EA034173B1 - Противогрибковая композиция, содержащая штамм lactobacillus paracasei - Google Patents

Противогрибковая композиция, содержащая штамм lactobacillus paracasei Download PDF

Info

Publication number
EA034173B1
EA034173B1 EA201491848A EA201491848A EA034173B1 EA 034173 B1 EA034173 B1 EA 034173B1 EA 201491848 A EA201491848 A EA 201491848A EA 201491848 A EA201491848 A EA 201491848A EA 034173 B1 EA034173 B1 EA 034173B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
strain
food
lactobacillus
milk
feed
Prior art date
Application number
EA201491848A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201491848A1 (ru
Inventor
Тина Хорнбек
Майке Лисберг
Силья Кей Диемер
Original Assignee
Кр. Хансен А/С
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from PCT/EP2012/056384 external-priority patent/WO2012136830A1/en
Application filed by Кр. Хансен А/С filed Critical Кр. Хансен А/С
Publication of EA201491848A1 publication Critical patent/EA201491848A1/ru
Publication of EA034173B1 publication Critical patent/EA034173B1/ru

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20Bacteria; Culture media therefor
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01NPRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • A01N63/20Bacteria; Substances produced thereby or obtained therefrom
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23CDAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
    • A23C13/00Cream; Cream preparations; Making thereof
    • A23C13/12Cream preparations
    • A23C13/16Cream preparations containing, or treated with, microorganisms, enzymes, or antibiotics; Sour cream
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23CDAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
    • A23C19/00Cheese; Cheese preparations; Making thereof
    • A23C19/02Making cheese curd
    • A23C19/032Making cheese curd characterised by the use of specific microorganisms, or enzymes of microbial origin
    • A23C19/0323Making cheese curd characterised by the use of specific microorganisms, or enzymes of microbial origin using only lactic acid bacteria, e.g. Pediococcus and Leuconostoc species; Bifidobacteria; Microbial starters in general
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23CDAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
    • A23C19/00Cheese; Cheese preparations; Making thereof
    • A23C19/06Treating cheese curd after whey separation; Products obtained thereby
    • A23C19/068Particular types of cheese
    • A23C19/076Soft unripened cheese, e.g. cottage or cream cheese
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23CDAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
    • A23C9/00Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
    • A23C9/12Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
    • A23C9/123Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt
    • A23C9/1234Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt characterised by using a Lactobacillus sp. other than Lactobacillus Bulgaricus, including Bificlobacterium sp.
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23KFODDER
    • A23K10/00Animal feeding-stuffs
    • A23K10/10Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes
    • A23K10/16Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions
    • A23K10/18Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions of live microorganisms
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L3/00Preservation of foods or foodstuffs, in general, e.g. pasteurising, sterilising, specially adapted for foods or foodstuffs
    • A23L3/34Preservation of foods or foodstuffs, in general, e.g. pasteurising, sterilising, specially adapted for foods or foodstuffs by treatment with chemicals
    • A23L3/3454Preservation of foods or foodstuffs, in general, e.g. pasteurising, sterilising, specially adapted for foods or foodstuffs by treatment with chemicals in the form of liquids or solids
    • A23L3/3463Organic compounds; Microorganisms; Enzymes
    • A23L3/3571Microorganisms; Enzymes
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/135Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74Bacteria
    • A61K35/741Probiotics
    • A61K35/744Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
    • A61K35/747Lactobacilli, e.g. L. acidophilus or L. brevis
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/10Antimycotics
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205Bacterial isolates
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/11Lactobacillus
    • A23V2400/165Paracasei
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/11Lactobacillus
    • A23V2400/175Rhamnosus
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12RINDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/225Lactobacillus
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10STECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215Microorganisms
    • Y10S435/822Microorganisms using bacteria or actinomycetales
    • Y10S435/853Lactobacillus

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Oncology (AREA)

Abstract

Изобретение относится к противогрибковой композиции, содержащей штамм Lactobacillus paracasei DSM25612, которая дополнительно может содержать по меньшей мере один штамм Lactobacillus rhamnosus. Также изобретение относится к пищевым, кормовым или фармацевтическим продуктам, содержащим заявленную противогрибковую композицию, а также к способу их получения. Изобретение также относится к применению заявленной противогрибковой композиции для подавления роста дрожжей и плесени.

