EA035120B1 - Производные пиперидина в качестве ингибиторов hdac1/2 - Google Patents

Производные пиперидина в качестве ингибиторов hdac1/2 Download PDF

Info

Publication number
EA035120B1
EA035120B1 EA201791259A EA201791259A EA035120B1 EA 035120 B1 EA035120 B1 EA 035120B1 EA 201791259 A EA201791259 A EA 201791259A EA 201791259 A EA201791259 A EA 201791259A EA 035120 B1 EA035120 B1 EA 035120B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
compound
mmol
mixture
stirred
alkyl
Prior art date
Application number
EA201791259A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201791259A1 (ru
Inventor
Джон Х. Ван Дуцер
Ральф Мазичек
Original Assignee
Редженаси Фармасьютиклс, Ллк
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Редженаси Фармасьютиклс, Ллк filed Critical Редженаси Фармасьютиклс, Ллк
Publication of EA201791259A1 publication Critical patent/EA201791259A1/ru
Publication of EA035120B1 publication Critical patent/EA035120B1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/496—Non-condensed piperazines containing further heterocyclic rings, e.g. rifampin, thiothixene or sparfloxacin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D211/36—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/56—Nitrogen atoms
    • C07D211/58—Nitrogen atoms attached in position 4
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D409/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Hydrogenated Pyridines (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)

Abstract

В изобретении предложены соединения формулы I, фармацевтические композиции, содержащие такие соединения, и способы применения таких соединений для лечения заболеваний или расстройств, связанных с активностью HDAC1 и/или HDAC2:

