ES2248091T3 - Materia grasa/aceite de embrion de soja y procedimiento para la preparacion de productos de soja con una elevada concentracion de embrion. - Google Patents
Materia grasa/aceite de embrion de soja y procedimiento para la preparacion de productos de soja con una elevada concentracion de embrion.Info
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Abstract
Aceite preparado a partir de un producto a base de soja que contiene entre 15 y 80% en peso de contenido de germen.
Description
Materia grasa/aceite de embrión de soja y
procedimiento para la preparación de productos de soja con una
elevada concentración de embrión.
La presente invención se refiere a un aceite
preparado a partir de un producto a base de soja enriquecido en
germen, que se puede producir mediante la separación y
concentración de una fracción de germen (aunque el "germen"
debería denominarse académicamente "hipocotilo", en la presente
invención el término "germen" significa hipocotilo).
Tal como las demás semillas para aceite, la de
soja consiste en los cotiledones (aproximadamente el 90%), el
germen (aproximadamente el 2%) y la cáscara (aproximadamente el 8%).
Las semillas de soja se utilizan como materia prima para el aceite
de soja, una vez eliminada la cáscara, pero sin separar entre sí los
cotiledones y el germen ricos en aceite.
Cuando se produce aceite a partir de la semilla
de soja, primero se eliminan de la materia prima de soja las
sustancias extrañas tales como ramas, vainas y otras semillas, en
una etapa de selección para mejorar la calidad del producto de
aceite final y del bizcocho sin grasa. A continuación, se
proporciona elasticidad al material sometiéndolo, por ejemplo, a un
tratamiento térmico, se tritura mediante un triturador de rodillo o
un rodillo de goma y se separa en las fracciones de cáscara,
cotiledón y germen. La cáscara, que contiene componentes tales como
un pigmento que afecta la calidad del aceite negativamente, se
elimina mediante un tamiz vibrante o un aparato de separación por
aire. El cotiledón y el germen se combinan en escamas para deshacer
su estructura y facilitar la extracción del aceite, seguido de la
extracción con n-hexano para producir un aceite
crudo, que finalmente se purifica para producir aceite de semilla
de soja.
La solicitud de patente japonesa abierta Sho. 59
(1984)-82063 y la solicitud de patente japonesa
abierta Hei.11 (1999)-196803 dan a conocer un
procedimiento para obtener una fracción de germen a partir de
sojas cortadas a la mitad mediante un tamiz o mediante separación
por aire. Con dicho procedimiento la fracción de germen se puede
separar a una concentración elevada sin que sufra daño alguno. Sin
embargo, es imposible tratar una gran cantidad de sojas cortadas
por la mitad en una sola etapa de triturado. Además, la velocidad
de recogida del germen pegado a la cáscara es muy baja, lo que
incrementa la carga de la máquina de escamado. Por tales razones,
es difícil extraer aceite de la fracción enriquecida en germen
obtenida a partir de la soja cortada a la mitad en vista de la
capacidad de procesamiento y la gestión del proceso.
La patente japonesa Sho. 56
(1981)-39176 da a conocer un procedimiento para la
concentración de germen de soja mediante la separación por aire de
sojas trituradas crudamente y la separación de una fracción
comprendida entre un tamaño de 14 y 60 mesh mediante un tamiz. Sin
embargo, debido a que el procedimiento daña gravemente la fracción
de germen, la soja triturada crudamente tiene que ser inmediatamente
sometida a la siguiente etapa. Además, el tamaño de la fracción de
soja separada es tan fino que la cantidad de aceite extraído es
pequeña, incrementando la carga en la etapa para eliminar
disolvente de la harina.
La solicitud de patente japonesa abierta Sho. 62
(1987)-100256 da a conocer un procedimiento que
comprende tratar sojas prensadas crudamente a una temperatura y
presión elevadas durante cierto período de tiempo, liberarlas a baja
presión para que se expanda solamente la fracción de germen y a
continuación separar el germen y el cotiledón utilizando su
diferencia de densidad. Sin embargo, es muy peligroso realizar
este procedimiento a temperaturas y presiones elevadas y es muy
posible que en tales condiciones se destruyan los componentes
nutritivos del germen. Además, resulta desventajoso el gran esfuerzo
necesario para purificar el aceite extraído de los cotiledones
quemados en aceite de soja inodoro y sin sabor para ensaladas.
La soja es un alimento muy saludable y ha sido
ampliamente utilizado como materia prima en diversos tipos de
alimentos.
Hasta ahora, se ha analizado y publicado la
composición de fitoesteroles del aceite extraído de cada una de las
partes de cotiledón, germen y cáscara, respectivamente [Kajimoto,
G., et al., J. Jpn. Oil Chem. Soc., 33(8):518
(1984)]. Sin embargo, Kajimoto et al., no dieron a conocer
la cantidad total de esterol contenida en dicho aceite extraído de
cada una de las partes de la semilla de soja. Además, tampoco
publicaron ningún efecto reductor del colesterol producido por el
aceite extraído de la soja.
Por otra parte, se conoce que el aceite suplido
con esterol (esterol de soja) que se obtiene a partir del destilado
inodoro, un producto secundario de la producción de "aceite de
tempura" (aceite japonés para freír), puede reducir el nivel de
colesterol en el cuerpo [Shibuya, et al., Journal of
Kagawa Nutrition University, 14:173 (1983)]
El documento
JP-A-59147647 da a conocer una
invención relacionada con un dispositivo para pelar la cáscara de la
soja, en el que los cotiledones y el germen de la soja pelada se
tritura a un tamaño de 1/8 de su tamaño original. La soja preparada
de este modo se puede utilizar como materia prima en la producción
de leche de soja.
