ES2939049T3

ES2939049T3 - Proceso para preparar derivados de purina

Info

Publication number: ES2939049T3
Application number: ES18702530T
Authority: ES
Inventors: Ben Skead; Robert Westwood; Derek Londesbrough; Julian Northen; Chris Atherton
Original assignee: Cyclacel Ltd
Current assignee: Cyclacel Ltd
Priority date: 2017-01-26
Filing date: 2018-01-25
Publication date: 2023-04-18
Anticipated expiration: 2038-01-25
Also published as: CN110248943B; CN110248943A; AU2018213119B2; EP4212533A1; PL3573988T3; EP3573988B1; JP2020505348A; CA3050061A1; WO2018138500A1; KR102524773B1; US10927113B2; KR20190111043A; EP3573988A1; US20190389863A1; AU2018213119A1; JP2022163113A; JP7122759B2

Abstract

La presente invención se refiere a un proceso para preparar un compuesto de fórmula [I], comprendiendo dicho proceso las etapas de: fórmula [II]+fórmula [III]->fórmula [I] (i) formar una mezcla de reacción que comprende (a) un compuesto de fórmula [II], (b) un compuesto de fórmula [III] y (c) 1,2-propanodiol o polietilenglicol, o una mezcla de los mismos, y opcionalmente (d) una base; (ii) calentar dicha mezcla de reacción a una temperatura de al menos aproximadamente 150°C para formar un compuesto de fórmula [I]; (iii) aislar dicho compuesto de fórmula [I]; y (iv) opcionalmente convertir dicho compuesto de fórmula [I] en forma de sal; donde: R1 y R2 son cada uno independientemente H, alquilo o haloalquilo; cada uno de R3 y R4 es independientemente H, alquilo, haloalquilo o arilo; R5 es alquilo, alquenilo, cicloalquilo o cicloalquilalquilo, cada uno de los cuales puede estar opcionalmente sustituido con uno o más grupos OH; R6 se selecciona de ciclopropilamino, ciclopropilmetilamino, ciclobutilamino, ciclobutilmetilamino y fórmula (A) donde uno de X, Y y Z es N y el resto es CR9; R7, R8 y cada R9 son independientemente H, alquilo o haloalquilo, en el que al menos uno de R7, R8 y R9 es distinto de H. Otros aspectos de la invención se refieren a un proceso altamente diastereoselectivo para la preparación de compuestos de fórmula [III] , un proceso para preparar intermedios de fórmula [II] y otros intermedios útiles en la síntesis de compuestos de fórmula [I], y un proceso para preparar la sal tartrato cristalina y la base libre de compuestos de fórmula [I]. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Proceso para preparar derivados de purina

La presente invención se relaciona con un proceso para preparar derivados de purina, e intermediarios y derivados relacionados con los mismos.

Antecedentes de la invención

Los derivados de purina que muestran actividad inhibidora de CDK (por sus siglas en inglés) se divulgan en WO 2008/122767 (Cyclacel Limited; Cancer Research Technology Limited). A modo de ejemplo, los estudios han demostrado que el compuesto [1], que tiene el nombre químico (2R,3S)-3-(6-((4,6-dimetilpiridin-3-ilmetilamino)-9-isopropil-9H-purin-2-ilamino)pentan-2-ol, exhibe una potente actividad inhibidora de CDK y, por lo tanto, tiene aplicaciones terapéuticas potenciales en el tratamiento de trastornos proliferativos, trastornos inflamatorios e inmunitariamente mediados, trastornos autoinmunes y autoinmunitariamente mediados, trastornos renales, trastornos cardiovasculares, trastornos oftálmicos, trastornos neurodegenerativos, trastornos psiquiátricos, trastornos virales, trastornos metabólicos y trastornos respiratorios.

Ventajosamente, el compuesto [1] muestra una potencia sorprendentemente alta en estudios de toxicidad celular en una variedad de líneas celulares diferentes.

La preparación sintética del compuesto [1] se describió por primera vez en WO 2008/122767. El esquema de reacción se muestra en la Figura 1. La preparación involucró la síntesis del derivado de purina sustituido con flúor [2] y el acoplamiento con (2R,3S)-3-aminopentan-2-ol, [3]. La reacción de acoplamiento se llevó a cabo en nBuOH en presencia de DMSO y DIEA (por sus siglas en inglés, respectivamente). La reacción requirió calentamiento a una temperatura de 140 °C por 72 horas y tuvo un rendimiento de solamente 12 % del producto deseado. El compuesto intermediario [3] se preparó por la oxidación de Swern de (S)-2-(tritilamino)butan-1-ol, y la reducción subsecuente con MeLi y CuBrSMe2. A continuación, el producto intermediario resultante se trató con TFA (por sus siglas en inglés) para brindar el compuesto [3]. Sin embargo, el paso de reducción de MeLi/CuBrSMe2 llevó a una estereoselectividad deficiente, lo que tuvo un rendimiento de un producto con solamente 75 % de d.e. (por sus siglas en inglés).

En WO 2011/089401 (Cyclacel Limited), como se muestra en la Figura 2, se divulgaron condiciones alternativas para el paso de acoplamiento. Estas condiciones alternativas involucran hacer reaccionar el compuesto [2] con el compuesto [3] en DIEA y etilenglicol a una temperatura de 125 °C por 48 horas. Esto dio lugar a una marcada mejora en la productividad del compuesto crudo [1] (59 % contra el 12 % en WO 2008/122767), que posteriormente se cristalizó en MTBE (por sus siglas en inglés) para dar un rendimiento global de 49,4 %. El material de base libre cristalino se convirtió subsecuentemente en la sal L-tartrato cristalina (Forma II; también referida como Forma E) con un rendimiento de 72 % por recristalización en una mezcla de etanol/agua.

La presente invención busca proporcionar una preparación sintética alternativa para el compuesto inhibidor de CDK [1], y los productos intermediarios y derivados relacionados con los mismos. Más específicamente, pero no exclusivamente, la presente invención busca proporcionar una ruta sintética que sea adecuada para escalar y/o que dé lugar a uno o más rendimientos mejorados, pureza mejorada, estereoselectividad mejorada, facilidad de preparación mejorada, tiempos de reacción más rápidos, cantidades reducidas de/menos productos secundarios, y/o que requieren cantidades reducidas de reactivos.

Declaración de invención

La invención se relaciona con un proceso para preparar un compuesto de fórmula [1],

que comprende los pasos de:

(i) formar una mezcla de reacción que comprende (a) un compuesto de fórmula [2], (b) un compuesto de fórmula [3], y (c) 1.2- propanodiol o polietilenglicol, o una mezcla de los mismos;

(ii) calentar dicha mezcla de reacción a una temperatura de al menos 150 °C para formar un compuesto de fórmula [1]; y (lii) aislar dicho compuesto de fórmula [1].

Ventajosamente, el solicitante ha mostrado que las condiciones de acoplamiento descritas anteriormente llevan a una mejora notable del rendimiento. Por ejemplo, para el compuesto [1] (estructura que se muestra a continuación), usando 1.2- propanodiol en el paso (i), el rendimiento total de la base libre cristalina es aproximadamente 79 % = comparado con 59 % en WO 2011/089401.

Descripción detallada

Proceso para preparar compuestos de fórmula [1]

La presente invención proporciona un nuevo procedimiento para la síntesis del compuesto [1]. A modo de ilustración, el solicitante ha demostrado que el uso del intermediario de alta pureza [2] es crítico para obtener el compuesto de base libre [1] con la pureza suficiente para alcanzar la especificación objetivo del compuesto [1]-L-sal de tartrato. La cristalización del compuesto de base libre [1] se logra tras la inclusión de un evento de siembra en el procedimiento. La formación/cristalización de la sal de tartrato también se ha modificado con éxito con respecto a las condiciones de la técnica anterior para mejorar el rendimiento global de la etapa final que da el compuesto [1]-L-sal de tartrato.

