ES2338638T3 - Metodo para producir un aditivo nutricional, el propio aditivo y su uso. - Google Patents
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Abstract
Método de producción de un aditivo nutricional para su uso en la prevención de enfermedades intestinales, en cuyo método se trata levadura de cerveza mediante un proceso hidrolítico, caracterizado porque la levadura de cerveza se filtra y la levadura de cerveza filtrada se trata hidrolíticamente de manera que se abre la estructura celular mediante rotura y se incrementa la concentración efectiva de oligo- y/o polisacáridos, betaglucano y/o proteína sobre la superficie de las estructuras celulares.
Description
Método para producir un aditivo nutricional, el
propio aditivo y su uso.
La presente invención se refiere a un método
como queda definido en el preámbulo de la reivindicación 1 para la
producción de un aditivo nutricional. La invención también se
refiere a un aditivo nutricional, a su uso y a un preparado que
contiene el aditivo.
El equilibrio microbiano intestinal constituye
un requisito previo para la salud y bienestar, así como para la
productividad de animales. Las perturbaciones de este equilibrio
aparecen como diarrea y otros problemas intestinales y pueden
incluso conducir a la muerte del animal.
Los animales de estómago único son protegidos
contra la influencia de microbios perjudiciales por la adición de
diversos antibióticos y productos quimioterapéuticos que inhiben el
crecimiento microbiano en el forraje utilizado para alimentar el
animal. Igualmente, a los forrajes se pueden añadir producto
probióticos, tales como diversos microbios, ácidos y levaduras,
para mantener el equilibrio intestinal y evitar el uso de
antibióticos. También existen mezclas de forrajes con oligosacáridos
añadidos a los mismos para favorecer el crecimiento de microbios
útiles. Además, la solicitud de Patente FI 965 192 describe un
hidrolizado de levadura que contiene oligosacáridos y/o
polisacáridos y su uso en la prevención de enfermedades
intestinales.
El uso de antibióticos implica el problema de
desarrollo de cepas microbianas inmunes a los antibióticos y los
consecuentes riesgos para la salud de los seres humanos que ello
trae consigo. Un problema que surge con los productos probióticos
es su eficiencia variable y en general baja; por otro lado, los
costes de su uso son claramente elevados. Un problema que surge con
el forraje que contiene oligosacáridos puros y con el forraje ya
conocido que contiene oligosacáridos y/o polisacáridos, consiste
similarmente en una influencia variable y en general demasiado
débil de los oligosacáridos y/o polisacáridos a la hora de prevenir
enfermedades intestinales. Además, el precio de los oligosacáridos
puros es elevado.
El objeto de la presente invención consiste en
eliminar los inconvenientes antes mencionados.
Un objeto específico de la invención consiste en
describir un método para la producción de un aditivo nutricional
que se puede emplear para ejercer una influencia más efectiva sobre
los microbios intestinales, al objeto de promover la salud y/o
crecimiento de los animales.
Otro objeto de la invención consiste en
describir un aditivo nutricional efectivo de calidad uniforme que
se puede emplear para reducir enfermedades intestinales en animales
y ello de un modo económico.
Un objeto más de la invención consiste en
describir el uso de un nuevo aditivo producido de acuerdo con la
invención y un preparado que contiene dicho aditivo.
En cuanto a las medidas características de la
invención, se hace referencia a las reivindicaciones.
En el método de la invención para producir un
aditivo nutricional, se filtra y elabora levadura de cerveza de tal
manera que se altera su estructura celular y se incrementa la
concentración efectiva de oligo- y/o polisacáridos, betaglucano y/o
proteínas en la superficie de las estructuras celulares, es decir,
se rompe la estructura celular para liberar oligo- y/o
polisacáridos, betaglucano y/o proteínas para su uso en la
prevención de enfermedades intestinales.
La invención también describe productos
obtenidos mediante este método, su uso y preparados que contienen
los aditivos de acuerdo con las reivindicaciones.
