ES2905647T3

ES2905647T3 - Proceso para la producción de ácido graso altamente insaturado de una pureza alta con un rendimiento alto

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Publication number: ES2905647T3
Application number: ES16802801T
Authority: ES
Inventors: Hiroshi Tabata; Tetsuro Taira; Jun Fujii; Yoshihisa Misawa; Yoshio Shimizu
Original assignee: Bizen Chemical Co Ltd
Current assignee: Bizen Chemical Co Ltd
Priority date: 2015-06-01
Filing date: 2016-05-30
Publication date: 2022-04-11
Anticipated expiration: 2036-05-30
Also published as: JP6510639B2; WO2016194359A1; CA2986213C; EP3305754A1; KR102604060B1; US10196584B2; CN107922307A; JPWO2016194359A1; KR20180020154A; DK3305754T3; EP3305754A4; EP3305754B1; CN107922307B; CA2986213A1; US20180148664A1

Abstract

Un método de purificación de sustancias seleccionadas del grupo que consiste en ácidos grasos altamente insaturados y derivados de los mismos, que comprende: (a) poner en contacto y agitar unas primeras materias primas que comprenden las sustancias con una primera solución acuosa de sal de plata para recoger una primera capa oleosa y una primera capa acuosa; (b) separar la primera capa acuosa en una segunda solución acuosa de sal de plata y las sustancias; (c) poner en contacto y agitar una solución acuosa seleccionada del grupo que consiste en la primera solución acuosa de sal de plata y la segunda solución acuosa de sal de plata con la primera capa oleosa, para la separación en una capa oleosa y una capa acuosa para obtener una segunda capa acuosa que comprende las sustancias; y (d) poner en contacto y agitar la segunda capa acuosa con unas segundas materias primas que comprenden las sustancias para recoger una segunda capa oleosa y una tercera capa acuosa, en donde la segunda capa oleosa comprende las sustancias, en donde los derivados de dichos ácidos grasos altamente insaturados se seleccionan de uno cualquiera de los derivados de éster de metilo, éster de etilo, amida, metil amida, triglicérido, diglicérido o monoglicérido.

Description

DESCRIPCIÓN

Proceso para la producción de ácido graso altamente insaturado de una pureza alta con un rendimiento alto Campo técnico

La presente invención se refiere a un método de producción novedoso de un éster de etilo de ácido graso altamente insaturado. La presente invención también se refiere a un método de purificación de un éster de etilo de ácido graso altamente insaturado.

La presente invención se refiere particularmente a una técnica de purificación a partir de ácidos grasos altamente insaturados derivados de animales y plantas y grasas y aceites de microorganismos, tales como aceites de pescado, aceites extraídos de algas y aceites extraídos de plantas modificadas genéticamente; y los derivados de los mismos, y particularmente a un método de producción industrial y económica de productos de calidad farmacéutica.

Antecedentes de la técnica

En los últimos años, los ácidos grasos insaturados se perciben no solo como ácidos grasos esenciales en los complementos, sino que, dado que particularmente el éster de etilo de ácido eicosapentaenoico fue aprobado como fármaco terapéutico de la arteriesclerosis obliterante y la hiperlipidemia como paso a un fármaco de venta libre sin receta, existe un mercado en expansión para el etilo de EPA de calidad farmacéutica. En otras palabras, los ácidos grasos altamente insaturados se han usado en productos farmacéuticos y alimentos saludables. Sin embargo, dado que los ácidos grasos altamente insaturados tienen muchos enlaces dobles, resulta difícil obtenerlos con síntesis química.

Los ácidos grasos altamente insaturados se producen mediante la extracción y purificación de organismos marinos, tales como los aceites de pescado. Sin embargo, los contenidos de ácidos grasos altamente insaturados son pequeños y, por tanto, se ha deseado una técnica de purificación con un rendimiento alto/una pureza alta.

Convencionalmente, con respecto a los métodos de separación de un ácido graso específico de una mezcla de ácidos grasos o monoésteres, existieron principalmente la destilación, el tamizado molecular y la extracción con fluido supercrítico como métodos de separación que usan la diferencia en los números de carbonos; y el fraccionamiento a baja temperatura, la adición de urea, la formación de complejos de plata, el fraccionamiento con disolventes y los métodos cromatográficos en columna que usan resina de tratamiento con iones de plata y ODS, como métodos de separación que usan el número de enlaces dobles. Aunque estos métodos de purificación son sencillos, cada uno de ellos tiene deficiencias, tales como la insuficiencia en la separación y la inadecuación para el tratamiento industrial en masa, incluso si resulta posible una alta purificación, tal como en el caso de los métodos cromatográficos. En la producción industrial real, los ácidos grasos altamente puros se producen mediante la combinación de una pluralidad de estos métodos de purificación. Sin embargo, existen muchos puntos a mejorar en la complicación de los métodos de purificación y en la pureza/el rendimiento.

El principio del tratamiento con nitrato de plata radica en que, entre los ácidos grasos altamente insaturados, particularmente los ácidos grasos altamente insaturados que tienen una gran cantidad de enlaces dobles dentro de la molécula forman un complejo de enlaces dobles dentro de la molécula y los iones de plata, mediante la mezcla con una solución acuosa de nitrato de plata. Mediante la utilización de esta propiedad, se ha practicado el análisis en ácidos grasos insaturados que utiliza la diferencia de fuerza de retención de un portador de columna de gel de sílice que transporta iones de plata. En el método de producción industrial de ácidos grasos altamente insaturados, la solubilidad en agua de este complejo se utiliza para fraccionar fracciones liposolubles, que incluyen ácidos grasos saturados o ácidos grasos moderadamente/altamente insaturados que tienen una pequeña cantidad de enlaces dobles dentro de la molécula, como capas oleosas. Dado que un complejo soluble en agua se puede separar en nitrato de plata y ácidos grasos altamente insaturados purificados mediante el calentamiento de la solución, tal proceso sencillo permite la purificación de ácidos grasos altamente insaturados a escala industrial.

Sin embargo, el tratamiento con nitrato de plata tiene inconvenientes como método de producción en el sentido de que el precio del nitrato de plata, que es la materia prima, es alto y existen grandes fluctuaciones en el precio. Además, dado que no todos los ácidos grasos altamente insaturados diana forman un complejo y algunos de ellos permanecerán en la capa oleosa, resulta difícil decir que este es un método de producción que logra un rendimiento alto. Como resultado, existe el inconveniente de que se eleva el coste de producción.

Además, en principio, existe la dificultad de retirar completamente los ácidos grasos altamente insaturados que tienen tres o más enlaces dobles dentro de la molécula como impurezas, en el tratamiento con nitrato de plata. En el momento de la purificación de una pureza alta que logra calidades farmacéuticas, tales impurezas se convierten en la causa de la reducción del rendimiento de los métodos de purificación en las etapas de purificación anteriores y las etapas de purificación posteriores.

