EA037115B1 - Композиции и способы, предназначенные для ингибирования экспрессии гена hao1 (оксидазы 1 гидроксикислот (гликолат-оксидазы)) - Google Patents
Композиции и способы, предназначенные для ингибирования экспрессии гена hao1 (оксидазы 1 гидроксикислот (гликолат-оксидазы)) Download PDFInfo
- Publication number
- EA037115B1 EA037115B1 EA201790789A EA201790789A EA037115B1 EA 037115 B1 EA037115 B1 EA 037115B1 EA 201790789 A EA201790789 A EA 201790789A EA 201790789 A EA201790789 A EA 201790789A EA 037115 B1 EA037115 B1 EA 037115B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- nucleotides
- nucleotide
- rnai agent
- strand
- hao1
- Prior art date
Links
- 102100038837 2-Hydroxyacid oxidase 1 Human genes 0.000 title claims abstract description 123
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 97
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 title claims abstract description 77
- 108010062584 glycollate oxidase Proteins 0.000 title claims description 119
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title description 135
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 title description 28
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims abstract description 334
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims abstract description 289
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims abstract description 271
- 230000009368 gene silencing by RNA Effects 0.000 claims abstract description 226
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 claims abstract description 30
- 101001031589 Homo sapiens 2-Hydroxyacid oxidase 1 Proteins 0.000 claims abstract description 11
- 108091030071 RNAI Proteins 0.000 claims abstract 22
- 238000012986 modification Methods 0.000 claims description 168
- 230000004048 modification Effects 0.000 claims description 157
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 claims description 131
- 239000003446 ligand Substances 0.000 claims description 109
- 108091081021 Sense strand Proteins 0.000 claims description 106
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 claims description 84
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol group Chemical group [C@@H]1(CC[C@H]2[C@@H]3CC=C4C[C@@H](O)CC[C@]4(C)[C@H]3CC[C@]12C)[C@H](C)CCCC(C)C HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 claims description 47
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 claims description 24
- OVRNDRQMDRJTHS-KEWYIRBNSA-N N-acetyl-D-galactosamine Chemical class CC(=O)N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-KEWYIRBNSA-N 0.000 claims description 21
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K thiophosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=S RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 21
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 13
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims description 12
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 claims description 10
- POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-N dodecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCC(O)=O POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 claims description 10
- 125000005642 phosphothioate group Chemical group 0.000 claims description 9
- YACKEPLHDIMKIO-UHFFFAOYSA-N methylphosphonic acid Chemical compound CP(O)(O)=O YACKEPLHDIMKIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 claims description 5
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 claims description 5
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 claims description 3
- KBDWGFZSICOZSJ-UHFFFAOYSA-N 5-methyl-2,3-dihydro-1H-pyrimidin-4-one Chemical group N1CNC=C(C1=O)C KBDWGFZSICOZSJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 2
- PTMHPRAIXMAOOB-UHFFFAOYSA-L phosphoramidate Chemical compound NP([O-])([O-])=O PTMHPRAIXMAOOB-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 2
- 125000001921 locked nucleotide group Chemical group 0.000 claims 1
- 150000002780 morpholines Chemical class 0.000 claims 1
- GMTCPFCMAHMEMT-UHFFFAOYSA-N n-decyldecan-1-amine Chemical group CCCCCCCCCCNCCCCCCCCCC GMTCPFCMAHMEMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 101150105486 HAO1 gene Proteins 0.000 abstract description 55
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 abstract description 49
- 230000008685 targeting Effects 0.000 abstract description 28
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 abstract description 7
- 238000012228 RNA interference-mediated gene silencing Methods 0.000 description 204
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 168
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 112
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 85
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 85
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 84
- 239000002585 base Substances 0.000 description 80
- -1 deoxyribothymine Natural products 0.000 description 74
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 69
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 64
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 63
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 63
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 60
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 58
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 49
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 48
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 44
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 37
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 36
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 35
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 35
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 33
- 239000000562 conjugate Substances 0.000 description 33
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 32
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 31
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 31
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 31
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 31
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 31
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 30
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 27
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 26
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 25
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 25
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 24
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 24
- NRJAVPSFFCBXDT-HUESYALOSA-N 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC NRJAVPSFFCBXDT-HUESYALOSA-N 0.000 description 23
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 23
- 239000004530 micro-emulsion Substances 0.000 description 22
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 22
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 22
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 20
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 20
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 19
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 18
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 18
- IYMAXBFPHPZYIK-BQBZGAKWSA-N Arg-Gly-Asp Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O IYMAXBFPHPZYIK-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 17
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 17
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 16
- MBLBDJOUHNCFQT-UHFFFAOYSA-N N-acetyl-D-galactosamine Natural products CC(=O)NC(C=O)C(O)C(O)C(O)CO MBLBDJOUHNCFQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 16
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 16
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 16
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 16
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 16
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 16
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 16
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 15
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 15
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 15
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 15
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 15
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 14
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 14
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 14
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 14
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 14
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 14
- WNXJIVFYUVYPPR-UHFFFAOYSA-N 1,3-dioxolane Chemical compound C1COCO1 WNXJIVFYUVYPPR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 13
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 13
- UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N guanine Chemical compound O=C1NC(N)=NC2=C1N=CN2 UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 13
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 13
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 13
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 13
- 239000012096 transfection reagent Substances 0.000 description 13
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-M Glycolate Chemical compound OCC([O-])=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 12
- 241000282567 Macaca fascicularis Species 0.000 description 12
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 12
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 description 12
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 12
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 12
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 12
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 12
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 12
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 12
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 12
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 12
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 12
- 238000012552 review Methods 0.000 description 12
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 11
- 150000001720 carbohydrates Chemical group 0.000 description 11
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 11
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 11
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 11
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 11
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 11
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 11
- 239000000463 material Substances 0.000 description 11
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 11
- 229940126585 therapeutic drug Drugs 0.000 description 11
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 11
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 10
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 10
- ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N Uracil Chemical compound O=C1C=CNC(=O)N1 ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 10
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 10
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 10
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 10
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 10
- 238000011160 research Methods 0.000 description 10
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 10
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 10
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 10
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 10
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 10
- 102000000574 RNA-Induced Silencing Complex Human genes 0.000 description 9
- 108010016790 RNA-Induced Silencing Complex Proteins 0.000 description 9
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 9
- 230000000021 endosomolytic effect Effects 0.000 description 9
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 9
- 230000030279 gene silencing Effects 0.000 description 9
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 9
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 9
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 9
- 230000002485 urinary effect Effects 0.000 description 9
- LDGWQMRUWMSZIU-LQDDAWAPSA-M 2,3-bis[(z)-octadec-9-enoxy]propyl-trimethylazanium;chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCCOCC(C[N+](C)(C)C)OCCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC LDGWQMRUWMSZIU-LQDDAWAPSA-M 0.000 description 8
- 108091023037 Aptamer Proteins 0.000 description 8
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N Ribose Natural products OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 8
- 102100026842 Serine-pyruvate aminotransferase Human genes 0.000 description 8
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 8
- HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N alpha-D-Furanose-Ribose Natural products OCC1OC(O)C(O)C1O HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 150000001408 amides Chemical group 0.000 description 8
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 8
- 108010072041 arginyl-glycyl-aspartic acid Proteins 0.000 description 8
- 239000003833 bile salt Substances 0.000 description 8
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 8
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 8
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 8
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 8
- OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N cytosine Chemical compound NC=1C=CNC(=O)N=1 OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 8
- MWRBNPKJOOWZPW-CLFAGFIQSA-N dioleoyl phosphatidylethanolamine Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(=O)OCCN)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC MWRBNPKJOOWZPW-CLFAGFIQSA-N 0.000 description 8
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 8
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 8
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N hexadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 8
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 8
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 8
- 239000000816 peptidomimetic Substances 0.000 description 8
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 8
- 229920000768 polyamine Polymers 0.000 description 8
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 8
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 8
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 8
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 8
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 8
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 8
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 8
- KILNVBDSWZSGLL-KXQOOQHDSA-N 1,2-dihexadecanoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC KILNVBDSWZSGLL-KXQOOQHDSA-N 0.000 description 7
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 7
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 7
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 7
- 108010039918 Polylysine Proteins 0.000 description 7
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 7
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 7
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 7
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 description 7
- 239000000074 antisense oligonucleotide Substances 0.000 description 7
- 238000012230 antisense oligonucleotides Methods 0.000 description 7
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 7
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 7
- 229940093761 bile salts Drugs 0.000 description 7
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 7
- KXGVEGMKQFWNSR-UHFFFAOYSA-N deoxycholic acid Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)C(O)C2 KXGVEGMKQFWNSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 210000001163 endosome Anatomy 0.000 description 7
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 7
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 7
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 7
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 7
- WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N phosphatidylcholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N 0.000 description 7
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 7
- 229920000656 polylysine Polymers 0.000 description 7
- 239000000047 product Substances 0.000 description 7
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 7
- 230000001177 retroviral effect Effects 0.000 description 7
- 125000002652 ribonucleotide group Chemical group 0.000 description 7
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 7
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 7
- 229930024421 Adenine Natural products 0.000 description 6
- HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N D-ribofuranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H]1O HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N 0.000 description 6
- 108010042407 Endonucleases Proteins 0.000 description 6
- 108091093094 Glycol nucleic acid Proteins 0.000 description 6
- 101000629622 Homo sapiens Serine-pyruvate aminotransferase Proteins 0.000 description 6
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 6
- 101100338329 Mus musculus Hao1 gene Proteins 0.000 description 6
- 108091093037 Peptide nucleic acid Proteins 0.000 description 6
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229960000643 adenine Drugs 0.000 description 6
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 6
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 6
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 6
- YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N arachidonic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N 0.000 description 6
- 239000003613 bile acid Substances 0.000 description 6
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 6
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 6
- BHQCQFFYRZLCQQ-OELDTZBJSA-N cholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 BHQCQFFYRZLCQQ-OELDTZBJSA-N 0.000 description 6
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229940104302 cytosine Drugs 0.000 description 6
- GHVNFZFCNZKVNT-UHFFFAOYSA-N decanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCC(O)=O GHVNFZFCNZKVNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 6
- OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N folic acid Chemical compound C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 6
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 6
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 6
- WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-N octanoic acid Chemical compound CCCCCCCC(O)=O WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 6
- 125000004437 phosphorous atom Chemical group 0.000 description 6
- 208000000891 primary hyperoxaluria type 1 Diseases 0.000 description 6
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 6
- 229940083542 sodium Drugs 0.000 description 6
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 6
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 6
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 6
- 229940035893 uracil Drugs 0.000 description 6
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 6
- BHQCQFFYRZLCQQ-UHFFFAOYSA-N (3alpha,5alpha,7alpha,12alpha)-3,7,12-trihydroxy-cholan-24-oic acid Natural products OC1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)C(O)C2 BHQCQFFYRZLCQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N Adenine Chemical compound NC1=NC=NC2=C1N=CN2 GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000004380 Cholic acid Substances 0.000 description 5
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical class OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 102000015779 HDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 5
- 108010010234 HDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 5
- 102000007330 LDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 5
- 108010007622 LDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 5
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 5
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical class CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 101100338330 Rattus norvegicus Hao1 gene Proteins 0.000 description 5
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 5
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 5
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 5
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 5
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 5
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 5
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 5
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 5
- 230000008859 change Effects 0.000 description 5
- 235000019416 cholic acid Nutrition 0.000 description 5
- 229960002471 cholic acid Drugs 0.000 description 5
- 239000000412 dendrimer Substances 0.000 description 5
- 229920000736 dendritic polymer Polymers 0.000 description 5
- KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N deoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N 0.000 description 5
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 5
- 229960003724 dimyristoylphosphatidylcholine Drugs 0.000 description 5
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 5
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 5
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 5
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 5
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 5
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 5
- 230000036541 health Effects 0.000 description 5
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 5
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 5
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 5
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 5
- NFQBIAXADRDUGK-KWXKLSQISA-N n,n-dimethyl-2,3-bis[(9z,12z)-octadeca-9,12-dienoxy]propan-1-amine Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/CCCCCCCCOCC(CN(C)C)OCCCCCCCC\C=C/C\C=C/CCCCC NFQBIAXADRDUGK-KWXKLSQISA-N 0.000 description 5
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 5
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 5
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 5
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 5
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 5
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 5
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 5
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 5
- RUDATBOHQWOJDD-UHFFFAOYSA-N (3beta,5beta,7alpha)-3,7-Dihydroxycholan-24-oic acid Natural products OC1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)CC2 RUDATBOHQWOJDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- OYHQOLUKZRVURQ-NTGFUMLPSA-N (9Z,12Z)-9,10,12,13-tetratritiooctadeca-9,12-dienoic acid Chemical compound C(CCCCCCC\C(=C(/C\C(=C(/CCCCC)\[3H])\[3H])\[3H])\[3H])(=O)O OYHQOLUKZRVURQ-NTGFUMLPSA-N 0.000 description 4
- WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N (E)-8-Octadecenoic acid Natural products CCCCCCCCCC=CCCCCCCC(O)=O WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N (±)-α-Tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- CITHEXJVPOWHKC-UUWRZZSWSA-N 1,2-di-O-myristoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCCCCCCC CITHEXJVPOWHKC-UUWRZZSWSA-N 0.000 description 4
- RVHYPUORVDKRTM-UHFFFAOYSA-N 1-[2-[bis(2-hydroxydodecyl)amino]ethyl-[2-[4-[2-[bis(2-hydroxydodecyl)amino]ethyl]piperazin-1-yl]ethyl]amino]dodecan-2-ol Chemical compound CCCCCCCCCCC(O)CN(CC(O)CCCCCCCCCC)CCN(CC(O)CCCCCCCCCC)CCN1CCN(CCN(CC(O)CCCCCCCCCC)CC(O)CCCCCCCCCC)CC1 RVHYPUORVDKRTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IZHVBANLECCAGF-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxy-3-(octadecanoyloxy)propyl octadecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC IZHVBANLECCAGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 20:1omega9c fatty acid Natural products CCCCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WOKDXPHSIQRTJF-UHFFFAOYSA-N 3-[3-[3-[3-[3-[3-[3-[3-[3-(2,3-dihydroxypropoxy)-2-hydroxypropoxy]-2-hydroxypropoxy]-2-hydroxypropoxy]-2-hydroxypropoxy]-2-hydroxypropoxy]-2-hydroxypropoxy]-2-hydroxypropoxy]-2-hydroxypropoxy]propane-1,2-diol Chemical compound OCC(O)COCC(O)COCC(O)COCC(O)COCC(O)COCC(O)COCC(O)COCC(O)COCC(O)COCC(O)CO WOKDXPHSIQRTJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 9-Heptadecensaeure Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000013607 AAV vector Substances 0.000 description 4
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 4
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 4
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 4
- 102000004533 Endonucleases Human genes 0.000 description 4
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 4
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N Glycolic acid Chemical class OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000005639 Lauric acid Substances 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- OVRNDRQMDRJTHS-CBQIKETKSA-N N-Acetyl-D-Galactosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@@H](O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-CBQIKETKSA-N 0.000 description 4
- OHLUUHNLEMFGTQ-UHFFFAOYSA-N N-methylacetamide Chemical compound CNC(C)=O OHLUUHNLEMFGTQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108700019961 Neoplasm Genes Proteins 0.000 description 4
- 102000048850 Neoplasm Genes Human genes 0.000 description 4
- 239000005642 Oleic acid Substances 0.000 description 4
- ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N Oleic acid Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000021314 Palmitic acid Nutrition 0.000 description 4
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 4
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 4
- 102000006382 Ribonucleases Human genes 0.000 description 4
- 108010083644 Ribonucleases Proteins 0.000 description 4
- 108091028664 Ribonucleotide Proteins 0.000 description 4
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 4
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 4
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 4
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 4
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 4
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 4
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 4
- DTOSIQBPPRVQHS-PDBXOOCHSA-N alpha-linolenic acid Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCCCCC(O)=O DTOSIQBPPRVQHS-PDBXOOCHSA-N 0.000 description 4
- 235000020661 alpha-linolenic acid Nutrition 0.000 description 4
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 4
- IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N beta-L-thymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(CO)C(O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 4
- 230000004700 cellular uptake Effects 0.000 description 4
- 229940106189 ceramide Drugs 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 4
- RUDATBOHQWOJDD-BSWAIDMHSA-N chenodeoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)CC1 RUDATBOHQWOJDD-BSWAIDMHSA-N 0.000 description 4
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 4
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 4
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 4
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 4
- 239000005547 deoxyribonucleotide Substances 0.000 description 4
- 125000002637 deoxyribonucleotide group Chemical group 0.000 description 4
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 229960002086 dextran Drugs 0.000 description 4
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 4
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 4
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 description 4
- 235000019152 folic acid Nutrition 0.000 description 4
- 239000011724 folic acid Substances 0.000 description 4
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 4
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 4
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 4
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 4
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 4
- HHLFWLYXYJOTON-UHFFFAOYSA-N glyoxylic acid Chemical compound OC(=O)C=O HHLFWLYXYJOTON-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 4
- 238000007913 intrathecal administration Methods 0.000 description 4
- QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N isooleic acid Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCCC(O)=O QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229960004488 linolenic acid Drugs 0.000 description 4
- KQQKGWQCNNTQJW-UHFFFAOYSA-N linolenic acid Natural products CC=CCCC=CCC=CCCCCCCCC(O)=O KQQKGWQCNNTQJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N m-cresol Chemical compound CC1=CC=CC(O)=C1 RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 4
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 4
- MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N methamphetamine Chemical compound CN[C@@H](C)CC1=CC=CC=C1 MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 4
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 4
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 4
- WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N n-Pentadecanoic acid Natural products CCCCCCCCCCCCCCC(O)=O WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 125000004430 oxygen atom Chemical group O* 0.000 description 4
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 4
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 4
- 150000004804 polysaccharides Chemical class 0.000 description 4
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 239000003380 propellant Substances 0.000 description 4
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 4
- 238000011552 rat model Methods 0.000 description 4
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 4
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 4
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 4
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 4
- 239000002336 ribonucleotide Substances 0.000 description 4
- 125000000548 ribosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- ATHGHQPFGPMSJY-UHFFFAOYSA-N spermidine Chemical compound NCCCCNCCCN ATHGHQPFGPMSJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- PFNFFQXMRSDOHW-UHFFFAOYSA-N spermine Chemical compound NCCCNCCCCNCCCN PFNFFQXMRSDOHW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 4
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 4
- 229940032147 starch Drugs 0.000 description 4
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 4
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 4
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 4
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 4
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- TUNFSRHWOTWDNC-HKGQFRNVSA-N tetradecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCC[14C](O)=O TUNFSRHWOTWDNC-HKGQFRNVSA-N 0.000 description 4
- RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N thymine Chemical group CC1=CNC(=O)NC1=O RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 4
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 4
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 4
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 4
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 4
- OQQOAWVKVDAJOI-UHFFFAOYSA-N (2-dodecanoyloxy-3-hydroxypropyl) dodecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCC(=O)OCC(CO)OC(=O)CCCCCCCCCCC OQQOAWVKVDAJOI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 description 3
- SLKDGVPOSSLUAI-PGUFJCEWSA-N 1,2-dihexadecanoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine zwitterion Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OCCN)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC SLKDGVPOSSLUAI-PGUFJCEWSA-N 0.000 description 3
- AXTGDCSMTYGJND-UHFFFAOYSA-N 1-dodecylazepan-2-one Chemical compound CCCCCCCCCCCCN1CCCCCC1=O AXTGDCSMTYGJND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RZRNAYUHWVFMIP-KTKRTIGZSA-N 1-oleoylglycerol Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC(O)CO RZRNAYUHWVFMIP-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 3
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 3
- LRFJOIPOPUJUMI-KWXKLSQISA-N 2-[2,2-bis[(9z,12z)-octadeca-9,12-dienyl]-1,3-dioxolan-4-yl]-n,n-dimethylethanamine Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/CCCCCCCCC1(CCCCCCCC\C=C/C\C=C/CCCCC)OCC(CCN(C)C)O1 LRFJOIPOPUJUMI-KWXKLSQISA-N 0.000 description 3
- KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 7H-purine Chemical compound N1=CNC2=NC=NC2=C1 KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 3
- 239000005632 Capric acid (CAS 334-48-5) Substances 0.000 description 3
- 239000005635 Caprylic acid (CAS 124-07-2) Substances 0.000 description 3
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 3
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102100031780 Endonuclease Human genes 0.000 description 3
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010007979 Glycocholic Acid Proteins 0.000 description 3
- 101000941029 Homo sapiens Endoplasmic reticulum junction formation protein lunapark Proteins 0.000 description 3
- 101000991410 Homo sapiens Nucleolar and spindle-associated protein 1 Proteins 0.000 description 3
- 229930010555 Inosine Natural products 0.000 description 3
- UGQMRVRMYYASKQ-KQYNXXCUSA-N Inosine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C2=NC=NC(O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 3
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 3
- 108090001090 Lectins Proteins 0.000 description 3
- 102000004856 Lectins Human genes 0.000 description 3
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N N-acetyl-beta-D-glucosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N 0.000 description 3
- 101710163270 Nuclease Proteins 0.000 description 3
- 102100030991 Nucleolar and spindle-associated protein 1 Human genes 0.000 description 3
- 229920002873 Polyethylenimine Polymers 0.000 description 3
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 3
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 3
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 description 3
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000700618 Vaccinia virus Species 0.000 description 3
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 description 3
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 description 3
- UAYXCKWHISTQAV-MSNJVRRCSA-N [(2R,3R,4R,5R)-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)-4-hexadecoxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] dihydrogen phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCO[C@@H]1[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)N=C(N)C=C1 UAYXCKWHISTQAV-MSNJVRRCSA-N 0.000 description 3
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 3
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 3
- 150000001252 acrylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 3
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 3
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 3
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 3
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 3
- 150000008051 alkyl sulfates Chemical class 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 3
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 3
- 235000021342 arachidonic acid Nutrition 0.000 description 3
- 229940114079 arachidonic acid Drugs 0.000 description 3
- 150000001540 azides Chemical class 0.000 description 3
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 3
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 3
- 125000003636 chemical group Chemical group 0.000 description 3
- 229960001091 chenodeoxycholic acid Drugs 0.000 description 3
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 3
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 3
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 3
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 3
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 3
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 3
- 239000003405 delayed action preparation Substances 0.000 description 3
- 229960003964 deoxycholic acid Drugs 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 229960005160 dimyristoylphosphatidylglycerol Drugs 0.000 description 3
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 3
- BPHQZTVXXXJVHI-AJQTZOPKSA-N ditetradecanoyl phosphatidylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@@H](O)CO)OC(=O)CCCCCCCCCCCCC BPHQZTVXXXJVHI-AJQTZOPKSA-N 0.000 description 3
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 3
- 229940071106 ethylenediaminetetraacetate Drugs 0.000 description 3
- 150000002191 fatty alcohols Chemical class 0.000 description 3
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 3
- 238000001476 gene delivery Methods 0.000 description 3
- 230000037440 gene silencing effect Effects 0.000 description 3
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 3
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 3
- RFDAIACWWDREDC-FRVQLJSFSA-N glycocholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(=O)NCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 RFDAIACWWDREDC-FRVQLJSFSA-N 0.000 description 3
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 3
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 description 3
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 3
- 229960003786 inosine Drugs 0.000 description 3
- 102000006495 integrins Human genes 0.000 description 3
- 108010044426 integrins Proteins 0.000 description 3
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 3
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 3
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 3
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 3
- 238000007914 intraventricular administration Methods 0.000 description 3
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 3
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 3
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 3
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 3
- 239000002523 lectin Substances 0.000 description 3
- 210000005228 liver tissue Anatomy 0.000 description 3
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 3
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 3
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 3
- 125000001570 methylene group Chemical group [H]C([H])([*:1])[*:2] 0.000 description 3
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 3
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 3
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 3
- 229910052758 niobium Inorganic materials 0.000 description 3
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 3
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 description 3
- 125000003835 nucleoside group Chemical group 0.000 description 3
- 229960002446 octanoic acid Drugs 0.000 description 3
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 3
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 3
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 3
- 229920000058 polyacrylate Polymers 0.000 description 3
- 229920000223 polyglycerol Polymers 0.000 description 3
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 3
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 3
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 3
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 3
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000003242 quaternary ammonium salts Chemical class 0.000 description 3
- 210000001533 respiratory mucosa Anatomy 0.000 description 3
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 3
- 229920002477 rna polymer Polymers 0.000 description 3
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 3
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 3
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 3
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 3
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 3
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 3
- 229920001059 synthetic polymer Polymers 0.000 description 3
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 3
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000012222 talc Nutrition 0.000 description 3
- 150000004044 tetrasaccharides Chemical class 0.000 description 3
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 3
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 3
- 150000004043 trisaccharides Chemical class 0.000 description 3
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 3
- 235000019165 vitamin E Nutrition 0.000 description 3
- 239000011709 vitamin E Substances 0.000 description 3
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 3
- 235000021119 whey protein Nutrition 0.000 description 3
- OPCHFPHZPIURNA-MFERNQICSA-N (2s)-2,5-bis(3-aminopropylamino)-n-[2-(dioctadecylamino)acetyl]pentanamide Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCN(CC(=O)NC(=O)[C@H](CCCNCCCN)NCCCN)CCCCCCCCCCCCCCCCCC OPCHFPHZPIURNA-MFERNQICSA-N 0.000 description 2
- 125000000008 (C1-C10) alkyl group Chemical group 0.000 description 2
- LVGUZGTVOIAKKC-UHFFFAOYSA-N 1,1,1,2-tetrafluoroethane Chemical compound FCC(F)(F)F LVGUZGTVOIAKKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SNKAWJBJQDLSFF-NVKMUCNASA-N 1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC SNKAWJBJQDLSFF-NVKMUCNASA-N 0.000 description 2
- BIABMEZBCHDPBV-MPQUPPDSSA-N 1,2-palmitoyl-sn-glycero-3-phospho-(1'-sn-glycerol) Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@@H](O)CO)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC BIABMEZBCHDPBV-MPQUPPDSSA-N 0.000 description 2
- LDVVTQMJQSCDMK-UHFFFAOYSA-N 1,3-dihydroxypropan-2-yl formate Chemical compound OCC(CO)OC=O LDVVTQMJQSCDMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IQFYYKKMVGJFEH-BIIVOSGPSA-N 2'-deoxythymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-BIIVOSGPSA-N 0.000 description 2
- 101710160338 2-Hydroxyacid oxidase 1 Proteins 0.000 description 2
- FZWGECJQACGGTI-UHFFFAOYSA-N 2-amino-7-methyl-1,7-dihydro-6H-purin-6-one Chemical compound NC1=NC(O)=C2N(C)C=NC2=N1 FZWGECJQACGGTI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JQKOHRZNEOQNJE-ZZEZOPTASA-N 2-azaniumylethyl [3-octadecanoyloxy-2-[(z)-octadec-9-enoyl]oxypropyl] phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(COP([O-])(=O)OCC[NH3+])OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC JQKOHRZNEOQNJE-ZZEZOPTASA-N 0.000 description 2
- OHXPGWPVLFPUSM-KLRNGDHRSA-N 3,7,12-trioxo-5beta-cholanic acid Chemical compound C1CC(=O)C[C@H]2CC(=O)[C@H]3[C@@H]4CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]4(C)C(=O)C[C@@H]3[C@]21C OHXPGWPVLFPUSM-KLRNGDHRSA-N 0.000 description 2
- HIQIXEFWDLTDED-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxy-1-piperidin-4-ylpyrrolidin-2-one Chemical compound O=C1CC(O)CN1C1CCNCC1 HIQIXEFWDLTDED-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RYVNIFSIEDRLSJ-UHFFFAOYSA-N 5-(hydroxymethyl)cytosine Chemical compound NC=1NC(=O)N=CC=1CO RYVNIFSIEDRLSJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LRSASMSXMSNRBT-UHFFFAOYSA-N 5-methylcytosine Chemical compound CC1=CNC(=O)N=C1N LRSASMSXMSNRBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UJBCLAXPPIDQEE-UHFFFAOYSA-N 5-prop-1-ynyl-1h-pyrimidine-2,4-dione Chemical compound CC#CC1=CNC(=O)NC1=O UJBCLAXPPIDQEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091027075 5S-rRNA precursor Proteins 0.000 description 2
- PEHVGBZKEYRQSX-UHFFFAOYSA-N 7-deaza-adenine Chemical compound NC1=NC=NC2=C1C=CN2 PEHVGBZKEYRQSX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HCGHYQLFMPXSDU-UHFFFAOYSA-N 7-methyladenine Chemical compound C1=NC(N)=C2N(C)C=NC2=N1 HCGHYQLFMPXSDU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LRFVTYWOQMYALW-UHFFFAOYSA-N 9H-xanthine Chemical compound O=C1NC(=O)NC2=C1NC=N2 LRFVTYWOQMYALW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101150021474 AGT1 gene Proteins 0.000 description 2
- 244000215068 Acacia senegal Species 0.000 description 2
- 101800002011 Amphipathic peptide Proteins 0.000 description 2
- 229920000856 Amylose Polymers 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N Aspirin Chemical compound CC(=O)OC1=CC=CC=C1C(O)=O BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N Beta-D-1-Arabinofuranosylthymine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101710113962 Bombinin-like peptides Proteins 0.000 description 2
- KAKZBPTYRLMSJV-UHFFFAOYSA-N Butadiene Chemical group C=CC=C KAKZBPTYRLMSJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108090000565 Capsid Proteins Proteins 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 2
- 102100023321 Ceruloplasmin Human genes 0.000 description 2
- 201000006082 Chickenpox Diseases 0.000 description 2
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 description 2
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 2
- 108010069514 Cyclic Peptides Proteins 0.000 description 2
- 102000001189 Cyclic Peptides Human genes 0.000 description 2
- 229930105110 Cyclosporin A Natural products 0.000 description 2
- PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N Cyclosporin A Chemical compound CC[C@@H]1NC(=O)[C@H]([C@H](O)[C@H](C)C\C=C\C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C1=O PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N 0.000 description 2
- 108010036949 Cyclosporine Proteins 0.000 description 2
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 2
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 2
- 241000701022 Cytomegalovirus Species 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 2
- 150000008574 D-amino acids Chemical class 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 2
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000016911 Deoxyribonucleases Human genes 0.000 description 2
- 108010053770 Deoxyribonucleases Proteins 0.000 description 2
- 241000702421 Dependoparvovirus Species 0.000 description 2
- LCGLNKUTAGEVQW-UHFFFAOYSA-N Dimethyl ether Chemical compound COC LCGLNKUTAGEVQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N Fucose Natural products C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N 0.000 description 2
- 102100041003 Glutamate carboxypeptidase 2 Human genes 0.000 description 2
- 108010035713 Glycodeoxycholic Acid Proteins 0.000 description 2
- WVULKSPCQVQLCU-UHFFFAOYSA-N Glycodeoxycholic acid Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(=O)NCC(O)=O)C)C1(C)C(O)C2 WVULKSPCQVQLCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229930186217 Glycolipid Natural products 0.000 description 2
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 2
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 2
- 108010043121 Green Fluorescent Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000004144 Green Fluorescent Proteins Human genes 0.000 description 2
- 229920000084 Gum arabic Polymers 0.000 description 2
- NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N Histamine Chemical compound NCCC1=CN=CN1 NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000006992 Interferon-alpha Human genes 0.000 description 2
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 description 2
- 206010065973 Iron Overload Diseases 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 2
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N L-fucopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N 0.000 description 2
- SMEROWZSTRWXGI-UHFFFAOYSA-N Lithocholsaeure Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)CC2 SMEROWZSTRWXGI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 2
- 108060004795 Methyltransferase Proteins 0.000 description 2
- YNAVUWVOSKDBBP-UHFFFAOYSA-N Morpholine Natural products C1COCCN1 YNAVUWVOSKDBBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N Mytomycin Chemical compound C1N2C(C(C(C)=C(N)C3=O)=O)=C3[C@@H](COC(N)=O)[C@@]2(OC)[C@@H]2[C@H]1N2 NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N 0.000 description 2
- OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N N-Pteroyl-L-glutaminsaeure Natural products C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N N-acelyl-D-glucosamine Natural products CC(=O)NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N N-acetylglucosamine Natural products CC(=O)N[C@@H](C=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N 0.000 description 2
- RFDAIACWWDREDC-UHFFFAOYSA-N Na salt-Glycocholic acid Natural products OC1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(=O)NCC(O)=O)C)C1(C)C(O)C2 RFDAIACWWDREDC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CMWTZPSULFXXJA-UHFFFAOYSA-N Naproxen Natural products C1=C(C(C)C(O)=O)C=CC2=CC(OC)=CC=C21 CMWTZPSULFXXJA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000636 Northern blotting Methods 0.000 description 2
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 description 2
- 208000037273 Pathologic Processes Diseases 0.000 description 2
- KPKZJLCSROULON-QKGLWVMZSA-N Phalloidin Chemical compound N1C(=O)[C@@H]([C@@H](O)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C[C@@](C)(O)CO)NC(=O)[C@H](C2)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H]3C[C@H](O)CN3C(=O)[C@@H]1CSC1=C2C2=CC=CC=C2N1 KPKZJLCSROULON-QKGLWVMZSA-N 0.000 description 2
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 2
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N Progesterone Chemical compound C1CC2=CC(=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H](C(=O)C)[C@@]1(C)CC2 RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N 0.000 description 2
- 102000007327 Protamines Human genes 0.000 description 2
- 108010007568 Protamines Proteins 0.000 description 2
- 101710149951 Protein Tat Proteins 0.000 description 2
- RADKZDMFGJYCBB-UHFFFAOYSA-N Pyridoxal Chemical compound CC1=NC=C(CO)C(C=O)=C1O RADKZDMFGJYCBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N Pyrimidine Chemical compound C1=CN=CN=C1 CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RWRDLPDLKQPQOW-UHFFFAOYSA-N Pyrrolidine Chemical compound C1CCNC1 RWRDLPDLKQPQOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 2
- AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N Riboflavin Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N 0.000 description 2
- MEFKEPWMEQBLKI-AIRLBKTGSA-O S-adenosyl-L-methionine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](C[S+](CC[C@H]([NH3+])C([O-])=O)C)O[C@H]1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1 MEFKEPWMEQBLKI-AIRLBKTGSA-O 0.000 description 2
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229920002125 Sokalan® Polymers 0.000 description 2
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010046980 Varicella Diseases 0.000 description 2
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 description 2
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 description 2
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 2
- 241000711975 Vesicular stomatitis virus Species 0.000 description 2
- 229930003427 Vitamin E Natural products 0.000 description 2
- DSNRWDQKZIEDDB-GCMPNPAFSA-N [(2r)-3-[2,3-dihydroxypropoxy(hydroxy)phosphoryl]oxy-2-[(z)-octadec-9-enoyl]oxypropyl] (z)-octadec-9-enoate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OCC(O)CO)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC DSNRWDQKZIEDDB-GCMPNPAFSA-N 0.000 description 2
- HMNZFMSWFCAGGW-XPWSMXQVSA-N [3-[hydroxy(2-hydroxyethoxy)phosphoryl]oxy-2-[(e)-octadec-9-enoyl]oxypropyl] (e)-octadec-9-enoate Chemical compound CCCCCCCC\C=C\CCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(=O)OCCO)OC(=O)CCCCCCC\C=C\CCCCCCCC HMNZFMSWFCAGGW-XPWSMXQVSA-N 0.000 description 2
- 235000010489 acacia gum Nutrition 0.000 description 2
- 239000000205 acacia gum Substances 0.000 description 2
- DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;sodium Chemical compound [Na].CC(O)=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960001138 acetylsalicylic acid Drugs 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- 125000002015 acyclic group Chemical group 0.000 description 2
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 2
- OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N adenosine Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 2
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 2
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 2
- 150000001345 alkine derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 125000005907 alkyl ester group Chemical group 0.000 description 2
- 125000002947 alkylene group Chemical group 0.000 description 2
- 125000000304 alkynyl group Chemical group 0.000 description 2
- 150000001412 amines Chemical group 0.000 description 2
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 2
- 239000003945 anionic surfactant Substances 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 210000001742 aqueous humor Anatomy 0.000 description 2
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 210000000941 bile Anatomy 0.000 description 2
- 239000012148 binding buffer Substances 0.000 description 2
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 2
- 239000008366 buffered solution Substances 0.000 description 2
- 238000010804 cDNA synthesis Methods 0.000 description 2
- OSGAYBCDTDRGGQ-UHFFFAOYSA-L calcium sulfate Chemical compound [Ca+2].[O-]S([O-])(=O)=O OSGAYBCDTDRGGQ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 2
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 2
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 2
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 2
- 210000001175 cerebrospinal fluid Anatomy 0.000 description 2
- 229960001265 ciclosporin Drugs 0.000 description 2
- 235000015165 citric acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 2
- 230000000536 complexating effect Effects 0.000 description 2
- 239000008139 complexing agent Substances 0.000 description 2
- 230000001268 conjugating effect Effects 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 2
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 2
- ZDPUTNZENXVHJC-UHFFFAOYSA-N cumingianoside D Natural products C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=CN1C1OC(CO)C(OP(O)(O)=O)C1O ZDPUTNZENXVHJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000000753 cycloalkyl group Chemical group 0.000 description 2
- 229960002997 dehydrocholic acid Drugs 0.000 description 2
- 229940009976 deoxycholate Drugs 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 2
- 210000004207 dermis Anatomy 0.000 description 2
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 2
- FNSGMDGTCLGGBA-UHFFFAOYSA-N dimethylamino butanoate Chemical compound CCCC(=O)ON(C)C FNSGMDGTCLGGBA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 239000012149 elution buffer Substances 0.000 description 2
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 description 2
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000013613 expression plasmid Substances 0.000 description 2
- 238000001125 extrusion Methods 0.000 description 2
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 2
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 2
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 2
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 2
- 229940014144 folate Drugs 0.000 description 2
- 229960000304 folic acid Drugs 0.000 description 2
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 2
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 2
- 230000000799 fusogenic effect Effects 0.000 description 2
- WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N gamma-tocopherol Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC1CCC2C(C)C(O)C(C)C(C)C2O1 WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000002270 gangliosides Chemical class 0.000 description 2
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 2
- 239000007903 gelatin capsule Substances 0.000 description 2
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 2
- RZRNAYUHWVFMIP-HXUWFJFHSA-N glycerol monolinoleate Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OC[C@H](O)CO RZRNAYUHWVFMIP-HXUWFJFHSA-N 0.000 description 2
- 229940074049 glyceryl dilaurate Drugs 0.000 description 2
- 229940074045 glyceryl distearate Drugs 0.000 description 2
- 229940099347 glycocholic acid Drugs 0.000 description 2
- WVULKSPCQVQLCU-BUXLTGKBSA-N glycodeoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(=O)NCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 WVULKSPCQVQLCU-BUXLTGKBSA-N 0.000 description 2
- 239000005090 green fluorescent protein Substances 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- ZDPUTNZENXVHJC-UUOKFMHZSA-N guanosine 3'-monophosphate Chemical compound C1=NC=2C(=O)NC(N)=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](OP(O)(O)=O)[C@H]1O ZDPUTNZENXVHJC-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 2
- 210000003128 head Anatomy 0.000 description 2
- 125000005842 heteroatom Chemical group 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 2
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 2
- 102000047383 human HAO1 Human genes 0.000 description 2
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 description 2
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 229920003063 hydroxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 2
- 229940031574 hydroxymethyl cellulose Drugs 0.000 description 2
- FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N hypoxanthine Chemical compound O=C1NC=NC2=C1NC=N2 FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VKOBVWXKNCXXDE-UHFFFAOYSA-N icosanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O VKOBVWXKNCXXDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000002460 imidazoles Chemical class 0.000 description 2
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- CGIGDMFJXJATDK-UHFFFAOYSA-N indomethacin Chemical compound CC1=C(CC(O)=O)C2=CC(OC)=CC=C2N1C(=O)C1=CC=C(Cl)C=C1 CGIGDMFJXJATDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008011 inorganic excipient Substances 0.000 description 2
- 239000000138 intercalating agent Substances 0.000 description 2
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 2
- XMGQYMWWDOXHJM-UHFFFAOYSA-N limonene Chemical compound CC(=C)C1CCC(C)=CC1 XMGQYMWWDOXHJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008206 lipophilic material Substances 0.000 description 2
- SMEROWZSTRWXGI-HVATVPOCSA-N lithocholic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)CC1 SMEROWZSTRWXGI-HVATVPOCSA-N 0.000 description 2
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 2
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 2
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 2
- 210000002751 lymph Anatomy 0.000 description 2
- 239000012139 lysis buffer Substances 0.000 description 2
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 2
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 2
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 2
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N methylparaben Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002493 microarray Methods 0.000 description 2
- 239000001788 mono and diglycerides of fatty acids Substances 0.000 description 2
- 229940074096 monoolein Drugs 0.000 description 2
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 2
- OZBZDYGIYDRTBV-RSLAUBRISA-N n,n-dimethyl-1,2-bis[(9z,12z,15z)-octadeca-9,12,15-trienoxy]propan-1-amine Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCCCCCOC(C)C(N(C)C)OCCCCCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/CC OZBZDYGIYDRTBV-RSLAUBRISA-N 0.000 description 2
- 229950006780 n-acetylglucosamine Drugs 0.000 description 2
- OHDXDNUPVVYWOV-UHFFFAOYSA-N n-methyl-1-(2-naphthalen-1-ylsulfanylphenyl)methanamine Chemical compound CNCC1=CC=CC=C1SC1=CC=CC2=CC=CC=C12 OHDXDNUPVVYWOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960002009 naproxen Drugs 0.000 description 2
- CMWTZPSULFXXJA-VIFPVBQESA-N naproxen Chemical compound C1=C([C@H](C)C(O)=O)C=CC2=CC(OC)=CC=C21 CMWTZPSULFXXJA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- 239000006199 nebulizer Substances 0.000 description 2
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 description 2
- 239000012457 nonaqueous media Substances 0.000 description 2
- 239000007764 o/w emulsion Substances 0.000 description 2
- 230000009437 off-target effect Effects 0.000 description 2
- 125000002811 oleoyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])/C([H])=C([H])\C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 2
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 2
- 239000008012 organic excipient Substances 0.000 description 2
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 2
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 2
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 2
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 2
- 230000009054 pathological process Effects 0.000 description 2
- 230000000149 penetrating effect Effects 0.000 description 2
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 2
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 2
- 150000004713 phosphodiesters Chemical group 0.000 description 2
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 2
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 2
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 2
- 229920000771 poly (alkylcyanoacrylate) Polymers 0.000 description 2
- 229920001308 poly(aminoacid) Polymers 0.000 description 2
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 2
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 2
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 2
- WGYKZJWCGVVSQN-UHFFFAOYSA-N propylamine Chemical compound CCCN WGYKZJWCGVVSQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000013772 propylene glycol Nutrition 0.000 description 2
- QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N propylparaben Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940048914 protamine Drugs 0.000 description 2
- ZCCUUQDIBDJBTK-UHFFFAOYSA-N psoralen Chemical compound C1=C2OC(=O)C=CC2=CC2=C1OC=C2 ZCCUUQDIBDJBTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 150000003212 purines Chemical class 0.000 description 2
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 2
- 210000005084 renal tissue Anatomy 0.000 description 2
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 2
- 125000006853 reporter group Chemical group 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 2
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 2
- HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N schardinger α-dextrin Chemical compound O1C(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(O)C2O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC2C(O)C(O)C1OC2CO HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000004911 serous fluid Anatomy 0.000 description 2
- RMAQACBXLXPBSY-UHFFFAOYSA-N silicic acid Chemical compound O[Si](O)(O)O RMAQACBXLXPBSY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000012239 silicon dioxide Nutrition 0.000 description 2
- 235000019812 sodium carboxymethyl cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 229920001027 sodium carboxymethylcellulose Polymers 0.000 description 2
- 235000019333 sodium laurylsulphate Nutrition 0.000 description 2
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 2
- 229940045946 sodium taurodeoxycholate Drugs 0.000 description 2
- YXHRQQJFKOHLAP-FVCKGWAHSA-M sodium;2-[[(4r)-4-[(3r,5r,8r,9s,10s,12s,13r,14s,17r)-3,12-dihydroxy-10,13-dimethyl-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl]pentanoyl]amino]ethanesulfonate Chemical compound [Na+].C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(=O)NCCS([O-])(=O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 YXHRQQJFKOHLAP-FVCKGWAHSA-M 0.000 description 2
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 2
- 229940063673 spermidine Drugs 0.000 description 2
- 229940063675 spermine Drugs 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 2
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 2
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 2
- 238000007910 systemic administration Methods 0.000 description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 2
- 231100001274 therapeutic index Toxicity 0.000 description 2
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 2
- UMGDCJDMYOKAJW-UHFFFAOYSA-N thiourea Chemical compound NC(N)=S UMGDCJDMYOKAJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 2
- 229940113082 thymine Drugs 0.000 description 2
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 2
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 2
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 2
- DCXXMTOCNZCJGO-UHFFFAOYSA-N tristearoylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC)COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC DCXXMTOCNZCJGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZDPHROOEEOARMN-UHFFFAOYSA-N undecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCC(O)=O ZDPHROOEEOARMN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940046009 vitamin E Drugs 0.000 description 2
- 239000007762 w/o emulsion Substances 0.000 description 2
- 239000011534 wash buffer Substances 0.000 description 2
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 2
- NOOLISFMXDJSKH-UTLUCORTSA-N (+)-Neomenthol Chemical compound CC(C)[C@@H]1CC[C@@H](C)C[C@@H]1O NOOLISFMXDJSKH-UTLUCORTSA-N 0.000 description 1
- DTGKSKDOIYIVQL-WEDXCCLWSA-N (+)-borneol Chemical compound C1C[C@@]2(C)[C@@H](O)C[C@@H]1C2(C)C DTGKSKDOIYIVQL-WEDXCCLWSA-N 0.000 description 1
- NFLGAXVYCFJBMK-RKDXNWHRSA-N (+)-isomenthone Natural products CC(C)[C@H]1CC[C@@H](C)CC1=O NFLGAXVYCFJBMK-RKDXNWHRSA-N 0.000 description 1
- REPVLJRCJUVQFA-UHFFFAOYSA-N (-)-isopinocampheol Natural products C1C(O)C(C)C2C(C)(C)C1C2 REPVLJRCJUVQFA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PUDXUJRJLRLJIU-QYVSTXNMSA-N (2r,3r,4r,5r)-5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)-4-(2-methoxyethoxy)oxolan-3-ol Chemical compound COCCO[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1 PUDXUJRJLRLJIU-QYVSTXNMSA-N 0.000 description 1
- YIMATHOGWXZHFX-WCTZXXKLSA-N (2r,3r,4r,5r)-5-(hydroxymethyl)-3-(2-methoxyethoxy)oxolane-2,4-diol Chemical compound COCCO[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@H]1O YIMATHOGWXZHFX-WCTZXXKLSA-N 0.000 description 1
- JNYAEWCLZODPBN-JGWLITMVSA-N (2r,3r,4s)-2-[(1r)-1,2-dihydroxyethyl]oxolane-3,4-diol Chemical class OC[C@@H](O)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1O JNYAEWCLZODPBN-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- PMBSJRVVKHNWGX-GIWSHQQXSA-N (2r,3s,4r,5r)-2-(6-aminopurin-9-yl)-4-dihydroxyphosphinothioyloxy-3-fluoro-5-(hydroxymethyl)oxolan-3-ol Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](OP(O)(O)=S)[C@]1(O)F PMBSJRVVKHNWGX-GIWSHQQXSA-N 0.000 description 1
- LOGFVTREOLYCPF-KXNHARMFSA-N (2s,3r)-2-[[(2r)-1-[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-hydroxybutanoic acid Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](N)CCCCN LOGFVTREOLYCPF-KXNHARMFSA-N 0.000 description 1
- HSINOMROUCMIEA-FGVHQWLLSA-N (2s,4r)-4-[(3r,5s,6r,7r,8s,9s,10s,13r,14s,17r)-6-ethyl-3,7-dihydroxy-10,13-dimethyl-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl]-2-methylpentanoic acid Chemical compound C([C@@]12C)C[C@@H](O)C[C@H]1[C@@H](CC)[C@@H](O)[C@@H]1[C@@H]2CC[C@]2(C)[C@@H]([C@H](C)C[C@H](C)C(O)=O)CC[C@H]21 HSINOMROUCMIEA-FGVHQWLLSA-N 0.000 description 1
- VDYVTMXBGOIUMS-KWXKLSQISA-N (6z,9z,29z,32z)-19-[(dimethylamino)methyl]octatriaconta-6,9,29,32-tetraene-18,21-dione Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/CCCCCCCC(=O)CC(CN(C)C)C(=O)CCCCCCC\C=C/C\C=C/CCCCC VDYVTMXBGOIUMS-KWXKLSQISA-N 0.000 description 1
- 108030001056 (S)-2-hydroxy-acid oxidases Proteins 0.000 description 1
- AVZIYOYFVVSTGQ-RBWRNIRVSA-N (z)-octadec-9-enoic acid;propane-1,2,3-triol Chemical compound OCC(O)CO.OCC(O)CO.OCC(O)CO.OCC(O)CO.OCC(O)CO.OCC(O)CO.OCC(O)CO.OCC(O)CO.OCC(O)CO.OCC(O)CO.CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O AVZIYOYFVVSTGQ-RBWRNIRVSA-N 0.000 description 1
- FJXSLZRUXGTLPF-HKIWRJGFSA-N (z)-octadec-9-enoic acid;propane-1,2,3-triol Chemical compound OCC(O)CO.OCC(O)CO.OCC(O)CO.OCC(O)CO.CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O FJXSLZRUXGTLPF-HKIWRJGFSA-N 0.000 description 1
- JUDOLRSMWHVKGX-UHFFFAOYSA-N 1,1-dioxo-1$l^{6},2-benzodithiol-3-one Chemical compound C1=CC=C2C(=O)SS(=O)(=O)C2=C1 JUDOLRSMWHVKGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QJHMHZVVRVXKOY-UHFFFAOYSA-N 1,2,3,4,5-pentafluoro-6-(2,3,4,5,6-pentafluorophenoxy)benzene Chemical group FC1=C(F)C(F)=C(F)C(F)=C1OC1=C(F)C(F)=C(F)C(F)=C1F QJHMHZVVRVXKOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FYADHXFMURLYQI-UHFFFAOYSA-N 1,2,4-triazine Chemical class C1=CN=NC=N1 FYADHXFMURLYQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZIZMDHZLHJBNSQ-UHFFFAOYSA-N 1,2-dihydrophenazine Chemical compound C1=CC=C2N=C(C=CCC3)C3=NC2=C1 ZIZMDHZLHJBNSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CSTYETQXRJUWCP-UHFFFAOYSA-N 1,3-dihexadecoxypropan-2-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCOCC(O)COCCCCCCCCCCCCCCCC CSTYETQXRJUWCP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NGOTYFZFWPHNSU-UHFFFAOYSA-N 1,3-dioxol-4-amine Chemical compound NC1=COCO1 NGOTYFZFWPHNSU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GXUBXLAZTOBCCR-DNRKLUKYSA-N 1-[(2r,3r,4r,5r)-4-dihydroxyphosphinothioyloxy-5-(hydroxymethyl)-3-(2-methoxyethoxy)oxolan-2-yl]-5-methylpyrimidine-2,4-dione Chemical compound COCCO[C@@H]1[C@H](OP(O)(O)=S)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(C)=C1 GXUBXLAZTOBCCR-DNRKLUKYSA-N 0.000 description 1
- VABSBRAHTJXQPF-FDDDBJFASA-N 1-[(2r,3r,4r,5r)-4-dihydroxyphosphinothioyloxy-5-(hydroxymethyl)-3-methoxyoxolan-2-yl]-5-methylpyrimidine-2,4-dione Chemical compound CO[C@@H]1[C@H](OP(O)(O)=S)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(C)=C1 VABSBRAHTJXQPF-FDDDBJFASA-N 0.000 description 1
- UIFJBEWVRSHKCF-ZOQUXTDFSA-N 1-[(2r,3r,4r,5r)-4-dihydroxyphosphinothioyloxy-5-(hydroxymethyl)-3-methoxyoxolan-2-yl]pyrimidine-2,4-dione Chemical compound CO[C@@H]1[C@H](OP(O)(O)=S)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 UIFJBEWVRSHKCF-ZOQUXTDFSA-N 0.000 description 1
- FCKJWLXUOMAXRY-JXOAFFINSA-N 1-[(2r,3r,4s,5r)-4-dihydroxyphosphinothioyloxy-3-hydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-5-methylpyrimidine-2,4-dione Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](OP(O)(O)=S)[C@@H](CO)O1 FCKJWLXUOMAXRY-JXOAFFINSA-N 0.000 description 1
- QXMLYBQBMGZPTE-LTNPLRIYSA-N 1-[(2r,3s,4r,5r)-4-dihydroxyphosphinothioyloxy-3-fluoro-3-hydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-5-methylpyrimidine-2,4-dione Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@H]1[C@](F)(O)[C@H](OP(O)(O)=S)[C@@H](CO)O1 QXMLYBQBMGZPTE-LTNPLRIYSA-N 0.000 description 1
- XKKRMVGRQHZUHY-FJGDRVTGSA-N 1-[(2r,3s,4r,5r)-4-dihydroxyphosphinothioyloxy-3-fluoro-3-hydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]pyrimidine-2,4-dione Chemical compound O[C@]1(F)[C@H](OP(O)(O)=S)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 XKKRMVGRQHZUHY-FJGDRVTGSA-N 0.000 description 1
- KIGHLLZHFAOEHO-PKPIPKONSA-N 1-[(2s)-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)pyrrolidin-1-yl]ethanone Chemical compound CC(=O)N1CC(O)C[C@H]1CO KIGHLLZHFAOEHO-PKPIPKONSA-N 0.000 description 1
- BUOBCSGIAFXNKP-KWXKLSQISA-N 1-[2,2-bis[(9z,12z)-octadeca-9,12-dienyl]-1,3-dioxolan-4-yl]-n,n-dimethylmethanamine Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/CCCCCCCCC1(CCCCCCCC\C=C/C\C=C/CCCCC)OCC(CN(C)C)O1 BUOBCSGIAFXNKP-KWXKLSQISA-N 0.000 description 1
- PLKOSISDOAHHCI-QYCRHRGJSA-N 1-[2,3-bis[(9z,12z)-octadeca-9,12-dienoxy]propyl]-4-methylpiperazine Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/CCCCCCCCOCC(OCCCCCCCC\C=C/C\C=C/CCCCC)CN1CCN(C)CC1 PLKOSISDOAHHCI-QYCRHRGJSA-N 0.000 description 1
- UHDGCWIWMRVCDJ-UHFFFAOYSA-N 1-beta-D-Xylofuranosyl-NH-Cytosine Natural products O=C1N=C(N)C=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NVJUHMXYKCUMQA-UHFFFAOYSA-N 1-ethoxypropane Chemical compound CCCOCC NVJUHMXYKCUMQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MZMNEDXVUJLQAF-UHFFFAOYSA-N 1-o-tert-butyl 2-o-methyl 4-hydroxypyrrolidine-1,2-dicarboxylate Chemical compound COC(=O)C1CC(O)CN1C(=O)OC(C)(C)C MZMNEDXVUJLQAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PNXSUXRNBHUCSF-HSYVXBRLSA-N 107658-43-5 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)OC(=O)CC[C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)OC(=O)[C@H](CCC(=O)OC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)N)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)N)C1C=NC=N1 PNXSUXRNBHUCSF-HSYVXBRLSA-N 0.000 description 1
- TZMSYXZUNZXBOL-UHFFFAOYSA-N 10H-phenoxazine Chemical compound C1=CC=C2NC3=CC=CC=C3OC2=C1 TZMSYXZUNZXBOL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NVKAWKQGWWIWPM-ABEVXSGRSA-N 17-β-hydroxy-5-α-Androstan-3-one Chemical compound C1C(=O)CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CC[C@H]21 NVKAWKQGWWIWPM-ABEVXSGRSA-N 0.000 description 1
- UHUHBFMZVCOEOV-UHFFFAOYSA-N 1h-imidazo[4,5-c]pyridin-4-amine Chemical compound NC1=NC=CC2=C1N=CN2 UHUHBFMZVCOEOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MXHRCPNRJAMMIM-SHYZEUOFSA-N 2'-deoxyuridine Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 MXHRCPNRJAMMIM-SHYZEUOFSA-N 0.000 description 1
- IHPYMWDTONKSCO-UHFFFAOYSA-N 2,2'-piperazine-1,4-diylbisethanesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)CCN1CCN(CCS(O)(=O)=O)CC1 IHPYMWDTONKSCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WALUVDCNGPQPOD-UHFFFAOYSA-M 2,3-di(tetradecoxy)propyl-(2-hydroxyethyl)-dimethylazanium;bromide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCCCCCCOCC(C[N+](C)(C)CCO)OCCCCCCCCCCCCCC WALUVDCNGPQPOD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- VEPOHXYIFQMVHW-XOZOLZJESA-N 2,3-dihydroxybutanedioic acid (2S,3S)-3,4-dimethyl-2-phenylmorpholine Chemical compound OC(C(O)C(O)=O)C(O)=O.C[C@H]1[C@@H](OCCN1C)c1ccccc1 VEPOHXYIFQMVHW-XOZOLZJESA-N 0.000 description 1
- AZUHIVLOSAPWDM-UHFFFAOYSA-N 2-(1h-imidazol-2-yl)-1h-imidazole Chemical compound C1=CNC(C=2NC=CN=2)=N1 AZUHIVLOSAPWDM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QSHACTSJHMKXTE-UHFFFAOYSA-N 2-(2-aminopropyl)-7h-purin-6-amine Chemical compound CC(N)CC1=NC(N)=C2NC=NC2=N1 QSHACTSJHMKXTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PIINGYXNCHTJTF-UHFFFAOYSA-N 2-(2-azaniumylethylamino)acetate Chemical group NCCNCC(O)=O PIINGYXNCHTJTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XMGJGSKRRWXOIF-UHFFFAOYSA-N 2-(azepan-1-yl)ethyl 2-cyclohexyl-2-thiophen-3-ylacetate;2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylic acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O.C1CCCCC1C(C1=CSC=C1)C(=O)OCCN1CCCCCC1 XMGJGSKRRWXOIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710105017 2-Hydroxyacid oxidase Proteins 0.000 description 1
- 102100038838 2-Hydroxyacid oxidase 2 Human genes 0.000 description 1
- QFOCLINPINTVJI-UUOKFMHZSA-N 2-amino-9-[(2r,3r,4s,5r)-4-dihydroxyphosphinothioyloxy-3-hydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-3h-purin-6-one Chemical compound C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](OP(O)(O)=S)[C@H]1O QFOCLINPINTVJI-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 1
- PLWXKAOZQSMLOO-AEHJODJJSA-N 2-amino-9-[(2r,3s,4r,5r)-4-dihydroxyphosphinothioyloxy-3-fluoro-3-hydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-3h-purin-6-one Chemical compound C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](OP(O)(O)=S)[C@]1(O)F PLWXKAOZQSMLOO-AEHJODJJSA-N 0.000 description 1
- KJJPLEZQSCZCKE-UHFFFAOYSA-N 2-aminopropane-1,3-diol Chemical group OCC(N)CO KJJPLEZQSCZCKE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BFSVOASYOCHEOV-UHFFFAOYSA-N 2-diethylaminoethanol Chemical class CCN(CC)CCO BFSVOASYOCHEOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PJGGNCVBADYCMZ-UHFFFAOYSA-N 2-dihydroxyphosphinothioyloxyethanol Chemical compound OCCOP(O)(O)=S PJGGNCVBADYCMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WROUWQQRXUBECT-UHFFFAOYSA-N 2-ethylacrylic acid Chemical compound CCC(=C)C(O)=O WROUWQQRXUBECT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004200 2-methoxyethyl group Chemical group [H]C([H])([H])OC([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- NHQASRHDTRKDLB-UWWUCLMCSA-N 2-oxo-2-[[(8R,9S,10S,13R,14S,17R)-15,15,16-trihydroxy-10,13-dimethyl-17-[(2R)-pentan-2-yl]-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,17-dodecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-16-yl]amino]acetic acid Chemical compound OC1(C([C@@H]([C@]2(CC[C@@H]3[C@]4(CCCCC4CC[C@H]3[C@H]12)C)C)[C@H](C)CCC)(NC(C(=O)O)=O)O)O NHQASRHDTRKDLB-UWWUCLMCSA-N 0.000 description 1
- 108020005345 3' Untranslated Regions Proteins 0.000 description 1
- LNQVTSROQXJCDD-KQYNXXCUSA-N 3'-AMP Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](OP(O)(O)=O)[C@H]1O LNQVTSROQXJCDD-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- UOOOPKANIPLQPU-XVFCMESISA-N 3'-CMP Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](CO)O1 UOOOPKANIPLQPU-XVFCMESISA-N 0.000 description 1
- FOGRQMPFHUHIGU-XVFCMESISA-N 3'-UMP Chemical compound O[C@@H]1[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 FOGRQMPFHUHIGU-XVFCMESISA-N 0.000 description 1
- PYSRRFNXTXNWCD-UHFFFAOYSA-N 3-(2-phenylethenyl)furan-2,5-dione Chemical compound O=C1OC(=O)C(C=CC=2C=CC=CC=2)=C1 PYSRRFNXTXNWCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UMCMPZBLKLEWAF-BCTGSCMUSA-N 3-[(3-cholamidopropyl)dimethylammonio]propane-1-sulfonate Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(=O)NCCC[N+](C)(C)CCCS([O-])(=O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 UMCMPZBLKLEWAF-BCTGSCMUSA-N 0.000 description 1
- BVZVICBYYOYVEP-MAZCIEHSSA-N 3-[bis[(9z,12z)-octadeca-9,12-dienyl]amino]propane-1,2-diol Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/CCCCCCCCN(CC(O)CO)CCCCCCCC\C=C/C\C=C/CCCCC BVZVICBYYOYVEP-MAZCIEHSSA-N 0.000 description 1
- PKXRZLCKEAZQPI-CLFAGFIQSA-N 3-[bis[(z)-octadec-9-enyl]amino]propane-1,2-diol Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCCN(CC(O)CO)CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC PKXRZLCKEAZQPI-CLFAGFIQSA-N 0.000 description 1
- VXGRJERITKFWPL-UHFFFAOYSA-N 4',5'-Dihydropsoralen Natural products C1=C2OC(=O)C=CC2=CC2=C1OCC2 VXGRJERITKFWPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YJCCSLGGODRWKK-NSCUHMNNSA-N 4-Acetamido-4'-isothiocyanostilbene-2,2'-disulphonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C1=CC(NC(=O)C)=CC=C1\C=C\C1=CC=C(N=C=S)C=C1S(O)(=O)=O YJCCSLGGODRWKK-NSCUHMNNSA-N 0.000 description 1
- YOVCFEVDVQMNJV-MAZCIEHSSA-N 4-[2,3-bis[(9z,12z)-octadeca-9,12-dienoxy]propyl]morpholine Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/CCCCCCCCOCC(OCCCCCCCC\C=C/C\C=C/CCCCC)CN1CCOCC1 YOVCFEVDVQMNJV-MAZCIEHSSA-N 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- IZUICORHMRDKIW-DNRKLUKYSA-N 4-amino-1-[(2r,3r,4r,5r)-4-dihydroxyphosphinothioyloxy-5-(hydroxymethyl)-3-(2-methoxyethoxy)oxolan-2-yl]-5-methylpyrimidin-2-one Chemical compound COCCO[C@@H]1[C@H](OP(O)(O)=S)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)N=C(N)C(C)=C1 IZUICORHMRDKIW-DNRKLUKYSA-N 0.000 description 1
- XSENBMRUQFWMEW-ZOQUXTDFSA-N 4-amino-1-[(2r,3r,4r,5r)-4-dihydroxyphosphinothioyloxy-5-(hydroxymethyl)-3-methoxyoxolan-2-yl]pyrimidin-2-one Chemical compound CO[C@@H]1[C@H](OP(O)(O)=S)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)N=C(N)C=C1 XSENBMRUQFWMEW-ZOQUXTDFSA-N 0.000 description 1
- GUEIFVRYWPOXHJ-DNRKLUKYSA-N 4-amino-1-[(2r,3r,4r,5r)-4-hydroxy-5-(hydroxymethyl)-3-(2-methoxyethoxy)oxolan-2-yl]-5-methylpyrimidin-2-one Chemical compound COCCO[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)N=C(N)C(C)=C1 GUEIFVRYWPOXHJ-DNRKLUKYSA-N 0.000 description 1
- ZCFXTYHOHYXCTE-FJGDRVTGSA-N 4-amino-1-[(2r,3s,4r,5r)-4-dihydroxyphosphinothioyloxy-3-fluoro-3-hydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]pyrimidin-2-one Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@](F)(O)[C@H](OP(O)(O)=S)[C@@H](CO)O1 ZCFXTYHOHYXCTE-FJGDRVTGSA-N 0.000 description 1
- 229960000549 4-dimethylaminophenol Drugs 0.000 description 1
- VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 4-dimethylaminopyridine Substances CN(C)C1=CC=NC=C1 VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HFQQYIUTYJVYFZ-UHFFFAOYSA-N 4-methylpentyl 2-cyanoprop-2-enoate Chemical compound CC(C)CCCOC(=O)C(=C)C#N HFQQYIUTYJVYFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OVONXEQGWXGFJD-UHFFFAOYSA-N 4-sulfanylidene-1h-pyrimidin-2-one Chemical compound SC=1C=CNC(=O)N=1 OVONXEQGWXGFJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108020003589 5' Untranslated Regions Proteins 0.000 description 1
- 102000040125 5-hydroxytryptamine receptor family Human genes 0.000 description 1
- 108091032151 5-hydroxytryptamine receptor family Proteins 0.000 description 1
- IZZIWIAOVZOBLF-UHFFFAOYSA-N 5-methoxysalicylic acid Chemical compound COC1=CC=C(O)C(C(O)=O)=C1 IZZIWIAOVZOBLF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZLAQATDNGLKIEV-UHFFFAOYSA-N 5-methyl-2-sulfanylidene-1h-pyrimidin-4-one Chemical compound CC1=CNC(=S)NC1=O ZLAQATDNGLKIEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KXBCLNRMQPRVTP-UHFFFAOYSA-N 6-amino-1,5-dihydroimidazo[4,5-c]pyridin-4-one Chemical compound O=C1NC(N)=CC2=C1N=CN2 KXBCLNRMQPRVTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VPIAFVALSSSQJN-RGURZIINSA-N 6-amino-1-[(2s)-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)pyrrolidin-1-yl]hexan-1-one Chemical compound NCCCCCC(=O)N1CC(O)C[C@H]1CO VPIAFVALSSSQJN-RGURZIINSA-N 0.000 description 1
- DCPSTSVLRXOYGS-UHFFFAOYSA-N 6-amino-1h-pyrimidine-2-thione Chemical compound NC1=CC=NC(S)=N1 DCPSTSVLRXOYGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QNNARSZPGNJZIX-UHFFFAOYSA-N 6-amino-5-prop-1-ynyl-1h-pyrimidin-2-one Chemical compound CC#CC1=CNC(=O)N=C1N QNNARSZPGNJZIX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 6-{[2-carboxy-4,5-dihydroxy-6-(phosphanyloxy)oxan-3-yl]oxy}-4,5-dihydroxy-3-phosphanyloxane-2-carboxylic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)C(P)C(O)C(O)C1OC1C(C(O)=O)OC(OP)C(O)C1O FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NKUWEFYHYZHAAC-UHFFFAOYSA-N 6h-cyclopenta[d][1,3]dioxol-5-amine Chemical compound O1COC2=C1CC(N)=C2 NKUWEFYHYZHAAC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LOSIULRWFAEMFL-UHFFFAOYSA-N 7-deazaguanine Chemical compound O=C1NC(N)=NC2=C1CC=N2 LOSIULRWFAEMFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HRYKDUPGBWLLHO-UHFFFAOYSA-N 8-azaadenine Chemical compound NC1=NC=NC2=NNN=C12 HRYKDUPGBWLLHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LPXQRXLUHJKZIE-UHFFFAOYSA-N 8-azaguanine Chemical compound NC1=NC(O)=C2NN=NC2=N1 LPXQRXLUHJKZIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005508 8-azaguanine Drugs 0.000 description 1
- OYHQOLUKZRVURQ-HZJYTTRNSA-M 9-cis,12-cis-Octadecadienoate Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/CCCCCCCC([O-])=O OYHQOLUKZRVURQ-HZJYTTRNSA-M 0.000 description 1
- MSSXOMSJDRHRMC-UHFFFAOYSA-N 9H-purine-2,6-diamine Chemical compound NC1=NC(N)=C2NC=NC2=N1 MSSXOMSJDRHRMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010062307 AAVALLPAVLLALLAP Proteins 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 101150003270 Agxt gene Proteins 0.000 description 1
- 108010033918 Alanine-glyoxylate transaminase Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 239000005995 Aluminium silicate Substances 0.000 description 1
- 101150102415 Apob gene Proteins 0.000 description 1
- 101001015570 Arabidopsis thaliana Glycolate oxidase 1 Proteins 0.000 description 1
- 241000416162 Astragalus gummifer Species 0.000 description 1
- 241000972773 Aulopiformes Species 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000004255 Butylated hydroxyanisole Substances 0.000 description 1
- 239000004322 Butylated hydroxytoluene Substances 0.000 description 1
- NLZUEZXRPGMBCV-UHFFFAOYSA-N Butylhydroxytoluene Chemical compound CC1=CC(C(C)(C)C)=C(O)C(C(C)(C)C)=C1 NLZUEZXRPGMBCV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002126 C01EB10 - Adenosine Substances 0.000 description 1
- 125000006374 C2-C10 alkenyl group Chemical group 0.000 description 1
- KERQKKXVHHBJKM-RGURZIINSA-N CCCCCC(=O)N1CC(O)C[C@H]1CO Chemical compound CCCCCC(=O)N1CC(O)C[C@H]1CO KERQKKXVHHBJKM-RGURZIINSA-N 0.000 description 1
- QYOVMAREBTZLBT-KTKRTIGZSA-N CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCO Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCO QYOVMAREBTZLBT-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 101710132601 Capsid protein Proteins 0.000 description 1
- KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-M Carbamate Chemical compound NC([O-])=O KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 108050004290 Cecropin Proteins 0.000 description 1
- 102000009410 Chemokine receptor Human genes 0.000 description 1
- 108050000299 Chemokine receptor Proteins 0.000 description 1
- 229920002101 Chitin Polymers 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 101710094648 Coat protein Proteins 0.000 description 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- 239000004971 Cross linker Substances 0.000 description 1
- 240000008067 Cucumis sativus Species 0.000 description 1
- 235000010799 Cucumis sativus var sativus Nutrition 0.000 description 1
- UHDGCWIWMRVCDJ-PSQAKQOGSA-N Cytidine Natural products O=C1N=C(N)C=CN1[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-PSQAKQOGSA-N 0.000 description 1
- UOOOPKANIPLQPU-UHFFFAOYSA-N Cytidylic acid B Natural products O=C1N=C(N)C=CN1C1C(O)C(OP(O)(O)=O)C(CO)O1 UOOOPKANIPLQPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LAJXCUNOQSHRJO-ZYGJITOWSA-N Cytochalasin E Chemical compound C([C@H]1[C@@H]2[C@@H]([C@]3(O[C@H]3[C@@H]3/C=C/C[C@H](C)C(=O)[C@](C)(O)/C=C/OC(=O)O[C@@]23C(=O)N1)C)C)C1=CC=CC=C1 LAJXCUNOQSHRJO-ZYGJITOWSA-N 0.000 description 1
- AUNGANRZJHBGPY-UHFFFAOYSA-N D-Lyxoflavin Natural products OCC(O)C(O)C(O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NOOLISFMXDJSKH-UHFFFAOYSA-N DL-menthol Natural products CC(C)C1CCC(C)CC1O NOOLISFMXDJSKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XULFJDKZVHTRLG-JDVCJPALSA-N DOSPA trifluoroacetate Chemical compound [O-]C(=O)C(F)(F)F.CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCCOCC(C[N+](C)(C)CCNC(=O)C(CCCNCCCN)NCCCN)OCCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC XULFJDKZVHTRLG-JDVCJPALSA-N 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 1
- 239000003109 Disodium ethylene diamine tetraacetate Substances 0.000 description 1
- 208000029853 Disorder of glyoxylate metabolism Diseases 0.000 description 1
- 108700006830 Drosophila Antp Proteins 0.000 description 1
- ZGTMUACCHSMWAC-UHFFFAOYSA-L EDTA disodium salt (anhydrous) Chemical compound [Na+].[Na+].OC(=O)CN(CC([O-])=O)CCN(CC(O)=O)CC([O-])=O ZGTMUACCHSMWAC-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 241001115402 Ebolavirus Species 0.000 description 1
- UPEZCKBFRMILAV-JNEQICEOSA-N Ecdysone Natural products O=C1[C@H]2[C@@](C)([C@@H]3C([C@@]4(O)[C@@](C)([C@H]([C@H]([C@@H](O)CCC(O)(C)C)C)CC4)CC3)=C1)C[C@H](O)[C@H](O)C2 UPEZCKBFRMILAV-JNEQICEOSA-N 0.000 description 1
- 108050009340 Endothelin Proteins 0.000 description 1
- 102000002045 Endothelin Human genes 0.000 description 1
- 241000792859 Enema Species 0.000 description 1
- ZZSNKZQZMQGXPY-UHFFFAOYSA-N Ethyl cellulose Chemical compound CCOCC1OC(OC)C(OCC)C(OCC)C1OC1C(O)C(O)C(OC)C(CO)O1 ZZSNKZQZMQGXPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001856 Ethyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 108060002716 Exonuclease Proteins 0.000 description 1
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940123457 Free radical scavenger Drugs 0.000 description 1
- 108010087294 GALA peptide Proteins 0.000 description 1
- 102000006395 Globulins Human genes 0.000 description 1
- 108010044091 Globulins Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 101710183768 Glutamate carboxypeptidase 2 Proteins 0.000 description 1
- 102100031181 Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylethanolamin Natural products NCCOP(O)(=O)OCC(O)CO JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- 102100021181 Golgi phosphoprotein 3 Human genes 0.000 description 1
- 229920002907 Guar gum Polymers 0.000 description 1
- 229920000569 Gum karaya Polymers 0.000 description 1
- 101000892862 Homo sapiens Glutamate carboxypeptidase 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000780643 Homo sapiens Protein argonaute-2 Proteins 0.000 description 1
- 108010070875 Human Immunodeficiency Virus tat Gene Products Proteins 0.000 description 1
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 1
- 241000713772 Human immunodeficiency virus 1 Species 0.000 description 1
- PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N Hydroxyproline Chemical compound O[C@H]1CN[C@H](C(O)=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N 0.000 description 1
- GRRNUXAQVGOGFE-UHFFFAOYSA-N Hygromycin-B Natural products OC1C(NC)CC(N)C(O)C1OC1C2OC3(C(C(O)C(O)C(C(N)CO)O3)O)OC2C(O)C(CO)O1 GRRNUXAQVGOGFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N Hypoxanthine nucleoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(NC=NC2=O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HEFNNWSXXWATRW-UHFFFAOYSA-N Ibuprofen Chemical compound CC(C)CC1=CC=C(C(C)C(O)=O)C=C1 HEFNNWSXXWATRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 1
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 1
- 102000003777 Interleukin-1 beta Human genes 0.000 description 1
- 108090000193 Interleukin-1 beta Proteins 0.000 description 1
- 229920001202 Inulin Polymers 0.000 description 1
- QUOGESRFPZDMMT-UHFFFAOYSA-N L-Homoarginine Natural products OC(=O)C(N)CCCCNC(N)=N QUOGESRFPZDMMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N L-Ornithine Chemical compound NCCC[C@H](N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- QUOGESRFPZDMMT-YFKPBYRVSA-N L-homoarginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCCNC(N)=N QUOGESRFPZDMMT-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 239000004166 Lanolin Substances 0.000 description 1
- 101710128836 Large T antigen Proteins 0.000 description 1
- 229920002884 Laureth 4 Polymers 0.000 description 1
- 239000012097 Lipofectamine 2000 Substances 0.000 description 1
- 239000012098 Lipofectamine RNAiMAX Substances 0.000 description 1
- 241000282553 Macaca Species 0.000 description 1
- 241000282560 Macaca mulatta Species 0.000 description 1
- 208000035719 Maculopathy Diseases 0.000 description 1
- 108060003100 Magainin Proteins 0.000 description 1
- 235000019759 Maize starch Nutrition 0.000 description 1
- 101710125418 Major capsid protein Proteins 0.000 description 1
- 108010007013 Melanocyte-Stimulating Hormones Proteins 0.000 description 1
- 108010090054 Membrane Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000012750 Membrane Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- NFLGAXVYCFJBMK-UHFFFAOYSA-N Menthone Chemical compound CC(C)C1CCC(C)CC1=O NFLGAXVYCFJBMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 1
- 108091022875 Microtubule Proteins 0.000 description 1
- 102000029749 Microtubule Human genes 0.000 description 1
- 241000713869 Moloney murine leukemia virus Species 0.000 description 1
- 101000819572 Mus musculus Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 101100296015 Mus musculus Ovos gene Proteins 0.000 description 1
- 101100015391 Mus musculus Ralgds gene Proteins 0.000 description 1
- 241000251748 Myxinidae Species 0.000 description 1
- BACYUWVYYTXETD-UHFFFAOYSA-N N-Lauroylsarcosine Chemical compound CCCCCCCCCCCC(=O)N(C)CC(O)=O BACYUWVYYTXETD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BKAYIFDRRZZKNF-VIFPVBQESA-N N-acetylcarnosine Chemical compound CC(=O)NCCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 BKAYIFDRRZZKNF-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 108010057466 NF-kappa B Proteins 0.000 description 1
- 102000003945 NF-kappa B Human genes 0.000 description 1
- 206010029113 Neovascularisation Diseases 0.000 description 1
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 1
- KYRVNWMVYQXFEU-UHFFFAOYSA-N Nocodazole Chemical compound C1=C2NC(NC(=O)OC)=NC2=CC=C1C(=O)C1=CC=CS1 KYRVNWMVYQXFEU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108020004711 Nucleic Acid Probes Proteins 0.000 description 1
- 101710141454 Nucleoprotein Proteins 0.000 description 1
- WTAYIFXKJBMZLY-XZABIIKCSA-N OCC(O)CO.OCC(O)CO.OCC(O)CO.OCC(O)CO.OCC(O)CO.OCC(O)CO.CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O Chemical compound OCC(O)CO.OCC(O)CO.OCC(O)CO.OCC(O)CO.OCC(O)CO.OCC(O)CO.CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O WTAYIFXKJBMZLY-XZABIIKCSA-N 0.000 description 1
- 229910004679 ONO2 Inorganic materials 0.000 description 1
- 108010038807 Oligopeptides Proteins 0.000 description 1
- 102000015636 Oligopeptides Human genes 0.000 description 1
- 239000012124 Opti-MEM Substances 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N Orn-delta-NH2 Natural products NCCCC(N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N Ornithine Natural products OC(=O)C(C)CCCN UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007990 PIPES buffer Substances 0.000 description 1
- 241001631646 Papillomaviridae Species 0.000 description 1
- 239000004264 Petrolatum Substances 0.000 description 1
- 108010009711 Phalloidine Proteins 0.000 description 1
- PCNDJXKNXGMECE-UHFFFAOYSA-N Phenazine Natural products C1=CC=CC2=NC3=CC=CC=C3N=C21 PCNDJXKNXGMECE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ABLZXFCXXLZCGV-UHFFFAOYSA-N Phosphorous acid Chemical class OP(O)=O ABLZXFCXXLZCGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000709664 Picornaviridae Species 0.000 description 1
- 108010069381 Platelet Endothelial Cell Adhesion Molecule-1 Proteins 0.000 description 1
- 102100024616 Platelet endothelial cell adhesion molecule Human genes 0.000 description 1
- 229920002730 Poly(butyl cyanoacrylate) Polymers 0.000 description 1
- 229920002319 Poly(methyl acrylate) Polymers 0.000 description 1
- 229920002723 Poly(methyl cyanoacrylate) Polymers 0.000 description 1
- 229920002556 Polyethylene Glycol 300 Polymers 0.000 description 1
- 229920002565 Polyethylene Glycol 400 Polymers 0.000 description 1
- 108010020346 Polyglutamic Acid Proteins 0.000 description 1
- 241001505332 Polyomavirus sp. Species 0.000 description 1
- 208000004777 Primary Hyperoxaluria Diseases 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- 101710083689 Probable capsid protein Proteins 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 102100034207 Protein argonaute-2 Human genes 0.000 description 1
- 239000004373 Pullulan Substances 0.000 description 1
- 229920001218 Pullulan Polymers 0.000 description 1
- 108010066717 Q beta Replicase Proteins 0.000 description 1
- 238000002123 RNA extraction Methods 0.000 description 1
- 238000010802 RNA extraction kit Methods 0.000 description 1
- 230000007022 RNA scission Effects 0.000 description 1
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 1
- 241000711798 Rabies lyssavirus Species 0.000 description 1
- 208000007400 Relapsing-Remitting Multiple Sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- 108091006243 SLC7A13 Proteins 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000700584 Simplexvirus Species 0.000 description 1
- ABBQHOQBGMUPJH-UHFFFAOYSA-M Sodium salicylate Chemical compound [Na+].OC1=CC=CC=C1C([O-])=O ABBQHOQBGMUPJH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108010056088 Somatostatin Proteins 0.000 description 1
- 102000005157 Somatostatin Human genes 0.000 description 1
- HVUMOYIDDBPOLL-XWVZOOPGSA-N Sorbitan monostearate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](O)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1O HVUMOYIDDBPOLL-XWVZOOPGSA-N 0.000 description 1
- 238000002105 Southern blotting Methods 0.000 description 1
- 241000934878 Sterculia Species 0.000 description 1
- 229930182558 Sterol Natural products 0.000 description 1
- 241000272534 Struthio camelus Species 0.000 description 1
- 241000251576 Styela clava Species 0.000 description 1
- 229920000147 Styrene maleic anhydride Polymers 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- ULUAUXLGCMPNKK-UHFFFAOYSA-N Sulfobutanedioic acid Chemical class OC(=O)CC(C(O)=O)S(O)(=O)=O ULUAUXLGCMPNKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940100389 Sulfonylurea Drugs 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical class OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UCKMPCXJQFINFW-UHFFFAOYSA-N Sulphide Chemical compound [S-2] UCKMPCXJQFINFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WBWWGRHZICKQGZ-UHFFFAOYSA-N Taurocholic acid Natural products OC1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(=O)NCCS(O)(=O)=O)C)C1(C)C(O)C2 WBWWGRHZICKQGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004098 Tetracycline Substances 0.000 description 1
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-N Thiophosphoric acid Chemical group OP(O)(S)=O RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RKEITGVZZHXKON-SKAWGCAZSA-N Thymidine glycol Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)(O)C(O)N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 RKEITGVZZHXKON-SKAWGCAZSA-N 0.000 description 1
- 108020004440 Thymidine kinase Proteins 0.000 description 1
- 108010061174 Thyrotropin Proteins 0.000 description 1
- 102000011923 Thyrotropin Human genes 0.000 description 1
- 229920001615 Tragacanth Polymers 0.000 description 1
- 108090000340 Transaminases Proteins 0.000 description 1
- 102000004338 Transferrin Human genes 0.000 description 1
- 108090000901 Transferrin Proteins 0.000 description 1
- 101800001690 Transmembrane protein gp41 Proteins 0.000 description 1
- BAECOWNUKCLBPZ-HIUWNOOHSA-N Triolein Natural products O([C@H](OCC(=O)CCCCCCC/C=C\CCCCCCCC)COC(=O)CCCCCCC/C=C\CCCCCCCC)C(=O)CCCCCCC/C=C\CCCCCCCC BAECOWNUKCLBPZ-HIUWNOOHSA-N 0.000 description 1
- PHYFQTYBJUILEZ-UHFFFAOYSA-N Trioleoylglycerol Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC)COC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC PHYFQTYBJUILEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 229910052770 Uranium Inorganic materials 0.000 description 1
- FOGRQMPFHUHIGU-UHFFFAOYSA-N Uridylic acid Natural products OC1C(OP(O)(O)=O)C(CO)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 FOGRQMPFHUHIGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N Vinblastine Natural products O=C(O[C@H]1[C@](O)(C(=O)OC)[C@@H]2N(C)c3c(cc(c(OC)c3)[C@]3(C(=O)OC)c4[nH]c5c(c4CCN4C[C@](O)(CC)C[C@H](C3)C4)cccc5)[C@@]32[C@H]2[C@@]1(CC)C=CCN2CC3)C JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N 0.000 description 1
- 229930003779 Vitamin B12 Natural products 0.000 description 1
- 241000269370 Xenopus <genus> Species 0.000 description 1
- OKOBNEWPAUJTPU-ZOQUXTDFSA-N [(2R,3R,4R,5R)-2-(2,4-dioxopyrimidin-1-yl)-5-(hydroxymethyl)-4-methoxyoxolan-3-yl] dihydrogen phosphate Chemical compound P(=O)(O)(O)O[C@H]1[C@@H](O[C@@H]([C@H]1OC)CO)N1C(=O)NC(=O)C=C1 OKOBNEWPAUJTPU-ZOQUXTDFSA-N 0.000 description 1
- AHUGXCIORAQGLW-CBBSRJIPSA-N [(2R,3R,4R,5R)-2-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-2-[(3R,4R,5R)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-5-(hydroxymethyl)-4-methoxyoxolan-3-yl] dihydrogen phosphate Chemical compound P(=O)(O)(O)O[C@H]1[C@@](O[C@@H]([C@H]1OC)CO)(N1C=NC=2C(=O)NC(N)=NC1=2)C1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O1)CO AHUGXCIORAQGLW-CBBSRJIPSA-N 0.000 description 1
- VJOLKGPFVZWISL-KQYNXXCUSA-N [(2R,3R,4R,5R)-2-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-5-(hydroxymethyl)-4-methoxyoxolan-3-yl] dihydrogen phosphate Chemical compound P(=O)(O)(O)O[C@H]1[C@@H](O[C@@H]([C@H]1OC)CO)N1C=NC=2C(=O)NC(N)=NC1=2 VJOLKGPFVZWISL-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- HIHPRLNFFHUHIX-CVOJFSLMSA-N [(2R,3R,4R,5R)-2-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)-2-[(3R,4R,5R)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-5-(hydroxymethyl)-4-methoxyoxolan-3-yl] dihydrogen phosphate Chemical compound P(=O)(O)(O)O[C@H]1[C@@](O[C@@H]([C@H]1OC)CO)(N1C(=O)N=C(N)C=C1)C1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O1)CO HIHPRLNFFHUHIX-CVOJFSLMSA-N 0.000 description 1
- BYITXEYRSZETCZ-ZOQUXTDFSA-N [(2R,3R,4R,5R)-2-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)-5-(hydroxymethyl)-4-methoxyoxolan-3-yl] dihydrogen phosphate Chemical compound P(=O)(O)(O)O[C@H]1[C@@H](O[C@@H]([C@H]1OC)CO)N1C(=O)N=C(N)C=C1 BYITXEYRSZETCZ-ZOQUXTDFSA-N 0.000 description 1
- BEEFTOQGXITOEY-YAFJMCAISA-N [(2R,3R,4R,5R)-2-(6-aminopurin-9-yl)-2-[(3R,4R,5R)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-5-(hydroxymethyl)-4-methoxyoxolan-3-yl] dihydrogen phosphate Chemical compound P(=O)(O)(O)O[C@H]1[C@@](O[C@@H]([C@H]1OC)CO)(N1C=NC=2C(N)=NC=NC1=2)C1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O1)CO BEEFTOQGXITOEY-YAFJMCAISA-N 0.000 description 1
- WRBVKOLBBDODMK-IOSLPCCCSA-N [(2R,3R,4R,5R)-2-(6-aminopurin-9-yl)-5-(hydroxymethyl)-4-methoxyoxolan-3-yl] dihydrogen phosphate Chemical compound P(=O)(O)(O)O[C@H]1[C@@H](O[C@@H]([C@H]1OC)CO)N1C=NC=2C(N)=NC=NC1=2 WRBVKOLBBDODMK-IOSLPCCCSA-N 0.000 description 1
- DNVGJQSFVPMJGE-DNRKLUKYSA-N [(2r,3r,4r,5r)-2-(hydroxymethyl)-4-(2-methoxyethoxy)-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-3-yl] dihydrogen phosphate Chemical compound COCCO[C@@H]1[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(C)=C1 DNVGJQSFVPMJGE-DNRKLUKYSA-N 0.000 description 1
- ZPSJSMITNAKPRX-FDDDBJFASA-N [(2r,3r,4r,5r)-2-(hydroxymethyl)-4-methoxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-3-yl] dihydrogen phosphate Chemical compound CO[C@@H]1[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(C)=C1 ZPSJSMITNAKPRX-FDDDBJFASA-N 0.000 description 1
- NPRNBAPBGVERRF-ZOQUXTDFSA-N [(2r,3r,4r,5r)-5-(2,4-dioxopyrimidin-1-yl)-2-(hydroxymethyl)-4-methoxyoxolan-3-yl] dihydrogen phosphate Chemical compound CO[C@@H]1[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 NPRNBAPBGVERRF-ZOQUXTDFSA-N 0.000 description 1
- SGEUBSPLWALIEU-MSNJVRRCSA-N [(2r,3r,4r,5r)-5-(2,4-dioxopyrimidin-1-yl)-4-hexadecoxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] dihydrogen phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCO[C@@H]1[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 SGEUBSPLWALIEU-MSNJVRRCSA-N 0.000 description 1
- IATVSXSQCCSKNS-ZOQUXTDFSA-N [(2r,3r,4r,5r)-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)-2-(hydroxymethyl)-4-methoxyoxolan-3-yl] dihydrogen phosphate Chemical compound CO[C@@H]1[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)N=C(N)C=C1 IATVSXSQCCSKNS-ZOQUXTDFSA-N 0.000 description 1
- NCMCHCZGGKNNRZ-DNRKLUKYSA-N [(2r,3r,4r,5r)-5-(4-amino-5-methyl-2-oxopyrimidin-1-yl)-2-(hydroxymethyl)-4-(2-methoxyethoxy)oxolan-3-yl] dihydrogen phosphate Chemical compound COCCO[C@@H]1[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)N=C(N)C(C)=C1 NCMCHCZGGKNNRZ-DNRKLUKYSA-N 0.000 description 1
- DUDZRBVSHCOKLU-LTNPLRIYSA-N [(2r,3r,4s,5r)-4-fluoro-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-3-yl] dihydrogen phosphate Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@H]1[C@](F)(O)[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](CO)O1 DUDZRBVSHCOKLU-LTNPLRIYSA-N 0.000 description 1
- QGZHQRNBDZDKFW-FJGDRVTGSA-N [(2r,3r,4s,5r)-5-(2,4-dioxopyrimidin-1-yl)-4-fluoro-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] dihydrogen phosphate Chemical compound O[C@]1(F)[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 QGZHQRNBDZDKFW-FJGDRVTGSA-N 0.000 description 1
- SQXGRYKQXLPVFG-AEHJODJJSA-N [(2r,3r,4s,5r)-5-(2-amino-6-oxo-3h-purin-9-yl)-4-fluoro-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] dihydrogen phosphate Chemical compound C1=NC=2C(=O)NC(N)=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](OP(O)(O)=O)[C@]1(O)F SQXGRYKQXLPVFG-AEHJODJJSA-N 0.000 description 1
- PTESHFKYBQMNFR-FJGDRVTGSA-N [(2r,3r,4s,5r)-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)-4-fluoro-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] dihydrogen phosphate Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@](F)(O)[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](CO)O1 PTESHFKYBQMNFR-FJGDRVTGSA-N 0.000 description 1
- KLVQSNKMLGBSHV-GIWSHQQXSA-N [(2r,3r,4s,5r)-5-(6-aminopurin-9-yl)-4-fluoro-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] dihydrogen phosphate Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](OP(O)(O)=O)[C@]1(O)F KLVQSNKMLGBSHV-GIWSHQQXSA-N 0.000 description 1
- CUNUAWNLABBGSW-GYBHYMNSSA-N [(2r,3s,4r,5r)-5-(2,4-dioxopyrimidin-1-yl)-4-hydroxy-2-(1-hydroxyethyl)oxolan-3-yl] dihydrogen phosphate Chemical compound O[C@@H]1[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](C(O)C)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 CUNUAWNLABBGSW-GYBHYMNSSA-N 0.000 description 1
- LEBBDRXHHNYZIA-LDUWYPJVSA-N [(2s,3r,4s,5r,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl] n-[(z)-1,3-dihydroxyoctadec-4-en-2-yl]carbamate Chemical compound CCCCCCCCCCCCC\C=C/C(O)C(CO)NC(=O)O[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O LEBBDRXHHNYZIA-LDUWYPJVSA-N 0.000 description 1
- HIHOWBSBBDRPDW-PTHRTHQKSA-N [(3s,8s,9s,10r,13r,14s,17r)-10,13-dimethyl-17-[(2r)-6-methylheptan-2-yl]-2,3,4,7,8,9,11,12,14,15,16,17-dodecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-3-yl] n-[2-(dimethylamino)ethyl]carbamate Chemical compound C1C=C2C[C@@H](OC(=O)NCCN(C)C)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HIHOWBSBBDRPDW-PTHRTHQKSA-N 0.000 description 1
- TTWXVHUYMARJHI-KWXKLSQISA-N [(6Z,9Z,29Z,32Z)-20-[(dimethylamino)methyl]octatriaconta-6,9,29,32-tetraen-19-yl] carbamate Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/CCCCCCCCC(CN(C)C)C(OC(N)=O)CCCCCCCC\C=C/C\C=C/CCCCC TTWXVHUYMARJHI-KWXKLSQISA-N 0.000 description 1
- HCAJCMUKLZSPFT-KWXKLSQISA-N [3-(dimethylamino)-2-[(9z,12z)-octadeca-9,12-dienoyl]oxypropyl] (9z,12z)-octadeca-9,12-dienoate Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC(CN(C)C)OC(=O)CCCCCCC\C=C/C\C=C/CCCCC HCAJCMUKLZSPFT-KWXKLSQISA-N 0.000 description 1
- YKTSYUJCYHOUJP-UHFFFAOYSA-N [O--].[Al+3].[Al+3].[O-][Si]([O-])([O-])[O-] Chemical compound [O--].[Al+3].[Al+3].[O-][Si]([O-])([O-])[O-] YKTSYUJCYHOUJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 1
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 1
- 238000004847 absorption spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 150000001241 acetals Chemical class 0.000 description 1
- XVIYCJDWYLJQBG-UHFFFAOYSA-N acetic acid;adamantane Chemical compound CC(O)=O.C1C(C2)CC3CC1CC2C3 XVIYCJDWYLJQBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001251 acridines Chemical class 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 239000011149 active material Substances 0.000 description 1
- 229960005305 adenosine Drugs 0.000 description 1
- LNQVTSROQXJCDD-UHFFFAOYSA-N adenosine monophosphate Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(CO)C(OP(O)(O)=O)C1O LNQVTSROQXJCDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 239000004479 aerosol dispenser Substances 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 235000010419 agar Nutrition 0.000 description 1
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 125000003172 aldehyde group Chemical group 0.000 description 1
- PPQRONHOSHZGFQ-LMVFSUKVSA-N aldehydo-D-ribose 5-phosphate Chemical group OP(=O)(O)OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PPQRONHOSHZGFQ-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 1
- 229940072056 alginate Drugs 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000001336 alkenes Chemical class 0.000 description 1
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000005083 alkoxyalkoxy group Chemical group 0.000 description 1
- 125000002877 alkyl aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 150000004996 alkyl benzenes Chemical class 0.000 description 1
- 125000005600 alkyl phosphonate group Chemical group 0.000 description 1
- 239000002168 alkylating agent Substances 0.000 description 1
- 229940100198 alkylating agent Drugs 0.000 description 1
- 102000018568 alpha-Defensin Human genes 0.000 description 1
- UPEZCKBFRMILAV-UHFFFAOYSA-N alpha-Ecdysone Natural products C1C(O)C(O)CC2(C)C(CCC3(C(C(C(O)CCC(C)(C)O)C)CCC33O)C)C3=CC(=O)C21 UPEZCKBFRMILAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108050007802 alpha-defensin Proteins 0.000 description 1
- 235000012211 aluminium silicate Nutrition 0.000 description 1
- SNAAJJQQZSMGQD-UHFFFAOYSA-N aluminum magnesium Chemical compound [Mg].[Al] SNAAJJQQZSMGQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009435 amidation Effects 0.000 description 1
- 238000007112 amidation reaction Methods 0.000 description 1
- 150000001409 amidines Chemical class 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 125000005122 aminoalkylamino group Chemical group 0.000 description 1
- 239000002280 amphoteric surfactant Substances 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 229960003473 androstanolone Drugs 0.000 description 1
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 229940031955 anhydrous lanolin Drugs 0.000 description 1
- 238000005571 anion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 229920006318 anionic polymer Polymers 0.000 description 1
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940121363 anti-inflammatory agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 1
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 239000003908 antipruritic agent Substances 0.000 description 1
- 238000003491 array Methods 0.000 description 1
- 125000003710 aryl alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 229940009098 aspartate Drugs 0.000 description 1
- 229960005261 aspartic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000002820 assay format Methods 0.000 description 1
- 230000000712 assembly Effects 0.000 description 1
- 238000000429 assembly Methods 0.000 description 1
- 239000003212 astringent agent Substances 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000892 attapulgite Drugs 0.000 description 1
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 1
- 125000000477 aza group Chemical group 0.000 description 1
- RHISNKCGUDDGEG-UHFFFAOYSA-N bactenecin Chemical compound CCC(C)C1NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CCCN=C(N)N)NC(=O)C(NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(N)CCCN=C(N)N)CSSCC(C(=O)NC(CCCN=C(N)N)C(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CCCN=C(N)N)NC1=O RHISNKCGUDDGEG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010016341 bactenecin Proteins 0.000 description 1
- 230000037429 base substitution Effects 0.000 description 1
- 235000013871 bee wax Nutrition 0.000 description 1
- 239000012166 beeswax Substances 0.000 description 1
- 239000000440 bentonite Substances 0.000 description 1
- 229910000278 bentonite Inorganic materials 0.000 description 1
- SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N bentoquatam Chemical compound O.O=[Si]=O.O=[Al]O[Al]=O SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000686 benzalkonium chloride Drugs 0.000 description 1
- CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N benzyl(dimethyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C[NH+](C)CC1=CC=CC=C1 CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108050002883 beta-defensin Proteins 0.000 description 1
- 102000012265 beta-defensin Human genes 0.000 description 1
- 230000008436 biogenesis Effects 0.000 description 1
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 1
- 238000001815 biotherapy Methods 0.000 description 1
- 229920001400 block copolymer Polymers 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 210000002449 bone cell Anatomy 0.000 description 1
- 229910021538 borax Inorganic materials 0.000 description 1
- KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N boric acid Chemical compound OB(O)O KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004327 boric acid Substances 0.000 description 1
- 229940116229 borneol Drugs 0.000 description 1
- CKDOCTFBFTVPSN-UHFFFAOYSA-N borneol Natural products C1CC2(C)C(C)CC1C2(C)C CKDOCTFBFTVPSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 1
- 235000019282 butylated hydroxyanisole Nutrition 0.000 description 1
- CZBZUDVBLSSABA-UHFFFAOYSA-N butylated hydroxyanisole Chemical compound COC1=CC=C(O)C(C(C)(C)C)=C1.COC1=CC=C(O)C=C1C(C)(C)C CZBZUDVBLSSABA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940043253 butylated hydroxyanisole Drugs 0.000 description 1
- 235000010354 butylated hydroxytoluene Nutrition 0.000 description 1
- 229940095259 butylated hydroxytoluene Drugs 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- FUFJGUQYACFECW-UHFFFAOYSA-L calcium hydrogenphosphate Chemical compound [Ca+2].OP([O-])([O-])=O FUFJGUQYACFECW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- QXDMQSPYEZFLGF-UHFFFAOYSA-L calcium oxalate Chemical group [Ca+2].[O-]C(=O)C([O-])=O QXDMQSPYEZFLGF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000011132 calcium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000005251 capillar electrophoresis Methods 0.000 description 1
- LDVVMCZRFWMZSG-UHFFFAOYSA-N captan Chemical compound C1C=CCC2C(=O)N(SC(Cl)(Cl)Cl)C(=O)C21 LDVVMCZRFWMZSG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000007942 carboxylates Chemical class 0.000 description 1
- 238000005266 casting Methods 0.000 description 1
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 1
- 108060001132 cathelicidin Proteins 0.000 description 1
- 102000014509 cathelicidin Human genes 0.000 description 1
- 239000003093 cationic surfactant Substances 0.000 description 1
- 101150118073 cbi gene Proteins 0.000 description 1
- 230000007910 cell fusion Effects 0.000 description 1
- 239000013553 cell monolayer Substances 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920003086 cellulose ether Polymers 0.000 description 1
- 235000020221 chamomile extract Nutrition 0.000 description 1
- 229940119217 chamomile extract Drugs 0.000 description 1
- BHONFOAYRQZPKZ-LCLOTLQISA-N chembl269478 Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 BHONFOAYRQZPKZ-LCLOTLQISA-N 0.000 description 1
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 229940009025 chenodeoxycholate Drugs 0.000 description 1
- 229940099352 cholate Drugs 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 208000020832 chronic kidney disease Diseases 0.000 description 1
- 238000011260 co-administration Methods 0.000 description 1
- AGVAZMGAQJOSFJ-WZHZPDAFSA-M cobalt(2+);[(2r,3s,4r,5s)-5-(5,6-dimethylbenzimidazol-1-yl)-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] [(2r)-1-[3-[(1r,2r,3r,4z,7s,9z,12s,13s,14z,17s,18s,19r)-2,13,18-tris(2-amino-2-oxoethyl)-7,12,17-tris(3-amino-3-oxopropyl)-3,5,8,8,13,15,18,19-octamethyl-2 Chemical compound [Co+2].N#[C-].[N-]([C@@H]1[C@H](CC(N)=O)[C@@]2(C)CCC(=O)NC[C@@H](C)OP(O)(=O)O[C@H]3[C@H]([C@H](O[C@@H]3CO)N3C4=CC(C)=C(C)C=C4N=C3)O)\C2=C(C)/C([C@H](C\2(C)C)CCC(N)=O)=N/C/2=C\C([C@H]([C@@]/2(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=N\C\2=C(C)/C2=N[C@]1(C)[C@@](C)(CC(N)=O)[C@@H]2CCC(N)=O AGVAZMGAQJOSFJ-WZHZPDAFSA-M 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 229940075614 colloidal silicon dioxide Drugs 0.000 description 1
- 238000007398 colorimetric assay Methods 0.000 description 1
- 230000009918 complex formation Effects 0.000 description 1
- 238000006482 condensation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 230000008602 contraction Effects 0.000 description 1
- 239000005289 controlled pore glass Substances 0.000 description 1
- 239000012059 conventional drug carrier Substances 0.000 description 1
- 239000013256 coordination polymer Substances 0.000 description 1
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 1
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 description 1
- 238000009295 crossflow filtration Methods 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 125000001995 cyclobutyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])(*)C1([H])[H] 0.000 description 1
- 229940097362 cyclodextrins Drugs 0.000 description 1
- NZNMSOFKMUBTKW-UHFFFAOYSA-N cyclohexanecarboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1CCCCC1 NZNMSOFKMUBTKW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UHDGCWIWMRVCDJ-ZAKLUEHWSA-N cytidine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-ZAKLUEHWSA-N 0.000 description 1
- 210000004292 cytoskeleton Anatomy 0.000 description 1
- 210000000172 cytosol Anatomy 0.000 description 1
- GHVNFZFCNZKVNT-UHFFFAOYSA-M decanoate Chemical compound CCCCCCCCCC([O-])=O GHVNFZFCNZKVNT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- HABLENUWIZGESP-UHFFFAOYSA-N decanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCC(O)=O.CCCCCCCCCC(O)=O HABLENUWIZGESP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- STORWMDPIHOSMF-UHFFFAOYSA-N decanoic acid;octanoic acid;propane-1,2,3-triol Chemical compound OCC(O)CO.CCCCCCCC(O)=O.CCCCCCCCCC(O)=O STORWMDPIHOSMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 229940124447 delivery agent Drugs 0.000 description 1
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- MXHRCPNRJAMMIM-UHFFFAOYSA-N desoxyuridine Natural products C1C(O)C(CO)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 MXHRCPNRJAMMIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000368 destabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 1
- 238000001784 detoxification Methods 0.000 description 1
- 229960000633 dextran sulfate Drugs 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- GUJOJGAPFQRJSV-UHFFFAOYSA-N dialuminum;dioxosilane;oxygen(2-);hydrate Chemical compound O.[O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3].O=[Si]=O.O=[Si]=O.O=[Si]=O.O=[Si]=O GUJOJGAPFQRJSV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019700 dicalcium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 229940095079 dicalcium phosphate anhydrous Drugs 0.000 description 1
- 229960001193 diclofenac sodium Drugs 0.000 description 1
- ZBCBWPMODOFKDW-UHFFFAOYSA-N diethanolamine Chemical group OCCNCCO ZBCBWPMODOFKDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000006471 dimerization reaction Methods 0.000 description 1
- PSLWZOIUBRXAQW-UHFFFAOYSA-M dimethyl(dioctadecyl)azanium;bromide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)CCCCCCCCCCCCCCCCCC PSLWZOIUBRXAQW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- UAKOZKUVZRMOFN-JDVCJPALSA-M dimethyl-bis[(z)-octadec-9-enyl]azanium;chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC[N+](C)(C)CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC UAKOZKUVZRMOFN-JDVCJPALSA-M 0.000 description 1
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- ZGSPNIOCEDOHGS-UHFFFAOYSA-L disodium [3-[2,3-di(octadeca-9,12-dienoyloxy)propoxy-oxidophosphoryl]oxy-2-hydroxypropyl] 2,3-di(octadeca-9,12-dienoyloxy)propyl phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].CCCCCC=CCC=CCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCC=CCC=CCCCCC)COP([O-])(=O)OCC(O)COP([O-])(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCC=CCC=CCCCCC)COC(=O)CCCCCCCC=CCC=CCCCCC ZGSPNIOCEDOHGS-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000019301 disodium ethylene diamine tetraacetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N dl-hydroxyproline Natural products OC1C[NH2+]C(C([O-])=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DTGKSKDOIYIVQL-UHFFFAOYSA-N dl-isoborneol Natural products C1CC2(C)C(O)CC1C2(C)C DTGKSKDOIYIVQL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-M dodecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCC([O-])=O POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000003828 downregulation Effects 0.000 description 1
- 239000006196 drop Substances 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- UPEZCKBFRMILAV-JMZLNJERSA-N ecdysone Chemical compound C1[C@@H](O)[C@@H](O)C[C@]2(C)[C@@H](CC[C@@]3([C@@H]([C@@H]([C@H](O)CCC(C)(C)O)C)CC[C@]33O)C)C3=CC(=O)[C@@H]21 UPEZCKBFRMILAV-JMZLNJERSA-N 0.000 description 1
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 description 1
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 description 1
- 201000000523 end stage renal failure Diseases 0.000 description 1
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 1
- ZUBDGKVDJUIMQQ-UBFCDGJISA-N endothelin-1 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(O)=O)NC(=O)[C@H]1NC(=O)[C@H](CC=2C=CC=CC=2)NC(=O)[C@@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H]2CSSC[C@@H](C(N[C@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N2)=O)NC(=O)[C@@H](CO)NC(=O)[C@H](N)CSSC1)C1=CNC=N1 ZUBDGKVDJUIMQQ-UBFCDGJISA-N 0.000 description 1
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 1
- 239000007920 enema Substances 0.000 description 1
- 229940079360 enema for constipation Drugs 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 230000007071 enzymatic hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 210000001339 epidermal cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000010502 episomal replication Effects 0.000 description 1
- 229940011871 estrogen Drugs 0.000 description 1
- 239000000262 estrogen Substances 0.000 description 1
- 235000019325 ethyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920001249 ethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 102000013165 exonuclease Human genes 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 235000019256 formaldehyde Nutrition 0.000 description 1
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 1
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 229920000370 gamma-poly(glutamate) polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 230000007614 genetic variation Effects 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 description 1
- 229940049906 glutamate Drugs 0.000 description 1
- 108020004445 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 125000005456 glyceride group Chemical group 0.000 description 1
- UPWGQKDVAURUGE-UHFFFAOYSA-N glycerine monooleate Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OC(CO)CO UPWGQKDVAURUGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000005908 glyceryl ester group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003976 glyceryl group Chemical group [H]C([*])([H])C(O[H])([H])C(O[H])([H])[H] 0.000 description 1
- 150000002334 glycols Chemical class 0.000 description 1
- YQOKLYTXVFAUCW-UHFFFAOYSA-N guanidine;isothiocyanic acid Chemical compound N=C=S.NC(N)=N YQOKLYTXVFAUCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000665 guar gum Substances 0.000 description 1
- 235000010417 guar gum Nutrition 0.000 description 1
- 229960002154 guar gum Drugs 0.000 description 1
- 229940093915 gynecological organic acid Drugs 0.000 description 1
- 229910001385 heavy metal Inorganic materials 0.000 description 1
- KWLMIXQRALPRBC-UHFFFAOYSA-L hectorite Chemical compound [Li+].[OH-].[OH-].[Na+].[Mg+2].O1[Si]2([O-])O[Si]1([O-])O[Si]([O-])(O1)O[Si]1([O-])O2 KWLMIXQRALPRBC-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000271 hectorite Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 125000000592 heterocycloalkyl group Chemical group 0.000 description 1
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-M hexadecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- GNOIPBMMFNIUFM-UHFFFAOYSA-N hexamethylphosphoric triamide Chemical compound CN(C)P(=O)(N(C)C)N(C)C GNOIPBMMFNIUFM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010842 high-capacity cDNA reverse transcription kit Methods 0.000 description 1
- 229960001340 histamine Drugs 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091008039 hormone receptors Proteins 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000003906 humectant Substances 0.000 description 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 239000000416 hydrocolloid Substances 0.000 description 1
- 239000008172 hydrogenated vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 229920001477 hydrophilic polymer Polymers 0.000 description 1
- 150000001261 hydroxy acids Chemical class 0.000 description 1
- 229960002591 hydroxyproline Drugs 0.000 description 1
- 235000010979 hydroxypropyl methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000001866 hydroxypropyl methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920003088 hydroxypropyl methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- UFVKGYZPFZQRLF-UHFFFAOYSA-N hydroxypropyl methyl cellulose Chemical compound OC1C(O)C(OC)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(OC2C(C(O)C(OC3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)C(CO)O2)O)C(CO)O1 UFVKGYZPFZQRLF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GRRNUXAQVGOGFE-NZSRVPFOSA-N hygromycin B Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](NC)C[C@@H](N)[C@H](O)[C@H]1O[C@H]1[C@H]2O[C@@]3([C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](C(N)CO)O3)O)O[C@H]2[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 GRRNUXAQVGOGFE-NZSRVPFOSA-N 0.000 description 1
- 229940097277 hygromycin b Drugs 0.000 description 1
- 229960001680 ibuprofen Drugs 0.000 description 1
- 125000002632 imidazolidinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000002636 imidazolinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000000951 immunodiffusion Effects 0.000 description 1
- 238000000760 immunoelectrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 1
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 238000007901 in situ hybridization Methods 0.000 description 1
- 229960000905 indomethacin Drugs 0.000 description 1
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000011221 initial treatment Methods 0.000 description 1
- 229910003480 inorganic solid Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 229960003130 interferon gamma Drugs 0.000 description 1
- 210000003963 intermediate filament Anatomy 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 238000000185 intracerebroventricular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007917 intracranial administration Methods 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 230000002601 intratumoral effect Effects 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- JYJIGFIDKWBXDU-MNNPPOADSA-N inulin Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)OC[C@]1(OC[C@]2(OC[C@]3(OC[C@]4(OC[C@]5(OC[C@]6(OC[C@]7(OC[C@]8(OC[C@]9(OC[C@]%10(OC[C@]%11(OC[C@]%12(OC[C@]%13(OC[C@]%14(OC[C@]%15(OC[C@]%16(OC[C@]%17(OC[C@]%18(OC[C@]%19(OC[C@]%20(OC[C@]%21(OC[C@]%22(OC[C@]%23(OC[C@]%24(OC[C@]%25(OC[C@]%26(OC[C@]%27(OC[C@]%28(OC[C@]%29(OC[C@]%30(OC[C@]%31(OC[C@]%32(OC[C@]%33(OC[C@]%34(OC[C@]%35(OC[C@]%36(O[C@@H]%37[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O%37)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%36)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%35)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%34)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%33)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%32)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%31)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%30)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%29)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%28)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%27)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%26)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%25)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%24)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%23)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%22)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%21)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%20)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%19)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%18)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%17)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%16)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%15)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%14)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%13)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%12)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%11)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%10)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O9)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O8)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O7)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O6)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O5)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 JYJIGFIDKWBXDU-MNNPPOADSA-N 0.000 description 1
- 229940029339 inulin Drugs 0.000 description 1
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 1
- 239000002563 ionic surfactant Substances 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- QRWOVIRDHQJFDB-UHFFFAOYSA-N isobutyl cyanoacrylate Chemical compound CC(C)COC(=O)C(=C)C#N QRWOVIRDHQJFDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 125000005969 isothiazolinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 description 1
- 125000003965 isoxazolidinyl group Chemical group 0.000 description 1
- NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N kaolin Chemical compound O.O.O=[Al]O[Si](=O)O[Si](=O)O[Al]=O NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000010494 karaya gum Nutrition 0.000 description 1
- 239000000231 karaya gum Substances 0.000 description 1
- 229940039371 karaya gum Drugs 0.000 description 1
- 210000002510 keratinocyte Anatomy 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 229940039717 lanolin Drugs 0.000 description 1
- 235000019388 lanolin Nutrition 0.000 description 1
- DDVBPZROPPMBLW-ZJBINBEQSA-N latrunculin a Chemical compound C([C@H]1[C@@]2(O)C[C@H]3C[C@H](O2)CC[C@@H](/C=C\C=C/CC\C(C)=C/C(=O)O3)C)SC(=O)N1 DDVBPZROPPMBLW-ZJBINBEQSA-N 0.000 description 1
- DDVBPZROPPMBLW-UHFFFAOYSA-N latrunculin-A Natural products O1C(=O)C=C(C)CCC=CC=CC(C)CCC(O2)CC1CC2(O)C1CSC(=O)N1 DDVBPZROPPMBLW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940070765 laurate Drugs 0.000 description 1
- 229940062711 laureth-9 Drugs 0.000 description 1
- 239000008141 laxative Substances 0.000 description 1
- 229940125722 laxative agent Drugs 0.000 description 1
- 231100000518 lethal Toxicity 0.000 description 1
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 description 1
- 238000007834 ligase chain reaction Methods 0.000 description 1
- 235000001510 limonene Nutrition 0.000 description 1
- 229940087305 limonene Drugs 0.000 description 1
- 229940049918 linoleate Drugs 0.000 description 1
- 238000001638 lipofection Methods 0.000 description 1
- 150000002634 lipophilic molecules Chemical class 0.000 description 1
- 108700040422 lipopolylysine Proteins 0.000 description 1
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 239000006193 liquid solution Substances 0.000 description 1
- 239000003589 local anesthetic agent Substances 0.000 description 1
- 229960005015 local anesthetics Drugs 0.000 description 1
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 1
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 1
- 230000001926 lymphatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002794 lymphocyte assay Methods 0.000 description 1
- 238000010841 mRNA extraction Methods 0.000 description 1
- 208000002780 macular degeneration Diseases 0.000 description 1
- 239000002075 main ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 125000002960 margaryl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 229940041616 menthol Drugs 0.000 description 1
- 229930007503 menthone Natural products 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 150000004692 metal hydroxides Chemical class 0.000 description 1
- WDWDWGRYHDPSDS-UHFFFAOYSA-N methanimine Chemical compound N=C WDWDWGRYHDPSDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000010270 methyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004292 methyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- IDBOAVAEGRJRIZ-UHFFFAOYSA-N methylidenehydrazine Chemical group NN=C IDBOAVAEGRJRIZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002216 methylparaben Drugs 0.000 description 1
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 1
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 1
- 210000003632 microfilament Anatomy 0.000 description 1
- 210000004688 microtubule Anatomy 0.000 description 1
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 1
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008185 minitablet Substances 0.000 description 1
- 230000000116 mitigating effect Effects 0.000 description 1
- 210000003470 mitochondria Anatomy 0.000 description 1
- 229960004857 mitomycin Drugs 0.000 description 1
- 108091005601 modified peptides Proteins 0.000 description 1
- 239000003607 modifier Substances 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- RZRNAYUHWVFMIP-UHFFFAOYSA-N monoelaidin Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OCC(O)CO RZRNAYUHWVFMIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000865 mononuclear phagocyte system Anatomy 0.000 description 1
- 229910052901 montmorillonite Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000002757 morpholinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 210000000214 mouth Anatomy 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 229940105132 myristate Drugs 0.000 description 1
- JIDVGUQUQSOHOL-UHFFFAOYSA-N myxin Chemical compound C1=CC=C2[N+]([O-])=C3C(OC)=CC=CC3=[N+]([O-])C2=C1O JIDVGUQUQSOHOL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XVUQPECVOGMPRU-ZPPAUJSGSA-N n,n-dimethyl-1,2-bis[(9z,12z)-octadeca-9,12-dienoxy]propan-1-amine Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/CCCCCCCCOC(C)C(N(C)C)OCCCCCCCC\C=C/C\C=C/CCCCC XVUQPECVOGMPRU-ZPPAUJSGSA-N 0.000 description 1
- GLGLUQVVDHRLQK-WRBBJXAJSA-N n,n-dimethyl-2,3-bis[(z)-octadec-9-enoxy]propan-1-amine Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCCOCC(CN(C)C)OCCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC GLGLUQVVDHRLQK-WRBBJXAJSA-N 0.000 description 1
- UKXOXMLXFQEEQJ-KWXKLSQISA-N n,n-dimethyl-2,3-bis[[(9z,12z)-octadeca-9,12-dienyl]sulfanyl]propan-1-amine Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/CCCCCCCCSCC(CN(C)C)SCCCCCCCC\C=C/C\C=C/CCCCC UKXOXMLXFQEEQJ-KWXKLSQISA-N 0.000 description 1
- DDBRXOJCLVGHLX-UHFFFAOYSA-N n,n-dimethylmethanamine;propane Chemical compound CCC.CN(C)C DDBRXOJCLVGHLX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZUHZZVMEUAUWHY-UHFFFAOYSA-N n,n-dimethylpropan-1-amine Chemical compound CCCN(C)C ZUHZZVMEUAUWHY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OZSVEZZAQGRTBE-PXYINDEMSA-N n-[6-[(2s)-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)pyrrolidin-1-yl]-6-oxohexyl]acetamide Chemical compound CC(=O)NCCCCCC(=O)N1CC(O)C[C@H]1CO OZSVEZZAQGRTBE-PXYINDEMSA-N 0.000 description 1
- QNILTEGFHQSKFF-UHFFFAOYSA-N n-propan-2-ylprop-2-enamide Chemical compound CC(C)NC(=O)C=C QNILTEGFHQSKFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940042880 natural phospholipid Drugs 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 201000000173 nephrocalcinosis Diseases 0.000 description 1
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 1
- 125000001893 nitrooxy group Chemical group [O-][N+](=O)O* 0.000 description 1
- 229950006344 nocodazole Drugs 0.000 description 1
- 229940021182 non-steroidal anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 1
- QTNLALDFXILRQO-UHFFFAOYSA-N nonadecane-1,2,3-triol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCC(O)C(O)CO QTNLALDFXILRQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000956 nontoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000001613 nuclear run-on assay Methods 0.000 description 1
- 239000002853 nucleic acid probe Substances 0.000 description 1
- 230000000269 nucleophilic effect Effects 0.000 description 1
- 150000003833 nucleoside derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- HEGSGKPQLMEBJL-RKQHYHRCSA-N octyl beta-D-glucopyranoside Chemical compound CCCCCCCCO[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O HEGSGKPQLMEBJL-RKQHYHRCSA-N 0.000 description 1
- 239000003924 oil dispersant Substances 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 239000003883 ointment base Substances 0.000 description 1
- 229940049964 oleate Drugs 0.000 description 1
- 229960002969 oleic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000021313 oleic acid Nutrition 0.000 description 1
- 125000001117 oleyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])/C([H])=C([H])\C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000003605 opacifier Substances 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 125000001181 organosilyl group Chemical group [SiH3]* 0.000 description 1
- 229960003104 ornithine Drugs 0.000 description 1
- 150000002905 orthoesters Chemical class 0.000 description 1
- 150000003891 oxalate salts Chemical class 0.000 description 1
- 125000000160 oxazolidinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 102000002574 p38 Mitogen-Activated Protein Kinases Human genes 0.000 description 1
- 108010068338 p38 Mitogen-Activated Protein Kinases Proteins 0.000 description 1
- 238000012856 packing Methods 0.000 description 1
- 229910052625 palygorskite Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000004738 parenchymal cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 235000010987 pectin Nutrition 0.000 description 1
- 239000001814 pectin Substances 0.000 description 1
- 229920001277 pectin Polymers 0.000 description 1
- MCYTYTUNNNZWOK-LCLOTLQISA-N penetratin Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(N)=O)C1=CC=CC=C1 MCYTYTUNNNZWOK-LCLOTLQISA-N 0.000 description 1
- 239000003961 penetration enhancing agent Substances 0.000 description 1
- JLFNLZLINWHATN-UHFFFAOYSA-N pentaethylene glycol Chemical compound OCCOCCOCCOCCOCCO JLFNLZLINWHATN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000863 peptide conjugate Substances 0.000 description 1
- 125000001151 peptidyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000000858 peroxisomal effect Effects 0.000 description 1
- 210000002824 peroxisome Anatomy 0.000 description 1
- 229940066842 petrolatum Drugs 0.000 description 1
- 235000019271 petrolatum Nutrition 0.000 description 1
- 238000002823 phage display Methods 0.000 description 1
- 239000008177 pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 239000008251 pharmaceutical emulsion Substances 0.000 description 1
- 229940124531 pharmaceutical excipient Drugs 0.000 description 1
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010587 phase diagram Methods 0.000 description 1
- 229960002895 phenylbutazone Drugs 0.000 description 1
- VYMDGNCVAMGZFE-UHFFFAOYSA-N phenylbutazonum Chemical compound O=C1C(CCCC)C(=O)N(C=2C=CC=CC=2)N1C1=CC=CC=C1 VYMDGNCVAMGZFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000008104 phosphatidylethanolamines Chemical class 0.000 description 1
- 150000003905 phosphatidylinositols Chemical class 0.000 description 1
- 150000008298 phosphoramidates Chemical class 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 125000004193 piperazinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003386 piperidinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000036470 plasma concentration Effects 0.000 description 1
- 239000013600 plasmid vector Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- ONJQDTZCDSESIW-UHFFFAOYSA-N polidocanol Chemical compound CCCCCCCCCCCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCO ONJQDTZCDSESIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000729 poly(L-lysine) polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920000962 poly(amidoamine) Polymers 0.000 description 1
- 229920002627 poly(phosphazenes) Polymers 0.000 description 1
- 229920001481 poly(stearyl methacrylate) Polymers 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 108010064470 polyaspartate Proteins 0.000 description 1
- 239000004417 polycarbonate Substances 0.000 description 1
- 229920000515 polycarbonate Polymers 0.000 description 1
- 229920005646 polycarboxylate Polymers 0.000 description 1
- 125000005575 polycyclic aromatic hydrocarbon group Chemical group 0.000 description 1
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 description 1
- 229920001601 polyetherimide Polymers 0.000 description 1
- 229920002643 polyglutamic acid Polymers 0.000 description 1
- 229920002720 polyhexylacrylate Polymers 0.000 description 1
- 229920002704 polyhistidine Polymers 0.000 description 1
- 229920001855 polyketal Polymers 0.000 description 1
- 108010055896 polyornithine Proteins 0.000 description 1
- 229920002714 polyornithine Polymers 0.000 description 1
- 229920000056 polyoxyethylene ether Polymers 0.000 description 1
- 229920006324 polyoxymethylene Polymers 0.000 description 1
- 229920002635 polyurethane Polymers 0.000 description 1
- 239000004814 polyurethane Substances 0.000 description 1
- 229920002717 polyvinylpyridine Polymers 0.000 description 1
- 150000004032 porphyrins Chemical class 0.000 description 1
- 230000032361 posttranscriptional gene silencing Effects 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000007639 printing Methods 0.000 description 1
- 239000000186 progesterone Substances 0.000 description 1
- 229960003387 progesterone Drugs 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 235000010232 propyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004405 propyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 229960003415 propylparaben Drugs 0.000 description 1
- 230000007111 proteostasis Effects 0.000 description 1
- 230000005588 protonation Effects 0.000 description 1
- 235000019423 pullulan Nutrition 0.000 description 1
- 125000004219 purine nucleobase group Chemical group 0.000 description 1
- 239000002213 purine nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000000561 purinyl group Chemical group N1=C(N=C2N=CNC2=C1)* 0.000 description 1
- 125000003072 pyrazolidinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000002755 pyrazolinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 229960003581 pyridoxal Drugs 0.000 description 1
- 235000008164 pyridoxal Nutrition 0.000 description 1
- 239000011674 pyridoxal Substances 0.000 description 1
- 125000000714 pyrimidinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 150000003233 pyrroles Chemical class 0.000 description 1
- 125000000719 pyrrolidinyl group Chemical group 0.000 description 1
- LKUNXBRZDFMZOK-UHFFFAOYSA-N rac-1-monodecanoylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCC(=O)OCC(O)CO LKUNXBRZDFMZOK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GHBFNMLVSPCDGN-UHFFFAOYSA-N rac-1-monooctanoylglycerol Chemical compound CCCCCCCC(=O)OCC(O)CO GHBFNMLVSPCDGN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002516 radical scavenger Substances 0.000 description 1
- 230000003252 repetitive effect Effects 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 210000001525 retina Anatomy 0.000 description 1
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 1
- 235000019192 riboflavin Nutrition 0.000 description 1
- 229960002477 riboflavin Drugs 0.000 description 1
- 239000002151 riboflavin Substances 0.000 description 1
- 239000003161 ribonuclease inhibitor Substances 0.000 description 1
- 125000006413 ring segment Chemical group 0.000 description 1
- 238000005096 rolling process Methods 0.000 description 1
- 150000003873 salicylate salts Chemical class 0.000 description 1
- 235000019515 salmon Nutrition 0.000 description 1
- 108700004121 sarkosyl Proteins 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 108010060800 serine-pyruvate aminotransferase Proteins 0.000 description 1
- 238000007493 shaping process Methods 0.000 description 1
- 229920002545 silicone oil Polymers 0.000 description 1
- RYMZZMVNJRMUDD-HGQWONQESA-N simvastatin Chemical compound C([C@H]1[C@@H](C)C=CC2=C[C@H](C)C[C@@H]([C@H]12)OC(=O)C(C)(C)CC)C[C@@H]1C[C@@H](O)CC(=O)O1 RYMZZMVNJRMUDD-HGQWONQESA-N 0.000 description 1
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 1
- WXMKPNITSTVMEF-UHFFFAOYSA-M sodium benzoate Chemical compound [Na+].[O-]C(=O)C1=CC=CC=C1 WXMKPNITSTVMEF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000010234 sodium benzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004299 sodium benzoate Substances 0.000 description 1
- NRHMKIHPTBHXPF-TUJRSCDTSA-M sodium cholate Chemical compound [Na+].C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC([O-])=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 NRHMKIHPTBHXPF-TUJRSCDTSA-M 0.000 description 1
- HRZFUMHJMZEROT-UHFFFAOYSA-L sodium disulfite Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S(=O)S([O-])(=O)=O HRZFUMHJMZEROT-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- VMSNAUAEKXEYGP-YEUHZSMFSA-M sodium glycodeoxycholate Chemical compound [Na+].C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(=O)NCC([O-])=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 VMSNAUAEKXEYGP-YEUHZSMFSA-M 0.000 description 1
- 229940001584 sodium metabisulfite Drugs 0.000 description 1
- 235000010262 sodium metabisulphite Nutrition 0.000 description 1
- RYYKJJJTJZKILX-UHFFFAOYSA-M sodium octadecanoate Chemical class [Na+].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O RYYKJJJTJZKILX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960004025 sodium salicylate Drugs 0.000 description 1
- 229920003109 sodium starch glycolate Polymers 0.000 description 1
- 239000008109 sodium starch glycolate Substances 0.000 description 1
- 229940079832 sodium starch glycolate Drugs 0.000 description 1
- JAJWGJBVLPIOOH-IZYKLYLVSA-M sodium taurocholate Chemical compound [Na+].C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(=O)NCCS([O-])(=O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 JAJWGJBVLPIOOH-IZYKLYLVSA-M 0.000 description 1
- 239000004328 sodium tetraborate Substances 0.000 description 1
- 235000010339 sodium tetraborate Nutrition 0.000 description 1
- WDFRNBJHDMUMBL-OICFXQLMSA-M sodium;(4r)-4-[(3r,5s,7r,8r,9s,10s,13r,14s,17r)-3,7-dihydroxy-10,13-dimethyl-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl]pentanoate Chemical compound [Na+].C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC([O-])=O)C)[C@@]2(C)CC1 WDFRNBJHDMUMBL-OICFXQLMSA-M 0.000 description 1
- WDFRNBJHDMUMBL-FUXQPCDDSA-M sodium;(4r)-4-[(3r,5s,7s,8r,9s,10s,13r,14s,17r)-3,7-dihydroxy-10,13-dimethyl-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl]pentanoate Chemical compound [Na+].C([C@H]1C[C@@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC([O-])=O)C)[C@@]2(C)CC1 WDFRNBJHDMUMBL-FUXQPCDDSA-M 0.000 description 1
- FKJIJBSJQSMPTI-CAOXKPNISA-M sodium;(4r)-4-[(5s,8r,9s,10s,13r,14s,17r)-10,13-dimethyl-3,7,12-trioxo-1,2,4,5,6,8,9,11,14,15,16,17-dodecahydrocyclopenta[a]phenanthren-17-yl]pentanoate Chemical compound [Na+].C1CC(=O)C[C@H]2CC(=O)[C@H]3[C@@H]4CC[C@H]([C@@H](CCC([O-])=O)C)[C@@]4(C)C(=O)C[C@@H]3[C@]21C FKJIJBSJQSMPTI-CAOXKPNISA-M 0.000 description 1
- JGMJQSFLQWGYMQ-UHFFFAOYSA-M sodium;2,6-dichloro-n-phenylaniline;acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O.ClC1=CC=CC(Cl)=C1NC1=CC=CC=C1 JGMJQSFLQWGYMQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000007909 solid dosage form Substances 0.000 description 1
- 230000003381 solubilizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N somatostatin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)[C@@H](C)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)N)C(O)=O)=O)[C@H](O)C)C1=CC=CC=C1 NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N 0.000 description 1
- 229960000553 somatostatin Drugs 0.000 description 1
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 1
- 235000011076 sorbitan monostearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001587 sorbitan monostearate Substances 0.000 description 1
- 229940035048 sorbitan monostearate Drugs 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- 150000003408 sphingolipids Chemical class 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 description 1
- 238000003153 stable transfection Methods 0.000 description 1
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 150000003432 sterols Chemical class 0.000 description 1
- 235000003702 sterols Nutrition 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000547 substituted alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 150000003445 sucroses Chemical class 0.000 description 1
- IIACRCGMVDHOTQ-UHFFFAOYSA-N sulfamic acid Chemical group NS(O)(=O)=O IIACRCGMVDHOTQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003456 sulfonamides Chemical group 0.000 description 1
- BDHFUVZGWQCTTF-UHFFFAOYSA-M sulfonate Chemical compound [O-]S(=O)=O BDHFUVZGWQCTTF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 150000003871 sulfonates Chemical class 0.000 description 1
- 150000003457 sulfones Chemical group 0.000 description 1
- 150000003462 sulfoxides Chemical class 0.000 description 1
- 125000004434 sulfur atom Chemical group 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- WBWWGRHZICKQGZ-GIHLXUJPSA-N taurocholic acid Chemical compound C([C@@H]1C[C@H]2O)[C@@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@@H]([C@@H](CCC(=O)NCCS(O)(=O)=O)C)[C@@]2(C)[C@H](O)C1 WBWWGRHZICKQGZ-GIHLXUJPSA-N 0.000 description 1
- AWDRATDZQPNJFN-VAYUFCLWSA-N taurodeoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(=O)NCCS(O)(=O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 AWDRATDZQPNJFN-VAYUFCLWSA-N 0.000 description 1
- 238000011191 terminal modification Methods 0.000 description 1
- 150000003505 terpenes Chemical class 0.000 description 1
- 235000007586 terpenes Nutrition 0.000 description 1
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 229930101283 tetracycline Natural products 0.000 description 1
- 229960002180 tetracycline Drugs 0.000 description 1
- 235000019364 tetracycline Nutrition 0.000 description 1
- 150000003522 tetracyclines Chemical class 0.000 description 1
- TUNFSRHWOTWDNC-UHFFFAOYSA-N tetradecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC(O)=O TUNFSRHWOTWDNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JYKSTGLAIMQDRA-UHFFFAOYSA-N tetraglycerol Chemical compound OCC(O)CO.OCC(O)CO.OCC(O)CO.OCC(O)CO JYKSTGLAIMQDRA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZEMGGZBWXRYJHK-UHFFFAOYSA-N thiouracil Chemical compound O=C1C=CNC(=S)N1 ZEMGGZBWXRYJHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XXYIANZGUOSQHY-XLPZGREQSA-N thymidine 3'-monophosphate Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](OP(O)(O)=O)C1 XXYIANZGUOSQHY-XLPZGREQSA-N 0.000 description 1
- 229960000874 thyrotropin Drugs 0.000 description 1
- 230000001748 thyrotropin Effects 0.000 description 1
- 229930003799 tocopherol Natural products 0.000 description 1
- 239000011732 tocopherol Substances 0.000 description 1
- 125000002640 tocopherol group Chemical class 0.000 description 1
- 235000019149 tocopherols Nutrition 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 239000012049 topical pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 235000010487 tragacanth Nutrition 0.000 description 1
- 239000000196 tragacanth Substances 0.000 description 1
- 229940116362 tragacanth Drugs 0.000 description 1
- FGMPLJWBKKVCDB-UHFFFAOYSA-N trans-L-hydroxy-proline Natural products ON1CCCC1C(O)=O FGMPLJWBKKVCDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000014898 transaminase activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 230000037317 transdermal delivery Effects 0.000 description 1
- 239000012581 transferrin Substances 0.000 description 1
- 238000003146 transient transfection Methods 0.000 description 1
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 1
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 1
- PHYFQTYBJUILEZ-IUPFWZBJSA-N triolein Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC)COC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC PHYFQTYBJUILEZ-IUPFWZBJSA-N 0.000 description 1
- 229940117972 triolein Drugs 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 230000010415 tropism Effects 0.000 description 1
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 1
- 210000001635 urinary tract Anatomy 0.000 description 1
- RUDATBOHQWOJDD-UZVSRGJWSA-N ursodeoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)CC1 RUDATBOHQWOJDD-UZVSRGJWSA-N 0.000 description 1
- 229960001661 ursodiol Drugs 0.000 description 1
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 1
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 229960003048 vinblastine Drugs 0.000 description 1
- JXLYSJRDGCGARV-XQKSVPLYSA-N vincaleukoblastine Chemical compound C([C@@H](C[C@]1(C(=O)OC)C=2C(=CC3=C([C@]45[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]6(CC)C=CCN([C@H]56)CC4)(O)C(=O)OC)N3C)C=2)OC)C[C@@](C2)(O)CC)N2CCC2=C1NC1=CC=CC=C21 JXLYSJRDGCGARV-XQKSVPLYSA-N 0.000 description 1
- OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N vincristine Chemical compound C([N@]1C[C@@H](C[C@]2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C([C@]56[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]7(CC)C=CCN([C@H]67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)C[C@@](C1)(O)CC)CC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N 0.000 description 1
- 229960004528 vincristine Drugs 0.000 description 1
- OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N vincristine Natural products C1C(CC)(O)CC(CC2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C(C56C(C(C(OC(C)=O)C7(CC)C=CCN(C67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)CN1CCC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019155 vitamin A Nutrition 0.000 description 1
- 239000011719 vitamin A Substances 0.000 description 1
- 235000019156 vitamin B Nutrition 0.000 description 1
- 239000011720 vitamin B Substances 0.000 description 1
- 235000019163 vitamin B12 Nutrition 0.000 description 1
- 239000011715 vitamin B12 Substances 0.000 description 1
- 235000019168 vitamin K Nutrition 0.000 description 1
- 239000011712 vitamin K Substances 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000011800 void material Substances 0.000 description 1
- 239000008307 w/o/w-emulsion Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 1
- 229940124024 weight reducing agent Drugs 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
- 229940075420 xanthine Drugs 0.000 description 1
- SFVVQRJOGUKCEG-OPQSFPLASA-N β-MSH Chemical compound C1C[C@@H](O)[C@H]2C(COC(=O)[C@@](O)([C@@H](C)O)C(C)C)=CCN21 SFVVQRJOGUKCEG-OPQSFPLASA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
- A61K31/713—Double-stranded nucleic acids or oligonucleotides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
- A61K47/549—Sugars, nucleosides, nucleotides or nucleic acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
- A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
- C12N15/1137—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing against enzymes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y101/00—Oxidoreductases acting on the CH-OH group of donors (1.1)
- C12Y101/03—Oxidoreductases acting on the CH-OH group of donors (1.1) with a oxygen as acceptor (1.1.3)
- C12Y101/03015—(S)-2-Hydroxy-acid oxidase (1.1.3.15)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/10—Type of nucleic acid
- C12N2310/14—Type of nucleic acid interfering N.A.
