EP0073513A1 - Verfahren zur Durchführung analytischer Bestimmungen und hierfür geeignetes Mittel - Google Patents

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EP0073513A1
EP0073513A1 EP82107972A EP82107972A EP0073513A1 EP 0073513 A1 EP0073513 A1 EP 0073513A1 EP 82107972 A EP82107972 A EP 82107972A EP 82107972 A EP82107972 A EP 82107972A EP 0073513 A1 EP0073513 A1 EP 0073513A1
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reagent
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transport
sample
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Sigmar Dr. Klose
Fritz Dr. Stähler
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Roche Diagnostics GmbH
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Definitions

  • the invention relates to a method for carrying out analytical determinations by mixing and incubating a sample solution with at least one reagent and measurement of a parameter in the reaction mixture and to a means suitable for this.
  • the reagent sample solution formed in this way moves on until it finally reaches a measuring zone, where the change in color intensity is measured optically.
  • the measuring zone is an integral part of the reagent carrier.
  • test execution techniques are advantageous in that they allow very simple handling, since no reagent solutions have to be prepared, since there is no need to pipette reagent, there are no stability problems with the reagents, which are increasingly unstable in solution, etc.
  • the invention is based on the object of maintaining these advantages and at the same time eliminating the disadvantages described.
  • the new process combines the advantages of the described reagent carrier technology with the accuracy and accuracy of conventional wet chemical processes.
  • sample solution to be analyzed (generally diluted with water) is placed in an input point from which it flows through one or more carriers of dry reagent on the way to a measuring point, the reagents being dissolved in whole or in part.
  • the flow occurs under strict control of the flow velocities and thus the flow times, by superimposing the driving interface force on a second force that can accelerate, brake or stop the flow.
  • the liquid At the end of the flow path, the liquid then reaches a measuring point, which is not identical to the reagent carrier, in which a reaction signal, preferably the optical transmission, is measured.
  • Possible reagents are those that can be completely or partially detached from the carrier material, eg. B. buffer substances, salts, enzymes or their substrates, on the other hand those which are adsorptively or covalently bound to the support material and to which a "solid phase reaction" can then take place, for example ion exchangers, carrier-bound biologically active substances such as enzymes, antibodies or antigens and the like .
  • the driving forces (K 1 ) in each case being interface or capillary forces.
  • K 2 is a centrifugal force
  • This analysis system uses interchangeable insert elements for centrifugal analysis rotors, which are made, for example, from a molded plastic body made of polystyrene, plexiglass, Polyurethane u. ⁇ .
  • reagent carrier fields which consist of an absorbent carrier material that is impregnated with the reagent, or other small reagent-filled cavities (e.g. a surface structure in the plastic body), which are inserted into the plastic body, and a sealing film, so on a rotor inserted in a centrifuge that the liquid moving capillary force can be controlled by the centrifugal force. For this it is necessary that different speeds and thus centrifugal forces can be set.
  • FIGS. 1a and 1b of the accompanying drawing show an insert element suitable for the invention in plan view, Fig. 1b in side view in section.
  • Fig. 2 shows schematically how the insert element of Fig. 1 on a suitable centrifuge rotor, as z. B. is described in DE-OS 3044372, is applied by fasteners, not shown here.
  • a sample application chamber (31) is provided in a molded plastic body, which is connected to various reagent fields I to VII (32).
  • Each reagent field consists of a piece of absorbent carrier impregnated with a specific reagent, such as. B. paper or fleece.
  • (33) and (33a) are mixing valves I and II, (34) denotes the measuring point (cuvette).
  • Fig. 1b shows the insert element of Fig. 1a in side view. (35) denotes the plastic base body, (36) the sealing foil is covered by the sample application chamber, reagent field mixing valves and measuring point.
  • the sample is placed in the sample application chamber (31).
  • a specific speed U1 is then set which is suitable for bringing the sample to the reagent field I (32).
  • the capillary force absorbs the solution, i.e. H. the solution is transported over the reagent field (32).
  • the centrifugal force Z1 is smaller than the capillary force K1
  • the solution remains in the field (32), provided the absorption volume of the field is greater than the volume of the sample.
  • the residence time of the solution in R I is to be precisely determined.
  • the centrifugal force is increased to Z2 so that Z2> K1, the solution enriched with the reagent on R I leaves this field and comes into contact with the reagent field R II.
  • the process is repeated here.
  • the solution is distributed over R II, i. H. transported on.
  • the conditions described above apply analogously.
  • the process can be repeated any number of times, in which case reagent fields I to IV are run through.
  • the insert elements can be designed differently and also have more or fewer reagent fields.
  • the forces K n and Z are practically freely selectable, which can be achieved in a technically very simple manner, in particular for the latter by the stepless adjustment of Z.
  • the advantages of carrying out analysis methods are that the time required for this is kept as short as possible. Therefore, the residence time of the solution on the reagent fields should be as short as possible.
  • the mixing valve (33) has a boundary wall which is closed in the direction of the centrifugal force.
  • a surface-active chamber arranged obliquely downward against the direction of flow from the test application chamber to the measuring point, e.g. B. capillary arranged, which bends at its lower end and continues to the reagent field V.
  • the centrifugal force Z3 is greater than the capillary force in the bottom capillary K3, the liquid is held on the boundary wall.
  • the service life in the mixing valve (33) can again be freely selected by setting the condition Z M > K M.
  • the condition for the transport is therefore exactly the opposite of the conditions described above.
  • the mixing valve (33a) is helpful to find a homogeneous solution into the cuvette (34).
  • the mixing is a complex process which, for. B. is caused by strong acceleration and deceleration of the centrifuge or the flow of air through the solution. This is avoided according to the invention with technically simple means.
  • K 2 is a compressive force
  • FIG. 3 such an element is shown in supervision, in Fig. 4 in side view schematically.
  • the made of a suitable material such as. B.
  • Plastic existing molded body (8) has reagent carrier fields (5, 6, 7) - which are inserted into the plastic body. These reagent carrier fields are covered by an elastic sealing film (11).
  • a sample application chamber (9) contains an absorbent, inert, compressible material which, for example, can hold 15 pl of liquid in the unloaded state and retains, for example, 2 pl of liquid in the compressed state.
  • a bulge in the body (8) serves as a measuring point or cuvette (21).
  • the body (8) also has an overflow chamber (10) and a vent hole (12).
  • Valve slots (1, 2, 3, 4) are used to hold valve stamps with which the individual reagent carrier fields can be separated from each other.
  • pressure stamps 13, 14, 15, 16 are provided, the base area of which corresponds exactly to the area of the respective reagent carrier surface and which serve to compress filled reagent fields (FIG. 5).
  • the stamp (14) is pressed onto the field (5) so that the liquid has to leave this field and is transported into the field (6) via the capillary suction effect.
  • the valve plunger (18) is pressed down, so that the contact to field (5) is interrupted. Again, the time for the removal or dissolution of the reagent can be freely selected in field (6) (which in turn is generally a process lasting seconds).
  • valve valve (19) has been lifted off, if appropriate, in an analogous manner by pressing valve stamp (18) and pressing stamp (15). If necessary, the mixing process between field (6) and field (7) can be repeated in analogy to the manner described using valve stamp (20).
  • the resulting solution is then pressed into the cuvette (21) by pressing the valve stamp (19) and the stamp (15).
  • the change in extinction is measured in a suitable manner in a conventional method for a sufficiently long time.
  • the concentration of the substance to be analyzed can also be calculated from this signal change using customary methods.
  • the measures available for carrying out the change of the 1st or 2nd force required for the method are primarily to be seen in the speed changes for the centrifugal force, and in the movement of pressure stamps for the pressure force.
  • the interfacial force can also be regulated or changed by using surface-active agents.
  • surface active The polyoxyethylene derivatives are preferred, but other nonionic detergents and anionic detergents, for example bile acid derivatives, or cationic detergents or mixtures thereof can also be used. Examples of analyzes which can be carried out according to the invention are those described in DE-OS P 30 44 385.
  • the method is particularly suitable for the determination of glucose, bilirubin, creatinine, albumin, protein, iron, hemoglobin, urea, uric acid, triglycerides, cholesterol, chloride, calcium, phosphate, 1-GT, alkaline phosphates, GOT, GPT, lactate dehydrogenase, lipase , Amylase, creatine kinase, thyroid hormones, acid phosphatase, drugs, cancer indicators and coagulation factors, whereby in each case known reagents can be used for these determinations.
  • Human serum samples were 1: 200 with bidist. Diluted water. 60 ⁇ l of this diluted solution were added to the sample application chamber (1).
  • Alkaline phosphatase was according to the insert element. 1 and 2 determined.
  • a human serum sample was 1:10 with bidist. Diluted water. 60 ⁇ l of this diluted solution was added to the sample application chamber (1).
  • the recorded dependencies of the extinctions on time were evaluated using one of the usual methods in which the slope of the straight line is a measure of the activity of the enzyme to be determined.
  • the unknown activities of alkaline phosphatase in the sample were determined after calibration of the method with a standard.
  • the correlation with a comparison method which is based on one of the known manual techniques, is good, as can be seen from FIG. 7.
  • Serum samples were 1:10 with bidist. Diluted water. 60 ⁇ l of this diluted solution were added to the sample application chamber (1).
  • a human serum sample was 1:25 with bidist. Diluted water. 60 ⁇ l of this diluted solution were added to the sample application chamber (1).
  • a human serum sample was 1: 200 with bidist. Diluted water. 60 ⁇ l of this diluted solution were added to the sample application chamber (1).
  • Reagent carrier papers with a size of 6 x 6 x 0.3 mm are produced as follows: 10 .mu.l of the reagent solutions, which contain a quarter of the amount of substance as the different papers of the example in Example 1, are placed on a paper of the specified size. The solutions are completely absorbed; then the solvent water is removed from the papers by lyophilization.
  • the sample is 1: 200 with bidist. Diluted water. 15 ⁇ l of this diluted solution are placed in the application chamber (9). Then the solution in the above Brought to Sen first reagent carrier (5). Use time: 10 sec. Then the solution from (5) is brought (6) in the manner already described. Residence time: 10 sec. In an analogous manner, the solution is placed on the reagent carrier 3 (7). Residence time: 5 sec. From there, the solution is brought into the cuvette (21) by slowly lowering the plunger (16). In it, the absorbance at 500 nm is monitored in a known manner as a function of time. The course of this curve can be used to determine the glucose concentration in unknown samples using the known "fixed-time-kinetic" method after calibration with a standard.
  • Reagent carrier papers with the size 6 x 6 x 0.3 mm are produced as follows: 10 ⁇ l of the reagent solutions, which contain exactly a quarter of the amount of substance as the different papers of Example 2, are placed on a paper of the specified size. The solutions are completely absorbed; then the solvent water is removed from the papers by lyophilization.
  • the two papers are placed in the same order as in Example 2 on the first two positions of the analysis element of FIG. 3.
  • a paper that does not contain any reagent is placed in the third position.
  • the sample this diluted solution are placed in the order chamber (9). Then the solution is brought onto the first reagent carrier (5) in the manner described. Residence time: 10 seconds. The solution from (5) is then brought to (6) in the manner already described. Residence time: 10 sec. The solution is applied to the blanket (7) in an analogous manner. Residence time: 5 sec. From there, the solution is brought into the cuvette (21) by slowly lowering the plunger (16). In it, the absorbance at 410 nm is tracked as a function of time. The activity of the alkaline phosphatase in unknown samples can be determined from the course of the recorded straight line using known kinetic determination methods after calibration with a standard.
  • Reagent carrier papers with a size of 6 x 6 x 0.3 mm are produced as follows: 10 .mu.l of the reagent solutions, which contain exactly a quarter of the amount of substance as the different papers of Example 4, were placed on a paper of the specified size. The solutions are completely absorbed; then the solvent water was removed from the papers by lyophilization.
  • the two papers were placed in the same order as in Example 4 on the first two positions of the analysis element of FIG. 3.
  • the sample was 1:25 with bidist. Diluted water. 15 pl of this diluted solution were placed in the application chamber (9). Then the solution is brought onto the first reagent carrier (5) in the manner described. Residence time: 10 sec. The solution from (5) was then brought to (6) in the manner already described. Residence time: 10 sec. The solution was moved to the field (7) in an analogous manner. Residence time: 5 sec. From there, the solution is brought into the cuvette (21) by slowly lowering the plunger (16). In it, the absorbance at 340 nm is monitored in a known manner as a function of time. After a curved initial phase, this function was linear. The activity of creatine kinase in an unknown sample is determined from this fraction using known evaluation methods for kinetic methods after calibration with a standard.

