ES2287761T3 - Procedimiento para la preparacion por via enzimatica de agentes emulsionantes que contienen mono- y di-acil-gliceridos. - Google Patents
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Abstract
Procedimiento para la preparación por vía enzimática de emulsionantes que contienen mono- y di-acil-glicéridos, caracterizado porque a) se dispone previamente una mezcla a base de un componente fosfolipídico y de un componente triacil-glicerídico, b) a la mezcla procedente de la etapa a) del procedimiento se le añade una cantidad de una solución acuosa que contiene una (fosfo-)lipasa, tal que el contenido de agua de la mezcla está situado entre 3 y 15 % en peso, c) la mezcla obtenida de la etapa b) del procedimiento se lleva a reaccionar a unas temperaturas comprendidas entre 20º y 80ºC durante un período de tiempo de por lo menos 2 horas, y finalmente d) la mezcla, después del final de la reacción, se seca.
Description
Procedimiento para la preparación por vía
enzimática de agentes emulsionantes que contienen mono- y
di-acil-glicéridos.
Es objeto del presente invento un procedimiento
para la preparación por vía enzimática de emulsionantes que
contienen mono- y
di-acil-glicéridos, y a la
utilización de éstos.
Las lecitinas y lisolecitinas se utilizan como
emulsionantes en diferentes aplicaciones. Se encuentran éstas en
alimentos, cosméticos, agentes de complemento de la nutrición y
formulaciones químicas.
Ellas se obtienen por lo general como productos
secundarios de la obtención de aceites, p.ej. a partir de soja o
colza, o se extraen directamente a partir de la correspondiente
materia prima, tal como p.ej. yema de huevo. Las lecitinas y
lisolecitinas constituyen en la mayor parte de los casos una
compleja mezcla de fosfolípidos (fosfatos de
1,2-diacil-glicerol),
lisofosfolípidos (fosfato de 1- o
2-mono-acil-glicerol
como derivado de hidrólisis de fosfolípidos), glicolípidos y
triacil-glicéridos. Según sea el proceso de
elaboración, los contenidos de las fracciones individuales en el
producto final pueden fluctuar en gran manera.
La lecitina bruta constituye una lecitina no
normalizada, tal como resulta como producto secundario p.ej. en un
molino de aceite al realizar el refino de un aceite vegetal. La
expresión aceite comprende un aceite vegetal refinado o no
refinado, un aceite vegetal parcial o totalmente endurecido
(hidrogenado) o una grasa animal, todos cuyos componentes
principales son triacil-glicéridos.
Los mono-, di- y
tri-acil-glicéridos tienen uno, dos
o tres grupos acilo, que proceden de un ácido graso saturado, o
insaturado una vez o múltiples veces, de cadena larga.
Preferiblemente, los grupos acilo tienen de 6 a 35 átomos de C, en
particular de 10 a 30 átomos de C, y de manera todavía más preferida
de 12 a 26 átomos de C. Los monoacil-glicéridos
pueden ser 1- ó
2-monoacil-glicéridos, los
diacil-glicéridos pueden representar 1,2- o
1,3-diacil-glicéridos.
Unos contenidos más altos de lisolecitinas se
pueden obtener con ayuda de una hidrólisis enzimática de los
correspondientes fosfolípidos mediante separación de uno o dos
radicales de ácidos grasos para dar los correspondientes
lisofosfolípidos.
Como una "lisolecitina" se debe de
entender, en el presente contexto así como también en el sentido
comercial y de legislación alimentaria, una mezcla de lípidos
polares y de lípidos neutros, parcialmente hidrolizados
enzimáticamente, que tienen una proporción de material insoluble en
acetona de por lo menos 56%. La proporción de material insoluble en
acetona es en este contexto uno de los parámetros analíticos más
importantes, que se aprovecha para la evaluación legal alimentaria
de una lecitina y que describe la proporción de los lípidos polares
en la lecitina, que no son solubles en acetona.
La hidrólisis de lípidos y fosfolípidos con
lipasas y fosfolipasas ha sido bien descrita (Adlercreutz, Patrick,
1994: "Enzyme-catalyzed lipid modiification"
[Modificación de lípidos catalizada por enzimas]; Biotechnology
& Genetic Engineering Reviews 12, 231-254).
Además de esto, un gran número de documentos de
patentes se ocupan asimismo de la hidrólisis por vía enzimática de
fosfolípidos para dar lisolecitinas.
