CN110959762B - 酵母水解物及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及生物发酵、饲料领域，具体涉及一种母猪饲料专用的酵母水解物及其制备方法和应用。本发明提供了一种酵母水解物，其中，所述酵母水解物包含蛋白质、酸溶蛋白、酵母细胞壁、核酸和小肽，以酵母水解物干物质质量计，所述蛋白质的含量为40‑45％，所述酸溶蛋白的含量为32‑37％，所述小肽的含量为18‑25％，所述酵母细胞壁的含量为25‑35％，所述核酸的含量≥9％，所述酵母水解物的溶解率为50‑60％，本发明所述的酵母水解物富含蛋白质、氨基酸、小肽、多糖、维生素等成分，不仅能为母猪提供充足和均衡的营养成分，还能调节母猪身体机能，增强免疫力，母猪体态好，乳汁充足，还能提高出生仔猪窝重和成活率。

Description

酵母水解物及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及生物发酵、饲料领域，具体涉及一种母猪饲料专用的酵母水解物及其制备方法和应用。
背景技术
随着养殖业的发展，母猪的繁殖性能大大提高，而相应的对于母猪的饲养状况仍然没有很大的发展，泌乳母猪奶水不好是母猪饲养的普遍现象。泌乳期母猪除维持机体正常代谢和体组织沉积外，还要哺育仔猪，对营养需求很高，营养摄入不足会直接导致母猪体组织透支和泌乳量下降，进而影响母猪后续繁殖性能和乳仔猪生长发育。母猪采食量低，会导致仔猪出生重低、分娩延迟、死胎增多，也会直接导致泌乳量低、仔猪腹泻、断奶体重小、保育猪健康状况差等问题。因此，泌乳期母猪营养值得高度重视，除了提高母猪的泌乳性能外，还需要防止母猪失重过多，确保母猪断奶后能尽快返情。因此，迫切需要探索新的策略，以提高母猪采食量、提高母猪对营养物质消化吸收率，以适应泌乳母猪的需求。
泌乳母猪奶水不好是母猪饲养的普遍现象，应激更加重了母猪的泌乳问题。因此，需要开发一种能提升母猪采食量、增加泌乳能力、减少掉膘、提高仔猪成活率的功能性蛋白原料。
酵母细胞营养物质丰富，含有蛋白质、小肽、多种必需氨基酸、维生素、矿物质、核酸、β-葡聚糖和甘露聚糖等成分。小肽具有提高动物对蛋白质的利用率、改善生长性能、促进对矿物质元素的吸收等作用。β-葡聚糖能刺激动物体产生对机体免疫功能起关键作用的巨噬细胞，可清除体内损伤、衰亡的细胞核侵入体内的病原微生物。甘露聚糖能促进有益菌的增生，而有益菌又是良好的免疫激活剂，能有效提高抗干扰素和巨噬细胞的活性，通过产生抗体和提高巨噬作用活性等刺激免疫，从而激发机体体液和细胞免疫，促进免疫器官发育及T淋巴细胞和B淋巴细胞增多，从而增强机体的免疫功能。
发明内容
为此，本发明所解决的技术的问题是提供一种能提升母猪采食量、增加泌乳能力、减少掉膘、提高仔猪成活率的功能性蛋白原料。
为了适应泌乳母猪的需求，本发明提供了一种酵母水解物，其选用酿酒酵母菌种，经纯培养发酵、自溶、酶解获得一种酵母水解物，应用于泌乳母猪饲料中，不仅能为母猪提供充足和均衡的营养成分，还能调节母猪身体机能，增强免疫力，母猪体态好，乳汁充足，还能提高出生仔猪窝重和成活率。
本发明提供了一种酵母水解物，其中，所述酵母水解物包含蛋白质、酸溶蛋白、酵母细胞壁、核酸和小肽，以酵母水解物干物质质量计，所述蛋白质的含量为40-45％，所述酸溶蛋白的含量为32-37％，所述小肽的含量为18-25％，所述酵母细胞壁的含量在25-35％，所述核酸含量≥9％，所述酵母水解物的溶解率为50-60％。
本发明提供了所述酵母水解物的制备方法，其包含下述步骤：
(1)发酵培养：将酿酒酵母菌株Z2.2进行发酵培养，得到酵母乳；
(2)自溶：将步骤(1)所得到的酵母乳进入热击处理；
(3)酶解：然后加入复合酶酶解得到酵母水解物，优选的，所述复合酶为木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶中的两种或两种以上。
本发明还提供了所述的酵母水解物在饲料中的应用，优选在母猪饲料中的应用，更优选在泌乳母猪饲料中的应用。
具体来说，本发明提出了如下技术方案。
本发明提供了一种酵母水解物，所述酵母水解物包含蛋白质、酸溶蛋白、酵母细胞壁、核酸和小肽，以酵母水解物干物质质量计，所述蛋白质的含量为40-45％，所述酸溶蛋白的含量为32-37％，所述小肽的含量为18-25％，所述酵母细胞壁的含量为25-35％，所述核酸的含量≥9％，所述酵母水解物的溶解率为50-60％。
优选的，对于上述所述的酵母水解物，其中，以酵母水解物的干物质质量计，所述蛋白质的含量为42.30-44.60％，所述酸溶蛋白的含量为34.93-36.20％，所述小肽的含量为23.52-24.85％，所述酵母细胞壁的含量为28.40-34.30％，所述核酸的含量≥10.59％，所述酵母水解物的溶解率为53.5-59.20％。
优选的，对于上述所述的酵母水解物，其中，所述酵母细胞壁包含甘露聚糖和β-葡聚糖，其中，所述甘露聚糖的含量为12-17％，优选为15.30-16.80％，所述β-葡聚糖的含量为13-18％，优选为13.10-17.50％。
优选的，对于上述所述的酵母水解物，其中，所述酵母水解物通过酿酒酵母发酵、自溶酶解而得到，优选的，所述酿酒酵母为酿酒酵母菌株Z2.2，所述酿酒酵母菌株的保藏编号为CCTCC NO：M205128。
本发明提供了一种上述所述酵母水解物的制备方法，其包含下述步骤：
(1)发酵培养：将酿酒酵母菌株Z2.2进行发酵培养，得到酵母乳；
(2)自溶：将步骤(1)所得到的酵母乳进入热击处理；
(3)酶解：然后加入复合酶酶解得到酵母水解物，优选的，所述复合酶为木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶中的两种或两种以上。
优选的，对于上述所述的制备方法，其中，在步骤(2)中，所述将所得到的酵母乳进行热击处理后还包含加入柠檬酸，然后进行保温处理的步骤。
优选的，对于上述所述的制备方法，其中，所述热击处理的温度为80-95℃，优选的，所述热击处理的时间为40-50s。
优选的，对于上述所述的制备方法，其中，以酵母乳的质量计，加入柠檬酸的量为1-5‰。
优选的，对于上述所述的制备方法，其中，所述保温处理的保温温度为40-60℃，保温时间为12-20h，优选为16-20h，pH为4.5-6.4，优选为5-6。
优选的，对于上述所述的制备方法，其中，在步骤(3)中，以酵母乳干物质的质量计，所述木瓜蛋白酶的添加量为1-3‰，优选为2-3‰，较优选为2.5-3‰；所述中性蛋白酶的添加量为1-3‰，优选为1.2-3‰，较优选为2.5-3‰；所述碱性蛋白酶的添加量为1-3‰，优选为1.2-3‰，较优选为2.5-3‰。
