EA029972B1 - Способы получения полипептидных композиций - Google Patents

Способы получения полипептидных композиций Download PDF

Info

Publication number
EA029972B1
EA029972B1 EA201391136A EA201391136A EA029972B1 EA 029972 B1 EA029972 B1 EA 029972B1 EA 201391136 A EA201391136 A EA 201391136A EA 201391136 A EA201391136 A EA 201391136A EA 029972 B1 EA029972 B1 EA 029972B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
polypeptide
bei
buz
run
lyophilized
Prior art date
Application number
EA201391136A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201391136A1 (ru
Inventor
Джеймс Кранц
Джозеф Ринелла
Original Assignee
ГЛЭКСОСМИТКЛАЙН ЭлЭлСи
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by ГЛЭКСОСМИТКЛАЙН ЭлЭлСи filed Critical ГЛЭКСОСМИТКЛАЙН ЭлЭлСи
Publication of EA201391136A1 publication Critical patent/EA201391136A1/ru
Publication of EA029972B1 publication Critical patent/EA029972B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • C07K1/02—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length in solution
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39591—Stabilisation, fragmentation
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/22—Hormones
    • A61K38/26—Glucagons
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/22—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against growth factors ; against growth regulators
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/24—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
    • C07K16/244—Interleukins [IL]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2878—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the NGF-receptor/TNF-receptor superfamily, e.g. CD27, CD30, CD40, CD95
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2887—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against CD20
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/569—Single domain, e.g. dAb, sdAb, VHH, VNAR or nanobody®

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Abstract

Изобретение относится к способу получения полипептидной композиции, который включает объединение полипептида с добавкой трет-бутанола с образованием жидкой смеси и лиофилизацию жидкой смеси с получением лиофилизированной полипептидной композиции, где жидкая смесь содержит от приблизительно 2 до приблизительно 5 об.% трет-бутанола. Также представлен способ получения жидкой полипептидной композиции, включающий объединение полипептида с трет-бутанолом с образованием жидкой смеси, лиофилизацию жидкой смеси для получения лиофилизированной полипептидной композиции, получение лиофилизированного полипептида и восстановление лиофилизированного полипептида достаточным количеством фармацевтически приемлемого диспергирующего средства с получением жидкой полипептидной композиции. Кроме того, представлен способ уменьшения времени восстановления лиофилизированной полипептидной композиции, который включает лиофилизацию жидкой смеси и восстановление лиофилизированного полипептида достаточным количеством фармацевтически приемлемого диспергирующего средства до лиофилизированной полипептидной композиции с получением жидкой полипептидной композиции, где время восстановления полипептида, лиофилизированного в присутствии добавки трет-бутанола, является меньше, чем время восстановления аналогичного полипептида, лиофилизированного при отсутствии добавки трет-бутанола.