El documento de solicitud de patente europea
EP-A-260573 describe la preparación
de una lisolecitina, en la que una lecitina se mezcla con
5-30% en peso de agua y se hace reaccionar en
presencia de una sal de calcio así como de una enzima que hidroliza
a la lecitina para dar una lisolecitina.
En el documento de solicitud de patente
internacional WO 91/03565 se enseña la hidrólisis de fosfolípidos
aislados en el seno de disolventes orgánicos, con ayuda de una
lipasa inmovilizada, mientras que el documento
EP-A-870840 describe la hidrólisis
de una solución acuosa de una lecitina con fosfolipasas, en la que
los resultantes lisofosfolípidos son liberados de sustancias
acompañantes mediante una extracción con un disolvente
(acetona).
Un procedimiento adicional para la preparación
de una lisolecitina se describe en el documento de patente japonesa
JP 10042884, donde el producto deseado se prepara por hidrólisis de
una lecitina mediante una fosfolipasa A2 en una mezcla de un
disolvente y de agua.
El documento WO 97/28270 enseña un procedimiento
para la preparación de lisofosfatidilcolina a partir del substrato
fosfatidilcolina, con ayuda de una fosfolipasa A2. La reacción se
lleva a cabo en una dispersión del substrato con un agente
adicional seleccionado entre el conjunto formado por los
monoacil-glicéridos, los
diacil-glicéridos, los ésteres con ácidos grasos de
poligliceroles, de sacarosa y de sorbitán, así como por glicerol, en
presencia de agua.
Junto a las lecitinas y lisolecitinas, también
ciertos mono- y di-acil-glicéridos
actúan como estabilizadores para emulsiones. Ellos se obtienen en
la mayor parte de los casos mediante una saponificación en
condiciones alcalinas de triacil-glicéridos a altas
temperaturas. Ellos, no obstante, a continuación de esta etapa de
hidrólisis, deben ser purificados de una manera con intensos
costos.
Un método alternativo para la preparación de
monoacil-glicéridos lo describe el documento WO
02/11543. Con ayuda de una lipasa, a partir del correspondiente
triacil-glicérido se obtiene más de un 40% en forma
de monoacil-glicéridos en una mezcla de un poliol y
de agua. La lecitina así como también las grasas se añaden en este
caso exclusivamente para la ampliación del espectro de
substratos.
Por regla general, los mono- y
di-acil-glicéridos se emplean para
la estabilización de emulsiones en combinación con lisolecitinas en
los sectores de los productos de panificación y de las margarinas.
Para esto, hasta ahora, en la mayor parte de los casos, los
componentes individuales se preparan por separado, se purifican y se
mezclan en la concentración deseada.
El documento WO 00/52190 describe un
procedimiento para la preparación de una mezcla de lisolípidos,
lisofosfolípidos, monoacil-glicéridos y
diacil-glicéridos por reacción de una lecitina en
una mezcla de agua y de un poliol en presencia de una combinación
de una lipasa y de una fosfolipasa. El centro de gravedad de la
importancia está situado en este contexto en la conversión lo más
completa que sea posible de los fosfolípidos con un grado de
conversión de 80%, referido a la relación de lisofosfatidilcolina a
fosfatidilcolina. Mediante el alto contenido de agua de la solución
de reacción, de aproximadamente 60%, la obtención del producto final
está vinculada no obstante con un alto gasto en energía y costos.
Un ajuste definido de la relación de una lisolecitina a los mono- y
di-acil-glicéridos no es posible sin
embargo con este procedimiento, puesto que siempre predomina la
porción de lisofosfolípidos, y la proporción de
monoacil-glicéridos, mediante la adición del
glicerol, siempre resulta esencialmente más alta que la proporción
de diacil-glicéridos.
No obstante, la relación entre los mono- y
di-acil-glicéridos así como los
lisofosfolípidos en el producto que se ha de estabilizar puede
variar en gran manera dependiendo de la respectiva aplicación. Así,
p.ej. para la estabilización de margarinas, se añaden
mono-/di-acil-glicéridos y una
lisolecitina en la relación de 1,7:1, al contrario de lo cual en el
sector de los productos de panificación predomina la proporción de
la lisolecitina, y la correspondiente mezcla se presenta en la
relación de 0,4:1.
