ES2399667T3 - Nuevos agentes para el tratamiento de trastornos conectados con neurotransmisión deteriorada - Google Patents

Nuevos agentes para el tratamiento de trastornos conectados con neurotransmisión deteriorada Download PDF

Info

Publication number
ES2399667T3
ES2399667T3 ES07801575T ES07801575T ES2399667T3 ES 2399667 T3 ES2399667 T3 ES 2399667T3 ES 07801575 T ES07801575 T ES 07801575T ES 07801575 T ES07801575 T ES 07801575T ES 2399667 T3 ES2399667 T3 ES 2399667T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
oregano
reducer
extract
mental
oregano extract
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
ES07801575T
Other languages
English (en)
Inventor
Ann Fowler
Regina Goralczyk
Claus Kilpert
Goede Schueler
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
DSM IP Assets BV
Original Assignee
DSM IP Assets BV
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by DSM IP Assets BV filed Critical DSM IP Assets BV
Application granted granted Critical
Publication of ES2399667T3 publication Critical patent/ES2399667T3/es
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/53—Lamiaceae or Labiatae (Mint family), e.g. thyme, rosemary or lavender
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K10/00—Animal feeding-stuffs
    • A23K10/30—Animal feeding-stuffs from material of plant origin, e.g. roots, seeds or hay; from material of fungal origin, e.g. mushrooms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K50/00—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals
    • A23K50/40—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for carnivorous animals, e.g. cats or dogs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K50/00—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals
    • A23K50/50—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for rodents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L2/00—Non-alcoholic beverages; Dry compositions or concentrates therefor; Their preparation
    • A23L2/52—Adding ingredients
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L7/00—Cereal-derived products; Malt products; Preparation or treatment thereof
    • A23L7/10—Cereal-derived products
    • A23L7/117—Flakes or other shapes of ready-to-eat type; Semi-finished or partly-finished products therefor
    • A23L7/126—Snacks or the like obtained by binding, shaping or compacting together cereal grains or cereal pieces, e.g. cereal bars
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/045—Hydroxy compounds, e.g. alcohols; Salts thereof, e.g. alcoholates
    • A61K31/05—Phenols
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/12—Ketones
    • A61K31/122—Ketones having the oxygen directly attached to a ring, e.g. quinones, vitamin K1, anthralin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/08—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for nausea, cinetosis or vertigo; Antiemetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/04—Antipruritics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/02—Drugs for disorders of the nervous system for peripheral neuropathies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/06—Antimigraine agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/20—Hypnotics; Sedatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/22—Anxiolytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/24—Antidepressants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Diabetes (AREA)

Abstract

Uso de una composición dietética o farmacéutica administrable por vía oral que comprende un extractoobtenido a partir de plantas del género Origanum por extracción con un disolvente o fluidos supercríticos,hidrodestilación para obtener aceites esenciales, o extracción/destilación con gases calientes en un proceso para:mantenimiento o la mejora de la atención y la concentración, la memoria y la capacidad para recordar, capacidad deaprendizaje, procesamiento del lenguaje, resolución de problemas y funcionamiento intelectual, mejora de la memoria a corto plazo, aumento del estado de alerta mental, aumento de la capacidad de concentración y la agudeza mental, intensificación de la vigilancia mental, reducción de la fatiga mental, refuerzo de la salud mental, mantenimiento de una función cognitiva equilibrada, regulación del hambre y la saciedad y la regulación de la actividad motora, uso como antidepresivo, mejorador del humor/vitalidad, aliviador del estrés, reductor de la ansiedad, reductor dela tensión, reductor de la tristeza, reductor de la infelicidad/descontento, reductor de la irritabilidad, reductor de ladisforia, reductor del comportamiento obsesivo-compulsivo, y/o relajante, o utilización como preventivo o normalizador de las alteraciones de los ritmos circadianos, con la salvedad de que la composición no incluye la combinación de orégano y extractos de Crataegus.

