ES2928050T3

ES2928050T3 - Peptidomimético de horquilla beta con actividad inhibidora de elastasa y formas de dosificación en aerosol del mismo

Info

Publication number: ES2928050T3
Application number: ES17733738T
Authority: ES
Inventors: Piet Bruijnzeel; Johann Zimmermann; Philip Barth; Eric Chevalier; Christian Ludin; Manfred Keller
Original assignee: Spexis AG
Current assignee: Spexis AG
Priority date: 2016-05-31
Filing date: 2017-05-31
Publication date: 2022-11-15
Anticipated expiration: 2037-05-31
Also published as: EP3463280B1; JP7286319B2; AU2017273508A1; EA201892819A1; US11844823B2; PL3463280T3; CN109195580A; CA3024522A1; HUE060393T2; JP2019523222A; JP2023017793A; US20220023379A1; HRP20221185T1; CA3024521A1; KR102511284B1; PH12018502521A1; LT3463280T; CN116159024A; KR20190011750A; WO2017207118A1

Abstract

La presente invención se refiere a aerosoles farmacéuticos que comprenden un peptidomimético β-horquilla de fórmula ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-lle-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), o un péptido farmacéuticamente aceptable sal del mismo, que tiene actividad inhibidora frente a la elastasa de neutrófilos humana. Se relaciona además con composiciones farmacéuticas sólidas o líquidas y kits para preparar y administrar tales aerosoles. La invención se puede utilizar para la prevención, el control o el tratamiento de enfermedades pulmonares, como la deficiencia de alfa-1 antitripsina (AATD), la fibrosis quística (FQ), la bronquiactasia por fibrosis no quística (NCFB) o la enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC). , o infecciones, o enfermedades, o afecciones de los pulmones, mediadas por o resultantes de la actividad de la elastasa de neutrófilos humana. Así, la invención se refiere además a una composición farmacéutica o un aerosol farmacéutico que comprende el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-lle-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), o cualquier sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para usar en un método para la prevención, manejo o tratamiento de enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por o son el resultado de la actividad de elastasa de neutrófilos humanos en un sujeto. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Peptidomimético de horquilla beta con actividad inhibidora de elastasa y formas de dosificación en aerosol del mismo

Sector de la invención

La presente invención se refiere a aerosoles farmacéuticos que comprenden un peptidomimético de horquilla p de fórmula ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), o una sal aceptable farmacéuticamente del mismo, que se da a conocer específicamente en la Patente WO2006/087001 A1 y tiene actividad inhibidora contra la elastasa de neutrófilos humana. Se refiere, además, a composiciones farmacéuticas sólidas o líquidas y kits para preparar y administrar dichos aerosoles. La presente invención se puede utilizar para la prevención, el control o el tratamiento de enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana o son resultantes de la misma, por ejemplo, enfermedades pulmonares, tales como deficiencia de alfa-1 antitripsina (AATD, alpha-1 antitrypsin deficiency), fibrosis quística (FQ), bronquiectasias no asociadas a fibrosis quística (NCFB, non-cystic fibrosis bronchiectasis) o enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC), o infecciones de los pulmones que causan enfermedades o afecciones de los pulmones, que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana. De este modo, la presente invención se refiere, además, a una composición farmacéutica o un aerosol farmacéutico que comprende el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo, para su utilización en un procedimiento para la prevención, el control o el tratamiento de enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana en un paciente o son resultantes de la misma.

Estado de la técnica anterior

La elastasa de neutrófilos humana (NE, neutrophil elastase, humana), un miembro de la familia de las serina proteasas, constituye una importante diana terapéutica. Además de la catepsina G y la proteinasa 3, está íntimamente implicada en la modulación de actividades de las citocinas y sus receptores. Particularmente en los sitios de inflamación, se libera una alta concentración de NE humana de las células polimorfonucleares infiltrantes en estrecha correlación temporal con niveles elevados de citocinas inflamatorias, lo que indica firmemente que esta proteasa está implicada en el control de la bioactividad y disponibilidad de citocinas (U. Bank, S. Ansorge, J. Leukoc Biol. 2001, 69, 177-90). Se sabe que la NE humana es la principal responsable de la proteólisis extracelular y contribuye al daño tisular al catalizar la hidrólisis de una amplia variedad de macromoléculas de matriz, proteínas plasmáticas, mediadores inflamatorios, y receptores de superficie celular con importantes consecuencias locales y sistémicas (C. A. Oven; E. J. Campbell; J. Leukoc. Biol. 1999, 65, 137-150). Por tanto, los inhibidores de la n E humana son candidatos a fármacos novedosos y valiosos para enfermedades inflamatorias infecciosas, que incluyen enfermedades pulmonares, tales como la enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC), el síndrome de dificultad respiratoria aguda (SDRA), la fibrosis quística (FQ) y la lesión por reperfusión isquémica (H. Ohbayashi, Expert Opin. Investig. Drugs 2002, 11, 965-980; B. Korkmaz, T. Moreau, F. Gauthier, Biochimie 2008, 90, 227). Se han descubierto inhibidores de la catepsina G, elastasa o triptasa humanas, tales como los peptidomiméticos de horquilla p (Patentes WO 2006/087001; WO 2015/096872; W^o2015/096873). Pueden satisfacer una necesidad importante de nuevas terapias que prevengan o traten y/o mitiguen de manera eficaz estas enfermedades o afecciones.

Las vías de administración se pueden clasificar en si el efecto del fármaco es local (administración tópica) o sistémico (administración enteral o parenteral). La administración de productos farmacéuticos a los bronquios y los pulmones (administración pulmonar de fármacos) se ha utilizado para el tratamiento local de enfermedades y afecciones del sistema respiratorio. Sin embargo, también se ha demostrado la viabilidad de la inhalación como vía alternativa de administración para el tratamiento de enfermedades sistémicas utilizando la gran superficie de los pulmones para la absorción (J. S. Patton, P. R. Byron, Not. Rev. Drug Discov. 2007, 6, 67 -74; M. Hohenegger, Curr. Pharm. Des. 2010, 16, 2484-2492).

En particular, las sustancias farmacológicas pueden administrarse al sistema respiratorio como polvos secos aerosolizados o líquidos aerosolizados, siendo estos últimos soluciones o dispersiones, tales como suspensiones de sustancias farmacológicas (Patente EP 2 567 691). Se han desarrollado diversos dispositivos para convertir una composición sólida o líquida en un aerosol para permitir la inhalación. Para la conversión de soluciones o suspensiones de sustancias farmacológicas de base acuosa en aerosoles inhalables, normalmente se utilizan nebulizadores. Son particularmente útiles para enfermedades que requieren altas dosis pulmonares, por ejemplo, FQ, y pacientes, por ejemplo, niños, que no pueden coordinar o alcanzar los flujos necesarios para la utilización de otros dispositivos de inhalación (M. Knoch, M. Keller, Expert Opin. Drug Del. 2005, 2, 377-390, Patentes WO 2007/091266, WO 98/19694, WO 2007/090646 y WO 2008/025560).

La inhalación de sustancias farmacológicas puede ser favorable para la profilaxis y/o el tratamiento de infecciones y/o enfermedades de las vías respiratorias asociadas con la actividad de la elastasa de neutrófilos. Existen evidencias de que la infiltración de las vías respiratorias por neutrófilos conducirá a un aumento de la elastasa de neutrófilos dentro del compartimento extracelular y, por lo tanto, inducirá efectos nocivos. En un modelo en ratón de estimulación con alérgenos de neutrófilos, se pudo demostrar que la inhibición de la elastasa de neutrófilos por sivelelstat atenúa la hiperreactividad y la inflamación de las vías respiratorias (H. Koga, N. Miyahara et al., Respir. Res. 2013, 14:8). En un modelo en ratón diferente, se descubrió que la administración de rhalfa1PI no glicosilado, una forma recombinante del inhibidor de la elastasa, inhibidor de la proteinasa alfa-1 (alfa1 PI), a la superficie de las vías respiratorias de ratones CD-1 por instilación nasal, era altamente protectora contra la lesión mediada por elastasa, incluso significativamente más protectora que el alfa1 PI glicosilado derivado de la sangre. Estos resultados sugieren que la administración en aerosol de rhalfa1 PI podría ser una estrategia eficaz para controlar la fisiopatología dependiente de elastasa asociada con la enfermedad pulmonar de fibrosis quística. Recientemente, R. Siekmeier resumió los resultados de los estudios clínicos completados hasta el momento que apuntan a la deposición pulmonar de alfa1 PI inhalado de pacientes con deficiencia hereditaria de alfa1 PI o fibrosis quística (Eur. J. Med. Res. 2010, 15 [Suplemento II], 164). Para ambas áreas terapéuticas, la mayoría de los estudios indican que la administración de alfa1 PI por inhalación puede servir como un tratamiento potente para neutralizar el exceso de proteínas inflamatorias y elastasa de neutrófilos. Aunque estos últimos efectos no conducen automáticamente a mejoras en la función pulmonar del paciente, una reducción clara de la inflamación de las vías respiratorias después del tratamiento con alfa1 PI puede preceder a cambios estructurales pulmonares (M. Griese, P. Latzin et al. Eur. Respir. J. 2007, 29, 240).

En general, la ventaja de la administración de la sustancia farmacológica por inhalación es que puede proporcionar un suministro de dosis terapéuticas suficientes del fármaco directamente al sitio de acción principal, por ejemplo, en el caso de enfermedades respiratorias, a la vez que se minimizan los riesgos de toxicidad sistémica. Adicionalmente, se pueden evitar las farmacocinéticas y/o farmacodinámicas subóptimas asociadas con la exposición sistémica al fármaco. Además, la inhalación (en casa) es un modo de administración más conveniente que la inyección intravenosa (sala médica).

Aun así, la eficacia de un tratamiento basado en la administración de la sustancia farmacológica inhalada depende principalmente del fármaco que se seleccione, una composición farmacéutica del mismo adecuada para la inhalación y el dispositivo que se utilice. Por tanto, existe una gran necesidad de composiciones farmacéuticas, aerosoles y kits terapéuticos adicionales que sean adecuados para la prevención, el control o el tratamiento de enfermedades o afecciones que estén mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana o sean resultantes de la misma, que mejoren el resultado de los tratamientos actualmente conocidos y/o superen las desventajas de los tratamientos actualmente conocidos.

Características de la invención

La presente invención da a conocer un aerosol farmacéutico para administración pulmonar que comprende una fase líquida dispersa y una fase gaseosa continua. El alcance de la presente invención está definido por las reivindicaciones adjuntas. La fase líquida dispersa comprende gotitas acuosas que comprenden el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo. Las gotitas de la fase dispersa tienen un diámetro de masa mediana de 1,5 pm a 5 pm con una distribución de tamaño de gotita que tiene una desviación estándar geométrica de 1,2 a 1,7. Además, la presente invención da a conocer el aerosol farmacéutico para administración pulmonar que comprende una fase líquida dispersa y una fase gaseosa continua, en el que la fase líquida dispersa comprende gotitas acuosas que comprenden el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-Pro-Pro-), o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo, para su utilización en un procedimiento para la prevención, el control o el tratamiento de enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana en un paciente o son resultantes de la misma.

En otro aspecto, la presente invención da a conocer composiciones farmacéuticas líquidas y sólidas a partir de las cuales se puede preparar el aerosol anterior. La composición líquida comprende el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo, en una concentración dentro de un intervalo de 4 mg/ml a 100 mg/ml, de manera preferente, dentro de un intervalo de 17 mg/ml a 95 mg/ml, o de 35 mg/ml a 95 mg/ml, respectivamente y, de manera más preferente, dentro de un intervalo de aproximadamente 70 mg/ml a 95 mg/ml.

En todavía otro aspecto, la presente invención da a conocer un kit que comprende un nebulizador y una composición líquida o sólida, en el que el nebulizador está adaptado para aerosolizar la composición líquida en un aerosol, tal como se ha descrito anteriormente. Además, la presente invención da a conocer un kit que comprende un nebulizador y una composición líquida o sólida, en el que el nebulizador está adaptado para aerosolizar la composición líquida en un aerosol, tal como se ha descrito anteriormente, para su utilización en un procedimiento para la prevención, el control o el tratamiento de enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana en un paciente o son resultantes de la misma.

En todavía otro aspecto, la presente invención da a conocer, además, un procedimiento para preparar y suministrar un aerosol para administración pulmonar. El procedimiento comprende la etapa de proporcionar una composición farmacéutica líquida que comprende el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo, en una concentración dentro de un intervalo de aproximadamente 4 mg/ml a 100 mg/ml, de manera preferente, dentro de un intervalo de 17 mg/ml a 95 mg/ml, o de 35 mg/ml a 95 mg/ml, respectivamente y, de manera más preferente, dentro de un intervalo de 70 mg/ml a 95 mg/ml, o, de proporcionar una composición farmacéutica sólida para preparar la composición líquida, en la que la composición comprende el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo, y en la que la composición sólida es soluble o dispersable en un disolvente líquido acuoso, y en la que la composición líquida comprende una concentración dentro de un intervalo de 4 mg/ml a 100 mg/ml, de manera preferente, dentro de un intervalo de 17 mg/ml a 95 mg/ml, o de 35 mg/ml a 95 mg/ml, respectivamente, y de manera más preferente, dentro de un intervalo de 70 mg/ml a 95 mg/ml, del compuesto activo, o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo, y la etapa de proporcionar un nebulizador capaz de aerosolizar dicha composición farmacéutica líquida a una velocidad media de suministro, como mínimo, de 0,8 mg del compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo, por minuto, estando el nebulizador adaptado, además, para emitir un aerosol que comprende una fase líquida dispersa que tiene un diámetro de masa mediana de 1,5 pm a 5 pm, y que tiene una distribución de tamaño de gotita que tiene una desviación estándar geométrica de 1,2 a 1,7. En una etapa posterior, se acciona el nebulizador para aerosolizar la composición farmacéutica líquida que, finalmente, puede ser inhalada por mamíferos, de manera más preferente, por pacientes humanos.

En todavía otro aspecto, la presente invención da a conocer una composición farmacéutica que comprende el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-Pro-Pro-), o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo y, de manera opcional, uno o más diluyentes, excipientes o portadores aceptables farmacéuticamente, para su utilización en un procedimiento para la prevención, el control o el tratamiento de enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana en un paciente o son resultantes de la misma.

En todavía otro aspecto, la presente invención da a conocer un kit que comprende el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo, y un prospecto, en el que el prospecto comprende instrucciones para tratar a un paciente por enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana o son resultantes de la misma utilizando el compuesto activo.

Descripción breve de las figuras

Las figuras 1 y 2 muestran los efectos de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) administrado por inhalación en un modelo LPS/fMLP de activación de neutrófilos en rata. Se analizó la actividad de la elastasa de neutrófilos en los sobrenadantes de BAL de las tráqueas de ratas muertas. Los datos se muestran en comparación con el vehículo de control. Los datos se representan como medias ( figura 1 ) y como puntos de datos individuales junto con sus correspondientes valores medio y error estándar de la media (s.e.m.) ( figura 2).

La figura 3 muestra las curvas de concentración plasmática media-tiempo de dosis individuales crecientes (80 mg, 160 mg y 320 mg por cohorte) de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) administrado por inhalación a pacientes con fibrosis quística. Estas curvas muestran perfiles típicos similares a los perfiles de curvas resultantes de dosis comparables de compuesto activo inhaladas por sujetos sanos.

