ES2201792T3

ES2201792T3 - Medicamento que contiene complejos de platino y su utilizacion.

Info

Publication number: ES2201792T3
Application number: ES99953589T
Authority: ES
Inventors: Eberhard Amtmann; Gerhard Schilling
Original assignee: Deutsches Krebsforschungszentrum DKFZ; Universitaet Heidelberg
Current assignee: Deutsches Krebsforschungszentrum DKFZ; Universitaet Heidelberg
Priority date: 1998-08-25
Filing date: 1999-08-25
Publication date: 2004-03-16
Anticipated expiration: 2019-08-25
Also published as: DE19940407A1; JP2002523361A; AU769882B2; EP1107751A2; DE59905863D1; HUP0103262A3; AU1028600A; KR20010079680A; PL346643A1; BR9913321A; MXPA01001999A; ATE241975T1; CZ2001569A3; CA2341701A1; US20020004526A1; CN1398183A; NZ509529A; AU769882C; NO20010907D0; DK1107751T3

Abstract

Medicamento con un contenido de por lo menos un compuesto de la fórmula general (I) en la que R1 y R2, cada uno independientemente del otro, significan un radical alquilo lineal o ramificado de 1 a 30 átomos de carbono, un radical alquenilo lineal o ramificado de 2 a 30 átomos de carbono, un radical alquilo mono- o policíclico de 3 a 30 átomos de carbono, un radical alquenilo mono- o policíclico de 4 a 30 átomos de carbono, o un radical aromático mono- o policíclico de 6 a 30 átomos de carbono, pudiendo dichos radicales estar sustituidos o no sustituidos por uno o varios sustituyentes.

Description

Medicamento que contiene complejos de platino y su utilización.

La presente invención se refiere a medicamentos que contienen complejos de platino y a su utilización para la terapia de las enfermedades tumorales.

En la actualidad, las enfermedades de cáncer se tratan en la mayoría de los casos antes y/o después de una operación con una terapia con medicamentos o con radioterapia. En la terapia de tumores con medicamentos, la quimioterapia, se utilizan compuestos que afectan al crecimiento del cáncer de forma diferente. Sin embargo, la quimioterapia a menudo produce efectos secundarios graves, desagradables para el paciente, tales como pérdida de pelo, náuseas, vómito, cansancio, daño de la médula ósea, y de los glóbulos blancos. Esto es el caso en particular de los compuestos de platino utilizados hasta ahora, tales como cisplatino y carboplatino. A menudo se producen también infecciones secundarias de mayor o menor gravedad. Además, no todos los tipos de tumor responden a una quimioterapia, por ejemplo el carcinoma de células del riñón o tumores del tracto gastrointestinal.

Por tanto, el objetivo de la invención es proporcionar un medicamento eficaz para el tratamiento de enfermedades de cáncer. El medicamento debería ser eficaz en pequeña dosificación, presentar una mínima toxicidad para las células sanas y poseer pocos efectos secundarios. Además, el medicamento debería ser apto también para la quimioterapia regional y permitir su administración ambulante. Además, el medicamento debería rebajar también el riesgo de recaída. Además, debería ser posible almacenar el medicamento durante un periodo de tiempo prolongado sin pérdida de actividad.

Sorprendentemente, se ha hallado que complejos de platino y xantogenato forman compuestos estables con una excelente acción antitumoral.

Por consiguiente, según un aspecto, la presente invención se refiere a medicamentos que contienen complejos de platino de la fórmula general (I)

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en la que R_{1} y R_{2}, cada uno independientemente del otro, significan un radical alquilo lineal o ramificado de 1 a 30 átomos de carbono, un radical alquenilo lineal o ramificado de 2 a 30 átomos de carbono, un radical alquilo mono- o policíclico de 3 a 30 átomos de carbono, un radical alquenilo mono- o policíclico de 4 a 30 átomos de carbono, o un radical aromático mono- o policíclico con 6 a 30 átomos de carbono, pudiendo dichos radicales estar sustituidos o no sustituidos por uno o varios sustituyentes.

Según otro aspecto, la presente invención se refiere a la utilización del medicamento para la preparación de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad de cáncer.

R_{1} y R_{2} pueden ser iguales o diferentes.

Preferentemente, R_{1} y R_{2} son radicales C_{1}-C_{14}-alquilo o radicales C_{3}-C_{14}-cicloalquilos lineales. De forma particularmente preferida, R_{1} y R_{2} representan CH_{3}CH_{2}.