Description

Изобретение относится к способу получения полипептидной композиции, который включает объединение полипептида с добавкой трет-бутанола с образованием жидкой смеси и лиофилизацию жидкой смеси с получением лиофилизированной полипептидной композиции, где жидкая смесь содержит от приблизительно 2 до приблизительно 5 об.% трет-бутанола. Также представлен способ получения жидкой полипептидной композиции, включающий объединение полипептида с трет-бутанолом с образованием жидкой смеси, лиофилизацию жидкой смеси для получения лиофилизированной полипептидной композиции, получение лиофилизированного полипептида и восстановление лиофилизированного полипептида достаточным количеством фармацевтически приемлемого диспергирующего средства с получением жидкой полипептидной композиции. Кроме того, представлен способ уменьшения времени восстановления лиофилизированной полипептидной композиции, который включает лиофилизацию жидкой смеси и восстановление лиофилизированного полипептида достаточным количеством фармацевтически приемлемого диспергирующего средства до лиофилизированной полипептидной композиции с получением жидкой полипептидной композиции, где время восстановления полипептида, лиофилизированного в присутствии добавки трет-бутанола, является меньше, чем время восстановления аналогичного полипептида, лиофилизированного при отсутствии добавки трет-бутанола.
029972
Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к способам получения полипептидных композиций, а также к способу уменьшения времени восстановления лиофилизированной полипептидной композиции.
Уровень техники, предшествующий изобретению
Лиофилизация представляет собой способ, которым удаляют растворитель из раствора с образованием твердого вещества или порошка, который является стабильным и более удобным для хранения при повышенной температуре по сравнению с жидкостью. Лиофилизация, также известная как сушка вымораживанием, включает вымораживание с последующей сублимацией. Получаемое лиофилизированное вещество можно хранить без охлаждения, уменьшая затраты на хранение и транспортировку вещества, а также необходимое для продукта место для хранения. Она также может уменьшать массу продукта, что аналогичным образом снижает затраты на перевозку и связанные с ней затраты. Лиофилизация является особенно пригодной для сохранения и хранения различных биологических молекул, т.к. она увеличивает их срок хранения.
Биологические молекулы труднее стабилизировать посредством состава, чем низкомолекулярные соединения вследствие ряда химических групп и зависимости стабильности от сохранения нативной укладки. По этой причине многие коммерческие биологические молекулы являются лиофилизированными. В основном лиофилизация улучшает стабильность посредством (ί) удаления воды (поскольку многие химические деградации биологических веществ являются гидролитическими) и (ίί) уменьшения общей подвижности системы (поскольку динамическое движение боковых цепей и молекул является необходимым для возникновения событий химической и физической деградации).
Лиофилизированные биологические молекулы перед использованием восстанавливают часто в тех же контейнерах, в которых их лиофилизировали и хранили. Короткое время восстановления является предпочтительным для врачей и пациентов. Если время восстановления лиофилизированной биологической молекулы является слишком длинным, это увеличивает время получения, таким образом затрудняя введение многим пациентам в одних и тех же условиях. Кроме того, многие биологические молекулы конструируют для введения самими пациентами. Более короткое время восстановления способствует тому, что пациенты полностью восстанавливают биологическую молекулу перед введением, таким образом улучшая безопасность и эффективность.
Предшествующие попытки уменьшения времени восстановления были сосредоточены преимущественно на составе восстанавливающего буфера. В противоположность этому, настоящее изобретение относится к добавлению добавки трет-бутанола к составу буфера, используемого для лиофилизации биологической молекулы. Таким образом, существует необходимость в способах для уменьшения времени восстановления лиофилизированной биологической молекулы.
Сущность изобретения
Настоящее изобретение относится к способу получения полипептидной композиции, включающему объединение полипептида с добавкой трет-бутанола с образованием жидкой смеси и лиофилизацию жидкой смеси с получением лиофилизированной полипептидной композиции.
Настоящее изобретение также относится к способу уменьшения времени восстановления лиофилизированной полипептидной композиции, включающему а) лиофилизацию жидкой смеси, содержащей полипептид, где жидкая смесь содержит добавку трет-бутанола, и Ь) восстановление лиофилизированного полипептида достаточным количеством фармацевтически приемлемого диспергирующего средства для лиофилизированной полипептидной композиции с получением жидкой полипептидной композиции, где время восстановления полипептида, лиофилизированного в присутствии добавки трет-бутанола, является меньшим, чем время восстановления аналогичного полипептида, лиофилизированного при отсутствии добавки трет-бутанола.
Настоящее изобретение также относится к способу получения жидкой полипептидной композиции, включающему получение лиофилизированного полипептида, получаемого способом по настоящему изобретению, и восстановление лиофилизированного полипептида достаточным количеством фармацевтически приемлемого диспергирующего средства с получением жидкой полипептидной композиции.
Краткое описание чертежей
Фиг. 1 - графики времени восстановления лиофилизата способом встряхивания.
Фиг. 2 - графики времени восстановления лиофилизата способом отстаивания.
Фиг. 3 - графики времени восстановления лиофилизата в зависимости от номера образца. (А) Диаграммы размаха, суммирующие среднее время восстановления всех тестов в зависимости от номера образца. Граница ближайшего к нулю блока обозначает 25-й процентиль, линия в блоке отмечает медиану, и граница дальше всего расположенного от нуля блока обозначает 75-й процентиль. "Усы" (величины ошибок) выше и ниже блока обозначают 90- и 10-й процентиль. Выбросы ниже 10-го или выше 90-го процентилей нанесены на график в виде символов. (В) Все значения времени восстановления лиофилизата, нанесенные на график в зависимости от номера образца.
Фиг. 4 - графики времени восстановления лиофилизата в зависимости от номера образца, определяемые химиком-аналитиком и способом восстановления.
Фиг. 5 - аминокислотная последовательность альбиглютида (δΕΟ ΙΌ N0:1).
- 1 029972
Фиг. 6 - гистограмма сравнения конечных точек восстановления образцов, лиофилизированных с добавлением 2% трет-ВиОН или без него. Столбики представляют собой среднее значение всех тестов, и "усы" представляют собой стандартное отклонение всех тестов зависимости от типа образца.
Фиг. 7 - гистограмма сравнения конечных точек восстановления образцов, лиофилизированных с добавлением 2% трет-ВиОН или без него. Столбики представляют собой среднее значение всех тестов, и усы представляют собой стандартное отклонение всех тестов в зависимости от типа образца.
Фиг. 8 - аминокислотная последовательность тяжелой (8ЕО ГО N0:3) и легкой цепей (8Е0 ГО N0:4) тАЬ к N000.
Фиг. 9 - аминокислотная последовательность бАЬ к ΤΝΡΚ1 (8Е0 ГО N0:5).
Фиг. 10 - аминокислотная последовательность ГО18 (8Е0 ГО N0:6).
Фиг. 11 - аминокислотная последовательность тяжелой (8Е0 ГО N0:7) и легкой цепей (8Е0 ГО N0:8) антитела к 1Ь5.
Фиг. 12 - аминокислотная последовательность доменов УН (8Е0 ГО N0:9) и УЪ (8Е0 ГО N0:10) антитела к ΟΌ20.
Подробное описание изобретения
Настоящее изобретение в числе прочего относится к способам получения и способам применения составов для лиофилизации. Авторы изобретения открыли, что при добавлении добавки трет-бутанола к составу для лиофилизации полипептида время восстановления лиофилизированного полипептида уменьшается.
Изобретение относится к ряду способов, которые можно использовать для получения полипептидной композиции, включающих объединение полипептида с добавкой трет-бутанола с образованием жидкой смеси и лиофилизацию жидкой смеси с получением лиофилизированной полипептидной композиции.
В настоящем описании раскрыты способы лиофилизации полипептидов из жидких растворов и продукты, содержащие лиофилизированные полипептиды, получаемые из таких лиофилизированных жидких растворов. В определенных вариантах осуществления добавку трет-бутанола растворяют в водном растворе, содержащем полипептид, и лиофилизируют для обеспечения твердых композиций, содержащих лиофилизированный полипептид. В определенных вариантах осуществления эти твердые композиции, содержащие лиофилизированный полипептид, являются стабильными и подходящими для хранения, например подходящими для хранения в течение длительных периодов времени. Такое хранение можно проводить в условиях окружающей среды, при контролируемой температуре, при контролируемой влажности или другом условии или наборе условий, и можно хранить в запечатанном контейнере (например, бутылке или сосуде со съемной крышкой, пробирках, капсуле, каплете, флаконе, шприце, шприце с двойным картриджем или другом контейнере) и можно хранить в запечатанном контейнере в атмосфере инертных газов (например, азота, аргона, гелия или других инертных газов), или другом контейнере с другим элементом или соединением в контейнере или без него.
Следует понимать, что настоящее изобретение не ограничено конкретными способами, реагентами, соединениями, композициями или биологическими системами, которые, конечно, могут изменяться. Также следует понимать, что используемая в настоящем описании терминология предназначена только для описания конкретных вариантов осуществления, и не предполагают, что она является ограничивающей. Как используют в настоящем описании и прилагаемой формуле изобретения, формы единственного числа включают определяемые объекты во множественном числе, если из контекста явно не следует иное. Таким образом, например, ссылка на "полипептид" включает комбинацию двух или более полипептидов и т.п.
В рамках изобретения "приблизительно", когда относится к измеряемой величине, такой как количество, продолжительность периода времени и т.п., означает, что включает вариации ±20 или ±10%, включая ±5, ±1 и ±0,1% от конкретной величины, т.к. такие вариации соответствуют выполнению описываемых способов.
Если не определено иное, все используемые в настоящем описании технические и научные термины имеют то же значение, как общепринято понимает специалист в данной области, к которой принадлежит изобретение. Хотя в практическом осуществлении для тестирования настоящего изобретения можно использовать любые способы и вещества, аналогичные или эквивалентные таким, как описываемые в настоящем описании, предпочтительные вещества и способы описаны в настоящем описании. В описании и формуле изобретения настоящего изобретения используют следующую ниже терминологию.
Все "аминокислотные" остатки, определяемые в настоящем описании, находятся в природной Ьконфигурации. В соответствии с общепринятой номенклатурой полипептидов сокращенные обозначения аминокислотных остатков представлены в следующей ниже таблице.
- 2 029972
1 буква 3 буквы Аминокислота
Υ Туг Ъ-тирозин
С 61у й-глицин
Г Рйе Ъ-фенилаланин
М Меб Ъ-метионин
А А1а Ъ-аланин
5 Зег Ъ-серин
I Не Ъ-изолейцин
ъ Ьеи лейцин
т Тйг Ъ-треонин
V Уа1 Ъ-валин
Р Рго Ъ-пролин
к Ьуз Ъ-лизин
н НФз Ъ-гистидин
0 С1п Ъ-глутамин
Е С1и Ъ-глутаминовая кислота
И Тгр Ъ-триптофан
К Агд Ъ-аргинин
ϋ Азр Ъ-аспарагиновая кислота
N Азп Ъ-аспарагин
С Суз Ъ-цистеин
Следует отметить, что все последовательности аминокислотных остатков в настоящем описании предоставлены формулами, ориентация которых слева направо представляет собой общепринятое направление от Ν-конца к С-концу.
"Низшие оксиуглеводороды", как указано в настоящем описании, означают соединения, содержащие алкильные радикалы и атомы кислорода, содержащие от 1 до 8 атомов углерода и от 1 до 4 атомов кислорода. Иллюстративные низшие оксиуглеводороды включают, но не ограничиваются ими, низшие алканолы, низшие кетоны, низшие карбоновые кислоты, сложные эфиры низших карбоновых кислот, низшие карбонаты и т.п.
" Низший" по отношению к описываемым в настоящем описании химическим соединениям относится к таким соединениям, которые содержат от 1 до 8 атомов углерода.
"Низший алканол" относится к насыщенной С1-С8алкильной группе, которая может быть с разветвленной или неразветвленной цепью от 1 до 4 гидроксильных групп. Иллюстративные низшие акланолы, содержащие 1 гидроксильную группу, включают, но не ограничиваются ими, метанол, этанол, нпропанол, изопропанол, н-бутанол, изобутанол, 2-бутанол, трет-бутанол, пентанол, изопентанол, 2пентанол, 3-пентанол, трет-пентанол и т.п.
Иллюстративные "низшие кетоны" включают, но не ограничиваются ими, ацетон, метилэтилкетон, метилпропилкетон, метилизопропилкетон, метилбутилкетон, метилизобутилкетон, метил-2-бутилкетон, метил-трет-бутилкетон, диэтилкетон, этилпропилкетон, этилизопропилкетон, этилбутилкетон, этилизобутилкетон, этил-трет-бутилкетон и т.п.
Иллюстративные "низшие карбоновые кислоты" включают, но не ограничиваются ими, муравьиную кислоту, уксусную кислоту, пропионовую кислоту, масляную кислоту, изомасляную кислоту и т.п.
Иллюстративные "сложные эфиры низших карбоновых кислот" включают, но не ограничиваются ими, метилацетат, этилацетат, пропилацетат, изопропилацетат, бутилацетат, изобутилацетат, 2бутилацетат, трет-бутилацетат и т.п.
Иллюстративные "низшие карбонаты" включают, но не ограничиваются ими, диметилкарбонат, метилэтилкарбонат, метилпропилкарбонат, метилизопропилкарбонат, метилбутилкарбонат, метилизобутилкарбонат, метил-2-бутилкарбонат, метил-трет-бутилкарбонат, диэтилкарбонат, этилпропилкарбонат, этилизопропилкарбонат, этилбутилкарбонат, этилизобутилкарбонат, этил-трет-бутилкарбонат и т.п.
"Низшие галогенуглеводороды", как указано в настоящем описании, означают соединения, содержащие алкильные радикалы и атомы галогена, содержащие от 1 до 8 атомов углерода и от 1 до 4 атомов галогена. Предпочтительно атомы галогена представляют собой хлор, фтор и бром. Наиболее предпочтительно атомы галогена представляют собой атомы хлора. Иллюстративные низшие галогенуглеводороды включают, но не ограничиваются ими, метилхлорид, метиленхлорид, хлороформ, тетрахлорид углерода и т. п.
"Низшие галогеноксиуглеводороды" означают оксиуглеводороды, как определено в настоящем описании, которые дополнительно замещены от 1 до 4 атомами хлора. Иллюстративный галогеноксиуглеводород включает, но не ограничиваются им, гексафторацетон.
"Низшие сульфоксиуглеводороды" означают оксиуглеводороды, как определено в настоящем описании, которые также содержат атом серы. Иллюстративные низшие сульфоксиуглеводороды включают, но не ограничиваются ими, диметилсульфоксид (ΌΜ8Ο) и диметилсульфон.
- 3 029972
"Низшие циклоуглеводороды" относятся к алкильным радикалам, которые являются циклизованными, такими как, например, 3-8-членные углеводородные кольца. Иллюстративный циклоуглеводород включает, но не ограничивается им, циклогексан.
"Полипептид", "пептид" и "белок" в настоящем описании используют взаимозаменяемо для обозначения полимера из аминокислотных остатков. Полипептид может быть природного происхождения (получаемым из ткани), рекомбинантным или естественным образом экспрессируемым прокариотическими или эукариотическими клеточными препаратами, или получаемым химически способами синтеза. Термины применяют к аминокислотным полимерам, в которых один или более аминокислотных остатков представляют собой искусственный химический миметик соответствующей природной аминокислоты, а также к природным аминокислотным полимерам и неприродному аминокислотному полимеру. Аминокислотные миметики относятся к химическим соединениям, которые обладают структурой, которая отличается от общей химической структуры аминокислоты, но которые функционируют аналогичным образом, как природная аминокислота. Неприродные остатки хорошо описаны в научной и патентной литературе, несколько иллюстративных неприродных композиций, пригодных в качестве миметиков природных аминокислотных остатков, и руководства описаны ниже. Миметики ароматических аминокислот можно получать заменой, например, на Ό- или Ь-нафилаланин, Ό- или Ь-фенилглицин, Ό- или Ь-2тиенилаланин, Ό-или Ь-1, -2, 3- или 4-пиренилаланин, Ό- или Ь-3-тиенилаланин, Ό- или Ь-(2пиридинил)аланин, Ό- или Ь-(3-пиридинил)аланин, Ό-или Ь-(2-пиразинил)аланин, Ό- или Ь-(4изопропил)фенилглицин: Ь-(трифторметил)фенилглицин, О-(трифторметил)фенилаланин: Ό-парафторфенилаланин, Ό- или Ь-пара-бифенилфенилаланин, К- или Ь-пара-метоксибифенилфенилаланин: Όили Ь-2-индол(алкил)аланины, и Ό- или Ь-алкилаланины, где алкил может представлять собой замещенный или незамещенный метил, этил, пропил, гексил, бутил, пентил, изопропил, изобутил, вторичный изотил, изопентил или некислые аминокислоты. Ароматические кольца неприродной аминокислоты включают, например, тиазолильные, тиофенильные, пиразолильные, бензимидазолильные, нафтильные, фуранильные, пирролильные и пиридильные ароматические кольца.
