EA022872B1 - Гемисукцинатная соль 6-(1h-индол-4-ил)-4-(5-{[4-(1-метилэтил)-1-пиперазинил]метил}-1,3-оксазол-2-ил)-1h-индазола, ее полиморф, содержащая их фармацевтическая композиция, их применение и способ лечения - Google Patents

Abstract

Настоящее изобретение относится к гемисукцинатной соли 6-(1Н-индол-4-ил)-4-(5-{[4-(1-метилэтил)-1-пиперазинил]метил}-1,3-оксазол-2-ил)-1Н-индазола (соединения формулы (II)) и ее полиморфу, которые являются ингибиторами активности киназы Pl3. Настоящее изобретение также относится к фармацевтической композиции, содержащей указанную соль или указанный полиморф, к их применению для ингибирования PI3-киназы и в лечении и изготовлении лекарственного средства для применения в лечении расстройства, опосредованного ненадлежащей активностью PI3-киназы, и к способу лечения такого расстройства.

Description

Настоящее изобретение относится к полиморфу соединения и солям соединения и их полиморфам, причем соединение является ингибитором киназной активности, более конкретно ингибитором активности или функции изоформы дельта фосфоинозитид-3'ОН-киназы (здесь далее ΡΙ3Κδ), способам их получения, к фармацевтическим композициям, содержащим их, и к их применению в лечении различных расстройств.

Предшествующий уровень техники

Клеточные мембраны представляют большое количество вторичных мессенджеров, которые могут быть вовлечены в целый ряд путей сигнальной трансдукции. Что касается функции и регуляции эффекторных ферментов в сигнальных путях фосфолипидов, ΡΙ-киназы класса I (например ΡΙ3Κ дельта) генерируют вторичные мессенджеры из фосфолипидных пулов мембраны. Р13К-киназы класса I превращают мембранный фосфолипид ΡΙ(4,5)Ρ₂ в ΡΙ(3,4,5)Ρ₃, который функционирует как вторичный мессенджер. ΡΙ и ΡΙ(4)Ρ также являются субстратами ΡΙ3Κ и могут фосфорилироваться и превращаться в ΡΙ3Ρ и ΡΙ(3,4)Ρ₂ соответственно. Кроме того, эти фосфоинозитиды могут превращаться в другие фосфоинозитиды 5'специфичными и 3'-специфичными фосфатазами. Таким образом, ферментативная активность ΡΙ3Κ приводит прямо или опосредованно к образованию двух подтипов 3'-фосфоинозитидов, которые функционируют как вторичные мессенджеры в путях внутриклеточной сигнальной трансдукции (УапйаезеЪгоеск е! а1., Тгепбз Вюсйет. 8с1. 22(7), р. 267-72 (1997); ЬезНе е! а1., Сйет. Кеу. 101(8), р. 2365-80 (2001); Καΐδο е! а1., Аппи. Кеу. Се11 Пеу. Βίοί. 17, р. 615-75 (2001); и Токег, Се11. Мо1. Ше 8с1. 59(5), р. 761-79 (2002)). К настоящему времени идентифицировано восемь ΡΙ3Κ млекопитающих, которые разделены на три основных класса (Ι, ΙΙ и ΙΙΙ) на основе гомологии последовательностей, структуры, партнеров связывания, способа активации и предпочтения в отношении субстрата. Ιπ уйто ΡΙ3Κ класса Ι могут фосфорилировать фосфатидилинозитол (ΡΙ), фосфатидилинозитол-4-фосфат (ΡΙ4Ρ) и фосфатидилинозитол-4,5-бисфосфат (ΡΙ(4,5)Ρ₂), продуцируя фосфатидилинозитол-3-фосфат (ΡΙ3Ρ), фосфатидилинозитол-3,4-бисфосфат (ΡΙ(3,4)Ρ₂ и фосфатидилинозитол-3,4,5-трифосфат (ΡΙ(3,4,5)Ρ₃ соответственно. ΡΙ3Κ класса ΙΙ могут фосфорилировать ΡΙ и ΡΙ4Ρ. ΡΙ3Κ класса ΙΙΙ могут фосфорилировать только фосфорилатный ΡΙ (УапйаезеЪгоеск е! а1. (1997), см. выше; УапйаезеЪгоеск е! а1., Ехр. Се11 Кез. 253(1), р. 239-54 (1999); ЬезНе е! а1. (2001), см. выше).

ΡΙ3Κ класса Ι представляет собой гетеродимер, состоящий из каталитической субъединицы р110 и регуляторной субъединицы, и семейство этого класса дополнительно разделено на ферменты класса Ы и класса № на основе регуляторных партнеров и механизма регуляции. Ферменты класса Ы состоят из трех отдельных каталитических единиц (р110а, р110в и р110δ), которые димеризуются с пятью отдельными регуляторными субъединицами (р85а, р55а, р50а, р85в и р55у), причем все каталитические субъединицы способны взаимодействовать со всеми регуляторными субъединицами с образованием различных гетеродимеров. ΡΙ3Κ класса Ы обычно активируются в ответ на стимуляцию рецепторных тирозинкиназ факторами роста посредством взаимодействия доменов 8Н2 регуляторных субъединиц со специфическими фосфотирозиновыми остатками активированных рецепторных или адапторных белков, таких как ΙΚ8-1. Небольшие ΟΤΡ азы (гуанозинтрифосфатазы) (газ в качестве примера) также вовлечены в активацию ΡΙ3Κ в сочетании с активацией рецепторных тирозинкиназ. Обе р110а и р110в конститутивно экспрессируются во всех типах клеток, тогда как экспрессия р110δ в большей степени ограничена популяциями лейкоцитов и некоторыми эпителиальными клетками. Напротив, единственный фермент класса Ф состоит из каталитической субъединицы 110γ, которая взаимодействует с регуляторной субъединицей р101. Кроме того, фермент класса Ф активируется в ответ на системы сопряженных с О-белком рецепторов (ΟΡΕК), и его экспрессия, по-видимому, ограничена лейкоцитами.

Схема А. Превращение ΡΙ(4,5)Ρ₂ в ΡΙ(3,4,5)Ρ₃

о

Р1с11п5(3,4,5)Р₃

- 1 022872

Как проиллюстрировано на приведенной выше схеме А, фосфоинозитид-3-киназы (ΡΙ3Κ) фосфорилируют гидроксильную группу на атоме углерода в положении 3 инозитольного кольца. В результате фосфорилирования фосфоинозитидов с образованием Ρΐά1η8(3,4,5)Ρ₃, Ρΐά1ηδ(3,4)Ρ₂ и Ρΐά1ηδ(3)Ρ продуцируются вторичные мессенджеры для различных путей сигнальной трансдукции, включая пути, необходимые для пролиферации клеток, клеточной дифференцировки, клеточного роста, размера клеток, жизнеспособности клеток, апоптоза, адгезии, подвижности клеток, миграции клеток, хемотаксиса, инвазии, реорганизации цитоскелета, изменений формы клеток, направленной миграции везикул и метаболического пути (Какко ек а1. (2001 ), см. выше; и §кеш ек а1., Мо1. Меб. Тобау 6(9), р. 347-57 (2000)).

Активность ΡI3-киназ, ответственная за образование указанных фосфорилированных сигнальных продуктов, первоначально была идентифицирована как связанная с вирусными онкобелками и тирозинкиназами рецепторов факторов роста, которые фосфорилируют фосфатидилинозитол (ΡΙ) и его фосфорилированные производные по 3'-гидроксильной группе инозитольного кольца (Еапауокои ек а1., Тгепбз Се11 Βίο1. 2, р. 358-60 (1992)). Однако более поздние биохимические исследования выявили, что ΡI3-киназы класса I (например, изоформа ΡΙ3Κδ класса ΙΑ) являются киназными ферментами с двойной специфичностью, что означает, что они проявляют как липидкиназную (фосфорилирование фосфоинозитидов), так и протеинкиназную активность, и, как было показано, они обладают способностью фосфорилировать другой белок в качестве субстратов, включая аутофосфорилирование как внутримолекулярный регуляторный механизм (УапЬаезеЬтоеск ек а1., ЕМВО 1. 18(5), р. 1292-302 (1999)). Клеточные процессы, в которых ΡΙ3Κ играют важную роль, включают супрессию апоптоза, реорганизацию актинового скелета, рост сердечных миоцитов, стимуляцию гликогенсинтазы инсулином, опосредованное фактором некроза опухолей альфа (ΤΝΡα) примирование нуклеофилов, образование супероксидов, миграцию лейкоцитов и адгезию к эндотелиальным клеткам.

Полагают, что активация ΡI3-киназ вовлечена в широкий диапазон клеточных ответов, включая клеточный рост, дифференцировку и апоптоз (Гагкег. Сиггепк Вю1оду 5(6), р. 577-79 (1995); и Уао ек а1., 8с1епее 267(5206), р. 2003-06 (1995)). Представляется, что ΡI3-κиназы вовлечены в целый ряд аспектов активации лейкоцитов. Было показано, что р85-ассоциированная ΡI3-киназа физически связывается с цитоплазматическим доменом СИ28, который является важной ко-стимулирующей молекулой для активации Т-клеток в ответ на антиген (Бадев ек а1., №йиге 369, р. 327-29 (1994); и Кибб, 1тшишку 4, р. 527-34 (1996)). Активация Т-клеток через С.П28 снижает порог для активации антигеном и повышает величину и продолжительность пролиферативного ответа. Эти эффекты связаны с увеличениями транскрипции целого ряда генов, включая интерлейкин-2 (1Ь-2), важный фактор роста Т-клеток (Ргазеге! ек а1., 8аепсе 251 (4991), р. 313-16 (1991)).

ΡΙ3Κγ была идентифицирована как медиатор О δ-γ-зависимой регуляции активности 1ΝΚ, и О δ-γ являются субъединицами гетеротримерных О-белков (Ьоре/-11а5аса ек а1., 1. Вю1. СЬет. 273(5), р. 2505-8 (1998)). Позднее (ЬаНатдие ек а1., Нптипйу 16(3), р. 441-51 (2002)) стало известно, что ΡΙ3Κγ передает воспалительные сигналы через различные рецепторы, сопряженные с О(1)-белком, и играет важную роль в отношении функции тучных клеток, стимулов в контексте лейкоцитов и иммунологии, включая цитокины, хемокины, аденозины, антитела, интегрины, факторы агрегации, факторы роста, вирусы или гормоны, например (Ьа\\ког ек а1., 1. Се11 8ск 114 ^к 16), р. 2903-10 (2001); Ьайагдие ек а1. (2002), см. выше; БкерЬепз ек а1., Сигг. Оршюп Се11 Вю1. 14(2), р. 203-13 (2002)).

Специфические ингибиторы индивидуальных членов семейства ферментов предоставляют бесценные инструменты для понимания функций каждого фермента. Два соединения, ЬУ294002 и вортманнин (см. ниже), широко применяются в качестве ингибиторов ΡI3-киназ. Эти соединения являются неспецифическими ингибиторами ΡΙ3Κ, так как они не делают различий между четырьмя членами ΡI3-киназ класса Ι. Например, значения Κ.\₀ вортманнина в отношении каждой из различных ΡI3-киназ класса Ι находятся в диапазоне 1-10 нМ. Подобным образом, значения Κ.'₅₀ для ЬУ294002 в отношении каждой из этих ΡI3-киназ составляют примерно 15-20 мкМ (Ргитап ек а1., Апп. Кеу. ВюсЬет. 67, р. 481-507 (1998)), а также 5-10 мкМ в отношении СК2 протеинкиназы и проявляют некоторую ингибиторную активность в отношении фосфолипаз. Вортманнин представляет собой грибковый метаболит, который необратимо ингибирует активность ΡΙ3Κ в результате ковалентного связывания с каталитическим доменом этого фермента. Ингибирование активности ΡΙ3Κ вортманнином исключает последующий клеточный ответ на внеклеточный фактор. Например, нейтрофилы отвечают на хемокин ίΜек-^еи-ΡЬе (ίΜΕΡ) стимуляцией ΡΙ3Κ и синтезированием Ρкб1η8 (3,4,5)Р₃. Этот синтез коррелирует с активацией респираторного бурста, вовлеченного в нейтрофильную деструкцию инвазивных микроорганизмов. Обработка нейтрофилов вортманнином предотвращает ίΜΕΡ-индуцированный респираторный бурстерный ответ (ТЬе1еп ек а1., Бтос. №к1. Асаб. 8ск И8А 91, р. 4960-64 (1994)). Фактически, эти эксперименты с вортманнином, а также другие экспериментальные данные показывают, что активность ΡΙ3Κ в клетках гематопоэтической клеточной линии, в частности в нейтрофилах, моноцитах и других типах лейкоцитов, вовлечена во многом в иммунный ответ, не требующий обращения к памяти, связанный с острым и хроническим воспалением.

- 2 022872

Имеется доказательство, основанное на исследованиях с использованием вортманнина, что функция Р13-киназ также требуется для некоторых аспектов лейкоцитарной передачи сигнала через рецепторы, сопряженные с О-белком (ТБе1еп е! а1. (1994), см. выше). Более того, было показано, что вортманнин и БУ294002 блокируют миграцию нейтрофилов и высвобождение супероксидов.

В настоящее время уже совершенно ясно, что дерегуляция онкогенов и генов-супрессоров опухолей способствует образованию злокачественных опухолей, например, за счет увеличения роста и пролифирации клеток или повышения жизнеспособности клеток. Теперь также известно, что сигнальные пути, опосредованные семейством Р13К, играют центральную роль в ряде клеточных процессов, включая пролиферацию и выживание, и что дерегуляция этих путей является причинным фактором множества видов рака человека и других заболеваний (Ка!зо е! а1., Аппиа1 Кеу. Се11 Иеу. Вю1. (2001) 17, р. 615-675, и Боз!ег е! а1., Е Се11 Бс1епсе (2003) 116(15), р. 3037-3040). Эффекторные белки Р13К инициируют сигнальные пути и цепи путем транслокации в плазматическую мембрану через консервативный плекстрингомологичный (РН) домен, который специфически взаимодействует с РМ1пз(3,4,5)Р₃ (УапйаезеЬгоеск е! а1., Аппи. Кеу. Вюсйеш. (2001), 70, р. 535-602). Эффекторные белки, передающие сигналы через РМ1пз(3,4,5)Р₃ и РН домены, включают серин/треонин (Бег/ТЬг)-киназы, тирозинкиназы, Кас или АгГ ОЕБ (факторы гуанин-нуклеотидного обмена) и АгГ ОАР (белки активации ОТР азы).

В В-клетках и Т-клетках Р13К играют важную роль, активируя семейство Тес протеинтирозинкиназ, включающих тирозинкиназу Брутона (ВТК) в В-клетках и интерлейкин-2-индуцибельную Т-клеточную киназу (1ТК) в Т-клетках.

В результате Р13К-активации ВТК или 1ТК транслоцируются в плазматическую мембрану, где они впоследствии фосфорилируются Бгс-киназами. Одной из главных мишеней активированной 1ТК является фосфолипаза С-гамма (РБСу1 ), которая гидролизует РМ1пз(4,5)Р₂ в 1пз(3,4,5)Р₃ и инициирует внутриклеточное увеличение уровней кальция, и диацилглицерин (ЭАО), который может активировать протеинкиназы С в активированные Т-клетки.

В отличие от р110а и р110р класса 1А р1105 экспрессируется в ограниченных типах ткани. Ее высокий уровень экспрессии в лимфоцитах и лимфоидных тканях дает основание считать, что она играет роль в Р13К-опосредованной сигнализации в иммунной системе. Мыши с инактивированной методом нокин гена р1105 киназой также жизнеспособны, и их фенотип ограничен дефектами в иммунной сигнализации (ОккепБаид е! а1., Бс1епсе (2002) 297, р. 1031-4). Эти трансгенные мыши дали представление о функции Р13К5 в В-клеточной и Т-клеточной сигнализации. В частности, р1105 требуется для образования РМ1пз(3,4,5)Р₃ по ходу СЭ28 и/или Т-клеточной рецепторной (ТСК) сигнализации. Ключевым эффектом Р13К-сигнализации ниже ТСК является активация Ак!, которая фосфорилирует антиапоптические факторы, а также различные факторы транскрипции для продуцирования цитокинов. Как следствие, Т-клетки с неактивной р1105 имеют недостатки в пролифирации и секреции ТЕ1- и ТБ2-цитокинов. Активация Т-клеток через СЭ28 снижает порог для активации ТСК антигеном и повышает величину и продолжительность пролиферативного ответа. Эти эффекты опосредованы Р13К5-зависимым увеличением транскрипции ряда генов, включая 1Б-2, важный Т-клеточный фактор роста.

Таким образом, ожидается, что ингибиторы Р13К будут давать терапевтическую пользу в результате модулирования опосредованных Т-клетками воспалительных ответов, связанных с респираторными заболеваниями, такими как астма, СОРЭ и муковисцидоз. Кроме того, имеются данные, указывающие на то, что направленные на Т-клетки терапии могут обеспечивать кортикостероидсберегающие свойства (А1ехапбег е! а1. Бапсе! (1992) 339 р. 324-8), что дает основания предполагать, что можно обеспечивать полезную терапию, либо автономную, либо в комбинации с ингаляционными или пероральными глюкокортикостероидами, при респираторных заболеваниях. Ингибитор Р13К может быть также использован при астме вместе с другими традиционными терапевтическими средствами, такими как длительно действующий бета-агонист (БАВА).

В сосудистой сети Р13К5 экспрессируется эндотелиальными клетками и участвует в направленной миграции нейтрофилов путем модулирования проадгезивного состояния этих клеток в ответ на ТЫЕа (Риг1 е! а1., В1ооб (2004) 103(9), р. 3448-56). Роль Р13К5 в ТЫЕа-индуцированной сигнализации эндотелиальных клеток продемонстрирована путем фармакологического ингибирования фосфорилирования Ак! и активности РЭК1. Дополнительно, Р13К5 вовлечена в проницаемость сосудов и отек тканей дыхательных путей через УЕОБ-путь (Бее е! а1., Б А11егду Сйп. 1ттипо1. (2006) 118(2), р. 403-9). Эти наблюдения указывают на дополнительные преимущества ингибирования Р13К5 при астме за счет совместного сни- 3 022872 жения лейкоцитарной транссудации и проницаемости сосудов, ассоциированных с астмой. К тому же, активность ΡΙ3Κδ требуется для функционирования тучных клеток как ίη νίίτο, так и ίη νίνο (ΑΝ е! а1., №йиге (2004) 431, р. 1007-11; и Α1ί е! а1., 1. 1ттипо1. (2008) 180(4), р. 2538-44), что также позволяет предполагать, что ингибирование ΡΙ3Κ должно давать терапевтическую пользу при симптомах аллергических заболеваний, таких как астма, аллергический ринит и атопический дерматит.

Роль ΡΙ3Κδ в В-клеточной пролиферации, секреции антител, В-клеточной антигенной и 1Ь-4рецепторной сигнализации, В-клеточной антигенпрезентирующей функции также установлена (ОккепЬаид е! а1., (2002), см. выше; А1-А1\уап е! а1., 1. 1ттипо1. (2007) 178(4), р. 2328-35; и Вйапсю е! а1., В1ооб (2006) 107(2), р. 642-50) и указывает на участие в аутоиммунных заболеваниях, таких как ревматоидный артрит или системная красная волчанка. Следовательно, ингибиторы ΡΙ3Κ могут быть также полезны при симптомах этих заболеваний.

Фармакологическое ингибирование ΡΙ3Κδ ингибирует ΙΜΤΡ-зависимый хемотаксис нейтрофилов на 1САМ (фактор межклеточной адгезии) - покрытой агарозной матричной интегринзависимой несимметричной системе (8абЬи е! а1, Пттипок (2003) 170(5), р. 2647-54). Ингибирование ΡΙ3Κδ регулирует активацию, адгезию и миграцию нейтрофилов, не оказывая воздействия на опосредованный нейтрофилами фагоцитоз и бактериальную активность по отношению к §!арЬу1ососсиз аигеиз (8абЬи е! а1., ВюсЬет. ВюрЬуз. Кез. Соттип. (2003) 308(4), р. 764-9). В целом, эти данные указывают на то, что ингибирование ΡΙ3Κδ не будет глобально ингибировать функции нейтрофилов, необходимые для врожденной иммунной защиты. Роль ΡΙ3Κδ в нейтрофилах дает дополнительные возможности для лечения воспалительных заболеваний, в которые вовлечено ремоделирование ткани, таких как ί'ΌΡΌ или ревматоидный артрит.

Дополнительно, имеется также доказательство того, что ΡI3Κ-ферменты класса Ι;·ι также вносят вклад в опухолегенез при множестве различных видов рака человека, либо прямо, либо опосредованно (УКапсо апб За\\уегз. №!ите Ке\1е\уз Сапсег (2002) 2(7), р. 489-501). Например, ингибирование ΡΙ3Κδ может играть терапевтическую роль в лечении злокачественных гематологических расстройств, таких как острый миелоидный лейкоз (Вй1о!!е! е! а1., Опсодепе (2006) 25(50), р. 6648-59). Более того, активирующие мутации в р110а (ген ΡΙΚ3(Α) связаны с различными другими опухолями, такими как опухоли ободочной кишки и опухоли молочной железы и легкого (8атие1з е! а1., 8с1епсе (2004) 304(5670), р. 554).

Было также показано, что ΡΙ3Κ вовлечена в создание центральной сенсибилизации при болезненных воспалительных состояниях (Ге/е1 е! а1., ТЬе 1. о£ №итозс1епсе (2008) 28 (16), р. 4261-4270).

Большое разнообразие ретровирусов и ДНК-содержащих вирусов активируют ΡΒΚ-путь как способ предотвращения гибели клеток-хозяев во время вирусной инфекции и, в конечном счете, использования механизма синтеза клеток-хозяев для его репликации (Уод! е! а1., Упо1оду 344(1), р. 131-8 (2006); ВисЬкотюЬ е! а1., Ν;·ιΙ. Ке\; МюгоЪю1. 6(4), р. 265-75 (2008)). Таким образом, в дополнение к общепризнанным свойствам ингибиторы ΡΙ3Κ могут обладать противовирусными свойствами. Эти противовирусные эффекты представляют интерес с точки зрения перспектив при вызываемых вирусами воспалительных обострениях. Например, широко распространенный простудный риновирус человека (НКУ) ответственен за более чем 50% инфекций дыхательных путей, но осложнения этих инфекций могут быть значительными в некоторых популяциях. В частности, они возникают при таких респираторных заболеваниях, как астма или хроническое обструктивное заболевание легких ((ΟΡΌ). Риновирусная инфекция эпителиальных клеток приводит к ΡΌΚ-зависимой секреции цитокинов и хемокинов (№\\'сотЬ е! а1., 1. Вю1. СЬет. (2005) 280(44), р. 36952). Этот воспалительный ответ соотносится с ухудшением респираторных симптомов во время инфекции. Таким образом, ингибиторы ΡΙ3Κ могут гасить ненормально большой иммунный ответ на вирус, слабый в других обстоятельствах. Большинство штаммов НКУ инфицируют бронхиальные эпителиальные клетки путем первоначального связывания с рецептором ГСАМ-1. Комплекс НКУ-КАМ-1 затем дополнительно интернализируется в результате эндоцитоза, и было показано, что для этого события требуется активность ΡΙ3Κ (Баи е! а1., 1. Iттиηο1. (2008) 180(2), р. 870-880). Таким образом, ингибиторы ΡΙ3Κ могут также блокировать вирусные инфекции путем ингибирования проникновения вируса в клетки-хозяева.

Ингибиторы ΡΙ3Κ могут быть полезны в ослаблении других типов респираторных инфекций, включая грибковый инфекционный аспергиллез (ВопИаа е! а1., Мисоза1 Ютипок (2010) 3(2), р. 193-205). Кроме того, мыши с дефицитом Ρ13Κδ более устойчивы к инфицированию протозойным паразитом Ье1зЬтата та)ог (Ыи е! а1., 1. Iттиηο1. (2009) 183(3), р. 1921-1933). С учетом эффектов на вирусные инфекции эти сообщения свидетельствуют о том, что ингибиторы ΡΙ3Κ могут быть полезны для лечения множества различных инфекций.

Было также показано, что ингибирование ΡΙ3Κ промотирует регуляторную Т-клеточную дифференцировку (§аиет е! а1., Бгос. №11. Асаб. 8с1. И8А (2008) 105(22), р. 7797-7802), что свидетельствует о том, что ингибиторы ΡΙ3Κ могут быть полезны в терапевтических целях при аутоиммунных или аллергических заболеваниях путем индуцирования иммунотолерантности к аутоантигену или аллергену. Недавно была также установлена связь изоформы ΡΙ3Κδ с индуцированной дымом глюкокортикоидной интенсив- 4 022872 ностью (МагМск е! а1., Ат. Т Кезрй. Сп!. Саге Мей. (2009) 179(7), р. 542-548). Это наблюдение свидетельствует о том, что пациенты с СОРИ, которые в иных обстоятельствах плохо реагируют на кортикостероиды, могут получать пользу от комбинации ингибитора Р13К с кортикостероидом.

Р13К также вовлечена в другие респираторные состояния, такие как идиопатический фиброз легких (ГРЕ). 1РР представляет собой фиброзное заболевание с прогрессирующим ухудшением легочной функции и повышенной смертностью вследствие дыхательной недостаточности. При 1РР циркулирующие фиброциты направленно поступают в легкое через хемокиновый рецептор СХСК4. Р13К необходим как для сигнализации, так и для экспрессии СХСК4 (Мейгай е! а1., Ιηί. Р Вюсйет. и Се11 Бю1. (2009) 41, р.1708-1718). Таким образом, снижая экспрессию СХСК4 и блокируя ее эффект или функции, ингибитор Р13К будет ингибировать рекрутинг фиброцитов в легкое и, следовательно, замедлять фибротический процесс, лежащий в основе 1РР, заболевания с высокой неудовлетворенной потребностью лечения.

Соединения, которые являются ингибиторами Р13-киназ, могут быть полезны в лечении расстройств, связанных с ненадлежащей активностью киназ, в частности ненадлежащей активностью Р13киназ, например в лечении и предупреждении расстройств, опосредованных Р13-киназными механизмами. Такими расстройствами являются респираторные заболевания, включая астму, хроническое обструктивное заболевание легких (СОРИ) и идиопатический фиброз легких (1РР); вирусные инфекции, включая вирусные инфекции дыхательных путей и вирусные обострения респираторных заболеваний, таких как астма и СОРИ; невирусные респираторные инфекции, включая аспергиллез и лейшманиоз; аллергические заболевания, включая аллергический ринит и атопический дерматит; аутоиммунные заболевания, включая ревматоидный артрит и рассеянный склероз; воспалительные расстройства, включая воспалительное заболевание кишечника; сердечно-сосудистые заболевания, включая тромбоз и атеросклероз; гематологические злокачественности; нейродегенеративные заболевания; панкреатит; полиорганную недостаточность; почечные заболевания; агрегацию тромбоцитов; рак; подвижность сперматозоидов; отторжение трансплантата; отторжение имплантата; повреждения легких; и боль, включая боль, ассоциированную с ревматоидным артритом или остеоартритом, боль в спине, генерализованную воспалительную боль, пост-гепатическую невралгию, диабетическую невропатию, воспалительную невропатическую боль (травму), невралгию тройничного нерва и центральную боль.

Были предприняты попытки получить соединения, которые ингибируют активность Р13-киназ, и целый ряд таких соединений раскрыт в данной области.

В международной патентной заявке РСТ/ЕР 2010/055666 (номер публикации АО 2010/125082) описаны соединения, имеющие общую формулу (I)

и их соли.

В примерах в международной патентной заявке РСТ/ЕР 2010/055666 (номер публикации АО 2010/125082) описано получение 6-(1Н-индол-4-ил)-4-(5-{[4-( 1 -метилэтил)-1 -пиперазинил]метил}-1,3оксазол-2-ил)-1Н-индазола, который может быть представлен формулой (II)

называемый далее в данном документе как Соединение А, и его гидрохлоридных солей.

Авторы настоящего изобретения обнаружили полиморф соединения А и соли соединения А и их полиморфы. В одном воплощении соли соединения А могут обладать свойствами, которые делают их особенно подходящими для введения в качестве лекарственного средства, например ингаляцией. В еще одном воплощении гемисукцинатная соль соединения А может обладать такими свойствами стабильности, например, в композициях, содержащих эксципиенты, такие как лактоза, и растворимости, которые делают ее пригодной для введения ингаляцией.

Краткое изложение сущности изобретения

Изобретение относится к полиморфу соединения А и солям соединения А и их полиморфам (здесь далее полиморфы и соли по изобретению).

- 5 022872

Краткое описание графических материалов

На фиг. 1 представлена картина дифракции рентгеновских лучей на порошке (ДРЛП) для полиморфа соединения А.

На фиг. 2 представлена картина ДРЛП для полиморфа тозилатной соли соединения А.

На фиг. 3 представлена картина ДРЛП для полиморфа гемифумаратной соли соединения А.

На фиг. 4 представлена картина ДРЛП для полиморфа гемисукцинатной соли соединения А. Подробное описание изобретения

В одном аспекте изобретение относится к полиморфу соединения А.

В одном воплощении изобретения предложен полиморф соединения А, отличающийся тем, что он дает картину ДРЛП, содержащую пики (°2θ) при примерно 9,0, примерно 9,6, примерно 10,4 и/или примерно 12,5.

В другом воплощении изобретения предложен полиморф соединения А, отличающийся тем, что он дает картину ДРЛП, содержащую пики, по существу, такие, как указано в табл.1.

В еще одном воплощении изобретения предложен полиморф соединения А, отличающийся тем, что он дает картину ДРЛП, по существу, в соответствии с фиг. 1.

В другом аспекте изобретение относится к солям соединения А и их полиморфам.

В одном воплощении изобретения предложена соль соединения А, выбранная из тозилата, гемифумарата и гемисукцината.

В другом воплощении изобретения предложена соль соединения А, выбранная из гемифумарата и гемисукцината.

В другом воплощении изобретения предложена гемифумаратная соль соединения А.

В еще одном воплощении изобретения предложена гемисукцинатная соль соединения А.

Тозилатная соль соединения А представляет собой монотозилатную соль, образованную 6-(1Ниндол-4-ил)-4-(5-{ [4-(1-метилэтил)-1-пиперазинил]метил}-1,3-оксазол-2-ил)-1Н-индазолом и паратолуолсульфоновой кислотой в стехиометрическом соотношении, составляющем примерно 1:1. Гемифумаратная соль соединения А представляет собой соль, образованную 6-(1Н-индол-4-ил)-4-(5-{[4-(1метилэтил)-1-пиперазинил]метил}-1,3-оксазол-2-ил)-1 Н-индазолом и фумаровой кислотой в стехиометрическом соотношении, составляющем примерно 2:1. Гемисукцинатная соль соединения А представляет собой соль, образованную 6-(1Н-индол-4-ил)-4-(5-{[4-(1-метилэтил)-1-пиперазинил]метил}-1,3-оксазол2-ил)-1Н-индазолом и янтарной кислотой в стехиометрическом соотношении, составляющем примерно 2:1.

В объем изобретения также входят любые сольваты, например гидраты, комплексы и полиморфные формы солей по изобретению.

Соли по изобретению могут существовать в кристаллической или некристаллической форме или в виде их смеси. В отношении соединений по изобретению, которые находятся в кристаллической форме, специалисту будет очевидно, что могут быть образованы фармацевтически приемлемые сольваты, в которых молекулы растворителя включены в кристаллическую решетку при кристаллизации. Сольваты могут содержать неводные растворители, такие как этанол, изопропанол, ΌΜ8Θ, уксусная кислота, этаноламин и ЕЮАс, или они могут содержать в качестве растворителя воду, которая включена в кристаллическую решетку. Сольваты, в которых вода является растворителем, который включен в кристаллическую решетку, обычно называются гидратами. Гидраты включают стехиометрические гидраты, а также структуры, содержащие вариабельные количества воды. Для специалиста очевидно, что количество воды может зависеть от условий, например от влажности. Например, по мере снижения влажности количество воды может уменьшаться и по мере увеличения влажности количество воды может увеличиваться. Такие изменения количества воды входят в объем изобретения. В одном воплощении изобретения предложен гидрат гемисукцинатной соли соединения А. В другом воплощении гидрат гемисукцинатной соли соединения А может представлять собой моногидрат, в котором стехиометрическое соотношение соединение А:янтарная кислота:вода составляет примерно 2:1:1. В другом воплощении изобретения предложен гидрат гемифумаратной соли соединения А. В еще одном воплощении гидрат гемифумаратной соли соединения А может представлять собой дигидрат, в котором стехиометрическое соотношение соединение А:фумаровая кислота:вода составляет примерно 2:1:2.

В одном воплощении изобретения предложен полиморф тозилатной соли соединения А, отличающийся тем, что он дает картину ДРЛП, содержащую пики (°2θ) при примерно 6,3, примерно 9,3, примерно 11,3 и/или примерно 12,7.

В другом воплощении изобретения предложен полиморф тозилатной соли соединения А, отличающийся тем, что он дает картину ДРЛП, содержащую пики, по существу, такие, как указано в табл. 2.

В еще одном воплощении изобретения предложен полиморф тозилатной соли соединения А, отличающийся тем, что он дает картину ДРЛП, по существу, в соответствии с фиг. 2.

В одном воплощении изобретения предложен полиморф гемифумаратной соли соединения А, отличающийся тем, что он дает картину ДРЛП, содержащую пики (°2θ) при примерно 6,9, примерно 13,8 и/или примерно 14,4.

- 6 022872

В другом воплощении изобретения предложен полиморф гемифумаратной соли соединения А, отличающийся тем, что он дает картину ДРЛП, содержащую пики, по существу, такие, как указано в табл.3.

В еще одном воплощении изобретения предложен полиморф гемифумаратной соли соединения А, отличающийся тем, что он дает картину ДРЛП, по существу, в соответствии с фиг. 3.

В одном воплощении изобретения предложен полиморф гемисукцинатной соли соединения А, отличающийся тем, что он дает картину ДРЛП, содержащую пики (°2θ) при примерно 7,2, примерно 13,2 и/или примерно 14,0.

В другом воплощении изобретения предложен полиморф гемисукцинатной соли соединения А, отличающийся тем, что он дает картину ДРЛП, содержащую пики, по существу, такие, как указано в табл.

4.

В еще одном воплощении изобретения предложен полиморф гемисукцинатной соли соединения А, отличающийся тем, что он дает картину ДРЛП, по существу, в соответствии с фиг. 4.

Когда в данном документе указано, что на картине ДРЛП есть пик при указанном значении, тогда это обычно означает, что пик находится в пределах ±0,2 от указанного значения, например в пределах ±0,1 от указанного значения.

Изобретение охватывает полиморф соединения А и соли соединения А и их полиморфы, выделенные в чистой форме, или в смеси с другими веществами, например другими полиморфами, или солями, или сольватами (включая их полиморфы) соединения А, или с другим веществом.

Таким образом, в одном аспекте предложен полиморф соединения А или соль соединения А или ее полиморф в выделенной или чистой форме. Выделенная или чистая форма относится к образцу, в котором полиморф соединения А или соль соединения А или ее полиморф присутствует в количестве >75%, в частности >90%, более конкретно >95% и еще более конкретно >99% относительно других веществ, которые могут присутствовать в образце.

Термины и определения.

В данном документе символы и условные обозначения, использованные в описании способов, на схемах и в примерах, соответствуют тем символам и условным обозначениям, которые используются в современной научной литературе, например в 1оигиа1 οί 1йе Атепсап СЕеш1са1 8ос1е1у или 1оигиа1 οί Βιο1о§1са1 Сйеш1з1гу. Для обозначения аминокислотных остатков, которые, допустим, находятся в Ьконфигурации, обычно, если не указано иное, использованы стандартные однобуквенные или трехбуквенные сокращения. Если не указано иное, все исходные вещества были приобретены у коммерческих поставщиков, и их использовали без дополнительной очистки. Конкретно, в примерах и по всему тексту данного описания могут быть использованы следующие сокращения:

ЭСМ дихлорметан ϋΜΡυ 1,З-диметил-3,4,5,6-тетрагид ро-2-(1 Н)-пиримидинон

ЭМЗО диметилсульфоксид

ЕЮАс этилацетат г граммы ч час(ы)

ВЭЖХ высокоэффективная жидкостная хроматография

ΙΜ3 денатурат

ΙΡΑ изопропиловый спирт

ЖХ/МС жидкостная хроматография/масс-спектроскопия л литр

М молярный

МНАП масс-направленная автоматизированная препаративная ВЭЖХ

Ме метил

МеСЫ ацетонитрил

МеОН метанол мг миллиграммы мин минуты мл миллилитры ммоль миллимоли

Р1 время удерживания

КТ комнатная температура

ТРА трифторуксусная кислота

ТНР тетрагидрофуран

УВЭЖХ ультравысокоэффективная жидкостная хроматография

УФ ультрафиолетовое излучение

ДРЛП дифракция рентгеновских лучей на порошке

Все ссылки на рассол относятся к насыщенному водному раствору ЫаС1.

- 7 022872

Получение полиморфов и солей.

Изобретение также относится к способам получения полиморфов и солей по изобретению.

В одном аспекте изобретения предложен способ получения полиморфа соединения А, включающий очистку соединения А хроматографией и кристаллизацию полиморфа из очищенных фракций.

В еще одном аспекте изобретения предложен способ получения соли соединения А, ее полиморфа, включающий приведение соединения А в контакт с подходящей кислотой, такой как паратолуолсульфоновая кислота, фумаровая кислота или янтарная кислота, в присутствии подходящего растворителя, такого как денатурат (ΙΜδ), ацетонитрил или ΌΜδΟ.

Соединение А может быть получено по известным методикам, таким как методики, описанные в международной патентной заявке РСТ/ЕР 2010/055666 (номер публикации \УО 2010/125082) и в разделе Примеры ниже. Описание международной патентной заявки РСТ/ЕР 2010/055666 (номер публикации \νθ 2010/125082) включено в данное описание посредством ссылки.

Способы применения

Полиморфы и соли по изобретению могут быть полезны в лечении расстройств, в основе которых лежит патология, связанная (по меньшей мере частично) с ненадлежащей активностью Р13-киназ, таких как астма и хроническое обструктивное заболевание легких (СОРИ). Ненадлежащая активность ΡΙ3киназ относится к любой активности Р13-киназ, которая отклоняется от нормальной активности ΡΙ3киназ, ожидаемой у конкретного пациента. Ненадлежащая активность Р13-киназ может принимать форму, например, аномального увеличения активности или отклонения от нормы в привязке ко времени и/или контролю активности Р13-киназ. Такая ненадлежащая активность может проявляться в результате, например, сверхэкспрессии или мутации протеинкиназы, приводящей к ненадлежащей или неконтролируемой активации. Соответственно в еще одном аспекте данное изобретение относится к способам лечения таких расстройств.

Такие расстройства включают респираторные заболевания, включая астму, хроническое обструктивное заболевание легких (СОРИ) и идиопатический фиброз легких (1РР); вирусные инфекции, включая вирусные инфекции дыхательных путей и вирусные обострения респираторных заболеваний, таких как астма и СОРИ; невирусные респираторные инфекции, включая аспергиллез и лейшманиоз; аллергические заболевания, включая аллергический ринит и атопический дерматит; аутоиммунные заболевания, включая ревматоидный артрит и рассеянный склероз; воспалительные расстройства, включая воспалительное заболевание кишечника; сердечно-сосудистые заболевания, включая тромбоз и атеросклероз; гематологические злокачественности; нейродегенеративные заболевания; панкреатит; полиорганную недостаточность; почечные заболевания; агрегацию тромбоцитов; рак; подвижность сперматозоидов; отторжение трансплантата; отторжение имплантата; повреждения легких; и боль, включая боль, ассоциированную с ревматоидным артритом или остеоартритом, боль в спине, генерализованную воспалительную боль, пост-гепатическую невралгию, диабетическую невропатию, воспалительную невропатическую боль (травму), невралгию тройничного нерва и центральную боль. В одном из воплощений такие расстройства включают респираторные заболевания, включая астму и хроническое обструктивное заболевание легких (СОРИ); аллергические заболевания, включая аллергический ринит и атопический дерматит; аутоиммунные заболевания, включая ревматоидный артрит и рассеянный склероз; воспалительные расстройства, включая воспалительное заболевание кишечника; сердечно-сосудистые заболевания, включая тромбоз и атеросклероз; гематологические злокачественности; нейродегенеративные заболевания; панкреатит; полиорганную недостаточность; почечные заболевания; агрегацию тромбоцитов; рак; подвижность сперматозоидов; отторжение трансплантата; отторжение имплантата; повреждения легких; и боль, включая боль, ассоциированную с ревматоидным артритом или остеоартритом, боль в спине, генерализованную воспалительную боль, постгепатическую невралгию, диабетическую невропатию, воспалительную невропатическую боль (травму), невралгию тройничного нерва и центральную боль.

Способы лечения по изобретению включают введение безопасного и эффективного количества полиморфа или соли по изобретению пациенту, нуждающемуся в таком лечении. Отдельные воплощения данного изобретения предусматривают способы лечения любого из вышеупомянутых расстройств путем введения безопасного и эффективного количества полиморфа или соли по изобретению пациенту, нуждающемуся в таком лечении.

Используемый в данном описании термин лечить со ссылкой на расстройство означает: (1) улучшать состояние или предупреждать расстройство или одно или более биологических проявлений этого расстройства, (2) препятствовать (а) одной или более точкам в биологическом каскаде, который приводит к расстройству или ответственен за расстройство, или (б) одному или более биологическим проявлениям заболевания, (3) ослаблять один или более симптомов или эффектов, ассоциированных с расстройством, или (4) замедлять прогрессирование расстройства или одного или более биологических проявлений расстройства.

Как указано выше, лечение расстройства охватывает предупреждение расстройства. Специалисту должно быть ясно, что предупреждение не является абсолютным термином. В медицине предупреждение относится к профилактическому введению лекарственного средства, по существу, для уменьшения вероятности или тяжести расстройства или его биологического проявления или для препятствования

- 8 022872 наступлению такого расстройства или его биологического проявления.

Используемое в данном описании выражение безопасное и эффективное количество со ссылкой на полиморф или соль по изобретению или другой фармацевтически активный агент означает количество, достаточное для лечения состояния пациента, но достаточно низкое, чтобы избежать серьезных побочных эффектов (при разумном соотношении польза/риск) в рамках обоснованного медицинского суждения. Безопасное и эффективное количество соединения будет варьировать в зависимости от выбранного конкретного соединения (например, с учетом силы действия, эффективности и периода полувыведения соединения), выбранного пути введения, расстройства, подлежащего лечению, тяжести расстройства, подлежащего лечению, возраста, размера, массы и физического состояния пациента, которого лечат, истории болезни пациента, которого лечат, продолжительности лечения, природы сопутствующей терапии, желательного терапевтического эффекта и подобных факторов, но, тем не менее, может быть в установленном порядке определено специалистом.

Используемый в данном описании термин пациент относится к человеку (включая взрослых и детей) или другому животному. В одном из воплощений пациент относится к человеку.

Полиморфы и соли по изобретению можно вводить любым путем введения, включая системное введение и местное введение. Системное введение включает пероральное введение, парентеральное введение, трансдермальное введение и ректальное введение. Парентеральное введение относится к путям введения, иным, чем энтеральное или трансдермальное, и обычно осуществляется инъекцией или инфузией. Парентеральное введение включает внутривенную, внутримышечную и подкожную инъекцию или инфузию. Местное введение включает нанесение на кожу, а также введение в глаз, введение в ухо, внутривагинальное введение, введение ингаляцией и интраназальное введение. Ингаляция относится к введению в легкие пациента вдыханием либо через рот, либо через носовые проходы. В одном из воплощений полиморфы и соли по изобретению можно вводить перорально. В другом воплощении полиморфы и соли по изобретению можно вводить ингаляцией. В еще одном воплощении полиморфы и соли по изобретению можно вводить интраназально.

Полиморфы и соли по изобретению можно вводить однократно или в соответствии с режимом введения доз, когда несколько доз вводят через варьирующие интервалы времени в течение заданного периода времени. Например, дозы можно вводить один, два, три или четыре раза в сутки. В одном из воплощений дозу вводят один раз в сутки. В еще одном воплощении дозу вводят два раза в сутки. Дозы можно вводить до достижения желаемого терапевтического эффекта или в течение неограниченного периода для поддержания желаемого терапевтического эффекта. Подходящие режимы введения доз для полиморфа или соли по изобретению зависят от фармакокинетических свойств этого полиморфа или соли, таких как всасывание, распределение и период полувыведения, которые могут быть определены специалистом. Кроме того, подходящие режимы введения доз полиморфа или соли по изобретению, включая длительность периода введения доз, зависят от расстройства, подлежащего лечению, тяжести расстройства, подлежащего лечению, возраста и физического состояния пациента, которого лечат, истории болезни пациента, которого лечат, природы сопутствующей терапии, желательного терапевтического эффекта и подобных факторов в рамках знаний и опыта специалиста. Специалисты понимают, что подходящие режимы введения доз могут потребовать корректировки с учетом ответной реакции индивидуального пациента на режим введения доз или с течением времени, когда потребуется изменить режим введения доз индивидуальному пациенту.

Типичные суточные дозировки могут варьировать в зависимости от выбранного конкретного пути введения. Типичные суточные дозировки для перорального введения находятся в диапазоне от 0,001 до 50 мг на кг общей массы тела, например от 1 до 10 мг на кг общей массы тела. Например, суточные дозировки для перорального введения могут составлять от 0,5 мг до 2 г на пациента, например от 10 мг до 1 г на пациента.

В одном аспекте изобретения предложен способ лечения расстройства, опосредованного ненадлежащей активностью Р13-киназы, включающий введение безопасного и эффективного количества полиморфа или соли по изобретению пациенту, нуждающемуся в таком лечении.

В одном из воплощений расстройство, опосредованное ненадлежащей активностью Р13-киназ, выбрано из группы, состоящей из респираторных заболеваний (включая астму, хроническое обструктивное заболевание легких (СОРИ) и идиопатический фиброз легких (1РР)); вирусных инфекций (включая вирусные инфекции дыхательных путей и вирусные обострения респираторных заболеваний, таких как астма и СОРЭ); невирусных респираторных инфекций (включая аспергиллез и лейшманиоз); аллергических заболеваний (включая аллергический ринит и атопический дерматит); аутоиммунных заболеваний (включая ревматоидный артрит и рассеянный склероз); воспалительных расстройств (включая воспалительное заболевание кишечника); сердечно-сосудистых заболеваний (включая тромбоз и атеросклероз); гематологических злокачественностей; нейродегенеративных заболеваний; панкреатита; полиорганной недостаточности; почечных заболеваний; агрегации тромбоцитов; рака; подвижности сперматозоидов; отторжения трансплантата; отторжения имплантата; повреждений легких; и боли (включая боль, ассоциированную с ревматоидным артритом или остеоартритом, боль в спине, генерализованную воспалительную боль, постгепатическую невралгию, диабетическую невропатию, воспалительную невропатиче- 9 022872 скую боль (травму), невралгию тройничного нерва и центральную боль).

В одном из воплощений расстройство, опосредованное ненадлежащей активностью ΡΣ3 -киназ, представляет собой респираторное заболевание. В другом воплощении расстройство, опосредованное ненадлежащей активностью Р13-киназ, представляет собой астму. В другом воплощении расстройство, опосредованное ненадлежащей активностью Р13-киназ, представляет собой хроническое обструктивное заболевание легких (СОРИ). В еще одном воплощении расстройство, опосредованное ненадлежащей активностью Р13-киназ, представляет собой идиопатический фиброз легких (ΙΡΡ).

В одном из воплощений расстройство, опосредованное ненадлежащей активностью Р13-киназы, представляет собой боль.

В одном из воплощений настоящего изобретения предложен способ лечения респираторного заболевания, включающий введение безопасного и эффективного количества полиморфа или соли по изобретению пациенту, нуждающемуся в таком лечении.

В другом воплощении настоящего изобретения предложен способ лечения астмы, включающий введение безопасного и эффективного количества полиморфа или соли по изобретению пациенту, нуждающемуся в таком лечении.

В одном аспекте изобретения предложен полиморф или соль по изобретению для применения в лекарственной терапии.

В другом аспекте изобретения предложен полиморф или соль по изобретению для применения в лечении расстройства, опосредованного ненадлежащей активностью Р13-киназы.

В еще одном аспекте изобретения предложено применение полиморфа или соли по изобретению в изготовлении лекарственного средства для применения в лечении расстройства, опосредованного ненадлежащей активностью Р13-киназы.

Композиции.

Перед тем как вводить пациенту, полиморфы и соли по изобретению обычно, но не обязательно, должны быть приготовлены в виде фармацевтических композиций.

Соответственно в одном аспекте данное изобретение относится к фармацевтическим композициям, содержащим полиморф или соль по изобретению и один или более фармацевтически приемлемых эксципиентов.

В другом аспекте данное изобретение относится к фармацевтическим композициям, содержащим от 0,05 до 1000 мг полиморфа или соли по изобретению и от 0,1 до 2 г одного или более фармацевтически приемлемых эксципиентов.

В еще одном аспекте данное изобретение относится к фармацевтической композиции для лечения или профилактики расстройства, опосредованного ненадлежащей активностью Р13-киназы, содержащей полиморф или соль по изобретению.

Фармацевтические композиции по изобретению могут быть приготовлены и упакованы в нерасфасованной форме, из которой безопасное и эффективное количество полиморфа и соли по изобретению может быть извлечено и затем введено пациенту, например, в виде порошка или сиропа. Альтернативно, фармацевтические композиции по изобретению могут быть приготовлены и упакованы в стандартной лекарственной форме, где каждая физически дискретная единица содержит полиморф или соль по изобретению.

Фармацевтические композиции по изобретению, приготовленные в стандартной лекарственной форме, обычно могут содержать, например, от 0,5 мг до 1 г, или от 1 до 700 мг, или от 5 до 100 мг полиморфа и соли по изобретению.

Фармацевтические композиции по изобретению обычно содержат один полиморф или соль по изобретению.

Используемое в данном описании выражение фармацевтически приемлемый эксципиент означает фармацевтически приемлемое вещество, композицию или носитель, включаемые в предоставленной форме или консистенции в фармацевтические композиции. Каждый эксципиент должен быть совместимым с другими ингредиентами фармацевтических композиций при смешивании, чтобы избежать взаимодействий, которые могут существенно снизить эффективность полиморфа и соли по изобретению при введении пациенту, и взаимодействий, которые могут привести к получению композиций, которые не являются фармацевтически приемлемыми. Кроме того, каждый эксципиент непременно должен быть фармацевтически приемлемым, например должен иметь достаточно высокую чистоту.

Полиморф или соль по изобретению и фармацевтически приемлемый эксципиент или эксципиенты, как правило, будут готовить в лекарственной форме, адаптированной для введения пациенту желаемым путем введения. Например, лекарственные формы включают лекарственные формы, адаптированные (1) для перорального введения, такие как таблетки, капсулы, каплетки, пилюли, пастилки, порошки, сиропы, эликсиры, суспензии, растворы, эмульсии, саше и облатки; (2) для парентерального введения, такие как стерильные растворы, суспензии и порошки для разведения; (3) для трансдермального введения, такие как трансдермальные пластыри; (4) для ректального введения, такие как суппозитории; (5) для введения ингаляцией, такие как аэрозоли, растворы и сухие порошки; и (6) для местного введения, такие как кремы, мази, лосьоны, растворы, пасты, спреи, пены и гели.

- 10 022872

Подходящие фармацевтически приемлемые эксципиенты будут варьировать в зависимости от выбранной конкретной лекарственной формы. Кроме того, подходящие фармацевтически приемлемые эксципиенты могут быть выбраны с учетом конкретной функции, которую они могут выполнять в композиции. Например, некоторые фармацевтически приемлемые эксципиенты могут быть выбраны ввиду того, что они способны облегчать изготовление однородных лекарственных форм. Некоторые фармацевтически приемлемые эксципиенты могут быть выбраны ввиду того, что они способны облегчать изготовление стабильных лекарственных форм. Некоторые фармацевтически приемлемые эксципиенты могут быть выбраны ввиду того, что они способны облегчать перенос или транспорт полиморфа или соли по изобретению сразу после введения пациенту из одного органа или участка тела в другой орган или участок тела. Некоторые фармацевтически приемлемые эксципиенты могут быть выбраны ввиду того, что они способны улучшать соблюдение пациентом режима и схемы лечения.

Подходящие фармацевтически приемлемые эксципиенты включают следующие типы эксципиентов: разбавители, наполнители, связывающие вещества, разрыхлители, смазывающие вещества, глиданты, гранулирующие агенты, покровные агенты, увлажняющие агенты, растворители, со-растворители, суспендирующие агенты, эмульгаторы, подсластители, корригенты, агенты, маскирующие вкус, красители, антислеживатели, увлажнители, хелатирующие агенты, пластификаторы, агенты, повышающие вязкость, антиоксиданты, консерванты, стабилизаторы, поверхностно-активные вещества и буферные агенты. Для специалиста очевидно, что некоторые фармацевтически приемлемые эксципиенты могут выполнять более чем одну функцию и могут выполнять альтернативные функции в зависимости от того, насколько много эксципиента присутствует в композиции и какие другие эксципиенты присутствуют в композиции.

Специалисты обладают необходимыми знаниями и способны выбрать подходящие фармацевтически приемлемые эксципиенты в соответствующих количествах для использования в данном изобретении. Кроме того, имеется большое количество доступных специалистам ресурсов, в которых описаны фармацевтически приемлемые эксципиенты и которые могут быть полезны в выборе подходящих фармацевтически приемлемых эксципиентов. Примеры включают РетшдЮп'к РЬаттасеиИса1 8с1епсек (Маек РиЪЬкЬ1пд Сотрапу), ТЬе НапДЪоок οί РЬаттасеиЬса1 Л44Шуек (Со\\ег РиЪЬкЫпд ЫтИеф и ТЬе НапДЪоок οί РЬагтасеийса1 Ехс1р1еп18 ДЬе Лтепсап РЬаттасеиЬса1 ЛккоааНоп и 1Ье РЬаттасеиЬса1 Ргекк).

Фармацевтические композиции по изобретению готовят с использованием методов и способов, известных специалистам в данной области техники. Некоторые способы, обычно используемые в данной области, описаны в РепипдЮп'к РЬаттасеиЬса1 Заепсек (Маск РиЪЬкЫпд Сотрапу).

Соответственно в еще одном аспекте данное изобретение относится к способу приготовления фармацевтической композиции, содержащей полиморф или соль по изобретению и один или более фармацевтически приемлемых эксципиентов, включающему смешивание ингредиентов. Фармацевтическая композиция, содержащая полиморф или соль по изобретению, может быть приготовлена, например, путем смешивания при температуре окружающей среды и атмосферном давлении.

В одном из воплощений полиморф или соль по изобретению может быть приготовлен(а) в лекарственной форме для перорального введения. В другом воплощении полиморф или соль по изобретению может быть приготовлен(а) в лекарственной форме для введения ингаляцией. В еще одном воплощении полиморф и соль по изобретению может быть приготовлен(а) в лекарственной форме для интраназального введения.

В одном из аспектов данное изобретение относится к твердой пероральной лекарственной форме, такой как таблетка или капсула, содержащей безопасное и эффективное количество полиморфа или соли по изобретению и разбавитель или наполнитель. Подходящие разбавители и наполнители включают лактозу, сахарозу, декстрозу, маннит, сорбит, крахмал (например кукурузный крахмал, картофельный крахмал и предварительно желатинизированный крахмал), целлюлозу и ее производные (например микрокристаллическую целлюлозу), сульфат кальция и двухосновный фосфат кальция. Пероральная твердая лекарственная форма может дополнительно содержать связывающее вещество. Подходящие связывающие вещества включают крахмал (например кукурузный крахмал, картофельный крахмал и предварительно желатинизированный крахмал), желатин, аравийскую камедь, альгинат натрия, альгиновую кислоту, трагакант, гуаровую камедь, повидон и целлюлозу и ее производные (например микрокристаллическую целлюлозу). Пероральная твердая лекарственная форма может дополнительно содержать разрыхлитель. Подходящие разрыхлители включают кросповидон, крахмал - гликолят натрия, кроскармелозу, альгиновую кислоту и натрий-карбоксиметилцеллюлозу. Пероральная твердая лекарственная форма может дополнительно содержать смазывающее вещество. Подходящие смазывающие вещества включают стеариновую кислоту, стеарат магния, стеарат кальция и тальк.

В тех случаях, когда это целесообразно, композиции в стандартной лекарственной форме для перорального введения могут быть микроинкапсулированными. Может также быть приготовлена композиция, обеспечивающая пролонгированное или длительное высвобождение, например, путем нанесения покрытия или заключения дисперсного вещества в полимерах, воске или т.п.

Полиморфы и соли по изобретению могут быть также связаны с растворимыми полимерами в качестве носителя для направленной доставки лекарственного средства. Такие полимеры могут включать

- 11 022872 поливинилпирролидон, пирановый сополимер, полигидроксипропилметакриламидфенол, полигидроксиэтиласпартамидфенол или полиэтиленоксидполилизин, замещенный пальмитоильными остатками. Кроме того, полиморфы и соли по изобретению могут быть связаны с полимерами класса биоразлагаемых полимеров, полезными для достижения контролируемого высвобождения лекарственного средства, например с полимолочной кислотой, полиэпсилонкапролактоном, полигидроксимасляной кислотой, полиортоэфирами, полиацеталями, полидигидропиранами, полицианоакрилатами и поперечносшитыми или амфипатическими блок-сополимерами гидрогелей.

В другом аспекте данное изобретение относится к жидкой пероральной лекарственной форме. Пероральные жидкости, такие как растворы, сиропы и эликсиры, могут быть приготовлены в стандартной лекарственной форме, заданное количество которой содержит предопределенное количество полиморфа или соли по изобретению. Сиропы могут быть приготовлены путем растворения полиморфа или соли по изобретению в соответственно корригированном водном растворе, а эликсиры могут быть приготовлены с использованием нетоксичного спиртового носителя. Суспензии могут быть приготовлены путем диспергирования полиморфа или соли по изобретению в нетоксичном носителе. Солюбилизаторы и эмульгаторы, такие как этоксилированные изостеариловые спирты и эфиры полиоксиэтиленсорбита, консерванты, корригирующая добавка, такая как масло перечной мяты или натуральные подсластители или сахарин или другие искусственные подсластители, и т.п. также могут быть добавлены.

В еще одном аспекте данное изобретение относится к лекарственной форме, адаптированной для введения пациенту ингаляцией, например в виде сухого порошка, аэрозоля, суспензии или раствора. В одном из воплощений данное изобретение относится к лекарственной форме, адаптированной для введения пациенту ингаляцией в виде сухого порошка. В еще одном воплощении данное изобретение относится к лекарственной форме, адаптированной для введения пациенту ингаляцией при помощи небулайзера.

Сухие порошковые композиции для доставки в легкое ингаляцией обычно содержат полиморф или соль по изобретению в виде тонкоизмельченного порошка вместе с одним или более фармацевтически приемлемыми эксципиентами в виде тонкоизмельченных порошков. Фармацевтически приемлемые эксципиенты, пригодные, в частности, для использования в сухих порошках, известны специалистам в данной области и включают лактозу, крахмал, маннит и моно-, ди- и полисахариды. Тонкоизмельченный порошок может быть получен, например, в результате микронизации и измельчения. Как правило, измельченное соединение (например, микронизированное) может быть охарактеризовано значением Ό₅₀ (средний диаметр частиц) примерно от 1 до примерно 10 мкм (измеренным, например, методом лазерной дифракции).

Сухой порошок можно вводить пациенту при помощи резервуарного сухого порошкового ингалятора (ΡΌΡΙ), имеющего резервуар, пригодный для хранения многократных (недозированных) доз лекарственного средства в сухой порошковой форме. ΡΌΡΙ обычно включают в себя устройство для дозирования каждой дозы лекарственного средства из резервуара в положение доставки. Например, дозирующее устройство может содержать дозировочную чашку, перемещающуюся из первого положения, где чашка может заполняться лекарственным средством из резервуара, во второе положение, где отмеренная доза лекарственного средства предоставляется пациенту для ингаляции.

Альтернативно, сухой порошок может находиться в капсулах (например желатиновых или пластиковых), картриджах или блистерных упаковках для использования в многодозовом сухом порошковом ингаляторе (ΜΌΡΙ). ΜΌΡΙ являются ингаляторами, в которых лекарственное средство находится в многодозовой упаковке, содержащей (или, иначе, несущей) множество определенных доз (или их частей) лекарственного средства. Когда сухой порошок представлен в виде блистерной упаковки, тогда такая упаковка содержит множество блистеров, в которых находится лекарственное средство в форме сухого порошка. Блистеры обычно расположены в регулярном порядке с возможностью легкого высвобождения из них лекарственного средства. Например, блистеры могут быть расположены по окружности на блистерной упаковке в форме диска или блистеры могут иметь вытянутую форму, например форму полоски или ленты. Каждая(ый) капсула, картридж или блистер может содержать, например, от 20 мкг до 10 мг полиморфа или соли по изобретению.

Аэрозоли могут быть образованы путем суспендирования или растворения полиморфа или соли по изобретению в сжиженном пропелленте. Подходящие пропелленты включают галогеноуглероды, углеводороды и другие сжиженные газы. Репрезентативные пропелленты включают трихлорфторметан (пропеллент 11), дихлорфторметан (пропеллент 12), дихлортетрафторэтан (пропеллент 114), тетрафторэтан (НРА-134а), 1,1-дифторэтан (НРА-152а), дифторметан (НРА-32), пентафторэтан (НРА-12), гептафторпропан (НРА-227а), перфторпропан, перфторбутан, перфторпентан, бутан, изобутан и пентан. Аэрозоли, содержащие полиморф или соль по изобретению, в большинстве случаев могут быть введены пациенту с помощью дозирующего ингалятора (ΜΌΙ). Такие устройства известны специалистам в данной области техники.

Аэрозоль может содержать дополнительные фармацевтически приемлемые эксципиенты, обычно используемые с ΜΌΙ, такие как поверхностно-активные вещества, смазывающие вещества, сорастворители и другие эксципиенты для повышения физической стабильности препарата, для улучшения

- 12 022872 работы клапана, для улучшения растворимости или для улучшения вкуса.

Таким образом, в качестве еще одного аспекта данного изобретения предложена аэрозольная фармацевтическая композиция, содержащая полиморф или соль по изобретению и фторуглерод или водородсодержащий хлорфторуглерод в качестве пропеллента, возможно в комбинации с поверхностноактивным веществом и/или со-растворителем.

Согласно другому аспекту данного изобретения предложена аэрозольная фармацевтическая композиция, в которой пропеллент выбран из 1,1,1,2-тетрафторэтана, 1,1,1,2,3,3,3-гептафтор-н-пропана и их смесей.

Композиции по изобретению могут быть забуферены путем добавления подходящих буферных агентов.

Для использования в ингаляторе или инсуффляторе могут быть изготовлены капсулы и картриджи, например капсулы и картриджи из желатина, содержащие предназначенную для ингаляции порошковую смесь полиморфа или соли по изобретению и подходящей порошковой основы, такой как лактоза или крахмал. Каждая(ый) капсула или картридж, как правило, может содержать от 20 мкг до 10 мг полиморфа или соли по изобретению. Альтернативно, полиморф или соль по изобретению может присутствовать без эксципиентов, таких как лактоза.

Доля активного полиморфа или соли в местных композициях согласно изобретению зависит от точного типа композиции, которую изготавливают, но будет составлять, как правило, от 0,001 до 10 мас.%. Как правило, для большинства типов композиций используемая доля будет составлять от 0,005 до 1%, например от 0,01 до 0,5%. Однако в порошках для ингаляции или инсуффляции используемая доля будет составлять от 0,1 до 5%.

Аэрозольные композиции предпочтительно готовят таким образом, что каждая отмеренная доза или пшик аэрозоля содержит от 20 мкг до 10 мг, предпочтительно от 20 до 2000 мкг, более предпочтительно от примерно 20 до 500 мкг полиморфа или соли по изобретению. Введение можно выполнять один раз в сутки или несколько раз в сутки, например 2, 3, 4 или 8 раз, с введением, например, 1, 2 или 3 доз каждый раз. Общая суточная доза, вводимая с аэрозолем, будет составлять от 100 мкг до 10 мг, предпочтительно от 200 до 2000 мкг. Общая суточная доза и отмеренная доза, доставляемая капсулами и картриджами, находящимися в ингаляторе или инсуффляторе, обычно будет в два раза больше дозы, доставляемой с аэрозольными композициями.

В случае суспензионных аэрозольных композиций размер частиц дисперсного (например, микронизированного) лекарственного средства должен быть таким, чтобы обеспечивать вдыхание, по существу, всего лекарственного средства в легкие при введении аэрозольной композиции, и поэтому будет составлять менее 100 мкм, желательно менее 20 мкм и, в частности, в диапазоне от 1 до 10 мкм, например от 1 до 5 мкм, более предпочтительно от 2 до 3 мкм.

Композиции по изобретению могут быть приготовлены путем диспергирования или растворения медикамента и полиморфа или соли по изобретению в выбранном пропелленте в подходящем контейнере, например с помощью обработки ультразвуком или с помощью смесителя с высокими сдвиговыми усилиями. Этот процесс желательно проводить в условиях с контролируемой влажностью.

Химическая и физическая стабильность, а также фармацевтическая приемлемость аэрозольных композиций по изобретению могут быть определены методами, известными специалистам в данной области техники. Так, например, химическая стабильность компонентов может быть определена, например, ВЭЖХ-анализом после длительного хранения продукта. Данные по физической стабильности могут быть получены другими общепринятыми аналитическими методами, такими как, например, тестирование на утечку, анализ на производительность клапана (средняя масса выпускаемой дозы при срабатывании), анализ на воспроизводимость дозы (количество активного ингредиента при срабатывании) и анализ распределения распыляемой струи.

Стабильность суспензионных аэрозольных композиций по изобретению может быть определена общепринятыми методами, например путем определения распределения размеров флокуляции с использованием прибора для измерения светорассеяния в отраженном свете или путем определения распределения частиц по размерам в каскадном импакторе, или аналитическим методом двойной импинджер (Мп шршдег). В данном описании ссылка на анализ двойной импинджер означает Определение осаждения выпущенной дозы при ингаляциях под давлением с использованием аппарата А, как определено в Британской Фармакопее (ВгП+Н РБагтасорае1а 1988, радез А204-207, АрреиФх XVII С). Такие методы делают возможным расчет вдыхаемой фракции аэрозольных композиций. В одном методе вдыхаемую фракцию рассчитывают по тонкодисперсной фракции, которая представляет собой количество активного ингредиента, собранного в нижней камере импинджера при срабатывании, выраженное в процентах от общего количества активного ингредиента, доставленного при срабатывании, с использованием метода двойного импинджера, описанного выше.

Термин дозирующий ингалятор, или ΜΌΙ, означает устройство, включающее баллончик, закрепленную на баллончике насадку и расположенный в насадке клапан, дозирующий композицию. ΜΌΙсистема включает в себя подходящее канальное устройство. Подходящие канальные устройства содержат, например, клапан-пускатель и цилиндрический или конусоподобный проход, через который лекар- 13 022872 ственное средство может доставляться из заполненого баллончика посредством дозирующего клапана в нос или рот пациента, например мундштучный пускатель.

Баллончики ΜΌΙ обычно содержат контейнер, способный выдерживать давление паров используемого пропеллента, например пластмассовый или стеклянный сосуд с пластмассовым покрытием или предпочтительно металлический баллончик, например, из алюминия или из его сплава, возможно анодированный, покрытый лаком и/или с пластмассовым покрытием (например, как описано во включенной в данное описание посредством ссылки международной публикации АО 96/32099, где часть или вся внутренняя поверхность покрыта одним или более фторуглеродными полимерами, возможно в комбинации с одним или более полимерами, не являющимися фторуглеродными), и этот контейнер закрыт дозирующим клапаном. Насадка может быть закреплена на баллончике посредством ультразвуковой сварки, прикручивания или обжатия. ΜΌΙ, упомянутые в данном описании, могут быть изготовлены способами, известными в данной области (см., например, Вугоп выше и АО 96/32099). Предпочтительно баллончик оснащен блоком-насадкой, где клапан, дозирующий лекарственное средство, расположен в насадке, и указанная насадка закреплена на своем месте опрессовкой.

В одном из воплощений данного изобретения металлическая внутренняя поверхность баллончика покрыта фторполимером, более предпочтительно фторполимером, смешанным с полимером, не являющимся фторполимером. В другом воплощении данного изобретения металлическая внутренняя поверхность баллона покрыта полимерной смесью политетрафторэтилена (РТРЕ) и полиэфирсульфона (РЕЗ). В еще одном воплощении данного изобретения вся металлическая внутренняя поверхность баллончика покрыта полимерной смесью политетрафторэтилена (РТЕЕ) и полиэфирсульфона (РЕЗ).

Дозирующие клапаны предназначены для доставки отмеренного количества композиции при срабатывании и имеют герметизирующую прокладку для предотвращения утечки пропеллента через клапан. Прокладка может быть изготовлена из любого подходящего эластомерного материала, такого как, например, полиэтилен низкой плотности, хлорбутил, бромбутил, ЕРОМ (этилен-пропилен-диеновый мономер), черные и белые бутадиен-акрилонитрильные каучуки, бутилкаучук и неопрен. Подходящие клапаны коммерчески доступны от производителей, известных в индустрии аэрозолей, например от Уа1о18, Ргапсе (например ΌΡ10, ΌΡ30, ΌΡ60), Векрак рю, ИК (например ВК300, ВК357) и 3М-№о1есктс Ыб, ИК (например Зргаупикег™).

В различных воплощениях МЭ1 могут быть также использованы совместно с другими системами, такими как, без ограничения, упаковки для хранения и содержания в них МЭ1, включая те из них, которые описаны в патентах США №№ 6119853, 6179118, 6315112, 6352152, 6390291 и 6679374, а также счетчики доз, такие как, без ограничения, счетчики доз, описанные в патентах США №№ 6360739 и 6431168.

Для изготовления крупномасштабных партий в промышленном производстве заполненных баллончиков могут быть использованы обычные способы и оборудование для массового производства, известные специалистам в области производства фармацевтических аэрозолей. Так, например, в одном способе массового изготовления суспензионных аэрозольных препаратов дозирующий клапан соединяют с алюминиевым контейнером опрессовкой с получением пустого баллончика. В загрузочный сосуд добавляют конкретное лекарственное средство, и сжиженный пропеллент вместе с возможными эксципиентами под давлением подают через этот загрузочный сосуд в производственный сосуд. Суспензию лекарственного средства смешивают, затем осуществляют рециркуляцию в фасовочную машину, и аликвоту суспензии лекарственного средства затем заливают через дозирующий клапан в баллон. В одном примере способа массового производственного изготовления аэрозольных препаратов в виде раствора дозирующий клапан закрепляют на алюминиевом контейнере опрессовкой с получением пустого баллончика. Сжиженный пропеллент вместе с возможными эксципиентами и растворенное лекарственное средство под давлением подают через загрузочный сосуд в производственный сосуд.

В альтернативном способе аликвоту сжиженной композиции добавляют в открытый баллончик в условиях, достаточно холодных для того, чтобы композиция не испарялась, а затем дозирующий клапан закрепляют на баллоне опрессовкой.

Обычно в партиях, изготовленных для фармацевтического применения, каждый заполненный баллончик взвешивают для контроля, снабжают кодом с номером партии, укладывают в лоток для хранения и затем проводят тестирование готовой продукции.

Суспензии и растворы, содержащие полиморф или соль по изобретению, можно также вводить пациенту с помощью небулайзера. Растворитель или суспендирующий агент, используемый для небулизации, может представлять собой любую фармацевтически приемлемую жидкость, такую как вода, водный солевой раствор, спирты или гликоли, например этанол, изопропиловый спирт, глицерин, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль и т.д. или их смеси. В солевых растворах используют соли, которые проявляют небольшую фармакологическую активность или не проявляют никакой фармакологической активности после введения. Для этой цели могут быть использованы неорганические соли, такие как соли щелочных металлов или аммонийгалогенидные соли, например хлорид натрия, хлорид калия, или органические соли, такие как калиевые, натриевые и аммониевые соли органических кислот, например аскорбиновой

- 14 022872 кислоты, лимонной кислоты, уксусной кислоты, винной кислоты и т.д.

В суспензию или раствор могут быть добавлены другие фармацевтически приемлемые эксципиенты. Полиморф или соль по изобретению может быть стабилизирован(а) добавлением неорганической кислоты, например соляной кислоты, азотной кислоты, серной кислоты и/или фосфорной кислоты; органической кислоты, например аскорбиновой кислоты, лимонной кислоты, уксусной кислоты и винной кислоты и т.д., комплексообразующего агента, такого как ΕΌΤΆ (этилендиаминтетрауксусная кислота) или лимонная кислота и их соли; или антиоксиданта, такого как витамин Е или аскорбиновая кислота. Их можно использовать по отдельности или вместе для стабилизации полиморфа и соли по изобретению. Могут быть добавлены консерванты, такие как хлорид бензалкония или бензойная кислота и их соли. Поверхностно-активное вещество может быть добавлено, в частности, для повышения физической стабильности суспензий. Поверхностно-активные вещества включают лецитин, динатрийдиоктилсульфосукцинат, олеиновую кислоту и сложные эфиры сорбитана.

В еще одном аспекте данное изобретение относится к лекарственной форме, адаптированной для интраназального введения.

Композиции для введения в нос могут включать аэрозольные композиции под давлением и водные композиции, вводимые в нос с помощью нагнетательного насоса. Особый интерес представляют композиции, которые не находятся под давлением и адаптированы для местного введения в носовую полость. Подходящие для этой цели композиции содержат воду в качестве разбавителя или носителя. Водные композиции для введения в легкое или нос могут быть приготовлены с использованием традиционных эксципиентов, таких как буферные агенты, агенты, модифицирующие тоничность, и т.п. Водные композиции можно также вводить в нос небулизацией.

Полиморф и соль по изобретению может быть приготовлен(а) в виде жидкой композиции для доставки из жидкостного дозирующего устройства, например жидкостного дозатора, имеющего дозирующее сопло или дозирующую насадку, через которое(ую) отмеренная доза жидкостной композиции распыляется, когда пользователь нажимает на насосный механизм жидкостного дозатора. Такие жидкостные дозаторы, как правило, снабжены резервуаром для множества отмериваемых доз жидкой композиции, причем эти дозы распыляются при последовательных срабатываниях насоса. Дозирующее сопло или насадка могут иметь конфигурацию, подходящую для введения в ноздри пользователя для впрыскивания жидкого препарата в носовую полость. Жидкостное дозирующее устройство вышеупомянутого типа описано и проиллюстрировано в публикации международной патентной заявки АО 05/044354, полное содержание которой включено в данное описание посредством ссылки. Дозирующее устройство имеет корпус, в котором находится выпускающее жидкость устройство с нагнетательным насосом, установленным на контейнере, в котором находится жидкая композиция. Корпус имеет по меньшей мере один приводимый в действие пальцами боковой рычаг, который двигается внутрь относительно корпуса, перемещая контейнер вверх в корпусе посредством эксцентрика, заставляя насос сжимать и нагнетать отмеренную дозу композиции из ствола насоса через назальное сопло корпуса. В одном воплощении жидкостное дозирующее устройство представляет собой дозатор общего типа, проиллюстрированный на фиг. 30-40 в АО 2005/044354.

Фармацевтические композиции, адаптированные для интраназального введения, в которых носитель представляет собой твердое вещество, включают крупнозернистый порошок, имеющий размер частиц, например, в пределах от 20 до 500 мкм, который вводят быстрой ингаляцией через носовой проход из содержащего порошок контейнера, держа его вплотную к носу. Подходящие композиции, в которых носитель представляет собой жидкость, для введения в виде назального спрея или в виде назальных капель включают водные или масляные растворы полиморфа или соли по изобретению.

Фармацевтические композиции, адаптированные для трансдермального введения, могут быть представлены в виде отдельных пластырей, предназначенных для того чтобы они находились в тесном контакте с эпидермисом пациента в течение длительного периода времени. Например, активный ингредиент может доставляться из пластыря в результате ионтофореза, как описано в РЬагтасеиЬса1 КезеагсЬ, 3(6), 318(1986).

Фармацевтические композиции, адаптированные для местного введения, могут быть приготовлены в форме мазей, кремов, суспензий, лосьонов, порошков, растворов, паст, гелей, спреев, аэрозолей или масел.

Мази, кремы и гели могут быть приготовлены, например, на водной или масляной основе с добавлением подходящего загустителя, и/или гелеобразующего агента, и/или растворителей. Такие основы могут включать, например, воду и/или масло, такое как вазелиновое масло или растительное масло, например арахисовое масло или касторовое масло, или растворитель, такой как полиэтиленгликоль. Загустители и гелеобразующие агенты, которые могут быть использованы в соответствии с природой основы, включают мягкий парафин, стеарат алюминия, цетостеариловый спирт, полиэтиленгликоли, ланолин, пчелиный воск, производные карбоксиполиметилена и целлюлозы, и/или глицерилмоностеарат, и/или неионные эмульгаторы.

Лосьоны могут быть приготовлены на водной или масляной основе и будут, как правило, также содержать один или более эмульгаторов, стабилизаторов, диспергирующих агентов, суспендирующих

- 15 022872 агентов или загустителей.

Порошки для наружного применения могут быть приготовлены с использованием любой подходящей порошковой основы, например талька, лактозы или крахмала. Капли могут быть приготовлены на водной или неводной основе, содержащей также один или более диспергирующих агентов, солюбилизирующих агентов, суспендирующих агентов или консервантов.

Препараты для местного применения можно вводить путем одного или более нанесений в сутки на пораженный участок, и на участках кожи преимущественно могут быть использованы окклюзионные повязки. Непрерывная или пролонгированная доставка может быть достигнута с использованием адгезивной резервуарной системы.

Для лечения глаза или других наружных тканей, например ротовой полости и кожи, композиции можно наносить в виде мази или крема для местного применения. Для приготовления мази полиморф или соль по изобретению может быть использован(а) либо с парафиновой, либо с водосмешиваемой мазевой основой. Альтернативно, полиморф или соль по изобретению может быть приготовлен(а) в виде крема с основой для крема типа масло-в-воде или вода-в-масле.

Фармацевтические композиции, адаптированные для парентерального введения, включают водные и неводные стерильные инъекционные растворы, которые могут содержать антиоксиданты, буферы, бактериостаты и растворенные вещества, которые делают композицию изотоничной с кровью реципиента, и водные и неводные стерильные суспензии, которые могут содержать суспендирующие агенты и загустители. Композиции могут быть представлены в однодозовых или многодозовых контейнерах, например в запаянных ампулах и флаконах, и их можно хранить в высушенном сублимацией (лиофилизированном) состоянии, требующем только добавления стерильного жидкого носителя, например воды для инъекций, непосредственно перед применением. Инъекционные растворы и суспензии для немедленного введения могут быть получены из стерильных порошков, гранул и таблеток.

Полиморфы и соли и фармацевтические композиции по изобретению могут быть использованы в комбинации с одним или более другими терапевтическими агентами, например агентами, выбранными из противовоспалительных агентов, антихолинергических агентов (в частности антагонист рецепторов М1/М2/М3), агонистов (₂-адренорецептора, противоинфекционных агентов, таких как антибиотики или противовирусные средства, или антигистаминных средств, или могут их содержать. Таким образом, в следующем аспекте данного изобретения предложена комбинация, содержащая полиморф или соль по изобретению вместе с одним или более другими терапевтически активными агентами, например агентами, выбранными из противовоспалительного агента, такого как кортикостероид или ΝδΑΙΌ (нестероидное противовоспалительное лекарственное средство), антихолинергического агента, агониста β₂адренорецептора, противоинфекционного агента, такого как антибиотик или противовирусное средство, или антигистаминного средства. Одно воплощение изобретения охватывает комбинации, содержащие полиморф или соль по изобретению вместе с агонистом (У-адренорецептора, и/или антихолинергическим средством, и/или ингибитором РИЕ-4 (фосфодиэстераза-4), и/или антигистаминным средством.

В одном из воплощений данное изобретение охватывает способ лечения расстройства, опосредованного ненадлежащей активностью Р13-киназ, включающий введение безопасного и эффективного количества комбинации, содержащей полиморф или соль по изобретению вместе с одним или более терапевтически активными агентами.

В еще одном аспекте данного изобретения предложена комбинация, содержащая полиморф или соль по изобретению, избирательный(ую) в отношении Р13К0, вместе с соединением или его фармацевтически приемлемой солью, избирательным(ой) в отношении другой Р13-киназы, например Р13Ку.

Одно из воплощений данного изобретения охватывает комбинации, содержащие один или два других терапевтических агента.

Специалисту в данной области будет ясно, что в тех случаях, когда это целесообразно, другой(ие) терапевтический(ие) ингредиент(ы) могут быть использованы в форме солей, например солей щелочных металлов, или аминных солей, или солей присоединения кислоты, или в виде пролекарств, или в виде эфиров, например низших алкиловых эфиров, или в виде сольватов, например гидратов, для оптимизации активности, и/или стабильности, и/или физических свойств, таких как растворимость, терапевтического ингредиента.

Должно быть ясно также, что в тех случаях, когда это целесообразно, терапевтические ингредиенты могут быть использованы в оптически чистой форме.

В одном из воплощений данное изобретение охватывает комбинацию, содержащую полиморф или соль по изобретению вместе с агонистом ( 2-адренорецептора.

Примеры агонистов ( ₂-адренорецептора включают сальметерол (который может представлять собой рацемат или единственный энантиомер, например К-энантиомер), сальбутамол (который может представлять собой рацемат или единственный энантиомер, например К-энантиомер), формотерол (который может представлять собой рацемат или единственный диастереомер, например К,К-диастереомер), сальмефамол, фенотерол, кармотерол, этантерол, наминтерол, кленбутерол, пирбутерол, флербутерол, репротерол, бамбутерол, индакатерол, тербуталин и их соли, например соль ксинафоат (1-гидрокси-2- 16 022872 нафталинкарбоксилат) сальметерола, сульфатную соль или свободное основание сальбутамола или фумаратную соль формотерола. В одном из воплощений длительно действующие агонисты β₂адренорецептора, например соединения, которые обеспечивают эффективную бронходилатацию в течение примерно 12 ч или дольше, являются предпочтительными.

Другие агонисты в₂-адренорецептора включают те из них, которые описаны в АО 02/066422, АО 02/070490, АО 02/076933, АО 03/024439, АО 03/072539, АО 03/091204, АО 04/016578, АО 2004/022547, АО 2004/037807, АО 2004/037773, АО 2004/037768, АО 2004/039762, АО 2004/039766, АО 01/42193 и АО 03/042160.

Примеры агонистов в₂-адренорецептора включают

3-(4-{[6-({(2К)-2-гидрокси-2-[4-гидрокси-3-гидроксиметил)фенил]этил}амино)гексил]окси}бутил)бензолсульфонамид;

3- (3-{[7-({(2К)-2-гидрокси-2-[4-гидрокси-3-гидроксиметил)фенил]этил}-амино)гептил]окси}пропил)бензолсульфонамид;

4- {(1К)-2-[(6-{2-[(2,6-дихлорбензил)окси]этокси}гексил)амино]-1-гидроксиэтил}-2-(гидроксиметил)фенол;

4- {(1К)-2-[(6-{4-[3-(циклопентилсульфонил)фенил]бутокси}гексил)амино]-1-гидроксиэтил}-2(гидроксиметил)фенол;

Ы-[2-гидроксил-5-[(1К)-1-гидрокси-2-[[2-4-[[(2К)-2-гидрокси-2-фенилэтил]амино]фенил]этил]амино]этил]фенил]формамид;

Ы-2-{2-[4-(3-фенил-4-метоксифенил)аминофенил]этил}-2-гидрокси-2-(8-гидрокси-2(1Н)хинолинон5-ил)этиламин и

5- [(К)-2-(2-{4-[4-(2-амино-2-метил-пропокси)-фениламино]-фенил}-этиламино)-1-гидрокси-этил]-8гидрокси-1Н-хинолин-2-он.

Агонист в₂-адренорецептора может быть в форме соли, образованной с фармацевтически приемлемой кислотой, выбранной из серной, соляной, фумаровой, гидроксинафтойной (например 1- или 3гидрокси-2-нафтойной), коричной, замещенной коричной, трифенилуксусной, сульфаминовой, сульфаниловой, нафталинакриловой, бензойной, 4-метоксибензойной, 2- или 4-гидроксибензойной, 4хлорбензойной и 4-фенилбензойной кислот.

Подходящие противовоспалительные агенты включают кортикостероиды. Подходящими кортикостероидами, которые могут быть использованы в комбинации с полиморфами или солями по изобретению, являются пероральные и ингалируемые кортикостероиды и их пролекарства, которые обладают противовоспалительной активностью. Примеры включают метилпреднизолон, преднизолон, дексаметазон, флутиказона пропионат, δ-фторметиловый эфир 6а,9а-дифтор-11в-гидрокси-16а-метил-17а-[(4метил-1,3 -тиазол-5 -карбонил)окси] -3 -оксо-андроста-1,4-диен-17 β -карботиокислоты, δ-фторметиловый эфир 6α, 9а-дифтор- 17α- [(2-фуранилкарбонил)окси] -11 β -гидрокси-16а-метил-3 -оксо-андроста-1,4-диен17в-карботиокислоты (флутиказона фуроат), §-(2-оксо-тетрагидрофуран-3§-иловый) эфир 6а,9а-дифтор11в-гидрокси-16а-метил-3-оксо-17а-пропионилокси-андроста-1,4-диен-17в-карботиокислоты, δ-цианометиловый эфир 6а,9а-дифтор-11 в-гидрокси-16а-метил-3-оксо-17а-(2,2,3,3-тетраметилциклопропилкарбонил)окси-андроста-1,4-диен-17в-карботиокислоты и δ-фторметиловый эфир 6а,9а-дифтор-11вгидрокси-16а-метил- 17а-(1 -метилциклопропилкарбонил)окси-3 -оксо-андроста-1,4-диен-17 β -карботиокислоты, эфиры беклометазона (например, 17-пропионатный эфир или 17,21-дипропионатный эфир), будесонид, флунисолид, эфиры мометазона (например, мометазона фуроат), триамцинолона ацетонид, рофлепонид, циклесонид (16а, 17-[[(К)-циклогексилметилен]бис(окси)]-11в,21-дигидрокси-прегна-1,4диен-3,20-дион), бутиксокорта пропионат, КРК-106541 и δΤ-126. Предпочтительные кортикостероиды включают флутиказона пропионат, δ-фторметиловый эфир 6а,9а-дифтор-11в-гидрокси-16а-метил-17а[(4-метил-1,3-тиазол-5-карбонил)окси]-3-оксо-андроста-1,4-диен-17в-карботиокислоты, δ-фторметиловый эфир 6а,9а-дифтор-17а-[(2-фуранилкарбонил)окси]-11 в-гидрокси-16а-метил-3-оксо-андроста-1,4диен-17в-карботиокислоты, δ-цианометиловый эфир 6а,9а-дифтор-11в-гидрокси-16а-метил-3-оксо-17а(2,2,3,3-тетраметилциклопропилкарбонил)окси-андроста-1,4-диен-17в-карботиокислоты и δ-фторметиловый эфир 6а,9а-дифтор-11в-гидрокси-16а-метил-17а-(1-метилциклопропилкарбонил)окси-3-оксоандроста-1,4-диен-17в-карботиокислоты. В одном из воплощений кортикостероид представляет собой δфторметиловый эфир 6а,9а-дифтор-17а-[(2-фуранилкарбонил)окси]-11 в-гидрокси-16а-метил-3-оксоандроста-1,4-диен-17 β -карботиокислоты.

Примеры кортикостероидов могут включать кортикостероиды, которые описаны в АО 2002/088167, АО 2002/100879, АО 2002/12265, АО 2002/12266, АО 2005/005451, АО 2005/005452, АО 2006/072599 и АО 2006/072600.

Нестероидные соединения с агонизмом глюкокортикоидов, которые проявляют избирательность в отношении трансрепрессии по сравнению с трансактивацией и которые могут быть полезны в комбинированной терапии, включают соединения, охваченные в следующих патентных заявках: АО 03/082827, АО 98/54159, АО 04/005229, АО 04/009017, АО 04/018429, АО 03/104195, АО 03/082787, АО

- 17 022872

03/082280, АО 03/059899, АО 03/101932, АО 02/02565, АО 01/16128, АО 00/66590, АО 03/086294, АО 04/026248, АО 03/061651 и АО 03/08277. Дополнительные нестероидные соединения охвачены в АО 2006/000401, АО 2006/000398 и АО 2006/015870.

Примеры противовоспалительных агентов включают нестероидные противовоспалительные лекарственные средства (Ν8ΑΙΌ).

Примеры Ν8ΑΙΌ включают кромгликат натрия, недокромил-натрий, ингибиторы фосфодиэстеразы (ΡΌΕ) (например теофиллин, ингибиторы ΡΌΕ4 или смешанные ингибиторы ΡΌΕ3/ΡΌΕ4), антагонист лейкотриенов, ингибиторы синтеза лейкотриенов (например монтелукаст), ингибиторы ^NО8, ингибиторы триптазы и эластазы, антагонисты бета-2 интегрина и агонисты или антагонисты аденозиновых рецепторов (например агонисты аденозина-2а), антагонисты цитокинов (например антагонисты хемокинов, такие как антагонист ССК3), или ингибиторы синтеза цитокинов, или ингибиторы 5-липоксигеназы. ΐΝО8 (ингибитор индуцибельной синтазы оксида азота) предпочтителен для перорального введения. Примеры ингибиторов |КО8 включают ингибиторы ^NО8, которые описаны в АО 93/13055, АО 98/30537, АО 02/50021, АО 95/34534 и АО 99/62875. Примеры ингибиторов ССК3 включают ингибиторы ССК3, которые описаны в АО 02/26722.

В одном из воплощений данного изобретения предложено применение полиморфов и солей по изобретению в комбинации с ингибитором фосфодиэстеразы 4 (ΡΌΕ4), особенно в случае композиции, адаптированной для ингаляции. Ρ^Ε4-специфичный ингибитор, полезный в этом аспекте изобретения, может представлять собой любое соединение, о котором известно, что оно ингибирует фермент ΡΌΕ4, или которое раскрыто как соединение, которое действует как ингибитор ΡΌΕ4, и которое является ингибитором только ΡΌΕ4, а не соединением, которое ингибирует другие члены семейства ΡΌΕ, такие как ΡΌΕ3 и ΡΌΕ5, а также ΡΌΕ4.

Соединения включают цис-4-циано-4-(3 -циклопентилокси-4-метоксифенил)циклогексан-1 карбоновую кислоту, 2-карбометокси-4-циано-4-(3 -циклопропилметокси-4-дифторметоксифенил)циклогексан-1-он и цис-[4-циано-4-(3-циклопропилметокси-4-дифторметоксифенил)циклогексан-1-ол], а также цис-4-циано-4-[3-(циклопентилокси)-4-метоксифенил]циклогексан-1-карбоновую кислоту (также известную как циломиласт) и его соли, эфиры, пролекарства или физические формы, которые описаны в патенте США 5552438, выданном 03 сентября 1996 года (полное содержание этого патента и соединения, которые в нем раскрыты, включены в данное описание посредством ссылки).

Другие соединения включают ААЭ-12-281 от Б1Ыоп (НоГдеп, Ν. е1 а1. 151Н ΕΡΜС 1пЕ 8утр. Меб. СЬет. (8ерГ 6-10, Ε6ίηόπΓ§Η), 1998, АЬв1 Ρ.98; СА8 ссылочный № 247584020-9); производное 9бензиладенина под наименованием NС8-613 (ΙΝ8ΕΚΜ); Ό-4418 от СЫтовтепсе и 8сЬе^^ηд-Ρ1οидЬ; бензодиазепиновый ингибитор ΡΌΕ4, идентифицированный как С1-1018 (ΡΌ-168787) и принадлежащий компании ΡΠ/ег; производное бензодиоксола, описанное Куо\\а Накко в АО 99/16766; К-34 от Куо^а Накко; У-11294А от №рр (Ьапбе11в, Ь.Е ек а1., Επγ. Кевр. 1. [Аппи. Сопд. Επγ. Кевр. 8ос. (8ерк 19-23, Оепеуа) 1998] 1998, 12 (8ирр1. 28): АЬвк Ρ2393); рофлумиласт (СА8 ссылочный № 162401-32-3) и фталазинон (АО 99/47505, описание которой включено в данное описание посредством ссылки) от Вук-Ои1беп; пумафентрин, (-)-пара-[(4аК*,10Ь8*)-9-этокси-1,2,3,4,4а,10Ь-гексагидро-8-метокси-2метилбензо[с][1,6]нафтиридин-6-ил]-Ы^-диизопропилбензамид, являющийся ингибитором ΡΌΕ3/ΡΌΕ4, который получен и опубликован Вук-Ои1беп, в настоящее время АНапа; арофиллин, разрабатываемый АйпиаП-ЕгобевГагта; УМ554/иМ565 от Уегпайв; или Т-440 (ТапаЬе 8е1уаки; Рир, К. ек а1. 1. ЕНагтасок Εxр. ТЬег.,1998, 284(1): 162) и Т2585.

Дополнительные соединения раскрыты в публикации международной патентной заявки АО 04/024728 (О1ахо Огоир Ыб.), АО 04/056823 (О1ахо Огоир Ыб.) и АО 04/103998 (О1ахо Огоир Ыб.) (например, соединение примера 399 или соединение примера 544, раскрытые в этой заявке). Дополнительные соединения также раскрыты в АО 2005/058892, АО 2005/090348, АО 2005/090353 и АО 2005/090354, все от имени О1ахо Огоир ЫтЪеб.

Примерами антихолинергических агентов являются те соединения, которые действуют как антагонисты мускариновых рецепторов, в частности те соединения, которые являются антагонистами рецепторов М₁ или М₃, двойственными антагонистами рецепторов М₁/М₃ или М₂/М₃ или панантагонистами рецепторов М₁/М₂/М₃. Иллюстративные соединения для введения ингаляцией включают ипратропий (например, в форме бромида, СА8 22254-24-6, продаваемый под наименованием АкгоуепЕ), окситропий (например, в форме бромида, СА8 30286-75-0) и тиотропий (например, в форме бромида, СА8 136310-93-5, продаваемый под наименованием 8ртуа). Интерес также представляют реватропат (например, в форме гидробромида, СА8 262586-79-8) и ЬА8-34273, который раскрыт в АО 01/04118. Иллюстративные соединения для перорального введения включают пирензепин (СА8 28797-61-7), дарифенацин (СА8 133099-04-4 или СА8 133099-07-7 для гидробромида, продаваемый под наименованием ΕηаЬ1еx), оксибутинин (СА8 5633-20-5, продаваемый под наименованием Обгорай), теродилин (СА8 15793-40-5), толтеродин (СА8 124937-51-5 или СА8 124937-52-6 для тартрата, продаваемый под наименованием ОектоГ), отилоний (например, в форме бромида, СА8 26095-59-0, продаваемый под наименованием 8равтотеп), троспийхлорид (СА8 10405-02-4) и солифенацин (СА8 242478-37-1 или СА8 242478-38-2 для сукцината, также известный как УМ-905 и продаваемый под наименованием Уевюаге).

- 18 022872

Дополнительные соединения раскрыты в \УО 2005/037280, \νϋ 2005/046586 и \νϋ 2005/104745, которые включены в данное описание посредством ссылки. Комбинации по настоящему изобретению включают, без ограничения:

йодид(3-эндо)-3-(2,2-ди-2-тиенилэтенил)-8,8-диметил-8-азониабицикло[3.2.1]октана; бромид(3-эндо)-3-(2-циано-2,2-дифенилэтил)-8,8-диметил-8-азониабицикло[3.2.1]октана; бромид4-[гидрокси(дифенил)метил] -1 -{2-[(фенилметил)окси] этил} -1 -азониабицикло [2.2.2] октана и бромид(1К,58)-3-(2-циано-2,2-дифенилэтил)-8-метил-8-{2-[(фенилметил)окси]этил}-8-азониабицикло[3.2.1]октана.

Другие антихолинергические агенты включают соединения, которые раскрыты в патентной заявке США 60/487981, включая, например:

бромид(3-эндо)-3-(2,2-ди-2-тиенилэтенил)-8,8-диметил-8-азониабицикло[3.2.1]октана;

бромид(3-эндо)-3-(2,2-дифенилэтенил)-8,8-диметил-8-азониабицикло[3.2.1]октана;

4-метилбензолсульфонат(3-эндо)-3-(2,2-дифенилэтенил)-8,8-диметил-8-азониабицикло[3.2.1]октана;

бромид(3-эндо)-8,8-диметил-3-[2-фенил-2-(2-тиенил)этенил]-8-азониабицикло[3.2.1]октана и/или бромид(3-эндо)-8,8-диметил-3-[2-фенил-2-(2-пиридинил)этенил]-8-азониабицикло[3.2.1]октана. Дополнительные антихолинергические агенты включают соединения, которые раскрыты в патентной заявке США 60/511009, включая, например:

йодид(эндо)-3-(2-метокси-2,2-ди-тиофен-2-ил-этил)-8,8-диметил-8-азониа-бицикло[3.2.1]октана;

3-((эндо)-8-метил-8-аза-бицикло[3.2.1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропионитрил;

(эндо)-8-метил-3-(2,2,2-трифенил-этил)-8-аза-бицикло[3.2.1]октан;

3-((эндо)-8-метил-8-аза-бицикло[3.2.1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропионамид;

3-((эндо)-8-метил-8-аза-бицикло[3.2.1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропионовую кислоту;

(эндо)-3-(2-циано-2,2-дифенил-этил)-8,8-диметил-8-азониа-бицикло[3.2.1]октана йодид; бромид(эндо)-3 -(2-циано-2,2-дифенил-этил)-8,8-диметил-8-азониа-бицикло[3.2.1]октана; 3-((эндо)-8-метил-8-аза-бицикло[3.2.1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропан-1-ол;

Ы-бензил-3-((эндо)-8-метил-8-аза-бицикло[3.2.1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропионамид;

йодид(эндо)-3-(2-карбамоил-2,2-дифенил-этил)-8,8-диметил-8-азониа-бицикло[3.2.1]октана;

1-бензил-3-[3-((эндо)-8-метил-8-аза-бицикло[3.2.1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропил]мочевину;

1-этил-3-[3-((эндо)-8-метил-8-аза-бицикло[3.2.1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропил]мочевину;

Ы-[3-((эндо)-8-метил-8-аза-бицикло[3.2.1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропил]ацетамид;

Ы-[3-((эндо)-8-метил-8-аза-бицикло[3.2.1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропил]бензамид;

3-((эндо)-8-метил-8-аза-бицикло[3.2.1]окт-3-ил)-2,2-ди-тиофен-2-ил-пропионитрил;

йодид(эндо)-3-(2-циано-2,2-ди-тиофен-2-ил-этил)-8,8-диметил-8-азониа-бицикло[3.2.1]октана;

Ы-[3-((эндо)-8-метил-8-аза-бицикло[3.2.1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропил]бензолсульфонамид;

[3-((эндо)-8-метил-8-аза-бицикло[3.2.1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропил]мочевину;

Ы-[3-((эндо)-8-метил-8-аза-бицикло[3.2.1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропил]метансульфонамид и/или бромид(эндо)-3-{2,2-дифенил-3-[(1-фенил-метаноил)амино]пропил}-8,8-диметил-8-азониабицикло[3.2.1]октана.

Дополнительные соединения включают йодид(эндо)-3 -(2-метокси-2,2-ди-тиофен-2-ил-этил)-8,8-диметил-8-азониа-бицикло[3.2.1]октана; йодид(эндо)-3 -(2-циано-2,2-дифенил-этил)-8,8-диметил-8-азониа-бицикло[3.2.1]октана; бромид(эндо)-3 -(2-циано-2,2-дифенил-этил)-8,8-диметил-8-азониа-бицикло[3.2.1]октана; йодид(эндо)-3 -(2-карбамоил-2,2-дифенил-этил)-8,8-диметил-8-азониа-бицикло[3.2.1]октана; йодид(эндо)-3-(2-циано-2,2-ди-тиофен-2-ил-этил)-8,8-диметил-8-азониа-бицикло[3.2.1]октана и/или бромид(эндо)-3-{2,2-дифенил-3-[(1-фенил-метаноил)-амино]-пропил}-8,8-диметил-8-азониабицикло[3.2.1]октана.

В одном из воплощений данного изобретения предложена комбинация, содержащая полиморф или соль по изобретению вместе с антагонистом Н1. Примеры антагонистов Н1 включают, без ограничения, амелексанокс, астемизон, азатадин, азеластин, акривастин, бромфенирамин, цетиризин, левоцетиризин, эфлетиризин, хлофенирамин, клемастин, циклизин, каребастин, ципрогептадин, карбиноксамин, дескарбоэтоксилоратидин, доксиламин, диметинден, эбастин, эпинастин, эфлетиризин, фексофенадин, гидроксизин, кетотифен, лоратадин, левокарбастин, мизоластин, меквитазин, миансерин, ноберастин, меклизин, норастемизол, олопатадин, пикумаст, пириламин, прометазин, терфенадин, трипеленнамин, темеластин, тримепразин и трипролидин, в частности цетиризин, левоцетиризин, эфлетиризин и фексофенадин. В еще одном воплощении данного изобретения предложена комбинация, содержащая полиморф или соль по изобретению вместе с антагонистом (и/или обратным агонистом) Н3. Примеры антагонистов Н3 включают, например, те соединения, которые описаны в \νϋ 2004/035556 и в \νϋ 2006/045416. Другие антагонисты гистаминовых рецепторов, которые могут быть использованы в комбинации с полиморфами и солями по изобретению, включают антагонисты (и/или обратные агонисты) рецептора Н4, например соединения, раскрытые в 1аЫопо\Узк1 е! а1., 1. Меб. Сйет. 46:3957-3960 (2003).

Таким образом, в следующем аспекте данного изобретения предложена комбинация, содержащая

- 19 022872 полиморф или соль по изобретению вместе с ингибитором ΡΌΕ4.

Таким образом, в следующем аспекте данного изобретения предложена комбинация, содержащая полиморф или соль по изобретению вместе с агонистом (₂-адренорецептора.

Таким образом, в следующем аспекте данного изобретения предложена комбинация, содержащая полиморф или соль по изобретению вместе с кортикостероидом.

Таким образом, в следующем аспекте данного изобретения предложена комбинация, содержащая полиморф или соль по изобретению вместе с нестероидным агонистом СК (глюкокортикоидные рецепторы).

Таким образом, в следующем аспекте данного изобретения предложена комбинация, содержащая полиморф или соль по изобретению вместе с антихолинергическим средством.

Таким образом, в следующем аспекте данного изобретения предложена комбинация, содержащая полиморф или соль по изобретению вместе с антигистаминным средством.

Таким образом, в следующем аспекте данного изобретения предложена комбинация, содержащая полиморф или соль по изобретению вместе с ингибитором ΡΌΕ4 и агонистом (₂-адренорецептора.

Таким образом, в следующем аспекте данного изобретения предложена комбинация, содержащая полиморф или соль по изобретению вместе с антихолинергическим средством и ингибитором ΡΌΕ-4.

Указанные выше комбинации для удобства могут быть представлены для применения в форме фармацевтической композиции, и поэтому фармацевтические композиции, содержащие комбинацию, как она определена выше, вместе с фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем составляют еще один аспект данного изобретения.

Индивидуальные компоненты таких комбинаций можно вводить либо последовательно, либо одновременно в отдельных или объединенных фармацевтических композициях. В одном из воплощений индивидуальные компоненты вводят одновременно в объединенной фармацевтической композиции. Специалистам в данной области не составит труда определить соответствующие дозы известных терапевтических агентов.

Таким образом, в следующем аспекте данного изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая комбинацию полиморфа или соли по изобретению вместе с другим терапевтически активным агентом.

Таким образом, в следующем аспекте данного изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая комбинацию полиморфа и соли по изобретению вместе с ингибитором ΡΌΕ4.

Таким образом, в следующем аспекте данного изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая комбинацию полиморфа и соли по изобретению вместе с агонистом ( 2адренорецептора.

Таким образом, в следующем аспекте данного изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая комбинацию полиморфа и соли по изобретению вместе с кортикостероидом.

Таким образом, в следующем аспекте данного изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая комбинацию полиморфа и соли по изобретению вместе с нестероидным агонистом СК.

Таким образом, в следующем аспекте данного изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая комбинацию полиморфа и соли по изобретению вместе с антихолинергическим средством.

Таким образом, в следующем аспекте данного изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая комбинацию полиморфа и соли по изобретению вместе с антигистаминным средством.

Таким образом, в следующем аспекте данного изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая комбинацию полиморфа и соли по изобретению вместе с ингибитором ΡΌΕ4 и агонистом ( 2-адренорецептора.

Таким образом, в следующем аспекте данного изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая комбинацию полиморфа и соли по изобретению вместе с антихолинергическим средством и ингибитором ΡΌΕ4.

Далее изобретение иллюстрируется примерами, не ограничивающими объем изобретения.

Примеры

Приведенные ниже примеры иллюстрируют данное изобретение. Эти примеры не предназначены для того чтобы ограничивать объем настоящего изобретения; они предназначены для того чтобы дать специалисту руководство по получению и применению соединений, композиций и способов по настоящему изобретению. Хотя конкретные воплощения настоящего изобретения описаны, для специалиста будет очевидным то, что могут быть выполнены различные изменения и модификации, не выходящие за рамки замысла и объема данного изобретения.

В тех случаях, когда название коммерческого поставщика приведено после названия соединения или реагента, например соединение X (АИпсН) или соединение Х/АИпсН, тогда это означает, что соединение X можно приобрести у того коммерческого поставщика, название которого указано. Если

- 20 022872 указания нет, то соединение или реагент могут быть приобретены у стандартного поставщика, такого как $1£ша АШпсН, Ьапса8£ег, Г1иогосНеш, ТС1 и т.д.

Названия соединений, указанных в заголовках примеров, присвоены с использованием программы присвоения названий соединениям, сопоставляющей структуру с названием (например, АСО/Ыаше Ва1сН ν. 9.0).

Общие подробности экспериментов.

Методы жидкостной хроматографии/масс-спектроскопии (ЖХ/МС).

ЖХ/МС-анализ проводили с использованием одного из методов, перечисленных ниже.

Метод А.

Аппаратура для ЖХ/МС:

колонка: Асцш1у УВЭЖХ ВЕН С]₈, 1,7 мкм, 2,1 *50 мм. Термостат колонки установлен на 40°С.

Растворитель А: 0,1%-ный раствор муравьиной кислоты в воде+10 мМ ацетат аммония.

Растворитель Б: МеС№вода 95:5+0,05% муравьиной кислоты.

Объем вводимого образца: 0,5 мкл.

Техника ввода образца: петлевой инжектор с возможностью частичного заполнения и перезаполнения шприца.

УФ-детектирование: 220-330 нм.

Скорость сбора данных УФ-детектирования: 40 точек в секунду.

Диапазон МС-сканирования: от 100 до 1000 а.е.м. (атомные единицы массы).

Частота МС-сканирования: 0,2-секундное сканирование с задержкой 0,1 с между сканированиями.

Режим МС-сканирования: электрораспыление с попеременной регистрацией положительных и отрицательных ионов.

Время цикла: 2 мин и 30 с.

Градиент:

Время	Скорость потока (мл/мин)	%А	%В
0	1	97	3
0,1	1	97	3
1,4	1	0	100
1,9	1	0	100
2	1	97	3

Метод Б.

ВЭЖХ-анализ проводили на колонке Зипйге С18 (30*4,6 мм в.д. (внутренний диаметр), диаметр частиц сорбента 3,5 мкм) при 30°С.

Растворитель А: 0,1%-ный (об./об.) раствор муравьиной кислоты в воде.

Растворитель Б: 0,1%-ный (об./об.) раствор муравьиной кислоты в ацетонитриле.

Использовали следующий градиент:

Посредством УФ-детектирования регистрировали усредненный сигнал при длине волны от 210 до 350 нм, и масс-спектры регистрировали на масс-спектрометре в режиме электрораспылительной ионизации с попеременной регистрацией положительных и отрицательных ионов.

Метод В.

ВЭЖХ-анализ проводили на колонке РНепошепех Ьиша С18(2) (50*2 мм в.д., диаметр частиц сорбента 3 мкм или признанный эквивалент) при 40°С.

Растворитель А: 0,05%-ный (об./об.) раствор ТГА в воде.

Растворитель Б: 0,05%-ный (об./об.) раствор ТГА в ацетонитриле.

Использовали следующий градиент: ___

Время (мин)	Скорость потока (мл/мин)	%А	%В
0	1	100	0
8	1	5	95
8,01	1	100	0

Длина волны УФ-детектирования зависела от определяемого в анализе вещества, и масс-спектры регистрировали на масс-спектрометре в режиме распылительной ионизации с регистрацией положитель- 21 022872 ных ионов.

Метод Г.

ВЭЖХ-анализ проводили на колонке Рйепошепех Ьиша С18(2) (50^2 мм в.д., диаметр частиц сорбента 3 мкм или признанный эквивалент) при 60°С.

Растворитель А: 0,05%-ный (об./об.) раствор ТРА в воде.

Растворитель В: 0,05%-ный (об./об.) раствор ТРА в ацетонитриле.

Использовали следующий градиент: ___

Время (мин)	Скорость потока (мл/мин)	%А	%в
0	1,5	100	0
2,5	1,5	5	95
2,7	1,5	5	95
2,9	1,5	100	0

Длина волны УФ-детектирования зависела от определяемого в анализе вещества, и масс-спектры регистрировали на масс-спектрометре в режиме распылительной ионизации с регистрацией положительных ионов.

Методы масс-направленной автоматизированной препаративной ВЭЖХ.

Методы масс-направленной автоматизированной препаративной ВЭЖХ, использованные для очистки соединений, описаны ниже.

Метод А - высокий рН.

Колонка: \\а1ег5 ХВКГООЕ Ргер С18, 5 мкм ΟΒΌ (30x150 мм).

Использовали следующие растворители: растворитель А - 10 мМ бикарбонат аммония в воде, доведенный до рН 10 водным раствором аммиака; растворитель Б - ацетонитрил+0,1%-ный водный раствор аммиака.

Сбор данных осуществляли УФ-спектроскопией, масс-спектроскопией или их комбинацией. В результате УФ-детектирования регистрировали усредненный сигнал при длине волны от 210 до 350 нм. Масс-спектры снимали на масс-спектрометре в режиме электрораспылительной ионизации с попеременной регистрацией положительных и отрицательных ионов.

Получение соединения А

Промежуточные соединения и примеры.

Промежуточное соединение 1. 6-Хлор-4-йод-1-(фенилсульфонил)-1Н-индазол.

6-Хлор-4-йод-1Н-индазол (30 г, 108 ммоль, доступен от Зтоуа) растворяли в Ν,Νдиметилформамиде (300 мл) и охлаждали в бане лед/вода в атмосфере азота. Порциями добавляли гидрид натрия (5,17 г, 129 ммоль), поддерживая температуру ниже 10°С. После окончания добавления реакционную смесь перемешивали в течение 20 мин, затем по каплям добавляли бензолсульфонилхлорид (16,5 мл, 129 ммоль) в течение 15 мин. Реакционную смесь оставляли нагреваться до КГ в течение ночи, затем выливали на смесь лед/вода (2 л). Выпавший в осадок продукт собирали фильтрованием, промывали водой (приблизительно 400 мл) и сушили в вакуумном шкафу в течение ночи с получением указанного в заголовке соединения (43,3 г).

ЖХ/МС (Метод А): Κί 1,38 мин, МН+419.

Способ Б.

К перемешиваемому раствору 6-хлор-4-йод-1Н-индазола (633,6 г) в ТНР (5,7 л) добавляли гидроксид натрия (227,4 г), затем добавляли бисульфат тетра-н-бутиламмония (38,0 г) при 20±3°С в атмосфере азота. Эту смесь перемешивали при 20±3°С в течение 1 ч 3 мин, затем добавляли бензолсульфонилхлорид (319 мл) с такой скоростью, чтобы поддерживать внутреннюю температуру <25°С. Остаточный бензолсульфонилхлорид смывали в сосуд с ТНР (630 мл), затем смесь перемешивали в течение 1 ч 10 мин. Смесь охлаждали до <5°С и добавляли воду (12,7 л) с такой скоростью, чтобы поддерживать внутреннюю температуру ниже 5±3°С, затем смесь перемешивали при 0-5°С в течение 1 ч 20 мин. Твердое вещество собирали вакуумной фильтрацией, промывали водой (2x1,9 л), сушили отсасыванием влаги, затем дополнительно сушили в вакууме, продувая азотом, при 40±3°С в течение ночи с получением указанного в заголовке соединения (780,8 г).

ЖХ/МС (Метод В): Κί 6,28 мин, МН+ 419.

Способ В.

Все массы, объемы и эквиваленты отнесены к 6-хлор-4-йод-1Н-индазолу.

- 22 022872

6-Хлор-4-йод-1Н-индазол (1,0 экв., 1 мас., 50 г), гидроксид натрия (2,25 экв., 0,324 мас., 16,16 г) и гидросульфат тетрабутиламмония (0,05 экв., 0,061 мас., 3,05 г) перемешивают в ТНР (9,5 об., 475 мл) при 20±3°С в атмосфере азота в течение 1 ч. Смесь охлаждают до 15±3°С и по каплям добавляют бензолсульфонилхлорид (1,10 экв., 0,51 об., 25,5 мл) в течение 20 мин, поддерживая температуру реакции ниже 25°С, и промывают ТНР (0,5 об., 25 мл). Полученную смесь затем перемешивают в атмосфере азота при 20±3°С в течение по меньшей мере 1 ч, после чего осуществляют проверку на завершение реакции методом ВЭЖХ. В реакционную смесь затем добавляют 0,25М раствор соляной кислоты (18 об., 900 мл), охлажденный до 0±3°С, в течение 15 мин, поддерживая температуру водной суспензии ниже 20°С. Эту суспензию промывают 0,25М раствором соляной кислоты (2 об., 100 мл). Полученную оранжевую суспензию затем перемешивают при 2±3°С в течение по меньшей мере 1 ч. Твердое отфильтровывают, промывают водой (2x3 об., 2x150 мл) и сушат под разрежением в течение 20 мин, затем сушат в глубоком вакууме при 40±3°С до постоянной температуры образца с получением 6-хлор-4-йод-1(фенилсульфонил)-1Н-индазола в виде оранжевого твердого вещества.

Промежуточное соединение 2. 6-Хлор-1-(фенилсульфонил)-4-(триметилстаннанил)-1Н-индазол.

6-Хлор-4-йод-1-(фенилсульфонил)-1Н-индазол (30 г, 71,7 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (8,1 г, 7,01 ммоль), ксилол (200 мл), триэтиламин (19,98 мл, 143 ммоль.) и гексаметилдиолово (21,8 мл, 105 ммоль) нагревали при 150°С в течение 2 ч. Горячую реакционную смесь фильтровали через целит, промывая дополнительно ксилолом, и растворитель выпаривали в вакууме. Остаток растирали с циклогексаном, и осадок собирали фильтрованием и сушили в вакуумном шкафу с получением указанного в заголовке соединения (14,4 г).

ЖХ/МС (Метод А): К! 1,51 мин, МН+ 457.

Промежуточное соединение 3а. Этил-2-[6-хлор-1-(фенилсульфонил)-1Н-индазол-4-ил]-1,3-оксазол5-карбоксилат.

партиями тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (3,37 г, 2,92 ммоль), этил-2-хлор-1,3-оксазол-5карбоксилат (6,65 г, 37,9 ммоль, доступный от Аро11о Зшепййс) и йодид меди(1) (1,11 г, 5,83 ммоль) добавляли к раствору 6-хлор-1-(фенилсульфонил)-4-(триметилстаннанил)-1Н-индазола (13,28 г, 29,2 ммоль) в Ν,Ν-диметилформамиде (52 мл). В трех из этих партий тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (1,03 г, 0,89 ммоль), этил-2-хлор-1,3-оксазол-5-карбоксилат (2,03 г, 11,59 ммоль) и йодид меди(1) (0,34 г, 1,78 ммоль) добавляли к раствору 6-хлор-1-(фенилсульфонил)-4-(триметилстаннанил)-1Н-индазола (4,06 г, 8,91 ммоль) в Ν,Ν-диметилформамиде (16 мл). В четвертой партии тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (0,28 г, 0,24 ммоль), этил-2-хлор-1,3-оксазол-5-карбоксилат (0,55 г, 3,14 ммоль) и йодид меди(1) (0,09 г, 0,48 ммоль) добавляли к раствору 6-хлор-1-(фенилсульфонил)-4(триметилстаннанил)-1Н-индазола (1,10 г, 2,42 ммоль) в Ν,Ν-диметилформамиде (4 мл). Каждую партию нагревали и перемешивали при 100°С под воздействием микроволнового излучения в течение 30 мин. Смеси давали возможность охладиться до КТ, и объединенный осажденный продукт суспендировали в диэтиловом эфире и собирали фильтрованием, промывая дополнительно диэтиловым эфиром, затем сушили в вакуумном шкафу в течение 72 ч. Приблизительно 5,2 г полученного твердого вещества растворяли в дихлорметане и пропускали через целит, элюируя дополнительным количеством дихлорметана. Растворитель выпаривали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде бледнооранжевого твердого вещества (4,95 г).

ЖХ/МС (Метод А): К! 1,38 мин, МН+ 432.

- 23 022872

Промежуточное соединение 3б. Метил-2-[6-хлор-1-(фенилсульфонил)-1Н-индазол-4-ил]-1,3оксазол-5-карбоксилат.

К перемешиваемому раствору 6-хлор-4-йод-1-(фенилсульфонил)-1Н-индазола (549,8 г) в толуоле (1,43 л) добавляли триэтиламин (380 мл) при 20±3°С в атмосфере азота. Добавляли гексаметилдиолово (385 мл) в толуоле (825 мл), затем добавляли толуол (275 мл), затем добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (154,7 г). Реакционную смесь нагревали до 120°С и перемешивали при этой температуре в течение 3 ч. Смеси давали возможность охладиться до 20±3°С, фильтровали, затем промывали толуолом (4,95 л). Фильтрат переносили в чистый сосуд через фильтр 1)отпчск Нипкег 5 мкм, смывая дополнительно толуолом (550 мл). Партию затем промывали 50%-ным водным раствором ΚΡ (5,5 л), водную суспензию фильтровали, и фильтрат воссоединяли с органической фазой. Водную фазу отделяли, и органическую фазу промывали 50%-ным водным раствором ΚΡ (5,5 л), затем водой (5,5 л). Органический слой разбавляли ΌΜΡϋ (2,75 л), затем концентрировали вакуумной дистилляцией до приблизительно 5,4 об. К полученному раствору добавляли йодид меди(Ц (25,5 г), затем добавляли метил-2хлор-1,3-оксазол-5-карбоксилат (279 г, доступный от Аро11о 8с1епййс) при 20±3°С. Раствор дегазировали, применяя вакуум и продувки азотом (^х3). Добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (78 г), смесь дегазировали (^х3) и затем нагревали до 85-90°С в течение 10 ч. Смесь разбавляли ΌΜδΟ (13,75 л) и охлаждали до 20±3°С, затем порциями приблизительно по 1 об. добавляли воду (2,75 л) в течение приблизительно 15 мин до начала кристаллизации. Полученную суспензию выдерживали при 20±3°С в течение 1,5 ч. Твердое вещество собирали вакуумной фильтрацией, промывали водой (2^χ2,75 л), сушили отсасыванием влаги и затем дополнительно сушили в вакууме, продувая азотом, при 45±5°С в течение ночи с получением указанного в заголовке соединения (341,1 г).

ЖХ/МС (Метод В): Кк 6,08 мин, МН+418.

Промежуточное соединение 4. {2-[6-Хлор-1-(фенилсульфонил)-1Н-индазол-4-ил]-1,3-оксазол-5ил}метанол.

/- он

N... О

Д.....

/'.....\

Способ А.

Раствор этил-2-[6-хлор-1 -(фенилсульфонил)-1Н-индазол-4-ил]-1,3-оксазол-5-карбоксилата (5,11 г, 11,8 ммоль) в дихлорметане (80 мл) охлаждали до -25°С в высушенной в термостате круглодонной колбе. По каплям добавляли гидрид диизобутилалюминия (25 мл, 37,5 ммоль, 1,5М раствор в толуоле), и эту реакционную смесь перемешивали при -20°С в течение 3 ч. Добавляли 10%-ный водный раствор тартрата калия-натрия (80 мл), и реакционную смесь перемешивали в течение 5 мин. Выпавшее в осадок твердое вещество отфильтровывали и распределяли между этилацетатом (500 мл) и водой (500 мл). Слои разделяли, и водный слой промывали дополнительным количеством этилацетата (3 150 мл). Объединенные органические фазы сушили и упаривали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества (1,1 г).

ЖХ/МС (Метод А): Кк 1,09 мин, МН+ 390.

Оставшийся фильтрат концентрировали в вакууме, и остаток распределяли между этилацетатом (500 мл) и водой (500 мл). Слои разделяли, и водный слой промывали дополнительным количеством этилацетата (3^χ150 мл). Объединенные органические фазы промывали водой (2^χ150 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и упаривали с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества (1,9 г).

ЖХ/МС (Метод А): Кк 1,09 мин, МН⁺ 390.

Способ Б.

К раствору этил-2-[6-хлор-1-(фенилсульфонил)-1Н-индазол-4-ил]-1,3-оксазол-5-карбоксилата (1,15 г) в ТНР (17,25 мл), перемешиваемому в атмосфере азота в ледяной бане, добавляли раствор гидрид диизобутилалюминия (5,08 мл, 5,64 ммоль) в толуоле. Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение

- 24 022872

ч. Добавляли декагидрат сульфата натрия (2,5 г), смесь перемешивали при КТ в течение 1 ч, затем фильтровали, промывали ТНР (2x5 об.) и концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (0,98 г).

ЖХ/МС (Метод Г): Κΐ 2,20 мин, МН+ 390.

Способ В.

К раствору этил-2-[6-хлор-1-(фенилсульфонил)-1Н-индазол-4-ил]-1,3-оксазол-5-карбоксилата (604,5 г) в ТНР (8,7 л), перемешиваемому в атмосфере азота при 0±3°С, добавляли приблизительно 1,ЗМ раствор гидрида диизобутилалюминия (1,8 кг) в толуоле. Реакционную смесь перемешивали при 0±3°С в течение 30 мин и затем разбавляли ее ТНР (3 л). Добавляли декагидрат сульфата натрия (1,3 кг), поддерживая температуру ниже 5°С.

Смесь перемешивали при 0±3°С в течение 10 мин и затем нагревали до 20±3°С и выдерживали при этой температуре в течение 1 ч. Суспензию фильтровали, промывали ТНР (4x3 л) и концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (529,6 г).

ЖХ/МС (Метод В): Κΐ 5,18 мин, МН+ 390.

Способ Г.

Все массы, объемы и эквиваленты отнесены к 6-хлор-4-йод-1-(фенилсульфонил)-1Н-индазолу.

Хлорид цинка (3,6 экв., 1,17 мас., 52,7 г) в тетрагидрофуране (5 об., 225 мл) охлаждают до температуры от 0 до 5°С. В сосуд добавляют раствор этил-оксазол-5-карбоксилата (1,1 экв., 0,37 мас., 18,1 г, скорректировано для анализа 92 мас.%) в тетрагидрофуране (5 об., 225 мл). Суспензию охлаждают до 10±5°С в атмосфере азота и добавляют 1М раствор бис-(триметилсилил)-литийамида в тетрагидрофуране (1,80 экв., 4,30 об., 193 мл) в течение 15 мин, поддерживая температуру -10±5°С. Полученный раствор перемешивают в атмосфере азота при -10±5°С в течение 1 ч. К раствору добавляют 6-хлор-4-йод-1(фенилсульфонил)-1Н-индазол (1,0 экв., 1,0 мас., 45,0 г) и тетракис(трифенилфосфин)палладий (0,03 экв., 0,083 мас., 3,73 г) (эту смесь дегазируют с использованием вакуума/азота 3 раза) и затем эту смесь нагревают до 60±3°С в течение по меньшей мере 6 ч. Завершение реакции проверяют методом ВЭЖХ. Реакционный раствор охлаждают до 0±3°С и добавляют раствор 25 мас./мас.% гидрида диизобутилалюминия в толуоле (4,0 экв., 6,4 об., 288 мл), поддерживая температуру ниже 5°С. Полученный реакционный раствор перемешивают при 0±3°С в течение по меньшей мере 1 ч. Завершение реакции проверяют методом ВЭЖХ (общий). Реакционную смесь порциями добавляют к раствору лимонной кислоты (4,0 экв., 2,0 мас., 90 г) в воде (10 об., 450 мл) при 0±5°С в течение примерно 1 ч. Полученный раствор перемешивают при 20°С в течение 15 мин, экстрагируют этилацетатом (10 об., 450 мл), органический слой промывают водой (2x3 об., 2x135 мл) и фильтруют через керамический фильтр с пористостью 4. Органический слой затем упаривают при пониженном давлении (45°С, 100 мбар) до 2-3 об., добавляют диметилсульфоксид (10 об., 50 мбар), и раствор выпаривают при пониженном давлении (45°С, 100 мбар) для удаления всех следов других растворителей. К раствору при 45°С по каплям добавляют воду (5 об., 225 мл) в течение 30 мин, полученную реакционную смесь охлаждают до 20°С в течение 3 ч, и ее перемешивают при 20°С в течение по меньшей мере 15 мин. Продукт фильтруют, промывают раствором диметилсульфоксид:вода (1:2) (2 об., 90 мл), затем промывают водой (3 об., 135 мл), затем сушат в глубоком вакууме при 60±3°С до постоянной температуры образца с получением (2-[6-хлор-1-(фенилсульфонил)-1Н-индазол-4ил]оксазол-5-ил)метанола в виде бежевого твердого вещества.

Промежуточное соединение 5. 4-[5-(Бромметил)-1,3-оксазол-2-ил]-6-хлор-1-(фенилсульфонил)-1Ниндазол.

{2-[6-Хлор-1 -(фенилсульфонил)-1Н-индазол-4-ил]-1,3-оксазол-5-ил}метанол (1,626 г, 4,17 ммоль) растворяли в безводном дихлорметане (20 мл) и добавляли тетрабромид углерода (2,77 г, 8,34 ммоль). Реакционную смесь охлаждали до 0°С и по каплям добавляли раствор трифенилфосфина (2,188 г, 8,34 ммоль) в дихлорметане (20 мл). После нагревания до КТ и перемешивания в течение еще 3 ч растворитель частично удаляли в вакууме, и раствор прямо очищали хроматографией на силикагеле, элюируя 0100% этилацетатом в дихлорметане. Соответствующие фракции объединяли с получением указанного в заголовке соединения в виде кремового твердого вещества (1,16 г).

ЖХ/МС (Метод Б): Κΐ 3,70 мин, МН+ 454.

Способ Б.

Трифенилфосфиндибромид (20,60 г, 48,8 ммоль) добавляли к суспензии {2-[6-хлор-1- 25 022872 (фенилсульфонил)-1Н-индазол-4-ил]-1,3-оксазол-5-ил}метанола (9,06 г, 23,2 ммоль) в дихлорметане (181 мл) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали при 0°С до завершения реакции. Добавляли воду (91 мл) и насыщенный раствор бикарбоната натрия (91 мл), и смесь перемешивали, затем слои разделяли. Водный слой экстрагировали дихлорметаном (45 мл), и органические фазы объединяли и промывали водой (91 мл). Слои разделяли, и органический слой концентрировали досуха, затем растворяли в метаноле (136 мл). После перемешивания в течение 30 мин полученную белую суспензию фильтровали, и твердое вещество сушили в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде не совсем белого твердого вещества (9,58 г).

ЖХ/МС (Метод Г): Κί 2,57 мин, МН+ 452/454.

Способ В.

Трифенилфосфиндибромид (1,2 кг) добавляли к суспензии {2-[6-хлор-1-(фенилсульфонил)-1Ниндазол-4-ил]-1,3-оксазол-5-ил}метанола (544,7 г) в дихлорметане (3,8 л), перемешиваемой в атмосфере азота при 10±3°С. Реакционную смесь перемешивали при 10±3°С в течение 20 мин. Добавляли воду (2,7 л) и насыщенный раствор бикарбоната натрия (5,4 л), и смесь перемешивали, затем разделяли. Водный слой экстрагировали дополнительным количеством дихлорметана (2,7 л), и органические фазы объединяли и промывали водой (2,7 л). Слои разделяли, и органический слой концентрировали досуха, затем растворяли в метаноле (6,5 л). После перемешивания в течение 5 ч полученную белую суспензию фильтровали, промывали метанолом (2x1,1 л), и твердое вещество сушили в вакууме при 40±5°С с получением указанного в заголовке соединения в виде не совсем белого твердого вещества (514,0 г).

ЖХ/МС (Метод В): Κί 6,40 мин, МН+ 453/455.

Способ Г.

Все массы, объемы и эквиваленты отнесены к (2-(6-хлор-1-(фенилсульфонил)-1Н-индазол-4ил)оксазол-5-ил)метанолу.

(2-(6-Хлор-1-(фенилсульфонил)-1Н-индазол-4-ил)оксазол-5-ил)метанол (1,0 экв., 1 мас., 34,0 г) и трифенилфосфиндибромид (1,3 экв., 1,32 мас., 45,0 г) перемешивают в дихлорметане (15 об., 510 мл) при 20±3°С в атмосфере азота в течение 1 ч. Завершение реакции затем проверяют методом ВЭЖХ. Сразу после завершения реакции в реакционную смесь добавляют метанол (0,8 об., 27,2 мл), при интенсивном перемешивании по каплям добавляют 8 мас./мас.% раствор гидрокарбоната натрия (10 об., 340 мл) в течение 15 мин (по результатам проверки водный рН>7). Смесь нагревают до 30±3°С и перемешивают в течение 10 мин, затем разделяют, водный слой реэкстрагируют дихлорметаном (5 об., 170 мл), и объединенные дихлорметановые слои промывают водой (5 об., 170 мл). Дихлорметановый раствор затем упаривают при пониженном давлении до объема приблизительно 4 об. К раствору добавляют метанол (15 об., 510 мл), и этот раствор упаривают при пониженном давлении при 260 мбар, 20°С для удаления остаточного дихлорметана до примерно 15 об. Суспензию затем перемешивают при 20°С в течение по меньшей мере 6 ч. Твердое вещество отфильтровывают, промывают метанолом (2x1 об., 2x34 мл), сушат под разрежением в течение 20 мин, затем сушат в глубоком вакууме при 30±3°С до постоянной температуры образца с получением 5-(бромметил)-2-(6-хлор-1-(фенилсульфонил)-1Н-индазол-4-ил)оксазола в виде бежевого твердого вещества.

Промежуточное соединение 6а. 6-Хлор-4-(5-{[(2К,68)-2,6-диметил-4-морфолинил]метил}-1,3оксазол-2-ил)-1 -(фенилсульфонил)-1 Н-индазол.

4-[5-(Бромметил)-1,3-оксазол-2-ил]-6-хлор-1-(фенилсульфонил)-1Н-индазол (0,580 г, 1,28 ммоль) растворяли в дихлорметане (5 мл) и добавляли (2К,68)-2,6-диметилморфолин (0,317 мл, 2,56 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при КТ в течение 3 ч, затем растворитель удаляли в потоке азота. Полученное желтое твердое вещество растворяли в дихлорметане (5 мл) и промывали водой (2x2,5 мл). Слои разделяли (гидрофобная фритта), и органический слой упаривали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого твердого вещества (0,60 г).

ЖХ/МС (Метод А): Κί 0,86 мин, МН+ 487.

¹Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-ά) δ (м.д. (миллионные доли)) 8.93 (ά, 1=1.0 Гц, 1Н), 8.33 (άά, 1=1.0, 1.5 Гц, 1Н), 8.04-8.00 (т, 2Н), 7.98 (ά, 1=1.5 Гц, 1Н), 7.62 (ίί, 1=1.5, 7.5 Гц, 1Н), 7.51 (ί, 1=7.5 Гц, 2Н), 7.15 (з, 1Н), 3.67 (з, 2Н), 3.75-3.66 (т, 2н), 2.79-2.72 (т, 2Н), 1.86 (άά, 1=10.5, 11.0 Гц, 2Н), 1.16 (ά, 1=6.5 Гц, 6Н).

Аналогично с использованием соответствующего амина было получено следующее соединение:

- 26 022872

Проме- жуточное соединение №	Название	Структура	Амин	ЖХ/МС Р( мин	ЖХ/МС мн+
66	6-хлор-4-(5-{[4-(1- метилэтил)-1- перазинил]метил}- 1,3-оксазол-2-ил)- 1- (фенилсульфонил)- 1 Н-индазол	Νν° α δ	1-(1- метилэтил)- пиперазин	0,77	500

Промежуточное соединение 6б.

Способ Б.

Изопропилпиперазин (165 мл) добавляли к суспензии 4-[5-(бромметил)-1,3-оксазол-2-ил]-6-хлор-1(фенилсульфонил)-1Н-индазола (250,1 г) в дихлорметане (2,5 л), перемешиваемой в атмосфере азота при 22±3°С. Реакционную смесь перемешивали при 22±3°С в течение 1,25 ч и затем добавляли воду (2,5 л), и смесь перемешивали, затем разделяли. Водный слой экстрагировали дополнительным количеством дихлорметана (0,5 л), и органические слои объединяли и промывали водой (2,5 л). Слои разделяли, и органический слой концентрировали досуха в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества (274,6 г).

ЖХ/МС (Метод Б): К! 3,33 мин, МН+ 500.

Способ В.

Все массы, объемы и эквиваленты отнесены к 5-(бромметил)-2-(6-хлор-1-(фенилсульфонил)-1Ниндазол-4-ил)оксазолу (скорректировано для анализа).

ΌΜδΟ (7 об., 70 мл) и изопропилпиперазин (1,5 экв., 0,387 мас., 0,431 об., 4,31 мл, 3,87 г) загружают в чистый сосуд. 5-(Бромметил)-2-(6-хлор-1-(фенилсульфонил)-1Н-индазол-4-ил)оксазол (1,0 экв., 10 г (9,13 г скорректировано для анализа), 1 мас.) добавляют 5 порциями при 20°С в течение 1 ч, и смесь перемешивают в течение 1 ч. Смесь нагревают до 50°С и выдерживают в течение 1 ч, затем методом ВЭЖХ проверяют окончание потребления исходного вещества. Добавляют триэтиламин (1,2 экв., 0,244 мас., 0,336 об., 2,44 г, 3,36 мл) в течение 10 мин, и смесь выдерживают в течение 30 мин, затем охлаждают до 20°С в течение 1 ч и дополнительно выдерживают в течение 2 ч. Густую суспензию фильтруют и промывают ΌΜδΟ (2x1,5 об., 2x15 мл), затем смесью ацетон:вода 1:2 (3x2 об., 3х 20 мл). Полученное твердое вещество сушили обдувом на фильтре и сушили при 60°С в вакууме до постоянной массы/температуры с получением 2-(6-хлор-1-(фенилсульфонил)-1Н-индазол-4-ил)-5-((4изопропилпиперазин-1-ил)метил)оксазола в виде не совсем белого твердого вещества.

Перекристаллизация.

Все массы, объемы и эквиваленты отнесены к 2-(6-хлор-1-(фенилсульфонил)-1Н-индазол-4-ил)-5((4-изопропилпиперазин-1-ил)метил)оксазолу. ΌΜδΟ (7,7 мас., 231 г) загружают в чистый сосуд, затем загружают 2-(6-хлор-1-(фенилсульфонил)-1Н-индазол-4-ил)-5-((4-изопропилпиперазин-1ил)метил)оксазол (1 мас., 30 г). Партию нагревают до 75°С до окончания растворения, и смесь фильтруют и промывают ΌΜδΟ (1,1 мас., 33 г, предварительно нагретым до 75°С). Смесь охлаждают до 20°С в течение 2 ч, выдерживают в течение еще 2 ч и фильтруют. Остаток на фильтре промывают ΌΜδΟ (2,2 мас., 66 г), затем смесью 3:1 вода:ацетон (3x2 об., 3x60 мл). Продукт сушат обдувом на фильтре и сушат при 60°С в вакууме до постоянной массы/температуры с получением 2-(6-хлор-1-(фенилсульфонил)-1Ниндазол-4-ил)-5-((4-изопропилпиперазин-1-ил)метил)оксазола в виде не совсем белого твердого вещества.

Промежуточное соединение 7. 6-(1Н-Индол-4-ил)-4-(5-{[4-(1-метилэтил)-1-пиперазинил]метил}1,3 -оксазол-2-ил)-1 -(фенилсульфонил)-1 Н-индазол.

Раствор бикарбоната натрия (228,0 г) в воде (2,7 л) добавляли к суспензии 6-хлор-4-(5-{[4-(1метилэтил)-1-пиперазинил]метил}-1,3-оксазол-2-ил)-1-(фенилсульфонил)-1Н-индазола (271,2 г) и 4(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-индола (263,2 г, доступен от Аро11о δ^πΗί^ Ытйеб) в изопропаноле (2,7 л), перемешиваемой в атмосфере азота при температуре окружающей среды. После дегазирования посредством вакуумирования и продувки азотом добавляли комплекс хлорида 2'(диметиламино)-2-бифенилил-палладия(П) с динорборнилфосфином (29,83 г). Смесь дегазировали снова и затем нагревали до 90±3°С и выдерживали при этой температуре в течение 2 ч. Смесь охлаждали до

- 27 022872

20±5°С в течение 25 мин и выдерживали при этой температуре в течение ночи. Полученную суспензию фильтровали, промывали водой (1,35 л) и затем суспендировали с толуолом (4*1,35 л). Твердое вещество сушили в вакууме при 50°С с получением указанного в заголовке соединения в виде серого твердого вещества (302,7 г).

ЖХ/МС (Метод Б): Κΐ 3,20 мин, МН+ 581.

Способ Б.

Все массы, объемы и эквиваленты отнесены к 2-(6-хлор-1-(фенилсульфонил)-1Н-индазол-4-ил)-5((4-изопропилпиперазин-1-ил)метил)оксазолу.

Смесь 2-(6-хлор-1 -(фенилсульфонил)-1Н-индазол-4-ил)-5 -((4-изопропилпиперазин-1 -ил)метил)оксазол (1,0 экв., 1 мас., 10,0 г), 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-индол(1,1 экв., 0,535 мас., 5,35 г) и К₃РО₄ (1,2 экв., 0,509 мас., 5,09 г) загружают последовательно в сосуд с мешалкой, содержащий 1РА (5 об., 50 мл) и воду (5 об., 50 мл). Затем добавляют КНР₂ (2,2 экв., 0,344 мас., 3,44 г), и смесь нагревают до 75-80°С в потоке Ν₂ в течение по меньшей мере 1 ч для дегазации. Между тем 1РА (5 об., 50 мл) загружают в отдельный сосуд и нагревают до образования флегмы в течение 1 ч в потоке Ν₂ для дегазации. 1РА охлаждают до 20°С и последовательно добавляют Рб(ОАс)₂ (0,02 экв., 0,0090 мас., 90,0 мг) и трициклогексилфосфин (0,04 экв., 0,0224 мас., 224 мг) и выдерживают в течение 1 ч до образования желтого раствора. Этот желтый раствор затем добавляют в течение 10 мин в первый сосуд, поддерживая температуру 75-80°С, и перемешивают в течение по меньшей мере 4 ч. Смесь охлаждают до 20°С и выдерживают в течение по меньшей мере 1 ч. Суспензию затем фильтруют и промывают смесью 1:1 1РА:вода (2 об., 20 мл), затем водой (2*2 об., 2*20 мл) и сушат в вакууме при 60+3°С до постоянной температуры с получением 2-(6-(1Н-индол-4-ил)-1-(фенилсульфонил)-1Н-индазол-4-ил)-5-((4изопропилпиперазин-1-ил)метил)оксазола в виде желтого твердого вещества.

Промежуточное соединение 8. Этил-оксазол-5-карбоксилат.

Все массы, объемы и эквиваленты отнесены к толуолсульфонилметилизоцианиду. Толуолсульфонилметилизоцианид (ТозМ1с) (12,31 г, 1 мас., 1 экв.) растворяют в БСМ (61,6 мл, 5 об.) при 0°С в атмосфере Ν₂. В отдельном сосуде этилглиоксилат (50 мас.% раствор в толуоле, 20,6 г, 20,0 мл, 1,67 мас.) разбавляют БСМ (61,6 мл, 5 об.) в атмосфере Ν₂ и добавляют ΌΒυ (12,48 г, 12,35 мл, 1,3 экв., 1,01 мас.), что приводит к образованию раствора пурпурного цвета. Второй раствор добавляют к раствору ТозМ1с в течение 1 ч, поддерживая температуру 0°С, затем проверяют завершение реакции методом ВЭЖХ еще через 20 мин. Реакцию гасят медленным добавлением 2М НС1 (10 об., 123 мл), и Г)СМслой отделяют. Водный слой реэкстрагируют ОСМ (5 об., 61,6 мл), и объединенные органические слои сушат над Ж₂ЗО₄, затем выпаривают на ВисЫ, 25°С, 100 мбар для удаления ОСМ и толуола. Перегоняют при 12 мбар, температура рубашки 105°С, температура паров 60-80°С, с получением этил-оксазол-5карбоксилата в виде бесцветного масла.

Промежуточное соединение 9. 4-(4,4,5,5-Тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-индол.

Все массы, объемы и эквиваленты отнесены к 4-броминдолу.

Бис(пинаколато)дибор (1,555 мас., 1,20 экв., 31,1 г), ацетат калия (1,00 мас., 2,0 экв., 20,0 г) и 4броминдол (1,00 мас., 0,64 об., 1,00 экв., 20,0 г) загружают последовательно в атмосфере Ν₂ в чистый сухой сосуд, содержащий толуол (5 об., 100 мл), и промывают толуолом (2 об., 40 мл). Смесь дегазируют посредством вакуума/продувки Ν₂ *3 и нагревают до 100°С. В отдельном чистом сухом сосуде трисбензилиденацетондипалладий (0,0234 мас., 0,005 экв., 0,467 г) и трициклогексилфосфин (0,0286 мас., 0,02 экв., 0,572 г) объединяют в атмосфере Ν₂ и добавляют толуол (1 об., 20 мл). Смесь дегазируют посредством вакуума/продувки Ν₂ *3 и перемешивают в течение 30 мин. В реакционный сосуд добавляют раствор катализатора, и смесь нагревают при 95-100°С в течение по меньшей мере 3 ч до тех пор, пока весь 4-броминдол не израсходуется по результатам анализа методом ВЭЖХ. Смесь охлаждают до 60°С и фильтруют для удаления неорганических веществ. Остаток на фильтре промывают толуолом (2*2 об., 2 *40 мл). Темный раствор затем перегоняют, сокращая объем до 4 об. (80 мл) в вакууме (50-60°С, 100 мбар) и выдерживают при 60°С в течение 1 ч. Полученную суспензию охлаждают до 20°С в течение 2 ч и добавляют гептан (12 об., 240 мл) в течение 1 ч. Смесь выдерживают в течение по меньшей мере 1 ч и фильтруют. Остаток на фильтре промывают смесью толуолтептан (1:4, 2 об., 40 мл), затем гептаном (2 об., 40 мл) и сушат в вакууме при 50-60°С до постоянной температуры образца с получением 4-(4,4,5,5- 28 022872 тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-индола в виде бежевого твердого вещества.

Перекристаллизация.

Все массы, объемы и эквиваленты отнесены к 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Ниндолу.

Изопропанол (6 об., 4,72 мас., 54,3 кг) загружают в чистый сосуд, затем загружают 4-(4,4,5,5тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-индол (1 мас., 11,5 кг), и смесь перемешивают и нагревают до образования флегмы (82°С) в течение 40 мин. Партию охлаждают до 70±3°С и добавляют воду (6 об., 6 мас., 69 кг) посредством перистальтического насоса в течение 1 ч, поддерживая температуру 70±3°С. Содержимое выдерживают при 70±3°С в течение 60 мин и охлаждают до 20°С в течение 2 ч. Суспензию выдерживают при 20°С в течение по меньшей мере 6 ч и фильтруют. Остаток на фильтре промывают смесью 1:1 1РА:вода (2 об., 23 л) и смесью 1:3 1РА:вода (2 об., 23 л) и сушат в вакууме при 60°С до постоянной температуры с получением 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-индола в виде белого твердого вещества.

Пример 1. 6-(1 Н-Индол-4-ил)-4-(5-{[4-{1 -метилэтил)-1 -пиперазинил]метил}-1,3-оксазол-2-ил)-1Ниндазол.

6-Хлор-4-(5-[[4-( 1 -метилэтил)-1 -пиперазинил]метил}-1,3-оксазол-2-ил)-1 -(фенилсульфонил)-1Ниндазол (97 мг, 0,194 ммоль), 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-индол (61,3 мг, 0,252 ммоль, доступный от Бгопйег 8с1епййс Еигоре), хлор-[2'-(диметиламино)-2-бифенилил]палладий-(1К,48)бицикло[2.2.1]гепт-2-ил[(18,4К)-бицикло[2.2.1]гепт-2-ил]фосфан (10,87 мг, 0,019 ммоль) и трехосновный фосфат калия (124 мг, 0,582 ммоль) растворяли в 1,4-диоксане (1 мл) и воде (0,1 мл) и нагревали в микроволновом реакторе Вю1;а§е ЫШаЮг при 100°С в течение 30 мин. Добавляли дополнительное количество 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-индола (61,3 мг, 0,252 ммоль) и хлор-[2'(диметиламино)-2-бифенилил]палладий-(1К,48)-бицикло[2.2.1]гепт-2-ил[(18,4К)-бицикло[2.2.1]гепт-2ил]фосфана (5 мг), и реакционную смесь нагревали при 110°С в течение 30 мин, затем при 140°С в течение 30 мин. Растворитель удаляли в вакууме, и остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя смесью 0-25% метанола в дихлорметане. Соответствующие фракции объединяли и концентрировали с получением коричневого твердого вещества, которое растворяли в смеси МеОН:ЭМ8О (1 мл, 1:1, об./об.) и очищали методом МНАП ВЭЖХ (Метод А). Соответствующие фракции концентрировали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (30 мг).

ЖХ/МС (Метод А): К! 0,57 мин, МН+ 441.

Способ Б.

6-Хлор-4-(5-{ [4-( 1 -метилэтил)-1 -пиперазинил]метил}-1,3-оксазол-2-ил)-1 -(фенилсульфонил)-1Ниндазол (75,17 г, 150 ммоль), 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-индол (73,1 г, 301 ммоль), бикарбонат натрия (37,9 г, 451 ммоль) и хлор-[2'-(диметиламино)-2-бифенилил]палладий(1К,48)-бицикло[2.2.1]гепт-2-ил[(18,4К)-бицикло[2.2.1]гепт-2-ил]фосфан (8,43 г, 15,03 ммоль) суспендировали в продуваемом азотом 1,4-диоксане (1200 мл) и воде (300 мл). Реакционный сосуд помещали попеременно в вакуум и в азот пять раз при перемешивании верхнеприводной мешалкой, затем в конце помещали в атмосферу азота и нагревали до 120°С в течение 2,5 ч.

Реакционную смесь охлаждали до 45°С и затем обрабатывали 2М водным раствором гидроксида натрия (376 мл, 752 ммоль). После перемешивания при 45°С в течение ночи (примерно 13 ч) смесь охлаждали до КТ и добавляли ЭСМ (600 мл) и воду (400 мл). Слои разделяли, и водный слой реэкстрагировали смесью ПСМ:1,4-диоксан (1:1). Добавляли рассол, и смесь фильтровали через целит, промывая смесью ПСМ:1,4-диоксан (1:1). Слои разделяли, и к органическому слою добавляли 2М НС1 (1000 мл). Смесь снова фильтровали через целит, промывая 500 мл 2М НС1, и промывочные жидкости держали отдельно. Слои фильтрата затем разделяли, и органический слой промывали кислотными промывочными жидкостями после фильтрования через целит. Слои разделяли, и кислотные водные слои объединяли. Эти объединенные слои промывали ЭСМ противотоком 2x500 мл, и после каждой промывки выполняли фильтрование через целит. Кислотную водную фазу затем подвергали конечному фильтрованию через целит, промывая слой целлита 150 мл 2М НС1.

Кислотную водную фазу переносили в химический стакан (5000 мл) и при интенсивном перемешивании добавляли 2М Να()ΙΙ для подщелачивания смеси до рН 10, 11. Смесь затем экстрагировали с использованием смеси 1,4-диоксан:ПСМ (1:1) (5x500 мл). Объединенные органические фазы промывали рассолом, сушили над сульфатом магния, фильтровали и упаривали с получением коричневой пены, которую сушили в вакууме при 50°С в течение ночи.

- 29 022872

Это вещество разделяли на три партии, и каждую партию очищали обращенно-фазовой колоночной хроматографией (3*, 1,9 кг С18 колонка), нанося в смеси ΌΜΡ/ΤΡΑ (1:1, 30 мл), затем элюируя 3-40% МеСЫ в воде+0,25% ΤΡΑ (примечание: на колонках 2 и 3 использовали разный градиент, начиная с 10% МеСЫ).

Соответствующие фракции объединяли, ацетонитрил удаляли в вакууме, и кислотный водный раствор подщелачивали до рН 10 добавлением к перемешиваемому раствору насыщенного водного раствора карбоната натрия. Полученное твердое вещество собирали фильтрованием, промывали водой, затем сушили в вакууме при 65°С в течение ночи с получением указанного в заголовке соединения (28,82 г) в виде бледно-коричневой пены.

ЖХ/МС (Метод Α): К! 0,68 мин, МН+ 441.

'II ЯМР (400 МГц, ΌΜ8Ο-6₆) δ 13.41 (Ьг. 5., 1Н), 11.35 (Ьг. 5., 1Н), 8.59 (Ьг. 5., 1Н), 8.07 (б, 1=1.5 Гц, 1Н), 7.90 (Ьг. 5., 1Н), 7.51-7.44 (т, 2Н), 7.32 (5, 1Н), 7.27-7.21 (т, 2Н), 6.61-6.58 (т, 1Н), 3.73 (Ьг. 5., 2Н), 2.64-2.36 (т, 9Н), 0.97-0.90 (т, 6Н).

Способ В.

Гидроксид калия (145,6 г) добавляли к суспензии 6-(1Н-индол-4-ил)-4-(5-{[4-(1-метилэтил)-1пиперазинил]метил}-1,3-оксазол-2-ил)-1-(фенилсульфонил)-1Н-индазола (300,7 г) и бромида цетилтриметиламмония (9,3 г) в тетрагидрофуране (6,0 л) и воде (30 мл), перемешивая в атмосфере азота при температуре окружающей среды. Смесь нагревали при температуре дефлегмации в течение 17 ч и затем охлаждали до 20-25°С. Добавляли этилацетат (3,0 л) и воду (3,0 л), перемешивали в течение 10 мин и затем разделяли. Органический слой экстрагировали соляной кислотой (1М, 1*3,0 л, 2*1,5 л), и кислотные экстракты объединяли и подщелачивали до примерно рН 8 добавлением насыщенного раствора карбоната натрия (2,1 л). После выдерживания в течение 30 мин полученную суспензию фильтровали, промывали водой (300 мл), и твердое вещество сушили в вакууме при 65°С с получением указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого твердого вещества (127,9 г).

ЖХ/МС (Метод Б): К! 2,44 мин, МН+ 441.

Способ Г.

Все массы, объемы и эквиваленты отнесены к 2-(6-(1Н-индол-4-ил)-1-(фенилсульфонил)-1Ниндазол-4-ил)-5-((4-изопропилпиперазин-1-ил)метил)оксазолу.

Гидроксид калия (0,483 мас., 5 экв., 242 г) добавляют к суспензии 2-(6-(1Н-индол-4-ил)-1(фенилсульфонил)-1Н-индазол-4-ил)-5-((4-изопропилпиперазин-1-ил)метил)оксазола (1 мас., 1 экв., 501 г) и СТАВ (бромид цетилтриметиламмония) (0,031 мас., 0,05 экв., 15,5 г) в 2-метилтетрагидрофуране (10 об., 5,01 л), затем нагревают при температуре дефлегмации (79°С) в течение по меньшей мере 4 ч до завершения реакции. Смесь охлаждают до 50°С и промывают при 50°С водой (2*10 об., 2*5 л). Раствор разбавляют 2-метилтетрагидрофураном (5 об., 2,5 л) и фильтруют при 50°С для удаления выпавших в осадок остатков палладия. Органический раствор затем перегоняют (100 мбар, 20°С) до 2 об. (1 л), разбавляют 2-метилтетрагидрофураном (1 об., 0,5 л) и 3-пентаноном (3 об., 1,5 л) и перегоняют (100 мбар, 30 °С) до 2 об. (1 л). Раствор снова разбавляют 3-пентаноном (3 об., 1,5 л) и перегоняют (80 мбар, 25°С) до 2 об. (1 л). Раствор снова разбавляют 3-пентаноном (3 об.,1,5 л) и перегоняют (100 мбар, 30°С) до 3 об. (1,5 л). Суспензию охлаждают до 20°С в течение 1 ч и выдерживают при 20°С в течение по меньшей мере 2 ч. Продукт фильтруют в вакууме, промывают 3-пентаноном (1 об., 0,5 л) и сушат в вакууме при 60°С с получением 2-(6-(1Н-индол-4-ил)-1Н-индазол-4-ил)-5-((4-изопропилпиперазин-1-ил)метил)оксазола в виде желто-коричневого твердого вещества.

Получение полиморфа соединения А

6-(1Н-Индол-4-ил)-4-(5-{[4-(1-метилэтил)-1-пиперазинил]метил}-1,3-оксазол-2-ил)-1Н-индазол (25 г) растворяли в диметилформамиде (ΌΜΡ, 240 мл) и фильтровали (фильтр с пористостью 4). ΌΜΡ (10 мл) использовали в качестве первой линии промывки для промывки стеклянной посуды и фильтровали. Вещество подвергали хроматографии, впрыскивая 14*17-18 мл и в конце впрыскивая приблизительно 10 мл. Фракции, содержащие 6-(1Н-индол-4-ил)-4-(5-{[4-(1-метилэтил)-1-пиперазинил]метил}-1,3-оксазол2-ил)-1Н-индазол, упаривали в вакууме при температуре до 40°С. Полученное твердое вещество фильтровали, промывали водой (100 мл) и сушили при 60°С в вакууме в течение ночи.

Условия хроматографии:

ВЭЖХ система Уапап 8Ό-1.

Колонка: РЬепотепех Ьцпа С18(11), 50*243 мм.

Элюент А: 0,1Μ ацетат аммония, доведенный до рН 8,0 аммиаком 0,88.

Элюент В: ацетонитрил.

Детектор: 350 нм диапазон 12.

Впрыскивание: приблизительно 17, 18 мл раствора в ΌΜΡ (1 г на 10 мл ΌΜΡ).

ЯМР, согласующийся с ожидаемым спектром:

ЯМР (400 МГц, ΌΜ8Ο б6): 13.42 (Ьг 5, 1Н), 1 1.35 (Ьг 5, 1Н), 8.60 (5, 1Н), 8.08 (б 1=1.2Гц, 1Н), 7.91 (5, 1Н), 7.48 (т, 2Н), 7.32 (5, 1Н), 7.24 (т, 2Н), 6.61 (5, 1Н), 3.73 (5, 1Н), 2.58 (т, 1Н), 2.45 (Ьг 5, 4Н), 0.94 (б, 1=6.6 Гц, 6Н)

- 30 022872

Уширенный синглет при 2,45 м.д. вероятно содержит некоторые остаточные алифатические протоны; однако маловероятно, что интегрирование является точным из-за перекрывания с пиком ЭМЗО (й5). Остаточные алифатические протоны вероятно находятся под пиком ЭМЗО (й5).

Получение солей соединения А и их полиморфов

Тозилат.

6-(1Н-Индол-4-ил)-4-(5-{[4-(1-метилэтил)-1-пиперазинил]метил}-1,3-оксазол-2-ил)-1Н-индазол (1,5013 г) суспендировали в ацетонитриле (10 мл) и перемешивали. Отдельно, моногидрат паратолуолсульфоновой кислоты (679,5 мг, 1,05 экв.) растворяли в ацетонитриле (5 мл) и добавляли. Сразу образовывался смолистый осадок, который обрабатывали ультразвуком и растирали, чтобы сделать подвижной эту твердую массу. В суспензию вносили затравку кристаллической тозилатной соли и перемешивали ее в течение ночи. Твердое вещество выделяли и сушили в вакууме при 50°С.

ЯМР, согласующийся с ожидаемым спектром:

ЯМР (400 МГц, 1)\1ЗО й6): 13.45 (Ьг к, 1Н), 11,37 (Ьг к, 1Н), 8.92 (Ьг к, 1Н), 8.64 (к, 1Н), 8.1 1 (к, 1Н), 7.94 (к, 1Н), 7.48 (т, 4Н), 7.43 (к, 1Н), 7.24 (т, 2Н), 7.12 (й, 1=8.1 Гц, 2Н), 6.61 (к, 1Н), 3.97 (к, 2Н), 3.42 (т, 3Н), 3.13 (т, 4Н), 2.54 (т, 1Н), 2.28 (к, 3Н), 1.23 (й, 1=6.4 Гц, 6Н)

Алифатические протоны, не наблюдаемые здесь, вероятно находятся под пиком ЭМЗО (й5).

Затравка кристаллической тозилатной соли может быть получена следующим способом:

6-(1Н-Индол-4-ил)-4-(5-{[4-(1-метилэтил)-1-пиперазинил]метил}-1,3-оксазол-2-ил)-1Н-индазол (0,1003 г) суспендировали в ацетонитриле (1,5 мл) и перемешивали. Отдельно, моногидрат толуолсульфоновой кислоты (45,6 мг, 1,05 экв.) растворяли в ацетонитриле (0,5 мл) и добавляли к суспензии 6-(1Ниндол-4-ил)-4-(5-{[4-(1-метилэтил)-1-пиперазинил]метил}-1,3-оксазол-2-ил)-1Н-индазола. Образовывался смолистый осадок, который перемешивали в течение 10 мин. Образец нагревали до приблизительно 50°С и обрабатывали ультразвуком с небольшим визуальным эффектом. Твердое вещество вручную перемешивали шпателем, чтобы сделать его подвижным, и перемешивали в течение 4 суток при комнатной температуре. Твердое вещество отфильтровывали и сушили под разрежением.

Гемифумарат.

6-(1Н-Индол-4-ил)-4-(5-{[4-(1-метилэтил)-1-пиперазинил]метил}-1,3-оксазол-2-ил)-1Н-индазол (1,5014 г) и фумаровую кислоту (217,2 мг, 0,56 экв.) суспендировали в 1М§ (15 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Суспензию фильтровали и сушили под разрежением, затем в вакууме при 50°С в течение ночи.

ЯМР, согласующийся с ожидаемым спектром:

ЯМР (400 МГц, 1)\1ЗО й6): 13.47 (Ьг к, 1Н), 11.37 (Ьг к, 1Н), 8.60 (к, 1Н), 8.08 (к, 1Н), 7.92 (к. 1Н), 7.48 (т, 2Н), 7.34 (к, 1Н), 7.24 (т, 2Н), 6.61 (к, 1Н), 6.56 (к, 1Н), 3.76 (к, 2Н), 2.74 (т, 1Н), 2.58 (Ьг к, 7Н), 1.00 (й, 1=6.6 Гц, 6Н)

Широкий синглет при 2,58 м.д. вероятно содержит остаточные алифатические протоны; однако маловероятно, что интегрирование является точным из-за перекрывания с пиком ЭМЗО (й5).

Гемисукцинат.

Способ А.

Денатурат (1М§, 1 мл) добавляли к 6-(1Н-индол-4-ил)-4-(5-{[4-(1-метилэтил)-1пиперазинил]метил}-1,3-оксазол-2-ил)-1Н-индазолу (0,1006 г) и перемешивали. Отдельно янтарную кислоту (28,3 мг, 1,05 экв.) растворяли в 1М§ (1 мл) и затем добавляли к суспензии 6-(1Н-индол-4-ил)-4-(5{[4-(1-метилэтил )-1-пиперазинил]метил}-1,3-оксазол-2-ил)-1Н-индазола и перемешивали при комнатной температуре в течение выходных дней (приблизительно 72 ч). Твердое вещество выделяли фильтрованием и промывали 1М§ (приблизительно 1 мл), затем сушили в вакууме при 50°С.

ЯМР, согласующийся с ожидаемым спектром:

ЯМР (400 МГц, 1)\1ЗО й6): 13.42 (Ьг к, 1Н), 11.36 (Ьг к, 1Н), 8.61 (к, 1Н), 8.09 (й, 1=1.2 Гц, 1Н), 7.92 (к, 1Н), 7.48 (т, 2Н), 7.34 (к, 1Н), 7.25 (т, 2Н), 6.62 (к, 1Н), 3.76 (к, 2Н), 2.67 (т, 1Н), 2.40 (к, 2Н), 0.98 (й, 1=6.6 Гц, 6Н)

Алифатические протоны, не наблюдаемые здесь, вероятно находятся под пиком ЭМЗО (й5).

Способ Б.

Все массы, объемы и эквивалентны отнесены к 2-(6-(1Н-индол-4-ил)-1Н-индазол-4-ил)-5-((4изопропилпиперазин-1-ил)метил)оксазолу.

Смесь 2-(6-(1Н-индол-4-ил)-1Н-индазол-4-ил)-5 -((4-изопропилпиперазин-1-ил)метил)оксазола (1 мас., 440 г) и янтарной кислоты (0,14 мас., 0,52 экв., 61,6 г) перемешивают в ОМЗО (2,9 об., 1,28 л) при 20-25°С. Полученный прозрачный раствор переносят в сосуд для кристаллизации через фильтр 5 мкм компрессора Эотшск НиШег, затем линию промывают дополнительным количеством ЭМЗО (0,1 об., 44 мл). К раствору добавляют метанол (1 об., 440 мл) в течение 10 мин через предыдущий фильтр, затем добавляют суспензию гемисукцината 2-(6-(1Н-индол-4-ил)-1Н-индазол-4-ил)-5-((4-изопропилпиперазин1-ил)метил)оксазола (0,005 мас., 2,2 г) в метаноле (0,05 об., 22 мл). Суспензию перемешивают при 2025°С в течение 3 ч, затем добавляют метанол (3 об., 1,32 л) через предыдущий фильтр в течение приблизительно 1 ч, и суспензию затем выдерживают при этой температуре в течение по меньшей мере 16 ч. Полученное твердое вещество отфильтровывают, промывают предварительно фильтрованным метано- 31 022872 лом (2x10 об., 2x4,4 л), затем сушат под разрежением в течение 0,5 ч. Партию сушат в вакууме при 5055°С до постоянной температуры образца с получением 2-(6-(1Н-индол-4-ил)-1Н-индазол-4-ил)-5-((4изопропилпиперазин-1-ил)метил)оксазола, соли с гемиянтарной кислотой в виде не совсем белого твердого вещества.

Содержание воды.

Содержание воды в гемисукцинатной соли определяли методом кулонометрического титрования по Карлу Фишеру в соответствии с и8Р <921> \а!ег ^еίе^т^ηаί^оη (МеШоб 1 с), ВР ^еίе^т^паί^оп о£ \а!ег (МеШоб III), РН. Еиг. \аίе^: Мюго ^еίе^т^паί^оп (МеШоб 2.5.32) и ΙΡ \а!ег ^еίе^т^паί^оп (Каг1 РПсНег МеШоб). На основе среднего значения из 2 измерений было определено содержание воды 1,8 мас./мас.% с использованием кулонометрического твердотельного (термостат) метода с реагентом Нубгапа1 Сои1отаί АК и при температуре термостата, установленной на 110°С.

Дифракция рентгеновских лучей на порошке (ДРЛП) для полиморфа соединения А и полиморфов солей соединения А

Данные получали на порошковом дифрактометре РА№1уНеа1 Х'РеЛ Рго, модель Р\3040/60, серийный номер ΌΥ1850, с использованием детектора Х'Се1ега^г. Условия сбора данных: излучение Си Ка, напряжение генератора 40 кВ, ток генератора 45 мА, начальный угол 2,0°2θ, конечный угол 40,0°2θ, шаг 0,0167°2θ, время на шаг 31,75 с. Образец подготавливали укладыванием нескольких миллиграммов образца на 8ΐ пластины (нулевой фон), распределяя порошок тонким слоем.

Полиморф соединения А.

Данные ДРЛП представлены на фиг. 1.

Характеристические ДРЛП углы и ά-межплоскостные расстояния для твердотельной формы суммированы в табл.1. Положения пиков измеряли с использованием компьютерной программы I ПдНвсоге.

Таблица 1

Полиморф тозилатной соли соединения А.

Данные ДРЛП показаны на фиг. 2. Характеристические ДРЛП углы и ά-межплоскостные расстояния для твердотельной формы суммированы в табл. 2. Положения пиков измерены с использованием компьютерной программы I ПдНвсоге.

Таблица 2

Полиморф гемифумаратной соли соединения А.

Данные ДРЛП показаны на фиг. 3. Характеристические ДРЛП углы и ά-межплоскостные расстояния для твердотельной формы суммированы в табл. 3. Положения пиков измерены с использованием компьютерной программы I ПдНвсоге.

- 32 022872

Таблица 3

Полиморф гемисукцинатной соли соединения А.

Данные ДРЛП показаны на фиг. 4.

Характеристические ДРЛП углы и ά-межплоскостные расстояния для твердотельной формы суммированы в табл. 4. Положения пиков измерены с использованием компьютерной программы НщБзсоге.

Таблица 4

Claims (8)

1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

   1. Г емисукцинат 6-(1 Н-индол-4-ил)-4-(5 - {[4-( 1 -метилэтил)-1 -пиперазинил]метил} -1,3-оксазол-2ил)-1 Н-индазола.
2. 2. Полиморф гемисукцинатной соли 6-(1Н-индол-4-ил)-4-(5-{[4-(1-метилэтил)-1-пиперазинил]метил}-1,3-оксазол-2-ил)-1Н-индазола, отличающийся тем, что он дает картину дифракции рентгеновских лучей на порошке (ДРЛП), содержащую пики (°2θ) при примерно 7,2, примерно 13,2 и/или примерно 14,0.
3. 3. Полиморф по п.2, отличающийся тем, что он дает картину ДРЛП, содержащую пики, по существу, такие, как указано в табл. 4.
4. 4. Фармацевтическая композиция, обладающая активностью ингибитора ΡI3-киназы, содержащая соль по п. 1 или полиморф по любому из пп.2 или 3 и один или более фармацевтически приемлемых эксципиентов.
5. 5. Применение соли по п.1 или полиморфа по любому из пп.2 или 3 для ингибирования ΡI3-киназы.
6. 6. Применение соли по п.1 или полиморфа по любому из пп.2 или 3 в лечении расстройства, опосредованного ненадлежащей активностью ΡI3-киназы.
7. 7. Применение соли по п.1 или полиморфа по любому из пп.2 или 3 в изготовлении лекарственного средства для применения в лечении расстройства, опосредованного ненадлежащей активностью ΡΙ3киназы.
8. 8. Способ лечения расстройства, опосредованного ненадлежащей активностью ΡI3-киназы, включающий введение безопасного и эффективного количества соли по п. 1 или полиморфа по любому из пп.2 или 3 пациенту, нуждающемуся в таком лечении.