Partiendo de este estado de los conocimientos,
se ha establecido para el presente invento la misión de poner a
disposición un procedimiento para la preparación por vía enzimática
de emulsionantes que contienen mono- y
di-acil-glicéridos, que sin la
adición, en caso contrario usual, de calcio, polioles o disolventes
orgánicos, permita una preparación barata de mezclas de mono- y
di-acil-glicéridos así como de
lisofosfolípidos, y que además de esto haga posible un ajuste
flexible de la relación entre los mono- y
di-acil-glicéridos así como los
lisofosfolípidos mediante variación de la composición de la mezcla
de reacción o de las condiciones de reacción.
El problema planteado por esta misión se
resolvió con un correspondiente procedimiento, en el que
- a)
- se dispone previamente una mezcla de un componente fosfolipídico y de un componente triacil-glicerídico,
- b)
- a la mezcla procedente de la etapa a) del procedimiento se le añade una cantidad de una solución acuosa que contiene (fosfo-)lipasas, tal que el contenido de agua de la mezcla está situado entre 3 y 15% en peso y en particular entre 5 y 12% en peso, a continuación
- c)
- la mezcla obtenida a partir de la etapa b) del procedimiento se hace reaccionar a unas temperaturas comprendidas entre 20º y 80ºC a lo largo de un período de tiempo de por lo menos 2 horas, y finalmente
- d)
- la mezcla, después del final de la reacción, se seca.
De modo sorprendente, se ha comprobado, en el
caso de la reacción simultánea conforme al invento de fosfolípidos
(lecitina) y de triacil-glicéridos (aceite) para
dar lisofosfolípidos y mono- así como
di-acil-glicéridos, que mediante la
elección de los parámetros temperatura, periodo de tiempo de
incubación, relación entre lecitina y aceite, entre lecitina y agua
o respectivamente entre aceite y agua, o/y la cantidad de enzima
añadida, se puede ajustar exactamente la composición del producto
de reacción. Así, p.ej. a través de la relación de lecitina a
aceite, que se puede definir por medio de la proporción de material
insoluble en acetona, es posible, en el caso de una hidrólisis con
una lipasa y con una determinada proporción de agua, ajustar
planificadamente la proporción de
monoacil-glicéridos y de
1,2-diacil-glicéridos en la
proporción total de
mono-/di-acil-glicéridos, junto con
una proporción comparativamente constante de
1,3-diacil-glicéridos.
Alternativamente, no obstante, también a través del período de
tiempo de incubación, p.ej. a una temperatura de 60ºC con 0,05% de
una lipasa en una mezcla de una lecitina bruta y un aceite, con una
proporción de material insoluble en acetona de 50%, y con una
proporción de agua de 10%, se puede hacer variar la proporción de
monoacil-glicéridos y de
1,3-diacil-glicéridos en la
proporción total de
mono-/di-acil-glicéridos,
permaneciendo comparativamente constante la proporción de
1,2-diacil-glicéridos en el
contenido total de
mono-/di-acil-glicéridos. Estas
ventajas no se podían esperar en esta magnitud, tomando en
consideración la sencillez de la realización del procedimiento.
Como componente fosfolipídico se ha manifestado
conforme al invento como especialmente apropiada una lecitina y
preferiblemente una lecitina bruta, habiéndose de considerar como
especialmente preferida una lecitina bruta de
soja.
soja.
\newpage
\global\parskip0.900000\baselineskip
Los aceites vegetales y/o animales,
preferiblemente en una forma refinada y/o por lo menos parcialmente
endurecida, son representantes especialmente apropiados en el marco
del presente invento del componente
triacil-glicerídico, tal como se dispone previamente
en la etapa a) del procedimiento.
En lo que se refiere a la realización del
procedimiento, en una variante especial en la etapa a) del
procedimiento, se puede disponer previamente una mezcla que contiene
una proporción del componente fosfolipídico comprendida entre 10 y
80% en peso y una proporción del componente
triacil-glicerídico comprendida entre 20 y 90% en
peso. La relación en peso entre la proporción del componente
fosfolipídico y la proporción del componente
triacil-glicerídico es ventajosamente de 1:0,25 a
1:4.
En general, la etapa a) del procedimiento no
está sometida a ninguna restricción especial, pero en ciertas
condiciones puede ser ventajoso que la mezcla sea llevada en la
etapa a) del procedimiento a una temperatura comprendida entre 35º y
60ºC, lo cual también lo considera asimismo el presente invento.
En lo que se refiere a la etapa b) del
procedimiento, se ha de considerar como preferido que se emplee una
lipasa y/o fosfolipasa de origen microbiano, preferiblemente
procedente de Candida y/o Aspergillus. Cepas especialmente
apropiadas son en este contexto Aspergillus niger y
Candida cylindracea, pudiendo escogerse naturalmente también
cualquier otra apropiada fuente de enzimas.
Tal como ya se ha expuesto, una gran ventaja del
presente procedimiento consiste en que la relación de mono- y
di-acil-glicéridos en el producto
que actúa emulsionando se puede ajustar de una manera planificada.
El invento prevé por lo tanto también que en la etapa b) del
procedimiento se emplee una cantidad de una (fosfo)lipasa de
0,05 a 10,0 mg por ml de la mezcla de reacción, y en particular de
0,1 a 5 mg por ml de la mezcla de reacción. La cantidad de enzima
en cada caso deseada se puede emplear en este contexto evidentemente
también dependiendo de la actividad enzimática, por lo cual es
recomendable una correspondiente cantidad entre 0,1 y 120 \mug por
ml de mezcla de reacción. Por lo general, la relación de la lipasa a
la fosfolipasa en el componente enzimático que se emplea, se puede
hacer variar en un amplio intervalo, con lo cual se puede ejercer
planificadamente influencia sobre la composición del producto (del
emulsionante) obtenido.
Se ha de considerar como preferida, en lo que se
refiere a la etapa c) del procedimiento, una temperatura que está
situada entre 40 y 50ºC. La duración de la reacción en la etapa c)
del procedimiento debería estar situada ventajosamente entre 5 y 20
horas y de manera especialmente preferida entre 8 y 12 horas.
La etapa de desecación d) final, en el presente
invento, de nuevo no es en general limitadora y se puede llevar a
cabo con cualquier procedimiento usual. Sin embargo, debería
procurarse disponer de unas condiciones moderadas, por lo cual son
especialmente apropiadas unas temperaturas que están situadas entre
60º y 80ºC. La realización de la desecación en un vacío es
especialmente recomendable.
Típicamente, el procedimiento conforme al
invento se lleva a cabo reuniendo una lecitina con un aceite en una
relación específica, atemperando a una temperatura entre 35º - 60ºC
y mezclando mediante agitación. Una fuente posible para la lecitina
es en este contexto una lecitina bruta procedente de soja,
pudiéndose utilizar en vez de una lecitina bruta también una
lecitina normalizada, desaceitada o fraccionada. Como aceite entran
en cuestión aceites vegetales, tales como p.ej. un aceite de soja, o
un aceite vegetal hidrogenado, tal como p.ej. una grasa de palma, o
sin embargo también aceites y grasas animales. El componente
enzimático es añadido como una lipasa en una solución acuosa a la
mezcla de la lecitina y el aceite, estando situada la proporción
total de agua, preferiblemente, en el intervalo de 6 a 12% en peso.
Posibles fuentes para enzimas lipasas son en este contexto en
particular Candida cylindracea (compárese Biocatalysts
[Biocatalizadores], Pontypridd, Gales) o Aspergillus niger
(compárese Amano, Nagoya, Japón). La mezcla de reacción es agitada a
continuación a una temperatura determinada y durante un período de
tiempo determinado, pudiendo la temperatura estar situada p.ej. en
el intervalo de 50ºC. Como período de tiempo de incubación, está
previsto preferiblemente un intervalo comprendido entre 2 y 15
horas. Después de haber transcurrido esta reacción, la mezcla es
secada en vacío a una temperatura de aproximadamente 70ºC, y el
producto, eventualmente, es todavía cristalizado.
Como producto preferido se reivindica por el
presente invento una mezcla que se compone de una lisolecitina y de
mono- y di-acil-glicéridos, debiendo
estar situadas las proporciones preferidas, en lo referente a la
lisolecitina entre 3,0 y 55% en peso, y en lo referente a los
monoacil-glicéridos entre 2,0 y 20% en peso. En lo
referente a la proporción de diacil-glicéridos se
recomiendan unas proporciones que están situadas entre 6,0 y 40% en
peso.
Alternativamente, el invento prevé, como
producto del procedimiento reivindicado, una mezcla, en la que la
relación del componente fosfolipídico a los componentes mono- y
diacil-glicerídicos combinados es de 1:0,25 a
4,0.
Los productos de reacción, después de la
desecación, se pueden utilizar directamente como emulsionantes en
procedimientos clásicos para la producción de margarinas o mezclas
de panificación. En este caso no se necesita ninguna adición de
otros componentes tales como p.ej. mono- o
di-acil-glicéridos adicionales.
