BR112018074532B1

BR112018074532B1 - Composição farmacêutica, aerossol, e, kit.

Info

Publication number: BR112018074532B1
Application number: BR112018074532-4A
Authority: BR
Inventors: Piet BRUIJNZEEL; Johann Zimmermann; Philip BARTH; Eric Chevalier; Christian Ludin; Manfred Keller
Original assignee: Polyphor Ag
Priority date: 2016-05-31
Filing date: 2017-05-31
Publication date: 2022-02-08
Also published as: EP3463280B1; JP7286319B2; AU2017273508A1; EA201892819A1; US11844823B2; PL3463280T3; CN109195580A; CA3024522A1; HUE060393T2; JP2019523222A; JP2023017793A; US20220023379A1; HRP20221185T1; CA3024521A1; KR102511284B1; PH12018502521A1; LT3463280T; CN116159024A; KR20190011750A; WO2017207118A1

Abstract

a presente invenção refere-se a aerossóis farmacêuticos compreendendo uma folha beta peptidomimética de fórmula ciclo( octg glu thr ala ser ile pro pro gln lys tyr dpro pro ), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, tendo atividade inibitória contra a elastase neutrofílica de humanos. refere-se ainda a composições farmacêuticas sólidas ou líquidas e kits para preparar e administrar tais aerossóis. a invenção pode ser usada para prevenção, controle ou tratamento de doenças pulmonares, tais como, deficiência de alfa-1 antitripsina (daat), fibrose cística (fc), bronquiectasia não fibrose cística (bfnc) ou doença pulmonar obstrutiva crônica (dpoc), ou infecções, ou doenças, ou condições dos pulmões, sendo mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos. assim, a invenção refere-se ainda a uma composição farmacêutica ou um aerossol farmacêutico compreendendo o composto ativo ciclo( octg glu thr ala ser ile pro pro gln lys tyr dpro pro ), ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para uso em um método para prevenção, controle ou tratamento de doenças ou condições dos pulmões sendo mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos em um indivíduo.

Description

CAMPO DA INVENÇÃO

[001] A invenção refere-se a aerossóis farmacêuticos compreendendo uma folha β peptidomimética de fórmula ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, sendo especificamente descrita em WO2006/087001 A1 e tendo atividade inibitória contra a elastase neutrofílica de humanos. Refere-se ainda a composições farmacêuticas sólidas ou líquidas e kits para preparar e administrar tais aerossóis. A invenção pode ser usada para a prevenção, o controle ou o tratamento de doenças ou condições dos pulmões que são mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos, por exemplo, doenças pulmonares, tais como, deficiência de alfa-1 antitripsina (DAAT), fibrose cística (FC), bronquiectasia não fibrose cística (BNFC) ou doença pulmonar obstrutiva crônica (DPOC), ou infecções dos pulmões que causam doenças ou condições dos pulmões, sendo mediadas pela atividade de elastase neutrofílica de humanos. Assim, a invenção refere-se ainda a uma composição farmacêutica ou um aerossol farmacêutico compreendendo o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para uso em um método para prevenção, controle ou tratamento de doenças ou condições dos pulmões sendo mediadas ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos em um indivíduo.

FUNDAMENTOS DA INVENÇÃO

[002] A elastase neutrofílica de humanos (EN de humanos), um membro da família da serina protease, constitui um importante alvo terapêutico. Além da catepsina G e da proteinase 3, está intimamente envolvida na modulação de atividades de citocinas e seus receptores. Particularmente nos sítios de inflamação, a alta concentração de EN de humanos é liberada da infiltração de células polimorfonucleares em estreita correlação temporal a níveis elevados de citocinas inflamatórias, indicando fortemente que esta protease está envolvida no controle da bioatividade e da disponibilidade da citocina (U. Bank, S. Ansorge, J. Leukoc. Biol. 2001, 69, 177-90). Sabe-se que a EN de humanos é a principal responsável pela proteólise extracelular e contribui para o dano tecidual ao catalisar a hidrólise de uma ampla variedade de macromoléculas de matriz, proteínas plasmáticas, mediadores inflamatórios e receptores de superfície celular com importantes consequências locais e sistêmicas (C. A. Oven; E. J. Campbell; J. Leukoc. Biol. 1999, 65, 137-150). Assim, os inibidores da EN de humanos são novos candidatos valiosos a fármacos para doenças inflamatórias infecciosas, incluindo doenças pulmonares tipo doença pulmonar obstrutiva crônica (DPOC), síndrome do desconforto respiratório agudo (SDRA), fibrose cística (FC) e lesão de reperfusão isquêmica, (H. Ohbayashi, Expert Opin. Investig. Drugs 2002, 11, 965-980; B. Korkmaz, T. Moreau, F. Gauthier, Biochimie 2008, 90, 227). Eles podem atender a uma necessidade significativa de novas terapias efetivamente prevenindo ou tratando e/ou mitigando essas doenças ou condições.

[003] As vias de administração podem ser classificadas se o efeito do fármaco for local (administração tópica) ou sistêmico (administração entérica ou parentérica). A dispensação de produtos farmacêuticos aos brônquios e pulmões (dispensação de fármaco pulmonar) tem sido usada para o tratamento local de doenças e condições do sistema respiratório. No entanto, a viabilidade da inalação como uma via alternativa de administração para o tratamento de doenças sistêmicas utilizando a grande superfície dos pulmões para absorção também foi demonstrada (J. S. Patton, P. R. Byron, Nat. Rev. Drugs Discov. 2007, 6, 67-74; M. Hohenegger, Curr. Pharm. Des. 2010, 16, 2484-2492).

[004] Em particular, as substâncias farmacológicas podem ser dispensadas ao sistema respiratório como pós secos em aerossol ou líquidos em aerossol, sendo estes últimos soluções ou dispersões, tal como, suspensões de substâncias farmacológicas. Vários dispositivos foram desenvolvidos para converter uma composição sólida ou líquida em um aerossol para permitir a inalação. Para a conversão de soluções ou suspensões de substâncias farmacológicas de base aquosa em nebulizadores de aerossol inaláveis são normalmente usados nebulizadores. Eles são particularmente úteis para doenças que requerem doses pulmonares altas, por exemplo, CF e pacientes, por exemplo, crianças, que são incapazes de coordenar ou alcançar taxas de fluxo necessárias para o uso de outros dispositivos de inalação (M. Knoch, M. Keller, Expert Opin. Drugs Del. 2005, 2, 377-390).

[005] A inalação de substâncias farmacológicas pode ser favorável para a profilaxia e/ou tratamento de infecções do trato respiratório e/ou doenças associadas à atividade de elastase neutrofílica. Há evidências de que a infiltração das vias aéreas pelos neutrófilos levará a um aumento da elastase neutrofílica dentro do compartimento extracelular, induzindo, assim, efeitos deletérios. Em um modelo de camundongo de desafio com alérgeno neutrofílico, pode ser demonstrado que a inibição da elastase neutrofílica por sivelelstat atenua a hiperresponsividade e a inflamação das vias aéreas (H. Koga, N. Miyahara et al., Respir.Res. 2013, 14:8). Em um modelo de camundongo diferente, a dispensação de alfa-1-PI rh não glicosilada, uma forma recombinante do inibidor de alfa-1-proteinase inibidor de elastase (alfa- 1-PI), à superfície das vias aéreas de camundongos CD-1 por instilação nasal foi altamente protetora contra lesão mediada por elastase, mesmo significativamente mais protetora do que o alfa-1-PI derivado do sangue glicosilado. Estes resultados sugerem que a dispensação de alfa-1-PI rh em aerossol pode ser uma estratégia eficaz para controlar a fisiopatologia dependente de elastase associada à doença pulmonar por fibrose cística. Recentemente, R. Siekmeier resumiu os resultados de estudos clínicos até agora concluídos visando a deposição pulmonar de alfa-1-PI inalado de pacientes com deficiência hereditária de alfa-1-PI ou fibrose cística (Eur. J. Med. Res. 2010, 15 [Suppl. II], 164). Para ambas as áreas terapêuticas, a maioria dos estudos indica que a administração de alfa-1-PI por inalação pode servir como uma terapia potente para neutralizar o excesso de proteínas inflamatórias e elastase neutrofílica. Enquanto os últimos efeitos não conduzem automaticamente a melhorias na função pulmonar do paciente, uma clara redução da inflamação das vias aéreas após o tratamento com alfa-1-PI pode preceder as alterações estruturais pulmonares (M. Griese, P. Latzin et al., Eur. Respir. J. 2007, 29, 240).

[006] Geralmente, o benefício da dispensação da substância farmacológica via inalação é que esta pode fornecer a dispensação de doses terapêuticas suficientes do fármaco diretamente para o sítio de ação primário, por exemplo, no caso de doenças respiratórias, minimizando os riscos de toxicidade sistêmica. Além disso, a farmacocinética e/ou farmacodinâmica subideais associadas à exposição sistêmica a fármacos podem ser evitadas. Além disso, a inalação (em casa) é um modo de administração mais conveniente do que a injeção intravenosa (enfermaria médica).

[007] Ainda assim, a eficácia de uma terapia baseada na dispensação da substância farmacológica inalada depende principalmente do fármaco que é selecionado, uma composição farmacêutica do mesmo adequada para inalação e o dispositivo que é empregado. Assim, existe uma forte necessidade de mais composições farmacêuticas, aerossóis e kits terapêuticos que sejam adequados para prevenção, controle ou tratamento de doenças ou condições mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos, melhorando o resultado de terapias presentemente conhecidas e/ou superando as desvantagens das terapias atualmente conhecidas.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

[008] A invenção fornece um aerossol farmacêutico para administração pulmonar compreendendo uma fase líquida dispersada e uma fase gasosa contínua. A fase líquida dispersada compreende gotículas aquosas que compreendem o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável da mesma. As gotículas da fase dispersada têm um diâmetro mediano de massa de cerca de 1,5 μ m a cerca de 5 μ m com uma distribuição de tamanho de gotícula tendo um desvio padrão geométrico de cerca de 1,2 a cerca de 1,7. É ainda fornecido pela invenção o aerossol farmacêutico para administração pulmonar compreendendo uma fase líquida dispersada e uma fase gasosa contínua, em que a fase líquida dispersada compreende gotículas aquosas compreendendo o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para uso em um método para prevenção, controle ou tratamento de doenças ou condições dos pulmões que estão senso mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos em um indivíduo.

[009] Em um outro aspecto, a invenção fornece composições farmacêuticas líquidas e sólidas a partir das quais o aerossol acima pode ser preparado. A composição líquida compreende o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro- Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em uma concentração dentro de uma faixa de cerca de 4 mg/ml a cerca de 100 mg/ml, preferencialmente, em uma faixa de cerca de 17 mg/mL a cerca de 95 mg/mL, ou cerca de 35 mg/mL a cerca de 95 mg/mL, respectivamente, e mais preferencialmente, dentro de uma faixa de cerca de 70 mg/mL a cerca de 95 mg/mL.

[0010] Ainda em outro aspecto, a invenção fornece um kit compreendendo um nebulizador e uma composição líquida ou sólida, em que o nebulizador está adaptado para aerossolizar a composição líquida em um aerossol, como descrito acima. É ainda fornecido pela invenção um kit compreendendo um nebulizador e uma composição líquida ou sólida, em que o nebulizador é adaptado para aerossolizar a composição líquida em um aerossol, como descrito acima, para uso em um método para prevenção, controle ou tratamento de doenças ou condições dos pulmões sendo mediadas ou resultantes de atividade de elastase neutrofílica de humanos em um indivíduo.

[0011] Ainda em outro aspecto, a invenção descreve ainda um método de preparação e dispensação de um aerossol para administração pulmonar. O método compreende a etapa de fornecer uma composição farmacêutica líquida compreendendo o composto ativo ciclo (-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em uma concentração dentro de uma faixa de cerca de 4 mg/mL a cerca de 100 mg/mL, de preferência, dentro de uma faixa de cerca de 17 mg/mL a cerca de 95 mg/mL, ou cerca de 35 mg/mL a cerca de 95 mg/mL, respectivamente, e mais de preferência variam de cerca de 70 mg/mL a cerca de 95 mg/mL, ou fornecendo uma composição farmacêutica sólida para preparar a composição líquida, em que a composição compreende o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro- Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e em que a composição sólida dissolúvel ou dispersável em um solvente líquido aquoso e em que a composição líquida compreende uma concentração dentro de uma faixa de cerca de 4 mg/mL a cerca de 100 mg/mL, de preferência, dentro de uma faixa de cerca de 17 mg/mL a cerca de 95 mg/mL, ou cerca de 35 mg/mL a cerca de 95 mg/mL, respectivamente, e mais de preferência, dentro de uma faixa de cerca de 70 mg/mL a cerca de 95 mg/mL, o composto ativo, ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e a etapa de fornecer um nebulizador capaz de aerossolizar a referida composição farmacêutica líquida a uma taxa de dispensação média de pelo menos cerca de 0,8 mg do composto ativo ciclo (-OctG-Glu- Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-),ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, por minuto, o nebulizador sendo ainda adaptado para emitir um aerossol compreendendo uma fase líquida dispersada tendo um diâmetro mediano de massa de cerca de 1,5 μ m a cerca de 5 μ m, e tendo uma distribuição de tamanhos de gotículas tendo um desvio padrão geométrico de cerca de 1,2 a cerca de 1,7. Em uma etapa subsequente, o nebulizador é operado para aerossolizar a composição farmacêutica líquida que finalmente pode ser inalada pelos mamíferos, mais preferencialmente, por seres humanos.

[0012] Ainda em outro aspecto, a invenção fornece uma composição farmacêutica compreendendo o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo e, opcionalmente, um ou mais diluentes, excipientes ou carreadores farmaceuticamente aceitáveis, para uso em um método para prevenção, controle ou tratamento de doenças ou condições dos pulmões mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica em um indivíduo.

[0013] Ainda em outro aspecto, a invenção fornece um kit compreendendo o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-),ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável da mesma, e uma bula em que a bula compreende instruções para o tratamento de um indivíduo para doenças ou condições dos pulmões sendo mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos usando o composto ativo.

BREVE DESCRIÇÃO DAS FIGURAS

[0014] As Figuras. 1 e 2 mostram os efeitos do ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) administrado por inalação em um modelo LPS/fMLP de ativação de neutrófilos em camundongo. Os sobrenadantes de BAL da traqueia de camundongos mortos foram analisados quanto à atividade de elastase neutrofílica. Os dados são exibidos versus o carreador de controle. Os dados são representados como meios (Figura 1) e como dados individuais, juntamente com a média correspondente e valores s.e.m. (Figura 2).

[0015] A Figura 3 mostra as curvas médias de concentração plasmática-tempo de doses únicas ascendentes (80 mg, 160 mg e 320 mg por coorte) de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) administrado por inalação a pacientes com fibrose cística. Essas curvas mostram perfis típicos semelhantes aos perfis de curvas resultantes de doses comparáveis de compostos ativos inalados por indivíduos saudáveis.

[0016] A Figura 4 mostra as concentrações médias de escarro de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) administrado por inalação a pacientes com fibrose cística em doses crescentes únicas (80 mg, 160 mg e 320 mg por coorte). Os dados são exibidos em função do tempo. A comparação das concentrações do composto ativo na escarro (Figura 4) e no plasma (Figura 3) mostra que as concentrações do composto ativo no escarro são aproximadamente 103 vezes mais elevadas do que no plasma.

[0017] A Figura 5 mostra os efeitos na elastase neutrofílica ativa No escarro de pacientes com fibrose cística induzida por ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) administrado por inalação a pacientes com fibrose cística em doses únicas ascendentes (80 mg, 160 mg e 320 mg por coorte). Os dados são exibidos em função do tempo e representados como médias. Além disso, os dados do placebo também são mostrados.

[0018] Pode ocorrer inibição forte (> 90%) da elastase ativa no escarro ao longo de várias horas após a administração de uma dose única de composto ativo em todos os grupos de dose.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

[0019] Em um primeiro aspecto, a invenção fornece um aerossol farmacêutico para administração pulmonar compreendendo uma fase líquida dispersada e uma fase gasosa contínua. A fase líquida dispersada compreende gotículas aquosas compreendendo o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. As gotículas da fase dispersa têm um diâmetro mediano de massa de cerca de 1,5 μ m a cerca de 5 μ m com uma distribuição de tamanhos de gotículas tendo um desvio padrão geométrico de cerca de 1,2 a cerca de 1,7.

[0020] O aerossol da invenção é para dispensação pulmonar, o que é preferível conseguido por inalação oral do aerossol. Como aqui usado na descrição e nas reivindicações, a dispensação pulmonar significa dispensação de aerossol a qualquer parte ou característica dos pulmões incluindo os chamados pulmões profundos, os pulmões periféricos, os alvéolos, os brônquios e os bronquíolos.

[0021] As condições das regiões alvo pulmonares nas quais prevenção, controle ou tratamento de mamíferos, mais preferencialmente, de indivíduos humanos, usar o aerossol da invenção é potencialmente útil incluindo doenças ou condições dos pulmões mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos, por exemplo em particular, doenças pulmonares, tais como, deficiência de alfa-1 antitripsina (DAAT), fibrose cística (FC), bronquiectasia não fibrose cística (BNFC) ou doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD), ou infecções dos pulmões provocando doenças ou condições dos pulmões, sendo mediada pela atividade de elastase neutrofílica de humanos.

[0022] Como aqui usado na descrição e nas reivindicações, um aerossol é uma dispersão de uma fase sólida e/ou líquida em uma fase gasosa. A fase dispersa, também denominada fase descontínua, compreende múltiplas partículas sólidas e/ou líquidas. Ambos os tipos físicos básicos de aerossóis, isto é, dispersões sólidas e líquidas em uma fase gasosa, podem ser usados como aerossóis farmacêuticos.

[0023] De acordo com a presente invenção, o aerossol compreende uma fase líquida dispersada e uma fase gasosa contínua. Esses aerossóis são por vezes referidos como “aerossóis líquidos” ou líquidos aerossolizados. Deve ser notado que o requisito de uma fase líquida dispersada não exclui a presença de uma fase sólida. Em particular, a fase líquida dispersada pode ela própria representar uma dispersão, tal como uma suspensão de partículas sólidas em um líquido.

[0024] A fase gasosa contínua deve ser selecionada de qualquer gás ou mistura de gases que seja farmaceuticamente aceitável. Por exemplo, ar ou ar comprimido como fase gasosa é mais comum em terapia de inalação usando nebulizadores como geradores de aerossol. Alternativamente, outros gases e misturas gasosas, como ar enriquecido com oxigênio, ou misturas de nitrogênio e oxigênio podem ser usados. O uso de ar como fase gasosa contínua é o mais preferido.

[0025] O composto ativo é ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável da mesma, tendo atividade inibitória contra a elastase neutrófila de humanos. Estruturalmente, o composto ativo é um tridecapeptídeo cíclico homodético, em que OctG é ácido (S)-2- aminodecanóico e DPro é D-prolina. As abreviações (código de 3 letras) para os restantes resíduos de aminoácidos são geralmente reconhecidas. Todos os resíduos de aminoácidos estão na configuração L, exceto um resíduo de D- prolina.

[0026] Como aqui usado na descrição e nas reivindicações, o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) deve ser entendido como incluindo os respectivos solvatos.

[0027] Os solvatos assim como os sais são categorias de formas em que o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) pode ser usado como um ingrediente ativo em uma composição farmacêutica.

[0028] Os sais são compostos neutros compostos de íons, ou seja, cátions e ânions. Se o composto ativo pode atuar como um ácido, sais potencialmente úteis podem ser formados com cátions inorgânicos, tais como sódio, potássio, cálcio, magnésio e/ou amônio, ou com cátions orgânicos, tais como os derivados de arginina, lisina, glicina, e/ou etilenodiamina. Se o composto ativo (ou partes do mesmo) pode atuar como uma base, como por exemplo o resíduo de Lys sendo um dos resíduos de aminoácido de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), então sais potencialmente úteis podem ser formados com ânions inorgânicos, tais como cloreto, brometo, iodeto, fosfato (mono- ou dibásico), sulfato, nitrato, acetato, trifluoroacetato, propionato, butirato, maleato, fumarato, metanossulfonato, etanossulfonato, 2-hidroxi-etilssulfonato, n-propilssulfonato, isopropilssulfonato, lactato, malato e/ou citrato.

[0029] O termo sal farmaceuticamente aceitável ou farmacêutico é usado para referir-se a um fármaco ionizável ou composto ativo que foi combinado com um contraíon para formar um complexo neutro. A conversão de um fármaco ou composto ativo em um sal através deste processo pode, por exemplo, aumentar a sua estabilidade química, tornar o complexo mais fácil de administrar e/ou permitir a manipulação do perfil farmacocinético do agente.

[0030] Em uma modalidade preferida da invenção, o contraíon do composto ativo é acetato.

[0031] O aerossol é ainda caracterizado por as gotículas da fase líquida dispersada terem um diâmetro médio de massa de cerca de 1,5 μ m a cerca de 5 μ m com uma distribuição de tamanhos de gotículas com um desvio padrão geométrico de cerca de 1,2 a cerca de 1,7. O diâmetro mediano de massa (DMM), tal como aqui usado na descrição e nas reivindicações, o diâmetro mediano de massa da fase líquida dispersada medida por difração de laser. Vários aparelhos analíticos apropriados para determinar o DMM são conhecidos e estão comercialmente disponíveis, tais como o Malvern MasterSizer X ou o Malvern SprayTec. A distribuição geométrica incluindo o desvio padrão geométrico (GSD) das partículas ou gotículas líquidas em aerossol pode ser determinada simultaneamente com o DMM. O GSD descreve como a dispersão é um conjunto de números cuja média preferida é a média geométrica.

[0032] Em uma modalidade preferida, o aerossol é para dispensação pulmonar e a fase líquida dispersada de tal aerossol tem um DMM na faixa de cerca de 2,0 μ m a cerca de 4,5 μ m e um GSD na faixa de cerca de 1,2 a cerca de 1,7. Mais preferencialmente, o aerossol da invenção tem um DMM na faixa de cerca de 2,5 μ m a cerca de 3,5 μ m e um GSD na faixa de cerca de 1,4 a cerca de 1,6. Cada um destes conjuntos de combinações é particularmente útil para conseguir uma concentração local alta do composto ativo nos pulmões, incluindo os brônquios e bronquíolos, em relação à quantidade de composto ativo que é aerossolizado.

[0033] Em outra modalidade preferida, o aerossol é emitido a partir de um gerador de aerossol a uma taxa de pelo menos cerca de 0,1 mL/min. Em outra modalidade, a taxa de saída (total) sendo a taxa na qual o aerossol é emitido do gerador de aerossol pelo menos cerca de 0,150 mL/min ou pelo menos cerca de 150 mg/min para aqueles aerossóis líquidos cujas densidades são - para fins práticos - próximas a 1 g/mL, ou seja, dentro da faixa de cerca de 0,95 g/mL a cerca de 1,05 g/mL. Em outras modalidades, a taxa de saída está dentro da faixa de cerca de 200 mg/min a cerca de 700 mg/min, ou de cerca de 250 mg/min a cerca de 650 mg/min, respectivamente.

[0034] Em outra modalidade preferida, o aerossol é emitido a partir de um gerador de aerossol a uma taxa de dispensação média de pelo menos cerca de 0,8 mg do composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, por minuto. A taxa de dispensação (média) de um fármaco ou composto ativo é uma de duas métricas ou dois parâmetros discretos a serem definida(o)s e medida(o)s de acordo com, por exemplo, Ph. Eur. (Pharmacopeia Europaea) 2.9.44 e/ou USP (United States Pharmacopeia) 1601 para determinar a quantidade de fármaco ou composto ativo que se espera que um paciente receba durante um período de tratamento. Em outras modalidades, a taxa média de dispensação do composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo está dentro da faixa de cerca de 3 mg a cerca de 25 mg por minuto ou dentro da faixa de cerca de 5 mg a cerca de 18 mg por minuto, respectivamente.

[0035] Geradores de aerossol apropriados, em particular nebulizadores, que são adequados para gerar o(s) aerossol(óis) descrito(s) na descrição e nas reivindicações são discutidos em mais detalhe aqui abaixo.

[0036] Em outro aspecto, a presente invenção é direcionada a uma composição farmacêutica líquida para preparar o aerossol como descrito acima, compreendendo o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em uma concentração dentro de uma faixa de cerca de 4 mg/mL a cerca de 100 mg/mL.

[0037] Como aqui definido na descrição e nas reivindicações, uma composição farmacêutica líquida é um material líquido que compreende pelo menos um composto ativo e pelo menos um excipiente farmacologicamente substancialmente inerte farmaceuticamente aceitável. Deve ser notado que o termo “composição líquida” não significa necessariamente que nenhum material sólido esteja presente. Por exemplo, uma suspensão líquida representando uma dispersão de partículas sólidas em uma fase líquida contínua é também abrangida no termo acima.

[0038] De preferência, a composição líquida a partir da qual o aerossol é preparado é uma composição aquosa; consequentemente, a água é o constituinte líquido predominante de tal composição. Solventes e cossolventes que não sejam a água devem ser evitados. Em outra modalidade, a composição compreende pelo menos cerca de 80% em peso de água. Ainda em outra modalidade, pelo menos cerca de 90% em peso dos constituintes líquidos da composição é água.

[0039] Se a incorporação de um solvente não aquoso, tais como, etanol, glicerol, propilenoglicol ou polietilenoglicol, não puder ser evitada, o excipiente deve ser cuidadosamente selecionado e tendo em consideração a sua aceitabilidade fisiológica e o uso terapêutico da composição. De acordo com uma modalidade preferida, a composição é substancialmente isenta de solventes não aquosos.

[0040] A concentração do composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile- Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, na composição líquida está dentro de uma faixa desde cerca de 4 mg/mL a cerca de 100 mg/mL. De um modo preferido, a concentração do composto ativo acima, ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, está na faixa de cerca de 17 mg/mL a cerca de 95 mg/mL ou cerca de 35 mg/mL a cerca de 95 mg/mL, respectivamente, ou mais preferido, de cerca de 70 mg/mL a cerca de 95 mg/mL. Uma concentração alta de um composto ativo em uma composição adequada para ser aerossolizada fornece conveniência e aquiescência do paciente: Quanto maior essa concentração, menor o volume total de composição líquida compreendendo a dose eficaz do composto ativo a ser inalado e o menor tempo total sendo necessário para a inalação de tal dose eficaz.

[0041] A viscosidade dinâmica da composição líquida tem uma influência na eficácia da nebulização e na distribuição do tamanho de partícula do aerossol formado por nebulização. A viscosidade dinâmica deve, de preferência, ser ajustada para uma faixa de cerca de 0,8 mPas a cerca de 1,7 mPas. Em outras modalidades, a viscosidade dinâmica está na faixa de cerca de 1,0 mPas a cerca de 1,7 mPas, ou na faixa de cerca de 1,2 mPas a cerca de 1,6 mPas, respectivamente.

[0042] De modo a obter um aerossol que seja altamente adequado para administração pulmonar, a tensão superficial da composição líquida da invenção deve, de preferência, ser ajustada para uma faixa de cerca de 25 mN/m a cerca de 80 mN/m, mais preferencialmente, a uma faixa de cerca de 30 mN/m a cerca de 70 mN/m, ou ainda mais preferencialmente, a uma faixa de cerca de 45 mN/m a cerca de 55 mN/m.

[0043] Em geral, a qualidade de um aerossol e a eficácia da nebulização podem ser adversamente afetadas nas partes inferiores das modalidades acima apresentadas; no entanto, os resultados dos estudos descritos abaixo indicam que não há alterações significativas nos desempenhos das composições líquidas da invenção no que respeita acima.

[0044] É bem conhecido na técnica que a adição de um agente tensoativo a uma composição líquida aquosa pode resultar em uma redução da tensão superficial relativamente acentuadamente inferior à da solução tampão fisiológica ou da água. Portanto, uma concordância deve ser encontrada em cada caso, dependendo da aplicação pretendida.

[0045] Para ser bem tolerado, um aerossol deve - na medida do possível - ter uma tonicidade fisiológica ou osmolalidade. Assim, pode ser desejável incorporar um excipiente osmoticamente ativo para controlar a osmolalidade do aerossol. Tal excipiente, ou excipientes, se, por exemplo, uma combinação de substâncias é usada, deve ser selecionado para idealmente atingir uma osmolalidade do aerossol que não se desvie muito da dos fluidos fisiológicos, isto é, de cerca de 150 mOsmol/kg. No entanto, é de novo encontrada uma concordância entre as necessidades físico-químicas e/ou farmacêuticas, por um lado, e os requisitos fisiológicos, por outro lado. Em geral, uma osmolalidade até cerca de 800 mOsmol/kg pode ser aceitável. Em particular, uma osmolalidade na faixa de cerca de 200 mOsmol/kg a cerca de 600 mOsmol/kg é o preferida. Em outras modalidades, a osmolalidade está na faixa de cerca de 250 mOsmol/kg a cerca de 500 mOsmol/kg ou na faixa de cerca de 300 mOsmol/kg a cerca de 450 mOsmol/kg, respectivamente.

[0046] Uma abordagem para melhorar a efetividade e/ou eficácia da composição pode ser intensificar o tempo de retenção local da composição após a deposição do aerossol nas regiões alvo. Por exemplo, um tempo de residência prolongado da composição depositada nos pulmões pode levar a uma exposição contínua mais elevada do composto ativo no local de ação. Ao mesmo tempo, pode reduzir a frequência necessária de administração e, portanto, intensificar a conveniência e a concordância do paciente.

[0047] De modo a conseguir uma retenção prolongada do composto ativo em geral, podem ser seguidas várias estratégias de formulação, por exemplo, conversão do composto ativo altamente solúvel em água em uma forma sólida menos solúvel, tal como um sal pouco solúvel. Como consequência, o composto está presente no aerossol na forma não dissolvida, tal como na forma de uma micro ou nanossuspensão. Após deposição das gotículas de aerossol, a fase líquida da composição combina com o fluido fisiológico, por exemplo, muco, e permite que o fármaco se dissolva.

[0048] Uma estratégia de formulação diferente baseia-se no fato de o(s) excipiente (s) polimérico(s), como descrito abaixo, poderem ter um efeito na liberação do composto ativo a partir da formulação e/ou no tempo de residência local da composição após a deposição no tecido alvo. Portanto, tais excipientes afetam também a biodisponibilidade local do composto ativo no sítio de ação.

[0049] Em uma das modalidades preferidas, o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala- Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, é formulado com um excipiente polimérico para efetuar uma liberação lenta e uma retenção local prolongada. Polímeros potencialmente adequados incluem, em particular, polímeros solúveis em água ou dispersáveis em água farmaceuticamente aceitáveis, tais como, metilcelulose, hidroxietilcelulose, alginato, galactomanano, dextrano, agar, goma de guar, tragacanto e misturas dos mesmos.

[0050] Se um ou vários excipientes poliméricos estiverem presentes na composição líquida da invenção, deve-se ter cuidado com a influência na viscosidade dinâmica de tal composição, a fim de assegurar uma aerossolização eficiente. Assim, a viscosidade dinâmica não deve exceder cerca de 1,7 mPas. Em geral, o grau exato do(s) polímero(s) e a presença de outros excipientes devem ser considerados para determinar o conteúdo do(s) polímero(s) nessa composição líquida.

[0051] Sabe-se que outros excipientes, nomeadamente agentes complexantes, tais como ciclodextrinas, sais metálicos di- ou multivalentes, tais como, sais de cálcio-magnésio ou alumínio, agentes quelantes, tais como, ácido etilenodiaminotetracético incluindo os seus sais, ou agentes anfifílicos, tais como, fosfolipídeos ou lecitinas, pode de um modo semelhante prolongar a liberação do composto ativo como, por exemplo, excipientes poliméricos.

[0052] A composição líquida da invenção pode compreender outros excipientes farmaceuticamente aceitáveis, por exemplo, agentes osmóticos, tais como sais inorgânicos; excipientes para ajustar e/ou tamponar o pH, tais como, sais orgânicos ou in orgânicos, ácidos e bases, agentes de volume e auxiliares de liofilização, tais como sacarose e lactose, álcoois de açúcares, tipo manitol, sorbitol e xilitol, estabilizadores e antioxidantes, tais como vitamina E incluindo os seus derivados, licopeno incluindo os seus derivados e ácido ascórbico, tensoativos iônicos e não iônicos, tais como, fosfolipídios e polissorbatos, agentes modificadores do sabor, desintegrantes, agentes colorantes, edulcorantes e/ou aromatizantes.

[0053] Em uma das modalidades preferidas, um ou mais agentes osmóticos, tais como, cloreto de sódio, são incorporados na composição para ajustar a osmolalidade a um valor em uma faixa preferida como delineado acima. Em uma modalidade mais preferida, o agente osmótico é o cloreto de sódio.

[0054] De modo a fornecer um aerossol bem tolerado, a preparação de acordo com a invenção deve ser ajustada para um pH eu-hídrico. O termo “euhídrico” implica que pode haver uma diferença entre os requisitos farmacêuticos e fisiológicos para que seja encontrado um concordância que, por exemplo, garanta que, por um lado, a preparação seja suficientemente estável durante o armazenamento, mas, por outro mão, ainda é bem tolerada. De um modo preferido, o valor de pH encontra-se na região ligeiramente ácida a neutra, isto é, entre cerca de 4 e cerca de 8. Em geral, os desvios para um meio fracamente ácido são tolerados melhor do que um desvio alcalino. Particularmente preferida é uma composição tendo um pH compreendido entre cerca de 4,5 e cerca de 7,5.

[0055] Para ajustar o pH da composição da invenção e/ou tamponar essa composição, podem ser utilizados ácidos, bases, sais e combinações destes fisiologicamente aceitáveis. Excipientes adequados para baixar o valor de pH e/ou como componentes ácidos de um sistema tampão são ácidos minerais fortes, tais como ácido sulfúrico e ácido clorídrico. Ácidos inorgânicos e orgânicos de média concentração, tais como, ácido fosfórico, ácido cítrico, ácido tartárico, ácido succínico, ácido fumárico, metionina, ácido lático, ácido acético, ácido glucurônico, bem como sais ácidos, tais como, fosfatos de hidrogênio com sódio ou potássio, pode ser usado também. Excipientes adequados para elevar o valor de pH e/ou como componentes básicos de um sistema tampão são bases minerais, tais como, hidróxido de sódio, ou outros hidróxidos e óxidos alcalinos e alcalino terrosos, tais como, hidróxido de magnésio, hidróxido de cálcio ou sais básicos de amônio, tais como, hidróxido de amônio, acetato de amônio ou aminoácidos básicos, tais como, lisina, ou carbonatos, tais como, carbonato de sódio ou magnésio, hidrogeno carbonato de sódio ou citratos, tal como citrato de sódio.

[0056] Em uma modalidade preferida, a composição da invenção compreende pelo menos um excipiente para ajustar o pH. Em uma modalidade mais preferida, esse excipiente é hidróxido de sódio.

[0057] Principalmente por razões farmacêuticas, a estabilização química da composição da invenção por outros aditivos pode ser indicada. As reações de degradação mais comuns de um composto ativo quimicamente definido em preparações aquosas compreendem, em particular, reações de hidrólise que podem ser limitadas principalmente por ajuste de pH ótimo, bem como reações de oxidação. Como o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) compreende um resíduo de lisina tendo um grupo amino primário, o último, por exemplo, pode estar submetido à ataque oxidativo. Portanto, a adição de um antioxidante, ou um antioxidante em combinação com um sinergista, pode ser aconselhável ou necessário.

[0058] Antioxidantes são substâncias naturais ou sintéticas que são capazes de prevenir ou inibir a oxidação do composto ativo. Antioxidantes são principalmente adjuvantes que são oxidáveis e/ou atuam como agentes redutores, tais como, acetato de tocoferol, licopeno, glutationa reduzida, catalase, peróxido dismutase. Antioxidantes adequados adicionais são, por exemplo, ácido ascórbico, ascorbato de sódio e outros sais e derivados de ácido ascórbico, por exemplo, palmitato de ascorbila, ácido fumárico e seus sais, ácido málico e seus sais.

[0059] Substâncias sinérgicas são aquelas que não atuam diretamente como reagentes em processos de oxidação, mas que neutralizam tais processos por mecanismos indiretos, por exemplo, pela complexação de íons metálicos que são conhecidos por atuarem cataliticamente em processos de oxidação. O ácido etilenodiaminotetracético (EDTA) e os sais e derivados do mesmo, ácido cítrico e os sais dos mesmos, o ácido málico e os sais do mesmo, são substâncias sinérgicas que podem atuar como agentes quelantes.

[0060] Em uma das modalidades, a composição da invenção compreende pelo menos um antioxidante. Em uma outra modalidade, a composição compreende um antioxidante e um agente quelante.

[0061] Como mencionado acima, a composição da invenção pode compreender um excipiente que afeta o sabor. Um mau gosto é extremamente desagradável e irritante, especialmente na administração por inalação, e pode resultar em não concordância e, portanto, falha na terapia. O mau gosto é percebido pelo paciente através da parte do aerossol que precipita na região oral e faríngea durante a inalação. Mesmo que o tamanho de partícula do aerossol possa ser otimizado de tal maneira que apenas uma pequena fração da preparação precipite nas regiões acima mencionadas (a referida fração sendo perdida para terapia, a menos que a mucosa oral, faríngea ou nasal seja o tecido alvo) atualmente é dificilmente possível reduzir a referida fração a tal ponto que o mau gosto de um composto ativo não seja mais percebido. Portanto, a melhoria do sabor de uma composição ou o mascaramento do sabor de um composto ativo pode ser crucial.

[0062] De modo a melhorar o sabor da composição, podem ser incorporados um ou mais excipientes potencialmente úteis do grupo de açúcares, álcoois de açúcar, sais, aromatizantes, agentes complexantes, polímeros, edulcorantes, tais como, sacarina de sódio, aspartame, tensoativos.

[0063] Em uma modalidade preferida, a composição da invenção compreende pelo menos um excipiente modificador do sabor. Em uma modalidade mais preferida, o referido excipiente modificador do sabor é a sacarina sódica.

[0064] Em outra modalidade, a composição compreende um composto ativo adicional, cuja combinação com o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro- Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) tendo um efeito terapêutico combinado ou, idealmente, sinergístico.

[0065] No caso de uma formulação líquida para aerossolização poder não ter uma vida útil suficientemente longa para servir como uma formulação adequada para o mercado, pode ser benéfico fornecer uma composição sólida em vez disso. Tal composição sólida geralmente tem o potencial para uma vida útil mais longa em comparação com uma composição líquida.

[0066] A composição sólida da invenção compreende o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo e, pelo menos, um excipiente. Em geral, os mesmos excipientes já descritos acima podem ser selecionados. Dependendo do processo/método de fabricação da composição sólida, um ou mais excipientes adicionais podem ser úteis. Se a composição sólida for, por exemplo, preparada por secagem por congelamento (liofilização) sendo um dos métodos preferidos de preparação de tal composição sólida, pode ser vantajoso incorporar pelo menos um agente de volume e/ou auxiliar de liofilização, por exemplo, um açúcar, tal como sacarose, frutose, glucose, trealose ou um álcool de açúcar, tal como manitol, sorbitol, xilitol, isomalte.

[0067] A composição sólida é ainda caracterizada por ser dissolúvel ou dispersável em um solvente líquido aquoso. Como aqui definido na descrição e nas reivindicações, o termo “dissolúvel” significa que a composição sólida e o solvente líquido aquoso podem ser combinados para formar uma solução ou solução coloidal, enquanto o termo “dispersável” deve ser interpretado para incluir a formação de dispersões líquidas, em particular, emulsões e microsuspensões. O termo “aquoso” significa que o principal constituinte líquido do solvente é a água. Solventes e cossolventes que não sejam a água devem ser evitados. Em outra modalidade, o solvente líquido aquoso compreende pelo menos cerca de 80% em peso de água. Ainda em outra modalidade, pelo menos cerca de 90% em peso dos constituintes líquidos do solvente é água. Se a incorporação de um solvente não aquoso, tal como etanol, glicerol, propilenoglicol ou polietilenoglicol, não puder ser evitada, o excipiente deve ser cuidadosamente selecionado e tendo em consideração a sua aceitabilidade fisiológica e o uso terapêutico da composição. De acordo com uma modalidade preferida, a composição é substancialmente livre de solventes não aquosos. Se a incorporação de um solvente não aquoso, tais como, etanol, glicerol, propileno glicol ou polietileno glicol, não puder ser evitada, as mesmas precauções devem ser consideradas como descrito acima. De acordo com outra modalidade preferida, o solvente aquoso para dissolver ou dispersar a composição sólida é substancialmente isento de solventes não aquosos.

[0068] A quantidade do composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln- Lys-Tyr-DPro-Pro-), ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, na composição sólida tem que corresponder a uma concentração dentro de uma faixa de cerca de 4 mg/mL a cerca de 100 mg/mL após a dissolução ou dispersão em um solvente líquido aquoso. Mais de preferência, a quantidade do composto ativo acima, ou de qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, tem que corresponder a uma concentração dentro da faixa de cerca de 17 mg/mL a cerca de 95 mg/mL ou cerca de 35 mg/mL a cerca de 95 mg/mL, respectivamente ou, ainda mais preferencialmente, cerca de 70 mg/mL a cerca de 95 mg/mL, após a dissolução ou dispersão em um solvente líquido aquoso.

[0069] Em uma outra modalidade, o contraíon do composto ativo ciclo(-OctG-Glu- Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) na composição sólida é acetato.

[0070] A composição sólida da invenção para reconstituição pode fazer parte de um kit farmacêutico. Tal kit compreende, de preferência, a composição sólida na forma estéril. Como aqui usado na descrição e nas reivindicações, os termos “estéril” ou “esterilidade” são definidos de acordo com o significado farmacêutico usual e assim devem ser entendidos como a ausência de germes que são capazes de reprodução. A esterilidade é determinada com testes adequados que são definidos nas farmacopéias relevantes. De acordo com os padrões científicos atuais, um nível de garantia de esterilidade (SAL) de 10-6, ou seja, garantia de menos de uma chance em um milhão de microrganismos viáveis estão presentes em um artigo esterilizado), é considerado aceitável para preparações estéreis. Na prática, as taxas de contaminação podem ser maiores, e as taxas de contaminação para preparações fabricadas assepticamente podem chegar a cerca de 10-3. Por razões práticas, continua difícil exigir esterilidade em um sentido absoluto. Por conseguinte, a esterilidade da composição da invenção deve ser entendida na descrição e nas reivindicações de tal maneira que a referida composição satisfaz os requisitos da farmacopeia relevante em relação à esterilidade.

[0071] A composição sólida da invenção pode ser preparada fornecendo uma composição líquida sendo semelhante à composição líquida pronta para aerossolização e subsequentemente secando-a, por exemplo, por liofilização. Semelhante significa que a composição líquida a partir da qual a composição sólida é preparada por secagem pode não compreender todos os ingredientes sólidos da composição líquida pronta a usar, por exemplo, no caso de o carreador líquido para reconstituição ser concebido para compreender um ou mais dos excipientes. Nem sequer é necessário que as concentrações dos ingredientes destas duas composições líquidas sejam idênticas. A composição sólida da invenção pode mesmo ser preparada, por exemplo, fornecendo o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo e, opcionalmente, a pelo menos um excipiente, na forma de pó e subsequentemente misturando esse pó com um pó compreendendo os excipientes restantes para finalmente formar uma mistura em pó.

[0072] Em outro aspecto, a invenção fornece um kit farmacêutico para a preparação e dispensação de um aerossol farmacêutico para administração pulmonar compreendendo uma fase líquida dispersada e uma fase gasosa contínua, em que a fase líquida dispersada compreende gotículas aquosas compreendendo o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, tem um diâmetro mediano de massa de cerca de 1,5 μ m a cerca de 5 μ m, e tem uma distribuição de tamanho de gotícula tendo um desvio padrão geométrico de cerca de 1,2 a cerca de 1,7. O kit é ainda caracterizado por compreender um nebulizador de aerossol e uma composição compreendendo uma concentração dentro de uma faixa de cerca de 4 mg/mL a cerca de 100 mg/mL do composto ativo, ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; ou compreendendo um nebulizador e uma composição farmacêutica sólida para preparar a composição líquida, em que a composição compreende o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro- Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e em que a composição sólida é dissolúvel ou dispersável em um solvente líquido aquoso, e em que a composição líquida compreende uma concentração dentro de uma faixa de cerca de 4 mg/mL a cerca de 100 mg/mL do composto ativo, ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0073] Nebulizadores são dispositivos capazes de aerossolizar líquidos. De um modo preferido, o nebulizador do kit da invenção é selecionado de nebulizadores de jato, nebulizadores ultrassônicos, nebulizadores piezoeletrônicos, nebulizadores de colisão de jato, nebulizadores eletro-hidrodinâmicos, nebulizadores de força capilar, nebulizadores de membrana perfurada e nebulizadores de membrana vibratória perfurados (M. Knoch, M. Keller, Expert Opin. Drug Deliv., 2005, 2, 377). Particularmente preferidos são os nebulizadores piezoelétricos, nebulizadores do tipo membrana eletro-hidrodinâmicos e/ou perfurados, por exemplo, nebulizadores das plataformas de dispensação de fármacos MysticTM (Battelle Pharma [Battelle Memorial Institute], United States), eFlowTM (Pari GmbH, Alemanha), AeronebTM, Aeroneb ProTM, Aero DoseTM (Aerogen Inc, United States). Estes tipos de nebulizadores são particularmente úteis se o aerossol for dispensado aos brônquios e/ou pulmões.

[0074] De preferência, o nebulizador deve ser selecionado ou adaptado para ser capaz de aerossolizar a composição líquida a uma taxa de pelo menos cerca de 0,1 mL/min. Mais de preferência, o nebulizador é capaz de uma taxa de saída (total) (a taxa à qual o aerossol é emitido do gerador de aerossol) de pelo menos cerca de 0,150 mL/min ou pelo menos cerca de 150 mg/min para essas composições líquidas dos quais são - para fins práticos - perto de 1 g/mL, ou seja, dentro da faixa de cerca de 0,95 g/mL a cerca de 1,05 g/mL. Em outras modalidades, a taxa de saída do nebulizador está dentro da faixa de cerca de 200 mg/min a cerca de 700 mg/min, ou de cerca de 250 mg/min a cerca de 650 mg/min, respectivamente.

[0075] O nebulizador também deve preferencialmente ser selecionado ou adaptado para ser capaz de aerossolizar e emitir a composição líquida a uma taxa de dispensação média de pelo menos cerca de 0,8 mg do composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro- Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, por minuto. A taxa de dispensação (média) de um fármaco ou composto ativo é um parâmetro para determinar a quantidade de fármaco ou composto ativo que se espera que um paciente receba durante um período de tratamento. Em outras modalidades, o nebulizador é selecionado ou adaptado para permitir uma taxa de dispensação média do composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr- Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, na faixa de cerca de 3 mg por minuto a cerca de 25 mg por minuto ou entre cerca de 5 mg por minuto e cerca de 18 mg por minuto, respectivamente.

[0076] De acordo com uma outra preferência, o nebulizador deve ser selecionado ou adaptado para ser capaz de aerossolizar e emitir pelo menos cerca de 70% em peso da dose carregada do composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, enquanto que a referida fração da dose carregada é constituída por gotículas com um diâmetro mediano de massa não maior que cerca de 5 μ m. Uma fração de uma fase dispersada tendo um tamanho de gotícula não maior que cerca de 5 μ m é muitas vezes referida como a fração respirável, pois as gotículas do referido tamanho - em contraste com gotículas maiores - têm uma alta probabilidade de serem depositadas nos pulmões, em vez da traqueia e da faringe. De um modo mais preferido, pelo menos cerca de 80% em peso da dose cheia no nebulizador é aerossolisada em gotículas de um tamanho não mio que cerca de 5 μ m e emitida a partir do dispositivo. Tal dispositivo pode ser mais bem selecionado usando um nebulizador eletrônico, opcionalmente personalizado, baseado no desenho de membrana vibratória perfurada, tal como um nebulizador da plataforma de distribuição de fármacos eFlowTM (Pari GmbH, Alemanha). De acordo com modalidades ainda mais preferidas, um mínimo de cerca de 85% em peso e cerca de 90% em peso, respectivamente, da dose carregada é aerossolizado em gotículas de um tamanho não maior que cerca de 5 μ m e emitidas.

[0077] Em outro aspecto, a invenção fornece um método de preparação e dispensação de um aerossol para administração pulmonar, o referido método compreendendo as etapas de fornecer uma composição farmacêutica líquida compreendendo o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em uma concentração dentro de uma faixa de cerca de 4 mg/mL até cerca de 100 mg/mL, ou fornecendo uma composição farmacêutica sólida para preparar a composição líquida, em que a composição compreende o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), ou qualquer farmaceuticamente sal aceitável do mesmo, e em que a composição sólida é dissolúvel ou dispersável em um solvente líquido aquoso, e em que a composição líquida compreende uma concentração dentro de uma faixa de cerca de 4 mg/mL a cerca de 100 mg/mL do composto ativo, ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e fornecer um nebulizador capaz de aerossolizar a referida composição farmacêutica líquida a uma taxa de dispensação média de pelo menos cerca de 0,8 mg do composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), ou qualquer sal farmacologicamente aceitável do mesmo, por minuto, o nebulizador sendo ainda adaptado para emitir um aerossol compreendendo uma fase líquida dispersada tendo um diâmetro mediano de massa de cerca de 1,5 μ m a cerca de 5 μ m, e tendo uma distribuição de tamanho de gotícula tendo um desvio padrão geométrico de cerca de 1,2 a cerca de 1,7, e operando o nebulizador para aerossolizar a composição farmacêutica líquida.

[0078] A composição da invenção, líquida, inicialmente sólida ou finalmente aerossolizada, ou o kit farmacêutico compreendendo a composição, pode ser usado para prevenção, controle ou tratamento de doenças ou condições dos pulmões que sejam mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos, por exemplo doenças pulmonares, tais como, a deficiência de alfa-1 antitripsina (DAAT), fibrose cística (FC), bronquiectasia não fibrose cística (BFNC) ou doença pulmonar obstrutiva crônica (DPOC), ou infecções dos pulmões que causam doenças ou condições dos pulmões, sendo mediadas pela atividade de elastase neutrofílica de humanos.

[0079] Como aqui usado, o termo “prevenção”/”prevenir”, por exemplo, tratamentos preventivos compreendem tratamentos profiláticos. Em aplicações preventivas, a composição farmacêutica ou o aerossol farmacêutico da invenção é administrada(o) a um indivíduo suspeito de ter, ou em risco de desenvolver doenças ou condições dos pulmões que sejam mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos.

[0080] Como aqui usado, o termo “controle” significa aumentar o tempo até aparecer um sintoma de doenças ou condições dos pulmões sendo mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos ou uma marca associada a doenças ou condições dos pulmões mediadas por ou resultante da atividade de elastase neutrofílica de humanos ou retardar o aumento da gravidade de um sintoma de doenças ou condições dos pulmões que são mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos. Adicionalmente, “controle” como usado aqui inclui reversão ou inibição da progressão da doença. “Inibição” da progressão da doença ou complicação da doença em um indivíduo significa prevenir ou reduzir a progressão da doença e/ou complicação da doença no indivíduo.

[0081] Os termos “tratamento”/”tratar” como aqui usados incluem: (1) retardar o aparecimento de sintomas clínicos do estado, da doença ou da condição que se desenvolve em um animal, particularmente um mamífero e especialmente um humano, que pode ser afetado ou predisposto ao estado, à doença ou à condição, mas ainda não experimenta ou apresenta sintomas clínicos ou subclínicos do estado, da doença ou da condição; (2) inibir o estado ou a condição (por exemplo, interromper, reduzir ou retardar o desenvolvimento da doença, ou uma recaída da mesma em caso de tratamento de manutenção, de pelo menos um sintoma clínico ou subclínico e/ou (3) aliviar a condição (isto é, causando a regressão do estado, da doença ou da condição ou pelo menos um de seus sintomas clínicos ou subclínicos.) O benefício para um paciente a ser tratado é estatisticamente significativo ou pelo menos perceptível para o paciente ou para o médico. será apreciado que quando um medicamento é administrado a um paciente para tratar uma doença, o resultado pode nem sempre ser um tratamento eficaz.

[0082] Em aplicações terapêuticas, a composição farmacêutica é normalmente administrada a um indivíduo, tal como um paciente que sofre de doenças ou condições dos pulmões sendo mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos, em uma quantidade suficiente para curar ou, pelo menos parcialmente, interromper os sintomas da doença ou condição. Os valores eficazes para este uso dependerão da gravidade e curso da doença, terapia anterior, estado de saúde do paciente e resposta a fármacos, e parecer do médico que está realizando o tratamento.

[0083] No caso em que a condição do indivíduo não melhora, a composição farmacêutica ou o aerossol farmacêutico da invenção podem ser administrados cronicamente, o que por um longo período de tempo, incluindo ao longo da duração da vida do indivíduo, para melhorar ou de outro modo controlar ou limitar os sintomas da doença ou da condição do indivíduo.

[0084] No caso em que o estado do indivíduo melhora, a composição farmacêutica ou o aerossol farmacêutico podem ser administrados continuamente; alternativamente, a dose de fármacos a ser administrada pode ser temporariamente reduzida ou temporariamente suspensa durante um certo período de tempo (isto é, um “folga de fármacos”).

[0085] Uma vez ocorrida a melhoria da condição do paciente, uma dose de manutenção da composição farmacêutica ou do aerossol farmacêutico da invenção é administrada se necessário. Subsequentemente, a dosagem ou a frequência de administração, ou ambas, é opcionalmente reduzida, como uma função dos sintomas, a um nível no qual a doença melhorada é retida.

[0086] Assim, em outro aspecto, a invenção fornece uma composição farmacêutica compreendendo o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; em que OctG é ácido (S)-2-aminodecanóico; DPro é D-prolina; e opcionalmente um ou mais diluentes, excipientes ou carreadores farmaceuticamente aceitáveis, para uso em um método para prevenção, controle ou tratamento de doenças ou patologias dos pulmões que sejam mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos em um indivíduo, de preferência, para uso em um método para tratamento de doenças ou condições dos pulmões que são mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos em um indivíduo.

[0087] Também é fornecido o uso da composição farmacêutica como aqui descrito para a fabricação de um medicamento para prevenção, controle ou tratamento de doenças ou condições dos pulmões mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos em um indivíduo, de preferência para a fabricação de um medicamento para o tratamento de doenças ou condições dos pulmões que são mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos em um indivíduo.

[0088] Também é fornecido o uso de uma composição farmacêutica como aqui descrito para prevenção, controle ou tratamento de doenças ou condições dos pulmões sendo mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos em um indivíduo, de preferência, para o tratamento de doenças ou condições dos pulmões sendo mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos em um indivíduo.

[0089] É também fornecido um método para prevenção, controle ou tratamento de doenças ou condições dos pulmões que sejam mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos em um indivíduo, de preferência, um método para o tratamento de doenças ou condições dos pulmões que sejam mediadas por ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos em um indivíduo, compreendendo a administração ao referido indivíduo de uma composição farmacêutica como aqui descrita, por exemplo, administrando ao referido indivíduo uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma composição farmacêutica como aqui descrita.

[0090] O termo “diluente, excipiente ou carreador farmaceuticamente aceitável”, como aqui usado, refere-se a um carreador ou excipiente ou diluente que é adequado para uso em humanos e/ou animais sem efeitos colaterais adversos indevidos (tais como, toxicidade, irritação e resposta alérgica) com uma relação benefício/risco razoável. Pode ser um solvente, agente de suspensão ou carreador farmaceuticamente aceitável, para dispensar os presentes compostos ao indivíduo.

[0091] A determinação de uma quantidade terapeuticamente eficaz está bem dentro da capacidade dos habilitados na técnica, especialmente à luz da descrição detalhada aqui fornecida. Em algumas modalidades, uma quantidade terapeuticamente eficaz do composto ativo ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode (i) reduzir a concentração de elastase ativa no escarro de um indivíduo, ii) pode inibir a atividade de elastase neutrofílica de humanos no escarro de um indivíduo. Em várias modalidades, a quantidade é suficiente para melhorar, paliar, diminuir e/ou atrasar um ou mais dos sintomas de doenças ou condições dos pulmões sendo mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos em um indivíduo.

[0092] A quantidade terapeuticamente eficaz pode variar dependendo do indivíduo, e da doença ou condição a ser tratada, do peso e da idade do indivíduo, da gravidade da doença ou condição, e da maneira de administração, que pode ser prontamente determinada por um habilitado comum na técnica.

[0093] Em uma modalidade, as doenças ou condições dos pulmões que são mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos são doenças pulmonares, tais, como deficiência de alfa-1 antitripsina (DAAT), fibrose cística (FC), bronquiectasia não fibrose cística (BFNC), ou doença pulmonar obstrutiva crônica (DPOC), ou infecções dos pulmões que causam doenças ou condições dos pulmões, sendo mediadas pela atividade de elastase neutrofílica de humanos.

[0094] Em uma modalidade preferida, as doenças ou condições dos pulmões que são mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos são doenças pulmonares, em que a doença pulmonar é a bronquiectasia não fibrose cística (BFNC) ou fibrose cística (FC).

[0095] Em uma modalidade mais preferida, as doenças ou condições dos pulmões que são mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos são doenças pulmonares, em que a doença pulmonar é fibrose cística (FC).

[0096] Em uma modalidade, o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, é administrado ao indivíduo como aerossol farmacêutico para administração pulmonar compreendendo uma fase líquida dispersada e uma fase gasosa contínua, em que a fase líquida dispersada

[0097] (a) compreende gotículas aquosas compreendendo o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-); ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; em que OctG é ácido (S)-2-aminodecanoico; DPro é D-prolina; (b) tem um diâmetro mediano de massa de cerca de 1,5 μ m a cerca de 5 μ m; e (c) tem uma distribuição de tamanho de gotícula com um desvio padrão geométrico de cerca de 1,2 a cerca de 1,7.

[0098] De um modo preferido, o aerossol é emitido a partir de um gerador de aerossol a uma taxa de pelo menos cerca de 0,1 mL de fase líquida dispersada por minuto.

[0099] De igual modo, de um modo preferido, o aerossol é emitido a partir de um gerador de aerossol a uma taxa de dispensação média de pelo menos cerca de 0,8 mg do composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-); ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; por minuto.

[00100] O aerossol é, de preferência, emitido a partir de um gerador de aerossol a uma taxa e a uma taxa de dispensação média, como descrito nas modalidades preferidas acima.

[00101] Em uma modalidade, a composição farmacêutica para uso em um método para prevenção, controle ou tratamento de doenças ou condições dos pulmões que são mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos em um indivíduo, é uma composição farmacêutica líquida para preparar um aerossol como descrito aqui, em que a composição farmacêutica líquida compreende o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em uma concentração dentro de uma faixa de cerca de 4 mg/mL a cerca de 100 mg/mL, de preferência, em uma faixa de cerca de 17 mg/mL a cerca de 95 mg/mL, ou de cerca de 35 mg/mL a cerca de 95 mg/mL, respectivamente, e mais preferencialmente, em uma faixa de cerca de 70 mg/mL a cerca de 95 mg/mL.

[00102] Em outro aspecto, a invenção fornece um aerossol farmacêutico para administração pulmonar compreendendo uma fase líquida dispersada e uma fase gasosa contínua, em que a fase líquida dispersa

[00103] (a) compreende gotículas aquosas compreendendo o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-); ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; em que OctG é ácido (S)-2-aminodecanoico; DPro é D-prolina; (b) tem um diâmetro mediano de massa de cerca de 1,5 μ m a cerca de 5 μ m; e (c) tem uma distribuição de tamanhos de gotículas tendo um desvio padrão geométrico de cerca de 1,2 a cerca de 1,7, para uso em um método para prevenção, controle ou tratamento de doenças ou condições dos pulmões mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos em um indivíduo.

[00104] O aerossol é, de preferência, emitido a partir de um gerador de aerossol a uma taxa e a uma taxa de dispensação média, como descrito nas modalidades preferidas acima.

[00105] Também é fornecido o uso do aerossol farmacêutico como aqui descrito para a fabricação de um medicamento para prevenção, controle ou tratamento de doenças ou condições dos pulmões sendo mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos em um indivíduo, de preferência, para a fabricação de um medicamento para o tratamento de doenças ou condições dos pulmões que são mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos em um indivíduo.

[00106] Também é fornecida o uso do aerossol farmacêutico como aqui descrito para prevenção, controle ou tratamento de doenças ou condições dos pulmões mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos em um indivíduo, de preferência, para o tratamento de doenças ou condições dos pulmões sendo mediados pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos em um indivíduo.

[00107] É também fornecido um método para prevenção, controle ou tratamento de doenças ou condições dos pulmões que sejam mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos em um indivíduo, de preferência, um método para o tratamento de doenças ou condições dos pulmões que sejam mediados pela ou resultante da atividade de elastase neutrofílica de humanos em um indivíduo, compreendendo a administração ao referido indivíduo do aerossol farmacêutico como aqui descrito, por exemplo, administrando ao referido indivíduo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um aerossol farmacêutico como aqui descrito.

[00108] Em uma modalidade, as doenças ou condições dos pulmões que são mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos são doenças pulmonares, tais como, deficiência de alfa-1 antitripsina (DAAT), fibrose cística (FC), bronquiectasia não fibrose cística (BFNC), ou doença pulmonar obstrutiva crônica (DPOC), ou infecções dos pulmões que causam doenças ou condições dos pulmões, sendo mediadas pela atividade de elastase neutrofílica de humanos.

[00109] Em uma modalidade preferida, as doenças ou condições dos pulmões que são mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos são doenças pulmonares, em que a doença pulmonar é a bronquiectasia não fibrose cística (BFNC) ou fibrose cística (FC).

[00110] Em uma modalidade mais preferida, as doenças ou estados dos pulmões que são mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos são doenças pulmonares, em que a doença pulmonar é fibrose cística (FC).

[00111] O contraíon do composto ativo da composição farmacêutica ou do aerossol farmacêutico para uso em um método para prevenção, controle ou tratamento de doenças ou condições dos pulmões que são mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos em um indivíduo é como descrito para o composto ativo acima e é, de preferência, acetato.

[00112] A composição farmacêutica ou o aerossol farmacêutico para uso em um método para prevenção, controle ou tratamento de doenças ou condições dos pulmões que são mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos em um indivíduo são geralmente administradas ao indivíduo por inalação oral ou intratraqueal, de preferência, por inalação oral.

[00113] O regime de dosagem do composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, compreendido pela composição farmacêutica ou pelo aerossol farmacêutico, nos métodos aqui fornecidos podem variar dependendo da indicação, via de administração e gravidade da condição, por exemplo. Dependendo da via de administração, uma dose adequada pode ser calculada de acordo com o peso corporal, a área de superfície corporal ou o tamanho do órgão. Fatores adicionais que podem ser levados em consideração incluem o tempo e a frequência de administração, combinações de fármacos, sensibilidades à reação e a tolerância/resposta à terapia. A quantidade, por exemplo, a quantidade terapeuticamente eficaz do composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser fornecido em uma dose única ou em doses múltiplas para atingir o ponto final de tratamento desejado.

[00114] A frequência da dosagem dependerá dos parâmetros farmacocinéticos do composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), ou de qualquer sal farmaceuticamente aceitável da mesma, administrados, da via de administração e da doença particular tratada. A dose e a frequência da dosagem podem também depender dos dados farmacocinéticos e farmacodinâmicos, bem como dados da toxicidade e da eficácia terapêutica. Por exemplo, a informação farmacocinética e farmacodinâmica sobre o composto ativo ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser coletada através de estudos pré-clínicos in vitro e in vivo, posteriormente confirmados em humanos durante o curso de ensaios clínicos. Assim, para o composto ativo ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, usado nos métodos aqui fornecidos, uma dose terapeuticamente eficaz pode ser estimada inicialmente a partir de ensaios bioquímicos e/ou baseados em células. Em seguida, a dosagem pode ser formulada em modelos animais para atingir uma faixa de concentração circulante desejável. À medida que os estudos com humanos são realizados, informações adicionais emergirão quanto aos níveis de dosagem apropriados e à duração do tratamento para várias doenças e condições.

[00115] A toxicidade e a eficácia terapêutica do composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser determinado por procedimentos farmacêuticos padrão em culturas de células ou animais experimentais, por exemplo, para determinar a LD50 (a dose letal para 50% da população) e a ED50 (a dose terapeuticamente eficaz em 50% da população). A razão de dose entre efeitos tóxicos e terapêuticos é o “índice terapêutico”, que tipicamente é expressado como a razão LD50/ED50. Os compostos que exibem grandes índices terapêuticos, isto é, a dose tóxica é substancialmente superior à dose eficaz, são preferidos. Os dados obtidos de tais ensaios de cultura de células e estudos adicionais em animais podem ser usados na formulação de uma faixa de dosagem para uso humano. As doses de tais compostos estão preferencialmente dentro de uma faixa de concentrações circulantes que incluem o ED50 com pouca ou nenhuma toxicidade.

[00116] Um regime de tratamento exemplificativo implica a administração uma vez por dia, duas vezes por dia, três vezes ao dia, todos os dias, todo segundo dia, todo terceiro dia, todo quarto dia, todo quinto dia, todos sexto dia, duas vezes por semana, uma vez por semana. O composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, é usualmente administrado em múltiplas ocasiões. Intervalos entre doses únicas podem ser, por exemplo, menos de um dia, um dia, dois dias, três dias, quatro dias, cinco dias, seis dias ou uma semana. A combinação da invenção pode ser dada como um tratamento contínuo ininterrupto. A combinação da invenção também pode ser dada em um regime em que o indivíduo recebe ciclos de tratamento (ciclos de administração) interrompidos por uma folga farmacológica ou período de não tratamento.

[00117] Em uma modalidade, o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, da composição farmacêutica ou do aerossol farmacêutico para uso em um método para prevenção, controle ou tratamento de doenças ou condições dos pulmões mediadas pela ou resultantes da elastase neutrofílica de humanos da atividade em um indivíduo é administrado ao indivíduo a uma dose entre cerca de 0,1 e cerca de 10000 mg/dia.

[00118] Em uma modalidade, o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, composição farmacêutica ou aerossol farmacêutico para uso em um método para prevenção, controle ou tratamento de doenças ou condições dos pulmões mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos em um indivíduo é administrado ao indivíduo a uma dose entre cerca de 0,001 e cerca de 100 mg/kg.

[00119] Em uma modalidade, o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, composição farmacêutica ou aerossol farmacêutico para uso em um método para prevenção, controle ou tratamento de doenças ou condições dos pulmões mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos em um indivíduo é administrada ao indivíduo a uma dose entre cerca de 5 e cerca de 1000 mg/dia.

[00120] Em uma modalidade, o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, composição farmacêutica ou aerossol farmacêutico para uso em um método para prevenção, controle ou tratamento de doenças ou condições dos pulmões mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos é administrado ao indivíduo a uma dose entre cerca de 20 e cerca de 960 mg/dia.

[00121] Em uma modalidade, o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, a composição farmacêutica ou o aerossol farmacêutico para uso em um método para prevenção, controle ou tratamento de doenças ou condições dos pulmões mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos em um indivíduo é administrado(a) ao indivíduo a uma dose entre cerca de 80 e cerca de 320 mg/dia.

[00122] Em uma modalidade, o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, a composição farmacêutica ou o aerossol farmacêutico para uso em um método para prevenção, controle ou tratamento de doenças ou condições dos pulmões mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos em um indivíduo é administrado ao indivíduo a uma dose de cerca de 20, cerca de 60, cerca de 120, cerca de 240, cerca de 480 ou cerca de 960 mg/dia.

[00123] Em uma modalidade, o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, a composição farmacêutica ou o aerossol farmacêutico para uso em um método para prevenção, controle ou tratamento de doenças ou condições dos pulmões mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos em um indivíduo é administrado(a) ao indivíduo a uma dose de cerca de 80, cerca de 160, ou cerca de 320 mg/dia.

[00124] Em outro aspecto, a invenção fornece um kit para a preparação e a dispensação de um aerossol farmacêutico para administração pulmonar, compreendendo uma fase líquida dispersada e uma fase gasosa contínua, em que a fase líquida dispersada

[00125] (a) compreende gotículas aquosas compreendendo o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-); ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; em que OctG é ácido (S)-2-aminodecanoico; DPro é D-prolina; (b) tem um diâmetro mediano de massa de cerca de 1,5 μ m a cerca de 5 μ m; e (c) tem uma distribuição de tamanho de gotícula com um desvio padrão geométrico de cerca de 1,2 a cerca de 1,7; e em que o kit compreende um nebulizador e uma composição líquida compreendendo uma concentração dentro de uma faixa de cerca de 4 mg/mL a cerca de 100 mg/mL do composto ativo; ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; ou compreende um nebulizador e uma composição farmacêutica sólida para preparar a composição líquida, em que a composição compreende o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-); ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; e em que a composição sólida é dissolúvel ou dispersável em um solvente líquido aquoso, e em que a composição líquida compreende uma concentração dentro de uma faixa de cerca de 4 mg/mL a cerca de 100 mg/mL do composto ativo; ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para uso em um método para prevenção, controle ou tratamento de doenças ou condições dos pulmões sendo mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos em um indivíduo.

[00126] Também é fornecido o uso do kit como aqui descrito para a fabricação de um medicamento para prevenção, controle ou tratamento de doenças ou condições dos pulmões mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos em um indivíduo, de preferência, para a fabricação de um medicamento para o tratamento de doenças ou condições dos pulmões que são mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos em um indivíduo.

[00127] Também é fornecido o uso do kit, como aqui descrito, para prevenção, controle ou tratamento de doenças ou condições dos pulmões mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos em um indivíduo, de preferência, para o tratamento de doenças ou condições dos pulmões sendo mediada pela ou resultante da atividade de elastase neutrofílica de humanos em um indivíduo.

[00128] É também fornecido um método para prevenção, controle ou tratamento de doenças ou condições dos pulmões que sejam mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos em um indivíduo, de preferência, um método para o tratamento de doenças ou condições dos pulmões que sejam mediadas pela ou resultante da atividade de elastase neutrofílica de humanos em um indivíduo, compreendendo a administração ao referido indivíduo do aerossol farmacêutico do kit como aqui descrito, por exemplo, administrando ao referido indivíduo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um aerossol farmacêutico do kit, como aqui descrito.

[00129] Em uma modalidade, o nebulizador do kit para uso em um método para prevenção, controle ou tratamento de doenças ou condições dos pulmões que são mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos em um indivíduo é selecionado do grupo consistindo em nebulizadores de jato, nebulizadores ultrassônicos, nebulizadores piezoeletrônicos, nebulizadores de colisão de jato, nebulizadores eletro- hidrodinâmicos, nebulizadores de força capilar, nebulizadores de membrana perfurada e nebulizadores de membrana vibratória perfurada.

[00130] Em uma modalidade, o nebulizador do kit para uso em um método para prevenção, controle ou tratamento de doenças ou condições dos pulmões que são mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos em um indivíduo é adaptado para ser capaz de aerossolizar a composição líquida a uma taxa de pelo menos cerca de 0,8 mg do composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-); ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; por minuto.

[00131] Em uma modalidade, pelo menos, cerca de 70% em peso da dose carregada do composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, compreendido pelo kit, é compreendido de gotículas tendo um diâmetro mediano de massa não maior que cerca de 5 μ m.

[00132] Em uma modalidade, o contraíon do composto ativo compreendido pelo kit é como descrito para o composto ativo acima e é, de preferência, acetato.

[00133] Em outro aspecto, a invenção fornece um kit compreendendo o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), ou qualquer

[00134] sal farmaceuticamente aceitável da mesma; em que OctG é ácido (S)-2-aminodecanoico; DPro é D-prolina; e uma bula em que a bula compreende instruções para o tratamento de um indivíduo para doenças ou condições dos pulmões sendo mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos usando o composto ativo.

[00135] Em uma modalidade, o kit compreende o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, como aerossol para administração pulmonar compreendendo uma fase líquida dispersada e uma fase gasosa contínua, em que a fase líquida dispersada

[00136] (a) compreende gotículas aquosas compreendendo o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-); ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável da mesma; (b) tem um diâmetro mediano de massa de cerca de 1,5 μ m a cerca de 5 μ m; e (c) tem uma distribuição de tamanho de gotícula tendo um desvio padrão geométrico de cerca de 1,2 a cerca de 1,7.

[00137] Em uma modalidade, pelo menos, cerca de 70% em peso da dose carregada do composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, compreendido pelo kit, é compreendido de gotículas tendo um diâmetro mediano de massa não maior que 5 μ m.

[00138] Em uma modalidade, o contraíon do composto ativo compreendido pelo kit é como descrito para o composto ativo acima e é, de preferência, acetato.

[00139] Os seguintes Exemplos ilustram a presente invenção, mas não devem ser interpretados como limitando o seu escopo de qualquer forma.

Exemplos Exemplo 1:

[00140] 248,18 g de sal acetato de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro- Pro-) com base em um conteúdo de peptídeo líquido de 93,03% (ver cálculo abaixo) e correspondendo a 230,88 g de peptídeo líquido, foram dissolvidos em solução aquosa de cloreto de sódio a 0,5% (p/p). A solução foi ajustada para pH 5,5 com 154 g de hidróxido de sódio a 1 M e finalmente solução aquosa de cloreto de sódio a 0,5% (p/p) foi adicionada até um peso total de 2957 g. Após filtração estéril através de filtros de tamanho de poros de 2 x 0,22 μ m, o produto foi acondicionado em Ph.Eur. Frascos de vidro tipo 1 com tampas de borracha de bromobutila revestidas com fluoropolímero e cápsulas de alumínio liso removíveis por rasgamento. A concentração da solução foi de 80 mg/mL.

[00141] Cálculo do conteúdo de peptídeo líquido da substância farmacológica (composto ativo): Conteúdo de peptídeo líquido [%] = [(100 -impureza[%]/100)x(100 - conteúdo de água [%]/100)x(100 - solvente residual [%]/100)x(100-TFA residual/100) x sal livre[%]/100] x 100 = [(100- 0,7/100)x(100-2,5/100)x(100-0,013/100) x 96,1/100] x 100 = 93,03%

Exemplo 2:

[00142] A formulação do Exemplo 2 foi preparada como descrito no Exemplo 1, exceto que foi usada uma solução aquosa a 0,6% (p/p) de cloreto de sódio.

Exemplo 3:

[00143] 4,2 g de sal acetato de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) corrigidos para 95% de pureza foram dissolvidos em 40 ml de solução aquosa de cloreto de sódio a 0,6% (p/p). A solução foi ajustada para pH 5,5 com hidróxido de sódio a 1M e finalmente solução de cloreto de sódio a 0,6% (p/p) foi adicionada a um volume total de 50 mL. Após filtração estéril sob condições assépticas (fluxo de ar laminar) usando um filtro de seringa de PES (Polieterssulfona) de 0,2 μ m, a formulação foi dividida em alíquotas em frascos estéreis de 5 mL com tampas de borracha estéreis revestidas com teflon e armazenadas refrigeradas a 5 ± 3°C e temperatura ambiente (25 ± 2°C), respectivamente. A concentração da solução foi de 80 mg/mL. Durante 12 semanas, a solução foi observada para estabilidade. Parâmetros físico- químicos (TABELA 1) e características de aerossol (TABELA 2) de um aerossol preparado e dispensado por um nebulizador eletrônico eFlow® 30 XL (Pari Pharma GmbH, Starnberg, Alemanha) foram determinados no início e no final do período de observação. A caracterização físico-química e a determinação das características de aerossóis (difração de laser com Malvern Mastersizer X, V2.15, [Malvern Instruments GmbH, Herrenberg, Alemanha]) foram realizadas pela Pari Pharma GmbH, BU Pharma, Grafeling, Alemanha, de acordo com métodos compatíveis com farmacopéia. Tabela 1: Propriedades físico-químicas da formulação do Exemplo 3

[00144] As propriedades físico-químicas da formulação anterior permanecem inalteradas durante 12 semanas a 5°C e 25°C, respectivamente.Tabela 2: Características de aerossóis da formulação do Exemplo 3, determinadas em triplicado

[00145] Durante o armazenamento de 12 semanas a 5°C e 25°C, respectivamente, não significativo (P= 95%, n=3) alterações no diâmetro mediano de massa, desvio padrão geométrico e fração respirável (<5 μ m) foram observadas. Apenas a taxa de saída total da amostra a 5°C foi ligeiramente diminuída.

Exemplo 4:

[00146] 1,05 g de sal acetato de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro- Pro-) corrigido para 95% de pureza foram dissolvidos em 0,9% (p/p) de solução aquosa de cloreto de sódio para obter um volume total de 10 mL. A concentração da solução foi 100 mg/mL. Os parâmetros físico-químicos (Tabela 3) e as características de aerossol (Tabela 4) de um aerossol preparado e dispensado por um nebulizador eletrônico eFlow® 30 XL foram determinados por Pari Pharma GmbH, BU Pharma, Grafeling, Alemanha, como explicado acima. Tabela 3: Propriedades físico-químicas da formulação do Exemplo 4

Tabela 4: Características do aerossol da formulação do Exemplo 4, determinado em _ triplicado

Exemplo 5:

[00147] 1,05 g de sal acetato de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro- Pro-) corrigido para 95% de pureza foram dissolvidos em 0,9% (p/p) de solução aquosa de cloreto de sódio para obter um volume total de 10 mL. Adicionou-se subsequentemente 0,02% (p/p) de polissorbato 80. A concentração da solução foi de 100 mg/mL. Os parâmetros físico-químicos (Tabela 5) e as características de aerossol (Tabela 6) de um aerossol preparado e dispensado por um nebulizador eletrônico eFlow® 30 XL foram determinados por Pari Pharma GmbH, BU Pharma, Grafeling, Alemanha, como explicado acima. Tabela 5: Propriedades físico-químicas da formulação do Exemplo 5

Tabela 6: Características do aerossol da formulação do Exemplo 5, determinado em triplicado

Exemplo 6a - e:

[00148] 5,4 g de sal de acetato de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro- Pro-) com base em um conteúdo de peptídeo líquido de 93,03% (ver o cálculo acima) e correspondendo a 5,023 g de peptídeo líquido, foram dissolvidos em 0,5% (w/w) solução aquosa de cloreto de sódio. A solução foi ajustada para pH 5,5 com hidróxido de sódio a 1 M e finalmente solução de cloreto de sódio a 0,5% (p/p) foi adicionada a um volume total de 71,8 mL. A concentração da solução foi de 70 mg/mL (Exemplo 6a).

[00149] Soluções diluídas com concentrações de 35 mg/ml (Exemplo 6b), 17,4 mg/ml (Exemplo 6c), 8,8 mg/ml (Exemplo 6d) e 4,3 mg/ml (Exemplo 6e) foram preparadas com placebo (0,5% [w/w] solução aquosa de cloreto de sódio) de acordo com a Tabela 7. Tabela 7: Esquema de preparação para soluções diluídas dos Exemplos 6b, 6c, 6d e 6e

[00150] a) O pH do placebo usado para a etapa de diluição foi de 4,76 e o pH da solução diluída correspondente não foi reajustado para pH 5,5.

Exemplo 6f:

[00151] A formulação do Exemplo 6f foi preparada de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1. A concentração da solução foi de 80 mg/mL.

Determinação das taxas de dispensação (média) e doses totais dispensadas Exemplos 6a, 6c, 6e e 6f

[00152] A determinação das taxas de dispensação e doses totais dispensadas foi realizada pela Intertek Melbourn Scientific (Melbourn, Reino Unido) em triplicado para formulações de 70 mg/mL (Exemplo 6a), 17,4 mg/mL (Exemplo 6c) e 4,3 mg/mL (Exemplo 6e) e em quintuplicado para a formulação de 80 mg/mL (Exemplo 6f) usando dispositivos Pari eFlow® XL 30 (Pari Pharma, Starnberg, Alemanha) e um método adequado, conforme a farmacopeia para a referida determinação de formulações compreendendo sal de acetato de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-).

[00153] Os resultados (valores médios) estão resumidos na Tabela 8. Tabela 8: Taxas de dispensação e doses totais dispensadas de Exemplos 6a, 6c, 6e e 6f

a) Eficiência média [%] é a média do total do composto ativo liberado (dose, real)/média da dose teórica dispensada (calculada usando massa dispensada (média) e concentração da solução, densidade assumida como 1 g/mL)

Determinação da distribuição aerodinâmica de tamanho de partículas (APSD)de Exemplos 6a, 6c, 6e e 6f

[00154] A determinação de APSD foi realizada pela Intertek Melbourn Scientific (Melbourn, Reino Unido) em triplicado para formulações de 70 mg/mL (Exemplo 6a), 17,4 mg/mL (Exemplo 6c) e 4,3 mg/mL (Exemplo 6e) e em quintuplicado para o Formulação de 80 mg/mL (Exemplo 6f) usando o Next Generation Impactor (NGI), dispositivos Pari eFlow® XL 30 (Pari Pharma, Starnberg, Alemanha) e um método adequado, compatível com farmacopeia para o APSD de formulações compreendendo sal de acetato de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-).

[00155] Os resultados (valores médios) estão resumidos na Tabela 9. Tabela 9: Determinação da distribuição aerodinâmica de tamanho de partículas (APSD) de Exemplos 6a, 6c, 6e e 6f

a) MOC: Coletor de Micro-orifício b) FPD: Dose de Partículas Finas c) FPF: Fração de Partículas Finas; FPF é a FDP expressada como uma porcentagem da dose dispensada d) GSD: Desvio Padrão Geométrico e) MMAD: Distribuição Aerodinâmica Mediana de Massa f) Após determinação da quantidade de fármaco (composto ativo) depositado nos diversos estágios de FPD; FPF, GSD e MMAD foram calculados usando o programa CITAS, versão 3.10.

[00156] A partir dos resultados acima, não foram observadas alterações significativas no desempenho das soluções de diferentes concentrações dentro da faixa apresentada, exceto o efeito da concentração reduzida nos totais de fármacos.

Estudo de toxicidade por inalação de 28 dias, em concordância com GLP em camundongos

[00157] Em um estudo de toxicidade por inalação de 28 dias em concordância com GLP em camundongos, realizado por Charles River Laboratories Preclinical Services, Tranent, Edimburgo, Reino Unido, a formulação descrita no Exemplo 2 e as diluições da mesma, bem como o carreador, foram administrados usando o dispositivo nebulizador Pari eFlow® XL. 30 (Pari Pharma, Starnberg, Alemanha) para 100 min por dia durante 28 dias, seguido por um período de recuperação de 2 semanas. Os camundongos foram tratados com carreador (0,6% [p/p] de solução aquosa de cloreto de sódio ajustada a pH 5,5 com HCl a 1M de grau farmacêutico) ou aerossóis contendo 0,15, 0,73 e 1,63 mg/L de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-), correspondendo ao grupo médio total, atingiram doses de fármaco de 0, 11, 53 e 119 mg/kg/dia, respectivamente. Dez animais foram usados para o estudo principal de toxicidade e cinco animais adicionais para a fase de recuperação. Os parâmetros avaliados incluíram sinais clínicos, pesos corporais, consumo alimentar, exame oftalmológico, patologia clínica, achados macroscópicos de necropsia, pesos do órgão e exames histopatológicos. Ganho de peso corporal ligeiramente reduzido foi observado em machos com 119 mg/kg/dia em comparação com o grupo de carreador de controle. Isso foi associado à redução no consumo de alimentos em animais tratados. Houve uma boa recuperação no ganho de peso corporal durante o período de recuperação entre os dias 28 e 42. Não houve sinais clínicos ou achados oftálmicos.

[00158] Não houve achados em patologia clínica (hematologia, coagulação, química clínica e investigações de urinálise) que foram considerados toxicologicamente relevantes. Não houve alterações relacionadas ao tratamento em pesos de órgãos ou achados macroscópicos após o tratamento com o fármaco. A histopatologia da laringe revelou metaplasia escamosa mínima focal sem atipias celulares de displasia em todos os grupos. Essas alterações foram resolvidas durante o período de recuperação e foram consideradas uma resposta não adversa e adaptativa à irritação leve. A histopatologia dos pulmões revelou acúmulo de macrófagos alveolares multifocais mínimos a moderados em todos os grupos. Esse leve aumento no acúmulo de macrófagos foi considerado uma resposta não específica à inalação de altas concentrações de material excedendo a capacidade de depuração do pulmão. Em conclusão, o Nível de Efeito Adverso Não Observado (NOAEL) foi de 119 mg/kg/dia, uma vez que as alterações no ganho de peso corporal e ingestão alimentar e os achados histopatológicos na laringe foram considerados não adversos.

Estudo de toxicidade por inalação de 28 dias, em concordância com GLP, em macacos

[00159] Em um estudo de toxicidade por inalação de 28 dias em macacos cynomolgus, realizado por Charles River Laboratories Preclinical Services, Tranent, Edimburgo, Reino Unido, a formulação descrita no Exemplo 2 e as diluições da mesma, bem como o carreador, foram administrados usando o dispositivo nebulizador Pari eFlow® XL 30 (Pari Pharma, Starnberg, Alemanha) com uma máscara de inalação oronasal por 60 min por dia durante 28 dias, seguido de um período de recuperação de 2 semanas. Os macacos foram tratados com carreador (solução aquosa de cloreto de sódio a 0,6% [p/p] ajustada a pH 5,5 com grau farmacêutico de HCl a 1M) ou sal de acetato aerossolizado de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) correspondente para a média estimada de doses de fármaco atingidas de 0, 11,2, 30,1 e 112 mg/kg/dia, respectivamente. No total, cinco machos e cinco fêmeas foram usados para cada dose do estudo de toxicidade, incluindo a recuperação. Os parâmetros avaliados incluíram sinais clínicos, pesos corporais, eletrocardiologia, exame oftalmológico, patologia clínica, parâmetros toxicocinéticos no plasma, achados de necropsia macroscópica, pesos dos órgãos e exames histopatológicos. Não houve alterações no peso corporal, sinais clínicos, achados oftalmológicos ou eletrocardiográficos ou alterações nos parâmetros urinários atribuíveis ao tratamento farmacológico. Na hematologia e patologia clínica, algumas pequenas alterações, toxicologicamente insignificantes foram observadas. Nenhum desses achados foi considerado importante do ponto de vista toxicológico, uma vez que a magnitude das respostas foi pequena, e a maioria dos achados foi confinada a um sexo e/ou mostrou evidência de regressão quando ambos os sexos foram afetados. Os achados macroscópicos incluíram aumento do peso dos pulmões em machos com 112 mg/kg/dia, e um animal com aparência com manchas dos pulmões e aumento do linfonodo traqueobrônquico. Os achados histopatológicos foram observados em todos os níveis de dose da fármaco, incluindo aumento do número de macrófagos alveolares, infiltrados perivasculares/peribronquiolares e depósitos eosinofílicos granulares no pulmão e hiperplasia linfóide nos linfonodos traqueobrônquicos, que apresentaram recuperação completa. Esses achados demonstraram reversibilidade completa durante a recuperação e foram considerados como sendo devidos à inalação de material que excedeu a capacidade normal de depuração pulmonar, particularmente em 112 mg/kg/dia. Em conclusão, NOAEL neste estudo foi de 112 mg/kg/dia, uma vez que as alterações discutidas acima foram todas consideradas não adversas.

Estudo primeiro no homem em indivíduos saudáveis para investigar a segurança e tolerabilidade de doses únicas oralmente inaladas de uma formulação de sal acetato de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro- Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-)

[00160] Neste estudo aleatório, de grupos paralelos, controlados por placebo, duplo cego, de escalonamento de dose (por nível de dose) de doses únicas inaladas em 48 indivíduos saudáveis em seis grupos de dose de oito indivíduos cada, conduzido por Inamed GmbH, Gauting, Alemanha, a inalação oral controlada da formulação descrita no Exemplo 1 e diluições da mesma, bem como o placebo (solução aquosa de cloreto de sódio a 0,5% [p/p] ajustada para pH 5,5 com grau farmacêutico de HCl a 1 M) ocorreram através do nebulizador Pari eFlow® XL 30 (Pari Pharma GmbH, Starnberg, Alemanha). Os níveis de dose e concentrações correspondentes de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys- Tyr-DPro-Pro-)(composto ativo) estão resumidos na Tabela 10. Tabela 10

[00161] O volume da solução nebulizadora de placebo correspondeu àquela do composto ativo a um nível de dose particular. A duração da inalação dependeu do volume total da solução nebulizadora e variou entre vários minutos e aproximadamente uma hora. Os eventos adversos foram tabulados e resumidos de acordo com a versão atual do Dicionário Médico para Atividades Reguladoras.

Resultados de segurança e tolerabilidade

[00162] Nenhuma morte, nenhum evento adverso (EA) grave e nenhum outro EA significativo ocorreu durante o estudo. No total, 27 AEs, 24 eventos adversos emergentes do tratamento (EAETs) foram registrados em 13 indivíduos (27,1%). Todos esses indivíduos estavam em composto ativo. Nenhuma EA foi relatada para indivíduos tendo solução de placebo inalada. Em relação ao número de EAs, bem como sua relação de intensidade e causal com a medicação do estudo, um número total maior de EAs e EAs relacionados foi relatado do grupo que inalou a dose mais alta de composto ativo (960 mg; grupo de dose 6) quando comparado a os outros níveis de dose. A maioria dos EAs e os sintomas relatados estavam relacionados ao sistema respiratório, como “tosse”, “irritação do trato respiratório”, produção de muco aumentada ou declínio transitório do volume expiratório forçado no primeiro segundo (VEF1). A maior ocorrência de sintomas respiratórios e EAs respiratórios, especialmente nos grupos que inalam doses mais altas do composto ativo, possivelmente pode ter sido relacionada à longa duração da inalação. Estes EAs podem não estar necessariamente relacionados com a formulação do Exemplo 1 e próprias diluições da mesma, mas podem possivelmente ser EAs dos procedimentos. Com relação à tolerabilidade local, houve três eventos adversos relacionados à inalação (“tosse”). A tolerabilidade total foi julgada como ‘muito boa’ ou ‘boa’ pela maioria dos indivíduos (97,9%). Ao longo do estudo, a maioria dos valores laboratoriais clínicos permaneceu dentro das respectivas faixas de referência. A maioria dos resultados individuais do exame físico, das medições dos sinais vitais, dos registros do eletrocardiograma (ECG) e dos resultados da função pulmonar estavam dentro das faixas de referência clínica comumente aceitas. Nenhuma influência dependente do tempo do composto ativo nos parâmetros de segurança medidos tornou-se óbvia. Não houve diferença relevante entre os diferentes grupos de dose.

[00163] Os resultados apresentados acima do estudo Primeiro em Homem mostram que a formulação do Exemplo 1 e as diluições da mesma são altamente adequadas para aerossolização em uma larga faixa de concentrações e aplicáveis para administração por inalação em humanos mesmo em altas concentrações (80 mg/mL).

Efeito da administração por inalação de sal acetato de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) em um modelo IN VIVO de ativação de neutrófilos no camundongo

[00164] O objetivo deste estudo (conduzido por Envigo CRS Limited, Alconbury, Huntingdon, Reino Unido) foi avaliar os efeitos do sal de acetato de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-)administrado por inalação em um modelo LPS/fMLP de ativação de neutrófilos no camundongo.

Preparação das formulações

[00165] A formulação para o grupo de animais de teste 1 (carreador) foi solução salina a 0,5% (p/v) ajustada para um pH de 5,5 com HC1 a 1 M e filtrada através de um filtro de 0,2 μ m.

[00166] As formulações para grupos de animais de teste 2 - 4 foram preparadas como a seguir: A quantidade apropriada de sal acetato de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) foi pesada e a quantidade apropriada de solução salina a 0,5% (p/v), pH 5,5, foi adicionada para produzir uma concentração formulada de 83,28 mg/mL. O pH da solução final foi ajustado para 5,5 com a NaOH 1M.

[00167] Uma quantidade apropriada de 83,28 mg/mL de sal acetato de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) foi adicionada a uma quantidade apropriada de carreador para produzir uma formulação de 15,62 mg/mL.

[00168] Finalmente, uma quantidade apropriada de 15,62 mg/mL de sal acetato de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) adicionada a uma quantidade apropriada de carreador para produzir uma formulação de 5,21 mg/mL. As três soluções de formulação (83,28 mg/mL, 15,62 mg/mL, 5,21 mg/mL) foram então filtradas através de um filtro de 0,2 μ m.

[00169] As formulações foram preparadas 1 dia antes da dosagem e armazenadas a 2-8°C no escuro até ao dia do uso quando foram retiradas do frigorífico e mantidas em temperatura ambiente (< 25°C) e agitadas suavemente por pelo menos 1 h antes da dosagem.

[00170] A Tabela 11 resume as concentrações das formulações preparadas para os grupos de animais de teste 1 - 4, levando em consideração uma razão de sal acetato/base livre de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) sendo 1,041. Assim, estas formulações correspondem à formulação descrita no Exemplo 1 e diluições das mesmas. Tabela 11

Procedimento para coorte de tratamento por inalação

[00171] Os animais foram desafiados com LPS em aerossol (lipopolissacarídeo, 1 mg/mL) durante 30 min. Aproximadamente 3 h após o término do desafio com LPS, os animais foram administrados carreador ou formulações como descrito acima do sal acetato de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) por inalação (Grupos 1-4) ao longo de 30 min período usando um nebulizador eletrônico eFlow® 30 XL (Pari Pharma GmbH, Starnberg, Alemanha; focinho apenas exposição). Todos os animais foram dosados com fMLP (N- formil-Met-Leu-Phe, 5 mg/kg) aproximadamente 4 h após a conclusão do desafio com LPS por via intratraqueal sob anestesia gasosa transitória a um volume de 1 mL/kg. Aproximadamente 2 h após a administração de fMLP, os animais foram terminados e uma lavagem broncoalveolar (BAL) foi realizado para avaliar o infiltrado de células inflamatórias e a atividade de elastase neutrofílica. O procedimento para a coorte de tratamento de inalação está resumido na Tabela 12. Tabela 12

Nível de exposição (μg/L) baseado em um camundongo de 250 g. LPS em solução salina a 0,9% (p/v) fMLP em 1% de DMSO em solução salina Camundongo macho, Crl:CD (SD), Charles River Laboratories, Wilmington, Massachusetts, EUA

[00172] Todos os animais foram terminados à lavagem broncoalveolar aproximadamente 6 h após a exposição a LPS.

[00173] Dose dispensada (μg/kg) = C (μg/L) x RMV (L/min) x D (min) BW (kg) em que C = Concentração no ar inalado RMV = volume respiratório em minuto, calculado a partir da fórmula: RMV (L/min) = 0,608xBW (kg)0,852 (Ref. 1) D = duração da exposição em min BW = peso corporal Ref. 1: D.J. Alexander, C.J. Collins, D.W. Coombs et al., Recomendação do grupo de trabalho da Associação de Toxicologistas de Inalação (AIT) para cálculo e expressão padrão de dose dispensada em estudos de toxicologia por inalação de aerossóis não clínicos com produtos farmacêuticos; Inhal. Tox., 2008, 20, 1179-1189.

[00174] As doses de fMLP e os pontos temporais foram escolhidos com base nos dados publicados (ver, por exemplo, S. Yasui, A. Nagai, K. Aoshiba et al., Eur. Respir. J., 1995, 8, 1293; T. Yang, J. Zhang, K. Sun et al., Inflamm. Res. 2012, 61, 563; R. Corteling, D. Wyss, A. Trifilieff, BMC Pharmacology, 2002, 2, 1) e experiência na Envigo CRS Limited. A seleção da dose do fármaco foi baseada em um estudo anterior por via intratraqueal na Envigo CRS Limited. Neste estudo anterior, doses intratraqueais de 0,03 a 3 mg/kg do fármaco mostraram-se eficazes neste modelo animal.

[00175] Não foram observados sinais clínicos relacionados com itens de teste entre o período de dosagem e o término do estudo. Dois animais do grupo 1 (carreador) morreram logo após a administração de fMLP devido à anestesia profunda.

Lavagem broncoalveolar (LBA)

[00176] Após a confirmação da morte, a traqueia de um animal foi isolada, a cânula traqueal foi inserida e presa no lugar e a via aérea foi lavada com 3 mL de solução salina tamponada com fosfato (PBS). A lavagem foi repetida duas vezes e no total foram utilizados três lotes de 3 mL de PBS. As primeiras células contendo alíquotas de lavagem foram colocadas em um tubo de centrífuga de 15 ml em gelo úmido (Tubo A). O fluido BAL reunido a partir das duas segundas lavagens foi colocado em um segundo tubo (Tubo B). Os tubos A e B foram colocados em gelo úmido até serem centrifugados. A centrifugação foi realizada a 800 x g durante 10 min a ca. 4°C e o sobrenadante foi colhido. Até a análise da elastase neutrofílica, o sobrenadante era armazenado em ca. de 80°C.

Atividade de elastase neutrofílica

[00177] As duas alíquotas do sobrenadante de BAL foram analisadas quanto atividade de elastase neutrofílica como a seguir: 120 μ L de sobrenadante de BAL da alíquota 1 foram transferidos para uma placa de 96 cavidades (Corning # 3650). Em paralelo, foi preparada uma faixa de diluição de 1,6 a 0,025 mU/cavidade de uma elastase neutrofílica de humanos comercial (hNE, Serva#20927.01). 120 μL de cada diluição de hNE foram transferidos em duplicata para a placa de 96 cavidades. Para iniciar a reação enzimática, foram adicionados 80 μL de um substrato peptídico fluorescente (MeOSuc-Ala-Ala-Pro-Val-AMC) a uma concentração final de 500 μM a cada cavidade e a placa foi imediatamente colocada no leitor fluorescente victor2v pré-aquecido a 37°C. A fluorescência (Xexc. 485 nm, Xem. 535 nm) foi registada durante 2 h a 37°C. A velocidade inicial de enzima (RFU/min) de todas as amostras foi calculada e convertida em mU/mL de equivalente de hNE, usando a equação de regressão linear obtida do gráfico (RFU/min vs mU/mL de diluição de hNE) da faixa padrão de elastase neutrofílica de humanos. O ensaio foi repetido usando o sobrenadante de LBA a partir da alíquota 2. Os dados de elastase neutrofílica reportados uma média da atividade de elastase neutrofílica de ambas as alíquotas. A atividade de elastase neutrofílica no líquido de LBA é apresentada na Tabela 13 e nas Figuras 1 e 2.Tabela 13

Valores arredondados, a precisão pode não ser exibida. Os dados são expressados como média ± s.e.m. ****p<0,0001 quando comparado com o grupo tratado com carreador (inalação)/fMLP. O fármaco ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) administrado em doses de 0,3, 3 e 30 mg/kg por via de inalação 3 h após o desafio com LPS e 1 h antes de desafio com fMLP inibiu significativamente a atividade de elastase neutrofílica em fluido de BAL colhido 6 h após desafio com LPS.

Estudo de fase-Ib para investigar a segurança, a tolerabilidade e a farmacocinética de doses únicas inaladas oralmente de sal acetato de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) em pacientes com fibrose cística

[00178] Neste estudo randomizado, duplo-cego, controlado por placebo, em grupos paralelos de escalamento de dose (por nível de dose), a segurança e a tolerabilidade de doses crescentes únicas (SAD) de sal acetato de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-)administrado por inalação em pacientes com fibrose cística (FC) foram investigados. Adicionalmente, foi avaliada a farmacocinética do fármaco após uma única dose crescente no plasma e no escarro, bem como o seu efeito farmacodinâmico na atividade de elastase neutrofílica no escarro.

Tratamento

[00179] Neste estudo, conduzido por Inamed GmbH, Gauting, Alemanha, 24 indivíduos com fibrose cística, que preencheram todos os critérios de inclusão e nos quais nenhum critério de exclusão estava presente, foram incluídos e receberam tratamento randomizado. Eles foram agrupados em grupos de 3 doses de 8 indivíduos cada. 6 indivíduos receberam a formulação descrita no Exemplo 1 e as suas diluições e 2 indivíduos receberam placebo (solução aquosa de cloreto de sódio a 0,5% [p/p] ajustada a pH 5,5 com grau farmacêutico de HCl a 1 M). A inalação oral da formulação acima, bem como o placebo, ocorreu através do dispositivo nebulizador Pari eFlow® XL 30 (Pari Pharma GmbH, Starnberg, Alemanha). Os níveis de dose e concentrações correspondentes de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) (composto ativo) estão resumidos na Tabela 14.Tabela 14

[00180] O volume da solução nebulizadora de placebo correspondeu àquela do composto ativo a um nível de dose particular. A duração da inalação foi estimada entre 7 e 20 min. Os eventos adversos foram tabulados e resumidos de acordo com a versão atual do Dicionário Médico para Atividades Reguladoras.

Resultados de segurança e tolerabilidade

[00181] Nenhuma morte, nenhum evento adverso grave (EA) e nenhum outro EA significativo ocorreu durante o estudo. Não houve EAs locais relacionados à inalação. Nenhum dos 24 indivíduos terminou o estudo cedo por causa da EA.

[00182] No total, 6 AEs, todos eventos adversos emergentes do tratamento (EAETs), foram registrados em 6 indivíduos. Os termos mais frequentemente relatados foram “tontura” e “dor de cabeça” com dois eventos cada. Todos os 6 EAETs foram considerados como não relacionados ao composto ativo. Nenhum dos EAETs foi classificado como grave. A duração do EA foi transitória. Todos os 6 AEs foram resolvidos sem sequelas. Em relação ao número de EAs, bem como a sua intensidade e relação causal com a medicação do estudo, não se observou nenhuma diferença óbvia entre os níveis de dose. Ao longo do estudo, a maioria dos valores laboratoriais clínicos, bem como os resultados do ECG e dos sinais vitais, permaneceram dentro dos respectivos intervalos de referência. Quaisquer achados divergentes não foram clinicamente relevantes e estão bem de acordo com a extensão dos desvios usualmente observados em estudos com pacientes com FC. A maioria dos resultados dos testes de função pulmonar foram os esperados dos pacientes com FC.

Avaliações Farmacocinéticas

[00183] Os seguintes parâmetros farmacocinéticos foram avaliados para ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) (composto ativo): Plasma: AUCo ,. AUCo , /D. Cmax, Cmax/D do composto ativo no plasma como variáveis primárias e tmx, ti/2, Xz, AUCo-túitimo do composto ativo no plasma como variáveis secundárias. Escarro: Concentrações do composto ativo no escarro foram calculadas e Cmax e AUC0-túltimo foram determinados.

Amostragem e processamento de amostras para amostras de plasma

[00184] Amostras de sangue para a determinação das concentrações plasmáticas do composto ativo foram tomadas nos seguintes pontos temporais: No dia i na pré-dose, i0 min e 0,5 h, i h, 2 h, 3 h, 4 h, 6 h, 8 h, i2 h, i5 h e no dia 2 às 24 h após a dose (após início da inalação).

[00185] As amostras foram coletadas em tubos de amostragem de plasma K3-EDTA fechados(Monovette® Sarstedt, Alemanha). O intervalo de tempo aceito para procedimentos de manipulação da amostra para cada amostra individual do estudo, ou seja, o tempo entre a coleta da amostra e a centrifugação da amostra não devia exceder 60 min, e o tempo entre o término da centrifugação e o congelamento da amostra também não devia exceder 60 min.

[00186] As amostras foram centrifugadas a aproximadamente 4°C (± 2°C) a 2200 x g por i5 min. O sobrenadante de plasma resultante foi então transferido para 2 tubos de polipropileno (1a alíquota de pelo menos 1 mL e reserva) e congelado na posição vertical abaixo de 20°C. As amostras foram armazenadas em um congelador sob controle contínuo de temperatura abaixo de 20° C do dia após a coleta da amostra até o transporte (gelo seco com um dispositivo de registro térmico) para o local bioanalítico (Pharmacelsus GmbH, Saarbrücken, Alemanha).

Amostragem e processamento de amostras para amostras de escarro

[00187] Amostras espontâneas de escarro para avaliações de PK foram coletadas durante os seguintes intervalos/períodos temporais: No dia 1, logo que possível após a chegada do indivíduo ao local de estudo (PK em branco), no dia 1 no período de tempo entre 1 he 3 h após o início da inalação e na manhã do dia 2, a aproximadamente 24 h após o início da inalação. Além disso, qualquer escarro espontâneo de escarro entre 0-1 h após o início da inalação foi coletada.

[00188] Amostras de escarro espontâneas foram coletadas em placas de Petri de poliestireno e colocadas no gelo imediatamente. Todas as etapas de processamento tiveram que ser realizadas com reagentes frios e no gelo sempre que possível. Os tampões foram separados da saliva, mas o último não foi descartado. Se uma amostra de escarro foi tomada para a atividade de PK e de elastase neutrofílica na análise do escarro, o tampão foi dividido em 2 partes aproximadamente iguais. Uma parte foi processada para análise de PK e a outra para avaliação da atividade de elastase neutrofílica no escarro.

[00189] Para processamento de PK, o tampão resultante foi dividido em aproximadamente 2 partes iguais. Estes foram transferidos para 2 tubos de transferência para avaliação PK de (SP1) e Reserva de PK (SP3). Até 1,0 mL de saliva foi transferido para outro tubo de transferência para avaliação PK (SP2). A saliva restante na placa de Petri foi descartada. O peso das amostras de escarro (SP1 + SP3) foi determinado e todas as amostras foram imediatamente colocadas em gelo seco para congelamento. Após o congelamento, as amostras foram armazenadas em posição vertical a -80 ± 10°C. As amostras de escarro e saliva para avaliação PK (SP1 + SP2) foram enviadas para a Pharmacelsus GmbH em gelo seco. As amostras de escarro de reserva (SP3) foram armazenadas em -80 ± 10°C na Inamed GmbH, Gauting, Alemanha.

Métodos Bioanalíticos

[00190] Para a análise do composto ativo no plasma, foi usado um método de espectrometria de massa em tandem (LC-MS/MS) e cromatografia líquida de alta sensibilidade e validado.

[00191] Para a análise do composto ativo na escarro, foi usado um método de espectrometria de massa em tandem e cromatografia líquida de alta sensibilidade validado ou, quando não disponível, ‘adequado à finalidade’ (LC-MS/MS).

[00192] Os procedimentos bioanalíticos foram realizados de acordo com as normas vigentes de Boas Práticas de Laboratório (GLP), e os requisitos de validação da EMA e da US Food and Drug Administration (FDA) para ensaios bioanalíticos e foram descritos nos POPs aplicáveis, incluindo regulamentos para análises de rotina e regulamentos gerais para análise.

Parâmetros farmacocinéticos derivados

[00193] Os parâmetros farmacocinéticos mencionados acima foram calculados com base nos tempos reais de amostragem de sangue e escarro usando procedimentos não compartimentais.

Curvas de tempo-concentração plasmática e parâmetros farmacocinéticos derivados de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-)

[00194] As curvas médias de concentração plasmática-tempo do composto ativo são mostradas na Figura 3.

[00195] As curvas do composto ativo mostram perfis típicos e semelhantes aos resultados de indivíduos saudáveis inalando doses comparáveis de composto ativo, as suas primeiras concentrações no plasma foram detectadas precocemente em pacientes com FC.

[00196] As concentrações plasmáticas do composto ativo aumentaram para atingir os respectivos picos (tmax, média) em 1,3 h no grupo de dose 1, em 1,5 h no grupo de dose 2 e em 2,3 h no grupo de dose 3. Posteriormente, as concentrações plasmáticas do composto ativo diminuíram com uma semivida terminal média de 4,1 h no grupo de dose 1, 3,5 h no grupo de dose 2 e 3,8 h no grupo de dose 3. 24 horas após a inalação, o composto ativo ainda pode ser detectado em indivíduos de todos os grupos de dose, com concentrações plasmáticas médias de 2,8 ng/mL no grupo de dose 1, 4,4 ng/mL no grupo de dose 2 e 15,2 ng/mL no grupo de dose 3.

Concentração de escarro de ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-)

[00197] As concentrações médias de escarro do composto ativo são mostradas na Figura 4.

[00198] Já no primeiro momento de amostragem do escarro após a inalação (intervalo de amostragem de 0-1h), o composto ativo foi detectado na maioria dos indivíduos em todos os grupos de dose. A concentração do composto ativo na escarro aumentou com a dose, com os valores de concentração médios mais elevados (DP) de 0,6 (0,79) g/L (grupo de dose 1, intervalo de amostragem de 1 a 3 horas), 1,1 (1,23) g/L 2, 0-1h intervalo de amostragem) e 1,8 (1,81) g/L (grupo de dose 3, intervalo de amostragem de 01h). O composto ativo ainda pode ser detectado no escarro em indivíduos de todos os grupos de dose, 24 horas após a inalação.

Avaliações farmacodinâmicas

[00199] O efeito farmacodinâmico de doses únicas crescentes de composto ativo foi investigado por avaliação da atividade de elastase neutrofílica (NE) no escarro usando o ensaio de TERF (transferência de energia de ressonância por fluorescência) após aliquotação e congelamento de PBS.

Amostragem e processamento de amostras para amostras de escarro

[00200] Amostras espontâneas de escarro para avaliação da atividade de elastase neutrofílica (NE) foram coletadas durante os seguintes intervalos/períodos de tempo: No dia da triagem, se possível, para avaliação inicial da atividade da NE, no Dia 1, o mais cedo possível após a chegada do indivíduo no sítio do estudo para avaliação inicial da atividade da NE, no Dia 1 no período de tempo entre 1 h e 3 h após o início da inalação, e na manhã do dia 2, a aprox. 24 h após o início da inalação.

[00201] Amostras de escarro espontâneas foram coletadas em placas de Petri de poliestireno e colocadas no gelo imediatamente. Todas as etapas de processamento tiveram que ser realizadas com reagentes frios e no gelo sempre que possível. Os tampões foram separados da saliva, mas o último não foi descartado. Se uma amostra de escarro foi tomada para a atividade de PK e EN na análise do escarro, o tampão foi dividido em 2 partes aproximadamente iguais. Uma parte foi processada para avaliação da atividade do EN no escarro e a outra para análise da PK, conforme descrito acima.

[00202] Para avaliação da atividade do EN no escarro, a princípio, determinou-se o peso da amostra de escarro e adicionou-se 8 mL de solução salina tamponada com fosfato (PBS) fria por grama de escarro purificada. A amostra foi submetida a vórtice durante 30 s em temperatura ambiente (1524°C). Em seguida, a fração solúvel foi separada do sedimento de escarro por centrifugação (10 min a 1000 x g e 4°C). O sobrenadante foi transferido para um tubo novo.

[00203] As partículas insolúveis remanescentes foram separadas por uma segunda etapa de centrifugação a 3500 x g durante 15 min a 4°C. Se o sobrenadante não fosse dividido em alíquotas imediatamente, o PBS/sobrenadante de escarro foi transferido para um tubo novo.

[00204] Dez alíquotas de 50 μL de PBS/escarro foram transferidas para tubos de transferência para avaliação. Além disso, 4 alíquotas de 50 μ L de PBS/escarro foram transferidas para tubos de transferência como reserva. No caso de haver uma sobra, o volume restante foi imediatamente transferido para um tubo de transferência para avaliação. Qualquer sobra maior que 2,0 mL foi descartada.

[00205] As amostras foram congeladas imediatamente e armazenadas em posição vertical a -80 ± 10°C. As amostras de PBS/escarro foram enviadas para a MLM Medical Labs GmbH, Monchengladbach, Alemanha, em gelo seco. As amostras de reserva de PBS/escarro foram armazenadas a -80 ± 10°C na Inamed GmbH, Gauting, Alemanha.

Métodos Bioanalíticos

[00206] A atividade de EN no escarro foi avaliada usando um ensaio de elastase FRET adaptado de um ensaio descrito em Nature Protocols, 2008, 3, 991 (B. Korkmaz, S. Attucci, M. A. Juliano et al.) e validado por MLM Medical Labs GmbH, Monchengladbach, Alemanha.

[00207] O ensaio baseia-se na reação da elastase neutrofílica de humanos com o substrato 2Abz-Ala-Pro-Glu-Glu-Ile-Met-Arg-Arg-Gln- Tyr(3NO2)-OH (GeneCust Europe SA, Ellange, Luxemburgo, #P160301- SY452824). Ao adicionar a solução de substrato, a reação enzimática é iniciada e a elastase presente nas amostras reage com o substrato adicionado. O produto da reação é detectado através de medição de fluorescência e a velocidade inicial da reação é determinada. A concentração de elastase ativa nas amostras desconhecidas é calculada de volta usando a curva de calibração calculada a partir dos padrões.

[00208] Foi preparada uma solução de reserva de elastase de referência (elastase neutrofílica de humanos [ELA2], Holtzel Diagnostika, Koln, Alemanha, #PN31255) com atividade enzimática conhecida. A concentração exata da enzima elastase foi determinada por titulação contra uma solução de alfa 1-antitripsina (Athens Research and Technology, Atenas, EUA, #16-16- 011609), com uma concentração definida. A solução de reserva de referência de elastase ativa foi ajustada por adição de PBS a uma concentração de 3000 nM e as alíquotas foram armazenadas a -80°C.

[00209] O ensaio FRET foi realizado em placas de microtitulação de 96 cavidades brancas em volume total de 100 μl por cavidade. Foram preparadas diluições de escarro em PBS de 1:5, 1:50 e 1:100 em tampão de reação de elastase (HEPES de 50 mM, pH 7,4, NaCl a 750 mM, 0,05% [v/v] NP-40), 5 μL por cavidade e 90 μL de tampão de reação de elastase foram adicionados. Foi preparada uma solução de reserva de substrato a 5 mM de 2Abz-Ala-Pro-Glu-Glu-Ile-Met-Arg-Arg-Gln-Tyr(3NO2)-OH em 30% (v/v) de N,N-dimetilformamida/água e adicionalmente diluída a 400 nM pela adição de tampão de reação de elastase. 5 μl da solução de substrato a 400 nM foram adicionados às cavidades e a velocidade de reação Vi foi determinada por FRET em Exc.: 320 nm-Emiss: 420 nm. A concentração de elastase ativa em escarro em PBS foi determinada por comparação das velocidades de reação das diluições definidas a partir da solução de reserva de referência de elastase ativa.

[00210] A faixa de medição analítica deste método foi de 115,002880,00 ng/mL. Os coeficientes de variação intra e inter-ensaio foram <17,14% e <8,96%, respectivamente.

Elastase neutrofílica ativa no escarro

[00211] As concentrações médias de EN ativa são mostradas na Figura 5.

[00212] Os resultados da concentração de EN ativa foram altamente variáveis ao longo do tempo. Quando medidas pelo ensaio FRET, as concentrações médias (DP) de EN ativa no escarro no Dia 1 (pré-dose) foram 18823,6 (19758,72) ng/mL para o nível de dose 1, 9548,7 (6222,55) ng/mL para o nível de dose 2 e 10480,7 (10528,00) ng/mL para o nível de dose 3. A concentração média de EN (SD) ativa para indivíduos placebo na pré-dose foi de 46711,8 (48456,86) ng/mL.

[00213] A concentração de EN ativa no escarro diminuiu fortemente nos indivíduos após a inalação do composto ativo. Os valores da concentração média (DP) em 1-3 h após a inalação foram de 612,5 (1218,62) ng/mL para o nível de dose 1 e 115,0 (0,00) ng/mL para os níveis de dose 2 e 3. O valor médio (DP) dos indivíduos inalando placebo em 1-3 h após a inalação foi de 34370,0 (19988,11) ng/mL.

[00214] As concentrações ativas médias (DP) de EN no escarro em 24 h após a inalação foram 1467,7 (2154,43) ng/mL para o nível de dose 1, 16849,4 (23518,56) ng/mL para o nível de dose 2 e 7712,5 (11394,04) ng/mL para o nível de dose 3. A média (DP) da concentração ativa de EN em 24 h para indivíduos tratados com placebo foi de 19338,8 (9062,32) ng/mL.

Conclusões farmacodinâmicas

[00215] A concentração média de EN ativa no escarro de pacientes com FC diminuiu fortemente após a inalação de dose única de composto ativo administrada por uma formulação descrita no Exemplo 1. Na faixa de doses examinada, a extensão desta resposta pareceu ser independente da dose administrada. Embora difícil de julgar devido à alta variabilidade dos dados, a concentração média de EN ativa no escarro aparentemente retornou aos níveis basais em 24 h após a inalação do composto ativo. A inalação de solução placebo não teve efeito distinto sobre a concentração média de EN ativa no escarro. Estes resultados clínicos mostram que o ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-) administrado por uma formulação descrita no Exemplo 1 inibe a EN no escarro de pacientes com FC.

Claims

1. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-); ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; em que OctG é ácido (S)-2-aminodecanoico; DPro é D-prolina; cloreto de sódio e opcionalmente um ou mais diluentes, excipientes ou carreadores farmaceuticamente aceitáveis; para uso em um método para prevenção, controle ou tratamento de doenças ou patologias dos pulmões que sejam mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos em um indivíduo.

2. Composição farmacêutica para uso, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que as doenças ou condições dos pulmões mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos são doenças pulmonares, tais como, deficiência de alfa-1 antitripsina (DAAT), fibrose cística (FC), bronquiectasia fibrose não cística (BFNC), ou doença pulmonar obstrutiva crônica (DPOC), ou infecções dos pulmões que causam doenças ou condições dos pulmões, sendo mediada pela atividade de elastase neutrofílica de humanos.

3. Composição farmacêutica para uso, de acordo com a reivindicação 2, caracterizada pelo fato de que a doença pulmonar é bronquiectasia não fibrose cística (BNFC) ou fibrose cística (FC).

4. Composição farmacêutica para uso, de acordo com a reivindicação 2, caracterizada pelo fato de que a doença pulmonar é fibrose cística (FC).

5. Composição farmacêutica para uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 4, caracterizada pelo fato de que o contraíon do composto ativo é acetato.

6. Composição farmacêutica para uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 5, caracterizada pelo fato de que o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-); ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; é administrado ao indivíduo como aerossol farmacêutico para administração pulmonar compreendendo uma fase líquida dispersada e uma fase gasosa contínua, em que a fase líquida dispersada (a) compreende gotículas aquosas compreendendo o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-); ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; (b) tem um diâmetro mediano de massa de cerca de 1,5 μm a cerca de 5 μm; e (c) tem uma distribuição de tamanho de gotícula tendo um desvio padrão geométrico de cerca de 1,2 a cerca de 1,7.

7. Composição farmacêutica para uso, de acordo com a reivindicação 6, caracterizada pelo fato de que o aerossol é emitido a partir de um gerador de aerossol a uma taxa de pelo menos cerca de 0,1 mL de fase líquida dispersada por minuto.

8. Composição farmacêutica para uso, de acordo com a reivindicação 6, caracterizada pelo fato de que o aerossol é emitido a partir de um gerador de aerossol a uma taxa de dispensação média de pelo menos cerca de 0,8 mg do composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-); ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; por minuto.

9. Composição farmacêutica para uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 8, caracterizada pelo fato de que a composição farmacêutica é uma composição farmacêutica líquida para a preparação de um aerossol compreendendo o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-); ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; em uma concentração dentro de uma faixa de cerca de 4 mg/mL a cerca de 100 mg/mL.

10. Composição farmacêutica para uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 9, caracterizada pelo fato de que o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-); ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; é administrado ao indivíduo em uma dose entre cerca de 0,1 e cerca de 10.000 mg/dia.

11. Composição farmacêutica para uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 9, caracterizada pelo fato de que o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-); ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; é administrado ao indivíduo em uma dose entre cerca de 0,001 e cerca de 100 mg/kg.

12. Composição farmacêutica para uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 9, caracterizada pelo fato de que o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-); ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; é administrado ao indivíduo a uma dose entre cerca de 5 e cerca de 1000 mg/dia.

13. Composição farmacêutica para uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 9, caracterizada pelo fato de que o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-); ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; é administrado ao indivíduo a uma dose de cerca de 20, cerca de 60, cerca de 120, cerca de 240, cerca de 480 ou cerca de 960 mg/dia.

14. Composição farmacêutica para uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 9, caracterizada pelo fato de que o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-); ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; é administrado ao indivíduo a uma dose entre cerca de 80 e cerca de 320 mg/dia.

15. Composição farmacêutica para uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 9, caracterizada pelo fato de que o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-); ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; é administrado ao indivíduo a uma dose de cerca de 80, cerca de 160 ou cerca de 320 mg/dia.

16. Composição farmacêutica para uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 15, caracterizada pelo fato de que o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-); ou qualquer seu sal farmaceuticamente aceitável é administrado ao indivíduo por inalação oral.

17. Aerossol farmacêutico para administração pulmonar, caracterizado pelo fato de que compreende uma fase líquida dispersada e uma fase gasosa contínua, em que a fase líquida dispersada (a) compreende gotículas aquosas compreendendo o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-); ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; em que OctG é ácido (S)-2-aminodecanoico; DPro é D-prolina; (b) tem um diâmetro mediano de massa de cerca de 1,5 μm a cerca de 5 μm; e (c) tem uma distribuição de tamanho de gotícula tendo um desvio padrão geométrico de cerca de 1,2 a cerca de 1,7; para uso em um método para prevenção, controle ou tratamento de doenças ou patologias dos pulmões que sejam mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos em um indivíduo.

18. Aerossol para uso, de acordo com a reivindicação 17, caracterizado pelo fato de que as doenças ou condições dos pulmões sendo mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos são doenças pulmonares, tais como, deficiência de alfa-1 antitripsina (DAAT), fibrose cística (FC), bronquiectasia fibrose não cística (BFNC), ou doença pulmonar obstrutiva crônica (DPOC), ou infecções dos pulmões que causam doenças ou condições dos pulmões, sendo mediadas pela atividade de elastase neutrofílica de humanos.

19. Aerossol para uso, de acordo com a reivindicação 18, caracterizado pelo fato de que a doença pulmonar é bronquiectasia fibrose não cística (BNFC) ou fibrose cística (FC).

20. Aerossol para uso, de acordo com a reivindicação 18, caracterizado pelo fato de que a doença pulmonar é a fibrose cística (FC).

21. Aerossol para uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 17 a 20, caracterizado pelo fato de que o contraíon do composto ativo é acetato.

22. Aerossol para uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 17 a 21, caracterizado pelo fato de que o aerossol é emitido a partir de um gerador de aerossol a uma taxa de pelo menos cerca de 0,1 mL de fase líquida dispersada por minuto.

23. Aerossol para uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 17 a 21, caracterizado pelo fato de que o aerossol é emitido a partir de um gerador de aerossol a uma taxa de dispensação média de pelo menos cerca de 0,8 mg do composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-); ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; por minuto.

24. Aerossol para uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 17 a 23, caracterizado pelo fato de que o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-); ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; é administrado ao indivíduo em uma dose entre cerca de 0,1 e cerca de 10000 mg/dia.

25. Aerossol para uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 17 a 23, caracterizado pelo fato de que o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-); ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; é administrado ao indivíduo em uma dose entre cerca de 0,001 e cerca de 100 mg/kg.

26. Aerossol para uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 17 a 23, caracterizado pelo fato de que o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-); ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; é administrado ao indivíduo a uma dose entre cerca de 5 e cerca de 1000 mg/dia.

27. Aerossol para uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 17 a 23, caracterizado pelo fato de que o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-); ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; é administrado ao indivíduo a uma dose de cerca de 20, cerca de 60, cerca de 120, cerca de 240, cerca de 480 ou cerca de 960 mg/dia.

28. Aerossol para uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 17 a 23, caracterizado pelo fato de que o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-); ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; é administrado ao indivíduo a uma dose entre cerca de 80 e cerca de 320 mg/dia.

29. Aerossol para uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 17 a 23, caracterizado pelo fato de que o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-); ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; é administrado ao indivíduo a uma dose de cerca de 80, cerca de 160 ou cerca de 320 mg/dia.

30. Aerossol para uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 17 a 29, caracterizado pelo fato de que o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-); ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; é administrado ao indivíduo por inalação oral.

31. Kit para a preparação e distribuição de um aerossol farmacêutico para administração pulmonar, caracterizado pelo fato de que compreende uma fase líquida dispersada e uma fase gasosa contínua, em que a fase líquida dispersada (a) compreende gotículas aquosas compreendendo o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-); ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; em que OctG é ácido (S)-2-aminodecanoico; DPro é D-prolina; (b) tem um diâmetro mediano de massa de cerca de 1,5 μm a cerca de 5 μm; e (c) tem uma distribuição de tamanho de gotícula tendo um desvio padrão geométrico de cerca de 1,2 a cerca de 1,7; e em que o kit compreende um nebulizador e uma composição líquida compreendendo uma concentração dentro de uma faixa de cerca de 4 mg/mL a cerca de 100 mg/mL do composto ativo; ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; ou compreende um nebulizador e uma composição farmacêutica sólida para preparar a composição líquida, em que a composição compreende o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-); ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; e em que a composição sólida é dissolúvel ou dispersável em um solvente líquido aquoso, e em que a composição líquida compreende uma concentração dentro de uma faixa de cerca de 4 mg/mL a cerca de 100 mg/mL do composto ativo; ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; para uso em um método para prevenção, controle ou tratamento de doenças ou condições dos pulmões sendo mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos em um indivíduo.

32. Kit, de acordo com a reivindicação 31, caracterizado pelo fato de que o nebulizador é selecionado do grupo que consiste em nebulizadores de jato, nebulizadores ultrassônicos, nebulizadores piezoeletrônicos, nebulizadores de colisão de jato, nebulizadores eletro- hidrodinâmicos, nebulizadores de força capilar, nebulizadores de membrana perfurada e nebulizadores de membrana vibratória perfurada.

33. Kit, de acordo com as reivindicações 31 ou 32, caracterizado pelo fato de que o nebulizador é adaptado para ser capaz de aerossolizar a composição líquida a uma taxa de pelo menos cerca de 0,8 mg do composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-); ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; por minuto.

34. Kit, caracterizado pelo fato de que compreende o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-); ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; em que OctG é ácido (S)-2-aminodecanoico; DPro é D-prolina; e cloreto de sódio; e uma bula em que a bula compreende instruções para o tratamento de um indivíduo para doenças ou condições dos pulmões sendo mediadas pela ou resultantes da atividade de elastase neutrofílica de humanos usando o composto ativo.

35. Kit, de acordo com a reivindicação 34, o kit caracterizado pelo fato de que compreende o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-); ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; como aerossol para administração pulmonar compreendendo uma fase líquida dispersada e uma fase gasosa contínua, em que a fase líquida dispersada (a) compreende gotículas aquosas compreendendo o composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-); ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; (b) tem um diâmetro mediano de massa de cerca de 1,5 μm a cerca de 5 μm; e (c) tem uma distribuição de tamanho de gotícula tendo um desvio padrão geométrico de cerca de 1,2 a cerca de 1,7.

36. Kit, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 31 a 35, caracterizado pelo fato de que pelo menos cerca de 70% em peso da dose carregada do composto ativo ciclo(-OctG-Glu-Thr-Ala-Ser-Ile-Pro-Pro-Gln-Lys-Tyr-DPro-Pro-); ou qualquer sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; é constituído por gotículas com um diâmetro mediano de massa não superior a cerca de 5 μm.

37. Kit, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 31 a 36, caracterizado pelo fato de que o contraíon do composto ativo é acetato.