Como se mencionó, la invención se relaciona con un proceso para preparar un compuesto de fórmula [1], dicho proceso comprende los pasos de:

(i) formar una mezcla de reacción que comprende (a) un compuesto de fórmula [2], (b) un compuesto de fórmula [3], y (c) 1,2-propanodiol o polietilenglicol, o una mezcla de los mismos;

(ii) calentar dicha mezcla de reacción a una temperatura de al menos 150 °C para formar un compuesto de fórmula [1]; y (iii) aislar dicho compuesto de fórmula [1].

En una realización preferida, el proceso de la presente invención comprende además el paso de:

(iv) convertir dicho compuesto de fórmula [1] en forma de sal.

En una realización preferida, el paso (i) comprende además una base seleccionada de N,N-diisopropiletilamina (DIEA), tri-N-propilamina y tri-N-butilamina. Aún más preferiblemente, la base es N,N-diisopropiletilamina (DIEA).

Preferiblemente, cuando la mezcla de reacción comprende una base, está presente en una cantidad de al menos 2 equivalentes molares relativos al compuesto de fórmula [2], más preferiblemente, de 2 a 6 equivalentes molares relativos al compuesto de fórmula [2], más preferiblemente, de 2 a 4 equivalentes molares relativos al compuesto de fórmula [2]. En una realización preferida, la base está presente en una cantidad de 2 equivalentes molares relativos al compuesto de fórmula [2]. En otra realización preferida, la base está presente en una cantidad de 3 equivalentes molares relativos al compuesto de fórmula [2]. En otra realización preferida, la base está presente en una cantidad de 4 equivalentes molares relativos al compuesto de fórmula [2].

En una realización preferida, el paso (i) comprende formar una mezcla de reacción que comprende (a) un compuesto de fórmula [2], (b) un compuesto de fórmula [3], (c) 1,2-propanodiol, y (d) una base, preferiblemente DIEA.

En otra realización preferida, el paso (i) comprende formar una mezcla de reacción que comprende (a) un compuesto de fórmula [2], (b) un compuesto de fórmula [3], y (c) 1,2-propanodiol.

En otra realización preferida, el paso (i) comprende formar una mezcla de reacción que comprende (a) un compuesto de fórmula [2], (b) un compuesto de fórmula [3], (c) polietilenglicol, y (d) una base, preferiblemente DIEA. Preferiblemente, el polietilenglicol es PEG-200 o PEG-400, más preferiblemente, PEG-200 (por sus siglas en inglés).

En otra realización preferida, el paso (i) comprende formar una mezcla de reacción que comprende (a) un compuesto de fórmula [2], (b) un compuesto de fórmula [3], y (c) polietilenglicol. Preferiblemente, el polietilenglicol es PEG-200 o PEG-400, más preferiblemente, PEG-200.

PEG-200 y PEG-400 y similares polietilenglicoles líquidos se pueden obtener de fuentes comerciales (por ejemplo, Sigma Aldrich; Dow, bajo el nombre comercial CARBOWAX™).

En una realización preferida, la mezcla de reacción se calienta a una temperatura de 150 °C a 180 °C, más preferiblemente de 150 °C a 170 °C, más preferiblemente de 150 °C a 160 °C, incluso más preferiblemente de 150 °C a 155 °C.

Incluso más preferiblemente, la mezcla de reacción se calienta a una temperatura de 150 °C.

En otra realización preferida, la mezcla de reacción se calienta por un período de al menos 48 horas. En una realización más preferida, la mezcla de reacción se calienta por un período de al menos 24 horas. En otra realización preferida, la mezcla de reacción se calienta por un período de al menos 12 horas. En otra realización preferida, la mezcla de reacción se calienta por un período de al menos 72 horas. En una realización muy preferida, la mezcla de reacción se calienta por un período de 24 horas. En otra realización muy preferida, la mezcla de reacción se calienta por un período de 48 horas. En otra realización muy preferida, la mezcla de reacción se calienta por un período de 72 horas.

En otra realización preferida, la mezcla de reacción se calienta por un período de 24 a 96 horas, más preferiblemente de 24 a 72 horas, o de 24 a 48 horas. En otra realización preferida, la mezcla de reacción se calienta por un período de 48 a 96 horas, más preferiblemente de 48 a 72 horas.

En una realización preferida, el 1,2-propanodiol o polietilenglicol está presente en una cantidad de al menos 2 equivalentes en volumen relativos al compuesto de fórmula [2], más preferiblemente, de 2 a 20 equivalentes en volumen relativos al compuesto de fórmula [ 2], más preferiblemente, de 2 a 10 equivalentes relativos al compuesto de fórmula [2]. En una realización preferida, la base está presente en una cantidad de 5 a 10 equivalentes en volumen relativos al compuesto de fórmula [2]. En otra realización preferida, la base está presente en una cantidad de 5 equivalentes en volumen relativos al compuesto de fórmula [2]. En una realización preferida la base está presente en una cantidad de 9 equivalentes relativos al compuesto de fórmula [2].

Ventajosamente, el presente proceso permite usar un equivalente molar reducido del compuesto de fórmula [3] relativos al compuesto [2], en comparación con los métodos descritos en la técnica (ver WO 2008/122767, que requiere 5,7 equivalentes del compuesto [ 3] en la preparación del compuesto [1] y WO 2011/089401, que requiere 3,5 equivalentes). Esto es benéfico en términos de minimizar el uso de reactivos y facilitar la purificación, así como por razones económicas en el escalamiento.

Por lo tanto, en una realización preferida, en el contexto de la preparación del compuesto [1], la mezcla de reacción comprende de 2 a 3 equivalentes molares del compuesto [3] relativos al compuesto [2]. Más preferiblemente, la mezcla de reacción comprende de 2 a 2,5 o de 2 a 2,2 equivalentes molares del compuesto [3] relativos al compuesto [2]. Incluso más preferiblemente, la mezcla de reacción comprende 2 equivalentes molares del compuesto [3] relativos al compuesto [2].

En una realización altamente preferida, el proceso comprende formar una mezcla de reacción que comprende (a) un compuesto de fórmula [2], (b) un compuesto de fórmula [3] (2 equivalentes), (c) 1,2-propanodiol (5 vol), y (d) DIEA (4 equivalentes), y calentando dicha mezcla de reacción a una temperatura de 150 °C por un período de 72 horas. En una realización preferida alternativa, se omite la DIEA.

En una realización altamente preferida, el proceso comprende formar una mezcla de reacción que comprende (a) un compuesto de fórmula [2], (b) un compuesto de fórmula [3] (2 equivalentes), (c) polietilenglicol, preferiblemente, PEG-400 o PEG-200 (5 vol), y (d) DIEA (4 equivalentes), y calentando dicha mezcla de reacción a una temperatura de 150 °C por un período de 72 horas. En una realización preferida alternativa, se omite la DIEA.

En una realización preferida, el paso (iii) comprende extraer la mezcla de reacción del paso (ii) en agua y acetato de etilo, separar la fase de acetato de etilo, y secar con un agente secante, filtrar y concentrar el filtrado. Los agentes secantes adecuados (por ejemplo, sulfato de magnesio) serán familiares para el experto en la técnica.

En una realización preferida, el paso (iii) comprende además el paso de destilar azeotrópicamente el filtrado concentrado con éter metílico de butilo terciario (TBME, por sus siglas en inglés).

En una realización preferida, en el contexto de la preparación del compuesto [1], el paso (iii) comprende además el paso de cristalizar el compuesto [1] en éter metílico de butilo terciario (TBME). Preferiblemente, este paso comprende calentar a reflujo y sembrar con un cristal del compuesto [1] preparado de acuerdo con los procedimientos de WO 2011/089401 (ver, en particular, el Ejemplo 1). Preferiblemente, la mezcla sembrada se enfría a una temperatura de 50 a 55 °C. Preferiblemente, la mezcla se agita a esta temperatura por 30 minutos y posteriormente se deja enfriar a temperatura ambiente.

Formación de sal

En una realización preferida, el proceso comprende el paso de convertir dicho compuesto de fórmula [1] en la sal L-tartrato, más preferiblemente la sal L-tartrato en forma cristalina. Incluso más preferiblemente, la sal de L-tartrato es la forma cristalina II (correspondiente a la Forma E, como se describe en WO 2011/089401), y se puede preparar por los métodos descritos en la misma (ver el Ejemplo 5.5).