La invención está basada en trabajos de
investigación en donde se investigaron aditivos nutricionales y en
donde se observó de manera inesperada que, mediante levadura de
cerveza de primera filtración y elaboración de la misma además
hidrolíticamente, de manera que se rompa la estructura celular de la
levadura de cerveza, se obtiene un producto que, cuando se
administra a un animal junto con el forraje, reduce enfermedades
intestinales del animal de un modo considerablemente más efectivo
que el conseguido con un producto obtenido tratando simplemente la
levadura de cerveza mediante un proceso hidrolítico.
El mecanismo de influencia del producto así
obtenido en la prevención de enfermedades intestinales está basado
en el hecho de que su uso en conexión con forrajes inhibe la
adherencia microbiana al intestino, lo cual significa que los
oligo- y/o polisacáridos y/o proteínas que se liberan en conexión
con la filtración de la levadura de cerveza y rotura de la
estructura celular, funcionan de manera análoga a receptores de
microbios dañinos, tal como E. coli, en el intestino,
debilitando la capacidad de los microbios para adherirse a la pared
del intestino.
Además, los oligo- y/o polisacáridos,
betaglucano, proteínas, nucleótidos, péptidos y otras sustancias
liberadas en conexión con la referida rotura de la estructura
celular de la levadura de cerveza, son útiles con respecto a la
regulación de la población microbiana intestinal.
\newpage
Los productos de rotura obtenidos por vía de la
filtración y proceso de hidrólisis tienen una influencia sobre la
respuesta inmunológica del animal, es decir, ciertos componentes de
la levadura de cerveza, por ejemplo las estructuras de azúcares de
la levadura que contienen fósforo, pueden mejorar la respuesta
inmunológica de los animales, inhibiendo así enfermedades
intestinales. El método de producción tiene además un efecto sobre
el tipo e intensidad de la respuesta inmunológica.
La levadura de cerveza se produjo como un
subproducto de la industria cervecera. Normalmente, la mezcla de
levadura de cerveza se pasa, una vez producida la cerveza, al
interior de recipientes de almacenamiento, en donde la levadura de
cerveza se deposita en la parte inferior del recipiente. Después de
esto, se separa la cerveza que permanece en la superficie. El
contenido en materia seca de la levadura de cerveza así obtenida
varía normalmente en el intervalo de 7-13% en
peso.
En el método de la invención, la levadura de
cerveza depositada en el fondo del recipiente se filtra por medios
mecánicos y/o neumáticos. La levadura de cerveza puede ser filtrada
por cualquier método de filtración conocido. Para evitar que los
filtros se obstruyan, por ejemplo las placas de filtración, es
posible utilizar un vibrador, por ejemplo, un
micro-vibrador a una elevada frecuencia, y/o
cualquier otra técnica correspondiente que impida la obstrucción.
La densidad del filtro se selecciona en base al tamaño de partícula
de la levadura.
El contenido en materia seca de la levadura de
cerveza filtrada de acuerdo con la invención es de al menos 15% en
peso, preferentemente 18-20% en peso.
En la levadura de cerveza utilizada, los oligo-
y/o polisacáridos, betaglucano, proteínas, tal como
mano-proteína, están unidos en las estructuras
celulares de la materia prima.
En el método de la invención, la estructura
celular de la levadura de cerveza se rompe hidrolíticamente
empleando un ácido y/o un álcali, por vía de autolisis y/o
enzimáticamente. Además del procesado hidrolítico, también es
posible el tratamiento térmico y/o tratamiento con detergente de la
levadura de cerveza y/o se puede emplear un tratamiento que rompe
la estructura celular de la materia prima, por ejemplo, sometiendo
la estructura celular a una fuerza mecánica, hidrostática y/o
neumática.
Los ácidos empleados en la hidrólisis pueden
ser, por ejemplo, ácidos minerales convencionales, tales como ácido
clorhídrico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico, ácido nítrico y
similares, así como ácidos orgánicos fuertes, por ejemplo, ácido
fórmico, ácido acético, ácido propiónico y similares. El intervalo
de pH usado en la hidrólisis puede encontrarse por debajo de 4, por
ejemplo, alrededor de 2-4. En la hidrólisis
alcalina, los álcalis empleados pueden ser, por ejemplo, hidróxidos
alcalinos convencionales, tales como hidróxido sódico, hidróxido
potásico, etc, hidróxido amónico u otros álcalis que liberan oligo-
y/o polisacáridos.