A continuación, se ejemplificarán métodos de purificación representativos en las técnicas convencionales.

A continuación, se describirán los problemas de las técnicas que se han usado en la purificación de los ácidos grasos insaturados y los derivados de los mismos.

1) Destilación con precisión

Característica: un método de separación mediante la utilización de las diferencias en los puntos de ebullición de cada componente.

Problema: se puede producir una desnaturalización térmica; se requiere mucho tiempo en la purificación de productos altamente puros.

2) Destilación molecular

Característica: poca influencia térmica en el momento de la destilación.

Problema: baja capacidad de separación.

3) Método de tratamiento con urea

Característica: utilización de la propiedad de la urea disuelta, es decir, incorporación en moléculas lineales coexistentes, al tiempo que se forman cristales de aductos columnares hexagonales en el momento de la cristalización.

Problema: baja selectividad; eliminación de residuos debido a la derivación del aducto de urea.

4) Tratamiento con nitrato de plata

Característica: utilización de la propiedad de una solución acuosa de nitrato de plata, es decir, formación de un complejo con enlaces dobles de ácidos grasos.

Problema: el precio de la plata es inestable; implica impurezas.

5) Cromatografía de lecho fijo

Característica: pequeña influencia térmica; se permite la separación con alta precisión.

Problema: gran uso de eluyentes; inadecuada para la producción industrial.

6) Cromatografía de lecho móvil simulado

Característica: adecuada para la industrialización debido al pequeño uso de eluyentes y operaciones continuas.

Problema: las cargas de ODS, que a menudo se usan para la separación de ácidos grasos insaturados, son caras; dado que únicamente se puede usar un disolvente individual, la separación de gradiente no resulta posible.

Con respecto a las técnicas de purificación de ésteres de etilo de ácido eicosapentaenoico (EPA), por ejemplo, las Bibliografías de Patentes 1-4 describen el tratamiento con nitrato de plata como técnica de purificación industrialmente notable de ácidos grasos insaturados y los derivados de los mismos. Sin embargo, los métodos de las Patentes 1-4 tienen los siguientes problemas:

1) los ácidos grasos insaturados distintos del EPA y el ácido docosahexaenoico (DHA) también forman un complejo al mismo tiempo y resulta difícil obtener ácidos grasos altamente insaturados con una pureza alta; y 2) algunos de los ácidos grasos altamente insaturados no forman un complejo y el rendimiento se reduce mediante la eliminación de los mismos.

El documento EP0576191A2 divulga que los compuestos con dos, tres o más instauraciones etilénicas (poliinsaturados) se separan de los compuestos con menos o ninguna de tales insaturaciones, mediante el contacto de una mezcla de dichos compuestos con un medio de atrapamiento líquido selectivo para los poliinsaturados. El medio de atrapamiento que contiene los poliinsaturados se pone en contacto con un medio de liberación inmiscible que absorbe los poliinsaturados y normalmente los poliinsaturados se recuperan del medio de liberación. A continuación, se pueden reciclar el medio de atrapamiento y normalmente también el medio de liberación.

Se requiere un método de producción de ácidos grasos altamente insaturados con una pureza alta/un rendimiento alto que compense las deficiencias de las técnicas convencionales.

[Bibliografía de Patentes]

[PTL 1] Patente japonesa n.° 3001954

[PTL 2] Patente japonesa n.° 2786748

[PTL 3] Patente japonesa n.° 2935555

[PTL 4] Patente japonesa n.° 2895258

Sumario de la invención

Problema técnico

La presente invención resuelve los problemas descritos anteriormente con respecto a la purificación de ácidos grasos altamente insaturados y los derivados de los mismos.

Solución al problema

La invención se define en las reivindicaciones independientes a las que se debe hacer ahora referencia.

Un aspecto se caracteriza con un método de purificación de ácidos grasos altamente insaturados y los derivados de los mismos que usa una solución acuosa de sal de plata, en donde: los ácidos grasos altamente insaturados y los derivados de los mismos, que son materias primas, se añaden a una solución donde se forma un complejo con ácidos grasos altamente insaturados y los derivados de los mismos en una capa oleosa creada como subproducto y una solución acuosa de sal de plata para recoger los ácidos grasos altamente insaturados y los derivados de los mismos en la capa oleosa; y el coste de producción se reduce mediante la mejora del rendimiento.

Con el fin de obtener sustancias liposolubles altamente puras de calidades farmacéuticas, resulta deficiente realizar la purificación únicamente con una solución acuosa de sal de plata, tal como en la técnica convencional, y existe la necesidad de combinar otros métodos de purificación. En otro aspecto, se logra una alta purificación mediante la reducción del ácido araquidónico, el ácido eicosatetraenoico y los derivados de los mismos, que son difíciles de retirar en el momento de la purificación, en comparación con los métodos convencionales. En otras palabras, en el otro aspecto, las sustancias liposolubles diana se pueden obtener con un rendimiento alto.

Un aspecto adicional se caracteriza por que el método de la presente invención se puede usar para purificar ácidos grasos altamente insaturados y los derivados de los mismos hasta calidades farmacéuticas a un coste menor que el método de purificación convencional que usa una solución acuosa de sal de plata.

En otro aspecto, una mezcla de ácidos grasos altamente insaturados y los derivados de los mismos, que son materias primas, se mezcla con una solución acuosa de sal de plata para formar un complejo soluble en agua de ácidos grasos altamente insaturados específicos y la sal de plata y los ácidos grasos altamente insaturados específicos se purifican una vez de esta capa acuosa. En un aspecto específico, se añade de nuevo una solución de sal de plata a una capa oleosa creada como subproducto en el momento de la purificación para permitir la formación de complejos con nitrato de plata y, a continuación, se añaden materias primas adicionales para obtener los ácidos grasos altamente insaturados específicos y los derivados de los mismos con una pureza alta/un rendimiento alto, logrando, de ese modo, la reducción del coste de producción.

Efectos ventajosos de la invención

De acuerdo con el método de producción de la presente invención, los ácidos grasos altamente insaturados no purificados y los derivados de los mismos se pueden purificar industrialmente en productos de calidad farmacéutica a bajo coste.

Breve descripción de los dibujos

[Fig. 1] La Fig. 1 muestra esquemáticamente una primera realización de ejemplo de la presente invención.

[Fig. 2] La Fig. 2 muestra esquemáticamente una segunda realización de ejemplo ("n"-ésimo lote de purificación que comprende tres tandas de purificación) de la presente invención.

[Fig. 3] La Fig. 3 muestra esquemáticamente la segunda realización de ejemplo ("n+1"-ésimo lote de purificación que comprende tres tandas de purificación) de la presente invención.

[Fig. 4] La Fig. 4 muestra esquemáticamente la segunda realización de ejemplo ("n"-ésimo lote de purificación que comprende dos tandas de purificación) de la presente invención.