El documento
JP-A-9181562 da a conocer la adición
de un residuo de plantas de aceite, que es un extracto de semillas
o embriones de soja, a un material graso animal licuado que
contiene colesterol; extracción del colesterol del material graso
animal y a continuación la separación del residuo de plantas de
aceite.
El documento
US-A-3.993.756 da a conocer una
fracción no saponificable de aceite de soja que contiene
aproximadamente entre 40 y 50% en peso de esterol vegetal y
aproximadamente entre 18 y 22% en peso de tocoferol.
Por consiguiente el objetivo de la presente
invención es mejorar la capacidad de procesamiento en una etapa de
trituración, reducir la pérdida del germen debida a su asociación
con la (cáscara) de la soja, reducir la cantidad de carga en una
etapa de escamado y en la etapa de eliminación del disolvente y
reducir la cantidad de aceite remanente en una etapa de extracción
cuando se obtiene la fracción de germen de soja a partir del
material de soja. Como resultado, tanto el aceite extraído del
germen como el extraído del cotiledón se pueden obtener sin pérdida
alguna, y a continuación se puede purificar en aceite de soja con
buen sabor.
Otro objetivo de la presente invención es
proporcionar aceite preparado a partir de la fracción anterior que
contiene el germen de soja en una concentración elevada, como
material de soja.
Los inventores han valorado el aceite mencionado
anteriormente en un ensayo en animales para valorar su efecto en la
reducción del colesterol en el cuerpo y encontraron inesperadamente
que muestra un efecto reductor del colesterol en el cuerpo a una
cantidad de esterol contenido en él mismo inferior a la descrita en
los documentos anteriores. El aceite de la presente invención
puede, por consiguiente, utilizarse para proporcionar un agente que
contiene dicho aceite como componente efectivo para reducir el
colesterol en el cuerpo de los animales.
La presente invención se refiere al aceite o
aceite de soja preparado a partir de un material de soja que
contiene entre 15 y 80% en peso, preferentemente entre 30 y 80% en
peso, más preferentemente entre 40 y 80% en peso de contenido de
germen.
El material de soja se puede producir mediante
un procedimiento que comprende un triturado crudo de una materia
prima de soja o sus semillas seleccionadas, de las que se han
extraído las materias extrañas, a un tamaño inferior a 1/2, tal
que las semillas de soja que presentan la mitad del tamaño de las
semillas originales quedan sustancialmente excluidas de las sojas
trituradas, preferentemente comprendido más de 1/16 y menos de 1/2,
más preferentemente comprendido entre más de 1/8 y menos de 1/4 del
tamaño original, y separar y concentrar una fracción de germen de
soja.
En el procedimiento de producción anterior, la
separación y concentración de la fracción de germen de soja se
puede realizar después del triturado crudo y escamado.
Los presentes inventores han encontrado que dicho
aceite de soja según la presente invención contiene originalmente
un 0,8% o más en peso, preferentemente un 1,2% o más en peso, más
preferentemente un 2,5% o más en peso, de contenido en esterol
total sin adición del esterol durante las etapas de producción.
Considerando que el contenido en esterol del
aceite de soja para tempura corriente es de aproximadamente el 0,4%
en peso, el contenido en esterol del aceite de soja según la
presente invención es entre 2 y 6 veces superior al del aceite de
soja para temperatura habitual.
En consecuencia, la presente invención se refiere
a un aceite de soja que contiene 0,8% o más en peso,
preferentemente 1,2% o más en peso, más preferentemente 2,5% o más
en peso o más de contenido en esterol total.
En la presente invención el término "esterol
total" significa un total de ocho tipos de esteroles, es decir,
\beta-sitosterol, campesterol, estigmasterol,
\Delta7-estigmastenol, brasicasterol,
\Delta7-avenasterol, citrostadienol y
colesterol.
El aceite de soja según la presente invención
puede contener cualquier cantidad de otros esteroles aparte de los
ocho anteriores y sus sustancias reducidas y ésteres.
El aceite de soja de la presente invención está
caracterizado porque contiene tocoferol en una cantidad de 100 mg o
más, preferentemente entre 130 y aproximadamente 300 mg por 100 g
de aceite de soja.
Por otra parte, el aceite de soja habitual para
tempura contiene entre aproximadamente 80 y 170 mg de tocoferol por
100 g de aceite.
El aceite de la presente invención se puede
utilizar además como agente para reducir el colesterol en el
cuerpo, especialmente en el suero y en el hígado, que comprende
como componente efectivo el aceite preparado a partir de una
materia de soja que comprende entre 15 y 80% en peso de contenido
de germen.
El aceite de la presente invención se puede
utilizar además para diversos tipos de alimentos tales como un
alimento con un suplemento nutritivo, un alimento reforzado
nutritivamente y alimentos para utilizaciones sanitarias
específicas, que contienen el aceite preparado a partir del
material de soja que comprende entre 15 y 80% en peso de contenido
de germen.
La Figura 1 muestra una gráfica de una
cromatografía de gases (GC) de los materiales no saponificables del
aceite de soja preparado a partir de la materia de soja que
contiene 40% en peso de contenido de germen.
La Figura 2 muestra una gráfica de GC de los
materiales no saponificables del aceite de soja como
comparación.
La Figura 3 muestra la proporción entre el nivel
de HDL-colesterol y el nivel de (VDL +
LDL)-colesterol en el suero después de 2 semanas
crianza.
La Figura 4 muestra un cambio del nivel de
colesterol total en el suero con el transcurso del tiempo.