Las enzimas que pueden utilizarse en la
hidrólisis enzimática incluyen, por ejemplo, varias proteasas, por
ejemplo, proteasas ácidas o alcalinas. En la hidrólisis, también es
posible emplear la enzima contenida en la propia levadura de
cerveza, en cuyo caso la hidrólisis ocurre por vía de autolisis.
Además, la hidrólisis puede llevarse a cabo empleando otras
enzimas, proteasas, ribonucleasas y deaminasas incorporadas. En el
procesado enzimático también es posible emplear una combinación de
varias enzimas, de manera simultánea y/o sucesivamente, por
ejemplo, papaína, ribonucleasa y/o deaminasa. En general, el método
se puede efectuar empleando enzimas presentadas en las
especificaciones referidas a continuación y/u otras enzimas
conocidas por sí mismas y que tienen el efecto deseado de romper la
estructura celular de la materia prima, de forma conjunta y/o por
separado, por ejemplo, como se describe en las especificaciones
referidas a continuación.
En la hidrólisis, la levadura se puede calentar
a una temperatura por encima de 40ºC, en la autolisis e hidrólisis
enzimática, por ejemplo a 40-65ºC y en la hidrólisis
ácida y alcalina, por ejemplo a 70-95ºC. La duración
del periodo de calentamiento puede variar dependiendo de la
temperatura, por ejemplo 1-12 horas.
Las fracciones insolubles y solubles obtenidas
por vía de la hidrólisis contienen oligo- y/o polisacáridos,
betaglucano y/o proteínas como componentes deseados.
La rotura hidrolítica de levadura se describe en
las descripciones y solicitudes de Patente: FI 965 192, WO 96/38057
y GB 1032687. Estos métodos así como otros métodos conocidos se
pueden emplear en conexión con la presente invención, siendo el
producto utilizable expresamente el producto sin fraccionar como tal
o la fracción insoluble o soluble.
El producto preparado por el método de la
invención se puede emplear como forraje o alimento directamente
como tal, en forma húmeda o seca, y puede tratarse generalmente de
la manera deseada.
El aditivo nutricional producido por el método
de la invención se puede emplear en forrajes destinados a animales
de estómago único, por ejemplo, ganado porcino, especialmente
cerdos, aves de corral, tales como gallinas, pollos y pavos, vacas,
animales de pelo, tales como zorros y mascotas, tales como perros y
gatos, caballos, especialmente potrillos, peces y similares, para
evitar enfermedades intestinales. La cantidad utilizada de aditivo
nutricional en forrajes/alimentación de animales de estómago único
puede ser de 0,01-1,0% en peso, con preferencia
0,1- 0,3% en peso de la cantidad total de forraje, calculada en
términos de materia seca. El aditivo se puede emplear junto con
forraje/alimento o como tal. Un uso adecuado del aditivo es aquel en
donde la ingesta diaria es de 0,1-10 g/día, con
preferencia 0,1-3 g/día.
El aditivo nutricional de la invención también
se puede emplear en alimentos para seres humanos, por ejemplo en
preparados alimenticios para niños o adultos o como un preparado
servido por separado para promover la salud, para equilibrar
microbios intestinales y para impedir enfermedades intestinales.
Cuando se añade a forraje para animales, el
aditivo producido por el método de la invención es en un
25-30% aproximadamente más eficaz a la hora de
inhibir el crecimiento de microbios dañinos y promover el
crecimiento de microbios útiles que un producto preparado a partir
de levadura de cerveza sin filtrar. Al mismo tiempo, se mejoran el
crecimiento del animal, el uso del forraje y la economía global en
la producción. Por otro lado, los constituyentes útiles de la
levadura quedan preservados en el mismo producto. Además, la
invención permite la producción económica del aditivo y del
preparado de la invención.
Por otro lado, el uso de productos de forraje de
acuerdo con la invención, es decir, productos de forraje natural en
el forraje para animales proporciona la posibilidad de detener el
uso de antibióticos en el forraje. El riesgo de desarrollo de cepas
microbianas inmunes a los antibióticos se disminuye y los peligros
para la salud humana causados por las mismas se reducen.