Puede utilizarse cualquier radical C_{1-30}-alquilo lineal o ramificado. Ejemplos de los mismos son los grupos metilo, etilo, propilo, ispropilo, butilo, isobutilo, terc-butilo, n-butilo, n-hexilo, 2-metilpentilo, 2,3-dimetilbutilo, n-heptilo, 2-metilhexilo, 2,2-dimetilpentilo, 3,3-dimetilpentilo, 3-etilpentilo, n-octilo, 2,2-dimetilhexilo, 3,3-dimetilhexilo, 3-metil-3-etilpentilo. Debido a su mejor solubilidad, se prefieren las cadenas alquilo cortas, tales como metilo, etilo, propilo e isopropilo.

Puede utilizarse cualquier radical C_{2-30}-alquenilo lineal o ramificado. Ejemplos de los mismos son grupos vinilo, propenilo, isopropenilo, alilo, 2-metilalilo, butenilo o isobutenilo, hexenilo o isohexenilo, heptenilo o isoheptenilo, octenilo o isooctenilo. Se prefieren los grupos vinilo, propenilo e isopropenilo.

El radical cicloalquilo de 3 a 30 átomos de carbono puede ser cualquier radical cicloalquilo. Ejemplos de los mismos son los grupos ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo o ciclohexilo, cicloheptilo, ciclooctilo, ciclononilo o ciclodecilo. Se prefieren los grupos ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo y ciclohexilo.

El radical cicloalquenilo de 4 a 30 átomos de carbono puede ser cualquier radical cicloalquenilo. Ejemplos de los mismos son los grupos ciclobutenilo, ciclopentenilo o ciclohexenilo, cicloheptenilo, ciclooctenilo, ciclononenilo o ciclodecenilo. Se prefieren los grupos ciclobutenilo, ciclopentenilo o ciclohexenilo. Ejemplos de radicales alquilo o alquenilo policíclicos comprenden norborneno, adamantano o benzvaleno.

Además, R_{1} y R_{2} pueden ser cualquier radicales C_{6-30}-arilo mono- o policíclicos. Ejemplos de los mismos son radicales carbocíclicos, monocíclicos, por ejemplo el grupo fenilo, radicales heterocíclicos, monocíclicos, por ejemplo los grupos tienilo, furilo, piranilo, pirrolilo, imidazolilo, pirazolilo, piridilo, pirazinilo, pirimidinilo, tiazolilo, oxazolilo, furazanilo, pirrolinilo, imidazolinilo, pirazolinilo, tiazolinilo, triazolilo, tetrazolilo, así como los isómeros posicionales del o de los heteroátomo(s) que dichos grupos pueden contener, radicales constituidos por anillos condensados carbocíclicos, por ejemplo el grupo naftilo o el grupo fenantrenilo, radicales constituidos por anillos condensados heterocíclicos, por ejemplo benzofuranilo, benzotienilo, benzimidazolilo, benzotiazolilo, nafto[2,3- b]tienilo, tiantrenilo, isobenzofuranilo, cromenilo, xantenilo, fenoxatiinilo, indolizinilo, isoindolilo, 3H-indolilo, indolilo, indazolilo, purinilo, quinolizinilo, isoquinolilo, quinolilo, ftalazinilo, naftiridinilo, quinoxalinilo, quinazolinilo, cinolinilo, pteridinilo, carbazolilo, !03!-carbolinilo, acridinilo, fenazinilo, fenotiazinilo, fenoxazinilo, indolinilo, isoindolinilo, imidazopiridilo, imidazopirimidinilo, así como los sistemas condensados policíclicos constituidos por los compuestos heterocíclicos monocíclicos, tales como por ejemplo los que se han definido anteriormente, tales como por ejemplo furo[2,3-b]pirrol, o tieno[2,3-b]furano, y, en particular, los grupos furilo, tales como 2-furilo, imidazolilo, tales como 2-imidazolilo, piridilo, tales como 2-piridilo, 3-piridilo, 4-piridilo, pirimidinilo, tal como pirimidin-2-ilo, tiazolilo, tal como tiazol-2-ilo, tiazolinilo, tal como tiazolin-2-ilo, triazolilo, tal como triazol-2-ilo, tetrazolilo, tal como tetrazol-2-ilo, benzimidazolilo, tal como benzimidazol-2-ilo, benzotiazolilo, tal como benzotiazol-2-ilo, purinilo, tal como purin-7-ilo, o quinolilo, tal como 4-quinolilo.

