ES2335783T3 - Producto fermentado sin lactosa a partir de batido de frutos secos sin legumbres y/o horchata. - Google Patents

Producto fermentado sin lactosa a partir de batido de frutos secos sin legumbres y/o horchata. Download PDF

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ES2335783T3 ES05743929T ES05743929T ES2335783T3 ES 2335783 T3 ES2335783 T3 ES 2335783T3 ES 05743929 T ES05743929 T ES 05743929T ES 05743929 T ES05743929 T ES 05743929T ES 2335783 T3 ES2335783 T3 ES 2335783T3
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M&Ordf; Carmen Miralles Aracil
Adolfo Marti Vidagany
Isabel Martinez Ortiz
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Abstract

Esta invención describe productos fermentados con bacterias lácticas y probióticos a partir leche o batido de almendras (Prunus amygdalus var dulcis), de otros frutos secos no legumbres u horchata, obtenida de tubérculos de chufa (Cyperus sculentus). Presentan los beneficios nutricionales de los frutos secos y la horchata y de las bacterias probióticas añadidas, con sabor propio y consistencia, acidez y cierto aroma similar al yogur. Opcionalmente, si se mantiene baja la concentración de azúcares poseerán propiedades astringentes y de repoblación de la flora intestinal. También se pueden combinar con aditivos y sabores y enriquecer con minerales, vitaminas, fibra u oligosacáridos con efecto bifidogénico, etc., o pasteurizar después de la fermentación. En casi todos los casos estos productos constituyen un excelente complemento nutricional para adolescentes, deportistas o personas de edad avanzada.

Description

Producto fermentado sin lactosa a partir de batido de frutos secos sin legumbres y/o horchata.
Sector de la técnica
Industria láctea, transformación de frutos secos, producción de horchata de chufa, producción de leche de almendras, postres lácteos.
Estado de la técnica
En las zonas de clima templado y seco, existen pocas explotaciones lecheras, por lo que evidentemente, la leche para consumo en fresco no es parte de su acervo cultural. Sin embargo, tradicionalmente se han elaborado numerosas bebidas a partir de productos vegetales de gran valor nutricional y notables cualidades organolépticas, entre las que destacan la leche de almendras y la horchata de chufa.
El consumo de almendras y productos derivados está ligado a la cultura de estas regiones de clima mediterráneo desde tiempos prerromanos, constituyendo un alimento de alto valor nutritivo y energético. Su composición bioquímica varía poco entre las numerosas variedades conocidas: la fracción lipídica es rica en ácidos grasos poliinsaturados, por lo que posee propiedades anticolesterolémicas, sus proteínas son altamente digeribles y el principal carbohidrato que contiene es la sacarosa (Características físico-químicas y tecnológicas de la almendra de la Comunidad Valenciana (1999), Monografías. Vols I, II y III.- AINIA, Valencia). Sus cualidades sensoriales son excelentes pues tienen sabor propio y característico.
Desde antiguo se conoce y utiliza la "leche de almendras" por sus propiedades nutricionales en nutrición infantil de sustitución, como complemento de la dieta en mujeres en lactación y personas de edad avanzada, así como por sus propiedades cosméticas. Teniendo en cuenta la composición porcentual media del fruto seco (Tabla 1), la leche de almendras (o batido) con un contenido en materia seca del 10-15% puede aproximarse nutricionalmente a la leche de vaca, con un ligero exceso de grasa y deficiencia de azúcares. No obstante, el contenido en minerales de la leche de vaca es todavía muy superior (Tabla 2).
TABLA 1 Comparación del contenido promedio en nutrientes de las principales variedades de almendra con la leche de vaca
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TABLA 2 Comparación del contenido promedio en minerales de las principales variedades de almendra con la leche de vaca (mg/100 g)
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Existen hoy en día numerosas casas comerciales que distribuyen productos líquidos fabricados exclusivamente a partir de almendras, avellanas u otros frutos secos, a los que legalmente no se puede denominar leche y que en su defecto utilizan los términos batido, lechada, etc. El producto comercial más antiguo de esta gama puede que sea la crema o concentrado de almendras, que es una pasta de almendras finamente molidas lista para disolver en agua por el consumidor y que se conserva bien gracias a su elevada concentración de azúcar añadido (40%) . Sin embargo, no consta que existan publicaciones ni producto comercial registrado que se haya preparado fermentando este sustrato.
En la cuenca mediterránea y norte de África se cultiva y consumen los tubérculos de Cyperus sculentus como fruto seco. En España se denomina "chufa", y en inglés también "earth almond" o "tigernut" y también "chufa", y se usa para preparar horchata, llamada antiguamente leche de chufa. Este extracto de chufa posee un alto contenido en almidones y azúcares (Tabla 3), así como una elevada proporción de ácidos grasos poliinsaturados (principalmente ácido oleico).
