ES2539502T3 - Compuestos del ácido [(5H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-11-il)piperazin-1-il]-2,2-dimetilpropanoico sustituidos como agonistas inversos de H1/antagonistas de 5-HT2A con actividad dual - Google Patents

Abstract

Un compuesto de la fórmula**Fórmula** en la que R1 es cloro o metilo; R2 es metilo, etilo, isopropilo, cloro, bromo, trifluorometilo, o metiltio; y R3 es hidrógeno o metoxi; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Description

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presencia de un catalizador de metal de transición tal como platino; hierro en ácido acético; y dicloruro de estaño en ácido clorhídrico. La anilina correspondiente primero se puede aislar o hacer reaccionar directamente en condiciones de ciclación para proporcionar un compuesto de Fórmula III. La ciclación se lleva a cabo en presencia de un ácido tal como ácido clorhídrico o una base tal como t-butóxido de potasio. Se puede preparar un compuesto de Fórmula V donde R4 es metilo o etilo como se describe en las preparaciones o mediante procedimientos conocidos en las técnicas químicas para la producción de compuestos estructuralmente análogos.

Esquema 3

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En las siguientes preparaciones y ejemplos ilustrativos, los reactivos se obtuvieron a partir de una diversidad de fuentes comerciales. En general, los disolventes se eliminan a presión reducida (se evaporan). En algunos procedimientos, los rendimientos indicados son rendimientos en bruto representativos para productos que se aíslan mediante evaporación o filtración y se usan directamente sin purificación adicional.

Preparación 1

Síntesis de 2,2-dimetil-3-oxo-propanoato de metilo

Añadir 3-hidroxi-2,2-dimetilpropanoato de metilo (33 g, 250 mmol) a peryodinano de Dess-Martin (106 g, 250 mmol) suspendido en DCM (1000 ml) a 0 °C y agitar a temperatura ambiente durante 18 h. Filtrar la mezcla de reacción a través de un lecho de celite y concentrar el filtrado. Lavar el filtrado concentrado con pentano (2 x 200ml). Separar la capa de pentano y concentrar al vacío para dar 2,2-dimetil-3-oxo-propanoato de metilo (31,93 g, cuantitativo). RMN de 1H (d6-DMSO) δ 9,59 (s, 1H), 3,67 (s, 3H), 1,26 (s, 6H).

Preparación 2

Síntesis de 4-(3-metoxi-2,2-dimetil-3-oxopropil)piperazin-1-carboxilato de terc-butilo

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Agitar una solución de 2,2-dimetil-3-oxo-propanoato de metilo (30,88 g, 237,31 mmoles) y piperazin-1-carboxilato de terc-butilo (34,00 g, 182,55 mmoles) en DCM (500 ml) a temperatura ambiente durante 20 minutos. Añadir ácido acético (2 equiv); 20,92 ml, 365,09 mmoles) seguido de triacetoxiborohidruro de sodio (1,4 equiv; 54,17 g, 255,56 mmoles) durante 0,5 h y agitar la mezcla resultante agitada a temperatura ambiente durante la noche. Con cuidado, desactivar con agua (250 ml) y transferir la mezcla a un embudo de decantación con DCM (300 ml). Lavar la capa orgánica resultante con salmuera. Secar sobre MgSO4, filtrar y evaporar para dar 4-(3-metoxi-2,2-dimetil-3-oxopropil)piperazin-1-carboxilato de terc-butilo. (58 g, 100 %). EM (m/z): 301,2 (M+1).

Preparación 3

Síntesis de diclorhidrato de 2,2-dimetil-3-(piperazin-1-il)propanoato de metilo

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Añadir a una solución de 4-(3-metoxi-2,2-dimetil-3-oxopropil)piperazin-1-carboxilato de terc-butilo (58,0 g, 193,08 mmoles) en alcohol isopropílico (150 ml) una solución de cloruro de hidrógeno en dioxano 4 M ((4 equiv); 7 5

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193,08 ml, 772,31 mmoles) durante 15 minutos, observando la evolución del gas y un precipitado fino. Calentar a 55 °C durante 3 h para dar un precipitado blanco. Enfriar hasta 10 °C y recoger el sólido blanco mediante filtración, lavar con alcohol isopropílico adicional (30 ml), luego EtOAc. Secar en un horno a vacío a 45 °C durante 1 h para dar diclorhidrato de 2,2-dimetil-3-(piperazin-1-il)propanoato de metilo (31 g, 59 % de rendimiento). EM (m/z): =201,1 (M+1).

Preparación 4

Síntesis de clorhidrato de 2,2-dimetil-3-(piperazin-1-il)propanoato de metilo

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Disolver diclorhidrato de 2,2-dimetil-3-(piperazin-1-il)propanoato de metilo (112,0 g, 409,95 mmoles) en agua (250 ml). Añadir bicarbonato de sodio sólido para dar una capa acuosa de pH 4 y extraer la mezcla en una solución de DCM al 10 % en éter dietílico (300 ml) para eliminar algo de materia sólida oscura y algo de color. Desechar la capa orgánica. Basificar la fase acuosa hasta pH 8 con solución de hidróxido de sodio acuosa 2 M, luego saturar con cloruro de sodio sólido. Extraer en una solución al 10 % de isopropanol en cloroformo. Añadir adicionalmente hidróxido de sodio acuoso 2 M para mantener el pH 8. Repetir la extracción en una solución al 10 % de isopropanol en cloroformo. Continuar con el procedimiento de extracción hasta que el 85 % del material esperado se haya recuperado. Lavar con salmuera la solución de isopropanol en cloroformo, secar sobre Na2SO4, filtrar y evaporar para dar clorhidrato de 2,2-dimetil-3-(piperazin-1-il)propanoato de metilo (82,1 g % de rendimiento). EM (m/z): 201,1 (M+1).

Preparación 5

Síntesis de 4-etenil-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo

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Desgasificar, mediante purgado con nitrógeno durante 10 minutos, una solución de 4-bromo-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo (2,0 g, 9,8 mmoles), trietenilboroxin piridina (1,3 equiv; 3,1 g, 12,7 mmoles), y carbonato de potasio (3 equiv; 4,1 g, 29,4 mmoles) en una mezcla de 1,4-dioxano (20 ml) y agua (10 ml). Añadir tris(dibencilidenacetonilo)bis-paladio (Pd2(dba)3) (0,01 equiv; 0,0925 g, 98,0 mmoles) y 1,1’-bis(di-terc-butilfosfino)ferroceno (dtbpf) (0,03 equiv; 0,0853 g, 294,1 mmoles) y calentar a 95 °C durante 3 h. Enfriar hasta la temperatura ambiente, luego repartir entre agua (50ml) y una mezcla 1:1 de hexanos/éter dietílico (100 ml). La capa orgánica se lava con agua (2 x 50 ml), luego salmuera. Secar sobre Na2SO4, filtrar y evaporar para dar 4-etenil-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo como un aceite de color paja (1,5 g). Usar sin purificación adicional. RMN de 1H (CDCl3), δ: 8,90 (1H, s. a.), 7,02 (1H, m), 6,95 (1H, m), 6,56 (1H, q) 5,48 (1H, dd), 5,05 (1H, dd), 3,86 (3H, s).

Preparación 6

Síntesis de 4-etil-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo

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Cargar en un frasco de Parr de 500 ml, una mezcla de paladio al 5 % sobre carbón vegetal (0,2 g) en etanol (25 ml) y añadir 4-etenil-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo (1,4 g, 9,3 mmoles). Hidrogenar a 206,8 kPa durante 3 h para dar una conversión completa mediante CL-EM. Filtrar a través de celite y evaporar para dar un aceite. Hacer pasar a través de un soporte de gel de sílice con isohexano/acetato de etilo (100:0 a 75:25) para dar el compuesto del título como un

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aceite amarillo pálido (1,12g). RMN de 1H (CDCl3), δ: 8,87 (1H, s. a.), 6,73-6,78 (2H, m), 3,83 (3H, s), 2,50 (2H, q, J=7,8 Hz) y 1,19 (3H, t, J=7,3 Hz). Preparación 7 Síntesis de 4-(prop-1-en-2-il)-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo

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Mezclar 4-yodo-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo (1,5 g, 5,98 mmoles), 4,4,5,5-tetrametil-2-(prop-1-en-2-il)-1,3,2-dioxaborolano (3,01 g, 17,98 mmoles) 1,1’-bis(di-terc-butilfosfino)ferroceno (dtbpf) (0,3 g, 0,06 mmoles), tris(dibencilidenacetonilo)bis-paladio (Pd2(dba)3) (0,3 g, 0,06 mmoles), fosfato tripotásico (2,54 g, 11,95 mmoles) y metanol (12 ml). Calentar la mezcla en un tubo sellado en un microondas a 140 °C durante 30 minutos. Enfriar, filtrar la mezcla de reacción y lavar el sinterizado con metanol, evaporar el filtrado a presión reducida y someter a cromatografía sobre sílice eluyendo con isohexano/diclorometano (gradiente de elución, 100:0 a 0:100). Evaporar las fracciones que contienen producto para dar 4-(prop-1-en-2-il)-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo. (0,679 g, 68,79 % de rendimiento). EM (m/z): 166,1 (M+1).

Preparación 8

Síntesis de 3-metoxi-4-metil-1H-pirrol-2-carboxilato de etilo

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Añadir sulfato de dimetilo (3 ml, 3,99 g, 31,63 mmoles) a una mezcla de éster etílico del ácido 3-hidroxi-4-metil-1H-pirrol-2-carboxílico (3,5 g, 20,69 mmoles) e hidróxido de sodio 2M (75 ml, 1500 mmoles) y agitar vigorosamente la mezcla de reacción durante 30 min a temperatura ambiente (se aplica baño de enfriamiento con agua). Recoger el precipitado resultante y lavar con agua. Añadir más sulfato de dimetilo (3ml, 3,99 g, 31,63 mmoles) al filtrado y agitar durante 30 minutos. Recoger el precipitado resultante y lavar con agua. Añadir más sulfato de dimetilo (3 ml, 3,99 g, 31,63 mmoles) al filtrado y agitar durante 1 h. Combinar los precipitados aislados y secar en un horno a vacío a 50 °C durante 30 minutos para dar 3-metoxi-4-metil-1H-pirrol-2-carboxilato de etilo (3,221 g, 84,98 % de rendimiento). EM (m/z): 184,09 (M+1).

Preparación 9

Síntesis de 1-(5-cloro-2-nitrobencil)-4-metil-1H-pirrol-2-carboxilato de etilo

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Agitar vigorosamente una solución de 2-(bromometil)-4-cloro-1-nitro-benceno (25,02 g, 99,88 mmoles) en DCM (200 ml), y añadir a esta una solución de 4-metil-1H-pirrol-2-carboxilato de etilo (15 g, 97,92 mmoles) en DCM (200 ml). Luego añadir hidróxido de tetra-n-butilamonio 30-hidratado (0,508 g) y enfriar la mezcla agitada en nitrógeno hasta 5 °C usando un baño de hielo externo. Añadir hidróxido de sodio ac. al 25% (200 ml) gota a gota durante 15 minutos observando la elevación de la temperatura interna hasta 10 °C. Agitar y dejar templar hasta la temperatura ambiente. Agitar a temperatura ambiente durante 3,5 h. Añadir adicionalmente hidróxido de sodio ac. al 50 % (20 ml) y

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agitar a temperatura ambiente durante1 h adicional. Detener la agitación y dejar que las capas se separen. Transferir a un embudo de decantación y lavar la capa orgánica con ácido clorhídrico 1 N (200 ml), observando que el pH de esta capa sea ácido usando papel indicador A continuación, lavar la capa orgánica con agua (600 ml) y luego salmuera (600 ml) y finalmente secar sobre Na2SO4. Filtrar la mezcla y eliminar el disolvente al vacío a 40 °C para dar un aceite naranja. Purificar haciendo pasar a través de un soporte de gel de sílice con isohexano/acetato de etilo (gradiente que eluye desde el 10 al 20 %) para dar 1-(5-cloro-2-nitrobencil)-4-metil-1H-pirrol-2-carboxilato de etilo como un aceite amarillo (33 g, cuantitativo). EM (m/z): 322,98 (M+1).

Preparación 9 alternativa

Síntesis de 1-(5-cloro-2-nitrobencil)-4-metil-1H-pirrol-2-carboxilato de etilo

En una atmósfera de nitrógeno con agitación añadir carbonato de cesio (96g, 295 mmoles) a una solución de 4-metil-1H-pirrol-2-carboxilato de etilo (30 g, 196 mmoles) en DMF (240 ml) y calentar la mezcla de reacción hasta 40 °C a 45 °C durante 1 hora. Enfriar la mezcla de reacción hasta la temperatura ambiente y añadir una solución de 2-(bromometil)-4-cloro-1-nitro-benceno (54 g, 216 mmoles) en DMF (120 ml) gota a gota. Agitar la suspensión resultante durante 1,5 h a 2,0 h, filtrar los sólidos y aclarar la torta de filtración con DMF (45 ml). Transferir los sólidos a un recipiente de reacción limpio, añadir agua (200 ml) y enfriar la suspensión hasta 10 °C a 15 °C con agitación durante 1 h a 2 h. Filtrar la suspensión, aclarar con agua (75 ml) y transferir los sólidos a otro recipiente de reacción. Añadir etanol (125 ml) y agitar la suspensión a 5 °C a 10 °C durante 1 h a 2 h. Filtrar los sólidos, aclarar la torta de filtración con etanol (20 ml), y secar los sólidos en un horno a menos de 50 °C a presión reducida para dar 1-(5-cloro-2-nitrobencil)-4-metil-1H-pirrol-2-carboxilato de etilo como un sólido amarillo (54 g, 94,1 % de pureza, 73,3 % de rendimiento).

Preparación 10

Síntesis de 4-bromo-1-(5-cloro-2-nitrobencil)-1H-pirrol-2-carboxilato de etilo

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Lavar hidruro de sodio al 60 % suspendido en aceite mineral (1,2 equiv; 1,1 g, 27,52 mmoles) con una cantidad pequeña de isohexano (x 2). Suspender en N,N-dimetilacetamida (15 ml) y refrigerar en un baño de hielo. Añadir 4-bromo-1H-pirrol-2-carboxilato de etilo (5,0 g, 22,93 mmoles) en porciones durante 15 minutos dejando que la evolución del gas cese entre adiciones. Agitar a temperatura ambiente durante 15minutos para dar una solución marrón. Añadir 2-(bromometil)-4-cloro-1-nitro-benceno (1,15 equiv; 6,61 g, 26,37 mmoles) en porciones durante 15 minutos y agitar la solución violeta resultante a temperatura ambiente durante 2,5 h. Enfriar en un baño de hielo y desactivar con agua (10 ml). Repartir entre ácido clorhídrico 1M (100 ml) y EtOAc (300 ml). Lavar la capa orgánica con agua (2 x 100 ml), luego salmuera. Secar sobre Na2SO4 y decolorar con carbón vegetal activado. Filtrar a través de celite y evaporar para dar 4-bromo-1-(5-cloro-2-nitrobencil)-1H-pirrol-2-carboxilato de etilo como un aceite naranja (9,1 g, cuantitativo). RMN de 1H (CDCl3) δ: 8,12 (1H, d), 7,40 (1H, dd), 7,07 (1H, d), 6,92 (1H, d), 6,53 (1H, d), 5,87 (2H, s), 4,17 (2H, q), 1,25 (3H, t).

Los siguientes compuestos se preparan esencialmente mediante el procedimiento de la preparación 10.

Preparación n.º

Nombre Estructura Datos físicos

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4-metil-1-(5-metil-2-nitrobencil)-1H-pirrol-2carboxilato de etilo imagen16 EM (m/z): 303,09 (M+1)

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(continuación)

Preparación n.º

Nombre Estructura Datos físicos

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1-(5-metil-2-nitrobencil)-4-(trifluorometil)-1Hpirrol-3-carboxilato de etilo imagen17 RMN de 1H (d6-DMSO) δ 8,06 (1H, d), 7,90 (1H, s), 7,37 (1H, d), 7,25 (1H, s), 6,31 (1H, s), 5,87 (2H, s), 4,09 (2H, q), 2,27 (3H, s), 1,13 (3H, t)

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4-cloro-1-(5-cloro-3-nitrobencil)-1H-pirrol-3carboxilato de metilo imagen18 RMN de 1H (CDCl3) δ: 8,16 (1H, d), 7,40 (1H, dd),6,98 (1H, d), 6,88 (1H, d), 6,53 (1H, d), 5,86 (2H, s), 3,73 (3H, s)

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1-(5-cloro-3-nitrobencil)-4-(metilsulfanil)-1Hpirrol-3-carboxilato de metilo imagen19 EM (m/z): 340,98 (M+1)

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4-bromo-1-(5-metil-2-nitrobencil)-1H-pirrol-2carboxilato de metilo imagen20 EM (m/z): 352,98 (M+1)

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1-(5-cloro-2-nitrobencil)-4-etil-1H-pirrol-2carboxilato de metilo imagen21 EM (m/z):323,18 (M+1)

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1-(5-cloro-3-nitrobencil)-4-(prop-1-en-2-il)1H-pirrol-3-carboxilato de metilo imagen22 EM (m/z): 334,98 (M+1)

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(continuación)

Preparación n.º

Nombre Estructura Datos físicos

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1-(5-cloro-3-nitrobencil)-4-(trifluorometil)-1Hpirrol-3-carboxilato de etilo imagen23 RMN de 1H (CDCl3) d: 8,14 (1H, d), 7,43 (1H, dd), 7,25 (1H, s), 7,22 (1H, d), 6,51 (1H, d), 5,92 (2H, s), 4,20 (2H, q),1,28 (3H, t).

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1-(5-metil-2-nitrobencil)-4-(metilsulfanil)-1Hpirrol-2-carboxilato de metilo imagen24 EM (m/z): 321,03 (M+1)

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1-(5-cloro-2-nitrobencil)-3-metoxi-4-metil-1Hpirrol-2-carboxilato de etilo imagen25 EM (m/z): 353,13 (M+1)

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3-metoxi-4-metil-1-(5-metil-3-nitrobencil)-1Hpirrol-3-carboxilato de etilo imagen26 EM (m/z): 333,18 (M+1)

Preparación 22 Síntesis de1-(2-amino-5-clorobencil)-4-metil-1H-pirrol-2-carboxilato de etilo

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Cargar platino al 5 % (S)/carbón vegetal (2,5 g), y 1-(5-cloro-2-nitrobencil)-4-metil-1H-pirrol-2-carboxilato de etilo (16,0 g, 49,57 mmoles) en un frasco de Parr de 500 ml. Añadir etanol (200 ml), luego dibromuro de cinc (0,22 equiv; 2,46 g, 10,91 mmoles) y colocar la mezcla en hidrógeno a 275,8 kPa e hidrogenar a temperatura ambiente durante la noche, supervisando la formación de un intermedio parcialmente hidrogenado. Retirar el frasco de Parr, calentar 10 suavemente en un baño de agua para disolver el material cristalizado y filtrar a través de celite. Combinar con el filtrado de una ejecución idéntica y evaporar para dar 1-(2-amino-5-clorobencil)-4-metil-1H-pirrol-2-carboxilato de etilo como

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un sólido blanquecino. Colocar a alto vacío para eliminar etanol residual para dar el material (35 g, cuantitativo). EM (m/z): 293,1 (M+1)

Preparación 22 alternativa

Síntesis de 1-(2-amino-5-clorobencil)-4-metil-1H-pirrol-2-carboxilato de etilo

5 En un recipiente de reacción en nitrógeno cargar una solución de 1-(5-cloro-2-nitrobencil)-4-metil-1H-pirrol-2-carboxilato de etilo (100,0 g, 310 mmoles) en THF (800 ml) y añadir dibromuro de cinc (0,22 equiv; 15,4 g, 68,4 mmoles) con agitación a temperatura ambiente. Cargar una suspensión densa de platino al 5 % (S)/carbón vegetal (13,3 g) en THF (25 ml), y colocar el recipiente en hidrógeno a 380 kPa. Hidrogenar a temperatura ambiente durante 30 h a 40 h, supervisando la formación de un intermedio parcialmente

10 hidrogenado y filtrar sobre diatomita. Aclarar el filtro con ayuda de THF (300 ml) y concentrar el filtrado, por debajo de 40 °C, para alcanzar un volumen de aproximadamente 200 ml. Añadir DCM (250 ml), concentrar la solución, por debajo de 40 °C, para alcanzar un volumen de aproximadamente 200 ml, y añadir DCM adicional (600 ml). Este procedimiento se puede repetir según sea necesario para eliminar niveles no deseados de THF de la mezcla de reacción. Cargar agua (500 ml), separar las capas, y lavar la capa orgánica con agua (300 ml), seguido de solución

15 acuosa de cloruro de sodio al 25 % (250 ml). Concentrar la solución, 40 °C, para alcanzar un volumen de aproximadamente 200 ml, añadir heptano (400 ml), y concentrar la solución, por debajo de 40 °C, para alcanzar un volumen de aproximadamente 200 ml. Añadir heptano (400 ml) y calentar la mezcla de reacción hasta 40-45 °C con agitación durante 2-3 h. Enfriar la mezcla de reacción hasta 5-10 °C y continuar la agitación a esta temperatura durante 1-2 h. Filtrar los sólidos resultantes y secar en un horno a menos de 50 °C a presión reducida para dar

20 1-(2-amino-5-clorobencil)-4-metil-1H-pirrol-2-carboxilato de etilo (81,4 g, 95,8 % de pureza, 85,9 % de rendimiento) como un sólido amarillo.

Los siguientes compuestos se preparan esencialmente mediante el procedimiento de la preparación 22.

Preparación n.º

Nombre Estructura EM (m/z): (M+1)

23

1-(3-amino-5-metilbencil)-4-metil-1H-pirrol-3carboxilato de etilo imagen28 273,09

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1-(3-amino-5-metilbencil)-4-(trifluorometil)-1Hpirrol-2-carboxilato de etilo imagen29 327,18

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1-(3-amino-5-metilbencil)-3-metoxi-4-metil-1Hpirrol-2-carboxilato de etilo imagen30 303,19

Preparación 26 25 Síntesis de 1-(2-amino-5-clorobencil)-4-bromo-1H-pirrol-2-carboxilato de etilo

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A una solución bien agitada de 4-bromo-1-(5-cloro-2-nitrobencil)-1H-pirrol-2-carboxilato de etilo (9,1 g, 23,48 mmoles) en ácido acético (60,00 ml) a 70 °C, añadir hierro (5 equiv; 6,56 g, 117,38 mmoles) en porciones durante 0,5 h. A la mitad de la adición, observar una exotermia para mantener una temperatura de 85 °C con el baño de aceite retirado.