Por lo tanto, en una realización preferida, el proceso comprende un paso de cristalización que consiste en calentar a reflujo el producto aislado en el paso (iii) en etanol, y adicionar por goteo una solución de ácido L-tartárico en una mezcla de agua y etanol.

En una realización particularmente preferida, la relación de etanol:agua en la mezcla final después de la adición de la solución de ácido L-tartárico es de al menos 15:1, más preferiblemente al menos 20:1, más preferiblemente al menos 25:1, incluso aún más preferiblemente, al menos 30:1. Ventajosamente, el aumento de la proporción de etanol relativo al agua en el paso de cristalización lleva a una mejora notable en el rendimiento de la sal de tartrato cristalina del compuesto [1] en relación con los rendimientos descritos en la técnica (aproximadamente 87 % contra 72 % en Ejemplo 5.5 de WO 2011/089401).

En una realización particularmente preferida, la relación de etanol:agua en la mezcla final después de la adición de la solución de ácido L-tartárico es de 37,5:1.

En una realización preferida, el proceso comprende mantener la temperatura entre 75 y 78 °C durante la adición de la solución de ácido L-tartárico.

En una realización preferida, el paso de cristalización comprende además la filtración pulida de la mezcla, el calentamiento del filtrado a una temperatura de 60 a 65 °C, y la siembra con [1]-L-tartrato cristalino forma II. La forma II de [1]-L-tartrato cristalino (también conocida como forma E) se puede preparar de acuerdo con las enseñanzas de WO 2011/089401 (Cyclacel Limited).

En una realización preferida, el filtrado sembrado se agita a una temperatura de 60 a 65 °C por al menos 1 hora.

En una realización preferida, el proceso comprende además el paso de enfriar la mezcla a una temperatura de 15 a 20 °C, y agitar a esa temperatura por al menos 1 hora para inducir la cristalización del compuesto [1]-L-tartrato. Preferiblemente, la velocidad de enfriamiento es de 10 °C/hora.

En una realización preferida, el compuesto [1]-L-tartrato se filtra, se lava con etanol y se seca al vacío.

Como se mencionó anteriormente, en el contexto de la reacción de acoplamiento, el solicitante ha demostrado que el uso de un intermediario de fórmula [2] de alta pureza es crítico para obtener el compuesto de base libre de fórmula [1] con la pureza suficiente para lograr el especificación objetivo de la sal del compuesto [1]-L-tartrato.

En una realización preferida, el compuesto de fórmula [2] se pasa a través de una almohadilla de sílice, se suspende en éter dietílico, se filtra y se seca antes del paso (i).

En una realización preferida, el compuesto de fórmula [2] tiene una pureza de al menos 97 %, más preferiblemente, al menos 97,5 %, incluso más preferiblemente, al menos 98 % por HPLC (por sus siglas en inglés).

El solicitante ha demostrado además que el uso de un compuesto de fórmula [3] con una alta pureza desastrosómica (es decir, una alta d.e.) también es importante para obtener buenos rendimientos en la reacción de acoplamiento con compuestos de fórmula [2]. En una realización preferida, el presente proceso comprende un proceso alternativo para preparar el compuesto de fórmula [3], que lleva a una excelente diastereoselectividad, por ejemplo, valores d.e. mayores o iguales a 99 %. El uso del compuesto de fórmula [3] con una alta pureza desastrosómica en el paso de acoplamiento permite preparar el compuesto de fórmula [1] con alto rendimiento sin necesidad de separación cromatográfica de su estereoisómero. En cambio, el producto crudo se puede aislar y purificar simplemente por cristalización a partir de MTBE (por sus siglas en inglés), lo que tiene ventajas obvias en términos de eficiencia de escalamiento.

En una realización preferida, el compuesto de fórmula [3] tiene un exceso diastereoisómero de al menos 85 %, más preferiblemente, al menos 90 %, aún más preferiblemente, al menos 95 %.

En una realización altamente preferida, el compuesto de fórmula [3] tiene un exceso diastereoisómero de al menos 96, 97, 98 o 99 %.

En una realización preferida, el compuesto de fórmula [3] se prepara por los pasos de:

(a) tratar un compuesto [5] con complejo de (S)-2-Me-CBS-oxazoborolidina y borano-N,N-dietilanilina en un disolvente que comprende THF (por sus siglas en inglés) para formar un compuesto [4]; y

(b) eliminar el grupo protector PG (por sus siglas en inglés) de dicho compuesto [4] para dar el compuesto [3].

Los grupos protectores de amina adecuados serán familiares para aquellos expertos en la técnica; ver, por ejemplo, Protective Groups in Organic Synthesis de Theodora W. Greene and Peter G. M. Wuts. Preferiblemente, el grupo protector PG es un grupo f-butiloxicarbonilo (Boc, por sus siglas en inglés).

Ventajosamente, las condiciones anteriores llevan a una reducción altamente diastereoselectiva, impartiendo un exceso diastereoisómero muy alto (aproximadamente 99 %) en el intermediario resultante. Este exceso de diastereoisómero supera con creces los niveles observados para la preparación de dichos productos intermediarios de acuerdo con los métodos de la técnica anterior; ver, por ejemplo, WO 2003/002565 (Cyclacel Limited; d.e. de 80 %) o WO 2008/122767 (Cyclacel Limited; Cancer Research Technology Limited; d.e. de 75 %).

En una realización preferida, la (S)-2-Me-CBS-oxazoborolidina es una solución en tolueno. En una realización preferida, el paso (a') comprende (i) adicionar por goteo el complejo borano-W,W-dietilanilina a una mezcla de (S)-2-Me-CBS-oxazoborolidina en THF; y (ii) adicionar por goteo el compuesto de fórmula [5] en THF a la mezcla formada en el paso (i). Preferiblemente, la mezcla formada en el paso (ii) se agita a temperatura ambiente por al menos 12 horas.

En una realización preferida, el paso (a') comprende además cristalizar el compuesto de fórmula [4] a partir de heptano. En una realización preferida, el paso (b') comprende tratar dicho compuesto de fórmula [4] con HCl gaseoso en metanol, concentrar al vacío, disolver en acetato de etilo, y posteriormente rociar con NH3.

En una realización altamente preferida, el proceso de la invención comprende preparar un compuesto de fórmula [2] por los pasos de:

(i) tratar el compuesto [6] con HF, piridina y fBuONO para formar el compuesto [7]; y

(ii) tratar dicho compuesto [7] con bromuro de isopropilo en DMSO y K2CO3 para formar el compuesto [2].

A continuación se describen más detalles del proceso de síntesis de acuerdo con la invención, con referencia al esquema de reacción expuesto en el Esquema 1:

sal del [1]-L-tartrato Esquema 1: Preparación de la sal del compuesto [11-L-tartrato

La reacción se llevó a cabo con éxito en una escala de 115 g para dar el producto deseado compuesto [4] con un rendimiento de 85 % (99,2 g) como un sólido blanco.

La desprotección con Boc del compuesto [4] procedió limpiamente hasta la sal de clorhidrato deseada del compuesto [3]. Posteriormente, se consiguió la formación de bases libres rociando amoníaco a través de una suspensión de la sal de clorhidrato en acetato de etilo para dar el compuesto [3] como un aceite amarillo claro con un rendimiento global de 95 % (48,7 g). El análisis de 1H NMR (por sus siglas en inglés) indicó que el material aislado es adecuado para usar en el paso de acoplamiento.

El solicitante ha encontrado que la pureza del compuesto [2] también tiene un efecto significativo en la reacción de acoplamiento final. Para evaluar el efecto de una mayor pureza [2] en el perfil final de la reacción de acoplamiento, se pasaron 55 g del compuesto [2] (96,80 % de pureza por HPLC) a través de una almohadilla de sílice eluyendo con MeOH al 15 % en DCM (por sus siglas en inglés). A continuación, el producto resultante se suspendió en éter dietílico, se filtró y se secó para dar 49,3 g del compuesto [2] con una pureza de 98,46 % por HPLC.

La reacción de acoplamiento final se llevó a cabo en 1,2-propanodiol (5 vol) con 2 eq del compuesto [3] a 150 °C.

Se llevó a cabo una prueba de uso del compuesto [2] purificado y el lote a granel del compuesto [3] en una escala de 1 g (2 eq del compuesto [3] en 5 vol de 1,2-propanodiol a 15o °C). Después de 18 horas, la HPLC indicó 94,13 % de compuesto [1], 1,74 % de compuesto [2], y 1,66 % de aducto de propanodiol. Aunque la reacción no fue completa, el resultado anterior confirmó que el uso del compuesto [2] de alta pureza es crítico para lograr una conversión > 90 % en el producto (en comparación con 87 % de conversión en el compuesto [1] cuando el compuesto [2] de se usó una pureza de 96,80 %).

Se llevó a cabo una reacción de acoplamiento final a escala de 10 g, que dio una conversión de 93,11 % en producto (aducto de 1,2-propanodiol al 1,4 %) y proporcionó el compuesto de base libre crudo [1] con una pureza de 95,54 % por HPLC (1,3 % de aducto de 1,2 -propanodiol) después del tratamiento. La 1H NMR confirmó que la eliminación de 1,2-propanodiol tuvo éxito en el tratamiento. El producto crudo (12,2 g) se recristalizó en TBME (2 volúmenes de TBME). La cristalización ocurrió cuando se adicionó una semilla de compuesto de base libre cristalino (semilla preparada de acuerdo con las enseñanzas de WO 2011/089401; Cyclacel Limited; Forma A, Ejemplo 1). El sólido resultante se filtró y se secó para dar el compuesto de base libre [1] con un rendimiento total de 81 % (a partir del compuesto [2] de entrada, objetivo de 79 %) con una pureza de 97,84 % por HPLC (0,95 % de aducto de 1,2 -propanodiol), pureza objetivo > 97 %). Este material se llevó hasta la formación de la sal de tartrato.

Posteriormente, se realizó una reacción de acoplamiento final a gran escala en una escala de 36,2 g. La reacción transcurrió como esperado, dando una conversión de 95,01 % en producto (0,29 % de aducto de 1,2 -propanodiol). El tratamiento proporcionó el compuesto de base libre crudo [1] como un sólido espumoso blanco (46,9 g) con una pureza de 95,22 % por HPLC (0,20 % de aducto de 1,2 -propanodiol, 1,74 % RRT 0,98 (por sus siglas en inglés)). Una recristalización sembrada a partir de TBME (usando cristal semilla de la Forma A como se describe anteriormente) dio un compuesto de base libre cristalino [1] con un rendimiento total de 79 % y una pureza de 97,32 % (0,14 % de aducto de 1,2-propanodiol, 1,10 % RRT 0,98).

El compuesto [1] (87,6 % de pureza) se convirtió posteriormente en la sal de L-tartrato cristalina correspondiente. Se llevó a cabo una formación de sal de prueba en una escala de 5 g usando material de la reacción de acoplamiento a gran escala. Se usó una relación de 37,5:1 etanol:agua. Después de la adición de ácido tartárico, se adicionó una semilla de forma II a 60-65 °C que no se disolvió. La reacción se agitó a 60-65 °C por 1 hora (durante la cual se inició la cristalización), y posteriormente se enfrió a 15-20 °C por 1 hora. Después de agitar a 15-20 °C, los sólidos resultantes se aislaron y secaron. Esto produjo la sal del compuesto [1]-L-tartrato con un rendimiento de 83 % (a partir de la base libre, rendimiento total de 65 % del compuesto [2] de entrada) con una pureza de 98,57 % (0,15 % de aducto de 1,2-propanodiol, 0,37 % RRT 0,98). La 1H N^mR confirmó una sal 1:1 y la XR^pD confirmó la forma II.

Posteriormente se llevó a cabo una formación de sal a gran escala en una escala de 29,9 g usando las condiciones anteriores para confirmar el proceso. El aislamiento produjo la sal del compuesto [1]-L-tartrato con un rendimiento de 87 % (a partir de la base libre, 69 % de rendimiento general a partir del compuesto de entrada) con una pureza de 98,80 % (0,37 % de aducto de 1,2-propanodiol, 0,02 % RRT 0,98). 1H NMR confirmó una sal 1:1 y la XRPD (por sus siglas en inglés) confirmó la forma II.

El solicitante ha demostrado así que el uso del compuesto [2] de mayor pureza en la reacción de acoplamiento final es crítico para obtener una conversión de -95 % en el compuesto [1]. El compuesto de base libre [1] se puede convertir posteriormente en la forma L-tartrato cristalina correspondiente con un buen rendimiento.

La presente invención se describe adicionalmente con referencia a las siguientes figuras, en donde:

La Figura 1 muestra el esquema de reacción para preparar el compuesto [1] como se divulga en WO 2008/122767.

La Figura 2 muestra el esquema de reacción para preparar el compuesto [1]-L-tartrato como se divulga en WO 2011/089401.

La presente invención se describe adicionalmente con referencia a los siguientes ejemplos no limitantes.

Ejemplos

Abreviaturas

THF tetrahidrofurano

EtOAc acetato de etilo

PMA ácido fosfomolíbdico

MeOH metanol

DCM diclorometano

TBME éter metílico de butilo terciario

DCM diclorometano

DIEA W,W-diisopropiletilamina

¹H NMR: Los espectros de ¹H NMR se recolectaron usando un espectrómetro JEOL ECX de 400 MHz equipado con un muestreador automático. Las muestras se disolvieron en D⁶-DMSO para el análisis y el espectro se adquirió a temperatura ambiente usando un experimento de protones estándar adquiriendo 16 lecturas, usando el software Delta NMR de procesamiento y control, versión 4.3. A continuación, los datos se procesaron usando el procesador ¹D NMR versión 12.0 de ACD labs.

DSC: Los datos de DSC (por sus siglas en inglés) se recolectaron en un PerkinElmer Pyris 6000 DSC equipado con un portamuestras de 45 posiciones. El instrumento fue verificado para la calibración de energía y temperatura usando indio certificado. Una cantidad predefinida de la muestra, 0,5-3,0 mg, se colocó en una bandeja de aluminio perforada y se calentó a 20 “C min^-1de 30 a 350 °C, o se varió según dictara la experimentación. Se mantuvo sobre la muestra una purga de nitrógeno seco a 20mlmin ^-1. El control del instrumento, la adquisición de datos y el análisis se realizaron con Pyris Software v11.1.1 Revisión H.

XRPD: Los patrones de difracción de rayos X en polvo se recopilaron en un difractómetro PANalytical usando radiación de Cu Ka (45 kV, 40 mA), goniómetro 0-0, espejo de enfoque, ranura de divergencia (1/2"), ranuras de soller en el haz incidente y divergente (4 mm), y un detector PIXcel. El software usado para la recopilación de datos fue X'Pert Data Collector, versión 2.2f, y los datos se presentaron usando X'Pert Data Viewer, versión 1.2d.

Los patrones de XRPD se adquirieron bajo condiciones ambientales mediante una etapa de muestra de lámina de transmisión (poliimida-Kapton, película de 12,7 mm de espesor) bajo condiciones ambientales usando un PANalytical X'Pert PRO. El rango de recopilación de datos fue de 2,994 - 35° 20 con una velocidad de exploración continua de 0,202004°s^-1.

HPLC: Método A

Preparación de la solución de muestra:

Pesar con exactitud 50 mg de muestra en un matraz volumétrico de 100 mL. Adicionar 50 mL de metanol al matraz, disolver mediante sonicación si es necesario, diluir al volumen con agua purificada y mezclar bien la solución resultante.

Columna: 150 x 4,6 mm Luna C18 (2), tamaño de partícula de 5 mm, (ex-Phenomenex; # OOF-4252-EO) Fase móvil: A - Amortiguador de acetato de amonio 0,01 M (pH 8,0)

B - Acetonitrilo

Velocidad de flujo: 1,0 mL-min-1

Volumen de 5 |jL

inyección:

Detección: UV a 254 nm

Temp. de columna: 30 °C

Postejecución: 5 minutos

HPLC: Método B

Preparación de la solución de muestra:

Columna: 150 x 4,6 mm XBridge Phenyl, tamaño de partícula de 3,5 mm, (de Waters; # 186003335) Fase móvil: A - Agua Purificada: Ácido trifluoroacético (100:0,1)

B - Acetonitrilo:Ácido trifluoroacético (100:0,1)

Velocidad de flujo: 1,0 m Lm in'1

Volumen de 5 j L

inyección:

Detección: UV a 268 nm

Temp. de columna: 30 °C

Postejecución: 5 minutos

HPLC quiral

Columna: 250 x 4,6 mm Chiralpak AD-H, tamaño de partícula de 5 mm, (ex-Daicel Chemical Industries, Ltd; #

DAIC 19325)

Fase móvil: Etanol:Hexano (50:50)

Velocidad de flujo: 1,0 mLmin-1

Volumen de

inyección:

Detección: UV a 268 nm

Temp. de columna: 40 °C

Postejecución: 20 minutos

HRGC (por sus siglas en inglés):

Preparación de la solución de muestra

Pesar con exactitud 50 mg de muestra en un matraz volumétrico de 10 mL. Disolver en 5 pm de diclorometano, usando sonicación si es necesario, diluir al volumen con diclorometano y mezclar bien la solución resultante.

Columna: DB-1 30m x 0,32mm; espesor de película de 1,0 mm (ex-J&W Scientific #123-1033) Programa de horno: 40 °C (Mantener 5 min), posteriormente 10 °Cm in-1 a 300 °C (Mantener 10 min) Temperatura de inyector: 200 °C, dividido

Temp. de columna: 250 °C, F.I.D. (por sus siglas en inglés)

Presión de cabezal: 82.74 kPa (12 psi), presión constante

Gas portador: Nitrógeno

Relación de división: 50:1

Volumen de inyección: 2 |jL

Revestimiento: SGE Focusliner con inserto de fibra de vidrio

Exceso enantiomérico por HRGC:

Preparación de la solución de muestra

Pesar con exactitud 10 mg de cada enantiómero [(2R,3S); (2S,3R); (2R,3R); (2S,3S)] en un recipiente adecuado. Disolver en aproximadamente 1 mL de diclorometano de grado HPLC, sonicar si es necesario. Adicionar 500 j L de anhídrido trifluoroacético y 500 j L de ácido trifluoroacético, y dejar derivar por 15-30 minutos a temperatura ambiente. Inyectar esta solución.

Preparación de la solución de muestra

Pesar con exactitud, por duplicado, 10 mg de muestra en un recipiente adecuado. Disolver en aproximadamente 1 mL de diclorometano de grado HPLC, sonicar si es necesario. Adicionar 500 ^jL de anhídrido trifluoroacético y 500 ^jL de ácido trifluoroacético, y dejar derivar por 15-30 minutos a temperatura ambiente. Inyectar esta solución.

Columna: Gamma-TA Ciclodextrina 30 m x 0,32 mm; película de 0,125 mm (ex-Astec; Cat. no. 73033) Programa de horno: 80°C (Mantener 10 min), posteriormente 2 °Cm in_1 a 90 °C (Mantener 20 min),

posteriormente 10 °Cm in_1 a 80 °C

Temperatura de inyector: 200 °C, dividido

Temp. de columna: 250 °C, F.I.D.

Presión de cabezal: 137.90 kPa (20 psi), presión constante

Gas portador: Nitrógeno

Relación de división: 50:1

Volumen de inyección: 1 j L

Revestimiento: SGE Focusliner con inserto de fibra de vidrio

Área del pico de [(2R, 35) — (25,31?)]

% de exceso enantiomérico = 100

Área del pico de f(2 R, 35) — (25,3R)] ^%

Área del pico de f(2R, 35) — (25,35)1

% de exceso diastereomérico = - ---------- - -------- — -— -— — — - x 100 %

Área del pico de [(2R, 35) — (25,35)]

Síntesis de (2R,3S)-3-aminopentan-2-ol

Preparación del Compuesto [4]

Se diluyó (S)-2-metil-CBS-oxaborolidina (solución 1 M en tolueno, 59,6 mL, 0,06 mol) con THF (171 mL) en un recipiente seco purgado con nitrógeno. Se adicionó por goteo complejo de borano-N,N-dietilanilina (102 mL, 0,57 mol) a temperatura ambiente, y la solución se dejó en agitación por 15 minutos. El compuesto [5] (115,0 g, 0,57 mol) se disolvió en THF (345 mL) y se adicionó por goteo por 4,5 h. Una vez completada la adición, se dejó agitar la reacción durante la noche a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno. La cromatografía en capa fina (EtOAc al 20 % en heptano, visualizado por PMA (por sus siglas en inglés)) indicó el consumo completo del material de partida. La reacción se inactivó cuidadosamente por la adición por goteo de metanol (174 mL) por 1 hora. La temperatura se mantuvo a < 20 °C durante todo el enfriamiento rápido. La solución se concentró al vacío antes de adicionar más metanol (174 mL). La solución se concentró bajo presión reducida para dar un sólido ceroso blanco. El producto crudo se recristalizó en heptano (202 mL). El producto recristalizado se filtró y se enjuagó con heptano (2 x 156 mL) para producir un sólido blanco. Éste se secó en un horno de vacío a 40 °C durante la noche para dar el compuesto [4] como un sólido blanco (99,2 g, 85 %). El análisis se realizó por HRGC y HRGC quiral como se describe anteriormente.

Desprotección del Compuesto [4]

Se gaseó MeOH (645 mL) con HCl por 1 hora a < 20 °C en un matraz de 20 L bajo N2. La solución fue 3,85 M por titulación. El matraz se enfrió a < 15 °C. El compuesto [4] (101,1 g, 0,50 mol) se cargó en porciones a < 15 °C. La solución se agitó durante la noche. La reacción se completó por TLC (por sus siglas en inglés), (MeOH al 5%/DCM, visualizado con PMA). La solución se concentró al vacío a 35-40 °C. El aceite se destiló azeotrópicamente con EtOAc (4 x 75 mL), y se trituró para dar un sólido blanco. El sólido se recolectó en EtOAc (588 mL). La mezcla de reacción se enfrió a 0-5 °C, y se roció con NH3 (g) por 1 hora a 0-5 °C bajo N2. Al final de la adición el pH fue 8. La mezcla se filtró y la torta del filtrado se lavó con EtOAc (147 mL). El filtrado se concentró al vacío a 35-40 °C para dar el producto deseado [3] como un aceite amarillo claro (50,7 g). La ¹H NMR confirmó la identidad del producto e indicó que estaba presente EtOAc residual a -4 %, dando un rendimiento activo de 48,7 g, 95 %.

Preparación del Compuesto [7]

Se cargó HF al 60 %/piridina (2982,3 g) en un recipiente de PTFE (por sus siglas en inglés) de 6 L, y se enfrió entre -35 y -30 °C. El compuesto (322,2 g, 1 eq mol) se cargó en el recipiente manteniendo la temperatura del lote entre -35 y -30°C. Se permitió que el contenido del recipiente se calentara entre -15 y -10°C, posteriormente se adicionó por goteo nitrito de ferc-butilo (160 mL, 1 eq mol) manteniendo la temperatura entre -15 y -5 °C. El lote se dejó calentar a temperatura ambiente (entre 15 y 20 °C), y se agitó por 17 horas. Se tomaron muestras del lote para su terminación por HPLC, lo que indicó la presencia de 11,3 % del compuesto [6]. Se adicionó nitrito de ferc-butilo adicional (48 mL, 0,3 eq mol) y se agitó por 3 horas, una comprobación completa mostró que quedó 2,3 % del compuesto [6]. Se adicionó nitrito de ferc-butilo adicional (48 mL, 0,3 eq mol) y se agitó durante la noche. Una terminación final indicó que quedó 0,7% del compuesto [6]. La mezcla de reacción se inactivó en solución ac. sat. de K2CO3 (12000 mL), ac. sat. adicional. Se adicionó K2CO3 (3500 mL) para ajustar a pH 8, el lote se agitó por 90 minutos, y posteriormente se filtró. El filtro se lavó con agua purificada (3200 mL). El sólido se devolvió al recipiente de enfriamiento rápido y se suspendió en agua purificada (3200 mL) por 34 minutos, y se filtró. El filtro se lavó con agua purificada (3200 mL). El sólido se devolvió al recipiente de enfriamiento rápido y se suspendió en agua purificada (3200 mL) por 34 minutos, y se filtró. El filtro se lavó con agua purificada (3200 mL) y TBME (3 x 1600 mL). El sólido se secó a 45 °C al vacío. Rendimiento = 222,5 g (68,3 %); pureza 94,9 % por Hp LC (Método A).

Preparación del Compuesto [2]

La reacción se llevó a cabo en un lote que se dividió en cuatro porciones para el tratamiento y posteriormente se purificó en dos porciones, logrando un rendimiento total de 2261,6 g (79 % contra 85 % objetivo).

Bajo N2 se cargó DMSO (25000 mL), el compuesto [7] (2479,9 g 1 eq mol) y carbonato de potasio (2504,7 g 2 eq mol). Se adicionó 2-bromopropano (8520 mL, 10 eq mol) manteniendo la temperatura del lote entre 15 y 25 °C. La mezcla de reacción se calentó a 60 °C y se agitó por 35 minutos manteniendo la temperatura entre 58 y 62°C. Se tomaron muestras de la mezcla de reacción para completar el análisis. La HPLC (Método A) indicó que la reacción se había completado (0,14 % restante del compuesto [7]). La mezcla de reacción se enfrió entre 18 y 25 °C. El lote se dividió en 4 porciones aproximadamente iguales. Cada porción se devolvió al recipiente con agua purificada (11200 mL) y acetato de etilo (11200 mL), se agitó por 10 minutos y las capas se separaron.

Tratamiento de reacción

La capa acuosa se cargó en el recipiente y se extrajo con acetato de etilo (3 x 6200 mL). Las capas orgánicas combinadas se cargaron en el recipiente y se lavaron con agua purificada (6 x 9300 mL). La capa orgánica se secó sobre sulfato de magnesio (1014,1 g) y se filtró. La torta de filtrado se lavó con acetato de etilo (3 x 2500 mL). Se tomaron muestras de la solución del lote para análisis por HPLC, lo que indicó una pureza cruda de 94,1 %.

Purificación

Las capas orgánicas secas se combinaron en dos porciones. Cada porción se destiló del recipiente de 50 L hasta la agitación mínima, y posteriormente se transfirió a un evaporador rotatorio de 2 L para completar la concentración. El compuesto crudo [2] (1480,5 g) se disolvió en MeOH al 15 %/EtOAc (3000 mL) en una garrafa. Se cargó sílice (2961,3 g) en la garrafa y se agitó el contenido por 15 minutos. Se cargó MeOH/EtOAc al 15% adicional (2000 mL) en la garrafa para ayudar a formar una suspensión espesa con la sílice. Se preparó un filtro de placa y se rellenó con sílice (4441,5 g) en MeOH al 15 %/EtOAc. El compuesto crudo [2]/suspensión de sílice se transfirió a la placa de filtro y se empaquetó. A continuación, la almohadilla de sílice se lavó con MeOH al 15 %/EtOAc (88800 mL) recolectado en 5 fracciones, MeOH al 15 %/EtOAc (44360 mL) recolectado en 2 fracciones, y MeOH al 15 %/EtOAc (44360 mL) recolectado en 2 fracciones. Las fracciones con el compuesto [2] se filtraron y concentraron. El sólido resultante se destiló azeotrópicamente con EtOAc (3 x 3000 mL) y se secó en un horno de vacío durante la noche a 30 °C. Rendimiento = 1090,3 g; pureza 96,9 % por HPLC (Método A).

El análogo alquenilo correspondiente del compuesto [2] se puede preparar como se indica a continuación. Una suspensión de compuesto (1,0 g) y pentóxido de fósforo (1,04 g, 2 eq) en tolueno (40 mL), colidina (0,9 g, 2 eq) y acetona (2,1 g, 10 eq) se calentó a reflujo con agitación durante la noche. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y se filtró. La torta del filtro se agitó con solución ac. sat. de NaHCO3 (30 mL) y tolueno (30 mL) por 5 minutos y posteriormente se volvió a filtrar. Las fases se separaron, y la fase acuosa se extrajo con tolueno (30 mL). Los extractos orgánicos combinados se secaron (sulfato de sodio), filtraron y concentraron al vacío. El producto se purificó por cromatografía (sílice 65 g) eluyente = EtOAc ^ 10 % MeOH en EtOAc) para proporcionar 190 mg de producto -90 % puro por 1H NMR y 0,1 g adicional de material menos puro. El producto menos puro se pasó nuevamente por la columna (sílice 51 g, eluyente = MeOH al 4 % en DCM) para dar un producto adicional (70 mg). Rendimiento total 260 mg (22,7 %). El análogo alquenilo de [2] se puede hacer reaccionar con el compuesto [3] (3-10 eq) en PEG200 y DIPEA calentando durante la noche a 120-130 °C. El producto se puede purificar por cromatografía en columna usando MeOH al 4 % en DCM como eluyente para dar el producto con una pureza > 95 por 1H NMR.

Purificación de compuesto [2]

Para evaluar el efecto del compuesto [2] de mayor pureza en el perfil final de la reacción de acoplamiento, se pasaron 55 g del compuesto (96,80 % de pureza por HPLC) a través de una almohadilla de sílice eluyendo con MeOH al 15 % en DCM. Posteriormente, el producto resultante se suspendió en éter dietílico, se filtró y se secó para dar 49,3 g del compuesto [2] con una pureza de 98,46 % por HPLC (Método A).

Preparación del Compuesto [1] usando 1,2-propanodiol en el paso (i)

Una solución del compuesto [2] (36,2 g, 115,15 mmol) y el compuesto [3] (24,7 g, 23,8 g activo, 230,71 mmol) en 1,2-propanodiol (181 mL) se calentó a 150 °C durante la noche. El análisis por HPLC (Método B) indicó 0,29 % de aducto de propanodiol, 95,01 % del compuesto [1], y 0,57 % del compuesto [4]. Alternativamente, se puede usar PEG-200 en lugar de 1,2-propanodiol. Opcionalmente, la mezcla de reacción comprende además DIEA (2 equivalentes molares). Después de enfriar a 15-20 °C, se cargaron en el recipiente agua (250 mL) y acetato de etilo (120 mL), y el lote se agitó por 10 minutos. Las capas se separaron, y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (4 x 100 mL). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera al 2,5% p/p (3 x 160 mL) y posteriormente con agua (3 x 160 mL). La capa orgánica se secó sobre MgSO4 y se filtró. El filtrado se concentró y posteriormente se destiló azeotrópicamente con TBME (2 x 250 mL) para aislar el compuesto de base libre [1] crudo [1] (46,9 g). El análisis HPLC indicó una pureza del 95,22 % (Método B).

El material crudo (46,9 g) se recolectó en TBME (94 mL) y se calentó a reflujo. Se adicionó una semilla de compuesto cristalino [1] (0,009 g; preparado de acuerdo con las enseñanzas de WO 2011/089401; Forma A; Cyclacel Limited), y la solución turbia resultante se enfrió a 50-55 °C y se agitó por 30 minutos. El cristal semilla se preparó de acuerdo con el Ejemplo 1 de WO 2011/089401 (Cyclacel Limited). Posteriormente, la mezcla de reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente durante la noche. El sólido resultante se filtró, se lavó con TBME (3 x 47 mL) y se secó. El sólido blanquecino se secó a 40 °C al vacío para dar el compuesto de base libre [1] (36,0 g, 79 %; Forma A). La caracterización de XRPD y DSC estuvo de acuerdo con la Forma A, WO 2011/089401; ver la Tabla 1 para conocer los picos de XRPD de referencia). Opcionalmente, el grupo hidroxilo secundario del compuesto [1] se puede oxidar tratándolo con un agente oxidante, tal como clorocromato de piridinio (0,2 eq) y ácido peryódico (2,5 eq) en MeCN como disolvente, por ejemplo, agitar a temperatura ambiente por 21 horas y posteriormente recargar con más clorocromato de piridinio y ácido peryódico según sea necesario para que la reacción se complete (seguido de purificación usando una cromatografía en columna).

Preparación del Compuesto [1] usando PEG-200 y DIEA en el paso (i)

Se llevó a cabo una reacción a pequeña escala para comparar los perfiles de reacción de HPLC de una reacción usando PEG-200 en comparación directa con 1,2-propanodiol. Por lo tanto, bajo N2 se cargó el compuesto [2] (1,0 g, 3,181 mmol) y el disolvente de reacción (9,0 mL, 9 volúmenes). Posteriormente, la mezcla se agitó por 5 minutos antes de la adición de DIEA (2,2 mL, 4 eq) y el compuesto [3] (0,66 g, 6,362 mol), posteriormente las reacciones se calentaron a temperatura (150 °C). El perfil de reacción se muestra después de 72 h en la siguiente tabla.

Síntesis de la sal del compuesto [1]-L-tartrato

El compuesto de base libre cristalino [1] (29,9 g, 75,22 mmol) se disolvió en etanol (420 mL), y la solución resultante se calentó a reflujo. Se adicionó por goteo una solución de ácido L-tartárico (11,29 g, 75,22 mmol) en agua (12 mL)/etanol (30 mL) manteniendo la temperatura del lote a 75-78 °C. La solución se filtró por completo (se enfrió a 57 °C durante la filtración sin evidencia de cristalización). La solución filtrada se calentó a 60-65 °C y se sembró con el compuesto [1]-L-tartrato sal forma II (0,003 g) preparado de acuerdo con el Ejemplo 5 de WO 2011/089401 (Cyclacel Limited). La mezcla se agitó a 60-65 °C por 1 hora, tiempo durante el cual se inició la cristalización. Posteriormente, la suspensión se enfrió a 15-20 °C a 10 °C/h. Después de agitar a 15-20 °C por 1 hora, el sólido se filtró, se lavó con etanol (3 x 60 mL) y se secó. El secado adicional en un horno de vacío produjo sal de [1]-L-tartrato como un sólido blanco (36,0 g, 87 % de la base libre). La 1H NMR confirmó la identidad del producto y la HPLC (Método B) indicó una pureza de 98,80 %. El producto también se analizó por HPLC quiral. El análisis de DSC (pico 182,73 °C, inicio 179,61 °^c) y de XRPD confirmo la forma II de acuerdo con WO 2011/089401 (ver la Tabla 2 para las referencias de los picos de XRPD).

Varias modificaciones y variaciones de los aspectos descritos de la invención serán evidentes para aquellos expertos en la técnica sin apartarse del alcance de la invención. Aunque la invención se ha descrito en conexión con realizaciones preferidas específicas, se debe entender que la invención, tal como se reivindica, no se debe limitar indebidamente a tales realizaciones específicas. De hecho, varias modificaciones de los modos descritos para llevar a cabo la invención que son evidentes para los expertos en los campos relevantes están destinadas a estar dentro del alcance de las siguientes reivindicaciones.

Tabla 1: Picos de XRPD para la base libre cristalina (Forma A) del compuesto [1]

Pos. Altura FWHM d-espaciamiento Int. Rel. Ancho de punta

[°2 Th.] [cts] [°2 Th.] ____ [AL [%] [°2 Th.]

7,5313 21162,64 0,0768 11,73852 100,00 0,0921

9,6026 846,92 0,0768 9,21066 4,00 0,0921

10,2275 400,15 0,1023 8,64925 1,89 0,1228

11,2954 1863,94 0,1023 7,83384 8,81 0,1228

11,6652 300,53 0,1023 7,58631 1,42 0,1228

12,2672 3812,02 0,1023 7,21534 18,01 0,1228

12,6242 497,83 0,1023 7,01205 2,35 0,1228

13,1780 953,85 0,1023 6,71859 4,51 0,1228

14,0653 4092,77 0,1023 6,29672 19,34 0,1228

14,8535 1458,15 0,0768 5,96431 6,89 0,0921

Pos. Altura FWHM d-espaciamiento Int. Rel. Ancho de punta [°2 Th.] [cts] [°2 Th.] [A] [%] [°2 Th.] 15,1515 343,64 0,0768 5,84765 1,62 0,0921 15,5775 2894,50 0,1279 5,68868 13,68 0,1535 16,9914 2108,17 0,1023 5,21838 9,96 0,1228 17,6862 1501,97 0,1279 5,01490 7,10 0,1535 18,3040 644,51 0,0591 4,84701 3,05 0,0709 18,3954 1212,49 0,0768 4,82314 5,73 0,0921 18,6301 1666,18 0,1023 4,76289 7,87 0,1228 18,9784 1639,81 0,1279 4,67626 7,75 0,1535 19,3292 475,31 0,1023 4,59219 2,25 0,1228 20,2061 1067,39 0,1023 4,39483 5,04 0,1228

Tabla 2: Picos de XRPD para sal de L-tartrato (Forma E, también conocida como Forma II) del compuesto [1]

Pos. Altura FWHM d-espaciamiento Int. Rel. Ancho de punta [°2 Th.] [cts] [°2 Th.] [A] [%] [°2 Th.] 6,6675 15483,76 0,0768 13,25733 100,00 0,0921 8,2340 241,15 0,1023 10,73824 1,56 0,1228 9,7722 479,22 0,1023 9,05118 3,09 0,1228 11,9598 926,89 0,1023 7,40005 5,99 0,1228 12,3792 494,24 0,0768 7,15029 3,19 0,0921 13,0632 4104,92 0,0768 6,77739 26,51 0,0921 13,3777 2386,00 0,1023 6,61876 15,41 0,1228 13,9359 413,30 0,0768 6,35490 2,67 0,0921 14,9035 1349,55 0,1023 5,94439 8,72 0,1228 15,4032 975,17 0,0768 5,75266 6,30 0,0921 15,9507 949,23 0,1023 5,55642 6,13 0,1228 16,2665 488,77 0,1023 5,44926 3,16 0,1228 16,5423 792,08 0,1023 5,35902 5,12 0,1228 17,3614 2687,54 0,1023 5,10799 17,36 0,1228 17,5690 1410,91 0,1023 5,04809 9,11 0,1228 17,8630 201,26 0,1023 4,96566 1,30 0,1228 19,6395 1756,56 0,0768 4,52032 11,34 0,0921 19,8636 777,97 0,0768 4,46982 5,02 0,0921 20,1195 549,42 0,1023 4,41355 3,55 0,1228 20,7288 1423,91 0,1279 4,28518 9,20 0,1535 21,1373 389,18 0,1279 4,20327 2,51 0,1535 21,5804 674,89 0,1535 4,11797 4,36 0,1842 22,5683 459,02 0,1535 3,93989 2,96 0,1842 22,9541 780,05 0,1279 3,87454 5,04 0,1535 23,2869 904,34 0,1023 3,81992 5,84 0,1228 23,5693 1652,40 0,1535 3,77478 10,67 0,1842 24,0730 899,56 0,1535 3,69692 5,81 0,1842 24,6316 316,32 0,1791 3,61434 2,04 0,2149 25,2971 1357,36 0,1535 3,52074 8,77 0,1842 26,3772 346,67 0,1023 3,37898 2,24 0,1228 27,0905 141,69 0,1023 3,29160 0,92 0,1228 27,6723 474,86 0,1023 3,22371 3,07 0,1228 27,9727 708,87 0,1535 3,18977 4,58 0,1842 28,9051 262,52 0,1535 3,08896 1,70 0,1842 29,2843 136,18 0,1535 3,04982 0,88 0,1842 30,0801 73,71 0,1535 2,97092 0,48 0,1842 30,4059 137,17 0,1279 2,93982 0,89 0,1535 31,9006 27,79 0,1535 2,80541 0,18 0,1842

Claims

REIVINDICACIONES

1. Un proceso para preparar un compuesto de fórmula [1],

que comprende los pasos de:

(i) formar una mezcla de reacción que comprende (a) un compuesto de fórmula [2], (b) un compuesto de fórmula [3], y (c) I , 2-propanodiol o polietilenglicol, o una mezcla de los mismos.

2. El proceso de acuerdo con la reivindicación 1, que comprende además el paso de:

(iv) convertir dicho compuesto de fórmula [1] en forma de sal.

3. El proceso de acuerdo con la reivindicación 1 o la reivindicación 2, en donde la mezcla de reacción en el paso (i) comprende además una base seleccionada de N,N-diisopropiletilamina (DIEA), tri-N-propilamina y tri-N-butilamina.

4. El proceso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde el paso (i) comprende formar una mezcla de reacción que comprende (a) un compuesto de fórmula [2], (b) un compuesto de fórmula [3], (c) 1,2-propanodiol, y (d) opcionalmente una base, o en donde el paso (i) comprende formar una mezcla de reacción que comprende (a) un compuesto de fórmula [2], (b) un compuesto de fórmula (c), polietilenglicol, y (d) opcionalmente un base.

5. El proceso de acuerdo con la reivindicación 4, en donde el polietilenglicol es un polietilenglicol líquido, preferiblemente PEG-200 o PEG-400, más preferiblemente PEG-200.

6. El proceso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde la mezcla de reacción se calienta a una temperatura de 150 °C a 155 °C, más preferiblemente en donde la mezcla de reacción se calienta a una temperatura de 150 °C, y/o en donde la mezcla de reacción se calienta por un período de al menos 24 horas, y/o en donde la mezcla de reacción comprende de 2 a 3 equivalentes molares del compuesto [3] relativos al compuesto [2], o en donde la mezcla de reacción comprende 2 equivalentes molares del compuesto [3] relativos al compuesto [2].

7. El proceso de acuerdo con cualquier reivindicación anterior, en donde el paso (iii) comprende extraer la mezcla de reacción del paso (ii) en agua y acetato de etilo, separar la fase de acetato de etilo y secar con un agente secante, filtrar y concentrar el filtrado; y destilación azeotrópica del filtrado concentrado con éter metílico de butilo terciario (TBME).

8. El proceso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde el paso (iii) comprende además el paso de cristalizar el compuesto [1] a partir de éter metílico de butilo terciario (TBME).

9. El proceso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores que comprende convertir dicho compuesto de fórmula [1] en la sal L-tartrato.

10. El proceso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores que comprende calentar a reflujo el producto aislado en el paso (iii) en etanol y adicionar por goteo una solución de ácido L-tartárico en una mezcla de agua y etanol, en donde la relación de etanol:agua en la mezcla final después de la adición de la solución de ácido L-tartárico es al menos 15:1, preferiblemente 37,5:1.

I I . El proceso de acuerdo con la reivindicación 10 que comprende mantener la temperatura entre 75 y 78 °C durante la adición de la solución de ácido L-tartárico.

12. El proceso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 10 a 11 que comprende además el paso de filtrar la mezcla, calentar el filtrado a una temperatura de 60 a 65 °C, y sembrar con [1]-L-tartrato cristalino forma II, también conocido como forma E, como es definido por los picos de XRPD establecidos en la siguiente tabla:

Pos. Altura FWHM d-espaciamiento Int. Rel. Ancho de punta

[°2 Th.] [cts] [°2 Th.] [A] [%] [°2 Th.]

6,6675 15483,76 0,0768 13,25733 100,00 0,0921

8,2340 241,15 0,1023 10,73824 1,56 0,1228

9,7722 479,22 0,1023 9,05118 3,09 0,1228

11,9598 926,89 0,1023 7,40005 5,99 0,1228

12,3792 494,24 0,0768 7,15029 3,19 0,0921

13,0632 4104,92 0,0768 6,77739 26,51 0,0921

13,3777 2386,00 0,1023 6,61876 15,41 0,1228

13,9359 413,30 0,0768 6,35490 2,67 0,0921

14,9035 1349,55 0,1023 5,94439 8,72 0,1228

15,4032 975,17 0,0768 5,75266 6,30 0,0921

15,9507 949,23 0,1023 5,55642 6,13 0,1228

16,2665 488,77 0,1023 5,44926 3,16 0,1228

16,5423 792,08 0,1023 5,35902 5,12 0,1228

17,3614 2687,54 0,1023 5,10799 17,36 0,1228

17,5690 1410,91 0,1023 5,04809 9,11 0,1228

17,8630 201,26 0,1023 4,96566 1,30 0,1228

19,6395 1756,56 0,0768 4,52032 11,34 0,0921

19,8636 777,97 0,0768 4,46982 5,02 0,0921

20,1195 549,42 0,1023 4,41355 3,55 0,1228

20,7288 1423,91 0,1279 4,28518 9,20 0,1535

21,1373 389,18 0,1279 4,20327 2,51 0,1535

21,5804 674,89 0,1535 4,11797 4,36 0,1842

22,5683 459,02 0,1535 3,93989 2,96 0,1842

22,9541 780,05 0,1279 3,87454 5,04 0,1535

23,2869 904,34 0,1023 3,81992 5,84 0,1228

23,5693 1652,40 0,1535 3,77478 10,67 0,1842

24,0730 899,56 0,1535 3,69692 5,81 0,1842

24,6316 316,32 0,1791 3,61434 2,04 0,2149

25,2971 1357,36 0,1535 3,52074 8,77 0,1842

26,3772 346,67 0,1023 3,37898 2,24 0,1228

27,0905 141,69 0,1023 3,29160 0,92 0,1228

27,6723 474,86 0,1023 3,22371 3,07 0,1228

27,9727 708,87 0,1535 3,18977 4,58 0,1842

28,9051 262,52 0,1535 3,08896 1,70 0,1842

29,2843 136,18 0,1535 3,04982 0,88 0,1842

30,0801 73,71 0,1535 2,97092 0,48 0,1842

30,4059 137,17 0,1279 2,93982 0,89 0,1535

31,9006 27,79 0,1535 2,80541 0,18 0,1842

34,4898 70,18 0,2047 2,60050 0,45 0,2456

el proceso comprende además agitar el filtrado sembrado a una temperatura de 60 a 65 °C por al menos 1 hora, enfriar la mezcla a una temperatura de 15 a 20 °C, y agitar a esa temperatura por al menos 1 hora para inducir la cristalización del compuesto [1]-L-tartrato, opcionalmente en donde la velocidad de enfriamiento es de 5 a 10 °C/hora.

13. El proceso de acuerdo con la reivindicación 12, en donde el compuesto [1]-L-tartrato se filtra, se lava con etanol, y se seca al vacío.

14. El proceso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde el compuesto [2] se pasa a través de una almohadilla de sílice eluyendo con MeOH/DCM, se suspende en éter dietílico, se filtra y se seca antes del paso (i) y/o en donde el compuesto [2] tiene una pureza de al menos 97 %, más preferiblemente, al menos 97,5 % o incluso más preferiblemente al menos 98 % por HpLC, y/o en donde el compuesto [3] tiene un exceso diastereoisómero de al menos 85 %, más preferiblemente, al menos 90 %, incluso más preferiblemente, al menos 95 %, y/o en donde el compuesto [3] tiene un exceso diastereoisómero de al menos 99 %.

15. El proceso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, en donde el compuesto [3] se prepara por los pasos de:

(a) tratar un compuesto [5] con complejo de (S)-2-Me-CBS-oxazoborolidina y borano-^W-dietilanilina en un disolvente que comprende THF para formar un compuesto [4]; y

(b) eliminar el grupo protector PG de dicho compuesto [4] para dar el compuesto [3], en donde PG es un grupo protector, preferiblemente Boc.

16. El proceso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9 que comprende preparar un compuesto de fórmula [2] por los pasos de: