ES2559042T3 - Compuestos intermedios para preparar peptidomiméticos de Smac - Google Patents

Abstract

Un compuesto de fórmula 7**Fórmula**

Description

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DESCRIPCION

Compuestos intermedios para preparar peptidomimeticos de Smac

La presente invencion se refiere en general a compuestos novedosos que son productos intermedios en la preparacion de compuestos novedosos que inhiben el enlace de la proteina Smac al Inhibidor de Proteinas de Apoptosis (IAP), tales compuestos son en general farmacologicamente utiles como agentes en terapias cuyo mecanismo de accion se apoye en la inhibicion de la interaccion de Smac/IAP, y mas particularmente utiles en terapias para el tratamiento de enfermedades proliferativas, incluyendo cancer.

Antecedentes

La muerte celular programada tiene un papel critico en la regulacion del numero de celulas y en la eliminacion de las celulas estresadas o danadas de los tejidos normales. En realidad, la red de mecanismos de senalizacion apoptotica inherentes en la mayoria de los tipos de celulas proporciona una barrera mayor para el desarrollo y progreso del cancer humano. Debido a que la radiacion y las quimioterapias mas comunmente empleadas se apoyan en la activacion de las sendas apoptoticas para aniquilar las celulas de cancer, las celulas tumorales que son capaces de evadir la muerte celular programada con frecuencia llegan a ser resistentes al tratamiento.

Las redes de senalizacion de apoptosis se clasifican como intrinsecas cuando son mediadas por las interacciones de receptor de muerte-ligando, o bien como extrinsecas cuando son mediadas por estres celular y permeabilizacion mitocondrial. Ambas sendas convergen finalmente en las Caspasas individuales. Una vez activadas, las Caspasas disocian un numero de sustratos relacionados con la muerte celular, efectuando la destruccion de la celula.

Las celulas tumorales han ideado un numero de estrategias para circunvenir la apoptosis. Un mecanismo molecular recientemente reportado involucra la sobre-expresion de miembros de la familia de IAP. Los inhibidores de las proteinas de apoptosis sabotean la apoptosis mediante su interaccion directa con, y la neutralizacion de, las Caspasas. Los inhibidores de proteinas de apoptosis prototipo, XIAP y cIAP, tienen tres dominios funcionales referidos como los dominios BIR 1, 2 y 3. El dominio BIR3 interactua directamente con la Caspasa 9, e inhibe su capacidad para enlazarse y disociar su sustrato natural, la Pro-caspasa 3.

Se ha reportado que una proteina mitocondrial pro-apoptotica, Smac (tambien conocida como DIABLO), es capaz de neutralizar XIAP y/o cIAP mediante su enlace con un bolsillo de enlace de peptido (sitio de enlace de Smac) sobre la superficie de BIR3, precluyendo de esta manera la interaccion entre XIAP y/o cIAP y la Caspasa 9. La presente invencion se refiere a productos intermedios para preparar moleculas terapeuticas que se enlazan con el bolsillo de enlace de Smac, promoviendo de esta manera la apoptosis en las celulas que se dividen rapidamente. Estas moleculas terapeuticas son utiles para el tratamiento de enfermedades proliferativas, incluyendo cancer.

La WO 2005/097791 describe derivados amida que inhiben el enlazamiento de la proteina Smac a las proteinas inhibidoras de la apoptosis (IAP).

Sumario de la invencion

La presente invencion se refiere a compuestos novedosos de formulas 6 y 7:

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que son de uso en la preparacion del compuesto novedoso compuesto A (fSJ-W-('('SJ1-ciclohexil-2-{(S)-2-[4-(4-fluoro- benzoil)-tiazol-2-il]-pirrolidin-1-il}-2-oxo-etil)-2-metilamino-propionamida, ejemplo 1) o sales farmaceuticamente 5 aceptables de los mismos.

El compuesto A es un compuesto de formula (I):

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Ri es H, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono, alquenilo de 2 a 4 atomos de carbono, alquinilo de 2 a 4 atomos de carbono, o cicloalquilo de 3 a 10 atomos de carbono, cuyo R1 puede estar insustituido o sustituido;

R2 es H, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono, alquenilo de 2 a 4 atomos de carbono, alquinilo de 2 a 4 atomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 10 atomos de carbono, cuyo R2 puede estar insustituido o sustituido;

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R3 es H, CF3, C2F5, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono, alquenilo de 2 a 4 atomos de carbono, alquinilo de 2 a 4 atomos de carbono, CH2-Z, o

R2 y R3, tomados junto con el atomo de nitrogeno con el que estan unidos, forman un anillo heteroclclico, cuyo alquilo, alquenilo, alquinilo, o anillo heteroclclico puede estar insustituido o sustituido;

Z es H, OH, F, Cl, CH3, CH2Cl, CH2F o CH2OH;

R4 es alquilo de 0 a 10 atomos de carbono, alquenilo de 0 a 10 atomos de carbono, alquinilo de 0 a 10 atomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 10 atomos de carbono, en donde el grupo alquilo de 0 a 10 atomos de carbono, o cicloalquilo esta insustituido o sustituido;

A es het, el cual puede estar sustituido o insustituido;

D es alquileno de 1 a 7 atomos de carbono o alquenileno de 2 a 9 atomos de carbono, C(O), O, NR7, S(O)r, C(O)- alquilo de 1 a 10 atomos de carbono, O-alquilo de 1 a 10 atomos de carbono, S(O)r-alquilo de 1 a 10 atomos de carbono, C(O)-arilalquilo de 0 a 10 atomos de carbono, O-arilalquilo de 0 a 10 atomos de carbono, o S(O)r- arilalquilo de 0 a 10 atomos de carbono, cuyos grupos alquilo y arilo pueden estar insustituidos o sustituidos;

r es 0, 1, o 2;

A1 es un arilo sustituido o insustituido o het insustituido o sustituido, cuyos sustituyentes sobre arilo y het son halogeno, alquilo, alcoxilo inferior, NR5R6, CN, NO2 o SRs;

cada Q es independientemente H, alquilo de 1 a 10 atomos de carbono, alcoxilo de 1 a 10 atomos de carbono, aril-alcoxilo de 1 a 10 atomos de carbono, OH, O-alquilo de 1 a 10 atomos de carbono, (CH2)0-6-cicloalquilo de 3 a 7 atomos de carbono, arilo, aril-alquilo de 1 a 10 atomos de carbono, O-(CH2)0-6 arilo, (CH2)1-6 het, het, O-(CH2)1-6 het, -OR11, C(O)Rn, -C(O)N(Rh)(R12), N(Rh)(R12), SR11, S(O)Rn, S(O)2 R11, S(O)2-N(Rn)(R12), o NRn-S(O)2- (R12), en donde alquilo, cicloalquilo y arilo estan insustituidos o sustituidos;

n es 0, 1, 2 o 3, 4, 5, 6 o 7;

het es un anillo heteroclclico monoclclico de 5 a 7 miembros que contiene de 1 a 4 heteroatomos del anillo seleccionados a partir de N, O y S, o un sistema de anillo fusionado de 8 a 12 miembros que incluye un anillo heteroclclico monoclclico de 5 a 7 miembros que contiene 1, 2, o 3 heteroatomos del anillo seleccionados a partir de N, O y S, cuyo het esta insustituido o sustituido;

R11 y R12 son independientemente H, alquilo de 1 a 10 atomos de carbono, (CH2)0-6-cicloalquilo de 3 a 7 atomos de carbono, (CH2)0-6-(CH)0-1(arilo)1-2, C(O)-alquilo de 1 a 10 atomos de carbono, -C(O)-(CH2)1-6-cicloalquilo de 3 a 7 atomos de carbono, -C(O)-O-(CH2)0-6-arilo, -C(O)-(CH2)0-6-O-fluorenilo, C(O)-NH-(CH2)0-6-arilo, C(O)-(CH2)0-6- arilo, C(O)-(CH2)1-6-het, -C(S)-alquilo de 1 a 10 atomos de carbono, -C(S)-(CH2)1-6-cicloalquilo de 3 a 7 atomos de carbono, -C(S)-O-(CH2)0-6-arilo, -C(S)-(CH2)0-6-O-fluorenilo, C(S)-NH-(CH2)0-6-arilo, -C(S)-(CH2)0-6-arilo, o C(S)- (CH2)-i-6-het, C(O)R11, C(O)NR11R12, C(O)OR11, S(O)nR11, S(O)mNR11R12, m = 1 o 2, C(S)R11, C(S)NR11R12, C(S)ORn, en donde alquilo, cicloalquilo y arilo estan insustituidos o sustituidos; o R11 y R12 son un sustituyente que facilita el transporte de la molecula a traves de una membrana celular, o

R11 y R12, junto con el atomo de nitrogeno, forman het,

en donde:

los sustituyentes de alquilo de R11 y R12 pueden estar insustituidos o sustituidos por uno o mas sustituyentes seleccionados a partir de alquilo de 1 a 10 atomos de carbono, halogeno, OH, O-alquilo de 1 a 6 atomos de carbono, -S-alquilo de 1 a 6 atomos de carbono, CF3 o NR11R12;

los sustituyentes de cicloalquilo sustituido de R11 y R12 estan sustituidos por uno o mas sustituyentes seleccionados a partir de un alqueno de 2 a 10 atomos de carbono; alquilo de 1 a 6 atomos de carbono; halogeno; OH; O-alquilo de 1 a 6 atomos de carbono; S-alquilo de 1 a 6 atomos de carbono, CF3; o NR11R12 y

het sustituido o arilo sustituido de R11 y R12 estan sustituidos por uno o mas sustituyentes seleccionados a parti r de halogeno, hidroxilo, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono, alcoxilo de 1 a 4 atomos de carbono, nitro, CNO-C(O)- alquilo de 1 a 4 atomos de carbono, y C(O)-O-alquilo de 1 a 4 atomos de carbono;

R5, R6 y R7 son independientemente hidrogeno, alquilo inferior, arilo, aril-alquilo inferior, cicloalquilo, o cicloalquil- 5 alquilo inferior, C(O)RS; S(O)Rs, C(O)ORS, C(O)N R5R6, y

los sustituyentes sobre R1, R2, R3, R4, Q, y los grupos A y A1, son independientemente halogeno, hidroxilo, alquilo inferior, alquenilo inferior, alquinilo inferior, alcanollo inferior, alcoxilo inferior, arilo, aril-alquilo inferior, amino, amino-alquilo inferior, di-alquilo inferior-amino, alcanollo inferior, amino-alcoxilo inferior, nitro, ciano, ciano-alquilo inferior, carboxilo, carbalcoxilo inferior, alcanollo inferior, arilollo, arilo inferior-alcanollo, carbamollo, N-mono- o 10 N,N-di-alquilo inferior-carbamollo, ester del acido alquilo inferior-carbamico, amidino, guanidina, ureido, mercapto,

sulfo, tioalquilo inferior, sulfoamino, sulfonamida, benzo-sulfonamida, sulfonato, sulfanil-alquilo inferior, aril- sulfonamida, aril-sulfonato sustituido por halogeno, alquilo inferior-sulfinilo, aril-sulfinilo; aril-alquilo inferior-sulfinilo, alquilo inferior-aril-sulfinilo, alquilo inferior-sulfonilo, aril-sulfonilo, aril-alquilo inferior-sulfonilo, aril-alquilo inferior- alquilo inferior-aril-sulfonilo, halogeno-alquilo inferior-mercapto, halogeno-alquilo inferior-sulfonilo, fosfono 15 (-P(=O)(OH)2), hidroxi-alcoxilo inferior-fosforilo, o di-alcoxilo inferior-fosforilo, (Ra)NC(O)-NR1oR13, ester del acido

alquilo inferior-carbamico o carbamatos o -NRbRm,

en donde:

Rb y R14 pueden ser iguales o diferentes, y son independientemente H o alquilo inferior, o

R8 y R14, junto con el atomo de nitrogeno, forman un anillo heteroclclico de 3 a 8 miembros que contiene un 20 heteroatomo de nitrogeno del anillo, y que opcionalmente puede contener uno o dos heteroatomos adicionales del anillo seleccionados a partir de nitrogeno, oxlgeno, y azufre, cuyo anillo heteroclclico puede estar insustituido o sustituido con alquilo inferior, halogeno, alquenilo inferior, alquinilo inferior, hidroxilo, alcoxilo inferior, nitro, amino, alquilo inferior, amino, di-alquilo inferior-amino, ciano, carboxilo, carbalcoxilo inferior, formilo, alcanollo inferior, oxo, carbarmollo, N- o N,N-di-alquilo inferior-carbamollo, mercapto, o tioalquilo inferior; y

25 Rg, R10 y R*13 son independientemente hidrogeno, alquilo inferior, alquilo inferior sustituido por halogeno, arilo,

aril-alquilo inferior, arilo sustituido por halogeno, aril-alquilo inferior sustituido por halogeno.

Descripcion detallada de la presente invencion

Como se utiliza en la presente, el termino “arilo” se define como un radical aromatico que tiene de 6 a 14 atomos de carbono del anillo, y ningun heteroatomo del anillo. El grupo arilo puede ser monoclclico, o biclclico o triclclico 30 fusionado. Puede estar insustituido o sustituido por uno o mas, de preferencia uno o dos sustituyentes, en donde los sustituyentes son como se describen en la presente. Como se define en la presente, la fraccion de arilo puede ser completamente aromatica independientemente de si es monoclclica o biclclica. Sin embargo, si contiene mas de un anillo, como se define en la presente, el termino “arilo” incluye las fracciones en donde cuando menos un anillo es completamente aromatico, mientras que los otros anillos pueden estar parcialmente insaturados o 35 saturados, o pueden ser completamente aromaticos. El “arilo” preferido es fenilo, naftilo, o indanilo. El arilo mas preferido es fenilo.

