa vaiheessa metyyli-tiometyylieetteri muutetaan vastaavaksi suojatuksi fosfono-oksimetyylieetteriksi. Tämä saadaan aikaan käsittelemällä MTM-eetteri NIS:llä ja suojatulla fosfaatilla HOP(O)(0Ry)2· 10 Kolmannessa vaiheessa fosfonosuojaryhmä ja mahdolliset hydroksisuojaryhmät poistetaan, jolloin saadaan kaavan (A) mukainen yhdiste. Sopiva fosfonosuojaryhmä on esim.
bentsyyli, joka voidaan poistaa katalyyttisellä hydro-genolyysillä; hydroksisuojaryhmät, kuten trialkyylisilyyli, 15 voidaan poistaa fluoridi-ionilla, trikloorietoksikarbonyyli voidaan poistaa sinkillä. Suojaryhmien poistaminen opetetaan oppikirjoissa kuten Greene ja Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, 1991; ja McOmnie, Protective Groups in Organic Chemistry, Plenum 20 Press, 1973. Molempia vaiheita käsitellään tarkemmin selityksen jäljemmässä osassa.
Kaaviossa I esitettyjen reaktiovaiheiden muunnelma esitetään kaaviossa II
• 25 Kaavio II
I V r—[OHJn + n CH3SCH2(OCH2)mOP(OKORy)2 :V: V*) (Ca) :v. u • ' 30 <9 i Kaaviossa II kaavan (Aa) mukainen yhdiste saatetaan reagoimaan kaavan (Ca) mukaisen yhdisteen ja NIS:in kans- » « t sa, jolloin saadaan kaavan (C) mukainen yhdiste, josta « * * • *’ 35 sitten poistetaan suojaus, jolloin saadaan kaavan (A)
I I
16 111724 mukainen yhdiste. Kaavan (Ca) mukaiset yhdisteet, joissa m on 0, voidaan valmistaa käsittelemällä ensin metyyli- tiometanoli emäksellä, kuten natrium-, litium- tai kaliumheksametyylidisilatsidilla, jolloin saadaan metyyli- 5 tiometoksidi; metoksidi saatetaan reagoimaan suojatun klooritosfaatin, kuten dibentsyylikloorifosfaatin, kanssa, jolloin saadaan haluttu yhdiste. Kaavan (Ca) mukaiset yhdisteet, joissa m on 1, voidaan valmistaa käsittelemällä CH3SCH2OCH2CI disuojatulla fosfaattisuolalla, esim. di- 10 bentsyylifosfaatin natrium-, kalium- tai tetra(n-but- yyli) ammoniumsuolalla; tai CH3SCH2OCH2CI voidaan ensin muuttaa vastaavaksi jodiyhdisteeksi käyttäen natriumjodidia ennen reaktiota fosfaattisuolan kanssa. Vaihtoehtoisesti voidaan kaavan (Ca) mukaiset yhdisteet, joissa m on 1, 15 valmistaa käsittelemällä CH3SCH2OCH2CI natriumjodidilla sekä natriumtiometoksidilla, jolloin saadaan CH3SCH2OCH2SCH3; tämä yhdiste käsitellään sitten NIS:llä ja disuojatulla fosfaatilla, kuten dibentsyylifosfaatilla, jolloin saadaan haluttu yhdiste. Mikä tahansa edellä mainituista rea- 20 gensseista voidaan pidentää yhdellä metyleenioksiyksiköllä kerrallaan saattamalla mainittu reagenssi reagoimaan metyylitiometanolin ja NIS:n kanssa.
: ’ : Toisessa menetelmässä kaavan (A) mukaisen yhdisteen valmistamiseksi T-alkoksidi (Ad) saatetaan reagoimaan j 25 jodifosfaatin kanssa, kuten on esitetty kaaviossa III.
• « · * • · * • »
ι·;·> Kaavio III
» a » Τ'—(01n + ICH2(OCH2)mOP(0)(ORy)2 :v. (Ad) : 30 » » »
Kaaviossa III jodifosfaattiyhdiste saadaan saatta-y] maila C1CH2 (OCH2) mCl reagoimaan disuojatun fosfaatisuolan : ·' 35 kanssa, jolloin saadaan C1CH2 (OCH2) mOP (O) (ORy)2, joka sitten i7 111724 käsitellään natriumjodidilla, jolloin saadaan haluttu tuote.
Vielä eräs menetelmä kaavan (A) mukaisten yhdisteiden alaryhmän valmistamiseksi, joissa vähintään toinen 5 fosfono-oksimetoksiryhmistä on sidottu taksaaniryhmään esitetään kaaviossa IV.
Kaavio IV
p°,.. .x 10 jn + 13-OH—txn —[OCH2(OCH2)mSCH3]n -- (Ba) CT 'x (D)
Kaaviossa IV m ja n ovat kuten edellä on määritelty; X on ei-vetyryhmä, P on hydroksisuojaryhmä; txn on taksaaniryhmä. Kaavan (D) mukaiset yhdisteet ovat taksaa-15 neja, joissa on 13a-hydroksiryhmä ja yksi tai useampi me-tyylitiometyylieetteri sidottuna suoraan tai epäsuorasti taksaanirunkoon; tähän kuuluvat myös kaavan (D) mukaiset C13-metallialkoksidit. Esimerkki kaavan (D) mukaisesta yhdisteestä on 7-0-metyylitiometyylibakkatiini III; 20
AcQ_P OCH2SCH3 : HO"·/
i.Y: 25 0H J fJ
PhC(0)0 V * Taksaanin (D) kytkentä atsetidinonin kanssa on ana loginen kaavion VI kanssa, jäljempänä; siten siinä kuvattu 30 menetelmä kaavan (Id) mukaisen yhdisteen valmistamiseksi pätee myös kaavan (Ba) mukaisen yhdisteen valmistamiseen (s.o. kaavan (B) mukainen yhdiste, jossa vähintään toinen MTM-ryhmä on sidottuna suoraan tai epäsuorasti taksaaniryhmään), mikäli kaaviossa VI käytetään kaavan (D) mukais-* ‘ 35 ta yhdistettä kaavan (II) mukaisen yhdisteen sijaan. Tak- ie 111724 saani (D) muutetaan edullisesti ensin C13-raetallialkoksi-diksi, kuten natrium-, kalium- tai litiumalkoksidiksi; litiumalkoksidi on edullinen. Atsetidinoni toimii C13-si-vuketjun prekursorina. Taksaanin kytkentäreaktion jälkeen 5 poistetaan hydroksisuojaryhmä P, ja haluttaessa voidaan sivuketjun vapaa hydroksiryhmä muuttaa MTM-eetteriksi tai derivatisoida esteriksi tai karbonaatiksi, kuten tässä on kuvattu.
Atsetidinoni voidaan valmistaa myöhemmin kuvatta-10 vien menetelmien avulla, jotka myös tunnetaan yleisesti alalla. Kaavan (D) mukaiset yhdisteet voidaan valmistaa edellä kuvatulla yleisellä menetelmällä kaavan (B) mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi käyttämällä sopivasti suojattua taksaania. Niitä voidaan kuitenkin käytännön isem-15 min valmistaa kaavan (B) mukaisesta yhdisteestä pilkkomalla 13-sivuketju käyttäen boorihydridiä, kuten natrium- tai tetrabutyyliammoniumboorihydridiä; esim. käsitellään pak-litakselin 7-0-MTM tetrabutyyliammoniumboorihydridillä, jolloin saadaan 7-0-MTM-bakkatiini 111:a.
20 Kaavion I mukaista yleistä menetelmää kaavan (A) mukaisen yhdisteen valmistamiseksi kuvataan tarkemmin kaa-• I viossa V, jossa kuvataan kaavan (I') mukaisen yhdisteen : valmistamista (s.o. kaavan (I) mukainen yhdiste, jossa m on 0). Tässä synteesikaaviossa käytettyä menetelmää voi-25 daan yleisesti soveltaa muidenkin taksaanijohdannaisten ;;V suhteen, jotka eivät nimenomaan ole kaavan (I) mukaisia.
* Lisäksi alan ammattimies voi muunnella kaavion V mukaista ’ menetelmää tässä annettujen oppien mukaan, jolloin saadaan kaavan (A) mukaisia taksaanijohdannaisia, joissa m on 1 : 30 tai 2.
: : On ymmärrettävä, että kaaviossa V, kuten myös '·, muualla selityksessä, termi "hydroksisuojaryhmä" voi myös ! / käsittää karbonaatteja (-0C(0)0Rx); siten käytettäessä kar bonaattia hydroksisuojaryhmänä, on tarkoitus, että se V 35 poistetaan myöhemmässä vaiheessa, jolloin syntyy vapaa i9 111724 hydroksiryhmä, muuten karbonaattiryhmä jää osana lopputuotteeseen .
Kaavio V
5 S* Rla/7Va R4(0)pCONH O V / \ JL"'R2' r5'^V^^V' o.......^ (Ia)
Rla / / AcO
10 HO OCOPh (la) SMe2/(PhCOO)2 or (Ib) Ac20/DMS0 R3b R6bR7b \ \ / R2b 15 rMo)pconh o v >—JL--R2'
()4. XJL
*,b HO OCOPh 20 (2) NIS/H0P(0)(OR/)2 R3c r6c r7c ^ ·'.'·· R4(0)pCONH o \ ) ( JLmR2' 25 R5/XV^0.......? yL 'jL <lc)
... R · / AcO
: H0 OCOPh (3) fosfonosuojaryhmän ja, mikäli läsnä, hydroksisuojaryhmän > ' ·' 30 poistaminen R3’ , , , \Κί-'Ζ7 R2" ; ; ; rMo)pconh 0 .
:*·*: 35 r1' '—
• 00 / / AcO
·;· H0 oeoph 20 11 1724
Kaaviossa V Rla on hydroksi, suojattu hydroksi, -0C(0)Rx tai -0C(0)0Rx; R2 on vety, ja R2a on vety, hydroksi, suojattu hydroksi, tai -0C(0)0Rx; tai R2’ on fluori, ja R2a on vety; R3a on vety, hydroksi, suojattu hydroksi, ase-5 toksi, tai -0C(0)0Rx; toinen symboleista R6a ja R7a on vety ja toinen on hydroksi, suojattu hydroksi tai Cx_6-alkanoyy-lioksi; tai R6a ja R7a muodostavat yhdessä oksoryhmän; sillä edellytyksellä, että vähintään yksi symboleista Rla, R2a tai R3a, R6a tai R7a on hydroksi. Rlb on hydroksi, suojattu hyd-10 roksi, -OCH2SCH3, -0C(0)Rx tai -0C(0)0Rx; R2' on vety, ja R2b on vety, hydroksi, suojattu hydroksi, -OCH2SCH3 tai -0C(0)-0RX; tai R2 on fluori, ja RZb on vety; R3b on vety, hydroksi, suojattu hydroksi, asetoksi, -OCH2SCH3 tai -0C(0)0Rx; toinen symboleista R6b ja R7b on vety ja toinen on hydroksi, 15 suojattu hydroksi, Cx_6-alkanoyylioksi tai -OCH2SCH3; tai R6b ja R7b muodostavat yhdessä oksoryhmän; sillä edellytyksellä, että vähintään yksi symboleista Rlb, R2b, R3b, R6b tai R7b on -OCH2SCH3. R1c on hydroksi, suojattu hydroksi, -0CH2-0P(0)(0Ry)2, -0C(0)Rx tai -0C(0)0Rx; R2 on vety, ja R2c on 20 vety, hydroksi, suojattu hydroksi, -0CH20P(0) (0Ry)2 tai -0C(0)0Rx; tai R2 on fluori, ja R2c on vety; R3c on vety, ·· hydroksi, suojattu hydroksi, asetoksi, -0CH20P(0) (0RY)2 tai , : -0C(0)0Rx; toinen symboleista R6c ja R7c on vety ja toinen on hydroksi, suojattu hydroksi, C1.6-alkanoyylioksi tai 25 -0CH20P(0)(0Ry)2; sillä edellytyksellä, että vähintään yksi symboleista Rlc, R2c, R3c, r6c tai R7c on -0CH20P(0) (0Ry)2. R1' on hydroksi, -0CH20P(0)(0H)2, -0C(0)Rx tai -0C(0)0Rx; R2"’ • · · on vety; ja R2" on vety, hydroksi, -0CH20P(0)(0H)2 tai -0C(0)0Rx; tai R2 on fluori, ja R2 on vety; R3 on vety, : 30 hydroksi, asetoksi, -0CH20P(0)(0H)2 tai -0C(0)0Rx; toinen symboleista R6 ja R7 on vety ja toinen on hydroksi, Cx_6-: X alkanoyylioksi tai -0CH20P(0)(0H)2; sillä edellytyksellä, ’••V että vähintään yksi symboleista R1', R2', R3", R6’ tai R7' on -0CH20P(0)(0H)2. R4, R5 ja Rx ovat kuten aikaisemmin on mää-: .· 25 ritelty, ja Ry on fosfonosuojaryhmä.
* I
2i 111724
Ensimmäisessä vaiheessa kaavan (Ia) mukaisen yhdisteen vapaa hydroksiryhmä muutetaan vastaavaksi metyyli-tiometyylieetteriryhmäksi (-OCH2SCH3). Tämä muutos voidaan saada aikaan jommallakummalla edellä mainituista menetel-5 mistä (la - dimetyylisulfidimenetelmä) ja (Ib - dimetyyli-sulfoksidimenetelmä). Dimetyylisulfidimenetelmää alkoholien muuttamiseksi metyylitiometyylieettereiksi kuvaavat Medina et ai., julkaisussa Tet. Lett., 1988, ss. 3773 -3776, josta relevantit osat täten sisällytetään viitteinä. 10 Dimetyylisulfoksidimenetelmä on hyvin tunnettu reaktio nimellä Pummerer-reaktio.
On huomattava, että hydroksiryhmän reaktiivisuus vaihtelee riippuen sen sijainnista lähtöaineena käytettävässä kaavan (Ia) mukaisessa taksaanijohdannaisessa. Vaik-15 kakin yleensä 2'-hydroksiryhmä on asylointireaktioissa reaktiivisempi kuin 7-hydroksiryhmä, joka taas on reaktii-visempi kuin 10-hydroksiryhmä, on todettu että, yllättävästi kyllä, 7-hydroksiryhmä on helpommin muutettavissa metyylitiometyylieetteriksi kuin 2'-hydroksiryhmä. Ter-20 tiaarinen hydroksiryhmä asemassa C-l on yleensä vähiten reaktiivinen. Hydroksireaktiivisuuden erilaisuus voidaan ·<· hyödyntää kontrolloimaan metyylitiometylointiastetta.
: Siten kaavan (Ia) mukaisen yhdisteen ollessa kysy- myksessä, jossa Rla ja R2a molemmat ovat hydroksiryhmiä, on .1 25 vallitseva metyylitiometylointituote vastaava 7-0-metyyli- tiometyylieetteri. Jotta saataisiin kaavan (Ib) mukainen i » t 1 yhdiste, jossa Rlb on metyylitiometoksi, ilman että myös
• » I
’· mahdollisesti läsnä oleva 7-hydroksiryhmä muuttuisi metyy- litiometyylietteriksi, 7-hydroksiryhmä blokeerataan tavan-ί 30 omaisella hydroksisuojaryhmällä, kuten trietyylisilyylil- lä. Samalla tavalla voidaan 10-metyylitiometyylietteri ; ’·. saada, ilman että mahdollisesti läsnä olevat 7- ja/tai 2 ’ -hydroksiryhmät muuttuvat, kun viimeksi mainitut ryhmät blokeerataan samanlaisilla tai erilaisilla hydroksisuoja-• Y 35 ryhmillä. Vaikka 7-hydroksiryhmä onkin edullisin metyyli- 22 1 1 17 2 4 tiometylointikohta, on kuitenkin edullista suojata 2'-hyd-roksiryhmä, jos 7-monometyylitiometyylletter! on haluttu tuote.
Lisäksi voidaan vaikuttaa reaktio-olosuhteisiin, 5 jolloin suositaan bis- tai tris-metyylitiometyylietteri-taksaanijohdannaisten muodostumista. Esim. paklitakselin tapauksessa voidaan, pidentämällä reaktioaikaa tai käyttämällä suurempaa metyylitiometylointireagenssiylimäärää, saada 2',7-bis(metyylitiometyyli)eetteripaklitakselin suh-10 teellistä määrää suuremmaksi tuoteseoksessa.
Palataksemme kaavioon V, menetelmässä (la) kaavan (Ia) mukaista yhdistettä käsitellään dimetyylisulfidillä ja orgaanisella peroksidilla, kuten bentsoyyliperoksidil-la. Reaktio suoritetaan inertissä orgaanisessa liuottimes-15 sa, kuten asetonitriilissä, metyleenikloridissa tai vastaavassa, lämpötilassa, joka edesauttaa tuotteen syntymistä; tyypillisesti reaktio suoritetaan lämpötilavälillä noin -40 °C - noin huoneenlämpötila. Dimetyylisulfidia ja bentsoyyliperoksidia käytetään ylimäärin suhteessa lähtö-20 aineena käytettävään kaavan (Ia) mukaiseen taksaanijohdannaiseen.
··· Lähtöaineiden suhteelliset määrät riippuvat halu- : tusta metyylitiometylointiasteesta. Kun lähtöaineena käy- » 1 ,· ·, tettävässä kaavan (Ia) mukaisessa taksaani johdannaisessa . ! 25 yksi vapaa hydroksiryhmä on tarkoitus muuttaa monometyyli- ;;Υ tiometyylietteriksi, dimetyylisulfidia ja bentsoyyliperok- I M » • ;1 sidia voidaan käyttää jopa kymmenenkertäisenä ylimääränä ’’’ ’ suhteessa kaavan (Ia) mukaiseen taksaani johdannaiseen; ja edullisesti dimetyylisulfidia käytetään noin kaksin- tai : 30 kolminkertaista suhteellista ylimäärää bentsoyyliperoksi- • din suhteen. Siinä tapauksessa, että kaavan (Ia) mukaises- ; sa lähtöaineessa on sekä 2'- että 7-hydroksiryhmiä, 2',7- bis(metyylitiometyyli)eetterin suhteellinen määrä kasvaa T käytettäessä suhteellisesti suurempia dimetyylisulfidi- ja 35 bentsoyyliperoksidimääriä. Kun 2',7-bis(metyylitiometyy- i » 23 1117 2 4 li)eetteri on haluttu tuote, dimetyylisulfidia käytetään edullisesti noin 15 - 20-kertaista ylimäärää suhteessa lähtöaineena käytettävään taksaanijohdannaiseen; ja bent-soyyliperoksidia käytetään noin 5 - 10-kertaista ylimäärää 5 suhteessa lähtöaineena käytettävään taksaanijohdannaiseen.
Vaihtoehtoisesti voidaan kaavan (Ib) mukaista yhdistettä valmistaa saattamalla kaavan (Ia) mukainen yhdiste reagoimaan dimetyylisulfoksidin ja etikkahappoanhydri-din kanssa (menetelmä Ib). Tämä menetelmä on sopiva deri-10 vatisoidessa ei-2'-hydroksiryhmä sen metyylitiometyylieet-teriksi. Menetelmässä (Ib) kaavan (Ia) mukainen yhdiste liuotetaan dimetyylisulf oksidiin, ja etikkahappoanhydridiä lisätään liuokseen. Reaktio suoritetaan yleensä huoneenlämpötilassa, 18 - 24 tunnin aikana monometyylitiometyyli-15 eetterin valmistamiseksi.
Reaktiokaavion toisessa vaiheessa metyylitiometyy-lieetteri muutetaan vastaavaksi suojatuksi fosfono-oksime-tyylieetteriksi. Metyylitiometyyliryhmän muuttaminen suojatuksi fosfono-oksimetyylieetteriksi voidaan suorittaa 20 käyttäen yleistä menetelmää, jota ovat kuvanneet Veeneman et ai., Tetrahedron, 1991, v47, s. 1547 - 1562, josta re-levantit osat täten sisällytetään viitteinä. Siten kaavan : (Ib) mukainen yhdiste, jossa on vähintään yksi metyylitio- metyylieetteriryhmä, käsitellään N-jodisukkinimidilla ja 25 suojatulla fosforihapolla, kuten dibentsyylifosfaatilla. Reaktio suoritetaan inertissä orgaanisessa liuottimessa, * » * • ;* kuten tetrahydrofuraanissa, tai hologenoidussa hiilivedys- • » » '·’ * sä, kuten 1,2-dikloorietaanissa tai metyleenikloridissa, ja mahdollisesti dehydrointiaineen, kuten molekyyliseulo-V 30 jen läsnä ollessa. Katalyyttiä, kuten hopeatrifluorimetaa- : nisulfonaattia, voidaan lisätä reaktion nopeuttamiseksi.
’ _ Reaktio suoritetaan lämpötilassa, joka vaihtelee noin 0 °C:sta noin huoneenlämpötilaan, edullisesti huoneenlämpötilassa. N-jodisukkinimidia ja suojattua fosforihappoa 35 käytetään noin samanlaisina molaarisina ekvivalentteina 24 11 1724 kuin kaavan (Ib) mukaista metyylitiometyylieetteriä, mutta niitä käytetään edullisesti jonkin verran ylimäärin, esim. noin 1,3 - noin 1,5 ekvivalenttia suhteessa kaavan (Ib) mukaiseen yhdisteeseen.
5 Reaktiokaavion kolmannessa vaiheessa fosfonosuoja- ryhmä ja hydroksisuojaryhmä, mikäli läsnä, poistetaan. Suojaryhmien poistaminen tapahtuu alalla hyvin tunnetuin tavanomaisin menetelmin, kuten happo- tai emäskatalysoidulla hydrolyysillä, hydrogenolyysillä, pelkistämällä jne. 10 Esim. voidaan katalyyttistä hydrogenolyysiä käyttää bent-syylifosfonosuojaryhmän, kuten myös bentsyylioksikarbonyy-lihydroksisuojaryhmän, poistamiseksi. Suojaryhmien poista-mismenetelmiä voidaan löytää tavallisista hakuteoksista, kuten Greene ja Wuts tai McOmnie, ks. edellä.
15 Kaavan (I) mukaisen yhdisteen emässuolat voidaan muodostaa tavanomaisin menetelmin, kuten saattamalla vapaa kaavan (I) mukainen happo reagoimaan metalliemäksen tai amiinin kanssa. Sopivia metalliemäksiä ovat natriumin, kaliumin, litiumin, kalsiumin, bariumin, magnesiumin, sin-20 kin ja alumiinin hydroksidit, karbonaatit ja bikarbonaa-tit; ja sopivia amiineja ovat trietyyliamiini, ammoniakki, >; ·· lysiini, arginiini, N-metyyliglukamiini, etanoliamiini, : prokaiini, bentsatiini, dibentsyyliamiini, trometamiini I · (TRIS), klooriprokaiini, koliini, dietanoliamiini, tri- : 25 etanoliamiini ja vastaavat. Emässuolat voidaan puhdistaa edelleen kromatografoimalla sekä lyofilisoimalla tai ki-teyttämällä.
* ♦ ·
Taksaani johdannaisten lähtöaineet Edellä kuvattuja menetelmiä voidaan soveltaa mihin : \* 30 tahansa kaavan T-[0H]n mukaiseen taksaanijohdannaiseen, jolloin muodostuu kaavan (A) mukaisia yhdisteitä. Monta ; *·, esimerkkiä kaavan T-[0H]n mukaisista taksaani johdannaisista I I » !!.’ on ilmoitettu kirjallisuudessa ja jotkut niistä mainitaan T seuraavassa: (a) paklitakseli; (b) TaxotereR; (c) 10-des- • · * * 35 asetyylipaklitakseli; (d) taksaanijohdanaiset, jotka kuva- 25 111724 taan PCT-hakemusjulkaisussa nro 93/06 079 (julkaistu 1.4.1993), joilla on kaava o ^17
K15. 716 D R19 \l /18 / D
5 M_V //*20 R4. Rs o yL JU, ari\ SYP’- K2 \ rL / p/ R23 R "27 / R24 ίο r»Rk jossa R! on -0R6, -SR7 tai -NR8R9; R2 on vety, alkyyli, al-kenyyli, alkynyyli, aryyli tai heteroaryyli; R3 ja R4 ovat itsenäisesti vety, alkyyli, alkenyyli, alkynyyli, aryyli, heteroaryyli tai asyyli, sillä edellytyksellä, etteivät R3 15 ja R4 molemmat ole asyyli; R5 on -COR10, -COOR10, -COSR10, -CONR8R10, -S02Ru, tai -POR12R13; R6 on vety, alkyyli, alkenyyli, alkynyyli, aryyli, heteroaryyli, hydroksisuojaryhmä tai funktionaalinen ryhmä, joka lisää taksaanijohdannaisen vesiliuokoisuutta; R7 on alkyyli, alkenyyli, alkynyyli, 20 aryyli, heteroaryyli tai sulfhydryylisuojaryhmä; Re on vety, alkyyli, alkenyyli, alkynyyli, aryyli tai heteroaryy-li; R9 on aminosuojaryhmä; R10 on alkyyli, alkenyyli, alkynyyli, aryyli tai heteroaryyli; Rn on alkyyli, alkenyyli, alkynyyli, aryyli, heteroaryyli, -OR10 tai -NR8R14; R12 ja R13 ! 25 ovat itsenäisesti alkyyli, alkenyyli, alkynyyli, aryyli, heteroaryyli, -OR10 tai -NR8R14; R14 on vety, alkyyli, alke- * * * ' nyyli, alkynyyli, aryyli tai heteroaryyli; R15 ja R16 ovat
1 » I
* itsenäisesti vety, hydroksi, alempi alkanoyylioksi, alke- noyylioksi, alkynoyyIloksi tai aryloyylioksi; tai R1S ja R16 30 muodostavat yhdessä oksoryhmän; R17 ja R18 ovat itsenäisesti vety, hydroksi, alempi alkanoyylioksi, alkenoyylioksi, ; _ alkynoyylioksi tai aryloyylioksi; tai R17 ja R18 muodostavat !..* yhdessä oksoryhmän; R19 ja R20 ovat itsenäisesti vety, hyd roksi, alempi alkanoyylioksi, alkenoyylioksi, alkynoyyli-V 35 oksi tai aryloyylioksi; R21 ja R22 ovat itsenäisesti vety, 26 1 1 1724 alempi alkanoyylioksi, alkenoyylioksi, alkynoyylioksi tai aryloyylioksi; tai R21 ja R22 muodostavat yhdessä oksoryh-män; R24 on vety, hydroksi, alempi alkanoyylioksi, alkenoyylioksi, alkynoyylioksi tai aryloyylioksi; tai R23 ja R24 5 muodostavat yhdessä okso- tai metyleeniryhmän; tai R23 ja R24 muodostavat yhdessä hiiliatomin kanssa, johon ne ovat liittyneet, oksiraanirenkaan; tai R23 ja R24 muodostavat yhdessä hiiliatomin kanssa, johon ne ovat liittyneet, okse-taanirenkaan; R25 on vety, hydroksi, alempi alkanoyylioksi, 10 alkenoyylioksi, alkynoyylioksi tai aryloyylioksi; tai R26 on vety, hydroksi, alempi alkanoyylioksi, alkenoyylioksi, alkynoyylioksi tai aryloyylioksi; tai R26 ja R25 muodostavat yhdessä oksoryhmän; ja R27 on vety, hydroksi, alempi alkoksi, alkanoyylioksi, alkenoyylioksi, alkynoyylioksi 15 tai aryloyylioksi; (e) taksaanijohdanaiset, jotka kuvataan US-patenttijulkaisussa 5 227 400 paklitakselin 3'-desfe-nyyli-3'-(2-furyyli)- tai 3'-(2-tienyyli)johdannaiset, TaxotereR; (f) taksaanijohdanaiset, jotka kuvataan julkaisussa EP 534 709, julkaistu 31.3.1993, (paklitakselijoh-20 dannaiset, joissa sivuketjun fenyyliryhmät on itsenäisesti korvattu naftyylillä, styryylillä tai substituoidulla fenyylillä). Ks. myös PCT 92/09 589, julkaistu 11.06.1992;
, : (g) taksaanijohdanaiset, jotka kuvataan julkaisussa EP
_ ' 534 707, julkaistu 31.3.1993, (paklitakselijohdanaiset, , ; 25 joissa 3’-N-bentsoyyliryhmä on korvattu etoksikarbonyylil- /’/ lä tai metoksikarbonyylillä); (h) PCT-hakemusjulkaisu nro 93/06 093, julkaistu 1.4.1993 (paklitakselin ja TaxotereR:n ' ’ 10-desasetoksijohdannaisia); (i) julkaisu EP 524 093, jul kaistu 20.1.1993 10-, 7- tai 7,10-bis-0-(N-substituoituja 30 karbamoyylitaksaanijohdannaisia); (j) paklitakselin 9-a- hydroksianalogia kuvaa Klein julkaisussa "Synthesis of 9-Dihydrotaxol: A New Bioactive Taxane," Tetrahedron Letters, 1993 34(13); 2047 - 2050; (k) paklitakselin ja
TaxotereR:n 14-B-hydroksianalogeja, jotka valmistetaan ‘ : 35 14-B-hydroksi-10-deasetyylibakkatiini III:sta, kuvattiin 27 1 1 1724 kokouksessa 205:th ACS National Meeting in Colorado, 1993. (Med. Chem. Division, Abstract No. 28); ja (1) muita taksaaneja, kuten C7-fluoritaksaaneja ja erilaisia C10-substituoituja taksaaneja, kuvataan vireillä olevassa US-5 patenttihakemuksessa sarjanro 08/062 687, jätetty 20.5.1993, joka täten kokonaisuudessaan sisällytetään tähän viitteenä.
Taksaanijohdannaisten vapaa hydoksiryhmä voidaan muuttaa tavanomaisilla menetelmillä vastaavaksi esteriksi 10 tai karbonaatiksi; esim. kaavan (Ia) mukaisissa yhdisteissä toinen symboleista Rla, R2a ja R3a on -0C(0)Rx tai -0C(0)0Rx ja Rx on kuten aikaisemmin on määritelty. Siten taksaanijohdannainen T-OH voidaan saattaa reagoimaan kaavan L-C(0)0Rx mukaisen yhdisteen (L on lähtevä ryhmä), kuten 15 klooriformiaatin, kanssa emäksen, kuten tertiaarisen amiinin, läsnä ollessa, jolloin saadaan vastaavaa karbonaattia; esim. paklitakseli reagoi etyylikloorifor-miaatin kanssa di-isopropyylietyyliamiinin läsnä ollessa, jolloin saadaan 2'-O-etyylioksikarbonyylipaklitakselia. T-20 OH voi myös reagoida karboksyylihapon RXC02H kanssa tai sen asylointiekvivalentin (esim. anhydridin, aktiivisen esterin '· tai asyylihalogenidin) kanssa, jolloin saadaan vastaava : : esteri.
;V.* Lisäksi kaavan T-[OH]n mukaisia taksaani j ohdannaisia :25 voidaan valmistaa asyloimalla taksaaniryhmä, jossa on C13- li* · ryhmä vastaavasti substituoidulla 3-amino-2-hydroksipro-paanihapolla, sen asylointiekvivalentilla tai sen prekur- i < > sorilla. Sopivia substituoitujen 3-amino-2-hydroksipropaa-nihappojen prekursoreita ovat esim. kaavan (III) mukaiset : * 30 atsetidinonit. Tätä asylointireaktiota esimerkillistetään I » ’ kytkettäessä hydroksisuojattu bakkatiini III tai hydroksi- j suojattu 10-deasetyylibakkatiini III ja fenyyli-isoserii- nijohdannainen, jolloin saadaan paklitakselijohdannaisia, » * • kuten esim. Denis et ai., ovat kuvanneet US-patenttijulkai- * # t ! *’ 35 suissa 4 924 011 ja 4 924 012; ja kytkettäessä suojattu 28 1 1 17 2 4 bakkatiini III ja atsetidinoni, jolloin saadaan paklitak-selia ja sen johdannaisia, kuten on kuvattu julkiseksi tulleessa EP-patenttihakemuksessa 400 971, julkaistu 5.12.1990 (nyt US-patentti 5 175 315) ja US-patenttijul-5 kaisussa 5 229 526.
Menetelmä, joka kuvataan EP-patenttihakemuksessa 400 971, (Holtan-menetelmä) käsittää l-bentsoyyli-3-(1- etoksi)etoksi-4-fenyyli-2-atsetidinonin reaktion 7-0-tri-etyylisilyylibakkatiini III:n kanssa N,N-dimetyyliaminopy-10 ridiinin ja pyridiinin läsnä ollessa 25 °C:ssa 12 tunnin aikana; paklitakselia saadaan sen jälkeen kun erilaiset hydroksisuojaryhmät on poistettu. Holton-menetelmän parannusta kuvaavat Ojima et ai. julkaisussa "New and Efficient Approaches to the Semisynthesis of Taxol and its C-13 Side 15 Chain Analogs by Means of B-Lactam Synthon Method", Tetrahedron, 1992, 48(34): 6985 - 7012. Ojiman menetelmän mukaan muodostetaan ensin 7-O-trietyylisilyylibakkatiini III:n natriumsuola natriumhydridin avulla; tämä suola saatetaan reagoimaan kiraalisen l-bentsoyyli-3-(1-etoksi)-20 etoksi-4-fenyyli-2-atsetidinonin kanssa, jolloin saadaan paklitakselia sen jälkeen kun erilaiset hydroksisuojaryh-·; · mät on poistettu. US-patenttikulkaisussa 5 229 526 Holton .* ; kuvaa bakkatiini III:n metallialkoksidin tai sen erilais- ten johdannaisten kytkentää 2-atsetidinonin kanssa, jol-; 25 loin saadaan taksaaneja, joissa on C13-sivuketju. Tätä menetelmää sanotaan hyvin diastereoselektiiviseksi; siksi \ ; voidaan käyttää sivuketjuprekursorin, 2-atsetidinonin ra- seemisia seoksia. Hiljattain Ojima et ai. raportoivat "A Highly Efficient Route to Taxotere by the B-Lactam Synthon 30 Method" julkaisussa Tetrahedron Letters, 1993, 34(26): 4149 - 4152, kytkemällä 7,10-bis-0-( trikloorietoksikarbo-nyyli)-10-deasetyylibakkatiini III:n metallialkoksideja kiraalisen 1-(t-butoksikarbonyyli)-4-fenyyli-3-(suojattu hydroksi)-2-atsetidinonin kanssa, jolloin saadaan Taxo-; V 35 tereR, sen jälkeen kun suojaryhmät on poistettu. Kaikkien 29 1 1 1724 edellä siteerattujen julkaisujen relevantit osat sisällytetään täten viltteinä.
Yleistetty bakkatlini/atsetidinonimenetelmä kaavan (Ia) mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi kuvataan kaa-5 viossa VI. Taas voidaan muita taksaanijohdannaisia, jotka eivät nimenomaan ole kaavan (Ia) mukaisia, valmistaa tällä menetelmällä käyttämällä sopivia lähtöaineita.
Kaavio VI
10
CWV 2I
ho»··/ Jl JL (in
/ ~~y AcO
15 H0 OCOPh PO, /9 11111
20 \dR?/dRM
R«(0)pC0NH 0 v ) \ JL....R2'
.....QcTX
! PO ' Ac O
. ' . H0 OCOPh 25 ·,· ·' (Ia) 30 Kaaviossa VI R2’ on vety, R2d on vety, suojattu hyd- roksi tai -0C(0)0Rx; tai R2' on fluori, ja R2d on vety; R3d on vety, asetoksi, suojattu hydroksi, tai -0C(0)0Rx; toinen symboleista R6d ja R7d on vety ja toinen on hydroksi, suojattu hydroksi tai C1.6-alkanoyylioksi; tai R6d ja R7d muo- 35 dostavat yhdessä oksoryhmän; P on hydroksisuojaryhmä; M on 30 1 1 17 2 4 vety tai ryhmän IA metalli, kuten litium, natrium tai kalium; ja p, R4, R5 ja Rx ovat kuten aikaisemmin on määritelty. Reaktio voidaan suorittaa menetelmän mukaan, joka on kuvattu EP-patenttihakemuksessa 400 971, jolloin kaavan 5 (II) mukainen bakkatiini III -johdannainen, jossa M on vety, saatetaan reagoimaan kaavan (III) mukaisen atsetidino-nin kanssa orgaanisen emäksen, kuten N,N-dimetyyliaminopy-ridiinin, läsnä ollessa. Bakkatiini III -johdannainen muutetaan kuitenkin edullisesti ensin 13-alkoksidiksi käsit-10 telemällä ensin mainittua vahvalla emäksellä, kuten hydri-deillä, alkyyliamideilla, ja ryhmän IA metallien bis(tri-alkyylisilyyli)amideilla, kuten edellä on kuvattu US-pa-tenttijulkaisussa 5 229 526 ja Ojiman viitteessä. Edullisemmin 13-alkoksidi on litiumalkoksidi. Litiumsuolan muo-15 dostus voidaan toteuttaa saattamalla kaavan (II) mukainen yhdiste, jossa M on vety, reagoimaan vahvan metalliemäksen kuten litiumdi-isopropyyliamidin, Ci-6-alkyylilitiumin, li-tiumbis(trimetyylisilyyli)amidin, fenyylilitiumin, litium-hydridin tai niiden kaltaisten emäksien kanssa.
20 Kaavan (II) mukaisen taksaanin ja kaavan (III) mukaisen atsetidinonin välinen kytkentäreaktio suoritetaan ’ ’ inertissä orgaanisessa liuottimessa, kuten tetrahydrofu- ·.’·· raanissa, alennetussa lämpötilassa lämpötilavälillä noin ! .* I 0 - noin -78 °C. Kaavan (III) mukaiset atsetidinonit voi- •25 daan käyttää raseemisina seoksina kytkettäessä niitä kaa- •V; van (II) mukaisten taksaanimetallialkoksidien kanssa, joissa M on ryhmän IA metalli; tällaisessa tapauksessa atsetidinonireaktanttia käytetään edullisesti vähintään , kaksi ekvivalenttia suhteessa taksaanireaktanttiin, ja *,.* 30 edullisemmin noin kolme - noin kuusi ekvivalenttia. Kiraa- ’·*’ lisiä atsetidinoneja voidaan myös käyttää, ja tällaisessa ;tapauksessa yksi atsetidinoniekvivalentti suhteessa tak-saanireaktanttiin voi olla tarpeellinen määrä, mutta edul-lisesti atsetidinonia käytetään hiukan ylimäärin, esim.
• ·’ 35 jopa 1,5 ekvivalenttia.
3i 111724
Hydroksisuojaryhmät voivat olla samoja tai niitä voidaan valita siten, että yhden tai useamman suojaryhmän selektiivinen poistaminen on mahdollista muita oleellisesti häiritsemättä; esim. kaavan (Id) mukaisessa yhdisteessä 5 R2d ja PO voivat molemmat olla trietyylisilyylioksi, ja R3d voi olla bentsyylioksikarbonyyli; katalyyttinen hydrogeno-lyysi palladiumin ja hiilen läsnä ollessa poistaa bentsyy-lioksikarbonyylisuojaryhmät poistamatta trietyylisilyyli-oksiryhmää. Siten kaavan (Id) mukaisen yhdisteen hydroksi-10 suojaryhmät voidaan selektiivisesti poistaa, jolloin saadaan kaavan (Ia) mukainen yhdiste.
Kaavan (II) mukaiset yhdisteet tunnetaan joko kirjallisuudesta, esim. bakkatiini III, 10-deasetyylibakka-tiini III ja niiden hydroksisuojatut johdannaiset, tai 15 niitä voidaan valmistaa tunnetuista yhdisteistä tavanomaisin menetelmin, esim. muuttamalla hydroksiryhmä karbonaatiksi. Lisää kaavan (II) mukaisia yhdisteitä voidaan valmistaa menetelmien mukaisesti, jotka on kuvattu jäljempänä osassa lähtöaineiden valmistus.
20 Kaavan (lii) mukaiset yhdisteet voidaan valmistaa kaavan (lila) mukaisesta yhdisteestä yleisen menetelmän mukaan, joka on kuvattu EP-patenttihakemuksessa 400 971 ja julkaisussa Ojima et ai., Tetrahedron, 48(34): 6985 - : 7012, 1992.
: .· ^5 e PO R5 : : po, nr5 , .. , '··. base ·ι-1* jZJH r4(o)pco-l 0^“^Y'(0)pR4
ox O
(Ilia) (III) : · ; 30 : Siten kaavan (lila) mukainen yhdiste käsitellään ensin emäksellä, kuten n-butyylilitiumilla tai trietyy-liamiinilla, ja sitten kaavan R4(0)pC0-L mukaisella yhdis-;·’ teellä, jossa L on lähtevä ryhmä, jolloin saadaan kaavan • 35 (III) mukainen yhdiste.
32 1 1 17 2 4
Kaavan (III) mukaiset yhdisteet voidaan valmistaa EP-patenttihakemuksessa 400 971 kuvatulla yleisellä menetelmällä kaavan (Illb) mukaisen välituoteyhdisteen, 2-asetoksi-4-substituoitu-2-atsetidinonin, kautta; tai US-5 patenttijulkaisussa 5 229 526 kuvatulla menetelmällä välituoteyhdisteen, 3-trietyylisilyylioksi-4-substituoitu-2-atsetidinonin, kautta. Parannetun menetelmän mukaan kaavan (Illb) mukainen yhdiste voidaan saada kondensoimalla asetoksiasetyylikloridi bis-amiinin kanssa, minkä jälkeen 10 seuraa hydrogenolyysi tai happokatkaisu N-imiiniryhmän poistamiseksi; tätä menetelmää esitetään seuraavassa kaaviossa, jossa R5 on mahdollisesti substituoitu aryyli-tai heteroaryyliryhmä, kuten furyyli tai tienyyli. Tätä menetelmää esitetään vireillä olevassa US- 15 patenttihakemuksessa sarjanro 08/052 434, jätetty 23.4.1993, joka täten sisällytetään viitteenä.
CH3C(0)OCH2C(OH3 CH3C(0)0^ ^ emäs | f +
20 rTchotchuSL ch-n=chrS
y r5" h”.* / kat. H 2 tai . S hapan katkaisu » · · I · CH3C(0)0^ r5·
: 25 I
«· * · —NH
. · . O
« I · • ·
Kaavan (Illb) mukaiset tuotteet, jotka saadaan i · · näistä sykloadditioreaktioista, ovat yleensä kahden cis- .. . atsetidinonin raseeminen seos. Raseeminen seos voidaan * · 30 erottaa tavanomaisin menetelmin, kuten muuttamalla diaste- * » ’•y’ reomeereiksi, differentiaaliabsorptiolla kiraalisilla i adsorbenteilla pakatulla kolonnilla tai entsymaattisesti.
Esim. voidaan kaavan (Illb) mukaisten yhdisteiden raseemi-nen seos saattaa kosketukseen entsyymin kanssa, joka kata- ·’ 35 lysoi esterin hydrolyysiä, esim. esteraasin tai lipaasin * » * » » * i 33 11 17 2 4 kanssa, jolloin selektiivisesti katkaistaan toisen enan-tiomeerin 3-asyyliryhmä, vaikuttamatta toiseen. (Ks. esim. Brieva et ai., J. Org. Chem., 1993, 58: 1068 - 1075; myös vireillä oleva US-patenttihakemus sarjanro 092 170, jätet-5 ty 14.7.1993 ja EP-patenttihakemus 552 041, julkaistu 29.7.1993.) Vaihtoehtoisesti voidaan raseeminen seos ensin altistaa emäskatalysoidulle hydrolyysille 3-asyyliryhmän poistamiseksi ja vastaavan 3-hydroksi-S-laktaamin raseemi-sen seoksen aikaansaamiseksi; 3-hydroksi-8-laktaamin ra-10 seeminen seos saatetaan sitten kosketukseen entsyymin kanssa, joka pystyy katalysoimaan hydroksiryhmän asyloin-tia, jolloin enantiomeerin toinen hydroksiryhmä asyloi-daan selektiivisesti, ilman että toiseen vaikutetaan. Tai 3-hydroksi-8-laktaamin raseeminen seos voidaan asyloida 15 kiraalisella karboksyylihapolla ja syntynyt diastereomee-rinen seos voidaan sitten erottaa käyttäen alalla tunnettuja menetelmiä, ja kiraalinen apuaine poistaa, jolloin saadaan haluttu enantiomeeri.
Ojima et ai. raportoivat julkaisuissa J. Org. 20 Chem., 58: 1681 - 1683, 1991; Tet. Lett., 33: 5737 - 5740, 1992; ja Tetrahedron, 48: 6985 - 7012, 1992 useiden kaavan ·.: (lila) mukaisten kiraalisten atsetidinonien ja/tai vastaa-
, ; vien N-(p-metoksifenyyli)yhdisteiden synteesejä; jolloin P
on hydroksisuojaryhmä tri-isopropyylisilyyli; ja R5 on .* ! 25 4-metoksifenyyli, 3,4-dimetoksifenyyli, fenyyli, 4-fluori- fenyyli, 4-trifluorimetyylifenyyli, 2-furyyli, 2-fenyyli-" etenyyli, 2-(2-furyyli)etenyyli, 2-metyylipropyyli, syklo- heksyylimetyyli, isopropyyli, fenetyyli, 2-sykloheksyyli-etyyli tai n-propyyli. Näiden julkaisujen relevantit osat 30 sisällytetään täten viitteinä. Alan ammattimies pystyy valmistamaan muita kaavan (III) mukaisia atsetidinoneja, : ’·. joita ei nimenomaan kuvata näissä viitteissä, käyttäen alalla yleisesti tunnettuja menetelmiä.
Biologiset tulokset I 35 Esillä olevan keksinnön mukaiset yhdisteet ovat uusia kasvaimenvastaisia aineita; Edustavia kaavan (A) 34 111724 mukaisia yhdisteitä on tutkittu in vitro -sytotoksisuus-testeissä ja in vitro -eläinkasvainmalleissa.
In vitro -sytotoksisuustiedot
Esillä olevan keksinnön mukaisilla yhdisteillä il-5 meni in vitro -sytotoksista vaikutusta ihmisen paksusuolen HCT-116- ja HCT-116/VM46-syöpäsoluja vastaan. HCT-116/ VM46-syöpäsoluja on ennenkin valittu teniposiidista resistanssia ja ilmaisemaan monen lääkeaineen fenotyyppiresis-tanssia, mukaan lukien resistanssia paklitakselia vastaan. 10 Sytotoksisuutta arvioitiin ihmisen paksusuolensyöpäsoluja vastaan käyttäen XTT (2,3-bis(2-metoksi-4-nitro-5-sulfen-yyli)-5-[(fenyyliamino)karbonyyli]-2H-tetratsoliumhydrok-sidia) vertailuaineena, kuten ovat raportoineet S. A. Scu-diero et ai., "Evaluation of soluble tetrazolium/formazan 15 assay for cell growth and drug sensivity in culture using human and other tumor cell lines", Cancer Res., 48: 4827 -483, 1988. Soluja käytettiin 4 000 solua/astia käyttäen 96 astian mikrotiitterilevyjä, ja 24 tunnin kuluttua lääkeainetta lisättiin ja laimennettiin sarjoittain. Soluja inku-20 boitiin 37 °C:ssa 72 tuntia, jolloin tetratsoliumväriaine, XTT, lisättiin. Elävissä soluissa dehydrogenaasientsyymi pelkistää XTT:n muodoksi, joka absorboi valoa aallonpituu- » · *; dessa 450 nm, mikä voidaan mitata spektrofotometrisesti.
·.·,·' Mitä suurempi absorbanssi, sitä suurempi on elävien solujen ·.’ j 25 lukumäärä. Tulokset ilmoitetaan ICsccnä, joka on se Γ*’; lääkeainepitoisuus, joka tarvitaan estämään solujen lisääntymisen (so. absorbanssi 450 nm: ssä) 50 luksi * verrattuna käsittelemättömiin vertailusoluihin. Tässä testissä tutkittujen yhdisteiden ICso-arvot ilmoitetaan 30 taulukossa I.
t t » i t | t t I t i * * » 35 11 17 2 4
Taulukko 1
In vitro -sytotoksisuusarvoja verrattuna ihmisen paksusuo-lensyöpäsoluja vastaan 5 _IC58 (μΜ)_
Yhdiste _HCT-116__HCT-116/VM461
Taxotere* 0,004 0,213 (53) paklitakseli 0,004 0,44 (124)
Esimerkki 1 0,020 1,30 (66)
Esimerkki 3 0,266 6,67 (25) 10 Esimerkki 4 0,044 5,36(122) kuluissa oleva arvo on keskimääräinen vastustuskyky verrattuna HCT-116-soluja vastaan.
15 Yhdiste 7-0-metyylitiometyylipaklitakseli (esimerk ki 1 (a) tutkittiin myös sytotoksisuustestissä ja sen IC50 oli 0,003 μΜ HCT-116- ja 0,025 μΜ HCT-116/VM46-soluja vastaan.
In vivo -kasvaimenvastainen vaikutus 20 Balb/c x DBA F, (CDFj) -hydridihiiriin implantoitiin ihon alle (SC) 0,1 ml 2-%:ista (w/v) M109-keuhkosyöpäso-lukkoa (kuten W. Rose on kuvannut julkaisussa "Evaluation . . of Madison 109 LUng Carcinoma as a Model for Screening ! Antitumor Drugs", Cancer Treatment Reports, 65, nro. 3 - ; 25 4, s. 299 - 312 (1981). Tutkittavia yhdisteitä ja vertai- ;·· * lulääkeainetta, paklitakselia, annettiin suonensisäisesti • ·' hiiriryhmille; jolloin kukin ryhmä sai tiettyä yhdistettä *,* · erilaisena annoksena, ja yhdistettä kohti tutkittiin kolme tai neljä erilaista annostasoa. Hiirien elossapysymistä : : 30 seurattiin päivittäin, kunnes oli kulunut suunnilleen 75 , ’; vuorokautta kasvainsiirrosta. Yksi hiiriryhmä koetta kohti . *, jätettiin käsittelemättä ja se toimi vertailuryhmänä. Kas vaimia mitattiin myös kerran tai kaksi viikossa ja niiden kokoa millimetreissä käytettiin kasvainten koon arvioimi-: ‘ : 35 seksi julkaistujen menetelmien mukaisesti (ibid).