5 La mezcla de reacción se espesará a medida que la exotermia se disipa y se puede añadir el resto del hierro. Agitar a 85 °C durante 0,5 h. Enfriar hasta la temperatura ambiente y verter sobre agua (200 ml). Extraer en cloroformo (2 x 200 ml). Combinar las capas orgánicas y lavar con agua (2 x 100 ml), luego solución acuosa de NaHCO3 saturada. Secar sobre Na2SO4, filtrar y evaporar hasta el compuesto del título como un aceite naranja (7,7 g, 92 % de rendimiento). EM (m/z): 358,98 (M+1)

10 Los siguientes compuestos se preparan esencialmente mediante el procedimiento de la preparación 26.

Preparación n.º

Nombre Estructura EM (m/z): (M+1)

27

1-(2-amino-5-clorobencil)-4-cloro-1H-pirrol-3carboxilato de metilo imagen32 298,99/ 301,09

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1-(2-amino-5-clorobencil)-4-(metilsulfanil)-1H -pirrol-2-carboxilato de metilo imagen33 311,13

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1-(3-amino-5-metilbencil)-4-bromo-1H-pirrol2-carboxilato de metilo imagen34 322,98

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1-(2-amino-5-clorobencil)-4-etil-1H-pirrol-2carboxilato de metilo imagen35 293,14

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(continuación)

Preparación n.º

Nombre Estructura EM (m/z): (M+1)

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1-(2-amino-5-clorobencil)-4-(propan-2-il)-1Hpirrol-2-carboxilato de metilo imagen36 307,09

Preparación 32 Síntesis de 7-cloro-2-metil-5,10-dihidro-11H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-11-ona

imagen37

5 A una solución de 1-[(2-amino-5-cloro-fenil)metil]-4-metil-pirrol-2-carboxilato de etilo (35 g, 119,55 mmoles) en dimetilsulfóxido (120 ml) añadir t-butóxido de potasio (14,76 g, 131,5 mmoles) durante 10 minutos. Calentar a 80 °C (temperatura del baño de aceite) durante 1 h. Dejar enfriar, luego verter sobre agua (400 ml). Recoger el sólido pulverulento marrón resultante mediante filtración lavando bien con agua. Aspirar hasta secar tanto como sea posible sobre el sinterizado, luego transferir a una placa y secar en un horno a vacío a 55°C sobre pentóxido de fósforo

10 durante la noche, para dar 7-cloro-2-metil-5,10-dihidro-11H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-11-ona. (22 g, 91 %). EM (m/z): 247,1 (M+1)

Preparación 32 alternativa

Síntesis de 7-cloro-2-metil-5,10-dihidro-11H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-11-ona.

A una solución de 1-[(2-amino-5-cloro-fenil)metil]-4-metil-pirrol-2-carboxilato de etilo (20 g, 68,3 mmoles) en

15 dimetilsulfóxido (60 ml) añadir t-butóxido de potasio (8,4 g, 74,9 mmoles) en DMSO (40 ml) y calentar la mezcla de reacción hasta 75-80 °C durante 1-2 h. Añadir agua (200 ml) lentamente, enfriar hasta la temperatura ambiente, y agitar durante 1-2 h. Filtrar los sólidos, lavar la torta de filtración con agua (75ml), y transferir los sólidos a un recipiente de reacción limpio. Añadir THF (100 ml) y calentar la mezcla de reacción hasta 30-35 °C hasta que los sólidos se disuelvan. Añadir DCM (350 ml) y continuar agitando a 30-35 °C durante 1-2 h. Añadir ácido clorhídrico 1 N (250 ml) y

20 continuar agitando a 30-35 °C durante 1-2 h. Separar las capas, lavar la capa orgánica con ácido clorhídrico 1 N (250 ml) seguido de una solución acuosa de cloruro de sodio al 25% (50 ml), y concentrar la solución, por debajo de 50 °C, para alcanzar un volumen de aproximadamente 25 ml. Añadir etanol (50 ml), concentrar la solución, por debajo de 50 °C, para alcanzar un volumen de aproximadamente 25 ml, y añadir etanol adicional (50 ml). Concentrar la solución, por debajo de 50 °C, para alcanzar un volumen de aproximadamente 25 ml, calentar la mezcla de reacción

25 hasta 45-50 °C, y agitar durante 1-2 h. Enfriar la mezcla de reacción hasta 5-10 °C con agitación durante 2-3 h, y filtrar los sólidos resultantes. Aclarar la torta de filtración con etanol (25 ml) y secar en un horno a menos de 50 °C a presión reducida para dar 7-cloro-2-metil-5,10-dihidro-11H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-11-ona como un sólido blanquecino (14,9 g, 99,9 % de pureza, 88,5 % de rendimiento).

Los siguientes compuestos se preparan esencialmente mediante el procedimiento de la preparación 32.

Preparación n.º

Nombre Estructura EM (m/z): (M+1)

33

2,7-dimetil-5,10-dihidro-11H-pirrolo[3,1-c][1,4] benzodiazepin-11-ona imagen38 227,09

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(continuación)

Preparación n.º

Nombre Estructura EM (m/z): (M+1)

34

2-bromo-7-cloro-5,10-dihidro-11H-pirrolo[3,1-c][1,4] benzodiazepin-11-ona imagen39 312,93

35

7-metil-2-(trifluorometil)-5,10-dihidro-11H-pirrolo[3,1c][1,4]benzodiazepin-11-ona imagen40 281,14

36

2,7-dicloro-5,10-dihidro-11H-pirrolo[3,1-c][1,4] benzodiazepin-11-ona imagen41 267,04

37

7-cloro-3-(metilsulfanil)-5,10-dihidro-11H-pirrolo[2,1-c ][1,4]benzodiazepin-11-ona imagen42 279,04 [M+H]+5 79,02 [2M+Na] +

38

2-bromo-7-metil-5,10-dihidro-11H-pirrolo[2,1-c][1,4] benzodiazepin-11-ona imagen43 291,04/2 91,99

39

7-cloro-2-(1-metiletil)-5,10-dihidro-11H-pirrolo[3,1-c][ 1,4]benzodiazepin-11-ona imagen44 275,19

40

7-cloro-3-(trifluorometil)-5,10-dihidro-11H-pirrolo[2,1c][1,4]benzodiazepin-11-ona imagen45 300,99

41

7-cloro-2-etil-5,10-dihidro-11H-pirrolo[2,1-c][1,4] benzodiazepin-11-ona imagen46 261,19

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(continuación)

Preparación n.º

Nombre Estructura EM (m/z): (M+1)

42

1-metoxi-2,7-dimetil-5,10-dihidro-11H-pirrolo[2,1-c][1, 4]benzodiazepin-11-ona imagen47 257,14

Preparación 43 Síntesis alternativa de 7-cloro-2-(trifluorometil)-5,10-dihidro-11H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-11-ona

imagen48

5 Añadir dicloruro de estaño (3 equiv; 3,02 g, 15,77 mmol) en ácido clorhídrico 5 M (20 ml, 100 mmol) a 1-(5-cloro-2-nitrobencil)-4-(trifluorometil)-1H-pirrol-2-carboxilato de etilo (1 equiv; 1,98 g, 5,26 mmoles) y etanol (100 ml) a 50 °C. Calentar durante la noche y, luego, durante unas 26 h adicionales, eliminar la mayoría del etanol al vacío y diluir la solución resultante con agua y recoger el precipitado resultante mediante filtración, lavar bien con agua y secar al vacío a 40 °C. Absorber el sólido sobre sílice, someter a cromatógrafía eluyendo con DCM/metanol (5:95)

10 para dar aminoéster no cliclado (0,260 g) y 7-cloro-2-(trifluorometil)-5,10-dihidro-11H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-11-ona (0,613 g). Calentar el éster no ciclado en una mezcla de ácido clorhídrico 5 M (10 ml, 50 mmol) durante 80 h. Eliminar el etanol al vacío y recoger el sólido precipitado resultante mediante filtración y lavar con agua para dar 7-cloro-2-(trifluorometil)-5,10-dihidro-11H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-11-ona (0,17 g). Combinar con la

15 7-cloro-2-(trifluorometil)-5,10-dihidro-11H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-11-ona precedente para dar (0,794 g, 50 % de rendimiento). EM (m/z): 300,99 (M+1)

El siguiente compuesto se prepara esencialmente mediante el procedimiento de la preparación 43.

Preparación n.º

Nombre Intermedio EM (m/z): (M+1)

44

7-cloro-1-metoxi-2-metil-5,10-dihidro-11H-pirrolo[2,1c][1,4]benzodiazepin-11-ona imagen49 277,09

Preparación 45 Síntesis de 7,11-dicloro-2-metil-5H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepina

imagen50

20

A una suspensión de 7-cloro-2-metil-5,10-dihidro-11H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-11-ona (40,6 g, 164,58 mmoles) en metoxibenceno (250 ml) a 70 °C añadir N,N-dimetilanilina (2,8 equiv; 58,59 ml, 460,8 mmoles) en una porción seguido de cloruro de fosforilo (2,3 equiv (molares); 35,18 ml, 378,52 mmoles) durante 20 minutos, controlando la exotermia mediante adición. Calentar la solución oscura resultante a 90 °C durante 1,5 h. Añadir cloruro 25 de fosforilo adicional (0,33 equiv; 5,05 ml, 54,31 mmoles) y calentar la mezcla a 90 °C durante 1 h adicional para dar una conversión completa. Evaporar casi hasta sequedad y repartir el residuo entre agua (500ml) y acetato de etilo (2

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x 500 ml). Combinar las capas orgánicas y lavar con agua (500ml), luego salmuera. Secar sobre Na2SO4, filtrar y evaporar sobre sílice. Hacer pasar a través de un soporte de gel de sílice con isohexano/acetato de etilo (gradiente de elución del 5 al 25 %). Combinar las fracciones de producto y evaporar hasta una cantidad pequeña de disolvente. Añadir isohexano (150 ml) y recoger el polvo amarillo resultante mediante filtración para dar

5 7,11-dicloro-2-metil-5H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepina (34,0 g, 78 % de rendimiento). EM (m/z): 265,1 (M+1)

Síntesis alternativa:

En una atmósfera de N2 añadir cloruro de fosforilo (124 g, 819 mmol) a una mezcla de 7-cloro-2-metil-5,10-dihidro-11H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-11-ona (100 g, 405 mmol), N,N-dimetilanilina (138 g, 1,14 mol) y anisol (550 ml). Calentar hasta 80-85 °C y agitar durante 4 h. a 6 h. Concentrar hasta un total de 1,5 10 volúmenes a 2,5 volúmenes mientras se mantiene la temperatura por debajo de 75 °C. Enfriar hasta 15-25 °C. Añadir diclorometano (600 ml) gota a gota y agitar durante 1 h. Añadir la mezcla resultante a agua (600 ml) mientras se mantiene la temperatura entre 10 °C y 35 °C. Agitar durante 1 h y luego separar las capas. Extraer la capa acuosa con diclorometano (2 × 600 ml). Lavar las capas orgánicas combinadas con HCl 1,0 N (600 g) seguido de NaHCO3 al 7 % (600 g). Filtrar la capa orgánica a través de diatomita (20 g a 30 g) y gel de sílice (60 g a 100 g). Concentrar el filtrado

15 resultante hasta un total de 1,5 volúmenes a 2,5 volúmenes mientras se mantiene la temperatura por debajo de 45 °C. Añadir heptano (270 g a 410 g) y concentrar el filtrado resultante hasta un total de 1,5 volúmenes a 2,5 volúmenes mientras se mantiene la temperatura por debajo de 45 °C. Añadir heptano (150 g a 210 g), enfriar hasta 5 °C a 10 °C, y agitar durante 2 h a 3 h. Filtrar, aclarar el filtro la torta con heptano, y secar a vacío, por debajo de 45 °C, para obtener el compuesto del título como un sólido amarillo pálido (90 % al 95 % de rendimiento)

20 Los siguientes compuestos se preparan esencialmente mediante el procedimiento de la preparación 45.

Preparación n.º

Nombre Estructura EM (m/z): (M+1)

46

3,11-dicloro-7-metil-5H-pirrolo[3,1-c][1,4] benzodiazepina imagen51 265,09/267,04

47

7,11-dicloro-1-metoxi-3-metil-5H-pirrolo[2,1 -c][1,4]benzodiazepina imagen52 295,09/297,04

48

11-cloro-2,7-dimetil-1-metoxi-5H-pirrolo[2,1 -c][1,4]benzodiazepina imagen53 275,14/277,09

49

2-bromo-11-cloro-7-metil-5H-pirrolo[2,1-c][1 ,4]benzodiazepina imagen54 309,04/310,98

Preparación 50

Síntesis de 3-[4-(7-cloro-2-metil-5H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-11-il)piperazin-1-il]-2,2-dimetilpropanoato de metilo

imagen55

5

10

15

20

25

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40

45

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Añadir cloruro de fosforilo (1,47 ml, 2,43 g, 15,85 mmoles) a 7-cloro-2-metil-5,10-dihidro-11H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-11-ona (1,117 g, 4,53 mmoles) en DCM (50 ml) y agitar a temperatura ambiente durante un fin de semana. Añadir agua helada a la mezcla de reacción, luego añadir DCM, separar la capa acuosa y lavar la capa de DCM con agua y solución de hidrogenocarbonato de sodio. Secar la solución de DCM con MgSO4, filtrar y evaporar el disolvente al vacío para dar 7,11-dicloro-2-metil-5H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepina (1,167 g).

Disolver diclorhidrato de 2,2-dimetil-3-(piperazin-1-il)propanoato de metilo (1,61 g, 5,89 mmoles) en agua y cargar sobre dos cartuchos SCX-2 (10 g). Lavar los cartuchos con metanol y eluir con amoniaco 2 M en metanol. Concentrar al vacío, luego disolver el aceite resultante en acetonitrilo (40 ml). Añadir 7,11-dicloro-2-metil-5H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepina (1,167 g, 4,4 mmoles) a la solución de acetonitrilo. Dividir la solución de acetonitrilo y colocarla en 2 tubos de microondas, añadir carbonato de potasio (0,89 g, 6,79 mmoles) a cada tubo de microondas y calentar y agitar a 140 °C en el microondas durante 3,5 h. Dejar que la mezcla de reacción enfríe, filtrar, lavar el sólido recogido sobre el sinterizado con acetonitrilo, luego concentrar el filtrado al vacío, añadir metanol y, luego, evaporar hasta sequedad. Tratar con más metanol y recoger el precipitado resultante, lavar el precipitado con metanol para dar 3-[4-(7-cloro-2-metil-5H-pirrolo[2,1-c][1,4] benzodiazepin-11-il)piperazin-1-il]-2,2-dimetilpropanoato de metilo como un sólido cristalino (1,1 g). EM (m/z): 429,18 (M+1).

Síntesis alternativa de 3-[4-(7-cloro-2-metil-5H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-11-il)piperazin-1-il]2,2-dimetilpropanoato de metilo

A una suspensión de 7,11-dicloro-2-metil-5H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepina (34,0 g, 128,23 mmoles) en acetonitrilo (300 ml) añadir clorhidrato de 2,2-dimetil-3-(piperazin-1-il)propionato de metilo (2,1 equiv; 63,75 g, 269,29 mmoles) y carbonato de potasio (4 equiv; 70,89 g, 512,93 mmoles). Calentar la mezcla a reflujo durante la noche. Evaporar hasta sequedad. Repartir el residuo entre agua (500 ml) y EtOAc (2 x 500 ml). Combinar las capas orgánicas y lavar con agua (500 ml), luego salmuera. Secar sobre sulfato de sodio, filtrar y evaporar hasta un aceite marrón Añadir isohexano (~150 ml) y un cristal de siembra de la preparación 50. Dejar que cristalice durante 2 h, luego transferir el matraz a un refrigerador y dejar reposar. Recoger sólido cristalino pesado resultante mediante filtración, lavando con isohexano frío. Secar en un horno a vacío a 40 °C durante 1 h, para dar 3-[4-(7-cloro-2-metil-5H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-11-il)piperazin-1-il]-2,2-dimetilpropanoato de metilo (53,6 g, 97 % de rendimiento). EM (m/z): 429,18 (M+1).

Segunda síntesis alternativa de 3-[4-(7-cloro-2-metil-5H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-11-il)piperazin-1-il] -2,2-dimetilpropanoato de metilo

Calentar una mezcla de 7,11-dicloro-2-metil-5H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepina (10,0 g, 37,7 mmol), diclorhidrato de 2,2-dimetil-3-(piperazin-1-il)-propionato de metilo (19,4 g, 71,0 mmol), diisopropilamina (22,9 g, 226 mmol), y acetonitrilo (80 g) a 80 °C a 85 °C durante 22 h a 26 h. Enfriar hasta 30 °C a 40 °C y añadir acetato de etilo (80 g). Añadir agua (80 g) gota a gota. Agitar 40 min. a 60 min. y separar las capas. Extraer la capa acuosa con acetato de etilo (60 g a 80 g). Lavar las capas orgánicas combinadas con cloruro de sodio acuoso al 25% (2 X 40 g). Concentrar la capa orgánica hasta un total de 1,5 volúmenes y 3,5 volúmenes mientras se mantiene la temperatura por debajo de 50 °C. Añadir heptano (41 g a 55 g) a 40 °C a 50 °C) y agitar durante 2 h a 3 h Concentrar hasta un total de 1,5 volúmenes a 3,0 volúmenes mientras se mantiene la temperatura por debajo de 50 °C. Enfriar hasta 0 °C a 10 °C y agitar durante 2 h a 3 h. Filtrar, lavar la torta de filtración con heptano (3,0 g a 10,0 g), y secar a vacío, por debajo de 60 °C, para conseguir el compuesto del título (16,0 g, 94,7 % ensayo % p/p, 94 % de rendimiento) como un sólido amarillo claro.

Preparación 51

Síntesis de 3-[4-(2,7-dicloro-5H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-11-il)piperazin-1-il]-2,2-dimetilpropanoato de metilo

imagen56

Añadir cloruro de fosforilo (5 equiv; 4,36 ml, 7,19 g, 46,89 mmoles) a 2,7-dicloro-5,10-dihidro-11Hpirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-11-ona (1 equiv; 2,505 g, 9,38 mmoles) en cloroformo (80 ml) y calentar y agitar a 50 °C durante la noche. Decantar la solución de reacción y evaporar al vacío hasta un aceite. Disolver el aceite en DCM, lavar con solución acuosa de hidrogenocarbonato de sodio saturada. Secar la solución de DCM sobre Na2SO4,

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filtrar y concentrar hasta sequedad para dar 2,7,11-tricloro-5H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepina como un sólido de color crema. Paralelamente desalar clorhidrato de 2,2-dimetil-3-(piperazin-1-il)propanoato de metilo (0,837 g, 3,54 mmoles) por disolución en metanol, añadir la solución metanólica a una columna SCX-2 (10 g), lavar con metanol y luego eluir con solución de amoniaco 2,5 M en metanol, evaporar la fracción de amoniaco en metanol para dar 5 2,2-dimetil-3-(piperazin-1-il)propanoato de metilo (0,665 g) como un aceite. Mezclar este aceite con 2,7,11-tricloro-5H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepina (0,505 g 1,77 mmoles), carbonato de potasio (0,733 g, 5,31 mmoles) y acetonitrilo (20 ml) y calentar a reflujo durante la noche. Enfriar la mezcla de reacción hasta la temperatura ambiente y filtrar, lavando el sinterizado con EtOAc, luego evaporar el filtrado al vacío hasta un sólido Someter a cromatógrafía sobre sílice eluyendo con metanol/DCM (gradiente de elución 2:98 a 8:92). Evaporar las

10 fracciones que contienen producto para dar 3-[4-(2,7-dicloro-5H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-11-il)piperazin-1-il]-2,2-dimetilpropanoato de metilo (0,69 g). EM (m/z): 449,13/451,07 (M+1)

Los siguientes compuestos se preparan esencialmente mediante el procedimiento de la preparación 51.

Preparación n.º Nombre Estructura EM (m/z): (M+1)

3-[4-(3,7-dimetil-5H-pirrolo[3,1-c][1,4]52

imagen57409,23

benzodiazepin-11-il)piperazin-1-il]-2,2dimetilpropanoato de metilo

3-[4-(2-bromo-7-cloro-5H-pirrolo[2,153

imagen58493,00/495,00

c][1,4]benzodiazepin-11-il)piperazin-1-il]-2,2dimetilpropanoato de metilo

3-[4-(7-cloro-2-etil-5H-pirrolo[2,1c][1,4]benzodiazepin-11-il)piperazin-1-il]-2,2

54

imagen59443,18dimetilpropanoato de metilo

Preparación n.º

Nombre Estructura EM (m/z): (M+1)

55

3,3-dimetil-3-[4-(7-metil-3-(trifluorometil)-5H-pirrolo [2,1-c][1,4]benzodiazepin-11-il)piperazin-1-il] propanoato de metilo imagen60 463,17

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(continuación)

56

3-[4-(7-cloro-3-(trifluorometil)-5H-pirrolo[2,1-c][1,4] benzodiazepin-11-il)piperazin-1-il]-2,2dimetilpropanoato de metilo imagen61 483,17

57

3-[4-(7-cloro-2-(1-metiletil)-5H-pirrolo[2,1-c][1,4] benzodiazepin-11-il)piperazin-1-il]-2,2dimetilpropanoato de metilo imagen62 457,07/459,17

58

3,3-dimetil-3-[4-(7-metil-3-(trifluorometil)-5Hpirrolo[3,1-c][1,4]benzodiazepin-11-il)piperazin-1-il ]propanoato de metilo imagen63 463,17

59

3-[4-(3-bromo-7-metil-5H-pirrolo[2,1-c][1,4] benzodiazepin-11-il)piperazin-1-il]-2,2dimetilpropanoato de metilo imagen64 473,12/475,07

Preparación 60

Síntesis de 2,2-dimetil-3-[4-(7-metil-2-(metilsulfanil)-5H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-11-il)piperazin-1-il]propanoato de metilo

imagen65

5

Tratar 1-(5-metil-2-nitrobencil)-4-(metilsulfanil)-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo (3,49 mmoles; 1,12 g) con ácido acético (15 ml), luego tratar con hierro, polvo (10,5 mmoles; 585 mg), luego calentar lentamente en un baño de aceite a 80 °C. Después de unas pocas horas incrementar la temperatura del baño de aceite hasta 90°C. Luego dejar la reacción a 60 °C durante 2 días. Luego concentrar hasta sequedad para eliminar ácido acético, luego tratar con EtOAc 10 y lavar a través de un soporte de sílice con más EtOAc hasta que el color naranja cese de desaparecer. Concentrar el eluyente rojo hasta sequedad, luego tratar con metanol, luego re-concentrar y disolver en DCM (20 ml) y tratar con cloruro de fosforilo (1,0 ml). Calentar la reacción en un baño de aceite a 50 °C durante la noche. Luego enfriar la reacción hasta la TA y tratar con hielo, luego lavar dos veces con agua y luego NaHCO3 (ac.). Secar la capa orgánica sobre MgSO4, filtrar y concentrar hasta un alquitrán. Mientras tanto, disolver diclorhidrato de 15 2,2-dimetil-3-(piperazin-1-il)propanoato de metilo (1,60 g, 5,86 mmoles) en agua, luego cargar sobre un cartucho SCX-2 (2 x 10 g) y lavar con metanol y luego eluir con amoniaco en metanol. Concentrar la solución básica hasta sequedad hasta un aceite. Luego disolver este aceite en acetonitrilo (50ml) y añadir a una mezcla del alquitrán y carbonato de potasio (1,0 g), luego calentar a reflujo. Después de 2 horas, someter la reacción a microondas hasta

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añadir hidróxido de sodio (3 equiv; 7,83 g, 195,82 mmoles) y calentar a 70 °C durante 4 h para dar una solución clara. Calentar a 70 °C durante 1 h adicional luego enfriar ligeramente. Añadir ácido clorhídrico 5 M para dar pH 8 y precipitar un sólido blanco. Añadir adicionalmente ácido clorhídrico 5 M para dar un pH entre 6,5 y 7. Reducir el volumen de disolvente hasta la mitad y luego refrigerar el matraz en un refrigerador durante 0,5 h. Recoger el sólido blanco resultante mediante filtración y secar durante la noche en un horno a vacío a 40 °C sobre pentóxido de fósforo para dar ácido 3-[4-(7-cloro-2-metil-5H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-11-il)piperazin-1-il]-2,2-dimetilpropanoico (26,5 g, 98 % de rendimiento). EM (m/z): 415,3 (M+1). Punto de fusión por CDB=246,5 °C (inicio).

Los siguientes compuestos se preparan esencialmente mediante el procedimiento del ejemplo 1.

Ejemplo n.º

Nombre Estructura EM (m/z): (M+1)

2

ácido 3-[4-(3,7-dimetil-5H-pirrolo[3,1-c][1,4]benzodiazepin-11-il) piperazin-1-il]-2,2-dimetilpropanoico imagen68 395,28

3

ácido 3-[4-(2-bromo-7-cloro-5H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-1 1-il)piperazin-1-il]-2,2-dimetilpropanoico imagen69 480,97

4

ácido 3-[4-(7-cloro-2-etil-5H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-11-il) piperazin-1-il]-2,2-dimetilpropanoico imagen70 429,18

5

ácido 2,2-dimetil-3-{4-[7-metil-2-(trifluorometil)-5H-pirrolo[2,1-c][1, 4]benzodiazepin-11-il]piperazin-1-il}propanoico imagen71 449,18

6

ácido 3-[4-(7-cloro-3-(trifluorometil)-5H-pirrolo[2,1-c][1,4] benzodiazepin-11-il)piperazin-1-il]-3,3-dimetilpropanoico imagen72 468,62

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(continuación)

Ejemplo n.º

Nombre Estructura EM (m/z): (M+1)

7

ácido 3-[4-(2,7-dicloro-5H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-11-il) piperazin-1-il]-2,2-dimetilpropanoico imagen73 435,18

8

ácido 3-[4-(7-cloro-2-(metilsulfanil)-5H-pirrolo[2,1-c][1,4] benzodiazepin-11-il)piperazin-1-il]-3,3-dimetilpropanoico imagen74 447,17

9

ácido 2,2-dimetil-3-{4-[7-metil-2-(propan-2-il)-5H-pirrolo[2,1-c][1,4 ]benzodiazepin-11-il]piperazin-1-il}propanoico imagen75 423,17

10

ácido 3-[4-(2-etil-7-metil-5H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-11-il) piperazin-1-il]-2,2-dimetilpropanoico imagen76 409,18

11

ácido 3-{4-[7-cloro-2-(propan-2-il)-5H-pirrolo[2,1-c][1,4] benzodiazepin-11-il]piperazin-1-il}-2,2-dimetilpropanoico imagen77 443,18

12

ácido 2,2-dimetil-3-{4-[7-metil-2-(metilsulfanil)-5H-pirrolo[2,1-c][1, 4]benzodiazepin-11-il]piperazin-1-il}propanoico imagen78 427,18

Ejemplo 13

Síntesis del diclorhidrato del ácido 3-[4-(7-cloro-2-metil-5H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-11-il)piperazin-1-il]-2,2-dimetilpropanoico

25

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A una suspensión de ácido 3-[4-(7-cloro-2-metil-5H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-11-il)piperazin-1-il]-2,2-dimetilpropanoico (24,25 g, 58,44 mmoles) en alcohol isopropílico (250 ml) a 60 °C, añadir una solución de cloruro de hidrógeno en dioxano 4 M 5 (2,4 equiv; 35,07 ml, 140,26 mmoles) durante 10 minutos para dar una solución clara. Dejar enfriar ligeramente, luego evaporar hasta un sólido blanquecino. Triturar con una cantidad pequeña de dietil éter y recoger el sólido pulverulento color crema mediante filtración. Secar en un horno a vacío a 40 °C durante la noche. Moler hasta un polvo fino y secar en un horno a vacío a 60 °C durante 6 h. Supervisar los niveles de alcohol isopropílico residual mediante RMN de 1H. Disolver en etanol templado (350ml) y evaporar hasta sequedad. Triturar con etanol (50ml) y evaporar, de nuevo,

10 hasta sequedad. Triturar con éter dietílico seco (200ml) y recoger el sólido resultante mediante filtración. Secar durante 6 h en un horno a vacío a 50 °C para dar diclorhidrato del ácido 3-[4-(7-cloro-2-metil-5H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-11-il)piperazin-1-il]-2,2-dimetilpropanoico (26,9 g, 94 % de rendimiento) EM (m/z): 415,2 (M+1).

Los siguientes compuestos se preparan esencialmente mediante el procedimiento del ejemplo 13.

Ejemplo n.º

Nombre Estructura EM (m/z): (M+1)

14

diclorhidrato del ácido 3-[4-(2,7-dimetil-5H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-11-il) piperazin-1-il]-2,2-dimetilpropanoico imagen80 395,28

15

diclorhidrato del ácido 3-[4-(2-bromo-7-cloro-5H-pirrolo[2,1c][1,4]benzodiazepin-11-il)piperazin-1-il]-2,2dimetilpropanoico imagen81 480,97

16

diclorhidrato del ácido 3-[4-(7-cloro-2-etil-5H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-11-il )piperazin-1-il]-2,2-dimetilpropanoico imagen82 429,18

17

diclorhidrato del ácido 2,2-dimetil-3-{4-[7-metil-2-(trfluorometil)-5H-pirrolo[2,1-c][1, 4]benzodiazepin-11-il]piperazin-1-il}propanoico imagen83 449,18

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(continuación)

Ejemplo n.º

Nombre Estructura EM (m/z): (M+1)

18

diclorhidrato del ácido 3-{4-[7-cloro-2-(trifluorometil)-5H-pirrolo[3,1-c][1,4] benzodiazepin-11-il]piperazin-1-il}-2,2-dimetilpropanoico imagen84 469,07

19

diclorhidrato del ácido 3-[4-(2,7-dicloro-5H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-11-il) piperazin-1-il]-2,2-dimetilpropanoico imagen85 434,68

20

clorhidrato del ácido 3-{4-[7-cloro-2-(metilsulfanil)-5H-pirrolo[2,1-c][1,4] benzodiazepin-11-il]piperazin-1-il}-2,2-dimetilpropanoico imagen86 446,98