“Het”, como se utiliza en la presente, se refiere a los compuestos de heteroarilo y heteroclclicos que contienen cuando menos un heteroatomo del anillo de S, O, o N. De una manera mas especlfica, “het” es un anillo heteroclclico de 5 a 7 miembros que contiene de 1 a 4 heteroatomos seleccionados a partir de N, O, y S, o un 40 sistema de anillo fusionado de 8 a 12 miembros que incluye cuando menos un anillo heteroclclico de 5 a 7 miembros, que contiene 1, 2, o 3 heteroatomos seleccionados a partir de N, O, y S. Los ejemplos de het, como se utilizan en la presente, incluyen pirrolidilo, tetrahidrofurilo, tetrahidrotiofurilo, piperidilo, piperazilo, purinilo, tetrahidropiranilo, morfolino, 1,3-diazapanilo, 1,4-diazapanilo, 1,4-oxazepanilo, 1,4-oxatiapanilo, furilo, tienilo, pirrilo, pirrolilo, pirazolilo, triazolilo, tetrazolilo, indazolilo, oxadiazolilo, imidazolilo, pirrolidilo, pirrolidinilo, tiazolilo, 45 oxazolilo, piridilo, pirazolilo, pirazinilo, pirimidinilo, isoxazolilo, pirazinilo, quinolilo, isoquinolilo, piridopirazinilo, pirrolopiridilo, furopiridilo, indolilo, benzofurilo, benzotiofurilo, benzoindolilo, benzotienilo, pirazolilo, piperidilo, piperazinilo, indolinilo, morfolinilo, benzoxazolilo, pirroloquinolilo, y similares. Los heteroarilos estan dentro del alcance de la definicion de het. Los ejemplos de los heteroarilos son piridilo, pirimidinilo, quinolilo, tiazolilo, y benzotiazolilo. El het mas preferido es piridilo, pirimidinilo y tiazolilo. El het puede estar insustituido o sustituido 50 como se describe en la presente. Se prefiere que este insustituido, o si esta sustituido, esta sustituido sobre un atomo de carbono por halogeno, en especial fluor o cloro, hidroxilo, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono, tal como

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metilo y etilo, alcoxilo de 1 a 4 atomos de carbono, en especial metoxilo y etoxilo, nitro, -O-C(O)-alquilo de 1 a 4 atomos de carbono, o -C(O)-O-alquilo de 1 a 4 atomos de carbono, carbamoilo, W-mono- o W,W-di-alquilo inferior- carbamoilo, ester del acido alquilo inferior-carbamico, amidino, guanidina, ureido, mercapto, sulfo, tioalquilo inferior, sulfoamino, sulfonamida, sulfonato, sulfanilo, SCN o nitro, o sobre un atomo de nitrogeno por alquilo de 1 a 4 atomos de carbono, en especial metilo o etilo, -O-C(O)-alquilo de 1 a 4 atomos de carbono, o -C(O)-O-alquilo de 1 a 4 atomos de carbono, tal como carbometoxilo o carboetoxilo.

Cuando dos sustituyentes, junto con un nitrogeno comunmente enlazado, son het, se entiende que el anillo heterociclico resultante es un anillo que contiene nitrogeno, tal como aziridina, azetidina, azol, piperidina, piperazina, morfilina, pirrol, pirazol, tiazol, oxazol, piridina, pirimidina, isoxazol, y similares, en donde el het puede estar insustituido o sustituido como se define anteriormente en la presente.

Halogeno es fluor, cloro, bromo, o yodo, en especial fluor y cloro.

A menos que se especifique de otra manera, “alquilo”, ya sea el anterior o en combinacion, incluye alquilo de cadena recta o ramificada, tal como metilo, etilo, propilo normal, isopropilo, butilo normal, butilo secundario, butilo terciario, pentilo normal y pentilo ramificado, hexilo normal y hexilo ramificado, y similares.

Un grupo “cicloalquilo” significa cicloalquilo de 3 a 10 atomos de carbono que tiene de 3 a 10 atomos de carbono del anillo, y puede ser, por ejemplo, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo, o ciclo-octilo, ciclononilo, y similares. El grupo cicloalquilo puede ser monociclico o biciclico fusionado. Se prefiere que sea monociclico. Mas aun, el grupo cicloalquilo preferido es ciclopentilo o ciclohexilo. Mas preferiblemente, cicloalquilo es ciclohexilo. El grupo cicloalquilo puede estar completamente saturado o parcialmente saturado, aunque se prefiere que este completamente saturado. Como se define en la presente, excluye a los grupos arilo. Los grupos cicloalquilo pueden estar insustituidos o sustituidos con cualquiera de los sustituyentes definidos mas adelante, de preferencia halogeno, hidroxilo, o alquilo de 1 a 4 atomos de carbono, tal como metilo.

Los sustituyentes que facilitan el transporte de la molecula a traves de una membrana celular son conocidos por los expertos en la tecnica de la quimica medicinal [ver, por ejemplo, Gangewar S. y colaboradores, Drug Discovery Today, Volumen 2, paginas 148-155 (1997), y Bundgaard H. y Moss J., Pharma. Res., Volumen 7, pagina 885 (1990)]. En terminos generales, estos sustituyentes son sustituyentes lipofilicos. Estos sustituyentes lipofilicos incluyen un alquilo de 6 a 30 atomos de carbono, el cual esta saturado, mono-insaturado, poli- insaturado, incluyendo polieno interrumpido por metileno, fenilo, fenilo que esta sustituido por uno o dos grupos alquilo de 1 a 8 atomos de carbono, cicloalquilo de 5 a 9 atomos de carbono, cicloalquilo de 5 a 9 atomos de carbono que esta sustituido por uno o dos grupos alquilo de 1 a 8 atomos de carbono, -X1-fenilo, -X1-fenilo que esta sustituido en el anillo de fenilo por uno o dos grupos alquilo de 1 a 8 atomos de carbono, X1 -cicloalquilo de 5 a 9 atomos de carbono, o X1-cicloalquilo de 5 a 9 atomos de carbono que esta sustituido por uno o dos grupos alquilo de 1 a 8 atomos de carbono; en donde X1 es alquilo de 1 a 24 atomos de carbono que esta saturado, mono-insaturado, o poli-insaturado, y es de cadena recta o ramificada.

Insustituido pretende significar que el unico sustituyente es hidrogeno.

Excepto como se describa en la presente, cualquiera de los grupos arilo, het, alquilo, alquenilo, alquinilo, o cicloalquilo, puede estar insustituido o independientemente sustituido por hasta cuatro, de preferencia uno, dos, o tres sustituyentes, seleccionados a partir del grupo que consiste en: halogeno, tal como Cl o Br; hidroxilo; alquilo inferior, tal como alquilo inferior de 1 a 3 atomos de carbono; alquilo inferior que puede estar sustituido con cualquiera de los sustituyentes definidos en la presente; alquenilo inferior; alquinilo inferior; alcanoilo inferior; alcoxilo inferior, tal como metoxilo; arilo, tal como fenilo o naftilo; arilo sustituido, tal como fluoro-fenilo o metoxi- fenilo; aril-alquilo inferior, tal como bencilo; amino-mono- o di-alquilo inferior, tal como di-metil-amino; alcanoilo inferior-amino-acetil-amino; amino-alcoxilo inferior, tal como etoxi-amina; nitro; ciano; ciano-alquilo inferior; carboxilo; carbalcoxilo inferior, tal como metoxi-carbonilo; n-propoxi-carbonilo o iso-propoxi-carbonilo; ariloilo inferior, tal como benzoilo; carbamoilo; N-mono- o N,N-di-alquilo inferior-carbamoilo; ester del acido alquilo inferior-carbamico; amidino, guanidina; ureido; mercapto; sulfo; tioalquilo inferior; sulfoamino; sulfonamida; benzosulfonamida; sulfonato; sulfanil-alquilo inferior, tal como metil-sulfanilo; sulfoamino; aril-sulfonamida; aril- sulfonato sustituido o insustituido por halogeno, tal como cloro-fenil-sulfonato; alquilo inferior-sulfinilo; aril-sulfinilo; aril-alquilo inferior-sulfinilo; alquilo inferior-aril-sulfinilo; alcano inferior-sulfonilo; aril-sulfonilo; aril-alquilo inferior- sulfonilo; aril-alquilo inferior; alquilo inferior-aril-sulfonilo; halo-alquilo inferior-mercapto; halo-alquilo inferior- sulfonilo; tal como tri-fluoro-metan-alcoxi-fosforilo, urea, y urea sustituida de la formula (R9) NC(O)N(R10), (R13), en donde R9, R10 y R13 son como se definen en la presente, tal como 3-trifluoro-metil-fenil-urea; alquil-ester de acido carbamico o carbamatos, tales como etil-N-fenil-carbamato; o -NR8R14, en donde R8 y R14 pueden ser iguales o

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diferentes, y son independientemente H; alquilo inferior, por ejemplo, metilo, etilo, o propilo; o Rs y R14, junto con el atomo de N, forman un anillo heteroclclico de 3 a S miembros que contiene un heteroatomo de nitrogeno del anillo, y opcionalmente uno o dos heteroatomos adicionales del anillo seleccionados a partir del grupo que consiste en nitrogeno, oxlgeno, y azufre (por ejemplo, piperazinilo, pirazinilo, alquilo inferior-piperazinilo, piridilo, indolilo, tiofenilo, tiazolilo, benzotiofenilo, pirrolidinilo, piperidino, o imidazolinilo, en donde el anillo heteroclclico puede estar sustituido con cualquiera de los sustituyentes definidos anteriormente en la presente.

De preferencia, los grupos alquilo, cicloalquilo, y arilo anteriormente mencionados, estan independientemente insustituidos o estan sustituidos por alquilo inferior, arilo, aril-alquilo inferior, carboxilo, carbalcoxilo inferior, y en especial halogeno, -OH, -SH, -OCH3, -SCH3, -CN, -SCN o nitro.

Como se define en la presente, el termino “alquilo inferior”, cuando se utiliza solo o en combinacion, se refiere a alquilo que contiene de 1 a 6 atomos de carbono. El grupo alquilo puede ser de cadena ramificada o recta, y es como se define anteriormente en la presente.

El termino “alquenilo inferior” se refiere a un grupo alquenilo que contiene de 2 a 6 atomos de carbono. Un grupo alquenilo es un grupo hidrocarbilo que contiene cuando menos un doble enlace de carbono-carbono. Como se define en la presente, puede estar insustituido o sustituido con los sustituyentes descritos en la presente. Los dobles enlaces de carbono-carbono pueden estar entre cualesquiera dos atomos de carbono del grupo alquenilo. Se prefiere que contenga 1 o 2 dobles enlaces de carbono-carbono, y mas preferiblemente un doble enlace de carbono-carbono. El grupo alquenilo puede ser de cadena recta o ramificada. Los ejemplos incluyen etenilo, 1- propenilo, 2-propenilo, 1-butenilo, 2-butenilo, 2-metil-1-propenilo, 1,3-butadienilo y similares. El grupo alquenilo preferido es etenilo.

El termino “alquinilo inferior”, como se utiliza en la presente, se refiere a un grupo alquinilo que contiene de 2 a 6 atomos de carbono. Un grupo alquinilo es un grupo hidrocarbilo que contiene cuando menos un triple enlace de carbono-carbono. El triple enlace de carbono-carbono puede estar entre cualesquiera dos atomos de carbono del grupo alquinilo. Se prefiere que el grupo alquinilo contenga 1 o 2 triples enlaces de carbono-carbono, y mas preferiblemente un triple enlace de carbono-carbono. El grupo alquinilo puede ser de cadena recta o ramificada. Los ejemplos incluyen etinilo, 1-propinilo, 2-propinilo, 1 -butinilo, 2-butinilo y similares. El grupo alquinilo preferido es etinilo.

Como se utiliza en la presente, el termino “aril-alquilo” se refiere a un grupo arilo conectado con la cadena principal mediante un grupo alquileno de puente. Los ejemplos incluyen bencilo, fenetilo, naftil-metilo, y similares. El aril-alquilo preferido es bencilo. De una manera similar, grupo ciano-alquilo se refiere a un grupo ciano conectado con la cadena principal mediante un grupo alquileno de puente.

El termino “alquil-arilo” por otra parte, se refiere a un grupo alquilo puenteado hasta la cadena principal a traves de un grupo fenileno. Los ejemplos incluyen metil-fenilo, etil-fenilo y similares.

Como se utiliza en la presente, el termino “alcanollo inferior” se refiere a una cadena de alquilo inferior en donde uno de los atomos de carbono es reemplazado por un grupo C=O. El grupo C=O puede estar presente en uno de los extremos del sustituyente, o a la mitad de la fraccion. Los ejemplos incluyen formilo, acetilo, 2-propanollo, 1- propanollo y similares.

El termino “alcoxilo” se refiere a un grupo alquilo como se define en la presente, conectado con la cadena principal mediante un atomo de oxlgeno. Los ejemplos incluyen metoxilo, etoxilo y similares.

El termino “tioalquilo inferior” se refiere a un grupo alquilo, como se define en la presente, conectado con la cadena principal mediante un atomo de azufre. Los ejemplos incluyen tiometilo (o mercapto-metilo), tioetilo (mercapto-etilo), y similares.

El termino “carbalcoxilo inferior” o el sinonimo del mismo, se refiere a un grupo alcoxi-carbonilo, en donde la union con la cadena principal es a traves del grupo arilo (C(O)). Los ejemplos incluyen metoxi-carbonilo, etoxi-carbonilo, y similares.

Se debe entender que la terminologla C(O) se refiere a un grupo -C=O, ya sea cetona, aldehldo o acido, o derivado de acido. De una manera similar, S(O) se refiere a un grupo -S=O.