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/31—Chemical structure of the backbone
- C12N2310/315—Phosphorothioates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/32—Chemical structure of the sugar
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/32—Chemical structure of the sugar
- C12N2310/321—2'-O-R Modification
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/34—Spatial arrangement of the modifications
- C12N2310/344—Position-specific modifications, e.g. on every purine, at the 3'-end
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/34—Spatial arrangement of the modifications
- C12N2310/346—Spatial arrangement of the modifications having a combination of backbone and sugar modifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/35—Nature of the modification
- C12N2310/351—Conjugate
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/35—Nature of the modification
- C12N2310/351—Conjugate
- C12N2310/3515—Lipophilic moiety, e.g. cholesterol
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Virology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к средствам для RNAi, например двухнитевым средствам для RNAi, целенаправленно воздействующим на ген HAO1, и к способам применения таких средств для RNAi для ингибирования экспрессии HAO1, и к способам лечения субъектов, например, с PH1. В данном документе описаны двухнитевые средства для RNAi, которые ингибируют экспрессию гена HAO1 в клетке, такой как клетка в организме субъекта, например млекопитающего, как, например, человека с ассоциированным с HAO1 нарушением, и применения таких двухнитевых средств для RNAi. В определенных аспектах настоящего изобретения практически все нуклеотиды iRNA согласно настоящему изобретению являются модифицированными.
Description
(54) КОМПОЗИЦИИ И СПОСОБЫ, ПРЕДНАЗНАЧЕННЫЕ ДЛЯ ИНГИБИРОВАНИЯ ЭКСПРЕССИИ ГЕНА НАО1 (ОКСИДАЗЫ 1 ГИДРОКСИКИСЛОТ (ГЛИКОЛАТОКСИДАЗЫ))
(31) | 62/062,751; 62/147,976; 62/214,602 | (56) US-A1-20140288158 |
(32) (33) | 2014.10.10; 2015.04.15; 2015.09.04 US | US-A1-20110287974 US-A1-20140221465 WO-A2-2013074974 |
(43) | 2017.08.31 | WO-A2-2012023 960 |
(86) PCT/US2015/054881 (87) WO 2016/057893 2016.04.14 (71 )(73) Заявитель и патентовладелец: | US-A1-20110301229 |
ЭЛНИЛЭМ ФАРМАСЬЮТИКАЛЗ, ИНК. (US) (72) Изобретатель:
Куэрбс Уилльям, Фитцжеральд Кевин, Беттенкорт Брайан, Лайебоу Эбигейл, Эрбе Дэвид В. (US) (74) Представитель:
Медведев В.Н. (RU)
037115 В1
037115 Bl (57) Изобретение относится к средствам для RNAi, например двухнитевым средствам для RNAi, целенаправленно воздействующим на ген НАО1, и к способам применения таких средств для RNAi для ингибирования экспрессии НАО1, и к способам лечения субъектов, например, с РН1. В данном документе описаны двухнитевые средства для RNAi, которые ингибируют экспрессию гена НАО 1 в клетке, такой как клетка в организме субъекта, например млекопитающего, как, например, человека с ассоциированным с НАО1 нарушением, и применения таких двухнитевых средств для RNAi. В определенных аспектах настоящего изобретения практически все нуклеотиды iRNA согласно настоящему изобретению являются модифицированными.
Перекрестная ссылка на родственные заявки
Заявка на данное изобретение испрашивает приоритет предварительной заявки на патент США № 62/062751, поданной 10 октября 2014 г., и предварительной заявки на патент США № 62/147976, поданной 15 апреля 2015 г., и предварительной заявки на патент США № 62/214602, поданной 4 сентября 2015 г., каждая из которых включена в данный документ посредством ссылки в полном объеме.
Перечень последовательностей
Заявка на данное изобретение включает перечень последовательностей, который был подан в электронном виде в формате с кодировкой ASCII и настоящим включен в данный документ при помощи ссылки в полном объеме. Указанная копия файла с кодировкой ASCII, созданная 8 октября 2015 г., имеет название 30864PCT_CRF_sequencelisting. txt, и ее размер составляет 735705 байт.
Уровень техники
Первичная гипероксалурия 1 типа (РН1) представляет собой нарушение метаболизма глиоксилата с аутосомно-рецессивным типом наследования. Детоксикация глиоксилата в печени нарушена вследствие мутации гена AGXT, который кодирует пероксисомальный фермент печени - аланин-глиоксилатаминотрансферазу (AGT). AGT1 является конечным ферментом в метаболическом расщеплении гидроксипролина. Потеря функции AGT перерабатывать промежуточный метаболит глиоксилат в глицин вызывает накопление и превращение глиоксилата в гликолат, который окисляется до оксалата при помощи фермента гликолат-оксидазы (GO), также известной как оксидаза гидроксикислот (НАО1).
Регуляция уровня глиоксилата, главного предшественника оксалата, происходит в нескольких участках клетки, в том числе митохондриях, пероксисоме и цитозоле. Избыточный оксалат у пациентов с РН1 не может быть полностью выведен почками, что приводит к образованию и отложению кристаллов оксалата кальция в почках и мочевыводящих путях. Повреждение почек вызвано сочетанием тубулярной токсичности от оксалата, нефрокальциноза и обструкции почек из-за камней. Более 30% пациентов достигают терминальной стадии почечной недостаточности (ESRD).
Ген НАО1 кодирует фермент оксидазу 1 гидроксикислот, также известную как гликолат-оксидаза (GO). Белок НАО1 экспрессируется преимущественно в печени и представляет собой оксидазу 2-гидроксикислот, наиболее активную в отношении гликолата.
В мышиной модели РН1, в которой удален ген AGT1, уровни оксалатов в моче снижаются при удалении гена НАО1.
PH1, AGXT и НАО1 описаны в следующих источниках: Angel L. Реу, Armando Albert, и Eduardo Salido, Protein Homeostasis Defects of Alanine-Glyoxylate Aminotransferase: New Therapeutic Strategies in Primary Hyperoxaluria Type I, BioMed Research International, vol. 2013, Article ID 687658, 15 pages, 2013. doi:10.1155/2013/687658; Cochat и Rumsby (2013), NEJM 369:7; Salido et al. (2006), PNAS 103:18249; Baker et al. (2004), American Journal of Physiology - Heart and Circulatory Physiology, опубликовано 1 октября 2004 г, Vol. 287 No. 4, H1771-H1779DOI: 10.1152/ajpheart.00234.2004.
Краткое описание изобретения
Настоящее изобретение предусматривает композиции, содержащие средства для RNAi, например средства на основе двухнитевой iRNA, целенаправленно воздействующие на НАО1. Настоящее изобретение также предусматривает способы, в которых применяют композиции согласно настоящему изобретению для ингибирования экспрессии НАО1 и для лечения ассоциированных с НАО1 нарушений, например РН1.
Краткое описание графических материалов
На фиг. 1 показана нуклеотидная последовательность мРНК НАО1 Homo sapiens (SEQ ID NO: 1).
На фиг. 2 показана нуклеотидная последовательность мРНК НАО1 Mus musculus (SEQ ID NO: 2).
Фиг. 3А представляет собой график, на котором показаны результаты отбора in vitro конъюгатов GalNac-siRNA для GO (HAO) в первичных гепатоцитах макака-крабоеда.
Фиг. 3В представляет собой график, на котором показана кривая зависимости доза-эффект конъюгата GalNac-siRNA для GO (HAO) в первичных гепатоцитах макака-крабоеда.
Фиг. 4А представляет собой график, на котором показаны результаты оценки in vivo конъюгатов GalNac-siRNA для GO (HAO) у мышей линии С57В6 после однократной дозы.
Фиг. 4В представляет собой график, на котором показаны результаты оценки in vivo конъюгатов GalNac-siRNA для GO (HAO) у мышей линии С57В6 после повторной дозы.
Фиг. 5А представляет собой график, на котором показаны уровни оксалатов в моче у нокаутных (KO) по AGXT мышей после лечения при помощи конъюгатов GalNac-siRNA для GO (HAO).
Фиг. 5В представляет собой график, на котором показаны уровни гликолата в моче у KO по AGXT мышей после лечения при помощи конъюгатов GalNac-siRNA для GO (HAO).
Фиг. 6А представляет собой график, на котором показаны уровни мРНК AGXT в крысиной модели РН1 через 72 ч после однократной дозы siRNA AGXT.
Фиг. 6В представляет собой график, на котором показаны уровни оксалатов в моче в крысиной модели РН1 через 72 ч после лечения при помощи конъюгата GalNac-siRNA для GO (HAO).
- 1 037115
Фиг. 6C представляет собой график, на котором показаны уровни оксалатов в моче в крысиной модели РН1, наблюдаемые в течение 49 дней с продолжающимся еженедельным введением доз на 14 и 21 дни как AF-011-63102, так и AD-62994 и сборами мочи за 24 ч, как показано.
Фиг. 6D представляет собой график, на котором показана продолжительность нокдауна HAO1 у крыс. Показаны уровни мРНК либо через одну неделю, либо через четыре недели после последней из 4 доз (что соответствует 28 и 49 дням на фиг. 6C) и приведены относительно уровней, наблюдаемых у крыс, которых лечили при помощи PBS.
На фиг. 7 показана обратная комплементарная последовательность нуклеотидной последовательности мРНК HAO1 Homo sapiens (SEQ ID NO: 3).
На фиг. 8 показана обратная комплементарная последовательность нуклеотидной последовательности мРНК HAO1 Mus musculus (SEQ ID NO: 4).
На фиг. 9 показана нуклеотидная последовательность мРНК HAO1 Масаса fascicularis (SEQ ID NO: 5).
На фиг. 10 показана нуклеотидная последовательность мРНК HAO1 Rattus norvegicus (SEQ ID NO: 6).
На фиг. 11 показана обратная комплементарная последовательность нуклеотидной последовательности мРНК HAO1 Масаса fascicularis (SEQ ID NO: 7).
На фиг. 12 показана обратная комплементарная последовательность нуклеотидной последовательности мРНК HAO1 Rattus norvegicus (SEQ ID NO: 8).
На фиг. 13 показан отбор in vivo конъюгатов GalNAc для GO.
Фиг. 14 представляет собой график, на котором показана оценка in vivo конъюгатов GO-GalNAc у мышей.
Фиг. 15 представляет собой график, на котором показана оценка эффекта дозы конъюгатов GO-GalNAc у мышей.
Фиг. 16 представляет собой график, на котором показана оценка эффекта дозы конъюгатов GO-GalNAc у мышей.
Фиг. 17 представляет собой график, на котором показана оценка эффекта дозы у мышей.
Фиг. 18 представляет собой два графика, на которых показана взаимосвязь нокдауна мРНК с уровнями гликолата в сыворотке крови у мышей.
Фиг. 19 представляет собой два графика, на которых показана взаимосвязь нокдауна мРНК с уровнями гликолата в сыворотке крови у крыс.
Фиг. 20 представляет собой график, на котором показано дозозависимое ингибирование мРНК HAO1 при помощи ALN-65585 в первичных гепатоцитах яванского макака.
Фиг. 21 представляет собой два графика, на которых показаны уровни мРНК HAO1 и гликолата в сыворотке крови после лечения при помощи однократной дозы ALN-GO1 у мышей.
Фиг. 22 представляет собой график, на котором показана продолжительность сайленсинга мРНК HAO1 после лечения при помощи однократной дозы ALN-GO1 у мышей.
Фиг. 23 представляет собой график, на котором показаны уровни мРНК HAO1 и гликолата в сыворотке крови после лечения при помощи однократной дозы ALN-GO1 у крыс.
Фиг. 24 представляет собой два графика, на которых показаны уровни оксалатов и гликолата в моче в мышиной модели первичной гипероксалурии I типа после однократной дозы ALN-GO1.
Фиг. 25А представляет собой график, на котором показаны уровни мРНК HAO1 в крысиной модели первичной гипероксалурии I типа после однократной дозы ALN-GO1.
Фиг. 25В представляет собой график, на котором показаны уровни оксалатов в моче в крысиной модели первичной гипероксалурии I типа после однократной дозы ALN-GO1.
Фиг. 26 представляет собой два графика, на которых показаны уровни мРНК HAO1 и оксалатов в моче в крысиной модели первичной гипероксалурии I типа после повторного введения дозы ALN-GO1.
Фиг. 27 представляет собой два графика, на которых показаны уровни мРНК HAO1 и гликолата в сыворотке крови после повторного введения дозы отличным от человека приматам.
Подробное описание изобретения
Настоящее изобретение предусматривает композиции, содержащие средства для RNAi, например двухнитевые средства для RNAi, целенаправленно воздействующие на HAO1. Настоящее изобретение также предусматривает способы, в которых применяют композиции согласно настоящему изобретению для ингибирования экспрессии HAO1 и для лечения ассоциированных с HAO1 нарушений.
I. Определения.
Для того чтобы настоящее изобретение можно было более легко понять, вначале даны определения некоторым терминам. Кроме того, следует отметить, что во всех случаях перечисления значения или диапазона значений параметра подразумевают, что значения и диапазоны, промежуточные по отношению к перечисленным значениям, также подразумеваются как часть настоящего изобретения.
Форму единственного числа используют в данном документе для обозначения одного или нескольких (т.е. по меньшей мере одного) грамматических объектов данного изобретения. В качестве примера элемент означает один элемент или несколько элементов, например множество элементов.
- 2 037115
Термин включающий используют в данном документе для обозначения фразы включающий без ограничения и используют взаимозаменяемо с ней.
Термин или используют в данном документе для обозначения термина и/или и используют взаимозаменяемо с ним, если контекст явно не указывает иное.
Используемый в данном документе HAO1 относится к гену, кодирующему фермент оксидазу 1 гидроксикислот. Другие названия гена включают в себя GO, GOX, GOX1 и НАОХ1. Белок также известен как гликолат-оксидаза и оксидаза (S)-2-гидроксикислот. Номером доступа в GenBank для мРНК HAO1 человека является NM_017545.2; мРНК НАО1 макака-крабоеда (Масаса fascicularis) является ХМ_005568381.1; мРНК НАО1 мыши (Mus musculus) является NM_010403.2; мРНК НАО1 крысы (Rattus norvegicus) является ХМ_006235096.1.
Термин НАО1, используемый в данном документе, также относится к встречающимся в природе вариантам последовательности ДНК гена НАО1, например единичному нуклеотидному полиморфизму (SNP) в гене НАО1. Иллюстративные SNP можно найти в dbSNP, базе данных коротких генетических вариаций, в NCBI, доступной на www.ncbi.nlm.nih.gov/projects/SNP.
Используемая в данном документе целевая последовательность относится к непрерывной части нуклеотидной последовательности молекулы мРНК, образованной в процессе транскрипции гена НАО1, в том числе к мРНК, которая является продуктом процессинга РНК первичного продукта транскрипции.
Используемый в данном документе термин нить, содержащая последовательность относится к олигонуклеотиду, содержащему цепь нуклеотидов, которая описывается последовательностью, обозначаемой с использованием стандартной номенклатуры нуклеотидов.
Каждое из G, С, А и U, как правило, означает нуклеотид, который содержит соответственно гуанин, цитозин, аденин и урацил в качестве основания. Т и ''dT'' используют в данном документе взаимозаменяемо, и они относятся к дезоксирибонуклеотиду, где нуклеиновым основанием является тимин, например дезоксириботимину, 2'-дезокситимидину или тимидину. Однако будет понятно, что термин ''рибонуклеотид'', или ''нуклеотид'', или ''дезоксирибонуклеотид'' также может относиться к модифицированному нуклеотиду, который подробнее описан ниже, или имитирующему нуклеотид заменяющему фрагменту. Специалисту в данной области хорошо известно, что гуанин, цитозин, аденин и урацил могут быть замещены другими фрагментами без значительного изменения свойств в отношении спаривания оснований олигонуклеотида, содержащего нуклеотид, несущий такой заменяющий фрагмент. Например, без ограничения, нуклеотид, содержащий инозин в качестве основания, может образовывать пару оснований с нуклеотидами, содержащими аденин, цитозин или урацил. Следовательно, нуклеотиды, содержащие урацил, гуанин или аденин, могут быть замещены в нуклеотидных последовательностях согласно настоящему изобретению нуклеотидами, содержащими, например, инозин. Последовательности, содержащие такие заменяющие фрагменты, являются вариантами осуществления настоящего изобретения.
Термины ''iRNA'', ''средство для RNAi'', ''средство на основе iRNA'', ''средство для РНКинтерференции'', используемые в данном документе взаимозаменяемо, относятся к средству, которое содержит РНК в том значении, в котором этот термин определен в данном документе, и которое опосредует целенаправленное расщепление РНК-транскрипта посредством пути с участием РНКиндуцируемого комплекса сайленсинга (RISC). iRNA управляет специфичным в отношении последовательности разрушением мРНК посредством такого процесса, как РНК-интерференция (RNAi). iRNA модулирует, например ингибирует, экспрессию HAO1 в клетке, например в клетке в организме субъекта, как, например, субъекта-млекопитающего.
В одном варианте осуществления средство для RNAi согласно настоящему изобретению включает однонитевую РНК, которая взаимодействует с целевой последовательностью РНК, например целевой последовательностью мРНК HAO1, управляя расщеплением целевой РНК. Не желая ограничиваться какой-либо теорией, предполагают, что длинная двухнитевая РНК, введенная в клетки, разрезается на siRNA эндонуклеазой III типа, известной как Dicer (Sharp et al. (2001), Genes Dev. 15:485). Dicer, фермент, подобный рибонуклеазе III типа, обеспечивает процессинг dsRNA до коротких интерферирующих РНК длиной 19-23 пары оснований с характерными 3'-выступами из двух оснований (Bernstein, et al., (2001), Nature, 409:363). siRNA затем включаются в РНК-индуцируемый комплекс сайленсинга (RISC), в котором одна или несколько хеликаз раскручивают дуплекс siRNA, что позволяет комплементарной антисмысловой нити управлять распознаванием мишени (Nykanen, et al., (2001), Cell, 107:309). После связывания с соответствующей целевой мРНК одна или несколько эндонуклеаз в RISC расщепляют мишень для индукции сайленсинга (Elbashir, et al., (2001) Genes Dev. 15:188). Таким образом, в одном аспекте настоящее изобретение относится к однонитевой РНК (siRNA), образованной внутри клетки, и которая способствует образованию RISC-комплекса для осуществления сайленсинга целевого гена, т.е. гена НАО1. Соответственно, термин ''siRNA'' также используют в данном документе для обозначения RNAi, описанной выше.
В другом варианте осуществления средство для RNAi может быть однонитевой siRNA, которую вводят в клетку или организм для ингибирования целевой мРНК. Однонитевые средства для RNAi связываются с Argonaute 2 комплекса RISC, обладающим эндонуклеазной активностью, который затем расщепляет целевую мРНК. Однонитевые siRNA, как правило, содержат 15-30 нуклеотидов и являются хи- 3 037115 мически модифицированными. Конструирование и тестирование однонитевых siRNA описаны в патенте США № 8101348 и в Lima et al., (2012), Cell, 150:883-894, полное содержание каждого из которых настоящим включено в данный документ при помощи ссылки. Любые антисмысловые нуклеотидные последовательности, описанные в данном документе, можно использовать в качестве однонитевой siRNA, которая описана в данном документе или которая химически модифицирована способами, описанными в Lima et al., (2012), Cell, 150:883-894.
В еще одном варианте осуществления настоящее изобретение предусматривает молекулы однонитевого антисмыслового олигонуклеотида, целенаправленно воздействующего на НАО1. ''Молекула однонитевого антисмыслового олигонуклеотида'' является комплементарной последовательности в целевой мРНК (т.е. НАО1). Молекулы однонитевого антисмыслового олигонуклеотида могут ингибировать трансляцию стехиометрическим образом путем спаривания оснований с мРНК и физического нарушения механизма трансляции, см. Dias, N. et al., (2002), Mol. Cancer. Ther. 1:347-355. В качестве альтернативы молекулы однонитевого антисмыслового олигонуклеотида ингибируют целевую мРНК путем гибридизации с мишенью и расщепления мишени посредством явления расщепления с помощью RNaseH. Молекула однонитевого антисмыслового олигонуклеотида может иметь длину от приблизительно 10 до приблизительно 30 нуклеотидов и иметь последовательность, комплементарную целевой последовательности. Например, молекула однонитевого антисмыслового олигонуклеотида может содержать последовательность, которая включает в себя по меньшей мере приблизительно 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 или более смежных нуклеотидов из любой из антисмысловых нуклеотидных последовательностей, описанных в данном документе, например последовательностей, представленных в любой из табл. 1 или 2 или связывающихся с любым из целевых сайтов, описанных в данном документе. Молекулы однонитевого антисмыслового олигонуклеотида могут предусматривать модифицированную РНК, ДНК или их комбинацию.
В другом варианте осуществления iRNA для применения в композициях, путях применения и способах согласно настоящему изобретению является двухнитевой РНК, и в данном документе ее называют двухнитевым средством для RNAi, молекулой двухнитевой РНК (dsRNA), средством на основе dsRNA или dsRNA. Термин ''dsRNA'' относится к комплексу молекул рибонуклеиновой кислоты с дуплексной структурой, содержащему две антипараллельные и практически комплементарные нити нуклеиновой кислоты, рассматриваемые как имеющие ''смысловую'' и ''антисмысловую'' ориентации по отношению к целевой РНК, т.е. гену НАО1. В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения двухнитевая РНК (dsRNA) запускает разрушение целевой РНК, например мРНК, через посттранскрипционный механизм сайленсинга генов, называемый в данном документе РНК-интерференцией или RNAi.
Как правило, большинство нуклеотидов каждой нити молекулы dsRNA являются рибонуклеотидами, но, как подробно описано в данном документе, каждая нить или обе нити могут также содержать один или несколько нуклеотидов, не являющихся рибонуклеотидами, например дезоксирибонуклеотид и/или модифицированный нуклеотид. Кроме того, используемое в данном описании ''средство для RNAi'' может включать рибонуклеотиды с химическими модификациями; средство для RNAi может включать значительные модификации множества нуклеотидов. Такие модификации могут включать все типы модификаций, раскрытых в данном документе или известных в уровне техники. Любые такие модификации, которые используются в молекуле типа siRNA, охвачены термином средство для RNAi в контексте данных описания и формулы изобретения.
Две нити, образующие дуплексную структуру, могут быть различными частями одной большей молекулы РНК или они могут быть отдельными молекулами РНК. В тех случаях, если две нити являются частью одной большей молекулы и, следовательно, соединены непрерывающейся цепью нуклеотидов от 3'-конца одной нити к 5'-концу соответствующей другой нити, образующих дуплексную структуру, соединительную цепь РНК называют петлей шпилькой. В тех случаях, если две нити соединены ковалентно иным образом, нежели непрерывающейся цепью нуклеотидов от 3'-конца одной нити к 5'-концу соответствующей другой нити, образующих дуплексную структуру, соединительную структуру называют линкером. Нити РНК могут иметь одинаковое или разное число нуклеотидов. Максимальное количество пар оснований является количеством нуклеотидов в самой короткой нити dsRNA за вычетом любых выступов, которые присутствуют в дуплексе. Помимо дуплексной структуры средство для RNAi может предусматривать один или несколько нуклеотидных выступов.
В одном варианте осуществления средство для RNAi согласно настоящему изобретению представляет собой dsRNA из 24-30 нуклеотидов, которая взаимодействует с целевой последовательностью РНК, например с целевой последовательностью мРНК НАО1, управляя расщеплением целевой РНК. Не желая ограничиваться какой-либо теорией, длинная двухнитевая РНК, введенная в клетки, разрезается на siRNA эндонуклеазой III типа, известной как Dicer (Sharp et al. (2001), Genes Dev. 15:485). Dicer, фермент, подобный рибонуклеазе III типа, обеспечивает процессинг dsRNA до коротких интерферирующих РНК длиной 19-23 пары оснований с характерными 3'-выступами из двух оснований (Bernstein, et al., (2001), Nature, 409:363). siRNA затем включаются в РНК-индуцируемый комплекс сайленсинга (RISC), в котором одна или несколько хеликаз раскручивают дуплекс siRNA, что позволяет комплементарной ан- 4 037115 тисмысловой нити управлять распознаванием мишени (Nykanen, et al., (2001), Cell, 107:309). После связывания с соответствующей целевой мРНК одна или несколько эндонуклеаз в RISC расщепляют мишень для индукции сайленсинга (Elbashir, et al., (2001), Genes Dev. 15:188).
Используемый в данном документе ''нуклеотидный выступ'' относится к неспаренным нуклеотиду или нуклеотидам, которые выпячиваются из дуплексной структуры средства для RNAi, когда 3'-конец одной нити средства для RNAi выходит за пределы 5'-конца другой нити или vice versa. ''Затупленный конец'' или ''тупой конец'' означает, что на конце двухнитевого средства для RNAi нет неспаренных нуклеотидов, т.е. нет нуклеотидного выступа. Средство для RNAi ''с тупыми концами'' представляет собой dsRNA, которая является двухнитевой по всей длине, т.е. не имеет нуклеотидного выступа на любом конце молекулы. Средства для RNAi согласно настоящему изобретению включают в себя средства для RNAi с нуклеотидным выступом на одном конце (т.е. средства с одним выступом и одним тупым концом) или с нуклеотидными выступами на обоих концах.
Термин ''антисмысловая нить'' относится к нити двухнитевого средства для RNAi, включающего участок, который, по сути, комплементарен целевой последовательности (например, мРНК HAO1 человека). Используемый в данном документе термин ''участок, комплементарный части мРНК, кодирующей HAO1'' относится к участку антисмысловой нити, который, по сути, комплементарен части последовательности мРНК HAO1. В тех случаях, когда участок комплементарности не полностью комплементарен целевой последовательности, тогда ошибочные спаривания наиболее допустимы в концевых участках и, если присутствуют, как правило, встречаются в концевом участке или концевых участках, например в пределах 6, 5, 4, 3 или 2 нуклеотидов от 5'-конца и/или 3'-конца.
Термин ''смысловая нить'', используемый в данном документе, относится к нити dsRNA, которая включает участок, который, по сути, комплементарен участку антисмысловой нити.
Используемый в данном документе термин участок расщепления относится к участку, который непосредственно прилегает к сайту расщепления. Сайт расщепления является сайтом мишени, по которому происходит расщепление. В некоторых вариантах осуществления участок расщепления содержит три основания на любом из концов сайта расщепления, который непосредственно прилегает к нему. В некоторых вариантах осуществления участок расщепления содержит два основания на любом из концов сайта расщепления, который непосредственно прилегает к нему. В некоторых вариантах осуществления сайт расщепления, в частности, находится в сайте, граничащем с нуклеотидами 10 и 11 антисмысловой нити, и участок расщепления содержит нуклеотиды 11, 12 и 13.
Используемый в данном документе термин комплементарный, если не указано иное, при использовании для описания первой нуклеотидной последовательности по отношению ко второй нуклеотидной последовательности относится к способности олигонуклеотида или полинуклеотида, содержащего первую нуклеотидную последовательность, гибридизироваться и образовывать дуплексную структуру при определенных условиях с олигонуклеотидом или полинуклеотидом, содержащим вторую нуклеотидную последовательность, как будет понятно специалисту в данной области. Такие условия, например, могут представлять собой жесткие условия, где жесткие условия могут включать 400 мМ NaCl, 40 мМ PIPES, рН 6,4, 1 мМ EDTA, 50°С или 70°С в течение 12-16 ч с последующим отмыванием. Можно применять другие условия, такие как физиологически соответствующие условия, характерные для организма. Например, комплементарная последовательность является удовлетворительной для обеспечения выполнения соответствующей функции нуклеиновой кислоты, например RNAi. Специалист в данной области сможет определить набор условий, наиболее подходящих для тестирования комплементарности двух последовательностей в соответствии с конечным применением гибридизированных нуклеотидов.
Последовательности могут быть ''полностью комплементарными'' по отношению к любой, когда присутствует спаривание оснований нуклеотидов первой нуклеотидной последовательности с нуклеотидами второй нуклеотидной последовательности по всей длине первой и второй нуклеотидных последовательностей. Однако когда первую последовательность в данном документе обозначают как ''по сути, комплементарную'' по отношению ко второй последовательности, тогда две последовательности могут быть полностью комплементарными или в них может иметь место ошибочное спаривание одной или нескольких, но, как правило, не более 4, 3 или 2 пар оснований при гибридизации, с сохранением при этом способности гибридизоваться при условиях, наиболее соответствующих их конечному применению. Однако если два олигонуклеотида предназначены образовывать при гибридизации один или несколько однонитевых выступов, то такие выступы не будут считаться ошибочными спариваниями применительно к определению комплементарности. Например, dsRNA, содержащая один олигонуклеотид из 21 нуклеотида в длину и другой олигонуклеотид из 23 нуклеотидов в длину, где более длинный олигонуклеотид содержит последовательность из 21 нуклеотида, которая полностью комплементарна более короткому олигонуклеотиду, может быть указана как полностью комплементарная для целей, описанных в данном документе.
''Комплементарные'' последовательности, используемые в данном документе, могут также включать или могут быть образованы полностью из пар оснований, образованных не по модели Уотсона-Крика, и/или пар оснований, образованных из не встречающихся в природе и модифицированных нуклеотидов, в такой степени, при которой выполняются вышеуказанные требования по отношению к их способности
- 5 037115 гибридизоваться. Такие пары оснований, образованные не по модели Уотсона-Крика, включают без ограничения неоднозначное или хугстиновское спаривание оснований G:U.
Термины комплементарный, ''полностью комплементарный'' и ''по сути, комплементарный'' в данном документе можно использовать по отношению к совпадению оснований между смысловой нитью и антисмысловой нитью dsRNA или между антисмысловой нитью dsRNA и целевой последовательностью, как будет понятно из контекста их использования.
Используемый в данном документе полинуклеотид, который по сути, комплементарен по меньшей мере части'' матричной РНК (мРНК), относится к полинуклеотиду, который, по сути, комплементарен непрерывной части мРНК, представляющей интерес, (например, мРНК, кодирующей HAO1), в том числе 5'-UTR, открытой рамке считывания (ORF) или 3'-UTR. Например, полинуклеотид комплементарен по меньшей мере части мРНК HAO1, если последовательность, по сути, комплементарна непрерывающейся части мРНК, кодирующей HAO1.
Термин ингибирование, используемый в данном документе, используют взаимозаменяемо со снижением, сайленсингом, подавлением, супрессией и другими подобными терминами, и он включает любой уровень ингибирования.
Фраза ''ингибирование экспрессии HAO1'', используемая в данном документе, включает ингибирование экспрессии любого гена HAO1 (такого как, например, ген HAO1 мыши, ген HAO1 крысы, ген HAO1 обезьяны или ген HAO1 человека), а также вариантов (например, встречающихся в природе вариантов) или мутантов гена HAO1. Таким образом, ген HAO1 может быть геном HAO1 дикого типа, мутантным геном HAO1 или трансгенным геном HAO1 в контексте клетки, группы клеток или организма, подвергнутых генетической манипуляции.
''Ингибирование экспрессии гена HAO1'' предусматривает любой уровень ингибирования гена HAO1, например по меньшей мере частичную супрессию экспрессии гена HAO1, такую как ингибирова-
ние | по меньшей мере приблизительно | на 5%, по меньшей мере приблизительно | на | 10%, |
по | меньшей мере приблизительно на | 15%, по меньшей мере приблизительно | на | 20%, |
по | меньшей мере приблизительно на | 25%, по меньшей мере приблизительно | на | 30%, |
по | меньшей мере приблизительно на | 35%, по меньшей мере приблизительно | на | 40%, |
по | меньшей мере приблизительно на | 45%, по меньшей мере приблизительно | на | 50%, |
по | меньшей мере приблизительно на | 55%, по меньшей мере приблизительно | на | 60%, |
по | меньшей мере приблизительно на | 65%, по меньшей мере приблизительно | на | 70%, |
по | меньшей мере приблизительно на | 75%, по меньшей мере приблизительно | на | 80%, |
по | меньшей мере приблизительно на | 85%, по меньшей мере приблизительно | на | 90%, |
по | меньшей мере приблизительно на | 91%, по меньшей мере приблизительно | на | 92%, |
по | меньшей мере приблизительно на | 93%, по меньшей мере приблизительно | на | 94%, |
по | меньшей мере приблизительно на | 95%, по меньшей мере приблизительно | на | 96%, |
по | меньшей мере приблизительно на 97%, по меньшей мере приблизительно на | 98% | или |
по меньшей мере приблизительно на 99%.
Экспрессию гена НАО1 можно оценивать, исходя из уровня любой переменной, ассоциированной с экспрессией гена НАО1, например уровня мРНК НАО1 или уровня белка НАО1, например, в тканях и/или уровней оксалатов в моче. Ингибирование можно оценивать по снижению абсолютного или относительного уровня одной или нескольких из этих переменных по сравнению с контрольным уровнем. Контрольным уровнем может быть любой тип контрольного уровня, который используют в данной области, например исходный уровень до введения дозы или уровень, определенный у сходных субъекта, клетки или образца, которые не обработаны или обработаны контролем (таким как, например, контроль только с буфером или контроль с неактивным средством).
Фраза ''приведение клетки в контакт с двухнитевым средством для RNAi'', используемая в данном документе, включает приведение клетки в контакт любым возможным способом. Приведение клетки в контакт с двухнитевым средством для RNAi предусматривает приведение клетки в контакт со средством для RNAi in vitro или приведение клетки в контакт со средством для RNAi in vivo. Приведение в контакт можно осуществлять непосредственно или опосредованно. Таким образом, например, средство для RNAi можно приводить в физический контакт с клеткой путем отдельного осуществления способа или, в качестве альтернативы, средство для RNAi можно поместить в обстановку, которая позволит средству прийти в контакт с клеткой или послужит причиной этому.
Приведение клетки в контакт in vitro можно выполнять, например, путем инкубирования клетки со средством для RNAi. Приведение клетки в контакт in vivo можно выполнять, например, путем введения инъекцией средства для RNAi в ткань, в которой находится клетка, или рядом с ней или путем введения инъекцией средства для RNAi в другую область, кровоток или подкожное пространство так, что средство будет впоследствии достигать ткани, в которой находится клетка, которую необходимо привести в контакт со средством. Например, средство для RNAi может содержать лиганд, например лиганд, представляющий собой GalNAc3, который направляет средство для RNAi к месту, представляющему интерес, например к печени, и/или может быть связано с ним. Также возможны комбинации in vitro и in vivo способов приведения в контакт. По отношению к способам согласно настоящему изобретению клетку также
- 6 037115 можно приводить в контакт со средством для RNAi in vitro и в дальнейшем пересаживать субъекту.
Используемый в данном документе термин субъект включает человека или отличного от человека животного, предпочтительно позвоночного и более предпочтительно млекопитающего. Субъект может включать трансгенный организм. Наиболее предпочтительно субъектом является человек, как, например, человек, страдающий ассоциированным с HAO1 нарушением или предрасположенный к его развитию.
Термин пациент или субъект, используемый в данном документе, подразумевает как включающее либо человека, либо отличного от человека животного, предпочтительно млекопитающего, например человека или обезьяну. Наиболее предпочтительно субъектом или пациентом является человек.
Термин ''ассоциированное с HAO1 нарушение'', используемый в данном документе, предназначен включать любое нарушение, которое можно лечить или предупреждать, или симптомы которого можно облегчать, при помощи ингибирования экспрессии HAO1. Примеры включают в себя без ограничения первичную гипероксалурию 1 (РН1).
Терапевтически эффективное количество, используемое в данном документе, подразумевают как включающее количество средства для RNAi, которого, при введении пациенту для лечения ассоциированного с HAO1 заболевания, достаточно для эффективного лечения заболевания (например, путем уменьшения, ослабления или поддержания существующего заболевания или одного или нескольких симптомов заболевания). Терапевтически эффективное количество может варьировать в зависимости от средства для RNAi, пути введения средства, заболевания и его тяжести и анамнеза заболевания, возраста, веса, семейного анамнеза, генетического строения, стадии патологических процессов, опосредованных экспрессией HAO1, типов предшествующего или сопутствующего лечения, при наличии такового, и других индивидуальных особенностей пациента, который подлежит лечению.
''Профилактически эффективное количество'', используемое в данном документе, подразумевают как включающее количество средства для RNAi, которого, при введении субъекту, у которого еще не возникли или не проявились симптомы HAO1-ассоциированного заболевания, но у которого может иметься предрасположенность к заболеванию, достаточно для предупреждения или ослабления заболевания или одного или нескольких симптомов заболевания. Ослабление заболевания включает замедление течения болезни или снижение тяжести заболевания, которое разовьется позже. Профилактически эффективное количество может варьировать в зависимости от средства для RNAi, пути введения средства, степени риска развития заболевания и анамнеза заболевания, возраста, веса, семейного анамнеза, генетического строения, типов предшествующего или сопутствующего лечения, при наличии такового, и других индивидуальных особенностей пациента, который подлежит лечению.
Терапевтически эффективное количество или профилактически эффективное количество также включает количество средства для RNAi, которое вызывает некоторый желательный локальный или системный эффект при приемлемом соотношении польза/риск, принятом по отношению к любому лечению. Средства для RNAi, применяемые в способах согласно настоящему изобретению, можно вводить в количестве, достаточном для получения приемлемого соотношения польза/риск, принятого по отношению к такому лечению.
Термин образец, используемый в данном документе, предусматривает совокупность сходных жидкостей, клеток или тканей, выделенных из организма субъекта, а также жидкостей, клеток или тканей, присутствующих в организме субъекта. Примеры биологических жидкостей включают кровь, сыворотку крови и серозные жидкости, плазму крови, спинномозговую жидкость, внутриглазные жидкости, лимфу, мочу, слюну и т. п. Образцы тканей могут включать образцы из тканей, органов или локальных участков. Например, образцы можно получить из конкретных органов, частей органов или жидкостей или клеток в этих органах. В определенных вариантах осуществления образцы можно получить из печени (например, всей печени, или определенных сегментов печени, или определенных типов клеток в печени, таких как, например, гепатоциты). В некоторых вариантах осуществления образец, полученный из организма субъекта относится к крови или плазме крови, взятым из организма субъекта. В дополнительных вариантах осуществления образец, полученный из организма субъекта относится к ткани печени (или ее составляющим), полученным из организма субъекта.
II. Средства на основе iRNA, представляющие собой dsRNA, согласно настоящему изобретению.
В данном документе описаны двухнитевые средства для RNAi, которые ингибируют экспрессию гена HAO1 в клетке, такой как клетка в организме субъекта, например млекопитающего, как, например, человека с ассоциированным с HAO1 нарушением, и применения таких двухнитевых средств для RNAi.
Соответственно, настоящее изобретение предусматривает двухнитевые средства для RNAi с химическими модификациями, способные ингибировать экспрессию целевого гена (т.е. гена HAO1) in vivo.
Как описано более подробно ниже, в определенных аспектах настоящего изобретения практически все нуклеотиды iRNA согласно настоящему изобретению являются модифицированными. В других вариантах осуществления настоящего изобретения все нуклеотиды в iRNA согласно настоящему изобретению являются модифицированными. iRNA согласно настоящему изобретению, в которых практически все нуклеотиды являются модифицированными, являются в значительной степени, но не полностью модифицированными и могут содержать не более 5, 4, 3, 2 или 1 немодифицированного нуклеотида.
- 7 037115
Средство для RNAi содержит смысловую нить и антисмысловую нить. Каждая нить средства для RNAi в длину может варьироваться от 12 до 30 нуклеотидов. Например, каждая нить может составлять 14-30 нуклеотидов в длину, 17-30 нуклеотидов в длину, 19-30 нуклеотидов в длину, 25-30 нуклеотидов в длину, 27-30 нуклеотидов в длину, 17-23 нуклеотида в длину, 17-21 нуклеотид в длину, 17-19 нуклеотидов в длину, 19-25 нуклеотидов в длину, 19-23 нуклеотида в длину, 19-21 нуклеотид в длину, 21-25 нуклеотидов в длину или 21-23 нуклеотида в длину.
Каждая нить может составлять 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24,25, 26, 27, 28, 29 или 30 нуклеотидов в длину. Каждая нить средства для RNAi может иметь такую же длину или может иметь другую длину.
Смысловая нить и антисмысловая нить, как правило, образуют двухнитевой РНК-дуплекс (dsRNA), также называемый в данном документе как ''средство для RNAi''. Дуплексный участок средства для RNAi может составлять 12-30 пар нуклеотидов в длину. Например, дуплексный участок может составлять 14-30 пар нуклеотидов в длину, 17-30 пар нуклеотидов в длину, 27-30 пар нуклеотидов в длину, 17-23 пары нуклеотидов в длину, 17-21 пару нуклеотидов в длину, 17-19 пар нуклеотидов в длину, 19-25 пар нуклеотидов в длину, 19-23 пары нуклеотидов в длину, 19-21 пару нуклеотидов в длину, 21-25 пар нуклеотидов в длину или 21-23 пары нуклеотидов в длину. В другом примере длина дуплексного участка выбрана из 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26 и 27 пар нуклеотидов.
В одном варианте осуществления средство для RNAi может содержать один или несколько выступающих участков и/или блокирующих групп на 3'-конце, 5'-конце или обоих концах одной или обеих нитей. Выступ может составлять 1-6 нуклеотидов в длину, например 2-6 нуклеотидов в длину, 1-5 нуклеотидов в длину, 2-5 нуклеотидов в длину, 1-4 нуклеотида в длину, 2-4 нуклеотида в длину, 1-3 нуклеотида в длину, 2-3 нуклеотида в длину или 1-2 нуклеотида в длину. Выступы могут быть обусловлены тем, что одна нить длиннее другой, или могут быть обусловлены тем, что две нити одинаковой длины расположены со сдвигом. Выступ может образовывать ошибочное спаривание с целевой мРНК или он может быть комплементарным целевым последовательностям генов или может иметь другую последовательность. Первая и вторая нити также могут быть соединены, например, дополнительными основаниями с образованием шпильки или при помощи других не содержащих основания линкеров.
В одном варианте осуществления каждый из нуклеотидов в выступающем участке средства для RNAi независимо может быть модифицированным или немодифицированным нуклеотидом, в том числе без ограничения с сахаром с 2'-модификацией, такой как 2-F, 2'-О-метил, тимидин (Т), 2-О-метоксиэтил5-метилуридин (Тео), 2'-О-метоксиэтиладенозин (Аео), 2'-O-метоксиэтил-5-метилцитидин (m5Сео) и любые их комбинации. Например, последовательность выступа на обоих концах каждой нити может быть ТТ. Выступ может образовывать ошибочное спаривание с целевой мРНК или он может быть комплементарным целевым последовательностям генов или может иметь другую последовательность.
5'- или 3'-выступы смысловой нити, антисмысловой нити или обеих нитей средства для RNAi могут быть фосфорилированы. В некоторых вариантах осуществления выступающий(ие) участок(и) содержит(ат) два нуклеотида с фосфотиоатом между двумя нуклеотидами, при этом два нуклеотида могут быть одинаковыми или различными. В одном варианте осуществления выступ присутствует на 3'-конце смысловой нити, антисмысловой нити или обеих нитей. В одном варианте осуществления этот 3'-выступ присутствует в антисмысловой нити. В одном варианте осуществления этот 3'-выступ присутствует в смысловой нити.
Средство для RNAi может предусматривать только один выступ, который может повышать интерферирующую активность RNAi без воздействия на его общую стабильность. Например, однонитевой выступ может быть расположен на 3'-конце смысловой нити или в качестве альтернативы на 3'-конце антисмысловой нити. RNAi также может иметь тупой конец, расположенный на 5'-конце антисмысловой нити (или 3'-конце смысловой нити) или vice versa. Как правило, антисмысловая нить RNAi имеет нуклеотидный выступ на 3'-конце, а 5'-конец является тупым. Не желая ограничиваться какой-либо теорией, полагают, что асимметричный тупой конец на 5'-конце антисмысловой нити и 3'-концевой выступ антисмысловой нити способствуют включению направляющей нити в процесс с участием RISC.
Синтез и модификации.
Любая из нуклеиновых кислот, например RNAi, описанных в настоящем изобретении, может быть синтезирована и/или модифицирована способами, хорошо известными из уровня техники, такими как описанные в Current protocols in nucleic acid chemistry, Beaucage, S.L. et al. (Edrs.), John Wiley & Sons, Inc., New York, NY, USA, который настоящим включен в данный документ при помощи ссылки. Модификации включают в себя, например, концевые модификации, например модификации 5'-конца (фосфорилирование, конъюгирование, инвертированные связи) или модификации 3'-конца (конъюгирование, нуклеотиды ДНК, инвертированные связи и т.д.); модификации оснований, например замену стабилизирующими основаниями, дестабилизирующими основаниями или основаниями, которые образуют пару оснований с расширенным репертуаром партнеров, удаление оснований (лишенные азотистого основания нуклеотиды) или конъюгирование оснований; модификации сахаров (например, в 2'-положении или 4'-положении) или замену сахара и/или модификации остова, в том числе модификацию или замену фосфодиэфирных связей. Конкретные примеры соединений iRNA, применимых в описанных в данном до
- 8 037115 кументе вариантах осуществления, включают без ограничения РНК, содержащие модифицированные остовы или неприродные межнуклеозидные связи. РНК с модифицированными остовами включают, среди прочего, такие, которые не содержат атом фосфора в остове. В контексте данного описания и как иногда упоминается в данной области, модифицированные РНК, не содержащие атом фосфора в их межнуклеозидном остове, также могут считаться олигонуклеозидами. В некоторых вариантах осуществления модифицированная iRNA будет содержать атом фосфора в своем межнуклеозидном остове.
Модифицированные остовы РНК включают, например, фосфотиоаты, хиральные фосфотиоаты, фосфодитиоаты, фосфотриэфиры, аминоалкилфосфотриэфиры, метил- и другие алкилфосфонаты, в том числе 3'-алкиленфосфонаты, и хиральные фосфонаты, фосфинаты, фосфорамидаты, в том числе 3'-аминофосфорамидат и аминоалкилфосфорамидаты, тионофосфорамидаты, тионоалкилфосфонаты, тионоалкилфосфотриэфиры и боранофосфаты с нормальными 3'-5'-связями, их аналоги с 2'-5'-связями, а также таковые с инвертированной полярностью, где соседние пары нуклеозидных звеньев соединены 3'-5' к 5'-3' или 2'-5' к 5'-2'. Также включены различные соли, смешанные соли и формы свободной кислоты.
Иллюстративные патенты США, в которых изложена идея получения вышеуказанных фосфорсодержащих связей, включают без ограничения патенты США № 3687808; 4469863; 4476301; 5023243;
5177195; 5188897; 5264423; 5276019; 5278302; 5286717; 5321131; 5399676; 5405939; 5453496; 5455233;
5466677; 5476925; 5519126; 5536821; 5541316; 5550111; 5563253; 5571799; 5587361; 5625050; 6028188;
6124445; 6160109; 6169170; 6172209; 6 239265; 6277603; 6326199; 6346614; 6444423; 6531590; 6534639;
6608035; 6683167; 6858715; 6867294; 6878805; 7015315; 7041816; 7273933; 7321029 и патент США № RE39464, полное содержание каждого из которых настоящим включено в данный документ при помощи ссылки.
Модифицированные остовы РНК, которые не содержат атом фосфора в своем составе, включают остовы, образованные короткоцепочечными алкильными или циклоалкильными межнуклеозидными связями, смешанными гетероатомными и алкильными или циклоалкильными межнуклеозидными связями или одной или несколькими короткоцепочечными гетероатомными или гетероциклическими межнуклеозидными связями. Они включают остовы с морфолиновыми связями (частично образованные из сахарной части нуклеозида); силоксановые остовы; сульфидные, сульфоксидные и сульфоновые остовы; формацетильные и тиоформацетильные остовы; метиленформацетильные и тиоформацетильные остовы; алкенсодержащие остовы; сульфаматные остовы; метилениминовые и метиленгидразиновые остовы; сульфонатные и сульфонамидные остовы; амидные остовы и другие, содержащие смесь составляющих частей N, О, S и СН2.
Иллюстративные патенты США, в которых изложена идея получения вышеуказанных олигонуклеозидов, включают без ограничения патенты США № 5034506; 5166315; 5185444; 5214134; 5216141; 5235033; 564562; 5264564; 5405938; 5434257; 5466677; 5470967; 5489677; 5541307; 5561225; 5596086; 5602240;5608046;5610289;5618704; 5623070; 5663312; 5633360; 5677437 и 5677439, полное содержание каждого из которых настоящим включено в данный документ при помощи ссылки.
В других вариантах осуществления рассматриваются подходящие миметики РНК для применения в iRNA, в которых как сахар, так и межнуклеозидная связь, т.е. остов нуклеотидных звеньев, заменены новыми группами. Единицы оснований сохраняются для гибридизации с соответствующим целевым соединением нуклеиновой кислоты. Одно такое олигомерное соединение, миметик РНК, который, как было показано, обладает превосходными свойствами гибридизации, называется пептидной нуклеиновой кислотой (PNA). В соединениях PNA сахарный остов РНК заменен амидсодержащим остовом, в частности аминоэтилглициновым остовом. Нуклеотидные основания сохраняются и соединяются непосредственно или опосредованно с атомами азота азагруппы амидной части остова.
Иллюстративные патенты США, в которых изложена идея получения соединений PNA, включают без ограничения патенты США № 5539082; 5714331 и 5719262, полное содержание каждого из которых настоящим включено в данный документ при помощи ссылки. Дополнительные соединения PNA, подходящие для применения в iRNA согласно настоящему изобретению, описаны, например, в Nielsen et al., Science, 1991, 254, 1497-1500.
Некоторые варианты осуществления, представленные в настоящем изобретении, предусматривают РНК с фосфотиоатными остовами и олигонуклеозиды с гетероатомными остовами и, в частности, -CH2-NH-CH2-, -CH2-N (CH3)-O-CH2- [известный как метилен (метилиминовый) или MMI остов], -CH2-O-N(CH3)-СН2-, -СН2-N(CH3)-N(CH3)-СН2- и -N(CH3)-СН2-СН2-,[где нативный фосфодиэфирный остов представлен как -О-Р-О-СН2-] согласно вышеупомянутому патенту США № 5489677 и амидные остовы согласно вышеупомянутому патенту США № 5602240. В некоторых вариантах осуществления РНК, представленные в данном документе, имеют морфолиновые структуры остова согласно вышеупомянутому патенту США № 5034506.
Модифицированные РНК также могут содержать один или несколько замещенных сахарных фрагментов. iRNA, например dsRNA, представленные в данном документе, могут содержать одно из следующего в 2'-положении: ОН; F; О-, S- или N-алкила; О-, S-или N-алкенила; О-, S- или N-алкинила или О-алкил-O-алкила, где алкил, алкенил и алкинил могут быть замещенными или незамещенными
- 9 037115
С1-С10-алкилом или С2-С10-алкенилом и алкинилом. Иллюстративные пригодные модификации включают О[(ОДпО]тСНз, О(СН2)пОСНз, O(CH2)nNH2, О(СЩ)пСНз, O(CH2)nONH2 и O(CH;)nO\|(CH;)nCH;)|, где п и т равняются от 1 до приблизительно 10. В других вариантах осуществления dsRNA содержат одно из следующего в 2'-положении: низшего С1-С10-алкила, замещенного низшего алкила, алкарила, аралкила, О-алкарила или О-аралкила, SH, SCH3, OCN, Cl, Br, CN, CF3, OCF3, SOCH3, SO2CH3, ONO2, NO2, N3, NH2, гетероциклоалкила, гетероциклоалкарила, аминоалкиламино, полиалкиламино, замещенного силила, расщепляющей РНК группы, репортерной группы, интеркалятора, группы для улучшения фармакокинетических свойств iRNA или группы для улучшения фармакодинамических свойств iRNA и других заместителей с аналогичными свойствами. В некоторых вариантах осуществления модификация включает 2'-метоксиэтокси (2'-O-CH2CH2OCH3, также известный как 2'-О-(2-метоксиэтил) или 2'-МОЕ) (Martin et al., Helv. Chim. Acta, 1995, 78:486-504) т.е. алкокси-алкоксигруппу. Другой иллюстративной модификацией является 2'-диметиламинооксиэтокси, т.е. группа O(CH2)2ON(CH3)2, также известная как 2'-DMAOE, описанная в примерах в данном документе ниже, и 2'-диметиламиноэтоксиэтокси (также известная в уровне техники как 2'-О-диметиламиноэтоксиэтил или 2'-DMAEOE), т.е. 2'-О-СН2-О-СН2-К(СН2)2.
Другие модификации включают 2'-метокси (2'-ОСН3), 2'-аминопропокси (2'-OCH2CH2CH2NH2) и 2'-фтор (2'-F). Подобные модификации также могут быть осуществлены в других положениях в РНК iRNA, в частности в 3'-положении сахара в 3'-концевом нуклеотиде или в dsRNA с 2'-5'-связями и в 5'-положении 5'-концевого нуклеотида. iRNA также могут содержать миметики сахаров, такие как циклобутиловые фрагменты, вместо пентофуранозильного сахара. Иллюстративные патенты США, в которых изложена идея получения таких модифицированных сахарных структур, включают без ограничения патенты США № 4981957; 5118800; 5319080; 5359044; 5393878; 5446137; 5466786; 5514785; 5519134; 5567811; 5576427; 5591722; 5597909; 5610300; 5627053; 5639873; 5646265; 5658873; 5670633 и 5700920, некоторые из которых имеют общего заявителя с настоящей заявкой. Полное содержание каждого из вышеупомянутых источников настоящим включено в данный документ при помощи ссылки.
iRNA также может содержать модификации или замещения нуклеотидного основания (часто называемого в данной области просто как основание). Используемые в данном документе немодифицированные или природные нуклеотидные основания включают пуриновые основания аденин (А) и гуанин (G) и пиримидиновые основания тимин (Т), цитозин (С) и урацил (U). Модифицированные нуклеотидные основания включают в себя другие синтетические и природные нуклеотидные основания, такие как дезокситимин (dT), 5-метилцитозин (5-me-C), 5-гидроксиметилцитозин, ксантин, гипоксантин, 2-аминоаденин, 6-метил- и другие алкил-производные аденина и гуанина, 2-пропил- и другие алкилпроизводные аденина и гуанина, 2-тиоурацил, 2-тиотимин и 2-тиоцитозин, 5-галогенурацил и -цитозин, 5-пропинилурацил и -цитозин, 6-азоурацил, цитозин и тимин, 5-урацил (псевдоурацил), 4-тиоурацил, 8-галоген-, 8-амино-, 8-тиол-, 8-тиоалкил-, 8-гидроксил- и другие 8-замещенные аденины и гуанины, 5-галоген-, в частности 5-бром-, 5-трифторметил- и другие 5-замещенные урацилы и цитозины, 7-метилгуанин и 7-метиладенин, 8-азагуанин и 8-азааденин, 7-деазагуанин и 7-деазааденин, а также 3-деазагуанин и 3-деазааденин.
Дополнительные нуклеотидные основания включают раскрытые в патенте США № 3687808, таковые, раскрытые в Modified Nucleosides in Biochemistry, Biotechnology and Medicine, Herdewijn, P. ed. Wiley-VCH, 2008; таковые, раскрытые в The Concise Encyclopedia Of Polymer Science And Engineering, pages 858-859, Kroschwitz, J.L., ed. John Wiley & Sons, 1990, таковые, раскрытые в Englisch et al., Angewandte Chemie, International Edition, 1991, 30, 613, и таковые, раскрытые в Sanghvi, Y.S., Chapter 15, dsRNA Research and Applications, pages 289-302, Crooke, S.T. и Lebleu, В., Ed., CRC Press, 1993. Некоторые из этих нуклеотидных оснований особенно пригодны для повышения аффинности связывания олигомерных соединений, представленных в настоящем изобретении. Они включают 5-замещенные пиримидины, 6-азапиримидины и N-2, N-6 и -О6 замещенные пурины, в том числе 2-аминопропиладенин, 5-пропинилурацил и 5-пропинилцитозин. Было показано, что 5-метилцитозиновые замещения повышают стабильность дуплекса нуклеиновых кислот на 0,6-1,2°С (Sanghvi, Y.S., Crooke, S.T. и Lebleu, В., Eds., dsRNA Research and Applications, CRC Press, Boca Raton, 1993, p. 276-278) и представляют собой иллюстративные замещения оснований, еще более конкретно в сочетании с 2'-О-метоксиэтиловыми модификациями сахаров.
Иллюстративные патенты США, в которых изложена идея получения некоторых из вышеуказанных модифицированных нуклеотидных оснований, а также других модифицированных нуклеотидных оснований, включают без ограничения вышеуказанные патенты США № 3687808, 4845205; 513030; 5134066; 5175273; 5367066; 5432272; 5457187; 5459255; 5484908; 5502177; 5525711; 5552540; 5587469; 5594121, 5596091; 5614617; 5681941; 5750692; 6015886; 6147200; 6166197; 6222025; 6235887; 6380368; 6528640; 6639062; 6617438; 7045610; 7427672 и 7495088, полное содержание каждого из которых настоящим включено в данный документ при помощи ссылки.
РНК iRNA также может быть модифицирована таким образом, что включает одну или несколько запертых нуклеиновых кислот (LNA). Запертая нуклеиновая кислота представляет собой нуклеотид, содержащий модифицированный рибозный фрагмент, где рибозный фрагмент содержит дополнительный
- 10 037115 мостик, соединяющий 2'- и 4'-атомы углерода. Эта структура эффективно запирает рибозу в структурной конформации 3'-эндо. Было показано, что добавление запертых нуклеиновых кислот в siRNA повышает стабильность siRNA в сыворотке крови и снижает нецелевые эффекты (Elmen, J. et al., (2005),
Nucleic Acids Research, 33(1):439-447; Mook, O.R. et al., (2007), Mol. Canc. Ther. 6(3):833-843;
Grunweller, A. et al., (2003), Nucleic Acids Research, 31(12):3185-3193).
Иллюстративные патенты США, в которых изложена идея получения нуклеотидов запертых нуклеиновых кислот, включают в себя без ограничения следующие патенты США № 6268490; 6670461; 6794499; 6998484; 7053207; 7084125 и 7399845, полное содержание каждого из которых настоящим включено в данный документ при помощи ссылки.
Потенциально стабилизирующие модификации на концах молекул РНК могут включать N-(ацетиламинокапроил)-4-гидроксипролинол (Нур-С6-NHAc), N-капроил-4-гидроксипролинол (Нур-С6), N-ацетил-4-гидроксипролинол (Hyp-NHAc), тимидин-2'-О-дезокситимидин (эфир), N-(аминокапроил)-4-гидроксипролинол (Нур-С6-амино), 2-докозаноилуридин-3-фосфат, инвертированное основание dT (idT) и др. Раскрытие этой модификации можно найти в публикации согласно РСТ № WO 2011/005861.
Модифицированные iRNA, содержащие мотивы согласно настоящему изобретению.
В определенных аспектах настоящего изобретения двухнитевые средства для RNAi согласно настоящему изобретению включают средства с химическими модификациями, которые раскрыты, например, в предварительной заявке на патент США № 61/561710, поданной 18 ноября 2011 г., или в PCT/US2012/065691, поданной 16 ноября 2012 г. и опубликованной как WO 2013/075035 А1, полное содержание каждой из которых включено в данный документ посредством ссылки.
Как показано в данном документе и в предварительной заявке № 61/561710, превосходный результат может быть получен путем введения одного или нескольких мотивов с тремя одинаковыми модификациями трех последовательных нуклеотидов в смысловую нить и/или антисмысловую нить средства для RNAi, в частности, в сайт расщепления или рядом с ним. В некоторых вариантах осуществления смысловая нить и антисмысловая нить средства для RNAi могут быть полностью модифицированы иным способом. Введение таких мотивов нарушает паттерн модификаций, если он имеется, смысловой и/или антисмысловой нити. Средство для RNAi, к примеру смысловая нить, может быть необязательно конъюгировано с лигандом, представляющим собой производное GalNAc. Полученные в результате средства для RNAi характеризуются превосходной активностью в отношении сайленсинга генов.
Более конкретно, неожиданно было обнаружено, что в тех случаях, когда смысловая нить и антисмысловая нить двухнитевого средства для RNAi модифицированы так, что содержат один или несколько мотивов с тремя одинаковыми модификациями трех последовательных нуклеотидов в сайте расщепления по меньшей мере одной нити средства для RNAi или рядом с ним, тогда активность средства для RNAi в отношении сайленсинга генов была наилучшим образом повышена.
В одном варианте осуществления средство для RNAi представляет собой олигонуклеотид с обоими тупыми концами, составляющий 19 нуклеотидов в длину, где смысловая нить содержит по меньшей мере один мотив из трех 2'-Б-модификаций трех последовательных нуклеотидов в положениях 7, 8, 9 от 5'-конца.
Антисмысловая нить содержит по меньшей мере один мотив из трех 2'-О-метил-модификаций трех последовательных нуклеотидов в положениях 11, 12, 13 от 5'-конца.
В другом варианте осуществления средство для RNAi представляет собой олигонуклеотид с обоими тупыми концами, составляющий 20 нуклеотидов в длину, где смысловая нить содержит по меньшей мере один мотив из трех 2'-Б-модификаций трех последовательных нуклеотидов в положениях 8, 9, 10 от 5'-конца. Антисмысловая нить содержит по меньшей мере один мотив из трех 2'-О-метил-модификаций трех последовательных нуклеотидов в положениях 11, 12, 13 от 5'-конца.
В еще одном варианте осуществления средство для RNAi представляет собой олигонуклеотид с обоими тупыми концами, составляющий 21 нуклеотид в длину, где смысловая нить содержит по меньшей мере один мотив из трех 2'-Б-модификаций трех последовательных нуклеотидов в положениях 9, 10, 11 от 5'-конца. Антисмысловая нить содержит по меньшей мере один мотив из трех 2'-О-метилмодификаций трех последовательных нуклеотидов в положениях 11, 12, 13 от 5'-конца.
В одном варианте осуществления средство для RNAi содержит смысловую нить из 21 нуклеотида и антисмысловую нить из 23 нуклеотидов, где смысловая нить содержит по меньшей мере один мотив из трех 2'-Б-модификаций трех последовательных нуклеотидов в положениях 9, 10, 11 от 5'-конца; антисмысловая нить содержит по меньшей мере один мотив из трех 2'-О-метил-модификаций трех последовательных нуклеотидов в положениях 11, 12, 13 от 5'-конца, где один конец средства для RNAi тупой, в то время как другой конец предусматривает выступ из 2 нуклеотидов. Предпочтительно выступ из 2 нуклеотидов находится на 3'-конце антисмысловой нити. В тех случаях, когда выступ из 2 нуклеотидов находится на 3'-конце антисмысловой нити, между тремя концевыми нуклеотидами могут быть две фосфотиоатные межнуклеотидные связи, при этом два из трех нуклеотидов являются выступающими нуклеотидами, а третий нуклеотид является спаренным нуклеотидом, следующим за выступающим нуклеотидом. В одном варианте осуществления средство для RNAi дополнительно содержит две фосфотиоат- 11 037115 ные межнуклеотидные связи между концевыми тремя нуклеотидами как на 5'-конце смысловой нити, так и на 5'-конце антисмысловой нити. В одном варианте осуществления каждый нуклеотид в смысловой нити и антисмысловой нити средства для RNAi, в том числе нуклеотиды, которые являются частью мотивов, является модифицированным нуклеотидом. В одном варианте осуществления каждый остаток независимо модифицирован 2'-O-метилом или 3'-фтором, например в чередующемся мотиве. Необязательно средство для RNAi дополнительно содержит лиганд (предпочтительно, GalNAc3).
В одном варианте осуществления средство для RNAi содержит смысловую и антисмысловую нити, где средство для RNAi содержит первую нить с длиной, которая составляет по меньшей мере 25 и самое большее 29 нуклеотидов, и вторую нить с длиной, которая составляет самое большее 30 нуклеотидов, по меньшей мере с одним мотивом из трех 2'-О-метил-модификаций трех последовательных нуклеотидов в положении 11, 12, 13 от 5'-конца; где 3'-конец первой нити и 5'-конец второй нити образуют тупой конец, а вторая нить на своем 3'-конце на 1-4 нуклеотида длиннее, чем первая нить, где дуплексный участок составляет по меньшей мере 25 нуклеотидов в длину, а вторая нить в достаточной степени комплементарна целевой мРНК на протяжении по меньшей мере 19 нуклеотидов длины второй нити, для снижения экспрессии целевого гена, где средство для RNAi вводят в клетку млекопитающего и где расщепление средства для RNAi при помощи dicer предпочтительно дает в результате siRNA, предусматривающую 3'-конец второй нити, за счет чего снижается экспрессия целевого гена у млекопитающего. Необязательно, средство для RNAi дополнительно содержит лиганд.
В одном варианте осуществления смысловая нить средства для RNAi содержит по меньшей мере один мотив с тремя одинаковыми модификациями трех последовательных нуклеотидов, где один из мотивов находится в сайте расщепления в смысловой нити.
В одном варианте осуществления антисмысловая нить средства для RNAi может также содержать по меньшей мере один мотив с тремя одинаковыми модификациями трех последовательных нуклеотидов, где один из мотивов находится в сайте расщепления в смысловой нити или рядом с ним.
Для средства для RNAi с дуплексным участком, составляющим 17-23 нуклеотида в длину, сайт расщепления антисмысловой нити находится обычно около положений 10, 11 и 12 от 5'-конца. Таким образом, мотивы с тремя одинаковыми модификациями могут находиться в положениях 9, 10, 11; положениях 10, 11, 12; положениях 11, 12, 13; положениях 12, 13, 14 или положениях 13, 14, 15 антисмысловой нити, при этом отсчет начинается с 1-го нуклеотида от 5'-конца антисмысловой нити, или отсчет начинается с 1-го спаренного нуклеотида в дуплексном участке от 5'-конца антисмысловой нити. Сайт расщепления в антисмысловой нити может также изменяться в соответствии с длиной дуплексного участка RNAi от 5'-конца.
Смысловая нить средства для RNAi может содержать по меньшей мере один мотив с тремя одинаковыми модификациями трех последовательных нуклеотидов в сайте расщепления нити; а антисмысловая нить может характеризоваться по меньшей мере одним мотивом с тремя одинаковыми модификациями трех последовательных нуклеотидов в сайте расщепления нити или рядом с ним. В тех случаях, когда смысловая нить и антисмысловая нить образуют дуплекс dsRNA, смысловая нить и антисмысловая нить могут быть выровнены так, что один мотив из трех нуклеотидов в смысловой нити и один мотив из трех нуклеотидов в антисмысловой нити имеют перекрытие по меньшей мере в один нуклеотид, т.е. по меньшей мере один из трех нуклеотидов мотива в смысловой нити образует пару оснований по меньшей мере с одним из трех нуклеотидов мотива в антисмысловой нити. В качестве альтернативы по меньшей мере два нуклеотида могут перекрываться или все три нуклеотида могут перекрываться.
В одном варианте осуществления смысловая нить средства для RNAi может содержать несколько мотивов с тремя одинаковыми модификациями трех последовательных нуклеотидов. Первый мотив может находиться в сайте расщепления нити или рядом с ним, а другие мотивы могут представлять собой фланкирующую модификацию. Термин фланкирующая модификация в данном документе относится к мотиву, находящемуся в другой части нити, который отделен от мотива в сайте расщепления той же нити или рядом с ним. Фланкирующая модификация либо прилегает к первому мотиву, либо отделена по меньшей мере одним или несколькими нуклеотидами. В тех случаях, когда мотивы непосредственно прилегают друг к другу, тогда химическая структура мотивов отличается друг от друга, а когда мотивы разделены одним или несколькими нуклеотидами, тогда химические структуры могут быть одинаковыми или разными. Могут присутствовать две или более фланкирующие модификации. Например, если присутствуют две фланкирующие модификации, то каждая фланкирующая модификация может встречаться на одном конце относительно первого мотива, который находится в сайте расщепления или рядом с ним, или с обеих сторон основного мотива.
Подобно смысловой нити, антисмысловая нить средства для RNAi может содержать несколько мотивов с тремя одинаковыми модификациями трех последовательных нуклеотидов, при этом по меньшей мере один из мотивов находится в сайте расщепления нити или рядом с ним. Данная антисмысловая нить может также содержать одну или несколько фланкирующих модификаций, при выравнивании подобных фланкирующим модификациям, которые могут присутствовать в смысловой нити.
В одном варианте осуществления фланкирующая модификация в смысловой нити или антисмысловой нити средства для RNAi обычно не включает первый один или первые два концевых нуклеотида на
- 12 037115
З'-конце, 5'-конце или на обоих концах нити.
В другом варианте осуществления фланкирующая модификация в смысловой нити или антисмысловой нити средства для RNAi обычно не включает первый один или первые два спаренных нуклеотида в дуплексном участке на 3'-конце, 5'-конце или на обоих концах нити.
В тех случаях, если каждая из смысловой нити и антисмысловой нити средства для RNAi содержит по меньшей мере одну фланкирующую модификацию, то фланкирующие модификации могут попадать на один и тот же конец дуплексного участка и иметь перекрытие в один, два или три нуклеотида.
В тех случаях, если каждая из смысловой нити и антисмысловой нити средства для RNAi содержит по меньшей мере две фланкирующие модификации, то смысловая нить и антисмысловая нить могут быть выравнены так, что две модификации, каждая от одной нити, попадают на один конец дуплексного участка с перекрытием в один, два или три нуклеотида; две модификации, каждая от одной нити, попадают на другой конец дуплексного участка с перекрытием в один, два или три нуклеотида; две модификации одной нити попадают по обе стороны от ведущего мотива с перекрытием в один, два или три нуклеотида в дуплексном участке.
В одном варианте осуществления каждый нуклеотид в смысловой нити и антисмысловой нити средства для RNAi, в том числе нуклеотиды, которые являются частью мотивов, может быть модифицирован. Каждый нуклеотид может быть модифицированным одинаковыми или разными модификациями, которые могут включать одно или несколько изменений одного или обоих несвязанных с фосфатом атомов кислорода и/или одного или нескольких связанных с фосфатом атомов кислорода; изменение компонента рибозного сахара, например 2'-гидроксила в рибозном сахаре; полную замену фосфатного фрагмента дефосфоризованными линкерами; модификацию или замену встречающегося в природе основания и замену или модификацию рибозофосфатного остова.
Поскольку нуклеиновые кислоты представляют собой полимеры из субъединиц, то многие модификации встречаются в положении, которое повторяется в пределах нуклеиновой кислоте, например модификация основания, или фосфатного фрагмента, или не образующего связь атома О фосфатного фрагмента. В некоторых случаях модификация будет встречаться во всех рассматриваемых положениях в нуклеиновой кислоте, но во многих случаях не будет. В качестве примера модификация может встречаться только в 3'- или 5'-концевом положении, может встречаться только в концевом участке, например в положении концевого нуклеотида или в последних 2, 3, 4, 5 или 10 нуклеотидах нити. Модификация может встречаться в двухнитевом участке, в однонитевом участке или в обоих. Модификация может встречаться только в двухнитевом участке РНК или может встречаться только в однонитевом участке РНК. Например, фосфотиоатная модификация в положении не образующего связь атома О может встречаться только на одном или обоих концах, может встречаться только в концевом участке, например в положении концевого нуклеотида или в последних 2, 3, 4, 5 или 10 нуклеотидах нити или может встречаться в двухнитевом и однонитевом участках, в частности на концах. 5'-конец или концы могут быть фосфорилированы.
Это создает возможность, например, для повышения стабильности, для включения конкретных оснований в выступы, или для включения модифицированных нуклеотидов или имитаторов нуклеотидов, в однонитевые выступы, например в 5'- или 3'-выступ или в оба. Например, может быть желательно включить пуриновые нуклеотиды в выступы. В некоторых вариантах осуществления все или некоторые основания в 3'- или 5'-выступе могут быть модифицированы, например, с помощью модификации, описанной в данном документе. Модификации могут предусматривать, например, применение модификаций в 2'-положении рибозного сахара с помощью модификаций, известных из уровня техники, например применение дезоксирибонуклеотидов, 2'-дезокси-2'-фтор-(2'-Е)- или 2'-O-метил-модификаций вместо рибозного сахара нуклеинового основания, а также модификаций фосфатной группы, например фосфотиоатных модификаций. Выступы необязательно должны быть гомологичными целевой последовательности.
В одном варианте осуществления каждый остаток смысловой нити и антисмысловой нити независимо модифицирован LNA, HNA, CeNA, 2'-метоксиэтилом, 2'-O-метилом, 2'-О-цдлилом, 2'-С-аллилом, 2'-дезокси, 2'-гидроксилом или 2'-фтором. Нити могут содержать более одной модификации. В одном варианте осуществления каждый остаток смысловой нити и антисмысловой нити независимо модифицирован с помощью 2'-O-метила или 2'-фтора.
По меньшей мере две различные модификации, как правило, присутствуют в смысловой нити и антисмысловой нити. Эти две модификации могут быть 2'-O-метил- или 2'-фтор-модификациями или другими.
В одном варианте осуществления Na и/или Nb имеет модификации чередующегося паттерна. Термин чередующийся мотив, используемый в данном документе, относится к мотиву с одной или несколькими модификациями, при этом каждая модификация встречается у чередующихся нуклеотидов одной нити. Чередующийся нуклеотид может относиться к каждому второму нуклеотиду или к каждому третьему нуклеотиду или аналогичному паттерну. Например, если каждый из А, В и С представляет собой один тип модификации нуклеотида, то чередующийся мотив может представлять собой АВАВАВАВАВАВ..., АВВААВВААВВ..., ААВААВААВААВ , АААВАААВАААВ..., АААВВВАААВВВ... или АВСАВСАВСАВС... и т.д.
- 13 037115
Тип модификаций, содержащихся в чередующемся мотиве, может быть одинаковым или разным. Например, если каждый из А, В, С, D представляет собой один тип модификации нуклеотида, то чередующийся паттерн, т.е. модификации каждого второго нуклеотида, может быть одинаковым, но каждая из смысловой нити или антисмысловой нити может быть выбрана из нескольких возможных модификаций в чередующемся мотиве, как, например, АВАВАВ..., аСаСАС..., BDBDBD... или CDCdCd... и т.д.
В одном варианте осуществления средство для RNAi по настоящему изобретению содержит паттерн модификаций для чередующегося мотива смысловой нити, сдвинутый относительно паттерна модификации для чередующегося мотива антисмысловой нити. Сдвиг может быть таким, что модифицированная группа нуклеотидов смысловой нити соответствует модифицированной другим способом группе нуклеотидов антисмысловой нити и vice versa. Например, при спаривании смысловой нити с антисмысловой нитью в дуплексе dsRNA чередующийся мотив в смысловой нити может начинаться с АВАВАВ от 5'- к 3'-концу нити, а чередующийся мотив в антисмысловой нити может начинаться с ВАВАВА от 5'- к 3'-концу нити в дуплексном участке. В качестве другого примера чередующийся мотив в смысловой нити может начинаться с ААВВААВВ в направлении от 5'- к 3'-концу нити, а чередующийся мотив в антисмысловой нити может начинаться с ВВААВВАА в направлении от 5'- к 3'-концу нити в пределах дуплексного участка, так что между смысловой нитью и антисмысловой нитью имеется полный или частичный сдвиг паттернов модификаций.
В одном варианте осуществления средство для RNAi, содержащее паттерн чередующегося мотива 2'-О-метил-модификации и 2'-Б-модификации в смысловой нити, первоначально имеет сдвиг в отношении паттерна чередующегося мотива 2' -О-метил-модификации и 2'-Б-модификации в антисмысловой нити, т.е. 2'-О-метил-модифицированный нуклеотид в парах оснований смысловой нити с 2'-Е-модифицированным нуклеотидом в антисмысловой нити и vice versa. 1 положение в смысловой нити может начинаться с 2'-Б-модификации, а 1 положение в антисмысловой нити может начинаться с 2'-О-метил-модификации.
Введение одного или нескольких мотивов с тремя одинаковыми модификациями трех последовательных нуклеотидов в смысловую нить и/или антисмысловую нить нарушает первоначальный паттерн модификаций, присутствующий в смысловой нити и/или антисмысловой нити. Такое нарушение паттерна модификаций смысловой и/или антисмысловой нити путем введения одного или нескольких мотивов с тремя одинаковыми модификациями трех последовательных нуклеотидов в смысловую и/или антисмысловую нить неожиданно повышает активность сайленсинга генов в отношении целевого гена.
В одном варианте осуществления в тех случаях, если мотив с тремя одинаковыми модификациями трех последовательных нуклеотидов вводят в любую из нитей, модификация нуклеотида, следующего за мотивом, является модификацией, отличной от модификации мотива. Например, часть последовательности, содержащей мотив, представляет собой ...NaYYYNb..., где Y представляет собой модификацию мотива с тремя одинаковыми модификациями трех последовательных нуклеотидов, a Na и Nb представляют собой модификацию нуклеотида, следующего за мотивом YYY, которая отличается от модификации Y, и где Na и Nb могут быть одинаковыми или разными модификациями. В качестве альтернативы Na и/или Nb могут присутствовать или отсутствовать в случае, если присутствует фланкирующая модификация.
Средство для RNAi может дополнительно содержать по меньшей мере одну фосфотиоатную или метилфосфонатую межнуклеотидную связь. Модификация фосфотиоатной или метилфосфонатной межнуклеотидной связи может встречаться у любого нуклеотида смысловой нити или антисмысловой нити или обеих нитей в любом положении нити. Например, модификация межнуклеотидной связи может встречаться у каждого нуклеотида смысловой нити и/или антисмысловой нити; при этом каждая модификация межнуклеотидной связи может встречаться в чередующемся паттерне в смысловой нити и/или антисмысловой нити; или смысловая нить или антисмысловая нить могут содержать обе модификации межнуклеотидной связи в чередующемся паттерне. Чередующийся паттерн модификаций межнуклеотидной связи в смысловой нити может быть таким же, как у антисмысловой нити, или отличным от него, и чередующийся паттерн модификаций межнуклеотидной связи в смысловой нити может иметь сдвиг относительно чередующегося паттерна модификаций межнуклеотидной связи в антисмысловой нити.