Los sustituyentes preferidos de los varios radicales citados anteriormente pueden seleccionarse del grupo siguiente:

-: halógeno: fluoro, cloro, bromo, yodo

-: amino, alquilamino, dimetilamino o etilamino, dialquilamino, tales como dimetilamino, dietilamino, metiletilamino, estando presente cada uno de dichos radicales dialquilamino opcionalmente en forma del óxido,

-: aminoalquilo, tal como aminometilo o aminoetilo,

-: dialquilaminoalquilo, tal como dimetilaminometilo o -etilo,

-: dialquilaminoalquiloxi, tal como dimetilaminoetiloxi,

-: hidroxi,

-: grupo carboxilo libre, esterificado, tal como alcoxicarbonilo, por ejemplo metoxicarbonilo o etoxicarbonilo, transformado en una sal, por ejemplo por medio de un átomo de sodio o de potasio,

-: alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, tales como metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, terc-butilo, opcionalmente sustituido por uno o más átomo(s) de halógeno, por ejemplo por fluoro, tal como trifluorometilo,

-: oxo, ciano, nitro, formilo,

-: acilo, tales como acetilo, propionilo, butirilo, benzoilo,

-: aciloxi, tal como acetoxi o un radical de la fórmula:

-O-CO-(CH_{2})_{n}CO_{2}H, siendo n = 1 a 5,

-: alcoxi, tales como metoxi, etoxi, propiloxi, isopropiloxi, butiloxi,

-: alquiltio,, tales como metiltio, etiltio, propiltio, isopropiltio, butiltio,

-: carbamoilo,

-: alquenilo, tales como vinilo, propenilo,

-: alquinilo, tales como etinilo, propinilo, y

-: arilo, tales como fenilo, furilo, tienilo.

Ejemplos de radicales sustituidos de esta manera, que pueden mencionarse, incluyen radicales alquilo sustituidos por uno o varios átomo(s) de halógeno, tales como los grupos trifluorometilo, trifluorobutilo, pentafluoropropilo, pentafluorobutilo, pentafluoropentilo, heptafluorobutilo o nonaflurobutilo o 2-cloroetilo.

Los compuestos de la fórmula (I) citada anteriormente puede describirse en su totalitad con el término de "compuestos de tioplatino".

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Preferentemente, los compuestos de la fórmula (I) se preparan por medio de un procedimiento, caracterizado porque se lleva a cabo de manera conocida una reacción de intercambio de ligandos con un complejo de platino, tal como por ejemplo cis-clorodiaminplatino(II), con el xantogenato correspondiente. Se trata por ejemplo de un procedimiento, caracterizado porque un compuesto de la fórmula

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en la que Me representa un átomo alcalino o alcalinotérreo y R tiene la definición citada para R_{1} y R_{2}, se hace reaccionar con un complejo de platino, tal como cis-diamindicloroplatino(II), y el nuevo complejo de platino resultante se aísla.

Los compuestos de la fórmula (I) son aptos para el tratamiento de varias enfermedades de cáncer, tales como por ejemplo tumores de testículo, carcinomas de ovario, vejiga, colon, próstata, carcinomas bronquiales de células pequeñas y no pequeñas, carcinomas de la zona de cabeza y de garganta, carcinomas de la zonas del tórax y del abdomen, carcinomas del cervix y del endometrio, sarcomas y melanomas así como leucemias. Se prefiere la terapia del carcinoma bronquial de células pequeñas o del carcinoma colorrectal. La terapia puede realizarse también como una terapia acompañante de una radioterapia o antes o después de una operación quirúrgica.

Los compuestos de la fórmula (I) son bien tolerados. El valor L_{50} es más bajo en un factor de tres que el del cisplatino conocido en la terapia de tumores. Una dosificación que presenta un buen efecto antitumoral casi no produce efectos secundarios. En particular con los compuestos de tioplatino, hasta ahora la nefrotoxicidad temida y conocida para cisplatino no se ha observado en este grado. Otra ventaja de los compuestos según la invención radica en que presentan una amplia gama de acción contra varios tumores y, en particular, también contra tumores que hasta ahora han sido resistentes a la terapia con compuestos de platino (por ejemplo cisplatino). Tioplatino es particularmente apto para tumores sólidos.

Otra ventaja consiste en que los compuestos según la invención presentan una mayor eficacia en la región de los valores de pH ligeramente ácida que en la alcalina, teniendo en cuenta que muchos tejidos de tumores presentan un medio más bien ácido. Los inventores han realizado una investigación con bis[O-etilditiocarbonato]platino(II), un complejo de coordinación de platino según la fórmula (I), en el cual platino ha formado un complejo con átomos de azufre. Tras protonación, se abren dos enlaces de azufre reversiblemente (produciendo un "complejo agua"), que pueden iniciar una reticulación del ADN. Tras aumentar el valor pH, los protones disocian de los átomos de azufre, restableciendo la molécula inerte. Para esta reacción, se ha establecido la ecuación de reacción siguiente dependiente del pH:

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Por esta ecuación puede apreciarse que un desplazamiento del valor pH a la región (ligeramente) ácida convierte el "prodrug" según la fórmula (I) en el compuesto realmente reactivo. Dicho concepto es confirmado por los ejemplos.

El medicamento según la invención puede administrarse de manera diferente, por ejemplo por vía oral, parenteral, cutánea, subcutánea, intravenosa, intramuscular, rectal o intratumoral. Se prefiere la administración intravenosa o intratumoral, es decir la administración a determinados órganos enfermos o regiones corporales. El medicamento se administra al paciente durante un periodo de tiempo establecido por un médico. El medicamento puede administrarse tanto a humanos como a mamíferos.

El médico establecerá la dosificación del compuesto según la invención a base de los parámetros específicos del paciente, tales como edad, peso, sexo, gravedad de la enfermedad, etc. Preferentemente, la dosificación se sitúa entre 0,001 y 1000 mg/kg de peso corporal.

El medicamento se formulará de forma adecuada según el tipo de administración, por ejemplo en forma de comprimidos sencillos o de grageas, cápsulas de gelatina dura o blanda, polvo para ser reconstituido antes de su uso, granulados, supositorios, óvulos, preparaciones de inyección, soluciones de infusión, pomadas, cremas, geles, microesferas, implantes, los cuales se preparan según los métodos galénicos convencionales.

Los compuestos de la fórmula (I) pueden formularse, si se desea, junto con otras sustancias activas y con excipientes habituales para composiciones farmacéuticas, por ejemplo, en función del preparado a preparar, con talco, goma arábiga, lactosa, almidón, estearato de magnesio, manteca de cacao, vehículos acuosos y no acuosos, grasas de origen animal o vegetal, derivados de parafina, glicoles (en particular polietilenglicol), varios plastificantes, dispersantes o emulsificadores, conservantes.

Para la preparación de preparados líquidos, pueden utilizarse aditivos, tales como solución de cloruro sódico, etanol, sorbitol, glicerol, aceite de oliva, aceite de almendra, propilenglicol o etilenglicol.

Preferentemente, se preparan soluciones de infusión o inyección. Se trata preferentemente de soluciones o suspensiones acuosas, que pueden ser preparados antes de su uso, por ejemplo a partir de preparados liofilizados que contienen la sustancia activa por sí sola o junto con un vehículo, tales como manitol, lactosa, glucosa, albúmina y similares. Las soluciones listas para su uso se esterilizan y, si se desea, se mezclan con sustancias auxiliares, por ejemplo con conservantes, estabilizantes, emulsificadores, disolventes, tampones y/o sales para la regulación de la presión osmótica. La esterilización puede conseguirse por medio de una filtración estéril, pasando la mezcla por un filtro con un tamaño de poro pequeño, y a continuación la composición puede liofilizarse, si así se desea. También es posible la adición de una pequeña cantidad de antibióticos, con el fin de ayudar en la conservación de la esterilidad.

Resulta ventajoso proporcionar el medicamento según la invención en una forma unitaria de dosis, con el fin de administrarlo a un mamífero que requiere un tratamiento anticancerígeno.

La invención se refiere asimismo a medicamentos o composiciones farmacéuticas que contienen una cantidad terapéuticamente activa del ingrediente activo (compuesto de la fórmula (I) según la invención) junto con vehículos o diluyentes orgánicos o inorgánicos inertes, sólidos o líquidos, farmacéuticamente aceptables, aptos para la administración prevista y que no presenten una interacción adversa con los ingredientes activos.

La invención se refiere también a un procedimiento para la producción de una composición farmacéutica, caracterizado porque el compuesto según la fórmula (I) se mezcla con un vehículo farmacéuticamente aceptable.

De entre los medicamentos según la invención, pueden mencionarse en particular los compuestos descritos en la parte experimental y sobre todo los compuestos en los que en la fórmula (I) citada anteriormente R_{1} y/o R_{2}, que pueden ser iguales o diferentes, son un grupo metilo, etilo, propilo o isopropilo.

Los medicamentos o composiciones farmacéuticas según la invención comprenden, como sustancia activa, por lo menos una sustancia activa tal como se ha definido anteriormente. Opcionalmente, pueden incluirse en la composición otras sustancias activas farmacéuticas, tales como por ejemplo inmunosupresivos, por ejemplo cicloesporina, rapamicina, 15-desoxispuergualina, OKT3, azatioprina; citoquinas (por ejemplo TNF), interferon, etc. Además, la composición según la invención puede contener adicionalmente un esteroide u otros citoestáticos (por ejemplo cisplatino, metotrexato, aminopterina, dacarbazina, compuestos de nitrosourea, fluorouracil, bleomicina, daunomicina, daunorubicina, doxorubicina, mitramicina, mitomicina C, etc.).

La invención se ilustrará de forma más completa haciendo referencia a las figuras:

Fig. 1: regresión y crecimiento de tumor tras el tratamiento de un carcinoma bronquial de células pequeñas con un compuesto según la invención y un control, respectivamente

Fig. 2: efecto antitumoral de un compuesto según la invención sobre un carcinoma de colon humano en el ratón desnudo

Fig. 3: eficacia de citoestáticos en función del pH

Fig. 4: efecto antitumoral de tioplatino sobre xenotrasplantes humanos

Fig. 5: histopatología del riñón e intestino delgado tras un tratamiento con tioplatino y cisplatino

La invención se ilustrará con mayor detalle haciendo referencia a los ejemplos que siguen a continuación.

Ejemplo 1 Procedimiento para la preparación de complejos de platino(II) con dietilxantogenato (bis[O-etilditiocarbonato]platino(II)

1 mmol de cis-diamindicloroplatino(II) se disolvió en 600 ml de agua destilada, y a la solución resultante se adicionaron 10 mmol de xantogenato de potasio y de metilo. La solución se agitó a temperatura ambiente durante seis horas. El precipitado resultante se recuperó por filtración, se lavó tres veces con agua destilada y se secó al vacío. Tras recristalizarlo en acetona caliente, el producto se obtuvo como cristales amarillos con una pureza de más de un 98% y un rendimiento de un 68%.

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Ejemplo 2

Se preparó la composición farmacéutica siguiente:

Se prepararon suspensiones de inyección de la formulación siguiente:

- Compuesto del Ejemplo 1....................................................1 g

- Excipiente (solución de dispersión acuosa): alcohol

benzílico, polietilenglicol 900, carboximetilcelulosa

(sal sódica), cloruro sódico, agua para hacer un

preparado de inyección para una ampolla de..........................1 ml

Con el fin de estabilizar la solución, lo más preferible es adicionar PEG hasta obtener una solución al 5%.

Ejemplo 3 Investigación farmacológica del compuesto según el Ejemplo 1

a): Efecto antitumoral sobre un carcinoma bronquial humano de células pequeñas en el ratón desnudo

Células de carcinoma bronquial (SCLC) se implantaron a ratones nu/nu, cepa NMRI (5x10^{6} células en 0,1 ml de solución de sal común) bajo la piel. Después de dos semanas, los tumores habían alcanzado un tamaño de aproximadamente 8 mm. A continuación, cinco animales en cada caso se trataron i.v. o bien con 0,2 ml de solución de sal común/0,1% de BSA/1% de acetona (grupo de control) o bien con 10 mg/kg del compuesto según el Ejemplo 1 en solución de sal común/1% de BSA/1% de acetona (grupo a tratar). El crecimiento de tumor se controlaba diariamente. Los valores se han representado en la Figura 1 adjunta.

Se ve claramente que en los ratones tratados con el compuesto según el Ejemplo 1 (grupo a tratar) disminuyó el tamaño de tumor, mientras que en los ratones del grupo de control el crecimiento de tumor aumentaba continuamente.

b): Efecto antitumoral de un compuesto según el Ejemplo 1 sobre un carcinoma de colon humano en el ratón desnudo

Células de carcinoma de colon (SW707) se implantaron a ratones nu/nu de una edad de 6 semanas, cepa NMRI (5x10^{6} células en solución de sal común) bajo la piel. Después de 10 días, cuando los tumores habían alcanzado un tamaño de aproximadamente 10 mm, seis animales en cada caso se trataron i.v. o bien con 0,2 ml de solución de sal común/1% de BSA/1% de acetona (grupo de control), o bien con 7,5 mg/kg del compuesto según el Ejemplo 1 en solución de sal común/1% de BSA/1% de acetona (grupo a tratar I) o bien con 10 mg/kg de cisplatino (grupo a tratar II). El crecimiento de tumor se controlaba diariamente y se registró en la gráfica representada en la Figura 2 adjunta.

Por la Fig. 2 puede apreciarse que el crecimiento de tumor en el grupo a tratar I fue frenado, mientras que en el grupo de control y en el grupo a tratar II se podía observar un crecimiento de tumor continuo. Esto demuestra que los compuestos según la invención son muy superiores a cisplatino e incluso despliegan una eficacia en tumores que hasta ahora no han respondido a los compuestos de platino (cisplatino). Por tanto, los compuestos de tioplatino presentan un espectro de acción más amplio que los citoestáticos anteriores.

Ejemplo 4 Eficacia de citoestáticos en función del pH

Células Hela se sembraron en placas de Linbro (10^{5}) y se incubaron tras 6 horas con concentraciones diferentes de cisplatino o de un compuesto según el Ejemplo 1 en un medio basal según Eagle, que contenía 2,2 g (pH 7,4) o 0,85 g (pH 6,8) de bicarbonato sódico y un 10% de suero de ternera fetal a 37ºC durante 24 horas en una atmósfera de un 5% de CO_{2}. El número de células vivas se determinó, tras una coloración vital con azul de tripano, en una cámara de Neubauer. El resultado puede verse en la Fig. 3.

Sorprendentemente, el compuesto según el Ejemplo 1 presenta una acción máxima en la región ligeramente ácida, mientras que el citoestático convencional cisplatino es más activo en la región alcalina. Puesto que los tejidos de tumores presentan a menudo un pH ligeramente ácido, resulta obvio que debido a esta característica el compuesto según el Ejemplo 1 presenta una mejor eficacia que los citoestáticos convencionales.

Ejemplo 5 Incorporación de platino en función del pH

10^{7} células Hela se colocaron en placas de cultivo, y 4 horas más tarde las células se alimentaron con un medio que contenía o bien 2,2 g/l (pH 7,4) o bien 0,85 g/l (pH 6,8) de NaHCO_{3}. Tras establecer una atmósfera de un 5% de CO_{2}, se adicionó cisplatino o tioplatino hasta obtener en cada caso una concentración final de 33 \muM. 4 horas después de la adición del platino, una placa de cada grupo a tratar se lavó 5 veces con 50 ml de PBS frío. Las células se quitaron de las placas por rascado, y el contenido en Pt se determinó por el método de activación por neutrones. A tal fin, tras el liofilizado, las muestras y los estándares de platino se irradiaron con neutrones (5 x 10^{12} n cm^{-2} sec^{-1}) durante 30 minutos. Una semana más tarde, la radiación \gamma se determinó a 158,4 keV y 208,2 keV, y la concentración de platino se determinó por medio de estándares. El límite de detección era de 2 ng.

En otras placas, se aisló, 16 horas después de la incubación, el ADN por extracción con fenol/cloroformo, seguido de una precipitación con etanol. El contenido en platino de 100 \mug de cada muestra se determinó, tal como se ha descrito anteriormente, por el método de activación por neutrones.

	Contenido en platino
	Total en células	Contenido en platino
Tratamiento	(ng/10^{7} células)	ADN (ng/mg)
Sin tratar, pH 6,8	< 1	< 10
Sin tratar, pH 7,4	< 1	< 10
Cisplatino, pH 6,8	140	14,6
Cisplatino, pH 7,4	156	140
Tioplatino, pH 6,8	4780	13870
Tioplatino, pH 7,4	3680	1760

A partir de las cifras de la tabla puede apreciarse que tras la incubación con tioplatino a un valor pH ligeramente ácido de 6,8, una cantidad 8 veces más alta de platino se encontraba ligada al ADN que tras una incubación a un pH de 7,4. Con cisplatino podía observarse el efecto inverso, es decir, a un pH de 7,4 10 veces más ADN se encontraba ligada a cisplatino que a un pH de 6,8. La absorción de platino por parte de las células era dependiente del pH. Sin embargo, la absorción total era 30-100 veces más alta para tioplatino que para cisplatino.

Ejemplo 6 Citotoxicidad en función del valor pH

Células se colocaron en placas de Linbro, y 4 horas más tarde se alimentaron las células con un medio que contenía o bien 2,2 g/l (pH 7,4) o bien 0,85 g/l (pH 6,8) de NaHCO_{3}. Tras establecer una atmósfera de un 5% de CO_{2}, se adicionó cisplatino o tioplatino hasta obtener concentraciones comprendidas, en cada caso, entre 5 y 150 \muM. El número de células vivas se determinó 24 horas más tarde, calculándose los valores IC_{50} e IC_{99} a partir de las curvas de respuesta a la dosis (desviaciones estándares por debajo del 10% en todos los casos).

		IC_{50}pH6,8/7,4	IC_{99}pH6,8/7,4	IC_{50}pH6,8/7,4	IC_{99}pH6,8/7,4
Línea	Tipo de célula	cisplatino (\muM)	cisplatino (\muM)	tioplatino (\muM)	tioplatino (\muM)
HeLa	Cáncer cervix hum.	86/25	111/54	5/51	16,3/>55
H10	Cáncer pulm. cél. peq. hum.	72/42	>150/90	5,1/15,4	13,2/30,8
SW707	Cáncer colorectal hum.	9,6/<4,8	90/38,4	3,7/13,2	7,5/26,4
CV1	Cáncer riñon ratón	>150/>150	>150/>150	3,9/23	13,2/106
Capan2	Cáncer páncreas hum.	143/139	>150/>150	17,3/50,6	40,9/99
Dan-G	Cáncer páncreas hum.	45/36	78/72	15,4/52,8	20,9/64,5
Jurkat	Linfoma cél.T hum.	52,5/54	120/126	6,8/21,1	13,6/132
S180	Sarcoma ratón	63/24	>150/114	16,5/63,8	37,5/>110

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Por la tabla, puede apreciarse que la citoxicidad de casi todas las líneas para tioplatino era mucho mejor a un pH de 6,8 que a un pH de 7,4, mientras que para cisplatino los resultados obtenidos eran al revés, es decir mejor eficacia a un pH de 7,4. En todos los casos, tioplatino presentaba un IC_{50} 2-8 veces más bajo a 6,8 que a 7,4. Para cisplatino, el IC_{50} era peor a un pH de 6,8 que a uno de 7,4 o bien no había un efecto de pH detectable.

Ejemplo 7 Efecto antitumoral de tioplatino sobre xenotrasplantes humanos

Se hace referencia a la Figura 4.

Células H10 humanas de un carcinoma de pulmón de células pequeñas (A) o células SW707 de un carcinoma colorectal (B) se inyectaron subcutáneamente a ratones nu/nu-Swiss, y 12 días más tarde, cuando los tumores habían alcanzado un diámetro de 8-10 mm, 5 ratones recibieron una inyección individual i.p. de Tween 80 al 10% (asterisco; = control), 10 mg/kg de cisplatino (triángulos) o 10 mg/kg de tioplatino, disuelto hasta obtener una concentración de 1 mg/ml en Tween 80 al 10% (cuadrados). Los tamaños de tumor se determinaron en dos direcciones, y se calculó el crecimiento de tumor relativo. Los valores promedios se han indicado en la Fig. 4.

(C):: pesos corporales medios del grupo con carcinomas de pulmón de células pequeñas. Las desviaciones estándares eran menos del 3%.

Por la Fig. 4, puede apreciarse que cisplatino era eficaz en células H10, mientras que en el carcinoma colorectal (SW707) no se observó efecto alguno ni siquiera con una dosis de 10 mg/kg. Con la misma dosificación, tioplatino era eficaz contra ambos tipos de cáncer. El tamaño de tumor medio del grupo tratado con tioplatino era más pequeño que el del grupo tratado con cisplatino. Con tioplatino se consiguió una disminución del tamaño de tumor en el cáncer de pulmón de células pequeñas en un 23%, en comparación con el grupo de control (es decir, una reducción del tamaño a aproximadamente 1/4 parte del control), mientras que con cisplatino sólo podía conseguirse una reducción a la mitad del tamaño de tumor, en comparación con el control (Fig. 4A). En el caso del cáncer colorectal, cisplatino no mostró efecto alguno, mientras que tioplatino era capaz de impedir el crecimiento de tumor (Fig. 4B).

La pérdida de peso constituye una estimación aproximada de los efectos secundarios tóxicos. Mientras que los animales tratados con cisplatino presentaban, en los días 3 y 6, una pérdida de un 12% y 13%, respectivamente, en el grupo de cisplatino no se detectó ninguna pérdida de peso (Fig. 4C).

Ejemplo 8 Investigación de la toxicidad sobre riñones y intestino delgado

Se hace referencia a la Fig. 5.

Ratones Swiss recibieron i.p. o bien 15 mg/kg de cisplatino (A,C) o bien 20 mg/kg de tioplatino (B,D). Cuatro días más tarde, se prepararon cortes histológicos del intestino delgado (A,B) y de los riñones (C,D) y se coloraron con hematoxilina y eosina.

En los animales tratados con cisplatino, los riñones presentaban una degeneración grave y vacuolización de los túbulos (Fig. 5C). La estructura del intestino delgado se ha quedado destrozada en su mayor parte, y en la lámina propria (Fig. 5A) pueden observarse infiltrados de gran tamaño. Al contrario, el tratamiento con una alta dosis de 10 mg/kg de tioplatino deja intacta la estructura de los riñones (Fig. 5D) y del intestino delgado (Fig. 5B).

Claims

1. Medicamento con un contenido de por lo menos un compuesto de la fórmula general (I)

5

en la que R_{1} y R_{2}, cada uno independientemente del otro, significan un radical alquilo lineal o ramificado de 1 a 30 átomos de carbono, un radical alquenilo lineal o ramificado de 2 a 30 átomos de carbono, un radical alquilo mono- o policíclico de 3 a 30 átomos de carbono, un radical alquenilo mono- o policíclico de 4 a 30 átomos de carbono, o un radical aromático mono- o policíclico de 6 a 30 átomos de carbono, pudiendo dichos radicales estar sustituidos o no sustituidos por uno o varios sustituyentes.

2. Medicamento según la reivindicación 1, en el que en el compuesto de la fórmula (I), R_{1} y R_{2} representan cada uno un radical C_{1-14}-alquilo o un radical C_{3-14}-cicloalquilo.

3. Medicamento según la reivindicación 1 ó 2, en el que en el compuesto de la fórmula (I), R_{1} y R_{2} representan cada uno CH_{3}CH_{2}.

4. Medicamento según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que el compuesto de la fórmula (I) es el complejo de platino(II) con dimetilxantogenato o el complejo de platino(II) con dietilxantogenato.

5. Medicamento según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, que comprende adicionalmente un compuesto inmunosupresivo, seleccionado de entre el grupo constituido por cicloesporina, rapamicina, 15-desoxispergualina, OKT3 y azatioprina.

6. Medicamento según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, que comprende adicionalmente citoquinas, interferon u otros citoestáticos.

7. Medicamento según la reivindicación 6, en el que el citoestático adicional es cisplatino, metotrexato, aminopterina, dacarbazina, compuestos de nitrosourea, fluorouracil, bleomicina, daunomicina, daunorubicina, doxorubicina, mitramicina, mitomicina C.

8. Medicamento según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, proporcionado en una forma unitaria de dosis para la administración a un mamífero que necesita un tratamiento con un agente anticancerígeno.

9. Medicamento según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, que comprende adicionalmente un vehículo inerte, farmacéuticamente aceptable o un diluyente.

10. Utilización de un medicamento según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, para la preparación de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad de cáncer.

11. Utilización según la reivindicación 10, en la que la enfermedad de cáncer se ha seleccionado de entre el grupo constituido por tumores de testículos, carcinomas de ovario, vejiga, colon, próstata, carcinomas bronquiales de células pequeñas y no pequeñas, carcinomas de las zonas de cabeza y de garganta, carcinomas de las zonas de tórax y abdomen, carcinomas de cervix y endometrio, sarcomas, melanomas y leucemias.

12. Utilización según la reivindicación 10, en la que la enfermedad de cáncer es el carcinoma bronquial de células pequeñas o el carcinoma colorectal.

13. Procedimiento para la preparación de un medicamento según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, caracterizado porque el compuesto de la fórmula (I) se mezcla con un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable.