ES2552106T3

ES2552106T3 - Polímeros biocompatibles para una composición médica

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Publication number: ES2552106T3
Application number: ES10006666.1T
Authority: ES
Inventors: Denis Barritault; Véronique BARBIER-CHASSEFIERE
Original assignee: ORGANES TISSUS REGENERATION REPARATION REMPLACEMENT
Current assignee: ORGANES TISSUS REGENERATION REPARATION REMPLACEMENT
Priority date: 2003-10-28
Filing date: 2004-10-28
Publication date: 2015-11-25
Anticipated expiration: 2024-10-28
Also published as: EP2229947A2; ATE480245T1; EP1677807B1; DK2260853T3; DK2229947T3; PT1677807E; CN102885849A; EP2229947B1; JP2014218503A; EP2260853A3; EP1677807A2; JP5026791B2; EP2260853B1; CA2543530A1; JP2012067127A; IL175235A; PL1677807T4; PL1677807T3; EP2260853A2; JP2007514649A

Abstract

Composición farmacéutica, dermatológica o cosmética para su uso como un medicamento destinado a la prevención, alivio y/o tratamiento del malestar, síntomas molestos seleccionados entre hormigueo, irritación, picazón y tirantez cutánea y/o protección de los tejidos frente a estos, correspondiendo dicha composición de un polímero biocompatible a la siguiente fórmula general (I) AaXxYy (I) en la que: A es glucosa, X representa un grupo RCOOR', Y representa un grupo O o N-sulfonato unido a A y correspondiente a una de las siguientes fórmulas - ROSO3R', -RNSO3R', en las que: R representa una cadena hidrocarburo alifática, posiblemente ramificada y/o insaturada y que puede contener uno o más anillos aromáticos y R' representa un átomo de hidrógeno o un catión, a representa el número de monómeros, y es de tal forma que la masa de dichos polímeros de fórmula (I) sea mayor de aproximadamente 2000 daltons. x representa la tasa de sustitución de los monómeros A por los grupos X, siendo x entre aproximadamente el 20 y el 150%, y representa la tasa de sustitución de los monómeros A por los grupos Y, siendo y entre aproximadamente el 30 y el 150%,

Description

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Otras ventajas y características de la invención aparecerán a partir de los ejemplos a continuación y que se refieren a la preparación y formulación de los polímeros biocompatibles usados dentro del contexto de la presente invención y que también describen su actividad contra el dolor. Estos ejemplos se proporcionan únicamente como ilustrativos y no puede interpretarse como limitante la presente invención.

5 Ejemplo I: Preparación, Medición de la Resistencia a Glicanasas y Formulación de los Polímeros Biocompatibles

1) Ejemplo de Preparación.

10 El fármaco se obtiene por la síntesis de un dextrano (Amersham Pharmacia T40 USP). El método de síntesis comprende dos etapas de injerto químico, carboximetilación y O-sulfonación.

a) Protocolo de carboximetilación

15 Se preparan simultáneamente 75 ml de una solución de dextrano T40 (15 g, 92,5 mmol) en agua Milli-Q y 48 ml de una solución que contiene 29,6 g (740 mmol) de sosa cáustica. La temperatura de las dos soluciones se reduce a 4 ºC antes de verter suavemente la solución de sosa cáustica en la solución de dextrano. La mezcla de reacción se agita durante veinte minutos a 4 ºC. Después de la adición gradual de 30,6 g (323,8 mmol) de ácido cloroacético, la temperatura de la mezcla de reacción se eleva a 50 ºC durante cincuenta minutos antes de neutralizarse con ácido

20 acético (pH 7).

La solución obtenida después de la refrigeración se filtra sobre una membrana de 0,45 µm (Millipore), el volumen se eleva a dos litros y se añade cloruro sódico para obtener una concentración final de 1 M. La sal sódica del carboximetildextrano se purifica por ultrafiltración con flujo tangencial sobre una membrana con un umbral de corte

25 de 10000 daltons (PelliconMARCAREG, Millipore). Se realizan dos lavados sucesivos a volumen constantes, inicialmente con 2,5 l de cloruro sódico 1 M seguido de 18 l de agua Milli-Q. El carboximetildextrano se concentra y el sistema de ultrafiltración se aclara con 250 ml de agua Milli-Q.

La solución final se deshidrata por liofilización.

30 b) Protocolo de Sulfatación.

El CMD, en forma de sal sódica, es insoluble es un medio orgánico, es necesario inicialmente para acidificar el polímero por percolación sobre una resina de intercambio iónico (Amberlite IR 120) con el fin de generar un CMDH+.