В одном варианте осуществления RNAi содержит модификацию фосфотиоатной или метилфосфонатной межнуклеотидной связи в выступающем участке. Например, выступающий участок может содержать два нуклеотида с фосфотиоатной или метилфосфонатной межнуклеотидной связью между двумя нуклеотидами. Модификации межнуклеотидной связи также могут быть выполнены для соединения выступающих нуклеотидов с концевыми спаренными нуклеотидами в дуплексном участке. Например, по меньшей мере 2, 3, 4 или все выступающие нуклеотиды могут быть связаны посредством фосфотиоатной или метилфосфонатной межнуклеотидной связи и, необязательно, могут присутствовать дополнительные фосфотиоатные или метилфосфонатные межнуклеотидные связи, соединяющие выступающий нуклеотид со спаренным нуклеотидом, который следует за выступающим нуклеотидом. Например, между тремя концевыми нуклеотидами могут присутствовать по меньшей мере две фосфотиоатные межнуклеотидные связи, при этом два из трех нуклеотидов представляют собой выступающие нуклеотиды, а третий явля- 14 037115 ется спаренным нуклеотидом, следующим за выступающим нуклеотидом. Эти три концевые нуклеотида могут быть на 3'-конце антисмысловой нити, 3'-конце смысловой нити, 5'-конце антисмысловой нити и/или 5'-конце антисмысловой нити.
В одном варианте осуществления выступ из 2 нуклеотидов находится на 3'-конце антисмысловой нити и между тремя концевыми нуклеотидами присутствуют две фосфотиоатные межнуклеотидные связи, при этом два из трех нуклеотидов являются выступающими нуклеотидами, а третий нуклеотид является спаренным нуклеотидом, следующим за выступающим нуклеотидом. Необязательно, средство для RNAi может дополнительно иметь две фосфотиоатные межнуклеотидные связи между концевыми тремя нуклеотидами как на 5'-конце смысловой нити, так и на 5'-конце антисмысловой нити.
В одном варианте осуществления средство для RNAi содержит ошибочное(ые) спаривание(ия) с мишенью, в дуплексе или их комбинации. Ошибочное спаривание может встречаться в выступающем участке или дуплексном участке. Пары оснований можно выстраивать на основании их способности содействовать диссоциации или плавлению (например, по свободной энергии ассоциации или диссоциации определенного спаривания, при этом наиболее простым подходом является изучение пар по отдельности для каждой пары оснований, однако также можно применять анализ ближайшего соседа или подобный). С точки зрения содействия диссоциации: A:U более предпочтительна, чем G:C; G:U более предпочтительна, чем G:C; a Т:С более предпочтительна, чем G:C (I = инозин). Ошибочные спаривания, например неканонические или отличные от канонических типы спаривания (описанные в других местах данного документа), предпочтительнее канонических типов спаривания (А:Т, A:U, G:C); и типы спаривания, которые включают универсальное основание, предпочтительнее канонических типов спаривания.
В одном варианте осуществления средство для RNAi содержит по меньшей мере одну из первых 1, 2, 3, 4 или 5 пар оснований в дуплексных участках от 5'-конца антисмысловой нити, независимо выбранную из группы, состоящей из: A:U, G:U, I:C и ошибочно спаренных пар, например неканонических, или отличных от канонических типов спаривания, или типов спаривания, которые включают универсальное основание, для содействия диссоциации антисмысловой нити на 5'-конце дуплекса.
В одном варианте осуществления нуклеотид в положении 1 в пределах дуплексного участка, в направлении от 5'-конца антисмысловой нити, выбран из группы, состоящей из A, dA, dU, U и dT. В качестве альтернативы по меньшей мере одна из первых 1, 2 или 3 пар оснований в пределах дуплексного участка, в направлении от 5'-конца антисмысловой нити, представляет собой пару оснований AU. Например, первая пара оснований в пределах дуплексного участка, в направлении от 5'-конца антисмысловой нити, представляет собой пару оснований AU.
В одном варианте осуществления последовательность смысловой нити может быть представлена формулой (I)
5' np-Na-(X X X )a-Nb-Y Y Y -Nb-(Z Ζ Ζ ) :-Na-nq 3' (I) где каждый из i и j независимо равняется 0 или 1;
каждый из р и q независимо равняется 0-6;
каждый Na независимо представляет собой олигонуклеотидную последовательность, содержащую 0-25 модифицированных нуклеотидов, при этом каждая последовательность содержит по меньшей мере два неодинаково модифицированных нуклеотида;
каждый Nb независимо представляет собой олигонуклеотидную последовательность, содержащую 0-10 модифицированных нуклеотидов;
каждый np и nq независимо представляет собой выступающий нуклеотид;
где Nb и Y имеют неодинаковую модификацию;
каждый из XXX, YYY и ZZZ независимо представляет собой один мотив с тремя одинаковыми модификациями трех последовательных нуклеотидов.
Предпочтительно в YYY все нуклеотиды 2'-F-модифицированы.
В одном варианте осуществления Na и/или Nb содержит модификации чередующегося паттерна.
В одном варианте осуществления мотив YYY находится в сайте расщепления смысловой нити или рядом с ним. Например, если средство для RNAi содержит дуплексный участок из 17-23 нуклеотидов в длину, то мотив YYY может находиться в сайте расщепления или около него (например, может находиться в положениях 6, 7, 8, 7, 8, 9, 8, 9, 10, 9, 10, 11, 10, 11, 12 или 11, 12, 13) в смысловой нити, при этом отсчет начинается с 1-го нуклеотида от 5'-конца или, необязательно, отсчет начинается с 1-го спаренного нуклеотида в дуплексном участке от 5'-конца.
В одном варианте осуществления i равняется 1, a j равняется 0, или i равняется 0, a j равняется 1, или как i, так и j равняются 1. Смысловая нить, таким образом, может быть представлена следующими формулами:
5’ np-Na-YYY-Nb-ZZZ-Na-nq 3’ (Ib) ;
5’ np-Na-XXX-Nb-YYY-Na-nq 3’ (1с); или
5’ np-Na-XXX-Nb-YYY-Nb-ZZZ-Na-nq 3’ (Id).
В тех случаях, когда смысловая нить представлена формулой (Ib), тогда Nb представляет собой олигонуклеотидную последовательность, содержащую 0-10, 0-7, 0-5, 0-4, 0-2 или 0 модифицированных нук- 15 037115 леотидов. Каждый Na независимо может представлять собой олигонуклеотидную последовательность, содержащую 2-20, 2-15 или 2-10 модифицированных нуклеотидов.
В тех случаях, когда смысловая нить представлена формулой (Ic), тогда Nb представляет собой олигонуклеотидную последовательность, содержащую 0-10, 0-7, 0-10, 0-7, 0-5, 0-4, 0-2 или 0 модифицированных нуклеотидов. Каждый Na независимо может представлять собой олигонуклеотидную последовательность, содержащую 2-20, 2-15 или 2-10 модифицированных нуклеотидов.
В тех случаях, когда смысловая нить представлена формулой (Id), тогда каждый Nb независимо представляет собой олигонуклеотидную последовательность, содержащую 0-10, 0-7, 0-5, 0-4, 0-2 или 0 модифицированных нуклеотидов. Предпочтительно Nb равняется 0, 1, 2, 3, 4, 5 или 6. Каждый Na независимо может представлять собой олигонуклеотидную последовательность, содержащую 2-20, 2-15 или 2-10 модифицированных нуклеотидов.
Каждый из X, Y и Z может быть одинаковым или отличным от остальных.
В других вариантах осуществления i равняется 0, a j равняется 0, и смысловая нить может быть представлена формулой
5’ np-Na-YYY- Na-nq 3’ (la).
В тех случаях, когда смысловая нить представлена формулой (Ia), тогда каждый Na независимо может представлять собой олигонуклеотидную последовательность, содержащую 2-20, 2-15 или 2-10 модифицированных нуклеотидов.
В одном варианте осуществления последовательность антисмысловой нити RNAi может быть представлена формулой (II)
5' nq.-Na'-( Ζ ' Ζ ' Z ' ) k_Nb '-Υ Ύ Ύ '-Nb ' - (X'X'X ' ) i~N'a-np ' 3’ (II) где каждый из k и l независимо равняется 0 или 1;
каждый из р' и q' независимо равняется 0-6;
каждый Na' независимо представляет собой олигонуклеотидную последовательность, содержащую 0-25 модифицированных нуклеотидов, при этом каждая последовательность содержит по меньшей мере два неодинаково модифицированных нуклеотида;
каждый Nb' независимо представляет собой олигонуклеотидную последовательность, содержащую 0-10 модифицированных нуклеотидов;
каждый np' и nq' независимо представляет собой выступающий нуклеотид;
где Nb' и Y' имеют неодинаковую модификацию;
каждый из Х'Х'Х', ΥΎΎ1 и Z'Z'Z' независимо представляет собой один мотив с тремя одинаковыми модификациями трех последовательных нуклеотидов.
В одном варианте осуществления Na' и/или Nb' содержит модификации чередующегося паттерна.
Мотив Y'Y'Y' находится в сайте расщепления антисмысловой нити или рядом с ним. Например, если средство для RNAi содержит дуплексный участок, составляющий 17-23 нуклеотида в длину, то мотив Y'Y'Y' может находиться в положениях 9, 10, 11;10, 11, 12; 11, 12, 13; 12, 13, 14; или 13, 14, 15 антисмысловой нити, при этом отсчет начинается с 1-го нуклеотида от 5'-конца или, необязательно, отсчет начинается с 1-го спаренного нуклеотида в дуплексном участке от 5'-конца. Предпочтительно мотив Y'Y'Y' находится в положениях 11, 12, 13.
В одном варианте осуществления в мотиве Y'Y'Y' все нуклеотиды 2'-ОМе-модифицированы.
В одном варианте осуществления k равняется 1, а l равняется 0, или k равняется 0, а l равняется 1, или как k, так и l равняются 1.
Антисмысловая нить, таким образом, может быть представлена следующими формулами:
5’ nq.-Na'-Z 'Ζ 'Z '-Nb'-Y'Y'Y'-Na'-np. 3’ (I lb) ;
5’ nq.-Na'-Y'Y'Y'-Nb'-X'X'X'-np. 3’ (lie); или
5’ nq.-Na'- Ζ ' Ζ ' Z '-Nb '-Y ' Y ' Y '-Nb ' - X'X'X '-Na '-np. 3’ (lid).
В тех случаях, когда антисмысловая нить представлена формулой (IIb), тогда Nb' представляет собой олигонуклеотидную последовательность, содержащую 0-10, 0-7, 0-10, 0-7, 0-5, 0-4, 0-2 или 0 модифицированных нуклеотидов. Каждый Na' независимо представляет собой олигонуклеотидную последовательность, содержащую 2-20, 2-15 или 2-10 модифицированных нуклеотидов.
В тех случаях, когда антисмысловая нить представлена формулой (IIc), тогда Nb' представляет собой олигонуклеотидную последовательность, содержащую 0-10, 0-7, 0-10, 0-7, 0-5, 0-4, 0-2 или 0 модифицированных нуклеотидов. Каждый Na' независимо представляет собой олигонуклеотидную последовательность, содержащую 2-20, 2-15 или 2-10 модифицированных нуклеотидов.
В тех случаях, когда антисмысловая нить представлена формулой (IId), тогда каждый Nb' независимо представляет собой олигонуклеотидную последовательность, содержащую 0-10, 0-7, 0-10, 0-7, 0-5, 0-4, 0-2 или 0 модифицированных нуклеотидов. Каждый Na' независимо представляет собой олигонуклеотидную последовательность, содержащую 2-20, 2-15 или 2-10 модифицированных нуклеотидов. Предпочтительно Nb равняется 0, 1, 2, 3, 4, 5 или 6.
В других вариантах осуществления k равняется 0, а l равняется 0, и антисмысловая нить может быть представлена формулой
- 16 037115
5’ np--Na,-Υ ’ Υ ’ Υ ’ - Na<-nq. 3’ (la) .
В тех случаях, когда антисмысловая нить представлена формулой (IIa), тогда каждый Na' независимо представляет собой олигонуклеотидную последовательность, содержащую 2-20, 2-15 или 2-10 модифицированных нуклеотидов.
Каждый из X', Y' и Z' может быть одинаковым или отличным от остальных.
Каждый нуклеотид смысловой нити и антисмысловой нити независимо может быть модифицирован LNA, HNA, CeNA, 2'-метоксиэтилом, 2'-О-метилом, 2'-О-аллилом, 2'-С-аллилом, 2'-гидроксилом или 2'-фтором. Например, каждый нуклеотид смысловой нити и антисмысловой нити независимо модифицирован 2'-О-метилом или 2'-фтором. Каждый X, Y, Z, X', Y' и Z', в частности, может представлять собой 2'-О-метил-модификацию или 2'-фтор-модификацию.
В одном варианте осуществления смысловая нить средства для RNAi может содержать мотив YYY, находящийся в положениях 9, 10 и 11 нити, в тех случаях, когда дуплексный участок составляет 21 нуклеотид, при этом отсчет начинается с 1-го нуклеотида от 5'-конца или, необязательно, отсчет начинается с 1-го спаренного нуклеотида в дуплексном участке от 5'-конца; и Y представляет собой 2'-F-модификацию. Смысловая нить может дополнительно содержать мотив XXX или мотивы ZZZ в качестве фланкирующих модификаций на противоположном конце дуплексного участка; и каждый из XXX и ZZZ независимо представляет собой 2'-ОМе-модификацию или 2'-F-модификацию.
В одном варианте осуществления антисмысловая нить может содержать мотив Y'Y'Y', находящийся в положениях 11, 12, 13 нити, при этом отсчет начинается с 1-го нуклеотида от 5'-конца или, необязательно, отсчет начинается с 1-го спаренного нуклеотида в дуплексном участке от 5'-конца; и Y' представляет собой 2'-O-метил-модификацию. Антисмысловая нить может дополнительно содержать мотив Х'Х'Х' или мотивы Z'Z'Z' в качестве фланкирующих модификаций на противоположном конце дуплексного участка; и каждый из Х'Х'Х' и Z'Z'Z' независимо представляет собой 2'-ОМе-модификацию или 2'-F-модификацию.
Смысловая нить, представленная любой из вышеприведенных формул (Ia), (Ib), (Ic) и (Id), образует дуплекс с антисмысловой нитью, представленной любой из формул (IIa), (IIb), (IIc) и (IId) соответственно.
Соответственно, средства для RNAi для применения в способах согласно настоящему изобретению могут содержать смысловую нить и антисмысловую нить, при этом каждая нить содержит 14-30 нуклеотидов, дуплекс для RNAi, представленный формулой (III) смысловая нить: 5' np -Na-(X X Х)± -Nb- YYY -Nb - (Ζ Ζ Z):-Nanq 3’ антисмысловая нить: 3' np'-Na'-(X'X'X')k-Nb'-Y'Y'Y'-Nb'( Ζ ' Ζ ' Ζ ' ) b-Na'-nq' 5’, (III) где каждый из i, j, k и l независимо равняется 0 или 1;
каждый из р, р', q и q' независимо равняется 0-6;
каждый Na и Na' независимо представляет собой олигонуклеотидную последовательность, содержащую 0-25 модифицированных нуклеотидов, при этом каждая последовательность содержит по меньшей мере два неодинаково модифицированных нуклеотида;
каждый Nb и Nb' независимо представляет собой олигонуклеотидную последовательность, содержащую 0-10 модифицированных нуклеотидов;
каждый np', np, nq' и nq, каждый из которых может присутствовать или отсутствовать, независимо представляет собой выступающий нуклеотид; и каждый из XXX, YYY, ZZZ, X'X'X', Y'Y'Y' и Z'Z'Z' независимо представляет собой один мотив с тремя одинаковыми модификациями трех последовательных нуклеотидов.
В одном варианте осуществления i равняется 0 и j равняется 0; или i равняется 1, a j равняется 0; или i равняется 0, a j равняется 1; или как i, так и j равняются 0; или как i, так и j равняются 1. В другом варианте осуществления k равняется 0 и l равняется 0; или k равняется 1, а l равняется 0; k равняется 0, а l равняется 1; или как k, так и l равняются 0; или как k, так и l равняются 1.
- 17 037115
Иллюстративные комбинации смысловой нити и антисмысловой нити, образующих дуплекс RNAi, включают формулы, приведенные ниже:
5' пр - Na -Y Y Y -Na-nq 3’
3’ np'-Na'-Y ' Y ' Υ ' -Na'nq' 5’ (Ша)
5’ ηρ -Na -Y Y Y -Nb -Ζ Ζ Ζ -Na-nq 3’
3’ ηρ'-Na'-Υ ' Υ ' Υ '-Nb'-Ζ ' Ζ ' Ζ '-Na'nq' 5’ (11Ib)
5’ np-Na- XXX -Nb -Υ Υ Υ - Na-nq 3’
3’ np'-Na'-X 'X 'X '-Nb'-Y Ύ Ύ '-Na'-nq' 5’ (IIIc)
5’ np -Na -XXX -Nb-Y Y Y -Nb- Ζ Ζ Z -Na-nq 3’
3’ np'-Na'-X'X'X'-Nb'-Y Ύ Ύ'-Nb'-Z 'Ζ 'Z '-Na-nq' 5’ (IIId)
В тех случаях, когда средство для RNAi представлено формулой (IIIa), тогда каждый Na независимо представляет собой олигонуклеотидную последовательность, содержащую 2-20, 2-15 или 2-10 модифицированных нуклеотидов.
В тех случаях, когда средство для RNAi представлено формулой (IIIb), тогда каждый Nb независимо представляет собой олигонуклеотидную последовательность, содержащую 1-10, 1-7, 1-5 или 1-4 модифицированных нуклеотида. Каждый Na независимо представляет собой олигонуклеотидную последовательность, содержащую 2-20, 2-15 или 2-10 модифицированных нуклеотидов.
В тех случаях, когда средство для RNAi представлено формулой (IIIc), тогда каждый Nb, Nb' независимо представляет собой олигонуклеотидную последовательность, содержащую 0-10, 0-7, 0-10, 0-7, 0-5, 0-4, 0-2 или 0 модифицированных нуклеотидов. Каждый Na независимо представляет собой олигонуклеотидную последовательность, содержащую 2-20, 2-15 или 2-10 модифицированных нуклеотидов.
В тех случаях, когда средство для RNAi представлено формулой (IIId), тогда каждый Nb, Nb' независимо представляет собой олигонуклеотидную последовательность, содержащую 0-10, 0-7, 0-10, 0-7, 0-5, 0-4, 0-2 или 0 модифицированных нуклеотидов. Каждый Na, Na' независимо представляет собой олигонуклеотидную последовательность, содержащую 2-20, 2-15 или 2-10 модифицированных нуклеотидов. Каждый из Na, Na', Nb и Nb' независимо содержит модификации чередующегося паттерна.
Каждый из X, Y и Z в формулах (III), (IIIa), (IIIb), (IIIc) и (IIId) может быть одинаковым или отличным от остальных.
В тех случаях, когда средство для RNAi представлено формулами (III), (IIIa), (IIIb), (IIIc) и (IIId), тогда по меньшей мере один из нуклеотидов Y может образовывать пару оснований с одним из нуклеотидов Y'. В качестве альтернативы по меньшей мере два из нуклеотидов Y образуют пары оснований с соответствующими нуклеотидами Y' или все три из нуклеотидов Y образуют пары оснований с соответствующими нуклеотидами Y'.
В тех случаях, когда средство для RNAi представлено формулой (IIIb) или (IIId), тогда по меньшей мере один из нуклеотидов Z может образовывать пару оснований с одним из нуклеотидов Z'. В качестве альтернативы по меньшей мере два из нуклеотидов Z образуют пары оснований с соответствующими нуклеотидами Z; или все три из нуклеотидов Z образуют пары оснований с соответствующими нуклеотидами Z'.
В тех случаях, когда средство для RNAi представлено формулой (IIIc) или (IIId), тогда по меньшей мере один из нуклеотидов X может образовывать пару оснований с одним из нуклеотидов X'. В качестве альтернативы по меньшей мере два из нуклеотидов X образуют пары оснований с соответствующими нуклеотидами X; или все три из нуклеотидов X образуют пары оснований с соответствующими нуклеотидами X'.
В одном варианте осуществления модификация нуклеотида Y отличается от модификации нуклеотида Y', модификация нуклеотида Z отличается от модификации нуклеотида Z', и/или модификация нуклеотида X отличается от модификации нуклеотида X'.
В одном варианте осуществления в тех случаях, когда средство для RNAi представлено формулой (IIId), тогда модификациями Na являются 2'-O-метил- или 2'-фтор-модификации. В другом варианте осуществления в тех случаях, когда средство для RNAi представлено формулой (IIId), тогда модификациями Na являются 2'-O-метил- или 2'-фтор-модификации, и np'>0, и по меньшей мере один np' соединен с соседним нуклеотидом посредством фосфотиоатной связи. В еще одном варианте осуществления в тех случаях, когда средство для RNAi представлено формулой (IIId), тогда модификациями Na являются 2'-O-метил- или 2'-фтор-модификации, np'>0 и по меньшей мере один np' соединен с соседним нуклеоти- 18 037115 дом посредством фосфотиоатной связи, а смысловая нить конъюгирована с одним или несколькими производными GalNAc, присоединенными посредством двухвалентного или трехвалентного разветвленного линкера. В другом варианте осуществления в тех случаях, когда средство для RNAi представлено формулой (IIId), тогда модификациями Na являются 2'-О-метил- или 2'-фтор-модификации, np'>0 и по меньшей мере один np' соединен с соседним нуклеотидом посредством фосфотиоатной связи, смысловая нить содержит по меньшей мере одну фосфотиоатную связь, и смысловая нить конъюгирована с одним или несколькими производными GalNAc, присоединенными посредством двухвалентного или трехвалентного разветвленного линкера.
В одном варианте осуществления в тех случаях, когда средство для RNAi представлено формулой (IIIa), тогда модификациями Na являются 2'-O-метил- или 2'-фтор-модификации, np'>0 и по меньшей мере один np' соединен с соседним нуклеотидом посредством фосфотиоатной связи, смысловая нить содержит по меньшей мере одну фосфотиоатную связь, и смысловая нить конъюгирована с одним или несколькими производными GalNAc, присоединенными посредством двухвалентного или трехвалентного разветвленного линкера.
В одном варианте осуществления средство для RNAi является мультимером, содержащим по меньшей мере два дуплекса, представленных формулами (III), (IIIa), (IIIb), (IIIc) и (IIId), где дуплексы соединены линкером. Линкер может быть расщепляемым или нерасщепляемым. Необязательно, мультимер дополнительно содержит лиганд. Каждый из дуплексов может быть нацелен на один и тот же ген или на два различных гена или каждый из дуплексов может быть нацелен на один и тот же ген в двух различных целевых сайтах.
В одном варианте осуществления средство для RNAi является мультимером, содержащим три, четыре, пять, шесть или более дуплексов, представленных формулами (III), (IIIa), (IIIb), (IIIc) и (IIId), где дуплексы соединены линкером. Линкер может быть расщепляемым или нерасщепляемым. Необязательно, мультимер дополнительно содержит лиганд. Каждый из дуплексов может быть нацелен на один и тот же ген или на два различных гена или каждый из дуплексов может быть нацелен на один и тот же ген в двух различных целевых сайтах.
В одном варианте осуществления два средства для RNAi, представленные формулами (III), (IIIa), (IIIb), (IIIc) и (IIId), соединены друг с другом на 5'-конце и один или оба 3'-конца необязательно конъюгированы с лигандом. Каждое из средств может быть нацелено на один и тот же ген или на два различных гена или каждое из средств может быть нацелено на один и тот же ген в двух различных целевых сайтах.
В различных публикациях описаны мультимерные средства для RNAi, которые можно применять в способах согласно настоящему изобретению. Такие публикации включают WO 2007/091269, патент США № 7858769, WO 2010/141511, WO 2007/117686, WO 2009/014887 и WO 2011/031520, полное содержание которых настоящим включено в данный документ при помощи ссылки.
Средство для RNAi, содержащее один или нескольких углеводных фрагментов, конъюгированных со средством для RNAi, может улучшать одно или несколько свойств средства для RNAi. Во многих случаях углеводный фрагмент будет присоединен к модифицированной субъединице средства для RNAi. Например, рибозный сахар одной или нескольких рибонуклеотидных субъединиц средства на основе dsRNA можно заменять другими фрагментами, например отличным от углевода (предпочтительно циклическим) носителем, к которому присоединен углеводный лиганд. Рибонуклеотидную субъединицу, в которой рибозный сахар субъединицы был заменен таким образом, называют в данном документе субъединицей с модификацией путем замены рибозы (RRMS). Циклический носитель может быть карбоциклической кольцевой системой, т.е. все атомы в кольце являются атомами углерода, или гетероциклической кольцевой системой, т.е. один или несколько атомов в кольце могут быть гетероатомами, например азотом, кислородом, серой. Циклический носитель может быть моноциклической кольцевой системой или может содержать два или более колец, например конденсированных колец. Циклический носитель может представлять собой полностью насыщенную кольцевую систему, или он может содержать одну или несколько двойных связей.
Лиганд может быть присоединен к полинуклеотиду посредством носителя. Носители включают (i) по меньшей мере одну точку присоединения к остову, предпочтительно две точки присоединения к остову, и (ii) по меньшей мере одну связывающую точку присоединения. Точка присоединения к остову, используемая в данном документе, относится к функциональной группе, например гидроксильной группе, или, как правило, связи, доступной для введения носителя в остов, например фосфатный или модифицированный фосфатный, например серосодержащий, остов, и которая подходит для этого, рибонуклеиновой кислоты. Связывающая точка присоединения (ТАР) в некоторых вариантах осуществления относится к входящему в кольцо атому циклического носителя, например атому углерода или гетероатому (отличному от атома, который обеспечивает точку присоединения к остову), с которым связывается выбранный фрагмент. Фрагмент может быть, например, углеводом, например моносахаридом, дисахаридом, трисахаридом, тетрасахаридом, олигосахаридом и полисахаридом. Необязательно, выбранный фрагмент присоединен посредством промежуточного связывающего фрагмента к циклическому носителю. Таким образом, циклический носитель будет часто включать функциональную группу, например
- 19 037115 аминогруппу, или, как правило, обеспечивать связь, подходящую для введения или связывания другого химического структурного элемента, например лиганда, в состав кольца.
Средства для RNAi можно конъюгировать с лигандом через носитель, где носитель может быть циклической группой или ациклической группой; предпочтительно, циклическая группа выбрана из пирролидинила, пиразолинила, пиразолидинила, имидазолинила, имидазолидинила, пиперидинила, пиперазинила, [1,3]-диоксолана, оксазолидинила, изоксазолидинила, морфолинила, тиазолидинила, изотиазолидинила, хиноксалинила, пиридазинонила, тетрагидрофурила и декалина; предпочтительно ациклическая группа выбрана из остова, представляющего собой серинол, или остова, представляющего собой диэтаноламин.
В определенных конкретных вариантах осуществления средство для RNAi для применения в способах согласно настоящему изобретению представляет собой средство, выбранное из группы средств, приведенных в любой из табл. 1 и 2. В одном варианте осуществления в тех случаях, когда средство представляет собой средство, приведенное в табл. 1, тогда у средства может отсутствовать концевой dT.
Настоящее изобретение дополнительно включает двухнитевые средства для RNAi, содержащие любую из последовательностей, приведенных в любой из табл. 1 или 2, которые содержат 5'-фосфат или миметик фосфата в антисмысловой нити (см., например, публикацию согласно РСТ № WO 2011005860). Дополнительно, настоящее изобретение включает двухнитевые средства для RNAi, содержащие любую из последовательностей, приведенных в одной из табл. 1 или 2, которые включают 2'-фтор-группу вместо 2'-ОМе-группы на 5'-конце смысловой нити.
Дополнительные мотивы.
В определенных аспектах двухнитевые средства для RNAi, описанные в данном документе, содержат смысловую нить и антисмысловую нить, при этом указанные смысловая нить и антисмысловая нить содержат меньше одиннадцати, десяти, девяти, восьми, семи, шести или пяти 2'-дезоксифтормодификаций.
В определенных аспектах двухнитевые средства для RNAi, описанные в данном документе, содержат смысловую нить и антисмысловую нить, при этом указанные смысловая нить и антисмысловая нить содержат меньше десяти, девяти, восьми, семи, шести, пяти, четырех фосфотиоатных межнуклеотидных связей.
В определенных аспектах двухнитевые средства для RNAi, описанные в данном документе, содержат смысловую нить и антисмысловую нить, при этом указанные смысловая нить и антисмысловая нить содержат меньше десяти 2'-дезоксифтор-модификаций и меньше шести фосфотиоатных межнуклеотидных связей.
В определенных аспектах двухнитевые средства для RNAi, описанные в данном документе, содержат смысловую нить и антисмысловую нить, при этом указанные смысловая нить и антисмысловая нить содержат меньше восьми 2'-дезоксифтор-модификаций и меньше шести фосфотиоатных межнуклеотидных связей.
В определенных аспектах двухнитевые средства для RNAi, описанные в данном документе, содержат смысловую нить и антисмысловую нить, при этом указанные смысловая нить и антисмысловая нить содержат меньше девяти 2'-дезоксифтор-модификаций и меньше шести фосфотиоатных межнуклеотидных связей.
Лиганды.
Двухнитевые средства для RNAi согласно настоящему изобретению необязательно могут быть конъюгированы с одним или несколькими лигандами. Лиганд может быть присоединен к смысловой нити, антисмысловой нити или к обеим нитям на 3'-конце, 5'-конце или на обоих концах. К примеру, лиганд может быть конъюгирован со смысловой нитью. В некоторых вариантах осуществления лиганд конъюгирован с 3'-концом смысловой нити. В одном варианте осуществления лигандом является лиганд GalNAc. Особенно в некоторых вариантах осуществления лигандом является GalNAc3. Лиганды соединены, предпочтительно ковалентно, либо непосредственно, либо опосредованно через промежуточный связывающий фрагмент.
В некоторых вариантах осуществления лиганд меняет распределение, нацеливание или время жизни молекулы, в которую он введен. В некоторых вариантах осуществления лиганд обеспечивает повышенную аффинность в отношении выбранной мишени, например молекулы, клетки или типа клеток, компартмента, рецептора, например компартмента клетки или органа, ткани, органа или участка тела, например, по сравнению с молекулой, у которой отсутствует такой лиганд. Лиганды, обеспечивающие повышенную аффинность в отношении выбранной мишени, также называют нацеливающими лигандами.
Некоторые лиганды могут обладать эндосомолитическими свойствами. Эндосомолитические лиганды способствуют лизису эндосомы и/или транспорту композиции согласно настоящему изобретению или ее компонентов из эндосомы в цитоплазму клетки. Эндосомолитический лиганд может представлять собой полианионный пептид или пептидомиметик, который проявляет рН-зависимую мембранную активность и фузогенность. В одном варианте осуществления эндосомолитический лиганд принимает свою активную конформацию при значении рН эндосомы. Активной конформацией является такая конфор- 20 037115 мация, при которой эндосомолитический лиганд способствует лизису эндосомы и/или транспорту композиции согласно настоящему изобретению или ее компонентов из эндосомы в цитоплазму клетки. Иллюстративные эндосомолитические лиганды включают пептид GALA (Subbarao et al., Biochemistry, 1987, 26:2964-2972), пептид EALA (Vogel et al., J. Am. Chem. Soc., 1996, 118:1581-1586) и их производные (Turk et al., Biochem. Biophys. Acta, 2002, 1559:56-68). В одном варианте осуществления эндосомолитический компонент может содержать химическую группу (например, аминокислоту), которая будет претерпевать изменения в заряде или протонировании в ответ на изменения рН. Эндосомолитический компонент может быть линейным или разветвленным.
Лиганды могут улучшать транспортировку, гибридизацию и свойства специфичности и могут также улучшать устойчивость к нуклеазам у полученного естественного или модифицированного олигорибонуклеотида или полимерной молекулы, содержащей любую комбинацию мономеров, описанных в данном документе, и/или естественных или модифицированных рибонуклеотидов.
Лиганды, как правило, могут включать терапевтические модификаторы, например, для повышения поглощения; диагностические соединения или репортерные группы, например, для отслеживания распределения; перекрестно сшивающие средства и придающие устойчивость к нуклеазам фрагменты. Общие примеры включают липиды, стероиды, витамины, сахара, белки, пептиды, полиамины и миметики пептидов.
Лиганды могут включать вещество, встречающееся в природе, такое как белок (например, сывороточный альбумин человека (HSA), липопротеин низкой плотности (LDL), липопротеин высокой плотности (HDL) или глобулин); углевод (например, декстран, пуллулан, хитин, хитозан, инулин, циклодекстрин или гиалуроновая кислота) или липид. Лиганд также может быть рекомбинантной или синтетической молекулой, такой как синтетический полимер, например синтетическая полиаминокислота, олигонуклеотид (например, аптамер). Примеры полиаминокислот включают полиаминокислоту, представляющую собой полилизин (PLL), поли-Ь-аспарагиновую кислоту, поли-Ь-глутаминовую кислоту, сополимер стирола и ангидрида малеиновой кислоты, сополимер L-лактида и гликолида, сополимер дивинилового эфира и малеинового ангидрида, N-(2-гидроксиnропил)метакриламидный сополимер (НМРА), полиэтиленгликоль (PEG), поливиниловый спирт (PVA), полиуретан, поли(2-этилакриловую кислоту), N-изопропилакриламидные полимеры или полифосфазин. Примеры полиаминов включают полиэтиленимин, полилизин (PLL), спермин, спермидин, полиамин, полиамин-псевдопептид, полиаминпептидомиметик, полиамин-дендример, аргинин, амидин, протамин, катионный липид, катионный порфирин, четвертичную соль полиамина или альфа-спиральный пептид.
Лиганды также могут включают нацеливающие группы, например нацеливающее на клетку или ткань средство, например лектин, гликопротеин, липид или белок, например антитело, которое связывается с определенным типом клеток, например клеткой почки. Нацеливающей группой могут быть тиреотропин, меланотропин, лектин, гликопротеин, поверхностный белок А, углевод-муцин, поливалентная лактоза, поливалентная галактоза, N-ацетилгалактозамин, N-ацетилглюкозамин, поливалентная манноза, поливалентная фукоза, гликозилированные полиаминокислоты, поливалентная галактоза, трансферрин, бисфосфонат, полиглутамат, полиаспартат, липид, холестерин, стероид, желчная кислота, фолат, витамин В12, биотин, RGD-пептид, миметик RGD-пептида или аптамер.
Другие примеры лигандов включают красители, интеркалирующие средства (например, акридины), сшивающие средства (например, псорален, митомицин С), порфирины (ТРРС4, тексафирин, сапфирин), полициклические ароматические углеводороды (например, феназин, дигидрофеназин), искусственные эндонуклеазы или хелатор (например, EDTA), липофильные молекулы, например холестерин, холевую кислоту, адамантануксусную кислоту, 1-пиренмасляную кислоту, дигидротестостерон, 1,3-бис-О-(гексадецил)глицерин, геранилоксигексильную группу, гексадецил-глицерин, борнеол, ментол, 1,3-пропандиол, гептадецильную группу, пальмитиновую кислоту, миристиновую кислоту, О3-(олеоил)литохолевую кислоту, О3-(олеоил)холеновую кислоту, диметокситритил или феноксазин и пептидные конъюгаты (например, пептид antennapedia, Tat-пептид), алкилирующие средства, фосфат, амино, меркапто, PEG (например, PEG-40K), MPEG, [MPEG]2, полиамино, алкил, замещенный алкил, меченные радиоизотопом маркеры, ферменты, гаптены (например, биотин), помощники транспорта/всасывания (например, аспирин, витамин Е, фолиевую кислоту), синтетические рибонуклеазы (например, имидазол, бисимидазол, гистамин, имидазольные кластеры, конъюгаты акридин-имидазол, комплекс Eu3+ тетраазамакроциклов), динитрофенил, HRP или АР.
Лигандами могут быть белки, например гликопротеины, или пептиды, например молекулы со специфической аффинностью в отношении ко-лиганда, или антитела, например антитело, которое связывается с определенным типом клеток, таким как раковая клетка, эндотелиальная клетка или костная клетка. Лиганды могут также включать гормоны и рецепторы гормонов. Они также могут включать отличные от пептидов виды молекул, такие как липиды, лектины, углеводы, витамины, кофакторы, поливалентную лактозу, поливалентную галактозу, N-ацетилгалактозамин, N-ацетилглюкозамин, поливалентную маннозу, поливалентную фукозу или аптамеры. Например, лигандом может быть липополисахарид, активатор МАР-киназы р38 или активатор NF-кВ.
- 21 037115
Лигандом может быть вещество, например лекарственное средство, которое может увеличивать поглощение средства на основе iRNA клеткой, например, путем разрушения цитоскелета клетки, например путем разрушения микротрубочек, микрофиламентов и/или промежуточных филаментов клетки. Лекарственным средством, например, может быть таксон, винкристин, винбластин, цитохалазин, нокодазол, яплакинолид, латрункулин А, фаллоидин, свинхолид А, инданоцин или миосервин.
Лиганд может увеличивать поглощение олигонуклеотида клеткой, например, путем активации воспалительной реакции. Иллюстративные лиганды, которые будут обладать таким эффектом, включают фактор некроза опухолей альфа (TNF-альфа), интерлейкин-1-бета или гамма интерферон.
В одном аспекте лиганд представляет собой липидную молекулу или молекулу на основе липида. Такая липидная молекула или молекула на основе липида предпочтительно связываются с сывороточным белком, например сывороточным альбумином человека (HSA). Связывающийся с HSA лиганд обеспечивает распределение конъюгата в целевой ткани, например отличной от ткани почек целевой ткани организма. Например, целевой тканью может быть печень, в том числе паренхиматозные клетки печени. Также в качестве лигандов можно использовать другие молекулы, которые могут связывать HSA. Например, можно использовать напроксен или аспирин. Липидный лиганд или лиганд на основе липида может (а) повышать устойчивость к разрушению конъюгата, (b) повышать нацеливающую способность или транспорт в целевую клетку или клеточную мембрану и/или (с) может быть использован для корректировки связывания с сывороточным белком, например HSA.
Лиганд на основе липида можно применять для модулирования, например регулирования связывания конъюгата с целевой тканью. Например, липидный лиганд или лиганд на основе липида, который связывается с HSA более сильно, с меньшей вероятностью будет нацеливаться на почки и, следовательно, с меньшей вероятностью будет выводиться из организма. Липидный лиганд или лиганд на основе липида, который связывается с HSA менее сильно, можно применять для нацеливания конъюгата на почки.
В одном варианте осуществления лиганд на основе липида связывает HSA. Предпочтительно он связывает HSA с аффинностью, достаточной для того, чтобы конъюгат предпочтительно распределялся в ткань, отличную от ткани почек. В одном варианте осуществления аффинность является такой, что связывание HSA-лиганд может быть обратимым. В другом варианте осуществления лиганд на основе липида слабо связывает HSA или не связывает вообще, так что конъюгат будет предпочтительно распределяться в почку. Другие фрагменты, которые нацеливаются на клетки почки, также можно использовать вместо или в дополнение к лиганду на основе липида.
В другом аспекте лигандом является фрагмент, например витамин, который поглощается целевой клеткой, например пролиферирующей клеткой. Такие варианты являются особенно пригодными для лечения нарушений, характеризующихся нежелательной пролиферацией клеток, например злокачественного или доброкачественного типа, например раковых клеток. Иллюстративные витамины включают витамин А, Е и K. Другие иллюстративные витамины включают витамины группы В, например фолиевую кислоту, В12, рибофлавин, биотин, пиридоксаль, или другие витамины или питательные вещества, поглощаемые раковыми клетками. Также включены HAS, липопротеин низкой плотности (LDL) и липопротеин высокой плотности (HDL).
В другом аспекте лигандом является средство, обеспечивающее проникновение в клетку, предпочтительно спиральное средство, обеспечивающее проникновение в клетку. Предпочтительно средство является амфипатическим. Иллюстративным средством является пептид, такой как tat или antennopedia. Если средство представляет собой пептид, то он может быть модифицированным, в том числе пептидилмиметик, инвертомеры, отличные от пептидных или псевдопептидные связи, и также в нем могут использоваться D-аминокислоты. Спиральное средство предпочтительно представляет собой альфаспиральное средство, которое предпочтительно характеризуется липофильной и липофобной фазами.
Лигандом может быть пептид или пептидомиметик.
Пептидомиметик (также называемый в данном документе олигопептидомиметиком) является молекулой, способной сворачиваться в определенную трехмерную структуру, аналогичную естественному пептиду. Длина пептидного фрагмента или фрагмента-пептидомиметика может составлять приблизительно 5-50 аминокислот, например приблизительно 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45 или 50 аминокислот. Пептидом или пептидомиметиком, например, может быть пептид, обеспечивающий проникновение в клетку, катионный пептид, амфипатический пептид или гидрофобный пептид (например, состоящий преимущественно из Tyr, Trp или Phe). Пептидным фрагментом может быть пептид-дендример, конформационно затрудненный пептид или перекрестно сшитый пептид. В другом альтернативном варианте пептидный фрагмент может включать гидрофобную последовательность, контролирующую перенос через мембрану (MTS). Иллюстративным содержащим гидрофобную MTS пептидом является RFGF с аминокислотной последовательностью AAVALLPAVLLALLAP (SEQ ID NO: 9). Аналог RFGF (например, аминокислотная последовательность AALLPVLLAAP (SEQ ID NO: 10)), содержащий гидрофобную MTS, также может быть нацеливающим фрагментом. Пептидный фрагмент может представлять собой доставляющий пептид, который может переносить большие полярные молекулы, в том числе пептиды, олигонуклеотиды и белки, через клеточные мембраны. Например, как было обнаружено, последователь- 22 037115 ности Tat-белка HIV (GRKKRRQRRRPPQ) (SEQ ID NO: 11) и белка Antennapedia Drosophila (RQIKIWFQNRRMKWKK) (SEQ ID NO: 12) способны функционировать в качестве доставляющих пептидов. Пептид или пептидомиметик может кодироваться случайной последовательностью ДНК, как, например, пептид, идентифицированный из библиотеки фагового дисплея или комбинаторной библиотеки одна гранула-одно соединение (ОВОС) (Lam et al., Nature, 354:82-84, 1991). Предпочтительно пептид или пептидомиметик, связанный со средством на основе iRNA, посредством введенной мономерной единицы, представляет собой нацеливающий на клетку пептид, такой как содержащий аргинин-глицинаспарагиновую кислоту (RGD) пептид или RGD-миметик. Пептидный фрагмент может варьироваться по длине от приблизительно 5 до приблизительно 40 аминокислот. Пептидные фрагменты могут иметь структурную модификацию, как, например, для повышения стабильности или управления конформационными свойствами. Можно использовать любую из структурных модификаций, описанных ниже. Фрагмент, представляющий собой RGD-пептид, можно применять для нацеливания на опухолевую клетку, такую как эндотелиальная опухолевая клетка или опухолевая клетка рака молочной железы (Zitzmann et al., Cancer Res., 62:5139-43, 2002). RGD-пептид может способствовать нацеливанию средства на основе iRNA на опухоли ряда других тканей, в том числе легкого, почки, селезенки или печени (Aoki et al., Cancer Gene Therapy, 8:783-787, 2001). Предпочтительно RGD-пептид будет способствовать нацеливанию средства на основе iRNA на почку. RGD-пептид может быть линейным или циклическим и может быть модифицированным, например гликозилированным или метилированным, для способствования нацеливанию на конкретные ткани. Например, гликозилированный RGD-пептид может доставлять средство на основе iRNA к опухолевой клетке, экспрессирующей aVe3 (Haubner et al., Jour. Nucl. Med., 42:326-336, 2001). Можно использовать пептиды, которые нацеливаются на маркеры, которыми обогащены пролиферирующие клетки. Например, содержащие RGD пептиды и пептидомиметики могут быть нацелены на раковые клетки, в частности клетки, на поверхности которых присутствует интегрин. Таким образом, можно применять RGD-пептиды, циклические пептиды, содержащие RGD, RGD-пептиды, которые включают D-аминокислоты, а также синтетические RGD-миметики. В дополнение к RGD можно применять другие фрагменты, которые нацеливаются на лиганд интегрин. Как правило, такие лиганды можно использовать для контроля пролиферации клеток и ангиогенеза. Некоторые конъюгаты с таким типом лиганда нацелены на РЕСАМ-1, VEGF или другой раковый ген, например раковый ген, описанный в данном документе.
Пептид, обеспечивающий проникновение в клетку позволяет проникать в клетку, например микробную клетку, такую как бактериальная или грибная клетка, или в клетку млекопитающего, такую как клетка человека. Пептидом, проникающим в микробную клетку, например, может быть α-спиральный линейный пептид (например, LL-37 или Ceropin P1), содержащий дисульфидную связь пептид (например, α-дефенсин, β-дефенсин или бактенецин), или петид, содержащий только одну или две преобладающие аминокислоты (например, PR-39 или индолицидин). Пептид, обеспечивающий проникновение в клетку, также может включать клеточный сигнал внутриядерной локализации (NLS). Например, пептидом, обеспечивающим проникновение в клетку, может быть двухкомпонентный амфипатический пептид, такой как MPG, который получен из домена пептида слияния gp41 HIV-1 и NLS из большого Т-антигена SV40 (Simeoni et al., Nucl. Acids Res. 31:2717-2724, 2003).
В одном варианте осуществления нацеливающим пептидом может быть амфипатический α-спиральный пептид. Иллюстративные амфипатические α-спиральные пептиды включают без ограничений цекропины, ликотоксины, парадаксины, буфорин, CPF, бомбинин-подобный пептид (BLP), кателицидины, цератотоксины, пептиды S. clava, кишечные антимикробные пептиды миксины (HFIAP), магаинины, бревинины-2, дермасептины, меллитины, плевроцидины, пептиды Н2А, пептиды Xenopus, эскулентины-1 и церины. Предпочтительно целый ряд факторов будет рассматриваться в связи с поддержанием целостности и стабильности спирали. Например, будут использовать максимальное количество стабилизирующих спираль остатков (например, leu, ala или lys) и будут использовать минимальное количество дестабилизирующих спираль остатков (например, пролин или циклические мономерные единицы). Будет рассматриваться кэпирующий остаток (например, Gly, представляет собой иллюстративный N-кэпирующий остаток) и/или может использоваться С-концевое амидирование для обеспечения дополнительной Н-связи для стабилизации спирали. Стабильность может обеспечивать образование солевых мостиков между остатками с противоположными зарядами, разделенными i±3 или i±4 положениями. Например, катионные остатки, такие как лизин, аргинин, гомоаргинин, орнитин или гистидин, могут образовывать солевые мостики с анионными остатками, глутаматом или аспартатом.
Лиганды, представляющие собой пептиды и пептидомиметики, включают те пептиды, которые имеют природное происхождение, или модифицированные пептиды, например D- или L- пептиды; α-, βили γ-пептиды; пептиды с N-метилом; азапептиды; пептиды с одним или несколькими амидами, т.е. пептиды со связями, замененными одной или несколькими мочевинными, тиомочевинными, карбаматными или сульфонилмочевинными связями; или циклические пептиды.
Нацеливающим лигандом может быть любой лиганд, который способен нацеливаться на конкретный рецептор. Примерами являются: фолат, GalNAc, галактоза, манноза, манноза-6Р, кластеры сахаров,
- 23 037115 такие как кластер GalNAc, маннозный кластер, галактозный кластер, или аптамер. Кластер представляет собой комбинацию двух или более единиц сахара. Нацеливающие лиганды также включают лиганды рецепгора-интегрина, лиганды хемокинового рецептора, трансферрин, биотин, лиганды серотонинового рецептора, PSMA, эндотелин, GCPII, соматостатин, лиганды LDL и HDL. Основу лигандов также может составлять нуклеиновая кислота, например в случае аптамера. Аптамер может быть немодифицированным или может иметь любую комбинацию модификаций, раскрытых в данном документе.
Эндосомальные высвобождающие средства включают имидазолы, поли- или олигоимидазолы, PEI, пептиды, фузогенные пептиды, поликарбоксилаты, полиакатионы, скрытые олиго- или поликатионы или анионы, ацетали, полиацетали, кетали/поликетали, ортоэфиры, полимеры со скрытыми или не скрытыми катионными или анионными зарядами, дендримеры со скрытыми или не скрытыми катионными или анионными зарядами.
PK-модулятор означает модулятор фармакокинетических параметров. PK-модуляторы включает липофилы, желчные кислоты, стероиды, фосфолипидные аналоги, пептиды, белок-связывающие средства, PEG, витамины и т.д. Иллюстративные PK-модуляторы включают без ограничения холестерин, жирные кислоты, холевую кислоту, литохолевую кислоту, диалкилглицериды, диацилглицерид, фосфолипиды, сфинголипиды, напроксен, ибупрофен, витамин Е, биотин и т.д. Олигонуклеотиды, которые содержат некоторое количество фосфотиоатных связей, также, как известно, связываются с сывороточным белком, таким образом короткие олигонуклеотиды, например олигонуклеотиды из приблизительно 5 оснований, 10 оснований, 15 оснований или 20 оснований, содержащие множество фосфотиоатных связей в остове, также пригодны в настоящем изобретении в качестве лигандов (например, в качестве РКмодулирующих лигандов).
Кроме того, аптамеры, которые связывают сывороточные компоненты (например, сывороточные белки) также пригодны в настоящем изобретении в качестве PK-модулирующих лигандов.
Другие конъюгаты, представляющие собой лиганды, пригодные в настоящем изобретении, описаны в заявках на выдачу патентов США USSN: 10/916185, поданной 10 августа 2004 г.; USSN: 10/946873, поданной 21 сентября 2004 г.; USSN: 10/833934, поданной 3 августа 2007 г.; USSN: 11/115989, поданной 27 апреля 2005 г., и USSN: 11/944227, поданной 21 ноября 2007 г., которые включены посредством ссылки в полном объеме для всех целей.
В тех случаях, когда присутствуют два или более лиганда, тогда все лиганды могут обладать одинаковыми свойствами, могут обладать различными свойствами или некоторые лиганды обладают одинаковыми свойствами, в то время как другие обладают различными свойствами. Например, лиганд может обладать нацеливающими свойствами, обладать эндосомолитической активностью или обладать PK-модулирующими свойствами. В одном варианте осуществления все лиганды обладают различными свойствами.
Лиганды могут быть присоединены к олигонуклеотидам в разных местах, например на 3'-конце, 5'-конце и/или во внутреннем положении. В некоторых вариантах осуществления лиганд присоединен к олигонуклеотидам через промежуточный связывающий фрагмент, например, носитель, описанный в данном документе. Лиганд или связанный лиганд могут присутствовать на мономере в тех случаях, когда мономер введен в растущую нить. В некоторых вариантах осуществления лиганд может быть введен посредством связывания с мономером-'предшественником после того, как мономер-предшественник был введен в растущую нить. Например, мономер, содержащий, например, связывающий фрагмент с аминогруппой на конце (т.е. без ассоциированного лиганда), например TAP-(CH2)nNH2, может быть введен в растущую нить олигонуклеотидов. На следующей стадии, т.е. после введения мономерапредшественника в нить, лиганд с электрофильной группой, например группой сложного пентафторфенилэфира или альдегидной группой, затем можно присоединить к мономеру-предшественнику путем связывания электрофильной группы лиганда с концевой нуклеофильной группой связывающего фрагмента мономера-предшественника.
В другом примере может быть введен мономер с химической группой, пригодной для участия в реакциях клик-химии, например связывающий фрагмент/линкер с азидом или алкином на конце. На последующей стадии, т.е. после введения мономера-предшественника в нить, лиганд с комплементарной химической группой, например алкин или азид, может быть присоединен к мономеру-предшественнику путем связывания алкина и азида вместе.
В некоторых вариантах осуществления лиганд может быть конъюгирован с нуклеиновыми основаниями, сахарными фрагментами или межнуклеозидными связями в молекулах нуклеиновой кислоты. Конъюгация с пуриновыми нуклеиновыми основаниями или их производными может происходить в любом положении, в том числе по атомам внутри кольца и вне кольца. В некоторых вариантах осуществления к 2-, 6-, 7- или 8-положениям пуринового нуклеинового основания присоединен конъюгатный фрагмент. Конъюгация с пиримидиновыми нуклеиновыми основаниями или их производными также может происходить в любом положении. В некоторых вариантах осуществления 2-, 5- и 6-положения пиримидинового нуклеинового основания могут быть замещены конъюгатным фрагментом. Конъюгация с сахарными фрагментами нуклеозидов может происходить при любом атоме углерода. Примеры атомов углерода в сахарном фрагменте, к которым может быть присоединен конъюгатный фрагмент, включают
- 24 037115
2', 3' и 5' атомы углерода. К положению 1' также может быть присоединен конъюгатный фрагмент, как, например, в остатке, с удаленным азотистым основанием. Межнуклеозидные связи также могут нести конъюгатные фрагменты. Что касается фосфорсодержащих связей (например, фосфодиэфирной, фосфотиоатной, фосфодитиоатной, фосфорамидатной и т.п.), то конъюгатный фрагмент может быть присоединен непосредственно к атому фосфора или к атому О, N или S, связанному с атомом фосфора. Что касается амин- или амид-содержащих межнуклеозидных связей (например, PNA), то конъюгатный фрагмент может быть присоединен к атому азота амина или амида или к смежному атому углерода.
Лиганды GalNAc и линкеры.
В некотором варианте осуществления siRNA, целенаправленно воздействующая на ген HAO1, конъюгирована с углеводом, например, моносахаридом (таким как GalNAc), дисахаридом, трисахаридом, тетрасахаридом, полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления siRNA конъюгирована с лигандом N-ацетилгалактозамином (GalNAc). Повышения эффективности доставки в гепатоциты после подкожного введения. Способы конъюгирования углеводов, например N-ацетилгалактозамина, например, с siRNA хорошо известны специалисту в данной области. Примеры могут быть найдены в US 8106022 и WO 2014/025805.
В некоторых вариантах осуществления siRNA, целенаправленно воздействующая на ген HAO1, конъюгирована с лигандом, например с GalNac, посредством линкера. Например, лигандом может быть одно или несколько производных GalNAc (N-ацетилглюкозамина), присоединенных посредством двухвалентного или трехвалентного разветвленного линкера.
В одном варианте осуществления dsRNA согласно настоящему изобретению конъюгирована с двухвалентными и трехвалентными разветвленными линкерами, включающими структуры, показанные в
ряющиеся единицы могут быть одинаковыми или различными;
каждый из P2A, P2B, P3A, P3B, P4A, P4B, P5A, P5B, P5C, T2A, T2B, T3A, T3B, T4A, T4B, T4A, T5B, T5C независимо для каждого случая отсутствует, представляет собой CO, NH, O, S, OC(O), NHC(O), CH2, CH2NH или СН2О;
Q2A, q2b, q3a, q3b, q4a, q4b, q5a, qSB, q5c независимо в каждом случая отсутствуют, представляют собой алкилен, замещенный алкилен, где одна или несколько метиленовых групп могут прерываться или
- 25 037115 оканчиваться одним или несколькими из О, S, S(O), SO2, N(RN), C(R')=C(R''), С=С или С(О);
каждый из R2A, R2B, R3A, R3B, R4A, R4B, R5A, R5B, R5c независимо в каждом случае отсутствует, представляет собой NH, О, S, СН2, С(О)О, C(O)NH, NHCH(Ra)С(О), -С(О)СН(Ra)-NH-, СО, CH=N-O, о
или гетероциклил;
L2A, L2B, L3A, L3B, L4A, L4B, L5A, L5B и L5C представляют собой лиганд, т.е. каждый независимо для каждого случая представляет собой моносахарид (такой как GalNAc), дисахарид, трисахарид, тетрасаха рид, олигосахарид или полисахарид; и
Ra представляет собой Н или боковую цепь аминокислоты.
В случае средств для RNAi, служащих для ингибирования экспрессии целевого гена, особенно при менимы трехвалентные линкеры, посредством которых конъюгируют производные GalNAc, такие как линкеры формулы (VII)
где L5A, L5B и L5C представляют собой моносахарид, такой как производное GalNAc.
Примеры подходящих двухвалентных и трехвалентных разветвленных линкерных групп, посредством которых конъюгируют производные GalNAc, включают без ограничения следующие соединения:
- 26 037115
- 27 037115
Дополнительные лиганды.
В некоторых вариантах осуществления лиганд выбран из одного из следующих:
- 28 037115
III. Доставка iRNA согласно настоящему изобретению.
Доставку средства на основе iRNA согласно настоящему изобретению к клетке, например клетке в организме субъекта, таком как субъект-человек (например, субъект, нуждающийся в этом, такой как субъект с ассоциированным с HAO1 нарушением), можно осуществлять различными путями. Например, доставку можно осуществлять путем приведения клетки в контакт с iRNA согласно настоящему изобретению либо in vitro, либо in vivo. Доставку in vivo также можно осуществлять непосредственно путем введения субъекту композиции, содержащей iRNA, например dsRNA. В качестве альтернативы доставку in vivo можно осуществлять опосредованно путем введения одного или нескольких векторов, которые кодируют iRNA и управляют ее экспрессией. Такие альтернативные случаи дополнительно описаны ниже.
Как правило, любой способ доставки молекулы нуклеиновой кислоты (in vitro или in vivo) может быть адаптирован для применения с iRNA согласно настоящему изобретению (см., например, Akhtar S. and Julian R.L. (1992), Trends Cell. Biol. 2(5):139-144 и WO 94/02595, которые включены в данный документ при помощи ссылки в полном их объеме). Что касается доставки in vivo, факторы, которые учитывают в контексте доставки молекулы iRNA, включают, например, биологическую стабильность доставляемой молекулы, предупреждение неспецифических эффектов и накопление доставляемой молекулы в целевой ткани.
Неспецифические эффекты iRNA могут быть сведены к минимуму путем локального введения, например путем прямой инъекции или вживления в ткань, или местного введения препарата. Локальное введение в место обработки максимально увеличивает локальную концентрацию средства, ограничивает воздействие средства на системные ткани, которые в ином случае могут быть повреждены средством или которые могут разрушить средство, и позволяет вводить более низкую общую дозу молекулы iRNA. Из результатов нескольких исследований виден эффективный нокдаун генных продуктов при введении iRNA локально. Например, было показано, что внутриглазная доставка dsRNA к VEGF как путем инъекции в стекловидное тело макаков-крабоедов (Tolentino, M.J., et al. (2004), Retina 24:132-138), так и субретинальных инъекций мышам (Reich, S.J., et al. (2003), Mol. Vis. 9:210-216) предупреждает неоваскуляризацию в экспериментальной модели возрастной макулярной дистрофии. Кроме того, непосредственная внутриопухолевая инъекция dsRNA мышам уменьшает размер опухоли (Pille, J., et al. (2005), Mol. Ther. 11:267-274) и может продлевать время жизни мышей с опухолями (Kim, W.J., et al. (2006), Mol. Ther. 14:343-350; Li, S., et al. (2007), Mol. Ther. 15:515-523). Было показано, что РНК-интерференция также успешна при локальной доставке к CNS путем непосредственной инъекции (Dorn, G., et al. (2004), Nucleic Acids, 32:e49; Tan, P.H., et al. (2005), Gene Ther. 12:59-66; Makimura, H., et al. (2002), BMC Neurosci. 3:18; Shishkina, G.T., et al. (2004), Neuroscience 129:521-528; Thakker, E.R., et al. (2004), Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 101:17270-17275; Akaneya, Y., et al. (2005), J. Neurophysiol. 93:594-602) и к легким путем интраназального введения (Howard, К.А., et al. (2006), Mol. Ther. 14:476-484; Zhang, X., et al. (2004), J. Biol. Chem. 279:10677-10684; Bitko, V., et al. (2005), Nat. Med. 11:50-55). Что касается системного введения iRNA для лечения заболевания, то РНК может быть модифицирована или, альтернативно, доставлена при помощи системы доставки лекарственного средства; оба способа служат для предупреждения быстрого разрушения dsRNA эндо- и экзонуклеазами in vivo. Модификация РНК или фармацевтический носитель также могут делать возможным нацеливание композиции с iRNA на целевую ткань, и с их помощью можно избежать нежелательных нецелевых эффектов. Молекулы iRNA можно модифицировать при помощи химического конъюгирования с липофильными группами, такими как холестерин, для повышения поглощения клеткой и предупреждения разрушения. Например, направленную против АроВ iRNA, конъюгированную с липофильным фрагментом, представляющим собой холестерин, системно вводили мышам, что приводило к нокдауну мРНК ароВ как в печени, так и в тонкой кишке (Soutschek, J., et al. (2004), Nature, 432:173-178). Как было показано, конъюгация iRNA с аптамером ингибирует рост опухоли и опосредует регресс опухоли на мышиных моделях рака предстательной железы (McNamara, J.O., et al. (2006), Nat. Biotechnol. 24:1005-1015). В альтернативном варианте осуществления iRNA можно доставлять с помощью систем доставки лекарственных средств, таких как наночастица, дендример, полимер,
- 29 037115 липосомы или катионная система доставки. Положительно заряженные катионные системы доставки способствуют связыванию молекулы iRNA (отрицательно заряженной), а также увеличивают взаимодействия на отрицательно заряженной клеточной мембране с обеспечением эффективного поглощения iRNA клеткой. Катионные липиды, дендримеры или полимеры могут быть либо связанными с iRNA, либо на них воздействуют для образования пузырька или мицеллы (см., например, Kim S.H., et al. (2008), Journal of Controlled Release 129(2):107-116), которые заключают в себя iRNA. Образование везикул или мицелл также предупреждает разрушение iRNA при системном введении. Способы получения и введения катионных комплексов с iRNA находятся в пределах квалификации специалистов в данной области (см., например, Sorensen, D.R., et al. (2003), J. Mol. Biol 327:761-766; Verma, U.N., et al. (2003), Clin. Cancer Res. 9:1291-1300; Arnold, A.S. et al. (2007), J. Hypertens. 25:197-205, которые включены в данный документ при помощи ссылки в полном их объеме). Некоторые неограничивающие примеры систем доставки лекарственных средств, пригодных для системной доставки iRNA, включают DOTAP (Sorensen, D.R., et al. (2003), выше; Verma, U.N., et al. (2003), выше), олигофектамин, твердые частицы с нуклеиновой кислотой-липидом (Zimmermann, T.S., et al. (2006), Nature, 441:111-114), кардиолипин (Chien, P.Y., et al. (2005), Cancer Gene Ther. 12:321-328; Pal, A., et al. (2005), Int. J. Oncol. 26:1087-1091), полиэтиленимин (Bonnet M.E., et al. (2008), Pharm. Res. электронная публикация перед печатью 16 августа; Aigner, A. (2006), J. Biomed. Biotechnol. 71659), содержащие Arg-Gly-Asp (RGD) пептиды (Liu, S. (2006), Mol. Pharm. 3:472-487) и полиамидоамины (Tomalia, D.A., et al. (2007), Biochem. Soc. Trans. 35:6167; Yoo, H., et al. (1999), Pharm. Res. 16:1799-1804). В некоторых вариантах осуществления iRNA образует комплекс с циклодекстрином для системного введения. Способы введения и фармацевтические композиции с iRNA и циклодекстринами можно найти в патенте США № 7427605, который включен в данный документ при помощи ссылки в полном его объеме. Кодируемые вектором iRNA согласно настоящему изобретению iRNA, целенаправленно воздействующая на ген НАО1, может экспрессироваться из транскрипционных единиц, вставленных в ДНК-или РНК-векторы (см., например, Couture, A., et al., TIG. (1996), 12:5-10; Skillern, A., et al., международную публикацию согласно PCT № WO 00/22113, Conrad, международную публикацию согласно РСТ № WO 00/22114 и Conrad, патент США № 6054299). Экспрессия может быть временной (приблизительно от часов до недель) или длительной (от недель до месяцев или дольше) в зависимости от конкретной применяемой конструкции и целевых ткани или типа клеток. Такие трансгены можно вводить в виде линейной конструкции, кольцевой плазмиды или вирусного вектора, который может быть интегрирующим или неинтегрирующим вектором. Трансгены также могут быть сконструированы с возможностью наследования их в виде экстрахромосомной плазмиды (Gassmann, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA (1995), 92:1292).
Отдельные нить или нити iRNA могут транскрибироваться с промотора вектора экспрессии. В целевую клетку можно совместно вводить два отдельных вектора экспрессии (например, путем трансфекции или инфицирования) для экспрессии двух отдельных нитей с получением, например, dsRNA. В альтернативном случае, каждая отдельная нить dsRNA может транскрибироваться с участием промоторов, оба из которых расположены в одной и той же плазмиде экспрессии. В одном варианте осуществления dsRNA экспрессируется в виде полинуклеотидов с инвертированным повтором, соединенных линкерной полинуклеотидной последовательностью так, что dsRNA имеет структуру типа стебель-петля.
Векторы экспрессии iRNA, как правило, являются ДНК-плазмидами или вирусными векторами. Векторы экспрессии, совместимые с эукариотическими клетками, предпочтительно совместимые с клетками позвоночных, можно использовать для получения рекомбинантных конструкций для экспрессии iRNA, которая описана в данном документе. Векторы экспрессии для эукариотических клеток хорошо известны в уровне техники и доступны из ряда коммерческих источников. Как правило, предусмотрено, что такие векторы содержат удобные сайты рестрикции для вставки необходимого сегмента нуклеиновой кислоты. Доставка векторов, экспрессирующих iRNA, может быть системной, как, например, путем внутривенного или внутримышечного введения, путем введения в целевые клетки, эксплантированные от пациента, с последующим обратным введением пациенту или путем любого другого способа, который обеспечивает возможность введения в необходимую целевую клетку.
Целевые клетки можно трансфицировать плазмидами экспрессии iRNA в виде комплекса с носителями-катионными липидами (например, олигофектамином) или носителями на основе некатионных липидов (например, Transit-TKO™). В настоящем изобретением также рассматриваются множественные трансфекции при помощи липидов для типов iRNA-опосредованного нокдауна, нацеленных на различные участки целевой РНК, на протяжении недели или более. Успешное введение векторов в клеткихозяева можно контролировать при помощи разнообразных известных способов. Например, временную трансфекцию можно выявить при помощи репортера, такого как флуоресцентный маркер, например зеленый флуоресцентный белок (GFP). Стабильная трансфекция клеток ex vivo может быть подтверждена с применением маркеров, которые обеспечивают устойчивость трансфицированной клетки к определенным факторам окружающей среды (например, антибиотикам и лекарственным средствам), как, например, устойчивость к гигромицину В.
Системы вирусных векторов, которые можно использовать со способами и композициями, описанными в данном документе, включают без ограничения (а) аденовирусные векторы; (b) ретровирусные
- 30 037115 векторы, в том числе без ограничения лентивирусные векторы, вирус мышиного лейкоза Молони и т.д.; (с) векторы на основе аденоассоциированного вируса; (d) векторы на основе вируса простого герпеса; (е) векторы на основе SV40; (f) векторы на основе вируса полиомы; (g) векторы на основе вируса папилломы; (h) векторы на основе пикорнавируса; (i) векторы на основе поксвируса, такого как ортопокс, например векторы на основе вируса осповакцины, или авипокс, например канарипокс или оспы кур; и (j) хелпер-зависимый или слабый аденовирус. Также преимущественными могут быть вирусы с нарушенной репликацией. Различные векторы будут встраиваться в геном клеток или не будут встраиваться в геном клеток. При необходимости, конструкции могут включать последовательности вирусов для трансфекции. В качестве альтернативы конструкция может быть включена в векторы, способные к эписомальной репликации, например векторы на основе EPV и EBV. В конструкциях для рекомбинантной экспрессии iRNA, как правило, будут необходимы регуляторные элементы, например промоторы, энхансеры и т. д., для обеспечения экспрессии iRNA в целевых клетках. Другие аспекты, учитываемые в отношении векторов и конструкций, дополнительно описаны ниже.
Векторы, пригодные для доставки iRNA, будут включать регуляторные элементы (промотор, энхансер и т. д.), достаточные для экспрессии iRNA в необходимой целевой клетке или ткани. Регуляторные элементы можно выбирать для получения либо конститутивной, либо регулируемой/индуцибельной экспрессии.
Экспрессия iRNA может быть точно регулируемой, например, путем использования индуцибельной регуляторной последовательности, которая чувствительна к определенным физиологическим регуляторам, например уровням глюкозы в крови или гормонам (Docherty et al., 1994, FASEB J. 8:20-24). Такие индуцибельные экспрессирующие системы, подходящие для управления экспрессией dsRNA в клетках или у млекопитающих, включают, например, регулирование при помощи экдизона, при помощи эстрогена, прогестерона, тетрациклина, химических индукторов димеризации и изопропил-бета-Э1тиогалактопиранозида (IPTG). Специалист в данной области сможет выбрать соответствующую регуляторную/промоторную последовательность, опираясь на предполагаемое использование трансгена iRNA.
Можно использовать вирусные векторы, которые содержат последовательности нуклеиновых кислот, кодирующие iRNA.
Например, можно использовать ретровирусный вектор (см. Miller et al., Meth. Enzymol. 217:581-599 (1993)). Данные ретровирусные векторы содержат компоненты, необходимые для правильной упаковки вирусного генома и интеграции в ДНК клетки-хозяина. Последовательности нуклеиновых кислот, кодирующие iRNA, клонируют в один или несколько векторов, которые облегчают доставку нуклеиновой кислоты пациенту. Более подробное описание ретровирусных векторов можно найти, например, в Boesen et al., Biotherapy, 6:291-302 (1994), в котором описано применение ретровирусного вектора для доставки гена mdr1 к гемопоэтическим стволовым клеткам для придания стволовым клеткам лучшей устойчивости к химиотерапии. Другими источниками, иллюстрирующими применение ретровирусных векторов в генной терапии, являются: Clowes et al., J. Clin. Invest. 93:644-651 (1994); Kiem et al., Blood 83:1467-1473 (1994); Salmons and Gunzberg, Human Gene Therapy 4:129-141 (1993); и Grossman and Wilson, Curr. Opin. in Genetics and Devel. 3:110-114 (1993). Лентивирусные векторы, предусматриваемые для применения, включают, например, векторы на основе HIV, описанные в патентах США № 6143520; 5665557 и 5981276, которые включены в данный документ при помощи ссылки.
Также для применения в доставке iRNA согласно настоящему изобретению предусматриваются аденовирусы. Аденовирусы представляют собой особенно перспективные проводники, например, для доставки генов в респираторный эпителий. Аденовирусы естественным образом инфицируют респираторный эпителий, где они вызывают заболевание с легким течением. Другими мишенями для систем доставки на основе аденовирусов являются печень, центральная нервная система, эндотелиальные клетки и мышца. Аденовирусы обладают преимуществом в том, что способны инфицировать неделящиеся клетки. В Kozarsky and Wilson, Current Opinion in Genetics and Development 3:499-503 (1993) представлена обзорная статья о генной терапии на основе аденовирусов. В Bout et al., Human Gene Therapy 5:3-10 (1994) было показано применение аденовирусных векторов для переноса генов в респираторный эпителий макакрезус. Другие примеры применения аденовирусов в генной терапии можно найти в Rosenfeld et al., Science, 252:431-434 (1991); Rosenfeld et al., Cell, 68:143-155 (1992); Mastrangeli et al., J. Clin. Invest. 91:225-234 (1993); публикации согласно PCT WO 94/12649; и Wang, et al., Gene Therapy, 2:775-783 (1995). Подходящий AV-вектор для экспрессии iRNA, описанной в настоящем изобретении, способ конструирования рекомбинантного AV-вектора и способ доставки вектора в целевые клетки описаны в Xia H. et al. (2002), Nat. Biotech. 20:1006-1010.
Векторы на основе аденоассоциированного вируса (AAV) также можно использовать для доставки iRNA согласно настоящему изобретению (Walsh et al., Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 204:289-300 (1993); патент США № 5436146). В одном варианте осуществления iRNA может экспрессироваться в виде двух отдельных комплементарных однонитевых молекул РНК при помощи рекомбинантного AAV-вектора, например, либо с РНК-промоторами, U6 или H1, либо с промотором цитомегаловируса (CMV). Подходящие AAV-векторы для экспрессии dsRNA, описанной в настоящем изобретении, способы конструирования рекомбинантного AAV-вектора и способы доставки векторов в целевые клетки описаны в
- 31 037115
Samulski R. et al. (1987), J. Virol. 61:3096-3101; Fisher K.J. et al. (1996), J. Virol, 70:520-532; Samulski R. et al. (1989), J. Virol. 63: 3822-3826; патенте США № 5252479; патенте США № 5139941; международной заявке на патент № WO 94/13788 и международной заявке на патент № WO 93/24641, полное раскрытие которых включено в данный документ при помощи ссылки.
Другой вирусный вектор, подходящий для доставки iRNA согласно настоящему изобретению, представляет собой поксвирус, такой как вирус осповакцины, например аттенуированный вирус осповакцины, как, например, модифицированный вирус Анкара (MVA) или NYVAC, авипокс, как, например, оспа кур или канарипокс.
В случае необходимости тропизм вирусных векторов может быть модифицирован путем псевдотипирования векторов белками оболочки или другими поверхностными антигенами из других вирусов или путем замещения различных вирусных капсидных белков. Например, лентивирусные векторы можно подвергать псевдотипированию поверхностными белками из вируса везикулярного стоматита (VSV), вируса бешенства, вируса Эбола, вируса Мокола и т.п. AAV-векторы можно получать для нацеливания на различные клетки путем построения векторов так, чтобы они экспрессировали различные серотипы капсидных белков; см., например, Rabinowitz J.E. et al. (2002), J. Virol. 76:791-801, полное раскрытие которого включено в данный документ при помощи ссылки.
Фармацевтический препарат на основе вектора может включать вектор в приемлемом разбавителе или может включать матрицу замедленного высвобождения, в которую включено средство доставки генов. В качестве альтернативы в случае, когда вектор доставки целого гена может вырабатываться нативно рекомбинантными клетками, например ретровирусными векторами, тогда фармацевтический препарат может включать одну или несколько клеток, которые вырабатывают систему доставки генов.
IV. Фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению
Настоящее изобретение также включает фармацевтические композици.и и составы, которые включают iRNA согласно настоящему изобретению. В одном варианте осуществления в данном документе предусмотрены фармацевтические композиции, содержащие iRNA, которые описаны в данном документе, и фармацевтически приемлемый носитель. Фармацевтические композиции, содержащие iRNA, являются применимыми для лечения ассоциированного с НАО1 заболевания или нарушения. Такие фармацевтические композиции составляют в зависимости от способа доставки.
Фармацевтические композиции, содержащие средства для RNAi согласно настоящему изобретению, могут быть, например, растворами с буфером или без него или композициями, содержащими фармацевтически приемлемые носители. Такие композиции включают, например, водные или кристаллические композиции, липосомные составы, мицеллярные составы, эмульсии и векторы для генной терапии.
В способах согласно настоящему изобретению средство для RNAi можно вводить в растворе. Свободное средство для RNAi можно вводить в небуферном растворе, например в солевом растворе или в воде. В качестве альтернативы свободную siRNA также можно вводить в подходящем буферном растворе. Буферный раствор может предусматривать ацетат, цитрат, проламин, карбонат или фосфат или любую их комбинацию. В одном варианте осуществления буферный раствор представляет собой забуференный фосфатом солевой раствор (PBS). рН и осмолярность буферного раствора, содержащего средство для RNAi, можно корректировать, с тем чтобы он подходил для введения субъекту.
В некоторых вариантах осуществления буферный раствор дополнительно содержит средство для регулирования осмолярности раствора, так что осмолярность поддерживается при необходимом значении, например при физиологических значениях плазмы крови человека. Растворенные вещества, которые можно добавлять к буферному раствору для регулирования осмолярности, включают без ограничения белки, пептиды, аминокислоты, не поддающиеся метаболизму полимеры, витамины, ионы, сахара, метаболиты, органические кислоты, липиды или соли. В некоторых вариантах осуществления средство для регулирования осмолярности раствора представляет собой соль. В определенных вариантах осуществления средство для регулирования осмолярности раствора представляет собой хлорид натрия или хлорид калия.
Фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению можно вводить в дозах, достаточных для ингибирования экспрессии гена HAO1.
Дозы.
Как правило, приемлемая доза iRNA согласно настоящему изобретению будет находиться в диапазоне от приблизительно 0,001 до приблизительно 200,0 мг/кг веса тела реципиента в сутки, как правило, в диапазоне от приблизительно 0,1 до 10 или от 1 до 50 мг/кг веса тела в сутки. Например, dsRNA можно вводить в количестве приблизительно 0,01 мг/кг, приблизительно 0,05 мг/кг, приблизительно 0,5 мг/кг, приблизительно 1 мг/кг, приблизительно 1,5 мг/кг, приблизительно 2 мг/кг, приблизительно 3 мг/кг, приблизительно 4 мг/кг, приблизительно 5 мг/кг, приблизительно 6 мг/кг, приблизительно 7 мг/кг, приблизительно 8 мг/кг, приблизительно 9 мг/кг приблизительно 10 мг/кг, приблизительно 20 мг/кг, приблизительно 30 мг/кг, приблизительно 40 мг/кг или приблизительно 50 мг/кг за однократную дозу.
В другом варианте осуществления средство для RNAi, например dsRNA, вводят в дозе от приблизительно 0,1 до приблизительно 50 мг/кг, от приблизительно 0,25 до приблизительно 50 мг/кг, от приблизительно 0,5 до приблизительно 50 мг/кг, от приблизительно 0,75 до приблизительно 50 мг/кг,
- 32 037115 от приблизительно 1 до приблизительно 50 мг/кг, от приблизительно 1,5 до приблизительно 50 мг/кг, от приблизительно 2 до приблизительно 50 мг/кг, от приблизительно 2,5 до приблизительно 50 мг/кг, от приблизительно 3 до приблизительно 50 мг/кг, от приблизительно 3,5 до приблизительно 50 мг/кг, от приблизительно 4 до приблизительно 50 мг/кг, от приблизительно 4,5 до приблизительно 50 мг/кг, от приблизительно 5 до приблизительно 50 мг/кг, от приблизительно 7,5 до приблизительно 50 мг/кг, от приблизительно 10 до приблизительно 50 мг/кг, от приблизительно 15 до приблизительно 50 мг/кг, от приблизительно 20 до приблизительно 50 мг/кг, от приблизительно 20 до приблизительно 50 мг/кг, от приблизительно 25 до приблизительно 50 мг/кг, от приблизительно 25 до приблизительно 50 мг/кг, от приблизительно 30 до приблизительно 50 мг/кг, от приблизительно 35 до приблизительно 50 мг/кг, от приблизительно 40 до приблизительно 50 мг/кг, от приблизительно 45 до приблизительно 50 мг/кг, от приблизительно 0,1 до приблизительно 45 мг/кг, от приблизительно 0,25 до приблизительно 45 мг/кг, от приблизительно 0,5 до приблизительно 45 мг/кг, от приблизительно 0,75 до приблизительно 45 мг/кг, от приблизительно 1 до приблизительно 45 мг/кг, от приблизительно 1,5 до приблизительно 45 мг/кг, от приблизительно 2 до приблизительно 45 мг/кг, от приблизительно 2,5 до приблизительно 45 мг/кг, от приблизительно 3 до приблизительно 45 мг/кг, от приблизительно 3,5 до приблизительно 45 мг/кг, от приблизительно 4 до приблизительно 45 мг/кг, от приблизительно 4,5 до приблизительно 45 мг/кг, от приблизительно 5 до приблизительно 45 мг/кг, от приблизительно 7,5 до приблизительно 45 мг/кг, от приблизительно 10 до приблизительно 45 мг/кг, от приблизительно 15 до приблизительно 45 мг/кг, от приблизительно 20 до приблизительно 45 мг/кг, от приблизительно 20 до приблизительно 45 мг/кг, от приблизительно 25 до приблизительно 45 мг/кг, от приблизительно 25 до приблизительно 45 мг/кг, от приблизительно 30 до приблизительно 45 мг/кг, от приблизительно 35 до приблизительно 45 мг/кг, от приблизительно 40 до приблизительно 45 мг/кг, от приблизительно 0,1 до приблизительно 40 мг/кг, от приблизительно 0,25 до приблизительно 40 мг/кг, от приблизительно 0,5 до приблизительно 40 мг/кг, от приблизительно 0,75 до приблизительно 40 мг/кг, от приблизительно 1 до приблизительно 40 мг/кг, от приблизительно 1,5 до приблизительно 40 мг/кг, от приблизительно 2 до приблизительно 40 мг/кг, от приблизительно 2,5 до приблизительно 40 мг/кг, от приблизительно 3 до приблизительно 40 мг/кг, от приблизительно 3,5 до приблизительно 40 мг/кг, от приблизительно 4 до приблизительно 40 мг/кг, от приблизительно 4,5 до приблизительно 40 мг/кг, от приблизительно 5 до приблизительно 40 мг/кг, от приблизительно 7,5 до приблизительно 40 мг/кг, от приблизительно 10 до приблизительно 40 мг/кг, от приблизительно 15 до приблизительно 40 мг/кг, от приблизительно 20 до приблизительно 40 мг/кг, от приблизительно 20 до приблизительно 40 мг/кг, от приблизительно 25 до приблизительно 40 мг/кг, от приблизительно 25 до приблизительно 40 мг/кг, от приблизительно 30 до приблизительно 40 мг/кг, от приблизительно 35 до приблизительно 40 мг/кг, от приблизительно 0,1 до приблизительно 30 мг/кг, от приблизительно 0,25 до приблизительно 30 мг/кг, от приблизительно 0,5 до приблизительно 30 мг/кг, от приблизительно 0,75 до приблизительно 30 мг/кг, от приблизительно 1 до приблизительно 30 мг/кг, от приблизительно 1,5 до приблизительно 30 мг/кг, от приблизительно 2 до приблизительно 30 мг/кг, от приблизительно 2,5 до приблизительно 30 мг/кг, от приблизительно 3 до приблизительно 30 мг/кг, от приблизительно 3,5 до приблизительно 30 мг/кг, от приблизительно 4 до приблизительно 30 мг/кг, от приблизительно 4,5 до приблизительно 30 мг/кг, от приблизительно 5 до приблизительно 30 мг/кг, от приблизительно 7,5 до приблизительно 30 мг/кг, от приблизительно 10 до приблизительно 30 мг/кг, от приблизительно 15 до приблизительно 30 мг/кг, от приблизительно 20 до приблизительно 30 мг/кг, от приблизительно 20 до приблизительно 30 мг/кг, от приблизительно 25 до приблизительно 30 мг/кг, от приблизительно 0,1 до приблизительно 20 мг/кг, от приблизительно 0,25 до приблизительно 20 мг/кг, от приблизительно 0,5 до приблизительно 20 мг/кг, от приблизительно 0,75 до приблизительно 20 мг/кг, от приблизительно 1 до приблизительно 20 мг/кг, от приблизительно 1,5 до приблизительно 20 мг/кг, от приблизительно 2 до приблизительно 20 мг/кг, от приблизительно 2,5 до приблизительно 20 мг/кг, от приблизительно 3 до приблизительно 20 мг/кг, от приблизительно 3,5 до приблизительно 20 мг/кг, от приблизительно 4 до приблизительно 20 мг/кг, от приблизительно 4,5 до приблизительно 20 мг/кг, от приблизительно 5 до приблизительно 20 мг/кг, от приблизительно 7,5 до приблизительно 20 мг/кг, от приблизительно 10 до приблизительно 20 мг/кг или от приблизительно 15 до приблизительно 20 мг/кг. Значения и диапазоны, промежуточные по отношению к перечисленным значениям, также подразумеваются как часть настоящего изобретения.
К примеру, средство для RNAi, например dsRNA, можно вводить в дозе приблизительно 0,01, 0,02, 0,03, 0,04, 0,05, 0,06, 0,07, 0,08, 0,09, 0,1, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,8, 0,9, 1,0, 1,1, 1,2, 1,3, 1,4, 1,5, 1,6, 1,7,
1,8, 1,9, 2,0, 2,1, 2,2, 2,3, 2,4, 2,5, 2,6, 2,7, 2,8, 2,9, 3,0, 3,1, 3,2, 3,3, 3,4, 3,5, 3,6, 3,7, 3,8, 3,9, 4,0, 4,1, 4,2, 4,3,
4,4, 4,5, 4,6, 4,7, 4,8, 4,9, 5,0, 5,1, 5,2, 5,3, 5,4, 5,5, 5,6, 5,7, 5,8, 5,9, 6,0, 6,1, 6,2, 6,3, 6,4, 6,5, 6,6, 6,7, 6,8, 6,9,
7,0, 7,1, 7,2, 7,3, 7,4, 7,5, 7,6, 7,7, 7,8, 7,9, 8,0, 8,1, 8,2, 8,3, 8,4, 8,5, 8,6, 8,7, 8,8, 8,9, 9,0, 9,1, 9,2, 9,3, 9,4, 9,5,
9,6, 9,7, 9,8, 9,9, 10, 10,5, 11, 11,5, 12, 12,5, 13, 13,5, 14, 14,5, 15, 15,5, 16, 16,5, 17, 17,5, 18, 18,5, 19, 19,5, 20, 20,5, 21, 21,5, 22, 22,5, 23, 23,5, 24, 24,5, 25, 25,5, 26, 26,5, 27, 27,5, 28, 28,5, 29, 29,5, 30, 31, 32, 33, 34, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49 или приблизительно 50 мг/кг. Значения и диапазоны, промежуточные по отношению к перечисленным значениям, также подразумеваются как часть настоящего изобретения.
- 33 037115
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения, например, если двухнитевое средство для RNAi предусматривает модификации (например, один или несколько мотивов с тремя одинаковыми модификациями трех последовательных нуклеотидов, в том числе один такой мотив в сайте расщепления средства или рядом с ним), шесть фосфотиоатных связей и лиганд, то такое средство вводят в дозе от приблизительно 0,01 до приблизительно 0,5 мг/кг, от приблизительно 0,01 до приблизительно 0,4 мг/кг, от приблизительно 0,01 до приблизительно 0,3 мг/кг, от приблизительно 0,01 до приблизительно 0,2 мг/кг, от приблизительно 0,01 до приблизительно 0,1 мг/кг, от приблизительно 0,01 до приблизительно 0,09 мг/кг, от приблизительно 0,01 до приблизительно 0,08 мг/кг, от приблизительно 0,01 до приблизительно 0,07 мг/кг, от приблизительно 0,01 до приблизительно 0,06 мг/кг, от приблизительно 0,01 до приблизительно 0,05 мг/кг, от приблизительно 0,02 до приблизительно 0,5 мг/кг, от приблизительно 0,02 до приблизительно 0,4 мг/кг, от приблизительно 0,02 до приблизительно 0,3 мг/кг, от приблизительно 0,02 до приблизительно 0,2 мг/кг, от приблизительно 0,02 до приблизительно 0,1 мг/кг, от приблизительно 0,02 до приблизительно 0,09 мг/кг, от приблизительно 0,02 до приблизительно 0,08 мг/кг, от приблизительно 0,02 до приблизительно 0,07 мг/кг, от приблизительно 0,02 до приблизительно 0,06 мг/кг, от приблизительно 0,02 до приблизительно 0,05 мг/кг, от приблизительно 0,03 до приблизительно 0,5 мг/кг, от приблизительно 0,03 до приблизительно 0,4 мг/кг, от приблизительно 0,03 до приблизительно 0,3 мг/кг, от приблизительно 0,03 до приблизительно 0,2 мг/кг, от приблизительно 0,03 до приблизительно 0,1 мг/кг, от приблизительно 0,03 до приблизительно 0,09 мг/кг, от приблизительно 0,03 до приблизительно 0,08 мг/кг, от приблизительно 0,03 до приблизительно 0,07 мг/кг, от приблизительно 0,03 до приблизительно 0,06 мг/кг, от приблизительно 0,03 до приблизительно 0,05 мг/кг, от приблизительно 0,04 до приблизительно 0,5 мг/кг, от приблизительно 0,04 до приблизительно 0,4 мг/кг, от приблизительно 0,04 до приблизительно 0,3 мг/кг, от приблизительно 0,04 до приблизительно 0,2 мг/кг, от приблизительно 0,04 до приблизительно 0,1 мг/кг, от приблизительно 0,04 до приблизительно 0,09 мг/кг, от приблизительно 0,04 до приблизительно 0,08 мг/кг, от приблизительно 0,04 до приблизительно 0,07 мг/кг, от приблизительно 0,04 до приблизительно 0,06 мг/кг, от приблизительно 0,05 до приблизительно 0,5 мг/кг, от приблизительно 0,05 до приблизительно 0,4 мг/кг, от приблизительно 0,05 до приблизительно 0,3 мг/кг, от приблизительно 0,05 до приблизительно 0,2 мг/кг, от приблизительно 0,05 до приблизительно 0,1 мг/кг, от приблизительно 0,05 до приблизительно 0,09 мг/кг, от приблизительно 0,05 до приблизительно 0,08 мг/кг или от приблизительно 0,05 до приблизительно 0,07 мг/кг. Значения и диапазоны, промежуточные по отношению к вышеупомянтым значениям, также являются частью настоящего изобретения, например средство для RNAi можно вводить субъекту в дозе, составляющей от приблизительно 0,015 до приблизительно 0,45 мг/кг.
К примеру, средство для RNAi, например средство для RNAi в фармацевтической композиции, можно вводить в дозе, составляющей приблизительно 0,01, 0,0125, 0,015, 0,0175, 0,02, 0,0225, 0,025, 0,0275, 0,03, 0,0325, 0,035, 0,0375, 0,04, 0,0425, 0,045, 0,0475, 0,05, 0,0525, 0,055, 0,0575, 0,06, 0,0625, 0,065, 0,0675, 0,07, 0,0725, 0,075, 0,0775, 0,08, 0,0825, 0,085, 0,0875, 0,09, 0,0925, 0,095, 0,0975, 0,1, 0,125, 0,15, 0,175, 0,2, 0,225, 0,25, 0,275, 0,3, 0,325, 0,35, 0,375, 0,4, 0,425, 0,45, 0,475 или приблизительно 0,5 мг/кг. Значения, промежуточные по отношению к перечисленным значениям, также являются частью настоящего изобретения.
Схемы лечения.
Фармацевтическую композицию можно вводить один раз в день или iRNA можно вводить в виде двух, трех или более частей дозы через определенные интервалы на протяжении дня или даже при помощи непрерывной инфузии или доставки посредством состава с контролируемым высвобождением. В таком случае количество iRNA, содержащееся в каждой части дозы, должно быть соответственно меньше, чтобы обеспечить общую суточную дозу. Единица дозирования также может быть составлена для доставки в течение нескольких дней, например, при помощи традиционного состава с замедленным высвобождением, который предусматривает замедленное высвобождение iRNA в течение периода в несколько дней. Составы с замедленным высвобождением хорошо известны из уровня техники и особенно пригодны для доставки средств в определенный участок, например, их можно применять со средствами согласно настоящему изобретению. В данном варианте осуществления единица дозирования содержит соответствующее количество суточной дозы.
В других вариантах осуществления однократная доза фармацевтических композиций может быть длительного действия, так что последующие дозы вводят с интервалами не более 3, 4 или 5 дней или с интервалами не более 1, 2, 3 или 4 недель. В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения однократную дозу фармацевтических композиций согласно настоящему изобретению вводят один раз в неделю. В других вариантах осуществления настоящего изобретения однократную дозу фармацевтических композиций согласно настоящему изобретению вводят каждые две недели.
Специалисту в данной области будет понятно, что определенные факторы могут влиять на дозу и временные рамки, необходимые для эффективного лечения субъекта, в том числе без ограничения тяжесть заболевания или нарушения, типы предшествующего лечения, общее состояние здоровья и/или возраст субъекта и другие имеющиеся заболевания. Кроме того, лечение субъекта терапевтически эффективным количеством композиции может включать один период лечения или серию периодов лече- 34 037115 ния. Расчеты эффективных доз и времени полужизни in vivo для отдельных iRNA, охваченных настоящим изобретением, можно проводить с применением традиционных методик.
Расчеты эффективных доз и времени полужизни in vivo для отдельных iRNA, охваченных настоящим изобретением, также можно проводить на основании тестирования in vivo с применением соответствующей животной модели. К примеру, достижения в области генетики мышей обеспечили ряд мышиных моделей для изучения различных заболеваний человека, как, например, нарушения, ассоциированного с экспрессией HAO1. Такие модели можно использовать для проведения тестирования iRNA in vivo, а также для определения терапевтически эффективной дозы. Подходящие мышиные модели известны в данной области и включают, например, животные модели, описанные в данном документе.
Способы введения.
Фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению можно вводить различными путями в зависимости от того, необходимо ли локальное или же системное лечение, и от области, подлежащей обработке. Введение может быть местным (например, при помощи трансдермального пластыря), легочным, например путем ингаляции или инсуффляции порошков или аэрозолей, в том числе при помощи ингалятора; интратрахеальным, интраназальным, эпидермальным и трансдермальным, пероральным или парентеральным. Парентеральное введение включает в себя внутривенную, внутриартериальную, подкожную, внутрибрюшинную или внутримышечную инъекцию или инфузию; субдермальное, например посредством вживленного устройства; или интракраниальное, например интрапаренхиматозное, подоболочечное или интравентрикулярное введение.
iRNA можно доставлять таким образом, чтобы происходило нацеливание на конкретную ткань, такую как печень.
Составы.
Фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению включают без ограничения растворы, эмульсии и содержащие липосомы составы. Такие композиции могут быть получены из ряда компонентов, который включает без ограничения предварительно полученные жидкости, самоэмульгирующиеся твердые вещества и самоэмульгирующиеся полутвердые вещества.
Фармацевтические составы согласно настоящему изобретению, которые в целях удобства могут находиться в виде единичной лекарственной формы, можно получать согласно традиционным техникам, хорошо известным в фармацевтической промышленности. Такие техники включают стадию приведения активных ингредиентов во взаимодействие с фармацевтическим(ми) носителем(ями) или наполнителем(ями). Как правило, составы получают путем равномерного и тщательного приведения активных ингредиентов во взаимодействие с жидкими носителями или мелкоизмельченными твердыми носителями или и теми, и другими, а затем, при необходимости, придания продукту формы.
Композиции согласно настоящему изобретению могут быть составлены в любой из многих возможных лекарственных форм, как, например, без ограничения таблеток, капсул, желатиновых капсул, жидких сиропов, пластичных гелей, суппозиториев и клизм. Композиции согласно настоящему изобретению также могут быть составлены в виде суспензий в водных, неводных или смешанных средах. Водные суспензии дополнительно могут содержать вещества, которые повышают вязкость суспензии, в том числе, например, карбоксиметилцеллюлозу натрия, сорбит и/или декстран. Суспензия также может содержать стабилизаторы.
Композиции согласно настоящему изобретению могут быть составлены для перорального введения; парентерального, интрапаренхиматозного (в головной мозг), подоболочечного, интравентрикулярного или внутрипеченочного введения и/или местного введения.
Композиции и составы для перорального введения включают порошки или гранулы, микрочастицы, наночастицы, суспензии или растворы в воде или неводных средах, капсулы, желатиновые капсулы, пакетики с порошком для приготовления раствора, таблетки или мини-таблетки. Необходимыми могут быть загустители, ароматизирующие вещества, разбавители, эмульгаторы, диспергирующие средства или связующие вещества. В некоторых вариантах осуществления составы для перорального введения являются такими, в которых dsRNA, описанные в настоящем изобретении, вводят в сочетании с одним или несколькими веществами, способствующие проникновению, поверхностно-активными вещества и хелаторами. Подходящие поверхностно-активные вещества включают жирные кислоты и/или их сложные эфиры или соли, желчные кислоты и/или их соли. Подходящие желчные кислоты/соли желчных кислот включают хенодезоксихолевую кислоту (CDCA) и урсодезоксихенодезоксихолевую кислоту (UDCA), холевую кислоту, дегидрохолевую кислоту, дезоксихолевую кислоту, глюкохолевую кислоту, гликохолевую кислоту, гликодезоксихолевую кислоту, таурохолевую кислоту, тауродезоксихолевую кислоту, тауро-24,25-дигидро-фузидат натрия и гликодигидрофузидат натрия. Подходящие жирные кислоты включают арахидоновую кислоту, ундекановую кислоту, олеиновую кислоту, лауриновую кислоту, каприловую кислоту, каприновую кислоту, миристиновую кислоту, пальмитиновую кислоту, стеариновую кислоту, линолевую кислоту, линоленовую кислоту, дикапрат, трикапрат, моноолеин, дилаурин, глицерил-1-монокапрат, 1-додецилазациклогептан-2-он, ацилкарнитин, ацилхолин или моноглицерид, диглицерид или их фармацевтически приемлемую соль (например, натриевую). В некоторых вариантах осуществления используют комбинации веществ, способствующих проникновению, например жирные
- 35 037115 кислоты/соли жирных кислот в комбинации с желчными кислотами/солями желчных кислот. Одной иллюстративной комбинацией является натриевая соль лауриновой кислоты, каприновой кислоты и UDCA. Дополнительные вещества, способствующие проникновению, включают полиоксиэтилен-9-лауриловый эфир, полиоксиэтилен-20-цетиловый эфир. dsRNA, описанные в настоящем изобретении, могут быть доставлены перорально, в форме гранул, в том числе частиц, высушенных распылением, или в комплексе с образованием микро- или наночастиц. Комплексообразующие средства для dsRNA включают полиаминокислоты; полиимины; полиакрилаты; полиалкилакрилаты, полиоксэтаны, полиалкилцианоакрилаты; катионизированные виды желатина, альбумины, виды крахмала, акрилаты, полиэтиленгликоли (PEG) и виды крахмала; полиалкилцианоакрилаты; DEAE-производные полиимины, поллуланы, виды целлюлозы и виды крахмала. Подходящие комплексообразующие средства включают хитозан, N-триметилхитозан, поли-Ь-лизин, полигистидин, полиорнитин, полиспермины, протамин, поливинилпиридин, политиодиэтиламинометилэтилен (PTDAE), полиаминостирол (например, п-амино), поли(метилцианоакрилат), поли(этилцианоакрилат), поли(бутилцианоакрилат), поли(изобутилцианоакрилат), поли(изогексилцианоакрилат), DEAE-метакрилат, DEAE-гексилакрилат, DEAE-акриламид, DEAE-альбумин и DEAE-декстран, полиметилакрилат, полигексилакрилат, поли(D,L-молочную кислоту), сополимер DL-молочной и гликолевой кислот (PLGA), альгинат и полиэтиленгликоль (PEG). Составы для перорального введения для dsRNA и их получение описаны подробно в патенте США № 6887906, публикации США № 20030027780 и патенте США № 6747014, каждый из которых включен в данный документ при помощи ссылки.
Композиции и составы для парентерального, интрапаренхиматозного (в головной мозг), подоболочечного, интравентрикулярного или внутрипеченочного введения могут включать стерильные водные растворы, которые также могут содержать буферы, разбавители и другие соответствующие добавки, такие как без ограничения вещества, способствующие проникновению, соединения-носители и другие фармацевтически приемлемые носители или наполнители.
Фармацевтические композиции и составы для местного введения могут включать трансдермальные пластыри, мази, лосьоны, кремы, гели, капли, суппозитории, распыляемые растворы, жидкости и порошки. Могут быть необходимы или желательны традиционные фармацевтические носители, водные, порошкообразные или масляные основы, загустители и т.п. Также могут быть пригодными презервативы, перчатки с покрытием и т.п. Подходящие составы для местного введения включают составы, в которых iRNA, описанные в настоящем изобретении, находятся в смеси со средством для местной доставки, таким как липиды, липосомы, жирные кислоты, сложные эфиры жирных кислот, стероиды, хелатирующие средства и поверхностно-активные вещества. Подходящие липиды и липосомы включают нейтральные (например, диолеоилфосфатидилэтаноламин (DOPE), димиристоилфосфатидилхолин (DMPC), дистеароилфосфатидилхолин), отрицательные (например, димиристоилфосфатидилглицерин (DMPG)) и катионные (например, диолеилтетраметиламинопропил (DOTAP) и диолеоилфосфатидилэтаноламин (DOTMA)). iRNA, описанные в настоящем изобретении, могут быть инкапсулированы в липосомах или могут образовывать комплексы с ними, в частности с катионными липосомами. В качестве альтернативы iRNA могут образовывать комплексы с липидами, в частности с катионными липидами. Подходящие жирные кислоты и сложные эфиры включают без ограничения арахидоновую кислоту, олеиновую кислоту, эйкозановую кислоту, лауриновую кислоту, каприловую кислоту, каприновую кислоту, миристиновую кислоту, пальмитиновую кислоту, стеариновую кислоту, линолевую кислоту, линоленовую кислоту, дикапрат, трикапрат, моноолеин, дилаурин, глицерил-1-монокапрат, 1-додецилазациклогептан-2он, ацилкарнитин, ацилхолин или сложные С1-20алкиловые эфиры (например, изопропилмиристат (IPM)), моноглицерид, диглицерид или их фармацевтически приемлемую соль. Составы для местного введения подробно описаны в патенте США № 6747014, который включен в данный документ при помощи ссылки.
Составы с iRNA, содержащие мембранные молекулярные ансамбли.
iRNA для применения в композициях и способах согласно настоящему изобретению могут быть составлены для доставки в мембранном молекулярном ансамбле, например липосоме или мицелле. Используемый в данном документе термин липосома относится к везикуле, состоящей из амфифильных липидов, расположенных в виде по меньшей мере одного бислоя, например одного бислоя или множества бислоев. Липосомы включают однослойные и многослойные везикулы, которые имеют мембрану, образованную из липофильного материала, и водную внутреннюю среду. Водная часть содержит композицию с iRNA. Липофильный материал отделяет водную внутреннюю среду от водной внешней среды, которая, как правило, не включает композицию с iRNA, хотя в некоторых примерах может включать. Липосомы пригодны для переноса и доставки активных ингредиентов к участку их действия. Благодаря тому, что мембрана липосомы структурно подобна биологическим мембранам, в случае введения липосом в ткань бислой липосомы сливается с бислоем клеточных мембран. По мере того как идет слияние липосомы и клетки внутреннее водное содержимое, которое включает iRNA, доставляется в клетку, где iRNA может специфически связываться с целевой РНК и может опосредовать RNAi. В некоторых случаях липосомы также являются специфически нацеленными, например, для направления iRNA в конкретные типы клеток.
- 36 037115
Липосомы, содержащие средство для RNAi, могут быть получены рядом способов. В одном примере липидный компонент липосомы растворяют в детергенте для образования мицелл из липидного компонента. Например, липидный компонент может представлять собой амфипатический катионный липид или липидный конъюгат. Детергент может характеризоваться высокой критической концентрацией мицеллообразования и может быть неионным. Иллюстративные детергенты включают холат, CHAPS, октилглюкозид, дезоксихолат и лауроилсаркозин. Препарат средства для RNAi затем добавляют к мицеллам, которые включают липидный компонент. Катионные группы липида взаимодействуют со средством для RNAi и конденсируются вокруг средства для RNAi с образованием липосомы. После конденсации детергент удаляют, например путем диализа, с получением липосомного препарата средства для RNAi.
При необходимости соединение-носитель, которое содействует конденсации, можно добавлять во время реакции конденсации, например, путем контролируемого добавления. Например, соединениеноситель может быть полимером, отличным от нуклеиновой кислоты (например, спермином или спермидином). Также можно корректировать рН для содействия конденсации.
Способы получения стабильных средств доставки полинуклеотидов, которые включают комплекс полинуклеотида/катионного липида в качестве структурных компонентов средств доставки, дополнительно описаны, например, в WO 96/37194, полное содержание которой включено в данный документ при помощи ссылки. Образование липосом может также включать один или несколько аспектов иллюстративных способов, описанных в Feigner, P.L. et al., Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 8:7413-7417, 1987; патенте США № 4897355; патенте США № 5171678; Bangham, et al. M. Mol. Biol. 23:238, 1965; Olson, et al. Biochim. Biophys. Acta 557:9, 1979; Szoka, et al. Proc. Natl. Acad. Sci. 75:4194, 1978; Mayhew, et al. Biochim. Biophys. Acta 775:169, 1984; Kim, et al. Biochim. Biophys. Acta 728:339, 1983; и Fukunaga, et al. Endocrinol. 115:757, 1984. Широко применяемые методики получения липидных агрегатов с размером, подходящим для использования в качестве средств доставки, включают обработку ультразвуком и замораживание-оттаивание с экструзией (см., например, Mayer, et al. Biochim. Biophys. Acta, 858:161, 1986). Микрофлюидизацию можно использовать в тех случаях, когда необходимы стабильно малые (от 50 до 200 нм) и относительно однородные агрегаты (Mayhew, et al. Biochim. Biophys. Acta, 775:169, 1984). Такие способы легко адаптировать для упаковки препаратов средства для RNAi в липосомы.
Липосомы делятся на два больших класса. Катионные липосомы являются положительно заряженными липосомами, которые взаимодействуют с отрицательно заряженными молекулами нуклеиновых кислот с образованием стабильных комплексов. Положительно заряженный комплекс нуклеиновой кислоты/липосомы связывается с отрицательно заряженной клеточной поверхностью и интернализируется в эндосому. Вследствие того, что внутри эндосомы кислый рН, липосомы разрываются, высвобождая свое содержимое в клеточную цитоплазму (Wang et al., Biochem. Biophys. Res. Commun., 1987, 147, 980985).
Липосомы, которые являются рН-чувствительными или отрицательно-заряженными, захватывают нуклеиновые кислоты вместо образования комплекса с ними. Поскольку как нуклеиновая кислота, так и липид имеют одинаковый заряд, то происходит отталкивание вместо образования комплекса. Тем не менее, некоторая часть нуклеиновых кислот захватывается водной внутренней средой этих липосом. рНчувствительные липосомы использовали для доставки нуклеиновых кислот, кодирующих ген тимидинкиназы, в монослои клеток в культуре. Экспрессию экзогенного гена выявляли в целевых клетках (Zhou et al., Journal of Controlled Release, 1992, 19, 269-274).
Один основной тип липосомных композиций включает фосфолипиды, отличные от фосфатидилхолина природного происхождения. Композиции для нейтральных липосом, например, могут быть образованы из димиристоилфосфатидилхолина (DMPC) или дипальмитоилфосфатидилхолина (DPPC). Композиции для анионных липосом, как правило, образованы из димиристоилфосфатидилглицерина, тогда как анионные фузогенные липосомы образованы преимущественно из диолеилфосфатидилэтаноламина (DOPE). Другой тип липосомных композиций образован из фосфатидилхолина (PC), такого как, например, PC соевых бобов и PC яиц. Другой тип образован из смесей фосфолипида, и/или фосфатидилхолина, и/или холестерина.
Примеры других способов для введения липосом в клетки in vitro и in vivo включают патенты США № 5283185; 5171678; WO 94/00569; WO 93/24640; WO 91/16024; Feigner, J. Biol. Chem. 269:2550, 1994; Nabel, Proc. Natl. Acad. Sci. 90:11307, 1993; Nabel, Human Gene Ther. 3:649, 1992; Gershon, Biochem. 32:7143, 1993; и Strauss EMBO J. 11:417, 1992.
Также исследовали неионогенные липосомные системы для определения их пригодности в доставке лекарственных средств в кожу, в частности системы, содержащие неионогенное поверхностно-активное вещество и холестерин. Неионные липосомные составы, содержащие Novasome™ I (глицерилдилаурат/холестерин/полиоксиэтилен-10-стеариловый эфир) и Novasome™ II (глицерилдистеарат/холестерин/полиоксиэтилен-10-стеариловый эфир), использовали для доставки циклоспорина-А в слой дермы кожи мышей. Результаты показали, что такие неионные липосомные системы были эффективны в обеспечении депонирования циклоспорина А в различных слоях кожи (Hu et al. S.Т.P. Pharma. Sci., 1994, 4(6):466).