Junto al procedimiento propiamente dicho y a las
mezclas preparadas con el mismo, el presente invento, de acuerdo
con la reivindicación 14, reivindica también la utilización de las
mezclas que se pueden preparar con el procedimiento para la
preparación de emulsiones y cremas en el sector alimentario, en
particular en forma de helados mantecados, margarinas y productos de
panificación, y en el sector de los cosméticos.
\global\parskip1.000000\baselineskip
En el marco de este invento, se encontró
finalmente que los productos y, por consiguiente, el emulsionante,
al contrario que los emulsionantes obtenibles hasta ahora, que se
preparan mediante mezcladura de los componentes puros de una
lisolecitina y de
mono-/di-acil-glicéridos, pueden
presentarse también en forma líquida, y que por lo tanto se pueden
utilizar con facilidad sin ningún tratamiento ulterior, y sin
experimentar en este caso mermas de calidad.
Con el procedimiento reivindicado, mediante la
reacción enzimática simultánea de fosfolípidos (lecitina) y de
triacil-glicéridos (aceite) a lisofosfolípidos y
mono- y di-acil-glicéridos, se
consigue de una manera sencilla la preparación de emulsionantes. La
conversión de una lecitina en una lisolecitina se efectúa en este
contexto a través de una hidrólisis por vía enzimática, sin que para
esto se tengan que añadir disolventes orgánicos, polioles y/o
calcio, o sin que se tenga utilizar una proporción de agua > 15%
en peso. Además de esto, en el marco del procedimiento conforme al
invento es posible con precisión de objetivo un ajuste exacto de
las proporciones de componentes lipídicos individuales en el
producto, haciéndose variar ciertos parámetros iniciales
seleccionados. Finalmente, una ventaja adicional del invento ha de
ser vista en el hecho de que los emulsionantes así obtenidos se
pueden obtener también directamente en una forma líquida.
En el caso del procedimiento descrito para la
preparación por vía enzimática de emulsionantes que contienen mono-
y di-acil-glicéridos, en una primera
etapa a) del procedimiento, se dispone previamente una mezcla de un
componente fosfolipídico y de un componente
triacil-glicerídico, a continuación en la etapa b)
del procedimiento, a la mezcla obtenida de esta manera se le añade
una cantidad de una solución acuosa que contiene
(fosfo)lipasas, tal que el contenido de agua de la mezcla
está situado entre 3 y 15% en peso. A continuación, en la etapa c)
del procedimiento, la mezcla obtenida a partir de la etapa
precedente se lleva a reaccionar a unas temperaturas comprendidas
entre 20º y 80ºC durante un período de tiempo de por lo menos dos
horas, y finalmente esta mezcla se seca. Como componentes
especialmente apropiados se han mostrado una lecitina bruta de soja
y aceites vegetales y/o animales, que se hacen reaccionar en común
con una mezcla de una lipasa y/o una fosfolipasa como componente
enzimático. Con este procedimiento, que se contenta sin los
disolventes orgánicos, los polioles ni los aditivos iónicos en caso
contrario usuales, así como con una pequeña proporción de agua, se
obtienen unos emulsionantes, cuya composición a base de
lisofosfolípidos y mono- y
di-acil-glicéridos se puede ajustar
de una manera planificada. Estos emulsionantes, que también son
obtenibles en forma líquida, encuentran su empleo en los sectores
alimentario y cosmético.
Los siguientes Ejemplos ponen de manifiesto las
ventajas mencionadas del procedimiento reivindicado para la
preparación por vía enzimática de emulsionantes.
La lecitina bruta utilizada en los siguientes
Ejemplos procedía de Honeymead, EE.UU.; y en el caso del aceite de
soja se trataba de productos usuales en el comercio libremente
adquiribles.
La composición de los productos en cada caso
obtenidos se analizó con ayuda de la HPLC, de la HPTLC y con métodos
gravimétricos.
Para la HPLC (cromatografía de fase líquida de
alto rendimiento) se utilizó como fase estacionaria una columna con
gel de sílice Si60. La fase móvil se componía de una mezcla de
n-hexano, 2-propanol y agua
(0,25/4/1 [v/v/v], v = volumen), que se vertía sobre la columna con
un caudal de 1,2 ml/min. Con ayuda de los diferentes períodos de
tiempo de retención, se pudieron cuantificar los contenidos de
fosfatidilcolina y de lisofosfatidilcolina. Las muestras fueron
previamente disueltas en mezclas de n-hexano y
2-propanol (2/1 [v/v]).
