ES2217462T3

ES2217462T3 - Procedimiento para aislar 1-(n2-((s)-etoxicarbonil)-3-fenilpropil)-n6-trifluoroacetil)-l-lisil-l-prolina (ester etilico de lisinopropil (tfa), lpe).

Info

Publication number: ES2217462T3
Application number: ES98113455T
Authority: ES
Inventors: Matthias Dr. Kottenhahn; Roland Moller; Michael Kraft; Karlheinz Prof. Dr. Drauz; Klaus Dr. Stingl
Original assignee: Degussa GmbH
Current assignee: Evonik Operations GmbH
Priority date: 1997-07-30
Filing date: 1998-07-18
Publication date: 2004-11-01
Anticipated expiration: 2018-07-18
Also published as: DE19832405A1; EP0896000A1; US5907044A; JPH1192496A; EP0896000B1; ATE260932T1; DE59810880D1; JP4307594B2; US6455705B1

Abstract

MEDIANTE PROCEDIMIENTOS CONOCIDOS DE AISLAMIENTO PARA LA OBTENCION DE LPE SON MUY DIFERENTES LOS DISOLVENTES PARA LA EXTRACCION DEL LPE A PARTIR DE UNA FASE ACUOSA EN UNA FASE ORGANICA Y PARA SU CRISTALIZACION. EL CAMBIO DEL DISOLVENTE A ESCALA TECNICA ES DIFICIL LLEVARLO DE MANERA TOTAL A CABO, EN TODO CASO ES MUY COSTOSO EN UN PRODUCTO TAN DELICADO COMO EL LPE. DADO POR TANTO QUE UN DISOLVENTE O UNA MEZCLA DE DISOLVENTES SE UTILIZA PARA EXTRACCION, LO CUAL REPRESENTA UNA PARTE IMPORTANTE DEL DISOLVENTE O DE LA MEZCLA DE DISOLVENTE, A PARTIR DE LA CUAL SE REALIZA LA CRISTALIZACION, SE CONSIGUE RENUNCIAR AL PROCEDIMIENTO DE DESTILACION DEL LPE, PERO QUE SIN EMBARGO SE LLEGA A UNA ELEVADA CALIDAD TANTO EN CUANTO A RENDIMIENTO COMO EN CUANTO A PUREZA DEL PRODUCTO FINAL. 1 - [N 2 - ((S - ETOXICARBONIL) - 3 - FENILPROPIL) N 6 - TRIFLUORACETIL] - L - LISIL - L - PROLINA (LISINOPRIL(TFA)ETILESTER, LPE) COMO ETAPA PREVIA PARA LA OBTENCION DE UN INHIBIDOR DE ACE.

Description

Procedimiento para aislar 1-[N^{2}-((S)-etoxicarbonil)-3-fenilpropil)-N^{6}-trifluoroacetil]-L-lisil-L-prolina (éster etilico de lisinopropil (Tfa), LPE).

La invención se refiere a un procedimiento para aislar 1-[N^{2}-((S)-etoxicarbonil)-3-enilpropil)-N^{6}-trifluoroacetil]-L-lisil-L-prolina (LPE, compuesto I).

1

Los aminoácidos N-sustituidos de este tipo son valiosos productos intermedios para la preparación de inhibidores de la enzima convertidora de la angiotensina (ACE), que actúan como reguladores de la presión sanguínea. (I) es el producto previo directo para obtener la 1-[N^{2}-((S)-carboxi)-3-fenilpropil)]-L-lisil-L-prolina (Lisinopril II), que presenta destacados resultados terapéuticos en la lucha contra la hipertensión (Zestril®, Coric®, Prinivil®).

El compuesto (I) se obtiene, según el estado conocido de la técnica, mediante la aminación reductora de éster etílico del ácido 2-oxo-4-fenilbutírico con el dipéptido Lys(Tfa)-Pro.

2

En J. Org. Chem. 1988, 53, 836-344 se describe un procedimiento de este tipo. Según éste, (I) se obtiene, con un rendimiento del 42%, mediante extracción en condiciones básicas de la solución bruta de reacción, una extracción del producto, dispuesta a continuación, en cloruro de metileno a pH 4,6 y subsiguiente cristalización, tras cambio de disolvente, en éter metil-terc.-butílico, ciclohexano.

El documento EP 05 23 449 se refiere a la síntesis de (I), que según el Ejemplo 3 se obtiene con un rendimiento del 60%. La elaboración de la solución bruta de reacción obtenida, según este procedimiento comprende, junto a la etapa de extracción de carácter básico y otra de carácter ácido con 1,1,1-tricloroetano, una cristalización en éter metil-terc.-butílico.

Fundamentalmente también son conocidos otros procedimientos para la preparación del compuesto (I), que no se basan en aminación reductora, pero son menos ventajosos (documento EP 0 336 368 A2). Aquí se extrae la fase acuosa del producto con cloruro de metileno. Después del secado de la fase orgánica sobre sulfato sódico se cambia, sin embargo, de nuevo el disolvente para la cristalización en éter metil-terc.-butílico.