La Figura 5 muestra un cambio en el nivel de
HDL-colesterol en el suero con el transcurso del
tiempo.
El material de soja que contiene entre 15 y 80%
en peso de contenido de germen, que se utiliza como material para
la preparación de aceite de soja según la presente invención, se
produce como se describe a continuación:
En primer lugar, la materia prima de soja
(semillas de soja enteras) opcionalmente se pueden seleccionar
eliminando las materias extrañas (contaminantes) tales como ramas,
vainas, malas hiervas, arena partículas de metal y pequeñas
piedras.
A continuación, la materia prima de soja
seleccionada de este modo (las semillas seleccionadas) se calienta,
seca, pela y tritura crudamente mediante cualquier aparato que
utiliza fricción, fuerza de impacto, fuerza de cizalla y
semejantes.
La materia prima de soja se tritura crudamente a
un tamaño inferior a ½ , preferentemente entre 1/16 o más y menos de
½, más preferentemente entre 1/8 o más y menos de ¼ del tamaño
original y se separa y concentra la fracción del germen de soja. La
materia prima de soja se tritura crudamente a un tamaño inferior a ½
para, por ejemplo, mejorar la capacidad de procesamiento en la
etapa de triturado, para reducir la pérdida de germen debida a su
asociación con la cáscara de la soja y para reducir la cantidad de
carga en la etapa de escamado. El tamaño "inferior a ½"
significa que las habas de soja medio cortadas (1/2 de las habas de
soja originales) quedan sustancialmente excluidas de entre las
habas de soja trituradas.
Las ventajas que se alcanzan mediante el
triturado crudo de la materia prima de soja a un tamaño inferior a
1/2, preferentemente 1/16 o más y menos de 1/2, más
preferentemente 1/8 o más y menos de ¼ del tamaño original se
resumen en la Tabla 1 más adelante. En la Tabla 1
"\circledcirc", "\medcirc", "\Delta" y
"X" significan "más preferente", "preferente",
"habitual" y "malo", respectivamente.
| ^{1}/_{2} o mas | Inferior a ^{1}/_{2} y | Inferior a ^{1}/_{4} y | Inferior a 1/8 | Inferior a 1/16 | |
| ^{1}/_{4} o mas | 1/8 o mas | y 1/16 | |||
| Pureza del germen | \circledcirc | \medcirc | \medcirc | \medcirc | \Delta |
| Daño del germen | \circledcirc | \medcirc | \medcirc | \medcirc | \Delta |
| Capacidad de procesamiento | \Delta | \medcirc | \circledcirc | \medcirc | \Delta |
| en la etapa de triturado | |||||
| Asociación del germen a | X | \medcirc | \circledcirc | \medcirc | \Delta |
| la cáscara de soja | |||||
| Carga en la | X | \medcirc | \circledcirc | \medcirc | \Delta |
| etapa de escamado | |||||
| Eficacia de la extracción | \medcirc | \circledcirc | \circledcirc | \medcirc | X |
El calentamiento y secado de la materia prima de
soja se realiza generalmente durante entre 4 y 8 horas a entre 40 y
80ºC.
La soja crudamente triturada se somete por lo
menos a una etapa con un aparato separador tal como el tamiz y el
aparato de separación por aire que utiliza la diferencia en
densidad, tamaño de grano y forma de grano para eliminar la cáscara
y el cotiledón y para separar y concentrar la fracción de germen de
soja que contiene cierta cantidad de germen. Como resultado, se
produce la materia prima de soja según la presente invención. En
este caso, la cáscara y el germen se pueden separar entre sí
todavía más destruyendo ligeramente la cáscara que tiene el germen
asociado, eliminando la cáscara con el aparato de separación
descrito anteriormente, seguido de la separación y concentración de
la fracción de germen que contiene una gran cantidad del
germen.
Cuando se utiliza el aparato de separación basado
en las diferencias en tamaño de grano, la fracción de germen de
soja que contiene la mayoría del germen se puede separar y
concentrar recogiendo las fracciones de tamaño 7 mesh (2,80 mm) o
menos y recogiendo además las fracciones de tamaño de 10 a 14 mesh
(1,70 mm a 1,18 mm) con el tamiz. El tamaño de la malla en el tamiz
para recoger las fracciones depende del grado de triturado crudo y
se puede utilizar una malla de tamaño 14 a 16 mesh.
La fracción de germen de soja producida de este
modo que contiene germen como principal componente contiene por lo
menos un 15% en peso de germen y se puede utilizar como materia de
soja para la preparación del aceite de soja según la presente
invención. La fracción de soja anterior también puede contener
otros componentes que consisten principalmente en cotiledones y
cáscaras en diversas proporciones, que dependen de las condiciones
de separación y concentración, que también se utilizan como
materiales para el aceite de soja.
El material de soja según la presente invención
puede contener, además del material derivado de la soja, otros
materiales de germen derivados, por ejemplo, de maíz, trigo, arroz
y colza en la proporción adecuada para la extracción del aceite
según la presente invención.
El material de soja producido de este modo a
continuación se caliente durante varios segundos, aproximadamente
60 minutos, por ejemplo, a entre 40 y 100ºC, se escama, y se pone en
contacto con un disolvente orgánico tal como
n-hexano con el fin de extraer un componente de
aceite o un aceite crudo. Por el contrario, las escamas se pueden
calentar e hinchar mediante un dilatador, seguido de la extracción
con el disolvente orgánico o líquido carbonatado para proporcionar
el aceite crudo.