Description

Nuevos agentes para el tratamiento de trastornos conectados con neurotransmisión deteriorada
La presente invención se refiere al uso de extractos de orégano y/o componentes volátiles de extracto de orégano como agentes para uso en un método de tratamiento de trastornos conectados con neurotransmisión deteriorada, es 5 decir reducida, como se detalla en esta memoria.
Se ha encontrado, de acuerdo con esta invención, que tales extractos son inhibidores de la reabsorción de serotonina, inhibidores de la reabsorción de noradrenalina, e inhibidores de la reabsorción de dopamina. Así pues, los mismos pueden mimetizar la acción de productos farmacéuticos que son inhibidores de absorción duales e inhibidores de absorción triples. Por tanto, estos extractos y sus materias volátiles son particularmente eficaces en el
10 tratamiento de trastornos del humor, con inclusión de depresión y ansiedad, y pueden utilizarse para regular los biorritmos en los humanos. Los mismos tienen también numerosos usos veterinarios, y pueden utilizarse para prevenir o tratar las consecuencias conductuales o fisiológicas del estrés.
WO 95/05838 da a conocer el uso de un aceite vegetal volátil derivable de clavo, nuez moscada, pimienta, tomillo, pimentón, orégano, mejorana, albahaca y estragón francés o un constituyente de los mismos (v.g. linalol, tujona,
15 canfeno, carvacrol, y timol del aceite de tomillo) para combatir cambios deletéreos en el sistema nervioso periférico (tales como morfología, estructura y cantidad de tejido). No existe doctrina alguna acerca del uso de que el uso de estas sustancias afecte a los procesos bioquímicos en el cerebro.
WO 01/45780 da a conocer el uso de fototerapia, opcionalmente en combinación con aromaterapia, en donde el orégano es uno de los ingredientes posibles, para tratar trastornos del sueño combinados con nerviosismo. Así
20 pues, la composición se administra por medios olfativos.
Campo de la presente invención
Esta invención se refiere al uso de extractos de orégano y/o sus componentes volátiles para la fabricación de composiciones para el tratamiento y la prevención de trastornos conectados con neurotransmisión liberada o reducida. Así pues, en un aspecto la presente invención se refiere a composiciones dietéticas o farmacéuticas o
25 veterinarias, que comprenden al menos un extracto de orégano o uno de sus componentes volátiles para uso en un proceso para el mantenimiento o la mejora de la atención y la concentración, la memoria y la capacidad para recordar, capacidad de aprendizaje, procesamiento del lenguaje, resolución de problemas y funcionamiento intelectual, mejora de la memoria a corto plazo,
30 aumento del estado de alerta mental, aumento de la capacidad de concentración y la agudeza mental, intensificación de la vigilancia mental, reducción de la fatiga mental, refuerzo de la salud mental,
35 mantenimiento de una función cognitiva equilibrada, regulación del hambre y la saciedad y la regulación de la actividad motora, uso como antidepresivo, mejorador del humor/vitalidad, aliviador del estrés, reductor de la ansiedad, reductor de la tensión, reductor de la tristeza, reductor de la infelicidad/descontento, reductor de la irritabilidad, reductor de la disforia, reductor del comportamiento obsesivo-compulsivo, y/o relajante, o
40 utilización como preventivo o normalizador de las alteraciones de los ritmos circadianos, con la salvedad de que la composición no incluye la combinación de orégano y extractos de Crataegus.
Sorprendentemente, se ha descubierto que los extractos de orégano y sus componentes volátiles de esta invención, actúan como inhibidores de la reabsorción de serotonina, prolongando así el tiempo en que está disponible la serotonina para la neurotransmisión. Esto conduce a un equilibrio del humor y efecto de alivio del estrés. 45 Adicionalmente, los extractos de orégano y sus componentes volátiles de esta invención son eficaces también como inhibidores de la reabsorción de noradrenalina, inhibidores de la reabsorción de dopamina, y/o inhibidores de la reabsorción dual de serotonina, noradrenalina y/o dopamina, o inhibidores triples de la reabsorción de noradrenalina, serotonina y dopamina. Así pues, los mismos son particularmente útiles para tratamiento de la depresión, la ansiedad, o una combinación de las mismas, mediado por la neurotransmisión de serotonina o
50 noradrenalina o una combinación de las mismas.
Los neurotransmisores principales son serotonina, dopamina, noradrenalina, acetilcolina, glutamato, y ácido gammaaminobutírico. Los neurotransmisores de relevancia particular para los trastornos relacionados con el humor son serotonina, noradrenalina y dopamina. El aumento en la neurotransmisión se consigue por aumento de la concentración del neurotransmisor en la hendidura sináptica, haciéndola así disponible para neurotransmisión
55 incrementada o prolongada por inhibición de la reabsorción en el extremo del nervio pre-sináptico, o por prevención del catabolismo de los neurotransmisores por inhibición de enzimas degradantes tales como las monoaminooxidasas A y B.
DEFINICIONES
Los términos "neurotransmisión deteriorada" y "neurotransmisión reducida" se utilizan intercambiablemente a lo largo de la presente solicitud. Los mismos se utilizan en la presente solicitud de acuerdo con su significado bien conocido por las personas expertas en la técnica, y se refieren a un estado de disregulación de la neurotransmisión,
5 que puede ocurrir al nivel de biosíntesis, procesamiento, almacenamiento, liberación, reabsorción y fijación de los receptores de neurotransmisores. La neurotransmisión deteriorada, en particular una reducción de la neurotransmisión, puede manifestarse en sí misma en animales con inclusión de humanos como perturbación del comportamiento, las emociones, el humor y los procesos del pensamiento, por ejemplo, en uno de diversos tipos de depresión.
10 La expresión "extracto de orégano y/o sus componentes volátiles" tiene por objeto comprender no sólo mixturas completas de compuestos extraíbles sino también únicamente compuestos volátiles de la planta considerados aisladamente o en cualquier combinación entre ellos. Los componentes volátiles más importantes de los extractos de orégano de acuerdo con la presente invención son: carvacrol, timol, timoquinona y timoquinol. Ejemplos de componentes volátiles adicionales de extractos de orégano son:
15 4-terc-butilfenol; 2,3-diisopropil-5-metilfenol; 2,4-diisopropil-3-metilfenol; 2,4-diisopropil-5-metilfenol; 2,5-diisopropil-3metilfenol; 2,5- diisopropil-4-metilfenol; 2,6-diisopropil-3-metilfenol y p-ment-3-en-1-ol.
La expresión "extractos de orégano" de la presente invención no abarca tés o extractos acuosos calientes producidos a partir de hojas frescas o secadas o cualesquiera otras partes de especies de Orégano, así como tés que contienen únicamente cantidades traza de los componentes volátiles.
20 Los extractos obtenidos por destilación con vapor, están, sin embargo, dentro del alcance de la presente invención. Tales extractos contienen generalmente compuestos volátiles que no se degradan fácilmente. Los aceites destilados contienen escasamente timoquinona y otras materias volátiles, dado que las mismas se degradan más rápidamente durante la destilación con vapor. Sin embargo, aquéllos pueden contener cantidades elevadas de carvacrol. Los extractos con SFCO2 son especialmente preferidos por su estabilidad (hasta 5 años en recipientes cerrados).
25 El término "animales" incluye humanos, y abarca mamíferos, peces y aves. Se prefieren: humanos, mascotas o animales de compañía, animales de granja, y animales utilizados en la industria de la piel.
La expresión "animales de granja" incluye: peces, tales como salmón y trucha, animales de piscifactoría tales como camarones, cerdos, caballos, rumiantes (ganado vacuno, ovejas, cabras) y aves de corral (tales como gansos, pollos, pollitos de asar, gallinas ponedoras, codornices, patos, y pavos). Se prefieren aves de corral, ganado vacuno,
30 ovejas, cabras y cerdos.
"Mascotas" o "animales de compañía" incluyen perros, gatos, pájaros, peces de acuario, cobayos, conejos (jack), liebres y hurones. Se prefieren perros y gatos.
Los "animales utilizados en la industria de la piel" incluyen visones, zorros, y liebres.
La expresión "composiciones dietéticas" incluye cualquier tipo de producto nutricional, tal como alimentos/piensos y 35 bebidas (reforzados), e incluye también productos clínicos de nutrición, así como suplementos dietéticos.
"Refuerzo" significa que al menos un extracto de orégano o uno o más componentes volátiles del mismo se añadió/añadieron durante la fabricación del alimento/pienso o bebida.
En los humanos, los trastornos conectados con la neurotransmisión deteriorada o reducida, incluyen: depresión, ansiedad, irritabilidad, infelicidad/descontento, tristeza, disforia, comportamiento obsesivo-compulsivo, insomnio, y
40 anormalidades de los biorritmos (ritmos circadianos alterados).
Las composiciones que se utilizan en esta invención pueden caracterizarse por tanto como agentes de equilibración del humor, mejoradores del humor/vitalidad, aliviadores del estrés, reductores de la ansiedad, reductores de la tensión, relajantes, mejoradores del sueño, y normalizadores de los biorritmos.
Numerosas composiciones farmacéuticas que son reguladores de los neurotransmisores han demostrado ser útiles
45 en diversos trastornos relacionados con el humor. Dado que se ha encontrado que los extractos de esta invención actúan utilizando mecanismos bioquímicos iguales o similares, puede llegarse a la conclusión de que aquéllos son útiles para afecciones similares como inhibidores de la absorción.
Los compuestos que aumentan los niveles de neurotransmisores en el cerebro y mejoran así su transmisión, pueden exhibir por tanto propiedades antidepresivas así como efectos beneficiosos en una diversidad de otros
50 trastornos mentales (Neurotransmitters. Drugs and Brain function, R.A. Webster (ed), John Wiley & Sons, Nueva York, 2001, p. 187-211, 289-452, 477-498).
ansiedad, y reductores del comportamiento obsesivo-compulsivo. Todos ellos mejoran, aumentan y refuerzan la neurotransmisión fisiológica, especialmente en el sistema nervioso central, y por consiguiente alivian la disfunción mental.
Compuestos antidepresivos tricíclicos (TCAs) tales como imipramina, amitriptilina, y clomipramina, inhiben la
5 reabsorción de serotonina, noradrenalina y/o dopamina. Los mismos están considerados generalmente entre los antidepresivos más eficaces disponibles, pero presentan cierto número de desventajas debido a que interaccionan adicionalmente con varios receptores cerebrales, v.g., con los receptores colinérgicos. Y lo que es más importante, los TCAs son peligrosos dado que, si se consumen en dosis excesivas, presentan frecuentemente cardiotoxicidad aguda.
10 Otra clase de fármacos antidepresivos son los denominados SSRIs (inhibidores selectivos de la reabsorción de serotonina), que incluyen fluoxetina, paroxetina, sertralina, citaloplam, y fluvoxamina, que bloquean el transportador de serotonina (SERT), un transportador de neurotransmisores de alta afinidad dependiente de cloruro de sodio que termina la neurotransmisión serotonérgica por reabsorción de la serotonina. Dichos fármacos han demostrado ser eficaces en el tratamiento de la depresión y la ansiedad, y usualmente son mejor tolerados que los TCAs. Estas
15 medicaciones se inician típicamente a dosis bajas y pueden aumentarse hasta que alcanzan un nivel terapéutico. Un efecto secundario común es la náusea. Otros posibles efectos secundarios incluyen disminución del apetito, boca seca, sudoración, infección, estreñimiento, bostezo, temblor, somnolencia y disfunción sexual.
Asimismo, las revisiones sistemáticas y las pruebas clínicas aleatorizadas controladas por placebo (RCTs) indican que algunos SSRIs (escitalopram, paroxetina y sertralina), el SNRI venlafaxina, algunas benzodiazepinas 20 (alprazolam y diazepam), el antidepresivo tricíclico imipramina, y el agonista parcial de 5-HT1A buspirona son todos ellos eficaces en tratamiento agudo. En general, el efecto del tratamiento es a menudo moderado y los síntomas reaparecen cuando se interrumpe el periodo de tratamiento. Por esta razón, un tratamiento o prevención continuo(a) a largo plazo con compuestos que tengan efectos secundarios menores que los SSRIs y pueda seguirse durante largos periodos de tiempo podría ser favorable con respecto al tratamiento con fármacos. Esto se puede conseguir
25 por administración a las personas que lo precisan de extractos de orégano o sus componentes volátiles en la forma de suplementos dietéticos.
Por esta razón, existe todavía necesidad de compuestos para el método de mejora de los trastornos conectados con neurotransmisión deteriorada que no exhiban los efectos secundarios negativos de los antidepresivos conocidos. Muchos pacientes están interesados en terapias alternativas con menos o ningún efecto secundario asociados con
30 la toma de fármacos conocidos. La depresión grave es una enfermedad de larga duración y recurrente, que por lo general está mal diagnosticada. Adicionalmente, muchos pacientes sufren de depresión ligera o moderadamente grave. Por ello, existe un interés creciente en el desarrollo de compuestos, así como de composiciones farmacéuticas y/o dietéticas, que puedan utilizarse para tratar o prevenir el desarrollo de enfermedades/trastornos mentales tales como depresión, en personas de riesgo, y para estabilización del humor.
35 Adicionalmente, compuestos que previenen el catabolismo de los neurotransmisores más ampliamente por inhibición de las monoaminooxidasas (MAOs) A y B, denominados inhibidores de MAO (MAOIs), exhiben efectos antidepresivos. Las MAOs catalizan la oxidación de los neurotransmisores que contienen grupos amina tales como serotonina, noradrenalina, y dopamina.
Adicionalmente, los moduladores de la neurotransmisión ejercen efectos pleiotrópicos sobre las funciones mentales 40 y cognitivas. Además de la depresión, ejemplos de otras afecciones humanas se enumeran a continuación.
Trastorno de Ansiedad Generalizada (GAD) y Otros Trastornos de Ansiedad
Es bien sabido que la neurotransmisión deteriorada, v.g. los niveles bajos de neurotransmisores, está conectada con diversas enfermedades y afecciones mentales tales como los trastornos de depresión y ansiedad generalizada (GAD). Los pacientes sufren a menudo, sea como comorbilidad a la depresión o aisladamente, del síndrome de 45 ansiedad generalizada o trastorno de ansiedad generalizada. La GAD es una afección de ansiedad altamente prevaleciente y enfermedad crónica en atención primaria (~ 10% de los pacientes) (Wittchen et al, 2005 Eur. Neuropsychopharm. 15:357-376). Los pacientes se presentan a su médico de atención primaria con síntomas físicos múltiples. La GAD se caracteriza por tensión crónica, y preocupación y tensión ansiosa (> 6 meses), que son incapacitantes e incontrolables, y van acompañadas por un síndrome de hipervigilancia característico (con inclusión 50 de inquietud, tensión muscular, y problemas del sueño). Si no se trata, la GAD sigue un uso crónico fluctuante y tiende a hacerse más grave con la edad. Los pacientes de GAD sufren de depresión sub-síndrome. Los pacientes de GAD se clasifican como usuarios frecuentes con la carga económica global máxima directa e indirecta sanitaria de todos los trastornos de ansiedad y depresivos. A pesar de la alta incidencia de la GAD, pocos enfermos son diagnosticados, tratados con medicación, o remitidos al psiquiatra; se precisan instrumentos diagnósticos simples
55 para ayudar al reconocimiento y la monitorización de los pacientes. Con indiferencia del diagnóstico específico, los médicos requieren tratamientos eficaces de los síntomas de la GAD. Los SSRIs tales como paroxetina son eficaces para el tratamiento de la GAD [Stocchi et al., 2003 J Clin Psychiatry 63 (3): 250.]
Varios SSRIs han sido aprobados por la FDA para el tratamiento de los trastornos de ansiedad:
fluoxetina -OCD, PD sertralina -OCD, PD, PTSD, SAD paroxetina -OCD, PD, SAD, GAD, PTSD
5 escitalopram -GAD fluvoxamina -OCD
[OCD: trastorno obsesivo-compulsivo, PD: trastorno de pánico, PTSD: trastorno de estrés post-traumático, SAD: trastorno de ansiedad social, GAD: trastorno de ansiedad generalizado]
Agresión
10 La agresividad impulsiva patológica puede asociarse con la inervación serotonérgica inferior en la corteza cingulada anterior, como se demuestra utilizando PET, donde se ha demostrado que la fijación de [11C]McN 5652 estaba significativamente reducida en esta región cerebral [Frankle et al. 2005 Am. J. Psych., 162:915-923]. A este respecto, debe indicarse también que la disfunción de serotonina se ha correlacionado con comportamientos criminales impulsivos y violentos, abuso de alcohol e intentos suicidas, habiéndose comunicado también en niños
15 internados por comportamiento agresivo.
Se ha demostrado que el empobrecimiento dietético de triptófano da como resultado un aumento en las respuestas agresivas, en una situación de laboratorio, en tanto que el aumento de triptófano daba como resultado una disminución en las respuestas agresivas. Así pues, presumiblemente, la disminución de serotonina está ligada a un aumento en la agresión [Marsh et al. 2002, Neuropsychopharm 26:660-671].
20 Trastorno de hiperactividad con déficit de atención (ADHD)
Cierto número de antidepresivos que afectan a la reabsorción de una o más de las monoaminas son también eficaces en el tratamiento de la ADHD y constituyen una buena alternativa a las medicaciones estimulantes utilizadas comúnmente: (1) antidepresivos tricíclicos (TCAs), tales como imipramina, desipramina y amitriptilina, cuyo mecanismo de acción incluye el bloqueo de la reabsorción de noradrenalina y serotonina y la regulación
25 decreciente de los receptores β-adrenérgicos; (2) inhibidores duales de la reabsorción, tales como bupropión (inhibidor de la reabsorción de dopamina/noradrenalina) y venlafaxina (SNRI); (3) inhibidores de la reabsorción simples, tales como atomoxetina y tomoxetina (bloqueo de los transportadores de noradrenalina de la corteza presináptica prefrontal) [Greydanus 2005. Ind. J. Ped., 72:953-960; Chouinard 2005 J. Psych. & Neuro., 31 (3): 168-176].
30 Perturbaciones de los Ritmos Circadianos
Los trastornos del humor y el estrés ocupacional pueden conducir a perturbaciones en los ritmos circadianos (los denominados biorritmos). Estas afecciones son a menudo crónicas y persistentes. Asimismo, la disregulación de los ritmos circadianos inducida por vuelos a larga distancia (jet-lag), así como por el trabajo a turnos, pueden causar síntomas similares y angustia. Por tanto, el uso de suplementos dietéticos para mantener el ritmo circadiano normal
35 (al que está habituado un animal o humano), y/o para aliviar y prevenir los síntomas asociados con un ritmo circadiano perturbado, tales como el deterioro de la función cognitiva y la memoria, y la fatiga mental y física, está justificado para mejorar la calidad global de vida y aumentar la energía vital de una persona que se encuentre en necesidad de ello.
Trastorno del Sueño, Insomnio, y Síndrome de Fatiga Crónica
40 El sueño y la depresión están estrechamente ligados. Las anormalidades del sueño EEG son habituales en la depresión, y el insomnio puede conducir a depresión. Las alteraciones del sueño afectan a otros ritmos biológicos implicados en la depresión (Vogel et al. 1990 Neurosci Biobehav Rev 14:49-63; Mc Carley 1982. Am J Psych 139:565-570). Los antidepresivos pueden mejorar la continuidad del sueño, reducir el sueño con movimiento rápido de los ojos (REM) y prolongar el sueño de onda lenta (SWS) (Sraner et al 2006 en Clinical Pharmacology of Sleep.