TABLA 3 Valor nutricional de la horchata de chufa (tigernut, Cyperus sculentus)
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La elaboración tradicional de la horchata de chufa comienza con el lavado y tratamiento germicida de la chufa. Una vez aclarado, se ponen en remojo un tiempo, se aclara de nuevo y se procede a su trituración en un molino. En la trituración se añaden aproximadamente 3 litros de agua por kilo de chufa, se prensa después para obtener el primer extracto y se tamiza. El residuo del tamiz y del prensado se mezclan, añadiendo alrededor de dos litros de agua por kg de chufa, se prensa y se tamiza para formar un segundo extracto que se añade al anterior, con lo que se obtiene el extracto final. Finalmente el proceso de elaboración de la horchata se completa disolviendo la proporción deseada de azúcar de caña (sacarosa), por lo general entre 100 y 150 gramos por litro de extracto, se tamiza de nuevo (procedimiento resumido, según el Consejo Regulador de la Horchata de Chufa de Valencia, www.chufadevalencia.org/ESP/HORCHATA). Tradicionalmente se consumía de forma estacional y en fresco, pero numerosas firmas comerciales distribuyen todo el año este producto pasteurizado, esterilizado o congelado. Posee propiedades organolépticas muy características, sin embargo, su alto contenido en almidones no solubles y la falta de emulsificantes naturales en este producto dificultan en gran medida su conservación en frío y su estabilidad tras el tratamiento térmico. Tampoco existe registro conocido de productos fermentados obtenidos a partir de horchata de chufa.
Debido a los problemas de intolerancia a lactosa y alergias a proteínas de la leche y a una considerable saturación del mercado, se observa un incremento en investigaciones y publicaciones en las que se describe el uso de sustratos de fermentación de origen vegetal. Sin embargo, en ninguno se utilizó leche de almendra o leche de frutos secos u horchata de chufa como materia prima [Martensen, O., Öste, R. y Obst, H. (2002) Texture promoting capacity and EPS formation by lactic acid bacteria in three different oat-based non-dairy media. Eur Food Res Technol 214: 232-236; Kovalenko-IV; Briggs, JL (2002) Textural characterization of soy-based yogurt by the vane method. Journal-of-Texture-Studies 33 (2) 105-118; Ashay, OA; Taiwo, LB; Fasoyiro, SB; Akinnagbe CA (2001) Compositional and shelf-life properties of soy-yogurt using two starter cultures. Nutrition and Food-Science; 31 (5) 247-250; Yazici, F; Alvarez, VB; Hansen, PMT (1997) Fermentation and properties of calcium-fortified soy milk yogurt. Journal-of-Food-Science; 62 (3) 457-461; Heenan, CN; Adams, MC; Hosken, RW; Fleet, GH (2002) Growth médium for culturing probiotic bacteria for applications in vegetarían food products. Lebensmittel-Wissenschaft-und-Technologie; 35 (2) 171-176].
También ha irrumpido en el mercado (especialmente en tiendas de alimentación natural, orgánica y vegetariana) una serie de sustitutivos lácteos y productos fermentados de origen leguminoso, vegetal, fundamentalmente de soja, a pesar de sus carencias organolépticas y ciertos problemas de alergias derivados de sus proteínas.
Existen patentes que registraron la utilización de proteínas vegetales como base para una fermentación láctica.
Por ejemplo, la solicitud US2003031756: Method for preparing food products by fermenting soy milk with Streptococcus thermophilus. Boufassa Corinne; Tourancheau Myriam, 2003-02-13, GERVAIS DANONE SA (US), recoge un método para la obtención de un nuevo tipo de producto con post-acidificación reducida, por fermentación con Streptococcus thermophilus, u otras bacterias lácticas, partiendo de leche de soja como base (50%), a la que se añaden otros componentes, como harinas de granos o leche de almendras. Su diferente composición le aportará propiedades intrínsecamente diferentes al producto que se describe en esta invención.
Por ejemplo, la patente CN1385082 Lactic acid drink having almond protein and preparation process thereof. Ma Jing. 2002-12-18, presenta una bebida ácida obtenida a partir de leche y leche de almendra como materia prima, que se somete a fermentación láctica. Esta bebida se describe con propiedades beneficiosas para la salud y sabor agradable. No obstante, posee leche, algo que se pretende evitar en dietas vegetarianas, de alergia o intolerancia a componentes de la leche.
Por ejemplo, la solicitud CN1270217: Green-series functional beverages An Guoqing, 2000-10-18, también describe el uso de leche fermentada como producto de partida al que se añaden batidos o extractos de nuez, cacahuete, sésamo negro, almendra, flor de crisantemo, etc., con el fin de mejorar su contenido en nutrientes o promover su absorción, prevenir o curar enfermedades. Como se ha mencionado, en la invención que se describe más adelante se trató de evitar el uso de leche.
Por otra parte, existe un gran auge de los denominados "Alimentos Funcionales", algunos de ellos denominados así por contener microorganismos calificados como probióticos. Éstos son microorganismos que, más allá del mero aporte nutricional, ejercen efectos beneficiosos sobre uno o más órganos, mejorando el estado general de salud, o reduciendo el riesgo de contraer enfermedades [American Journal of Clinical Nutrition (2001) Special issue on Prebiotics and Probiotics, Feb; Vol 73 (2 Suppl)] Más específicamente, se han demostrado los siguientes efectos de las bacterias "funcionales" (probióticos): reducen el contenido en lactosa de productos lácteos, favorecen la degradación del colesterol y sales biliares, mejoran la respuesta inmunológica tanto local como sistémica, inhiben la proliferación de patógenos, producen numerosos metabolitos y vitaminas beneficiosos, y contribuyen a la eliminación de compuestos cancerígenos. Aunque los alimentos que los contienen se clasifican como Alimentos Funcionales, en muchos países no pueden denominarse yogures ya que, por ejemplo, y de acuerdo con el CÓDICE Alimentario español, "el yogur es un producto fermentado elaborado con leche (de vaca u otro animal) que contiene un mínimo de 10^{7} ufc/ml de Streptococcus salivarius subsp thermophilus y Lactobacillus delbrueckii subsp bulgaricus".