- 37 037115
Липосомы также включают пространственно стабилизированные липосомы, термин, используемый в данном документе, относится к липосомам, содержащим один или несколько специализированных липидов, которые при включении в липосомы приводят к увеличению времени жизни в кровотоке по сравнению с липосомами, у которых отсутствуют такие специальные липиды. Примерами пространственно стабилизированных липосом являются липосомы, в которых часть образующей везикулу липидной составляющей липосомы (А) содержит один или несколько гликолипидов, таких как моносиалоганглиозид GM1, или (В) получена из одного или нескольких гидрофильных полимеров, таких как полиэтиленгликолевый (PEG) фрагмент. Не желая ограничиваться какой-либо конкретной теорией, в области техники полагают, что по меньшей мере для пространственно стабилизированных липосом, содержащих ганглиозиды, сфингомиелин или PEG-производные липиды, увеличенное время полужизни в кровотоке этих пространственно стабилизированных липосом является следствием сниженной степени поглощения клетками ретикулоэндотелиальной системы (RES) (Allen et al., FEBS Letters, 1987, 223, 42; Wu et al., Cancer Research, 1993, 53, 3765).
Различные липосомы, содержащие один или несколько гликолипидов, известны в уровне техники. Papahadjopoulos et al. (Ann. N.Y. Acad. Sci., 1987, 507, 64) описали способность моносиалоганглиозида GM1, сульфата галактоцереброзида и фосфатидилинозитола увеличивать время полужизни липосом в крови. Эти полученные данные были прокомментированы Gabizon et al. (Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 1988, 85, 6949). В патенте США № 4837028 и WO 88/04924, оба из которых принадлежат Allen et al., раскрыты липосомы, содержащие (1) сфингомиелин и (2) ганглиозид GM1 или сложные эфиры сульфата галактоцереброзида. В патенте США № 5543152 (Webb et al.) раскрыты липосомы, содержащие сфингомиелин. Липосомы, содержащие 1,2-sn- димиристоилфосфатидилхолин, раскрыты в WO 97/13499 (Lim et al).
В одном варианте осуществления применяют катионные липосомы. Преимущество катионных липосом состоит в том, что они способны сливаться с клеточной мембраной. Некатионные липосомы, несмотря на то, что они не могут сливаться настолько эффективно с плазматической мембраной, поглощаются макрофагами in vivo, и их можно использовать для доставки средств для RNAi к макрофагам.
Дополнительные преимущества липосом включают следующее: липосомы, полученные из натуральных фосфолипидов, являются биосовместимыми и биоразрушаемыми; липосомы могут включать широкий диапазон водо- и липидорастворимых лекарственных средств; липосомы могут защищать инкапсулированные средства для RNAi во своих внутренних отделениях от метаболизма и разрушения (Rosoff, в Pharmaceutical Dosage Forms, Lieberman, Rieger and Banker (Eds.), 1988, volume 1, p. 245). Важными факторами, которые необходимо учитывать при получении липосомных составов, являются поверхностный заряд липида, размер везикулы и водный объем липосом.
Положительно заряженный синтетический катионный липид, хлорид N-[1-(2,3-диолеилокси)пропил]-N,N,N-триметиламмония (DOTMA), можно использовать для образования малых липосом, которые самопроизвольно взаимодействуют с нуклеиновой кислотой с образованием комплексов липиднуклеиновая кислота, которые способны сливаться с отрицательно заряженными липидами клеточных мембран клеток культуры тканей, что приводит к доставке средства для RNAi (см., например, Feigner, P.L. et al., Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 8:7413-7417, 1987 и патент США № 4897355 касательно описания DOTMA и его применения с ДНК).
Аналог DOTMA, 1,2-бис-(олеоилокси)-3-(триметиламмоний)пропан (DOTAP), можно применять в комбинации с фосфолипидом с образованием везикул, образующих комплекс с ДНК. Lipofectin™ (Bethesda Research Laboratories, Гейтерсберг, Мэриленд) представляет собой эффективное средство для доставки сильно анионных нуклеиновых кислот в живые клетки культуры тканей, которое содержит положительно заряженные DOTMA-липосомы, которые самопроизвольно взаимодействуют с отрицательно заряженными полинуклеотидами с образованием комплексов. Суммарный заряд полученных комплексов является также положительным в тех случаях, когда используют липосомы с достаточным положительным зарядом. Положительно заряженные комплексы, полученные таким способом, самопроизвольно присоединяются к отрицательно заряженным клеточным поверхностям, сливаются с плазматической мембраной и эффективно доставляют функциональные нуклеиновые кислоты, например, в клетки культуры тканей. Другой коммерчески доступный катионный липид, 1,2-бис-(олеоилокси)-3,3(триметиламмоний)пропан (DOTAP) (Boehringer Mannheim, Индианаполис, Индиана), отличается от DOTMA тем, что олеиловые фрагменты связаны сложноэфирными, а не простыми эфирными связями.
Другие опубликованные соединения с катионными липидами включают такие соединения, которые были конъюгированы с рядом фрагментов, в том числе, например, карбоксиспермин, который был конъюгирован с одним из двух типов липидов и включает такие соединения, как 5-карбоксиспермилглициндиоктаолеоиламид (DOGS) (Transfectam™, Promega, Мэдисон, Висконсин) и дипальмитоилфосфатидилэтаноламина 5-карбоксиспермил-амид (DPPES) (см., например, патент США № 5171678).
Другой конъюгат с катионным липидом предусматривает получение производных липида с помощью холестерина (DC-Chol), которые были составлены в виде липосом в комбинации с DOPE (см.,
- 38 037115
Gao, X. and Huang, L., Biochim. Biophys. Res. Commun. 179:280, 1991). Сообщалось, что липополилизин, полученный путем конъюгирования полилизина с DOPE, является эффективным для трансфекции в присутствии сыворотки крови (Zhou, X. et al., Biochim. Biophys. Acta, 1065:8, 1991). Сообщается, что в случае определенных клеточных линий такие липосомы, содержащие конъюгированные катионные липиды, проявляют более низкую токсичность и обеспечивают более эффективную трансфекцию, чем DOTMAсодержащие композиции. Другие коммерчески доступные продукты с катионными липидами включают DMRIE и DMRIE-HP (Vical, Ла-Хойя, Калифорния) и Lipofectamine (DOSPA) (Life Technology, Inc., Гейтерсберг, Мэриленд). Другие катионные липиды, подходящие для доставки олигонуклеотидов, описаны в WO 98/39359 и WO 96/37194.
Липосомные составы особенно подходят для местного введения, при этом липосомы обладают некоторыми преимуществами по сравнению с другими составами. Такие преимущества включают сниженное побочное действие по отношению к высокой системной абсорбции введенного лекарственного средства, повышенное накопление введенного лекарственного средства в необходимой мишени и возможность вводить средство для RNAi в кожу. В некоторых вариантах осуществления липосомы используют для доставки средства для RNAi к эпидермальным клеткам и также для повышения проникновения средства для RNAi в дермальные ткани, например в кожу. Например, липосомы можно вводить местно. Была описана местная доставка лекарственных средств, составленных в виде липосом, в кожу (см., например, Weiner et al., Journal of Drug Targeting, 1992, vol. 2,405-410 и du Plessis et al., Antiviral Research, 18, 1992, 259-265; Mannino, R.J. и Fould-Fogerite, S., Biotechniques, 6:682-690, 1988; Itani, T. et al. Gene, 56:267-276, 1987; Nicolau, C. et al. Meth. Enz. 149:157-176, 1987; Straubinger, R.M. и Papahadjopoulos, D. Meth. Enz. 101:512-527, 1983; Wang, C.Y. и Huang, L., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 84:7851-7855, 1987).
Также исследовали неионогенные липосомные системы для определения их пригодности в доставке лекарственных средств в кожу, в частности системы, содержащие неионогенное поверхностно-активное вещество и холестерин. Неионные липосомные составы, содержащие Novasome I (глицерилдилаурат/холестерин/полиоксиэтилен-10-стеариловый эфир) и Novasome II (глицерилдистеарат/холестерин/полиоксиэтилен-10-стеариловый эфир), использовали для доставки лекарственного средства в слой дермы кожи мышей. Такие составы со средством для RNAi пригодны для лечения дерматологического нарушения.
Липосомы, которые включают iRNA, могут быть получены с высокой способностью к деформации. Такая деформируемость может позволить липосомам проникать через пору, которая меньше среднего радиуса липосомы. К примеру, типом деформируемых липосом являются трансферосомы. Трансферосомы можно получать путем добавления поверхностных пограничных активаторов, обычно поверхностноактивных веществ, к стандартной липосомной композиции. Трансферосомы, которые включают средство для RNAi, можно доставлять, например, подкожно путем инъекции для доставки средства для RNAi к кератиноцитам в коже. Для того, чтобы пройти через неповрежденную кожу млекопитающего, липидные везикулы должны проникнуть через ряд мелких пор, каждая с диаметром менее 50 нм, под воздействием подходящего трансдермального градиента. Кроме того, благодаря свойствам липидов, такие трансферосомы могут быть самооптимизирующимися (приспосабливающимися к форме пор, например, в коже), самовосстанавливающимися, и, зачастую, могут достигать свои мишени без разделения на фрагменты, и часто могут быть самозагружающимися.
Другие составы, пригодные в настоящем изобретении, описаны в предварительных заявках США с серийными № 61/018616, поданной 2 января 2008 г.; 61/018611, поданной 2 января 2008 г.; 61/039748, поданной 26 марта 2008 г.; 61/047087, поданной 22 апреля 2008 г., и 61/051528, поданной 8 мая 2008 г. В заявке согласно РСТ с № PCT/US2007/080331, поданной 3 октября 2007 г., также описаны составы, применимые в настоящем изобретении.
Трансферосомы представляют собой еще один тип липосом и представляют собой липидные агрегаты с высокой способностью к деформации, они являются перспективными кандидатами в качестве средств доставки лекарственных средств. Трансферосомы могут быть описаны как липидные капельки, которые обладают настолько высокой способностью к деформации, что они легко могут проникать через поры, меньшие, чем капельки. Трансферосомы являются приспосабливающимися к окружающей среде, в которой их используют, например, они являются самооптимизирующимися (приспосабливающимися к форме пор кожи), самовосстанавливающимися, зачастую достигают мишеней без разделения на фрагменты и часто могут быть самозагружающимися. Для получения трансферосом можно добавлять поверхностные пограничные активаторы, обычно поверхностно-активные вещества, к стандартной липосомной композиции. Трансферосомы использовали для доставки сывороточного альбумина в кожу. Как было показано, опосредованная трансферосомами доставка сывороточного альбумина была такой же эффективной, как подкожная инъекция раствора, содержащего сывороточный альбумин.
Поверхностно-активные вещества находят широкое применение в составах, таких как эмульсии (в том числе микроэмульсии) и липосомы. Наиболее распространенным способом классифицирования и ранжирования свойств многих различных типов поверхностно-активных веществ, как естественных, так и синтетических, является применение гидрофильно-липофильного баланса (HLB). Природа гидрофильной группы (также известной как головка) предоставляет наиболее эффективное средство для распре- 39 037115 деления по категориям различных поверхностно-активных веществ, применяемых в составах (Rieger, в
Pharmaceutical Dosage Forms, Marcel Dekker, Inc., New York, N.Y., 1988, p. 285).
Если молекула поверхностно-активного вещества не ионизирована, то ее классифицируют как неионогенное поверхностно-активное вещество. Неионные поверхностно-активные вещества находят широкое применение в фармацевтических и косметических продуктах, и они применимы при широком диапазоне значений рН. Обычно их значения HLB находятся в диапазоне от 2 до приблизительно 18, в зависимости от их структуры. Неионогенные поверхностно-активные вещества включают неионогенные сложные эфиры, такие как сложные эфиры этиленгликоля, сложные эфиры пропиленгликоля, сложные глицериловые эфиры, сложные полиглицериловые эфиры, сложные эфиры сорбитана, сложные эфиры сахарозы и этоксилированные сложные эфиры. Неионогенные алканоамиды и простые эфиры, как, например, этоксилаты жирных спиртов, пропоксилированные спирты и этоксилированные/пропоксилированные блок-сополимеры, также включены в данный класс. Полиоксиэтиленовые поверхностно-активные вещества являются наиболее распространенными представителями класса неионогенных поверхностно-активных веществ.
Если молекула поверхностно-активного вещества несет отрицательный заряд при растворении или диспергировании в воде, то поверхностно-активное вещество классифицируют как анионное. Анионные поверхностно-активные вещества включают карбоксилаты, как, например, омыляющие вещества, ациллактилаты, ациламиды аминокислот, сложные эфиры серной кислоты, такие как алкилсульфаты и этоксилированные алкилсульфаты, сульфонаты, такие как алкилбензолсульфонаты, ацилизетионаты, ацилтаураты, и сульфосукцинаты, и фосфаты. Наиболее важными представителями класса анионных поверхностно-активных веществ являются алкилсульфаты и омыляющие вещества.
Если молекула поверхностно-активного вещества несет положительный заряд при растворении или диспергировании в воде, то поверхностно-активное вещество классифицируют как катионное. Катионные поверхностно-активные вещества включают соли четвертичного аммония и этоксилированные амины. Соли четвертичного аммония являются наиболее используемыми представителями данного класса.
Если молекула поверхностно-активного вещества обладает способностью нести как положительный, так и отрицательный заряд, то поверхностно-активное вещество классифицируют как амфотерное. Амфотерные поверхностно-активные вещества включают производные акриловой кислоты, замещенные алкиламиды, N-алкилбетаины и фосфатиды.
Было рассмотрено использование поверхностно-активных веществ в готовых лекарственных формах, составах и в эмульсиях (Rieger, в Pharmaceutical Dosage Forms, Marcel Dekker, Inc., New York, N.Y., 1988, p. 285).
iRNA для применения в способах согласно настоящему изобретению может также предусматриваться в виде мицеллярных составов. Мицеллы в данном документе определены как конкретный тип молекулярного ансамбля, в котором амфипатические молекулы расположены в виде сферической структуры, так что все гидрофобные части молекул направлены вовнутрь, оставляя гидрофильные части в контакте с окружающей водной фазой. Противоположное расположение имеет место, если окружающая среда гидрофобная.
Смешанный мицеллярный состав, подходящий для доставки через трансдермальные мембраны, может быть получен путем смешивания водного раствора композиции с siRNA, С8-С22-алкилсульфата щелочного металла и мицеллообразующих соединений. Иллюстративные мицеллообразующие соединения включают лецитин, гиалуроновую кислоту, фармацевтически приемлемые соли гиалуроновой кислоты, гликолевую кислоту, молочную кислоту, вытяжку из ромашки, вытяжку из огурца, олеиновую кислоту, линолевую кислоту, линоленовую кислоту, моноолеин, моноолеаты, монолаураты, масло бурачника, масло первоцвета вечернего, ментол, тригидроксиоксохоланил-глицин и его фармацевтически приемлемые соли, глицерин, полиглицерин, лизин, полилизин, триолеин, простые эфиры полиоксиэтилена и их аналоги, простые полидоканол-алкиловые эфиры и их аналоги, хенодезоксихолат, дезоксихолат и их смеси. Мицеллообразующие соединения можно добавлять одновременно или после добавления алкилсульфата щелочного металла. Смешанные мицеллы будут формироваться практически при любом типе смешивания ингредиентов, но для получения мицелл с меньшим размером требуется интенсивное перемешивание.
В одном способе получают первую мицеллярную композицию, которая содержит композицию с siRNA и по меньшей мере алкилсульфат щелочного металла. Первую мицеллярную композицию затем смешивают по меньшей мере с тремя мицеллообразующими соединениями с образованием смешанной мицеллярной композиции. В другом способе мицеллярную композицию получают путем смешивания композиции с siRNA, алкилсульфата щелочного металла и по меньшей мере одного из мицеллообразующих соединений с последующим добавлением оставшихся мицеллообразующих соединений при интенсивном перемешивании.
Фенол и/или м-крезол можно добавлять к смешанной мицеллярной композиции для стабилизации состава и защиты от роста бактерий. В качестве альтернативы фенол и/или м-крезол можно добавлять с мицеллообразующими ингредиентами.
- 40 037115
Изотоническое средство, такое как глицерин, также можно добавлять после образования смешанной мицеллярной композиции.
Для доставки мицеллярного состава в виде распыляемого раствора состав можно поместить в аэрозольный распылитель и распылитель зарядить газомвытеснителем. Г аз-вытеснитель, который пребывает под давлением, находится в жидкой форме в распылителе. Соотношения ингредиентов корректируют так, что водная фаза и фаза газа-вытеснителя становятся единым целым, т.е. присутствует одна фаза. Если присутствуют две фазы, то необходимо встряхнуть распылитель перед распылением порции содержимого, например, через дозирующий клапан. Распыляемая доза фармацевтического средства вытесняется из дозирующего клапана в виде мелкодисперсного распыляемого раствора.
Газы-вытеснители могут включать водородсодержащие хлорфторуглероды, водородсодержащие фторуглероды, простой диметиловый эфир и простой диэтиловый эфир. В определенных вариантах осуществления можно применять HFA 134а (1,1,1,2-тетрафторэтан).
Конкретные концентрации основных ингредиентов могут быть определены при помощи проведения относительно простых экспериментов. Для абсорбции через ротовую полость часто требуется увеличить, например по меньшей мере удвоить или утроить, дозу, предназначенную для инъекции или введения через желудочно-кишечный тракт.
Липидные частицы.
iRNA, например dsRNA, согласно настоящему изобретению могут быть полностью инкапсулированы в липидном составе, например LNP или другой частице нуклеиновая кислота-липид.
Используемый в данном документе термин LNP относится к стабильной частице нуклеиновой кислоты-липида. LNP содержат катионный липид, некатионный липид и липид, который предупреждает агрегацию частиц (например, конъюгат PEG-липид). LNP весьма пригодны для системных применений, поскольку они характеризуются длительным временем жизни в кровотоке после внутривенной (i.v.) инъекции и накапливаются в дистальных участках (например, участках, физически отделенных от места введения). LNP включают pSPLP, которая включает инкапсулированный комплекс конденсирующее средство-нуклеиновая кислота, который изложен в РСТ публикации № WO 00/03683. Частицы согласно настоящему изобретению обычно имеют средний диаметр от приблизительно 50 до приблизительно 150 нм, чаще от приблизительно 60 до приблизительно 130 нм, чаще от приблизительно 70 до приблизительно 110 нм, наиболее часто от приблизительно 70 до приблизительно 90 нм, и они являются практически нетоксичными. Кроме того, нуклеиновые кислоты, когда присутствуют в частицах нуклеиновой кислоты-липида согласно настоящему изобретению, тогда устойчивы в водном растворе к разрушению нуклеазой. Частицы нуклеиновая кислота-липид и способ их получения раскрыты, например, в патентах США №№ 5976567; 5981501; 6534484; 6586410; 6815432; публикации США № 2010/0324120 и публикации согласно РСТ № WO 96/40964.
В одном варианте осуществления соотношение липида и лекарственного средства (соотношение вес/вес) (например, соотношение липида и dsRNA) будет находится в диапазоне от приблизительно 1:1 до приблизительно 50:1, от приблизительно 1:1 до приблизительно 25:1, от приблизительно 3:1 до приблизительно 15:1, от приблизительно 4:1 до приблизительно 10:1, от приблизительно 5:1 до приблизительно 9:1 или от приблизительно 6:1 до приблизительно 9:1. Диапазоны, промежуточные по отношению к перечисленным выше диапазонам, также рассматриваются как часть настоящего изобретения.
Катионный липид может представлять собой, например:
хлорид N,N-диолеил-N,N-диметиламмония (DODAC), бромид N,N-дистеарил-N,N-диметиламмония (DDAB), хлорид N-(I-(2,3-диолеоилокси)пропил)-N,N,N-триметиламмония (DOTAP), хлорид N-(I-(2,3-диолеилокси)пропил)-N,N,N-триметиламмония (DOTMA), N,N-диметил-2,3-диолеилокси)пропиламин (DODMA),
1,2-дилинолеилокси-N,N-диметиламинопропан (DLinDMA),
1,2-дилиноленилокси-N,N-диметиламинопропан (DLenDMA),
1,2-дилинолеилкарбамоилокси-3 -диметиламинопропан (DLin-C-DAP),
1,2-дилинолеилокси-3 -(диметиламино)ацетоксипропан (DLin-DAC),
1,2-дилинолеилокси-3 -морфолинопропан (DLin-MA),
1,2-дилинолеоил-3 -диметиламинопропан(DLinDAP),
1,2-дилинолеилтио-3 -диметиламинопропан (DLin-S-DMA),
-линолеоил-2-линолеилокси-3 -диметиламинопропан (DLin-2-DMAP), хлористую соль 1,2-дилинолеилокси-3-триметиламинопропана (DLin-TMA-Cl), хлористую соль 1,2-дилинолеоил-3-триметиламинопропана (DLin-TAP-Cl), 1,2-дилинолеилокси-3-(N-метилпиперазино)пропан (DLin-MPZ) или 3-(N,N-дилинолеиламино)-1,2-пропандиол (DLinAP), 3-(N,N-диолеиламино)-1,2-пропандиол (DOAP),
- 41 037115
1,2-дилинолеилоксо-3 -(2-N,N-диметиламино)этоксипропан (DLin-EG-DMA),
1,2-дилиноленилокси-N,N-диметиламинопропан (DLinDMA),
2,2-дилинолеил-4-диметиламинометил-[1,3]-диоксолан (DLin-K-DMA) или его аналоги, (3αR,5s,6αS)-N,N-диметил-2,2-ди((9Z,12Z)-октαдека-9,12-диенил)тетрагидро-3αНциклопента[d] [ 1,3]-диоксол-5 -амин (ALN100), (6Z,9Z,28Z,31Z)-гентатриаконта-6,9,28,31-тетраен-19-ил-4-(диметиламино)бутаноат (МС3),
1,1 '-(2-(4-(2-((2-(бис-(2-гидроксидодецил)амино)этил)(2-гидроксидодецил)амино)этил)пиперазин-1 ил)этилазандиил)дидодекан-2-ол (Tech G1) или их смесь.
Катионный липид может содержать от приблизительно 20 до приблизительно 50 мол.% или приблизительно 40 мол.% от общего содержания липидов, присутствующих в частице.
В другом варианте осуществления можно использовать соединение 2,2-дилинолеил-4диметиламиноэтил-[1,3]-диоксолан для получения наночастиц на основе липида-siRNA. Синтез 2,2-дилинолеил-4-диметиламиноэтил-[1,3]-диоксолана описан в международной заявке № PCT/US2009/061897, опубликованной как WO 2010/048536, которая включена в данный документ при помощи ссылки.
В одном варианте осуществления частица на основе липида-siRNA включает 40% 2,2-дилинолеил4-диметиламиноэтил-[1,3]-диоксолана: 10% DSPC: 40% холестерина: 10% PEG-C-DOMG (мольный процент) с размером частиц, составляющим 63,0±20 нм, и соотношением siRNA/липид, составляющим 0,027.
Ионизируемый/некатионный липид может представлять собой анионный липид или нейтральный липид, в том числе без ограничения дистеароилфосфатидилхолин (DSPC), диолеоилфосфатидилхолин (DOPC), дипальмитоилфосфатидилхолин (DPPC), диолеоилфосфатидилглицерин (DOPG), дипальмитоилфосфатидилглицерин (DPPG), диолеоилфосфатидилэтаноламин (DOPE), пальмитоилолеоилфосфатидилхолин (РОРС), пальмитоилолеоилфосфатидилэтаноламин (POPE), диолеоилфосфатидилэтаноламин4-(N-малеимидометил)циклогексан-1 -карбоксилат (DOPE-mal), дипальмитоилфосфатидилэтаноламин (DPPE), димиристоилфосфоэтаноламин (DMPE), дистеароилфосфатидилэтаноламин (DSPE), 16-O-монометил-РЕ, 16-O-диметил-РЕ, 18-1-транс-РЕ, 1-стеароил-2-олеоил-фосфатидилэтаноламин (SOPE), холестерин или их смесь. Некатионный липид может составлять от приблизительно 5 до приблизительно 90, приблизительно 10 или приблизительно 58 мол.%, если холестерин включен, от общего содержания липидов, присутствующих в частице.
Конъюгированный липид, который препятствует агрегации частиц, может представлять собой, например, конъюгат полиэтиленгликоль (PEG)-липид, в том числе без ограничения PEG-диацилглицерин (DAG), PEG-диалкилоксипропил (DAA), PEG-фосфолипид, PEG-церамид (Cer) или их смесь. Конъюгат PEG-DAA может представлять собой, например, PEG-дилаурилоксипропил (Ci2), PEG-димиристоилоксипропил (Ci4), PEG-дипальмитилоксипропил (Ci6) или PEG-дистеарилоксипропил (Ci8). Конъюгированный липид, который предупреждает агрегацию частиц, может составлять от 0 до приблизительно 20 или приблизительно 2 мол.% от общего содержания липидов, присутствующих в частице.
В некоторых вариантах осуществления частица на основе нуклеиновой кислоты-липида дополнительно включает холестерин в количестве, например, от приблизительно 10 до приблизительно 60 или приблизительно 48 мол.% от общего содержания липидов, присутствующих в частице.
В одном варианте осуществления липидоид ND98-4HCl (MW 1487) (см. заявку на выдачу патента США № 12/056230, поданную 26 марта 2008 г., которая включена в данный документ при помощи ссылки), холестерин (Sigma-Aldrich) и PEG-церамид С16 (Avanti Polar Lipids) можно использовать для получения наночастиц на основе липида-dsRNA (т.е. частиц LNP01). Маточные растворы каждого в этаноле могут быть получены следующим образом: ND98, 133 мг/мл; холестерин, 25 мг/мл, PEG-церамид С16, 100 мг/мл. Маточные растворы ND98, холестерина и PEG-церамида С16 можно затем объединять, например, в молярном соотношении 42:48:10. Объединенный липидный раствор можно смешивать с водным раствором dsRNA (например, в ацетате натрия, рН 5) так, чтобы конечная концентрация этанола составляла приблизительно 35-45%, а конечная концентрация ацетата натрия составляла приблизительно 100-300 мМ. Наночастицы на основе липида-dsRNA обычно образуются самопроизвольно при смешивании. В зависимости от необходимого распределения частиц по размеру, полученную смесь наночастиц можно продавливать через поликарбонатную мембрану (например, с отсечением по размеру в 100 нм) с использованием, например, экструдера с термоцилиндром, как, например, Lipex Extruder (Northern Lipids, Inc). В некоторых случаях стадию экструзии можно пропустить. Удаление этанола и одновременная замена буфера могут быть осуществлены, например, при помощи диализа или тангенциальной поточной фильтрации. Буфер можно заменить, например, забуференным фосфатом солевым раствором (PBS) с рН, составляющим приблизительно 7, например рН, составляющим приблизительно 6,9, рН, составляющим приблизительно 7,0, рН, составляющим приблизительно 7,1, рН, составляющим приблизительно 7,2, рН, составляющим приблизительно 7,3, или рН, составляющим приблизительно 7,4. Составы LNP01 описаны, например, в публикации международной заявки № WO 2008/042973, которая настоящим включена при помощи ссылки.
- 42 037115
Дополнительные иллюстративные составы на основе липида-dsRNA описаны в табл. А.
Таблица А
Иллюстративные составы на основе липида-dsRNA
Ионизируемый/катионный липид | Катионный липид/некатионный липид/холестерин/конъюгат PEG- липид Соотношение липид:siRNA | |
DLinDMA/DPPC/холестерин/PEG-eDMA | ||
LNP DL | 1,2-дилиноленилокси-И,N- | |
(57,1/7,1/34,4/1,4) | ||
inDMA | диметиламинопропан (DLinDMA) | липид:siRNA ~ 7:1 |
2,2-дилинолеил-4- | ХТС/0РРС/холестерин/РЕ6-с0МА | |
2-ХТС | диметиламиноэтил-[1,3]- | 57,1/7,1/34,4/1,4 |
диоксолан (ХТС) | липид:siRNA ~ 7:1 | |
2,2-дилинолеил-4- | XTC/DSPC/xonecTepHH/PEG-DMG | |
LNP05 | диметиламиноэтил-[1,3]- | 57,5/7,5/31,5/3,5 |
диоксолан (ХТС) | липид:siRNA ~ 6:1 | |
2,2-дилинолеил-4- | XTC/DSPC/xonecTepHH/PEG-DMG | |
LNP06 | диметиламиноэтил-[1,3]- | 57,5/7,5/31,5/3,5 |
диоксолан (ХТС) | липид:siRNA ~ 11:1 | |
2,2-дилинолеил-4- | XTC/DSPC/xonecTepHH/PEG-DMG | |
LNP07 | диметиламиноэтил-[1,3]- | 60/7,5/31/1,5 |
диоксолан (ХТС) | липид:siRNA ~ 6:1 | |
2,2-дилинолеил-4- | XTC/DSPC/xonecTepHH/PEG-DMG | |
LNP08 | диметиламиноэтил-[1,3]- | 60/7,5/31/1,5 |
диоксолан (ХТС) | липид:siRNA ~ 11:1 | |
2,2-дилинолеил-4- | XTC/DSPC/xonecTepHH/PEG-DMG | |
LNP09 | диметиламиноэтил-[1,3]- | 50/10/38,5/1,5 |
диоксолан (ХТС) (3aR, 5s,6aS)-Ν,Ν-диметил-2,2- | липид:siRNA 10:1 | |
ди ( ( 9Ζ ,12Ζ)-октадека-9,12- | ALN100/DSPC/xonecTepHH/PEG-DMG | |
LNP10 | диенил)тетрагидро-ЗаН- | 50/10/38,5/1,5 |
циклопента[d][1,3]диоксол-5амин (ALN100) | липид:siRNA 10:1 | |
(6Z,9Z,28Z,31Z)-гептатриаконта- | MC-3/DSPC/xonecTepHH/PEG-DMG | |
LNP11 | 6,9,28,31-тетраен-19-ил-4- | 50/10/38,5/1,5 |
(диметиламино)бутаноат (МСЗ) 1,1' - (2-(4-(2-( (2-(бис(2гидроксидодецил)амино)этил)(2гидроксидодецил)амино)этил)пипе | липид:siRNA 10:1 Tech Gl/DSPC/xonecTepHH/PEG-DMG | |
LNP12 | разин-1- ил)этилазанедиил)дидодекан-2-ол (С12-200) | 50/10/38,5/1,5 липид:siRNA 10:1 XTC/DSPC/хол/PEG-DMG |
LNP13 | ХТС | 50/10/38,5/1,5 липид:siRNA: 33:1 MC3/DSPC/xon/PEG-DMG |
LNP14 | МСЗ | 40/15/40/5 липид:siRNA: 11:1 МСЗ/ОЗРС/хол/PEG-DSG/GalNAc-PEG- |
LNP15 | МСЗ | DSG 50/10/35/4,5/0,5 |
- 43 037115
липид:siRNA: 11:1 | ||
LNP16 | МСЗ | МСЗ/DSPC/хол/PEG-DMG 50/10/38,5/1,5 липид:siRNA: 7:1 |
LNP17 | МСЗ | МСЗ/DSPC/хол/PEG-DSG 50/10/38,5/1,5 липид:siRNA: 10:1 |
LNP18 | МСЗ | МСЗ/DSPC/хол/PEG-DMG 50/10/38,5/1,5 липид:s i RNA: 12:1 |
LNP19 | МСЗ | МСЗ/DSPC/хол/PEG-DMG 50/10/35/5 липид:siRNA: 8:1 |
LNP2 0 | МСЗ | МСЗ/DSPC/хол/PEG-DPG 50/10/38,5/1,5 липид:siRNA: 10:1 |
LNP21 | С12-200 | C12-200/DSPC/xon/PEG-DSG 50/10/38,5/1,5 липид:siRNA: 7:1 |
LNP22 | ХТС | ХТС/DSPC/хол/PEG-DSG 50/10/38,5/1,5 липид:siRNA: 10:1 |
Сокращения в табл. А включают следующее: DSPC: дистеароилфосфатидилхолин; DPPC: дипальмитоилфосфатидилхолин; PEG-DMG: PEG-дидимиристоилглицерин (C14-PEG или PEG-C14) (PEG со средней молекулярной массой 2000); PEG-DSG: PEG-дистирилглицерин (C18-PEG или PEG-C18) (PEG со средней молекулярной массой 2000); PEG-cDMA: PEG-карбамоил-1,2-димиристоилоксипропиламин (PEG со средней молекулярной массой 2000).
Составы, содержащие DLinDMA (1,2-дилиноленилокси-ЫП-диметиламинопропан) описаны в международной публикации № WO2009/127060, поданной 15 апреля 2009 г., которая настоящим включена при помощи ссылки.
Составы, содержащие ХТС, описаны, например, в предварительной заявке США с серийным № 61/148366, поданной 29 января 2009 г.; предварительной заявке США с серийным № 61/156851, поданной 2 марта 2009 г.; предварительной заявке США с серийным №, поданной 10 июня 2009 г.; предварительной заявке США с серийным № 61/228373, поданной 24 июля 2009 г.; предварительной заявке США с серийным № 61/239686, поданной 3 сентября 2009 г., и международной заявке № PCT/US2010/022614, поданной 29 января 2010 г., которые настоящим включены при помощи ссылки.
Составы, содержащие МС3, описаны, например, в публикации США № 2010/0324120, поданной 10 июня 2010 г., полное содержание которой настоящим включено при помощи ссылки.
Составы, содержащие ALNY-100, описаны, например, в международной заявке на выдачу патента с номером PCT/US09/63933, поданной 10 ноября 2009 г., которая настоящим включена при помощи ссылки.
Составы, содержащие С12-200, описаны в предварительной заявке США с серийным № 61/175770, поданной 5 мая 2009 г., и международной заявке № PCT/US10/33777, поданной 5 мая 2010 г., которые настоящим включены при помощи ссылки.
Дополнительные составы.
(i) Эмульсии.
Композиции согласно настоящему изобретению могут быть получены и составлены в виде эмульсий. Эмульсии, как правило, являются гетерогенными системами одной жидкости, диспергированной в другой в форме капелек, диаметр которых обычно превышает 0,1 мкм (см., например, Ansel's Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, Allen, LV., Popovich NG., и Ansel HC., 2004, Lippincott Williams & Wilkins (8th ed.), New York, NY; Idson, в Pharmaceutical Dosage Forms, Lieberman, Rieger и Banker (Eds.), 1988, Marcel Dekker, Inc., New York, N.Y., volume 1, p. 199; Rosoff, в Pharmaceutical Dosage Forms, Lieberman, Rieger и Banker (Eds.), 1988, Marcel Dekker, Inc., New York, N.Y., Volume 1, p. 245; Block in Pharmaceutical Dosage Forms, Lieberman, Rieger и Banker (Eds.), 1988, Marcel Dekker, Inc., New York, N.Y., volume 2, p. 335; Higuchi et al., в Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., Easton, Pa., 1985, p. 301). Эмульсии часто представляют собой двухфазные системы, содержащие две
- 44 037115 несмешиваемые жидкие фазы, тщательно перемешанные и диспрегированные одна в другой. Как правило, эмульсии могут быть эмульсиями по типу либо вода в масле (w/o), либо масло в воде (o/w). В тех случаях, когда водная фаза является мелкораспыленной в общем объеме масляной фазы и диспергированной в виде мельчайших капелек в нем, тогда полученную композицию называют эмульсией по типу вода в масле (w/o). В качестве альтернативы, в тех случаях, когда масляная фаза является мелкораспыленной в общем объеме водной фазы и диспергированной в виде мельчайших капелек в нем, тогда полученную композицию называют эмульсией по типу масло в воде (o/w). Эмульсии могут содержать дополнительные компоненты вдобавок к диспергированным фазам и активное лекарственное средство, которое может присутствовать в виде раствора либо в водной фазе, масляной фазе либо как таковое в качестве отдельной фазы. Фармацевтические наполнители, такие как эмульгаторы, стабилизаторы, красители и антиоксиданты, могут присутствовать в эмульсиях при необходимости. Фармацевтические эмульсии также могут представлять собой множественные эмульсии, которые состоят более чем из двух фаз, такие как, например, в случае эмульсий по типу масло в воде в масле (o/w/o) и вода в масле в воде (w/o/w). Такие сложные составы часто обеспечивают определенные преимущества, которые не обеспечивают простые двухкомпонентные эмульсии. Множественные эмульсии, в которых отдельные масляные капельки эмульсии по типу o/w включают маленькие водные капельки, составляют эмульсию по типу w/o/w. Аналогично этому система масляных капелек, заключенная в каплях воды, стабилизированных в масляной диспергирующей фазе, обеспечивает эмульсию по типу o/w/o.
Эмульсии характеризуются малой термодинамической стабильностью либо ее отсутствием. Часто диспергированная или дисперсная фаза эмульсии хорошо диспергирована в дисперсионной или диспергирующей фазе и поддерживается в такой форме при помощи эмульгаторов или вязкости состава. Любая фаза эмульсии может быть полутвердой или твердой, как и в случае подобных эмульсии мазевых основ и кремов. Другие способы стабилизации эмульсий охватывают применение эмульгаторов, которые могут быть включены в любую фазу эмульсии. Эмульгаторы в целом могут быть разделены на четыре категории: синтетические поверхностно-активные вещества, встречающиеся в природе эмульгаторы, абсорбционные основы и тонкодисперсные твердые вещества (см., например, Ansel's Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, Allen, LV., Popovich NG., и Ansel HC., 2004, Lippincott Williams & Wilkins (8th ed.), New York, NY; Idson, в Pharmaceutical Dosage Forms, Lieberman, Rieger и Banker (Eds.), 1988, Marcel Dekker, Inc., New York, N.Y., volume 1, p. 199).
Синтетические поверхностно-активные вещества, также известные как сурфактанты, нашли широкое применение в составе эмульсий, и их рассматривали в литературе (см., например, Ansel's Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, Allen, LV., Popovich NG., и Ansel HC., 2004, Lippincott Williams & Wilkins (8th ed.), New York, NY; Rieger, в Pharmaceutical Dosage Forms, Lieberman, Rieger и Banker (Eds.), 1988, Marcel Dekker, Inc., New York, N.Y., volume 1, p. 285; Idson, в Pharmaceutical Dosage Forms, Lieberman, Rieger и Banker (Eds.), Marcel Dekker, Inc., New York, N.Y., 1988, volume 1, p. 199). Поверхностно-активные вещества обычно являются амфифильными и содержат гидрофильную и гидрофобную части. Соотношение гидрофильной и гидрофобной природы поверхностно-активного вещества называют гидрофильно-липофильным балансом (HLB), и оно является ценным инструментом в распределении на категории и выборе поверхностно-активных веществ при получении составов. Поверхностно-активные вещества можно разделить на различные классы, исходя из природы гидрофильной группы: неионная, анионная, катионная и амфотерная (см., например, Ansel's Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, Allen, L.V., Popovich N.G., и Ansel H.C., 2004, Lippincott Williams & Wilkins (8th ed.), New York, NY Rieger, в Pharmaceutical Dosage Forms, Lieberman, Rieger и Banker (Eds.), 1988, Marcel Dekker, Inc., New York, N.Y., volume 1, p. 285).
Встречающиеся в природе эмульгаторы, используемые в составах эмульсий, включают ланолин, пчелиный воск, фосфатиды, лецитин и гуммиарабик. Абсорбционные основы, такие как безводный ланолин и гидрофильный вазелин, обладают гидрофильными свойствами, так что они могут впитывать воду с образованием эмульсий по типу w/o, при этом сохраняя свою полутвердую консистенцию. Мелкоизмельченные твердые вещества также использовали в качестве подходящих эмульгаторов, в особенности в комбинации с поверхностно-активными веществами и в вязких препаратах. Они включают полярные неорганические твердые вещества, такие как гидроксиды тяжелых металлов, неразбухающие глины, такие как бентонит, аттапульгит, гекторит, каолин, монтмориллонит, коллоидный силикат алюминия и коллоидный алюмосиликат магния, пигменты и неполярные твердые вещества, такие как углерод или глицерила тристеарат.
Большое разнообразие неэмульгирующих материалов также включают в составы эмульсий, и они содействуют свойствам эмульсий. Они включают жиры, масла, воски, жирные кислоты, жирные спирты, сложные эфиры жирных кислот, увлажнители, гидрофильные коллоиды, консерванты и антиоксиданты (Block, в Pharmaceutical Dosage Forms, Lieberman, Rieger и Banker (Eds.), 1988, Marcel Dekker, Inc., New York, N.Y., volume 1, p. 335; Idson, в Pharmaceutical Dosage Forms, Lieberman, Rieger и Banker (Eds.), 1988, Marcel Dekker, Inc., New York, N.Y., volume 1, p. 199).
Гидрофильные коллоиды или гидроколлоиды включают встречающиеся в природе смолы и синтетические полимеры, такие как полисахариды (например, гуммиарабик, агар, альгиновую кислоту, карра- 45 037115 генан, гуаровую камедь, камедь карайи и трагакант), производные целлюлозы (например, карбоксиметилцеллюлозу и карбоксипропилцеллюлозу) и синтетические полимеры (например, карбомеры, простые эфиры целлюлозы и карбоксивиниловые полимеры). Они диспергируются или набухают в воде с образованием коллоидных растворов, которые стабилизируют эмульсии путем образования крепких межфазных пленок вокруг капелек диспергированной фазы и путем повышения вязкости дисперсионной фазы.
Поскольку эмульсии часто содержат некоторое количество ингредиентов, таких как углеводы, белки, стеролы и фосфатиды, которые могут легко поддерживать рост микробов, то такие составы часто включают консерванты. Широко используемые консерванты, включенные в составы эмульсий, включают метилпарабен, пропилпарабен, четвертичные соли аммония, бензалкония хлорид, сложные эфиры пгидроксибензойной кислоты и борную кислоту. Антиоксиданты также обычно добавляют к составам эмульсий для предупреждения ухудшения качества состава. Используемые антиоксиданты могут быть ловушками свободных радикалов, как, например, токоферолы, алкил галлаты, бутилированный гидроксианизол, бутилированный гидрокситолуол, илит восстановителями, такими как аскорбиновая кислота и метабисульфит натрия, и синергистами антиоксидантов, такими как лимонная кислота, винная кислота и лецитин.
Применение составов эмульсий посредством дерматологического, перорального и парентерального путей и способы их получения были рассмотрены в литературе (см., например, Ansel's Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, Allen, L.V., Popovich N.G., и Ansel H.C., 2004, Lippincott Williams & Wilkins (8th ed.), New York, NY; Idson, в Pharmaceutical Dosage Forms, Lieberman, Rieger и Banker (Eds.), 1988, Marcel Dekker, Inc., New York, N.Y., volume 1, p. 199). Составы эмульсий для пероральной доставки очень широко применяют из-за удобства составления, а также с точки зрения эффективности при абсорбции и биодоступности (см., например, Ansel's Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, Allen, L.V., Popovich N.G., и Ansel H.C., 2004, Lippincott Williams & Wilkins (8th ed.), New York, NY; Rosoff, в Pharmaceutical Dosage Forms, Lieberman, Rieger и Banker (Eds.), 1988, Marcel Dekker, Inc., New York, N.Y., volume 1, p. 245; Idson, в Pharmaceutical Dosage Forms, Lieberman, Rieger и Banker (Eds.), 1988, Marcel Dekker, Inc., New York, N.Y., volume 1, p. 199). Слабительные средства на основе минеральных масел, жирорастворимые витамины и питательные препараты с высоким содержанием жира находятся в числе материалов, которые обычно вводят перорально в виде эмульсий по типу o/w.
(ii) Микроэмульсии.
В одном варианте осуществления настоящего изобретения композиции iRNA и нуклеиновых кислот составлены в виде микроэмульсий. Микроэмульсия может быть определена как система воды, масла и амфифильного вещества, которая является отдельным оптически изотропным и термодинамически стабильным жидким раствором (см., например, Ansel's Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, Allen, L.V., Popovich N.G., и Ansel H.C., 2004, Lippincott Williams & Wilkins (8th ed.), New York, NY; Rosoff, в Pharmaceutical Dosage Forms, Lieberman, Rieger и Banker (Eds.), 1988, Marcel Dekker, Inc., New York, N.Y., volume 1, p. 245). Обычно микроэмульсии представляют собой системы, которые получают путем сперва диспергирования масла в водном растворе поверхностно-активного вещества, а затем добавления достаточного количества четвертого компонента, как правило, спирта со средней длиной цепи, с получением прозрачной системы. Таким образом, микроэмульсии также были описаны как термодинамически стабильные, изотропически чистые дисперсии двух несмешиваемых жидкостей, которые стабилизируются межфазными пленками поверхностно-активных молекул (Leung и Shah, в Controlled Release of Drugs: Polymers and Aggregate Systems, Rosoff, M., Ed., 1989, VCH Publishers, New York, pages 185-215). Микроэмульсии обычно получают путем объединения от трех до пяти компонентов, которые включают масло, воду, поверхностно-активное вещество, вторичное поверхностно-активное вещество и электролит. Является ли микроэмульсия микроэмульсией по типу вода в масле (w/o) или масло в воде (o/w), зависит от свойств используемых масла и поверхностно-активного вещества и от структуры и геометрической упаковки полярных головок и углеводородных хвостов молекул поверхностноактивного вещества (Schott, в Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., Easton, Pa., 1985, p. 271).
Активно изучается феноменологический подход с использованием фазовых диаграмм, и с его помощью специалистами в данной области были получены обширные данные о том, как составлять микроэмульсии (см., например, Ansel's Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, Allen, L.V., Popovich N.G., и Ansel H.C., 2004, Lippincott Williams & Wilkins (8th ed.), New York, NY; Rosoff, в Pharmaceutical Dosage Forms, Lieberman, Rieger и Banker (Eds.), 1988, Marcel Dekker, Inc., New York, N.Y., volume 1, p. 245; Block, в Pharmaceutical Dosage Forms, Lieberman, Rieger и Banker (Eds.), 1988, Marcel Dekker, Inc., New York, N.Y., volume 1, p. 335). По сравнению с традиционными эмульсиями микроэмульсии имеют преимущество солюбилизации водонерастворимых лекарственных средств в составе термодинамически стабильных капелек, которые образуются самопроизвольно.
Поверхностно-активные вещества, используемые в получении микроэмульсий, включают без ограничения ионные поверхностно-активные вещества, неионные поверхностно-активные вещества, Brij 96, полиокиэтиленолеиловые эфиры, сложные эфиры жирных кислот и полиглицерина, тетраглицерина монолаурат (ML310), тетраглицерина моноолеат (МО310), гексаглицерина моноолеат (РО310), гексаглице- 46 037115 рина пентаолеат (РО500), декаглицерина монокапрат (МСА750), декаглицерина моноолеат (МО750), декаглицерина секвиолеат (SO750), декаглицерина декаолеат (DAO750) отдельно или в комбинации с вторичными поверхностно-активными веществами. Вторичное поверхностно-активное вещество, обычно являющееся спиртом с короткой цепью, таким как этанол, 1-пропанол и 1-бутанол, служит для увеличения межфазной текучести путем проникновения в пленку из поверхностно-активного вещества и соответственно создания неупорядоченной пленки из-за пустого пространства, образующегося среди молекул поверхностно-активного вещества. Однако микроэмульсии могут быть получены без использования вторичных поверхностно-активных веществ, и в области техники известны самоэмульгирующиеся системы микроэмульсий без спирта. Водной фазой, как правило, без ограничения может быть вода, водный раствор лекарственного средства, глицерин, PEG300, PEG400, полиглицерины, пропиленгликоли и производные этиленгликоля. Масляная фаза может предусматривать без ограничения материалы, такие как Captex 300, Captex 355, Capmul MCM, сложные эфиры жирных кислот, среднецепочечные (C8-C12) моно-, ди- и триглицериды, полиоксиэтилированные сложные эфиры жирных кислот и глицерила, жирные спирты, полигликолизированные глицериды, насыщенные полигликолизированные С8-С10-глицериды, растительные масла и силиконовое масло.
Микроэмульсии представляют особый интерес с точки зрения растворимости лекарственного средства и повышенной абсорбции лекарственных средств. Липидные микроэмульсии (по типу как o/w, так и w/o) были предложены для увеличения пероральной биодоступности лекарственных средств, включая пептиды (см., например, патенты США № 6191105; 7063860; 7070802; 7157099; Constantinides et al., Pharmaceutical Research, 1994, 11, 1385-1390; Ritschel, Meth. Find. Exp. Clin. Pharmacol., 1993, 13, 205). Микроэмульсии обеспечивают преимущества в виде улучшенной растворимости лекарственного средства, защиты лекарственного средства от ферментативного гидролиза, возможного увеличения абсорбции лекарственного средства за счет индуцированных поверхностно-активным веществом изменений текучести мембран и проницаемости, удобства получения, удобства перорального введения по сравнению с твердой лекарственной формой, улучшенной клинической действенности и пониженной токсичности (см., например, патенты США № 6191105; 7063860; 7070802; 7157099; Constantinides et al., Pharmaceutical Research, 1994, 11, 1385; Ho et al., J. Pharm. Sci., 1996, 85, 138-143). Часто микроэмульсии могут образовываться самопроизвольно, когда их компоненты объединяют при температуре окружающей среды. Это может быть в особенности преимущественным, когда составляют термолабильные лекарственные средства, пептиды или iRNA. Микроэмульсии также были эффективными при трансдермальной доставке активных компонентов как при косметических, так и при фармацевтических применениях. Предполагается, что композиции и составы микроэмульсий согласно настоящему изобретению будут способствовать повышенной системной абсорбции iRNA и нуклеиновых кислот из желудочнокишечного тракта, а также улучшать локальное клеточное поглощение iRNA и нуклеиновых кислот.
Микроэмульсии согласно настоящему изобретению также могут содержать дополнительные компоненты и добавки, такие как сорбитанмоностеарат (Grill 3), Labrasol и вещества, способствующие проникновению, для улучшения свойств состава и для повышения абсорбции iRNA и нуклеиновых кислот согласно настоящему изобретению. Вещества, способствующие проникновению, используемые в микроэмульсиях согласно настоящему изобретению, могут быть классифицированы, как принадлежащие к одной из пяти основных категорий: поверхностно-активные вещества, жирные кислоты, соли желчных кислот, хелатирующие средства и нехелатирующие вещества, отличные от поверхностно-активных веществ (Lee et al., Critical Reviews in Therapeutic Drug Carrier Systems, 1991, p. 92). Каждый из этих классов рассмотрен выше.
(iii) Микрочастицы.
Средство для RNAi согласно настоящему изобретению может быть включено в частицу, например микрочастицу. Микрочастицы можно получать при помощи сушки распылением, но также можно получать другими способами, в том числе лиофилизацией, выпариванием, сушкой в псевдоожиженном слое, сушкой в вакууме или при помощи комбинации этих методик.
(iv) . Вещества, способствующие проникновению.
В одном варианте осуществления в настоящем изобретении применяют разнообразные вещества, способствующие проникновению, для воздействия на эффективную доставку нуклеиновых кислот, в частности iRNA, в кожу животных. Большинство лекарственных средств присутствуют в растворе как в ионизированной, так и в неионизированной форме. Однако, как правило, только жирорастворимые или липофильные лекарственные средства легко проходят через клеточные мембраны. Было установлено, что даже нелипофильные лекарственные средства могут проходить через клеточные мембраны, если мембрана, через которую необходимо пройти, обработана веществом, способствующим проникновению. Вдобавок к способствованию диффузии нелипофильных лекарственных средств через клеточные мембраны вещества, способствующие проникновению, также повышают проницаемость для липофильных лекарственных средств.
Вещества, способствующие проникновению, могут быть классифицированы, как принадлежащие к одной из пяти основных категорий, т.е. поверхностно-активным веществам, жирным кислотам, солям желчных кислот, хелатирующим средствам и нехелатирующим веществам, отличным от поверхностно- 47 037115 активных веществ (см., например, Malmsten, M. Surfactants and polymers in drug delivery, Informa Health
Care, New York, NY, 2002; Lee et al., Critical Reviews in Therapeutic Drug Carrier Systems, 1991, p. 92). Каждый из вышеуказанных классов веществ, способствующих проникновению, описан ниже более подробно.
Поверхностно-активные вещества (или сурфактанты) являются химическими структурными единицами, которые при растворении в водном растворе снижают поверхностное натяжение раствора или межфазное натяжение между водным раствором и другой жидкостью, в результате чего повышается абсорбция iRNA через слизистую. Помимо солей желчных кислот и жирных кислот, эти вещества, способствующие проникновению, включают, например, лаурилсульфат натрия, полиоксиэтилен-9-лауриловый эфир и полиоксиэтилен-20-цетиловый эфир (см., например, Malmsten, M. Surfactants and polymers in drug delivery, Informa Health Care, New York, NY, 2002; Lee et al., Critical Reviews in Therapeutic Drug Carrier Systems, 1991, p.92) и перфорированные эмульсии, такие как FC-43. Takahashi et al., J. Pharm. Pharmacol., 1988, 40, 252).
Разнообразные жирные кислоты и их производные, которые действуют как вещества, способствующие проникновению, включают, например, олеиновую кислоту, лауриновую кислоту, каприновую кислоту (н-декановую кислоту), миристиновую кислоту, пальмитиновую кислоту, стеариновую кислоту, линолевую кислоту, линоленовую кислоту, дикапрат, трикапрат, моноолеин (1-моноолеоил-рацглицерин), дилаурин, каприловую кислоту, арахидоновую кислоту, глицерин 1-монокапрат, 1-додецилазациклогептан-2-он, ацилкарнитины, ацилхолины, их C1-20алкиловые сложные эфиры (например, метиловый, изопропиловый и трет-бутиловый) и их моно- и диглицериды (т.е. олеат, лаурат, капрат, миристат, пальмитат, стеарат, линолеат и т.д.) (см., например, Touitou, E., et al. Enhancement in Drug Delivery, CRC Press, Danvers, MA, 2006; Lee et al., Critical Reviews in Therapeutic Drug Carrier Systems, 1991, p. 92; Muranishi, Critical Reviews in Therapeutic Drug Carrier Systems, 1990, 7, 1-33; El Hariri et al., J. Pharm. Pharmacol., 1992, 44, 651-654).
Физиологическая роль желчи включает содействие в распределении и абсорбции липидов и жирорастворимых витаминов (см., например, Malmsten, M. Surfactants and polymers in drug delivery, Informa Health Care, New York, NY, 2002; Brunton, Chapter 38 в Goodman & Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics, 9th Ed., Hardman et al. Eds., McGraw-Hill, New York, 1996, p. 934-935). Разные природные соли желчных кислот и их синтетические производные действуют как вещества, способствующие проникновению. Таким образом, термин соли желчных кислот включает любые встречающиеся в природе компоненты желчи, а также любые из их синтетических производных. Подходящие соли желчных кислот включают, например, холевую кислоту (или ее фармацевтически приемлемую натриевую соль, холат натрия), дегидрохолевую кислоту (дегидрохолат натрия), дезоксихолевую кислоту (дезоксихолат натрия), глюкохолевую кислоту (глюкохолат натрия), гликохолевую кислоту (гликохолат натрия), гликодезоксихолевую кислоту (гликодезоксихолат натрия), таурохолевую кислоту (таурохолат натрия), тауродезоксихолевую кислоту (тауродезоксихолат натрия), хенодезоксихолевую кислоту (хенодезоксихолат натрия), урсодезоксихолевую кислоту (UDCA), тауро-24,25-дигидрофузидат натрия (STDHF), гликодигидрофузидат натрия и полиоксиэтилен-9-лауриловый эфир (РОЕ) (см., например, Malmsten, M. Surfactants and polymers in drug delivery, Informa Health Care, New York, NY, 2002; Lee et al., Critical Reviews in Therapeutic Drug Carrier Systems, 1991, page 92; Swinyard, Chapter 39 в: Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th Ed., Gennaro, ed., Mack Publishing Co., Easton, Pa., 1990, pages 782-783; Muranishi, Critical Reviews in Therapeutic Drug Carrier Systems, 1990, 7, 1-33; Yamamoto et al., J. Pharm. Exp. Ther., 1992, 263, 25; Yamashita et al., J. Pharm. Sci., 1990, 79, 579-583).
Хелатирующие средства, используемые применительно к настоящему изобретению, можно определить как соединения, которые удаляют ионы металла из раствора путем образования комплексов с ними, в результате чего повышается абсорбция iRNA через слизистую. В отношении их применения в качестве веществ, способствующих проникновению, в настоящем изобретении хелатирующие средства обладают дополнительным преимуществом, также выступая в качестве ингибиторов ДНКазы, поскольку большинство охарактеризованных ДНК-нуклеаз требуют двухвалентный ион металла для катализа и, таким образом, ингибируются хелатирующими средствами (Jarrett, J. Chromatogr., 1993, 618, 315-339). Подходящие хелатирующие средства включают без ограничения двунатриевый этилендиаминтетраацетат (EDTA), лимонную кислоту, салицилаты (например, салицилат натрия, 5-метоксисалицилат и гомовалинат), N-ацилпроизводные коллагена, лаурет-9 и N-аминоацилпроизводные бета-дикетонов (енамины) (см., например, Katdare, A. et al., Excipient development for pharmaceutical, biotechnology, and drug delivery, CRC Press, Danvers, MA, 2006; Lee et al., Critical Reviews in Therapeutic Drug Carrier Systems, 1991, page 92; Muranishi, Critical Reviews in Therapeutic Drug Carrier Systems, 1990, 7, 1-33; Buur et al., J. Control Rel., 1990, 14, 43-51).
Используемые в данном документе нехелатирующие соединения, отличные от поверхностноактивных веществ, способствующие проникновению, могут быть определены как соединения, которые проявляют небольшую активность в качестве хелатирующих средств или в качестве поверхностноактивных веществ, но которые тем не менее повышают абсорбцию iRNA через слизистую пищеварительного тракта (см., например, Muranishi, Critical Reviews in Therapeutic Drug Carrier Systems, 1990, 7,
- 48 037115
1-33). Этот класс веществ, способствующих проникновению, включает, например, ненасыщенные цикломочевины, производные 1-алкил- и 1-алкенилазацикло-алканона (Lee et al., Critical Reviews in
Therapeutic Drug Carrier Systems, 1991, page 92) и нестероидные противовоспалительные средства, такие как диклофенак натрия, индометацин и фенилбутазон (Yamashita et al., J. Pharm. Pharmacol., 1987, 39,
621-626).
Средства, которые повышают поглощение iRNA на клеточном уровне, также можно добавлять к фармацевтическим и другим композициям согласно настоящему изобретению. Например, катионные липиды, такие как липофектин (Junichi et al, патент США № 5705188), катионные производные глицерина и поликатионные молекулы, такие как полилизин (Lollo et al., заявка согласна РСТ WO 97/30731), также, как известно, повышают степень клеточного захвата dsRNA. Примеры коммерчески доступных реагентов для трансфекции включают среди прочего, например, Lipofectamine™ (Invitrogen; Карлсбад, Калифорния), Lipofectamine 2000™ (Invitrogen; Карлсбад, Калифорния), 293fectin™ (Invitrogen; Карлсбад, Калифорния), Cellfectin™ (Invitrogen; Карлсбад, Калифорния), DMRIE-C™ (Invitrogen; Карлсбад, Калифорния), Freestyle™ MAX (Invitrogen; Карлсбад, Калифорния), Lipofectamine™ 2000 CD (Invitrogen; Карлсбад, Калифорния), Lipofectamine™ (Invitrogen; Карлсбад, Калифорния), RNAiMAX (Invitrogen; Карлсбад, Калифорния), Oligofectamine™ (Invitrogen; Карлсбад, Калифорния), Optifect™ (Invitrogen; Карлсбад, Калифорния), реагент для трансфекции X-tremeGENE Q2 (Roche; Грензахерштрассе, Швейцария), реагент для липосомной трансфекции DOTAP (Грензахерштрассе, Швейцария), реагент для липосомной трансфекции DOSPER (Грензахерштрассе, Швейцария) или Fugene (Грензахерштрассе, Швейцария), реагент Transfectam® (Promega; Мэдисон, Висконсин), реагент для трансфекции TransFast™ (Promega; Мэдисон, Висконсин), реагент Tfx™-20 (Promega; Мэдисон, Висконсин), реагент Tfx™-50 (Promega; Мэдисон, Висконсин), DreamFect™ (OZ Biosciences; Марсель, Франция), EcoTransfect (OZ Biosciences; Марсель, Франция), реагент для трансфекции TransPassa D1 (New England Biolabs; Ипсвич, Массачусетс, США), LyoVec™/LipoGen™ (Invitrogen; Сан-Диего, Калифорния, США), реагент для трансфекции PerFectin (Genlantis; Сан-Диего, Калифорния, США), реагент для трансфекции NeuroPORTER (Genlantis; Сан-Диего, Калифорния, США), реагент для трансфекции GenePORTER (Genlantis; Сан-Диего, Калифорния, США), реагент для трансфекции GenePORTER 2 (Genlantis; СанДиего, Калифорния, США), реагент для трансфекции Cytofectin (Genlantis; Сан-Диего, Калифорния, США), реагент для трансфекции BaculoPORTER (Genlantis; Сан-Диего, Калифорния, США), реагент для трансфекции TroganPORTER™ (Genlantis; Сан-Диего, Калифорния, США), RiboFect (Bioline; Тонтон, Массачусетс, США), PlasFect (Bioline; Тонтон, Массачусетс, США), UniFECTOR (B-Bridge International; Маунтин-Вью, Калифорния, США), SureFECTOR (B-Bridge International; Маунтин-Вью, Калифорния, США) или HiFect™ (B-Bridge International, Маунтин-Вью, Калифорния, США).
Для повышения проникновения введенных нуклеиновых кислот можно использовать другие средства, в том числе гликоли, такие как этиленгликоль и пропиленгликоль, пирролы, такие как 2-пиррол, азоны и терпены, такие как лимонен и ментон.
(v) Носители.
Определенные композиции согласно настоящему изобретению также содержат в составе соединения-носители. Используемый в данном документе термин соединение-носитель или носитель может относиться к нуклеиновой кислоте или ее аналогу, которые являются инертными (т.е. не обладают биологической активностью per se), но распознаются в качестве нуклеиновой кислоты in vivo процессами, которые снижают биодоступность нуклеиновой кислоты с биологической активностью, например, путем разрушения биологически активной нуклеиновой кислоты или путем содействия ее удалению из кровотока. Совместное введение нуклеиновой кислоты и соединения-носителя, обычно с избытком последнего вещества, может привести к существенному сокращению количества нуклеиновой кислоты, перерабатываемой печенью, почками или другими внесосудистыми депо, предположительно вследствие конкуренции между соединением-носителем и нуклеиновой кислотой за общий рецептор. Например, переработка частично фосфотиоатной dsRNA тканью печени может быть сокращена при ее совместном введении с полиинозиновой кислотой, сульфатом декстрана, полицитидиновой кислотой или 4-ацетамидо-4'изотиоциано-стильбен-2,2'-дисульфокислотой (Miyao et al., DsRNA Res. Dev., 1995, 5, 115-121; Takakura et al., DsRNA & Nucl. Acid Drug Dev., 1996, 6, 177-183.
(vi) Наполнители.
В отличие от соединения-носителя фармацевтический носитель или наполнитель представляет собой фармацевтически приемлемый растворитель, суспендирующее средство или любую другую фармакологически инертное средство для доставки одной или нескольких нуклеиновых кислот в организм животного. Наполнитель может быть жидким или твердым веществом, и его выбирают с учетом предполагаемого способа введения с тем, чтобы обеспечить необходимый объем, консистенцию и т.д., при объединении с нуклеиновой кислотой и другими компонентами данной фармацевтической композиции. Типичные фармацевтические носители включают без ограничения связывающие средства (например, прежелатинизированный маисовый крахмал, поливинилпирролидон или гидроксипропилметилцеллюлозу и т.д.); наполнители (например, лактозу и другие сахара, микрокристаллическую целлюлозу, пектин, жела- 49 037115 тин, сульфат кальция, этилцеллюлозу, полиакрилаты или вторичный кислый фосфат кальция и т.д.); смазывающие вещества (например, стеарат магния, тальк, кремнезем, коллоидный диоксид кремния, стеариновую кислоту, стеараты металлов, гидрогенизированные растительные масла, кукурузный крахмал, полиэтиленгликоли, бензоат натрия, ацетат натрия и т.д.); разрыхлители (например, крахмал, натрия крахмалгликолат и т.д.) и смачивающие средства (например, лаурилсульфат натрия и т.д.).
Также для составления композиций согласно настоящему изобретению можно применять фармацевтически приемлемые органические или неорганические наполнители, подходящие для введения, отличного от парентерального, которые не взаимодействуют неблагоприятным образом с нуклеиновыми кислотами. Подходящие фармацевтически приемлемые носители включают без ограничения воду, растворы солей, спирты, полиэтиленгликоли, желатин, лактозу, амилозу, стеарат магния, тальк, кремниевую кислоту, вязкий парафин, гидроксиметилцеллюлозу, поливинилпирролидон и т.п.
Составы для местного введения нуклеиновых кислот могут включать стерильные и нестерильные водные растворы, неводные растворы в обычных растворителях, таких как спирты, или растворы нуклеиновых кислот в жидких или твердых масляных основах. Растворы также могут содержать буферы, разбавители и другие подходящие добавки. Можно использовать фармацевтически приемлемые органические или неорганические наполнители, подходящие для введения, отличного от парентерального, которые не взаимодействуют неблагоприятным образом с нуклеиновыми кислотами.
Подходящие фармацевтически приемлемые наполнители включают без ограничения воду, растворы солей, спирт, полиэтиленгликоли, желатин, лактозу, амилозу, стеарат магния, тальк, кремниевую кислоту, вязкий парафин, гидроксиметилцеллюлозу, поливинилпирролидон и т.п.
(vii) Другие компоненты.
Композиции согласно настоящему изобретению могут дополнительно содержать другие вспомогательные компоненты, традиционно встречающиеся в фармацевтических композициях, при уровнях применения, установленных в уровне техники. Таким образом, например, композиции могут содержать дополнительные совместимые фармацевтически активные материалы, такие как, например, противозудные средства, вяжущие средства, местные анестетики или противовоспалительные средства, или могут содержать дополнительные материалы, пригодные для физического составления композиций согласно настоящему изобретению в различных лекарственных формах, такие как красители, ароматизирующие вещества, консерванты, антиоксиданты, замутнители, загустители и стабилизаторы. Однако такие материалы при добавлении не должны чрезмерно вступать в конфликт с биологическими активностями компонентов композиций согласно настоящему изобретению. Составы могут быть стерильными, и, при необходимости, их можно смешивать со вспомогательными средствами, например смазывающими веществами, консервантами, стабилизаторами, смачивающими средствами, эмульгаторами, солями для оказания влияния на осмотическое давление, буферами, красящими веществами, ароматизаторами и/или отдушками и т.п., которые не взаимодействуют неблагоприятным образом с нуклеиновой(ыми) кислотой(ами) состава.
Водные суспензии могут содержать вещества, которые повышают вязкость суспензии, в том числе, например,ткарбоксиметилцеллюлозу натрия, сорбит и/или декстран. Суспензия также может содержать стабилизаторы.
В некоторых вариантах осуществления фармацевтические композиции, описанные в настоящем изобретении, включают (а) одно или несколько соединений, представляющих собой iRNA, и (b) одно или несколько средств, которые действуют по механизму, отличному от RNAi, и которые пригодны в лечении, например, РН1.
Тестирование композиций.
Токсичность и терапевтическая эффективность таких соединений могут быть определены стандартными фармацевтическими процедурами на клеточных культурах или экспериментальных животных, например, для определения LD50 (дозы, летальной для 50% популяции) и ED50 (дозы, терапевтически эффективной для 50% популяции). Соотношение доз между токсичным и терапевтическим эффектами является терапевтическим индексом, и его можно выражать как соотношение LD50/ED50. Предпочтительными являются соединения, которые характеризуются высоким терапевтическим индексом.
Данные, полученные при анализах с клеточными культурами и исследованиях на животных, можно использовать при составлении ряда доз для применения у людей. В настоящем изобретении доза композиций, описанных в данном документе, как правило, находится в диапазоне циркулирующих концентраций, который включают ED50 с малой токсичностью или без таковой. Доза может варьироваться в этом диапазоне в зависимости от применяемой лекарственной формы и используемого пути введения. Для любого соединения, применяемого в способах, описанных в настоящем изобретении, терапевтически эффективную дозу можно первоначально установить по результатам анализов с клеточными культурами. Доза может быть составлена для животных моделей для получения диапазона концентрации циркулирующего в плазме соединения или, при необходимости, полипептидного продукта целевой последовательности (например, достижения уменьшенной концентрации полипептида), что включает IC50 (т.е. концентрацию тестового соединения, при помощи которой достигают полумаксимальное ингибирование симптомов), которую устанавливают в клеточной культуре. Такую информацию можно использовать для
- 50 037115 более точного определения пригодной дозы у людей. Уровни в плазме можно измерять, например, при помощи высокоэффективной жидкостной хроматографии.
В дополнение к их введению, рассматриваемому выше, iRNA, описанные в настоящем изобретении, можно вводить в комбинации с другими известными средствами, эффективными в лечении патологических процессов, которые опосредованы перегрузкой железом и которые можно лечить путем ингибирования экспрессии HAO1. В любом случае, курирующий врач может корректировать количество и временные рамки введения iRNA, исходя из результатов, наблюдаемых при использовании стандартных средств измерения эффективности, известных в уровне техники или описанных в данном документе.
V. Способы ингибирования экспрессии HAO1.
Настоящее изобретение предусматривает способы ингибирования экспрессии HAO1 (оксидазы 1 гидроксикислот) в клетке. Способы включают приведение клетки в контакт со средством для RNAi, например двухнитевым средством для RNAi, в количестве, эффективном для ингибирования экспрессии HAO1 в клетке, за счет чего осуществляется ингибирование экспрессии HAO1 в клетке.
Приведение клетки в контакт с двухнитевым средством для RNAi можно выполнять in vitro или in vivo. In vivo приведение клетки в контакт со средством для RNAi включает приведение клетки или группы клеток в организме субъекта, например субъекта-человека, в контакт со средством для RNAi. Также возможны комбинации in vitro и in vivo способов приведения в контакт. Приведение в контакт может быть непосредственным или опосредованным, как рассматривалось выше. Более того, приведение в контакт клетки можно выполнять посредством нацеливающего лиганда, в том числе любого лиганда, описанного в данном документе или известного в уровне техники. В некоторых вариантах осуществления нацеливающий лиганд представляет собой углеводный фрагмент, например лиганд, представляющий собой GalNAc3, или любой другой лиганд, который направляет средство для RNAi к месту, представляющему интерес, например, печени субъекта.
Термин ингибирование, используемый в данном документе, используют взаимозаменяемо с сокращением, сайленсингом, понижающей регуляцией и другими подобными терминами, и он включает любой уровень ингибирования.
Подразумевают, что фраза ингибирование экспрессии HAO1 относится к ингибированию экспрессии любого гена HAO1 (такого как, например, ген HAO1 мыши, ген HAO1 крысы, ген HAO1 обезьяны или ген HAO1 человека), а также вариантов или мутантов гена HAO1. Таким образом, ген HAO1 может быть геном HAO1 дикого типа, мутантным геном HAO1 или трансгенным геном HAO1 в контексте клетки, группы клеток или организма, подвергнутых генетической манипуляции.
Ингибирование экспрессии гена HAO1 включает любой уровень ингибирования гена HAO1, например по меньшей мере частичную супрессию экспрессии гена HAO1. Экспрессию гена HAO1 можно оценивать исходя из уровня или изменения уровня любой переменной, связанной с экспрессией гена HAO1, например уровня мРНК HAO1, уровня белка HAO1. Данный уровень можно оценивать в отдельной клетке или в группе клеток, в том числе, например, образце, полученном из организма субъекта.
Ингибирование можно оценивать по снижению абсолютного или относительного уровня одной или нескольких переменных, которые связаны с экспрессией HAO1, по сравнению с контрольным уровнем. Контрольным уровнем может быть любой тип контрольного уровня, который используют в данной области, например исходный уровень до введения дозы или уровень, определенный у подобного субъекта, клетки или образца, которые не обработаны или обработаны контролем (таким как, например, контроль только с буфером или контроль с неактивным средством).
В некоторых вариантах осуществления способов согласно настоящему изобретению экспрессия гена HAO1 ингибируется по меньшей мере приблизительно на 5%, по меньшей мере на приблизительно
10%, по меньшей мере приблизительно | на 15%, по меньшей мере приблизительно | на 20%, |
по меньшей мере приблизительно на | 25%, по меньшей мере приблизительно | на 30%, |
по меньшей мере приблизительно на | 35%, по меньшей мере приблизительно | на 40%, |
по меньшей мере приблизительно на | 45%, по меньшей мере приблизительно | на 50%, |
по меньшей мере приблизительно на | 55%, по меньшей мере приблизительно | на 60%, |
по меньшей мере приблизительно на | 65%, по меньшей мере приблизительно | на 70%, |
по меньшей мере приблизительно на | 75%, по меньшей мере приблизительно | на 80%, |
по меньшей мере приблизительно на | 85%, по меньшей мере приблизительно | на 90%, |
по меньшей мере приблизительно на | 91%, по меньшей мере приблизительно | на 92%, |
по меньшей мере приблизительно на | 93%, по меньшей мере приблизительно | на 94%, |
по меньшей мере приблизительно на | 95%, по меньшей мере приблизительно | на 96%, |
по меньшей мере приблизительно на 97%, по меньшей мере приблизительно на | 98% или |
по меньшей мере приблизительно на 99%.
Доказательством ингибирования экспрессии гена НАО1 может служить снижение количества мРНК, экспрессируемого первой клеткой или первой группой клеток (такие клетки могут присутствовать, например, в образце, полученном из организма субъекта), в которых транскрибируется ген НАО1 и которую или которые обрабатывали (например, посредством приведения клетки или клеток в контакт со средством для RNAi согласно настоящему изобретению или посредством введения средства для RNAi
- 51 037115 согласно настоящему изобретению субъекту, в организме которого клетки находятся или находились), так что экспрессия гена НАО1 ингибируется по сравнению со второй клеткой или второй группой клеток, по сути, идентичных первой клетке или группе клеток, но которую или которые не обрабатывали (контрольная(ые) клетка(и)). В некоторых вариантах осуществления ингибирование оценивают посредством выражения уровня мРНК в обработанных клетках как процент от уровня мРНК в контрольных клетках с помощью следующей формулы:
|(мРНК в контрольных клетках) - (мРНК в обработанных клетках) ----------------------------------------------·100 % (мРНК в контрольных клетках)
В качестве альтернативы ингибирование экспрессии гена HAO1 можно оценивать по снижению параметра, который функционально связан с экспрессией гена HAO1, например экспрессией белка HAO1. Сайленсинг гена HAO1 можно выявить в любой клетке, экспрессирующей НАО1 либо конститутивно, либо при помощи генной инженерии, и с помощью любого анализа, известного в уровне техники. Печень является основным местом экспрессии НАО1. Другие важные места экспрессии включают почки и матку.
Доказательством ингибирования экспрессии белка HAO1 может служить снижение уровня белка HAO1, который экспрессируется клеткой или группой клеток (например, уровня белка, экспрессируемого в образце, полученном из организма субъекта). Как объяснялось выше в отношении оценки супрессии мРНК, ингибирование уровней экспрессии белка в обработанной клетке или обработанной группе клеток можно аналогично выражать как процент от уровня белка в контрольной клетке или группе контрольных клеток.
Контрольная клетка или контрольная группа клеток, которую можно использовать для оценки ингибирования экспрессии гена HAO1, включают клетку или группу клеток, которая еще не была в контакте со средством для RNAi согласно настоящему изобретению. Например, контрольная клетка или контрольная группа клеток может быть получена от отдельного субъекта (например, субъекта-человека или субъекта-животного) перед лечением субъекта средством для RNAi.
Уровень мРНК HAO1, который экспрессируется клеткой или группой клеток, можно определять при помощи любого способа, известного в уровне техники, для оценки экспрессии мРНК. В одном варианте осуществления уровень экспрессии HAO1 в образце определяют путем выявления транскрибируемого полинуклеотида или его части, например мРНК гена HAO1. РНК можно извлекать из клеток при помощи методик извлечения РНК, включая, например, извлечение с помощью кислого фенола/гуанидинизотиоцианата (RNAzol B; Biogenesis), наборы для получения РНК RNeasy (Qiagen) или PAXgene (PreAnalytix, Швейцария). Типичные форматы анализов, в которых используют гибридизацию рибонуклеиновых кислот, включают ядерные run-on анализы, RT-PCR, анализы защиты от РНКаз (Melton et al., Nuc. Acids Res. 12:7035), нозерн-блоттинг, гибридизацию in situ и микроматричные анализы.
В одном варианте осуществления уровень экспрессии НАО1 определяют при помощи зонда для нуклеиновой кислоты. Термин зонд, используемый в данном документе, относится к любой молекуле, которая способна селективно связываться с конкретным НАО1. Зонды могут быть синтезированы специалистом в данной области или получены из соответствующих биологических препаратов. Могут быть специально сконструированы зонды, содержащие метку. Примеры молекул, которые можно использовать в качестве зондов, включают без ограничения РНК, ДНК, белки, антитела и органические молекулы.
Выделенные мРНК можно использовать при анализах на основе гибридизации или амплификации, которые включают без ограничения анализы, представляющие собой саузерн- или нозерн-блоттинг, анализы, представляющие собой полимеразную цепную реакцию (PCR), и матрицы с зондами. Один способ определения уровней мРНК включает приведение выделенной мРНК в контакт с молекулой нуклеиновой кислоты (зондом), которая может гибридизоваться с мРНК НАО1. В одном варианте осуществления мРНК иммобилизуют на твердой поверхности и приводят в контакт с зондом, например, путем пропускания выделенной мРНК через агарозный гель и переноса мРНК из геля на мембрану, такую как нитроцеллюлоза. В альтернативном варианте осуществления зонд(ы) иммобилизуют на твердой поверхности и мРНК приводят в контакт с зондом(ами), например на генном микрочипе Affymetrix. Специалист в данной области может легко адаптировать известные способы обнаружения мРНК для применения в определении уровня мРНК НАО1.
Альтернативный способ определения уровня экспрессии НАО1 в образце включает способ амплификации нуклеиновой кислоты и/или обратной транскрипции (с получением кДНК), например, мРНК в образце, например при помощи RT-PCR (экспериментальный вариант осуществления изложен в Mullis, 1987, патенте США № 4683202), лигазной цепной реакции (Barany (1991) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 88:189-193), самоподдерживающейся репликации последовательности (Guatelli et al. (1990), Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87:1874-1878), системы транскрипционной амплификации (Kwoh et al. (1989), Proc. Natl. Acad. Sci. USA 86:1173-1177), репликазы Q-бета (Lizardi et al. (1988), Bio/Technology 6:1197), репликации по типу катящегося кольца (Lizardi et al., патент США № 5854033) или любой другой способ амплификации нуклеиновой кислоты, за которым следует обнаружение амплифицированных молекул при помо- 52 037115 щи методик, хорошо известных специалисту в данной области. Такие схемы обнаружения особенно пригодны для обнаружения молекул нуклеиновой кислоты, если такие молекулы присутствуют в очень малых количествах. В конкретных аспектах согласно настоящему изобретению уровни экспрессии HAO1 определяют при помощи количественной флуорогенной RT-PCR (т.е. системы TaqMan™).
Уровни экспрессии мРНК HAO1 можно контролировать при помощи мембранного блота (как, например, используемого при анализе гибридизации, такого как нозерн, саузерн, дот и т.п.) или микролунок, опытных пробирок, гелей, гранул или волокон (или любой твердой подложки, содержащей связанную нуклеиновую кислоту). См. патенты США № 5770722, 5874219, 5744305, 5677195 и 5445934, которые включены в данный документ при помощи ссылки. Определение уровня экспрессии НАО1 также может включать использование зондов для нуклеиновой кислоты в растворе.
В некоторых вариантах осуществления уровень экспрессии мРНК оценивают с использованием анализов с разветвленной ДНК (bDNA) или PCR в режиме реального времени (qPCR). Применение таких способов описано и проиллюстрировано в разделе Примеры, представленном в данном документе.
Уровень экспрессии белка НАО1 можно определить, используя любой способ, известный в уровне техники для измерения уровней белка. Такие способы включают, например, электрофорез, капиллярный электрофорез, высокоэффективную жидкостную хроматографию (HPLC), тонкослойную хроматографию (TLC), гипердиффузионную хроматографию, реакции преципитации в жидкости или геле, абсорбционную спектроскопию, колориметрические анализы, спектрофотометрические анализы, проточную цитометрию, иммунодиффузию (одиночную или двойную), иммуноэлектрофорез, вестерн-блоттинг, радиоиммунологический анализ (RIA), твердофазные иммуноферментные анализы (ELISA), иммунофлюоресцентные анализы, электрохемилюминисцентные анализы и т.п.
Термин образец, используемый в данном документе, относится к отбору схожих жидкостей, клеток или тканей, выделенных из организма субъекта, а также жидкостей, клеток или тканей, присутствующих в организме субъекта. Примеры биологических жидкостей включают кровь, сыворотку крови и серозные жидкости, плазму крови, лимфу, мочу, спинномозговую жидкость, слюну, внутриглазные жидкости и т.п. Образцы тканей могут включать образцы из тканей, органов или локальных участков. Например, образцы можно получить из конкретных органов, частей органов или жидкостей или клеток в этих органах. В определенных вариантах осуществления образцы можно получить из печени (например, всей печени, или определенных сегментов печени, или определенных типов клеток в печени, таких как, например, гепатоциты). В некоторых вариантах осуществления образец, полученный из организма субъекта относится к крови или плазме крови, взятым из организма субъекта. В дополнительных вариантах осуществления образец, полученный из организма субъекта относится к ткани печени, полученной из организма субъекта.
В некоторых вариантах осуществления способов согласно настоящему изобретению средство для RNAi вводят субъекту так, что средство для RNAi доставляется к конкретному месту в организме субъекта. Ингибирование экспрессии HAO1 можно оценивать при помощи измерений уровня или изменения уровня мРНК HAO1 или белка HAO1 в образце, полученном из жидкости или ткани из конкретного места в организме субъекта. В некоторых вариантах осуществления местом является печень. Местом также может быть подразделение или подгруппа клеток из любого из указанных выше мест. Место также может включать клетки, которые экспрессируют конкретный тип рецептора.
VI. Способы лечения или предупреждения ассоциированного с HAO1 нарушения.
Настоящее изобретение также предусматривает способы лечения или предупреждения заболеваний и состояний, на которые можно воздействовать при помощи экспрессии гена HAO1. Например, композиции, описанные в данном документе, можно применять для лечения любого нарушения, ассоциированного с РН1.
Эффективность лечения или предупреждения заболевания можно оценивать, например, путем измерения прогрессировани заболевания, ремиссии заболевания, тяжести симптомов, уменьшения боли, качества жизни, дозы лекарственного препарата, необходимой для поддержания эффекта лечения, уровня маркера заболевания или любого другого измеряемого параметра, соответствующего данному заболеванию, лечение которого осуществляют или предупреждение которого предусматривают. Контролирование эффективности лечения или предупреждения путем измерения любого из таких параметров или любой комбинации параметров находится в компетенции специалиста в данной области.
Лечебный или предупредительный эффект является очевидным, когда наблюдается статистически значимое улучшение одного или нескольких параметров болезненного состояния, или по отсутствию усугубления или развития симптомов в тех случаях, когда их, при иных обстоятельствах, прогнозировали. В качестве примера благоприятное изменение измеряемого параметра заболевания по меньшей мере на 10% и предпочтительно по меньшей мере на 20, на 30, на 40, на 50% или более может служить показателем эффективного лечения. Об эффективности данного лекарственного средства на основе iRNA или состава с таким лекарственным средством можно также судить при помощи экспериментальной животной модели данного заболевания, которая известна в уровне техники. При использовании экспериментальной животной модели эффективность лечения доказана, когда наблюдают статистически значимое снижение маркера или ослабление симптома.
- 53 037115
В качестве альтернативы эффективность можно измерять по уменьшению тяжести заболевания, которое определено специалистом в области техники, связанной с диагностикой, исходя из принятой в клинической практике шкалы оценивания тяжести заболевания.
В некоторых вариантах осуществления способов согласно настоящему изобретению, экспрессия HAO1 снижается в течение длительного отрезка времени, например по меньшей мере одной недели, двух недель, трех недель или четырех недель, или дольше. Например, в некоторых случаях экспрессия гена HAO1 подавляется по меньшей мере приблизительно на 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 98 или 100% путем введения средства на основе iRNA, описанного в данном документе. В некоторых вариантах осуществления ген НАО1 подавляется по меньшей мере приблизительно на 60, 70 или 80% путем введения средства на основе iRNA. В некоторых вариантах осуществления ген НАО1 подавляется по меньшей мере приблизительно на 85, 90 или 95% путем введения двухнитевого олигонуклеотида. В другом варианте осуществления ген НАО1 остается подавленным в течение 7 дней, 10 дней, 20 дней, 30 дней или дольше после введения.
Введение.
Средства для RNAi согласно настоящему изобретению можно вводить субъекту при помощи любого способа введения, известного в уровне техники, в том числе без ограничения подкожного, внутривенного, внутримышечного, внутриглазного, внутрибронхиального, внутриплеврального, внутрибрюшинного, внутриартериального, лимфатического, спинномозгового и любых их комбинаций. В некоторых вариантах осуществления средства вводят подкожно.
В некоторых вариантах осуществления введение осуществляют посредством инъекции депопрепарата. Инъекция депо-препарата может высвобождать средство для RNAi устойчивым образом в течение длительного периода времени. Таким образом, инъекция депо-препарата может снижать частоту введения доз, необходимых для получения необходимого эффекта, например необходимого ингибирования HAO1 или терапевтического или профилактического эффекта. Инъекция депо-препарата может также предусматривать более устойчивые концентрации в сыворотке крови. Инъекции депо-препарата могут предусматривать подкожные инъекции или внутримышечные инъекции. В некоторых вариантах осуществления инъекция депо-препарата является подкожной инъекцией.
В некоторых вариантах осуществления введение осуществляют посредством насоса. Насос может быть внешним насосом или имплантированным хирургическим путем насосом. В определенных вариантах осуществления насос является подкожно имплантированным осмотическим насосом. В других вариантах осуществления насос является инфузионным насосом. Инфузионный насос можно применять для внутривенных, подкожных, артериальных или эпидуральных инфузий. В некоторых вариантах осуществления инфузионный насос является подкожным инфузионным насосом. В других вариантах осуществления насос является имплантированным хирургическим путем насосом, который доставляет средство для RNAi в печень.
Другие способы введения включают эпидуральное, внутрицеребральное, интрацеребровентрикулярное, назальное введение, внутриартериальное, внутрисердечное, внутрикостную инфузию, подоболочечное, и интравитреальное, и легочное. Способ введения можно выбрать, исходя из того, необходимо местное или системное лечение, и исходя из области, которая подлежит лечению. Путь и место введения можно выбрать для усиления целенаправленного воздействия.
Способ включает введение средства на основе iRNA, например дозы, достаточной для понижения уровней мРНК HAO1 в течение по меньшей мере 5, более предпочтительно 7, 10, 14, 21, 25, 30 или 40 дней; и необязательно введение второй однократной дозы dsRNA, где вторую однократную дозу вводят по меньшей мере через 5, более предпочтительно через 7, 10, 14, 21, 25, 30 или 40 дней после введения первой однократной дозы, за счет чего осуществляется ингибирование экспрессии гена НАО1 у субъекта.
В одном варианте осуществления дозы средства на основе iRNA согласно настоящему изобретению вводят не более одного раза каждые четыре недели, не более одного раза каждые три недели, не более одного раза каждые две недели или не более одного раза каждую неделю. В другом варианте осуществления введения могут продолжаться в течение одного, двух, трех или шести месяцев, или одного года, или дольше. В другом варианте осуществления дозы средства на основе iRNA согласно настоящему изобретению вводят один раз в неделю в течение трех недель.
Как правило, средство на основе iRNA не активизирует иммунную систему, например оно не повышает уровни цитокинов, как, например, уровни TNF-альфа или IFN-альфа. Например, при измерении при помощи анализов, таких как анализ РВМС in vitro, как, например, описано в данном документе, повышение уровней TNF-альфа или IFN-альфа составляет менее 30, 20 или 10% от уровня в контрольных клетках, обработанных контрольной dsRNA, такой как dsRNA, которая не оказывает целенаправленного воздействия на НАО1.
Например, субъекту можно вводить терапевтическое количество средства на основе iRNA, как, например, 0,3, 0,5, 1,0, 1,5, 2,0, 2,5 или 3 мг/кг dsRNA. Средство на основе iRNA можно вводить путем внутривенной инфузии в течение некоторого периода времени, как, например, в течение периода, составляющего 5, 10, 15, 20 или 25 мин. Введение повторяют, например, регулярно, как, например, раз в
- 54 037115 две недели (т.е. каждые две недели) в течение одного, двух, трех, четырех месяцев или дольше. После осуществления режима первичного лечения лекарственные препараты можно вводить менее часто. Например, после введения раз в две недели в течение трех месяцев введение можно повторять один раз в месяц в течение шести месяцев или года или дольше. Введение средства на основе iRNA может снижать уровни НАО1, например, в клетке, ткани, крови, моче или другой части организма пациента по меньшей мере на 10%, по меньшей мере на 15%, по меньшей мере на 20%, по меньшей мере на 25%, по меньшей мере на 30%, по меньшей мере на 40%, по меньшей мере на 50%, по меньшей мере на 60%, по меньшей мере на 70%, по меньшей мере на 80% или по меньшей мере на 90% или более.
Перед введением полной дозы средства на основе iRNA пациентам можно вводить меньшую дозу, как, например, дозу, приводящую к менее чем 5% инфузионной реакции, и наблюдать их в отношении нежелательных явлений, как, например, аллергических реакций, или в отношении повышенных уровней липидов или кровяного давления. В другом примере пациента можно наблюдать в отношении нежелательных иммуностимулирующих эффектов, как, например, повышенных уровней цитокина (например, TNF-альфа или INF-альфа).
Пациенты, нуждающиеся в средстве для RNAi к HAO1, могут быть идентифицированы путем сбора семейного анамнеза. Медицинский работник, такой как врач, медицинская сестра, или член семьи могут принять во внимание семейный анамнез перед назначением или введением dsRNA для HAO1. Также можно выполнять ДНК-тест в отношении пациента для идентификации мутации в гене AGT1 перед введением пациенту средства для RNAi к HAO1. Диагноз РН1 может быть подтвержден при помощи любого теста, хорошо известного специалисту в данной области.
Лечебный или предупредительный эффект является очевидным, когда наблюдается статистически значимое улучшение одного или нескольких параметров болезненного состояния, или по отсутствию усугубления или развития симптомов в тех случаях, когда их, при иных обстоятельствах, прогнозировали. В качестве примера благоприятное изменение измеряемого параметра заболевания по меньшей мере на 10% и предпочтительно по меньшей мере на 20, на 30, на 40, на 50% или более может служить показателем эффективного лечения. Об эффективности для данного средства на основе iRNA согласно настоящему изобретению или состава такого средства на основе iRNA можно также судить при помощи экспериментальной животной модели для данного заболевания, которая известна в уровне техники. При использовании экспериментальной животной модели, эффективность лечения доказана, когда наблюдают статистически значимое снижение маркера или ослабление симптома.
Доза средства для RNAi, которую вводят субъекту, может быть подобрана с уравновешиванием риска и пользы определенной дозы, например, для достижения необходимого уровня супрессии гена НАО1 (который определяют, например, исходя из супрессии мРНК НАО1, экспрессии белка НАО1 или снижения уровней оксалатов) или необходимого терапевтического или профилактического эффекта, вместе с тем одновременно избегая нежелательного побочного действия.
В некоторых вариантах осуществления средство для RNAi вводят при помощи двух или более доз. При необходимости облегчить проведение повторяющихся или частых инфузий может быть целесообразной имплантация устройства для доставки, например насоса, полупостоянного стента (например, внутривенного, внутрибрюшинного, интрацистернального или внутрисуставного) или емкости. В некоторых вариантах осуществления число или количество последовательных доз зависит от достижения необходимого эффекта, например супрессии гена HAO1, или достижения терапевтического или профилактического эффекта, например уменьшения перегрузки железом. В некоторых вариантах осуществления средство для RNAi вводят в соответствии со схемой. Например, средство для RNAi можно вводить один раз в неделю, два раза в неделю, три раза в неделю, четыре раза в неделю или пять раз в неделю. В некоторых вариантах осуществления схема предусматривает введения с равными интервалами, например ежечасно, каждые 4, каждые 6, каждые 8, каждые 12 ч, ежедневно, каждые 2 дня, каждые 3 дня, каждые 4 дня, каждые 5 дней, еженедельно, раз в две недели или раз в месяц. В других вариантах осуществления схема предусматривает введения с небольшим интервалом с последующим более длительным периодом времени, в течение которого средство не вводят. Например, схема может включать первичный набор доз, которые вводят в течение относительно короткого периода времени (например, приблизительно каждые 6 ч, приблизительно каждые 12 ч, приблизительно каждые 24 ч, приблизительно каждые 48 ч или приблизительно каждые 72 ч) с последующим более длительным периодом времени (например, приблизительно 1 неделя, приблизительно 2 недели, приблизительно 3 недели, приблизительно 4 недели, приблизительно 5 недель, приблизительно 6 недель, приблизительно 7 недель или приблизительно 8 недель), в течение которого средство для RNAi не вводят. В одном варианте осуществления средство для RNAi первоначально вводят каждый час, а впоследствии вводят с более длительными интервалами (например, раз в день, раз в неделю, раз в две недели или раз в месяц). В другом варианте осуществления средство для RNAi первоначально вводят ежедневно, а впоследствии вводят с более длительными интервалами (например, раз в неделю, раз в две недели или раз в месяц). В определенных вариантах осуществления более длительный интервал увеличивается со временем, или его определяют на основе достижения необходимого эффекта. В конкретном варианте осуществления средство для RNAi вводят один раз в день в течение первой недели с последующим введением доз раз в неделю, начиная с восьмого дня введения. В
- 55 037115 другом конкретном варианте осуществления средство для RNAi вводят через день в течение первой недели с последующим введением доз раз в неделю, начиная с восьмого дня введения.
В некоторых вариантах осуществления средство для RNAi вводят при режиме дозирования, который включает фазу насыщения'' из введений с небольшими интервалами, за которой может следовать ''фаза поддержания'', в которой средство для RNAi вводят с более длительными интервалами. В одном варианте осуществления фаза насыщения включает пять ежедневных введений средства для RNAi в течение первой недели. В другом варианте осуществления фаза поддержания включает введения средства для RNAi один или два раза в неделю. В дополнительном варианте осуществления фаза поддержания длится 5 недель.
Любую из этих схем необязательно можно повторять с обеспечением одного или нескольких повторов. Число повторов может зависеть от достижения необходимого эффекта, например супрессии гена HAO1, и/или достижения терапевтического или профилактического эффекта, например снижения уровней оксалатов или уменьшения симптома РН1.
В другом аспекте в настоящем изобретении описан способ инструктирования конечного пользователя, например лица, осуществляющего уход или лечение, или субъекта, в отношении того, как вводить средство на основе iRNA, описанное в данном документе. Способ включает, необязательно, предоставление конечному пользователю одной или нескольких доз средства на основе iRNA и инструктирование конечного пользователя по введению средства на основе iRNA в режиме, описанном в данном документе, таким образом, инструктируя конечного пользователя.
VII. Наборы.
Настоящее изобретение также предусматривает наборы для применения любого из средств на основе iRNA и/или осуществления любого из способов согласно настоящему изобретению. Такие наборы включают одно или несколько средств для RNAi и инструкции по применению, например инструкции для ингибирования экспрессии HAO1 в клетке путем приведения клетки в контакт со средством(ами) для RNAi в количестве, эффективном для ингибирования экспрессии HAO1. Наборы могут необязательно дополнительно содержать средства для приведения клетки в контакт со средством для RNAi (например, устройство для инъекции) или средства для определения степени ингибирования HAO1 (например, средства для определения степени ингибирования мРНК или белка HAO1). Такие средства для определения степени ингибирования HAO1 могут предусматривать средства для получения образца из организма субъекта, например образец плазмы крови. Наборы согласно настоящему изобретению необязательно могут дополнительно содержать средства для введения средства(средств) для RNAi субъекту или средства для определения терапевтически эффективного или профилактически эффективного количества.
VIII. Диагностические маркеры для РН1 и родственных состояний/
Также в данном документе описаны маркеры и способы для диагностики болезненных состояний, вызванных сверхсинтезом оксалатов, в частности РН1 и родственных состояний, а также средства для лечения указанных состояний.
Согласно другому аспекту настоящее изобретение относится к способу лечения РН1-состояния у субъекта (заболеваний с образованием камней, в особенности РН1). Диагностический способ включает стадии (а) осуществления нокдауна экспрессии HAO1 у субъекта, (b) получения биологической сыворотки крови из организма указанного субъекта и (b) определения уровня гликолата в указанной сыворотке крови. Следует принимать во внимание, что повышенный уровень гликолата в сыворотке крови по сравнению с отрицательным контролем указывает на ингибирование способности фермента гликолатоксидазы предотвращать образование оксалатов, что является причиной РН1-состояний.
В одном варианте осуществления в данном документе описан набор для диагностики PH1состояния, причем указанный набор включает следующее: (а) средство для определения присутствия представляющего интерес аналита в сыворотке крови, где указанным представляющим интерес аналитом является один из гликолатов; и (b) средства градуирования. Например, указанным представляющим интерес аналитом является гликолат, при этом указанным средством является siRNA, целенаправленно воздействующая на HAO1.
Если не указано иное, все технические и научные термины, используемые в данном документе, имеют такое значение, которое обычно понятно специалисту в области техники, к которой относится настоящее изобретение. Хотя способы и материалы, аналогичные или эквивалентные таковым, описанным в данном документе, можно применять в практическом осуществлении или тестировании iRNA и способов, описанных в настоящем изобретении, подходящие способы и материалы описаны ниже. Все публикации, заявки на выдачу патентов, патенты и другие литературные источники, которые упоминаются в данном документе, включены при помощи ссылки в полном объеме. В случае конфликта настоящее описание, включая определения, будет иметь преимущественную силу. Кроме того, материалы, способы и примеры являются только иллюстративными и не подразумеваются как ограничивающие.
- 56 037115
Примеры
Материалы и способы.
Следующие материалы и способы использовали в примерах. Используемые в данном документе НАО и GO используют взаимозаменяемо.
Синтез siRNA.
Однонитевые РНК получали при помощи твердофазного синтеза в масштабе, составляющем 1 мкмоль, с использованием синтезирующего устройства Expedite 8909 (Applied Biosystems, Applera Deutschland GmbH, Дармштадт, Германия) и стекла с контролируемым размером пор (CPG, 500А, Proligo Biochemie GmbH, Гамбург, Германия) в качестве твердой подложки. РНК и содержащую 2'-О-метилнуклеотиды РНК получали при помощи твердофазного синтеза с использованием соответствующих фосфорамидатов и 2'-О-метил-фосфорамидатов соответственно (Proligo Biochemie GmbH, Гамбург, Германия). Эти структурные блоки встраивали в выбранные места в пределах последовательности олигорибонуклеотидной цепи при помощи общепринятой фосфорамидитной химии нуклеозидов, как, например, описанной в Current protocols in nucleic acid chemistry, Beaucage, S.L. et al. (Eds.), John Wiley & Sons, Inc., New York, NY, USA. Фосфотиоатные связи вводили путем замены окисляющего йодного раствора раствором реагента Beaucage (Chruachem Ltd, Глазго, Великобритания) в ацетонитриле (1%). Далее вспомогательные реагенты получали от Mallinckrodt Baker (Грисхайм, Германия).
Снятие защиты и очистку неочищенных олигорибонуклеотидов выполняли при помощи анионообменной HPLC согласно установленным процедурам. Выходы и концентрации определяли по УФ-поглощению раствора соответствующей РНК при длине волны, составляющей 260 нм, при помощи спектрального фотометра (DU 640В, Beckman Coulter GmbH, Унтершлайсхайм, Германия).
Двухнитевую РНК получали при помощи смешивания эквимолярного раствора комплементарных нитей в буфере для гибридизации (20 мМ фосфата натрия, рН 6,8; 100 мМ хлорида натрия), затем нагревали на водяной бане при 85-90°С в течение 3 мин и охлаждали до комнатной температуры в течение периода, составляющего 3-4 ч. Раствор с гибридизированной РНК хранили при -20°С до момента использования.
В некоторых случаях дуплекс (dsRNA) синтезировали неоднократно. Разные партии помечали разными добавочными номерами. К примеру, AD-62933.1 и AD-62933.2 представляют собой разные партии одного и того же дуплекса.
Культура клеток и трансфекции.
Использовали первичные гепатоциты макака-крабоеда (РСН) и первичные гепатоциты мыши (РМН). PCH (Celsis, № М003055, серия СВТ) или РМН (выделенные непосредственно перед процедурой) трансфицировали путем добавления 14,8 мкл Opti-MEM с 0,2 мкл Lipofectamine RNAiMax на лунку (Invitrogen, Карлсбад, Калифорния, № по кат. 13778-150) к 5 мкл дуплексов siRNA на лунку в 96-луночном планшете и инкубировали при комнатной температуре в течение 15 мин. Затем к смеси siRNA добавляли 80 мкл сред для клеток крыс in vitro GRO CP (in vitro Technologies), содержащих ~2x 104 клеток РСН или РМН. Клетки инкубировали в течение 24 ч перед очисткой РНК. Эксперименты с использованием однократной дозы выполняли при конечной концентрации дуплекса, составляющей 10 или 20 нМ и 0,1 или 0,2 нМ, и эксперименты для определения эффекта дозы проводили в диапазоне доз с конечной концентрацией дуплекса, составляющей от 10 нМ до 36 фМ, с использованием 86-кратных разведений.
Выделение общей РНК.
Общую РНК выделяли при помощи набора DYNABEADS mRNA Isolation Kit (Invitrogen, № по кат. 610-12). Клетки собирали и лизировали в 150 мкл лизирующего/связывающего буфера, затем перемешивали в течение 5 мин при 850 об/мин с помощью Eppendorf Thermomixer (скорость перемешивания была одинаковой на всем протяжении процесса). 10 мкл магнитных гранул и 80 мкл смеси лизирующего/связывающего буфера добавляли в круглодонный планшет и перемешивали в течение 1 мин. Магнитные гранулы удерживали при помощи магнитной установки и супернатант удаляли без смещения гранул. После удаления супернатанта лизированные клетки добавляли к оставшимся гранулам и перемешивали в течение 5 мин. После удаления супернатанта магнитные гранулы промывали 2 раза 150 мкл промывочного буфера А и перемешивали в течение 1 мин. Гранулы вновь удерживали и супернатант удаляли. Затем гранулы промывали 150 мкл промывочного буфера В, удерживали и супернатант удаляли. На следующей стадии гранулы промывали 150 мкл элюирующего буфера, удерживали и супернатант удаляли. Гранулы оставляли высыхать в течение 2 мин. После высыхания добавляли 50 мкл элюирующего буфера и перемешивали в течение 5 мин при 70°С. Гранулы удерживали с помощью магнита в течение 5 мин. Удаляли 40 мкл супернатанта и вносили в другой 96-луночный планшет.
Синтез кДНК.
Синтез кДНК осуществляли с использованием набора ABI High capacity cDNA reverse transcription kit (Applied Biosystems, Фостер-Сити, Калифорния, № по кат. 4368813) Мастер-микс из 2 мкл 10Х буфера, 0,8 мкл 25Х dNTP, 2 мкл случайных праймеров, 1 мкл обратной транскриптазы, 1 мкл ингибитора РНКазы и 3,2 мкл Н2О на реакцию добавляли в 10 мкл общей РНК. кДНК получали с использованием термоциклера Bio-Rad С-1000 или S-1000 (Hercules, Калифорния) посредством следующих стадий: 25°С
- 57 037115 мин, 37°С 120 мин, 85°С 5 с, хранение при 4°С.
ПЦР в режиме реального времени.
мкл кДНК добавляли к мастер-миксу, содержащему 0,5 мкл зондов TaqMan для GAPDH мыши (№ по кат. 4352339Е, Life Technologies) или специально разработанных зондов TaqMan для GAPDH макака-крабоеда: F - GCATCCTGGGCTACACTGA (SEQ ID NO: 13), R - TGGGTGTCGCTGTTGAAGTC (SEQ ID NO: 14), зонд - CCAGGTGGTCTCCTCC (SEQ ID NO: 15)), 0,5 мкл НАО1 человека или мыши (HS00213909_M1, который является перекрестнореагирующим с НОА1 макака-крабоеда, Mm 00439249_m1 для анализов с мышиным, life technologies) и 5 мкл мастер-микса с зондом Lightcycler 480 (Roche, № по кат. 04887301001) на лунку в 50 384-луночных планшетах (Roche, № по кат. 04887301001). ПЦР в режиме реального времени выполняли в системе для ПЦР в режиме реального времени LightCycler480 (Roche) с применением ΔΔCt (RQ)-анαлиза. Каждый дуплекс тестировали при двух независимых трансфекциях и каждую трансфекцию оценивали в двух повторностях, если не указано иное в итоговых таблицах.
Для расчета относительного кратного изменения данные в реальном времени анализировали с использованием способа ΔΔCt и нормализовали относительно анализов, выполненных с клетками, трансфицированными с помощью 10 нМ AD-1955, или ложно-трансфицированными клетками. Значения IC50 рассчитывали с применением модели согласования по 4 параметрам с использованием XLFit и нормализовали в соответствии с данными для клеток, трансфицированных AD-1955, или интактных клеток.
Смысловая и антисмысловая последовательности AD-1955 представляют собой:
СМЫСЛОВАЯ: 5'-cuuAcGcuGAGuAcuucGAdTsdT-3' (SEQ ID NO: 16) и
АНТИСМЫСЛОВАЯ: 5'-UCGAAGuACUcAGCGuAAGdTsdT-3' (SEQ ID NO: 17).