36 1 1 1724
Yhdisteellä käsiteltyjen (T) hiirien mediaanielos-sapysymisaikoja verrattiin vertailuna (C) toimineiden hiirten mediaanielossapysymisaikaan. Näiden kahden arvon suhde jokaiselle yhdisteellä käsitellylle hiiriryhmälle 5 kerrottiin sadalla ja on ilmaistu prosentteina (so. % T/C) taulukossa II esimerkkiyhdisteille. Lisäksi ilmoitetaan taulukossa II myös käsiteltyjen ryhmien ja vertailuryhmän kasvaimien kasvamiseksi 1 g:n painoksi tarvittavan mediaa-niajan ero ilmaistuna T-C-arvoina päivinä. Mitä surempi 10 T-C-arvo, sitä suurempi viive primaarisessa kasvaimen kasvussa. Yhdisteitä, joilla % T/C oli > 125 % ja/tai T-C > 4,0 vuorokautta, pidettiin vaikuttavina M109 SC- mallissa.
Taulukko II
15 ========SB—_β=_==Βββ=Β_ββ=_β__^^ _Maksimaalinen teho__Opt im. annos
Yhdiste__% T/C__T-C (päiviä) (mg/kg/inj ;)
Esimerkki 1 131 14.0 45*
Paklitakseli 134 14 48/24*'c 20 Esimerkki 3 160 18.8 24b
Paklitakseli 151 15 18b » * , · ayhdistettä annettiin suonensisäisesti kerran päivässä, : : 4:ntenä, 5:ntenä, 6:ntena, 7:ntenä ja 8:ntena päivänä 25 kasvainsiirron jälkeen.
jV, byhdistettä annettiin suonensisäisesti kerran päivässä, 5:ntenä, 6:ntena, 7:ntenä, 8:ntena ja 9:ntenä päivänä « · * kasvainsiirron jälkeen.
,, , korkeammalla annoksella saavutettiin maksimaalinen elin- (i; 30 aika; alempi annos liittyi kasvaimen kasvun maksimaaliseen viiveeseen.
t < r » * i t i
Esimerkin 3 mukaista yhdistettä (trietanoliamiini- f * · suolan muodossa) tutkittiin vielä hiiren ja ihmisen * · » : 35 ksenograftikasvainmalleissa (M109, A2780/cDDP - ihmisen 37 1 1 17 2 4 munasarjasyöpä, joka on resistentti cis-platinaa vastaan, ja HCT-116 - ihmisen paksusuolensyöpä) käyttäen paklitak-selia positiivisena vertailuna. A2780/cDDP-mallia kuvaavat Rose ja Basler julkaisussa, In vivo, 1990, 4: 391 - 396; 5 HCT-116-mallia kuvaavat Rose ja Basler julkaisussa, In vivo, 1989, 3: 249 - 254. M109 annettiin ihonalaisesti joka toinen viikko Balb/C-hiirille ja implantoitiin ihonalaisesti CDFl-hiirille kasvaimenvastaista tutkimista varten. A2780/cDDP ja HCT-116 kasvatettiin atyymisissä hii-10 rissä sekä antoa (joka toinen tai kolmas viikko) terapeuttisia kokeita varten. Esimerkin 3 mukaista yhdistettä annettiin suonensisäisesti liuotettuna veteen, tai suun kautta liuotettuna veteen, jossa oli muutama tippa Tween 80:tä, tai liuotettuna cremophore/etanoli-seokseen (50 %/ 15 50 %) ja laimennettuna suolaliuoksella. Hoitomalli ihon alaisesti tapahtuvia M109-kasvainkokeita varten oli kerran päivässä viitenä peräkkäisenä päivänä alkaen seuraavana vuorokautena kasvainsiirron jälkeen. Ihmisen ksenografti-testejä varten yhdisteitä annettiin kerran vuorokaudessa 20 joka toinen päivä viitenä annoksena, alkaen kun kasvaimen kooksi arvioitiin 50 - 100 mg.
·;·· Eräässä M109-kokeessa saavutettiin antamalla esi- . . | merkin 3 mukaista yhdistettä suonensisäisesti maksimaali- nen prosentuaalinen T/C, joka oli 155 vuorokautta (T-C oli ; t-t 25 10 vuorokautta) annoksella 36 mg/kg/injektio (vrt. pakli- • i r ::V takseli maksimaalinen prosentuaalinen T/C 132 vuorokautta, (T-C 13 vuorokautta) annoksella 36 tai 18 mg/kg/injektio).
* Samassa kokeessa saavutettiin antamalla esimerkin 3 mu kaista yhdistettä suun kautta maksimaalinen prosentuaali-: 30 nen T/C, joka oli 158 vuorokautta (T-C oli 22,8 vuorokaut- ta) annoksella 160 mg/kg/anto, kun paklitakselilla samalla annostuksella (korkein testattu) suspendoituna veteen ja ,··, Tween 80:een ei ilmennyt vaikutusta. Toisessa M109-kokees- ’ sa saavutettiin antamalla esimerkin 3 mukaista yhdistettä : 35 suonensisäisesti maksimaalinen prosentuaalinen T/C, joka 38 1 1 1724 oli 170 vuorokautta (T-C oli 17 vuorokautta) annoksella 48 mg/kg/injektio (vrt. paklitakseli maksimaalinen prosentuaalinen T/C 167 vuorokautta, (T-C 14 vuorokautta) annoksella 48 tai 36 mg/kg/injektio). Samassa kokeessa saavu-5 tettiin antamalla esimerkin 3 mukaista yhdistettä suun kautta maksimaalinen prosentuaalinen T/C, joka oli 172 vuorokautta (T-C oli 17 vuorokautta) annoksella 200 mg/ kg/anto, kun paklitakselilla annoksella 60 mg/kg/injektio liuotettuna cremophore/etanoli/suolaliuosseokseen ei il-10 mennyt vaikutusta. Tässä kokeessa cremophore/etanoli/suo-laliuosseokseen liuotettua paklitakselia ei voitu antaa suurempana annoksena kuin 60 mg/kg/injektio johtuen liukoisuus- ja myrkyllisyysesteistä.
A2780/cDDP-kokeessa saavutettiin antamalla esimer-15 kin 3 mukaista yhdistettä suonensisäisesti maksimaalinen prosentuaalinen T-C-arvo, joka oli 29,8 vuorokautta annoksella 36 mg/kg/injektio (vrt. paklitakseli maksimaalinen T-C 26,3 vuorokautta annoksella 36 mg/kg/injektio). Antamalla esimerkin 3 mukaista yhdistettä suun kautta maksi-20 maalinen T-C oli 20 vuorokautta annoksella 160 mg/kg/anto. HCT-116-kokeessa saavutettiin antamalla suonensisäisesti 24 tai 36 mg/kg/injektio paklitakseli, parannus kuudella seitsemästä hoidetusta hiirestä tai vastaavasti seitsemällä kahdeksasta hoidetusta hiirestä. Parannus tarkoittaa vapaa • 25 kasvaimista 80 vuorokautta implantaation jälkeen.
Keksinnön mukaiset yhdisteet ovat taksaani j ohdan- • · naisten f osf ono-oksimetyylieettereitä. Niiden farmaseuttisesti hyväksyttävillä suolamuodoilla on parannettu vesi- ,, , Huokoisuus verrattuna paklitakseliin mahdollistaen sopi- • 30 vimpien farmaseuttisten koostumusten valmistamisen. Sitou- tumatta teoriaan uskotaan, että esillä olevan keksinnön • mukaiset fosfono-oksimetyylieetterit ovat paklitakselin tai sen johdannaisten esiasteita; tällöin fosfono-oksime-tyyliryhmä lohkaistaan, kun aine pääsee kosketukseen in I | · : ’ 35 vivo fosfataasin kanssa, jolloin muodostuu alkuperäinen ' ‘ yhdiste.
39 1 1 1724
Esillä olevan keksinnön kaavan (A) mukaisia yhdisteitä voidaan käyttää samalla tavalla kuin paklitakselia; siksi syöpäsairauksien hoitoon perehtynyt onkologisti pystyy ilman turhaa kokeilemista arvioinaan 5 sopivan hoitosuunnitelman esillä olevan keksinnön mukaisen yhdisteen antoa varten. Tämän keksinnön mukaisilla yhdisteillä käytettävä annos, antotapa ja anto-ohjelma eivät ole erityisesti rajoitetut, ja ne vaihtelevat riippuen käytettävästä yhdisteestä. Siten esillä olevan 10 keksinnön mukaista yhdistettä voidaan antaa käyttäen mitä tahansa sopivaa antotapaa, edullisesti ruuansulatuskanavan ulkopuolista; annettava annostus voi olla esim. välillä 1 - noin 100 mg/kg kehon painosta tai noin 20 - noin 500 mg/kg potilaan kehon painosta. Kaavan (A) mukaiset yhdisteet 15 voidaan antaa myös suun kautta; suun kautta tapahtuva annostus on välillä noin 5 - noin 500 mg/kg kehon painosta.
Varsinainen annos riippuu erityisestä käytetystä koostumuksesta, antotavasta, siitä missä lääkeainetta annetaan, potilaasta ja hoidettavasta kasvaimesta. Monta 20 tekijää, jotka vaikuttavat lääkeaineen vaikutukseen, on otettava huomioon annosta määritettäessä, kuten ikä, paino, * · sukupuoli, ruokavalio ja potilaan fyysinen kunto.
> ·/·.* Farmaseuttiset koostumukset sisältävät kasvaimen- : : : vastaisesti tehokkaan määrän kaavan (A) mukaista yhdistettä • 25 yhdessä yhden tai useamman farmaseuttisesti hyväksyttävän • « · t |V. kantajan, täyteaineen, laimentimen tai apuaineen kanssa.
• I
Esimerkkejä paklitakselin tai sen johdannaisen > · · koostumuksista voidaan löytää esimerkiksi US-patenteista ,, , 4 960 790 ja 4 814 470. Esim. voidaan esillä olevan • ; 30 keksinnön mukaiset yhdisteet formuloida tablettien, t t • * » 40 1 1 1724 pillerien, jauheseosten, kapselien, injektioiden, liuosten, peräpuikkojen, emulsioiden, dispersioiden, ravintoesi-seosten muodossa ja muissa sopivissa muodoissa. Niitä voidaan myös valmistaa steriileinä kiinteinä koostumuksina, 5 esim. pakastekuivattuina ja haluttaessa kombinoida muiden farmaseuttisesti hyväksyttävien täyteaineiden kanssa. Tällaiset kiinteät koostumukset voidaan saattaa käyttömuotoon steriilin veden, fysiologisen suolaliuoksen, veden ja orgaanisen liuottimen, kuten propyleeniglykolin, 10 etanolin ja vastaavien, avulla tai jonkin muun steriilin injektoitavissa olevan väliainen avulla juuri ennen ruuansulatuskanavan ulkopuolella tapahtuvaa antoa.
Tyypillisiä farmaseuttisesti hyväksyttäviä kantajia ovat esimerkiksi mannitoli, urea, dekstraanit, laktoosi, 15 peruna- ja maissitärkkelykset, magnesiumstearaatti, talkki, kasviöljyt, polyalkyleeniglykolit, etyyliselluloosa, poly-(vinyylipyrrolidoni), kalsiumkarbonaatti, etyylioleaatti, isopropyylimyristaatti, bentsyylibentsoaatti, natrium-karbonaatti, gelatiini, kaliumkarbonaatti ja piihappo. 20 Farmaseuttinen valmiste voi myös sisältää ei-toksisia apuaineita, kuten emulgointi-, säilöntä-, kostutusaineita ’ ja niiden kaltaisia, esimerkiksi sorbitaanimonolauraattia, trietanoliamiinioleaattia, polyoksietyleenimonostearaatt ia, : : glyseryylitripalmitaattia, dioktyylinatriumsulfosukki- • 25 naattia ja niiden kaltaisia.
“.n Seuraavissa kokeellisissa menetelmissä kaikkien • # • > lämpötilojen on ymmärrettävä olevan celsiusasteina (°C) « * » ellei toisin ole ilmoitettu. Ydinmagneettisten resonanssi .. . (NMR:n) -spektrien tunnusomaiset arvot viittaavat kemial- 30 lisiin siirtymiin (δ) ilmaistuna miljoonasosina (ppm) ver-tailustandardina olevaan tetrametyylisilaaniin (TMS) näh-den. Protoni-NMR-spetrituloksissa eri siirtymille ilmoi-
» » · I
tettu suhteellinen ala vastaa tietyn funktionaalisen tyy-pin vetyatomien lukumäärää molekyylissä. Siirtymien luon-
» I
4i 111724 ne, mitä tulee kerrannaisuuteen, on ilmoitettu leveänä singlettinä (bs), leveänä duplettina (bd), leveänä trip-lettinä (bt), leveänä kvartettina (bq), singlettinä (s), multiplettinä (m), duplettina (d), kvartettina (q), trip-5 lettinä (t), dupletin duplettina (dd), tripletin duplettina (dt) ja kvartetin duplettina (dq). NMR-spektrien ottamiseen käytetyt liuottimet ovat asetoni-d6 (deuteroitu asetoni), DMSO-d6 (perdeuterodimetyylisulfoksidi), D20 (deuteroitu vesi), CDC13 (deuterokloroformi) ja muut tavanomaiset 10 deuteroidut liuottimet. Infrapuna (IR) -spektrikuvaus käsittää ainoastaan absorptioaallonpituudet (cm-1), joilla on funktionaalisen ryhmän identifiointiarvo.
Celite on Johns-Manvilie Products Corporationin rekisteröity kauppanimi piimaalle.
15 Tässä käytetyt lyhennykset ovat alalla yleisesti
käytettyjä tavanomaisia lyhennyksiä. Joitakin niistä ovat: MS (massaspektrometria); HRMS (korkean erotuskyvyn omaava massaspektrometria); Ac (asetyyli); Ph (fenyyli), v/v (ti-lavuus/tilavuus); FAB (nopea atomipommitus); ΝΟΒΑ (m-nit-20 robentsyylialkoholi); min (minuutti[a]); h (tunti[a]); NIS (N-jodisukkinimidi); BOC (t-butoksikarbonyyli); CBZ (bent-• * syylioksikarbonyyli); Bn (bentsyyli); Bz (bentsoyyli); TES
: (trietyylisilyyli); DMSO (dimetyylisulfoksidi); THF (tet- , ·, *, rahydrofuraani); HMDS (heksametyylisilatsaani).
. ’ 25 Lähtöaineiden valmistus * I · 11'.’ Useiden kaavan (A) mukaisten yhdisteiden valmistuk- sessa käyttökelpoisten erityisten lähtöaineiden valmistus *·' ’ kuvataan jäljempänä.
• » > 42 1 1 17 2 4
Valmistus 1 10-desasetoksipaklitakseli
9 OH
PhCONH O V / \ Jf
P h I
ÖH
• / AcO
H° OCOPh 10 (a) 2',7-0-bis (2,2,2-trikloorietoksikarbonyyli)-10- deasetyy1ipaklitakseli 10-deasetyylipaklitakselia (140 mg, 0,173 mmol) kuivassa dikloorimetaanissa (3,5 ml) käsiteltiin 0 eC:ssa pyridiinillä (0,028 ml, 0,346 mmol) ja trikloorietyyli-15 klooriformiaatilla (0,0724 ml, 0,260 mmol). Tunnin kuluttua tässä lämpötilassa kylmähaude poistettiin ja seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa yön yli. Liuotin haihdutettiin ja jäännös kromatografoitiin silikageelillä (30 -50 % etyyliasetaattia heksaanissa), jolloin saatiin otsi-20 kon mukainen yhdiste vaahtona (92,3 mg, 46 %). Eluoimalla edelleen saatiin reagoimatonta lähtöainetta (35 mg, 25 %), ja 2',10-0-bis(2,2,2-trikloorietoksikarbonyyli)-10-dease-: tyylipaklitakselia 16 %:n saannolla.
(b) 2',7-0-bis(2,2,2-trikloorietoksikarbonyyli)- 25 10-desasetoksi-ll,12-dihydropaklitakseli-10,12(18)-dieeni ;; · Vaiheessa (a) saatua tuotetta (92,3 mg, 0,079 mmol) • *' kuivassa dikloorimetaanissa (2 ml) käsiteltiin huoneen- · lämpötilassa 1,1,2-trifluori-2-klooritrietyyliamiinilla (0,0384 ml, 0,238 mmol). Liuosta sekoitettiin yön yli.
; : 30 Liuotin haihdutettiin ja jäännös puhdistettiin pylväskro- ; matografisesti (25 % etyyliasetaattia heksaanissa), jol loin saatiin otsikon mukainen yhdiste valkoisena jauheena [li/ (42,8 mg, 47,3 %).
43 1 1 17 2 4 (c) 10-desasetoksi-ll, 12-dihydropaklitakseli-lO, 12- (18)dleenl
Valheessa (b) saatua tuotetta (39 mg, 0,034 mmol) liuotettiin metanoliin (0,5 ml) ja etikkahappoon (0,5 ml), 5 ja käsiteltiin happopestyllä sinkkipulverilla (66,4 mg, 1,020 mmol). Liete kuumennettiin 40 °C:ssa tunnin ajan, suodatettiin ja suodos haihdutettiin. Kromatografoimalla jäännös 60-%:isella etyyliasetaatti/heksaaniseoksella saatiin otsikon mukainen yhdiste vaahtona (22 mg, 81 %).
10 (d) 10-desasetoksipaklitakseli
Vaiheessa (c) saatua tuotetta (22 mg, 0,028 mmol) etyyliasetaatissa (0,7 ml) hydrogenoitiin ilmakehän paineessa, kun läsnä oli palladiumia puuhiilellä (10-%:ista, 14,7 mg, 0,014 mmol Pd). Kun seos oli ollut 5,5 tuntia 15 huoneenlämpötilassa, saatiin suodattamalla (huuhtelemalla etyyliasetaatilla), haihduttamalla ja kromatografoimalla (60 % etyyliasetaattia heksaanissa) otsikon mukainen yhdiste (15,0 mg, 68 %) valkoisena vaahtona.
Valmistus 2 20 7- deoks i - 7a- f luor ipakl i taksel i
AC° /? F
PhCONH O \ I \] JL
• · Ph'^ 25 = \ /__/
: 7 / AcO
H0 ocoPh (a) 2*-0-bentsyylioksikarbonyyli-7-deoksi-7a-fluo-ripaklitakseli : 30 Dietyyliaminorikkitrifluoridia (DAST, 18,7 μΐ, ; 0,141 mmol) liuotettiin kuivaan dikloorimetaaniin (0,5 ml), ja tämä liuos jäähdytettiin 0 °C:seen. Liuos, jossa oli 2'-0-(bentsyylioksikarbonyyli)paklitakselia (71 mg, 0,072 mmol) dikloorimetaanissa (1 ml), lisättiin ja syn- 35 tynyttä liuosta pidettiin 0 eC:ssa 30 minuuttia ja huo- 44 1 1 1724 neenlämpötilassa neljä tuntia. Sitten lisättiin vettä (0,15 ml) reaktioseokseen reaktion lopettamiseksi ja syn-tynyt seos väkevöitiin, jolloin syntyi jäännös. Jäännös kromatografoitiin silikageelipylväällä (eluoimalla 40-pro-5 senttisellä etyyliasetaatilla heksaanissa), jolloin saatiin 61 mg (saanto: 85,7 %) l:l-seosta, jossa oli otsikon mukaista yhdistettä ja 2'-0-bentsyylioksikarbonyyli-8-des-metyy1i-7,8-syklopropapaklitakselia.
(b) 7-deoksi-7a-fluoripaklitakseli 10 Vaiheessa (a) saatu reaktioseos (89 mg) liuotettiin etyyliasetaattiin (3 ml) ja seosta sekoitettiin vetypai-neessa, joka oli hiukan yli ilmakemän paine, kun läsnä oli palladiumia puuhiilellä (10 % Pd, 29 mg, 0,027 mmol). Kahdentoista tunnin kuluttua liuotin poistettiin ja jäännös 15 puhdistettiin silikageelillä kromatografoimalla (eluoimalla 40-%:isella etyyliasetaatilla heksaanissa), jolloin saatiin 67,7 mg otsikon mukaista yhdistettä sekä 8-desme-tyyli-7,8-syklopropapaklitakselia. Seuraavaa HPLC-menetel-mää käytettiin 7-deoksi-7a-fluoripaklitakselin ja 8-desme-20 tyyli-7,8-syklopropapaklitakselin erottamiseksi.
Varustus • · j pumppu: PE Series 4 . : kolonni: Shandon Hypercarb (grafitisoitu hiili) 7
' < I
,·,·’ pm, 100 x 4,6 mm, #59864750 (preparatiivisten kolonnien » » . 25 käyttöohjeita on saatavissa yrityksestä Keystone Scien- tific, Bellefonte, PA) • » · • injektori: PE ISS-100
*’ 1 detektori: HP-104 OM
Olosuhteet j 30 liikkuva faasi: 85:15 metyleenikloridi:heksaaniseos i : erotusta ei menetetty käyttämällä 80:19:1 metyleeniklori- : s di:heksaani:isopropyylialkoholiseosta ‘I,’.' valuma: 2,5 ml/min
I I
detektori: 254 nm • \‘ 35 laimennin: näyte laimennettiin metyleenikloridiin • M ' 1 45 1Ί1724
Valmistus 3 7-deoksi-7a-fluoribakkatiini lii
AcO
ho...../ yc i / j AcC>“
10 HO
OCOPh
Kuivaan pulloon lisättiin inertissä atmosfäärissä 2'-0-(bentsyylioksikarbonyyli)paklitakselia (4 g, 4 mmol) ja kuivaa tolueenia (80 ml). Syntynyttä lietettä sekoitet-15 tiin huoneenlämpötilassa lisäten kuivaa tetrahydrofuraania (16 ml) tipoittain, kunnes syntyi väritön liuos. Edellä mainittu liuos jäähdytettiin -78 °C:seen kuivajää/asetoni-hauteessa ja käsiteltiin sitten dietyyliaminorikkitrifluo-ridilla (DAST, 1,2 ml, 2,5 ekvivalenttia). Reaktioseos sai 20 sekoittua 16 tunta, jona aikana se vähitellen lämpeni huoneenlämpötilaan. Syntynyt suspensio suodatettiin ja suodos (laimennettuna etyyliasetaatilla (30 ml)) pestiin kylläs-, , ; tetyllä natriumvetykarbonaattiliuoksella sekä suolaliuok- . / sella. Orgaaninen osa kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin, ; 25 jolloin saatiin raakatuote valkoisena vaahtona. Raaka ma- I · | ;;· * teriaali puhdistettiin osittain silikageelipylväskromato- * » » ·’ ·' grafoimalla (eluoimalla 10-%:isella CH3CN:lla CH2Cl2:ssa), * jolloin saatiin 1,45 g seosta, jossa oli 2' -O-(bentsyyli oksikarbonyyli )-7-deoksi-7o-fluoripaklitakselia ja 2'-0- i · t • 30 (bentsyylioksikarbonyyli )-8-desmetyyli-7,8-syklopropapak- : litakselia (82:18-seos ^-NMRrn perusteella).
. ' Edellä mainittu seos (1,45 g) liuotettiin etyyli- 'Ι! asetaattiin (60 ml) ja käsiteltiin palladiumilla hiilellä I i (300 mg). Kun seosta oli ravistettu neljä tuntia vetypai-j ‘ : 35 neessa 50 psi (345 kPa), reaktioseos ilmastettiin ja suo- 46 11 17 2 4 (Jätettiin lyhyen silikageelikerroksen läpi ja väkevöitiin. Näin saatiin haluttu tuoteseos, 7-deoksi-7a-fluoripakli-takseli ja 8-desmetyyli-7,8-syklopropapaklitakseli, valkoisena vaahtona (1,24 g, saanto: 99 %, 90:10-seos xH-NMR:n 5 perusteella). Tämä seos liuotettiin kuivaan metyleeniklo-ridiin (30 ml) ja käsiteltiin tetrabutyyliammoniumboori-hydridillä (745 mg, 2,9 mmol, 2 ekvivalenttia) ja sai sekoittua kuusi tuntia. Reaktio lopetettiin sitten etikkaha-polla (1 ml), laimennettiin lisäämällä lisää metyleeniklo-10 ridia (30 ml) ja pestiin kyllästetyllä natriumvetykarbo-naattiliuoksella. Orgaaninen osa kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin. Raaka, substituoitu taksaaniydinseos puhdistettiin osittain silikageelilpylväskromatografoimalla (eluoi-malla 10-%:isella CH3CN:lla CH2Cl2:ssa), jolloin saatiin 15 90:10-seos (1H-NMR:n perusteella), jossa oli 7-deoksi-7a- fluoribakkatiinia III ja 8-desmetyyli-7,8-syklopropabakka-tiini III:a (510 mg, 60 %) valkoisena vaahtona. Syntynyt vaahto kiteytettiin kuumasta isopropanolista, jolloin saatiin 7-deoksi-7a-fluoribakkatiini III:a pieninä valkoisina 20 neuloina (saanto: 410 mg); sp. 234 - 236 °C (hajoaa).
Valmistus 4 10-desasetoksi-7-deoksi-7a-fluoripaklitakseli
' ‘ f F
:V: 25 Phco^H^o^ \ ? öh >—
; : i / AcO
H0 OCOPh 30 (a) 2' -0-bentsyylioksikarbonyyli-10-desasetoksipak- litakseli 10-desasetoksipaklitakselia (27 mg, 0,034 mmol) dikloorimetaanissa (1 ml) käsiteltiin bentsyylikloorifor-miaatilla (0,0146 ml, 0,102 mmol), sekä di-isopropyletyy- : * 35 liamiinilla (0,0177 ml, 0,102 mmol). Reaktioseos sekoitet- 47 111724 tiin O eC:ssa 45 minuuttia, ja huoneenlämpötilassa 12 tuntia. Haihduttamalla liuotin ja kromatografoimalla silika-geelillä (eluoimalla 40-%:isella etyyliasetaatilla heksaa-nissa) saatiin 25,5 mg (saanto: 81 %) otsikon mukaista 5 yhdistettä vaahtona.
(b) 10-desasetoksi-7-deoksi-7a-fluoripaklitakseli Vaiheessa (a) saatua tuotetta (25,5 mg, 0,028 mmol) diklorimetaanissa (0,8 ml) 0 °C:ssa käsiteltiin DAST:lla (0,0071 ml, 0,055 mmol). 45 minuutin kuluttua 0 eC:ssa 10 reaktio sai jatkua viisi tuntia huoneenlämpötilassa. Haihduttamalla liuotin ja kromatografoimalla saatiin 2'-0-bentsyylioksikarbonyyli-7-deoksi-7a-fluoripaklitakselia raakavaahtona. Tämä yhdiste liuotettiin etyyliasetaattiin (1 ml) ja seosta sekoitettiin vetypaineessa, joka oli hiu-15 kan yli ilmakemän paine, kun läsnä oli palladiumia puuhiilellä (10 %, 8,9 mg) 12 tuntia huoneenlämpötilassa. Katalyytti poistettiin suodattamalla ja kromatografoimalla tuote silikageelillä saatiin 10 mg (saanto: 40 % kaksi vaihetta) otsikon mukaista yhdistettä vaahtona.
20 Valmistus 5 10-deasetyyli-7-deoksi-7a-fluoripaklitakseli • H0\ lf f ; phco^H^o^ \ \ : 0H / / Aco ·'j : H0 ocoph
Liuos, jossa oli 2',10-0-bis(2,2,2-trikloorietoksi-·': 30 karbonyyli)-10-deasetyylipaklitakselia (120 mg, 0,103 mmol) dikloorimetaanissa (2 ml), jäähdytettiin 0 eC:seen • ja käsiteltiin DAST:lla (0,0266 ml, 0,207 mmol). Liuosta sekoitettiin 0 eC:ssa 30 minuuttia ja huoneenlämpötilassa neljä tuntia. Reaktio lopetettiin lisäämällä vettä (0,05 35 ml). Reaktioseos väkevöitiin ja jäännös puhdistettiin si- 48 11 17 2 4 likageelillä kromatografoimalla (eluoimalla 30-%:isella etyyliasetaatilla heksaanissa), jolloin saatiin 81 mg (saanto: 68 %) 2',10-0-bis(2,2,2-trikloorietoksikarbonyy-li)-7-deoksi-7a-fluoripaklitakselia vaahtona. Tämä yhdiste 5 (63 mg, 0,054 mmol) liuotettiin metanoliin (0,5 ml) ja etikkahappoon (0,5 ml) ja käsiteltiin sinkkipulverilla (104 mg, 1,62 mmol) 90 minuutin ajan 45 °C:ssa. Reaktio-seos suodatettiin ja suodos väkevöitiin. Kromatografoimalla jäännös silikageelillä (eluoimalla seoksella, jossa oli 10 40 % heksaania ja 60 % etyyliasetaattia) saatiin 38 mg (saanto: 86 %) otsikon mukaista yhdistettä valkoisena kiintoaineena.
Valmistus 6 7-deoksibakkatiini 15 AcO 0 vH, ho·"·/ jl j.
20 V_iX/° HO f AcÖ
PhC(O)Ö (a) 7-0-t(metyylitio)tiokarbonyyli]bakkatiini III 25 Bakkatiini III:a (750 mg, 1,278 mmol) liuotettiin kuivaan tetrahydrofuraaniin (20 ml) ja imidatsolia (8,7 • ‘ mg, 0,128 mmol) lisättiin yhtenä annoksena. Natriumhydri- V ' diä (50-%:ista mineraaliöljyssä, 77 mg, 1,597 mmol) lisät tiin huoneenlämpötilassa. Kun kaasunkehitys oli loppunut • ‘ · 30 (10 min), hiilidisulfidia (4,6 ml) lisättiin heti. Kolmen ; : tunnin jälkeen huoneenlämpötilassa keltainen liuos käsi teltiin metyylijodidilla (0,238 ml, 3,835 mmol) ja sekoitettiin yön yli. Käsittelemällä etyyliasetaatilla ja vedellä saatiin otsikon mukainen yhdiste raakaöljynä.
49 11 17 2 4
Vaihtoehtoinen menetelmä:
Bakkatiini III:a (394 mg, 0,672 mmol) liuotettiin tetrahydrofuraaniin (5 ml) ja hiilidisulfidiin (1 ml). Tähän liuokseen lisättiin natriumhydridiä (40,3 mg, 5 60-%:ista, 1,009 mmol). Katalyyttinen määrä imidatsolia lisättiin myös. Reaktioseosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 1,5 tuntia ja sitten metyylijodidia (122,8 μΐ, 2,016 mmol) lisättiin. 40 minuutin kuluttua liuotin poistettiin vakuumissa, ja jäännös kromatografoitiin silikageelillä 10 (eluoimalla 20-, 50-, 60-%:isella etyyliasetaatilla hek-saanissa), jolloin saatiin otsikon mukainen yhdiste (260 mg, saanto: 57,2 %) yhdessä 7-epibakkatiinin kanssa (98,5 mg, 25 %).
(b) 7-0-1 (metyylitio)tiokarbonyyli]-13-0-trietyyli-15 silyylibakkatiini III
Vaiheen (a) mukainen tuote raakaöljynä liuotettiin kuivaan dimetyyliformamidiin (5 ml) ja käsiteltiin imidat-solilla (870 mg, 12,78 mmol) ja trietyylisilyylikloridilla (2,10 ml, 12,78 mmol) huoneenlämpötilassa 15 tunnin ai-20 kana. Vettä lisättiin sekä uutettiin etyyliasetaattiin. Orgaaninen kerros pestiin huolellisesti vedellä ja kui-·;·· vattiin sitten. Flashkromatografoimalla silikageelillä .* .* (eluoimalla 20-%:isella etyyliasetaatilla heksaanissa) saatiin otsikon mukainen yhdiste lasimaisena kiintoaineena . ! 25 (saanto: 209 mg, 20 %, kaksi vaihetta).
Vaihtoehtoinen menetelmä:
Vaiheen (a) mukainen tuote (193,4 mg, 0,286 mmol) *’ ’ liuotettiin kuivaan dimetyyliformamidiin (2,86 ml). Tähän liuokseen lisättiin imidatsolia (77,9 mg, 1,14 mmol) sekä : *,· 30 trietyylisilyylikloridia (192 μΐ, 1,14 mmol). Reaktio- seosta sekoitettiin yön yli huoneenlämpötilassa. Kahdentoista tunnin kuluttua reaktioseos laimennettiin etyyli-’ asetaatilla (150 ml). Orgaaninen kerros pestiin vedellä (3 x 10 ml) ja suolaliuoksella (1 x 10 ml), kuivattiin ja : 35 väkevöitiin vakuumissa. Jäännös kromatografoitiin silika- so 111724 geelillä (eluoimalla 20-%:isella etyyliasetaatilla heksaa-nissa), jolloin saatiin otsikon mukainen yhdiste (163 mg, saanto: 72,0 %).
(c) 7-deoksi-13-0-trietyylisilyylibakkatiini III
5 Vaiheessa (b) saatua tuotetta (182 mg, 0,230 mmol) kuivassa bentseenissä (5 ml) kuumennettiin 80 °C:seen, kun läsnä oli tributyylitinahydridiä (0,310 ml, 1,150 mmol) ja 2,2f-atsobisisobutyyrinitriiliä (AIBN, 10 mg). Kolmen tunnin kuluttua liuos sai jäähtyä ja liuotin haihdutettiin 10 vakuumissa. Kromatografoimalla jäännös silikageelillä (eluoimalla 20-%:isella etyyliasetaatilla heksaanissa) saatiin otsikon mukainen yhdiste öljynä.
(d) 7-deoksibakkatiini III
Vaiheessa (c) saatua tuotetta liuotettiin tetrahyd-15 rofuraaniin (5 ml) ja käsiteltiin tetrabutyyliammonium- fluoridilla (IM tetrahydrofuraanissa, 0,50 ml, 0,50 mmol) kaksi tuntia huoneenlämpötilassa. Laimentamalla etyyliasetaatilla ja pesemällä vedellä ja suolaliuoksella sekä kromatografoimalla silikageelillä (eluoimalla 1:1 etyyliase-20 taatti/heksaaniseoksella) saatiin otsikon mukainen yhdiste valkoisena lasimaisena kiintoaineena (63 mg, saanto: 58 %, kaksi vaihetta).
Valmistus 7
10-desasetoksibakkatiini III
25 O
:· : Il OH
K
ho.....^ HO £ AcÖ PhC (0) Ö
I I
51 111724
(a) 10-deasetyyli-10-0-(pentafluorifenoksi)tiokar-bonyyli-7-0-trietyylisilyylibakkatiini III
7-0-trietyylisilyyli-lO-deasetyylibakkatiini III:a Greene et ai., J. Am. Chem. Soc., 110, s. 5917, 1988) (319 5 mg, 0,485 mmol) liuotettiin kuivaan tetrahydrofuraaniin (5 ml), jäähdytettiin -40 °C:seen, ja käsiteltiin n-butyy-lilitiumilla (1,58 M heksaanissa, 0,384 ml, 0,606 mmol). 40 minuutin kuluttua tässä lämpötilassa pentafluorifenyy-liklooritionoformiaattia (0,086 ml, 0,536 mmol) lisättiin 10 sellaisenaan injektioruiskulla. Reaktioseosta sekoitettiin -20 °C:ssa 90 minuuttia, lopetettiin kyllästetyllä ammo-niumkloridiliuoksella, ja uutettiin etyyliasetaatilla. Etyyliasetaattikerros kuivattiin ja väkevöitiin. Jäännös puhdistettiin silikageelillä kromatografoimalla (eluoimal-15 la 40-%:isella etyyliasetaatilla heksaanissa), jolloin saatiin otsikon mukainen yhdiste vaahtona (320 mg, saanto: 74 %).
(b) 10-desasetoksi-7-0-trietyylisilyylibakkatiini lii 20 Vaiheen (a) mukainen tuote (119 mg, 0,135 mmol) liuotettiin kuivaan tolueeniin (3 ml) ja käsiteltiin • AIBN:llä (2 mg). Liuoksesta poistettiin kaasu kuivalla . ; typellä, sitten tributyylitinahydridiä (0,055 ml, 0,202 . mmol) lisättiin. Sitten liuosta kuumennettiin 90 °C:ssa . 25 tunnin ajan. Liuotin haihdutettiin sitten ja kromatogra- foimalla jäännös silikageelillä (eluoimalla 40-%:isella etyyliasetaatilla heksaanissa) saatiin otsikon mukainen '·' yhdiste (87 mg, saanto: 99 %) värittömänä vaahtona.
(c) 10-desasetoksibakkatiini III
: 30 Vaiheessa (b) saatua tuotetta (120 mg, 0,187 mmol) i » 1 i)(_: liuotettiin asetonitriiliin (3,5 ml) ja liuos jäähdytet- : ,·, tiin -10 °C:seen. Väkevää kloorivetyhappoa (36-%:ista, • * » 0,060 ml) lisättiin, ja liuosta sekoitettiin 30 minuuttia. Seos laimennettiin etyyliasetaatilla (75 ml) ja pestiin • ",’ 35 kyllästetyllä natriumvetykarbonaattiliuoksella ja suola- 52 1 117 2 4 liuoksella, sitten kuivattiin ja väkevöitiin. Jäännös puhdistettiin silikagelillä flashkromatografoimalla (eluoi-malla 70-%:isella etyyliasetaatilla heksaanissa), jolloin saatiin 10-deasetyylioksibakkatiini III vaahtona (75 mg, 5 saanto: 76 %).
Valmistus 8
10-desasetoksi-7-deoksibakkatiini III
0 10
ho··/ VC 1 JL
HO £ ÄcÖ PhG(0)Ö
(a) 7-0- [ (metyylitio)tiokarbonyyli]-10-desasetoksi-bakkatiini III
10-desasetoksibakkatiini III:a (75 mg, 0,142 mmol) 20 liuotettiin kuivaan tetrahydrofuraaniin (2 ml) ja hiilidi-sulfidiin (0,5 ml). Natriumhydridiä (60-%:ista mineraali-öljyssä, 8,5 mg, 0,213 mmol) lisättiin sitten, ja seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa kaksi tuntia. Jodimetaa-nia (0,026 ml, 0,426 mmol) lisättiin ja reaktio sai jatkua / ; 25 yön yli. Liuotin poistettiin sitten ja jäännös puhdistet- ; : : tiin silikageelillä kromatografoimalla (eluoimalla 50 - 1 « i 70-%:isella etyyliasetaatilla heksaanissa), jolloin saa-· tiin otsikon mukainen yhdiste vaahtona (46,4 mg, saanto: 53 %).
30 (b) 10-desasetoksi-7-deoksibakkatiini III
' : Vaiheen (a) mukainen tuote (36 mg, 0,058 mmol) ; refluksoitiin bentseenissä (1 ml), kun läsnä oli AIBN:ä (2 mg) ja tributyylitinahydridiä (0,079 ml, 0,290 mmol) argonatmosfäärissä kolme tuntia. Väkevöimällä reaktioseos l ' ; 35 ja flashkromatografoimalla jäännös silikageelillä (eluoi- 53 1 1 1724 maila 40-%:isella etyyliasetaatilla heksaanlssa) sekä erottamalla tuote HPLC:n avulla (korkean erotuskyvyn nes-tekromatografla) muista komponenteista, saatiin otsikon mukainen yhdiste vaahtona (16,8 mg, saanto: 56 %).
5 Vaihtoehtoinen menetelmä:
Liuokseen, jossa oli 7-0-[(metyylitio)karbonotioyy-11]-13-0-trietyylisilyylibakkatiini III:a (valmistuksen I vaiheen (b) mukaista tuotetta, 416,3 mg, 0,527 mmol) kuivassa tolueenissa (10,5 ml) lisättiin katalyyttinen määrä 10 AIBN:ä, ja syntyneestä liuoksesta poistettiin kaasu kuivalla typellä viiden minuutin ajan. Tributyylitinahydridiä (708,7 μΐ, 2,63 mmol) lisättiin ja reaktioseosta kuumennettiin 100 °C:ssa kaksi tuntia, minkä jälkeen toinen annos tributyylitinahydridiä (425,3 μΐ, 1,581 mmol) lisät-15 tiin. Reaktioseosta kuumennettiin 5,5 tuntia 100 °C:ssa, ja sai sitten jäähtyä huoneenlämpötilaan. Kromatografoi-malla silikageelillä (eluoimalla 20-%:isella etyyliasetaatilla heksaanlssa) saatiin 7-deoksi-10-desasetoksi-13-0-(trietyylisilyyli)bakkatiini III:a (320 mg, saanto: 97 %). 20 Liuokseen, jossa oli edellä mainitun vaiheen tuo tetta (160 mg, 0,255 mmol) kuivassa tetrahydrofuraanissa (2 ml) huoneenlämpötilassa, lisättiin tetrabutyyliammo-. niumfluoridia (766 μΐ, 1 M, 0,766 mmol). Reaktioseosta , .* sekoitettiin tunnin ajan huoneenlämpötilassa. Liuotin ,* ; 25 poistettiin ja jäännös kromatografoitiin silikageelillä '·' (eluoimalla 50 - 70-%:isella etyyliasetaatilla heksaanis- : .* sa), jolloin saatiin haluttu otsikon mukainen yhdiste v 1 (115 mg, saanto: 87,9 %).
Valmistus 9 30 (3R,4S)-l-t-butoksikarbonyyli-4-fenyyli-3-trietyy- lisilyylioksi-2-atsetidinoni ::ί·! (C2H5)3SiQ. /h * * % ·
I—I
λ-N
& v=*o
OtBu 54 1 1 17 2 4
Sekoitettuun liuokseen, jossa oli (3R,4S)-4-fenyy- li-3-trietyylisilyylioksi-2-atsetidinonia (2,200 g, 7,92 mmol) kuivassa tetrahydrofuraanissa (25 ml), lisättiin N, N-di-isopropyylietyyliamiinia (1,65 ml, 9,510 mmol, 1,2 5 ekvivalenttia) 0 °C:ssa argonatmosfäärissä. Liuosta sekoitettiin viisi minuuttia, minkä jälkeen lisättiin di-t-bu-tyylidikarbonaattia (2,080 g, 9,510 mmol, 1,2 ekvivalenttia) ja 4-dimetyyliaminopyridiiniä (193,6 mg, 1,581 mmol, O, 20 ekvivalenttia). Reaktioseosta sekoitettiin 0 eC:ssa 10 60 minuuttia, sitten laimennettiin etyyliasetaatilla (25 ml). Syntynyt liuos pestiin suolaliuoksella, 10-%:isella NaHC03-liuoksella, 10-%:isella kloorivetyhapolla, kuivattiin (MgS04), ja väkevöitiin, jolloin saatiin raakatuote (öljy). Yhdiste puhdistettiin edelleen silikageelillä 15 flashkromatografoimalla (eluoimalla 15-%:isella etyyliasetaatilla heksaanissa), jolloin saatiin otsikon mukainen yhdiste valkoisena kiintoaineena (2,4 g, saanto: 83 %). Valmistus 10 (±)-cis-3-asetyylioksi-4-fenyyliatsetidin-2-oni 20 CH3C(0)0Ph
, , O
’; · (a) 1 l:n kolmikaulapulloon, joka oli varustettu
• « I
' 25 lämpömittarilla, magneettisekoittajalla ja tiputussuppi- M : lolla, lisättiin hydrobentsamidia (30,00 g, 100,5 mmol) ja : V etyyliasetaattia (150 ml). Sekoittaen ja argonpatjan alla V *’ reaktioseos jäähdytettiin 5 eC:seen ja trietyyliamiinia (16,8 ml, 121 mmol) lisättiin. Liuos, jossa oli asetoksi- 30 asetyylikloridia (12,4 ml, 116 mmol) etyyliasetaatissa (300 ml), lisättiin sitten tipoittain 90 minuutin aikana.
, Kuudentoista tunnin jälkeen tässä lämpötilassa reaktioseos : sai lämmetä 20 °C:seen (1,5 tuntia) ja siirrettiin erotus- * ♦ ’···* suppiloon. Orgaaninen kerros pestiin peräkkäin NH4Cl-liuok- !'·*: 35 sella (kyllästetty) (150 ml, 100 ml), NaHC03-liuoksella * t 55 1 1 17 2 4 (kyllästetty) (120 ml) ja suolaliuoksella (120 ml). Identifioimista varten otsikon mukainen yhdiste voidaan eristää tässä vaiheessa kuivaamalla orgaaninen faasi MgS04:lla, suodattamalla ja poistamalla liuotin vakuumissa. Näin saa-5 tiin (±)-cis-3-asetyylioksi-l-[(fenyyli)(bentsyylideeni-imino)metyyli]-4-fenyyliatsetidin-2-oni kvantitatiivisena raakasaantona punaisena lasina.
(b) Liuos, jossa oli vaiheessa (a) saatu yhdiste etyyliasetaatissa (500 ml), siirrettiin varovasti argon-10 virrassa 2,0 l:n Parr-pulloon, jossa oli 10-%:ista palladiumia aktivoidulla puuhiilellä (6,00 g). Tätä seosta käsiteltiin vedyllä (4 atm, 404 kPa) 20 tunnin aikana, minkä jälkeen katalyytti poistettiin suodattamalla celite-ker-roksen läpi. Suodatinkakku lietettiin etyyliasetaattiin 15 (200 ml), sekoitettiin (10 min) ja suodatettiin. Suodatin kakku huuhdeltiin etyyliasetaatilla (100 ml) ja suodokset yhdistettiin. Orgaaninen kerros pestiin 10-%:isella kloo-rivetyhapolla (300 ml) ja molemmat kerrokset suodatettiin sintratun lasisuppilon läpi valkoisen saostuman poistami-20 seksi (dibentsyyliamiini.HCl), joka huuhdeltiin etyyliasetaatilla (100 ml). Faasit erotettiin ja orgaaninen kerros i pestiin toisella annoksella 10-%:ista kloorivetyhappoa ; · (200 ml). Yhdistetyt 10-%:iset kloorivetyhappopesut uutet- tiin takaisin etyyliasetaatilla (200 ml) ja yhdistetyt : 25 orgaaniset kerrokset pestiin NaHC03-liuoksella (kyllästet ty) (300 ml) ja suolaliuoksella (250 ml). Orgaaninen kerros kuivattiin MgS04:lla, suodatettiin ja väkevöitiin va- * kuumissa, kunnes tilavuus oli 75 ml. Tämä seos jäähdytet tiin 4 °C:seen ja saostunut tuote eristettiin suodattamal-30 la. Suodatinkakku pestiin heksaanilla (200 ml), jolloin ϊ saatiin 16,12 g (78,1 %:n kokonaissaanto hydrobentsamidis- , ta) otsikon mukaista yhdistettä valkoisina neuloina, sp.
: / 150 - 151 °C.
* * 56 11 17 2 4
Valmistus 11 (±)- cis-3-trietyylisilyylioksi-4-(2-furyyli)-N-t-butoksikarbonyyliatsetidin-2-oni 5 tcsoA A)
Λ—NBoc O
(a) Seurattiin valmistuksessa 10, osassa (a) kuvat-10 tua menetelmää, paitsi että hydrofuramidia [s.o. 2-furyy- li-CH-(N=CH-2-furyyli )2] käytettiin hydrobentsamidin sijaan ja reaktio suoritettiin mittakaavassa 18,6 mmol (vast. 100 mmol). Siten, käyttämällä hydrofuramidia (5,00 g, 18,6 mmol), trietyyliamiinia (3,11 ml, 22,3 mmol) ja asetoksi-15 asetyylikloridia (2,30 ml, 21,4 mmol) saatiin 6,192 g (saanto: 90,4 %) (±)-cis-3-asetyylioksi-l-[(2-furyyli)(2-furyylimetyleeni-imino)metyyli]-4-(2-furyyli)atsetidin-2-onia vaaleanpunaisena siirappina.
(b) Seurattiin valmistuksessa 10, osassa (b) kuvat-20 tua menetelmää, paitsi että tuote eristettiin preparatii- visella TLC:llä ja reaktio suoritettiin mittakaavassa 2,7 mmol perustuen alkuperäisen hydrofuramidin määrään. Siten osassa (a) edellä saatu raakatuote liuotettiin uudelleen f · ' '
> · I
‘ etyyliasetaattiin (50 ml) ja lisättiin 10-%:iseen palla- * · ; 25 diumiin aktivoidulla puuhiilellä (150 mg). Puhdistamalla • < * : raaka kiintoaine preparatiivisella TLC:llä (2 mm:n silika- * » t ·' ·* geeli, eluoimalla 1:1 etyyliasetaatti/heksaaniseoksella) : saatiin 386 mg (65,8 %:n korjattu kokonaissaanto hydrofur- amidista)(±)-cis-3-(asetyylioksi)-4-(2-furyyli)atsetidin-j ’ : 30 2-onia keltaisena kiintoaineena. Tämä kiteytettiin uudel- :’*leen etyyliasetaatti/heksaaniseoksesta, sp. 118 - 119 °C.
. ’· (c) Yhdiste, joka saatiin osassa (b) edellä (3,78 g, 19,4 mmol) 60 ml:ssa metanolia, sekoitettiin • · ;·" K2C03:n kanssa (20 mg, 0,14 mmol) 90 minuutin aikana ja : ' : 35 liuos neutraloitiin käyttäen Dowex 50W-X8:aa ja suodatet- » ? S ! » 57 1 1 17 2 4 tiin. Suodos väkevöitiin ja jäännös liuotettiin 80 ml:aan vedetöntä tetrahydrofuraania ja sekoitettiin 0 °C:ssa imi-datsolin (1,44 g, 21,2 mmol) ja TESClrn (3,4 ml, 20,2 mmol) kanssa 30 minuuttia. Liuos laimennettiin etyyliase-5 taatilla ja pestiin suolaliuoksella, kuivattiin MgS04:lla ja väkevöitiin. Jäännös kromatografoitiin silikageelillä (eluoimalla 3:1 heksaani/etyyliasetaattiseoksella), jolloin saatiin 4,47 g (saanto: 86 %) (±)- cis-3-trietyylisi-lyylioksi-4-(2-furyyli)-atsetidin-2-onia värittömänä öl-10 jynä.
(d) Osan (c) mukaista tuotetta (2,05 g, 7,7 mmol) 30 ml:ssa dikloorimetaania sekoitettiin 0 °C:ssa di-iso-propyylietyyliamiinin (1,5 ml, 8,6 mmol) ja di-t-butyyli-dikarbonaatin (2,0 g, 9,2 mmol) ja katalyyttisen dimetyy-15 liaminopyridiinimäärän (DMAP) kanssa. Liuos laimennettiin dikloorimetaanilla ja pestiin suolaliuoksella, kuivattiin MgS04:lla ja väkevöitiin. Jäännös kromatografoitiin silikageelillä (eluoimalla 8:1 heksaani/etyyliasetaattiseoksel-la), jolloin saatiin 2,0 g (saanto: 70 %) otsikon mukaista 20 yhdistettä vahamaisena kiintoaineena.
Osassa (b) saatua raseemista seosta (b) voidaan .] käyttää substraattina entsymaattista hydrolyysiä varten : käyttäen lipaasia, kuten PS-30, jonka lähteenä on Pseudo-
• I I
. monas-laji. (Amano International Co.), jolloin saadaan ! 25 (3R,4R)-3-hydroksi-4-(2-furyyli)-atsetidin-2-onia. Mene- |;V telmää, jossa käytetään entsymaattista resoluutiota käyt- » « · * täen lipaasia PD-30 ja muita entsyymejä, kuvataan vireillä '· 1 olevassa US-patenttihakemuksessa sarjanro 092 170, jätetty 14.7.1993, joka täten kokonaisuudessaan sisällytetään ; 30 viitteenä.
Osien (c) ja (d) mukaisia menetelmiä seurattiin : käyttäen (3R,4R)-3-hydroksi-4-(2-furyyli)-atsetidin-2- t i i il,* onia, jolloin saatiin (3R,4R)-N-(t-butoksikarbonyyli)-3- trietyylisilyoksi-4-(2-furyyli)atsetidin-2-onia.
* * » > t t
) 1 t ! I
58 11 1724
Valmistus 12 (±)-cis-3-trietyylisilyylioksi-4-(2-tienyyli)-N-t- butoksikarbonyyliatsetidin-2-oni
5 /O
/9—NBoc O
(a) Valmistuksessa 10, vaiheessa (a) kuvattua me-10 netelmää seurattiin, paitsi että hydrotienamidia [s.o.
2-1ienyy 1 i-CH-(N=CH-2-1ienyy 1 i)2] käytettiinhydrobentsami-din sijaan. Siten, käyttämällä hydrotienamidia (30 g, 94,7 mmol), trietyyliamiinia (15,84 ml, 114 mmol) ja asetoksi-asetyylikloridia (11,6 ml, 108 mmol), saatiin (+)-cis-3-15 asetyylioksi-1-[(2-tienyyli)(2-trietyylimetyleeni-imino)-metyyli]-4-(2-tienyyli)atsetidin-2-onia jäykkäjuoksuisena öljynä.
(b) Etikkahapon 70-%:ista vesiliuosta (0,35 ml jää-etikkaa ja 0,15 ml vettä) lisättiin yhtenä annoksena se- 20 koitettuun liuokseen, jossa oli osassa (a) saatua tuotetta (0,431 g, 1,03 mmol) diklorimetaanissa (2,93 ml) 25 eC:n , lämpötilassa. Reaktioseosta refluksoitiin ja sitä sekoi- , , tettiin 2,5 tuntia. Reaktioseos laimennettiin 50 ml:11a dikloorimetaania ja pestiin sitten kahdella 75 ml:n annok-'1 ’ 25 sella kyllästettyä natriumvetykarbonaattiliuosta ja sitten I < ' ' yhdellä 50 ml:n annoksella kyllästettyä suolaliuosta. Or- ί , gaaninen uute väkevöitiin vakuumissa ruskeaksi öljyksi, V ’ liuotettiin minimaaliseen dikloorimetaanimäärään, ja lai tettiin sitten silikageelipylvääseen, jonka mitat olivat ;’· ; 30 4" x 0,5". Eluoimalla käyttäen gradienttia, jossa oli 10 - " ; 60 % etyyliasetaattia heksaanissa, saatiin vähemmän polaa- , risia sivutuotteita ja sitten (±)-cis-3-asetyylioksi-4-(2- • I t * tienyyli)atsetidin-2-onia (0,154 g, saanto: 75 %) valkoi- ’·;1 sena kiintoaineena.
j i » » 1 I ί » » 59 111724 (c) Liuos, jossa oli osassa (b) saatua tuotetta (b) (2,5 g, 11,8 mmol), liuotettiin metanoliin (10 ml) ja käsiteltiin kyllästetyllä natriumvetykarbonaattiliuoksella (10 ml) ja syntynyt liete sai sekoittua huoneenlämpötilas-5 sa kolme tuntia. Reaktio laimennettiin sitten etyyliasetaatilla (20 ml) ja pestiin vedellä (15 ml). Vesifaasi uutettiin takaisin useita kertoja etyyliasetaatilla ja yhdistetyt orgaaniset fraktiot kuivattiin (MgS04) ja vä-kevöitiin, jolloin saatiin keltainen kiintoaine (saanto: 10 1,7 g). Raaka materiaali liuotettiin kuivaan tetrahydrofu- raaniin (20 ml) ja liuos jäähdytettiin 5 °C:seen jää/vesi-hauteessa. Imidatsolia (752 mg, 1,1 ekvivalenttia) lisättiin sitten. Kun seosta oli sekoitettu viisi minuuttia, trietyylikloorisilaania (1,85 ml, 1,1 ekvivalenttia) li-15 sättiin tipoittain. Syntynyt suspensio sai sekoittua kolme tuntia siinä lämpötilassa; sitten kiintoaines poistettiin suodattamalla. Orgaaninen osa pestiin vedellä (2 x 20 ml), sitten kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin. Raakatuote puhdistettiin silikageelillä pylväskromatografoimalla (eluoi-20 maila heksaani/etyyliasetaattiseoksella 7:3), jolloin saatiin (±)-cis-3-trietyylisilyylioksi-4-(2-tienyyli)atseti-din-2-onia värittömänä kiintoaineena (1,5 g, saanto: . 45 %). sp. 70 - 71 °C.
• » I
Vaihtoehtoinen menetelmä: ,' ;1 25 Osassa (b) saatua tuotetta (2,0 g, 9,37 mmol) 40 ; : ml:ssa metanolia sekoitettiin K2C03:n (60 mg, 0,43 mmol) ί kanssa 30 minuuttia ja liuos neutraloitiin käyttäen Dowex ·, · 50W-X8:aa ja suodatettiin. Suodos väkevöitiin ja jäännös liuotettiin 50 ml:aan vedetöntä tetrahydrofuraania, ja : : 30 sitä sekoitettiin 0 °C:ssa imidatsolin (0,85 g, 11,3 mmol) : ja TESCl:n (1,9 ml, 12,5 mmol) kanssa 30 minuuttia. Liuos , , laimennettiin etyyliasetaatilla ja pestiin suolaliuoksel- ' la, kuivattiin MgS04:lla ja väkevöitiin. Jäännös kromato- ’;· grafoitiin silikageelillä (eluoimalla 3:1 heksaani/etyyli- I I 1 M t t 60 11 1724 asetaattiseoksella), jolloin saatiin 2,13 g (saanto: 86 %) otsikon mukaista yhdistettä värittömänä öljynä.
(d) Liuos, jossa oli osassa (c) saatua tuotetta (425,7 mg, 1,48 mmol), liuotettiin dikloorimetaaniin 5 (10 ml) ja jäähdytettiin 5 °C:seen jää/vesihauteessa.
Reaktioseos käsiteltiin katalyyttisellä DMAP-määrällä sekä di-isopropyylietyyliamiinilla (TESC1, 0,25 ml, 1,0 ekvivalenttia) ja sitten di-t-butyylidikarbonaatilla (388,4 mg, 1,2 ekvivalenttia). Kun seosta oli sekoitettu kaksi tuntia 10 siinä lämpötilassa, reaktio lopetettiin kyllästetyllä nat-riumvetykarbonaattiliuoksella (5 ml) ja orgaaninen faasi pestiin vedellä (5 ml) kuivattiin sitten (MgS04), vietiin lyhyen silikageelitulpan läpi ja väkevöitiin, jolloin saatiin haluttu tuote värittömänä öljynä (525,3 mg, saanto: 15 93 %).
Edellä valmistuksissa 9, 11(d) ja 12(d) käytettyä menetelmää voidaan soveltaa valmistettaessa muita N-subs-tituoituja atsetidinoneja, jotka ovat käyttökelpoisia valmistettaessa keksinnön mukaisia yhdisteitä. Esimerkkejä 20 tällaisista atsetidinoneista on lueteltu seuraavassa tau lukossa; P alla on hydroksisuojaryhmä, kuten trietyylisi- ·; ; lyyli, tri-isopropyylisilyyli ja etoksietyyli.
* » * i i
» I
61 111724 p /5 P(\ vSR5 | + R4(0)C(0)-L -► I | i—NH /“~N\/(0) PR4
° ° T
5 0 L _R4(0)p ___
Cl Ph 4-CH30-Ph- 3,4-diCH30-Ph- 10 Ph- 4-F-Ph- 4-CF3-Ph- 2-furanyl- 2-thienyl- 15 PhCH = CH- 2-furanyyli-CH=CH- (CH3)2CHCH2- C6HirCH2- (CH3)2CH-
PhCH2CH2- 20 CeH,,-CH2CH2- CH3CH2CH2- 4-CI-Ph ! 2-F-Ph \ ·| 3-F-Ph : 25 4-CH3-Ph :.: : Cl 4-CH30-Ph- 3,4-diCH30-Ph- : ‘ ': 4-CF3-Ph- 2-furanyyli PhCH = CH- ,, , 30 (CH3)2CHCH2- c6h,,-ch2- : PhCH2CH2- 62 1 1 17 2 4 _L__R4(0)„__Rf___ (CH3)3C0C02 (CH3)3CO- 4-CH30-Ph- 4-F-Ph- 5 4-CF3-Ph-
PhCH = CH-(CH3)2CH-PhCH2CH2-CeH,,-CH2CH2-CH3CH2CH2- 10 -—-:--
Cl CH3- 4-CH30-Ph-
Ph- 4-F-Ph- 2-furanyyli- 2-furanyyli-CH=CH- 15 PhCH2CH2- C6H„-CH2CH2- ch3ch2ch2-
Valmistus 13 20 10-deoksitaksoteeri
I? 0H
tBuOC (O) NH O \ J \| J.
,v! : 25 ÖH —/ / : .: : OH i ÖAc
Phc (0)0 ·,· ·’ 10-desasetoksi-7-0-trietyylisilyylibakkatiiniIII:a (100 mg, 0,156 mmol) laitettiin pulloon argonin alla ja 30 liuotettiin kuivaan tetrahydrof uraani in (1,5 ml). Kun seos oli jäähdytetty -40 °C:seen, n-butyylilitiumia (1,45 M heksaanissa, 0,119 ml, 0,170 mmol) lisättiin tipoittain • · sekä(3R,4S)-l-tert-butoksikarbonyyli-4-fenyyli-3-trietyy- lisilyylioksi-2-atsetidinonia (94,2 mg, 0,25 mmol) tetra-’· 35 hydrofuraanissa (0,5 ml) kahden minuutin aikana. Seos läm- 63 111724 niitettiin heti O °C:seen ja sitä sekoitettiin 45 minuuttia ennen kuin reaktio lopetettiin kyllästetyllä ammoniumklo-ridiliuoksella (3 ml). Seos uutettiin etyyliasetaatilla, kuivattiin, ja väkevöitiin. Kromatografoimalla silikagee-5 Iillä (eluoimalla 30-%:isella etyyliasetaatilla heksaanis-sa) saatiin 10-deoksi-2',7-bis-0-(trietyylisilyyli)takso-teeri vaahtona (125 mg, saanto: 76 %). Tämä yhdiste (100 mg, 0,098 mmol) liuotettiin heti asetonitriiliin (2 ml) -5 °C:ssa ja käsiteltiin kloorivetyhapolla (0,037 ml, 10 36 %, 12 M). Seosta sekoitettiin kaksi tuntia -5 °C:ssa, sitten reaktio lopetettiin natriumvetykarbonaattiliuoksel-la, uutettiin etyyliasetaatilla, ja kuivattiin. Liuotin haihdutettiin, minkä jälkeen kromatografoltiin silikagee-lillä (eluoimalla 75-%:isella etyyliasetaatilla heksaanis-15 sa), jolloin saatiin otsikon mukainen yhdiste vaahtona (80,5 mg, saanto: 80 %).
Valmistuksen (13) mukaista menetelmää voidaan soveltaa valmistettaessa muita kaavan (Ia) mukaisia yhdisteitä lähtemällä vastaavasta bakkatiini III -yhdisteestä 20 ja atsetidinoniyhdisteestä; esimerkkejä tällaisista atse-tidinoneista on lueteltu seuraavassa taulukossa. On ymmär-•j rettävä, että vaikka alla esitetyt yhdisteet esitetään va- .·. : pailla hydroksiryhmillä, voidaan valitsemalla harkiten . erilaisia hydroksisuojaryhmiä mikä tahansa suojaryhmistä 25 2'-, 7- tai 10-asemassa selektiivisesti poistaa vaikutta- matta muihin läsnä oleviin suojaryhmiin. 1 · » » 64 1 1 1724 R3a p , \ / R2a R4 (O)pCONH 0 v R2' 5 Sh H0 OCOPh R2' R2a R31 h4(0)p R5 H OH AcO Ph 4-CH30-Ph- 10 3,4-diCH30-Ph-
Ph- 4-F-Ph- 4-CF3-Ph- 2-furanyyli- 15 2-tienyyli-
PhCH = CH- 2-furanyyli-CH=CH- (CH3)2CHCH2-
CeH„-CH2- (CH3)2CH- 20 PhCH2CH2-
CeH„-CH2CH2- CH3CH2CH2- ! 4-CI-Ph / 2-F-Ph 2t- 3-F-Ph : 4-CH3-Ph 2 2
1 I
• ·
R2' R2' R3e R4(0)p RB
65 111724 H OH OH (CH3)3CO 4-CH30-Ph-
Ph 4-F-Ph- 4-CF3-Ph- 2-furanyyli-2-tienyyli-PhCH = CH-CeH„-CH2- 10 (CH3)2CH-
PhCH2CH2- OH H Ph 4-CH30-Ph- 3,4-diCH30-Ph- 4-F-Ph- 15 4-CF3-Ph- 2-furanyyli- 2-tienyyli-
PhCH = CH- 2-furanyyli-CH=CH- 20 (CH3)2CHCH2- C6Hn-CH2- (CH3)2CH- : ·: PhCH2CH2- ;· : CeH,,-CH2CH2- CH3CH2CH2- V 25 • 1 t » · * * · * » R2' R2* R3a R4(0)p R5 , 111724 66 H H (CH3)3CO 4-CH30-Ph- 3,4-diCH30-Ph- 5 Ph' 4-F-Ph- 4-CF3-Ph- 2-furanyyli-2-tienyyli-PhCH = CH- 10 2-furanyyli-CH=CH- (CH3)2CHCH2-
CeHn*CH2- (CH3)2CH-
PhCH2CH2- 15 CeHn-CH2CH2- CH3CH2CH2- H OH AcO 2-naf tyyli Ph 4-OH-Ph 4-CH30-Ph 4-F-Ph 20 (CH3)3CO- ch3- (CH3)2CH- .· CH2 = CHCH2- .·’.·! 4-CI-Ph 25 : ; : F H AcO (CH3)3CO- Ph i V F H OH Ph Ph 111724 R2' R2* R3* R4(0)p R5 67 H H AcO Ph 4-CH30-Ph- 3,4-diCH30-Ph-
Ph- 5 4-F-Ph- 4-CF3-Ph- 2-furanyyli-2-tienyyli-PhCH = CH- 2-furanyyli-CH=CH- (CH3)jCHCH2-CeH,,-CH2-(CH3)2CH-PhCH2CH2- . C6H„-CH2CH2 15 CH3CH2CH2-
Valmistus 14
Bis(metyylitionetyyli)eetteri 20 CH3SCH2OCH2SCH3
Natriumjodidia (8,23 g, 55,23 mmol) lisättiin . liuokseen, jossa oli 1,1'-diklooridimetyylieetteriä 25 (3,0 g, 26,3 mmol) asetonissa (100 ml) 0 °C:ssa ja seosta sekoitettiin tässä lämpötilassa 20 minuuttia. Natriumtio-* metoksidia (1,84 g, 5,23 mmol) lisättiin sitten neljänä annoksena ja syntynyttä liuosta sekoitettiin vielä tunnin ajan. Heterogeeninen liuos suodatettiin celite-kerroksen 30 läpi ja suodos väkevöitiin vakuumissa. Jäljelle jäänyt öljy jaettiin etyyliasetaatin ja kyllästetyn natriumvety-karbonaattiliuoksen välillä. Vesikerros poistettiin ja uutettiin edelleen etyyliasetaatilla. Yhdistetyt orgaaniset uutteet käsiteltiin sitten 1:1 (v:v) -seoksella, jossa 35 oli kyllästettyä natriumvetykarbonaattiliuosta ja 5-%:ista 68 111724 natriumtiosulfaattiliuosta. Orgaaniset faasit pestiin sitten suolaliuoksella, kuivattiin natriumsulfaatilla ja vä-kevöitiin vakuumissa. Jäljelle jäänyt öljy puhdistettiin flashkromatografoimalla (30:1, heksaani:etyyliasetaatti), 5 jolloin saatiin 1,9 g keltaista öljyä, joka sitten tislattiin käyttäen kugelrohr-laitetta (120 - 130 eC, 20 itimHg), jolloin saatiin 1,5 g (45 %) otsikon mukaista yhdistettä värittömänä öljynä.
^-NMR (300 MHz, CDC13) 6: 4,73 (4H, s), 2,15 (6H, s).
10 Valmistus 15
Dibentsyylimetyylitiometyylifosfaatti CH3SCH20P(0)(0Bu)2 15 Liuokseen, jossa oli bis(metyylitiometyyli)eetteriä (30 mg, 2,34 mmol) ja molekyyliseuloja (300 mg) tetrahyd-rofuraanissa (100 ml) huoneenlämpötilassa, lisättiin di-bentsyylifosfaattia (2,74 g, 9,85 mmol) sekä N-jodisukkin-imidia (608 mg, 2,71 mmol) ja liuosta sekoitettiin neljä 20 tuntia. Reaktioseos laimennettiin sitten etyyliasetaatilla ja suodatettiin celite-kerroksen läpi. Suodos käsiteltiin ·· 1:1 (v:v) -seoksella, jossa oli kyllästettyä natriumvety- : karbonaattiliuosta ja 5-%:ista natriumtiosulfaattiliuosta.
Väritön orgaaninen uute pestiin sitten suolaliuoksella, : 25 kuivattiin natriumsulfaatilla ja väkevöitiin vakuumissa, jolloin saatiin 600 mg (69 %) otsikon mukaista yhdistettä. 1H-NMR (300 MHz, CDC13) 6: 7,35 (10H, s), 5,29 (2H, d, J = 12,2 Hz), 5,08 (4H, dd, J = 8,0, 1,0 Hz), 4,68 (2H, s), 2,10 (3H, s).
30 Esimerkit
Seuraavat esimerkit kuvaavat esillä olevan keksin-: nön edustavien yhdisteiden synteesiä eikä niitä pidä tul- ... kita keksinnön piiriä rajoittaviksi millään tavalla. Alan I | T ammattimies pystyy käyttämään hyväksi näitä menetelmiä : 35 ilman turhaa kokeilemista, syntetisoitaessa yhdisteitä, 69 1 1 17 2 4 jotka kuuluvat keksinnön piiriin, mutta joita ei erikseen ole kuvattu.
Esimerkki 1 7-0-fosfono-oksimetyylipaklitakseli ja sen nononat-5 riumsuola (a) 7-0-metyylitiometyylipaklitakselin valmistus
AcO O
\_/ OCHjSCHj
PhCO^H^O^ \
HO
OCOPh
Bentsoyyliperoksidia (0,98 g, 4 mmol) lisättiin voimakkaasti sekoitettuun seokseen, jossa oli paklitakse-15 lia (0,85 g, mmol) ja dimetyylisulfidia (0,72 ml, 8 mmol) kuivassa asetonitriilissä (10 ml) 0 ®C:ssa. Sekoittamista jatkettiin 2,5 tuntia 0 eC:ssa. Reaktion etenemistä seurattiin TLC:lla silikageelillä käyttäen tolueeni:asetoni (2:1, v/v) liuotinsysteemiä (Rftax = 0,38, Rf prod *0,64), ja 20 kun polaarisempien tuotteiden muodostus havaittiin, reaktio lopetettiin haihduttamalla liuottimet käyttäen Rotava-: poria 30 °C:ssa. Reaktioseoksen TLC-analyysin perusteella .* ; läsnä oli jonkin verran reagoimatonta paklitakselia ja • · ♦ ,· ' 2',7-0-bis(metyylitiometyyli)paklitakselia. Otsikon mukai- 25 sen yhdisteen erotus reaktioseoksesta saatiin aikaan ;; flashpylväskromatografiällä silikageelillä 60 (40 - 63 pm) *, EM Science (100 ml), pylvään läpimitta: 2 tuumaa, käyt- ‘ täen etyyliasetaatti:heksaani (1:1, v/v) -liuotinsysteemiä (Rf prod = 0,34). Tuote (552 mg, 60 %:n saanto) saatiin tai-
• » I
: ' 30 teen fraktioista 12 - 18 (kukin fraktio noin 20 ml).
O MS (FAB/matriisi ΝΟΒΑ, NaJ, KJ): [M+H]\ m/z 914? [M+Na]*, : .*, m/z 936; [M+K] + , m/z 952.
···' Alkuaineanalyysi: C: 64,28 (lask. 64,39), H: 5,85 (lask.
;* 6,07), N: 1,46 (lask. 1,53).
; 35 UV (MeOH): Imax = 226 nm, E(1 %/l cm) - 150, A * 0,2653.
70 1 1 17 2 4 IR (KBr): 3432, 3066, 2940, 1726, 1668, 1602, 1582, 1514, 1484, 1452, 1372, 1242, 1178, 1142, 1108, 1068, 1026, 990, 916, 884, 852, 802, 774, 710, 608, 570, 538, 482 cm'1. 1H-NMR (CDC13) 6: 1,15 (3H, s), 1,19 (3H, s), 1,73 (3H, s), 5 1,79 (H, s), 1,90 (3H, d), 2,09 (3H, s), 2,16 (3H, s), 2,29 (2H, d), 2,35 (3H, s), 2,77 (H, m), 3,70 (H, d), 3,83 (H, d), 4,17 (H, d), 4,26 (H, m, päällekkäin H, d), 4,63 (2H, t), 4,77 (H, dd), 4,91 (H, d), 5,65 (H, d), 5,77 (H, dd), 6,16 (H, dd), 6,48 (H, s), 7,07 (H, d), 7,29 - 7,50 10 (10 H, m), 7,57 (H, m), 7,73 (2 H, d), 8,08 (2H, d).
(b) 7-O-dibentsyylifosfono-oksimetyylipaklitakselin valmistus
AcO 0 \_/ 0CH,0F(0) (OCHjPh),
PhCOMH 0 \ / \ JL
15 .......(. ,
Liuos, jossa oli N-jodisukkinimidia (45 mg, 0,2 mM) ja dibentsyylifosfaattia (55 mg, 0,2 mM) kuivassa tetra-20 hydrofuraanissa (4 ml), lisättiin seokseen, jossa oli 7-0-metyylitiometyylipaklitakselia (119 mg, 0,13 mM) ja jau-hettuja 4 A: n molekyyli seulo ja (noin 120 mg) kuivassa 1,2-; dikloorietaanissa (5 ml). Reaktioseosta sekoitettiin huo- * · t !neenlämpötilassa 16 tuntia. Reaktion etenemistä seurattiin ; 25 TLCrlla silikageelillä käyttäen tolueeni:asetoni (2:1, ;;·/ v/v) liuotinsysteemiä (Rfprod = 0,48). Molekyyliseulat pois- ·' tettiin suodattamalla celiten 545 läpi ja suodos uutettiin '.· · metyleenikloridilla (100 ml). Orgaaninen kerros pestiin 1- %:isella natriumtiosulfaattiliuoksella (noin 100 ml) ja ’ 30 0,5 M natriumvetykarbonaattiliuoksella (100 ml) ja suola liuoksella. Uute suodatettiin Whatman Phase Separatorin , läpi ja liuottimet haihdutettiin. Puhdistamalla käyttäen silikageeli 60 flashpylväässä ja metyleenikloridi:etyyli-;·’ asetaatti-seosta (2:1, v/v) saatiin 7-0-dibentsyylifosfo- : ’ 35 no-oksimetyylipaklitakselia (41,5 mg).
7i 111724 (c) 7-0-fosfono-oksimetyylipaklitakselin ja sen mononatriumsuolan valmistus
AcO 0 \_Λ QCHaOP(O) (OH) ,
PhCOtJH 0 \ / \ ^ .......
0H J ~7 AcO
"° oboPh 7-0-dibentsyylifosfono-oksimetyylipaklitakselia (41,5 mg) liuotettiin etyyliasetaattiin (5 ml) ja 10-pro-10 senttistä palladiumia puuhiilellä (20 mg) lisättiin. Hyd-rogenointi suoritettiin paineessa 40 psi (276 kPa) huoneenlämpötilassa tunnin aikana. Reaktion etenemistä seurattiin TLC:lla silikageelillä käyttäen kloroformi:metano-li:vesisysteemiä (120:45:8, v/v). Puhdistamalla prepara-15 tiivisella TLC:llä (käyttäen 20 x 20 x 0,05 cm:n levyjä analyyttisessä systeemissä) saatiin 7-0-fosfono-oksimetyy-lipaklitakselia (26 mg, 75 %:n saanto).
Koska huomattiin, että 7-0-dibentsyylifosfo-oksime-tyylipaklitakseli hajoaa silikageelipuhdistuksen aikana, 20 hydrogenointimenetelmää modifioitiin. Siten raaka 7-0-di- bentsyylifosfono-oksimetyylipaklitakseliuute hydrogenoi-. .: tiin ilman mitään puhdistusta. Raa'an 7-O-dibentsyylifos- . ,; fono-oksimetyylipaklitakseliuutteen hydrogenointi suori- ‘ tettiin paineessa 60 psi (400 kPa) 24 tunnin aikana.
25 7-0-fosfono-oksimetyylipaklitakselia (70 mg) liuo- • t » tettiin 5 ml:aan asetoni:vesiseosta (1:1) ja laimennettiin • vedellä 50 ml:ksi. Kuivaa natriumvetykarbonaattia (18 mg, 1,2 ekvivalenttia) lisättiin. Asetoni haihdutettiin huoneenlämpötilassa käyttäen Rotavaporia ja jäljelle jäänyt 30 vesiliuos lyofilisoitiin. Raaka 7-0-fosfono-oksimetyyli- paklitakselimononatriumsuola puhdistettiin käyttäen C18-käänteisfaasipylväskromatografiaa vesi:asetonitriilisys-‘* teemissä (70:30, v/v). Eluaatti monitoroitiin analyytti sellä HPLC:llä (15 cm, Jones C18 pylväs, 1 ml/minuutti, 35 1 = 230/270 nm) käyttäen asetonitriili:0,05 M ammoniumase- 72 11 17 2 4 taattipuskuri -seosta (45:55, v/v), pH « 7, Rt 2,09 minuuttia. Fraktiot, joissa oli haluttua tuotetta, kombinoitiin, asetonitriili haihdutettiin ja jäljelle jäänyt vesi-liuos lyofilisoitiin, jolloin saatiin 7-0-fosfono-oksime-5 tyylipaklitakselimononatriumsuolaa (112 mg).
MS (FAB): [Μ+ΗΓ, m/z 986; [M+Na]*, m/z 1008.
UV (MeOH): Amax = 230 nm.
E(1 %/l cm) = 248.
IR (KBr); 3430, 3066, 2948, 1724, 1652, 1602, 1580, 1518, 10 1486, 1452, 1372, 1316, 1246, 1178, 1154, 1108, 1070, 1000, 982, 946, 856, 802, 776, 710, 628, 538 cm’1.
1H-NMR (asetoni-d6/D20) 6: 8,05 (2H, d), 7,92 (2H, d), 7,65 (1H, dd), 7,58 - 7,35 (9H, m, päällekkäisyyttä), 7,23 (1H, dd), 6,38 (1H, s), 6,08 (1H, t), 5,65 (1H, d), 5,60 (1H, 15 d), 5,10 (1H, br. s), 4,99 (1H, d), 4,97 (1H, br. s), 4,80 (1H, d), 4,28 (1H, dd), 4,11 (2H, s), 3,79 (1H, d), 2,94 (1H, m), 2,35 (3H, s), 2,35 - 2,10 (1H, m), 2,13 (3H, s), 1,95 (3H, s), 1,84 (1H, m), 1,67 (3H, s), 1,13 (6H, s, pällekkälsyyttä).
20 Esimerkki 2
Vaihtoehtoinen menetelmä 7-0-fosfono-oksimetyyli-paklitakselin valmistamiseksi (a) 2'-0-(bentsyylioksikarbonyyli)paklitakselin » i * ' · valmistus I « 25 ; , AcO 0
PhCHj0C(0)Ö ' J —/ acO^V/0 , H0 ocoph : : 30
Sekoitettuun liuokseen, jossa oli paklitakselia ; (150 mg, 0,176 mmol) ja N,N-di-isopropyylietyyliamiinia (93 μΐ, 0,534 mmol, 3 ekvivalenttia) vedettömässä metylee-nikloridissa (4 ml) huoneenlämpötilassa, lisättiin bent-; * 35 syyliklooriformiaattia (75 μΐ, 0,525 mmol, 3 ekvivalent- 73 1117 2 4 tia). Reaktioseosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa kolme tuntia, väkevöitiin 2 ml:ksi, ja se puhdistettiin silika-geelipylväällä käyttäen 1:1 etyyliasetaatti/heksaaniseosta eluenttina, jolloin saatiin otsikon mukainen yhdiste val-5 koisena jauheena (150 mg, saanto: 86 %). sp. 140 - 150 °C (hajoaa).
(b) 2’-O-(bentsyylioksikarbonyyli)-7-0-metyylitio-metyylipaklitakselin valmistus
AcO o 10 \_/ OCHjSCMj
PhCONH 0 \ / \ I Jf ......^ \·^ phcHaoc (o)ö '— / AcO ^ H0 <XX)Ph 15 Jäähdytettyyn (kuivajää - CC14; haudelämpötila -30 eC) liuokseen, jossa oli 2'-0-(bentsyylioksikarbonyyli )paklitakselia (4,935 g; 5,0 mmol) kuivassa asetonitrii-lissä (80 ml), lisättiin peräkkäin dimetyylisulfidia (3,6 ml; 40 mmol) ja bentsoyyliperoksidia (4,9 g; 20,247 mmol).
20 Kymmenen minuutin kuluttua -30 eC:ssa kylmähaude poistettiin ja reaktioseosta sekoitettiin voimakkaasti kaksi tuntia huoneenlämpötilassa. Reaktioseos laimennettiin sitten etyyliasetaatilla 200 ml:ksi ja pestiin vedellä ja suolaliuoksella. Orgaaninen kerros kuivattiin (MgS04), ja liuo- 25 tin haihdutettiin, jolloin saatiin jäännös, joka pidettiin ;; vakuumissa 18 tuntia mahdollisen dimetyylisulfoksidin ’ poistamiseksi, joka oli läsnä sivutuotteena. Jäännös puh distettiin siikageelipylväällä käyttäen eluenttina ensin etyyliasetaatti:heksaaniseosta (1:2) vähemmän polaaristen . 30 epäpuhtauksien postamiseksi sekä etyyliasetaatti:heksaani seosta (1:1), jolloin saatiin haluttu otsikon mukainen , ' yhdiste vaahtona. Tämä trituroitiin kuivalla eetterillä ja suodatettiin, jolloin saatiin otsikon mukainen yhdiste » » ·;·’ vaahtomaisena kiintoaineena (5,0 g, 95 %). sp. 120 - 35 122 °C.
I I
74 1 1 17 2 4 MS (FAB): [MH]*, m/z 1048; [M+Na]\ m/z 1070; [M+K] + , m/z 108.
IR (KBr): 3440, 3066, 1750, 1722, 1664, 1602, 1583, 1538 cm'1.
5 1H-NMR (CDC13) 6: 1,177 (3H, s), 1,236 (3H, s), 1,745 (3H, S), 2,023 (3H, s), 2,121 (3H, s), 2,162 (3H, s), 2,436 (3H, s), 3,887 (H, d), 4,134 (H, d), 4,197 (H, d), 4,295 (H, m), 4,964 (H, d), 5,161 (2H, d), 5,450 (H, d,) 5,703 (H, d), 5,981 (H, dd), 6,257 (H, t), 6,541 (H, s), 6,920 10 (H, d, NH), 7,322 - 8,22 (15 H, m).
Otsikon mukainen yhdiste valmistettiin myös seuraa-valla vaihtoehtoisella mentelmällä:
Liuokseen, jossa oli 2'-0-(bentsyylioksikarbonyy-li)paklitakselia (2,0 g; 2,0263 mmol) kuivassa dimetyyli-15 sulfoksidissa (10 ml), lisättiin tipoittain etikkahappoan-hydridiä (10 ml). Syntynyttä seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 18 tunti typen alla, laimennettiin etyyliasetaatilla (100 ml), ja pestiin varovasti kylmällä 6-pro-senttisella natriumvetykarbonaattiliuoksella (6 x 30 ml), 20 kylmällä vedellä (6 x 30 ml) ja suolaliuoksella. Orgaaninen kerros kuivattiin (MgS04), ja liuotin haihdutettiin, . jolloin saatiin jäännös. Tämä puhdistettiin silikageeli- pylväällä ja eluoitiin käyttäen metyleenikloridia, mety-leenikloridi:5-%:inen asetonitriili -seosta ja metyleeni-25 kloridi:10-%:inen asetonitriili -seosta, jolloin saatiin haluttu otsikon mukainen yhdiste (1,86 g, 87,7 %). Tämä : ' yhdiste on identtinen sen kanssa, joka saatiin käyttäen V · edellä kuvattua dimetyylisulfidi/bentsoyyliperoksidimene- telmää.
30 (c) 2,-0-(bentsyylioksikarbonyyli)-7-0-dibentsyyli- fosfono-oksimetyylipaklitakselin valmistus I !
l AcO O
·· » \_f OCR »OP (0) (OCH jPh) 3 : ,· 35 phcH,oc(o)6 / /»«ν' ,,, ; HO *0«* 75 11 17 2 4
Liuokseen, jossa oli 2'-0-(bentsyylioksikarbonyy-li)-7-0-metyylitiometyylipaklitakselia (5,0 g; 5,5396 mmol) kuivassa 1,2-dikloorietaanissa (120 ml), lisättiin aktivoituja jauhettuja 4 A:n molekyyliseuloja (5,0 g).
5 Tähän seokseen lisättiin tipoittain huoneenlämpötilassa liuos, jossa oli N-jodisukkinimidia (1,61 g; 7,1632 mmol) ja dibentsyylifosfaattia (1,97 g; 7,1632 mmol) kuivassa tetrahydrofuraanissa (90 ml). Kun seosta oli sekoitettu voimakkaasti huoneenlämpötilassa 30 minuuttia, reaktioseos 10 suodatettiin celiten yli ja suodos haihdutettiin kuivaksi, jolloin saatiin punainen jäännös. Jäännös liuotettiin etyyliasetaattiin (100 ml), pestiin kylmällä 6-%:isella NaHS03-liuoksella (2 x 50 ml), kylmällä 6-%:isella NaHC03-liuoksella (2 x 50 ml) ja suolaliuoksella (1 x 50 ml). Or-15 gaaninen kerros kuivattiin (MgS04) ja liuotin haihdutettiin, jolloin saatiin kiinteä massa, joka trituroitiin kuivalla eetterillä ja suodatettiin, jolloin saatiin otsikon mukainen yhdiste kermanvärisenä kiintoaineena (5,9 g, 97 %). sp. 124 - 127 °C.
20 MS (FAB): [MH]*, m/z 1278; [M+Na] + , m/z 1301; [M+K]\ m/z 1316.
•i IR (KBr); 3430, 3066, 3032, 1750, 1726, 1664, 1582, .* 1532 cm-1.
·! 1H-NMR (CDC13) 6: 1,160 (3H, s), 1,703 (3H, s), 1,985 (3H, V. 25 s), 2,164 (3H, s), 2,420 (3H, s), 3,854 (H, d), 4,151 (H, ;:v d), 4,216 (H, m), 4,298 (H, d), 4,873 (H, d), 5,043 (6H, m), 5,140 (2H, d), 5,417 (H, d), 5,670 (H, d), 5,971 (H, : dd), 6,241 (H, t), 6,317 (H, s), 6,912 (H, d, NH), 7,280 - 8,115 (25H, m).
30 (d) 7-0-fosfono-oksimetyylipaklitakselin valmistus , , Liuokseen, jossa oli 2' -0-(bentsyylioksikarbonyy- ; li )-7-0-dibentsyyli£osfono-oksimetyylipaklitakselia (6,0 i ’ g; 4,7095 mmol) etyyliasetaatissa (120 ml) lisättiin 10-%:ista palladiumia hiilellä (6,0 g) ja seosta hydroge-j 35 noitiin paineessa 60 psi (400 kPa) 24 tuntia. Reaktioseos * 1 76 111724 suodatettiin celiten yli ja liuotin haihdutettiin, jolloin saatiin 4,07 g raakaa jäännöstä. Tämä puhdistettiin lyhyellä silikageelipylväällä eluoimalla käyttäen peräkkäin kloroformi:10-%:ista, 20-%:ista ja 40-%:ista metanoliseos-5 ta, jolloin saatiin otsikon mukainen yhdiste valkoisena kiintoaineena (3,2 g, 71 %) sp. 155 - 158 eC.
Tällä tuotteella oli sama Rf (TLC) ja sama retentio-aika (HPLC) kuin autenttisella näytteellä.
MS (FAB): [MH]\ m/z 964; [M+Na]*, m/z 986; [M+K]\ m/z 10 1002; [M+K*+Na+-H]+ , m/z 1024; [Μ+2Κ-ΗΓ, m/z 1040.
UV (MeOH): Imax = 230 nm, E(1 %/l cm) = 252,5.
IR (KBr): 3432, 3066, 2992, 1722, 1648, 1602, 1580, 1522, 1488, 1452, 1372, 1316, 1246, 1178, 1154, 1110, 1070, 1000, 980, 946, 854, 802, 776, 710, 628, 538 cm-1.
15 1H-NMR (asetoni-d6/D20) 6: 1,08 (3H, s), 1,10 ( 3H, s), 1,63 (3H, s), 1,88 (3H, s), 1,96 (H, m), 2,13 (3H, s), 2,32 (3H, s), 2,89 (H, m), 3,76 (H, d), 4,19 (H, m), 4,89 (H, dd), 5,09 (H, dd), 5,55 - 5,60 (2H, päällekkäiset duple-tit), 6,04 (H, t), 6,32 (H, s), 7,20 (H, t), 7,34 - 7,67 20 (10H, päällekkäiset multipletit), 7,87 (2H, dd), 8,02 (2H, dd).
Esimerkki 3 2 ' -0- (etoksikarbonyyli)-7-0-fosfono-oksimetyylipak-litakseli 25 (a) 2'-0-(etoksikarbonyyliJpaklitakselin valmistus ;’ · ; AcO o ;';' phcoNH o \ r ·; 30 chsch30C(0)0 VvDv° ‘/ H0 OCOPh ; Liuokseen, jossa oli paklitakselia (4,35 g, 5,1 mmol) kuivassa metyleenikloridissa (51 ml) lisättiin N,N- I t di-isopropyylietyyliamiinia (2,67 ml, 15,3 mmol), sekä : 35 etyyliklooriformiaattia (1,46 ml, 15,3 mmol). Reaktioseos- t | 77 111724 ta sekoitettiin 0 °C:ssa kaksi tuntia ja sitten huoneenlämpötilassa vielä tunnin ajan. Reaktioseos laimennettiin etyyliasetaatilla (400 ml), orgaaninen faasi pestiin kyllästetyllä NaHC03-liuoksella (2 x 30 ml) ja suolaliuoksella 5 (30 ml). Syntynyt orgaaninen faasi kuivattiin MgS04:lla, jolloin saatiin raaka otsikon mukainen yhdiste (93 %), joka käytettiin seuraavassa vaiheessa ilman eri puhdistusta.
MS (FAB/NOBA, NaJ, KJ): [M+H] + , m/z 926; [M+Na]*, m/z 948; 10 [M+K]+ , m/z 964.
HRMS (FAB/ ΝΟΒΑ, CsJ/Gly ulkoinen vertailu): [M+H]+ m/z 926,3588 havaittu, C50H56N016, laskettu arvo: 926,3599 (poikkeama Δ = 1,2 ppm).
lH-NMR (CDC13) 6: 1,13 (3H, s), 1,23 (3H, s), 1,30 (3H, t), 15 1,67 (3H, s), 1,92 (3H, s), 2,21 (3H, s), 2,37 (H, d), 2,45 (3H, s), 2,54 (H, m), 3,80 (H, d), 4,15 - 4,32 (4H, päällekkäiset multipletit), 4,43 (H, dd), 4,96 (H, d), 5,42 (H, d), 5,68 (H, d), 5,98 (H, dd), 6,28 (2H, päällekkäiset multipletit), 7,00 (H, d), 7,34 - 7,59 (11H, pääl-20 lekkäiset multipletit), 7,74 (2H, d), 8,12 (2H, d). Vaihtoehtoinen menetelmä: ,··· Paklitakselia (5,40 g, 6,324 mmol) kuivassa dikloo- ; rimetaanissa (63 ml) jäähdytettiin 0 °C:seen ja käsitel- tiin laimentamattomalla N,N-di-isopropyylietyyliamiinilla ; 25 (3,30 ml, 3 ekvivalenttia) ja sitten laimentamattomalla !!’.* etyyliklooriformiaatilla (1,81 ml, 3 ekvivalenttia) ti- poittain viiden minuutin aikana. Reaktio monitoroitiin *'* TLC:llä (50-%:isella etyyliasetaatilla heksaanissa). Kah den tunnin jälkeen 0 °C:ssa ja 16 tunnin jälkeen huoneen-’,· 30 lämpötilassa reaktio oli mennyt loppuun ja keltaisenorans- si liuos laimennettiin etyyliasetaatilla (300 ml) ja pestiin kyllästetyllä natriumvetykarbonaattiliuoksella (3 x ·' 75 ml) ja suolaliuoksella (75 ml). Kuivaamalla (MgS04) ja haihduttamalla saatiin raaka otsikon mukainen yhdiste, 35 joka puhdistettiin seostamalla: dikloorimetaania (noin 78 111724 100 ml) lisättiin sekä jäähdytettiin ja lisättiin heksaa-nia (noin 60 ml) samenemispisteeseen. Kun seosta oli jäähdytetty jäällä useita tunteja, kiintoaine otettiin talteen suodattamalla. Saanto 5,17 g (88 %).
5 Vaihtoehtoinen menetelmä:
Liekissä kuivattuun, yksikaulaiseen 3 l:n pulloon liuotettiin paklitakselia (99,0 g, 115,9 mmol) 1350 ml:aan kuivaa metyleenikloridia argonatmosfäärissä. Liuos jäähdytettiin -10 °C:seen. Ν,Ν-di-isopropyylietyyliamiinia 10 (52,4 g, 405,7 mmol) lisättiin hitaasti (lisäysaika noin kolme minuuttia) sekä etyyliklooriformiaattia (31,45 g, 289,8 mmol; lisäysaika noin 15 minuuttia). Syntynyttä seosta sekoitettiin yön yli (16 tuntia) -4 °C:ssa. TLC:n perusteella reaktio ei ollut mennyt loppuun. Toinen annos 15 N,N-di-isopropyylietyyliamiinia (2,62 g, 20,28 mmol) lisättiin sekä etyyliklooriformiaattia (2,20 g, 20,28 mmol) ja sekoittamista jatkettiin kolme tuntia -4 °C:ssa. Lähtöainetta ei havaittu TLC:n perusteella. Kylmä seos laimennettiin etyyliasetaatilla (1,5 1) ja siirrettiin erotus-20 suppiloon. Se pestiin sitten 5-%:isella KHS04-liuoksella (2 x 500 ml), vedellä (1 x 500 ml), 5-%:isella KHS04-liuok-·.: sella (1 x 500 ml), vedellä (1 x 500 ml), kyllästetyllä , , ,* NaHC03-liuoksella (2 x 500 ml) ja suolaliuoksella (2 x 500 ml), kuivattiin (MgS04) ja liuottimet poistettiin va-25 kuumissa, jolloin saatiin 147 g raakatuotetta. Jäännös li',’ liuotettiin lämpimään metyleenikloridiin (800 ml, haude- \ lämpötila 42 °C) ja heksaania lisättiin tipoittain (530 ' ml) sekoittamalla pitäen lämpötila vakiona. Kiteytyvä seos laitettiin sivuun kolmeksi tunniksi huoneenlämpötilassa ja • ’,· 30 sitten kylmähuoneeseen (0 °C) yöksi. Raskaat valkoiset · kiteet otettiin talteen suodattamalla ja pestiin heksaani/ ; ’ . metyleenikloridiseoksella 1:1 (v/v) (2 x 200 ml). Kun tuo- tetta oli imukuivattu tunnin ajan, se kuivattiin vakuumis-sa (noin 1,0 mmHg) yön yli, jolloin saatiin 95,7 g (89 %:n 79 1 1 1724 saanto) otsikon mukaista yhdistettä (homogeenisuusindeksi mitattuna HPLCtllä = 98,5 %).
(b) 2'-0-(etoksikarbonyyli)-7-0-metyylitiometyyli-paklitakselin valmistus 5
AcO 0 \_/ OCHjSCH j
PhCONH O \ / \ I 1 ....../)< Π CH3CH,0C(0)0 m &OPh 10
Liuokseen, jossa oli 2'-0-(etoksikarbonyyli)pakli-takselia (4,38 g, 4,7 mmol) kuivassa dimetyylisulfoksidis-sa (12,5 ml), lisättiin etikkahappoanhydridiä (12,5 ml). Reaktioseosta sekoitettiin 24 tuntia huoneenlämpötilassa 15 ja sitten se laimennettiin etyyliasetaatilla (500 ml), pestiin kyllästetyllä NaHC03-liuoksella (3 x 40 ml) ja vedellä (2 x 40 ml). Syntynyt orgaaninen kerros kuivattiin MgS04:lla, ja liuottimet haihdutettiin vakuumissa. Jäännös puhdistettiin silikageelillä kroraatografoimalla (40 pro-20 senttisellä etyyliasetaatilla heksaanissa), jolloin saatiin haluttu otsikon mukainen yhdiste (4,39 g, 94 %).
MS (FAB/NOBA, NaJ, KJ): [M+H] + , m/z 986; [M+Na]\ m/z 1008? , : [M+K]+ , m/z 1024.
, / HRMS (FAB/NOBA, CsJ/Gly ulkoinen vertailu); [M+H]* m/z ! 25 986,3646 (laskettu arvo: 986,3633, poikkeama Δ = 1,3 ppm).
1H-NMR (CDC13) 6: 1,18 (3H, s), 1,20 (3H, s), 1,30 (3H, s), i 1,75 (3H, s), 1,84 (H, m), 2,09 (3H, s), 2,11 (3H, s), V : 2,16 (3H, s), 2,24 (H, d), 2,37 (H, d), 2,45 (3H, s), 2,80 (H, m), 3,68 (H, d), 4,08 - 4,33 (5H, m, päällekkäin), Γν 30 4,65 (2H, s), 4,96 (H, d), 5,43 (H, d), 5,69 (H, d), 5,98 (H, dd), 6,26 (H, t), 6,55 (H, s), 7,00 (H, d), 7,32 -7,61 (11H, m, päällekkäin), 7,73 (2H, dd), 8,11 (2H, dd). Vaihtoehtoinen menetelmä: 2'-0-(etoksikarbonyyli)paklitakselia (2,260 g, 35 2,4406 mmol) liuotettiin vedettömään dimetyylisulfoksidiin 80 111724 (6 ml) ja etikkahappoanhydridiä (6 ml) lisättiin yhtenä annoksena huoneenlämpötilassa. Reaktiota monitoroitiin HPLC:llä (C18 analyyttinen pylväs; käyttäen 60-%:ista ase-tonitriiliä:40-%:ista 10 mM anunoniumfosfaattipuskuria, 5 pH 6). 30 tunnin kuluttua liuos laimennettiin etyyliasetaatilla (250 ml) ja pestiin kyllästetyllä natriumvety-karbonaattiliuoksella (kolme kertaa), sitten vedellä ja suolaliuoksella. Kun se oli kuivattu magnesiumsulfaatilla ja suodatettu, raakatuote kromatografoitiin silikageelil-10 lä (40-%:isella etyyliasetaatilla heksaanissa), jolloin saatiin otsikon mukainen yhdiste valkoisena vaahtona (2,030 g, 91 %), joka oli 90-%:isesti puhdasta HPLC:n perusteella. Osa puhdistettiin edelleen käyttäen toista pylvästä (5-%:ista asetonitriiliä diklorimetaanissa), jolloin 15 saatiin materiaali, joka oli noin 97-%:isesti puhdasta HPLC:n perusteella.
Vaihtoehtoinen menetelmä 2' -O- (etoksikarbonyyli) -7-0-metyy1itiometyy1ipaklitakselin valmistamiseksi 2'-O-(etoksikarbonyyliJpaklitakselia (4,170 g, 20 4,503 mmol) liuotettiin vedettömään asetonitriiliin (68 ml) -40 °C:ssa ja dimetyylisulfidia (3,2 ml, 44,10 mmol) lisättiin sekä bentsoyyliperoksidia (4,400 g, 18,24 mmol).
,v : Seos laitettiin jäähauteeseen ja sitä sekoitettiin 0 °C:n • 4 lämpötilassa, ja reaktion kulkua monitoroitiin TLC:llä .* ^ 25 (40-%:isella etyyliasetaatilla heksaanissa). Kolmen tunnin kuluttua lähtöainetta ei havaittu, ja liuos käsiteltiin * > » lisäämällä etyyliasetaattia (250 ml) ja kyllästettyä nat-’·' riumvetykarbonaattiliuosta (100 ml). Orgaaninen faasi pes tiin edelleen natriumvetykarbonaattiliuoksella, vedellä ja ; ',· 30 suolaliuoksella, sitten se kuivattiin magnesiumsulfaatilla : : ja suodatettiin. Jäännös puhdistettiin silikageelillä : , s flashkromatografoimalla (4-%:ista asetonitriiliä dikloori- metaanissa), jolloin saatiin otsikon mukainen yhdiste vai- f * ” koisena vaahtona (2,571 g, 58 %:n saanto). Tämän näytteen » » 81 111724 puhtaus oli > 97 % HPLC:n perusteella. NMR-spektri oli identtinen edellä mainitun kanssa.
Vaihtoehtoinen menetelmä 2' -0- (etoksikarbonyyli) -7- O-metyylitiometyylipaklitakselin valmistamiseksi 5 2'-0-(etoksikarbonyyli)paklitakselia (49,3 g, 53,2 mmol) laitettiin liekissä kuivattuun yksikaulaiseen 1 l:n pulloon ja liuotettiin kuivaan asetonitriiliin (500 ml) huoneenlämpötilassa. Metyylisulfidia (39,1 ml, 0,532 mol) lisättiin nopeasti injektioneulan kautta. Sekoitettu reak-10 tioseos jäähdytettiin -16 °C:seen jää/suolahauteessa ja kiinteää bentsoyyliperoksidia (51,6 g, 0,213 mol) lisättiin seokseen yhtenä annoksena. (Neljä kokonaista ekvivalenttia tarvitaan, jotta reaktio menisi loppuun.) Sekoittamista jatkettiin 30 minuuttia, jolloin lämpötila nousi 15 noin -10 °C:seen. Reaktioväliaine pysyi tänä ajanjaksona heterogeenisena (bentsoyyliperoksidi ei ollut liuennut kokonaan). Jäähdytyshaude vaihdettiin jää/vesihauteeksi, lämpötila nostettiin 0 °C:seen ja jäljellä oleva bentsoyyliperoksidi liukeni noin viiden minuutin kuluttua lämpene-20 misen jälkeen. Reaktion todettiin menneen loppuun TLC:n perusteella, kun seosta oli sekoitettu 0 °C:ssa vielä 2,5 tuntia. Liuoksen tilavuus vähennettiin noin 200 ml:ksi . ·. : poistamalla liuotin rotovapilla ja se siirrettiin sitten erotussuppiloon, jossa se pestiin heptaanilla (5 x 500 .* I 25 ml). Asetonitriilikerros laimennettiin etyyliasetaatilla (1,5 1) ja pestiin 3:1-seoksella, jossa oli kyllästettyä • ;* NaHC03-liuosta/5-%:ista K2C03-liuosta (v/v) (2 x 500 ml), '·' kyllästetyllä NaHC03-liuoksella (2 x 500 ml), puolikylläs- tetyllä suolaliuoksella (1 x 500 ml) ja suolaliuoksella : 30 (1 x 500 ml), kuivattiin (MgS04) ja liuottimet poistettiin : : vakuumissa, jolloin saatiin 67,0 g raakatuotetta. Se liuo- ; , , tettiin asetoniin (200 ml), lämmitettiin 40 °C:seen vesi- hauteessa ja heksaania lisättiin tipoittain sekoittamalla, kunnes samenemista havaittiin (400 ml). Kiteytyvä seos l 35 laitettiin sivuun kolmeksi tunniksi huoneenlämpötilassa ja 82 11 17 2 4 sitten kylmähuoneeseen (0 eC), jossa se pidettiin yön yli (16 tuntia). Muodostui paksu kakku. Kiintoaine otettiin talteen suodattamalla ja pestiin heksaani/asetoniseoksella 3:1 (v/v) (2 x 50 ml). Syntyneitä valkoisia kiteitä imu-5 kuivattiin tunnin ajan ja sitten kuivattiin vakuumissa (noin 0,5 mmHg) yön yli, jolloin saatiin 47,5 g (91 %:n saanto) otsikon mukaista yhdistettä (homogeenisuusindeksi mitattuna HPLCrllä = 94,8 %).
(c) 2' -0- (etoksikarbonyyli)-7-0-dibentsyylifosfono-lO oksimetyylipaklitakselin valmistus
Ac9 j? OCI-^OP (0)(0CH2P h)2 PhCONH O \ )-*1 !
Ph^N^^O...../ 15 ch3ch2oc(0)ö HO f ÖAc PhC(0)Ö
Liuos, jossa oli N-jodisukkinimidia (1,953 g, 8,65 mmol) ja dibentsyylifosfaattia (2,41g, 8,65 nunol) tetra-20 hydrofuraanissa, lisättiin seokseen, jossa oli 2'-0-(etok- sikarbonyyli)-7-0-metyylitiometyylipaklitakselia (5,677 g, 5,76 mmol) ja 4 A: n molekyyli seuloja (5,7 g) metyleeniklo-ridissa (100 ml) huoneenlämpötilassa. Reaktioseosta sekoitettiin 40 minuuttia huoneenlämpötilassa. Tämän ajan jäi-,' ; 25 keen reaktio oli mennyt loppuun TLC:n perusteella. Reak- ; · tioseos suodatettiin celiten läpi ja suodos väkevöitiin ‘ ' vakuumissa, jolloin saatiin ruskea jäännös, joka laimen- v * nettiin etyyliasetaatilla (800 ml), orgaaninen faasi pes tiin l-%:isella Na2S03-liuoksella (2 x 80 ml) ja sitten : ‘ 30 5-%:isella suolaliuoksella (2 x 50 ml). Orgaaninen faasi väkevöitiin vakuumissa ja kuivattiin. Kromatografoimalla syntynyt jäännös (50 - 60-%:isella etyyliasetaatilla hek- ! » » saanissa) saatiin haluttu otsikon mukainen yhdiste (6,23 9, 89 %).
83 111724 MS (FAB/NOBA, NaJ, KJ): [M+Na]*, m/z 1238; [M+K]*, m/z 1254.
HRMS (FAB/NOBA, CsJ/Gly ulkoinen vertailu); [M+Na]+ m/z 1216,4291 (C65H71N020P laskettu arvo; 1216,4307; poikkeama 5 Δ = 1,3 ppm).
1H-NMR (CDC13) δ: 1,18 (3H, s), 1,21 (3H, s), 1,30 (3H, t), 1,67 (6H, s), 1,80 (H, s), 1,93 (H, m), 1,99 #3H, d), 2,18 (3H, s), 2,23 (H, m), 2,38 (H, m), 2,45 (3H, s), 2,80 (H, m), 3,86 (H, d), 4,14 - 4,32 (5H, multipletit päällek-10 käin), 4,88 (H, d), 5,00 - 5,07 (4H, multipletit päällekkäin), 5,42 (H, d), 5,68 (H, d), 5,96 (H, dd), 6,26 (H, t), 6,33 (H, s), 6,95 (H, d), 7,30 - 7,61 (11 H, multipletit päällekkäin), 7,75 (2H, dd), 8,12 (2H, dd). Vaihtoehtoinen menetelmä: 15 Liuokseen, jossa oli 2'-0-(etoksikarbonyyli)-7-0- metyylitiometyylipaklitakselia (350 mg, 0,355 mmol) vedettömässä tetrahydrofuraania (8 ml), lisättiin liuos, jossa oli N-jodisukkinimidia (120 mg, 0,532 mmol) ja dibentsyy-lifosfaattia (148 mg, 0,532 mmol) tetrahydrofuraanissa 20 (5 ml). Reaktio monitoroitiin HPLC:llä (C18 pylväs; 70 % asetonitriiliä, 30 % 10 mM ammoniumfosfaattia, pH 6). Kah-«5 den tunnin kuluttua vähemmän kuin 5 % lähtöainetta havait- . .* tiin, ja reaktioseos käsiteltiin tavalliseen tapaan. Liuos , ·, laimennettiin etyyliasetaatilla (75 ml), ja pestiin 1-pro- . t 25 senttisellä natriumbisulfiittiliuoksella (2 x 50 ml) ja * % suolaliuoksella (50 ml). Kun liuos oli nopeasti kuivattu
» ' I
magnesiumsulfaatilla ja suodatettu, liuotin haihdutettiin. ’·' ' Flashkromatografoimalla silikageelillä (45 % etyyliase- taattia/heksaania) saatiin otsikon mukainen yhdiste val-I 30 koisena vaahtona (281 mg, 65 %). HPLC-analyysin perusteel- it>,: la puhtaus oli noin 95 %.
Vaihtoehtoinen menetelmä: * t *
Murskattuja 4 A;n molekyyliseuloja laitettiin lie-kissä kuivattuun yksikaulaiseen 1 l:n pulloon, joka sitten ; 35 kytkettiin vakuumilinjaan (noin 0,5 mmHg). Seuloja kuumen- I t 84 111724 nettiin 10 minuuttia kuumennuslaitteella sekoittaen niitä samalla käsin. Kun seos oli jäähtynyt vakuumissa, argonia johdettiin pulloon ja 2'-0-(etoksikarbonyyli)-7-0-metyyli-tiometyylipaklitakselia (37,5 g, 38,03 mmol) lisättiin, 5 sekä dibentsyylifosfaattia (14,8 g, 53,24 mmol) ja tetra-hydrofuraania (400 ml). Heterogeenistä seosta sekoitettiin voimakkaasti 15 minuuttia huoneenlämpötilassa magneettise-koittajalla. Erilliseen liekissä kuivattuun pulloon liuotettiin N-jodisukkinimidia (10,7 g, 47,54 mmol) tetrahyd-10 rofuraaniin (50 ml) argonin alla. (NJS-liuoksen valmistuk sen aikana, liuosta siirrettäessä ja reaktion aikana, astiat oli peitetty alumiinifoliolla suojaksi valolta.) Se lisättiin sitten hitaasti (10 minuutin aikana) reaktio-seokseen injektioneulan avulla. Pullo, jossa NJS oli, pes-15 tiin 5 ml:11a tetrahydrofuraania ja siirrettiin reaktio-seokseen, jota sitten sekoitettiin kaksi tuntia huoneenlämpötilassa. TLC-analyysin perusteella lähtöainetta ei ollut läsnä. Tummanpunainen liuos suodatettiin celite-kerroksen läpi suoraan voimakkaasti sekoitettuun kaksi-20 faasiseen seokseen, jossa oli etyyliasetaattia (500 ml), 10-%:ista natriumtiosulfaattiliuosta (300 ml) ja kylläs-. . j tettyä natriumbikarbonaattiliuosta (200 ml). Punainen väri , ; hävisi muutamassa sekunnissa ja muodostui väritön liuos.
Celite-kerros pestiin etyyliasetaatilla (noin 100 ml) ja t 25 molemmat nestekerrokset siirrettiin erotussuppiloon. Or-
• I
” gaaninen kerros laimennettiin 1 1:11a etyyliasetaattia, ' ‘ kerrokset erotettiin ja orgaaninen kerros pestiin 3:1- seoksella, jossa oli kyllästettyä NaHC03-liuosta/5-%:ista K2C03-liuosta (2 x 500 ml), kyllästetyllä NaHC03-liuoksella ; 30 (2 x 500 ml), puolikyllästetyllä suolaliuoksella (1 x 500 ml) ja suolaliuoksella (1 x 500 ml). Uute kuivattiin vedettömällä MgS04:lla ja suodatettiin. Uute käsiteltiin 5,0 g:11a neutraalia Noriittia (puuhiiltä) sekoittamalla ; sitä 15 minuuttia huoneenlämpötilassa. Se suodatettiin * 35 taas celite-kerroksen läpi ja liuotin poistettiin alenne- 11! | t | 85 1 1 1724 tussa paineessa, jolloin saatiin 52 g raakatuotetta. Se liuotettiin tolueeni/metyleenikloridiseokseen (280 ml/25 ml) ja heksaania lisättiin tipoittain (20 ml). Kiteytyvä seos laitettiin sivuun kolmeksi tunniksi huoneenlämpöti-5 lassa ja jätettiin sitten 0 eC:seen yöksi. Pullon seinämille muodostui vaaleankeltainen kiintoaine. Kun emäliuos oli dekantoitu, jäännös trituroitiin tolueenilla (50 ml), suodatettiin, pestiin tolueenilla ja kuivattiin imusuodat-timella 30 minuuttia. Se siirrettiin sitten eksikkaatto-10 riin, jossa oli Drieriittiä, ja kuivattiin edelleen vakuu-missa (noin 0,5 mmHg) neljä tuntia, jolloin saatiin 24,4 g (53 %:n saanto) otsikon mukaista yhdistettä (homogeeni-suusindeksi mitattuna HPLC:llä = 95,9 %). Emäliuos haihdutettiin kuivaksi, trituroitiin tolueenilla (100 ml), suo-15 datettiin, pestiin tolueenilla ja kuivattiin imusuodatti-mella 30 minuuttia. Kun oli kuivattu eksikkaattorissa edellä kuvatulla tavalla, saatiin 12,5 g (27 %:n saanto) samaa tuotetta (homogeenisuusindeksi mitattuna HPLC:llä = 97,1 %).
20 (d) 21-0-(etoksikarbonyyli)-7-0-fosfono-oksimetyy- lipaklitakselin; sen mononatrium-, monokalium, trietyyliemiini-, arginiini-, lysiini-, etanolismiini-, N-metyyli-glukamiini- ja trietanoliamiinisuolojen valmistus äco o 25 \_f OCHjOP(O)(OH)2 \ Ml
CH,CHj0C{0)Ö -/ AcjV
·· H0 OCOPh i .· 30 : Liuokseen, jossa oli 2'-0-(etoksikarbonyyli)-7-0- . dibentsyylifosfono-oksimetyylipaklitakselia (1,23 g, 1,01 mmol) kuivassa etyyliasetaatissa (40 ml) lisättiin 10-pro- i t senttistä palladiumia hiilellä (428 mg, 10 %, 0,404 mmol). j 35 Reaktioseosta hydrogenoitiin paineessa (60 psi = 400 kPa)
« I
86 111724 pois celiten läpi, sitten celite huuhdeltiin useita kertoja etyyliasetaatilla. Suodos väkevöitiin, jolloin saatiin otsikon mukaista yhdistettä vapaassa happomuodossa (1,01 g, 80-%:isesti puhdasta HPLC:n perusteella). Epäpuhtaudet 5 poistettiin seuraavassa vaiheessa kromatografoimalla pre-paratiivisella C-18-pylväällä.
MS (FAB/NOBA, NaJ, KJ): [M + Na] + , m/z 1058; [M+K]\ m/z 1074; [M+2Na-H] + , m/z 1080; [M+Na+K-H] + , m/z 1096; [M+2K-H]+, m/z 1112.
10 HRMS (FAB/NOBA, CsJ/Gly, ulkoinen vertailu): [M+Na]+, m/z 1058,3163 (C51H58N020PNa laskettu arvo: 1058,3188; poikkeama Δ = 2,3 ppm).
1H-NMR (asetoni-d6/D20) 6: 1,13 (3h, s), 1,21 (3H, s), 1,66 (3H, s), 1,87 (H, m), 1,93 (3H, s), 2,14 (3H, s), 2,18 (H, 15 m), 2,44 (3H, s), 2,95 (H, m), 3,81 (H, d), 4,12 (2H, s), 4,15 - 4,27 (3H, multipletit päällekkäin), 4,92 - 4,99 (2H, br. multipletit päällekkäin), 5,15 (H, br. s), 5,48 (H, d), 5,61 (H, d), 5,84 (H, dd), 6,07 (H, t), 6,36 (H, s), 7,25 (H, t), 7,28 - 7,69 (10H, multipletit päällek- 20 käin), 7,89 (2H, dd), 8,08 (2H, dd), 8,86 (H, d). Vaihtoehtoinen menetelmä: ·· 2' -0-( etoksikarbonyyli )-7-0-(dibentsyylifosf ono-ok- j simetyyli)paklitakselia (490 mg, 0,402 mmol) etyyliasetaa- , *. tissa (20 ml) hydrogenoitiin Parr-ravistimessa paineessa ; # 25 60 psi (400 kPa), kun läsnä oli palladiumia hiilellä (10 % V. w/w, 150 mg). Reaktiota seurattiin TLC:llä ja HPLC:llä.
• · ; Kun ei enää havaittu lähtöainetta eikä välituotetta (to- ’· ’ dennäköisesti monobentsyylifosfaattia) (26 tuntia), sus pensio suodatettiin celiten läpi ja haihdutettiin kuivak-: : 30 si. HPLC-analyysin perusteella puhtaus oli 88 - 92 %.
Vaihtoehtoinen menetelmä: : , , 2'-0-(etoksikarbonyyli)-7-0-fosfono-oksimetyylipak- , j litakselitrietyyliamiinisuolaa, jota kuvataan alla (5,4 g, 4,75 mmol), jaettiin voimakkaasti etyyliasetaatin (100 ml) : 35 ja 5-%:isen NaHS04-liuoksen (45 ml) välillä sekoittamalla ► » 87 1 1 1724 O °C:ssa 30 minuuttia. Vesikerros erotettiin ja uutettiin etyyliasetaatilla (20 ml). Yhdistetyt etyyliasetaattiker-rokset pestiin puoliväkevällä suolaliuoksella (25 ml), suolaliuoksella (25 ml x 2), kuivattiin Na2S04:lla ja suo-5 datettiin, jolloin saatiin liuos, jossa oli happo (noin 4,75 mmol) etyyliasetaatissa (noin 150 ml). Tämä etyyli-asetaattiliuos väkevöitiin sitten kuivaksi rotavaporilla, jolloin saatiin 3,75 g otsikon mukaista yhdistettä vapaassa happomuodossa 95 %:n saannolla. Homogeenisuusindeksi 10 mitattuna HPLC:llä = 96,1 %.
Mononatriumsuola valmistettiin seuraavasti: 2 ' -0- (etoksikarbonyyli) -7-0-fosfono-oksimetyylipak-litakselinäyte (1,6 g, 1,55 mmol) liuotettiin asetonitrii-liin (30 ml) ultraäänen avulla. Tämä liuos laimennettiin 15 vedellä (30 ml) ja 1,1 M NaHC03-liuosta (2,11 ml, 2,32 mmol) lisättiin, sekoittaen ja käyttäen ultraääntä vuorotellen, jolloin saatiin liuos (5-20 minuuttia). Jonkin verran maitomainen liuos laitettiin C-18-pylvääseen, pestiin kahdella pylvästilavuudella vettä, sitten mononat-20 riumsuola eluoitiin 25-%:isella asetonitriili/vesiseoksel-la. Vastaavat fraktiot kerättiin yhteen, asetonitriili •j haihdutettiin, ja vesifaasi lyofilisoitiin, jolloin saa- ; · tiin otsikon mukaisen yhdisteen mononatriumsuola (850 mg, .· . noin 50 %), jonka HPLC-puhtaus oli 97 %.
·'. 25 MS (FAB/NOBA, NaJ, KJ): [M+Na]*, m/z 1180.
HRMS (FAB/NOBA, CsJ/Gly ulkoinen vertailu): [M+Na] + , m/z *./ 1080,2968 (C51H57N020PNa2 laskettu arvo: 1080,3007; poikkeama D = 3,6 ppm).
Alkuaineanalyysi: C: 52,65 (lask. 56,72), H: 5,06 (lask.
! : 30 5,23), N: 1,20 (lask. 1,30), Na: 2,74 (lask. 2,12).
' .
IR (KBr): 3430, 3066, 2988, 1746, 1722, 1660, 1602, 1582, : X 1526, 1488, 1452, 1374, 1246, 1178, 1150, 1108, 1070, ,’·'··! 1052, 1026, 1002, 966, 912, 834, 792, 776, 710, 628, 1 » 538 cm"1.
ββ 111724 ^-NMR (DMS0-d6/D20, asetoni-d6) δ: 1,10 (6H, s), 1,23 (3H, t), 1,64 (3H, s), 1,70 (H, m), 1,90 (3H,s), 1,99 (H, m), 2,14 (3H, s), 2,37 (3H, s), 2,98 (H, m), 3,74 (H, d), 4,07 (2H, s), 4,13 - 4,26 (3H, m, päällekkäin), 4,80 (H, br.
5 dd), 4,97 (H, d), 5,09 (H, br. t), 5,44 (H, d), 5,55 (H, d), 5,99 (H, t), 6,34 (H, s), 7,22 (H, t), 7,43 - 7,69 (10H, m, päällekkäin), 7,92 (2H, dd), 8,06 (2H, dd).
Natriumsuola voidaan myös valmistaa seuraavasti: Raakaa 2'-O-(etoksikarbonyyli)-7-0-fosfono-oksime-10 tyylipaklitakselia (89 %; 70 mg, 0,060 mmol) etyyliasetaatissa (2 ml) käsiteltiin liuoksella, jossa oli natrium-etyyliheksanoaattia (87,5 mM etyyliasetaatissa, 1,0 ml, 0,0875 mmol) huoneenlämpötilassa sekoittamalla. Kun seosta oli sekoitettu huoneenlämpötilassa tunnin ajan, heksaania 15 (1,2 ml) lisättiin samenemispisteeseen asti. Kun seosta oli säilytetty -20 °C:ssa kaksi tuntia, hieno amorfinen jauhe suodatettiin (hieman vaikeasti, hyvin hitaasti) hienon suodatinpaperin läpi, jolloin saatiin 45 mg (70 %) natriumsuolaa. Tämän puhtaus oli 95,2 % HPLC:n perusteella 20 ja se sisälsi pienen määrän etyyliheksaanihappoa (NMR).
Trietanoliamiinisuola valmistettiin seuraavasti: ·· 2 ' -0-( etoksikarbonyyli )-7-0-fosfono-oksimetyylipak- ; j litakselia, raakaa hydrogenointivaiheesta (89-%:ista HPLC:n perusteella) (0,69 g, 0,593 mmol korjattu epä-; <_ 25 puhtauksia huomioiden), liuotettiin etyyliasetaattiin il (10 ml), ja sekoitettiin hitaasti samalla kuin liuos, jos- * > i sa oli trietanoliamiinia (0,11 M etyyliasetaatissa, käy-' tetty 5,1 ml, 0,95 ekvivalenttia), lisättiin tipoittain.
Näin saatu maitomainen liuos pidettiin 0 °C:ssa kaksi tun-: 30 tia ja suodatettiin suodatinpaperilla huuhdellen kylmällä · etyyliasetaatilla. Saanto: 499 mg (80 %) amorfista, hie- : \ noa, ei-sähöstaattista jauhetta, jota kuivattiin yön yli vakuumissa. HPLC:n perusteella puhtaus oli 96,6 % (C-18, 45 % 5 mM Q12 + 10 mM ammoniumfosfaattia pH 6, 55 % aseto-• 35 nitriiliä). NMR-spekrissä (D20/asetoni/DMS0) näkyy etyyli- 89 11 1724 asetaattijälkiä mutta ei muita selviä epäpuhtauksia. Analyysin mukaan kysymyksessä oli 2 - 3 x hydraatti.
Toisesta kokeesta saatu vähemmän tärkeä trietanoli-amiinisuola puhdistettiin edelleen seuraavalla menetelmäl-5 lä. Trietanoliamiinisuolaa (noin 2 g) liuotettiin noin 30-%:iseen asetonitriili/vesiseokseen. Tämä liuos eluoi-tiin pienellä typpipaineella C18-pylvään läpi (Bakerbond) käyttäen gradienttia, jossa oli 20 - 40 % asetonitriiliä vedessä. Fraktiot, joissa oli haluttua trietanoliamiini-10 suolaa, otettiin talteen; asetonitriili poistettiin rota-vaporilla alennetussa paineessa. Vesiliuos jäähdytettiin ja lyofilisoitiin yön yli, jolloin saatiin 1,4 g trietanoliamiinisuolaa, jonka puhtaus oli 97,5 %.
Trietanoliamiinisuola voidaan myös valmistaa seu-15 raavasti: 2 ’ -0- (etoksikarbonyyli )-7-0-fosfono-oksimetyylipak-litakselitrietyyliamiinisuolaa (3,0 g, 2,64 mmol) jaettiin etyyliasetaatin (60 ml) ja 5-%:isen NaHS04-liuoksen (30 ml) välillä sekoittamalla 0 °C:ssa 15 minuuttia. Vesikerros 20 erotettiin ja uutettiin etyyliasetaatilla (10 ml). Yhdis tetyt etyyliasetaattikerrokset pestiin suolaliuoksella (15 ml), kuivattiin Na2S04:lla ja suodatettiin, jolloin : saatiin liuos, jossa oli happo (noin 2,64 mmol) etyyliase taatissa (noin 70 ml). Tähän etyyliasetaattiliuokseen li- . 25 sättiin huoneenlämpötilassa tipoittain voimakkaasti se- ;; ,* koittaen N(CH2CH2OH)3 (0,35 ml, 2,64 mmol) viiden minuutin • i t * aikana. Syntynyttä suspensiota sekoitettiin vielä tunnin ' ajan ja sitten se suodatettiin, pestiin etyyliasetaatilla (15 ml x 2) ja kuivattiin vakuumissa, jolloin saatiin * ’ ·* 30 2,8 g trietanoliamiinisuolaa 89 %:n saannolla. HPLC- : analyysin perusteella homogeenisuusindeksi oli 98,7 %; sp.
: *·, > 157 °C (hajoaa).
\',V Alkuaineanalyysi C56H73N2023P. 2,0 H20.0,3 EtOAc: ’τ' laskettu: C, 55,60; H, 6,48; N, 2,27; KF (H20), 2,92.
• V 35 saatu: C, 55,94; H, 6,59; N, 2,43; KF (H20), 3,50.
90 1 1 17 2 4
Trietyyliamiinisuola valmistettiin seuraavasti: Liuokseen, jossa oli 2'-0-(etoksikarbonyyli)-7-0-dibentsyylifosfono-oksimetyylipaklitakselia (10 g, 8,23 mmol) etyyliasetaatissa (350 ml) huoneenlämpötilassa, li-5 sättiin 10-%:ista palladiumia hiilellä (2 g, 20 %:n annos). Syntyneestä suspensiosta poistettiin kaasu pumppaamalla ilma pois ja huuhtomalla argonilla. Tämä prosessi toistettiin vielä kaksi kertaa. Argon korvattiin sitten vedyllä käyttäen samaa kaasunpoistomenetelmää. Syntynyttä 10 suspensiota sekoitettiin ilmapallon vetypaineessa 2-3 psi (14 - 21 kPa) 16 tuntia huoneenlämpötilassa sekoittaen voimakkaasti. Vety imettiin pois ja korvattiin argonilla kolme kertaa käyttäen samaa kaasunpoistomenetelmää. Syntynyt suspensio suodatettiin celite-kerroksen läpi. Tähän 15 homogeeniseen suodokseen lisättiin hitaasti trietyyliamii-nia (8,23 mmol, 1,14 ml) viiden minuutin aikana sekoittaen voimakkaasti. Syntynyttä hienoa valkoista suspensiota sekoitettiin vielä 30 minuuttia. Se suodatettiin sintratun suppilon läpi, jonka huokoskoko oli E. Suodatinkakkua kui-20 vattiin vakuumissa (1 mmHg) 16 tuntia, jolloin saatiin 8,22 g otsikon mukaista trietyyliamiinisuolaa 88 %:n saan-;··· nolla. HPLC-analyysin perusteella homogeenisuusindeksi oli :’· · 97,4 %; sp. > 178 °C (hajoaa).
t ·
Alkuaineanalyysi C57H73N202oP.4, 5 H20: : 25 laskettu: C, 56,19; H, 6,79; N, 2,30; KF (H20), 6,65.
• t * !:V saatu: C, 56,33; H, 6,87; N, 2,32; KF (H20), 7,96.
Vaihtoehtoinen menetelmä trietyyliamiinisuolan valmistamiseksi: 2'-O-(etoksikarbonyyli)-7-0-dibentsyylifosfono-ok- : .* 30 simetyylipaklitakselia (5,67 g, 4,66 mmol) lisättiin 250 ml:n pulloon ja liuotettiin etyyliasetaattiin (150 ml).
: Pullo varustettiin kolmitieventtiilillä, jolloin toinen , liitos oli kytketty talon vakumiin ja toinen argonputkeen.
• Käyttäen venttiiliä pullo evakuoitiin osittain ja huuhdel- > I * : 35 tiin sitten argonilla. Tämä prosessi toistettiin vielä 91 111724 kaksi kertaa. Palladiumia aktiivihiilellä (10 % Pd) (0,85 g) lisättiin pulloon. Kolmitieventiiliin kytketty argonlinja korvattiin vetytäytteisellä ilmapallolla. Käyttäen venttiiliä pullo evakuoitiin osittain ja huuhdeltiin 5 sitten vedyllä. Tämä prosessi toistettiin vielä neljä kertaa. Syntynyttä seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa vetyilmapalloatmosfäärin alla yön yli. TLC-analyysin perusteella 17 tuntia ensimmäisen vetykäsittelyn jälkeen lähtöainetta ei enää ollut läsnä. Vetyilmapallo, joka oli 10 kytketty kolmitieventtiiliin, korvattiin argonlinjalla.
Käyttäen venttiiliä pullo evakuiotiin osittain ja huuhdeltiin sitten argonilla. Tämä prosessi toistettiin vielä kaksi kertaa. Pullon sisältö vakuumisuodatettiin celite-kerroksen läpi. Celite huuhdeltiin etyyliasetaatilla (2 x 15 10 ml). Sekoitettuun suodokseen lisättiin trietyyliamiinia (0,650 ml, 4,66 mmol). Syntynyttä suspensiota sekoitettiin huoneenlämpötilassa kaksi tuntia, minkä jälkeen tilavuus vähennettiin noin 150 mlrksi rotavaporilla. Kiintoaine suodatettiin, pestiin etyyliasetaatilla (2 x 10 ml) ja 20 kuivattiin vakuumissa, jolloin saatiin 4,76 g (90 %:n saanto) otsikon mukaista trietyyliamiinisuolaa valkoisena ·;··· jauheena (HPLC-analyysin perusteella tuotteen homogeeni- : suusindeksi oli 96,6 %).
Vaihtoehtoinen menetelmä trietyyliamiinisuolan val-. ’ 25 mistamiseksi: !; ‘, * 2'-0-(etoksikarbonyyli)-7-0-dibentsyylifosfono-ok- < i k • simetyylipaklitakselia (5,17 g, 4,25 mmol) lisättiin 250 ml:n pulloon ja liuotettiin etyyliasetaattiin (150 ml). Pullo varustettiin kolmitieventtiilillä, jolloin toinen • V 30 liitos oli kytketty talon vakumiin ja toinen argonputkeen.
;it_: Käyttäen venttiiliä pullo evakuiotiin osittain ja huuhdel- '·, tiin sitten argonilla. Tämä prosessi toistettiin vielä s i > kaksi kertaa. Palladiumia aktiivihiilellä (10 % Pd) > i (0,86 g) lisättiin pulloon. Kolmitieventiiliin kytketty • 35 argonlinja korvattiin vetytäytteisellä ilmapallolla. Käyt- > ! 92 1 1 1724 täen venttiiliä pullo evakuoitiin osittain ja huuhdeltiin sitten vedyllä. Tämä prosessi toistettiin vielä viisi kertaa. Syntynyttä seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa vetyilmapalloatmosfäärin alla yön yli. TLC-analyysin pe-5 rusteella 16 tuntia ensimmäisen vetykäsittelyn jälkeen lähtöainetta ei enää ollut läsnä. Vetyilmapallo, joka oli kytketty kolmitieventtiiliin, korvattiin argoniinjalla. Käyttäen venttiiliä pullo evakuoitiin osittain ja huuhdeltiin sitten argonilla. Tämä prosessi toistettiin vielä 10 kaksi kertaa. Pullon sisältö vakuumisuodatettiin celite-kerroksen läpi. Celite huuhdeltiin etyyliasetaatilla (4 x 10 ml). Sekoitettuun suodokseen lisättiin trietyyliamiinia (0,590 ml, 4,25 mmol). Syntynyttä suspensiota sekoitettiin huoneenlämpötilassa tunnin ajan, minkä jälkeen tilavuus 15 vähennettiin noin 140 ml:ksi rotavaporilla. Kiintoaine suodatettiin, pestiin etyyliasetaatilla (10 ml) ja kuivattiin vakuumissa, jolloin saatiin 4,46 g (92 %:n saanto) otsikon mukaista trietyyliamiinisuolaa valkoisena jauheena (HPLC-analyysin perusteella tuotteen homogeenisuusindeksi 20 oli 96,7 %).
Lysiinisuola valmistettiin seuraavasti: ; ·· 2'-0-(etoksikarbonyyli)-7-0-dibentsyylifosfono-ok- ·. ; simetyylipaklitakselia (15,0 g, 12,34 mmol) lisättiin an noksittain suspensioon, jossa oli 10-%:ista palladiumia . 25 hiilellä (20 %:n annos, 3 g) etanolissa (600 ml, 200 proof [100 tilavuus-%] ) 0 °C:ssa. Syntyneestä suspensiosta pois- 1 t · tettiin kaasu evakuoimalla ilma ja huuhtelemalla argonil-’·’ la. Tämä prosessi toistettiin vielä kaksi kertaa. Argon korvattiin sitten vedyllä käyttäen samaa kaasunpoistomene- • I ' ; 30 telmää ja sekoittamalla voimakkaasti. Syntynyttä seosta i t - i, : sekoitettiin 0 °C:ssa kaksi tuntia. Kylmähaude poistettiin ; , , ja reaktioliuosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa vielä j!!,’ 4,5 tuntia. Reaktioseoksesta poistettiin kaasu evakuoimal- *; la vety ja huuhtelemalla argonilla kolme kertaa. Se suoda- j 35 tettiin argonin alla celite-kerroksen läpi. Syntyneeseen 93 11 1724 suodokseen lisättiin hitaasti liuos, jossa oli lysiiniä (1,63 g, 0,94 ekvivalenttia) 1:1 vesi:etanoli-seoksessa (200 proof [100 tilavuus-%]) (20 ml) viiden minuutin aikana samalla voimakkaasti sekoittaen. Syntyneeseen valkoi-5 seen suspensioon lisättiin tislattua vettä (110 ml) ja seosta sekoitettiin 30 minuuttia. Se lämmitettiin noin 55 °C:seen. Syntynyttä homogeenista liuosta pidettiin öl-jyhauteessa 50 eC:ssa ja se jäähdytettiin hitaasti huoneenlämpötilaan 16 tunnin aikana ja 4 °C:seen kolmen tun-10 nin aikana. Se suodatettiin ja imukuivattiin 16 tuntia, jolloin saatiin 11,8 g (noin 80 %:n saanto) lysiinisuolaa, jonka homogeenisuusindeksi HPLC-analyysin perusteella oli 99,0 %; sp. > 170°C (hajoaa).
Alkuaineanalyysi C57H72N3022P. 8,0 H20: 15 laskettu: C, 51,62; H, 6,9; N, 3,17; KF (H20), 10,87.
saatu: C, 51,76; H, 6,57; N, 3,48; KF (H20), 11,42.
Etanoliamiinisuola valmistettiin seuraavasti: 2-0-(etoksikarbonyyli)-7-0-fosfono-oksimetyylipak-litakselitrietyyliamiinisuolaa (3,0 g, 2,64 mmol) jaettiin 20 etyyliasetaatin (60 ml) ja 5-%:isen NaHS04-liuoksen (30 ml) välillä sekoittaen voimakkaasti 0 °C:ssa 15 minuuttia. :··; Vesikerros erotettiin ja uutettiin etyyliasetaatilla (15 ml). Yhdistetyt etyyliasetaattikerrokset pestiin suola- * t liuoksella (15 ml), kuivattiin Na2S04:lla ja suodatettiin, ; ,·. 25 jolloin saatiin liuos, jossa oli vapaa happo (noin 2,64 mmol) etyyliasetaatissa (noin 70 ml). Tähän etyyliasetaat- * · tiliuokseen lisättiin huoneenlämpötilassa tipoittain se- * i * koittaen voimakkaasti liuos, jossa oli H2NCH2CH2OH (0,15 ml, 2,64 mmol) etyyliasetaatissa (5 ml), viiden minuutin aika-·’ 30 na. Syntynyttä suspensiota sekoitettiin vielä tunnin ajan . · ja suodatettiin sitten, pestiin etyyliasetaatilla (15 ml x ! · . 2), ja kuivattiin vakuumissa, jolloin saatiin 2,6 g otsi- . >·, kon mukaista etanoliamiinisuolaa 89 %:n saannolla. HPLC- analyysin perusteella tuotteen homogeenisuusindeksi oli : 35 97,8 %; sp. > 130 °C (hajoaa).
94 1117 2 4
Alkuaineanalyysi C53H65N2021P. 2, 5 H20: laskettu: C, 55,73; H, 6,18; N, 2,45; KF (H20), 3,94. saatu: C, 55,76; H, 6,39; N, 2,45; KF (H20), 6,00.
Arginiinisuola valmistettiin seuraavasti: 5 2'-O-(etoksikarbonyyli)-7-0-dibentsyylifosfono-ok- simetyylipaklitakselia (30,0 g, 24,69 nunol) lisättiin annoksittain suspensioon, jossa oli 10-%:ista palladiumia hiilellä (20 %:n annos, 6 g) etanolissa (900 ml, 200 proof [100 tilavuus-%]) 0 °C:ssa. Syntyneestä suspensiosta pois-10 tettiin kaasu evakuoimalla ilma ja huuhtelemalla argonilla. Tämä prosessi toistettiin vielä kaksi kertaa. Argon korvattiin sitten vedyllä käyttäen samaa kaasunpoistomene-telmää ja sekoittamalla voimakkaasti. Syntynyttä seosta sekoitettiin 0 °C:ssa kaksi tuntia. Kylmähaude poistettiin 15 ja reaktioliuosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa vielä 24 tuntia. Reaktioseoksesta poistettiin kaasu evakuoimalla vety ja huuhtelemalla argonilla kolme kertaa käyttämällä edellä kuvattua kaasunpoistomenetelmää. Se suodatettiin argonin alla celite-kerroksen läpi. Suodos jaettiin kah-20 teen yhtä suureen osaan ja etanolia (190 ml, 200 proof [100 tilavuus-%]) lisättiin kuhunkin osaan. Toiseen osaan ...j (noin 630 ml) lisättiin hitaasti liuos, jossa oli arginii- ,\ ; nia (2,0 g, 0,94 ekvivalenttia) 2:1 vesi:etanoliseoksessa ,· ’ (200 proof [100 tilavuus-%]) (20 ml), viiden minuutin ai- . 25 kana samalla voimakkaasti sekoittaen. Syntyneeseen valkoi- seen suspensioon lisättiin tislattua vettä (100 ml) ja » I f * seosta sekoitettiin 30 minuuttia ja lämmitettiin noin * ( i ’ 60 °C:seen. Se suodatettiin kuumana ja suodos pidettiin öljyhauteessa 50 °C:ssa ja se jäähdytettiin hitaasti huo- * 30 neenlämpötilaan ja pidettiin huoneenlämpötilassa kaksi : : tuntia ja 4 °C:ssa kaksi tuntia. Se suodatettiin ja pes- * ’ . tiin kylmällä 3-%:isella vesi/etanoliseoksella (100 ml) ja ' imukuivattiin 16 tuntia, jolloin saatiin 12,95 g (noin 86 %:n saanto) otsikon mukaista arginiinisuola, jonka ho-i ‘ · 35 mogeenisuusindeksi oli 96,7 %.
I | 95 1 117 2 4 Tämä materiaali (12,95 g) liuotettiin seokseen, jossa oli 15 % vettä etanolissa (noin 700 ml) 55 °C:ssa. Liuos jäähdytettiin ja pidettiin 30 °C:ssa 3,5 tuntia, huoneenlämpötilassa 16 tuntia ja 4 °C:ssa kolme tuntia. 5 Syntyneet kiteet suodatettiin, pestiin kylmällä 2-%:isella vesi/etanoliseoksella (50 ml x 2), imukuivattiin neljä tuntia ja kuivattiin vakuumissa (1 mmHg) 16 tuntia, jolloin saatiin 10,2 g (noin 80 %:n saanto) otsikon mukaista arginiinisuolaa (homogeenisuusindeksi oli 98,5 %); sp. > 10 176 °C (hajoaa).
Alkuaineanalyysi C57H72N5022P.6,4 H20: laskettu: C, 51,65; H, 6,45; N, 5,28; KF (H20), 8,70.
saatu: C, 51,86; H, 6,65; N, 5,53; KF (H20), 8,72.
N-metyyliglukamiinisuola valmistettiin seuraavasti: 15 2'-O-(etoksikarbonyyli)-7-0-dibentsyylifosfono-ok- simetyylipaklitakselia (30,0 g, 24,69 mmol) lisättiin annoksittain suspensioon, jossa oli 10-%:ista palladiumia hiilellä (20 %:n annos, 6 g) etanolissa (900 ml, 200 proof [100 tilavuus-%]) 0 °C:ssa. Syntyneestä suspensiosta pois-20 tettiin kaasu evakuoimalla ilma ja huuhtelemalla argonilla. Tämä prosessi toistettiin vielä kaksi kertaa. Argon *: korvattiin sitten vedyllä käyttäen samaa kaasunpoistomene- : telmää ja sekoittamalla voimakkaasti. Syntynyttä seosta ·. sekoitettiin 0 °C:ssa kaksi tuntia. Kylmähaude poistettiin : 25 ja reaktioliuosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa vielä * * * |!V 24 tuntia. Reaktioseoksesta poistettiin kaasu evakuoimalla * * vety ja huuhtelemalla argonilla kolme kertaa käyttämällä ·' ’ edellä kuvattua kaasunpoistomenetelmää. Se suodatettiin argonin alla celite-kerroksen läpi. Suodos jaettiin kah-·’ 30 teen yhtä suureen osaan ja etanolia (190 ml, 200 proof * > i [100 tilavuus-%]) lisättiin kuhunkin osaan. Toiseen osaan (noin 630 ml) lisättiin hitaasti liuos, jossa oli N-metyy-.*··, liglukamiinia (2,24 g, 0,94 ekvivalenttia) 1:1 vesi:etano- liseoksessa (200 proof [100 tilavuus-%]) (20 ml) viiden
1 I
: 35 minuutin aikana samalla voimakkaasti sekoittaen. Synty- t 96 1 117 2 4 neeseen valkoiseen suspensioon lisättiin tislattua vettä (100 ml) ja seosta sekoitettiin 30 minuuttia ja seos lämmitettiin noin 49 °C:seen. Kirkas homogeeninen liuos pidettiin öljyhauteessa 50 °C:ssa ja se jäähdytettiin hi-5 taasti huoneenlämpötilaan ja pidettiin huoneenlämpötilassa kaksi tuntia ja 4 eC:ssa 1,5 tuntia. Se suodatettiin ja pestiin kylmällä 3-%:isella vesi/etanoliseoksella (100 ml) ja imukuivattiin huoneenlämpötilassa 16 tuntia, jolloin saatiin 9,65 g (noin 64 %:n saanto) otsikon mukaista N-me-10 tyyliglukamiinisuolaa, jonka homogeenisuusindeksi oli 96,4 %.
Tämä materiaali (9,65 g) liuotettiin seokseen, jossa oli 15 % vettä etanolissa (noin 450 ml) 52 °C:ssa. Liuos jäähdytettiin ja pidettiin 28 eC:ssa 3,5 tuntia, 15 huoneenlämpötilassa 16 tuntia ja 4 eC:ssa kolme tuntia. Syntyneet kiteet suodatettiin, pestiin kylmällä 2-%:isella vesi/etanoliseoksella (50 ml x 2), imukuivattiin neljä tuntia ja kuivattiin vakuumissa (1 mmHg) 16 tuntia, jolloin saatiin 7,5 g (noin 80 %:n saanto) otsikon mukaista 20 N-metyyliglukamiinisuolaa. (HPLC-analyysin perusteella homogeenisuusindeksi oli 98,6 %); sp. > 154 °C (hajoaa).
• f Alkuaineanalyysi C58H75N2025P. 5,0 H20: , : laskettu: C, 52,72; H, 6,48; N, 2,12; KF (H20), 6,82, . ! saatu: C, 53,09; H, 6,50; N, 2,08; KF (H20), 7,12, 25 Esimerkki 4 ’ 2'-0-(fosfono-oksimetyyli)paklitakseli (a) 2?-0-(metyylitiometyyli)-7-0-(trietyylisilyy-li)paklitakselin valmistus ; 30 AC°\ H OSi (CH2CH3) 3
PhCONH 0 \ y—\l JL
:;,v ph^'NVs^^Ns'c>'···^ CH3SCH2Ö --/ 7v° HO £ AcÖ ‘ ·, 35 PhC (0) Ö » a 97 111724 Jäähdytettyyn (0--5 °C) liuokseen, jossa oli 7-0-(trietyylisilyyli)paklitakselia (2,46 g; 2,5439 mmol) kuivassa asetonitriilissä (100 ml) lisättiin dimetyylisulfi-dia (1,348 g; 1,59 ml; 21,6976 mmol) sekä bentsoyyliperok-5 sidia (2,628 g; 10,8488 mmol). Heterogeenistä seosta sekoitettiin 0 eC:ssa tunnin ajan ja pidettiin 5 °C:ssa 18 tuntia. Syntyi keltainen liuos. Tämä haihdutettiin kuivaksi ja puhdistettiin silikageelipylväällä (eluoimalla etyy-liasetaatti/heksaaniseoksella, 1:4; 1:3 ja 1:2), jolloin 10 saatiin otsikon mukainen yhdiste (1,0 g, 38 %). Tämä käytettiin sellaisenaan seuraavassa vaiheessa.
MS: [M+H]*, 1028; [M+Na]\ 1050; [M+K]\ 1066.
(b) 2'-0-(metyylitiometyyli)paklitakselin valmistus
AcO O qj! 15 PhCONH O \ )-( Ϊ CH3SCH2Ö ---f zsy0 HO j AcÖ PhC(O)Ö 20 Jäähdytettyyn (-15 °C) liuokseen, jossa oli vaiheen j (a) mukaista tuotetta (1,0 g; 0,9737 mmol) kuivassa aseto- . : nitriilissä (30 ml), lisättiin tipoittain 0,5 N kloorive- . , tyhappoa (3 ml). Syntynyttä liuosta sekoitettiin -15 °C:n ; 25 lämpötilassa tunnin ajan ja 5 ®C:ssa 18 tuntia. Tämä lai- ;; mennettiin etyyliasetaatilla (20 ml) ja pestiin kylmällä \ ’ 6-%:isella NaHC03-liuoksella ja suolaliuoksella. Se kuivat tiin (MgS04) ja haihdutettiin kuivaksi. Se puhdistettiin silikageelilevyllä (metyleenikloridi:15 % asetonitriiliä), : 30 jolloin saatiin puhdas otsikon mukainen yhdiste (280 mg, 31,4 %).
IR (KBr): 3446, 3064, 2940, 1726, 1666, 1582, 1516, 1486. 1H-NMR (CDC13) 6: 1,118 (s, 3H), 1,229 (s, 3H), 1,662 (s, 3H), 1,689 (s, 3H), 1,871 (s, 3H), 2,209 (s, 3H), 2,450 : 35 (s, 3H), 3,800 (d, H), 4,119 (d, H), 4,305 (d, H), 4,413 (m, H), 4,563 (d, H), 4,703 (d, H), 4,940, (d, H), 4,958 111724 (dd, H), 5,667 (d, H), 5,822 (dd, H), 6,263 (m, 2H), 7,019 (d, NH), 7,293 - 8,127 (m, 15H).
MS: [M+H]*, 914; [M+Na]*, 936; [M+K]% 952.
HRMS: MH*: 914,3394 (laskettu = 914,3422).
5 (c) 2’-O-(dibentsyylifosfono-oksimetyylljpaklitak- selln valmistus
AcO 0 0H PhCONH 0 \ ^1Γ 10 Ph Π (PhCHoO) 2P (O) OCHoÖ A/0 HO j AcÖ PhC(0)Ö 15 Sekoitettuun liuokseen, jossa oli vaiheen (b) mu kaista tuotetta (0,89 g; 0,9748 mmol) kuivassa 1,2-dikloo-rietaanissa (12 ml), lisättiin jauhettuja 4 A:n molekyyli-seuloja (1,0 g) sekä tipoittain liuos, jossa oli N-jodi-sukkinimidia (0,33 g; 1,4622 mmol) ja dibentsyylifosfaat-20 tia (0,41 g; 1,4622 mmol) kuivassa tetrahydrofuraanissa (8 ml). Syntynyttä seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa ·:· tunnin ajan ja suodatettiin celiten yli. Suodos haihdutet- : tiin kuivaksi ja punainen jäännös liuotettiin etyyliase- , taattiin (50 ml) ja pestiin kylmällä 6-%:isella NaHS03- 25 liuoksella, kylmällä 6-%:isella NaHC03-liuoksella ja suola- ,','V liuoksella. Se kuivattiin (MgS04) ja haihdutettiin, jolloin * » saatiin vaahto. Tämä puhdistettiin silikageelilevyllä (me-tyleenikloridi:20 % asetonitriiliä), jolloin saatiin puhdas tuote (0,77 g, 69 %).
30 IR (KBr): 3854, 3744, 3362, 3066, 1960, 1722, 1602, 1580. *NMR (CDC13) 6: 1,075 (s, 3H), 1,167 (s, 3H), 1,651 (s, 3H), 1,799 (s, 3H), 2,209 (s, 3H), 2,296 (s, 3H), 2,464 (m, H), 3,686 (d, H), 4,121 (d, H), 4,240 (d, H), 4,293 (m, H), 4,808 - 4,957, (m, 6H), 5,006 (m, H), 5,565 - 99 1 1 17 2 4 5,649 (m, 2H), 6,034 (t, H), 6,194 (3, H), 7,100 - 8,132, (m, 26H).
MS: [M+H]\ 1144; [M+Na]\ 1166; [M+K]*, 1182.
(d) 2 ' -O- (fosfono-oksimetyylijpaklltakselin valmis- 5 tus AC°\ f OH PhCONH o \ V— 10 (ho)2p (0)och2ö p\y° HO j AcÖ Phc(0)ö
Seos, jossa oli vaiheen (b) mukaista tuotetta (0,9 g; 0,7874 mmol) ja 10-%:ista palladiumia hiilellä 15 (1,0 g) etyyliasetaatissa (20 ml), hydrogenoitiin painees sa 60 psi (400 kPa) 24 tuntia. Reaktioseos suodatettiin celiten yli ja suodos haihdutettiin kuivaksi. Jäännös puhdistettiin silikageelilevyllä (metyleenikloridi:40 % meta-nolia), jolloin saatiin otsikon mukainen yhdiste (0,254 g, 20 33,4 %). sp. 202 - 205 °C (hajoaa).
IR (KBr): 3438, 3066, 2942, 1722, 1652, 1602 cm-1.
. 1H-NMR (asetoni-d6/D20 ) 6: 1,081 (s, 6H), 1,571 (s, 3H), . ; 1,847 (s, 3H), 2,115 (s, 3H), 2,357 (s, 3H), 3,707 (d, H), 4,08 (m, 2H), 4,275 (m, H), 4,941 - 5,085 (m, 4H), 5,231 25 (t, H), 5,430 (d, H), 5,544 (d, H), 5,970 (t, H), 6,376 ;; (s, H), 6,961 - 8,017 (m, 16H).
MS: [M+Na]+ , 986; [M+K]*, 1002; [M+2Na-H]\ 1008; [M+Na+K-V ; H]+, 1024; [Μ+2Κ-ΗΓ, 1040.
HRMS: MNa+, 986,2955 (laskettu = 986,2976).
* * t I § » » t 100 1 1 1724
Esimerkki 5 2', 7-O-bis (f os fono-oksimetyyli)pakl it akseli natrium-suola (a) 2’,7-0-bis(metyylitiometyyli)paklitakselin val- 5 mistus
AcC\ o
PhCOMH O \ OCH SCH3 .....HTK2 10 cH’s<V iTrxc^o
PhC (°) O iAc
Kiinteää bentsoyyliperoksidia (1,995 g, 8 mmol) lisättiin sekoitettuun liuokseen, jossa oli paklitakselia 15 (0,853 g, 1 mmol) ja dimetyylisulfidia (1,465 g, 20 mmol) ja asetonitriiliä (20 ml) 0 eC:ssa. Reaktioseosta sekoitettiin voimakkaasti 0 °C:ssa kolme tuntia. Reaktion kulkua monitoroitiin TLC:llä heksaani:etyyliasetaattiseokses-sa (1:1, v/v), Rf pakntak.eii = 0.24, Rf tuote = 0,60. Kun lähtö-20 aine oli hävinnyt (noin kolmen tunnin kuluttua), reaktio lopetettiin haihduttamalla liuottimet 25 eC:ssa käyttäen vesisuihkuvakuumia. Kuiva jäännös erotettiin käyttäen si-likageelipylvästä (EM Science, 40 - 63 pm ), 100 ml kui-, ·' vaa silikageeliä, pylväs koko: Φ = 3/4 tuumaa, liuotinsys- I 25 teemi: heksaani:etyyliasetaattiseos (3:2, v/v), kunkin fraktion tilavuus: noin 25 ml. Otsikon mukainen yhdiste (0,515 g, 53 %:n saanto) saatiin talteen fraktioista 15 -V : 19.
MS (FAB/matriisi ΝΟΒΑ, NaJ KJ): [M+H]+, m/z 974; [M+Na]\ Γ *' 30 m/z 996; [M+K]\ m/z 1012.
UV (MeOH): Amax = 204 nm, E(1 %/l cm) - 243,45; Amax = 228 nm, E(1 %/l cm) = 313,99.
IR (KBr): 3440, 3064, 2926, 1724, 1668, 1602, 1582, 1514, ' 1484, 1452, 1372, 1314, 1266, 1242, 1178, 1142, 1068, ιοί 111724 1026, 990, 916, 886, 848, 800, 774, 710, 646, 606, 570, 540, 480 cm*1.
'H-NMR (CDC13) δ: 1,17 (3H, s), 1,20 (3H, s), 1,68 (3H, s), 1,74 (3H, s), 1,84 (H, dd), 2,04 <3H, d), 2,09 (3H, s), 5 2,15 (3H, s) päällekkäin (H, m), 2,37 (H, dd), 2,51 (3H, s), 2,79 (H, ddd), 3,78 (H, d), 4,18 (H, d), 4,28 (H, m), 4,31 (H, d), 4,53 - 4,74 (4H, kaksi päällekkäistä AB m), 4,93 (H,d), 4,95 (H, d), 5,68 (H, d), 5,82 (H, dd), 6,24 (H, dd), 6,54 (H, s), 7,05 (H, d), 7,28 - 7,59 (10H, pääl-10 lekkäin m), 7,57 (H, m), 7,76 (2H, d), 8,09 (2H, d).
(b) 2',7-0-bis(dibentsyylifosfono-oksimetyyli)pak-litakselin valmistus
Ac0x o 15 PhCOip O OCH2OPO(OCH2Ph)2
Ph^^V^o.......( V" (PhCH20) 2OPOCH2Ö 1 phc(°)<5 20 Liuos, jossa oli N-jodisukkinimidia, (135 mg, 0,5 mmol) ja dibentsyylifosfaattia, (167 mg, 0,5 mmol) kuivas-sa tetrahydrofuraanissa (8 ml), lisättiin seokseen, jossa oli 2',7-0-bis(metyylitiometyyli)paklitakselia (198 mg, ·[ 0,2 mmol) ja 5 A:n molekyyliseuloja (noin 200 mg) metylee- . 25 nikloridissa (12 ml) huoneenlämpötilassa. Reaktioseosta ;; ,* sekoitettiin 1,5 tuntia, sitten molekyyliseulat suoda- t , · tettiin pois celiten avulla, pestiin metyleenikloridilla '* * (10 ml) ja liuottimet haihdutettiin huoneenlämpötilassa
käyttäen vesisuihkuvakuumia. Jäännös liuotettiin etyy-30 liasetaattiin (100 ml) ja pestiin erotussuppilossa 1-pro-: senttisellä natriumtiosulfaattiliuoksella (50 ml), 0,5 M
, natriumvetykarbonaattiliuoksella (50 ml), ja kahdesti ve- .. dellä (2 x 50 ml). Orgaaninen faasi kuivattiin magnesium- sulfaatilla, haihdutettiin kuivaksi ja liuotettiin uudel-35 leen etyyliasetaattiin (1 ml). Tuote seostettiin 50 ml:lla loa 111724 etyylieetteri:heksaaniseosta (1:1) ja pestiin kahdesti samalla seoksella (2 x 50 ml). Raakatuote (218 mg) saatiin 74 %:n saannolla. Tämän tuotteen puhdistus suoritettiin kuljettamalla sen metyleenikloridiliuos (3 ml) silikagee-5 Iin läpi Φ = 3/4 tuumaa x L = 1 tuumaa) ja eluoimalla tuote 50 ml:11a metyleenikloridi:etyyliasetaattiseosta (3:1). Otsikon mukainen yhdiste (172,7 mg) saatiin 59,3 %:n saannolla.
MS (FAB, matriisi NOBA/NaJ, KJ): [M+Na]\ m/z 1456; [M+K]\ 10 m/z 1472.
UV (MeCN): Imax = 194 nm, E(1 %/l cm) * 1078,36; Imax = 228 nm, E(1 %/l cm) = 311,95.
IR (KBr): 3430, 3066, 3032, 2958, 1744, 1726, 1664, 1602, 1582, 1532, 1488, 1456, 1372, 1270, 1244, 1158, 1108, 15 1068, 1016, 1000, 952, 886, 800, 776, 738, 698, 604, 498 cm-1.
1H-NMR (CDC13) 6: 1,12 (3H, s), 1,14 (3H, s), 1,56 (H, m), 1,67 (3H, s), 1,84 (3H, d), 1,90 (H, m), 2,17 (3H, s), 2,29 (3H, s), 2,73 (H, m), 3,73 (H, d), 4,08 (H, d), 4,15 20 (H, m), 4,20 (H, d), 4,77 (H, m), 4,79 (H, d), 4,91 - 5,04 (10H päällekkäin m), 5,25 (H, dd), 5,38 (H, dd), 5,54 -• 5,64 (2H, päällekkäin m), 5,99 (H, br. dd), 6,25 (H, s), . : 7,11 - 7,14 (2H, m), 7,24 - 7,64 (28H, päällekkäin m), .· \ 7,94 (2H, dd), 8,04 (2H, dd), 8,30 (H, d).
25 (c) 2' , 7-0-bis(fosfono-oksimetyyli)paklitakselinat- riumsuolan valmistus i t * «
; ; AcO Q
PhC0|H O \ s' / OCH2OPO(OH)2 ,2Na ' 30 Ph . 0"'"··( V. \
(HO)2OPOCH2Ö JL I
Phcioiö 4C 0 2', 7-0-bis( dibentsyylifosfono-oksimetyyli Jpaklitak-i 35 selinäyte (112 mg, 0,078 mmol) liuotettiin etyyliasetaat- xo3 111724 tiin (7 ml) ja hydrogenoitiln käyttäen 10-%:ista palladiumia puuhiilellä (50 mg) huoneenlämpötilassa, paineessa 60 psi (400 kPa), kaksi tuntia. Katalyytti poistettiin suodattamalla celiten yli. Celiitti huuhdeltiin etyyliase-5 taatilla (10 ml). Suodos käsiteltiin kiinteällä natrium-vetykarbonaatilla (20 mg, 3 ekvivalenttia) ja sitten liuotin haihdutettiin. Kuiva jäännös liuotettiin uudelleen 5 ml:aan vesi:asetoniseosta (4:1, v/v) ja puhdistettiin C-18-käänteisfaasipylväskromatografiällä (55 - 105 pm 10 C-18, Waters, 50 ml kuivaa C-18:ta, Φ = 3/4 tuumaa, vesi: asetoniseosta (4:1, v/v). Eluentti monitoroitiin analyyttisellä HPLC Jones C-18 -pylväällä (15 cm, 1 ml/minuutti, λ = 230 nm) asetonitriili:fosfaattipuskurissa pH 6 (50/50, v/v) lisäämällä Q12-ionipariseosta (Regis), Rt = 4,7 mi-15 nuuttia. Fraktiot, joissa oli otsikon mukaista yhdistettä, kombinoitiin, asetoni haihdutettiin vesisuihkuvakuumissa 20 eC:ssa ja liuos lyofilisoitiin. Otsikon mukainen yhdiste (44,2 mg) saatiin 58,8 %:n saannolla.
MS (FAB, matriisi NOBA/NaJ, KJ): [M+H]+, m/z 1118; [M+Na]+, 20 m/z 1140.
UV (MeCN): Amax = 192 nm, E(1 %/l cm) = 129,73; Amax = 230 nm, E(1 %/l cm) = 26,43.
: IR (KBr): 3430, 3066, 2956, 1724, 1658, 1604, 1582, 1520, 1486, 1452, 1374, 1316, 1256, 1152, 1110, 1070, 1026, 966, . 25 914, 802, 772, 710, 538 cm'1.
^-NMR (asetoni-d6/D20 ) 6 : 0,97 ( 3H, s), 1,02 (3H, s), 1,47 ; : (H, m), 1,54 (3H, s), 1,70 (H, m), 1,75 (3H, s), 1,85 (H, V : m), 2,11 (3H, s), 2,30 (3H, s), 2,88 (H, m), 3,64 (H, d), 4,03 (H, m), 4,06 (H, d), 4,16 (H, d), 4,74 (H, m), 4,86 : 30 (H, m), 5,11 (H, br. t), 5,22 (H, d), 5,42 (H, d), 5,90 (H, br. t), 6,21 (H, s), 7,06 (H, br. t), 7,32 - 7,69 (10H, päällekkäiset m), 7,80 (2H, d), 7,93 (2H, d).
•i » f i ί 104 1 117 2 4
Esimerkki 6
7-0-metyylitiometyylibakkatiini III
. Λ O OCHjSCH,
AcO li i 2 3 OBz
Liuokseen, jossa oli 2’-O-etyylioksikarbonyyli-7-O-10 metyylitiometyylipaklitakselia (esimerkin 3 (b) mukaista yhdistettä, 27 g, 27,4 mmol) 100 ml:ssa tetrahydrofuraania ja 500 ml:ssa metanolia, lisättiin vastajauhettua kalium-karbonaattia (2,7 g, 19 mmol). Liuosta sekoitettiin 30 minuuttia ja neutraloitiin IR-120 (ΙΓ) -hartsilla, suodatet-15 tiin ja väkevöitiin. Raaka suodos liuotettiin sitten 200 mitään dikloorimetaania ja sekoitettiin 24 tuntia tetrabu-tyyliammoniumboorihydridin (10 g) kanssa. Liuos laimennettiin diklorimetaanilla ja pestiin vedellä, kyllästetyllä natriumvetykarbonaattiliuoksella ja suolaliuoksella. Or-20 gaaninen osa kuivattiin sitten MgS04:lla ja väkevöitiin. Jäännös kromatografoitiin silikageelillä (1:1 heksaani/ etyyliasetaattiseoksella), jolloin saatiin 9,4 g otsikon , .· mukaista yhdistettä (53 %), jonka sulamispiste oli 269 eC.
, V, FABMS (ΝΟΒΑ) M+H laskettu C33H43SOn: 647, saatu: 647.
• : 25 IR (KBr) 3474, 1746, 1724, 1712, 1270, 1240, 1070 cm'1.
xH-NMR (CDC13, 300 MHz) 6: 8,08 (d, J = 7,1 Hz, 2H), 7,58 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,45 (t, J = 7,8 Hz, 2H), 6,55 (s, 1H), 4,94 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 4,83 (br q, J = 5,1 Hz, 1H), 4,66 (ABq, J = 14,7, 12,3 Hz, 2H), 4,30 (m, 2H), 4,13 30 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 3,91 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 2,79 (m, 1H), 2,27 (s, 3H), 2,25 (m, 2H), 2,19 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,10 (s, 4H), 1,81 (m, 1H), 1,72 (s, 3H), 1,61 (m, Y/ 2H), 1,16 (s, 3H), 1,03 (s, 3H).
: ‘ 13C-NMR (CDCI3, 75,5 Hz) 6: 202,3, 170,8, 169,3, 167,0, : 35 144,2, 132,6, 132,1, 130,1, 129,4, 128,6, 83,9, 80,9,
• I
105 111724 78.7, 75,7, 74,5, 73,9, 67,9, 57,6, 47,6, 42,7, 38,3, 26.7, 22,6, 21,0, 20,1, 15,2, 15,0, 10,8,
Esimerkki 7 31-N-debentsoyyli-3'-desfenyyli-3'-N-(t-butyyliok-5 sikarbonyyli)-3'-(2-furyyli)-2'-O-etyylioksikarbo- nyy1i-7-0-fosfono-oksimetyy1ipaklitakselitrietano-liamiinisuola (a) 3'-N-debentsoyyli-31-desfenyyli-3'-N-(t-butyy-lioksikarbonyyli ) -3' - ( 2-furyyli ) -7-O-metyylitiometyylipak-10 litakselin valmistus ficoP och2sch3 ^/^O^NH 0 HO = Ö/te VO OH OBz
Liuokseen, jossa oli HMDSrää (0,40 ml, 1,90 mmol) 15 mlrssa tetrahydrofuraania, lisättiin liuos, jossa oli 20 n-BuLi:a (0,75 ml, 2,5 M heksaanissa, 1,88 mmol) ja seosta sekoitettiin viisi minuuttia -55 °C:ssa. Tähän liuok-- .: seen lisättiin 7-MTM bakkatiini III (esimerkin 6 mukaista , ; tuotetta, 1,03 g, 1,59 mmol) 10 ml:ssa tetrahydrofuraania ja seosta sekoitettiin 10 minuuttia ennen kuin lisättiin . ! 25 10 ml liuosta, jossa oli (3R,4R)-1-(t-butyylioksikarbonyy- / li)-4-(2-furyyli)-3-(trietyylisilyylioksi)-2-atsetidinonia * * • *’ (883 mg, 2,40 mmol). Kylmähaude poistettiin ja korvattiin ' 0 °C:isella hauteella ja reaktioseosta sekoitettiin 30 mi nuuttia. Liuos laimennettiin etyyliasetaatilla ja pestiin 30 kyllästetyllä NH4Cl-liuoksella, kuivattiin MgS04:lla ja väkevöitiin. Jäännös kromatografoitiin silikageelillä [*. (2,5:1 heksaani/etyyliasetaattiseoksella), jolloin saatiin 1,5 g kytkentätuotetta, 3'-N-debentsoyyli-3 '-desfenyyli-; ’ 3' -N-( t-butyylioksikarbonyyli )-3' -(2-furyyli)-7-0-metyyli- : 35 tiometyyli-2'-O-trietyylisilyylipaklitakselia (93 %).
• I
10· 111724 FABMS (ΝΟΒΑ) M+Na laskettu C50H71NSSlO16: 1036, saatu: 1036. IR (filmi) 3446 (s), 1720, 1368, 1242, 1166, 1144, 1124, 1066 cm'1.
^-NMR (CDC13, 300 MHz) δ: 8,07 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 7,56 5 (m, 1H), 7,46 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 7,36 (m, 1H), 6,56 (s, 1H), 6,33 (m, 1H), 6,20 (m, 2H), 5,67 (d, J = 6,9Hz, 1H), 5,29 (br s, 2H), 4,94 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 4,75 (s, 1H), 4,65 (s, 2H), 4,28 (m, 2H), 4,16 (d, J = 8,1Hz, 1H), 3,89 (d, J = 6,9 Hz, 1H), 2,80 (m, 1H), 2,46 (s, 3H), 2,37 (m, 10 1H), 2,22 (m, 1H), 2,16 (s, 3H),2,10 (s, 3H), 2,04 (s, 3H), 1,84 (m, 1H), 1,74 (s,3H), 1,65 (m, 1H), 1,33 (s, 9H), 1,20 (s, 3H), 1,19 (s, 3H), 0,81 (t, J = 7,8 Hz, 9H), 0,47 (m, 6H).
13C-NMR (CDCI3, 75,5 Hz) 6: 202,0, 171,2, 170,3, 169,3, 15 167,1, 155,3, 152,0, 141,9, 141,0, 133,6, 132,9, 130,2, 129.2, 128,7, 110,7, 107,3, 84,0, 81,1, 80,2, 78,7, 76,1, 75,7, 74,7, 74,1, 72,4, 71,1, 57,4, 52,8, 47,1, 43,3, 35.2, 33,0, 28,1, 26,3, 22,9, 21,2, 21,0, 15,0, 14,5, 10,9, 6,5, 4,3, 20 Liuokseen, jossa oli edellä saatua 2’-trietyylisi- lyylieetteriä (330 mg, 0,32 mmol) 7 ml:ssa tetrahydrofu-. j raania, lisättiin tetrabutyyliammoniumfluoridia (0,35 ml, : 1,0 M tetrahydrofuraanissa, 0,35 mmol) ja seosta sekoitet- tiin 10 minuuttia. Liuos laimennettiin etyyliasetaatilla . . 25 ja pestiin suolaliuoksella, kuivattiin MgS04:lla ja väke- vöitiin ja jäännös kromatografoitiin silikageelillä (2:1 heksaani/etyyliasetaattiseoksella), jolloin saatiin 301 mg ’·* " otsikon mukaista yhdistettä (95 %).
FABMS (ΝΟΒΑ) M+H laskettu C45H58N016S: 900, saatu: 900.
: 30 IR (film) 3442, 1720, 1242, 1066, 1026 cm'1.
., : ^-NMR (CDCI3, 300 MHz) 6: 8,07 (d, J = 7,3 Hz, 2H), 7,57 (t, J = 7,3 Hz, 1H), 7,45 (t, J = 7,8 Hz, 2H), 7,38 (s, 1H), 6,53 (s, 1H), 6,34 (d, J = 3,2 Hz, 1H), 6,29 (d, J = : ’ 3,2 Hz, 1H), 6,17 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 5,65 (d, J = 6,9 : 35 Hz, 1H), 5,29 (m, 2H), 4,92 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 4,70 (m, 107 111724 1H), 4,64 (d, J = 4,6 Hz, 2H), 4,29 (m, 2H), 4,14 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 3,86 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 3,37 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 2,77 (m, 1H), 2,38 (s, 3H), 2,32 (m, 2H), 2,16 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,77 (m, 3H), 1,73 5 (s, 3H), 1,33 (s, 9H), 1,17 (s, 3H), 1,12 (s, 3H).
13C-NMR (CDC13, 75,5 Hz) 6: 202,0, 172,6, 170,3, 169,2, 167.0, 155,2, 151,3, 142,4, 140,4, 133,7, 133,2, 130,2, 129.1, 128,7, 110,7, 107,4, 83,9, 81,2, 80,5,78,6, 76,5, 76.1, 75,4, 74,6, 74,0, 72,5, 71,8, 57,4, 51,7, 47,2, 10 43,2, 35,2, 32,8, 28,1, 26,4, 22,6, 20,9, 15,2, 14,6, 10,9, 8,3.
(b) 3' -N-debentsoyyli-3' -desfenyyll-3' -N-(t-butyy-liokslkarbonyyli)-3’-(2-furyyli)-2'-O-etyylioksikarbonyy-li-7-0-metyylitiometyylipaklitakselin valmistus 15 A Λ 0 OCH.SCH,
AcO JJ m I 2 3
BocN O
20 HO Ξ ÖAc \^0 OC02Et OBz .: Liuokseen, jossa oli vaiheen (a) mukaista tuotetta , ; (864 mg, 0,96 mmol) 50 ml:ssa dikloorimetaania 0 eC:ssa, , ·’ lisättiin di-isopropyylietyyliamiinia (2,0 ml, 11,5 mmol) 25 ja etyyliklooriformiaattia (0,50 ml, 5,25 mmol) ja seosta sekoitettiin neljä tuntia. Liuos laimennettiin dikloorime-taanilla ja pestiin kyllästetyllä natriumvetykarbonaatti-'·' * liuoksella ja kuivattiin MgS04:lla ja väkevöitiin. Jäännös kromatografoitiin silikageelillä (1:1 heksaani/etyyliase-30 taattiseoksella), jolloin saatiin 884 mg otsikon mukaista , 2’-etyylikarbonaattia (95 %).
I·, FABMS (ΝΟΒΑ) M+H laskettu C48H62N018S:lie 972,3688, saatu: 972,3654.
·: IR (filmi) 1752, 1720, 1370, 1244, 1196, 1176, 1064 cm'1.
* * ·
• I
111724 1H-NMR (CDC13, 300 MHz) δ: 8,09 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 7,57 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,46 (t, J - 7,8 Hz, 2H), 7,38 (s, 1H), 6,55 (s, 1H), 6,35 (m, 1H), 6,27 (m, 1H), 6,22 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 5,67 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 5,51 (d, J = 5 9,9 Hz, 1H), 5,34 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 5,25 (d, J - 10,2
Hz, 1H), 4,95 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 4,65 (s, 2H), 4,30 (m, 2H), 4,22 (m, 2H), 3,88 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 2,81 (m, 1H), 2,41 (s, 3H), 2,36 - 2,21 (ra, 2H), 2,16 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 2,09 (s, 3H), 1,83 (m, 1H), 1,74 (s, 3H), 1,67 (s, 10 1H), 1,59 (s, 1H), 1,34 (s, 9H), 1,29 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,20 (s, 3H), 1,18 (s, 3H).
13C-NMR (CDCI3, 75,5 Hz) 6: 202,1, 169,9, 169,1, 167,6, 167,0, 154,0, 150,1, 142,6, 141,0, 133,6, 132,9, 130,2, 129.2, 128,7, 110,7, 107,5, 83,9, 81,1, 80,7, 78,7, 76,0, 15 75,7, 75,1, 74,7, 74,2, 71,8, 65,1, 57,4, 49,7, 47,1, 43.2, 35,0, 33,0, 28,1, 26,3, 22,6, 21,1, 20,9, 15,1, 14,5, 14,1, 10,9, (c) 3'-N-debentsoyyli-3’-desfenyyli-3'-N-(t-butyy-lioksikarbonyyli)-3'-(2-furyyli)-2'-O-etyylioksikarbonyy-20 li-7-0-dibentsyylifosfono-oksimetyylipaklitakselin valmistus O 0CH20P(0)(0CH2Ph)2
BocN O
· ·: H° ^öAc :· ·; V-O 0C02Et OBz : Liuokseen, jossa oli vaiheen (b) mukaista tuotetta (230 mg, 0,236 mmol) 10 ml:ssa vedetöntä tetrahydrofuraa-30 nia, lisättiin 300 mg 4 A:n molekyyliseuloja, dibentsyyli-; fosfaattia (270 mg, 0,98 mmol) ja uudelleenkiteytettyä . NlS:ää (62 mg, 0,28 mmol). Tähän liuokseen lisättiin ho- ’ peatrifluorimetaanisulfonaattia (45 mg, 0,17 mmol) ja *·;’ liuosta sekoitettiin kolme tuntia. Liuos suodatettiin ce- : ‘ : 35 liten läpi ja laimennettiin etyyliasetaatilla ja pestiin 109 111724 10-%:isella Na2S2Oe-liuoksella, kyllästetyllä natriumve-tykarbonaattiliuoksella ja suolaliuoksella, kuivattiin MgS04:lla ja väkevöitiin. Jäännös kromatografoitiin sili-kageelillä (15-%:inen asetonitriili/kloroformiseos), jol-5 loin saatiin 219 mg otsikon mukaista dibentsyylifosfaattia (77 %).
FABMS (ΝΟΒΑ) M+Na laskettu C61H72NP022Na:lie 1224, saatu: 1224.
IR (filmi) 3422 (br), 1750, 1722, 1370, 1244, 1160, 1036, 10 1016, 1000, 976, 944 cm-1.
XH-NMR (CDC13, 300 MHz) 6: 8,08 (d, J = 6,9 Hz, 2H), 7,58 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 7,46 (t, J = 7,8 Hz, 2H), 7,39 (s, 1H), 7,31 (m, 10), 6,35 (m, 2H), 6,28 (s, 1H), 6,21 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 5,64 (d, J = 6,9 Hz, 1H), 5,50 (d, J = 15 10,5 Hz, 1H), 5,39 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 5,32 (d, J = 2,4
Hz, 1H), 5,25 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 5,01 (dd, J = 8,1, 6,3 Hz, 5H), 4,86 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 4,29 - 4,09 (m, 4H), 3,85 (d, J = 6,9 Hz, 1H), 2,77 (m, 1H), 2,40 (s, 3H),2,30 (m, 2H), 2,16 (s, 3H), 1,99 (s, 3H), 1,94 (m,lH), 1,70 (s, 20 3H), 1,67 (s, 1H), 1,54 (s, 1H), l,34(s, 9H), 1,28 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,20 (s, 3H), 1,17 (s, 3H).
..: 13C-NMR (CDCI3, 75,5 Hz) 6: 201,8, 169,9, 169,2, 167,7, ; 167,0, 155,1, 154,0, 150,0, 142,74, 141,1, 133,7, 132,9, .·’.·! 130,2, 129,1, 128,7, 128,5, 128,4, 128,0, 110,7, 107,6, 25 93,8, 84,1, 81,6, 80,8, 80,7, 78,8, 76,3, 75,1, 74,6, ::v 71,8, 69,3, 69,2, 65,1, 57,0, 49,7, 46,7, 43,2, 35,0, • t · 28,1, 26,4, 22,6, 21,2, 20,8, 14,6, 14,1, 10,5.
* 1 I I » < t 1 » ♦ no 111724 (d) 3'-N-debentsoyyli-3’-desfenyyli-3'-N-(t-butyy-lioksikarbonyyli)-3'-(2-furyyli)-2’-O-etyylioksikarbonyy-li-7-O-fosfono-oksimetyylipaklitakselitrietanoliamiinisuo-lan valmistus 5 ACO 0 OCH2OP(°)(OH)2
BocN O
/S‘aaf^i^°X' ÖAc
0CO,Et OBZ
10 2
Liuokseen, jossa oli vaiheen (c) mukaista tuotetta (311 mg, 0,259 mmol) 25 ml:ssa etyyliasetaattia, lisättiin 60 mg palladiumia hiilellä (10-%:ista) ja liuosta sekoitettiin 30 minuuttia vetyatmosfäärissä. Katalyytti pois-15 tettiin suodattamalla celiten läpi ja suodos väkevöitiin vakuumissa. Jäännös liuotettiin 3 ml:aan etyyliasetaattia ja trietanoliamiinia lisättiin (2,3 ml, 0,1 M etyyliasetaatissa, 0,23 mmol). Liuos väkevöitiin ja jäännös kroma-tografoitiin käyttäen C18 (40-%:ista asetonitriili/vesi-20 seosta) ja lyofilisoitiin, jolloin saatiin 205 mg fosfaat-titrietanoliamiinisuolaa (67 %).
FABMS (ΝΟΒΑ) M+Na laskettu C47H60HP022Na:lie 1044, saatu:
A
1044.
; IR (filmi) 3432 (br), 1752, 1722, 1372, 1246, 1158, 1108, .v:‘ 25 1096, 1070, 1002 cm’1.
1H-NMR (asetoni-d6/D20, 300 MHz) 6: 8,09 (d, J = 7,2 Hz, i 2H), 7,62 (m, 2H), 7,52 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 6,48 (d, J = V : 3,3 Hz, 1H), 6,42 (m, 2H), 6,16 (t, J = 8,7 Hz, 1H), 5,65 (d, J = 6,9 Hz, 1H), 5,46 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 5,30 (d, :11: 30 J = 3,6 Hz, 1H), 5,17 (br s, 1H), 5,01 (br d, J = 9,0 Hz, 1H), 4,19 (br s, 1H), 4,18 (m, 5H), 3,95 (m, 6H), 3,87 (d, J = 6,9 Hz, 1H), 3,68 (s, 7H), 3,50 (br t, J = 4,8 Hz, 6H), 2,95 (m, 1H), 2,44 (s, 3H), 2,41 (m, 2H), 2,16 (s, ’·;>1 3H), 1,9 (s, 3H), 1,94 (m, 1H), 1,68 (s, 3H), 1,34 (s, f\: 35 9H), 1,24 (t, J = 6,9 Hz, 3H), 1,17 (s, 6H).
m 111724
Esimerkki 8 3'-N-debentsoyyli-3'-desfenyyli-3'-N-(t-butyyliok-sikarbonyyli) -3' - (2-tienyyli ) -2 ’ -O-etyylioksikar-bonyyli-7-0-fosfono-oksimetyylipaklitakselitrieta-5 noliamiinisuola (a) 3'-H-debentsoyyli-3 *-desfenyyli-3'-N-(t-butyy-lioksikarbonyyli) -3' - (2-tienyyli) -7-0-metyylitiometyyli-paklitakselin valmistus O OCHjSCH,
AcO II a I 2 3
10 h X
BocN 0 ' \ HO i 0Ac \^S ÖH OBz 15 Liuokseen, jossa oli HMDS:ää (0,5 ml, 2,4 mmol) 18 ml:ssa tetrahydrofuraania -55 °C:ssa, lisättiin n-BuLi:a (0,85 ml, 2,5 M heksaanissa, 2,1 mmol). Kymmenen minuutin kuluttua 7-MTM bakkatiini III (1,15 g, 1,78 mmol) 18 mlrssa tetrahydrofuraania lisättiin tipoittain ja seosta 20 sekoitettiin kylmässä 10 minuuttia. (±)-cis-l-(t-butyyli-oksikarbonyyli )-4-( 2-tienyyli )-3-( trietyylisilyylioksi) -2-atsetidinonia (2,80 g, 7,3 mmol) 18 ml:ssa tetrahydrofu-,· ; raania lisättiin ja kylmähaude sai hitaasti lämmetä 0 °C:n lämpötilaan 30 minuutissa. Liuos laimennettiin etyyliase-; 25 taatilla ja pestiin kyllästetyllä NH4Cl-liuoksella, kuivat- * tiin MgS04:lla ja väkevöitiin. Jäännös kromatografoltiin silikageelillä (5:1 heksaani/etyyliasetaattiseoksella), v : jolloin saatiin 1,87 g takaisin saatua laktaamia; (3:1 heksaani/etyyliasetaattiseoksella), jolloin saatiin 1,44 g j * : 30 kytkentätuotetta 3'-N-debentsoyyli-3'-desfenyyli-3'-N-(t- : : butyylioksikarbonyyli )-3 ' -(2-tienyyli)-7-O-metyylitiome- . tyyli-2'-O-trietyylisilyylipaklitakselia (78 %).
FABMS (ΝΟΒΑ) M+Na laskettu C51H71N015S2SiNa:lie 1052, saatu: » t 1052.
112 111724 IR (filmi) 3442 (br), 1720, 1490, 1368, 1270, 1242, 1162, 1110, 1064, 1024, 984, 754 cm'1.
XH-NMR (CDC13, 300 MHz) 6: 8,09 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 7,57 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,47 (t, J = 7,8 Hz, 2H), 7,22 (m, 5 1H), 6,95 (m, 2H), 6,55 (s, 1H), 6,21 (t, J = 9,3 Hz, 1H), 5,68 (d, J = 6,9 Hz, 1H), 5,49 (br d, 1H), 5,39 (br d, J = 9,6 Hz, 1H), 4,94 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 4,65 (s, 2H), 4,57 (s, 1H), 4,28 (m, 2H), 4,17 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 3,88 (d, J = 6,9 Hz, 1H), 2,80 (m, 1H), 2,46 (s, 3H), 2,37 (m, 1H), 10 2,20 (m, 1H), 2,17 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 1,84 (m, 1H), 1,74 (s, 3H), 1,68 (s, 1H), 1,62 (s, 1H), 1,31 (s, 9H), 1,20 (s, 6H), 0,84 (t, J = 7,8 Hz, 9H), 0,50 (m, 6H).
13C-NMR (CDCI3, 75,5 Hz) 6: 201,9, 171,1, 170,7, 170,1, 15 169,3, 167,0, 155,1, 142,8, 140,9, 133,6, 132,9, 130,2, 129,2, 128,7, 126,9, 124,6, 83,9, 81,2, 80,1, 78,8, 77,4, 76,0, 75,7, 75,2, 74,8, 74,1, 71,3, 57,4, 53,8, 47,0, 43.3, 35,3, 33,3, 28,1, 26,3, 23,0, 21,3, 20,9, 14,9, 14.4, 10,9, 6,6, 4,5.
20 Liuokseen, jossa oli edellä saatua 2'-trietyylisi- lyylieetteriä (1,41 g, 1,37 mmol) 14 ml:ssa tetrahydrofu-raania, lisättiin tetrabutyyliammoniumfluoridia (1,4 ml, ,·, : 1,0 M tetrahydrofuraanissa, 1,40 mmol). Liuosta sekoitet tiin 30 minuuttia, laimennettiin etyyliasetaatilla ja pes-i 25 tiin suolaliuoksella, kuivattiin MgS04:lla ja väkevöitiin.
;; Jäännös kromatografoitiin silikageelillä (1:1 heksaani/ ' ‘ etyyliasetaattiseoksella), jolloin saatiin 1,16 g otsikon ‘ mukaista yhdistettä (92 %).
FABMS (ΝΟΒΑ) M+Na laskettu C45H57N015S2Na 938, saatu: 938.
; ·' 30 IR (filmi) 3440 (br), 1720, 1368, 1242, 1168, 1106, 1066, : 710 cm'1.
1H-NMR (CDCI3, 300 MHz) 6: 8,08 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 7,59 ;/ (m, 1H), 7,47 (t, J = 7,8 Hz, 2H), 7,24 (m, 1H), 7,07 (m, 1H), 6,99 (m, 1H), 6,53 (s, 1H), 6,18 (t, J = 8,1 Hz, 1H), * ' 35 5,66 (d, J = 6,9 Hz, 1H), 5,49 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 5,32 113 111724 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 4,92 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 4,63 (m, 3H), 4,28 (m, 2H), 4,15 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 3,86 (d, J - 6,9 Hz, 1H), 2,80 (m, 1H), 3,47 (d, J - 5,4 Hz, 1H), 2,78 (m, 1H), 2,36 (s, 3H), 2,34 (, 2H), 2,17 (S, 3H), 2,10 (s, 5 3H), 2,00 (s, 3H), 1,83 (m, 1H), 1,74 (s, 3H), 1,72 (s, 1H), 1,61 (s, 1H), 1,33 (s, 9H), 1,21 (s, 3H), 1,18 (s, 3H).
13C-NMR (CDC13, 75,5 Hz) 6: 201,9, 172,3, 170,3, 169,2, 167,0, 154,0, 141,5, 140,2, 133,7, 133,3, 130,2, 129,1, 10 128,7, 127,0, 125,4, 125,4, 83,9, 81,3, 80,4, 78,6, 76,1, 75,4, 74,5, 74,0, 73,4, 72,5, 57,5, 52,8, 47,2, 43,2, 35,3, 32,9, 28,2, 26,4, 22,6, 20,9, 15,1, 14,7, 10,8.
(b) 3'-N-debentsoyyli-3'-desfenyyli-3'-N-(t-butyy-lioksikarbonyyli) -3 · - ( 2-tienyyli ) -2 ' -O-etyylioksikarbonyy-15 li-7-O-metyylitiometyylipaklitakselin valmistus ooch^ch,
BocN 0 II
20 HO ^ ÖAc \^S OC02Et ÖBz
Liuokseen, jossa oli vaiheen (a) mukaista tuotetta , , (621 mg, 0,677 mmol) 35 ml:ssa dikloorimetaania 0 ®C:ssa, ; lisättiin di-isopropyylietyyliamiinia (1,20 ml, 6,89 mmol)
< I
/ 25 ja etyyliklooriformiaattia (0,35 ml, 3,7 mmol) ja seosta * · *’· < sekoitettiin tunnin ajan. Kylmähaude poistettiin ja liuos- ta sekoitettiin kaksi tuntia ja laimennettiin dikloorime- taanilla ja pestiin kyllästetyllä natriumvetykarbonaatti- liuoksella ja kuivattiin MgS04:lla ja väkevöitiin. Jäännös 30 kromatografoitiin silikageelillä (1:1 heksaani/etyyliase- taattiseoksella), jolloin saatiin 528 mg otsikon mukaista yhdistettä (79 %).
FABMS (ΝΟΒΑ) M+Na laskettu C48H61N017S2Na 1010, saatu: 1010. IR (filmi) 3510, 3440, 1752, 1720, 1370, 1244, 1198, 1170, i : 35 1026, 988, 756 cm’1.
114 111724 "H-NMR (CDCI3, 300 MHz) δ: 8,09 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 7,58 (m, 1H), 7,48 (t, J = 7,8 Hz, 2H), 7,26 (m, 1H), 6,99 (,2H), 6,55 (s, 1H), 6,23 (t, J = 9,0 Hz, 1H), 5,68 (d, J = 6,9 Hz, 2H), 5,33 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 5,25 (d, J = 5 2,4Hz, 1H), 4,94 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 4,65 (s, 2H), 4,33 - 4,08 (m, 5H), 3,88 (d, J = 6,9 Hz, 1H), 2,80 (m, 1H), 2,40 (s, 3H), 2,40 - 2,20 (m, 2H), 2,16 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 2,07 (s, 3H), 1,83 (m, 1H), 1,74 (s, 3H), 1,69 (s, 1H), 1,60 (s, 1H), 1,33 (s, 9H), 1,31 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,20 10 (s, 3H), 1,19 (s, 3H).
13C-NMR (CDCI3, 75,5 Hz) 6: 202,0, 169,7, 169,1, 167,5, 167.1, 154,0, 140,9, 133,6, 132,9, 130,2, 129,2, 128,7, 127.2, 125,4, 125,3, 83,9, 81,2, 80,6, 78,8, 76,9, 76,0, 75,7, 74,7, 74,2, 72,8, 72,0, 65,2, 57,4, 50,9, 47,1, 15 43,3, 35,1, 33,0, 28,1, 26,4, 22,7, 21,2,20,9, 15,1, 14,5, 14,1, 10,9.
(c) 31-N-debentsoyyli-31-desfenyyli-3'-N-(t-butyy-lioksikarbonyyli) -3' - ( 2-tienyyli) -2 1 -O-etyylioksikarbonyy-li-7-0-dlbentsyylifosfono-oksimetyylipaklitakselin valmis-20 tus O OCH2OP(0)(OCH2Ph)2
; ,· BocN O
25 HO Ξ ÖAc f, : 0C02Et OBz • Liuokseen, jossa oli vaiheen (b) mukaista tuotetta (516 mg, 0,522 mmol) 15 ml:ssa vedetöntä tetrahydrofuraa-nia, lisättiin 530 mg 4 A:n molekyyliseuloja, dibentsyy- ; ; 30 lifosfaattia (576 mg, 2,09 mmol) ja uudelleenkiteytettyä NIS:ää (136 mg, 0,604 mmol). Tähän liuokseen lisättiin hopeatrifluorimetaanisulfonaattia (50 mg, 0,194 mmol) ja liuosta sekoitettiin tunnin ajan. Liuos suodatettiin celi- • i ;1 ten läpi ja laimennettiin etyyliasetaatilla ja pestiin V 35 10-%:isella Na2S208-liuoksella, kyllästetyllä natriumve- us 111724 tykarbonaattiliuoksella ja suolaliuoksella, kuivattiin MgS04:lla ja väkevöitiin. Jäännös kromatografoitiin silika-geelillä (15-%:inen asetonitriili/kloroformiseos), jolloin saatiin 535 mg otsikon mukaista yhdistettä (84 %).
5 FABMS (ΝΟΒΑ) M+Na laskettu C61H72N021PSNa:lie 1240, saatu: 1240.
IR (filmi) 3424 (br), 1750, 1722, 1370, 1244, 1016, 1000, 944 cm-1.
1H-NMR (CDC13, 300 MHz) 6: 8,08 (d, J - 7,0 Hz, 2H), 7,58 10 (m, 1H), 7,47 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 7,28 (m, 11H), 6,99 (m, 2H), 6,33 (s, 1H), 6,22 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 5,66 (m, 2H), 5,39 (t, J = 6,6 Hz, 1H), 5,34 (d, J = 12 Hz, 1H), 5,22 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 5,01 (dd, J = 8,1, 6,0 Hz, 5H), 4,86 (d, J - 7,8 Hz, 1H), 4,29 - 4,08 (m, 5H), 3,85 (d, J -15 6,6 Hz, 1H), 2,76 (m, 1H), 2,39 (s, 3H), 2,35 - 2,18 (m, 2H), 2,16 (s, 3H), 1,97 (s, 4H), 1,69 (s, 4H), 1,33 (s, 9H), 1,30 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,20 (s, 3H), 1,17 (s, 3H). 13C-NMR (CDCIj, 75,5 Hz) 6: 197,4, 165,4, 164,9, 163,3, 162,7, 150,6, 149,7, 136,7, 136,0, 129,4, 128,6, 125,9, 20 124,7, 124,3, 124,2, 124,1, 123,6, 122,9, 121,1, 121,0, 89,4, 79,8, 77,3, 76,5, 76,3, 74,4, 72,0, 70,7, 70,3, , 67,7, 64,9, 64,9, 60,9, 52,7, 46,5, 42,3, 38,9, 30,7, .· ; 23,8, 22,0, 18,3, 17,0, 16,4, 10,3, 9,8, 6,2.
(d) 3'-N-debentsoyyli-3'-desfenyyli-3'-N-(t-butyy-25 lioksikarbonyyli)-3,-(2-tienyyli)-2,-0-etyylioksikarbonyy- li-7-0-f osfono-oksimetyylipaklitakselitrietanoliamiinisuo-lan valmistus
AcO »° OCh20P(0)(OH)j
• 30 H
Boc- ^ HO ^ ÖAc 0C02Et ÖBz 116 111724
Liuokseen, jossa oli vaiheen (c) mukaista tuotetta (512 mg, 0,42 mmol) 30 ml:ssa etyyliasetaattia, lisättiin 53 mg palladiumia hiilellä (10-%:ista) ja liuosta sekoitettiin vetyatmosfäärissä kolme tuntia. Katalyytti pois-5 tettiin suodattamalla celiten läpi ja suodos väkevöitiin vakuumissa. Jäännös liuotettiin 2 ml:aan etyyliasetaattia ja trietanoliamiinia lisättiin (4,0 ml, 0,1 M etyyliasetaatissa, 0,40 mmol). Liuos väkevöitiin ja jäännös kroma-tografoitiin käyttäen C18 (40-%:ista asetonitriili/vesi-10 seosta) ja lyofilisoitiin, jolloin saatiin 280 mg fosfaat-titrietanoliamiinisuolaa (56 %). HPLC-analyysin perusteella suolan puhtaus oli 96 %.
FABMS (ΝΟΒΑ) M+Na laskettu C47H60NO21PS: lie 1060, saatu: 1060.
15 IR (KBr) 3422 (br), 1750, 1720, 1372, 1246, 1162, 1096, 1068, 1000 cm'1.
1H-NMR (asetoni-d6/D20, 300 MHz) 6: 8,06 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 7,63 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 7,52 (t, J = 7,8 Hz, 2H), 7,38 (d, J = 4,2 Hz, 1H), 7,16 (d, J = 3,5 Hz, 1H), 7,01 20 (dd, J = 5,1, 3,6 Hz, 1H), 6,37 (s, 1H), 6,11 (t, J = 8,7 Hz, 1H), 5,61 (d, J = 6,9 Hz, 1H), 5,60 (s, 1H), 5,26 (d, J = 4,5 Hz, 1H), 5,14 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 5,00 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 4,86 (dd, J = 12,0, 6,3 Hz, 1H), 4,17 (m, 5H), 4,00 (s, 7H), 3,92 (t, J = 4,8 Hz, 6H), 3,84 (d, J = 25 6,9 Hz, 1H), 3,48 (t, J = 5,4 Hz, 6H), 2,94 (m, 1H), 2,42 (s, 3H), 2,36 (m, 1H), 2,27 (m, 1H), 2,15 (s, 3H), 1,95 (s, 4H), 1,66 (s, 3H), 1,30 (s, 9H), 1,23 (t, J = 7,2 Hz, V 1 3H), 1,14 (s, 6H).
117 111724
Esimerkki 9 10-desasetyyli-3'-N-desbentsoyyli-31-N-(t-butyyli-oksikarbonyyli) -10-0-( fosfono-oksimetyyli )paklitak-seli 5 (a) 10-desasetyyli-10-0-bentsyylioksikarbonyyli-7- O-trietyylisilyylibakkatiini III:n valmistus CBZO q
\ y}—9 OTES
10 HQll"\ /\ ÖBz ÖAc
Kuivaan pulloon, jossa argonatmosfäärissä oli 7-0-trietyylisilyyli-10-desasetyyli bakkatiini III:a (2,093 g, 15 3,177 mmol), lisättiin kuivaa tetrahydrofuraania (30 ml) ja liuos jäähdytettiin -70 eC:seen. Tähän lisättiin 1,6 M n-butyylilitiumia (2,38 ml, 3,81 mmol) tipoittain. Kun seosta oli sekoitettu 15 minuuttia, bentsyylikloorifor-miaattia (0,91 ml, 6,35 mmol) lisättiin tipoittain. Syn-20 tynyttä seosta sekoitettiin kolme tuntia lämmittäen sitä vähitellen huoneenlämpötilaan. Reaktio lopetettiin lisää-mällä 25 ml kyllästettyä NH4C1-liuosta, se pestiin suola-j liuoksella, ja kuivattiin MgS04:11a. Flashkromatografoimal- la silikageelillä (käyttäen 30 - 45-%:ista etyyliasetaat-; ·( 25 ti/heksaaniseosta) saatiin 2,24 g (89 %) otsikon mukaista !!',* yhdistettä valkoisena vaahtona.
1H-NMR (300 MHz, CDC13) 6: 8,10 (d, J - 8,0, 2H); 7,6 -: 7,58 (m, 1H) 7,47 (t, J = 8,0, 2H); 7,41 - 7,26 (m, 5H); 6.29 (s, 1H); 5,61 (d, J = 7,0, 1H); 5,20 (q, J = 12,2, 30 2H);4,96 (d, J = 9,0, 1H); 4,87 - 4,84 (m, 1H); 4,48 (dd, J = 6,7, J = 10,4, 1H); 4,30 (d, J = 8,5, 1H); 4,14 (d, J - 8,5, 1H); 3,84 (d, J = 7,0, 1H); 2,58 - 2,48 (m, 1H); 2.29 (m, 4H); 2 20 (s, 3H); 2,03 (d, J - 5,0, 1H); 1,92 - 1,83 (m, 1H); 1,68 (s, 3H); 1,17 (s, 3H); 1,04 (s, 3H); : 35 0,91 (t, J = 7,5, 9H); 0,57 (q, J = 7,4, 6H).
ne 111724 (b) 10-desasetyyli-10-0-bentsyylioksikarbonyyli-3 ’ -N-debentsoyyli-3'-N-(t-butyylioksikarbonyyli)-2',7-bis-0-trietyy1isilyylipaklitakselin valmistus 5 >7njLH . cbzo. o
X Ξ n OTES
Phr^ 0-( / S
TESÖ SvAJ
HO -- }Co ÖBz ÖAc 10
Kuivaan pulloon jossa oli vaiheen (a) mukaista tuotetta (3,50 g, 4,42 mmol), lisättiin pieni määrä tolueenia ja liuos väkevöitiin sitten vakuumissa. Tämä pullo laitettiin argonatmosfääriin ja 100 ml kuivaa tetrahydrofuraania 15 lisättiin. Pullo jäähdytettiin -70 °C:seen ja 1,0 M li-tiumheksametyylidisilatsidia (6,19 ml, 6,19 mmol) lisättiin tipoittain. Kun seosta oli sekoitettu 20 minuuttia, liuos, jossa oli (3R,4S)-1-(t-butyylioksikarbonyyli)-4-fe-nyyli-3-trietyylisilyylioksi-2-atsetidinonia (2,58 g, 7,07 20 mmol) 10 mlrssa kuivaa tetrahydrofuraania, lisättiin tipoittain. Reaktioseosta sekoitettiin 3,5 tuntia ja se läm-mitettiin vähitellen huoneenlämpötilaan. Reaktio lopetet-. : tiin sitten lisäämällä 70 ml kyllästetty NH4Cl-liuosta, se .pestiin suolaliuoksella ja kuivattiin MgS04:lla. Flashkro-25 matografoimalla (silikageeli, 5 - 15-%:ista etyyliasetaat-ti/heksaaniseosta) saatiin 5,12 g (99 %, ) otsikon mukaista * yhdistettä valkoisena vaahtona.
"H-NMR (300 MHz, CDC13) 6: 8,11 (d, J = 8,0, 2H); 7,60 - 7,58 (m, 1H); 7,48 (t, J = 8,0, 2H); 7,24 - 7,26 (m, 10H); 30 6,32 - 6,26 (m, 2H); 5,69 (d, J = 7,0, 1H); 5,47 (bd, J = 9,7, 1H); 5,31 - 5,10 (m, 3H); 4,94 (d, J = 8,5, 1H); 4,56 (s, 1H); 4,46 (dd, J = 6,9, J = 10,6, 1H)? 4,31 (d, J = 8,3, 1H); 4,17 (d, J = 8,3, 1H); 3,81 (d, J = 7,0, 1H); ;·’ 2,53 (s, 3H); 2,48-2,33 (m, 1H); 2,22 - 2,17 (m, 1H); 2,09 | 35 (s, 3H); 1,95 - 1,86 (m, 1H); 1,70 (s, 3H); 1,65 (s, 1H); 119 111724 1,52 (s, 1H); 1,30 (s, 9H); 1,26 - 1,19 (m, 6H); 0,94 -0,87 (m. 9H); 0,80 - 0,75 (m, 9H); 0,61 - 0,53 (m, 6H); 0,48 - 0,30 (m, 6H).
(c) 10-desasetyyli-3' -H-debentsoyyli-3' -N-(t-butyy-5 lioksikarbonyyli)-7-0-trietyylisilyylipaklitakselin val mistus CBZO n
/ ° nh o \ P
7 II \ Af . OTES
10 p^o,Q( y< HÖ ÖBz ÖAc
Valheessa (b) saatua tuotetta (5,12 g, 4,40 mmol) 15 liuotettiin 100 ml:aan etyyliasetaattia, siirrettiin Parr- pulloon ja laitettiin argonpatjan alle. Tähän lisättiin 10-%:ista palladiumia hiilellä (2,4 g) ja reaktioseos laitettiin Parr-hydrogenointilaitteeseen paineessa 55 psi (380 kPa) kahdeksaksi tunniksi. Reaktioseos suodatettiin 20 celite-kerroksen läpi ja väkevöitiin. Flashkromatografoi-malla (silikageeli, 15 - 20-%:ista etyyliasetaatti/heksaa-niseosta) saatiin 3,24 g (79 %) otsikon mukaista yhdistet-, , ; tä valkoisena vaahtona. Vaiheen (b) mukaisen tuotteen 2'- / trietyylisilyyliryhmän hydrolysointi johtui Parr-laitteis- 25 tossa olevista happamista jäännöksistä.
::v 1H-NMR (300 MHz, CDC13) 6: 8,10 (d,J = 8,0, 2H); 7,63 - 7,58 (m, 1H); 7,49 (d, J = 8,0, 2H); 7,39 - 7,26 (m, 5H); :·: : 6,27 - 6,17(m, 1H); 5,64 (d, J = 7,2); 5,42 (d, J = 9,4, 1H); 5,28 - 5,25 (m, 1H); 5,12 (s, 1H); 4,92 (d, J = 8,6, j’·.’·· 30 1H); 4,62 (bs, 1H); 4,38 - 4,28 (m, 3H); 4,17 (d, J = 8,5, 1H); 3,85 (d, J = 6,7, 1H); 3,36 (d, J = 5,3, 1H); 2,49 -; 2,40 (m, 1H); 2,36 (s, 3H); 2,25 (bd, J = 8,7, 2H); 1,99 - 1,91 (m, 1H); 1,85 (s, 3H); 1,74 (s, 3H); 1,69 (s, 1H), 1,67 (s, 1H); 1,35 (s, 9H); 1,22 (s, 3H); 1,11 (s, 3H); • 35 0,93 (t, J = 7,5 9H); 0,61 - 0,49 (m, 6H).
χΜ 111724 (d) 10-desasetyyli-2 ’ -O-bentsyylioksikarbonyyli-31 -N-debentsoyyli-31 -N- (t-butyylioksikarbonyyli) -7-0-trietyy-lisilyylipaklitakselin valmistus 5 >4Λ<Η0 χ H5°
ÄA >K>WOTES
Ph V O-../ V CBZÖ ÖBz ÖAc
Pulloon, jossa oli vaiheen (c) mukaista tuotetta (3,24 g, 3,51 mmol), lisättiin 30 ml kuivaa dikloorirae-taania. Pullo laitettiin argonin alle ja jäähdytettiin 0 "C:seen. N,N-di-isopropyylietyyliamiinia (1,22 ml, 15 7,02 mmol) lisättiin reaktioseokseen sekä bentsyylikloo- riformiaattia (1,00 ml, 7,02 mmol) tipoittain. Viidentoista minuutin kuluttua jäähdytyshaude poistettiin ja reaktiota sekoitettiin huoneenlämpötilassa seitsemän tuntia. Reaktio lopetettiin sitten lisäämällä 30 ml kyllästetty 20 NH4Cl-liuosta, se pestiin suolaliuoksella ja kuivattiin MgS04:lla. Flashkromatografoimalla (silikageeli, 7 , 20-%:ista etyyliasetaatti/heksaaniseosta) saatiin 3,24 g t . (89 %) otsikon mukaista yhdistettä valkoisena kiintoai neena .
25 1H-NMR (300 MHz, CDC13) 6: 8,10 (d, J = 8,0, 2H); 7,62 -;;V 7,57 (m, 1H); 7,48 (t, J = 8,0, 2H); 7,40 - 7,26 (m, 10H); 6,33 - 6,27 (m, 1H? 5,66 (d, J = 7,0, 1H); 5,49 - 5,42 (m, V ; 2H); 5,31 (s, 1H); 5,22 - 5,13 (m, 3H); 4,93 (d, J = 9,4, 1H); 4,38 (dd, J = 6,5, J = 10,7, 1H); 4,34 - 4,28 (m, ; 30 2H); 4,18 (d J = 8,3, 1H); 3,90 (d, J = 6,7, 1H); 2,52 - 2,30 (m, 4H); 2,24 - 2,20 (m, 1H); 1,97 - 1,87 (m, 3H); 1,74 (s, 3H); 1,59 (s, 3H); 1,32 (s, 9H); 1,26, (s, 3H); 1,11 (s, 3H); 0,96 - 0,88 (m, 9H); 0,61 - 0,48 (m, 6H).
121 111724 (e) 10-desasetyyli-2' -O-bentsyylioksikarbonyyli-3' -N-debentsoyyli-3'-N-(t-butyylioksikarbonyyli)-10-0-(di-bentsyylifosfono-oksimetyyli) -7-0-trietyylisilyylipakli-takselin valmistus 5
BnO% O
. O BnO~p? ΧΛ,. ° s? _
PhY O'·./ V f\
10 CBZÖ J
H0 f )Co ÖBz ÖAc
Vaiheen (d) mukaista tuotetta liuotettiin seokseen, jossa oli 13,5 ml (54 %) DMSOita, 8,75 ml (35 %) etikka-15 happoanhydridiä ja 2,75 ml (11 %) jääetikkaa ja laitettiin argonatmosfäärin alle. Reaktioseosta sekoitettiin 56 tuntia, minkä jälkeen se laimennettiin etyyliasetaatilla 60 ml:ksi. Liuos pestiin kyllästetyllä natriumvetykarbonaat-tiliuoksella, kunnes se oli neutraali pH-paperilla mitat-20 tuna, ja pestiin sitten suolaliuoksella. Orgaaninen osa kuivattiin MgS04:lla ja väkevöitiin. Flashkromatografoimalla : käyttäen 15 - 20-%:ista etyyliasetaatti/heksaaniseosta ; saatiin 3,12 g raakaa valkoista vaahtoa, jossa oli haluttu tiometyyliasetaalituote (so. 10-desasetyyli-2'-0-bentsyy-/ 25 lioksikarbonyyli-3'-N-debentsoyyli-3'-N-(t-butyylioksikar- ;; * · bonyyli) -10-0- (metyylitiometyyli) -7-0-trietyylisilyylipak- * * · : ·’ litakseli), jonka osuus oli 70 % NMR-analyysin perusteel- • ’ ’’ la.
Edellä mainittu raaka seos (3,12 g) liuotettiin 30 sitten 1,2-dikloorietaaniin (61 ml) ja laitettiin argon-: : patjan alle. 4 A:n jauhettuja molekyyliseuloja (3,12 g) lisättiin ja syntynyttä heterogeenista seosta sekoitettiin ,,, voimakkaasti. Tähän lisättiin liuos, jossa oli uudelleen- kiteytettyä N-jodisukkinimidia (0,830 g, 3,69 mmol) ja 35 dibentsyylifosfaattia (1,027 g, 3,69 mmol) kuivassa tetra- 122 111724 hydrofuraanissa (46 ml) injektioneulan avulla. Syntynyttä seosta sekoitettiin viisi tuntia, suodatettiin celite-ker-roksen läpi, ja laimennettiin 250 mlrksi etyyliasetaatilla. Se pestiin kylmällä 2-%:isella NaHS03-liuoksella (2 x 5 125 ml), kylmällä 6-%:isella NaHC03-liuoksella (2 x 125 ml) ja suolaliuoksella. Orgaaninen faasi kuivattiin MgS04:lla ja väkevöitiin. Flashkromatografoimalla (silikageeli, 25 -35-%:ista etyyliasetaatti/heksaaniseosta) saatiin 1,52 g (40 %) otsikon mukaista yhdistettä valkoisena kiintoai-10 neena.
1H-NMR (CDC13, 300 MHz) 6: 8,08 (d, J = 7,0, 2H); 7,59 -7,55 (m, 1H); 7,46 (t, J = 7,2, 2H); 7,38 - 7,25 (m, 20H); 6,30 (t, J = 8,5, 1H); 5,65 (d, J = 6,8, 1H); 5,49 - 5,39 (m, 4H); 5,32 (s, 1H); 5,18 - 4,19 (m, 4H); 4,93 (d, J -15 9,2, 1H); 4,44 (dd, J = 6,6, J = 10,2, 1H); 4,31 (d, J = 8,4, 1H); 4,16 (d, J = 8,5, 1H); 3,80 (d, J = 6,9, 1H); 2,69 - 2,39, (m, 4H), 2,33 - 2,23 (m, 3H); 2,03 (s, 3H); 1,90 (t, J = 12,6, 1H); 1,68 - 1,63 (m, 6H); 1,28 (s, 9H); 1,16 - 1,10 (m, 6H); 0,93 (t, J = 7,4, 9H); 0,55 (q, J = 20 7,8, 6H).