La figura 4 muestra las concentraciones medias en esputo de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) administradas por inhalación a pacientes con fibrosis quística como dosis individuales crecientes (80 mg, 160 mg y 320 mg por cohorte). Los datos se muestran en función del tiempo. La comparación de las concentraciones de compuesto activo en esputo ( figura 4 ) y plasma ( figura 3 ) muestra que las concentraciones de compuesto activo en esputo son aproximadamente 103 veces mayores que en plasma.

La figura 5 muestra los efectos sobre la elastasa de neutrófilos activa en el esputo de pacientes con fibrosis quística inducidos por ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) administrado por inhalación a pacientes con fibrosis quística en dosis individuales crecientes (80 mg, 160 mg y 320 mg por cohorte). Los datos se muestran en función del tiempo y se representan como medias. Además, también se representan los datos del placebo.

Se puede obtener una fuerte inhibición (> 90 %) de la elastasa activa en el esputo durante varias horas después de la administración de una dosis individual del compuesto activo en todos los grupos de dosis.

Descripción detallada de la invención

En un primer aspecto, la presente invención da a conocer un aerosol farmacéutico para administración pulmonar que comprende una fase líquida dispersa y una fase gaseosa continua. La fase líquida dispersa comprende gotitas acuosas que comprenden el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo. Las gotitas de la fase dispersa tienen un diámetro de masa mediana de 1,5 pm a 5 pm con una distribución de tamaño de gotita que tiene una desviación estándar geométrica de 1,2 a 1,7.

El aerosol de la presente invención es para administración pulmonar, lo que se consigue, de manera preferente, mediante la inhalación oral del aerosol. Tal como se utiliza en el presente documento en la descripción y las reivindicaciones, la administración pulmonar significa el suministro de aerosol a cualquier parte o característica de los pulmones, incluidos los denominados pulmones profundos, los pulmones periféricos, los alvéolos, los bronquios y los bronquiolos.

Entre las afecciones de las regiones diana pulmonares, en las que la prevención, el control o el tratamiento de mamíferos, de manera más preferente, de pacientes humanos, utilizando el aerosol de la presente invención es potencialmente útil, se incluyen enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana o son resultantes de la misma, por ejemplo, en particular, enfermedades pulmonares, tales como deficiencia de alfa-1 antitripsina (AATD), fibrosis quística (FQ), bronquiectasias no asociadas a fibrosis quística (NCFB) o enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC), o infecciones de los pulmones que causan enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana.

Tal como se utiliza en el presente documento, en la descripción y las reivindicaciones, un aerosol es una dispersión de una fase sólida y/o líquida en una fase gaseosa. La fase dispersa, también denominada fase discontinua, comprende múltiples partículas sólidas y/o líquidas. Ambos tipos físicos básicos de aerosoles, es decir, dispersiones sólidas y líquidas en fase gaseosa, pueden utilizarse como aerosoles farmacéuticos.

Según la presente invención, el aerosol comprende una fase líquida dispersa y una fase gaseosa continua. Dichos aerosoles se denominan a veces “aerosoles líquidos” o líquidos en aerosol. Cabe señalar que el requisito de una fase líquida dispersa no excluye la presencia de una fase sólida. En particular, la fase líquida dispersa puede representar en sí misma una dispersión, tal como una suspensión de partículas sólidas en un líquido.

La fase gaseosa continua debe seleccionarse entre cualquier gas o mezcla de gases que sea aceptable farmacéuticamente. Por ejemplo, el aire o el aire comprimido como fase gaseosa son más comunes en la terapia de inhalación que utiliza nebulizadores como generadores de aerosol. De manera alternativa, se pueden utilizar otros gases y mezclas de gases, tales como aire enriquecido con oxígeno, o mezclas de nitrógeno y oxígeno. La utilización de aire como fase gaseosa continua es lo más preferente.

El compuesto activo es ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo, que tiene actividad inhibidora contra la elastasa de neutrófilos humana. Estructuralmente, el compuesto activo es un tridecapéptido cíclico homodésico, en el que OctG es ácido (S)-2-aminodecanoico y DPro es D-prolina. Las abreviaturas (código de 3 letras) para los residuos de aminoácidos restantes son las generalmente reconocidas. Todos los residuos de aminoácidos están en configuración L, excepto un residuo de D-prolina.

Tal como se utiliza en el presente documento, en la descripción y las reivindicaciones, el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) debe entenderse que incluye los respectivos solvatos.

Los solvatos, así como las sales, son categorías de formas en las que el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) se puede utilizar como principio activo en una composición farmacéutica. Las sales son compuestos neutros compuestos por iones, es decir, cationes y aniones. Si el compuesto activo puede actuar como un ácido, se pueden formar sales potencialmente útiles con cationes inorgánicos, tales como sodio, potasio, calcio, magnesio y/o amonio, o con cationes orgánicos, tales como los derivados de arginina, lisina, glicina y/o etilendiamina. Si el compuesto activo (o partes del mismo) puede actuar como una base, como, por ejemplo, el residuo de Lys siendo uno de los residuos de aminoácido de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), entonces se pueden formar sales potencialmente útiles con aniones inorgánicos, tales como cloruro, bromuro, yoduro, fosfato (monobásico o dibásico), sulfato, nitrato, acetato, trifluoroacetato, propionato, butirato, maleato, fumarato, metanosulfonato, etanosulfonato, 2-hidroxi-etilsulfonato, n-propilsulfonato, isopropilsulfonato, lactato, malato y/o citrato.

El término sal aceptable farmacéuticamente o sal farmacéutica se utiliza para referirse a un fármaco ionizable o compuesto activo que se ha combinado con un contraión para formar un complejo neutro. Convertir un fármaco o compuesto activo en una sal a través de este proceso puede, por ejemplo, aumentar su estabilidad química, hacer que el complejo sea más fácil de administrar y/o permitir la manipulación del perfil farmacocinético del agente.

En una realización preferente de la presente invención, el contraión del compuesto activo es acetato.

El aerosol se caracteriza, además, por que las gotitas de la fase líquida dispersa tienen un diámetro de masa mediana de 1,5 |xm a 5 |om con una distribución de tamaño de gotita que tiene una desviación estándar geométrica de 1,2 a aproximadamente 1,7. El diámetro de masa mediana (MMD, mass median diameter), tal como se utiliza en el presente documento, en la descripción y las reivindicaciones, es el diámetro de masa mediana de la fase líquida dispersa medido mediante difracción láser. Se conocen y están disponibles en el mercado diversos aparatos analíticos apropiados para determinar el MMD, tales como Malvern MasterSizer X o Malvern SprayTec. La distribución geométrica, que incluye la desviación estándar geométrica (GSD, geometric standard deviation) de las partículas o gotitas líquidas aerosolizadas puede determinarse de manera simultánea con el MMD. La GSD describe cuán disperso es un conjunto de números cuyo promedio preferente es la media geométrica.

En una realización preferente, el aerosol es para administración pulmonar y la fase líquida dispersa de dicho aerosol tiene un MMD en el intervalo de 2,0 |j.m a aproximadamente 4,5 |j.m y una GSD en el intervalo de 1,2 a 1,7. De manera más preferente, el aerosol de la presente invención tiene un MMD en el intervalo de 2,5 |om a aproximadamente 3,5 |om y una GSD en el intervalo de 1,4 a 1,6. Cada uno de estos conjuntos de combinaciones es particularmente útil para conseguir una alta concentración local del compuesto activo en los pulmones, incluyendo los bronquios y los bronquiolos, en relación con la cantidad de compuesto activo que se aerosoliza.

En otra realización preferente, el aerosol se emite desde un generador de aerosol a una velocidad, como mínimo, de 0,1 ml/min. En otra realización, la velocidad de salida (total), que es la velocidad a la que se emite el aerosol desde el generador de aerosol, es, como mínimo, de 0,150 ml/min o, como mínimo, de 150 mg/min para aquellos aerosoles líquidos cuyas densidades son, para fines prácticos, próximas a 1 g/ml, es decir, dentro del intervalo de 0,95 g/ml a 1,05 g/ml. En realizaciones adicionales, la velocidad de salida está dentro del intervalo de 200 mg/min a 700 mg/min, o de 250 mg/min a 650 mg/min, respectivamente.

En otra realización preferente, el aerosol se emite desde un generador de aerosol a una velocidad media de suministro, como mínimo, de 0,8 mg del compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro), o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo, por minuto. La velocidad (media) de suministro de un fármaco o compuesto activo es una de dos medidas o parámetros discretos que se definen y miden según, por ejemplo, Ph. Eur. (Farmacopea Europea) 2.9.44 y/o USP (Farmacopea de Estados Unidos) 1601 para determinar la cantidad de fármaco o compuesto activo que se espera que reciba un paciente durante un período de tratamiento. En realizaciones adicionales, la velocidad media de suministro del compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo, está dentro del intervalo de 3 mg a aproximadamente 25 mg por minuto o dentro del intervalo de 5 mg a 18 mg por minuto, respectivamente. Los generadores de aerosol apropiados, en particular nebulizadores, que son adecuados para generar el aerosol o aerosoles descritos en el presente documento, en la descripción y las reivindicaciones, se describen con más detalle a continuación.

En otro aspecto, la presente invención se refiere a una composición farmacéutica líquida para preparar el aerosol, tal como se ha descrito anteriormente, que comprende el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo, en una concentración dentro de un intervalo de 4 mg/ml a 100 mg/ml.

Tal como se define en el presente documento, en la descripción y las reivindicaciones, una composición farmacéutica líquida es un material líquido que comprende, como mínimo, un compuesto activo y, como mínimo, un excipiente aceptable farmacéuticamente y sustancialmente inerte farmacológicamente. Cabe señalar que el término “composición líquida” no significa necesariamente que no esté presente ningún material sólido. Por ejemplo, el término anterior también abarca una suspensión líquida que representa una dispersión de partículas sólidas en una fase líquida continua.

De manera preferente, la composición líquida, a partir de la cual se prepara el aerosol, es una composición acuosa; en consecuencia, el agua es el constituyente líquido predominante de dicha composición. Deben evitarse los disolventes y codisolventes distintos del agua. En otra realización, la composición comprende, como mínimo, el 80 % en peso de agua. En todavía otra realización, como mínimo el 90 % en peso de los constituyentes líquidos de la composición es agua.

Si no se puede evitar la incorporación de un disolvente no acuoso, tal como etanol, glicerol, propilenglicol o polietilenglicol, el excipiente debe seleccionarse con cuidado y teniendo en cuenta su aceptabilidad fisiológica y la utilización terapéutica de la composición. Según una realización preferente, la composición está sustancialmente libre de disolventes no acuosos.

La concentración del compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo, en la composición líquida está dentro de un intervalo de 4 mg/ml a 100 mg/ml. De manera preferente, la concentración del compuesto activo anterior, o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo, está dentro del intervalo de 17 mg/ml a 95 mg/ml, o de 35 mg/ml a 95 mg/ml, respectivamente, o, de manera más preferente, de aproximadamente 70 mg/ml a 95 mg/ml. Una alta concentración de un compuesto activo en una composición adecuada para ser aerosolizada proporciona comodidad y cumplimiento terapéutico para el paciente: cuanto mayor sea dicha concentración, menor será el volumen total de la composición líquida que comprende la dosis eficaz del compuesto activo que se inhalará y menor será el tiempo total necesario para la inhalación de dicha dosis eficaz.

La viscosidad dinámica de la composición líquida influye en la eficacia de la nebulización y en la distribución del tamaño de partícula del aerosol formado por nebulización. La viscosidad dinámica debe ajustarse, de manera preferente, a un intervalo de 0,8 mPas a 1,7 mPas. En otras realizaciones, la viscosidad dinámica está en el intervalo de 1,0 mPas a 1,7 mPas, o en el intervalo de aproximadamente 1,2 mPas a 1,6 mPas, respectivamente. A efectos de obtener un aerosol que sea muy adecuado para la administración pulmonar, la tensión superficial de la composición líquida de la presente invención debe ajustarse, de manera preferente, a un intervalo de 25 mN/m a 80 mN/m, de manera más preferente, a un intervalo de 30 mN/m a 70 mN/m o, de manera incluso más preferente, a un intervalo de 45 mN/m a 55 mN/m. En general, la calidad de un aerosol y la eficacia de la nebulización podrían verse afectadas negativamente en las partes inferiores de las realizaciones presentadas anteriormente; sin embargo, los resultados de los estudios que se describen a continuación indican que no hay cambios significativos en los rendimientos de las composiciones líquidas de la presente invención en el aspecto anterior.

Es bien conocido en la técnica que la adición de un surfactante a una composición líquida acuosa puede dar lugar a que la tensión superficial se reduzca de manera bastante destacada por debajo de la del agua o la solución de tampón fisiológica. Por lo tanto, se debe encontrar un compromiso en cada caso dependiendo de la aplicación prevista.

A efectos de que sea bien tolerado, un aerosol debe tener, en la medida de lo posible, una tonicidad u osmolalidad fisiológica. Por tanto, puede ser deseable incorporar un excipiente activo osmóticamente para controlar la osmolalidad del aerosol. Dicho excipiente o excipientes, si se utiliza, por ejemplo, una combinación de sustancias, deberían seleccionarse para alcanzar idealmente una osmolalidad del aerosol que no se desvíe demasiado de la de los fluidos fisiológicos, es decir, de 150 mOsmol/kg. Sin embargo, debe encontrarse de nuevo un compromiso entre, por un lado, las necesidades físico-químicas y/o farmacéuticas y, por otro lado, los requisitos fisiológicos. En general, puede ser aceptable una osmolalidad de hasta 800 mOsmol/kg. En particular, es preferente una osmolalidad en el intervalo de 200 mOsmol/kg a aproximadamente 600 mOsmol/kg. En realizaciones adicionales, la osmolalidad está en el intervalo de 250 mOsmol/kg a 500 mOsmol/kg o en el intervalo de aproximadamente 300 mOsmol/kg a 450 mOsmol/kg, respectivamente.

Un enfoque para mejorar la efectividad y/o la eficacia de la composición puede ser aumentar el tiempo de retención local de la composición después de la deposición del aerosol en las regiones diana. Por ejemplo, un tiempo de residencia prolongado de la composición depositada en los pulmones puede conducir a una mayor exposición continua del compuesto activo en el sitio de acción. Al mismo tiempo, puede reducir la frecuencia requerida de administración y, por lo tanto, mejorar la comodidad y el cumplimiento terapéutico del paciente.

A efectos de conseguir una retención prolongada del compuesto activo, en general, se pueden seguir diversas estrategias de formulación, por ejemplo, conversión del compuesto activo altamente soluble en agua en una forma sólida menos soluble, tal como una sal poco soluble. Como consecuencia, el compuesto está presente en el aerosol en forma no disuelta, tal como en forma de microsuspensión o nanosuspensión. Después de la deposición de las gotitas de aerosol, la fase líquida de la composición se combina con el fluido fisiológico, por ejemplo moco, y permite que el fármaco se disuelva.

Una estrategia de formulación diferente se basa en el hecho de que el excipiente o excipientes poliméricos, tal como se describen a continuación, pueden tener un efecto sobre la liberación del compuesto activo a partir de la formulación y/o sobre el tiempo de residencia local de la composición después de la deposición sobre el tejido diana. Por lo tanto, dichos excipientes también afectan a la biodisponibilidad local del compuesto activo en el sitio de acción.

En una de las realizaciones preferentes, el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo, se formula con un excipiente polimérico para efectuar una liberación lenta y una retención local prolongada. Entre los polímeros potencialmente adecuados se incluyen, en particular, polímeros solubles en agua o dispersables en agua aceptables farmacéuticamente, tales como metilcelulosa, hidroxietilcelulosa, alginato, galactomanano, dextrano, agar, goma guar, tragacanto y mezclas de los mismos.

Si uno o varios excipientes poliméricos están presentes en la composición líquida de la presente invención, se debe tener cuidado con la influencia sobre la viscosidad dinámica de dicha composición a efectos de asegurar una aerosolización eficaz. De este modo, la viscosidad dinámica no debe superar 1,7 mPas. En general, se debe considerar el grado exacto del polímero o polímeros y la presencia de otros excipientes para determinar el contenido del polímero o polímeros en dicha composición líquida.

Se sabe que otros excipientes, a saber, agentes complejantes, tales como ciclodextrinas, sales de metales divalentes o multivalentes, tales como sales de calcio, magnesio o aluminio, agentes quelantes, tales como el ácido etilendiaminotetraacético, incluidas sus sales, o agentes anfifílicos, tales como fosfolípidos o lecitinas, pueden prolongar de manera similar la liberación del compuesto activo como, por ejemplo, los excipientes poliméricos. La composición líquida de la presente invención puede comprender excipientes aceptables farmacéuticamente adicionales, por ejemplo, agentes osmóticos, tales como sales inorgánicas; excipientes para ajustar y/o tamponar el pH, tales como sales orgánicas o inorgánicas, ácidos y bases, agentes de carga y adyuvantes de liofilización, tales como sacarosa y lactosa, alcoholes de azúcar, como manitol, sorbitol y xilitol, estabilizantes y antioxidantes, tales como vitamina E, incluyendo sus derivados, licopeno, incluyendo sus derivados y ácido ascórbico, surfactantes iónicos y no iónicos, tales como fosfolípidos y polisorbatos, modificadores del sabor, disgregantes, colorantes, edulcorantes y/o aromatizantes.

Se incorporan en la composición uno o más agentes osmóticos, tales como cloruro de sodio, para ajustar la osmolalidad a un valor en un intervalo preferente, tal como se ha descrito anteriormente en el presente documento. A efectos de proporcionar un aerosol bien tolerado, la preparación, según la presente invención, debe ajustarse a un pH euhídrico. El término “euhídrico” implica que puede haber una diferencia entre los requisitos farmacéuticos y fisiológicos, de manera que debe encontrarse un compromiso que, por ejemplo, asegure que, por un lado, la preparación sea suficientemente estable durante el almacenamiento, pero, por otro lado, siga siendo bien tolerada. De manera preferente, el valor del pH se encuentra en la región ligeramente ácida a neutra, es decir, entre 4 y 8. En general, las desviaciones hacia un medio débilmente ácido se toleran mejor que un cambio alcalino. Es particularmente preferente una composición que tenga un pH que se encuentre dentro del intervalo de 4,5 a 7,5. Para ajustar el pH de la composición de la presente invención y/o tamponar dicha composición, se pueden utilizar ácidos, bases, sales aceptables fisiológicamente, y combinaciones de estos. Los excipientes adecuados para reducir el valor del pH y/o como componentes ácidos de un sistema tampón son ácidos minerales fuertes, tales como ácido sulfúrico y ácido clorhídrico. También se pueden utilizar ácidos inorgánicos y orgánicos de fuerza media, tales como ácido fosfórico, ácido cítrico, ácido tartárico, ácido succínico, ácido fumárico, metionina, ácido láctico, ácido acético, ácido glucurónico, así como sales ácidas, tales como hidrogenofosfatos con sodio o potasio. Los excipientes adecuados para aumentar el valor del pH y/o como componentes básicos de un sistema tampón son bases minerales, tales como hidróxido de sodio, u otros hidróxidos y óxidos alcalinos y alcalinotérreos, tales como hidróxido de magnesio, hidróxido de calcio o sales básicas de amonio, tales como hidróxido de amonio, acetato de amonio o aminoácidos básicos, tales como lisina, o carbonatos, tales como carbonato de sodio o magnesio, hidrogenocarbonato de sodio o citratos, tales como citrato de sodio.

En una realización preferente, la composición de la presente invención comprende, como mínimo, un excipiente para ajustar el pH. En una realización más preferente, ese excipiente es hidróxido de sodio.

Principalmente, por razones farmacéuticas, puede estar indicada la estabilización química de la composición de la presente invención mediante aditivos adicionales. Las reacciones de degradación más comunes de un compuesto activo definido químicamente en preparaciones acuosas comprenden, en particular, reacciones de hidrólisis que pueden estar limitadas principalmente por un ajuste óptimo del pH, así como reacciones de oxidación. Como el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) comprende un residuo de lisina que tiene un grupo amino primario, este último, por ejemplo, puede estar sujeto a un ataque oxidativo. Por lo tanto, puede ser aconsejable o necesaria la adición de un antioxidante, o un antioxidante en combinación con un sinergista.

Los antioxidantes son sustancias naturales o sintéticas que son capaces de prevenir o inhibir la oxidación del compuesto activo. Los antioxidantes son principalmente adyuvantes que son oxidables y/o actúan como agentes reductores, tales como acetato de tocoferol, licopeno, glutatión reducido, catalasa, peróxido dismutasa. Otros antioxidantes adecuados son, por ejemplo, ácido ascórbico, ascorbato de sodio y otras sales y derivados del ácido ascórbico, por ejemplo, palmitato de ascorbilo, ácido fumárico y sus sales, ácido málico y sus sales.

Las sustancias sinérgicas son aquellas que no actúan directamente como reactivos en procesos de oxidación, sino que contrarrestan dichos procesos mediante mecanismos indirectos, por ejemplo, mediante complejación de iones metálicos que se sabe que actúan catalíticamente en procesos de oxidación. El ácido etilendiaminotetraacético (EDTA) y sales y derivados del mismo, el ácido cítrico y sales del mismo, el ácido málico y sales del mismo, son dichas sustancias sinérgicas que pueden actuar como agentes quelantes.

En una de las realizaciones, la composición de la presente invención comprende, como mínimo, un antioxidante. En una realización adicional, la composición comprende tanto un antioxidante como un agente quelante.

Tal como se ha mencionado anteriormente, la composición de la presente invención puede comprender un excipiente que afecta al sabor. Un mal sabor es extremadamente desagradable e irritante, especialmente en la administración por inhalación, y puede dar como resultado el incumplimiento terapéutico y, por tanto, el fracaso del tratamiento. El mal sabor es percibido por el paciente a través de la parte del aerosol que precipita en la región bucal y faríngea durante la inhalación. Incluso si el tamaño de partícula del aerosol se puede optimizar de tal manera que solo una pequeña fracción de la preparación precipite en las regiones mencionadas anteriormente (dicha fracción se pierde para el tratamiento, a menos que la mucosa bucal, faríngea o nasal sea el tejido diana), actualmente es casi imposible reducir dicha fracción hasta el punto de que ya no se perciba el mal sabor de un compuesto activo. Por lo tanto, puede ser crucial la mejora del sabor de una composición o el enmascaramiento del sabor de un compuesto activo.

A efectos de mejorar el sabor de la composición, se pueden incorporar uno o más excipientes potencialmente útiles del grupo de azúcares, alcoholes de azúcar, sales, aromatizantes, agentes complejantes, polímeros, edulcorantes, tales como sacarina sódica, aspartamo, surfactantes.

En una realización preferente, la composición de la presente invención comprende, como mínimo, un excipiente modificador del sabor. En una realización más preferente, dicho excipiente modificador del sabor es sacarina sódica. En otra realización, la composición comprende un compuesto activo adicional, cuya combinación con el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) tiene un efecto terapéutico combinado o, idealmente, sinérgico.

En caso de que una formulación líquida para aerosolización no tenga una vida útil suficientemente larga para servir como una formulación adecuada para el mercado, puede ser beneficioso proporcionar una composición sólida en su lugar. Dicha composición sólida tiene, en general, el potencial de una vida útil más larga en comparación con una composición líquida.

La composición sólida de la presente invención comprende el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo, y, como mínimo, un excipiente. En general, se pueden seleccionar los mismos excipientes que ya se han descrito anteriormente. Dependiendo del proceso/procedimiento de fabricación de la composición sólida, pueden ser útiles uno o más excipientes adicionales. Si la composición sólida se prepara, por ejemplo, mediante secado por congelación (liofilización), que es uno de los procedimientos preferentes para preparar dicha composición sólida, puede ser ventajoso incorporar, como mínimo, un agente de carga y/o agente auxiliar de liofilización, por ejemplo, un azúcar, tal como sacarosa, fructosa, glucosa, trehalosa o un alcohol de azúcar, tal como manitol, sorbitol, xilitol, isomalt.

La composición sólida se caracteriza, además, por que es soluble o dispersable en un disolvente líquido acuoso. Tal como se define en el presente documento, en la descripción y las reivindicaciones, el término “soluble” significa que la composición sólida y el disolvente líquido acuoso se pueden combinar para formar una solución o solución coloidal, mientras que el término “dispersable” debe interpretarse que incluye la formación de dispersiones líquidas, en particular, emulsiones y microsuspensiones. El término “acuoso” significa que el constituyente líquido principal del disolvente es el agua. Deben evitarse los disolventes y codisolventes distintos del agua. En otra realización, el disolvente líquido acuoso comprende, como mínimo, el 80 % en peso de agua. En todavía otra realización, como mínimo, el 90 % en peso de los constituyentes líquidos del disolvente es agua. Si no puede evitarse la incorporación de un disolvente no acuoso, tal como etanol, glicerol, propilenglicol o polietilenglicol, el excipiente debe seleccionarse con cuidado y teniendo en cuenta su aceptabilidad fisiológica y la utilización terapéutica de la composición. Según una realización preferente, la composición está sustancialmente libre de disolventes no acuosos. Si no se puede evitar la incorporación de un disolvente no acuoso, tal como etanol, glicerol, propilenglicol o polietilenglicol, deben tomarse las mismas precauciones descritas anteriormente. Según otra realización preferente, el disolvente acuoso para disolver o dispersar la composición sólida está sustancialmente libre de disolventes no acuosos.

La cantidad del compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo, en la composición sólida tiene que corresponder a una concentración dentro de un intervalo de aproximadamente 4 mg/ml a 100 mg/ml después de la disolución o dispersión en un disolvente líquido acuoso. De manera más preferente, la cantidad del compuesto activo anterior, o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo, tiene que corresponder a una concentración dentro del intervalo de 17 mg/ml a 95 mg/ml, o de 35 mg/ml a 95 mg/ml, respectivamente, o, de manera incluso más preferente, de 70 mg/ml a 95 mg/ml, después de la disolución o dispersión en un disolvente líquido acuoso.

En una realización adicional, el contraión del compuesto activo es ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) en la composición sólida es acetato.

La composición sólida de la presente invención para reconstitución puede formar parte de un kit farmacéutico. Dicho kit comprende, de manera preferente, la composición sólida en forma estéril. Tal como se utilizan en el presente documento, en la descripción y las reivindicaciones, los términos “estéril” o “esterilidad” se definen según el significado farmacéutico habitual y, por tanto, deben entenderse como la ausencia de gérmenes que son capaces de reproducirse. La esterilidad se determina con pruebas adecuadas que están definidas en las farmacopeas correspondientes. Según los estándares científicos actuales, un nivel de garantía de esterilidad (SAL, sterility assurance level) de 10-6, es decir, la garantía de menos de una posibilidad entre un millón de que estén presentes microorganismos viables en un artículo esterilizado, se considera aceptable para las preparaciones estériles. En la práctica, las tasas de contaminación pueden ser más elevadas y las tasas de contaminación de las preparaciones fabricadas de manera aséptica podrían ascender a 10-3. Por razones prácticas, sigue siendo difícil exigir esterilidad en un sentido absoluto. Por lo tanto, la esterilidad de la composición de la presente invención debe entenderse en el presente documento, en la descripción y las reivindicaciones, de tal manera que dicha composición cumpla con los requisitos de la farmacopea correspondiente con respecto a la esterilidad.

La composición sólida de la presente invención se puede preparar proporcionando una composición líquida que sea similar a la composición líquida lista para la aerosolización y secándola posteriormente, por ejemplo, mediante liofilización. Similar significa que la composición líquida, a partir de la cual se prepara la composición sólida mediante secado, puede no comprender todos los ingredientes sólidos de la composición líquida lista para utilizar, por ejemplo, en el caso de que el portador líquido para la reconstitución esté diseñado para comprender uno o más de los excipientes. Incluso no es necesario que las concentraciones de los ingredientes de estas dos composiciones líquidas sean idénticas. La composición sólida de la presente invención puede incluso prepararse, por ejemplo, proporcionando el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo, y, de manera opcional, como mínimo, un excipiente en forma de polvo y posteriormente mezclar dicho polvo con un polvo que comprende el resto de excipientes para formar finalmente una mezcla en polvo.

En otro aspecto, la presente invención da a conocer un kit farmacéutico para la preparación y el suministro de un aerosol farmacéutico para administración pulmonar que comprende una fase líquida dispersa y una fase gaseosa continua, en el que la fase líquida dispersa comprende gotitas acuosas que comprenden el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo, tiene un diámetro de masa mediana de 1,5 p.m a 5 pm, y tiene una distribución de tamaño de gotita que tiene una desviación estándar geométrica de 1,2 a 1,7. El kit se caracteriza, además, por comprender un nebulizador de aerosol y una composición que comprende una concentración dentro de un intervalo de 4 mg/ml a 100 mg/ml del compuesto activo, o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo; o por comprender un nebulizador y una composición farmacéutica sólida para preparar la composición líquida, en la que la composición comprende el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo, y en la que la composición sólida es soluble o dispersable en un disolvente líquido acuoso, y en la que la composición líquida comprende una concentración dentro de un intervalo de 4 mg/ml a 100 mg/ml del compuesto activo, o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo.

Los nebulizadores son dispositivos capaces de aerosolizar líquidos. De manera preferente, el nebulizador del kit de la presente invención se selecciona entre nebulizadores de chorro, nebulizadores ultrasónicos, nebulizadores piezoeléctricos, nebulizadores por colisión de chorros, nebulizadores electrohidrodinámicos, nebulizadores de fuerza capilar, nebulizadores de membrana perforada y nebulizadores de membrana vibrante perforada (M. Knoch, M. Keller, Expert Opin. Drug Deliv., 2005, 2, 377). Son particularmente preferentes los nebulizadores piezoeléctricos, electrohidrodinámicosjy/o de membrana perforada, por ejemplo, nebulizadores de las plataformas dê administración de fármacos Mystic (Battelle Pharma [Battelle Memorial Institute], Estados Unidos), eFlow (Pari GmbH, Alemania), Aeroneb , Aeroneb Pro , Aero dosis (Aerogen Inc, Estados Unidos). Estos tipos de nebulizadores son particularmente útiles si el aerosol debe administrarse a los bronquios y/o los pulmones.

De manera preferente, el nebulizador debe seleccionarse o adaptarse para que sea capaz de aerosolizar la composición líquida a una velocidad, como mínimo, de 0,1 ml/min. De manera más preferente, el nebulizador es capaz de una velocidad de salida (total) (la velocidad a la que el aerosol emite desde el generador de aerosol), como mínimo, de 0,150 ml/min o, como mínimo, 150 mg/min para aquellas composiciones líquidas cuyas densidades son, para fines prácticos, próximas a 1 g/ml, es decir, dentro del intervalo de 0,95 g/ml a aproximadamente 1,05 g/ml. En realizaciones adicionales, la velocidad de salida del nebulizador está dentro del intervalo de 200 mg/min a 700 mg/min, o de 250 mg/min a 650 mg/min, respectivamente.

El nebulizador también debería seleccionarse o adaptarse, de manera preferente, para que sea capaz de aerosolizar y emitir la composición líquida a una velocidad media de suministro, como mínimo, de 0,8 mg del compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo, por minuto. La velocidad de suministro (media) de un fármaco o compuesto activo es un parámetro para determinar la cantidad de fármaco o compuesto activo que se espera que reciba un paciente durante un período de tratamiento. En realizaciones adicionales, el nebulizador se selecciona o adapta para permitir una velocidad media de suministro del compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo, en el intervalo de 3 mg por minuto a 25 mg por minuto o en el intervalo de 5 mg por minuto a 18 mg por minuto, respectivamente.

Según una preferencia adicional, el nebulizador debería seleccionarse o adaptarse para que sea capaz de aerosolizar y emitir, como mínimo, el 70 % en peso de la dosis cargada del compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo, mientras que dicha fracción de la dosis cargada se compone de gotitas que tienen un diámetro de masa mediana de no más de 5 |j.m. Una fracción de una fase dispersa que tiene un tamaño de gotita de no más de aproximadamente 5 p.m a menudo se denomina fracción respirable, ya que las gotitas de dicho tamaño, en contraste con las gotitas más grandes, tienen una alta probabilidad de depositarse en los pulmones, en lugar de en la tráquea y la faringe. De manera más preferente, como mínimo, el 80 % en peso de la dosis cargada en el nebulizador se aerosoliza en gotitas de un tamaño de no más de 5 |om y se emite desde el dispositivo. Dicho dispositivo se puede seleccionar mejor mediante la utilización de un nebulizador electrónico, de manera opcional personalizado, basado en el diseño de membrana perforada vibrante, tal como un nebulizador de la plataforma de administración de fármacos eFlow (Pari GmbH, Alemania). Según realizaciones incluso más preferentes, como mínimo el 85 % en peso y el 90 % en peso, respectivamente, de la dosis cargada se aerosoliza en gotitas de un tamaño de no más de 5 |om y se emite.

En otro aspecto, la presente invención da a conocer un procedimiento para preparar y suministrar un aerosol para administración pulmonar, comprendiendo dicho procedimiento las etapas de proporcionar una composición farmacéutica líquida que comprende el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo, en una concentración dentro de un intervalo de aproximadamente 4 mg/ml a 100 mg/ml, o proporcionar una composición farmacéutica sólida para preparar la composición líquida, en la que la composición comprende el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo, y en la que la composición sólida es soluble o dispersable en un disolvente líquido acuoso, y en la que la composición líquida comprende una concentración dentro de un intervalo de 4 mg/ml a 100 mg/ml del compuesto activo, o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo, y proporcionar un nebulizador capaz de aerosolizar dicha composición farmacéutica líquida a una velocidad media de suministro, como mínimo, de 0,8 mg del compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo, por minuto, estando el nebulizador, además, adaptado para emitir un aerosol que comprende una fase líquida dispersa que tiene un diámetro de masa mediana de 1,5 |om a 5 p.m y que tiene una distribución de tamaño de gotita que tiene una desviación estándar geométrica de 1,2 a 1,7, y accionar el nebulizador para aerosolizar la composición farmacéutica líquida.

La composición de la presente invención, ya sea líquida, inicialmente sólida o finalmente aerosolizada, o el kit farmacéutico que comprende la composición, se pueden utilizar para la prevención, el control o el tratamiento de enfermedades o afecciones de los pulmones mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana o son resultantes de la misma, por ejemplo, enfermedades pulmonares, tales como la deficiencia de alfa-1 antitripsina (AATD), fibrosis quística (FQ), bronquiectasias no asociadas a fibrosis quística (NCFB) o enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC), o infecciones de los pulmones que causan enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana.

Tal como se utiliza en el presente documento, el término “prevención”/“prevenir”, por ejemplo, tratamientos preventivos, comprende tratamientos profilácticos. En aplicaciones preventivas, la composición farmacéutica o el aerosol farmacéutico de la presente invención se administra a un paciente que se sospecha que tiene enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana o son resultantes de la misa, o corre el riesgo de desarrollarlas.

Tal como se utiliza en el presente documento, el término “control” significa aumentar el tiempo hasta la aparición de un síntoma de enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana o son resultantes de la misma o una señal asociada con enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana o son resultantes de la misma o ralentizar el aumento de la gravedad de un síntoma de enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana o son resultantes de la misma. Además, “control”, tal como se utiliza en el presente documento, incluye revertir o inhibir la progresión de la enfermedad. “Inhibición” de la progresión de la enfermedad o complicación de la enfermedad en un paciente significa prevenir o reducir la progresión de la enfermedad y/o la complicación de la enfermedad en el paciente.

Los términos “tratamiento”/“tratar”, tal como se utilizan en el presente documento, incluyen: (1) retrasar la aparición de síntomas clínicos del estado, enfermedad o afección que se desarrolla en un animal, particularmente un mamífero y especialmente un ser humano, que puede estar afectado o predispuesto al estado, enfermedad o afección, pero que aún no experimenta ni muestra síntomas clínicos o subclínicos del estado, enfermedad o afección; (2) inhibir el estado o afección (por ejemplo, detener, reducir o retrasar el desarrollo de la enfermedad o una recaída de la misma en caso de tratamiento de mantenimiento, como mínimo, de un síntoma clínico o subclínico de la misma; y/o (3) aliviar la afección (es decir, provocar la regresión del estado, enfermedad o afección o, como mínimo, uno de sus síntomas clínicos o subclínicos). El beneficio para un paciente a tratar es estadísticamente significativo o, como mínimo, perceptible para el paciente o para el médico. Sin embargo, se entenderá que cuando se administra un medicamento a un paciente para tratar una enfermedad, el resultado puede no ser siempre un tratamiento eficaz.

En aplicaciones terapéuticas, la composición farmacéutica se administra habitualmente a un paciente, tal como un paciente que ya sufre de enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana o son resultantes de la misma, en una cantidad suficiente para curar o, como mínimo, detener parcialmente los síntomas de la enfermedad o afección. Las cantidades eficaces para esta utilización dependerán de la gravedad y la evolución de la enfermedad, el tratamiento previo, el estado de salud del paciente y la respuesta a los fármacos, y el criterio del médico tratante.

En el caso de que el estado del paciente no mejore, la composición farmacéutica o el aerosol farmacéutico de la presente invención se puede administrar de forma crónica, es decir, durante un período prolongado de tiempo, incluso durante toda la vida del paciente a efectos de mejorar o, en cualquier caso, controlar o limitar los síntomas de la enfermedad o afección del paciente.

En el caso en el que el estado del paciente mejora, la composición farmacéutica o el aerosol farmacéutico se pueden administrar de forma continua; de manera alternativa, la dosis de los fármacos que se administran puede reducirse temporalmente o suspenderse temporalmente durante un cierto período de tiempo (es decir, un “descanso farmacológico”).

Una vez que se ha producido la mejoría del estado del paciente, si es necesario, se administra una dosis de mantenimiento de la composición farmacéutica o del aerosol farmacéutico de la presente invención. Posteriormente, la dosificación o la frecuencia de administración, o ambas, se reducen de manera opcional, en función de los síntomas, hasta un nivel en el que se mantiene la enfermedad mejorada.

De este modo, en otro aspecto, la presente invención da a conocer una composición farmacéutica que comprende el compuesto activo ciclo (-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo; en el que OctG es ácido (S)-2-aminodecanoico; DPro es D-prolina; y, de manera opcional, uno o más diluyentes, excipientes o portadores aceptables farmacéuticamente, para su utilización en un procedimiento para la prevención, el control o el tratamiento de enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana en un paciente o son resultantes de la misma, de manera preferente, para su utilización en un procedimiento para el tratamiento de enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana en un paciente o son resultantes de la misma.

También se da a conocer la utilización de la composición farmacéutica, tal como se describe en el presente documento, para la fabricación de un medicamento para la prevención, el control o el tratamiento de enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana en un paciente o son resultantes de la misma, de manera preferente, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana en un paciente o son resultantes de la misma.

También se da a conocer la utilización de una composición farmacéutica, tal como se describe en el presente documento para la prevención, el control o el tratamiento de enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana en un paciente o son resultantes de la misma, de manera preferente, para el tratamiento de enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana en un paciente o son resultantes de la misma.

También se da a conocer un procedimiento para la prevención, el control o el tratamiento de enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana en un paciente o son resultantes de la misma, de manera preferente, un procedimiento para el tratamiento de enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana en un paciente o son resultantes de la misma, que comprende administrar a dicho paciente una composición farmacéutica, tal como se describe en el presente documento, por ejemplo, administrar a dicho paciente una cantidad eficaz terapéuticamente de una composición farmacéutica, tal como se describe en el presente documento.

El término “diluyente, excipiente o portador aceptable farmacéuticamente”, tal como se utiliza en el presente documento, se refiere a un portador o excipiente o diluyente que es adecuado para su utilización con seres humanos y/o animales sin efectos secundarios adversos indebidos (tales como toxicidad, irritación y respuestas alérgicas) proporcionales a una relación riesgo/beneficio razonable. Puede ser un disolvente, un agente de suspensión o un vehículo aceptable farmacéuticamente para administrar los presentes compuestos al paciente.

La determinación de una cantidad eficaz terapéuticamente está dentro de la capacidad de los expertos en la materia, especialmente a la luz de la memoria detallada proporcionada en el presente documento. En algunas realizaciones, una cantidad eficaz terapéuticamente del compuesto activo o una sal aceptable farmacéuticamente del mismo puede (i) reducir la concentración de elastasa activa en el esputo de un paciente, ii) puede inhibir la actividad de la elastasa de neutrófilos humana en el esputo de un paciente. En diversas realizaciones, la cantidad es suficiente para mejorar, paliar, disminuir y/o retrasar uno o más de los síntomas de enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana en un paciente o son resultantes de la misma.

La cantidad eficaz terapéuticamente puede variar según el paciente, la enfermedad o afección que se esté tratando, el peso y la edad del paciente, la gravedad de la enfermedad o afección y la forma de administración, y se puede determinar fácilmente por un experto en la materia.

En una realización, las enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana en un paciente o son resultantes de la misma son enfermedades pulmonares, tales como deficiencia de alfa-1 antitripsina (AATD), fibrosis quística (FQ), bronquiectasias no asociadas a fibrosis quística (NCFB) o enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC), o infecciones de los pulmones que causan enfermedades o afecciones de los pulmones, que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana.

En una realización preferente, las enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana o son resultantes de la misma son enfermedades pulmonares, en las que la enfermedad pulmonar es bronquiectasias no asociadas a fibrosis quística (NCFB) o fibrosis quística (FQ).

En una realización más preferente, las enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana o que resultan de la misma son enfermedades pulmonares, en las que la enfermedad pulmonar es fibrosis quística (FQ).

En una realización, el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo, se administra al paciente como aerosol farmacéutico para administración pulmonar, que comprende una fase líquida dispersa y una fase gaseosa continua, en el que la fase líquida dispersa

(a) comprende gotitas acuosas que comprenden el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-);

o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo; en el que

OctG es ácido (S)-2-aminodecanoico;

DPro es D-prolina;

(b) tiene un diámetro de masa mediana de 1,5 pm a 5 pm; y

(c) tiene una distribución de tamaño de gotita que tiene una desviación estándar geométrica de 1,2 a 1,7.

De manera preferente, el aerosol se emite desde un generador de aerosol a una velocidad, como mínimo, de 0,1 ml de fase líquida dispersa por minuto.

De manera igualmente preferente, el aerosol se emite desde un generador de aerosol a una velocidad media de suministro, como mínimo, de 0,8 mg del compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-); o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo; por minuto.

De manera preferente, el aerosol se emite desde un generador de aerosol a una velocidad y a una velocidad media de suministro, tal como se ha descrito en las realizaciones preferentes anteriores.

En una realización, la composición farmacéutica para su utilización en un procedimiento para la prevención, el control o el tratamiento de enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana en un paciente o son resultantes de la misma, es una composición farmacéutica líquida para preparar un aerosol, tal como se describe en el presente documento, en el que la composición farmacéutica líquida comprende el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo, en una concentración dentro de un intervalo de 4 mg/ml a 100 mg/ml, de manera preferente, dentro de un intervalo de 17 mg/ml a 95 mg/ml, o de 35 mg/ml a 95 mg/ml, respectivamente, y, de manera más preferente, dentro de un intervalo de 70 mg/ml a 95 mg/ml.

En otro aspecto, la presente invención da a conocer un aerosol farmacéutico para administración pulmonar que comprende una fase líquida dispersa y una fase gaseosa continua, en el que la fase líquida dispersa

(a) comprende gotitas acuosas que comprenden el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-); o cualquier

sal aceptable farmacéuticamente del mismo; en el que

OctG es ácido (S)-2-aminodecanoico;

DPro es D-prolina;

(b) tiene un diámetro de masa mediana de 1,5 pm a 5 pm; y

(c) tiene una distribución de tamaño de gotita que tiene una desviación estándar geométrica de 1,2 a 1,7, para su utilización en un procedimiento para la prevención, el control o el tratamiento de enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana en un paciente o son resultantes de la misma.

También se da a conocer la utilización del aerosol farmacéutico, tal como se describe en el presente documento, para la fabricación de un medicamento para la prevención, el control o el tratamiento de enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana en un paciente o son resultantes de la misma, de manera preferente, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana en un paciente o son resultantes de la misma.

También se da a conocer la utilización del aerosol farmacéutico, tal como se describe en el presente documento, para la prevención, el control o el tratamiento de enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana en un paciente o son resultantes de la misma, de manera preferente, para el tratamiento de enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana en un paciente o son resultantes de la misma.

También se da a conocer un procedimiento para la prevención, el control o el tratamiento de enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana en un paciente o son resultantes de la misma, de manera preferente, un procedimiento para el tratamiento de enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana en un paciente o son resultantes de la misma, que comprende administrar a dicho paciente el aerosol farmacéutico, tal como se describe en el presente documento, por ejemplo, administrar a dicho paciente una cantidad eficaz terapéuticamente de un aerosol farmacéutico, tal como se describe en el presente documento.

En una realización, las enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana o son resultantes de la misma son enfermedades pulmonares, tales como deficiencia de alfa-1 antitripsina (AATD), fibrosis quística (FQ), bronquiectasias no asociadas a fibrosis quística (NCFB) o enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC), o infecciones de los pulmones que causan enfermedades o afecciones de los pulmones, que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana.

En una realización más preferente, las enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana o son resultantes de la misma son enfermedades pulmonares, en las que la enfermedad pulmonar es fibrosis quística (FQ).

El contraión del compuesto activo de la composición farmacéutica o el aerosol farmacéutico para su utilización en un procedimiento para la prevención, el control o el tratamiento de enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana en un paciente o son resultantes de la misma es tal como se describe para el compuesto activo anterior y es, de manera preferente, acetato.

La composición farmacéutica o el aerosol farmacéutico para su utilización en un procedimiento para la prevención, el control o el tratamiento de enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana en un paciente o son resultantes de la misma, se administra habitualmente al paciente por inhalación oral o intratraqueal, de manera preferente, por inhalación oral.

El régimen de dosificación del compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo, comprendidos por la composición farmacéutica o el aerosol farmacéutico, en los procedimientos dados a conocer en el presente documento, puede variar dependiendo de la indicación, la vía de administración y la gravedad de la afección, por ejemplo. Dependiendo de la vía de administración, se puede calcular una dosis adecuada según el peso corporal, el área de superficie corporal o el tamaño de los órganos. Entre los factores adicionales que se pueden tener en cuenta se incluyen el tiempo y la frecuencia de administración, las combinaciones de fármacos, las reacciones de sensibilidad y la tolerancia/respuesta al tratamiento. La cantidad, por ejemplo, la cantidad eficaz terapéuticamente del compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), o una sal aceptable farmacéuticamente del mismo, puede proporcionarse en una dosis individual o en múltiples dosis para conseguir el punto final del tratamiento deseado.

La frecuencia de dosificación dependerá de los parámetros farmacocinéticos del compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo, administrados, la vía de administración y la enfermedad particular tratada. La dosis y la frecuencia de dosificación también pueden depender de los datos farmacocinéticos y farmacodinámicos, así como de toxicidad y eficacia terapéutica. Por ejemplo, la información farmacocinética y farmacodinámica del compuesto activo, o una sal aceptable farmacéuticamente del mismo, puede recopilarse a través de estudios preclínicos in vitro e in vivo y, más tarde, confirmarse en seres humanos durante el transcurso de ensayos clínicos. Por tanto, para el compuesto activo, o una sal aceptable farmacéuticamente del mismo, utilizados en los procedimientos dados a conocer en el presente documento, se puede estimar inicialmente una dosis eficaz terapéuticamente a partir de ensayos bioquímicos y/o basados en células. A continuación, se puede formular la dosificación en modelos animales para conseguir un intervalo de concentración circulante deseable. Como se están llevando a cabo más estudios en seres humanos, aparecerá más información con respecto a los niveles de dosificación adecuados y a la duración del tratamiento para diversas enfermedades y afecciones.

La toxicidad y eficacia terapéutica del compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo, puede determinarse mediante procedimientos farmacéuticos estándar en cultivos celulares o animales de experimentación, por ejemplo, para determinar la LD⁵⁰(la dosis letal para el 50 % de la población) y la ED⁵⁰(la dosis eficaz terapéuticamente en el 50 % de la población). La relación de dosis entre los efectos tóxicos y terapéuticos es el “índice terapéutico”, que normalmente se expresa como la relación LD⁵⁰/ED⁵⁰. Son preferentes los compuestos que muestren elevados índices terapéuticos, es decir, la dosis tóxica es sustancialmente más alta que la dosis eficaz. Los datos obtenidos a partir de dichos ensayos de cultivos celulares y estudios adicionales en animales se pueden utilizar para formular un intervalo de dosificación para utilización en seres humanos. Las dosis de dichos compuestos se encuentran, de manera preferente, dentro de un intervalo de concentraciones circulantes que incluyen la ED⁵⁰con poca o ninguna toxicidad.

Un régimen de tratamiento de ejemplo implica la administración una vez al día, dos veces al día, tres veces al día, todos los días, cada dos días, cada tres días, cada cuatro días, cada cinco días, cada seis días, dos veces por semana, una vez por semana. El compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo, habitualmente se administra en múltiples ocasiones. Los intervalos entre dosis individuales pueden ser, por ejemplo, menos de un día, un día, dos días, tres días, cuatro días, cinco días, seis días o una semana. La combinación de la presente invención puede administrarse como un tratamiento continuo e ininterrumpido. La combinación de la presente invención también puede administrarse en un régimen en el que el paciente recibe ciclos de tratamiento (ciclos de administración) interrumpidos por un período de descanso farmacológico o un período de no tratamiento.

En una realización, el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo, de la composición farmacéutica o el aerosol farmacéutico para su utilización en un procedimiento para la prevención, el control o el tratamiento de enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana en un paciente o son resultantes de la misma, se administra al paciente a una dosis entre 0,1 y 10.000 mg/día.

En una realización, el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo, de la composición farmacéutica o el aerosol farmacéutico para su utilización en un procedimiento para la prevención, el control o el tratamiento de enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana en un paciente o son resultantes de la misma, se administra al paciente a una dosis entre 0,001 y 100 mg/día.

En una realización, el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo, de la composición farmacéutica o el aerosol farmacéutico para su utilización en un procedimiento para la prevención, el control o el tratamiento de enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana en un paciente o son resultantes de la misma, se administra al paciente a una dosis entre 5 y 1.000 mg/día.

En una realización, el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo, de la composición farmacéutica o el aerosol farmacéutico para su utilización en un procedimiento para la prevención, el control o el tratamiento de enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana en un paciente o son resultantes de la misma, se administra al paciente a una dosis entre 20 y 960 mg/día.

En una realización, el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo, de la composición farmacéutica o el aerosol farmacéutico para su utilización en un procedimiento para la prevención, el control o el tratamiento de enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana en un paciente o son resultantes de la misma, se administra al paciente a una dosis entre 80 y 320 mg/día.

En una realización, el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo, de la composición farmacéutica o el aerosol farmacéutico para su utilización en un procedimiento para la prevención, el control o el tratamiento de enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana en un paciente o son resultantes de la misma, se administra al paciente a una dosis de 20, 60, 120, 240, 480 o 960 mg/día.

En una realización, el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo, de la composición farmacéutica o el aerosol farmacéutico para su utilización en un procedimiento para la prevención, el control o el tratamiento de enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana en un paciente o son resultantes de la misma, se administra al paciente a una dosis de 80, 160 o 320 mg/día.

En otro aspecto, la presente invención da a conocer un kit para la preparación y el suministro de un aerosol farmacéutico para administración pulmonar, que comprende una fase líquida dispersa y una fase gaseosa continua, en el que la fase líquida dispersa

o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo; en el que

OctG es ácido (S)-2-aminodecanoico;

DPro es D-prolina;

(b) tiene un diámetro de masa mediana de 1,5 pm a 5 pm; y

(c) tiene una distribución de tamaño de gotita que tiene una desviación estándar geométrica de 1,2 a 1,7;

y en el que el kit comprende un nebulizador y una composición líquida que comprende una concentración dentro de un intervalo de 4 mg/ml a 100 mg/ml del compuesto activo; o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo;

o comprende un nebulizador y una composición farmacéutica sólida para preparar la composición líquida, en la que la composición comprende el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-); o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo; y en la que la composición sólida es soluble o dispersable en un disolvente líquido acuoso, y en la que la composición líquida comprende una concentración dentro de un intervalo de 4 mg/ml a 100 mg/ml del compuesto activo; o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo, para su utilización en un procedimiento para la prevención, el control o el tratamiento de enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana en un paciente o son resultantes de la misma.

También se da a conocer la utilización del kit, tal como se describe en el presente documento, para la fabricación de un medicamento para la prevención, el control o el tratamiento de enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana en un paciente o son resultantes de la misma, de manera preferente, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana en un paciente o son resultantes de la misma.

También se da a conocer la utilización del kit, tal como se describe en el presente documento, para la prevención, el control o el tratamiento de enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana en un paciente o son resultantes de la misma, de manera preferente para el tratamiento de enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana en un paciente o son resultantes de la misma.

También se da a conocer un procedimiento para la prevención, el control o el tratamiento de enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana en un paciente o son resultantes de la misma, de manera preferente un procedimiento para el tratamiento de enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana en un paciente o son resultantes de la misma, que comprende administrar a dicho paciente el aerosol farmacéutico del kit, tal como se describe en el presente documento, por ejemplo, administrar a dicho paciente una cantidad eficaz terapéuticamente de un aerosol farmacéutico del kit, tal como se describe en el presente documento.

En una realización, el nebulizador del kit para su utilización en un procedimiento para la prevención, el control o el tratamiento de enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana en un paciente o son resultantes de la misma, se selecciona del grupo que consiste en nebulizadores de chorro, nebulizadores ultrasónicos, nebulizadores piezoeléctricos, nebulizadores por colisión de chorros, nebulizadores electrohidrodinámicos, nebulizadores de fuerza capilar, nebulizadores de membrana perforada y nebulizadores de membrana vibrante perforada.

En una realización, el nebulizador del kit para su utilización en un procedimiento para la prevención, el control o el tratamiento de enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana en un paciente o son resultantes de la misma, está adaptado para ser capaz de aerosolizar la composición líquida a una velocidad, como mínimo, de 0,8 mg del compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-); o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo; por minuto.

En una realización, como mínimo, el 70 % en peso de la dosis cargada del compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo, comprendido en el kit se compone de gotitas que tienen un diámetro de masa mediana de no más de 5 pm.

En una realización, el contraión del compuesto activo comprendido en el kit es tal como se ha descrito para el compuesto activo anterior y es, de manera preferente, acetato.

En otro aspecto, la presente invención da a conocer un kit que comprende el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), o cualquier

sal aceptable farmacéuticamente del mismo; en el que

OctG es ácido (S)-2-aminodecanoico;

DPro es D-prolina;

y un prospecto, en el que el prospecto comprende instrucciones para tratar un paciente por enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana o son resultantes de la misma, utilizando el compuesto activo.

En una realización, el kit comprende el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo, como aerosol para administración pulmonar, que comprende una fase líquida dispersa y una fase gaseosa continua, en el que la fase líquida dispersa

sal aceptable farmacéuticamente del mismo;

(b) tiene un diámetro de masa mediana de 1,5 pm a 5 pm; y

En una realización, como mínimo, el 70 % en peso de la dosis cargada del compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo, comprendida en el kit se compone de gotitas que tienen un diámetro de masa mediana de no más de 5 pm.

En una realización, el contraión del compuesto activo comprendido en el kit es tal como se describe para el compuesto activo anterior y es, de manera preferente, acetato.

Los siguientes ejemplos ilustran la presente invención, pero no deben interpretarse como limitantes de su alcance de ninguna manera.

Ejemplos

Ejemplo 1:

Se disolvieron 248,18 g de sal de acetato de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) basados en un contenido neto de péptido del 93,03 % (véase el cálculo a continuación) y correspondientes a 230,88 g de péptido neto, en solución acuosa de cloruro de sodio al 0,5 % (p/p). La solución se ajustó a pH 5,5 con 154 g de hidróxido de sodio 1 M y, finalmente, se añadió una solución acuosa de cloruro de sodio al 0,5 % (p/p) hasta un peso total de 2.957 g. Después de la filtración estéril a través de filtros de tamaño de poro de 2 x 0,22 pm, el producto se envasó en viales de vidrio tipo 1 según la farmacopea europea con tapones de caucho de bromobutilo recubiertos con fluoropolímero y sellados exteriores de aluminio lisos desprendibles. La concentración de la solución fue de 80 mg/ml.

Cálculo del contenido neto de péptido de la sustancia farmacológica (compuesto activo):

Contenido neto de péptido [%] = [(100 - impureza [%]/100) x (100 - contenido de agua [%]/100) x (100 - disolvente residual [%]/100) x (100 - TFA residual/100) x sal libre [%]/100] x 100 = [(100 - 0,7/100) x (100 - 2,5/100) x (100 -0,013/100) x 96,1/100] x 100 = 93,03 %

Ejemplo 2:

La formulación del ejemplo 2 se preparó tal como se describe en el ejemplo 1, excepto que se utilizó una solución acuosa de cloruro de sodio al 0,6 % (p/p).

Ejemplo 3:

Se disolvieron 4,2 g de la sal de acetato de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) corregidos para una pureza del 95 % en 40 ml de solución acuosa de cloruro de sodio al 0,6 % (p/p). La solución se ajustó a pH 5,5 con hidróxido de sodio 1 M y, finalmente, se añadió una solución de cloruro de sodio al 0,6 % (p/p) hasta un volumen total de 50 ml. Después de la filtración estéril en condiciones asépticas (flujo de aire laminar) utilizando un filtro de jeringa de 0,2 pm de PES (polietersulfona), la formulación se dividió en alícuotas en viales estériles de 5 ml con tapones de caucho recubiertos de teflón estériles y se almacenaron refrigerados a 5 ± 3 oC y temperatura ambiente (25 ± 2 oC), respectivamente. La concentración de la solución fue de 80 mg/ml. Durante 12 semanas se observó la estabilidad de la solución. Se determinaron los parámetros fisicoquímicos (tabla 1) y las características del aerosol (tabla 2) de un aerosol preparado y suministrado por un nebulizador electrónico eFlow® 30 XL (Pari Pharma GmbH, Starnberg, Alemania) al principio y al final del período de observación. La caracterización fisicoquímica y la determinación de las características del aerosol (difracción láser con Malvern Mastersizer X, V2.15, [Malvern Instruments GmbH, Herrenberg, Alemania]), fueron realizadas por Pari Pharma GmbH, BU Pharma, Grafeling, Alemania, según procedimientos conformes con la farmacopea.

T l 1: Pr i fi i ími l f rm l i n l m l

Las propiedades fisicoquímicas de la formulación anterior permanecen sin cambios durante 12 semanas a 5 oC y 25 oC, respectivamente.

T l 2: r rí i l r l l f rm l i n l m l rmin r ri li

Durante el almacenamiento de 12 semanas a 5 oC y 25 oC, respectivamente, no se observaron cambios significativos (P = 95 %, n = 3) en el diámetro de masa mediana, la desviación estándar geométrica y la fracción respirable (< 5 pm). Solo se redujo ligeramente la velocidad de salida total de la muestra a 5 oC.

Ejemplo 4:

Se disolvieron 1,05 g de sal de acetato de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) corregidos para una pureza del 95 % en una solución acuosa al 0,9 % (p/p) de cloruro de sodio para obtener un volumen total de 10 ml. La concentración de la solución fue de 100 mg/ml. Los parámetros fisicoquímicos (tabla 3) y las características del aerosol (tabla 4) de un aerosol preparado y suministrado por un nebulizador electrónico eFlow® 30 XL fueron determinados por Pari Pharma GmbH, BU Pharma, Grafeling, Alemania, tal como se ha explicado anteriormente.

T l : Pr i fi i ími l f rm l i n l m l 4

Tabl 4: r rí i l r l l f rm l i n l m l 4 rmin r ri licado

Ejemplo 5:

Se disolvieron 1,05 g de sal de acetato de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) corregidos para una pureza del 95 % en una solución acuosa al 0,9 % (p/p) de cloruro de sodio para obtener un volumen total de 10 ml. Posteriormente se añadió polisorbato 80 al 0,02 % (p/p). La concentración de la solución fue de 100 mg/ml. Los parámetros fisicoquímicos (tabla 5) y las características del aerosol (tabla 6) de un aerosol preparado y suministrado por un nebulizador electrónico eFlow® 30 XL fueron determinados por Pari Pharma GmbH, BU Pharma, Grafeling, Alemania, tal como se ha explicado anteriormente.

T l : Pr i fi i ími l f rm l i n l m l

Tabl : r rí i l r l l f rm l i n l m l rmin r ri licado

Ejemplo 6a - e:

Se disolvieron 5,4 g de sal de acetato de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) basado en un contenido neto de péptido del 93,03 % (véase el cálculo anterior) y correspondientes a 5,023 g de péptido neto, en una solución acuosa de cloruro de sodio al 0,5 % (p/p). La solución se ajustó a pH 5,5 con hidróxido de sodio 1 M y, finalmente, se añadió una solución de cloruro de sodio al 0,5 % (p/p) hasta un volumen total de 71,8 ml. La concentración de la solución fue de 70 mg/ml (ejemplo 6a).

Se prepararon soluciones diluidas con concentraciones de 35 mg/ml (ejemplo 6b), 17,4 mg/ml (ejemplo 6c), 8,8 mg/ml (ejemplo 6d) y 4,3 mg/ml (ejemplo 6e) con placebo (solución acuosa de cloruro de sodio al 0,5 % [p/p]) según la tabla 7.

T l 7: E m r r i n l l i n il i l m l

Ejemplo 6f:

La formulación del ejemplo 6f se preparó según el procedimiento descrito en el ejemplo 1. La concentración de la solución fue de 80 mg/ml.

Determinación de las velocidades de suministro (media) y las dosis totales suministradas de

Ejemplos 6a, 6c, 6e y 6f

Intertek Melbourn Scientific (Melbourn, Reino Unido) realizó la determinación de las velocidades de suministro y las dosis totales suministradas por triplicado para las formulaciones de 70 mg/ml (ejemplo 6a), 17,4 mg/ml (ejemplo 6c) y 4,3 mg/ml (ejemplo 6e) y por quintuplicado para la formulación de 80 mg/ml (ejemplo 6f) utilizando dispositivos Pari eFlow® XL 30 (Pari Pharma, Starnberg, Alemania) y un procedimiento adecuado conforme con la farmacopea para dicha determinación de formulaciones que comprenden sal de acetato de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-).

Los resultados (valores medios) se resumen en la tabla 8.

T l : V l i mini r i l mini r l m l f

Determinación de la distribución de tamaño de partículas aerodinámicas (APSD, aerodynamic particle size distribution) de

Ejemplos 6a, 6c, 6e y 6f

Intertek Melbourn Scientific (Melbourn, Reino Unido) realizó la determinación de la APSD por triplicado para las formulaciones de 70 mg/ml (ejemplo 6a), 17,4 mg/ml (ejemplo 6c) y 4,3 mg/ml (ejemplo 6e) y por quintuplicado para la formulación de 80 mg/ml (ejemplo 6f) utilizando los dispositivos de Next Generation Impactor (NGI), Pari eFlow® XL 30 (Pari Pharma, Starnberg, Alemania) y un procedimiento adecuado conforme con la farmacopea para la APSD de formulaciones que comprenden sal de acetato de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-).

Los resultados (valores medios) se resumen en la tabla 9.

Tabla 9: Determinación de la distribución de tamaño de partículas aerodinámicas (APSD) de los ejemplos 6a,

6c 6e 6f

A partir de los resultados anteriores, no se observaron cambios significativos en el rendimiento de las soluciones de diferente concentración dentro del intervalo presentado, excepto el efecto de la concentración reducida sobre los totales de fármaco.

Estudio de toxicidad por inhalación de 28 días conforme con las GLP (Good Laboratory Practice) en ratas

En un estudio de toxicidad por inhalación de 28 días en ratas conforme con las GLP, llevado a cabo por los Servicios Preclínicos de Charles River Laboratories, Tranent, Edimburgo, Reino Unido, se administraron la formulación descrita en el ejemplo 2 y diluciones de la misma, así como el vehículo, utilizando el dispositivo nebulizador Pari eFlow® XL 30 (Pari Pharma, Starnberg, Alemania) durante 100 minutos por día durante 28 días, seguido de un período de recuperación de 2 semanas. Las ratas se trataron con vehículo (solución acuosa de cloruro de sodio al 0,6 % [p/p] ajustada a pH 5,5 con HCI de calidad farmacéutica 1 M) o aerosoles que contenían 0,15, 0,73 y 1,63 mg/l de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), correspondiente a las dosis medias generales de fármaco alcanzadas por el grupo de 0, 11, 53 y 119 mg/kg/día, respectivamente. Se utilizaron diez animales para el estudio de toxicidad principal y 5 animales adicionales para la fase de recuperación. Los parámetros evaluados incluyeron signos clínicos, peso corporal, consumo de alimentos, examen ocular, patología clínica, hallazgos macroscópicos de necropsia, peso de los órganos y exámenes histopatológicos. Se observó un aumento de peso corporal ligeramente reducido en los machos a 119 mg/kg/día en comparación con el grupo de control con vehículo. Esto se asoció con una reducción en el consumo de alimentos en los animales tratados. Hubo una buena recuperación en el aumento de peso corporal durante el período de recuperación entre los días 28 y 42. No hubo signos clínicos ni hallazgos oculares.

No hubo hallazgos en la patología clínica (investigaciones de hematología, coagulación, química clínica y análisis de orina) que se consideraran toxicológicamente relevantes. No hubo cambios relacionados con el tratamiento en el peso de los órganos ni hallazgos macroscópicos después del tratamiento con el fármaco. La histopatología de la laringe reveló metaplasia escamosa mínima focal sin atipia celular de displasia en todos los grupos. Estos cambios se resolvieron durante el período de recuperación y se consideraron una respuesta adaptativa no adversa a una irritación leve. La histopatología de los pulmones reveló una acumulación de mínima a moderada de macrófagos alveolares multifocales en todos los grupos. Este ligero aumento en la acumulación de macrófagos se consideró una respuesta no específica a la inhalación de altas concentraciones de material que excedían la capacidad de depuración pulmonar. En conclusión, el nivel de efectos adversos no observados (NOAEL, No Observed Adverse Effect LeveI) fue de 119 mg/kg/día, ya que los cambios en el aumento de peso corporal y la ingesta de alimentos y los hallazgos histopatológicos en la laringe se consideraron no adversos.

Estudio de toxicidad por inhalación de 28 días conforme con las GLP en monos

En un estudio de toxicidad por inhalación de 28 días en monos cynomolgus conforme con las GLP, llevado a cabo por los Servicios Preclínicos de Charles River Laboratories, Tranent, Edimburgo, Reino Unido, se administraron la formulación descrita en el ejemplo 2 y diluciones de la misma, así como el vehículo, utilizando el dispositivo nebulizador Pari eFlow® XL 30 (Pari Pharma, Starnberg, Alemania) con una máscara de inhalación oronasal durante 60 minutos por día durante 28 días, seguido de un período de recuperación de 2 semanas. Los monos se trataron con vehículo (solución acuosa de cloruro de sodio al 0,6 % [p/p] ajustada a pH 5,5 con HCI de calidad farmacéutica 1 M) o sal de acetato aerosolizada de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), correspondiente a las dosis de fármaco medias estimadas alcanzadas de 0, 11,2, 30,1 y 112 mg/kg/día, respectivamente. Se utilizaron en total cinco machos y cinco hembras para cada dosis del estudio de toxicidad, incluyendo la recuperación. Los parámetros evaluados incluyeron signos clínicos, peso corporal, electrocardiología, examen ocular, patología clínica, parámetros toxicocinéticos en el plasma, hallazgos macroscópicos de necropsia, peso de los órganos y exámenes histopatológicos. No hubo cambios en el peso corporal, signos clínicos, hallazgos oculares o electrocardiográficos o cambios en los parámetros urinarios atribuibles al tratamiento farmacológico. En hematología y patología clínica, se observaron algunos cambios menores toxicológicamente insignificantes. Ninguno de estos hallazgos se consideró toxicológicamente importante, ya que la magnitud de las respuestas fue pequeña, y la mayoría de los hallazgos se limitaron a un sexo y/o mostraron evidencia de regresión cuando ambos sexos estaban afectados. Los hallazgos macroscópicos incluyeron un aumento del peso de los pulmones en los machos a 112 mg/kg/día y un animal con una apariencia moteada de los pulmones y un ganglio linfático traqueobronquial agrandado. Se observaron hallazgos histopatológicos en todos los niveles de dosis del fármaco, incluyendo un mayor número de macrófagos alveolares, infiltrados perivasculares/peribronquiolares y depósitos eosinofílicos granulares en el pulmón e hiperplasia linfoide en los ganglios linfáticos traqueobronquiales, que mostraron una recuperación completa. Estos hallazgos demostraron una reversibilidad completa durante la recuperación y se consideraron que se debían a la inhalación de material que excedía la capacidad normal de depuración pulmonar, particularmente a 112 mg/kg/día. En conclusión, el NOAEL en este estudio fue de 112 mg/kg/día, ya que los cambios descritos anteriormente fueron todos considerados como no adversos.

Primer estudio en humanos realizado en sujetos sanos para investigar la seguridad y la tolerabilidad de dosis individuales inhaladas por vía oral de una formulación de sal de acetato de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr"DPro-Pro-)

En este estudio de escalado de la dosis de grupos paralelos (por nivel de dosis) aleatorizado, doble ciego, controlado con placebo, de dosis individuales inhaladas en 48 sujetos sanos en seis grupos de dosis de ocho sujetos cada uno, llevado a cabo por Inamed GmbH, Gauting, Alemania, se produjo la inhalación oral controlada de la formulación descrita en el ejemplo 1 y diluciones de la misma, así como el placebo (solución acuosa de cloruro de sodio al 0,5 % [p/p] ajustada a pH 5,5 con HCl de calidad farmacéutica 1 M) a través del dispositivo nebulizador Pari eFlow® XL 30 (Pari Pharma GmbH, Starnberg, Alemania). Los niveles de dosis y las concentraciones correspondientes de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) (compuesto activo) se resumen en la tabla 10.

Tabla 10

El volumen de la solución nebulizadora de placebo correspondió al del compuesto activo a un nivel de dosis particular. La duración de la inhalación dependía del volumen total de la solución nebulizadora y variaba entre varios minutos y aproximadamente una hora. Los acontecimientos adversos se tabularon y resumieron según la versión actual del Medical Dictionary for Regulatory Activities.

Resultados de seguridad y tolerabilidad

No se produjeron muertes, ni acontecimientos adversos graves (AE, adverse events), ni otros AE significativos durante el estudio. En total, se registraron 27 AE, de los cuales 24 acontecimientos adversos surgidos durante el tratamiento (TEAE, treatment-emergent adverse events) en 13 pacientes (27,1 %). Todos estos pacientes estaban en tratamiento con compuesto activo. No se notificaron AE para los pacientes que inhalaron la solución de placebo. Con respecto al número de AE, así como a su intensidad y relación causal con el medicamento del estudio, se notificó un mayor número total de AE y AE relacionados en el grupo que inhaló la dosis más alta de compuesto activo (960 mg; grupo de dosis 6) en comparación con los otros niveles de dosis. La mayoría de los AE y síntomas notificados estaban relacionados con el sistema respiratorio, tales como “tos”, “irritación de las vías respiratorias”, aumento de la producción de mucosidad o disminución transitoria del volumen espiratorio forzado en el primer segundo (VEF¹). La mayor aparición de síntomas respiratorios y AE respiratorios, especialmente en los grupos que inhalan dosis más altas de compuesto activo, posiblemente puede estar relacionada con la larga duración de la inhalación. Es posible que estos AE no estén necesariamente relacionados con la formulación del ejemplo 1 y sus propias diluciones, pero es posible que sean AE del procedimiento. Con respecto a la tolerabilidad local, hubo tres acontecimientos adversos relacionados con la inhalación (“tos”). La tolerabilidad general fue juzgada como “muy buena” o “buena” por la mayoría de los pacientes (97,9 %). A lo largo del estudio, la mayoría de los valores de laboratorio clínico se mantuvieron dentro de los respectivos intervalos de referencia. La mayoría de los resultados individuales del examen físico, mediciones de signos vitales, registros de electrocardiograma (ECG) y resultados de la función pulmonar estaban dentro de los intervalos de referencia clínica habitualmente aceptados. No se hizo evidente ninguna influencia dependiente del tiempo del compuesto activo sobre los parámetros de seguridad medidos. No hubo diferencias relevantes entre los diferentes grupos de dosis.

Los resultados presentados anteriormente del primer estudio en humanos muestran que la formulación del ejemplo 1 y diluciones de la misma son muy adecuadas para la aerosolización en un amplio intervalo de concentraciones y son aplicables para la administración por inhalación en seres humanos incluso a altas concentraciones (80 mg/ml). Efecto de la administración por inhalación de la sal de acetato de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) en un modelo in vivo de activación de neutrófilos en rata

El propósito de este estudio (llevado a cabo por Envigo CRS Limited, Alconbury, Huntingdon, Reino Unido) fue evaluar los efectos de la sal de acetato de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) administrado por inhalación en un modelo LPS/fMLP de activación de neutrófilos en rata.

Preparación de formulaciones

La formulación para el grupo de animales de prueba 1 (vehículo) fue solución salina al 0,5 % (p/v) ajustada a un pH de 5,5 con HCl 1 M y filtrada a través de un filtro de 0,2 gm.

Las formulaciones para los grupos de animales de prueba 2 - 4 se prepararon de la siguiente manera:

Se pesó la cantidad adecuada de sal de acetato de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) y se añadió la cantidad adecuada de solución salina al 0,5 % (p/v), pH 5,5, para producir una concentración formulada de 83,28 mg/ml.

El pH de la solución final se ajustó a 5,5 con NaOH 1 M.

Se añadió una cantidad adecuada de 83,28 mg/ml de sal de acetato de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) a una cantidad adecuada de vehículo para producir una formulación de 15,62 mg/ml.

Finalmente, se añadió una cantidad adecuada de 15,62 mg/ml de sal de acetato de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) a una cantidad adecuada de vehículo para producir una formulación de 5,21 mg/ml. A continuación, las tres soluciones de formulación (83,28 mg/ml, 15,62 mg/ml, 5,21 mg/ml) se filtraron a través de un filtro de 0,2 gm.

Las formulaciones se prepararon 1 día antes de la dosificación y se almacenaron a 2-8 oC en la oscuridad hasta el día de su utilización cuando se sacaron de la nevera y se mantuvieron a temperatura ambiente (< 25 oC) y se agitaron suavemente, como mínimo, durante 1 hora antes de la dosificación.

La tabla 11 resume las concentraciones de las formulaciones preparadas para los grupos de animales de prueba 1 -4 teniendo en cuenta una proporción de sal de acetato/base libre de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) que es de 1,041. Por tanto, estas formulaciones corresponden a la formulación descrita en el ejemplo 1 y diluciones de la misma.

Tabla 11

Procedimiento para la cohorte de tratamiento por inhalación

Los animales se expusieron a LPS (lipopolisacárido, 1 mg/ml) aerosolizado durante 30 minutos. Aproximadamente 3 horas después del final de la estimulación con LPS, a los animales se les administró el vehículo o las formulaciones, tal como se han descrito anteriormente, de la sal de acetato de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) por inhalación (grupos 1-4) durante un período de 30 minutos utilizando un nebulizador electrónico eFlow® 30 XL (Pari Pharma GmbH, Starnberg, Alemania; exposición solo por el hocico). A todos los animales se les administró fMLP (N-formil-Met-Leu-Phe, 5 mg/kg) aproximadamente 4 horas después de completar la estimulación con LPS por vía intratraqueal bajo anestesia gaseosa transitoria a un volumen de dosis de 1 ml/kg. Aproximadamente 2 horas después de la administración de fMLP, los animales fueron sacrificados y se realizó un lavado broncoalveolar (BAL) para evaluar el infiltrado de células inflamatorias y la actividad de la elastasa de neutrófilos. El procedimiento para la cohorte de tratamiento por inhalación se resume en la tabla 12.

