ES2066237T3 - Procedimiento para producir gamma-interferon humano recombinante sin cisteina carente de metionina en el extremo n-terminal. - Google Patents
Procedimiento para producir gamma-interferon humano recombinante sin cisteina carente de metionina en el extremo n-terminal.Info
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Abstract
SE PRESENTA UN METODO PARA PRODUCIR UNA GAMMA-INTERFERONA HUMANA RECOMBINANTE SIN CISTEINA Y LIBRE DE METIONINA EN EL TERMINAL -N QUE SE USA PARA PREPARAR GAMMA-INTERFERONA MUY APRECIADA COMO AGENTE TERAPEUTICO. EL METODO SUMINISTRA UNA PRODUCCION QUE EXCEDE 1.10 U/1 POR CULTIVO POR LO CUAL NO ES NECESARIO APLICAR ANTICUERPOS MONOCLONALES PARA PURIFICARLO. LA GAMMA-INTERFERONA ASI OBTENIDA EN LA CUAL LA METIONINA EN SU TERMINAL -N HA SIDO DESCARGADA INTRACELULARMENTE, TIENE UNA PUREZA POR ENCIMA DEL 99.6%, MANTENIENDO SU ACTIVIDAD BIOLOGICA DESPUES DE LA LIOFILIZACION Y ES SOLUBLE EN SOLUCIONES ACUOSAS. EL METODO SE REALIZA EXPRESANDO EL PLASMIDO PIBM EN UNA CADENA "ESCHERICHIA COLI" LE 392 QUE HA SIDO REGISTRADO EN EL "CENTRO DE DEPOSITO NACIONAL" PARA MICROORGANISMOS INDUSTRIALES Y CULTIVOS CELULARES BAJO EL N RMENTADOR A TEMPERATURAS ENTRE 36 Y 38 EACION, DESPUES DE LO CUAL EL PRODUCTO ASI OBTENIDO SE PURIFICA, RENATURALIZA Y LEVIGA MIENTRAS SE SEPARAN LOS SOLVENTES Y MEZCLAN QUE LO ACOMPAÑAN.
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