优选的，对于上述所述的制备方法，其中，
所述木瓜蛋白酶的酶解温度为55-65℃，pH为5-6.4，优选为5-5.8，酶解时间为6-10h；
所述中性蛋白酶的酶解温度为55-65℃，pH为5-6.4，优选为5-5.8，酶解时间为6-10h；
所述碱性蛋白酶的酶解温度为65-70℃，优选为68-70℃，pH为7-9，优选为8-9，酶解时间为10-15h。
优选的，对于上述所述的制备方法，其中，在步骤(1)中，所述发酵培养采用流加方式流加碳源、氮源和磷源；
以质量份计，所述碳源为6000-8000份，所述氮源为400-700份，优选为500-700份，所述磷源为300-600份；
所述碳源为糖蜜，优选为25-35wt％的糖蜜，更优选为30wt％的糖蜜；
所述氮源为硫酸铵；
所述磷源为磷酸二氢钾。
优选的，对于上述所述的制备方法，其中，在步骤(1)中，所述发酵培养的发酵温度为29-33℃，发酵时间为20-30h，发酵的pH为4.5-6.5。
优选的，对于上述所述的制备方法，其中，还包含将所述的酵母水解物进行干燥的步骤：酶解反应后，升温至75-85℃，保温2-5h，干燥得到酵母水解物。
本发明提供了上述所述的酵母水解物或上述制备方法制备得到的酵母水解物在饲料中的应用，优选在母猪饲料中的应用，较优选在泌乳母猪饲料中的应用。
本发明提供了一种饲料，其包含上述所述的酵母水解物或上述制备方法制备得到的酵母水解物和基础日粮，所述酵母水解物的添加量为0.3-1wt％。
本发明提供了一种饲料，其包含上述所述的酵母水解物或上述制备方法制备得到的酵母水解物，所述酵母水解物替代鱼粉添加到基础日粮中，所述酵母水解物替代鱼粉的量为0.5-1wt％。
本发明所取得的有益效果是：
1.酵母水解物所用原料为酿酒酵母，可以实现规模化生产。
2.本发明产品中，酵母水解物可作为饲料原料使用，富含蛋白质、氨基酸、小肽、多糖、维生素等成分，可以为母猪提供生长所必需营养成分。
3.本发明通过动物实验验证，确定了酵母水解物在泌乳母猪中的优势，不仅能为母猪提供充足和均衡的营养成分，还能调节母猪身体机能，母猪体态好，乳汁充足，还能提高出生仔猪窝重和成活率。
菌株保藏信息
本发明所用的菌种酿酒酵母Z2.2(Saccharomyces cerevisiae Hansen Z2.2)于2005年10月25日保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号为CCTCC NO:M205128，保藏地址：中国.武汉.武汉大学，邮政编码：430072；电话：(027)-68754052(该酵母菌株在中国申请号200710135740.6的专利申请中已有记载)。
具体实施方式
如上所述，本发明提供了一种酵母水解物，所述酵母水解物包含蛋白质、酸溶蛋白、酵母细胞壁、核酸和小肽，以酵母水解物干物质质量计，所述蛋白质的含量为40-45％，所述的酸溶蛋白含量为32-37％，所述的小肽含量为18-25％，所述酵母细胞壁的含量为25-35％，所述核酸含量≥9％，所述酵母水解物的溶解率为50-60％。
在本发明优选的一种具体实施方式中，其中，以酵母水解物的干物质质量计，所述蛋白质的含量为42.30-44.60％，所述酸溶蛋白的含量为34.93-36.20％，所述小肽的含量为23.52-24.85％，所述酵母细胞壁的含量为28.40-34.30％，所述核酸的含量≥10.59％，所述酵母水解物的溶解率为53.5-59.20％。
所述酵母水解物的溶解率越高，表示酵母经过自溶酶解工艺，所含的营养成分分解为小分子的物质，有利于动物对营养成分的吸收利用。
所述的酵母细胞壁多糖是免疫增强剂，对母猪的机体免疫有保护作用，不同的添加量对动物的免疫提升效果会有差异，正常范围内添加，不会存在有害影响，高含量添加可能会造成免疫抑制。
优选的，所述酵母细胞壁包含甘露聚糖和β-葡聚糖，其中，所述甘露聚糖的含量为12-17％，优选为15.30-16.80％，所述β-葡聚糖的含量为13-18％，优选为13.10-17.50％。
在本发明优选的一种具体实施方式中，所述酵母水解物通过酿酒酵母发酵、自溶酶解而得到，优选的，所述酿酒酵母为酿酒酵母菌株Z2.2，所述酿酒酵母菌株的保藏编号为CCTCC NO：M205128。
本发明提供上述酵母水解物的制备方法，其通过将酿酒酵母菌种Z2.2(CCTCC NO:M205128)，经纯培养发酵、自溶、酶解获得一种酵母水解物。
在本发明优选的一种具体实施方式中，其中，所述制备方法包括下述步骤：
(1)发酵培养：将酿酒酵母菌株Z2.2进行发酵培养，得到酵母乳；
(2)自溶：将步骤(1)所得到的酵母乳进入热击处理；
(3)酶解：然后加入复合酶酶解得到酵母水解物，优选的，所述复合酶为木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶中的两种或两种以上。
其中，在步骤(2)中，所述将所得到的酵母乳进行热击处理后还包含加入柠檬酸，然后进行保温处理的步骤。优选的，以酵母乳的质量计，加入柠檬酸的量为1-5‰。较优选的，所述保温处理的保温温度为40-60℃，保温时间为12-20h，优选为16-20h，pH为4.5-6.4，优选为5-6。
在本发明优选的一种具体实施方式中，其中，所述热击处理的温度为40-50℃，优选的，所述热击处理的时间为40-50s。
在本发明优选的一种具体实施方式中，其中，在步骤(3)中，以酵母乳干物质的质量计，所述木瓜蛋白酶的添加量为1-3‰，优选为2-3‰，较优选为2.5-3‰；所述中性蛋白酶的添加量为1-3‰，优选为1.2-3‰，较优选为2.5-3‰；所述碱性蛋白酶的添加量为1-3‰，优选为1.2-3‰，较优选为2.5-3‰。
优选的，所述木瓜蛋白酶的酶解温度为55-65℃，pH为5-6.4，优选为5-5.8，酶解时间为6-10h；
所述中性蛋白酶的酶解温度为55-65℃，pH为5-6.4，优选为5-5.8，酶解时间为6-10h；
所述碱性蛋白酶的酶解温度为65-70℃，优选为68-70℃，pH为7-9，优选为8-9，酶解时间为10-15h。
在本发明优选的一种具体实施方式中，其中，在步骤(1)中，所述发酵培养采用流加方式流加碳源、氮源和磷源；
以质量份计，所述碳源为6000-8000份，所述氮源为400-700份，优选为500-700份，所述磷源为300-600份；
所述碳源为糖蜜，优选为25-35wt％的糖蜜，更优选为30wt％的糖蜜；