21

diclorhidrato del ácido 2,2-dimetil-3-{4-[7-metil-2-(propan-2-il)-5H-pirrolo[2,1-c][[1, 4]benzodiazepin-11-il]piperazin-1-il}propanoico imagen87 423,18

22

diclorhidrato del ácido 3-[4-(2-etil-7-metil-5H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-11-il )piperazin-1-il]-2,2-dimetilpropanoico imagen88 409,18

23

diclorhidrato del ácido 3-{4-[7-cloro-2-(propan-2-il)-5H-pirrolo[2,1-c][1,4] benzodiazepin-11-il]piperazin-1-il}-2,2-dimetilpropanoico imagen89 443,18

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5

10

15

20

25

30

35

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(continuación)

Ki de 5-HT1D (nM)

> 3980 > 8550

Ejemplo 1

Ejemplo 13

Ki de 5-HT1E (nM)

---- > 5370

Ki de 5-HT1F (nM)

---- > 8250

Ki de 5-HT5 (nM)

> 8830 > 9090

Ki de 5-HT6 (nM)

2690 > 5830

Ki de 5-HT7 (nM)

> 2060 > 3970

Ki de adrenérgico alfa1A (nM)

> 8910 > 8910

Ki de adrenérgico alfa1B (nM)

> 10900 > 10900

Ki de adrenérgico alfa2A (nM)

> 9030 > 8470

Ki de adrenérgico alfa2B (nM)

> 4980 > 4800

Ki de adrenérgico alfa2C (nM)

> 4020 > 5330

Transportador de serotonina

> 641 > 515

Transportador de norepinefrina

> 682 > 526

Transportador de dopamina

> 879 > 880

Por lo tanto, se espera que las dosis fisiológicamente pertinentes de los compuestos de la invención proporcionen inhibición sustancial de los receptores H1 y 5-HT2A in vivo, mientras no interaccionan sustancialmente con otros receptores fisiológicamente pertinentes, y, de esta manera, se espera que proporcionen la farmacología deseada mientras se evitan los efectos no deseados asociados con la actividad colateral. Tales efectos no deseados incluyen, pero no están limitados a, los siguientes: actividad antagonista sobre 5-HT2C asociada con el aumento de peso durante el tratamiento, actividad agonista sobre 5-HT2B asociada con valvulopatía, modulación del canal hERG asociada con prolongación de QT, y actividad de GABAA asociada con actividad convulsiva. Lo que es más, se evita la interferencia con la fisiología del sueño/ vigilia mediante la selectividad sobre los receptores de dopamina, otros receptores de serotonina, receptores adrenérgicos, y transportadores de monoaminas.

Ocupación del receptor 5-HT2A: Se somete a ensayo la ocupación del receptor para demostrar el grado de interacción con el receptor 5-HT2A in vivo. De manera concisa, las ratas Sprague-Dawley macho (Harlan Sprague-Dawley, Indianápolis, IN), que pesan aproximadamente 230-280 gramos, tienen acceso libre a alimento y agua hasta el comienzo del protocolo experimental de 3 horas. Se usa 1 mg/kg de ketanserina (antagonista de 5-HT2A no selectivo) como control positivo para establecer la validez del ensayo. Los compuestos de prueba o control se administran mediante sonda oral en un vehículo que comprende hidroxipropil-beta-ciclodextrina al 20 %. Como marcador se usa MDL 100907 ((R)-(+)-α-(2,3-dimetoxifenil)-1-[2-(4-fluorofenil)etil]-4-piperidinmetanol), un antagonista de 5-HT2A selectivo. Se suspende MDL 100907 en agua con 5 µl de ácido láctico diluido (mg/ml), se diluye hasta 6 µg/ml con solución salina, y se administra en un volumen de 1 ml/kg por vía intravenosa a través de la vena lateral de la cola para producir una dosis de marcador de 3 µg/kg. Se administra el compuesto de prueba a las ratas, ketanserina, o vehículo (N=4), seguido una hora más tarde de dosis intravenosa de marcador de MDL 100907 de 3 µg/kg. Es en el momento de la administración del marcador cuando se considera que se ha de medir la ocupación del receptor (OR). Quince minutos después de la administración del marcador, se sacrifican las ratas mediante dislocación cervical. Se recogen las muestras de plasma y se eliminan las muestras de córtex frontal y cerebelo. El nivel de marcador de MDL 100907 se mide en cada muestra cortical y cerebelosa. La OR se calcula usando el bien establecido procedimiento de relación que emplea una región de densidad de receptor alta representativa de la unión total (córtex frontal) normalizada por un área sin o con niveles muy bajos de receptor (cerebelo). Esta región, denominada región cero, representa la unión no específica de la sonda de ligando. La relación de vehículo de los niveles de marcador en el córtex relativa a al cerebelo representa el 0 % de ocupación. Una relación del 1 representa el 100 % de ocupación y se logra cuando se bloquea toda la unión específica al receptor 5-HT2A del marcador MDL 100907. Las relaciones de intermedio de marcador cortical a cerebeloso a partir del grupo pretratado con el compuesto de prueba se interpolan linealmente entre la relación de los niveles de marcador en los animales tratados con el vehículo (0 % de ocupación) y una relación de 1 (100 % de ocupación) a fin de determinar el porcentaje de OR de 5-HT2A.

Análisis con MDL 100907: Se pesan las muestras cerebelosas y de córtex y se colocan en tubos de centrífuga cónicos en hielo. A cada tubo se añaden cuatro volúmenes (p/v) de acetonitrilo que contiene ácido fórmico al 0,1%. Las muestras se homogeneizan luego y se centrifugan a 14 000 rpm (21,920 x g) durante 16 minutos. Se diluye el sobrenadante añadiendo 100-900 µl de agua estéril en viales de inyección para HPLC para análisis de CL/EM/EM. Se lleva a cabo el análisis de MDL 100907 usando un HPLC Agilent modelo 1200 (Agilent Technologies, Palo Alto, CA) y un espectrómetro de masas API 4000. La separación cromatográfica es en una columna C18 de 2,1 x 50 mm (número

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Determinación de la eficacia. La eficacia umbral para cada una de las cuatro variables de eficacia se calcula representando el incremento en cada variable relativo a los controles de vehículo durante el periodo de 6 horas después del tratamiento frente a log(dosis). La eficacia umbral para cada variable es la dosis que da el valor umbral de eficacia definida para cada variable; +30 min de sueño no MOR acumulado adicional, +25 min sueño total acumulado adicional, 1,75 de incremento en la duración de episodios de sueño promedio, y 1,5 de incremento en la duración de episodios de sueño más larga. Se encuentra que el compuesto del ejemplo 13 tiene dosis umbrales eficaces como se muestra en la tabla 3.

Tabla 3

Dosis eficaz estimada (mg/kg) 95 % de intervalo de confianza (mg/kg)

Acumulación nMOR=30 min

1,2 0,89-1,6

Acumulación de sueño total=25 min

0,58 0,40-0,86

Episodio de sueño más largo (incremento de 1,75 veces)

0,21 0,098-0,44

Episodio de sueño promedio (incremento de 1,5 veces)

0,77 0,44-1,4

Determinación de los efectos no deseados. Cada variable de respuesta de ’efecto no deseado’ (véase la leyenda de la tabla para las definiciones), se representa frente a log(dosis).

10 El valor umbral para inhibición MOR se define como la reducción acumulativa de sueño MOR de -10 min. El valor umbral para el insomnio de rebote se define como -20 min. El valor umbral para la ILM reducida se define como -5 recuentos de actividad locomotora por minuto de vigilia definida por EEG . Se define un efecto no deseado significativo que aparece cuando el límite de confianza inferior está por debajo del valor umbral para todas las dosis en o por encima de las dosis eficaces promedio. Para los compuestos ejemplificados, no se observan apariciones no desadas

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Claims (1)

1. imagen1