ES2215270T3

ES2215270T3 - Inhibicion de productos terminales de glicosilacion avanzada.

Info

Publication number: ES2215270T3
Application number: ES98201404T
Authority: ES
Inventors: Steven Harold Zuckerman
Original assignee: Eli Lilly and Co
Current assignee: Eli Lilly and Co
Priority date: 1993-12-21
Filing date: 1994-12-19
Publication date: 2004-10-01
Anticipated expiration: 2014-12-19
Also published as: EP1095654A3; DK0664121T3; ZA9410091B; NO313083B1; UA39941C2; PT963756E; EP1095654B1; CA2138508A1; JPH07196498A; HUT71476A; HU9403660D0; IL112034A; TW427902B; DE69433348T2; RU2127592C1; CZ320494A3; ES2210089T3; KR950016722A; EP0963756B1; DE69433578T2

Abstract

SE PRESENTAN PROCEDIMIENTOS PARA INHIBIR LA OXIDACION DEL LDL, LA ARTERIOSCLEROSIS, LOS PRODUCTOS FINALES DE LA GLICOSILACION AVANZADA Y LOS ANIONES DE SUPEROXIDOS Y OTROS COMPUESTOS INTERMEDIOS DE OXIGENO REACTIVO, QUE COMPRENDEN LA ADMINISTRACION A UN HUMANO O A OTRO MAMIFERO CON NECESIDAD DEL TRATAMIENTO DE UNA CANTIDAD EFECTIVA DE UN COMPUESTO QUE TIENE LA FORMULA (I) EN LA QUE R 1 Y R 3 SON INDEPENDIENTEMENTE HIDROGENO, -CH 3 , LA FORMULA (II) O LA FORMULA (III) EN DONDE AR ES FENILO OPCIONALMENTE SUSTITUIDO; R 2 ES LA FORMULA (IV), (V) O (VI), ASIMISMO SE PRESENTAN LAS SALES Y SOLVATOS FARMACOLOGICAMENTE ACEPTABLES DEL COMPUESTO.

Description

Inhibición de productos terminales de glicosilación avanzada.

La arteriosclerosis como se manifiesta en su principal complicación clínica, la cardiopatía isquémica, continúa siendo la principal causa de muerte en los países industrializados. Ahora está muy aceptado que la arteriosclerosis puede comenzar con una lesión local en el endotelio arterial seguida de proliferación de las células del músculo liso arterial a partir de la túnica media hacia la túnica íntima junto con deposición de lípidos y acumulación de células espumosas derivadas de macrófagos en la lesión. A medida que la placa aterosclerótica se desarrolla incluye, progresivamente, más y más del vaso sanguíneo afectado y, eventualmente, puede conducir a isquemia o infarto. Por lo tanto, es deseable proporcionar métodos para inhibir la progresión de la arteriosclerosis en pacientes en necesidad de ello.

Hay evidencia, en base a hallazgos en animales y de laboratorio, que la peroxidación de los lípidos de la LDL, tales como las porciones de ácidos grasos insaturados de los ésteres de colesterol y de los fosfolípidos de la LDL, facilita la acumulación de colesterol en los monocitos / macrófagos que, eventualmente, se transforman en células espumosas y se depositan en el espacio subendotelial de la pared del vaso. La acumulación de células espumosas en la pared del vaso se reconoce como un suceso temprano en la formación de una placa aterosclerótica. De este modo, se cree que la peroxidación de los lípidos de la LDL es un prerrequisito importante para la acumulación facilitada del colesterol en la pared del vaso y la subsecuente formación de una placa aterosclerótica. Por ejemplo, se ha mostrado que los monocitos / macrófagos capturan y degradan LDL natural a velocidades relativamente bajas y sin una acumulación marcada de colesterol. Por el contrario, las LDL oxidadas son capturadas por estos monocitos / macrófagos a velocidades mucho mayores y con acumulación marcada de colesterol [(Parthasarathy y col., J. Clin. Invest. 77, 641 (1986)]. Por tanto, es deseable proporcionar métodos para inhibir la peroxidación de los lípidos de la LDL en un paciente en necesidad de ello.

Se ha mostrado que el 2,2'-bis (3,5-di-terciario-butil-4-hidroxifeniltio) propano (también conocido como probucol), que es un conocido antioxidante, puede impedir la progresión de la aterosclerosis de una manera que es independiente de su efecto sobre las concentraciones de colesterol plasmático en descenso [véase Kita y col., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 84, 5928 (1987); Carew y col., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 84, 7725 (1987)]. Se cree que los antioxidantes, tales como el probucol, pueden impedir o inhibir el desarrollo del aterosclerosis inhibiendo la peroxidación de la LDL y, de este modo, impedir la acumulación facilitada de colesterol en los monocitos / macrófagos que, eventualmente, se transforman en células espumosas y se depositan en el espacio subendotelial de la pared del vaso [véase Parthasarathy y col., J. Clin. Invest. 77, 641 (1986)]. De acuerdo con esto, es deseable proporcionar un método para inhibir la peroxidación de la LDL.

La presente invención se refiere a determinados compuestos que son útiles como inhibidores de los productos finales de glucosilación avanzada (AGE), o la glucosilación de las proteínas AGE.

La invención proporciona el uso de un compuesto de fórmula

1

en la que R_{1} y R_{3} son independientemente hidrógeno, -CH_{3}, ---

\uelm{C}{\uelm{\dpara}{O}}

--- (alquilo C_{1}-C_{6}) o ---

\uelm{C}{\uelm{\dpara}{O}}

--- Ar, siendo Ar, fenilo opcionalmente sustituido;

R_{2} es 2 3

y

sales y solvatos farmacéuticamente aceptables del mismo, en la preparación de un medicamento útil para inhibir los productos finales de glucosilación avanzada.

La presente invención se refiere al descubrimiento de un grupo seleccionado de compuestos, los de fórmula I, que son útiles para inhibir los AGE. El uso proporcionado por esta invención se pone en práctica mediante la administración a un ser humano o a otro mamífero en necesidad de una dosis de un compuesto de fórmula I o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, que es eficaz para inhibir los anteriores. El término inhibir se define para que incluya su significado generalmente aceptado que incluye el tratamiento profiláctico de un sujeto humano para incurrir en uno de los anteriores y mantenerlo bajo control y/o el tratamiento de un problema existente enumerado anteriormente. En sí mismo, el presente método incluye el tratamiento terapéutico médico y/o el tratamiento profiláctico, según sea apropiado.

Generalmente, el compuesto se formula con excipientes, diluyentes o vehículos comunes y se comprime en comprimidos o se formula como elixires o soluciones para la administración oral oportuna o se administra a través de las vías intramuscular o intravenosa. Los compuestos pueden administrarse transdérmicamente y pueden formularse como formas farmacéuticas de liberación sostenida y similares.

Los compuestos de fórmula I usados en la presente invención pueden hacerse de acuerdo a los procedimientos establecidos, tales como los detallados en las patentes de Estados Unidos Nº 4.133.814, 4.418.068 y 4.380.635. En general, el procedimiento comienza con un benzo[b]tiofeno que tiene un grupo 6-hidroxilo y un grupo 2-(4-hidroxifenilo). El compuesto de partida se protege, se acila, y se desprotege para formar los compuestos de fórmula I. Los ejemplos de la preparación de tales compuestos se proporcionan en las patentes de Estados Unidos citadas anteriormente. El fenilo opcionalmente sustituido incluye fenilo y fenilo sustituido una vez o dos veces con alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxilo C_{1}-C_{4}, hidroxilo, nitro, cloro, flúor o tr(cloro o fluoro) metilo.

En la invención se incluye el uso del siguiente compuesto, conocido como raloxifeno:

4

Los compuestos usados en esta invención forman sales de adición ácida y básica farmacéuticamente aceptables con una amplia variedad de ácidos y bases orgánicos e inorgánicos e incluyen las sales fisiológicamente aceptables que se usan frecuentemente en la química farmacéutica. Tales sales son también parte de esta invención. Los ácidos inorgánicos típicos usados para formar tales sales incluyen el clorhídrico, bromhídrico, yodhídrico, nítrico, sulfúrico, fosfórico, hipofosfórico y similares. También pueden usarse las sales derivadas de ácidos orgánicos, tales como ácidos alifáticos mono y dicarboxílicos, ácidos alcanoicos sustituidos con fenilo, ácidos hidroxialcanoicos e hidroxialcanodioicos, ácidos aromáticos, ácidos alifáticos y aromaticosulfónicos. De este modo, tales sales farmacéuticamente aceptables incluyen acetato, fenilacetato, trifluoroacetato, acrilato, ascorbato, benzoato, clorobenzoato, dinitrobenzoato, hidroxibenzoato, metoxibenzoato, metilbenzoato, o-acetoxibenzoato, naftalen-2-benzoato, bromuro, isobutirato, fenilbutirato, \beta-hidroxibutirato, butino-1,4-dioato, hexino-1,4-dioato, caprato, caprilato, cloruro, cinnamato, citrato, formato, fumarato, glicolato, heptanoato, hipurato, lactato, malato, maleato, hidroximaleato, malonato, mandelato, mesilato, nicotinato, isonicotinato, nitrato, oxalato, ftalato, teraftalato, fosfato, monohidrogenofosfato, dihidrogenofosfato, metafosfato, pirofosfato, propiolato, propionato, fenilpropionato, salicilato, sebacato, succinato, suberato, sulfato, bisulfato, pirosulfato, sulfito, bisulfito, sulfonato, bencensulfonato, p-bromofenilsulfonato, clorobencensulfonato, etansulfonato, 2-hidroxietansulfonato, metansulfonato, naftalen-1-sulfonato, naftalen-2-sulfonato, p-toluensulfonato, xilensulfonato, tartarato y similares. Una sal preferida es la sal clorhidrato.

Las sales de adición ácida farmacéuticamente aceptables se forman, típicamente, haciéndose reaccionar un compuesto de fórmula I con una cantidad equimolar o en exceso del ácido. Generalmente, los reactivos se combinan en un disolvente mutuo tal como éter dietílico o benceno. Normalmente, la sal precipita en la solución en, aproximadamente, una hora a diez días y puede aislarse mediante filtración o el disolvente puede eliminarse mediante medios ordinarios.

Las bases usadas comúnmente para la formación de sales incluyen hidróxido amónico e hidróxidos de metales alcalinos y alcalinotérreos, carbonatos y bicarbonatos, así como aminas alifáticas y aromáticas, diaminas alifáticas e hidroxialquilaminas. Las bases especialmente útiles en la preparación de las sales de adición incluyen hidróxido amónico, carbonato potásico, bicarbonato sódico, hidróxido cálcico, metilamina, dietilamina, etilendiamina, ciclohexilamina y etanolamina.

Generalmente, las sales farmacéuticamente aceptables tienen características de solubilidad aumentada en comparación con el compuesto a partir del cual derivan y, de este modo, son frecuentemente más apreciadas para la formulación como líquidos o emulsiones.

Las formulaciones farmacéuticas pueden prepararse mediante procedimientos conocidos en la técnica. Por ejemplo, los compuestos pueden formularse con excipientes, diluyentes o vehículos comunes y conformarse como comprimidos, cápsulas, suspensiones, polvos y similares. Los ejemplos de excipientes, diluyentes y vehículos que son adecuados para tales formulaciones incluyen los siguientes: agentes de relleno y diluyentes tales como almidón, azúcares, manitol y derivados silícicos; aglutinantes tales como carboximetilcelulosa y otros derivados de celulosa, alginatos, gelatina y polivinilpirrolidona; agentes hidratantes tales como glicerol; agentes desintegrantes tales como agar-agar, carbonato cálcico y bicarbonato sódico; agentes para retardar la disolución tales como parafina; aceleradores de reabsorción tales como compuestos de amonio cuaternario; caolín y bentonita de superficie; y lubricantes tales como talco, estearato cálcico y magnésico y polietilglicoles sólidos.

Los compuestos también pueden formularse como elixires o soluciones para la administración oral oportuna o como soluciones apropiadas para la administración parenteral, por ejemplo, a través de las vías intramuscular, subcutánea o intravenosa. De un modo adicional, los compuestos son muy adecuados para la formulación como formas farmacéuticas de liberación sostenida y similares. Las formulaciones pueden constituirse de tal forma que liberen el ingrediente activo sólo o, preferentemente, en una parte particular del tracto digestivo, posiblemente a lo largo de un período de tiempo. Los revestimientos, envueltas y matrices protectoras pueden hacerse, por ejemplo, a partir de sustancias poliméricas o ceras.

Puesto que los compuestos descritos inhiben la oxidación de la LDL inducida por cobre o mediante oxidación basada en macrófagos, el uso de la invención abarca la inhibición o la formación de los productos finales de glucosilación avanzada (AGE) incluyendo la glucosilación de proteínas tales como AGE-albúmina, AGE-colágeno y AGE-LDL. Por ejemplo, se cree que las complicaciones cardiovasculares observadas en los diabéticos se deben, al menos en parte, al aumento de las cantidades de proteínas modificadas con AGE. Por lo tanto, la invención abarca la inhibición de enfermedades en las que contribuyen las concentraciones elevadas de proteínas modificadas con AGE.

Puede determinarse una dosis eficaz de los compuestos descritos para las complicaciones enumeradas mediante el uso de técnicas ordinarias y observando los resultados obtenidos en circunstancias análogas. A la hora de determinar la dosis eficaz, se consideran diversos factores que incluyen, pero no están limitados a: la especie del paciente; su tamaño, edad y estado de salud general; la enfermedad específicamente implicada; el grado, implicación o gravedad de la enfermedad; la respuesta del paciente individual; el compuesto en particular administrado; el modo de administración; las características de biodisponibilidad de la preparación administrada; el régimen de dosificación seleccionado; y el uso de medicación acompañante.

De un modo generalmente aceptado, una dosis diaria eficaz variará de 0,1 a 1000 mg / día y, más típicamente, de 50 a 200 mg / día. Tales dosificaciones se administrarán a un sujeto en necesidad de tratamiento de una a tres veces al día o, más frecuentemente, según se necesite, para inhibir eficazmente uno de los problemas enumerados.

Normalmente, se prefiere administrar un compuesto de fórmula I en la forma de una sal de adición ácida, tal como se acostumbra en la administración de sustancias farmacéuticas que llevan un grupo básico, tal como el anillo piperidino. También es ventajoso administrar un compuesto como ese a través de la vía oral. Para tales fines, están disponibles las siguientes formas farmacéuticas orales.

Formulaciones

En las formulaciones que siguen, "ingrediente activo" quiere decir un compuesto de fórmula I.

Formulación 1

Cápsulas de gelatina

Las cápsulas de gelatina dura se preparan usando lo siguiente:

Ingrediente	Cantidad (mg / cápsula)
Ingrediente activo	0,1-1000
Almidón, NF	0-650
Polvo fluidificado de almidón	0-650
Silicona fluida de 3,5 cm^{2} / s	0-15

Los ingredientes se mezclan, se hacen pasar a través de un tamiz de malla Nº 45 de Estados Unidos y se rellenan cápsulas de gelatina dura.

Los ejemplos de las formulaciones específicas de cápsulas del compuesto de fórmula I, en las que el compuesto es raloxifeno, incluyen los mostrados más adelante:

Formulación 2

Cápsula de raloxifeno

Ingrediente	Cantidad (mg / cápsula)
Raloxifeno	1
Almidón, NF	112
Polvo fluidificado de almidón	225,3
Silicona fluida de 3,5 cm^{2} / s	1,7

Formulación 3

Cápsula de raloxifeno

Ingrediente	Cantidad (mg / cápsula)
Raloxifeno	5
Almidón, NF	108
Polvo fluidificado de almidón	225,3
Silicona fluida de 3,5 cm^{2} / s	1,7

Formulación 4

Cápsula de raloxifeno

Ingrediente	Cantidad (mg / cápsula)
Raloxifeno	10
Almidón, NF	103
Polvo fluidificado de almidón	225,3
Silicona fluida de 3,5 cm^{2} / s	1,7

Formulación 5

Cápsula de raloxifeno

Ingrediente	Cantidad (mg / cápsula)
Raloxifeno	50
Almidón, NF	150
Polvo fluidificado de almidón	397
Silicona fluida de 3,5 cm^{2} / s	3,0

Las formulaciones específicas anteriores pueden cambiarse acatando las variaciones razonables proporciona-
das.

Se prepara una formulación de comprimidos usando los ingredientes de más adelante:

Formulación 6

Comprimidos

Ingrediente	Cantidad (mg / comprimido)
Ingrediente activo	0,1-1000
Celulosa microcristalina	0-650
Dióxido de silicio de pirólisis	0-650
Ácido esteárico	0-15

Los componentes se mezclan y se comprimen para conformar comprimidos.

De un modo alternativo, los comprimidos, que contienen, cada uno de ellos, 0,1-1000 mg de ingrediente activo, se preparan como sigue:

Formulación 7

Comprimidos

Ingrediente	Cantidad (mg / comprimido)
Ingrediente activo	0,1-1000
Almidón	45
Celulosa microcristalina	35
Polivinilpirrolidona (en forma de solución en	4
agua al 10%)
Carboximetilcelulosa sódica	4,5
Estearato magnésico	0,5
Talco	1

El ingrediente activo, almidón y celulosa se hacen pasar a través de un tamiz de malla Nº 45 de Estados Unidos y se mezclan exhaustivamente. La solución de polivinilpirrolidona se mezcla con los polvos resultantes que, seguidamente, se hacen pasar a través de un tamiz de malla Nº 14 de Estados Unidos. Los gránulos producidos de esta manera se secan a 50-60ºC y se hacen pasar a través de un tamiz de malla Nº 18 de Estados Unidos. La carboximetilcelulosa sódica, el estearato magnésico y el talco, se hicieron pasar previamente a través de un tamiz de malla Nº 60 de Estados Unidos y, seguidamente, se añadieron a los gránulos que, después de mezclarse, se comprimieron en una máquina de comprimidos para proporcionar comprimidos.

Las suspensiones, que tienen, cada una de ellas, 0,1-1000 mg de medicamento por 5 ml de dosis, se hacen como sigue:

\newpage

Formulación 8

Suspensiones

Ingrediente	Cantidad (mg / 5 ml)
Ingrediente activo	0,1-1000 mg
Carboximetilcelulosa sódica	50 mg
Jarabe	1,25 mg
Solución de ácido benzoico	0,10 ml
Saborizante	cs
Colorante	cs
Agua purificada hasta	5 ml

El medicamento se hace pasar a través de un tamiz de malla Nº 45 de Estados Unidos y se mezcla con la carboximetilcelulosa sódica y el jarabe para formar una pasta suave. La solución de ácido benzoico, el saborizante y el colorante se diluyen con algo del agua y se añaden agitando. Seguidamente, se añade suficiente agua para producir el volumen requerido.

Procedimientos de ensayo

Ensayo 1

Se usó el ensayo del ácido tiobarbitúrico como se describe por Schuh y col. (PNAS 75: 3173,1978) y según se modifica por Morel y col. (Lab Invest 55: 419,1986) para determinar el grado de inhibición de la peroxidación de LDL por el estradiol y por el compuesto A de la invención. Se incubó una solución de 1 ml que contiene 250 microgramos (\mug) de LDL o bien con estradiol o bien con el compuesto A de la invención en cantidades que varían de 1 a 30 \muM durante 5-18 horas a 37ºC en presencia de CuSO_{4} 5 \muM. después de la incubación, se añadió 1 ml de ácido tricloroacético 25% y 1 ml de ácido tiobarbitúrico 1%. Todas las muestras se hirvieron durante 45 minutos y la fluorescencia se midió a longitudes de onda de excitación de 515 nm y de emisión de
553 nm.

(El compuesto A es un compuesto de fórmula I en el que R_{1} y R_{3} son hidrógeno y R_{2} es 1-pirrolidino).

Unidades TBAR
Condiciones	25 \muM	5 \muM	1 \muM	0 \muM
Compuesto A	78	109	142	356
Estradiol	160	153	259	356
Control (sin cobre)	90	90	90	90

Ensayo 2

Se sembraron macrófagos residentes de la cavidad peritoneal del ratón a 1 x 10^{6} células por pocillo en medio F10 sin suero. Se añadió LDL, que había sido dializada y filtrada a través de un filtro de 0,2 \mum, a cada pocillo a una concentración final de 1 mg / ml (500 \mug añadidos por pocillo) y los macrófagos se trataron con 1-5 \muM del compuesto A o con el control durante 24 horas. Los pocillos designados con medio solo representan a la LDL incubada toda una noche en la misma placa con medio F10 sin células. El valor se sustrajo de los valores TBAR obtenidos en presencia de los macrófagos residentes y reflejó la extensión de modificación celular de la LDL.

\newpage

Condiciones	Unidades TBAR
Control	130
Compuesto A 5 \muM	30
Compuesto A 2,5 \muM	75
Compuesto A 1 \muM	129
Estradiol 25 \muM	30

Claims

1. El uso de un compuesto que tiene la fórmula

5

en la que R^{1} y R^{3} son independientemente hidrógeno, -CH_{3}, ---

\uelm{C}{\uelm{\dpara}{O}}

--- (alquilo C_{1}-C_{6}) o ---

\uelm{C}{\uelm{\dpara}{O}}

--- Ar, siendo Ar, fenilo opcionalmente sustituido;

R^{2} se selecciona del grupo constituido por pirrolidino y piperidino; o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, en la preparación de un medicamento para inhibir los productos terminales de glucosilación avanzada.

2. El uso de la reivindicación 1, en el que dicho compuesto es

6

o su sal clorhidrato.

3. El uso de un compuesto de acuerdo con las reivindicaciones 1 ó 2 en la preparación de un medicamento para inhibir las complicaciones cardiovasculares observadas en la diabetes.