El documento WO 02 37984 describe un producto no lácteo fermentado. Se trata de leche basada en avena fermentada con bacterias ácidas. No existen indicios sugiriendo la posibilidad de usar frutos secos y/o chufa con este mismo fin.
El documento WO 99 27795 D4 describe un producto fermentado a partir de materia prima vegetal, siendo siempre la soja un componente esencial en el producto descrito en este documento.
El documento JP 2072848 describe un producto fermentado a partir de frutos secos y se convierte en una pasta usando bacterias lácticas.
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De acuerdo con la presente invención, no existe degradación enzimática previa a la fermentación. Por otra parte, de acuerdo con el documento JP 2072848 el producto de frutos secos que se fermenta no es una solución láctea sino una pasta.
El documento DE 199 13 399 describe un producto lácteo fermentado que contiene entre el 0,1 y el 30% de chufa por litro de leche y con las características de un producto lácteo.
El documento CN 1385 082 describe una bebida que comprende leche y leche de almendras como materia prima. El producto descrito por D7 es una bebida basada en ácido láctico que contiene proteína de almendra. En el documento CN 1385 082 tampoco existen indicios que describan o sugieran una razón para suprimir la leche.
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Descripción de la invención Breve descripción de la invención
Esta invención describe cómo aprovechar la riqueza nutricional y las cualidades sensoriales de la almendra, frutos secos y horchata de chufa, para preparar productos fermentados con bacterias lácticas y probióticos. Se han obtenido productos ante todo sabrosos, con múltiples efectos beneficiosos sobre la salud: aquellos derivados de la almendra y frutos secos (ácidos grasos poliinsaturados, proteínas de fácil digestibilidad, bajo contenido en azúcares) y las propiedades probióticas de las bacterias que se utilicen. Estos, excluyen la presencia de proteínas lácteas, lactosa y proteínas de soja, evitando problemas de intolerancia y alergias, así como su sabor a habichuela (soja). Además, se puede edulcorar o enriquecer estos productos con ciertos minerales (Fe, Ca), vitaminas, fibra u oligosacáridos con efecto bifidogénico, etc. Debido también a su alto contenido en potasio y magnesio, estos productos constituyen un excelente complemento nutricional para sectores concretos de población, como niños, adolescentes, deportistas o personas de tercera edad.
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Descripción detallada de la invención
Esta invención comprende una gama de productos obtenidos por fermentación láctica de bebidas, de origen vegetal, tradicionales en la Europa mediterránea y norte de África, como pueden ser la leche (o batido) de almendras y la horchata de chufa, así como otros productos nuevos de similar naturaleza obtenidos de otros frutos secos. Tanto la leche de almendras como la horchata de chufa son productos muy ricos en nutrientes, aunque con una composición diferente. La deliberada ausencia de leche, soja y derivados de ambos en estos nuevos productos evitará problemas de intolerancia y alergias a aquellos. Además, estos nuevos productos ofrecen sabores básicos diferentes que excluyen el sabor lácteo así como el marcado sabor a habichuela de la soja y sus derivados. En el producto obtenido los recuentos de coliformes son cero, y posee baja post-acidificación, es decir el pH desciende menos de 0,1-0,2 unidades de pH en 28 días. A estos productos, se les pueden añadir sustancias y aditivos para obtener productos que posean características fisicoquímicas, nutricionales y sensoriales muy diversas. Así mismo, puede eliminarse todo o parte del aceite de la almendra, que por si mismo es valioso, para obtener derivados bajos en grasa y para estandarizar el producto.
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La leche (o batido) de almendras, frutos secos y horchata de chufa
Tiene una gran importancia la obtención de una matriz liquida que contenga azúcares fermentables por las bacterias lácticas que se utilizarán como iniciadores, así como proteínas y aditivos, de forma que se obtenga una buena textura y viscosidad en el producto fermentado terminado (equivalente a la del yogur tradicional, yogures bebibles o leches fermentadas). Además, la matriz liquida de partida debe poseer una gran calidad microbiológica, al menos equivalente a la leche de vaca pasteurizada (recuentos de patógenos y enterobacterias = 0; mesófilos totales <10^{2}), puesto que normalmente se someterá a temperaturas de 30-37ºC durante la fermentación. Para ello, todos los procesos se deben realizar de forma muy higiénica. El proceso se inicia con el triturado, que puede realizarse en una o varias fases. Si se realiza en una sola fase, se añaden antes los azúcares y aditivos. Si se realiza un triturado grueso previo, se añaden los azúcares y otros aditivos tras este primer triturado, antes del molido fino.
Para el molido fino, se utiliza un molino de piedras o coloidal hasta obtener una suspensión de textura al gusto, desde suave a grumosa, ajustándose la concentración de materia seca también al gusto. A continuación se procede a la extracción (o adición) de ácidos grasos o aceites y, posteriormente, a su homogeneización. En los ensayos realizados, los aditivos se adicionan antes del molido fino para adaptarse mejor a nuestras condiciones, pero podrían añadirse en otras fases de la preparación.
