ES2621261T3 - Péptido que puede emplearse en productos para recubrimiento, promotores de adhesión o adhesivos para superficies oxidadas - Google Patents

Abstract

Dodecapéptido, caracterizado porque el dodecapéptido presenta la secuencia de aminoácidos HMISTMNAASRR (SEQ ID NO:10).

Description

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Ejemplos de aglutinantes adecuados comprenden (co)polímeros de (met)acrilato, poli(ésteres de vinilo) parcialmente saponificados, poliésteres, resinas alquídicas, polilactonas, policarbonatos, poliéteres, productos de adición de resina epóxica-amina, poliurea, poliamidas, poliimidas o poliuretanos. Obviamente también pueden emplearse mezclas de diferentes polímeros, siempre que no surjan efectos no deseados por la mezcla. Los componentes que van a reticularse pueden presentar grupos que se reticulan térmicamente o grupos que se reticulan fotoquímicamente. Los agentes de reticulación térmica adecuados son, por ejemplo, agentes de reticulación a base de epóxidos, de melamina o de isocianatos bloqueados. Agentes de reticulación adecuados para la reticulación fotoquímica son principalmente compuestos con varios grupos etilénicamente insaturados, principalmente acrilatos di-o polifuncionales.

La adhesión del barniz sobre el sustrato se mejora ventajosamente por el péptido de la invención. Además, en los ensayos de protección frente a la corrosión, también se logra una estabilidad mejorada frente a la infiltración de la capa de barniz.

Otro objeto de la presente invención es, por lo tanto, el uso del péptido de la invención como componentes de productos de recubrimiento, barnices y pinturas, promotores de adhesión o adhesivos para superficies oxidadas, así como de materiales composite de varias capas o sustratos recubiertos.

El siguiente ejemplo explica la invención sin limitarla al mismo:

Ejemplo 1: Cuantificación de péptidos sobre superficies (de acero)

Con el método descrito a continuación se ilustra cómo puede realizarse una cuantificación de péptidos adheridos a superficies (de acero).

Mediante evaluación visual, por lo tanto, es posible generar un resultado objetivamente medible respecto de las propiedades de adhesión. Este procedimiento debe entenderse a manera de ejemplo; otros procedimientos de detección química pueden ser adecuados de manera análoga (por ejemplo reacción con ninhidrina).

Con el método descrito pueden discriminar se los péptidos mencionados en la tabla 3 y puede hacerse una distinción entre péptidos buenos (P6, P7) moderados (P13, P15) y malos y los que no se enlazan (10, 17) tal como puede deducirse del gráfico mostrado en la figura 1.

Aplicación de los péptidos:

2x 10 μl de solución de péptido (2 mg/ml disueltos en 1xPBS pH 7,4 de Gibco) se aplican sobre una laminilla de acero HDG (redonda, diámetro 2,3 cm). Los primeros 10 μl se secan en aproximadamente 15’, los segundos 10 μl se aplican gota a gota a continuación sobre el mismo sitio y se secan durante 30’. El secado se realiza 30°C en un horno de hibridación HB-1000 de UVP en presencia de 200 ml de agua.

Lavado:

Las laminillas se ponen para lavar en un plato de cristalización (diámetro 19cm) con 1 litro de 1xPBS pH 7,4 y se agita levemente durante 10’ a temperatura ambiente (60 rpm, Certomat U de B. Braun). A continuación se secan las laminillas a 30°C.

Tintura:

Las laminillas se transfieren a un plato de 6-pozos. Por medio de una pipeta se aplican 150 µl de solución de tintura Coomassie sobre la laminilla. Después de 30 segundos cuidadosamente (en el borde) se adicionan 6ml de regulador de pH 1xPBS pH 7,4 para enjuagar la solución de tintura. Después, la laminilla se transfiere a 2x 6 ml de 1xPBS pH 7,4, con el fin de eliminar la solución residual de tintura. A continuación, la laminilla se seca brevemente a 30 °C. (Solución de tintura de Coomassie: 2 g de Coomassie brilliant blue R-250, 0,5 g de Coomassie brilliant blue G-250, 50 ml de metanol, 425 ml de etanol, 100 ml de ácido acético glacial y agua destilada hasta 1000 ml).

Desprendimiento:

Por medio de una pipeta se aplican 20 µl de solución de DMSO/CH3COOH (v/v 9/1) sobre el sitio tinturado. Se deja que la solución de extracción actúe durante 5’ a temperatura ambiente; a continuación el líquido es succionado, hacia arriba y hacia abajo, por medio de la pipeta, hasta que la mancha se elimina completamente de la laminilla. El sobrenadante se transfiere a un recipiente de reacción.

Medición:

La medición de la intensidad de color se efectúa en un espectrofotómetro Nanodrop 1000. (Program UV VIS). Para este propósito se aplica una muestra de 2 µl y se mide a 602 nm.

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Tablas y figuras: Tabla 1:

Posición:

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12

Péptido K1 (no es según la invención)

X K R R P G X X V E X X

Péptido K2 (no es según la invención)

H N T I R I L T I K L X

Péptido K3 (no es según la invención)

R H S S T L R Y R P H P

Péptido 8 (no es según la invención)

R S I V T F S L R Q N R

Péptido 9 (no es según la invención)

Q R N L I K S T C R K I

X: todo tipo de aminoácido

Tabla 2:

Péptido Nr.

Secuencia de AA Ensayo de adhesión

HDG-acero inoxidable

1

2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Evaluación cuantitativa Evaluación Coomassie (absorción 602nm)

6 (no es según la invención)

S R A R L F V V T Y H K 0,728

7

H M I S T M N A A S R R 0,549

13 (no es según la invención)

R N T I R I R T I K H P 0,348

15 (no es según la invención)

R H S S T L R Y R P L P 0,369

10 (no es según la invención)

R Q L Q R L M K S V N S 0,229

17 (no es según la invención)

Q Q S R H I L N R K K P 0,186

Tabla 3:

Secuencias de nucleótidos que codifican péptidos según la invención

Péptido

Secuencia

Péptido 6 (no es según la invención)

tccagggcacgactatttgtagtcacatatcacaaa

Péptido 7

cacatgatatctacaatgaacgcggcgagccggcga

Péptido 8 (no es según la invención)

agaagcatagtaacctttagtttaagacaaaatcgc

Péptido 9 (no es según la invención)

caacgtaatttgattaaatcgacgtgccggaaaatc

Péptido 10 (no es según la invención)

cgccagctccagaggctgatgaaatcagtaaattcg

Péptido 13 (no es según la invención)

cgcaacactattcgtatacggactataaaacatccg

Péptido 15 (no es según la invención)

cgacacagtagtactctgaggtataggccacttccg

Péptido 17 (no es según la invención)

caacaaagtcgtcatatactgaatagaaaaaaaccg

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Claims (1)

1. imagen1