45 S.R. Pandi-Perumal et al (editores). Birkhäuser, Basilea, pp. 103-124.
Los TCAs se utilizan comúnmente para el tratamiento del síndrome de fatiga crónica. Se cree que los TCAs promueven la etapa 4, de sueño sin movimiento rápido de los ojos, [Craig et al 2002. Am. Fam. Physician, 65:10831090].
Trastorno Obsesivo-Compulsivo (OCD)
50 La neurotransmisión mejorada en los receptores 5-HT2 puede estar implicada en la acción terapéutica de los SSRIs en el OCD; la hiperactividad en el bucle neuronal entre la corteza orbitofrontal, la cabeza del núcleo caudado y el tálamo puede ser atenuada por los SSRIs, debido a activación incrementada de los receptores inhibidores 5-HT2 en la corteza orbitofrontal [Blier et al 2001 J. Psych & Neuro. 26(1): 37-43]. Los SSRIs, tales como zimeldina, fluoroxetina y sertralina, han demostrado ser eficaces en el tratamiento del OCD [Chouinard, 2005 J. Psych. & Neuro. 31(3): 168-176].
Dolor
Los antidepresivos con mecanismos de acción diferentes pueden ser eficaces también en el tratamiento del dolor.
5 Por ejemplo, amitriptilina y mianserina, que son antagonistas 5-HT2 potentes, se utilizan para el control del dolor crónico [Blier et al 2001. J. . Psych. & Neuro. 26(1): 37-43]. El inhibidor de la reabsorción de noradrenalina/serotonina/dopamina, duloxetina, es eficaz en el tratamiento del dolor neuropático asociado con la neuropatía periférica diabética [Chouinard, 2005 J. Psych. & Neuro. 31(3): 168-176]. Este tipo de dolor es diferente del asociado con la inflamación. De acuerdo con esta invención, el dolor se reduce utilizando un mecanismo
10 diferente de la disminución de la inflamación.
Como antidepresivo, los extractos de orégano y sus componentes volátiles, así como composiciones/medicamentos que los contienen, pueden utilizarse en métodos de mejora mental, del comportamiento, y de los trastornos emocionales/afectivos, neuróticos, neurodegenerativos, relacionados con la comida y el estrés tales como v.g. depresión unipolar, depresión bipolar, depresión aguda, depresión crónica, depresión subcrónica, distimia, 15 depresión postparto, disforia/síndrome premenstrual (PMS) síntomas depresivos climatéricos, agresión, trastornos de déficit de atención (ADS), trastornos de ansiedad social, trastornos afectivos estacionales, trastornos de ansiedad/ansiedad generalizada (GAD), síndrome de fibromialgia, fatiga crónica, trastornos del sueño (insomnio), trastornos de estrés post-traumático, trastornos de pánico, trastornos obsesivo-compulsivos, síndrome de piernas inquietas, nerviosismo, migraña/dolores de cabeza primarios y dolor en general, emesis, bulimia, anorexia nerviosa,
20 trastorno de excesos en la comida, trastornos gastrointestinales, síndrome de agotamiento, irritabilidad y cansancio.
Como antidepresivo, los extractos de orégano y sus componentes volátiles, así como las composiciones/medicamentos que los contienen, pueden utilizarse también para la fabricación de composiciones para prevención primaria y secundaria y/o el tratamiento del deterioro neurocognitivo. Adicionalmente, aquéllos son eficaces también en el tratamiento de síntomas depresivos u otros síntomas relacionados con neurotransmisión 25 perturbada que aparecen como comorbilidad en enfermedades crónicas, v.g. enfermedades cardiovasculares, ataques, cáncer, Enfermedad de Alzheimer y Enfermedad de Parkinson. De acuerdo con esta invención, los extractos de orégano y sus componentes volátiles, así como las composiciones/medicamentos que los contienen, no se utilizan para tratamiento de enfermedades cardiovasculares, derrames cerebrales, cáncer, enfermedad de Alzheimer y enfermedad de Parkinson propiamente dichas, sino para tratar la depresión provocada por estas
30 enfermedades.
Los extractos de orégano o sus componentes volátiles pueden utilizarse para la fabricación de medicamentos para el tratamiento de un trastorno relacionado con la neurotransmisión deteriorada. Los mismos pueden utilizarse adicionalmente para la fabricación de composiciones para uso como agentes de equilibración del humor, mejoradores del humor/vitalidad, aliviadores del estrés, mejoradores del estado, reductores de la ansiedad,
35 reductores de la tensión, reductores de la tristeza, reductores de la infelicidad/descontento, reductores de la irritabilidad, reductores de la disforia, reductores del comportamiento obsesivo-compulsivo, relajantes, mejoradores del sueño y/o aliviadores del insomnio.
"Mejorador del humor", "mejorador de la vitalidad" o "reforzador del bienestar emocional" significa que el humor o la vitalidad de una persona tratada con ello se mejora, que aumenta su autoestima y/o que las ideas negativas y/o la
40 tensión negativa, la tristeza, la infelicidad y el descontento, la irritabilidad y la disforia se reducen. Significa también que las emociones están equilibradas y/o que el bienestar general, especialmente el mental, y la vitalidad se mejoran o se mantienen, y que el riesgo de fluctuaciones del humor se reduce, que se mantiene el humor positivo, y que uno se siente lleno de energía y motivado.
"Reductor de la tensión, reductor de la tristeza, reductor de la infelicidad/descontento, reductor de la irritabilidad,
45 reductor de la disforia" significa que la tensión (crónica) y la preocupación se reducen o se alivian. El síndrome de hipervigilancia, con inclusión de inquietud y tensión muscular, se reduce o se alivia también. Las fobias sociales y de otros tipos se resuelven también al menos parcialmente. En general, el entorno social se siente como menos amenazante. La persona está emocionalmente relajada, experimenta comodidad y goza de la compañía y el contacto con otras gentes. En general, la persona se siente llena de energía y motivada para realizar las tareas
50 diarias.
Un "relajante" actúa corrigiendo completa o parcialmente el ritmo circadiano (biorritmo) de una persona que se ha perturbado debido a jet-lag o trabajo a turnos. Un relajante prevendrá al menos parcialmente o anulará los síntomas asociados con tales perturbaciones, es decir el deterioro de la función cognitiva y la memoria, la fatiga mental y física, y mejorará globalmente la calidad de vida y la energía vital. Así, los extractos de orégano o uno o más de sus
55 componentes volátiles, pueden utilizarse también para prevenir y/o anular el deterioro de la función cognitiva y la memoria, para prevenir y/o anular la fatiga mental y física, y para mejorar la calidad global de vida y la energía vital.
Una realización adicional de la presente invención se refiere al uso de extractos de orégano o sus componentes volátiles y al uso de composiciones que los contienen como "mejoradores del estado", es decir como medios para reducir la irritabilidad y el cansancio, para reducir, prevenir o aliviar la fatiga física y mental, para favorecer el sueño tranquilo, es decir para actuar contra el insomnio y los trastornos del sueño y mejorar el sueño, y para aumentar la 5 energía en términos más generales, especialmente para aumentar la producción de energía cerebral, en individuos enfermos o de salud normal. Además, tales "mejoradores del estado" pueden utilizarse para mejora de la cognición en general, y especialmente para mantenimiento o mejora de la atención y concentración, de la memoria y la capacidad de recordar, de la capacidad de aprendizaje, del procesamiento del lenguaje, de la resolución de problemas y del funcionamiento intelectual; para mejora de la memoria a corto plazo; para aumento del estado de
10 alerta mental; para aumento de la capacidad de concentración y la agudeza mental, para intensificación de la vigilancia mental; para reducción de la fatiga mental; para respaldo del bienestar cognitivo, para mantenimiento de una función cognitiva equilibrada, para la regulación del hambre y la saciedad, y para la regulación de la actividad motora.
Así pues, un aspecto preferido de la invención se refiere al uso de extractos de orégano y sus componentes volátiles 15 como agentes de equilibración del humor y/o aliviadores del estrés.
En una realización adicional preferida de la presente invención, los extractos de orégano o sus componentes volátiles se utilizan para mantener los ritmos circadianos en humanos, para alivio y/o para prevención de los síntomas asociados con un ritmo circadiano perturbado en humanos. Así, el humor se estabiliza y se alcanza un equilibrio emocional para hacer frente al estrés de la vida diaria y mantener la eficiencia física y psicológica.
20 Adicionalmente, los síntomas asociados con un ritmo circadiano perturbado, tales como deterioro de la función cognitiva y la memoria, así como fatiga mental y física, se alivian y/o se previenen, con lo que se mejora la calidad de vida global. Estas personas se benefician también del mantenimiento de la energía vital. Asimismo, la disregulación de los ritmos circadianos inducida por vuelos a larga distancia (jet-lag), así como por el trabajo a turnos y los síntomas asociados con ello, se alivian y/o se previenen.
25 Otro aspecto preferido de la invención se refiere al uso de los extractos de orégano o sus componentes volátiles para la fabricación de una composición, para uso como antidepresivo.
En el contexto de esta invención, "tratamiento" abarca también co-tratamiento así como prevención. La "prevención" puede ser la prevención de la primera aparición (prevención primaria) o la prevención de una recurrencia (prevención secundaria). La prevención significa también que el riesgo de sufrir neurotransmisión deteriorada, o de
30 humor desequilibrado o estrés se reduce. El término "prevención" abarca especialmente la reducción del riesgo o incidencia del desarrollo de ciertos síntomas, especialmente asociados con un ritmo circadiano perturbado.
En otra realización, una dosis eficaz de extractos de orégano o sus componentes volátiles puede utilizarse especialmente para mantenimiento del bienestar mental, para mantenimiento de una función cognitiva equilibrada, para contribución al mantenimiento de un humor positivo, relajación, y para reforzar el bienestar cognitivo.
35 Los extractos o sus componentes volátiles de esta invención mejoran, aumentan y refuerzan la neurotransmisión fisiológica, especialmente en el sistema nervioso central, y por consiguiente pueden aliviar la disfunción mental.
Otro aspecto adicional de esta invención es un método para prevención o tratamiento de trastornos conectados con la neurotransmisión deteriorada en humanos por aumento del nivel plasmático de carvacrol hasta al menos 10 ng/ml en humanos, preferiblemente por aumento del nivel de carvacrol en plasma hasta dentro del intervalo de 10 ng/ml a
40 51.000 ng/ml en humanos. El nivel en plasma puede medirse como se describe en los ejemplos.
USOS VETERINARIOS
Otro aspecto de esta invención son usos veterinarios del extracto de orégano y/o sus componentes volátiles. Los animales pueden exhibir reacciones de comportamiento y/o fisiológicas adversas frente a situaciones estresantes. Por ejemplo, los animales criados en ambientes de producción en gran escala, o que son transportados, pueden
45 tener una disminución en la cantidad o calidad de la carne o la leche. Las aves de corral estresadas pueden recurrir a arrancamiento de las plumas, reducción de la puesta de huevos y canibalismo. Muchos animales pueden volverse agresivos o exhibir comportamientos obsesivo-compulsivos. Los extractos y componentes volátiles de esta invención, al actuar como neurotransmisores, pueden aliviar estos comportamientos y fisiología indeseables en los animales.
50 En una realización preferida de la presente invención, los extractos de orégano o sus componentes volátiles se administran para prevención del estrés en animales de granja, en la cría de ganado para producción en gran escala, durante el transporte al matadero y/o para prevención de la pérdida de calidad de la carne en dichos animales durante el transporte al matadero.
En otra realización preferida de la presente invención, los extractos de orégano o sus componentes volátiles se
55 administran a mascotas o animales de compañía para reducción del estrés, la tensión y la agresividad y el comportamiento compulsivo exhibido en condiciones estresantes, tales como separación, cambio o pérdida del propietario, durante la separación en los días festivos y la permanencia en los denominados "hoteles de animales", y el mantenimiento en albergues o refugios para animales.
Especialmente los animales de compañía y animales de granja pueden encontrarse en condiciones de necesidad de mejora o aumento de la neurotransmisión. Tales condiciones se presentan v.g. después de la captura o el
5 transporte o con el alojamiento, cuando los animales desarrollan trastornos análogos y sufren angustia o agresividad, o exhiben comportamientos estereotípicos, o ansiedad, tensión, tristeza, infelicidad/descontento e irritabilidad, disforia y trastorno obsesivo-compulsivo.
Así pues, los extractos de orégano o sus componentes volátiles, y las preferencias expuestas anteriormente, pueden utilizarse en general como antidepresivos para animales con inclusión de los humanos, preferiblemente para
10 humanos y otros mamíferos, particularmente para animales de compañía y animales de granja.
Otra realización de esta invención es un método para reducción del estrés en animales de granja en la crianza de ganado para producción en gran escala, durante el transporte al matadero y/o para prevención de la pérdida de calidad de la carne de dichos animales de granja durante el transporte al matadero, que comprende administrar una dosis eficaz de un extracto de orégano o uno o más de sus componentes volátiles a los animales de granja que se
15 encuentran en necesidad de ello. Los animales de granja son preferiblemente aves de corral, ganado vacuno, ovejas, cabras y cerdos.
En otra realización preferida de la presente invención, los extractos de orégano o sus componentes volátiles se administran a aves de corral para prevención del arrancamiento de las plumas y el canibalismo que dan como resultado v.g. pérdidas de la calidad de la carne y la producción de huevos. Así pues, otro aspecto de esta invención
20 es un método para prevención de la pérdida de la producción de huevos, el arrancamiento de las plumas y el canibalismo y las pérdidas de calidad de la carne debido al estrés por transporte entre las aves de corral, que comprende administrar una dosis eficaz de un extracto de orégano o uno de sus componentes volátiles a aves de corral que se encuentran en necesidad de ello.
Otro aspecto de esta invención es un método para prevención y/o alivio del estrés en piscifactoría que comprende el
25 paso de administrar una dosis eficaz de un extracto de orégano o uno o más de sus componentes volátiles a animales que se encuentran en necesidad de ello, en donde los animales son peces o camarones.
Otro aspecto adicional de esta invención es un método para reducción del estrés, la tensión, la agresividad y/o el comportamiento compulsivo en animales de compañía que se encuentran en condiciones estresantes, tales como separación, cambio o pérdida del propietario, durante la separación de los días festivos y el mantenimiento en los
30 denominados "hoteles de animales", así como el mantenimiento en albergues, y otras condiciones de crianza y reproducción densas, que comprende el paso de administrar una dosis eficaz de un extracto de orégano o uno o más de sus componentes volátiles a animales de compañía que se encuentran en necesidad de ello, especialmente a gatos y perros que se encuentran en necesidad de ello.
Otro aspecto adicional de esta invención es un método para prevención y/o reducción de los síntomas asociados
35 con condiciones estresantes en animales utilizados para la industria de la piel, preferiblemente para visones, zorros y/o liebres.
En el caso de los animales, los extractos de orégano o sus componentes volátiles, se administran preferiblemente como piensos reforzados o bebidas reforzadas (v.g. como adición al agua de bebida).
Extractos de orégano o sus componentes volátiles
40 Los extractos de orégano pueden ser de cualquier origen de una planta (planta entra o partes de la misma) perteneciente a los géneros Origanum tal como Origanum vulgare y Thymus tal como Thymus vulgaris en forma de un concentrado de compuestos extraíbles, especialmente compuestos volátiles. Ejemplos adicionales de plantas del genero Origanum abarcadas por el término "orégano" son O. majorana, O. dictamus, O. creticum, O. majoricum, O. aureum, O. compactus, O. syriaca, O. tyt-thantum, O. heracleoticum, O. smyrnaeum and O. virens. Ejemplos
45 adicionales de plantas del género Thymus abarcadas por el término "orégano" son T. herbus-barona, T. citriodorus, T. mastichiana, T. pulegioides, T. serpyllum, T. pallasianus y T. praecox. El concentrado puede contener además disolventes utilizados para la extracción, puede estar exento de ellos o puede transferirse a materiales portadores específicos. Los extractos se pueden obtener de acuerdo con métodos bien conocidos en la técnica, v.g., por (una) extracción con disolventes como metanol, etanol, acetato de etilo, dietiléter, n-hexano, cloruro
50 de metileno, o con fluidos supercríticos tales como dióxido de carbono (puro o en mixtura con otros disolventes tales como alcoholes) u óxido de dinitrógeno, (b) hidrodestilación para obtención de aceites esenciales o (c) extracción/destilación con gases calientes como nitrógeno.
Preferiblemente, se utilizan extractos de orégano que se obtienen por una extracción con el uso de dióxido de carbono supercrítico. Tales extractos tienen la ventaja de que no contienen cantidad alguna de disolventes 55 orgánicos, proteínas o metales pesados. Si se desea, una extracción con dióxido de carbono supercrítico va seguida
por un segundo paso de extracción con CO2 fluido supercrítico para eliminar ceras y enriquecer selectivamente las materias volátiles.
Los extractos de orégano o sus componentes volátiles pueden ser de origen natural, sintético o mixto (es decir, parcialmente natural y parcialmente sintético), es decir, que aquéllos pueden, aparte de obtenerse por extracción de
5 plantas y fraccionamiento, sintetizarse químicamente y, en caso deseado, mezclarse unos con otros en cualesquiera cantidades deseadas. Los mismos se pueden preparar y utilizar en cualesquiera purezas y concentraciones deseadas, v.g., como soluciones que los contienen en concentraciones tan bajas como, v.g., 10% (p/p) o menos, o hasta aproximadamente 100% (p/p).
Se prefieren extractos de orégano que contienen una proporción elevada de al menos uno de sus componentes
10 volátiles. Son más preferidos extractos de orégano que contienen al menos un total de 70% en peso de componentes volátiles como se ha mencionado arriba, basados en el peso total del extracto. Los extractos de orégano completamente naturales pueden reforzarse con al menos un componente volátil específico de los mismos.
Extractos de orégano preferidos en el contexto de la presente invención son aquéllos en los cuales:
el extracto de orégano comprende al menos 30% en peso de carvacrol,
15 el extracto de orégano comprende al menos 50% en peso de carvacrol, más preferiblemente aquéllos en los cuales el extracto de orégano comprende al menos 60% en peso de carvacrol, y muy preferiblemente aquéllos en los cuales el extracto de orégano comprende al menos 65% en peso de carvacrol, basado en el peso del extracto de orégano.
Se prefieren también extractos de orégano y extractos de orégano que comprenden timoquinona en una cantidad
20 comprendida en el intervalo de 0 a 30% en peso, preferiblemente en donde el extracto de orégano comprende al menos 1% en peso de timoquinona, más preferiblemente en donde el extracto de orégano comprende al menos 2% en peso de timoquinona, aún más preferiblemente en donde el extracto de orégano comprende al menos 5% en peso de timoquinona y muy preferiblemente en donde el extracto de orégano comprende timoquinona en un intervalo de 5 a 30% en
25 peso, basado en el peso del extracto de orégano.
Otros extractos de orégano preferidos son aquéllos en donde el extracto de orégano comprende al menos 50% en peso de carvacrol y desde 0 a 25% en peso de timoquinona, preferiblemente en donde el extracto de orégano comprende al menos 50% en peso de carvacrol y al menos 1% en peso de timoquinona;
30 más preferiblemente en donde el extracto de orégano comprende al menos 55% en peso de carvacrol y al menos 2% en peso de timoquinona, aún más preferiblemente en donde el extracto de orégano comprende al menos 60% en peso de carvacrol y al menos 5% en peso de timoquinona, y muy preferiblemente en donde el extracto de orégano comprende al menos 65% en peso de carvacrol y timoquinona
35 en un intervalo de 5 a 25% en peso, basado en el peso de extracto de orégano.
Se prefieren también los métodos en que se utilizan componentes volátiles simples o sus mixturas, en donde los componentes volátiles se seleccionan del grupo constituido por carvacrol, timoquinona, p-cimeno, timoquinol, limoneno, linalol, borneol, 4-terpineol, timol y cariofileno. Preferiblemente, los compuestos volátiles se seleccionan del grupo constituido por carvacrol, timoquinona y p-cimeno, más preferiblemente en donde los componentes
40 volátiles son carvacrol y/o timoquinona, y muy preferiblemente en donde el componente volátil es carvacrol.
Aún más preferidos son extractos de orégano que no contienen: un extracto hidrófilo, una cantidad esencial de uno de los constituyentes siguientes: ácido rosmarínico, eugenol, sales de eugenol, isómeros de eugenol, paredes de células de levadura o 1-piperoilpiperidina. Una "cantidad esencial” como se utiliza en esta memoria la cantidad total de cualquiera de estos ingredientes, si está presente en absoluto, es preferiblemente inferior a 0,5% en peso, más
45 preferiblemente inferior a 0,2% en peso, aún más preferiblemente inferior a 0,1% en peso, basada en el peso total de dicho extracto de orégano o material de orégano o el o los componentes volátiles.
Adicionalmente, ciertas combinaciones de extractos de plantas no se prefieren en esta invención, tales como la combinación de extracto de orégano y: Agaricus blazei, ortiga, alcachofa, Crataegus, Leonurus, milenrama común, muérdago, Crataeg, Herba viola
50 tricolor, Scutellariae baicalensis, cúrcuma, hilo de oro, agracejo.
La composición de la presente invención se encuentra preferiblemente en la forma de composición nutricional, tal como alimento reforzado, pienso reforzado, o bebidas reforzadas, o en forma de alimento/pienso líquido reforzado para animales, con inclusión de los humanos.
Las composiciones dietéticas y farmacéuticas de acuerdo con la presente invención pueden encontrarse en
55 cualquier forma galénica que sea adecuada para administración al cuerpo animal con inclusión del cuerpo humano, especialmente en cualquier forma que sea convencional para administración oral, v.g. en forma sólida, tal como (aditivos/suplementos para) alimento o pienso, premezcla de alimento o pienso, alimento o pienso reforzado, tabletas, píldoras, gránulos, grageas, cápsulas, y formulaciones efervescentes tales como polvos y tabletas, o en forma líquida tales como soluciones, emulsiones o suspensiones como v.g. bebidas, pastas y suspensiones aceitosas. Las pastas pueden estar encapsuladas en cápsulas de vaina dura o blanda, en cuyo caso las cápsulas
5 presentan v.g. una matriz de gelatina (de pescado, de cerdo, de ave de corral, de vaca), proteínas de plantas o ligninsulfonato. Ejemplos de otras formas de aplicación son formas para administración transdérmica, parenteral o inyectable. Las composiciones dietéticas y farmacéuticas pueden encontrarse en la forma de formulaciones de liberación controlada (retardada). Las composiciones de la presente invención no se administran por vía nasal.
Las composiciones dietéticas de acuerdo con la presente invención pueden contener adicionalmente hidrocoloides
10 protectores (tales como gomas, proteínas, almidones modificados), aglomerantes, agentes de formación de film, agentes/materiales encapsulantes, materiales de pared/vaina, compuestos matriz, recubrimientos, emulsionantes, agentes tensioactivos, agentes solubilizantes (aceites, grasas, ceras, lecitinas, etc.), absorbentes, portadores, cargas, co-compuestos, agentes dispersantes, agentes humectantes, adyuvantes de procesamiento (disolventes), agentes de fluidificación, agentes enmascaradores del sabor, agentes de aumento de peso, agentes gelificantes,
15 agentes formadores de gel, antioxidantes y antimicrobianos.
Ejemplos de alimentos son barras de cereales, productos lácteos, tales como yogures, y artículos de repostería, tales como pasteles y galletas. Ejemplos de alimento reforzado son barras de cereales, y artículos de repostería, tales como pan, panecillos, donuts, pasteles y galletas. Ejemplos de suplementos dietéticos son tabletas, píldoras, gránulos, grageas, cápsulas y formulaciones efervescentes, en la forma de bebidas no alcohólicas, tales como
20 refrescos, zumos de frutas, limonadas, bebidas constituidas casi exclusivamente por agua, tés y bebidas lácteas, en forma de alimento líquido, tales como sopas y productos lácteos (bebidas muesli).
Las bebidas abarcan bebidas no alcohólicas y bebidas alcohólicas así como preparaciones líquidas para añadir al agua de bebida y alimentos líquidos. Las bebidas no alcohólicas son v.g. refrescos, bebidas para deportes, zumos de frutas, zumos de hortalizas, v.g. zumo de tomate), limonadas, tés y bebidas lácteas. Los alimentos líquidos son
25 v.g. sopas y productos lácteos (v.g. bebidas muesli).
Además de como mínimo un extracto de orégano o uno de sus componentes volátiles, las composiciones farmacéuticas de acuerdo con la presente invención pueden contener adicionalmente aditivos y adyuvantes, excipientes o diluyentes farmacéuticos convencionales, que incluyen, pero sin carácter limitante, agua, gelatina de cualquier origen, gomas vegetales, ligninsulfonato, talco, azúcares, almidón, goma arábiga, aceites vegetales,
30 polialquilenglicoles, agentes saborizantes, conservantes, estabilizadores, agentes emulsionantes, tampones, lubricantes, colorantes, agentes humectantes, cargas, y análogos. El material portador puede ser un material portador inerte orgánico o inorgánico adecuado para administración oral/parenteral/inyectable.
Para humanos, una dosis diaria adecuada de extractos de orégano o sus componentes volátiles para los propósitos de la presente invención puede estar comprendida dentro del intervalo que va desde 0,001 mg por kg de peso
35 corporal a aproximadamente 100 mg por kg de peso corporal al día. Es más preferida una dosis diaria de aproximadamente 0,01 a aproximadamente 10 mg por kg de peso corporal, y es especialmente preferida una dosis diaria de aproximadamente 0,05 a 5,0 mg por kg de peso corporal.
En las preparaciones unitarias en forma sólida para humanos, el extracto de orégano o sus componentes volátiles está/están presentes adecuadamente en una cantidad que va desde aproximadamente 0,1 mg a aproximadamente 40 1000 mg, con preferencia desde aproximadamente 1 mg a aproximadamente 500 mg por dosis unitaria. Para alivio de los síntomas asociados con afecciones como las mencionadas en esta memoria, el extracto de orégano o cualquiera de sus componentes volátiles se toma(n) una o dos veces al día junto con una comida durante al menos una semana y hasta 6-12 meses. Para prevención de la aparición de síntomas asociados con afecciones como las que se mencionan en esta memoria, y para el mantenimiento de un estado relajado en líneas generales, es
45 adecuado el consumo sobre una base regular.
En las composiciones dietéticas, especialmente en alimentos y bebidas para humanos, el extracto de orégano o sus componentes volátiles está/están presentes convenientemente en una cantidad que va desde aproximadamente 0,0001 (1 mg/kg) a aproximadamente 5% en peso (50 g/kg), con preferencia desde aproximadamente 0,001% (10 mg/kg) a aproximadamente 1% en peso (10 g/kg), de modo más preferible desde aproximadamente 0,01 (100
50 mg/kg) a aproximadamente 0,5% en peso (5 g/kg) basado en el peso total del alimento o bebida. Para alivio de los síntomas asociados con condiciones como las definidas anteriormente, el producto alimenticio se toma una o dos veces al día al menos durante 1 a 3 semanas o sobre una base regular, es decir al menos una vez al día.
En los alimentos y bebidas en una realización preferida de la invención, la cantidad del extracto de orégano o sus componentes volátiles es/son 10 a 30 mg por servicio, es decir 120 mg por kg de alimento o bebida. El producto
55 alimenticio se toma una o dos veces al día al menos durante 1 a 3 semanas o preferiblemente sobre una base regular de al menos una vez al día.
Para los animales con exclusión de los humanos, una dosis diaria adecuada de un extracto de orégano o sus componentes volátiles, para los propósitos de la presente invención puede estar comprendida dentro del intervalo que va desde 0,001 mg/kg de peso corporal a aproximadamente 1000 mg por kg de peso corporal al día. Es más preferida una dosis diaria de aproximadamente 0,1 mg a aproximadamente 500 mg por kg de peso corporal, y es especialmente preferida una dosis diaria de aproximadamente 1 mg a 100 mg por kg de peso corporal. Para prevenir y reducir los síntomas asociados con condiciones estresantes, tales como la cría de ganado para producción en gran escala y para la crianza industrial o piscicultura, el producto que contiene el extracto de orégano
o su/sus componentes volátiles se administra durante toda la vida del animal hasta su conducción al matadero. Especialmente en el caso en que los animales de granja, tales como aves de corral, ganado vacuno, ovejas, cabras y cerdos, especialmente ganado vacuno y cerdos, se transportan al matadero, aquéllos deberían administrarse en una dosis diaria de aproximadamente 3 a 800 mg/kg de peso corporal del extracto y/o sus componentes volátiles, preferiblemente durante el transporte, mas preferiblemente al menos 3 días antes del transporte y durante el transporte.
Para mascotas, en condiciones estresantes como en las granjas o albergues de animales o tiendas de mascotas, el producto debería administrarse daten al menos 1-3 semanas, o a lo largo de todo el periodo de crianza. En condiciones de estrés a corto plazo, tales como una separación durante días festivos, mantenimiento en "hoteles para animales", visitas a o permanencia en clínicas veterinarias, el producto puede administrarse al menos 3 días, y preferiblemente 7 días, antes del suceso estresante.
La invención se ilustra adicionalmente por los ejemplos que siguen.
Ejemplos
Ejemplo 1: Preparación de dos extractos de O. vulgare
En los ejemplos que siguen, "-se" hace referencia a extracto de orégano 1 tipo fenol, obtenido de, y "-to" hace referencia a extracto de orégano 2 de tipo terpineol, obtenidos ambos de Flavex, Alemania.
Hojas secas de O. vulgare se molieron y extrajeron con dióxido de carbono supercrítico. Los parámetros de extracción fueron como sigue: temperatura de 45ºC; presión de trabajo: 300 bar (-to) o 100 bar (-se); se necesitaron 17 kg (-to) y 15 kg (-se) de dióxido de carbono para 1 kg de material vegetal; los extractos se obtuvieron en el separador por estrangulación de la presión a 60 bar a 30ºC.
25 kg (-to) o 50 kg (-se) de material vegetal produjeron respectivamente 1 kg de extracto.
El extracto 1 tenía la composición siguiente (analizada por Cromatografía de Gases)
El contenido total de aceite esencial era 83% (las partes restantes son ceras vegetales)
Componentes volátiles: terpineno 0,2%, cimeno 2,6%, 4-terpineol 1,5%, timoquinona, 23%, timol 0,3%, carvacrol 62%, cariofileno 1,5%.
El extracto 2 (RV141-23) contenía 80-90% de aceite esencial con un contenido elevado de terpineoles que incluían trans-beta-terpineol 35-50%, cis-beta-terpineol 5-10%, 4-terpineol 8-12%, y una cantidad relativamente pequeña de fenoles que incluían timol 5-12%, carvacrol < 1%, basada en el contenido total de aceites esenciales.
Ejemplo 2: Preparación del extracto de orégano 3
Se extrajeron hojas de Origanum vulgare con una mixtura de disolventes constituida por metil-terc-butil-éter y metanol con la ratio en volumen 9:1.
Ejemplo 3: Preparación y composición del extracto de orégano 4 Flavex
Las hojas de orégano se preparó de acuerdo con el Ejemplo 1, extracto puro. Debido a un lote de recolección diferente, la composición era ligeramente diferente al extracto 1.
El contenido total de aceite esencial era 89,5% (las partes restantes son ceras vegetales)
Componentes volátiles: cimeno 7,8%, 4-terpineol 1,2%, timoquinona, 12,1%, timol 0,22%, carvacrol 68,5%, cariofileno 1,6%, limoneno 0,1%, linalol 0,77%, borneol 2,6%.
Ejemplo 4: Composición detallada de los extractos de orégano
Se prepararon extractos por destilación con vapor de hojas de orégano.
La composición era como sigue:
Método de análisis GC/MS 10
GC/MS
GC/MS
GC/MS
Carvacrol
Timoquinona Timol
p/p
p/p
p/p
Extracto 5 (especia Oregano dragon)
61,6 - 9,0
Extracto 6 (hierbas Yafa/Marruecos)
30,7 - 21,6
Extracto 7 (Aysun/Derial, Turquía)
64,9 - 0,3
Ejemplo 5: Inhibición de la absorción de serotonina por los extractos de orégano
Células HEK-293 que expresaban de manera estable el transportador de la reabsorción de serotonina humana (hSERT) se obtuvieron de R. Blakely, Vanderbilt University, EE.UU. Las células se dejaron crecer rutinariamente en Medio de Eagle Modificado de Dulbecco, adquirido de Bioconcept, Allschwil, Suiza, que contenía 10% de suero de 15 ternero fetal, penicilina, estreptomicina, L-glutamina y el antibiótico G418, y se sometieron a pases por tripsinación. Un día antes del ensayo, se sembraron las células en el medio arriba mencionado. Inmediatamente antes del ensayo, se reemplazó el medio por tampón de bicarbonato Krebs-Ringer, adquirido de Sigma Chemicals Ltd., suplementado con pargilina 35 μM, CaCl2 2,2 mM, ácido ascórbico 1 mM y ácido N-2-hidroxietilpiperazina-N'-2etanosulfónico 5 mM (tampón "Hepes"). La absorción de serotonina en las células se determinó por adición de
20 serotonina radiomarcada (3H) (Amersham Biosciences GE Healthcare, Slough, Reino Unido) a una concentración de 20 nM, e incubación durante 30 minutos a la temperatura ambiente. Después de la eliminación del marcador no incorporado por lavado suave 3 veces con el tampón anterior, se cuantificó la serotonina incorporada por recuento mediante centelleo de líquido.
La absorción de serotonina por el transportador era inhibida por el extracto de orégano de una manera dependiente
25 de la dosis. Los valores CI50 medidos para la inhibición de la absorción de serotonina por 3 extractos de orégano se muestran en la Tabla 1.
Tabla 1: Valores CI50 medidos para inhibición de la absorción de serotonina en células transfectadas HEK-293 por los extractos de orégano 1, 2 y 3, y sus componentes volátiles timol, carvacrol y timoquinol. Los datos se muestran como media ± s.e.m., donde la CI50 se expresa como μM para los compuestos simples y como μg/ml para los
30 extractos.
Sustancia
CI50 [μM o μg/ml] para absorción de serotonina tritiada
Extracto de Orégano 1
3,2 μg/ml ± 1,4
Extracto de Orégano 2
15,31 μg/ml ± 5,3
Extracto de Orégano 3
66,3 μg/ml ± 3,0
Extracto de Orégano 4
1,95 μg/ml ± 0,94 (n=3)
Extracto de Orégano 5
7,8 μg/ml
Extracto de Orégano 6
5,8 μg/ml
Extracto de Orégano 7
4,1 μg/ml
Timol
5,0 μM ± 0,4
Carvacrol
9,5 μM
Timoquinol
26,6 μM
Ejemplo 6: Inhibición de las Monoaminooxidasas por el extracto de orégano 1
Se utilizaron las aminas orgánicas p-tiramina o bencilamina como sustratos para las enzimas Monoamino-Oxidasa A (MAO-A) y B (MAO-B), respectivamente. El peróxido de hidrógeno (H2O2) producido por esta reacción se cuantificó 35 por reacción con ácido vainillínico, catalizado por peroxidasa de rábano picante (HRP).
Las reacciones se llevaron a cabo en placas de microtitulación de poliestireno. Las enzimas MAO (concentración final 2 U/ml) se mezclaron con p-tiramina (Sigma, concentración final 0,5 mM) o bencilamina (Sigma, concentración final 0,5 mM) en caso apropiado y la solución cromógena (que contenía ácido vainillínico (Fluka), 4-aminoantipirina (Fluka) y peroxidasa de rábano picante (Sigma, concentraciones finales 0,25 mM, 0,125 mM y 1 U/ml,
5 respectivamente) en tampón de fosfato de potasio 0,2 M de pH 7,6. Las reacciones se siguieron en un lector de absorbancia de placas de microtitulación, v.g. Spectramax M5 (Molecular Devices Corporation). Se tomaron lecturas de absorbancia a 495 nm cada 15 segundos durante 40 minutos y se calcularon las velocidades de reacción iniciales por regresión lineal utilizando SOFTmaxPro (Molecular Devices Corporation).
El efecto del extracto de orégano 1 sobre las enzimas monoamina-oxidasa se determinó por su inclusión en el
10 ensayo en un intervalo de concentraciones entre 0,03 y 100 μM durante 10 minutos antes de y durante la incubación con sustrato. Para determinar el efecto de los compuestos sobre la porción de la reacción catalizada con HRP, la enzima MAO se reemplazó por H2O2 (Molecular Probes, concentración final 0,2 mM). Las reacciones que contenían MAO-A y -B eran inhibidas ambas por el extracto de orégano 1 de una manera dependiente de la dosis, mientras que la reacción de control se mantenía inafectada. Los valores CI50 medidos para inhibición de la actividad de
15 monoaminooxidasa por el extracto de orégano 1 se muestran en la Tabla 2.
Tabla 2: Valores CI50 medidos para inhibición de las enzimas Monoamina-Oxidasa-A y -B por el extracto de orégano
1. Los datos se muestran como la media ± s.e.m.
Sustancia
CI50 [μg/ml] para Inhibición de MAO-A CI50 [mg/ml] para Inhibición de MAO-B
Extracto de Orégano 1
2,7 μg/ml ± 0,8 s.e.m. n=2 13,4 μg/ml ± 3,6 s.e.m. n=2
Ejemplo 7: Efecto del extracto de orégano 1 en el Test de Observación Primaria (Irwin) en el ratón
20 El método, que detecta la primera dosis tóxica, el intervalo de dosis activo y los efectos principales de una sustancia de test sobre el comportamiento y la función fisiológica, sigue el descrito por Irwin (Irwin S. 1968 Psychopharma. 13:222-257).
Se administró a ratones la sustancia de test y se observaron los animales en comparación simultánea con un grupo de control al que se administró vehículo (condiciones no ciegas). Se compararon 3 grupos tratados con el mismo
25 grupo de control en cualquier momento. Todos los animales comprendidos dentro de un grupo de tratamiento se observaron simultáneamente.
Las modificaciones de comportamiento, los síntomas fisiológicos y de neurotoxicidad, el diámetro de la pupila y la temperatura rectal se registraron de acuerdo con una parrilla de observación estandarizada derivada de la de Irwin. La parrilla contiene los apartados siguientes: letalidad*, convulsiones*, temblor*, Straub*, sedación, excitación,
30 andadura anormal* (bambolearse, andar de puntillas), saltos*, descoordinación motora*, contorsiones*, piloerección*, estereotipos* (olfateo, masticación, movimientos de la cabeza), sacudidas de la cabeza*, rascado*, respiración*, agresividad*, temblor, reactividad al tacto, tono muscular, pérdida del reflejo de enderezamiento, ptosis, exoftalmos, pérdida de agarre, acinesia, catalepsia, pérdida de tracción, pérdida de reflejo corneal, analgesia, defecación, salivación, lacrimación, diámetro de pupila (Unidad = 1/45 mm) y temperatura rectal.
35 Las observaciones se realizaron 15, 30, 60, 120 y 180 minutos después de la administración de la sustancia de test y también 24 horas más tarde. Los síntomas marcados (*) se observaron continuamente desde 0 a 15 minutos después de la administración. Se estudiaron 5 ratones por grupo. El extracto de orégano 4 se solubilizó en 3% (v/v) DMSO, 3% (v/v) Tween 80 en solución salina (0,9% p/v NaCl) y se inyectó en los ratones por vía intraperitoneal (i.p.).
40 Resultados
-
El extracto de orégano 1 a 3 mg/kg no inducia cambios adicionales de comportamiento, en comparación con el vehículo.
-
A 10 mg/kg, el mismo inducía una sedación ligera en 3 ratones y reducía el temor de 15 a 30 minutos en la totalidad de los 5 ratones.
45 -A 30 mg/kg, el extracto de orégano 1 inducía sedación ligera en 4 ó 5 ratones de 15 a 60 minutos, inducía temor en 3 ó 4 ratones desde 15 a 60 minutos y reducía el tono muscular en 1 a 5 ratones de 30 a 60 minutos.
-
A 100 mg/kg, el extracto de orégano 1 inducía sedación que era ligera a acusada en 4 ó 5 ratones desde los 15 a los 180 minutos y ligera en 1 ratón a las 24 horas. El mismo reducía el temor en 4 ó 5 ratones desde los 15 a 180 minutos, reducía la reactividad al tacto en 4 ratones desde los 60 a los 180 minutos y reducía el tono muscular en 3 ó 4 ratones desde los 30 minutos a las 24 horas.
Así pues, el extracto de orégano 1 exhibía un efecto sedante relajante moderado y dependiente de la dosis, y reducía el temor.
5 Ejemplo 8: Test de Natación de Porsolt
El "test de Comportamiento Desesperado" o "Test de Natación Forzada de Porsolt" es un modelo animal validado para la depresión (véase Nagatsu, 2004 NeuroTox., 25: 11-20, y Porsolt et al., 1977 Arch. Int. Pharmacodyn. 229: 327-336). El mismo responde a la mejora de la transmisión de varios neurotransmisores que incluyen serotonina, dopamina y noradrenalina.
10 El test, que detecta la actividad antidepresiva, se llevó a cabo como ha sido descrito por Porsolt et al supra. Los ratones que se ven obligados a nadar en una situación de la cual no pueden escapar se vuelven rápidamente inmóviles. Los antidepresivos reducen la duración de la inmovilidad.
Los ratones se pusieron individualmente en cilindros (altura = 24 cm, diámetro = 13 cm) que contenían 10 cm de agua (22ºC) de la cual no podían escapar. Los ratones se pusieron en el agua durante 6 minutos y se midió la
15 duración de la inmovilidad durante los 4 últimos minutos.
Se estudiaron 15 ratones por cada uno de los 4 grupos. El test se realizó a ciegas, es decir que la persona que realizaba el experimento era distinta de la persona que inyectaba a los ratones y por consiguiente no conocía a cuál de los 4 grupos pertenecía cada ratón.
El extracto de orégano 1 se evaluó a 3 dosis (10, 30 y 60 mg/kg), administrado i.p. 30 minutos antes del test, y se
20 comparó con un grupo de control, al que se administró vehículo de igual manera. El extracto de orégano 4 así administrado se disolvió en vehículo (solución salina que contenía 3% (v/v) de DMSO y 3% (v/v) de Tween® 80). Se administraron venlafaxina (16 mg/kg, i.p.), como sustancia de comparación, e imipramina (32 mg/kg, i.p.), como compuesto de referencia, en las mismas condiciones experimentales.
Los datos se analizaron por comparación de los grupos tratados con el grupo de control utilizando test de Student no 25 apareados, y se presentan en la Tabla 3.
Tabla 3: Reducción del "tiempo de inmovilidad" con concentración creciente de extracto de orégano 1.
TRATAMIENTO (mg/kg) i.p., -30 min
DURACIÓN DE LA INMOVILIDAD (s)
Media ± s.e.m.
% Cambio respecto al control
Vehículo
164,7 ± 7,6 - -
Extracto de orégano 1 (10) Extracto de orégano 1 (30) Extracto de orégano 1 (60)
163,7 ± 10,3 137,1 ± 9,5 125,6 ± 6,5 -1% -17% -24% NS * ***
Venlafaxina (16)
80,1 ± 11,1 -51% ***
Imipramina (32)
49,7 ± 7,9 -70% ***
15 ratones por grupo
Test t de Student: NS = no significativo; * = p < 0,05; *** = p < 0,001
30 Así pues, el extracto de orégano 1 reducía significativamente el tiempo de inmovilidad comparado con el grupo de control, en 17% y 24% en los grupos de dosis intermedia y máxima, respectivamente. En su conjunto, se registraba un efecto significativo dependiente de la dosis del extracto de orégano 1. Imipramina (32 mg/kg i.p.) y venlafaxina (16 mg/kg, i.p.), administradas en las mismas condiciones experimentales, reducían significativamente el comportamiento de inmovilidad, en comparación con el control de vehículo (-70% y -51%, respectivamente, p <
35 0,001).
Estos resultados demuestran que el extracto de orégano 1 (60 mg/kg, i.p.) tiene una eficacia similar que el antidepresivo tricíclico imipramina, y el SNRI, venlafaxina, en su capacidad para reducir significativamente el comportamiento relacionado con la depresión.
Ejemplo 9: Test de Enterramiento de Canicas como Test de comportamiento de tipo ansiedad u obsesivo40 compulsivo
Behavior 1979, 31:299-306) o pinchazos de choque (Pinel et al 1978, J. Comp.Physiol. Psych. 92:708-712). El test de enterramiento de canicas se ideó como una modificación de dicho test. Poling et al. 1981 J. Exp. Anal. Behavior 1981, 35:31-44) expusieron ratas a jaulas individuales cada una de las cuales contenía 25 canicas, diariamente durante 10 ó 21 días consecutivos. Se contó el número de canicas enterradas, cada día del periodo de 10 días, o 24 horas después de la exposición durante 21 días. Los autores consignaban que el enterramiento de canicas no estaba determinado por la novedad, o debido a ningún estímulo nocivo.
Se ha comunicado que el comportamiento de enterramiento de canicas por los ratones es sensible a una gama de tranquilizantes menores (v.g. diazepam) y mayores (v.g. haloperidol) (Broekkamp et al., 1986 Eur. J. Pharmacol. 126:223-229), además de los SSRIs (v.g. fluvoxamina, fluoxetina, citalopram), antidepresivos tricíclicos (v.g. imipramina, desipramina) e inhibidores selectivos de la absorción de noradrenalina (v.g. reboxetina), a dosis que no inducen sedación. El modelo puede reflejar comportamiento de tipo ansiedad o comportamiento obsesivocompulsivo (véase De Boer et al, 2003 Eur. J. Pharma. 463:145-161).
El método aplicado aquí sigue el descrito por Broekkamp et al., 1986, supra. Los ratones (n = 15 por grupo de tratamiento) se pusieron individualmente en jaulas de plástico transparentes (33 x 21 x 18 cm) con 5 cm de serrín en el suelo y 25 canicas (de 1 cm de diámetro) agrupadas en el centro de la jaula. Una segunda jaula, puesta boca abajo, servía como tapa. El número de canicas cubiertas por el serrín (al menos en sus dos terceras partes) se contó al final del periodo de test de 30 minutos. Los tests fueron realizados por investigadores ciegos al protocolo de tratamiento con fármacos.
Antes del test, la totalidad de las jaulas y canicas se "impregnaron" dejando 10 ratones naíf en cada jaula durante 15 minutos.
Se evaluó el extracto de orégano 1 a 10, 30 y 60 mg/kg, administrados i.p. 30 minutos antes del test, y se comparó con un grupo de control de vehículo. El extracto de orégano 1 se disolvió en una soll8ución salina que contenía 3% (v/v) de DMSO y 3% (v/v) de Tween® 80 “vehículo”. Se administró vehículo al grupo de control del mismo modo, mientras que se utilizó fluoxetina (32 mg/kg) como sustancia de referencia, administrada en las mismas condiciones experimentales. Los datos se analizaron por comparación de los grupos tratados con el control de vehículo utilizando tests t de Student no apareados.
Resultados:
Tabla 4: Efectos del extracto de orégano 1 y fluoxetina en el test de enterramiento de canicas en los ratones
TRATAMIENTO (mg/kg) i.p., -30 min
NÚMERO DE CANICAS CUBIERTAS POR SERRÍN
Media ± s.e.m.
% Cambio respecto al control
Vehículo
21,2 ±1,6 --
Extracto de orégano 1 (10) Extracto de orégano 1 (30) Extracto de orégano 1 (60)
12,7 ± 2,7 5,8 ± 2,6 6,9 ± 2,6 -40% * -73 % *** -67 % ***
Venlafaxina (16) Fluoxetina (32)
0,5 ± 0,3 1,4 ± 1,0 -98 % *** -93 % ***
15 ratones por grupo
Test t de Student: NS = no significativo; * = p < 0,05; *** = p < 0,001
El extracto de orégano 1 (10, 30 y 60 mg/kg), administrado i.p. 30 minutos antes del test, reducía de manera dependiente de la dosis el número de canicas cubiertas, en comparación con el control de vehículo de control (40%, p < 0,05, -73%, p < 0,001 y -67%, p < 0,001, respectivamente).
Fluoxetina (32 mg/kg i.p.) y venlafaxina (16 mg/kg, i.p.), administradas en las mismas condiciones experimentales, anulaban prácticamente el enterramiento de las canicas, en comparación con el control de vehículo (-93% y -98%, respectivamente, p < 0,001).
Estos resultados demuestran que el extracto de orégano 1 tiene una eficacia similar al SSRI, fluoxetina, y al SNRI, venlafaxina, en su capacidad para reducir significativamente el comportamiento de ansiedad/obsesivo-compulsivo.
Ejemplo 10: Efecto del Extracto de Orégano 1 en el Test de la Jaula Iluminada-Oscura en el Ratón
El método, que detecta actividad ansiolítica, sigue el descrito por Crawley, 1981 Pharmacol. Biochem. Behav., 15:695-699. Los ansiolíticos aumentan el tiempo pasado en el compartimiento iluminado.
Los animales se pusieron en el compartimento iluminado de una jaula de 2 compartimientos, con una mitad iluminada y abierta (25 x 27 x 27 cm) y la otra mitad oscura y cerrada (20 x 27 x 27 cm). El tiempo pasado en cada 5 compartimiento, así como el número de veces que el animal cruza de un lado al otro, se registra durante un test de 3 minutos. Se estudiaron 15 ratones por grupo. El test se realizó a ciegas.
El extracto de orégano 1 se evaluó a 3 dosis (10, 30 y 60 mg/kg), administradas i.p. 30 minutos antes del test, y se comparó con un control de vehículo. El extracto de orégano 1 se disolvió en una solución salina que contenía 3% (v/v) de DMSO y 3% (v/v) de Tween® 80 ("vehículo"). Se administró vehículo al grupo de control, se utilizó
10 venlafaxina (16 mg/kg i.p.) como sustancia de comparación y se utilizó clobazam (16 mg/kg, i.p.) como sustancia de referencia, administrándose todos ellos i.p., 30 minutos antes del test.
Tabla 5: Resultado del Test de la Jaula Iluminada-Oscura en el ratón
TRATAMIENTO (mg/kg) i.p. -30 min
TIEMPO PASADO EN EL COMPARTIMIENTO ILUMINADO (s) NÚMERO DE CRUZAMIENTOS
media ± s.e.m.
% cambio respecto al control media ± s.e.m. % cambio respecto al control
Vehículo
55,3 ± 6,3 - 4,7 ± 1,1 -
Extracto de orégano 1 (10) Extracto de orégano 1 (30) Extracto de orégano 1 (60)
70,7 ± 7,5 56,8 ± 5,8 74,9 ± 7,2 NS +28% NS +3% NS +35% 7,1 ± 0,9 3,2 ± 0,7 3,5 ± 0,6 NS +51% NS -32% NS -26%
Venlafaxina (16)
55,2 ± 9,3 NS 0% 4,4 ± 0,9 NS -6%
Clobazam (16)
118,4 ± 3,4 *** +114% 7,9 ± 0,9 * +68%
15 ratones por grupo Test t de Student: NS = no significativo; * = p < 0,05; *** = p < 0,001
El extracto de orégano 1 a 10 y 60 mg/kg aumentaba el tiempo pasado en el compartimiento iluminado, en
15 comparación con el control de vehículo (+28%, y +35%, p = 0,0506 respectivamente, próximo a la significación). El mismo tendía a aumentar el número de cruzamientos a 10 mg/kg (+51%, p = 0,0888) pero no tenía efecto claro alguno a 30 y 60 mg/kg. Así pues, puede suponerse que el extracto de orégano 1 tiene un efecto ansiolítico moderado, tal como se mide en el test de la jaula iluminada-oscura en el ratón.
Ejemplo 11: Efecto del extracto de orégano 4 en el test de natación forzada de Porsolt en el ratón después 20 de alimentación oral por sonda esofágica subcrónica
Este test, que detecta la actividad antidepresiva, se realizó del mismo modo que se describe en el ejemplo 7, excepto que la ruta de administración del compuesto y las dosis eran diferentes. El extracto de orégano 4 se evaluó a 3 dosis (75, 150 y 300 mg/kg), administradas por vía oral (p.o.) 24, 5, y 1 hora antes del test, y se comparó con un grupo de control de vehículo. El extracto de orégano 1 así administrado se disolvió en "vehículo" de aceite de maíz
25 exento de tocoferol). Se administró vehículo (p.o.) al grupo de control, mientras que se administró imipramina (32 mg/kg), p.o.; disuelta en agua) a un grupo separado como compuesto de referencia, 24, 5 y 1 hora antes del test.
Los ratones se pusieron individualmente en cilindros (altura = 24,5 cm, diámetro = 19,5 cm) que contenían 13,5 cm de agua (22ºC) de la que no podían escapar. Los ratones se dejaron en el agua durante 6 minutos, se examinaron automáticamente mediante una cámara de vídeo y se monitorizaron por un sistema de software disponible
30 comercialmente (VideoMot2, TSE Systems GmbH, Alemania), y se midió la duración de la inmovilidad durante los últimos 4 minutos.
Se estudiaron 10 ratones por cada uno de los 5 grupos. Los datos se analizaron por comparación de los grupos tratados y el grupo de control positivo con el grupo de vehículo utilizando el Análisis de la Varianza (ANOVA) y el test post-hoc de Bonferroni.
35 Tabla 6: Resultados del test de natación forzada en el ratón después de administración subcrónica de 3 concentraciones del extracto de orégano 1.
TRATAMIENTO
DURACIÓN DE LA INMOVILIDAD (s)
(mg/kg) p.o.., -24, -5, -1 h
Media ± s.e.m. % cambio respecto al control
Vehículo
129,35 ± 11,10 --
Extracto de orégano 1(75) Extracto de orégano 1(150) Extracto de orégano 1 (300)
76,74 ± 46,02 87,79 ± 14,08 102,06 ± 13,69 -41 % * -32 % * -21 % NS
Imipramina (32)
64,59 ± 8,26 -50 % ***
10 ratones por grupo
Test t de Student: NS = no significativo; * = p < 0,05; *** = p < 0,001
Así pues, el extracto de orégano 4 reducía significativamente el tiempo de inmovilidad, comparado con el grupo de
5 control, en 41% y 32% respectivamente en los grupos de dosis baja e intermedia. Globalmente, se apreciaba un efecto significativo del extracto de orégano 4. La imipramina (32 mg/kg i.p.) administrada en las mismas condiciones experimentales, reducía significativamente el comportamiento de inmovilidad, en comparación con el control de vehículo (-50%, p < 0,001).
Estos resultados demuestran que el extracto de orégano 4 (75 y 150 mg/kg, p.o.) tiene una eficacia similar al
10 antidepresivo tricíclico imipramina, en su capacidad para reducir significativamente el comportamiento relacionado con la depresión.
Ejemplo 12: Efecto del extracto de orégano 4 sobre los niveles de serotonina en el hipocampo medidos por microdiálisis in vivo
Ratas macho Sprague-Dawley (250-320 g) se alojaron en grupos de 4-5 en condiciones de temperatura (21 ± 2ºC) y
15 humedad (55 ± 10%) controladas con acceso libre a comida y agua (con las luces encendidas desde las 07,00 a las 19,00). Las ratas se anestesiaron utilizando hidrato de cloral (400 mg/kg i.p.) y con una sonda simple de microdiálisis (BASi tipo MD2200, membrana de 2 mm, punto de corte 30.000 Daltons) implantada en el hipocampo dorsal utilizando un marco estereotáxico en las coordenadas siguientes (rostro-caudal -4,5 mm; medio-lateral -2,5 mm; dorso-ventral -4,5 mm del bregma y la superficie de la duramadre de acuerdo con Paxinos & Watson 6) y fijada
20 en posición con cemento dental. La temperatura corporal se mantuvo a 36ºC utilizando una almohadilla de calentamiento y se monitorizó por medio de un termómetro rectal digital. La sonda de microdiálisis se sometió a perfusión con fluido cerebroespinal artificial (aCSF) a 1 μl/min y los niveles extracelulares de monoaminas se determinaron por recogida de muestras de medio perfundido cada 15 min y se ensayaron utilizando cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) con detección electroquímica.
25 La fase móvil de la HPLC (EDTA 0,5 M, ácido monocloroacético 0,1 M de pH 3,1, 0,15 g/l de octil-sulfato de sodio, 5% de acetonitrilo, 0,7% de tetrahidrofurano) se bombeó a través del sistema a 70 μl/min. Se separaron las monoaminas utilizando una columna capilar de fase inversa de 1 x 100 mm ODS 3 mm con bucle de inyección de 5 μl y se detectaron utilizando un detector electroquímico epsilon (BASi) con un electrodo vítreo de carbono ajustado a +650 mV frente a un electrodo de referencia Ag/AgCl. Se identificaron los picos de dializado por comparación de los
30 tiempos de elución de pico con estándares de referencia y se cuantificaron de acuerdo con la medida del área de pico utilizando análisis de regresión lineal. Los límites de detección para 5HT y 5 HIAA se definieron como la cantidad de muestra que producía un área de pico doble del ruido de fondo por unidad de tiempo y eran aproximadamente 0,1 fmol/muestra en ambos casos.
Los estudios preliminares demostraron que después de la implantación de la sonda de diálisis, el nivel de 5HT era
35 inicialmente alto debido a la liberación de plaquetas activadas por la coagulación de la sangre causada por la cirugía, pero dentro de 150 minutos de la terminación de la cirugía el nivel basal de 5HT era prácticamente constante. Por esta razón, las inyecciones se administraron rutinariamente a 150, 210 y 270 min después de la cirugía y se recogieron muestras de perfundido hasta 60 minutos después de la inyección final.
Para ensayo de rutina, se prepararon dos ratas, una de las cuales se utilizó para testar el extracto de orégano y la
40 otra como muestra de control (vehículo). Debido a la variabilidad de la liberación basal de 5HT entre los ensayos y la variabilidad en la eficiencia de las sondas de microdiálisis para detectar 5HT en el fluido extracelular, estos datos se normalizaron de acuerdo con los dos valores obtenidos inmediatamente antes de la primera inyección (es decir las muestras en los momentos de 135 y 150 min). Los datos procedentes de estudios replicados para cada compuesto se expresan por tanto como % del nivel basal, como es la práctica normal para los estudios de microdiálisis. A fin de determinar el efecto de cada dosis del extracto sobre la cantidad total de 5HT liberada, se estimó el área bajo la curva (AUC) utilizando el método del trapecio a lo largo del periodo de muestreo subsiguiente a cada administración de la dosis y se compararon los valores para el compuesto de ensayo/extracto con el control apropiado por ANOVA de dos vías (siendo los factores de test Tratamiento y Dosis) seguido por comparaciones post-hoc a dosis
5 individuales utilizando el test t de Bonferroni. Todos los análisis estadísticos se realizaron utilizando Graphpad Prism.
El extracto de orégano 4 (10, 30 y 60 mg/kg, i.p.) se disolvió en solución salina que contenía 0,2% (p/v) de hidroxipropilmetilcelulosa, mientras que el compuesto de referencia, fluoxetina (3, 10 y 30 mg/kg, i.p.) se disolvió en solución salina. Se investigaron adicionalmente 2 grupos de control, a los que se administraron solución salina que
10 contenía 0,2% (p/v) de hidroxipropilmetilcelulosa o solución salina sola, respectivamente.
Tabla 7: Efecto del Extracto de Orégano 1 sobre 5HT acumulativa en cada periodo de dosificación y expresado con relación al nivel basal de 5HT medido inmediatamente antes de la inyección de la primero dosis de compuesto. Las inyecciones se realizaron a los 150, 210 y 270 min después de la cirugía. La dosis de cada compuesto se expresa como mg/kg. Los datos se expresan como la media ± s.e.m. (n = 5-6). El análisis estadístico para cada dosis de 15 compuesto se compara contra el periodo de tiempo correspondiente para el vehículo apropiado, sea solución salina
o solución salina + 0,2% de hidroxipropilmetilcelulosa, utilizando el test t de Bonferroni y para cada compuesto globalmente por ANOVA de dos vías.
TRATAMIENTO (mg/kg)
Tiempo de inyección después de la cirugía (min) 5-HT LEVEL (% basal)
Media ± s.e.m.
Significación estadística
Solución salina
150 210 270 84 ± 4 71 ± 9 65 ± 7
0,2 % (p/v) hidroxipropilmetil celulosa en solución salina
150 210 270 80 ± 7 68 ± 4 67 ± 5
Extracto de orégano 4 (10) Extracto de orégano 4 (30) Extracto de orégano 4 (60)
150 210 270 88 ± 3 82 ± 5 75 ± 5 † † †
Fluoxetina (3) Fluoxetina (10) Fluoxetina (30)
150 210 270 85 ± 4 131 ± 9 160 ± 7 ††† ††† ††† *** ***
5 - 6 ratas por grupo ANOVA de dos vías: frente a grupo de control de solución salina, global; †p < 0,05, †††p < 0,001 Test post-hoc de Bonferroni: frente a grupo de control de solución salina; ***p < 0,001