El tratamiento térmico es de fundamental importancia, para reducir los recuentos bacterianos y, por tanto, para asegurar su calidad higiénica, realizándose a continuación del molido y la homogeneización. Las condiciones de temperatura, tiempo y presión dependerán de la naturaleza del producto (por ejemplo, almendras, avellanas, chufa, etc), del tamaño de partículas de la suspensión, su concentración de sólidos, viscosidad, carga microbiológica antes del tratamiento y de la estabilidad de los componentes al tratamiento térmico. Este tratamiento puede provocar la desnaturalización de las proteínas, pero favorece la gelificación de las propios almendras y también de los aditivos añadidos para estabilizar el producto, como goma de xantano, pectina, goma de garrofín, goma de acacia u otros polímeros. Los ensayos con leche de almendra que se describen en esta patente se realizaron sobre materia prima pasteurizada en nuestra planta piloto, pero también se ensayó la fermentación sobre producto comercial (batido de almendras, Diemilk, Nitriops) tratado a altas temperaturas (UHT) con los mismos resultados. Así mismo, los ensayos con leche (batido) de avellana y horchata de chufa, se realizaron con productos esterilizados por el método UHT.
Fermentación.- Las bacterias lácticas y bifidobacterias utilizadas fermentan la lactosa (azúcar disacárido de la leche) y otros azúcares produciendo ácido láctico (produce acidificación), polisacáridos (dan textura gelatinosa) y compuestos volátiles (aportan aromas). Tanto los frutos secos como la chufa poseen suficientes azúcares mono y disacáridos (como glucosa, fructosa y sacarosa) como para garantizar su fermentación, no obstante, también se pueden añadir antes o después del molido fino en cantidad abundante como sustrato de fermentación y como edulcorante. Aunque se podría añadir también lactosa, en los ejemplos que se describen se evitó su presencia, puesto que el producto que se pretende conseguir no debe tener lactosa y pese a que se podría garantizar su eliminación se prefería obviar las consecuencias negativas que comporta para muchos consumidores.
Hasta el momento, se han realizado ensayos con resultados muy satisfactorios utilizando diversos fermentos lácticos de la especie St. salivarius subsp thermophilus, así como de ésta misma bacteria St. salivarius subsp thermophilus junto con Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus, Bifidobacterium lactis, Lactobacillus casei y Lactobacillus acidophilus. Otras especies probióticas se pueden incorporar fácilmente a estos productos, como Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus johnsonii, Lactobacillus fermentum o Lactobacillus reuteri. Asimismo, puede también fermentarse la leche de almendra con inoculo de kéfir, obteniendo, por ejemplo, kéfir de almendra o de horchata. El inoculo de kéfir no es una única bacteria/levadura, sino que es un cultivo mixto y además muy variable en su composición de cepas.
Como se describe en los ejemplos, para obtener la acidez necesaria (pH < 4,6), el inoculo inicial recomendable de St. salivarius subsp thermophilus está en torno a 10^{6} - 10 ^{7} ufc/ml y el de los probióticos (otras especies) se ajusta en función de su potencial fermentativo y de otros factores relacionados con sus efectos metabólicos. Asimismo, la temperatura óptima de incubación es de 42ºC para St. salivarius subsp thermophilus, pero puede variar en función de las otras especies inoculadas y de las características del producto.
El producto final.- La seguridad de estos productos está garantizada, por el simple hecho de que, todos los componentes utilizados para su elaboración se consumen habitualmente y están autorizados. Así, utilizaremos como materia prima productos pasteurizados o esterilizados de consumo tradicional (frutos secos molidos u horchata de chufa, agua y aditivos alimentarios autorizados), a los que se le añaden cultivos iniciadores de productos lácteos y probióticos obtenidos de empresas especializadas, con las correspondientes garantías.
Los productos obtenidos poseen consistencia similar al yogur tradicional, yogures bebibles o leches fermentadas es decir, con valores de viscosidad aproximadamente entre 60 y 250 mPas/seg., en función del cultivo iniciador y aditivos utilizados. En este sentido, según las medidas realizadas en nuestro laboratorio, cabe diferenciar entre las leches fermentadas bebidas con menor grado de viscosidad de 37 a 155-60 mPas/seg. (respectivamente de, Leche Fermentada Natural [Central Lechera Asturiana] y Dan'up [Danone]) y los yogures y leches fermentadas para comer "con cuchara", que poseen valores medios de 210 a 250 mPas/seg. (Yogurt Natural y Bio [Danone], La Lechera [Nestlé], etc). Sin embargo, esta propiedad puede ajustarse a otros valores mediante los aditivos adecuados. Son ante todo sabrosos, con acidez variable según los inóculos iniciadores o probióticos utilizados (causada por la formación de ácido láctico) y un suave aroma y sabor del producto lácteo fermentado (posiblemente por la formación de diacetilo y acetaldehído). Esto los hace propicios para mezclarse con diferentes productos, como frutas diversas, chocolate, miel, cereales, diversos tipos de esencias y sabores que podrán ampliar enormemente la gama de productos derivados de éstos, o que se obtengan por mezclas posteriores.
La inclusión de especies bacterianas probióticas, tiene como consecuencia que el producto poseerá múltiples efectos beneficiosos sobre la salud: aquellos derivados de la almendra y frutos secos (ácidos grasos poliinsaturados, proteínas de fácil digestibilidad, alto contenido en K^{+}, bajo contenido en azúcares, etc.), o de la horchata de chufa, y las propiedades probióticas de las bacterias que se utilicen.