La invención será ahora descrita con detalle
haciendo referencia a los siguientes ejemplos de sus
modalidades.
\vskip1.000000\baselineskip
En un experimento se produjo un aditivo
nutricional de acuerdo con la invención a partir de levadura de
cerveza con un contenido en materia seca de 9% en peso, obtenida en
una industria cervecera.
La levadura de cerveza fue filtrada
mecánicamente por medio de un filtro fino, haciendo vibrar las
placas del filtro con un microvibrador a una elevada frecuencia. La
levadura se filtró hasta un contenido en materia seca de 18% en
peso. Durante la filtración, se separó 3-4% de la
materia seca con el líquido y el rendimiento en materia seca de la
levadura fue de 50-60% de la cantidad estimada.
La levadura de cerveza filtrada fue hidrolizada
con un ácido. En la hidrólisis, el pH de la suspensión espesa de
levadura se mantuvo en un valor de 2-3 empleando un
ácido fuerte (4 horas) y a una temperatura de
70-85ºC. A continuación, el pH se incrementó a un
valor de 4-5 y el producto obtenido se enfrió. El
producto final obtenido se puede emplear como tal o se puede secar
por métodos conocidos.
\vskip1.000000\baselineskip
En este experimento, se comparó el efecto de un
hidrolizado de levadura como el obtenido en el ejemplo 1 sobre la
adherencia de la bacteria E. coli a membranas mucosas
porcinas sobre placas de microvaloración, con el correspondiente
efecto de un hidrolizado de levadura producido por el método
descrito en la solicitud de Patente FI 965 192; el experimento se
describe en la publicación Conway, P.L., (1990) Infection and
Immunity, 58, 3178-3182. La presencia de receptores
específicos K88 en mucosa ileal porcina depende de la edad.
Los resultados se ofrecen en la tabla 1.
\vskip1.000000\baselineskip
A partir de los resultados se estableció que el
aditivo de la invención fue más efectivo en un
25-30% aproximadamente a la hora de inhibir la
adherencia de E. coli que un producto preparado a partir de
levadura de cerveza sin filtrar.
\vskip1.000000\baselineskip
Se llevó a cabo un experimento para investigar
el efecto del hidrolizado de levadura preparado en el ejemplo 1 y
de un hidrolizado 2 de acuerdo con la invención sobre la inmunidad
intestinal de ratas. La inmunidad se determinó midiendo el
contenido en IgA del tracto digestivo y determinando las
proporciones de células inmunes a partir de muestras de tejido
intestinal. Las determinaciones comparativas se realizaron empleando
un control y un producto de betaglucano.
En cada ensayo, se emplearon 6 ratas. Se tomaron
muestras de tejido del duodeno y del íleo 28 días después de
iniciarse el experimento de alimentación. Las muestras fueron
diluidas y su IgA se determinó mediante el nuevo método ELISA, el
cual se utilizó para medir la respuesta inmunológica a nivel del
intestino. Por los métodos ya conocidos, la inmunidad ha sido
medida indirectamente a partir de cultivos celulares o muestras de
sangre. Por el método ahora utilizado, es posible medir tanto la
inmunidad mediada por las células como la inmunidad mediada por los
anticuerpos en el intestino y, de este modo, se puede medir
directamente el efecto inhibidor de diferentes productos contra
enfermedades intestinales. En las determinaciones, se emplearon
anticuerpos monoclonales específicos a células inmunes de
ratas.
El producto de acuerdo con la invención (0,3%) y
beta-glucano no tuvo un gran efecto sobre el
contenido en IgA en el tracto digestivo. Ambos incrementaron el
contenido en IgA en comparación con el control. En las raciones más
pequeñas, el producto de la invención incrementó el contenido en IgA
en comparación con el control.
Las frecuencias de macrófagos y células
CD8-positivas (células positivas/0,5 villus) se
ofrecen en la tabla 2.
\vskip1.000000\baselineskip
A partir de la tabla 2 puede verse que el
producto de la invención causó un importante incremento en la
frecuencia de células macrofágicas y un incremento definido en la
frecuencia de células CD8-positivas. El producto de
la invención estimuló localmente en el tracto digestivo aquellos
tipos de respuesta inmunológica que tienen una importancia
especialmente en infecciones intracelulares (virus, parásitos y
bacterias que proliferan en células), aportando una protección
adicional incluso contra otras infecciones además de las causadas
por E. coli, mientras que el producto de betaglucano fue más
o menos ineficaz.
La invención no queda limitada a los ejemplos de
sus modalidades anteriormente descritos; más bien, son posibles
variaciones de la misma dentro del alcance de la idea inventiva
definida en las reivindicaciones.
Claims (15)
1. Método de producción de un aditivo
nutricional para su uso en la prevención de enfermedades
intestinales, en cuyo método se trata levadura de cerveza mediante
un proceso hidrolítico, caracterizado porque la levadura de
cerveza se filtra y la levadura de cerveza filtrada se trata
hidrolíticamente de manera que se abre la estructura celular
mediante rotura y se incrementa la concentración efectiva de oligo-
y/o polisacáridos, betaglucano y/o proteína sobre la superficie de
las estructuras celulares.
2. Método según la reivindicación 1,
caracterizado porque la levadura de cerveza se filtra
mecánicamente.
3. Método según la reivindicación 1 o 2,
caracterizador porque la levadura de cerveza se filtra hasta
un contenido mínimo en materia seca de 15%, preferentemente hasta
un contenido en materia seca de 18-20%.
4. Método según cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 3, caracterizado porque la levadura de
cerveza filtrada se trata con un ácido y/o un álcali.
5. Método según cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 4, caracterizado porque la levadura de
cerveza filtrada se trata enzimáticamente.
6. Método según cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 5, caracterizado porque la levadura de
cerveza filtrada se trata con calor y/o por medios mecánicos,
hidrostáticos o neumáticos, de manera que se rompa la estructura
celular.
7. Método según cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 6, caracterizado porque el producto
obtenido se utiliza como tal sin fraccionamiento.
8. Método según cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 7, caracterizado porque el producto de
oligo- y/o polisacárido, betaglucano y/o proteína obtenido se añade
a alimentos en una cantidad de 0,01-1,0% en peso,
con preferencia 0,1-0,3% en peso, calculado en
términos de materia seca.
9. Aditivo nutricional para la prevención de
enfermedades intestinales, caracterizado porque el aditivo
ha sido producido por tratamiento de levadura de cerveza filtrada
mediante un proceso hidrolítico, de manera que la estructura
celular se abre mediante rotura y se incrementa la concentración
efectiva de oligo- y/o polisacáridos, betaglucano y/o proteínas
sobre la superficie de las estructuras celulares.
10. Aditivo según la reivindicación 9,
caracterizado porque el aditivo ha sido producido filtrando
mecánicamente levadura de cerveza.
11. Aditivo según la reivindicación 9 o 10,
caracterizado porque el aditivo ha sido producido tratando la
materia prima con un ácido y/o un álcali.
12. Aditivo según cualquiera de las
reivindicaciones 9 a 11, caracterizado porque el aditivo ha
sido producido tratando la materia prima enzimáticamente.
13. Aditivo según cualquiera de las
reivindicaciones 9 a 12, caracterizado porque la levadura de
cerveza ha sido tratada con calor y/o por medios mecánicos,
hidrostáticos o neumáticos, de manera que se rompa la estructura
celular.
14. Uso de un aditivo nutricional como el
definido en cualquiera de las reivindicaciones 9 a 13 en la
preparación de alimentos destinados a la prevención de enfermedades
intestinales, siendo la cantidad utilizada del aditivo de
0,01-1,0% en peso, con preferencia
0,1-0,3% en peso, mezclado en sustancias
nutritivas.
15. Preparado que contiene un aditivo
nutricional y destinado para su aporte a una criatura que ha de ser
alimentada, caracterizado porque el preparado contiene un
producto como el definido en cualquiera de las reivindicaciones 10
a 13 en una cantidad de 0,01-1,0% en peso, con
preferencia 0,1-0,3% en peso de la porción diaria de
alimento y/o alimentación.
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