La HPTLC (cromatografía de capa fina de alto
rendimiento) se llevó a cabo con gel de sílice Si60, aplicado sobre
una placa de vidrio (con el formato 20 x 10 cm) como fase
estacionaria. Como fase móvil sirvió una mezcla de dietil-éter,
bencina de petróleo y ácido acético glacial en la relación de
40/59/1 [v/v/v]. Después de la fase de análisis y de la desecación
de la placa, las bandas obtenidas se derivatizaron con una solución
de sulfato de cobre-(II) (10% en peso de sulfato de cobre disuelto
en ácido fosfórico al 8%) y se cuantificó el contenido de
monoacil-glicéridos así como el de 1,2- y
1,3-diacil-glicéridos. Las muestras
fueron previamente disueltas en cloroformo.
El método gravimétrico se empleó para la
determinación de la proporción de material insoluble en acetona. En
este caso, la muestra se mezcló con acetona, el residuo obtenido se
separó, se secó y se pesó.
45 g de una lecitina bruta se mezclaron con 55 g
de un aceite de soja y se agitaron a una temperatura de 47,5ºC. Se
disolvieron 0,13 g de una lipasa procedente de Candida
cylindracea (de Biocatalysts, Reino Unido) en 9 g de agua, y a
continuación se añadieron mediando agitación a la mezcla de la
lecitina y del aceite. Esta mezcla se agitó a 47,5ºC y, después de
un período de tiempo de reacción de 8,5 h, se secó bajo un vacío de
0,1 bar y a una temperatura de 80ºC.
Resultado: El producto obtenido contenía
28% en peso de material insoluble en acetona, lo que corresponde a
una proporción de lecitina de 43%, y además 2% en peso de
lisofosfatidilcolina, 4,5% en peso de
monoacil-glicéridos y 11% en peso de
diacil-glicéridos. La relación de lecitina a
mono-/di-acil-glicéridos fue de
1:0,34.
135 g de una lecitina bruta se mezclaron con 165
g de un aceite de soja y con 27 g de agua y se agitaron a una
temperatura de 47,5ºC. Se añadieron, mediando agitación, 0,15 g de
una lipasa procedente de Candida cylindracea a la mezcla de
la lecitina y del aceite. Esta mezcla se agitó a 47,5ºC y, después
de un período de tiempo de reacción de 8,5 h, se secó bajo un vacío
de 0,1 bar y a una temperatura de 80ºC.
Resultado: El producto obtenido contenía
27% en peso de material insoluble en acetona, lo que corresponde a
una proporción de lecitina de 42%, y además 2,5% en peso de
lisofosfatidilcolina, 5% en peso de
monoacil-glicéridos y 10% en peso de
diacil-glicéridos. La relación de lecitina a
mono-/di-acil-glicéridos fue de
1:0,36.
10 g de una lecitina bruta se mezclaron con 90 g
de un aceite de soja y se agitaron a una temperatura de 35ºC. Se
disolvieron 0,1 g de una lipasa procedente de Candida
cylindracea en 12 g de agua y a continuación se añadieron
mediando agitación a la mezcla de la lecitina y del aceite. Esta
mezcla se agitó a 35ºC y, después de un período de tiempo de
reacción de 15 h, se secó bajo un vacío de 0,1 bar y a una
temperatura de 60ºC.
Resultado: El producto obtenido contenía
6% en peso de material insoluble en acetona, lo que corresponde a
una proporción de lecitina de 9,5%, y además 0,2% en peso de
lisofosfatidilcolina, 4% en peso de
monoacil-glicéridos y 10% en peso de
diacil-glicéridos. La relación de lecitina a
mono-/di-acil-glicéridos fue de
1:1,5.
30 g de una lecitina bruta se mezclaron con 270
g de un aceite de soja y se agitaron a una temperatura de 60ºC. Se
disolvieron 0,3 g de una lipasa procedente de Candida
cylindracea en 18 g de agua y a continuación se añadieron
mediando agitación a la mezcla de la lecitina y del aceite. Esta
mezcla se agitó a 60ºC y, después de un período de tiempo de
reacción de 15 h, se secó bajo un vacío de 0,1 bar y a una
temperatura de 80ºC.
Resultado: El producto obtenido contenía
6% en peso de material insoluble en acetona, lo que corresponde a
una proporción de lecitina de 9,5%, y además 0,2% en peso de
lisofosfatidilcolina, 2% en peso de
monoacil-glicéridos y 12% en peso de
diacil-glicéridos. La relación de lecitina a
mono-/di-acil-glicéridos fue de
1:1,5.
70 g de una lecitina bruta se mezclaron con 30 g
de un aceite de soja y se agitaron a una temperatura de 35ºC. Se
disolvieron 0,1 g de una lipasa procedente de Candida
cylindracea en 12 g de agua y a continuación se añadieron
mediando agitación a la mezcla de la lecitina y del aceite. Esta
mezcla se agitó a 35ºC y, después de un período de tiempo de
reacción de 2 h, se secó bajo un vacío de 0,1 bar y a una
temperatura de 60ºC.
Resultado: El producto obtenido tenía una
proporción de material insoluble en acetona de 45% y contenía 3% en
peso de lisofosfatidilcolina, 6,5% en peso de
monoacil-glicéridos y 9% en peso de
diacil-glicéridos.
75 g de una lecitina bruta se mezclaron con 25 g
de un aceite de soja y se agitaron a una temperatura de 47,5ºC. Se
disolvieron 0,05 g de una lipasa procedente de Candida
cylindracea en 9 g de agua y a continuación se añadieron
mediando agitación a la mezcla de la lecitina y del aceite. Esta
mezcla se agitó a 47,5ºC durante un período de tiempo de 8,5 h, y a
continuación se secó bajo un vacío de 0,1 bar y a una temperatura de
80ºC.
Resultado: El producto obtenido tenía una
proporción de material insoluble en acetona de aproximadamente 50%
en peso y contenía 4% en peso de lisofosfatidilcolina, 5% en peso de
monoacil-glicéridos y 6% en peso de
diacil-glicéridos.
225 g de una lecitina bruta se mezclaron con 275
g de un aceite de soja y se agitaron a una temperatura de 47,5ºC.
Se disolvieron 0,25 g de una lipasa procedente de Candida
cylindracea en 70 g de agua y a continuación se añadieron
mediando agitación a la mezcla de la lecitina y del aceite. Esta
mezcla se agitó a 47,5ºC y, después de un período de tiempo de
reacción de 8,5 h, se secó bajo un vacío de 0,1 bar y a una
temperatura de 80ºC.
Resultado: El producto obtenido tenía una
proporción de material insoluble en acetona de aproximadamente 30%
en peso y contenía 2% en peso de lisofosfatidilcolina, 8% en peso de
monoacil-glicéridos y 8,5% en peso de
diacil-glicéridos.
\newpage
70 g de una lecitina bruta se mezclaron con 30 g
de un aceite de soja y se agitaron a una temperatura de 60ºC. Se
disolvieron 0,1 g de una lipasa procedente de Aspergillus
niger en 12 g de agua y a continuación se añadieron mediando
agitación a la mezcla de la lecitina y del aceite. Esta mezcla se
agitó a 60ºC y, después de un período de tiempo de reacción de 15 h,
se secó bajo un vacío de 0,1 bar y a una temperatura de 60ºC.
Resultado: El producto obtenido tenía una
proporción de material insoluble en acetona de aproximadamente 45%
en peso y contenía 3% en peso de lisofosfatidilcolina, 5% en peso de
monoacil-glicéridos y 10% en peso de
diacil-glicéridos.
70 g de una lecitina bruta se mezclaron con 30 g
de una grasa de palma endurecida y se agitaron a una temperatura de
45ºC. Se disolvieron 0,05 g de una lipasa procedente de Candida
cylindracea en 10 g de agua y a continuación se añadieron
mediando agitación a la mezcla de la lecitina y del aceite. Esta
mezcla se agitó a 45ºC y, después de un período de tiempo de
reacción de 8 h, se secó bajo un vacío de 0,1 bar y a una
temperatura de 60ºC. A continuación, el producto se enfrió y se
separó por cristalización.
Resultado: El emulsionante contenía una
proporción de material insoluble en acetona de aproximadamente 45%
en peso y además 3% en peso de lisofosfatidilcolina, 5% en peso de
monoacil-glicéridos y 10% en peso de
diacil-glicéridos.
(Ejemplo de
aplicación)
El emulsionante preparado de acuerdo con el
Ejemplo 9 se empleó en un procedimiento normalizado para la
producción de una margarina de acuerdo con la siguiente receta:
- 47,5% en peso
- de un aceite de soja
- 31,5% en peso
- de un aceite de palma
- 19,8% en peso
- de agua
- 0,1% en peso
- de cloruro de sodio
- 0,07% en peso
- de proteína de plasma lácteo
- 0,03% en peso
- de ácido cítrico,
- 1,0% en peso
- de un emulsionante.
Resultado: Se obtuvo una margarina que ha
de equipararse a las margarinas clásicas en lo que se refiere a la
textura, al comportamiento de fusión y a la aptitud para
extenderse.
Claims (14)
1. Procedimiento para la preparación por vía
enzimática de emulsionantes que contienen mono- y
di-acil-glicéridos,
caracterizado porque
a) se dispone previamente una mezcla a base de
un componente fosfolipídico y de un componente
triacil-glicerídico,
b) a la mezcla procedente de la etapa a) del
procedimiento se le añade una cantidad de una solución acuosa que
contiene una (fosfo-)lipasa, tal que el contenido de agua de la
mezcla está situado entre 3 y 15% en peso,
c) la mezcla obtenida de la etapa b) del
procedimiento se lleva a reaccionar a unas temperaturas comprendidas
entre 20º y 80ºC durante un período de tiempo de por lo menos 2
horas, y finalmente
d) la mezcla, después del final de la reacción,
se seca.
2. Procedimiento de acuerdo con la
reivindicación 1, caracterizado porque como componente
fosfolipídico se utiliza una lecitina, preferiblemente una lecitina
bruta y de manera especialmente preferida una lecitina bruta de
soja.
3. Procedimiento de acuerdo con una de las
reivindicaciones 1 ó 2, caracterizado porque como componente
triacil-glicerídico se emplea un aceite vegetal y/o
animal, preferiblemente en una forma refinada y/o por lo menos
parcialmente endurecida.
4. Procedimiento de acuerdo con una de las
reivindicaciones 1 a 3, caracterizado porque en la etapa a)
del procedimiento se dispone previamente una mezcla con una
proporción de componente fosfolipídico comprendida entre 10 y 80% en
peso.
5. Procedimiento de acuerdo con una de las
reivindicaciones 1 a 4, caracterizado porque en la etapa a)
del procedimiento se dispone previamente una mezcla con una
proporción de componente triacil-glicerídico
comprendida entre 20 y 90% en peso.
6. Procedimiento de acuerdo con una de las
reivindicaciones 1 a 5, caracterizado porque la mezcla, en la
etapa a) del procedimiento, se lleva a una temperatura comprendida
entre 35 y 60ºC.
7. Procedimiento de acuerdo con una de las
reivindicaciones 1 a 6, caracterizado porque en la etapa b)
de procedimiento se emplea una lipasa y/o fosfolipasa de origen
microbiano, preferiblemente procedente de Candida y/o
Aspergillus.
8. Procedimiento de acuerdo con una de las
reivindicaciones 1 a 7, caracterizado porque se utiliza una
cantidad de (fosfo)lipasa de 0,05 a 10 mg/ml.
9. Procedimiento de acuerdo con una de las
reivindicaciones 1 a 8, caracterizado porque en la etapa c)
del procedimiento se ajusta una temperatura comprendida entre 40º y
50ºC.
10. Procedimiento de acuerdo con una de las
reivindicaciones 1 a 9, caracterizado porque la duración de
la reacción en la etapa c) del procedimiento está situada entre 5 y
20 horas.
11. Procedimiento de acuerdo con una de las
reivindicaciones 1 a 10, caracterizado porque la etapa de
desecación d) se lleva a cabo a unas temperaturas comprendidas entre
60 y 80ºC.
12. Procedimiento de acuerdo con una de las
reivindicaciones 1 a 11, caracterizado porque se obtiene una
mezcla de una lisolecitina y de mono- y
di-acil-glicéridos en unas
proporciones preferentes comprendidas entre 3,0 y 75% en peso de la
lisolecitina, de 2,0 a 20% en peso de
monoacil-glicéridos y de 6,0 a 40% en peso de
diacil-glicéridos.
13. Procedimiento de acuerdo con una de las
reivindicaciones 1 a 11, caracterizado porque se obtiene una
mezcla con una relación de componente fosfolipídico a componente
mono- y di-acil-glicerídico de
1:0,25 a 4,0.
14. Procedimiento para la preparación de
emulsiones y cremas en el sector alimentario, en particular en forma
de helados mantecados, margarinas y productos de panificación, y en
el sector cosmético, que comprende
- i)
- la preparación por vía enzimática de emulsionantes que contienen mono- y di- acil-glicéridos de acuerdo con una de las reivindicaciones 1 a 13, y
- ii)
- la preparación de emulsiones y cremas en el sector alimentario, en particular en forma de helados comestibles, margarinas y productos de panificación, y en el sector cosmético, mediando empleo de los emulsionantes contenidos en i).
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