Descripción de las realizaciones

En lo sucesivo en el presente documento, se describirá la presente invención. A lo largo de toda la presente memoria descriptiva, se debe entender que, a menos que se indique particularmente de otro modo, una expresión en su forma singular también incluye la concepción de pluralidad. También se debe entender que, a menos que se indique particularmente de otro modo, los términos y las expresiones usados en la presente memoria descriptiva tienen los significados que se usan convencionalmente en la técnica. Por lo tanto, a menos que se defina de otro modo, todos los términos y las expresiones técnicos y científicos usados en la presente memoria descriptiva tienen los mismos significados que entienden comúnmente aquellos que tienen experiencia habitual en la materia a la que se refiere la presente invención. En caso de conflicto, prevalecerá la presente memoria descriptiva, incluyendo las definiciones. Además, en la presente memoria descriptiva, la expresión "% en peso" y "concentración porcentual de masa" se pueden usar indistintamente. Además, en la presente memoria descriptiva, a menos que se indique particularmente de otro modo, el "%" significa "% en peso".

(Definición de términos y expresiones)

En lo sucesivo en el presente documento, se enumerarán las definiciones de los términos y las expresiones que se usan particularmente en la presente memoria descriptiva.

La expresión "aceites y grasas de materia prima", tal como se usa en el presente documento, se refiere a aceites y grasas que se usan como materias primas en la purificación de la presente invención. El tratamiento de desacidificación se puede realizar o no en los aceites y las grasas de materia prima. Preferentemente, los aceites y las grasas de materia prima de la presente invención son aceites y grasas de materia prima sobre los que se realiza el tratamiento de desacidificación.

La expresión "materias primas", tal como se usa en el presente documento, se refiere a cualquier sustancia, incluyendo sustancias que se seleccionan del grupo que consiste en ácidos grasos altamente insaturados y los derivados de los mismos. Por ejemplo, las "materias primas" de la presente invención pueden ser, pero sin limitación, "los aceites y las grasas de materia prima" descritos anteriormente y una "capa oleosa" generada en el proceso de purificación de la presente invención. Cuando la "capa oleosa" generada en el proceso de purificación de la presente invención comprende sustancias que se seleccionan del grupo que consiste en ácidos grasos altamente insaturados y los derivados de los mismos, estas se pueden utilizar como materias primas de purificación de la presente invención sin eliminarse.

El término "purificación", tal como se usa en el presente documento, se refiere a cualquier operación que aumente la concentración de las sustancias que serán la diana de la purificación.

La expresión "tanda de purificación", tal como se usa en el presente documento, se refiere a una operación de aumento de la concentración de sustancias que serán la diana de la purificación en una solución acuosa de sal de plata. Por tanto, representativamente, cuando una solución acuosa de sal de plata se somete a la "tanda de purificación", resulta posible obtener una solución acuosa de sal de plata que tenga una concentración aumentada de las sustancias diana. Una pluralidad de (dos o más) tandas de purificación se puede denominar "lote de purificación". Cada lote de purificación no tiene que comprender necesariamente el mismo número de tandas de purificación.

La expresión "ácidos grasos altamente insaturados", tal como se usa en el presente documento, significa ácidos grasos insaturados que tienen un número de carbonos de 16 o más, que también tienen dos o más enlaces dobles dentro de la molécula. Por ejemplo, estos pueden ser, pero sin limitación, ácido docosahexaenoico (C22:6, DHA), ácido eicosapentaenoico (C20:5, EPA), ácido araquidónico (C20:4, AA), ácido docosapentaenoico (C22:5, DPA), ácido estearidónico (C18:4), ácido linolénico (C18:3) y ácido linoleico (C18:2). Los derivados de los ácidos grasos altamente insaturados que se pueden obtener con el método de adquisición de la presente invención se refieren a derivados donde los ácidos grasos pueden ser o no del tipo libre. De acuerdo con los métodos de la invención, los derivados se seleccionan de derivados de éster de metilo, éster de etilo, amida, metil amida, triglicérido, diglicérido o monoglicérido. Preferentemente, las sustancias diana en el método de purificación de la presente invención son ésteres de etilo seleccionados del grupo que consiste en ácido docosapentaenoico, ácido eicosapentanoico, ácido docosahexaenoico y ésteres de etilo de alcoholes inferiores de aquellos ácidos.

La expresión "sal de plata", tal como se usa en el presente documento, se refiere a la sal de plata que puede formar un complejo con enlaces insaturados en ácidos grasos insaturados. Por ejemplo, esta puede ser, pero sin limitación, sal de nitrato de plata, sal de perclorato de plata, sal de acetato de plata, sal de tricloroacetato de plata y sal de trifluoroacetato de plata. La sal de plata se disuelve en agua de tal manera que la concentración se vuelve preferentemente del 15 % o más, más preferentemente del 20 % o más e incluso más preferentemente del 40 % o más, para lograr una solución acuosa de sal de plata y esto se usa para la purificación de derivados de ácidos grasos altamente insaturados. Además, la concentración de sal de plata en la solución acuosa de sal de plata no está particularmente limitada, pero preferentemente la concentración de saturación es el límite superior.

El término "antioxidante", tal como se usa en el presente documento, se refiere a una sustancia que reduce o retira las reacciones dañinas implicadas con el oxígeno en los organismos vivos, los alimentos, las necesidades diarias y las materias primas industriales. Representativamente, el antioxidante puede ser, pero sin limitación, butilhidroxitolueno, tocoferol y un derivado de tocoferol. Por ejemplo, el derivado de tocoferol puede ser, pero sin limitación, d-a-tocoferol, d-p-tocoferol, d-Y-tocoferol, d-8-tocoferol, l-a-tocoferol, l-p-tocoferol, l-Y-tocoferol y l-S-tocoferol; dl-a-tocoferol, dl-p-tocoferol, dl-Y-tocoferol y dl-5-tocoferol, que son mezclas de los mismos; y acetato de tocoferol, succinato de tocoferol, fosfato de tocoferol, aspartato de tocoferol, glutamato de tocoferol, palmitato de tocoferol, nicotinato de tocoferol, linoleato de tocoferol y tocoferol polietoxilado, que son derivados de los mismos. En el método de purificación de la presente invención, el método de separación selectiva de derivados de ácidos grasos altamente insaturados de una mezcla de derivados de ácidos grasos se realiza de manera representativa mediante, pero sin limitación: la adición de una solución acuosa de sal de plata que puede formar un complejo con enlaces insaturados a la mezcla de derivados de ácidos grasos descrita anteriormente que contiene los derivados de ácidos grasos altamente insaturados; la agitación preferentemente durante 5 minutos a 4 horas, más preferentemente durante 10 minutos a 2 horas, para formar el complejo de sal de plata soluble en agua-derivados de ácidos grasos altamente insaturados; y la disolución selectiva únicamente de los derivados de ácidos grasos altamente insaturados en una solución acuosa de sal de plata.

