ES2205203T3 - Inhibidor del crecimiento de thiobacillus thiooxidans. - Google Patents

Inhibidor del crecimiento de thiobacillus thiooxidans.

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ES2205203T3 ES97917412T ES97917412T ES2205203T3 ES 2205203 T3 ES2205203 T3 ES 2205203T3 ES 97917412 T ES97917412 T ES 97917412T ES 97917412 T ES97917412 T ES 97917412T ES 2205203 T3 ES2205203 T3 ES 2205203T3
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Abstract

SE DESCRIBE UN INHIBIDOR DEL CRECIMIENTO DE THIOBACILLUS THIOOXIDANS QUE CONTIENE COMO PRINCIPIO ACTIVO AL MENOS UNA SUSTANCIA SELECCIONADA ENTRE EL GRUPO FORMADO POR UN POLVO DE WOLFRAMIO Y COMPUESTOS DE WOLFRAMIO. BAJO UNAS CONDICIONES ACIDAS DE VALORES DE PH DE 4 O INFERIORES, ESTE INHIBIDOR DEL CRECIMIENTO INHIBE SUFICIENTEMENTE EL CRECIMIENTO DE T. THIOOXIDANS. CUANDO SE AÑADE EN CANTIDADES TRAZA, POR EJEMPLO, A UN MATERIAL ESTRUCTURAL TAL COMO CEMENTO EN UNA PLANTA DE TRATAMIENTO DE AGUAS RESIDUALES, ETC., PUEDE POR TANTO INHIBIR EL CRECIMIENTO DE T. THIOOXIDANS SIN DETERIORAR SUSTANCIALMENTE LA RESISTENCIA, ETC., DEL MATERIAL ESTRUCTURAL EN SI MISMO.

Description

Inhibidor del crecimiento de Thiobacillus thiooxidans.
El presente invento se refiere a un inhibidor del crecimiento del Thiobacillus thiooxidans, particularmente se refiere a un inhibidor del crecimiento capaz de inhibir el crecimiento del Thiobacillus thiooxidans en instalaciones de tratamiento de aguas residuales para impedir el deterioro de estructuras de hormigón o tuberías de alcantarillado de hormigón que estén en contacto con las aguas residuales.
Ha sido un problema el que las estructuras de hormigón en las instalaciones de tratamiento de aguas residuales se vuelvan yésicas y se deterioren. Este deterioro se sabe que es atribuible a bacterias oxidantes del azufre del género Thiobacillus que oxidan sulfuro de hidrógeno a ácido sulfúrico. Estas bacterias viven normalmente ampliamente distribuidas en el suelo o agua y crecen por la oxidación de compuestos sulfurados y asimilación de dióxido de carbono. Las bacterias oxidantes del azufre del género Thiobacillus se sabe que existen no sólo en la porción de estructuras que están en contacto con las aguas residuales, sino también en estructuras en las instalaciones de tratamiento de aguas residuales que están de cara al aire pero sin contactar con las aguas residuales, dependiendo de las especies de las mismas.
Se han propuestos diversos métodos para impedir tal deterioro de las estructuras. La mayoría de los métodos realizados de modo práctico incluyen recubrir las estructuras con materiales anticorrosivos. Sin embargo, el recubrimiento del material anticorrosivo puede ser fácilmente dañado a partir de agujeros o arañazos, y tiene así problemas en la duración. Además, el recubrimiento en una unión de tubos de diámetro pequeño es difícil. Adicionalmente, este método no es ventajoso en términos de costes.
Por tanto, se propone otro método en la solicitud de patente Japonesa abierta a inspección pública Nº 4-149053, en la cual el deterioro de los materiales estructurales debido a las bacterias oxidantes del azufre del género Thiobacillus se impide mediante la incorporación directamente al hormigón de un metal particular o un óxido de un metal particular insoluble en agua pero soluble en ácido sulfúrico, tal como el níquel, en vez de recubrir la superficie de las estructuras con los materiales anticorrosivos. En este método, el níquel impide completamente la actividad de oxidación del azufre, la respiración, y la actividad fijadora del gas dióxido de carbono de las bacterias que oxidan el azufre cuando el valor pH está alrededor de la neutralidad. Este método es excelente para impedir de modo suficiente el deterioro debido a las bacterias que oxidan el azufre.