Таблица В
Сокращения нуклеотидных мономеров, используемые в представлении последовательности нуклеиновой кислоты
Сокращение | Нуклеотид(ы) |
А | Аденозин-3'-фосфат |
АЬ | Бета-Ь-аденозин-З'-фосфат |
Af | 2'-Фтораденозин-3'-фосфат |
Afs | 2'-Фтораденозин-3'-фосфотиоат |
As | Аденозин-3'-фосфотиоат |
С | Цитидин-3'-фосфат |
Cb | Бета-Ь-цитидин-З'-фосфат |
Cf | 2'-Фторцитидин-3'-фосфат |
Cfs | 2'-Фторцитидин-3'-фосфотиоат |
Cs | Цитидин-3'-фосфотиоат |
G | Гуанозин-3'-фосфат |
Gb | Бета-Ц-гуанозин-З'-фосфат |
Gbs | Бета-Ь-гуанозин-З'-фосфотиоат |
Gf | 2'-Фторгуанозин-3'-фосфат |
Gf s | 2'-Фторгуанозин-3'-фосфотиоат |
Gs | Гуанозин-3'-фосфотиоат |
T | 5'-Метилуридин-3'-фосфат |
Tf | 2'-Фтор-5-метилуридин-З'-фосфат |
Tfs | 2'-Фтор-5-метилуридин-З'-фосфотиоат |
Ts | 5-Метилуридин-З'-фосфотиоат |
U | Уридин-3'-фосфат |
Uf | 2'-Фторуридин-3'-фосфат |
Ufs | 2'-Фторуридин-3'-фосфотиоат |
Us | Уридин-3'-фосфотиоат |
N | Любой нуклеотид (G, А, С, Т или U) |
a | 2'-0-Метиладенозин-З'-фосфат |
as | 2'-0-Метиладенозин-З'-фосфотиоат |
c | 2'-О-Метилцитидин-3'-фосфат |
cs | 2'-О-Метилцитидин-3'-фосфотиоат |
g | 2'-0-Метилгуанозин-З'-фосфат |
gs | 2'-0-Метилгуанозин-З'-фосфотиоат |
- 58 037115
t | 2'-О-Метил-5-метилуридин-З'-фосфат |
ts | 2'-О-Метил-5-метилуридин-З'-фосфотиоат |
U | 2'-О-Метилуридин-3'-фосфат |
US | 2'-О-Метилуридин-3'-фосфотиоат |
dT | 2'-Дезокситимидин |
dTs | 2'-Дезокситимидин-3'-фосфотиоат |
dU | 2'-Дезоксиуридин |
s | Фосфотиоатная связь |
L96 | N-[Трис(GalNAc-алкил)амидодеканоил)]-4гидроксипролинол-Нур-(GalNAc-алкил)3 |
(Aeo) | 2'-0-Метоксиэтиладенозин-З'-фосфат |
(Aeos ) | 2'-0-Метоксиэтиладенозин-З'-фосфотиоат |
(Geo) | 2'-0-Метоксиэтилгуанозин-З'-фосфат |
(Geos ) | 2'-0-Метоксиэтилгуанозин-З'-фосфотиоат |
(Teo) | 2'-О-Метоксиэтил-5-метилуридин-З'-фосфат |
(Teos ) | 2'-О-Метоксиэтил-5-метилуридин-З'-фосфотиоат |
(m5Ceo) | 2'-О-Метоксиэтил-5-метилцитидин-З'-фосфат |
(m5Ceos) | 2'-О-Метоксиэтил-5-метилцитидин-З'-фосфотиоат |
(A3m) | 3'-О-Метиладенозин-2'-фосфат |
(A3mx) | 3'-О-Метилксилофуранозиладенозин-2'-фосфат |
(G3m) | 3'-О-Метилгуанозин-2'-фосфат |
(G3mx) | 3'-О-Метилксилофуранозилгуанозин-2'-фосфат |
(C3m) | 3'-О-Метилцитидин-2'-фосфат |
(C3mx) | 3'-О-Метилксилофуранозилцитидин-2'-фосфат |
(U3m) | 3'-О-Метилуридин-2'-фосфат |
(U 3mx) | 3'-О-Метилксилоуридин-2'-фосфат |
(Chd) | 2'-О-Гексадецилцитидин-3'-фосфат |
(pshe) | Гидроксиэтилфосфоротиоат |
(Uhd) | 2'-О-Гексадецилуридин-3'-фосфат |
(Tgn) | Тимидин-гликоль-нуклеиновая кислота (GNA), 3-изомер |
(Cgn) | Цитидин-гликоль-нуклеиновая кислота (GNA) |
(Chd) | 2'-О-Гексадецилцитидин-3'-фосфат |
(Ggn) | 2'-О-Гексадецилцитидин-3'-фосфат |
(Agn) | Аденозин-гликоль-нуклеиновая кислота (GNA) |
P | 5'-Фосфат |
(m5Cam) | 2'-0-(N-Метилацетамид)-5-метилцитидин-З'-фосфат |
(m5Cams) | 2'-0-(N-Метилацетамид)-5-метилцитидин-З'-фосфоротиоат |
(Tam) | 2'-0-(N-Метилацетамид)тимидин-3'-фосфат |
(Tams ) | 2'-0-(N-Метилацетамид)тимидин-3'-фосфоротиоат |
(Aam) | 2'-0-(N-Метилацетамид)аденозин-3'-фосфат |
(Aams) | 2'-0-(N-Метилацетамид)аденозин-3'-фосфоротиоат |
(Gam) | 2'-0-(N-Метилацетамид)гуанозин-3'-фосфат |
(Gams ) | 2'-0-(N-Метилацетамид)гуанозин-3'-фосфоротиоат |
Y34 | Лишенный азотистого основания 2'-0-метил |
Y44 | 2-Гидроксиметилтетрагидрофуран-5-фосфат |
Пример 1. Конструирование, специфичность и прогнозирование эффективности siRNA.
Конструирование siRNA выполняли для идентификации siRNA, целенаправленно воздействующих на транскрипты HAO1 человека, макака-крабоеда, мыши и крысы, аннотированные в базе данных генов N CBI (http: //www.ncbi. nlm.nih.gov/gene/).
При конструировании использовали следующие транскрипты из коллекции эталонных последовательностей NCBI: мРНК HAO1 человека (Homo sapiens) представляет собой NM_017545.2; мРНК HAO1 макака-крабоеда (Масаса fascicularis) представляет собой ХМ_005568381.1; мРНК HAO1 мыши (Mus musculus) представляет собой NM 010403.2; мРНК HAO1 крысы (Rattus norvegicus) представляет собой ХМ_006235096.1.
- 59 037115
Вследствие высокого расхождения последовательностей примат/грызун дуплексы siRNA конструировали в нескольких отдельных партиях, в том числе без ограничения партиях, содержащих дуплексы, соответствующие только транскриптам человека и яванского макака; только транскриптам человека, яванского макака, мыши и крысы и только транскриптам мыши и крысы. Все дуплексы siRNA конструировали так, чтобы они имели 100% идентичность с приведенными транскриптом человека и транскриптами других видов, рассмотренными в каждой партии конструирования (выше).
Специфичность всех возможных олигонуклеотидов из 19 нуклеотидов прогнозировали исходя из каждой последовательности. Затем отбирали кандидатные олигомеры из 19 нуклеотидов, у которых отсутствовали повторения длиннее 7 нуклеотидов. Эти siRNA, 1069 кандидатных человека/яванского макака, 184 человека/яванского макака/мыши/крысы и 579 мыши/крысы, использовали при обширных поисках в отношении соответствующих транскриптом (определенные как набор из записей NM и ХМ в пределах наборов эталонных последовательностей человека, яванского макака, мыши или крысы в NCBI) с применением исчерпывающего алгоритма грубой силы, включенного в скрипт на питоне BruteForce.ру. Далее скрипт разбирал выравнивания транскрипт-олигонуклеотид с получением балла, основанного на положении и количестве ошибочных спариваний между siRNA и любым потенциальным нецелевым транскриптом. Нецелевой' балл взвешивали для выделения различий в затравочном участке siRNA в положениях 2-9 от 5'-конца молекулы. Каждой паре олигонуклеотид-транскрипт из поиска грубой силы присваивали балл для ошибочного спаривания путем суммирования отдельных баллов для ошибочного спаривания; ошибочные спаривания в положениях 2-9 определяли как 2,8, ошибочные спаривания в положениях сайта расщепления 10-11 определяли как 1,2 и ошибочные спаривания в участке 12-19 определяли как 1,0. Дополнительное нецелевое прогнозирование выполняли путем сравнения встречаемости гептамеров и октамеров, полученных из трех отличных полученных из затравки гексамеров каждого олигонуклеотида. Гексамеры из положений 2-7 по отношению к 5'-началу использовали для создания 2 гептамеров и одного октамера. Гептамер1 создавали путем добавления А на 3'-конец гексамера; гептамер2 создавали путем добавления А на 5'-конец гексамера; октамер создавали путем добавления А как на 5'-конец, так и на 3'-конец гексамера. Предварительно рассчитывали встречаемость октамеров и гептамеров в 3'UTRome человека, яванского макака, мыши или крысы (определенные как подпоследовательности транскриптом из базы данных эталонных последовательностей в NCBI, где конец кодирующего участка, CDS, является четко определенным). Встречаемость октамеров нормализовали по отношению к встречаемости гептамеров с использованием медианного значения из диапазона встречаемостей октамеров. Затем рассчитывали mirSeedScore путем вычисления суммы ((3 х нормализованное подсчитанное число для октамеров) + (2 х подсчитанное число для гептамера 2) + (1 х подсчитанное число для гептамера 1)).
Обоим нитям siRNA присваивали категорию специфичности согласно рассчитанным баллам: балл выше 3 квалифицировали как высокоспецифичная, равный 3 как специфичная и от 2,2 до 2,8 квалифицировали как умеренно специфичная. siRNA упорядочивали по специфичности антисмысловой нити. Затем отбирали дуплексы из наборов вариантов человека/яванского макака и мыши/крысы, у антисмысловых олигонуклеотидов которых отсутствовала GC в первом положении, отсутствовал G в обоих положениях 13 и 14, и присутствовали 3 или более U или А в затравочном участке (характеристики дуплексов с высокой прогнозированной эффективностью). Подобным образом отбирали дуплексы из наборов вариантов человека/яванского макака/мыши и человека/яванского макака/мыши/крысы, в которых присутствовали 3 или более U или А в затравочном участке.
Кандидатные коньюгированные с GalNAc дуплексы, 21 и 23 нуклеотида в длину для смысловой и антисмысловой нитей соответственно, конструировали путем удлинения антисмысловых олигонуклеотидов из 19 нуклеотидов 4 дополнительными нуклеотидами в 3'-направлении (сохраняя полную комплиментарность с целевым транскриптом). Смысловую нить описывали как обратную комплементарную последовательность первых 21 нуклеотида антисмыслового олигомера из 23 нуклеотидов. Выбирали такие дуплексы, которые сохраняли полные соответствия ко всем выбранным транскриптам видов на протяжении всех 23 нуклеотидов.
Антисмысловые нити, которые содержали С или G в первом положении с 5'-конца, модифицировали так, чтобы они имели U в первом положении с 5'-конца, если только осуществление этого не приводило к ряду из 4 или более смежных U (5А3'), в таком случае их модифицировали так, чтобы они имели А в первом положении с 5'-конца. Смысловые нити, подлежащие спариванию в дуплексы с этими антисмысловыми нитями с UA заменой, соответственно модифицировали для сохранения комплементарности. Примеры, описанные ниже, включают в себя AD-62989 и AD-62993.
Синтезировали олигонуклеотиды из 21/23 нуклеотидов, являющиеся в общей сложности 31 смысловой и 31 антисмысловой нитями, полученными из транскрипта человека/яванского макака, 19 смысловыми и 19 антисмысловыми нитями, полученными из транскрипта человека/яванского макака/мыши/крысы, и 48 смысловыми и 48 антисмысловыми нитями, полученными из транскрипта мыши/крысы, и составляли в коньюгированные с GalNAc дуплексы.
- 60 037115
Последовательности смысловой и антисмысловой нитей модифицированных дуплексов показаны в табл. 1, а последовательности смысловой и антисмысловой нитей немодифицированных дуплексов показаны в табл. 2.
Таблица 1а
Модифицированные последовательности HAO1
Название дуплекса | Последовательность смысловой нити | SEQ ID NO: | Последовательность антисмысловой нити | SEQ ID NO: | Вид |
AD-62933 | GfsasAfuGfuGfaAfAfGfuC faUfcGfaCfaAfL96 | 18 | usUfsgUfcGfaUfgAfcuuUfс AfcAfuUfcsusg | 89 | Hs/Mm |
AD-62939 | UfsusUfuCfaAfuGfGfGfuG fuCfcUfaGfgAfL96 | 19 | usCfscUfaGfgAfcAfcccAfu UfgAfaAfasgsu | 90 | Hs/Mm |
AD-62944 | GfsasAfaGfuCfaUfCfGfaC faAfgAfcAfuUfL96 | 20 | asAfsuGfuCfuUfgUfcgaUfg Af cUfuUfcsasc | 91 | Hs/Mm |
AD-62949 | UfscsAfuCfgAfcAfAfGfaC faUfuGfgUfgAfL96 | 21 | usCfsaCfcAfaUfgUfcuuGfu CfgAfuGfascsu | 92 | Hs/Mm |
AD-62954 | UfsusUfcAfaUfgGfGfUfgU fcCfuAfgGfaAfL96 | 22 | usUfscCfuAfgGfaCfaccCfa UfuGfaAfasasg | 93 | Hs/Mm |
AD-62959 | AfsasUfgGfgUfgUfCfCfuA fgGfaAfcCfuUfL96 | 23 | asAf sgGfuUfcCfuAfggaCfa CfcCfaUfusgsa | 94 | Hs/Mm |
AD-62964 | GfsasCfaGfuGfcAfCfAfaU faUfuUfuCfcAfL96 | 24 | usGfsgAfaAfaUfaUfuguGfc Af cUfgUfcsasg | 95 | Hs/Mm |
AD-62 9 69 | AfscsUfuUfuCfaAfUfGfgG fuGfuCfcUfaAfL96 | 25 | usUfsaGfgAfcAfcCfcauUfg AfaAfaGfuscsa | 96 | Hs/Mm |
AD-62934 | AfsasGfuCfaUfcGfAfCfaA fgAfcAfuUfgAfL96 | 26 | usCfsaAfuGfuCfuUfgucGfa UfgAfcUfususc | 97 | Hs/Mm |
AD-62940 | AfsusCfgAfcAfaGfAfCfaU fuGfgUfgAfgAfL96 | 27 | usCfsuCfaCfcAfaUfgucUfu GfuCfgAfusgsa | 98 | Hs/Mm |
AD-62945 | GfsgsGfaGfaAfaGfGfUfgU fuCfaAfgAfuAfL96 | 28 | usAfsuCfuUfgAfaCfaccUfu UfcUfcCfcscsc | 99 | Hs/Mm |
AD-62950 | CfsusUfuUfcAfaUfGfGfgU fgUfcCfuAfgAfL96 | 29 | usCfsuAfgGfaCfaCfccaUfu GfaAfaAfgsusc | 100 | Hs/Mm |
AD-62 955 | UfscsAfaUfgGfgUfGfUfcC fuAfgGfaAfcAfL96 | 30 | usGfsuUfcCfuAfgGfacaCfc CfaUfuGfasasa | 101 | Hs/Mm |
- 61 037115
AD-62 9 60 | UfsusGfaCfuUfuUfCfAfaU fgGfgUfgUfcAfL96 | 31 | usGfsaCfaCfcCfaUfugaAfa AfgUfcAfasasa | 102 | Hs/Mm |
AD-62 9 65 | AfsasAfgUfcAfuCfGfAfcA faGfaCfaUfuAfL96 | 32 | usAf saUfgUfcUfuGfucgAfu GfaCfuUfuscsa | 103 | Hs/Mm |
AD-62970 | CfsasGfgGfgGfaGfAfAfaG fgUfgUfuCfaAfL96 | 33 | usUfsgAfaCfaCfcUfuucUfc CfcCfcUfgsgsa | 104 | Hs/Mm |
AD-62935 | CfsasUfuGfgUfgAfGfGfaA faAfaUfcCfuUfL96 | 34 | asAfsgGfaUfuUfuUfccuCfa CfcAfaUfgsusc | 105 | Hs/Mm |
AD-62941 | AfscsAfuUfgGfuGfAfGfgA faAfaAfuCfcUfL96 | 35 | asGfsgAfuUfuUfuCfcucAfc CfaAfuGfuscsu | 106 | Hs/Mm |
AD-62946 | Af sgsGfgGfgAfgAfAfAfgG fuGfuUfcAfaAfL 9 6 | 36 | usUfsuGfaAfcAfcCfuuuCfu CfcCfcCfusgsg | 107 | Hs/Mm |
AD-62951 | AfsusGfgUfgGfuAfAfUfuU fgUfgAfuU fuU fL 9 6 | 37 | asAfsaAfuCfaCfaAfauuAfc CfaCfcAfuscsc | 108 | Hs |
AD-62 95 6 | GfsasCfuUfgCfaUfCfCfuG fgAfaAfuAfuAfL96 | 38 | usAfsuAfuU fuCfcAfggaUfg CfaAfgUfcscsa | 109 | Hs |
AD-62961 | GfsgsAfaGfgGfaAfGfGfuA fgAfaGfuCfuUfL96 | 39 | asAfsgAfcUfuCfuAfccuUfc CfcUfuCfcsasc | 110 | Hs |
AD-62 9 66 | UfsgsUfcUfuCfuGfUfUfuA fgAfuUfuCfcUfL96 | 40 | asGfsgAfaAfuCfuAfaacAfg Af aGfaCfasgsg | 111 | Hs |
AD-62971 | CfsusUfuGfgCfuGfU fUfuC fcAfaGfaUfcUfL96 | 41 | asGfsaUfcUfuGfgAfaacAfg CfcAfaAfgsgsa | 112 | Hs |
AD-62 93 6 | AfsasUfgUfgUfuUfGfGfgC faAfcGfuCfaUfL96 | 42 | asUfsgAfcGfuUfgCfccaAfa CfaCfaUfususu | 113 | Hs |
AD-62942 | UfsgsUfgAfcUfgUfGfGfaC faCfcCfcUfuAfL96 | 43 | usAfsaGfgGfgUfgUfccaCfa GfuCfaCfasasa | 114 | Hs |
AD-62947 | GfsasUfgGfgGfuGfCfCfaG fcUfaCfuAfuUfL96 | 44 | asAfsuAfgUfaGfcUfggcAfc CfcCfaUfcscsa | 115 | Hs |
AD-62952 | GfsasAfaAfuGfuGfUfUfuG fgGfcAfaCfgUfL96 | 45 | asCfsgUfuGfcCfcAfaacAfc AfuUfuUfcsasa | 116 | Hs |
AD-62957 | GfsgsCfuGfuUfuCfCfAfaG faUfcUfgAfcAfL96 | 46 | usGfsuCfaGfaUfcUfuggAfa AfcAfgCfcsasa | 117 | Hs |
AD-62962 | UfscsCfaAfcAfaAfAfUfaG fcCfaCfcCfcUfL96 | 47 | asGfsgGfgUfgGfcUfauuUfu GfuUfgGfasasa | 118 | Hs |
AD-62 967 | GfsusCfuUfcUfgUfUfUfaG faUfuUfcCfuUfL96 | 48 | asAfsgGfaAfaUfcUfaaaCfa GfaAfgAfcsasg | 119 | Hs |
AD-62972 | UfsgsGfaAfgGfgAfAfGfgU faGfaAfgUfcUfL96 | 49 | asGfsaCfuUfcUfaCfcuuCfc CfuUfcCfascsa | 120 | Hs |
AD-62937 | UfscsCfuUfuGfgCfUfGfuU fuCfcAfaGfaUfL96 | 50 | asUfscUfuGfgAfaAfcagCfc AfaAfgGfasusu | 121 | Hs |
AD-62943 | CfsasUfcUfcUfcAfGfCfuG fgGfaUfgAfuAfL96 | 51 | usAfsuCfaUfcCfcAfgcuGfa GfaGfaUfgsgsg | 122 | Hs |
- 62 037115
AD-62948 | GfsgsGfgUfgCfcAfGfCfuA fcUfaUfuGfaUfL96 | 52 | asUfscAfaUfaGfuAfgcuGfg CfaCfcCfcsasu | 123 | Hs |
AD-62953 | Af susGfuGfuUfuGfGfGf cA faCfgUfcAfuAfL96 | 53 | usAfsuGfaCfgUfuGfcccAfa AfcAfcAfususu | 124 | Hs |
AD-62958 | CfsusGfuUfuAfgAfUfUfuC fcUfuAfaGfaAfL96 | 54 | usUfscUfuAfaGfgAfaauCfu AfaAfcAfgsasa | 125 | Hs |
AD-62 9 63 | Af sgsAfaAfgAfaAfUfGfgA fcUfuGfcAfuAfL96 | 55 | usAfsuGfcAfaGfuCfcauUfu CfuUfuCfusasg | 126 | Hs |
AD-62 9 68 | GfscsAfuCfcUfgGfAfAfaU faUfaUfuAfaAfL96 | 56 | usUfsuAfaUfaUfaUfuucCfa GfgAfuGfcsasa | 127 | Hs |
AD-62973 | CfscsUfgUfcAfgAfCfCfaU fgGfgAfaCfuAfL96 | 57 | usAf sgUfuCfcCfaUfgguCfu GfaCfaGfgscsu | 128 | Hs |
AD-62938 | Af sasAfcAfuGfgUfGfUfgG faUfgGfgAfuAfL96 | 58 | usAfsuCfcCfaUfcCfacaCfc AfuGfuUfusasa | 129 | Hs |
AD-62974 | CfsusCfaGfgAfuGfAfAfaA faUfuUfuGfaAfL96 | 59 | usUfscAfaAfaUfuUfuucAfu CfcUfgAfgsusu | 130 | Hs |
AD-62978 | CfsasGfcAfuGfuAfUfUfaC fuUfgAfcAfaAfL96 | 60 | usUfsuGfuCfaAfgUfaauAfc AfuGfcUfgsasa | 131 | Hs |
AD-62982 | UfsasUfgAfaCfaAfCfAfuG fcUfaAfaUfcAfL96 | 61 | usGfsaUfuUfaGfcAfuguUfg UfuCfaUfasasu | 132 | Hs |
AD-62986 | AfsusAfuAfuCfcAfAfAfuG fuUfuUfaGfgAfL96 | 62 | usCfscUfaAfaAfcAfuuuGfg AfuAfuAfususc | 133 | Hs |
AD-62990 | CfscsAfgAfuGfgAfAfGfcU fgUfaUfcCfaAfL96 | 63 | usUfsgGfaUfaCfaGfcuuCfc AfuCfuGfgsasa | 134 | Hs |
AD-62994 | GfsasCfuUfuCfaUfCfCfuG fgAfaAfuAfuAfL96 | 64 | usAfsuAfuUfuCfcAfggaUfg AfaAfgUfcscsa | 135 | Hs |
AD-62998 | CfscsCfcGfgCfuAfAfUfuU fgUfaUfcAfaUfL96 | 65 | asUfsuGfaUfaCfaAfauuAfg CfcGfgGfgsgsa | 136 | Hs |
AD-63002 | UfsusAfaAfcAfuGfGfCfuU fgAfaUfgGfgAfL96 | 66 | usCfscCfaUfuCfaAfgccAfu GfuUfuAfascsa | 137 | Hs |
AD-62975 | AfsasUfgUfgUfuUfAfGfaC faAfcGfuCfaUfL96 | 67 | asUfsgAfcGfuUfgUfcuaAfa CfaCfaUfususu | 138 | Mm |
AD-62979 | AfscsUfaAfaGfgAfAfGfaA fuUfcCfgGfuUfL96 | 68 | asAfscCfgGfaAfuUfcuuCfc UfuUfaGfusasu | 139 | Mm |
AD-62983 | UfsasUfaUfcCfaAfAfUfgU fuUfuAfgGfaUfL96 | 69 | asUfscCfuAfaAfaCfauuUfg GfaUfaUfasusu | 140 | Mm |
AD-62987 | GfsusGfcGfgAfaAfGfGfcA fcUfgAfuGfuUfL96 | 70 | asAfscAfuCfaGfuGfccuUfu CfcGfcAfcsasc | 141 | Mm |
AD-62991 | UfsasAfaAfcAfgUfGfGfuU fcUfuAfaAfuUfL96 | 71 | asAfsuUfuAfaGfaAfccaCfu GfuUfuUfasasa | 142 | Mm |
AD-62995 | AfsusGfaAfaAfaUfUfUfuG faAfaCfcAfgUfL96 | 72 | asCfsuGfgUfuUfcAfaaaUfu UfuUfcAfuscsc | 143 | Mm |
- 63 037115
AD-62999 | Af sasCfaAfaAfuAfGfCfaA fuCfcCfuUfuUfL96 | 73 | asAfsaAfgGfgAfuUfgcuAfu UfuUfgUfusgsg | 144 | Mm |
AD-63003 | CfsusGfaAfaCfaGfAfUfcU fgUfcGfaCfuUfL96 | 74 | asAfsgUfcGfaCfaGfaucUfg UfuUfcAfgscsa | 145 | Mm |
AD-62 97 6 | UfsusGfuUfgCfaAfAfGfgG fcAfuUfuUfgAfL96 | 75 | usCfsaAfaAfuGfcCfcuuUfg CfaAfcAfasusu | 146 | Mm |
AD-62980 | CfsusCfaUfuGfuUfUfAfuU faAf cCfuGfuAfL96 | 76 | usAfscAfgGfuUfaAfuaaAfc AfaUfgAfgsasu | 147 | Mm |
AD-62984 | CfsasAfcAfaAfaUfAfGfcA faUfcCfcUfuUfL96 | 77 | asAfsaGfgGfaUfuGfcuaUfu UfuGfuUfgsgsa | 148 | Mm |
AD-62992 | CfsasUfuGfuUfuAfUfUfaA fcCfuGfuAfuUfL96 | 78 | asAfsuAfcAfgGfuUfaauAfa AfcAfaUfgsasg | 149 | Mm |
AD-62 9 9 6 | UfsasUfcAfgCfuGfGfGf aA fgAfuAfuCfaAfL96 | 79 | usUfsgAfuAfuCfuUfcccAfg CfuGfaUfasgsa | 150 | Mm |
AD-63000 | UfsgsUfcCfuAfgGfAfAfcC fuUfuUfaGfaAfL96 | 80 | usUfscUfaAfaAfgGfuucCfu AfgGfaCfascsc | 151 | Mm |
AD-63004 | UfscsCfaAfcAfaAfAfUfaG fcAfaUfcCfcUfL96 | 81 | asGfsgGfaUfuGfcUfauuUfu GfuUfgGfasasa | 152 | Mm |
AD-62977 | GfsgsUfgUfgCfgGfAfAfaG fgCfaCfuGfaUfL96 | 82 | asUfscAfgUfgCfcUfuucCfg CfaCfaCfcscsc | 153 | Mm |
AD-62981 | UfsusGfaAfaCfcAfGfUfaC fuUfuAfuCfaUfL96 | 83 | asUfsgAfuAfaAfgUfacuGfg UfuUfcAfasasa | 154 | Mm |
AD-62985 | UfsasCfuUfcCfaAfAfGfuC fuAfuAfuAfuAfL96 | 84 | usAfsuAfuAfuAfgAfcuuUfg GfaAfgUfascsu | 155 | Mm |
AD-62989 | UfscsCfuAfgGfaAfCfCfuU fuUfaGfaAfaUfL96 | 85 | asUfsuUfcUfaAfaAfgguUfc CfuAfgGfascsa | 156 | Mm |
AD-62993 | CfsusCfcUfgAfgGfAfAfaA fuUfuUfgGfaAfL96 | 86 | usUfscCfaAfaAfuUfuucCfu CfaGfgAfgsasa | 157 | Mm |
AD-62997 | GfscsUfcCfgGfaAfUfGfuU fgCfuGfaAfaUfL96 | 87 | asUfsuUfcAfgCfaAfcauUfc CfgGfaGfcsasu | 158 | Mm |
AD-63001 | GfsusGfuUfuGfuGfGfGf gA fgAf cCfaAfuAfL96 | 88 | usAfsuUfgGfuCfuCfcccAfc AfaAfcAfcsasg | 159 | Mm |
Таблица 1b
Дополнительные модифицированные последовательности HAO1
Название дуплекса | Последовательность смысловой нити | SEQ ID NO: | Последовательность антисмысловой нити | SEQ ID NO: | Вид |
AD- | GfsasAfuGfuGfaAfAfGfuCf | usUfsgUfcGfaUfgAfcuuU | Hs/M | ||
62933.2 | aUfcGfaCfaAfL96 | 18 | fcAfcAfuUfcsusg | 89 | m |
AD- | UfsusUfuCfaAfuGfGfGfuGf | usCfscUfaGfgAfcAfcccA | Hs/M | ||
62939.2 | uCfcUfaGfgAfL96 | 19 | fuUfgAfaAfasgsu | 90 | m |
- 64 037115
AD- 62944.2 | GfsasAfaGfuCfaUfCfGfaCf aAfgAfcAfuUfL96 | 20 | asAfsuGfuCfuUfgUfcgaU fgAfcUfuUfcsasc | 91 | Hs/M m |
AD- 62949.2 | UfscsAfuCfgAfcAfAfGfaCf aUfuGfgUfgAfL96 | 21 | usCfsaCfcAfaUfgUfcuuG fuCfgAfuGfascsu | 92 | Hs/M m |
AD- 62954.2 | UfsusUfcAfaUfgGfGfUfgUf cCfuAfgGfaAfL96 | 22 | usUfscCfuAfgGfaCfaccC faUfuGfaAfasasg | 93 | Hs/M m |
AD- 62959.2 | Af sasUfgGfgUfgUfCfCfuAf gGfaAfcCfuUfL96 | 23 | asAf sgGfuUfcCfuAfggaC faCfcCfaUfusgsa | 94 | Hs/M m |
AD- 62964.2 | GfsasCfaGfuGfcAfCfAfaUf aUfuUfuCfcAfL96 | 24 | usGfsgAfaAfaUfaUfuguG fcAfcUfgUfcsasg | 95 | Hs/M m |
AD- 62969.2 | Af scsUfuUfuCfaAfUfGfgGf uGfuCfcUfaAfL96 | 25 | usUfsaGfgAfcAfcCfcauU fgAfaAfaGfuscsa | 96 | Hs/M m |
AD- 62934.2 | Af sasGfuCfaUfcGfAfCfaAf gAfcAfuUfgAfL96 | 26 | usCfsaAfuGfuCfuUfgucG faUfgAfcUfususc | 97 | Hs/M m |
AD- 62940.2 | AfsusCfgAfcAfaGfAfCfaU f uGfgUfgAfgAfL96 | 27 | usCfsuCfaCfcAfaUfgucU fuGfuCfgAfusgsa | 98 | Hs/M m |
AD- 62945.2 | GfsgsGfaGfaAfaGfGfUfgUf uCfaAfgAfuAfL96 | 28 | usAf suCfuUfgAfaCfaccU fuUfcUfcCfcscsc | 99 | Hs/M m |
AD- 62950.2 | CfsusUfuUfcAfaUfGfGfgUf gUfcCfuAfgAfL96 | 29 | usCfsuAfgGfaCfaCfccaU fuGfaAfaAfgsusc | 100 | Hs/M m |
AD- 62955.2 | UfscsAfaUfgGfgUfGfUfcCf uAfgGfaAfcAfL96 | 30 | usGfsuUfcCfuAfgGfacaC fcCfaUfuGfasasa | 101 | Hs/M m |
AD- 62960.2 | UfsusGfaCfuUfuUfCfAfaUf gGfgUfgUfcAfL96 | 31 | usGfsaCfaCfcCfaUfugaA faAfgUf cAfasasa | 102 | Hs/M m |
AD- 62965.2 | AfsasAfgUfcAfuCfGfAfcAf aGfaCfaUfuAfL96 | 32 | usAfsaUfgUfcUfuGfucgA fuGfaCfuUfuscsa | 103 | Hs/M m |
AD- 62970.2 | CfsasGfgGfgGfaGfAfAfaGf gUfgUfuCfaAfL96 | 33 | usUfsgAfaCfaCfcUfuucU fcCfcCfcUfgsgsa | 104 | Hs/M m |
AD- 62935.2 | CfsasUfuGfgUfgAfGfGfaAf aAfaUfcCfuUfL96 | 34 | asAfsgGfaUfuUfuUfccuC faCfcAfaUfgsusc | 105 | Hs/M m |
AD- 62941.2 | AfscsAfuUfgGfuGfAfGf gAf aAfaAfuCfcUfL96 | 35 | asGfsgAfuUfuUfuCfcucA fcCfaAfuGfusesu | 106 | Hs/M m |
AD- 62946.2 | AfsgsGfgGfgAfgAfAfAfgGf uGfuUfcAfaAfL96 | 36 | usUfsuGfaAfcAfcCfuuuC fuCfcCfcCfusgsg | 107 | Hs/M m |
AD- 62951.2 | Af susGfgUfgGfuAfAfUfuUf gUfgAfuUfuUfL96 | 37 | asAfsaAfuCfaCfaAfauuA fcCfaCfcAfuscsc | 108 | Hs |
AD- 62956.2 | GfsasCfuUfgCfaUfCfCfuGf gAfaAfuAfuAfL96 | 38 | usAfsuAfuUfuCf cAfggaU fgCfaAfgUfesesa | 109 | Hs |
AD- 62961.2 | GfsgsAfaGfgGfaAfGfGfuAf gAfaGfuCfuUfL96 | 39 | asAfsgAfcUfuCfuAfccuU fcCfcUfuCfcsasc | 110 | Hs |
AD- 62966.2 | UfsgsUfcUfuCfuGfUfUfuAf gAfuUfuCfcUfL96 | 40 | asGfsgAfaAfuCfuAfaacA fgAfaGfaCfasgsg | 111 | Hs |
- 65 037115
AD- 62971.2 | CfsusUfuGfgCfuGfUfUfuCf cAfaGfaUfcUfL96 | 41 | asGfsaUfcUfuGfgAfaacA fgCfcAfaAfgsgsa | 112 | Hs |
AD- 62936.2 | Af sasUfgUfgUfuUfGfGfgCf aAfcGfuCfaUfL96 | 42 | asUfsgAfcGfuUfgCfccaA faCfaCfaUfususu | 113 | Hs |
AD- 62942.2 | UfsgsUfgAfcUfgUfGfGfaCf aCfcCfcUfuAfL96 | 43 | usAfsaGfgGfgUfgUfccaC faGfuCfaCfasasa | 114 | Hs |
AD- 62947.2 | GfsasUfgGfgGfuGfCfCfaGf cUfaCfuAfuUfL96 | 44 | asAfsuAfgUfaGfcUfggcA fcCfcCfaUfcscsa | 115 | Hs |
AD- 62952.2 | GfsasAfaAfuGfuGfUfUfuGf gGfcAfaCfgUfL96 | 45 | asCfsgUfuGfcCfcAfaacA fcAfuUfuUfcsasa | 116 | Hs |
AD- 62957.2 | GfsgsCfuGfuUfuCfCfAfaGf aUfcUfgAfcAfL96 | 46 | usGfsuCfaGfaUfcUfuggA faAfcAfgCfcsasa | 117 | Hs |
AD- 62962.2 | UfscsCfaAfcAfaAfAfUfaGf cCfaCfcCfcUfL96 | 47 | asGfsgGfgUfgGfcUfauuU fuGfuUfgGfasasa | 118 | Hs |
AD- 62967.2 | GfsusCfuUfcUfgUfUfUfaGf aUfuUfcCfuUfL96 | 48 | asAfsgGfaAfaUfcUfaaaC faGfaAfgAfcsasg | 119 | Hs |
AD- 62972.2 | UfsgsGfaAfgGfgAfAfGfgUf aGfaAfgUfcUfL96 | 49 | asGfsaCfuUfcUfaCfcuuC fcCfuUfcCfascsa | 120 | Hs |
AD- 62937.2 | UfscsCfuUfuGfgCfUfGfuUf uCfcAfaGfaUfL96 | 50 | asUfscUfuGfgAfaAfcagC fcAfaAfgGfasusu | 121 | Hs |
AD- 62943.2 | CfsasUfcUfcUfcAfGfCfuGf gGfaUfgAfuAfL96 | 51 | usAfsuCfaUfcCfcAfgcuG faGfaGfaUfgsgsg | 122 | Hs |
AD- 62948.2 | GfsgsGfgUfgCfcAfGfCfuAf cUfaUfuGfaUfL96 | 52 | asUfscAfaUfaGfuAfgcuG fgCfaCfcCfcsasu | 123 | Hs |
AD- 62953.2 | AfsusGfuGfuUfuGfGfGfcAf aCfgUfcAfuAfL96 | 53 | usAfsuGfaCfgUfuGfcccA faAfcAfcAfususu | 124 | Hs |
AD- 62958.2 | CfsusGfuUfuAfgAfUfUfuCf cUfuAfaGfaAfL96 | 54 | usUfscUfuAfaGfgAfaauC fuAfaAfcAfgsasa | 125 | Hs |
AD- 62963.2 | AfsgsAfaAfgAfaAfUfGfgAf cUfuGfcAfuAfL96 | 55 | usAfsuGfeAfaGfuCfcauU fuCfuUfuCfusasg | 126 | Hs |
AD- 62968.2 | GfscsAfuCfcUfgGfAfAfaUf aUfaUfuAfaAfL96 | 56 | usUfsuAfaUfaUfaUfuucC faGfgAfuGfcsasa | 127 | Hs |
AD- 62973.2 | CfscsUfgUfcAfgAfCfCfaUf gGfgAfaCfuAfL96 | 57 | usAfsgUfuCfcCfaUfgguC fuGfaCfaGfgscsu | 128 | Hs |
AD- 62938.2 | AfsasAfcAfuGfgUfGfUfgGf aUfgGfgAfuAfL96 | 58 | usAfsuCfcCfaUfcCfacaC fcAfuGfuUfusasa | 129 | Hs |
AD- 62974.2 | CfsusCfaGfgAfuGfAfAfaAf aUfuUfuGfaAfL96 | 59 | usUfscAfaAfaUfuUfuucA fuCfcUfgAfgsusu | 130 | Hs |
AD- 62978.2 | CfsasGfcAfuGfuAfUfUfaCf uUfgAfcAfaAfL96 | 60 | usUfsuGfuCfaAfgUfaauA feAfuGfeUfgsasa | 131 | Hs |
AD- 62982.2 | UfsasUfgAfaCfaAfCfAfuGf cUfaAfaUfcAfL96 | 61 | usGfsaUfuUfaGfcAfuguU fgUfuCfaUfasasu | 132 | Hs |
- 66 037115
AD- 62986.2 | AfsusAfuAfuCfcAfAfAfuGf uUfuUfaGfgAfL96 | 62 | usCfscUfaAfaAfcAfuuuG fgAfuAfuAfususc | 133 | Hs |
AD- 62990.2 | CfscsAfgAfuGfgAfAfGfcUf gUfaUfcCfaAfL96 | 63 | usUfsgGfaUfaCfaGfcuuC fcAfuCfuGfgsasa | 134 | Hs |
AD- 62994.2 | GfsasCfuUfuCfaUfCfCfuGf gAfaAfuAfuAfL96 | 64 | usAfsuAfuUfuCfcAfggaU fgAfaAfgUfcscsa | 135 | Hs |
AD- 62998.2 | CfscsCfcGfgCfuAfAfUfuUf gUfaUfcAfaUfL96 | 65 | asUfsuGfaUfaCfaAfauuA fgCfcGfgGfgsgsa | 136 | Hs |
AD- 63002.2 | UfsusAfaAfcAfuGfGfCfuUf gAfaUfgGfgAfL96 | 66 | usCfscCfaUfuCfaAfgccA fuGfuUfuAfascsa | 137 | Hs |
AD- 62975.2 | Af sasUfgUfgUfuUfAfGfaCf aAfcGfuCfaUfL96 | 67 | asUfsgAfcGfuUfgUfcuaA faCfaCfaUfususu | 138 | Mm |
AD- 62979.2 | AfscsUfaAfaGfgAfAfGfaAf uUfcCfgGfuUfL96 | 68 | asAf scCfgGfaAfuUfcuuC fcUfuUfaGfusasu | 139 | Mm |
AD- 62983.2 | UfsasUfaUfcCfaAfAfUfgUf uUfuAfgGfaUfL96 | 69 | asUfscCfuAfaAfaCfauuU fgGfaUfaUfasusu | 140 | Mm |
AD- 62987.2 | GfsusGfcGfgAfaAfGfGf cAf cUfgAfuGfuUfL96 | 70 | asAfscAfuCfaGfuGfccuU fuCfcGfcAfcsasc | 141 | Mm |
AD- 62991.2 | UfsasAfaAfcAfgUfGfGfuUf cUfuAfaAfuUfL96 | 71 | asAfsuUfuAfaGfaAfccaC fuGfuUfuUfasasa | 142 | Mm |
AD- 62995.2 | AfsusGfaAfaAfaUfUfUfuGf aAfaCfcAfgUfL96 | 72 | asCfsuGfgUfuUfcAfaaaU fuUfuUfcAfuscsc | 143 | Mm |
AD- 62999.2 | AfsasCfaAfaAfuAfGfCfaAf uCfcCfuUfuUfL96 | 73 | asAfsaAfgGfgAfuUfgcuA fuUfuUfgUfusgsg | 144 | Mm |
AD- 63003.2 | CfsusGfaAfaCfaGfAfUfcUf gUfcGfaCfuUfL96 | 74 | asAfsgUfcGfaCfaGfaucU fgUfuUfcAfgscsa | 145 | Mm |
AD- 62976.2 | UfsusGfuUfgCfaAfAfGfgGf cAfuUfuUfgAfL96 | 75 | usCfsaAfaAfuGfcCfcuuU fgCfaAfcAfasusu | 146 | Mm |
AD- 62980.2 | CfsusCfaUfuGfuUfUfAfuUf aAf cCfuGfuAfL9 6 | 76 | usAfscAfgGfuUfaAfuaaA fcAfaUfgAfgsasu | 147 | Mm |
AD- 62984.2 | CfsasAfcAfaAfaUfAfGf cAf aUfcCfcUfuUfL96 | 77 | asAfsaGfgGfaUfuGfcuaU fuUfuGfuUfgsgsa | 148 | Mm |
AD- 62992.2 | CfsasUfuGfuUfuAfUfUfaAf cCfuGfuAfuUfL96 | 78 | asAfsuAfcAfgGfuUfaauA faAfcAfaUfgsasg | 149 | Mm |
AD- 62996.2 | UfsasUfcAfgCfuGfGfGf aAf gAfuAfuCfaAfL96 | 79 | usUfsgAfuAfuCfuUfcccA fgCfuGfaUfasgsa | 150 | Mm |
AD- 63000.2 | UfsgsUfcCfuAfgGfAfAfcCf uUfuUfaGfaAfL96 | 80 | usUfscUfaAfaAfgGfuucC fuAfgGfaCfascsc | 151 | Mm |
AD- 63004.2 | UfscsCfaAfcAfaAfAfUfaGf cAfaUfcCfcUfL96 | 81 | asGfsgGfaUfuGfcUfauuU fuGfuUfgGfasasa | 152 | Mm |
AD- 62977.2 | GfsgsUfgUfgCfgGfAfAfaGf gCfaCfuGfaUfL96 | 82 | asUfscAfgUfgCfcUfuucC fgCfaCfaCfcscsc | 153 | Mm |
- 67 037115
AD- 62981.2 | UfsusGfaAfaCfcAfGfUfaCf uUfuAfuCfaUfL96 | 83 | asUfsgAfuAfaAfgUfacuG fgUfuUfcAfasasa | 154 | Mm |
AD- 62985.2 | UfsasCfuUfcCfaAfAfGfuCf uAfuAfuAfuAfL96 | 84 | usAfsuAfuAfuAfgAfcuuU fgGfaAfgUfascsu | 155 | Mm |
AD- 62989.2 | UfscsCfuAfgGfaAfCfCfuUf uUfaGfaAfaUfL96 | 85 | asUfsuUfcUfaAfaAfgguU fcCfuAfgGfascsa | 156 | Mm |
AD- 62993.2 | GfsusCfcUfgAfgGfAfAfaAf uUfuUfgGfaAfL96 | 86 | usUfscCfaAfaAfuUfuucC fuCfaGfgAfgsasa | 157 | Mm |
AD- 62997.2 | GfscsUfcCfgGfaAfUfGfuUf gCfuGfaAfaUfL96 | 87 | asUfsuUfcAfgCfaAfcauU fcCfgGfaGfcsasu | 158 | Mm |
AD- 63001.2 | GfsusGfuUfuGfuGfGfGfgAf gAfcCfaAfuAfL96 | 88 | usAfsuUfgGfuCfuCfcccA fcAfaAfcAfcsasg | 159 | Mm |
AD- 62933.1 | GfsasAfuGfuGfaAfAfGfuCf aUfcGfaCfaAfL96 | 160 | usUfsgUfcGfaUfgAfcuuU fcAfcAfuUfcsusg | 277 | |
AD- 65630.1 | Y44gsasAfuGfuGfaAfAfGfu CfaUfcGfaCfaAfL96 | 161 | PusUfsgUfcGfaUfgAfcuu UfcAfcAfuUfcsusg | 278 | |
AD- 65636.1 | gsasauguGfaAfAfGfucauCf gacaaL96 | 162 | usUfsgUfcGfaUfgAfcuuU fcAfcAfuUfcsusg | 279 | |
AD- 65642.1 | gsasauguGfaAfAfGfucaucg acaaL96 | 163 | usUfsgUfcGfaUfgAfcuuU fcAfcAfuUfcsusg | 280 | |
AD- 65647.1 | gsasauguGfaaAfGfucaucga caaL96 | 164 | usUfsgUfcGfaUfgAfcuuU fcAfcAfuUfcsusg | 281 | |
AD- 65652.1 | gsasauguGfaaaGfucaucGfa caaL96 | 165 | usUfsgUfcGfaUfgAfcuuU fcAfcAfuUfcsusg | 282 | |
AD- 65657.1 | gsasaugugaaaGfucaucGfac aaL96 | 166 | usUfsgUfcGfaUfgAfcuuU fcAfcAfuUfcsusg | 283 | |
AD- 65662.1 | gsasauguGfaaaGfucaucgac aaL96 | 167 | usUfsgUfcGfaUfgAfcuuU fcAfcAfuUfcsusg | 284 | |
AD- 65625.1 | Af susGfuGfaAfAfGfuCfaUf cGfaCfaAfL96 | 168 | usUfsgUfcGfaUfgAfcuuU fcAfcAfususc | 285 | |
AD- 65631.1 | asusguGfaAfAfGfucaucgac aaL96 | 169 | usUfsgucGfaugacuuUfcA fcaususc | 286 | |
AD- 65637.1 | GfsasAfuGfuGfaAfAfGfuCf aUfcGfaCfaAfL96 | 170 | usUfsgucGfaUfgAfcuuUf cAfcauucsusg | 287 | |
AD- 65643.1 | GfsasAfuGfuGfaAfAfGfuCf aUfcGfaCfaAfL96 | 171 | usUfsgucGfaUfGfacuuUf cAfcauucsusg | 288 | |
AD- 65648.1 | GfsasAfuGfuGfaAfAfGfuCf aUfcGfaCfaAfL96 | 172 | usUfsgucGfaugacuuUfcA fcauucsusg | 289 | |
AD- 65653.1 | GfsasAfuGfuGfaAfAfGfuCf aUfcGfaCfaAfL96 | 173 | usUfsgucGfaugacuuUfca cauucsusg | 290 | |
AD- 65658.1 | GfsasAfuGfuGfaAfAfGfuCf aUfcGfaCfaAfL96 | 174 | usUfsgucgaugacuuUfcac auucsusg | 291 |
- 68 037115
AD- 65663.1 | gsasauguGfaAfAfGfucaucg acaaL96 | 175 | usUfsgucGfaUfgAfcuuUf cAfcauucsusg | 292 | |
AD- 65626.1 | gsasauguGfaAfAfGfucaucg acaaL96 | 176 | usUfsgucGfaUfGfacuuUf cAfcauucsusg | 293 | |
AD- 65638.1 | gsasauguGfaaAfGfucaucga caaL96 | 177 | usUfsgucGfaUfgAfcuuUf cAfcauucsusg | 294 | |
AD- 65644.1 | gsasauguGfaaAfGfucaucga caaL96 | 178 | usUfsgucGfaUfGfacuuUf cAfcauucsusg | 295 | |
AD- 65649.1 | gsasauguGfaaAfGfucaucga caaL96 | 179 | usUfsgucGfaugacuuUf cA fcauucsusg | 296 | |
AD- 65654.1 | gsasaugugaaagucau(Cgn)g acaaL96 | 180 | usUfsgUfcGfaUfgAfcuuU fcAfcAfuUfcsusg | 297 | |
AD- 65659.1 | gsasaugdTgaaagucau(Cgn) gacaaL96 | 181 | usUfsgUfcGfaUfgAfcuuU fcAfcAfuUfcsusg | 298 | |
AD- 65627.1 | gsasaudGugaaadGucau(Cgn )gacaaL96 | 182 | usUfsgUfcGfaUfgAfcuuU fcAfcAfuUfcsusg | 299 | |
AD- 65633.1 | gsasaugdTgaaadGucau(Cgn )gacaaL96 | 183 | usUfsgUfcGfaUfgAfcuuU fcAfcAfuUfcsusg | 300 | |
AD- 65639.1 | gsasaugudGaaadGucau(Cgn )gacaaL96 | 184 | usUfsgUfcGfaUfgAfcuuU fcAfcAfuUfcsusg | 301 | |
AD- 65645.1 | gsasaugugaaadGucaucdGac aaL96 | 185 | usUfsgUfcGfaUfgAfcuuU fcAfcAfuUfcsusg | 302 | |
AD- 65650.1 | gsasaugugaaadGucaucdTac aaL96 | 186 | usUfsgUfcGfaUfgAfcuuU fcAfcAfuUfcsusg | 303 | |
AD- 65655.1 | gsasaugugaaadGucaucY34a caaL96 | 187 | usUfsgUfcGfaUfgAfcuuU fcAfcAfuUfcsusg | 304 | |
AD- 65660.1 | gsasaugugaaadGucadTcdTa caaL96 | 188 | usUfsgUfcGfaUfgAfcuuU fcAfcAfuUfcsusg | 305 | |
AD- 65665.1 | gsasaugugaaadGucaucdGad CaaL96 | 189 | usUfsgUfcGfaUfgAfcuuU fcAfcAfuUfcsusg | 306 | |
AD- 65628.1 | gsasaugugaaadGucaucdTad CaaL96 | 190 | usUfsgUfcGfaUfgAfcuuU fcAfcAfuUfcsusg | 307 | |
AD- 65634.1 | gsasaugugaaadGucaucY34a dCaaL96 | 191 | usUfsgUfcGfaUfgAfcuuU fcAfcAfuUfcsusg | 308 | |
AD- 65646.1 | GfsasAfuGfuGfaAfAfGfuCf aUfcGfaCfaAfL96 | 192 | usdTsgucgaugdAcuudTca cauucsusg | 309 | |
AD- 65656.1 | GfsasAfuGfuGfaAfAfGfuCf aUfcGfaCfaAfL96 | 193 | usUsgucgaugacuudTcaca uucsusg | 310 | |
AD- 65661.1 | GfsasAfuGfuGfaAfAfGfuCf aUfcGfaCfaAfL96 | 194 | usdTsgucdGaugacuudTca cauucsusg | 311 | |
AD- 65666.1 | GfsasAfuGfuGfaAfAfGfuCf aUfcGfaCfaAfL96 | 195 | usUsgucdGaugacuudTcac auucsusg | 312 |
- 69 037115
AD- 65629.1 | GfsasAfuGfuGfaAfAfGfuCf aUfcGfaCfaAfL96 | 196 | usdTsgucgaugacuudTcdA cauucsusg | 313 | |
AD- 65635.1 | GfsasAfuGfuGfaAfAfGfuCf aUfcGfaCfaAfL96 | 197 | usdTsgucdGaugacuudTcd Acauucsusg | 314 | |
AD- 65641.1 | gsasaugugaaadGucau(Cgn) gacaaL96 | 198 | usdTsgucgaugdAcuudTca cauucsusg | 315 | |
AD- 62994.1 | GfsasCfuUfuCfaUfCfCfuGf gAfaAfuAfuAfL96 | 199 | usAfsuAfuUfuCfcAfggaU fgAfaAfgUfcscsa | 316 | |
AD- 65595.1 | gsascuuuCfaUfCfCfuggaAf auauaL96 | 200 | usAfsuAfuUfuCfcAfggaU fgAfaAfgUfcscsa | 317 | |
AD- 65600.1 | gsascuuuCfaUfCfCfuggaaa uauaL96 | 201 | usAfsuAfuUfuCfcAfggaU fgAfaAfgUfcscsa | 318 | |
AD- 65610.1 | gsascuuuCfaucCfuggaaAfu auaL96 | 202 | usAfsuAfuUfuCfcAfggaU fgAfaAfgUfcscsa | 319 | |
AD- 65615.1 | gsascuuucaucCfuggaaAfua uaL96 | 203 | usAfsuAfuUfuCfcAfggaU fgAfaAfgUfcscsa | 320 | |
AD- 65620.1 | gsascuuuCfaucCfuggaaaua uaL96 | 204 | usAfsuAfuUfuCf cAfggaU fgAfaAfgUfcscsa | 321 | |
AD- 65584.1 | CfsusUfuCfaUfCfCfuGfgAf aAfuAfuAfL96 | 205 | usAfsuAfuUfuCfcAfggaU fgAfaAfgsusc | 322 | |
AD- 65590.1 | csusuuCfaUfCfCfuggaaaua uaL96 | 206 | usAfsuauUfuccaggaUfgA faagsusc | 323 | |
AD- 65596.1 | GfsasCfuUfuCfaUfCfCfuGf gAfaAfuAfuAfL96 | 207 | usAfsuauUfuCfcAfggaUf gAfaagucscsa | 324 | |
AD- 65601.1 | GfsasCfuUfuCfaUfCfCfuGf gAfaAfuAfuAfL96 | 208 | usAfsuauUfuCfCfaggaUf gAfaagucscsa | 325 | |
AD- 65606.1 | GfsasCfuUfuCfaUfCfCfuGf gAfaAfuAfuAfL96 | 209 | usAfsuauUfuccaggaUfgA faagucscsa | 326 | |
AD- 65611.1 | GfsasCfuUfuCfaUfCfCfuGf gAfaAfuAfuAfL96 | 210 | usAfsuauUfuccaggaUfga aagucscsa | 327 | |
AD- 65616.1 | GfsasCfuUfuCfaUfCfCfuGf gAfaAfuAfuAfL96 | 211 | usAfsuauuuccaggaUfgaa agucscsa | 328 | |
AD- 65621.1 | gsascuuuCfaUfCfCfuggaaa uauaL96 | 212 | usAfsuauUfuCfcAfggaUf gAfaagucscsa | 329 | |
AD- 65585.1 | gsascuuuCfaUfCfCfuggaaa uauaL96 | 213 | usAfsuauUfuCfCfaggaUf gAfaagucscsa | 330 | |
AD- 65591.1 | gsascuuuCfaUfCfCfuggaaa uauaL96 | 214 | usAfsuauUfuccaggaUfgA faagucscsa | 331 | |
AD- 65597.1 | gsascuuuCfauCfCfuggaaau auaL96 | 215 | usAfsuauUfuCfcAfggaUf gAfaagucscsa | 332 | |
AD- 65602.1 | gsascuuuCfauCfCfuggaaau auaL96 | 216 | usAfsuauUfuCfCfaggaUf gAfaagucscsa | 333 |
- 70 037115
AD- 65607.1 | gsascuuuCfauCfCfuggaaau auaL96 | 217 | usAfsuauUfuccaggaUfgA faagucscsa | 334 | |
AD- 65612.1 | gsascuuucauccuggaa(Agn) uauaL96 | 218 | usAfsuAfuUfuCfcAfggaU fgAfaAfgUfcscsa | 335 | |
AD- 65622.1 | gsascuuucaucdCuggaa (Agn )uauaL96 | 219 | usAfsuAfuUfuCfcAfggaU fgAfaAfgUfcscsa | 336 | |
AD- 65586.1 | gsascudTucaucdCuggaa(Ag n)uauaL96 | 220 | usAfsuAfuUfuCfcAfggaU fgAfaAfgUfcscsa | 337 | |
AD- 65592.1 | gsascuudTcaucdCuggaa(Ag n)uauaL96 | 221 | usAfsuAfuUfuCfcAfggaU fgAfaAfgUfcscsa | 338 | |
AD- 65598.1 | gsascuuudCaucdCuggaa(Ag n)uauaL96 | 222 | usAfsuAfuUfuCfcAfggaU fgAfaAfgUfcscsa | 339 | |
AD- 65603.1 | gsascuuucaucdCuggaadAua uaL96 | 223 | usAfsuAfuUfuCfcAfggaU fgAfaAfgUfcscsa | 340 | |
AD65608.1 | gsascuuucaucdCuggaadTua uaL96 | 224 | usAfsuAfuUfuCfcAfggaU fgAfaAfgUfcscsa | 341 | |
AD- 65613.1 | gsascuuucaucdCuggaaY34u auaL96 | 225 | usAfsuAfuUfuCfcAfggaU fgAfaAfgUfcscsa | 342 | |
AD- 65618.1 | gsascuuucaucdCuggdAadTu auaL96 | 226 | usAfsuAfuUfuCfcAfggaU fgAfaAfgUfcscsa | 343 | |
AD- 65623.1 | gsascuuucaucdCuggaadTud AuaL96 | 227 | usAfsuAfuUfuCfcAfggaU fgAfaAfgUfcscsa | 344 | |
AD- 65587.1 | gsascuuucaucdCuggaa (Agn )udAuaL96 | 228 | usAfsuAfuUfuCfcAfggaU fgAfaAfgUfcscsa | 345 | |
AD- 65593.1 | gsascuudTcaucdCuggaadAu dAuaL96 | 229 | usAfsuAfuUfuCfcAfggaU fgAfaAfgUfcscsa | 346 | |
AD- 65599.1 | GfsasCfuUfuCfaUfCfCfuGf gAfaAfuAfuAfL96 | 230 | usdAsuau.uuccdAggadTga aagucscsa | 347 | |
AD- 65604.1 | GfsasCfuUfuCfaUfCfCfuGf gAfaAfuAfuAfL96 | 231 | usdAsuauuuccaggadTgaa agucscsa | 348 | |
AD- 65609.1 | GfsasCfuUfuCfaUfCfCfuGf gAfaAfuAfuAfL96 | 232 | usAsuauuuccaggadTgaaa gucscsa | 349 | |
AD- 65614.1 | GfsasCfuUfuCfaUfCfCfuGf gAfaAfuAfuAfL96 | 233 | usdAsuaudTuccaggadTga aagucscsa | 350 | |
AD- 65619.1 | GfsasCfuUfuCfaUfCfCfuGf gAfaAfuAfuAfL96 | 234 | usAsuaudTuccaggadTgaa agucscsa | 351 | |
AD- 65624.1 | GfsasCfuUfuCfaUfCfCfuGf gAfaAfuAfuAfL96 | 235 | usdAsuauuuccaggadTgdA aagucscsa | 352 | |
AD65588.1 | GfsasCfuUfuCfaUfCfCfuGf gAfaAfuAfuAfL96 | 236 | usdAsuaudTuccaggadTgd Aaagucscsa | 353 | |
AD- 65594.1 | gsascuuucaucdCuggaa(Agn )uauaL96 | 237 | usdAsuauuuccdAggadTga aagucscsa | 354 |
- 71 037115
AD68309.1 | asgsaaagGfuGfUfUfcaagau gucaL96 | 238 | usGfsacaUfcUfUfgaacAf cCfuuucuscsc | 355 | |
AD68303.1 | csasuccuGfgAfAfAfuauauu aacuL96 | 239 | asGfsuuaAfuAfUfauuuCf cAfggaugsasa | 356 | |
AD65626.5 | gsasauguGfaAfAfGfucaucg acaaL96 | 240 | usUfsgucGfaUfGfacuuUf cAfcauucsusg | 357 | |
AD68295.1 | asgsugcaCfaAfUfAfuuuucc cauaL96 | 241 | usAfsuggGfaAfAfauauUf gUfgcacusgsu | 358 | |
AD68273.1 | gsasaaguCfaUfCfGfacaaga cauuL96 | 242 | asAfsuguCfuUfGfucgaUf gAfcuuucsasc | 359 | |
AD68297.1 | asasugugAfaAfGfUfcaucga caaaL96 | 243 | usUfsuguCfgAfUfgacuUf uCfacauuscsu | 360 | |
AD68287.1 | csusggaaAfuAfUfAfuuaacu guuaL96 | 244 | usAfsacaGfuUfAfauauAf uUfuccagsgsa | 361 | |
AD- 68300.1 | asusuuucCfcAfUfCfuguauu auuuL96 | 245 | asAf sauaAfuAfCfagauGf gGfaaaausasu | 362 | |
AD- 68306.1 | usgsucguUfcUfUfUfuccaac aaaaL96 | 246 | usUfsuugUfuGfGfaaaaGf aAfcgacascsc | 363 | |
AD68292.1 | asusccugGfaAfAfUfauauua acuaL96 | 247 | usAfsguuAfaUfAfuauuUf cCfaggausgsa | 364 | |
AD68298.1 | gscsauuuUfgAfGfAfggugau gauaL96 | 248 | usAfsucaUfcAfCfcucuCf aAfaaugcscsc | 365 | |
AD68277.1 | csasggggGfaGfAfAfaggugu ucaaL96 | 249 | usUfsgaaCfaCfCfuuucUf cCfcccugsgsa | 366 | |
AD68289.1 | gsgsaaauAfuAfUfUfaacugu uaaaL96 | 250 | usUfsuaaCfaGfUfuaauAf uAfuuuccsasg | 367 | |
AD68272.1 | csasuuggUfgAfGfGfaaaaau ccuuL96 | 251 | asAfsggaUfuUfUfuccuCf aCfcaaugsusc | 368 | |
AD- 68282.1 | gsgsgagaAfaGfGfUfguucaa gauaL96 | 252 | usAfsucuUfgAfAfcaccUf uUfcucccscsc | 369 | |
AD68285.1 | gsgscauuUfuGfAfGfagguga ugauL96 | 253 | asUfscauCfaCfCfucucAf aAfaugccscsu | 370 | |
AD68290.1 | usascaaaGfgGfUfGfucguuc uuuuL96 | 254 | asAfsaagAfaCfGfасаcCf cUfuuguasusu | 371 | |
AD68296.1 | usgsggauCfuUfGfGfugucga aucaL96 | 255 | usGfsauuCfgAfCfaccaAf gAfucccasusu | 372 | |
AD- 68288.1 | csusgacaGfuGfCfAfcaauau uuuaL96 | 256 | usAfsaaaUfaUfUfgugcAf cUfgucagsasu | 373 | |
AD68299.1 | csasgugcAfcAfAfUfauuuuc ccauL96 | 257 | asUfsgggAfaAfAfuauuGf uGfcacugsusc | 374 | |
AD68275.1 | ascsuuuuCfaAfUfGfgguguc cuaaL96 | 258 | usUfsaggAfcAfCfccauUf gAfaaaguscsa | 375 |
- 72 037115
AD68274.1 | ascsauugGfuGfAfGfgaaaaa uccuL96 | 259 | asGfsgauUfuUfUfccucAf cCfaauguscsu | 376 | |
AD68294.1 | ususgcuuUfuGfAfCfuuuuca augaL96 | 260 | usCfsauuGfaAfAfagucAf aAfagcaasusg | 377 | |
AD68302.1 | csasuuuuGfaGfAfGfgugaug augaL96 | 261 | usCfsaucAfuCfAfccucUf cAfaaaugscsc | 378 | |
AD68279.1 | ususgacuUfuUfCfAfaugggu gucaL96 | 262 | usGfsacaCfcCfAfuugaAf aAfgucaasasa | 379 | |
AD68304.1 | csgsacuuCfuGfUfUfuuagga cagaL96 | 263 | usCfsuguCfcUfAfaaacAf gAfagucgsasc | 380 | |
AD- 68286.1 | csuscugaGfuGfGfGfugccag aauaL96 | 264 | usAfsuucUfgGfCfacccAf cUfcagagscsc | 381 | |
AD68291.1 | gsgsgugcCfaGfAfAfugugaa aguaL96 | 265 | usAfscuuUfcAfCfauucUf gGfcacccsasc | 382 | |
AD68283.1 | uscsaaugGfgUfGfUfccuagg aacaL96 | 266 | usGfsuucCfuAfGfgacaCf cCfauugasasa | 383 | |
AD- 68280.1 | asasagucAfuCfGfAfcaagac auuaL96 | 267 | usAf saugUfcUfUfgucgAf uGfacuuuscsa | 384 | |
AD68293.1 | asusuuugAfgAfGfGfugauga ugcaL96 | 268 | usGfscauCfaUfCfaccuCf uCfaaaausgsc | 385 | |
AD68276.1 | asuscgacAfaGfAfCfauuggu gagaL96 | 269 | usCfsucaCfcAfAfugucUf uGfucgausgsa | 386 | |
AD- 68308.1 | gsgsugccAfgAfAfUfgugaaa gucaL96 | 270 | usGfsacuUfuCfAfcauuCf uGfgcaccscsa | 387 | |
AD68278.1 | gsascaguGfcAfCfAfauauuu uccaL96 | 271 | usGfsgaaAfaUfAfuuguGf cAfcugucsasg | 388 | |
AD68307.1 | ascsaaagAfgAfGfAfcugugc agaaL96 | 272 | usUfscugCfaCfAfguguCf uCfuuuguscsa | 389 | |
AD68284.1 | ususuucaAfuGfGfGfuguccu aggaL96 | 273 | usCfscuaGfgAfCfacccAf uUfgaaaasgsu | 390 | |
AD68301.1 | cscsguuuCfcAfAfGfaucuga caguL96 | 274 | asCfsuguCfaGfAfucuuGf gAfaacggscsc | 391 | |
AD68281.1 | asgsggggAfgAfAfAfgguguu caaaL96 | 275 | usUfsugaAfcAfCfcuuuCf uCfccccusgsg | 392 | |
AD68305.1 | asgsucauCfgAfGfAfagacau ugguL96 | 276 | asCfscaaUfgUfCfuuguCf gAfugacususu | 393 |
- 73 037115
Таблица 2а
Немодифицированные последовательности HAO1 (человека и человека/мыши)
Название дуплекса | SEQ ID NO: | Последователь- ность смысловой нити | SEQ ID NO: | Последовательность антисмысловой нити | Положение в NM_017545.2 |
AD-62933 | 394 | GAAU GU GAAAGU СAU С GACAA | 443 | UU GU C GAU GACUUU CACA UUCUG | 1072-1094 |
AD-62939 | 395 | UUUUCAAUGGGUGUCC UAGGA | 444 | U C CUAGGACAC C CAUU GA AAAGU | 1302-1324 |
AD-62944 | 396 | GAAAGU СAU С GACAAG ACAUU | 445 | AAU GU CUU GU C GAU GACU UUCAC | 1078-1100 |
AD-62949 | 397 | U CAU С GACAAGACAUU GGUGA | 446 | U CAC CAAU GU CUU GU C GA UGACU | 1083-1105 |
AD-62954 | 398 | UUUCAAUGGGUGUCCU AGGAA | 447 | UUCCUAGGACACCCAUUG AAAAG | 1303-1325 |
AD-62959 | 399 | AAUGGGUGUCCUAGGA ACCUU | 448 | AAGGUU C CUAG GACAC С C AUUGA | 1307-1329 |
AD-62964 | 400 | GACAGUGCACAAUAUU UUCCA | 449 | UGGAAAAUAUUGUGCACU GUCAG | 1134- 1156_C21A |
AD-62 969 | 401 | ACUUUUCAAUGGGUGU CCUAA | 450 | UUAGGACAC C CAUU GAAA AGUCA | 1300- 1322_G21A |
AD-62934 | 402 | AAGU СAU С GACAAGAC AUUGA | 451 | U CAAU GU CUU GU C GAU GA CUUUC | 1080- 1102_G21A |
AD-62940 | 403 | AUСGACAAGACAUUGG U GAGA | 452 | U CU CAC CAAU GU CUU GU C GAU GA | 1085- 1107_G21A |
AD-62945 | 404 | GGGAGAAAGGUGUUCA AGAUA | 453 | UAUCUUGAACACCUUUCU CCCCC | 996- 1018_G21A |
AD-62950 | 405 | CUUUUCAAUGGGUGUC CUAGA | 454 | U CUAGGACAC C CAUU GAA AAGUC | 1301- 1323_G21A |
AD-62 955 | 406 | UCAAUGGGUGUCCUAG GAACA | 455 | U GUU C CUAGGACAC C CAU UGAAA | 1305- 1327_C21A |
AD-62 960 | 407 | UUGACUUUUCAAUGGG UGUCA | 456 | U GACAC C CAUU GAAAAGU CAAAA | 1297- 1319_C21A |
AD-62 9 65 | 408 | AAAGU CAU С GACAAGA CAUUA | 457 | UAAU GU CUU GU C GAU GAC UUUCA | 1079- 1101_G21A |
AD-62970 | 409 | CAGGGGGAGAAAGGUG UUCAA | 458 | UUGAACACCUUUCUCCCC CUGGA | 992-1014 |
AD-62935 | 410 | CAUUGGUGAGGAAAAA UCCUU | 459 | AAGGAUUUUUCCUCACCA AUGUC | 1095-1117 |
AD-62941 | 411 | ACAUUGGUGAGGAAAA AU C CU | 460 | AGGAUUUUUCCUCACCAA UGUCU | 1094-1116 |
AD-62946 | 412 | AGGGGGAGAAAGGUGU U C AAA | 461 | UUUGAACACCUUUCUCCC CCUGG | 993- 1015_G21A |
AD-62974 | 413 | CUCAGGAUGAAAAAUU UUGAA | 462 | UU CAAAAUUUUU CAU C CU GAGUU | 563-585 |
AD-62978 | 414 | CAGCAU GUAUUACUU G ACAAA | 463 | UUU GU CAAGUAAUACAU G CUGAA | 1173-1195 |
- 74 037115
AD-62982 | 415 | UAUGAACAACAUGCUA AAUCA | 464 | UGAUUUAGCAUGUUGUUC AUAAU | 53-75 |
AD-62 9 8 6 | 416 | AUAUAU C CAAAU GUUU UAGGA | 465 | U C CUAAAACAUUU GGAUA UAUUC | 1679-1701 |
AD-62990 | 417 | CCAGAUGGAAGCUGUA UCCAA | 466 | UUGGAUACAGCUUCCAUC UGGAA | 156-178 |
AD-62994 | 418 | GACUUUCAUCCUGGAA AUAUA | 467 | UAUAUUU C CAGGAU GAAA GUCCA | 1341-1363 |
AD-62998 | 419 | CCCCGGCUAAUUUGUA UCAAU | 468 | AUU GAUACAAAUUAGC C G GGGGA | 29-51 |
AD-63002 | 420 | UUAAACAUGGCUUGAA UGGGA | 469 | U С C CAUU CAAGC CAU GUU UAACA | 765-787 |
AD-62975 | 421 | AAU GU GUUUAGACAAC GUCAU | 470 | AU GAC GUU GU CUAAACAC AUUUU | 1388-1410 |
AD-62979 | 422 | ACUAAAGGAAGAAUUC CGGUU | 471 | AACCGGAAUUCUUCCUUU AGUAU | 1027-1049 |
AD-62983 | 423 | UAUAU C CAAAU GUUUU AGGAU | 472 | AU C CUAAAACAUUU GGAU AUAUU | 1680-1702 |
AD-62987 | 424 | GUGCGGAAAGGCACUG AUGUU | 473 | AACAU CAGU GC CUUU С C G CACAC | 902-924 |
AD-62991 | 425 | UAAAACAGUGGUUCUU AAAUU | 474 | AAUUUAAGAACCACUGUU UUAAA | 1521-1543 |
AD-62995 | 426 | AU GAAAAAUUUU GAAA CCAGU | 475 | ACUGGUUUCAAAAUUUUU CAUCC | 569-591 |
AD-62999 | 427 | AACAAAAUAGCAAUСC CUUUU | 476 | AAAAGGGAUUGCUAUUUU GUUGG | 1264-1286 |
AD-63003 | 428 | CU GAAACAGAU CU GU C GACUU | 477 | AAGU C GACAGAU CU GUUU CAGCA | 195-217 |
AD-62 97 6 | 429 | UUGUUGCAAAGGGCAU UUUGA | 478 | UCAAAAUGCCCUUUGCAA CAAUU | 720-742 |
AD-62980 | 430 | CUCAUUGUUUAUUAAC CUGUA | 479 | UACAGGUUAAUAAACAAU GAGAU | 1483-1505 |
AD-62984 | 431 | CAACAAAAUAGCAAUC CCUUU | 480 | AAAGGGAUUGCUAUUUUG UUGGA | 1263-1285 |
AD-62992 | 432 | CAUUGUUUAUUAACCU GUAUU | 481 | AAUACAGGUUAAUAAACA AU GAG | 1485-1507 |
AD-62 9 9 6 | 433 | UAUCAGCUGGGAAGAU AUCAA | 482 | UU GAUAU CUU С C CAGCU G AUAGA | 670-692 |
AD-63000 | 434 | UGUCCUAGGAACCUUU UAGAA | 483 | UUCUAAAAGGUUCCUAGG AC ACC | 1313-1335 |
AD-63004 | 435 | UСCAACAAAAUAGCAA UCCCU | 484 | AGGGAUUGCUAUUUUGUU GGAAA | 1261-1283 |
- 75 037115
AD-62977 | 436 | GGUGUGCGGAAAGGCA CUGAU | 485 | AUCAGUGCCUUUCCGCAC АСССС | 899-921 |
UU GAAAC CAGUACUUU | AU GAUAAAGUACU GGUUU | ||||
AD-62981 | 437 | AUCAU | 486 | САААА | 579-601 |
UACUU С CAAAGU CUAU | UAUAUAUAGACUUUGGAA | ||||
AD-62985 | 438 | AUAUA | 487 | GUACU | 75-97_G21A |
UCCUAGGAACCUUUUA | AUUUCUAAAAGGUUСCUA | 1315- | |||
AD-62989 | 439 | GAAAU | 488 | GGACA | 1337_G21U |
CUСCUGAGGAAAAUUU | UUСCAAAAUUUUСCUCAG | ||||
AD-62993 | 440 | UGGAA | 489 | GAGAA | 603-625_G21A |
GCUCCGGAAUGUUGCU | AUUUCAGCAACAUUCCGG | ||||
AD-62997 | 441 | GAAAU | 490 | AGCAU | 181-203_C21U |
GUGUUUGUGGGGAGAC | UAUUGGUCUССССАСААА | ||||
AD-63001 | 442 | CAAUA | 491 | CACAG | 953-975_C21A |
Таблица 2b
Немодифицированные последовательности HAO1 (мыши)
Название дуплекса | SEQ ID NO: | Последовательно сть смысловой нити | SEQ ID NO: | Последовательность антисмысловой нити | Положение в NM_010403. 2 |
AD-62951 | 492 | AUGGUGGUAAUUUGUG AUUUU | 514 | AAAAU CACAAAUUAC САС CAUCC | 1642-1664 |
AD-62 956 | 493 | GACUUGCAUCCUGGAA AUAUA | 515 | UAUAUUUCCAGGAUGCAA GUCCA | 1338-1360 |
AD-62961 | 494 | GGAAGGGAAGGUAGAA GUCUU | 516 | AAGACUU CUAC CUU С C CU UCCAC | 864-886 |
AD-62 9 66 | 495 | UGUCUUCUGUUUAGAU UUCCU | 517 | AGGAAAUCUAAACAGAAG ACAGG | 1506-1528 |
AD-62971 | 496 | CUUUGGCUGUUUCCAA GAUCU | 518 | AGAUCUUGGAAACAGCCA AAGGA | 1109-1131 |
AD-62 9 3 6 | 497 | AAUGUGUUUGGGCAAC GUCAU | 519 | AU GAC GUU GC С CAAACAC AUUUU | 1385-1407 |
AD-62942 | 498 | U GU GACU GU G GACAC C CCUUA | 520 | UAAGGGGUGUCCACAGUC ACAAA | 486-508 |
AD-62947 | 499 | GAUGGGGUGCCAGCUA CUAUU | 521 | AAUAGUAGCUGGCACCCC AU CCA | 814-836 |
AD-62952 | 500 | GAAAAUGUGUUUGGGC AACGU | 522 | AC GUU GC C CAAACACAUU UUCAA | 1382-1404 |
AD-62957 | 501 | GGCUGUUUCCAAGAUC UGACA | 523 | UGUCAGAUCUUGGAAACA GCCAA | 1113-1135 |
AD-62962 | 502 | UССAACAAAAUAGСCA | 524 | AGGGGUGGCUAUUUUGUU | 1258-1280 |
- 76 037115
CCCCU | GGAAA | ||||
AD-62 9 67 | 503 | GU CUU CU GUUUAGAUU UCCUU | 525 | AAGGAAAUCUAAACAGAA GACAG | 1507-1529 |
AD-62972 | 504 | UGGAAGGGAAGGUAGA AGUCU | 526 | AGACUU CUAC CUUCCCUU С САСА | 863-885 |
AD-62937 | 505 | UCCUUUGGCUGUUUCC AAGAU | 527 | AUCUUGGAAACAGCCAAA GGAUU | 1107-1129 |
AD-62943 | 506 | CAUCUCUCAGCUGGGA UGAUA | 528 | U AU С AU С С С AG CU GAGAG AUGGG | 662-684 |
AD-62948 | 507 | GGGGUGCCAGCUACUA UUGAU | 529 | AUCAAUAGUAGCUGGCAC CCCAU | 817-839 |
AD-62953 | 508 | AUGUGUUUGGGCAACG UCAUA | 530 | UAU GACGUUGCC САААСА CAUUU | 1386- 1408_С21А |
AD-62958 | 509 | CUGUUUAGAUUUCCUU AAGAA | 531 | UUCUUAAGGAAAUCUAAA CAGAA | 1512- 1534_С21А |
AD-62 9 63 | 510 | AGAAAGAAAU G GACUU GCAUA | 532 | UAUGCAAGUСCAUUUCUU UCUAG | 1327- 1349_С21А |
AD-62 9 68 | 511 | GCAUCCUGGAAAUAUA UUAAA | 533 | UUUAAUAUAUUU С CAGGA UGCAA | 1343- 1365_С21А |
AD-62973 | 512 | CCUGUCAGACCAUGGG AACUA | 534 | UAGUU С С CAU GGU CU GAC AGGCU | 308- 330_G21A |
AD-62938 | 513 | AAACAUGGUGUGGAUG GGAUA | 535 | U AU С С С AU С С АС АС С AU G UUUAA | 763- 785_С21А |
Таблица 2с
Дополнительные немодифицированные последовательности HAO1
Название дуплекса | SEQ ID NO: | Последовательность смысловой нити | SEQ ID NO: | Последовательность антисмысловой нити | Положение в NM_017545.2 |
AD- 62933.2 | 394 | GAAU GU GAAAGU СAU С GA САА | 443 | UU GU C GAU GACUUU CACA UUCUG | 1072-1094 |
AD- 62939.2 | 395 | UUUUCAAUGGGUGUCCUA GGA | 444 | U C CUAGGACAC C CAUU GA AAAGU | 1302-1324 |
AD- 62944.2 | 396 | GAAAGU CAU С GACAAGAC AUU | 445 | AAU GU CUU GU C GAU GACU UUCAC | 1078-1100 |
AD- 62949.2 | 397 | U CAU С GACAAGACAUU G G UGA | 446 | U CAC CAAU GU CUU GU C GA UGACU | 1083-1105 |
AD- 62954.2 | 398 | UUUCAAUGGGUGUCCUAG GAA | 447 | UU C CUAGGACAC C CAUU G AAAAG | 1303-1325 |
AD- 62959.2 | 399 | AAUGGGUGUCCUAGGAAC CUU | 448 | AAGGUUCCUAGGACACCC AUU GA | 1307-1329 |
AD- | 400 | GACAGUGCACAAUAUUUU | 449 | UGGAAAAUAUUGUGCACU | 1134- |
- 77 037115
62964.2 | CCA | GUCAG | 1156_C21A | ||
AD- 62969.2 | 401 | ACUUUUCAAUGGGUGUCC UAA | 450 | UUAGGACAC C CAUU GAAA AGUCA | 1300- 1322_G21A |
AD- 62934.2 | 402 | AAGU CAU C GACAAGACAU UGA | 451 | U CAAU GU CUU GU C GAU GA CUUUC | 1080- 1102_G21A |
AD- 62940.2 | 403 | AU C GACAAGACAUU G GU G AGA | 452 | U CU CAC CAAU GU CUU GU C GAU GA | 1085- 1107_G21A |
AD- 62945.2 | 404 | GGGAGAAAGGUGUUCAAG AUA | 453 | UAUCUUGAACACCUUUCU CCCCC | 996- 1018_G21A |
AD- 62950.2 | 405 | CUUUUCAAUGGGUGUCCU AGA | 454 | U CUAGGACAC C CAUU GAA AAGUC | 1301- 1323_G21A |
AD- 62955.2 | 406 | UCAAUGGGUGUCCUAGGA АСА | 455 | U GUU C CUAGGACAC C CAU UGAAA | 1305- 1327_C21A |
AD- 62960.2 | 407 | UUGACUUUUCAAUGGGUG UCA | 456 | U GACAC C CAUU GAAAAGU CAAAA | 1297- 1319_C21A |
AD- 62965.2 | 408 | AAAGU CAU C GACAAGACA UUA | 457 | UAAU GU CUU GU C GAU GAC UUUCA | 1079- 1101_G21A |
AD- 62970.2 | 409 | CAGGGGGAGAAAGGUGUU CAA | 458 | UUGAACACCUUUCUCCCC CUGGA | 992-1014 |
AD- 62935.2 | 410 | CAUUGGUGAGGAAAAAUC CUU | 459 | AAGGAUUUUUCCUCACCA AUGUC | 1095-1117 |
AD- 62941.2 | 411 | ACAUUGGUGAGGAAAAAU CCU | 460 | AGGAUUUUUCCUCACCAA UGUCU | 1094-1116 |
AD- 62946.2 | 412 | AGGGGGAGAAAGGUGUUC AAA | 461 | UUUGAACACCUUUCUCCC CCUGG | 993- 1015_G21A |
AD- 62974.2 | 413 | CU CAGGAU GAAAAAUUUU GAA | 462 | UU CAAAAUUUUU CAU CCU GAGUU | 563-585 |
AD- 62978.2 | 414 | CAGCAU GUAUUACUU GAC AAA | 463 | UUU GU CAAGUAAUACAU G CUGAA | 1173-1195 |
AD- 62982.2 | 415 | UAUGAACAACAUGCUAAA UCA | 464 | UGAUUUAGCAUGUUGUUC AUAAU | 53-75 |
AD- 62986.2 | 416 | AUAUAU C CAAAU GUUUUA GGA | 465 | U C CUAAAACAUUU GGAUA UAUUC | 1679-1701 |
AD- 62990.2 | 417 | CCAGAUGGAAGCUGUAUC CAA | 466 | UUGGAUACAGCUUCCAUC UGGAA | 156-178 |
AD- 62994.2 | 418 | GACUUU CAU C CU GGAAAU AUA | 467 | UAUAUUU C CAGGAU GAAA GUCCA | 1341-1363 |
AD- 62998.2 | 419 | CCCCGGCUAAUUUGUAUC AAU | 468 | AUU GAUACAAAUUAGC C G GGGGA | 29-51 |
AD- 63002.2 | 420 | UUAAACAUGGCUUGAAUG GGA | 469 | U С C CAUU CAAGC CAU GUU UAACA | 765-787 |
AD- | 421 | AAU GU GUUUAGACAAC GU | 470 | AU GAC GUU GU CUAAACAC | 1388-1410 |
- 78 037115
62975.2 | CAU | AUUUU | |||
AD- 62979.2 | 422 | ACUAAAGGAAGAAUUСCG GUU | 471 | AACCGGAAUUCUUCCUUU AGUAU | 1027-1049 |
AD- 62983.2 | 423 | UAUAU C CAAAU GUUUUAG GAU | 472 | AU C CUAAAACAUUU GGAU AUAUU | 1680-1702 |
AD- 62987.2 | 424 | GUGCGGAAAGGCACUGAU GUU | 473 | AACAU CAGU GC CUUU С C G CACAC | 902-924 |
AD- 62991.2 | 425 | UAAAACAGU GGUU CUUAA AUU | 474 | AAUUUAAGAACCACUGUU UUAAA | 1521-1543 |
AD- 62995.2 | 426 | AU GAAAAAUUUU GAAAC C AGU | 475 | ACUGGUUUCAAAAUUUUU CAUCC | 569-591 |
AD- 62999.2 | 427 | AACAAAAUAGCAAUСCCU UUU | 476 | AAAAGGGAUUGCUAUUUU GUUGG | 1264-1286 |
AD- 63003.2 | 428 | CU GAAACAGAU CU GU C GA CUU | 477 | AAGU C GACAGAU CU GUUU CAGCA | 195-217 |
AD- 62976.2 | 429 | UUGUUGCAAAGGGCAUUU UGA | 478 | UCAAAAUGCCCUUUGCAA CAAUU | 720-742 |
AD- 62980.2 | 430 | CUCAUUGUUUAUUAACCU GUA | 479 | UACAGGUUAAUAAACAAU GAGAU | 1483-1505 |
AD- 62984.2 | 431 | CAACAAAAUAGCAAUССC UUU | 480 | AAAGGGAUUGCUAUUUUG UUGGA | 1263-1285 |
AD- 62992.2 | 432 | CAUUGUUUAUUAACCUGU AUU | 481 | AAUACAGGUUAAUAAACA AU GAG | 1485-1507 |
AD- 62996.2 | 433 | UAUCAGCUGGGAAGAUAU CAA | 482 | UU GAUAU CUU С C CAGCU G AUAGA | 670-692 |
AD- 63000.2 | 434 | U GU C CUAGGAAC CUUUUA GAA | 483 | UUCUAAAAGGUUCCUAGG AC ACC | 1313-1335 |
AD- 63004.2 | 435 | UСCAACAAAAUAGCAAUC CCU | 484 | AGGGAUUGCUAUUUUGUU GGAAA | 1261-1283 |
AD- 62977.2 | 436 | GGUGUGCGGAAAGGCACU GAU | 485 | AUCAGUGCCUUUCCGCAC ACCCC | 899-921 |
AD- 62981.2 | 437 | UU GAAAC CAGUACUUUAU CAU | 486 | AU GAUAAAGUACU GGUUU CAAAA | 579-601 |
AD- 62985.2 | 438 | UACUU C CAAAGU CUAUAU AUA | 487 | UAUAUAUAGACUUUGGAA GUACU | 75-97_G21A |
AD- 62989.2 | 439 | UCCUAGGAACCUUUUAGA AAU | 488 | AUUUCUAAAAGGUUCCUA GGACA | 1315- 1337_G21U |
AD- 62993.2 | 440 | CU C CU GAGGAAAAUUUU G GAA | 489 | UUCCAAAAUUUUCCUCAG GAGAA | 603- 625_G21A |
AD- 62997.2 | 441 | GCUCCGGAAUGUUGCUGA AAU | 490 | AUUUCAGCAACAUUCCGG AGCAU | 181- 203_C21U |
AD- | 442 | GUGUUUGUGGGGAGACCA | 491 | UAUUGGUCUСССCACAAA | 953- |
- 79 037115
63001.2 | AUA | CACAG | 975_C21A | ||
AD- 62951.2 | 492 | AUGGUGGUAAUUUGUGAU UUU | 514 | AAAAU CACAAAUUAC CAC CAUCC | 1642-1664 |
AD- 62956.2 | 493 | GACUUGCAUCCUGGAAAU AUA | 515 | UAUAUUUCCAGGAUGCAA GUCCA | 1338-1360 |
AD- 62961.2 | 494 | GGAAGGGAAGGUAGAAGU CUU | 516 | AAGACUU CUAC CUU С C CU UCCAC | 864-886 |
AD- 62966.2 | 495 | U GU CUU CU GUUUAGAUUU CCU | 517 | AGGAAAUCUAAACAGAAG ACAGG | 1506-1528 |
AD- 62971.2 | 496 | CUUUGGCUGUUUCCAAGA UCU | 518 | AGAUCUUGGAAACAGCCA AAGGA | 1109-1131 |
AD- 62936.2 | 497 | AAUGUGUUUGGGCAACGU CAU | 519 | AUGACGUUGCC СAAACAC AUUUU | 1385-1407 |
AD- 62942.2 | 498 | UGUGACUGUGGACACCCC UUA | 520 | UAAGGGGUGUCCACAGUC ACAAA | 486-508 |
AD- 62947.2 | 499 | GAUGGGGUGCCAGCUACU AUU | 521 | AAUAGUAGCUGGCACCCC AU CCA | 814-836 |
AD- 62952.2 | 500 | GAAAAUGUGUUUGGGCAA CGU | 522 | AC GUU GC C CAAACACAUU UUCAA | 1382-1404 |
AD- 62957.2 | 501 | GGCUGUUUCCAAGAUCUG АСА | 523 | U GU CAGAU CUU GGAAACA GCCAA | 1113-1135 |
AD- 62962.2 | 502 | U С СAACAAAAUAG С СAC C CCU | 524 | AGGGGUGGCUAUUUUGUU GGAAA | 1258-1280 |
AD- 62967.2 | 503 | GU CUU CU GUUUAGAUUU C CUU | 525 | AAGGAAAUCUAAACAGAA GACAG | 1507-1529 |
AD- 62972.2 | 504 | UGGAAGGGAAGGUAGAAG UCU | 526 | AGACUU CUAC CUUCCCUU CCACA | 863-885 |
AD- 62937.2 | 505 | UCCUUUGGCUGUUUCCAA GAU | 527 | AUCUUGGAAACAGCCAAA GGAUU | 1107-1129 |
AD- 62943.2 | 506 | CAUCUCUCAGCUGGGAUG AUA | 528 | UAU CAU С С CAG CU GAGAG AUGGG | 662-684 |
AD- 62948.2 | 507 | GGGGUGCCAGCUACUAUU GAU | 529 | AUCAAUAGUAGCUGGCAC CCCAU | 817-839 |
AD- 62953.2 | 508 | AUGUGUUUGGGCAACGUC AUA | 530 | UAU GACGUUGCC CAAACA CAUUU | 1386- 1408_C21A |
AD- 62958.2 | 509 | CUGUUUAGAUUUCCUUAA GAA | 531 | UUCUUAAGGAAAUCUAAA CAGAA | 1512- 1534_C21A |
AD- 62963.2 | 510 | AGAAAGAAAUGGACUUGC AUA | 532 | UAUGCAAGUCCAUUUCUU UCUAG | 1327- 1349_C21A |
AD- 62968.2 | 511 | GCAUCCUGGAAAUAUAUU AAA | 533 | UUUAAUAUAUUU C CAGGA UGCAA | 1343- 1365_C21A |
AD- | 512 | CCUGUCAGACCAUGGGAA | 534 | UAGUU С C CAU GGU CU GAC | 308- |
- 80 037115
62973.2 | CUA | AGGCU | 330_G21A | ||
AD- 62938.2 | 513 | AAACAUGGUGUGGAUGGG AUA | 535 | U AU С С C AU С С AC AC C AU G UUUAA | 763- 785_C21A |
AD- 62933.1 | 536 | GAAU GU GAAAGU CAU C GA CAA | 653 | UU GU C GAU GACUUU CACA UUCUG | 1072-1094 |
AD- 65630.1 | 537 | GAAU GU GAAAGU CAU C GA CAA | 654 | UU GU C GAU GACUUU CACA UUCUG | 1072-1094 |
AD- 65636.1 | 538 | GAAU GU GAAAGU CAU C GA CAA | 655 | UU GU C GAU GACUUU CACA UUCUG | 1072-1094 |
AD- 65642.1 | 539 | GAAU GU GAAAGU CAU C GA CAA | 656 | UU GU C GAU GACUUU CACA UUCUG | 1072-1094 |
AD- 65647.1 | 540 | GAAU GU GAAAGU CAU C GA CAA | 657 | UU GU C GAU GACUUU CACA UUCUG | 1072-1094 |
AD- 65652.1 | 541 | GAAU GU GAAAGU CAU C GA CAA | 658 | UU GU C GAU GACUUU CACA UUCUG | 1072-1094 |
AD- 65657.1 | 542 | GAAU GU GAAAGU CAU C GA CAA | 659 | UU GU C GAU GACUUU CACA UUCUG | 1072-1094 |
AD- 65662.1 | 543 | GAAU GU GAAAGU CAU C GA CAA | 660 | UU GU C GAU GACUUU CACA UUCUG | 1072-1094 |
AD- 65625.1 | 544 | AU GU GAAAGU CAU C GACA A | 661 | UU GU C GAU GACUUU CACA UUC | 1072-1094 |
AD- 65631.1 | 545 | AU GU GAAAGU CAU C GACA A | 662 | UU GU C GAU GACUUU CACA UUC | 1072-1094 |
AD- 65637.1 | 546 | GAAU GU GAAAGU CAU C GA CAA | 663 | UU GU C GAU GACUUU CACA UUCUG | 1072-1094 |
AD- 65643.1 | 547 | GAAU GU GAAAGU CAU C GA CAA | 664 | UU GU C GAU GACUUU CACA UUCUG | 1072-1094 |
AD- 65648.1 | 548 | GAAU GU GAAAGU CAU C GA CAA | 665 | UU GU C GAU GACUUU CACA UUCUG | 1072-1094 |
AD- 65653.1 | 549 | GAAU GU GAAAGU CAU C GA CAA | 666 | UU GU C GAU GACUUU CACA UUCUG | 1072-1094 |
AD- 65658.1 | 550 | GAAU GU GAAAGU CAU C GA CAA | 667 | UU GU C GAU GACUUU CACA UUCUG | 1072-1094 |
AD- 65663.1 | 551 | GAAU GU GAAAGU CAU C GA CAA | 668 | UU GU C GAU GACUUU CACA UUCUG | 1072-1094 |
AD- 65626.1 | 552 | GAAU GU GAAAGU CAU C GA CAA | 669 | UU GU C GAU GACUUU CACA UUCUG | 1072-1094 |
AD- 65638.1 | 553 | GAAU GU GAAAGU CAU C GA CAA | 670 | UU GU C GAU GACUUU CACA UUCUG | 1072-1094 |
AD- 65644.1 | 554 | GAAU GU GAAAGU CAU C GA CAA | 671 | UU GU C GAU GACUUU CACA UUCUG | 1072-1094 |
AD- | 555 | GAAU GU GAAAGU CAU C GA | 672 | UU GU C GAU GACUUU CACA | 1072-1094 |
- 81 037115
65649.1 | CAA | UUCUG | |||
AD- 65654.1 | 556 | GAAU GU GAAAGU GAU C GA CAA | 673 | UU GU C GAU GACUUU GAGA UUCUG | 1072-1094 |
AD- 65659.1 | 557 | GAAU GT GAAAGU GAU C GA CAA | 674 | UU GU C GAU GACUUU GAGA UUCUG | 1072-1094 |
AD- 65627.1 | 558 | GAAU GU GAAAGU GAU C GA CAA | 675 | UU GU C GAU GACUUU GAGA UUCUG | 1072-1094 |
AD- 65633.1 | 559 | GAAU GT GAAAGU GAU C GA CAA | 676 | UU GU C GAU GACUUU GAGA UUCUG | 1072-1094 |
AD- 65639.1 | 560 | GAAU GU GAAAGU GAU C GA CAA | 677 | UU GU C GAU GACUUU GAGA UUCUG | 1072-1094 |
AD- 65645.1 | 561 | GAAU GU GAAAGU GAU C GA CAA | 678 | UU GU C GAU GACUUU GAGA UUCUG | 1072-1094 |
AD- 65650.1 | 562 | GAAUGUGAAAGUGAUCTA CAA | 679 | UU GU C GAU GACUUU GAGA UUCUG | 1072-1094 |
AD- 65655.1 | 563 | GAAU GU GAAAGU GAU GAG AA | 680 | UU GU C GAU GACUUU GAGA UUCUG | 1072-1094 |
AD- 65660.1 | 564 | GAAUGUGAAAGUCATCTA CAA | 681 | UU GU C GAU GACUUU GAGA UUCUG | 1072-1094 |
AD- 65665.1 | 565 | GAAU GU GAAAGU GAU C GA CAA | 682 | UU GU C GAU GACUUU GAGA UUCUG | 1072-1094 |
AD- 65628.1 | 566 | GAAUGUGAAAGUGAUCTA CAA | 683 | UU GU C GAU GACUUU GAGA UUCUG | 1072-1094 |
AD- 65634.1 | 567 | GAAU GU GAAAGU GAU GAG AA | 684 | UU GU C GAU GACUUU GAGA UUCUG | 1072-1094 |
AD- 65646.1 | 568 | GAAU GU GAAAGU GAU C GA CAA | 685 | UTGUCGAUGACUUTCACA UUCUG | 1072-1094 |
AD- 65656.1 | 569 | GAAU GU GAAAGU GAU C GA CAA | 686 | UU GU C GAU GACUUT GAGA UUCUG | 1072-1094 |
AD- 65661.1 | 570 | GAAU GU GAAAGU GAU C GA CAA | 687 | UTGUCGAUGACUUTCACA UUCUG | 1072-1094 |
AD- 65666.1 | 571 | GAAU GU GAAAGU GAU C GA CAA | 688 | UU GU C GAU GACUUT GAGA UUCUG | 1072-1094 |
AD- 65629.1 | 572 | GAAU GU GAAAGU GAU C GA CAA | 689 | UTGUCGAUGACUUTCACA UUCUG | 1072-1094 |
AD- 65635.1 | 573 | GAAU GU GAAAGU GAU C GA CAA | 690 | UTGUCGAUGACUUTCACA UUCUG | 1072-1094 |
AD- 65641.1 | 574 | GAAU GU GAAAGU GAU C GA CAA | 691 | UTGUCGAUGACUUTCACA UUCUG | 1072-1094 |
AD- 62994.1 | 575 | GACUUU GAU C GU GGAAAU AUA | 692 | UAUAUUU C CAGGAU GAAA GUCCA | 1341-1363 |
AD- | 576 | GACUUU GAU C GU GGAAAU | 693 | UAUAUUU C CAGGAU GAAA | 1341-1363 |
- 82 037115
65595.1 | AUA | GUCCA | |||
AD- 65600.1 | 577 | GACUUU CAU C CU GGAAAU AUA | 694 | UAUAUUU C CAGGAU GAAA GUCCA | 1341-1363 |
AD- 65610.1 | 578 | GACUUU CAU C CU GGAAAU AUA | 695 | UAUAUUU C CAGGAU GAAA GUCCA | 1341-1363 |
AD- 65615.1 | 579 | GACUUU CAU C CU GGAAAU AUA | 696 | UAUAUUU C CAGGAU GAAA GUCCA | 1341-1363 |
AD- 65620.1 | 580 | GACUUU CAU C CU GGAAAU AUA | 697 | UAUAUUU C CAGGAU GAAA GUCCA | 1341-1363 |
AD- 65584.1 | 581 | CUUU CAU C CU GGAAAUAU A | 698 | UAUAUUU C CAGGAU GAAA GUC | 1341-1361 |
AD- 65590.1 | 582 | CUUU CAU C CU GGAAAUAU A | 699 | UAUAUUU C CAGGAU GAAA GUC | 1341-1361 |
AD- 65596.1 | 583 | GACUUU CAU C CU GGAAAU AUA | 700 | UAUAUUU C CAGGAU GAAA GUCCA | 1341-1363 |
AD- 65601.1 | 584 | GACUUU CAU C CU GGAAAU AUA | 701 | UAUAUUU C CAGGAU GAAA GUCCA | 1341-1363 |
AD- 65606.1 | 585 | GACUUU CAU C CU GGAAAU AUA | 702 | UAUAUUU C CAGGAU GAAA GUCCA | 1341-1363 |
AD- 65611.1 | 586 | GACUUU CAU C CU GGAAAU AUA | 703 | UAUAUUU C CAGGAU GAAA GUCCA | 1341-1363 |
AD- 65616.1 | 587 | GACUUU CAU C CU GGAAAU AUA | 704 | UAUAUUU C CAGGAU GAAA GUCCA | 1341-1363 |
AD- 65621.1 | 588 | GACUUU CAU C CU GGAAAU AUA | 705 | UAUAUUU C CAGGAU GAAA GUCCA | 1341-1363 |
AD- 65585.1 | 589 | GACUUU CAU C CU GGAAAU AUA | 706 | UAUAUUU C CAGGAU GAAA GUCCA | 1341-1363 |
AD- 65591.1 | 590 | GACUUU CAU C CU GGAAAU AUA | 707 | UAUAUUU C CAGGAU GAAA GUCCA | 1341-1363 |
AD- 65597.1 | 591 | GACUUU CAU C CU GGAAAU AUA | 708 | UAUAUUU C CAGGAU GAAA GUCCA | 1341-1363 |
AD- 65602.1 | 592 | GACUUU CAU C CU GGAAAU AUA | 709 | UAUAUUU C CAGGAU GAAA GUCCA | 1341-1363 |
AD- 65607.1 | 593 | GACUUU CAU C CU GGAAAU AUA | 710 | UAUAUUU C CAGGAU GAAA GUCCA | 1341-1363 |
AD- 65612.1 | 594 | GACUUU CAU C CU GGAAAU AUA | 711 | UAUAUUU C CAGGAU GAAA GUCCA | 1341-1363 |
AD- 65622.1 | 595 | GACUUU CAU C CU GGAAAU AUA | 712 | UAUAUUU C CAGGAU GAAA GUCCA | 1341-1363 |
AD- 65586.1 | 596 | GACUTUCAUCCUGGAAAU AUA | 713 | UAUAUUU C CAGGAU GAAA GUCCA | 1341-1363 |
AD- | 597 | GACUUTCAUCCUGGAAAU | 714 | UAUAUUU C CAGGAU GAAA | 1341-1363 |
- 83 037115
65592.1 | AUA | GUCCA | |||
AD- 65598.1 | 598 | GACUUU CAU C CU GGAAAU AUA | 715 | UAUAUUU C CAGGAU GAAA GUCCA | 1341-1363 |
AD- 65603.1 | 599 | GACUUU CAU C CU GGAAAU AUA | 716 | UAUAUUU C CAGGAU GAAA GUCCA | 1341-1363 |
AD- 65608.1 | 600 | GACUUUCAUCCUGGAATU AUA | 717 | UAUAUUU C CAGGAU GAAA GUCCA | 1341-1363 |
AD- 65613.1 | 601 | GACUUU CAU C CU GGAAUA UA | 718 | UAUAUUU C CAGGAU GAAA GUCCA | 1341-1363 |
AD- 65618.1 | 602 | GACUUUCAUCCUGGAATU AUA | 719 | UAUAUUU C CAGGAU GAAA GUCCA | 1341-1363 |
AD- 65623.1 | 603 | GACUUUCAUCCUGGAATU AUA | 720 | UAUAUUU C CAGGAU GAAA GUCCA | 1341-1363 |
AD- 65587.1 | 604 | GACUUU CAU C CU GGAAAU AUA | 721 | UAUAUUU C CAGGAU GAAA GUCCA | 1341-1363 |
AD- 65593.1 | 605 | GACUUTCAUCCUGGAAAU AUA | 722 | UAUAUUU C CAGGAU GAAA GUCCA | 1341-1363 |
AD- 65599.1 | 606 | GACUUU CAU C CU GGAAAU AUA | 723 | UAUAUUU C CAGGAT GAAA GUCCA | 1341-1363 |
AD- 65604.1 | 607 | GACUUU CAU C CU GGAAAU AUA | 724 | UAUAUUU C CAGGAT GAAA GUCCA | 1341-1363 |
AD- 65609.1 | 608 | GACUUU CAU C CU GGAAAU AUA | 725 | UAUAUUU C CAGGAT GAAA GUCCA | 1341-1363 |
AD- 65614.1 | 609 | GACUUU CAU C CU GGAAAU AUA | 726 | UAUAUTUCCAGGATGAAA GUCCA | 1341-1363 |
AD- 65619.1 | 610 | GACUUU CAU C CU GGAAAU AUA | 727 | UAUAUTUCCAGGATGAAA GUCCA | 1341-1363 |
AD- 65624.1 | 611 | GACUUU CAU C CU GGAAAU AUA | 728 | UAUAUUU C CAGGAT GAAA GUCCA | 1341-1363 |
AD- 65588.1 | 612 | GACUUU CAU C CU GGAAAU AUA | 729 | UAUAUTUCCAGGATGAAA GUCCA | 1341-1363 |
AD- 65594.1 | 613 | GACUUU CAU C CU GGAAAU AUA | 730 | UAUAUUU C CAGGAT GAAA GUCCA | 1341-1363 |
AD- 68309.1 | 614 | AGAAAGGUGUUCAAGAUG UCA | 731 | U GACAU CUU GAACAC CUU UCUCC | 1001- 1022_C21A |
AD- 68303.1 | 615 | CAU C CU GGAAAUAUAUUA ACU | 732 | AGUUAAUAUAUUU C CAGG AUGAA | 1349-1370 |
AD- 65626.5 | 616 | GAAU GU GAAAGU CAU C GA CAA | 733 | UU GU C GAU GACUUU CACA UUCUG | 1072-1094 |
AD- 68295.1 | 617 | AGU GCACAAUAUUUU С С C AUA | 734 | UAUGGGAAAAUAUUGUGC ACUGU | 1139- 1160_C21A |
AD- | 618 | GAAAGU CAU C GACAAGAC | 735 | AAU GU CUU GU C GAU GACU | 1080-1100 |
- 84 037115
68273.1 | AUU | UUCAC | |||
AD- 68297.1 | 619 | AAU GU GAAAGU CAU C GAC AAA | 736 | UUUGUCGAUGACUUUCAC AUUCU | 1075- 1096_G21A |
AD- 68287.1 | 620 | CUGGAAAUAUAUUAACUG UUA | 737 | UAACAGUUAAUAUAUUU C CAGGA | 1353-1374 |
AD- 68300.1 | 621 | AUUUU С C CAU CU GUAUUA UUU | 738 | AAAUAAUACAGAUGGGAA AAUAU | 1149-1170 |
AD- 68306.1 | 622 | UGUCGUUCUUUUC CAACA AAA | 739 | UUUU GUU GGAAAAGAAC G AC ACC | 1252-1273 |
AD- 68292.1 | 623 | AUCCUGGAAAUAUAUUAA CUA | 740 | UAGUUAAUAUAUUU C CAG GAU GA | 1350- 1371_G21A |
AD- 68298.1 | 624 | GCAUUUUGAGAGGUGAUG AUA | 741 | UAU CAU CAC CU CU CAAAA UGCCC | 734- 755_G21A |
AD- 68277.1 | 625 | CAGGGGGAGAAAGGUGUU CAA | 742 | UUGAACACCUUUCUCCCC CUGGA | 994-1014 |
AD- 68289.1 | 626 | GGAAAUAUAUUAACUGUU AAA | 743 | UUUAACAGUUAAUAUAUU UCCAG | 1355-1376 |
AD- 68272.1 | 627 | CAUUGGUGAGGAAAAAUC CUU | 744 | AAGGAUUUUUCCUCACCA AUGUC | 1097-1117 |
AD- 68282.1 | 628 | GGGAGAAAGGUGUUCAAG AUA | 745 | UAUCUUGAACACCUUUCU CCCCC | 998- 1018_G21A |
AD- 68285.1 | 629 | GGCAUUUUGAGAGGUGAU GAU | 746 | AU CAU CAC CU CU CAAAAU GCCCU | 733-754 |
AD- 68290.1 | 630 | UACAAAGGGUGUCGUUCU UUU | 747 | AAAAGAAC GACAC C CUUU GUAUU | 1243-1264 |
AD- 68296.1 | 631 | UGGGAUCUUGGUGUCGAA UCA | 748 | U GAUU C GACAC CAAGAU C CCAUU | 783-804 |
AD- 68288.1 | 632 | CU GACAGU GCACAAUAUU UUA | 749 | UAAAAUAUU GU GCACU GU CAGAU | 1134- 1155_C21A |
AD- 68299.1 | 633 | CAGU GCACAAUAUUUU С C CAU | 750 | AUGGGAAAAUAUUGUGCA CUGUC | 1138-1159 |
AD- 68275.1 | 634 | ACUUUUCAAUGGGUGUCC UAA | 751 | UUAGGACAC C CAUU GAAA AGUCA | 1302- 1322_G21A |
AD- 68274.1 | 635 | ACAUUGGUGAGGAAAAAU CCU | 752 | AGGAUUUUUCCUCACCAA UGUCU | 1096-1116 |
AD- 68294.1 | 636 | UUGCUUUUGACUUUUCAA UGA | 753 | U CAUU GAAAAGU CAAAAG CAAUG | 1293- 1314_G21A |
AD- 68302.1 | 637 | CAUUUU GAGAGGU GAU GA UGA | 754 | U CAU CAU CAC CU CU CAAA AUGCC | 735- 756_C21A |
AD- 68279.1 | 638 | UUGACUUUUCAAUGGGUG UCA | 755 | U GACAC C CAUU GAAAAGU CAAAA | 1299- 1319_C21A |
AD- | 639 | C GACUU CU GUUUUAGGAC | 756 | U CU GU C CUAAAACAGAAG | 212-233 |
- 85 037115
68304.1 | AGA | UCGAC | |||
AD- | CUCUGAGUGGGUGCCAGA | UAUUCUGGCACCCACUCA | 1058- | ||
68286.1 | 640 | AUA | 757 | GAGCC | 1079_G21A |
AD- | GGGUGCCAGAAUGUGAAA | UACUUUCACAUUCUGGCA | 1066- | ||
68291.1 | 641 | GUA | 758 | CCCAC | 1087_C21A |
AD- | UCAAUGGGUGUCCUAGGA | U GUU C CUAGGACAC C CAU | 1307- | ||
68283.1 | 642 | АСА | 759 | UGAAA | 1327_C21A |
AD- | AAAGU СAU С GACAAGACА | UAAU GU CUU GU C GAU GAC | 1081- | ||
68280.1 | 643 | UUA | 760 | UUUCA | 1101_G21A |
AD- | AUUUU GAGAGGU GAU GAU | U GCAU CAU CAC CU CU CAA | 736- | ||
68293.1 | 644 | GCA | 761 | AAUGC | 757_C21A |
AD- | AU С GACAAGACAUU G GU G | U CU CAC CAAU GU CUU GU C | 1087- | ||
68276.1 | 645 | AGA | 762 | GAU GA | 1107_G21A |
AD- | GGUGCCAGAAUGUGAAAG | UGACUUUCACAUUCUGGC | |||
68308.1 | 646 | UCA | 763 | AC CCA | 1067-1088 |
AD- | GACAGUGCACAAUAUUUU | UGGAAAAUAUUGUGCACU | 1136- | ||
68278.1 | 647 | CCA | 764 | GUCAG | 1156_C21A |
AD- | ACAAAGAGACACU GU G CA | UU CU GCACAGU GU CU CUU | 1191- | ||
68307.1 | 648 | GAA | 765 | UGUCA | 1212_G21A |
AD- | UUUUCAAUGGGUGUCCUA | U C CUAGGACAC C CAUU GA | |||
68284.1 | 649 | GGA | 766 | AAAGU | 1304-1324 |
AD- | С C GUUU C CAAGAU CU GAC | ACU GU CAGAU CUU GGAAA | |||
68301.1 | 650 | AGU | 767 | CGGCC | 1121-1142 |
AD- | AGGGGGAGAAAGGUGUUC | UUUGAACACCUUUCUCCC | 995- | ||
68281.1 | 651 | AAA | 768 | CCUGG | 1015_G21A |
AD- | AGU CAU C GACAAGACAUU | AC CAAU GU CUU GU C GAU G | |||
68305.1 | 652 | GGU | 769 | ACUUU | 1083-1104 |
Пример 2. Скрининг в отношении однократной дозы in vitro с использованием первичных гепатоцитов обезьяны.
Модифицированные и конъюгированные дуплексы siRNA для HAO1 оценивали на эффективность с помощью анализов с трансфекцией с использованием первичных гепатоцитов обезьяны. siRNA для HAO1 трансфицировали в двух дозах, 10 и 0,1 нМ. Результаты этих анализов показаны в табл. 3, и данные выражены как доля оставшегося количества транскрипта в клетках, трансфицированных siRNA, целенаправленно воздействующими на НАО1, по отношению к клеткам, трансфицированным отрицательным по siRNA контролем, AD-1955, ± среднее квадратичное отклонение (SD).
Результаты показаны на фиг. 3А. На фиг. 3В показан эффект дозы с использованием одного из наиболее активных конъюгатов (№ 31) (AD-62933) по результатам скрининга первичных двух доз; значение IC50 составляло ~19 пМ.
- 86 037115
Таблица 3 а
Скрининг в отношении однократной дозы для HAO1 с использованием гепатоцитов обезьяны
ID дуплекса | Вид | 10 нМ PCH | 0,1 нМ PCH | SD 10 нМ PCH | SD 0,1 нМ PCH |
AD-62974 | Hs | 5,3 | 29,8 | 1,87 | 11,11 |
AD-62975 | Hs | 7,6 | 31,3 | 0,34 | 1,99 |
AD-62976 | Hs | 4,7 | 35,5 | 0,34 | 13,90 |
AD-62977 | Hs | 29,2 | 66, 9 | 8,32 | 43,88 |
AD-62978 | Hs | 3,8 | 8,9 | 0,15 | 4,29 |
AD-62979 | Hs | 27,5 | 80,7 | 1,35 | 19,58 |
AD-62980 | Hs | 7,4 | 32,2 | 1,26 | 1,42 |
AD-62981 | Hs | 18,7 | 49,9 | 3,46 | 12,83 |
AD-62982 | Hs | 2,2 | 8,5 | 0,10 | 7,71 |
AD-62983 | Hs | 19,4 | 41,0 | 11,19 | 6, 60 |
AD-62984 | Hs | 6, 7 | 13,3 | 1,05 | 2,60 |
AD-62985 | Hs | 2,3 | 8,3 | 0,24 | 2,68 |
AD-62986 | Hs | 39,0 | 57,2 | 3,82 | 16, 31 |
AD-62987 | Hs | 11,5 | 17,8 | 14,62 | 15,39 |
AD-62989 | Hs | 10,6 | 34,2 | 2,23 | 2,68 |
AD-62990 | Hs | 12,0 | 18,4 | 9,11 | 5,23 |
AD-62991 | Hs | 7,2 | 14,2 | 1,30 | 2,96 |
AD-62992 | Hs | 3,9 | 16, 0 | 1,15 | 1,80 |
AD-62993 | Hs | 22,3 | 58,4 | 9,91 | 6,28 |
AD-62994 | Hs | 3,2 | 10,8 | 1,21 | 1,69 |
AD-62995 | Hs | 5,5 | 17,6 | 4,58 | 3,25 |
AD-62996 | Hs | 3,4 | 20,7 | 2,16 | 3,73 |
AD-62997 | Hs | 4,5 | 24,2 | 0,67 | 3,32 |
AD-62998 | Hs | 4,3 | 14,7 | 0,49 | 0,29 |
AD-62999 | Hs | 11,4 | 15,5 | 1,23 | 2,50 |
AD-63000 | Hs | 45,5 | 90,6 | 13,41 | 43,49 |
AD-63001 | Hs | 13,3 | 31,0 | 0,20 | 2,13 |
AD-63002 | Hs | 6, 6 | 22,0 | 0,26 | 5,75 |
AD-63003 | Hs | 36, 8 | 5,1 | 47,09 | 0,60 |
AD-63004 | Hs | 12,7 | 35,4 | 1,55 | 9,42 |
AD-62933 | Hs/Mm | 5,8 | 13,4 | 0,71 | 0,13 |
AD-62934 | Hs/Mm | 52,2 | 35,9 | 6, 64 | 5,08 |
AD-62935 | Hs/Mm | 7,7 | 22,7 | 1,53 | 4,97 |
AD-62939 | Hs/Mm | 25,1 | 49,0 | 9,48 | 2,88 |
- 87 037115
AD-62940 | Hs/Mm | 11,9 | 50,4 | 4,12 | 13,91 |
AD-62941 | Hs/Mm | 9,6 | 30,3 | 7,28 | 3,11 |
AD-62944 | Hs/Mm | 8,0 | 18,5 | 1,40 | 5,63 |
AD-62945 | Hs/Mm | 22,9 | 36,5 | 17,16 | 13,81 |
AD-62946 | Hs/Mm | 19,3 | 29,5 | 15,29 | 1,74 |
AD-62949 | Hs/Mm | 34,1 | 84,2 | 18,11 | 18,42 |
AD-62950 | Hs/Mm | 12,7 | 36,2 | 5,69 | 6, 54 |
AD-62954 | Hs/Mm | 46, 0 | 53,2 | 37,57 | 10,61 |
AD-62955 | Hs/Mm | 24,6 | 36, 0 | 0,97 | 16,36 |
AD-62959 | Hs/Mm | 32,3 | 37,4 | 12,49 | 12,08 |
AD-62960 | Hs/Mm | 18,1 | 37,5 | 2,12 | 3,12 |
AD-62964 | Hs/Mm | 16,2 | 52,4 | 5,59 | 22,40 |
AD-62965 | Hs/Mm | 18,5 | 34,5 | 3,77 | 22,38 |
AD-62969 | Hs/Mm | 11,7 | 34,0 | 0,17 | 12,55 |
AD-62970 | Hs/Mm | 13,6 | 21,2 | 1,13 | 5,85 |
AD-62936 | Mm | 91,3 | 55,6 | 16, 03 | 0,27 |
AD-62937 | Mm | 45,8 | 77,7 | 22,77 | 47,01 |
AD-62938 | Mm | 78,3 | 55,1 | 8,81 | 2,70 |
AD-62942 | Mm | 18,8 | 21,7 | 7,34 | 8,00 |
AD-62943 | Mm | 6,7 | 31,0 | 0,79 | 7,22 |
AD-62947 | Mm | 27,9 | 82,0 | 14,01 | 2,01 |
AD-62948 | Mm | 21,9 | 52,5 | 6,56 | 21,01 |
AD-62951 | Mm | 40,1 | 77,4 | 8,76 | 3,03 |
AD-62952 | Mm | 33,7 | 69,9 | 17,76 | 1,71 |
AD-62953 | Mm | 79,9 | 65,1 | 96, 61 | 22,79 |
AD-62956 | Mm | 7,6 | 16,4 | 1,01 | 12,39 |
AD-62957 | Mm | 6,7 | 21,3 | 0,99 | 3,02 |
AD-62958 | Mm | 38,9 | 54,4 | 21,66 | 29,39 |
AD-62961 | Mm | 35,3 | 66, 0 | 0,35 | 24,65 |
AD-62962 | Mm | 70,7 | 63,7 | 21,17 | 26, 36 |
AD-62963 | Mm | 35,1 | 66,5 | 35,49 | 9,42 |
AD-62966 | Mm | 69,0 | 100,3 | 17,07 | 3,44 |
AD-62967 | Mm | 90,7 | 116, 7 | 22,01 | 47,77 |
AD-62968 | Mm | 46,3 | 72,2 | 28,37 | 67,08 |
AD-62971 | Mm | 17,9 | 46, 3 | 1,23 | 23,41 |
AD-62972 | Mm | 75,6 | 122,9 | 24,75 | 18,00 |
AD-62973 | Mm | 102,8 | 73,9 | 22,49 | 14,39 |
- 88 037115
Таблица 3b
Дополнительный скрининг в отношении однократной дозы для HAO1 с использованием первичных гепатоцитов обезьяны
ID дуплекса | Вид | 10 нМ PCH | 0,1 нМ PCH | SD 10 нМ PCH | SD 0,1 нМ PCH |
AD-62974.2 | Hs | 5,3 | 29,8 | 1,87 | 11,11 |
AD-62975.2 | Hs | 7,6 | 31,3 | 0,34 | 1,99 |
AD-62976.2 | Hs | 4,7 | 35,5 | 0,34 | 13,90 |
AD-62977.2 | Hs | 29,2 | 66, 9 | 8,32 | 43,88 |
AD-62978.2 | Hs | 3,8 | 8,9 | 0,15 | 4,29 |
AD-62979.2 | Hs | 27,5 | 80,7 | 1,35 | 19,58 |
AD-62980.2 | Hs | 7,4 | 32,2 | 1,26 | 1,42 |
AD-62981.2 | Hs | 18,7 | 49,9 | 3,46 | 12,83 |
AD-62982.2 | Hs | 2,2 | 8,5 | 0,10 | 7,71 |
AD-62983.2 | Hs | 19,4 | 41,0 | 11,19 | 6, 60 |
AD-62984.2 | Hs | 6,7 | 13,3 | 1,05 | 2,60 |
AD-62985.2 | Hs | 2,3 | 8,3 | 0,24 | 2,68 |
AD-62986.2 | Hs | 39,0 | 57,2 | 3,82 | 16, 31 |
AD-62987.2 | Hs | 11,5 | 17,8 | 14,62 | 15,39 |
AD-62989.2 | Hs | 10,6 | 34,2 | 2,23 | 2,68 |
AD-62990.2 | Hs | 12,0 | 18,4 | 9, 11 | 5,23 |
AD-62991.2 | Hs | 7,2 | 14,2 | 1,30 | 2,96 |
AD-62992.2 | Hs | 3,9 | 16, 0 | 1,15 | 1,80 |
AD-62993.2 | Hs | 22,3 | 58,4 | 9,91 | 6,28 |
AD-62994.2 | Hs | 3,2 | 10,8 | 1,21 | 1,69 |
AD-62995.2 | Hs | 5,5 | 17,6 | 4,58 | 3,25 |
AD-62996.2 | Hs | 3,4 | 20,7 | 2,16 | 3,73 |
AD-62997.2 | Hs | 4,5 | 24,2 | 0,67 | 3,32 |
AD-62998.2 | Hs | 4,3 | 14,7 | 0,49 | 0,29 |
AD-62999.2 | Hs | 11,4 | 15,5 | 1,23 | 2,50 |
AD-63000.2 | Hs | 45,5 | 90,6 | 13,41 | 43,49 |
AD-63001.2 | Hs | 13,3 | 31,0 | 0,20 | 2,13 |
AD-63002.2 | Hs | 6, 6 | 22,0 | 0,26 | 5,75 |
AD-63003.2 | Hs | 36, 8 | 5,1 | 47,09 | 0,60 |
AD-63004.2 | Hs | 12,7 | 35,4 | 1,55 | 9,42 |
AD-62933.2 | Hs/Mm | 5,8 | 13,4 | 0,71 | 0,13 |
AD-62934.2 | Hs/Mm | 52,2 | 35,9 | 6, 64 | 5,08 |
AD-62935.2 | Hs/Mm | 7,7 | 22,7 | 1,53 | 4,97 |
AD-62939.2 | Hs/Mm | 25,1 | 49,0 | 9,48 | 2,88 |
AD-62940.2 | Hs/Mm | 11,9 | 50,4 | 4,12 | 13,91 |
AD-62941.2 | Hs/Mm | 9,6 | 30,3 | 7,28 | 3,11 |
AD-62944.2 | Hs/Mm | 8,0 | 18,5 | 1,40 | 5,63 |
AD-62945.2 | Hs/Mm | 22,9 | 36, 5 | 17,16 | 13,81 |
AD-62946.2 | Hs/Mm | 19,3 | 29,5 | 15,29 | 1,74 |
- 89 037115
AD-62949.2 | Hs/Mm | 34,1 | 84,2 | 18,11 | 18,42 |
AD-62950.2 | Hs/Mm | 12,7 | 36,2 | 5,69 | 6, 54 |
AD-62954.2 | Hs/Mm | 46, 0 | 53,2 | 37,57 | 10,61 |
AD-62955.2 | Hs/Mm | 24,6 | 36, 0 | 0,97 | 16, 36 |
AD-62959.2 | Hs/Mm | 32,3 | 37,4 | 12,49 | 12,08 |
AD-62960.2 | Hs/Mm | 18,1 | 37,5 | 2,12 | 3,12 |
AD-62964.2 | Hs/Mm | 16,2 | 52,4 | 5,59 | 22,40 |
AD-62965.2 | Hs/Mm | 18,5 | 34,5 | 3,77 | 22,38 |
AD-62969.2 | Hs/Mm | 11,7 | 34,0 | 0,17 | 12,55 |
AD-62970.2 | Hs/Mm | 13,6 | 21,2 | 1,13 | 5,85 |
AD-62936.2 | Mm | 91,3 | 55, 6 | 16, 03 | 0,27 |
AD-62937.2 | Mm | 45,8 | 77,7 | 22,77 | 47,01 |
AD-62938.2 | Mm | 78,3 | 55,1 | 8,81 | 2,70 |
AD-62942.2 | Mm | 18,8 | 21,7 | 7,34 | 8,00 |
AD-62943.2 | Mm | 6, 7 | 31,0 | 0,79 | 7,22 |
AD-62947.2 | Mm | 27,9 | 82,0 | 14,01 | 2,01 |
AD-62948.2 | Mm | 21,9 | 52,5 | 6,56 | 21,01 |
AD-62951.2 | Mm | 40,1 | 77,4 | 8,76 | 3,03 |
AD-62952.2 | Mm | 33,7 | 69,9 | 17,76 | 1,71 |
AD-62953.2 | Mm | 79,9 | 65,1 | 96, 61 | 22,79 |
AD-62956.2 | Mm | 7,6 | 16, 4 | 1,01 | 12,39 |
AD-62957.2 | Mm | 6,7 | 21,3 | 0,99 | 3,02 |
AD-62958.2 | Mm | 38,9 | 54,4 | 21,66 | 29,39 |
AD-62961.2 | Mm | 35,3 | 66, 0 | 0,35 | 24,65 |
AD-62962.2 | Mm | 70,7 | 63,7 | 21,17 | 26, 36 |
AD-62963.2 | Mm | 35,1 | 66,5 | 35,49 | 9,42 |
AD-62966.2 | Mm | 69,0 | 100,3 | 17,07 | 3,44 |
AD-62967.2 | Mm | 90,7 | 116, 7 | 22,01 | 47,77 |
AD-62968.2 | Mm | 46, 3 | 72,2 | 28,37 | 67,08 |
AD-62971.2 | Mm | 17,9 | 46, 3 | 1,23 | 23,41 |
AD-62972.2 | Mm | 75,6 | 122,9 | 24,75 | 18,00 |
AD-62973.2 | Mm | 102,8 | 73,9 | 22,49 | 14,39 |
Пример 3. Скрининг в отношении однократной дозы in vitro с использованием первичных гепатоцитов мыши.
Модифицированные и конъюгированные дуплексы siRNA для HAO1 оценивали на эффективность с помощью анализов с трансфекцией с использованием первичных гепатоцитов мыши. siRNA для HAO1 трансфицировали в двух дозах, 20 и 0,2 нМ. Результаты этих анализов показаны в табл. 4, и данные выражены как доля оставшегося количества транскрипта в клетках, трансфицированных siRNA, целенаправленно воздействующими на HAO1, по отношению к клеткам, трансфицированным отрицательным по siRNA контролем, AD-1955, ± среднее квадратичное отклонение (SD).
- 90 037115
Таблица 4а
Скрининг в отношении однократной дозы для HAO1 с использованием первичных гепатоцитов мыши
ID дуплекса | Вид | 20 нМ PMH | 0,2 нМ PMH | SD 20 нМ PMH | SD 0,2 нМ PMH |
AD-62974 | Hs | 1,5 | 11,5 | 0,3 | 8,5 |
AD-62975 | Hs | 6,2 | 24,5 | 1,9 | 19,4 |
AD-62976 | Hs | 8,3 | 60,0 | 3,9 | 7, 9 |
AD-62977 | Hs | 69,1 | 106, 9 | 44,8 | 18,3 |
AD-62978 | Hs | 30,0 | 46, 3 | 26, 0 | 27,3 |
AD-62979 | Hs | 50,7 | 59,5 | 45,6 | 43,4 |
AD-62980 | Hs | 65,4 | 89,5 | 68,9 | 29,3 |
AD-62981 | Hs | 65,8 | 83,3 | 31,9 | 23,7 |
AD-62982 | Hs | 86, 6 | 67,0 | 92,1 | 65,5 |
AD-62983 | Hs | 81,5 | 103, 6 | 61,3 | 68,0 |
AD-62984 | Hs | 13,5 | 51,8 | 1,2 | 37,7 |
AD-62985 | Hs | 53,8 | 37,7 | 38,1 | 26,3 |
AD-62986 | Hs | 138,5 | 153,4 | 140,7 | 119,6 |
AD-62987 | Hs | 39,0 | 99,6 | 44,9 | 110,7 |
AD-62989 | Hs | 17,1 | 2,2 | 23,1 | 1, 6 |
AD-62990 | Hs | 4,3 | 46,3 | 4,6 | 46,4 |
AD-62991 | Hs | 125,2 | 102,6 | 111,9 | 92,9 |
AD-62992 | Hs | 64,7 | 65,6 | 67,8 | 55,8 |
AD-62993 | Hs | 83,8 | 79,0 | 63,0 | 22,2 |
AD-62994 | Hs | 1,9 | 5,4 | 1,5 | 0,2 |
AD-62995 | Hs | 2,9 | 17,4 | 1,8 | 13,8 |
AD-62996 | Hs | 49,3 | 61,4 | 43,6 | 49,9 |
AD-62997 | Hs | 60,2 | 83,4 | 19,1 | 45,7 |
AD-62998 | Hs | 73,5 | 86, 7 | 71,5 | 69,4 |
AD-62999 | Hs | 38,7 | 50,0 | 29,5 | 22,7 |
AD-63000 | Hs | 27,3 | 56, 6 | 26, 1 | 41,4 |
AD-63001 | Hs | 56, 6 | 83,8 | 52,9 | 13,5 |
AD-63002 | Hs | 81,6 | 74,2 | 67,4 | 70,5 |
AD-63003 | Hs | 46,4 | 47,7 | 42,4 | 21,4 |
AD-63004 | Hs | 28,6 | 64,5 | 17,0 | 44,5 |
AD-62933 | Hs/Mm | 1,1 | 4,6 | 0,5 | 4, 0 |
AD-62934 | Hs/Mm | 7,6 | 43,4 | 0,6 | 32,6 |
AD-62935 | Hs/Mm | 1,3 | 7,0 | 0,3 | 3,4 |
- 91 037115
AD-62939 | Hs/Mm | 6,1 | 21,4 | 2,2 | 14,5 |
AD-62940 | Hs/Mm | 6, 0 | 16, 9 | 1,4 | 3,8 |
AD-62941 | Hs/Mm | 5,6 | 8,5 | 3,9 | 6, 3 |
AD-62944 | Hs/Mm | 3,3 | 4,3 | 2,9 | 4,5 |
AD-62945 | Hs/Mm | 6, 4 | 7,0 | 1,0 | 7,2 |
AD-62946 | Hs/Mm | 18,3 | 21,4 | 19,2 | 21,1 |
AD-62949 | Hs/Mm | 11,4 | 43,7 | 8,9 | 38,3 |
AD-62950 | Hs/Mm | 9,9 | 21,9 | 4,7 | 20,8 |
AD-62954 | Hs/Mm | 9,4 | 65,5 | 0,2 | 64,3 |
AD-62955 | Hs/Mm | 5,8 | 21,8 | 5,5 | 5,8 |
AD-62959 | Hs/Mm | 4,2 | 9, 6 | 1,8 | 5, 3 |
AD-62960 | Hs/Mm | 5,4 | 10,1 | 3,8 | 2,5 |
AD-62964 | Hs/Mm | 3,7 | 21,2 | 0,9 | 12,7 |
AD-62965 | Hs/Mm | 8,0 | 20,8 | 5,3 | 23,5 |
AD-62969 | Hs/Mm | 6, 4 | 4,7 | 3,8 | 5,1 |
AD-62970 | Hs/Mm | 19,6 | 5,2 | 14,6 | 6, 1 |
AD-62936 | Mm | 7,0 | 17,5 | 0,1 | 9,9 |
AD-62937 | Mm | 4,0 | 16, 9 | 0,8 | 10,2 |
AD-62938 | Mm | 4,0 | 49,1 | 0,7 | 42,4 |
AD-62942 | Mm | 3,4 | 4,9 | 1,2 | 5,3 |
AD-62943 | Mm | 3,8 | 14,9 | 2,2 | 10,6 |
AD-62947 | Mm | 10,9 | 6, 4 | 9,6 | 1,6 |
AD-62948 | Mm | 6, 7 | 18,7 | 6, 9 | 15,8 |
AD-62951 | Mm | 8,1 | 11,8 | 8,6 | 14,5 |
AD-62952 | Mm | 9,4 | 23,2 | 10,1 | 29,2 |
AD-62953 | Mm | 11,3 | 10,3 | 13,7 | 12,1 |
AD-62956 | Mm | 2,2 | 3,9 | 1,8 | 1,6 |
AD-62957 | Mm | 3,2 | 22,5 | 3,1 | 20,0 |
AD-62958 | Mm | 7,5 | 16, 0 | 5,8 | 13,2 |
AD-62961 | Mm | 4,3 | 6, 9 | 2,8 | 5,6 |
AD-62962 | Mm | 17,1 | 42,4 | 14,2 | 49,5 |
AD-62963 | Mm | 2,3 | 10,8 | 0,6 | 8,3 |
AD-62966 | Mm | 5,7 | 11,6 | 5,8 | 5,6 |
AD-62967 | Mm | 3,8 | 21,7 | 2,0 | 23,0 |
AD-62968 | Mm | 3,5 | 9,4 | 0,3 | 9,0 |
AD-62971 | Mm | 4,6 | 3,1 | 5,0 | 2,7 |
AD-62972 | Mm | 13,8 | 22,7 | 17,0 | 24,9 |
AD-62973 | Mm | 19,3 | 51,9 | 19,7 | 21,9 |
- 92 037115
Т аблица 4b
Дополнительный скрининг в отношении однократной дозы для HAO1 с использованием первичных гепатоцитов мыши
ID дуплекса | Вид | Название смыслового олигонуклеотида | 20 нМ PMH | 0,2 нМ PMH | SD 20 нМ PMH | SD 0,2 нМ PMH |
AD-62974.2 | Hs | A-126176.1 | 1,5 | 11,5 | 0,3 | 8,5 |
AD-62975.2 | Hs | A-126192.1 | 6,2 | 24,5 | 1,9 | 19,4 |
AD-62 976.2 | Hs | A-126208.1 | 8,3 | 60,0 | 3,9 | 7,9 |
AD-62977.2 | Hs | A-126224.1 | 69,1 | 106, 9 | 44,8 | 18,3 |
AD-62978.2 | Hs | A-126178.1 | 30,0 | 46, 3 | 26, 0 | 27,3 |
AD-62979.2 | Hs | A-126194.1 | 50,7 | 59,5 | 45,6 | 43,4 |
AD-62980.2 | Hs | A-126210.1 | 65,4 | 89,5 | 68,9 | 29,3 |
AD-62981.2 | Hs | A-126226.1 | 65,8 | 83,3 | 31,9 | 23,7 |
AD-62982.2 | Hs | A-126180.1 | 86, 6 | 67,0 | 92,1 | 65,5 |
AD-62983.2 | Hs | A-126196.1 | 81,5 | 103,6 | 61,3 | 68,0 |
AD-62984.2 | Hs | A-126212.1 | 13,5 | 51,8 | 1,2 | 37,7 |
AD-62985.2 | Hs | A-126228.1 | 53,8 | 37,7 | 38,1 | 26, 3 |
AD-62986.2 | Hs | A-126182.1 | 138,5 | 153,4 | 140,7 | 119,6 |
AD-62987.2 | Hs | A-126198.1 | 39,0 | 99,6 | 44,9 | 110,7 |
AD-62989.2 | Hs | A-126230.1 | 17,1 | 2,2 | 23,1 | 1,6 |
AD-62990.2 | Hs | A-126184.1 | 4,3 | 46, 3 | 4,6 | 46, 4 |
AD-62991.2 | Hs | A-126200.1 | 125,2 | 102,6 | 111,9 | 92,9 |
AD-62992.2 | Hs | A-126216.1 | 64,7 | 65,6 | 67,8 | 55,8 |
AD-62993.2 | Hs | A-126232.1 | 83,8 | 79,0 | 63,0 | 22,2 |
AD-62994.2 | Hs | A-126186.1 | 1,9 | 5,4 | 1,5 | 0,2 |
AD-62995.2 | Hs | A-126202.1 | 2,9 | 17,4 | 1,8 | 13,8 |
AD-62996.2 | Hs | A-126218.1 | 49,3 | 61,4 | 43,6 | 49,9 |
AD-62997.2 | Hs | A-126234.1 | 60,2 | 83,4 | 19,1 | 45,7 |
AD-62998.2 | Hs | A-126188.1 | 73,5 | 86, 7 | 71,5 | 69,4 |
AD-62999.2 | Hs | A-126204.1 | 38,7 | 50,0 | 29,5 | 22,7 |
AD-63000.2 | Hs | A-126220.1 | 27,3 | 56, 6 | 26, 1 | 41,4 |
AD-63001.2 | Hs | A-126236.1 | 56, 6 | 83,8 | 52,9 | 13,5 |
AD-63002.2 | Hs | A-126190.1 | 81,6 | 74,2 | 67,4 | 70,5 |
AD-63003.2 | Hs | A-126206.1 | 46, 4 | 47,7 | 42,4 | 21,4 |
AD-63004.2 | Hs | A-126222.1 | 28,6 | 64,5 | 17,0 | 44,5 |
AD-62933.2 | Hs/Mm | A-126094.1 | 1,1 | 4,6 | 0,5 | 4,0 |
AD-62934.2 | Hs/Mm | A-126110.1 | 7,6 | 43,4 | 0,6 | 32,6 |
AD-62935.2 | Hs/Mm | A-126126.1 | 1,3 | 7,0 | 0,3 | 3,4 |
AD-62939.2 | Hs/Mm | A-126096.1 | 6, 1 | 21,4 | 2,2 | 14,5 |
AD-62940.2 | Hs/Mm | A-126112.1 | 6, 0 | 16, 9 | 1,4 | 3,8 |
- 93 037115
AD-62941.2 | Hs/Mm | A-126128.1 | 5,6 | 8,5 | 3,9 | 6, 3 |
AD-62944.2 | Hs/Mm | A-126098.1 | 3,3 | 4,3 | 2,9 | 4,5 |
AD-62945.2 | Hs/Mm | A-126114.1 | 6, 4 | 7,0 | 1,0 | 7,2 |
AD-62946.2 | Hs/Mm | A-126130.1 | 18,3 | 21,4 | 19,2 | 21,1 |
AD-62949.2 | Hs/Mm | A-126100.1 | 11,4 | 43,7 | 8,9 | 38,3 |
AD-62950.2 | Hs/Mm | A-126116.1 | 9,9 | 21,9 | 4,7 | 20,8 |
AD-62954.2 | Hs/Mm | A-126102.1 | 9,4 | 65,5 | 0,2 | 64,3 |
AD-62 955.2 | Hs/Mm | A-126118.1 | 5,8 | 21,8 | 5,5 | 5,8 |
AD-62959.2 | Hs/Mm | A-126104.1 | 4,2 | 9,6 | 1,8 | 5,3 |
AD-62960.2 | Hs/Mm | A-126120.1 | 5,4 | 10,1 | 3,8 | 2,5 |
AD-62964.2 | Hs/Mm | A-126106.1 | 3,7 | 21,2 | 0,9 | 12,7 |
AD-62 9 65.2 | Hs/Mm | A-126122.1 | 8,0 | 20,8 | 5,3 | 23,5 |
AD-62969.2 | Hs/Mm | A-126108.1 | 6, 4 | 4,7 | 3,8 | 5,1 |
AD-62970.2 | Hs/Mm | A-126124.1 | 19,6 | 5,2 | 14,6 | 6, 1 |
AD-62936.2 | Mm | A-126142.1 | 7,0 | 17,5 | 0,1 | 9,9 |
AD-62937.2 | Mm | A-126158.1 | 4,0 | 16, 9 | 0,8 | 10,2 |
AD-62938.2 | Mm | A-126174.1 | 4,0 | 49,1 | 0,7 | 42,4 |
AD-62942.2 | Mm | A-126144.1 | 3,4 | 4,9 | 1,2 | 5,3 |
AD-62943.2 | Mm | A-126160.1 | 3,8 | 14,9 | 2,2 | 10,6 |
AD-62947.2 | Mm | A-126146.1 | 10,9 | 6, 4 | 9,6 | 1,6 |
AD-62948.2 | Mm | A-126162.1 | 6, 7 | 18,7 | 6, 9 | 15,8 |
AD-62951.2 | Mm | A-126132.1 | 8,1 | 11,8 | 8,6 | 14,5 |
AD-62952.2 | Mm | A-126148.1 | 9,4 | 23,2 | 10,1 | 29,2 |
AD-62953.2 | Mm | A-126164.1 | 11,3 | 10,3 | 13,7 | 12,1 |
AD-62 95 6.2 | Mm | A-126134.1 | 2,2 | 3,9 | 1,8 | 1,6 |
AD-62957.2 | Mm | A-126150.1 | 3,2 | 22,5 | 3,1 | 20,0 |
AD-62958.2 | Mm | A-126166.1 | 7,5 | 16, 0 | 5,8 | 13,2 |
AD-62961.2 | Mm | A-126136.1 | 4,3 | 6, 9 | 2,8 | 5,6 |
AD-62962.2 | Mm | A-126152.1 | 17,1 | 42,4 | 14,2 | 49,5 |
AD-62963.2 | Mm | A-126168.1 | 2,3 | 10,8 | 0,6 | 8,3 |
AD-62 9 66.2 | Mm | A-126138.1 | 5,7 | 11,6 | 5,8 | 5,6 |
AD-62 9 67.2 | Mm | A-126154.1 | 3,8 | 21,7 | 2,0 | 23,0 |
AD-62968.2 | Mm | A-126170.1 | 3,5 | 9,4 | 0,3 | 9,0 |
AD-62971.2 | Mm | A-126140.1 | 4,6 | 3,1 | 5,0 | 2,7 |
AD-62972.2 | Mm | A-126156.1 | 13,8 | 22,7 | 17,0 | 24,9 |
AD-62973.2 | Mm | A-126172.1 | 19,3 | 51,9 | 19,7 | 21,9 |
Пример 4. Скрининг в отношении эффекта дозы с использованием первичных гепатоцитов обезьяны.
Значения IC50 модифицированных и конъюгированных дуплексов siRNA для HAO1 определяли с использованием первичных гепатоцитов обезьяны. siRNA для HAO1 трансфицировали в пределах диапазона доз с конечной концентрацией дуплекса, составляющей от 10 нМ до 36 фМ, с использованием 86-кратных разведений. Результаты этих анализов показаны в табл. 5.
- 94 037115
Таблица 5 а
Скрининг в отношении эффекта дозы для HAO1 с использованием первичных гепатоцитов мыши
ID дуплекса | Вид | IC50 PCH (нМ) |
AD-62984 | Hs | 0,017 |
AD-62994 | Hs | 0,029 |
AD-62989 | Hs | 0,175 |
AD-62974 | Hs | 0,288 |
AD-62975 | Hs | 0,399 |
AD-62933 | Hs/Mm | 0,019 |
AD-62944 | Hs/Mm | 0,027 |
AD-62935 | Hs/Mm | 0,137 |
AD-62965 | Hs/Mm | 0,155 |
AD-62941 | Hs/Mm | 0,245 |
AD-62940 | Hs/Mm | 0,927 |
Таблица 5 b
Дополнительный скрининг в отношении эффекта дозы для HAO1 с использованием первичных гепатоцитов мыши
ID дуплекса | Вид | IC50 PCH (нМ) |
AD-62984.2 | Hs | 0,017 |
AD-62994.2 | Hs | 0,029 |
AD-62989.2 | Hs | 0,175 |
AD-62974.2 | Hs | 0,288 |
AD-62975.2 | Hs | 0,399 |
AD-62933.2 | Hs/Mm | 0,019 |
AD-62944.2 | Hs/Mm | 0,027 |
AD-62935.2 | Hs/Mm | 0,137 |
AD-62965.2 | Hs/Mm | 0,155 |
AD-62941.2 | Hs/Mm | 0,245 |
AD-62940.2 | Hs/Mm | 0,927 |
Пример 5. Скрининг в отношении эффекта дозы с использованием первичных гепатоцитов мыши.
Значения IC50 модифицированных и конъюгированных дуплексов siRNA для HAO1 определяли с использованием первичных гепатоцитов мыши. siRNA для НАО1 трансфицировали в пределах диапазона доз с конечной концентрацией дуплекса, составляющей от 10 нМ до 36 фМ, с использованием 86-кратных разведений. Результаты этих анализов показаны в табл. 6.
Таблица 6а
Скрининг в отношении эффекта дозы для HAO1 с использованием первичных гепатоцитов мыши
ID дуплекса | Вид | IC50 РМН (нМ) |
AD-62989 | Hs | 0, 003 |
AD-62994 | Hs | 0, 006 |
AD-62975 | Hs | 0, 059 |
AD-62974 | Hs | 0, 122 |
AD-62984 | Hs | 0,264 |
AD-62944 | Hs/Mm | 0, 002 |
AD-62935 | Hs/Mm | 0, 007 |
AD-62965 | Hs/Mm | 0, 008 |
AD-62933 | Hs/Mm | 0, 008 |
AD-62941 | Hs/Mm | 0, 087 |
AD-62940 | Hs/Mm | 0, 090 |
- 95 037115
Таблица 6b Дополнительный скрининг в отношении эффекта дозы для HAO1 с использованием первичных гепатоцитов мыши
ID дуплекса | Вид | IC50 PMH (нМ) |
AD-62989.2 | Hs | 0,003 |
AD-62994.2 | Hs | 0,006 |
AD-62975.2 | Hs | 0,059 |
AD-62974.2 | Hs | 0,122 |
AD-62984.2 | Hs | 0,264 |
AD-62944.2 | Hs/Mm | 0,002 |
AD-62935.2 | Hs/Mm | 0,007 |
AD-62965.2 | Hs/Mm | 0,008 |
AD-62933.2 | Hs/Mm | 0,008 |
AD-62941.2 | Hs/Mm | 0,087 |
AD-62940.2 | Hs/Mm | 0,090 |
Таблица 7
Дополнительный скрининг в отношении однократной дозы для HAO1 с использованием первичных гепатоцитов яванского макака и мыши
ID дуплекса | 10 нМ PCH | 0,1 нМ PCH | SD 10 нМ PCH | SD 0, 1 нМ PCH | 10 нМ PMH | 0,1 нМ PMH | SD 10 нМ PMH | SD 0,1 нМ PMH |
AD- 62933. 1 | 26, 1 | 22,8 | 17,0 | 6, 0 | 9,0 | 26,3 | 6, 0 | 7,6 |
AD- 65584 . 1 | 12,9 | 28,0 | 5, 1 | 6, 0 | 3,8 | 12,3 | 0,7 | 7,3 |
AD- 65585.1 | 9, 8 | 21, 0 | 4,1 | 1,0 | 6, 8 | 11,6 | 4,5 | 5,7 |
- 96 037115
AD- 65586.1 | 24,3 | 24,2 | 10,9 | 2,7 | 16, 7 | 19,0 | 5,1 | 1,8 |
AD- 65587.1 | 24,7 | 31,7 | 10,2 | 21,9 | 13,6 | 27,1 | 5,7 | 10,3 |
AD- 65588.1 | 39,2 | 33,0 | 35,6 | 5,6 | 27,1 | 33,5 | 11,0 | 8,3 |
AD- 65590.1 | 5,6 | 15,4 | 0, 4 | 6, 6 | 4,2 | 8,7 | 1,1 | 0,5 |
AD- 65591.1 | 13,9 | 20,4 | 5, 0 | 4,9 | 7,6 | 18,4 | 0,1 | 2,9 |
AD- 65592.1 | 15,6 | 24,3 | 7,4 | 3,7 | 10,1 | 24,5 | 3,1 | 1,0 |
AD- 65593.1 | 30,8 | 37,5 | 4,4 | 8,7 | 38,4 | 41,3 | 5,2 | 10,4 |
AD- 65594.1 | 18,0 | 21,8 | 5, 6 | 2,6 | 24,7 | 25,3 | 0,5 | 7,6 |
AD- 65595.1 | 19,9 | 31,9 | 0, 1 | 11,3 | 9,1 | 12,2 | 5,0 | 5,7 |
AD- 65596.1 | 12,3 | 19,2 | 0, 6 | 1,6 | 10,0 | 19,9 | 1,0 | 1,9 |
AD- 65597.1 | 10,2 | 34,8 | 2,8 | 10,1 | 22,8 | 32,0 | 6,2 | 5,7 |
AD- 65598.1 | 14,4 | 21,2 | 3,2 | 8,6 | 10,8 | 22,0 | 2,6 | 8,8 |
AD- 65599.1 | 15,0 | 28,3 | 2,5 | 21,3 | 18,0 | 25,4 | 1,7 | 8,3 |
AD- 65600.1 | 11,8 | 13,7 | 5, 6 | 0,3 | 6, 4 | 14,5 | 5,7 | 6, 8 |
AD- 65601.1 | 15,4 | 20,5 | 0, 5 | 1,6 | 5,5 | 17,2 | 0,3 | 3,9 |
AD- 65602.1 | 12,9 | 23,3 | 0, 8 | 12,0 | 11,0 | 25,4 | 2,6 | 2,6 |
AD- 65603.1 | 33,8 | 41,0 | 2,2 | 6, 8 | 37,4 | 58,6 | 3,0 | 10,5 |
AD- 65604.1 | 10,4 | 18,7 | 1, 3 | 2,3 | 12,9 | 24,5 | 0,9 | 9,2 |
AD- 65606.1 | 14,3 | 12,3 | 0,2 | 3,1 | 4,8 | 14,0 | 2,0 | 4,2 |
AD- 65607.1 | 9,2 | 18,5 | 2,1 | 3, 6 | 14,4 | 32,8 | 1,9 | 1,6 |
AD- 65608.1 | 36, 6 | 31,1 | 7,9 | 11,6 | 27,5 | 29,8 | 8,5 | 4,6 |
- 97 037115
AD- 65609.1 | 14,2 | 19,8 | 5, 1 | 0,8 | 14,6 | 23,6 | 5,3 | 1,5 |
AD- 65610.1 | 59,1 | 59,6 | 15, 0 | 13,3 | 35,0 | 70,9 | 10,0 | 0,1 |
AD- 65611.1 | 12,9 | 14,2 | 5, 4 | 1,8 | 4,5 | 17,3 | 0,6 | 2,2 |
AD- 65612.1 | 19,3 | 20,5 | 1, 5 | 9,0 | 16,2 | 23,3 | 3,8 | 1,7 |
AD- 65613.1 | 20,0 | 19,3 | 5, 7 | 0,7 | 11,0 | 23,9 | 1,0 | 5,4 |
AD- 65614.1 | 12,4 | 27,1 | 2,2 | 0,5 | 14,2 | 16, 7 | 3,8 | 11,9 |
AD- 65615.1 | 53,1 | 60,3 | 1, 4 | 7,7 | 48,2 | 80,9 | 9,9 | 39,4 |
AD- 65616.1 | 21,7 | 12,5 | 17, 8 | 5,5 | 5,3 | 13,3 | 0,5 | 7,2 |
AD- 65618.1 | 19,4 | 67,6 | 3, 4 | 35,9 | 16, 7 | 21,6 | 4,2 | 4,8 |
AD- 65619.1 | 17,0 | 27,2 | 0, 5 | 12,4 | 12,5 | 26, 3 | 3,2 | 2,3 |
AD- 65620.1 | 58,0 | 70,5 | 21, 8 | 2,8 | 37,9 | 54,8 | 0,4 | 12,7 |
AD- 65621.1 | 12,3 | 17,5 | 4,6 | 2,3 | 3,8 | 11,3 | 1,3 | 0,3 |
AD- 65622.1 | 17,7 | 20,4 | 6, 1 | 0,9 | 10,8 | 13,9 | 6, 3 | 3,1 |
AD- 65623.1 | 44,4 | 32,9 | 7,9 | H. Д. | 37,7 | 20,6 | 28,5 | 0,9 |
AD- 65624.1 | 13,0 | 23,3 | 5, 0 | 9,8 | 9,2 | 7,9 | 2,8 | 0,4 |
AD- 65625.1 | 9,8 | 13,3 | 0, 6 | 1,5 | 10,0 | 19,2 | 4,6 | 1,6 |
AD- 65626.1 | 7,7 | 15,0 | 1, 1 | 4,9 | 8,6 | 14,7 | 3,6 | 2,4 |
AD- 65627.1 | 18,8 | 24,8 | 7,8 | 1,8 | 19,7 | 18,5 | 8,1 | 12,0 |
AD- 65628.1 | 27,3 | 31,7 | 4,9 | 3,9 | 29,7 | 43,4 | 6, 4 | 19,6 |
AD- 65629.1 | 12,8 | 20,8 | 1, o | 8,1 | 18,9 | 23,2 | 3,2 | 13,9 |
AD- 65630.1 | 7,2 | 14,0 | 0, 3 | 5,3 | 6, 1 | 8,5 | 1,3 | 2,1 |
- 98 037115
AD- 65631.1 | 6, 7 | 17,2 | 0, 7 | 5,7 | 12,0 | 23,1 | 4,0 | 0,9 |
AD- 65633.1 | 13,8 | 28,6 | 3, 4 | 5,4 | 17,0 | 26,2 | 1,2 | 3,9 |
AD- 65634.1 | 12,2 | 23,6 | 6, 6 | 1,2 | 21,6 | 35,2 | 1,4 | 8,2 |
AD- 65635.1 | 11,7 | 27,7 | 5, 7 | 4,7 | 18,5 | 38,4 | 2,5 | 6, 5 |
AD- 65636.1 | 13,1 | 29,4 | 0, 6 | 12,9 | 21,3 | 35,6 | 3,1 | 13,1 |
AD- 65637.1 | 16, 0 | 22,8 | 5, 1 | 9,6 | 8,3 | 18,5 | 0,6 | 0,4 |
AD- 65638.1 | 11,5 | 15,9 | 4,3 | 2,1 | 20,8 | 31,8 | 3,5 | 3,2 |
AD- 65639.1 | 14,6 | 28,3 | 7,4 | 5,5 | 18,6 | 35,2 | 0,2 | 0,3 |
AD- 65641.1 | 32,3 | 49,3 | 3, 4 | 8,9 | 29,1 | 34,0 | 4,8 | 8,8 |
AD- 65642.1 | 10,4 | 23,0 | 0, 1 | 4,7 | 10,1 | 21,3 | 1,0 | 6, 5 |
AD- 65643.1 | 12,6 | 13,7 | 0, 3 | 2,5 | 5,3 | 20,6 | 1,8 | 6, 8 |
AD- 65644.1 | 8,1 | 13,5 | 0, 1 | 0,3 | 16, 4 | 24,1 | 3,4 | 4,2 |
AD- 65645.1 | 69,5 | 88,7 | 6, 3 | 26, 6 | 81,8 | 75,5 | 13,6 | 5,8 |
AD- 65646.1 | 8,9 | 47,0 | o, 9 | 15,6 | 26, 5 | 37,7 | 3,7 | 4,7 |
AD- 65647.1 | 11,0 | 14,0 | 2,9 | 0,3 | 16, 6 | 23,7 | 2,6 | 0,7 |
AD- 65648.1 | 7,3 | 25,4 | 3, 3 | 2,9 | 5,9 | 13,9 | 2,1 | 0,9 |
AD- 65649.1 | 11,6 | 23,0 | 1, 9 | 3,4 | 20,7 | 29,8 | 2,1 | 3,6 |
AD- 65650.1 | 27,9 | 40,6 | 13,1 | 14,0 | 27,6 | 30,6 | 9,7 | 6, 8 |
AD- 65652.1 | 73,4 | 72,2 | 5,2 | 1,8 | 47,6 | 59,7 | 7,5 | 21,4 |
AD- 65653.1 | 9,6 | 32,4 | 2,7 | 4,7 | 5,9 | 24,3 | 0,0 | 6, 7 |
AD- 65654.1 | 41,6 | 45,5 | 10,4 | 11,7 | 22,8 | 35,7 | 2,9 | 3,1 |
- 99 037115
AD- 65655.1 | 19,2 | 18,3 | 0, 1 | 4,8 | 17,8 | 18,8 | 3,8 | 3,9 |
AD- 65656.1 | 10,8 | 16, 1 | 4,7 | 3,1 | 6,2 | 13,8 | 1,6 | 1,8 |
AD- 65657.1 | 107,8 | 114,5 | 8,7 | 6, 7 | 36, 3 | 51,2 | 1,6 | 14,1 |
AD- 65658.1 | 9,6 | 13,5 | 0, 7 | 1,3 | 4,8 | 11,7 | 0,2 | 3,3 |
AD- 65659.1 | 17,5 | 39,8 | 1, 1 | 1,4 | 13,0 | 24,6 | 3,5 | 3,3 |
AD- 65660.1 | 21,5 | 33,1 | 5, 4 | 1,6 | 14,6 | 29,0 | 0,5 | 4,1 |
AD- 65661.1 | 13,9 | 40,1 | 2,2 | 12,8 | 13,2 | 27,3 | 6, 8 | 7,1 |
AD- 65662.1 | 111,2 | 242,2 | 29,9 | 179,6 | 42,5 | 47,9 | 4,6 | 1,6 |
AD- 65663.1 | 11,5 | 28,2 | 3, 8 | н. д. | 5,5 | 7,6 | 1,4 | 0,1 |
AD- 65665.1 | 104,8 | 141,7 | 13,0 | 26, 9 | 39,4 | 44,2 | 13,1 | 5,3 |
AD- 65666.1 | 14,4 | 28,1 | 6, 9 | 1,8 | 3,8 | 12,7 | 0,3 | 4,8 |
Таблица 8
Дополнительный скрининг в отношении однократной дозы с использованием первичных гепатоцитов яванского макака
Дуплекс | 10 нМ РСН | 10 нМ РСН SD | 0,1 нМ РСН | 0,1 нМ РСН SD |
AD-65626.5 | 7,1 | 0,7 | 23,5 | 3,7 |
AD-68272.1 | 10,1 | 1, 9 | 39,5 | 10,3 |
AD-68273.1 | 6, 8 | 2,2 | 29,7 | 10,1 |
AD-68274.1 | 15,7 | 4,7 | 49,4 | 12,1 |
AD-68275.1 | 15,5 | 2,7 | 47,4 | 10,4 |
AD-68276.1 | 22,3 | 8,1 | 83, 0 | 21,7 |
AD-68277.1 | 14,2 | 1, 1 | 25,2 | 7,9 |
AD-68278.1 | 18,6 | 3,2 | 97,5 | 25,4 |
AD-68279.1 | 14,7 | 3, 8 | 62,5 | 19,6 |
AD-68280.1 | 24,9 | 2,6 | 54,7 | 8, 1 |
AD-68281.1 | 38,3 | 18,6 | 70,7 | 8, 8 |
AD-68282.1 | 11,3 | 3,1 | 35, 9 | 3, 6 |
AD-68283.1 | 14,4 | 3, 6 | 79, 9 | 26, 5 |
AD-68284.1 | 25,1 | 4,7 | 82,3 | 8,2 |
AD-68285.1 | 10,4 | 1,3 | 39,3 | 10,3 |
- 100 037115
AD-68286.1 | 14,7 | 4,5 | 71,9 | 18,3 |
AD-68287.1 | 8,0 | 2,3 | 28,4 | 3,5 |
AD-68288.1 | 14,8 | 3, 5 | 31,7 | 6, 3 |
AD-68289.1 | 11,8 | 2,5 | 30,8 | 3,5 |
AD-68290.1 | 11,5 | 4,9 | 40,3 | 8,4 |
AD-68291.1 | 15,8 | 6, 3 | 69,9 | 6, 6 |
AD-68292.1 | 9,8 | 3, 0 | 37,3 | 20,7 |
AD-68293.1 | 20,2 | 6, 1 | 85,2 | 20,8 |
AD-68294.1 | 12,9 | 5, 0 | 68,7 | 21,6 |
AD-68295.1 | 7,5 | 1, 4 | 22,6 | 3,9 |
AD-68296.1 | 8,5 | 1, 1 | 51,3 | 7,0 |
AD-68297.1 | 8,2 | 2,4 | 27,4 | 4,0 |
AD-68298.1 | 10,1 | 2,8 | 35,6 | 10,4 |
AD-68299.1 | 11,8 | 2,4 | 47,7 | 16,2 |
AD-68300.1 | 7,2 | 1, 7 | 33,8 | 4,6 |
AD-68301.1 | 34,2 | 14,3 | 78,3 | 25,8 |
AD-68302.1 | 15,6 | 5, 8 | 57,1 | 10,0 |
AD-68303.1 | 7,0 | 2,0 | 23,9 | 4,5 |
AD-68304.1 | 14,8 | 2,4 | 64,2 | 12,1 |
AD-68305.1 | 25,3 | 3, 8 | 106, 5 | 23,8 |
AD-68306.1 | 12,4 | 2,0 | 19,8 | 1,8 |
AD-68307.1 | 22,2 | 8,9 | 93,1 | 22,6 |
AD-68308.1 | 22,2 | 4,0 | 79,6 | 7,8 |
AD-68309.1 | 8,0 | 2,7 | 19,9 | 3,7 |
Пример 6. Оценка in vivo конъюгатов GO-GalNAc у мышей линии С57В6.
Конъюгаты GO-GalNAc вводили дозами подкожно мышам линии С57В6 в концентрации, составляющей 10, 5, 2,5 или 1,25 мг/кг, и при помощи qPCR оценивали степень нокдауна мРНК в печени через 72 ч после введения доз. Значения ED50 для однократной дозы составляют примерно 1,25 и 2,5 мг/кг для соединения A (AD-62994) и соединения В (AD-62933) соответственно. При исследованиях с повторной дозой конъюгаты вводили дозами подкожно еженедельно (QW) в течение 4 недель и оценивали уровни мРНК GO в печени через 72 ч после 4-ой дозы. Значения ED50 повторной дозы составляли ~0,3 мг/кг для обоих соединений. Результаты показаны на фиг. 4.
Пример 7. Оценка in vivo степени нокдауна GO и влияния на уровни оксалатов у KO по AGXT мышей.
siRNA для GO (AD-40257) в липидных наночастицах (LNP) вводили дозами внутривенно KO по AGXT мышам (Salido et al. (2006) PNAS 103:18249) в концентрации, составляющей 1 мг/кг. Уровни оксалатов или гликолата в моче измеряли на 15-й день при помощи ионообменной хроматографии/массспектроскопии. Результаты показаны на фиг. 5. Данные выражали относительно показателей до введения доз и нормализовали по отношению к уровню креатинина (Cr) для регулирования разбавления мочи. N=4 мышей на группу и планки погрешностей представляют среднее квадратичное отклонение.
Пример 8. Оценка in vivo конъюгатов GO-GalNAc на крысиной модели с нокдауном по AGXT.
Для получения крысиной модели PH1 siRNA для AGXT (AD-63102) в LNP (AF-011-63102) вводили дозами в концентрации, составляющей 1 мг/кг, внутривенно самкам крыс линии Sprague Dawley на 1-й день и на 7-й день для поддержания нокдауна AGXT в печени крыс и 1% этиленгликоля добавляли к питьевой воде для дополнительной стимуляции образования оксалатов. На 0-й день и 7-й день некоторым крысам также вводили дозами конъюгат GalNAc-siRNA для GO (AD-62994) или PBS-контроль. Результаты показаны на фиг. 6. На фиг. 6А показана количественная оценка уровней мРНК AGXT в печени через 72 ч после однократной дозы siRNA для AGXT в LNP, составляющей 1 мг/кг. На фиг. 6В, уровни оксалатов в моче количественно определяли с помощью собранной за 24 ч мочи, собранной с -1-го дня по 0-й день, с 3-го дня по 4-й день, с 5-го дня по 6-й день и с 7-го дня по 8-й день. Данные нормализовали по отношению к уровню креатинина для регулирования разбавления мочи. N=3 для групп AGXT и N=2 для группы PBS-контроля. На фиг. 6С, за этими же крысами (что и на фиг. 6В) далее наблюдали до 49-го дня с продолжающимся еженедельным введением доз на 14 и 21 дни как AF-011-63102, так и AD-62994 и сборами мочи за 24 ч, как показано. Этиленгликоль продолжали добавлять в питьевую воду до 28-го дня. На фиг. 6D продолжительность нокдауна HAO1 у крыс показана при помощи измерения уровней мРНК
- 101 037115 либо через одну неделю, либо через четыре недели после последней из 4 доз (что соответствует 28 и 49 дням на фиг. 6С) и приведены относительно уровней, наблюдаемых у крыс, которых лечили при помощи
PBS. Планки погрешностей представляют среднее квадратичное отклонение везде, где используются.
Название дуплекса | Мишень | Название смысловой целевой нити | |
AD-40257.1 | HAO1 | NM_017545,2_1306-1324_s | |
AD-40257.2 | HAO1 | NM_017545,2_1306-1324_s | |
AD-63102.1 | AGXT | NM_016702,3_1109-1127_s | |
AD-63102.2 | AGXT | NM_016702,3_1109-1127_s | |
AD-63102.3 | AGXT | NM_016702,3_1109-1127_s | |
Название дуплекса | Модифицированная последовательность смысловой нити | Немодифицированная последовательность смысловой нити | SEQ ID NO: |
AD-40257.1 | uucAAuGGGuGuccuAGGAdTsdT | UU CAAU G G GU GU С CUAGGA | 770 и 771 |
AD-40257.2 | uucAAuGGGuGuccuAGGAdTsdT | UU CAAU G G GU GU C CUAGGA | 770 и 771 |
AD-63102.1 | AcAAcuGGAGGGAcAu с GudT s dT | ACAACUGGAGGGACAUCGU | 772 и 773 |
AD-63102.2 | AcAAcuGGAGGGAcAu cGudT s dT | ACAACUGGAGGGACAUCGU | 772 и 773 |
AD-63102.3 | AcAAcuGGAGGGAcAu c GudT s dT | ACAACUGGAGGGACAUCGU | 772 и 773 |
Название дуплекса | Модифицированная последовательность антисмысловой нити | Немодифицированная последовательность антисмысловой нити | SEQ ID NO: |
AD-40257.1 | и С CuAG GAcAC С cAUU GAAdT s dT | и С CUAGGACAC С CAUU GAA | 774 и 775 |
AD-40257.2 | U C CuAG GAcAC C cAUU GAAdT s dT | U С CUAGGACAC С CAUU GAA | 774 и 775 |
AD-63102.1 | ACGAUGUCCCUCcAGUUGUdTsdT | ACGAUGUCCCUCCAGUUGU | 776 и 777 |
AD-63102.2 | ACGAUGUCCCUCcAGUUGUdTsdT | ACGAUGUCCCUCCAGUUGU | 776 и 777 |
AD-63102.3 | ACGAUGUCCCUCcAGUUGUdTsdT | ACGAUGUCCCUCCAGUUGU | 776 и 777 |
Пример 9. Оценка in vivo конъюгатов GO-GalNAc.
Самкам мышей линии C57BL/6 возрастом 6-8 недель вводили однократную подкожную дозу конъюгатов siRNA-GalNac для GO, в табл. 9. Мышей выводили из эксперимента через 72 ч и печень анализировали в отношении мРНК НАО при помощи анализа с bDNA. Результаты показаны на фиг. 13.
Таблица 9
Конъюгаты siRNA-GalNac для GO (НАО)
Название дуплекса | Модифицированная последовательность смысловой нити | SEQ ID NO: |
AD-62989.2 | UfscsCfuAfgGfaAfCfCfuUfuUfaGfaAfaUfL96 | 778 |
AD-62994.2 | GfsasCfuUfuCfaUfCfCfuGfgAfaAfuAfuAfL96 | 779 |
AD-62933.2 | GfsasAfuGfuGfaAfAfGfuCfaUfcGfaCfaAfL9 6 | 780 |
AD-62935.2 | CfsasUfuGfgUfgAfGfGfaAfaAfaUfcCfuUfL96 | 781 |
AD-62940.2 | AfsusCfgAfcAfaGfAfCfaUfuGfgUfgAfgAfL96 | 782 |
AD-62941.2 | AfscsAfuUfgGfuGfAfGfgAfaAfaAfuCfcUfL96 | 783 |
AD-62944.2 | GfsasAfaGfuCfaUfCfGfaCfaAfgAfcAfuUfL96 | 784 |
AD-62965.2 | AfsasAfgUfcAfuCfGfAfcAfaGfaCfaUfuAfL96 | 785 |
Название дуплекса | Модифицированная антисмысловая нить | SEQ ID NO: |
AD-62989.2 | asUfsuUfcUfaAfaAfgguUfcCfuAfgGfascsa | 786 |
AD-62994.2 | usAfsuAfuUfuCfcAfggaUfgAfaAfgUfcscsa | 787 |
AD-62933.2 | usUfsgUfcGfaUfgAfcuuUfcAfcAfuUfcsusg | 788 |
AD-62935.2 | asAfsgGfaUfuUfuUfccuCfaCfcAfaUfgsusc | 789 |
AD-62940.2 | usCfsuCfaCfcAfaUfgucUfuGfuCfgAfusgsa | 790 |
AD-62941.2 | asGfsgAfuUfuUfuCfcucAfcCfaAfuGfusesu | 791 |
AD-62944.2 | asAfsuGfuCfuUfgUfcgaUfgAfcUfuUfcsasc | 792 |
AD-62965.2 | usAfsaUfgUfcUfuGfucgAfuGfaCfuUfuscsa | 793 |
- 102 037115
Название дуплекса | Перекрестная реактивность | Морской свинки? | ММ к мыши | ММ к GP |
AD-62989.2 | Hs | да | пол. 8 | |
AD-62994.2 | Hs | нет | пол. 16 | пол. 2, 12, 16 |
AD-62933.2 | Hs/Mm | да | ||
AD-62935.2 | Hs/Mm | да | ||
AD-62940.2 | Hs/Mm | да | ||
AD-62941.2 | Hs/Mm | да | ||
AD-62944.2 | Hs/Mm | да | ||
AD-62 9 65.2 | Hs/Mm | да |
Пример 10. Оценка in vivo конъюгатов GO-GalNAc у мышей.
Самкам мышей линии С57 BL/6 вводили однократную подкожную дозу, составляющую 3 мг/кг, ряда конъюгатов siRNA-GalNAc для GO, описанных в данном документе, или PBS-контроль. Мышей выводили из эксперимента через 72 ч и при помощи qPCR оценивали степень нокдауна мРНК НАО1 в печени. Результаты показаны на фиг. 14, выраженные относительно PBS-контроля.
Пример 11. Оценка эффекта дозы конъюгатов GO-GalNAc у мышей.
Самкам мышей линии С57 BL/6 вводили однократную подкожную дозу, составляющую либо 1, либо 3 мг/кг, одного из конъюгатов siRNA-GalNAc для GO, соединения A (AD-62994), соединения В (AD-62933), соединения С (AD-65644), соединения D (AD-65626), соединения Е (AD-65590), соединения F (AD-65585) или PBS-контроля. Через десять дней мышей выводили из эксперимента и при помощи qPCR оценивали степень нокдауна мРНК НАО1 в печени. При исследованиях с повторной дозой соединения С, D, F или PBS-контроль вводили дозами подкожно еженедельно (QW) в течение 4 недель и уровни мРНК HAO1 в печени оценивали через 10 дней после последней дозы. Результаты экспериментов с использованием однократной дозы показаны на фиг. 15 и экспериментов с использованием повторной дозы показаны на фиг. 16, выраженные относительно PBS-контроля. Из этих данных видна улучшенная действенность соединений AD-65644 и AD-65626 относительно AD-62933 и соединений AD-65590 и AD-65585 относительно AD-62994.
Пример 12. Оценка эффекта дозы соединения D у мышей.
Самкам мышей линии С57 BL/6 вводили однократную подкожную дозу AD-65626 или PBS-контроля, составляющую 0,1, 0,3, 1, 3 или 10 мг/кг. Через десять дней мышей выводили из эксперимента и при помощи qPCR оценивали степень нокдауна мРНК НАО1 в печени, при этом результаты выражали относительно PBS-контроля, как показано на фиг. 17. Из этих результатов видно более чем 3-кратное улучшение действенности по сравнению с соединением AD-62933.
Пример 13. Взаимосвязь нокдауна мРНК с уровнями гликолата в сыворотке крови у мышей.
Самкам мышей линии С57 BL/6 вводили однократную подкожную дозу AD-65585 или PBS-контроля, составляющую 0,1, 0,3, 1, 3 или 10 мг/кг. Через десять дней мышей выводили из эксперимента и при помощи qPCR оценивали степень нокдауна мРНК НАО1 в печени, при этом результаты выражали относительно PBS-контроля. Уровни гликолата в образцах сыворотки крови от этих же самых мышей количественно определяли при помощи ионообменной хроматографии совместно с массспектроскопией, как описано ранее (Knight et al., Anal. Biochem. 1 Февраля 2012 г; 421(1): 121-124). Результаты для этих экспериментов показаны на фиг. 18.
Из этих результатов видно, что AD-65585 является таким же действенным, как и AD-65626, оба характеризуются значением ED50 однократной дозы, составляющим ~0,3 мг/кг, у мышей WT. Кроме того, сайленсинг мРНК HAO1 приводит к зависимым от дозы повышениям уровня гликолата в сыворотке крови, составляющим до 4 раз (примерно 200 мкМ), при двух наивысших дозах.
Пример 14. Взаимосвязь нокдауна мРНК с уровнями гликолата в сыворотке крови у крыс.
Самцам крыс линии Sprague Dawley вводили однократную подкожную дозу AD-65626 или PBS-контроля, составляющую 1, 3 или 10 мг/кг. Через четырнадцать дней крыс выводили из эксперимента и при помощи qPCR оценивали степень нокдауна мРНК НАО1 в печени, при этом результаты выражали относительно PBS-контроля. Уровни гликолата в образцах сыворотки крови от этих же самых крыс, собранные как перед введением доз, так и на 14-й день, количественно определяли при помощи ионообменной хроматографии совместно с масс-спектроскопией, и в этом случае также как описано (Knight et al., Anal. Biochem. 1 Февраля 2012 г; 421(1):121-124). Результаты для этих экспериментов показаны на фиг. 19.
Согласно результатам наблюдений за мышами дикого типа из этих результатов также видно, что сайленсинг мРНК НАО1 у крыс линии Sprague Dawley приводит к зависимым от дозы повышениям уровня гликолата в сыворотке крови, составляющим до 12 раз (примерно 140 мкМ), при двух наивысших дозах.
- 103 037115
Пример 15. Исследование фармакологических свойств ALN-65585.
Ингибирование HAO1 в гепатоцитах.
Первичные гепатоциты яванского макака трансфицировали с помощью RNAimax (Invitrogen) серийно разведенным AD-65585 (ALN-65585, ALN-GO1) или контролем, представляющим собой ненацеливающуюся мРНК с люциферазой (AD1955), в концентрации, составляющей 10 нМ. Относительные уровни мРНК НАО1 определяли путем нормализации в отношении уровней мРНК GAPDH, которые количественно определяли при помощи RT-PCR в режиме реального времени. Данные наносили на график с расчетом показателя IC50, составляющего 10 пМ. Результаты показаны на фиг. 20.
Трансфекция in vitro AD-65585 показала значение ED50, составляющее примерно 10 пМ, на первичных гепатоцитах яванского макака.
Фармакологические свойства однократной дозы у мыши.
Фармакологические свойства ALN-GO1 оценивали у мышей путем количественного определения уровней мРНК HAO1 в печени и гликолата в сыворотке крови (фиг. 21). Однократная SC доза ALN-GO1 приводила к дозозависимой супрессии мРНК HAO1 в дозе, составляющей 10 мг/кг, приводящей к сайленсингу со значением ED90. Установили, что доза со значением ED50 для сайленсинга GO1 у мыши составляет 0,3 мг/кг. Уровни гликолата в сыворотке крови повышались зависимым от дозы образом, при этом максимальный уровень составлял примерно в 4 раза выше от исходных уровней. Результаты показаны на фигуре 21, на которой показаны уровни мРНК НАО1 в печени и гликолата в сыворотке крови через 10 дней после однократной подкожной дозы ALN-65585 у мышей линии C57BL/6. Столбики представляют среднее значение, полученное от 3 или 4 животных, и планки погрешностей отображают среднее квадратичное отклонение.
Продолжительность действия однократной дозы у мыши.
Сайленсинг GO1 был долговременным и обратимым после однократной SC дозы (фиг. 22). Однократная SC доза ALN-GO1 у мышей в концентрации, составляющей 3 мг/кг, приводила к >70% сайленсингу мРНК в течение примерно 6 недель, после чего уровни мРНК возвращались к исходным уровням через 12 недель после введения дозы. Результаты показаны на фиг. 22: уровни мРНК НАО1 в печени в многочисленные моменты времени после однократной подкожной дозы ALN-65585 у мышей линии C57BL/6. Каждая точка измерения представляет среднее значение, полученное от 3 животных, и планки погрешностей отображают среднее квадратичное отклонение.
Фармакологические свойства однократной дозы у крысы Фармакологические свойства ALN-GO1 оценивали у крыс путем количественного определения уровней мРНК НАО1 в печени (фиг. 23). Однократное SC введение ALN-GO1 самцам крыс линии Sprague Dawley приводило к дозозависимой супрессии мРНК HAO1 в дозе, составляющей >3 мг/кг, приводящей к сайленсингу со значением ED90. Результаты показаны на фиг. 23: уровни мРНК HAO1 в печени через 10 дней после однократной подкожной дозы ALN-65585 у крыс линии Sprague Dawley. Столбики представляют среднее значение, полученное от 3 животных, и планки погрешностей отображают среднее квадратичное отклонение. Установили, что доза со значением ED50 для сайленсинга GO1 у крысы составляет 0,3 мг/кг.
Фармакологические свойства однократной дозы у KO по AGXT мыши.
Влияние ALN-GO1 на уровни оксалатов оценивали на КО по AGXT мышиной модели РН1. Результаты показаны на фиг. 24. Выделение оксалатов (вверху) и гликолата (внизу) с мочой за 24 ч KO по AGXT мышей после однократной подкожной дозы ALN-65585. Разные буквы означают значимое различие между 3 группами доз на каждой конкретной неделе (n=3 на дозу). Выделение с мочой с течением времени существенно не изменяется у животных с PBS-контролем (n=1).
Уровни оксалатов в моче показали дозозависимые сокращения количества после однократной дозы ALN-GO1 с наибольшим примерно 50% снижением количества оксалатов при дозе, составляющей 3 мг/кг, которое длилось в течение >3 недель перед возвращением к уровням до введения дозы. Уровни гликолата в моче показали дозозависимые повышения после однократной дозы ALN-GO1 с наибольшими примерно 5-кратными повышениями при дозе, составляющей 3 мг/кг, которые длились в течение >4 недель.
Фармакологические свойства однократной дозы на индуцированной крысиной модели РН1.
ALN-GO1 оценивали на второй модели РН1 на грызунах, при которой у крыс с использованием siRNA ингибировали AGXT в печени и уровни оксалатов стимулировали этиленгликолем (фиг. 25А и 25В). Уровни мРНК НАО1 в печени и оксалатов в моче за 24 ч количественно определяли для определения степени снижения НАО1, необходимой для наибольшего сокращения количества оксалатов. Результаты показаны на фиг. 25А и 25В: уровни мРНК НАО1 в печени у крысиной индуцированной модели РН1 через 14 дней после однократной подкожной дозы ALN-65585 и еженедельного введения доз siRNA AF-011-AGXT (2 дозы, составляющие 1 мг/кг). Уровни оксалатов в моче за 24 ч, нормализованные к уровням креатинина в моче. Столбики представляют среднее значение, полученное от 3 животных, и планки погрешностей отображают среднее квадратичное отклонение. Корреляционное поле снижения уровней мРНК и оксалатов представляет отдельных животных из множества экспериментов.
- 104 037115
Однократная доза ALN-GO1 в этой модели показала дозозависимое снижение уровней мРНК и оксалатов в моче с примерно 85% наибольшим сокращением количества мРНК и примерно 90% наибольшим сокращением количества оксалатов в моче, наблюдаемые при наивысших дозах ALN-GO1 (фиг. 25А и 25В). В этой индуцированной крысиной модели РН1 сокращения количеств мРНК и оксалатов в моче привели к соотношению 1:1.
Фармакологические свойства многократных доз на индуцированной крысиной модели РН1.
Действенность ALN-GO1 оценивали в исследованиях на нормальных крысах с ингибированной активностью AGXT и этиленгликолем (индуцированная модель РН1) путем количественного определения уровней мРНК НАО1 в печени и оксалатов в моче за 24 ч. Результаты показаны на фиг. 26: уровни мРНК НАО1 в печени у крысиной индуцированной модели РН1 через 28 дней после повторного подкожного введения дозы ALN-65585 и повторного iv введения дозы siRNA AF-011-AGXT (четыре дозы, составляющие 1 мг/кг). Уровни оксалатов в моче за 24 ч, нормализованные к уровням креатинина в моче. Столбики представляют среднее значение, полученное от 2 или 3 животных, и планки погрешностей отображают среднее квадратичное отклонение.
Лечение с помощью ALN-GO1 приводило к устойчивым сокращениям количества оксалатов в моче у всех групп лечения в течение примерно 3 недель. На 28-й день после повторного введения дозы ALN-GO1 (и четырех доз AF-011-AGXT) во всех группах присутствует >95% сокращение количества мРНК, >85% снижение уровней оксалатов в моче.
Фармакологические свойства многократных доз у NHP.
Фармакологические свойства ALN-GO1 оценивали у макаков-крабоедов (отличный от человека примат (NHP)) путем количественного определения уровней мРНК HAO1 при биопсии печени и гликолата в сыворотке крови. В следующей ниже таблице показан план исследования фармакологических свойств с использованием NHP с подробным изображением уровня доз и режима введения доз.
№ группы | Тестируемый | Уровень дозы | Частота введения |
объект | (мг/кг) | ДОЗЫ | |
1 | PBS | н. д. | QM х 6 |
2 | AD-65585 | 0,25 | QM х 8 |
3 | AD-65585 | 1 | QM х 8 |
4 | AD-65585 | 1 | QM х 6 |
5 | AD-65585 | 2 | QM х 6 |
6 | AD-65585 | 4 | QM х 6 |
7 | AD-65585 | 2 -> 1 | QM х 4 -> QM х 5 |
Результаты показаны на фиг. 27. Уровни гликолата в сыворотке крови у NHP для всех групп до 85го дня, данные представляют групповые средние величины, полученные от 3 животных на группу, линии представляют среднее квадратичное отклонение. Количество мРНК HAO1 при биопсии печени на 29-й день, линии представляют групповые средние величины, символы представляют уровни мРНК отдельных животных относительно PBS-контроля на 29-й день.
После первого месяца введения доз (29-й день) дозозависимый сайленсинг мРНК наблюдали во всех группах с сайленсингом мРНК до 99% в группах 6 и 7, которым вводили дозы, составляющие 4 мг/кг ежемесячно или 2 мг/кг еженедельно. Наибольшие повышенные уровни гликолата в сыворотке крови, составляющие примерно 70 мкМ, сохранялись в течение по меньшей мере 3 недель в группе 6, которой ежемесячно вводили дозу, составляющую 4 мг/кг. Промежуточный уровень гликолата в сыворотке крови.
Пример 16. Дополнительные последовательности siRNA.
Конструирование дополнительных siRNA выполняли для идентификации siRNA, целенаправленно воздействующих на HAO1, NM_017545.2.
- 105 037115
Немодифицированная последовательность | SEQ ID NO: | Модифицированная последовательность | SEQ ID NO: | Нить | Длина |
AUGUAUGUUACUUCUU AGAGA | 794 | asusguauGfuUfAfCfu ucuuagagaL96 | 1890 | смысловая | 21 |
U CU CUAAGAAGUAACA UACAUCC | 795 | usCfsucuAfaGfAfagu aAfcAfuacausesc | 1891 | антисмысловая | 23 |
U GUAU GUUACUU CUUA GAGAG | 796 | usgsuaugUfuAfCfUfu cuuagagagL96 | 1892 | смысловая | 21 |
CUCU CUAAGAAGUAAC AUACAUC | 797 | csUfscucUfaAfGfaag uAfaCfauacasusc | 1893 | антисмысловая | 23 |
UAGGAU GUAU GUUACU UCUUA | 798 | usasggauGfuAfUfGfu uacuucuuaL96 | 1894 | смысловая | 21 |
UAAGAAGUAACAUACA UCCUAAA | 799 | usAfsagaAfgUfAfаса uAfcAfuccuasasa | 1895 | антисмысловая | 23 |
UUAGGAU GUAU GUUAC UUCUU | 800 | ususaggaUfgUfAfUfg uuacuucuuL96 | 1896 | смысловая | 21 |
AAGAAGUAACAUACAU CCUAAAA | 801 | asAfsgaaGfuAfAfcau aCfaUfccuaasasa | 1897 | антисмысловая | 23 |
AGAAAGGUGUUСAAGA UGUCC | 802 | asgsaaagGfuGfUfUfc aagauguccL96 | 1898 | смысловая | 21 |
GGACAUCUUGAACACС UUUCUCC | 803 | gsGfsacaUfcUfUfgaa cAfcCfuuucuscsc | 1899 | антисмысловая | 23 |
GAAAGGUGUUСAAGAU GUCCU | 804 | gsasaaggUfgUfUfCfa agauguccuL96 | 1900 | смысловая | 21 |
AGGACAUCUUGAACAC CUUUCUC | 805 | asGfsgacAfuCfUfuga aCfaCfcuuucsusc | 1901 | антисмысловая | 23 |
GGGGAGAAAGGUGUUC AAGAU | 806 | gsgsggagAfaAfGfGfu guucaagauL96 | 1902 | смысловая | 21 |
AU CUUGAACACCUUUС UCCCCCU | 807 | asUfscuuGfaAfCfacc uUfuCfuccccscsu | 1903 | антисмысловая | 23 |
GGGGGAGAAAGGUGUU CAAGA | 808 | gsgsgggaGfaAfAfGfg uguucaagaL96 | 1904 | смысловая | 21 |
UCUUGAACACCUUUCU CCCCCUG | 809 | usCfsuugAfaCfAfccu uUfcUfcccccsusg | 1905 | антисмысловая | 23 |
AGAAACUUUGGCUGAU AAUAU | 810 | asgsaaacUfuUfGfGfc ugauaauauL96 | 1906 | смысловая | 21 |
AUAUUAUCAGСCAAAG UUUCUUC | 811 | asUfsauuAfuCfAfgcc aAfaGfuuucususc | 1907 | антисмысловая | 23 |
GAAACUUUGGCUGAUA AUAUU | 812 | gsasaacuUfuGfGfCfu gauaauauuL96 | 1908 | смысловая | 21 |
- 106 037115
AAUAUUAUCAGCCAAA GUUUCUU | 813 | asAfsuauUfaUfCfage cAfaAfguuucsusu | 1909 | антисмысловая | 23 |
AUGAAGAAACUUUGGC UGAUA | 814 | asusgaagAfaAfCfUfu uggcugauaL96 | 1910 | смысловая | 21 |
UAUCAGCCAAAGUUUC UUCAUCA | 815 | usAfsucaGfcCfAfaag uUfuCfuucauscsa | 1911 | антисмысловая | 23 |
GAUGAAGAAACUUUGG CUGAU | 816 | gsasugaaGfaAfAfCfu uuggcugauL96 | 1912 | смысловая | 21 |
AUCAGCCAAAGUUUCU U CAU CAU | 817 | asUfscagCfcAfAfagu uUfcUfucaucsasu | 1913 | антисмысловая | 23 |
AAGGCACUGAUGUUCU GAAAG | 818 | asasggcaCfuGfAfUfg uucugaaagL96 | 1914 | смысловая | 21 |
CUUU CAGAACAU CAGU GCCUUUC | 819 | esUfsuucAfgAfAfcau cAfgUfgccuususc | 1915 | антисмысловая | 23 |
AGGCACUGAUGUUCUG AAAGC | 820 | asgsgcacUfgAfUfGfu ucugaaagcL96 | 1916 | смысловая | 21 |
GCUUUCAGAACAUCAG UGCCUUU | 821 | gsCfsuuuCfaGfAfаса uCfaGfugccususu | 1917 | антисмысловая | 23 |
CGGAAAGGCACUGAUG UUCUG | 822 | esgsgaaaGfgCfAfCfu gauguucugL96 | 1918 | смысловая | 21 |
CAGAACAUCAGUGCCU UUCCGCA | 823 | csAfsgaaCfaUfCfagu gCfcUfuuccgscsa | 1919 | антисмысловая | 23 |
GCGGAAAGGCACUGAU GUUCU | 824 | gscsggaaAfgGfCfAfc ugauguucuL96 | 1920 | смысловая | 21 |
AGAACAUCAGUGCCUU UCCGCAC | 825 | asGfsaacAfuCfAfgug cCfuUfuccgcsasc | 1921 | антисмысловая | 23 |
AGAAGACU GACAU CAU UGCCA | 826 | asgsaagaCfuGfAfCfa ucauugccaL96 | 1922 | смысловая | 21 |
UGGCAAUGAUGUCAGU CUUCUCA | 827 | usGfsgcaAfuGfAfugu cAfgUfcuucuscsa | 1923 | антисмысловая | 23 |
GAAGACU GACAU CAUU GCCAA | 828 | gsasagacUfgAfCfAfu cauugccaaL96 | 1924 | смысловая | 21 |
UUGGCAAUGAUGUCAG UCUUCUC | 829 | usUfsggcAfaUfGfaug uCfaGfucuucsusc | 1925 | антисмысловая | 23 |
GCUGAGAAGACUGACA UCAUU | 830 | gscsugagAfaGfAfCfu gacaucauuL96 | 1926 | смысловая | 21 |
AAU GAU GU CAGU CUUC UCAGCCA | 831 | asAfsugaUfgUfCfagu cUfuCfucagcscsa | 1927 | антисмысловая | 23 |
- 107 037115
GGCUGAGAAGACUGAC AU CAU | 832 | gsgscugaGfaAfGfAfc ugacaucauL96 | 1928 | смысловая | 21 |
AU GAU GU CAGU CUU CU CAGCCAU | 833 | asUfsgauGfuCfAfguc uUfcUfcagccsasu | 1929 | антисмысловая | 23 |
UAAUGCCUGAUUCACA ACUUU | 834 | usasaugcCfuGfAfUfu cacaacuuuL96 | 1930 | смысловая | 21 |
AAAGUUGUGAAUCAGG CAUUACC | 835 | asAfsaguUfgUfGfaau cAfgGfcauuascsc | 1931 | антисмысловая | 23 |
AAUGCCUGAUUCACAA CUUUG | 836 | asasugccUfgAfUfUfc acaacuuugL96 | 1932 | смысловая | 21 |
CAAAGUU GU GAAU CAG GCAUUAC | 837 | csAf saagUfuGfUfgaa uCfaGfgcauusasc | 1933 | антисмысловая | 23 |
UUGGUAAUGCCUGAUU CACAA | 838 | ususgguaAfuGfCfCfu gauucacaaL96 | 1934 | смысловая | 21 |
UUGUGAAUCAGGCAUU ACCAACA | 839 | usUfsgugAfaUfCfagg cAfuUfaccaascsa | 1935 | антисмысловая | 23 |
GUUGGUAAUGCCUGAU UCACA | 840 | gsusugguAfaUfGfCfc ugauucacaL96 | 1936 | смысловая | 21 |
UGUGAAUCAGGCAUUA CCAACAC | 841 | usGfsugaAfuCfAfggc aUfuAfccaacsasc | 1937 | антисмысловая | 23 |
UAUCAAAUGGCUGAGA AGACU | 842 | usasucaaAfuGfGfCfu gagaagacuL96 | 1938 | смысловая | 21 |
AGU CUU CU CAGC CAUU UGAUAUC | 843 | asGfsucuUfcUfCfagc cAfuUfugauasusc | 1939 | антисмысловая | 23 |
AUCAAAUGGCUGAGAA GACUG | 844 | asuscaaaUfgGfCfUfg agaagacugL96 | 1940 | смысловая | 21 |
CAGU CUU CU CAGCCAU UUGAUAU | 845 | csAf sgucUfuCfUfcag cCfaUfuugausasu | 1941 | антисмысловая | 23 |
AAGAUAUCAAAUGGCU GAGAA | 846 | asasgauaUfcAfAfAfu ggcugagaaL96 | 1942 | смысловая | 21 |
UU CU CAGC CAUUU GAU AUCUUCC | 847 | usUfscucAfgCfCfauu uGfaUfaucuuscsc | 1943 | антисмысловая | 23 |
GAAGAUAUCAAAUGGC UGAGA | 848 | gsasagauAfuCfAfAfa uggcugagaL96 | 1944 | смысловая | 21 |
U CU CAGC CAUUU GAUA UCUUCCC | 849 | usCfsucaGfcCfAfuuu gAfuAfucuucs cs c | 1945 | антисмысловая | 23 |
UCUGACAGUGCACAAU AUUUU | 850 | uscsugacAfgUfGfCfa caauauuuuL96 | 1946 | смысловая | 21 |
- 108 037115
AAAAUAUUGUGCACUG UCAGAUC | 851 | asAfsaauAfuUfGfugc aCfuGfucagasusc | 1947 | антисмысловая | 23 |
CUGACAGUGCACAAUA UUUUC | 852 | csusgacaGfuGfCfAfc aauauuuucL96 | 1948 | смысловая | 21 |
GAAAAUAUUGUGCACU GUCAGAU | 853 | gsAfsaaaUfaUfUfgug cAfcUfgucagsasu | 1949 | антисмысловая | 23 |
AAGAUCUGACAGUGCA CAAUA | 854 | asasgaucUfgAfCfAfg ugcacaauaL96 | 1950 | смысловая | 21 |
UAUU GU GCACU GU CAG AUCUUGG | 855 | usAf suugUfgCfAfcug uCfaGfaucuusgsg | 1951 | антисмысловая | 23 |
CAAGAUCUGACAGUGC ACAAU | 856 | csasagauCfuGfAfCfa gugcacaauL96 | 1952 | смысловая | 21 |
AUUGUGCACUGUCAGA UCUUGGA | 857 | asUfsuguGfcAfCfugu cAfgAfucuugsgsa | 1953 | антисмысловая | 23 |
ACUGAUGUUCUGAAAG CUCUG | 858 | ascsugauGfuUfCfUfg aaagcucugL96 | 1954 | смысловая | 21 |
CAGAGCUUUCAGAACA UCAGUGC | 859 | csAf sgagCfuUfUfcag aAfcAfucagusgs c | 1955 | антисмысловая | 23 |
CUGAUGUUCUGAAAGC UCUGG | 860 | csusgaugUfuCfUfGfa aagcucuggL96 | 1956 | смысловая | 21 |
CCAGAGCUUUCAGAAC AUCAGUG | 861 | csCfsagaGfcUfUfuca gAfaCfaucagsusg | 1957 | антисмысловая | 23 |
AGGCACUGAUGUUCUG AAAGC | 862 | asgsgcacUfgAfU fGfu ucugaaagcL96 | 1958 | смысловая | 21 |
GCUUUCAGAACAUCAG UGCCUUU | 863 | gsCfsuuuCfaGfAfаса uCfaGfugccususu | 1959 | антисмысловая | 23 |
AAGGCACUGAUGUUCU GAAAG | 864 | asasggcaCfuGfAfUfg uucugaaagL96 | 1960 | смысловая | 21 |
CUUUCAGAACAUCAGU GCCUUUC | 865 | csUfsuucAfgAfAfcau cAfgUfgccuususc | 1961 | антисмысловая | 23 |
AACAACAUGCUAAAUC AGUAC | 866 | asascaacAfuGfCfUfa aaucaguacL96 | 1962 | смысловая | 21 |
GUACU GAUUUAGCAU G UUGUUCA | 867 | gsUfsacuGfaUfUfuag cAfuGfuuguuscsa | 1963 | антисмысловая | 23 |
ACAACAUGCUAAAUCA GUACU | 868 | ascsaacaUfgCfUfAfa aucaguacuL96 | 1964 | смысловая | 21 |
AGUACUGAUUUAGCAU GUUGUUC | 869 | asGfsuacUfgAfUfuua gCfaUfguugususc | 1965 | антисмысловая | 23 |
- 109 037115
UAUGAACААСAUGCUA AAUCA | 870 | usasugaaCfaAfCfAfu gcuaaaucaL96 | 1966 | смысловая | 21 |
U GAUUUAGCAU GUU GU UCAUAAU | 871 | usGfsauuUfaGfCfaug uUfgUfucauasasu | 1967 | антисмысловая | 23 |
UUAUGAACAACAUGCU AAAUC | 872 | ususaugaAfcAfAfCfa ugcuaaaucL96 | 1968 | смысловая | 21 |
GAUUUAGCAUGUUGUU CAUAAUC | 873 | gsAfsuuuAfgCfAfugu uGfuUfcauaasusc | 1969 | антисмысловая | 23 |
UCUUUAGUGUCUGAAU AU AUC | 874 | uscsuuuaGfuGfUfCfu gaauauaucL96 | 1970 | смысловая | 21 |
GAUAUAUU CAGACACU AAAGAUG | 875 | gsAfsuauAfuUfCfaga cAfcUfaaagasusg | 1971 | антисмысловая | 23 |
CUUUAGUGUCUGAAUA UAUCC | 876 | csusuuagUfgUfCfUfg aauauauccL96 | 1972 | смысловая | 21 |
GGAUAUAUUCAGACAC UAAAGAU | 877 | gsGfsauaUfaUfUfcag aCfaCfuaaagsasu | 1973 | антисмысловая | 23 |
CACAU CUUUAGU GU CU GAAUA | 878 | csascaucUfuUfAfGfu gucugaauaL96 | 1974 | смысловая | 21 |
UAUU CAGACACUAAAG AUGUGAU | 879 | usAfsuucAfgAfCfacu aAfaGfaugugsasu | 1975 | антисмысловая | 23 |
U CACAU CUUUAGU GU C UGAAU | 880 | uscsacauCfuUfUfAfg ugucugaauL96 | 1976 | смысловая | 21 |
AUU CAGACACUAAAGA UGUGAUU | 881 | asUfsucaGfaCfAfcua aAfgAfugugasusu | 1977 | антисмысловая | 23 |
U GAUACUU CUUU GAAU GUAGA | 882 | usgsauacUfuCfUfUfu gaauguagaL96 | 1978 | смысловая | 21 |
U CUACAUU CAAAGAAG UAUCACC | 883 | usCfsuacAfuUfCfaaa gAfaGfuaucascsc | 1979 | антисмысловая | 23 |
GAUACUU CUUU GAAU G UAGAU | 884 | gsasuacuUfcUfUfUfg aauguagauL96 | 1980 | смысловая | 21 |
AU CUACAUU CAAAGAA GUAUCAC | 885 | asUfscuaCfaUfUfcaa aGfaAfguaucsasc | 1981 | антисмысловая | 23 |
UUGGUGAUACUUCUUU GAAUG | 886 | ususggugAfuAfCfUfu cuuugaaugL96 | 1982 | смысловая | 21 |
CAUU CAAAGAAGUAU C ACCAAUU | 887 | csAfsuucAfaAfGfaag uAfuCfaccaasusu | 1983 | антисмысловая | 23 |
AUUGGUGAUACUUCUU UGAAU | 888 | asusugguGfaUfAfCfu ucuuugaauL96 | 1984 | смысловая | 21 |
- 110 037115
AUU CAAAGAAGUAU CA CCAAUUA | 889 | asUfsucaAfaGfAfagu aUfcAfccaaususa | 1985 | антисмысловая | 23 |
AAUAAC CU GU GAAAAU GCUCC | 890 | asasuaacCfuGfUfGfa aaaugcuccL96 | 1986 | смысловая | 21 |
GGAGCAUUUUCACAGG UUAUUGC | 891 | gsGfsagcAfuUfUfuca cAfgGfuuauusgsc | 1987 | антисмысловая | 23 |
AUAAC CU GU GAAAAU G CUCCC | 892 | asusaaccUfgUfGfAfa aaugcucccL96 | 1988 | смысловая | 21 |
GGGAGCAUUUUCACAG GUUAUUG | 893 | gsGfsgagCfaUfUfuuc aCfaGfguuaususg | 1989 | антисмысловая | 23 |
UAGCAAUAACCUGUGA AAAUG | 894 | usasgcaaUfaAfCfCfu gugaaaaugL96 | 1990 | смысловая | 21 |
CAUUUUCACAGGUUAU UGCUAUC | 895 | csAf suuuUfcAfCfagg uUfaUfugcuasusc | 1991 | антисмысловая | 23 |
AUAGCAAUAACCUGUG AAAAU | 896 | asusagcaAfuAfAfCfc ugugaaaauL96 | 1992 | смысловая | 21 |
AUUUUCACAGGUUAUU GCUAUCC | 897 | asUfsuuuCfaCfAfggu uAfuUfgcuauscsc | 1993 | антисмысловая | 23 |
AAU CACAU CUUUAGU G UCUGA | 898 | asasucacAfuCfUfUfu agugucugaL96 | 1994 | смысловая | 21 |
U CAGACACUAAAGAU G UGAUUGG | 899 | usCfsagaCfaCfUfaaa gAfuGfugauusgsg | 1995 | антисмысловая | 23 |
AU CACAU CUUUAGU GU CUGAA | 900 | asuscacaUfcUfUfUfa gugucugaaL96 | 1996 | смысловая | 21 |
UU CAGACACUAAAGAU GUGAUUG | 901 | usUfscagAfcAfCfuaa aGfaUfgugaususg | 1997 | антисмысловая | 23 |
UUCCAAUCACAUCUUU AGUGU | 902 | ususccaaUfcAfCfAfu cuuuaguguL96 | 1998 | смысловая | 21 |
ACACUAAAGAU GU GAU UGGAAAU | 903 | asCfsacuAfaAfGfaug uGfaUfuggaasasu | 1999 | антисмысловая | 23 |
UUUCCAAUCACAUCUU UAGUG | 904 | ususuccaAfuCfAfCfa ucuuuagugL96 | 2000 | смысловая | 21 |
CACUAAAGAU GU GAUU GGAAAUC | 905 | csAfscuaAfaGfAfugu gAfuUfggaaasusc | 2001 | антисмысловая | 23 |
ACGGGCAUGAUGUUGA GUUCC | 906 | ascsgggcAfuGfAfUfg uugaguuccL96 | 2002 | смысловая | 21 |
GGAACUСAACAUCAUG CCCGUUC | 907 | gsGfsaacUfcAfAfcau cAfuGfcccgususc | 2003 | антисмысловая | 23 |
- 111 037115
CGGGCAUGAUGUUGAG UUCCU | 908 | csgsggcaUfgAfUfGfu ugaguuccuL96 | 2004 | смысловая | 21 |
AGGAACUСAACAUCAU GCCCGUU | 909 | asGfsgaaCfuCfAfаса uCfaUfgcccgsusu | 2005 | антисмысловая | 23 |
GGGAACGGGCAUGAUG UUGAG | 910 | gsgsgaacGfgGfCfAfu gauguugagL96 | 2006 | смысловая | 21 |
GUCAACAUGAUGGСCG UUCCCAG | 911 | csUfscaaCfaUfCfaug cCfcGfuucccsasg | 2007 | антисмысловая | 23 |
UGGGAACGGGCAUGAU GUUGA | 912 | usgsggaaCfgGfGfCfa ugauguugaL96 | 2008 | смысловая | 21 |
UCAACAUGAUGССCGU UCCCAGG | 913 | usCfsaacAfuCfAfugc cCfgUfucccasgsg | 2009 | антисмысловая | 23 |
ACUAAGGUGAAAAGAU AAUGA | 914 | ascsuaagGfuGfAfAfa agauaaugaL96 | 2010 | смысловая | 21 |
UCAUUAUCUUUUCACC UUAGUGU | 915 | usCfsauuAfuCfUfuuu cAfcCfuuagusgsu | 2011 | антисмысловая | 23 |
CUAAGGUGAAAAGAUA AU GAU | 916 | csusaaggUfgAfAfAfa gauaaugauL96 | 2012 | смысловая | 21 |
AU CAUUAU CUUUU GAG CUUAGUG | 917 | asUfscauUfaUfCfuuu uCfaCfcuuagsusg | 2013 | антисмысловая | 23 |
AAACACUAAGGUGAAA AGAUA | 918 | asasacacUfaAfGfGfu gaaaagauaL96 | 2014 | смысловая | 21 |
UAU CUUUU GAG CUUAG UGUUUGC | 919 | usAfsucuUfuUfCfacc uUfaGfuguuusgsc | 2015 | антисмысловая | 23 |
CAAACACUAAGGUGAA AAGAU | 920 | csasaacaCfuAfAfGfg ugaaaagauL96 | 2016 | смысловая | 21 |
AU CUUUU CAC CUUAGU GUUUGCU | 921 | asUfs cuuU fuCfAfccu uAfgUfguuugscsu | 2017 | антисмысловая | 23 |
AGGUAGCACUGGAGAG AAUUG | 922 | asgsguagCfaCfUfGfg agagaauugL96 | 2018 | смысловая | 21 |
CAAUUCUGUCCAGUGG UACCUUC | 923 | csAfsauuCfuCfUfcca gUfgCfuaccususc | 2019 | антисмысловая | 23 |
GGUAGCACUGGAGAGA AUUGG | 924 | gsgsuagcAfcUfGfGfa gagaauuggL96 | 2020 | смысловая | 21 |
CCAAUUCUCUCCAGUG CUACCUU | 925 | csCfsaauUfcUfCfucc aGfuGfcuaccsusu | 2021 | антисмысловая | 23 |
GAGAAGGUAGCACUGG AGAGA | 926 | gsasgaagGfuAfGfCfa cuggagagaL96 | 2022 | смысловая | 21 |
- 112 037115
U CU CU C CAGU GCUAC C UUCUCAA | 927 | usCfsucuCfcAfGfugc uAfcCfuucucsasa | 2023 | антисмысловая | 23 |
UGAGAAGGUAGCACUG GAGAG | 928 | usgsagaaGfgUfAfGfc acuggagagL96 | 2024 | смысловая | 21 |
CU CU C CAGU GCUAC CU UCUCAAA | 929 | esUfscucCfaGfUfgcu aCfcUfucucasasa | 2025 | антисмысловая | 23 |
AGUGGACUUGCUGCAU AUGUG | 930 | asgsuggaCfuUfGfCfu gcauaugugL96 | 2026 | смысловая | 21 |
CACAUAUGCAGCAAGU CCACUGU | 931 | csAfscauAfuGfCfage aAfgUfccacusgsu | 2027 | антисмысловая | 23 |
GUGGACUUGCUGCAUA UGUGG | 932 | gsusggacUfuGfCfUfg cauauguggL96 | 2028 | смысловая | 21 |
CCACAUAUGCAGCAAG UCCACUG | 933 | csCfsacaUfaUfGfcag cAfaGfuccacsusg | 2029 | антисмысловая | 23 |
CGACAGUGGACUUGCU GCAUA | 934 | csgsacagUfgGfAfCfu ugcugcauaL96 | 2030 | смысловая | 21 |
UAUGCAGCAAGUCCAC UGUCGUC | 935 | usAfsugcAfgCfAfagu cCfaCfugucgsusc | 2031 | антисмысловая | 23 |
ACGACAGUGGACUUGC UGCAU | 936 | ascsgacaGfuGfGfAfc uugcugcauL96 | 2032 | смысловая | 21 |
AUGCAGCAAGUCCACU GUCGUCU | 937 | asUfsgcaGfcAfAfguc cAfcUfgucguscsu | 2033 | антисмысловая | 23 |
AAGGUGUUCAAGAUGU CCUCG | 938 | asasggugUfuCfAfAfg auguccucgL96 | 2034 | смысловая | 21 |
CGAGGACAUCUUGAAC ACCUUUC | 939 | esGfsaggAfcAfUfcuu gAfaCfaccuususc | 2035 | антисмысловая | 23 |
AGGUGUUCAAGAUGUC CUC GA | 940 | asgsguguUfcAfAfGfa uguccucgaL96 | 2036 | смысловая | 21 |
UCGAGGACAUCUUGAA CACCUUU | 941 | usCfsgagGfaCfAfucu uGfaAfcaccususu | 2037 | антисмысловая | 23 |
GAGAAAGGUGUUCAAG AUGUC | 942 | gsasgaaaGfgUfGfUfu caagaugucL96 | 2038 | смысловая | 21 |
GACAU CUU GAACAC CU UUCUCCC | 943 | gsAfscauCfuUfGfaac aCfcUfuucucscsc | 2039 | антисмысловая | 23 |
GGAGAAAGGUGUUCAA GAUGU | 944 | gsgsagaaAfgGfUfGfu ucaagauguL96 | 2040 | смысловая | 21 |
ACAUCUUGAACACCUU UCUCCCC | 945 | asCfsaucUfuGfAfаса cCfuUfucuccscsc | 2041 | антисмысловая | 23 |
- 113 037115
ААСCGUCUGGAUGAUG UGCGU | 946 | asasccguCfuGfGfAfu gaugugcguL96 | 2042 | смысловая | 21 |
AC G CACAU CAU С CAGA CGGUUGC | 947 | asCfsgcaCfaUfCfauc cAfgAfcgguusgsc | 2043 | антисмысловая | 23 |
ACCGUCUG GAU GAU GU GCGUA | 948 | ascscgucUfgGfAfUfg augugcguaL96 | 2044 | смысловая | 21 |
UAC G CACAU CAU С CAG ACGGUUG | 949 | usAfscgcAfcAfUfcau cCfaGfacggususg | 2045 | антисмысловая | 23 |
GGGCAACCGUCUGGAU GAUGU | 950 | gsgsgcaaCfcGfUfCfu ggaugauguL96 | 2046 | смысловая | 21 |
ACAU CAU С CAGAC G GU UGCCCAG | 951 | asCfsaucAfuCfCfaga cGfgUfugcccsasg | 2047 | антисмысловая | 23 |
UGGGCAACCGUCUGGA UGAUG | 952 | usgsggcaAfcCfGfUfc uggaugaugL96 | 2048 | смысловая | 21 |
CAU CAU C CAGAC GGUU GCCCAGG | 953 | csAf sucaUfcCfAfgac gGfuUfgcccasgsg | 2049 | антисмысловая | 23 |
GAAACUUUGGCUGAUA AUAUU | 954 | gsasaacuUfuGfGfCfu gauaauauuL96 | 2050 | смысловая | 21 |
AAUAUUAU CAGC CAAA GUUUCUU | 955 | asAf suauUfaUfCfage cAfaAfguuucsusu | 2051 | антисмысловая | 23 |
AAACUUUGGCUGAUAA UAUUG | 956 | asasacuuUfgGfCfUfg auaauauugL96 | 2052 | смысловая | 21 |
CAAUAUUAUCAGCCAA AGUUUCU | 957 | csAf sauaUfuAfUfcag cCfaAfaguuuscsu | 2053 | антисмысловая | 23 |
UGAAGAAACUUUGGCU GAUAA | 958 | usgsaagaAfaCfUfUfu ggcugauaaL96 | 2054 | смысловая | 21 |
UUAUCAGCCAAAGUUU CUUCAUC | 959 | usUfsaucAfgCfCfaaa gUfuUfcuucasusc | 2055 | антисмысловая | 23 |
AUGAAGAAACUUUGGC UGAUA | 960 | asusgaagAfaAfCfUfu uggcugauaL96 | 2056 | смысловая | 21 |
UAUCAGCCAAAGUUUC UUCAUCA | 961 | usAf sucaGfcCfAfaag uUfuCfuucauscsa | 2057 | антисмысловая | 23 |
AAAGGUGUUCAAGAUG UCCUC | 962 | asasagguGfuUfCfAfa gauguccucL96 | 2058 | смысловая | 21 |
GAGGACAUCUUGAACA CCUUUCU | 963 | gsAfsggaCfaUfCfuug aAfcAfccuuuscsu | 2059 | антисмысловая | 23 |
AAGGUGUUCAAGAUGU CCUCG | 964 | asasggugUfuCfAfAfg auguccucgL96 | 2060 | смысловая | 21 |
- 114 037115
CGAGGACAUCUUGAAC ACCUUUC | 965 | csGfsaggAfcAfUfcuu gAfaCfaccuususc | 2061 | антисмысловая | 23 |
GGAGAAAGGUGUUCAA GAUGU | 966 | gsgsagaaAfgGfUfGfu ucaagauguL96 | 2062 | смысловая | 21 |
ACAUCUUGAACACCUU UCUCCCC | 967 | asCfsaucUfuGfAfаса cCfuUfucuccscsc | 2063 | антисмысловая | 23 |
GGGAGAAAGGUGUUCA AGAUG | 968 | gsgsgagaAfaGfGfUfg uucaagaugL96 | 2064 | смысловая | 21 |
CAUCUUGAACACCUUU CUCCCCC | 969 | csAfsucuUfgAfAfcac cUfuUfcucccscsc | 2065 | антисмысловая | 23 |
AAAU CAGUACUU С CAA AGUCU | 970 | asasaucaGfuAfCfUfu ccaaagucuL96 | 2066 | смысловая | 21 |
AGACUUUGGAAGUACU GAUUUAG | 971 | asGfsacuUfuGfGfaag uAfcUfgauuusasg | 2067 | антисмысловая | 23 |
AAU CAGUACUU С CAAA GUCUA | 972 | asasucagUfaCfUfUfc caaagucuaL96 | 2068 | смысловая | 21 |
UAGACUUUGGAAGUAC UGAUUUA | 973 | usAf sgacUfuUfGfgaa gUfaCfugauususa | 2069 | антисмысловая | 23 |
UGCUAAAUCAGUACUU CCAAA | 974 | usgscuaaAfuCfAfGfu acuuccaaaL96 | 2070 | смысловая | 21 |
UUUGGAAGUACUGAUU UAGCAUG | 975 | usUfsuggAfaGfUfacu gAfuUfuagcasusg | 2071 | антисмысловая | 23 |
AUGCUAAAUCAGUACU UCCAA | 976 | asusgcuaAfaUfCfAfg uacuuccaaL96 | 2072 | смысловая | 21 |
UUGGAAGUACUGAUUU AGCAUGU | 977 | usUfsggaAfgUfAfcug aUfuUfagcausgsu | 2073 | антисмысловая | 23 |
ACAU CUUUAGU GU CU G AAUAU | 978 | ascsaucuUfuAfGfUfg ucugaauauL96 | 2074 | смысловая | 21 |
AUAUU CAGACACUAAA GAUGUGA | 979 | asUfsauuCfaGfAfcac uAfaAfgaugusgsa | 2075 | антисмысловая | 23 |
CAUCUUUAGUGUCUGA AUAUA | 980 | csasucuuUfaGfUfGfu cugaauauaL96 | 2076 | смысловая | 21 |
UAUAUU CAGACACUAA AGAUGUG | 981 | usAfsuauUfcAfGfаса cUfaAfagaugsusg | 2077 | антисмысловая | 23 |
AAU CACAU CUUUAGU G UCUGA | 982 | asasucacAfuCfUfUfu agugucugaL96 | 2078 | смысловая | 21 |
U CAGACACUAAAGAU G UGAUUGG | 983 | usCfsagaCfaCfUfaaa gAfuGfugauusgsg | 2079 | антисмысловая | 23 |
- 115 037115
CAAU CACAU CUUUAGU GUCUG | 984 | csasaucaCfaUfCfUfu uagugucugL96 | 2080 | смысловая | 21 |
CAGACACUAAAGAU GU GAUUGGA | 985 | csAf sgacAfcUfAfaag aUfgUfgauugsgsa | 2081 | антисмысловая | 23 |
GCAU GUAUUACUU GAG AAAGA | 986 | gscsauguAfuUfAfCfu ugacaaagaL96 | 2082 | смысловая | 21 |
U CUUU GU CAAGUAAUA CAUGCUG | 987 | usCfsuuuGfuCfAfagu aAfuAfGaugesusg | 2083 | антисмысловая | 23 |
CAU GUAUUACUU GACA AAGAG | 988 | csasuguaUfuAfCfUfu gacaaagagL96 | 2084 | смысловая | 21 |
CUCUUUGUCAAGUAAU ACAUGCU | 989 | esUfscuuUfgUfCfaag uAfaUfacaugscsu | 2085 | антисмысловая | 23 |
UU CAGCAU GUAUUACU UGACA | 990 | ususcagcAfuGfUfAfu uacuugacaL96 | 2086 | смысловая | 21 |
U GU CAAGUAAUACAU G CUGAAAA | 991 | usGfsucaAfgUfAfaua cAfuGfcugaasasa | 2087 | антисмысловая | 23 |
UUU CAGCAU GUAUUAC UUGAC | 992 | ususucagCfaUfGfUfa uuacuugacL96 | 2088 | смысловая | 21 |
GUCAAGUAAUACAUGC UGAAAAA | 993 | gsUfscaaGfuAfAfuac aUfgCfugaaasasa | 2089 | антисмысловая | 23 |
AU GUUACUU CUUAGAG AGAAA | 994 | asusguuaCfuUfCfUfu agagagaaaL96 | 2090 | смысловая | 21 |
UUU CU CU CUAAGAAGU AACAUAC | 995 | usUfsucuCfuCfUfaag aAfgUfaacausasc | 2091 | антисмысловая | 23 |
U GUUACUU CUUAGAGA GAAAU | 996 | usgsuuacUfuCfUfUfa gagagaaauL96 | 2092 | смысловая | 21 |
AUUUCUCUCUAAGAAG UAACAUA | 997 | asUfsuucUfcUfCfuaa gAfaGfuaacasusa | 2093 | антисмысловая | 23 |
AUGUAUGUUACUUCUU AGAGA | 998 | asusguauGfuUfAfCfu ucuuagagaL96 | 2094 | смысловая | 21 |
U CU CUAAGAAGUAACA UACAUCC | 999 | usCfsucuAfaGfAfagu aAfcAfuacausesc | 2095 | антисмысловая | 23 |
GAU GUAU GUUACUU CU UAGAG | 1000 | gsasuguaUfgUfUfAfc uucuuagagL96 | 2096 | смысловая | 21 |
CU CUAAGAAGUAACAU ACAUCCU | 1001 | esUfscuaAfgAfAfgua aCfaUfacaucscsu | 2097 | антисмысловая | 23 |
ACAACUUUGAGAAGGU AGCAC | 1002 | ascsaacuUfuGfAfGfa agguagcacL96 | 2098 | смысловая | 21 |
- 116 037115
GUGCUACCUUCUCAAA GUUGUGA | 1003 | gsUfsgcuAfcCfUfucu cAfaAfguugusgsa | 2099 | антисмысловая | 23 |
CAACUUUGAGAAGGUA GCACU | 1004 | csasacuuUfgAfGfAfa gguagcacuL96 | 2100 | смысловая | 21 |
AGUGCUACCUUCUCAA AGUUGUG | 1005 | asGfsugcUfaCfCfuuc uCfaAfaguugsusg | 2101 | антисмысловая | 23 |
AUU CACAACUUU GAGA AGGUA | 1006 | asusucacAfaCfUfUfu gagaagguaL96 | 2102 | смысловая | 21 |
UAC CUU CU CAAAGUU G UGAAUCA | 1007 | usAf sccuUfcUfCfaaa gUfuGfugaauscsa | 2103 | антисмысловая | 23 |
GAUU CACAACUUU GAG AAGGU | 1008 | gsasuucaCfaAfCfUfu ugagaagguL96 | 2104 | смысловая | 21 |
AC CUU CU CAAAGUU GU GAAUCAG | 1009 | asCfscuuCfuCfAfaag uUfgUfgaaucsasg | 2105 | антисмысловая | 23 |
AACAUGCUAAAUCAGU ACUUC | 1010 | asascaugCfuAfAfAfu caguacuucL96 | 2106 | смысловая | 21 |
GAAGUACUGAUUUAGC AUGUUGU | 1011 | gsAfsaguAfcUfGfauu uAfgCfauguusgsu | 2107 | антисмысловая | 23 |
ACAUGCUAAAUCAGUA CUUCC | 1012 | ascsaugcUfaAfAfUfc aguacuuccL96 | 2108 | смысловая | 21 |
GGAAGUACUGAUUUAG CAUGUUG | 1013 | gsGfsaagUfaCfUfgau uUfaGfcaugususg | 2109 | антисмысловая | 23 |
GAACAACAUGCUAAAU CAGUA | 1014 | gsasacaaCfaUfGfCfu aaaucaguaL96 | 2110 | смысловая | 21 |
UACU GAUUUAGCAU GU UGUUCAU | 1015 | usAfscugAfuUfUfage aUfgUfuguucsasu | 2111 | антисмысловая | 23 |
UGAACAACAUGCUAAA UCAGU | 1016 | usgsaacaAfcAfUfGfc uaaaucaguL96 | 2112 | смысловая | 21 |
ACUGAUUUAGCAUGUU GUUCAUA | 1017 | asCfsugaUfuUfAfgea uGfuUfguucasusa | 2113 | антисмысловая | 23 |
AAAC CAGUACUUUAU C AUUUU | 1018 | asasaccaGfuAfCfUfu uaucauuuuL96 | 2114 | смысловая | 21 |
AAAAU GAUAAAGUACU GGUUUCA | 1019 | asAf saauGfaUfAfaag uAfcUfgguuuscsa | 2115 | антисмысловая | 23 |
AAC CAGUACUUUAU CA UUUUC | 1020 | asasccagUfaCfUfUfu aucauuuucL96 | 2116 | смысловая | 21 |
GAAAAU GAUAAAGUAC UGGUUUC | 1021 | gsAf saaaUfgAfUfaaa gUfaCfugguususc | 2117 | антисмысловая | 23 |
- 117 037115
UUU GAAAC CAGUACUU UAUCA | 1022 | ususugaaAfcCfAfGfu acuuuaucaL96 | 2118 | смысловая | 21 |
UGAUAAAGUACUGGUU UGAAAAU | 1023 | usGfsauaAfaGfUfacu gGfuUfucaaasasu | 2119 | антисмысловая | 23 |
UUUU GAAAC CAGUACU UUAUC | 1024 | ususuugaAfaCfCfAfg uacuuuaucL96 | 2120 | смысловая | 21 |
GAUAAAGUACUGGUUU CAAAAUU | 1025 | gsAfsuaaAfgUfAfcug gUfuUfcaaaasusu | 2121 | антисмысловая | 23 |
GAGAAGAUGGGCUACA AGGCC | 1026 | gsasgaagAfuGfGfGfc uacaaggccL96 | 2122 | смысловая | 21 |
GGCCUUGUAGCCCAUC UUCUCUG | 1027 | gsGfsccuUfgUfAfgcc cAfuCfuucucsusg | 2123 | антисмысловая | 23 |
AGAAGAUGGGCUACAA GGCCA | 1028 | asgsaagaUfgGfGfCfu acaaggccaL96 | 2124 | смысловая | 21 |
UGGCCUUGUAGCCCAU CUUCUCU | 1029 | usGfsgccUfuGfUfagc cCfaUfcuucuscsu | 2125 | антисмысловая | 23 |
GGCAGAGAAGAUGGGC UACAA | 1030 | gsgscagaGfaAfGfAfu gggcuacaaL96 | 2126 | смысловая | 21 |
UU GUAGC C CAU CUU CU CUGCCUG | 1031 | usUfsguaGfcCfCfauc uUfcUfcugccsusg | 2127 | антисмысловая | 23 |
AGGCAGAGAAGAUGGG CUACA | 1032 | asgsgcagAfgAfAfGfa ugggcuacaL96 | 2128 | смысловая | 21 |
UGUAGCCCAUCUUCUC UGCCUGC | 1033 | usGfsuagCfcCfAfucu uCfuCfugccusgsc | 2129 | антисмысловая | 23 |
AACGGGCAUGAUGUUG AGUUC | 1034 | asascgggCfaUfGfAfu guugaguucL96 | 2130 | смысловая | 21 |
GAACUCAACAUCAUGC CCGUUCC | 1035 | gsAf sacuCfaAfCfauc aUfgCfccguuscsc | 2131 | антисмысловая | 23 |
ACGGGCAUGAUGUUGA GUUCC | 1036 | ascsgggcAfuGfAfUfg uugaguuccL96 | 2132 | смысловая | 21 |