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Abstract

Zur Durchführung analytischer Bestimmungen durch Mischen und Inkubieren einer Probelösung mit wenigstens einem Reagenz und Messung eines Parameters im Reaktionsgemisch, wobei die Probelösung von eine Aufgabestellung zu einer Meßstelle transportiert wird, transportiert man die Probelösung zuerst zu einem löslichen Trockenreagenz unter wenigstens teilweiser Auflösung des letzteren und transportiert dann zur Meßstelle weiter und läßt den Transport durch zwei verschiedene Krafte erfolgen, wobei er wenigstens auf einem Teil der Transportstrecke durcn eine auf die Lösung wirkende Grenzflächenkraft als erste Kraft bewirkt wird, der zur Regelung der Transportgeschwindigkeit oder Transportrichtung als zweite Kraft eine Zentrifugalkraft oder/und Druckkraft überlagert wird, die je nachdem, welcher Transportzustand der Flüssigkeit eingestellt werden soll, größer oder kleiner als die erste Kraft gemacht wird.

Description

  • Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Durchführung analytischer Bestimmungen durch Mischen und Inkubieren einer Probelösung mit wenigstens einem Reagenz und Messung eines Parameters im Reaktionsgemisch und ein hierfür geeignetes Mittel.
  • Die Verwendung von Trockenreagentien auf geeigneten inerten Trägermaterialien ist ein seit langem bekanntes Hilfsmittel bei der Durchführung chem. Reaktionen, die zum qualitativen oder quantitativen Nachweis einer zu analysierenden Substanz herangezogen werden können. Als Beispiele seien genannt: DE-AS 2332 760, DE-OS 2717 817, EPA 0014 797, DE-OS 2752 352, DE-OS 2927 345. Diesen Verfahren ist gemeinsam, daß die in Lösung befindliche Probe auf den Reagenzträger gegeben wird. Von seinem Auftragsort diffundiert die Probe dann unter Einwirkung von Kapillarkräften in den Träger.
  • Auf dem Weg werden Reagentien ganz oder teilweise aufgelöst, die auf diese Weise gebildete Reagenz-Probelösung wandert weiter, bis sie schließlich zu einer Meßzone gelangt, wo die Farbintensitätsänderung optisch vermessen wird. Die Meßzone ist jeweils integraler Bestandteil des Reagenzträgers.
  • Wie nun z. B. aus der DE-OS 2927 345 zu entnehmen ist, werfen Verfahren, bei denen die Diffusionsprozesse ungesteuert ablaufen und bei denen die Remission von Lichtstrahlen direkt auf dem Reagenzträger, der im allgemeinen aus einer opaken Schicht besteht, gemessen wird, beträchtliche Probleme auf. Fasermaterialien zeigen Unregelmäßigkeiten, die im Mikrobereich zu unterschiedlichen Ausbreitungsgeschwindigkeiten der Flüssigkeiten führen, es entstehen Zonen mit höheren oder niedrigeren Reagenzkonzentrationen als sie optimal sind. So wird z. B. in der EPA 0014 797 erwähnt, daß "Lufttaschen" in den Trägermaterialien zu zusätzlichen Schwierigkeiten führen und die Schlußfolgerung gezogen, daß Flüssigkeitsströme, die durch Kapillarkräfte erzeugt werden, "kontrolliert" werden müssen.
  • Der zweite wesentliche Nachteil liegt in der Remissionsmessung selbst:
    • im Gegensatz zur Durchlicht-Fotometrie gibt es hier keine lineare Beziehung zwischen der Konzentration einer lichtabsorbierenden Substanz und der Extinktion. Man erhält mehr oder weniger stark gekrümmte Eichkurven, in die die Oberflächeneigenschaften stark mit eingehen. Darin ist ein grundsätzlicher Nachteil zu sehen, der die Reproduzierbarkeit eines analytischen Auswerteverfahrens stark negativ beeinflußt. Außerdem können damit Tests, die auf der Messung von sich bildenden oder abnehmenden Trübungen (turbidimetrische Verfahren) beruhen, grundsätzlich nicht durchgeführt werden. Diese stellen aber bei immunologischen Methoden und auch bei Enzymbestimmungen wie der Lipase-Bestimmung eine weit verbreitete zuverlässige Technik dar.
  • Ein weiterer Nachteil solcher Analysenelemente ist darin zu sehen, daß unterschiedliche Reaktionsphasen bei mehrstufiger Reaktion auf getrennten Schichten der Analysenelemente nicht gezielt angesteuert werden können. Das heißt, die Startzeitpunkte von Folgereaktionen hängen von der nicht konstanten Diffusionsgeschwindigkeit der Lösung ab.
  • Auch in der schichtenförmigen Anordnung selbst ist ein Nachteil zu sehen, da die Berührungsflächen von Reagenzien, die sich in Bezug auf ihre Stabilität ungünstig beeinflussen können, relativ groß sind. Günstiger wäre es, solche Reagenzien streng getrennt voneinander in einem Reagenzträger anzuordnen.
  • Aus obigem geht hervor, daß es im Sinne der Erzielung von Analysenergebnissen mit maximaler Richtigkeit und Reproduzierbarkeit notwendig ist, die genannten Nachteile zu vermeiden, da sie dem Anwendungsbereich solcher "Analysenelemente", die aus Reagenzträgern aufgebaut sind, relativ enge Grenzen setzen.
  • Aus der Sicht des Benutzers sind solche Testdurchführungstechniken jedoch insofern vorteilhaft, als sie eine sehr einfache Handhabung erlauben, da keine Reagenzlösungen angesetzt werden müssen, da das Pipettieren von Reagenz entfällt, keine Stabilitätsprobleme mit den in Lösung immer instabileren Reagenzien auftreten usw.
  • Der Erfindung liegt nun die Aufgabe zugrunde, diese Vorteile beizubehalten und gleichzeitig die geschilderten Nachteile zu beseitigen.
  • Gelöst wird diese Aufgabe erfindungsgemäß durch ein Verfahren zur Durchführung analytischer Bestimmungen durch Mischen und Inkubieren einer Probelösung mit wenigstens einem Reagenz und Messung eines Parameters im Reaktionsgemisch, wobei die Probelösung von einer Aufgabestelle zu einer Meßstelle transportiert wird, welches dadurch gekennzeichnet ist, daß man die Probelösung zuerst zu einem löslichen Trockenreagenz transportiert unter wenigstens teilweiser Auflösung des letzteren und dann zur Meßstelle weitertransportiert und der Transport durch zwei verschiedene Kräfte erfolgt, wobei er wenigstens auf einem Teil der Transportstrecke durch eine auf die Lösung wirkende Grenzflächenkraft als erste Kraft bewirkt wird, der zur Regelung der Transportgeschwindigkeit oder Transportrichtung als zweite Kraft eine Zentrifugalkraft oder/ und Druckkraft überlagert wird, die je nachdem, welcher Transportzustand der Flüssigkeit eingestellt werden soll, größer oder kleiner als die erste Kraft gemacht wird.
  • Das neue Verfahren verbindet die Vorteile der geschilderten Reagenzträgertechnik mit der Genauigkeit und Fehlerfreiheit üblicher naßchemischer Verfahren.
  • Erreicht wird dies dadurch, daß die zu analysierende Probelösung (im allgemeinen mit Wasser verdünnt) in eine Eingabestelle gegeben wird, von der aus sie auf dem Weg zu einer Meßstelle einen oder mehrere Träger von Trockenreagenz durchströmt, wobei die Reagenzien ganz oder teilweise gelöst werden. Das Durchströmen geschieht unter strenger Kontrolle der Fließgeschwindigkeiten und damit der Fließzeiten, indem der treibenden Grenzflächenkraft eine zweite Kraft überlagert wird, die den Strom beschleunigen, bremsen oder anhalten kann. Am Ende des Strömungsweges gelangt die Flüssigkeit dann an eine Meßstelle, die nicht mit dem Reagenzträger identisch ist, in der ein Reaktionssignal, vorzugsweise die optische Transmission, gemessen wird.
  • Als Reagenzien kommen dabei einerseits solche in Frage, die vom Trägermaterial ganz oder teilweise abgelöst werden können, z. B. Puffersubstanzen, Salze, Enzyme oder deren Substrate, andererseits solche, die am Trägermaterial adsorbtiv oder kovalent gebunden sind und an denen dann eine "Festphasen-Reaktion" stattfinden kann, beispielsweise Ionenaustauscher, trägergebundene biologisch aktive Substanzen wie Enzyme, Antikörper oder Antigene und ähnliche.
  • Für die Messung eines Reaktionssignals eignen sich z. B. außer der schon erwähnten optischen Transmission je nach Ausführungsform der Meßstelle auch Elektrodenpotentiale, elektrische Leitfähigkeit, Fluoreszenzstrahlung usw.
  • Im folgenden wird die Erfindung unter Bezugnahme auf die Zeichnung näher beschrieben. In dieser stellen dar:
    • Fig. 1a und 1 b Oben- bzw. Seitenansicht eines für die Erfindung geeigneten Einstatzelementes,
    • Fig. 2 Darstellung des Elementes von Fig. 1a und 1b auf dem Rotor
    • Fig. 3, 4 und 5 Ansichten eines anderen Analysenelementes zur Durchführung der Erfindung,
    • Fig. 6, 7, 8, 9 und 10 erfindungsgemäß erhaltene Analysenresultate in graphischer Darstellung.
  • Je nach den überlagerten Kräften (K2) gibt es im wesentlichen zwei Ausführungsformen der Erfindung, wobei die treibenden Kräfte (K1) jeweils Grenzflächen- bzw. Kapillarkräfte sind.
  • Bei der ersten Ausführungsform ist K2 eine Zentrifugalkraft.
  • Bei diesem Analysensystem werden austauschbare Einsatzelemente für Zentrifugalanalysenrotoren, die beispielsweise aus einem Plastikformkörper aus Polystyrol, Plexiglas, Polyurethan u. ä. sowie Reagenzträgerfeldern, die aus einem saugfähigen Trägermaterial, das mit dem Reagenz imprägniert ist, oder anderen kleinen reagenzgefüllten Hohlräumen (z. B. einer Oberflächenstruktur im Plastikkörper), die in den Plastikkörper eingelegt sind, und einer Verschließfolie bestehen, so auf einen Rotor einer Zentrifuge gesteckt, daß die flüssigkeitsbewegende Kapillarkraft von der Zentrifugalkraft gesteuert werden kann. Hierzu ist notwendig, daß verschiedene Drehzahlen und damit Zentrifugalkräfte eingestellt werden können.
  • Der Analysenablauf bei dieser Ausführungsform der Erfindung wird anhand der Figuren 1a und 1b der beigefügten-Zeichnung näher beschrieben. Fig. 1a zeigt ein für die Erfindung geeignetes Einsatzelement in der Aufsicht, Fig. 1b in der Seitenansicht im Schnitt.
  • Fig. 2 stellt schematisch dar, wie das Einsatzelement von Fig. 1 auf einem geeigneten Zentrifugenrotor, wie er z. B. in der DE-OS 3044372 beschrieben ist, durch hier nicht gezeigte Befestigungsmittel aufgebracht ist.
  • Wie in Fig. 1a gezeigt, ist in einem Plastikformkörper eine Probenauftragskammer (31) vorgesehen, die mit verschiedenen Reagenzfeldern I bis VII (32) in Verbindung steht. Jedes Reagenzfeld besteht aus einem mit einem bestimmten Reagenz imprägnierten Stück saugfähigen Trägers, wie z. B. Papier oder Vlies. (33) und (33a) sind Mischventile I und II, (34) bezeichnet die Meßstelle (Küvette). Fig. 1b zeigt das Einsatzelement von Fig. 1a in Seitenansicht. (35) bezeichnet den Plastikgrundkörper, (36) die Verschließfolie durch die Probenauftragskammer, Reagenzfeldermischventile und Meßstelle abgedeckt sind.
  • Die Durchführung des Verfahrens der Erfindung wird nun unter Bezugnahme auf Fig. 1 und 2 näher beschrieben.
  • Die Probe wird in die Probenauftragskammer (31) gegeben. Dann wird eine bestimmte Drehzahl U1 eingestellt, die geeignet ist, die Probe an das Reagenzfeld I (32) heranzuführen. Sobald der Kontakt hergestellt ist, saugt die Kapillarkraft die Lösung auf, d. h. die Lösung wird über das Reagenzfeld (32) transportiert. Ist die Zentrifugalkraft Z1 kleiner als die Kapillarkraft K1, bleibt die Lösung, sofern das Aufnahmevolumen des Feldes größer ist als das Volumen der aufgegebenen Probe, in dem Feld (32). Mit der Bedingung Z1<K1 ist also die Verweilzeit der Lösung in R I genau festzulegen. Vergrößert man nun die Zentrifugalkraft auf Z2, so daß Z2>K1 gilt, verläßt die um das auf R I befindliche Reagenz angereicherte Lösung dieses Feld und tritt mit dem Reagenzfeld R II in Kontakt. Hier wiederholt sich der Vorgang. Die Lösung wird über R II verteilt, d. h. weitertransportiert. In Analogie gelten die oben beschriebenen Bedingungen.
  • Der Vorgang läßt sich beliebig oft wiederholen, wobei im hier skizzierten Fall Reagenzfelder I bis IV durchlaufen werden. Natürlich können die Einsatzelemente anders gestaltet sein und auch mehr oder weniger Reagenzfelder aufweisen. Die Kräfte Kn und Z sind praktisch frei wählbar, was vor allem für letztere durch die stufenlose Einstellung von Z technisch sehr einfach realisiert werden kann. Die Durchführung von Analysenverfahren gewinnt dadurch an Vorteilen, daß man die dazu benötigte Zeit so kurz wie möglich hält. Deshalb sollte auch die Verweilzeit der Lösung auf den Reagenzfeldern so kurz wie möglich sein. Es ist möglich, die Zentrifugalkraft Z so groß zu wählen, daß die Lösung von den Kapillarkräften nur gebremst wird, d. h. die Lösung kommt nicht zum Stehen, sondern wandert mit von der Kraft (Z - K ) hervorgerufener Geschwindigkeit durch die entsprechenden Reagenzfelder. Findet dieser Vorgang in Sekunden oder Sekundenbruchteilen statt, so ist es leicnt möglich, daß sich an der Lösungsfront höhere Reagenzkonzentrationen einstellen, d. h. in Richtung Zentrifugalkraft baut sich über das Lösungsvolumen ein Konzentrationsanstieg auf.
  • Zur Einhaltung definierter Reaktionsbedingungen gehört es jedoch, einheitliche Konzentrationsverhältnisse - wenn nötig - einzustellen. Um derartige Inhomogenitäten zu beseitigen, wird erfindungsgemäß ein sogenanntes Mischventil (33) vorgesehen. Das Mischventil (33) weist eine in Richtung der Zentrifugalkraft geschlossene Begrenzungswand auf. Am Boden ist eine schräg nach unten entgegen der Strömungsrichtung von Probeauftragskammer zu Meßstelle angeordnete grenzflächenaktive Kammer, z. B. Kapillare angeordnet, welche an ihrem unteren Ende umbiegt und zum Reagenzfeld V weiterführt. Solange die Zentrifugalkraft Z3 größer ist als die Kapillarkraft in der Bodenkapillare K3, wird die Flüssigkeit an der Begrenzungswand festgehalten. Senkt man Z3 unter den Wert von K3, so saugt die Kapillare die Flüssigkeit selbständig aus dem Mischraum (33) in die zugehörige Kapillare ab, wobei vorher bestehende Gradienten beseitigt werden und die Kapillarkraft transportiert die Flüssigkeit zum Reagenzfeld V. Allgemein ausgedrückt wirkt daher hier die Kapillarkraft in der Kapillare des Mischventils (33) immer als Transportkraft, wenn Z < K ist.
  • Die Standzeit im Mischventil (33) ist wiederum frei wählbar durch die Einstellung der Bedingung ZM>KM. Die Bedingung für den Transport ist also genau umgekehrt zu den oben beschriebenen Bedingungen.
  • Die weiteren Schritte über die Reagenzfelder V bis VII und über das Mischventil II (33a) brauchen nicht erneut beschrieben werden, sie ergeben sich aus Analogiebetrachtungen zu den vorigen Schritten. In der erläuterten Ausführungsform ist das Mischventil (33a) hilfreich, um eine homogene Lösung in die Küvette (34) zu befördern. In bekannten Ausführungsformen von Zentrifugalanalyzern ist das Mischen ein aufwendiger Vorgang, der z. B. durch starkes Beschleunigen und Abbremsen der Zentrifuge oder das Durchströmen der Lösung mit Luft bewirkt wird. Dies wird erfindungsgemäß mit technisch einfachen Mitteln vermieden.
  • Bei der zweiten Ausführungsform der Erfindung ist K2 eine Druckkraft.
  • In den Fig. 3, 4 und 5 der Zeichnung werden für diese Ausführungsform geeignete Mittel in Form von wegwerfbaren Analysenelementen dargestellt.
  • In Fig. 3 ist ein derartiges Element in Aufsicht, in Fig. 4 in der Seitenansicht schematisch dargestellt. Der aus einem geeigneten Material, wie z. B. Plastik bestehende Formkörper (8) weist Reagenzträgerfelder (5, 6, 7)- auf, die in den Plastikkörper eingelegt sind. Durch eine elastische Verschließfolie (11) sind diese Reagenzträgerfelder abgedeckt. Eine Probenauftragskammer (9) enthält ein saugfähiges inertes zusammenpreßbares Material, das beispielsweise in entlastetem Zustand 15 pl Flüssigkeit aufnehmen kann und im zusammengepreßten Zustand beispielsweise 2 pl Flüssigkeit zurückhält. Eine Ausbuchtung im Körper (8) dient als Meßstelle bzw. Küvette (21). Der Körper (8) weist außerdem eine Überlaufkammer (10) und eine Entlüftungsbohrung (12) auf.
  • Ventilschlitze (1, 2, 3, 4) dienen zur Aufnahme von Ventilstempeln, mit denen die einzelnen Reagenzträgerfelder voneinander getrennt werden können. Außerdem sind Druckstempel (13, 14, 15, 16) vorgesehen, deren Grundfläche genau der Fläche der jeweiligen Reagenzträgerfläche entspricht und die dazu dienen, gefüllte Reagenzfelder zusammenzudrücken (Fig. 5).
  • Der Verfahrensablauf bei dieser Ausführungsform der Erfindung ist folgendermaßen:
    • Die Probe wird in die Auftragskammer (9) gebracht, indem die Folie (11) mit einer Nadel durchstochen wird. Es wird eine solche Menge injiziert, daß sich das inerte, saugfähige Vlies in der Kammer (9) vollständig füllt, aber keine Lösung abgibt. Anschließend wird z. B. durch eine geeignete Steuerungsvorrichtung, der Stempel (13) auf das Feld (9) gedrückt, so daß die Flüssigkeit dieses Feld verlassen muß und mittels der Kapillarkraft in das Feld (5) transportiert wird. über die Kohäsion der Flüssigkeit wird diese praktisch vollständig nach (5) überführt. Anschließend wird der Ventilstempel (17) z. B. ebenfalls über einen geeigneten Mechanismus gesteuert, heruntergedrückt, so daß (5) von der Auftragskammer (9) abgetrennt ist. Die Folie (11) paßt sich jeweils den Konturen an und dient als Dichtmembran. Die Probelösung kann eine frei wählbare Zeit lang im Feld (5) stehen gelassen werden. In der Regel löst sich allerdings das im Feld (5) befindliche Trockenreagenz innerhalb weniger Sekunden.
  • Im nächsten Schritt wird der Stempel (14) auf das Feld (5) gedrückt, so daß die Flüssigkeit dieses Feld verlassen muß und über die kapillare Ansaugwirkung des Feldes (6) in dieses hineintransportiert wird. Danach wird der Ventilstempel (18) heruntergedrückt, so daß der Kontakt zu Feld (5) unterbrochen ist. Wiederum kann die Zeit zur Ab- oder Auflösung des Reagenz in Feld (6) frei gewählt werden (wobei es sich wiederum im allgemeinen um Sekunden dauernde Vorgänge handelt).
  • Sollte sich bei dem Flüssigkeitstransport durch Kapillarkräfte und bei dem Einströmen in das Reagenzfeld ein Konzentrationsgradient aufbauen, kann dieser dadurch beseitigt werden, daß man vor den Weitertransport nach Feld (7) einen Mischvorgang einschaltet. Durch Andrücken des Ventilstempels (19), Abheben des Ventilstempels (18) und des Stempels (14) und Andrücken des Stempels (15), wird die Flüssigkeit nach Feld (5) zurücktransportiert. Durch Anheben von Stempel (15) und Andrücken von Stempel (14) wird die Flüssigkeit wieder nach Feld (6) zurückbefördert. Gegebenenfalls kann diese Vor-Rück-Bewegung mehrere Male wiederholt werden. Zum Schluß wird dann wieder der Zustand hergestellt: Stempel (14) angedrückt, Ventilstempel (18) angedrückt.
  • Der Weitertransport der Flüssigkeit von Feld (6) nach Feld (7) erfolgt nach gegebenenfalls Abheben von Ventilstempel (19) in analoger Weise durch Andrücken von Ventilstempel (18) und Andrücken von Stempel (15). Gegebenenfalls kann der Mischvorgang zwischen Feld (6) und Feld (7) in Analogie zur beschriebenen Weise unter Benutzung von Ventilstempel (20) wiederholt werden.
  • Nach Auflösen des Reagenz in Feld (7) wird die so entstandene Lösung dann durch Andrücken von Ventilstempel (19) und Andrücken von Stempel (15) in die Küvette (21) gedrückt.
  • Danach wird in geeigneter Weise in einem üblichen Verfahren die Extinktionsänderung während einer genügend langen Zeit gemessen. Aus dieser Signaländerung kann ebenfalls mit üblichen Methoden die Konzentration der zu analysierenden Substanz berechnet werden.
  • Die für die Durchführung der für das Verfahren erforderliche Änderung der 1. bzw. 2. Kraft zur Verfügung stehenden Maßnahmen sind für die Zentrifugalkraft in erster Linie in Drehzahländerungen, für die Druckkraft in Bewegung von Druckstempeln zu sehen. Die Grenzflächenkraft kann außer durch die Oberflächengestaltung auch durch Einsatz oberflächenaktiver Mittel geregelt bzw. verändert werden. Als oberflächenaktive Mittel werden die Polyoxyäthylenderivate bevorzugt, jedoch können auch andere nichtionische Detergentien sowie anionische Detergentien, z.B. Gallensäurederivate, oder kationische Detergentien oder Gemische davon verwendet werden. Beispiele für erfindungsgemäß durchführbare Analysen sind die in der DE-OS P 30 44 385 beschriebenen. Insbesondere eignet sich das Verfahren zur Bestimmung von Glucose, Bilirubin, Creatinin, Albumin, Eiweiß, Eisen, Hemoglobin, Harnstoff, Harnsäure, Triglyceriden, Cholesterin, Chlorid, Kalzium, Phosphat,1-GT, alkalischer Phosphate, GOT,GPT, Lactatdehydrogenase, Lipase, Amylase, Creatinkinase, Schilddrüsenhormonen, saure Phosphatase, Drogen, Krebsindikatoren und Gerinnungsfaktoren, wobei jeweils für diese Bestimmungen an sich bekannte Reagenzien eingesetzt werden können.
  • Die folgenden Beispiele erläutern die Erfindung weiter:
    • B e i s p i e l 1
  • Glucosebestimmung unter Verwendung des Einsatzelements gemäß Fig. 1 und 2.
  • Auf Filterpapiere der Größe 6 x 6 mm und der Dicke 0,3 mm wurden folgende Reagenzien aufgebracht und wie aus Fig. 1 ersichtlich, im beschriebenen Einsatzelement positioniert:
    Figure imgb0001
  • Humanserumproben wurden 1 : 200 mit bidest. Wasser verdünnt. Von dieser verdünnten Lösung wurden 60 pl in die Probenauftragskammer (1) gegeben.
  • Es wurde bei 25 °C nach folgendem Programm zentrifugieru:
    Figure imgb0002
  • Die Änderung der Extinktion in Abhängigkeit von der Zeit wurde gemessen und nach einem der üblichen "Fixed-time-kinetischen Verfahren" ausgewertet. Die unbekannten Konzentrationen an Glucose in der Probe wurden nach Eichung des Verfahrens mit einem Standard bestimmt. Die Übereinstimmung mit einer Vergleichsmethode, der eine der bekannten manuellen Techniken zugrunde liegt, ist sehr gut, wie aus Fig. 6 zu erkennen ist, welche die Ergebnisse der Vergleichsmethode auf der Abscisse, der erfindungsgemäßen Methode auf der Ordinate zeigt.
  • Auf der Ordinate sind auch in den folgenden Beispielen die Werte mit der erfindungsgemäßen Methode aufgetragen (Symbol ZF).
    • B e i s p i e 1 2
  • Alkalische Phosphatase wurde auf dem Einsatzelement gemäß . Fig. 1 und 2 bestimmt.
  • Auf Filterpapiere der Größe 6 x 6 mm und der Dicke 0,3 mm wurden folgende Reagenzien aufgebracht und wie aus Fig. 1 ersichtlich, positioniert:
    Figure imgb0003
  • Eine Humanserumprobe wurde 1 : 10 mit bidest. Wasser verdünnt. Von dieser verdünnten Lösung wurden 60 ul in die Probenauftragskammer (1) gegeben.
  • Es wurde bei 37 °C nach folgendem Programm zentrifugiert:
    Figure imgb0004
  • Die aufgezeichneten Abhängigkeiten der Extinktionen von der Zeit wurden nach einem der üblichen Verfahren, bei denen die Steigung der Geraden ein Maß für die Aktivität des zu bestimmenden Enzyms ist, ausgewertet. Die unbekannten Aktivitäten an Alkalischer Phosphatase in der Probe wurden nach Eichung des Verfahrens mit einem Standard bestimmt. Die Korrelation mit einer Vergleichsmethode, der eine der bekannten manuellen Techniken zugrunde liegt, ist gut, wie aus Fig. 7 zu erkennen ist.
    • L e i s p i e l 3
  • Bilirubin-Bestimmung mit dem Einsatzelement von Fig. 1 und 2.
  • Auf Filterpapiere der Größe 6 x 6 mm und der Dicke 0,3 mm wurden folgende Reagentien aufgebracht und wie aus Fig. 1 ersichtlich, positioniert:
    Figure imgb0005
    • V Nicht imprägniertes Filterpapier
  • Serumproben wurden 1 : 10 mit bidest. Wasser verdünnt. Von dieser verdünnten Lösung wurden je 60 µl in die Probenauftragskammer (1) gegeben.
  • Es wurde bei 25 °C nach folgendem Programm zentrifugiert:
    Figure imgb0006
  • Die aufgezeichneten Abhängigkeiten der Extinktionen von der Zeit wurden nach einem der üblichen "Endpunkt-Verfahren" ausgewertet; die unbekannten Konzentrationen an Bilirubin in der Probe wurden nach Eichung des Verfahrens mit einem Standard bestimmt. Die Übereinstimmung mit einer Vergleichsmethode, der eine der bekannten manuellen Techniken zugrunde liegt, ist sehr gut, wie Fig. 8 zeigt.
    • B e i s p i e 1 4
  • Creatinkinase-Bestimmung mit dem Einsatzelement von Fig. 1 und 2.
  • Auf Filterpapiere der Größe 6 x 6 mm und der Dicke 0,3 mm wurden folgende Reagenzien aufgebracht und wie aus Fig. 1 ersichtlich, positioniert:
    Figure imgb0007
  • Eine Humanserumprobe wurde 1 : 25 mit bidest. Wasser verdünnt. Von dieser verdünnten Lösung wurden 60 pl in die Probenauftragskammer (1) gegeben.
  • Es wurde bei 37 °C nach folgendem Programm zentrifugiert:
    Figure imgb0008
  • Die aufgezeichneten Abhängigkeiten der Extinktionen von der Zeit wurden nach einem der üblichen Verfahren für kinetische Messungen ausgewertet, die unbekannten Aktivitäten an Creatinkinase in der Probe wurden nach Eichung des Verfahrens mit einem Standard bestimmt. Die Übereinstimmung mit einer Vergleichsmethode, der eine der bekannten manuellen Techniken zugrunde liegt, ist sehr gut, wie Fig. 9 zeigt.
    • B e i s p i e l 5
  • IgG-Bestimmung mit dem Einsatzelement von Fig. 1 und 2.
  • Auf Filterpapiere der Größe 6 x 6 mm und der Dicke 0,3 mm wurden folgende Reagenzien aufgebracht und wie aus Fig. 1 ersichtlich, positioniert (in diesem Fall wurden zwei verschiedene Reagenzträgerpapiere in die gleiche Kammer gege- ben):
    Figure imgb0009
  • Eine Humanserumprobe wurde 1 : 200 mit bidest. Wasser verdünnt. Von dieser verdünnten Lösung wurden 60 µl in die Probenauftragskammer (1) gegeben.
  • Es wurde bei 25 °C nach folgendem Programm zentrifugiert:
    Figure imgb0010
    Figure imgb0011
  • Die aufgezeichneten Abhängigkeiten der Extinktionen von der Zeit wurden nach einem der üblichen Verfahren zur Auswertung von kinetischen Trübungstesten ausgewertet, die unbekannten Konzentrationen an IgG in der Probe werden nach Eichung des Verfahrens mit 3 Standards unterschiedlicher Konzentration und Erstellung einer Eichkurve bestimmt. Die Übereinstimmung mit einer Vergleichsmethode, der eine Adaptation auf dem Analysenautomaten "ABA 100" der Firma ABBOTT zugrunde liegt, ist sehr gut, wie Fig. 10 zeigt.
    • B e i s p i e l 6
  • Glucosebestimmung mit dem Analysenelement gemäß Fig. 3.
  • Reagenzträgerpapiere der Größe 6 x 6 x 0,3 mm werden wie folgt hergestellt: 10 pl der Reagenzlösungen, die ein Viertel der Substanzmengen enthalten wie die verschiedenen Papiere des Beispiels in Beispiel 1, werden auf ein Papier der angegebenen Größe gegeben. Die Lösungen werden vollständig aufgesaugt; anschließend wird das Lösungsmittel Wasser durch Lyophilisieren aus den Papieren entfernt.
  • Die drei verschiedenen Papiere werden in der gleichen Reihenfolge wie in Beispiel 1 auf die drei Positionen des Analysenelements von Fig. 3 gelegt.
  • Die Probe wird 1 : 200 mit bidest. Wasser verdünnt. 15 µl dieser verdünnten Lösung werden in die Auftragskammer (9) gegeben. Dann wird die Lösung in der oben geschilderten Weise auf Sen ersten Reagenzträger (5) gebracht. Verw i i-zeit: 10 sec. Anschließend wird die Lösung aus (5) naet (6) in ebenfalls bereits geschilderter Art und Weise gebracht. Verweilzeit: 10 sec. In analoger Weise wird die Lösung auf den Reagenzträger 3 (7) gebracht. Verweilzeit: 5 sec. Von dort wird die Lösung durch langsames Absenken des Stempels (16) in die Küvette (21) gebracht. In ihr wird in bekannter Weise die Extinktion bei 500 nm in Abhängigkeit von der Zeit verfolgt. Aus dem Verlauf dieser Kurve kann mit dem bekannten "Fixed-time-kinetischen" Verfahren nach Eichung mit einem Standard die Glucosekonzentration in unbekannten Proben bestimmt werden.
  • Es wurden wäßrige Lösungen mit den Konzentrationen 50, 100, 150, 200, 300 und 400 mg/dl (durch Einwaage eingestellt) untersucht. Die Wiederfindung lag zwischen 98 und 102 %.
    • B e i s p i e l 7
  • Alkalische Phosphatase mit dem Element gemäß Fis. 3.
  • Reagenzträgerpapiere der Größe 6 x 6 x 0,3 mm werden wie folgt hergestellt: 10 pl der Reagenzlösungen, die genau ein Viertel der Substanzmengen enthalten wie die verschiedenen Papiere des Beispiels 2, werden auf ein Papier der angegebenen Größe gegeben. Die Lösungen werden vollständig aufgesaugt; anschließend wird das Lösungsmittel Wasser durch Lyophilisieren aus den Papieren entfernt.
  • Die beiden Papiere werden in der gleichen Reihenfolge wie in Beispiel 2 auf die ersten beiden Positionen des Analysenelements von Fig. 3 gelegt. Auf die dritte Position wird ein Papier gelegt, das kein Reagenz enthält.
  • Die probe
    Figure imgb0012
    dieser verdunnten Lösung werden in die Auftragskagsammer (9)gegeben. Dann wird die Lösung in der geschilderten Weise auf den ersten Reagenzträger (5) gebracht. Verweilzeit: 10 sec. Anschließend wird die Lösung aus (5) nach (6) in ebenfalls bereits geschilderter Art und Weise gebracht. Verweilzeit: 10 sec. In analoger Weise wird die Lösung auf das Leervlies (7) gebracht. Verweilzeit: 5 sec. Von dort wird die Lösung durch langsames Absenken des Stempels (16) in die Küvette (21) gebracht. In ihr wird die Extinktion bei 410 nm in Abhängigkeit von der Zeit verfolgt. Aus dem Verlauf der aufgezeichneten Geraden kann mit bekannten kinetischen Bestimmungsverfahren nach Eichung mit einem Standard die Aktivität der alkalischen Phosphatase in unbekannten Proben bestimmt werden.
  • Es wurden verschiedene Kontrollseren, die Aktivitäten zwischen 30 und 600 U/1 enthielten, untersucht. Die Wiederfindung lag zwischen 90 und 110 %.
    • B e i s p i e 1 8
  • Creatinkinasebestimmung mit dem Element gemäß Fig. 3.
  • Reagenzträgerpapiere der Größe 6 x 6 x 0,3 mm werden wie folgt hergestellt: 10 µl der Reagenzlösungen, die genau ein Viertel der Substanzmengen enthalten wie die verschiedenen Papiere des Beispiels 4, wurden auf ein Papier der angegebenen Größe gegeben. Die Lösungen werden vollständig aufgesaugt; anschließend wurde das Lösungsmittel Wasser durch Lyophilisieren aus den Papieren entfernt.
  • Die beiden Papiere wurden in der gleichen Reihenfolge wie in Beispiel 4 auf die ersten beiden Positionen des Analysenelements von Fig. 3 gelegt. Auf die dritte Position wurde ein Papier der gleichen Art, das kein Reagenz enthielt, gelegt.
  • Die Probe wurde 1 : 25 mit bidest. Wasser verdünnt. 15 pl dieser verdünnten Lösung wurden in die Auftragskammer (9) gegeben. Dann wird die Lösung in der geschilderten Weise auf den ersten Reagenzträger (5) gebracht. Verweilzeit: 10 sec. Anschließend wurde die Lösung aus (5) nach (6) in ebenfalls bereits geschilderter Art und Weise gebracht. Verweilzeit: 10 sec. In analoger Weise wurde die Lösung auf das Feld (7) bewegt. Verweilzeit: 5 sec. Von dort wird die Lösung durch langsames Absenken des Stempels (16) in die Küvette (21) gebracht. In ihr wird in bekannter Weise die Extinktion bei 340 nm in Abhängigkeit von der Zeit verfolgt. Nach einer gekrümmten Anfangsphase erhielt man einen linearen Verlauf dieser Funktion. Aus diesem Anteil wird mit Hilfe von bekannten Auswerteverfahren für kinetische Methoden nach Eichung mit einem Standard die Aktivität an Creatinkinase in einer unbekannten Probe bestimmt.
  • Es wurden verschiedene Humanserumproben mit aufgereinigtem Enzym in der Weise aufgestockt, daß man Aktivitäten von 5 bis 800 U/1 erhielt. Vergleichswerte wurden durch eine manuelle Messung gewonnen. Die Wiederfindungen gegenüber diesen manuellen Werten lagen zwischen 92 und 110 %.

Claims (8)

1. Verfahren zur Durchführung analytischer Bestimmungen durch Mischen und Inkubieren einer Probelösung mit wenigstens einem Reagenz und Messung eines Parameters im Reaktionsgemisch, wobei die Probelösung von einer Aufgabestellung zu einer Meßstelle transportiert wird, dadurch gekennzeichnet, daß man die Probelösung zuerst zu einem löslichen Trockenreagenz transportiert unter wenigstens teilweiser Auflösung des letzteren und dann zur Meßstelle weitertransportiert und der Transport durch zwei verschiedene Kräfte erfolgt, wobei er wenigstens auf einem Teil der Transportstrecke durch eine auf die Lösung wirkende Grenzflächenkraft als erste Kraft bewirkt wird, der zur Regelung der Transportgeschwindigkeit oder Transportrichtung als zweite Kraft eine Zentrifugalkraft oder/und Druckkraft überlagert wird, die je nachdem, welcher Transportzustand der Flüssigkeit eingestellt werden soll, größer oder kleiner als die erste Kraft gemacht wird.
2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet , daß man die erste physikalische Kraft in Richtung oder/und entgegen der Richtung der zweiten physikalischen Kraft einwirken läßt.
3. Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet , daß man die erste physikalische Kraft durch die Oberflächenqestaltung oder/und oberflächenaktive Mittel regelt.
4. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet , daß man den Wert der zweiten physikalischen Kraft mehrmals höher und niedriger als den Wert der ersten physikalischen Kraft einstellt.
5. Verfahren nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß man während der Inkubation des Reagenz-Probelösungsgemisches den Wert der zweiten physikalischen Kraft über den Wert der ersten physikalischen Kraft einstellt.
6. Verfahren nach einem der Ansprüche 2 bis 5, dadurch gekennzeichnet , daß man die zweite physikalische Kraft durch Änderung der Drehzahl eines Zentrifugenrotors erhöht oder erniedrigt.
7. Rotoreinsatzelement zur Durchführung des Verfahrens nach den Ansprüchen 1 bis 6 mit einer Zentrifugalkraft als zweiter Kraft, gekennzeichnet durch einen Formkörper (35) mit einer Probenauftragskammer (31), die mit einer Mehrzahl von Reagenzfeldern (32) in Verbindung steht, die jeweils ein mit einem bestimmten Reagenz imprägniertes saugfähiges Trägermaterial enthalten, wenigstens einer Mischventilkammer (33, 33a), einer Meßkammer (34) und Mittel (36) zum Verschließen der Kammern und Felder.
8. Analysenelement zur Durchführung des Verfahrens nach den Ansprüchen 1 bis 5 mit einer Druckkraft als zweiter Kraft, gekennzeichnet durch einen Formkörper (8) mit einer Probenauftragskammer (9), in der sich ein saugfähiges, inertes zusammenpreßbares Material befindet, einer Mehrzahl von Reagenzträgerfeldern (5, 6, 7), die jeweils ein mit einem bestimmten Reagenz imprägniertes saugfähiges zusammenpreßbares Trägermaterial enthalten, einer Meßkammer (21), einer überlaufkammer (10) und einer Entlüftungsbohrung (12), sowie mit zwischen den einzelnen Reagenzträgerfeldern (5, 6, 7) sowie der Auftragskammer (9) angeordneten Ventilschlitzen (1, 2, 3, 4) mit darin beweglich angeordneten Ventilstempeln sowie weiter einer Mehrzahl von Druckstempeln (13, 14, 15, 16) die so angeordnet sind, daß sie unabhängig voneinander auf die Probenauftragskammer (9) und die Reagenzträgerfelder (5, 6, 7) eine bestimmte Druckkraft auszuüben vermögen.
EP82107972A 1981-09-01 1982-08-30 Verfahren zur Durchführung analytischer Bestimmungen und hierfür geeignetes Mittel Expired - Lifetime EP0073513B2 (de)

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DE (2) DE3134611A1 (de)
IL (1) IL66576A (de)
ZA (1) ZA826348B (de)

Cited By (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0167171A2 (de) * 1984-07-06 1986-01-08 Roche Diagnostics GmbH Verfahren und Vorrichtung zur Durchführung analytischer Bestimmungen
FR2581194A1 (fr) * 1985-04-29 1986-10-31 Materiel Biomedical Dispositif pour l'analyse d'un liquide biologique.
GB2186081A (en) * 1986-02-04 1987-08-05 Orion Yhtymae Oy Liquid analysis and analytical element
WO1988006731A1 (en) * 1987-03-03 1988-09-07 P B Diagnostic Systems, Inc. Self-contained immunoassay element
EP0296846A1 (de) * 1987-06-26 1988-12-28 Gerrard Abdool Rayman Eine Vorrichtung zum Testen von Flüssigkeiten
EP0182385B1 (de) * 1984-11-23 1989-05-03 Roche Diagnostics GmbH Verfahren und Reagenz zur quantitativen Bestimmung von freiem Thyroxin in Plasma, Serum oder Vollblut
US6653625B2 (en) 2001-03-19 2003-11-25 Gyros Ab Microfluidic system (MS)
US6717136B2 (en) 2001-03-19 2004-04-06 Gyros Ab Microfludic system (EDI)
US6812456B2 (en) 2001-03-19 2004-11-02 Gyros Ab Microfluidic system (EDI)
US10620194B2 (en) 2001-03-19 2020-04-14 Gyros Patent Ab Characterization of reaction variables

Families Citing this family (53)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5144139A (en) * 1985-08-05 1992-09-01 Biotrack, Inc. Capillary flow device
US5164598A (en) * 1985-08-05 1992-11-17 Biotrack Capillary flow device
US4756884A (en) * 1985-08-05 1988-07-12 Biotrack, Inc. Capillary flow device
US5140161A (en) * 1985-08-05 1992-08-18 Biotrack Capillary flow device
US5204525A (en) * 1985-08-05 1993-04-20 Biotrack Capillary flow device
JPS62142003A (ja) * 1985-12-13 1987-06-25 Ishikawajima Harima Heavy Ind Co Ltd 圧延設備
US5242803A (en) * 1987-07-17 1993-09-07 Martin Marietta Energy Systems, Inc. Rotor assembly and assay method
US5173262A (en) * 1987-07-17 1992-12-22 Martin Marietta Energy Systems, Inc. Rotor assembly and method for automatically processing liquids
US5077017A (en) * 1987-11-05 1991-12-31 Biotrack, Inc. Integrated serial dilution and mixing cartridge
GB8728639D0 (en) * 1987-12-08 1988-01-13 Scient Generics Ltd Device for analytical determinations
US4999304A (en) * 1987-12-28 1991-03-12 Miles Inc. Dynamic braking centrifuge
JPH0266431A (ja) * 1988-08-31 1990-03-06 Tdk Corp 電気化学的光学特性測定用セル
US5230866A (en) * 1991-03-01 1993-07-27 Biotrack, Inc. Capillary stop-flow junction having improved stability against accidental fluid flow
US5258314A (en) * 1991-03-18 1993-11-02 Paradigm Biotechnologies Partnership Microprocessor-based biomedical monitoring apparatus and method
US6168956B1 (en) 1991-05-29 2001-01-02 Beckman Coulter, Inc. Multiple component chromatographic assay device
US5468648A (en) * 1991-05-29 1995-11-21 Smithkline Diagnostics, Inc. Interrupted-flow assay device
US5869345A (en) * 1991-05-29 1999-02-09 Smithkline Diagnostics, Inc. Opposable-element assay device employing conductive barrier
US5877028A (en) 1991-05-29 1999-03-02 Smithkline Diagnostics, Inc. Immunochromatographic assay device
US5607863A (en) * 1991-05-29 1997-03-04 Smithkline Diagnostics, Inc. Barrier-controlled assay device
US5998220A (en) 1991-05-29 1999-12-07 Beckman Coulter, Inc. Opposable-element assay devices, kits, and methods employing them
US5304348A (en) * 1992-02-11 1994-04-19 Abaxis, Inc. Reagent container for analytical rotor
WO1993019827A1 (en) * 1992-04-02 1993-10-14 Abaxis, Inc. Analytical rotor with dye mixing chamber
DE4212280A1 (de) * 1992-04-11 1993-10-14 Boehringer Mannheim Gmbh Asymmetrisch poröse Membranen
US5783446A (en) * 1996-03-04 1998-07-21 Biocircuits Corporation Particle assay using fluid velocity gradients
US5879951A (en) 1997-01-29 1999-03-09 Smithkline Diagnostics, Inc. Opposable-element assay device employing unidirectional flow
US5939252A (en) 1997-05-09 1999-08-17 Lennon; Donald J. Detachable-element assay device
US6013513A (en) * 1997-10-30 2000-01-11 Motorola, Inc. Molecular detection apparatus
DE59803938D1 (de) * 1997-11-19 2002-05-29 Biognosis Gmbh Vorrichtung zur sequentiellen ausgabe von fliessfähigen reagenzien
US7014815B1 (en) 1998-10-30 2006-03-21 Burstein Technologies, Inc. Trackable optical discs with concurrently readable nonoperational features
US6531095B2 (en) 1999-02-11 2003-03-11 Careside, Inc. Cartridge-based analytical instrument with optical detector
US6391264B2 (en) 1999-02-11 2002-05-21 Careside, Inc. Cartridge-based analytical instrument with rotor balance and cartridge lock/eject system
US6348176B1 (en) 1999-02-11 2002-02-19 Careside, Inc. Cartridge-based analytical instrument using centrifugal force/pressure for metering/transport of fluids
WO2000047977A1 (en) * 1999-02-11 2000-08-17 Careside, Inc. Cartridge-based analytical instrument
DE19932958C2 (de) 1999-07-14 2003-08-07 Walter Schubert Vorrichtung zur Bindung von Molekülen, Molekülgruppen, Molekülteilen und/oder Zellen
US6593143B1 (en) * 2000-02-29 2003-07-15 Agilent Technologies, Inc. Centrifuge system with contactless regulation of chemical-sample temperature using eddy currents
US6571651B1 (en) * 2000-03-27 2003-06-03 Lifescan, Inc. Method of preventing short sampling of a capillary or wicking fill device
EP1410044A2 (de) * 2000-11-08 2004-04-21 Burstein Technologies, Inc. Interaktives system zur analyse biologischer proben und zur verarbeitung damit im zusammenhang stehender angaben und verwendung davon
WO2002046747A1 (fr) * 2000-12-06 2002-06-13 Kabushiki Kaisya Advance Unite d'inspection de fluide corporel facilitee
WO2002046762A2 (en) * 2000-12-08 2002-06-13 Burstein Technologies, Inc. Optical disc assemblies for performing assays
US6760298B2 (en) * 2000-12-08 2004-07-06 Nagaoka & Co., Ltd. Multiple data layer optical discs for detecting analytes
US7091034B2 (en) * 2000-12-15 2006-08-15 Burstein Technologies, Inc. Detection system for disk-based laboratory and improved optical bio-disc including same
AU2002368023A1 (en) * 2001-05-16 2004-03-04 Burstein Technologies, Inc. Variable sampling for rendering pixelization of analysis results in optical bio-disc assembly
US20040241381A1 (en) * 2002-01-31 2004-12-02 Chen Yihfar Microfluidic structures with circumferential grooves for bonding adhesives and related optical analysis discs
EP2465609B1 (de) 2007-06-21 2016-12-28 Gen-Probe Incorporated Verfahren zum Mischen der Inhalte einer Nachweiskammer
US8486333B2 (en) * 2008-02-04 2013-07-16 Micropoint Biosciences, Inc. Centrifugal fluid analyzer rotor
CA2859167C (en) 2011-12-12 2021-03-16 Step Ahead Innovations, Inc. Submerged chemical indicator and holder
WO2014205230A1 (en) 2013-06-19 2014-12-24 Step Ahead Innovations Inc. Aquatic environment water parameter testing systems and methods
US9308508B2 (en) 2013-07-22 2016-04-12 Kianoosh Peyvan Sequential delivery device and method
EP2942104A1 (de) 2014-05-08 2015-11-11 Radisens Diagnostics Ltd. Probenapplikator für Point-of-Care-Vorrichtung
US10545137B2 (en) 2016-04-22 2020-01-28 Becton, Dickinson And Company Multiplex polymeric dye devices and methods for using the same
EP3579974A4 (de) 2017-02-08 2020-12-30 Becton, Dickinson and Company Vorrichtungen für getrocknete farbstoffreagenzien und verfahren zur herstellung und verwendung davon
WO2020101831A1 (en) 2018-11-13 2020-05-22 Becton, Dickinson And Company Dried reagent strainers and methods for making and using the same
EP4110523A4 (de) 2020-02-25 2024-03-20 Helixbind, Inc. Reagenzträger für fluidische systeme

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE1944246A1 (de) * 1968-08-29 1970-03-05 Minnesota Mining And Mfg C Verfahren und Vorrichtung zur quantitativen Bestimmung von chemischen Blutsubstanzen in Blutderivaten
DE2536886A1 (de) * 1974-08-19 1976-03-04 Damon Corp Verfahren und vorrichtung zur analytischen bestimmung loeslicher bestandteile in fasermaterialien als traegermedien
US3999868A (en) * 1974-11-29 1976-12-28 Manuel Sanz Unit for use in optical analysis
DE2927345A1 (de) * 1978-07-07 1980-02-28 Technicon Instr Verfahren und vorrichtung zur analyse einer probe
EP0014797A1 (de) * 1978-10-25 1980-09-03 EASTMAN KODAK COMPANY (a New Jersey corporation) Vorrichtung zum Flüssigkeitstransport, Verfahren zum Transportieren einer Flüssigkeit, Verfahren zur Flüssigkeitsanalyse und Testelement zur Verwendung bei der Flüssigkeitsanalyse
US4244916A (en) * 1977-08-18 1981-01-13 Jean Guigan Device for conditioning a sample of liquid for analyzing with internal filter

Family Cites Families (24)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3036894A (en) * 1958-10-22 1962-05-29 Jasper A Forestiere Method of using testing containers
DE1773584A1 (de) * 1967-06-13 1973-01-04 Xerox Corp Reaktionsbehaelter
US3532470A (en) * 1968-01-22 1970-10-06 Beckman Instruments Inc Sample holder with centrifugation means
US3540857A (en) * 1968-01-22 1970-11-17 Beckman Instruments Inc Sample capsule and filtering mechanism
DD101014A1 (de) * 1973-01-04 1973-10-12
US3795451A (en) * 1973-04-24 1974-03-05 Atomic Energy Commission Rotor for fast analyzer of rotary cuvette type
US4007010A (en) * 1974-07-03 1977-02-08 Woodbridge Iii Richard G Blister plane apparatus for testing samples of fluid
US3972595A (en) * 1975-01-27 1976-08-03 International Business Machines Corporation Ferrofluid display device
US4042335A (en) * 1975-07-23 1977-08-16 Eastman Kodak Company Integral element for analysis of liquids
DE2553613C3 (de) * 1975-11-28 1978-11-23 Compur-Electronic Gmbh, 8000 Muenchen Verfahren zur Vorbereitung von Meßflüssigkeiten
FR2341865A1 (fr) * 1976-02-19 1977-09-16 Api Labor Support pour le dosage d'activites enzymatiques et procede de dosage a l'aide de ce support
US4065263A (en) * 1976-04-02 1977-12-27 Woodbridge Iii Richard G Analytical test strip apparatus
FR2409514A1 (fr) * 1977-11-17 1979-06-15 Bretaudiere Jean Pierre Perfectionnement aux appareils d'analyse par centrifugation
CA1129498A (en) * 1978-10-25 1982-08-10 Richard L. Columbus Structural configuration and method for transport of a liquid drop through an ingress aperture
US4237234A (en) * 1978-10-30 1980-12-02 Meunier Henry E Device for use in the study of biochemical or enzymatic reactions produced by living organisms
DE2915248C3 (de) * 1979-04-14 1982-01-14 Gise, Frhr. von, Hardo, Dr.med., 7400 Tübingen Einrichtung zum automatischen wahlweisen u. exakten Behandeln von Präparaten
IN154925B (de) * 1979-10-26 1984-12-22 Guigan Jean
CA1152353A (en) * 1980-05-05 1983-08-23 Georges Revillet Multicuvette rotor for analyser
US4305722A (en) * 1980-06-13 1981-12-15 Coulter Electronics, Inc. Wetting cycle for spun blood smears
US4387164A (en) * 1980-11-05 1983-06-07 Fmc Corporation Method and apparatus for chemical analysis using reactive reagents dispersed in soluble film
DE3044372A1 (de) * 1980-11-25 1982-07-08 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Rotoreinheit mit einsatzelementen fuer einen zentrifugalanalysator
DE3044385A1 (de) * 1980-11-25 1982-06-24 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Verfahren zur durchfuehrung analytischer bestimmungen und hierfuer geeignetes rotoreinsatzelement
US4426451A (en) * 1981-01-28 1984-01-17 Eastman Kodak Company Multi-zoned reaction vessel having pressure-actuatable control means between zones
US4390499A (en) * 1981-08-13 1983-06-28 International Business Machines Corporation Chemical analysis system including a test package and rotor combination

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE1944246A1 (de) * 1968-08-29 1970-03-05 Minnesota Mining And Mfg C Verfahren und Vorrichtung zur quantitativen Bestimmung von chemischen Blutsubstanzen in Blutderivaten
DE2536886A1 (de) * 1974-08-19 1976-03-04 Damon Corp Verfahren und vorrichtung zur analytischen bestimmung loeslicher bestandteile in fasermaterialien als traegermedien
US3999868A (en) * 1974-11-29 1976-12-28 Manuel Sanz Unit for use in optical analysis
US4244916A (en) * 1977-08-18 1981-01-13 Jean Guigan Device for conditioning a sample of liquid for analyzing with internal filter
DE2927345A1 (de) * 1978-07-07 1980-02-28 Technicon Instr Verfahren und vorrichtung zur analyse einer probe
EP0014797A1 (de) * 1978-10-25 1980-09-03 EASTMAN KODAK COMPANY (a New Jersey corporation) Vorrichtung zum Flüssigkeitstransport, Verfahren zum Transportieren einer Flüssigkeit, Verfahren zur Flüssigkeitsanalyse und Testelement zur Verwendung bei der Flüssigkeitsanalyse

Cited By (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0167171A3 (en) * 1984-07-06 1988-06-22 Boehringer Mannheim Gmbh Method and device for performing analytical determinations
EP0167171A2 (de) * 1984-07-06 1986-01-08 Roche Diagnostics GmbH Verfahren und Vorrichtung zur Durchführung analytischer Bestimmungen
EP0182385B1 (de) * 1984-11-23 1989-05-03 Roche Diagnostics GmbH Verfahren und Reagenz zur quantitativen Bestimmung von freiem Thyroxin in Plasma, Serum oder Vollblut
FR2581194A1 (fr) * 1985-04-29 1986-10-31 Materiel Biomedical Dispositif pour l'analyse d'un liquide biologique.
GB2186081A (en) * 1986-02-04 1987-08-05 Orion Yhtymae Oy Liquid analysis and analytical element
FR2593920A1 (fr) * 1986-02-04 1987-08-07 Orion Yhtymae Oy Procede d'analyse de liquides et elements d'analyse a utiliser dans le procede
BE1001166A5 (fr) * 1986-02-04 1989-08-08 Orion Yhtymae Oy Procede d'analyse de liquides et element d'analyse a utiliser dans le procede.
GB2186081B (en) * 1986-02-04 1990-10-17 Orion Yhtymae Oy A method for performing a liquid analysis and an analytical device for use in the method.
AU605257B2 (en) * 1987-03-03 1991-01-10 Behring Diagnostics Inc. Self-contained immunoassay element
WO1988006731A1 (en) * 1987-03-03 1988-09-07 P B Diagnostic Systems, Inc. Self-contained immunoassay element
EP0281201A1 (de) * 1987-03-03 1988-09-07 PB Diagnostic Systems, Inc. Integriertes Immunoassayelement
US4918025A (en) * 1987-03-03 1990-04-17 Pb Diagnostic Systems, Inc. Self contained immunoassay element
EP0296846A1 (de) * 1987-06-26 1988-12-28 Gerrard Abdool Rayman Eine Vorrichtung zum Testen von Flüssigkeiten
US5004584A (en) * 1987-06-26 1991-04-02 Rayman Gerard A Device for testing fluids
US6653625B2 (en) 2001-03-19 2003-11-25 Gyros Ab Microfluidic system (MS)
US6717136B2 (en) 2001-03-19 2004-04-06 Gyros Ab Microfludic system (EDI)
US6812456B2 (en) 2001-03-19 2004-11-02 Gyros Ab Microfluidic system (EDI)
US7148476B2 (en) 2001-03-19 2006-12-12 Gyros Patent Ab Microfluidic system
US10620194B2 (en) 2001-03-19 2020-04-14 Gyros Patent Ab Characterization of reaction variables

Also Published As

Publication number Publication date
DE3264913D1 (en) 1985-08-29
JPS5847241A (ja) 1983-03-18
IL66576A (en) 1987-12-20
EP0073513B1 (de) 1985-07-24
DE3134611A1 (de) 1983-03-10
ZA826348B (en) 1983-07-27
CA1190839A (en) 1985-07-23
US4916078A (en) 1990-04-10
IL66576A0 (en) 1982-12-31
ATE14480T1 (de) 1985-08-15
EP0073513B2 (de) 1992-02-05
US4898832A (en) 1990-02-06
JPH0133776B2 (de) 1989-07-14

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