Puesto que la fermentación microbiana consume una cantidad determinada del azúcar disuelto, se pueden diseñar productos con distintos azúcares y distintas cantidades de ellos, para obtener productos con distintas propiedades, como su sabor dulce o capacidad astringente. También se pueden utilizar edulcorantes artificiales y azúcares no metabolizables (fructosa, sorbitol, etc.) en la confección de productos bajos en calorías o productos para diabéticos.
Además, estos productos se puede enriquecer con ciertos minerales (Fe, Ca), vitaminas, fibra u oligosacáridos con efecto bifidogénico, etc. para que estos productos cubran las necesidades de sectores concretos de población, como niños, adolescentes, deportistas o personas de tercera edad.
Una realización particular de esta invención que tendría bastante importancia, daría lugar a productos FERMENTADOS PASTEURIZADOS CON EFECTO "BIFIDUS", pero QUE NO REQUERIRÁN CADENA DE FRÍO. Ello se conseguirá añadiendo, entre otros aditivos, oligofructosacáridos o diferentes almidones a la matriz líquida de la leche de almendras. Ajustando su concentración, así como la de otros gelificantes (los oligofructosacáridos tienen por si mismos propiedades espesantes) para obtener la viscosidad deseada. En este caso, se llevará a cabo la fermentación inicial, al menos con una cepa de S. salivarius subsp thermophilus, y posteriormente el producto se pasteuriza, quedando listo para comercialización. Aunque este producto carecerá de fermentos lácticos y probióticos vivos, aportará ventajas logísticas y de comercialización importantes.
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Breve descripción del contenido de las figuras
Figura 1: Evolución del pH durante la fermentación de la leche de almendras inoculada con 10^{7} ufc/ml de tres cepas de Streptococcus salivarius subsp thermophilus: BS5 (\blacksquare), BS9 (\Delta) y BS12/(X). La línea del control representa la evolución del pH de la leche sin inocular con iniciadores.
Figura 2: Evolución del pH durante la fermentación de la leche de almendras inoculada con 10^{8} ufc/ml de St. salivarius subsp thermophilus BS5 (\blacksquare) , St. salivarius BS5 más Bifidobacterium lactis BL230 (\Delta) y St. salivarius con L. casei BL227 (X). La línea del control representa la evolución del pH de la lechada sin inocular con iniciadores.
Figura 3: Evolución del pH durante la fermentación de leche de avellanas inoculada con 10^{8} ufc/ml de St. salivarius subsp thermophilus: BS5 y Lactobacillus acidophilus BL228 (\blacksquare). La línea del control representa la evolución del pH de la leche sin inocular con iniciadores.
Figura 4 Evolución del pH durante la fermentación de horchata de chufa (Cyperus sculentus) inoculada con 10^{8} ufc/ml de St. salivarius subsp thermophilus: BS5 y Lactobacillus acidophilus BL228. La línea del control representa la evolución del pH de la horchata sin inocular con iniciadores.
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Ejemplo 1 Obtención un producto fermentado con St. salivarius subsp thermophilus a partir de leche de almendras
Materiales utilizados.- Las almendras utilizadas fueron de las variedades Marcona y Ferraduel, obteniéndose resultados similares con ambas variedades. Se probaron diferentes agentes estabilizantes (gelificantes o espesantes) como, goma de garrofín, goma de xantano, goma de acacia, almidón de maíz, carragenato y pectina, en concentraciones del 0,5% y 0,3%, seleccionándose finalmente la goma de xantano, goma de acacia y carragenato. Los gelificantes y estabilizantes son de naturaleza muy variada y tienen efecto sinérgico. Se probaron diferentes concentraciones de azúcar (de 10 a 77 g/1) que fue siempre sacarosa (azúcar de caña).
Equipamiento de planta piloto.- Calderín de vapor (Groen), picadora doméstica con vaso de cristal (Braun), Molino Coloidal (Fryma), homogeneizador (Mantón Gauli), intercambiador tubular fabricado por Luzzysa S.A. y automatizado por SUGEIN S.A. y cámara de flujo laminar (Telstar S.A.).
Otro equipo de laboratorio - Viscosímetro Tester VT5^{R} (Haake).
Métodos microbiológicos- Los recuentos en placa de petri se realizaron en los siguientes medios de cultivo: Coliformes, VRBG a 42ºC; clostridios sulfito reductores, TSC-D-cicloserina a 42ºC; mesófilos totales TSA a 37ºC; esporulados aerobios, LBA a 37ºC, después de calentar 10 min a 60ºC; Streptococcus STA a 42ºC; lactobacilos y Bifidobacterium lactis, MRS a 37ºC.
Seguimiento de la acidificación del producto durante la fermentación.- Para el seguimiento de las fermentaciones se utilizó un equipo de medición de pH y conductividad (Consort) con 6 puertos y conexión a puerto RS322 de un ordenador de sobremesa.
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1.- Obtención de una leche (o batido) de almendras homogeneizada y pasteurizada
En primer lugar, se debe obtener un sustrato pasteurizado (libre de contaminantes y posibles patógenos) con propiedades óptimas para soportar el crecimiento de bacterias lácticas (fermentos lácticos), de forma que las propiedades físicas, nutricionales y organolépticas del producto obtenido tras la fermentación sean las adecuadas.