所述氮源为硫酸铵；
所述磷源为磷酸二氢钾。
其中，所述发酵培养的发酵温度为29-33℃，发酵时间为20-30h，发酵的pH为4.5-6.5。
在本发明优选的一种具体实施方式中，其中，还包含将制备得到的水解物进行干燥的步骤：在酶解反应结束后，将酵母水解物加热至75-85℃，保温2-5h，干燥得到酵母水解物。
本发明还提供了上述酵母水解物或上述制备方法所得到的水解物在饲料中的应用，优选在母猪饲料中的应用，较优选在泌乳母猪饲料中的应用。
本发明还提供了一种饲料，其包含上述的酵母水解物和基础日粮，其中，所述酵母水解物的添加量为0.3-1wt％。
本发明提供了一种饲料，其包含上述的酵母水解物和基础日粮，其中，所述酵母水解物替代鱼粉添加到基础日粮中，所述酵母水解物替代鱼粉的量为0.5-1wt％。
下面对本实施例所用的原料及设备的生产厂家，以及产品分析使用的设备和分析方法进行说明如下，其中所述的化学物质没有标明的均为常规试剂的化学纯级别。实施例所用到的原料的信息及实验设备如表1和表2所示
表1实施例中所用到的原料的信息
原料信息 纯度 生产厂家
糖蜜 一级 广西南宁糖业股份有限公司
柠檬酸 99％食品级 潍坊英轩实业有限公司
木瓜蛋白酶 10万u/g食品级 南宁庞博生物工程有限公司
中性蛋白酶 10万u/g食品级 南宁庞博生物工程有限公司
碱性蛋白酶 10万u/g食品级 南宁庞博生物工程有限公司
表2实施例中所用到的实验设备的信息
设备名称 型号 生产厂家
离心机 TGC-16C 上海安亭科学器材厂
水分测定仪 MF-50 艾安德仪器有限公司
分光光度计 UV2000 上海智诚分析仪器制造有限公司
旋涡混合器 VM-D 上海皓庄仪器有限公司
压力蒸汽灭菌器 MLS-3751L-PC 日本松下三洋
高效液相色谱仪 LC300 日本岛津
实施例一 酵母水解物的制备
(1)酵母发酵培养
培养液含有碳源、氮源、磷源，其中碳源为30％浓度的糖蜜7000g，氮源为硫酸铵400g，磷源为磷酸二氢钾600g。将培养液在121℃灭菌10min，接种酵母菌进行发酵培养，发酵温度29℃，发酵时间30h，发酵pH 4.5-6.5，获得纯培养液体发酵酵母乳。
(2)酵母自溶
将酵母乳在温度80℃进行热击50s，向所述酵母乳中加入5‰柠檬酸调节pH为4.5；降温至50℃，保温12h；
(3)酵母酶解：
调节自溶处理后的溶液pH为5，温度58℃，加入1‰木瓜蛋白酶进行酶解反应8h；调节pH为6.4，温度58℃，加入2.5‰中性蛋白酶进行酶解反应8h；再调节pH为7，温度65℃，加入1.2‰碱性蛋白酶进行酶解反应15h。
(4)浓缩干燥
酶解反应结束后，升温到75℃保温5h，灭活酶，并浓缩干燥，获得酵母水解物产品。
将上述制备得到的水解物进行溶解率、蛋白质含量、核酸含量、酸溶蛋白含量、小肽的含量以及酵母细胞壁含量(即甘露聚糖和β-葡聚糖含量)的测定。
1.酵母水解物的溶解率的测定方法
1.1测定原理
使样品溶解于水，通过离心收集沉淀，计算出溶出物质重量占总重的比例。
1.2试剂与仪器
a)蒸馏水；
b)离心机(5000g)；
c)水分测定仪；
d)分析天平；
1.3测定步骤
准确称取样品10g(精确到0.1mg),记为m0，溶解于200mL蒸馏水中，使其充分溶解后全部转入离心杯中，5000g离心5min，准确测定沉淀重量，记为m1，并测定沉淀干物质含量(按照GB 5009.3-2010第一法检测)，沉淀干物质含量记为D。
1.4结果计算
样品溶解率为：
X——样品溶解率，％；
m0——称取样品重量，g；
m1——离心后沉淀重量，g；
D——离心后沉淀干物质含量，％。
计算结果保留至小数点后1位。
经过上述进行测定，得到实施例一所制备得到的酵母水解物的溶解率为53.5％。
2.酵母水解物中蛋白质含量的测定
粗蛋白的测定参照GB/T6432-94饲料中粗蛋白的测定方法进行测定，其具体操作为：取1g试样，在混合催化剂(0.4g五水硫酸铜+6g硫酸钾)作用下，加入12ml浓硫酸进行消煮；再进行蒸馏，用硼酸吸收产物氨；再用0.1mol/l的盐酸滴定，读取数据，计算氮含量，蛋白质系数选用N(氮含量)×6.25，计算得到粗蛋白的含量。
根据上述方法，得到酵母水解物中蛋白质的含量为44.60％。
3.酵母水解物中的核酸含量的测定
按《饲料中总磷的测定分光光度法》(GB/T 6437)测定总磷。核酸分子结构中含有一定比例的磷(RNA含磷量约为8.5％～9.0％，DNA含磷量约为9.2％)，测定其含磷量即可求出核酸含量，按下式计算：核酸含量＝总磷×340/31。其具体操作为：将酵母核酸中的磷经消化后生成溶于水的无机磷，与钼酸铵反应生成磷钼酸铵，在酸性条件下，用还原剂生成钼兰，其颜色的深浅与P2O5的含量成正比，符合郎伯-比尔定律，以分光光度计在700nm处测定吸光度。
经上述方法进行测定后，实施例一制备得到的酵母水解物的核酸含量为11.40％。
4、酵母水解物中的酸溶蛋白、小肽含量的测定
酸溶蛋白按国家标准GB/T 22492-2008大豆肽粉中附录B.4.1执行。酸溶蛋白为分子量低于1万道尔顿的小分子肽及游离氨基酸的总和。检测原理：高分子蛋白质在酸性条件(15％三氯乙酸)下易被沉淀，相对分子质量较小的蛋白质水解物(酸溶蛋白)可溶于酸性溶液(包括小分子肽和游离氨基酸)。样品经酸化后，测定滤液中的蛋白质含量，即可得到样品中酸溶蛋白含量。
小肽含量：滤液中的酸溶蛋白含量减去游离氨基酸含量，即可得到样品中小肽含量。游离氨基酸按国家标准GB/T 18246-2000饲料中氨基酸的测定中3.3酸提取法执行。
经上述方法进行测定后，实施例一制备得到的酵母水解物的酸溶蛋白含量为34.93％，小肽含量为23.52％。
5、酵母水解物中的甘露聚糖和β-葡聚糖的测定
1.1检测原理
根据葡聚糖和甘露糖在流动相和液相色谱柱的固定相之间具有不同的分配系数，将水解后的样品注入液相色谱，用纯水做流动相，糖类分子流出后，经示差检测器检测，用外标法定量。
在β-葡聚糖和甘露聚糖水解时，由于样品可能存在水解不彻底，以及水解产生的葡萄糖和甘露糖由于高温造成部分发生其它副反应，导致检测结果比产品中实际含有的β-葡聚糖和甘露聚糖偏低。检测中采用葡聚糖对照品对上述水解过程引起的误差进行修正。
1.2仪器
a)水浴锅；
b)旋涡混合器；
c)电炉；
d)压力蒸汽灭菌器；
e)高效液相色谱仪：带示差检测器和糖柱(6.5mm×300mm waters sugar pak-1)。
1.3试剂
a)纯水；
b)盐酸：37％左右；
c)葡萄糖：AR；
d)甘露糖：AR；
e)氢氧化钠：AR；
f)葡萄糖和甘露糖混合标液(2g/L)：分别称取葡萄糖和甘露糖各0.2000g，用纯水定容至100ml。
g)葡聚糖对照品(curdlan from Alcaligenes faecalis)：Sigma产品，货号C7821。
h)氢氧化钠溶液：300g/L。
1.4样品处理
准确称取400mg(精确至0.1mg)样品放入一个20ml的耐热玻璃制的带螺帽的小试管中，加入6.0ml盐酸(37％)，小心的将小瓶盖紧后用旋涡混合器混合，得到均一的悬浮液。将小瓶放入30℃水浴中处理45min，每15min用旋涡混合器振荡混合一次。然后将悬浮物定量的转移到200ml杜氏瓶中，用约100ml～120ml的水，分几次洗涤小试管，洗涤液并入杜氏瓶中。将杜氏瓶放入高压灭菌锅，121℃下处理60min。取出后冷却，用氢氧化钠溶液将溶液调pH到6～7，然后定容至200ml。使用0.45微米孔径的醋酸纤维素膜过滤备用。
同时准确称取葡聚糖对照品(见1.3(g))200mg，按样品处理方法进行同样的处理。
1.5色谱条件
采用纯水做为流动相，流速为0.5ml/min，柱温80℃，待仪器基线平稳后再进样。
1.6标准曲线的绘制
分别吸取甘露糖/葡萄糖标液(见1.3(f))1、2、3、4、5ml到10ml容量瓶中，用高纯水定容到刻度，得到甘露糖、葡萄糖各为200、400、600、800、1000mg/l的混合标样。在上述色谱条件下准确进样20ul，得到色谱峰面积和标准物质量浓度之间的回归方程，绘制标准曲线。
1.7样品及对照品的测定
在同样的色谱条件下，将处理好的样品和葡聚糖对照品分别注入色谱仪中，记录各色谱峰的保留时间和峰面积。用糖标样色谱峰的保留时间定性，用糖标样色谱峰的峰面积来定量。
1.8结果计算
β-葡聚糖或甘露聚糖的含量按下式计算：
X＝(A1×0.2×100)÷(m1×1000)×0.9×F……………………(1)
F＝P×(100-W)÷[(A2×0.2×100)÷(m2×1000)×0.9]…(2)
式中：
X---样品中β-葡聚糖或甘露聚糖的含量，％；
A1---根据样品溶液的峰面积，在标准曲线上查得的样品溶液的葡萄糖或甘露糖的含量，mg/L；
A2---根据葡聚糖对照品溶液的峰面积，在标准曲线上查得的样品溶液的葡萄糖的含量，mg/L；
m1---称取样品的质量，g；
m2---称取葡聚糖对照品的质量，g；
0.2---样品/葡聚糖对照品处理后定容的体积，L；
0.9---将葡萄糖或甘露糖换算成β-葡聚糖或甘露聚糖的系数；
F---样品酸水解中葡萄糖和甘露糖被破坏造成结果偏低的经验补偿系数；
P---葡聚糖对照品的纯度(依据试剂厂家提供的检测报告)；
W---葡聚糖对照品的水分(依据试剂厂家提供的检测报告)。
备注：在同一个实验室内，一般1～2个月检测F值即可。F值在1.25左右，实验室定期对F值进行修正。
1.9允许误差
在重复性检测条件下获得的两次独立测定结果的相对相差不得超过下表中所规定的数值：
将实施例一所制备得到的酵母水解物使用上述方法进行测定，得到甘露聚糖的含量为16.80％，β-葡聚糖的含量为17.50％，即酵母水解物中细胞壁的含量为34.3％。
实施例二 酵母水解物的制备
(1)酵母发酵培养
培养液含有碳源、氮源、磷源，其中碳源为30％浓度的糖蜜8000g，氮源为硫酸铵700g，磷源为磷酸二氢钾300g。将培养液在121℃灭菌10min，接种酵母菌进行发酵培养，发酵温度31℃，发酵时间26h，发酵pH 4.5-6.5，获得纯培养液体发酵酵母乳。
(2)酵母自溶
将酵母乳在温度85℃进行热击45s，向所述酵母乳中加入3‰柠檬酸调节pH为5；升温至40℃，保温20h；
(3)酵母酶解：
调节自溶处理后的溶液pH为5.8，温度55℃，加入2‰木瓜蛋白酶进行酶解反应10h；调节pH为5，温度55℃，加入1.2‰中性蛋白酶进行酶解反应10h；再调节pH为8，温度68℃，加入2.5‰碱性蛋白酶进行酶解反应12h。
(4)浓缩干燥
酶解反应结束后，升温到85℃保温2h，灭活酶，并浓缩干燥，获得酵母水解物产品。
使用实施例一中溶解率、蛋白质含量、核酸含量、酸溶蛋白含量、小肽含量以及酵母细胞壁含量的测定方法进行测定，经测定得到实施例二所制备得到的酵母水解物溶解率为55.8％，蛋白质含量为42.30％，核酸含量为10.59％，酸溶蛋白含量为35.13％，小肽含量为23.85％，甘露聚糖含量为15.30％，β-葡聚糖含量为13.10％，即酵母细胞壁的含量为28.40％。
实施例三 酵母水解物的制备
(1)酵母发酵培养
培养液含有碳源、氮源、磷源，其中碳源为30％浓度的糖蜜6000g，氮源为硫酸铵500g，磷源为磷酸二氢钾500g。将培养液在121℃灭菌10min，接种酵母菌进行发酵培养，发酵温度30℃，发酵时间28h，发酵pH 4.5-6.5，获得纯培养液体发酵酵母乳。
(2)酵母自溶
将酵母乳在温度95℃进行热击40s，向所述酵母乳中加入1‰柠檬酸调节pH为6.4；升温至60℃，保温16h；
(3)酵母酶解：
调节自溶处理后的溶液pH为6.4，温度65℃，加入3‰木瓜蛋白酶进行酶解反应6h；调节pH为5.8，温度65℃，加入3‰中性蛋白酶进行酶解反应6h；再调节pH为9，温度70℃，加入3‰碱性蛋白酶进行酶解反应10h。
(4)浓缩干燥
酶解反应结束后，升温到80℃保温3h，灭活酶，并浓缩干燥，获得酵母水解物产品。
使用实施例一中溶解率、蛋白质含量、核酸含量、酸溶蛋白含量、小肽含量以及酵母细胞壁含量的测定方法进行测定，经测定得到实施例三所制备得到的酵母水解物溶解率为59.20％，蛋白质含量为43.40％，核酸含量为11.10％，酸溶蛋白含量为36.20％，小肽含量为24.85％，甘露聚糖含量为15.60％，β-葡聚糖含量为14.50％，即酵母细胞壁的含量为30.10％。
实施例四 酵母水解物的制备
(1)酵母发酵培养
培养液含有碳源、氮源、磷源，其中碳源为30％浓度的糖蜜6500g，氮源为硫酸铵550g，磷源为磷酸二氢钾400g。将培养液在121℃灭菌10min，接种酵母菌进行发酵培养，发酵温度30℃，发酵时间25h，发酵pH 4.5-6.5，获得纯培养液体发酵酵母乳。
(2)酵母自溶
将酵母乳在温度90℃进行热击40s，向所述酵母乳中加入4‰柠檬酸调节pH为6；升温至45℃，保温18h；
(3)酵母酶解：
调节自溶处理后的溶液pH为6，温度60℃，加入1.5‰木瓜蛋白酶进行酶解反应9h；调节pH为6，温度60℃，加入2.2‰中性蛋白酶进行酶解反应9h。
(4)浓缩干燥
酶解反应结束后，升温到80℃保温2.5h，灭活酶，并浓缩干燥，获得酵母水解物产品。
使用实施例一中溶解率、蛋白质含量、核酸含量、酸溶蛋白含量、小肽含量以及酵母细胞壁含量的测定方法进行测定，经测定得到实施例四所制备得到的酵母水解物溶解率为52.50％，蛋白质含量为43.75％，核酸含量为10.26％，酸溶蛋白含量为33.54％，小肽含量为22.50％，甘露聚糖含量为13.22％，β-葡聚糖含量为16.05％，即酵母细胞壁的含量为29.27％。
实施例五 酵母水解物的制备
(1)酵母发酵培养
培养液含有碳源、氮源、磷源，其中碳源为30％浓度的糖蜜7500g，氮源为硫酸铵600g，磷源为磷酸二氢钾450g。将培养液在121℃灭菌10min，接种酵母菌进行发酵培养，发酵温度33℃，发酵时间30h，发酵pH 4.5-6.5，获得纯培养液体发酵酵母乳。
(2)酵母自溶
将酵母乳在温度83℃进行热击48s，向所述酵母乳中加入2.5‰柠檬酸调节pH为5.5；升温至50℃，保温18h；
(3)酵母酶解：
调节自溶处理后的溶液pH为5.5，温度62℃，加入2.5‰木瓜蛋白酶，酶解反应7h；调节pH为8.5，温度70℃，加入1‰碱性蛋白酶进行酶解反应14h。
(4)浓缩干燥
酶解反应结束后，升温到85℃保温4h，灭活酶，并浓缩干燥，获得酵母水解物产品。
使用实施例一中溶解率、蛋白质含量、核酸含量、酸溶蛋白含量、小肽含量以及酵母细胞壁含量的测定方法进行测定，经测定得到实施例五所制备得到的酵母水解物溶解率为50.55％，蛋白质含量为40.63％，核酸含量为9.86％，酸溶蛋白含量为32.26％，小肽含量为18.55％，甘露聚糖含量为12.52％，β-葡聚糖含量为13.26％，即酵母细胞壁的含量为25.78％。
实施例六 酵母水解物的制备
(1)酵母发酵培养
培养液含有碳源、氮源、磷源，其中碳源为30％浓度的糖蜜6500g，氮源为硫酸铵550g，磷源为磷酸二氢钾400g。将培养液在121℃灭菌10min，接种酵母菌进行发酵培养，发酵温度30℃，发酵时间25h，发酵pH 4.5-6.5，获得纯培养液体发酵酵母乳。
(2)酵母自溶
将酵母乳在温度95℃进行热击40s，向所述酵母乳中加入4‰柠檬酸调节pH为6；升温至45℃，保温15h；
(3)酵母酶解：
调节自溶处理后的溶液pH为6，温度60℃，加入1.2‰中性蛋白酶，酶解反应9h；调节pH为7，温度68℃，加入3‰碱性蛋白酶进行酶解反应15h。
(4)浓缩干燥
酶解反应结束后，升温到80℃保温5h，灭活酶，并浓缩干燥，获得酵母水解物产品。
使用实施例一中溶解率、蛋白质含量、核酸含量、酸溶蛋白含量、小肽含量以及酵母细胞壁含量的测定方法进行测定，经测定得到实施例六所制备得到的酵母水解物溶解率为51.63％，蛋白质含量为42.13％，核酸含量为9.51％，酸溶蛋白含量为33.84％，小肽含量为21.60％，甘露聚糖含量为15.09％，β-葡聚糖含量为12.46％，即酵母细胞壁的含量为27.55％。
对比例一 普通酵母水解物的制备
(1)酵母发酵培养
培养液含有碳源、氮源、磷源，其中碳源为30％浓度的糖蜜7000g，氮源为硫酸铵400g，磷源为磷酸二氢钾600g。将培养液在121℃灭菌10min，接种酵母菌进行发酵培养，发酵温度29℃，发酵时间30h，发酵pH 4.5-6.5，获得纯培养液体发酵酵母乳。
(2)酵母自溶
将酵母乳在温度80℃进行热击50s，向所述酵母乳中加入5‰柠檬酸调节pH为4.5；升温至50℃，保温12h；
(3)酵母酶解：
调节自溶处理后的溶液pH为6.4，温度58℃，加入1‰木瓜蛋白酶，酶解反应8h。
(4)浓缩干燥
酶解反应结束后，升温到75℃保温5h，灭活酶，并浓缩干燥，获得酵母水解物产品。
使用实施例一中溶解率、蛋白质含量、核酸含量、酸溶蛋白含量、小肽含量以及酵母细胞壁含量的测定方法进行测定，经测定得到对比例一所制备得到的酵母水解物溶解率为45.23％，蛋白质含量为43.56％，核酸含量为10.85％，酸溶蛋白含量为27.09％，小肽含量为15.80％，甘露聚糖含量为15.35％，β-葡聚糖含量为17.20％，即酵母细胞壁的含量为32.55％。
对比例二 普通酵母水解物的制备
(1)酵母发酵培养
培养液含有碳源、氮源、磷源，其中碳源为30％浓度的糖蜜7000g，氮源为硫酸铵400g，磷源为磷酸二氢钾600g。将培养液在121℃灭菌10min，接种酵母菌进行发酵培养，发酵温度29℃，发酵时间30h，发酵pH 4.5-6.5，获得纯培养液体发酵酵母乳。
(2)酵母自溶
将酵母乳在温度80℃进行热击50s，向所述酵母乳中加入5‰柠檬酸调节pH为4.5；升温至50℃，保温12h；
(3)酵母酶解：
调节自溶处理后的溶液pH为6.4，温度58℃，加入2.5‰中性蛋白酶，酶解反应8h。
(4)浓缩干燥
酶解反应结束后，升温到75℃保温5h，灭活酶，并浓缩干燥，获得酵母水解物产品。
使用实施例一中溶解率、蛋白质含量、核酸含量、酸溶蛋白含量、小肽含量以及酵母细胞壁含量的测定方法进行测定，经测定得到对比例二所制备得到的酵母水解物溶解率为48.60％，蛋白质含量为44.02％，核酸含量为11.00％，酸溶蛋白含量为29.68％，小肽含量为16.85％，甘露聚糖含量为14.80％，β-葡聚糖含量为18.23％，即酵母细胞壁的含量为33.03％。
对比例三 普通酵母水解物的制备
(1)酵母发酵培养
培养液含有碳源、氮源、磷源，其中碳源为30％浓度的糖蜜7000g，氮源为硫酸铵400g，磷源为磷酸二氢钾600g。将培养液在121℃灭菌10min，接种酵母菌进行发酵培养，发酵温度29℃，发酵时间30h，发酵pH 4.5-6.5，获得纯培养液体发酵酵母乳。
(2)酵母自溶
将酵母乳在温度80℃进行热击50s，向所述酵母乳中加入5‰柠檬酸调节pH为4.5；升温至50℃，保温12h；
(3)酵母酶解：
调节自溶处理后的溶液pH为7，温度65℃，加入1.2‰碱性蛋白酶，酶解反应15h。
(4)浓缩干燥
酶解反应结束后，升温到75℃保温5h，灭活酶，并浓缩干燥，获得酵母水解物产品。
使用实施例一中溶解率、蛋白质含量、核酸含量、酸溶蛋白含量、小肽含量以及酵母细胞壁含量的测定方法进行测定，经测定得到对比例三所制备得到的酵母水解物溶解率为47.55％，蛋白质含量为44.31％，核酸含量为10.51％，酸溶蛋白含量为28.60％，小肽含量为16.22％，甘露聚糖含量为17.70％，β-葡聚糖含量为16.80％，即酵母细胞壁的含量为34.50％。
对比例四 普通酵母水解物的制备
(1)酵母发酵培养
培养液含有碳源、氮源、磷源，其中碳源为30％浓度的糖蜜7000g，氮源为硫酸铵400g，磷源为磷酸二氢钾600g。将培养液在121℃灭菌10min，接种酵母菌进行发酵培养，发酵温度29℃，发酵时间30h，发酵pH 4.5-6.5，获得纯培养液体发酵酵母乳。
(2)酵母自溶
将酵母乳在温度80℃进行热击50s，向所述酵母乳中加入5‰柠檬酸调节pH为4.5；升温至50℃，保温12h；
(3)酵母酶解：
调节自溶处理后的溶液pH为6.4，温度58℃，加入0.8‰木瓜蛋白酶，酶解反应8h；调节pH为6.4，温度58℃，加入0.8‰中性蛋白酶酶解反应8h；再调节pH为7，温度65℃，加入0.8‰碱性蛋白酶，酶解反应15h。
(4)浓缩干燥
酶解反应结束后，升温到75℃保温5h，灭活酶，并浓缩干燥，获得酵母水解物产品。
使用实施例一中溶解率、蛋白质含量、核酸含量、酸溶蛋白含量、小肽含量以及酵母细胞壁含量的测定方法进行测定，经测定得到对比例四所制备得到的酵母水解物溶解率为45.30％，蛋白质含量为44.35％，核酸含量为10.68％，酸溶蛋白含量为30.03％，小肽含量为16.82％，甘露聚糖含量为14.16％，β-葡聚糖含量为13.25％，即酵母细胞壁的含量为27.41％。
对比例五 普通酵母水解物的制备
(1)酵母发酵培养
培养液含有碳源、氮源、磷源，其中碳源为30％浓度的糖蜜6000g，氮源为硫酸铵500g，磷源为磷酸二氢钾500g。将培养液在121℃灭菌10min，接种酵母菌进行发酵培养，发酵温度30℃，发酵时间28h，发酵pH 4.5-6.5，获得纯培养液体发酵酵母乳。
(2)酵母自溶
将酵母乳在温度95℃进行热击40s，向所述酵母乳中加入1‰柠檬酸调节pH为6.4；升温至60℃，保温16h；
(3)酵母酶解
调节自溶处理后的溶液pH为5，温度65℃，加入3.2‰木瓜蛋白酶，酶解反应6h；调节pH为5，温度65℃，加入3.2‰中性蛋白酶酶解反应6h；再调节pH为9，温度70℃，加入3.2‰碱性蛋白酶，酶解反应10h。
(4)浓缩干燥
酶解反应结束后，升温到80℃保温3h，灭活酶，并浓缩干燥，获得酵母水解物产品。
使用实施例一中溶解率、蛋白质含量、核酸含量、酸溶蛋白含量、小肽含量以及酵母细胞壁含量的测定方法进行测定，经测定得到对比例五所制备得到的酵母水解物溶解率为65.45％，蛋白质含量为43.58％，核酸含量为11.05％，酸溶蛋白含量为37.40％，小肽含量为17.50％，甘露聚糖含量为15.84％，β-葡聚糖含量为14.82％，即酵母细胞壁的含量为30.66％。
将实施例一与对比例一、对比例二和对比例三进行相比，其区别在于，实施例一采用三种酶进行水解，而对比例一仅采用单一的一种酶进行酶解，从酵母水解物的测定结果可以看出，实施例一中所得到的酵母水解物的溶解率高于对比例一、对比例二和对比例三所得到的酵母水解物的溶解率，而溶解高表明酵母经过自溶、酶解工艺之后，所含的营养成分分解为小分子物质，有利于动物对营养成分的吸收利用，此外，实施例一中所得到的酸溶蛋白及小肽含量均高于对比例一、对比例二和对比例三中所得到的酸溶蛋白及小肽含量，而酸溶蛋白质的含量高，代表其含有的小分子肽及游离氨基酸的含量高，而小肽具有提高动物对蛋白质的利用率、改善生长性能、促进对矿物质元素的吸收等作用。从而说明了本发明的技术方案能够得到溶解率、酸溶蛋白及小肽含量高的酵母水解物。
将实施例一与对比例四进行对比，其区别在于，对比例四中的三种酶的使用量均低于1‰，即均为0.8‰，其他条件均相同，从所得到的酵母水解物的测定结果可以看出，对比例四所得到的酵母水解物的溶解率、酸溶蛋白和小肽含量均低于实施例一中所得到的酵母水解物的溶解率、酸溶蛋白和小肽的含量。
将实施例三与对比例五进行对比，其区别在于，实施例三中的木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶的使用量均为3‰，而对比例五中的三种酶的使用量均为3.2‰，将二者所得到的酵母水解物进行测定分析，从分析结果中可以看出，虽然对比例五中的酵母水解物的溶解率及酸溶蛋白的含量均高于实施例三，但是小肽含量低于实施例三的小肽含量，可能原因是所添加的酶含量超出一定的范围后，小肽被过度水解成游离氨基酸，从而使得小肽的含量降低。此外，增加酶的含量也提高了制备酵母水解物的生产成本。
从对比例四和对比例五及与本发明的实施例的结果可以得到，采用本发明自溶酶的使用量在特定的范围之内，所得到的酵母水解物的溶解率、酸溶蛋白和小肽的含量较高。
以下是本发明所述酵母水解物对猪生理性能影响的实验：
1.在哺乳母猪饲料中分别添加0.3wt％实施例一、0.3wt％对比例一、0.3wt％对比例五所制备得到的酵母水解物对母猪泌乳性能的影响
试验选择泌乳母猪20头(宜昌农盛猪场)，胎次2-3胎，分为4组。试验周期从产前2-3天开始，至断奶(22-23日龄)结束，共计25天。采用猪场自配粉料，分别额外添加0.3wt％实施例一所制备的酵母水解物(实验组1)、0.3wt％对比例一所制备的酵母水解物(实验组2)、0.3％wt对比例五所制备的酵母水解物(实验组3)(表3)。
表3饲料组成(饲喂基础)％
原料，％ 对照组 实验组1 实验组2 实验组3
玉米 65.00 65.00 65.00 65.00
去皮豆粕 20.00 20.00 20.00 20.00
细麸 5.50 5.20 5.20 5.20
膨化大豆 5.00 5.00 5.00 5.00
进口鱼粉，粗蛋白68 1.00 1.00 1.00 1.00
细石粉 1.00 1.00 1.00 1.00
酵母水解物(实施例一) 0.00 0.3 0.00 0.00
酵母水解物(对比例一) 0.00 0.00 0.3 0.00
酵母水解物(对比例一) 0.00 0.00 0.00 0.3
磷酸氢钙 1.00 1.00 1.00 1.00
赖氨酸70％ 0.40 0.40 0.40 0.40
蛋氨酸 0.05 0.05 0.05 0.05
食盐 0.40 0.40 0.40 0.40
母猪预混料 0.30 0.30 0.30 0.30
氯化胆碱50％ 0.20 0.20 0.20 0.20
甘氨酸铁 0.10 0.10 0.10 0.10
抗氧化剂 0.05 0.05 0.05 0.05
总计 100 100 100 100
考察指标：全程记录母猪日采食量；分娩当天记录窝重、总产仔数、活仔数、断奶当天记录断奶仔猪头数和断奶窝重；母猪泌乳量＝(仔猪断奶窝重-仔猪初始窝重)×4，其结果如表4所示。
表4泌乳母猪日粮添加不同酵母水解物对母猪泌乳性能和仔猪生长性能的影响
对照组 实验组1 实验组2 实验组3
母猪采食量(kg/d) 4.65±0.45a 5.38±0.52b 4.95±0.40ab 5.12±0.46ab
初生均重(kg) 2.02±0.19 1.8±0.21 1.92±0.05 1.98±0.45
断奶均重(kg) 6.56±0.36 6.9±0.22 6.77±0.30 6.85±0.45
母猪泌乳量(kg/头) 170.32±25.21a 212.64±16.48b 198.56±10.24ab 205.48±14.87ab
断奶仔猪存活率 91.21％ 96.52％ 92.60％ 93.85％
注：母猪泌乳量＝(断奶窝重-初始窝重)*4；同行肩标不同小写字母表示差异显著(p<0.05)试验结果如表4所示。
从表4可以看出，泌乳母猪饲料添加3种不同方法制备的酵母水解物后，对母猪的泌乳性能和断奶仔猪的生长性能都有明显的促进作用，其中，实验组1的促进作用最佳，实验组3的促进作用次之。相比对照组，实验组1母猪采食量提高15.70％，断奶均重提高5.18％，断奶仔猪存活率提高5.31％，母猪泌乳量提升24.85％。
2.在哺乳母猪饲料中采用0.5wt％实施例一所制备得到的酵母水解物替代0.5％鱼粉对于母猪及仔猪生长性能的影响
选择预产期相近的3处棚舍的产房母猪(宜昌农盛猪场)，其中中间预产期母猪棚舍为试验组，剩余两处为对照组。试验从母猪进入产房开始到断奶结束，周期25天。试验组和对照组按照现阶段母猪饲喂标准，保证相同的饲喂模式。其试验日粮如表5所示。
表5饲料组成(饲喂基础)％
原料，％ 对照组 实验组
玉米 70.00 70.00
膨化豆粕 23.48 23.48
进口鱼粉，粗蛋白68％ 2.00 1.50
酵母水解物 0.50
磷酸氢钙 1.00 1.00
细石粉 1.00 1.00
大豆油 1.00 1.00
母猪多维多矿预混料0.5％ 0.50 0.50
食盐 0.35 0.35
赖氨酸 0.25 0.25
硫酸钠饲料级 0.20 0.20
苏氨酸 0.13 0.13
氯化胆碱50％ 0.10 0.10
合计 100.00 100.00
检测指标：记录母猪采食量、母猪产仔情况、仔猪初生重、仔猪断奶重、仔猪成活率、断奶仔猪正品率、断奶后一周发情率，其结果如表6和表7所示。
表6泌乳母猪日粮添加酵母水解物对母猪生产性能的影响
表7泌乳母猪日粮添加酵母水解物对仔猪生产性能的影响
由表6可知，与对照组相比，哺乳料中添加酵母水解物替代部分鱼粉后，对母猪采食量没有显著影响，但提高了断奶母猪一周发情率的趋势，并且平均耗料量降低，仔猪断奶日龄降低。
从表7可以看出，哺乳料中添加酵母水解物后对仔猪生产水平有显著的影响，出生仔猪的健仔数量明显增多，断奶重也有了明显提高，每头母猪提供的窝均合格仔猪数也有了明显提升。综上所述，在哺乳料中添加酵母水解物后能够在一定程度上提高母猪及仔猪的生产性能。
3.在泌乳母猪饲料中采用1wt％实施例一所制备得到的酵母水解物替代1wt％鱼粉对于母猪繁殖性能的影响
试验选择24头妊娠108d左右母猪(宜昌农盛猪场)，平均随机分成对照组和试验组，每头母猪为1个重复，对照组饲喂基础日粮，试验组饲喂基础日粮+1％酵母水解物-1％进口鱼粉。试验配料参照表8。实验周期：产前20天更换泌乳母猪料，至仔猪21日龄断奶时结束。
表8饲料组成(饲喂基础)％
原料，％ 对照组 实验组
玉米 66 66
43豆粕 20 20
进口超蒸鱼粉 3 2
大豆油 3 3
麦麸 4 4
4％哺乳母猪预混料 4 4
酵母水解物 0 1
合计 100 100
考察指标：全程记录母猪日采食量；分娩当天记录窝重、总产仔数、活仔数、断奶当天记录断奶仔猪头数和断奶窝重；母猪泌乳量＝(仔猪断奶窝重-仔猪初始窝重)×4。
其结果如表9和表10所示：
表9泌乳母猪日粮添加酵母水解物对仔猪存活率的影响
表10泌乳母猪日粮添加酵母水解物对仔猪存活率的影响
由表9可知，与对照组相比，在饲粮中添加1％酵母水解物，初生死仔数减少了0.6头，从表10可以看出，仔猪初生重提高31.25g，仔猪断奶重提高40.64g，平均断奶窝重提高1.1kg，，母猪掉膘减少了1.37mm。表明，酵母水解物可以提高仔猪的断奶窝重和断奶均重，且提高哺乳期母猪泌乳量，减少母猪哺乳期间的掉膘重。
实施例二及实施例六所制备得到的酵母水解物具有类似的效果。
综上，针对目前母猪养殖中存在的问题，本发明提供的饲用酵母水解物不仅能为母猪提供蛋白质、核酸、维生素等营养成分，含有的丰富酵母细胞壁对泌乳母猪的免疫仅能有一定的促进作用，起到调节母猪身体机能的效果。饲料添加本发明的酵母水解物，母猪体态好，乳汁充足，还能提高出生仔猪窝重和成活率。
以上所述，仅是本发明实施的较佳实施例，并非对本发明做任何形式上的限制，凡在本发明的精神和原则之内所做的修改、等同替换和改进等，均需要包含在本发明的保护范围之内。

Claims (41)

1.一种酵母水解物，其特征在于，所述酵母水解物包含蛋白质、酸溶蛋白、酵母细胞壁、核酸和小肽，以酵母水解物干物质质量计，所述蛋白质的含量为42.30-44.60%，所述酸溶蛋白的含量为34.93-36.20%，所述小肽的含量为23.52-24.85%，所述酵母细胞壁的含量为28.40-34.30%，所述核酸的含量≥10.59%，所述酵母水解物的溶解率为53.5-59.20%;
所述的酵母水解物的制备方法，其包含下述步骤：
（1）发酵培养：将酿酒酵母菌株Z2.2进行发酵培养，得到酵母乳；
（2）自溶：将步骤（1）所得到的酵母乳进入热击处理；
（3）酶解：然后加入复合酶酶解得到酵母水解物，所述复合酶为木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶；
所述酿酒酵母菌株Z2.2的保藏编号为CCTCC NO：M205128；
以酵母乳干物质的质量计，所述木瓜蛋白酶的添加量为1-3‰，所述中性蛋白酶的添加量为1-3‰，所述碱性蛋白酶的添加量为1-3‰。
2.根据权利要求1所述的酵母水解物，其中，所述酵母细胞壁包含甘露聚糖和β-葡聚糖，其中，所述甘露聚糖的含量为12-17%，所述β-葡聚糖的含量为13-18%。
3.根据权利要求1所述的酵母水解物，其中，所述酵母细胞壁包含甘露聚糖和β-葡聚糖，其中，所述甘露聚糖的含量为15.30-16.80%，所述β-葡聚糖的含量为13.10-17.50%。
4.权利要求1-3任一项所述的酵母水解物的制备方法，其包含下述步骤：
（1）发酵培养：将酿酒酵母菌株Z2.2进行发酵培养，得到酵母乳；
（2）自溶：将步骤（1）所得到的酵母乳进入热击处理；
（3）酶解：然后加入复合酶酶解得到酵母水解物，所述复合酶为木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶；
所述酿酒酵母菌株Z2.2的保藏编号为CCTCC NO：M205128；
以酵母乳干物质的质量计，所述木瓜蛋白酶的添加量为1-3‰，所述中性蛋白酶的添加量为1-3‰，所述碱性蛋白酶的添加量为1-3‰。
5.根据权利要求4所述的制备方法，其中，在步骤（2）中，所述将所得到的酵母乳进行热击处理后还包含加入柠檬酸，然后进行保温处理的步骤。
6.根据权利要求4所述的制备方法，其中，所述热击处理的温度为80-95℃。
7.根据权利要求5所述的制备方法，其中，所述热击处理的温度为80-95℃。
8.根据权利要求4所述的制备方法，其中，所述热击处理的时间为40-50s。
9.根据权利要求5所述的制备方法，其中，所述热击处理的时间为40-50s。
10.根据权利要求6所述的制备方法，其中，所述热击处理的时间为40-50s。
11.根据权利要求5所述的制备方法，其中，以酵母乳的质量计，加入柠檬酸的量为1-5‰。
12.根据权利要求7所述的制备方法，其中，以酵母乳的质量计，加入柠檬酸的量为1-5‰。
13.根据权利要求9所述的制备方法，其中，以酵母乳的质量计，加入柠檬酸的量为1-5‰。
14.根据权利要求5所述的制备方法，其中，所述保温处理的保温温度为40-60℃，保温时间为12-20h，pH为4.5-6.4。
15.根据权利要求7所述的制备方法，其中，所述保温处理的保温温度为40-60℃，保温时间为12-20h，pH为4.5-6.4。
16.根据权利要求9所述的制备方法，其中，所述保温处理的保温温度为40-60℃，保温时间为12-20h，pH为4.5-6.4。
17.根据权利要求11所述的制备方法，其中，所述保温处理的保温温度为40-60℃，保温时间为12-20h，pH为4.5-6.4。
18.根据权利要求14所述的制备方法，其中，所述保温处理的保温时间为16-20h。
19.根据权利要求14所述的制备方法，其中，所述保温处理的pH为5-6。
20.根据权利要求4-19任一项所述的制备方法，其中，在步骤（3）中，以酵母乳干物质的质量计，所述木瓜蛋白酶的添加量为2-3‰；所述中性蛋白酶的添加量为1.2-3‰；所述碱性蛋白酶的添加量为1.2-3‰。
21.根据权利要求4-19任一项所述的制备方法，其中，在步骤（3）中，以酵母乳干物质的质量计，所述木瓜蛋白酶的添加量为2.5-3‰；所述中性蛋白酶的添加量为2.5-3‰；所述碱性蛋白酶的添加量为2.5-3‰。
22.根据权利要求4-19任一项所述的制备方法，其中，
所述木瓜蛋白酶的酶解温度为55-65℃，pH为5-6.4，酶解时间为6-10h；
所述中性蛋白酶的酶解温度为55-65℃，pH为5-6.4，酶解时间为6-10h；
所述碱性蛋白酶的酶解温度为65-70℃，pH为7-9，酶解时间为10-15h。
23.根据权利要求20所述的制备方法，其中，
所述木瓜蛋白酶的酶解温度为55-65℃，pH为5-6.4，酶解时间为6-10h；
所述中性蛋白酶的酶解温度为55-65℃，pH为5-6.4，酶解时间为6-10h；
所述碱性蛋白酶的酶解温度为65-70℃，pH为7-9，酶解时间为10-15h。
24.根据权利要求22所述的制备方法，其中，所述木瓜蛋白酶的酶解pH为5-5.8。
25.根据权利要求22所述的制备方法，其中，所述中性蛋白酶的酶解pH为5-5.8。
26.根据权利要求22所述的制备方法，其中，所述碱性蛋白酶的酶解温度为68-70℃，pH为8-9。
27.根据权利要求4-19任一项所述的方法，其中，在步骤（1）中，所述发酵培养采用流加方式流加碳源、氮源和磷源；
以质量份计，所述碳源为6000-8000份，所述氮源为400-700份，所述磷源为300-600份；
所述碳源为糖蜜，
所述氮源为硫酸铵；
所述磷源为磷酸二氢钾。
28.根据权利要求20所述的方法，其中，在步骤（1）中，所述发酵培养采用流加方式流加碳源、氮源和磷源；
以质量份计，所述碳源为6000-8000份，所述氮源为400-700份，所述磷源为300-600份；
所述碳源为糖蜜，
所述氮源为硫酸铵；
所述磷源为磷酸二氢钾。
29.根据权利要求22所述的方法，其中，在步骤（1）中，所述发酵培养采用流加方式流加碳源、氮源和磷源；
以质量份计，所述碳源为6000-8000份，所述氮源为400-700份，所述磷源为300-600份；
所述碳源为糖蜜，
所述氮源为硫酸铵；
所述磷源为磷酸二氢钾。
30.根据权利要求27所述的方法，其中，所述氮源为500-700份。
31.根据权利要求27所述的方法，其中，所述碳源为25-35wt%的糖蜜。
32.根据权利要求27所述的方法，其中，所述碳源30wt%的糖蜜。
33.根据权利要求27所述的制备方法，其中，在步骤（1）中，所述发酵培养的发酵温度为29-33℃，发酵时间为20-30h，发酵的pH为4.5-6.5。
34.根据权利要求28所述的制备方法，其中，在步骤（1）中，所述发酵培养的发酵温度为29-33℃，发酵时间为20-30h，发酵的pH为4.5-6.5。
35.根据权利要求29所述的制备方法，其中，在步骤（1）中，所述发酵培养的发酵温度为29-33℃，发酵时间为20-30h，发酵的pH为4.5-6.5。
36.根据权利要求4-19任一项所述的方法，其中，还包含将所述的酵母水解物进行干燥的步骤：酶解反应后，升温至75-85℃，保温2-5h，干燥得到酵母水解物。
37.权利要求1-3任一项所述的酵母水解物或权利要求4-36任一项所述的方法制备得到的酵母水解物在饲料中的应用。
38.权利要求1-3任一项所述的酵母水解物或权利要求4-36任一项所述的方法制备得到的酵母水解物在母猪饲料中的应用。
39.权利要求1-3任一项所述的酵母水解物或权利要求4-36任一项所述的方法制备得到的酵母水解物在泌乳母猪饲料中的应用。
40.一种饲料，其包含权利要求1-3任一项所述的酵母水解物或权利要求4-36任一项所述的方法制备得到的酵母水解物和基础日粮，所述酵母水解物的添加量为0.3-1wt%。
41.一种饲料，其包含权利要求1-3任一项所述的酵母水解物或权利要求4-36任一项所述的方法制备得到的酵母水解物，所述酵母水解物替代鱼粉添加到基础日粮中，所述酵母水解物替代鱼粉的量为0.5-1wt%。
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