La cristalización en éter metil-terc.-butílico puro conduce a un grano cristalino que filtra mal, y a rendimientos insuficientes la mayor parte de las veces (documento EP 0 645 398 A1). Si se hace cristalizar (I) en soluciones de elevada concentración, se hace necesaria una recristalización adicional. Se describe también la adición de ciclohexano (J. Org. Chem., 1988, 53, 836 - 844) en la cristalización para elevar el rendimiento. En este caso existe, sin embargo, el peligro de la separación en forma de aceite, lo que dificulta fuertemente un aislamiento del producto no sólo a escala técnica.

En el documento EP 0 645 398 A1 se investiga detalladamente la posibilidad de la cristalización del compuesto (I) en diferentes disolventes o mezclas de disolventes. En este caso resultó que al emplear éter metil-terc.-butílico o mezclas con contenido en éter metil-terc.-butílico era muy grande el contenido en disolvente residual de los cristales después de la cristalización, o bien en el cristal estaba incluido disolvente residual. El material bruto en LPE, así obtenido, es extremadamente difícil de secar. Los prolongados tiempos de secado, que pueden perjudicar la calidad del producto (formación de DKP especialmente a temperaturas elevadas), o bien la tendencia a la adherencia del producto hacen necesarios conceptos de secado especialmente complejos.

A partir del documento WO 95/07928 es conocida una clase de elaboración que describe una extracción con subsiguiente cristalización. En este caso se purifica previamente, en un intervalo de pH de 0 - 6,3, el material bruto para la preparación de LPE, eventualmente por medio de varias etapas de extracción líquido/líquido antes de que se cristalice a temperaturas reducidas en una mezcla de éter metil-terc.-butílico y metilciclohexano. También aquí tenía lugar, entre la extracción y la cristalización, un cambio de disolvente.

Es desventajoso en el procedimiento de elaboración de LPE según el estado conocido de la técnica que frecuentemente se emplean disolventes clorados que ponen en peligro el medio ambiente, y que durante la elaboración debe cambiarse el disolvente, lo que a escala técnica difícilmente puede lograrse por completo, y por ello sólo pueden ajustarse composiciones de disolventes insuficientemente definidas para la cristalización. Además, sólo se permiten para tales cambios de disolvente condiciones suaves de temperatura en virtud de la sensibilidad del producto, lo que trae consigo prolongados tiempos de destilación. Los procedimientos del estado conocido de la técnica conducen además, con frecuencia, a cristales que filtran mal, con mucho disolvente residual incluido. Un producto de este tipo necesita largos procesos de secado, que a escala técnica hacen controlables los apelmazamientos y las adherencias sólo muy difícilmente.

Atendiendo al estado conocido de la técnica, aquí indicado y discutido, era, pues, misión de la invención encontrar un nuevo procedimiento para el aislamiento de LPE (I) que permita, a través de una forma de proceder simplificada y más rentable poder aislar mejor a partir de una fase producto acuosa el material bruto obtenido en un proceso de preparación de LPE, que por su parte, mediante propiedades cristalinas más favorables del material precipitado, ayude a reducir los tiempos de secado habitualmente prolongados que gravan considerablemente la LPE (I).

Era además misión de la invención generar, con los nuevos procedimientos de aislamiento más sencillos, un material final de LPE que, con tiempos de secado equiparables, sea mejor que el del estado conocido de la técnica, en especial respecto al contenido en disolvente residual.

Era también misión de la invención una LPE (I) mejorada.

Técnicamente se resuelven estos problemas por un procedimiento con las particularidades de la parte caracterizante de la reivindicación 1. Son objeto de las subsiguientes reivindicaciones subordinadas a la reivindicación 1 ventajosas modificaciones del procedimiento de la invención. Respecto del producto acabado, la reivindicación 1 indica una solución.

Debido a que a partir de una solución acuosa de producto de un proceso de preparación de LPE, preparada según el procedimiento del estado conocido de la técnica, se extrae la LPE (I) con un disolvente o mezcla de disolventes y, a continuación, este disolvente o mezcla de disolventes se emplea como un componente principal del disolvente o mezcla de disolventes en que cristaliza la LPE(1), se logra por medio de este procedimiento simplificado y mucho más rentable obtener cristales de LPE, que se distingan por propiedades cristalinas más favorables. La LPE, así generada, presenta, después de la cristalización, sólo pequeñas inclusiones de disolvente y posee, en virtud de su estructura cristalina bien configurada, una destacada capacidad de filtración. El escaso contenido en porción de disolvente residual incluido es el causante de que puedan reducirse significativamente los antes prolongados tiempos de secado por cada tanda de secado. En este caso, la LPE, así preparada, posee un destacado pequeño contenido en productos secundarios igual que el del estado conocido de la técnica. Por tanto, puede prepararse de modo sorprendente, a pesar del modo simplificado de proceder a la extracción y cristalización de la LPE, un producto final más ventajoso respecto del estado conocido de la técnica, lo que permite poner a disposición un procedimiento más económico para la preparación de LPE.

Es especialmente ventajoso que el nuevo procedimiento para la extracción y cristalización de LPE (I) se realice con disolventes o mezclas de disolventes consistentes en ésteres y/o cetonas de la fórmula general (III)

3

mezclándose eventual v adicionalmente estos disolventes o mezclas de disolventes con hidrocarburos alifáticos o cicloalifáticos de cadena abierta como disolventes.