Ejemplo 13: Inhibición de la absorción de dopamina por el extracto de orégano 1
La estimación de la liberación acumulativa de 5HT medida como AUC en los 60 min después de la administración
20 de cada dosis de tratamiento (Tabla 7) tal como se analizó por ANOVA de dos vías indicaba también un efecto global significativo del tratamiento con extracto de orégano 4 (F(1,30) = 5,61; p < 0,05).
Las acciones de varios neurotransmisores, con inclusión de dopamina, están reguladas por su absorción y aclaramiento rápidos de las juntas sinápticas por las proteínas de transporte de la membrana plasmática. El 25 transportador de dopamina en las neuronas dopaminérgicas centrales es responsable de la recuperación de hasta 90% del neurotransmisor liberado. Los transportadores de monoaminas son dianas de afinidad alta para cierto número de agentes psicoactivos tales como cocaína, anfetamina, y antidepresivos. Estos agentes, por bloqueo de los transportadores y prevención consiguiente de la absorción neuronal, elevan los niveles de concentración de neurotransmisores extracelulares tanto en el sistema nervioso central como en el periférico, contribuyendo a sus
30 efectos de comportamiento y autonómicos.
Células CHO-Ki/hDAT, que expresaban el transportador de dopamina humano (hDAT) se extendieron en placas antes del ensayo. Las células (2 x 105/ml) se incubaron con extracto de orégano y/o vehículo en tampón Tris-HEPES modificado de pH 7,1 a 25ºC durante 20 minutos antes de la adición de [3H]dopamina 50 nM durante 10 minutos. La señal específica se determinó en presencia de nomifensina 10 μM. Las células se solubilizaron luego con tampón de lisis SDS al 1%. La reducción de la absorción de [3H]dopamina en 50% o más (≥ 50%) con relación a los controles de vehículo indica una actividad inhibidora significativa. Los compuestos puros (nomifensina timoquinol) se cribaron a 10 concentraciones hasta 100 μM: 0,00316, 0,01, 0,0316, 0,1, 0,316, 1, 3,16, 10, 31,6 y 100 μM. El extracto de orégano se cribó a 10 concentraciones hasta 100 μg/ml: 0,00316, 0,01, 0,0316, 0,1, 0,316, 1,
5 3,16, 10, 31,6 y 100 μg/ml. Estas mismas concentraciones se aplicaron simultáneamente a un grupo separado de células sin tratar y se evaluaron respecto a posible citotoxicidad inducida por el compuesto únicamente si se observaba una inhibición significativa de la absorción.
Tabla 8: Valores CI50 medidos para inhibición de la reabsorción de dopamina en células CHO-Ki transfectadas por el extracto de orégano 1, y su componente volátil timoquinol. Los datos se representan como media ± s.e.m., donde la
10 CI50 se expresa como μM (o nM) para los compuestos individuales y como μg/ml para el extracto de orégano.
Compuesto
CI50
*Nomifensina
11 nM
Timoquinol
65,6 ± 1,2 μM (n=2)*
Extracto de orégano 1
6,3 μg/ml
* Indica el agente estándar de referencia utilizado.
Referencias:
Giros, et al. 1992 Mol. Pharmacol. 42: 383-390 15 Pristupa, et al 1994 Mol. Pharmacol. 45:125-135
Ejemplo 14: Inhibición de la absorción de noradrenalina por el extracto de orégano
Las acciones de varios neurotransmisores, con inclusión de noradrenalina, están reguladas por su absorción y aclaramiento rápidos de las juntas sinápticas por las proteínas de transporte de la membrana plasmática. El 20 transportador noradrenalina en las neuronas adrenérgicas centrales es responsable de la recuperación de hasta el 90% de neurotransmisor liberado. Los transportadores de monoaminas son dianas de alta afinidad para varios agentes psicoactivos tales como cocaína, anfetamina, y antidepresivos. Estos agentes, por bloqueo de los transportadores y prevención consiguiente de la absorción neuronal, elevan los niveles de concentración de neurotransmisores extracelulares tanto en el sistema nervioso central como en el periférico, contribuyendo a sus
25 efectos de comportamiento y autonómicos.
Células MDCK de riñón de perro que expresaban de manera estable el transportador de noradrenalina humana recombinante se extendieron en placas un día antes del ensayo. Las células (2 x 105/ml) se preincubaron con el extracto de orégano y/o vehículo en tampón Tri-HEPES modificado de pH 7,1 a 25ºC durante 20 minutos, después de lo cual se añadió [3H]noradrenalina 25 nM para incubación durante 10 minutos. Las células contenidas en el 30 pocillo se lavaron luego dos veces, se solubilizaron con tampón de lisis SDS al 1% y el lisado se sometió a recuento para determinar la absorción de [3H]noradrenalina. La señal específica se determinó en presencia de desipramina 10 μM. La reducción de la absorción de [3H]noradrenalina en un 50% o más (≥ 50%) con relación a los controles de vehículo indica una actividad inhibidora significativa. Los compuestos puros (desipramina) se escrutaron a 10 concentraciones hasta 100 μM: 0,00316, 0,01, 0,0316, 0,1, 0,316, 1, 3,16, 10, 31,6 y 100 μM. El extracto de orégano
35 1 se cribó a 10 concentraciones hasta 100 μg/ml: 0,00316, 0,01, 0,0316, 0,1, 0,316, 1, 3,16, 10, 31,6 y 100 μg/ml. Estas mismas concentraciones se aplicaron concurrentemente a un grupo separado de células sin tratar y se evaluaron respecto a posible citotoxicidad inducida por el compuesto únicamente si se observaba una inhibición significativa de la absorción.
Tabla 9: Valores CI50 medidos para inhibición de la reabsorción de noradrenalina en células MDCK transfectadas 40 por el extracto de orégano 1. Los datos se presentan como media ± s.e.m., donde la CI50 se expresa como nM para los compuestos individuales y como μg/ml para el extracto de orégano.
Inhibidor
CI50
*Desipramina
1,9 nM
Extracto de orégano
13,6 μg/ml
* Indica el agente estándar de referencia utilizado. Referencia:
45 Galli, et al. 1995. J. Exp. Biol. 198: 2197-2212 Las concentraciones de carvacrol "libre" (aglicona) y carvacrol "total" (aglicona + forma conjugada) se determinaron en 64 muestras de plasma de rata. Cuatro ratas macho y cuatro ratas hembra recibieron una sola dosis de 800 mg de extracto de orégano 4 por kg de peso corporal por sonda esofágica oral, respectivamente. La solución de aplicación se preparó en aceite de maíz a una concentración de 200 mg de extracto por gramo de formulación. Se
5 recogieron muestras de plasma a las 0, 0,5, 1, 2, 3, 4, 6, 8, 24 horas y 48 horas (terminal) después de la aplicación por sonda esofágica de al menos 3 animales macho y 3 animales hembra.
El análisis de las muestras se realizó con un sistema de cromatografía líquida - espectrometría de masas en tándem (LC/MS/MS), utilizando un sistema de cambio de columna para purificación y desalado en línea de las muestras.
Después de la adición del estándar interno (D2-timol) y la precipitación de la proteína (en el caso del analito "libre") o
10 pre-digestión por β-glucuronidasa seguida por precipitación de la proteína (en el caso del analito "total"), las muestras se inyectaron en una columna de guarda Waters XTerra™ MS C18 utilizada como columna de purificación, y se transfirieron luego a una columna Waters XTerra™ MS C18. La detección se realizó utilizando espectrometría de masas en tándem en modo MRM.
Las muestras de calibración y control de calidad se prepararon en solución de suero de albúmina bovina al 5% y
15 plasma humano. Se controló el comportamiento día a día con los resultados de las muestras de control de calidad (QC) dentro de cada lote analítico. El límite inferior de cuantificación se ajustó a 10,0 ng/ml para carvacrol "libre" y 20,0 ng/ml para carvacrol "total".
Se realizó un estudio cinético después de la administración oral del extracto de orégano 4 a las ratas macho y hembra.
20 El objetivo de este estudio analítico era la determinación de las concentraciones "libre" y "total" de carvacrol en las muestras de plasma de rata. Se analizaron con buen resultado un total de 64 muestras.
Se recogieron las muestras de plasma en momentos diferentes después de la aplicación de la sonda esofágica. La dosis administrada era 800 mg/kg de extracto de orégano 4 en aceite de maíz.
Las concentraciones de carvacrol "libre" medidas variaban desde indetectable a 50.100 ng/ml, y las concentraciones 25 de carvacrol "total" desde indetectable a 50.000 ng/ml.
Tabla 10: Determinación de carvacrol libre y total en muestras de plasma de ratas hembra ND* no detectada
Número ID
Nombre de la Muestra (Sexo / # Rata / Tiempo) Carvacrol Libre (ng/ml) Carvacrol Total (ng/ml)
1
F 1 0 *ND *ND
2
F 1 0,5 30,9 2160
3
F 1 1 192 4220
4
F 1 2 64,3 829
5
F 1 3 128 3540
6
F 1 4 246 4480
7
F 1 6 135 4000
8
F 1 8 159 3810
9
F 1 24 127 5850
10
F 1 Terminal (48h) *ND <LOQ =20,0 ng/ml
11
F 2 0 *ND *ND
12
F 2 0,5 5120 14800
13
F 2 1 6050 18600
14
F 2 2 840 3550
15
F 2 3 228 1780
16
F 2 4 102 1160
17
F 2 6 91,9 1920
18
F 2 8 1630 6800
19
F 2 24 8,91 1530
20
F 2 Terminal (48h) *ND <LOQ =20,0 ng/ml
21
F 3 0 *ND *ND
22
F 3 0,5 4090 11000
23
F 3 1 3610 10000
24
F 3 2 1360 6470
25
F 3 3 174 1360
26
F 3 4 50,3 928
27
F 3 6 48,3 1140
28
F 3 8 <LOQ = 10,0 ng/ml 541
29
F 3 24 <LOQ = 10,0 ng/ml 1680
30
F 3 Terminal (48h) *ND <LOQ =20,0 ng/ml
31
F 4 0 *ND <LOQ =20,0 ng/ml
32
F 4 0,5 50100 50000
LOQ* por debajo del límite inferior de cuantificación: LOQ* (carvacrol libre) = 10,0 ng/ml LOQ* (carvacrol total) = 20,0 ng/ml
Tabla 11: Determinación de carvacrol libre y total en muestras de plasma de ratas macho ND* no detectada
Número ID
Nombre de la Muestra (Sexo / # Rata / Tiempo) Carvacrol Libre (ng/ml) Carvacrol Total (ng/ml)
33
M 1 0 *ND *ND
34
M 1 0,5 1320 18700
35
M 1 1 1820 25200
36
M 1 2 199 5590
37
M t 3 51,5 3010
38
M 1 4 30,4 2750
39
M 1 6 83,4 6290
40
M 1 8 185 8610
41
M 1 24 68,1 8460
42
M 1 Terminal (48h) *ND <LOQ = 20,0 ng/ml
43
M 2 0 *ND *ND
44
M 2 0,5 1530 11100
45
M 2 1 1790 13500
46
M 2 2 166 1260
47
M 2 3 58,4 665
48
M 2 4 40 1040
49
M 2 6 980 8080
50
M 2 8 156 2780
51
M 2 24 <LOQ = 10,0 ng/ml 1820
52
M 2 Terminal (48h) *ND <LOQ = 20,0 ng/ml
53
M 3 0 *ND *ND
54
M 3 0,5 103 2310
55
M 3 1 1150 8550
56
M 3 2 584 6380
57
M 3 3 1580 11200
58
M 3 4 316 2900
59
M 3 6 100 2040
60
M 3 8 140 3630
61
M 3 24 <LOQ = 10,0 ng/ml 2750
62
M 3 Terminal (48h) *ND <LOQ = 20,0 ng/ml
63
M 4 0 *ND *ND
64
M 4 0,5 55,9 4960

Ejemplo 16: Preparación de una cápsula de gelatina blanda
LOQ* por debajo del límite inferior de cuantificación: LOQ* (carvacrol libre) = 10,0 ng/ml LOQ* (carvacrol total) = 20,0 ng/ml
Puede prepararse una cápsula de gelatina blanda que comprende los ingredientes siguientes:
Ingrediente
Cantidad por Cápsula
Extracto de Orégano
500 mg
Lecitina
50 mg
Aceite de soja
250 mg
Pueden administrarse dos cápsulas por día durante 3 meses a un adulto humano para el tratamiento de la distimia crónica leve. 10 Ejemplo 17: Preparación de una cápsula de gelatina blanda Puede prepararse una cápsula de gelatina blanda que comprende los ingredientes siguientes:
Ingrediente
Cantidad por Cápsula
Extracto de Orégano
200 mg
Aceite de primavera de noche
300 mg
Vitamina B6
100 mg
Puede tomarse una cápsula por día, preferiblemente durante la segunda mitad del ciclo menstrual, durante 14 días para el tratamiento del síndrome premenstrual y el trastorno disfórico premenstrual.
15 Ejemplo 18: Preparación de un refresco instantáneo aromatizado
Ingrediente
Cantidad [g]
Extracto de Orégano
0,9
Sacarosa, polvo fino
922,7
Ácido ascórbico, polvo fino
2,0
Ácido cítrico, polvo anhidro
55,0
Esencia de limón
8,0
Citrato trisódico, polvo anhidro
6,0
Fosfato tricálcico
5,0
β-Caroteno 1% CWS de DNP AG, Kaiseraugst, Suiza
0,4
Cantidad total
1000
Se mezclan Todos los ingredientes y se tamizan a través de un tamiz de 500 μm. El polvo resultante se pone en un recipiente apropiado y se mezcla en un mezclador tubular durante al menos 20 minutos. Para preparación de la bebida, se mezclan 125 g del polvo mixto obtenido con agua suficiente para producir 1 litro de bebida.
El refresco listo para beber contiene aprox. 30 mg de extracto de orégano por servicio (250 ml). Como reforzador y para bienestar general se recomiendan 2 servicios por día (240 ml).
Ejemplo 19: Preparación de una barra de cereales reforzada no horneada
Ingrediente
Cantidad [g]
Extracto de Orégano
0,95
Azúcar
114,55
Agua
54,0
Sal
1,5
Jarabe de glucosa
130,0
Jarabe de azúcar invertido
95,0
Jarabe de sorbitol
35,0
Grasa de almendra de palma
60,0
Grasa de horneado
40,0
Lecitina
1,5
Aceite de palma hidrogenado
2,5
Manzana desecada y cortada
63,0
Copos de maíz
100,0
Granos de arroz crujientes
120,0
Granos de trigo crujientes
90,0
Avellana tostada
40,0
Leche desnatada en polvo
45,0
Esencia de manzana 74863-33
2,0
Ácido cítrico
5,0
Cantidad total
1000
El extracto de orégano se mezcla previamente con polvo de leche desnatada y se pone en un mezclador de bols planetario. Se añaden copos de maíz y granos crujientes de arroz, y se mezcla suavemente. Se añaden luego las manzanas secadas y cortadas. En una primera cazuela de cocción se mezclan azúcar, agua y sal en las cantidades arriba indicadas (solución 1). En una segunda cazuela de cocción se mezclan jarabes de glucosa, azúcar invertido y 5 sorbitol en las cantidades arriba indicadas (solución 2). Una mixtura de manteca de horno, manteca de almendra de palma, lecitina y emulsionante es la fase de grasa. La solución 1 se calienta a 110ºC. La solución 2 se calienta a 113ºC y se enfría luego en un baño de agua fría. Después de ello se combinan las soluciones 1 y 2. La fase de grasa se funde a 75ºC en un baño de agua. Se añade la fase de grasa a la mixtura combinada de las soluciones 1 y
2. Se añaden saborizante de manzana y ácido cítrico a la mezcla líquida azúcar-grasa. Se añade la masa líquida a
10 los ingredientes secos y se mezcla bien en el mezclador de bols planetario. Se coloca la masa sobre una placa de mármol y se lamina al espesor deseado. Se enfría la masa a la temperatura ambiente y se corta en piezas. La barra de cereales no horneada contiene aprox. 25 mg de extracto de orégano por servicio (30 g). Para bienestar general y aporte de energía pueden tomarse 1-2 barras de cereales al día.
Ejemplo 20: Alimentación seca para perros que comprende extracto de orégano o sus componentes 15 volátiles para alivio del estrés y revitalización del perro
Una dieta basal comercial para perros (v.g. Mera Dog "Brocken", MERA-Tiernahrung GmbH, Marienstraβe 80-84, D-47625 Kevelaer-Wetten, Alemania) se pulveriza con una solución de extracto de orégano en una cantidad suficiente para administrar a un individuo una dosis diaria de 50 mg por kg de peso corporal, basada en el peso del extracto de orégano o el concentrado de sus componentes volátiles. La composición alimenticia se seca a fin de que
20 contenga aproximadamente 90% en peso de materia seca. Para un perro medio de 10 kg de peso corporal que consume aprox. 200 g de alimentación seca por día, la comida para perro contiene aprox. 2500 mg de extracto de orégano o sus componentes volátiles/kg de alimento. Para perros de mayor peso, la mezcla de pienso se prepara análogamente.
Ejemplo 21: Comida húmeda para gatos que comprende extracto de orégano o sus componentes volátiles
25 Una dieta basal comercial para gatos (v.g. Happy Cat "Adult", Tierfeinnahrung, Südliche Hauptstraβe 38, D86517 Wehringen, Alemania) se mezcla con una solución de extracto de orégano o sus componentes volátiles en una cantidad suficiente para administrar a un individuo una dosis diaria de 100 mg por kg de peso corporal, basada en el peso del extracto de orégano seco o concentrado de sus componentes volátiles. Para un gato medio de 5 kg de peso corporal que consuma aprox. 400 g de comida húmeda, la comida para gatos contiene aprox. 1250 mg/kg
30 de extracto de orégano. La composición de comida se seca de modo que contenga aproximadamente 90% en peso de materia seca.
Ejemplo 22: Tratamientos para perros que contienen extracto de orégano
Se pulverizan tratamientos comerciales para perro (v.g. Mera Dog "Biscuit", MERA-Tiernahrung GmbH, Marienstraβe 80-84, D-47625 Kevelaer-Wetten, Alemania) con una solución de extracto de orégano o sus
35 componentes volátiles en una cantidad suficiente para administrar a los tratamientos 5-50 mg por g de tratamiento, basado en el peso del extracto de orégano seco o el concentrado de sus componentes volátiles. La composición alimenticia se seca de modo que contenga una materia seca de aproximadamente 90% en peso.
Ejemplo 23: Tratamientos para gatos que contienen extracto de orégano
Se pulverizan tratamientos comerciales para gato (v.g. Whiskas Dentabits para gatos suministrado por Whiskas,
40 Master-foods GmbH, Eitzer Str. 215, 27283 Verden/Aller, Alemania) con una solución de extracto de orégano o sus componentes volátiles en una cantidad suficiente para administrar a los tratamientos 5-50 mg por g de tratamiento, basado en el peso del extracto de orégano seco o el concentrado de sus componentes volátiles. La composición alimenticia se seca de modo que contenga una materia seca de aproximadamente 90% en peso.