Description

Область изобретения
Настоящее изобретение относится к противогрибковой композиции, содержащей штамм, к противогрибковой композиции, содержащей штамм и по меньшей мере один штамм Lactobacillus rhamnosus, к пищевым, кормовым и фармацевтическим продуктам, содержащим такую противогрибковую композицию, к способу изготовления таких пищевых, кормовых и фармацевтических продуктов, к способу снижения содержания дрожжей и плесени в таких пищевых, кормовых и фармацевтических продуктах и к применениям противогрибковой композиции.
Предпосылки изобретения
В течение многих лет молочнокислые бактерии использовали для увеличения срока хранения пищевых продуктов. В ходе ферментации молочнокислые бактерии образуют молочные кислоты и другие органические кислоты, таким образом, снижая рН пищевого продукта, делая неблагоприятным рост нежелательных микроорганизмов, таких как патогенные бактерии, дрожжи и грибы.
Кроме того, некоторые молочнокислые бактерии образуют также метаболиты с противомикробной активностью.
Патентная заявка США № US2011/0045134 относится к использованию Lactobacillus paracasei для придания противогрибковых свойств ферментированным молочным продуктам.
Европейская Патентная заявка № ЕР1442113 относится к смесям Propionibacterium jensenii и Lactobacillus sp., таких как Lactobacillus paracasei, с противомикробной активностью для использования для биозащиты.
Однако, все еще существует необходимость в биозащитных средствах для улучшенного противогрибкового эффекта в форме отдельных штаммов или в комбинации с другими биозащитными штаммами.
Краткое изложение сущности изобретения
Авторы настоящего изобретения посредством обширного скрининга и исследования обнаружили, что конкретные штаммы Lactobacillus paracasei обладают значимо более высоким эффектом против дрожжей и плесени по сравнению с коммерческими биозащитными культурами на рынке.
Авторы настоящего изобретения, кроме того, обнаружили, что конкретная группа молочнокислых бактерий при комбинации с другой группой молочнокислых бактерий обладает значительным синергическим противомикробным эффектом. Противомикробный эффект двух комбинированных групп бактерий неожиданно превышает сумму отдельных эффектов двух групп бактерий.
Краткое описание чертежей
На фиг. 1 изображен рост плесени в йогурте с 1,5% жира, ферментированном с помощью заквасочной культуры YF-L901 отдельно (верхний ряд), вместе с HOLDBAC™ YM-B (средний ряд) и вместе с Lactobacillus paracasei CHCC14676. Целевые загрязнители добавляли в концентрациях, упомянутых в тексте слева направо: Penicillium brevi compaction (M1), Penicillium commune (M6), Aspergillus versicolor (M7) и Penicillium glabrum (M8) соответственно. Йогурты инкубировали при 7±1°C в течение 61 суток.
На фиг. 2 изображены подсчеты клеток изолята Debaryomyces hansenii, добавленного к йогурту с 1,5% жира, ферментированного с помощью заквасочной культуры YF-L901 отдельно (контроль) или вместе с культурой HOLDBAC™ YM-B (FloldBac YM-B), вместе с культурой FIOLDBAC™ YM-C (HoldBac YM-C) или со штаммом Lactobacillus paracasei CHCC14676 (14676). Йогурты хранили при 7±1°C и анализировали в подходящие интервалы.
На фиг. 3 показан рост плесени на чашках, полученных из молока, ферментированного с помощью заквасочной культуры отдельно (контроль, первая фигура), вместе с Lb. paracasei СНСС14676 (вторая фигура), вместе с Lb. rhamnosus CHCC5366 (третья фигура) или вместе с комбинацией Lb. paracasei СНСС14676 и Lb. rhamnosus CHCC5366 (четвертая фигура). Целевые загрязнители добавляли в концентрациях, упомянутых в тексте, сверху слева, двигаясь по часовой стрелке вниз влево на чашке: Penicillium naigiovense, Penicillium commune, Aspergillus versicolor и Penicillium crustosum, соответственно. Затем чашки инкубировали при 7±1°C в течение 12 суток.
На фиг. 4 показан рост плесени на чашках, полученных из молока, ферментированного с помощью заквасочной культуры отдельно (контроль, первая фигура), вместе с Lb. paracasei СНСС14676 (вторая фигура), вместе с Lb. rhamnosus CHCC14226 (третья фигура) или вместе с комбинацией Lb. paracasei СНСС14676 и Lb. rhamnosus CHCC14226 (четвертая фигура). Целевые загрязнители добавляли в концентрациях, упомянутых в тексте, сверху слева, двигаясь по часовой стрелке вниз влево на чашке: Penicillium naigiovense, Penicillium commune, Aspergillus versicolor и Penicillium crustosum, соответственно. Затем чашки инкубировали при 7±1°C в течение 12 суток.
На фиг. 5 показан рост Mucor ssp. на греческом йогурте, полученном из молока, ферментированного с помощью только заквасочной культуры (левый стакан) или из молока, ферментированного в присутствии Lactobacillus rhamnosus СНСС5366 и Lactobacillus paracasei CHCC14676 (правый стакан).
На фиг. 6 показан рост плесени Rhizopus stolonifer на греческом йогурте, полученном из молока, ферментированного с помощью только заквасочной культуры (R, т.е. контроль), с помощью заквасочной культуры и HOLDBAC™ YM-B (YM-B), с помощью заквасочной культуры и Lactobacillus rhamnosus
- 1 034173
CHCC5366 (5366), или с помощью заквасочной культуры и комбинации Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 и Lactobacillus paracasei CHCC14676 (5366+14676).
На фиг. 7 показан рост Penicillium brevicompactum (M1), Penicillium commune (M6), Aspergillus versicolor (M7) и Penicillium glabrum (M8) на сметане, полученной из молока, ферментированного с помощью только заквасочной культуры (верхний ряд); с помощью заквасочной культуры и HOLDBAC™ YMB (средний ряд); или с помощью заквасочной культуры и комбинации Lactobacillus paracasei CHCC14676 и Lactobacillus rhamnosus СНСС12697 (нижний ряд).
На фиг. 8 показан рост D. hansenii на сметане, полученной из молока, ферментированного с помощью только заквасочной культуры (контроль); с помощью заквасочной культуры и HOLDBAC™ YM-B (YM-B); или с помощью заквасочной культуры, Lactobacillus paracasei CHCC14676 и Lactobacillus rhamnosus CHCC12697 (12697+14676).
На фиг. 9 показан рост Saccharomyces cerevisiae на белом рассольном сыре, полученном из молока, ферментированного с помощью только заквасочной культуры (контроль); с помощью заквасочной культуры и HOLDBAC™ YM-B (YM-B) или с помощью заквасочной культуры, Lactobacillus paracasei CHCC14676 и Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 (5366+14676).
На фиг. 10 показан рост Kluyveromyces marxianus на белом рассольном сыре, полученном из молока, ферментированного с помощью только заквасочной культуры (контроль); с помощью заквасочной культуры и HOLDBAC™ YM-B (YM-B); или с помощью заквасочной культуры, Lactobacillus paracasei CHCC14676 и Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 (5366+14676).
На фиг. 11 показан рост Penicillium commune на белом рассольном сыре, полученном из молока, ферментированного с помощью только заквасочной культуры (R, т.е. контроль); with заквасочная культура и HOLDBAC™ YM-B (YM-B); или с помощью заквасочной культуры, Lactobacillus paracasei CHCC14676 и Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 (5366+14676).
На фиг. 12 изображен рост плесени Penicillium paneum в йогурте с 1,5% жира, полученном из молока, ферментированного с помощью заквасочной культуры отдельно (R, т.е. контроль), с помощью заквасочной культуры и HOLDBAC™ YM-B (YM-B), с помощью заквасочной культуры и Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 (5366), или с помощью заквасочной культуры и комбинации Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 и Lactobacillus paracasei CHCC14676 (5366+14676).
На фиг. 13 показан рост плесени Penicillium crustosum в йогурте с 1,5% жира, полученном из молока, ферментированного с помощью заквасочной культуры отдельно (верхний ряд), с помощью заквасочной культуры и HOLDBAC™ YM-B (второй ряд), с помощью заквасочной культуры и Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 (третий ряд) или с помощью заквасочной культуры и комбинации Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 и Lactobacillus paracasei СНСС14676 (нижний ряд). Намеченный загрязнитель добавляли в концентрациях 100 спор/стакан, и йогурты инкубировали при 7±1°C (левый столбец), 12±1°C (центральный столбец) или 22±1°C (правый столбец) в течение 36 суток.
Подробное описание изобретения
Настоящее изобретение относится к противогрибковой композиции, содержащей штамм Lactobacillus paracasei DSM25612.
Вариантом настоящего изобретения является противогрибковая композиция, дополнительно содержащая по меньшей мере один штамм Lactobacillus rhamnosus.
Другим вариантом настоящего изобретения является противогрибковая композиция, в которой по меньшей мере один штамм Lactobacillus rhamnosus выбран из штаммов DSM24616, DSM24652, DSM23035.
Настоящее изобретение также относится пищевому, кормовому или фармацевтическому продукту, содержащему указанную противогрибковую композицию.
Вариантом настоящего изобретения является пищевой продукт, выбранный из фруктов и продуктов переработки фруктов, овощей и продуктов переработки овощей, зерна и продуктов переработки зерна, молочных продуктов, мяса, домашней птицы и морепродуктов, и их смесей.
Другим вариантом настоящего изобретения является пищевой продукт, который представляет собой молочный продукт.
Другим вариантом настоящего изобретения является пищевой продукт, где указанный молочный продукт представляет собой мезофильный или термофильный кисломолочный продукт, такой как йогурт или сметана.
Настоящее изобретение также относится к способу получения указанного пищевого, кормового или фармацевтического продукта, включающий добавление к исходному пищевому, кормовому или фармацевтическому продукту указанной противогрибковой композиции, причем в процессе получения концентрация штамма Lactobacillus paracasei остается постоянной или увеличивается.
Вариантом настоящего изобретения является способ, согласно которому концентрация Lactobacillus paracasei составляет по меньшей мере 1х 106 КОЕ в пересчете на 1 г или 1 мл пищевого, кормового или фармацевтического продукта, или по меньшей мере 1х105 КОЕ в пересчете на 1 см2 поверхности пищевого, кормового или фармацевтического продукта.
- 2 034173
Другим вариантом настоящего изобретения является способ, согласно которому концентрация каждого из штаммов Lactobacillus rhamnosus и Lactobacillus paracasei составляет по меньшей мере 1 х 106 KOE в пересчете на 1 г или 1 мл пищевого, кормового или фармацевтического продукта, или по меньшей мере 1 х 105 KOE в пересчете на 1 см2 поверхности пищевого, кормового или фармацевтического продукта.
Другим вариантом настоящего изобретения является способ, дополнительно включающий одну или несколько стадий ферментации.
Другим вариантом настоящего изобретения является способ, включающий ферментацию исходного продукта, представляющего собой молочный субстрат, с заквасочной культурой, содержащей по меньшей мере один штамм, выбранный из Lactobacillus, Streptococcus, Lactococcus или Leuconostoc.
Настоящее изобретение также относится к применению указанной противогрибковой композиции для получения пищевого, кормового или фармацевтического продукта.
Настоящее изобретение также относится к применению указанной противогрибковой композиции для подавления роста дрожжей и плесени.
Определения
Как применяют в настоящем документе, термин молочнокислая бактерия обозначает грамположительную, микроаэрофильную или анаэробную бактерию, которая ферментирует сахара с образованием кислот, включая молочную кислоту в качестве преобладающей образуемой кислоты. Наиболее пригодные с промышленной точки зрения молочнокислые бактерии обнаружены внутри порядка Lactobacillales, который включает в себя виды Lactococcus, виды Streptococcus, виды Lactobacillus, виды Leuconostoc, виды Pseudoleuconostoc, виды Pediococcus, виды Brevibacterium и виды Enterococcus. Их часто используют в качестве пищевых культур отдельно или в комбинации с другими молочнокислыми бактериями.
Термин пищевой продукт предназначен, чтобы включать в себя также сыр. Термин сыр понимают как включающий в себя любой сыр, включая твердые, полутвердые и мягкие сыры, такие как сыры следующих типов: домашний, брынза, чеддер, пармезан, моцарелла, эмменталь, данбо, гауда, эдам, сыры типа брынзы, голубые сыры, рассольные сыры, камамбер и бри. Специалисту в данной области известно, как превращать сгусток в сыр, способы можно обнаружить в литературе, см., например, Kosikowski, F.V., и V.V. Mistry, Cheese and Fermented Milk Foods, 1997, 3rd Ed. F. V. Kosikowski, L. L. C. Westport, CT. Как применяют в настоящем документе, сыр, имеющий концентрацию NaCl ниже 1,7% (мас./мас.), обозначают как сыр с низким содержанием соли.
Молочнокислые бактерии, включая бактерии видов Lactobacillus и Lactococcus, в норме поставляются для молочной промышленности либо в форме замороженных, либо в форме лиофилизированных культур для размножения производственной закваски, либо в форме так называемых готовых к применению в производстве наборов (DVS) культур, предназначенных для прямой инокуляции в сосуд для ферментации или чан для получения молочного продукта, такого как кисломолочный продукт или сыр. Такие культуры молочнокислых бактерий, как правило, обозначают как заквасочные культуры или закваски.
Термин мезофил в настоящем документе относится к микроорганизмам, которые лучше всего развиваются при средних температурах (15-40°C). Наиболее пригодные с промышленной точки зрения мезофильные бактерии включают в себя виды Lactococcus и виды Leuconostoc. Термин мезофильная ферментация в настоящем документе относится к ферментации при температуре между приблизительно 22 и приблизительно 35°C. Термин мезофильный кисломолочный продукт относится к кисломолочным продуктам, полученным посредством мезофильной ферментации мезофильной заквасочной культуры, и включает в себя такие кисломолочные продукты как пахта, простокваша, сквашенное молоко, сметана, сквашенные сливки и свежий сыр, такой как кварк, творог и сливочный сыр.