13C-NMR (CDC13, 75,5 MHz) 6: 204,1, 169,7, 167,9, 167,1, 151,1, 140,7, 135,7, 133,6, 130,2, 129,2, 128,9, 128,8, .·. : 128,7, 128,6, 128,5, 128,4, 128,3, 128,2, 128,0, 127,8, .·.·; 126,4, 90,4, 84,2, 81,1, 80,4, 79,3, 78,8, 74,9, 72,8, 25 72,0, 70,5, 69,2, 69,1, 69,0, 58,1, 46,8, 43,2, 37,1, ;:V 35,0, 28,1, 26,5, 22,8, 21,0, 14,1, 10,0, 6,9, 5,5.
• » | ; M.S. (FAB) m/z+: 1345.
(f) lO-desasetyyli^'-O-bentsyylioksikarbonyyli-S'-N-debentsoyyli-31-N-(t-butyylioksikarbonyyli)-10-0-(di-30 bentsyylifosfono-oksimetyyli)paklitakselin valmistus
I I
'·' BnO O
· , O BnO-p. _ i-: Λ O 0
!·;·: 35 KJK
ph y V [\ 1 CBZÖ ÖBz ÖAc 123 111724
Liuos, jossa oli vaiheen (e) mukaista tuotetta (50,8 mg, 0,038 mmol) kuivassa tetrahydrofuraanissa (2,5 ml) argonin alla, jäähdytettiin -40 °C:seen. Tähän liuokseen lisättiin tetrabutyyliammoniumfluoridia (0,057 ml, 5 0,057 mmol) tetrahydrofuraanissa (1,0 M) tipoittain. Reak- tioseosta sekoitettiin 1,5 tuntia, jolloin sitä vähitellen lämmitettiin -20 °C:seen. Reaktio lopetettiin sitten lisäämällä 15 ml kyllästettyä NH4Cl-liuosta ja seos laimennettiin 30 ml:11a etyyliasetaattia. Orgaaninen faasi pes-10 tiin NaHC03-liuoksella (2 x 15 ml) ja suolaliuoksella. Se kuivattiin MgS04:lla ja väkevöitiin. Preparatiivisella ohutkerroskromatografiällä (silikageeli, 50-%:inen etyyli-asetaatti/heksaaniseos) saatiin 36 mg (77 %) otsikon mukaista yhdistettä valkoisena jauheena.
15 1H-NMR (CDClj, 300 MHz) 6: 8,10 (d, J = 8,5, 2h); 7,60 - 7,55 (m, 1H); 7,49 - 7,44 (m, 2H); 7,36 - 7,18 (m, 20H); 6,27 - 6,22 (m, 1H); 5,78 (s, 1H); 5,67 (d, J = 7,0, 1H); 5,44 - 5,34 (m, 3H); 5,27 (d, J = 2,2, 1H); 5,24 - 5,05 (m, 4H); 5,01 - 4,91 (m, 4H); 4,39 - 4,28 (m, 2H); 4,17 20 (d, J = 8,2, 1H); 3,87 (d, J = 7,0, 1H); 2,58 - 2,51 (m, 1H); 2,41 (s, 3H); 2,40 - 2,18 (m, 2H), 2,00 - 1,87 (m, 5H); 1,73 - 1,69 (m, 4H); 1,30 (s, 9H); 1,22 - 1,15 (m, 6H).
j M.S. (FAB) m/z\· 1231.
25 (g) 10-desasetyyli-3’-N-desbentsoyyli-3'-N-(t-bu- tyylioksikarbonyyli)-10-0- (f osf ono-oksimetyyli) paklitakse- • litrietanoliamiinisuolan valmistus tr· * I · HO. .0 yO H O" K' A 0 O o
Ph>T O.·./ li ÖQz 6fic° 124 111724 500 ml:n Parr-pulloon laitettiin 10-desasetyyli-2'-0-bentsyylioksikarbonyyli-3' -N-debentsoyyli-3' -N- (t-butyy-lioksikarbonyyli )-10-0- (dibentsyylif osf ono-oks ime tyyli) -paklitakselia (264,9 mg, 0,215 mmol) ja etyyliasetaattia 5 (20 ml). Pullo huuhdeltiin sitten argonilla ja siihen li sättiin 10-%:ista palladiumia hiilellä (318 mg). Syntynyttä seosta käsiteltiin Parr-laitteessa vetypaineessa 55 psi (380 kPa). Reaktiota monitoroitiin HPLC:llä (70:30 CH3CN/Q8 puskuri, pH 6,0, 1,00 ml/minuutti, Zorbax C-18 -pylväs, 10 25,0 cm, λ = 230 nm), kunnes lähtöainetta ei enää havaittu (12,5 tuntia). Seos suodatettiin celite-kerroksen läpi, joka pestiin etyyliasetaatilla ja pienellä määrällä di-kloorimetaania. Syntynyt suodos väkevöitiin ja jäännös liuotettiin dikloorimetaaniin (5 ml). Lisäämällä heksaania 15 syntyi valkoinen saostuma, josta eristettiin 140,3 mg vapaata happoa (80-%:isesti puhdasta HPLC:n perusteella) valkoisena kiintoaineena. Tämä materiaali käytettiin suoraan seuraavassa vaiheessa.
Pulloon, jossa oli edellä mainittua vapaata happoa 20 (140 mg, 0,153 mmol), lisättiin dikloorimetaania (10 ml).
Syntynyttä liuosta käsiteltiin sitten 0,100 M trietanoli-amiiniliuoksella etyyliasetaatissa (1,16 ml, 0,116 mmol), : jolloin liuos sameni. Noin 2 ml heksaania lisättiin ja * · * seos laitettiin -20 °C:seen yön ajaksi. Syntynyt saostuma .* ! 25 suodatettiin 4,0 - 5,5 pm:n sintratun lasisuppilon läpi.
”,* Kiintoaine otettiin talteen ja laitettiin vakuumiin nel- * jäksi tunniksi, jolloin saatiin 69,9 mg (42 %) otsikon ’* * mukaista trietanoliamiinisuolaa harmaana jauheena, joka oli 95 - 96-%:isesti puhdasta HPLC-analyysin perusteella.
V 30 (TR = 2,05 min, 70:30 CH3CN/Q8 puskuri pH 6,0, 1,00 ml/min, : Zorbax C-18 25,0 cm, λ = 230 nm).
1H-NMR (asetoni-d6/D20, 300 MHz) 6: 8,03 (d, J = 7,4,2H); 7,65 (t, j = 7,3, ih),· 7,54 (t, j = 7,6, 2h); 7,42 - 7,33 ;·’ (m, 5H); 7,21 (t, J = 7,0, 1H); 6,09 (t, J = 9,0, 1H); |‘V 35 5,81 (s, 1H); 5,59 (d, J = 7,0, 1H); 5,12 (bs, 2H); 4,93 125 1117 2 4 (d, J = 8,4, 2H), 4,56 (d, J = 4,9, 1H); 4,31 - 4,26(m, 1H); 4,11 (s, 2H); 3,41 - 3,37 (m, 6H); 2,42 - 2,32 (m, 5H); 2,15 (bs, 1H); 1,97 (s, 3H); 1,77 - 1,64 (m, 2H); 1,58 (s, 3H); 1,13 (s, 9H); 1,15 - 1,07 (m, 6H).
5 13C-NMR (asetoni-d6/D20 , 75 , 6 MHz) 6: 171,6, 166,9, 156,6, 141.8, 135,1, 134,2, 131,0, 130,7, 129,4, 129,3, 12B.4, 128.1, 88,3, 85,4, 81,9, 79,7, 78,6, 78,1, 76,8, 76,0, 74.8, 71,9, 71,2, 47,4, 44,0, 37,1, 36,3, 28,5, 27,0, 23.1, 22,0, 14,7, 10,4.
10 HRMS: MNa", 940,3142 (laskettu C44H56NOiePNa:lle = 940,3133). Esimerkki 10 2'-O-fosfono-oksimetoksimetyylipaklitakseli (a) 2'-0-(metyylitiometoksimetyyli)-7-0-trietyyli-silyylipaklitakselin valmistus 15
ArO O
\ H OSi (CH2CH3) 3
PhCONH 0 \ y-i Jf
Ph^V^X"··/ CH3SCH20CH20 7^-—y 7%/° 20 H0 i Ac°
PhC (0)0 ,,,,: Liuokseen, jossa oli 7-0-trietyylisilyylipaklitak- , . selia (70,0 mg, 72,2 mmol), bis(metyylitiometyyli)eetteriä ; (90 mg, 72,2 mmol), molekyyliseuloja (70 mg), ja N-jodi- / ; 25 sukkinimidia (160 mg, 72,2 mmol) tetrahydrofuraanissa ; : : (2,0 ml) huoneenlämpötilassa, lisättiin hopeatriflaattia : (5,0 mg, 19,5 mmol) ja syntynyttä liuosta sekoitettiin v ; kaksi tuntia. Reaktioseos laimennettiin sitten etyyliase taatilla ja suodatettiin celite-kerroksen läpi. Suodos . ; 30 pestiin kyllästetyllä natriumvetykarbonaattiliuoksella ; sekä 1:1-seoksella (v:v), jossa oli kyllästettyä natrium- vetykarbonaattiliuosta ja 5-%:ista natriumtiosulfaatti- 4 * * liuosta ja lopuksi suolaliuoksella. Orgaaniset faasit kui-;·’ vattiiin sitten natriumsulfaatilla ja väkevöitiin vakuu- : * : 35 missä. Jäljelle jäänyt öljy puhdistettiin flashkromatogra- »6 111724 foimalla (3:1, heksaani:etyyliasetaattiseoksella), jolloin saatiin 22,0 mg (29 %) otsikon mukaista yhdistettä valkoisena kiintoaineena.
XH-NMR (300MHz, CDC13) 6: 8,12 - 7,20 (15H, m), 7,04 (1H, 5 d, J = 8,9 Hz), 6,41 (1H, s), 6,25 (1H, m), 5,81 (1H, dd, J = 8,9, 2,4 Hz), 5,68 (1H, d, J - 7,0 Hz), 4,93 (1H, d, 8,0 Hz), 4,79 (2H, m), 4,71 (1H, d, 2,4 Hz), 4,45 (1H, dd, J = 10,5, 6,6 Hz), 4,30 (1H, d, J = 8,3 Hz), 4,28 (1H, d, J * 11,7 Hz), 4,17 (1H, d, J - 8,3 Hz), 4,04 (1H, d, J « 10 11,7 Hz), 3,80 (1H, d, J = 6,9 Hz), 2,48 - 1,13 (25H, m, mukaan lukien singletit arvoilla 2,51, 2,13, 2,05, 2,01, 1,69, 1,19, 1,16 kukin), 0,98 - 0,85 (9H, m), 0,65 - 0,50 (6H, m).
(b) 2' -O- (dibentsyylifosfono-oksimetoksimetyyli)-7-15 trietyylisilyylipaklitakselin valmistus ÄC0\ ί OSi(CH2CH3)3 PhCONH O \ )-! 20 (OBn) 2 (0) POCH2OCH2Ö HO i AcÖ
PhC (0) 6
Liuokseen, jossa oli vaiheen (a) mukaista tuotetta / (15 mg, 0,0141 mmol) ja molekyyliseuloja (15 mg) tetrahyd- • ' 25 rofuraanissa (0,5 ml) huoneenlämpötilassa, lisättiin di- : bentsyylifosfaattia (20,0 mg, 0,089 mmol) sekä N-jodisuk- tl » : kinimidla (4,2 mg, 0,0187 mmol) ja liuosta sekoitettiin ' tunnin ajan. Reaktioseoksen TLC-analyysin perusteella sii nä oli ainoastaan lähtöainetta. Hopeatriflaattia (5,0 mg, 30 0,019 mmol) lisättiin sitten kolmena annoksena kahden tun nin aikana ja reaktioseosta sekoitettiin vielä tunnin ajan. Reaktioseos laimennettiin sitten etyyliasetaatilla ja syntynyt liuos suodatettiin celite-kerroksen läpi. Suo-dos käsiteltiin 1:1-seoksella (v:v), jossa oli kyllästet-35 tyä natriumvetykarbonaattiliuosta ja 5-%:ista natriumtio- 127 111724 sulfaattiliuosta. Orgaaninen uute pestiin sitten suolaliuoksella, kuivattiiin natriumsulfaatilla ja väkevöitiin vakuumissa. Jäljelle jäänyt öljy puhdistettiin flashkroma-tografoimalla (1:1, heksaani:etyyliasetaattiseoksella), 5 jolloin saatiin 5,0 mg (33 %) otsikon mukaista yhdistettä. 1H-NMR (300 MHz, CDC13) 6: 8,08 - 7,16 (25H, m), 7,18 (1H, d, J = 8,8 Hz), 6,41 (1H, s), 6,21 (1H, m), 5,82 (1H, dd, J = 9,0, 3,1 Hz), 5,66 (1H, d, 7,0 Hz), 5,01 - 4,65 (10H, m), 4,56 (1H, dd, J = 14,7, 5,6 Hz), 4,43 (1H, dd, J = 10 10,4, 6,7 Hz), 4,29 (1H, d, J - 8,3 Hz), 4,16 (1H, d, J = 8,3 Hz), 3,78 (1H, d, J = 7,0 Hz), 2,60 - 1,13 (22H, m, mukaan lukien singletit arvoilla 2,49, 2,15, 1,93, 1,66, 1,15, 1,13, 3H kukin), 0,95 - 0,84 (9H, m), 0,63 - 0,45 (6H, m).
15 (c) 2'-O-fosfono-oksimetoksimetyylipaklitakselin valmistus
AC0\ ί °H
PhCONH 0 \ )-\ I
20 Ξ I )_( ...../ (HO) 2P (0) och2och2ö X~7L~~—/ fV° ; HO £ Ac0
PhC(O)Ö 25 ;;1 : Vaiheessa (b) saatua tuotetta käsiteltiin tetrabu- ' ·' tyyliammoniumfluoridilla esimerkin 9 (f) mukaisella taval- ·.· 1 la 7-0-trietyylisilyylisuojaryhmän poistamiseksi. Näin saatu yhdiste hydrogenoitiin katalyyttisesti edellä ole-30 vien esimerkkien mukaisesti, jolloin saatiin otsikon mukainen yhdiste.
* I
* I
» · 128 1 1 1724
Esimerkki 11 2'-O-fosfono-oksimetoksimetyylipaklitakseli (vaihtoehtoinen menetelmä) (a) 2'-O-trietyylisilyylipaklitakselin valmistus 5 O Ac o
PhCONH O v ) C A/
Ph^^v^o...../ y*»*
10 °N
SKCHaCHsh HO =Ac
BzO
Liuokseen, jossa oli paklitakselia (20,0 g, 0,0234 mol) ja imidatsolia (3,59 g, 0,052 mol) 150 ml:ssa DMF:ää 15 (dime tyyli f ormamidi) 0 eC:ssa, lisättiin trietyylisilyyli- kloridia (6,0 ml, 0,053 mol) 2,0 ml:n annoksina 20 minuutissa. Reaktioseosta sekoitettiin sitten 0 °C:ssa tunnin ajan. Seos laimennettiin sitten etyyliasetaatilla ja kyllästetyllä ammoniumkloridiliuoksella. Orgaaninen kerros 20 poistettiin, se pestiin suolaliuoksella, kuivattiin nat-riumsulfaatilla ja väkevöitiin vakuumissa, jolloin saatiin ;; keltainen öljy. Puhdistamalla raakatuote flashkromatogra- foimalla (heksaani:etyyliasetaattiseosta: 1:3 sitten 1:1) saatiin 21,07 g (98 %:n saanto) haluttua otsikon mukaista ‘25 yhdistettä värittömänä kiintoaineena.
: XH-NMR (300 MHz, CDC13) 6: 8,15 (2H, m), 7,70 (2H, m), i 7,65 - 7,30 (11H, m), 7,15 (1H, d, J = 8,9 Hz), 6,30 (1H, •V': s), 6,25 (1H, m), 6,70 - 6,10 (2H, m), 4,94 (1H, d, J = 7,9 Hz), 4,67 (1H, d, 2,0 Hz), 4,40 (1H, m), 4,29 (1H, d, 30 J = 8,4 Hz), 4,18 (1H, d, J = 8,4 Hz), 3,81 (1H, d,J = 7,1 Hz), 2,65 - 1,10 (22H, mukaan lukien singletit arvoilla 2,55, 2,20, 1,88, 1,69, 1,22, 1,13, 3H kukin).
» * ’ I I i » 129 111724 (b) 2'-O-trietyylisilyyli-7-O-bentsyylioksikarbo- nyylipaklitakselin valmistus
OAc n V. /! OCBZ
5 PhCONH Ο \ Ύ \[/\ .....\ v
°\ HOV
Si(CH2CH3)3 i ÖAC
BzÖ 10
Butyylilitiumia (1,6 M heksaanissa, 12,9 ml, 8,06 mmol) lisättiin tipoittain 10 minuutissa liuokseen, jossa oli 2'-O-trietyylisilyylipaklitakselia (22,3 g, 24,1 mmol) tetrahydrofuraanissa (250 ml) jäähdytettynä -50 eC:seen.
15 Syntynyttä liuosta sekoitettiin 20 minuuttia ja lämpötila pidettiin välillä -50 eC ja -35 eC. Reaktioseos jäähdytettiin sitten -50 °C:seen ja bentsyyliklooriformiaattia (5,08 ml, 29,8 mmol) lisättiin tipoittain viidessä minuutissa. Reaktioseosta pidettiin -40 °C:ssa 30 minuuttia, 20 minkä jälkeen lämpötila sai nousta 0 eC:seen noin 30 minuutissa. Seos laimennettiin sitten etyyliasetaatilla ja kyllästetyllä ammoniumkloridiliuoksella ja syntynyt orgaa- . ninen kerros pestiin suolaliuoksella, kuivattiin natrium- • · sulfaatilla ja väkevöitiin vakuumissa. Raa’an reaktioseok-, 25 sen 1H-NMR-analyysin perusteella läsnä oli sekä haluttua ; · 2' -0-trietyylisilyyli-7-0-bentsyylioksikarbonyylipaklitak- i « t : ' selia että 2'-0-trietyylisilyyli-7-epihydroksipaklitakse- * lia (suhteessa 3:1). Tätä tuoteseosta käytettiin seuraa- vassa vaiheessa ilman eri puhdistusta ja isomeerit erotet-; 30 tiin tämän jälkeen. Päätuotteen, 2'-O-trietyylisilyyli-7- O-bentsyylioksikarbonyylipaklitakselin, analyyttinen näyte . puhdistettiin flashkromatografoimalla.
: 1H-NMR (300 MHz, CDC13) 6: 8,12 (2H, m), 7,72 (1H, m), * > 7,65 - 7,27 (1H, d, J = 8,8 Hz), 6,41 (1H, m), 6,20 (1H, i‘\: 35 m), 5,72 - 5,65 (2H, m), 5,52 (1H, m), 5,24 (1H, d, J =
» » « > I
130 111724 12,3 Hz), 5,16 (1H, d, J = 12,3 Hz), 4,95 (1H, d, J = 8,7 Hz), 4,69 (1H, s), 4,35 (1H d, J = 8,3 Hz), 4,25 (1H, d, J = 8,3 Hz), 3,94 (1H, d J = 6,8 Hz), 2,70 - 1,12 (22H, mukaan lukien singletit arvoilla 2,54, 2,14, 2,01, 1,80, 5 1,20, 1,15, 3H kukin), 0,81 - 0,73 (9H, m), 0,55 - 0,31 (6H, m).
(c) 7-0-bentsyylioksikarbonyylipaklltakselin valmistus OAc n V // OCB2 10 Λ ^ f r /
PhCONH O \ / V/C
Ph^'N^X)·····/ V.CH3 L \ i \ / CHj/ \ ÖH i\^° HO : Ξ i OAc 15 Bz°
Kloorivetyhappoa (6 N, 1,0 ml, 6,0 mmol) lisättiin liuokseen, jossa oli vaiheen (b) mukaista tuotetta (24,0 g, 22,6 mmol) asetonitriilissä (250 ml) jäähdytettynä 0 °C:seen. Kymmenen minuutin kuluttua reaktio oli TLC-20 analyysin perusteella (heksaani:etyyliasetaatti, 1:1) mennyt loppuun. Reaktioseos laimennettiin kyllästetyllä nat-,,riumvetykarbonaattiliuoksella sekä etyyliasetaatilla ja _· j orgaaninen kerros poistettiin, se pestiin suolaliuoksella, 'kuivattiin natriumsulfaatilla ja väkevöitiin vakuumissa.
; 25 Jäljelle jäänyt öljy puhdistettiin flashkromatografoimalla · (heksaani:etyyliasetaatti, 1:3, sitten 1:1), jolloin saa- : ' tiin 11,4 g (48 % kahdessa vaiheessa) otsikon mukaista ’ yhdistettä ja 4,8 g (20 %) 7-epihydroksipaklitakselia.
1H-NMR (300 MHz, CDC13) 6: 8,09 (2H, m), 7,71 (2H, m), 30 7,65 - 7,27 (16H, m), 7,10 (1H, d, 8,9 Hz), 6,39 (1H, s), 6,16 (1H, m), 5,81 (1H, d, J = 8,9, 2,4 Hz), 5,65 (1 H, d, J = 6,9 Hz), 5,49 (1H, dd, J = 10,6, 7,2 Hz), 5,20 (1H, d, : J = 11,9 Hz), 5,12 (1H, d, J = 11,9), 4,91 (1H, d, J = 8,4 ·; Hz), 4,78 (1H, m), 4,30 (1H, d, J - 8,4 Hz), 4,15 (1H, d, 35 J = 8,4 Hz), 3,91 (1H, d, J = 6,8 Hz), 3,69 (1H, d, J - 131 111724 4,9 Hz), 2,65 - 1,10 (22H, mukaan lukien singletit arvoilla 2,39, 2,18, 1,81, 1,75, 1,21, 1,15, 3H kukin).
(d) 2 *-0-(metyylitiometoksimetyyli)-7-0-bentsyyli-oksikarbonyy1ipaklitakselin valmistus 5
OAc g \ // OCBZ
PhCONH O v )-\J/ ...../ \>CH, 10 \ HO : Ξ
iU / : OAC
BzÖ
MeS
Hopeatriflaattia (300 mg, 1,17 mmol) lisättiin 15 liuokseen, jossa oli 7-O-bentsyylioksikarbonyylipaklitak-selia (5,53 g, 5,71 mmol), 1,1'-ditiometyylidimetyylieet-teriä (7,8 g, 57,1 mmol), N-jodisukkinimidia (6,35 g, 28,3 mmol) ja uunikuivattuja, jauhettuja molekyyliseuloja (5,0 g) tetrahydrofuraanissa (110 ml) huoneenlämpötilassa. 20 Reaktioseoksen TLC-analyysin (heksaani:etyyliasetaatti- seos, 1:1), perusteella 20 minuutin kulutta noin 40 % läh-,. : töaineesta oli muuttunut nopeammin liikkuvaksi tuotteeksi.
• ; Hopeatriflaattia (150 mg, 0,585 mmol) lisättiin sitten ja reaktiota monitoroitiin TLC:n avulla, jonka perusteella 25 todettiin, että 30 minuutin kuluttua reaktio oli tapahtu-• nut noin 65-%risesti. Seos laimennettiin etyyliasetaatilla (100 ml), suodatettiin käyttäen celite-kerrosta ja suodos kaadettiin erotussuppiloon, jossa oli 200 ml kyllästettyä natriumvetykarbonaattiliuosta ja 50 ml 5-%:ista natrium-30 tiosulfaattiliuosta. Orgaaninen kerros poistettiin, pes tiin suolaliuoksella, kuivattiin natriumsulfaatilla ja väkevöitiin vakuumissa. Jäljelle jäänyt öljy puhdistettiin ! ’ flashkromatografoimalla(heksaani:etyyliasetaattigradient- tieluointi 4:1 - 3:2), jolloin saatiin 3,0 g (54 %:n saan- 132 111724 to) otsikon mukaista yhdistettä vaaleankeltaisena kiintoaineena.
1H-NMR (300 MHz, CDC13) 6: 8,10 (2H, m), 7,74 (2H, m), 7,66 - 7,25 (18H, m), 7,05 (1H, d, J = 8,9 Hz), 6,40 (1H, 5 s), 6,26 (1H, m), 5,77 (1H, dd, J = 8,8, 2,5 Hz), 5,71 (1H, d, J = 6,9 Hz), 5,51 (1H, dd, J - 10,6, 7,1 Hz), 5,21 (1H, d, J = 11,9 Hz), 5,14 (1 H, d, J = 11,9 Hz), 4,92 (1H, m), 4,79 (2H, m), 4,68 (1H, d, J = 2,5 Hz), 4,31 (1H, d, J = 11,8 Hz), 4,30 (1H, d, J - 8,5 Hz), 4,16 (1H, d, 10 J = 8,5 Hz), 4,10 (1H, d, J = 11,8 Hz), 3,93 (1H, d, J - 6,9 Hz), 2,65 - 1,10 (25H mukaan lukien singletit arvoilla 2,50, 2,15, 2,05, 1,74, 1,72, 1,20, 1,15, 3H kukin).
(e) 2' -O-(dibentsyylifosfono-oksimetoksimetyyli)-7-O-bentsyylioksikarbonyylipaklitakselin valmistus 15
OAc q \ // OCBZ
PhCONH O v )-K f / ...../ ff"3 20 \ HOi / -- OAc °. BzÖ • O )
(BnOfePO
, Liuokseen, jossa oli 2'-0-(metyylitiometoksimetyy- 25 li)-7-0-bentsyylioksikarbonyylipaklitakselia (1,06 g, 1,07 mmol) ja uunikuivattuja, jauhettuja molekyyliseuloja (1,0 * * • g) tetrahydrofuraanissa (20 ml) huoneenlämpötilassa, li- '· ‘ sättiin dibentsyylifosfaattia (1,49 g, 5,30 mmol) sekä heti tämän jälkeen N-jodisukkinimidia (2,65 g, 1,18 mmol).
30 Reaktioseoksen TLC-analyysin perusteella todettiin, että : 2,5 tunnin kuluttua reaktio oli tapahtunut noin 60-pro- senttisesti. N-jodisukkinimidia (175 mg, 0,78 mmol) lisät-tiin sitten ja reaktioseosta sekoitettiin vielä 30 minuuttia, minkä jälkeen reaktio oli TLC-analyysin perusteella : 35 mennyt loppuun. Reaktioseos laimennettiin sitten etyyli-
I I
133 111724 asetaatilla (50 ml) ja suodatettiin käyttäen celite-ker-rosta. Suodos kaadettiin erotussuppiloon jossa oli 100 ml kyllästettyä natriumvetykarbonaattiliuosta ja 20 ml 5-pro-senttista natriumtiosulfaattiliuosta. Orgaaninen kerros 5 poistettiin, pestiin suolaliuoksella, kuivattiin natrium-sulfaatilla ja väkevöitiin vakuumissa. Jäljelle jäänyt öljy puhdistettiin flashkromatografoimalla (heksaani:etyy-liasetaattigradienttieluointi, 3:1 - 1:1), jolloin saatiin 750 mg (62 %:n saanto) haluttua otsikon mukaista yhdistet-10 tä valkoisena kiintoaineena.
1H-NMR (360 MHz, CDC13) 6: 8,10 (2H, m), 7,79 (2H, m), 7,65 - 7,24 (26H, m), 7,10 (lH,m), 6,41 (1H, s), 6,20 (1H, m), 5,79 (1H, dd, J = 8,8, 3,6 Hz), 5,65 (1H, d, J = 7,0 Hz), 5,52 (lH,m), 5,20 (1H, d, J = 11,8 Hz), 5,11 (1H, d, 15 J = 11,8 Hz), 5,04 - 4,85 (6H, m), 4,75 - 4,60 (4H, m), 4,30 (1H, d, 8,4 Hz), 4,15 (1H, d, J = 8,4 Hz), 3,92 (1H, d, J = 7,0 Hz) 2,65 - 1,10 (22 H mukaan lukien singletit arvoilla 2,48, 2,19, 1,95, 1,80, 1,20, 1,10, 3H kukin).
(f) 2' -O-fosfono-oksimetoksimetyylipaklitakselitri-20 etanoliamiinisuolan valmistus
Palladiumia (10-%:ista) hiilellä lisättiin liuok-. .: seen, jossa oli 2'-0-(dibentsyylifosfono-oksimetoksimetyy- li)-7-0-bentsyylioksikarbonyylipaklitakselia (500 mg,
* t I
j 0,382 mmol) etyyliasetaatissa (40 ml) Parr-pullossa. Astia . ! 25 kiinnitettiin Parr-laitteistoon ja reaktioseos hydrogenoi- ;; / tiin paineessa 50 psi (345 kPa). Reaktioseosta ravistet- » » • ·’ tiin 6,5 tuntia, ja suodatettiin käyttäen sintrattua la- v * sisuppiloa. Trietanoliamiinia (0,1 N etyyliasetaatissa, 4.0 ml) lisättiin tähän suodokseen ja syntynyt liuos väke-30 vöitiin vakuumissa. Raaka kiintoaine suspendoitiin noin 5.0 ml:aan etyyliasetaattia ja liuotin dekantoitiin. Tämä prosessi toistettiin kolme kertaa ja syntynyttä otsikon mukaista trietanoliamiinisuolaa (300 mg) saatiin 87 %:n puhtaudella HPLC-analyysin perusteella. Puhdistamalla tämä | ‘ : 35 tuote edelleen C18-kromatografiällä (vesi:asetonitriili- 134 111724 seos, 3:1) saatiin haluttua otsikon mukaista yhdistettä (120 mg, 34 %) 95 %:n puhtaudella HPLC-analyysin perusteella.
^-NMR (300MHz, CD3COCD3, D20 ) 6 : 9,05 (1H, d, J = 8,7 Hz), 5 8,15 - 7,12 (21H, m), 6,40 (lH,m), 6,05 (1H, m), 5,69 - 5,55 (2H, m), 5,01 - 4,85 (6H, m), 4,35 (1H, m), 4,14 (2H, m), 3,96 - 3,85 (6H, m), 3,25 (1H, d, J = 7,1 Hz), 3,30 -3,15 (6H, m) 2,50 - 1,04 (22H, mukaan lukien singletit arvoilla 2,49, 2,15, 2,05, 1,81, 1,60, 3H kukin).
10 Lisäesimerkit
Edellä olevien esimerkkien ja kuvauksien tarjoamia yleisiä menetelmiä seurataan valmistettaessa seuraavat keksinnön mukaiset, kaavan (A) mukaiset yhdisteet.
»5 111724
I -HO *H -H
•HI rH Η Η Ή H
r-H *H CL) -—» >1 Ή , r; >·< H J- ><Ι·Η· >ιί>ιί>ι
C iH rH --- β C
^ ol « c n O o i >1XM a <υ (ti ^nMO^^AGT 3 -H o
• V:3-hX,Q>i(1>0*H4JM
A 4-i +J O O >. A. 1 I A
1 I — tn 4-> ro ro I
CM 04 -H φ 04
S
CM
£ JZ 0-
M Q
M f\ CC / \ ____ >·. M B ° m _ ....... & u M -. F J o (ti < M ^*N. jL / cc < I I § 6 .. ,: o=\ * · \ M i
. > \.....Il Oi O
\ ; g / 6 : ; ; ° \ « % :; : · °~ ; : : w 05 o
;;· · oi O
... ^ o
ί * >—I
-->1 ',,, w * <ΰ . , <β ... +j
. . +J
... Ή : : o ' ' ' _ T .¾ » o; rö >* ... ^ O nj
... 4J
"α * 136 1 1 17 2 4
•H
Ή ·Η -Η ·Η ·Η ·Η ιΗ •Η Η Η Ή «Η Ή ·Η H Η rl ^ ·γ| ·γΙ , <—I ι Ή t>i *Η r-< a.>icj > v,qN><Q)0>fGa)OjCLöoa)<uMc:c:>-c ΚΐΐΜΤ,βμ^β Λ & O ll (1) Vi ft 4J Οι id (ÖCO.
cj^x<d3Cl<uviovi . -Hftoaowma)
• 3 o ·Η Λ O -H 3MOi^t+JO H £) r-< 0 0 -H
^tmii-POH+J'waiO i uiQjO^m-iu-i+j i i ui λ: i i i ίο cg -h i m >i i i i
CN (N -H >1 n rn CN -rl CM -H CO CN CO (N
ω ό - ο £ x: .e « 05 CL CL n
X
o g O O x « < < ° ·:··: j* x o :\i 2 o '·’· a X — X T- o **'.* Cd o q O X « : : : x υη ·· o x :*.·. o o • * » * » * · t :*·;: % 1 x x ’ ’ * ’ f* , : x o x
. “1. o o S
‘;·’ o u o .. · OiQ. 9i o- : · : o x o l" °« X* ; o I o o o o
, I
137 111724
SL
0- > -C SL SL SL s: 9, (¾ CL. Q- Q. O. O. -£ o I · 0 o . o o r, SL S SL S. n o' ~ O- 0- 0-0- n
1 X
O o n m
X X
2 2 a x ° ° 2 2
ο; n O O a. o. X
w ° < < o o
N N
X X
o o 0 o
1 I
• _£* , x o x 2 o 2 ·; o o o _ • ‘ . .¾ s: x 2, s: o x x ; f 2 x" : οχο o o o
t I I
»
X X X XXX
<11 t — '00' ' ' 2 _E*
. ; : o x , O g g O . o o o £ X
·· o2 ο022οό2οοΛ6ο^ S
- xg 2 χ2υ88υ52οΝυη2δ25 χ χ o * ° f* o ° o x~x~g g υ 2 o o g χΟ υΧ”"0 Ο χ χ 11 ί υ ·,· ; O O O g X ο O O -£· °· 9 Ο 111724 •Η ·Η
-H -H (—1 -H -H -H i—I *H
i—1 r—( -rH -H i—I Ή i—I i—I £>-* -H Ή Ή ·Η ί>ι ϊ>Ί ί>ι Ή -H rH >ii—I >ίΉ a; cco>t>H>i-p>ffico>i>i>i-p>· <u<i)^c>ift3aa)(i)Uc>iDji3a -p ftftncoxi o +j (¾ n « c ο λ c 300ΡΦΡ0Ρ 300ΡΦΜ0Ρ λ m <—t 3-ηο,^ι axi u r-t 3 -ri & r-< a ocux^-^oxo ο&χ^νοχο
wi>iiitn>iMtni>iiitn>iW -Η ΓΜ U) m ro -H 0) -H -H CM tn n ro -rH U) -H
ό ό . o a e ^ tr. n o
X X
a u
a O O
B« 2 2 I ·
CN CN
,* r x x
•, ; O O
:* : B 1 2 • o o
’ * M CN
: : x x o o :: o o
, » I
; ’·' % x x
' ‘ * I
: : o *' 2 ”'· 5 u :, ° o ,,.,: x” * u 139 11 17 2 4 •Η ·Η •H -H I—I Ή ·γΗ -H I—1 Ή
I—I I—( >ι Ή -H I—I -H I—I (—I ·Ρ ·Η I—I -H
K*iK*l>i»--1-Hr—l>iH
> 1>1 ίΗ Ql ί>ι H ίΝ i>i 1 t>i Ϊ>ί ΐ>· ci cao>i>i>.-p>icao>i><>i+J>· a> (¾ ω <u P c N P< 3 a
+J D, ft Λ C O A O +J ft ft H C Ο ,P O
ΡΟΟΡΦΡΟΡ POOPPPOP ,Ρ P Ή p -H (¾ H ,Ρ prHp-ιΗΡιΉ A
O CuXAA OX ΟΟΑΧΆΑΟΧΟ tn I >-, I I m >, m tn ι >ι i i m >i to
•H γί in n ro -H w -Η t-i cn tn ro η -p in -P
ό 6 & a: j: öi o n x x u a B o o I *
<N «V
.· : x x ·, 2 2 ; : - 2 2 ' Ίχ a. Q-
O O
• » CSI M
:. : x x u u : : o o
• t I
: ,· « 1 x S I s
u O
«9. .
5 5
* * * * * O
• ‘ I " u 5 140 1 1 17 2 4 Η Ή H -H rH Ή Ή Ό ·—I Ή ι—I ι—I >, *γΗ ίΗ ι—I *γΗ (—( ι—I >, Ό Ό ι—{ Ό >ι>ί>ι>—I -Η Ή >, Η >ι >ι >ί »H ·Η ι—I >ι Η > >, >, Ρ, >, rH >,>·,> >i>(Oj>iO>,>.,>i (¾ CCO>i>i>i-P>-CCO>(>i>i4J>i ω a) v-ι c >, o, 0 ρ a) ω o c >,04001 +J C4C40C O X! O 4J & ftnJ 0ΟΛΟ 00000)000 00000)000 X! O >-H 0-H CO —I Ρ X) 0 rH 0 *H P, i—I P,
Ο O, .V Ό -Ρ OX Ο Ο Ά X Ρ Ρ O X O
cni>iiitn>((nwi>iiiw)>itn •o (n w ro m -H in -ο ·ο cm in m n ·ο ω ·Η ό ό > υ ο C ^ _χ>
Ori ο ο
X X
U Ο Β ο Ο « < < * * ΟΙ *Ν
X X
; ; ο ο ·' * Β § 2 ·. · (¾ ο. ο- ο ο * · <Ν <Ν :. ; χ χ ο υ : : 9 9 Γ ' ,* · Βί 1 Χ : ό ό 2 5 ο 5 - ° ο • ··. & 2 : , f χ ο 2
• · _ρ U
X ο ο 1« 111724
-η -H
-H -H i—I ·γ4 ·η Ή ι—I ·Η r-t (—I Ή -γΗ ι—t -r-i ι—t ι—I *ιΗ -η ι—( Ή
> i>i .Η ·Η rH S Η ί>π£>ιϊ>ιι-Η·Η.Η!>*ι—I
Γγ* £>1^ίΠι£^>—Ϊ>1 ft ί*1 rt ί>1 Ϊ>1 ^ ΠΠΟ>ι>ι>ι·μ>ιΠΠΟ>ι>Ί>ι·Ρ>
ωω n c >ι a π a ω di M π ίη a n Q
*J ft ft ιβ G 0 Λ O +1 a 1¾ <ti ΠΟΛΟ noon o non ποοηωηοη λ n rH η *η Οι ή Οι λ η η η -η ana ΟΛΛί'ΜΛΟΛίΟΟ^ΛίΊ-Ι+ΙΟΛίΟ (oi>iiiu)>)Wtni>iiicn>iW n (N οι n n -h tn -η ·η cn tn ro η ·η tn ·Η
• I
O O
> U υ C/. n ’"""ro
X X
o o «o o
li 2. S
* IN N
X X
; : o o F: : « 2 o . . 02 Q- °- o o
» k N N
: x x ,, , o u : · ; 9 9 * * »
Fv % 1 x
6 S
~ o , , -r. 2 «
... Dl o I
: ,· n u X " ....: u x υ 1« 111724 -H *r-|
H -H rH -H -H Ή )—I *H
rH I—I Ή -H r~i -1-i i—( i—( £>s -rH Ή 1—( ·r-i
> i>s ιΗ Ή rH t>i i—I
rS. >s >s ft >s i—I N N ft >i H >i >< > ^ aao>i>i>i-p>-,aöo>~i>i>i+J>' ω <u h c: >s ft d ft <u on c >i a 3 o.
+j a a « c O Λ o -P ft ft m β ΟΛΟ dOOHOHOHdOOHOHOH Λ HrH 0 -H ftiH ft Λ M H 0 -H fti—ΙΟ o ftftiM-4+j o,* o o ft λ; ή -μ ο,ΜΟ
tni>iiiw>,(nwi>iiiin>iw •H (N Cl) ro ro -H (O -H -H (M W ΓΟ ΓΟ Ή W -H
Ö 0 & % “ fYl n n
X X
o y g o o « < < • . * \ fS es
X X
. : o o ' : a o o • a o- o- • o o rs rs
• · X X
:, : o o o o
• * I I
:·,·, % x x : 2 2 o o •... · u u M n n
Ou fs x x ·' · ’ 2 2 , n r>
. , , , , 2; X
U O
us 111724
H -H
Ή Ή i—I Ή Ή *H .—I Ή
i—I i—I £>i -H -H i—I Ή i—I i—I -H *H i—I *H
> !>i Oi ϊ>ι .H >i >i >< >i N ft >, H ί>ιϊ>ΊΪ>· dj aco>i>i>i+J>iadO>i>(>i-tJ> ^ <u(us-ia>iadai<u<uftiö>iad& +J ft ft ® C O Λ O -P ft ft Λ (! ΟΛΟ
POOPOPOP POOPOPOP Λ P Λ P -H ft Η & Λ PH P -P ft H Q
0 ft Λ in +J O A! O O ft A! Ή -P OAiO
«ι>ιΐ I to >i to ui I >i I I in >. to
-H (N to η ΓΟ -H to ·|Η ·Η CN to rn ΓΟ -rH to -H
« I
o o > u o £ n n fV. *"*r> ‘"’π
X X
u o
a O O
« < <
X X
..: o o
. 1 O
: * £ δ
* ’ M <N
::: x x *** (J u ;·. . o o • . · .
4 » t
% X X
o 2 § :v. « g § f 2 111724 144 Ή ·Η •Η ·Η rH ·Η ·Η ·Η ι—I ·Η '—! rH £>ι ·γΗ ·Η γΗ ·Η ι—I ι—I ^ ·Η ·Η ι—I ·Η > ί>ι Σ>ι £>ί ι—I ·«—I ι—I £>ι ι—I ί>ι £>ί r-1 *Η r-1 ^ Η 02 >ι >1 dl >ι Η >ι >ι >ι >ι >ι Οι >ί γΗ >ι >ί CCO>i>i>1+J>iCaO>i>i>i4-l> O)O)^C>iO43CL,0a>MC>ift3Q +J ftOiröC O Λ O +J ft ft Λ fi ΟΛΟ ΟΟΟΜΦΟΟΜ ΦΟΟΟΦΟΟΜ Λ V4 ι—I 3 -Η Οι Ή Ο Λ Ο I 0 *Η (¾ ι—(Ο Ο ft Λ Ή 4J O X Ο Ο 1¾ Λ! 4-1 Λ Ο Μ Ο ΜΙ>ίΙ I W >ι 0) W I >il I W >ι U)
•H (N tn m ΓΟ -H tn -.H H <N tn ΓΟ ΓΟ -H tn -H
ό ό > υ <-> £ η η ry. τι ϊή
X X
α υ Β Ο Ο « ζ ζ » <ν η ’· ': ΐ χ ο ο ' : „ ο ο .’ Ίχ, α- ο.
ο ο CN ΡΊ : χ χ : ; · ο ο , ο ο J ’ ι « » * :v. χ χ ό !.·'· ° ό ο 2 ~ υ « Ο 2
; · X X
. . Ο Ο " £ 11 ’ ’ I ™ u 111724 145
H -H
H *H i—I -β -H *H i—I -H
•β ·Η i—I rH £>i x—I -β -β -β rH >H r-H -H
> Ή'βίβίβ^.ϊβ,β'β.β
Qj κ*1κ*ι£>ιΪ>ιΡη£>1.Η,—I [λ 5β>ιββΟ-Ρ>ι>.^>ι>ι·ββΟ·Ρ>ι>ι>· β βω ω β β >, >. α α βω ω β β ϊβ >, q ω ω -μ o, a λ β βο ω ωβ) ΟιΟίΛββο βββοοοωωβ βββοοοωωβ
β β Χ> β .-I Η ·Η -β Ο. β β Λ β ,β .Η -β -β Q
'β'βΟΛΛίΛί-μβΟ'βίβΟΛΑίΛίβίβΟ I I (0 I >1 >1 I I W I I M I >1 >i I I (0
tNjn-HcNuioinrg-HfMro-HCNMtontvi-H
I I
ο ο
IS CM
X X
U CJ
fs IS
t X X
o' u o
M IS IS
I x o a r> n x x o u 0 o o “ < 5
* IN IS
: X X
, · ; 2 2 '· ‘i o o . ‘. aL a. ql
*, ,* O O
(S CM
: x x : u u o o .,, ' ' :·.·. % 1 1 , * < <-> ,,,. x , · , u
IN
X x * 2 o : * ; o • . (_> « o 111724 146
H -H
Ή -rl t—1 -rl -H -H r-H Ή •v Ή Ή i—( ιΗ VH -H -H ·Η H Η H Ή
fyt r—I rH -rl '3 r-| f—I r-l -r-( N Ή H
^ ί>ι H S>i >1 ft r-Ί Ή >1 >-t >1 ft >1 r-l >- >)>i>i£GO-l~>><>l >i>i>iC:CO+J>i>i α q >ι ω ω m 3 >i ft s g >1 a> a) m 3 >ί & n3 rö G +J ft ft .ft C O (0 fdG-Pftft-QGO MM0>3oooa>M mmogoooom 3 3 -H jQ M r-l r-l -r| ft 3 3 Ή Λ M r-l H -rl ft
Ή ft -P Oft^^i4J O ft ft ft O ft ϋ X *) O
i iitni>i>iiwi i i n i >ί >i i ui (NncN-ricNto m n -H n n in Ή n m w ro -h
-H -H
O) 05 λ; λ; 0 o
-rl -H
1 I r-l . >1 >1 fc >t >1 (U ft ft ^ o o
M M
ft A
O O
0) 0) ' ' ·Η Ή
a O O
u o (¾ < <
1 . w _N
X X
• · o O
• * o δ » » » rr ϋ- — . ' O' ft 0- , , o o
f I · rv N
... X X
*·' ’ o o o o * * » · i ’,· 1*< x x ,···. x ; ; o » ? I rv
• _ X X
« U O
: * o . o **: 9 i __ 147 111724
•H
•Η ·Η γΗ Ή Ή ι—I ι—1 *Η Η Η >ι Ή ·Η >ι Η ^L. >ι >ι >* «—I »H Cl( 05>ι >ι c c >ι >ι ο >ι c α <υ α> >i m &
« rtj +J (¼ C G (¾ O
Μ νι3θα>(ΐ)ΟΜ .? 3 X> Μ -Η -Η rH (¾
'w t-IODj-P-P^O
I I in ι ι ι >i in γί m -H oj in m cn -h 6 0 £ % ϋ tY. n n
X X
y o - o o » u o
Pi < <
<S <N
·; ; X x g g o o CL Q.
; · b O O
* · jV <n n
“ X X
: u o : o o <M « x x * · u o o o ... ' * t * r·;.· % x x * » : ,·, . . _ o ό2°ό ,όό δ λ n 5o52o62og . ό“5 5 " ’ . r9uoo“o“u. H 50 “01" x"5 5 5 5„5^§§sI5 5 § ‘ * u X " " O O X X 11 f 9
U5uU U(J X
u 111724 148 •Η Ή rl Ή I—I I—I Ή Ή H r-4 ι-Η Ή rH Ή ·Η Ή *γ-Ι ·Η ·Η ί>ι rH ι—Ι > ι—Ιί>1·Η Ή r-l rH I—I rH f—I -ι-Ι r-I Ϊ>1 £>1 -r4 £>(
Ci I >H >, Ql r-4 >1 >1 >1 Ι>ιΟί>1Γ-Η>1
>iCl>,C>iO>i>i>i >1 >i>i>i>iOc:>iC
CQ)>ia)C!|H>iÖ β C CC>iOiM(U>i<1) (Ö 4-1 C ft O Dl fi K) (Ö <0 (ÖnJCOOi-PCQ, ppoos-ioonn M nnonosoo 3·Ω·ΗΜθ4^Η·Η33ίΙί)3·Ηαι·ΗΛ-ΗΜ 44 0·ΡΡιΟΑί4->4-ι44 4-1 4-14-14^0,¾ 04-1¾
I ω I I ω >ι I I I i ι ι i <o >, co ι I
tN-rltNoj-rHinnno) in cn n m .h w -h cn (n , ή o £ , X 0 o a o . o " ’Z o > n X ζ1 «*»
X £ g X
U 5 o £ & ~ o .2 o
X
S O O O 2,
“, υ υ o Q
04 < < < (j
O
» <M Γ4 M
X X X
2 g o ~ :, ·· o 2 2 2 ::: a o o o ^ K X X X o * · · u o o « . o o o x
,,, «Μ M W (J
; · X X X O
; a u u v o o o
* , * I II
* t »
' : fa« X XXX
.,, γ» o n
·" · XXX
ο o o
N (N N
-r XXX
, pj 5 o o u o o o —; u o u o o o
• · I
149 1Ί1724 Η Ή ί—I τΊ Ή r~t Ή Ή
-Η -ιΗ ·Η ^ ι—I rH Ή -Η ‘Η 1—I ·—I
> ιΗ f—I Ή Η ^ι!>ιΉ ί>Η f-Hr-ΗΉι— 04 !>ι ί>ι Ή a i"H ί>ι 1—1 ^ 0ί 1>ι Η ί>ι >ι>ι>ι>ιθα>ιβ >i>i>i>iOC>iC qq>iaP<i)>i<D ce>iftM(u>ia> ns (öco a -p q a iti ie q o a p ca ρρωροοωο ρρΦΜΟΟωο
q q -h a ή Λ ·η p q q -h a <-ι Λ -h P
«Hiw+Jojio+ja'p'M-Po^o+ja ιιιιη^ωιι ι ι ι w >ι ω ι ι <ΝΓΟΠ·Ηω·Η<Ν(ΝΟ)πη·Η(η·Η(ΝΓΜ I ·
O O
. o u £ o n (V ~
X X
o o . o
X
„ O as
B " S
04 O ~
U O
o
• CN N
·; ·: χ x , . o 9 ’’· ‘i a o o , ·. 04 “r °r
*. ' O O
CN
; ,·. x x . . ο a o o J . · I ·
!', , 04 X X
‘ 1 r> :.: : x ο
. . M
*,,,1 - x 1 C4 § :v, o : o o 111724 150 -r-l Ή I—I ·Ρ -H rH -H -Η
Ή ·Η ·Η r—i 1—I Ή Ή Ή >1 ι—I ι—I
> Ήτ—l-r-lrH>i>i-H!>iiHr—l-Hr-1 >ί ·Η £>ι 0η (¾ Η ί>ι ί>^ r-t >ι (¾ ι—I ί>* cc>ia^a)>,a) dc^ana^a) rtjttjcoft-paft mfdcoft+JCft mpidpogojo ΜΜΦΜοΰωο
3 3 ·Ή Q) .-1 .Q -Η P 2 G ·Η Ομ Ή Λ Ή P
ή <η +j ο λ; o +1 ft ή ή +j ο λ; o -p a
I I I 10 >1 LO I I I I I M >1 ω I I
tNron-Pui-HcMCN oirom-Htn-HcscNi ö 6 > u <~> (Y. t~i o
X X
o g n CL· b J g ^ o o g
* ' * «X fN
X X
; * o g _ o g ' ' Tv a a o o
’ N M
: x x • o u , ‘. o o * * · » ;: % 1 x x o ' ΓΊ
„ X X
Is,*, C4 o u„
; O
U
o 111724 151
•H
i-1 ·Η *H
Ή Ή *Η f-H ·—I ·ι-| -ι-{ ·Η Ή ι—I ι-Η /νκ^ιϊ^Ηί^Οίί^Η^Ϊ^ >η >i >* >, >1 >, cc^c^^u^cdc c c α (önicoft-Pcara <ο a a
ΗΜΦΙηΟΡΦΟΜ H M H
a a a 4-14-14-)0.¾ 0-PC4M-I U-| 4-1 4-1
I I I UI >i U> I I I I I I
iNCOn-i-1t/}-HC4(M<M 04 CN (N
Λ 'H Λ Ή A ’-t A a O m U m '-'tn Ou) «l-* fN V WV> tN ^
XHH T· r*i ^ c-S "f* i-S
O -i- o -1- O -i- O
O CJ -H O -H o -H CJ -H
. CJ " r-l " r-t " h rH
£ £ PC >, £ X >, jz X >, £ X >, 0- CJ >, CL O >, O. CJ >, CL O >f
CJ ΐ O rr 0 rt O rt O
T" a -γ°ι -r a -r^a A 0 Λ o rt 0 ·*· 0 CJ U) CJ U) CJ(0 CJ ill
Ή Ή Ή »H
_ n n
f XX
ϋ CJ CJ 0) Q> I; 2 O O % %
K O o CJ ° O
o o o
1 I I
‘ , t 0 fS M r< <N
’ ’ x x x x x o 2 2 2 2 • g 2 2 2 2 %ί Cl CL 0- 0- o.
o o o o o
, N M M M IN
* · X X X X X
: : cj cj cj o o o o o o o
s t I I · I I
»
« I
% X X X X X
! * .n n ; * xx u u * n *n — T” X -r- X *T“ a o 2 o 2 o * ; o o
o CJ
.: o o
s t ι I
152 1 1 17 2 4
Η Ή -H Ή -H -H -H
'—I i—I i—1 i—I i—I i—I r—1 . £11
-y kN r11 ί>Ί ►""’f J1N tN
05c G G G G G G
iti iti iti iti iti iti iti
U H H U U U U
G G 3 3 G G G
4-1 4-1 4-1 4-1 4-1 4h 4-1
I I I I I I I
IN IN IN IN IN IN IN
i Ή t 1H 1H i 1H i Ή i -H i -Hi O01 ow m n «O m o too mo m-v η -V -¾ « λ;« a; « a< « a; 1< X O xo .ox ,0X ,0X lOX .ox
O G o G O G O O G O O G o O G O O G O
(N i—I r< r—I y i r—( n [ ) H n r \ r-l m f \ i—(m ( i H w > £x ^ ^ x >1 H, t. u„ >,i o x r) i>i x o >. x
DJCLU^IlU^-^U — >1 U ~ >1 O ~>iO ~ >1 O
^ <N &| <N 0-4 -r- Cl1 <N Q4 <N -p <N 1T- Q_| <N -t- Q_| «N
x O xo ?Hpx o01 o01 o ° X Λ o x
o G (J G iiGo G 4 O ΰ 4 u GO ΰ 4 U
n O- n Q, ft n Q| o C4 ” ft » C4n XO xc OX ox ox ox ox
(Jw Ow MQ M(J MO MO MO
•H Ή Ή ·Η Ή ·Η ·Η r. .e -ρ -X SZ.
Q- 0. χ X ο.
„ — — Ο Ο α> α> ~ % 2 2 ο ο 2 5 9 05 υ υ ο υ ο ο ο 9 9οο 9 1 ' I I '
CSCN<N<N<N
·; ·: Ν „ X X χ χ χ £ £ 9 9 9 9 9 : ο ο ο ο ο ο ο «2 2 ο ο ο ο ο ,.1 o' cl α. ™ " « «
^ ο Ο 1 1 X 1 X
’. 2 « ο ο υ υ ο : χ χ ο ο ο ο ο O O N N « N Μ . ο ο χ χ χ χ χ V V ο ο ο ο υ ο ο ο ο ο liiti ; =,χ χ χ χ χ χ χ * n rt r> r»
' X X X X
: o o u o
: , IN <N IN CN
_.X x X χ X χ X
6 u i o u Ä o
‘ i, 1^ΓνΟ Γ1 O (nO CN
: o o o o o u o o
; O O O O
| I I I
111724 153 *tH ·γΗ -γΗ τ4 *ρΗ ·γΗ Ή ι—I ·—I ι-Η Ή ·Η Ή γΗ ι—1 ιΗ Ή >ι ιΗ γΗ > >·. >ι >ι >ι >1 >1 ί»ι >ί >ι >ί (¾ >ι C β β >. >. β β β β φ φ φ β β β φ φ φ id J-) +-) -piti id id (¾ a (¾ β β β β β β β 0 0 Ό β Χ)Χ)Χ|β β β Ρ β β 4-1 Ο Ο 04-1 4-1 4-1 ΟιΟιΟι
I ΙΛ W « I I I I I I
ΓΝ -Η -Η ·Η (N CN (N IN (N CN
Η j? ό . χ ...
Ο Μ ο ο ο ο οοο . ο >, o- o o o ο ο ο > η -1_ η η jc JZ η η η |V τι η, Ο γϊ r. n CL Q_ Q- r> r.
Xc-rMXXX XXX
o p g o a o o o a
Ct" .2 u si -S’ J= -r j= -τ’ x: — O ® ~ U a> O a> ^
Is S o" 2 2 o 5 2 o" 5 2 Ä o o o o o o o o o o 9 o 9 o 9 o 9 ' I ' I ' I '
CM CM CM N N CM M CM CM CM
x x x xx x x xxx 2 222222222 o o o 22 2 2 222 a. a. cl a.0. o. cl o. cl a.
bO O O OO O O OOO
* /y/ CM CM CM ΓΜ CM CM «M CMCMCM
w X X X XX X X XXX
o o o o o o o auo ; o ooooooooo
ι »N CM CM CM CM CM CM CMCMCM
X X X XX X X XXX
: o o o ooo o ooo
O O O OO O O OOO
| I I 11 < I t I ( ^ x xxxxxxxxx * · * e n co ro n n r>
XXX XXX
; auo OOO
... CM CM CM CM CM CM
j -f- m ^ I 7 *r~ t I X I
«o 9. 2 2 ο ο o 2 2 2 : - ooo ooo o u o ooo ooo ooo ιΜ 111724 Ή
•ι-l -ιΗ ι—I
•Η -Η t—I »—I Ή -Η -Η Ή ι—1-Ηι—I ·Η £>ι ί>ι r—1 fH ιΗ Ή ;~-
Ρΰ £>< £*< X
>(>(>i>iCCO>i >ι >ι >ι
G>iC>ilUa>GG G G G
röGnJG-POtOiHi id id iti
GlDGlUGOOG G G G
G -H G -G ,Q G >H G G G G
•G +J <G -P O CG Λ<ί >G Ή Ή M-t
I I I I M I >ι I I I I
CNtNmrO-GOJMlN (N (N CN
t -H Ή -H *G
O in in in tn ~ ^ λ; λ; λ; . X o , · o . o < o O o Ή O O Ή O Ή O Ή (J S* ^ f ) (J Ή (J Ή (J Ή
£ r> X >i % n .C >i n JZ « JZ >ϊ -C
fV ”**n O *>1 ~rs. -7> Q. k5^ **r» X *7> Ϊ>Ί Q_ δ 5 8 5 a s t> 8 a 8 o ä cii cu cm X o o o o O m u) w w •H *H Ή ·Η x a.
a O O 9, S o ° «, u u o 2 5=i υ K < < o O u < 9 9
«N
. X
•:*·: o : o ’. : a.
a X X X X X O
: : : oi o o o o o ;£ o o
* (N
... χ ·,·. o ,· o
X X I X X X
< e . * r* (N ^ W <N
X X X X X
: ; ’. o o o o o o O o O O 5 ϊ ! o. a. o. o. a. « ~ O o o o o f.
* (V ΓΝ cn cn rs r* t«J
: . , x x x x x (9 • . u u u u u 9 o o o - o o 9
* <N CN CN CN fN \J
:··: ι x x x x o (J o u o o o o o o 155 1 1 1724 H ·Η Ή Ή f—I ·Η -γ-ϊ ι—1 -Η ι—I Ή ι—! -ιΗ Ή ι—I -M t—t ·Η
ι-Η £>ι ι—I Ή κ*ι κ’ί Ή ι—I '—I *“( -Η "Ή '—I
> r* r“ >ί >1 >ι f—Ι>ϊ£1|Ή>ι>·ι>ι>ιΉ>ι£Ι^Ή>ι Q/ έ έ ^ C<UG>i(DH>iQ4G<UG>i<l)H>ift
itS-PiOCftOiGO (d-PrtJCftftCO
HGHOIOOOIG MGH<DOO<DH
G 43 G -H M H -W 04 3Λ3·γ<^Η·Η(1(
4-1 O 44 +J Oi Ai -P O 4-1 O 44 4-> Oi Ai 4-> O
iiniii>iitniwiii>iiw (N-rHntNCN 01 m -H Γ4 -H CO CN (N wn-H
ό ό . O <_>
> O _c n _c -G -C
rV ~~n Q- n Ql 0- ΟΙ I
o o N C*
Ϊ I
0 o
a o 2 o O
% O. cl O O
^ o o < <
CN CH
1 I
o a o o t <
:; ': ^ x x x X
. ¾ “· “ “ “· ‘ ‘ Γ4
X
* > ' * — o : -Γ X r: ,, f x o o * M fi- •: · _ x i e o
CtJ ^ O CL "
; - · ^ O ™ 0 . X
• o q £
u X O
,; o o * '? 5 o 156 111724
•H - -H
H i—I Ή -H i—I -H
H pH ·Η i—1 -H i—f Ή £>i i—t -H -H ·Η ·Η -H
> Η*γΗΪΗι—I >i -pH £*-4 pH Ή 3*1 i—I ^1 Ή iH pH pH iH rH
Oh p>1 pH >1 i>1 ft H >1 3*1 *H 3>1 £>1 ft *H >· >1 >1 3*1 3*1 3*1 3>i >i C >i O 3*i β 3>i >i C 3*ι Ο >i β >1 >1 3>i >1 >i c>i(ucm>i φ β 3*1 <u β h >i aie β β β c (ΰβ+JrdQic; a<dc-t-i(oac q φ m <e m «s Η φ β η ο φ ο η φ β h ο φ oh μ π η h 3 ·Η Λ 3 Η ·Η Η β ·Η .Q β .Η ·Η Η β β β β 3
M-i-POM-H^+J ΟρΐΗ-μθΜ-ΙΛί+J (1 Ή <4-ι Μ-ι Μ-ι H-I
ΐΐ(ηι>ιΐ.βιιιιηΐ3Ηΐ.βΐι ι ι ι ι
(Nn-HrOtnrMPpOJCNrO-pHnMtNftrMtN CN tN CN (N
ι ι · ι ι ι ι o o o o o o o . (J CJ ooouu n n n n n r> n (Y. '*~r> "‘n **~n *"n *""?> ““n X X xxxxx ο u u y y υ u x £ x o n CJ a — CJ <u = vj ^ «Ν ^ O fN *—
05 < < CjOUoO
o 9 o
• 1 I
CJI X xxxxx
; "= u- LL U. LL U. LL LL
PS
* ΪΜ IN IN
M.: j I ι ξ x ! i : ; o o o o o o o _ I o 2 2 2 o o ... (XQ_ " 0.0.0.«« . . o o o o ^ ^
, « CJ « ph pp CJ CJ
'; '1 5 ° 5 5 5 °~ ? 5 9 9 9 g g o o o I * t «7 111724
•H
•H r-f -H
Ή ·Η ·Η rH ^ I—I
'—I Η Η ·Η ·Η > >i -C n JZ £ JZ jz >1 >1 H H >i (¾ >i 04 N a. cl cl a. a. Q-^^^^coa
C C C >i >i <D M <D
(d (OnJCC-PCLCL
Ll Li Li 0) <D 3 O O
Cl 3 3 -rl -rl Λ H Li
M-ι t|-i iw +J +J o^JCL
I I I I I U) >1 I
CN Γ4 n CM ΓΟ Ή U) ON
ό ό ό ό ό ό ό
.OOCJOOCJO
£ m η ρϊ «> « ο «·> (V. r> tn r> tn γ> in «·>
IIIIIII
2 2 2 2 2 2 2 M (Μ Μ
XXI
ο ο ο .e 2 2 2 ο. cl ο. α.
ΒθΙΙΐΟΟ° « ο ° ° ° χ" X* χ" ο α ο ο • ο ο ο M m e*
XXX
O O U
ο ο ο < I « rv η
. X X
22 • : 2 2 : ο. Q- Β _ I O O X X — 04 χ Ο χΝ χ ° ° Χ υ Ο : ο ο , N C4
X X
CJ ο ο ο 1 1 ^U-XXXIXU- f rv rs
XX
o o ' i —- en m ! 2 2 5 u * . Q. Q_ *·* * cl ° ° χ o χ 5 χ 04 ~ " o 2 o H o
• ·,: 5 5 o O
o o o o : xl'· <j o o o 158 1 1 1724
•H
•H rH *H
Ή Ή I-H rH
Ή i-H *H ·Η >ί
-- _ >i >1 M Ή >1 Cl* >M
"9 >i S* >i N G O G
d to g g -μ aa
M M d) 0) G O O
G G -n -η λ a m M-l 14-1 +J 4-1 o M a il i i tn >1 i in m (n n -n m cn ό > “ o£ *>
X
o
M
X
o o o.
3 O
« X
(J
O
ΓΝ
X
o 9 I ta -r- « 1 » ·
' ‘ 1 ' 3 LL
I , ' CX
r>
,"·. X
* ,* o
«N
• _ X
a « ^ «N
• · O
O
• : o

Claims (58)

111724
1. Menetelmä yhdisteen valmistamiseksi, jonka kaava on (A) 5 T- 0CH2(0CH2)m0P(0)(0H)2 n (A) jossa T on taksaaniryhmä, jonka C13-hiilessä on substituoitu 10 3-amino-2-hydroksipropanoyylioksiryhmä; m on 0 tai kokonaisluku 1 - 6; n on 1, 2 tai 3; tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävän suolan valmistamiseksi; tunnettu siitä, että poistetaan hydroksi-15 ja fosfonosuojaryhmä(t) yhdisteestä, jonka kaava on (C) Τ'- 0CH2(0CH2)m0P(0)(0Ry)2 n <c> jossa Ry on fosfonosuojaryhmä ja Τ' on taksaanijohdannai-20 nen, jossa reagoimattomat hydroksiryhmat on suojattu.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että taksaaniryhmälle edelleen on ; tunnusomaista, että se sisältää vähintään yhden C11-C12- ,_·[ kaksoissidoksen, Cl-hydroksiryhmän, C2-bentsoyylioksiryh- .* 25 män, C4-asetyylioksiryhmän, C9-oksiryhmän ja C5-C20-oks- etaaniryhmän. J
* * • ’ 3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, V * tunnettu siitä, että taksaaniryhmä on johdettu tähteestä, jonka kaava on 30 i s R” R7e R?e 35 ....: H0 ocoph 160 1 1 1724 jossa R2e' on vety ja R2e on vety, hydroksi, -0C(0)RX tai -0C(0)0Rx; tai R2e on vety ja R2e' on fluori; R3e on vety, hydroksi, -0C(0)Rx, Ci-6-alkyylioksi tai -0C(0)0Rx; toinen 5 symboleista R6e ja R7e on vety ja toinen on hydroksi tai -0C(0)0Rx; tai R6e ja R7e muodostavat yhdessä oksoryhmän; Rx on Ci-g-alkyyli, joka mahdollisesti on substituoitu yhdestä kuuteen samanlaisella tai erilaisella halogeeniatomilla, C3-6-sykloalkyyli, C2-6-alkenyyli, tai radikaali, jonka kaava 10 on Ra '"-'M, jossa D on sidos tai Ci_s-alkyyli; ja Ra, Rb ja Rc ovat itsenäisesti vety, amino, Ci-6-alkyyliamino, di-Ci-6- alkyyliamino, halogeeni, Ci-6-alkyyli tai Ci-6-alkoksi.
4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että substituoitu 3-amino-2-• - · hydroksipropanoyyli oksi ryhmä on johdettu tähteestä, jonka kaava on V: R4(0)pC0blH 0 T: bR1e 20 jossa Rle on vety, -C(0)Rx tai -C(0)0Rx; R4 ja R5 ovat itsenäisesti Ci-6-alkyyli, C2-G-alkenyyli, C2-6~ ; alkynyyli tai -Z-R6; * « * Z on suora sidos, Ci-6-alkyyli tai C2-6-alkenyyli; 1 · ;·’ 25 R6 on aryyli, substituoitu aryyli, C3-6-sykloalkyyli tai heteroaryyli ,- •:': p on 0 tai 1; ja Rx on kuten aikaisemmin on määritelty. 111724 161 ^
5 R5^/VvN'^'v'o ^ /nv<^>No Rlb Jf / AcO H0 ÖCOPh jossa Rlb on hydroksi, suojattu hydroksi, -OCH2SCH3, 10 -0C(0)RX tai -0C(0)0Rx; R2 on vety, ja R2b on vety, hydrok si, suojattu hydroksi, -OCH2SCH3 tai -0C(0)0Rx; tai R2' on fluori, ja R2b on vety; R3b on vety, hydroksi, suojattu hydroksi, asetoksi, -OCH2SCH3 tai -0C(0)0Rx; toinen symboleista R6b ja R7b on vety ja toinen on hydroksi, 15 suojattu hydroksi, Ci-6-alkanoyylioksi tai -OCH2SCH3; tai R6b ja R7b muodostavat yhdessä oksoryhmän; sillä edellytyksellä, että vähintään yksi symboleista Rlb, R2b, R3b, R6b tai R7b on -OCH2SCH3; p, R4, R5 ja Rx ovat kuten aikaisemmin on määritelty.
5. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että taksaaniryhmälle edelleen on tunnusomaista, että se sisältää vähintään yhden C11-C12-kaksoissidoksen, Cl-hydroksiryhmän, C2-bentsoyylioksiryh- 5 män, C4-asetyylioksiryhmän, C9-oksiryhmän ja C5-C20-oks-etääniryhmän; ja substituoitu 3-amino-2-hydroksipropanoyy-lioksiryhmä on johdettu tähteestä, jonka kaava on R4(0)pC0yH 0 OR1e jossa Rle, R4, R5 ja p ovat kuten aikaisemmin on määritelty. 10
6. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että kaavan (A) mukaisella yhdisteellä on kaava v!j/ r2 ,· R4(0)pC0tslH O \ ) ......y j . AcÖ *· H0 OCOPh t · jossa ;* 15 R1 on hydroksi, -0CH2 (0CH2) m0P (0) (OH)2, -0C(0)Rx tai : -OC(0)0RX ; .* R2' on vety, ja R2 on vety, hydroksi, -OCH2 (0CH2) m0P (O) (OH) 2 : tai -OC (0) 0RX; tai R2' on fluori, ja R2 on vety;
7. Patenttivaatimuksen 6 mukainen menetelmä, 5 tunnettu siitä, että R2' on vety ja R2 on -OCH2- OP(O)(OH)2; tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävä suola.
8. Patenttivaatimuksen 7 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että R1 on hydroksi tai -0C(0)0Rx; ja Rx on kuten aikaisemmin on määritelty.
9. Patenttivaatimuksen 8 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että Rx on Ci-6~alkyyli.
10 R5'^Xr/^,0'......{ CH3SCH2OCH2Ö // Aco^0 H0 ÖCOPh jossa R2 , R2b, R3b, R4, R5, R6b, R7b ja p ovat kuten aikai-15 semmin on määritelty.
10. Patenttivaatimuksen 8 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että R3 on vety, hydroksi tai ase-toksi.
11. Patenttivaatimuksen 8 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että R4(0)p on fenyyli tai t-bu-toksi.
12. Patenttivaatimuksen 8 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että R5 on fenyyli, 2-furyyli tai 20 2-tienyyli.
13. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, *;··· tunnettu siitä, että valmistetaan 2'-O-(etoksikar- .' : bonyyli)-7-0-(fosfono-oksimetyyli)paklitakseli tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävä suola. ; 25
14. Patenttivaatimuksen 13 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan natriumsuola.
15. Patenttivaatimuksen 13 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan trietanoliamii-nisuola. ; '_· 30
16. Patenttivaatimuksen 13 mukainen menetelmä, ; ; tunnettu siitä, että valmistetaan trietyyliamiini- . suola. ’ II,’
17. Patenttivaatimuksen 13 mukainen menetelmä, » 1 tunnettu siitä, että valmistetaan arginiinisuola. 1β, 111724 loo
18. Patenttivaatimuksen 13 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan lysiinisuola.
19. Patenttivaatimuksen 13 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan etanoliamiini- 5 suola.
20. Patenttivaatimuksen 13 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan N-metyyligluka-miinisuola.
20 R3 on vety, hydroksi, asetoksi, -0CH2 (0CH2) m0P (O) (OH) 2 tai -OC (0) 0RX; , toinen symboleista R6 ja R7 on vety ja toinen on hydroksi, j Ci-6-alkanoyylioksi tai -0CH2 (0CH2) m0P (O) (0H)2; tai R6 ja R7 muodostavat yhdessä oksiryhmän; sillä edellytyksellä, että 2 5 vähintään yksi symboleista R1, R2, R3, R6 tai R7 on -OCH2-(0CH2) mOP (0) (OH) 2; * » «2 111724 m on O, 1 tai 2; R4, R5, Rx ja p ovat kuten aikaisemmin on määritelty; tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävä suola.
21. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, 10 tunnettu siitä, että valmistetaan 7-0-(fosfono- oksimetyyli)paklitakseli tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävä suola.
22. Patenttivaatimuksen 21 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan natriumsuola.
23. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 3'-N-de- bentsoyyli-3'-desfenyyli-3'-N-(t-butyylioksikarbonyyli)-3'-(2-furyyli)-2'-O-etyylioksikarbonyyli-7-O-(fosfono-oksimetyyli)paklitakseli tai sen farmaseuttisesti hyväk-20 syttävä suola.
24. Patenttivaatimuksen 23 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan trietanoliamii- .'. : nisuola. * ·
25. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, *t 25 tunnettu siitä, että valmistetaan 3'-N-debentsoyy- li-3'-desfenyyli-3'-N-(t-butyylioksikarbonyyli)-3'-(2-tie-nyyli)-2'-O-etyylioksikarbonyyli-7-O-(fosfono-oksimetyy-li)paklitakseli tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävä suola . ; 30
26. Patenttivaatimuksen 25 mukainen menetelmä, ; tunnettu siitä, että valmistetaan trietanoliamii- : I·, nisuola.
'27. Patenttivaatimuksen 6 mukainen menetelmä, ;· tunnettu siitä, että R1 on -0CH20P(0) (OH) 2; tai sen • ' : 35 farmaseuttisesti hyväksyttävä suola. ιω 111724
28. Patenttivaatimuksen 27 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että R2' on vety, R2 on vety, hyd-roksi tai -0C(0)0Rx, ja Rx on määritelty kuten patenttivaatimuksessa 6.
29. Patenttivaatimuksen 28 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että R3 on vety, hydroksi tai ase-toksi.
30. Patenttivaatimuksen 28 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että R4(0)p on fenyyli tai t-bu- 10 toksi.
31. Patenttivaatimuksen 28 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että R5 on fenyyli.
32. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 2'-O-(fosfono- 15 oksimetyyli)paklitakseli tai sen farmaseuttisesti hyväk syttävä suola.
33. Patenttivaatimuksen 6 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että R1 ja R2 ovat molemmat -OCH2-OP(O)(OH)2; tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävä suola.
34. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 2',7'-O-bis(fos-,, fono-oksimetyyli) paklitakseli tai sen farmaseuttisesti 1 · . ; hyväksyttävä suola.
35. Patenttivaatimuksen 34 mukainen menetelmä, ; 25 tunnettu siitä, että valmistetaan natriumsuola.
• 36. Patenttivaatimuksen 6 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että R1 on -0CH20P(0) (OH) 2; tai sen · farmaseuttisesti hyväksyttävä suola.
37. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, ·; 30 tunnettu siitä, että valmistetaan 2'-O-(fosfono- " ; oksimetoksimetyyli)paklitakseli tai sen farmaseuttisesti , \ hyväksyttävä suola.
38. Patenttivaatimuksen 37 mukainen menetelmä, ·'' tunnettu siitä, että valmistetaan trietanoliamii- 35 nisuola. 165 1 1 17 2 4
39. Patenttivaatimuksen 6 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että R3 on -OCH20P(0) (OH) 2 tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävä suola.
40. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, 5 tunnettu siitä, että valmistetaan 10-desasetyy- li-3'-N-debentsoyyli-3'-N-(t-butyylioksikarbonyyli)-10-0-(fosfono-oksimetyyli)paklitakseli tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävä suola.
41. Patenttivaatimuksen 40 mukainen menetelmä, 10 tunnettu siitä, että valmistetaan trietanoliamii- nisuola.
42. Menetelmä yhdisteen valmistamiseksi, jonka kaava on (B) 15 Τ'- OCH2(OCH2)mSCH3 (B) n j ossa T' on taksaaniryhmä, jonka C13-hiilessä on substituoitu 3-amino-2-hydroksipropanoyylioksiryhmä ja jossa reagoimat-20 tomat hydroksiryhmät on suojattu; m on 0 tai kokonaisluku 1 - 6; ja ____: n on 1, 2 tai 3, ; tunnettu siitä, että yhdiste, jonka kaava on (Aa) t 1 ::· 25 τ’ [oh] n <*a> ·· saatetaan reagoimaan dimetyylisulfoksidin ja etikkahappo- anhydridin kanssa, tai dimetyylisulfidin ja orgaanisen · peroksidin kanssa.
43. Patenttivaatimuksen 42 mukainen menetelmä, : · : 30 tunnettu siitä, että orgaaninen peroksidi on bent- soyyliperoksidi.
. 44. Patenttivaatimuksen 42 mukainen menetelmä, ·;;/ tunnettu siitä, että kaavan (B) mukaisen yhdisteen '·*’ kaava on : 35 166 1 1 1724 R3b R6b R^R2b R4 (O) pCONH o \ /
45. Patenttivaatimuksen 44 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 7-0-metyylitio- ···· metyylipaklitakseli.
= ; 46. Patenttivaatimuksen 44 mukainen menetelmä, , tunnettu siitä, että valmistetaan 2'-O-(bentsyy- 25 lioksikarbonyyli)-7-0-metyylitiometyylipaklitakseli.
47. Patenttivaatimuksen 44 mukainen menetelmä, > · • tunnettu siitä, että valmistetaan 2'-0-(etoksikar- I » ' bonyyli)-7-0-metyylitiometyylipaklitakseli.
48. Patenttivaatimuksen 44 mukainen menetelmä, • 30 tunnettu siitä, että valmistetaan 2'-0-(metyyli- : tiometyyli)-7-0-(trietyylisilyyli)paklitakseli.
• 49. Patenttivaatimuksen 44 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 2'-O-(metyyli- » t ·;* tiometyyli) paklitakseli. 35 111724
50. Patenttivaatimuksen 44 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 2',7'-O-bis(me-tyylitiometyyli)paklitakseli.
51. Patenttivaatimuksen 44 mukainen menetelmä, 5 tunnettu siitä, että valmistetaan 3'-N-debentsoyy- li-3'-desfenyyli-3'-N-(t-butyylioksikarbonyyli)-3'-(2-fu-ryyli)-7-0-metyylitiometyyli)paklitakseli.
52. Patenttivaatimuksen 44 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 3'-N-debentsoyy- 10 li-3'-desfenyyli-3'-N-(t-butyylioksikarbonyyli)-3'-(2-fu-ryyli)-2'-0-etyylioksikarbonyyli-7-0-metyylitiometyyli)-paklitakseli.
53. Patenttivaatimuksen 44 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 3'-N-debentsoyy- 15 li-3'-desfenyyli-3'-N-(t-butyylioksikarbonyyli)-3'-(2-tie-nyyli)-7-0-metyylitiometyyli)paklitakseli.
54. Patenttivaatimuksen 44 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 3'-N-debentsoyy-li-3'-desfenyyli-3'-N-(t-butyylioksikarbonyyli)-3'-(2-tie- 20 nyyli)-2'-O-etyylioksikarbonyyli-7-O-metyylitiometyyli)-paklitakseli.
;·*· 55. Menetelmä yhdisteen valmistamiseksi, jonka j kaava on (B1) 25 Τ'- OCH2(OCH2)mSCH3 (B') : [ Jn *..! jossa • · » ’·’ * Τ' on taksaaniryhmä, jonka C13-hiilessä on substituoitu 3- amino-2-hydroksipropanoyylioksiryhmä ja jossa reagoimat-i ’,· 30 tomat hydroksiryhmät on suojattu; :>t_! m on 0 tai kokonaisluku 1 - 6; ja : n on 1, 2 tai 3, tunnettu siitä, että yhdiste, jonka kaava on (Aa) : V 35 Τ’- [OH] n (Aa) 111724 saatetaan reagoimaan yhdisteen kanssa, jonka kaava on CH3SCH2OCH2SCH3 ja N-jodisukkinimidin kanssa.
56. Patenttivaatimuksen 55 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan yhdiste, jonka 5 kaava on R3b 06b R7b \ R2b R4 (0) pCONH o \ / JL'R2'
57. Patenttivaatimuksen 56 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 2'-O-(metyyli- tiometoksimetyyli)-7-0-(trietyylisilyyli)paklitakseli.
58. Patenttivaatimuksen 56 mukainen menetelmä, 20 tunnettu siitä, että valmistetaan 2'-0-(metyyli tiometoksime tyyli) -7-0-bentsyylioksikarbonyylipaklitak-seli. 1 · · t t • * • · • · · > * * lit * I 169 1 1 1724
FI935821A 1992-12-24 1993-12-23 Menetelmä taksaanijohdanaisten fosfono-oksimetyylieettereiden valmistamiseksi FI111724B (fi)

Applications Claiming Priority (6)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US99645592A 1992-12-24 1992-12-24
US99645592 1992-12-24
US10801593A 1993-08-17 1993-08-17
US10801593 1993-08-17
US15484093A 1993-11-24 1993-11-24
US15484093 1993-11-24

Publications (3)

Publication Number Publication Date
FI935821A0 FI935821A0 (fi) 1993-12-23
FI935821A FI935821A (fi) 1994-06-25
FI111724B true FI111724B (fi) 2003-09-15

Family

ID=27380404

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI935821A FI111724B (fi) 1992-12-24 1993-12-23 Menetelmä taksaanijohdanaisten fosfono-oksimetyylieettereiden valmistamiseksi

Country Status (21)

Country Link
EP (1) EP0604910B1 (fi)
JP (1) JP3189140B2 (fi)
KR (2) KR100241852B1 (fi)
CN (2) CN1037774C (fi)
AT (1) ATE193891T1 (fi)
AU (1) AU660570B2 (fi)
CA (1) CA2111527C (fi)
CZ (1) CZ289871B6 (fi)
DE (1) DE69328858T2 (fi)
DK (1) DK0604910T3 (fi)
ES (1) ES2147739T3 (fi)
FI (1) FI111724B (fi)
GR (1) GR3034312T3 (fi)
HU (1) HUT65547A (fi)
IL (1) IL108111A (fi)
MX (1) MX9308012A (fi)
NO (1) NO310238B1 (fi)
NZ (1) NZ250550A (fi)
PL (1) PL175014B1 (fi)
PT (1) PT604910E (fi)
TW (1) TW410228B (fi)

Families Citing this family (44)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES2230790T3 (es) * 1992-01-15 2005-05-01 E.R. SQUIBB &amp; SONS, INC. Procedimientos enzimaticos para la resolucion de mezclas enantiomericas de compuestos utiles como intermedios en la preparacion de taxanos.
DE69333989T2 (de) * 1992-11-13 2006-08-17 Florida State University, Tallahassee Taxane mit einer alkylsubstituierten Seitenkette und sie enthaltende pharmazeutische Zusammensetzungen
FR2698871B1 (fr) 1992-12-09 1995-02-24 Rhone Poulenc Rorer Sa Nouveau taxoïdes, leur préparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent.
KR100378612B1 (ko) * 1992-12-23 2003-04-03 브리스톨-마이어스스퀴브컴파니 신규 측쇄-함유 탁산 및 그의 중간체 화합물
US6593482B2 (en) * 1993-02-01 2003-07-15 Aventis Pharma S.A. Methods for preparing new taxoids and pharmaceutical compositions containing them
TW397866B (en) 1993-07-14 2000-07-11 Bristol Myers Squibb Co Enzymatic processes for the resolution of enantiomeric mixtures of compounds useful as intermediates in the preparation of taxanes
CA2129288C (en) * 1993-08-17 2000-05-16 Jerzy Golik Phosphonooxymethyl esters of taxane derivatives
FR2712289B1 (fr) * 1993-11-08 1996-01-05 Rhone Poulenc Rorer Sa Nouveaux dérivés de taxicine, leur préparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent.
US5677470A (en) * 1994-06-28 1997-10-14 Tanabe Seiyaku Co., Ltd. Baccatin derivatives and processes for preparing the same
US6201140B1 (en) * 1994-07-28 2001-03-13 Bristol-Myers Squibb Company 7-0-ethers of taxane derivatives
AU4133096A (en) * 1994-10-28 1996-05-23 Research Foundation Of The State University Of New York, The Taxoid derivatives, their preparation and their use as antitumor agents
US6458976B1 (en) 1994-10-28 2002-10-01 The Research Foundation Of State University Of New York Taxoid anti-tumor agents, pharmaceutical compositions, and treatment methods
US6500858B2 (en) 1994-10-28 2002-12-31 The Research Foundation Of The State University Of New York Taxoid anti-tumor agents and pharmaceutical compositions thereof
CA2162759A1 (en) * 1994-11-17 1996-05-18 Kenji Tsujihara Baccatin derivatives and processes for preparing the same
US5489589A (en) * 1994-12-07 1996-02-06 Bristol-Myers Squibb Company Amino acid derivatives of paclitaxel
IT1275936B1 (it) * 1995-03-17 1997-10-24 Indena Spa Derivati della 10-deacetilbaccatina iii e della 10-deacetil-14b- idrossibaccatina iii loro metodo di preparazione e formulazioni
US6372780B2 (en) 1995-03-27 2002-04-16 Aventis Pharma S.A. Methods of treating cell lines expressing multidrug resistance P-glycoprotein
MA23823A1 (fr) 1995-03-27 1996-10-01 Aventis Pharma Sa Nouveaux taxoides, leur preparation et les compositions qui les contiennent
US5847170A (en) * 1995-03-27 1998-12-08 Rhone-Poulenc Rorer, S.A. Taxoids, their preparation and pharmaceutical compositions containing them
US5840929A (en) * 1995-04-14 1998-11-24 Bristol-Myers Squibb Company C4 methoxy ether derivatives of paclitaxel
TW354293B (en) * 1995-06-06 1999-03-11 Bristol Myers Squibb Co Prodrugs of paclitaxel derivatives
US6441025B2 (en) 1996-03-12 2002-08-27 Pg-Txl Company, L.P. Water soluble paclitaxel derivatives
CA2250295C (en) 1996-03-12 2008-12-30 Pg-Txl Company L.P. Water soluble paclitaxel prodrugs
US5635531A (en) * 1996-07-08 1997-06-03 Bristol-Myers Squibb Company 3'-aminocarbonyloxy paclitaxels
US5977386A (en) * 1996-12-24 1999-11-02 Bristol-Myers Squibb Company 6-thio-substituted paclitaxels
US5902822A (en) * 1997-02-28 1999-05-11 Bristol-Myers Squibb Company 7-methylthiooxomethyl and 7-methylthiodioxomethyl paclitaxels
US6156789A (en) * 1998-03-17 2000-12-05 Rhone-Poulenc Rorer S.A. Method for treating abnormal cell proliferation in the brain
US6204257B1 (en) * 1998-08-07 2001-03-20 Universtiy Of Kansas Water soluble prodrugs of hindered alcohols
US6362172B2 (en) 2000-01-20 2002-03-26 Bristol-Myers Squibb Company Water soluble prodrugs of azole compounds
US6649632B2 (en) 2000-02-02 2003-11-18 Fsu Research Foundation, Inc. C10 ester substituted taxanes
KR20010112395A (ko) 2000-02-02 2001-12-20 플로리다 스테이트 유니버시티 리서치 파운데이션, 인크 항종양제로서의 ｃ７ 카르보네이트 치환된 탁산
PL350028A1 (en) 2000-02-02 2002-10-21 Univ Florida State Res Found C10 carbonate substituted taxanes as antitumor agents
US20020077290A1 (en) 2000-03-17 2002-06-20 Rama Bhatt Polyglutamic acid-camptothecin conjugates and methods of preparation
WO2002024178A2 (en) * 2000-09-22 2002-03-28 Bristol-Myers Squibb Company Method for reducing toxicity of combined chemotherapies
CA2422964A1 (en) 2000-09-22 2002-03-28 Bristol Myers Squibb Company Method for reducing toxicity of combined chemotherapies
US6448401B1 (en) 2000-11-20 2002-09-10 Bristol-Myers Squibb Company Process for water soluble azole compounds
KR20050044621A (ko) 2001-11-30 2005-05-12 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 파클리탁셀 용매화물
US7834043B2 (en) 2003-12-11 2010-11-16 Abbott Laboratories HIV protease inhibiting compounds
PE20050693A1 (es) 2004-02-13 2005-09-27 Univ Florida State Res Found Taxanos sustituidos con esteres de ciclopentilo en c10
WO2006014282A2 (en) 2004-07-06 2006-02-09 Abbott Laboratories Prodrugs of hiv protease inhibitors
ES2389518T3 (es) 2008-01-18 2012-10-26 Indena S.P.A. Formas sólidas de ortataxel
JP2011517455A (ja) 2008-03-31 2011-06-09 フロリダ・ステイト・ユニバーシティ・リサーチ・ファウンデイション・インコーポレイテッド Ｃ（１０）エチルエステルおよびｃ（１０）シクロプロピルエステル置換タキサン
CN101648973B (zh) * 2009-09-03 2012-05-30 漆又毛 水溶性紫杉烷及制备方法
EP2749565B1 (en) * 2011-08-25 2017-05-31 Bonac Corporation Nucleoside phosphoramidates for producing nucleic acids

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4942184A (en) * 1988-03-07 1990-07-17 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Water soluble, antineoplastic derivatives of taxol
US4960790A (en) * 1989-03-09 1990-10-02 University Of Kansas Derivatives of taxol, pharmaceutical compositions thereof and methods for the preparation thereof
US5059699A (en) * 1990-08-28 1991-10-22 Virginia Tech Intellectual Properties, Inc. Water soluble derivatives of taxol
FR2678930B1 (fr) * 1991-07-10 1995-01-13 Rhone Poulenc Rorer Sa Procede de preparation de derives de la baccatine iii et de la desacetyl-10 baccatine iii.
US5272171A (en) * 1992-02-13 1993-12-21 Bristol-Myers Squibb Company Phosphonooxy and carbonate derivatives of taxol
CA2129288C (en) * 1993-08-17 2000-05-16 Jerzy Golik Phosphonooxymethyl esters of taxane derivatives

Also Published As

Publication number Publication date
DK0604910T3 (da) 2000-07-31
HUT65547A (en) 1994-06-28
IL108111A0 (en) 1994-04-12
PT604910E (pt) 2000-09-29
DE69328858D1 (de) 2000-07-20
CN1093369A (zh) 1994-10-12
TW410228B (en) 2000-11-01
ES2147739T3 (es) 2000-10-01
NO934614D0 (no) 1993-12-15
PL175014B1 (pl) 1998-10-30
MX9308012A (es) 1994-08-31
AU660570B2 (en) 1995-06-29
KR100274373B1 (en) 2000-12-15
GR3034312T3 (en) 2000-12-29
CN1184219C (zh) 2005-01-12
DE69328858T2 (de) 2001-03-01
EP0604910B1 (en) 2000-06-14
CN1037774C (zh) 1998-03-18
PL301610A1 (en) 1994-06-27
NO310238B1 (no) 2001-06-11
ATE193891T1 (de) 2000-06-15
IL108111A (en) 2002-09-12
KR940014375A (ko) 1994-07-18
JP3189140B2 (ja) 2001-07-16
AU5260993A (en) 1994-07-07
CA2111527C (en) 2000-07-18
JPH072885A (ja) 1995-01-06
CA2111527A1 (en) 1994-06-25
CZ285593A3 (en) 1994-12-15
CN1174838A (zh) 1998-03-04
KR100241852B1 (ko) 2000-03-02
FI935821A0 (fi) 1993-12-23
NO934614L (no) 1994-06-27
FI935821A (fi) 1994-06-25
NZ250550A (en) 1995-02-24
CZ289871B6 (cs) 2002-04-17
EP0604910A1 (en) 1994-07-06

Similar Documents

Publication Publication Date Title
FI111724B (fi) Menetelmä taksaanijohdanaisten fosfono-oksimetyylieettereiden valmistamiseksi
FI113271B (fi) Taksaanijohdannaisten fosfono-oksimetyylieetterit
US6455575B2 (en) Phosphonooxymethyl ethers of taxane derivatives
FI109795B (fi) Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten 6,7-modifioitujen paklitakseleiden valmistamiseksi
EP0590267B1 (en) Deoxy taxols
EP0694539B1 (en) 7-O-Ethers of taxane derivatives
FI110942B (fi) Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten fluoritaksolien valmistamiseksi
AU3477797A (en) 7-deoxy-6-substituted paclitaxels
RU2136673C1 (ru) Фосфонооксиметиловые эфиры таксановых производных, промежуточные соединения, противоопухолевая фармацевтическая композиция, способ ингибирования роста опухоли у млекопитающих
RU2131874C1 (ru) Фторотаксолы, промежуточные соединения, фармацевтическая композиция и способ лечения
KR100292331B1 (ko) 플루오로탁솔

Legal Events

Date Code Title Description
MA Patent expired