В рамках изобретения "пептид" включает пептиды, которые представляют собой консервативные варианты таких пептидов, которые конкретно проиллюстрированы в настоящем описании. В рамках изобретения "консервативная вариация" означает замену аминокислотного остатка другим биологически аналогичным остатком. Примеры консервативных вариаций включают, но не ограничиваются ими, замену одного гидрофобного остатка, такого как изолейцин, валин, лейцин, аланин, цистеин, глицин, фенилаланин, пролин, триптофан, тирозин, норлейцин или метионин, на другой или замену одного полярного остатка на другой, такую как замена аргинина на лизин, глутаминовой кислоты на аспарагиновую кислоту или глутамина на аспарагин и т. п. Нейтральные гидрофильные аминокислоты, которые могут быть замещены другими аминокислотами, включают аспарагин, глутамин, серин и треонин. "Консервативная вариация" также включает использование замещенной аминокислоты вместо незамещенной исходной аминокислоты, при условии, что антитела, вырабатываемые к замещенному полипептиду, также являются иммунореактивными по отношению к незамещенному полипептиду. Такие консервативные замены входят в определение классов пептидов по изобретению. В рамках изобретения "катионный" относится к любому пептиду, который имеет общий положительный заряд при рН 7,4. Биологическую активность пептидов можно определять общепринятыми способами, известными специалистам в данной области и описываемыми в настоящем описании.
"Рекомбинантный", когда используют в отношении белка, означает, что белок модифицировали введением гетерологичной нуклеиновой кислоты или белка, или изменением нативной нуклеиновой кислоты или белка.
Как используют, "время восстановления" и его грамматические варианты означают количество времени, необходимое для растворения и/или суспендирования лиофилизированной молекулы в жидкой форме. Например, время восстановления включает, но не ограничивается им, время, необходимое для суспендирования сухого осадка полипептида в воде или буфере после лиофилизации. Таким образом, "снижение" или "уменьшение" времени восстановления и его грамматические варианты означают меньшее количество времени, которое необходимо для суспендирования полипептида, высушенного в первом составе и/или условии, в жидкости по сравнению с аналогичным полипептидом, высушенным во втором составе и/или условии, и который суспендируют в аналогичной жидкости.
Настоящее изобретение также относится к способу уменьшения времени восстановления лиофилизированной полипептидной композиции, включающему а) лиофилизацию жидкой смеси, содержащей полипептид, где жидкая смесь содержит добавку трет-бутанола, и Ь) восстановление лиофилизированного полипептида достаточным количеством фармацевтически приемлемого диспергирующего средства до лиофилизированной полипептидной композиции с получением жидкой полипептидной композиции, где время восстановления полипептида, лиофилизированного в присутствии добавки трет-бутанола, является меньше времени восстановления аналогичного полипептида, лиофилизированного при отсутствии добавки трет-бутанола.
Настоящее изобретение также относится к способу получения жидкой полипептидной композиции, включающему получение лиофилизированного полипептида, получаемого способом по настоящему изо- 4 029972
бретению, и восстановление лиофилизированного полипептида достаточным количеством фармацевтически приемлемого диспергирующего средства с получением жидкой полипептидной композиции.
В определенных иллюстративных вариантах осуществления лиофилизированный полипептид полностью восстанавливается при контактировании с достаточным количеством фармацевтически приемлемого диспергирующего средства. Например, в определенных вариантах осуществления лиофилизированный полипептид смешивают с диспергирующим средством, например, встряхивая в течение приблизительно 5 с, а затем отстаивают в течение приблизительно от 5 приблизительно до 30 мин с получением жидкой полипептидной композиции. Диспергирующее средство предпочтительно представляет собой стерильную воду или "воду для инъекций" (\УР1). Жидкий полипептид можно перед введением дополнительно разбавлять изотоническим физиологическим раствором или другими эксципиентами для получения желаемой концентрации. По настоящему изобретению "эксципиенты" включают, но не ограничиваются ими, стабилизаторы, например сывороточный альбумин человека (ΗδΆ), бычий сывороточный альбумин (ΒδΑ), α-казеин, глобулины, α-лактальбумин, ЬОН, лизоцим, миоглобин, овальбумин, РНКазу А, буферные средства, например лимонную кислоту, ΗΕΡΕδ, гистидин, ацетат калия, цитрат калия, фосфат калия (КН2РО4), ацетат натрия, бикарбонат натрия, цитрат натрия, фосфат натрия (ΝΑΗ2ΡΟ4), трисоснование и трис-НС1, аминокислоты/метаболиты, например глицин, аланин (β-аланин, β-аланин), аргинин, бетаин, лейцин, лизин, глутаминовую кислоту, аспарагиновую кислоту, гистидин, пролин, 4гидроксипролин, саркозин, γ-аминомасляную кислоту (ГАМК), опины (аланопин, октопин, стромбин) и триметиламин-Ы-оксид (ТМАО), поверхностно-активные вещества, например полисорбат 20 и 80 и полоксамер 407, жирные кислоты, например фосфотидилхолин, этаноламин и ацетилтриптофанат, полимеры, например полиэтиленгликоль (ΡΕΟ) и поливинилпирролидон (РУР) 10, 24, 40, низкомолекулярные эксципиенты, например арабинозу, целлобиозу, этиленгликоль, фруктозу, фукозу, галактозу, глицерин/глицерин, глюкозу, инозитол, лактозу, маннит, мальтозу, мальтотриозу, маннозу, мелибиозу, 2метил-2,4-пентандиол, октулозу, пропиленгликоль, рафинозу, рибозу, сорбит, сахарозу, трегалозу, ксилит и ксилозу, и высокмолекулярные эксципиенты, например целлюлозу, (3-циклодекстрин, декстран (10 кДа), декстран (40 кДа), декстран (70 кДа), фиколл, желатин, гидроксипропилметилцеллюлозу, гидроксиэтилкрахмал, мальтодекстрин, метоцел, ПЭГ (6 кДа), полидекстрозу, поливинилпирролидон (РУР) к15 (10 кДа), РУР (40 кДа), РУР к30 (40 кДа), РУР к90 (1000 кДа), сефадекс О 200 и крахмал, антиоксиданты, например аскорбиновую кислоту, цистеин НС1, тиоглицерин, тиогликолевую кислоту, тиосорбит и глутатион, восстановители, например цистеин НС1, дитиотреотол и другие тиолы или тиофены, хелатирующие средства, например ΕΌΤΑ, ΕΟΤΑ, глутаминовую кислоту и аспарагиновую кислоту, неорганические соли/металлы, например Са2+, Νί2+, Мд2'. Μη2+, Ν;·ι2δΟ4. (ΝΗ4)2δΟ4, №-12НРО4/№-1Н2РО4. К2НРО4/КН2РО4, Мд§О4 и ΝαΡ, органические соли, например ацетат Να, полиэтилен Να, каприлат Να (октаноат Να), пропионат, лактат, сукцинат и цитрат, органические растворители, например ацетонитрил, диметилсульфоксид (ЭМбО) и этанол.
Термин "поверхностное натяжение" относится к силе притяжения, оказываемой молекулами ниже поверхности на молекулы на поверхности/поверхность раздела с воздухом, обусловленной высокой молекулярной концентрацией жидкости по сравнению с низкой молекулярной концентрацией газа. Жидкости с низкими значениями поверхностного натяжения, такие как неполярные жидкости, являются более текучими по сравнению с водой. Как правило, значения поверхностного натяжения выражают в ньютонах/метры или динах/сантиметры.
"Динамическое поверхностное натяжение", как указано в настоящем описании, представляет собой поверхностное/поверхности раздела с воздухом и динамическое междуфазное натяжение на поверхности/поверхности раздела фаз. Существует ряд альтернативных способов измерения динамического поверхностного натяжения, например поверхностная тензиометрия способом "прилипшего пузырька" или поверхностная тензиометрия способом "пульсирующего пузырька".
Термин "вязкость" относится к внутреннему сопротивлению текучести, проявляемому жидкостью при определенной температуре, отношению напряжения сдвига к скорости сдвига. Вязкость жидкости равна один пуаз, если сила в 1 дин/кв. см вызывает перемещение двух параллельных поверхностей жидкости площадью один квадратный сантиметр и на расстоянии один квадратный сантиметр относительно друг друга со скоростью 1 см/с. Один пуаз равен одной сотни сантипуаз.
В отношении эффективной вязкости следует понимать, что значение вязкости зависит от условий, в которых проводили измерение, таких как температура, применяемого отношения сдвига и напряжения сдвига. Эффективную вязкость определяют как отношение напряжения сдвига к отношению применяемого сдвига. Существует ряд альтернативных способов измерения эффективной вязкости. Например, вязкость можно тестировать подходящим вискозиметром или реометром типа конус и плоскость, параллельная плоскость или другого типа.
Настоящее изобретение также относится к составу, подходящему для лиофилизации полипептида. В определенных вариантах осуществления жидкая смесь содержит приблизительно от 0,1 приблизительно до 10 об.% добавки трет-бутанола, приблизительно от 0,25 приблизительно до 5 об.% добавки третбутанола или приблизительно 2 об.% добавки трет-бутанола. В одном из вариантов осуществления со- 5 029972
став содержит приблизительно 10 мМ фосфата натрия рН 7,2, приблизительно 117 мМ трегалозы, приблизительно 153 мМ маннита и приблизительно 0,01% (мас./об.) полисорбата 80. В другом варианте осуществления состав содержит 26 мМ гистидина, 150 мМ трегалозы, 0,02% полисорбата 80 (Р§80), рН 6,0. В определенных вариантах осуществления полипептид содержит альбиглютид (§Е0 ГО N0:1). В других вариантах осуществления полипептид содержит 1Ь18 (8Е0 ГО N0:6). В одном из вариантов осуществления настоящее изобретение относится к жидкому составу, содержащему приблизительно 2% трет-бутанола. В одном из вариантов осуществления жидкий состав содержит приблизительно 2% третбутанола, приблизительно 10 мМ фосфата натрия рН 7,2, приблизительно 117 мМ трегалозы, приблизительно 153 мМ маннита и приблизительно 0,01% (мас./об.) полисорбата 80. В другом варианте осуществления состав содержит приблизительно 2% трет-бутанола, приблизительно 26 мМ гистидина рН 6,0, приблизительно 150 мМ трегалозы и приблизительно 0,02% полисорбата 80 (Р§80).
В рамках изобретения "терапевтический белок" относится к любому белку и/или полипептиду, который можно вводить млекопитающему для вызывания биологического или медицинского ответа ткани, системы, животного или человека, которые определяет, например, исследователь или клиницист.
Терапевтический белок может вызывать более одного биологического или медицинского ответа. Кроме того, термин "терапевтически эффективное количество" означает любое количество, которое по сравнению с соответствующим индивидуумом, который не получал такое количество, приводит, но не ограничивается этим, к выздоровлению, предотвращению или улучшению состояния заболевания, нарушения или побочного эффекта или снижению скорости прогрессирования заболевания или нарушения. Термин также включает в свой объем количества, эффективные для усиления нормальной физиологической функции, а также количества, эффективные для вызывания физиологической функции у пациента, которая усиливает или способствует терапевтическому эффекту второго фармацевтического средства.
В одном из вариантов осуществления буфер представляет собой фосфат натрия. В одном из вариантов осуществления буфер представляет собой гистидин. В одном из вариантов осуществления поверхностно-активное вещество представляет собой полисорбат 80. В одном из вариантов осуществления по меньшей мере один эксципиент выбран из трегалозы, мальтозы, сахарозы, маннозы, лактозы, маннита, сорбита, глицерина и декстрозы. В одном из вариантов осуществления эксципиент содержит трегалозу и маннит.
В рамках изобретения "агонист ОЬР-1" означает любое соединение или композицию, способную стимулировать продукцию инсулина и/или обладающую по меньшей мере одним видом активности ОЬР1, включая, но, не ограничиваясь ими, гормон инкретин и/или его фрагмент, вариант и/или конъюгат и миметик инкретина и/или его фрагмент, вариант и/или конъюгат.
В рамках изобретения "гормон инкретин" означает любой гормон, который усиливает секрецию инсулина или иным образом повышает уровень инсулина. Одним из примеров гормона инкретина является ОЬР-1. ОЬР-1 представляет собой инкретин, секретируемый Ь-клетками кишечника в ответ на прием пищи. У здорового индивидуума ОЬР-1 играет важную роль, регулируя постпрандиальные уровни глюкозы в крови, стимулируя глюкозозависимую секрецию инсулина поджелудочной железой, приводящую к увеличенному всасыванию глюкозы на периферии. ОЬР-1 также подавляет секрецию глюкагона, приводя к снижению продукции глюкозы в печени. Кроме того, ОЬР-1 задерживает время опорожнения желудка и замедляет моторику тонкого кишечника, задерживая всасывание пищи. ОЬР-1 способствует длительной компетентности бета-клеток, стимулируя транскрипцию генов, участвующих в глюкозозависимой секреции инсулина, и способствуя неогенезу бета-клеток (Ме1ег с1 а1., Вюбтидк, 2003, 17 (2): 93-102).
В рамках изобретения "активность ОЬР-1" означает один или более видов активности природного ОЬР-1 человека, включая, но, не ограничиваясь ими, снижение глюкозы в крови и/или плазме, стимуляцию глюкозозависимой секреции инсулина или иным образом повышение уровня инсулина, подавление секреции глюкагона, снижение фруктозамина, увеличение доставки и метаболизма глюкозы в головном мозге, задержку опорожнения желудка и стимуляцию компетентности бета-клеток и/или неогенеза. Композиция, обладающая активностью ОЬР-1 или агониста ОЬР-1, может вызывать непосредственно или опосредованно любой из этих видов активности и другой вид активности, ассоциированной с активностью ОЬР-1. В качестве примера, композиция, обладающая активностью ОЬР-1, может непосредственно или опосредованно стимулировать глюкозозависимую продукцию инсулина, при этом стимуляция продукции инсулина может непосредственно снижать уровни глюкозы в плазме у млекопитающего.
В рамках изобретения "миметик инкретина" представляет собой соединение, способное активировать секрецию инсулина или иным образом повышать уровень инсулина. Миметик инкретина может стимулировать секрецию инсулина, увеличивая неогенез бета-клеток, ингибируя апоптоз бета-клеток, ингибируя секрецию глюкагона, задерживая опорожнение желудка и вызывая чувство сытости у млекопитающего. Миметик инкретина может включать, но, не ограничиваться им, любой полипептид, который обладает активностью ОЬР-1, включая, но, не ограничиваясь ими, экзендин-3 и экзендин-4, включая любые его фрагменты и/или варианты, и/или конъюгаты.
В рамках изобретения "конъюгат" или "конъюгированный" и его грамматические варианты относятся к двум молекулам, которые связаны друг с другом. Например, первый полипептид может быть ковалентно или нековалентно связанный со вторым полипептидом. Первый полипептид может быть кова- 6 029972
лентно связанным посредством химического линкера или может быть генетически слитым со вторым полипептидом, где первый и второй полипептид имеют общий полипептидный остов.
В рамках изобретения "фрагмент", когда используют в отношении полипептида, представляет собой полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, которая является такой же, как часть, но не полная аминокислотная последовательность целого природного полипептида. Фрагменты могут быть "отдельными" или содержаться в более крупном полипептиде, в котором они образуют часть или область в виде одной непрерывной области в отдельном более крупном полипептиде. В качестве примера, фрагмент природного ОЬР-1 включает аминокислоты от 7 до 36 природных аминокислот от 1 до 36. Кроме того, фрагменты полипептида также могут представлять собой варианты природной частичной последовательности. Например, фрагмент ОЬР-1, содержащий аминокислоты 7-30 природного ОЬР-1, может также представлять собой вариант, содержащий замены аминокислот в его частичной последовательности.