Description

Смежные заявки
Заявка на данное изобретение испрашивает приоритет согласно предварительной заявке на патент
США, серийный № 62/091221, поданной 12 декабря 2014 г., и предварительной заявке на патент США, серийный № 62/238,931, поданной 8 октября 2015 г., содержание которых полностью включено в настоящее описание посредством ссылки.
Предшествующий уровень техники
В настоящее время биологической мишенью, представляющей интерес, является гистондеацетилаза (HDAC) (см., например, обсуждение применения ингибиторов гистондеацетилаз для лечения рака: Marks et al. Nature Reviews Cancer, 2001, 7, 194; Johnstone et al. Nature Reviews Drug Discovery, 2002, 287). Посттрансляционная модификация белков посредством ацетилирования и деацетилирования остатков лизина играет критическую роль в регуляции их клеточных функций. HDAC представляют собой цинксодержащие гидролазы, которые модулируют экспрессию генов посредством деацетилирования остатков N-ацетиллизина гистоновых белков и других транскрипционных регуляторов (Hassig et al. Curr. Opin. Chem. Biol. 1997, 1, 300-308). HDAC участвуют в клеточных путях, контролирующих форму и дифференцировку клеток, и было показано, что ингибитор HDAC эффективен при лечении рака, не поддающегося лечению другими методами (Warrell et al. J. Natl. Cancer Inst. 1998, 90, 1621-1625).
Идентифицировано одиннадцать HDAC человека, которые используют Zn в качестве кофактора (Taunton et al. Science, 1996, 272, 408-411; Yang et al. J. Biol. Chem. 1997, 272, 28001-28007. Grozinger et al. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 1999, 96, 4868-4873; Kao et al. Genes Dev. 2000, 14, 55-66. Hu et al. J. Biol. Chem. 2000, 275, 15254-15264; Zhou et al. Proc. Natl. Acad. Sci U.S.A. 2001, 98, 10572-10577; Venter et al. Science, 2001, 291, 1304 - 1351), и члены данного семейства разделяются на три класса (класс I, II и IV) на основании гомологии последовательности к их дрожжевым ортологам (О. Witt et al. Cancer Letters, 2009, 277, 8-21). Класс I HDAC включает HDAC1, HDAC2, HDAC3 и HDAC8, называемые классическими HDAC, что подразумевает присутствие каталитического кармана с ионом Zn2+ в его основании.
Сохраняется необходимость в получении структурно разнообразных ингибиторов HDAC, в особенности таких, которые являются активными и/или селективными ингибиторами конкретных классов HDAC и отдельных HDAC.
Краткое изложение сущности изобретения
В настоящем документе предложены соединения, фармацевтические композиции, содержащие такие соединения, и способы применения таких соединений для лечения заболеваний или расстройств, связанных с активностью HDAC, в частности заболеваний или расстройств, в которые вовлечена экспрессия HDAC1 и/или HDAC2. Заболевания, в которые вовлечена экспрессия HDAC1 и/или HDAC2, включают без ограничений различные типы рака и гемоглобинопатии, такие как серповидноклеточная анемия и бета-талассемия.
Таким образом, в одном аспекте настоящего изобретения предложено соединение формулы I
R2
Y
I или его фармацевтически приемлемая соль.
В одном воплощении настоящего изобретения предложено соединение формулы II
R2
II или его фармацевтически приемлемая соль.
- 1 035120
В конкретном воплощении настоящего изобретения предложено соединение формулы III
R2
III или его фармацевтически приемлемая соль.
В другом воплощении настоящего изобретения предложены соединения, представленные в табл. 1, или их фармацевтически приемлемые соли.
В другом аспекте настоящего изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы I, формулы II, формулы IIa, формулы III или формулы IIIa, соединение, представленное в табл. 1, соединение, представленное в табл. 1a, или их фармацевтически приемлемые соли вместе с фармацевтически приемлемым носителем.
В другом аспекте настоящего изобретения предложен способ ингибирования активности HDAC1 и/или HDAC2 у субъекта, включающий введение субъекту соединения формулы I, формулы II, формулы IIa, формулы III или формулы IIIa, соединения, представленного в табл. 1, соединения, представленного в табл. 1a, или их фармацевтически приемлемых солей.
В другом аспекте настоящего изобретения предложен способ селективного ингибирования активности каждого из HDAC1 и/или HDAC2 по сравнению с другими HDAC у субъекта, включающий введение субъекту соединения формулы I, формулы II, формулы IIa, формулы III или формулы IIIa, соединения, представленного в табл. 1, соединения, представленного в табл. 1a, или их фармацевтически приемлемых солей. В некоторых воплощениях изобретения соединение обладает 5-1000 кратной селективностью к каждому из HDAC1 и/или HDAC2 по сравнению с другими HDAC. В других воплощениях изобретения соединение, протестированное в анализе фермента HDAC, обладает 5-1000 кратной селективностью к каждому из HDAC1 и/или HDAC2 по сравнению с другими HDAC.
В другом аспекте настоящего изобретения предложен способ лечения заболевания, опосредованного одной или более HDAC, у субъекта, включающий введение субъекту соединения формулы I, формулы II, формулы IIa, формулы III или формулы IIIa, соединения, представленного в табл. 1, соединения, представленного в табл. 1a, или их фармацевтически приемлемых солей. В некоторых воплощениях изобретения заболевание опосредовано HDAC1 и HDAC2. В другом воплощении изобретения заболевание опосредовано HDAC1. В еще одном воплощении изобретения заболевание опосредовано HDAC2.
В другом аспекте настоящего изобретения предложен способ лечения заболевания у субъекта, включающий введение субъекту соединения формулы I, формулы II, формулы IIa, формулы III или формулы IIIa, соединения, представленного в табл. 1, соединения, представленного в табл. 1a, или их фармацевтически приемлемых солей. В одном воплощении изобретения заболевание представляет собой миелодиспластический синдром. В одном воплощении изобретения заболевание представляет собой гемоглобинопатию. В одном воплощении изобретения заболевание представляет собой серповидноклеточную анемию. В еще одном воплощении изобретения заболевание представляет собой бета-талассемию.
В другом воплощении изобретения заболевание представляет собой рак. Рак может быть выбран из рака легкого, рака толстой кишки, рака молочной железы, нейробластомы, лейкоза или лимфомы. В еще одном воплощении изобретения рак представляет собой нейробластому. Лейкоз может представлять собой острый миелогенный лейкоз или острый мегакариоцитарный лейкоз.
В другом аспекте настоящего изобретения предложен способ лечения серповидноклеточной анемии, бета-талассемии, миелодиспластического синдрома, острого миелогенного лейкоза, нейробластомы или острого мегакариоцитарного лейкоза у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества соединения формулы I, формулы II, формулы IIa, формулы III или формулы IIIa, соединения, представленного в табл. 1, соединения, представленного в табл. 1a, или их фармацевтически приемлемых солей.
В другом воплощении способов лечения, описанных в настоящем документе, субъект, подлежащий лечению, представляет собой человека.
В еще одном аспекте настоящего изобретения предложен способ лечения заболевания или расстройства, связанного с дефицитом GATA-связывающего белка 2 (Gata2), включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения формулы I, формулы II, формулы IIa, формулы III или формулы IIIa, соединения, представленного в табл. 1, соединения, представленного в табл. 1a, или их фармацевтически приемлемых солей.
- 2 035120
В еще одном аспекте настоящего изобретения предложен способ увеличения экспрессии GATAсвязывающего белка 2 (Gata2) в клетке, включающий приведение клетки в контакт с соединением формулы I, формулы II, формулы IIa, формулы III или формулы IIIa, соединением, представленным в табл. 1, соединением, представленным в табл. 1a, или их фармацевтически приемлемыми солями.
В другом аспекте настоящего изобретения предложен способ индукции экспрессии HbG (гаммаглобина) у субъекта, включающий введение субъекту соединения формулы I, формулы II, формулы IIa, формулы III или формулы IIIa, соединения, представленного в табл. 1, соединения, представленного в табл. 1a, или их фармацевтически приемлемых солей.
Краткое описание графических материалов
На фиг. 1 представлен график, показывающий профиль ингибирования HDAC соединением 003 для HDAC1, HDAC2 и HDAC3 (см. Пример 43).
На фиг. 2 показана концентрация в плазме крови у крыс в зависимости от времени при пероральном введении 40 мг/кг соединения 003 (см. Пример 44).
На фиг. 3 показана индукция фетального глобина in vitro соединением 003 по сравнению с другим известным ингибитором HDAC1/2, соединением A (см. Пример 45).
На фиг. 4 представлен график, показывающий профиль ингибирования HDAC соединением 005 для HDAC1, HDAC2 и HDAC3 (см. Пример 43).
На фиг. 5 показана концентрация в плазме крови у крыс в зависимости от времени при пероральном введении 20 мг/кг соединения 005 (см. Пример 44).
На фиг. 6 показана индукция фетального глобина in vitro соединением 005 по сравнению с другим известным ингибитором HDAC1/2, соединением А (см. Пример 45).
На фиг. 7 показано, что обработка эритроидных предшественников различными ингибиторами HDAC1/2 (соединениями 005 и A) приводит к индукции мРНК Gata2.
Подробное описание изобретения
Настоящее изобретение в целом относится к соединениям, фармацевтическим композициям, содержащим такие соединения, и к способам применения таких соединений для лечения заболеваний или расстройств, связанных с активностью HDAC, в частности, заболеваний или расстройств, в которые вовлечен любой тип экспрессии HDAC1 и/или HDAC2.
Определения
Ниже приведены определения различных терминов, используемых для описания данного изобретения. Эти определения применимы к терминам, используемым на протяжении всего данного описания и всей формулы изобретения, если иное не ограничено в особых случаях, либо по отдельности, либо в составе более широкой группы.
Термин приблизительно в целом указывает на возможное изменение значения не более чем на 10, 5 или 1%. Например, приблизительно 25 мг/кг будет в целом указывать в самом широком смысле на значение 22,5-27,5 мг/кг, т.е. 25±2,5 мг/кг.
Термин алкил относится к насыщенным неразветвленным или разветвленным углеводородным группировкам, содержащим в некоторых воплощениях изобретения от одного до шести или от одного до восьми атомов углерода соответственно. Число атомов углерода в алкильном заместителе может быть указано префиксом Cx-Cy, где x представляет собой минимальное, а y представляет собой максимальное число атомов углерода в заместителе. Аналогично, описание цепи Cx указывает на группу, содержащую x атомов углерода (т.е. не включая число гетероатомов). Примеры G-C'6-алкильных группировок включают без ограничений метильные, этильные, пропильные, изопропильные, н-бутильные, третбутильные, неопентильные, н-гексильные группировки; и примеры Q-Cs-алкильных группировок включают без ограничений метильные, этильные, пропильные, изопропильные, н-бутильные, трет-бутильные, неопентильные, н-гексильные, гептильные и октальные группировки.
Термин алкокси относится к -O-алкильной группировке. Неограничивающие примеры C1-C6алкокси включают метокси, этокси, 1-пропокси, 2-пропокси, н-бутокси, трет-бутокси, пентокси, гексокси и т.д. Алкильная часть алкокси может быть неразветвленной или разветвленной.
Термин арил относится к моно- или полициклической карбоциклической кольцевой системе, имеющей одно или более ароматических колец, конденсированных или неконденсированных, включающих без ограничений фенил (т.е. Cs-арил), нафтил, тетрагидронафтил, инданил, инденил и т.п. В некоторых воплощениях изобретения арильные группы имеют 6 атомов углерода (например, Cs-арил). В некоторых воплощениях изобретения арильные группы имеют от шести до десяти атомов углерода (например, Cs-Qo-арил). В некоторых воплощениях изобретения арильные группы имеют от шести до шестнадцати атомов углерода.
Термин циклоалкил означает одновалентную группу, образованную из моноциклического или полициклического насыщенного или частично ненасыщенного карбоциклического кольцевого соединения. Примеры Cз-C6-циклоалкила включают без ограничений циклопропил, циклобутил, циклопентил и циклогексил; примеры Cз-C8-циклоалкила включают без ограничений циклопропил, циклобутил, циклопентил и циклогексил, циклогептил и циклооктил; и примеры Cз-C12-циклоалкила включают без ограничений циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, бицикло[2.2.1]гептил и бицик- 3 035120 ло[2.2.2]октил. Также рассматриваются одновалентные группы, образованные из моноциклического или полициклического карбоциклического кольцевого соединения, имеющего углерод-углеродную двойную связь в результате удаления одного атома водорода. Примеры таких групп включают без ограничений циклопропенил, циклобутенил, циклопентенил, циклогексенил, циклогептенил, циклооктенил и т.п.
Термин гетероарил относится к моно- или полициклической (например, би- или трициклической или более) конденсированной или неконденсированной группировке или кольцевой системе, имеющей по меньшей мере одно ароматическое кольцо, где один или более образующих кольцо атомов представляет собой гетероатом, такой как атом кислорода, серы или азота. В некоторых воплощениях изобретения гетероарильная группа имеет от одного до восьми атомов углерода, от одного до шести атомов углерода, от двух до шести атомов углерода (например, Ci-Cs-гетероарил, Ci-Ce-гетероарил или C2-C6гетероарил). В другом воплощении изобретения гетероарильная группа имеет от одного до пятнадцати атомов углерода. В некоторых воплощениях изобретения гетероарильная группа содержит от пяти до шестнадцати кольцевых атомов, из которых один кольцевой атом выбран из атомов кислорода, серы и азота; ноль, один, два или три кольцевых атома представляют собой дополнительные гетероатомы, независимо выбранные из атомов кислорода, серы и азота; и остальные кольцевые атомы представляют собой атомы углерода. Гетероарил включает без ограничений пиридинил, пиразинил, пиримидинил, пирролил, пиразолил, имидазолил, тиазолил, оксазолил, изоксазолил, тиазолил, тиадиазолил, оксадиазолил, тиофенил, фуранил, индолил, хинолинил, изохинолинил, бензимидазолил, бензоксазолил, хиноксалинил, акридинил и т.п.
Термин гетероциклил относится к неароматическому 3-, 4-, 5-, 6- или 7-членному кольцу или к би- или трициклической группе конденсированной или неконденсированной системы, где (i) каждое кольцо содержит от одного до трех гетероатомов, независимо выбранных из атомов кислорода, серы и азота, а остальные атомы представляют собой атомы углерода (например, О-О.-гетероциклил. C3-C6гетероциклил или С^^-гетероциклил), (ii) каждое 5-членное кольцо имеет от 0 до 1 двойной связи, и каждое 6-членное кольцо имеет от 0 до 2 двойных связей, (iii) гетероатомы азота и серы могут быть необязательно окислены, (iv) гетероатом азота может быть необязательно кватернизирован и (iv) любое из описанных выше колец может быть конденсировано с бензольным кольцом. Термин гетероциклил включает без ограничений [1,3]диоксолан, пирролидинил, пиразолинил, пиразолидинил, имидазолинил, имидазолидинил, пиперидинил, пиперазинил, оксазолидинил, изоксазолидинил, морфолинил, тиазолидинил, изотиазолидинил и тетрагидрофурил.
Термины галогено и галоген относятся к атому, выбранному из фтора, хлора, брома и йода.
Термин галогеналкил относится к алкильным радикалам, где любой один или более атомов углерода алкила замещены галогено, как определено выше. Галогеналкил охватывает моногалогеналкильные, дигалогеналкильные и полигалогеналкильные радикалы. Термин галогеналкил включает без ограничений фторметил, дифторметил, трифторметил, хлорметил, дихлорметил, трихлорметил и пентафторэтил.
Термин гидрокси относится к радикалу -OH.
Термин HDAC относится к гистондеацетилазам, представляющим собой ферменты, которые удаляют ацетильные группы с остатков лизина в коровых гистонах, что приводит к образованию конденсированного и транскрипционно неактивного хроматина. В настоящее время известно 18 гистондеацетилаз, которые классифицируют на четыре группы. HDAC класса I, включающие HDAC1, HDAC2, HDAC3 и HDAC8, являются родственными гену RPD3 дрожжей. HDAC класса II, включающие HDAC4, HDAC5, HDAC6, HDAC7, HDAC9 и HDAC10, являются родственными гену Hdal дрожжей. HDAC класса III, также известные как сиртуины, являются родственными гену Sir2 и включают SIRT1-7. HDAC класса IV, содержащий только HDAC11, обладает признаками HDAC обоих классов, I и II. Термин HDAC относится к любому одному или более из 18 гистондеацетилаз, если не указано иное.
Термин ингибитор является синонимом термина антагонист.
Термин фармацевтически приемлемая соль относится к тем солям соединений, образованным способом по настоящему изобретению, которые в рамках тщательной медицинской оценки приемлемы для применения в контакте с тканями людей и низших животных, не вызывая неприемлемую токсичность, раздражение, аллергическую реакцию и т.п., и соответствуют рациональному отношению пользы и риска. Кроме того, фармацевтически приемлемые соли относятся к производным описываемых соединений, где исходное соединение модифицировано путем преобразования существующей кислотной или основной группировки в ее солевую форму. Примеры фармацевтически приемлемых солей включают без ограничений соли минеральных или органических кислот основных остатков, таких как амины; основные или органические соли кислотных остатков, таких как карбоновые кислоты; и т.п. Фармацевтически приемлемые соли по настоящему изобретению включают традиционные нетоксичные соли исходного соединения, образованные, например, из нетоксичных неорганических или органических кислот. Фармацевтически приемлемые соли по настоящему изобретению могут быть синтезированы из исходного соединения, содержащего основную или кислотную группировку, традиционными химическими способами. Как правило, такие соли могут быть получены путем взаимодействия форм свободной кислоты или свободного основания этих соединений со стехиометрическим количеством соответствующего основания или кислоты в воде, или в органическом растворителе, или в смеси двух растворителей; как
- 4 035120 правило, предпочтительна неводная среда, такая как эфир, этилацетат, этанол, изопропанол или ацетонитрил. Перечни подходящих солей могут быть найдены в Remington's Pharmaceutical Sciences, 17th ed.,
Mack Publishing Company, Easton, Pa., 1985, p. 1418 и в Journal of Pharmaceutical Science, 66, 2 (1977), каждая из которых полностью включена в настоящий документ посредством ссылки.
Комбинации заместителей и переменных, рассматриваемых данным изобретением, являются только такими, которые приводят в результате к образованию стабильных соединений. Термин стабильный относится к соединениям, обладающим достаточной стабильностью, обеспечивающей возможность их получения, и сохраняющим целостность соединения в течение достаточного периода времени, чтобы быть пригодными для осуществления целей, подробно описанных в настоящем документе (например, терапевтического или профилактического введения субъекту).
Термин субъект относится к млекопитающему. Субъект, таким образом, относится, например, к собакам, кошкам, лошадям, коровам, свиньям, морским свинкам и т.п. Предпочтительно субъект представляет собой человека. Когда субъект представляет собой человека, субъект в настоящем документе может называться пациентом.
Соединения по изобретению
В одном аспекте настоящего изобретения предложено соединение формулы I
или его фармацевтически приемлемая соль, где X1 представляет собой CR7 или N;
X2 представляет собой CH или N;
Y выбран из группы, состоящей из:
Z выбран из группы, состоящей из H, C1-C6-алкила, ^-арила, C(O)NR4R5, C(O)OR6, C(O)C1-C6алкила, C(O)Co-C6-алкил-C6-арила, C(O)-Cз-C6-циклоалкила, C(O)-C2-C6-гетероциклила и C(O)C0-C6алкилгетероарила, где арильные, гетероарильные, циклоалкильные и гетероциклильные группы необязательно замещены одним или двумя заместителями, выбранными из ^-^-алкила, галогена, C1-C6 галогеналкила, гидрокси или ^-^-алкокси;
Ra и Rb представляют собой H или Ra и Rb вместе образуют конденсированный ^-арил;
R1 представляет собой H;
R2 выбран из группы, состоящей из H, ^-^-алкила и ^-арила;
R3 выбран из группы, состоящей из H, ^-^-алкила и ^-арила; или
R2 и R3 вместе образуют ^-^-гетероциклил;
R4 выбран из группы, состоящей из H, C1-C6-алкила, C1-C6-алкил-OH и C1-C6-NH2;
R5 представляет собой ^-^-алкил; или
R4 и R5 вместе образуют ^-^-гетероциклил, где гетероциклил необязательно замещен одним или двумя заместителями, выбранными из C1-C6-алкила, галогена, C1-C6-галогеналкила, гидрокси или C1-C6 алкокси;
R6 выбран из группы, состоящей из C1-C6-алкила и C0-C6-алкил-C6-арила, где арил необязательно замещен одним или двумя заместителями, выбранными из ^-^-алкила, галогена или гидрокси; и
R7 выбран из группы, состоящей из H, C1-C6-алкила и C3-C6-циклоалкила.
В одном воплощении соединения формулы I Ra и Rb представляют собой H и R3 выбран из группы, состоящей из H и ^-арила.
В одном воплощении соединения формулы I Y выбран из группы, состоящей из:
В другом воплощении соединения формулы I Z выбран из группы, состоящей из H, C1-C6-алкила, ^-арила, C(O)OR6, C(O)C1-C6-алкила, C(o)c0-C6-алкил-C6-арила, C(O)-C3-C6-циклоалкила и C(O)C0-C6алкилгетероарила, где арильные, гетероарильные и циклоалкильные группы необязательно замещены
- 5 035120 одним или двумя заместителями, выбранными из С1-Сб-алкила, галогена, Ci-Сб-галогеналкила, гидрокси или СщС^алкокси.
В одном воплощении изобретения соединение формулы I представляет собой соединение формулы II
γ
II или его фармацевтически приемлемую соль.
В одном воплощении соединения формулы I или формулы II каждый из X1 и X2 представляет собой N или каждый из X1 и X2 представляет собой CH.
В другом воплощении соединения формулы I или формулы II Y представляет собой:
В другом воплощении соединения формулы I или формулы II Z выбран из группы, состоящей из C(O)NR4R5, C(O)OR6, С(О)-С3-Сб-циклоалкила, С(О)-С2-Сб-гетероциклила и С(О)С0-Сб-алкилгетероарила, где гетероарил, циклоалкил или гетероциклил необязательно замещены одним или двумя заместителями, выбранными из С1-Сб-алкила, галогена или гидрокси; и
R6 представляет собой Сб-арил.
Еще в одном другом воплощении соединения формулы I или формулы II Z выбран из группы, состоящей из H, С1-Сб-алкила и Сб-арила.
В одном воплощении соединения формулы I или формулы II R1 представляет собой H.
В другом воплощении соединения формулы I или формулы II R2 представляет собой H.
В другом воплощении соединения формулы I или формулы II R3 представляет собой H, метил, этил, изопропил или фенил. В другом воплощении соединения формулы I или формулы II R3 выбран из группы, состоящей из H или Сб-арила. Еще в одном воплощении соединения формулы I или формулы II R3 представляет собой H.
В одном воплощении изобретения соединение формулы I представляет собой соединение формулы IIa
γ
Па или его фармацевтически приемлемую соль.
В одном воплощении соединения формулы I или формулы IIa Y представляет собой:
В другом воплощении соединения формулы IIa Z выбран из группы, состоящей из C(O)NR4R5, C(O)OR6, С^ДС^Сз-циклоалкила, СЮ)-С2-Сб-гетеро11иклила и СЮ)С0-Сб-алкил1гтероарила, где гетероарил, циклоалкил или гетероциклил необязательно замещены одним или двумя заместителями, выбранными из С1-Сб-алкила, галогена или гидрокси; и
R6 представляет собой Сб-арил.
Еще в одном воплощении соединения формулы IIa Z выбран из группы, состоящей из H, С1-Сбалкила и Сб-арила.
В одном воплощении соединения формулы IIa R1 представляет собой H.
В другом воплощении соединения формулы IIa R2 представляет собой H.
В другом воплощении соединения формулы IIa R3 представляет собой H, метил, этил, изопропил или фенил. Еще в одном воплощении соединения формулы IIa R3 представляет собой H.
В конкретном воплощении изобретения R1 представляет собой H; R2 представляет собой H и
R3 представляет собой H.
В следующем воплощении изобретения соединение формулы I представляет собой соединение формулы III
III или его фармацевтически приемлемую соль.
В одном воплощении соединения формулы III каждый из X1 and X2 представляет собой N или каждый из X1 и X2 представляет собой CH.
В одном воплощении соединения формулы III R2 представляет собой H.
В одном воплощении соединения формулы III R3 представляет собой H, метил или изопропил.
В одном воплощении соединения формулы III R4 представляет собой H и R5 представляет собой C1-C6-алкил.
В другом воплощении соединения формулы III R4 и R5 вместе образуют гетероциклил, выбранный из группы, состоящей из морфолинила, пиперидинила, пиперазинила и пирролидинила, где морфолинил, пиперидинил, пиперазинил и пирролидинил необязательно замещены одним или двумя заместителями, выбранными из ^-^-алкила, галогена или гидрокси.
В другом воплощении соединения формулы III X1 и X2 представляют собой N;
R1 представляет собой H;
R2 представляет собой H;
R3 представляет собой H или ^-^-алкил;
R4 и R5 вместе образуют гетероциклил, выбранный из группы, состоящей из морфолинила, пиперидинила, пиперазинила и пирролидинила, где морфолинил, пиперидинил, пиперазинил и пирролидинил необязательно замещены одним или двумя заместителями, выбранными из C1-Cб-алкила, галогена или гидрокси.
В другом воплощении соединения формулы III X1 и X2 представляют собой N;
R1 представляет собой H;
R2 представляет собой H;
R3 представляет собой H;
R4 и R5 вместе образуют гетероциклил, выбранный из группы, состоящей из морфолинила, пиперидинила, пиперазинила и пирролидинила, где морфолинил, пиперидинил, пиперазинил и пирролидинил необязательно замещены одним или двумя заместителями, выбранными из C1-Cб-алкила, галогена или гидрокси.
В следующем воплощении изобретения соединение формулы I представляет собой соединение формулы IIIa
Ша или его фармацевтически приемлемую соль.
В одном воплощении соединения формулы IIIa R2 представляет собой H.
В одном воплощении соединения формулы IIIa R3 представляет собой H, метил или изопропил. В следующем воплощении соединения формулы IIIa R3 представляет собой H.
В одном воплощении соединения формулы III R4 представляет собой H и R5 представляет собой C1-Cб-алкил.
- 7 035120
В одном воплощении соединения формулы IIIa R4 и R5 вместе образуют гетероциклил, выбранный из группы, состоящей из морфолинила, пиперидинила, пиперазинила и пирролидинила, где морфолинил, пиперидинил, пиперазинил и пирролидинил необязательно замещены одним или двумя заместителями, выбранными из Cl-C6-алкила, галогена или гидрокси.
В другом воплощении соединения формулы IIIa
R1 представляет собой H;
R2 представляет собой H;
R3 представляет собой H.
В другом воплощении соединения формулы IIIa
R1 представляет собой H;
R2 представляет собой H;
R3 представляет собой H;
R4 и R5 вместе образуют гетероциклил, выбранный из группы, состоящей из морфолинила, пиперидинила, пиперазинила и пирролидинила, где морфолинил, пиперидинил, пиперазинил и пирролидинил необязательно замещены одним или двумя заместителями, выбранными из C1-C6-алкила, галогена или гидрокси.
В другом аспекте настоящего изобретения предложено соединение, выбранное из любого из соединений, представленных в табл. 1, или его фармацевтически приемлемая соль.
Таблица 1
IC50 (нМ)
- 8 035120
006 ° 6 4,7 22 274
007 сг\> т ό ° 118 703 929
008 Ο^Ν·^> Τ 6 9 37 124
009 Τδ (Ху 1 u 6 32 145 250
010 6¼^2 0<гч''^| Τ C/NH Xs 7,3 26 195
Oil 6¼^2 СГ%''% Τ ό 8,5 32 201
012 О·: /. 19 177 1269
013 Τδ ° 6 4 14 412
- 9 035120
014 Аа ΆΟΗ о 63 299 более 2000
015 СгА^^ Υ ANH As 3,2 12 149
016 A=k к. А 3,2 13 145
017 cYn'A Υ ό 18 99 1739
018 8Ау«а ° ό 12 78 516
019 Η οΑα Υ Α-ΝΗ y~s 0,9 4,2 43
020 'Л (ΑνΑ Υ C? 3,7 17 304
021 °χΑ 15 72 555
- 10 035120
022 Ay 5 18 203
023 ±4!ώ k^NH 3,9 20 267
024 ”о!ад 7 он ο 0 V X 6 26 287
025 Ό4!τ5 Τ ГУ Ζν 7 26 355
026 4ZHji 5=0 ΖΛ x A X н— w 10 72 315
027 SA 121 690 более 2000
028 Sa 74 443 более 2000
- 11 035120
029 оЧ=а О Ν 12 17 541
030 оЧ“± ° ό 7,1 9,4 466
031 Οΐ^Ν'^| </° Α 91 71 264
032 ο4± Ο^Ν^\ Γ) ^Ι\Γ 17 20 397
033 1 Η^/Ν Ν 04=Λ ϊ ο οΑ 1 ό \ y—ΝΗ Μτ' 48 211 более 2000
034 9 04% J ο °·] Τ <γ(_ι ό V /—ΝΗ 93 346 более 2000
- 12 035120
035 н ___N ό СЪ г Л ° V θ’] т аХ ό \ 9— ΝΗ ^7 22 196 1398
036 Ω КЪ J<2 Л S' и °”ι 1 ό NH 74 996 более 2000
037 I ° V (Г Τ 0 432 377 1855
038 <χγΝγΝ'ΐ] Η 4Η2 ΗΝ.Φ U ιυ 0 101 319 более 2000
039 н н XX η ρ 17 59 321
040 н τ Ν Д U J 1 0 0 8 39 277
041 XX η ρ π Ύ ] Η Ο YS ό 14 26 252
042 X] Η Ν ΝΗ |Ι η 1 2 i 210 714 более 2000
В другом аспекте настоящего изобретения предложено соединение, выбранное из любого из соединений, представленных в табл. 1a, или его фармацевтически приемлемая соль.
- 13 035120
Таблица 1a
Номер Структура Номер Структура
001 н O^NH ] X 6 002 н г О N^j νΔ o^n% ]
004 Η O'yy Τ 1^0 005 H ОЧ=Л Ο^Ν'^ι T ύ
006 Η УЧУ • ° ό 007 77/ o^o Τ ό 5
008 ο4=λ Ο^Ν·^> J τ,ο 009 ο ζ.
- 14 035120
012 Η ¢4=6 • Ο=: ό 013 Η 04=6 • ο 6
014 Η 04=6 оДж 6 015 Η 04=6 Τ 4ΝΗ &
016 04=6 c44''4 j 017 Η 64=6 %° ό
018 §4=6 • о χ 019 04=6 cr4^6 Τ' 6« 0s
020 Η 04=6 cr4'4 1 ό 021 Η 04=^
022 Η 0 ^1° ο 023 Η 64=6 c44^6 J ^ΝΗ ο
024 Η 04=6 7 он ο Ад 0> ο 025 Η 545 °4Ο
- 15 035120
026 ГД н 027 Η
028 н 030 “° ό
031 н ОЧУ сгЧЧ Т ά 032
033 сА ό 034 η-^ν ν ολ ° V сА ό
035 Η гЧ 1 1 Η ЧН2 сА 036 4 θ-r ά
037 сЧЧ'Ч Τ ό 038 (4τΝΤι Η ην A 44 0
039 Η η 64“^ 040 Η η ΧΥί η ρ Ο
041 Η ΧΝχΑ η ρ Η о ЧЧ ό 042 9ύ44 η ρ /N0 N<04^,4. о 0
В предпочтительных воплощениях соединения по настоящему изобретению обладают одним или более из следующих свойств: соединение способно к ингибированию по меньшей мере одной гистондеацетилазы (HDAC); соединение способно к ингибированию HDAC1 и/или HDAC2; соединение селективно ингибирует HDAC1 и/или HDAC2 по сравнению с другими HDAC.
Другим объектом настоящего изобретения является применение соединения, как описано в настоящем документе (например, любой из формул, приведенных в настоящем документе), при получении лекарственного средства для применения при лечении расстройства или заболевания, описанного в на- 16 035120 стоящем документе. Другим объектом настоящего изобретения является применение соединения, как описано в настоящем документе (например, любой из формул, приведенных в настоящем документе), для применения при лечении расстройства или заболевания, описанного в настоящем документе.
В другом аспекте настоящего изобретения предложен способ синтеза соединения формулы I, формулы II, формулы IIa, формулы III или формулы IIIa, соединения, представленного в табл. 1, соединения, представленного в табл. 1a, или их фармацевтически приемлемых солей. Синтез соединений по изобретению можно найти в приведенных ниже примерах. В одном воплощении изобретения, таким образом, представлен способ получения соединения любой из формул, приведенных в настоящем документе, с использованием любой одной или комбинации реакций, определенных в настоящем документе. Способ может включать использование одного или более промежуточных соединений или химических реагентов, определенных в настоящем документе.
В другом аспекте настоящего изобретения предложено меченное изотопом соединение любой из формул, определенных в настоящем документе. Такие соединения имеют один или более введенных в соединение изотопов, которые могут быть радиоактивными (например, H, H, C, C, S, P, I и I). Такие соединения полезны для исследований метаболизма лекарственного средства и для диагностики, а также для применения в терапевтических областях.
Защищенные производные соединений по изобретению могут быть получены способами, известными обычным специалистам в данной области техники. Подробное описание применимых методов создания защитных групп и их удаления можно найти в T.W. Greene, Protecting Groups in Organic Chemistry, 3rd edition, John Wiley and Sons, Inc., 1999, и ее последующих изданиях.
Соединения по настоящему изобретению могут быть предпочтительно получены или образованы способом по изобретению в виде сольватов (например, гидратов). Гидраты соединений по настоящему изобретению могут быть предпочтительно получены путем перекристаллизации из смеси водного/органического растворителя с использованием таких органических растворителей, как диоксан, тетрагидрофуран или метанол.