Además, con respecto a la temperatura de reacción de los derivados de ácidos grasos altamente insaturados descritos anteriormente y la solución acuosa de sal de plata, el límite inferior puede ser cualquier temperatura siempre que la solución acuosa de sal de plata sea un líquido y el límite superior es de 100 °C. Sin embargo, teniendo en cuenta la estabilidad oxidativa de los derivados de ácidos grasos altamente insaturados, la solubilidad de la sal de plata en agua, la velocidad de generación del complejo y similares, la temperatura de reacción es preferentemente de 10 a 30 °C.

En el momento del contacto de los derivados de ácidos grasos altamente insaturados descritos anteriormente con la solución acuosa de sal de plata, dicho contacto se realiza preferentemente en un gas inerte, por ejemplo, una atmósfera de nitrógeno, al tiempo que se bloquea la luz considerando la estabilidad oxidativa de los derivados de ácidos grasos altamente insaturados y la estabilidad de la sal de plata. Por ejemplo, mediante el establecimiento de una atmósfera de nitrógeno durante la producción, se puede bloquear la incorporación de oxígeno, que es la causa de la oxidación, y también resulta posible suprimir el aumento de peróxido debido a la oxidación de las materias primas. Además, mediante el bloqueo de la luz, que promueve la oxidación, resulta posible suprimir adicionalmente la oxidación y suprimir el aumento de peróxido.

El método de disociación de los derivados de ácidos grasos altamente insaturados del complejo de los derivados de ácidos grasos altamente insaturados descritos anteriormente y la sal de plata no está particularmente limitado, pero se trata de, por ejemplo, la extracción mediante disolventes orgánicos y un método de adición de agua para insolubilizar los derivados de ácidos grasos altamente insaturados para su separación.

(Formación de complejos de ácidos grasos altamente insaturados y los derivados de los mismos en una capa oleosa y una solución acuosa de sal de plata)

Sin desear quedar ligados a teoría alguna, la presente invención es un método de producción con un rendimiento alto/una pureza alta mediante el mezclado de ácidos grasos altamente insaturados y los derivados de los mismos, que son materias primas, con una solución donde se forma un complejo con ácidos grasos altamente insaturados y los derivados de los mismos en una capa oleosa. En lo sucesivo en el presente documento, se describirán las características de los mismos.

(1: con respecto a un complejo con una solución acuosa de sal de plata)

Se ioniza en agua una solución acuosa de sal de plata y se forma un complejo soluble en agua mediante la mezcla de ácidos grasos altamente insaturados que tienen tres o más enlaces dobles en la molécula e iones de plata a una temperatura baja. La facilidad de formación de un complejo depende del número de enlaces dobles dentro de la molécula y, generalmente, la capacidad de formación de complejos aumenta a medida que aumenta el número de enlaces dobles dentro de la molécula. Tal propiedad es un factor que permite una alta purificación mediante la presente invención.

(2: con respecto a las impurezas en el tratamiento con nitrato de plata)

Cuando se busca una purificación altamente pura que alcance calidades farmacéuticas de ácidos grasos altamente insaturados, tales como ácido eicosapentaenoico, ácido docosapentaenoico y ácido docosahexaenoico, que tengan cinco o más enlaces dobles dentro de la molécula como sustancias diana, el ácido araquidónico y el ácido eicosatetraenoico que tienen cuatro enlaces dobles estarán contenidos en una fracción purificada con un tratamiento con nitrato de plata como impurezas a la vista de las estructuras moleculares. Dado que las propiedades físicas, tales como el punto de ebullición y la polaridad, de aquellas moléculas se asemejan mucho a aquellas de las sustancias diana, estas se convierten en las causas de reducción en gran medida del rendimiento en el momento de la retirada con diversos métodos de purificación. Por tanto, con el fin de obtener sustancias diana de bajo coste de calidades farmacéuticas, se desea un método de retirada de las sustancias que se convertirían en candidatas a impurezas mediante la purificación sin la disminución del rendimiento de las sustancias diana.

(3: con respecto a la formación de complejos con una capa oleosa)

En los métodos convencionales, se añadió una cantidad en exceso de una solución acuosa de sal de plata desde el punto de vista del rendimiento. Por tanto, se generaron iones de plata en exceso y también se formó un complejo con ácido araquidónico y ácido eicosatetraenoico que tenía cuatro enlaces dobles, que se convierten en impurezas. Esto dio como resultado una disminución de la pureza y, finalmente, una disminución del rendimiento.

En la presente invención, la purificación de sustancias seleccionadas del grupo que consiste en ácidos grasos altamente insaturados y los derivados de los mismos con una pureza alta/un rendimiento alto se permite mediante la formación de un complejo mediante el mezclado de los ácidos grasos altamente insaturados y los derivados de los mismos en una capa oleosa con una solución acuosa de sal de plata una vez para consumir el exceso de iones de plata o mediante la limitación de la cantidad de iones de plata que se añadirán y la recogida de los ácidos grasos altamente insaturados y los derivados de los mismos en la capa oleosa.

Un método de purificación de sustancias seleccionadas del grupo que consiste en ácidos grasos altamente insaturados y los derivados de los mismos puede comprender las etapas de:

(a) poner en contacto y agitar unas primeras materias primas que comprenden dichas sustancias con una primera solución acuosa de sal de plata para recoger una primera capa oleosa y una primera capa acuosa; (b) separar dicha primera capa acuosa en una segunda solución acuosa de sal de plata y dichas sustancias; y (c) poner en contacto y agitar una solución acuosa seleccionada del grupo que consiste en la primera solución acuosa de sal de plata y la segunda solución acuosa de sal de plata con la primera capa oleosa, para la separación en una capa oleosa y una capa acuosa para obtener una segunda capa acuosa que comprende dichas sustancias. Cualquier sustancia, incluyendo las sustancias seleccionadas del grupo que consiste en ácidos grasos altamente insaturados y los derivados de los mismos, se usa como materia prima para su uso en este método. Los ejemplos de las materias primas de la presente invención pueden ser, pero sin limitación, los aceites y las grasas de materia prima descritos anteriormente y la capa oleosa generada en el proceso de purificación de la presente invención.

A este respecto, la condición del contacto y la agitación descritos anteriormente no está particularmente limitada y, por tanto, se pueden usar métodos de separación/purificación bien conocidos que usen una solución acuosa de sal de plata (por ejemplo, las Bibliografías de Patentes 1-4). Por ejemplo, la concentración de la sal de plata puede ser del 1 %, 3 %, 5 %, 10 %, 15 %, 20 %, 30 %, 40 %, 50 %, 60 % y una concentración de saturación.

En la separación de la capa oleosa y la capa acuosa de la mezcla preparada mediante el contacto y la agitación, se puede utilizar un método bien conocido. Por ejemplo, se puede usar la separación centrífuga o de pie. En la separación de ácidos grasos altamente insaturados y/o los derivados de los mismos (por ejemplo, ésteres de etilo de ácidos grasos altamente insaturados) de la capa acuosa, se puede utilizar un método bien conocido. Por ejemplo, se puede usar n-heptano y similares.

En la formación de un compuesto (complejo) de sal de plata y los ácidos grasos altamente insaturados y/o los derivados de los mismos, se puede usar un método bien conocido. Por ejemplo, el método puede ser, pero sin limitación, a temperaturas bajas. En la separación de los ácidos grasos altamente insaturados y/o los derivados de los mismos del compuesto (complejo), se puede usar un método bien conocido. Por ejemplo, el método puede ser, pero sin limitación, el calentamiento y la extracción con disolventes.

(Primera realización de ejemplo de la presente invención)

A continuación, se explicará una realización de la presente invención mediante la referencia a la Fig. 1.

Una primera solución acuosa de sal de plata se mezcla con materias primas y la solución mixta se separa en una primera capa oleosa y una primera capa acuosa. Los ácidos grasos altamente insaturados y/o los derivados de los mismos, que son las sustancias diana, se extraen de la primera capa acuosa y la solución restante se convierte en una segunda solución acuosa de sal de plata. Esta segunda solución acuosa de sal de plata se mezcla con la primera capa oleosa y la solución mixta se separa en una capa oleosa y una segunda capa acuosa. Dado que la capa oleosa comprende las sustancias diana únicamente en una concentración baja, se elimina esta. A continuación, la segunda capa acuosa se puede someter a una purificación adicional de la misma manera que la solución mixta de la primera solución acuosa de sal de plata y las materias primas.

(Segunda realización de ejemplo de la presente invención)

Una realización de la presente invención que usa de nuevo una capa oleosa obtenida en la etapa de purificación como materia prima sin la eliminación de la capa oleosa se explicará mediante la referencia a las Fig. 2-4.

Una unidad donde se combinan dos o más tandas de purificación se establece como lote de purificación y, mediante la realización continua de una pluralidad de lotes de purificación, resulta posible purificar en continuo ácidos grasos altamente insaturados y/o derivados de los mismos. La Fig. 2 muestra esquemáticamente un "n"-ésimo lote que comprende tres tandas de purificación. Aunque se describe una concentración de EPA representativa de cada solución (capa oleosa, materias primas, aceites y grasas), esta concentración es únicamente una indicación aproximada. En cada una de las tandas de purificación, una capa oleosa o los aceites y las grasas de materia prima se mezclan con una solución acuosa de sal de plata y una capa oleosa y una solución acuosa de sal de plata se preparan mediante separación de líquidos. La solución acuosa de sal de plata obtenida se usa para mezclarse con la capa oleosa o los aceites y las grasas de materia prima en la siguiente tanda de purificación del mismo lote o, cuando dicha tanda de purificación es la tanda de purificación final en dicho lote, se usa para mezclarse con la capa oleosa en la primera tanda de purificación del siguiente lote. Por ejemplo, cuando el lote de depuración comprende tres tandas de purificación, la cuarta solución acuosa de sal de plata del n-ésimo lote preparada en la tercera tanda de purificación del n-ésimo lote se usará como primera solución acuosa de sal de plata en el n+1-ésimo lote (es decir, el siguiente lote) para mezclarse con una capa oleosa en la primera tanda de purificación en el n+1-ésimo lote. La primera capa oleosa preparada en la primera tanda de purificación tiene una concentración de EPA baja y, por tanto, se elimina esta. Sin embargo, cuando la concentración de EPA es alta, la primera capa oleosa se puede usar de nuevo como materia prima de purificación sin eliminarse.

Posteriormente al n-ésimo lote de purificación que se muestra esquemáticamente en la Fig. 2, se puede realizar el n+1-ésimo lote que se muestra esquemáticamente en la Fig. 3. Una capa oleosa que se usará en la primera tanda de purificación del n+1-ésimo lote es representativamente "la segunda capa oleosa del n-ésimo lote" derivada del lote anterior. Una capa oleosa que se usará en la segunda tanda de purificación del n+1-ésimo lote es representativamente "la tercera capa oleosa del n-ésimo lote" derivada del lote anterior.

No se requiere necesariamente que cada lote de purificación comprenda tres tandas de purificación y este puede comprender cualquier número de tandas de purificación de dos o más. La Fig. 4 muestra esquemáticamente un lote de purificación que comprende dos tandas de purificación. Cuando el lote de depuración comprende dos tandas de purificación, la tercera solución acuosa de sal de plata del n-ésimo lote obtenida en la segunda tanda de purificación se puede usar como primera solución acuosa de sal de plata en el n+1-ésimo lote.

(Producto purificado que se puede obtener mediante la presente invención)

La pureza del ácido eicosapentaenoico (EPA) que se puede obtener mediante la presente invención es, por ejemplo, del 90 % (p/p) o superior, del 61 % (p/p) o superior, del 62 % (p/p) o superior, del 63 % (p/p) o superior, del 64 % (p/p) o superior, del 65 % (p/p) o superior, del 66 % (p/p) o superior, del 67 % (p/p) o superior, del 68 % (p/p) o superior, del 69 % (p/p) o superior o del 70 % (p/p) o superior. La pureza del EPA en el material de partida que se usará en la preparación de EPA que tiene estas purezas es representativamente, pero sin limitación, del 40 % (p/p). La pureza del ácido eicosapentaenoico (EPA) obtenido mediante la presente invención se puede aumentar adicionalmente mediante el uso de un método bien conocido (por ejemplo, la destilación con precisión, la destilación molecular, el método de tratamiento con urea, el tratamiento con nitrato de plata, la cromatografía de lecho fijo, la cromatografía de lecho móvil simulado o combinaciones de estos) y la pureza del ácido eicosapentaenoico (EPA) que se puede obtener como resultado de tal purificación adicional es, por ejemplo, del 90 % (p/p) o superior, del 91 % (p/p) o superior, del 92 % (p/p) o superior, del 93 % (p/p) o superior, del 94 % (p/p) o superior, del 95 % (p/p) o superior, del 96 % (p/p) o superior, del 96,5 % (p/p) o superior, del 97 % (p/p) o superior o del 97,5 % (p/p) o superior.

La concentración de ácido araquidónico (AA) en la composición que comprende ácido eicosapentaenoico (EPA) obtenida mediante la presente invención es del 0,4 % (p/p) o inferior, del 0,8 % (p/p) o inferior, del 1,0 % (p/p) o inferior, del 1,5 % (p/p) o inferior o del 3,0 % (p/p) o inferior. La concentración de ácido eicosatetraenoico (ETA) en la composición que comprende ácido eicosapentaenoico (EPA) obtenida mediante la presente invención es del 0,4 % (p/p) o inferior, del 0,8 % (p/p) o inferior, del 1,0 % (p/p) o inferior, del 1,5 % (p/p) o inferior o del 3,0 % (p/p) o inferior. En lo sucesivo en el presente documento, el método de purificación de los derivados de ácidos grasos altamente insaturados de la presente invención se explicará específicamente basándose en los Ejemplos y similares. Sin embargo, la presente invención no se limita a los mismos.