35 Posteriormente, el producto se presenta en forma de fibras algodonosas de color blanco.

El CMDH+ (6 g, 32 mmol) se pone en solución en una mezcla de FA (45 ml), DMF (180 ml) y 2-metil-2-buteno (45 ml) a 30 ºC. A esta solución se le añade el complejo de trióxido de azufre, SO3/DMF (24,3 g, 160 mmol). Se deja reaccionar durante dos horas a 30 ºC mientras se agita. La mezcla de reacción se neutraliza con

40 hidrogenocarbonato sódico (NaHCO3, 5%) a un pH = 7.

Después de la filtración sobre una membrana de 0,45 µm (Millipore), el volumen se eleve a dos litros y se añade cloruro sódico para obtener una concentración final de 1 M. La sal sódica del sulfato de carboximetildextrano se purifica por ultrafiltración con flujo tangencial sobre una membrana con un umbral de corte de 10000 daltons

45 (PelliconMARCAREG, Millipore). Se realizan dos lavados sucesivos a volumen constante, inicialmente con 5 l de cloruro sódico 1 M seguido de 18 l de agua Milli-Q. El sulfato de carboximetildextrano se concentra y el sistema de ultrafiltración se aclara posteriormente con 250 ml de agua Milli-Q.

La solución final se deshidrata por liofilización. El grado de sustitución (ds) de los grupos carboximetilo (dsCM) se

50 define como el grado de sustitución por unidad de glucosa de los grupos de carboximetilo y el ddD se define como el grado de sustitución por unidad de glucosa de los grupos sulfato. El producto OTD 70 obtenido cumple los siguientes criterios analíticos:

dsCM: de 0,25 a 0,75 55 dsS: de 0,80 a 1,30

En los ejemplos anteriores, los polímeros biocompatibles se prepararon en una solución de suero fisiológico.

2) Medición de la Resistencia a la Digestión por Glicanasas.

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En una formulación de pomada, las siguientes composiciones se prepararon usando gel de carboximetilcelulosa sódica (Aqualon) en complemento al 4,5% al 100% o además, un gel de hidroxipropilcelulosa neutra (Kucel de Aqualon de tipo 99MF EP) en complemento al 3% al 100% o además glicerina en complemento al 33% (H/L (fase hidrófila dispersa en una fase lipófila, tal como el excipiente de Roc® que contiene vaselina, parafina líquida,

5 glicéridos, éteres de polioxileno y cerisina) al 100%.

Una formulación particularmente eficaz para aplicaciones locales a pieles cerradas consiste en usar geles antibacterianos comercializados para lavar las manos sin agua "geles antibacterianos sin aclarado". Varios de estos productos basados en polietilenglicol, alcohol y glicerina son fáciles de obtener (por ejemplo, Assanis® de Blue

10 skin®) en los que el biopolímero es estable y se ajusta a una concentración final de entre 0,1 y 1000 microgramos por ml, con una concentración preferida de 100 microgramos).

Para las soluciones inyectables a través de la ruta sistémica, RGTA se encontraba en una solución de solución salina fisiológica en 1,5 mg/kg, a menos que se especifique otra cosa.

15 La Tabla 2 a continuación especifica los tipos de polímeros biocompatibles (pesos moleculares, tipos y grados de sustitución) usados en los diferentes ejemplos.

Tabla 2

Ejemploa: Polímeros biocompatibles Estructura de partida Estructura

Peso molecularb: Z Grado de sustitución X=CM Y=SO3 Z x y z

1,3: 0,40,5 0,7-1 -

0,40,5: 0,7-1

Todos los ejemplos: RGT A OTD70 Dextrano 40 - 0,40,5 0,7-1 -

3: RGTAE-87 Dextrano 70 - 0,39 1,10 -

3: RGTAC-17 Dextrano 200 - 0,48 1,15 -

3: RGTAC-6 Dextrano 500 - 0,43 1,30 -

3: RGTAC -21 Dextrano 2000 - 0,52 0,93 -

1, 3, 5, 6, 7, 8: RGTAE-97 Dextrano 40 a 2000 - 0,38 1,17 -

1, 3, 5, 8, 10: RGTAG-36 Dextrano 10 Fenilalanina metil éster 0,59 0,83 0,22

3, 5, 6, 12: RGTAC-27 Dextrano 40 Fenilalanina metil éster 0,76 0,81 0,18

3, 13: RGTAC 29 Dextrano 200 Fenilalanina metil éster 0,57 0,87 0,18

3, 13: RGTAC -31 Dextrano 500 Fenilalanina metil éster 0,46 0,88 0,27

3, 6: RGTAC -32 Dextrano 2000 Fenilalanina metil éster 0,47 0,88 0,22

Todos los ejemplos: RGTAE -82 Dextrano 40 acetato 0,4 1,00 0,18

1, 3, 5, 6, 10: RGTA-21 Dextrano 40 bencilamina 0,82 0,95 0,47

3, 11, 12, 13: RGTAE -61 Celulosa -90 - 0,39 1,13 -

3: RGTAE -57 β-glucano nd - 1,04 0,89 -

1, 3: Carboxi Metilcelulosa

1, 3, 5, 6: Glucuronano 200 acetato 1 -0.85 0,70

3: glucoglucuronano 550 0,5 0,9

3, 5, 6: RGTA MP4 Copolímero de ácido málico 6300 S-Butilo 0,65 0,25 0,10

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mucoso de Malpighi. Esta necrosis de coagulación también afecta al epitelio de los infundibulos pilosos sobre un espesor equivalente. Se trata de una quemadura superficial de segundo grado. Finalmente, la zona central de la quemadura en la que la epidermis se necrosa a lo largo de todo su grosor representa del 50 al 60% del área total quemada y corresponde a una quemadura profunda de segundo grado.

5 Por lo tanto, según las zonas, la necrosis respeta o no la membrana basal epidérmica y afecta o no a la parte adyacente de la dermis papilar. Se trata de una quemadura profunda de segundo grado o una quemadura intermedia superficial. Se observan lesiones necróticas idénticas a las de la dermis en el epitelio de los infundibulos pilosos y se extienden más o menos completamente al contenido de las glándulas sebáceas.

10 b) Protocolo Experimental.

Catorce ratas sin pelo macho, con un peso entre 280 y 300 gramos, se reparten aleatoriamente en dos grupos de 7 ratas. Tras la anestesia de las ratas de acuerdo con los protocolos reguladores para la experimentación animal, las

15 quemaduras se realizaron de acuerdo con el protocolo que se ha descrito anteriormente.

Cinco minutos después de realizar las quemaduras, los animales en los grupos tratados (G+) y de referencia (G-) recibieron una aplicación tópica de 1 mililitro de solución salina fisiológica que contenía o no 100 microgramos por mililitro de polímero biocompatible, empapado en una compresa estéril. Unos pocos minutos después, cada animal

20 recibió una inyección intramuscular (IM) de solución salina fisiológica que contenía o no polímero biocompatible (1,5 miligramos por kilo) en un volumen de 300 microlitros. Los animales en los grupos G+ recibieron posteriormente una inyección IM semanal de la misma dosis de polímero biocompatible y los de los grupos G+ recibieron una inyección de solución salina fisiológica. Los apósitos oclusivos consistían en una capa de tul grueso, con una película de Jelonet, Opsite (10 x 14 cm, Smith and Nephew) en la parte superior. El conjunto se cubrió con esparadrapo que

25 cubría todo el abdomen del animal.

Los apósitos se cambiaron cada 2 días durante la primera semana y semanalmente durante el primer mes. Los animales guardados en jaulas individuales animales ya no tenían ningún apósito un mes después de la operación.

30 c) Medición del Sufrimiento de los Animales.

El día 1, 3, 5 y 7, durante el cambio de apósitos, se observó una diferencia en el comportamiento de los animales tratados con polímero biocompatible (+) con respecto a los animales no tratados (-). Los animales tratados estaban mucho más calmados y se manipularon por el experimentador sin luchar y no emitían gritos. Par evitar

35 interferencias, los cambios de apósito se realizaron en una habitación separada del lugar en el que los animales se mantuvieron y las jaulas individuales se retiraron aleatoriamente (las ratas tratadas o no tratadas con un polímero biocompatible tenían sus apósitos cambiados sin ningún orden preestablecido). El experimentador, que no fue informado del tratamiento de los animales con un polímero biocompatible, con un protocolo de doble ciego, puntuó los siguientes parámetros de 1 a 5:

40 -Parámetro (a): Facilidad con la que la rata se deja coger (siendo 1 el más fácil); -Parámetro (b): Facilidad con la que permite retirar el apósito; -Parámetro (c): Reacción a palpación (tacto) del área quemada;

45 La palpación se realizó por la aplicación del tubo de latón usado previamente para la quemadura, pero a temperatura ambiente, aplicado sin presión al centro de la herida y mantenido en la posición recta con la mano durante 5 segundos.

-Parámetro (d): Reacción a la palpación en la zona periférica de la herida;

50 Tras el experimento de palpación, se midió la reacción del animal a los movimientos de la piel. Esto se realizando tirando de la piel sana tomada entre el pulgar y el dedo índice de cada mano del experimentador situado en cada lado o a aproximadamente 3 cm del centro inicial de la quemadura y por 4 movimientos lentos de un lado a otro de una distancia de 2 cm de acuerdo con un eje perpendicular a la columna vertebral, manteniéndose el animal por un

55 segundo experimentador por la base del cuello y las patas traseras.

-Parámetro (e): Facilidad con la que la rata se deja tratar para la limpieza de la herida y el reemplazo del apósito; -Parámetro (f): Si lo animales emiten sonidos audibles de sufrimiento en cada una de estas etapas.

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función respiratoria mejoró notablemente.

15) Ejemplo 15: Efectos calmantes de la tos del polímero biocompatible.

5 Fumar cigarrillos es una fuente frecuente de irritación de la garganta, la nariz y los bronquios y puede dar como resultado una tos regular o ataques de tos. Estos pueden volverse francamente dolorosos. La absorción por vía oral con gárgaras o por atomización o por respiración en aerosol del polímero biocompatible tiene un efecto de alivio y detención del malestar causado por estos fumadores rápidos.

10 16) Ejemplo 16: Efectos analgésicos del polímero biocompatible sobre ulceraciones del estómago.

Se observaron los efectos analgésicos sobre ulceraciones del estómago en dos casos.

El primero fue un hombre africano de 45 años que padecía úlcera de estómago diagnosticada por endoscopia pero

15 no tratada (por tratamiento antibiótico contra Helico Bacter) y suficientemente grave para que el dolor impusiera una dieta sin alcohol y sin ningún excitante gástrico (especias, café, etc.). A pesar de esta dieta, este hombre padeció una sensación de quemazón permanente, particularmente exacerbada en las comidas. La ingesta por vía oral de 20 ml de polímero biocompatible en solución en suero fisiológico a 100 microgramos por ml cada tres días eliminó todo dolor desde el primer día del tratamiento, que duró tres semanas sin recaída después de 6 meses.

20 El otro caso es un hombre de 57 años cuyas sensaciones de quemazón en el estomago se calman regularmente los minutos siguientes a la absorción de un sorbo de 20 ml de polímero biocompatible.

17) Ejemplo 17: Efecto analgésico del polímero biocompatible sobre dolores abdominal difusos.

25 Un hombre de 55 años que pesaba 70 kg que presentaba dolores abdominales difusos con frecuencia e intensidad crecientes, que desaparecieron posteriormente antes de reaparecer algunos días después se calmó eficazmente en varias ocasiones por una administración oral de 70 ml del polímero biocompatible objeto de la presente invención. Durante la media hora tras la administración, el dolor había desaparecido. Este hombre padecía de cólico nefrítico y

30 el efecto analgésico obtenido por esta administración oral únicamente fue eficaz en las fases iniciales del cólico. Durante los dolores más intensos, únicamente la morfina fue capaz de ser eficaz. Es esta observación la que permitió la realización de una acción sistémica contra el dolor del biopolímero a través de administración oral. Una mujer de 55 años, que padecía un cáncer inoperable de páncreas, sobrevivió sin tener que aumentar un nivel basal de morfina de 50 mg por día hasta un estadio muy tardío, sin que el dolor se volviera insoportable con una

35 administración oral y diaria de 100 microgramos/kg del polímero en solución en agua. No parece existir la mínima interferencia con la morfina distinta de un efecto añadido frente al dolor.

18) Ejemplo 18: Efecto analgésico del polímero biocompatible sobre dolores de cabeza.

40 El efecto del biopolímero sobre las cefaleas se observó en una decena de casos después de una administración oral del producto de acuerdo con las mismas condiciones que en el ejemplo 15. Aquí de nuevo, fue posible reducir notablemente el dolor de cabeza y a veces eliminarlo totalmente. En los dos casos tratados, los individuos, habituadas a fuertes migrañas y que, en general, no obtenían ningún alivio con los productos analgésicos convencionales (aspirina, paracetamol) no pasaron más dolor.

45 19) Ejemplo 19: Efectos analgésicos del polímero biocompatible sobre aftas, mucositis, dolor de garganta y sobre dolores dentales.

La aplicación del polímero biocompatible, directamente sobre las aftas bucales con la ayuda de un hisopo empapado 50 en polímero biocompatible o mediante un simple enjuague bucal da como resultado un alivio radical del dolor.

Lo mismo se aplica a dolores en las encías causados por desprendimiento de los dientes. En este caso, se observó una mejor eficacia tras el cepillado de los dientes y las zonas sensibles impregnadas con un cepillo empapado en una solución del biocompatible.

55 El efecto analgésico se observó en una serie de experimentos en un modelo de periodontitis inducida en hámsteres. El modelo experimental es tal como el publicado en Escartin y col., "A new approach to treat tissue destruction in periodontitis with chemically modified dextran polymers", FASEB J., 2003, vol. 17, 636-643. En esta serie de experimentos, los animales tratados con una inyección por vía intramuscular del polímero biocompatible a 0,4 mg/kg

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