Кроме того, соединения по настоящему изобретению могут иметь одну или более двойных связей или один или более асимметрических центров. Такие соединения могут встречаться в виде рацематов, рацемических смесей, отдельных энантиомеров, индивидуальных диастереомеров, диастереомерных смесей и цис- или транс- или Е- или Z-двойных изомерных форм и других стереоизомерных форм, которые могут быть определены с точки зрения абсолютной стехиометрии как (R)- или (S)- или как (D)- или (L)- для аминокислот. Все такие изомерные формы этих соединений явным образом включены в настоящее изобретение. Оптические изомеры могут быть получены из их соответствующих оптически активных предшественников с помощью описанных выше методик или путем разделения рацемических смесей. Разделение можно осуществлять в присутствии разделяющего агента, с помощью хроматографии или с помощью повторной кристаллизации либо любой комбинации этих методов, хорошо известных специалистам в данной области техники. Дополнительные подробности, касающиеся разделения, можно найти в Jacques, et al., Enantiomers, Racemates, and Resolutions (John Wiley & Sons, 1981). Соединения по данному изобретению могут быть также представлены в множественных таутомерных формах, в таких случаях в изобретение явным образом включены все таутомерные формы соединений, описанных в настоящем документе. Когда описанные в настоящем документе соединения содержат олефиновые двойные связи или другие центры геометрической асимметрии, и если не указано иное, подразумевают, что соединения включают оба геометрических изомера E и Z. Аналогичным образом подразумевают, что также включены все таутомерные формы. Конфигурация любой углерод-углеродной двойной связи, встречающаяся в настоящем документе, выбрана только для удобства и не предназначена для обозначения конкретной конфигурации, если это не указано в тексте; таким образом, углерод-углеродная двойная связь, произвольно изображенная в настоящем документе как транс, может представлять собой цис, транс или смесь двух изомеров в любом соотношении. Все такие изомерные формы таких соединений явным образом включены в настоящее изобретение.
Синтезированные соединения могут быть выделены из реакционной смеси и дополнительно очищены способом, таким как колоночная хроматография, жидкостная хроматография высокого давления или перекристаллизация. Как может быть понятно специалисту в данной области техники, дополнительные способы синтеза соединений приведенных в настоящем документе формул будут очевидны специалистам в данной области техники. Кроме того, различные стадии синтеза могут быть выполнены в альтернативной последовательности или в альтернативном порядке с получением желаемых соединений. Кроме того, растворители, значения температуры, продолжительность реакции и т.д., представленные в настоящем документе, предназначены только для целей иллюстрации, и обычному специалисту в данной области техники понятно, что при изменении условий реакции можно получить целевые соединения по настоящему изобретению. Методологии синтетических химических преобразований и защиты групп (защиты и удаления защиты), полезные при синтезе описанных в настоящем документе соединений, известны в данной области техники.
Перечисление списка химических групп в любом определении переменной в данном документе включает определения данной переменной в качестве любой отдельной группы или комбинации групп,
- 17 035120 включенных в список. Перечисление воплощения изобретения для приведенной в настоящем документе переменной включает данное воплощение в качестве любого отдельного воплощения или в комбинации с любыми другими воплощениями или их частями.
Фармацевтические композиции
В настоящем документе также предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемую соль вместе с фармацевтически приемлемым носителем.
В одном аспекте настоящего изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая любое из соединений по настоящему изобретению (т.е. соединения формулы I, формулы II, формулы IIa, формулы III или формулы IIIa, соединение, представленное в табл. 1, соединение, представленное в табл. 1a, или их фармацевтически приемлемые соли) вместе с фармацевтически приемлемым носителем.
В одном аспекте настоящего изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль вместе с фармацевтически приемлемым носителем.
В одном аспекте настоящего изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы II или его фармацевтически приемлемую соль вместе с фармацевтически приемлемым носителем.
В одном аспекте настоящего изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы IIa или его фармацевтически приемлемую соль вместе с фармацевтически приемлемым носителем.
В одном аспекте настоящего изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы III или его фармацевтически приемлемую соль вместе с фармацевтически приемлемым носителем.
В одном аспекте настоящего изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы IIIa или его фармацевтически приемлемую соль вместе с фармацевтически приемлемым носителем.
В одном аспекте настоящего изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение, представленное в табл. 1, или его фармацевтически приемлемые соли вместе с фармацевтически приемлемым носителем.
В одном аспекте настоящего изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение, представленное в табл. 1a, или его фармацевтически приемлемые соли вместе с фармацевтически приемлемым носителем.
В одном аспекте настоящего изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение 005 или его фармацевтически приемлемую соль вместе с фармацевтически приемлемым носителем.
Эти фармацевтические композиции содержат терапевтически эффективное количество соединения по настоящему изобретению, приготовленного вместе с одним или более фармацевтически приемлемыми носителями. Термин фармацевтически приемлемый носитель означает нетоксичный, инертный твердый, полутвердый или жидкий наполнитель, разбавитель, инкапсулирующий материал или вспомогательное вещество для лекарственной формы любого типа. Фармацевтические композиции можно вводить людям и другим животным перорально, ректально, парентерально, интрацистернально, интравагинально, интраперитонеально, местно (например, посредством порошков, мазей или капель), трансбуккально или в виде перорального или назального спрея.
Соединения по изобретению можно вводить в виде фармацевтических композиций любым традиционным путем, в частности энтерально, например перорально, например, в форме таблеток или капсул, или парентерально, например, в форме инъекционных растворов или суспензий, местно, например, в форме лосьонов, гелей, мазей или кремов, или в назальной форме или в форме суппозитория.
Фармацевтические композиции, содержащие соединение по настоящему изобретению в свободной форме или в форме фармацевтически приемлемой соли в сочетании по меньшей мере с одним фармацевтически приемлемым носителем или разбавителем, можно изготовить традиционным путем способами смешивания, грануляции или покрытия. Например, пероральные композиции могут представлять собой таблетки или желатиновые капсулы, содержащие активный ингредиент вместе с a) разбавителями, например лактозой, декстрозой, сахарозой, маннитом, сорбитом, целлюлозой и/или глицином; b) смазывающими веществами, например кремнеземом, тальком, стеариновой кислотой, ее магниевой или кальциевой солью и/или полиэтиленгликолем; для таблеток также c) связующими веществами, например алюмосиликатом магния, крахмальной пастой, желатином, трагакантом, метилцеллюлозой, натриевой солью карбоксиметилцеллюлозы и/или поливинилпирролидоном; при желании d) разрыхлителями, например крахмалами, агаром, альгиновой кислотой или ее натриевой солью или шипучими смесями; и/или e) адсорбентами, красителями, корригентами и подсластителями. Инъекционные композиции могут представлять собой водные изотонические растворы или суспензии, и суппозитории могут быть изготовлены из жирных эмульсий или суспензий. Композиции могут быть стерилизованными и/или содер- 18 035120 жать адъюванты, такие как консервирующие, стабилизирующие, увлажняющие или эмульгирующие агенты, стимуляторы растворения, соли для регулирования осмотического давления и/или буферные растворы. Кроме того, они также могут содержать другие терапевтически ценные вещества. Подходящие лекарственные формы для трансдермального применения включают эффективное количество соединения по настоящему изобретению с носителем. Носитель может включать абсорбируемые фармакологически приемлемые растворители, способствующие проникновению через кожу организма-хозяина. Например, трансдермальные устройства принимают форму повязки, содержащей элемент подложки, резервуар, содержащий соединение, необязательно с носителями, необязательно барьер, контролирующий скорость, для доставки соединения в кожу организма-хозяина с контролируемой и заданной скоростью в течение пролонгированного периода времени, и средства закрепления устройства на коже. Можно также использовать матричные трансдермальные лекарственные формы. Приемлемые лекарственные формы для местного применения, например на коже или глазах, предпочтительно представляют собой водные растворы, мази, кремы или гели, хорошо известные в данной области техники. Такие формы могут содержать солюбилизаторы, стабилизаторы, агенты, усиливающие тонические свойства, буферные растворы и консерванты.
Твердые дозированные формы таблеток, драже, капсул, пилюль и гранул могут быть приготовлены с покрытиями и оболочками, такими как энтеросолюбильные покрытия, покрытия контролируемого высвобождения и другие покрытия, хорошо известные в области изготовления фармацевтических лекарственных форм. В таких твердых дозированных формах активное соединение может быть смешано по меньшей мере с одним инертным разбавителем, таким как сахароза, лактоза или крахмал. Такие твердые дозированные формы могут также содержать, что является обычной практикой, дополнительные вещества, кроме инертных разбавителей, например смазывающие вещества для таблетирования и другие добавки для таблетирования, такие как стеарат магния и микрокристаллическая целлюлоза. В случае капсул, таблеток и пилюль дозированные формы могут также содержать буферные агенты.
Способы лечения
В настоящем изобретении предложены способы лечения или профилактики расстройств у субъекта, такого как человек или другое животное, путем введения субъекту терапевтически эффективного количества соединения по изобретению в таких количествах и в течение такого времени, которые необходимы для достижения желаемого результата. Термин терапевтически эффективное количество соединения по изобретению означает достаточное количество соединения, чтобы уменьшить симптомы расстройства у субъекта. Как хорошо понятно в области медицины, терапевтически эффективное количество соединения по данному изобретению будет находиться в рациональном соотношении пользы и риска, применимом к любому медикаментозному лечению.
Термин лечащий или лечение при использовании в настоящем документе включает облегчение, уменьшение или ослабление по меньшей мере одного симптома у субъекта или замедление прогрессирования заболевания. Например, лечение может представлять собой уменьшение одного или нескольких симптомов расстройства или полное устранение расстройства, такого как рак. В рамках значения настоящего описания термин лечить также обозначает остановку, задержку начала (т.е. период до клинической манифестации заболевания) и/или снижение риска развития или ухудшения течения заболевания.
Термин защищать используют в настоящем документе для обозначения профилактики, замедления или лечения или всего вместе, если целесообразно, развития, продолжительности или обострения заболевания у субъекта, например млекопитающего или человека.
Термин осуществлять профилактику, осуществляющий профилактику или профилактика при использовании в настоящем документе включает профилактику по меньшей мере одного симптома, связанного с состоянием, заболеванием или расстройством, профилактику которого осуществляют, или обусловленного им.
Как правило, соединения по изобретению будут вводить в терапевтически эффективных количествах посредством любого из обычных и приемлемых способов, известных в данной области техники, либо отдельно, либо в комбинации с одним или более терапевтических средств. Терапевтически эффективное количество может широко варьировать в зависимости от тяжести заболевания, возраста и относительного состояния здоровья субъекта, активности применяемого соединения и других факторов.
В некоторых воплощениях изобретения терапевтическое количество или доза соединений по настоящему изобретению может находиться в диапазоне от приблизительно 0,1 до приблизительно 500 мг/кг (от приблизительно 0,18 до приблизительно 900 мг/м ), альтернативно, от приблизительно 1 до приблизительно 50 мг/кг (от приблизительно 1,8 до приблизительно 90 мг/м2). Как правило, схемы лечения в соответствии с настоящим изобретением включают введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, от приблизительно 10 до приблизительно 1000 мг соединения(й) по данному изобретению в сутки в однократной или многократных дозах. Терапевтические количества или дозы будут также варьировать в зависимости от пути введения, а также от возможности совместного применения с другими средствами.
После улучшения состояния субъекта при необходимости может быть введена поддерживающая доза соединения, композиции или комбинации по данному изобретению. Впоследствии дозировка и/или
- 19 035120 частота введения может быть снижена в зависимости от симптомов до уровня, на котором сохраняется улучшение состояния; после облегчения симптомов до желаемого уровня лечение следует прекратить.
Однако субъекту может потребоваться периодическое лечение на долгосрочной основе после какоголибо рецидива симптомов заболевания.
Однако следует понимать, что суммарное суточное применение соединений и композиций по настоящему изобретению должно определяться лечащим врачом в рамках тщательной медицинской оценки. Конкретная ингибиторная доза для каждого конкретного пациента будет зависеть от различных факторов, включая расстройство, подлежащее лечению, и тяжесть расстройства; активность конкретного применяемого соединения; конкретную применяемую композицию; возраст, массу тела, общее состояние здоровья, пол и рацион питания пациента; время введения, путь введения и скорость выведения конкретного применяемого соединения; продолжительность лечения; лекарственные средства, применяемые в комбинации или одновременно с конкретным применяемым соединением; и подобных факторов, хорошо известных в области медицины.
В одном аспекте изобретения предложен способ селективного ингибирования активности каждого из HDAC1 и/или HDAC2 по сравнению с другими HDAC у субъекта, включающий введение субъекту соединения формулы I, формулы II, формулы IIa, формулы III или формулы IIIa, соединения, представленного в табл. 1, соединения, представленного в табл. 1a или их фармацевтически приемлемых солей.
В одном воплощении изобретения соединение обладает от приблизительно 2- до 1000- (включая диапазоны, такие как, например, от 5- до 1000-, от 10- до 1000-, от 5- до 100- и т.д.) кратно увеличенной селективностью по отношению к каждому из HDAC1 и/или HDAC2 по сравнению с другими HDAC. В другом воплощении изобретения соединение обладает от приблизительно 2- до 1000- (включая диапазоны, такие как, например, от 5- до 1000-, от 10- до 1000-, от 5- до 100- и т.д.) кратно увеличенной селективностью к каждому из HDAC1 и/или HDAC2 при исследовании в анализе фермента HDAC по сравнению с другими HDAC.
В другом аспекте изобретения предложен способ лечения заболевания, опосредованного HDAC, в частности HDAC1 и/или HDAC2, у субъекта, включающий введение субъекту соединения формулы I, формулы II, формулы IIa, формулы III или формулы IIIa, соединения, представленного в табл. 1, соединения, представленного в табл. 1a, или их фармацевтически приемлемых солей. Селективные ингибиторы HDAC1 и HDAC2 по настоящему изобретению обладают благоприятными фармакокинетическими профилями (см., например, Пример 44).
В другом аспекте настоящего изобретения предложен способ лечения заболевания, опосредованного HDAC1 и/или HDAC2, у субъекта, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли.
В одном аспекте настоящего изобретения предложен способ лечения заболевания, опосредованного HDAC1 и/или HDAC2, у субъекта, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества соединения формулы II или его фармацевтически приемлемой соли.
В одном аспекте настоящего изобретения предложен способ лечения заболевания, опосредованного HDAC1 и/или HDAC2, у субъекта, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества соединения формулы IIa или его фармацевтически приемлемой соли.
В одном аспекте настоящего изобретения предложен способ лечения заболевания, опосредованного HDAC1 и/или HDAC2, у субъекта, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества соединения формулы III или его фармацевтически приемлемой соли.
В одном аспекте настоящего изобретения предложен способ лечения заболевания, опосредованного HDAC1 и/или HDAC2, у субъекта, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества соединения формулы IIIa или его фармацевтически приемлемой соли.
В одном аспекте настоящего изобретения предложен способ лечения заболевания, опосредованного HDAC1 и/или HDAC2, у субъекта, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества соединения, представленного в табл. 1, или его фармацевтически приемлемых солей.
В одном аспекте настоящего изобретения предложен способ лечения заболевания, опосредованного HDAC1 и/или HDAC2, у субъекта, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества соединения, представленного в табл. 1a, или его фармацевтически приемлемых солей.
В одном аспекте настоящего изобретения предложен способ лечения заболевания, опосредованного HDAC1 и/или HDAC2, у субъекта, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества соединения 005 или его фармацевтически приемлемой соли.
Ингибирование HDAC1 и HDAC2 является достаточным для осуществления дерепрессии фетального глобина. В культивированных клетках CD34+ костного мозга человека, претерпевающих эритроидную дифференцировку, эти соединения могут вызвать дозозависимое увеличение экспрессии фетального гемоглобина (см., например, Пример 45).
Таким образом, эти соединения способны к дерепрессии фетального глобина посредством ингибирования HDAC. Соответственно, в одном воплощении изобретения соединения способны осуществлять лечение субъекта, страдающего гемоглобинопатией или подверженного ей. В предпочтительном воплощении изобретения соединения способны осуществлять лечение серповидноклеточной анемии или бета- 20 035120 талассемии.
В другом воплощении изобретения соединения по изобретению полезны при лечении миелодиспластических синдромов.
В некоторых воплощениях изобретения соединения по настоящему изобретению полезны в качестве противораковых средств. Соединения по изобретению способны к индукции апоптоза в раковых клетках, таким образом, они способны осуществлять лечение заболевания, такого как рак или пролиферативное заболевание. В одном воплощении изобретения соединения по изобретению могут быть полезны при лечении рака посредством уничтожения опухолевых клеток или ингибирования роста опухолевых клеток.
В некоторых воплощениях изобретения рак представляет собой рак легкого, рак толстой и прямой кишки, рак молочной железы, рак предстательной железы, рак печени, рак поджелудочной железы, рак головного мозга, рак почки, рак яичника, рак желудка, рак кожи, рак кости, рак ЖКТ, глиому, глиобластому, нейробластому, печеночно-клеточную карциному, папиллярную почечную карциному, плоскоклеточную карциному головы и шеи, лейкоз, лимфомы, миеломы, ретинобластому, рак шейки матки, меланому и/или рак кожи, рак мочевого пузыря, рак матки, рак яичка, рак пищевода и солидные опухоли. В некоторых воплощениях изобретения рак представляет собой рак легкого, рак толстой кишки, рак молочной железы, нейробластому, лейкоз или лимфомы. В других воплощениях изобретения рак представляет собой рак легкого, рак толстой кишки, рак молочной железы, нейробластому, лейкоз или лимфому. В следующем воплощении изобретения рак представляет собой немелкоклеточный рак легкого (НМРЛ) или мелкоклеточный рак легкого. В другом воплощении изобретения рак представляет собой нейробластому.
В следующих воплощениях изобретения рак представляет собой гемобластоз, такой как лейкоз или лимфома. В некоторых воплощениях изобретения лимфома представляет собой ходжкинскую лимфому или неходжкинскую лимфому. В некоторых воплощениях изобретения лейкоз представляет собой миелоидный, лимфоцитарный, миелоцитарный, лимфобластный или мегакариоцитарный лейкоз. В конкретном воплощении изобретения лейкоз представляет собой острый миелогенный лейкоз и мегакариоцитарный лейкоз.
В другом аспекте настоящего изобретения предложен способ лечения серповидноклеточной анемии, бета-талассемии, миелодиспластического синдрома, острого миелогенного лейкоза, нейробластомы или мегакариоцитарного лейкоза у субъекта, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения формулы I, формулы II, формулы IIa, формулы III или формулы IIIa, соединения, представленного в табл. 1, соединения, представленного в табл. 1a, или их фармацевтически приемлемых солей.
В другом аспекте настоящего изобретения предложен способ лечения серповидноклеточной анемии, бета-талассемии, миелодиспластического синдрома, острого миелогенного лейкоза, нейробластомы или мегакариоцитарного лейкоза у субъекта, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли.
В одном аспекте настоящего изобретения предложен способ лечения серповидноклеточной анемии, бета-талассемии, миелодиспластического синдрома, острого миелогенного лейкоза, нейробластомы или мегакариоцитарного лейкоза у субъекта, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества соединения формулы II или его фармацевтически приемлемой соли.
В одном аспекте настоящего изобретения предложен способ лечения серповидноклеточной анемии, бета-талассемии, миелодиспластического синдрома, острого миелогенного лейкоза, нейробластомы или мегакариоцитарного лейкоза у субъекта, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества соединения формулы IIa или его фармацевтически приемлемой соли.
В одном аспекте настоящего изобретения предложен способ лечения серповидноклеточной анемии, бета-талассемии, миелодиспластического синдрома, острого миелогенного лейкоза, нейробластомы или мегакариоцитарного лейкоза у субъекта, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества соединения формулы III или его фармацевтически приемлемой соли.
В одном аспекте настоящего изобретения предложен способ лечения серповидноклеточной анемии, бета-талассемии, миелодиспластического синдрома, острого миелогенного лейкоза, нейробластомы или мегакариоцитарного лейкоза у субъекта, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества соединения формулы IIIa или его фармацевтически приемлемой соли.
Способы, описанные в настоящем изобретении, включают способы, где субъекта определяют как нуждающегося в конкретном указанном лечении. Определение субъекта, нуждающегося в таком лечении, может быть основано на суждении субъекта или медицинского работника и может быть субъективным (например, мнение) или объективным (например, измеримым с помощью теста или способа диагностики).
Также, как обсуждалось выше, соединения по изобретению являются селективными ингибиторами HDAC1 и/или HDAC2 и, как таковые, полезны при лечении расстройств, модулируемых этими гистондеацетилазами (HDAC). Например, соединения по изобретению могут быть полезны при лечении рака (например, рака легкого, рака толстой кишки, рака молочной железы, нейробластомы, лейкоза или лимфом
- 21 035120 и т.д.). Соответственно, еще в одном аспекте в соответствии со способами лечения по настоящему изобретению происходит уничтожение опухолевых клеток или ингибирование их роста в результате приведения в контакт указанных опухолевых клеток с соединением или композицией по изобретению, как описано в настоящем документе.
Таким образом, в другом аспекте изобретения предложены способы лечения рака, включающие введение субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения по изобретению (т.е. соединения любой из формул, описанных в настоящем документе), как описано в настоящем документе. В некоторых воплощениях изобретения субъекта определяют как нуждающегося в таком лечении. В некоторых воплощениях изобретения предложен способ лечения рака, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения по изобретению или фармацевтической композиции, содержащей соединение по изобретению, в таких количествах и в течение такого времени, которые необходимы для достижения желаемого результата. В некоторых воплощениях настоящего изобретения терапевтически эффективное количество соединения или фармацевтической композиции по изобретению представляет собой количество, эффективное для уничтожения или ингибирования роста опухолевых клеток. Соединения и композиции в соответствии со способом по настоящему изобретению можно вводить, используя любое количество и любой путь введения, которые эффективны для уничтожения или ингибирования роста опухолевых клеток. Таким образом, выражение количество, эффективное для уничтожения или ингибирования роста опухолевых клеток, используемое в настоящем документе, относится к достаточному количеству агента для уничтожения или ингибирования роста опухолевых клеток. Точное требующееся количество будет варьировать от субъекта к субъекту в зависимости от биологического вида, возраста и общего состояния субъекта, тяжести инфекции, конкретного противоракового средства, способа его применения и т.п.
В некоторых воплощениях изобретения способ включает введение субъекту (включая без ограничений человека или животное), нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения или его фармацевтически приемлемого производного. В некоторых воплощениях изобретения соединения по изобретению полезны для лечения рака и других пролиферативных расстройств, включающих без ограничений рак легкого (например, немелкоклеточный рак легкого), рак толстой и прямой кишки, рак молочной железы, рак предстательной железы, рак печени, рак поджелудочной железы, рак головного мозга, рак почки, рак яичника, рак желудка, рак кожи, рак кости, рак ЖКТ, глиому, глиобластому, нейробластому, печеночно-клеточную карциному, папиллярную почечную карциному, плоскоклеточную карциному головы и шеи, лейкоз (например, ХМЛ, ОМЛ, ХЛЛ, ОЛЛ), лимфомы (неходжкинскую и ходжкинскую), миеломы, ретинобластому, рак шейки матки, меланому и/или рак кожи, рак мочевого пузыря, рак матки, рак яичка, рак пищевода и солидные опухоли.
В некоторых воплощениях изобретения предложен способ лечения любого из расстройств, описанных в настоящем документе, где субъект представляет собой человека.
В соответствии с вышеописанным в настоящем изобретении дополнительно предложен способ профилактики или лечения любого из описанных выше заболеваний или расстройств у субъекта, нуждающегося в таком лечении, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества соединения по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли. Для любого из описанных выше видов применения необходимая дозировка будет варьировать в зависимости от способа применения, конкретного состояния, подлежащего лечению, и желаемого эффекта.
Примеры
Ниже приведены примеры с целью иллюстрации и описания некоторых конкретных воплощений изобретения. Однако объем формулы изобретения никоим образом не ограничен приведенными в настоящем документе примерами. Специалистам в данной области техники будут очевидны различные изменения и модификации, и такие изменения и модификации, включающие без ограничений относящиеся к химическим структурам, заместителям, производным, лекарственным формам и/или способам по изобретению, могут быть выполнены без отклонения от сущности изобретения и объема его прилагаемой формулы. Определения переменных в структурах схем настоящего документа сопоставимы с соответствующими позициями представленных в настоящем документе формул.
- 22 035120
Пример 1. Синтез соединения 001
Стадия 1. бис-(Триметилсилил)амид лития (1,0 М раствор в ТГФ, 240 мл, 240 ммоль) медленно добавляли в круглодонную колбу с соединением 1 (25 г, 120 ммоль) при -76°C в атмосфере N2. Реакционную смесь перемешивали в течение 4 ч при -76°C, после чего в систему вводили йодметан (15 мл, 240 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при -76°C в течение 30 мин, а затем подогревали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь гасили 150 мл насыщенного водного раствора NH4Cl, разбавляли водой и экстрагировали EtOAc (этилацетатом, или ЭА). Органические слои промывали водой и соляным раствором и высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением целевого соединения 2 (25 г, 93%) в виде светло-желтого твердого вещества.
Стадия 2. K2CO3 (31 г, 224 ммоль) добавляли в раствор соединения 2 (25 г, 111 ммоль) в ДМСО (120 мл). В систему медленно добавляли H2O2 (100 мл) при 60°C и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 60°C. Затем систему вводили в холодную воду и экстрагировали ЭА. Органические слои промывали водой и соляным раствором и высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением целевого соединения 3 (26 г, 96%) в виде белого твердого вещества.
Стадия 3. Соединение 3 (26 г, 107 ммоль) растворяли в ACN (ацетонитриле) (200 мл) и 5н. KOH (100 мл). Затем в систему добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилимидазолидин-2,4-дион (15 г, 54 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи и концентрировали для удаления ACN. pH водной фазы доводили до приблизительно 5 2н. HCl в ледяной бане, экстрагировали ЭА и отделяли. Затем pH водной фазы доводили до 10. Осадок собирали с получением соединения 4 в виде белого твердого вещества (16 г, 69%).
Стадия 4. Раствор соединения 4 (2 г, 9,34 ммоль), 2-хлорпиримидина (2,6 г, 14,02 ммоль) и диизопропилэтиламина (DIPEA) (5,3 г, 28,03 ммоль) в 1,4-диоксане (25 мл) нагревали при 95°C в течение ночи. Затем реакционную смесь концентрировали и очищали с помощью колонки силикагеля с ЭА:петролейным эфиром (ПЭ) (1:5) с получением соединения 5 (1,8 г, 53%) в виде светло-желтого твердого вещества.
Стадия 5. Раствор соединения 5 (465 мг, 1,28 ммоль), 2н. NaOH (10 мл, 20 ммоль) в тетрагидрофуране (ТГФ) (10 мл) и EtOH (10 мл) нагревали при 55°C в течение 2 ч. Реакционный раствор концентрировали и pH водной фазы доводили до значения приблизительно 5-6. Полученный в результате раствор экстрагировали ЭА, органические слои промывали водой и соляным раствором, затем высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением целевого соединения 6 (400 мг, 93%) в виде белого твердого вещества.
Стадия 6. Смесь соединения 6 (400 мг, 1,19 ммоль), амина (345 мг, 1,19 ммоль), 1-этил-3-(3диметиламинопропил)карбодиимида (EDCI) (307 мг, 2,38 ммоль) и диметиламинопиридина (DMAP) (290 мг, 2,38 ммоль) в диметилформамиде (ДМФ) (10 мл) нагревали при 55°C в течение ночи. Смесь смешивали с водой и экстрагировали ЭА. Органические слои промывали водой и соляным раствором, затем высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Полученную в результате композицию очищали с помощью колонки силикагеля с ЭА:ПЭ (1:2) с получением соединения 7 (400 мг, 55%) в виде твердого вещества пурпурного цвета.
Стадия 7. Раствор соединения 7 (400 мг, 0,65 ммоль) в 1,4-диоксане (10 мл) с HCl/1,4-диоксаном (5 мл, 20 ммоль) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционный раствор концентрировали и промывали ПЭ с получением целевого соединения 8 (350 мг, 100%) в виде серого твердого вещества.
Стадия 8. Соединение 8 (162 мг, 0,4 ммоль) и Et3N (80 мг, 0,8 ммоль) растворяли в ТГФ (5 мл). В систему добавляли изопропилизоцианат (регистрационный номер CAS: 1795-48-8, 1,2 экв.). Смесь пере- 23 035120 мешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Затем смесь концентрировали и очищали с помощью препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с получением соединения
001 (35 мг, 16%).
1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 9,51 (s, 1H), 8,84 (s, 2H), 7,50 (s, 1H), 7,44 (d, J=2,0 Гц, 1H), 7,35 (d, J=5,1 Гц, 1H), 7,29 (dd, J=8,3, 2,1 Гц, 1h), 7,23 (d, J=2,7 Гц, 1H), 7,05 (dd, J=5,0, 3,6 Гц, 1H), 6,79 (d, J=8,3 Гц, 1H), 6,09 (d, J=7,6 Гц, 1H), 5,20 (s, 2H), 3,53 (d, J=13,6 Гц, 2H), 3,05 (t, J=10,7 Гц, 2H), 2,25 (d, J=13,8 Гц, 2H), 1,53-1,44 (m, 2H), 1,42 (s, 3H), 1,08 (d, J=6,6 Гц, 1H), 1,04 (d, J=6,6 Гц, 6H).
ЖХМС: m/z = 494 (M+H).
Пример 2. Синтез соединения 002
Стадия 1. К раствору соединения 1 (3 г, 14,28 ммоль), кипящему в 3-горлой колбе с продуванием N2 добавляли LHDMS (1 М, 21,4 мл) при -78°C. Реакционную смесь перемешивали в течение 3 ч, а затем медленно добавляли 2-йодпропан (3,6 г, 21,43 ммоль). Реакционный раствор перемешивали при -78°C и подогревали до комнатной температуры в течение ночи. Смесь гасили H2O (2 мл) и концентрировали, растворяли в ЭА (200 мл) и промывали водой (2x100 мл), а затем насыщенным водным раствором NaCl (100 мл). Органический слой концентрировали с получением соединения 2 в виде коричневого твердого вещества (4 г, 100%).
Стадия 2. К раствору соединения 2 (1 г, 3,97 ммоль) в ДМСО (30 мл) добавляли K2CO3 (1,6 г, 11,9 ммоль). Полученную в результате реакционную смесь перемешивали при 60°C. Затем добавляли по каплям H2O2 (30% водный раствор, 5 мл) и перемешивали в течение 2 ч. К смеси добавляли ЭА (100 мл), а затем смесь промывали водой (2x50 мл) и насыщенным водным раствором NaCl (50 мл). В результате высушивания безводным Na2SO4 и концентрирования получали соединение 3 в виде белого твердого вещества (1 г, 90%).