Tabla 12

Se sacrificaron todos los animales para el lavado broncoalveolar aproximadamente 6 horas después de la exposición a LPS.

C(|¿g/l) x RMV (l/min) x D (min)

Dosis suministrada (|xg/kg) =

BW (kg)

en la que

C = Concentración en el aire inhalado

RMV = Volumen minuto respiratorio, calculado a partir de la fórmula: RMV (l/min) = 0,608 x BW (kg)0,852 (Referencia 1)

D = Duración de la exposición en minutos

BW = Peso corporal

Referencia 1: D.J. Alexander, C.J. Collins, D.W. Coombs et al., Association of Inhalation Toxicologists (AIT) working party recommendation for standard delivered dose calculation and expression in non-clinical aerosol inhalation toxicology studies with pharmaceuticals; Inhal. Tox., 2008, 20, 1179-1189.

Las dosis de fMLP y los puntos de tiempo se eligieron basándose en los datos publicados (véase, por ejemplo, S. Yasui, A. Nagai, K. Aoshiba et al., Eur. Respir. J., 1995, 8, 1293; T. Yang, J. Zhang, K. Sun et al., Inflamm. Res.

2012, 61, 563, R. Corteling, D. Wyss, A. Trifilieff, BMC Pharmacology, 2002, 2, 1) y la experiencia en Envigo CRS Limited. La selección de la dosis del fármaco se basó en un estudio intratraqueal previo en Envigo CRS Limited. En este estudio previo, se descubrió que las dosis intratraqueales de 0,03 a 3 mg/kg del fármaco eran eficaces en este modelo animal.

No se observaron signos clínicos relacionados con el elemento de prueba entre el período de dosificación y la terminación del estudio. Dos animales del grupo 1 (vehículo) murieron justo después de la administración de fMLP debido a la anestesia profunda.

Lavado broncoalveolar (BAL, bronchoalveolar lavage)

Después de la confirmación de la muerte, se aisló la tráquea de un animal, se insertó la cánula traqueal y se aseguró en su lugar, y se lavaron las vías respiratorias con 3 ml de solución salina tamponada con fosfato (PBS). El lavado se repitió dos veces y, en total, se utilizaron tres lotes de 3 ml de PBS. La primera alícuota del lavado que contenía células se colocó en un tubo de centrífuga de 15 ml sobre hielo húmedo (tubo A). El líquido del BAL acumulado de los dos segundos lavados se colocó en un segundo tubo (tubo B). Los tubos A y B se colocaron en hielo húmedo hasta que se centrifugaron. La centrifugación se realizó a 800 x g durante 10 minutos a aproximadamente 4 oC y se recogió el sobrenadante. Hasta el análisis de la elastasa de neutrófilos, el sobrenadante se almacenó a aproximadamente 80 oC.

Actividad de la elastasa de neutrófilos

Se analizó la actividad de la elastasa de neutrófilos de las dos alícuotas de sobrenadante de BAL de la siguiente manera: se transfirieron 120 |o.l de sobrenadante de BAL de la alícuota 1 a una placa de 96 pocillos (Corning #3650). Paralelamente, se preparó un intervalo de dilución de 1,6 a 0,025 mU/pocillo de una elastasa de neutrófilos humana comercial (hNE, Serva #20927.01). Se transfirieron 120 |o.l de cada dilución de hNE por duplicado a la placa de 96 pocillos. Para iniciar la reacción enzimática, se añadieron a cada pocillo 80 |o.l de un sustrato peptídico fluorescente (MeOSuc-Ala-Ala-Pro-Val-AMC) a una concentración final de 500 |j.M y la placa se colocó inmediatamente en el lector de fluorescencia victor2v precalentado a 37 oC. Se registró la fluorescencia (A,exc. 485 nm, A,em. 535 nm) durante 2 horas a 37 oC. Se calculó la velocidad inicial de la enzima (UFR/min) de todas las muestras y se convirtió en mU/ml de hNE equivalente utilizando la ecuación de regresión lineal obtenida de la gráfica (UFR/min frente a mU/ml de dilución de hNE) del intervalo estándar de elastasa de neutrófilos humana. El ensayo se repitió utilizando sobrenadante de BAL de la alícuota 2. Los datos de elastasa de neutrófilos notificados son una media de la actividad de la elastasa de neutrófilos de ambas alícuotas. La actividad de la elastasa de neutrófilos en el líquido de BAL se presenta en la tabla 13 y las figuras 1 y 2.

Tabla 13

El fármaco ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) administrado a dosis de 0,3, 3 y 30 mg/kg por la vía de inhalación 3 horas después de la estimulación con LPS y 1 hora antes de la estimulación con fMLP inhibió significativamente la actividad de la elastasa de neutrófilos en el líquido de BAL recogido 6 horas después de la estimulación con LPS.

Estudio de fase Ib para investigar la seguridad, la tolerabilidad y la farmacocinética de dosis de acetato de sal de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) inhaladas por vía oral en pacientes con fibrosis quística

En este estudio de escalado de la dosis de grupos paralelos (por nivel de dosis) aleatorizado, doble ciego, controlado con placebo, se investigaron la seguridad y la tolerabilidad de las dosis individuales crecientes (SAD, single ascending doses) de la sal de acetato de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) administrado por inhalación en pacientes con fibrosis quística (FQ). Adicionalmente, se evaluó la farmacocinética del fármaco después de una dosis individual creciente en plasma y esputo, así como su efecto farmacodinámico sobre la actividad de la elastasa de neutrófilos en el esputo.

Tratamiento

En este estudio, llevado a cabo por Inamed GmbH, Gauting, Alemania, se incluyeron 24 pacientes con fibrosis quística, que cumplían todos los criterios de inclusión y en los que no estaba presente ningún criterio de exclusión, y recibieron un tratamiento aleatorizado. Se agruparon en 3 grupos de dosis de 8 pacientes cada uno. 6 pacientes recibieron la formulación descrita en el ejemplo 1 y diluciones de la misma y 2 pacientes recibieron placebo (solución acuosa de cloruro de sodio al 0,5 % [p/p] ajustada a pH 5,5 con HCl de calidad farmacéutica 1 M). La inhalación oral de la formulación anterior, así como del placebo, se produjo a través del dispositivo nebulizador Pari eFlow® XL 30 (Pari Pharma GmbH, Starnberg, Alemania). Los niveles de dosis y las concentraciones correspondientes de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) (compuesto activo) se resumen en la tabla 14.

Tabla 14

El volumen de la solución nebulizadora de placebo correspondió al del compuesto activo a un nivel de dosis particular. La duración de la inhalación se estimó entre 7 y 20 minutos. Los acontecimientos adversos se tabularon y resumieron según la versión actual del Medical Dictionary for Regulatory Activities.

Resultados de seguridad y tolerabilidad

No se produjeron muertes, ni acontecimientos adversos (AE) graves, ni otros AE significativos durante el estudio. No hubo Ae locales relacionados con la inhalación. Ninguno de los 24 pacientes terminó el estudio antes de tiempo debido a los AE.

En total, se registraron 6 AE, todos ellos acontecimientos adversos surgidos durante el tratamiento (TEAE), en 6 pacientes. Los términos notificados con mayor frecuencia fueron “mareos” y “dolor de cabeza” con 2 acontecimientos cada uno. Se consideró que los 6 TEAE no estaban relacionados con el compuesto activo. Ninguno de los TEAE fue calificado como grave. La duración de los AE fue transitoria. Los 6 AE se resolvieron sin secuelas. Con respecto al número de AE, así como a su intensidad y relación causal con el medicamento de estudio, no se hizo evidente ninguna diferencia obvia entre los niveles de dosis. A lo largo del estudio, la mayoría de los valores de laboratorio clínico, así como los resultados de ECG y signos vitales, se mantuvieron dentro de los respectivos intervalos de referencia. Cualquier hallazgo que se desviaba no fue clínicamente relevante y estuvo en consonancia con el grado de las desviaciones observadas habitualmente en estudios con pacientes con FQ. La mayoría de los resultados de las pruebas de función de los pulmones fueron tal como se esperaba para los pacientes con FQ.

Evaluaciones farmacocinéticas

Se evaluaron los siguientes parámetros farmacocinéticos para ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) (compuesto activo):

Plasma:

AUC^ü-„, AUC^ü- /^D, Cmáx, Cmáx/D del compuesto activo en plasma como variables primarias y tmáx, ti/², Az, AUCü-t último del compuesto activo en plasma como variables secundarias.

Esputo:

Se calcularon las concentraciones de compuesto activo en el esputo y se determinaron Cmáx y AUCü-t último.

Muestreo y procesamiento de muestras para muestras de plasma

Se tomaron muestras de sangre para la determinación de las concentraciones plasmáticas del compuesto activo en los siguientes puntos de tiempo:

El día 1 antes de la dosis, 10 minutos y 0,5 horas, 1 hora, 2 horas, 3 horas, 4 horas, 6 horas, 8 horas, 12 horas, 15 horas, y el día 2 a las 24 horas después de la dosis (después del inicio de la inhalación).

Las muestras se recogieron en tubos de muestras de plasma K3-EDTA cerrados (Monovette® Sarstedt, Alemania). El intervalo de tiempo aceptado para los procedimientos de manipulación de muestras para cada muestra de estudio individual, es decir, el tiempo entre la recogida de la muestra y la centrifugación de la muestra no debía superar los 60 minutos, y el tiempo entre el final de la centrifugación y la congelación de la muestra tampoco debía superar los 60 minutos.

Las muestras se centrifugaron a aproximadamente 4 oC (± 2 oC) a 2.200 x g durante 15 minutos. A continuación, el sobrenadante de plasma resultante se transfirió a 2 tubos de polipropileno (primera alícuota, como mínimo, de 1 ml y de base) y se congelaron en posición vertical por debajo de 20 oC. Las muestras se almacenaron en un congelador bajo control continuo de la temperatura por debajo de 20 oC desde el día siguiente a la recogida de la muestra hasta el envío (hielo seco con un dispositivo de registro térmico) al sitio de bioanálisis (Pharmacelsus GmbH, Saarbrücken, Alemania).

Muestreo y procesamiento de muestras para muestras de esputo

Se recogieron muestras de esputo espontáneas para evaluaciones farmacocinéticas (PK, pharmacokinetic) durante los siguientes intervalos/períodos de tiempo: el día -1 tan pronto como fue posible después de la llegada del paciente al sitio de estudio (PK en blanco), el día 1 en el período de tiempo entre 1 hora y 3 horas después del inicio de la inhalación, y en la mañana del día 2, aproximadamente 24 horas después del inicio de la inhalación. Además, se recogió cualquier expectoración espontánea de esputo entre 0 y 1 horas después del inicio de la inhalación.

Se recogieron muestras de esputo espontáneo en placas Petri de poliestireno y se colocaron en hielo inmediatamente. Todas las etapas del procesamiento debían realizarse con reactivos fríos y en hielo, siempre que fuera posible. Las secreciones se separaron de la saliva, pero esta última no se descartó. Si se tomaba una muestra de esputo tanto para la farmacocinética como para la actividad de la elastasa de neutrófilos en el análisis de esputo, la secreción se dividía en 2 partes aproximadamente iguales. Una parte se procesó para el análisis farmacocinético y la otra para la evaluación de la actividad de la elastasa de neutrófilos en el esputo.

Para el procesamiento PK, la secreción resultante se dividió en aproximadamente 2 partes iguales. Estas se transfirieron a 2 tubos de transferencia para evaluación PK (SP1) y base PK (SP3). Se transfirió hasta 1,0 ml de saliva a otro tubo de transferencia para la evaluación PK (SP2). Se descartó la saliva restante en la placa de Petri. Se determinó el peso de las muestras de esputo (SP1 SP3) y todas las muestras se colocaron inmediatamente en hielo seco para congelarlas. Después de la congelación, las muestras se almacenaron en posición vertical a -80 ± 10 oC. Las muestras de esputo y saliva para la evaluación PK (SP1 SP2) se enviaron a Pharmacelsus GmbH en hielo seco. Las muestras de esputo de base (SP3) se almacenaron a -80 ± 10 o en Inamed GmbH, Gauting, Alemania.

Procedimientos bioanalíticos

Para el análisis del compuesto activo en plasma, se utilizó un procedimiento de espectrometría de masas en tándem con cromatografía líquida (LC-MS/MS) de alta sensibilidad y validado.

Para el análisis del compuesto activo en el esputo, se utilizaría un procedimiento de espectrometría de masas en tándem con cromatografía líquida (LC-MS/MS) de alta sensibilidad validado o, cuando no estuviera disponible, “adecuado para el propósito”.

Los procedimientos bioanalíticos se realizaron según las normas actuales de Buenas Prácticas de Laboratorio (GLP, Good Laboratory Practice), la Administración de Alimentos y Medicamentos de los Estados Unidos (FDA, US Food and Drug Administration) y los requisitos de validación de la EMA para ensayos bioanalíticos y se describieron en los SOP aplicables, incluyendo las normas para el análisis de rutina y las normas generales para el análisis.

Parámetros farmacocinéticos derivados

Los parámetros farmacocinéticos mencionados anteriormente se calcularon basándose en los tiempos reales de muestreo de sangre y esputo utilizando procedimientos no compartimentales.

Curvas de concentración plasmática-tiempo y parámetros farmacocinéticos derivados de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-)

Las curvas de concentración plasmática media-tiempo del compuesto activo se muestran en la figura 3.

Las curvas de compuesto activo muestran perfiles típicos y similares a los resultados de sujetos sanos que inhalan dosis comparables de compuesto activo, sus primeras concentraciones plasmáticas se detectaron de forma temprana en pacientes con FQ.

Las concentraciones plasmáticas del compuesto activo aumentaron para alcanzar sus picos respectivos (tmáx, media) a las 1,3 horas en el grupo de dosis 1, a las 1,5 horas en el grupo de dosis 2 y a las 2,3 horas en el grupo de dosis 3. A partir de entonces, las concentraciones plasmáticas de compuesto activo disminuyeron con una semivida media terminal de 4,1 horas en el grupo de dosis 1,3,5 horas en el grupo de dosis 2 y 3,8 horas en el grupo de dosis 3. 24 horas después de la inhalación, el compuesto activo todavía podía detectarse en pacientes de todos los grupos de dosis, con concentraciones plasmáticas medias de 2,8 ng/ml en el grupo de dosis 1,4,4 ng/ml en el grupo de dosis 2 y 15,2 ng/ml en el grupo de dosis 3.

Concentración en esputo de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-)

Las concentraciones medias en esputo de compuesto activo se muestran en la figura 4.

Ya en el primer punto de tiempo de muestreo de esputo después de la inhalación (intervalo de muestreo de 0-1 horas), se detectó el compuesto activo en la mayoría de los pacientes en todos los grupos de dosis. La concentración de compuesto activo en el esputo aumentó con la dosis, con los valores de concentración media (DE) más elevados de 0,6 (0,79) g/l (grupo de dosis 1, intervalo de muestreo de 1 a 3 horas), 1,1 (1,23) g/l (grupo de dosis 2, intervalo de muestreo de 0-1 horas) y 1,8 (1,81) g/l (grupo de dosis 3, intervalo de muestreo de 0-1 horas). El compuesto activo aún podía detectarse en el esputo de pacientes de todos los grupos de dosis a las 24 horas después de la inhalación.

Evaluaciones farmacodinámicas

El efecto farmacodinámico de dosis individuales crecientes de compuesto activo se investigó mediante la evaluación de la actividad de la elastasa de neutrófilos (NE) en el esputo utilizando el ensayo FRET (transferencia de energía por resonancia de fluorescencia) después de la obtención de alícuotas en PBS y congelación.

Muestreo y procesamiento de muestras para muestras de esputo

Se recogieron muestras de esputo espontáneas para la evaluación de la actividad de la elastasa de neutrófilos (NE) durante los siguientes intervalos/períodos de tiempo:

El día del cribado, si es posible, para la evaluación inicial de la actividad de la NE, el día -1 tan pronto como sea posible después de la llegada del paciente al sitio de estudio para la evaluación inicial de la actividad de la NE, el día 1 en el período de tiempo entre 1 hora y 3 horas después del inicio de la inhalación, y en la mañana del día 2, aproximadamente 24 horas después del inicio de la inhalación.

Se recogieron muestras de esputo espontáneo en placas Petri de poliestireno y se colocaron en hielo inmediatamente. Todas las etapas del procesamiento debían realizarse con reactivos fríos y en hielo, siempre que fuera posible. Las secreciones se separaron de la saliva, pero esta última no se descartó. Si se tomaba una muestra de esputo tanto para la PK como para la actividad de la NE en el análisis de esputo, la secreción se dividía en 2 partes aproximadamente iguales. Una parte se procesó para la evaluación de la actividad de la NE en esputo y la otra para el análisis PK, tal como se ha descrito anteriormente.

Para la evaluación de la actividad de la NE en el esputo, en primer lugar, se determinó el peso de la muestra de esputo y se añadieron 8 ml de solución salina tamponada con fosfato (PBS) fría por gramo de esputo purificado. La muestra se agitó en vórtice durante 30 segundos a temperatura ambiente (15 - 24 oC). A continuación, la fracción soluble se separó del sedimento de esputo por centrifugación (10 minutos a 1.000 x g y 4 oC). El sobrenadante se transfirió a un tubo nuevo. Las partículas insolubles restantes se separaron mediante una segunda etapa de centrifugación a 3.500 x g durante 15 minutos a 4 oC. Si el sobrenadante no se dividía en alícuotas inmediatamente, el sobrenadante de PBS/esputo se transfería a un tubo nuevo.

Se transfirieron 10 alícuotas de 50 pl de PBS/esputo a tubos de transferencia para su evaluación. Además, se transfirieron 4 alícuotas de 50 pl de PBS/esputo a tubos de transferencia como base. En caso de que sobrara, el volumen restante se transfirió inmediatamente a un tubo de transferencia para su evaluación. Se descartó cualquier sobrante que excediera los 2,0 ml.

Las muestras se congelaron inmediatamente y se almacenaron en posición vertical a -80 ± 10 oC. Las muestras de PBS/esputo se enviaron a MLM Medical Labs GmbH, Monchengladbach, Alemania, en hielo seco. Las muestras de base de PBS/esputo se almacenaron a -80 ± 10 oC en Inamed GmbH, Gauting, Alemania.

Procedimientos bioanalíticos

La actividad de la NE en el esputo se evaluó utilizando un ensayo FRET de elastasa adaptado a partir de un ensayo descrito en Nature Protocols, 2008, 3, 991 (B. Korkmaz, S. Attucci, M.A. Juliano et al.) y validado por MLM Medical Labs GmbH, Monchengladbach, Alemania.

El ensayo se basa en la reacción de elastasa de neutrófilos humana con el sustrato 2Abz-Ala-Pro-Glu-Glu-Ile-Met-Arg-Arg-Gln-Tyr(3NÜ2)-OH (GeneCust Europe S.A., Ellange, Luxemburgo, #P160301-SY452824). Al añadir la solución de sustrato, se inicia la reacción enzimática y la elastasa presente en las muestras reacciona con el sustrato añadido. El producto de la reacción se detecta mediante la medición de fluorescencia y se determina la velocidad de reacción inicial. La concentración de elastasa activa en las muestras desconocidas se vuelve a calcular utilizando la curva de calibración calculada a partir de los patrones.

Se preparó una solución madre de referencia de elastasa (elastasa de neutrófilos humana [ELA2], Holtzel Diagnostika, Colonia, Alemania, #PN31255) con actividad enzimática conocida. La concentración exacta de enzima elastasa activa se determinó mediante titulación frente a una solución de alfa 1 -antitripsina (Athens Research and Technology, Athens, Estados Unidos, #16-16-011609), con una concentración definida. La solución madre de referencia de elastasa activa se ajustó mediante la adición de PBS hasta una concentración de 3.000 nM y las alícuotas se almacenaron a -80 oC.

El ensayo FRET se realizó en placas de microtitulación blancas de 96 pocillos en un volumen total de 100 |o.l por pocillo. Se prepararon diluciones de esputo en PBS de 1:5, 1:50 y 1:100 en tampón de reacción de elastasa (HEPES 50 mM, pH 7,4, NaCl 750 mM, NP-40 al 0,05 % [v/v]), se cargaron 5 |o.l por pocillo y se añadieron 90 |o.l de tampón de reacción de elastasa. Se preparó una solución madre de sustrato 5 mM de 2Abz-Ala-Pro-Glu-Glu-Ile-Met-Arg-Arg-Gln-Tyr(3NO2)-OH en A/,A/-dimetilformamida al 30 % (v/v)/agua y, posteriormente, se diluyó a 400 nM mediante la adición de tampón de reacción de elastasa. Se añadieron 5 |o.l de la solución de sustrato 400 nM a los pocillos y se determinó la velocidad de reacción Vi mediante FRET a Exc: 320 nm - Emis: 420 nm. La concentración de elastasa activa en el esputo con PBS se determinó mediante la comparación de las velocidades de reacción de diluciones definidas de la solución madre de referencia de elastasa activa.

El intervalo de medición analítica de este procedimiento fue 115,00-2.880,00 ng/ml. Los coeficientes de variación intraensayo e interensayo fueron < 17,14 % y < 8,96 %, respectivamente.

Elastasa de neutrófilos activa en esputo

Las concentraciones medias de NE activa se muestran en la figura 5.

Los resultados de la concentración de NE activa fueron muy variables en todo momento. Cuando se midieron mediante el ensayo FRET, las concentraciones medias (DE) de NE activa en el esputo el día -1 (antes de la dosis) fueron 18.823,6 (19.758,72) ng/ml para el nivel de dosis 1, 9.548,7 (6.222,55) ng/ml para el nivel de dosis 2 y 10.480,7 (10.528,00) ng/ml para el nivel de dosis 3. La concentración media (DE) de NE activa para pacientes con placebo antes de la dosis fue de 46.711,8 (48.456,86) ng/ml.

La concentración de NE activa en el esputo disminuyó fuertemente en pacientes después de inhalar el compuesto activo. Los valores de concentración media (DE) 1-3 horas después de la inhalación fueron 612,5 (1.218,62) ng/ml para el nivel de dosis 1 y 115,0 (0,00) ng/ml para los niveles de dosis 2 y 3. El valor medio (DE) para pacientes que inhalaron placebo 1-3 horas después de la inhalación fue de 34.370,0 (19.988,11) ng/ml.

Las concentraciones medias (DE) de NE activa en el esputo a las 24 horas después de la inhalación fueron 1.467,7 (2.154,43) ng/ml para el nivel de dosis 1, 16.849,4 (23.518,56) ng/ml para el nivel de dosis 2 y 7.712,5 (11.394,04) ng/ml para nivel de dosis 3. La concentración media (DE) de NE activa a las 24 horas para los pacientes con placebo fue de 19.338,8 (9.062,32) ng/ml.

Conclusiones farmacodinámicas

La concentración media de NE activa en el esputo de pacientes con FQ disminuyó fuertemente después de la inhalación de una dosis individual del compuesto activo administrado mediante una formulación descrita en el ejemplo 1. En el intervalo de dosis examinado, la extensión de esta respuesta parecía ser independiente de la dosis administrada. Aunque es difícil de juzgar debido a la gran variabilidad de los datos, la concentración media de NE activa en el esputo aparentemente volvió a los niveles iniciales a las 24 horas después de la inhalación del compuesto activo. La inhalación de la solución de placebo no tuvo un efecto distintivo sobre la concentración media ^deN^eactiva en el esputo. Estos resultados clínicos muestran que el ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-GlnLys-Tyr-DPro-Pro) administrado mediante una formulación descrita en el ejemplo 1 inhibe la NE en el esputo de pacientes con FQ.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Composición farmacéutica que comprende

el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-); o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo; en el que

OctG es ácido (S)-2-aminodecanoico;

DPro es D-prolina;

cloruro de sodio;

y, de manera opcional, uno o más diluyentes, excipientes o portadores aceptables farmacéuticamente;

para su utilización en un procedimiento para la prevención, el control o el tratamiento de enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana en un paciente o son resultantes de la misma,

en la que las enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana o son resultantes de la misma son enfermedades pulmonares seleccionadas entre deficiencia de alfa-1 antitripsina (AATD), fibrosis quística (FQ), bronquiectasias no asociadas a fibrosis quística (NCFB) o enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC), o infecciones de los pulmones que causan enfermedades o afecciones de los pulmones, que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana.

2. Composición farmacéutica para su utilización, según la reivindicación 1, en la que la enfermedad pulmonar es bronquiectasias no asociadas a fibrosis quística (NCFB) o fibrosis quística (FQ).

3. Composición farmacéutica para su utilización, según la reivindicación 1, en la que la enfermedad pulmonar es fibrosis quística (FQ).

4. Composición farmacéutica para su utilización, según cualquiera de las reivindicaciones 1-3, en la que el contraión del compuesto activo es acetato.

5. Composición farmacéutica para su utilización, según cualquiera de las reivindicaciones 1-4, en la que el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-); o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo; se administra al paciente como un aerosol farmacéutico para administración pulmonar que comprende una fase líquida dispersa y una fase gaseosa continua, en el que la fase líquida dispersa (a) comprende gotitas acuosas que comprenden el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-);

o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo;

(b) tiene un diámetro de masa mediana de 1,5 pm a 5 pm; y

6. Composición farmacéutica para su utilización, según la reivindicación 5, en la que el aerosol se emite desde un generador de aerosol a una velocidad, como mínimo, de 0,1 ml de fase líquida dispersa por minuto.

7. Composición farmacéutica para su utilización, según la reivindicación 5, en la que el aerosol se emite desde un generador de aerosol a una velocidad media de suministro, como mínimo, de 0,8 mg del compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-);

o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo; por minuto.

8. Composición farmacéutica para su utilización, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en la que la composición farmacéutica es una composición farmacéutica líquida para preparar un aerosol que comprende el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-Pro-Pro-);

o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo; en una concentración dentro de un intervalo de 4 mg/ml a 100 mg/ml.

9. Composición farmacéutica para su utilización, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, en la que el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-);

o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo; se administra al paciente a una dosis entre 0,1 y 10.000 mg/día.

10. Composición farmacéutica para su utilización, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, en la que el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-);

o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo; se administra al paciente a una dosis entre 0,001 y 100 mg/día.

11. Composición farmacéutica para su utilización, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, en la que el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-);

o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo; se administra al paciente a una dosis entre 5 y 1.000 mg/día.

12. Composición farmacéutica para su utilización, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, en la que el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-);

o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo; se administra al paciente a una dosis de 20, 60, 120, 240, 480 o 960 mg/día.

13. Composición farmacéutica para su utilización, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, en la que el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-);

o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo; se administra al paciente a una dosis entre 80 y 320 mg/día.

14. Composición farmacéutica para su utilización, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, en la que el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-);

o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo; se administra al paciente a una dosis de 80, 160 o 320 mg/día.

15. Composición farmacéutica para su utilización, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14, en la que el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-);

o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo se administra al paciente por inhalación oral.

16. Aerosol farmacéutico para administración pulmonar que comprende una fase líquida dispersa y una fase gaseosa continua, en el que la fase líquida dispersa

o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo; en el que

OctG es ácido (S)-2-aminodecanoico;

DPro es D-prolina;

(b) tiene un diámetro de masa mediana de 1,5 pm a 5 pm; y

(c) tiene una distribución de tamaño de gotita que tiene una desviación estándar geométrica de 1,2 a 1,7, medida tal como se describe en la descripción;

en el que las enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana o son resultantes de la misma son enfermedades pulmonares seleccionadas entre deficiencia de alfa-1 antitripsina (AATD), fibrosis quística (FQ), bronquiectasias no asociadas a fibrosis quística (NCFB) o enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC), o infecciones de los pulmones que causan enfermedades o afecciones de los pulmones, que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana.

17. Aerosol para su utilización, según la reivindicación 16, en el que la enfermedad pulmonar es bronquiectasias no asociadas a fibrosis quística (NCFB) o fibrosis quística (FQ).

18. Aerosol para su utilización, según la reivindicación 16, en el que la enfermedad pulmonar es fibrosis quística (FQ).

19. Aerosol para su utilización, según cualquiera de las reivindicaciones 16 a 18, en el que el contraión del compuesto activo es acetato.

20. Aerosol para su utilización, según cualquiera de las reivindicaciones 16 a 19, en el que el aerosol se emite desde un generador de aerosol a una velocidad, como mínimo, de 0,1 ml de fase líquida dispersa por minuto.

21. Aerosol para su utilización, según cualquiera de las reivindicaciones 16 a 19, en el que el aerosol se emite desde un generador de aerosol a una velocidad media de suministro, como mínimo, de 0,8 mg del compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-); o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo; por minuto.

22. Aerosol para su utilización, según cualquiera de las reivindicaciones 16 a 21, en el que el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-);

23. Aerosol para su utilización, según cualquiera de las reivindicaciones 16 a 21, en el que el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-);

24. Aerosol para su utilización, según cualquiera de las reivindicaciones 16 a 21, en el que el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-);

25. Aerosol para su utilización, según cualquiera de las reivindicaciones 16 a 21, en el que el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-);

26. Aerosol para su utilización, según cualquiera de las reivindicaciones 16 a 21, en el que el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-);

27. Aerosol para su utilización, según cualquiera de las reivindicaciones 16 a 21, en el que el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-);

28. Aerosol para su utilización, según cualquiera de las reivindicaciones 16 a 27, en el que el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-);

o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo; se administra al paciente por inhalación oral.

29. Kit que comprende

una composición farmacéutica que comprende

el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-);

o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo; en el que

OctG es ácido (S)-2-aminodecanoico;

DPro es D-prolina; y

cloruro de sodio;

y un prospecto, en el que el prospecto comprende instrucciones para tratar a un paciente por enfermedades o afecciones de los pulmones que están mediadas por la actividad de la elastasa de neutrófilos humana o son resultantes de la misma utilizando el compuesto activo.

30. Kit, según la reivindicación 29, en el que el kit comprende el compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-);

o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo; como aerosol para administración pulmonar que comprende una fase líquida dispersa y una fase gaseosa continua, en el que la fase líquida dispersa

o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo;

(b) tiene un diámetro de masa mediana de 1,5 pmi a 5 pmi; y

31. Kit, según cualquiera de las reivindicaciones 29 a 30, en el que, como mínimo, aproximadamente el 70 % en peso de la dosis cargada del compuesto activo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-); o cualquier sal aceptable farmacéuticamente del mismo; se compone de gotitas que tienen un diámetro de masa mediana de no más de 5 pmi.

32. Kit, según cualquiera de las reivindicaciones 29 a 31, en el que el contraión del compuesto activo es acetato.