Термин термофильный в настоящем документе относится к микроорганизмам, которые лучше всего развиваются при температурах выше 43°C. Наиболее пригодные с промышленной точки зрения термофильные бактерии включают в себя виды Streptococcus и виды Lactobacillus. Термин термофильная ферментация в настоящем документе относится к ферментации при температурах выше приблизительно 35°C, например, между приблизительно 35°C и приблизительно 45°C. Термин термофильный кисломолочный продукт относится к кисломолочным продуктам, полученным посредством термофильной ферментации термофильной заквасочной культуры, и включает в себя такие кисломолочные продукты, как йогурт термостатного способа производства, перемешанный йогурт и питьевой йогурт.
Термин молоко следует понимать как секрет молочных желез, полученный доением любого млекопитающего, такого как коровы, овцы, козы, буйволы или верблюды. В предпочтительном варианте осуществления молоко представляет собой коровье молоко. Термин молоко включает в себя также растворы белка/жира, полученные из растительных материалов, например соевое молоко.
Термин молочный субстрат представляет собой любой сырой и/или переработанный молочный материал, который можно подвергать ферментации в соответствии со способом по изобретению. Таким образом, пригодные молочные субстраты включают в себя, но без ограничения, растворы/суспензии любых молочных или подобных молочным продуктов, содержащих белок, таких как цельное молоко или
- 3 034173 молоко с низким содержанием жира, обезжиренное молоко, пахта, разведенный порошок молока, сгущенное молоко, сухое молоко, сыворотка, сывороточный пермеат, лактоза, маточная жидкость от кристаллизации лактозы, концентрат сывороточного белка или сливки. Очевидно, что молочный субстрат может происходить от любого млекопитающего, например, являясь, по существу, чистым молоком млекопитающего или разведенным порошком молока.
Перед ферментацией молочный субстрат можно гомогенизировать и пастеризовать в соответствии со способами, известными в данной области.
Гомогенизация, как применяют в настоящем документе, обозначает интенсивное перемешивание для получения растворимой суспензии или эмульсии. Если гомогенизацию проводят до ферментации, ее можно проводить так, чтобы расщеплять молоко на частицы меньшего размера, так что их невозможно более отделять от молока. Это можно осуществлять посредством пропускания молока под высоким давлением через малые отверстия.
Пастеризация, как применяют в настоящем документе, обозначает обработку молочного субстрата для уменьшения или исключения присутствия живых организмов, таких как микроорганизмы. Предпочтительно пастеризации достигают посредством поддержания указанной температуры в течение указанного периода времени. Указанной температуры обычно достигают посредством нагревания. Температуру и продолжительность можно выбирать, чтобы уничтожать или инактивировать конкретные бактерии, такие как опасные бактерии. Затем может следовать стадия быстрого охлаждения.
Ферментация в способах по настоящему изобретению обозначает превращение углеводов в спирты или кислоты посредством действия микроорганизма. Предпочтительно ферментация в способах по изобретению включает в себя превращение лактозы в молочную кислоту.
Способы ферментации для использования в получении молочных продуктов хорошо известны, и специалисту в данной области известно, как выбирать подходящие условия способа, такие как температура, кислород, количество и характеристики микроорганизма(микроорганизмов) и время процесса. Очевидно, что условия ферментации выбирают таким образом, чтобы поддерживать достижения по настоящему изобретению, т.е. получать молочный продукт в твердой (такой как сыр) или жидкой форме (такой как кисломолочный продукт).
Композиции по изобретению обеспечивают то преимущество, что нежелательные микроорганизмы, выбранные из грибов, бактерий и их смесей, например, в пищевых, кормовых и фармацевтических продуктах, и у человека и животных, можно подавлять. Предотвращение и/или подавление роста грибов, таких как дрожжи и плесень, является, в частности, предусмотренным. Таким образом, в предпочтительном варианте осуществления термин противомикробный следует понимать как противогрибковый.
Термин нежелательные микроорганизмы в настоящем документе относится к микроорганизмам, таким как бактерии и грибы, такие как дрожжи, которые являются патогенными и/или способными ухудшать пищевые, кормовые или фармацевтические продукты. Композиции по изобретению обеспечивают то преимущество, что нежелательные микроорганизмы, выбранные из грибов, бактерий и их смесей, например, в пищевых, кормовых и фармацевтических продуктах и у человека и животных, можно подавлять. Предотвращение и/или подавление роста грибов, таких как дрожжи и плесень, является, в частности, предусмотренным.
Термины подавлять и подлежать подавлению по отношению к дрожжам и плесени означает, например, что рост или количество, или концентрацию дрожжей и плесени, например, в пищевых продуктах и/или на поверхности пищевых продуктов, содержащих штаммы в соответствии с настоящим изобретением, ниже, чем в пищевых продуктах и/или на поверхности пищевых продуктов, не содержащих таких штаммов.
В настоящем контексте термин мутант следует понимать как штамм, полученный из штамма по изобретению посредством, например, генной инженерии, радиоактивного облучения и/или химической обработки. Является предпочтительным, чтобы мутант представлял собой функционально эквивалентный мутант, например мутант, обладающий, по существу, такими же или улучшенными, свойствами (например, по отношению к противогрибковым свойствам), как родительский штамм. Такой мутант является частью настоящего изобретения. В особенности, термин мутант относится к штамму, полученному подверганием штамма по изобретению любой общепринятой обработке для мутагенеза, включая обработку химическим мутагеном, таким как этанметансульфонат (EMS) или М-метил-М'-нитро-Мнитрогуанидин (NTG), УФ-светом, или к спонтанно возникшему мутанту. Мутант можно подвергать нескольким обработкам для мутагенеза (как одну обработку следует понимать одну стадию мутагенеза с последующей стадией скрининга/селекции), однако в настоящее время является предпочтительным проведение не более 20, или не более 10, или не более 5 обработок (или стадий скрининга/селекции). В предпочтительном в настоящее время мутанте менее 5%, или менее 1% или даже менее 0,1% нуклеотидов в бактериальном геноме заменено другим нуклеотидом, или делетировано, по сравнению с родительским штаммом.
Использование терминов а и an и the и сходных обозначений в контексте описываемого изобретения (особенно в контексте следующей ниже формулы изобретения) следует понимать как охватывающее как единственное, так и множественное число, если в настоящем документе не указано иначе
- 4 034173 или явно не противоречит контексту. Термины включающий, имеющий, включающий в себя и содержащий следует понимать как неограничивающие термины (т.е. обозначающие «включающий, но без ограничения), если не указано иначе. Перечисление диапазонов значений в настоящем документе предназначено только, чтобы служить способом сокращения индивидуального перечисления каждого отдельного значения, попадающего в пределы диапазона, если в настоящем документе не указано иначе, и каждое отдельное значение включено в описание, как если бы оно было индивидуально приведено в настоящем документе. Все способы, описанные в настоящем документе, можно осуществлять в любом подходящем порядке, если в настоящем документе не указано иначе или иным образом явно не противоречит контексту. Использование всех без исключения примеров, или иллюстративных формулировок (например, такой как), представленных в настоящем документе, предназначено только для лучшего освещения изобретения и не устанавливает ограничения объема изобретения, если в формуле изобретения не указано иначе. Никакие формулировки в описании не следует рассматривать как обозначающие какойлибо не заявленный в формуле изобретения элемент как необходимый для практического осуществления изобретения.
Осуществление и аспекты изобретения
Авторы настоящего изобретения провели скрининг среди 200 кандидатов из Lactobacillus plantarum, Lactobacillus paracasei и Lactobacillus rhamnosus для обнаружения наиболее эффективных комбинаций одного или двух штаммов против широкого ряда микроорганизмов, таких как дрожжи и плесень.
Скрининги проводили в модельном исследовании, насколько возможно, имитирующем мезофильные кисломолочные продукты, в средах на основе молока, к которым добавляли соответствующую заквасочную культуру с биозащитными кандидатами или без и которые ферментировали в условиях, соответствующих мезофильным кисломолочным продуктам. Намеченные организмы выделяли из мезофильных кисломолочных продуктов. Очищенные молочнокислые бактерии из культур HOLDBAC™ от Danisco A/S, Denmark, так же как полные культуры HOLDBAC™ YM-B и HOLDBAC™ YM-C, содержащие как молочнокислые бактерии, так и пропионовокислые бактерии, использовали в качестве отправной точки исследования.
Модельное исследование описано в Европейской Патентной заявке № ЕР11161609.0.
Обнаружено, что семнадцать кандидатов среди Lactobacillus paracasei и Lactobacillus rhamnosus в целом подавляют 12 индикаторных грибов так же хорошо или лучше, чем являющиеся отправной точкой исследования молочнокислые бактерии при тестировании при 25°C.
При тестировании на йогурте показано, что один штамм Lactobacillus paracasei, Lactobacillus paracasei штамм CHCC14676, депонированный в Немецкую коллекцию микроорганизмов и клеточных культур (DSMZ) под № доступа DSM25612, являлся значительно лучшим для подавления дрожжей и плесени, чем коммерчески доступные биозащитные культуры.
Подавляющий эффект штамма против дрожжей и плесени можно определять посредством хранения кисломолочных продуктов при подходящей температуре в течение подходящего времени хранения, как описано в примерах ниже.
Как правило, подходящая температура, при которой следует осуществлять этот способ, зависит от температуры, при которой конкретный пищевой, кормовой или фармацевтический продукт обычно хранят и/или изготавливают. Температура, при которой продукты обычно хранят, составляет между 5 и 26°C, предпочтительно температура составляет приблизительно 8°C.
Время хранения при температуре зависит от времени, в течение которого пищевой, кормовой, или фармацевтический продукт обычно хранят (срока хранения). Время хранения обычно составляет 5-65, предпочтительно 7-60 суток, более предпочтительно 7-28 суток и даже более предпочтительно время хранения составляет приблизительно 21 сутки, и более предпочтительно, вплоть до 60 суток или более.
Соответственно первый аспект настоящего изобретения относится к штамму Lactobacillus paracasei, выбранному из группы, состоящей из штамма Lactobacillus paracasei CHCC14676, депонированного в Немецкую коллекцию микроорганизмов и клеточных культур (DSMZ) под № доступа DSM25612 и полученным из него мутантным штаммам.
Мутантный штамм можно получать из депонированного штамма, например, посредством генной инженерии, облучения, УФ-света, химической обработки и/или способов, индуцирующих изменения генома. Мутант по изобретению может подавлять и/или предотвращать рост конкретных бактерий или грибов, предпочтительно плесени. Является предпочтительным, чтобы мутант оказывал по существу по меньшей мере 80% или более, по меньшей мере 90% или более, по меньшей мере 95% или более, или даже вплоть до 100% или более противогрибкового эффекта по сравнению с его родительским штаммом при определении, например, в анализе, как описано в примере 1, с использованием одного из видов плесени P. brevicompaction, P. commune, A. versicolor, D. hansenii или Р. glabum в качестве эталонного организма, рост которого необходимо подавлять.
Специалисту в данной области понятно, что с использованием депонированного штамма в качестве исходного материала, читатель - специалист в данной области - может посредством общепринятых способов мутагенеза или повторного выделения общепринятым образом получать дополнительные его му
- 5 034173 танты или производные, сохраняющие описанные в настоящем документе признаки и преимущества. Соответственно термин полученные из него мутантные штаммы из первого аспекта относится к мутантным штаммам, полученным с использованием депонированного штамма в качестве исходного материала.
Второй аспект относится к противогрибковой композиции, содержащей по меньшей мере один штамм Lactobacillus paracasei по первому аспекту изобретения, предпочтительно Lactobacillus paracasei штамм СНСС14676.
При тестировании Lactobacillus paracasei штамма СНСС14676 в комбинации с различными штаммами Lactobacillus rhamnosus неожиданно обнаружено, что эти комбинации являлись даже лучшими, чем любой из штаммов по отдельности, даже когда общие концентрации клеток являлись идентичными. В одном варианте осуществления изобретение относится к комбинации Lactobacillus paracasei штамма СНСС14676 и Lactobacillus rhamnosus штамма СНСС5366. В другом варианте осуществления изобретение относится к комбинации Lactobacillus paracasei штамма СНСС14676 и Lactobacillus rhamnosus штамма СНСС14226. В другом варианте осуществления изобретение относится к комбинации Lactobacillus paracasei штамма СНСС14676 и Lactobacillus rhamnosus штамма СНСС12697. Эти комбинации, повидимому, являются более эффективными, чем являющиеся отправной точки исследования культуры HOLDBAC™ YM-B и HOLDBAC™ YM-C от Danisco, Denmark.
Соответственно в предпочтительном варианте осуществления настоящее изобретение относится к противомикробным и более предпочтительно, противогрибковым композициям, содержащим Lactobacillus paracasei штамм СНСС14676, депонированный в German Collection of Microorganisms and Cell Cultures (DSMZ) под № доступа DSM25612 или полученный из него мутант и по меньшей мере один штамм Lactobacillus rhamnosus.
Предпочтительно по меньшей мере один штамм Lactobacillus rhamnosus выбран из группы, состоящей из Lactobacillus rhamnosus штамма СНСС12697 с № доступа DSM24616, Lactobacillus rhamnosus штамма СНСС14226 с № доступа DSM24652, Lactobacillus rhamnosus штамма СНСС5366 с № доступа DSM23035 и мутантных штаммов, полученных из этих депонированных штаммов.
Один из аспектов изобретения, таким образом, относится к противомикробной и более предпочтительно, противогрибковой композиции, содержащей Lactobacillus paracasei штамм СНСС14676 или полученный из него мутант и Lactobacillus rhamnosus штамм СНСС14226 или полученный из него мутант. В другом аспекте изобретение относится к противомикробной и более предпочтительно, противогрибковой композиции, содержащей по меньшей мере Lactobacillus paracasei штамм СНСС14676 или полученный из него мутант, и Lactobacillus rhamnosus штамм СНСС5366 или полученный из него мутант. В другом аспекте изобретение относится к противомикробной и более предпочтительно, противогрибковой композиции, содержащей по меньшей мере Lactobacillus paracasei штамм СНСС14676 или полученный из него мутант и Lactobacillus rhamnosus штамм СНСС12697 или полученный из него мутант. Предпочтительно, комбинация штамма Lactobacillus paracasei и штамма Lactobacillus rhamnosus в композициях по изобретению действует синергически в отношении их противомикробной и/или противогрибковой активности.
Противогрибковая композиция, как правило, содержит бактерии в концентрированной форме, включая замороженные, высушенные или лиофилизированные концентраты, как правило, имеющие концентрацию жизнеспособных клеток, лежащую в диапазоне 104-1012 KOE (колониеобразующих единиц) на грамм композиции, включая по меньшей мере 104 KOE на грамм композиции, например, по меньшей мере 105 KOE/г, например, по меньшей мере 106 KOE/г, например, по меньшей мере 107 KOE/г, например, по меньшей мере 108 KOE/г, например, по меньшей мере 109 KOE/г, например, по меньшей мере 1010 KOE/г, например, по меньшей мере 1011 KOE/г. Таким образом, композиция по изобретению предпочтительно представлена в замороженной, высушенной или лиофилизированной форме, например, в форме готовых к применению в производстве наборов (DVS) культур. Однако, как применяют в настоящем документе, композиция может также представлять собой жидкость, полученную после суспендирования замороженных, высушенных или лиофилизированных концентратов клеток в жидкой среде, такой как вода или буфер PBS. Когда композиция по изобретению представляет собой суспензию, концентрация жизнеспособных клеток лежит в диапазоне 104-1012 KOE (колониеобразующих единиц) на мл композиции, включая по меньшей мере 104 KOE на мл композиции, например по меньшей мере 105 KOE/мл, например, по меньшей мере 106 KOE/мл, например по меньшей мере 107 KOE/мл, например по меньшей мере 108 KOE/мл, например по меньшей мере 109 KOE/мл, например по меньшей мере 1010 KOE/мл, например по меньшей мере 1011 KOE/мл.
Композиция может в качестве дополнительных компонентов содержать криопротекторы и/или общепринятые добавки, включая пищевые добавки, такие как дрожжевые экстракты, сахара и витамины, например, витамин А, С, D, K или витамины семейства витамина В. Пригодные криопротекторы, которые можно добавлять к композициям по изобретению, представляют собой компоненты, улучшающие холодостойкость микроорганизмов, такие как маннит, сорбит, триполифосфат натрия, ксилит, глицерин, рафиноза, мальтодекстрин, эритрит, треит, трегалоза, глюкоза и фруктоза. Другие добавки могут включать в себя, например, углеводы, вкусовые добавки, минералы, ферменты (например, сычужный фер
- 6 034173 мент, лактазу и/или фосфолипазу.
В композициях по изобретению, содержащих Lactobacillus paracasei штамм СНСС14676 и штамм Lactobacillus rhamnosus, соотношение между Lactobacillus paracasei штаммом СНСС14676 и штаммом Lactobacillus rhamnosus, например, соотношение концентрации или количества бактерий Lactobacillus paracasei и концентрации или количества бактерий Lactobacillus rhamnosus, предпочтительно, составляет от 1:100 до 100:1, предпочтительно, 1:10-10:1.
Противогрибковую композицию по настоящему изобретению можно использовать в связи с любым пищевым, кормовым и фармацевтическим продуктом, который является подверженным разложению микроорганизмами и/или заражением дрожжами и плесенью. Они включают в себя, но без ограничения, фрукты и овощи, включая продукты переработки, зерно и продукты переработки зерна, молочные продукты, мясо, домашнюю птицу и морепродукты. В особенно предпочтительных вариантах осуществления композицию используют в связи с молочным продуктом и/или мясом и домашней птицей. В предпочтительном варианте осуществления композиции по изобретению предназначены для использования в качестве добавки при получении молочных продуктов, таких как йогурт, творог, сметана, сливочный сыр, белые рассольные сыры и т.п.
В предпочтительном варианте осуществления композиции по изобретению используют против грибов, таких как дрожжи и плесень. Это означает, что композиции используют для подавления и/или предотвращения роста грибов, вызывающих заражение в процессах молочной промышленности, в частности, процессах ферментации молока. Композиции по настоящему изобретению можно использовать, например, для подавления и/или предотвращения роста дрожжей, таких как дрожжи родов Klyveromyces (например, K. marxianus, K. lactis), Pichia (например, P. fermentans), Yarrowia (например, Y. lipolytica), Candida (например, С. sake) и т.п.; или плесени, такой как плесень родов Penicillium (например, P. nalgiovense, P. commune, P. crustosum, P. brevicompactum, P. glabrum), видов Mucor, видов Cladiosporium, Aspergillus (например, A. versicolor), Debaryomyces (например, D. hansenii), и т.п. Является особенно предпочтительным использовать композиции по изобретению для подавления и/или предотвращения роста видов Klyveromyces marxianus, Yarrowia lipolytica, Penicillium nalgiovense, видов Cladiosporium, Penicillium commune, видов Mucor, Penicillium brevicompactum, Aspergillus versicolor, Penicillium crustosum, Kluyveromyces lactis и/или Debaryomyces hansenii.
Противогрибковую композицию по второму аспекту настоящего изобретения можно также использовать в качестве фармацевтического продукта, предпочтительно, продукта для лечения инфекций патогенными грибами, такими как патогенные дрожжи.
В третьем аспекте настоящее изобретение относится к пищевому, кормовому или фармацевтическому продукту, содержащему штамм Lactobacillus paracasei по первому аспекту изобретения или противогрибковую композицию по второму аспекту изобретения.
В предпочтительном варианте осуществления пищевой, кормовой или фармацевтический продукт представляет собой пищевой продукт.
В более предпочтительном варианте осуществления такой пищевой продукт выбран из группы, состоящей из фруктов и продуктов переработки фруктов, овощей и продуктов переработки овощей, зерна и продуктов переработки зерна, молочных продуктов, мяса, домашней птицы и морепродуктов и их смесей.
В даже более предпочтительном варианте осуществления пищевой продукт представляет собой молочный продукт, предпочтительно мезофильный или термофильный кисломолочный продукт, такой как свежий сыр, йогурт, сметана или творог.
В другом предпочтительном варианте осуществления пищевой продукт представляет собой мясо или домашнюю птицу.
В предпочтительном варианте осуществления пищевой, кормовой или фармацевтический продукт представляет собой фармацевтический продукт.
Предпочтительно фармацевтический продукт представляет собой продукт, пригодный для введения противогрибковой композиции по второму аспекту настоящего изобретения человеку или животному для подавления патогенных микроорганизмов и облегчения симптомов, связанных с патогенными микроорганизмами. Примеры таких симптомов включают в себя симптомы, связанные с дрожжевой инфекцией. В таком варианте осуществления фармацевтический продукт может представлять собой единичную дозированную форму, содержащую противогрибковую композицию. Предпочтительно единичная дозированная форма представляет собой капсулу или таблетку. Однако единичная дозированная форма может также являться пригодной для введения на слизистую оболочку или кожу и, таким образом, может находиться в форме пасты, крема, мази и т.п.
Четвертый аспект настоящего изобретения относится к способу изготовления пищевого, кормового или фармацевтического продукта по третьему аспекту настоящего изобретения, включающего в себя добавления по меньшей мере одного штамма Lactobacillus paracasei по первому аспекту или противогрибковой композиции по второму аспекту изобретения в ходе изготовления пищевого, кормового или фармацевтического продукта.
Предпочтительно способ также включает в себя стадию контроля параметров изготовления в ходе
- 7 034173 изготовления, так что концентрация по меньшей мере одного штамма Lactobacillus paracasei остается постоянной или увеличивается.
В предпочтительном варианте осуществления концентрация по меньшей мере одного штамма Lactobacillus paracasei составляет по меньшей мере 1х106 KOE/г или каждого по меньшей мере 1х106 KOE/мл пищевого, кормового или фармацевтического продукта, или каждого по меньшей мере 1х105 KOE/см2 поверхности пищевого, кормового или фармацевтического продукта. Предпочтительно концентрация по меньшей мере одного штамма Lactobacillus paracasei составляет по меньшей мере 5х106 KOE/г или каждого по меньшей мере 5х106 KOE/мл пищевого, кормового или фармацевтического продукта, или каждого по меньшей мере 5х105 KOE/см2 поверхности пищевого, кормового или фармацевтического продукта, например, по меньшей мере 1х 107 KOE/г или каждого по меньшей мере 1х 107 KOE/мл пищевого, кормового или фармацевтического продукта, или каждого по меньшей мере 1 х 106 KOE/см2 поверхности пищевого, кормового или фармацевтического продукта, например по меньшей мере 5х107 KOE/г или каждого по меньшей мере 5х107 KOE/мл пищевого, кормового или фармацевтического продукта, или каждого по меньшей мере 5х106 KOE/см2 поверхности пищевого, кормового или фармацевтического продукта.
Когда пищевой, кормовой или фармацевтический продукт изготавливают посредством добавления композиции, содержащей Lactobacillus paracasei штамм СНСС14676 или полученный из него мутант и по меньшей мере один штамм Lactobacillus rhamnosus, концентрация Lactobacillus paracasei штамма СНСС14676 или полученного из него мутанта и/или концентрация по меньшей мере одного штамма Lactobacillus rhamnosus составляет каждого по меньшей мере 1х 106 KOE/г или каждого по меньшей мере 1х106 KOE/мл пищевого, кормового или фармацевтического продукта, или каждого по меньшей мере 1х105 KOE/см2 поверхности пищевого, кормового или фармацевтического продукта. Предпочтительно концентрация Lactobacillus paracasei штамма СНСС14676 или полученного из него мутанта и/или концентрация по меньшей мере одного штамма Lactobacillus rhamnosus составляет каждого по меньшей мере 5х106 KOE/г или каждого по меньшей мере 5х106 KOE/мл пищевого, кормового или фармацевтического продукта, или каждого по меньшей мере 5х105 KOE/см2 поверхности пищевого, кормового или фармацевтического продукта. В следующем варианте осуществления концентрация Lactobacillus paracasei штамма СНСС14676 или полученного из него мутанта и/или концентрация по меньшей мере одного штамма Lactobacillus rhamnosus составляет каждого по меньшей мере 1х108 KOE/г или каждого по меньшей мере 1х 108 KOE/мл пищевого, кормового или фармацевтического продукта, или каждого по меньшей мере 1х 107 KOE/см2 поверхности пищевого, кормового или фармацевтического продукта.
В предпочтительном варианте осуществления параметры изготовления контролируют в ходе изготовления, так что концентрация Lactobacillus paracasei штамма СНСС14676 (или полученного из него мутанта) и по меньшей мере одного штамма Lactobacillus rhamnosus увеличивается или остается постоянной.
Противогрибковую композицию в соответствии с настоящим изобретением наиболее просто используют посредством смешивания с пищевым, кормовым или фармацевтическим продуктом и/или нанесения на смешивающийся пищевой, кормовой или фармацевтический продукт, но она должна также являться эффективной для обработки поверхности твердых пищевых продуктов, или внутренней части таких продуктов, например, посредством инъекции. В других вариантах осуществления композицию можно наносить в форме маринада, панировки, приправ для натирания, глазури, смеси красителей и т.п., где ключевыми критериями является то, что противогрибковая композиция является доступной на поверхности, подверженной бактериальному разложению и заражению дрожжами и плесенью. В других вариантах осуществления композицию можно опосредованно приводить в контакт с поверхностью пищевого продукта посредством нанесения композиции на упаковку пищевого продукта и затем применения упаковки для поверхности пищевого продукта. Оптимальное количество для использования может зависеть от состава конкретного пищевого продукта, подлежащего обработке, и способа, используемого для нанесения композиции на поверхность пищевого продукта, но его можно определять простыми экспериментами.
В наиболее предпочтительном варианте осуществления способ включает в себя одну или несколько стадий ферментации и по меньшей мере один штамм Lactobacillus paracasei, или противогрибковую композицию можно добавлять к пищевому, кормовому или фармацевтическому продукту до, во время или после таких одной или нескольких стадий ферментации.
Предпочтительно способ включает в себя ферментацию субстрата, такого как молочный субстрат, в присутствии по меньшей мере одного штамма Lactobacillus paracasei по изобретению в течение периода времени, достаточного для появления противогрибковой активности по меньшей мере одного штамма Lactobacillus paracasei по изобретению. Эта противогрибковая активность оказывает эффект подавления развития дрожжей и/или плесени в продукте, ферментированном с помощью меньшей мере одного штамма.
В даже более предпочтительном варианте осуществления способ включает в себя ферментирование
- 8 034173 молочного субстрата с помощью заквасочной культуры, содержащей по меньшей мере один штамм из родов, выбранных из Lactobacillus, Streptococcus, Lactococcus и Leuconostoc, например по меньшей мере один штамм Lactobacillus bulgaricus и по меньшей мере один штамм Streptococcus thermophilus или например, по меньшей мере один штамм Lactococcus lactis подвида lactis, по меньшей мере один штамм Leuconostoc mesenteroides подвида cremoris и по меньшей мере один штамм Lactococcus lactis подвида diacetylactis.
Пятый аспект по изобретению относится к пищевому продукту, который можно получать способом по четвертому аспекту изобретения.
Шестой аспект настоящего изобретения относится к использованию штамма Lactobacillus paracasei по первому аспекту или противогрибковой композиции по второму аспекту для получения пищевого, кормового или фармацевтического продукта. Предпочтительно пищевой продукт, полученный посредством использования штамма Lactobacillus paracasei по первому аспекту или противогрибковой композиции по второму аспекту, представляет собой сыр, такой как домашний, брынза, чеддер, пармезан, моцарелла, эмменталь, данбо, гауда, эдам, сыр типа брынзы, голубой сыр, рассольный сыр, камамбер или бри.
Последний аспект изобретения относится к использованию штамма Lactobacillus paracasei по первому аспекту или противогрибковой композиции по второму аспекту для подавления роста дрожжей и плесени, в частности, в пищевых и кормовых продуктах.
Варианты осуществления настоящего изобретения описаны ниже посредством неограничивающих примеров.
Примеры
Пример 1. Исследование заражения йогурта с Lactobacillus paracasei CFICC14676
Для визуального исследования подавляющего эффекта штамма Lactobacillus paracasei CFICC14676 на различные виды плесени, P. brevicompactum, P. commune, A. versicolor и P. qlabrum получали йогурт с 1,5% жира:
Гомогенизированное молоко (1,5% жира) подвергали тепловой обработке при 95°C±1°C в течение 5 мин в 1 л бутылях в водяной бане и немедленно охлаждали. Коммерческую заквасочную культуру (FDVS YF-L901, которую можно получать из Chr. Flansen A/S, Denmark) инокулировали при 0,02%. Затем молоко инокулировали HOLDBAC™ YM-B (20 DCU/100 л) или Lactobacillus paracasei СНСС14676 (lx 107 КОЕ/мл) и одну бутыль использовали в качестве контроля и инокулировали только заквасочной культурой.
Молоко подвергали ферментации при 43°C±1°C до достижения рН 4,60±0,1. Полученный йогурт разливали в стаканы (100 г) и хранили при 7°C±1°C.
Через сутки после получения йогурта различную плесень инокулировали в форме заражения поверхности в двух повторах стаканов йогурта с одним пятном на поверхности йогурта с намеченными 100 спорами/пятно. Рост плесени оценивали визуально после хранения в течение 45 суток при 7°C±1°C.
Результат теста йогурта представлен на фиг. 1, показывающей, что P. brevi compaction (M1), P. commune (M6), А. versicolor (M7) и P. glabrum (M8) хорошо растут на йогурте, полученном из молока, ферментированного только с заквасочной культурой YF-L901 (верхний ряд) или с заквасочной культурой и культурой FIOLDBAC™ YM-B (средний ряд). В отличие от этого, когда Lactobacillus paracasei CHCC14676 присутствовал во время ферментации молока (нижний ряд), рост всех тестированных видов плесени был подавлен.
Пример 2. Количественные определения подавляющего эффекта Lactobacillus paracasei CHCC14676 против Debaryomyces hansenii
Для количественной оценки подавляющего эффекта Lactobacillus paracasei CHCC14676 на D. hansenii получали йогурт:
Гомогенизированное молоко (1,5% жира) подвергали тепловой обработке при 95°C±1°C в течение 5 мин в 1 л бутылях в водяной бане и охлаждали немедленно. Коммерческую заквасочную культуру (FDVS YF-L901, которую можно получать из Chr. Hansen A/S, Denmark) инокулировали при 0,02%. Затем молоко инокулировали HOLDBAC™ YM-B (20 DCU/100 л), HOLDBAC™ YM-C (10 DCU/100 л) или Lactobacillus paracasei CHCC14676 (1x107 KOE/г), и одну бутыль использовали в качестве контроля и инокулировали только заквасочной культурой.
Молоко ферментировали при 43°C±1°C до достижения рН 4,60±0,1. Полученный йогурт разливали в стаканы (100 г) и хранили при 7°C±1°C.
Через сутки после получения йогурта в стаканы инокулировали в двух повторах 1,00 мл/стакан дрожжей с намеченными 20 KOE/г. Дрожжи равномерно распределяли в йогурте. Стаканы хранили под крышкой при 7°C±1°C и в подходящие интервалы уровень заражения D. hansenii посредством посева 1 мл йогурта и дальнейших соответствующих 1-кратных разведений, полученных в солевом растворе пептона, на агар с дрожжевым экстрактом, глюкозой и хлорамфениколом (YGC) с последующей аэробной инкубацией в течение 5 суток при 25°C.
Как проиллюстрировано на фиг. 2, рост D. hansenii был подавлен в присутствии штамма Lactobacillus paracasei CHCC14676 при инокуляции вместе с заквасочной культурой YF-L901 перед ферментацией.
- 9 034173
Штамм вызывал значительно более высокое подавление, чем коммерческие культуры, HOLDBAC™ YMB и HOLDBAC™ YM-C.
Пример 3. Полуколичественные определения подавляющего эффекта Lb. Paracasei CHCC14676 и Lb. rhamnosus CHCC5366 отдельно и в комбинации против заражения различными видами плесени.
Для полуколичественных оценок Lb. paracasei CHCC14676 и Lb. rhamnosus CHCC5366 отдельно и в комбинации, использовали анализ на агаре, напоминающий способ изготовления и продукт йогурта.
Гомогенизированное молоко (1,5% жира масс./об.) подвергали тепловой обработке при 95°C в течение пяти минут и немедленно охлаждали. Коммерческую заквасочную культуру (F-DVS YC-350, которую можно получать из Chr. Hansen A/S, Denmark), инокулировали при 0,02%, и молоко распределяли по 220 мл бутылям. В бутыли дополнительно инокулировали Lb. paracasei СНСС14676, Lb. rhamnosus CHCC5366 и комбинацию двух штаммов, соответственно, в общей концентрации 1х107 КОЕ/мл. Одну бутыль без дополнительной инокуляции помимо заквасочной культуры, использовали в качестве контроля. Более того, 5% индикатора рН из бромкрезолового пурпурного и бромкрезолового зеленого добавляли во все бутыли для получения показателей скорости закисления, и для получения синей/зеленой окраски среды, что облегчало детекцию последующего роста дрожжей и плесени -мишеней. Все бутыли инкубировали в водяной бане при 43±1°C и подвергали ферментации в этих условиях до достижения рН 4,60±0,1. После ферментации бутыли немедленно охлаждали на льду и интенсивно встряхивали, чтобы разбить сгусток. Затем кисломолочный продукт нагревали до температуры 40°C и добавляли до 40 мл 5% стерильного раствора агара, расплавленного и охлажденного до 60°C. Затем этот раствор разливали в стерильные чашки Петри и чашки высушивали на рабочем столе с ламинарным воздухопотоком в течение 30 мин.
Суспензии полностью проросших спор в соответствующих разведениях из выбранных видов плесени Penicillium nalgiovense (10х), Penicillium commune (100х), Aspergillus versicolor (100x) и Penicillium crustosum (100x) наносили пятнами на чашки. Чашки инкубировали при 7°C и проверяли рост плесени в подходящие, регулярные интервалы.
Результаты анализа на агаре представлены на фиг. 3, показывающей, что все тестированные виды плесени росли очень хорошо на чашках с агаром из молока, ферментированного только с заквасочной культурой (контроль). Однако, когда Lb. paracasei СНСС14676 или Lb. rhamnosus CHCC5366 присутствовали во время ферментации молока, на полученных чашках сильно снижался рост всех видов плесени. Более того, когда Lb. paracasei CHCC14676 и Lb. rhamnosus CHCC5366 присутствовали в комбинации во время ферментации молока, наблюдали даже более сильное подавление, в частности для Penicillium commune, Aspergillus versicolor и Penicillium crustosum, нанесенных пятнами на чашки.
Пример 4. Полуколичественные определения подавляющего эффекта Lb. paracasei CHCC14676 и Lb. rhamnosus CHCC14226 отдельно и в комбинации против заражения различными видами плесени
Для полуколичественных оценок Lb. paracasei CHCC14676 и Lb. rhamnosus CHCC14226 отдельно и в комбинации использовали анализ на агаре, напоминающий способ изготовления и продукт йогурта:
Гомогенизированное молоко (1,5% жира мас./об.) подвергали тепловой обработке при 95°C в течение 5 мин и немедленно охлаждали. Коммерческую заквасочную культуру (F-DVS Yoflex® Mild, которую можно получать из Chr. Hansen A/S, Denmark) инокулировали при 0,02%, и молоко распределяли по 220 мл бутылям. В бутыли дополнительно инокулировали Lb. Paracasei СНСС14676, Lb. rhamnosus CHCC14226 и комбинацию двух штаммов, соответственно, в общей концентрации 1х107 KOE/мл. Одну бутыль без дополнительной инокуляции помимо заквасочной культуры, использовали в качестве контроля. Кроме того, 5% индикатора рН из бромкрезолового пурпурного и бромкрезолового зеленого добавляли во все бутыли для получения показателей скорости закисления, и для получения синей/зеленой окраски среды, что облегчало детекцию последующего роста дрожжей и плесени мишеней. Все бутыли инкубировали в водяной бане при 43±1°C и подвергали ферментации в этих условиях до достижения рН 4,60±0,1. После ферментации бутыли немедленно охлаждали на льду и интенсивно встряхивали, чтобы разбить сгусток. Затем кисломолочный продукт нагревали до температуры 40°C и добавляли до 40 мл 5% стерильного раствора агара, расплавленного и охлажденного до 60°C. Затем этот раствор разливали в стерильные чашки Петри и чашки высушивали на рабочем столе с ламинарным воздухопотоком в течение 30 мин.
Суспензии полностью проросших спор в соответствующих разведениях из выбранных видов плесени Penicillium nalgiovense (10х), Penicillium commune (100х), Aspergillus versicolor (100x) и Penicillium crustosum (100x) наносили пятнами на чашки. Чашки инкубировали при 7°C и проверяли рост плесени в подходящие, регулярные интервалы.
Результаты анализа на агаре представлены на фиг. 4, показывающей, что все тестированные виды плесени росли очень хорошо на чашках с агаром из молока, ферментированного только с заквасочной культурой (контроль). Однако, когда Lb. paracasei СНСС14676 или Lb. rhamnosus CHCC14226 присутствовали во время ферментации молока, на полученных чашках сильно снижался рост всех видов плесени. Более того, когда Lb. paracasei CHCC14676 и Lb. rhamnosus CHCC14226 присутствовали в комбинации во время ферментации молока, наблюдали даже более сильное подавление для Penicillium commune, As
- 10 034173 pergillus versicolor и Penicillium crustosum, нанесенных птянами на чашки.
Пример 5. Исследование заражения греческого йогурта с Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 и Lactobacillus paracasei СНСС14676 в комбинации
Для визуального исследования подавляющего эффекта Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 и Lactobacillus paracasei СНСС14676 в комбинации на виды Mucor греческий йогурт получали, по существу, следующим образом:
В пастеризованное молоко с 1,5% жира инокулировали коммерческую заквасочную культуру (FDVS YF-L901, которую можно получать из Chr. Flansen A/S, Denmark) при 0,02%. Одну партию, инокулированную только заквасочной культурой, использовали в качестве контроля. В другую партию дополнительно инокулировали комбинацию Lactobacillus rhamnosus штамма CFICC5366 (5х 106 КОЕ/г) и Lactobacillus paracasei штамма СНСС14676 (5х106 KOE/г).
Молоко подвергали ферментации при 43°C±1°C до конечного рН 4,55 (6-7 ч). Затем йогурт охлаждали до 25°C±1°C с обратным давлением 2 бар (200000 Па) и хранили при 6°C±1°C.
Через сутки после получения йогурта виды Mucor инокулировали в форме заражения поверхности в двух повторах стаканов йогурта посредством нанесения одного пятна на поверхность йогурта с намеченной концентрацией при инокуляции 100 спор/пятно. Рост плесени оценивали визуально после хранения в течение 15 суток при 22°C±1°C.
Результаты теста греческого йогурта представлены на фиг. 5, показывающей, что виды Mucor хорошо растут на йогурте, полученном из молока, ферментированного только с заквасочной культурой (левый стакан). В отличие от этого, когда Lactobacillus rhamnosus CFICC5366 и Lactobacillus paracasei CFICC14676 присутствовали во время ферментации молока (правый стакан), рост видов Mucor был подавлен.
Пример 6. Второе исследование заражения греческого йогурта с комбинацией Lactobacillus rhamnosus CFICC5366 и Lactobacillus paracasei CFICC14676
Для визуального исследования подавляющего эффекта комбинации Lactobacillus rhamnosus CFICC5366 и Lactobacillus paracasei CFICC14676 на плесень черного хлеба Rhizopus stolonifer греческий йогурт получали по существу следующим образом:
В пастеризованное молоко с 1,5% жира инокулировали коммерческую заквасочную культуру (FDVS YF-L901, которую можно получать из Chr. Flansen A/S, Denmark) при 0,02%. В молоко дополнительно инокулировали FIOLDBAC™ YM-B (10 DCU/100 л), с Lactobacillus rhamnosus штамм СНСС5366 (1х107 КОЕ/г), или комбиацию Lactobacillus rhamnosus штамм СНСС5366 (5х106 КОЕ/г) и Lactobacillus paracasei штамм CFICC14676 (5х106 КОЕ/г). Одну партию использовали в качестве контроля и инокулировали только заквасочной культурой.
Молоко ферментировали при 43°C±1°C до конечного рН 4,55 (6-7 ч). Затем йогурт охлаждали до 25°C±1°C с обратным давлением 2 бар (200000 Па) и хранили при 6°C±1°C.
Через сутки после получения йогурта Rhizopus stolonifer инокулировали в форме заражения поверхности в двух повторах стаканов йогурта посредством нанесения одного пятна на поверхность йогурта с намеченным заражением 100 спор/пятно. Рост плесени оценивали визуально после хранения в течение 42 суток при 7°C±1°C.
Результаты теста греческого йогурта представлены на фиг. 6, показывающей, что Rhizopus stolonifer хорошо растет на йогурте, полученном из молока, ферментированного только с заквасочной культурой (R, т.е. контроль) или с заквасочной культурой и культурой FIOLDBAC™ YM-B (YM-B). Однако, когда Lactobacillus rhamnosus CFICC5366 (5366) присутствовал, рост Rhizopus stolonifer был значительно подавлен. Когда Lactobacillus rhamnosus CFICC5366 и Lactobacillus paracasei CFICC14676 оба присутствовали во время ферментации молока (5366+14676), рост Rhizopus stolonifer был подавлен почти полностью.
Пример 7. Исследование заражения сметаны с Lactobacillus paracasei CFICC14676 и Lactobacillus rhamnosus CFICC12697 в комбинации
Для визуального исследования подавляющего эффекта комбинации Lactobacillus paracasei CFICC14676 и Lactobacillus rhamnosus CFICC12697 на рост различных видов плесени сметану получали по существу следующим образом:
Пастеризованное молоко с высоким содержанием жира инокулировали гетероферментативной коммерческой заквасочной культурой (F-DVS DSG-2000, которую можно получать из Chr. Flansen A/S, Denmark) при 0,01%. Молоко дополнительно инокулировали FIOLDBAC™ YM-B (10 DCU/100 л) или комбинацией Lactobacillus paracasei CHCC14676 (2,5х 106 KOE/г) и
Lactobacillus rhamnosus CHCC12697 (2,5х106 KOE/г). Одну партию использовали в качестве контроля и инокулировали только заквасочной культурой.
Молоко подвергали ферментации при 28°C±1°C до достижения рН 4,60+0,05, и сметану подвергали последующей обработке. Сметану перемешивали и охлаждали до 20°C±1°C и хранили при 7°C±1°C.
Через сутки после получения сметаны различные виды плесени инокулировали в форме заражения поверхности в двух повторах стаканов сметаны посредством нанесения одного пятна на поверхность
- 11 034173 сметаны с намеченной концентрацией 100 спор/пятно. Рост плесени оценивали визуально после хранения в течение 61 суток при 7°C±1°C.
Результаты теста сметаны представлены на фигуре 7, показывающей, что Penicillium brevicompactum (M1), Penicillium commune (M6), Aspergillus versicolor (M7) и Penicillium glabrum (M8) хорошо растут на сметане, полученной из молока, ферментированного только с заквасочной культурой (верхний ряд) или с заквасочной культурой и культурой HOLDBAC™ YM-B (средний ряд). В отличие от этого, когда Lactobacillus paracasei СНСС14676 и Lactobacillus rhamnosus CHCC12697 присутствовали во время ферментации молока (нижний ряд) рост всей тестированной плесени был подавлен.
Пример 8. Количественные определения подавляющего эффекта комбинации Lactobacillus paracasei CHCC14676 и Lactobacillus rhamnosus CHCC12697 против Debaryomyces hansenii в сметане
Для количественной оценки подавляющего эффекта комбинации Lactobacillus paracasei CFICC14676 и Lactobacillus rhamnosus CFICC12697 против Debaryomyces hansenii сметану получали по существу следующим образом:
Пастеризованное молоко с высоким содержанием жира инокулировали гетероферментативной коммерческой заквасочной культурой (F-DVS DSG-2000, которую можно получать из Chr. Flansen A/S, Denmark) при 0,01%. Молоко дополнительно инокулировали FIOLDBAC™ YM-B (10 DCU/100 л) или комбинацией Lactobacillus paracasei CFICC14676 (2,5x106 KOE/г) и
Lactobacillus rhamnosus CFICC12697 (2,5x106 KOE/г). Одну партию использовали в качестве контроля и инокулировали только заквасочной культурой.
Молоко подвергали ферментации при 28°C±1°C до достижения рН 4,60±0,05 и сметану подвергали последующей обработке. Сметану перемешивали и охлаждали до 20°C±1°C, и хранили при 7°C±1°C.
Через сутки после получения сметаны стаканы в двух повторах инокулировали 1,00 мл/стакан дрожжей с намеченными 20 KОЕ/г. Дрожжи равномерно распределяли в сметане. Стаканы хранили под крышкой при 7°C±1°C и анализировали в подходящие интервалы уровень заражения D. hansenii посредством посева 1 мл сметаны и дальнейших соответствующих 1-кратных разведений, полученных в солевом растворе пептона, на агар с дрожжевым экстрактом, глюкозой и хлорамфениколом (YGC) с последующей аэробной инкубацией в течение 5 суток при 25°C.
Как проиллюстрировано на фиг. 8, рост D. hansenii был подавлен в присутствии комбинации Lactobacillus paracasei CFICC14676 и Lactobacillus rhamnosus CFICC12697 при инокуляции вместе с заквасочной культурой DSG-2000 перед ферментацией. Штамм вызывал значительно более высокое подавление, чем коммерческая культура, HOLDBAC™ YM-B.
Пример 9. Исследование заражения белого рассольного сыра с Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 и Lactobacillus paracasei СНСС14676 в комбинации
Для количественной оценки подавляющего эффекта Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 и Lactobacillus paracasei СНСС14676 в комбинации против Saccharomyces cerevisiae, получали белый рассольный сыр:
Пастеризованное и стандартизированное молоко инокулировали коммерческой заквасочной культурой (FD-DVS SafeIT-1, которую можно получать из Chr. Hansen A/S, Denmark) при 40 Ед. на 1000 л молока. Молоко дополнительно инокулировали HOLDBAC™ YM-B (10 DCU/100 л) или комбинацией Lactobacillus rhamnosus штамма СНСС5366 (5x106 КОЕ/г) и Lactobacillus paracasei штамма СНСС14676 (5x106 КОЕ/г). Одну партию использовали в качестве контроля и инокулировали только заквасочной культурой. Молоко обрабатывали сычужным ферментом при 36°C±1°C с использованием Chy-Max plus (которую можно получать из Chr. Hansen A/S, Denmark) при 220 мл на 1000 л в течение 90 мин перед нарезанием. При рН 6,0 сырный сгусток подавали насосом к плесени и оставляли для стекания жидкости до конечного 4,8-4,7 (20-24 ч). Сыры помещали в банки с холодным рассолом (8%) и хранили при 5°C±1°C.
Через сутки после получения белого рассольного сыра в банки инокулировали дрожжи в двух повторах с намеченными 20 КОЕ/мл. Дрожжи равномерно распределяли в рассоле. Банки хранили под крышкой при 7°C±1°C в течение вплоть до 40 суток, и по 10 г анализировали в подходящие интервалы по уровню заражения Saccharomyces cerevisiae посредством посева соответствующих 1-кратных разведений, полученных в солевом растворе пептона, на агар с дрожжевым экстрактом, глюкозой и хлорамфениколом (YGC) с последующей аэробной инкубацией в течение 5 суток при 25°C.
Как проиллюстрировано на фиг. 9, рост Saccharomyces cerevisiae был подавлен в присутствии Lactobacillus rhamnosus СНСС5366 и Lactobacillus paracasei CHCC14676 в комбинации при инокуляции вместе с заквасочной культурой SafeIT-1. Штаммы вызывали значительно более высокое подавление, чем коммерчески доступная культура, HOLDBAC™ YM-B.
Пример 10. Второе исследование заражения белого рассольного сыра с Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 и Lactobacillus paracasei CHCC14676 в комбинации
Для количественной оценки подавляющего эффекта Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 и Lactobacillus paracasei СНСС14676 в комбинации против Kluyveromyces marxianus получали белый рассольный сыр, как описано в примере 1, за исключением того, что в банки инокулировали Kluyveromyces marxianus
- 12 034173 в качестве заражения дрожжами.
Как проиллюстрировано на фиг. 10, рост Kluyveromyces marxianus был подавлен в присутствии Lactobacillus rhamnosus СНСС5366 и Lactobacillus paracasei CHCC14676 в комбинации при инокуляции вместе с заквасочной культурой SafeIT-1. Штаммы вызывали значительно более высокое подавление, чем коммерчески доступная культура, HOLDBAC™ YM-B.
Пример 11. Второе исследование заражения белого рассольного сыра с Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 и Lactobacillus paracasei CHCC14676 в комбинации
Для визуального исследования подавляющего эффекта Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 и Lactobacillus paracasei СНСС14676 в комбинации против P. commune получали белый рассольный сыр, как описано в примере 1.
Через 7 суток после получения белого рассольного сыра сыр вынимали из рассола и P. commune инокулировали в двух повторах образцов сыра в форме заражения поверхности с тремя пятнами на поверхности сыра с намеченными 100 спорами/пятно. Рост двух различных изолятов P. commune оценивали визуально после хранения в течение 12 суток при 7°C±1°C и затем 16 суток при 12°C±1°C.
Результаты белого рассольного сыра представлены на фиг. 11, показывающей, что два изолята P. commune хорошо растут на белом рассольном сыре, полученном из молока, инокулированного только заквасочной культурой (слева). В отличие от этого, когда Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 и Lactobacillus paracasei СНСС14676 присутствовали во время изготовления сыра (справа), рост P. commune был сильно подавлен.
Пример 12. Исследование заражения йогурта с Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 и СНСС14676 против Penicillium paneum
Для визуального исследования подавляющего эффекта Lactobacillus rhamnosus штамма СНСС5366 отдельно или в комбинации с Lactobacillus paracasei CHCC14676 на плесень Р. paneum получали йогурт с 1,5% жира
Гомогенизированное молоко (1,5% жира) подвергали тепловой обработке при 95°C±1°C в течение 5 мин в 1 л бутылях в водяной бане и немедленно охлаждали. Коммерческую заквасочную культуру (FDVS YF-L901, которую можно получать из Chr. Hansen A/S, Denmark) инокулировали при 0,02%. В молоко дополнительно инокулировали HOLDBAC™ YM-B (20DCU/100 л), с Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 (1х107 KOE/мл) отдельно или комбинацию Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 (5х106 КОЕ/мл) и Lactobacillus paracasei CHCC14676 (5х106 KOE/мл). Одну бутыль использовали в качестве контроля и инокулировали только заквасочной культурой.
Молоко подвергали ферментации при 43°C±1°C до достижения рН 4,60±0,1. Полученный йогурт разливали в стаканы (100 г) и хранили при 7°C±1°C.
Через сутки после получения йогурта различные виды плесени инокулировали в форме заражения поверхности в двух повторах стаканов йогурта с одним пятном на поверхности йогурта с намеченными 100 спорами/пятно. Рост плесени оценивали визуально после хранения в течение 28 суток при 7°C±1°C
Результат теста йогурта представлен на фиг. 12, показывающей, что Р. рапеит хорошо растет на йогурте, полученном из молока, ферментированного только с заквасочной культурой YF-L901 или с заквасочной культурой и культурой HOLDBAC™ YM-B. В отличие от этого, когда Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 присутствовал во время ферментации молока, рост Р. рапеит был сильно снижен, и комбинация Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 и Lactobacillus paracasei CHCC14676 вызывала даже более сильное подавление роста Р. рапеит.
Пример 13. Исследование заражения йогурта с Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 и СНСС14676 при различных температурах хранения
Для визуального исследования подавляющего эффекта Lactobacillus rhamnosus штамма СНСС5366 отдельно или в комбинации с Lactobacillus paracasei CHCC14676 на плесень Р. crustosum при различных температурах хранения получали йогурт с 1,5% жира:
Гомогенизированное молоко (1,5% жира) подвергали тепловой обработке при 95°C±1°C в течение 5 мин в 1 л бутылях в водяной бане и немедленно охлаждали. Коммерческую заквасочную культуру (FDVS YF-L901, которую можно получать из Chr. Hansen A/S, Denmark) инокулировали при 0,02%. Молоко дополнительно инокулировали HOLDBAC™ YM-B (20 DCU/100 л), Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 (1х107 KOE/мл) отдельно или комбинацией Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 (5х106 KOE/мл) и Lactobacillus paracasei CHCC14676 (5х106 KOE/мл). Одну бутыль использовали в качестве контроля и инокулировали только заквасочной культурой.
Молоко подвергали ферментации при 43°C±1°C до достижения рН 4,60±0,1. Полученный йогурт разливали в стаканы (100 г) и хранили при 7°C±1°C.
Через сутки после получения йогурта Penicillium crustosum инокулировали в форме заражения поверхности в двух повторах стаканов йогурта с одним пятном на поверхности йогурта с намеченными 100 спорами/пятно. Рост плесени оценивали визуально после хранения в течение 36 суток при 7°C±1°C, 12°C±1°C или 22°C±1°C.
- 13 034173
Результаты теста йогурта представлены на фиг. 13, показывающей, что P. crustosum хорошо растет на йогурте, полученном из молока, ферментированного только с заквасочной культурой YF-L901 или с заквасочной культурой и культурой FIOLDBAC™ YM-B при всех температурах хранения. В отличие от этого, когда Lactobacillus rhamnosus CHCC5366, отдельно или в комбинации с Lactobacillus paracasei CHCC14676, присутствовал во время ферментации молока, рост P. crustosum был полностью предотвращен при хранении как при 7°C±1°C, так и при 12°C±1°C в течение 36 суток. При хранении при 22°C±1°C рост P. crustosum был сильно снижен в присутствии Lactobacillus rhamnosus СНСС5366 и даже сильней в присутствии комбинации Lactobacillus rhamnosus CHCC5366 и Lactobacillus paracasei СНСС14676.
Депозиты и заключение эксперта
Заявитель ходатайствует, чтобы образец депонированных микроорганизмов, указанных ниже, мог становиться доступным только для эксперта, до даты выдачи патента.
Lactobacillus paracasei штамм СНСС14676 депонирован 2012-02-02 в German Collection of Microorganisms and Cell Cultures (Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH; DSMZ), Inhoffenstr. 7B, D-38124 Braunschweig, и ему присвоен № доступа: DSM25612.
Lactobacillus rhamnosus штамм СНСС5366 депонирован 2009-10-14 в German Collection of Microorganisms and Cell Cultures (Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH; DSMZ), Inhoffenstr. 7B, D-38124 Braunschweig, и ему присвоен № доступа: DSM23035.
Lactobacillus rhamnosus штамм СНСС12697 депонирован 2011-03-01 в German Collection of Microorganisms and Cell Cultures (Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH; DSMZ), Inhoffenstr. 7B, D-38124 Braunschweig, и ему присвоен № доступа: DSM24616.
Lactobacillus rhamnosus штамм СНСС14226 депонирован 2011-03-15 в German Collection of Microorganisms and Cell Cultures (Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH; DSMZ), Inhoffenstr. 7B, D-38124 Braunschweig, и ему присвоен № доступа: DSM24652.
Депонирование выполнено согласно положениям Будапештского соглашения о международном признании депонирования микроорганизмов для целей патентной процедуры.
Ссылки
US 2011/0045134
ЕР 1442113
ЕР 11161609.0
Kosikowski F.V. and Mistry V.V., Cheese and Fermented Milk Foods, 1997, 3rd Ed. F.V. Kosikowski, L.L.C. Westport, CT

Claims (14)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Противогрибковая композиция, содержащая штамм Lactobacillus paracasei DSM25612.
  2. 2. Противогрибковая композиция по п.1, дополнительно содержащая по меньшей мере один штамм Lactobacillus rhamnosus.
  3. 3. Противогрибковая композиция по п.2, в которой по меньшей мере один штамм Lactobacillus rhamnosus выбран из штаммов DSM24616, DSM24652, DSM23035.
  4. 4. Пищевой, кормовой или фармацевтический продукт, содержащий противогрибковую композицию по любому из пп.1-3.
  5. 5. Пищевой продукт по п.4, выбранный из фруктов и продуктов переработки фруктов, овощей и продуктов переработки овощей, зерна и продуктов переработки зерна, молочных продуктов, мяса, домашней птицы, морепродуктов и их смесей.
  6. 6. Пищевой продукт по п.5, представляющий собой молочный продукт.
  7. 7. Пищевой молочный продукт по п.6, представляющий собой мезофильный или термофильный кисломолочный продукт, такой как йогурт или сметана.
  8. 8. Способ получения пищевого, кормового или фармацевтического продукта по п.4, включающий добавление к исходному пищевому, кормовому или фармацевтическому продукту противогрибковой композиции по любому из пп.1-3, причем в процессе получения концентрация штамма Lactobacillus paracasei остается постоянной или увеличивается.
  9. 9. Способ по п.8, согласно которому концентрация штамма Lactobacillus paracasei составляет по меньшей мере 1х106 KOE в пересчете на 1 г или 1 мл пищевого, кормового или фармацевтического продукта или по меньшей мере 1х105 KOE в пересчете на 1 см2 поверхности пищевого, кормового или фармацевтического продукта.
  10. 10. Способ по п.7, согласно которому концентрация каждого из штаммов Lactobacillus rhamnosus и Lactobacillus paracasei составляет по меньшей мере 1х106 KOE в пересчете на 1 г или 1 мл пищевого, кормового или фармацевтического продукта или по меньшей мере 1х105 KOE в пересчете на 1 см2 поверхности пищевого, кормового или фармацевтического продукта.
  11. 11. Способ по любому из пп.8-10, дополнительно включающий одну или несколько стадий ферментации.
  12. 12. Способ по п.11, включающий ферментацию исходного продукта, представляющего собой мо
    - 14 034173 лочный субстрат, с заквасочной культурой, содержащей по меньшей мере один штамм, выбранный из Lactobacillus, Streptococcus, Lactococcus или Leuconostoc.
  13. 13. Применение противогрибковой композиции по любому из пп.1-3 для получения пищевого, кормового или фармацевтического продукта.
  14. 14. Применение противогрибковой композиции по любому из пп.1-3 для подавления роста дрожжей и плесени.
EA201491848A 2012-04-09 2013-04-09 Противогрибковая композиция, содержащая штамм lactobacillus paracasei EA034173B1 (ru)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP12163509 2012-04-09
PCT/EP2012/056384 WO2012136830A1 (en) 2011-04-08 2012-04-09 Synergistic antimicrobial effect
EP12168971 2012-05-22
PCT/EP2013/057400 WO2013153070A1 (en) 2012-04-09 2013-04-09 Bioprotection using lactobacillus paracasei strains

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201491848A1 EA201491848A1 (ru) 2015-01-30
EA034173B1 true EA034173B1 (ru) 2020-01-14

Family

ID=49327138

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201491848A EA034173B1 (ru) 2012-04-09 2013-04-09 Противогрибковая композиция, содержащая штамм lactobacillus paracasei

Country Status (16)

Country Link
US (2) US10059919B2 (ru)
EP (1) EP2836588B1 (ru)
JP (1) JP6430930B2 (ru)
KR (1) KR101949372B1 (ru)
CN (1) CN104254599B (ru)
BR (1) BR112014024014B1 (ru)
DK (1) DK2836588T3 (ru)
EA (1) EA034173B1 (ru)
ES (1) ES2623768T3 (ru)
HK (1) HK1206390A1 (ru)
HU (1) HUE034411T2 (ru)
MX (1) MX351627B (ru)
PL (1) PL2836588T3 (ru)
PT (1) PT2836588T (ru)
UA (1) UA115331C2 (ru)
WO (1) WO2013153070A1 (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2023122035A3 (en) * 2021-12-20 2023-08-24 Solarea Bio, Inc. Compositions and methods for producing enhanced crops with probiotics

Families Citing this family (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9462817B2 (en) 2011-02-28 2016-10-11 Franklin Foods Holdings Inc. Processes for making cheese products utilizing denatured acid whey proteins
US9635870B2 (en) 2011-02-28 2017-05-02 Franklin Foods Holdings Inc. Direct-set cheese
JP6073857B2 (ja) 2011-04-08 2017-02-01 セーホーエル.ハンセン アクティーゼルスカブ 合成抗微生物効果
HUE034259T2 (en) * 2012-04-09 2018-02-28 Chr Hansen As Biological protection using Lactobacillus rhamnosus strains
DK2836588T3 (en) 2012-04-09 2017-05-22 Chr Hansen As Bioprotection using Lactobacillus paracasei strains
GB201409468D0 (en) * 2014-05-28 2014-07-09 Dupont Nutrition Biosci Aps Bacterium
KR101532207B1 (ko) * 2014-10-02 2015-06-30 컴퍼니맨 주식회사 저온에서의 숙성 및 유청분리를 통한 식감이 향상된 농후 발효유의 제조방법
ITUB20152376A1 (it) * 2015-07-07 2017-01-09 Alfasigma Spa Lactobacillus paracasei per la produzione di acido linoleico coniugato, preparazioni nutrizionali e farmaceutiche che lo comprendono e loro uso
UA127431C2 (uk) * 2015-08-31 2023-08-23 Кр. Гансен А/С Бактерія lactobacillus rhamnosus з протигрибковою активнiстю
BR112018003474A2 (pt) * 2015-08-31 2018-09-25 Chr Hansen As bactérias lactobacillus fermentum que reduzem a concentração de acetaldeído
DK3344052T3 (da) * 2015-08-31 2019-11-11 Chr Hansen As Lactobacillus fermentum-bakterier, som inhiberer eftersyrning
EP3180990A1 (en) * 2015-12-16 2017-06-21 Neste Oyj Method for preparing a composition having antimicrobial activity
EP3279312B1 (en) * 2016-08-02 2019-07-31 DSM IP Assets B.V. Bioprotection of dairy products
CN110741073A (zh) * 2017-06-09 2020-01-31 曾根农场股份公司 新乳酸菌及其用途
KR101972838B1 (ko) * 2017-07-25 2019-04-29 호서대학교 산학협력단 냉이로부터 추출된 항진균 조성물 및 이를 포함하는 조성물의 제조방법
MX2020010846A (es) 2018-04-19 2020-11-09 Chr Hansen As Inhibicion del crecimiento de hongos mediante el agotamiento de manganeso.
US20220151267A1 (en) * 2019-04-16 2022-05-19 Locus Ip Company, Llc Microbe-Based Emulsifying Food Additives
AR120265A1 (es) * 2019-10-23 2022-02-09 Chr Hansen As Composición bacteriana para controlar el deterioro por hongos y su uso
WO2022115709A2 (en) * 2020-11-30 2022-06-02 January, Inc. Methods and composition for treating metabolic syndrome
EP4248761A1 (en) * 2022-03-24 2023-09-27 Chr. Hansen A/S Yeast inhibition with bacillus subtilis via iron depletion
WO2023232677A1 (en) * 2022-05-31 2023-12-07 Lactobio A/S Strains, compositions and methods of use
CN118580982A (zh) * 2023-03-01 2024-09-03 重庆市天友乳业股份有限公司 副干酪乳杆菌ty-f15及其应用

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0302300A2 (en) * 1987-08-06 1989-02-08 Microlife Technics, Inc. Process for producing novel yeast and mold inhibiting products
EP0576780A2 (en) * 1992-06-10 1994-01-05 Valio Oy A novel microorganism strain, bacterial preparations comprising said strain, and use of said strain and preparations for the controlling of yeasts and moulds
US5965414A (en) * 1985-11-04 1999-10-12 Microlife Technics, Inc. Process for producing yeast and mold inhibiting products with lactobacillus
EP1308506A1 (en) * 2001-11-06 2003-05-07 Eidgenössische Technische Hochschule Zürich Mixtures of Propionibacterium jensenii and Lactobacillus sp. with antimicrobial activities for use as a natural preservation system
WO2009098411A2 (fr) * 2007-12-04 2009-08-13 Compagnie Gervais Danone Utilisation de l. casei ssp. paracasei comme antifongique
WO2012136830A1 (en) * 2011-04-08 2012-10-11 Chr. Hansen A/S Synergistic antimicrobial effect

Family Cites Families (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4956177A (en) 1985-11-04 1990-09-11 Microlife Technics, Inc. Method for inhibiting fungi
JP3001338B2 (ja) * 1992-06-10 2000-01-24 ヴァリオ・マイイェリーン・ケスクソスースリーケ 新規の微生物株、その菌株を含む細菌製剤、および酵母およびカビの制御のための上記菌株および製剤の使用
FR2758051B1 (fr) * 1997-01-06 1999-12-17 Cobiotex Procedes d'eradication systematique du portage d'agents pathogenes par des animaux et compositions mises en oeuvre dans ces procedes
UA78547C2 (en) 2002-02-21 2007-04-10 Nestle Sa Light-protective composition for skin intended for oral administration
RU2309760C2 (ru) 2002-02-21 2007-11-10 Сосьете Де Продюи Нестле С.А. Композиция для фотопротекции кожи
FI113057B (fi) 2002-11-04 2004-02-27 Valio Oy Menetelmä hiivojen kasvun estämiseksi
ITRM20040166A1 (it) 2004-03-31 2004-06-30 Alberto Cresci Ceppi batterici lab con proprieta' probiotiche e composizioni che contengono gli stessi.
US20100166721A1 (en) 2006-06-09 2010-07-01 Fabiola Masri Probotic compositions and uses thereof
US20080107699A1 (en) 2006-10-25 2008-05-08 Mark Spigelman Method of using topical probiotics for the inhibition of surface contamination by a pathogenic microorganism and composition therefor
DK1992351T3 (en) 2007-05-18 2016-06-06 Nestec Sa Lactobacillus johnsonii for the prevention of post-surgical infection
CN101768559B (zh) * 2008-12-31 2012-03-07 生展生物科技股份有限公司 副干酪乳杆菌副干酪亚种菌株及其抑菌组合物和用途
CN101613667B (zh) 2009-07-23 2011-02-02 中国科学院微生物研究所 一种制备l-乳酸的方法及其专用菌剂
WO2011141762A1 (en) 2010-05-12 2011-11-17 Compagnie Gervais Danone Synergistic fermentation of lactobacillus rhamnosus and lactobacillus paracasei subsp paracasei
HUE034259T2 (en) * 2012-04-09 2018-02-28 Chr Hansen As Biological protection using Lactobacillus rhamnosus strains
DK2836588T3 (en) 2012-04-09 2017-05-22 Chr Hansen As Bioprotection using Lactobacillus paracasei strains

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5965414A (en) * 1985-11-04 1999-10-12 Microlife Technics, Inc. Process for producing yeast and mold inhibiting products with lactobacillus
EP0302300A2 (en) * 1987-08-06 1989-02-08 Microlife Technics, Inc. Process for producing novel yeast and mold inhibiting products
EP0576780A2 (en) * 1992-06-10 1994-01-05 Valio Oy A novel microorganism strain, bacterial preparations comprising said strain, and use of said strain and preparations for the controlling of yeasts and moulds
EP1308506A1 (en) * 2001-11-06 2003-05-07 Eidgenössische Technische Hochschule Zürich Mixtures of Propionibacterium jensenii and Lactobacillus sp. with antimicrobial activities for use as a natural preservation system
WO2009098411A2 (fr) * 2007-12-04 2009-08-13 Compagnie Gervais Danone Utilisation de l. casei ssp. paracasei comme antifongique
WO2012136830A1 (en) * 2011-04-08 2012-10-11 Chr. Hansen A/S Synergistic antimicrobial effect

Non-Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Danisco A/S: "HOLDBAC-TM YM Protective Cultures", Danisco A/S 2008, pages 1-4, XP055062364, Retrieved from the Internet: URL:www.foodnavigator.com/content/.../Daniscocultures-FN-wk14-2008.pdf‎ [retrieved on 2013-05-08], the whole document *
HASSAN, Y.I. BULLERMAN, L.B.: "Antifungal activity of Lactobacillus paracasei ssp. tolerans isolated from a sourdough bread culture", INTERNATIONAL JOURNAL OF FOOD MICROBIOLOGY, ELSEVIER BV, NL, vol. 121, no. 1, 17 November 2007 (2007-11-17), NL, pages 112 - 115, XP022393063, ISSN: 0168-1605, DOI: 10.1016/j.ijfoodmicro.2007.11.038 *
NALAYINI THARMARAJ, NAGENDRA P. SHAH: "Antimicrobial effects of probiotic bacteria against selected species of yeasts and moulds in cheese-based dips", INTERNATIONAL JOURNAL OF FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY, vol. 44, no. 10, 1 October 2009 (2009-10-01), pages 1916 - 1926, XP055036827, ISSN: 09505423, DOI: 10.1111/j.1365-2621.2009.01986.x *
SCHNURER, J. ; MAGNUSSON, J.: "Antifungal lactic acid bacteria as biopreservatives", TRENDS IN FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY, ELSEVIER SCIENCE PUBLISHERS, GB, vol. 16, no. 1-3, 1 January 2005 (2005-01-01), GB, pages 70 - 78, XP027806611, ISSN: 0924-2244 *
SCHWENNINGER S M: "Detection of antifungal properties in Lactobacillus paracasei subsp. paracasei SM20, SM29, and SM63 and molecular typing of the strains.", JOURNAL OF FOOD PROTECTION, INTERNATIONAL ASSOCIATION FOR FOOD PROTECTION, US, vol. 68, no. 1, 1 January 2005 (2005-01-01), US, pages 111 - 119, XP008094232, ISSN: 0362-028X *
SCHWENNINGER, S.M. MEILE, L.: "A Mixed Culture of Propionibacterium jensenii and Lactobacillus paracasei subsp. paracasei Inhibits Food Spoilage Yeasts", SYSTEMATIC AND APPLIED MICROBIOLOGY., URBAN & FISCHER, AMSTERDAM, NL, vol. 27, no. 2, 1 January 2004 (2004-01-01), AMSTERDAM, NL, pages 229 - 237, XP004957580, ISSN: 0723-2020, DOI: 10.1078/072320204322881853 *
VOULGARI, K. ; HATZIKAMARI, M. ; DELEPOGLOU, A. ; GEORGAKOPOULOS, P. ; LITOPOULOU-TZANETAKI, E. ; TZANETAKIS, N.: "Antifungal activity of non-starter lactic acid bacteria isolates from dairy products", FOOD CONTROL., BUTTERWORTH, LONDON., GB, vol. 21, no. 2, 1 February 2010 (2010-02-01), GB, pages 136 - 142, XP026574807, ISSN: 0956-7135, DOI: 10.1016/j.foodcont.2009.04.007 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2023122035A3 (en) * 2021-12-20 2023-08-24 Solarea Bio, Inc. Compositions and methods for producing enhanced crops with probiotics

Also Published As

Publication number Publication date
US20190010445A1 (en) 2019-01-10
WO2013153070A1 (en) 2013-10-17
PL2836588T3 (pl) 2017-08-31
US20160068800A9 (en) 2016-03-10
CN104254599B (zh) 2018-01-23
US10767158B2 (en) 2020-09-08
MX351627B (es) 2017-10-23
EP2836588B1 (en) 2017-03-01
US20150064152A1 (en) 2015-03-05
MX2014012065A (es) 2014-11-21
EP2836588A1 (en) 2015-02-18
JP2015519042A (ja) 2015-07-09
UA115331C2 (uk) 2017-10-25
JP6430930B2 (ja) 2018-11-28
KR101949372B1 (ko) 2019-02-18
KR20140148480A (ko) 2014-12-31
US10059919B2 (en) 2018-08-28
EA201491848A1 (ru) 2015-01-30
HK1206390A1 (en) 2016-01-08
CN104254599A (zh) 2014-12-31
BR112014024014B1 (pt) 2022-03-03
HUE034411T2 (en) 2018-02-28
BR112014024014A2 (ru) 2017-06-20
ES2623768T3 (es) 2017-07-12
PT2836588T (pt) 2017-05-25
DK2836588T3 (en) 2017-05-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US10767158B2 (en) Bioprotection using lactobacillus paracasei strains
US10993974B2 (en) Synergistic antimicrobial effect
EP2836587B1 (en) Bioprotection using lactobacillus rhamnosus strains
US11096396B2 (en) Lactobacillus fermentum bacteria with antifungal activity

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG TJ TM