"Вариант", как этот термин используют в настоящем описании, представляет собой полинуклеотид или полипептид, который отличается от эталонного полинуклеотида или полипептида соответственно, но сохраняет основные свойства. Атипичный вариант полинуклеотида отличается нуклеотидной последовательностью от другого эталонного полинуклеотида. Изменения в нуклеотидной последовательности вариантов могут или не могут изменять аминокислотную последовательность полипептида, кодируемого эталонным полинуклеотидом. Изменения нуклеотида могут приводить к заменам аминокислот, добавлениям, делециям, слияниям и усечениям полипептида, кодируемого эталонной последовательностью, как описано выше. Характерный вариант полипептида отличается аминокислотной последовательностью от другого эталонного полипептида. В основном различия являются ограниченными так, что последовательности эталонного полипептида и варианта являются в целом близко сходными и во многих областях идентичными. Вариант и эталонный полипептид могут отличаться аминокислотной последовательностью по одной или более заменам, добавлениям, делециям в любом сочетании. Замещенный или встраиваемый аминокислотный остаток может или не может представлять собой аминокислотный остаток, кодируемый генетическим кодом. Вариант полинуклеотида или полипептида может быть природным, таким как аллельный вариант, или он может представлять собой вариант, который, как известно, не встречается в природе. Неприродные варианты полинуклеотидов и полипептидов можно получать способом мутагенеза или прямым синтезом. Варианты могут также включать, но не ограничиваться ими, полипептиды или их фрагменты, содержащие химическую модификацию одной или более их аминокислотных боковых групп. Химическая модификация включает, но не ограничивается ими, добавление химических групп, образование новых связей и удаление химических групп. Модификации аминокислотных боковых групп включают без ограничения ацилирование ε-аминогрупп лизина, Ν-алкилирование аргинина, гистидина или лизина, алкилирование карбоксильных групп глутаминовой или аспарагиновой кислоты и дезамидирование глутамина или аспарагина. Модификации концевой аминогруппы включают без ограничения модификации дезаминогрупп, Ν-низшего алкила, Ν-динизшего алкила и Ν-ацила. Модификации концевой карбоксигруппы включают без ограничения модификации амида, низшего алкиламида, диалкиламида и сложного эфира низших алкилов. Кроме того, одна или более боковых или концевых групп могут быть защищены защитными группами, как правило, известными специалистам в области белковой химии.
В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения полипептид представляет собой полипептид ОЬР-1. "Полипептид ОЬР-1" включает, но не ограничивается ими, ОЬР-1 или его фрагмент, вариант и/или конъюгат. Фрагменты и/или варианты, и/или конъюгаты ОЬР-1 по настоящему изобретению, как правило, обладают по меньшей мере одним видом активности ОЬР-1. ОЬР-1 или его фрагмент, вариант и/или конъюгат могут содержать сывороточный альбумин человека. Сывороточный альбумин человека можно конъюгировать с ОЬР-1 или его фрагментом и/или вариантом. Сывороточный альбумин человека можно конъюгировать с гормоном инкретина (таким как ОЬР-1) и/или миметиком инкретина (таким как экзендин-3 и экзендин-4), и/или их фрагментами и/или вариантами посредством химического линкера перед инъекцией или можно химически связывать с природным сывороточным альбумином человека ίη νίνο (см., например, патент США № 6593295 и патент США № 6329336, полностью включенные в настоящее описание посредством ссылки). Альтернативно, сывороточный альбумин человека можно подвергать генетическому слиянию с ОЬР-1 и/или его фрагментом и/или вариантом или другим агонистом ОЬР-1, таким как экзендин-3 или экзендин-4, и/или его фрагментами и/или вариантами. Примеры ОЬР-1 и его фрагментов и/или вариантов, генетически слитых с сывороточным альбумином человека, предоставлены в следующих ниже заявках РСТ: XVО 2003/060071, XVО 2003/59934, XVО 2005/003296, ΧνΟ 2005/077042 (полностью включенных в настоящее описание посредством ссылки).
Полипептиды, обладающие активностью ОЬР-1, могут содержать по меньшей мере один фрагмент и/или вариант ОЬР-1 человека. Два природных фрагмента ОЬР-1 человека предоставлены в ЗЕО ГО ΝΟ:2.
- 7 029972
7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17
Н15-А1а-С1и-С1у-Т5г-Р5е-Т5г-5ег-А5р-Уа1-5ег18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28
5ег-Туг-Ьеи-С1и-С1у-С1п-А1а-А1а-Ьу5-С1и-Р5е29 30 31 32 33 34 35 36 37
11е-А1а-Тгр-Ьеи-Уа1-Ьуз-01у-Агд-Хаа (5Е<2 Ю N0.: 2)
где Хаа в положении 37 представляет собой О1у (далее в настоящем описании обозначаемый как
"ОБР-1(7-37)"), или -ΝΗ2 (далее в настоящем описании обозначаемый как "ОБР-1(7-36)"). Фрагменты ОБР-1 могут включать, но не ограничиваться ими, молекулы ОБР-1, содержащие или альтернативно состоящие из аминокислот 7-36 ОБР-1 человека (ОБР-1(7-36)). Варианты ОБР-1 или его фрагменты могут содержать, но не ограничиваться ими, одну, две, три, четыре, пять или более замен аминокислот в ОБР-1 дикого типа или в природных фрагментах ОБР-1, показанных в ЗЕС) ГО N0:2. Варианты ОБР-1 или фрагменты ОБР-1 могут содержать, но не ограничиваться ими, замены остатка аланина аналогичного аланину 8 ОБР-1 дикого типа, где такой аланин является мутированным до глицина (далее в настоящем описании обозначаемый как "А8О") (см., например, мутантов, описанных в патенте США № 5545618, полностью включенным в настоящее описание посредством ссылки).
В некоторых аспектах по меньшей мере один фрагмент и вариант ОБР-1 содержит ОБР-1(736(А8О)) и является генетически слитым с сывороточным альбумином человека. В дополнительном варианте осуществления полипептиды по изобретению содержат одну, две, три, четыре, пять или более тандемно ориентированных молекул ОБР-1 и/или его фрагментов и/или вариантов, слитых с Ν-или Сконцом сывороточного альбумина человека или его вариантом. Другие варианты осуществления содержат такие полипептиды А8О, слитые с Ν- или С-концом альбумина или его вариантом. Пример двух тандемно ориентированных фрагментов и/или вариантов ОБР-1(7-36)(А8О), слитых с Ν-концом сывороточного альбумина человека, включает ЗЕС) ГО N0:1, которая представлена на фиг. 3. В другом аспекте по меньшей мере один фрагмент и вариант ОБР-1 содержат по меньшей мере два ОБР-1(7-36(А8О)), тандемно ориентированных и генетически слитых с сывороточным альбумином человека. В одном из аспектов по меньшей мере два ОБР-1(7-36(А8О)) являются генетически слитыми с Ν-концом сывороточного альбумина человека. По меньшей мере один полипептид, обладающий активностью ОБР-1, может содержать ЗЕС) ГО ΝΟ:1.
Варианты ОБР-1(7-37) можно обозначать, например, как О1и22-ОБР-1(7-37)ОН, что означает вариант ОБР-1, в котором глицин, обычно находящийся в положении 22 ОБР-1(7-37)ОН, заменили глутаминовой кислотой, Уа18-О1и22-ОБР-1(7-37)ОН означает соединение ОБР-1, в котором аланин, обычно находящийся в положении 8 и глицин, обычно расположенный в положении 22 ОБР-1(7-37)ОН, заменили валином и глутаминовой кислотой соответственно. Примеры вариантов ОБР-1 включают, но не ограничиваются ими,
- 8 029972
\/а18-С1_Р-1(7-37)ОН е1у8-еьр-1(7-37)он е1и22-еЬР-1(7-37)О- Н
Азр22-61-Р-1(7-37)ОН Аг§22-6ЬР-1(7-37)ОН 1_у522-<31_Р-1(7-37)ОН
Суз22-6ЬР-1(7-37)ОН \/а18-<31и22-<31_Р-1(7-37)ОН 7а18-Азр22-61_Р-1(7-37)ОН
\/а18-Аг§22-61_Р-1(7-37)ОН 7а18-1_уз22-61_Р-1(7-37)ОН \/а18-Су522-<31_Р-1(7-37)ОН
61у8-61и22-61_Р-1(7-37)ОН 61у8-Азр22-61_Р-1(7-37)ОН 61у8-Аг§22-61_Р-1(7-37)ОН
61у8-1_у522-С1_Р-1(7-37)ОН О1у8-Суз22-О1.Р-1(7-37)ОН О1и22-ОЬР-1(7-36)ОН
Азр22-6ЬР-1(7-36)ОН Аг§22-6ЬР-1(7-36)ОН Ьу522-6ЬР-1(7-36)ОН
Су522-еЬР-1(7-36)ОН Уа18-61и22-61_Р-1(7-36)ОН Уа18-А5р22-61_Р-1(7-36)ОН
\/а18-Аг§22-61_Р-1(7-36)ОН 7а18-Ьу522-6ЬР-1(7-36)ОН \/а18-Су522-<31_Р-1(7-36)ОН
61у8-61и22-61_Р-1(7-36)ОН 61у8-Азр22-6ЬР-1(7-36)ОН 61у8-Аг§22-6ЬР-1(7-36)ОН
е1у8-1_у522-С1_Р-1(7-36)ОН е1у8-суз22-е1_р-1(7-зб)он 1_уз23-е1_Р-1(7-37)ОН
\/а18-1_у523-<31_Р-1(7-37)ОН 61у8-Ьу523-6ЬР-1(7-37)ОН Н|524-6ЬР-1(7-37)ОН
ν3ΐ8-Ηί524-6ίΡ-1(7-37)ΟΗ 61у8-Н|524-6ЬР-1(7-37)ОН 1_уз24-61_Р-1(7-37)ОН
\/а18-1_у524-<31_Р-1(7-37)ОН 61у8-Ьу523-6ЬР-1(7-37)ОН 61и30-61_Р-1(7-37)ОН
\/а18-<31и30-С1_Р-1(7-37)ОН 61у8-61и30-61_Р-1(7-37)ОН Азр30-61_Р-1(7-37)ОН
\/а18-А5р30-<31_Р-1(7-37)ОН 61у8-Азр30-6ЬР-1(7-37)ОН 61п30-61_Р-1(7-37)ОН
\/а18-<31п30-<31_Р-1(7-37)ОН 61у8-61п30-61_Р-1(7-37)ОН Туг3°-6ЬР-1(7-37)ОН
7а18-Туг30-6ЬР-1(7-37)ОН <31уа-Туг30-<ЗЬР-1(7-37)ОН 5ег30-61_Р-1(7-37)ОН
\/а18-5ег30-С1_Р-1(7-37)ОН 61у8-5ег30-61.Р-1(7-37)ОН Ηί530-6ίΡ-1(7-37)ΟΗ
ν3ΐ8-Ηί53°-6ίΡ-1(7-37)ΟΗ 61у8-Н|530-6ЬР-1(7-37)ОН <31и34-<31_Р-1(7-37)ОН
\/а18-61и34-С1_Р-1(7-37)ОН 61у8-61и34-6ЬР-1(7-37)ОН А1а34-61_Р-1(7-37)ОН
Уа18-А1а34-61.Р-1(7-37)ОН 61у8-А1а34-6ЬР-1(7-37)ОН е1у34-еьр-1(7-37)он
Уа18-61у34-е1_Р-1(7-37)ОН 61у8-61у34-6ЬР-1(7-37)ОН А1а35-6ЬР-1(7-37)ОН
7а18-А1а35-6ЬР-1(7-37)ОН <31у8-А1а35-<ЗЬР-1(7-37)ОН 1_уз35-61_Р-1(7-37)ОН
\/а18-1_у535-<31_Р-1(7-37)ОН 61у8-Ьу535-6ЬР-1(7-37)ОН Н|535-6ЬР-1(7-37)ОН
'7а!8-Н!з35-6ЬР-1(7-37)ОН 6!у8-Н!535-61Р-1(7-37)ОН Рго35С!_Р-1(7 37)ОН
\/а13-Рго35-С>1_Р-1(7-37)ОН 61у8-РгоЗБ-61_Р-1(7-37)ОН 61иЗБ-61_Р-1(7-37)ОН
61у8-61и35-61_Р-1(7-37)ОН Уа18-А1а27-61_Р-1(7-37)ОН Уа18-Н|537-61_Р-1(7-37)ОН
7а18-е1и22Лу523-6ЬР-1(7-37)ОН \/а18-<31и22-<31и23-<31_Р-1(7-37)ОН \/а18-61и22-А1а27-61_Р-1(7-37)ОН
\/а18-01у34-1_у535-<31_Р-1(7-37)ОН Уа18-Н|537-61_Р-1- (7-37)ОН <31у8-Н|537-61-Р-1(7-37)ОН
\/а18-61и22-А1а27-61_Р-1(7-37)ОН 61у8-1_у522-61и23-61_Р-1(7-37)ОН. 61у8-61и22-А1а27-61_Р-1(7-37)ОН Уа18-61и35-61_Р-1(7-37)ОН 7а18-1_уз22-61и23-61_Р-1(7-37)ОН
Варианты ОЬР-1 также могут включать, но не ограничиваться ими, фрагменты ОЬР-1 или ОЬР-1, содержащие химическую модификацию одной или более их аминокислотных боковых групп. Химическая модификация включает, но не ограничивается ими, добавление химических групп, образование новых связей и удаление химических групп. Модификации аминокислот боковых групп включают без ограничения ацилирование ε-аминогрупп лизина, Ν-алкилирование аргинина, гистидина или лизина, алкилирование карбоксильных групп глутаминовой или аспарагиновой кислоты и дезамидирование глутамина или аспарагина. Модификации концевой аминогруппы включают без ограничения модификации дезаминогрупп, Ν-низшего алкила, Ν-динизшего алкила и Ν-ацила. Модификации концевой карбоксигруппы включают без ограничения модификации амида, низшего алкиламида, диалкиламида и сложного эфира низших алкилов. Кроме того, одна или более боковых или концевых групп могут быть защищены защитными группами, как правило, известными специалистам в области белковой химии.
Фрагменты или варианты ОЬР-1 также могут включать полипептиды, в которых одну или более аминокислот добавляют к Ν-концу и/или С-концу ОЬР-1(7-37)ОН фрагмента или варианта. Аминокислоты в ОЬР-1, в котором аминокислоты добавляют к Ν-концу или С-концу, обозначают аналогичным номером, как соответствующую аминокислоту в ОЬР-1(7-37)ОН. Например, Ν-концевая аминокислота соединения ОЬР-1, получаемого добавлением двух аминокислот к Ν-концу ОЬР-1(7-37)ОН, находится в положении 5, и С-концевая аминокислота соединения ОЬР-1, получаемого добавлением одной аминокислоты к С-концу ОЬР-1(7-37)ОН, находится в положении 38. Таким образом, положение 12 занимает фенилаланин и положение 22 занимает глицин в обоих этих соединениях ОЬР-1, как в ОЬР-1(7-37)ОН. Аминокислоты 1-6 ОЬР-1 с аминокислотами, добавленными к Ν-концу, могут представлять собой аналогичную или консервативную замену аминокислоты в соответствующем положении ОЬР-1(1-37)ОН. Аминокислоты 38-45 ОЬР-1 с аминокислотами, добавленными к С-концу, могут представлять собой аналогичную или консервативную замену аминокислоты в соответствующем положении глюкагона или экзендина-4.
Альбиглютид представляет собой новый аналог ОЬР-1, синтезируемого посредством генетического слияния устойчивой формы ЭРР-ΐν пептида в виде димера с альбумином человека, который обеспечивает длительную активность ОЬР-1 со временем полужизни приблизительно от 5 до 7 суток. Первичная
- 9 029972
аминокислотная последовательность альбиглютида представляет собой 8Еф ГО N0:1.
В другом аспекте настоящего изобретения композицию, содержащую по меньшей мере один полипептид, обладающий активностью ОЬР-1, вводят человеку от одного раза в сутки до одного раза каждый месяц, и можно вводить один раз в сутки, один раз каждые двое суток, один раз каждые трое суток, один раз каждые семь суток, один раз каждые четырнадцать суток, один раз каждые четыре недели и/или один раз каждый месяц. В другом аспекте первую дозу и вторую дозу композиции, содержащей по меньшей мере один полипептид, обладающий активностью ОЬР-1, вводят человеку. Первая и вторая доза может являться одинаковой или может отличаться. Каждая доза по меньшей мере одного полипептида, обладающего активностью ОЬР-1, может содержать приблизительно от 0,25 мкг приблизительно до 1000 мг по меньшей мере одного полипептида, обладающего активностью ОЬР-1. Дозы могут содержать, но не ограничиваться ими, от 0,25 мкг, 0,25, 1, 3, 6, 16, 24, 48, 60, 80, 104, 20, 400, 800 приблизительно до 1000 мг по меньшей мере одного полипептида, обладающего активностью ОЬР-1.
В одном из вариантов осуществления композиции по настоящему изобретению содержат приблизительно 15, 30, 50 или 100 мг δΡΟ ГО N0:1.
В другом варианте осуществления полипептид представляет собой антигенсвязывающий полипептид. В одном из вариантов осуществления антигенсвязывающий полипептид выбран из группы, состоящей из растворимого рецептора, антитела, фрагмента антитела, одиночного вариабельного домена иммуноглобулина, РаЬ, Р(аЬ')2, Ρν, дисульфид-связанного Ρν, 8сРу, полиспецифического антитела в закрытой конформации, дисульфид-связанного 8сΡν или диатела.
В рамках изобретения термин "антигенсвязывающий полипептид" относится к антителу, фрагментам антител и другим белковым конструкциям, которые способны связываться с антигеном.
В одном из вариантов осуществления антигенсвязывающий полипептид представляет собой тАЬ к ΝΟΟΟ. В одном из вариантов осуществления антигенсвязывающий полипептид содержит тяжелую цепь 8Е0 ГО N0:3 и легкую цепь δΞΟ ГО N0:4.
В одном из вариантов осуществления антигенсвязывающий полипептид представляет собой тАЬ к ГО5. В одном из вариантов осуществления антигенсвязывающий полипептид содержит тяжелую цепь δΞΟ ГО N0:7 и легкую цепь δΞΟ ГО N0:8.
В одном из вариантов осуществления антигенсвязывающий полипептид представляет собой тАЬ к ΟΌ20. В одном из вариантов осуществления антигенсвязывающий полипептид содержит вариабельную область тяжелой цепи 8Е0 ГО N0:9 и вариабельную область легкой цепи 8Е0 ГО N0:10. В одном из вариантов осуществления антигенсвязывающий полипептид представляет собой одиночный вариабельный домен иммуноглобулина. В одном из вариантов осуществления одиночный вариабельный домен иммуноглобулина представляет собой бАЬ к ТNΡΚ1. В одном из вариантов осуществления одиночный вариабельный домен иммуноглобулина содержит 8Е0 ГО N0:5.
Термины Ρν, Рс, Ρά, РаЬ или Р(аЬ)2 используют в их общепринятых значениях (см., например, Наг1о\у е! а1., АийЬоФек А ЬаЬота1огу Мапиа1, Со1б δρηπβ НагЬог ЬаЬота1огу, (1988)).
"Химерное антитело" относится к типу сконструированного антитела, которое содержит природную вариабельную область (легкую цепь и тяжелые цепи), получаемую из донорного антитела, в сочетании с константными областями легкой и тяжелой цепей, получаемыми из акцепторного антитела.
"Гуманизированное антитело" относится к типу сконструированного антитела, содержащему его ΟΌΚ, получаемые из не принадлежащего человеку донорного иммуноглобулина, где остающиеся получаемые из иммуноглобулина части молекулы получают из одного (или более) иммуноглобулина(ов) человека. Кроме того, несущие каркасную область остатки можно изменять для сохранения аффинности связывания (см., например, Онееп е! а1., Ргос. №11. Асаб δα υδΛ. 86:10029-10032 (1989), Нобдкоп е! а1., Вю/ТесЬпо1о§у, 9:421 (1991)). Подходящее акцепторное антитело человека может представлять собой антитело, выбранное из общепринятой базы данных, например базы данных КАВАТ.КТМ., базы данных Ьо8 А1ато§ ба1аЬа8е и базы данных δνίδδ Рто1еш в соответствии с гомологией с нуклеотидом и аминокислотными последовательностями донорного антитела. Антитело человека, характеризующееся гомологией каркасных областей донорного антитела (на основе аминокислот), может являться подходящим для предоставления константной области тяжелой цепи и/или вариабельной каркасной области тяжелой цепи для встраивания донорных ΟΌΚ. Подходящее акцепторное антитело, способное предоставлять константные или вариабельные каркасные области легкой цепи можно выбирать аналогичным образом. Следует отметить, что не существует необходимости, чтобы тяжелые и легкие цепи акцепторного антитела происходили от одного и того же акцепторного антитела. В известном уровне техники описано несколько путей получения таких гуманизированных антител - см., например, ЕР-А-0239400 и ЕР-А054951.
Термин "донорное антитело" относится к антителу (моноклональному и/или рекомбинантному), которое предоставляет аминокислотные последовательности своей вариабельной области, ΟΌΚ или другие функциональные фрагменты или их аналоги первому иммуноглобулиновому партнеру таким образом, чтобы обеспечивать измененную кодирующую область иммуноглобулина и получаемое экспрессируемое измененное антитело с характеристикой антигенной специфичности и нейтрализующей активности донорного антитела.
- 10 029972
Термин "акцепторное антитело" относится к антителу (моноклональному и/или рекомбинантному) гетерологичному донорному антителу, которое предоставляет все (или любой участок, но в некоторых вариантах осуществления все) аминокислотные последовательности, кодирующие его каркасные области тяжелых и/или легких цепей и/или его константные области тяжелых и/или легких цепей первому иммуноглобулиновому партнеру. В определенных вариантах осуществления антитело человека представляет собой акцепторное антитело.
"СОК" определяют, как аминокислотные последовательности определяющей комплементарность области антитела, которые представляют собой гипервариабельные области тяжелых и легких цепей иммуноглобулина; см., например, КаЪа! е! а1., Зссщспссх о£ Рго1еш8 о£ 1ттипо1ощса1 1п1сгсь1. 4ΐ1ι Εά., и.δ. ОераПтеШ о£ НеаИБ апб Нитап δθτνκθδ, №-10опа1 1п8Йи1е8 о£ НеаНй (1987). Существует три СОК тяжелой цепи и три СОК легкой цепи (или области СОК) в вариабельном участке иммуноглобулина. Таким образом, в рамках изобретения "СОК" относится ко всем трем СОК тяжелой цепи или всем трем СОК легкой цепи (или всем СОК тяжелой цепи и всем легкой цепи при необходимости). Структура и сворачивание белка антитела может подразумевать, что другие остатки являются частью антигенсвязывающей области, и специалисту в данной области это будет понятно; см. например, СНобиа е! а1., (1989) Соп&ттаНопк о£ иптипоДоЪиПп НуреггапаЫе гедюпз, ЫаШге, 342, р. 877-883.
В рамках изобретения термин "домен" относится к свернутой белковой структуре, которая имеет третичную структуру независимо от оставшейся части белка. Как правило, домены обуславливают отдельные функциональные свойства белков, и во многих случаях их можно добавлять, удалять или переносить на другие белки без потери функции оставшейся части белка и/или домена. "Одиночный вариабельный домен антитела" представляет собой свернутый домен полипептида, содержащий характерные последовательности вариабельных доменов антитела. Таким образом, он содержит вариабельные домены и модифицированные вариабельные домены всего антитела, например, в которых одна или более петель заменены последовательностями, которые не являются характеристикой вариабельных доменов антитела, или вариабельные домены антитела, которые являются усеченными или содержат Ν- или С-концевые удлинения, а также свернутые фрагменты вариабельных доменов, которые сохраняют, по меньшей мере, активность связывания и специфичность полноразмерного домена.
"Одиночный вариабельный домен иммуноглобулина" относится к вариабельному домену антитела (УН, νΗΗ, V), который специфически связывается с антигеном или эпитопом независимо от различной Vобласти или домена. Одиночный вариабельный домен иммуноглобулина может находиться в формате (например, гомо- или гетеромультимера) с другими различными вариабельными областями или вариабельными доменами, где другие области или домены не являются необходимыми для связывания антигена с одиночным вариабельным доменом иммуноглобулина (т.е. где одиночный вариабельный домен иммуноглобулина связывается с антигеном независимо от дополнительных вариабельных доменов). "Домен-специфическое антитело" или "бАЪ" представляет собой то же самое что и "одиночный вариабельный домен иммуноглобулина", который способен связываться с антигеном, как этот термин используют в настоящем описании. Одиночный вариабельный домен иммуноглобулина может представлять собой вариабельный домен антитела человека, а также включает одиночные вариабельные домены антител других видов, таких как грызун (например, как описано в АО 00/29004), акула-нянька и бАЪ АНН верблюдовых (нанотела). \;’Н|· верблюдовых представляют собой полипептиды одиночных вариабельных доменов иммуноглобулина, которые получают у видов, включающих верблюда, ламу, альпаку, дромадера и гуанако, которые продуцируют состоящие из тяжелых цепей антитела, естественным образом лишенные легких цепей. Такие домены Ащ можно гуманизировать доступными в данной области стандартными способами, и предполагают, что такие домены все еще являются "домен-специфическими антителами" по изобретению. В рамках изобретения ’АН" включает Ащ домены верблюдовых. NАКV представляют собой другой тип одиночного вариабельного домена иммуноглобулина, который идентифицировали у хрящевых рыб, включая акулу-няньку. Эти домены также известны как вариабельная область нового антигенного рецептора (общепринято сокращенно обозначаемая ν(ΝΑΡ,) или NАКV). Более подробно см. Мо1. 1ттипо1., 44, 656-665 (2006) и υδ20050043519Α.
Термин "эпитопсвязывающий домен" относится к домену, который специфически связывается с антигеном или эпитопом независимо от различной ν-области или домена, он может представлять собой домен-специфическое антитело (бАЪ), например одиночный вариабельный домен иммуноглобулина человека, верблюдовых или акулы.
В рамках изобретения термин "антигенсвязывающий участок" относится к участку на белке, который способен специфически связываться с антигеном, он может представлять собой одиночный домен, например эпитопсвязывающий домен, или он может представлять собой спаренные домены νγν^ как можно обнаружить в стандартном антителе. В некоторых аспектах по изобретению домены одноцепочечного Ρν (δ^ν) могут предоставлять антигенсвязывающие участки.
Термины "тАЪбАЪ" и бАЪтАЪ" применяют в настоящем описании для обозначения антигенсвязывающих белков по настоящему изобретению. Два термина можно использовать взаимозаменяемо, и предполагают, что они имеют одинаковое значение в рамках изобретения.
- 11 029972
Примеры
Настоящее изобретение можно дополнительно понять посредством ссылки на следующие ниже неограничивающие примеры.
Пример 1. Лиофилизация альбиглютида в присутствии трет-бутанола, этанола, ацетонитрила, ΝΗ4ацетата или ΝΗ4ΗΟΘ3.
Образцы альбиглютида получали для лиофилизации в соответствии с получением аналитической матрицы, описанной в табл. I. Лиофилизаты получали лиофилизацией 0,750 мл раствора, содержащего 50 мг альбиглютида в 10 мМ фосфате натрия рН 7,2, с 117 мМ трегалозой, 153 мМ маннитом, 0,01% (мас./об.) полисорбатом 80 во флаконах (2 мл 13 мм), содержащих соответствующую концентрацию трет-бутанола, этанола и ацетонитрила (1, 5 и 10% мас./об.) и соответствующую концентрацию ΝΗ4ацетата и ΝΗ4ΗΟΘ3 (100 и 250 мМ).
Таблица 1
Условия альбиглютида в зависимости от номера образца
№ условия Встряхивание/ покой восстановление (минуты) Кратность изменений Отстаивание восстановление (минуты) Кратность изменений
1: Буферный раствор 7,18 (+/-0,75) нет данных 18,09 (+/-4,55)
2: 1% третбутанол 3,23 (+/-0,43) 0, 45 6,01 (+/-1,56) 0,33
3: 5% третбутанол 5,38 (+/-0,44) 0,75 9,18 (+/-4,57) 0,51
4: 10% третбутанол 4,06 (+/-0,56) 0,57 4,80 (+/-0,10) 0,27
5: 1% этанол 6,17 (+/-0,67) 0, 86 14,89 (+/-2,83) 0,82
6: 5% этанол 6,85 (+/-0,61) 0, 95 13,47 (+/-0,56) 0,74
7: 10% этанол 5,78 (+/-0,55) 0, 81 11,01 (+/-0,83) 0, 61
8 : 1% ацетонитрил 5,90 (+/-0,55) 0, 82 13,22 (+/-0,60) 0,73
9: 5% ацетонитрил 6,05 (+/-0,53) 0, 84 12,60 (+/-1,64) 0,70
10: 10% ацетонитрил 5,82 (+/-0,51) 0, 81 10,27 (+/-0,11) 0,57
11: 100 мМ ЫН4-ацетат 7,81 (+/-0,51) 1, 09 10,73 (+/-0,59) 0,59
12: 250 мМ ЫН4-ацетат 6,65 (+/-0,90) 0, 93 10,98 (+/-3,22) 0, 61
13: 100 мМ ЫН4НСО3 6,55 (+/-0,56) 0, 91 10,63 (+/-2,26) 0,59
14: 250 мМ ЫН4НСО3 6,72 (+/-0,20) 0, 94 9,95 (+/-1,85) 0,55
(п=5) (п=3)
Образцы лиофилизировали с использованием лиофилизатора ЬуоЗШг в следующих ниже циклических условиях: цикл 74 ч.
- 12 029972
Стадия Время (минуты) Температура Давление
Загрузка 0 5°С Атмосферное
60 5°С Атмосферное
Скорость замораживания 180 -55°С Атмосферное
3 амо р а.жи вание 300 -55°С Атмосферное
Скорость отжига 360 -15°С Атмосферное
Отжиг 660 -15°С Атмосферное
Скорость сушки 1° 780 -55°С Атмосферное
Замораживание 900 -55°С Атмосферное
Отбор вакуума 930 -55°С 100 мкм Нд
1° сушка 1050 -55°С 100 мкм Нд
Скорость сушки 1° 1170 -25°С 100 мкм Нд
1° сушка 3570 -25°С 100 мкм Нд
Скорость сушки 2° 3930 40°С 100 мкм Нд
2° сушки 4350 40°С 100 мкм Нд
Скорость доведения до комнатной температуры 2 часа 4470 25°С 100 мкм Нд
Выдерживание при комнатной температуре 4650 25°С 100 мкм Нд
74,5
Пример 2. Восстановление лиофилизированного альбиглютида.
Лиофилизаты восстанавливали 0,675 мл воды для инъекций (ГОН) с использованием 1 мл шприца и иглы 250 (5/8") через пробку подвергнутого лиофилизации флакона (шприцы для введения туберкулина, Вес1оп-Г)1с1<пъоп № 309626). Объем 0,675 мл корректирует объем сухих компонентов, приводя к конечному объему 0,75 мл. Восстановление проводили "способом встряхивания" или "способом отстаивания". В способе встряхивания образец встряхивали в течение 10 с с последующими 15 с покоя. В способе отстаивания образец покачивали взад и вперед в течение 5 с, а затем оставляли в покое. Считали, что образцы восстановились, когда во флаконах визуально не обнаруживали частиц. Результаты обоих способов восстановления продемонстрированы в табл. 1, а также на фиг. 1 и 2.
Пример 3. Лиофилизация альбиглютида в присутствии трет-бутанола.
Образцы альбиглютида получали для лиофилизации в соответствии с получением аналитической матрицы, описанной в табл. 1. Лиофилизаты получали лиофилизацией 0,750 мл раствора, содержащего 50 мг альбиглютида в 10 мМ фосфата натрия рН 7,2, с 117 мМ трегалозой, 153 мМ маннитом, 0,01% (мас./об.) полисорбатом 80 во флаконах (2 мл 13 мм), содержащих соответствующую концентрацию трет-бутанола (от 34 до 202 мМ или 0,25 до 2% мас./об.).
Таблица 2
Условия альбиглютида в зависимости от номера образца
Образец № 6 условий: Флаконы/ Условие Объем 100 мг/мл ΒΌ3 (мл)
1 альбиглютид контроль 52 45,0 (0,75 мл/флакон)
2 2% трет-бутанол 42 37,5 (0,76 мл/флакон)
3 1,5% трет-бутанол 42 37,5 (0,76 мл/флакон)
4 1% трет-бутанол 52 45,0 (0,76 мл/флакон)
5 0,5% трет-бутанол 42 37,5 (0,75 мл/флакон)
6 0,25% трет-бутанол 42 37,5 (0,75 мл/флакон)
Образцы лиофилизировали с использованием лиофилизатора Ьуо81аг в следующих ниже циклических условиях: цикл 74 ч.
- 13 029972
Таблица 3
Стадия Время (минуты) Температура Давление
Загрузка 0 5°С Атмосферное
60 5°С Атмосферное
Скорость замораживания 180 -55°С Атмосферное
Замораживание 300 -55°С Атмосферное
Скорость отжига 360 -15°С Атмосферное
Отжиг 660 -15°С Атмосферное
Скорость сушки 1° 780 -55°С Атмосферное
Замораживание 900 -55°С Атмосферное
Отбор вакуума 930 -55°С 100 мкм Нд
1° сушка 1050 -55°С 100 мкм Нд
Скорость сушки 1° 1170 -25°С 100 мкм Нд
1° сушка 3570 -25°С 100 мкм Нд
Скорость сушки 2° 3930 40°С 100 мкм Нд
2° сушки 4350 40°С 100 мкм Нд
Скорость доведения до комнатной температуры 2 часа 4470 25°С 100 мкм Нд
Выдерживание при комнатной температуре 4650 25°С 100 мкм Нд
74,5
Пример 4. Восстановление лиофилизированного альбиглютида.
Лиофилизаты восстанавливали 0,675 мл воды для инъекций (^14) с использованием 1 мл шприц и иглу 25Θ (5/8") через пробку подвергнутого лиофилизации флакона (шприцы для введения туберкулина, ВееЮп-Ощктзоп № 309626). Объем 0,675 мл корректирует объем сухих компонентов, приводя к конечному объему 0,75 мл. Восстановление проводили "способом отстаивания" (добавление воды сопровождалось немедленным легким перемешиванием с последующим отстаиванием флакона). Добавление воды проводили в четырех вариациях на основе участия химика-аналитика (три разных человека проводят этап восстановления) и способа пипетирования.
Химик-аналитик 1: восстановление с использованием шприца через пробку.
Химик-аналитик 2: восстановление с использованием шприца через пробку.
Химик-аналитик 3: восстановление с использованием шприца через пробку.
Химик-аналитик 1: восстановление традиционным способом пипетирования с использованием Р1000 Καΐπΐπ.
Каждое время восстановления приведено в табл. 4 и графически представлено на фиг. 3. Существует четкий эффект трет-бутанола, добавляемого перед лиофилизацией, на значения конечных точек получаемого времени восстановления. Контрольные образцы лиофилизировали в присутствии только буферного раствора (без добавки трет-бутанола) и получали среднее 1=17,87 (±2,94) мин (п=26), высокие и низкие значения составляли 1=12,25 мин и 1=26,53 мин соответственно. Образцы с 0,25% трет-бутанолом являлись практически идентичными контрольным образцам с конечной точкой среднего времени восстановления 1=19,35 (±4,08) мин (п=20), высокие и низкие значения составляли 1=12,42 мин и 1=28,90 мин соответственно.
При концентрациях трет-бутанола при 0,5% или выше существует явное увеличение скоростей восстановления, где значения конечных точек увеличиваются с увеличением концентраций трет-бутанола. При 0,5% трет-бутаноле конечная точка среднего времени восстановления всех результатов составляла приблизительно 65% от контрольной группы с 1=11,84 (±2,94) мин (п=19), высокие и низкие значения составляли 1=0,58 мин и 1=17,93 соответственно. Стоит отметить, что для одного образца в группе 0,5% получали >37 мин. В этом случае лиофилизат прилип к стенке флакона выше мениска растворителя и не попал в раствор, таким образом экспериментальную точку исключали из усреднения.
При сравнении групп 1% трет-бутанола, 1,5% трет-бутанола и 2% трет-бутанола выявлено, что су- 14 029972
ществует заметное уменьшение времени восстановления с конечными точками 1=7,71 (±2,44) мин (п=30) при 1% трет-бутаноле, 1=7,16 (±2,65) мин (п=20) при 1,5% трет-бутаноле и 1=4,74 (±1,75) мин (п=20) при 2% трет-бутаноле. Высокие и низкие значения конечных точек составляли 1=1,37 мин и 1=11,67 мин при 1% трет-бутаноле, 1=3,90 мин и 1=15,50 мин при 1,5% трет-бутаноле и 1=2,75 мин и 1=9,25 мин при 2% трет-бутаноле. Эти диапазоны значений позволяют предположить, что время восстановления альбиглютида, лиофилизированного в присутствии 2% трет-бутанола в буферном растворе, может проходить в 3 раза быстрее, порядка 10 мин, по сравнению с рекомендуемыми в настоящее время для альбиглютида в буферном растворе 30 мин. В целом образцы 2% трет-бутанола являются приблизительно в 1,5 раза более быстрыми, чем образцы 1% трет-бутанола, и являются в ~3,75 раза быстрее, чем группа контрольных образцов.
Таблица 4
Конечные точки среднего времени восстановления лиофилизатов альбиглютида, группируемых в соответствии с типом образца
Группирование Контроль 2% третВи 1,5% третВи 1% третВи 0,5% третВи 0,25% третВи
Все тесты среднее значение 17,87 4,74 7,16 7,71 11,84 19, 35
(станд. откл.) 2, 94 1,75 2, 65 2,44 5, 18 4,08
(п) 26 20 20 30 19 20
Химик-аналитик 1 (шприц) - среднее значение 17,06 4, 61 6, 51 6, 97 13,53 17,37
(станд. откл.) 1,42 1,57 1,27 1,45 0,71 4,34
(п) 6 3 3 6 3 3
Химик-аналитик 2 (шприц) - среднее значение 17,95 4,90 8, 63 7,16 9, 23 21,24
(станд. откл.) 3,27 2, 62 3, 81 3, 99 7,76 4,49
(п) 7 6 6 9 5 6
Химик-аналитик 3 (шприц) - среднее значение 18,01 4, 60 6, 39 8,00 11,48 18,80
(станд. откл.) 4,55 0, 87 1, 64 1,26 5, 05 3, 99
(п) 7 6 6 9 6 6
Химик-аналитик 1 (пипетирование) среднее значение 18,40 4,78 6,71 8,84 13, 86 18,94
(станд. откл.) 1,54 1,93 2,54 1,24 3,56 3, 93
(п) 6 5 5 6 5 5
Результаты времени восстановления лиофилизатов также разделяли в зависимости от химикааналитика, и сравнение способа, включающего введение через пробку (шприц), относительно традиционного способа распечатывания флакона и диспергирования с использованием пипетки Катт приведено в табл. 4 и графически представлено на фиг. 4. Распределение конечных точек времени восстановления в каждой группе образцов является основным источником вариабельности, где способы с участием индивидуального химика-аналитика и/или восстановления оказывают минимальным влиянием на средние значения или стандартные отклонения для каждого типа образца. Исключение составляет 0,5% трет-бутанол (образец 5) и 0,25% трет-бутанол (образец 6), для которых выявлена более широкая вариабельность значений времени восстановления и стандартных отклонений по сравнению с другими образцами.
Пример 5. Восстановление лиофилизированных тАЬ, бАЬ и ΙΕ18.
тАЬ к N000 (ЗЕЭ ΙΌ N0:3 и 4), бАЬ к ЮТК.1 (ЗЕЭ ΙΌ N0:5), ΙΜ8 (ЗЕЭ ΙΌ N0:6), к 1Ь5 (ЗЕЭ ΙΌ N03:7 и 8) и к СЭ20 (вариабельные домены ЗЕС) ΙΌ N0:9 и 10) концентрировали до показанных ниже
- 15 029972
концентраций в составе, содержащем 26 мМ гистидина, 150 мМ трегалозы, 0,02% полисорбата 80 (РЗ80) рН 6,0 в объеме приблизительно 0,75 мл, а затем лиофилизировали в 2-мл флаконе.
79,3 мг шЛЬ к 1Ь5,
77,9 мг тАЬ к NΟОΟ,
78,2 мг тАЬ к СЭ20,
29,1 мг бАЬ к ΤΝΡΚ.1,
19,0 мг Ш-18.
Лиофилизаты восстанавливали 0,675 мл воды для инъекций (VI) с использованием 1 мл шприца и иглы 25О (5/8") через пробку подвергнутого лиофилизации флакона (шприцы для введения туберкулина, Вес1оп-Пюктзоп № 309626). Объем 0,675 мл корректирует объем сухих компонентов, приводя к конечному объему 0,75 мл. Восстановление проводили "способом отстаивания" (добавление воды сопровождалось немедленным легким перемешиванием с последующим отстаиванием флакона). Добавление воды проводили три разных химика-аналитика (три разных человека проводят этап восстановления) посредством шприца через пробку.
Каждые значения времени восстановления приведены в табл. 5 и графически представлены на фиг.
6 и 7.
Среди всех тестируемых 5 белков, белки с вводимым 2% трет-бутанолом во время лиофилизации обладали меньшим временем восстановления, чем контрольные группы. Это выявляют не только для тестируемых тАЬ, а также можно наблюдать для тестируемых низкомолекулярных соединений, бАЬ к ΤΝΡΚ1 и Ш-18, для которых также показано меньшее время восстановления в присутствии третбутанола.
Специалисты в данной области узнают или будут способны определять с использованием не более чем общепринятого экспериментирования многие эквиваленты конкретных вариантов осуществления изобретения, описываемых в настоящем описании.
Предполагают, что такие эквиваленты входят в следующую ниже формулу изобретения. Полные содержания всех ссылок патентов и опубликованных патентных заявок, цитируемых на всем протяжении настоящей заявки, таким образом включены посредством ссылки.
- 16 029972
СПИСОК ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ
<110> ΚΚΑΝΖ, Латез
КТМЕЬЬА, ЛозерЬ
<120> Лиофилизированные составы
<130> Ρυ64481
<150> 61/440,918
<151> 2011-02-09
<160> 10
<170> ЕазкБЕ12 £ог ЬФпЬогз УегзФоп 4.0
<210> 1
<211> 645
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Полипептид
<400> 1
НФз О1у О1и О1у
1 О1п А1а А1а Ьуз
О1и О1у ТЬг 20 РЬе
А1а Ьуз 35 О1и РЬе
Бег 50 О1и Уа1 А1а
65 А1а Ьеи Уа1 Ьеи
О1и Азр НФз Уа1
Суз Уа1 А1а 100 Азр
Ьеи РЬе 115 О1у Азр
О1у 130 О1и Мек А1а
145 Суз РЬе Ьеи О1п
Агд Рго О1и Уа1
ТЬг РЬе Ьеи 180 Ьуз
РЬе Туг 195 А1а Рго
РЬе 210 ТЬг О1и Суз
225 Ьуз Ьеи Азр О1и
Агд Ьеи Ьуз Суз
А1а Тгр А1а 260 Уа1
А1а О1и 275 Уа1 Бег
ТЬг РЬе ТЬг Бег
5 О1и РЬе 11е А1а
ТЬг Бег Азр Уа1
11е А1а Тгр 40 Ьеи
НФз Агд 55 РЬе Ьуз
11е 70 А1а РЬе А1а
85 Ьуз Ьеи Уа1 Азп
О1и Бег А1а О1и
Ьуз Ьеи Суз 120 ТЬг
Азр Суз 135 Суз А1а
НФз 150 Ьуз Азр Азр
165 Азр Уа1 Мек Суз
Ьуз Туг Ьеи Туг
О1и Ьеи Ьеи 200 РЬе
Суз О1п 215 А1а А1а
Ьеи 230 Агд Азр О1и
245 А1а Бег Ьеи О1п
А1а Агд Ьеи Бег
Ьуз Ьеи Уа1 280 ТЬг
Азр Уа1 10 Бег Бег
Тгр 25 Ьеи Уа1 Ьуз
Бег Бег Туг Ьеи
Уа1 Ьуз О1у Агд 60
Азр Ьеи О1у 75 О1и
О1п Туг 90 Ьеи О1п
О1и 105 Уа1 ТЬг О1и
Азп Суз Азр Ьуз
Уа1 А1а ТЬг Ьеи 140
Ьуз О1п О1и 155 Рго
Азп Рго 170 Азп Ьеи
ТЬг 185 А1а РЬе НФз
О1и 11е А1а Агд
РЬе А1а Ьуз Агд 220
Азр Ьуз А1а 235 А1а
О1у Ьуз 250 А1а Бег
Ьуз 265 РЬе О1у О1и
О1п Агд РЬе Рго
Азр Ьеи ТЬг Ьуз
Туг Ьеи О1и 15 О1у
О1у Агд 30 НФз О1у
О1и 45 О1у О1п А1а
Азр А1а НФз Ьуз
О1и Азп РЬе Ьуз 80
О1п Суз Рго 95 РЬе
РЬе А1а 110 Ьуз ТЬг
Бег 125 Ьеи НФз ТЬг
Агд О1и ТЬг Туг
О1и Агд Азп О1и 160
Рго Агд Ьеи 175 Уа1
Азр Азп 190 О1и О1и
Агд 205 НФз Рго Туг
Туг Ьуз А1а А1а
Суз Ьеи Ьеи Рго 240
Бег А1а Ьуз 255 О1п
Агд А1а 270 РЬе Ьуз
Ьуз 285 А1а О1и РЬе
Уа1 Нтз ТЬг О1и
- 17 029972
290 295 300
Суз Суз Няз О1у Азр Ьеи Ьеи О1и Суз А1а Азр Азр Агд А1а Азр Ьеи
305 310 315 320
А1а Ьуз Туг 11е Суз О1и Азп О1п Азр Бег 11е Бег Бег Ьуз Ьеи Ьуз
325 330 335
О1и Суз Суз О1и Ьуз Рго Ьеи Ьеи О1и Ьуз Бег Няз Суз 11е А1а О1и
340 345 350
ναι О1и Азп Азр О1и МеЬ Рго А1а Азр Ьеи Рго Бег Ьеи А1а А1а Азр
355 360 365
РЪе Уа1 О1и Бег Ьуз Азр Уа1 Суз Ьуз Азп Туг А1а О1и А1а Ьуз Азр
370 375 380
Уа1 РЪе Ьеи О1у МеЬ РЪе Ьеи Туг О1и Туг А1а Агд Агд Няз Рго Азр
385 390 395 400
Туг Бег Уа1 Уа1 Ьеи Ьеи Ьеи Агд Ьеи А1а Ьуз ТЪг Туг О1и ТЪг ТЪг
405 410 415
Ьеи О1и Ьуз Суз Суз А1а А1а А1а Азр Рго Няз О1и Суз Туг А1а Ьуз
420 425 430
να1 РЪе Азр О1и РЪе Ьуз Рго Ьеи Уа1 О1и О1и Рго О1п Азп Ьеи 11е
435 440 445
Ьуз О1п Азп Суз О1и Ьеи РЪе О1и О1п Ьеи О1у О1и Туг Ьуз РЪе О1п
450 455 460
Азп А1а Ьеи Ьеи Уа1 Агд Туг ТЪг Ьуз Ьуз Уа1 Рго О1п Уа1 Бег ТЪг
465 470 475 480
Рго ТЪг Ьеи Уа1 О1и Уа1 Бег Агд Азп Ьеи О1у Ьуз Уа1 О1у Бег Ьуз
485 490 495
Суз Суз Ьуз Няз Рго О1и А1а Ьуз Агд МеЬ Рго Суз А1а О1и Азр Туг
500 505 510
Ьеи Бег Уа1 Уа1 Ьеи Азп О1п Ьеи Суз Уа1 Ьеи Няз О1и Ьуз ТЪг Рго
515 520 525
να1 Бег Азр Агд Уа1 ТЪг Ьуз Суз Суз ТЪг О1и Бег Ьеи Уа1 Азп Агд
530 535 540
Агд Рго Суз РЪе Бег А1а Ьеи О1и Уа1 Азр О1и ТЪг Туг Уа1 Рго Ьуз
545 550 555 560
О1и РЪе Азп А1а О1и ТЪг РЪе ТЪг РЪе Няз А1а Азр 11е Суз ТЪг Ьеи
565 570 575
Бег О1и Ьуз О1и Агд О1п 11е Ьуз Ьуз О1п ТЪг А1а Ьеи Уа1 О1и Ьеи
580 585 590
να1 Ьуз Няз Ьуз Рго Ьуз А1а ТЪг Ьуз О1и О1п Ьеи Ьуз А1а Уа1 МеЬ
595 600 605
Азр Азр РЪе А1а А1а РЪе Уа1 О1и Ьуз Суз Суз Ьуз А1а Азр Азр Ьуз
610 615 620
О1и ТЪг Суз РЪе А1а О1и О1и О1у Ьуз Ьуз Ьеи Уа1 А1а А1а Бег О1п
625 630 635 640
А1а А1а Ьеи О1у Ьеи
645
<210> 2
<211> 31
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Полипептид
<220>
<221> ВАРИАНТ
<222> 31
<223> Хаа = О1у или -ΝΗ2
<400> 2
Няз А1а О1и О1у ТЪг РЪе ТЪг Бег Азр Уа1 Бег Бег Туг Ьеи О1и О1у
1 5 10 15
- 18 029972
Ο1η А1а А1а Ьуз О1и РЬе 11е А1а Тгр Беи Уа1 Ьуз О1у Агд Хаа 20 25 30
<210> 3
<211> 462
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> тяжелая цепь тАЬ к ΝΟΟΟ.
<400> 3
МеБ О1у Тгр Бег Суз 11е 11е Беи
1 Уа1 Нтз Бег Ο1η 5 Уа1 Ο1η Беи Уа1
Рго О1у А1а 20 Бег Уа1 Ьуз Уа1 Бег
ТЬг Бег 35 Туг Тгр МеБ Няз Тгр 40 Уа1
О1и 50 Тгр 11е О1у Азп 11е 55 Азп Рго
65 О1и Ьуз РЬе Буз Бег 70 Ьуз А1а ТЬг
ТЬг А1а Туг МеБ 85 О1и Беи Бег Бег
Туг Туг Суз 100 О1и Беи МеБ Ο1η О1у
ТЬг Уа1 115 Бег Бег А1а Бег ТЬг 120 Ьуз
Рго 130 Бег Бег Буз Бег ТЬг 135 Бег О1у
145 Уа1 Буз Азр Туг РЬе 150 Рго О1и Рго
А1а Беи ТЬг Бег 165 О1у Уа1 Няз ТЬг
О1у Ьеи Туг 180 Бег Беи Бег Бег Уа1
О1у ТЬг 195 Ο1η ТЬг Туг 11е Суз 200 Азп
Ьуз 210 Уа1 Азр Ьуз Ьуз Уа1 215 О1и Рго
225 Суз Рго Рго Суз Рго 230 А1а Рго О1и
Беи РЬе Рго Рго 245 Ьуз Рго Ьуз Азр
О1и Уа1 ТЬг 260 Суз Уа1 Уа1 Уа1 Азр
Буз РЬе 275 Азп Тгр Туг Уа1 Азр 280 О1у
Ьуз 290 Рго Агд О1и О1и Ο1η 295 Туг Азп
305 Ьеи ТЬг Уа1 Ьеи Няз 310 Ο1η Азр Тгр
Буз Уа1 Бег Азп 325 Буз А1а Ьеи Рго
Буз А1а Ьуз 340 О1у Ο1η Рго Агд О1и
Бег Агд 355 Азр О1и Беи ТЬг Буз 360 Азп
Ьуз 370 О1у РЬе Туг Рго Бег 375 Азр 11е
385 390
РЬе Ьеи 10 Уа1 А1а ТЬг А1а ТЬг 15 О1у
Ο1η 25 Бег О1у А1а О1и Уа1 30 Ьуз Буз
Суз Буз А1а Бег О1у 45 Туг ТЬг РЬе
Агд Ο1η А1а Рго 60 О1у Ο1η О1у Беи
Бег Азп О1у 75 О1у ТЬг Азп Туг Азп 80
МеБ ТЬг 90 Агд Азр ТЬг Бег ТЬг 95 Бег
Ьеи 105 Агд Бег О1и Азр ТЬг 110 А1а Уа1
Туг Тгр О1у Ο1η О1у 125 ТЬг Ьеи Уа1
О1у Рго Бег Уа1 140 РЬе Рго Беи А1а
О1у ТЬг А1а 155 А1а Беи О1у Суз Ьеи 160
Уа1 ТЬг 170 Уа1 Бег Тгр Азп Бег 175 О1у
РЬе 185 Рго А1а Уа1 Ьеи Ο1η 190 Бег Бег
Уа1 ТЬг Уа1 Рго Бег 205 Бег Бег Ьеи
Уа1 Азп Няз Ьуз 220 Рго Бег Азп ТЬг
Буз Бег Суз 235 Азр Ьуз ТЬг Няз ТЬг 240
Беи А1а 250 О1у А1а Рго Бег Уа1 255 РЬе
ТЬг 265 Беи МеБ 11е Бег Агд 270 ТЬг Рго
Уа1 Бег Няз О1и Азр 285 Рго О1и Уа1
Уа1 О1и Уа1 Няз 300 Азп А1а Буз ТЬг
Бег ТЬг Туг 315 Агд Уа1 Уа1 Бег Уа1 320
Ьеи Азп 330 О1у Ьуз О1и Туг Ьуз 335 Суз
А1а 345 Рго 11е О1и Буз ТЬг 350 11е Бег
Рго Ο1η Уа1 Туг ТЬг 365 Беи Рго Рго
Ο1η Уа1 Бег Беи 380 ТЬг Суз Ьеи Уа1
А1а Уа1 О1и 395 Тгр О1и Бег Азп О1у 400
- 19 029972
О1п Рго О1и Азп Азп 405 Туг Ьуз ТЬг ТЬг Рго 410 Рго Уа1 Ьеи Азр Зег 415 Азр
О1у Зег РЬе РЬе Ьеи Туг Зег Ьуз Ьеи ТЬг Уа1 Азр Ьуз Зег Агд Тгр
420 425 430
Ο1π О1п О1у Азп Уа1 РЬе Зег Суз Зег Уа1 МеЬ Н1з О1и А1а Ьеи Нтз
435 440 445
Азп Ηίβ Туг ТЬг О1п Ьуз Зег Ьеи Зег Ьеи Зег Рго О1у Ьуз
450 455 460
<210> 4 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность
<220>
<223> легкая цепь тАЪ к ΝΟΟΟ.
<400> 4
МеЬ О1у Тгр Зег Суз 11е 11е Ьеи РЬе Ьеи Уа1 А1а ТЬг А1а ТЬг О1у
1 5 10 15
Уа1 Н1з Зег Азр 11е Уа1 МеЬ ТЬг О1п Зег Рго Ьеи Зег Азп Рго Уа1
20 25 30
ТЬг Ьеи О1у О1п Рго Уа1 Зег 11е Зег Суз Агд Зег Зег Ьуз Зег Ьеи
35 40 45
Ьеи Туг Ьуз Азр О1у Ьуз ТЬг Туг Ьеи Азп Тгр РЬе Ьеи О1п Агд Рго
50 55 60
О1у О1п Зег Рго О1п Ьеи Ьеи 11е Туг Ьеи МеЬ Зег ТЬг Агд А1а Зег
65 70 75 80
О1у Уа1 Рго Азр Агд РЬе Зег О1у О1у О1у Зег О1у ТЬг Азр РЬе ТЬг
85 90 95
Ьеи Ьуз 11е Зег Агд Уа1 О1и А1а О1и Азр Уа1 О1у Уа1 Туг Туг Суз
100 105 110
О1п О1п Ьеи Уа1 О1и Туг Рго Ьеи ТЬг РЬе О1у О1п О1у ТЬг Ьуз Ьеи
115 120 125
О1и 11е Ьуз Агд ТЬг Уа1 А1а А1а Рго Зег Уа1 РЬе 11е РЬе Рго Рго
130 135 140
Зег Азр О1и О1п Ьеи Ьуз Зег О1у ТЬг А1а Зег Уа1 Уа1 Суз Ьеи Ьеи
145 150 155 160
Азп Азп РЬе Туг Рго Агд О1и А1а Ьуз Уа1 О1п Тгр Ьуз Уа1 Азр Азп
165 170 175
А1а Ьеи О1п Зег О1у Азп Зег О1п О1и Зег Уа1 ТЬг О1и О1п Азр Зег
180 185 190
Ьуз Азр Зег ТЬг Туг Зег Ьеи Зег Зег ТЬг Ьеи ТЬг Ьеи Зег Ьуз А1а
195 200 205
Азр Туг О1и Ьуз Н1з Ьуз Уа1 Туг А1а Суз О1и Уа1 ТЬг Н1з О1п О1у
210 215 220
Ьеи Зег Зег Рго Уа1 ТЬг Ьуз Зег РЬе Азп Агд О1у О1и Суз
225 230 235
<210> <211> <212> <213> 5 119 БЕЛОК Искусственная последовательность
<220>
<223> ЪАЪ к ΊΝΓΚ1.
<400> 5
О1и Уа1 О1п Ьеи Ьеи О1и Зег О1у О1у О1у Ьеи Уа1 О1п Рго О1у О1у
1 5 10 15
Зег Ьеи Агд Ьеи Зег Суз А1а А1а Зег О1у РЬе ТЬг РЬе А1а Нгз О1и
- 20 029972
20 25 30
ТЬг МеЕ Уа1 Тгр Уа1 Агд О1п А1а Рго О1у Ьуз О1у Ьеи О1и Тгр Уа1
35 40 45
Бег Ηίβ 11е Рго Рго Азр О1у О1п Азр Рго РЬе Туг А1а Азр Бег Уа1
50 55 60
Ьуз О1у Агд РЬе ТЬг 11е Бег Агд Азр Азп Бег Ьуз Азп ТЬг Ьеи Туг
65 70 75 80
Ьеи О1п МеЕ Азп Бег Ьеи Агд А1а О1и Азр ТЬг А1а Уа1 Туг Н1з Суз
85 90 95
А1а Ьеи Ьеи Рго Ьуз Агд О1у Рго Тгр РЬе Азр Туг Тгр О1у О1п О1у
100 105 110
ТЬг Ьеи Уа1 ТЬг Уа1 Бег Бег
115
<210> 6 <211> 157 <212> БЕЛОК <213> Ното ί зар1епз
<400> 6
Туг РЬе О1у Ьуз Ьеи О1и Бег Ьуз Ьеи Бег Уа1 11е Агд Азп Ьеи Азп
1 5 10 15
Азр О1п Уа1 Ьеи РЬе 11е Азр О1п О1у Азп Агд Рго Ьеи РЬе О1и Азр
20 25 30
МеЕ ТЬг Азр Бег Азр Суз Агд Азр Азп А1а Рго Агд ТЬг 11е РЬе 11е
35 40 45
11е Бег МеЕ Туг Ьуз Азр Бег О1п Рго Агд О1у МеЕ А1а Уа1 ТЬг 11е
50 55 60
Бег Уа1 Ьуз Суз О1и Ьуз 11е Бег ТЬг Ьеи Бег Суз О1и Азп Ьуз 11е
65 70 75 80
11е Бег РЬе Ьуз О1и МеЕ Азп Рго Рго Азр Азп 11е Ьуз Азр ТЬг Ьуз
85 90 95
Бег Азр 11е 11е РЬе РЬе О1п Агд Бег Уа1 Рго О1у Н1з Азр Азп Ьуз
100 105 110
МеЕ О1п РЬе О1и Бег Бег Бег Туг О1и О1у Туг РЬе Ьеи А1а Суз О1и
115 120 125
Ьуз О1и Агд Азр Ьеи РЬе Ьуз Ьеи 11е Ьеи Ьуз Ьуз О1и Азр О1и Ьеи
130 135 140
О1у Азр Агд Бег 11е МеЕ РЬе ТЬг Уа1 О1п Азп О1и Азр
145 150 155
<210> 7 <211> 449 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность
<220>
<223> тяжелая цепь тАЬ к !Ь5.
<400> 7
О1п Уа1 ТЬг Ьеи Агд О1и Бег О1у Рго А1а Ьеи Уа1 Ьуз Рго ТЬг О1п
1 5 10 15
ТЬг Ьеи ТЬг Ьеи ТЬг Суз ТЬг Уа1 Бег О1у РЬе Бег Ьеи ТЬг Бег Туг
20 25 30
Бег Уа1 Н1з Тгр Уа1 Агд О1п Рго Рго О1у Ьуз О1у Ьеи О1и Тгр Ьеи
35 40 45
О1у Уа1 11е Тгр А1а Бег О1у О1у ТЬг Азр Туг Азп Бег А1а Ьеи МеЕ
50 55 60
Бег Агд Ьеи Бег 11е Бег Ьуз Азр ТЬг Бег Агд Азп О1п Уа1 Уа1 Ьеи
65 70 75 80
ТЬг МеЕ ТЬг Азп МеЕ Азр Рго Уа1 Азр ТЬг А1а ТЬг Туг Туг Суз А1а
- 21 029972
85 90 95
Агд Азр Рго Рго Бег Бег Ьеи Ьеи Агд Ьеи Азр Туг Тгр О1у Агд О1у
100 105 110
ТИг Рго Уа1 ТИг Уа1 Бег Бег А1а Бег ТИг Ьуз О1у Рго Бег Уа1 РИе
115 120 125
Рго Ьеи А1а Рго Бег Бег Ьуз Бег ТИг Бег О1у О1у ТИг А1а А1а Ьеи
130 135 140
О1у Суз Ьеи Уа1 Ьуз Азр Туг РИе Рго О1и Рго Уа1 ТИг Уа1 Бег Тгр
145 150 155 160
Азп Бег О1у А1а Ьеи ТИг Бег О1у Уа1 Нтз ТИг РИе Рго А1а Уа1 Ьеи
165 170 175
О1п Бег Бег О1у Ьеи Туг Бег Ьеи Бег Бег Уа1 Уа1 ТИг Уа1 Рго Бег
180 185 190
Бег Бег Ьеи О1у ТИг О1п ТИг Туг 11е Суз Азп Уа1 Азп Нтз Ьуз Рго
195 200 205
Бег Азп ТИг Ьуз Уа1 Азр Ьуз Агд Уа1 О1и Рго Ьуз Бег Суз Азр Ьуз
210 215 220
ТИг Ηΐ3 ТИг Суз Рго Рго Суз Рго А1а Рго О1и Ьеи Ьеи О1у О1у Рго
225 230 235 240
Бег Уа1 РИе Ьеи РИе Рго Рго Ьуз Рго Ьуз Азр ТИг Ьеи МеЬ 11е Бег
245 250 255
Агд ТИг Рго О1и Уа1 ТИг Суз Уа1 Уа1 Уа1 Азр Уа1 Бег Н1з О1и Азр
260 265 270
Рго О1и Уа1 Ьуз РИе Азп Тгр Туг Уа1 Азр О1у Уа1 О1и Уа1 Н1з Азп
275 280 285
А1а Ьуз ТИг Ьуз Рго Агд О1и О1и О1п Туг Азп Бег ТИг Туг Агд Уа1
290 295 300
Уа1 Бег Уа1 Ьеи ТИг Уа1 Ьеи Нтз О1п Азр Тгр Ьеи Азп О1у Ьуз О1и
305 310 315 320
Туг Ьуз Суз Ьуз Уа1 Бег Азп Ьуз А1а Ьеи Рго А1а Рго 11е О1и Ьуз
325 330 335
ТИг 11е Бег Ьуз А1а Ьуз О1у О1п Рго Агд О1и Рго О1п Уа1 Туг ТИг
340 345 350
Ьеи Рго Рго Бег Агд О1и О1и МеЬ ТИг Ьуз Азп О1п Уа1 Бег Ьеи ТИг
355 360 365
Суз Ьеи Уа1 Ьуз О1у РИе Туг Рго Бег Азр 11е А1а Уа1 О1и Тгр О1и
370 375 380
Бег Азп О1у О1п Рго О1и Азп Азп Туг Ьуз ТИг ТИг Рго Рго Уа1 Ьеи
385 390 395 400
Азр Бег Азр С1у Бег РИе РИе Ьеи Туг Бег Ьуз Ьеи ТИг Уа1 Азр Ьуз
405 410 415
Бег Агд Тгр О1п О1п О1у Азп Уа1 РИе Бег Суз Бег Уа1 МеЬ Н1з О1и
420 425 430
А1а Ьеи Нгз Азп Нтз Туг ТИг О1п Ьуз Бег Ьеи Бег Ьеи Бег Рго О1у
435 440 445
Ьуз
<210> 8
<211> 220
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> легкая цепь тАЬ к !Ь5.
<400> 8
Азр 1 11е Уа1 МеЬ ТИг О1п 5 Бег Рго Азр Бег 10 Ьеи А1а Уа1 Бег Ьеи О1у 15
О1и Агд А1а ТИг 11е Азп Суз Ьуз Бег Бег О1п Бег Ьеи Ьеи Азп Бег
20 25 30
О1у Азп О1п Ьуз Азп Туг Ьеи А1а Тгр Туг О1п О1п Ьуз Рго О1у О1п
- 22 029972
35 40 45
Рго Рго Ьуз Ьеи Ьеи 11е Туг О1у А1а Зег ТЬг Агд О1и Зег О1у Уа1
50 55 60
Рго Азр Агд РЬе Зег О1у Зег О1у Зег О1у ТЬг Азр РЬе ТЬг Ьеи ТЬг
65 70 75 80
11е Зег Зег Ьеи О1п А1а О1и Азр Уа1 А1а Уа1 Туг Туг Суз О1п Азп
85 90 95
ναι Ηί3 Зег РЬе Рго РЬе ТЬг РЬе С1у О1у О1у ТЬг Ьуз Ьеи О1и 11е
100 105 110
Ьуз Агд ТЬг Уа1 А1а А1а Рго Зег Уа1 РЬе 11е РЬе Рго Рго Зег Азр
115 120 125
О1и О1п Ьеи Ьуз Зег О1у ТЬг А1а Зег Уа1 Уа1 Суз Ьеи Ьеи Азп Азп
130 135 140
РЬе Туг Рго Агд О1и А1а Ьуз Уа1 О1п Тгр Ьуз Уа1 Азр Азп А1а Ьеи
145 150 155 160
О1п Зег О1у Азп Зег О1п О1и Зег Уа1 ТЬг О1и О1п Азр Зег Ьуз Азр
165 170 175
Зег ТЬг Туг Зег Ьеи Зег Зег ТЬг Ьеи ТЬг Ьеи Зег Ьуз А1а Азр Туг
180 185 190
О1и Ьуз Ηί3 Ьуз Уа1 Туг А1а Суз О1и Уа1 ТЬг Н18 О1п О1у Ьеи Зег
195 200 205
Зег Рго Уа1 ТЬг Ьуз Зег РЬе Азп Агд О1у О1и Суз
210 215 220
<210> 9 <211> 141 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность
<220>
<223> νΗ антитела к СБ2 0
<400> 9
МеЬ РЬе Ьеи О1у Ьеи Зег Тгр 11е РЬе Ьеи Ьеи А1а 11е Ьеи Ьуз О1у
1 5 10 15
Vа1 О1п Суз О1и Vа1 О1п Ьеи Vа1 О1и Зег О1у О1у О1у Ьеи Vа1 Рго
20 25 30
О1п О1у Агд Зег Ьеи Агд Ьеи Зег Суз А1а А1а Зег О1у РЬе ТЬг РЬе
35 40 45
Азп Азр Туг А1а МеЬ Идз Тгр Vа1 Агд О1п А1а Рго О1у Ьуз О1у Ьеи
50 55 60
О1и Тгр Vа1 Зег ТЬг 11е Зег Тгр Азп Зег О1у Зег 11е О1у Туг А1а
65 70 75 80
Азр Зег Vа1 Ьуз О1у Агд РЬе ТЬг 11е Зег Агд Азр Азп А1а Ьуз Ьуз
85 90 95
Зег Ьеи Туг Ьеи О1п МеЬ Азп Зег Ьеи Агд А1а О1и Азр ТЬг А1а Ьеи
100 105 110
Туг Туг Суз А1а Ьуз Азр 11е О1п Туг О1у Азп Туг Туг Туг О1у МеЬ
115 120 125
Азр Vа1 Тгр О1у О1п О1у ТЬг ТЬг Vа1 ТЬг Vа1 Зег Зег
130 135 140
<210> <211> <212> <213> 10 127 БЕЛОК Искусственная последовательность
<220>
<223> νΣ антитела к СО2 0
<400> 10
- 23 029972
МеС 1 О1и А1а Рго А1а 5 О1п Ьеи Ьеи РЬе Ьеи 10 Ьеи Ьеи Ьеи Тгр Ьеи 15 Рго
Азр ТЬг ТЬг О1у О1и 11е Уа1 Ьеи ТЬг О1п Бег Рго А1а ТЬг Ьеи Бег
20 25 30
Ьеи Бег Рго О1у О1и Агд А1а ТЬг Ьеи Бег Суз Агд А1а Бег О1п Бег
35 40 45
Уа1 Бег Бег Туг Ьеи А1а Тгр Туг О1п О1п Ьуз Рго О1у О1п А1а Рго
50 55 60
Агд Ьеи Ьеи 11е Туг Азр А1а Бег Азп Агд А1а ТЬг О1у 11е Рго А1а
65 70 75 80
Агд РЬе Бег О1у Бег О1у Бег О1у ТЬг Азр РЬе ТЬг Ьеи ТЬг 11е Бег
85 90 95
Бег Ьеи О1и Рго О1и Азр РЬе А1а Уа1 Туг Туг Суз О1п О1п Агд Бег
100 105 110
Азп Тгр Рго 11е ТЬг РЬе О1у О1п О1у ТЬг Агд Ьеи О1и 11е Ьуз
115 120 125