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Como se utiliza en la presente, el termino S(O)r se refiere al numero de atomos de oxlgeno enlazados al atomo de azufre. Cuando r = 2, entonces S(O)r = SO2; cuando r es 1, entonces S(O)r es SO; y cuando r = O, entonces S(O)r es S.

El termino “Co”, como se utiliza en la presente, como parte de una definicion de alquilo como, por ejemplo, C0-10, se refiere a cero atomos de carbono. Por consiguiente, “aril-alquilo de 0 a 10 atomos de carbono” significa que el grupo arilo esta enlazado directamente a la cadena principal (C0), o que hay un grupo alquileno de 1 a 10 atomos de carbono que puentea la cadena principal con un grupo arilo.

El termino “(CH2)0-6” como parte de la definicion de un grupo mas grande, por ejemplo, (CH2)0-6 C3-C7 cicloalquilo, se refiere a un grupo que no esta presente (CH2)0, o a un grupo que contiene de 1 a 6 atomos de carbono

(CH2)1-6.

El termino “(CH2)0-6-(CH)0-1,(arilo)1-2”, en la definicion de R11 y R12, pretende significar uno de los siguientes: (CH2)1-6-arilo, arilo, -CH(arilo)2 o (CH2)1-6 (CH)(arilo)2.

Como se utiliza en la presente, la variable “n” se refiere al numero de sustituyentes sobre el anillo de pirrolidinilo (tetrahidro-pirrolilo). El termino “n” se define como 0 a 7, y determina el numero de sustituyentes Q sobre el anillo de pirrolidinilo (tetrahidro-pirrolilo). Q solamente puede estar presente en las posiciones 2, 3, 4 o 5 del anillo de pirrolidinilo, es decir, en los atomos de carbono del anillo de pirrolidinilo. Excepto por el carbono numero 2 que puede permitir una sustitucion, cada uno de los otros atomos de carbono esta saturado, y cada uno de ellos puede tener dos sustituyentes sobre el mismo. Cuando n es 7, entonces cada uno de los atomos de carbono esta enlazado con Q, como se define en la presente. Cada Q puede ser igual o diferente. Sin embargo, cuando n es 6, entonces uno de los siete posibles sustituyentes es H, y los otros cinco son Q, los cuales pueden ser iguales o diferentes. Ademas, cuando n es 5, entonces dos de los posibles sustituyentes son H, y los otros cinco son independientemente Q, como se define en la presente. Cuando n es 4, entonces tres de los siete posibles sustituyentes son H, y los restantes son Q, independientemente como se define en la presente. Cuando n es 3, entonces cuatro de los siete posibles sustituyentes son H, y los otros tres son Q, como se define en la presente. Cuando n es 2, entonces dos de los siete posibles sustituyentes son Q, y los restantes son H. Cuando n es 1, entonces solamente uno de los siete posibles sustituyentes es Q, y los restantes son H. Finalmente, cuando n es 0, los siete sustituyentes son H.

Se debe entender que cada uno de los sustituyentes Q pueden ser iguales o pueden ser diferentes.

Cuando se utiliza la forma plural para los compuestos, sales, preparaciones farmaceuticas, se pretende que tambien signifique un solo compuesto, una sola preparacion farmaceutica, una sal, y similares.

Sera aparente para un experto en la materia que los compuestos de la presente invencion pueden existir como una forma de sal, en especial como una sal de adicion de acido o como una sal de adicion de base. Cuando un compuesto exista en una forma de sal, estas formas de sal se incluyen dentro del alcance de la invencion. Aunque cualquier forma de sal puede ser util en las manipulaciones qulmicas, tales como los procedimientos de purificacion, solamente las sales farmaceuticamente aceptables son utiles para los productos farmaceuticos de la presente invencion.

Las sales farmaceuticamente aceptables incluyen, cuando sea apropiado, las sales de adicion de base y las sales de adicion de acido farmaceuticamente aceptables, por ejemplo las sales de metales, tales como las sales de metales alcalinos y alcalinoterreos, las sales de amonio, las sales de adicion de amina organica, las sales de adicion de aminoacidos, y las sales de sulfonato y similares. Las sales de adicion de acido incluyen las sales de adicion de acido inorganico, tales como clorhidrato, sulfato y fosfato, y las sales de adicion de acido organico, tales como alquil-sulfonato, aril-sulfonato, acetato, maleato, fumarato, tartrato, citrato, y lactato y similares. Los ejemplos de las sales de metales son las sales de metales alcalinos, tales como la sal de litio, la sal de sodio, y la sal de potasio; las sales de metales alcalinoterreos, tales como la sal de magnesio y la sal de calcio; la sal de aluminio, y la sal de zinc y similares. Los ejemplos de las sales de amonio son las sales de amonio y las sales de tetra-metil-amonio y similares. Los ejemplos de las sales de adicion de amina organica son las sales con morfolina y piperidina y similares. Los ejemplos de las sales de adicion se aminoacidos son las sales con glicina, fenilalanina, acido glutamico, y lisina y similares. Las sales de sulfonato incluyen mesilato, tosilato, y las sales de acido bencen-sulfonico y similares.

En vista de la estrecha relacion entre los compuestos en forma libre y aquellos en la forma de sus sales, incluyendo las sales que se pueden utilizar como intermediarios, por ejemplo en la purificacion o identificacion de

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los compuestos, tautomeros o mezclas tautomericas y sus sales, cualquier referenda a los compuestos anteriormente en la presente y mas adelante en la presente, en especial a los compuestos de la formula (I), debe entenderse para referirse tambien a los tautomeros correspondientes de estos compuestos, en especial de los compuestos de la formula (I), a las mezclas tautomericas de estos compuestos, en especial de los compuestos de la formula (I), o a las sales de cualquiera de estos, segun sea apropiado y conveniente y si no se menciona de otra manera.

Cualquier atomo de carbono asimetrico puede estar presente en la configuracion (R), (S), o (R,S), de preferencia en la configuracion (R) o (S). Los sustituyentes en un anillo en los atomos con enlaces saturados o los sustituyentes sobre dobles enlaces de carbono-carbono, si es posible, pueden estar presentes en la forma cis (=Z-) o trans (=E-). Por consiguiente, los compuestos pueden estar presentes como mezclas de isomeros, o de preferencia como los isomeros puros, preferiblemente como diaestereomeros enantiomericamente puros o como enantiomeros puros.

Los compuestos de la presente invencion se preparan mediante las tecnicas reconocidas en este campo. Por ejemplo, los compuestos de la formula (I) se preparan mediante la reaccion de un acido carboxllico o derivado acilante del mismo, tal como un haluro de acido de la formula (VIII) con una amina de la formula (IX) bajo condiciones de formacion de amida:

R

R

i\

N

I

R

C—OH

II

O

+

H

HN

0 r

C—N

R4

A—D—A1

(VIII)

(IX)

(I)

en donde R1, R2, R3, R4, Q, n, D, A y A1 son como se definen anteriormente en la presente, o R1, R2 como un grupo protector de amino que se remueve despues de que se efectua la reaccion.

De una manera alternativa, se puede preparar un compuesto de la formula (I), mediante la reaccion de un acido carboxllico de la formula (X) o un derivado acilante del mismo, tal como haluro de acido, y similar, con una pirrolidina de la formula (XI), bajo condiciones de formacion de amida:

R

R

imagen4

O

2

H

N

O

C—OH

R4

imagen5

(X)

(XI)

(I)

Las reacciones anteriores de preferencia se conducen bajo condiciones efectivas. Por ejemplo, si los reactivos de las formulas (VIII) y (X) son haluros de acidos, por ejemplo, entonces se hacen reaccionar con los compuestos de la formula (IX) o (XI), respectivamente, para formar un compuesto de la formula (I). De una manera alternativa, el acido de las formulas (VIII) y (X) se hace reaccionar con un compuesto de las formulas (IX) y (XI),

respectivamente, para generar un compuesto de la formula (I) en la presencia de un reactivo de acoplamiento, tal como HOBt, HBTU y similares, en la presencia de una base debil, tal como dietil-amina y similares.

El compuesto de la formula (VIII) esta comercialmente disponible, o bien se prepara mediante los procedimientos reconocidos en este campo.

5 El compuesto de la formula (IX) tambien se prepara bajo condiciones de formacion de amida, mediante la reaccion de un compuesto de la formula (XIV) o un derivado acilante del mismo, con un compuesto de la formula (XI):

O

/C\ H H II

----N—C—C—OH

R4

(XIV)

bajo condiciones de formacion de amida,

10 en donde:

Pi es un grupo protector de amida; y R4, Q, n, A, D y Ai son como se definen en la presente.

Por ejemplo como se describe anteriormente en la presente, un compuesto de la formula (XIV) se hace reaccionar con un compuesto de la formula (XI) en la presencia de un reactivo de acoplamiento de peptidos conocido en la 15 tecnica, tal como HOBt, HBTU, y similares, en la presencia de una base debil tal como dietil-amina y similares. De una manera alternativa, si el derivado acetilante del compuesto de la formula (XIV) fuera un haluro de acido, por ejemplo, un cloruro de acido, entonces reaccionarla con la amina de la formula (XV), sin la necesidad de un agente de acoplamiento para formar el compuesto de la formula (I).

El compuesto de la formula (XIV) es un aminoacido protegido y esta comercialmente disponible o se prepara a 20 partir de la formula (XV):

imagen6

(Q)n

HN

-A—D—A„

©

(XI) -----(IX)

H

HN—C—COOH (XV)

H |

R4

en donde el grupo amino se hace reaccionar con un grupo protector de amino bajo condiciones conocidas por un experto ordinario en este campo.

El compuesto de la formula (XV) esta comercialmente disponible, o se prepara bajo condiciones reconocidas en la 25 materia.

El compuesto de la formula (XI) esta comercialmente disponible, o se puede preparar de acuerdo con el esquema mostrado en seguida.

O

(Q)

n

OH NH BOC

(Q)

n

A(L1) NH BOC

A1DH

AiD(L3)

(Q)

A—D—A1 NH BOC

(XI)

o

(L)ACOOH

0

(Li)A(L2)

imagen7

NH

imagen8

A1DH

0

AiD(L3)

imagen9

(XI)

en donde:

A, Ai, Q y n son como se definen anteriormente en la presente;

Li, L2 y L3 son grupos salientes; y

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s un grupo protector y/o un auxiliar quiral.

El compuesto de la formula (X) se prepara mediante las tecnicas reconocidas en este campo. Por ejemplo, el compuesto de la formula (VIII) o el derivado acilante del mismo, se hace reaccionar con un compuesto de la formula (XXI) bajo condiciones de formaciOn de amida:

R

R

imagen11

OH

+

O

2

(VIII)

H

N — H

O

H

| |

C-

O 0 1

R4

imagen12

P

3

(XXI)

(X)

10 en donde:

R1, R2, R3, R4 son como se definen en la presente, o R2 como un grupo protector de amino que se remueve despues de que se efectua la reacciOn; y

P3 es un grupo protector de acido carboxllico.

La preparaciOn de un compuesto de la formula (VIII) se describe anteriormente en la presente. El compuesto de la

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formula (XXI) se deriva a partir de un compuesto de la formula (XV), el cual tambien se describe anteriormente en la presente.

Cada una de las reacciones descritas anteriormente en la presente de preferencia se conduce en un solvente en donde sean solubles los reactivos, tales como cloruro de metileno, dietil-eter, y similares. En adicion, las reacciones se conducen a temperaturas efectivas para que tengan lugar las reacciones.

Si cualquier grupo sobre los reactivos es reactivo bajo las condiciones descritas, se protege mediante un grupo protector conocido en la tecnica, antes de conducir las reacciones descritas anteriormente en la presente, y luego se remueve despues de que se efectua la reaccion. Los grupos protectores normalmente utilizados en estas reacciones se describen en un libro titulado como Protective Groups in Organic Synthesis, Theodora W. Greene, John Wiley & Sons, NY, NY (1981).

El termino “una cantidad terapeuticamente efectiva” o un sinonimo del mismo, del compuesto de la formula (I), como se define en la presente, es la cantidad suficiente para efectuar los resultados beneficos o deseados, incluyendo los resultados cllnicos. Por ejemplo, cuando se hace referencia a un agente que inhibe la proliferacion celular, una cantidad terapeuticamente efectiva del compuesto de la formula (I) es, por ejemplo, la cantidad suficiente para lograr esta reduccion en la proliferacion de las celulas de cancer comparandose con la respuesta obtenida en ausencia de (o sin administrar) el compuesto de las formulas (I).

Como se utiliza en la presente, y como es bien entendido en la tecnica, “tratamiento” es un planteamiento para obtener resultados beneficos o deseados, incluyendo los resultados cllnicos. Los resultados beneficos o deseados pueden incluir, pero no limitandose a, el alivio o la disminucion de uno o mas slntomas o condiciones, la disminucion del grado de enfermedad, el estado estabilizado (es decir, que no empeora) de la enfermedad, la prevencion de la extension de la enfermedad, la demora o el retardamiento del progreso de la enfermedad, la disminucion o paliacion del estado de enfermedad, y la remision (ya sea parcial o total), ya sea detectable o indetectable. “Tratamiento” tambien puede significar prolongar la sobrevivencia, comparandose con la sobrevivencia esperada si no se recibe tratamiento.

“Paliar” una enfermedad o trastorno significa que se disminuye la extension y/o las manifestaciones cllnicas indeseables de un trastorno o de un estado de enfermedad, y/o que se hace mas lento o se alarga el transcurso de tiempo del progreso, comparandose con la falta de tratamiento del trastorno.

El termino “modular”, como se utiliza en la presente, incluye la inhibicion o supresion de una funcion o actividad (tal como proliferacion celular), as! como la mejora de una funcion o actividad.

“Inhibir” o “suprimir” o “reducir” una funcion o actividad, tal como la proliferacion de las celulas de cancer, es reducir la funcion o actividad al compararse con condiciones de otra manera iguales excepto por la condicion o el parametro de interes, o de una manera alternativa, comparandose con otras condiciones.

El termino “animal”, como se utiliza en la presente, incluye a todos los miembros del reino animal, incluyendo seres humanos y no humanos. El animal de preferencia es un ser humano.

El termino “una celula”, como se utiliza en la presente, incluye una pluralidad de celulas. Administrar un compuesto a una celula incluye el tratamiento in vivo, ex vivo, e in vitro.

El termino “celulas de cancer”, como se utiliza en la presente, incluye todas las formas de cancer o enfermedad neoplasica.

Una enfermedad proliferativa es principalmente un tumor o cancer y/o cualesquiera metastasis. Los compuestos de la presente invencion son particularmente utiles para el tratamiento de cancer, por ejemplo, cancer de mama, cancer genitourinario, cancer de pulmon, cancer gastrointestinal, cancer epidermoide, melanoma, cancer de ovario, cancer de pancreas, neuroblastoma, cancer de cabeza y/o cuello o cancer de vejiga, o en un sentido mas amplio, cancer renal, de cerebro, o gastrico; en particular (i) un tumor de mama; un tumor epidermoide, tal como un tumor epidermoide de cabeza y/o cuello, o un tumor de boca; un tumor de pulmon, por ejemplo un tumor pulmonar de celulas pequenas o de celulas que no son pequenas; un tumor gastrointestinal, por ejemplo un tumor colo-rectal; o un tumor genitourinario, por ejemplo un tumor de prostata (en especial un tumor de prostata refractario a las hormonas); o (ii) una enfermedad proliferativa que sea refractaria al tratamiento con otros productos quimioterapeuticos; o (iii) un tumor que sea refractario al tratamiento con otros productos

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quimioterapeuticos debido a resistencia a multiples farmacos.

En un sentido mas amplio de la invencion, una enfermedad proliferativa puede ser adicionalmente una condicion hiperproliferativa, tal como leucemias, hiperplasias, fibrosis (en especial pulmonar, pero tambien otros tipos de fibrosis, tales como fibrosis renal), angiogenesis, soriasis, ateroesclerosis, y proliferacion de musculo liso en los vasos sangulneos, tal como estenosis o restenosis en seguida de angioplastla.

Cuando se menciona un tumor, una enfermedad tumoral, un carcinoma, o un cancer, tambien se implica metastasis en el organo o tejido original y/o en cualquier otra localizacion.

Los compuestos de la formula (I) son selectivamente toxicos o mas toxicos para las celulas que proliferan rapidamente que para las celulas normales, en particular en las celulas de cancer humanas, por ejemplo, para los tumores cancerosos. En adicion, los compuestos de la formula (I) tienen efectos antiproliferativos significativos y promueven la diferenciacion, por ejemplo el paro del ciclo celular y la apoptosis.

Se ha determinado que los compuestos de la presente invencion de la formula (I) son muy efectivos para aniquilar las celulas de cancer, mientras que al mismo tiempo, no aniquilan a las celulas normales. Estas propiedades hacen que los compuestos de la formula (I) sean extremadamente utiles como agentes contra el cancer.

Ejemplos de leucemias incluyen leucemia linfoblastica aguda (ALL), leucemia mielocltica aguda (AML), leucemia mieloide cronica (CML), leucemia linfocltica cronica (CLL), y leucemia mielo-monocltica juvenil (JMML). Los tipos de leucemia linfoblastica aguda que se pueden tratar con los compuestos de la invencion incluyen las celulas que expresan una protelna de fusion de bcr-abl, tales como las celulas de leucemia linfoblastica aguda positivas para Filadelfia, as! como las celulas de leucemia linfoblastica aguda negativas para Filadelfia. Los ejemplos de los linfomas incluyen linfoma de celulas-B de Burkitt, linfomas de Hodgkin, linfomas que no son de Hodgkin, incluyendo los linfomas de celulas aplasicas positivas para Ki-I, linfomas de celulas-T, y linfomas raros tales como linfomas histioclticos. Los ejemplos de los mielomas incluyen mielomas multiples.

Los compuestos de la formula (I) son de uso en el tratamiento o la inhibicion de mieloma, en especial mieloma multiple. El termino “mieloma”, como se utiliza en la presente, se refiere a un tumor compuesto de celulas del tipo normalmente encontrado en la medula osea. El termino “mieloma multiple”, como se utiliza en la presente, significa un neoplasma maligno diseminado de celulas de plasma, que se caracteriza por multiples focos tumorales de medula osea y secrecion de un componente M (un fragmento de inmunoglobulina monoclonal), asociado con lesiones osteollticas ampliamente extendidas que dan como resultado dolor de huesos, fracturas patologicas, hipercalcemia, y anemia normocltica normocromica. El mieloma multiple es incurable mediante el uso de las quimioterapias convencionales y de dosis alta.

Composiciones farmaceuticas

Los compuestos farmacologicamente aceptables pueden estar presentes en, o se pueden emplear, por ejemplo, para la preparacion de composiciones farmaceuticas que comprendan una cantidad efectiva de un compuesto de la formula (I), o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, como ingrediente activo, junto o en mezcla con uno o mas vehlculos farmaceuticamente aceptables, inorganicos u organicos, solidos o llquidos (materiales portadores).

Las composiciones farmaceuticas son aquellas para administracion enteral, tal como nasal, rectal u oral, o parenteral, tal como intramuscular o intravenosa, a animales de sangre caliente (en especial a un ser humano), las cuales comprenden una dosis efectiva del ingrediente farmacologicamente activo, de un compuesto de la formula (I) o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, en asociacion con un vehlculo farmaceuticamente aceptable. La dosis del ingrediente activo depende de la especie de animal de sangre caliente, del peso corporal, de la edad y de la condicion individual, de los datos farmaco-cineticos individuales, de la enfermedad que se vaya a tratar, y del modo de administracion.

La dosis de un compuesto de la formula (I) o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, para administrarse a animales de sangre caliente, por ejemplo seres humanos de un peso corporal de aproximadamente 70 kilogramos, es de preferencia de aproximadamente 3 miligramos a aproximadamente 10 gramos, mas preferiblemente de aproximadamente 10 miligramos a aproximadamente 1,5 gramos, de una manera muy preferible de aproximadamente 100 miligramos a aproximadamente 1000 miligramos/persona/dla, divididos de preferencia en 1 a 3 dosis individuales que, por ejemplo, pueden ser del mismo tamano, o en una forma de

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liberacion sostenida para obtener los resultados deseados. Usualmente, los ninos reciben la mitad de la dosis para adultos.

Las composiciones farmaceuticas comprenden de aproximadamente el 1 por ciento a aproximadamente el 95 por ciento, de preferencia de aproximadamente el 20 por ciento a aproximadamente el 90 por ciento de un compuesto de las formulas (I)-(VII). Las composiciones farmaceuticas de conformidad con la invencion pueden estar, por ejemplo, en una forma de dosis unitaria, tal como en la forma de ampolletas, frascos, supositorios, grageas, tabletas, o capsulas.

Las composiciones farmaceuticas de la presente invencion se preparan de una manera conocida por si misma, por ejemplo por medio de procesos convencionales de disolucion, liofilizacion, mezcla, granulacion, o confiterla.

En los metodos de tratamiento y composiciones descritos en la presente, el ingrediente activo descrito con detalle en la presente tlpicamente se administra para uso oral, topico, rectal, parenteral, local, por inhalacion o intracerebral. En una realizacion, las sustancias se administran en una forma intranasal por medio del uso topico de vehlculos intranasales adecuados, o por las vlas transdermicas, utilizando parches transdermicos para la piel conocidos por los expertos ordinarios en la materia. Para administrarse en la forma de un sistema de suministro transdermico, la administracion de la dosificacion sera continua en lugar de intermitente a traves de todo el regimen de dosificacion. Las sustancias tambien se pueden administrar por medio de un sistema de capsula de liberacion controlada o lenta, y de otras tecnologlas de suministro de farmacos.

Una forma de administracion preferida es la oral. Por ejemplo, para la administracion oral en la forma de una tableta o capsula, las sustancias activas se pueden combinar con un vehlculo inerte oral, no toxico, y farmaceuticamente aceptable, tal como lactosa, almidon, sacarosa, glucosa, metilcelulosa, estearato de magnesio, difosfato de calcio, sulfato de calcio, manitol, sorbitol, y similares; para la administracion oral en forma llquida, las sustancias oralmente activas se pueden combinar con cualquier vehlculo inerte oral, no toxico, y farmaceuticamente aceptable, tal como etanol, glicerol, agua, y similares. Tambien se pueden incorporar aglutinantes, lubricantes, agentes desintegrantes, y agentes colorantes adecuados en la forma de dosificacion, si se desea o es necesario. Los aglutinantes adecuados incluyen almidon, gelatina, azucares naturales tales como glucosa o beta-lactosa, edulcorantes de malz, gomas naturales y sinteticas tales como acacia, tragacanto, o alginato de sodio, carboxi-metil-celulosa, polietilenglicol, ceras, y similares. Los lubricantes adecuados utilizados en estas formas de dosificacion incluyen oleato de sodio, estearato de sodio, estearato de magnesio, benzoato de sodio, acetato de sodio, cloruro de sodio, y similares. Los ejemplos de los desintegrantes incluyen almidon, metilcelulosa, agar, bentonita, goma de xantano, y similares.

Las capsulas de gelatina pueden contener a la sustancia activa y vehlculos en polvo, tales como lactosa, almidon, derivados de celulosa, estearato de magnesio, acido estearico, y similares. Se pueden utilizar vehlculos y diluyentes similares para elaborar tabletas comprimidas. Las tabletas y capsulas se pueden fabricar como productos de liberacion sostenida para proporcionar la liberacion continua de los ingredientes activos durante un perlodo de tiempo. Las tabletas comprimidas pueden estar recubiertas con azucar o recubiertas con pellcula para enmascarar cualquier sabor desagradable y proteger a la tableta de la atmosfera, o pueden tener recubrimiento enterico para su desintegracion selectiva en el tracto gastrointestinal. Las formas de dosificacion llquida para administracion oral pueden contener agentes colorantes y saborizantes para aumentar la aceptacion por parte del paciente.

Se pueden utilizar agua, un aceite adecuado, dextrosa acuosa, y soluciones de azucar relacionadas y glicoles, tales como propilenglicol o polietilenglicoles, como vehlculos para las soluciones parenterales. Tambien es preferible que estas soluciones contengan una sal soluble en agua del ingrediente activo, agentes estabilizantes adecuados, y si es necesario, sustancias reguladoras del pH. Los agentes estabilizantes adecuados incluyen agentes anti-oxidantes, tales como bisulfato de sodio, sulfito de sodio, o acido ascorbico, ya sea solos o combinados, acido cltrico y sus sales, y EDTA de sodio. Las soluciones parenterales tambien pueden contener conservadores, tales como cloruro de benzalconio, metil- o propil-parabeno, y cloro-butanol.

El ingrediente activo descrito con detalle en la presente tambien se puede administrar en la forma de sistemas de suministro de liposomas, tales como veslculas unilamelares pequenas, veslculas unilamelares grandes, y residuos multilamelares. Los liposomas se pueden formar a partir de una variedad de fosfollpidos, tales como colesterol, estearil-amina, o fosfatidil-colinas, y similares.

Los compuestos de la formula (I) descritos con detalle en la presente, tambien se pueden acoplar con pollmeros solubles que sean vehlculos de farmacos dirigibles. Los ejemplos de estos pollmeros incluyen polivinil-pirrolidona,

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copollmero de pirano, poli-hidroxi-propil-metacril-amida-fenol, poli-hidroxi-etil-aspartamida-fenol, o poli-etilen- oxido-polilisina sustituida con residuos de palmitollo. Las sustancias de ingrediente activo tambien se pueden acoplar con pollmeros biodegradables utiles para lograr la liberacion controlada de un farmaco. Los pollmeros adecuados incluyen acido polilactico, acido poliglicolico, copollmeros de acido polilactico y poliglicolico, poli- epsilon-caprolactona, acido poli-hidroxi-butlrico, poli-orto-esteres, poli-acetales, poli-dihidro-piranos, poli-ciano- acilatos, y copollmeros de bloques reticulados o anfipaticos de hidrogeles. Las sustancias tambien se pueden fijar a pollmeros rlgidos y otras estructuras, tales como fulerenos o Buckeyballs.

Las composiciones farmaceuticas adecuadas para su administracion contienen de aproximadamente 1 a 1,500 miligramos de los compuestos de la formula (I) por unidad. En estas composiciones farmaceuticas, el ingrediente activo estara ordinariamente presente en una cantidad de aproximadamente el 0.5 al 95 por ciento en peso, basandose en el peso total de la composicion.

Los vehlculos farmaceuticos adecuados, y los metodos para la preparacion de las formas de dosificacion farmaceutica se describen en Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, un texto de referencia estandar en la tecnica de la formulacion de farmacos.

Los compuestos de la formula (I) se pueden administrar solos o en combinacion con otros gentes contra el cancer, tales como compuestos que inhiban la angiogenesis tumoral, por ejemplo, los inhibidores de proteasa, los inhibidores de quinasa receptora del factor de crecimiento epidermico, los inhibidores de quinasa receptora del factor de crecimiento endotelial vascular y similares; farmacos citotoxicos, tales como antimetabolitos, como antimetabolitos analogos de purina y pirimidina; agentes antimitoticos como farmacos estabilizantes de microtubulos y alcaloides antimitoticos; complejos de coordinacion de platino; antibioticos anti-tumorales; agentes alquilantes, tales como mostazas de nitrogeno y nitrosoureas; agentes endocrinos, tales como adrenocorticosteroides, androgenos, anti-androgenos, estrogenos, anti-estrogenos, inhibidores de aromatasa, agonistas de hormona liberadora de gonadotropina, y analogos de somatostatina, y compuestos que se dirigen a una enzima o receptor que se sobre-expresa y/o que esta de otra manera involucrado en una senda metabolica especlfica que aumenta en la celula tumoral, por ejemplo, inhibidores de fosfodiesterasa de ATP y GTP, inhibidores de desacetilasa de histona, inhibidores de quinasa de protelna, tales como inhibidores de quinasa de serina, treonina y tirosina, por ejemplo, quinasa de protelna tirosina de Abelson, y los diferentes factores de crecimiento, sus receptores y por consiguiente inhibidores de quinasa, tales como los inhibidores de quinasa receptora del factor de crecimiento epidermico, inhibidores de quinasa receptora del factor de crecimiento endotelial vascular, inhibidores del factor de crecimiento de fibroblastos, inhibidores del receptor del factor de crecimiento tipo insulina, e inhibidores de quinasa receptora del factor de crecimiento derivado de plaquetas, y similares; los inhibidores de amino-peptidasa de metionina, inhibidores de proteasoma, e inhibidores de ciclo- oxigenasa, por ejemplo los inhibidores de ciclo-oxigenasa-1 o -2.

Combinaciones

Un compuesto de la formula (I), o las sales farmaceuticamente aceptables del mismo, tambien se pueden utilizar con ventaja en combinacion con otros agentes anti-proliferativos. Estos agentes anti-proliferativos incluyen, pero no se limitan a, inhibidores de aromatasa; anti-estrogenos; inhibidores de topoisomerasa I; inhibidores de topoisomerasa II; agentes activos en microtubulos; agentes alquilantes; inhibidores de desacetilasa de histona; compuestos que induzcan los procesos de diferenciacion celular; inhibidores de ciclo-oxigenasa; inhibidores de MMP; inhibidores de mTOR; antimetabolitos antineoplasicos; compuestos de platina; compuestos que dirigen/reducen la actividad de quinasa de una protelna o llpido, y otros compuestos anti-angiogenicos; compuestos que dirigen, reducen, o inhiben la actividad de la fosfatasa de una protelna o llpido; agonistas de gonadorelina; anti-androgenos; inhibidores de aminopeptidasa de metionina; bisfosfonatos; modificadores de la respuesta biologica; anticuerpos antiproliferativos; inhibidores de heparanasa; inhibidores de las isoformas oncogenicas Ras; inhibidores de telomerasa; inhibidores de proteasoma; agentes utilizados en el tratamiento de malignidades hematologicas; compuestos que dirigen, reducen, o inhiben la actividad de Flt-3; inhibidores de Hsp90; temozolomida (TEMODAL®); y leucovorina.

Un compuesto de la formula (I) tambien se puede utilizar con ventaja en combinacion con los procesos terapeuticos conocidos, por ejemplo, la administracion de hormonas o en especial radiacion.

Un compuesto de la formula (I) se puede utilizar en particular como un radiosensibilizante, en especial para el tratamiento de tumores que exhiban una pobre sensibilidad a la radioterapia.

“Combinacion” significa ya sea una combinacion fija en una forma de dosificacion unitaria, o bien un kit de partes

para la administracion combinada, en donde se pueden administrar un compuesto de la formula (I) y un componente de combinacion de una forma independiente al mismo tiempo o por separado dentro de intervalos de tiempo que permitan especialmente que los componentes de combinacion muestren un efecto cooperativo, por ejemplo sinergico, o cualquier combinacion de los mismos.

5 Ejemplos

Los siguientes ejemplos pretenden ilustrar, pero no limitar adicionalmente, la invencion. Los ejemplos 2-36 son ejemplos de referencia.

Ejemplo 1 (S)-N-((S)-1-Ciclohexil-2-{(S)-2-[4-(4-fluoro-benzoil)-tiazol-2-il]-pirrolidin-1-il}-2-oxo-etil)-2-metil- amino-propionamida

10 El compuesto del tltulo, posteriormente en la presente, Compuesto A, se prepara mediante el siguiente esquema de reaccion:

o^o

I Reactivo de

VNV Lawesson, THF

89%

imagen13

2. TFAA, colidina

O^O

IF N X ^

O H \___/

NaOH

THF:H2O

A\ I

S'"

_ O 4-F-PhMgBr \ I

-S OVO THF, -55 OC O s

\ J. a -10 OC 'N J~\ 1

N nA O H x

Ar = 4-Fluoro-fenilo

EDC, HOBT, DIEA

HO Jl

-S ^

83%

HN(OCH3)CH3, DCM ^ ,N^

N

OH

92%

TFA:DCM (1:1)

_S Boc-L-c-Hex-Gly

Ars Jj S N HBTU, DIEA, DMF

O I

„A„J<

N

O H X

92% 2-pasos O H

imagen14

A\ J

TFA:DCM /—S

(1:1) Ar\ J

imagen15

imagen16

Boc-L-N-Me-Ala HBTU, DIEA, DMF

86% 2-pasos

TFA: DCM (1:1)

99%

imagen17

Paso 1: Tioamida (1)

HN

92%

Boc-L-Pro

3

94%

6

5

NH

9

7

8

10

Se agrega en porciones Reactivo de Lawesson (13.9 gramos, 34 milimoles, 0.70 equivalentes) (4.6 gramos, 3 15 veces) durante 20 minutos a una solucion de Boc-L-Pro (10.5 gramos, 49 milimoles, 1 equivalente) en 70 mililitros de tetrahidrofurano a 23°C. La mezcla amarilla nebulosa resultante se agita vigorosamente durante 5 horas, y

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

luego se concentra hasta obtener un solido amarillo claro. Este residuo se divide entre acetato de etilo (300 mililitros) y una solucion acuosa saturada de bicarbonato de sodio (500 mililitros). La fase organica se separa y la fase acuosa se extrae adicionalmente con acetato de etilo (500 mililitros, 2 veces). Las fases organicas se combinan, se lavan con salmuera (500 mililitros), y se secan sobre sulfato de sodio anhidro. La solucion seca se filtra y se concentra hasta obtener un solido amarillo claro. Este solido se tritura con dicloro-metano (20 mililitros, 2 veces) proporcionando la tioamida deseada 1 como un solido blanco esponjoso (10 gramos, 89 por ciento).

Paso 2: Tiazol (3)

Se agrega por goteo bromo-piruvato de etilo (2) (23.8 mililitros, 189 milimoles, 3 equivalentes) mediante una jeringa, a una mezcla de la tioamida (1) (14.5 gramos, 63.0 milimoles, 1 equivalente) y bicarbonato de potasio (50.5 gramos, 504 milimoles, 8 equivalentes) en 315 mililitros de dimetoxi-etano a 23°C. La mezcla se hace amarilla despues de completarse la adicion dentro de 5 minutos. La mezcla resultante se agita vigorosamente durante 25 minutos, y luego se enfrla a 0°C. Se agrega por goteo una mezcla pura de anhldrido trifluoro-acetico (TFAA) (8.8 mililitros, 63 milimoles, 1 equivalente) y colidina (13.5 mililitros, 102 milimoles, 1.6 equivalentes) por medio de una canula, a la mezcla amarilla preparada anteriormente, a 0°C. En seguida de esta adicion, se preparan tres porciones adicionales de anhldrido trifluoro-acetico puro (8.8 mililitros, 63 milimoles, 1 equivalente) y colidina (13.5 mililitros, 102 milimoles, 1.6 equivalentes), y se agregan en secuencia por goteo, por medio de una canula, a la mezcla de reaccion amarilla, a 0°C. La mezcla amarilla resultante se agita vigorosamente a 0°C durante 3 horas, y luego se agrega agua (1,000 mililitros). La solucion resultante se extrae con dicloro-metano (500 mililitros, 2 veces). Las fases organicas se combinan, se lavan con una solucion acuosa de HCl 0.5N (500 mililitros), se lavan con salmuera (500 mililitros), y se secan sobre sulfato de sodio anhidro. La solucion seca se filtra y se concentra hasta obtener un solido amarillo claro. Este solido se purifica mediante cromatografla en columna por evaporacion instantanea (1:9 a 2:3 de acetato de etilo:hexanos) proporcionando un solido amarillo claro. La trituracion de este solido con eter (20 mililitros) proporciono el tiazol (3) como un solido blanco (19 gramos, 92 por ciento).

Paso 4: Acido (4)

Una solucion del tiazol (3) (5 gramos, 15.3 milimoles, 1 equivalente) en tetrahidrofurano (40 mililitros) se agrega a una solucion de hidroxido de sodio (3.68 gramos, 91.9 milimoles, 6 equivalentes) en agua (40 mililitros) a 23°C. La mezcla resultante se agita vigorosamente a 23°C durante 3 horas, luego se concentra hasta 20 mililitros. La mezcla concentrada se enfrla a 0°C y el pH se ajusta a 3 mediante la adicion por goteo de una solucion concentrada de HCl. El solido blanco se recolecta mediante filtracion para proporcionar el acido carboxllico deseado (4) como un solido blanco (4.3 gramos, 94 por ciento).

Paso 5: Amida de Weinreb (5)

Se agrega HBTU (21 gramos, 55.5 milimoles, 1.5 equivalentes) a una solucion del acido (4) (11 gramos, 37 milimoles, 1 equivalente) en N,N-dimetil-formamida (100 mililitros) a 23°C. La mezcla resultante se enfrla a 0°C. Se agregan en secuencia DIEA (32.2 mililitros, 185 milimoles, 5 equivalentes) y clorhidrato de W,0-dimetil- hidroxil-amina (4.33 gramos, 44.4 milimoles, 1.2 equivalentes) a la mezcla de reaccion preparada anteriormente, a 0°C. La mezcla resultante se deja agitandose a 0°C durante 1 hora, y luego a 23°C durante 3 horas. La reaccion se concentra entonces hasta obtener un aceite color cafe. Este residuo se divide entre acetato de etilo (500 mililitros) y agua (1 litro). La fase organica se separa y la fase acuosa se extrae adicionalmente con acetato de etilo (500 mililitros, 2 veces). Las fases organicas se combinan, se lavan con una solucion saturada de bicarbonato de sodio (500 mililitros), se lavan con una solucion de acido cltrico al 5 por ciento (500 mililitros), se lavan con salmuera (500 mililitros), y se secan sobre sulfato de sodio anhidro. La solucion seca se filtra y se concentra hasta obtener un solido amarillo claro. Este solido se purifica mediante cromatografla en columna por evaporacion instantanea (1:9 a 9:1 de acetato de etilo:hexanos) proporcionando la amida de Weinreb (5) como un solido amarillo claro (11.1 gramos, 92 por ciento).

Paso 6: Cetona (6)

Se agrega por goteo bromuro de 4-fluoro-fenil-magnesio (0.8 M en tetrahidrofurano, 27.5 mililitros, 22 milimoles, 3 equivalentes) mediante una jeringa, a una solucion de la amida de Weinreb (5) (2.5 gramos, 7.32 milimoles, 1 equivalente) en tetrahidrofurano (70 mililitros) a -55°C (bano de hielo seco/isopropanol). La mezcla se agita a -55°C durante 1 hora, y luego se agrega una porcion adicional de bromuro de 4-fluoro-fenil-magnesio (0.8 M en tetrahidrofurano, 27.5 mililitros, 22 milimoles, 3 equivalentes) para impulsar la reaccion hasta completarse. La mezcla resultante se deja calentar a -10°C durante 2 horas, y se agita a esa temperatura durante 30 minutos

adicionales. La mezcla se enfrla entonces a -55°C y se agrega por goteo una solucion saturada de cloruro de amonio (50 mililitros) mediante una jeringa. La mezcla se divide entre agua (1 litro) y acetato de etilo (250 mililitros). La fase organica se separa y la fase acuosa se extrae adicionalmente con acetato de etilo (250 mililitros, 2 veces). Las fases organicas se combinan, se lavan con salmuera (500 mililitros) y se secan sobre 5 sulfato de sodio anhidro. La solucion seca se filtra y se concentra hasta obtener un aceite amarillo claro. Este aceite se purifica mediante cromatografla en columna por evaporacion instantanea (1:9 a 3:7 de acetato de etilo:hexanos) proporcionando la cetona (6) como un aceite transparente (2.3 gramos, 83 por ciento).

El resto de la slntesis sigue procedimientos que se dieron a conocer en la Publicacion Internacional Numero WO 05/097791, la cual se publico el 20 de octubre de 2005, dando como resultado el Compuesto A: MS ESI 10 501.23 (M+H)+.

Ejemplo 2 (S)-W-[(S)-Ciclohexil-(etil-{(S)-1-[5-(4-fluoro-benzoil)-piridin-3-il]-propil}-carbamoil)-metil]-2-metil-amino- propionamida

El compuesto del tltulo, referido posteriormente en la presente como Compuesto B, se prepara mediante el siguiente esquema de reaccion:

15

imagen18

HOBTlHBTU

JlPEA t OUF

79 %

BuLi t

Dess Martin

OH.Cl

79%

2 '2

Sin purification

Nh

AcOH /CH-a

rVWH ♦

jy-

U J

NaBhfOAC 1

65% en dos pasos

N 2

dUU

A

Eter

F Microondas

B6%

100 °C 71%

TFA CH.Q

i

r*N _N o

O^CI

o HCI endioxano

THr BB%

comosa de tfa

NaHCu

Ac i ao ciinco

Base LiOre

Como sai decitrato

59% en tres pasos

Compuesto B

Paso 1: 1-(5-Bromo-piridin-3-il)-4-hidroxi-butan-1-ona (1)

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

A una solucion de 3,5-dibromo-piridina (20.0 gramos, 84.4 milimoles) en 300 mililitros de eter a -70°C, se le agrega BuLi (30.4 mililitros, 75.96 milimoles, 2.5 M in hexano) lentamente (manteniendo la temperatura interna T < -65°C). Despues de agitar a -70°C durante 1 hora, se agrega lentamente g-butirolactona (10.9 gramos, 126.6 milimoles) (manteniendo la temperatura interna T < -65°C). Despues de agitar a -70°C durante 2 horas, la mezcla de reaccion se calienta a 0°C, y se apaga con 100 mililitros de agua, y se extrae con 150 mililitros de eter, 2 veces. Las capas organicas combinadas se concentran y se purifican mediante cromatografla (CH2O2 95 por ciento, EtOAc 5 por ciento) para dar la 1-(5-bromo-piridin-3-il)-4-hidroxi-butan-1-ona (1) (14.7 gramos, rendimiento del 79 por ciento) como un llquido amarillo palido.

Paso 2: 4-(5-Bromo-piridin-3-il)-4-oxo-butiraldehldo (2)

A una solucion de la 1-(5-bromo-piridin-3-il)-4-hidroxi-butan-1-ona (1) (5.0 gramos, 20.5 milimoles) en 90 mililitros de ChbCh a 25°C, se le agrega una solucion de peryodinano Dess-Martin (9.6 gramos, 22.5 milimoles) en 70 mililitros de CH2O2 lentamente. Despues de agitar a 25°C durante 20 minutos, la mezcla de reaccion se diluye con 200 mililitros de eter (sale de la solucion un lote de precipitados blancos) y se enfrla mediante un bano de hielo seco-acetona. El solido se filtra y se desecha. El filtrado se concentra. El residuo se diluye con 100 mililitros de eter y se enfrla mediante un bano de hielo seco-acetona, y los precipitados se remueven mediante filtracion. El filtrado se concentra para dar 6.2 gramos del 4-(5-Bromo-piridin-3-il)-4-oxo-butiraldehldo (2) como un aceite color cafe palido, el cual se convierte en un solido color cafe palido despues de enfriarse a 0°C, sin mayor purification para la reaccion del siguiente paso.

Paso 3: 3-Bromo-5-{(S)-1-[(R)-1-(4-metoxi-fenil)-etil]-pirrolidin-2-il}-piridina (3)

A una solucion del 4-(5-bromo-piridin-3-il)-4-oxo-butiraldehldo (2) (crudo del Paso 2, 20.5 milimoles) en 150 mililitros de CH2Cl2 a -70°C, se le agregan 3.5 mililitros de acido acetico y triacetoxi-borohidruro de sodio (10.2 gramos, 48.0 milimoles), y luego R-(+)-1-(4-metoxifenil)-etil-amina (3.9 gramos, 26.0 milimoles) lentamente con agitation. Despues de agitar a -70°C durante 1 hora, la mezcla de reaccion se calienta a temperatura ambiente. Despues de agitar a temperatura ambiente durante 2 horas, la mezcla de reaccion se diluye con 200 mililitros de CH2Cl2, y se lava con una solucion de 50 mililitros de agua, y 20 mililitros de bicarbonato de sodio saturado, y 100 mililitros de agua, 2 veces. Despues de la concentration, el producto crudo (dr = 86 : 14 mediante analisis de HPLC) se purifica mediante cromatografla en columna por evaporation instantanea (CH2O2 95 por ciento, EtOAc 5 por ciento) para dar la 3-bromo-5-{(S)-1-[(R)-1-(4-metoxi-fenil)-etil]-pirrolidin-2-il}-piridina (3) (4.7 gramos, rendimiento del 65 por ciento en dos pasos) como un llquido viscoso color cafe claro.

Paso 4a: 4-Fluoro-N-metoxi-N-metil-benzamida (4a)

A una solucion del acido 4-fluoro-benzoico (6.8 gramos, 48.57 milimoles) en 100 mililitros de N,N-dimetil- formamida a temperatura ambiente, se le agrega di-isopropil-etil-amina (25.3 mililitros, 145.7 milimoles). Despues de agitar a temperatura ambiente durante 20 minutos, se agregan HOBT (7.22 gramos, 53.43 milimoles), HBTU (20.26 gramos, 53.43 milimoles) y clorhidrato de W,0-dimetil-hidroxil-amina (5.69 gramos, 58.29 milimoles) a la solucion de la reaccion. Despues de agitar a temperatura ambiente durante 2 horas, la solucion de la reaccion se diluye con 200 mililitros de EtOAc y se lava con 50 mililitros de agua, 4 veces. Las capas organicas combinadas se concentran y se purifican mediante cromatografla en columna por evaporacion instantanea (hexano 70 por ciento, EtOAc 30 por ciento) para proporcionar la 4-fluoro-W-metoxi-W-metil-benzamida (4a) (7.0 gramos, rendimiento del 79 por ciento).

Paso 4: (4-Fluoro-fenil)-(5-{(S)-1-[(R)-1-(4-metoxi-fenil)-etil]-pirrolidin-2-il}-piridin-3-il)-metanona (4)

A una solucion de la 3-bromo-5-{(S)-1-[(R)-1-(4-metoxi-fenil)-etil]-pirrolidin-2-il}-piridina (3) (6.0 gramos, 16.6 milimoles) en 100 mililitros de eter a -73°C, se le agrega una solucion de butil-litio (7.3 mililitros, 18.3 milimoles, 2.5 M en hexano) lentamente (manteniendo la temperatura interna T < -70°C). Despues de agitar a -73°C durante 30 minutos, se agrega lentamente una solucion de 4-fluoro-W-metoxi-W-metil-benzamida (4a) (4.56 gramos, 24.9 milimoles) en 15 mililitros de eter (manteniendo la temperatura interna T < -70°C). Despues de agitar a -70°C durante 1.5 horas, la reaccion se apaga mediante la adicion de 20 mililitros de agua, y se calienta a temperatura ambiente con agitacion. La mezcla resultante se diluye con 100 mililitros de EtOAc y se lava con 30 mililitros de agua, 2 veces. La capa organica se concentra y se purifica mediante cromatografla en columna por evaporacion instantanea (CH2Cl2 95 por ciento, EtOAc 5 por ciento) para dar la (4-fluoro-fenil)-(5-{(S)-1-[(R)-1-(4-metoxi-fenil)- etil]-pirrolidin-2-il}-piridin-3-il)-metanona (4) (6.4 gramos, rendimiento del 86 por ciento) como un llquido viscoso color cafe claro.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

Paso 5: 4-Fluoro-fenil)-((S)-5-pirrolidin-2-il-piridin-3-il)-metanona (5)

Una solucion de la (4-fluoro-fenil)-(5-{(S)-1-[(R)-1-(4-metoxi-fenil)-etil]-pirrolidin-2-il}-piridin-3-il)-metanona (4) (3.3 gramos, 8.17 milimoles) en 5 mililitros de acido trifluoro-acetico se calienta a 100°C en un reactor de microondas durante 30 minutos. La solucion resultante se concentra para remover el acido trifluoro-acetico. El residuo se diluye con 100 mililitros de CH2O2, y se basifica lavando con 5 mililitros de bicarbonato de sodio saturado. La capa organica se concentra y se purifica mediante cromatografla en columna por evaporacion instantanea (CH2O2 100 por ciento hasta CH2Cl2 80 por ciento-MeOH 20 por ciento, gradiente en 30 minutos), para dar la 4-fluoro-fenil)-((S)-5-pirrolidin-2-il-piridin-3-il)-metanona (5) (1.57 gramos, rendimiento del 71 por ciento) como un llquido viscoso color cafe claro.

Paso 6: Terbutil-ester del acido (S)-1-((S)-1-Ciclohexil-2-{(S)-2-[5-(4-fluoro-benzoil)-piridin-3-il]-pirrolidin-1-il}-2-oxo- etil-carbamoil)-etil]-metil-carbamico (6)

A una solucion de la 4-fluoro-fenil)-((S)-5-pirrolidin-2-il-piridin-3-il)-metanona (2.57 gramos, 9.5 milimoles) y acido (S)-[(S)-2-(terbutoxi-carbonil-metil-amino)-propionil-amino]-ciclohexil-acetico (5) (3.58 gramos, 10.5 milimoles) en 75 mililitros de tetrahidrofurano a 0°C, se le agrega hidrato de cloruro de 4-(4,6-dimetoxi-[1,3,5]-triazin-2-il)-4-metil- morfolinio (2.97 gramos, 10.7 milimoles) en una porcion. Despues de agitar a 20°C durante 2 horas, la mezcla de reaccion se diluye con 100 mililitros de EtOAc, y se lava con 20 mililitros de agua, 3 veces. Despues de la concentracion, el producto crudo se purifica mediante cromatografla en columna por evaporacion instantanea (CH2Cl2 95 por ciento, MeOH 5 por ciento) para dar el terbutil-ester del acido (S)-1-((S)-1-ciclohexil-2-{(S)-2-[5-(4- fluoro-benzoil)-piridin-3-il]-pirrolidin-1-il}-2-oxo-etil-carbamoil)-etil]-metil-carbamico (6) (5.0 gramos, rendimiento del 88 por ciento) como un solido amarillo palido.

Paso 7: Dihidro-trifluoro-acetato de (S)-N-((S)-1-Ciclohexil-2-{(S)-2-[5-(4-fluoro-benzoil)-piridin-3-il]-pirrolidin-1-il}-2- oxo-etil)-2-metil-amino-propionamida (7)

A una solucion del terbutil-ester del acido (S)-1-((S)-1-ciclohexil-2-{(S)-2-[5-(4-fluoro-benzoil)-piridin-3-il]-pirrolidin- 1-il}-2-oxo-etil-carbamoil)-etil]-metil-carbamico (6) (4.78 gramos, 8.05 milimoles) en 3 mililitros de CH2Cl2 a -20°C, se le agregan 10 mililitros de acido trifluoro-acetico (previamente enfriado a -20°C) lentamente. Despues de agitar a 0°C durante 30 minutos, la mezcla de reaccion se concentra para remover el acido trifluoro-acetico tanto como sea posible a temperatura ambiente bajo un alto vaclo. El producto crudo se purifica mediante HPLC en fase inversa (Columna: Waters Sunfire, 50 x 50 millmetros; fase movil: CH3CN 25 por ciento - H2O 75 por ciento con acido trifluoro-acetico al 0.1 por ciento, hasta CH3CN 45 por ciento - H2O 55 por ciento con acido trifluoro-acetico al 0.1 por ciento mediante gradiente en 8 minutos; velocidad de flujo 65 mililitros/minuto; detector: 215 nanometros UV) para dar el dihidro-trifluoro-acetato de (S)-W-((S)-1-ciclohexil-2-{(S)-2-[5-(4-fluoro-benzoil)-piridin-3-il]- pirrolidin-1-il}-2-oxo-etil)-2-metil-amino-propionamida (7) (3.4 gramos, 4.70 milimoles, 58 por ciento basandose en la sal de acido 2-trifluoro-acetico) como un solido vidriado incoloro.

Un procedimiento alternativo para la desproteccion de Boc del compuesto B emplea HCl en dioxano en lugar del acido trifluoro-acetico: 3.38 gramos del producto acoplado con el dipeptido se disuelven en 50 mililitros de CH2Cl2 a -30°C. Se agregan lentamente 8 mililitros de HCl en dioxano (4.0 M), y la reaccion se agita a -30°C durante 30 minutos. Luego se remueve el bano, y la reaccion se calienta a temperatura ambiente durante 2 horas. Mediante LC/MS, la reaccion se completa a las 2.5 horas. Se evapora el solvente a sequedad para obtener un aceite, el cual entonces se purifica sobre la HPLC. El rendimiento es del 70-81 por ciento.

Paso 8: Citrato de (S)-N-((S)-1-ciclohexil-2-{(S)-2-[5-(4-fluoro-benzoil)-piridin-3-il]-pirrolidin-1-il}-2-oxo-etil)-2-metil- amino-propionamida (Compuesto B)

La sal de acido trifluoro-acetico, dihidro-trifluoro-acetato de (S)-W-((S)-1-ciclohexil-2-{(S)-2-[5-(4-fluoro-benzoil)- piridin-3-il]-pirrolidin-1-il}-2-oxo-etil)-2-metil-amino-propionamida (7) (3.4 gramos), se disuelve en 50 mililitros de CH2Cl2, y se basifica con bicarbonato de sodio saturado a un pH = 8. La solucion de la base libre se lava con 5 mililitros de agua, 2 veces, y se seca sobre sulfato de sodio, y se concentra para dar la (S)-W-((S)-1-ciclohexil-2- {(S)-2-[5-(4-fluoro-benzoil)-piridin-3-il]-pirrolidin-1-il}-2-oxo-etil)-2-metil-amino-propionamida (2.37 gramos, 4.80 milimoles), la cual se disuelve en una solucion de acido cltrico (901 miligramos, 4.80 milimoles) en 200 mililitros de agua. La solucion se seca mediante una secadora por congelacion para dar el citrato de (S)-W-((S)-1-ciclohexil-2- {(S)-2-[5-(4-fluoro-benzoil)-piridin-3-il]-pirrolidin-1-il}-2-oxo-etil)-2-metil-amino-propionamida, Compuesto B (3.23 gramos, rendimiento del 59 por ciento en tres pasos a partir del compuesto 6) como un solido amarillo claro. MS ESI 495.27 (M+H)+.

Ejemplo 3 (S)-W-((S)-1-Ciclohexil-2-{(S)-2-[5-(4-fluoro-fenoxi)-piridin-3-il}-pirrolidin-1-il}-2-oxo-etil)-2-metil-amino- propionamida

El compuesto del tltulo, posteriormente en la presente el Compuesto C, se puede preparar mediante la siguiente reaccion:

imagen19

NMP

91%

imagen20

imagen21

O O

,-K Kn

N^ H

/

OH

O

O

N^N

A ,

|^N N O

O^J Cf

THF 94% '

imagen22

O O

'A,J^n o < v°,

n • h s nj

O

imagen23

° < >°

/ \ 7 N

Como sal de TFA

Citric Acid

64% en tres pasos

imagen24

Compuesto C

Br

+ HO

F

Cu2O / Cs2C°3

+

F

5

TFA / CH2Cl2

F

F

NaHCO3 / H2O

5

Paso 1: 3-(4-Fluoro-fenoxi)-5-{(S)-1-[(R)-1-(4-metoxi-fenil)-etil]-pirrolidin-2-il}-piridina (4)

La mezcla de la 3-bromo-5-{(S)-1-[(R)-1-(4-metoxi-fenil)-etil]-pirrolidin-2-il}-piridina (3) (2.0 gramos, 5.54 milimoles), 4-fluoro-fenol (3.1 gramos, 27.7 milimoles), oxido de cobre (0.5 gramos, catalizador) y carbonato de cesio (5.4 gramos, 16.6 milimoles) en 10 mililitros de 1-W-metil-2-pirrolidinona, se calienta a 190°C en un reactor 10 de microondas durante 30 minutos. La solucion de la reaccion se diluye con 150 mililitros de EtOAc, y se filtra a traves de Celite. El filtrado se lava con 30 mililitros de agua, 4 veces. La capa organica se concentra y se purifica mediante cromatografla en columna por evaporacion instantanea (hexano 100 por ciento hasta hexano 60 por ciento y EtOAc 40 por ciento, mediante gradiente en 20 minutos)) para dar la 3-(4-fluoro-fenoxi)-5-{(S)-1-[(R)-1-(4- metoxi-fenil)-etil]-pirrolidin-2-il}-piridina (4) (1.98 gramos, rendimiento del 91 por ciento) como un llquido viscoso 15 amarillo claro.

Paso 2: 3-(4-Fluoro-fenoxi)-5-(S)-pirrolidin-2-il-piridina (5)

Una solucion de la 3-(4-fluoro-fenoxi)-5-{(S)-1-[(R)-1-(4-metoxi-fenil)-etil]-pirrolidin-2-il}-piridina (4) (1.98 gramos, 5.05 milimoles) en 5 mililitros de acido trifluoro-acetico, se calienta a 100°C en un reactor de microondas durante 20 minutos. La solucion resultante se concentra para remover el acido trifluoro-acetico. El residuo se diluye con 20 20 mililitros de CH2O2, y se basifica lavando con 5 mililitros de bicarbonato de sodio saturado. La capa organica se concentra y se purifica mediante cromatografla en columna por evaporacion instantanea (CH2O2 100 por ciento hasta CH2Cl2 95 por ciento - MeOH 5 por ciento), para dar la 3-(4-fluoro-fenoxi)-5-(S)-pirrolidin-2-il-piridina (5) (923 miligramos, rendimiento del 71 por ciento) como un solido amarillo palido.

Para el resto de la slntesis del compuesto C, MS ESI 483.27 (M+H)+, se siguen los procedimientos

correspondientes empleados en el Ejemplo 2.

Ejemplo 4 (S)-W-((S)-1-Ciclohexil-2-{(S)-2-[4-(4-fluoro-fenoxi)-piridin-2-il]-pirrolidin-1-il}-2-oxo-etil)-2-metil-amino- propionamida

El compuesto del tltulo, posteriormente en la presente el Compuesto D, se puede preparar mediante el siguiente 5 esquema de reaccion:

imagen25

Paso 1: Metoxi-metil-amida del acido 4-bromo-piridin-2-carboxllico (1)

A una solucion del acido 4-bromo-picollnico comercialmente disponible (10.0 gramos, 49.5 milimoles) en 200 mililitros de tetrahidrofurano anhidro a temperatura ambiente, se le agregan clorhidrato de W,0-hidroxil-amina 10 (4.83 gramos, 49.5 milimoles), trietil-amina (6.9 mililitros, 49.5 milimoles), carbonil-di-imidazol (CDI) (12.0 gramos,

74.3 milimoles) y W,W-dimetil-amino-piridina (DMAP) (20 miligramos, 0.16 milimoles). Despues de agitar a temperatura ambiente durante 4 horas, se toma una allcuota y se inyecta en la LC-MS para verificar el progreso de la reaccion. Al completarse la reaccion, la mezcla de reaccion se apaga con 100 mililitros de agua, y se extrae con 150 mililitros de acetato de etilo, 2 veces. Las capas organicas combinadas se concentran y se purifican 15 mediante cromatografla (hexanos 95 por ciento, EtOAc 5 por ciento, gradiente por pasos), para dar la metoxi- metil-amida del acido 4-bromo-piridin-2-carboxllico (1) como un aceite amarillo espeso (10.4 gramos, rendimiento del 86 por ciento) MS ES+ 247.02.

Paso 2: 1-(4-Bromo-piridin-2-il)-4,4-dimetoxi-butan-1-ona (2)

A una solucion del (1) (8.86 gramos, 36.2 milimoles) en 250 mililitros de tetrahidrofurano anhidro en un matraz de 20 fondo redondo de 3 cuellos secado con flama, a -70°C (bano de acetona-hielo seco), se le agrega lentamente el

reactivo de Grignard preparado a partir de dimetil-acetal de bromo-propionaidehldo (16.5 gramos, 90.4 milimoles) y rebabas de Mg (4.39 gramos, 181 milimoles) en tetrahidrofurano anhidro (250 mililitros), manteniendo la temperatura interna alrededor de -68°C a -70°C. Despues de agitar a -70°C durante 2 horas, la mezcla de reaccion se diluye con 200 mililitros de agua, removiendose el bano de hielo seco. La mezcla se vierte en un 5 embudo de separation, y la mezcla se extrae 3 veces con acetato de etilo (150 mililitros). Las capas organicas se combinan y se secan sobre Na2SO4 y el solvente se evapora, dejando un aceite amarillo espeso (11 gramos, rendimiento crudo del 100 por ciento, Ms ES+258.02).

Paso 3: 4-(4-Bromo-piridin-2-il)-4-oxo-butiraldehldo (3)

A una solution de la 1-(4-bromo-piridin-2-il)-4,4-dimetoxi-butan-1-ona (2) (cruda del Paso 2, 11 gramos, 38.2 10 milimoles) en 100 miligramos de CH2O2 a temperatura ambiente, se le agrega acido trifluoro-acetico (10.9 gramos, 95.4 milimoles), y la mezcla de reaccion se agita durante la noche. La reaccion se concentra, el residuo se disuelve en acetato de etilo (150 mililitros), y se lava con agua 3 veces. Las capas organicas se combinan, se secan sobre Na2SO4 y el solvente se evapora. El residuo se purifica mediante cromatografla en columna por evaporation instantanea (EtOAc al 30 por ciento en hexanos), para dar el 4-(4-bromo-piridin-2-il)-4-oxo- 15 butiraldehldo (3) como un aceite amarillo. (4.16 gramos, 45 por ciento): MS ES+ 244.04.

Paso 4: 4-Bromo-2-{(1S,2S)-1-[1-(4-metoxi-fenil)-etil]-pirrolidin-2-il}-piridina (4)

A una solucion del 4-(4-bromo-piridin-2-il)-4-oxo-butiraldehldo (3) (720 miligramos, 2.97 milimoles) en CH2O2 a -70°C, se le agregan acido acetico (8.93 miligramos, 0.15 milimoles), NaBH(OAc)3 (1.58 gramos, 7.44 milimoles), y (R)-(+)-1-(4-metoxifenil)-etil-amina (540 miligramos, 3.6 milimoles). La mezcla de reaccion se agita a -70°C 20 durante 1 hora, luego se calienta hasta la temperatura ambiente removiendo el bano de hielo, y dejandola agitandose durante otras 2 horas. La mezcla de reaccion se apaga mediante la adicion de agua (25 mililitros), y se lava con 20 mililitros de agua, 4 veces. Las capas organicas combinadas se concentran y se purifican mediante cromatografla en columna por evaporacion instantanea (hexano 70 por ciento, EtOAc 30 por ciento), para proporcionar la 4-bromo-2-{(1 S,2s)-1-[1-(4-metoxi-fenil)-etil]-pirrolidin-2-il}-piridina (4) (386 miligramos,

25 rendimiento del 36 por ciento) como un solido amarillo: MS ES+363.10.

Para el resto de la slntesis del compuesto D, MS ESI 483.27 (M+H)+, siguen los procedimientos correspondientes empleados en la slntesis de los Ejemplos 1 y 3.

Ejemplo 5 (S)-W-[(S)-Ciclohexil-2-((S)-2-{5-fluoro-2-[(4-fluoro-fenil)-metil-amino]-piridin-4-il}-pirrolidin-1-il)-2-oxo- etil]-2-metil-amino-propionamida

30 El compuesto del tltulo, posteriormente en la presente, Compuesto E, se prepara mediante el siguiente esquema de reaccion:

5

10

15

20

25

imagen26

MeO

OMe

imagen27

| Mg, THF OMe

MeO MgBr

THF, -400C, 30min

40%

imagen28

Reactivo Dess-Martin DCM

89%

1

imagen29

Resina Amberlyst Acetona, agua

imagen30

NaBH(OAc)3,DCM, AcOH, -78°C,

imagen31

Pd2(dba)3, KtOBu, Tolueno, ligando, 850C

imagen32

imagen33

HBTU, HOBt, DIPEA, DMF

imagen34

imagen35

Compuesto E

NH

Cl

NH

F

O

O

O

62%

95%

4

O

O

NHBoc

OH

F

F

TFA, 1000C

59%

6 (no aisiado)

1-(2-Cloro-5-fluoro-piridin-4-M)-4,4-dimetoxi-butan-1-ol (1)

A una solucion de Mg (0.71 gramos, 30 milimoles) en tetrahidrofurano (10 mililitros) se le agregan catalizador de yodo y una solucion de 3-bromo-1,1-dimetoxi-propano (3.99 gramos, 21.57 milimoles) en tetrahidrofurano (10 mililitros). La mezcla se agita a temperatura ambiente durante 2 horas. A -30°C, a una solucion de 2-cloro-5- fluoro-piridin-4-carbaldehldo (2.0 gramos, 12.54 milimoles) en tetrahidrofurano (5 mililitros) se le agrega el reactivo de Grignard preparado anteriormente. La mezcla se agita a esta temperatura durante 2 horas. Entonces la mezcla de reaccion se enfrla en un bano de hielo, se agregan NH4Cl saturado y agua, y la mezcla se extrae con EtOAc. Las capas organicas combinadas se lavan con salmuera, se secan sobre Na2SO4, se filtran, y se concentran. El producto crudo se purifica mediante cromatografla (EtOAc/hexano: 10 por ciento ~ 40 por ciento) para dar el 1-(2- cloro-5-fluoro-piridin-4-il)-4,4-dimetoxi-butan-1-ol (0.81 gramos, 25 por ciento). M/Z=264.13[M+1].

1 -(2-Cloro-5-fluoro-piridin-4-M)-4,4-dimetoxi-butan-1 -ona (2)

La suspension de 1-(2-cloro-5-fluoro-piridin-4-il)-4,4-dimetoxi-butan-1-ol (0.80 gramos, 3.03 milimoles) y reactivo Dess-Martin (1.54 gramos, 3.64 milimoles) en diclorometano (20 mililitros), se agita a temperatura ambiente durante 3 horas. El precipitado se filtra. Se agrega agua al filtrado y se extrae con diclorometano. Las capas organicas combinadas se lavan con agua, salmuera, se secan sobre Na2SO4, se filtran, y se concentran. El producto crudo se purifica mediante cromatografla (EtOAc/hexano: 5 por ciento a aproximadamente 20 por ciento) para dar la 1-(2-cloro-5-fluoro-piridin-4-il)-4,4-dimetoxi-butan-1-ona (0.71 gramos, 89 por ciento). M/Z=262.10[M+1].

1-(2-Cloro-5-fluoro-4-{(S)-1-[(R)-1-(4-metoxi-fenM)-etil]-pirroMdin-2-M}-piridma (4)

A una solucion de la 1-(2-cloro-5-fluoro-piridin-4-il)-4,4-dimetoxi-butan-1-ona (0.71 gramos, 2.71 milimoles) en acetona (15 mililitros), se le agregan resina Amberlyst 15 (1.1 gramos) y agua (0.5 mililitros). Despues de la agitacion mecanica durante 3 horas a temperatura ambiente, la mezcla se filtra. Las perlas de resina se lavan con acetona y diclorometano. El filtrado se concentra para dar el 4-(2-cloro-5-fluoro-piridin-4-il)-4-oxo-butiraldehldo (3), el cual se utiliza en el siguiente paso sin mayor purificacion.

La solucion de 4-(2-cloro-5-fluoro-piridin-4-il)-4-oxo-butiraldehldo en diclorometano (25 mililitros) se enfrla a -78°C, entonces se agregan trietoxi-borohidruro de sodio (1.72 gramos, 8.14 milimoles) y acido acetico (0.2 mililitros). Despues de que la mezcla se agita a esta temperatura durante 30 minutos, se agrega R(+)-a-metil-bencil-amina

(0.39 gramos, 2.57 milimoles) y la mezcla se calienta a temperatura ambiente durante la noche. Se agrega NaHCO3 saturado a la mezcla, y se separan las capas. La capa acuosa se extrae con dicloro-metano y las capas organicas combinadas se lavan con salmuera, se secan sobre Na2SO4, se filtran, y se concentran. El producto crudo se purifica mediante cromatografla (EtOAc/hexano: 5 por ciento a aproximadamente 20 por ciento), para 5 dar la 1-(2-cloro-5-fluoro-4-{(S)-1-[(R)-1-(4-metoxi-fenil)-etil]-pirrolidin-2-il}-piridina (0.57 gramos, 62 por ciento). HR Masas M/Z=335.1330 [M+1].

(5-Fluoro-4-{(S)-1-[(R)-1-(4-metoxi-fenil)-etil]-pirrolidin-2-il}-piridin-2-il)-(4-fluoro-fenil)-metil-amina (5)

A una solucion de la 1-(2-cloro-5-fluoro-4-{(S)-1-[(R)-1-(4-metoxi-fenil)-etil]-pirrolidin-2-il}-piridina (100 miligramos, 0.30 milimoles) en tolueno (25 mililitros), se le agregan (4-fluoro-fenil)-metil-amina (48 miligramos, 0.39 milimoles), 10 2-(diciclohexil-fosfino)-bifenilo (10 miligramos, 0.03 milimoles), Pd2(dba)3 (14 miligramos, 0.015 milimoles) y terbutoxido de potasio (84 miligramos, 0.75 milimoles). La mezcla de reaccion se agita a 85°C durante 3 horas y se enfrla a temperatura ambiente. Se agregan agua y EtOAc a la mezcla. Las capas se separan y la capa acuosa se extrae con EtOAc. Las capas organicas combinadas se lavan con salmuera, se secan sobre Na2SO4, se filtran, y se concentran. El producto crudo se purifica mediante cromatografla (EtOAc/hexano: 10 por ciento a 15 aproximadamente 40 por ciento) para dar la (5-fluoro-4-{(S)-1-[(R)-1-(4-metoxi-fenil)-etil]-pirrolidin-2-il}-piridin-2-il)- (4-fluoro-fenil)-metil-amina (120 miligramos, 95 por ciento). M/Z=424.23 [M+1].

Para el resto de la slntesis del compuesto E, MS ESI 514.30 (M+H)+, se siguen los procedimientos correspondientes empleados en la slntesis de los Ejemplos 1 y 3.

Ejemplos 6 a 31

20 Los siguientes compuestos se hacen mediante procedimientos similares a aquellos de los ejemplos anteriores.

Ej.

Nombre +MS ESI (M+H)+

6

(S)-W-((S)-1-Ciclohexil-2-{(S)-2-[4-(4-fluoro-benzoil)-5-metil-tiazol-2-il]-pirrolidin-1-il}-2-oxo- etil)-2-metil-amino-propionamida 515

7

(S)-W-{(S)-2-[(S)-2-(4-Benzoil-5-metil-oxazol-2-il)-pirrolidin-1-il]-1-ciclohexil-2-oxo-etil}-2- metil-amino-propionamida 481

8

(S)-W-((S)-1-Ciclohexil-2-{(S)-2-[4-(4-fluoro-benzoil)-5-metil-oxazol-2-il]-pirrolidin-1-il}-2- oxo-etil)-2-metil-amino-propionamida 499

9

(S)-W-((S)-1-Ciclohexil-2-{(S)-2-[4-(4-fluoro-benzoil)-5-metil-tiazol-2-il]-pirrolidin-1-il}-2-oxo- etil)-2-metil-amino-propionamida 487

10

(S)-W-{(S)-2-[(S)-2-(4-Benzoil-oxazol-2-il)-pirrolidin-1-il]-1-ciclohexil-2-oxo-etil}-2-metil- amino-propionamida 485

11

(S)-W-((S)-1-Ciclohexil-2-{(S)-2-[4-(2,4-difluoro-benzoil)-tiazol-2-il]-pirrolidin-1-il}-2-oxo- etil)-2-metil-amino-propionamida 519

12

(S)-N-((S)-1-Ciclohexil-2-{(S)-2-[4-(1H-indol-2-carbonil)-tiazol-2-il]-pirrolidin-1-il}-2-oxo- etil)-2-metil-amino-propionamida 522

13

(S)-W-((S)-1-Ciclohexil-2-{(S)-2-[2-(4-fluoro-fenoxi)-piridin-4-il]-pirrolidin-1-il}-2-oxo-etil)-2- metil-amino-propionamida 483.27

14

(S)-W-[(S)-1-((S)-2-{2-[(4-Fluoro-fenil)-metil-amino]-piridin-4-il}-pirrolidin-1-carbonil)-2- metil-propil]-2-metil-amino-propionamida 456.27

15

(S)-W-((S)-1-Ciclohexil-2-{(S)-2-[2-(4-fluoro-benzoil)-piridin-4-il]-pirrolidin-1-il}-2-oxo-etil)-2- metil-amino-propionamida 495.27

16

(S)-W-((S)-1-Ciclohexil-2-{(S)-2-[2-(5-fluoro-piridin-2-il-amino)-piridin-4-il]-pirrolidin-1-il}-2- oxo-etil)-2-metil-amino-propionamida 483.28

17

(S)-W-[(S)-1-Ciclohexil-2-((S)-2-{3-fluoro-2-[(4-fluoro-fenil)-metil-amino]-piridin-4-il}- 514.29

Ej.

Nombre +MS ESI (M+Hf

pirrolidin-1-il)-2-oxo-etil]-2-metil-amino-propionamida

18

(S)-W-((S)-1-Ciclohexil-2-{(S)-2-[3-fluoro-2-(4-fluoro-benzoil)-piridin-4-il]-pirrolidin-1-il}-2- oxo-etil)-2-metil-amino-propionamida 513.26

19

(S)-W-[(S)-2-((S)-2-{2-Amino-6-[W-(4-fluoro-fenil)-hidrazino]-piridin-4-il}-pirrolidin-1-il)-1- ciclohexil-2-oxo-etil]-2-metil-amino-propionamida 512.31

20

(S)-W-{(S)-1-Ciclohexil-2-oxo-2-[(S)-2-(4-fenoxi-piridin-2-il)-pirrolidin-1-il]-etil}-2-metil- amino-propionamida 465.3

21

(S)-N-((S)-1-Ciclohexil-2-{(S)-2-[6-(4-fluoro-fenoxi)-2-metil-pirimidin-4-il]-pirrolidin-1-il}-2- oxo-etil)-2-metil-amino-propionamida 498.3

22

(S)-N-((S)-1-Ciclohexil-2-{(S)-2-[4-(4-fluoro-benzoil)-piridin-2-il]-pirrolidin-1-il}-2-oxo-etil)-2- metil-amino-propionamida 495.3

23

(S)-N-((S)-1-Ciclohexil-2-{(S)-2-[6-(4-fluoro-benzoil)-2-metil-pirimidin-4-il]-pirrolidin-1-il}-2- oxo-etil)-2-metil-amino-propionamida 510.3

24

(S)-N-[(S)-1-Ciclohexil-2-((S)-2-{5-[(4-fluoro-fenil)-metil-amino]-piridin-3-il}-pirrolidin-1-il)-2- oxo-etil]-2-metil-amino-propionamida 496.3

25

(S)-N-[(S)-1-Ciclohexil-2-((S)-2-{4-[(4-fluoro-fenil)-metil-amino]-piridin-2-il}-pirrolidin-1-il)-2- oxo-etil]-2-metil-amino-propionamida 496.3

26

(S)-W-[(S)-1-Ciclohexil-2-((S)-2-{6-[(4-fluoro-fenil)-metil-amino]-2-metil-pirimidin-4-il}- pirrolidin-1-il)-2-oxo-etil]-2-metil-amino-propionamida 511.3

27

(S)-W-((S)-1-{(S)-2-[6-(4-Fluoro-benzoil)-2-metil-pirimidin-4-il]-pirrolidin-1-carbonil}-2-metil- propil)-2-metil-amino-propionamida 458.2

28

(S)-W-((S)-1-{(S)-2-[6-(4-Fluoro-benzoil)-2-metil-pirimidin-4-il]-pirrolidin-1-carbonil}-2-metil- propil)-2-metil-amino-propionamida 470.2

29

(S)-W-[(S)-1-((S)-2-{6-[(4-Fluoro-fenil)-metil-amino]-2-metil-pirimidin-4-il}-pirrolidin-1- carbonil)-2-metil-propil]-2-metil-amino-propionamida 471.3

30

(S)-W-((S)-1-Ciclohexil-2-{(S)-2-[6-(4-fluoro-fenil-amino)-2-metil-pirimidin-4-il]-pirrolidin-1- il}-2-oxo-etil)-2-metil-amino-propionamida 497.3

31

(S)-W-((S)-1-{(S)-2-[6-(4-Fluoro-fenil-amino)-2-metil-pirimidin-4-il]-pirrolidin-1-carbonil}-2- metil-propil)-2-metil-amino-propionamida 457.3

Con el objeto de medir la capacidad de los compuestos de la invencion para enlazarse con el bolsillo de enlace de peptido BIR3, se utilizan un ELISA y un ensayo basado en celulas.

Ejemplo 32 ELISA

Los compuestos se incuban con la protelna de fusion GST-BIR3 y el peptido SMAC biotinilado (AVPFAQK) en placas de 96 cavidades recubiertas con estreptavidina. Para el ELISA de XIAP BIR3 Smac, se utiliza una fusion de GST-BIR3 que contiene los aminoacidos 248-358 a partir de XIAP. Para el ELISA de CIAP1 BIR3 Smac, se utiliza una fusion de GST-BIR3 que contiene los aminoacidos 259-364 a partir de CIAP1. En seguida de una 5 incubacion de 30 minutos, los pozos se lavan extensamente. La protelna de fusion GST-BIR3 restante se monitorea mediante un ensayo ELISA que implica primero la incubacion con anticuerpos de cabra anti-GST, seguida por lavado e incubacion con anticuerpos anti-cabra conjugados con fosfatasa alcalina. La senal se amplifica utilizando Attophos (Promega), y se lee con Cytoflour Excitacion de 450 nanometros/40 y Emision de 580 nanometros. Las IC5os corresponden a la concentracion del compuesto que desplaza la mitad de la senal de 10 GST-BIR3. La IC50 para la Smac no biotinilada es de 400 nM. Los valores IC50 de los compuestos de los Ejemplos 1 a 4, en los ensayos ELISA descritos, estuvieron en el intervalo de <0.001 a 10 pM.

Ejemplo 33 Ensayo de proliferacion celular

Se monitorea la capacidad de los compuestos para inhibir el crecimiento de celulas tumorales in vitro, empleando el Ensayo de Proliferacion Celular No Radioactivo CellTiter 96® AQueous (Promega). Este ensayo se compone de 15 soluciones de un compuesto de tetrazolio novedoso [3-(4,5-dimetil-tiazol-2-il)-5-(3-carboxi-metoxi-fenil)-2-(4-sulfo- fenil)-2H-tetrazolio, sal interna; MTS] y un reactivo de acoplamiento de electrones (metosulfato de fenazina) PMS. El MTS se bio-reduce mediante las celulas en un producto de formazano, cuya absorbencia se mide a 490 nanometros. La conversion del MTS en el producto de formazano soluble en agua se lleva a cabo mediante las enzimas de deshidrogenasa encontradas en las celulas metabolicamente activas. La cantidad de producto de 20 formazano medida por la cantidad de absorbencia a 490 nanometros es directamente proporcional al numero de celulas vivas en el cultivo. Los valores IC50 de los compuestos descritos en los Ejemplos 1 a 4 en este ensayo celular, estuvieron en el intervalo de <0.001 a 50 pM.

Ejemplo 34 Tabletas 1 que comprenden compuestos de la formula (I)

Se preparan tabletas que comprenden, como ingrediente activo, 50 miligramos de cualquiera de los compuestos 25 de la formula (I) mencionados en los Ejemplos 1 a 4 precedentes, de la siguiente composicion, empleando el metodo de rutina:

Composicion

Ingrediente activo

50 mg

Almidon de trigo

60 mg

Lactosa

50 mg

Sllice coloidal

5 mg

Talco

9 mg

Estearato de magnesio

1 mg

Total

175 mg

Fabricacion: El ingrediente activo se combina con parte del almidon de trigo, la lactosa, y la sllice coloidal, y la mezcla se comprime a traves de un tamiz. Se mezcla una parte adicional del almidon de trigo con 5 veces la cantidad de agua, en un bano de agua, para formar una pasta, y la mezcla hecha primero se amasa con esta 30 pasta hasta que se forme una masa debilmente plastica.

Los granulos secos se comprimen a traves de un tamiz que tiene un tamano de malla de 3 millmetros, se mezclan con una mezcla previamente tamizada (tamiz de 1 millmetro) del almidon de malz restante, estearato de magnesio, y talco, y se comprimen para formar tabletas ligeramente biconvexas.

Ejemplo 35Tabletas 2 que comprenden compuestos de la formula (I)

35 Se preparan tabletas que comprenden, como ingrediente activo, 100 miligramos de cualquiera de los compuestos de la formula (I) de los Ejemplos 1 a 4, con los siguientes procedimientos convencionales:

Composicion

Ingrediente activo

100 mg

Lactosa cristalina

240 mg

Avicel

80 mg

PVPPXL

20 mg

Composicion

Aerosil

2 mg

Estearato de magnesio

5 mg

Total

447 mg

Fabricacion: El ingrediente activo se mezcla con los materiales portadores y se comprime por medio de una maquina formadora de tabletas (Korsch EKO, Diametro del troquel de 10 millmetros).

Ejemplo 36Capsulas

Se preparan capsulas que comprenden, como ingrediente activo, 100 miligramos de cualquiera de los 5 compuestos de la formula (I) dados en los Ejemplos 1 a 4, de la siguiente composicion, de acuerdo con los procedimientos convencionales:

Composicion

Ingrediente Activo

100 mg

Avicel

200 mg

PVPPXL

15 mg

Aerosil

2 mg

Estearato de magnesio

1.5 mg

Total

318.5 mg

La fabricacion se hace mezclando los componentes y rellenandolos en capsulas de gelatina dura, tamano 1.

El termino “ingrediente activo”, como se utiliza en la presente, se refiere a un compuesto de las formulas (I)-(VII), o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, como se define en la presente.

10

Claims (2)

1. REIVINDICACIONES

   1. Un compuesto de formula 7

   F

   (7).
2. 2. Un compuesto de formula 6

   5

   imagen1

   imagen2