MXPA01001999A - Medicamento que contiene compuestos complejos de platino asi como su empleo. - Google Patents

Abstract

La invencion se refiere a medicamentos con un contenido de cuando menos un compuesto de la formula general (i); (ver formula) en donde R1 y R2, respectivamente uno independiente del otro, signifiacn un radical alquilo de cadena recta o ramificada con 1 a 30 atomos de carbono, un radical alquenilo de cadena recta o ramificada, con 2 a 30 atomos de carbono, un radical alquilo mono-o policiclico con 3 a 30 atomos de carbono, un radical alquenilo mono- o policiclico con 4 a 30 atomos de carbono o un radical aromatico mono- o policiclico con 6 a 30 atomos de carbono, en donde estos radicales pueden estar sustituidos eventualmente por uno o varios sustituyentes. Asimismo, la invencion se refiere al empleo de los medicamentos para la terapia inmunosupresiva y para la terapia de tumores no invasiva.

Description

MEDICAMENTO QUE CONTIENE COMPUESTOS COMPLEJOS DE PLATINO ASI COMO SU EMPLEO La invención se refiere a medicamentos que contienen complejos de platino así como a su empleo en la terapia de enfermedades tumorales. Actualmente, el cáncer se trata por lo general antes y/o después de una operación con una terapia medicamentosa o radioterapia. En el caso de la terapia tumoral medicamentosa, la quimioterapia, se utilizan compuestos con los que se afecta de distinta manera el crecimiento del cáncer. Sin embargo, en el caso de la quimioterapia a menudo aparecen fuertes efectos secundarios incómodos para el paciente, tales como pérdida de cabello, mareos, vómitos, somnolencia, daño de la médula ósea y de los glóbulos blancos. Lo anterior aplica especialmente para los compuestos de platino empleados hasta ahora, tales como cisplatino o carboplatino. A menudo suceden también infecciones secundarias más o menos graves. Asimismo, no todos los tumores reaccionan a una quimioterapia, por ejemplo, el carcinoma de células renales o los tumores del tracto estómago-intestino. Así, la ¡nvención se basa en el objetivo de proporcionar un medicamento efectivo en el tratamiento del cáncer. El medicamento debe ser efectivo en dosificaciones bajas, lo menos tóxico posible para células sanas y poseer pocos efectos secundarios. Además, el medicamento también debe ser adecuado para la quimioterapia regional y se debe poder administrar de manera ambulante. Asimismo, el medicamento debe reducir el riesgo de recaídas. Además, el medicamento se debe poder almacenar por largo tiempo sin perder su efectividad. Sorprendentemente se encontró que los complejos de platino y xantogenato dan como resultado compuestos estables con una excelente acción antitumoral. Por esta razón, el objeto de la invención son medicamentos que contienen complejos de platino de la fórmula general (I): en donde Ri y R2, respectivamente uno independiente del otro, significan un radical alquilo de cadena recta o ramificada con 1 a 30 átomos de carbono, un radical alquenilo de cadena recta o ramificada con 2 a 30 átomos de carbono, un radical alquilo mono- o policíclico con 3 a 30 átomos de carbono, un radical alquenilo mono- o policíclico con 4 a 30 átomos de carbono, o un radical aromático mono- o policíclico con 6 a 30 átomos de carbono, en donde estos radicales pueden estar sustituidos eventualmente por uno o varios sustituyentes. Ri y R2 pueden ser idénticos o diferentes. y yí il * i l~& a.