Claims (12)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Способ получения полипептидной композиции, включающий объединение полипептида с добавкой трет-бутанола с образованием жидкой смеси и лиофилизацию жидкой смеси с получением лиофилизированной полипептидной композиции, где жидкая смесь содержит от приблизительно 2 до приблизительно 5 об.% трет-бутанола.
  2. 2. Способ по п.1, где полипептид представляет собой антигенсвязывающий полипептид.
  3. 3. Способ по п.1, где полипептид содержит по меньшей мере два полипептида СЬР-1, генетически слитых с Ν-концом сывороточного альбумина человека.
  4. 4. Способ по п.1, где антигенсвязывающий полипептид выбран из группы, состоящей из растворимого рецептора, антитела, фрагмента антитела, одиночного вариабельного домена иммуноглобулина, РаЬ, Р(аЬ')2, Εν, дисульфид-связанного Εν, 8сРу, полиспецифического антитела в закрытой конформации, дисульфид-связанного и диатела.
  5. 5. Способ получения жидкой полипептидной композиции, включающий
    объединение полипептида с трет-бутанолом с образованием жидкой смеси, где жидкая смесь содержит от приблизительно 2 до приблизительно 5 об.% трет-бутанола;
    лиофилизацию жидкой смеси для получения лиофилизированной полипептидной композиции; получение лиофилизированного полипептида; и
    восстановление лиофилизированного полипептида достаточным количеством фармацевтически приемлемого диспергирующего средства с получением жидкой полипептидной композиции.
  6. 6. Способ по п.5, где полипептид представляет собой антигенсвязывающий полипептид.
  7. 7. Способ по п.6, где полипептид содержит по меньшей мере два полипептида СЬР-1, генетически слитых с Ν-концом сывороточного альбумина человека.
  8. 8. Способ по п.6, где антигенсвязывающий полипептид выбран из группы, состоящей из растворимого рецептора, антитела, фрагмента антитела, одиночного вариабельного домена иммуноглобулина, ЕаЬ, Е(аЬ')2, Εν, дисульфид-связанного Εν, 8сΕν, полиспецифического антитела в закрытой конформации, дисульфид-связанного 8сΕν и диатела.
  9. 9. Способ уменьшения времени восстановления лиофилизированной полипептидной композиции, включающий:
    a) лиофилизацию жидкой смеси, содержащей полипептид, где жидкая смесь содержит от приблизительно 2 до приблизительно 5 об.% трет-бутанола, и
    b) восстановление лиофилизированного полипептида достаточным количеством фармацевтически приемлемого диспергирующего средства до лиофилизированной полипептидной композиции с получением жидкой полипептидной композиции,
    где время восстановления полипептида, лиофилизированного в присутствии добавки трет-бутанола, является меньше, чем время восстановления аналогичного полипептида, лиофилизированного при отсутствии добавки трет-бутанола.
  10. 10. Способ по п.9, где полипептид представляет собой антигенсвязывающий полипептид.
  11. 11. Способ по п.9, где полипептид содержит по меньшей мере два полипептида СЬР-1, генетически слитых с Ν-концом сывороточного альбумина человека.
  12. 12. Способ по п.9, где антигенсвязывающий полипептид выбран из группы, состоящей из растворимого рецептора, антитела, фрагмента антитела, одиночного вариабельного домена иммуноглобулина, ЕаЬ, Е(аЬ')2, Εν, дисульфид-связанного Εν, 8сΕν, полиспецифического антитела в закрытой конформации, дисульфид-связанного 8сΕν и диатела.
    - 24 029972
EA201391136A 2011-02-09 2012-02-09 Способы получения полипептидных композиций EA029972B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201161440918P 2011-02-09 2011-02-09
PCT/US2012/024452 WO2012109429A2 (en) 2011-02-09 2012-02-09 Lyophilized formulations