El aceite purificado se puede preparar por
desengome, refinamiento alcalino, decoloración y desodorización del
aceite crudo utilizando un procedimiento convencional conocido en
la materia.
Un agente o composición que comprende un aceite
según la presente invención contiene una actividad para reducir el
nivel de colesterol en el cuerpo, especialmente en el suero y en el
hígado. El agente puede comprender una multiplicidad de tipos de
auxiliares y aditivos farmacéuticamente aceptables, conocidos por
los expertos en la materia, además del aceite según la presente
invención como componente efectivo. Los auxiliares y aditivos
pueden estar en forma sólida, líquida o gelatinosa dependiendo del
tipo.
La dosis de agente reductor del colesterol que
comprende un aceite según la presente invención depende del nivel de
colesterol en el cuerpo, la edad, el género, la condición física
del sujeto, siendo apropiados entre 3 y 30 gramos de aceite de soja
por día para un adulto. Se puede seleccionar una ruta de
administración opcional tal como la oral, etc.
En especial, el agente reductor del colesterol
tiene una actividad para reducir significativamente el nivel de
colesterol en el suero.
Los diversos tipos de alimentos que comprenden
aceite según la presente invención, tales como los alimentos
comunes, los alimentos con suplementos nutritivos, los alimentos
fortificados nutritivamente y los alimentos para fines sanitarios
específicos pueden comprender cualquier componente conocido
aceptable desde el punto de vista de la higiene alimenticia, tales
como los aditivos alimentarios, alimentos, etc.
Los alimentos que comprenden un aceite según la
presente invención pueden tener diferentes tipos de formas que
dependen de las clases de sus componentes, tales como mayonesa,
margarina, esparcible, aliño, aceite para freír, pan, hamburguesa,
pastel, emulsión líquida y gelatina. El contenido del aceite según
la presente invención en los alimentos puede ser determinado
opcionalmente por el fabricante, dependiendo del tipo de
alimento.
Además, el aceite de soja según la presente
invención se puede combinar para la utilización con múltiples tipos
de aceites de germen tales como aceite de germen de maíz, aceite de
germen de trigo, aceite de germen de arroz y aceite de germen de
colza; y con el aceite de soja común, aceite de colza y aceite de
sésamo.
La presente invención se describirá con más
detalle haciendo referencia a los ejemplos siguientes, que en
ningún caso se proporcionan a título limitativo del alcance de la
presente invención.
Los componentes de aceite de los ejemplos se
analizaron mediante los procedimientos estándar para el análisis de
grasas, aceites y materiales relacionados: Japan Oil Chemist's
Society (1996). El análisis de algunos de los componentes de
tocoferol marcados con "*" y esteroles fue realizado por el
Japan Food Analysis Center, mientras que el resto de los ensayos
fue realizado por los presentes inventores. En los ejemplos el
término "%" significa % en peso.
Se prepararon tres tipos de aceites de soja según
la presente invención mediante la utilización de materias primas de
soja con diferentes contenidos de germen de soja y se estudiaron en
ensayos animales con respecto a su efecto reductor del colesterol.
El aceite de soja para tempura y el aceite de cotiledón se utilizó
en el mismo ensayo como comparación.
Se calentaron semillas de soja seleccionadas
durante un periodo comprendido entre 30 y 60 minutos a 80ºC y se
trituraron crudamente pasándolas por rodillos de goma a la vez que
simultáneamente se pelaron las cáscaras debido a la fuerza de
cizalla aplicada. Una vez separada y recogida, mediante separación
por aire, una fracción que contiene germen y cáscara como
principales componentes, se eliminó la fracción de cáscara mediante
fraccionamiento por aire y se concentró la fracción de germen. Una
parte del material de soja obtenido de este modo se tomó como
muestra. La muestra se separó en partes tales como germen y se
determinó que el contenido en germen, cotiledón y otras partes,
tales como cáscara, fue de aproximadamente 70% en peso,
aproximadamente 25% en peso y aproximadamente 5% en peso,
respectivamente.
Por el contrario, las semillas de soja enteras se
calentaron durante un periodo comprendido entre 30 y 60 minutos a
entre 80 y 100ºC, se trituraron crudamente a un tamaño inferior a ½
del original para producir una mezcla de cáscara, germen y
cotiledón. La parte de cáscara se eliminó de la mezcla mediante
separación por aire y la fracción de tamaño 7 mesh se eliminó
mediante un tamiz con el fin de recoger fracciones de tamaño 7 mesh
o inferiores (rendimiento: 21,5%).
A continuación, las fracciones con tamaño entre
10 y 14 mesh se obtuvieron mediante un tamiz vibrador o agitador
vibrante y se recuperó la cáscara asociada mediante fraccionamiento
por aire para dar una fracción de germen que corresponde al 30,4%
de las fracciones con un tamaño 7 mesh o inferior. Una parte del
material de soja obtenido de este modo se tomó como muestra. La
muestra se separó en partes tales como germen y otros hasta
aproximadamente 5% en peso, respectivamente. La parte de cotiledón
que se había obtenido separadamente se añadió al material de soja
anterior que contiene aproximadamente un 40% en peso de contenido de
germen para producir un material de soja que contiene
aproximadamente un 20% en peso de contenido de germen.
Los materiales de soja con diversas
concentraciones de germen se calentaron a 60ºC y se prensaron en
escamas de 0,2 a 0,3 mm de grosor mediante un rollo de escamar. Las
escamas se trataron con n-hexano durante una hora a
50ºC para producir un componente de aceite. El bizcocho resultante
se trató también del mismo modo para dar un componente de aceite.
A continuación se combinaron los dos componentes de aceite para
producir micela. La micela resultante se concentró a 50ºC y a
entre 100 y 150 mm Hg, se concentró todavía más durante entre 1 y 2
horas a entre 60 y 80ºC a presión reducida con un aspirador y
finalmente se calentó a entre 60 y 70ºC a presión reducida con una
bomba de vacío con el fin de eliminar reversiblemente el resto del
n-hexano y producir un aceite
crudo.
crudo.
El aceite crudo preparado a partir del material
de soja que contiene un 40% en peso de contenido de germen se
mezcló con ácido fosfórico (0,1%), se agitó durante 15 minutos a
70ºC, se mezcló con agua destilada, se agitó durante 30 minutos a
70ºC y se centrifugó para eliminar el componente gomoso. El aceite
resultante se mezcló con ácido fosfórico (0,1%), se agitó durante
15 minutos a 75ºC, se mezcló con una disolución de NaOH
(concentración normal) a 26ºC, se agitó durante 20 minutos a 70ºC y
se centrifugó. El sobrenadante resultante se mezcló con agua
destilada (5% del total), se lavó durante 1 minuto a 80ºC y se
centrifugó. El sobrenadante resultante se mezcló con tierra
activada (2%), se agitó durante 30 minutos a 80ºC a presión
reducida, se filtró y se sometió una destilación al vapor (cantidad
de vapor: 2%) durante 30 minutos a 180ºC para producir un aceite
purificado.
Por consiguiente, se preparó aceite crudo a
partir del material de soja que contiene un 70% en peso de
contenido de germen, aceite crudo y purificado a partir del
material de soja que contiene un 40% en peso de contenido de
germen y aceite crudo y purificado del material de soja que
contiene un 20% en peso de contenido de germen. Todos estos
aceites son aceites de soja según la presente invención.
El aceite crudo a partir de la parte de cotiledón
se preparó de la misma forma descrita anteriormente.
El contenido en esteroles, tocoferol y ácidos
grasos de los aceites representativos se analiza y resume en la
Tabla 2. La Figura 1 muestra una gráfica de cromatografía de gases
(GC) del material no saponificable del aceite de soja preparado a
partir del material de soja que contiene un 40% en peso de
contenido de germen. La Figura 2 muestra una gráfica de GC de los
materiales no saponificables del aceite de soja común como
comparación. Las condiciones para GC se muestran a continuación
únicamente como ejemplo.
\newpage
Detección: FID;
Temperatura: Ing. 280ºC, Det. 290ºC;
Columna 260ºC (50 minutos) - 10ºC/min - 300ºC (5
minutos);
Fase de transferencia: Helio;
Estándar interno: Colestanol.
Se demuestra a partir de la Fig. 1 y Fig. 2 que
la proporción entre los picos que aparecen después del
\beta-sitosterol, es decir, los de
\Delta7-estigmastenol,
\Delta7-avenasterol y citrostadienol y los picos
que aparecen más deprisa que el del
\beta-sitosterol, es decir, los de campesterol y
estigmasterol, es relativamente superior en la Figura 1 que en la
Figura 2. Por consiguiente, el aceite de soja según la presente
invención está caracterizado porque presenta las siguientes
características:
- (1)
- El contenido en esterol total es del 0,8% en peso o superior cuando el aceite de soja se prepara a partir de un producto a base de soja con un 15% en peso de contenido de germen. Dicho contenido es igual o superior al de los aceites comunes tales como el aceite de soja (0,4% en peso), aceite de colza (0,8% en peso), aceite de maíz (0,9% en peso), aceite de palma (0,3% en peso), aceite de girasol (0,3% en peso);
- (2)
- Hay muchos componentes de esterol cuyo tiempo de retención (r.t.) en GC es posterior al del \beta-sitosterol y su cantidad constituye entre el 20 y el 51% en peso de la cantidad total de esteroles en el aceite de soja;
- (3)
- La proporción (contenido) de campesterol en el esterol total es del 14% en peso o inferior, que es inferior a la del aceite de soja (20% en peso), aceite de colza (34% en peso) y aceite de maíz (20% en peso).
Utilizando los aceites nº 3, 5, 6, 7 y 8 de la
Tabla 2 como aceites que se van a ensayar, se realizaron ensayos en
animales para estudiar su capacidad para reducir el nivel de
colesterol en el suero según el siguiente protocolo de ensayo en
animales.
El aceite nº 8 se utilizó en los Ensayos nº 1 y
nº 2; los aceites nºs 3, 5, 6 y 7 se utilizaron en los Ensayos nºs
3, 4, 5 y 6, respectivamente.
Protocolos nº
1
Los miembros del ensayo y la composición de sus
dietas se resumen en la Tabla 3.
Se estabularon individualmente en jaulas ratas
Wistar (190 a 200 g) durante cuatro semanas, libremente alimentadas
con la dieta. En cada uno de los Ensayos nºs 1 a nº 5 se utilizaron
diez ratas y en el Ensayo nº 6 se utilizaron 6 ratas.
Al final del período de ensayo, las ratas fueron
anestesiadas con éter etílico. Se recogió sangre de la aorta
abdominal y se separó suero de la sangre mediante centrifugación
durante 15 minutos a 3.000 rpm. El nivel de colesterol total en el
suero se midió mediante un análisis enzimático utilizando FUJI
DRI-CHEM SLIDE TCHO PII.
La Figura 3 muestra la proporción entre el nivel
de HDL-colesterol y el nivel de (VLDL +
LDL)-colesterol en el suero después de un período de
dos semanas de estabulación. La Figura 4 muestra un cambio del nivel
total de colesterol en el suero durante el transcurso del tiempo.
La Figura 5 muestra el cambio en el nivel de
HDL-colesterol en el suero durante el transcurso del
tiempo.
Tal como se observa en la Figura 3, el Ensayo nº
4 demostró el segundo nivel más elevado de
HDL-colesterol y el segundo nivel más bajo de (VLDL
+ LDL)-colesterol, a la vez que el Ensayo nº 1 (no
se suplió colesterol) tuvo el nivel más elevado de
HDL-colesterol y el nivel más bajo de (VLDL +
LDL)-colesterol.
Tal como se observa en la Figura 4, el Ensayo nº
4 demostró el nivel de colesterol total más bajo en el suero entre
los diversos tipos de aceite de soja a lo largo de los períodos de
estabulación de 2, 3 y 4 semanas, seguido por el Ensayo nº 3, nº
5, nº 2 y nº 6.
Tal como se observa en la Figura 5, el Ensayo nº
3 y el nº 4 demostraron de modo semejante los niveles más elevados
de HDL-colesterol en el suero, seguidos de los
Ensayos nº 5, nº 2 y nº 6.
Tal como se observa en la Tabla 3, aunque el
contenido en esterol total contenido en el Ensayo nº 4 es
aproximadamente la mitad que la del Ensayo nº 3, el Ensayo nº 4
demostró el nivel más bajo de colesterol total en el suero a lo
largo de los períodos de estabulación de 2, 3 y 4 semanas.
El hecho anterior revelado primero mediante la
presente invención sugiere fuertemente que el efecto reductor del
nivel de colesterol del aceite de soja según la presente invención
no solamente se puede atribuir al contenido de esteroles en el
mismo.
Se prepararon otras muestras de aceite de soja
según la presente invención. Éstas se utilizaron en ensayos en
animales para estudiar el efecto reductor del colesterol en los que
también se ensayó un aceite común de soja para tempura suplido con
esterol de soja (que contuvo un 60% en peso de
\beta-sitosterol) como comparación.
Se trituraron crudamente semillas de soja
seleccionadas y el germen y la cáscara se separaron mediante un
aspirador grande. La parte de germen que puede tener contaminantes
tales como cáscaras y cotiledones se separó a continuación de la
parte de cáscara mediante una carrete grande. Además se eliminó la
parte de cáscara de la parte de germen utilizando un aspirador. El
material de soja producido de este modo contiene aproximadamente un
44,4% en peso ,o entre el 48 y el 52% en peso de contenido de germen
(Tabla 4). La Tabla 4 también muestra el contenido de la parte de
cotiledón.
El material de soja producido anteriormente se
escamó utilizando un rodillo de escamado, se extrajo con
n-hexano mediante un pequeño aparato de extracción
para producir micela. Una vez eliminado el n-hexano
de la micela, por destilación mediante un evaporador LTV a 50ºC y
entre 100 y 150 mm Hg, la micela se concentró durante entre 6 y 7
horas a entre 60 y 80ºC utilizando un evaporador capilar a presión
reducida con un aspirador y se secó durante entre 3 y 4 horas a
entre 60 y 70ºC utilizando un secador a presión reducida para
producir un aceite de soja (aceite de germen) según la presente
invención. La parte de cotiledón se trató de modo semejante, con el
fin de producir aceite de cotiledón.
Se analizaron dos lotes de aceite de soja (aceite
de germen) según la presente invención y el aceite de cotiledón y
los múltiples valores obtenidos se resumen en la Tabla 4.
Los Experimentos I y II se realizaron utilizando
los diversos tipos de aceite preparados anteriormente según los
siguientes protocolos para estudiar los efectos reductores del
colesterol. Las composiciones de las dietas se resumen en las
Tablas 5 y 6. Los aceites de cotiledón y de soja para tempura se
utilizaron como controles y los aceites de cotiledón y de soja para
tempura suplido con \beta-esterol se utilizaron
también como controles positivos. Todos los valores en las tablas
significan "% en peso".
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Experimento
I
Composición de la dieta
(%)
| Ensayo n° | 1 | 2 | 3 | 4 |
| Aceite de | Aceite de | Aceite de soja | (Aceite de soja | |
| germen | cotiledón | para tempura | para tempura | |
| + \beta-sitosterol) | ||||
| Contenido en germen (%) | 44,4 | 0 | 2 | 2 |
| en el material | ||||
| Aceite (g) | Aceite de | Aceite de | Aceite de soja | Aceite de soja |
| germen | cotiledón | para tempura | para tempura | |
| 9,0 | 9,0 | 9,0 | 9,0 | |
| (contenido en esterol) | (0,20) | (0,02) | (0,04) | (0,04) |
| \beta-sitosterol | - | - | - | 2,2 |
| Colesterol | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 |
| Ácido cólico | 0,15 | 0,15 | 0,15 | 0,15 |
| Caseína | 22,0 | 22,0 | 22,0 | 22,0 |
| Celulosa | 5,0 | 5,0 | 5,0 | 5,0 |
| Sales | 5,0 | 5,0 | 5,0 | 5,0 |
| Mezcla vitamínica | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 |
| CI Colina | 0,3 | 0,3 | 0,3 | 0,3 |
| Sacarosa | 57,55 | 57,55 | 57,55 | 55,35 |
\newpage
\vskip1.000000\baselineskip
Experimento
II
Composición de la dieta
(%)
| Ensayo n° | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
| Aceite de | Aceite de | Aceite de soja | (cotiledón + | Sebo de | |
| germen | cotiledón | para tempura | \beta-sitosterol) | vaca | |
| Contenido en germen (%) | 48 - 52 | 0 | 2 | 0 | - |
| en el material | |||||
| Aceite (g) | Aceite de | Aceite de | Aceite de | Aceite de | Sebo de |
| germen | cotiledón | soja para | cotiledón | vaca | |
| 9,0 | 9,0 | tempura | 9,0 | 9,0 | |
| 9,0 | |||||
| (contenido en esterol) | (0,23) | (0,02) | 0,04) | (0,02) | - |
| \beta-sitosterol | - | - | - | 2,2 | - |
| Colesterol | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 |
| Acido cólico | 0,15 | 0,15 | 0,15 | 0,15 | 0,15 |
| Caseína | 22,0 | 22,0 | 22,0 | 22,0 | 22,0 |
| Celulosa | 5,0 | 5,0 | 5,0 | 5,0 | 5,0 |
| Sales | 5,0 | 5,0 | 5,0 | 5,0 | 5,0 |
| Mezcla vitamínica | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 |
| CI Colina | 0,3 | 0,3 | 0,3 | 0,3 | 0,3 |
| Sacarosa | 57,55 | 57,55 | 57,55 | 55,35 | 57,55 |
\vskip1.000000\baselineskip
La pureza del \beta-esterol
(producido por Tokyo Kasei Co.) utilizado en las tablas anteriores
fue de aproximadamente el 60% siendo el resto campesterol.
Protocolos nº
2
Se estabularon tres ratas Wistar macho
(Experimento I; aprox. 190 g, Experimento II: 190 a 200 g) en una
jaula durante cuatro semanas y se alimentaron libremente con la
dieta. Nueve ratas por cada ensayo. Los resultados se muestran en la
Tabla 7.
El \beta-sitosterol (Tokyo
Kasei Co.) tuvo una pureza de aproximadamente 60% siendo el resto
campesterol. El nivel de colesterol en el suero se determinó del
mismo modo que en el Ejemplo 1 y el nivel de colesterol en el
hígado se determinó según el procedimiento de Rudel et al.,
[Rudel, L.L., et al., J. Lipid Res., 14:364 (1973)].
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Resultados Experimento
I
| Ensayo n° | Esterol (%/dieta) | Colesterol en suero | Colesterol hepático |
| (mg/dl) | (mg/g peso) | ||
| N° 1 aceite de germen | 0,20 | 110,6 \pm 8,8 | 14,03 \pm 2,11 |
| N° 2 aceite de cotiledón | 0,02 | 151,1 \pm 19,3 | 18,56 \pm 3,61 |
| N° 3 aceite de soja | 0,04 | 121,1 \pm 10,0 | 15,60 \pm 1,43 |
| para tempura | |||
| N° 4 aceite de soja para | 0,04 + 2,2 = 2,24 | 118,8 \pm 7,6 | 5,71 \pm 0,81 |
| tempura + \beta-sitosterol | |||
| N° 5 (referencia) | 83,8 \pm 6,0 | 2,59 \pm 0,11 | |
| Dieta Clea |
\vskip1.000000\baselineskip
Resultados Experimento
II
| Ensayo n° | Esterol (%/dieta) | Esterol en suero | Esterol hepático |
| (mg/dl) | (mg/g peso) | ||
| N° 1 aceite de germen | 0,23 | 102,2 \pm 11,3 | 14,29 \pm 3,81 |
| N° 2 aceite de cotiledón | 0,02 | 116,0 \pm 12,5 | 22,13 \pm 7,37 |
| N° 3 aceite de soja para | 0,04 | 109,9 \pm 6,2 | 21,44 \pm 7,50 |
| tempura | |||
| N° 4 aceite de cotiledón + | 0,02 + 2,2 = 2,22 | 124,2 \pm 9,4 | 5,71 \pm 1,75 |
| \beta-sitosterol | |||
| N° 5 sebo de vaca | 181,7 \pm 20,1 | 17,11 \pm 1,43 | |
| N° 6 (referencia) | 77,3 \pm 10,6 | 1,88 \pm 0,53 | |
| Dieta Clea | |||
| ("Dieta Clea" en las tablas anteriores es una dieta para animales comercialmente disponible, que no contiene | |||
| colesterol) |
\vskip1.000000\baselineskip
Tal como se observa en la Tabla 7, los niveles de
colesterol en el suero y en el hígado en el caso de aceite de
germen (Ensayo nº 1) fueron significativamente inferiores a los del
caso de aceite de cotiledón (Ensayo nº 2) o a los de aceite de soja
para tempura tanto en el Experimento I como en el Experimento
II.
El aceite de soja para tempura (Experimento I, nº
4) suplido con \beta-sitosterol en una cantidad 4
veces superior a la del contenido de esterol del aceite de germen
(Ensayo nº 1) y el aceite de cotiledón (Experimento II, nº 4)
suplido con \beta-sitosterol en una cantidad 4
veces superior a la del contenido en esterol en el aceite de germen
(Ensayo nº 1) demostraron un nivel de colesterol significativamente
inferior al del aceite de germen en el hígado, pero no en el
suero.
suero.
Dichos resultados podrían demostrar que el efecto
reductor del colesterol del aceite de soja según la presente
invención no se pueden atribuir exclusivamente al
\beta-sitosterol contenido en el mismo, sugiriendo
fuertemente que pueden existir otros componentes reductores del
colesterol del suero en el aceite de soja según la presente
inven-
ción.
ción.
El aceite de soja preparado en el Ejemplo 1 (el
aceite crudo preparado a partir del material de soja que contiene
40% en peso de contenido de germen y el aceite purificado obtenido
del mismo), aceite de soja para tempura, aceite de salvado de trigo
y aceite de maíz se ensayaron con respecto a su efecto reductor de
nivel de colesterol en el suero de acuerdo con el siguiente
protocolo de ensayo en animales. Los valores para los componentes
de la Tabla 8 significan "% en peso".
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Composición de la dieta
(%)
| Ensayo n° | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
| Aceite de soja | Aceite de salvado | Aceite de | Fracción de germen | Fracción de | |
| para tempura | de arroz | maíz | de soja (aceite crudo) | germen de soja | |
| (aceite purificado) | |||||
| Aceite (g) | 10,0 | 10,0 | 10,0 | 10,0 | 10,0 |
| (contenido en | (0,04) | (0,11) | (0,09) | (0,15) | (0,14) |
| esterol) | |||||
| Colesterol | - | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 |
| Colato sódico | - | 0,25 | 0,25 | 0,25 | 0,25 |
| Caseína | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Sacarosa | 60,80 | 60,05 | 60,05 | 60,05 | 60,05 |
| Celulosa | 4 | 4 | 4 | 4 | 4 |
| Mezcla de | 4 | 4 | 4 | 4 | 4 |
| minerales | |||||
| Mezcla | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 |
| vitamínica | |||||
| CI Colina | 0,2 | 0,2 | 0,2 | 0,2 | 0,2 |
| Total | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 |
\vskip1.000000\baselineskip
Protocolos nº
3
Se estabularon ratas macho Sprague Dawley (SD)
(135 g) individualmente en jaulas durante cuatro semanas, se
alimentaron libremente con la dieta. Diez ratas por ensayo. Los
resultados se muestran en la Tabla 9.
\vskip1.000000\baselineskip
| Ensayo n° | Colesterol | Colesterol total en | Esterol LDL en |
| suero después de 4 | suero después de 4 | ||
| semanas (mg/dl) | semanas (mg/dl) | ||
| N° 1 aceite de soja | - | 68 \pm 10 | 4 \pm 1 |
| para tempura | |||
| N° 2 aceite de salvado | + | 146 \pm 29 | 34 \pm 8 |
| de arroz | |||
| N° 3 aceite de maíz | + | 129 \pm 47 | 29 \pm 12 |
| N° 4 fracción de germen | + | 100 \pm 34 | 21 \pm 10 |
| de soja (aceite crudo) | |||
| N° 5 fracción de germen | + | 98 \pm 16 | 22 \pm 6 |
| de soja (aceite purificado) |
Tal como se observa en la Tabla 9, tanto los
niveles de colesterol total como los de
LDL-colesterol en suero en el caso del aceite de
soja (aceite de germen) fueron significativamente inferiores a
aquellos en el caso del aceite de salvado de arroz y aceite de
maíz que se conoce tienen el efecto de reducir el colesterol sérico,
demostrando que el efecto reductor del nivel de colesterol sérico
del aceite de soja según la presente invención es
significativamente superior al efecto del aceite de salvado de
arroz y al del aceite de maíz.
El colesterol sérico se determinó del mismo modo
que en el Ejemplo 1.
Los efectos reductores del colesterol del esterol
de soja se obtienen mediante su administración en cantidades tres
veces superiores a las del contenido de colesterol en la dieta
[Yasui , A., Kaneda, T., J. Jap. Soc. Food and Nutr.,
25(1):, nº 1, 27-32 (1973)].
Por otra parte, el esterol contenido en el aceite
de soja según la presente invención muestra los efectos reductores
del colesterol, aunque su contenido sea muy inferior, es decir, a
menos de la mitad del contenido de colesterol en la dieta, tal como
se observa en las Figuras 3 a 5 y en la Tabla 7.
Los efectos reductores del colesterol del
presente aceite de soja son muy notables e inesperados a partir de
las observaciones anteriores.
Además, los resultados anteriores sugieren que
pueden existir otros componentes reductores del colesterol a parte
del esterol de soja (\beta-sitosterol) en el
aceite de soja según la presente invención.
Claims (6)
1. Aceite preparado a partir de un producto a
base de soja que contiene entre 15 y 80% en peso de contenido de
germen.
2. Aceite según la reivindicación 1, preparado a
partir de un producto a base de soja que contiene entre 30 y 80% en
peso de contenido de germen.
3. Aceite según la reivindicación 1, en el que el
material de soja se produce mediante un procedimiento que comprende
triturar un material inicial de soja o sus semillas seleccionadas,
del que se han eliminado sustancias extrañas, a un tamaño inferior
a 1/2, de tal modo que las semillas de soja que presentan la mitad
del tamaño de las semillas de soja originales quedan
sustancialmente excluidas de entre las sojas trituradas, y separar
y concentrar una fracción de germen de soja.
4. Aceite según la reivindicación 1, en el que el
material de soja se produce mediante un procedimiento que comprende
triturar un material inicial de soja o sus semillas seleccionadas,
del que se han eliminado las sustancias extrañas, a un tamaño
inferior a 1/2, de tal modo que las semillas de soja que presentan
la mitad del tamaño de las semillas de soja originales quedan
sustancialmente excluidas de entre las sojas trituradas y escamar,
separar y concentrar una fracción de germen de soja.
5. Aceite según cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 4, en el que el contenido en campesterol está
comprendido entre el 7,0 y el 14% en peso, sobre la base del
contenido total de esteroles.
6. Aceite según cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 4, en el que el contenido en
\Delta7-estigmastenol,
\Delta7-avenasterol y citrostadienol está
comprendido entre el 20 y el 51% en peso, sobre la base del
contenido total de esteroles.
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