Claims (7)

  1. REIVINDICACIONES
    1. Uso de una composición dietética o farmacéutica administrable por vía oral que comprende un extracto obtenido a partir de plantas del género Origanum por extracción con un disolvente o fluidos supercríticos, hidrodestilación para obtener aceites esenciales, o extracción/destilación con gases calientes en un proceso para:
    5 mantenimiento o la mejora de la atención y la concentración, la memoria y la capacidad para recordar, capacidad de
    aprendizaje, procesamiento del lenguaje, resolución de problemas y funcionamiento intelectual, mejora de la memoria a corto plazo, aumento del estado de alerta mental,
    aumento de la capacidad de concentración y la agudeza mental,
    10 intensificación de la vigilancia mental, reducción de la fatiga mental, refuerzo de la salud mental, mantenimiento de una función cognitiva equilibrada, regulación del hambre y la saciedad y la regulación de la actividad motora,
    15 uso como antidepresivo, mejorador del humor/vitalidad, aliviador del estrés, reductor de la ansiedad, reductor de la tensión, reductor de la tristeza, reductor de la infelicidad/descontento, reductor de la irritabilidad, reductor de la disforia, reductor del comportamiento obsesivo-compulsivo, y/o relajante, o
    utilización como preventivo o normalizador de las alteraciones de los ritmos circadianos, con la salvedad de que la composición no incluye la combinación de orégano y extractos de Crataegus.
    20 2. Uso de una composición de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el extracto de orégano se obtiene de Origanum vulgare.
  2. 3. Uso de una composición de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-2, en donde la composición se selecciona del grupo constituido por productos lácteos, yogures, comida reforzada, barras de cereales, artículos de repostería, pasteles, galletas, suplementos dietéticos, tabletas, píldoras, gránulos, grageas, cápsulas, formulaciones
    25 efervescentes, bebidas no alcohólicas, refrescos, bebidas para deportes, zumos de fruta, limonadas, bebidas fundamentalmente acuosas, tés, bebidas de base láctea, alimento líquido, sopas, y bebidas muesli.
  3. 4.
    Uso de una composición de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-3 que es un uso veterinario.
  4. 5.
    Uso de una composición de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-4, en donde el extracto de orégano comprende al menos 30% en peso de carvacrol.
    30 6. Uso de una composición de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-5, en donde el extracto de orégano comprende timoquinona en una cantidad comprendida en el intervalo de 0 a 30% en peso.
  5. 7. Uso de una composición de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-6, en donde el extracto de orégano comprende al menos 50% en peso de carvacrol y de 0 a 25% en peso de timoquinona.
  6. 8. Uso de una composición de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-7, en donde el extracto de 35 orégano contiene un componente volátil simple seleccionado del grupo constituido por carvacrol y timoquinona.
  7. 9. Uso de una composición dietética o farmacéutica que comprende un extracto obtenido a partir de plantas del género Origanum por extracción con un disolvente o fluidos supercríticos, hidrodestilación para la obtención de aceites esenciales, o extracción/destilación como gases calientes en un proceso para:
    utilización como inhibidor de la reabsorción de noradrenalina, inhibidor de la reabsorción de dopamina, y/o 40 reinhibidores duales de la absorción de serotonina, noradrenalina y/o dopamina, o utilización como inhibidor triple de la absorción de noradrenalina, serotonina y/o dopamina, con la salvedad de que la composición no incluye la combinación de orégano y extracto de Crataegus.
ES07801575T 2006-08-09 2007-08-09 Nuevos agentes para el tratamiento de trastornos conectados con neurotransmisión deteriorada Active ES2399667T3 (es)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP06016659 2006-08-09
EP06016659 2006-08-09
PCT/EP2007/007053 WO2008017484A1 (en) 2006-08-09 2007-08-09 Novel agents for the treatment of disorders connected to impaired neurotransmission

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2399667T3 true ES2399667T3 (es) 2013-04-02

Family

ID=37649511

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES07801575T Active ES2399667T3 (es) 2006-08-09 2007-08-09 Nuevos agentes para el tratamiento de trastornos conectados con neurotransmisión deteriorada

Country Status (8)

Country Link
US (1) US20100074976A1 (es)
EP (1) EP2049132B1 (es)
JP (2) JP5776086B2 (es)
KR (1) KR101454039B1 (es)
CN (2) CN105106301A (es)
ES (1) ES2399667T3 (es)
PL (1) PL2049132T3 (es)
WO (1) WO2008017484A1 (es)

Families Citing this family (29)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102118981A (zh) * 2008-06-10 2011-07-06 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 植物提取物和pufa组合
MX2011004155A (es) 2008-10-20 2011-05-23 Unilever Nv Una composicion antimicrobiana.
JP2012518618A (ja) * 2009-02-20 2012-08-16 ディーエスエム アイピー アセッツ ビー．ブイ． 機敏さのためのオレガノ抽出物
CA2801143C (en) 2009-09-24 2017-09-26 Unilever Plc Disinfecting agent comprising eugenol, terpineol and thymol
FR2955782B1 (fr) 2010-01-29 2014-02-14 Expanscience Lab Extraction solide / liquide
WO2012076310A1 (en) 2010-12-07 2012-06-14 Unilever Nv An oral care composition
ITRM20110450A1 (it) * 2011-08-26 2013-02-27 Vecchio Francesca Del Metodo apparecchiatura ingredienti e formulazioni per produrre soluzioni ad elevato effetto nutriente ricostituente antiossidante e curativo per un sistema completo ed automatizzato per prevenire e combattere la sindrome dello spopolamento delle api
EP2773315B1 (en) 2011-11-03 2015-07-08 Unilever N.V. A personal cleaning composition
JP2013194031A (ja) * 2012-03-22 2013-09-30 Inabata Koryo Kk 骨形成促進剤
JP5986793B2 (ja) * 2012-04-26 2016-09-06 小川香料株式会社 セイボリーエキスの製造方法
KR101493139B1 (ko) * 2013-01-08 2015-02-13 경상대학교산학협력단 타이모퀴논 및 비타민 c를 유효성분으로 포함하는 신경세포 보호용 조성물
US20140301959A1 (en) * 2013-03-14 2014-10-09 Elias Chavando Composition for deodorizing breath
JP6847578B2 (ja) * 2013-10-09 2021-03-24 味の素株式会社 ヒスチジンを含有する食品およびその用途
US9630896B2 (en) 2013-11-22 2017-04-25 Tansna Therapeutics, Inc. 2,5-dialkyl-4-H/halo/ether-phenol compounds
CN103976986A (zh) * 2014-05-26 2014-08-13 中国药科大学 百里香酚在制备抗抑郁药物中的应用
CN106243096B (zh) * 2016-07-29 2019-11-29 上海璃道医药科技有限公司 三环类药物的新用途
JP7432501B2 (ja) * 2017-09-12 2024-02-16 ジャイナ ファーマシューティカルズ，インコーポレーテッド チモキノン含有組成物の調製法
BR112020012949A2 (pt) * 2017-12-27 2021-01-05 Sami Labs Limited Composições para o gerenciamento de hiperglicemia e afecções relacionadas
CN108184704A (zh) * 2018-01-16 2018-06-22 淄博南庚商贸有限公司 一种犬掌套
CN108157217A (zh) * 2018-01-16 2018-06-15 淄博南庚商贸有限公司 一种猫掌套
CN108419702A (zh) * 2018-01-16 2018-08-21 淄博南庚商贸有限公司 一种兔掌套
IL277388B1 (en) * 2018-03-20 2024-04-01 N S Oils Ltd A preparation containing oil from Nigella sativa seeds
JP2020031570A (ja) * 2018-08-29 2020-03-05 大正製薬株式会社 体内時計調整用組成物
AU2020317501A1 (en) * 2019-07-24 2022-01-06 Asahi Group Holdings, Ltd. Agent for regulating female hormone secretion and agent for alleviating unpleasant symptoms
BR112022008091A2 (pt) * 2019-11-08 2022-07-12 Kemin Ind Inc Aditivo de alimentos, método para estabilizar alimentos, e, composição estabilizada de alimentos
IT202000004123A1 (it) * 2020-02-27 2021-08-27 A M Italy S R L Composizione per l'uso nella terapia, in particolare per la cura della depressione
EP4181941A4 (en) * 2020-07-14 2024-05-01 Natur Tech Pharmacal Co Ltd COMPOSITIONS AND THEIR USES
US11911346B2 (en) * 2021-08-27 2024-02-27 Nutrient Survival Llc Orally administrated therapeutic for treating mild cognitive impairment (MCI) and improving human cognitive function
CN114948915B (zh) * 2022-07-18 2023-10-24 广东省农业科学院动物卫生研究所 百里醌在制备抗副猪嗜血杆菌药物中的应用

Family Cites Families (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2019185C1 (ru) * 1992-05-13 1994-09-15 Русанов Сергей Евгеньевич Сбор лекарственных растений, обладающий успокоительным и гипотензивным действием
WO1995005838A1 (en) 1993-08-20 1995-03-02 Scottish Agricultural College Beneficial effects of plant volatile oils
JPH09227399A (ja) * 1996-02-27 1997-09-02 Pola Chem Ind Inc 副腎皮質ホルモン分泌抑制剤
RU2113139C1 (ru) * 1996-07-02 1998-06-20 Курская биофабрика - фирма "БИОК" Концентрированная основа для напитка "пересвет"
JP3373738B2 (ja) * 1996-08-30 2003-02-04 ハウス食品株式会社 わさび香味調合品及びわさび風味食品
RO115120B1 (ro) * 1997-03-12 1999-11-30 Ovidiu Bojor Ceai antistres
RU2114629C1 (ru) * 1997-04-10 1998-07-10 Бабаскина Людмила Ивановна Сбор лекарственных трав, обладающий общеукрепляющим и нормализующим гормональный статус в климактерическом периоде действием
JP2000302658A (ja) * 1999-04-20 2000-10-31 Pola Chem Ind Inc 敏感肌用の皮膚外用剤
US6203796B1 (en) * 1999-07-08 2001-03-20 Andreas D. Papaprodromou Oregano-based therapeutic composition
HU222162B1 (hu) 1999-12-22 2003-04-28 Márta Fenyő Elrendezés emberi szervezet relaxálására és a közérzet javítására
RU2174005C1 (ru) * 2000-11-09 2001-09-27 Закрытое акционерное общество "Агропромышленная фирма "Фито-ЭМ" Сбор лекарственных растений для лечения неврозов и неврастении
JP4698038B2 (ja) * 2001-02-15 2011-06-08 株式会社Ａｄｅｋａ βグルカン含有油脂組成物を含有するベーカリー製品
US6387416B1 (en) * 2001-04-05 2002-05-14 Thomas Newmark Anti-Inflammatory herbal composition and method of use
JP2002360200A (ja) * 2001-06-08 2002-12-17 Kaneka San Spice:Kk スパイス・ハーブ入り冷凍揚げ物およびその冷凍揚げ物用衣材
JP2004002237A (ja) * 2002-05-31 2004-01-08 Noriko Yagi 老化防止ハーブ
JP2006008555A (ja) * 2004-06-24 2006-01-12 Japan Science & Technology Agency オレガノ抽出物のα−グルコシダーゼ阻害剤およびその利用
EP1768491B1 (en) * 2004-07-21 2010-03-10 Alltech, Inc. Composition and its use for controlling protozoal infections of animals
TWI342780B (en) * 2004-08-11 2011-06-01 Access Business Group Int Llc Dietary supplement
DE102006001979A1 (de) * 2006-01-13 2007-07-19 Basf Ag Verwendung einer wässrigen Polymerzusammensetzung zum Imprägnieren von Rohpapier
WO2012075239A1 (en) * 2010-12-03 2012-06-07 Theravance, Inc. Serotonin reuptake inhibitors

Also Published As

Publication number Publication date
KR101454039B1 (ko) 2014-10-27
EP2049132B1 (en) 2012-12-05
CN101500588A (zh) 2009-08-05
EP2049132A1 (en) 2009-04-22
JP2014122215A (ja) 2014-07-03
WO2008017484A1 (en) 2008-02-14
JP5776086B2 (ja) 2015-09-09
PL2049132T3 (pl) 2013-05-31
US20100074976A1 (en) 2010-03-25
JP2010500306A (ja) 2010-01-07
KR20090036579A (ko) 2009-04-14
CN105106301A (zh) 2015-12-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2399667T3 (es) Nuevos agentes para el tratamiento de trastornos conectados con neurotransmisión deteriorada
ES2357261T3 (es) Derivados de ligustilide para el tratamiento de trastornos del sistema nervioso central.
US8748491B2 (en) Dietary and pharmaceutical compositions containing tricyclic diterpenes and their derivatives and their uses
JP5737701B2 (ja) ローズマリー抽出物、これらを含有する食品および医薬品組成物、ならびにその使用
US20120244234A1 (en) Nigella extracts for the treatment of symptoms connected to impaired or imbalanced neurotransmission
US8227508B2 (en) Dietary and pharmaceutical compositions containing carnosol and/or rosmanol and their uses
US20120149766A1 (en) Dietary and pharmaceutical compositions comprising a sage extract containing a mixture of tricyclic diterpenes and their derivatives and their uses
US20110070326A1 (en) Oregano extract and its components for enhancing vigilance