Los radicales R_{1} y R_{2} representan en este caso ventajosamente un grupo de radicales alquilo (C_{1}-C_{6}). Los radicales pueden ser en este caso lineales o ramificados. En especial, los radicales pueden comprender: metilo, etilo, n-propilo, iso-propilo, n-butilo, sec.-butilo, iso-butilo, terc.-butilo, n-pentilo, n-hexilo. El radical R_{2} comprende el grupo del radical R_{1}, así como el grupo de los radicales alcoxi (C_{1}-C_{6}). Éstos pueden ser lineales o ramificados. En especial, son admisibles para R_{2}: metoxi, etoxi, n-propoxi, iso-propoxi, n-butoxi, sec.-butoxi, iso-butoxi, terc.-butoxi, n-pentoxi,
n-hexoxi. En este caso la mezcla del disolvente o mezcla de disolventes con los hidrocarburos puede realizarse antes o también después de la extracción. Como hidrocarburos alifáticos de cadena abierta, entran en consideración los que contienen de 5 a 9 átomos de C. Éstos pueden ser lineales o ramificados al azar. Con "hidrocarburos cicloalifáticos" se quiere dar a entender anillos de tamaño de 5 a 7, que pueden estar sustituidos arbitrariamente con radicales alquilo (C_{1}-C_{4}), que de nuevo pueden presentarse ramificados. Se han manifestado como disolventes o mezclas de disolventes muy especialmente ventajosos:

Ésteres	- acetato de etilo, acetato de n-propilo, acetato de n-butilo, propionato de etilo
Cetonas	- metil-isobutilcetona, dietilcetona, metilisopropilcetona
Compuestos alifáticos	- n-pentano, n-hexano, ciclohexano, metilciclohexano.

Son también igualmente apropiados los homólogos superiores de los disolventes antes descritos, resultando un límite natural en virtud de los puntos de ebullición crecientes y, por tanto, de un empeoramiento de las propiedades de secado del cristalizado húmedo. Se han manifestado como mezclas de disolventes especialmente ventajosas todas las combinaciones de los disolventes especialmente ventajosos antes citados.

Estos disolventes y/o mezclas de disolventes pueden emplearse ventajosamente asimismo para la purificación previa de la fase acuosa de producto a un pH entre 0 y 3,5. Esta purificación previa se efectúa antes de la propia extracción de la LPE (I) en la fase orgánica. Conduce a empobrecer en productos secundarios la fase acuosa de producto. Debido a que pueden emplearse los mismos disolventes y/o mezclas de disolventes que igualmente se pueden utilizar para la extracción y cristalización, se reduce ventajosamente la necesidad de poner a disposición una capacidad adicional de almacenamiento para disolventes y/o mezclas de disolventes diferentes a los de la extracción y cristalización de la LPE (I). Asimismo se mejora significativamente con ello la posibilidad de reciclaje de los disolventes. En un proceso técnico es por tanto siempre especialmente ventajoso emplear los nuevos disolventes diferentes posibles.

Además ha de verse una ventajosa configuración del procedimiento en que se realice, después del tratamiento con disolvente antes descrito, pero antes de la propia extracción de la LPE (I) en un disolvente orgánico o mezcla de disolventes una clarificación con carbón activo en el mismo intervalo de pH de 0 - 3,5. Con ello se mejora otra vez claramente la capacidad de cristalización de la LPE (I).

La extracción de la LPE (I) de su fase acuosa de producto, a la que antes se ha hecho referencia, se realiza a continuación en un intervalo de pH entre 3,5 y 6,3, de modo especialmente preferido 3,9 a 4,8. Es muy especialmente preferido que la solución orgánica de la LPE (I), así obtenida, antes de la cristalización, se separe por lavado con agua a un valor del pH de 4,8 a 6,3, de modo especialmente preferido es el intervalo de 5,7 a 6,0, y se separe la fase acuosa de la orgánica.

De acuerdo con la invención, antes de la cristalización definitiva, puede deshidratarse la solución de extracción de la LPE eventualmente por destilación azeótropa. Los disolventes o mezclas de disolventes indicados actúan en este caso como medio de arrastre del agua.

Las etapas de extracción a las que antes se ha hecho referencia se realizan ventajosamente a una temperatura entre 0ºC y 60ºC, siendo preferidos 20ºC a 45ºC y siendo especialmente preferidos 35ºC a 45ºC. En este caso se utilizan, en la aplicación de mezclas de disolventes, relaciones volumétricas entre ésteres y/o cetonas y los hidrocarburos alifáticos/cicloalifáticos empleados comprendidos entre 1:0,01 y 1:100, siendo muy especialmente ventajosa una relación de 1:0,5 a 1:2. La cristalización definitiva se efectúa de acuerdo con la invención a temperaturas entre -40ºC y +50ºC. Después de la cristalización, eventualmente después de concentrar las aguas madres, puede añadirse a éstas otra vez, ventajosamente, un hidrocarburo alifático o cicloalifático, tal como ya se ha descrito antes más detalladamente. Con ello se produce de nuevo una cristalización, pudiendo aumentarse los anteriores rendimientos, ya elevados, de > 75% en LPE (I) todavía en aproximadamente un 10%.

La presente invención comprende también una nueva LPE (I), que se distingue por una nueva y ventajosa modificación cristalina. Una LPE(I), que se preparó según el estado conocido de la técnica, presenta un comportamiento en difracción de rayos X completamente diferente al de una que se obtuvo según la presente invención. En la Tabla 1 están representados nuevos reflejos significativamente diferentes en una difracción de rayos X en un difractómetro de transmisión de la firma STOE/Darmstadt.

TABLA 1

nº	2 theta
1	6,7241
2	9,4851
3	11,9034
4	16,3074
5	17,8722

Difractómetro	:	Transmisión
monocromador	:	C Ge (111) curvado
longitud de onda	:	1.540598 Cu
detector	:	PSD curvado
modo de barrido	:	Transmisión/PSD estacionario/omega fijado
2 theta barrido

Los reflejos representados en la Tabla 1 poseen en este caso siempre una intensidad relativa de \geq 30% del reflejo principal a 21,2663. La tolerancia de los valores 2 theta asciende como máximo a \pm 10%. Se prefiere una desviación de \pm 5%, y de modo muy especialmente preferido la inseguridad se encuentra en \pm 1%.

Habitualmente aparecen, no obstante, en aparatos bien ajustados y bien calibrados, errores no superiores a \pm 0,02 unidades.

En las figuras 1 y 2 están contrapuestos los diagramas de rayos X de dos muestras de LPE. La figura 1 muestra los reflejos de una LPE (I) que se preparó según el estado conocido de la técnica (procedimiento según el documento EP 0 719 279, Ejemplo Comparativo 1, producto acabado completamente secado). La figura 2 comprende una muestra que se obtuvo según el Ejemplo 8 de la presente invención. No obstante, todos los diagramas de rayos X de las muestras de los Ejemplos 2 - 10 muestran iguales distribuciones de reflejos e iguales intensidades relativas.

Esta nueva modificación cristalina conduce a que la LPE (I) se puede filtrar de manera especialmente buena.

De acuerdo con la invención los tiempos de secado de la LPE (I), así preparada, se encuentran claramente por debajo de los de la del estado conocido de la técnica. El descubrimiento de la nueva modificación cristalina permitía la posibilidad de poder realizar el procedimiento de preparación de la LPE de manera económicamente más ventajosa.

Los Ejemplos siguientes deben explicar la invención, pero en ningún caso limitarla.

Ejemplo Comparativo 1

1-[N^{2}-((S)-etoxicarbonil)-3-fenilpropil)N^{6}-trifluoracetil]-L-lisil-L-prolina (compuesto I)

Se realiza una aminación reductora según la solicitud de patente EP 05 23 449, análogamente al Ejemplo 3 página 10.

Elaboración

La solución de reacción se concentró ampliamente por evaporación al vacío a una temperatura del baño de 45ºC. La cantidad empleada de dicha solución para la elaboración se escogió de manera que se encontraran en ella, junto al perfil típico de productos secundarios, en total 150 mmol del diasteroisómero deseado (SSS)-LPE (I). El residuo se recogió en 1400 ml de agua y separó por arrastre brevemente al vacío. Después de la adición de 120 ml de tolueno y 30 ml de acetato de etilo se ajustó el valor del pH a 1 con ácido clorhídrico concentrado. Se siguió agitando durante 10 min y, a continuación, se separaron las fases. A 5ºC se ajustó entonces en la fase acuosa un valor del pH de 4 y ésta se extrajo con 400 ml de acetato de etilo. Se separaron las fases, la fase orgánica se mezcló con 110 ml de agua y se ajustó con lejía de sosa (al 50%) a un valor del pH de 5,8. Después de la separación de las fases se concentró ampliamente al vacío la fase orgánica a una temperatura del sumidero de máximo 33ºC. El sumidero se mezcló con 125 ml de tolueno y se siguió concentrando hasta 120 g. Después de esto se añadieron 240 ml de éter metil-terc.-butílico y se enfrió hasta +4ºC. En este caso se formó un precipitado cristalino. A esta suspensión cristalina se añadieron gota a gota, en el transcurso de 3 h, 50 ml de metilciclohexano a 4ºC. Se continuó agitando durante 1 h, se filtró, se lavó después y, a continuación, se secó al vacío de la bomba de aceite durante 4 h a la temperatura ambiente.

Rendimiento: 67,7 g (85,2% del teórico)

Análisis

Contenido en diasteroisó-	Punto de fusión [ºC]	Disolvente residual [mg/kg]	[\alpha] 25/D (c = 1 MeOH/
mero SSS [% en peso]			HCl o,1 N) [grado]
92,0 (+ - 0,4)	Sin determinar	640 tolueno 49100 éter metil-terc.	- 24,0
		-butílico 770 metilciclohexano

Ejemplo 2 1-[N^{2}-((S)-etoxicarbonil)-3-fenilpropil)-N^{6}-trifluoracetil]-L-lisil-L-prolina (compuesto I)

Elaboración

La solución de reacción se concentró ampliamente por evaporación al vacío a una temperatura del baño de 45ºC. La cantidad empleada de dicha solución para la elaboración se escogió de manera que se encontraran en ella, junto al perfil típico de productos secundarios, en tontal 150 mmol del diastereoisómero deseado (SSS)-LPE (I). El residuo se recogió en 1400 ml agua y se separó por arrastre brevemente al vacío. Después de la adición de 120 ml de tolueno y 30 ml de acetato de etilo se ajustó el valor del pH a 1 con ácido clorhídrico concentrado. Se siguió agitando durante 10 min y, a continuación, se separaron las fases. A 40ºC se ajustó entonces en la fase acuosa un valor del pH de 4 y ésta se extrajo con 450 ml de acetato de etilo. Se separaron las fases, la fase orgánica se mezcló con 110 ml de agua y se ajustó con lejía de sosa (al 50%) a un valor del pH de 5,8. Después de la separación de las fases se añadieron a la fase orgánica 235 ml de metilciclohexano y se concentró al vacío hasta 290 g a una temperatura del sumidero de máximo 40ºC. El sumidero se enfrió hasta - 5ºC. En este caso, se formó un precipitado cristalino, que se filtró, se lavó después y a continuación se secó al vacío de la bomba de aceite durante 4 h a la temperatura ambiente (TA).

Rendimiento: 48,0 g (60,5% del teórico)

Análisis

Contenido en diasteroisó-	Punto de fusión [ºC]	Disolvente residual [mg/kg]	[\alpha] 25/D (c = 1 MeOH/
mero SSS [% en peso]			HCl o,1 N) [grado]
98,3 (+ - 0,3)	85 – 90	Acetato de etilo no detectable	- 25,2
		126 metilciclohexano

Ejemplo 3 1-[N^{2}-((S)-etoxicarbonil)-3-fenilpropil)-N^{6}-trifluoroacetil]-L-lisil-L-prolina (compuesto I)

Elaboración

La solución de reacción se concentró ampliamente por evaporación al vacío a una temperatura del baño de 45ºC. La cantidad empleada de dicha solución para la elaboración se escogió de manera que se encontraran en ella, junto al perfil típico de productos secundarios, en total 150 mmol diastereoisómero deseado (SSS)-LPE (I). El residuo se recogió en 1400 ml de agua y se separó por arrastre brevemente al vacío. Después de la adición de 120 ml de tolueno y 30 ml de acetato de etilo se ajustó el valor del pH a 1 con ácido clorhídrico concentrado. Se siguió agitando durtante10 min y, a continuación, se separaron las fases. A 40ºC se ajustó entonces en la fase acuosa un valor del pH de 4 y ésta se extrajo con 450 ml de propionato de etilo. Las fases se separaron, la fase orgánica se mezcló con 110 ml de agua y se ajustó con lejía de sosa (al 50%) a un valor del pH de 5,8. Después de la separación de las fases se añadieron a la fase orgánica 225 ml de metilciclohexano y se concentró al vacío hasta 270 g a una temperatura del sumidero de máximo 40ºC. El sumidero se mezcló con 250 ml de metilciclohexano y se enfrió hasta + 5ºC. En este caso se formó un precipitado cristalino, que se filtró, se lavó después y, a continuación, se secó al vacío de bomba de aceite durante 4 h a TA.

Rendimiento: 59,9 g (75,4% del teórico)

Análisis

Contenido en diasteroisó-	Punto de fusión [ºC]	Disolvente residual [mg/kg]	[\alpha] 25/D (c = 1 MeOH/
mero SSS [% en peso]			HCl o,1 N) [grado]
96,8 (+ - 0,8)	87 – 90	< 20 propionato de etilo	-25,5
		598 metilcoclohexano

Ejemplo 4 1-[N^{2}-((S)-etoxicarbonil)-3-fenilpropil)-N^{6}-trifluoroacetil]-L-lisil-L-prolina (compuesto I)

Elaboración

La solución de reacción se concentró ampliamente por evaporación al vacío una temperatura del baño de 45ºC. La cantidad empleada de dicha solución para la elaboración se escogió de manera que se encontraran en ella, junto al perfil típico de productos secundarios, en total 150 mmol del diastereoisómero deseado (SSS)-LPE (I). El residuo se recogió en 1400 ml de agua y se separó por arrastre brevemente al vacío. Después de la adición de 120 ml de tolueno y 30 ml de acetato de etilo se ajustó el valor del pH a 1 con ácido clorhídrico concentrado. Se siguió agitando durante 10 min y, a continuación, se separaron las fases. A 40ºC se ajustó entonces en la fase acuosa un valor del pH de 4 y ésta se extrajo con 450 ml de acetato de n-propilo. Las fases se separaron, la fase orgánica se mezcló con 110 ml de agua y se ajustó con lejía de sosa (al 50%) a un valor del pH de 5,8. Después de la separación de las fases se añadieron a la fase orgánica 300 ml de n-hexano y se concentró al vacío hasta 240 g a una temperatura del sumidero de máximo 40ºC. El sumidero se mezcló con 206 ml de n-hexano y se enfrió hasta + 5ºC. En este caso se formó un precipitado cristalino, que se filtró, se lavó después y, a continuación, se secó al vacío de la bomba de aceite durante 4 h a TA.

Rendimiento: 54,8 g (69,0% del teórico)

Análisis

Contenido en diasteroisó-	Punto de fusión [ºC]	Disolvente residual [mg/kg]	[\alpha] 25/D (c = 1 MeOH/
mero SSS [% en peso]			HCl o,1 N) [grado]
97,0 (+ - 0,6)	87 – 91	< 20 acetato de n-propilo	- 25,4
		43 n-hexano

Ejemplo 5 1-[N^{2}-((S)-etoxicarbonil)-3-fenilpropil)-N^{6}-trifluorletil]-L-lisil-L-prolina (compuesto I)

Se realiza una aminación reductora según la solicitud. de patente EP 05 23 449, análogamente al Ejemplo 3 página 10.

Elaboración

La solución de reacción se concentró ampliamente por evaporación al vacío a una temperatura del baño de 45ºC. La cantidad empleada de dicha solución para la elaboración se escogió de manera que se encontraran en ella, junto al perfil típico de productos secundarios, en total 150 mmol del diasteroisómero deseado (SSS)-LPE (I). El residuo se recogió en 1400 ml de agua y se separó por arrastre brevemente al vacío. Después de la adición de 120 ml de tolueno y 30 ml de acetato de etilo se ajustó el valor del pH a 1 con ácido clorhídrico concentrado. Se siguió agitando durante 10 min y, a continuación, se separaron las fases. A 40ºC se ajustó entonces en la fase acuosa un valor del pH de 4 y ésta se extrajo con 450 ml de propionato de etilo. Se separaron las fases, la fase orgánica se mezcló con 110 ml de agua y se ajustó con lejía de sosa (al 50%) a un valor del pH de 5,8. Después de la separación de las fases, la fase orgánica se concentró al vacío hasta 230 g a una temperatura del sumidero máximo de 40ºC. El sumidero se mezcló con 275 ml de ciclohexano y se enfrió hasta + 5ºC. En este caso se formó un precipitado cristalino que se filtró, se lavó después y, a continuación, se secó al vacío de la bomba de aceite durante 4 h a TA.

Rendimiento: 60,0 g (75,6% del teórico)

Análisis

Contenido en diasteroisó-	Punto de fusión [ºC]	Disolvente residual [mg/kg]	[\alpha] 25/D (c = 1 MeOH/
mero SSS [% en peso]			HCl o,1 N) [grado]
97,4 (+ - 0,8)	87 – 91	< 20 propionato de etilo	- 25,3
		524 ciclohexano

Ejemplo 6 1-[N^{2}-((S)-etoxicarbonil)-3-fenilpropil)-N^{6}-trifluoroacetil]-L-lisil-L-prolina (compuesto I)

Elaboración

La solución de reacción se concentró ampliamente por evaporación al vacío a una temperatura del baño de 45ºC. La cantidad empleada de dicha solución para la elaboración se escogió de manera que se encontraran en ella, junto al perfil típico de productos secundarios, en total 150 mmol del diasteroisómero deseado (SSS)-LPE (I). El residuo se recogió en 1400 ml de agua y se separó por arrastre brevemente al vacío. Después de la adición de 120 ml de tolueno y 30 ml de acetato de etilo se ajustó el valor del pH a 1 con ácido clorhídrico concentrado. Se siguió agitando durante 10 min y, a continuación, se separaron las fases. A 40ºC se ajustó entonces en la fase acuosa un valor del pH de 4 y ésta se extrajo con 450 ml de acetato de n-propilo. Se separaron las fases, la fase orgánica se mezcló con 110 ml de agua y se ajustó con lejía de sosa (al 50%) a un valor del pH de 5,8. Después de la separación de las fases, la fase orgánica se concentró al vacío hasta 200 g a una temperatura del sumidero de máximo 40ºC. El sumidero se mezcló con 270 ml de ciclohexano y se enfrió hasta + 5ºC. En este caso se formó un precipitado cristalino que se filtró, se lavó después y, a continuación, se secó al vacío de la bomba de aceite durante 4 h a TA.

Rendimiento: 56,5 g (71,2% del teórico)

Análisis

Contenido en diasteroisó-	Punto de fusión [ºC]	Disolvente residual [mg/kg]	[\alpha] 25/D (c = 1 MeOH/
mero SSS [% en peso]			HCl o,1 N) [grado]
97,6 (+ - 0,2)	87 – 91	< 20 acetato de n-propilo	- 25,4
		253 ciclohexano

Ejemplo 7 1-[N^{2}-((S)-etoxicarbonil)-3-fenilpropil)-N^{6}-trifluoroacetil]-L-lisil-L-prolina (compuesto I)

Elaboración

La solución de reacción se concentró ampliamente por evaporación al vacío a una temperatura del baño de 45ºC. La cantidad empleada de dicha solución para la elaboración se escogió de manera que se encontraran en ella, junto al perfil típico de productos secundarios, en total 150 mmol del diastereoisómero deseado (SSS)-LPE (I). El residuo se recogió en 1400 ml de agua y se separó por arrastre brevemente al vacío. Después de la adición de 120 ml de tolueno y 30 ml de acetato de etilo se ajustó el valor del pH a 1 con ácido clorhídrico concentrado. Se siguió agitando durante 10 min y, a continuación, se separaron las fases. A 40ºC se ajustó entonces en la fase acuosa un valor del pH de 4 y ésta se extrajo con 450 ml de metil-isobutilcetona. Se separaron las fases, la fase orgánica se mezcló con 110 ml de agua y se ajustó con lejía de sosa (al 50%) a un valor del pH de 5,8. Después de la separación de las fases, la fase orgánica se concentró al vacío hasta 230 g a una temperatura del sumidero de máximo 40ºC. El sumidero se mezcló con 185 ml de metilciclohexano y se enfrió hasta + 5ºC. En este caso se formó un precipitado cristalino que se filtró, se lavó después y, a continuación, se secó al vacío de la bomba de aceite durante 4 h a TA.

Rendimiento: 56,1 g (70,6% del teórico)

Análisis

Contenido en diasteroisó-	Punto de fusión [ºC]	Disolvente residual [mg/kg]	[\alpha] 25/D (c = 1 MeOH/
mero SSS [% en peso]			HCl o,1 N) [grado]
97,6 (+ - 0,6)	87 – 91	91 metilisobutilcetona 253	- 25,5
		metilciclohexano

Ejemplo 8 1-[N^{2}-((S)-etoxicarbonil)-3-fenilpropil)-N^{6}-trifluoroacetil]-L-lisil-L-prolina (compuesto I)

Elaboración

La solución de reacción se concentró ampliamente por evaporación al vacío a una temperatura del baño de 45ºC. La cantidad empleada de dicha solución para la elaboración se escogió de manera que se encontraran en ella, junto al perfil típico de productos secundarios, en total 150 mmol del diastereoisómero deseado (SSS)-LPE (I). El residuo se recogió en 1400 ml de agua y se separó por arrastre brevemente al vacío. Después de la adición de 120 ml de tolueno y 30 ml de acetato de etilo se ajustó el valor del pH a 1 con ácido clorhídrico concentrado. Se siguió agitando durante 10 min y, a continuación, se separaron las fases. A 40ºC se ajustó entonces en la fase acuosa un valor del pH de 4 y ésta se extrajo con 450 ml de metilisobutilcetona. Se separaron las fases, la fase orgánica se mezcló con 110 ml de agua y se ajustó con lejía de sosa (al 50%) a un valor del pH de 5,8. Después de la separación de las fases, la fase orgánica se concentró al vacío hasta 185 g a una temperatura del sumidero de máximo 40ºC. El sumidero se mezcló con 235 ml de ciclohexano y se enfrió hasta + 5ºC. En este caso se formó un precipitado cristalino que se filtró, se lavó después y, a continuación, se secó al vacío de la bomba de aceite durante 4 h a TA.

Rendimiento: 60,5 g (76,2% del teórico)

Análisis

Contenido en diasteroisó-	Punto de fusión [ºC]	Disolvente residual [mg/kg]	[\alpha] 25/D (c = 1 MeOH/
mero SSS [% en peso]			HCl o,1 N) [grado]
98,4 (+ - 0,5)	87 – 91	207 metilisobutilcetona	- 25,4
		226 ciclohexano

Ejemplo 9 1-[N^{2}-((S)-etoxicarhonil)-3-fenilpropil)-N^{6}-trifluoroacetil]-L-lisil-L-prolina (compuesto I)

Elaboración

La solución de reacción se concentró ampliamente por evaporación al vacío a una temperatura del baño de 45ºC. La cantidad empleada de dicha solución para la elaboración se escogió de manera que se encontraran en ella, junto al perfil típico de productos secundarios, en total 150 mmol del diastereoisómero deseado (SSS)-LPE (I). El residuo se recogió en 1400 ml de agua y se separó por arrastre brevemente al vacío. Después de la adición de 45 ml de metilisobutilcetona y 45 ml de ciclohexano se ajustó el valor del pH a 1 con ácido clorhídrico concentrado. Se siguió agitando durante 10 min y, a continuación, se separaron las fases. A 40ºC se ajustó entonces en la fase acuosa un valor del pH de 4 y ésta se extrajo con 450 ml de metilisobutilcetona. Se separaron las fases, la fase orgánica se mezcló con 110 ml de agua y se ajustó con lejía de sosa (al 50%) a un valor del pH de 5,8. Después de la separación de las fases, la fase orgánica se concentró al vacío hasta 185 g a una temperatura del sumidero de máximo 40ºC. El sumidero se mezcló con 235 ml de ciclohexano y se enfrió hasta + 5ºC. En este caso se formó un precipitado cristalino que se filtró, se lavó después y, a continuación, se secó al vacío de la bomba de aceite durante 4 h a TA.

Rendimiento: 61 g (76,8% del teórico)

Análisis

Contenido en diasteroisó-	Punto de fusión [ºC]	Disolvente residual [mg/kg]	[\alpha] 25/D (c = 1 MeOH/
mero SSS [% en peso]			HCl o,1 N) [grado]
98,6 (+ - 0,4)	87 – 91	215 metilisobutilcetona	- 25,6
		280 ciclohexano

Ejemplo 10 1-[N^{2}-((S)-etoxicarbonil)-3-fenilpropil)-N^{6}-trifluoríetil]-L-lisil-L-prolina (compuesto I)

Elaboración

La solución de reacción se concentró ampliamente por evaporación al vacío a una temperatura del baño de 45ºC. La cantidad empleada de dicha solución para la elaboración se escogió de manera que se encontraran en ella, junto al perfil típico de productos secundarios, en total 150 mmol del diasteroisómero deseado (SSS)-LPE (I). El residuo se recogió en 1400 ml de agua y se separó por arrastre brevemente al vacío. Después de la adición de 45 ml de metilisobutilcetona y 45 ml de ciclohexano se ajustó el valor del pH a 1 con ácido clorhídrico concentrado. Se siguió agitando durante 10 min y, a continuación, se separaron las fases. A 40ºC se ajustó entonces en la fase acuosa un valor del pH de 4 y ésta se extrajo con 450 ml de metilisobutilcetona. Se separaron las fases, la fase orgánica se mezcló con 110 ml de agua y se ajustó con lejía de sosa (al 50%) a un valor del pH de 5,8. Después de la separación de las fases, la fase orgánica se concentró al vacío hasta 160 g a una temperatura del sumidero de máximo 40ºC. El sumidero se mezcló con 175 ml de ciclohexano y se enfrió hasta + 5ºC. En este caso se formó un precipitado cristalino. A esta suspensión cristalina se añadieron gota a gota, en el transcurso de 1,5 h, 103 ml de ciclohexano a 5ºC. Se siguió agitando durante 1 h, se filtró, se lavó después y, a continuación, se secó al vacío de la bomba de aceite durante 4 h a TA.

Rendimiento: 66,0 g (83,1% del teórico)

Análisis

Contenido en diasteroisó-	Punto de fusión [ºC]	Disolvente residual [mg/kg]	[\alpha] 25/D (c = 1 MeOH/
mero SSS [% en peso]			HCl o,1 N) [grado]
97,4 (+ - 0,3)	87 – 91	167 metilisobutilcetona	- 25,6
		218 ciclohexano

Claims

1. Procedimiento para aislar LPE de la fórmula I

4

a partir de una solución acuosa del proceso de preparación de LPE mediante extracción y subsiguiente cristalización, caracterizado porque el disolvente o la mezcla de disolventes utilizado para la extracción de la LPE (I) es asimismo un componente principal del disolvente o mezcla de disolventes que se emplea para la cristalización, y porque se utiliza disolvente o mezclas de disolventes consistentes en ésteres y/o cetonas de la fórmula general III

5

con R_{1} = alquilo (C_{1}-C_{6}) y

R_{2} = alquilo (C_{1}-C_{6}), alcoxil(C_{1}-C_{6}) mezclado eventualmente con hidrocarburos alifáticos o cicloalifáticos de cadena abierta como disolventes, añadiéndose los hidrocarburos antes o después de la extracción al disolvente o mezcla de disolventes.

2. Procedimiento según la reivindicación anterior, caracterizado porque antes de la extracción se trata la fase acuosa de producto, a un pH entre 0 y 3,5, con uno de los disolventes o mezclas de disolventes y, a continuación, se separa la fase acuosa producto.

3. Procedimiento según una de las precedentes reivindicaciones, caracterizado porque antes de la extracción de la LPE (I) en la fase orgánica y después del tratamiento de la fase acuosa de producto con uno de los disolventes o mezclas de disolventes, se realiza una clarificación con carbón activo en un intervalo de pH 0 a 3,5.

4. Procedimiento según una de las precedentes reivindicaciones, caracterizado porque la extracción de la LPE (I) a partir de su solución acuosa se realiza a un valor del pH comprendido entre 3,9 y 4,8.

5. Procedimiento según una de las precedentes reivindicaciones, caracterizado porque la solución orgánica de extracción de la LPE, antes de la cristalización se separa por lavado con agua a un pH de 4,8 a 6,3, de modo especialmente preferido es el intervalo de 5,7 a 6,0, y se separa la fase acuosa.

6. Procedimiento según una de las precedentes reivindicaciones, caracterizado porque la solución de extracción de la LPE se deshidrata antes de la cristalización mediante destilación azeótropa.

7. Procedimiento según las reivindicaciones 4 y 5, caracterizado porque las etapas de extracción se realizan a temperaturas entre 0ºC y 60ºC.

8. Procedimiento según una de las precedentes reivindicaciones, caracterizado porque la relación volumétrica en la mezcla de disolventes entre el éster y/o cetona empleado y el hidrocarburo alifático/cicloalifático empleado se encuentra entre 1 : 0,01 y 1 : 100.

9. Procedimiento según la reivindicación 1, caracterizado porque la temperatura de cristalización se encuentra entre - 40ºC y +50ºC.

10. Procedimiento según la reivindicación 7, caracterizado porque después de la cristalización se añade de nuevo a las aguas madres, eventualmente después de su concentración, un hidrocarburo alifático o cicloalifático para completar la cristalización.

11. LPE con reflejos a

\hskip0.7cm

6,7241

\hskip3.9cm

9,4851

\hskip3.7cm

11,9034

\hskip3.7cm

16,3074

\hskip3.7cm

17,8722 (2 theta),

siendo el reflejo principal a 21,2663.