ES2582828T3 - Lactobacillus plantarum novedoso y composición que lo comprende - Google Patents

Lactobacillus plantarum novedoso y composición que lo comprende Download PDF

Info

Publication number
ES2582828T3
ES2582828T3 ES10827080.2T ES10827080T ES2582828T3 ES 2582828 T3 ES2582828 T3 ES 2582828T3 ES 10827080 T ES10827080 T ES 10827080T ES 2582828 T3 ES2582828 T3 ES 2582828T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
lactobacillus plantarum
composition
cells
cjlp243
test
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
ES10827080.2T
Other languages
English (en)
Inventor
Bong Joon Kim
Heon Woong Jung
Kang Pyo Lee
Sae Hun Kim
Tae Hoon Chun
Kwang Woo Hwang
TaeJoon WON
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
CJ CheilJedang Corp
Original Assignee
CJ CheilJedang Corp
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by CJ CheilJedang Corp filed Critical CJ CheilJedang Corp
Application granted granted Critical
Publication of ES2582828T3 publication Critical patent/ES2582828T3/es
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/741—Probiotics
    • A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
    • A61K35/747—Lactobacilli, e.g. L. acidophilus or L. brevis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9728—Fungi, e.g. yeasts
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2200/00—Function of food ingredients
    • A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
    • A23V2200/318—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on skin health and hair or coat
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/80—Process related aspects concerning the preparation of the cosmetic composition or the storage or application thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/225—Lactobacillus
    • C12R2001/25—Lactobacillus plantarum
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

El Lactobacillus plantarum CJLP243 depositado bajo el número KCCM 11045P.