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201391136A1 EA201391136A1 (ru) 2014-05-30
EA029972B1 true EA029972B1 (ru) 2018-06-29

Family

ID=46639199

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201391136A EA029972B1 (ru) 2011-02-09 2012-02-09 Способы получения полипептидных композиций

Country Status (16)

Country Link
US (1) US10286037B2 (ru)
EP (1) EP2672986B1 (ru)
JP (1) JP6125436B2 (ru)
KR (1) KR20140044305A (ru)
CN (2) CN107837395A (ru)
AU (1) AU2012214419B2 (ru)
BR (1) BR112013020383A2 (ru)
CA (1) CA2827033A1 (ru)
DK (1) DK2672986T3 (ru)
EA (1) EA029972B1 (ru)
ES (1) ES2791690T3 (ru)
IL (1) IL227896B (ru)
MX (1) MX2013009280A (ru)
SG (1) SG192671A1 (ru)
WO (1) WO2012109429A2 (ru)
ZA (1) ZA201306118B (ru)

Families Citing this family (21)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU2009228163B2 (en) 2008-03-28 2012-08-30 Glaxosmithkline Llc Methods of treatment
MX2016012447A (es) 2014-03-24 2017-01-06 Biogen Ma Inc Formulaciones de factor ix liofilizadas.
CN103920148B (zh) * 2014-04-24 2016-06-22 山东新华医疗器械股份有限公司 一种单克隆抗体制剂的冷冻干燥工艺
CN103966323A (zh) * 2014-04-25 2014-08-06 广州迪澳生物科技有限公司 可常温运输的干粉化恒温扩增检测试剂及其制备方法
US11273127B2 (en) * 2014-05-06 2022-03-15 The Regents Of The University Of Colorado, A Body Corporate Compositions, methods and uses for thermally stable multi-targeted antigens
WO2015171810A1 (en) * 2014-05-06 2015-11-12 The Regents Of The University Of Colorado, A Body Corporate Compositions, methods and uses for thermally stable human papillomavirus formulations
EP3160491A4 (en) * 2014-06-25 2018-01-17 GlaxoSmithKline LLC Pharmaceutical compositions
AR105616A1 (es) 2015-05-07 2017-10-25 Lilly Co Eli Proteínas de fusión
EP3313420B1 (en) 2015-06-25 2024-03-13 The Children's Medical Center Corporation Methods and compositions relating to hematopoietic stem cell expansion, enrichment, and maintenance
KR20180037275A (ko) 2015-08-24 2018-04-11 글락소스미스클라인 인털렉츄얼 프로퍼티 (넘버 2) 리미티드 생물제약 조성물
WO2017161001A1 (en) 2016-03-15 2017-09-21 Children's Medical Center Corporation Methods and compositions relating to hematopoietic stem cell expansion
CN107661288A (zh) * 2016-07-29 2018-02-06 江苏泰康生物医药有限公司 含有glp‑1 类似物融合蛋白的稳定液体制剂及其制备
EA201991207A1 (ru) * 2016-12-19 2019-12-30 Гленмарк Фармасьютикалс С.А. Новые агонисты tnfr и их применение
JP2020503316A (ja) * 2016-12-22 2020-01-30 ジェネンテック， インコーポレイテッド 凍結乾燥ポリペプチドの再構成時間を低減するための方法及び製剤
JP7295038B2 (ja) 2017-06-06 2023-06-20 グラクソスミスクライン エルエルシー 小児患者のための生物薬剤組成物及び方法
CN110747263B (zh) * 2019-11-12 2023-04-07 南京黎明生物制品有限公司 一种冻干添加剂及荧光pcr反应混合物干粉和制备方法
CN113081955B (zh) * 2020-01-09 2023-10-24 鲁南制药集团股份有限公司 一种免疫抑制剂单克隆抗体的制剂
CN111165656A (zh) * 2020-01-09 2020-05-19 南京大学（溧水）生态环境研究院 一种黑水虻冻干粉高效制备方法
CN116643056A (zh) * 2022-02-15 2023-08-25 厦门万泰凯瑞生物技术有限公司 促甲状腺激素受体复合物、试剂盒、制备方法和用途
WO2023225534A1 (en) 2022-05-18 2023-11-23 Protomer Technologies Inc. Aromatic boron-containing compounds and related insulin analogs
CN116159027A (zh) * 2022-12-29 2023-05-26 江苏诺泰澳赛诺生物制药股份有限公司 一种司美格鲁肽冻干药物组合物及其制备方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20030017169A1 (en) * 2000-12-29 2003-01-23 Sidney Pestka Controlled release systems for polymers
WO2009066956A2 (en) * 2007-11-22 2009-05-28 Sk Chemicals Co., Ltd. Lyophilized pharmaceutical composition with improved reconstitution time containing taxane derivatives and method of manufacturing the same
US20100158814A1 (en) * 2006-12-11 2010-06-24 Bracco Imaging S.P.A. Fibrin-Binding Peptides and Conjugates Thereof

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB9803448D0 (en) * 1998-02-18 1998-04-15 Pharma Mar Sa Pharmaceutical formulation
EP1463751B1 (en) * 2001-12-21 2013-05-22 Human Genome Sciences, Inc. Albumin fusion proteins
US7582312B2 (en) 2004-11-15 2009-09-01 Discovery Laboratories, Inc. Methods to produce lung surfactant formulations via lyophilization and formulations and uses thereof
US8436190B2 (en) * 2005-01-14 2013-05-07 Cephalon, Inc. Bendamustine pharmaceutical compositions
PL1965823T3 (pl) 2005-11-04 2017-08-31 Glaxosmithkline Llc Sposoby podawania środków hipoglikemicznych
KR102180849B1 (ko) 2006-01-24 2020-11-20 안선 바이오파르마, 아이엔씨. 고분자 미소 구체들의 조제를 위한 기술
CN101274096B (zh) * 2007-03-29 2011-04-27 上海万兴生物制药有限公司 一种稳定的巴曲酶药物组合物
US8275057B2 (en) * 2008-12-19 2012-09-25 Intel Corporation Methods and systems to estimate channel frequency response in multi-carrier signals
WO2011017070A1 (en) 2009-07-28 2011-02-10 Merck Sharp & Dohme Corp. Methods for producing high concentration lyophilized pharmaceutical formulations
CA2769221A1 (en) 2009-08-04 2011-02-10 Genentech, Inc. Concentrated polypeptide formulations with reduced viscosity
CN102018676B (zh) * 2010-12-21 2012-12-05 中山大学 一种水溶性药物纳米粒及其混悬型气雾剂的制备方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20030017169A1 (en) * 2000-12-29 2003-01-23 Sidney Pestka Controlled release systems for polymers
US20100158814A1 (en) * 2006-12-11 2010-06-24 Bracco Imaging S.P.A. Fibrin-Binding Peptides and Conjugates Thereof
WO2009066956A2 (en) * 2007-11-22 2009-05-28 Sk Chemicals Co., Ltd. Lyophilized pharmaceutical composition with improved reconstitution time containing taxane derivatives and method of manufacturing the same

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
BUSH M.A. et al. Safety, tolerability, pharmacodynamics and pharmacokinetics of albiglutide, a long-acting glucagon-like peptide-1 mimetic, in healthy subjects. Diabetes, Obesity and Metabolism, 11, 2009, 498-5054, реферат *
SCHWEGMAN, J.J. et al. Practical Formulation and Process Development of Freeze-Dried Products. Pharmaceutical Development and Technology, 2005, Vol. 10, pages 151-173; p. 165, col. 2, para 5; p. 166, col. 1, para 3 - col. 2, para 1; p. 169, col. 1, para 2 *
TEAGARDEN, D.L. et al. Practical aspects of lyophilization using non-aqueous co-solvent systems. European Journal of Pharmaceutical Sciences, 2002, Vol. 15, pages 115-133; p. 115, abstract; p. 117, Table 2; p. 121, col. 1, para 2-col. 2, para 1; p. 125, col. 1, para 2 *

Also Published As

Publication number Publication date
EP2672986A4 (en) 2015-12-30
WO2012109429A3 (en) 2012-10-18
WO2012109429A2 (en) 2012-08-16
SG192671A1 (en) 2013-09-30
US20140044717A1 (en) 2014-02-13
DK2672986T3 (da) 2020-06-08
EP2672986B1 (en) 2020-03-18
CN107837395A (zh) 2018-03-27
IL227896B (en) 2018-12-31
EA201391136A1 (ru) 2014-05-30
AU2012214419B2 (en) 2015-12-24
IL227896A0 (en) 2013-09-30
US10286037B2 (en) 2019-05-14
CN103492407A (zh) 2014-01-01
AU2012214419A1 (en) 2013-08-29
JP2014506578A (ja) 2014-03-17
MX2013009280A (es) 2013-09-06
KR20140044305A (ko) 2014-04-14
ZA201306118B (en) 2014-04-30
JP6125436B2 (ja) 2017-05-10
BR112013020383A2 (pt) 2017-06-13
CA2827033A1 (en) 2012-08-16
EP2672986A2 (en) 2013-12-18
ES2791690T3 (es) 2020-11-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA029972B1 (ru) Способы получения полипептидных композиций
ES2879387T3 (es) Proteínas de dominio de armazón a base de fibronectina que se unen a miostatina
ES2406764T3 (es) Formulaciones que comprenden antagonistas de VEGF para administración intravítrea
ES2897935T3 (es) Método para mejorar la solubilidad de proteína y péptido mediante el uso del enlace a un fragmento Fc de inmunoglobulina
KR102605317B1 (ko) 실온 안정성 동결건조된 단백질
JP6346189B2 (ja) Ｇｍ−ｃｓｆ中和化合物を含む液体製剤
CN104159614A (zh) TNF-α抗体的药物制剂
JP6580581B2 (ja) 注射用医薬組成物
KR20140066124A (ko) 점도가 감소된 제제
JP6339578B2 (ja) Ｇｍ−ｃｓｆ中和化合物を含む凍結乾燥製剤
BR112016025126B1 (pt) Composição aquosa compreendendo anticorpo neutralizante de gmcsf, e uso da mesma
KR20220020819A (ko) 이중 glp1/2 아고니스트의 약학적 비경구 조성물
KR20220027215A (ko) 다가 펩티드 컨쥬게이트를 위한 친수성 링커
WO2008029908A1 (fr) Préparation pharmaceutique lyophilisée stable comprenant un anticorps
KR20230121822A (ko) Glp-1/glp-2 이중 효능제의 약학적 조성물
KR20230121823A (ko) Glp-1/glp-2 이중 효능제의 약학적 조성물
KR20230121824A (ko) Glp-1/glp-2 이중 효능제의 약학적 조성물
CN110022855B (zh) 室温稳定的冻干蛋白质
TW201607564A (zh) 經安定化的多肽水性製劑
EA043419B1 (ru) Способ получения лиофилизированного фармацевтического состава на основе терапевтического белка

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM

MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): RU