Sin embargo, para inhibir de modo práctico el crecimiento de las bacterias que oxidan el azufre para impedir el deterioro del hormigón mediante la adición del níquel al hormigón, alrededor de 0,1 partes por peso de níquel es añadido a 100 partes por peso de cemento. Se desea por tanto desarrollar un inhibidor que exhiba un excelente efecto en la inhibición del crecimiento de las bacterias oxidantes del azufre en una cantidad de adición más pequeña.
Se sabe que el molibdeno, molibdato amónico o una mezcla de molibdato amónico y wolframio activa el crecimiento de Thiobacillus novellus, mientras que el wolframio, cuando se usa solo, inhibe el crecimiento de las mismas bacterias (Journal of Bacteriology, Vol.153, Nº. 2 (1983) William M. et al. "Sulfite Oxidase activity in Thiobacillus novellus" p.941-944). Por otro lado, se ha documentado también que, aunque el molibdeno (Mo^{4+}) activa el crecimiento de Thiobacillus novellus como se observa anteriormente, inhibe el crecimiento del Thiobacillus thiooxidans (Chemical Abstracts, Vol.95, Nº. 1 (6 de Julio, 1981) p127 (1081a)). Así, incluso las bacterias oxidantes del azufre del mismo género Thiobacillus tienen diferentes mecanismos inhibitorios del crecimiento. Por lo tanto, aunque se reconozca que una cierta inhibición del crecimiento tiene un efecto sobre las bacterias que oxidan el azufre que existen en un intervalo de pH neutro de 6 a 8 tal como el Thiobacillus novellus, no se usa tal inhibidor en un intervalo de pH ácido de 2 a 6, en el que el Thiobacillus novellus apenas existe. Además, no se cree que una sustancia que inhibe el crecimiento del anteriormente mencionado Thiobacillus novellus inhiba igualmente el crecimiento de bacterias que oxidan el azufre del género de Thiobacillus que existan en un intervalo de pH de 6 a 8 tal como el Thiobacillus thiooxidans.
Por lo tanto, los inhibidores del crecimiento propuestos hasta ahora no son siempre eficaces frente a todas las bacterias oxidantes del azufre del género Thiobacillus.
Es un objeto del presente invento proporcionar un inhibidor del crecimiento del Thiobacillus thiooxidans que pueda inhibir suficientemente el crecimiento de Thiobacillus thiooxidans bajo la condición ácida a pH 4 o inferior.
Es otro objeto del presente invento proporcionar un inhibidor del crecimiento de Thiobacillus thiooxidans que pueda inhibir al Thiobacillus thiooxidans mediante la incorporación de una cantidad muy pequeña del inhibidor a un material estructural tal como hormigón en una instalación de tratamiento de aguas residuales, y que no disminuya sustancialmente la fuerza del material estructural en sí mismo.
Los presentes inventores propusieron en la solicitud de patente japonesa abierta a inspección pública Nº. 4-149053 un método para impedir el deterioro de un material estructural debido a las bacterias oxidantes del azufre del género Thiobacillus. En el método, metales específicos u óxidos de metales específicos insolubles en agua pero solubles en ácido sulfúrico, tales como el níquel, se incorporan directamente al hormigón. Ya que para los Thiobacillus thiooxidans existentes en un intervalo de pH de neutro a ácido de 2 a 6, se obtiene suficiente actividad inhibitoria del crecimiento en la porción del material estructural que entra en contacto directamente con las aguas residuales que se mantiene en un intervalo de pH neutro. Sin embargo, los presentes inventores encontraron que la inhibición del crecimiento del mismo Thiobacillus thiooxidans se reduce sobre la superficie del material estructural próximo a la instalación de tratamiento de aguas residuales pero no en contacto directo con las aguas residuales bajo condiciones ácidas a pH 4 o inferior debido al sulfuro de hidrógeno en el aire. No está claro porqué la inhibición del crecimiento de las mismas bacterias varía dependiendo de las condiciones del pH. Sin embargo, se asume que el níquel propuesto no actúa directamente sobre las mismas bacterias, sino que se une a una enzima de las bacterias para exhibir la actividad inhibitoria del crecimiento, de tal modo que la unión de la enzima no esté lo suficientemente bajo condiciones ácidas, dando como resultado una inhibición del crecimiento insuficiente. Los presentes inventores buscaron entonces, una sustancia que inhibiera suficientemente el crecimiento del Thiobacillus thiooxidans, al que se atribuye el deterioro del hormigón bajo condiciones ácidas a pH 4 o inferior, y se encontró que el wolframio y los compuestos de wolframio inhiben eficazmente el crecimiento del Thiobacillus thiooxidans que existe bajo condiciones ácidas, para completar de ese modo el presente invento.
De acuerdo con el presente invento, se proporciona el uso de una sustancia seleccionada a partir del grupo que consiste de polvos de wolframio y un compuesto de wolframio, y una mezcla del mismo, como un inhibidor del crecimiento del Thiobacillus thiooxidans.
De acuerdo con el presente invento, se proporciona también el uso de dicha sustancia, que comprende además una sustancia de níquel seleccionada a partir del grupo que consiste de polvos de níquel, polvos de óxido de níquel, y mezclas del mismo.
La Fig.1 es una gráfica que muestra el efecto de Na_{2}WO_{4} sobre el crecimiento de la cepa NBI-3 medido en los Ejemplos 1 a 3 y en el Ejemplo Comparativo 1.
La Fig.2 es una gráfica que muestra el efecto de Na_{2}WO_{4} sobre la actividad de oxidación del azufre elemental de las células NBI-3 lavadas, medido en los Ejemplos 4 a 7 y en el Ejemplo Comparativo 2.
La Fig.3 es una gráfica que muestra el efecto de Na_{2}WO_{4} sobre la actividad de oxidación de azufre elemental de las células NBI-3 lavadas, medido en los Ejemplos Comparativos 3 a 7.
La Fig. 4 es una gráfica que muestra el efecto de Na_{2}WO_{4} sobre la actividad del oxígeno HSO_{3}^{-} de una proteína de membrana de la cepa NBI-3 medida en los Ejemplos 8 a 9 y en el Ejemplo Comparativo 8.
La Fig.5 es una gráfica que muestra el efecto de Na_{2}WO_{4} sobre una variedad de células medido en los Ejemplos 10 a14 y en los Ejemplos Comparativos 9 a 13.
La Fig. 6 es una gráfica que muestra el efecto sobre la actividad de oxidación de azufre elemental de las células NBI-3 lavadas medido en los Ejemplo 21 a 24.
El presente invento será descrito con más detalle aquí a continuación.
El presente inhibidor inhibe el crecimiento del Thiobacillus thiooxidans, al que se sabe que se atribuye el deterioro de los materiales estructurales tales como el hormigón, el mortero o polímeros moleculares superiores en las instalaciones de tratamiento de aguas residuales. El presente inhibidor puede inhibir eficazmente el crecimiento del Thiobacillus thiooxidans no sólo sobre un material estructural que entra en contacto con las aguas residuales directamente sino también sobre la superficie de un material estructural próximo a la instalación de tratamiento de aguas residuales bajo condiciones ácidas a pH 4 o inferior debido al sulfuro de hidrógeno en el aire, para impedir el deterioro del material estructural.
El presente inhibidor contiene como un ingrediente activo por lo menos una sustancia seleccionada a partir del grupo que consiste de polvos de wolframio (W); y compuestos de wolframio tales como W_{28}O_{58}, Na_{2}WO_{4}, CaWO_{4}, CaWO_{4}\cdotH_{2}O, CaWO_{4}\cdot2H_{2}O, o 5(NH_{4})_{2}O\cdot12WO_{3}\cdotnH_{2}O (n=0 a 5). Se asume que el ingrediente activo se une a una enzima del Thiobacillus thiooxidans bajo condiciones ácidas, particularmente a pH 4 o inferior, para inhibir la oxidación del azufre, la respiración y la fijación del gas dióxido de carbono de las bacterias, para inhibir de ese modo el crecimiento del Thiobacillus thiooxidans. Sin embargo, no se sabe como estos ingredientes activos se unen a la enzima de las bacterias.
Cuando el ingrediente activo del presente inhibidor está en la forma de polvos, el diámetro del mismo no está particularmente limitado. Sin embargo, se desea que el diámetro esté en un intervalo que permita la expresión de la inhibición del crecimiento eficaz cuando los polvos se administran al material estructural tal como el hormigón y permita la distribución a una posición deseable en el material estructural tras la formación del material estructural. Específicamente, el diámetro es convenientemente 0,005 a 0,2 mm. Si el diámetro excede los 0,2 mm, la actividad inhibitoria del crecimiento puede verse reducida, no siendo esto preferible. Si los compuestos de metal solubles en agua o un disolvente orgánico, tal como Na_{2}WO_{4}, son empleados, estos pueden emplearse en la forma de una disolución.
La concentración eficaz del presente inhibidor es preferiblemente no menos de 1 \mumol/l, y más preferiblemente de 10 a 100 \mumol/l con respecto al entorno de crecimiento para Thiobacillus thiooxidans. Por ejemplo, para impedir el deterioro del hormigón y el mortero debido al Thiobacillus thiooxidans, preferiblemente pueden ser añadidas 0,0001 a 0,1 partes por peso del inhibidor a 100 partes por peso de cemento en el hormigón o el mortero. Particularmente, aún mediante la adición de pequeñas cantidades del inhibidor, tales como 0,0001 a 0,01 partes por peso, se obtiene suficiente efecto de inhibición del crecimiento durante un período de tiempo prolongado comparado al recubrimiento convencional con material anticorrosivo.
El presente inhibidor puede contener además al menos una sustancia seleccionada a partir del grupo que consiste de polvos de níquel y polvos de óxido de níquel. Con estas sustancias contenidas, la inhibición del crecimiento del Thiobacillus thiooxidans en el intervalo de pH alrededor de la neutralidad puede mejorarse. No hay un límite particular al diámetro de los polvos de níquel y los polvos de óxido de níquel. Sin embargo, el diámetro es convenientemente 0,005 a 0,2 mm. El contenido del níquel o de los polvos de óxido de níquel se selecciona convenientemente de modo que la sustancia que contiene wolframio seleccionada a partir del grupo que consiste de polvos de wolframio y un compuesto de wolframio: polvos de níquel y/o polvos de óxido de níquel esté en un intervalo de 0,1 a 1,0 por peso.
El presente inhibidor puede ser incorporado en el hormigón mediante, por ejemplo, la adición de una cantidad deseable del inhibidor a una composición de hormigón, y el moldeado y el curado de la mezcla de acuerdo con los métodos públicamente conocidos. Particularmente, si el material inhibidor está en la forma de polvos, el material puede incorporarse fácilmente y uniformemente en el hormigón mediante el compactado por centrifugación. El compactado por centrifugación puede realizase de acuerdo con un método públicamente conocido para producir tuberías de Hume. Eligiendo convenientemente la condición para el compactado por centrifugación, se puede producir hormigón que tenga el inhibidor deseado. En el compactado por centrifugación, el diámetro del inhibidor es importante. Si el diámetro es demasiado pequeño, el inhibidor se mueve con el agua purgada durante el compactado por centrifugación y posiblemente se drene con el agua. Si el diámetro es demasiado grande, el inhibidor posiblemente se mueva radialmente hacia fuera tras el compactado por centrifugación. Así, el diámetro se selecciona preferiblemente de modo adecuado dentro del intervalo preferido anteriormente mencionado.
El presente inhibidor puede inhibir suficientemente el crecimiento del Thiobacillus thiooxidans aún bajo condiciones ácidas a pH 4,5 o inferior. Mediante la incorporación de una cantidad muy pequeñas del presente inhibidor al material estructural tal como hormigón en las instalaciones de tratamiento de aguas residuales, el crecimiento del Thiobacillus thiooxidans se inhibe suficientemente durante un largo período de tiempo. Además, el presente inhibidor no disminuye sustancialmente la fuerza del material estructural en sí mismo.
El presente invento será explicado con más detalle con referencia a los Ejemplos y los Ejemplos Comparativos, pero el presente invento no se limita a estos.
Ejemplos 1 a 3 y Ejemplo comparativo 1
20 ml de medio tiosulfato-sal inorgánica (pH 7,0) que contiene el tiosulfato sódico 0,2%, extracto de levadura 0,03%, (NH_{4})_{2}SO_{4} 0,3%, MgSO_{4}\cdot7H_{2}O 0,05%, K_{2}HPO_{4} 0,05%, KCl 0,01% y Ca(NO_{3})_{2}\cdot4H_{2}O 0,001% fueron inoculados con 1,0 g de hormigón corroído, y mantenido bajo condiciones aeróbicas a 30ºC. Cuando el pH del medio disminuyó hasta 2,0, el medio fue reemplazado por un medio fresco. Esta operación de cultivo fue repetida cinco veces. Una colonia amarilla de Thiobacillus thiooxidans obtenida mediante el cultivo fue aislada, y esta cepa aislada fue designada como NBI-3.
A 20 ml de medio de azufre elemental-sal inorgánica (pH 2,5) que contenía azufre elemental 1%, (NH_{4})_{2}SO_{4} 0,3%, MgSO_{4}\cdot7H_{2}O 0,05%, K_{2}HPO_{4} 0,05%, KCl 0,01% y Ca(NO_{3})_{2}\cdot4H_{2}O 0,001% se añadió una disolución acuosa que contenía 30 \mumol/l de Na_{2}WO_{4} (Ejemplo 1), 300 \mumol/l de Na_{2}WO_{4} (Ejemplo 2) ó 1000 \mumol/l de Na_{2}WO_{4} (Ejemplo 3), o no se añadió nada como un testigo (Ejemplo Comparativo 1). Con esta mezcla, se cultivó la cepa NBI-3. Se observó que el Na_{2}WO_{4} es insoluble a pH 2,5. La propagación de la cepa NBI-3 con el transcurso del tiempo fue medida por absorbancia a 660 nm. Los resultados se muestran en la Fig.1
A partir de los resultados de la Fig.1, se ve que el Na_{2}WO_{4} tiene una excelente actividad inhibitoria del crecimiento del Thiobacillus thiooxidans bajo condiciones ácidas a pH 2,5.
A un vaso de reacción de un manómetro Warburg que tiene un manómetro, un vaso de reacción y un agitador fueron añadidos 5 mg de células de NBI-3 lavadas cultivadas en los Ejemplos 1 a 3, 200 \mul de tampón \beta-alanina-SO_{4}^{2-} (pH 3,0) y 200 \mumol de sulfito sódico, que estaban en un volumen total de 3 ml. Al vaso se le añadió además una disolución acuosa que contenía 10 \mumol/l de Na_{2}WO_{4} (Ejemplo 4), 100 \mumol/l de Na_{2}WO_{4} (Ejemplo 5), 1000 \mumol/l de Na_{2}WO_{4} (Ejemplo 6) ó 10000 \mumol/l de Na_{2}WO_{4} (Ejemplo 7), o no se añadió nada como un testigo (Ejemplo Comparativo 2). El consumo de oxígeno por las células con el transcurso del tiempo fue medido, mientras el pH en el vaso de reacción se ajustó a 3,0 con 0,2 ml de hidróxido sódico cargado en el pocillo central. La fase gaseosa en el manómetro Warburg fue mantenida a 30ºC con agua. Los resultados se muestran en la Fig.2.
Ejemplos comparativos 3 y 4
Una medida fue realizada de la misma manera que en el Ejemplo Comparativo 2 excepto en que las células hervidas (Ejemplo Comparativo 3) o células no lavadas (Ejemplo Comparativo 4) fueron empleadas en lugar de las células lavadas de la cepa NBI-3. Los resultados se muestran en la Fig.3.
Ejemplos comparativos 5 a 7
Una medida fue realizada de la misma manera como en los Ejemplos 4 a 7 excepto que 1000 \mumol/l de níquel de tamaño de malla de no más de 200 (Ejemplo Comparativo 5) 10000 \mumol/l del mismo níquel (Ejemplo Comparativo 6) ó 20000 \mumol/l del mismo níquel (Ejemplo Comparativo 7) fueron empleados en lugar de Na_{2}WO_{4}. Los resultados se muestran en la Fig.3.
Comparando los resultados de la Fig.3. y Fig.2, se ve que el efecto inhibitorio del crecimiento del Thiobacillus thiooxidans de Na_{2}WO_{4} es extremadamente mayor que el del níquel en la misma cantidad.
Ejemplo 8 y 9 y Ejemplo comparativo 8
A un vaso de reacción de un manómetro Warburg que tiene un manómetro, un vaso de reacción y un agitador fueron añadidos 1 mg de proteína de membrana de NBI-3 cultivadas en los Ejemplos 1 a 3, 200 \mumol de tampón MoPS/NaOH (pH 7,0) y 20 \mumol de sulfito sódico. Al vaso se añadió además una disolución acuosa que contenía 1000 \mumol/l de Na_{2}WO_{4} (Ejemplo 8) ó 10000 \mumol/l de Na_{2}WO_{4} (Ejemplo 9), o no se añadió nada como un testigo (Ejemplo Comparativo 8). El consumo de oxígeno por las células con el transcurso del tiempo fue medido, mientras el pH en el vaso de reacción fue ajustado a 7,0 con 0,2 ml de hidróxido sódico cargado en el pocillo central. La fase gaseosa en el manómetro Warburg fue mantenida a 30ºC con aireación. Los resultados se muestran en la Fig.4.
Ejemplos 10 a 14 y Ejemplos comparativos 9 a 13
A 20 ml de medio de azufre elemental-sal inorgánica (pH 2,5) que contenía azufre elemental 1%, (NH_{4})_{2}SO_{4} 0,3%, MgSO_{4}\cdot7H_{2}O 0,05%, K_{2}HPO_{4} 0,05%, KCl 0,01% y Ca(NO_{3})_{2}\cdot4H_{2}O 0,001% fue añadida a una disolución acuosa que contenía 50 \mumol/l de Na_{2}WO_{4}, o no se añadió nada como testigos (Ejemplos Comparativos 9 a 13). A cada una de las mezclas se añadió Thiobacillus thiooxidans ON106 (Ejemplo 10), Thiobacillus thiooxidans ON107 (Ejemplo 11), Thiobacillus thiooxidans IFO13701 (Ejemplo 12), Thiobacillus thiooxidans JCM3867 (Ejemplo 13) o la cepa NBI-3 (Ejemplo 14), y fueron puestas a cultivar. La propagación de las células de cada cepa fue medida por absorbancia a 660 nm. Los resultados se muestran en la Fig.5.
A partir de los resultados de la Fig.5, se ve que el Na_{2}WO_{4} tiene una excelente actividad inhibitoria del crecimiento del Thiobacillus thiooxidans bajo condiciones ácidas a pH 2,5.
Ejemplo 15 a 20 y Ejemplos comparativos 14 y 15
A 20 ml de medio de azufre elemental-sal inorgánica (pH 2,5) que contiene 1% de azufre elemental, (NH_{4})_{2}SO_{4} 0,3%, MgSO_{4}\cdot7H_{2}O 0,05%, K_{2}HPO_{4} 0,05%, KCl 0,01% y Ca(NO_{3})_{2}\cdot4H_{2}O 0,001% se añadió una disolución acuosa que contenía 100 \mumol/l de polvos de wolframio (W) que tienen un diámetro de 10 a 50 \mum (Ejemplo 15) 100 \mumol/l de polvos de CaWO_{4}\cdot2H_{2}O que tienen un diámetro de 10 a 25 \mum (Ejemplo 16), 100 \mumol/l de polvos de CaWO_{4} que tienen un diámetro de 10 a 25 \mum (Ejemplo 17), 100 \mumol/l de polvos de W_{28}O_{58} que tienen un diámetro de 10 a 25 \mum (Ejemplo 18), 100 \mumol/l de polvos de 5 (NH_{4})_{2}O\cdot12WO_{3} que tienen un diámetro de 10 a 25 \mum (Ejemplo 19), una mezcla de 100 \mumol/l de polvos de Ni que tienen un diámetro de 10 a 50 y 100 \mumol/l de polvos W_{28}O_{58} que tienen un diámetro de 10 a 25 \mum (Ejemplo 20) ó 100 \mumol/l de polvos de Ni que tienen un diámetro de 10 a 50 \mum (Ejemplo Comparativo 14), o no se añadió nada como un testigo (Ejemplo Comparativo 15). Con esta mezcla, se cultivó la cepa NBI-3 preparada en el Ejemplo 1. La propagación de la cepa NBI-3 con el transcurso del tiempo fue medida por absorbancia a 660 nm. Los resultados se muestran en la Fig.6.
A partir de los resultados de la Fig.6, se ha visto que el wolframio y diversos compuestos de wolframio tienen una excelente actividad inhibitoria del crecimiento del Thiobacillus thiooxidans bajo las condiciones ácidas a pH 2,5.
Ejemplos 21 a 24
A 20 ml de medio de azufre elemental-sal inorgánica (pH 7,0) que contiene 1% de azufre elemental, (NH_{4})_{2}SO_{4} 0,3%, MgSO_{4}\cdot7H_{2}O 0,05%, K_{2}HPO_{4} 0,05%, KCl 0,01% y Ca(NO_{3})_{2}\cdot4H_{2}O 0,001% se añadió una disolución acuosa que contenía 100 \mumol/l de polvos de W_{28}O_{58} que tienen un diámetro de 10 a 25 \mum (Ejemplo 21), una mezcla de 100 \mumol/l de polvos de Ni que tienen un diámetro de 10 a 50 y 100 \mumol/l de polvos de W que tienen un diámetro de 10 a 50 \mum (Ejemplo 22), una mezcla de \mumol/l de polvos de Ni que tienen un diámetro de 10 a 50 y 100 \mumol/l de polvos de W_{28}O_{58} que tienen un diámetro de 10 a 25 \mum (Ejemplo 23) o una mezcla de 100 \mumol/l de polvos de Ni que tienen un diámetro de 10 a 50 y 100 \mumol/l de polvos de 5(NH_{4})_{2}O\cdot12WO_{3} que tienen un diámetro de 10 a 25 \mum (Ejemplo 24). Con esta mezcla, se cultivó la cepa NBI-3 preparada en el Ejemplo 1. La propagación de la cepa NBI-3 con el transcurso del tiempo fue medida por absorbancia a 660 nm. Los resultados se muestran en la Fig.7.
A partir de los resultados de la Fig.7, se ve que el inhibidor que contiene níquel exhibe una excelente actividad inhibitoria del crecimiento de Thiobacillus thiooxidans a pH 7,0.
\newpage
Ejemplos 25 a 27
A 20 ml de medio de azufre elemental-sal inorgánica (pH 2,5) que contiene azufre elemental 1%, (NH_{4})_{2}SO_{4} 0,3%, MgSO_{4}\cdot7H_{2}O 0,05%, K_{2}HPO_{4} 0,05%, KCl 0,01% y Ca(NO_{3})_{2}\cdot4H_{2}O 0,001% se añadió una disolución acuosa que contenía una mezcla de 100 \mumol/l de polvos de Ni que tienen un diámetro de 10 a 50 y 100 \mumol/l de polvos de W de diámetro de 10 a 50 \mum (Ejemplo 25), una mezcla de 100 \mumol/l de polvos de Ni que tienen un diámetro de 10 a 50 y 100 \mumol/l de polvos de W_{28}O_{58} que tienen un diámetro de 10 a 25 \mum (Ejemplo 26) o una mezcla de 100 \mumol/l de polvos de Ni que tienen un diámetro de 10 a 50 y 100 \mumol/l de polvos de 5(NH_{4})_{2}O\cdot12WO_{3} que tienen un diámetro de 10 a 25 \mum (Ejemplo 27). Con esta mezcla, se cultivó la cepa NBI-3 preparada en el Ejemplo 1. La propagación de la cepa NBI-3 con el transcurso del tiempo fue medida por absorbancia a 660 nm. Como resultado, la propagación de la cepa NBI-3 no estuvo en el nivel cero en ninguno de los Ejemplos a día 30.

Claims (5)

1. El uso de una sustancia seleccionada a partir del grupo que consiste de polvos de wolframio y un compuesto de wolframio, y una mezcla de los mismos, como un inhibidor del crecimiento del Thiobacillus thiooxidans.
2. El uso según la reivindicación 1, en el que dicho compuesto de wolframio se selecciona a partir del grupo que consiste en W_{28}O_{58}, Na_{2}WO_{4}, CaWO_{4}, CaWO_{4}\cdotH_{2}O, CaWO_{4}\cdot2H_{2}O, 5(NH_{4})_{2}O\cdot12WO_{3}\cdotnH_{2}O (n=0 a 5) y mezclas de los mismos.
3. El uso según la reivindicación 1, en el que dicha sustancia está en la forma de polvos que tienen un diámetro de 0,005 a 0,2 mm.
4. El uso según la reivindicación 1, en el que dicha sustancia comprende además una sustancia de níquel seleccionada a partir del grupo que consiste en polvos de níquel, polvos de óxido de níquel, y mezclas de los mismos.
5. El uso según la reivindicación 4, en el que el diámetro de los polvos de dicha sustancia de níquel es 0,005 a 0,2 mm.
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