Description

imagen1
imagen2
imagen3
que se muestran realizaciones ilustrativas de la invención.
El Lactobacillus plaratarum CJLP243 de acuerdo con un aspecto de la presente invención es una cepa novedosa de Lactobacillus plantarum aislada e identificada a partir de alimentos fermentados tradicionales de Corea. La comida 5 fermentada tradicional coreana puede ser kimchi, hortalizas fermentadas, pasta de soja, salsa de soja, chungkookjang, pescado fermentado, o similares, pero no está limitada a los mismos.
Un resultado de un análisis de la secuencia de bases del ARNr 16S para identificar y clasificar Lactobacillus plantarum mostró que Lactobacillus plantarum CJLP243 tenía la homología más alta (99,9%) con una cepa estándar 10 de Lactobacillus plantarum (Lactobacillus plantarum NBRC15891T, Número de acceso GenBank AB326351) y mostró la relación filogenética molecular más estrecha con Lactobacillus plantarum. Por lo tanto, el susodicho microorganismo fue identificado como Lactobacillus plantarum, denominado Lactobacillus plantarum CJLP243, y depositado en el Centro Coreano de Cultivo de Microorganismos (KCCM) el (Núm. de Depósito: KCCM11045P) de 14 de Octubre de 2009. La secuencia de bases de un gene de ARNr 16S de Lactobacillus plantarum CJLP243 se
15 muestra en el SEC ID NO: 1 en la lista de secuencias adjunta.
El Lactobacillus plantarum CJLP243 es una bacteria gram-positiva y un anaerobio facultativo que puede crecer en condiciones aerobias y anaerobias, no produce esporas, no tiene motilidad, y tiene forma de varilla. Las propiedades morfológicas y fisiológicas específicas de Lactobacillus plantarum CJLP243 han sido analizadas de acuerdo con
20 métodos convencionales conocidos en la técnica y se muestra en la Tabla 1 a continuación.
Tabla 1 [Tabla 1]
Propiedades morfológicas, fisiológicas y bioquímicas
Resultados
Morfología
Varilla
Motilidad
-
Espora
-
Catalasa
-
Homo-hetero fermentación
heterofermentación facultativa
Proliferación a 10°C
+
Proliferación a 42°C
+
Proliferación en NaCl al 7%
+
Proliferación en NaCl al 10%
-
Proliferación a pH 3,8
+
Proliferación en condiciones anaerobias
+
Producción de CO2 utilizando glucosa
-
Fermentación de azúcar
Glicerol
-
Eritritol
-
D-arabinosa
-
L-arabinosa
+
Ribosa
+
D-xilosa
-
L-xilosa
-
Adonitol
-
Xilósido
-
Galactosa
+
D-glucosa
+
D-fructosa
+
5
Propiedades morfológicas, fisiológicas y bioquímicas
Resultados
D-manosa
+
L-sorbosa
-
Ramnosa
+
Dulcitol
-
Inositol
-
Manitol
+
Sorbitol
+
D-manósido
+
D-glucósido
+
Glucosamina
+
Amigdalina
+
Alutina
+
Esculina
+
Salicina
+
Celobiosa
+
Maltosa
+
Lactosa
+
Melibiosa
+
Sacarosa
+
Trehalosa
+
Inulina
+
Melicitosa
+
D-rafinosa
+
Almidón
-
Glucógeno
-
Xilitol
-
Gentiobiosa
-
D-turanosa
-
D-lixosa
-
D-tagatosa
-
D-fucosa
-
L-fucosa
-
D-arabitol
-
L-arabitol
-
Gluconato
-
2-gluconato
-
5-gluconato
-
+: Positivo -: Negativo
6
imagen4
imagen5
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
productos farmacéuticos, alimentos funcionales, cosméticos, alimentos para ganado, o aditivos para la alimentación del ganado, sin ninguna preocupación sobre los efectos secundarios.
Si la composición se utiliza como productos farmacéuticos, la composición puede formularse en formulaciones farmacéuticas que se utilizan comúnmente en la técnica. Los productos farmacéuticos pueden ser formulaciones para administración oral tales como líquidos, suspensiones, polvos, gránulos, comprimidos, cápsulas, píldoras, o extractos.
Mientras se formula la composición, se pueden añadir a las formulaciones excipientes o aditivos compatibles farmacéuticamente aceptables. La formulación para administración oral puede incluir al menos uno seleccionado del grupo que consiste de un diluyente, un lubricante, un aglutinante, un disgregante, un edulcorante, un estabilizador, y un conservante, como excipiente, y al menos uno seleccionado del grupo que consiste en un agente aromatizante, una vitamina, y un antioxidante, como aditivo.
El excipiente y el aditivo pueden ser cualquier material farmacéuticamente aceptable. En particular, el diluyente puede ser ácido láctico, almidón de maíz, aceite de soja, celulosa microcristalina, o manitol, el lubricante puede ser estearato de magnesio o talco, y el aglutinante puede ser polivinilpirrolidona o hidroxipropilcelulosa. Además, los disgregantes pueden ser carboximetilcelulosa de calcio, glicolato de almidón sódico, polacrilina de potasio, o crospovidona, el edulcorante puede ser azúcar blanco, fructosa, sorbitol, o aspartamo, el estabilizador puede ser carboximetilcelulosa sódica, β-ciclodextrina, cera blanca, o goma de xantano, y el conservante pueden ser paraoxibenzoato de metilo, paraoxibenzoato de propilo, o sorbato de potasio.
Además de las sustancias anteriores, se pueden añadir a la formulación un aroma natural tal como aroma de ciruela, aroma de limón, aroma de piña, o aroma de hierbas, un zumo de fruta natural, un colorante natural tal como clorofilina o flavonoide, un agente edulcorante tal como fructosa, miel, alcohol de azúcar, o azúcar, o un acidulante, tal como ácido cítrico o citrato de sodio, o combinaciones de los mismos con el fin de mejorar el sabor.
Este método de formulación, y los excipientes y aditivos para la formulación se describen en detalle en Remington's Pharmaceutical Sciences (19a ed., 1995).
La composición se puede utilizar como alimento. El alimento puede incluir no sólo alimentos funcionales, sino también alimentos cotidianos. La composición utilizada como alimento funcional se puede formular en una variedad de formulaciones que se utilizan comúnmente en la técnica con excipientes o aditivos fisiológicamente aceptables. El alimento funcional puede ser polvo, gránulos, comprimidos, cápsulas, suspensiones, emulsiones, jarabes, líquidos, extractos, té, jalea, bebidas, o similares. Se pueden utilizar excipientes o aditivos fisiológicamente aceptables cualesquiera que se utilizan comúnmente en la técnica.
Debido a su eficacia para prevenir o tratar enfermedades atópicas, la composición puede ser utilizado en cosméticos. La composición utilizada en cosméticos se puede formular en una variedad de formulaciones que se utilizan comúnmente en la técnica. Durante la preparación de las formulaciones, pueden añadirse a las mismas excipientes o aditivos que sean aceptables para los cosméticos.
La composición puede ser utilizada como alimento para animales o aditivos de alimento para animales.
Si la composición se utiliza como un aditivo de alimento para animales, la composición puede ser un líquido con alta concentración que oscila de 20 a 90% o se pueden preparar en forma de polvo o gránulos. El aditivo de alimento para animales puede incluir al menos uno seleccionado del grupo que consiste en un ácido orgánico tal como ácido cítrico, ácido fumárico, ácido adípico, ácido láctico o ácido málico, una sal fosfato tal como fosfato de sodio, fosfato de potasio, pirofosfato ácido, o polifosfato (fosfato polimerizado), y un antioxidante natural tal como polifenol, catequina, α-tocoferol, extracto de romero, vitamina C, extracto de té verde, extracto de regaliz, quitosano, ácido tánico o ácido fítico. La composición utilizada como alimento para el ganado se puede formular en una variedad de formulaciones que se utilizan comúnmente en la técnica con ingredientes comúnmente utilizados en la alimentación del ganado.
El aditivo de alimento para animales y el alimento para animales pueden incluir cereales tales como trigo en polvo o pulverizado, avena, cebada, maíz o arroz; alimento para animales con proteína vegetal que contiene colza, habas, o girasol como ingrediente principal; alimento para animales con proteínas animales tales como sangre en polvo, carne en polvo, hueso en polvo, o pescado en polvo; azúcar; y productos lácteos tales como leche en polvo y suero de leche en polvo. El aditivo de alimento para animales y el alimento para animales pueden incluir adicionalmente suplementos de nutrientes, agentes para ayudar a la digestión y la absorción, sustancias promotoras del crecimiento, o similares.
El aditivo de alimento para animales solo se puede administrar a animales o se puede combinar con otro aditivo de alimento para animales en excipientes comestibles que van a ser administrados. Además, el aditivo de alimento para
9
imagen6
imagen7
imagen8
Los resultados se muestran en la FIG. 3. La FIG. 3 es un gráfico que ilustra una capacidad de adherencia de Lactobacillus plantarum CJLP243 a células epiteliales del intestino.
Haciendo referencia a la FIG. 3, Lactobacillus plantarum CJLP243 tenía una mayor capacidad de adherencia a las
5 células epiteliales intestinales después de 24 horas en comparación con Lactobacillus rhamnosus GG (KCTC 5033) comercialmente bien conocida como probiótico. De acuerdo con estos resultados, puede observarse que Lactobacillus plantarum CJLP243 de acuerdo con un aspecto de la presente invención es capaz de adherirse a las células epiteliales intestinales, mejorando así los entornos intestinales.
10 Ejemplo 4: Ensayo de seguridad de las cepas CJLP243 de Lactobacillus plantarum
Con el fin de evaluar la seguridad de las cepas aisladas en el Ejemplo 1, se llevaron a cabo una prueba de hemólisis, una prueba de licuefacción de la gelatina, una prueba de formación de metabolitos peligrosos (amoníaco), y una prueba de fenilalanina desaminasa de acuerdo con los métodos de prueba de seguridad sugeridas por una
15 norma colectiva de la Korean Bio Venture Association.
Los resultados se muestran en la Tabla 2 a continuación.
Tabla 2 20 [Tabla 2]
Seguridad de Lactobacillus plantarum CJLP243
Cepas
Prueba
prueba de licuefacción de la gelatina
prueba de fenilalanina desaminasa prueba de hemólisis prueba de formación de amoniaco
CJLP243
negativo negativo α-hemólisis, seguro negativo
De acuerdo con los resultados, Lactobacillus plantarum CJLP243 fue negativo para la prueba de licuefacción de la gelatina, la prueba de formación de metabolitos peligrosos (amoníaco), y la prueba de fenilalanina desaminasa, y mostró α-hemólisis que se estima no estaba relacionada con un patógeno. De este modo, se comprobó que
25 Lactobacillus plantarum CJLP243 se puede administrar de forma segura para el cuerpo humano.
Ejemplo 5: Crecimiento de las células inmunitarias de ratón a modo de experimento ex vivo
Con el fin de identificar la capacidad potenciadora inmunológica de Lactobacillus plantarum CJLP 243, se identificó
30 el crecimiento de las células inmunitarias de ratón mediante un ensayo MTT. El ensayo MTT se realizó como sigue de acuerdo con las instrucciones del fabricante de un kit de ensayo MTT (Promega, número de cat. G5430). En primer lugar, se diluyeron las células inmunitarias obtenidas mediante la eliminación de células de la sangre de esplenocitos de un ratón B6 en un medio RPMI 1640 que contenía suero bovino fetal al 10%. Después, las células inmunitarias se sembraron en la placa de 96 pocillos en la cantidad de 1 x 106 células/pocillo (volumen total de 200
35 μℓ). Después de que se completó la siembra de las células inmunitarias, se añadieron a cada pocillo Lactobacillus plantarum CJLP 243 vivos (5 x 106 células) y se cultivaron a 37°C en una incubadora con CO2 al 5% durante 3 días. Después de 3 días, se retiraron 100 μℓ de medio 1 hora antes del ensayo MTT con el fin de prepararse para el ensayo MTT. A continuación, se dispensaron a cada pocillo 20 μℓ de solución de MTT (2 mg/mL), y después se cultivó a 37°C durante 1 hora. Después, se midió la absorbancia a 490 nm usando un lector de ELISA (Molecular
40 Device, EE.UU.). Este procedimiento se repitió al menos 3 veces. En este procedimiento, en los grupos de control positivo, cada uno a una concentración de 10 mg/mL, se utilizaron concanavalina A (Con A; Número de cat. Sigma L6397), fitohemaglutamina (PHA; número de cat Sigma L8902), o lipopolisacárido (LPS; Número de cat. Sigma L4516), que son los principales mitógenos. Por otra parte, se adquirió β-glucano puro al 99% de Sigma Chemical (número de cat G5011, EE.UU.) y se utilizó a la concentración final de 1,25 g/mL para comparar la capacidad de
45 potenciación inmunológica. Los resultados se muestran en la figura. 4.
La FIG. 4 es un gráfico que ilustra los resultados del ensayo MTT que se realizó sobre las células inmunitarias de bazo, que se aislaron de un ratón y se cultivaron ex vivo, y después se trató con Lactobacillus plantarum CJLP243.
50 Haciendo referencia a la FIG. 4, se puede decir que Lactobacillus plantarum CJLP243 tiene capacidad superior para activar el crecimiento de los esplenocitos en comparación con los principales mitógenos, ß-glucano, y Lactobacillus rhamnosus GG (KCTC 5033), y por lo tanto se confirma que es capaz de inducir la potenciación de la inmunidad.
Ejemplo 6: Capacidad de producir IFN-γ utilizando el análisis de citoquinas
55 Con el fin de identificar una capacidad de potenciar el sistema inmunitario de Lactobacillus plantarum CJLP243 en
13 5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
un antígeno foráneo, se midió la capacidad de producción de IFN-γ, una citoquina de tipo Th1, utilizando un ensayo ELISA. En primer lugar, se diluyeron las células inmunitarias obtenidas mediante la eliminación de células de la sangre a partir de esplenocitos de un ratón B6 en un medio RPMI 1640 que contenía suero bovino fetal al 10%. Después, las células inmunitarias se sembraron en la placa de 96 pocillos en la cantidad de 1 x 106 células/pocillo (volumen total de 200 µℓ). Después de que se completó la siembra de las células inmunitarias, se añadieron a cada pocillo Lactobacillus plantarum CJLP 243 vivas (5 x 105 células) y se cultivaron a 37°C en una incubadora con CO2 al 5% durante 3 días. Después de 3 días, se retiraron 50 µℓ del medio de cultivo y se midió la cantidad de IFN-γ contenida en el mismo utilizando el ensayo ELISA. Para llevar a cabo el ensayo ELISA, una placa de ELISA se revistió con un anticuerpo IFN-γ a temperatura ambiente durante 4 horas, y a continuación se añadieron a la misma 50 µℓ del medio de cultivo y se cultivaron a temperatura ambiente. Después, el medio de cultivo se eliminó de la placa de ELISA, que después se recubrió con un anticuerpo para IFN-γ biotinilado (BD Bioscience, número de cat. 554410), que es un segundo anticuerpo, a temperatura ambiente durante aproximadamente 2 horas. La reacción de color se indujo mediante estreptavidina conjugada con peroxidasa de rábano picante (Vectore, número de cat. SA5004) y su sustrato, TMB (3,3',5,5'-tetrametilbencidina, KPL, número de cat. 50-76-03). Después de llevar a cabo la reacción de color, se añadieron 100 µg/mL de solución de parada (HCl3M) a la placa con el fin de detener la reacción de color. En este momento, la reacción de color mostró el cambio de color de azul a amarillo, y la absorbancia se midió a 450 nm utilizando un lector de ELISA (Molecular Device, EE.UU.) después de que se detuvo la reacción de color. Este procedimiento se repitió al menos 3 veces. En estos procedimientos, en los grupos positivos de control se utilizaron concanavalina A (Con A; número de cat. Sigma L6397), fitohemaglutamina (PHA; número de cat. Sigma L8902), o lipopolisacárido (LPS; número de cat. Sigma L4516), que son los principales mitógenos, cada uno a la concentración de 10 µg/mL. Adicionalmente, se adquirió β-glucano al 99% puro de Sigma Chemical (número de cat. G5011, EE.UU.) y se utilizó en una cantidad de 1,25 mg al final para comparar la capacidad de potenciación inmunológica. Los resultados se muestran en la FIG. 5.
La FIG. 5 es un gráfico que ilustra los resultados del ensayo de IFN-γ que se realizó sobre las células inmunitarias del bazo que se aislaron de ratón y se cultivaron ex vivo, y después se trataron con Lactobacillus plantarum CJLP243.
Haciendo referencia a la figura. 5, se puede decir que Lactobacillus plantarum CJLP243 tiene capacidad inferior a los principales mitógenos que son grupos de control positivo, pero capacidad significativamente superior a Lactobacillus rhamnosus GG (KCTC 5033) con respecto a la producción de IFN-γ, y por lo tanto se confirma que es capaz de inducir la inmunidad de tipo Th1 potenciada.
Ejemplo 7: Inmunidad potenciada de la cepa CJLP243 de Lactobacillus plantarum cuando se administra por vía oral
Se llevó a cabo como un ensayo para la identificación de la potenciación de la inmunidad de una cepa CJLP243 de Lactobacillus plantarum cuando se administra por vía oral de la siguiente manera.
Se adquirieron ratones Balb/c hembras de 4 semanas de edad, y se mantuvieron para la estabilización durante 1 semana en una sala de cría de animales, que estaba en la condición SPF mantenida a una temperatura de 24 ± 2°C y una humedad de 55 ± 15%. A los ratones se les proporcionó alimento general en polvo para animales a lo que se añadieron algunos antibióticos, y se les proporcionó agua ad libitum. Cada Lactobacillus rhamnosus GG y Lactobacillus plantarum CJLP 243 se procesó en forma de polvo liofilizado, que se mantuvo refrigerado. Las bacterias ácido lácticas se mezclaron uniformemente con el alimento en polvo para animales y se administraron oralmente a los ratones a una dosis de 2,5 x 1010 UFC/día/ratón. El peso de cada ratón se midió durante 8 semanas durante la administración, y a continuación todos los ratones fueron sacrificados para los siguientes experimentos.
Se retiró el bazo de cada ratón sacrificado, y se midieron su longitud y su peso. El bazo fue aplastado utilizando un émbolo de una jeringa y se filtró a través de una malla con el fin de separar las células, y estos procedimientos se llevaron a cabo en un tampón ACK. Las células separadas se contaron utilizando un microscopio.
Con el fin de identificar el cambio en la composición de células inmunitarias en los esplenocitos separados, las células T en las células separadas se tiñeron con anticuerpos anti-Thy1.2-FITC, y las células B se tiñeron con anticuerpos anti-CD 19-FITC. Las células T CD se tiñeron con anticuerpos anti-Thy1.2-FITC y anticuerpos anti-CD4-PE, y las células CD8 se tiñeron con anticuerpos anti-Thy1.2-FITC y anticuerpos anti-CD8-PE. Se analizaron las células teñidas en cada tejido para determinar su proporción de composición utilizando un FACScan (BD Biosciences, EE.UU.).
Los esplenocitos separados se trataron con ConA a una concentración de 5 µg/mL para estimular los linfocitos T. Después de 24 horas, se retiró el sobrenadante y se midieron las concentraciones de IFN-γ e IL-2, citoquinas de los linfocitos T, utilizando un ELISA. Una microplaca se recubrió con IFN-γ y anticuerpos de captura para IL-2 a 4°C durante la noche, y después se lavó con PBS (PBST) que contenía Tween 20 al 0,05% y se bloqueó con PBS que contenía suero bovino fetal al 3%. Después de 1 hora, la microplaca se lavó y se añadieron a cada pocillo el sobrenadante y una solución convencional (una solución convencional proporcionada por BD Bioscience) y se
14
imagen9
imagen10
imagen11

Claims (1)

  1. imagen1
ES10827080.2T 2009-10-28 2010-10-27 Lactobacillus plantarum novedoso y composición que lo comprende Active ES2582828T3 (es)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR20090102822 2009-10-28
KR1020090102822A KR101178217B1 (ko) 2009-10-28 2009-10-28 신규한 락토바실러스 플란타룸 및 이를 포함하는 조성물
PCT/KR2010/007431 WO2011052996A2 (en) 2009-10-28 2010-10-27 Novel lactobacillus plantarum and composition comprising the same

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2582828T3 true ES2582828T3 (es) 2016-09-15

Family

ID=43922829

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES10827080.2T Active ES2582828T3 (es) 2009-10-28 2010-10-27 Lactobacillus plantarum novedoso y composición que lo comprende

Country Status (13)

Country Link
US (3) US10093995B2 (es)
EP (1) EP2494031B1 (es)
JP (1) JP5709883B2 (es)
KR (1) KR101178217B1 (es)
CN (1) CN102597216B (es)
AU (1) AU2010314024B2 (es)
CA (1) CA2778372C (es)
DK (1) DK2494031T3 (es)
ES (1) ES2582828T3 (es)
MY (1) MY156849A (es)
PH (1) PH12012500847A1 (es)
PL (1) PL2494031T3 (es)
WO (1) WO2011052996A2 (es)

Families Citing this family (36)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101239806B1 (ko) * 2011-04-01 2013-03-06 주식회사한국야쿠르트 면역증강 활성을 가지는 신규한 락토바실러스 플란타룸 에이취와이 7712
ES2402014B1 (es) 2011-09-07 2014-02-27 Consejo Superior De Investigaciones Científicas (Csic) Peptido secretado por lactobacillus plantarum con función inmunomoduladora
JP6052485B2 (ja) * 2012-02-16 2016-12-27 国立大学法人金沢大学 免疫活性化乳酸菌組成物及び免疫活性化乳酸発酵食品
JP6052721B2 (ja) * 2012-06-28 2016-12-27 東海漬物株式会社 新規乳酸菌
BR122022016606B1 (pt) 2013-07-12 2023-01-24 Morinaga Milk Industry Co., Ltd Lactobacillus paracasei mortos pelo aquecimento, medicamento, alimento ou bebida, ração, agente promotor da produção de il-12 e uso
RU2607370C1 (ru) 2013-07-12 2017-01-10 Моринага Милк Индастри Ко., Лтд. Штамм молочнокислой бактерии, лекарственное средство, продукт питания, напиток, а также корм, которые содержат штамм молочнокислой бактерии
KR20160069733A (ko) * 2014-12-09 2016-06-17 (주)바이오리듬 신규한 균주로 알러지, 아토피성 피부염, 비염, 가려움증 등의 개선치료 및 면역력조절 기능을 갖는 Lactobacillus plantarum K-1 BR 균주
CN104611275B (zh) * 2015-02-11 2017-10-17 成都与康科技有限公司 植物乳杆菌ucn‑11菌株及其组合物和应用
KR101696670B1 (ko) * 2015-06-29 2017-01-16 롯데제과주식회사 내산성, 내담즙성 및 세포 부착능이 우수한 락토바실러스 플랜타럼 llp5193, 및 이를 유효성분으로 포함하는 제품
US20190029311A1 (en) * 2015-12-17 2019-01-31 Cj Cheiljedang Corporation Coating method of lactic acid bacteria with increased intestinal survival rate
BE1024425B9 (nl) * 2016-06-21 2018-03-26 Yun NV Dermatologische preparaten voor het onderhouden en/of herstellen van een gezonde huidmicrobiota
KR101848230B1 (ko) * 2016-11-21 2018-05-28 롯데제과 주식회사 락토바실러스 균주의 안정성 증진을 위한 프리바이오틱스 조성물 및 이를 이용한 안정화 증진방법
KR101910808B1 (ko) * 2016-11-28 2018-10-24 주식회사 쎌바이오텍 유산균 유래 p8 단백질 및 이의 항암 용도
CN110494551B (zh) * 2017-01-31 2023-06-16 庆熙大学校产学协力团 新型乳酸菌及其用途
EP3578637A4 (en) * 2017-01-31 2020-12-16 University - Industry Cooperation Group of Kyung Hee University NEW LACTIC BACTERIA AND THEIR USE
CN107937581B (zh) * 2017-12-28 2021-09-17 内蒙古农业大学 用于乳酸菌测序的扩增引物对、乳酸菌种属鉴定方法及应用
CN107937320B (zh) * 2018-01-08 2021-03-16 金华银河生物科技有限公司 一株植物乳杆菌、该植物乳杆菌冻干粉及其制备方法
CN108504648A (zh) * 2018-03-19 2018-09-07 金华银河生物科技有限公司 一种乳酸菌的共价包埋方法及乳酸菌制剂
CN108315277B (zh) * 2018-03-19 2021-01-05 金华银河生物科技有限公司 一株植物乳杆菌及一种冷冻干燥乳酸菌的方法
KR20190127156A (ko) 2018-05-03 2019-11-13 씨제이제일제당 (주) 항바이러스 및 면역조절 효능을 가지는 락토바실러스 플란타럼 cjlp17 및 이를 포함하는 조성물
AR119653A1 (es) 2018-07-13 2022-01-05 Cj Cheiljedang Corp Cepa cjlp475 de lactobacillus plantarum que tiene efectos antivirales e inmunomoduladores y una composición que comprende la misma
AR115758A1 (es) * 2018-07-13 2021-02-24 Cj Cheildang Corp Composición que comprende la cepa de lactobacillus plantarum cjlp475 y la cepa de lactobacillus plantarum cjlp243 y uso de la misma
AR115757A1 (es) * 2018-07-13 2021-02-24 Cj Cheiljedang Corp Composición que comprende la cepa cjlp475 de lactobacillus plantarum y la cepa cjlp17 de lactobacillus plantarum y el uso de la misma
WO2020091334A1 (ko) 2018-10-30 2020-05-07 씨제이제일제당 (주) 유산균의 동결 보호를 위한 시스테인 또는 이의 염의 용도
KR102196561B1 (ko) * 2019-08-20 2020-12-29 (주)필인터내셔널 피막층 내 사균체를 포함하는 연질캡슐제
US12502412B2 (en) 2019-12-31 2025-12-23 Gi Biome Lactobacillus fermentum strain, and composition for preventing or treating metabolic diseases, comprising same
KR102135879B1 (ko) * 2020-02-13 2020-07-21 주식회사 케이티앤지 신규 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) KC3 균주를 이용한 면역장애, 호흡기 염증 질환, 알레르기 및 천식의 예방 또는 치료용 조성물 및 이의 용도
AU2021229110B2 (en) 2020-02-26 2024-05-23 Gi Biome Lactobacillus Helveticus strain and composition containing same for prevention or treatment of inflammatory diseases
KR102139732B1 (ko) * 2020-04-27 2020-08-03 주식회사 항신바이탈 유산균을 함유하는 면역 기능 개선용 조성물
KR102154255B1 (ko) * 2020-05-22 2020-09-09 (주)녹십자웰빙 유산균을 함유하는 미세먼지 자극에 의한 호흡기 질환 또는 염증 질환 치료용 조성물
CN111529703B (zh) * 2020-06-17 2023-09-15 湖南循天然营养有限公司 一种组合物及其制备方法与在制备免疫佐剂中的应用
KR102623045B1 (ko) * 2021-03-22 2024-01-10 주식회사 지아이바이옴 락토바실러스 플란타럼 gb104 균주 및 이를 포함하는 암 예방 또는 치료용 조성물
CN113575961A (zh) * 2021-07-30 2021-11-02 宁波大学 茶多酚益生乳酸菌粉剂及其制备方法
KR102474576B1 (ko) * 2022-03-03 2022-12-06 농업회사법인 주식회사 반디 샐러드 채소 부산물 및 유산균을 포함하는 친환경 사료 조성물
KR102868578B1 (ko) * 2022-08-03 2025-10-13 씨제이웰케어 주식회사 면역조절 기능이 강화된 유산균 사균체 생산 방법
JP2025536702A (ja) * 2022-11-17 2025-11-07 ジーアイ ロンジェビティ インク． ラクチプランチバチルス・プランタルム菌株、その由来の培養液およびその抗アレルギー用途

Family Cites Families (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5514791A (en) * 1986-03-26 1996-05-07 Getty Scientific Development Company Genetic control of acetylation and pyruvylation of xanthan based polysaccharide polymers
SE519648C2 (sv) * 1998-03-06 2003-03-25 Essum Ab Ny stam av Lactobacillus plantarum
AU6571400A (en) * 1999-08-20 2001-03-19 Smithkline Beecham Laboratoires Pharmaceutiques S.A.S. Pharmaceutical formulation comprising amoxycillin and clavulanate
JP4667568B2 (ja) * 2000-09-01 2011-04-13 ハウスウェルネスフーズ株式会社 免疫増強組成物
KR20010000390A (ko) 2000-09-26 2001-01-05 이영준 김치추출물을 함유하는 노화 및 여드름을 포함한피부개선제 혼합조성물
TWI277651B (en) * 2002-09-02 2007-04-01 Genmont Biotech Inc New use of some lactobacillus strains in treating allergy
US20040047849A1 (en) * 2002-09-11 2004-03-11 Genmont Biotech Inc. Use of some lactobacillus strains in treating allergy
FR2848115B1 (fr) * 2002-12-05 2005-03-25 Rhodia Chimie Sa Composition de bacteries et son utilisation
US7740838B2 (en) * 2002-12-05 2010-06-22 Danisco A/S Bacterial composition and its use
ATE421256T1 (de) * 2003-03-13 2009-02-15 Kirin Holdings Kk Probiotische zusammensetzung
KR20040081242A (ko) * 2003-03-14 2004-09-21 변재영 김치제조방법
EP1664796B1 (en) * 2003-09-15 2010-12-15 Oklahoma Medical Research Foundation Method of using cytokine assays to diagnose, treat, and evaluate ankylosing spondylitis
US9314041B2 (en) 2005-03-03 2016-04-19 Meiji Co., Ltd. Immune function modulating agents
JP2007117031A (ja) * 2005-10-31 2007-05-17 Nakagaki Gijutsushi Jimusho:Kk インターフェロンガンマ発現誘導作用を有する発酵乳、及び発酵乳製造用種菌
WO2007108763A1 (en) * 2006-03-17 2007-09-27 Probac Ab Use of lactobacillus strains for promoting immunotolerance in autoimmune disease
US8114658B2 (en) * 2006-08-10 2012-02-14 House Wellness Foods Corporation Method of moisturizing skin

Also Published As

Publication number Publication date
CN102597216A (zh) 2012-07-18
MY156849A (en) 2016-04-15
WO2011052996A3 (en) 2011-08-25
AU2010314024A1 (en) 2012-05-10
KR101178217B1 (ko) 2012-09-07
DK2494031T3 (en) 2016-08-01
CA2778372C (en) 2017-02-07
EP2494031A2 (en) 2012-09-05
US20120208260A1 (en) 2012-08-16
EP2494031B1 (en) 2016-04-20
EP2494031A4 (en) 2013-11-06
US20210054467A1 (en) 2021-02-25
AU2010314024B2 (en) 2013-10-24
PL2494031T3 (pl) 2016-10-31
CN102597216B (zh) 2015-01-07
HK1173468A1 (en) 2013-05-16
PH12012500847A1 (en) 2013-01-07
US20190062852A1 (en) 2019-02-28
KR20110046020A (ko) 2011-05-04
JP5709883B2 (ja) 2015-04-30
WO2011052996A2 (en) 2011-05-05
US11760970B2 (en) 2023-09-19
US10844443B2 (en) 2020-11-24
CA2778372A1 (en) 2011-05-05
US10093995B2 (en) 2018-10-09
JP2013509176A (ja) 2013-03-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2582828T3 (es) Lactobacillus plantarum novedoso y composición que lo comprende
US9962417B2 (en) Lactobacillus plantarum and composition containing same
CN102292431B (zh) 一种植物乳杆菌及含该植物乳杆菌的组合物
ES2929354T3 (es) Lactobacillus plantarum CJLP17 con eficacia antiviral e inmunomoduladora y composición que comprende el mismo
JP6931718B2 (ja) 抗ウイルス効果及び免疫調節効能を有するラクトバチルス・プランタルムｃｊｌｐ４７５菌株及びそれを含む組成物
CN111032857B (zh) 包括植物乳杆菌cjlp475菌株和植物乳杆菌cjlp243菌株的组合物及其用途
CN110997898B (zh) 包括植物乳杆菌cjlp475菌株和植物乳杆菌cjlp17菌株的组合物及其用途
KR101905322B1 (ko) 유산균을 포함하는 면역 증강용 조성물
KR102244732B1 (ko) 프로바이오틱 초산균인 아세토박터 파스테리아누스 mglv 및 이의 면역조절 효과
Kim et al. Composition comprising Lactobacillus plantarum CJLP475 strain and Lactobacillus plantarum CJLP243 strain and use thereof
BR112019026602B1 (pt) COMPOSIÇÃO QUE COMPREENDE CEPAS DE Lactobacillus plantarum E MÉTODO PARA PREPARAR A DITA COMPOSIÇÃO