Ejemplos

En lo sucesivo en el presente documento, la presente invención se explicará más específicamente en relación con la purificación del ácido eicosapentaenoico basándose en los Ejemplos y los Ejemplos comparativos. Sin embargo, la presente invención no se limita a los siguientes Ejemplos.

Los sistemas que usan métodos convencionales se describirán como Ejemplos comparativos. En el Ejemplo 1, se realizó un ensayo mediante el uso de una capa oleosa creada como subproducto del Ejemplo comparativo 1.

(Ejemplo comparativo 1)

Las condiciones de ensayo fueron las siguientes.

Materias primas de partida: aceites y grasas que contienen éster de etilo de EPA al 40 %

Concentración de solución acuosa de nitrato de plata: 50 %

Disolvente de recogida: n-heptano

Uso de materia prima: 20 g

Uso de solución acuosa de nitrato de plata: 100 g

Uso de disolvente de recogida: 200 g

Condiciones de reacción:

1. Se mezclaron las materias primas y una solución acuosa de nitrato de plata y, después de la agitación durante tres horas a 10 °C, se recogieron una capa inferior (capa acuosa) y una capa superior (Capa oleosa 1).

2. Se añadieron 200 g de n-heptano a la capa inferior y, después del calentamiento durante dos horas a 80 °C, se recogió una capa superior (Capa oleosa 2).

3. Después de la concentración al vacío, el rendimiento se evaluó a partir de la cantidad obtenida y la pureza se evaluó a partir del análisis de CG (Shimadzu 2010 plus).

(Ejemplo 1)

Condiciones de ensayo

Materias primas: aceites y grasas que contienen éster de etilo de EPA al 40 %

Concentración de solución acuosa de nitrato de plata: 50 %

Disolvente de recogida: n-heptano

Uso de materia prima: 20 g

Uso de solución acuosa de nitrato de plata: 100 g

Uso de disolvente de recogida: 200 g

Condiciones de reacción:

1. Se añadió una solución acuosa de nitrato de plata a la capa superior (Capa oleosa 1) recogida en el Ejemplo 1 y, después de la agitación durante tres horas a 10 °C, se recogió una capa inferior (capa acuosa).

2. Las materias primas se añadieron a la capa inferior recogida y, después de la agitación durante tres horas a 10 °C, se recogió una capa inferior (capa acuosa).

3. Se añadieron 100 g de n-heptano a la capa inferior y, después del calentamiento durante dos horas a 80 °C, se recogió una capa superior (Capa oleosa 2).

4. Después de la concentración al vacío, el rendimiento se evaluó a partir de la cantidad obtenida y la pureza se evaluó a partir del análisis de CG (Shimadzu 2010 plus).

Los resultados del Ejemplo comparativo 1 y el Ejemplo 1 se describirán en las Tablas siguientes.

Tabla 1: composición de ácidos grasos de los productos purificados del Ejemplo comparativo 1 y el Ejemplo 1

T l 11

Tabla 2: rendimientos de los productos purificados del Ejemplo comparativo 1 y el Ejemplo 1

T l 21

A partir de los resultados anteriores, debido a la utilización eficaz de las capas oleosas, se redujeron las purezas de las impurezas que son difíciles de retirar, tales como el ácido araquidónico y el ácido eicosatetraenoico, en comparación con los métodos convencionales, aunque se mejoró la pureza del ácido eicosapentaenoico, en comparación con los métodos convencionales.

Además, mediante la recogida del ácido eicosapentaenoico en capas oleosas, el rendimiento se mejoró con éxito en más de 10 puntos, en comparación con los métodos convencionales.

Por tanto, se demostró que el ácido eicosapentaenoico se puede producir con una pureza alta/un rendimiento alto a un bajo coste, en comparación con los métodos convencionales.

(Ejemplo 2)

Las condiciones de ensayo fueron las siguientes.

En primer lugar, se añadieron 50 g de agua destilada a 50 g de nitrato de plata para agitarse/disolverse, como primera tanda. Se añadieron 20 g de una mezcla de ésteres de etilo de ácidos grasos (éster de etilo de EPA al 40,4 % (% de área de composición de ácidos grasos), pureza de éster de etilo de DHA del 15,0 %) a 100 g de esta solución acuosa de nitrato de plata al 50 % y se realizó la agitación durante tres horas a 10 °C. Posteriormente, la solución se dejó reposar durante 1 hora y se separó en dos capas. Esta capa superior (capa oleosa) se almacenó y la capa inferior (capa acuosa) se recogió por separado para la adición de 100 g de n-heptano para agitarse durante 2 horas a 80 °C. Posteriormente, la solución se dejó reposar durante 1 hora y se separó en dos capas. Esta capa superior se recogió por separado para obtener un concentrado de ésteres de etilo de ácidos grasos altamente insaturados. Además, la capa inferior que contenía nitrato de plata y la capa oleosa almacenada se usaron adicionalmente para la purificación de ésteres de etilo de ácidos grasos altamente insaturados en las tandas posteriores.

En la segunda tanda y en adelante, las operaciones descritas a continuación se realizaron repetidamente. La capa inferior que contenía nitrato de plata se mezcló con la capa oleosa almacenada y se agitó durante tres horas a 10 °C. Se recogió por separado una capa inferior (capa acuosa) y se mezcló con 20 g de una mezcla de ésteres de etilo de ácidos grasos para agitarse durante tres horas a 10 °C. Posteriormente, la solución se dejó reposar durante 1 hora y se separó en dos capas. Esta capa superior (capa oleosa) se almacenó y la capa inferior (capa acuosa) se recogió por separado para la adición de 100 g de n-heptano para agitarse durante 2 horas a 80 °C. Posteriormente, la solución se dejó reposar durante 1 hora y se separó en dos capas. Esta capa superior se recogió por separado para obtener un concentrado de ésteres de etilo de ácidos grasos altamente insaturados. Las reacciones descritas anteriormente se llevaron a cabo en una atmósfera de nitrógeno. Los resultados de la repetición de estas operaciones y el tratamiento de la mezcla descrita anteriormente hasta en cinco tandas se muestran en la Tabla 3. Tabla 3: lista de resultados de los Ejemplos

T l 1

Se puede entender que los resultados similares a los del Ejemplo 1 se reproducen de manera estable incluso mediante la repetición de los tratamientos. A partir de estos resultados, se demuestra que el ácido eicosapentaenoico se puede producir con una pureza alta/un rendimiento alto a un bajo coste, en comparación con los métodos convencionales.

A continuación, con el fin de evaluar los efectos de la presente invención más claramente, los resultados de llevar a cabo repetidamente los métodos convencionales se describirán a continuación como Ejemplo comparativo 2.

(Ejemplo comparativo 2)

Las condiciones de ensayo fueron las siguientes.

Concentración de solución acuosa de nitrato de plata: 50 %

Disolvente de recogida: n-heptano

Uso de materia prima: 20 g

Uso de solución acuosa de nitrato de plata: 100 g

Uso de disolvente de recogida: 200 g

Condiciones de reacción:

4. Las operaciones anteriores se llevaron a cabo en cinco tandas.

Los resultados del Ejemplo comparativo 2 se describirán en la siguiente Tabla.

Tabla 4: composición de ácidos grasos y rendimientos de los productos purificados de cinco tandas llevadas a cabo en el Ejemplo comparativo 2

T l 41

Se obtuvieron continuamente resultados similares a aquellos del Ejemplo comparativo 1. Cuando se comparó con los resultados del Ejemplo 2, resultó posible confirmar la mejora de la calidad y la mejora de los rendimientos asociados a la reducción de los contenidos de ácido araquidónico (AA) y ácido eicosatetraenoico (ETA), tal como afirma la presente invención.

(Ejemplo 3)

A continuación, con respecto al caso del uso de nuevo de la capa oleosa en una pluralidad de veces, el Ejemplo 3 describe los resultados del uso de nuevo de la capa oleosa en dos veces.

Se mostrarán los resultados con respecto a un sistema donde la capa oleosa almacenada se mezcla con una capa inferior que contiene nitrato de plata para agitarse durante tres horas a 10 °C y también se recoge ácido eicosapentaenoico de una capa superior (capa oleosa) creada como subproducto en la etapa de recogida por separado de una capa inferior (capa acuosa).

Las condiciones de ensayo fueron las siguientes.

Como primera tanda, se añadieron 50 g de agua destilada a 50 g de nitrato de plata para su agitación/disolución. Se añadieron 20 g de una mezcla de ésteres de etilo de ácidos grasos (éster de etilo de EPA al 40,4 % (% de área de composición de ácidos grasos), pureza de éster de etilo de DHA del 15,0 %) a 100 g de la solución acuosa de nitrato de plata al 50 % y se agitó la solución durante tres horas a 10 °C. Posteriormente, la solución se dejó reposar durante 1 hora y se separó en dos capas. Esta capa superior (capa oleosa) se almacenó y la capa inferior (capa acuosa) se recogió por separado para la adición de 100 g de n-heptano para agitarse durante dos horas a 80 °C. Posteriormente, la solución se dejó reposar durante 1 hora y se separó en dos capas. Esta capa superior se recogió por separado para obtener un concentrado de ésteres de etilo de ácidos grasos altamente insaturados. Además, la capa inferior que contenía nitrato de plata y la capa oleosa almacenada como Capa oleosa 2 se usaron adicionalmente en la purificación de ésteres de etilo de ácidos grasos altamente insaturados en las tandas posteriores.

Como segunda tanda, la Capa oleosa 1 almacenada se mezcló con la capa inferior que contenía nitrato de plata y se agitó durante tres horas a 10 °C. En el momento de la recogida por separado de la capa inferior (capa acuosa), la capa superior (capa oleosa) se almacenó para su uso en la purificación de ésteres de etilo de ácidos grasos altamente insaturados en las tandas posteriores como Capa oleosa 2. La capa inferior recogida por separado (capa acuosa) se mezcló con 20 g de una mezcla de ésteres de etilo de ácidos grasos y se agitó durante tres horas a 10 °C. Posteriormente, la solución se dejó reposar durante 1 hora y se separó en dos capas. Esta capa superior (capa oleosa) se almacenó y la capa inferior (capa acuosa) se recogió por separado para la adición de 100 g de nheptano para agitarse durante dos horas a 80 °C. Posteriormente, la solución se dejó reposar durante 1 hora y se separó en dos capas. Esta capa superior se recogió por separado para obtener un concentrado de ésteres de etilo de ácidos grasos altamente insaturados.

En la tercera tanda y en adelante, las operaciones descritas a continuación se llevaron a cabo repetidamente. La Capa oleosa 2 almacenada se mezcló con la capa inferior que contenía nitrato de plata y se agitó durante tres horas a 10 °C. La capa inferior (capa acuosa) se recogió por separado y se mezcló con la Capa oleosa 1 almacenada para agitarse durante tres horas a 10 °C. Esta capa superior (capa oleosa) se almacenó y la capa inferior (capa acuosa) se recogió por separado y se mezcló con 20 g de una mezcla de ésteres de etilo de ácidos grasos para agitarse durante tres horas a 10 °C. Posteriormente, la solución se dejó reposar durante 1 hora y se separó en dos capas. Esta capa superior (capa oleosa) se almacenó y la capa inferior (capa acuosa) se recogió por separado para la adición de 100 g de n-heptano para agitarse durante dos horas a 80 °C. Posteriormente, la solución se dejó reposar durante 1 hora y se separó en dos capas. Esta capa superior se recogió por separado para obtener un concentrado de ésteres de etilo de ácidos grasos altamente insaturados.

Las reacciones descritas anteriormente se llevaron a cabo en una atmósfera de nitrógeno. Los resultados de la repetición de estas operaciones y el tratamiento de la mezcla descrita anteriormente hasta en cinco tandas se muestran en la Tabla 5.

Tabla 5: lista de resultados de los Ejemplos

T l 1

En la segunda tanda y en adelante, la pureza y el rendimiento del ácido eicosapentaenoico se mejoran adicionalmente de manera estable y continua, en comparación con el Ejemplo 2. Aunque este proceso es más complicado que el Ejemplo 2 como proceso de producción, los resultados del Ejemplo 3 resultan más deseables en los productos donde el coste de las materias primas representa la mayor parte del coste de producción, tal como en el presente caso.

Aplicabilidad industrial

De acuerdo con el método de producción de la presente invención, los productos de calidad farmacéutica de ácidos grasos altamente insaturados y/o los derivados de los mismos se pueden purificar industrialmente a bajo coste a partir de ácidos grasos altamente insaturados no purificados y los derivados de los mismos.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Un método de purificación de sustancias seleccionadas del grupo que consiste en ácidos grasos altamente insaturados y derivados de los mismos, que comprende:

(a) poner en contacto y agitar unas primeras materias primas que comprenden las sustancias con una primera solución acuosa de sal de plata para recoger una primera capa oleosa y una primera capa acuosa;

(b) separar la primera capa acuosa en una segunda solución acuosa de sal de plata y las sustancias;

(c) poner en contacto y agitar una solución acuosa seleccionada del grupo que consiste en la primera solución acuosa de sal de plata y la segunda solución acuosa de sal de plata con la primera capa oleosa, para la separación en una capa oleosa y una capa acuosa para obtener una segunda capa acuosa que comprende las sustancias; y

(d) poner en contacto y agitar la segunda capa acuosa con unas segundas materias primas que comprenden las sustancias para recoger una segunda capa oleosa y una tercera capa acuosa, en donde la segunda capa oleosa comprende las sustancias,

en donde los derivados de dichos ácidos grasos altamente insaturados se seleccionan de uno cualquiera de los derivados de éster de metilo, éster de etilo, amida, metil amida, triglicérido, diglicérido o monoglicérido.

2. El método de acuerdo con la reivindicación 1, que comprende, además,

(e) separar la tercera capa acuosa en una tercera solución acuosa de sal de plata y las sustancias.

3. El método de acuerdo con la reivindicación 1, que comprende, además,

(f) aislar las sustancias de la segunda capa oleosa.

4. El método de acuerdo con la reivindicación 2, que comprende, además,

(g) poner en contacto y agitar una solución acuosa de sal de plata seleccionada de la primera solución acuosa de sal de plata, la segunda solución acuosa de sal de plata y la tercera solución acuosa de sal de plata con la segunda capa oleosa, para la separación en una capa oleosa y una capa acuosa para obtener una cuarta capa acuosa que comprende las sustancias.

5. El método de acuerdo con la reivindicación 1, en donde los derivados de ácidos grasos altamente insaturados son ésteres de etilo de ácidos grasos altamente insaturados y en donde los ésteres de etilo de ácidos grasos altamente insaturados se seleccionan del grupo que consiste en ácido docosapentaenoico, ácido eicosapentanoico, ácido docosahexaenoico y ésteres de etilo de alcoholes inferiores de aquellos, que tienen cinco o más enlaces dobles dentro de la molécula.

6. Un método de purificación de sustancias seleccionadas del grupo que consiste en ácidos grasos altamente insaturados y derivados de los mismos, que comprende:

poner en contacto y agitar una primera capa oleosa, que se recoge mediante el contacto y la agitación de unas primeras materias primas que comprenden las sustancias con una primera solución acuosa de sal de plata, con una segunda solución acuosa de sal de plata obtenida mediante la separación de una primera capa acuosa, que se recoge mediante el contacto y la agitación de las primeras materias primas que comprenden las sustancias con la primera solución acuosa de sal de plata, en la segunda solución acuosa de sal de plata y las sustancias, para la separación en una capa oleosa y una capa acuosa para recoger una segunda capa acuosa que comprende las sustancias, poniendo en contacto y agitando la segunda capa acuosa con materias primas que comprenden las sustancias para recoger una segunda capa oleosa y una tercera capa acuosa, en donde la segunda capa oleosa comprende las sustancias; o

poner en contacto y agitar una primera capa oleosa, que se recoge mediante el contacto y la agitación de unas primeras materias primas que comprenden las sustancias con una primera solución acuosa de sal de plata, con la primera solución acuosa de sal de plata, para la separación en una capa oleosa y una capa acuosa para recoger una segunda capa acuosa que comprende las sustancias, poniendo en contacto y agitando la segunda capa acuosa con materias primas que comprenden las sustancias para recoger una segunda capa oleosa y una tercera capa acuosa, en donde la segunda capa oleosa comprende las sustancias,

7. El método de acuerdo con la reivindicación 6, que comprende, además, separar la tercera capa acuosa en una tercera solución acuosa de sal de plata y las sustancias.

8. El método de acuerdo con la reivindicación 6, que comprende, además, aislar las sustancias de la segunda capa oleosa.

9. El método de acuerdo con la reivindicación 7, que comprende, además, poner en contacto y agitar una solución acuosa de sal de plata seleccionada del grupo que consiste en la primera solución acuosa de sal de plata, la segunda solución acuosa de sal de plata y la tercera solución acuosa de sal de plata con la segunda capa oleosa, para la separación en una capa oleosa y una capa acuosa para obtener una cuarta capa acuosa que comprende las sustancias.

10. El método de acuerdo con la reivindicación 6, en donde los derivados de ácidos grasos altamente insaturados son ésteres de etilo de ácidos grasos altamente insaturados y en donde los ésteres de etilo de ácidos grasos altamente insaturados se seleccionan del grupo que consiste en ácido docosapentaenoico, ácido eicosapentanoico, ácido docosahexaenoico y ésteres de etilo de alcoholes inferiores de aquellos, que tienen cinco o más enlaces dobles dentro de la molécula.

11. Un método de purificación de sustancias seleccionadas del grupo que consiste en ácidos grasos altamente insaturados y derivados de los mismos, comprendiendo el método no menos de 2 y no más de un lote de purificación, en donde cada uno de los lotes de purificación comprende no menos de 2 y no más de c tandas de purificación, en donde a y c son independientemente un número entero de 2 o más, en donde b es un número entero de no menos de 2 y no más de a, en donde d es un número entero de no menos de 1 y no más de c-1, en donde la d-ésima tanda de purificación incluida en el b-ésimo lote de purificación comprende:

mezclar una capa oleosa obtenida en la d+1-ésima tanda de purificación del b-1-ésimo lote de purificación con la d-ésima solución acuosa de sal de plata del b-ésimo lote de purificación;

realizar la separación de líquidos en la solución mixta para obtener la d-ésima capa oleosa del b-ésimo lote de purificación y la d+1-ésima solución acuosa de sal de plata del b-ésimo lote de purificación, y

en donde la c-ésima tanda de purificación del b-ésimo lote de purificación comprende:

mezclar aceites y grasas de materia prima con la c-ésima solución acuosa de sal de plata del b-ésimo lote de purificación; y

realizar la separación de líquidos en la solución mixta para obtener la c-ésima capa oleosa del b-ésimo lote de purificación y la c+1-ésima solución acuosa de sal de plata del b-ésimo lote de purificación,

12. El método de acuerdo con la reivindicación 11, que comprende, además:

realizar la extracción con disolventes orgánicos en la solución acuosa de sal de plata obtenida mediante la realización de la separación de líquidos en la solución mixta, para obtener un extracto que comprende ácidos grasos altamente insaturados;

opcionalmente, concentrar el extracto obtenido mediante la extracción con disolventes orgánicos; y

usar la destilación con precisión, la destilación molecular, el método de tratamiento con urea, el tratamiento con nitrato de plata, la cromatografía de lecho fijo, la cromatografía de lecho móvil simulado o las combinaciones de estos, en el concentrado para permitir que la concentración de ácido eicosapentaenoico (EPA) sea del 96,5 % (p/p) o superior.

13. El método de acuerdo con la reivindicación 12, en donde la concentración de ácido araquidónico (AA) es del 1,0 % (p/p) o inferior.

14. El método de acuerdo con la reivindicación 12, en donde la concentración de ácido eicosatetraenoico (ETA) es del 1,0 % (p/p) o inferior.