Стадия 3. К раствору соединения 3 (2,7 г, 10 ммоль) в ACN (50 мл) добавляли KOH (4н., водный раствор, 50 мл) и 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (DBDMH) (2,81 г, 5 ммоль) при 0°C. Полученную в результате реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали и добавляли 1н. HCl до доведения pH до приблизительно 6. Затем смесь экстрагировали ЭА (50 мл), а затем водную фазу доводили приблизительно до pH 9 добавлением KOH. Полученную в результате водную фазу экстрагировали ЭА (3x50 мл). Фазу ЭА высушивали безводным Na2SO4 и концентрировали с получением соединения 4 в виде бесцветной жидкости (1 г, 40%).
Стадия 4. Раствор соединения 4 (500 мг, 2,06 ммоль) и этил-2-хлорпиримидин-5-карбоксилата (384 мг, 2,06 ммоль) в Х-метил-2-пирролидоне (NMP) (10 мл) продували N2 и перемешивали при 140°C в течение 1 ч. К смеси добавляли ЭА (100 мл), после чего ее промывали водой (2x50 мл) и насыщенным водным раствором NaCl (50 мл). В результате концентрирования и очистки колоночной хроматографией на силикагеле (ПЭ:ЭА (5:1)) получали соединение 5 в виде белого твердого вещества (120 мг, 15%).
Стадия 5. К смеси соединения 5 (400 мг) в EtOH (водный 95% раствор, 5 мл) добавляли NaOH (2 М, 5 мл) и реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 2 ч. К смеси добавляли воду (50 мл), и pH доводили до приблизительно 7 лимонной кислотой. Полученную в результате водную смесь экстрагировали ЭА (3x50 мл). Фазу ЭА высушивали безводным Na2SO4 и концентрировали с получением соединения 6 в виде белого твердого вещества (340 мг, неочищенное).
Стадия 6. Раствор соединения 6 (100 мг, неочищенное), амина (79,6 мг, 0,274 ммоль), EDCI (71 мг, 0,549 ммоль), 1-гидрокси-7-азабензотриазола (HOAT) (75 мг, 0,549 ммоль), DMAP (3,4 мг, 0,027 ммоль),
- 24 035120
DIPEA (142 мг, 1,1 ммоль) в ДМФ (5 мл) перемешивали при 55°C в течение ночи. К смеси добавляли ЭА (100 мл), после чего ее промывали водой (3x50 мл) и концентрировали с получением соединения 7 в виде коричневого масла (200 мг, неочищенное).
Стадия 7. К раствору соединения 7 (200 мг, неочищенное) в ДХМ (2 мл) добавляли трифторуксусную кислоту (ТФУ) (2 мл) и полученную в результате смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Смесь концентрировали с получением соединения 8 в виде коричневого масла (200 мг, 20%).
Стадия 8. К раствору соединения 8 (100 мг, неочищенное) в ДХМ (5 мл) добавляли DIPEA (88,8 мг, 0,688 ммоль) и (44,6 мг, 0,275 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч. Смесь концентрировали и очищали препаративной ВЭЖХ с получением соединения 002 в виде белого твердого вещества (34 мг, 35%).
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 9,75 (s, 1H), 9,64 (s, 1H), 8,84 (s, 2H), 7,58 (s, 1H), 7,47 (d, J=1.9 Гц, 1H), 7,39 (d, J=4,9 Гц, 1H), 7,35 (dd, J=8,3, 2,1 Гц, 1H), 7,28 (d, J=3,3 Гц, 1H), 7,09-7,04 (m, 1H), 6,88 (d, J=8,4 Гц, 1H), 3,64 (d, J=10.5 Гц, 2H), 3,50 (d, J=11,9 Гц, 2H), 3,37 (d, J=8.4 Гц, 2H), 2,98 (dd, J=30,8, 11,3 Гц, 6H), 2,81 (s, 3H), 2,61-2,55 (m, 1H), 2,38 (d, J=11,7 Гц, 2H), 1,51 J=6,9 Гц, 6H).
ЖХМС: m/z = 563 (M+H).
Пример 3. Синтез соединения 003 (t, J=11,1 Гц, 2H), 0,86 (d,
Стадия 1. Смесь 2-О-пиримидина (1,86 г, 10 ммоль), амина (3,00, 15 ммоль) и NEt3 (3,0 г, 30 ммоль) в 1,4-диоксане (20 мл) перемешивали при 95°C в течение ночи. Смесь концентрировали, добавляли ЭА (60 мл) и водный раствор лимонной кислоты (60 мл) и полученную в результате смесь перемешивали в течение 30 мин. Органический слой отделяли, высушивали и концентрировали с получением соединения 2 (3,4 г, выход: 97%) в виде светло-желтого твердого вещества.
Стадия 2. Смесь соединения 2 (3,5 г, 10 ммоль) и NaOH (2 М, 15 мл) в EtOH (15 мл) и ТГФ (15 мл) перемешивали при 60°C в течение 2 ч. Смесь концентрировали и добавляли водный раствор лимонной кислоты до pH менее 7. Полученную в результате смесь перемешивали в течение 30 мин и фильтровали с получением соединения 3 (2,8 г, выход: 90%) в виде светло-желтого твердого вещества.
Стадия 3. Смесь соединения 3 (3,2 г, 10 ммоль), соединения амина (2,9 г, 10 ммоль), HOAT (2,0 г, 15 ммоль), EDCI (3,8 г, 20 ммоль) в ДМФ (25 мл) перемешивали при 60°C в течение ночи. К смеси добавляли ЭА (100 мл) и насыщенный водный раствор NaCl (100 мл) и полученную в результате смесь перемешивали в течение 30 мин. Органический слой отделяли, промывали насыщенным водным раствором NaCl (2x50 мл), высушивали и концентрировали с получением остатка, который промывали CH3CN (1020 мл) с получением соединения 4 (2,9 г, 50%) в виде серого твердого вещества.
Стадия 4. К раствору соединения 4 (2,9 г, 5 ммоль) в ДХМ (30 мл) добавляли ТФУ (5 мл) при комнатной температуре в течение 2 ч. Смесь концентрировали с получением соединения 5 (2,9 г, 100%) без дополнительной очистки.
Стадия 5. К раствору соединения 4 (197 мг, 0,5 ммоль) и NEt3 (250 мг, 2,5 ммоль) в ДХМ (5 мл) добавляли морфолин-4-карбонилхлорид (194 мг, 0,65 ммоль) при 0°C. Для отслеживания хода реакции до завершения использовали жидкостную хроматографию с масс-спектрометрией (ЖХМС). К реакционной смеси добавляли NH3-H2O (0,5 мл), которую затем перемешивали в течение 30 мин и концентрировали с получением остатка. В результате очистки на колонке силикагеля получали соединение 003 (114 мг, 45%) в виде светло-желтого твердого вещества.
1H ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 9,54 (s, 1H), 8,85 (s, 2H), 7,88 (d, J=7,9 Гц, 1H), 7,44 (d, J=1,9 Гц, 1H), 7,35 (d, J=5,0 Гц, 1H), 7,29 (dd, J=8,3, 2,1 Гц, 1H), 7,24 (d, J=3,4 Гц, 1H), 7,05 (dd, J=4,9, 3,7 Гц, 1H), 6,79 (d, J=8,3 Гц, 1H), 5,21 (s, 2H), 4,01 (dd, J=7,2, 3,3 Гц, 1H), 3,68-3,51 (m, 7H), 3,18-3,04 (m, 5H), 2,88 (t, J=11,7 Гц, 2H), 1,86 (d, J=10,0 Гц, 2H), 1,45 (dd, J=20,5, 11,3 Гц, 2H).
ЖХМС: m/z = 508 (M+H).
- 25 035120
Пример 4. Синтез соединения 004
Стадия 1. Раствор амина 1 (1 г, 4,67 ммоль), метил-4-бромбензоата (1 г, 4,67 ммоль), Pd2(dba)3 (428 мг, 0,47 ммоль), 2-дициклогексилфосфино-2',6'-ди-и-пропокси-1,1'-бифенил (RuPhos) (218 мг, 0,47 ммоль), Cs2CO3 (4,5 г, 14,0 ммоль) в толуоле (50 мл) продували N2 и перемешивали при 98°C в течение ночи. Смесь фильтровали, концентрировали и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (ПЭ:ЭА (5:1 - 1:1)) с получением соединения 2 в виде желтого твердого вещества (1,1 г, 65%).
Стадия 2. К смеси соединения 2 (1,1 г) в EtOH (водный 95% раствор, 5 мл) добавляли NaOH (2 М, 5 мл) и полученный в результате раствор перемешивали при 55°C в течение 2 ч. К смеси добавляли воду (50 мл), и pH доводили до 7 лимонной кислотой. Полученную в результате смесь экстрагировали ЭА (3x50 мл). Фазу ЭА высушивали безводным Na2SO4 и концентрировали с получением соединения 3 в виде белого твердого вещества (1 г, неочищенное).
Стадия 3. Раствор соединения 3 (800 мг, неочищенное), амина (694 мг, 2,395 ммоль), EDCI (618 мг, 4,790 ммоль), НОАТ (651 мг, 4,790 ммоль), DMAP (29 мг, 0,239 ммоль) и DIPEA (927 мг, 7,186 ммоль) в ДМФ (20 мл) перемешивали при 55°C в течение 3 дней. К смеси добавляли ЭА (100 мл) и полученный в результате раствор промывали водой (3x50 мл), концентрировали и очищали хроматографией на силикагеле (ПЭ:ЭА (6:1 - 1:1)) с получением соединения 4 в виде коричневого твердого вещества (650 мг, 45%).
Стадия 4. К раствору соединения 4 (300 мг) в ДХМ (2 мл) добавляли ТФУ (2 мл), и полученный в результате раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Смесь концентрировали с получением соединения 5 в виде коричневого масла (400 мг, неочищенное).
Стадия 5. К раствору соединения 5 (200 мг, неочищенное) в ДХМ (20 мл) добавляли DIPEA (190 мг, 1,478 ммоль) и морфолин-4-карбонилхлорид (110 мг, 0,739 ммоль). Полученную в результате реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч. Смесь концентрировали и очищали препаративной ВЭЖХ с получением соединения 004 в виде белого твердого вещества (67,4 мг).
1H ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 9,85 (s, 1H), 7,81 (t, J=21,9 Гц, 2H), 7,58 (d, J=1,7 Гц, 1H), 7,53-7,42 (m, 2H), 7,40 (d, J=3,1 Гц, 1h), 7,11 (dd, J=5,0, 3,6 Гц, 2H), 6,92 (s, 2H), 3,63-3,47 (m, 4H), 3,31-3,01 (m, 8H), 1,98 (d, J=14,0 Гц, 2H), 1,63 (d, J=12,9 Гц, 2H), 1,37 (s, 3H).
ЖХМС: m/z = 520 (M+H).
Пример 5. Синтез соединения 005
Стадия 1. К раствору соединения 1 (1 г, 5 ммоль) и метил-4-бромбензоата (1,1 г, 5 ммоль) в толуоле (20 мл) добавляли Pd2(dba)3 (230 мг, 0,25 ммоль), RuPhos (290 мг, 0,5 ммоль) и Cs2CO3 (4,9 г, 15 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 95°C в течение ночи в атмосфере N2. После того как исходное вещество было полностью израсходовано, гетерогенную смесь фильтровали через диатомит и концентрировали в вакууме с получением вязкого масла, которое очищали на колонке силикагеля с получением соединения 2 (1 г, 60%).
Стадия 2. Соединение 2 (1 г, 3 ммоль) растворяли в MeOH (10 мл) и ТГФ (10 мл). Затем в раствор добавляли 2н. NaOH (15 мл). Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 1 ч. Затем реакционную смесь концентрировали, чтобы удалить растворитель, и pH доводили до значения приблизительно 4- 26 035120 и экстрагировали ЭА. Органическую фазу промывали соляным раствором и высушивали над Na2SO4. В результате концентрирования органической фазы получали соединение 3 (800 мг, 82%) в виде белого твердого вещества.
Стадия 3. К раствору соединения 3 (500 мг, 1,56 ммоль) и амина (453 мг, 1,56 ммоль) в ДМФ (10 мл) добавляли HOAT (421 мг, 3,1 ммоль), EDCI (592 мг, 3,1 ммоль) и DIPEA (400 мг, 3,1 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение ночи. Реакционную смесь гасили водой и экстрагировали ЭА. Органическую фазу промывали соляным раствором и высушивали над Na2SO4. В результате очистки на колонке силикагеля получали соединение 4 (800 мг, 80%) в виде светло-желтого твердого вещества.
Стадия 4. К раствору соединения 4 (800 мг, 1,35 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли ТФУ (5 мл). Раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. В результате концентрирования раствора получали соединение 5 (600 мг, 100%) в виде серого твердого вещества.
Стадия 5. К раствору соединения 5 (80 мг, 0,20 ммоль) и 4-метилпиперазин-1-карбонилхлорида гидрохлорида (40 мг, 0,20 ммоль) добавляли триэтиламин (100 мг, 1 ммоль) при 0°C. Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч, а затем фильтровали через силикагель. В результате концентрирования и очистки препаративной ВЭЖХ получали соединение 004 (15 мг, 15%) в виде белого твердого вещества.
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 9,37 (s, 1H), 7,78 (d, J=8,7 Гц, 2H), 7,45 (d, J=2,1 Гц, 1H), 7,36 (dd, J=5,1, 1,0 Гц, 1H), 7,28 (d, J=2,1 Гц, 1H), 7,26 (d, J=2,2 Гц, 1H), 7,24 (dd, J=3,5, 1,1 Гц, 1H), 7,05 (dd, J=5,1, 3,6 Гц, 1H), 6,80 (d, J=8,3 Гц, 1H), 6,65 (d, J=8,8 Гц, 2H), 6,20 (d, J=8,1 Гц, 1H), 5,08 (s, 2H), 3,57 (d, J=13,0 Гц, 3H), 3,15 (s, 4H), 2,91 (t, J=11,3 Гц, 2H), 2,33 (s, 3H), 2,20 (s, 3H), 1,91 (d, J=10,2 Гц, 2H), 1,41-1,24 (m, 2H).
ЖХМС: m/z = 519 (M+H).
Пример 6. Синтез соединения 006
Стадии 1-4. См. стадии 1-4 Примера 5 для получения соединения 5.
Стадия 5. К раствору соединения 5 (100 мг, 0,25 ммоль) и пирролидин-1-карбонилхлорида (34 мг, 0,25 ммоль) добавляли триэтиламин (100 мг, 1 ммоль) при 0°C. Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч, а затем фильтровали через силикагель. В результате концентрирования и очистки препаративной ВЭЖХ получали соединение 006 (10 мг, 8%) в виде белого твердого вещества.
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 9,50 (s, 1H), 7,79 (d, J=8,8 Гц, 2H), 7,50 (d, J=2,1 Гц, 1H), 7,40 (d, J=4,2 Гц, 1H), 7,33 (dd, J=8,3, 2,1 Гц, 1H), 7,29 (d, J=2,7 Гц, 1H), 7,07 (dd, J=5,1, 3,6 Гц, 1H), 6,91 (d, J=8,3 Гц, 1H), 6,66 (d, J=8,8 Гц, 2H), 3,63 (d, J=13,2 Гц, 2H), 3,53 (s, 1H), 3,26 (t, J=6,5 Гц, 4H), 2,87 (t, J=11,2 Гц, 2H), 1,91 (d, J=10,8 Гц, 2H), 1,75 (t, J=6,5 Гц, 5H), 1,34 (dd, J=20,6, 10,1 Гц, 2H).
ЖХМС: m/z = 490 (M+H).
Пример 7. Синтез соединения 007
Стадия 1. Раствор бис-(триметилсилил)амида лития (1,0 М раствор в ТГФ, 240 мл, 240 ммоль) медленно добавляли в круглодонную колбу с соединением 1 (25 г, 120 ммоль) при -76°C в атмосфере азота. Смесь перемешивали в течение 4 ч при -76°C. Затем в систему добавляли йодметан (15 мл, 240 ммоль).
- 27 035120
Реакционную смесь перемешивали при -76°C в течение 30 мин, а затем подогревали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь гасили 150 мл насыщенного водного раствора NH4Cl, разбавляли водой и экстрагировали EtOAc. Органические слои промывали водой и соляным раствором, затем высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением целевого соединения 2 (25 г, 93%) в виде светло-желтого твердого вещества.
Стадия 2. В раствор соединения 2 (25 г, 111 ммоль) в ДМСО (120 мл) добавляли K2CO3 (31 г, 224 ммоль). В систему медленно добавляли H2O2 (100 мл) при 60°C и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 60°C. После завершения реакции систему гасили холодной водой и экстрагировали ЭА. Органические слои промывали водой и соляным раствором, затем высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением целевого соединения 3 (26 г, 96%) в виде белого твердого вещества.
Стадия 3. К раствору соединения 3 (26 г, 107 ммоль) в 200 мл CH3CN добавляли 5н. KOH (100 мл). Затем в систему добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилимидазолидин-2,4-дион (15 г, 54 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи. После завершения смесь концентрировали, чтобы удалить CH3CN, и pH водной фазы доводили до 5 2н. HCl в ледяной бане, экстрагировали ЭА и отделяли. Затем pH водной фазы доводили до 10. Осадок собирали с получением соединения 4 (16,1 г, 69%) в виде белого твердого вещества.
Стадия 4. К раствору соединения 4 (2 г, 9,34 ммоль) в 1,4-диоксане (25 мл) добавляли этил-2хлорпиримидин-5-карбоксилат (2,6 г, 14,02 ммоль) и DIPEA (5,3 г, 28,03 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 95°C в течение ночи. В результате концентрирования и очистки с помощью колонки силикагеля с ЭА:ПЭ (1:5) получали соединение 5 (1,8 г, 53%) в виде светло-желтого твердого вещества.
Стадия 5. Раствор соединения 5 (465 мг, 1,28 ммоль) и 2н. NaOH (10 мл, 20 ммоль) в ТГФ (10 мл) и EtOH (10 мл) нагревали при 55°C в течение 2 ч. После концентрирования и доведения pH водной фазы до 5-6 проводили экстракцию ЭА (2x15 мл). Органические слои промывали водой и соляным раствором, затем высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением соединения 6 (400 мг, 93%) в виде белого твердого вещества.
Стадия 6. Готовили раствор соединения 6 (400 мг, 1,19 ммоль), трет-бутил-2-амино-4-(тиофен-2ил)фенилкарбамата (345 мг, 1,19 ммоль), EDCI (307 мг, 2.38 ммоль) и DMAP (290 мг, 2,38 ммоль) в ДМФ (10 мл). Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение ночи. После завершения в смесь добавляли воду и экстрагировали ЭА (2x15 мл). Органические слои промывали водой и соляным раствором, затем высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. В результате очистки с помощью колонки силикагеля с ЭА:ПЭ (1:2) получали соединение 7 (400 мг, 55%) в виде твердого вещества пурпурного цвета.
Стадия 7. К раствору соединения 7 (400 мг, 0,65 ммоль) в 1,4-диоксане (10 мл) добавляли HCl/1,4диоксан (5 мл, 20 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. В результате концентрирования и промывания ПЭ получали соединение 8 (350 мг, 100%) в виде серого твердого вещест ва.
Стадия 8. К раствору соединения 8 (200 мг, 0,45 ммоль) и Et3N (101 мг, 2,2 экв.) в ТГФ (10 мл) добавляли фенилкарбонохлоридат (78 мг, 0,5 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. После завершения смесь концентрировали и очищали препаративной ВЭЖХ с получением соединения 007 (66 мг, 28%).
1H ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 9,71 (s, 1H), 8,88 (s, 2H), 7,68 (s, 1H), 7,50 (s, 1H), 7,42-7,35 (m, 4H), 7,30 (d, J=2,9 Гц, 1H), 7,22 (t, J=7,3 Гц, 1H), 7,12 (d, J=7,9 Гц, 2H), 7,10-7,06 (m, 1H), 6,91 (d, J=8,2 Гц, 1H), 3,76 (d, J=60,0 Гц, 2H), 3,32 (d, J=79,9 Гц, 2H), 2,40 (s, 2H), 1,65 (s, 2H), 1,48 (s, 3H).
ЖХМС: m/z = 529 (M+H)+.
Пример 8. Синтез соединения 008
Стадии 1-7. См. стадии 1-7 Примера 7 для получения соединения 8.
Стадия 8. К раствору соединения 8 (100 мг, 0,22 ммоль) и Et3N (44 мг, 0,44 ммоль) в ТГФ (5 мл) добавляли морфолин-1-карбонилхлорид (36 мг, 1,1 экв.). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. После завершения смесь концентрировали и очищали препаративной ВЭЖХ с получением соединения 008 (50 мг, 44%).
1H ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 9,52 (s, 1H), 8,85 (s, 2H), 7,56 (s, 1H), 7,44 (s, 1H), 7,35 (d, J=5,0 Гц, 1H), 7,29 (d, J=8,3 Гц, 1H), 7,23 (d, J=3,1 Гц, 1H), 7,07 - 7,03 (m, 1H), 6,79 (d, J=8,4 Гц, 1H), 5,22 (s, 2H), 3,56 (s, 4H), 3,08 (d, J=22,9 Гц, 6H), 2,31 (d, J=12,9 Гц, 2H), 1,56 (t, J=10,1 Гц, 2H), 1,42 (s, 3H).
- 28 035120
ЖХМС: m/z = 522 (M+H)+
Пример 9. Синтез соединения 009
Стадия 1. Смесь соединения 1 (1,86 г, 10 ммоль), соединения Boc-амина (3,00 г, 15 ммоль) и NEt3 (3,0 г, 30 ммоль) в 1,4-диоксане (20 мл) перемешивали при 95°C в течение ночи. Смесь концентрировали, и после добавления ЭА (60 мл) и водного раствора лимонной кислоты (60 мл) смесь перемешивали в течение 3 0 мин. Органический слой отделяли, высушивали и концентрировали с получением соединения 2 (3,4 г, 97%) в виде светло-желтого твердого вещества.
Стадия 2. Смесь соединения 2 (3,5 г, 10 ммоль) и NaOH (2 М, 15 мл) в EtOH (15 мл) и ТГФ (15 мл) перемешивали при 60°C в течение 2 ч. Смесь концентрировали и после добавления водного раствора лимонной кислоты для доведения до pH менее 7 смесь перемешивали в течение 30 мин и фильтровали с получением соединения 3 (2,8 г, 90%) в виде светло-желтого твердого вещества.
Стадия 3. Смесь соединения 3 (3,2 г, 10 ммоль), соединения Boc-амина (2,9 г, 10 ммоль), HOAT (2,0 г, 15 ммоль) и EDCI (3,8 г, 20 ммоль) в ДМФ (25 мл) перемешивали при 60°C в течение ночи. К смеси добавляли ЭА (100 мл) и насыщенный водный раствор NaCl (100 мл) и смесь перемешивали в течение 30 мин. Органический слой отделяли, промывали насыщенным водным раствором NaCl (2x50 мл), высушивали и концентрировали с получением остатка, который промывали CH3CN (10-20 мл) с получением соединения 4 (2,9 г, 50%) в виде серого твердого вещества.
Стадия 3. К раствору соединения 4 (2,9 г, 5 ммоль) в ДХМ (30 мл) добавляли ТФУ (5 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Смесь концентрировали с получением соединения 5 (2,9 г, 100%) без какой-либо дополнительной очистки.
Стадия 4. К раствору соединения 5 (197 мг, 0,5 ммоль) и NEt3 (250 мг, 2,5 ммоль) в ДХМ (5 мл) добавляли пиперидин-1-карбонилхлорид (96 мг, 0,65 ммоль) при 0°C. За реакцией следили с помощью ЖХМС до завершения. К смеси добавляли NH3H2O (0,5 мл), смесь перемешивали в течение 30 мин и концентрировали с получением остатка, который очищали с помощью колонки силикагеля с получением соединения 009 (114 мг, 45%) в виде светло-желтого твердого вещества.
1H ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 9,69 (s, 1H), 8,86 (s, 2H), 7,89 (d, J=8,0 Гц, 1H), 7,49 (s, 1H), 7,40 (d, J=5,1 Гц, 1H), 7,36 (d, J=8,2 Гц, 1H), 7,30 (d, J=3,3 Гц, 1H), 7,07 (dd, J=5,0, 3,7 Гц, 1H), 6,90 (d, J=8,2 Гц, 1H), 3,99 (s, 1H), 3,56 (d, J=11,5 Гц, 2H), 3,10 (s, 4H), 2,84 (t, J=11,6 Гц, 2H), 1,85 (d, J=10,7 Гц, 2H), 1,52 (s, 2H), 1,46 (d, J=8,3 Гц, 6H).
ЖХМС: m/z = 506 (M+H)+.
Пример 10. Синтез соединения 010
Стадии 1-7. См. стадии 1-7 Примера 7 для получения соединения 8.
Стадия 8. К раствору соединения 8 (100 мг, 0,22 ммоль) и Et3N (44 мг, 0,45 ммоль) в ТГФ (5 мл) добавляли пиперазин-1-карбонилхлорид (60 мг, 0,24 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. После завершения смесь концентрировали с получением неочищенного соединения 9 в виде масла (110 мг, неочищенное).
Стадия 9. К раствору соединения 9 (100 мг) в ДХМ (5 мл) добавляли ТФУ (1 мл) при комнатной температуре в течение 40 мин. После завершения смесь концентрировали и очищали препаративной ВЭЖХ с получением соединения 010 (35 мг, 30%, 2 стадии) в виде желтого твердого вещества.
- 29 035120 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 9,70 (s, 1H), 8,86 (s, 2H), 8,79 (s, 2H), 7,63 (s, 1H), 7,49 (d, J=1,8 Гц, 1H),
7,40 (d, J=5,0 Гц, 1H), 7,36 (dd, J=8,3, 1,9 Гц, 1H), 7,29 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,10-7,04 (m, 1H), 6,90 (d,
J=8,3 Гц, 1H), 3,37 (s, 1H), 3,29 (s, 4h), 3,09 (s, 6H), 2,32 (d, J=13,6 Гц, 2H), 1,56 (t, J=10,2 Гц, 2H), 1,43 (s,
3H).
ЖХМС: m/z = 521 (M+H)+.
Пример 11. Синтез соединения 011
Стадии 1-7. См. стадии 1-7 Примера 7 для получения соединения 8.
Стадия 8. К раствору соединения 8 (100 мг, 0,22 ммоль) и Et3N (45 мг, 0,45 ммоль) в ТГФ (5 мл) добавляли 4-метилпиперазин-1-карбонилхлорид (40 мг, 0,24 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Смесь фильтровали через силикагель и промывали ЭА. В результате концентрирования и очистки препаративной ВЭЖХ получали соединение 011 (42 мг, 36%).
1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 9,88 (s, 1H), 9,72 (s, 1H), 8,86 (s, 2H), 7,64 (s, 1H), 7,49 (d, J=1,8 Гц, 1H),
7,41 (d, J=5,0 Гц, 1H), 7,37 (dd, J=8,3, 2,0 Гц, 1H), 7,30 (d, J=2,9 Гц, 1H), 7,08 (dd, J=4,9, 3,7 Гц, 1H), 6,92 (d, J=8,4 Гц, 1H), 3,63 (d, J=11,2 Гц, 2H), 3,38 (d, J=8,2 Гц, 3H), 3,15-2,97 (m, 6H), 2,81 (s, 3H), 2,33 (d, J=13,5 Гц, 2H), 1,57 (t, J=10,1 Гц, 2H), 1,43 (s, 3H).
ЖХМС: m/z = 535 (M+H)+.
Пример 12. Синтез соединения 012
Стадия 1. К раствору соединения 6 (95 мг, 0,79 ммоль) и Et3N (159 мг, 1,6 ммоль) в ТГФ (5 мл) добавляли бис-(трихлорметил)карбонат (119 мг, 0,4 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и использовали непосредственно в следующей стадии (стадия 2).
Стадия 2. См. стадии 1-7 Примера 7 для получения соединения 8. Раствор соединения 8 (162 мг, 0,4 ммоль) и Et3N (80 мг, 0,8 ммоль) в ТГФ (5 мл) добавляли к раствору реакционной смеси стадии 1, содержащему соединение 7. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Затем смесь концентрировали и очищали препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографией (ВЭЖХ) с получением соединения 012 (35 мг, 16%).
1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 9,73 (s, 1Н), 8,86 (s, 2Н), 7,62 (s, 1Н), 7,50 (s, 1Н), 7,42 (d, J=5,0 Гц, 1Н), 7,38 (d, J=8,4 Гц, 1Н), 7,31 (d, J=3,1 Гц, 1Н), 7,08 (dd, J=5,0, 3,7 Гц, 1н), 6,93 (d, J=8,1 Гц, 1Н), 3,34 (s, 1Н), 3,31 (s, 1Н), 3,23 (d, J=5,6 Гц, 4н), 3,08 (t, J=10,8 Гц, 2Н), 2,31 (d, J=13,7 Гц, 2Н), 1,94 (d, J=13,9 Гц, 4н), 1,57 (t, J=10,0 Гц, 2Н), 1,43 (s, 3Н).
ЖХМС: m/z = 556 (M+H)+.
Пример 13. Синтез соединения 013
Стадия 1. Смесь метил-4-йодбензоата (2,6 г, 10 ммоль), соединения 4 (6,4 г, 30 ммоль), Pd2(dba)3 (915 мг, 1 ммоль), RuPhos (467 мг, 1 ммоль) и Cs2CO3 (9,75 г, 30 ммоль, 3 экв.) в толуоле (30 мл) переме- 30 035120 шивали при 95°C в атмосфере азота в течение ночи. Смесь охлаждали и добавляли ЭА (100 мл). Смесь фильтровали и концентрировали с получением остатка, который очищали с помощью колонки силикагеля с получением соединения 5 (2,2 г, 60%) в виде светло-желтого твердого вещества.
Стадия 2. К раствору соединения 5 (500 мг, 1,4 ммоль) в EtOH (15 мл) и ТГФ (15 мл) добавляли водный раствор NaOH (2 М, 15 мл) и смесь перемешивали при 60°C в течение 2 ч. Смесь концентрировали с получением остатка и добавляли воду (100 мл), после чего добавляли водный раствор лимонной кислоты, чтобы довести до pH менее 7, при 0°C, затем после фильтрования получали соединение 6 (369 мг, 80%) в виде белого твердого вещества.
Стадия 3. Смесь соединения 6 (150 мг, 0,45 ммоль), соединения Boc-амина (130 мг, 0,45 ммоль), НОАТ (103 мг, 0,76 ммоль), EDCI (145 мг, 0,76 ммоль) и NEt3 (154 мг, 1,52 ммоль) в ДМФ (5 мл) перемешивали при 60°C в течение ночи. К смеси добавляли ЭА (100 мл) и насыщенный водный раствор NaCl (100 мл) и смесь перемешивали в течение 30 мин. Органический слой отделяли, промывали насыщенным водным раствором NaCl (2x50 мл), высушивали и концентрировали с получением остатка, который очищали препаративной тонкослойной хроматографией (ТСХ) с получением соединения 7 (123 мг, 45%) в виде желтого твердого вещества.
Стадия 4. К раствору соединения 7 (120 мг, 0,20 ммоль) в ДХМ (5 мл) добавляли ТФУ (3 мл) при комнатной температуре в течение 2 ч. Смесь концентрировали с получением соединения 8 (80 мг, 100%), которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
Стадия 5. К раствору соединения 8 (80 мг, 0,20 ммоль) и Et3N (106 мг, 1,05 ммоль) в ТГФ (5 мл) добавляли соединение пирролдин-1-карбонилхлорид (74 мг, 0,30 ммоль) при 0°C и перемешивали в течение 2 ч. К смеси добавляли ЭА (50 мл) и насыщенный водный раствор NaCl (50 мл) и смесь перемешивали в течение 30 мин. Органический слой отделяли, промывали насыщенным водным раствором NaCl (2x50 мл), высушивали и концентрировали с получением остатка, который очищали препаративной ТСХ с получением соединения 013 (99 мг, 80%) в виде желтого твердого вещества.
1H ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 9,35 (s, 1H), 7,75 (d, J=8,7 Гц, 2H), 7,45 (d, J=2,0 Гц, 1H), 7,36 (d, J=5,1 Гц, 1H), 7,27 (dd, J=8,3, 2,1 Гц, 1H), 7,24 (d, J=3,5 Гц, 1H), 7,05 (dd, J=5,0, 3,6 Гц, 1H), 6,79 (dd, J=8,5, 3,5 Гц, 3H), 5,89 (s, 1H), 5,07 (d, J=12,4 Гц, 2H), 3,31 (d, J=7,8 Гц, 1H), 3,25 (t, J=6,4 Гц, 5H), 3,10 (t, J=10,5 Гц, 2H), 1,97 (d, J=13,9 Гц, 2H), 1,74 (s, 4H), 1,59 (t, J=9,9 Гц, 2H), 1,37 (s, 3H).
ЖХМС: m/z = 504 (M+H)+.
Пример 14. Синтез соединения 014
Стадия 1. Готовили раствор 4-гидроксипиперидина (соединения 1, 0,8 г, 7,9 ммоль), пиридина (1,3 г, 16 ммоль) и трет-бутилдиметилсилилхлорида (1,4 г, 9,5 ммоль) в CH2Cl2 (25 мл) при 0°C. Смесь перемешивали в течение 3 ч. После завершения смесь концентрировали и очищали с помощью колонки силикагеля с ЭА:ПЭ (1:5) с получением соединения 2 (1,5 г, 88%) в виде светло-желтого твердого вещества.
Стадия 2. К раствору соединения 2 (95 мг, 0,44 ммоль) и Et3N (89 мг, 0,9 ммоль) в ТГФ (5 мл) добавляли трифосген (74 мг, 0,25 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и использовали непосредственно на следующей стадии.
Стадия 3. К раствору соединения 4 (162 мг, 0,4 ммоль) и Et3N (80 мг, 0,8 ммоль) в ТГФ (5 мл) добавляли описанный выше раствор со стадии 2, содержащий соединение 3. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и использовали на следующей стадии без какой-либо дополнительной очистки.
Стадия 4. К раствору соединения 5 (неочищенной смеси) в ТГФ (5 мл) добавляли TBAF (5 капель) при 0°C. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, затем концентрировали и очищали препаративной ВЭЖХ с получением соединения 014 (29 мг, 15%, 3 стадии).
- 31 035120
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 9,67 (s, 1H), 8,86 (s, 2H), 7,56 (s, 1H), 7,48 (s, 1H), 7,39 (d, J=4,9 Гц, 1H),
7,37 - 7,31 (m, 1H), 7,28 (d, J=3,3 Гц, 1H), 7,10-7,03 (m, 1H), 6,88 (d, J=8,3 Гц, 1H), 3,59 (s, 3H), 3,42 (s, 1h),
3,25 (d, J=13,6 Гц, 2H), 3,03 (t, J=11,0 Гц, 2H), 2,83 (t, J=10,6 Гц, 2H), 2,29 (d, J=13,5 Гц, 2H), 1,70 (d,
J=9,9 Гц, 2H), 1,57 (t, J=10,3 Гц, 2H), 1,44 (d, J=10,4 Гц, 3H), 1,34-1,27 (m, 2H).
ЖХМС: m/z = 536 (M+H)+.
Пример 15. Синтез соединения 015
Стадии 1-4. См. стадии 1-4 Примера 13 для получения соединения 8.
Стадия 5. К раствору соединения 8 (80 мг, 0,20 ммоль) и Et3N (106 мг, 1,05 ммоль) в ТГФ (5 мл) добавляли трет-бутил-4-(хлоркарбонил)пиперазин-1-карбоксилат (74 мг, 0,30 ммоль) при 0°C и смесь перемешивали в течение 2 ч. К смеси добавляли ЭА (20 мл) и насыщенный водный раствор NaCl (20 мл) и смесь перемешивали в течение 30 мин. Органический слой отделяли, промывали насыщенным водным раствором NaCl (2x50 мл), высушивали и концентрировали с получением остатка, который очищали препаративной ТСХ с получением соединения 9 (99 мг, 80%) в виде желтого твердого вещества.
Стадия 6. К раствору соединения 9 (90 мг, 0,15 ммоль) в ДХМ (5 мл) медленно добавляли ТФУ (3 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Затем смесь концентрировали с получением остатка, который очищали препаративной ВЭЖХ с получением соединения 015 (45 мг, 60%) в виде белого твердого вещества.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 9,58 (s, 1H), 8,78 (s, 2H), 7,78 (t, J=9,6 Гц, 2H), 7,52 (d, J=2,1 Гц, 1H),
7,42 (d, J=5,1 Гц, 1H), 7,36 (dd, J=8,3, 2,1 Гц, 1H), 7,31 (d, J=3,5 Гц, 1H), 7,08 (dd, J=5,0, 3,6 Гц, 1H), 6,96 (d, J=8,3 Гц, 1H), 6,84 (d, J=8,4 Гц, 2H), 5,97 (s, 6H), 3,18 (t, J=10,6 Гц, 2H), 3,10 (s, 4H), 2,02-1,93 (m, 2H), 1,60 (t, J=9,7 Гц, 2H), 1,37 (s, 3H).
ЖХМС: m/z = 519 (M+H)+.
Пример 16. Синтез соединения 016
Стадии 1-4. См. стадии 1-4 Примера 13 для получения соединения 8.
Стадия 5. К раствору соединения 8 (80 мг, 0,20 ммоль) и Et3N (106 мг, 1,05 ммоль) в ТГФ (5 мл) добавляли 4-метилпиперазин-1-карбонилхлорид (49 мг, 0,30 ммоль) при 0°C и смесь перемешивали в течение 2 ч. Смесь очищали препаративной ТСХ с получением соединения 016 (49 мг, 46%) в виде желтого твердого вещества.
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 9,79 (s, 1Н), 9,58 (s, 1Н), 7,79 (d, J=8,7 Гц, 2Н), 7,51 (d, J=2,1 Гц, 1Н),
7,42 (d, J=4,2 Гц, 1Н), 7,36 (dd, J=8,3, 2,1 Гц, 1Н), 7,31 (d, J=3,5 Гц, 1Н), 7,08 (dd, J=5,0, 3,6 Гц, 1Н), 6,95 (d, J=8,3 Гц, 1Н), 6,84 (d, J=8,3 Гц, 2Н), 3,64 (d, J=11,6 Гц, 2Н), 3,43-3,28 (m, 4Н), 3,18 (t, J=10,3 Гц, 2Н), 3,10-2,96 (m, 4Н), 2,81 (s, 3Н), 1,99 (d, J=13,4 Гц, 2Н), 1,60 (t, J=9,7 Гц, 2Н), 1,37 (s, 3Н).
ЖХМС: m/z = 533 (M+H)+.
- 32 035120
Пример 17. Синтез соединения 017
2 3 4 5
Стадия 1. К раствору бис-(триметилсилил)амида лития (1,0 М раствор в ТГФ, 240 мл, 240 ммоль) в круглодонной колбе медленно добавляли соединение 1 (25 г, 120 ммоль) при -76°C в атмосфере азота. После перемешивания смеси в течение 4 ч при -76°C в систему добавляли по каплям йодэтан (17 мл, 240 ммоль). Реакционную смесь перемешивали еще в течение 30 мин, а затем подогревали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Остаток гасили 150 мл насыщенного водного раствора NH4Cl, разбавляли водой и экстрагировали EtOAc. Органические слои промывали водой и соляным раствором, затем высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением целевого соединения 2 (20 г, 70%) в виде светло-желтого твердого вещества.
Стадия 2. К раствору соединения 2 (20 г, 84 ммоль) добавляли K2CO3 (23 г, 168 ммоль) в ДМСО (120 мл). В систему очень медленно добавляли H2O2 (100 мл) при 60°C и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 60°C. Добавляли холодную воду и смесь экстрагировали ЭА (3x100 мл). Органические слои промывали водой и соляным раствором, затем высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением целевого соединения 3 (21 г, 99%) в виде белого твердого вещества.
Стадия 3. К раствору соединения 3 (20,5 г, 80 ммоль) в CH3CN (200 мл) и 5н. KOH (100 мл) добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилимидазолидин-2,4-дион (11,1 г, 40 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. После завершения смесь концентрировали, чтобы удалить CH3CN. Доведение pH водной фазы до 5 выполнял с 2н. HCl в ледяной бане, смесь экстрагировали ЭА и отделяли. Затем доводили pH водной фазы до 10. Осадок собирали с получением соединения 4 (10 г, 55%) в виде белого твердого вещества.
Стадия 4. Раствор соединения 4 (1,0 г, 4,4 ммоль), этил-4-бромбензоата (943 мг, 4,4 ммоль), Pd2(dba)3 (202 мг, 0,22 ммоль), RuPhos (103 мг, 0,22 ммоль) и Cs2CO3 (2,9 г, 8,8 ммоль) в толуоле (25 мл) перемешивали при 100°C в течение ночи. Смесь концентрировали и очищали с помощью колонки силикагеля с ЭА:ПЭ (1:5) с получением соединения 5 (1,0 г, 59%) в виде светло-желтого твердого вещества.
Стадия 5. Раствор соединения 5 (233 мг, 0,65 ммоль) и 2н. NaOH (10 мл, 20 ммоль) в ТГФ (10 мл) и EtOH (10 мл) перемешивали при 55°C в течение 2 ч. После концентрирования и доведения pH водной фазы до 5-6 проводили экстракцию ЭА (3x15 мл). Органические слои промывали водой и соляным раствором, затем высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением соединения 6 (200 мг, 93%) в виде белого твердого вещества.
Стадия 6. Смесь соединения 6 (200 мг, 0,6 ммоль), трет-бутил-2-амино-4-(тиофен-2ил)фенилкарбамата (173 мг, 0,6 ммоль), EDCI (154 мг, 1,2 ммоль) и DMAP (145 мг, 1,2 ммоль) в ДМФ (10 мл) перемешивали при 55°C в течение ночи. Смесь разбавляли водой и экстрагировали ЭА. Органические слои промывали водой и соляным раствором, затем высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. В результате очистки с помощью колонки силикагеля с ЭА:ПЭ (1:2) получали соединение 7 (200 мг, 55%) в виде твердого вещества пурпурного цвета.
Стадия 7. К раствору соединения 7 (200 мг, 0,32 ммоль) в 1,4-диоксане (10 мл) добавляли HCl/1,4диоксан (5 мл, 20 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. В результате концентрирования и промывания ПЭ получали соединение 8 (175 мг, 100%) в виде серого твердого вещества.