De preferencia, Ri y R2 significan radicales alquilo de cadena recta con 1 a 14 átomos de carbono o radicales cicloalquilo con 3 a 14 átomos de carbono. En particular, Ri y R2 significan CH3CH2. Se puede emplear cualquier radical alquilo de cadena recta o ramificada con 1 a 30 átomos de carbono. Ejemplos de lo anterior son grupos metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, butilo terciario, butilo normal, hexilo normal, 2-metilpentilo, 2,3-dimetilbutilo, n-heptilo, 2-metil-hexilo, 2,2-dimetilpentilo, 3,3-dimetilpentilo, 3-etilpentilo, octilo normal, 2,2-dimetilhexilo, 3,3-dimetilhexilo, 3-metil-3-etilpentilo. Por su mejor solubilidad, se prefieren cadenas cortas de alquilo, tales como metilo, etilo, propilo e isopropilo. Se puede utilizar cualquier radical alquenilo de cadena recta o ramificada con 2 a 30 átomos de carbono. Ejemplos de lo anterior son: grupos vinilo, propenilo, ¡sopropenilo, alilo, 2-metilalilo, butenilo o isobutenilo, hexenilo o ¡sohexenilo, heptenilo o isoheptenilo, octenilo o isooctenilo. Se prefieren vinilo, propenilo e ¡sopropenilo. El radical cicloalquilo con 3 a 30 átomos de carbono puede ser cualquier radical cicloalquilo. Ejemplos de lo anterior son: grupos ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo o ciciohexilo, cicioheptilo, ciclooctilo, ciclononilo o ciclodecilo. Se prefieren ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo y ciciohexilo. El radical cicloalquenilo con 4 a 30 átomos de carbono puede ser cualquier radical cicloalquenilo. Ejemplos de lo anterior son: grupos ciclobutenilo, ciclopentenilo o ciciohexenilo, cicloheptenilo, ciclooctenilo, ciclononenilo o fe<w«af- A.« . ciclodecenilo. Se prefieren ciclobutenilo, ciclopentenilo o ciciohexenilo. Los ejemplos de radicales alquilo o alquenilo policíclicos incluyen norborano, adamantano o benzvaleno. Asimismo, Ri y R2 pueden ser radicales arilo mono- o policíclicos con 6 a 30 átomos de carbono. Los ejemplos de lo anterior son radicales carbocíclicos, monocíclicos, tales como el grupo fenilo, un radical heterocíclico, monocíclico, tal como los grupos tienilo, furilo, piranilo, pirrolilo, imidazolilo, pirazolilo, piridilo, pirazinilo, pirimidinilo, pirazinilo, tiazolilo, oxazolilo, furazanilo, pirrolinilo, imidazolinilo, pirazolinilo, tiazolinilo, triazolilo, tetrazolilo, así como los isómeros de posición del o de los heteroátomos que pueden incluir estos grupos, un radical que consta de anillos carbocíclicos condensados, tal como el grupo naftilo o el grupo fenantrenilo, un radical que consta de anillos heterocíclicos condensados, tal como benzofuranilo, benzotienilo, benzimidazolilo, benzotiazolilo, nafto[2,3-b]tienilo, tiantrenilo, isobenzofuranilo, cromenilo, xantenilo, fenoxatiinilo, indolizinilo, isoindolilo, 3H-indolilo, indolilo, indazolilo, purinilo, quinolizinilo, ¡soquinolilo, ftalzinilo, naftiridinilo, quinoxalinilo, quinazolinilo, cinolinilo, pteridinilo, carbazolilo, ß-carbolinilo, acridinilo, fenazinilo, fenotiazinilo, fenoxazinilo, indolinilo, isoindolinilo, ¡midazopiridilo, imidazopiridmidinilo o también los sistemas policíclicos condensados que constan de monociclos heterocíclicos, tales como los que se definen anteriormente, como por ejemplo, furo[2,3-b]pirrol o tieno[2,3-b]fu?rano, y en particular los grupos fenilo, furilo, tales como 2-furilo, imidazolilo, como 2-¡midazolilo, piridilo, como 2-piridilo, 3-piridilo, 4-piridilo, pirimidinilo, como pirimid-2-ilo, tiazolilo, como tiazol-2-ilo, tiazolinilo, como tiazolin- 2-ilo, triazolilo, como triazol-2-ilo, tetrazolilo, como tetrazol-2-ilo, benzimidazolilo, como benzimidazol-2-ilo, benzotiazolilo, benzotiazol-2-ilo, purinilo, como purin-7- ilo, o quinolilo, como 4-quinolilo. 5 Los sustituyentes preferentemente presentes de los diversos radicales anteriormente indicados, se pueden seleccionar a partir de los siguientes grupos: halógeno: flúor, cloro, bromo, yodo; amino, alquilamino, dimetilamino o etilamino, dialquilamino, tal 10 como dimetilamino, dietilamino, metiletilamino, en donde cada uno de estos radicales dialquilamino se encuentra eventualmente en forma de óxido; aminoalquilo, tal como aminometilo o aminoetilo; dialquilaminoalquilo, tal como dimetilaminometilo o -etilo; dialquilaminoalcoxilo, tal como dimetilaminoetoxilo; 15 - hidroxilo, grupos carboxilo libres esterificados, tales como alcoxicarbonilo, por ejemplo, metoxicarbonilo o etoxicarbonilo, o convertidos en una sal, por ejemplo, mediante un átomo de sodio o potasio; alquilo con 1 a 8 átomos de carbono, tal como metilo, etilo, 20 propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, butilo terciario, eventualmente sustituido por uno o varios átomo(s) de halógeno, por ejemplo, por flúor, tal como trifluormetilo; oxo, ciano, nitro, formilo, -a&aa>-j?. acilo, tal como acetilo, propionilo, butirilo, benzoilo; aciloxilo, tal como acetoxilo, o un radical de la fórmula: -O-CO- (CH2)nCO2H, en donde n = 1 a 5; alcoxilo, tal como metoxilo, etoxilo, propiloxilo, isopropiloxilo, butiloxilo; tioalquilo, tal como tiometilo, tioetilo, tiopropilo, tioisopropilo, tiobutilo; carbamoílo; alquenilo, tal como vinilo, propenilo; - alquinilo, tal como etinilo, propinilo, y arilo, tal como fenilo, furilo, tienilo. Como ejemplos de estos radicales sustituidos se pueden citar radicales alquilo sustituidos por uno o varios átomo(s) de halógeno, tales como los grupos trifluormetilo, trifluorbutilo, pentafluorpropilo, pentafluorbutilo, pentafluorpentilo, heptafluorbutilo o nonafluorbutilo o 2-cloroetilo. Los compuestos de la fórmula (I) anterior se pueden describir en conjunto con el término "compuestos de tioplatino". De preferencia, los compuestos de la fórmula (I) se obtienen mediante un procedimiento que se caracteriza porque se lleva a cabo de manera en sí conocida una reacción de intercambio de ligandos a partir de un complejo de platino, tal como cisclorodiaminplatino(ll), con el correspondiente xantogenato. Éste es, por ejemplo, un procedimiento que se caracteriza porque se hace reaccionar un compuesto de la fórmula: S C-SMe \ OR en donde: Me significa un metal alcalino o terroalcalino, y R tiene la definición indicada para Ri y R2, con un complejo de platino, tal como cis-diclorodiaminplatino(ll), y se aisla el nuevo complejo de platino obtenido. Los compuestos de la fórmula (I) son adecuados para el tratamiento de diversas enfermedades de cáncer, tales como tumores en los testículos, carcinomas en los ovarios, en la vejiga, de colon-próstata, bronquiales de células pequeñas y no de células pequeñas, carcinomas de las regiones de la cabeza y la garganta, carcinomas de la región del tórax y el abdomen, carcinomas cervicales y de endometrio, sarcomas y melanomas así como leucemias. Se prefiere la terapia del carcinoma bronquial de células pequeñas o del carcinoma colorrectal. La terapia se puede realizar también como terapia simultánea a una radioterapia o antes, o bien, después de una intervención quirúrgica. Los compuestos de la fórmula (I) tienen una buena compatibilidad. El valor L50 es aproximadamente tres veces menor que para el cis-platino conocido en la terapia de tumores. Con una dosificación que tenga buena acción antitumoral, casi no aparecen efectos secundarios. En particular, hasta ahora no se ha observado de esta manera en los compuestos de tioplatino la nefrotoxicidad conocida y temida en el caso de cis-platino. Otra ventaja de los compuestos de conformidad con la invención es que poseen un amplio espectro de acción contra los tumores más diversos y, en especial, actúan también contra tumores que hasta ahora resistían una terapia con compuestos de platino (por ejemplo, cisplatino). El tioplatino es especialmente adecuado para tumores sólidos. Otra ventaja consiste en que los compuestos de conformidad con la invención tiene una mayor eficiencia en un pH ligeramente ácido que en un pH alcalino, ya que muchos tejidos de tumores presentan un medio más bien ácido. Los inventores realizaron investigaciones con bis[O-etilditiocarbonato]platino (II), un complejo de coordinación de platino de conformidad con la fórmula (I) en el que el platino se hace complejo con átomos de azufre. Después de la protonación, se abren de manera reversible dos enlaces de azufre (de modo que se forma un "complejo Aqua"), los cuales pueden iniciar una reticulación de ADN. Después de elevar el pH, los protones se disocian de los átomos de azufre y se vuelve a obtener la molécula inerte. Para lo anterior, se establece la siguiente ecuación de reacción que depende del pH: aáy í . ^ ? «A», En esta ecuación se puede observar que el desplazamiento del pH al intervalo (ligeramente) ácido del "profármaco" conforme a la fórmula (I), produce la formación del compuesto reactivo en sí. Esta ¡dea se confirma en los ejemplos. El medicamento de conformidad con la ¡nvención se puede administrar de diversas maneras, por ejemplo, oral, parenteral, cutáneo, subcutáneo, intravenoso, intramuscular, rectal o ¡ntratumoral. Se prefiere la administración intravenosa o intratumoral, es decir, la administración en los determinados órganos o regiones del cuerpo enfermas. El medicamento se administra a un paciente durante un período a determinar por el médico. El medicamento se puede administrar tanto a seres humanos como a mamíferos. La dosificación del compuesto de conformidad con la invención es determinada por el médico con base en los parámetros específicos del paciente, tales como edad, peso, sexo, gravedad de la enfermedad, etc. De preferencia, la dosificación es de entre 0.001 y 1000 mg/kg de peso corporal. Según el tipo de administración, el medicamento se formula de manera adecuada, por ejemplo, en forma de tabletas simples o en grageas, cápsulas de gelatina dura o blanda, polvos para su reconstitución antes de su empleo, granulados, supositorios, óvulos, preparados para inyección, soluciones de infusión, pomadas, cremas, gels, microesferas, implantes que se preparan conforme a procedimientos galénicos habituales. Los compuestos de la fórmula (I) se pueden formular eventualmente junto con otros ingredientes activos y con excipientes habituales en composiciones farmacéuticas, por ejemplo, según el preparado por obtener, talco, goma arábiga, lactosa, almidón, estearato de magnesio, mantequilla de cacao, vehículos acuosos y no acuosos, cuerpos grasos de origen animal o vegetal, derivados de parafina, glicoles (en particular polietilenglicol), diversos 5 plastificantes, agentes de dispersión o emulsionantes, conservadores. Para la obtención de preparados líquidos, se pueden utilizar aditivos tales como solución de cloruro de sodio, etanol, sorbita, glicerina, aceite de oliva, aceite de almendra, propilenglicol o etilenglicol. De preferencia, se preparan soluciones para infusión o inyección. Se 10 trata de preferencia de soluciones o suspensiones acuosas, en donde es posible prepararlas antes de su empleo, por ejemplo, a partir de preparados liofilizados que contienen el ingrediente activo solo o junto con un vehículo, tal como manita, lactosa, glucosa, albúmina y similares. Las soluciones listas para usarse se esterilizan y, eventualmente, se mezclan con auxiliares, tales como 15 conservadores, estabilizantes, emulsionantes, solubilizantes, tampones y/o sales para regular la presión osmótica. La esterilización se puede efectuar por filtración estéril a través de filtros con un tamaño de poro pequeño, después de lo cual la composición se puede eventualmente liofilizar. También se pueden agregar pequeñas cantidades de antibióticos, con el fin de ayudar a la conservación de la 2 o esterilidad. Resulta ventajosa la preparación del medicamento de conformidad con la ¡nvención en una forma de unidad de dosificación para la administración a ^¿&¡¡&&ü¿ #& mamíferos que requieren un tratamiento anti-cáncer. La ¡nvención se refiere también a medicamentos, o bien, composiciones farmacéuticas que contienen una cantidad terapéuticamente efectiva del ingrediente activo (compuesto de la fórmula (I) de conformidad con la invención) junto con vehículos farmacéuticamente compatibles, orgánicos o inorgánicos, inertes, sólidos o líquidos, o bien, diluyentes adecuados para la administración pretendida, y que no tengan una interacción desventajosa con el ingrediente activo. La invención se refiere también a un procedimiento para la producción de una composición farmacéutica, caracterizado porque se mezcla el compuesto conforme a la fórmula (I) con un vehículo farmacéuticamente compatible. De entre los medicamentos de conformidad con la invención se pueden citar particularmente los compuestos descritos en la parte experimental y, en especial, los compuestos en los que en la fórmula (I) anterior, R1 y/o R2, los cuales pueden ser idénticos o diferentes, son un grupo metilo, etilo, propilo o isopropilo. Los medicamentos, o bien, las composiciones farmacéuticas de conformidad con la ¡nvención incluyen como ingrediente activo cuando menos un ingrediente activo como se describe anteriormente. Eventualmente, en la composición se pueden incluir otros ingredientes activos farmacéuticos, tales como inmunosupresivos, por ejemplo, ciclosporina, rapamicina, 15- desoxispergualin, OKT3, azatioprin; citoquinas (por ejemplo, TNF), interferon, etc. Asimismo, la composición de conformidad con la invención puede contener adicionalmente un esteroide u otros agentes citoestáticos (por ejemplo, cisplatino, metotrexato, aminopterina, dacarbazina, compuestos de nitrosourea, fluoruracilo, 5 bleomicina, daunomicina, daunorubicina, doxorubicina, mitramicina, mitromicina C, etc.). La invención se ilustra más detalladamente con la ayuda de las figuras. Figura 1 : regresión, o bien, crecimiento de tumores después del ío tratamiento de un carcinoma bronquial de células pequeñas con un compuestos de conformidad con la invención, o bien, con un control. Figura 2: acción antitumoral de un compuesto de conformidad con la invención sobre un carcinoma de colon humano en ratones. Figura 3: acción dependiente del pH de los agentes citoestáticos. 15 Figura 4: efecto anti-tumoral de tioplatino en trasplantes de xenón humano. Figura 5: histopatología del riñon e intestino delgado después del tratamiento con tioplatino y cis-platino. La invención se ilustra más detalladamente con la ayuda de los 20 siguientes ejemplos.

EJEMPLO 1 Procedimiento para la preparación de complejos de dietilxantoqenato- platino(ll) (bis-IO-etilditiocarbonatol-platino (II)) 5 1 mmol de cis-diclorodiam¡nplatino(ll) se disolvió en 600 ml de agua destilada y, bajo agitación, se agregaron 10 mmoles de metilxantogenato de potasio. Se agita durante seis horas a temperatura ambiente. El precipitado que se forma se filtra, se lava tres veces con agua destilada y se seca al vacío. Después de la recristalización de acetona caliente, se obtiene el producto como 10 cristales amarillos con una pureza mayor al 98%, con un rendimiento de 68%.

EJEMPLO 2 15 Se prepara la siguiente composición farmacéutica: Se prepararon suspensiones para inyección con la siguiente formulación: Compuesto del Ejemplo 1 , 1g; Excipiente (solución acuosa de dispersión): bencilalcohol, 20 polietilenglicol 900, carboximetilcelulosa (sal sódica), cloruro de sodio, agua para '~£¡ j¡te& ¡j^ j¡^^^^^^^^^^^ ?^^^ y un preparadlo de inyección para una ampolleta de 1 ml. De manera preferida, PEG se agregó hasta una solución al 5%, con el fin de estabilizar así la solución.

EJEMPLO 3 Ensavo farmacológico con el compuesto conforme al Ejemplo 1 a) Acción antitumoral sobre un carcinoma bronquial de células pequeñas humano en ratones Se implantaron debajo de la piel células de carcinoma bronquial (SCLC) en ratones Nu/Nu de seis semanas, raza NMRI (5x106 células en 0.1 ml de solución de sal de cocina). Después de dos semanas, los tumores presentaban un tamaño de aproximadamente 8 mm. Posteriormente se trataron respectivamente cinco animales ya sea con 0.2 ml de solución de sal de cocina/0.1 %> de BSA/0.1 % de acetona (grupo de control) o con 10 mg/kg del compuesto de conformidad con al Ejemplo 1 en solución de sal de cocina/1 % de BSA/1 % de acetona (grupo de tratamiento) por vía intravenosa. El crecimiento de los tumores se revisó diariamente. Los valores se muestran en la Figura 1 adjunta. Se observa claramente que en los ratones tratados con el compuesto de conformidad con el Ejemplo 1 (grupo de tratamiento) se redujo el tamaño de los tumores, mientras que en los ratones del grupo de control se incrementó continuamente el crecimiento de los mismos. ^¿_ ^gg^^jáy b) Acción antitumoral de un compuesto de conformidad con el Ejemplo 1 en un carcinoma de colon humano en ratones Se implantaron debajo de la piel células de carcinoma de colon (SW707) en ratones Nu/Nu de seis semanas, raza NMRI (5x108 células en solución de sal de cocina). Después de diez días, cuando los tumores presentaban un tamaño de aproximadamente 10 mm, se trataron respectivamente seis animales ya sea con 0.2 ml de solución de sal de cocina/1 % de BSA/1 % de acetona (grupo de control), con 7.5 mg/kg del compuesto de conformidad con al Ejemplo 1 en solución de sal de cocina/1 % de BSA/1% de acetona por vía intravenosa (grupo de tratamiento I) o con 10 mg/kg de cisplatino por vía intravenosa (grupo de tratamiento II). El crecimiento de los tumores se revisó diariamente y se inscribió en la gráfica mostrada en la Figura 2. En la Figura 2 se puede observar que se detuvo el crecimiento de los tumores en el grupo de tratamiento I, mientras que en el grupo de control y en el grupo de tratamiento II, se registró un crecimiento continuo de los tumores. De lo anterior se desprende que los compuestos de conformidad con la invención son mucho mejores que cisplatino y que desarrollan una actividad incluso en el caso de tumores que hasta ahora no reaccionaban con compuestos de platino (cisplatino). Por ello, los compuestos de tioplatino poseen un espectro de actividad más amplio que los agentes citoestáticos de hasta ahora.

EJEMPLO 4 Dependencia del pH de la efectividad de los agentes citoestáticos Se plantaron células Hela en placas Linbro (105) y después de seis horas se incubaron 24 horas a 37°C en una atmósfera de 5% de CO2, con diversas concentraciones de cisplatino o un compuesto de conformidad con el Ejemplo 1 en medio basal según Eagle, el cual contenía ya sea 2.2 g (pH 7.4) ó 0.85 g (pH 6.8) de bicarbonato de sodio y 10% de suero fetal de ternera. Se determinó la cantidad de células vivas después de coloración vital con azul tripan en la cámara de conteo de Neubauer. El resultado se puede observar en la Figura 3. Sorprendentemente, el compuesto de conformidad con el Ejemplo 1 presenta un máximo de acción en el intervalo ligeramente ácido, mientras que el agente citoestático habitual cisplatino, actúa mejor en el intervalo alcalino. Puesto que los tejidos de tumores presentan a menudo un pH ligeramente ácido, es claro que el compuesto de conformidad con el Ejemplo 1 , gracias a esta propiedad, presenta una mayor acción que los agentes citoestáticos habituales.

.-«M« ...A» . A. ^- EJEMPLO 5 Dependencia del pH de la incorporación del platino Se colocaron 107 células Hela en cajas Petri y cuatro horas después se alimentaron las células con un medio que contenía, ya sea, 2.2 g/l (pH 7.4) ó 0.85 g/l (pH 6.8) de NaHCO3. Después de ajustar a una atmósfera de 5% de CO2, se ajustó el cisplatino o el tioplatino a respectivamente una concentración final de 33 µM. Cuatro horas después de la adición de platino, se lavó respectivamente una caja de cada uno de los grupos de tratamiento, 5 veces con 50 ml de PBS frío. Las células se desprendieron de las cajas y el contenido de Pt se determinó con el método de activación de neutrones. Para ello, después del secado por congelamiento, las muestras y el estándar de platino se irradiaron 30 minutos con neutrones (5 x 1012 n cm"2 seg"1). Una semana después se determinó la radiación ? de 158.4 keV y 208.2 keV y se determinó la concentración de platino con la ayuda de estándares. El límite de la detección fue de 2 ng. En otras cajas, 16 horas después de la incubación se aisló el ADN por extracción con fenol/cloroformo, seguido de una precipitación de etanol. El contenido de platino de respectivamente 100 µg se determinó como se describe anteriormente con el método de activación de neutrones. ^^^ ?^^á^jf Tratamiento CCoonntteenniiddoo dde Platino Contenido de Platino sin tratamiento, pH 6.8 < 1 < 10 sin tratamiento, pH 7.4 < 1 < 10 CisPt, pH 6.8 140 14.6 CisPt, pH 7.4 156 140 ThioPt, pH 6.8 4780 13870 ThioPt, pH 7.4 3680 1760 Los números anteriores demuestran que después de la incubación con tioplatino, con un pH ligeramente ácido de 6.8, se encontraba ligada al ADN una cantidad aproximadamente 8 veces mayor de platino que en la incubación a pH 7.4. Con el cis-platino se observó el efecto contrario, es decir, se enlazó 10 veces más ADN a pH 7.4 al cis-platino que a pH 6.8. La incorporación de platino por parte de las células fue independiente del pH. Sin embargo, la incorporación total fue 30 a 100 veces más elevada al utilizar tioplatino que al utilizar cisplatino.

EJEMPLO ß Dependencia de la citotoxicidad del pH Se dispusieron células en cajas Linbro y cuatro horas después se alimentaron las células con un medio que contenía, ya sea, 2.2 g/l (pH 7.4) ó 0.85 g/l (pH 6.8) de NaHCO3. Después de ajustar a una atmósfera de 5% de CO2, se tAnA=L^atfeüa., agregaron cis-platino o tioplatino a concentraciones respectivas de entre 5 y 150 µM. La cantidad de células vivas se determinó 24 horas después y se calcularon los valores IC50 e IC99 a partir de las curvas de respuesta de las dosis (en todos los casos, desviaciones estándar por debajo de 10%).

IC50 pH IC99 pH IC50 pH IC99 pH Tipo de 6.8/7.4 6.8/7.4 6.8/7.4 6.8/7.4 Célula célula cisplatino cisplatino tioplatino tioplatino (µM) (µM) (µM) (µM) cáncer HeLa cervical 86/25 111/54 5/51 16.3/>55 humano cáncer pulmonar H10 humano de 72/42 > 150/90 5.1/15.4 19.2/30.8 células pequeñas cáncer SW70 colorrectal 9.6/<4.8 90/38.4 3.7/13.2 7.5/26.4 7 humano cáncer renal CV1 >150/>150 >150/>150 3.9/23 13.2/106 de ratones cáncer de Capa páncreas 143/139 >150/>150 17.3/50.6 40.9/99 n2 humano cáncer de Dan- páncreas 45/36 78/72 15.4/52.8 20.9/64.5 G humano linfoma de Jurkat células T 52.5/54 120/126 6.8/21.1 13.6/132 t humano sarcoma de S180 63/24 >150/114 16.5/63.8 37.5/>110 ratones En la tabla se observa que la citotoxicidad para casi todas las células para tioplatino a pH 6.8 fue mucho mejor que a pH 7.4, mientras que en el caso de cisplatino se obtuvieron resultados opuestos, es decir, una mejor acción a pH 7.4. En todos los casos, tioplatino tuvo un IC50 2-8 veces menor a 6.8 que a 7.4. En el caso de cis-platino, a pH 6.8 el IC50 fue peor que a pH 7.4 o no se pudo detectar ningún efecto del pH.

EJEMPLO 7 Efecto anti-tumoral de tioplatino sobre xenotransplantes humanos Se remite a la Figura 4. Se inyectaron por vía subcutánea en ratones Nu/Nu-Swiss células H10 humanas de un carcinoma pulmonar de células pequeñas (A) o células SW707 de un carcinoma colorrectal (B) y doce días después, cuando los tumores presentaban un diámetro de 8-10 mm, cinco ratones recibieron una sola inyección i.p. de, ya sea, Tween 80 al 10% (estrellitas, control), 10 mg/kg de cisplatino (triángulos) ó 10 mg/kg de tioplatino disueltos a una concentración de 1 mg/ml en Tween 80 al 10% (cuadrados). Los tamaños de los tumores se determinaron en dos direcciones y se calculó el crecimiento relativo de los mismos. Los promedios se muestran en la Figura 4. (C): Pesos corporales promedio del grupo con carcinoma pulmonar de células pequeñas. Las desviaciones estándar fueron menores a 3%. y^y. y. . *~S & ákíi,JílA3á*> i En la Figura 4 se puede observar que cis-platino presentó actividad en células H10, mientras que en el caso del carcinoma colorrectal (SW707), incluso con una dosis de 10 mg/kg, no se presentó ninguna acción. Con la misma dosis, tioplatino presentó actividad en los dos tipos de cáncer. El tamaño de tumor promedio del grupo tratado con tioplatino fue menor que el del grupo tratado con cis-platino. En el caso del cáncer pulmonar de células pequeñas, con tioplatino se redujo el tamaño de los tumores a 23% del grupo de control (es decir, una disminución de aproximadamente 1/4 parte del control), mientras que con cisplatino sólo se pudo lograr una disminución de la mitad del tamaño de los tumores en comparación con el control (Figura 4A). En el caso del cáncer colorrectal, cisplatino no mostró ningún efecto, mientras que el crecimiento de los tumores se pudo evitar con tioplatino (Figura 4B). La pérdida de peso es un cálculo burdo de los efectos secundarios tóxicos. Mientras que los animales tratados con cis-platino tuvieron una pérdida de 12% y 13% en los días 3 y 6 después del tratamiento, en el grupo de tioplatino no se observó ninguna pérdida de peso (Figura 4C).

EJEMPLO 8 Investigación de la toxicidad sobre ríñones e intestino delgado Se remite a la Figura 5. Ratones Swiss recibieron i.p. ya sea 15 mg/kg de cisplatino (A, C) ó 20 mg/kg de tioplatino (B, D). Cuatro días después se realizaron cortes histológicos del intestino delgado (A, B) y de los ríñones (C, D) y se coloraron con hematoxilina y eosina. En el caso de los animales tratados con cis-platino, los ríñones presentan una degeneración grave y una vacuolización de los tubillos (Figura 5C). La estructura del intestino delgado se encuentra destruida en la mayor parte y en la Lamina propra (Figura 5A) se pueden observar grandes infiltraciones. Contrario a lo anterior, el tratamiento con una dosis elevada de 10 mg/kg de tioplatino, no afecta la estructura de los ríñones (Figura 5D) ni del intestino delgado (5B).

Claims (1)

1. NOVEDAD DE LA INVENCIÓN REIVINDICACIONES 1.- Una composición farmacéutica, caracterizada porque comprende 5 contenido de cuando menos un compuesto de la fórmula general (I): en donde Ri y R2, respectivamente uno independiente del otro, significan un radical alquilo de cadena recta o ramificada con 1 a 30 átomos de carbono, un 10 radical alquenilo de cadena recta o ramificada con 2 a 30 átomos de carbono, un radical alquilo mono- o policíclico con 3 a 30 átomos de carbono, un radical alquenilo mono- o policíclico con 4 a 30 átomos de carbono, o un radical aromático mono- o policíclico con 6 a 30 átomos de carbono, en donde estos radicales pueden estar sustituidos eventualmente por uno o varios sustituyentes. 15 2.- La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizada además porque en el compuesto de la fórmula (I), Ri y R2 significan respectivamente un radical alquilo con 1 a 14 átomos de carbono, de cadena recta, o un radical cicloalquilo con 3 a 14 átomos de carbono. 3.- La composición farmacéutica de conformidad con la 20 reivindicación 1 ó 2, caracterizada además porque en el compuesto de la fórmula JaJaa«a¿-^e-- A . A.yí,.y . ., -. 3,.,-t, . - .M^.y y^Ay .? »t > — ««ÉsAn-SS» «M . (I), R-i y R2 significan respectivamente CH3CH2. 4.- La composición farmacéutica conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizada además porque el compuesto de la fórmula (I) es un complejo de dimetilxantogenat-platino (II) o un complejo dietilxantogenat- platino (II). 5.- La composición farmacéutica de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizada además porque incluye adicionalmente un compuesto inmunosupresivo seleccionado a partir de ciclosporina, rapamicina, 15-desoxispergualina, OKT3 y azatioprina. 6.- La composición farmacéutica de conformidad con cualquier de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizada además porque incluye adicionalmente citoquinas, interferona u otros agentes citoestáticos. 1.- La composición farmacéutica de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, caracterizada además porque se prepara en una forma de unidad de dosificación para la administración a un mamífero que requiere un tratamiento con un agente anti-cáncer. 8.- La composición farmacéutica de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, caracterizada además porque incluye además un vehículo o un diluyente inerte farmacéuticamente compatible. 9.- El uso de una composición farmacéutica como la que se reclama en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8 para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de cáncer en mamíferos, incluyendo seres humanos. 10.- El uso de conformidad con la reivindicación 9, en donde el cáncer es el carcinoma bronquial de células pequeñas o carcinoma colorrectal. 11.- Un procedimiento para la preparación de un medicamento de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, caracterizado porque el compuesto conforme a la fórmula (I) se mezcla con un vehículo o diluyente inerte farmacéuticamente compatible.