GGAACUCAACAUCAUG CCCGUUC | 1037 | gsGfsaacUfcAfAfcau cAfuGfcccgususc | 2133 | антисмысловая | 23 |
UGGGAACGGGCAUGAU GUU GA | 1038 | usgsggaaCfgGfGfCfa ugauguugaL96 | 2134 | смысловая | 21 |
UCAACAUCAUGССCGU UCCCAGG | 1039 | usCfsaacAfuCfAfugc cCfgUfucccasgsg | 2135 | антисмысловая | 23 |
CUGGGAACGGGCAUGA UGUUG | 1040 | csusgggaAfcGfGfGfc augauguugL96 | 2136 | смысловая | 21 |
- 118 037115
CAACAUCAUGСCCGUU CCCAGGG | 1041 | csAfsacaUfcAfUfgcc cGfuUfcccagsgsg | 2137 | антисмысловая | 23 |
AUGUGGCUAAAGCAAU AGACC | 1042 | asusguggCfuAfAfAfg caauagaccL96 | 2138 | смысловая | 21 |
GGUCUAUUGCUUUAGC CACAUAU | 1043 | gsGfsucuAfuUfGfcuu uAfgCfcacausasu | 2139 | антисмысловая | 23 |
UGUGGCUAAAGCAAUA GACCC | 1044 | usgsuggcUfaAfAfGfc aauagacccL96 | 2140 | смысловая | 21 |
GGGUCUAUUGCUUUAG CCACAUA | 1045 | gsGfsgucUfaUfUfgcu uUfaGfccacasusa | 2141 | антисмысловая | 23 |
GCAUAUGUGGCUAAAG CAAUA | 1046 | gscsauauGfuGfGfCfu aaagcaauaL96 | 2142 | смысловая | 21 |
UAUUGCUUUAGCCACA UAUGCAG | 1047 | usAfsuugCfuUfUfage cAfcAfuaugcsasg | 2143 | антисмысловая | 23 |
UGCAUAUGUGGCUAAA GCAAU | 1048 | usgscauaUfgUfGfGfc uaaagcaauL96 | 2144 | смысловая | 21 |
AUUGCUUUAGCCACAU AUGCAGC | 1049 | asUfsugcUfuUfAfgcc aCfaUfaugcasgsc | 2145 | антисмысловая | 23 |
AGGAUGCUCCGGAAUG UUGCU | 1050 | asgsgaugCfuCfCfGfg aauguugcuL96 | 2146 | смысловая | 21 |
AGCAACAUUCCGGAGC AUCCUUG | 1051 | asGfscaaCfaUfUfccg gAfgCfauccususg | 2147 | антисмысловая | 23 |
GGAUGCUCCGGAAUGU UGCUG | 1052 | gsgsaugcUfcCfGfGfa auguugcugL96 | 2148 | смысловая | 21 |
CAGCAACAUUCCGGAG CAUCCUU | 1053 | csAfsgcaAfcAfUfucc gGfaGfcauccsusu | 2149 | антисмысловая | 23 |
UCCAAGGAUGCUCCGG AAUGU | 1054 | uscscaagGfaUfGfCfu ccggaauguL96 | 2150 | смысловая | 21 |
ACAUUCCGGAGCAUCC UUGGAUA | 1055 | asCfsauuCfcGfGfage aUfcCfuuggasusa | 2151 | антисмысловая | 23 |
AUCCAAGGAUGCUCCG GAAUG | 1056 | asusccaaGfgAfUfGfc uccggaaugL96 | 2152 | смысловая | 21 |
CAUUCCGGAGCAUCCU UGGAUAC | 1057 | csAfsuucCfgGf Afgea uCfcUfuggausasc | 2153 | антисмысловая | 23 |
U CACAU CUUUAGU GU C UGAAU | 1058 | uscsacauCfuUfUfAfg ugucugaauL96 | 2154 | смысловая | 21 |
AUU CAGACACUAAAGA UGUGAUU | 1059 | asUfsucaGfaCfAfcua aAfgAfugugasusu | 2155 | антисмысловая | 23 |
- 119 037115
CACAU CUUUAGU GU CU GAAUA | 1060 | csascaucUfuUfAfGfu gucugaauaL96 | 2156 | смысловая | 21 |
UAUU CAGACACUAAAG AUGUGAU | 1061 | usAfsuucAfgAfCfacu aAfaGfaugugsasu | 2157 | антисмысловая | 23 |
C CAAU CACAU CUUUAG UGUCU | 1062 | cscsaaucAfcAfUfCfu uuagugucuL96 | 2158 | смысловая | 21 |
AGACACUAAAGAU GU G AUUGGAA | 1063 | asGfsacaCfuAfAfaga uGfuGfauuggsasa | 2159 | антисмысловая | 23 |
U C CAAU CACAU CUUUA GUGUC | 1064 | uscscaauCfaCfAfUfc uuuagugucL96 | 2160 | смысловая | 21 |
GACACUAAAGAU GU GA UUGGAAA | 1065 | gsAfscacUfaAfAfgau gUfgAfuuggasasa | 2161 | антисмысловая | 23 |
AAAUGUGUUUAGACAA CGUCA | 1066 | asasauguGfuUfUfAfg acaacgucaL96 | 2162 | смысловая | 21 |
U GAC GUU GU CUAAACA CAUUUUC | 1067 | usGfsacgUfuGfUfcua aAfcAfcauuususc | 2163 | антисмысловая | 23 |
AAU GU GUUUAGACAAC GUCAU | 1068 | asasugugUfuUfAfGfa caacgucauL96 | 2164 | смысловая | 21 |
AU GAC GUU GU CUAAAC ACAUUUU | 1069 | asUfsgacGfuUfGfucu aAfaCfacauususu | 2165 | антисмысловая | 23 |
UU GAAAAU GU GUUUAG ACAAC | 1070 | ususgaaaAfuGfUfGfu uuagacaacL96 | 2166 | смысловая | 21 |
GUU GU CUAAACACAUU UUCAAUG | 1071 | gsUfsuguCfuAfAfаса cAfuUfuucaasusg | 2167 | антисмысловая | 23 |
AUU GAAAAU GU GUUUA GACAA | 1072 | asusugaaAfaUfGfUfg uuuagacaaL96 | 2168 | смысловая | 21 |
UU GU CUAAACACAUUU UCAAUGU | 1073 | usUfsgucUfaAfAfcac aUfuUfucaausgsu | 2169 | антисмысловая | 23 |
UACUAAAGGAAGAAUU CCGGU | 1074 | usascuaaAfgGfAfAfg aauuccgguL96 | 2170 | смысловая | 21 |
ACCGGAAUUCUUCCUU UAGUAUC | 1075 | asCfscggAfaUfUfcuu cCfuUfuaguasusc | 2171 | антисмысловая | 23 |
ACUAAAGGAAGAAUUC CGGUU | 1076 | ascsuaaaGfgAfAfGfa auuccgguuL96 | 2172 | смысловая | 21 |
AACCGGAAUUCUUCCU UUAGUAU | 1077 | asAfsccgGfaAfUfucu uCfcUfuuagusasu | 2173 | антисмысловая | 23 |
GAGAUACUAAAGGAAG AAUUC | 1078 | gsasgauaCfuAfAfAfg gaagaauucL96 | 2174 | смысловая | 21 |
- 120 037115
GAAUUCUUCCUUUAGU AU CUCGA | 1079 | gsAfsauuCfuUfCfcuu uAfgUfaucucsgsa | 2175 | антисмысловая | 23 |
CGAGAUACUAAAGGAA GAAUU | 1080 | esgsagauAfcUfAfAfa ggaagaauuL96 | 2176 | смысловая | 21 |
AAUUCUUCCUUUAGUA UCUCGAG | 1081 | asAfsuucUfuCfCfuuu aGfuAfucucgsasg | 2177 | антисмысловая | 23 |
AACUUUGGCUGAUAAU AUUGC | 1082 | asascuuuGfgCfUfGfa uaauauugcL96 | 2178 | смысловая | 21 |
GCAAUAUUAUCAGCCA AAGUUUC | 1083 | gsCfsaauAfuUfAfuca gCfcAfaaguususc | 2179 | антисмысловая | 23 |
ACUUUGGCUGAUAAUA UUGCA | 1084 | ascsuuugGfcUfGfAfu aauauugcaL96 | 2180 | смысловая | 21 |
UGCAAUAUUAUCAGCC AAAGUUU | 1085 | usGfscaaUfaUfUfauc aGfcCfaaagususu | 2181 | антисмысловая | 23 |
AAGAAACUUUGGCUGA UAAUA | 1086 | asasgaaaCfuUfUfGfg cugauaauaL96 | 2182 | смысловая | 21 |
UAUUAUCAGСCAAAGU UUCUUCA | 1087 | usAfsuuaUfcAfGfcca aAfgUfuucuuscsa | 2183 | антисмысловая | 23 |
GAAGAAACUUUGGCUG AUAAU | 1088 | gsasagaaAfcUfUfUfg gcugauaauL96 | 2184 | смысловая | 21 |
AUUAUCAGCCAAAGUU U CUU CAU | 1089 | asUfsuauCfaGfCfcaa aGfuUfucuucsasu | 2185 | антисмысловая | 23 |
AAAUGGCUGAGAAGAC UGACA | 1090 | asasauggCfuGfAfGfa agacugacaL96 | 2186 | смысловая | 21 |
U GU CAGU CUU CU CAGC CAUUUGA | 1091 | usGfsucaGfuCfUfucu cAfgCfcauuusgsa | 2187 | антисмысловая | 23 |
AAUGGCUGAGAAGACU GACAU | 1092 | asasuggcUfgAfGfAfa gacugacauL96 | 2188 | смысловая | 21 |
AU GU CAGU CUU CU CAG CCAUUUG | 1093 | asUfsgucAfgUfCfuuc uCfaGfccauususg | 2189 | антисмысловая | 23 |
UAUCAAAUGGCUGAGA AGACU | 1094 | usasucaaAfuGfGfCfu gagaagacuL96 | 2190 | смысловая | 21 |
AGU CUU CU CAGC CAUU UGAUAUC | 1095 | asGfsucuUfcUfCfagc cAfuUfugauasusc | 2191 | антисмысловая | 23 |
AUAUCAAAUGGCUGAG AAGAC | 1096 | asusaucaAfaUfGfGfc ugagaagacL96 | 2192 | смысловая | 21 |
GU CUU CU CAGC CAUUU GAUAUCU | 1097 | gsUfscuuCfuCfAfgcc aUfuUfgauauscsu | 2193 | антисмысловая | 23 |
- 121 037115
GUGGUUCUUAAAUUGU AAGCU | 1098 | gsusgguuCfuUfAfAfa uuguaagcuL96 | 2194 | смысловая | 21 |
AGCUUACAAUUUAAGA ACCACUG | 1099 | asGfscuuAfcAfAfuuu aAfgAfaccacsusg | 2195 | антисмысловая | 23 |
UGGUUCUUAAAUUGUA AGCUC | 1100 | usgsguucUfuAfAfAfu uguaagcucL96 | 2196 | смысловая | 21 |
GAGCUUACAAUUUAAG AACCACU | 1101 | gsAf sgcuUfaCfAfauu uAfaGfaaccascsu | 2197 | антисмысловая | 23 |
AACAGUGGUUCUUAAA UUGUA | 1102 | asascaguGfgUfUfCfu uaaauuguaL96 | 2198 | смысловая | 21 |
UACAAUUUAAGAAC CA CUGUUUU | 1103 | usAf scaaUfuUfAfaga aCfcAfcuguususu | 2199 | антисмысловая | 23 |
AAACAGUGGUUCUUAA AUUGU | 1104 | asasacagUfgGfUfUfc uuaaauuguL96 | 2200 | смысловая | 21 |
ACAAUUUAAGAAC CAC UGUUUUA | 1105 | asCfsaauUfuAfAfgaa cCfaCfuguuususa | 2201 | антисмысловая | 23 |
AAGU CAU C GACAAGAC AUUGG | 1106 | asasgucaUfcGfAfCfa agacauuggL96 | 2202 | смысловая | 21 |
C CAAU GU CUU GU C GAU GACUUUC | 1107 | csCfsaauGfuCfUfugu cGfaUfgacuususc | 2203 | антисмысловая | 23 |
AGU CAU C GACAAGACA UUGGU | 1108 | asgsucauCfgAfCfAfa gacauugguL96 | 2204 | смысловая | 21 |
AC CAAU GU CUU GU C GA UGACUUU | 1109 | asCfscaaUfgUfCfuug uCfgAfugacususu | 2205 | антисмысловая | 23 |
GU GAAAGU CAU C GACA AGACA | 1110 | gsusgaaaGfuCfAfUfc gacaagacaL96 | 2206 | смысловая | 21 |
U GU CUU GU C GAU GACU UUCACAU | 1111 | usGfsucuUfgUfCfgau gAfcUfuucacsasu | 2207 | антисмысловая | 23 |
U GU GAAAGU CAU C GAC AAGAC | 1112 | usgsugaaAfgUfCfAfu cgacaagacL96 | 2208 | смысловая | 21 |
GUCUUGUCGAUGACUU UCACAUU | 1113 | gsUfscuuGfuCfGfaug aCfuUfucacasusu | 2209 | антисмысловая | 23 |
GAUAAUAUUGCAGCAU UUUCC | 1114 | gsasuaauAfuUfGfCfa gcauuuuccL96 | 2210 | смысловая | 21 |
GGAAAAUGCUGCAAUA UUAUCAG | 1115 | gsGfsaaaAfuGfCfugc aAfuAfuuaucsasg | 2211 | антисмысловая | 23 |
AUAAUAUUGCAGCAUU UUCCA | 1116 | asusaauaUfuGfCfAfg cauuuuccaL96 | 2212 | смысловая | 21 |
- 122 037115
UGGAAAAUGCUGCAAU AUUAUCA | 1117 | usGfsgaaAfaUfGfcug cAfaUfauuauscsa | 2213 | антисмысловая | 23 |
GGCUGAUAAUAUUGCA GCAUU | 1118 | gs gs cugaUfaAfU fAfu ugcagcauuL96 | 2214 | смысловая | 21 |
AAUGCUGCAAUAUUAU CAGCCAA | 1119 | asAfsugcUfgCfAfaua uUfaUfcagccsasa | 2215 | антисмысловая | 23 |
UGGCUGAUAAUAUUGC AGCAU | 1120 | usgsgcugAfuAfAfUfa uugcagcauL96 | 2216 | смысловая | 21 |
AUGCUGCAAUAUUAUC AGCCAAA | 1121 | asUfsgcuGfcAfAfuau uAfuCfagccasasa | 2217 | антисмысловая | 23 |
GCUAAUUUGUAUCAAU GAUUA | 1122 | gscsuaauUfuGfUfAfu caaugauuaL96 | 2218 | смысловая | 21 |
UAAU CAUU GAUACAAA UUAGCCG | 1123 | usAfsaucAfuUfGfaua cAfaAfuuagcscsg | 2219 | антисмысловая | 23 |
CUAAUUU GUAU CAAU G AUUAU | 1124 | csusaauuUfgUfAfUfc aaugauuauL96 | 2220 | смысловая | 21 |
AUAAU CAUU GAUACAA AUUAGCC | 1125 | asUfsaauCfaUfUfgau aCfaAfauuagscsc | 2221 | антисмысловая | 23 |
CCCGGCUAAUUUGUAU CAAUG | 1126 | cs cs cggcUfaAfU fU fu guaucaaugL96 | 2222 | смысловая | 21 |
CAUU GAUACAAAUUAG CCGGGGG | 1127 | csAfsuugAfuAfCfaaa uUfaGfccgggsgsg | 2223 | антисмысловая | 23 |
CCCCGGCUAAUUUGUA UCAAU | 1128 | cscsccggCfuAfAfUfu uguaucaauL96 | 2224 | смысловая | 21 |
AUUGAUACAAAUUAGC CGGGGGA | 1129 | asUfsugaUfaCfAfaau uAfgCfcggggsgsa | 2225 | антисмысловая | 23 |
UAAUUGGUGAUACUUC UUUGA | 1130 | usasauugGfuGfAfUfa cuucuuugaL96 | 2226 | смысловая | 21 |
U CAAAGAAGUAU СAC C AAUUACC | 1131 | usCfsaaaGfaAfGfuau cAfcCfaauuascsc | 2227 | антисмысловая | 23 |
AAUUGGUGAUACUUCU UUGAA | 1132 | asasuuggUfgAfUfAfc uucuuugaaL96 | 2228 | смысловая | 21 |
UU CAAAGAAGUAU CAC CAAUUAC | 1133 | usUfscaaAfgAfAfgua uCfaCfcaauusasc | 2229 | антисмысловая | 23 |
GCGGUAAUUGGUGAUA CUUCU | 1134 | gscsgguaAfuUfGfGfu gauacuucuL96 | 2230 | смысловая | 21 |
AGAAGUAU CAC CAAUU ACCGCCA | 1135 | asGfsaagUfaUfCfacc aAfuUfaccgcscsa | 2231 | антисмысловая | 23 |
- 123 037115
GGCGGUAAUUGGUGAU ACUUC | 1136 | gsgscgguAfaUfUfGfg ugauacuucL96 | 2232 | смысловая | 21 |
GAAGUAU CAC CAAUUA CCGCCAC | 1137 | gsAfsaguAfuCfAfcca aUfuAfccgccsasc | 2233 | антисмысловая | 23 |
CAGUGGUUCUUAAAUU GUAAG | 1138 | csasguggUfuCfUfUfa aauuguaagL96 | 2234 | смысловая | 21 |
CUUACAAUUUAAGAAC CACUGUU | 1139 | csUfsuacAfaUfUfuaa gAfaCfcacugsusu | 2235 | антисмысловая | 23 |
AGUGGUUCUUAAAUUG UAAGC | 1140 | asgsugguUfcUfUfAfa auuguaagcL96 | 2236 | смысловая | 21 |
GCUUACAAUUUAAGAA CCACUGU | 1141 | gsCfsuuaCfaAfUfuua aGfaAfccacusgsu | 2237 | антисмысловая | 23 |
AAAACAGUGGUUCUUA AAUUG | 1142 | asasaacaGfuGfGfUfu cuuaaauugL96 | 2238 | смысловая | 21 |
CAAUUUAAGAAC CACU GUUUUAA | 1143 | csAfsauuUfaAfGfaac cAfcUfguuuusasa | 2239 | антисмысловая | 23 |
UAAAACAGUGGUUCUU AAAUU | 1144 | usasaaacAfgUfGfGfu ucuuaaauuL96 | 2240 | смысловая | 21 |
AAUUUAAGAACCACUG UUUUAAA | 1145 | asAfsuuuAfaGfAfacc aCfuGfuuuuasasa | 2241 | антисмысловая | 23 |
AC CU GUAUU CU GUUUA CAUGU | 1146 | ascscuguAfuUfCfUfg uuuacauguL96 | 2242 | смысловая | 21 |
ACAU GUAAACAGAAUA CAGGUUA | 1147 | asCfsaugUfaAfAfcag aAfuAfcaggususa | 2243 | антисмысловая | 23 |
C CU GUAUU CU GUUUAC AUGUC | 1148 | cscsuguaUfuCfUfGfu uuacaugucL96 | 2244 | смысловая | 21 |
GACAU GUAAACAGAAU ACAGGUU | 1149 | gsAf scauGfuAfAfаса gAfaUfacaggsusu | 2245 | антисмысловая | 23 |
AUUAACCUGUAUUCUG UUUAC | 1150 | asusuaacCfuGfUfAfu ucuguuuacL96 | 2246 | смысловая | 21 |
GUAAACAGAAUACAGG UUAAUAA | 1151 | gsUfsaaaCfaGfAfaua cAfgGfuuaausasa | 2247 | антисмысловая | 23 |
UAUUAACCUGUAUUCU GUUUA | 1152 | usasuuaaCfcUfGfUfa uucuguuuaL96 | 2248 | смысловая | 21 |
UAAACAGAAUACAGGU UAAUAAA | 1153 | usAf saacAfgAfAfuac aGfgUfuaauasasa | 2249 | антисмысловая | 23 |
AAGAAACUUUGGCUGA UAAUA | 1154 | asasgaaaCfuUfUfGfg cugauaauaL96 | 2250 | смысловая | 21 |
- 124 037115
UAUUAUCAGCCAAAGU UUCUUCA | 1155 | usAfsuuaUfcAfGfcca aAfgUfuucuuscsa | 2251 | антисмысловая | 23 |
AGAAACUUUGGCUGAU AAUAU | 1156 | asgsaaacUfuUfGfGfc ugauaauauL96 | 2252 | смысловая | 21 |
AUAUUAUCAGСCAAAG UUUCUUC | 1157 | asUfsauuAfuCfAfgcc aAfaGfuuucususc | 2253 | антисмысловая | 23 |
GAUGAAGAAACUUUGG CUGAU | 1158 | gsasugaaGfaAfAfCfu uuggcugauL96 | 2254 | смысловая | 21 |
AUCAGCCAAAGUUUCU U CAU CAU | 1159 | asUfscagCfcAfAfagu uUfcUfucaucsasu | 2255 | антисмысловая | 23 |
U GAU GAAGAAACUUU G GCUGA | 1160 | usgsaugaAfgAfAfAfc uuuggcugaL96 | 2256 | смысловая | 21 |
UCAGCCAAAGUUUCUU CAU CAUU | 1161 | usCfsagcCfaAfAfguu uCfuUfCaucasusu | 2257 | антисмысловая | 23 |
GAAAGGUGUUCAAGAU GUCCU | 1162 | gsasaaggUfgUfUfCfa agauguccuL96 | 2258 | смысловая | 21 |
AGGACAUCUUGAACAC CUUUCUC | 1163 | asGfsgacAfuCfUfuga aCfaCfcuuucsusc | 2259 | антисмысловая | 23 |
AAAGGUGUUCAAGAUG UCCUC | 1164 | asasagguGfuUfCfAfa gauguccucL96 | 2260 | смысловая | 21 |
GAGGACAUCUUGAACA CCUUUCU | 1165 | gsAfsggaCfaUfCfuug aAfcAfccuuuscsu | 2261 | антисмысловая | 23 |
GGGAGAAAGGUGUUCA AGAUG | 1166 | gsgsgagaAfaGfGfUfg uucaagaugL96 | 2262 | смысловая | 21 |
CAUCUUGAACACCUUU CUCCCCC | 1167 | csAfsucuUfgAfAfcac cUfuUfcucccscsc | 2263 | антисмысловая | 23 |
GGGGAGAAAGGUGUUC AAGAU | 1168 | gsgsggagAfaAfGfGfu guucaagauL96 | 2264 | смысловая | 21 |
AUCUUGAACACCUUUC UCCCCCU | 1169 | asUfscuuGfaAfCfacc uUfuCfuccccscsu | 2265 | антисмысловая | 23 |
AUCUUGGUGUCGAAUC AUGGG | 1170 | asuscuugGfuGfUfCfg aaucaugggL96 | 2266 | смысловая | 21 |
С C CAU GAUU C GACAC C AAGAUCC | 1171 | csCfscauGfaUfUfcga cAfcCfaagauscsc | 2267 | антисмысловая | 23 |
UCUUGGUGUCGAAUCA UGGGG | 1172 | uscsuuggUfgUfCfGfa aucauggggL96 | 2268 | смысловая | 21 |
С С C CAU GAUU C GACAC CAAGAUC | 1173 | csCfsccaUfgAfUfucg aCfaCfcaagasusc | 2269 | антисмысловая | 23 |
- 125 037115
UGGGAUCUUGGUGUCG AAU GA | 1174 | usgsggauCfuUfGfGfu gucgaaucaL96 | 2270 | смысловая | 21 |
U GAUU C GACAC CAAGA UCCCAUU | 1175 | usGfsauuCfgAfCfacc aAfgAfucccasusu | 2271 | антисмысловая | 23 |
AUGGGAUCUUGGUGUC GAAUC | 1176 | asusgggaUfcUfUfGfg ugucgaaucL96 | 2272 | смысловая | 21 |
GAUU C GACAC CAAGAU CCCAUUC | 1177 | gsAfsuucGfaCfAfcca aGfaUfcccaususc | 2273 | антисмысловая | 23 |
GCUACAAGGCCAUAUU UGUGA | 1178 | gscsuacaAfgGfCfCfa uauuugugaL96 | 2274 | смысловая | 21 |
UCACAAAUAUGGCCUU GUAGCCC | 1179 | usCfsacaAfaUfAfugg cCfuUfguagcscsc | 2275 | антисмысловая | 23 |
CUACAAGGCCAUAUUU GUGAC | 1180 | csusacaaGfgCfCfAfu auuugugacL96 | 2276 | смысловая | 21 |
GUCACAAAUAUGGCCU UGUAGCC | 1181 | gsUfscacAfaAfUfaug gCfcUfuguagscsc | 2277 | антисмысловая | 23 |
AUGGGCUACAAGGCCA UAUUU | 1182 | asusgggcUfaCfAfAfg gccauauuuL96 | 2278 | смысловая | 21 |
AAAUAUGGCCUUGUAG CCCAUCU | 1183 | asAfsauaUfgGfCfcuu gUfaGfcccauscsu | 2279 | антисмысловая | 23 |
GAUGGGCUACAAGGCC AUAUU | 1184 | gsasugggCfuAfCfAfa ggccauauuL96 | 2280 | смысловая | 21 |
AAUAUGGCCUUGUAGC CCAUCUU | 1185 | asAfsuauGfgCfCfuug uAfgCfccaucsusu | 2281 | антисмысловая | 23 |
ACUGGAGAGAAUUGGA AUGGG | 1186 | ascsuggaGfaGfAfAfu uggaaugggL96 | 2282 | смысловая | 21 |
СCCAUUCCAAUUCUCU CCAGUGC | 1187 | csCfscauUfcCfAfauu cUfcUfccagusgsc | 2283 | антисмысловая | 23 |
CUGGAGAGAAUUGGAA UGGGU | 1188 | csusggagAfgAfAfUfu ggaauggguL96 | 2284 | смысловая | 21 |
AC C CAUU C CAAUU CU C UCCAGUG | 1189 | asCfsccaUfuCfCfaau uCfuCfuccagsusg | 2285 | антисмысловая | 23 |
UAGCACUGGAGAGAAU UGGAA | 1190 | usasgcacUfgGfAfGfa gaauuggaaL96 | 2286 | смысловая | 21 |
UUCCAAUUCUCUCCAG UGCUACC | 1191 | usUfsccaAfuUfCfucu cCfaGfugcuascsc | 2287 | антисмысловая | 23 |
GUAGCACUGGAGAGAA UUGGA | 1192 | gsusagcaCfuGfGfAfg agaauuggaL96 | 2288 | смысловая | 21 |
- 126 037115
UCCAAUUCUCUCCAGU GCUACCU | 1193 | usCfscaaUfuCfUfcue cAfgUfgcuacscsu | 2289 | антисмысловая | 23 |
ACAGU GGACACAC CUU ACCUG | 1194 | ascsagugGfaCfAfCfa ccuuaccugL96 | 2290 | смысловая | 21 |
CAGGUAAGGUGUGUCC ACUGUCA | 1195 | csAfsgguAfaGfGfugu gUfcCfacuguscsa | 2291 | антисмысловая | 23 |
CAGU GGACACAC CUUA CCUGG | 1196 | csasguggAfcAfCfAfc cuuaccuggL96 | 2292 | смысловая | 21 |
CCAGGUAAGGUGUGUC CACUGUC | 1197 | csCfsaggUfaAfGfgug uGfuCfcacugsusc | 2293 | антисмысловая | 23 |
U GU GACAGU G GACACA CCUUA | 1198 | usgsugacAfgUfGfGfa cacaccuuaL96 | 2294 | смысловая | 21 |
UAAGGUGUGUСCACUG UCACAAA | 1199 | usAfsaggUfgUfGfucc aCfuGfucacasasa | 2295 | антисмысловая | 23 |
UU GU GACAGU G GACAC ACCUU | 1200 | ususgugaCfaGfUfGfg acacaccuuL96 | 2296 | смысловая | 21 |
AAGGUGUGUСCACUGU CACAAAU | 1201 | asAfsgguGfuGfUfcca cUfgUfcacaasasu | 2297 | антисмысловая | 23 |
GAAGACU GACAU CAUU GCCAA | 1202 | gsasagacUfgAfCfAfu cauugccaaL96 | 2298 | смысловая | 21 |
UUGGCAAUGAUGUCAG UCUUCUC | 1203 | usUfsggcAfaUfGfaug uCfaGfucuucsusc | 2299 | антисмысловая | 23 |
AAGACU GACAU CAUU G CCAAU | 1204 | asasgacuGfaCfAfUfc auugccaauL96 | 2300 | смысловая | 21 |
AUUGGCAAUGAUGUCA GUCUUCU | 1205 | asUfsuggCfaAfUfgau gUfcAfgucuuscsu | 2301 | антисмысловая | 23 |
CU GAGAAGACU GACAU CAUUG | 1206 | esusgagaAfgAfCfUfg acaucauugL96 | 2302 | смысловая | 21 |
CAAU GAU GU CAGU CUU CUCAGCC | 1207 | csAfsaugAfuGfUfcag uCfuUfcucagscsc | 2303 | антисмысловая | 23 |
GCUGAGAAGACUGACA UCAUU | 1208 | gscsugagAfaGfAfCfu gacaucauuL96 | 2304 | смысловая | 21 |
AAU GAU GU CAGU CUU C UCAGCCA | 1209 | asAfsugaUfgUfCfagu cUfuCfucagcscsa | 2305 | антисмысловая | 23 |
GCUCAGGUUCAAAGUG UUGGU | 1210 | gscsucagGfuUfCfAfa aguguugguL96 | 2306 | смысловая | 21 |
AC CAACACUUU GAAC C UGAGCUU | 1211 | asCfscaaCfaCfUfuug aAfcCfugagesusu | 2307 | антисмысловая | 23 |
- 127 037115
CUCAGGUUCAAAGUGU UGGUA | 1212 | csuscaggUfuCfAfAfa guguugguaL96 | 2308 | смысловая | 21 |
UAC CAACACUUU GAAC CUGAGCU | 1213 | usAfsccaAfcAfCfuuu gAfaCfcugagscsu | 2309 | антисмысловая | 23 |
GUAAGCUCAGGUUCAA AGUGU | 1214 | gsusaagcUfcAfGfGfu ucaaaguguL96 | 2310 | смысловая | 21 |
ACACUUUGAACCUGAG CUUACAA | 1215 | asCfsacuUfuGfAfacc uGfaGfcuuacsasa | 2311 | антисмысловая | 23 |
UGUAAGCUCAGGUUCA AAGUG | 1216 | usgsuaagCfuCfAfGfg uucaaagugL96 | 2312 | смысловая | 21 |
CACUUUGAACCUGAGC UUACAAU | 1217 | csAf scuuUfgAfAfccu gAfgCfuuacasasu | 2313 | антисмысловая | 23 |
AU GUAUUACUU GACAA AGAGA | 1218 | asusguauUfaCfUfUfg acaaagagaL96 | 2314 | смысловая | 21 |
UCUCUUUGU CAAGUAA UACAUGC | 1219 | usCfsucuUfuGfUfcaa gUfaAfuacausgsc | 2315 | антисмысловая | 23 |
U GUAUUACUU GACAAA GAGAC | 1220 | usgsuauuAfcUfUfGfa caaagagacL96 | 2316 | смысловая | 21 |
GU CU CUUU GU CAAGUA AUACAUG | 1221 | gsUfscucUfuUfGfuca aGfuAfauacasusg | 2317 | антисмысловая | 23 |
CAGCAU GUAUUACUU G ACAAA | 1222 | csasgcauGfuAfUfUfa cuugacaaaL96 | 2318 | смысловая | 21 |
UUU GU CAAGUAAUACA UGCUGAA | 1223 | usUfsuguCfaAfGfuaa uAfcAfugcugsasa | 2319 | антисмысловая | 23 |
U CAGCAU GUAUUACUU GACAA | 1224 | uscsagcaUfgUfAfUfu acuugacaaL96 | 2320 | смысловая | 21 |
UU GU CAAGUAAUACAU GCUGAAA | 1225 | usUfsgucAfaGfUfaau aCfaUfgcugasasa | 2321 | антисмысловая | 23 |
CUGCAACUGUAUAUCU ACAAG | 1226 | csusgcaaCfuGfUfAfu aucuacaagL96 | 2322 | смысловая | 21 |
CUU GUAGAUAUACAGU UGCAGCC | 1227 | csUfsuguAfgAfUfaua cAfgUfugcagscsc | 2323 | антисмысловая | 23 |
UGCAACUGUAUAUCUA CAAGG | 1228 | usgscaacUfgUfAfUfa ucuacaaggL96 | 2324 | смысловая | 21 |
C CUU GUAGAUAUACAG UUGCAGC | 1229 | csCfsuugUfaGfAfuau aCfaGfuugcasgsc | 2325 | антисмысловая | 23 |
UUGGCUGCAACUGUAU AU CUA | 1230 | ususggcuGfcAfAfCfu guauaucuaL96 | 2326 | смысловая | 21 |
- 128 037115
UAGAUAUACAGUUGCA GCCAACG | 1231 | usAfsgauAfuAfCfagu uGfcAfgccaascsg | 2327 | антисмысловая | 23 |
GUUGGCUGCAACUGUA UAUCU | 1232 | gsusuggcUfgCfAfAfc uguauaucuL96 | 2328 | смысловая | 21 |
AGAUAUACAGUUGCAG CCAACGA | 1233 | asGfsauaUfaCfAfguu gCfaGfccaacsgsa | 2329 | антисмысловая | 23 |
CAAAU GAU GAAGAAAC UUUGG | 1234 | csasaaugAfuGfAfAfg aaacuuuggL96 | 2330 | смысловая | 21 |
CCAAAGUUUCUUCAUC AUUUGCC | 1235 | csCfsaaaGfuUfUfcuu cAfuCfauuugscsc | 2331 | антисмысловая | 23 |
AAAU GAU GAAGAAACU UUGGC | 1236 | asasaugaUfgAfAfGfa aacuuuggcL9 6 | 2332 | смысловая | 21 |
GCCAAAGUUUCUUCAU CAUUUGC | 1237 | gsCfscaaAfgUfUfucu uCfaUfcauuusgsc | 2333 | антисмысловая | 23 |
GGGGCAAAUGAUGAAG AAACU | 1238 | gsgsggcaAfaUfGfAfu gaagaaacuL96 | 2334 | смысловая | 21 |
AGUUUCUUCAUCAUUU GCCCCAG | 1239 | asGfsuuuCfuUfCfauc aUfuUfgccccsasg | 2335 | антисмысловая | 23 |
UGGGGCAAAUGAUGAA GAAAC | 1240 | usgsgggcAfaAfUfGfa ugaagaaacL96 | 2336 | смысловая | 21 |
GUUUCUUCAUCAUUUG CCCCAGA | 1241 | gsUfsuucUfuCfAfuca uUfuGfccccasgsa | 2337 | антисмысловая | 23 |
CAAAGGGUGUCGUUCU UUUCC | 1242 | csasaaggGfuGfUfCfg uucuuuuccL96 | 2338 | смысловая | 21 |
GGAAAAGAACGACACC CUUUGUA | 1243 | gsGfsaaaAfgAfAfcga cAfcCfcuuugsusa | 2339 | антисмысловая | 23 |
AAAGGGUGUCGUUCUU UUCCA | 1244 | asasagggUfgUfCfGfu ucuuuuccaL96 | 2340 | смысловая | 21 |
UGGAAAAGAACGACAC CCUUUGU | 1245 | usGfsgaaAfaGfAfaeg aCfaCfccuuusgsu | 2341 | антисмысловая | 23 |
AAUACAAAGGGUGUCG UUCUU | 1246 | asasuacaAfaGfGfGfu gucguucuuL96 | 2342 | смысловая | 21 |
AAGAACGACACCCUUU GUAUUGA | 1247 | asAf sgaaCfgAfCfacc cUfuUfguauusgsa | 2343 | антисмысловая | 23 |
CAAUACAAAGGGUGUC GUUCU | 1248 | csasauacAfaAfGfGfg ugucguucuL96 | 2344 | смысловая | 21 |
AGAACGACACCCUUUG UAUUGAA | 1249 | asGfsaacGfaCfAfccc uUfuGfuauugsasa | 2345 | антисмысловая | 23 |
- 129 037115
AAAGGCACUGAUGUUC U GAAA | 1250 | asasaggcAfcUfGfAfu guucugaaaL96 | 2346 | смысловая | 21 |
UUU CAGAACAU CAGU G CCUUUCC | 1251 | usUfsucaGfaAfCfauc aGfuGfccuuuscsc | 2347 | антисмысловая | 23 |
AAGGCACUGAUGUUCU GAAAG | 1252 | asasggcaCfuGfAfUfg uucugaaagL96 | 2348 | смысловая | 21 |
CUUU CAGAACAU CAGU GCCUUUC | 1253 | csUfsuucAfgAfAfcau cAfgUfgccuususc | 2349 | антисмысловая | 23 |
GCGGAAAGGCACUGAU GUUCU | 1254 | gscsggaaAfgGfCfAfc ugauguucuL96 | 2350 | смысловая | 21 |
AGAACAUCAGUGCCUU UCCGCAC | 1255 | asGfsaacAfuCfAfgug cCfuUfuccgcsasc | 2351 | антисмысловая | 23 |
UGCGGAAAGGCACUGA UGUUC | 1256 | usgscggaAfaGfGfCfa cugauguucL96 | 2352 | смысловая | 21 |
GAACAUCAGUGCCUUU CCGCACA | 1257 | gsAf sacaUfcAfGfugc cUfuUfccgcascsa | 2353 | антисмысловая | 23 |
AAGGAUGCUCCGGAAU GUUGC | 1258 | asasggauGfcUfCfCfg gaauguugcL96 | 2354 | смысловая | 21 |
GCAACAUUCCGGAGCA UCCUUGG | 1259 | gsCfsaacAfuUfCfegg aGfcAfuccuusgsg | 2355 | антисмысловая | 23 |
AGGAUGCUCCGGAAUG UUGCU | 1260 | asgsgaugCfuCfCfGfg aauguugcuL96 | 2356 | смысловая | 21 |
AGCAACAUUCCGGAGC AUGCUUG | 1261 | asGfscaaCfaUfUfccg gAfgCfauccususg | 2357 | антисмысловая | 23 |
AUCCAAGGAUGCUCCG GAAUG | 1262 | asusccaaGfgAfUfGfc uccggaaugL96 | 2358 | смысловая | 21 |
CAUUCCGGAGCAUCCU UGGAUAC | 1263 | csAfsuucCfgGfAfgca uCfcUfuggausasc | 2359 | антисмысловая | 23 |
UAUCCAAGGAUGCUCC GGAAU | 1264 | usasuccaAfgGfAfUfg cuccggaauL96 | 2360 | смысловая | 21 |
AUUCCGGAGCAUCCUU GGAUACA | 1265 | asUfsuccGfgAfGfcau cCfuUfggauascsa | 2361 | антисмысловая | 23 |
AAUGGGUGGCGGUAAU UGGUG | 1266 | asasugggUfgGfCfGfg uaauuggugL96 | 2362 | смысловая | 21 |
CACCAAUUACCGCCAC CCAUUCC | 1267 | csAfsccaAfuUfAfccg cCfaCfccauuscsc | 2363 | антисмысловая | 23 |
AUGGGUGGCGGUAAUU GGUGA | 1268 | asusggguGfgCfGfGfu aauuggugaL96 | 2364 | смысловая | 21 |
- 130 037115
UCACCAAUUACCGCCA ССCAUUС | 1269 | usCfsaccAfaUfUfacc gCfcAfcccaususc | 2365 | антисмысловая | 23 |
UUGGAAUGGGUGGCGG UAAUU | 1270 | ususggaaUfgGfGfUfg gcgguaauuL96 | 2366 | смысловая | 21 |
AAUUАССGССАСССAU UCCAAUU | 1271 | asAfsuuaCfcGfCfcac cCfaUfuccaasusu | 2367 | антисмысловая | 23 |
AUUGGAAUGGGUGGCG GUAAU | 1272 | asusuggaAfuGfGfGfu ggcgguaauL96 | 2368 | смысловая | 21 |
AUUAC С GC САС С CAUU CCAAUUC | 1273 | asUfsuacCfgCfCfacc cAfuUfccaaususc | 2369 | антисмысловая | 23 |
GGAAAGGCACUGAUGU U CU GA | 1274 | gsgsaaagGfcAfCfUfg auguucugaL96 | 2370 | смысловая | 21 |
UСAGAACAUСAGUGСС UUUCCGC | 1275 | usCfsagaAfcAfUfcag uGfcCfuuuccsgsc | 2371 | антисмысловая | 23 |
GAAAGGCACUGAUGUU CUGAA | 1276 | gsasaaggCfaCfUfGfa uguucugaaL96 | 2372 | смысловая | 21 |
UUСAGAACAUСAGUGС CUUUCCG | 1277 | usUfscagAfaCfAfuca gUfgCfcuuucscsg | 2373 | антисмысловая | 23 |
GUGCGGAAAGGCACUG AUGUU | 1278 | gsusgcggAfaAfGfGfc acugauguuL96 | 2374 | смысловая | 21 |
AACAUCAGUGCCUUUC CGCACAC | 1279 | asAfscauCfaGfUfgcc uUfuCfcgcacsasc | 2375 | антисмысловая | 23 |
UGUGCGGAAAGGCACU GAUGU | 1280 | usgsugcgGfaAfAfGfg cacugauguL96 | 2376 | смысловая | 21 |
ACAU CAGU GC CUUU С С GCACACC | 1281 | asCfsaucAfgUfGfccu uUfcCfgcacasesc | 2377 | антисмысловая | 23 |
AAUUGUAAGCUCAGGU UCAAA | 1282 | asasuuguAfaGfCfUfc agguucaaaL96 | 2378 | смысловая | 21 |
UUUGAACCUGAGCUUA CAAUUUA | 1283 | usUfsugaAfcCfUfgag cUfuAfcaauususa | 2379 | антисмысловая | 23 |
AUUGUAAGCUCAGGUU CAAAG | 1284 | asusuguaAfgCfUfCfa gguucaaagL96 | 2380 | смысловая | 21 |
CUUUGAACCUGAGCUU ACAAUUU | 1285 | esUfsuugAfaCfCfuga gCfuUfacaaususu | 2381 | антисмысловая | 23 |
CUUAAAUUGUAAGCUС AGGUU | 1286 | csusuaaaUfuGfUf Afa gcucagguuL96 | 2382 | смысловая | 21 |
ААСCUGAGCUUACAAU UUAAGAA | 1287 | asAf sccuGfaGfCfuua cAfaUfuuaagsasa | 2383 | антисмысловая | 23 |
- 131 037115
UCUUAAAUUGUAAGCU CAGGU | 1288 | uscsuuaaAfuUfGfUfa agcucagguL96 | 2384 | смысловая | 21 |
ACCUGAGCUUACAAUU UAAGAAC | 1289 | asCfscugAfgCfUfuac aAfuUfuaagasasc | 2385 | антисмысловая | 23 |
GCAAACACUAAGGUGA AAAGA | 1290 | gscsaaacAfcUfAfAfg gugaaaagaL96 | 2386 | смысловая | 21 |
U CUUUU GAG CUUAGU G UUUGCUA | 1291 | usCfsuuuUfcAfCfcuu aGfuGfuuugcsusa | 2387 | антисмысловая | 23 |
CAAACACUAAGGUGAA AAGAU | 1292 | csasaacaCfuAfAfGfg ugaaaagauL96 | 2388 | смысловая | 21 |
AU CUUUU CAC CUUAGU GUUUGCU | 1293 | asUfscuuUfuCfAfccu uAfgUfguuugscsu | 2389 | антисмысловая | 23 |
GGUAGCAAACACUAAG GUGAA | 1294 | gsgsuagcAfaAfCfAfc uaaggugaaL96 | 2390 | смысловая | 21 |
UU CAC CUUAGU GUUU G CUACCUC | 1295 | usUfscacCfuUfAfgug uUfuGfcuaccsusc | 2391 | антисмысловая | 23 |
AGGUAGCAAACACUAA GGUGA | 1296 | asgsguagCfaAfAfCfa cuaaggugaL96 | 2392 | смысловая | 21 |
U CAC CUUAGU GUUU GC UACCUCC | 1297 | usCfsaccUfuAfGfugu uUfgCfuaccuscsc | 2393 | антисмысловая | 23 |
AGGUAGCAAACACUAA GGUGA | 1298 | asgsguagCfaAfAfCfa cuaaggugaL96 | 2394 | смысловая | 21 |
U CAC CUUAGU GUUU GC UACCUCC | 1299 | usCfsaccUfuAfGfugu uUfgCfuaccuscsc | 2395 | антисмысловая | 23 |
GGUAGCAAACACUAAG GUGAA | 1300 | gsgsuagcAfaAfCfAfc uaaggugaaL96 | 2396 | смысловая | 21 |
UU CAC CUUAGU GUUU G CUACCUC | 1301 | usUfscacCfuUfAfgug uUfuGfcuaccsusc | 2397 | антисмысловая | 23 |
UUGGAGGUAGCAAACA CUAAG | 1302 | ususggagGfuAfGfCfa aacacuaagL96 | 2398 | смысловая | 21 |
CUUAGU GUUU GCUAC C UCCAAUU | 1303 | csUfsuagUfgUfUfugc uAf cCfuccaasusu | 2399 | антисмысловая | 23 |
AUUGGAGGUAGCAAAC ACUAA | 1304 | asusuggaGfgUfAfGfc aaacacuaaL96 | 2400 | смысловая | 21 |
UUAGU GUUU GCUAC CU CCAAUUU | 1305 | usUfsaguGfuUfUfgcu aCfcUfccaaususu | 2401 | антисмысловая | 23 |
UAAAGUGCUGUAUCCU UUAGU | 1306 | usasaaguGfcUfGfUfa uccuuuaguL96 | 2402 | смысловая | 21 |
- 132 037115
ACUAAAGGAUACAGCA CUUUAGC | 1307 | asCfsuaaAfgGfAfuac aGfcAfcuuuasgsc | 2403 | антисмысловая | 23 |
AAAGUGCUGUAUCCUU UAGUA | 1308 | asasagugCfuGfUfAfu ccuuuaguaL96 | 2404 | смысловая | 21 |
UACUAAAGGAUACAGC ACUUUAG | 1309 | usAfscuaAfaGfGfaua cAfgCfacuuusasg | 2405 | антисмысловая | 23 |
AGGCUAAAGUGCUGUA UCCUU | 1310 | asgsgeuaAfaGfUfGfc uguauccuuL96 | 2406 | смысловая | 21 |
AAGGAUACAGCACUUU AGCCUGC | 1311 | asAfsggaUfaCfAfgca cUfuUfagccusgsc | 2407 | антисмысловая | 23 |
CAGGCUAAAGUGCUGU AUCCU | 1312 | csasggcuAfaAfGfUfg cuguauccuL96 | 2408 | смысловая | 21 |
AGGAUACAGCACUUUA GCCUGCC | 1313 | asGfsgauAfcAfGfcac uUfuAfgccugscsc | 2409 | антисмысловая | 23 |
AAGACAUUGGUGAGGA AAAAU | 1314 | asasgacaUfuGfGfUfg aggaaaaauL96 | 2410 | смысловая | 21 |
AUUUUUCCUCACCAAU GUCUUGU | 1315 | asUfsuuuUfcCfUfcac cAfaUfgucuusgsu | 2411 | антисмысловая | 23 |
AGACAUUGGUGAGGAA AAAUC | 1316 | asgsacauUfgGfUfGfa ggaaaaaucL96 | 2412 | смысловая | 21 |
GAUUUUUCCUCACCAA UGUCUUG | 1317 | gsAf suuuUfuCfCfuca cCfaAfugucususg | 2413 | антисмысловая | 23 |
CGACAAGACAUUGGUG AGGAA | 1318 | csgsacaaGfaCfAfUfu ggugaggaaL96 | 2414 | смысловая | 21 |
UUCCUCACCAAUGUCU UGUCGAU | 1319 | usUfsccuCfaCfCfaau gUfcUfugucgsasu | 2415 | антисмысловая | 23 |
UCGACAAGACAUUGGU GAGGA | 1320 | uscsgacaAfgAfCfAfu uggugaggaL96 | 2416 | смысловая | 21 |
UCCUCACCAAUGUCUU GUCGAUG | 1321 | usCfscucAfcCfAfaug uCfuUfgucgasusg | 2417 | антисмысловая | 23 |
AAGAU GU C CU C GAGAU ACUAA | 1322 | asasgaugUfcCfUfCfg agauacuaaL96 | 2418 | смысловая | 21 |
UUAGUAU CUC GAGGAC AUCUUGA | 1323 | usUfsaguAfuCfUfega gGfaCfaucuusgsa | 2419 | антисмысловая | 23 |
AGAU GU C CU C GAGAUA CUAAA | 1324 | asgsauguCfcUfCfGfa gauacuaaaL96 | 2420 | смысловая | 21 |
UUUAGUAU CUC GAGGA CAUCUUG | 1325 | usUfsuagUfaUfCfucg aGfgAfcaucususg | 2421 | антисмысловая | 23 |
- 133 037115
GUU CAAGAU GU C CU C G AGAUA | 1326 | gsusucaaGfaUfGfUfc cucgagauaL96 | 2422 | смысловая | 21 |
UAU CUC GAGGACAU CU UGAACAC | 1327 | usAf sucuCfgAfGfgac aUfcUfugaacsasc | 2423 | антисмысловая | 23 |
U GUU CAAGAU GU C CU C GAGAU | 1328 | usgsuucaAfgAfUfGfu ccucgagauL96 | 2424 | смысловая | 21 |
AU CU C GAGGACAU CUU GAACACC | 1329 | asUfscucGfaGfGfaca uCfuUfgaacascsc | 2425 | антисмысловая | 23 |
GAGAAAGGUGUUCAAG AUGUC | 1330 | gsasgaaaGfgUfGfUfu caagaugucL96 | 2426 | смысловая | 21 |
GACAU CUU GAACAC CU UUCUCCC | 1331 | gsAf scauCfuUfGfaac aCfcUfuucucscsc | 2427 | антисмысловая | 23 |
AGAAAGGUGUU C AAGA UGUCC | 1332 | asgsaaagGfuGfUfUfc aagauguccL96 | 2428 | смысловая | 21 |
GGACAUCUUGAACACC UUUCUCC | 1333 | gsGfsacaUfcUfUfgaa cAfcCfuuucuscsc | 2429 | антисмысловая | 23 |
GGGGGAGAAAGGUGUU CAAGA | 1334 | gsgsgggaGfaAfAfGfg uguucaagaL96 | 2430 | смысловая | 21 |
UCUUGAACACCUUUCU CCCCCUG | 1335 | usCfsuugAfaCfAfecu uUfcUfcccccsusg | 2431 | антисмысловая | 23 |
AGGGGGAGAAAGGUGU UCAAG | 1336 | asgsggggAfgAfAfAfg guguucaagL96 | 2432 | смысловая | 21 |
CUUGAACACCUUUCUC CCCCUGG | 1337 | esUfsugaAfcAfCfcuu uCfuCfccccusgsg | 2433 | антисмысловая | 23 |
GCUGGGAAGAUAUCAA AUGGC | 1338 | gscsugggAfaGfAfUfa ucaaauggcL96 | 2434 | смысловая | 21 |
GC CAUUU GAU AU CUU C CCAGCUG | 1339 | gsCfscauUfuGfAfuau cUfuCfccagcsusg | 2435 | антисмысловая | 23 |
CUGGGAAGAUAUCAAA UGGCU | 1340 | csusgggaAfgAfUfAfu caaauggcuL96 | 2436 | смысловая | 21 |
AGC CAUUU GAUAU CUU CCCAGCU | 1341 | asGfsccaUfuUfGfaua uCfuUfcccagscsu | 2437 | антисмысловая | 23 |
AUCAGCUGGGAAGAUA UCAAA | 1342 | asuscagcUfgGfGfAfa gauaucaaaL96 | 2438 | смысловая | 21 |
UUU GAUAU CUU С C CAG CUGAUAG | 1343 | usUfsugaUfaUfCfuuc cCfaGfcugausasg | 2439 | антисмысловая | 23 |
UAUCAGCUGGGAAGAU AUCAA | 1344 | usasucagCfuGfGfGfa agauaucaaL96 | 2440 | смысловая | 21 |
- 134 037115
UU GAUAU CUU С C CAGC UGAUAGA | 1345 | usUfsgauAfuCfUfucc cAf gCfugauasgsa | 2441 | антисмысловая | 23 |
U CU GU C GACUU CU GUU UUAGG | 1346 | uscsugucGfaCfUfUfc uguuuuaggL96 | 2442 | смысловая | 21 |
C CUAAAACAGAAGU C G ACAGAUC | 1347 | csCfsuaaAfaCfAfgaa gUfcGfacagasusc | 2443 | антисмысловая | 23 |
CU GU C GACUU CU GUUU UAGGA | 1348 | csusgucgAfcUfUfCfu guuuuaggaL96 | 2444 | смысловая | 21 |
UСCUAAAACAGAAGUC GACAGAU | 1349 | usCfscuaAfaAfCfaga aGfuCfgacagsasu | 2445 | антисмысловая | 23 |
CAGAU CU GU C GACUU C UGUUU | 1350 | csasgaucUfgUfCfGfa cuucuguuuL96 | 2446 | смысловая | 21 |
AAACAGAAGU C GACAG AUCUGUU | 1351 | asAf sacaGfaAfGfucg aCfaGfaucugsusu | 2447 | антисмысловая | 23 |
ACAGAU CU GU C GACUU CUGUU | 1352 | ascsagauCfuGfUfCfg acuucuguuL96 | 2448 | смысловая | 21 |
AACAGAAGU C GACAGA UCUGUUU | 1353 | asAf scagAfaGfUfcga cAfgAfucugususu | 2449 | антисмысловая | 23 |
UACUUCUUUGAAUGUA GAUUU | 1354 | usascuucUfuUfGfAfa uguagauuuL96 | 2450 | смысловая | 21 |
AAAU CUACAUU CAAAG AAGUAUC | 1355 | asAfsaucUfaCfAfuuc aAfaGfaaguasusc | 2451 | антисмысловая | 23 |
ACUUCUUUGAAUGUAG AUUUC | 1356 | ascsuucuUfuGfAfAfu guagauuucL96 | 2452 | смысловая | 21 |
GAAAU CUACAUU CAAA GAAGUAU | 1357 | gsAf saauCfuAfCfauu cAfaAfgaagusasu | 2453 | антисмысловая | 23 |
GUGAUACUUCUUUGAA UGUAG | 1358 | gsusgauaCfuUfCfUfu ugaauguagL96 | 2454 | смысловая | 21 |
CUACAUU CAAAGAAGU AUСАССА | 1359 | csUfsacaUfuCfAfaag aAfgUfaucacscsa | 2455 | антисмысловая | 23 |
GGUGAUACUUCUUUGA AUGUA | 1360 | gsgsugauAfcUfUfCfu uugaauguaL96 | 2456 | смысловая | 21 |
UACAUU CAAAGAAGUA UCACCAA | 1361 | usAfscauUfcAfAfaga aGfuAfucaccsasa | 2457 | антисмысловая | 23 |
UGGGAAGAUAUCAAAU GGCUG | 1362 | usgsggaaGfaUfAfUfc aaauggcugL96 | 2458 | смысловая | 21 |
CAG C CAUUU GAUAU CU UCCCAGC | 1363 | csAfsgccAfuUfUfgau aUfcUfucccasgsc | 2459 | антисмысловая | 23 |
- 135 037115
GGGAAGAUAUCAAAUG GCUGA | 1364 | gsgsgaagAfuAfUfCfa aauggcugaL96 | 2460 | смысловая | 21 |
U CAGC CAUUU GAUAU C UUCCCAG | 1365 | usCfsagcCfaUfUfuga uAfuCfuucccsasg | 2461 | антисмысловая | 23 |
CAGCUGGGAAGAUAUC AAAUG | 1366 | csasgcugGfgAfAfGfa uaucaaaugL96 | 2462 | смысловая | 21 |
CAUUU GAU AU CUU С С C AGCUGAU | 1367 | csAfsuuuGfaUfAfucu uCfcCfagcugsasu | 2463 | антисмысловая | 23 |
UCAGCUGGGAAGAUAU CAAAU | 1368 | uscsagcuGfgGfAfAfg auaucaaauL96 | 2464 | смысловая | 21 |
AUUU GAU AU CUU С C CA GCUGAUA | 1369 | asUfsuugAfuAfUfcuu cCfcAfgcugasusa | 2465 | антисмысловая | 23 |
U C CAAAGU CUAUAUAU GACUA | 1370 | uscscaaaGfuCfUfAfu auaugacuaL96 | 2466 | смысловая | 21 |
UAGU CAUAUAUAGACU UUGGAAG | 1371 | usAfsgucAfuAfUfaua gAfcUfuuggasasg | 2467 | антисмысловая | 23 |
C CAAAGU CUAUAUAU G ACUAU | 1372 | cscsaaagUfcUfAfUfa uaugacuauL96 | 2468 | смысловая | 21 |
AUAGU CAUAUAUAGAC UUUGGAA | 1373 | asUfsaguCfaUfAfuau aGfaCfuuuggsasa | 2469 | антисмысловая | 23 |
UACUU C CAAAGU CUAU AU AUG | 1374 | usascuucCfaAfAfGfu cuauauaugL96 | 2470 | смысловая | 21 |
CAUAUAUAGACUUUGG AAGUACU | 1375 | csAfsuauAfuAfGfacu uUfgGfaaguascsu | 2471 | антисмысловая | 23 |
GUACUU C CAAAGU CUA UAUAU | 1376 | gsusacuuCfcAfAfAfg ucuauauauL96 | 2472 | смысловая | 21 |
AUAUAUAGACUUUGGA AGUACUG | 1377 | asUfsauaUfaGfAfcuu uGfgAfaguacsusg | 2473 | антисмысловая | 23 |
UUAUGAACAACAUGCU AAAUC | 1378 | ususaugaAfcAfAfCfa ugcuaaaucL96 | 2474 | смысловая | 21 |
GAUUUAGCAUGUUGUU CAUAAUC | 1379 | gsAfsuuuAfgCfAfugu uGfuUfcauaasusc | 2475 | антисмысловая | 23 |
UAUGAACAACAUGCUA AAUCA | 1380 | usasugaaCfaAfCfAfu gcuaaaucaL96 | 2476 | смысловая | 21 |
U GAUUUAGCAU GUU GU UCAUAAU | 1381 | usGfsauuUfaGfCfaug uUfgUfucauasasu | 2477 | антисмысловая | 23 |
AU GAUUAU GAACAACA UGCUA | 1382 | asusgauuAfuGfAfAfc aacaugcuaL96 | 2478 | смысловая | 21 |
- 136 037115
UAGCAU GUU GUU CAUA AUCAUUG | 1383 | usAfsgcaUfgUfUfguu cAfuAfaucaususg | 2479 | антисмысловая | 23 |
AAU GAUUAU GAACAAC AUGCU | 1384 | asasugauUfaUfGfAfa caacaugcuL96 | 2480 | смысловая | 21 |
AGCAUGUUGUUCAUAA U CAUU GA | 1385 | asGfscauGfuUfGfuuc aUfaAfucauusgsa | 2481 | антисмысловая | 23 |
AAUU С С C CACUU CAAU ACAAA | 1386 | asasuuccCfcAfCfUfu caauacaaaL96 | 2482 | смысловая | 21 |
UUUGUAUUGAAGUGGG GAAUUAC | 1387 | usUfsuguAfuUfGfaag uGfgGfgaauusasc | 2483 | антисмысловая | 23 |
AUU С С C CACUU CAAUA CAAAG | 1388 | asusucccCfaCfUfUfc aauacaaagL96 | 2484 | смысловая | 21 |
CUUUGUAUUGAAGUGG GGAAUUA | 1389 | esUfsuugUfaU fUfgaa gUfgGfggaaususa | 2485 | антисмысловая | 23 |
CUGUAAUUCCCCACUU CAAUA | 1390 | csusguaaUfuCfCfCfc acuucaauaL96 | 2486 | смысловая | 21 |
UAUUGAAGUGGGGAAU UACAGAC | 1391 | usAf suugAfaGfUfggg gAfaUfuacagsasc | 2487 | антисмысловая | 23 |
UCUGUAAUUССCCACU UCAAU | 1392 | uscsuguaAfuUfCfCfc cacuucaauL96 | 2488 | смысловая | 21 |
AUUGAAGUGGGGAAUU ACAGACU | 1393 | asUfsugaAfgUfGfggg aAfuUfacagascsu | 2489 | антисмысловая | 23 |
UGAUGUGCGUAACAGA UUCAA | 1394 | usgsauguGfcGfUfAfa cagauucaaL96 | 2490 | смысловая | 21 |
UUGAAUCUGUUACGCA CAU CAU C | 1395 | usUfsgaaUfcUfGfuua cGfcAfCaucasusc | 2491 | антисмысловая | 23 |
GAU GUGCGUAACAGAU UCAAA | 1396 | gsasugugCfgUfAfAfc agauucaaaL96 | 2492 | смысловая | 21 |
UUUGAAUCUGUUACGC AC AU CAU | 1397 | usUfsugaAfuCfUfguu aCfgCfacaucsasu | 2493 | антисмысловая | 23 |
UGGAUGAUGUGCGUAA CAGAU | 1398 | usgsgaugAfuGfUfGfc guaacagauL96 | 2494 | смысловая | 21 |
AU CU GUUAC GCACAU C AUCCAGA | 1399 | asUfscugUfuAfCfgca cAfuCfauccasgsa | 2495 | антисмысловая | 23 |
CUGGAUGAUGUGCGUA ACAGA | 1400 | csusggauGfaUfGfUfg cguaacagaL96 | 2496 | смысловая | 21 |
U CU GUUAC GCACAU CA UCCAGAC | 1401 | usCfsuguUfaCfGfcac aUfcAfuccagsasc | 2497 | антисмысловая | 23 |
- 137 037115
GAAUGGGUGGCGGUAA UUGGU | 1402 | gsasauggGfuGfGfCfg guaauugguL96 | 2498 | смысловая | 21 |
ACCAAUUACCGCCACC CAUUCCA | 1403 | asCfscaaUfuAfCfcgc cAfcCfcauucscsa | 2499 | антисмысловая | 23 |
AAUGGGUGGCGGUAAU UGGUG | 1404 | asasugggUfgGfCfGfg uaauuggugL96 | 2500 | смысловая | 21 |
СACCAAUUACCGСCAC CCAUUCC | 1405 | csAfsccaAfuUfAfccg cCfaCfccauuscsc | 2501 | антисмысловая | 23 |
AUUGGAAUGGGUGGCG GUAAU | 1406 | asusuggaAfuGfGfGfu ggcgguaauL96 | 2502 | смысловая | 21 |
AUUAC C GC САС C CAUU CCAAUUC | 1407 | asUfsuacCfgCfCfacc cAfuUfccaaususc | 2503 | антисмысловая | 23 |
AAUUGGAAUGGGUGGC GGUAA | 1408 | asasuuggAfaUfGfGfg uggcgguaaL96 | 2504 | смысловая | 21 |
UUACCGCCACCCAUUC CAAUUCU | 1409 | usUfsaccGfcCfAfccc aUfuCfcaauuscsu | 2505 | антисмысловая | 23 |
UCCGGAAUGUUGCUGA AACAG | 1410 | uscscggaAfuGfUfUfg cugaaacagL96 | 2506 | смысловая | 21 |
CUGUUUCAGCAACAUU CCGGAGC | 1411 | csUfsguuUfcAfGfcaa cAfuUfccggasgsc | 2507 | антисмысловая | 23 |
CCGGAAUGUUGCUGAA ACAGA | 1412 | cscsggaaUfgUfUfGfc ugaaacagaL96 | 2508 | смысловая | 21 |
UCUGUUUCAGCAACAU UCCGGAG | 1413 | usCfsuguUfuCfAfgca aCfaUfuccggsasg | 2509 | антисмысловая | 23 |
AUGCUCCGGAAUGUUG CUGAA | 1414 | asusgcucCfgGfAfAfu guugcugaaL96 | 2510 | смысловая | 21 |
UUCAGCAACAUUCCGG AGCAUCC | 1415 | usUfscagCfaAfCfauu cCfgGfagcauscsc | 2511 | антисмысловая | 23 |
GAUGCUCCGGAAUGUU GCUGA | 1416 | gsasugcuCfcGfGfAfa uguugcugaL96 | 2512 | смысловая | 21 |
UCAGCAACAUUCCGGA GCAUCCU | 1417 | usCfsagcAfaCfAfuuc cGfgAfgcaucscsu | 2513 | антисмысловая | 23 |
U GU C CU C GAGAUACUA AAGGA | 1418 | usgsuccuCfgAfGfAfu acuaaaggaL96 | 2514 | смысловая | 21 |
UCCUUUAGUAUCUCGA GGACAUC | 1419 | usCfscuuUfaGfUfauc uCfgAfggacasusc | 2515 | антисмысловая | 23 |
GU C CU C GAGAUACUAA AGGAA | 1420 | gsusccucGfaGfAfUfa cuaaaggaaL96 | 2516 | смысловая | 21 |
- 138 037115
UU C CUUUAGUAU CU C G AGGACAU | 1421 | usUfsccuUfuAfGfuau cUfcGfaggacsasu | 2517 | антисмысловая | 23 |
AAGAU GU C CU C GAGAU ACUAA | 1422 | asasgaugUfcCfUfCfg agauacuaaL96 | 2518 | смысловая | 21 |
UUAGUAU CUC GAGGAC AUCUUGA | 1423 | usUfsaguAfuCfUfega gGfaCfaucuusgsa | 2519 | антисмысловая | 23 |
CAAGAU GU C CU C GAGA UACUA | 1424 | csasagauGfuCfCfUfc gagauacuaL96 | 2520 | смысловая | 21 |
UAGUAU CU C GAG GACA UCUUGAA | 1425 | usAf sguaUfcUfCfgag gAfcAfucuugsasa | 2521 | антисмысловая | 23 |
ACAACAUGCUAAAUCA GUACU | 1426 | ascsaacaUfgCfUfAfa aucaguacuL96 | 2522 | смысловая | 21 |
AGUACUGAUUUAGCAU GUUGUUC | 1427 | asGfsuacUfgAfUfuua gCfaUfguugususc | 2523 | антисмысловая | 23 |
CAACAUGCUAAAUCAG UACUU | 1428 | csasacauGfcUfAfAfa ucaguacuuL96 | 2524 | смысловая | 21 |
AAGUACUGAUUUAGCA UGUUGUU | 1429 | asAf sguaCfuGfAfuuu aGfcAfuguugsusu | 2525 | антисмысловая | 23 |
AUGAACAACAUGCUAA AUG AG | 1430 | asusgaacAf aCfAfUfg cuaaaucagL96 | 2526 | смысловая | 21 |
CUGAUUUAGCAUGUUG UUCAUAA | 1431 | esUfsgauUfuAfGfcau gUfuGfuucausasa | 2527 | антисмысловая | 23 |
UAUGAACAACAUGCUA AAUCA | 1432 | usasugaaCfaAfCfAfu gcuaaaucaL96 | 2528 | смысловая | 21 |
U GAUUUAGCAU GUU GU UCAUAAU | 1433 | usGfsauuUfaGfCfaug uUfgUfucauasasu | 2529 | антисмысловая | 23 |
GCCAAGGCUGUGUUUG UGGGG | 1434 | gscscaagGfcUfGfUfg uuuguggggL96 | 2530 | смысловая | 21 |
СССCACAAACACAGСC UUGGCGC | 1435 | csCfsccaCfaAfAfcac aGfcCfuuggcsgsc | 2531 | антисмысловая | 23 |
CCAAGGCUGUGUUUGU GGGGA | 1436 | cscsaaggCfuGfUfGfu uuguggggaL96 | 2532 | смысловая | 21 |
UСССCACAAACACAGC CUUGGCG | 1437 | usCfscccAfcAfAfаса cAfgCfcuuggscsg | 2533 | антисмысловая | 23 |
UGGCGCCAAGGCUGUG UUUGU | 1438 | usgsgcgcCfaAfGfGfc uguguuuguL96 | 2534 | смысловая | 21 |
ACAAACACAGCCUUGG CGCCAAG | 1439 | asCfsaaaCfaCfAfgee uUfgGfcgccasasg | 2535 | антисмысловая | 23 |
- 139 037115
UUGGCGCCAAGGCUGU GUUUG | 1440 | ususggcgCfcAfAfGfg cuguguuugL96 | 2536 | смысловая | 21 |
CAAACACAGCCUUGGC GCCAAGA | 1441 | csAfsaacAfcAfGfccu uGfgCfgccaasgsa | 2537 | антисмысловая | 23 |
UGAAAGCUCUGGCUCU UGGCG | 1442 | usgsaaagCfuCfUfGfg cucuuggcgL96 | 2538 | смысловая | 21 |
CGCCAAGAGCCAGAGC UUUCAGA | 1443 | csGfsccaAfgAfGfcca gAfgCfuuucasgsa | 2539 | антисмысловая | 23 |
GAAAGCUCUGGCUCUU GGCGC | 1444 | gsasaagcUfcUfGfGfc ucuuggcgcL96 | 2540 | смысловая | 21 |
GCGCCAAGAGCCAGAG CUUUCAG | 1445 | gsCfsgccAfaGfAfgcc aGfaGfcuuucsasg | 2541 | антисмысловая | 23 |
GUUCUGAAAGCUCUGG CUCUU | 1446 | gsusucugAfaAfGfCfu cuggcucuuL96 | 2542 | смысловая | 21 |
AAGAGCCAGAGCUUUC AGAACAU | 1447 | asAf sgagCfcAfGfage uUfuCfagaacsasu | 2543 | антисмысловая | 23 |
UGUUCUGAAAGCUCUG GCUCU | 1448 | usgsuucuGfaAfAfGfc ucuggcucuL96 | 2544 | смысловая | 21 |
AGAGCCAGAGCUUUCA GAACAUC | 1449 | asGfsagcCfaGfAfgcu uUfcAfgaacasusc | 2545 | антисмысловая | 23 |
CAGC CACUAUU GAU GU UCUGC | 1450 | csasgccaCfuAfUfUfg auguucugcL96 | 2546 | смысловая | 21 |
GCAGAACAUCAAUAGU GGCUGGC | 1451 | gsCfsagaAfcAfUfcaa uAfgUfggcugsgsc | 2547 | антисмысловая | 23 |
AGC CACUAUU GAU GUU CUGCC | 1452 | asgsccacUfaUfUfGfa uguucugccL96 | 2548 | смысловая | 21 |
GGCAGAACAUCAAUAG UGGCUGG | 1453 | gsGfscagAfaCfAfuca aUfaGfuggcusgsg | 2549 | антисмысловая | 23 |
GUGCCAGCCACUAUUG AU GUU | 1454 | gsusgccaGfcCfAfCfu auugauguuL96 | 2550 | смысловая | 21 |
AACAUCAAUAGUGGCU GGCACCC | 1455 | asAfscauCfaAfUfagu gGfcUfggcacscsc | 2551 | антисмысловая | 23 |
GGUGCCAGCCACUAUU GAUGU | 1456 | gsgsugccAfgCfCfAfc uauugauguL96 | 2552 | смысловая | 21 |
ACAUCAAUAGUGGCUG GCACCCC | 1457 | asCfsaucAfaUfAfgug gCfuGfgcaccscsc | 2553 | антисмысловая | 23 |
ACAAGGACCGAGAAGU САССА | 1458 | ascsaaggAfcCfGfAfg aagucaccaL96 | 2554 | смысловая | 21 |
- 140 037115
UGGUGACUUCUCGGUC CUUGUAG | 1459 | usGfsgugAfcUfUfcue gGfuCfcuugusasg | 2555 | антисмысловая | 23 |
CAAGGACCGAGAAGUC AC CAA | 1460 | csasaggaCfcGfAfGfa agucaccaaL96 | 2556 | смысловая | 21 |
UUGGUGACUUCUCGGU CCUUGUA | 1461 | usUfsgguGfaCfUfucu cGfgUfccuugsusa | 2557 | антисмысловая | 23 |
AUCUACAAGGACC GAG AAGUC | 1462 | asuscuacAfaGfGfAfc cgagaagucL96 | 2558 | смысловая | 21 |
GACUUCUCGGUCCUUG UAGAUAU | 1463 | gsAfscuuCfuCfGfguc cUfuGfuagausasu | 2559 | антисмысловая | 23 |
UAUCUACAAGGACCGA GAAGU | 1464 | usasucuaCfaAfGfGfa ccgagaaguL96 | 2560 | смысловая | 21 |
ACUUCUCGGUCCUUGU AGAUAUA | 1465 | asCfsuucUfcGfGfucc uUfgUfagauasusa | 2561 | антисмысловая | 23 |
CAGAAU GU GAAAGU CA UCGAC | 1466 | csasgaauGfuGfAfAfa gucaucgacL96 | 2562 | смысловая | 21 |
GU C GAU GACUUU CACA UUCUGGC | 1467 | gsUfscgaUfgAfCfuuu cAfcAfuucugsgsc | 2563 | антисмысловая | 23 |
AGAAU GU GAAAGU CAU CGACA | 1468 | asgsaaugUfgAfAfAfg ucaucgacaL96 | 2564 | смысловая | 21 |
U GU C GAU GACUUU CAC AUUCUGG | 1469 | usGfsuegAfuGfAfcuu uCfaCfauucusgsg | 2565 | антисмысловая | 23 |
GUGСCAGAAUGUGAAA GUCAU | 1470 | gsusgccaGfaAfUfGfu gaaagucauL96 | 2566 | смысловая | 21 |
AUGACUUUCACAUUCU GGCACCC | 1471 | asUfsgacUfuUfCfaca uUfcUfggcacscsc | 2567 | антисмысловая | 23 |
GGUGCCAGAAUGUGAA AGUCA | 1472 | gsgsugccAfgAfAfUfg ugaaagucaL96 | 2568 | смысловая | 21 |
UGACUUUCACAUUCUG GCACCCA | 1473 | usGfsacuUfuCfAfcau uCfuGfgcaccscsa | 2569 | антисмысловая | 23 |
AGAU GU C CU C GAGAUA CUAAA | 1474 | asgsauguCfcUfCfGfa gauacuaaaL96 | 2570 | смысловая | 21 |
UUUAGUAU CUC GAGGA CAUCUUG | 1475 | usUfsuagUfaUfCfucg aGfgAfcaucususg | 2571 | антисмысловая | 23 |
GAU GU C CU C GAGAUAC UAAAG | 1476 | gsasugucCfuCfGfAfg auacuaaagL96 | 2572 | смысловая | 21 |
CUUUAGUAUCUCGAGG ACAUCUU | 1477 | esUfsuuaGfuAfUfcue gAfgGfacaucsusu | 2573 | антисмысловая | 23 |
- 141 037115
UU CAAGAU GU C CU C GA GAUAC | 1478 | ususcaagAfuGfUfCfc ucgagauacL96 | 2574 | смысловая | 21 |
GUAU CU C GAG GACAU C UUGAACA | 1479 | gsUfsaucUfcGfAfgga cAfuCfuugaascsa | 2575 | антисмысловая | 23 |
GUU CAAGAU GU C CU C G AGAUA | 1480 | gsusucaaGfaUfGfUfc cucgagauaL96 | 2576 | смысловая | 21 |
UAU CUC GAGGACAU CU UGAACAC | 1481 | usAfsucuCfgAfGfgac aUfcUfugaacsasc | 2577 | антисмысловая | 23 |
GUGGACUUGCUGCAUA UGUGG | 1482 | gsusggacUfuGfCfUfg cauauguggL96 | 2578 | смысловая | 21 |
CCACAUAUGCAGCAAG UCCACUG | 1483 | csCfsacaUfaUfGfcag cAfaGfuccacsusg | 2579 | антисмысловая | 23 |
UGGACUUGCUGCAUAU GUGGC | 1484 | usgsgacuUfgCfUfGfc auauguggcL96 | 2580 | смысловая | 21 |
GCCACAUAUGCAGCAA GUCCACU | 1485 | gsCfscacAfuAfUfgca gCfaAfguccascsu | 2581 | антисмысловая | 23 |
GACAGUGGACUUGCUG CAUAU | 1486 | gsascaguGfgAfCfUfu gcugcauauL96 | 2582 | смысловая | 21 |
AUAUGCAGCAAGUCCA CUGUCGU | 1487 | asUfsaugCfaGfCfaag uCfcAfcugucsgsu | 2583 | антисмысловая | 23 |
CGACAGUGGACUUGCU GCAUA | 1488 | csgsacagUfgGfAfCfu ugcugcauaL96 | 2584 | смысловая | 21 |
UAUGCAGCAAGUCCAC UGUCGUC | 1489 | usAfsugcAfgCfAfagu cCfaCfugucgsusc | 2585 | антисмысловая | 23 |
AAC CAGUACUUUAU CA UUUUC | 1490 | asasccagUfaCfUfUfu aucauuuucL96 | 2586 | смысловая | 21 |
GAAAAU GAUAAAGUAC UGGUUUC | 1491 | gsAfsaaaUfgAfUfaaa gUfaCfugguususc | 2587 | антисмысловая | 23 |
AC CAGUACUUUAU CAU UUUCU | 1492 | ascscaguAfcUfUfUfa ucauuuucuL96 | 2588 | смысловая | 21 |
AGAAAAU GAUAAAGUA CUGGUUU | 1493 | asGfsaaaAfuGfAfuaa aGfuAfcuggususu | 2589 | антисмысловая | 23 |
UU GAAAC CAGUACUUU AU CAU | 1494 | ususgaaaCfcAfGfUfa cuuuaucauL96 | 2590 | смысловая | 21 |
AUGAUAAAGUACUGGU UUCAAAA | 1495 | asUfsgauAfaAfGfuac uGfgUfuucaasasa | 2591 | антисмысловая | 23 |
UUU GAAAC CAGUACUU UAUCA | 1496 | ususugaaAfcCfAfGfu acuuuaucaL96 | 2592 | смысловая | 21 |
- 142 037115
UGAUAAAGUACUGGUU U GAAAAU | 1497 | usGfsauaAfaGfUfacu gGfuUfucaaasasu | 2593 | антисмысловая | 23 |
C GAGAAGU CAC CAAGA AGCUA | 1498 | csgsagaaGfuCfAfCfc aagaagcuaL96 | 2594 | смысловая | 21 |
UAGCUUCUUGGUGACU UCUCGGU | 1499 | usAf sgcuUfcUfUfggu gAfcUfucucgsgsu | 2595 | антисмысловая | 23 |
GAGAAGU CAC CAAGAA GCUAG | 1500 | gsasgaagUfcAfCfCfa agaagcuagL96 | 2596 | смысловая | 21 |
CUAGCUUCUUGGUGAC UUCUCGG | 1501 | csUfsagcUfuCfUfugg uGfaCfuucucsgsg | 2597 | антисмысловая | 23 |
GGACCGAGAAGUCACC AAGAA | 1502 | gsgsaccgAfgAfAfGfu caccaagaaL96 | 2598 | смысловая | 21 |
UUCUUGGUGACUUCUC GGUCCUU | 1503 | usUfscuuGfgUfGfacu uCfuCfgguccsusu | 2599 | антисмысловая | 23 |
AGGACCGAGAAGUCAC CAAGA | 1504 | asgsgaccGfaGfAfAfg ucaccaagaL96 | 2600 | смысловая | 21 |
UCUUGGUGACUUCUCG GUCCUUG | 1505 | usCfsuugGfuGfAfcuu cUfcGfguccususg | 2601 | антисмысловая | 23 |
UCAAAGUGUUGGUAAU GCCUG | 1506 | uscsaaagUfgUfUfGfg uaaugccugL96 | 2602 | смысловая | 21 |
CAGGCAUUACCAACAC UUUGAAC | 1507 | csAfsggcAfuUfAfcca aCfaCfuuugasasc | 2603 | антисмысловая | 23 |
CAAAGUGUUGGUAAUG CCUGA | 1508 | csasaaguGfuUfGfGfu aaugccugaL96 | 2604 | смысловая | 21 |
UCAGGCAUUACCAACA CUUUGAA | 1509 | usCfsaggCfaUfUfacc aAfcAfcuuugsasa | 2605 | антисмысловая | 23 |
AGGUUCAAAGUGUUGG UAAUG | 1510 | asgsguucAfaAfGfUfg uugguaaugL96 | 2606 | смысловая | 21 |
CAUUAC CAACACUUU G AACCUGA | 1511 | csAfsuuaCfcAfAfcac uUfuGfaaccusgsa | 2607 | антисмысловая | 23 |
CAGGUUCAAAGUGUUG GUAAU | 1512 | csasgguuCfaAfAfGfu guugguaauL96 | 2608 | смысловая | 21 |
AUUACCAACACUUUGA ACCUGAG | 1513 | asUfsuacCfaAfCfacu uUfgAfaccugsasg | 2609 | антисмысловая | 23 |
UAUUACUU GACAAAGA GACAC | 1514 | usasuuacUfuGfAfCfa aagagacacL96 | 2610 | смысловая | 21 |
GU GU CU CUUU GU CAAG UAAUACA | 1515 | gsUfsgucUfcUfUfugu cAfaGfuaauascsa | 2611 | антисмысловая | 23 |
- 143 037115
AUUACUU GACAAAGAG ACACU | 1516 | asusuacuUfgAfCfAfa agagacacuL96 | 2612 | смысловая | 21 |
AGU GU CU CUUU GU CAA GUAAUAC | 1517 | asGfsuguCfuCfUfuug uCfaAfguaausasc | 2613 | антисмысловая | 23 |
CAU GUAUUACUU GACA AAGAG | 1518 | csasuguaUfuAfCfUfu gacaaagagL96 | 2614 | смысловая | 21 |
CUCUUUGUCAAGUAAU ACAUGCU | 1519 | csUfscuuUfgUfCfaag uAfaUfacaugscsu | 2615 | антисмысловая | 23 |
GCAU GU AUUACUU GAC AAAGA | 1520 | gscsauguAfuUfAfCfu ugacaaagaL96 | 2616 | смысловая | 21 |
U CUUU GU CAAGUAAUA CAUGCUG | 1521 | usCfsuuuGfuCfAfagu aAfuAfGaugesusg | 2617 | антисмысловая | 23 |
AAAGU CAU C GACAAGA CAUUG | 1522 | asasagucAfuCfGfAfc aagacauugL96 | 2618 | смысловая | 21 |
CAAU GU CUU GU C GAU G ACUUUCA | 1523 | csAfsaugUfcUfUfguc gAfuGfacuuuscsa | 2619 | антисмысловая | 23 |
AAGU CAU C GACAAGAC AUUGG | 1524 | asasgucaUfcGfAfCfa agacauuggL96 | 2620 | смысловая | 21 |
C CAAU GU CUU GU C GAU GACUUUC | 1525 | csCfsaauGfuCfUfugu cGfaUfgacuususc | 2621 | антисмысловая | 23 |
U GU GAAAGU CAU C GAC AAGAC | 1526 | usgsugaaAfgUfCfAfu cgacaagacL96 | 2622 | смысловая | 21 |
GUCUUGUCGAUGACUU UCACAUU | 1527 | gsUfscuuGfuCfGfaug aCfuUfucacasusu | 2623 | антисмысловая | 23 |
AU GU GAAAGU CAU C GA CAAGA | 1528 | asusgugaAfaGfUfCfa ucgacaagaL96 | 2624 | смысловая | 21 |
UCUUGUCGAUGACUUU CACAUUC | 1529 | usCfsuugUfcGfAfuga cUfuUfcacaususc | 2625 | антисмысловая | 23 |
AUAUGUGGCUAAAGCA AUAGA | 1530 | asusauguGfgCfUfAfa agcaauagaL96 | 2626 | смысловая | 21 |
UCUAUUGCUUUAGCCA CAUAUGC | 1531 | usCfsuauUfgCfUfuua gCfcAfcauausgsc | 2627 | антисмысловая | 23 |
UAUGUGGCUAAAGCAA UAGAC | 1532 | usasugugGfcUfAfAfa gcaauagacL96 | 2628 | смысловая | 21 |
GUCUAUUGCUUUAGCC ACAUAUG | 1533 | gsUfscuaUfuGfCfuuu aGfcCfacauasusg | 2629 | антисмысловая | 23 |
CUGCAUAUGUGGCUAA AGCAA | 1534 | esusgeauAfuGfUfGfg cuaaagcaaL96 | 2630 | смысловая | 21 |
- 144 037115
UUGCUUUAGCCACAUA UGCAGCA | 1535 | usUfsgcuUfuAfGfcca cAfuAfugcagscsa | 2631 | антисмысловая | 23 |
GCUGCAUAUGUGGCUA AAGCA | 1536 | gscsugcaUfaUfGfUfg gcuaaagcaL96 | 2632 | смысловая | 21 |
UGCUUUAGCCACAUAU GCAGCAA | 1537 | usGfscuuUfaGfCfcac aUfaUfgcagcsasa | 2633 | антисмысловая | 23 |
AGAC GACAGU GGACUU GCUGC | 1538 | asgsacgaCfaGfUfGfg acuugcugcL96 | 2634 | смысловая | 21 |
GCAGCAAGUCCACUGU CGUCUCC | 1539 | gsCfsagcAfaGfUfcca cUfgUfcgucuscsc | 2635 | антисмысловая | 23 |
GAC GACAGU GGACUU G CUGCA | 1540 | gsascgacAfgUfGfGfa cuugcugcaL96 | 2636 | смысловая | 21 |
UGCAGCAAGUCCACUG UCGUCUC | 1541 | usGfscagCfaAfGfucc aCfuGfucgucsusc | 2637 | антисмысловая | 23 |
UUGGAGACGACAGUGG ACUUG | 1542 | ususggagAfcGfAfCfa guggacuugL96 | 2638 | смысловая | 21 |
CAAGU C CACU GU C GU C UCCAAAA | 1543 | csAfsaguCfcAfCfugu cGfuCfuccaasasa | 2639 | антисмысловая | 23 |
UUU GGAGAC GACAGU G GACUU | 1544 | ususuggaGfaCfGfAfc aguggacuuL96 | 2640 | смысловая | 21 |
AAGU C CACU GU C GU CU CCAAAAU | 1545 | asAfsgucCfaCfUfguc gUfcUfccaaasasu | 2641 | антисмысловая | 23 |
GGCCACCUCCUCAAUU GAAGA | 1546 | gsgsccacCfuCfCfUfc aauugaagaL96 | 2642 | смысловая | 21 |
UCUUCAAUUGAGGAGG UGGCCCA | 1547 | usCfsuucAfaUfUfgag gAfgGfuggccscsa | 2643 | антисмысловая | 23 |
GCCACCUCCUCAAUUG AAGAA | 1548 | gscscaccUfcCfUfCfa auugaagaaL96 | 2644 | смысловая | 21 |
UUCUUCAAUUGAGGAG GUGGCCC | 1549 | usUfscuuCfaAfUfuga gGfaGfguggcscsc | 2645 | антисмысловая | 23 |
CCUGGGCCACCUCCUC AAUUG | 1550 | cscsugggCfcAfCfCfu ccucaauugL96 | 2646 | смысловая | 21 |
CAAUUGAGGAGGUGGC CCAGGAA | 1551 | csAfsauuGfaGfGfagg uGfgCfccaggsasa | 2647 | антисмысловая | 23 |
UCCUGGGCCACCUCCU CAAUU | 1552 | uscscuggGfcCfAfCfc uccucaauuL96 | 2648 | смысловая | 21 |
AAUUGAGGAGGUGGCC CAGGAAC | 1553 | asAfsuugAfgGfAfggu gGfcCfcaggasasc | 2649 | антисмысловая | 23 |
- 145 037115
U GUAU GUUACUU CUUA GAGAG | 1554 | usgsuaugUfuAfCfUfu cuuagagagL96 | 2650 | смысловая | 21 |
CU CU CUAAGAAGUAAC AUACAUG | 1555 | esUfscucUfaAfGfaag uAfaCfauacasusc | 2651 | антисмысловая | 23 |
GUAU GUUACUU CUUAG AGAGA | 1556 | gsusauguUfaCfUfUfc uuagagagaL96 | 2652 | смысловая | 21 |
U CU CU CUAAGAAGUAA CAUACAU | 1557 | usCfsucuCfuAfAfgaa gUfaAfcauacsasu | 2653 | антисмысловая | 23 |
AGGAU GUAU GUUACUU CUUAG | 1558 | asgsgaugUfaUfGfUfu acuucuuagL96 | 2654 | смысловая | 21 |
CUAAGAAGUAACAUAC AUCCUAA | 1559 | esUfsaagAfaGfUfaac aUfaCfauccusasa | 2655 | антисмысловая | 23 |
UAGGAU GUAU GUUACU UCUUA | 1560 | usasggauGfuAfUfGfu uacuucuuaL96 | 2656 | смысловая | 21 |
UAAGAAGUAACAUACA UCCUAAA | 1561 | usAfsagaAfgUfAfаса uAfcAfuccuasasa | 2657 | антисмысловая | 23 |
AAAUGUUUUAGGAUGU AU GUU | 1562 | asasauguUfuUfAfGfg auguauguuL96 | 2658 | смысловая | 21 |
AACAUACAU C CUAAAA CAUUUGG | 1563 | asAfscauAfcAfUfccu aAfaAfcauuusgsg | 2659 | антисмысловая | 23 |
AAUGUUUUAGGAUGUA UGUUA | 1564 | asasuguuUfuAfGfGfa uguauguuaL96 | 2660 | смысловая | 21 |
UAACAUACAU C CUAAA ACAUUUG | 1565 | usAfsacaUfaCfAfucc uAfaAfacauususg | 2661 | антисмысловая | 23 |
AUCCAAAUGUUUUAGG AU GUA | 1566 | asusccaaAfuGfUfUfu uaggauguaL96 | 2662 | смысловая | 21 |
UACAU C CUAAAACAUU UGGAUAU | 1567 | usAfscauCfcUfAfaaa cAfuUfuggausasu | 2663 | антисмысловая | 23 |
UAU C CAAAU GUUUUAG GAUGU | 1568 | usasuccaAfaUfGfUfu uuaggauguL96 | 2664 | смысловая | 21 |
ACAU C CUAAAACAUUU GGAUAUA | 1569 | asCfsaucCfuAfAfaac aUfuUfggauasusa | 2665 | антисмысловая | 23 |
AUGGGUGGCGGUAAUU GGUGA | 1570 | asusggguGfgCfGfGfu aauuggugaL96 | 2666 | смысловая | 21 |
UСACCAAUUACCGСCA CCCAUUC | 1571 | usCfsaccAfaUfUfacc gCfcAfcccaususc | 2667 | антисмысловая | 23 |
UGGGUGGCGGUAAUUG GUGAU | 1572 | usgsggugGfcGfGfUfa auuggugauL96 | 2668 | смысловая | 21 |
- 146 037115
AUCACCAAUUACCGCC ACCCAUU | 1573 | asUfseacCfaAfUfuac cGfcCfacccasusu | 2669 | антисмысловая | 23 |
UGGAAUGGGUGGCGGU AAUUG | 1574 | usgsgaauGfgGfUfGfg cgguaauugL96 | 2670 | смысловая | 21 |
CAAUUACCGССACСCA UUCCAAU | 1575 | csAf sauuAfcCfGfoca cCfcAfuuccasasu | 2671 | антисмысловая | 23 |
UUGGAAUGGGUGGCGG UAAUU | 1576 | ususggaaUfgGfGfUfg gcgguaauuL96 | 2672 | смысловая | 21 |
AAUUACCGССACСCAU UCCAAUU | 1577 | asAfsuuaCfcGfCfcac cCfaUfuccaasusu | 2673 | антисмысловая | 23 |
UUCAAAGUGUUGGUAA UGCCU | 1578 | ususcaaaGfuGfUfUfg guaaugccuL96 | 2674 | смысловая | 21 |
AGGCAUUACCAACACU UUGAACC | 1579 | asGfsgcaUfuAfCfcaa cAfcUfuugaascsc | 2675 | антисмысловая | 23 |
UCAAAGUGUUGGUAAU GCCUG | 1580 | uscsaaagUfgUfUfGfg uaaugccugL96 | 2676 | смысловая | 21 |
CAGGCAUUACCAACAC UUUGAAC | 1581 | csAfsggcAfuUfAfcca aCfaCfuuugasasc | 2677 | антисмысловая | 23 |
CAGGUUCAAAGUGUUG GUAAU | 1582 | csasgguuCfaAfAfGfu guugguaauL96 | 2678 | смысловая | 21 |
AUUACCAACACUUUGA ACCUGAG | 1583 | asUfsuacCfaAfCfacu uUfgAfaccugsasg | 2679 | антисмысловая | 23 |
UCAGGUUCAAAGUGUU GGUAA | 1584 | uscsagguUfcAfAfAfg uguugguaaL96 | 2680 | смысловая | 21 |
UUAC CAACACUUU GAA CCUGAGC | 1585 | usUfsaccAfaCfAfcuu uGfaAfccugasgsc | 2681 | антисмысловая | 23 |
С CAC CU C CU CAAUU GA AGAAG | 1586 | cscsaccuCfcUfCfAfa uugaagaagL96 | 2682 | смысловая | 21 |
CUUCUUCAAUUGAGGA GGUGGCC | 1587 | esUfsucuUfcAfAfuug aGfgAfgguggscsc | 2683 | антисмысловая | 23 |
CAC CU C CU CAAUU GAA GAAGU | 1588 | csasccucCfuCfAfAfu ugaagaaguL96 | 2684 | смысловая | 21 |
ACUUCUUCAAUUGAGG AGGUGGC | 1589 | asCfsuucUfuCfAfauu gAfgGfaggugsgsc | 2685 | антисмысловая | 23 |
UGGGCCACCUCCUCAA UUGAA | 1590 | usgsggccAfcCfUfCfc ucaauugaaL96 | 2686 | смысловая | 21 |
UUCAAUUGAGGAGGUG GCCCAGG | 1591 | usUfscaaUfuGfAfgga gGfuGfgcccasgsg | 2687 | антисмысловая | 23 |
- 147 037115
CUGGGCCACCUCCUCA AUUGA | 1592 | csusgggcCfaCfCfUfc cucaauugaL96 | 2688 | смысловая | 21 |
UCAAUUGAGGAGGUGG CCCAGGA | 1593 | usCfsaauUfgAfGfgag gUfgGfcccagsgsa | 2689 | антисмысловая | 23 |
GAGUGGGUGCCAGAAU GUGAA | 1594 | gsasguggGfuGfCfCfa gaaugugaaL96 | 2690 | смысловая | 21 |
UUCACAUUCUGGCACC CACUGAG | 1595 | usUfscacAfuUfCfugg cAfcCfcacucsasg | 2691 | антисмысловая | 23 |
AGUGGGUGCCAGAAUG UGAAA | 1596 | asgsugggUfgCfCfAfg aaugugaaaL96 | 2692 | смысловая | 21 |
UUUCACAUUCUGGCAC CCACUCA | 1597 | usUfsucaCfaUfUfcug gCfaCfccacuscsa | 2693 | антисмысловая | 23 |
CUCUGAGUGGGUGCCA GAAUG | 1598 | csuscugaGfuGfGfGfu gccagaaugL96 | 2694 | смысловая | 21 |
CAUUCUGGCACCCACU CAGAGCC | 1599 | csAfsuucUfgGfCfacc cAfcUfcagagscsc | 2695 | антисмысловая | 23 |
GCUCUGAGUGGGUGCC AGAAU | 1600 | gscsucugAfgUfGfGfg ugccagaauL96 | 2696 | смысловая | 21 |
AUUCUGGCACCCACUC AGAGCCA | 1601 | asUfsucuGfgCfAfccc aCfuCfagagescsa | 2697 | антисмысловая | 23 |
GCACUGAUGUUCUGAA AGCUC | 1602 | gscsacugAfuGfUfUfc ugaaagcucL96 | 2698 | смысловая | 21 |
GAGCUUUCAGAACAUC AGUGCCU | 1603 | gsAfsgcuUfuCfAfgaa cAfuCfagugcscsu | 2699 | антисмысловая | 23 |
CACU GAU GUU CU GAAA GCUCU | 1604 | csascugaUfgUfUfCfu gaaagcucuL96 | 2700 | смысловая | 21 |
AGAGCUUUCAGAACAU CAGUGCC | 1605 | asGfsagcUfuUfCfaga aCfaUfcagugscsc | 2701 | антисмысловая | 23 |
AAAGGCACUGAUGUUC UGAAA | 1606 | asasaggcAfcUfGfAfu guucugaaaL96 | 2702 | смысловая | 21 |
UUU CAGAACAU CAGU G CCUUUCC | 1607 | usUfsucaGfaAfCfauc aGfuGfccuuuscsc | 2703 | антисмысловая | 23 |
GAAAGGCACUGAUGUU CUGAA | 1608 | gsasaaggCfaCfUfGfa uguucugaaL96 | 2704 | смысловая | 21 |
UUCAGAACAUCAGUGC CUUUCCG | 1609 | usUfscagAfaCfAfuca gUfgCfcuuucscsg | 2705 | антисмысловая | 23 |
GGGAAGGUGGAAGUCU UCCUG | 1610 | gsgsgaagGfuGfGfAfa gucuuccugL96 | 2706 | смысловая | 21 |
- 148 037115
CAGGAAGACUUCCACC UUCCCUU | 1611 | csAfsggaAfgAfCfuuc cAfcCfuucccsusu | 2707 | антисмысловая | 23 |
GGAAGGUGGAAGUCUU CCUGG | 1612 | gsgsaaggUfgGfAfAfg ucuuccuggL96 | 2708 | смысловая | 21 |
СCAGGAAGACUUС САС CUUCCCU | 1613 | csCfsaggAfaGfAfcuu cCfaCfcuuccscsu | 2709 | антисмысловая | 23 |
GGAAGGGAAGGUGGAA GUCUU | 1614 | gsgsaaggGfaAfGfGfu ggaagucuuL96 | 2710 | смысловая | 21 |
AAGACUUCCACCUUCC CUUССАС | 1615 | asAfsgacUfuCfCfacc uUfcCfcuuccsasc | 2711 | антисмысловая | 23 |
UGGAAGGGAAGGUGGA AGUCU | 1616 | usgsgaagGfgAfAfGfg uggaagucuL96 | 2712 | смысловая | 21 |
AGACUU С САС CUU С С С UUCCACA | 1617 | asGfsacuUfcCfAfccu uCfcCfuuccascsa | 2713 | антисмысловая | 23 |
UGCUAAAUCAGUACUU ССААА | 1618 | usgscuaaAfuCfAfGfu acuuccaaaL96 | 2714 | смысловая | 21 |
UUUGGAAGUACUGAUU UAGCAUG | 1619 | usUfsuggAfaGfUfacu gAfuUfuagcasusg | 2715 | антисмысловая | 23 |
GCUAAAUCAGUACUUС CAAAG | 1620 | gscsuaaaUfcAfGfUfa cuuccaaagL96 | 2716 | смысловая | 21 |
CUUUGGAAGUACUGAU UUAGCAU | 1621 | csUfsuugGfaAfGfuac uGfaUfuuagcsasu | 2717 | антисмысловая | 23 |
AACAUGCUAAAUСAGU ACUUC | 1622 | asascaugCfuAfAfAfu caguacuucL96 | 2718 | смысловая | 21 |
GAAGUACUGAUUUAGC AUGUUGU | 1623 | gsAfsaguAfcUfGfauu uAfgCfauguusgsu | 2719 | антисмысловая | 23 |
СAACAUGCUAAAUСAG UACUU | 1624 | csasacauGfcUfAfAfa ucaguacuuL96 | 2720 | смысловая | 21 |
AAGUACUGAUUUAGCA UGUUGUU | 1625 | asAf sguaCfuGfAfuuu aGfcAfuguugsusu | 2721 | антисмысловая | 23 |
CCACAACUCAGGAUGA AAAAU | 1626 | cscsacaaCfuCfAfGfg augaaaaauL96 | 2722 | смысловая | 21 |
AUUUUUCAUCCUGAGU UGUGGCG | 1627 | asUfsuuuUfcAfUfccu gAfgUfuguggscsg | 2723 | антисмысловая | 23 |
СACAACUСAGGAUGAA AAAUU | 1628 | csascaacUfcAfGfGfa ugaaaaauuL96 | 2724 | смысловая | 21 |
AAUUUUUCAUСCUGAG UUGUGGC | 1629 | asAfsuuuUfuCfAfucc uGfaGfuugugsgsc | 2725 | антисмысловая | 23 |
- 149 037115
GCCGCCACAACUCAGG AUGAA | 1630 | gscscgccAfcAfAfCfu caggaugaaL96 | 2726 | смысловая | 21 |
UUCAUCCUGAGUUGUG GCGGCAG | 1631 | usUfscauCfcUfGfagu uGfuGfgcggcsasg | 2727 | антисмысловая | 23 |
UGCCGCCACAACUCAG GAU GA | 1632 | usgsccgcCfaCfAfAfc ucaggaugaL96 | 2728 | смысловая | 21 |
UCAUCCUGAGUUGUGG CGGCAGU | 1633 | usCfsaucCfuGfAfguu gUfgGfcggcasgsu | 2729 | антисмысловая | 23 |
GCAACCGUCUGGAUGA UGUGC | 1634 | gscsaaccGfuCfUfGfg augaugugcL96 | 2730 | смысловая | 21 |
G GAGAU CAU С CAGAC G GUUGCCC | 1635 | gsCfsacaUfcAfUfcca gAfcGfguugcscsc | 2731 | антисмысловая | 23 |
CAACCGUCUGGAUGAU GUGCG | 1636 | csasaccgUfcUfGfGfa ugaugugcgL96 | 2732 | смысловая | 21 |
C G CACAU CAU С CAGAC GGUUGCC | 1637 | csGfscacAfuCfAfucc aGfaCfgguugscsc | 2733 | антисмысловая | 23 |
CUGGGCAACCGUCUGG AU GAU | 1638 | csusgggcAfaCfCfGfu cuggaugauL96 | 2734 | смысловая | 21 |
AU CAU CCAGACGGUUG CCCAGGU | 1639 | asUfscauCfcAfGfacg gUfuGfcccagsgsu | 2735 | антисмысловая | 23 |
CCUGGGCAACCGUCUG GAU GA | 1640 | cscsugggCfaAfCfCfg ucuggaugaL96 | 2736 | смысловая | 21 |
UCAUCCAGACGGUUGC CCAGGUA | 1641 | usCfsaucCfaGfAfegg uUfgCfccaggsusa | 2737 | антисмысловая | 23 |
GCAAAUGAUGAAGAAA CUUUG | 1642 | gscsaaauGfaUfGfAfa gaaacuuugL96 | 2738 | смысловая | 21 |
CAAAGUUUCUUCAUCA UUUGCCC | 1643 | csAfsaagUfuUfCfuuc aUfcAfuuugcscsc | 2739 | антисмысловая | 23 |
CAAAU GAU GAAGAAAC UUUGG | 1644 | csasaaugAfuGfAfAfg aaacuuuggL96 | 2740 | смысловая | 21 |
CCAAAGUUUCUUCAUC AUUUGCC | 1645 | csCfsaaaGfuUfUfcuu cAfuCfauuugscsc | 2741 | антисмысловая | 23 |
UGGGGCAAAUGAUGAA GAAAC | 1646 | usgsgggcAfaAfUfGfa ugaagaaacL96 | 2742 | смысловая | 21 |
GUUUCUUCAUCAUUUG CCCCAGA | 1647 | gsUfsuucUfuCfAfuca uUfuGfccccasgsa | 2743 | антисмысловая | 23 |
CUGGGGCAAAUGAUGA AGAAA | 1648 | csusggggCfaAfAfUfg augaagaaaL96 | 2744 | смысловая | 21 |
- 150 037115
UUUCUUCAUCAUUUGC CCCAGAC | 1649 | usUfsucuUfcAfUfcau uUfgCfcccagsasc | 2745 | антисмысловая | 23 |
CCAAGGCUGUGUUUGU GGGGA | 1650 | cscsaaggCfuGfUfGfu uuguggggaL96 | 2746 | смысловая | 21 |
UССССACAAAGACAGC CUUGGCG | 1651 | usCfscccAfcAfAfаса cAfgCfcuuggscsg | 2747 | антисмысловая | 23 |
CAAGGCUGUGUUUGUG GGGAG | 1652 | csasaggcUfgUfGfUfu uguggggagL96 | 2748 | смысловая | 21 |
CU С С C CACAAACACAG CCUUGGC | 1653 | csUfscccCfaCfAfaac aCfaGfccuugsgsc | 2749 | антисмысловая | 23 |
GGCGCCAAGGCUGUGU UUGUG | 1654 | gsgscgccAfaGfGfCfu guguuugugL96 | 2750 | смысловая | 21 |
CACAAACACAGCCUUG GCGCCAA | 1655 | csAfscaaAfcAfCfage cUfuGfgcgccsasa | 2751 | антисмысловая | 23 |
UGGCGCCAAGGCUGUG UUUGU | 1656 | usgsgcgcCfaAfGfGfc uguguuuguL96 | 2752 | смысловая | 21 |
ACAAACACAGCCUUGG CGCCAAG | 1657 | asCfsaaaCfaCfAfgee uUfgGfcgccasasg | 2753 | антисмысловая | 23 |
ACUGCCGCCACAACUC AGGAU | 1658 | asesugeeGfcCfAfCfa acucaggauL96 | 2754 | смысловая | 21 |
AUCCUGAGUUGUGGCG GCAGUUU | 1659 | asUfsccuGfaGfUfugu gGfcGfgcagususu | 2755 | антисмысловая | 23 |
CUGCCGCCACAACUCA GGAUG | 1660 | csusgccgCfcAfCfAfa cucaggaugL96 | 2756 | смысловая | 21 |
CAUCCUGAGUUGUGGC GGCAGUU | 1661 | csAf succUfgAfGfuug uGfgCfggcagsusu | 2757 | антисмысловая | 23 |
UCAAACUGCCGCCACA ACUCA | 1662 | uscsaaacUfgCfCfGfc cacaacucaL96 | 2758 | смысловая | 21 |
UGAGUUGUGGCGGCAG UUUGAAU | 1663 | usGfsaguUfgUfGfgcg gCfaGfuuugasasu | 2759 | антисмысловая | 23 |
UUCAAACUGCCGCCAC AACUC | 1664 | ususcaaaCfuGfCfCfg ccacaacucL96 | 2760 | смысловая | 21 |
GAGUUGUGGCGGCAGU UUGAAUC | 1665 | gsAfsguuGfuGfGfegg cAfgUfuugaasusc | 2761 | антисмысловая | 23 |
GGGAAGAUAUCAAAUG GCUGA | 1666 | gsgsgaagAfuAfUfCfa aauggcugaL96 | 2762 | смысловая | 21 |
U CAGC CAUUU GAUAU C UUCCCAG | 1667 | usCfsagcCfaUfUfuga uAfuCfuucccsasg | 2763 | антисмысловая | 23 |
- 151 037115
GGAAGAUAUCAAAUGG CUGAG | 1668 | gsgsaagaUfaUfCfAfa auggcugagL96 | 2764 | смысловая | 21 |
CU CAGC CAUUU GAUAU CUUCCCA | 1669 | csUfscagCfcAfUfuug aUfaUfcuuccscsa | 2765 | антисмысловая | 23 |
AGCUGGGAAGAUAUCA AAUGG | 1670 | asgscuggGfaAfGfAfu aucaaauggL96 | 2766 | смысловая | 21 |
C CAUUU GAU AU CUU С C CAGCUGA | 1671 | csCfsauuUfgAfUfauc uUfcCfcagcusgsa | 2767 | антисмысловая | 23 |
CAGCUGGGAAGAUAUC AAAUG | 1672 | csasgcugGfgAfAfGfa uaucaaaugL96 | 2768 | смысловая | 21 |
CAUUU GAU AU CUU С С C AGCUGAU | 1673 | csAfsuuuGfaUfAfucu uCfcCfagcugsasu | 2769 | антисмысловая | 23 |
AAU CAGUACUU С CAAA GUCUA | 1674 | asasucagUfaCfUfUfc caaagucuaL96 | 2770 | смысловая | 21 |
UAGACUUUGGAAGUAC UGAUUUA | 1675 | usAfsgacUfuUfGfgaa gUfaCfugauususa | 2771 | антисмысловая | 23 |
AU CAGUACUU C CAAAG UCUAU | 1676 | asuscaguAfcUfUfCfc aaagucuauL96 | 2772 | смысловая | 21 |
AUAGACUUUGGAAGUA CUGAUUU | 1677 | asUfsagaCfuUfUfgga aGfuAfcugaususu | 2773 | антисмысловая | 23 |
GCUAAAUCAGUACUUC CAAAG | 1678 | gscsuaaaUfcAfGfUfa cuuccaaagL96 | 2774 | смысловая | 21 |
CUUUGGAAGUACUGAU UUAGCAU | 1679 | csUfsuugGfaAfGfuac uGfaUfuuagcsasu | 2775 | антисмысловая | 23 |
UGCUAAAUCAGUACUU CCAAA | 1680 | usgscuaaAfuCfAfGfu acuuccaaaL96 | 2776 | смысловая | 21 |
UUUGGAAGUACUGAUU UAGCAUG | 1681 | usUfsuggAfaGfUfacu gAfuUfuagcasusg | 2777 | антисмысловая | 23 |
UCAGCAUGCCAAUAUG UGUGG | 1682 | uscsagcaUfgCfCfAfa uauguguggL9 6 | 2778 | смысловая | 21 |
CCACACAUAUUGGCAU GCUGACC | 1683 | csCfsacaCfaUfAfuug gCfaUfgcugascsc | 2779 | антисмысловая | 23 |
CAGCAUGCCAAUAUGU GUGGG | 1684 | csasgcauGfcCfAfAfu augugugggL96 | 2780 | смысловая | 21 |
CCCACACAUAUUGGCA UGCUGAC | 1685 | csCfscacAfcAfUfauu gGfcAfugcugsasc | 2781 | антисмысловая | 23 |
AGGGUCAGCAUGCCAA UAUGU | 1686 | asgsggucAfgCfAfUfg ccaauauguL96 | 2782 | смысловая | 21 |
- 152 037115
ACAUAUUGGCAUGCUG ACCCUCU | 1687 | asCfsauaUfuGfGfcau gCfuGfacccuscsu | 2783 | антисмысловая | 23 |
GAGGGUCAGCAUGCCA AU AUG | 1688 | gsasggguCfaGfCfAfu gccaauaugL96 | 2784 | смысловая | 21 |
CAUAUUGGCAUGCUGA CCCUCUG | 1689 | csAfsuauUfgGfCfaug cUfgAfcccucsusg | 2785 | антисмысловая | 23 |
GCAUAUGUGGCUAAAG CAAUA | 1690 | gscsauauGfuGfGfCfu aaagcaauaL96 | 2786 | смысловая | 21 |
UAUUGCUUUAGCCACA UAUGCAG | 1691 | usAfsuugCfuUfUfage cAfcAfuaugcsasg | 2787 | антисмысловая | 23 |
CAUAUGUGGCUAAAGC AAUAG | 1692 | csasuaugUfgGfCfUfa aagcaauagL96 | 2788 | смысловая | 21 |
CUAUUGCUUUAGCCAC AUAUGCA | 1693 | esUfsauuGfeUfUfuag cCfaCfauaugscsa | 2789 | антисмысловая | 23 |
UGCUGCAUAUGUGGCU AAAGC | 1694 | usgscugcAfuAfUfGfu ggcuaaagcL96 | 2790 | смысловая | 21 |
GCUUUAGCCACAUAUG CAGCAAG | 1695 | gsCfsuuuAfgCfCfаса uAfuGfcagcasasg | 2791 | антисмысловая | 23 |
UUGCUGCAUAUGUGGC UAAAG | 1696 | ususgcugCfaUfAfUfg uggcuaaagL96 | 2792 | смысловая | 21 |
CUUUAGCCACAUAUGC AGCAAGU | 1697 | esUfsuuaGfcCfAfcau aUfgCfagcaasgsu | 2793 | антисмысловая | 23 |
AAAU GAU GAAGAAACU UUGGC | 1698 | asasaugaUfgAfAfGfa aacuuuggcL96 | 2794 | смысловая | 21 |
GCCAAAGUUUCUUCAU CAUUUGC | 1699 | gsCfscaaAfgUfUfucu uCfaUfcauuusgsc | 2795 | антисмысловая | 23 |
AAU GAU GAAGAAACUU UGGCU | 1700 | asasugauGfaAfGfAfa acuuuggcuL96 | 2796 | смысловая | 21 |
AGCCAAAGUUUCUUCA UCAUUUG | 1701 | asGfsccaAfaGfUfuuc uUfcAfucauususg | 2797 | антисмысловая | 23 |
GGGCAAAUGAUGAAGA AACUU | 1702 | gsgsgcaaAfuGfAfUfg aagaaacuuL96 | 2798 | смысловая | 21 |
AAGUUUCUUCAUCAUU UGCCCCA | 1703 | asAfsguuUfcUfUfcau cAfuUfugcccscsa | 2799 | антисмысловая | 23 |
GGGGCAAAUGAUGAAG AAACU | 1704 | gsgsggcaAfaUfGfAfu gaagaaacuL96 | 2800 | смысловая | 21 |
AGUUUCUUCAUCAUUU GCCCCAG | 1705 | asGfsuuuCfuUfCfauc aUfuUfgccccsasg | 2801 | антисмысловая | 23 |
- 153 037115
GAGAUACUAAAGGAAG AAUUC | 1706 | gsasgauaCfuAfAfAfg gaagaauucL96 | 2802 | смысловая | 21 |
GAAUUCUUCCUUUAGU AUCUCGA | 1707 | gsAfsauuCfuUfCfcuu uAfgUfaucucsgsa | 2803 | антисмысловая | 23 |
AGAUACUAAAGGAAGA AUUCC | 1708 | asgsauacUfaAfAfGfg aagaauuccL96 | 2804 | смысловая | 21 |
GGAAUUCUUCCUUUAG UAUCUCG | 1709 | gsGfsaauUfcUfUfccu uUfaGfuaucuscsg | 2805 | антисмысловая | 23 |
C CU C GAGAUACUAAAG GAAGA | 1710 | cscsucgaGfaUfAfCfu aaaggaagaL96 | 2806 | смысловая | 21 |
UCUUCCUUUAGUAUCU CGAGGAC | 1711 | usCfsuucCfuUfUfagu aUfcUfcgaggsasc | 2807 | антисмысловая | 23 |
U C CU C GAGAUACUAAA GGAAG | 1712 | us cs cucgAfgAfU fAfc uaaaggaagL96 | 2808 | смысловая | 21 |
CUUCCUUUAGUAUCUC GAGGACA | 1713 | csUfsuccUfuUfAfgua uCfuCfgaggascsa | 2809 | антисмысловая | 23 |
ACAACUCAGGAUGAAA AAUUU | 1714 | ascsaacuCfaGfGfAfu gaaaaauuuL96 | 2810 | смысловая | 21 |
AAAUUUUU CAU C CU GA GUUGUGG | 1715 | asAfsauuUfuUfCfauc cUfgAfguugusgsg | 2811 | антисмысловая | 23 |
CAACUCAGGAUGAAAA AUUUU | 1716 | csasacucAfgGfAfUfg aaaaauuuuL96 | 2812 | смысловая | 21 |
AAAAUUUUU CAU C CU G AGUUGUG | 1717 | asAfsaauUfuUfUfcau cCfuGfaguugsusg | 2813 | антисмысловая | 23 |
CGCCACAACUCAGGAU GAAAA | 1718 | csgsccacAfaCfUfCfa ggaugaaaaL96 | 2814 | смысловая | 21 |
UUUUCAUCCUGAGUUG UGGCGGC | 1719 | usUfsuucAfuCfCfuga gUfuGfuggcgsgsc | 2815 | антисмысловая | 23 |
CCGCCACAACUCAGGA UGAAA | 1720 | cscsgccaCfaAfCfUfc aggaugaaaL96 | 2816 | смысловая | 21 |
UUUCAUCCUGAGUUGU GGCGGCA | 1721 | usUfsucaUfcCfUfgag uUfgUfggcggscsa | 2817 | антисмысловая | 23 |
AGGGAAGGUGGAAGUC UUCCU | 1722 | asgsggaaGfgUfGfGfa agucuuccuL96 | 2818 | смысловая | 21 |
AGGAAGACUUCCACCU UCCCUUC | 1723 | asGfsgaaGfaCfUfucc aCfcUfucccususc | 2819 | антисмысловая | 23 |
GGGAAGGUGGAAGUCU UCCUG | 1724 | gsgsgaagGfuGfGfAfa gucuuccugL96 | 2820 | смысловая | 21 |
- 154 037115
CAGGAAGACUUCCACC UUCCCUU | 1725 | csAfsggaAfgAfCfuuc cAfcCfuucccsusu | 2821 | антисмысловая | 23 |
UGGAAGGGAAGGUGGA AGUCU | 1726 | usgsgaagGfgAfAfGfg uggaagucuL96 | 2822 | смысловая | 21 |
AGACUU C CAC CUU С С C UUCCACA | 1727 | asGfsacuUfcCfAfecu uCfcCfuuccascsa | 2823 | антисмысловая | 23 |
GUGGAAGGGAAGGUGG AAGUC | 1728 | gsusggaaGfgGfAfAfg guggaagucL96 | 2824 | смысловая | 21 |
GACUUCCACCUUCCCU UCCACAG | 1729 | gsAfscuuCfcAfCfcuu cCfcUfuccacsasg | 2825 | антисмысловая | 23 |
GGCGAGCUUGCCACUG UGAGA | 1730 | gsgscgagCfuUfGfCfc acugugagaL96 | 2826 | смысловая | 21 |
UCUCACAGUGGCAAGC UCGCCGU | 1731 | usCfsucaCfaGfUfggc aAfgCfucgccsgsu | 2827 | антисмысловая | 23 |
GCGAGCUUGCCACUGU GAGAG | 1732 | gscsgagcUfuGfCfCfa cugugagagL96 | 2828 | смысловая | 21 |
CUCUCACAGUGGCAAG CUCGCCG | 1733 | csUfscucAfcAfGfugg cAfaGfcucgcscsg | 2829 | антисмысловая | 23 |
GGACGGCGAGCUUGCC ACUGU | 1734 | gsgsacggCfgAfGfCfu ugccacuguL96 | 2830 | смысловая | 21 |
ACAGUGGCAAGCUCGC CGUCCAC | 1735 | asCfsaguGfgCfAfage uCfgCfcguccsasc | 2831 | антисмысловая | 23 |
UGGACGGCGAGCUUGC CACUG | 1736 | usgsgaegGfcGfAfGfc uugccacugL96 | 2832 | смысловая | 21 |
CAGUGGCAAGCUCGCC GUCCACA | 1737 | csAfsgugGfcAfAfgcu cGfcCfguccascsa | 2833 | антисмысловая | 23 |
AUGUGCGUAACAGAUU CAAAC | 1738 | asusgugeGfuAfAfCfa gauucaaacL96 | 2834 | смысловая | 21 |
GUUUGAAUCUGUUACG CACAUCA | 1739 | gsUfsuugAfaUfCfugu uAfeGfeacausesa | 2835 | антисмысловая | 23 |
U GU G C GUAACAGAUU C AAACU | 1740 | usgsugegUfaAfCfAfg auucaaacuL96 | 2836 | смысловая | 21 |
AGUUUGAAUCUGUUAC GCACAUC | 1741 | asGfsuuuGfaAfUfcug uUfaCfgcacasusc | 2837 | антисмысловая | 23 |
GAUGAUGUGCGUAACA GAUUC | 1742 | gsasugauGfuGfCfGfu aacagauucL96 | 2838 | смысловая | 21 |
GAAUCUGUUACGCACA U CAU CCA | 1743 | gsAfsaucUfgUfUfacg cAfcAfucaucscsa | 2839 | антисмысловая | 23 |