Distintos lotes de entre 1 y 2 Kg de almendra descascarillada se escaldaron en un calderín de aproximadamente 5 l de capacidad. Tras su pelado manual con guantes higiénicos, se sometieron a un primer molido grueso en una picadora de vaso (Braun) tras el que se le añadió el agua, hasta tener una concentración de almendras de 100 g/l, y los aditivos en las siguientes proporciones: 66 g/l de azúcar de caña, 3 g/l de goma de acacia, 3 g/l de goma de xantano y 3 g/l de I-carragenato. A continuación se sometió la mezcla a un picado fino en un molino coloidal hasta que el producto tenía aspecto lechoso, con textura fina y sin que se puedan percibir fragmentos al paladar.
A continuación se homogeneizó a una presión de 300 kg/cm^{2}. En este punto, se realizó un control del proceso con recuento bacteriano (Tabla 4, datos "Antes de pasteurizar"). Luego se bombeó en el intercambiador tubular para su pasteurización. El tratamiento térmico se realizó a presión atmosférica durante más de 6 minutos a 95ºC. A esta temperatura, tratamientos más prolongados pueden dar lugar a la rotura de la suspensión, posiblemente por la desnaturalización de proteínas. Tras la pasteurización se realiza el segundo control con recuentos bacterianos (Tabla 4). Los datos del control microbiológico del proceso se muestran en la Tabla 4. La principal conclusión es que se debe mantener la temperatura de 95ºC durante más de 6,30 minutos para tener recuentos de mesófilos totales <10 u.f.c. por mililitro. A continuación se mezclan los inóculos de los cultivos en el producto y se realiza un recuento bacteriano.
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TABLA 4 Ajuste de parámetros del proceso de pasteurización: recuentos bacterianos y pH de la leche de almendras
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2 - Ensayo de fermentación con St. salivarius subsp thermophilus
Aunque la almendra posee de 3,5 a 4,2% de azúcares simples fermentables (Tabla 1), se desea ensayar la adición de otros mono y disacáridos (como glucosa, fructosa y sacarosa) en cantidad abundante como sustrato de fermentación y edulcorante. La eficacia de fermentación de estos azúcares dependerá de la especie y cepa bacteriana utilizada. El conocimiento previo de la capacidad fermentativa de distintas bacterias lácticas candidatas y los métodos desarrollados en nuestro laboratorio nos ha permitido seleccionar de forma rápida aquellas que producen acidificación y formación de polisacáridos idóneas para el tipo de producto que se desea. En este punto se realiza la medida de la viscosidad, recuentos bacterianos y caducidad. Los ensayos realizados con diversas cepas de la especie St. salivarius subsp thermophilus han sido muy satisfactorios (Figura 1). Puede observarse que con las tres cepas utilizadas se puede alcanzar el pH deseado en estos productos (4,4-4,6), aunque con distintos tiempos de fermentación. Como consecuencia, el número de coliformes detectado en este producto siempre fue cero.
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Ejemplo 2 Obtención un producto fermentado a partir de leche de almendras con probióticos
Una vez desarrollado el primer producto fermentado o PRODUCTO BASE del ejemplo anterior, se ensayó la adición de bacterias probióticas. Hoy en día, las más utilizadas comercialmente son cepas de las especies: Bifidobacterium lactis, L. casei, L. rhamnosus, L. acidophilus, L. delbrueckii subsp. bulgaricus, L. johnsonii, L. fermentum y L. reuteri, entre otras. La propia St. salivarius subsp thermophilus, que junto a Lactobacillus delbrueckii subsp bulgaricus, es responsable de la fermentación del yogur, frecuentemente se considera como prebiótico por si misma.
Cada cepa probiótica posee características metabólicas propias. Por ello se deberán ajustar ciertas condiciones, como la temperatura de incubación y la naturaleza de los azúcares añadidos (ver arriba), con el fin de obtener productos aptos para el consumo y en los que los probióticos se encuentren en cantidades elevadas, pues se estima que la ingesta mínima de un probiótico debe ser superior a 10^{9} bacterias por dosis.
Se ensayó en experimentos independientes la co-inoculación de la leche de almendras (de idéntica composición a la descrita anteriormente) con St. salivarius subsp thermophilus y además con tres cepas de las especies: Bifidobacterium lactis, L. casei y L. acidophilus. Al incubar a 37ºC para permitir el crecimiento de las cepas probióticas, St. salivarius subsp thermophilus fermenta y se desarrolla más lentamente que a 42ºC (ver Figura 1). No obstante, los resultados muestran que la adición de una nueva bacteria acelera el proceso de fermentación (Figura 2), obteniéndose en todos los casos productos con características fisicoquímicas y sensoriales muy aptas (Tabla 5).
La Tabla 5, también muestra los parámetros microbiológicos del proceso, demostrándose que, sobre la leche de almendras, hay proliferación de las bacterias inoculadas. Las propiedades del producto obtenido suelen ser idóneas, salvo en el caso de la inoculación con L. casei, en cuyo caso, se debería modificar el azúcar añadido o el inoculo para mejorar sus posibilidades comerciales.
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(Tabla pasa a página siguiente)
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Conservación de la viabilidad y post-acidificación de los diferentes probióticos en leche de almendras fermentada
Con el fin de estudiar la viabilidad de las bacterias probióticas introducidas en estos productos a lo largo del tiempo de almacenaje en refrigeración y exposición en los mostradores de frió, se determinó la diferencia entre el número de viables al inicio (día 1) y a los 23-30 días de conservación en refrigeración (4ºC) en tres fermentaciones que contenían St. salivarius subsp thermophilus BS5, St. salivarius subsp thermophilus BS5 y Lactobacillus acidophilus BL228 y St. salivarius subsp thermophilus BS5 y Bifidobacterium lactis BL230 (Tabla 6). Como conclusión se puede afirmar que, si bien los recuentos de St. thermophilus descienden en todos los casos alrededor de un orden de magnitud, Lactobacillus acidophilus y, especialmente, Bifidobacterium lactis permanecen casi con el mismo nivel de
viabilidad.
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TABLA 6 Efecto de la incubación a 4ºC sobre los recuentos de viables de St. salivarius subsp thermophilus (BS5), Lactobacillus acidophilus (BL228) y Bifidobacterium lactis (BL230), así como sobre el pH, en cada una de las tres fermentaciones de leche de almendras realizadas para estudiar su acidificación en frío
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En relación con el fenómeno negativo de continuada acidificación de los productos fermentados durante el almacenamiento (post-acidificación), se ha podido constatar que el cambio es muy pequeño: de 0,10-0,13 unidades de pH (Tabla 6) .
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Ejemplo 3 Obtención de productos fermentados a partir de otros frutos secos: fermentación de un batido de avellanas
La avellana, y otros frutos secos, también poseen pequeñas cantidades de azúcares simples fermentables, sin embargo, se desea ensayar la adición de sacarosa en cantidad abundante como sustrato de fermentación y edulcorante. Para el ensayo que se describe, se parte de un batido de avellanas (Diemilk, Nutriops) esterilizado a alta temperatura (UHT) con 7% de avellanas, maltodextrinas y sacarosa, dando la siguiente composición por 100 g: hidratos de carbono, 6.3 g; azucares, 3,6 g; grasas, 2,2 g (saturada, 0,6 g, monoinsaturada, 1,2 g; poliinsaturada, 0,4 g); fibra alimentaria, 0,4 g; Na, 0,05g. A este producto se añadieron inóculos de las especies, St. salivarius subsp thermophilus BS5 y L. acidophilus BL228 y se incubó a 37ºC (Figura 3) . Pudo observarse un descenso adecuado del pH (4,53) y una buena proliferación de las dos bacterias inoculadas, dando como resultado características fisicoquímicas y sensoriales excelentes (Tabla 4). Así, la viscosidad se estimó en 110 mPas. (Tabla 7).
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Ejemplo 4 Obtención de un producto fermentado a partir de horchata de chufa
La alta concentración de azúcares presente en la horchata de chufa constituye un excelente sustrato fermentable para las bacterias lácticas y bifidobacterias. Al poseer una baja concentración de proteínas (Tabla 3), la viscosidad deberá lograrse por producción de exopolisacáridos bacterianos y/o por la adición de estabilizantes y agentes gelificantes. La alta concentración de almidones en la horchata evita el uso de tratamientos térmicos a más de 72ºC sin que se cause gelificación. Ello requiere tratamientos adicionales como la decantación o la utilización de enzimas amilolíticas previas al tratamiento térmico.
Para el ensayo de fermentación, se utiliza una horchata de chufa comercial UHT (Frixia, Industrias Lácteas Moráis, S.A.) con los siguientes ingredientes: agua, chufa, azúcar, emulsificante (E472, E471), aromas naturales, canela y limón. A este producto se le añadieron inóculos de, St. salivarius subsp thermophilus BS5 y L. acidophilus BL228 y se incubó a 37ºC (Figura 4). Tras incubar 3 h y 45 minutos, se logró un descenso del pH adecuado (pH=4,47), obteniéndose un producto con aspecto cremoso (viscosidad de 60 mPas) y sabor excelente (Tabla 6). Aunque las bacterias inoculadas no lograron proliferar en la horchata como en otros sustratos, si mostraron ser metabólicamente muy activas, como se deduce por el descenso del pH.
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(Tabla pasa a página siguiente)
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Ejemplo 5 Productos fermentados pasteurizados con "efecto bifidus"
Esta solicitud tendría bastante importancia, daría lugar a productos FERMENTADOS PASTEURIZADOS QUE NO REQUERIRÁN CADENA DE FRÍO a partir de cualquiera de los ejemplos anteriores añadiendo una etapa de pasteurización tras la fermentación... Esta realización particular se realiza a partir de los ejemplos anteriores a los que se añade, entre otros aditivos, oligofructosacáridos o diferentes almidones de utilización lenta (para conseguir el "EFECTO BIFIDUS") a la matriz líquida de la leche de almendras, ajustando su concentración, así como la de otros gelificantes (los oligofructosacáridos tienen por si mismos propiedades espesantes) para obtener la viscosidad deseada. En este caso, se lleva a cabo la fermentación inicial, al menos con una cepa de S. salivarius subsp thermophilus, y posteriormente el producto se pasteuriza, quedando listo para comercialización. Aunque este producto carece de fermentos lácticos y probióticos vivos, aporta ventajas logísticas y de comercialización importantes.

Claims (24)

1. Producto fermentado sin lactosa caracterizado por que no contiene ni lactosa ni soja ni ninguno de sus componentes, obteniéndose el producto a partir de una solución lechosa de frutos secos y/u horchata de chufa, mezclados y homogeneizados en agua, usando como sustrato para la fermentación, bacterias lácticas, bifidobacterias u otros microorganismos solos o en combinación y el producto fermentado terminado presenta una textura y viscosidad equivalentes a la del yogur tradicional o a la de los yogures bebibles o bebidas fermentadas.
2. Producto fermentado sin lactosa de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizado por que no contiene leche, ni ninguno de sus componentes.
3. Producto fermentado sin lactosa de acuerdo con las reivindicaciones 1 y 2, caracterizado por que al sustrato de la fermentación se le añaden, como sustratos co-adyuvantes, diversos tipos de azúcares o carbohidratos por ejemplo mono y disacáridos.
4. Producto fermentado sin lactosa de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 3, caracterizado por que el sustrato de fermentación es leche de almendras.
5. Producto fermentado sin lactosa de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 3, caracterizado por que el sustrato de fermentación es leche de avellanas.
6. Producto fermentado sin lactosa de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 3, caracterizado por que el sustrato de fermentación es horchata de chufa que es una bebida de Cyperus sculentus.
7. Producto fermentado sin lactosa de acuerdo con las reivindicaciones 4 a 6, caracterizado por que el sustrato de fermentación es una mezcla de sustratos.
8. Producto fermentado sin lactosa de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 7, caracterizado por que el fermento comprende la especie de bacteria láctica Streptococcus salivarius subsp thermophilus.
9. Producto fermentado sin lactosa de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 8, caracterizado por que el fermento comprende la especie de bacteria láctica Lactobacillus delbrueckii subsp bulgaricus.
10. Producto fermentado sin lactosa de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 9, caracterizado por que el fermento comprende alguna de las siguientes especies de bifidobacterias como probióticos Bifidobacterium lactis, Lactobacillus casei y Lactobacillus acidophilus.
11. Producto fermentado sin lactosa de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 10, caracterizado por que el fermento comprende alguna de las siguientes especies de bifidobacterias como probióticos Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus johnsonii, Lactobacillus fermentum o Lactobacillus reuteri.
12. Producto fermentado sin lactosa de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 11, caracterizado por que el fermento comprende el inoculo del kéfir o alguno de sus componentes.
13. Producto fermentado sin lactosa de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 12, caracterizado por que puede añadirse carbohidratos y proteínas y aditivos o eliminarse grasas y aceites para obtener productos que posean características fisicoquímicas, nutricionales y sensoriales muy diversas o productos con conservación mejorada.
14. Producto fermentado sin lactosa de acuerdo con la reivindicación 13, caracterizado por que se añaden distintos tipos de azúcares o carbohidratos por sus propiedades edulcorantes, dietéticas o funcionales.
15. Producto fermentado sin lactosa de acuerdo con la reivindicación 14, caracterizado por que los azúcares o carbohidratos son fibra dietética u oligosacáridos con efecto bifidogénico.
16. Producto fermentado sin lactosa de acuerdo con la reivindicación 13, caracterizado por que se añaden edulcorantes artificiales o azúcares no metabolizables como fructosa o sorbitol.
17. Producto fermentado sin lactosa de acuerdo con la reivindicación 13, caracterizado por que se añaden, como agentes gelificantes, espesantes o estabilizantes, goma de garrofín, goma de xantano, goma de acacia, almidón de maíz, carragenato y/o pectina.
18. Producto fermentado sin lactosa de acuerdo con la reivindicación 13, caracterizado por que se añaden enzimas amilolíticas para evitar que se produzca la gelificación en el tratamiento térmico.
19. Producto fermentado sin lactosa de acuerdo con la reivindicación 13, caracterizado por que se añaden suplementos para enriquecer estos productos con ciertos minerales (Fe, Ca) y vitaminas.
20. Producto fermentado sin lactosa de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 19, caracterizado por que el producto final fermentado posee bacterias vivas que tras 28 días de almacenamiento a temperatura de refrigeración contienen como mínimo 10^{6} ufc/ml, tiene de acidez (pH < 4,6), con valores de viscosidad aproximadamente entre 60 y 250 mPas/seg., los recuentos de coliformes son cero.
21. Producto fermentado sin lactosa de acuerdo con la reivindicación 20, caracterizado por que el producto final fermentado posee baja post-acidificación, es decir, el pH desciende menos de 0,2 unidades de pH en 28 días.
22. Producto fermentado sin lactosa de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 19, caracterizado por que el producto final fermentado se pasteuriza tras la fermentación, manteniendo sus características propias de acidez, pH < 4,6, con valores de viscosidad aproximadamente entre 60 y 250 mPas/seg., y los recuentos de coliformes son cero.
23. Método para obtener un producto fermentado sin lactosa de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 22, caracterizado por que comprende las siguientes etapas:
Opcionalmente trituración gruesa del sustrato
Adición de agua
Adición de azúcares
Adición de aditivos, opcionalmente en una etapa posterior
Molienda fino, con un molino de piedras o coloidal hasta obtener una suspensión con una textura desde suave a grumosa.
Ajuste de la concentración de materia seca
Eliminación de grasas
Homogeneización hasta obtener un tamaño uniforme de las partículas de grasa en suspensión
Tratamiento térmico de pasteurización o esterilización, las condiciones de temperatura, tiempo y presión dependen de la naturaleza del sustrato, del tamaño de partículas en la suspensión, su concentración de sólidos, viscosidad, carga microbiológica antes del tratamiento y de la estabilidad de los componentes al tratamiento térmico
Adición de fermentos
ermentación entre 37º y 42ºC hasta alcanzar un pH<4,6
Refrigeración para detener la fermentación
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24. Método para obtener un producto fermentado sin lactosa de acuerdo con la reivindicación 23, caracterizado por que tras la fermentación se realiza una pasteurización posterior para obtener productos pasteurizados tras la fermentación que no requieren refrigeración y que tienen una vida útil superior a 28 días.
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