Стадия 8. К раствору соединения 8 (95 мг, 0,21 ммоль) и Et3N (106 мг, 1,05 ммоль) в ТГФ (5 мл) добавляли морфолин-4-карбонилхлорид (50 мг, 0,3 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Смесь фильтровали через силикагель и промывали ЭА. В результате концентрирования и очистки препаративной ВЭЖХ получали соединение 017 (10 мг, 9%).
- 33 035120 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 9,56 (s, 1H), 7,76 (d, J=8,7 Гц, 2H), 7,52 (s, 1H), 7,42 (d, J=4,8 Гц, 1H),
7,36 (d, J=8,2 Гц, 1H), 7,31 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,11-7,04 (m, 1H), 6,95 (d, J=8,2 Гц, 1h), 6,81 (d, J=8,5 Гц, 2h),
5,86 (s, 1H), 3,55 (s, 8H), 3,11 (s, 4H), 2,02 (d, J=13,3 Гц, 2H), 1,76 (d, J=6,6 Гц, 2H), 1,50 (t, J=10,9 Гц, 2h),
0,75 (t, J=7,3 Гц, 3H).
ЖХМС: m/z = 534 (M+H)+.
Пример 18. Синтез соединения 018
(1,2 г, 5 ммоль) в диоксане (20 мл) добавляли DIPEA (1, 3 г,
Стадия 1. К раствору соединения ммоль) и этил-2-хлорпиримидин-5-карбоксилат (5,5 ммоль, 1,0 г). Смесь перемешивали при 100°C в течение ночи. После завершения, концентрирования и прямой очистки препаративной ТСХ с ПЭ:ЭА (2:1) получали соединение 2 (1,37 г, 70%) в виде белого твердого вещества.
Стадия 2. К раствору соединения 2 (220 мг, 0,56 ммоль) в EtOH (5 мл) и ТГФ (5 мл) добавляли водный раствор NaOH (2 М, 2 мл). Реакционную смесь перемешивали при 60°C в течение 2 ч. Смесь концентрировали с получением остатка. К остатку добавляли воду (10 мл) и добавляли водный раствор лимонной кислоты для достижения pH менее 7 при 0°C и смесь фильтровали с получением соединения 3 (200 мг, неочищенное) в виде белого твердого вещества.
Стадия 3. Смесь соединения 3 (200 мг, неочищенное), соединения трет-бутил-2-амино-4-(тиофен-2ил)фенилкарбамата (160 мг, 0,55 ммоль), EDCI (154 мг, 1,2 ммоль) и DMAP (145 мг, 1,2 ммоль) в ДМФ (10 мл) перемешивали при 67°C в течение ночи. Смесь разбавляли водой и экстрагировали ЭА с получением соединения 4 (200 мг, 55%) в виде желтого масла.
Стадия 4. К раствору соединения 4 (200 мг, 0,32 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли ТФУ (2 мл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. В результате концентрирования и промывания ПЭ получали соединение 5 (250 мг, неочищенное) в виде коричневого масла.
Стадия 5. К раствору соединения 5 (250 мг, неочищенное) и Et3N (106 мг, 1,05 ммоль) в ТГФ (5 мл) добавляли пирролидин-1-карбонилхлорид (70 мг, 0,5 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Смесь фильтровали через силикагель и промывали ЭА. В результате концентрирования и очистки препаративной ВЭЖХ получали соединение 018 (61 мг, 60%).
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 9,72 (s, 1H), 8,91 (s, 2H), 7,53 (s, 1H), 7,42 (d, J=4,8 Гц, 1H), 7,39 (d, J=8,3 Гц, 1H), 7,32 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,12-7,04 (m, 1H), 6,95 (d, J=8,2 Гц, 1H), 6,85-6,13 (m, 1H), 3,70 (dd, J=13,5, 7,5 Гц, 4H), 3,29 (s, 4H), 3,07 (t, J=10,5 Гц, 2H), 2,81 (t, J=12,8 Гц, 2H), 2,11 (dd, J=14,5, 7,9 Гц, 2H), 1,93 - 1,84 (m, 2H), 1,76 (s, 4H), 1,32 (d, J=12,1 Гц, 2H).
ЖХМС: m/z = 532 (m+H)+.
Пример 19. Синтез соединения 019
Стадия 1. Смесь метил-4-бромбензоата (2,1 г, 10 ммоль, 1 экв.), соединения 1 (6,0 г, 30 ммоль, 3 экв.), Pd2(dba)3 (915 мг, 1 ммоль, 0,1 экв.), 9,9-диметил-4,5-бис-(дифенилфосфино)ксантена (Ксантфос) (478 мг, 1 ммоль, 0,1 экв.) и Cs2CO3 (9,75 г, 30 ммоль, 3 экв.) в толуоле (30 мл) перемешивали при 95°C в
- 34 035120 атмосфере азота в течение ночи. Смесь охлаждали и в результате добавления ЭА (100 мл), фильтрования и концентрирования получали остаток, который очищали с помощью колонки силикагеля с получением соединения 2 (1,97 г, 59%) в виде светло-желтого твердого вещества.
Стадия 2. К раствору соединения 2 (3,34 г, 10 ммоль) в EtOH (15 мл) и ТГФ (15 мл) добавляли водный раствор NaOH (2 М, 15 мл) и перемешивали при 60°C в течение 5 ч. Смесь концентрировали с получением остатка. Смесь разбавляли водой (100 мл), и в результате добавления водного раствора лимонной кислоты и доведения до pH менее 7 при 0°C и фильтрования получали соединение 3 (3,07 г, 96%) в виде белого твердого вещества.
Стадия 3. Смесь соединения 3 (3,2 г, 10 ммоль, 1 экв.), Boc-амина (2,6 г, 9 ммоль, 0,9 экв.), EDCI (5,7 г, 30 ммоль, 3 экв.) в пиридине (Ру) (15 мл) перемешивали при 25°C в течение ночи. К смеси добавляли ЭА (100 мл) и водный раствор лимонной кислоты (50 мл) и смесь перемешивали в течение 30 мин. Органический слой отделяли, высушивали и концентрировали с получением остатка, который очищали с помощью колонки силикагеля с получением соединения 4 (3,7 г, 70%) в виде светло-желтого твердого вещества.
Стадия 4. К раствору соединения 4 (2,96 г, 5 ммоль) в ДХМ (20 мл) добавляли ТФУ (20 мл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Смесь концентрировали с получением остатка. К смеси добавляли воду (100 мл) и NaOH (2 М раствор), чтобы довести до pH менее 7, и смесь фильтровали с получением соединения 5 (1,86 г, 95%) в виде светло-желтого твердого вещества.
Стадия 5. К раствору соединения 5 (100 мг, 0,25 ммоль) и Et3N (50 мг, 0,5 ммоль) в ТГФ (5 мл) добавляли трет-бутил-4-(хлоркарбонил)пиперазин-1-карбоксилат (68 мг, 0,275 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. После завершения смесь концентрировали с получением неочищенного соединения 6 (110 мг) для следующей стадии.
Стадия 6. К раствору соединения 6 (110 мг, неочищенное) в ДХМ (5 мл) медленно добавляли ТФУ (2 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Затем смесь концентрировали с получением остатка, который очищали препаративной ВЭЖХ с получением соединения 019 (40 мг, 32%, 2 стадии) в виде белого твердого вещества.
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 9,37 (s, 1H), 8,71 (s, 2H), 7,79 (d, J=8,7 Гц, 2H), 7,45 (d, J=2,1 Гц, 1H), 7,36 (d, J=5,1 Гц, 1H), 7,30-7,20 (m, 3H), 7,05 (dd, J=5,1, 3,6 Гц, 1H), 6,81 (d, J=8,3 Гц, 1H), 6,66 (d, J=8,8 Гц, 2H), 3,63 (d, J=13,5 Гц, 2h), 3,48-3,42 (m, 1H), 3,30 (s, 4H), 3,11 (s, 4h), 2,96 (t, J=11,9 Гц, 2H), 1,92 (d, J=9,8 Гц, 2H), 1,34 (d, J=10,8 Гц, 2H), 1,05 (t, J=7,0 Гц, 1H).
ЖХМС: m/z = 505 (M+H)+.
Пример 20. Синтез соединения 020
Стадии 1-4. См. стадии 1-4 Примера 19 для получения соединения 5.
Стадия 5. К раствору соединения 5 (100 мг, 0,25 ммоль) и Et3N (50 мг, 0,5 ммоль) в ТГФ (5 мл) добавляли трет-бутил-4-(хлоркарбонил)пиперазин-1-карбоксилат (41 мг, 0,275 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Затем смесь концентрировали с получением остатка, который очищали препаративной ВЭЖХ с получением соединения 020 (32 мг, 25%) в виде белого твердого вещества.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 9,37 (s, 1H), 7,78 (d, J=8,6 Гц, 2H), 7,45 (d, J=2,0 Гц, 1H), 7,36 (d, J=4,4 Гц, 1H), 7,30-7,20 (m, 2H), 7,05 (dd, J=5,0, 3,7 Гц, 1H), 6,80 (d, J=8,3 Гц, 1H), 6,65 (d, J=8,8 Гц, 2H),
6,20 (d, J=7,9 Гц, 1Н), 5,07 (s, 2H), 3,60 - 3,52 (m, 6H), 3,18 - 3,06 (m, 4H), 2,92 (t, J=11,6 Гц, 2H), 2,08 (s, 1H), 1,91 (d, J=10,2 Гц, 2H), 1,33 (dd, J=20,7, 9,8 Гц, 2H).
ЖХМС: m/z = 506 (M+H)+.
Пример 21. Синтез соединения 021
Стадии 1-4. См. стадии 1-4 Примера 19 для получения соединения 5.
Стадия 5. К раствору соединения 5 (100 мг, 0,25 ммоль) и Et3N (50 мг, 0,5 ммоль) в ТГФ (5 мл) добавляли циклогексанкарбонилхлорид (41 мг, 0,275 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Затем смесь концентрировали с получением остатка, который очищали препаративной ВЭЖХ с получением соединения 021 (30 мг, 24%) в виде белого твердого вещества.
- 35 035120 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 9,61 (s, 1H), 7,81 (d, J=8,6 Гц, 2H), 7,53 (d, J=1,8 Гц, 1H), 7,43 (d,
J=4,8 Гц, 1H), 7,38 (d, J=8,3 Гц, 1H), 7,33 (d, J=3,3 Гц, 1H), 7,13-7,05 (m, 1H), 6,98 (d, J=8,4 Гц, 1h), 6,68 (d,
J=8,7 Гц, 2H), 4,29 (d, J=11,3 Гц, 1H), 3,92 (d, J=12,5 Гц, 1H), 3,66-3,57 (m, 1H), 3,27-3,13 (m, 1H), 2,852,73 (m, 1H), 2,67-2,56 (m, 1H), 2,03-1,88 (m, 2H), 1,75-1,58 (m, 5H), 1,37-1,12 (m, 7H).
ЖХМС: m/z = 503 (M+H)+.
Пример 22. Синтез соединения 022
Стадии 1-4. См. стадии 1-4 Примера 19 для получения соединения 5.
Стадия 5. К раствору соединения 5 (100 мг, 0,25 ммоль) и Et3N (50 мг, 0,5 ммоль) в ТГФ (5 мл) добавляли тетрагидро-2Н-пиран-4-карбонилхлорид (41 мг, 0,275 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Затем смесь концентрировали с получением остатка, который очищали препаративной ВЭЖХ с получением соединения 022 (20 мг, 16%) в виде белого твердого вещества.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 9,57 (s, 1H), 7,80 (d, J=8,6 Гц, 2H), 7,52 (s, 1H), 7,46-7,29 (m, 3H), 7,17,06 (m, 1H), 6,96 (s, 1H), 6,68 (d, J=8,6 Гц, 2H), 4,29 (d, J=14,4 Гц, 1H), 3,97 (d, J=13,9 Гц, 1H), 3,85 (d, J=9,7 Гц, 2H), 3,71-3,55 (m, 1H), 3,39 (t, J=11,5 Гц, 2H), 3,22 (t, J=11,6 Гц, 1H), 2,98-2,87 (m, 1H), 2,81 (t, J=12,1 Гц, 1Н), 2,08-1,86 (m, 2H), 1,68-1,43 (m, 4H), 1,39-1,13 (m, 2H).
ЖХМС: m/z = 505 (M+H)+.
Пример 23. Синтез соединения 023
Стадии 1-7. См. стадии 1-7 Примера 17 для получения соединения 8.
Стадия 8. К раствору соединения 8 (175 мг, 0,4 ммоль) и Et3N (106 мг, 1,05 ммоль) в ТГФ (5 мл) добавляли трет-бутил-4-(хлоркарбонил)пиперазин-1-карбоксилат (125 мг, 0,5 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. В результате фильтрования через силикагель и промывания ЭА получали соединение 9 (175 мг, 67%) в виде желтого масла.
Стадия 9. К раствору соединения 9 (175 мг, 0,28 ммоль) в 1,4-диоксане (10 мл) добавляли HCl/1,4диоксан (5 мл, 20 ммоль) при комнатной температуре с последующим перемешиванием в течение ночи. В результате концентрирования и промывания ПЭ получали целевое соединение 023 (92 мг, 63%) в виде желтого твердого вещества.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 10,21 (s, 1Н), 9,30 (s, 3Н), 7,91 (d, J=8,1 Гц, 2Н), 7,81 (s, 1Н), 7,59 (d, J=5,9 Гц, 2Н), 7,51 (d, J=3,3 Гц, 1Н), 7,45 (d, J=8,4 Гц, 1Н), 7,19-7,12 (m, 1Н), 6,90 (s, 2Н), 3,48-3,41 (m, 1Н), 3,33 (s, 4Н), 3,18-3,10 (m, 2Н), 3,06 (s, 4Н), 2,04 (d, J=13,0 Гц, 2Н), 1,77 (d, J=7,0 Гц, 2Н), 1,59-1,48 (m, 2Н), 1,08-1,02 (m, 2Н), 0,78 (t, J=7,0 Гц, 3Н).
ЖХМС: m/z = 533 (M+H)+.
Пример 24. Синтез соединения 024
Стадия 1. Раствор соединения 2 (300 мг, 0,90 ммоль) в ТФУ (5 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Затем в результате концентрирования и промывания ПЭ получали целевое соединение 3 (200 мг, 95%) в виде серого твердого вещества.
- 36 035120
Стадия 2. Готовили раствор соединения 3 (180 мг, 0,77 ммоль), 1-гидроксициклогексанкарбоновой кислоты (111 мг, 0,77 ммоль), гексафторфосфат O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетраметилурония (HATU) (351 мг, 0,92 ммоль) и DIPEA (199 мг, 1,5 ммоль) в ДМФ (10 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Смесь растворяли в воде и экстрагировали ЭА. Органические слои промывали водой и соляным раствором, затем высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Затем в результате очистки с помощью колонки силикагеля с ЭА:ПЭ (1:2) получали соединение 4 (150 мг, 54%) в виде твердого вещества пурпурного цвета.
Стадия 3. Раствор соединения 4 (150 мг, 0,42 ммоль) и 2н. NaOH (10 мл, 20 ммоль) в ТГФ (10 мл) и EtOH (10 мл) перемешивали при 60°C в течение 6 ч. Затем смесь концентрировали, и pH водной фазы доводили до 5-6 с последующей экстракцией ЭА. Органические слои промывали водой и соляным раствором, затем высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением целевого соединения 5 (130 г, 90%) в виде белого твердого вещества.
Стадия 4. Готовили смесь соединения 5 (70 мг, 0,2 ммоль), трет-бутил-2-амино-4-(тиофен-2ил)фенилкарбамата (59,0 мг, 0,2 ммоль), EDCI (39,0 мг, 0.3 ммоль), НОАТ (41 мг, 0,3 ммоль) и DIPEA (52 мг, 0,4 ммоль) в ДМФ (10 мл). Смесь перемешивали при 65°C в течение ночи. Затем смесь растворяли в воде и экстрагировали ЭА. Органические слои промывали водой и соляным раствором, затем высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Затем в результате очистки с помощью колонки силикагеля с ЭА:ПЭ (1:2) получали соединение 6 (20 мг, 16%) в виде твердого вещества пурпурного цвета.
Стадия 5. К раствору соединения 6 (20 мг, 0,03 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли HCl/1,4-диоксан (2 мл, 8,0 ммоль) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение ночи. В результате концентрирования и промывания ПЭ получали целевое соединение 024 (12 мг, 71%) в виде белого твердого вещества.
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 9,41 (s, 1H), 7,80 (d, J=8,5 Гц, 2H), 7,46 (s, 1H), 7,36 (d, J=4,9 Гц, 1H), 7,30-7,22 (m, 2H), 7,09-7,03 (m, 1H), 6,80 (d, J=8,4 Гц, 1H), 6,66 (d, J=8,6 Гц, 2H), 6,26 (d, J=7,9 Гц, 1h), 5,24 (s, 1H), 5,09 (s, 2H), 2,04-1,87 (m, 3H), 1,76-1,39 (m, 10H), 1,35-1,14 (m, 6H).
ЖХМС: m/z = 519 (M+H)+.
Пример 25. Синтез соединения 025
6
Стадия 1. См. стадии 1-4 Примера 24 для получения соединения 3.
Стадия 2. Готовили смесь соединения 3 (400 мг, 1,7 ммоль), 1-гидроксициклопентанкарбоновой кислоты (222 мг, 1,7 ммоль), HATU (969 мг, 2.6 ммоль) и DIPEA (439 мг, 3,4 ммоль) в ДМФ (10 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Смесь растворяли в воде и экстрагировали ЭА. Органические слои промывали водой и соляным раствором, затем высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Затем в результате очистки с помощью колонки силикагеля с ЭА:ПЭ (1:2) получали соединение 4 (300 мг, 51%) в виде твердого вещества пурпурного цвета.
Стадия 3. К раствору соединения 4 (300 мг, 0,87 ммоль) в ТГФ (10 мл) и EtOH (10 мл) добавляли 2н. NaOH (10 мл, 20 ммоль) при 60°C и полученную в результате реакционную смесь перемешивали в течение 6 ч. После концентрирования и доведения pH водной фазы до 5-6 проводили экстракцию ЭА (2x15 мл). Органические слои промывали водой и соляным раствором, затем высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением целевого соединения 5 (250 г, 87%) в виде белого твердого вещества.
Стадия 4. Готовили смесь соединения 5 (250 мг, 0,75 ммоль), трет-бутил-2-амино-4-(тиофен-2ил)фенилкарбамата (218 мг, 0,75 ммоль), EDCI (143,0 мг, 1,1 ммоль), НОАТ (147 мг, 1,1 ммоль) и DIPEA (194 мг, 1,5 ммоль) в ДМФ (10 мл). Реакционную смесь перемешивали при 65°C в течение ночи. Затем смесь растворяли в воде и экстрагировали ЭА. Органические слои промывали водой и соляным раствором, затем высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Затем в результате очистки с помощью колонки силикагеля с ЭА:ПЭ (1:2) получали соединение 6 (50 мг, 11%) в виде твердого вещества пурпурного цвета.
- 37 035120
Стадия 5. К раствору соединения 6 (50 мг, 0,08 ммоль) в ДХМ добавляли НС1/1,4-диоксан (2 мл,
8,0 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. В результате концентрирования и промывания ПЭ получали целевое соединение 025 (13 мг, 32%) в виде белого твердого вещества.
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 9,61 (s, 1H), 7,81 (d, J=8,6 Гц, 2H), 7,53 (s, 1H), 7,46-7,30 (m, 3H), 7,117,07 (m, 1H), 6,98 (d, J=8,0 Гц, 1H), 6,68 (d, J=8,7 Гц, 2H), 4,57-4,44 (m, 1H), 4,36-4,19 (m, 1H), 3,24-3,17 (m, 1H), 2,90-2,79 (m, 1H), 2,39-2,25 (m, 1H), 2,08-1,91 (m, 4H), 1,74-1,63 (m, 4H), 1,57-1,52 (m, 2H), 1,381,22 (m, 2H).
ЖХМС: m/z = 505 (M+H)+.
Пример 26. Синтез соединения 026
HNB0C
2
Стадия 1. К смеси соединения 1 (300 мг, 0,88 ммоль) в ТГФ (5 мл) и EtOH (5 мл) добавляли 2 М NaOH (более 5 мл) и полученную в результате реакционную смесь перемешивали при 60°C в течение 5 ч. Смесь концентрировали с получением остатка, который очищали с помощью флэш-колонки с получением соединения 2 (180 мг, выход: 65%) в виде желтого твердого вещества.
Стадия 2. Смесь соединения 2 (150 мг, 0,48 ммоль), соединения Boc-амина (139 мг, 0,48 ммоль), НОАТ (131 мг, 0,96 ммоль) и EDCI (183 мг, 0,96 ммоль) в ДМФ (4 мл) перемешивали при 60°C в течение ночи. К смеси добавляли ЭА (30 мл) и насыщенный водный раствор NaCl (100 мл) и полученную в результате реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин. Органический слой отделяли, промывали насыщенным водным раствором NaCl (2x50 мл), высушивали и концентрировали с получением остатка, который очищали препаративной ТСХ с получением соединения 3 (100 мг, 35%) в виде желтого твердого вещества.
Стадия 3. К раствору соединения 3 (100 мг, 0,17 ммоль) в ДХМ (3 мл) добавляли ТФУ (3 мл) и полученную в результате реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч.
Смесь концентрировали с получением остатка, который очищали препаративной ВЭЖХ с получением соединения 026 (20 мг, 24%) в виде белого твердого вещества.
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 9,53 (s, 1H), 8,76 (d, J=86,5 Гц, 2H), 8,41 (d, J=13,8 Гц, 1H), 7,43-7,38 (m, 3H), 7,37-7,31 (m, 3H), 7,29 (dd, J=8,3, 2,2 Гц, 1H), 7,22 (dd, J=7,7, 4,2 Гц, 2H), 7,04 (dd, J=5,1, 3,6 Гц, 1H), 6,79 (d, J=8,4 Гц, 1H), 3,46 (d, J=11,2 Гц, 2H), 3,34-3,20 (m, 2H), 2,96-2,90 (m, 2H), 2,86 (d, J=4,5 Гц, 3H), 2,26-2,08 (m, 2H).
ЖХМС: m/z = 485 (M+H)+.
Пример 27. Синтез соединения 027
- 38 035120
Стадия 1. Смесь соединения 1 (3,0 г, 15 ммоль), бромбензола (7,0 г, 45 ммоль), Pd2(dba)3 (1,4 г,
1,5 ммоль), RuPhos (700 мг, 1,5 ммоль) и Cs2CO3 (14,6 г, 45 ммоль) в толуоле (100 мл) перемешивали при
95°C в атмосфере азота в течение ночи. Смесь фильтровали и концентрировали последующим промыванием ПЭ (30 мл) с получением соединения 2 (3,5 г, выход: 85%) в виде светло-желтого твердого вещества.
Стадия 2. К раствору соединения 2 (3,5 г, 12,6 ммоль) в 1,4-диоксане (50 мл) добавляли HCl в 1,4-диоксане (9,45 мл, 37,8 ммоль) при комнатной температуре и смесь перемешивали в течение ночи. Смесь фильтровали с получением соединения 3 (2,0 г, 90%) в виде белого твердого вещества.
Стадия 3. Смесь соединения 3 (500 мг, 2,8 ммоль), этил-2-хлорпиримидин-5-карбоксилата (352 мг, 1,9 ммоль) и NEt3 (576 мг, 5,7 ммоль) в 1,4-диоксане (15 мл) перемешивали при 60°C в течение ночи. К смеси добавляли ЭА (100 мл) и насыщенный водный раствор NaCl (30 мл) и полученную в результате реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин. Органический слой отделяли, промывали насыщенным водным раствором NaCl (2x50 мл), высушивали и концентрировали и промывали ПЭ (30 мл) с получением соединения 4 (500 мг, 81%) в виде желтого твердого вещества.
Стадия 4. К раствору соединения 4 (500 мг, 1,5 ммоль) в EtOH (15 мл) и ТГФ (15 мл) добавляли водный раствор NaOH (2 М, 15 мл) и полученную в результате реакционную смесь перемешивали при 60°C в течение 5 ч. К смеси добавляли насыщенный водный раствор лимонной кислоты для доведения до pH менее 7, с последующим фильтрованием с получением соединения 5 (400 мг, 87%) в виде белого твердого вещества.
Стадия 5. Смесь соединения 5 (150 мг, 0,5 ммоль), соединения Boc-амина (145 мг, 0,5 ммоль), HOAT (136 мг, 1 ммоль), EDCI (191 мг, 1 ммоль) и NEt3 (202 мг, 2 ммоль) в ДМФ (5 мл) перемешивали при 60°C в течение ночи. К смеси добавляли ЭА (100 мл) и насыщенный водный раствор NaCl (100 мл) и полученную в результате реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин. Органический слой отделяли, промывали насыщенным водным раствором NaCl (2x50 мл), высушивали, концентрировали и промывали CH3CN (10-20 мл) с получением соединения 6 (140 мг, 49%) в виде желтого твердого вещества.
Стадия 6. К раствору соединения 6 (140 мг, 0,25 ммоль) в ДХМ (5 мл) добавляли ТФУ (3 мл) при комнатной температуре и полученную в результате реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч. Смесь концентрировали и очищали препаративной ВЭЖХ с получением соединения 027 (110 мг, 95%) в виде белого твердого вещества.
1H ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 9,52 (s, 1H), 8,86 (s, 2H), 7,87 (d, J=7,8 Гц, 1H), 7,45 (s, 1H), 7,35 (d, J=4,9 Гц, 1H), 7,29 (d, J=8,3 Гц, 1H), 7,25-7,18 (m, 3H), 7,07-7,02 (m, 1H), 6,96 (d, J=8,2 Гц, 2H), 6,83-6,73 (m, 2H), 5,20 (s, 2h), 3,72 (d, J=12,2 Гц, 2H), 2,82 (t, J=11,7 Гц, 2H), 1,99 (s, 1H), 1,96 (d, J=10,5 Гц, 2H), 1,69-1,58 (m, 2H).
ЖХМС: m/z = 471 (M+H)+.
Пример 28. Синтез соединения 028
HNB0C
Стадии 1, 2. См. стадии 1-2 Примера 27 для получения соединения 3.
Стадия 3. Смесь соединения 3 (300 мг, 1,7 ммоль), 4-фторбензонитрила (181 мг, 1,5 ммоль) и K2CO3 (414 мг, 3 ммоль) в ДМСО (10 мл) перемешивали при 100°C в течение ночи. К смеси добавляли ЭА (100 мл) и насыщенный водный раствор лимонной кислоты (30 мл) и полученную в результате реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин. Органический слой отделяли, промывали насыщенным водным раствором NaCl (2x50 мл), высушивали, концентрировали и очищали с помощью колонки силикагеля с получением соединения 4 (300 мг, 72%) в виде желтого твердого вещества.
Стадия 4. Раствор соединения 4 (300 мг, 1,1 ммоль) в HCl (20 мл) перемешивали при 80°C в течение 3 суток. Смесь фильтровали с получением соединения 5 (250 мг, 78%) в виде белого твердого вещества.
- 39 035120
Стадия 5. Смесь соединения 5 (150 мг, 0,5 ммоль), соединения Boc-амина (145 мг, 0,5 ммоль), HOAT (136 мг, 1 ммоль), EDCI (191 мг, 1 ммоль) и NEt3 (202 мг, 2 ммоль) в ДМФ (5 мл) перемешивали при 60°C в течение ночи. К смеси добавляли ЭА (80 мл) и насыщенный водный раствор NaCl (80 мл) и полученную в результате реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин. Органический слой отделяли, промывали насыщенным водным раствором NaCl (2x30 мл), высушивали, концентрировали и очищали препаративной ТСХ с получением соединения 6 (50 мг, 18%) в виде желтого твердого вещества.
Стадия 6. К раствору соединения 6 (50 мг, 0,09 ммоль) в ДХМ (5 мл) добавляли ТФУ (3 мл) при комнатной температуре и полученную в результате реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч. Смесь концентрировали и очищали препаративной ВЭЖХ с получением соединения 028 (5 мг, 12%) в виде белого твердого вещества.
1H ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 9,36 (s, 1H), 7,79 (d, J=8,6 Гц, 2H), 7,46 (d, J=1,9 Гц, 1H), 7,35 (d, J=5,0 Гц, 1H), 7,27 (dd, J=8,3, 2,0 Гц, 1H), 7,25- 7,18 (m, 3H), 7,08- 7,03 (m, 1H), 6,96 (d, J=8,2 Гц, 2H), 6,80 (d, J=8,3 Гц, 1H), 6,75 (t, J=7,2 Гц, 1H), 6,67 (d, J=8,7 Гц, 2H), 6,22 (d, J=8,0 Гц, 1H), 5,07 (s, 2H), 3,70 (d, J=12,8 Гц, 2H), 3,53 (s, 1H), 2,89 (t, J=11,0 Гц, 2H), 2,01 (d, J=10,8 Гц, 2H), 1,51 (dd, J=20,6, 10,5 Гц, 2H).
ЖХМС: m/z = 469 (M+H)+.
Пример 29. Синтез соединения 029
Стадии 1, 2. См. стадии 1-2 Примера 13 для получения соединения 6.
Стадия 3. Смесь соединения 6 (630 мг, 0,5 ммоль), соединения Boc-амина (484 мг, 1,7 ммоль), HOAT (510 мг, 3,78 ммоль), EDCI (721 мг, 3,78 ммоль), DIPEA (487 мг, 3,78 ммоль) и DMAP (461 мг, 3,78 ммоль) в ДМФ (5 мл) перемешивали при 67°C в течение 3 дней. К смеси добавляли ЭА (100 мл) и насыщенный водный раствор NaCl (100 мл) и полученную в результате реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин. Органический слой отделяли, промывали насыщенным водным раствором NaCl (2x50 мл), высушивали, концентрировали и очищали с помощью колонки силикагеля с получением соединения 7 (473 мг, 46%) в виде желтого твердого вещества.
Стадия 4. К раствору соединения 7 (250 мг, 0,42 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли ТФУ (3 мл) при комнатной температуре и полученную в результате смесь перемешивали в течение 2 ч. Смесь концентрировали с получением соединения 8 (300 мг, неочищенное) и использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
Стадия 5. К раствору соединения 8 (150 мг, неочищенное) и Et3N (50 мг, 0,5 ммоль) в ТГФ (5 мл) добавляли соединение морфолин-4-карбонилхлорид (37 мг, 0,25 ммоль) при 0°C и полученную в результате реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч. К смеси добавляли ЭА (10 мл) и насыщенный водный раствор NaCl (10 мл) и полученную в результате реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин. Органический слой отделяли, промывали насыщенным водным раствором NaCl (2x10 мл), высушивали, концентрировали и очищали препаративной ВЭЖХ с получением соединения 029 (44 мг, 35%) в виде белого твердого вещества.
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 9,36 (s, 1H), 8,51 (dd, J=4,7, 1,5 Гц, 2H), 7,76 (d, J=8,8 Гц, 2H), 7,66 (d, J=2,1 Гц, 1H), 7,57 (dd, J=4,7, 1,6 Гц, 2H), 7,47 (dd, J=8,4, 2,2 Гц, 1H), 6,88 (d, J=8,4 Гц, 1H), 6,79 (d, J=8,8 Гц, 2H), 5,87 (s, 1H), 5,29 (s, 2H), 3,60-3,51 (m, 4H), 3,32-3,24 (m, 2H), 3,17-3,08 (m, 6H), 1,98 (d, J=13,8 Гц, 2H), 1,64-1,55 (m, 2H), 1,36 (s, 3H).
ЖХМС: m/z = 515 (M+H)+.
- 40 035120
Пример 30. Синтез соединения 030
Стадии 1-3. См. стадии 1-3 Примера 29 для получения соединения 8.
Стадия 3. К раствору соединения 8 (150 мг, неочищенное) и Et3N (50 мг, 0,5 ммоль) в ТГФ (5 мл) добавляли соединение пирролидин-1-карбонилхлорид (33 мг, 0,25 ммоль) при 0°C и полученную в результате реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч. К смеси добавляли ЭА (10 мл) и насыщенный водный раствор NaCl (10 мл) и полученную в результате реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин. Органический слой отделяли, промывали насыщенным водным раствором NaCl (2x10 мл), высушивали, концентрировали и очищали препаративной ВЭЖХ с получением соединения 030 (17 мг, 14%) в виде белого твердого вещества.
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 9,34 (d, J=10,2 Гц, 1H), 8,51 (d, J=5,5 Гц, 2H), 7,76 (d, J=8,6 Гц, 2H), 7,67 (d, J=1,8 Гц, 1H), 7,58 (d, J=5,9 Гц, 2H), 7,48 (dd, J=8,3, 1,9 Гц, 1H), 6,88 (d, J=8,4 Гц, 1H), 6,79 (d, J=8,6 Гц, 2H), 5,87 (s, 1H), 5,31 (s, 2H), 3,31-3,20 (m, 6H), 3,10 (t, J=10,5 Гц, 2H), 1,98 (d, J=13,5 Гц, 2H), 1,74 (s, 4H), 1,59 (t, J=10,1 Гц, 2H), 1,37 (s, 3H).
ЖХМС: m/z = 499 (m+H)+.
Пример 31. Синтез соединения 031
Стадия 1. Смесь соединения 6 (270 мг, 0,8 ммоль), соединения Boc-амина (205 мг, 0,72 ммоль), НОАТ (216 мг, 1,6 ммоль), EDCI (305 мг, 1,6 ммоль), DIPEA (206 мг, 1,6 ммоль) и DMAP (195 мг,
1,6 ммоль) в ДМФ (25 мл) перемешивали при 67°C в течение 3 дней. К смеси добавляли ЭА (60 мл) и насыщенный водный раствор NaCl (60 мл) и полученную в результате реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин. Органический слой отделяли, промывали насыщенным водным раствором NaCl (2x20 мл), высушивали, концентрировали и очищали с помощью колонки силикагеля с получением соединения 7 (400 мг, 83%) в виде желтого твердого вещества.
Стадия 2. К раствору соединения 7 (200 мг, 0,33 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли ТФУ (3 мл) и полученную в результате смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Смесь концентрировали с получением соединения 8 (250 мг, неочищенное) и использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
Стадия 3. К раствору соединения 8 (150 мг, неочищенное) и Et3N (50 мг, 0,5 ммоль) в ТГФ (5 мл) добавляли соединение морфолин-4-карбонилхлорид (37 мг, 0,25 ммоль) при 0°C и полученную в результате реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч. К смеси добавляли ЭА (10 мл) и насыщенный водный раствор NaCl (10 мл) и полученную в результате реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин. Органический слой отделяли, промывали насыщенным водным раствором NaCl (2x10 мл), высушивали, концентрировали и очищали препаративной ВЭЖХ с получением соединения 031 (55 мг, 60%) в виде белого твердого вещества.
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 9,57 (s, 1H), 9,09 (s, 1H), 8,76 - 8,58 (m, 2H), 8,01 - 7,69 (m, 4H), 7,56 (d, J=7,2 Гц, 1H), 7,05-6,87 (m, 3H), 3,56 (s, 4H), 3,17 (d, J=39,8 Гц, 8H), 1,96 (s, 2H), 1,61 (s, 2H), 1,37 (s, 3H).
ЖХМС: m/z = 515 (M+H)+.
- 41 035120
Пример 32. Синтез соединения 032
NHBoc
Стадии 1, 2. См. стадии 1-2 Примера 19 для получения соединения 3.
Стадия 3. Смесь соединения 3 (150 мг, 0,45 ммоль), соединения Boc-амина (130 мг, 0,45 ммоль), НОАТ (103 мг, 0,76 ммоль), EDCI (145 мг, 0,76 ммоль) и NEt3 (154 мг, 1,52 ммоль) в CH3CN (5 мл) перемешивали при 60°C в течение ночи. К смеси добавляли ЭА (10 мл) и насыщенный водный раствор NaCl (10 мл) и полученную в результате реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин. Органический слой отделяли, промывали насыщенным водным раствором NaCl (2x10 мл), высушивали, концентрировали и очищали с помощью колонки силикагеля с получением соединения 4 (90 мг, 30%) в виде желтого твердого вещества.
Стадия 4. К раствору соединения 4 (90 мг, 0,15 ммоль) в ДХМ (5 мл) добавляли ТФУ (3 мл) при комнатной температуре и полученную в результате реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч. Смесь концентрировали с получением соединения 5 (58 мг, неочищенное) и использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
Стадия 5. К раствору соединения 5 (58 мг, 0,15 ммоль) и Et3N (33 мг, 0,33 ммоль) в ТГФ (5 мл) добавляли соединение пирролидин-1-карбонилхлорид (20 мг, 0,15 ммоль) при 0°C и полученную в результате реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч. Смесь очищали препаративной ВЭЖХ с получением соединения 032 (12 мг, 17%) в виде белого твердого вещества.
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 9,37 (s, 1H), 8,58 (d, J=5,1 Гц, 2H), 7,79 (d, J=8,8 Гц, 4H), 7,76 (d, J=2,1 Гц, 1H), 7,59 (dd, J=8,5, 2,2 Гц, 1H), 6,89 (d, J=8,5 Гц, 1H), 6,66 (d, J=8,8 Гц, 2H), 6,22 (d, J=7,4 Гц, 1H), 3,63 (d, J=13,2 Гц, 2H), 3,26 (t, J=6,4 Гц, 4H), 2,87 (t, J=11,3 Гц, 2H), 1,91 (d, J=10,0 Гц, 2H), 1,75 (t, J=6,5 Гц, 4H), 1,34 (dd, J=20,2, 10,4 Гц, 2H).
ЖХМС: m/z = 485 (M+H)+.
Пример 33. Синтез соединения 033
- 42 035120
Стадия 1. Смесь соединения 1 (2,1 г, 9,6 ммоль), этил-2-хлорпиримидин-5-карбоксилата (600 мг, 3,2 ммоль) и NEt3 (970 мг, 9,6 ммоль) в 1,4-диоксане (20 мл) перемешивали при 95°C в течение ночи. Смесь концентрировали с последующим добавлением ЭА (60 мл) и водного раствора лимонной кислоты (60 мл) и полученную в результате реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин. Органический слой отделяли, высушивали и концентрировали с получением соединения 2 (880 мг, выход: 75%) в виде светло-желтого твердого вещества.
Стадия 2. К раствору соединения 2 (880 мг, 2,4 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли ТФУ (5 мл) при комнатной температуре и полученную в результате реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч. Смесь концентрировали с получением соединения 3 (630 мг, 99%) в виде желтого твердого вещества.
Стадия 3. Смесь соединения 3 (630 мг, 2,4 ммоль), 2-индолуксусной кислоты (531 мг, 3 ммоль), HOAT (816 мг, 6 ммоль), EDCI (1,1 г, 6 ммоль) и NEt3 (1,2 г, 12 ммоль) в ДМФ (15 мл) перемешивали при 60°C в течение ночи. К смеси добавляли ЭА (100 мл) и насыщенный водный раствор NaCl (100 мл) и полученную в результате реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин. Органический слой отделяли, промывали насыщенным водным раствором NaCl (2x50 мл), высушивали и концентрировали с получением остатка, который очищали препаративной ТСХ с получением соединения 4 (600 мг, 60%) в виде желтого твердого вещества.
Стадия 4. К раствору соединения 4 (600 мг, 1,4 ммоль) в EtOH (15 мл) и ТГФ (15 мл) добавляли водный раствор NaOH (2 М, 15 мл) и полученную в результате реакционную смесь перемешивали при 60°C в течение 5 ч. Смесь концентрировали с получением остатка. К смеси добавляли воду (100 мл) и водный раствор лимонной кислоты до доведения pH менее 7 при 0°C с последующим фильтрованием с получением соединения 5 (400 мг, 72%) в виде белого твердого вещества.
Стадия 5. Смесь соединения 5 (150 мг, 0,38 ммоль), соединения Boc-амина (108 мг, 0,38 ммоль), НОАТ (103 мг, 0,76 ммоль), EDCI (145 мг, 0,76 ммоль) и NEt3 (154 мг, 1,52 ммоль) в ДМФ (5 мл) перемешивали при 60°C в течение ночи. К смеси добавляли ЭА (20 мл) и насыщенный водный раствор NaCl (20 мл) и полученную в результате реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин. Органический слой отделяли, промывали насыщенным водным раствором NaCl (2x20 мл), высушивали, концентрировали и очищали препаративной ТСХ с получением соединения 6 (150 мг, 59%) в виде желтого твердого вещества.
Стадия 6. К раствору соединения 6 (150 мг, 0,23 ммоль) в ДХМ (5 мл) добавляли ТФУ (3 мл) при комнатной температуре и полученную в результате реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч. Смесь концентрировали и очищали препаративной ВЭЖХ с получением соединения 033 (28 мг, 22%) в виде белого твердого вещества.
1H ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 10,94 (s, 1H), 9,75 (s, 1H), 8,91 (s, 2H), 7,58 (dd, J=15,8, 7,9 Гц, 5H), 7,41 (t, J=7,6 Гц, 4H), 7,36 (d, J=8,1 Гц, 1H), 7,31-7,24 (m, 3H), 7,08 (t, J=7,5 Гц, 1H), 7,01-6,97 (m, 2H), 4,84 (d, J=11,4 Гц, 2H), 4,58 (d, J=14,0 Гц, 2H), 4,14 (d, J=11,9 Гц, 1H), 3,82 (q, J=15,1 Гц, 3H), 3,09 (t, J=12,1 Гц, 1H), 2,82 (s, 3H), 2,63 (t, J=12,0 Гц, 1H), 1,63-1,44 (m, 5H), 1,31 (d, J=8,2 Гц, 2H).
ЖХМС: m/z = 562 (M+H)+.
Пример 34. Синтез соединения 034
- 43 035120
Стадия 1. См. стадии 1-4 Примера 3 для получения соединения 2.
Стадия 2. К раствору соединения 2 (5,25 г, 15 ммоль) в ДМСО (50 мл) добавляли K2CO3 (4,14 г, ммоль) и Cu (960 мг, 15 ммоль). Смесь перемешивали в атмосфере азота при 145°C в течение ночи.
Смесь фильтровали, и фильтрат собирали с последующей очисткой на колонке с получением соединения (2,4, 38%) в виде белого твердого вещества.
Стадия 3. К раствору соединения 3 (600 мг, 1,5 ммоль) в 1,4-диоксане (15 мл) добавляли 4 М HCl в 1,4-диоксане (10 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь фильтровали с получением соединения 4 (437 мг, 95%) в виде желтого твердого вещества.
Стадия 4. Смесь соединения 4 (437 мг, 1,75 ммоль), EDCI (543 мг, 3,5 ммоль), HOAT (476 мг,
3,5 ммоль), DIPEA (903 мг, 7 ммоль) и 2-индолуксусной кислоты (307 мг, 1,75 ммоль) в 5 мл ДМФ перемешивали при 60°C в течение ночи. После экстракции ЭА было получено целевое соединение 5 (600 мг, 84%) после очистки на колонке с ЭА.
Стадия 5. К раствору соединения 5 (600 мг, 1,47 ммоль) в EtOH/ТГФ добавляли 2н. водный раствор NaOH (5 мл), затем полученную в результате реакционную смесь перемешивали при 60°C в течение ночи. После выпаривания растворителя смесь экстрагировали ЭА, а затем объединенный органический слой высушивали с получением желаемого соединения 6 в виде белого твердого вещества (140 мг, 25%).
Стадия 6. Смесь соединения 6 (200 мг, 0,33 ммоль), EDCI (102 мг, 0,66 ммоль), НОАТ (88 мг, 0,66 ммоль), DIPEA (170 мг, 1,32 ммоль) и амина (102 мг, 0,33 ммоль) в 5 мл ДМФ перемешивали при 60°C в течение ночи. После экстракции ЭА было получено целевое соединение 7 (200 мг, 20%) в виде белого твердого вещества.
Стадия 7. К смеси соединения 7 (200 мг, 0,28 ммоль) в 5 мл CH2Cl2 добавляли 2 мл ТФУ и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. После экстракции ЭА целевое соединение 034 (10 мг, 6%) очищали препаративной ВЭЖХ.
1H ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 10,86 (s, 1H), 9,67 (s, 1H), 8,85 (s, 1H), 7,57-7,52 (m, 2H), 7,47-7,41 (m, 3H), 7,40-7,35 (m, 3H), 7,33 (d, J=8,1 Гц, 1H), 7,26 (t, J=7,4 Гц, 1H), 7,12 (s, 1H), 7,09 (d, J=8,8 Гц, 1h), 7,077,04 (m, 2H), 6,92 (t, J=7,0 Гц, 1H), 4,96 (s, 1H), 4,49 (d, J=10,4 Гц, 1H), 4,12 (d, J=10,9 Гц, 1H), 3,71 (q, J=15,0 Гц, 2H), 3,44 (q, J=7,0 Гц, 2H), 3,10 (t, J=12,3 Гц, 1H), 2,64 (t, J=12,2 Гц, 1H), 2,09 (s, 2H), 1,87 (dd, J=26,7, 12,8 Гц, 2H), 1,16-1,08 (m, 1H), 1,05 (t, J=7,0 Гц, 3H).
ЖХМС: m/z = 622 (M+H)+.
Пример 35. Синтез соединения 035 о
Стадия 1. Смесь этил-2-хлорпиримидин-5-карбоксилата (1,86 г, 10 ммоль), соединения 1 (3,00 г, 15 ммоль) и NEt3 (3,0 г, 30 ммоль) в 1,4-диоксане (20 мл) перемешивали при 95°C в течение ночи. Смесь концентрировали и добавляли ЭА (60 мл) и водный раствор лимонной кислоты (60 мл). Полученную в результате реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин. Органический слой отделяли, высушивали и концентрировали с получением соединения 2 (3,4 г, выход: 97%) в виде светло-желтого твердого вещества.
Стадия 2. К раствору соединения 2 (600 мг, 1,7 ммоль) в 1,4-диоксане (15 мл) добавляли 4 М HCl в 1,4-диоксане (10 мл) при комнатной температуре и полученную в результате реакционную смесь пере- 44 035120 мешивали в течение ночи. Смесь фильтровали с получением соединения 3 (427 мг, 100%) в виде желтого твердого вещества.
Стадия 3. Смесь соединения 3 (427 мг, 1,7 ммоль), соединения 2-индолуксусной кислоты (301 мг,
1,7 ммоль), НОАТ (462 мг, 3,4 ммоль), EDCI (649 мг, 3,4 ммоль) и NEt3 (687 мг, 6,8 ммоль) в ДМФ (15 мл) перемешивали при 60°C в течение ночи. К смеси добавляли ЭА (100 мл) и насыщенный водный раствор NaCl (100 мл) и полученную в результате реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин.
Органический слой отделяли, промывали насыщенным водным раствором NaCl (2x50 мл), высушивали и концентрировали с получением остатка, который очищали препаративной ТСХ с получением соединения 4 (584 мг, 84%) в виде желтого твердого вещества.
Стадия 4. К раствору соединения 4 (500 мг, 1,2 ммоль) в EtOH (15 мл) и ТГФ (15 мл) добавляли водный раствор NaOH (2 М, 15 мл) и полученную в результате реакционную смесь перемешивали при 60°C в течение 2 ч. Смесь концентрировали с получением остатка. К смеси добавляли воду (100 мл) и водный раствор лимонной кислоты до доведения pH менее 7 при 0°C с последующим фильтрованием с получением соединения 5 (342 мг, 75%) в виде белого твердого вещества.
Стадия 5. Смесь соединения 5 (150 мг, 0,39 ммоль), соединения Boc-амина (113 мг, 0,39 ммоль), НОАТ (103 мг, 0,76 ммоль), EDCI (145 мг, 0,76 ммоль) и NEt3 (154 мг, 1,52 ммоль) в ДМФ (5 мл) перемешивали при 60°C в течение ночи. К смеси добавляли ЭА (100 мл) и насыщенный водный раствор NaCl (100 мл) и полученную в результате реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин. Органический слой отделяли, промывали насыщенным водным раствором NaCl (2x50 мл), высушивали и концентрировали с получением остатка, который очищали препаративной ТСХ с получением соединения 6 (150 мг, 59%) в виде желтого твердого вещества.
Стадия 6. К раствору соединения 6 (150 мг, 0,23 ммоль) в ДХМ (5 мл) добавляли ТФУ (3 мл) при комнатной температуре и полученную в результате реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч. Смесь концентрировали и очищали препаративной ВЭЖХ с получением соединения 035 (2 мг, 1,5%) в виде белого твердого вещества.
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 10,92 (s, 1H), 9,57 (s, 1H), 8,86 (s, 2H), 7,84 (d, J=7,8 Гц, 1H), 7,56 (dd, J=12,6, 7,9 Гц, 4H), 7,49 (s, 1H), 7,36 (dt, J=17,7, 8,5 Гц, 5H), 7,27-7,19 (m, 3H), 7,07 (t, J=7,4 Гц, 1H), 6,97 (t, J=7,3 Гц, 1H), 6,84 (d, J=8,3 Гц, 1H), 5,15 (s, 2H), 4,33 (d, J=14,0 Гц, 1H), 3,78 (d, J=2,4 Гц, 2H), 3,15 (t, J=12,5 Гц, 1H), 2,77 (t, J=11,7 Гц, 1H), 1,84 (s, 2H), 1,32 (d, J=10,9 Гц, 2H).
ЖХМС: m/z = 548 (M+H)+.
Пример 36. Синтез соединения 036
Стадии 1-3. См. стадии 1-3 Примера 34 для получения соединения 4.
Стадия 4. Смесь соединения 4 (500 мг, 1,53 ммоль), EDCI (573 мг, 3 ммоль), HOAT (405 мг, 3 ммоль), DIPEA (390 мг, 3 ммоль) и 2-метил-3-индолуксусной кислоты (289 мг, 1,53 ммоль) в 10 мл ДМФ перемешивали при 60°C в течение ночи. После гашения ледяной водой целевое соединение 5 (508 мг, 69%) осаждали и собирали в виде белого твердого вещества.
Стадия 5. К раствору соединения 5 (508 мг, 1 ммоль) в EtOH/ТГФ (10 мл) добавляли 2н. NaOH (5 мл), затем полученную в результате реакционную смесь перемешивали при 60°C в течение ночи. После выпаривания растворителя pH смеси доводили до 4-5. Осадок собирали с получением желаемого со- 45 035120 единения 6 в виде белого твердого вещества (460 мг, 96%).
Стадия 6. Смесь соединения 6 (200 мг, 0,42 ммоль), EDCI (160 мг, 0,84 ммоль), НОАТ (113 мг,
0,84 ммоль), DIPEA (108 мг, 0,84 ммоль) и амина (120 мг, 0,42 ммоль) в 5 мл ДМФ перемешивали при
60°C в течение ночи. После экстракции ЭА было получено целевое соединение 7 (200 мг, неочищенное) в виде масла.
Стадия 7. К смеси соединения 7 (200 мг, неочищенное) в 5 мл CH2Cl2 добавляли 2 мл ТФУ и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. После экстракции ЭА целевое соединение 036 (94 мг, 46%) очищали препаративной ВЭЖХ.
1H ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 10,74 (s, 1H), 9,78 (s, 1H), 8,84 (s, 2H), 7,61-7,54 (m, 3H), 7,48-7,36 (m, 6H), 7,34-7,25 (m, 2H), 7,22 (d, J=8,0 Гц, 1H), 7,04-6,94 (m, 4H), 6,86 (t, J=7,4 Гц, 1H), 4,93 (t, J=11,9 Гц, 1H), 4,48 (d, J=13,2 Гц, 1H), 3,98 (d, J=12,1 Гц, 1H), 3,64 (dd, J=45,6, 15,4 Гц, 2H), 3,07 (t, J=12,4 Гц, 1H), 2,62 (t, J=12,2 Гц, 1H), 2,22 (s, 3H), 1,85 (d, J=11,3 Гц, 1H), 1,75 (d, J=10,8 Гц, 1H), 1,08 (d, J=8,4 Гц, 1H), 0,94 (d, J=8,5 Гц, 1H).
ЖХМС: m/z = 636 (M+H)+.
Пример 37. Синтез соединения 037
Стадия 1. См. стадии 1-4 Примера 13 для получения соединения 5.
Стадия 2. Смесь соединения 5 (250 мг, 0,69 ммоль) и N-бромсукцинамида (БСИ) (123 мг, 0,69 ммоль в ДХМ (10 мл) перемешивали при 0°C в течение 30 мин. К смеси добавляли ЭА (20 мл) и насыщенный водный раствор Na2SO3 (20 мл) и полученную в результате реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин. Органический слой отделяли, промывали насыщенным водным раствором NaCl (2x20 мл), высушивали, концентрировали и очищали препаративной ТСХ с получением соединения 6 (258 мг, 85%) в виде желтого твердого вещества.
Стадия 3. Смесь соединения 6 (240 мг, 0,55 ммоль), циклопропилбороновой кислоты (232 мг,
2.7 ммоль), Pd(OAc)2 (11 мг, 0,05 ммоль), трициклогексилфосфина (14 мг, 0,05 ммоль) и K3PO4 (360 мг,
1.7 ммоль) в толуоле (30 мл) и H2O (5 мл) перемешивали при 95°C в атмосфере азота в течение ночи. Смесь охлаждали и к смеси добавляли ЭА (100 мл). В результате фильтрования, концентрирования и очистки на колонке силикагеля получали соединение 7 (200 мг, 90%) в виде светло-желтого твердого вещества.
Стадия 4. К раствору соединения 7 (200 мг, 0,5 ммоль) в EtOH (15 мл) и ТГФ (15 мл) добавляли водный раствор NaOH (2 М, 15 мл) и полученную в результате реакционную смесь перемешивали при 60°C в течение 2 ч. Смесь концентрировали, а затем к смеси добавляли воду (20 мл) и водный раствор лимонной кислоты до доведения pH менее 7 при 0°C с последующим фильтрованием с получением соединения 8 (168 мг, 90%) в виде белого твердого вещества.
Стадия 5. Смесь соединения 8 (150 мг, 0,40 ммоль), соединения Boc-амина (114 мг, 0,40 ммоль), НОАТ (103 мг, 0,76 ммоль), EDCI (145 мг, 0,76 ммоль) и NEt3 (154 мг, 1,52 ммоль) в ДМФ (5 мл) перемешивали при 60°C в течение ночи. Смесь экстрагировали ЭА (2x10 мл), высушивали, концентрировали и очищали препаративной ТСХ с получением соединения 9 (120 мг, 50%) в виде желтого твердого вещества.
Стадия 6. К раствору соединения 9 (120 мг, 0,20 ммоль) в ДХМ (5 мл) добавляли ТФУ (3 мл) при комнатной температуре и полученную в результате реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч. Смесь концентрировали с получением соединения 10 (80 мг, 100%) и использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
Стадия 7. К раствору соединения 10 (80 мг, 0,20 ммоль) и Et3N (106 мг, 1,05 ммоль) в ТГФ (5 мл) добавляли морфолин-4-карбонилхлорид (45 мг, 0,30 ммоль) при 0°C и полученную в результате реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч. К смеси добавляли ЭА (10 мл) и насыщенный водный раствор NaCl (10 мл) и полученную в результате реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин. Органический слой отделяли, концентрировали и очищали препаративной ВЭЖХ с получением соединения 037
- 46 035120 (3 мг, 3%) в виде желтого твердого вещества.
1Н ЯМР (400 МГц, MeOD) δ 7,78 (d, J=7,1 Гц, 2H), 7,58 (d, J=7,6 Гц, 2H), 7,48 (s, 1H), 7,39 (t, J=7,9 Гц, 3H), 7,26 (t, J=7,4 Гц, 1H), 6,99 (d, J=8,3 Гц, 1H), 6,93 (d, J=9,2 Гц, 1H), 3,71-3,66 (m, 4H), 3,50 (d, J=13,6 Гц, 2H), 3,30-3,20 (m, 6H), 2,19 (d, J=13,9 Гц, 2H), 2,05 (s, 1H), 1,84-1,67 (m, 3H), 1,53 (s, 3H), 1,33 (d, J=17,9 Гц, 1H), 1,06-0,99 (m, 2H), 0,67 (d, J=4,4 Гц, 2h).
ЖХМС: m/z = 554 (M+H)+.
Пример 38. Синтез соединения 038
Стадия 1. Смесь соединения 1 (1,5 г, 10,2 ммоль), (Boc)2O (2,2 г, 10,2 ммоль) и триэтиламина (TEA) (2,06 г, 20,4 ммоль) в CH2Cl2 (50 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. В результате концентрирования и очистки с помощью колонки силикагеля с ЭА:ПЭ (1:5) получали соединение 2 (1,5 г, 60%) в виде желтого твердого вещества.
Стадия 2. Смесь соединения 2 (1,4 г, 5,7 ммоль), NaBH3CN (539 мг, 8,6 ммоль) и ацетата аммония (3,1 г, 40,0 ммоль) в MeOH (20 мл) перемешивали при 70°C в течение 2 ч. В результате концентрирования и очистки с помощью колонки силикагеля с ЭА:ПЭ (1:1) получали соединение 3 (1,2 г, 85%) в виде желтого твердого вещества.
Стадия 3. Готовили раствор соединения 3 (800 мг, 3,2 ммоль), этил-2-хлорпиримидин-5карбоксилата (603 мг, 3,2 ммоль) и DIPEA (826 мг, 6,4 ммоль) в 1,4-диоксане (25 мл). Смесь нагревали до 95°C и перемешивали в течение ночи. В результате концентрирования и очистки с помощью колонки силикагеля с ЭА:ПЭ (1:10) получали соединение 4 (1,0 г, 79%) в виде светло-желтого твердого вещества.
Стадия 4. Готовили раствор соединения 4 (1,0 г, 2,5 ммоль) и 2н. NaOH (10 мл, 20 ммоль) в ТГФ (10 мл) и EtOH (10 мл). Смесь нагревали до 60°C и перемешивали в течение 6 ч. После концентрирования и доведения pH водной фазы до 5 - 6 проводили экстракцию ЭА. Органические слои промывали водой и соляным раствором, затем высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением целевого соединения 5 (600 мг, 65%) в виде белого твердого вещества.
Стадия 5. Готовили смесь соединения 5 (100 мг, 0,27 ммоль), трет-бутил-2-аминодифенил-4илкарбамата (77 мг, 0,27 ммоль), EDCI (53,0 мг, 0,41 ммоль), НОАТ (55,0 мг, 0,41 ммоль) и DIEA (70 мг, 0,54 ммоль) в ДМФ (10 мл). Смесь нагревали до 65°C и перемешивали в течение ночи. Затем смесь растворяли в воде и экстрагировали ЭА. Органические слои промывали водой и соляным раствором, затем высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Затем в результате очистки с помощью колонки силикагеля с ЭА:ПЭ (1:1) получали соединение 6 (130 мг, 76%) в виде твердого вещества пурпурного цвета.
Стадия 6. К перемешанному раствору соединения 6 (130 мг, 0,2 ммоль) в CH2Cl2 (10 мл) добавляли НЩ/1,4-диоксан (2 мл, 8,0 ммоль) и полученную в результате реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. В результате концентрирования и промывания ПЭ получали целевое соединение 038 (55 мг, 62%) в виде белого твердого вещества.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 9,58 (s, 1Н), 8,92 (s, 2Н), 8,10 (d, J=8,8 Гц, 1Н), 7,6-7,47 (m, 3Н), 7,457,29 (m, 3Н), 7,24 (t, J=7,3 Гц, 1Н), 6,98-6,81 (m, 3Н), 6,54-6,40 (m, 2Н), 5,85 (s, 1н), 5,29 (s, 1Н), 3,13-3,04 (m, 1Н), 1,94 (d, J=5,1 Гц, 2Н), 1,18 (t, J=7,2 Гц, 2Н), 0,85 (s, 1Н).
ЖХМС: m/z = 437 (M+H)+.
- 47 035120
Пример 39. Синтез соединения 039
Стадия 1. Смесь соединения 1 (200 мг, 0,62 ммоль), EDCI (192 мг, 1,24 ммоль), НОАТ (170 мг, 1,24 ммоль), DIPEA (400 мг, 2,5 ммоль) и амина (177 мг, 0,62 ммоль) в 5 мл ДМФ перемешивали при 60°C в течение ночи. После экстракции ЭА было получено целевое соединение 2 (220 мг, 59%) в виде неочищенного масла.
Стадия 2. К смеси соединения 2 (220 г, 0,4 ммоль) в 5 мл CH2Cl2 добавляли 1 мл ТФУ. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. После экстракции ЭА (10 мл) и водой (2x10 мл) целевое соединение 039 (120 мг, 67%) очищали препаративной ВЭЖХ.
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 9,65 (s, 1H), 8,89 (s, 2H), 8,58 (s, 1H), 8,32 (s, 1H), 8,07 (d, J=7,3 Гц, 1H), 7,62-7,49 (m, 3H), 7,39 (dd, J=17,1, 9,2 Гц, 3H), 7,26 (t, J=7,4 Гц, 1H), 6,92 (s, 1H), 4,13 (s, 1H), 3,33 (d, J=12,8 Гц, 2H), 3,05 (d, J=9,9 Гц, 2H), 2,05 (d, J=11,4 Гц, 2H), 1,77-1,63 (m, 2H).
ЖХМС: m/z = 389 (M+H)+.
Пример 40. Синтез соединения 040
2 3
Стадия 1. Смесь соединения 1 (2,0 г, 17,5 ммоль), этил-2-хлорпиримидин-5-карбоксилата (3,2 г,
17,5 ммоль) и DIPEA (4,5 мг, 35,0 ммоль) в 5 мл CH2Cl2 перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. После экстракции ЭА (2x50 мл) объединенный органический слой высушивали с получением целевого соединения 2 (2,0 г, 43%) в виде белого твердого вещества.
Стадия 2. Раствор соединения 2 (400 мг, 1,5 ммоль) в 6 М HCl перемешивали при 100°C в течение ночи, и целевое соединение 3 высушивали с помощью сублимационной сушилки (300 мг, 85%).
Стадия 3. Смесь соединения 3 (150 мг, 0,63 ммоль), EDCI (197 мг, 1,26 ммоль), НОАТ (171 мг,
1,26 ммоль), DIPEA (325 мг, 2,5 ммоль) и амина (179 мг, 0,63 ммоль) в 5 мл ДМФ перемешивали при 60°C в течение ночи. После экстракции ЭА целевое соединение (200 мг, 63%) очищали на колонке с CH2Cl2:CH3OH (10:1).
Стадия 4. К смеси соединения 4 (100 г, 0,2 ммоль) в 5 мл CH2Cl2 добавляли ТФУ (1 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. После экстракции ЭА (10 мл) и водой (2x10 мл) целевое соединение 040 (20 мг, 25%) очищали препаративной ВЭЖХ.
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 9,52 (s, 1H), 8,84 (s, 2H), 7,78 (d, J=7,5 Гц, 1H), 7,59 - 7,46 (m, 3H), 7,39 (t, J=7,5 Гц, 2H), 7,32 (d, J=7,5 Гц, 1H), 7,24 (t, J=7,0 Гц, 1H), 6,85 (d, J=8,3 Гц, 1H), 5,14 (s, 2H), 3,77 (s, 1H), 2,75 (d, J=11,5 Гц, 2H), 2,16 (s, 3H), 1,95 (t, J=10,9 Гц, 2H), 1,83 (d, J=10,4 Гц, 2H), 1,55 (d, J=9,5 Гц, 2H).
ЖХМС: m/z = 403 (M+H)+.
Пример 41. Синтез соединения 041
- 48 035120
Стадии 1-5. См. стадии 1-5 Примера 7 для получения соединения 6.
Стадия 6. Смесь соединения 6 (200 мг, 0,62 ммоль), EDCI (192 мг, 1,24 ммоль), НОАТ (170 мг,
1,24 ммоль), DIPEA (400 мг, 2,5 ммоль) и амина (177 мг, 0,62 ммоль) в 5 мл ДМФ перемешивали при
60°C в течение ночи. После экстракции ЭА было получено целевое соединение 7 (187 мг, 50%) в виде неочищенного масла.
Стадия 7. К смеси соединения 7 (186 мг, 0,31 ммоль) в 5 мл CH2Cl2 добавляли 1 мл ТФУ. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. После экстракции ЭА (10 мл) и водой (2x10 мл) целевое соединение 041 (90 мг, 70%) очищали препаративной ВЭЖХ.
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 9,57 (s, 1H), 8,88 (s, 2H), 7,63 (s, 1H), 7,54 (d, J=7,4 Гц, 2H), 7,49 (s, 1H), 7,39 (t, J=7,7 Гц, 2H), 7,35-7,29 (m, 1H), 7,24 (t, J=7,3 Гц, 1H), 6,85 (d, J=8,4 Гц, 1H), 5,16 (s, 2H), 3,04 (d, J=13,0 Гц, 2H), 2,96 (t, J=10,8 Гц, 2H), 2,43 (s, 2H), 1,68 (t, J=10,7 Гц, 2H), 1,44 (s, 3H).
ЖХМС: m/z = 402 (M+H)+.
Пример 42. Синтез соединения 042
Стадия 1. Смесь соединения 1 (2,0 г, 13,6 ммоль), йодметана (5,8 г, 40,8 ммоль) и K2CO3 (5,5 г, 40,8 ммоль) в ДМФ (30 мл) перемешивали при 80°C в течение ночи. К смеси добавляли ЭА (100 мл) и насыщенный водный раствор NaCl (100 мл) и полученную в результате реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин. Органический слой отделяли, промывали насыщенным водным раствором NaCl (2x50 мл), высушивали и концентрировали, очищали с помощью колонки силикагеля с получением соединения 2 (1,5 г, 68%) в виде желтого твердого вещества.
Стадия 2. Смесь соединения 2 (1,5 г, 9,3 ммоль), NaBH3CN (1,8 г, 27,9 ммоль) и AcONH4 (3,6 г,
46,5 ммоль) в MeOH (30 мл) перемешивали при 70°C в течение 5 ч. К смеси добавляли ЭА (100 мл) и насыщенный водный раствор NaCl (100 мл) и полученную в результате реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин. Органический слой отделяли, промывали насыщенным водным раствором NaCl (2x50 мл), высушивали и концентрировали с получением соединения 3 (1,4 г, 80%) в виде белого твердого вещества.
Стадия 3. Смесь соединения 3 (1,6 г, 10 ммоль), этил-2-хлорпиримидин-5-карбоксилата (1,7 г, 9 ммоль) и DIPEA (3,9 г, 30 ммоль) в ДХМ (50 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь очищали на колонке силикагеля с получением соединения 4 (800 мг, 29%) в виде желтого твердого вещества.
Стадия 4. К раствору соединения 4 (800 мг, 2,6 ммоль) в EtOH (20 мл) и ТГФ (20 мл) добавляли водный раствор NaOH (2 М, 20 мл). Смесь перемешивали при 60°C в течение 2 ч. Смесь концентрировали с получением остатка, и к смеси добавляли воду (100 мл) и водный раствор лимонной кислоты до доведения pH до менее 7 при 0°C с последующим фильтрованием с получением соединения 5 (600 мг, 80%) в виде белого твердого вещества.
Стадия 5. Смесь соединения 5 (150 мг, 0,53 ммоль), соединения Boc-амина (152 мг, 0,53 ммоль), НОАТ (103 мг, 0,76 ммоль), EDCI (145 мг, 0,76 ммоль) и NEt3 (154 мг, 1,52 ммоль) в ДМФ (5 мл) перемешивали при 60°C в течение ночи. Смесь экстрагировали ЭА (910 мл) и водой (2x10 мл). Органический слой отделяли, промывали насыщенным водным раствором NaCl (2x20 мл), высушивали, концентрировали и очищали препаративной ТСХ с получением соединения 6 (45 мг, 15%) в виде желтого твердого вещества.
Стадия 6. К раствору соединения 6 (45 мг, 0,08 ммоль) в 1,4-диоксане (5 мл) добавляли HCl в 1,4-диоксане (0,5 мл) при комнатной температуре и полученную в результате реакционную смесь перемешивали в течение ночи. Смесь фильтровали с получением соединения 042 (15 мг, 41%).
1H ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 10,43 (s, 1H), 9,00 (d, J=29,0 Гц, 2H), 8,30 (d, J=8,6 Гц, 1H), 7,80 (d, J=1,9 Гц, 1H), 7,67 (d, J=7,4 Гц, 2H), 7,61 (dd, J=8,3, 1,9 Гц, 1H), 7,49 (t, J=7,7 Гц, 2H), 7,45-7,37 (m, 2H),
7,12 (t, J=7,8 Гц, 1H), 7,04 (d, J=7,3 Гц, 1H), 6,72 (d, J=8,2 Гц, 1H), 6,63 (t, J=7,3 Гц, 1H), 5,32 (d, J=6,8 Гц,
- 49 035120
1H), 3,39 (s, 2H), 2,90 (s, 3H), 2,07 (dd, J=22,1, 4,2 Гц, 2H).
ЖХМС: m/z = 451 (M+H)+.
Пример 43. Анализы фермента HDAC.
Соединения для исследования разводили в ДМСО до 50-кратной конечной концентрации и проводили серию 10,3-кратных разведений. Соединения разводили в аналитическом буфере (50 мМ 4-(2-гидроксиэтил)-1-пиперазин этансульфоновоя кислота (ГЭПЭС), pH 7,4, 100 мМ KCl, 0,001% Твин-20, 0,05% БСА, 20 мкМ трис-(2-карбоксиэтил)фосфин) до их 6-кратной конечной концентрации. Ферменты HDAC (приобретенные у компании BPS Biosciences) разводили до 1,5-кратной конечной концентрации в аналитическом буфере и предварительно инкубировали с соединениями в течение 24 ч перед добавлением субстрата.
Субстрат, представляющий собой трипептидный субстрат 3 (синтезированный в местной лаборатории) для каждого фермента, соответствовал Km, определенной с помощью кривой титрования субстрата. Используемые концентрации фермента и субстрата приведены в табл. 2. Субстраты разводили в аналитическом буфере до 6-кратной конечной концентрации с помощью 0,3 мкМ трипсина со степенью чистоты для секвенирования. Смесь субстрата и трипсина добавляли к смеси фермента и соединения, планшет встряхивали в течение 60 секунд и помещали в считывающее устройство для микротитрационных планшетов Spectramax M5. За проявлением флуоресценции следили в течение 30 мин и рассчитывали линейную скорость реакции. IC50 определяли с использованием программного обеспечения Graph Pad Prism на основании соответствия четырехпараметрической кривой. Значения IC50, полученные для соединений по данному изобретению, приведены в табл. 1. Примеры кривых приведены на фиг. 1 и 4.
Таблица 2
Концентрация фермента Концентрация субстрата
HDAC1 3,5 нг/мкл 3,8 мкМ
HDAC2 0,2 нг/мкл 2,3 мкМ
HDAC3 0,08 нг/мкл 3,9 мкМ
Пример 44. Фармакокинетика.
Самцов крыс линии Спрег-Доули (SD) не кормили в течение ночи. Соединения по изобретению растворяли в диметилацетамиде до 10-кратной конечной концентрации, затем добавляли реагент Solutol HS 15 (BASF) до конечной концентрации 10%. Наконец, добавляли 80% соляной раствор и перемешивали вихревым способом до получения прозрачного раствора. Для внутривенного (в/в) дозирования трем животным инъецировали 1 мг/кг соединения в дорзальную вену стопы. Для перорального (п/о) дозирования вводили 5 мг/кг соединения через пероральный зонд. Кровь брали из хвостовой вены в пробирки ^-ЭДТА через 5, 15, 30 мин, 1, 2, 4, 8 и 24 ч после дозирования. Кровь центрифугировали при 2000 xg в течение 5 мин при 4°C с получением плазмы крови. Плазму крови экстрагировали ацетонитрилом и анализировали концентрацию соединения с помощью жидкостной хроматографии с тандемной массспектрометрией (ЖХ/МС/МС). Концентрацию соединения в плазме крови рассчитывали на основании стандартной кривой в плазме крови крыс. Клиренс и площадь под кривой зависимости концентрации в плазме крови от времени после в/в введения рассчитывали с использованием программного обеспечения WinNonLin. Для расчета пероральной биодоступности использовали площадь под кривой, скорректированную по дозе, для в/в и перорального дозирования.
Сводные результаты представлены в табл. 3 и 4, а также на фиг. 2.
Для соединения 005 определяли фармакокинетику у Яванского макака. Соединение 005 растворяли в 0,5% гидроксипропилметилцеллюлозе и давали Яванским макакам в условиях кормления в дозе 20 мг/кг массы тела. Образцы плазмы крови брали в зависимости от времени и подвергали анализу, как описано выше. Концентрации в плазме в каждый момент времени показаны на фиг. 5.
- 50 035120
Таблица 3
Соединение Эффективность анализа на основании клеток Кассетное дозирование крыс для исследования ФК (5 мг/кг п/о)
Клиренс в/в Стах п/о Т1/2 п/о AUC п/о F%
Соединение 003 3 мкМ 0,12 2316 17 59876 118
Соединение 001 3 мкМ 0,53 988 3,8 5959 63
Соединение 002 3 мкМ 1,2 1011 5,9 6091 142
Соединение 005 1 мкМ 0,38 569 более 24 9162 79
Соединение 004 НО 0,57 1497 7,6 15941 209
Соединение 006 но 0,15 1517 14,5 31640 76
Соединения (табл. 3) исследовали посредством анализа индукции фетального глобина, и самая низкая концентрация для достижения 2-кратного увеличения экспрессии гена фетального глобина по сравнению с исходным уровнем представлена в столбце Эффективность анализа на основании клеток. Фармакокинетические свойства оценивали в эксперименте с использованием кассетного дозирования у крыс. Клиренс после в/в введения (Клиренс в/в) представлен в л/ч/кг. Максимальная концентрация в плазме крови после перорального введения (Cmax п/о) представлена в нг/мл. Период полувыведения в плазме крови после перорального введения (Т1/2 п/о) представлен в часах. Площадь под кривой после перорального введения (AUC п/о) представлена в часаххнг/мл. Фракция, абсорбируемая при введении пероральным путем (F%), представляет собой процентную долю площади под кривой после перорального введения от площади под кривой после в/в введения, скорректированной по дозе.
- 51 035120
Таблица 4
Соедин ение Токсичность in vitro АРМВ in vitro (абсорбция, распределение, метаболизм и выведение)
hE RG Су Р Тес т Эй мса Микрояд ерный анализ Раствори мость Стабиль ность в плазме крови Связыв ание белков Микросом альная стабильно сть
бол бол
Соедин ее ее Отр
ение 30 10 Отр. 54 мкМ НО НО 4,7 мин
003 мк мк
М М
бол
Соедин ение 001 ее 30 мк 2С 9 НО НО 16,9 мкМ НО но И мин
М
Соедин ение 002 бол ее 30 мк бол ее 10 мк НО НО 42,7 мкМ но но НО
М М
Соедин ение 005 13, 8 мк М бол ее 10 мк М Отр Отр. 13,8 мкМ но но НО
бол
Соедин 12 ее
ение мк 10 НО НО 12 мкМ но но но
004 М мк
М
бол бол
Соедин ее ее
ение 30 10 НО но НО но но но
006 мк мк
М М
Пример 45. Индукция фетального глобина.
Клетки CD34+, выделенные из костного мозга человека, культивировали in vitro, используя способ, описанный Bradner JE (Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2010 Jul 13;107(28):12617-22), состоящий из 7-дневной фазы размножения в питательной среде, поддерживающей дифференцировку клеток в направлении эритроидной линии, с последующей фазой дифференцировки в течение 3 дней, на которой продолжается развитие эритроидных клеток. В конце периода дифференцировки эти клетки, главным образом, представляют собой поздние эритробласты. Уровни мРНК определяли с помощью количественной полимеразной цепной реакции (ПЦР) в реальном времени, используя наборы праймеров/зондов, сконструиро- 52 035120 ванные для основного компонента зрелого β-глобина (β), минорного компонента зрелого β-глобина (δ), фетального β-подобного глобина (HbG, γ) и эмбрионального β-подобного глобина (ε). Уровни белка определяли методом проточной цитометрии, используя флуоресцентные антитела к фетальному гемоглобину (HbF) или к зрелому гемоглобину (HbA).
В эксперименте, показанном на фиг. 3, клетки претерпевали дифференцировку в присутствии растворителя (ДМСО), 0,3, 1 и 3 мкМ соединения A и 0,3, 1 и 3 мкМ соединения 003. В эксперименте, показанном на фиг. 6, клетки претерпевали дифференцировку в присутствии растворителя (ДМСО), 0,3, 1 и 3 мкМ соединения A и 0,3, 1 и 3 мкМ соединения 005. Уровни мРНК глобина определяли на 3-й день дифференцировки.
Соединение A представляет собой ингибитор HDAC1/2 (IC50 составляет приблизительно 4, 15 и 114 нМ для HDAC1, HDAC2 и HDAC3, соответственно), имеющий структуру, показанную ниже. Характеризация и синтез соединения A описаны в публикации патента США № 2014-0128391.
HN
Соединение А
Пример 46. Дополнительные исследования.
Были проведены дополнительные эксперименты, в которых было показано, что соединение 003 не ингибирует hERG, CYP и не обладает генотоксичностью.
Для количественных определений hERG линию клеток яичника китайского хомячка (CHO), стабильно трансфицированную кДНК hERG и экспрессирующую ионные каналы hERG, высевали в планшет QPatch (Sophion) при плотности клеток 3-8х106 на мл. Клетки подвергали режиму фиксации потенциала при исходном потенциале -80 мВ. Ток hERG активировали путем деполяризации при +20 мВ в течение 5 с, после чего ток возвращали к значению -50 мВ в течение 5 с для устранения инактивации и регистрировали дезактивирующий остаточный ток. Для определения амплитуды тока hERG использовали максимальное количество силы остаточного тока. Для построения эмпирических кривых и определения IC50 было выбрано шесть доз (30, 10, 3, 1, 0,3 и 0,1 мкМ) соединения 003. Анализ данных проводили с использованием аналитического программного обеспечения, предоставляемого компанией Sophion, и программного обеспечения Graphpad Prism. Соединение 003 не ингибировало активность канала hERG при самой высокой концентрации 30 мкМ.
Для определения ингибирования цитохрома P450 (Сур) живые микросомы человека от компании BD Gentest инкубировали с соединением 003 (10, 3,33, 1,11, 0,37, 0,12, 0,04, 0,01 мкМ) и концентрациями субстратов (CYP1A2: фенацетин 30 мкМ; CYP2C9: диклофенак 10 мкМ; CYP2C9: S-мефенитоин 35 мкМ; CYP3A4: мидазолам 5 мкМ и тестостерон 80 мкМ; CYP2D6: буфуралол 10 мкМ) в течение следующих периодов инкубации: CYP1A2, 2C9, 2D6: 10 мин, 37°C; CYP2C19: 45 мин, 37°C; CYP3A4: 5 мин, 37°C. Преобразование субстрата определяли количественно с помощью жидкостной хроматографии с тандемной масс-спектрометрией (ЖХ/МС/МС). Ингибирование вычисляли путем подбора кривой в программе Graph Pad Prism. Соединение 003 не ингибировало активность ни одного из Сур в концентрации вплоть до 10 мкМ.
Для определения генотоксичности бактериальные тестерные штаммы TA98, TA100, TA1535 и TA97a, как описано Ames et al. (1975), и тестерный штамм F.coli WP2 uvrA, как описано Green and Muriel (1976), инкубировали с соединением 003 при концентрациях 250, 75, 25, 7,5, 2,5, 0,75, 0,25 и 0,075 мкг/лунка в 24-луночных планшетах с гомогенатом печени (S9), приобретенным коммерческим путем (MolTox; Boone, NC), полученным от самцов крыс линии Спрег-Доули, которым вводили интраперитонеально Aroclor 1254 (200 мг/мл в кукурузном масле) в дозе 500 мг/кг за 5 дней до эвтаназии, либо в отсутствие гомогената печени. Мутагенность оценивали путем подсчета числа колоний, образующихся на непермиссивной среде. Соединение 003 не приводило к увеличению числа ревертантных колоний ни одного из штаммов как в присутствии, так и в отсутствие активации S9.
Дополнительную оценку генотоксичности проводили с помощью количественного определения образования микроядер в лимфоцитах периферической крови человека (HPBL). HPBL получали от здоровых доноров и подвергали воздействию соединения 003 при концентрациях 3500, 2450, 1715, 1200, 840, 588, 412, 288, 202, 141, 98,8, 69,2, 48,4 и 33,9 мкг/мл в течение 4 ч в присутствии или в отсутствие активации S9. Клетки промывали ФСБ и инкубировали в полной питательной среде, содержащей 6 мкг/мл цитохалазина В, в течение 24 ч. Затем клетки подвергали лизису, фиксировали и готовили препараты на предметных стеклах для микроскопического исследования. Количество одноядерных, двухъядерных и микроядерных клеток считали слепым методом. Соединение 003 не приводило к увеличению количества
- 53 035120 микроядерных клеток ни при одной из концентраций.
Пример 47. Обработка эритроидных предшественников различными ингибиторами HDAC1/2 приводит к индукции мРНК Gata2 Клетки CD34+, выделенные из костного мозга человека, размножали в течение 7 дней, как описано Sankaran et al., Science, vol. 322(5909), p. 1839-42 (2008). Затем клетки подвергали дифференцировке в присутствии указанных концентраций соединения 005, соединения A (другого известного ингибитора HDAC1/2) или контрольного растворителя (ДМСО) в течение 3 дней в питательной среде, поддерживающей эритропоэз (Hu et al., Isolation and functional characterization of human erythroblasts at distinct stages: implications for understanding of normal and disordered erythropoiesis in vivo, Blood, vol. 121(16), p. 3246-53 (2005)). мРНК Gata2 определяли методом количественной ПЦР в реальном времени и выражали относительно уровня мРНК бета-актина. Обработка соединением 005 или соединением A первичных эритроидных предшественников приводит в результате к эквивалентной, зависимой от дозы и от времени индукции%HbG (фиг. 6) и мРНК Gata2 (фиг. 7).
Включение путем ссылки.
Содержание всех ссылочных документов (включая литературные ссылки, опубликованные патенты, опубликованные заявки на патенты и одновременно находящиеся на рассмотрении заявки на патенты), цитируемые во всем тексте данной заявки, явным образом полностью включены в настоящий документ. Если не определено иное, все технические и научные термины, используемые в настоящем документе, соответствуют значениям, общеизвестным специалистам в данной области техники.
Эквиваленты.
Специалисты в данной области техники распознают или смогут определить с использованием не более чем стандартных экспериментов множество эквивалентов конкретных воплощений изобретения, описанных в настоящем документе. Подразумевается, что такие эквиваленты охвачены следующей формулой изобретения.

Claims (32)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Соединение формулы I
    I или его фармацевтически приемлемая соль, где X1 представляет собой CR7 или N; X2 представляет собой CH или N;
    Y выбран из группы, состоящей из:
    Z выбран из группы, состоящей из H, ^-^-алкила, ^-арила, C(O)NR4R5, C(O)OR6, C(O)C1-C6алкила, C(O)C0-C6-алкил-C6-арила, C(O)-C3-C6-циклоалкила, C(O)-C2-C6-гетероциклила и C(O)C0-C6алкилгетероарила, где арильные, гетероарильные, циклоалкильные и гетероциклильные группы необязательно замещены одним или двумя заместителями, выбранными из ^-^-алкила, галогена, C1-C6-галогеналкила, гидрокси или ^-^-алкокси;
    Ra и Rb представляют собой H или Ra и Rb вместе образуют конденсированный ^-арил;
    R1 представляет собой H;
    2
    R выбран из группы, состоящей из H, ^-^-алкила и ^-арила;
    R3 выбран из группы, состоящей из H, ^-^-алкила и ^-арила; или
    R2 и R3 вместе образуют C2-C6-гетероциклил;
    R4 выбран из группы, состоящей из H, ^-^-алкила, C1-C6-алкил-OH и C1-C6-NH2;
    R5 представляет собой CrQ-алкил; или
    R4 и R5 вместе образуют ^-^-гетероциклил, где гетероциклил необязательно замещен одним или двумя заместителями, выбранными из ^-^-алкила, галогена, C1-C6-галогеналкила, гидрокси или ^-Оз-алкокси;
    R6 выбран из группы, состоящей из ^-^-алкила и C0-C6-алкил-C6-арила, где арил необязательно замещен одним или двумя заместителями, выбранными из ^-^-алкила, галогена или гидрокси; и
    R7 выбран из группы, состоящей из H, ^-^-алкила и ^-^-циклоалкила;
    где термин гетероарил относится к моно- или полициклической конденсированной или неконден- 54 035120 сированной группировке или кольцевой системе, имеющей по меньшей мере одно ароматическое кольцо, где гетероарильная группа содержит от пяти до шестнадцати кольцевых атомов, из которых один кольцевой атом выбран из атомов кислорода, серы и азота; ноль, один, два или три кольцевых атома представляют собой дополнительные гетероатомы, независимо выбранные из атомов кислорода, серы и азота; и остальные кольцевые атомы представляют собой атомы углерода; и термин гетероциклил относится к неароматическому 3-, 4-, 5-, 6- или 7-членному кольцу или к биили трициклической группе конденсированной или неконденсированной системы, где каждое кольцо содержит от одного до трех гетероатомов, независимо выбранных из атомов кислорода, серы и азота, и остальные атомы представляют собой атомы углерода.
  2. 2. Соединение по п.1, имеющее структуру формулы II
    γ
    II или его фармацевтически приемлемая соль.
  3. 3. Соединение по п.1 или 2, где каждый из X1 и X2 представляет собой N или каждый из X1 и X2 представляет собой CH.
  4. 4. Соединение по любому из пп.1-3, где Y представляет собой:
  5. 5. Соединение по любому из пп.1-4, где
    Z выбран из группы, состоящей из C(O)NR4R5, C(O)OR6, C(O)-C3-C6-циклоалкила, C(O)-C2-C6гетероциклила и C(O)Co-C6-алкилгетероарила, где гетероарил, циклоалкил или гетероциклил необязательно замещены одним или двумя заместителями, выбранными из ^-^-алкила, галогена или гидрокси;
    R6 представляет собой ^-арил.
  6. 6. Соединение по любому из пп.1-4, где Z выбран из группы, состоящей из H, ^-^-алкила и ^-арила.
  7. 7. Соединение по любому из пп.1-6, где R2 представляет собой H.
  8. 8. Соединение по любому из пп.1-7, где R3 представляет собой H, метил, этил, изопропил или фенил.
  9. 9. Соединение по п.1, имеющее структуру формулы III
    III или его фармацевтически приемлемая соль.
  10. 10. Соединение по п.9, где каждый из X1 и X2 представляет собой N или каждый из X1 и X2 представляет собой CH.
  11. 11. Соединение по п.9 или 10, где R2 представляет собой H.
  12. 12. Соединение по любому из пп.9-11, где R3 представляет собой H, метил или изопропил.
  13. 13. Соединение по любому из пп.9-12, где R4 представляет собой H и R5 представляет собой ^-^-алкил.
  14. 14. Соединение по любому из пп.9-12, где R4 и R5 вместе образуют гетероциклил, выбранный из группы, состоящей из морфолинила, пиперидинила, пиперазинила и пирролидинила, где морфолинил, пиперидинил, пиперазинил и пирролидинил необязательно замещены одним или двумя заместителями, выбранными из ^-^-алкила, галогена или гидрокси.
  15. 15. Соединение по любому из пп.9-14, где
    X1 и X2 представляют собой N;
    - 55 035120
    R1 представляет собой H;
    R2 представляет собой H;
    R3 представляет собой H или С1-С4-алкил;
    R4 и R5 вместе образуют гетероциклил, выбранный из группы, состоящей из морфолинила, пиперидинила, пиперазинила и пирролидинила, где морфолинил, пиперидинил, пиперазинил и пирролидинил необязательно замещены одним или двумя заместителями, выбранными из ^-^-алкила, галогена или гидрокси.
  16. 16. Соединение по любому из пп.1-15, выбранное из:
    - 56 035120
    - 57 035120
    - 58 035120
    или их фармацевтически приемлемых солей.
  17. 17. Соединение по любому из пп.9-15, выбранное из:
    - 59 035120
    или их фармацевтически приемлемых солей.
  18. 18. Фармацевтическая композиция для лечения заболевания, опосредованного HDAC1 и/или HDAC2, содержащая соединение по любому из пп.1-17 и фармацевтически приемлемый носитель.
  19. 19. Способ ингибирования активности HDAC1 и/или HDAC2 у субъекта, включающий введение соединения по любому из пп.1-17 или его фармацевтически приемлемой соли.
  20. 20. Способ лечения заболевания, опосредованного HDAC1 и/или HDAC2, у субъекта, включающий введение субъекту соединения по любому из пп.1-17 или его фармацевтически приемлемой соли.
  21. 21. Способ по п.20, где заболевание представляет собой миелодиспластический синдром.
  22. 22. Способ по п.20, где заболевание представляет собой гемоглобинопатию.
  23. 23. Способ по п.22, где гемоглобинопатия представляет собой серповидноклеточную анемию или бета-талассемию.
  24. 24. Способ по п.20, где заболевание представляет собой рак легкого, рак толстой кишки, рак молочной железы, нейробластому, лейкоз или лимфому.
  25. 25. Способ по п.20, где заболевание представляет собой острый миелогенный лейкоз или острый мегакариоцитарный лейкоз.
  26. 26. Способ по п.20, где заболевание представляет собой нейробластому.
  27. 27. Способ лечения серповидноклеточной анемии, бета-талассемии, миелодиспластического синдрома, острого миелогенного лейкоза, нейробластомы или острого мегакариоцитарного лейкоза у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества соединения по любому из пп.1-17 или его фармацевтически приемлемой соли.
  28. 28. Способ по любому из пп.19-27, где субъект представляет собой человека.
  29. 29. Способ лечения заболевания или расстройства, обусловленного дефицитом GATAсвязывающего белка 2 (Gata2), включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения по любому из пп.1-17 или его фармацевтически приемлемой соли.
  30. 30. Способ увеличения экспрессии GATA-связывающего белка 2 (Gata2) в клетке, включающий приведение клетки в контакт с соединением по любому из пп.1-17 или его фармацевтически приемлемой солью.
  31. 31. Способ по п.30, где гиперэкспрессия Gata2 индуцирует HbG (гамма-глобин).
  32. 32. Способ индукции экспрессии HbG (гамма-глобина) у субъекта, включающий введение субъекту соединения по любому из пп.1-17 или его фармацевтически приемлемой соли.
EA201791259A 2014-12-12 2015-12-11 Производные пиперидина в качестве ингибиторов hdac1/2 EA035120B1 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201462091221P 2014-12-12 2014-12-12
US201562238931P 2015-10-08 2015-10-08
PCT/US2015/065289 WO2016094824A1 (en) 2014-12-12 2015-12-11 Piperidine derivatives as hdac1/2 inhibitors

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201791259A1 EA201791259A1 (ru) 2017-11-30
EA035120B1 true EA035120B1 (ru) 2020-04-29

Family

ID=56108272

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201791259A EA035120B1 (ru) 2014-12-12 2015-12-11 Производные пиперидина в качестве ингибиторов hdac1/2

Country Status (17)

Country Link
US (6) US9790180B2 (ru)
EP (2) EP3292113B1 (ru)
JP (1) JP6693957B2 (ru)
KR (1) KR20170095964A (ru)
CN (1) CN107835810A (ru)
AU (2) AU2015360270B9 (ru)
BR (1) BR112017012504A2 (ru)
CA (1) CA2970500C (ru)
CL (1) CL2017001511A1 (ru)
EA (1) EA035120B1 (ru)
ES (1) ES2816641T3 (ru)
HK (1) HK1251566A1 (ru)
IL (1) IL252828A0 (ru)
MX (2) MX2017007623A (ru)
PH (1) PH12017501095A1 (ru)
SG (1) SG11201704759QA (ru)
WO (1) WO2016094824A1 (ru)

Families Citing this family (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2013158984A1 (en) 2012-04-19 2013-10-24 Acetylon Pharmaceuticals, Inc. Biomarkers to identify patients that will respond to treatment and treating such patients
US9145412B2 (en) 2012-11-02 2015-09-29 Acetylon Pharmaceuticals, Inc. Selective HDAC1 and HDAC2 inhibitors
JP6626437B2 (ja) 2013-10-08 2019-12-25 アセチロン ファーマシューティカルズ インコーポレイテッドＡｃｅｔｙｌｏｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ． ヒストンデアセチラーゼ阻害剤とＨｅｒ２阻害剤またはＰＩ３Ｋ阻害剤のいずれかの組み合わせ
CR20160308A (es) 2013-12-03 2016-11-08 Acetylon Pharmaceuticals Inc Combinaciones de inhibidores de histona deacetilasa y farmacos inmunomoduladores
PL3231793T3 (pl) 2014-12-12 2020-07-27 Japan Tobacco Inc. Związki dihydropirymidyn-2-onu i ich zastosowania medyczne
SG11201704759QA (en) 2014-12-12 2017-07-28 Regenacy Pharmaceuticals Llc Piperidine derivatives as hdac1/2 inhibitors
WO2016200919A1 (en) 2015-06-08 2016-12-15 Acetylon Pharmaceuticals, Inc. Crystalline forms of a histone deacetylase inhibitor
CN107922352B (zh) 2015-06-08 2021-08-06 埃斯泰隆制药公司 制备蛋白质脱乙酰酶抑制剂的方法
US11324744B2 (en) 2016-08-08 2022-05-10 Acetylon Pharmaceuticals Inc. Methods of use and pharmaceutical combinations of histone deacetylase inhibitors and CD20 inhibitory antibodies
AR114270A1 (es) 2018-02-28 2020-08-12 Japan Tobacco Inc Compuestos de 4-metildihidropirimidinona y su uso farmacéutico
CN110372572A (zh) * 2019-08-23 2019-10-25 苏州汉德创宏生化科技有限公司 一种4,4-二氟哌啶-1-甲酰氯的合成方法
WO2024030659A1 (en) 2022-08-05 2024-02-08 Tango Therapeutics, Inc. An hdac inhibitor for treating cancer with a modified stk11 activity or expression

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2008046085A2 (en) * 2006-10-12 2008-04-17 Supergen, Inc. Quinoline derivatives for modulating dna methylation
WO2009049132A1 (en) * 2007-10-12 2009-04-16 Supergen, Inc. Quinoline derivatives for modulating dna methylation
US20090285772A1 (en) * 2007-10-12 2009-11-19 Supergen, Inc. Quinoline derivatives for modulating dna methylation

Family Cites Families (31)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7205304B2 (en) * 2002-03-13 2007-04-17 Janssen Pharmaceutica N.V. Sulfonyl-Derivatives as novel inhibitors of histone deacetylase
PL213783B1 (pl) * 2002-03-13 2013-05-31 Janssen Pharmaceutica Nv Podstawiona pochodna piperydyny lub piperazyny, jej zastosowanie i sposób wytwarzania oraz kompozycja farmaceutyczna
WO2005030705A1 (en) 2003-09-24 2005-04-07 Methylgene, Inc. Inhibitors of histone deacetylase
AR057579A1 (es) * 2005-11-23 2007-12-05 Merck & Co Inc Compuestos espirociclicos como inhibidores de histona de acetilasa (hdac)
KR101495611B1 (ko) 2006-04-07 2015-02-25 메틸진 인코포레이티드 히스톤 데아세틸라아제의 억제제
EP2013196B1 (en) 2006-04-26 2015-09-16 Merck Sharp & Dohme Corp. Disubstituted aniline compounds
EP2023924B1 (en) * 2006-05-18 2016-08-03 Merck Sharp & Dohme Corp. Aryl-fused spirocyclic compounds
JP2010120852A (ja) 2007-03-09 2010-06-03 Daiichi Sankyo Co Ltd 新規なジアミド誘導体
KR20100072024A (ko) 2007-09-14 2010-06-29 메틸진 인크. 히스톤 탈아세틸화 효소 ｈｄａｃ1, ｈｄａｃ2 및/또는 ｈｄａｃ3의 선택적 억제제 및 미세관 안정화제로의 암 병용 치료법
TWI511732B (zh) 2010-01-22 2015-12-11 Acetylon Pharmaceuticals Inc 作為蛋白質去乙醯酶抑制劑之反式醯胺化合物及其使用方法
WO2012018499A2 (en) 2010-08-05 2012-02-09 Acetylon Pharmaceuticals Specific regulation of cytokine levels by hdac6 inhibitors
CA2818125A1 (en) 2010-11-16 2012-05-24 Acetylon Pharmaceuticals, Inc. Pyrimidine hydroxy amide compounds as protein deacetylase inhibitors and methods of use thereof
AU2012212323A1 (en) 2011-02-01 2013-09-12 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois HDAC inhibitors and therapeutic methods using the same
CN102775356B (zh) * 2011-05-13 2015-07-22 江苏恒谊药业有限公司 4-氨基喹唑啉衍生物及其应用
KR20130077390A (ko) * 2011-12-29 2013-07-09 제이더블유중외제약 주식회사 단백질 키나아제 저해활성을 가지는 6-아미노-3-카복스아미도인다졸 유도체
WO2013158984A1 (en) 2012-04-19 2013-10-24 Acetylon Pharmaceuticals, Inc. Biomarkers to identify patients that will respond to treatment and treating such patients
US9145412B2 (en) 2012-11-02 2015-09-29 Acetylon Pharmaceuticals, Inc. Selective HDAC1 and HDAC2 inhibitors
US9139583B2 (en) 2013-02-01 2015-09-22 Acetylon Pharmaceuticals, Inc. Selective HDAC3 inhibitors
JP2016511237A (ja) 2013-02-01 2016-04-14 アセチロン ファーマシューティカルズ インコーポレイテッドＡｃｅｔｙｌｏｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ． 選択的ｈｄａｃ３阻害剤
EP3004141A4 (en) 2013-06-03 2017-05-31 Acetylon Pharmaceuticals, Inc. Histone deacetylase ( hdac) biomarkers in multiple myeloma
JP6626437B2 (ja) 2013-10-08 2019-12-25 アセチロン ファーマシューティカルズ インコーポレイテッドＡｃｅｔｙｌｏｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ． ヒストンデアセチラーゼ阻害剤とＨｅｒ２阻害剤またはＰＩ３Ｋ阻害剤のいずれかの組み合わせ
ES2862126T3 (es) 2013-10-10 2021-10-07 Acetylon Pharmaceuticals Inc Compuestos de pirimidín-hidroxiamida como inhibidores de histona desacetilasa
JP2016536354A (ja) 2013-10-10 2016-11-24 アセチロン ファーマシューティカルズ インコーポレイテッドＡｃｅｔｙｌｏｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ． 非ホジキンリンパ腫を治療するための、ｈｄａｃ阻害剤単独またはｂｔｋ阻害剤との組み合わせ
WO2015054355A1 (en) 2013-10-10 2015-04-16 Acetylon Pharmaceuticals, Inc. Hdac inhibitors, alone or in combination with pi3k inhibitors, for treating non-hodgkin's lymphoma
US20150105358A1 (en) 2013-10-11 2015-04-16 Acetylon Pharmaceuticals, Inc. Combinations of histone deacetylase inhibitors and immunomodulatory drugs
CR20160308A (es) 2013-12-03 2016-11-08 Acetylon Pharmaceuticals Inc Combinaciones de inhibidores de histona deacetilasa y farmacos inmunomoduladores
WO2015095632A1 (en) 2013-12-20 2015-06-25 Acetylon Pharmaceuticals, Inc. Histone deacetylase 6 (hdac6) biomarkers in multiple myeloma
US9464073B2 (en) 2014-02-26 2016-10-11 Acetylon Pharmaceuticals, Inc. Pyrimidine hydroxy amide compounds as HDAC6 selective inhibitors
CN107205988A (zh) 2014-07-07 2017-09-26 埃斯泰隆制药公司 利用组蛋白脱乙酰酶抑制剂治疗白血病
EP3204006A4 (en) * 2014-10-08 2018-04-04 Regenacy Pharmaceuticals, LLC Induction of gata2 by hdac1 and hdac2 inhibitors
SG11201704759QA (en) 2014-12-12 2017-07-28 Regenacy Pharmaceuticals Llc Piperidine derivatives as hdac1/2 inhibitors

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2008046085A2 (en) * 2006-10-12 2008-04-17 Supergen, Inc. Quinoline derivatives for modulating dna methylation
WO2009049132A1 (en) * 2007-10-12 2009-04-16 Supergen, Inc. Quinoline derivatives for modulating dna methylation
US20090285772A1 (en) * 2007-10-12 2009-11-19 Supergen, Inc. Quinoline derivatives for modulating dna methylation

Also Published As

Publication number Publication date
EP3292113A4 (en) 2018-07-04
AU2015360270B9 (en) 2019-12-05
US11702389B2 (en) 2023-07-18
AU2015360270B2 (en) 2019-11-28
SG11201704759QA (en) 2017-07-28
US20230348389A1 (en) 2023-11-02
US20190359569A1 (en) 2019-11-28
US20210179559A1 (en) 2021-06-17
PH12017501095A1 (en) 2017-10-18
CA2970500C (en) 2023-08-29
EP3292113A1 (en) 2018-03-14
JP2018502841A (ja) 2018-02-01
CA2970500A1 (en) 2016-06-16
HK1251566A1 (zh) 2019-02-01
MX2017007623A (es) 2018-09-26
JP6693957B2 (ja) 2020-05-13
CL2017001511A1 (es) 2018-02-16
WO2016094824A1 (en) 2016-06-16
BR112017012504A2 (pt) 2018-01-09
AU2015360270A1 (en) 2017-07-13
US20160168093A1 (en) 2016-06-16
EA201791259A1 (ru) 2017-11-30
EP3292113B1 (en) 2020-07-08
US10239837B2 (en) 2019-03-26
US20180022702A1 (en) 2018-01-25
US9790180B2 (en) 2017-10-17
ES2816641T3 (es) 2021-04-05
IL252828A0 (en) 2017-08-31
US10358421B2 (en) 2019-07-23
US20170369441A1 (en) 2017-12-28
EP3725787A1 (en) 2020-10-21
US10968180B2 (en) 2021-04-06
AU2020200846A1 (en) 2020-02-27
EP3725787B1 (en) 2023-11-29
MX2020002487A (es) 2020-07-13
CN107835810A (zh) 2018-03-23
KR20170095964A (ko) 2017-08-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA035120B1 (ru) Производные пиперидина в качестве ингибиторов hdac1/2
US10125131B2 (en) Selective HDAC3 inhibitors
US9884850B2 (en) Pyrimidine hydroxy amide compounds as HDAC6 selective inhibitors
EP3055299B1 (en) Pyrimidine hydroxy amide compounds as histone deacetylase inhibitors
JP5608655B2 (ja) Ｐ２ｘ３受容体活性のモジュレーター
JP7320263B2 (ja) Ｅｚｈ２阻害剤及びその使用
US20120101099A1 (en) Histone deacetylase inhibitors
US20160194311A1 (en) Substituted nicotinamide derivatives as kinase inhibitors
BR112019013001A2 (pt) inibidores de histona desacetilase
BR112020007632A2 (pt) composto, composição farmacêutica, método para inibir um dentre ou tanto ehmt1 quanto ehmt2, método para prevenir ou tratar um distúrbio sanguíneo, método para prevenir ou tratar um câncer e uso do composto
AU2009248231A1 (en) Novel N-(2-amino-phenyl)-acrylamides
WO2021020362A1 (ja) 複素環化合物

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG TJ TM RU