- 155 037115
GGAUGAUGUGCGUAAC AGAUU | 1744 | gsgsaugaUfgUfGfCfg uaacagauuL96 | 2840 | смысловая | 21 |
AAUCUGUUACGCACAU CAUCCAG | 1745 | asAf sucuGfuUfAfege aCfaUfcauccsasg | 2841 | антисмысловая | 23 |
GGGUCAGCAUGCCAAU AUGUG | 1746 | gsgsgucaGfcAfUfGfc caauaugugL96 | 2842 | смысловая | 21 |
CACAUAUUGGCAUGCU GACCCUC | 1747 | csAf scauAfuUfGfgca uGfcUfgacccsusc | 2843 | антисмысловая | 23 |
GGUCAGCAUGCCAAUA UGUGU | 1748 | gsgsucagCfaUfGfCfc aauauguguL96 | 2844 | смысловая | 21 |
ACACAUAUUGGCAUGC UGACCCU | 1749 | asCfsacaUfaUfUfggc aUfgCfugaccscsu | 2845 | антисмысловая | 23 |
CAGAGGGUCAGCAUGC CAAUA | 1750 | csasgaggGfuCfAfGfc augccaauaL96 | 2846 | смысловая | 21 |
UAUUGGCAUGCUGACC CUCUGUC | 1751 | usAf suugGfcAfUfgcu gAfcCfcucugsusc | 2847 | антисмысловая | 23 |
ACAGAGGGUCAGCAUG CCAAU | 1752 | ascsagagGfgUfCfAfg caugccaauL96 | 2848 | смысловая | 21 |
AUUGGCAUGCUGACCC UCUGUCC | 1753 | asUfsuggCfaUfGfcug aCfcCfucuguscsc | 2849 | антисмысловая | 23 |
GCUUGAAUGGGAUCUU GGUGU | 1754 | gscsuugaAfuGfGfGfa ucuugguguL96 | 2850 | смысловая | 21 |
ACAC CAAGAU С C CAUU CAAGCCA | 1755 | asCfsaccAfaGfAfucc cAfuUfcaagcscsa | 2851 | антисмысловая | 23 |
CUUGAAUGGGAUCUUG GUGUC | 1756 | esusugaaUfgGfGfAfu cuuggugucL96 | 2852 | смысловая | 21 |
GACAC CAAGAU С C CAU UCAAGCC | 1757 | gsAf scacCfaAfGfauc cCfaUfucaagscsc | 2853 | антисмысловая | 23 |
CAUGGCUUGAAUGGGA UCUUG | 1758 | csasuggcUfuGfAfAfu gggaucuugL96 | 2854 | смысловая | 21 |
CAAGAU С C CAUU CAAG CCAUGUU | 1759 | csAf sagaUfcCfCfauu cAfaGfccaugsusu | 2855 | антисмысловая | 23 |
ACAUGGCUUGAAUGGG AU CUU | 1760 | ascsauggCfuUfGfAfa ugggaucuuL96 | 2856 | смысловая | 21 |
AAGAUСCCAUUCAAGC CAUGUUU | 1761 | asAfsgauCfcCfAfuuc aAfgCfcaugususu | 2857 | антисмысловая | 23 |
UCAAAUGGCUGAGAAG ACUGA | 1762 | uscsaaauGfgCfUfGfa gaagacugaL96 | 2858 | смысловая | 21 |
- 156 037115
U CAGU CUU CU CAGC CA UUUGAUA | 1763 | usCfsaguCfuUfCfuca gCfcAfuuugasusa | 2859 | антисмысловая | 23 |
CAAAUGGCUGAGAAGA CUGAC | 1764 | csasaaugGfcUfGfAfg aagacugacL96 | 2860 | смысловая | 21 |
GU CAGU CUU CU CAGC C AUUUGAU | 1765 | gsUfscagUfcUfUfcue aGfcCfauuugsasu | 2861 | антисмысловая | 23 |
GAUAUCAAAUGGCUGA GAAGA | 1766 | gsasuaucAfaAfUfGfg cugagaagaL96 | 2862 | смысловая | 21 |
UCUUCUCAGCCAUUUG AU AU CUU | 1767 | usCfsuucUfcAfGfcca uUfuGfauauesusu | 2863 | антисмысловая | 23 |
AGAUAUCAAAUGGCUG AGAAG | 1768 | asgsauauCfaAfAfUfg gcugagaagL96 | 2864 | смысловая | 21 |
CUUCUCAGCCAUUUGA UAUCUUC | 1769 | esUfsucuCfaGfCfcau uUfgAfuaucususc | 2865 | антисмысловая | 23 |
GAAAGU CAU C GACAAG ACAUU | 1770 | gsasaaguCfaUfCfGfa caagacauuL96 | 2866 | смысловая | 21 |
AAU GU CUU GU C GAU GA CUUUCAC | 1771 | asAfsuguCfuUfGfucg aUfgAfcuuucsasc | 2867 | антисмысловая | 23 |
AAAGU CAU C GACAAGA CAUUG | 1772 | asasagucAfuCfGfAfc aagacauugL96 | 2868 | смысловая | 21 |
CAAU GU CUU GU C GAU G ACUUUCA | 1773 | csAfsaugUfcUfUfguc gAfuGfacuuuscsa | 2869 | антисмысловая | 23 |
AU GU GAAAGU CAU C GA CAAGA | 1774 | asusgugaAfaGfUfCfa ucgacaagaL96 | 2870 | смысловая | 21 |
UCUUGUCGAUGACUUU CACAUUC | 1775 | usCfsuugUfcGfAfuga cUfuUfcacaususc | 2871 | антисмысловая | 23 |
AAU GU GAAAGU CAU C G ACAAG | 1776 | asasugugAfaAfGfUfc aucgacaagL96 | 2872 | смысловая | 21 |
CUUGUCGAUGACUUUC ACAUUCU | 1777 | esUfsuguCfgAfUfgac uUfuCfacauuscsu | 2873 | антисмысловая | 23 |
GGCUAAUUUGUAUCAA UGAUU | 1778 | gsgscuaaUfuUfGfUfa ucaaugauuL96 | 2874 | смысловая | 21 |
AAU CAUU GAUACAAAU UAGCCGG | 1779 | asAf sucaUfuGfAfuac aAfaUfuagccsgsg | 2875 | антисмысловая | 23 |
GCUAAUUUGUAUCAAU GAUUA | 1780 | gscsuaauUfuGfUfAfu caaugauuaL96 | 2876 | смысловая | 21 |
UAAU CAUU GAUACAAA UUAGCCG | 1781 | usAfsaucAfuUfGfaua cAfaAfuuagcscsg | 2877 | антисмысловая | 23 |
- 157 037115
CCCCGGCUAAUUUGUA U C AAU | 1782 | cscsccggCfuAfAfUfu uguaucaauL96 | 2878 | смысловая | 21 |
AUUGAUACAAAUUAGC CGGGGGA | 1783 | asUfsugaUfaCfAfaau uAfgCfcggggsgsa | 2879 | антисмысловая | 23 |
CCCCCGGCUAAUUUGU AUCAA | 1784 | cscscccgGfcUfAfAfu uuguaucaaL96 | 2880 | смысловая | 21 |
UUGAUACAAAUUAGCC GGGGGAG | 1785 | usUfsgauAfcAfAfauu aGfcCfgggggsasg | 2881 | антисмысловая | 23 |
U GU C GACUU CU GUUUU AGGAC | 1786 | usgsucgaCfuUfCfUfg uuuuaggacL96 | 2882 | смысловая | 21 |
GU C CUAAAACAGAAGU CGACAGA | 1787 | gsUfsccuAfaAfAfcag aAfgUfcgacasgsa | 2883 | антисмысловая | 23 |
GU C GACUU CU GUUUUA GGACA | 1788 | gsuscgacUfuCfUfGfu uuuaggacaL96 | 2884 | смысловая | 21 |
U GU C CUAAAACAGAAG UCGACAG | 1789 | usGf succUfaAfAfаса gAf aGfucgacsasg | 2885 | антисмысловая | 23 |
GAUCUGUCGACUUCUG UUUUA | 1790 | gsasucugUfcGfAfCfu ucuguuuuaL96 | 2886 | смысловая | 21 |
UAAAACAGAAGU C GAC AGAUCUG | 1791 | usAf saaaCfaGfAfagu cGfaCfagaucsusg | 2887 | антисмысловая | 23 |
AGAUCUGUCGACUUCU GUUUU | 1792 | asgsaucuGfuCfGfAfc uucuguuuuL96 | 2888 | смысловая | 21 |
AAAACAGAAGU C GACA GAUCUGU | 1793 | asAf saacAfgAfAfguc gAfcAfgaucusgsu | 2889 | антисмысловая | 23 |
С C GAGAAGU CAC CAAG AAGCU | 1794 | cscsgagaAfgUfCfAfc caagaagcuL96 | 2890 | смысловая | 21 |
AGCUUCUUGGUGACUU CUCGGUC | 1795 | asGfscuuCfuUfGfgug aCfuUfcucggsusc | 2891 | антисмысловая | 23 |
C GAGAAGU CAC CAAGA AGCUA | 1796 | csgsagaaGfuCfAfCfc aagaagcuaL96 | 2892 | смысловая | 21 |
UAGCUUCUUGGUGACU UCUCGGU | 1797 | usAf sgcuUfcUfUfggu gAfcUfucucgsgsu | 2893 | антисмысловая | 23 |
AGGACCGAGAAGUCAC CAAGA | 1798 | asgsgaccGfaGfAfAfg ucaccaagaL96 | 2894 | смысловая | 21 |
UCUUGGUGACUUCUCG GUCCUUG | 1799 | usCfsuugGfuGfAfcuu cUfcGfguccususg | 2895 | антисмысловая | 23 |
AAGGACCGAGAAGUCA CCAAG | 1800 | asasggacCfgAfGfAfa gucaccaagL96 | 2896 | смысловая | 21 |
- 158 037115
CUUGGUGACUUCUCGG UCCUUGU | 1801 | csUfsuggUfgAfCfuuc uCfgGfuccuusgsu | 2897 | антисмысловая | 23 |
AAACAUGGCUUGAAUG GGAUC | 1802 | asasacauGfgCfUfUfg aaugggaucL96 | 2898 | смысловая | 21 |
GAUСCCAUUCAAGCCA UGUUUAA | 1803 | gsAfsuccCfaUfUfcaa gCfcAfuguuusasa | 2899 | антисмысловая | 23 |
AACAUGGCUUGAAUGG GAUCU | 1804 | asascaugGfcUfUfGfa augggaucuL96 | 2900 | смысловая | 21 |
AGAUССCAUUCAAGСC AUGUUUA | 1805 | asGfsaucCfcAfUfuca aGfcCfauguususa | 2901 | антисмысловая | 23 |
UGUUAAACAUGGCUUG AAUGG | 1806 | usgsuuaaAfcAfUfGfg cuugaauggL96 | 2902 | смысловая | 21 |
CCAUUCAAGCCAUGUU UAACAGC | 1807 | csCfsauuCfaAfGfcca uGfuUfuaacasgsc | 2903 | антисмысловая | 23 |
CUGUUAAACAUGGCUU GAAUG | 1808 | csusguuaAfaCfAfUfg gcuugaaugL96 | 2904 | смысловая | 21 |
CAUUCAAGCCAUGUUU AACAGCC | 1809 | csAfsuucAfaGfCfcau gUfuUfaacagscsc | 2905 | антисмысловая | 23 |
GACUUGCUGCAUAUGU GGCUA | 1810 | gsascuugCfuGfCfAfu auguggcuaL96 | 2906 | смысловая | 21 |
UAGCCACAUAUGCAGC AAGUCCA | 1811 | usAfsgccAfcAfUfaug cAfgCfaagucscsa | 2907 | антисмысловая | 23 |
ACUUGCUGCAUAUGUG GCUAA | 1812 | ascsuugcUfgCfAfUfa uguggcuaaL96 | 2908 | смысловая | 21 |
UUAGCCACAUAUGCAG CAAGUCC | 1813 | usUfsagcCfaCfAfuau gCfaGfcaaguscsc | 2909 | антисмысловая | 23 |
AGUGGACUUGCUGCAU AUGUG | 1814 | asgsuggaCfuUfGfCfu gcauaugugL96 | 2910 | смысловая | 21 |
CACAUAUGCAGCAAGU CCACUGU | 1815 | csAfscauAfuGfCfage aAfgUfccacusgsu | 2911 | антисмысловая | 23 |
CAGUGGACUUGCUGCA UAUGU | 1816 | csasguggAfcUfUfGfc ugcauauguL96 | 2912 | смысловая | 21 |
ACAUAUGCAGCAAGUC CACUGUC | 1817 | asCfsauaUfgCfAfgca aGfuCfcacugsusc | 2913 | антисмысловая | 23 |
UAAAU CAGUACUU C CA AAGUC | 1818 | usasaaucAfgUfAfCfu uccaaagucL96 | 2914 | смысловая | 21 |
GACUUUGGAAGUACUG AUUUAGC | 1819 | gsAf scuuUfgGfAfagu aCfuGfauuuasgsc | 2915 | антисмысловая | 23 |
- 159 037115
AAAU CAGUACUU С CAA AGUCU | 1820 | asasaucaGfuAfCfUfu ccaaagucuL96 | 2916 | смысловая | 21 |
AGACUUUGGAAGUACU GAUUUAG | 1821 | asGfsacuUfuGfGfaag uAfcUfgauuusasg | 2917 | антисмысловая | 23 |
AU GCUAAAUCAGUACU UCCAA | 1822 | asusgeuaAfaUfCfAfg uacuuccaaL96 | 2918 | смысловая | 21 |
UUGGAAGUACUGAUUU AGCAUGU | 1823 | usUfsggaAfgUfAfcug aUfuUfagcausgsu | 2919 | антисмысловая | 23 |
CAUGCUAAAUCAGUAC UUCCA | 1824 | csasugcuAfaAfUfCfa guacuuccaL96 | 2920 | смысловая | 21 |
UGGAAGUACUGAUUUA GCAUGUU | 1825 | usGfsgaaGfuAfCfuga uUfuAfgeaugsusu | 2921 | антисмысловая | 23 |
U C CU CAAUU GAAGAAG UGGCG | 1826 | uscscucaAfuUfGfAfa gaaguggcgL96 | 2922 | смысловая | 21 |
CGCCACUUCUUCAAUU GAGGAGG | 1827 | esGfsccaCfuUfCfuuc aAfuUfgaggasgsg | 2923 | антисмысловая | 23 |
C CU CAAUU GAAGAAGU GGCGG | 1828 | cscsucaaUfuGfAfAfg aaguggcggL96 | 2924 | смысловая | 21 |
CCGCCACUUCUUCAAU UGAGGAG | 1829 | csCfsgccAfcUfUfcuu cAfaUfugaggsasg | 2925 | антисмысловая | 23 |
CAC CU C CU CAAUU GAA GAAGU | 1830 | csasccucCfuCfAfAfu ugaagaaguL96 | 2926 | смысловая | 21 |
ACUUCUUCAAUUGAGG AGGUGGC | 1831 | asCfsuucUfuCfAfauu gAfgGfaggugsgsc | 2927 | антисмысловая | 23 |
C CAC CU C CU CAAUU GA AGAAG | 1832 | cscsaccuCfcUfCfAfa uugaagaagL96 | 2928 | смысловая | 21 |
CUUCUUCAAUUGAGGA GGUGGCC | 1833 | esUfsucuUfcAfAfuug aGfgAfgguggscsc | 2929 | антисмысловая | 23 |
CAAGAU GU C CU C GAGA UACUA | 1834 | csasagauGfuCfCfUfc gagauacuaL96 | 2930 | смысловая | 21 |
UAGUAU CU C GAG GACA UCUUGAA | 1835 | usAfsguaUfcUfCfgag gAfcAfucuugsasa | 2931 | антисмысловая | 23 |
AAGAU GU C CU C GAGAU ACUAA | 1836 | asasgaugUfcCfUfCfg agauacuaaL96 | 2932 | смысловая | 21 |
UUAGUAU CUC GAGGAC AUCUUGA | 1837 | usUfsaguAfuCfUfega gGfaCfaucuusgsa | 2933 | антисмысловая | 23 |
U GUU CAAGAU GU C CU C GAGAU | 1838 | usgsuucaAfgAfUfGfu ccucgagauL96 | 2934 | смысловая | 21 |
- 160 037115
AU CU C GAGGACAU CUU GAACACС | 1839 | asUfscucGfaGfGfaca uCfuUfgaacascsc | 2935 | антисмысловая | 23 |
GU GUU CAAGAU GU C CU CGAGA | 1840 | gsusguucAfaGfAfUfg uccucgagaL96 | 2936 | смысловая | 21 |
U CU C GAGGACAU CUU G AACACCU | 1841 | usCfsucgAfgGfAfcau cUfuGfaacacscsu | 2937 | антисмысловая | 23 |
ACAUGCUAAAUCAGUA CUUCC | 1842 | ascsaugcUfaAfAfUfc aguacuuccL96 | 2938 | смысловая | 21 |
GGAAGUACUGAUUUAG CAUGUUG | 1843 | gsGfsaagUfaCfUfgau uUfaGfcaugususg | 2939 | антисмысловая | 23 |
CAUGCUAAAUCAGUAC UUCCA | 1844 | csasugcuAfaAfUfCfa guacuuccaL96 | 2940 | смысловая | 21 |
UGGAAGUACUGAUUUA GCAUGUU | 1845 | usGfsgaaGfuAfCfuga uUfuAfgcaugsusu | 2941 | антисмысловая | 23 |
AACAACAUGCUAAAUC AGUAC | 1846 | asascaacAfuGfCfUfa aaucaguacL96 | 2942 | смысловая | 21 |
GUACU GAUUUAGCAU G UUGUUCA | 1847 | gsUfsacuGfaUfUfuag cAfuGfuuguuscsa | 2943 | антисмысловая | 23 |
GAACAACAUGCUAAAU CAGUA | 1848 | gsasacaaCfaUfGfCfu aaaucaguaL96 | 2944 | смысловая | 21 |
UACU GAUUUAGCAU GU UGUUCAU | 1849 | usAfscugAfuUfUfage aUfgUfuguucsasu | 2945 | антисмысловая | 23 |
GAAAGGCACUGAUGUU CUGAA | 1850 | gsasaaggCfaCfUfGfa uguucugaaL96 | 2946 | смысловая | 21 |
UUCAGAACAUCAGUGC CUUUCCG | 1851 | usUfscagAfaCfAfuca gUfgCfcuuucscsg | 2947 | антисмысловая | 23 |
AAAGGCACUGAUGUUC UGAAA | 1852 | asasaggcAfcUfGfAfu guucugaaaL96 | 2948 | смысловая | 21 |
UUU CAGAACAU CAGU G CCUUUCC | 1853 | usUfsucaGfaAfCfauc aGfuGfccuuuscsc | 2949 | антисмысловая | 23 |
UGCGGAAAGGCACUGA UGUUC | 1854 | usgseggaAfaGfGfCfa cugauguucL96 | 2950 | смысловая | 21 |
GAACAUCAGUGCCUUU CCGCACA | 1855 | gsAf sacaUfcAfGfugc cUfuUfccgcascsa | 2951 | антисмысловая | 23 |
GUGCGGAAAGGCACUG AU GUU | 1856 | gsusgcggAfaAfGfGfc acugauguuL96 | 2952 | смысловая | 21 |
AACAUCAGUGCCUUUC CGCACAC | 1857 | asAf scauCfaGfUfgee uUfuCfcgcacsasc | 2953 | антисмысловая | 23 |
- 161 037115
GUCAGCAUGCCAAUAU GUGUG | 1858 | gsuscagcAfuGfCfCfa auaugugugL96 | 2954 | смысловая | 21 |
CACACAUAUUGGCAUG CUGACCC | 1859 | csAfscacAfuAfUfugg cAfuGfcugacscsc | 2955 | антисмысловая | 23 |
UCAGCAUGCCAAUAUG UGUGG | 1860 | uscsagcaUfgCfCfAfa uauguguggL96 | 2956 | смысловая | 21 |
CCACACAUAUUGGCAU GCUGACC | 1861 | csCfsacaCfaUfAfuug gCfaUfgcugascsc | 2957 | антисмысловая | 23 |
GAGGGUCAGCAUGCCA AU AUG | 1862 | gsasggguCfaGfCfAfu gccaauaugL96 | 2958 | смысловая | 21 |
CAUAUUGGCAUGCUGA CCCUCUG | 1863 | csAfsuauUfgGfCfaug cUfgAfcccucsusg | 2959 | антисмысловая | 23 |
AGAGGGUCAGCAUGCC AAUAU | 1864 | asgsagggUfcAfGfCfa ugccaauauL96 | 2960 | смысловая | 21 |
AUAUUGGCAUGCUGAC CCUCUGU | 1865 | asUfsauuGfgCfAfugc uGfaCfccucusgsu | 2961 | антисмысловая | 23 |
GAUGCUCCGGAAUGUU GCUGA | 1866 | gsasugcuCfcGfGfAfa uguugcugaL96 | 2962 | смысловая | 21 |
UCAGCAACAUUCCGGA GCAUCCU | 1867 | usCfsagcAfaCfAfuuc cGfgAfgcaucscsu | 2963 | антисмысловая | 23 |
AUGCUCCGGAAUGUUG CUGAA | 1868 | asusgcucCfgGfAfAfu guugcugaaL96 | 2964 | смысловая | 21 |
UUCAGCAACAUUCCGG AGCAUCC | 1869 | usUfscagCfaAfCfauu cCfgGfagcauscsc | 2965 | антисмысловая | 23 |
CAAGGAUGCUCCGGAA UGUUG | 1870 | csasaggaUfgCfUfCfc ggaauguugL96 | 2966 | смысловая | 21 |
CAACAUUCCGGAGCAU CCUUGGA | 1871 | csAfsacaUfuCfCfgga gCfaUfccuugsgsa | 2967 | антисмысловая | 23 |
CCAAGGAUGCUCCGGA AU GUU | 1872 | cscsaaggAfuGfCfUfc cggaauguuL96 | 2968 | смысловая | 21 |
AACAUUCCGGAGCAUC CUUGGAU | 1873 | asAfscauUfcCfGfgag cAfuCfcuuggsasu | 2969 | антисмысловая | 23 |
GCGUAACAGAUUCAAA CUGCC | 1874 | gscsguaaCfaGfAfUfu caaacugccL96 | 2970 | смысловая | 21 |
GGCAGUUUGAAUCUGU UACGCAC | 1875 | gsGfscagUfuUfGfaau cUfgUfuacgcsasc | 2971 | антисмысловая | 23 |
C GUAACAGAUU CAAAC UGCCG | 1876 | csgsuaacAfgAfUfUfc aaacugccgL96 | 2972 | смысловая | 21 |
- 162 037115
CGGCAGUUUGAAUCUG UUACGCA | 1877 | csGfsgcaGfuUfUfgaa uCfuGfuuacgscsa | 2973 | антисмысловая | 23 |
AUGUGСGUААСAGAUU САААС | 1878 | asusgugcGfuAfAfCfа gauucaaacL96 | 2974 | смысловая | 21 |
GUUUGAAUCUGUUACG CACAUCA | 1879 | gsUfsuugAfaUfCfugu uAfcGfcacausesa | 2975 | антисмысловая | 23 |
GAUGUGСGUААСAGAU UCAAA | 1880 | gsasugugCfgUfAfAfc agauucaaaL96 | 2976 | смысловая | 21 |
UUUGAAUCUGUUACGC ACAUCAU | 1881 | usUfsugaAfuCfUfguu aCfgCfacaucsasu | 2977 | антисмысловая | 23 |
AGAGAAGAUGGGCUAC AAGGC | 1882 | asgsagaaGfaUfGfGfg cuacaaggcL96 | 2978 | смысловая | 21 |
GCCUUGUAGCCCAUCU UCUCUGC | 1883 | gsCfscuuGfuAfGfccc aUfcUfucucusgsc | 2979 | антисмысловая | 23 |
GAGAAGAUGGGCUACA AGGCC | 1884 | gsasgaagAfuGfGfGfc uacaaggccL96 | 2980 | смысловая | 21 |
GGCCUUGUAGCCCAUC UUCUCUG | 1885 | gsGfsccuUfgUfAfgcc cAfuCfuucucsusg | 2981 | антисмысловая | 23 |
AGGCAGAGAAGAUGGG CUACA | 1886 | asgsgcagAfgAfAfGfa ugggcuacaL96 | 2982 | смысловая | 21 |
UGUAGCCCAUCUUCUC UGCCUGC | 1887 | usGfsuagCfcCfAfucu uCfuCfugccusgsc | 2983 | антисмысловая | 23 |
CAGGCAGAGAAGAUGG GCUAC | 1888 | csasggcaGfaGfAfAfg augggcuacL96 | 2984 | смысловая | 21 |
GUAGC С CAU CUU CU CU GCCUGCC | 1889 | gsUfsagcCfcAfUfcuu cUfcUfgccugscsc | 2985 | антисмысловая | 23 |
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
Claims (31)
1. Конъюгат, способный ингибировать экспрессию HAO1 в клетке, который содержит двухнитевое средство RNAi, содержащее смысловую нить и антисмысловую нить, образующие двухнитевой участок, причем указанная смысловая нить содержит по меньшей мере 15 смежных нуклеотидов, отличающихся не более чем 3 нуклеотидами от любой из нуклеотидных последовательностей:
GAAUGUGAAAGUCAUCGACAA,
GAAAGUCAUCGACAAGACAUU или
GACUUUCAUCCUGGAAAUAUA, и указанная антисмысловая нить содержит по меньшей мере 15 смежных нуклеоитдов, отличающихся не более чем 3 нуклеотидами от любой из нуклеотидных последовательностей:
UUGUCGAUGACUUUCACAUUCUG,
AAUGUCUUGUCGAUGACUUUCAC или
UAUAUUUCCAGGAUGAAAGUCCA, причем практически все нуклеотиды указанной смысловой нити и практически все нуклеотиды указанной антисмысловой нити являются модифицированными нуклеотидами, и причем указанная смысловая нить конъюгирована с одним или несколькими производными GalNAc, присоединенными через разветвленный бивалентный или тривалентный линкер на 3'-конце.
2. Конъюгат по п.1, в котором все нуклеотиды указанной смысловой нити и все нуклеотиды указанной антисмысловой нити являются модифицированными нуклеотидами.
3. Конъюгат по п.1, в котором указанная смысловая нить и указанная антисмысловая нить содержат участок комплементарности, который содержит по меньшей мере 15 смежных нуклеотидов, отличающихся не более чем 3 нуклеотидами от любой из антисмысловых последовательностей, приведенных в табл. 2.
4. Конъюгат по любому из пп.1-3, причем по меньшей мере один из указанных модифицированных нуклеотидов выбран из группы, состоящей из 3'-концевого дезокситиминового (dT) нуклеотида, 2'-О-метил-модифицированного нуклеотида, 2'-фтор-модифицированного нуклеотида, 2'-дезоксимодифицированного нуклеотида, запертого нуклеотида, лишенного азотистого основания нуклеотида, 2'-амино-модифицированного нуклеотида, 2'-алкил-модифицированного нуклеотида, морфолинового нуклеотида, фосфорамидата, нуклеотида, содержащего неприродное основание, нуклеотида, содержаще-
- 163 037115 го 5'-фосфотиоатную группу, нуклеотида, содержащего 5'-фосфат или миметик 5'-фосфата, и концевого нуклеотида, связанного с холестериловым производным или бис-дециламидной группой додекановой кислоты.
5. Конъюгат по п.1, в котором по меньшей мере одна нить содержит 3'-выступ, состоящий по меньшей мере из одного нуклеотида.
6. Конъюгат по п.1, в котором по меньшей мере одна нить содержит 3'-выступ, состоящий по меньшей мере из двух нуклеотидов.
7. Конъюгат по п.1, в котором лигандом является
8. Конъюгат по п.1, в котором лиганд присоединен к З'-концу смысловой нити.
9. Конъюгат по п.8, в котором средство RNAi конъюгировано с лигандом, как показано на следующей схеме:
где X представляет собой О или S.
10. Конъюгат по п.1, в котором указанное средство дополнительно содержит по меньшей мере одну фосфотиоатную или метилфосфонатную межнуклеотидную связь.
11. Конъюгат по п.10, в котором фосфотиоатная или метилфосфонатная межнуклеотидная связь находится на 3'-конце одной нити.
12. Конъюгат по п.10, в котором указанное средство RNAi содержит 6-8 фосфотиоатных межнуклеотидных связей.
13. Конъюгат по п.12, в котором антисмысловая нить содержит две фосфотиоатные межнуклеотидные связи на 5'-конце и две фосфотиоатные межнуклеотидные связи на 3'-конце, а смысловая нить содержит по меньшей мере две фосфотиоатные межнуклеотидные связи либо на 5'-конце, либо на 3'-конце.
14. Конъюгат по п.1, в котором парой оснований в положении 1 от 5'-конца антисмысловой нити дуплекса является пара оснований AU.
15. Конъюгат по п.1, в котором средство RNAi выбрано из группы, состоящей из AD-62994, AD-62933, AD-65585 и AD-62944.
16. Конъюгат, способный ингибировать экспрессию НАО1 в клетке, который содержит двухнитевое средство RNAi, содержащее смысловую нить и антисмысловую нить, образующие двухнитевой участок, причем указанная смысловая нить содержит по меньшей мере 15 смежных нуклеотидов, отличающихся не более чем 3 нуклеотидами от любой из нуклеотидных последовательностей:
GAAUGUGAAAGUCAUCGACAA,
GAAAGUCAUCGACAAGACAUU или
GACUUUCAUCCUGGAAAUAUA, и указанная антисмысловая цепь содержит по меньшей мере 15 смежных нуклеотидов, отличающихся не более чем 3 нуклеотидами от любой из нуклеотидных последовательностей:
UUGUCGAUGACUUUCACAUUCUG,
AAUGUCUUGUCGAUGACUUUCAC или
UAUAUUUCCAGGAUGAAAGUCCA, причем практически все нуклеотиды указанной смысловой нити содержат модификацию, выбранную из группы, состоящей из 2'-O-метил-модификации и 2'-фтор-модификации, причем указанная смысловая нить содержит две фосфотиоатные межнуклеотидные связи на 5'-конце, причем практически все нуклеотиды указанной антисмысловой нити содержат модификацию, вы- 164 037115 бранную из группы, состоящей из 2'-О-метил-модификации и 2'-фтор-модификации, причем указанная антисмысловая нить содержит две фосфотиоатные межнуклеотидные связи на
5'-конце и две фосфотиоатные межнуклеотидные связи на 3'-конце, и причем указанная смысловая нить конъюгирована с одним или несколькими производными GalNAc, присоединенными посредством разветвленного двухвалентного или трехвалентного линкера на 3'-конце.
17. Конъюгат по п.16, где все нуклеотиды указанной смысловой нити и все нуклеотиды указанной антисмысловой нити содержат модификацию.
18. Средство RNAi, выбранное из группы средств RNAi, приведенных в табл. 1 или 2.
19. Средство RNAi по п.16, где средство RNAi выбрано из группы, состоящей из AD-62994, AD-62933, AD-65585 и AD-62944.
20. Способ лечения индивида с расстройством, связанным с HAO1, включающий подкожное введение индивиду терапевтически эффективного количества конъюгата по любому из пп.1-17, благодаря чему осуществляется лечение индивида.
21. Способ по п.20, в котором все нуклеотиды указанной смысловой нити и все нуклеотиды указанной антисмысловой нити содержат модификацию.
22. Способ по п.20, в котором индивидом является человек.
23. Способ по п.22, в котором у человека имеется РН1.
24. Способ по п.20, в котором двухнитевое средство RNAi вводят в дозе, составляющей от приблизительно 0,01 до приблизительно 10 мг/кг или от приблизительно 1 до приблизительно 10 мг/кг.
25. Способ по п.24, в котором двухнитевое средство RNAi вводят в дозе, составляющей приблизительно 0,1 мг/кг, приблизительно 1,0 мг/кг или приблизительно 3,0 мг/кг.
26. Способ по п.24, в котором двухнитевое средство RNAi вводят в дозе, составляющей от приблизительно 1 до приблизительно 10 мг/кг.
27. Способ по п.24, в котором двухнитевое средство RNAi вводят подкожно.
28. Способ по п.24, в котором двухнитевое средство RNAi вводят внутривенно.
29. Способ по п.24, в котором указанное средство RNAi вводят двумя или более дозами.
30. Способ по п.29, в котором указанное средство RNAi вводят с интервалами, выбранными из группы, состоящей из одного раза приблизительно каждые 12 ч, одного раза приблизительно каждые 24 ч, одного раза приблизительно каждые 48 ч, одного раза приблизительно каждые 72 ч и одного раза приблизительно каждые 96 ч.
31. Способ по п.29, в котором указанное средство RNAi вводят один раз в неделю в течение периода длительностью до 2 недель, до 3 недель, до 4 недель, до 5 недель или дольше.
(SEQ ID NO:1).
>gi j 111842321 ref | w 017545.21 оксидаза 1 гидрокси кислот Homo sapiens (гликолат-оксидаза) (HAO1), мРНК CTGGGATAGCAATAACCTGTGAAAATGCTCCCCCGGCTAATTTGTATCAATGATTATGAACAACATGCTA
AATCAGTACTTCCAAACTCTATATATGACTATTACAGGTCTGGGGCAAATGATGAAGAAACTTTGGCTGA TAATATTGCAGCATTTTCCAGATGGAAGCTGTATCCAAGGATGCTCCGGAATGTTGCTGAAACAGATCTG TCGACTTCTGTTTTAGGACAGAGGGTCAGCATGCCAATATGTGTGGGGGCTACGGCCATGCAGCGCATGG CTCATGTGGACGGCGAGCTTGCCACTGTGAGAGCCTGTCAGTCCCTGGGAACGGGCATGATGTTGAGTTC CTGGGCCACCTCCTCAATTGAAGAAGTGGCGGAAGCTGGTCCTGAGGCACTTCGTTGGCTGCAACTGTAT
ATCTACAMGACCG№AAGT£^CAAGAAGCTAGTGC№CAGGCAGAGAAGATi^GCTACAAGGCCATAT ttgtgacagtggacacaccttacctgggcaaccgtctggatgatgtgcgtaacagattcaaactgccgcc ACAACTCAGGATGAAAAATTTTGAAACCAGTACTTTATCATTTTCTCXTGAGGAAAATTTTGGAGAGGAC AGTGGACTTGCTGCMATGTGGCTAAAGCAATAGACCCATCTATCAGCTGGGAAGATATCAAATGGCTGA GAMACIGACATCATTGCCAATTGTTGCAAASGGCATTTTGA<aGGTGATGATGCClGGGAfiGCTGTTAA ACATGGCTTGAATGGGATCTTGGTGTCGAATCATGGGGCTCGACAACTCGATGGeGTGCCAGCCACTATT GATGTTCTGCCAGAAATTGTGC^GCTGTGGAAGGGAAGGTGGAAGTCTTCCTGGACGGGGGTGTGCGGA AAGGCACTGATGTTCTGAAAGCTGTGGCTCTTGGCGCCAAGGCTGTGTTTGTGGGGAGACCAATCGTTTG GGGCTTAGCTTTCCAGGGGGAGAAAGGTGTTCAAGATGTCCTCGAGATACTAAAGGAAGAATTCCGGTTG GCCATG(KTCTGAGTGGGTGCCAGM.TGTGAAAGTCATCGAaiAfiACATT№TGM CCGTTTCCAAGATCTGACAGTGCACAATATTTTCCCATCTGTATTATTTTTTTTCAGCATGTATTACTTG ACAAAGAGACACTGTGCAGAGGGTGACCACAGTCTGTAATTCCCCACTKAATACAAAGGGTGTCGTTCT TTTCCAACAAAATAGCAAICCCTTTTATTTCATTGCTTTTGACTITTCAATGGGTGTCCTAGGAACCTTT TAGAAAGAAATGGACTTTCATCCTGGAAATATATTAACTGTTAAAAAGAAAACATTGAAAATGTGTTTAG ACAACGTCATCCCCTGGCAGGCTAAAGTGCTGTATCCTTTAGTAAAATTGGAGGTAGCAAACACTAAGGT GAAAAGATAATGATCTCATTGrTTATTAACCTGTATTCTGTTTACATGrCTrTAAAACAGTGGTTCTTAA attgtaaggtcaggttcaaagtgttggtaatgcctgattcacaactttgagaaggtagcactggagagaa TTGGAATGGGTGGCGGTAATTGGTGATACTTCTTTGAATGTAGATTTCCAATCACATCTTTAGTGTCTGA ATATATCCAAATGTTTTAGGATGTATGTTACTTCTTAGAGAGAAATAAAGCATTTTTGGGAAGAAT
Фиг. 1
- 165 037115 (S1Q ID NO:2) >gi11338931661ref|NM 010403.21 оксидаза 1 гидроксикислот Mus musculus, печень {НАО1|, мРНК GGTTGCCCTACCCTGCCACAATGTTGCC^CGACTGGTCTGCATCAGTGATTATGAACAGCAWTCCGATC AGTGCTTCAGAAGTCAGTGTATGACTATTACAGGTCTGGGGCAAATGATCAGGAGACGTTAGCTGATAAC ATCCXAGCATTTTCTAGATGGAAGCTCTATCCACGGATGCTTa^AAC^^ CTTCTGTTTTAGGACAGAGAGTCAGCATGCCAATATGTGTTGGGGCTACTGCCATGCAGTGCATGOZTCA CGTGGACGGGGAGCTGGCCACTGTGCGAGCCTGTCAGACCATGGGAACTGGCATGATGCTGAGTTCTTGG GCTACCTCCTCAATAGAAGAAGTGGCAGAAGCTGGCCCAGAGGCACTTCGCTGGATGCAACTGTACATCT AmAAGACCGTGAGATCA^^ACA^TAGTGA^CO^CTGAiGAAGCAGGGTTACAAG^CATATlTGT GACTGTGGACACCCCTTACCTGGGCAACCGCATTGATGACGTGCGGAACAGGTTCAAGCTGCCACCACAA C’R^GGATGAJUUU^TTTGAAACCAATGATTiR^CATTTTCTCCTAAGGGAAATTTTGGAGACAACAGTG GACTTGCTGAATATGTGGCACAAGCTATAGACCCATCTCTCAGCTGGGATGATATTACATGGCTCAGACG attgacatcactgcctattgttgtaaagggcattttgagaggtgatgatgccaaggaagctgttaaacat GGTGTGGATGGGATCTTGGTGTCGAATCATGGGGCGCGACAACTGGATGGGGTGCCAGCTACTATTGATG tcctgccagagattgttgaggctgtggaagggaaggtagaagtcttcctggatgggggagtaaggaaagg TACTGA.TGTTCTCAAAGCTCTGGCCCTAGGA.GCC.AAGGCCGTTTTTGTGGGAAGACCCATCATCTGGGGC TTGGCTTTCCAGGGGGAGAAAGGTTTCAAGATGTCCTCGAGATATTGAAGGAAGAATTCCGACTGGCCA
TGGCTCTGAGTGGGTGCCAGAATGTGGAAAGTCATCGACAAGACATTGGTGAGGAAAAATCCTTTGGCTGT TTCCAMiATCTGACAGTGCACAATATTTTCCCATCTGTATTATTTTTTTTCCAGCGTGGATTACTTGACA AAGAGACACTGTGCAGAGGGTGACCACAGACTGTAACTCCCCACTTCTATACAAAGGGTGTCGTTCTTT’r ccaacaaaatagccaccccttttccttcatto:ttttgacttttcaatgggtgtcctaggaaccttctag AAAGAAATG^CTTGCATCCTGGAAATATATTAACTGTTAAAAAGAAAACATTGAAAATGTGTTTGGGCA ACGTCATCCCCTG^AGGCTAAAGT^TGGGGAACAAAAGArAT<XTCTGGTGMATTGCAGGlA®:ATG CTGAAGUGAAAGATACTGACCTCACICTICATTAACCTGTCTTCTGTTTAGATITCCTTAAGACAGTGGC TCTTACA^TTTGCACTTGGCTTTGAAATGCTGGAAATGCCCAGAGAAACATGAGGTTTGGATTTGCCATG TTGAGAAAATAGCACCAGGTAGAATTGAAATGGATGGTGGTAATTTGTGATTTTTTTTCTAGAAACTTTT САТТТТТТААСАСССГАТТТТТТТбААбеТАСАТТТТТАССТАТАТАТСАСАССТСТвААТАТСТСТСбА TGTTTTGTffiCACTCATTGCATTTGAAAGaSAtGTGTCTAGTCCAGTTGGGACCACATGGA^TATTTTT ACTTTTGAACTTTGTCTCCTCATTCTCATTTTAAAATAAGTGTTGACTTCCTAATTCCTCTTGAATCTTT? TTTGATTTTCTCACTTTTCXTCATTrATAGTCACATTCAGTGTAAAGTACATATTTTGTGGGGTCCGTGA TGAATAAAGATTTGAAATTCTTGTTCAGAAGGAAGGCAAAAAAAAAAAAAAGTCTTTCCTTTTATCACA
Applications Claiming Priority (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201462062751P | 2014-10-10 | 2014-10-10 | |
US201562147976P | 2015-04-15 | 2015-04-15 | |
US201562214602P | 2015-09-04 | 2015-09-04 | |
PCT/US2015/054881 WO2016057893A1 (en) | 2014-10-10 | 2015-10-09 | Compositions and methods for inhibition of hao1 (hydroxyacid oxidase 1 (glycolate oxidase)) gene expression |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
EA201790789A1 EA201790789A1 (ru) | 2017-08-31 |
EA037115B1 true EA037115B1 (ru) | 2021-02-08 |
Family
ID=55653836
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
EA201790789A EA037115B1 (ru) | 2014-10-10 | 2015-10-09 | Композиции и способы, предназначенные для ингибирования экспрессии гена hao1 (оксидазы 1 гидроксикислот (гликолат-оксидазы)) |
Country Status (38)
Country | Link |
---|---|
US (3) | US10478500B2 (ru) |
EP (2) | EP3204015B1 (ru) |
JP (3) | JP6836988B2 (ru) |
KR (2) | KR20230113654A (ru) |
CN (2) | CN108064154B (ru) |
AU (2) | AU2015330726B9 (ru) |
BR (1) | BR112017006469A2 (ru) |
CA (2) | CA3187050A1 (ru) |
CO (1) | CO2017004728A2 (ru) |
CR (1) | CR20170190A (ru) |
CY (2) | CY1125364T1 (ru) |
DK (1) | DK3204015T3 (ru) |
DO (1) | DOP2017000094A (ru) |
EA (1) | EA037115B1 (ru) |
EC (1) | ECSP17028310A (ru) |
ES (1) | ES2905889T3 (ru) |
HR (1) | HRP20211971T1 (ru) |
HU (2) | HUE057327T2 (ru) |
IL (3) | IL310466A (ru) |
JO (2) | JOP20200115A1 (ru) |
LT (2) | LT3204015T (ru) |
MX (2) | MX2017004634A (ru) |
MY (1) | MY192926A (ru) |
NO (1) | NO2022009I1 (ru) |
NZ (1) | NZ730404A (ru) |
PE (1) | PE20171763A1 (ru) |
PH (1) | PH12017500669A1 (ru) |
PL (1) | PL3204015T3 (ru) |
PT (1) | PT3204015T (ru) |
RS (1) | RS62854B1 (ru) |
SG (2) | SG10201913756QA (ru) |
SI (1) | SI3204015T1 (ru) |
TN (1) | TN2017000125A1 (ru) |
TW (3) | TW202342749A (ru) |
UA (1) | UA126266C2 (ru) |
UY (1) | UY36357A (ru) |
WO (1) | WO2016057893A1 (ru) |
ZA (1) | ZA201702071B (ru) |
Families Citing this family (23)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP6165723B2 (ja) | 2011-06-30 | 2017-07-19 | アローヘッド ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド | B型肝炎ウイルスの遺伝子発現を阻害するための組成物および方法 |
PT3581654T (pt) * | 2013-12-27 | 2021-06-02 | Dicerna Pharmaceuticals Inc | Métodos e composições para a inibição específica de glicolato oxidase (hao1) por rna de cadeia dupla |
JOP20200115A1 (ar) | 2014-10-10 | 2017-06-16 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | تركيبات وطرق لتثبيط التعبير الجيني عن hao1 (حمض أوكسيداز هيدروكسيلي 1 (أوكسيداز جليكولات)) |
WO2016205323A1 (en) | 2015-06-18 | 2016-12-22 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Polynucleotde agents targeting hydroxyacid oxidase (glycolate oxidase, hao1) and methods of use thereof |
AU2016306275A1 (en) | 2015-08-07 | 2018-02-08 | Arrowhead Pharmaceuticals, Inc. | RNAi therapy for Hepatitis B virus infection |
JOP20170161A1 (ar) | 2016-08-04 | 2019-01-30 | Arrowhead Pharmaceuticals Inc | عوامل RNAi للعدوى بفيروس التهاب الكبد ب |
AU2017368050A1 (en) | 2016-11-29 | 2019-06-20 | Puretech Lyt, Inc. | Exosomes for delivery of therapeutic agents |
ES2639863B1 (es) | 2017-03-10 | 2018-09-20 | Universidad De Granada | Compuestos para el tratamiento de enfermedades causadas por la acumulación de oxalato |
WO2018191278A2 (en) | 2017-04-11 | 2018-10-18 | Arbutus Biopharma Corporation | Targeted compositions |
US11261447B2 (en) | 2017-07-13 | 2022-03-01 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Methods for inhibition of HAO1 (hydroxyacid oxidase 1 (glycolate oxidase)) gene expression |
AU2018301477A1 (en) | 2017-07-13 | 2020-02-27 | Alnylam Pharmaceuticals Inc. | Lactate dehydrogenase a (LDHA) iRNA compositions and methods of use thereof |
CN118685406A (zh) * | 2018-05-14 | 2024-09-24 | 阿尔尼拉姆医药品有限公司 | 血管紧张素原(AGT)iRNA组合物及其使用方法 |
TW202039844A (zh) * | 2018-12-19 | 2020-11-01 | 美商阿尼拉製藥公司 | 類澱粉前驅蛋白(APP)RNAi劑組成物及其使用方法 |
US20220090047A1 (en) * | 2018-12-21 | 2022-03-24 | Precision Biosciences, Inc. | Genetic modification of the hydroxyacid oxidase 1 gene for treatment of primary hyperoxaluria |
JP7439248B2 (ja) | 2019-11-01 | 2024-02-27 | ライラック セラピューティクス, インク. | グリコール酸オキシダーゼ阻害剤としてのヘテロ環式カルボキシレート化合物 |
JP2023503644A (ja) * | 2019-11-27 | 2023-01-31 | ディー・ティー・エックス・ファーマ・インコーポレイテッド | デュシェンヌ型筋ジストロフィーの治療のための化合物および方法 |
EP4121534A1 (en) * | 2020-03-18 | 2023-01-25 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for treating subjects having a heterozygous alanine-glyoxylate aminotransferase gene (agxt) variant |
WO2022087041A1 (en) | 2020-10-21 | 2022-04-28 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Methods and compositions for treating primary hyperoxaluria |
WO2022104062A1 (en) | 2020-11-12 | 2022-05-19 | Precision Biosciences, Inc. | Engineered meganucleases having specificity for recognition sequences in the dystrophin gene |
WO2022119873A1 (en) | 2020-12-01 | 2022-06-09 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Methods and compositions for inhibition of hao1 (hydroxyacid oxidase 1 (glycolate oxidase)) gene expression |
WO2022212153A1 (en) * | 2021-04-01 | 2022-10-06 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Proline dehydrogenase 2 (prodh2) irna compositions and methods of use thereof |
CN117642505A (zh) | 2021-06-04 | 2024-03-01 | 神经微核糖核酸治疗有限公司 | 靶向腺苷激酶的反义寡核苷酸 |
EP4373934A1 (en) | 2021-07-19 | 2024-05-29 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Methods and compositions for treating subjects having or at risk of developing a non-primary hyperoxaluria disease or disorder |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20110287974A1 (en) * | 2010-05-24 | 2011-11-24 | Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem Ltd. | Methods and kits for ascertaining biosafety of an agent |
US20110301229A1 (en) * | 2004-03-15 | 2011-12-08 | Integrated Dna Technologies, Inc. | Methods and compositions for the specific inhibition of gene expression by double-stranded rna |
WO2012023960A2 (en) * | 2010-08-17 | 2012-02-23 | Transalgae (Israel) Ltd | Transgenically mitigating the establishment and spread of transgenic algae in natural ecosystems by suppressing the activity of a carbon concentrating mechanism |
WO2013074974A2 (en) * | 2011-11-18 | 2013-05-23 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Modified rnai agents |
US20140221465A1 (en) * | 2012-04-02 | 2014-08-07 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified polynucleotides for treating galactosylceramidase protein deficiency |
Family Cites Families (216)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US564562A (en) | 1896-07-21 | Joseph p | ||
US513030A (en) | 1894-01-16 | Machine for waxing or coating paper | ||
US3687808A (en) | 1969-08-14 | 1972-08-29 | Univ Leland Stanford Junior | Synthetic polynucleotides |
US4469863A (en) | 1980-11-12 | 1984-09-04 | Ts O Paul O P | Nonionic nucleic acid alkyl and aryl phosphonates and processes for manufacture and use thereof |
US5023243A (en) | 1981-10-23 | 1991-06-11 | Molecular Biosystems, Inc. | Oligonucleotide therapeutic agent and method of making same |
US4476301A (en) | 1982-04-29 | 1984-10-09 | Centre National De La Recherche Scientifique | Oligonucleotides, a process for preparing the same and their application as mediators of the action of interferon |
US5118800A (en) | 1983-12-20 | 1992-06-02 | California Institute Of Technology | Oligonucleotides possessing a primary amino group in the terminal nucleotide |
US5550111A (en) | 1984-07-11 | 1996-08-27 | Temple University-Of The Commonwealth System Of Higher Education | Dual action 2',5'-oligoadenylate antiviral derivatives and uses thereof |
FR2567892B1 (fr) | 1984-07-19 | 1989-02-17 | Centre Nat Rech Scient | Nouveaux oligonucleotides, leur procede de preparation et leurs applications comme mediateurs dans le developpement des effets des interferons |
US5367066A (en) | 1984-10-16 | 1994-11-22 | Chiron Corporation | Oligonucleotides with selectably cleavable and/or abasic sites |
US4897355A (en) | 1985-01-07 | 1990-01-30 | Syntex (U.S.A.) Inc. | N[ω,(ω-1)-dialkyloxy]- and N-[ω,(ω-1)-dialkenyloxy]-alk-1-yl-N,N,N-tetrasubstituted ammonium lipids and uses therefor |
FR2575751B1 (fr) | 1985-01-08 | 1987-04-03 | Pasteur Institut | Nouveaux nucleosides de derives de l'adenosine, leur preparation et leurs applications biologiques |
US5185444A (en) | 1985-03-15 | 1993-02-09 | Anti-Gene Deveopment Group | Uncharged morpolino-based polymers having phosphorous containing chiral intersubunit linkages |
US5034506A (en) | 1985-03-15 | 1991-07-23 | Anti-Gene Development Group | Uncharged morpholino-based polymers having achiral intersubunit linkages |
US5166315A (en) | 1989-12-20 | 1992-11-24 | Anti-Gene Development Group | Sequence-specific binding polymers for duplex nucleic acids |
US5235033A (en) | 1985-03-15 | 1993-08-10 | Anti-Gene Development Group | Alpha-morpholino ribonucleoside derivatives and polymers thereof |
US5405938A (en) | 1989-12-20 | 1995-04-11 | Anti-Gene Development Group | Sequence-specific binding polymers for duplex nucleic acids |
US4683202A (en) | 1985-03-28 | 1987-07-28 | Cetus Corporation | Process for amplifying nucleic acid sequences |
US5139941A (en) | 1985-10-31 | 1992-08-18 | University Of Florida Research Foundation, Inc. | AAV transduction vectors |
US4837028A (en) | 1986-12-24 | 1989-06-06 | Liposome Technology, Inc. | Liposomes with enhanced circulation time |
US4920016A (en) | 1986-12-24 | 1990-04-24 | Linear Technology, Inc. | Liposomes with enhanced circulation time |
US5264423A (en) | 1987-03-25 | 1993-11-23 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Inhibitors for replication of retroviruses and for the expression of oncogene products |
US5276019A (en) | 1987-03-25 | 1994-01-04 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Inhibitors for replication of retroviruses and for the expression of oncogene products |
JP2828642B2 (ja) | 1987-06-24 | 1998-11-25 | ハワード フローレイ インスティテュト オブ イクスペリメンタル フィジオロジー アンド メディシン | ヌクレオシド誘導体 |
US5188897A (en) | 1987-10-22 | 1993-02-23 | Temple University Of The Commonwealth System Of Higher Education | Encapsulated 2',5'-phosphorothioate oligoadenylates |
US4924624A (en) | 1987-10-22 | 1990-05-15 | Temple University-Of The Commonwealth System Of Higher Education | 2,',5'-phosphorothioate oligoadenylates and plant antiviral uses thereof |
EP0406309A4 (en) | 1988-03-25 | 1992-08-19 | The University Of Virginia Alumni Patents Foundation | Oligonucleotide n-alkylphosphoramidates |
US5278302A (en) | 1988-05-26 | 1994-01-11 | University Patents, Inc. | Polynucleotide phosphorodithioates |
US5216141A (en) | 1988-06-06 | 1993-06-01 | Benner Steven A | Oligonucleotide analogs containing sulfur linkages |
US5175273A (en) | 1988-07-01 | 1992-12-29 | Genentech, Inc. | Nucleic acid intercalating agents |
FR2645866B1 (fr) | 1989-04-17 | 1991-07-05 | Centre Nat Rech Scient | Nouvelles lipopolyamines, leur preparation et leur emploi |
US5744101A (en) | 1989-06-07 | 1998-04-28 | Affymax Technologies N.V. | Photolabile nucleoside protecting groups |
US5143854A (en) | 1989-06-07 | 1992-09-01 | Affymax Technologies N.V. | Large scale photolithographic solid phase synthesis of polypeptides and receptor binding screening thereof |
US5134066A (en) | 1989-08-29 | 1992-07-28 | Monsanto Company | Improved probes using nucleosides containing 3-dezauracil analogs |
US5436146A (en) | 1989-09-07 | 1995-07-25 | The Trustees Of Princeton University | Helper-free stocks of recombinant adeno-associated virus vectors |
US5591722A (en) | 1989-09-15 | 1997-01-07 | Southern Research Institute | 2'-deoxy-4'-thioribonucleosides and their antiviral activity |
US5399676A (en) | 1989-10-23 | 1995-03-21 | Gilead Sciences | Oligonucleotides with inverted polarity |
ATE190981T1 (de) | 1989-10-24 | 2000-04-15 | Isis Pharmaceuticals Inc | 2'-modifizierte nukleotide |
US5264564A (en) | 1989-10-24 | 1993-11-23 | Gilead Sciences | Oligonucleotide analogs with novel linkages |
US5177198A (en) | 1989-11-30 | 1993-01-05 | University Of N.C. At Chapel Hill | Process for preparing oligoribonucleoside and oligodeoxyribonucleoside boranophosphates |
CA2029273A1 (en) | 1989-12-04 | 1991-06-05 | Christine L. Brakel | Modified nucleotide compounds |
US5587361A (en) | 1991-10-15 | 1996-12-24 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleotides having phosphorothioate linkages of high chiral purity |
US5646265A (en) | 1990-01-11 | 1997-07-08 | Isis Pharmceuticals, Inc. | Process for the preparation of 2'-O-alkyl purine phosphoramidites |
US5459255A (en) | 1990-01-11 | 1995-10-17 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | N-2 substituted purines |
US5852188A (en) | 1990-01-11 | 1998-12-22 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleotides having chiral phosphorus linkages |
US5670633A (en) | 1990-01-11 | 1997-09-23 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Sugar modified oligonucleotides that detect and modulate gene expression |
US5681941A (en) | 1990-01-11 | 1997-10-28 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Substituted purines and oligonucleotide cross-linking |
US5587470A (en) | 1990-01-11 | 1996-12-24 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 3-deazapurines |
US5321131A (en) | 1990-03-08 | 1994-06-14 | Hybridon, Inc. | Site-specific functionalization of oligodeoxynucleotides for non-radioactive labelling |
US5470967A (en) | 1990-04-10 | 1995-11-28 | The Dupont Merck Pharmaceutical Company | Oligonucleotide analogs with sulfamate linkages |
US5264618A (en) | 1990-04-19 | 1993-11-23 | Vical, Inc. | Cationic lipids for intracellular delivery of biologically active molecules |
GB9009980D0 (en) | 1990-05-03 | 1990-06-27 | Amersham Int Plc | Phosphoramidite derivatives,their preparation and the use thereof in the incorporation of reporter groups on synthetic oligonucleotides |
EP0455905B1 (en) | 1990-05-11 | 1998-06-17 | Microprobe Corporation | Dipsticks for nucleic acid hybridization assays and methods for covalently immobilizing oligonucleotides |
US5981276A (en) | 1990-06-20 | 1999-11-09 | Dana-Farber Cancer Institute | Vectors containing HIV packaging sequences, packaging defective HIV vectors, and uses thereof |
US5541307A (en) | 1990-07-27 | 1996-07-30 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Backbone modified oligonucleotide analogs and solid phase synthesis thereof |
US5610289A (en) | 1990-07-27 | 1997-03-11 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Backbone modified oligonucleotide analogues |
US5608046A (en) | 1990-07-27 | 1997-03-04 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Conjugated 4'-desmethyl nucleoside analog compounds |
US5677437A (en) | 1990-07-27 | 1997-10-14 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Heteroatomic oligonucleoside linkages |
US5623070A (en) | 1990-07-27 | 1997-04-22 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Heteroatomic oligonucleoside linkages |
DE69126530T2 (de) | 1990-07-27 | 1998-02-05 | Isis Pharmaceutical, Inc., Carlsbad, Calif. | Nuklease resistente, pyrimidin modifizierte oligonukleotide, die die gen-expression detektieren und modulieren |
US5489677A (en) | 1990-07-27 | 1996-02-06 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleoside linkages containing adjacent oxygen and nitrogen atoms |
US5602240A (en) | 1990-07-27 | 1997-02-11 | Ciba Geigy Ag. | Backbone modified oligonucleotide analogs |
US5618704A (en) | 1990-07-27 | 1997-04-08 | Isis Pharmacueticals, Inc. | Backbone-modified oligonucleotide analogs and preparation thereof through radical coupling |
PT98562B (pt) | 1990-08-03 | 1999-01-29 | Sanofi Sa | Processo para a preparacao de composicoes que compreendem sequencias de nucleo-sidos com cerca de 6 a cerca de 200 bases resistentes a nucleases |
US5214134A (en) | 1990-09-12 | 1993-05-25 | Sterling Winthrop Inc. | Process of linking nucleosides with a siloxane bridge |
US5561225A (en) | 1990-09-19 | 1996-10-01 | Southern Research Institute | Polynucleotide analogs containing sulfonate and sulfonamide internucleoside linkages |
EP0549686A4 (en) | 1990-09-20 | 1995-01-18 | Gilead Sciences Inc | Modified internucleoside linkages |
US5432272A (en) | 1990-10-09 | 1995-07-11 | Benner; Steven A. | Method for incorporating into a DNA or RNA oligonucleotide using nucleotides bearing heterocyclic bases |
GB9100304D0 (en) | 1991-01-08 | 1991-02-20 | Ici Plc | Compound |
US7015315B1 (en) | 1991-12-24 | 2006-03-21 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Gapped oligonucleotides |
US5539082A (en) | 1993-04-26 | 1996-07-23 | Nielsen; Peter E. | Peptide nucleic acids |
US5719262A (en) | 1993-11-22 | 1998-02-17 | Buchardt, Deceased; Ole | Peptide nucleic acids having amino acid side chains |
US5714331A (en) | 1991-05-24 | 1998-02-03 | Buchardt, Deceased; Ole | Peptide nucleic acids having enhanced binding affinity, sequence specificity and solubility |
US5571799A (en) | 1991-08-12 | 1996-11-05 | Basco, Ltd. | (2'-5') oligoadenylate analogues useful as inhibitors of host-v5.-graft response |
US5283185A (en) | 1991-08-28 | 1994-02-01 | University Of Tennessee Research Corporation | Method for delivering nucleic acids into cells |
DE59208572D1 (de) | 1991-10-17 | 1997-07-10 | Ciba Geigy Ag | Bicyclische Nukleoside, Oligonukleotide, Verfahren zu deren Herstellung und Zwischenprodukte |
US5594121A (en) | 1991-11-07 | 1997-01-14 | Gilead Sciences, Inc. | Enhanced triple-helix and double-helix formation with oligomers containing modified purines |
US5252479A (en) | 1991-11-08 | 1993-10-12 | Research Corporation Technologies, Inc. | Safe vector for gene therapy |
ATE241426T1 (de) | 1991-11-22 | 2003-06-15 | Affymetrix Inc A Delaware Corp | Verfahren zur herstellung von polymerarrays |
US5484908A (en) | 1991-11-26 | 1996-01-16 | Gilead Sciences, Inc. | Oligonucleotides containing 5-propynyl pyrimidines |
US6235887B1 (en) | 1991-11-26 | 2001-05-22 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Enhanced triple-helix and double-helix formation directed by oligonucleotides containing modified pyrimidines |
US5359044A (en) | 1991-12-13 | 1994-10-25 | Isis Pharmaceuticals | Cyclobutyl oligonucleotide surrogates |
DE69233599T2 (de) | 1991-12-24 | 2006-12-14 | Isis Pharmaceuticals, Inc., Carlsbad | Unterbrochene 2'-modifizierte Oligonukleotide |
US6277603B1 (en) | 1991-12-24 | 2001-08-21 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | PNA-DNA-PNA chimeric macromolecules |
FR2687679B1 (fr) | 1992-02-05 | 1994-10-28 | Centre Nat Rech Scient | Oligothionucleotides. |
DE4203923A1 (de) | 1992-02-11 | 1993-08-12 | Henkel Kgaa | Verfahren zur herstellung von polycarboxylaten auf polysaccharid-basis |
US5633360A (en) | 1992-04-14 | 1997-05-27 | Gilead Sciences, Inc. | Oligonucleotide analogs capable of passive cell membrane permeation |
US5434257A (en) | 1992-06-01 | 1995-07-18 | Gilead Sciences, Inc. | Binding compentent oligomers containing unsaturated 3',5' and 2',5' linkages |
US5587308A (en) | 1992-06-02 | 1996-12-24 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health & Human Services | Modified adeno-associated virus vector capable of expression from a novel promoter |
EP0646178A1 (en) | 1992-06-04 | 1995-04-05 | The Regents Of The University Of California | expression cassette with regularoty regions functional in the mammmlian host |
CA2135313A1 (en) | 1992-06-18 | 1994-01-06 | Theodore Choi | Methods for producing transgenic non-human animals harboring a yeast artificial chromosome |
EP0577558A2 (de) | 1992-07-01 | 1994-01-05 | Ciba-Geigy Ag | Carbocyclische Nukleoside mit bicyclischen Ringen, Oligonukleotide daraus, Verfahren zu deren Herstellung, deren Verwendung und Zwischenproduckte |
AU4769893A (en) | 1992-07-17 | 1994-02-14 | Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. | Method and reagent for treatment of animal diseases |
US6346614B1 (en) | 1992-07-23 | 2002-02-12 | Hybridon, Inc. | Hybrid oligonucleotide phosphorothioates |
WO1994012649A2 (en) | 1992-12-03 | 1994-06-09 | Genzyme Corporation | Gene therapy for cystic fibrosis |
US5478745A (en) | 1992-12-04 | 1995-12-26 | University Of Pittsburgh | Recombinant viral vector system |
US5476925A (en) | 1993-02-01 | 1995-12-19 | Northwestern University | Oligodeoxyribonucleotides including 3'-aminonucleoside-phosphoramidate linkages and terminal 3'-amino groups |
EP0685234B1 (en) | 1993-02-19 | 2000-05-10 | Nippon Shinyaku Company, Limited | Drug composition containing nucleic acid copolymer |
GB9304618D0 (en) | 1993-03-06 | 1993-04-21 | Ciba Geigy Ag | Chemical compounds |
AU6449394A (en) | 1993-03-30 | 1994-10-24 | Sterling Winthrop Inc. | Acyclic nucleoside analogs and oligonucleotide sequences containing them |
CA2159629A1 (en) | 1993-03-31 | 1994-10-13 | Sanofi | Oligonucleotides with amide linkages replacing phosphodiester linkages |
DE4311944A1 (de) | 1993-04-10 | 1994-10-13 | Degussa | Umhüllte Natriumpercarbonatpartikel, Verfahren zu deren Herstellung und sie enthaltende Wasch-, Reinigungs- und Bleichmittelzusammensetzungen |
US6191105B1 (en) | 1993-05-10 | 2001-02-20 | Protein Delivery, Inc. | Hydrophilic and lipophilic balanced microemulsion formulations of free-form and/or conjugation-stabilized therapeutic agents such as insulin |
US5955591A (en) | 1993-05-12 | 1999-09-21 | Imbach; Jean-Louis | Phosphotriester oligonucleotides, amidites and method of preparation |
US6015886A (en) | 1993-05-24 | 2000-01-18 | Chemgenes Corporation | Oligonucleotide phosphate esters |
US5502177A (en) | 1993-09-17 | 1996-03-26 | Gilead Sciences, Inc. | Pyrimidine derivatives for labeled binding partners |
KR960705837A (ko) | 1993-11-16 | 1996-11-08 | 라이오넬 엔. 사이몬 | 비포스포네이트 뉴클레오시드간 연결기와 혼합된 비대칭적으로 순수한 포스포네이트 뉴클레오시드간 연결기를 갖는 합성 올리고머(Synthetic Oligomers Having Chirally Pure Phosphonate Internucleosidyl Linkages Mixed with Non-Phosphonate Internucleosidyl Linkages) |
US5457187A (en) | 1993-12-08 | 1995-10-10 | Board Of Regents University Of Nebraska | Oligonucleotides containing 5-fluorouracil |
US5446137B1 (en) | 1993-12-09 | 1998-10-06 | Behringwerke Ag | Oligonucleotides containing 4'-substituted nucleotides |
US5519134A (en) | 1994-01-11 | 1996-05-21 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Pyrrolidine-containing monomers and oligomers |
US5596091A (en) | 1994-03-18 | 1997-01-21 | The Regents Of The University Of California | Antisense oligonucleotides comprising 5-aminoalkyl pyrimidine nucleotides |
US5599922A (en) | 1994-03-18 | 1997-02-04 | Lynx Therapeutics, Inc. | Oligonucleotide N3'-P5' phosphoramidates: hybridization and nuclease resistance properties |
US5627053A (en) | 1994-03-29 | 1997-05-06 | Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. | 2'deoxy-2'-alkylnucleotide containing nucleic acid |
US5625050A (en) | 1994-03-31 | 1997-04-29 | Amgen Inc. | Modified oligonucleotides and intermediates useful in nucleic acid therapeutics |
US6054299A (en) | 1994-04-29 | 2000-04-25 | Conrad; Charles A. | Stem-loop cloning vector and method |
US5525711A (en) | 1994-05-18 | 1996-06-11 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Pteridine nucleotide analogs as fluorescent DNA probes |
US5543152A (en) | 1994-06-20 | 1996-08-06 | Inex Pharmaceuticals Corporation | Sphingosomes for enhanced drug delivery |
US5597909A (en) | 1994-08-25 | 1997-01-28 | Chiron Corporation | Polynucleotide reagents containing modified deoxyribose moieties, and associated methods of synthesis and use |
US5556752A (en) | 1994-10-24 | 1996-09-17 | Affymetrix, Inc. | Surface-bound, unimolecular, double-stranded DNA |
US6608035B1 (en) | 1994-10-25 | 2003-08-19 | Hybridon, Inc. | Method of down-regulating gene expression |
US5665557A (en) | 1994-11-14 | 1997-09-09 | Systemix, Inc. | Method of purifying a population of cells enriched for hematopoietic stem cells populations of cells obtained thereby and methods of use thereof |
JP3269301B2 (ja) | 1994-12-28 | 2002-03-25 | 豊田合成株式会社 | ガラスラン用ゴム配合物 |
US6166197A (en) | 1995-03-06 | 2000-12-26 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligomeric compounds having pyrimidine nucleotide (S) with 2'and 5 substitutions |
AU5359496A (en) | 1995-03-06 | 1996-09-23 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Improved process for the synthesis of 2'-o-substituted pyrimidines and oligomeric compounds therefrom |
WO1996037194A1 (en) | 1995-05-26 | 1996-11-28 | Somatix Therapy Corporation | Delivery vehicles comprising stable lipid/nucleic acid complexes |
US5981501A (en) | 1995-06-07 | 1999-11-09 | Inex Pharmaceuticals Corp. | Methods for encapsulating plasmids in lipid bilayers |
US5545531A (en) | 1995-06-07 | 1996-08-13 | Affymax Technologies N.V. | Methods for making a device for concurrently processing multiple biological chip assays |
EP0832271B8 (en) | 1995-06-07 | 2005-03-02 | INEX Pharmaceuticals Corp. | Lipid-nucleic acid particles prepared via a hydrophobic lipid-nucleic acid complex intermediate and use for gene transfer |
US7422902B1 (en) | 1995-06-07 | 2008-09-09 | The University Of British Columbia | Lipid-nucleic acid particles prepared via a hydrophobic lipid-nucleic acid complex intermediate and use for gene transfer |
US5858397A (en) | 1995-10-11 | 1999-01-12 | University Of British Columbia | Liposomal formulations of mitoxantrone |
DE69634606D1 (de) | 1995-10-16 | 2005-05-19 | Dana Farber Cancer Inst Inc | Neue expressionsvektoren und verfahren zu deren verwendung |
US6160109A (en) | 1995-10-20 | 2000-12-12 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Preparation of phosphorothioate and boranophosphate oligomers |
US5854033A (en) | 1995-11-21 | 1998-12-29 | Yale University | Rolling circle replication reporter systems |
US5858401A (en) | 1996-01-22 | 1999-01-12 | Sidmak Laboratories, Inc. | Pharmaceutical composition for cyclosporines |
US5994316A (en) | 1996-02-21 | 1999-11-30 | The Immune Response Corporation | Method of preparing polynucleotide-carrier complexes for delivery to cells |
US6444423B1 (en) | 1996-06-07 | 2002-09-03 | Molecular Dynamics, Inc. | Nucleosides comprising polydentate ligands |
US6639062B2 (en) | 1997-02-14 | 2003-10-28 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Aminooxy-modified nucleosidic compounds and oligomeric compounds prepared therefrom |
US6172209B1 (en) | 1997-02-14 | 2001-01-09 | Isis Pharmaceuticals Inc. | Aminooxy-modified oligonucleotides and methods for making same |
US6034135A (en) | 1997-03-06 | 2000-03-07 | Promega Biosciences, Inc. | Dimeric cationic lipids |
JP3756313B2 (ja) | 1997-03-07 | 2006-03-15 | 武 今西 | 新規ビシクロヌクレオシド及びオリゴヌクレオチド類縁体 |
ATE321882T1 (de) | 1997-07-01 | 2006-04-15 | Isis Pharmaceuticals Inc | Zusammensetzungen und verfahren zur verabreichung von oligonukleotiden über die speiseröhre |
US6794499B2 (en) | 1997-09-12 | 2004-09-21 | Exiqon A/S | Oligonucleotide analogues |
US6528640B1 (en) | 1997-11-05 | 2003-03-04 | Ribozyme Pharmaceuticals, Incorporated | Synthetic ribonucleic acids with RNAse activity |
US6617438B1 (en) | 1997-11-05 | 2003-09-09 | Sirna Therapeutics, Inc. | Oligoribonucleotides with enzymatic activity |
US7273933B1 (en) | 1998-02-26 | 2007-09-25 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Methods for synthesis of oligonucleotides |
US7045610B2 (en) | 1998-04-03 | 2006-05-16 | Epoch Biosciences, Inc. | Modified oligonucleotides for mismatch discrimination |
US6531590B1 (en) | 1998-04-24 | 2003-03-11 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Processes for the synthesis of oligonucleotide compounds |
US6867294B1 (en) | 1998-07-14 | 2005-03-15 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Gapped oligomers having site specific chiral phosphorothioate internucleoside linkages |
CA2335393C (en) | 1998-07-20 | 2008-09-23 | Inex Pharmaceuticals Corporation | Liposomal encapsulated nucleic acid-complexes |
AU6298899A (en) | 1998-10-09 | 2000-05-01 | Ingene, Inc. | Production of ssdna (in vivo) |
AU6430599A (en) | 1998-10-09 | 2000-05-01 | Cytogenix, Inc. | Enzymatic synthesis of ssdna |
US6465628B1 (en) | 1999-02-04 | 2002-10-15 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Process for the synthesis of oligomeric compounds |
WO2000050050A1 (en) | 1999-02-23 | 2000-08-31 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Multiparticulate formulation |
US7084125B2 (en) | 1999-03-18 | 2006-08-01 | Exiqon A/S | Xylo-LNA analogues |
ATE356824T1 (de) | 1999-05-04 | 2007-04-15 | Santaris Pharma As | L-ribo-lna analoge |
US6593466B1 (en) | 1999-07-07 | 2003-07-15 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Guanidinium functionalized nucleotides and precursors thereof |
US6147200A (en) | 1999-08-19 | 2000-11-14 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 2'-O-acetamido modified monomers and oligomers |
WO2001053307A1 (en) | 2000-01-21 | 2001-07-26 | Geron Corporation | 2'-arabino-fluorooligonucleotide n3'→p5'phosphoramidates: their synthesis and use |
US20070026394A1 (en) | 2000-02-11 | 2007-02-01 | Lawrence Blatt | Modulation of gene expression associated with inflammation proliferation and neurite outgrowth using nucleic acid based technologies |
IT1318539B1 (it) | 2000-05-26 | 2003-08-27 | Italfarmaco Spa | Composizioni farmaceutiche a rilascio prolungato per lasomministrazione parenterale di sostanze idrofile biologicamente |
US6998484B2 (en) | 2000-10-04 | 2006-02-14 | Santaris Pharma A/S | Synthesis of purine locked nucleic acid analogues |
CZ308053B6 (cs) | 2000-12-01 | 2019-11-27 | Max Planck Gesellschaft | Izolovaná molekula dvouřetězcové RNA, způsob její výroby a její použití |
US20050176025A1 (en) | 2001-05-18 | 2005-08-11 | Sirna Therapeutics, Inc. | RNA interference mediated inhibition of B-cell CLL/Lymphoma-2 (BCL-2) gene expression using short interfering nucleic acid (siNA) |
US20030170891A1 (en) | 2001-06-06 | 2003-09-11 | Mcswiggen James A. | RNA interference mediated inhibition of epidermal growth factor receptor gene expression using short interfering nucleic acid (siNA) |
WO2003015698A2 (en) | 2001-08-13 | 2003-02-27 | University Of Pittsburgh | Application of lipid vehicles and use for drug delivery |
JP2005528082A (ja) * | 2001-12-18 | 2005-09-22 | モンドバイオテック・ラボラトリーズ・アンスタルト | 間質性肺疾患の治療を向上させるためのインターフェロンγ又はパーフェニドンと分子診断薬との新規医薬組成物 |
EP2314690A1 (en) | 2002-07-10 | 2011-04-27 | Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. | RNA-interference by single-stranded RNA molecules |
US6878805B2 (en) | 2002-08-16 | 2005-04-12 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Peptide-conjugated oligomeric compounds |
US7956176B2 (en) * | 2002-09-05 | 2011-06-07 | Sirna Therapeutics, Inc. | RNA interference mediated inhibition of gene expression using chemically modified short interfering nucleic acid (siNA) |
DK2284266T3 (da) | 2002-11-14 | 2014-01-13 | Thermo Fisher Scient Biosciences Inc | sIRNA-MOLEKYLE MOD TP53 |
US9879266B2 (en) | 2002-11-14 | 2018-01-30 | Thermo Fisher Scientific Inc. | Methods and compositions for selecting siRNA of improved functionality |
WO2004090108A2 (en) | 2003-04-03 | 2004-10-21 | Alnylam Pharmaceuticals | Irna conjugates |
EP3450559A1 (en) | 2003-03-07 | 2019-03-06 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Therapeutic compositions |
WO2005014782A2 (en) | 2003-06-13 | 2005-02-17 | Alnylam Europe Ag., | Double-stranded ribonucleic acid with increased effectiveness in an organism |
JP4731324B2 (ja) | 2003-08-28 | 2011-07-20 | 武 今西 | N−o結合性架橋構造型新規人工核酸 |
CA2554212A1 (en) | 2004-02-10 | 2005-08-25 | Sirna Therapeutics, Inc. | Rna interference mediated inhibition of gene expression using multifunctional short interfering nucleic acid (multifunctional sina) |
US7642348B2 (en) * | 2004-10-04 | 2010-01-05 | Rosetta Genomics Ltd | Prostate cancer-related nucleic acids |
TWI335352B (en) | 2005-03-31 | 2011-01-01 | Calando Pharmaceuticals Inc | Inhibitors of ribonucleotide reductase subunit 2 and uses thereof |
PL2314594T3 (pl) | 2006-01-27 | 2014-12-31 | Isis Pharmaceuticals Inc | Zmodyfikowane w pozycji 6 analogi bicykliczne kwasów nukleinowych |
US8362229B2 (en) | 2006-02-08 | 2013-01-29 | Quark Pharmaceuticals, Inc. | Tandem siRNAS |
NZ571568A (en) | 2006-03-31 | 2010-11-26 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | Double-stranded RNA molecule compositions and methods for inhibiting expression of Eg5 gene |
JP5761911B2 (ja) | 2006-04-07 | 2015-08-12 | イデラ ファーマシューティカルズ インコーポレイテッドIdera Pharmaceuticals, Inc. | Tlr7およびtlr8に対する安定化免疫調節rna(simra)化合物 |
JP5570806B2 (ja) | 2006-05-11 | 2014-08-13 | アルナイラム ファーマシューティカルズ, インコーポレイテッド | Pcsk9遺伝子の発現を阻害するための組成物および方法 |
US8598333B2 (en) | 2006-05-26 | 2013-12-03 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | SiRNA silencing of genes expressed in cancer |
AU2007303205A1 (en) | 2006-10-03 | 2008-04-10 | Tekmira Pharmaceuticals Corporation | Lipid containing formulations |
WO2009014887A2 (en) | 2007-07-09 | 2009-01-29 | Idera Pharmaceuticals, Inc. | Stabilized immune modulatory rna (simra) compounds |
CA3043911A1 (en) | 2007-12-04 | 2009-07-02 | Arbutus Biopharma Corporation | Targeting lipids |
PT2279254T (pt) | 2008-04-15 | 2017-09-04 | Protiva Biotherapeutics Inc | Novas formulações lipídicas para entrega de ácido nucleico |
EP2298359A1 (en) * | 2008-06-04 | 2011-03-23 | Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. | Nucleic acid capable of controlling degranulation of mast cell |
EP2169071A1 (en) * | 2008-09-29 | 2010-03-31 | Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. | Rodent cancer model for human FGFR4 Arg388 polymorphism |
WO2010048536A2 (en) | 2008-10-23 | 2010-04-29 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Processes for preparing lipids |
CA2764158A1 (en) | 2009-06-01 | 2010-12-09 | Halo-Bio Rnai Therapeutics, Inc. | Polynucleotides for multivalent rna interference, compositions and methods of use thereof |
KR20230098713A (ko) | 2009-06-10 | 2023-07-04 | 알닐람 파마슈티칼스 인코포레이티드 | 향상된 지질 조성물 |
US9051567B2 (en) | 2009-06-15 | 2015-06-09 | Tekmira Pharmaceuticals Corporation | Methods for increasing efficacy of lipid formulated siRNA |
US8927513B2 (en) | 2009-07-07 | 2015-01-06 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | 5′ phosphate mimics |
US9512164B2 (en) | 2009-07-07 | 2016-12-06 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleotide end caps |
US8431544B1 (en) | 2009-08-27 | 2013-04-30 | Idera Pharmaceuticals, Inc. | Compositions for inhibiting gene expression and uses thereof |
PT2539451E (pt) * | 2010-02-24 | 2016-03-28 | Arrowhead Res Corp | Composições para entrega de arnsi dirigida ao alvo |
AR080364A1 (es) * | 2010-03-26 | 2012-04-04 | Danisco Us Inc | Tratamiento de fibras queratinosas con una enzima que tiene actividad perhidrolasa |
KR102395085B1 (ko) * | 2011-06-21 | 2022-05-09 | 알닐람 파마슈티칼스 인코포레이티드 | 안지오포이에틴-유사 3(ANGPTL3) iRNA 조성물 및 그 사용 방법 |
US9228188B2 (en) * | 2011-06-21 | 2016-01-05 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and method for inhibiting hepcidin antimicrobial peptide (HAMP) or HAMP-related gene expression |
PE20142362A1 (es) * | 2011-11-18 | 2015-01-30 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | Agentes de iarn, composiciones y metodos de uso de los mismos para tratar enfermedades asociadas con transtiretina (ttr) |
US9133461B2 (en) * | 2012-04-10 | 2015-09-15 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for inhibiting expression of the ALAS1 gene |
US9127274B2 (en) * | 2012-04-26 | 2015-09-08 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Serpinc1 iRNA compositions and methods of use thereof |
AU2013299717B2 (en) | 2012-08-06 | 2018-06-28 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Carbohydrate conjugated RNA agents and process for their preparation |
RS56783B9 (sr) * | 2012-12-05 | 2021-12-31 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | Sastavi pcsk9 irnk i postupci njihovih primena |
CA2904654C (en) | 2013-03-14 | 2023-12-05 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Complement component c5 irna compositions and methods of use thereof |
AU2014236250B2 (en) * | 2013-03-14 | 2019-01-03 | Dicerna Pharmaceuticals, Inc. | Process for formulating an anionic agent |
PT3581654T (pt) * | 2013-12-27 | 2021-06-02 | Dicerna Pharmaceuticals Inc | Métodos e composições para a inibição específica de glicolato oxidase (hao1) por rna de cadeia dupla |
JOP20200115A1 (ar) | 2014-10-10 | 2017-06-16 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | تركيبات وطرق لتثبيط التعبير الجيني عن hao1 (حمض أوكسيداز هيدروكسيلي 1 (أوكسيداز جليكولات)) |
WO2016205323A1 (en) * | 2015-06-18 | 2016-12-22 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Polynucleotde agents targeting hydroxyacid oxidase (glycolate oxidase, hao1) and methods of use thereof |
WO2017001623A1 (en) | 2015-06-30 | 2017-01-05 | British Telecommunications Public Limited Company | Energy management in a network |
US11261447B2 (en) | 2017-07-13 | 2022-03-01 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Methods for inhibition of HAO1 (hydroxyacid oxidase 1 (glycolate oxidase)) gene expression |
CN111845757A (zh) | 2019-04-30 | 2020-10-30 | 通用汽车环球科技运作有限责任公司 | 分心驾驶消除系统 |
CN110649043B (zh) | 2019-09-30 | 2021-11-19 | 厦门天马微电子有限公司 | 阵列基板、显示面板、显示装置及阵列基板的制备方法 |
KR102318555B1 (ko) | 2020-03-19 | 2021-10-29 | 한국과학기술연구원 | 광소자용 역나노콘과 그 제조방법 |
-
2014
- 2014-10-10 JO JOP/2020/0115A patent/JOP20200115A1/ar unknown
-
2015
- 2015-10-08 TW TW112101430A patent/TW202342749A/zh unknown
- 2015-10-08 TW TW110139154A patent/TW202223090A/zh unknown
- 2015-10-08 TW TW104133325A patent/TWI755351B/zh active
- 2015-10-09 SG SG10201913756QA patent/SG10201913756QA/en unknown
- 2015-10-09 CN CN201580066638.8A patent/CN108064154B/zh active Active
- 2015-10-09 KR KR1020237024608A patent/KR20230113654A/ko active Application Filing
- 2015-10-09 AU AU2015330726A patent/AU2015330726B9/en active Active
- 2015-10-09 UA UAA201704421A patent/UA126266C2/uk unknown
- 2015-10-09 RS RS20220081A patent/RS62854B1/sr unknown
- 2015-10-09 EP EP15848512.8A patent/EP3204015B1/en active Active
- 2015-10-09 CN CN202110908964.6A patent/CN113599389A/zh active Pending
- 2015-10-09 PE PE2017000870A patent/PE20171763A1/es unknown
- 2015-10-09 MY MYPI2017701237A patent/MY192926A/en unknown
- 2015-10-09 CA CA3187050A patent/CA3187050A1/en active Pending
- 2015-10-09 JP JP2017518946A patent/JP6836988B2/ja active Active
- 2015-10-09 TN TN2017000125A patent/TN2017000125A1/en unknown
- 2015-10-09 US US15/517,471 patent/US10478500B2/en active Active
- 2015-10-09 NZ NZ730404A patent/NZ730404A/en unknown
- 2015-10-09 HU HUE15848512A patent/HUE057327T2/hu unknown
- 2015-10-09 DK DK15848512.8T patent/DK3204015T3/da active
- 2015-10-09 LT LTEPPCT/US2015/054881T patent/LT3204015T/lt unknown
- 2015-10-09 MX MX2017004634A patent/MX2017004634A/es unknown
- 2015-10-09 EP EP21212946.4A patent/EP4039809A1/en active Pending
- 2015-10-09 SG SG11201702836PA patent/SG11201702836PA/en unknown
- 2015-10-09 PT PT158485128T patent/PT3204015T/pt unknown
- 2015-10-09 CA CA2963843A patent/CA2963843C/en active Active
- 2015-10-09 BR BR112017006469A patent/BR112017006469A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2015-10-09 IL IL310466A patent/IL310466A/en unknown
- 2015-10-09 IL IL251276A patent/IL251276B/en unknown
- 2015-10-09 PL PL15848512T patent/PL3204015T3/pl unknown
- 2015-10-09 HR HRP20211971TT patent/HRP20211971T1/hr unknown
- 2015-10-09 SI SI201531766T patent/SI3204015T1/sl unknown
- 2015-10-09 EA EA201790789A patent/EA037115B1/ru unknown
- 2015-10-09 IL IL293229A patent/IL293229B2/en unknown
- 2015-10-09 KR KR1020177012528A patent/KR102558604B1/ko active IP Right Grant
- 2015-10-09 CR CR20170190A patent/CR20170190A/es unknown
- 2015-10-09 WO PCT/US2015/054881 patent/WO2016057893A1/en active Application Filing
- 2015-10-09 ES ES15848512T patent/ES2905889T3/es active Active
- 2015-10-11 JO JOP/2015/0247A patent/JO3558B1/ar active
- 2015-10-13 UY UY0001036357A patent/UY36357A/es active IP Right Grant
-
2017
- 2017-03-24 ZA ZA2017/02071A patent/ZA201702071B/en unknown
- 2017-04-06 DO DO2017000094A patent/DOP2017000094A/es unknown
- 2017-04-07 MX MX2021005224A patent/MX2021005224A/es unknown
- 2017-04-10 PH PH12017500669A patent/PH12017500669A1/en unknown
- 2017-05-09 EC ECIEPI201728310A patent/ECSP17028310A/es unknown
- 2017-05-10 CO CONC2017/0004728A patent/CO2017004728A2/es unknown
-
2019
- 2019-11-04 US US16/673,863 patent/US11446380B2/en active Active
-
2020
- 2020-10-01 JP JP2020167179A patent/JP7404212B2/ja active Active
-
2021
- 2021-11-17 AU AU2021269372A patent/AU2021269372B2/en active Active
-
2022
- 2022-01-19 CY CY20221100051T patent/CY1125364T1/el unknown
- 2022-03-30 LT LTPA2022004C patent/LTPA2022004I1/lt unknown
- 2022-03-31 HU HUS2200011C patent/HUS2200011I1/hu unknown
- 2022-04-05 NO NO2022009C patent/NO2022009I1/no unknown
- 2022-04-06 CY CY2022008C patent/CY2022008I1/el unknown
- 2022-08-15 US US17/819,691 patent/US20230121944A1/en not_active Abandoned
-
2023
- 2023-12-13 JP JP2023209744A patent/JP2024037855A/ja active Pending
Patent Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20110301229A1 (en) * | 2004-03-15 | 2011-12-08 | Integrated Dna Technologies, Inc. | Methods and compositions for the specific inhibition of gene expression by double-stranded rna |
US20110287974A1 (en) * | 2010-05-24 | 2011-11-24 | Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem Ltd. | Methods and kits for ascertaining biosafety of an agent |
WO2012023960A2 (en) * | 2010-08-17 | 2012-02-23 | Transalgae (Israel) Ltd | Transgenically mitigating the establishment and spread of transgenic algae in natural ecosystems by suppressing the activity of a carbon concentrating mechanism |
WO2013074974A2 (en) * | 2011-11-18 | 2013-05-23 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Modified rnai agents |
US20140288158A1 (en) * | 2011-11-18 | 2014-09-25 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | MODIFIED RNAi AGENTS |
US20140221465A1 (en) * | 2012-04-02 | 2014-08-07 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified polynucleotides for treating galactosylceramidase protein deficiency |
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP7404212B2 (ja) | Hao1(ヒドロキシ酸オキシダーゼ1(グリコール酸オキシダーゼ))遺伝子の発現の阻害のための組成物および方法 | |
JP2023061967A (ja) | Tmprss6 irna組成物及びその使用方法 | |
JP7337044B2 (ja) | Hao1(ヒドロキシ酸オキシダーゼ1(グリコール酸オキシダーゼ))遺伝子発現の阻害方法 | |
EA038792B1 (ru) | КОМПОЗИЦИИ НА ОСНОВЕ RNAi Serpina1 И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ | |
US20230407312A1 (en) | Methods and compositions for inhibition of hao1 (hydroxyacid oxidase 1 (glycolate oxidase)) gene expression | |
US20230392155A1 (en) | Methods and compositions for treating primary hyperoxaluria | |
EA042137B1 (ru) | КОМПОЗИЦИИ НА ОСНОВЕ iRNA TMPRSS6 И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ |