BR112013010126B1

BR112013010126B1 - polimorfo, composto, composição farmacêutica, e, uso do polimorfo ou sal

Info

Publication number: BR112013010126B1
Application number: BR112013010126-1A
Authority: BR
Inventors: Julie Nicole Hamblin; Paul Spencer Jones; Suzanne Elaine Keeling; Joelle Le; Nigel James Parr; Robert David Willacy
Original assignee: Glaxo Group Limited
Priority date: 2010-10-27
Filing date: 2011-10-25
Publication date: 2021-05-25
Also published as: MX2013004783A; EP3447055A1; JP5894603B2; ZA201302480B; PL2632921T3; EA022872B1; GB201018124D0; HRP20182059T1; AU2011322649A1; CN103270037B; IL225704A0; US20130203772A1; DK2632921T3; CA2814436C; BR112013010126A2; CA2814436A1; JP2013540790A; HUE042754T2; KR101774026B1; AU2011322649B2

Abstract

POLIMORFO, COMPOSTO, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA, USO DO POLIMORFO OU SAL, E, MÉTODO DE TRATAR UM DISTÚRBIO MEDIADO PELA ATIVIDADE INAPROPRIADA DE PI3-CINASE. A presente invenção é direcionada a um polimorfo de um composto de fórmula (II) e aos seus sais e seus polimorfos, que é um inibidor de atividade de PI3-cinase.

Description

CAMPO DA INVENÇÃO

[001] A presente invenção é direcionada a um polimorfo de um composto e aos sais do composto e seus polimorfos, cujo composto é um inibidor de atividade de cinase, mais especificamente a um composto que é um inibidor da atividade ou da função de isoforma delta de fosfoinositídeo-3'- OH-cinase (doravante PI3Kδ), aos processos para a sua preparação, às composições farmacêuticas contendo-os, e ao seu uso no tratamento de vários distúrbios.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

[002] Membranas celulares representam um depósito grande de mensageiros secundários que podem ser alistados em uma variedade de rotas de transdução de sinal. Em relação à função e à regulação de enzimas efetoras em rotas sinalizadoras de fosfolipídeos, as PI3-cinases de Classe I (por ex. PI3Kδ) geram mensageiros secundários a partir das coleções de fosfolipídeos de membrana. PI3Ks de Classe I convertem o fosfolipídeo de membrana PI(4,5)P2 em PI(3,4,5)P3, que funciona como um mensageiro secundário. PI e PI(4)P também são substratos de PI3K e podem ser fosforilados e convertidos em PI3P e PI(3,4)P2, respectivamente. Em adição, estes fosfoinositídeos podem ser convertidos em outros fosfoinositídeos por fosfatases 5'-específicas e 3'-específicas. Assim, a atividade enzimática de PI3K resulta quer direta quer indiretamente na geração de dois subtipos de 3'-fosfoinositídeo que funcionam como mensageiros secundários em rotas de transdução de sinal intracelular (Trends Biochem. Sci. 22(7) p. 267-72 (1997) por Vanhaesebroeck et al.; Chem. Rev. 101(8) p. 2365-80 (2001) por Leslie et al.; Annu. Rev. Cell Dev. Biol. 17 p. 615-75 (2001) por Katso et al.; e Cell. Mol. Life Sci. 59(5) p. 761-79 (2002) por Toker). Até esta data, oito PI3Ks de mamífero têm sido identificadas, divididas em três classes principais (I, II, e III) baseando-se na homologia de sequências, na estrutura, nos parceiros de ligação, no modo de ativação, e na preferência por substrato. In vitro, PI3Ks de Classe I podem fosforilar fosfatidil-inositol (phosphatidylinositol, PI), fosfatidil-inositol-4-fosfato (phosphatidylinositol-4-phosphate, PI4P), e fosfatidil-inositol-4,5-bisfosfato (phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate, PI(4,5)P2) para produzir fosfatidil-inositol-3-fosfato (phosphatidylinositol-3- phosphate, PI3P), fosfatidil-inositol-3,4-bisfosfato (phosphatidylinositol-3,4- bisphosphate, PI(3,4)P2, e fosfatidil-inositol-3,4,5-trisfosfato (phosphatidylinositol-3,4,5-trisphosphate, PI(3,4,5)p3, respectivamente. PI3Ks de Classe II podem fosforilar PI e PI4P. PI3Ks de Classe III podem apenas fosforilar PI (Vanhaesebroeck et al., (1997), acima; Vanhaesebroeck et al., Exp. Cell Res. 253(1) p. 239-54 (1999); e Leslie et al., (2001), acima).

[003] PI3K de Classe I é um heterodímero consistindo de uma subunidade catalítica p110 e uma subunidade regulatória, e a família é adicionalmente dividida em enzimas de Classe Ia e de Classe Ib baseando-se nos parceiros regulatórios e no mecanismo de regulação. Enzimas de Classe Ia consistem de três subunidades catalíticas diferentes (p110α, p110β, e p110δ) que dimerizam com cinco subunidades regulatórias diferentes (p85α, p55α, p50α, p85β, e P55Y), com todas as subunidades catalíticas sendo capazes de interagir com todas as subunidades regulatórias para formar uma variedade de heterodímeros. PI3Ks de Classe Ia são geralmente ativadas em resposta à estimulação de tirosina-cinases receptoras por fator de crescimento, via interação dos domínios SH2 de subunidade regulatória com resíduos de fosfo-tirosina específicos das proteínas adaptadoras ou receptoras ativadas tal como IRS-1. GTPases pequenas (ras como um exemplo) também estão envolvidas na ativação de PI3K conjuntamente com ativação de tirosina- cinase receptora. Ambas p110α e p110β são constutivamente expressadas em todos os tipos de células, enquanto que a expressão de p110δ é mais restrita às populações de leucócitos e a algumas células epiteliais. Ao contrário, a única enzima de Classe Ib consiste de uma subunidade catalítica p110Y que interage com uma subunidade regulatória p101. Ademais, a enzima de Classe Ib é ativada em resposta aos sistemas de receptor acoplado à proteína-G (G- protein coupled receptor, GPCR) e sua expressão parece ser limitada aos leucócitos. Esquema A: Conversão de PI(4,5)P2 em PI(3,4,5)P3

[004] Como ilustrado em Esquema A acima, fosfoinositídeo-3- cinases (PI3Ks) fosforilam a hidroxila do terceiro carbono do anel inositol. A fosforilação de fosfoinositídeos para gerar PtdIns(3,4,5)P3, PtdIns(3,4)P2 e PtdIns(3)P, produz mensageiros secundários para uma variedade de rotas de transdução de sinal, incluindo aqueles essenciais para a proliferação celular, a diferenciação celular, o crescimento celular, o tamanho celular, a sobrevivência celular, a apoptose, a adesão, a motilidade celular, a migração celular, a quimiotaxia, a invasão, o rearranjo citoesquelético, as mudanças em forma celular, o tráfego de vesículas e a rota metabólica (Katso et al., (2001), acima; e Mol. Med. Today 6(9) p. 347-57 (2000) por Stein et al.).

[005] A atividade de PI3-cinases responsáveis pela geração destes produtos de sinalização fosforilados foi originalmente identificada como estando associada com oncoproteínas virais e tirosina-cinases receptoras de fator de crescimento que fosforilam fosfatidil-inositol (PI) e seus derivados fosforilados na hidroxila-3' do anel inositol (Panayotou et at. Trends Cell Biol. 2 p. 358-60 (1992)). Contudo, estudos bioquímicos mais recentes têm revelado que as PI3-cinases de Classe I (por ex. isoforma PI3Kδ de Classe IA) são enzimas cinase dual-específicas, significando que elas exibem atividade tanto de lipídeo-cinase (fosforilação de fosfoinositídeos) quanto de proteína-cinase, que, como tem sido demonstrado, são capazes de fosforilar outras proteínas como substratos, incluindo autofosforilação como um mecanismo regulatório intramolecular (EMBO J. 18(5) p. 1292-302 (1999) por Vanhaesebroeck et al.). Processos celulares nos quais PI3Ks desempenham uma função essencial incluem a supressão de apoptose, a reorganização do esqueleto de actina, o crescimento de miócito cardíaco, a estimulação de glicogênio-sintase por insulina, a geração de superóxido e a pré-estimulação (priming) de neutrófilos, e a migração de leucócitos e a adesão em células endoteliais.

[006] Acredita-se que a ativação de PI3-cinase está envolvida em uma ampla variedade de respostas celulares incluindo o crescimento celular, a diferenciação celular, e a apoptose celular (Parker, Current Biology 5(6) p. 577-79 (1995); e Yao et al., Science 267(5206) p. 2003-06 (1995)). PI3- cinase parece estar envolvida em numerosos aspectos de ativação de leucócito. Tem sido mostrado que uma PI3-cinase associada com p85 associa- se fisicamente com o domínio citoplásmico de CD28, que é uma molécula co- estimulatória importante para a ativação de células-T em resposta a antígeno (Pages et al., Nature 369 p. 327-29 (1994); e Rudd, Immunity 4 p. 527-34 (1996)). Ativação de células-T por meio de CD28 abaixa o limite para ativação por antígeno e aumenta a magnitude e a duração da resposta proliferativa. Estes efeitos estão ligados aos aumentos na transcrição de numerosos genes incluindo interleucina-2 (IL2), um importante fator de crescimento de célula-T (Fraserei et al., Science 251(4991) p. 313-16 (1991)).

[007] PI3KY tem sido identificada como um mediador de regulação dependente de G beta-gama da atividade de JNK, e G beta-gama são subunidades de proteínas-G heterotriméricas (Lopez-llasaca et al., J. Biol. Chem. 273(5) p. 2505-8 (1998)). Recentemente, (Laffargue et al., Immunity 16(3) p. 441-51 (2002)) tem sido descrito que PI3KY retransmite sinais inflamatórios por meio de vários receptores acoplados a G(i) e é fundamental para a função de mastócito, os estímulos no contexto de leucócitos, e a imunologia incluindo citocinas, quimiocinas, adenosinas, anticorpos, integrinas, fatores de agregação, fatores de crescimento, vírus ou hormônios por exemplo (J. Cell Sci. 114 (Pt 16) p. 2903-10 (2001) por Lawlor et al.; Laffargue et al., (2002), acima; e Curr. Opinion Cell Biol. 14(2) p. 203-13 (2002) por Stephens et al.).

[008] Inibidores específicos contra membros individuais de uma família de enzimas proporcionam ferramentas inestimáveis para decifrar as funções de cada enzima. Dois compostos, LY294002 e wortmannin (doravante), têm sido amplamente usados como inibidores de PI3-cinase. Estes compostos são inibidores de PI3K não-específicos, porque não distinguem entre os quatro membros das PI3-cinases de Classe I. Por exemplo, os valores de IC50 de wortmannin contra cada uma das vária PI3- cinases de Classe I estão dentro da faixa de 1-10 nM. Similarmente, os valores de IC50 para LY294002 contra cada uma destas PI3-cinases são cerca de 15-20 μM (Fruman et al., Ann. Rev. Biochem. 67 p. 481-507 (1998)), também 5-10 microM sobre proteína cinase CK2 e alguma atividade inibitória sobre fosfolipases. Wortmannin é um metabólito fúngico que irreversivelmente inibe a atividade de PI3K pela ligação covalente no domínio catalítico desta enzima. Inibição de atividade de PI3K por wortmannin elimina a resposta celular subsequente ao fator extracelular. Por exemplo, neutrófilos respondem à quimiocina fMet-Leu-Phe (fMLP) por estimulação de PI3K e síntese de Ptdins(3,4,5)P3. Esta síntese correlaciona-se com a ativação da explosão respiratória envolvida em destruição por neutrófilos dos microorganismos invasores. Tratamento de neutrófilos com wortmannin previne a reposta de explosão respiratória induzida por fMLP (Thelen et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 91 p. 4960-64 (1994)). De fato, estes experimentos com wortmannin, e também outra evidência experimental, mostram que a atividade de PI3K em células da linhagem hematopoiética, especialmente neutrófilos, monócitos, e outros tipos de leucócitos, está envolvida em muitas das respostas imunes de não-memória associadas com as inflamações aguda e crônica.

[009] Com base nos estudos usando wortmannin, há evidência de que a função de PI3-cinase também é exigida para alguns aspectos da sinalização de leucócito por meio de receptores acoplados à proteína-G (Thelen et al., (1994), acima). Além disso, tem sido mostrado que wortmannin e LY294002 bloqueiam a migração de neutrófilos e a liberação de superóxido.

[0010] Agora está bem entendido que a desregulação de oncogenes e de genes supressores de tumor contribui para a formação de tumores malignos, por exemplo por intermédio de proliferação e de crescimento celular aumentados ou sobrevivência celular aumentada. Agora também é sabido que as rotas de sinalização mediada pela família de PI3K têm uma função fundamental em numerosos processos celulares incluindo a proliferação, a sobrevivência, e a desregulação destas rotas é um fator causador de um amplo espectro de cânceres e outras doenças em humanos (Katso et al., Annual Rev. Cell Dev. Biol. (2001) 17 p. 615-675 e Foster et al., J. Cell Science (2003) 116(15) p. 3037-3040). Proteínas efetoras de PI3K iniciam as redes e rotas de sinalização por translocação para a membrana plasmática por meio de um domínio de Homologia de Pleckstrin (Pleckstrin Homology, PH) conservado, que interage especificamente com PtdIns(3,4,5)P3 (Vanhaesebroeck et al., Annu. Rev. Biochem. (2001) 70 p. 535-602). As proteínas efetoras sinalizando por meio de PtdIns(3,4,5)P3 e domínios PH incluem Serina/Treonina (Ser/Thr) cinases, Tirosina cinases, Rac ou Arf GEFs (Guanine nucleotide exchange factors, fatores de troca de nucleotídeo de guanina) e Arf GAPs (proteínas ativadoras de GTPase).

[0011] Em células-B e células-T as PI3Ks têm uma função importante por meio da ativação da família Tec de proteína tirosina cinases que incluem tirosina cinase de Bruton (Bruton's tyrosine kinase, BTK) em células-B e cinase de célula-T induzível por interleucina-2 (Interleukin-2-inducible T-cell cinase, ITK) em células-T. Sob ativação por PI3K, BTK ou ITK translocam- se para a membrana plasmática onde são subsequentemente fosforiladas por Src cinases. Um dos alvos principais de ITK ativada é a fosfolipase C-gama (PLCy1), que hidrolisa PtdIns(4,5)P2 em Ins(3,4,5)P3 e inicia um aumento intracelular em níveis de cálcio e diacil-glicerol (DAG) que pode ativar Proteína Cinases C em células-T ativadas.

[0012] Diferentemente de p110α e p110β de Classe IA, p110δ é expressada em uma maneira restrita a tecido. Seu alto nível de expressão em linfócitos e tecidos linfoides sugere uma função em sinalização mediada por PI3K no sistema imune. Camundongos p110δ-cinase-dead-knock-in também são viáveis e seu fenótipo é restrito aos defeitos em sinalização imune (Okkenhaug et al., Science (2002) 297 p. 1031-4). Estes camundongos transgênicos têm ajudado a compreender melhor a função de PI3Kδ em sinalização de célula-B e célula-T. Em especial, p110δ é exigida para formação de PtdIns(3,4,5)P3 após a sinalização de CD28 e/ou Receptor de Célula-T (T cell Receptor, TCR). Um efeito essencial na sinalização de PI3K após TCR é a ativação de Akt, que fosforila fatores anti-apoptóticos e também vários fatores de transcrição para a produção de citocina. Como uma consequência, células-T que inativam p110δ têm defeitos em proliferação e em secreção de citocinas Th1 e Th2. Ativação de células-T por meio de CD28 abaixa o limite para a ativação de TCR por antígeno e aumenta a magnitude e a duração da resposta proliferativa. Estes efeitos são mediados pelo aumento dependente de PI3Kδ na transcrição de numerosos genes incluindo IL2, um importante fator de crescimento de célula-T.

[0013] Portanto, é antevisto que os inibidores de PI3K proporcionam benefício terapêutico via sua função em modulação de respostas inflamatórias mediadas por célula-T associadas com doenças respiratórias tais como asma, COPD e fibrose cística. Em adição, há uma indicação de que as terapias direcionadas para célula-T podem proporcionar propriedades de economia de corticosteroide (Alexander et al., Lancet (1992) 339 p. 324-8) sugerindo que pode proporcionar uma terapia útil quer como uma terapia individual quer como uma terapia de combinação com glicocorticoides orais ou inalados em doenças respiratórias. Um inibidor de PI3K também pode ser usado juntamente com outras terapias convencionais tais como beta-agonistas de longa duração (long acting beta-agonists, LABA) em asma.

[0014] Na vasculatura, PI3Kδ é expressada por células epiteliais e participa em tráfego de neutrófilos por modulação do estado pró-adesivo destas células em resposta ao TNF-alfa (Puri et al., Blood (2004) 103(9) p. 3448-56.). Uma função para PI3Kδ em sinalização induzida por TNF-alfa de células endoteliais é demonstrada pela inibição farmacológica de fosforilação de Akt e atividade de PDK1. Em adição, PI3Kδ está envolvida em permeabilidade vascular e em edema de tecido das vias aéreas por meio da rota de VEGF (Lee et al., J. Allergy Clin. Immunol. (2006) 118(2) p. 403-9). Estas observações sugerem benefícios adicionais de inibição de PI3Kδ em asma pela redução combinada de extravasão de leucócitos e permeabilidade vascular associadas com asma. Em adição, atividade de PI3Kδ é exigida para a função de mastócito tanto in vitro quanto in vivo (Ali et al., Nature (2004) 431 p. 1007-11; e Ali et al., J. Immunol. (2008) 180(4) p. 2538-44) adicionalmente sugerindo que a inibição de PI3K deve ser terapeuticamente benéfica para indicações alergênicas tais com asma, rinite alérgica e dermatite atópica.

[0015] A função de PI3Kδ em proliferação de célula-B, secreção de anticorpo, sinalização de receptor de IL-4 e antígeno de célula-B, função de apresentação de antígeno de célula-B também está bem comprovada (Okkenhaug et al., (2002), acima; Al-Alwan et al., J. Immunol. (2007) 178(4) p. 2328-35; e Bilancio et al., Blood (2006) 107(2) p. 642-50) e indica uma função em doenças autoimunes tais como artrite reumatoide ou lúpus eritematoso sistêmico. Portanto os inibidores de PI3K também podem ser benéficos para estas indicações.

[0016] A inibição farmacológica de PI3Kδ inibe a quimiotaxia de neutrófilo dependente de fMLP em um sistema tendencioso dependente de integrina em matriz de agarose revestida com ICAM (Sadhu et al., J. Immunol. (2003) 170(5) p. 2647-54.). Inibição de PI3Kδ regula a ativação, a adesão e a migração de neutrófilo sem afetar a fagocitose mediada por neutrófilo e a atividade bactericida sobre Staphilococcus aureus (Sadhu et al., Biochem. Biophys. Res. Commun. (2003) 308(4) p. 764-9). No todo, os dados sugerem que inibição de PI3Kδ não deve inibir globalmente as funções de neutrófilo para inativar a defesa imune. A função de PI3Kδ em neutrófilos oferece escopo adicional para tratar doenças inflamatórias envolvendo remodelagem de tecido tais como COPD ou artrite reumatoide.

[0017] Em adição, também tem havido boa evidência de que as enzimas PI3K de Classe Ia outrossim contribuem para a tumorigênese em uma ampla variedade de cânceres de humano, quer direta quer indiretamente (Vivanco e Sawyers, Nature Reviews Cancer (2002) 2(7) p. 489-501). Por exemplo, inibição de PI3Kδ pode ter uma função terapêutica para o tratamento de distúrbios hematológicos malignos tal como leucemia mieloide aguda (Billottet et al., Oncogene (2006) 25(50) p. 6648-59). Além disso, ativação de mutações dentro de p110α (gene PIK3CA) tem estado associada com vários outros tumores tais como aqueles do cólon e da mama e dos pulmões (Samuels et al., Science (2004) 304(5670) p. 554).

[0018] Também tem sido mostrado que PI3K está envolvida no estabelecimento de sensibilização principal em condições inflamatórias dolorosas (Pezet et al., The J. of Neuroscience (2008) 28 (16) p. 4261-4270).

[0019] Uma ampla variedade de retrovírus e de vírus com base em DNA ativa a rota de PI3K como uma maneira de prevenir a morte da célula hospedeira durante a infecção viral e finalmente aproveita-se do maquinário de síntese da célula hospedeira para sua replicação (Virology 344(1) p. 131-8 (2006) por Vogt et al., Nat. Rev. Microbiol. 6(4) p. 265-75 (2008) por Buchkovich et al.). Portanto inibições de PI3K podem ter propriedades antivirais em adição às indicações antiinflamatórias e oncolíticas mais estabelecidas. Estes efeitos antivirais despertam perspectivas interessantes em exacerbações inflamatórias viralmente induzidas. Por exemplo, o rinovírus de humano (human rhinovirus, HRV) de resfriado comum é responsável por mais do que 50% das infecções do trato respiratório mas complicações destas infecções podem ser significativas em certas populações. Este é especialmente o caso em doenças respiratórias tais como asma ou doença pulmonar obstrutiva crônica (chronic obstruction pulmonary disease, COPD). Infecção rinoviral de células epiteliais ocasiona uma secreção de quimiocina e de citocina dependente de PI3K (J. Biol. Chem. (2005) 280(44) p. 36952 por Newcomb et al.). Esta resposta inflamatória correlaciona-se com piora dos sintomas respiratórios durante a infecção. Portanto inibidores de PI3K podem amortecer uma resposta imune exagerada a um vírus sob outros aspectos benigno. A maioria das cepas de HRV infecta células epiteliais bronquiais inicialmente por ligação no receptor de ICAM-1. O complexo de HRV- lCAM-1 é então depois incorporado por endocitose e tem sido mostrado que este evento exige a atividade de PI3K (J. Immunol. (2008) 180(2) p. 870-880 por Lau et al.). Portanto, inibidores de PI3K também podem bloquear as infecções virais pela inibição da entrada viral nas células hospedeiras.

[0020] Inibidores de PI3K podem ser úteis em redução de outros tipos de infecções respiratórias incluindo infecção fúngica aspergilose (Mucosal Immunol. (2010) 3(2) p. 193-205 por Bonifazi et al.). Em adição, camundongos deficientes em PI3Kδ são mais resistentes às infecções pelo parasita protozoário Leishmania major (J. Immunol. (2009) 183(3) p. 19211933 por Liu et al.). Considerados com os efeitos sobre as infecções virais, estes relatórios sugerem que os inibidores de PI3K podem ser úteis para o tratamento de uma ampla variedade de infecções.

[0021] Também tem sido mostrado que inibição de PI3K promove a diferenciação de célula-T regulatória (Proc. Natl. Acad. Sci. USA (2008) 105(22) p. 7797-7802 por Sauer et al.) sugerindo que os inibidores de PI3K podem servir para propósitos terapêuticos em indicações auto-imunes e alérgicas pela indução de imuno-tolerância para auto-antígeno ou alérgeno. Recentemente a isoforma PI3Kδ também tem estado ligada à insensibilidade a glicocorticoide induzida por fumaça (Am. J. Respir. Crit. Care Med. (2009) 179(7) p. 542-548 por Marwick et al.). Esta observação sugere que pacientes com COPD, que sob outros aspectos respondem insatisfatoriamente aos corticosteroides, podem se beneficiar da combinação de um inibidor de PI3K com um corticosteroide.

[0022] PI3K também tem estado envolvida em outras condições respiratórias tal como fibrose pulmonar idiopática (idiopathic pulmonary fibrosis, IPF). IPF é uma doença fibrótica com declínio progressivo da função pulmonar e mortalidade aumentada devido à insuficiência respiratória. Em IPF, fibrócitos circulantes são direcionados para o pulmão via o receptor de quimiocina CXCR4. PI3K é exigida para ambas sinalização e expressão de CXCR4 (Int. J. Biochem. and Cell Biol. (2009) 41 p.1708-1718 por Mehrad et al.). Portanto, pela redução da expressão de CXCR4 e pelo bloqueio de sua função efetora, um inibidor de PI3K inibiria o recrutamento de fibrócitos para o pulmão e consequentemente tornaria mais lento o processo subjacente à IPF, uma doença com alta necessidade não atendida.

[0023] Compostos que são inibidores de PI3-cinase podem portanto ser úteis no tratamento de distúrbios associados com atividade de cinase inapropriada, em especial atividade inapropriada de PI3-cinase, por exemplo no tratamento e na prevenção de distúrbios mediados por mecanismos de PI3- cinase. Tais distúrbios incluem doenças respiratórias incluindo asma, doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD) e fibrose pulmonar idiopática (IPF); infecções virais incluindo infecções virais do trato respiratório e exacerbação viral de doenças respiratórias tais como asma e COPD; infecções respiratórias não-virais incluindo aspergilose e leishmaniose; doenças alérgicas incluindo rinite alérgica e dermatite atópica; doenças autoimunes incluindo artrite reumatoide e esclerose múltipla; doenças inflamatórias incluindo doença intestinal inflamatória; doenças cardiovasculares incluindo trombose e aterosclerose; malignidades hematológicas; doenças neurodegenerativas; pancreatite; falência múltipla de órgãos; doenças renais; agregação de plaquetas; câncer; motilidade de esperma; rejeição de transplante; rejeição de enxerto; lesões pulmonares; e dor incluindo dor associada com artrite reumatoide ou osteoartrite, dor dorsal, dor inflamatória geral, neuralgia pós- herpética, neuropatia diabética, dor neuropática inflamatória (trauma), neuralgia trigeminal e dor Central.

[0024] Têm sido feitas tentativas para preparar compostos que inibem a atividade de PI3-cinase e numerosos tais compostos têm sido divulgados na técnica.

[0025] Pedido de Patente Internacional PCT/EP2010/055666 (número da publicação WO2010/125082) descreve compostos tendo a fórmula geral (I):

[0026] Os exemplos de Pedido de Patente Internacional PCT/EP2010/055666 (número da publicação WO2010/125082) descrevem a preparação de 6-(1H-indol-4-il)-4-(5-{[4-(1-metil-etil)-1-piperazinil]-metil}-

doravante chamado de "Composto A" e os seus sais de cloridrato.

[0027] Os presentes inventores agora têm encontrado um polimorfo de Composto A e sais de Composto A e seus polimorfos.

[0028] Em uma modalidade, os sais de Composto A podem ter propriedades que os torna especialmente adequados para administração como um medicamento, por exemplo por inalação. Em uma outra modalidade, o sal de hemi-succinato de Composto A pode ter estabilidade, por exemplo em formulações contendo excipientes tal como lactose, e propriedades de solubilidade que o torna especialmente adequado para administração por administração.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

[0029] A invenção é direcionada a um polimorfo de Composto A e sais de Composto A e seus polimorfos (doravante "polimorfos e sais da invenção").

DESCRIÇÃO BREVE DAS FIGURAS

[0030] Figura 1 mostra um padrão de difração de raios-X em pó (X- ray powder diffraction, XRPD) para um polimorfo de Composto A.

[0031] Figura 2 mostra um padrão de XRPD para um polimorfo do sal de tosilato de Composto A.

[0032] Figura 3 mostra um padrão de XRPD para um polimorfo do sal de hemi-fumarato de Composto A.

[0033] Figura 4 mostra um padrão de XRPD para um polimorfo do sal de hemi-succinato de Composto A.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

[0034] Em um aspecto, a invenção é direcionada a um polimorfo de Composto A.

[0035] Em uma modalidade, a invenção fornece um polimorfo de Composto A caracterizado pelo fato de que ele fornece um padrão de XRPD compreendendo picos (°2θ) a cerca de 9,0, cerca de 9,6, cerca de 10,4 e/ou cerca de 12,5.

[0036] Em outra modalidade, a invenção fornece um polimorfo de Composto A caracterizado pelo fato de que ele fornece um padrão de XRPD compreendendo picos substancialmente como apresentados em Tabela 1.

[0037] Em uma outra modalidade, a invenção fornece um polimorfo de Composto A caracterizado pelo fato de que ele fornece um padrão de XRPD substancialmente de acordo com a Figura 1.

[0038] Em um outro aspecto, a invenção é direcionada a sais de Composto A e seus polimorfos.

[0039] Em uma modalidade, a invenção fornece um sal de Composto A selecionado de tosilato, hemi-fumarato e hemi-succinato.

[0040] Em outra modalidade, a invenção fornece um sal de Composto A selecionado de hemi-fumarato e hemi-succinato.

[0041] Em outra modalidade, a invenção fornece o sal de hemi- fumarato de Composto A.

[0042] Em uma outra modalidade, a invenção fornece o sal de hemi- succinato de Composto A.

[0043] O sal de tosilato de Composto A é o sal de mono-tosilato formado entre 6-(1H-indol-4-il)-4-(5-{[4-(1-metil-etil)-1-piperazinil]-metil}- 1,3-oxazol-2-il)-1H-indazol e ácido p-tolueno-sulfônico em uma proporção estequiométrica de cerca de 1:1. O sal de hemi-fumarato de Composto A é o sal formado entre 6-(1H-indol-4-il)-4-(5-{[4-(1-metil-etil}-1-piperazinil]- metil}-1,3-oxazol-2-il)-1H-indazol e ácido fumárico em uma proporção estequiométrica de cerca de 2:1. O sal de hemi-succinato de Composto A é o sal formado entre 6-(1H-indol-4-il)-4-(5-{[4-(1-metil-etil)-1-piperazinil]- metil}-1,3-oxazol-2-il)-1H-indazol e ácido succínico em uma proporção estequiométrica de cerca de 2:1.

[0044] Também estão incluídos dentro do escopo da invenção quaisquer solvatos, por exemplo hidratos, complexos e formas polimórficas dos sais da invenção.

[0045] Os sais da invenção podem existir em forma cristalina ou não- cristalina, ou como uma sua mistura. Para sais da invenção que estão na forma cristalina, o técnico experiente reconhecerá que solvatos farmaceuticamente aceitáveis podem ser formados nos quais as moléculas de solvente são incorporadas no retículo cristalino durante a cristalização. Solvatos podem envolver solventes não-aquosos tais como etanol, isopropanol, DMSO, ácido acético, etanol-amina, e EtOAc, ou podem envolver água como o solvente que é incorporado dentro do retículo cristalino. Solvatos nos quais a água é o solvente que é incorporado dentro do retículo cristalino são tipicamente chamados de "hidratos". Os hidratos incluem hidratos estequiométricos e também composições contendo quantidades variáveis de água. Como a pessoa experiente reconhecerá, a quantidade de água pode depender das condições, por exemplo da umidade. Por exemplo, à medida que a umidade decresce a quantidade de água pode decrescer e à medida que a umidade aumenta a quantidade de água pode aumentar. Tais variações na quantidade de água estão incluídas dentro do escopo da invenção. Em uma modalidade, a invenção fornece um hidrato do sal de hemi-succinato de Composto A. Em outra modalidade, o hidrato do sal de hemi-succinato de Composto A pode ser o mono-hidrato no qual a proporção estequiométrica de Composto A: ácido succínico: água é cerca de 2:1:1. Em outra modalidade, a invenção fornece um hidrato do sal de hemi-fumarato de Composto A. Em uma outra modalidade, o hidrato do sal de hemi-fumarato de Composto A pode ser o di- hidrato no qual a proporção estequiométrica de Composto A: ácido fumárico: água é cerca de 2:1:2.

[0046] Em uma modalidade, a invenção fornece um polimorfo do sal de tosilato de Composto A caracterizado pelo fato de que ele fornece um padrão de XRPD compreendendo picos (°2θ) a cerca de 6,3, cerca de 9,3, cerca de 11.3 e/ou cerca de 12,7.

[0047] Em outra modalidade, a invenção fornece um polimorfo do sal de tosilato de Composto A caracterizado pelo fato de que ele fornece um padrão de XRPD compreendendo picos substancialmente como apresentados em Tabela 2.

[0048] Em uma outra modalidade, a invenção fornece um polimorfo do sal de tosilato de Composto A caracterizado pelo fato de que ele fornece um padrão de XRPD substancialmente de acordo com a Figura 2.

[0049] Em uma modalidade, a invenção fornece um polimorfo do sal de hemi-fumarato de Composto A caracterizado pelo fato de que ele fornece um padrão de XRPD compreendendo picos (°2θ) a cerca de 6,9, cerca de 13,8 e/ou cerca de 14,4.

[0050] Em outra modalidade, a invenção fornece um polimorfo do sal de hemi-fumarato de Composto A caracterizado pelo fato de que ele fornece um padrão de XRPD compreendendo picos substancialmente como apresentados em Tabela 3.

[0051] Em uma outra modalidade, a invenção fornece um polimorfo do sal de hemi-fumarato de Composto A caracterizado pelo fato de que ele fornece um padrão de XRPD substancialmente de acordo com a Figura 3.

[0052] Em uma modalidade, a invenção fornece um polimorfo de o sal de hemi-succinato de Composto A caracterizado pelo fato de que ele fornece um padrão de XRPD compreendendo picos (°2θ) a cerca de 7,2, cerca de 13,2 e/ou cerca de 14,0.

[0053] Em outra modalidade, a invenção fornece um polimorfo de o sal de hemi-succinato de Composto A caracterizado pelo fato de que ele fornece um padrão de XRPD compreendendo picos substancialmente como apresentados em Tabela 4.

[0054] Em uma outra modalidade, a invenção fornece um polimorfo de o sal de hemi-succinato de Composto A caracterizado pelo fato de que ele fornece um padrão de XRPD substancialmente de acordo com a Figura 4.

[0055] Quando é aqui indicado que há um pico em um padrão de XRPD em um dado valor, tipicamente significa que o pico está dentro de ± 0,2 do valor citado, por exemplo dentro de ± 0,1 do valor citado.

[0056] A invenção inclui o polimorfo de Composto A e os sais de Composto A e seus polimorfos isolados em forma pura ou quando misturados com outros materiais, por exemplo outros polimorfos, ou sais ou solvatos (inclusive de seus polimorfos) de Composto A, ou qualquer outro material.

[0057] Assim, em um aspecto é fornecido um polimorfo de Composto A ou sal de Composto A ou seu polimorfo em forma isolada ou pura. Forma "isolada" ou "pura" refere-se a uma amostra na qual o polimorfo de Composto A ou sal de Composto A ou seu polimorfo está presente em uma quantidade de >75%, especialmente >90%, mais especialmente >95% e ainda mais especialmente >99% em relação a outros materiais que podem estar presentes na amostra. Termos e definições

[0058] Como aqui usados os símbolos e convenções utilizados nestes processos, esquemas e exemplos são consistentes com aqueles usados na literatura científica contemporânea, por exemplo, o Journal of the American Chemical Society ou o Journal of Biological Chemistry. Abreviações padrão de letra única ou de três letras são geralmente usadas para designarem os resíduos de aminoácido, que são assumidos como estando na configuração-L salvo indicação em contrário. Salvo indicação em contrário, todos os materiais iniciais foram obtidos de fornecedores comerciais e usados sem purificação adicional. Especificamente, as seguintes abreviações podem ser utilizadas nos exemplos e em todo o relatório descritivo: DCM Dicloro-metano DMPU 1,3-Dimetil-3,4,5,6-tetra-hidro-2-(1H)-pirimidinona DMSO Dimetil-sulfóxido EtOAc Acetato de etila g Gramas h Hora(s) HPLC High performance liquid chromatography, cromatografia líquida de desempenho alto IMS Industrial metilated spirits, álcool industrial metilado IPA Isopropil-álcool LCMS Liquid chromatography - mass spectroscopy, cromatografia líquida - espectrometria de massas L Litro M Molar MDAP Mass directed automated preparative HPLC, HPLC preparativa automatizada direcionada para espectrometria de massas Me Metila MeCN Acetonitrila MeOH Metanol mg Miligramas mins Minutos mL Mililitros mmol Milimols Rt Retention time, tempo de retenção RT Room temperature, temperatura ambiente TFA Trifluoroacetic acid, ácido trifluoro-acético THF Tetra-hidro-furano UPLC Ultra High performance liquid chromatography, cromatografia líquida de desempenho ultra-alto UV Ultravioleta XRPD X-ray powder diffraction, difração de raios-X em pó

[0059] Todas as referências à salmoura são para uma solução aquosa saturada de NaCl. Preparação de polimorfo e de sal

[0060] A invenção também é direcionada aos processos para preparar os polimorfos e sais da invenção.

[0061] Em um aspecto, a invenção fornece um processo para preparar um polimorfo de Composto A que compreende purificar o Composto A por cromatografia e cristalizar o polimorfo das frações purificadas.

[0062] Em um outro aspecto, a invenção fornece um processo para preparar um sal de Composto A ou um seu polimorfo que compreende contatar o Composto A com um ácido adequado tal como ácido p-tolueno- sulfônico, ácido fumárico ou ácido succínico, na presença de um solvente adequado tal como álcool industrial metilado (IMS), acetonitrila ou DMSO.

[0063] O Composto A pode ser preparado de acordo com procedimentos conhecidos, tais como aqueles divulgados em Pedido de Patente Internacional PCT/EP2010/055666 (número da publicação WO2010/125082) e na seção de Exemplos abaixo. A divulgação do Pedido de Patente Internacional PCT/EP2010/055666 (número da publicação WO2010/125082) é aqui incorporada como referência. Métodos de uso

[0064] Os polimorfos e sais da invenção podem ser úteis no tratamento de distúrbios nos quais a patologia subjacente (pelo menos em parte) é atribuível à atividade inapropriada de PI3-cinase, tal como asma e doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD). "Atividade inapropriada de PI3- cinase " refere-se a qualquer atividade de PI3-cinase que se desvia da atividade de PI3-cinase normal esperada em um paciente específico. A PI3- cinase inapropriada pode tomar a forma de, por exemplo, aumento anormal em atividade, ou uma aberração na sincronização e/ou no controle de atividade de PI3-cinase. Tal atividade inapropriada pode resultar então, da sobreexpressão ou mutação da proteína cinase ocasionando ativação inapropriada ou descontrolada. Consequentemente, em outro aspecto a invenção é direcionada aos métodos de tratar tais distúrbios.

[0065] Tais distúrbios incluem doenças respiratórias incluindo asma, doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD) e fibrose pulmonar idiopática (IPF); infecções virais incluindo infecções virais do trato respiratório e exacerbação viral de doenças respiratórias tais como asma e COPD; infecções respiratórias não-virais incluindo aspergilose e leishmaniose; doenças alérgicas incluindo rinite alérgica e dermatite atópica; doenças autoimunes incluindo artrite reumatoide e esclerose múltipla; doenças inflamatórias incluindo doença intestinal inflamatória; doenças cardiovasculares incluindo trombose e aterosclerose; malignidades hematológicas; doenças neurodegenerativas; pancreatite; falência múltipla de órgãos; doenças renais; agregação de plaquetas; câncer; motilidade de esperma; rejeição de transplante; rejeição de enxerto; lesões pulmonares; e dor incluindo dor associada com artrite reumatoide ou osteoartrite, dor dorsal, dor inflamatória geral, neuralgia pós-herpética, neuropatia diabética, dor neuropática inflamatória (trauma), neuralgia trigeminal e dor Central. Em uma modalidade, tais distúrbios incluem doenças respiratórias incluindo asma e doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD); doenças alérgicas incluindo rinite alérgica e dermatite atópica; doenças autoimunes incluindo artrite reumatoide e esclerose múltipla; doenças inflamatórias incluindo doença intestinal inflamatória; doenças cardiovasculares incluindo trombose e aterosclerose; malignidades hematológicas; doenças neurodegenerativas; pancreatite; falência múltipla de órgãos; doenças renais; agregação de plaquetas; câncer; motilidade de esperma; rejeição de transplante; rejeição de enxerto; lesões pulmonares; e dor incluindo dor associada com artrite reumatoide ou osteoartrite, dor dorsal, dor inflamatória geral, neuralgia pós- herpética, neuropatia diabética, dor neuropática inflamatória (trauma), neuralgia trigeminal e dor Central.

[0066] Os métodos de tratamento da invenção compreendem administrar uma quantidade segura e efetiva de um polimorfo ou sal da invenção a um paciente em necessidade do mesmo. As modalidades da invenção incluem métodos de tratar qualquer um dos distúrbios acima mencionados pela administração de uma quantidade segura e efetiva de um polimorfo ou sal da invenção a um paciente em necessidade do mesmo.

[0067] Como aqui usado, "tratar" em referência a um distúrbio significa: (1) atenuar ou prevenir o distúrbio ou uma ou mais das manifestações biológicas do distúrbio, (2) interferir com (a) um ou mais pontos na cascata biológica que ocasiona o ou é responsável pelo distúrbio ou (b) uma ou mais das manifestações biológicas do distúrbio, (3) aliviar um ou mais dos sintomas ou efeitos associados com o distúrbio, ou (4) tornar mais lenta a progressão do distúrbio ou de uma ou mais das manifestações biológicas do distúrbio.

[0068] Como indicado acima, "tratamento" de um distúrbio inclui prevenção do distúrbio. O técnico experiente na técnica reconhecerá que "prevenção" não é um termo absoluto. Em medicina, "prevenção" é entendida para se referir à administração profilática de um medicamento para substancialmente diminuir a possibilidade ou a severidade de um distúrbio ou sua manifestação biológica, ou para retardar o início de tal distúrbio ou sua manifestação biológica.

[0069] Como aqui usado, "quantidade segura e efetiva" em referência a um polimorfo ou sal da invenção ou outro agente farmaceuticamente ativo significa uma quantidade suficiente para tratar a condição do paciente mas suficientemente baixa para evitar efeitos colaterais sérios (em uma taxa de benefício / risco razoável) dentro do escopo do julgamento médico correto. A quantidade segura e efetiva de um composto variará com o composto específico escolhido (por ex. considerar a potência, a eficácia, e a meia-vida do composto); a rota de administração escolhida; o distúrbio sendo tratado, a severidade do distúrbio sendo tratado; a idade; o tamanho; o peso, e a condição física do paciente sendo tratado; a história médica do paciente a ser tratado; a duração do tratamento; a natureza da terapia concorrente; o efeito terapêutico desejado; e fatores similares, mas pode contudo ser rotineiramente determinada pelo técnico experiente.

[0070] Como aqui usado, "paciente" refere-se a um humano (incluindo adultos e crianças) ou outro animal. Em uma modalidade, "paciente" refere-se a um humano.

[0071] Os polimorfos e sais da invenção podem ser administrados por qualquer rota de administração adequada, incluindo tanto administração sistêmica quanto administração tópica. Administração sistêmica inclui administração oral, administração parenteral, administração transdermal e administração retal. Administração parenteral refere-se às rotas de administração diferentes de enteral ou transdermal, e é tipicamente por injeção ou infusão. Administração parenteral inclui injeção intravenosa, intramuscular, e subcutânea ou infusão. Administração tópica inclui aplicação na pele e também como administração intraocular, auricular, intravaginal, inalada e intranasal. Inalação refere-se à administração para dentro dos pulmões do paciente quer inalado através da boca quer inalado através das passagens nasais. Em uma modalidade, os polimorfos e sais da invenção podem ser administrados oralmente. Em outra modalidade, os polimorfos e sais da invenção podem ser administrados por inalação. Em uma outra modalidade, os polimorfos e sais da invenção podem ser administrados intranasalmente.

[0072] Os polimorfos e sais da invenção podem ser administrados uma vez ou de acordo com um regime de dosagem no qual numerosas doses são administradas em intervalos de tempo variados por um determinado período de tempo. Por exemplo, doses podem ser administradas uma, duas, três, ou quatro vezes por dia. Em uma modalidade, a dose é administrada uma vez por dia. Em uma outra modalidade, a dose é administrada duas vezes por dia. Doses podem ser administradas até que o efeito terapêutico desejado seja alcançado ou indefinidamente para manter o efeito terapêutico desejado. Regimes de dosagem adequados para um polimorfo ou sal da invenção dependem das propriedades farmacocinéticas daquele polimorfo ou sal, tais como absorção, distribuição, e meia-vida, que podem ser determinadas pelo técnico experiente. Em adição, regimes de dosagem adequados, incluindo a duração na qual tais regimes são administrados, para um polimorfo ou sal da invenção dependem do distúrbio sendo tratado, da severidade do distúrbio sendo tratado, da idade e da condição física do paciente sendo tratado, da história médica do paciente a ser tratado, da natureza da terapia concorrente, do efeito terapêutico desejado, e fatores semelhantes dentro do conhecimento e da perícia do técnico experiente. Será adicionalmente entendido por tais técnicos experientes que regimes de dosagem adequados podem exigir ajuste determinado por uma resposta de um paciente individual ao regime de dosagem ou no decorrer do tempo porque o paciente individual necessita de mudança.

[0073] As dosagens diárias típicas podem variar dependendo da rota de administração específica escolhida. As dosagens diárias típicas para administração oral variam de 0,001 mg a 50 mg por kg de peso corporal total, por exemplo e 1mg a 10 mg por kg de peso corporal total. Por exemplo, dosagens diárias para administração oral podem ser de 0,5 mg a 2 g por paciente, tal como 10 mg a 1g por paciente.

[0074] Em um aspecto, a invenção portanto fornece um método de tratar um distúrbio mediado pela atividade inapropriada de PI3-cinase compreendendo administrar uma quantidade segura e efetiva de um polimorfo ou sal da invenção a um paciente em necessidade do mesmo.

[0075] Em uma modalidade, o distúrbio mediado pela atividade inapropriada de PI3-cinase é selecionado do grupo consistindo de doenças respiratórias (incluindo asma, doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD) e fibrose pulmonar idiopática (IPF)); infecções virais (incluindo infecções virais do trato respiratório e exacerbação viral de doenças respiratórias tais como asma e COPD); infecções respiratórias não-virais (incluindo aspergilose e leishmaniose); doenças alérgicas (incluindo rinite alérgica e dermatite atópica); doenças autoimunes (incluindo artrite reumatoide e esclerose múltipla); doenças inflamatórias (incluindo doença intestinal inflamatória); doenças cardiovasculares (incluindo trombose e aterosclerose); malignidades hematológicas; doenças neurodegenerativas; pancreatite; falência múltipla de órgãos; doenças renais; agregação de plaquetas; câncer; motilidade de esperma; rejeição de transplante; rejeição de enxerto; lesões pulmonares; e dor (incluindo dor associada com artrite reumatoide ou osteoartrite, dor dorsal, dor inflamatória geral, neuralgia pós-herpética, neuropatia diabética, dor neuropática inflamatória (trauma), neuralgia trigeminal e dor Central).

[0076] Em uma modalidade, o distúrbio mediado pela atividade inapropriada de PI3-cinase é uma doença respiratória. Em outra modalidade, o distúrbio mediado pela atividade de PI-3-cinase inapropriada é asma. Em outra modalidade, o distúrbio mediado pela atividade inapropriada de PI3- cinase é doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD). Em uma outra modalidade, o distúrbio mediado pela atividade inapropriada de PI3-cinase é fibrose pulmonar idiopática (IPF).

[0077] Em uma modalidade, o distúrbio mediado pela atividade inapropriada de PI3-cinase é dor.

[0078] Em uma modalidade, a presente invenção fornece um método de tratar uma doença respiratória compreendendo administrar uma quantidade segura e efetiva de um polimorfo ou sal da invenção a um paciente em necessidade do mesmo.

[0079] Em outra modalidade, a presente invenção fornece um método de tratar asma compreendendo administrar uma quantidade segura e efetiva de um polimorfo ou sal da invenção a um paciente em necessidade do mesmo.

[0080] Em um aspecto, a invenção fornece um polimorfo ou sal da invenção para uso em terapia médica.

[0081] Em outro aspecto, a invenção fornece um polimorfo ou sal da invenção para uso no tratamento de um distúrbio mediado pela atividade inapropriada de PI3-cinase.

[0082] Em um outro aspecto, a invenção fornece o uso de um polimorfo ou sal da invenção na manufatura de um medicamento para utilização no tratamento de um distúrbio mediado pela atividade inapropriada de PI3-cinase. Composições

[0083] Os polimorfos e sais da invenção normalmente, mas não necessariamente, serão formulados em composições farmacêuticas antes da administração a um paciente.

[0084] Consequentemente, em um aspecto a invenção é direcionada às composições farmacêuticas compreendendo um polimorfo ou sal da invenção e um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis.

[0085] Em outro aspecto a invenção é direcionada às composições farmacêuticas compreendendo 0,05 a 1.000 mg de um polimorfo ou sal da invenção e 0,1 a 2 g de um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis.

[0086] Em um outro aspecto a invenção é direcionada a uma composição farmacêutica para o tratamento ou a profilaxia de um distúrbio mediado pela atividade inapropriada de PI3-cinase compreendendo um polimorfo ou sal da invenção.

[0087] As composições farmacêuticas da invenção podem ser preparadas e embaladas em forma a granel na qual uma quantidade segura e efetiva de um polimorfo ou sal da invenção pode ser extraída e então dada ao paciente tal como com pós ou xaropes. Alternativamente, as composições farmacêuticas da invenção podem ser preparadas e embaladas em forma de dosagem unitária na qual cada unidade fisicamente discreta contém um polimorfo ou sal da invenção. Quando preparadas em forma de dosagem unitária, as composições farmacêuticas da invenção tipicamente podem conter, por exemplo, de 0,5 mg a 1 g, ou de 1 mg a 700 mg, ou de 5 mg a 100 mg de um polimorfo ou sal da invenção.

[0088] As composições farmacêuticas da invenção tipicamente contêm um polimorfo ou sal da invenção.

[0089] Como aqui usado, "excipiente farmaceuticamente aceitável" significa um material farmaceuticamente, uma composição farmaceuticamente ou um veículo farmaceuticamente envolvido(a) em dar forma ou consistência à composição farmacêutica. Cada excipiente precisa ser compatível com os outros ingredientes da composição farmacêutica quando misturado com outros ingredientes de tal modo que sejam evitadas interações que substancialmente reduziriam a eficácia do polimorfo ou sal da invenção quando administrado a um paciente e sejam evitadas interações que resultariam em composições farmacêuticas que não são farmaceuticamente aceitáveis. Em adição, cada excipiente obviamente precisa ser farmaceuticamente por ex. de pureza suficientemente alta.

[0090] O polimorfo ou sal da invenção e o excipiente farmaceuticamente aceitável ou os excipientes farmaceuticamente aceitáveis tipicamente serão formulados em uma forma de dosagem adaptada para administração ao paciente pela rota de administração desejada. Por exemplo, formas de dosagem incluem aquelas adaptadas para (1) administração oral tais como tabletes, cápsulas, caplets, pílulas, trociscos, pós, xaropes, elixires, suspensões, soluções, emulsões, sachês, e cachets; (2) administração parenteral tais como soluções, suspensões, e pós estéreis para reconstituição; (3) administração transdermal tais como emplastros transdermais; (4) administração retal tais como supositórios; (5) inalação tais como aerossóis, soluções, e pós secos; e (6) administração tópica tais como cremes, unguentos, loções, pastas, borrifos.

[0091] Excipientes farmaceuticamente aceitáveis adequados variarão dependendo da forma de dosagem específica escolhida. Em adição, excipientes farmaceuticamente aceitáveis adequados podem ser escolhidos para uma função específica na qual podem servir na composição. Por exemplo, certos excipientes farmaceuticamente aceitáveis podem ser escolhidos devido à sua capacidade para facilitar a produção de formas de dosagem uniformes. Certos excipientes farmaceuticamente aceitáveis podem ser escolhidos devido à sua capacidade para facilitar a produção de formas de dosagem estáveis. Certos excipientes farmaceuticamente aceitáveis podem ser escolhidos devido à sua capacidade para facilitar a condução ou o transporte do polimorfo ou sal da invenção logo que administrado ao paciente a partir de um órgão, ou uma porção do corpo, para outro órgão, ou outra porção do corpo. Certos excipientes farmaceuticamente aceitáveis podem ser escolhidos devido à sua capacidade para aumentar a aceitação do paciente.

[0092] Excipientes farmaceuticamente aceitáveis adequados incluem os seguintes tipos de excipientes: diluentes, cargas, aglutinantes, desintegrantes, lubrificantes, agentes de deslizamento, agentes granulantes, agentes de revestimento, agentes umectantes, solventes, co-solventes, agentes de suspensão, emulsificadores, edulcorantes, agentes aromatizantes, agentes mascaradores de sabor, agentes colorantes, agentes antiaglutinantes, hemectantes, agentes quelantes, plastificantes, agentes aumentadores de viscosidade, antioxidantes, conservantes, estabilizadores, e agentes tamponantes. O técnico experiente na técnica reconhecerá que certos excipientes farmaceuticamente aceitáveis podem servir com mais do que uma função e podem servir com funções alternativas dependendo de quanto do excipiente está presente na formulação e quais outros excipientes estão presentes na formulação.

[0093] Técnicos experientes possuem o conhecimento e a capacidade para permitir que eles selecionem excipientes farmaceuticamente aceitáveis adequados em quantidades apropriadas para uso na invenção. Em adição, há numerosas referências literárias que estão disponíveis para o técnico experiente que descrevem os excipientes farmaceuticamente aceitáveis e podem ser úteis para selecionar os excipientes farmaceuticamente aceitáveis adequados. Exemplos incluem Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Company), The Handbook of Pharmaceutical Additives (Gower Publishing Limited), e The Handbook of Pharmaceutical Excipientes (a American Pharmaceutical Association e a Pharmaceutical Press).

[0094] As composições farmacêuticas da invenção são preparadas usando técnicas e métodos conhecidas(os) por aquelas pessoas experientes na técnica. Alguns dos métodos usados na técnica são descritos em Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Company).

[0095] Consequentemente, em outro aspecto a invenção é direcionada a um processo para a preparação de uma composição compreendendo um polimorfo ou sal da invenção e um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis que compreende misturar os ingredientes. Uma composição farmacêutica compreendendo um polimorfo ou sal da invenção pode ser preparada, por exemplo, por mistura na temperatura ou na pressão atmosférica.

[0096] Em uma modalidade, o polimorfo ou sal da invenção será formulado para administração oral. Em outra modalidade, o polimorfo ou sal da invenção será formulado para administração inalada. Em uma outra modalidade, o polimorfo ou sal da invenção será formulado para administração intranasal.

[0097] Em um aspecto, a invenção é direcionada a uma forma de dosagem oral sólida tal como um tablete ou uma cápsula compreendendo uma quantidade segura e efetiva de um polimorfo ou sal da invenção e um diluente ou uma carga. Diluentes e cargas adequados incluem lactose, sacarose, dextrose, manitol, sorbitol, amido (por ex. amido de milho, amido de batata, e amido de pré-gelatinizado), celulose e seus derivados (por ex. celulose microcristalina), sulfato de cálcio, e fosfato de cálcio dibásico. A forma de dosagem oral pode adicionalmente compreender um aglutinante. Aglutinantes adequados incluem amido (por ex. amido de milho, amido de batata, e amido de pré-gelatinizado), gelatina, acácia, alginato de sódio, ácido algínico, tragacanto, goma guar, povidona, e celulose e seus derivados (por ex. celulose microcristalina). A forma de dosagem oral pode adicionalmente compreender um desintegrante. Desintegrantes adequados incluem crospovidona, amido- glicolato de sódio, croscarmelose, ácido algínico, e sódio-carbóxi-metil- celulose. A forma de dosagem oral pode adicionalmente compreender um lubrificante. Lubrificantes adequados incluem ácido esteárico, estearato de magnésio, estearato de cálcio, e talco.

[0098] Onde apropriado, formulações de dosagem unitária para administração oral podem ser microencapsuladas. A composição também pode ser preparada para prolongar ou estender a liberação como por exemplo por revestimento ou imersão de material particulado em polímero, cera ou semelhante.

[0099] Os polimorfos e sais da invenção também podem ser copulados com polímeros solúveis como veículos de medicamento selecionáveis. Tais polímeros podem incluir poli(vinil-pirrolidona), copolímero de pirano, poli(hidróxi-propil-metacrilamida-fenol), poli(hidróxi- etil-aspartamida-fenol), ou poli(óxido de etileno)-polilisina substituída com resíduos de palmitoíla. Ademais, os polimorfos e sais da invenção podem ser copulados em uma classe de polímeros biodegradáveis úteis para alcançar a liberação controlada de um medicamento, por exemplo, poli(ácido lático), poli(épsilon-caprolactona), poli(ácido hidróxi-butírico), poli(orto-ésteres), poliacetais, poli(di-hidro-piranos), poli(ciano-acrilatos) e copolímeros reticulados ou anfipáticos de hidrogeles.

[00100] Em outro aspecto, a invenção é direcionada a uma forma de dosagem oral líquida. Líquidos orais tais como solução, xaropes e elixires podem ser preparados em forma de dosagem unitária de modo que uma dada quantidade contenha uma quantidade predeterminada de um polimorfo ou sal da invenção. Xaropes podem ser preparados por dissolução de um polimorfo ou sal da invenção em uma solução aquosa adequadamente aromatizada, enquanto que elixires são preparados por meio do uso de um veículo alcoólico não tóxico. Suspensões podem ser formuladas por dispersão do polimorfo ou sal da invenção em um veículo não tóxico. Agentes de solubilização e emulsificadores tais como isoestearil-alcoóis etoxilados e poli(óxi-etileno)- sorbitol-éteres, conservantes, aditivo aromatizante tal como óleo de hortelã- pimenta ou edulcorantes naturais ou outros edulcorantes artificiais, et cetera também podem ser adicionados.

[00101] Em outro aspecto, a invenção é direcionada a uma forma de dosagem adaptada para administração a um paciente por inalação, por exemplo como um pó seco, um aerossol, uma suspensão, ou uma composição de solução. Em uma modalidade, a invenção é direcionada a uma forma de dosagem adaptada para administração a um paciente por inalação como um pó seco. Em uma outra modalidade, a invenção é direcionada a uma forma de dosagem adaptada para administração a um paciente por inalação via um nebulizador.

[00102] Composições de pó seco para liberação para o pulmão por inalação tipicamente compreendem um polimorfo ou sal da invenção como um pó finamente dividido junto com um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis como pós finamente divididos. Excipientes farmaceuticamente aceitáveis especialmente adequados para uso em pós secos são conhecidos por aquelas pessoas experientes na técnica e incluem lactose, amido, manitol, e mono-, di-, e polissacarídeos. O pó finamente dividido pode ser preparado, por exemplo, por micronização e moagem. Geralmente, o composto de tamanho reduzido (por ex. micronizado) pode ser definido por um valor de D50 de cerca de 1 micrômetro a cerca de 10 micrômetros (por exemplo conforme medido por difração de laser).

[00103] O pó seco pode ser administrado ao paciente via um inalador de pó seco em reservatório (reservoir dry powder inhaler, RDPI) tendo um reservatório adequado para armazenagem múltiplas doses (doses não- medidas) de medicamento na forma de pó. RDPIs tipicamente incluem um meio para medir cada dose de medicamento a partir do reservatório para uma posição de liberação. Por exemplo, o meio de medir pode compreender um copo medidor, que é móvel a partir de uma primeira posição onde o copo pode ser cheio com o medicamento do reservatório para uma segunda posição onde ao dose de medicamento medida é tornada disponível ao paciente para inalação.

[00104] Alternativamente, o pó seco pode ser apresentado em cápsulas (por ex. gelatina ou plástico), cartuchos, ou cartelas de blister para uso em um inalador de pó seco de múltiplas doses (multi-dose dry powder inhaler, MDPI). MDPIs são inaladores nos quais o medicamento está compreendido dentro de uma embalagem de múltiplas doses contendo (ou diferentemente suportando) múltiplas doses definidas (ou suas partes) de medicamento. Quando o pó seco é apresentado como uma cartela de blister, ele compreende múltiplos blisters para retenção do medicamento na forma de pó seco. Os blisters estão tipicamente posicionados em uma forma regular para facilidade de liberação do medicamento dos mesmos. Por exemplo, os blisters podem estar posicionados em uma maneira geralmente circular sobre uma cartela de blister discoide, ou os blisters podem ser de forma alongada, por exemplo compreendendo uma tira ou uma fita. Cada cápsula, cartucho, ou blister pode, por exemplo, conter entre 20 μg de 10 mg do polimorfo ou sal da invenção.

[00105] Aerossóis podem ser formados por suspensão ou dissolução de um polimorfo ou sal da invenção em um propelente líquido. Propelentes adequados incluem halocarbonetos, hidrocarbonetos, e outros gases liquefeitos. Propelentes representativos incluem: tricloro-fluoro-metano (propelente 11), dicloro-fluoro-metano (propelente 12), dicloro-tetrafluoro- etano (propelente 114), tetrafluoro-etano (HFA-134a), 1,1-difluoro-etano (HFA-152a), difluoro-metano (HFA-32), pentafluoro-etano (HFA-12), heptafluoro-propano (HFA-227a), perfluoro-propano, perfluoro-butano, perfluoro-pentano, butano, isobutano, e pentano. Aerossóis compreendendo um polimorfo ou sal da invenção tipicamente serão administrados a um paciente via um inalador de dose medida (metered dose inhaler, MDI). Tais dispositivos são conhecidos por aquelas pessoas experientes na técnica.

[00106] O aerossol pode conter excipientes farmaceuticamente aceitáveis adicionais tipicamente usados com MDIs tais como tensoativos, lubrificantes, co-solventes e outros excipientes para melhorar a estabilidade física da formulação, para melhorar o desempenho da válvula, para melhorar a solubilidade, ou para melhorar o gosto.

[00107] Assim é fornecida como um aspecto adicional da invenção uma formulação farmacêutica de aerossol compreendendo um polimorfo ou sal da invenção e um fluoro-carboneto ou cloro-fluoro-carboneto contendo hidrogênio como propelente, opcionalmente em combinação com um tensoativo e/ou um co-solvente.

[00108] De acordo com outro aspecto da invenção, é fornecida uma formulação farmacêutica de aerossol na qual o propelente é selecionado de 1,1,1,2-tetrafluoro-etano, 1,1,1,2,3,3,3-heptafluoro-n-propano e suas misturas.

[00109] As formulações da invenção podem ser tamponadas pela adição de agentes tamponantes adequados.

[00110] Cápsulas e cartuchos para uso em um inalador ou insuflados, de por exemplo gelatina, podem ser formuladas(os) contendo uma mistura de pó para inalação de um polimorfo ou sal da invenção e uma base de pó adequada tal como lactose ou amido. Cada cápsula ou cartucho pode geralmente conter de 20 μg a 10 mg do polimorfo ou sal da invenção. Alternativamente, o polimorfo ou sal da invenção pode estar presente sem excipientes tal como lactose.

[00111] A proporção do polimorfo ou sal ativo nas composições locais de acordo com a invenção depende do tipo preciso de formulação a ser preparada e geralmente estará dentro da faixa de 0,001% a 10% em peso. Geralmente, para a maioria dos tipos de preparações, a proporção usada estará dentro da faixa de 0,005% a 1%, por exemplo de 0,01% a 0,5%. Contudo, em pós para inalação ou insuflação a proporção usada estará normalmente dentro da faixa de 0,1% a 5%.

[00112] Formulações de aerossol são preferivelmente preparadas de modo que cada dose medida ou "sopro" de aerossol contenha de 20 μg a 10 mg, preferivelmente de 20 μg a 2.000 μg, mais preferivelmente de cerca de 20 μg a 500 μg de um polimorfo ou sal da invenção. Administração pode ser uma vez ao dia ou várias vezes ao dia, por exemplo 2, 3, 4 ou 8 vezes, dando por exemplo 1, 2 ou 3 doses cada vez. A dose diária total com um aerossol estará dentro da faixa de 100 μg a 10 mg, preferivelmente de 200 μg a 2.000 μg. A dose diária total e a dose medida liberada por cápsulas e cartuchos em um inalador ou insuflador geralmente serão o dobro daquela liberada com formulações de aerossol.

[00113] No caso de formulações de aerossol em suspensão, o tamanho de partícula do medicamento particulado (por ex., micronizado) deve ser tal de modo a permitir inalação de substancialmente todo o medicamento para dentro dos pulmões sob administração da formulação de aerossol e assim será menor do que 100 micrômetros, desejavelmente menor do que 20 micrômetros, e em especial dentro da faixa de 1 a 10 micrômetros, tal como de 1 a 5 micrômetros, mais preferivelmente de 2 a 3 micrômetros.

[00114] As formulações da invenção podem ser preparadas por dispersão ou solubilização do medicamento e um polimorfo ou sal da invenção no propelente selecionado em um recipiente apropriado, por exemplo, com o auxílio de sonificação ou um misturador de cisalhamento alto. O processo é desejavelmente realizado sob condições de umidade controlada.

[00115] A estabilidade química e física e a aceitabilidade farmacêutica das formulações de aerossol de acordo com a invenção podem ser determinadas por técnicas bem conhecidas por aquelas pessoas experientes na técnica. Assim, por exemplo, a estabilidade química dos componentes pode ser determinada por ensaio por HPLC, por exemplo, após armazenagem prolongada do produto. Dados de estabilidade física podem ser obtidos de outras técnicas analíticas convencionais tais como, por exemplo, por teste de vazamento, por ensaio de liberação de descarga de válvula (pesos de descarga de dose médios por acionamento), por ensaio de reprodutibilidade de dose (ingrediente ativo por acionamento) e análise de distribuição de borrifo.

[00116] A estabilidade das formulações de aerossol em suspensão de acordo com a invenção pode ser medida por técnicas convencionais, por exemplo, por medição da distribuição de tamanhos de floculação usando um instrumento de espalhamento de luz negra ou por medição da distribuição de tamanhos de partícula por impactação em cascata ou pelo processo analítico de "twin impinger" (impactador de dois estágios). Como aqui usada a referência ao ensaio "twin impinger" significa "Determinação da deposição da dose emitida em inalações pressurizadas usando aparelho A" ["Determination of the deposition of the emitted dose in pressurised inhalations using apparatus A"] como definida em British Pharmacopaeia 1988, páginas A204- 207, Appendix XVII C. Tais técnicas permitem que seja calculada a "fração respirável" das formulações de aerossol. Um método usado para calcular a "fração respirável" é por referência à "fração de partículas finas" que é a quantidade de ingrediente ativo coletada na câmara de impingidela inferior por acionamento expressada como uma percentagem da quantidade total de ingrediente ativo liberada por acionamento usando o método de twin impinger descrito acima.

[00117] O termo "inalador de dose medida" (metered dose inhaler, ou MDI) significa uma unidade compreendendo uma vasilha, uma tampa segura cobrindo a vasilha e uma válvula medidora de formulação situada na tampa. O sistema de MDI inclui um dispositivo de canalização adequado. Os dispositivos de canalização apropriados compreendem por exemplo, um acionador de válvula e uma passagem cônica ou cilíndrica através da qual o medicamento pode ser liberado da vasilha cheia via a válvula medidora para o nariz ou a boca de um paciente tal como um acionador bucal.

[00118] Vasilhas de MDI geralmente compreendem um recipiente capaz de suportar a pressão de vapor do propelente usado tal como um frasco de vidro revestido com plástico ou de plástico ou preferivelmente uma vasilha de metal, por exemplo, de alumínio ou de uma sua liga que pode opcionalmente estar anodizada, revestida com laca e/ou revestida com plástico (por exemplo incorporada aqui como referência WO96/32099 na qual parte das ou todas as superfícies internas estão revestidas com um ou mais polímeros de fluorocarboneto opcionalmente em combinação com um ou mais polímeros de não-fluoro-carboneto), cujo recipiente é fechado com uma válvula medidora. A tampa pode ser segura sobre a vasilha via uma soldagem ultrassônica, um encaixe por parafusos ou uma crimpagem. MDIs aqui ensinados podem ser preparados pelos métodos da técnica (por ex. veja Byron, acima e WO96/32099). Preferivelmente a vasilha é equipada com uma montagem de tampa, na qual a válvula medidora de equipamento está situada na tampa, e a dita tampa está crimpada no lugar.

[00119] Em uma modalidade da invenção a superfície interna metálica da vasilha está revestida com um fluoro-polímero, mais preferivelmente combinado com um não-fluoro-polímero. Em outra modalidade da invenção a superfície interna metálica da vasilha está revestida com uma combinação de polímeros de poli(tetrafluoro-etileno) (PTFE) e poli(éter-sulfona) (PES). Em uma outra modalidade da invenção toda a superfície metálica da vasilha está revestida com uma combinação de polímeros de poli(tetrafluoro-etileno) (PTFE) e poli(éter-sulfona) (PES).

[00120] As válvulas medidoras são projetadas para liberarem uma quantidade medida da formulação por acionamento e incorporam uma gaxeta para prevenir vazamento de propelente através da válvula. A gaxeta pode compreender qualquer material elastomérico adequado tal como, por exemplo, polietileno de densidade baixa, borracha cloro-butílica, borracha bromo-butílica, EPDM, borrachas de butadieno-acrilonitrila pretas e brancas, borracha butílica e neoprene. Válvulas adequadas estão comercialmente disponíveis em fabricantes bem conhecidos na indústria de aerossol, por exemplo, de Valois, França (por ex. DF10, DF30, DF60), Bespak plc, RU (por ex. BK300, BK357) e 3M-TM Neotechnic Ltd, RU (por ex. Spraymiser).

[00121] Em várias modalidades, os MDIs também podem ser usados conjuntamente com outras estruturas tais como, sem limitação, embalagens envoltórias para armazenagem e contendo os MDIs, incluindo aqueles descritos em Patentes U.S. de n° 6.119.853; 6.179.118; 6.315.112; 6.352.152; 6.390.291; e 6.679.374, e também unidades contadoras de dose, tais como, mas não limitadas, àquelas descritas em Patentes U.S. de n° 6.360.739 e 6.431.168.

[00122] Maquinário e métodos de manufatura em grande quantidade convencionais bem conhecidos por aquelas pessoas experientes na técnica de manufatura de aerossol farmacêutico podem ser utilizados para a preparação de bateladas de grande escala para a produção comercial de vasilhas cheias. Assim, por exemplo, em um método de manufatura em grande quantidade para preparar formulações de aerossol em suspensão uma válvula medidora é crimpada sobre uma vasilha de alumínio para formar uma vasilha vazia. O medicamento particulado é adicionado em um vaso de carga e um vaso de manufatura é cheio com propelente liquefeito junto com os excipientes opcionais sob pressão através do vaso de carga. A suspensão de medicamento é misturada antes da recirculação para uma maquina de enchimento e então a vasilha é cheia com uma alíquota da suspensão de medicamento através da válvula medidora. Em um exemplo de método de manufatura em grande quantidade para preparar formulações de aerossol em solução uma válvula medidora é crimpada sobre uma vasilha de alumínio para formar uma vasilha vazia. Um vaso de manufatura é cheio sob pressão através do vaso de carga com o propelente líquido junto com os excipientes opcionais e o medicamento dissolvido.

[00123] Em um processo alternativo, uma alíquota da formulação liquefeita é adicionada em uma vasilha aberta sob condições que estão suficientemente frias para garantir que a formulação não vaporize, e então uma válvula medidora é crimpada sobre a vasilha.

[00124] Tipicamente, em bateladas preparadas para uso farmacêutico, cada vasilha cheia tem seu peso checado, é codificada com um número de batelada e é embalada em uma bandeja para armazenagem antes do teste de liberação.

[00125] Suspensões e soluções compreendendo um polimorfo ou sal da invenção também podem ser administradas a um paciente via um nebulizador. O solvente ou agente de suspensão utilizado para nebulização pode ser qualquer líquido farmaceuticamente tal como água, solução aquosa salina, alcoóis ou glicóis, por ex., etanol, isopropil-álcool, glicerol, propileno-glicol, poli(etileno-glicol), etc. ou suas misturas. Soluções salinas utilizam sais que podem exibir pouca ou nenhuma atividade farmacológica após a administração. Tanto sais inorgânicos, tais como sais halogenados de amônio ou de metal alcalino, por ex., cloreto de sódio, cloreto de potássio, quanto sais orgânicos, tais como sais de potássio, de sódio e de amônio ou ácidos orgânicos, por ex., ácido ascórbico, ácido cítrico, acético, ácido tartárico, etc. podem ser usados para este propósito.

[00126] Outros excipientes farmaceuticamente aceitáveis podem ser adicionados na suspensão ou solução. O polimorfo ou sal da invenção pode ser estabilizado pela adição de um ácido inorgânico, por ex., ácido clorídrico, ácido nítrico, ácido sulfúrico e/ou ácido fosfórico; um ácido orgânico, por ex., ácido ascórbico, ácido cítrico, ácido acético, e ácido tartárico, etc., um agente complexante tal como EDTA ou ácido cítrico e seus sais; ou um antioxidante tal como vitamina E ou ácido ascórbico. Estes podem ser usados sozinhos ou juntos para estabilizar o polimorfo ou sal da invenção. Conservantes podem ser adicionados tais como cloreto de benzalcônio ou ácido benzoico e seus sais. Tensoativo pode ser adicionado especialmente para melhorar a estabilidade física das suspensões. Estes incluem lecitina, dioctil-sulfo- succinato de dissódio, ácido oleico e ésteres de sorbitana.

[00127] Em um outro aspecto, a invenção é direcionada a uma forma de dosagem adaptada para administração intranasal.

[00128] Formulações para administração nasal podem incluir formulações de aerossol pressurizadas e formulações aquosas administradas ao nariz por bomba pressurizada. Formulações que estão não-pressurizadas e adaptadas para serem administradas topicamente na cavidade nasal são de interesse específico. Formulações adequadas contêm água como o diluente ou veículo para este propósito. Formulações aquosas para administração ao pulmão ou ao nariz podem ser fornecidas com excipientes convencionais tais como agentes tamponantes, agentes modificadores de tonicidade et cetera. Formulações aquosas também podem ser administradas ao nariz por nebulização.

[00129] O polimorfo e sais da invenção podem ser formulados como uma formulação fluida para liberação de um dispensador de fluido, por exemplo um dispensador de fluido tendo um bocal dispensador ou um orifício dispensador através do qual uma dose medida da formulação fluida é dispensada sob aplicação de uma força aplicada pelo usuário em um mecanismo de bomba do dispensador de fluido. Tais dispensadores de fluido são geralmente munidos com um reservatório de múltiplas doses medidas da formulação fluida, as doses sendo dispensáveis sob acionamentos sequenciais da bomba. O orifício ou bocal dispensador pode estar configurado para ser inserido dentro das narinas do usuário para dispensação por borrifo da formulação fluida para dentro da cavidade nasal. Um dispensador de fluido do tipo anteriormente mencionado é descrito e ilustrado em WO05/044354, cujo conteúdo inteiro é por meio deste aqui incorporado como referência. O dispensador tem um alojamento que aloja um dispositivo de descarga de fluido tendo uma bomba de compressão montada sobre uma vasilha para conter uma formulação fluida. O alojamento tem pelo menos uma alavanca lateral operável por dedo que é móvel para dentro com respeito ao alojamento para girar o recipiente ascendentemente dentro do alojamento para fazer com que a bomba comprima e bombeie uma dose medida da formulação para fora de uma haste de bomba através de um bocal nasal do alojamento. Em uma modalidade, o dispensador de fluido é do tipo geral ilustrado em Figuras 3040 de WO05/044354.

[00130] Composições farmacêuticas adaptadas para administração intranasal nas quais o veículo é um sólido incluem um pó grosso tendo um tamanho de partícula por exemplo dentro da faixa de 20 a 500 micrômetros que é administrado por inalação rápida através da passagem nasal de um recipiente do pó mantido próximo do nariz. Composições adequadas nas quais o veículo é um líquido, para administração como um borrifo nasal ou como gotas nasais, incluem soluções aquosas ou oleosas do polimorfo ou sal da invenção.

[00131] Composições farmacêuticas adaptadas para administração transdermal podem ser apresentadas como emplastros discretos para permanecerem em contato íntimo com a epiderme do paciente por um período de tempo prolongado. Por exemplo, o ingrediente ativo pode ser liberado do emplastro por iontoforese como geralmente descrito em Pharmaceutical Research, 3(6), 318 (1986).

[00132] Composições farmacêuticas adaptadas para administração tópica podem ser formuladas como unguentos, cremes, suspensões, loções, pós, soluções, pastas, geles, aerossóis ou óleos.

[00133] Unguentos, creme e geles, podem, por exemplo, ser formulados com uma base aquosa ou oleosa com a adição de agente espessante e/ou gelificante e/ou solventes adequados. Tais bases podem portanto, por exemplo, incluir água e/ou um óleo tal como parafina líquida ou um óleo vegetal tal como óleo de amendoim ou óleo de rícino, ou um solvente tal como poli(etileno-glicol). Agentes espessantes e agentes gelificantes que podem ser usados de acordo com a natureza da base incluem parafina mole, estearato de alumínio, cetoestearil-álcool, poli(etileno-glicóis), lanolina, cera de abelha, carbóxi-polimetileno e derivados de celulose, e/ou monoestearato de glicerila e/ou agentes emulsificadores não-iônicos.

[00134] Loções podem ser formuladas com uma base aquosa ou oleosa e em geral também conterão um ou mais agentes emulsificadores, agentes estabilizadores, agentes dispersantes, agentes estabilizadores, agentes de suspensão ou agentes espessantes.

[00135] Pós para aplicação externa podem ser formados com o auxílio de qualquer base de pó adequada, por exemplo, talco, lactose ou amido. Gotas podem ser formuladas com uma base aquosa ou não-aquosa compreendendo um ou mais agentes dispersantes, agentes de solubilização, agentes de suspensão ou conservantes.

[00136] Preparações tópicas podem ser administradas por uma ou mais aplicações por dia na área afetada; sobre áreas da pele curativos oclusivos podem ser vantajosamente usados. Liberação contínua ou prolongada pode ser realizada por um sistema de reservatório adesivo.

[00137] Para tratamentos do olho ou de outros tecidos externos, por exemplo boca e pele, as composições podem ser aplicadas como um creme ou unguento tópico. Quando formulado em um unguento, o polimorfo ou sal da invenção pode ser utilizado quer com uma base de unguento parafínica quer com uma base de unguento miscível em água. Alternativamente, o polimorfo ou sal da invenção pode ser formulado em um creme com uma base de creme do tipo óleo-em-água ou uma base do tipo água-em-óleo.

[00138] Composições farmacêuticas adaptadas para administração parenteral incluem soluções de injeção estéreis aquosas e não-aquosas que podem conter antioxidantes, agentes tamponantes, bacteriostatos e solutos que tornam a formulação isotônica com o sangue do paciente recipiente intencionado; e soluções estéreis aquosas e não-aquosas que podem incluir agentes de suspensão e agentes espessantes. As composições podem ser apresentadas em recipientes de dose unitária ou de doses múltiplas, por exemplo frascos fechados e ampolas, e podem ser armazenadas em uma condição seca por congelamento (liofilizada) exigindo apenas a adição do veículo líquido estéril, por exemplo água para injeções, imediatamente antes do uso. Suspensões e soluções para injeção extemporâneas podem ser preparadas a partir de tabletes, grânulos e pós estéreis.

[00139] Os polimorfos e sais e composições farmacêuticas de acordo com a invenção podem ser usados em combinação com ou incluem um ou mais outros agentes terapêuticos, por exemplo selecionados de agentes antiinflamatórios, agentes anticolinérgicos (especialmente um antagonista de receptores M1/M2/M3),agonistas de β2-adreno-receptor, agentes antiinfecciosos, tais como antibióticos ou agentes antivirais, ou anti- histamínicos. A invenção portanto fornece, em um outro aspecto, uma combinação compreendendo um polimorfo ou sal da invenção junto com um ou mais outros agentes terapeuticamente ativos, por exemplo selecionados de um agente antiinflamatório, tal como um corticosteroide ou uma NSAID, um agente anticolinérgico, um agonista de β2-adreno-receptor, um agente antiinfeccioso, tal como um antibiótico ou um agente antiviral, ou um anti- histamínico. Uma modalidade da invenção inclui combinações compreendendo um polimorfo ou sal da invenção junto com um agonista de β2-adreno-receptor, e/ou um agente anticolinérgico, e/ou um inibidor de PDE- 4, e/ou um anti-histamínico.

[00140] Em uma modalidade, a invenção inclui um método de tratar um distúrbio mediado pela atividade inapropriada de PI3-cinase compreendendo administrar uma quantidade segura e efetiva de uma combinação compreendendo um polimorfo ou sal da invenção junto com um ou mais agentes terapeuticamente ativos.

[00141] Em um outro aspecto, a invenção fornece uma combinação compreendendo um polimorfo ou sal da invenção que é seletivo para PI3Kδ junto com um composto ou um seu sal farmaceuticamente aceitável que é seletivo para outra PI3-cinase, por exemplo PI3KY.

[00142] Uma modalidade a invenção inclui combinações compreendendo um ou dois outros agentes terapêuticos.

[00143] Será evidente para uma pessoa experiente na técnica que, onde apropriado, o(s) outro(s) agente(s) terapêutico(s) pode(m) ser usado(s) na forma de sais, por exemplo como sais de metal alcalino ou de amina ou como sais de adição de ácido, ou pró-medicamentos, ou como ésteres, por exemplo alquil-ésteres inferiores, ou como solvatos, por exemplo hidratos para otimizar a atividade e/ou a estabilidade e/ou as características físicas, tal como solubilidade, do ingrediente terapêutico. Será evidente também que, onde apropriado, os ingredientes terapêuticos podem ser usados em forma opticamente pura.

[00144] Em uma modalidade, a invenção inclui uma combinação compreendendo um polimorfo ou sal da invenção junto com um agonista de β2-adreno-receptor.

[00145] Exemplos de agonistas de β2-adrenorreceptor incluem salmeterol (que pode ser um racemato ou um enanciômero isolado tal como o enanciômero-R), salbutamol (que pode ser um racemato ou um enanciômero isolado tal como o enanciômero-R), formoterol (que pode ser um racemato ou um diastereoisômero isolado tal como o diastereoisômero-R,R), salmefamol, fenoterol, carmoterol, etanterol, naminterol, clembuterol, pirbuterol, flerbuterol, reproterol, bambuterol, indacaterol, terbutalina e seus sais, por exemplo o xinafoato (1-hidróxi-2-naftaleno-carboxilato) sal de salmeterol, o sal de sulfato ou a base livre de salbutamol ou o sal de fumarato de formoterol. Em uma modalidade, agonistas de β2-adrenorreceptor de longa ação, por exemplo, são preferidos compostos que proporcionam broncodilatação efetiva por cerca de 12 h ou mais.

[00146] Outros agonistas de β2-adrenorreceptor incluem aqueles descritos em WO 02/066422, WO02/070490, WO 02/076933, WO 03/024439, WO 03/072539, WO 03/091204, WO 04/016578, WO 2004/022547, WO 2004/037807, WO 2004/037773, WO 2004/037768, WO 2004/039762, WO 2004/039766, WO01/42193 e WO03/042160.

[00147] Exemplos de agonistas de β2-adrenorreceptor incluem: 3-(4- {[6-({(2R)-2-hidróxi-2-[4-hidróxi-3-(hidróxi-metil)-fenil]-etil}-amino)- hexil]-óxi}-butil)-benzeno-sulfonamida; 3-(3-{[7-({(2R)-2-hidróxi-2-[4-hidróxi-3-hidróxi-metil)-fenil]- etil}-amino)-heptil]-óxi}-propil)-benzeno-sulfonamida; 4-{(1 R)-2-[(6-{2-[(2,6-dicloro-benzil)-óxi]-etóxi}-hexil)- amino]-1-hidróxi-etil}-2-(hidróxi-metil)-fenol; 4-{(1R)-2-[(6-{4-[3-(ciclo-pentil-sulfonil)-fenil]-butóxi}- hexil)-amino]-1-hidróxi-etil}-2-(hidróxi-metil)-fenol; N-[2-hidroxil-5-[(1R)-1 -hidróxi-2-[[2-4-[[(2R)-2-hidróxi-2- fenil-etil]-amino]-fenil]-etil]-amino]-etil]-fenil]-formamida; N-2{2-[4-(3-fenil-4-metóxi-fenil)-amino-fenil]-etil}-2-hidróxi- 2-(8-hidróxi-2(1H)-quinolinon-5-il)-etil-amina; e 5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-amino-2-metil-propóxi)-fenil-amino]- fenil}-etil-amino)-1-hidróxi-etil]-8-hidróxi-1H-quinolin-2-ona.

[00148] O agonista de β2-adrenorreceptor pode estar na forma de um sal formado com um ácido farmaceuticamente selecionado de ácido sulfúrico, ácido clorídrico, ácido fumárico, ácido hidróxi-naftoico (por exemplo ácido 1- ou 3-hidróxi-2-naftoico), ácido cinâmico, ácido cinâmico substituído, ácido trifenil-acético, ácido sulfâmico, ácido sulfanílico, ácido naftaleno-acrílico, ácido benzoico, ácido 4-metóxi-benzoico, ácido 2- ou 4-hidróxi-benzoico, 4- cloro-benzoico e ácido 4-fenil-benzoico.

[00149] Agentes antiinflamatórios adequados incluem corticosteroides. Corticosteroides adequados que podem ser usados em combinação com os polimorfos ou sais da invenção são aqueles corticosteroides orais e inalados e seus pró-medicamentos que têm atividade antiinflamatória.

[00150] Exemplos incluem metil-prednisolona, prednisolona, dexametasona, propionato de fluticasona, S-fluoro-metil-éster de ácido 6α,9α- difluoro-11 β-hidr0xi-16α-metil- 17α-[ (4-metil-1, 3 -tiazol-5 -carbonil)-óxi] -3- oxo-androsta-1,4-dieno-17β-carbotioico, S-fluoro-metil-éster de ácido 6α,9α- difluoro- 17α- [(2-furanil-carbonil)-óxi] -11 β-hidr0xi-16a-metil-3-oxo- androsta-1,4-dieno-17β-carbotioico (furoato de fluticasona), S-(2-oxo-tetra- hidro-furan-3S-il)-éster de ácido 6a,9a-difluoro-11e-hidróxi-16a-metil-3- oxo-17 a-propionil-óxi-androsta-1,4-dieno-17 β-carbotioico, S-ciano-metil- éster de ácido 6a,9a-difluoro-11e-hidróxi-16a-metil-3-oxo-17a-(2,2,3,3- tetrametil-ciclo-propil-carbonil)-óxi-androsta-1,4-dieno-17β-carbotioico e S- fluoro-metil-éster de ácido 6a,9a-difluoro-11e-hidróxi-16a-metil-17a-(1- metil-ciclo-propil-carbonil)-óxi-3-oxo-androsta-1,4-dieno-17e-carbotioico, ésteres de beclometasona (por exemplo o éster de 17-propionato ou o éster de 17,21-dipropionato), budesonida, flunisolida, ésteres de mometasona (por exemplo furoato de mometasona), triancinolona-acetonida, rofleponida, ciclesonida (16α,17-[ [(R)-ciclo-hexil-metileno]-bis(óxi)]-11 β ,21 -di-hidróxi- pregna-1,4-dieno-3,20-diona, propionato de butixocort, RPR-106541, e ST- 126. Corticosteroides preferidos incluem propionato de fluticasona, S-fluoro- metil-éster de ácido 6a,9a-difluoro-11e-hidróxi-16a-metil-17a-[(4-metil-1,3- tiazol-5-carbonil)-0xi]-3-oxo-androsta-1,4-dieno-17β-carbotioico, S-fluoro- metil-éster de ácido 6a,9a-difluoro-17a-[(2-furanil-carbonil)-óxi]-11e- hidróxi-16α-metil-3-oxo-androsta-1,4-dieno-17 β-carbotioico, S-ciano-metil- éster de ácido 6α,9α-difluoro-11β-hidr0xi-16α-metil-3-oxo-17α-(2,2,3,3- tetrametil-ciclo-propil-carbonil)-óxi-androsta-1,4-dieno-17β-carbotioico e S- fluoro-metil-éster de ácido 6a,9a-difluoro-11e-hidróxi-16a-metil-17a-(1- metil-ciclo-propil-carbonil)-óxi-3-oxo-androsta-1,4-dieno-17 β-carbotioico.

[00151] Em uma modalidade o corticosteroide é S-fluoro-metil-éster de ácido 6a,9a-difluoro-17a-[(2-furanil-carbonil)-óxi]-11e-hidróxi-16a-metil-3- oxo-androsta-1,4-dieno-17β-carbotioico.

[00152] Exemplos de corticosteroides podem incluir aqueles descritos em WO2002/088167, WO2002/100879, WO2002/12265, WO2002/12266, WO2005/005451, WO2005/005452, WO2006/072599 e WO2006/072600.

[00153] Compostos não-esteroidais tendo agonismo contra glicocorticoide que podem possuir seletividade para transrepressão sobre transativação e que podem ser úteis em terapia de combinação incluem aqueles abordados nas seguintes patentes: WO03/082827, W098/54159, WO04/005229, WO04/009017, WO04/018429, WO03/104195, WO03/082787, WO03/082280, WO03/059899, WO03/101932, WO02/02565, WO01/16128, WO00/66590, WO03/086294, WO04/026248, WO03/061651 e WO03/08277. Outros compostos não-esteroidais são abordados em: WO2006/000401, WO2006/000398 e WO2006/015870.

[00154] Exemplos de agentes antiinflamatórios não-esteroidais incluem medicamentos antiinflamatórios não-esteroidais (non-steroidal antiinflammatory drugs, NSAID's).

[00155] Exemplos de NSAID's incluem cromo-glicato de sódio, nedocromil sódico, inibidores de fosfo-diesterase (phosphodiesterase, PDE) (por exemplo, teofilina, inibidores de PDE4 ou inibidores mistos de PDE3/PDE4), antagonistas de leucotrieno, inibidores da síntese de leucotrieno (por exemplo montelukast), inibidores de iNOS, inibidores de triptase e elastase, antagonistas de beta-2 integrina e antagonistas ou agonistas de receptor de adenosina (por ex. agonistas de adenosina 2a), antagonistas de citocina (por exemplo antagonistas de quimiocina, tal como antagonista de CCR3) ou inibidores da síntese de citocina, ou inibidores de 5-lipoxigenase. Um iNOS (inducible nitric oxide synthase inhibitor, inibidor da óxido-nítrico- sintase induzível) é preferivelmente para administração oral. Exemplos de inibidores de iNOS incluem aqueles divulgados em WO93/13055, WO98/30537, WO02/50021, W095/34534 e W099/62875. Exemplos de inibidores de CCR3 incluem aqueles divulgados em WO02/26722.

[00156] Em uma modalidade, a invenção fornece o uso dos polimorfos e sais da invenção em combinação com um inibidor de fosfo-diesterase 4 (PDE4), especialmente no caso de uma formulação adaptada para inalação. O inibidor específico para PDE4 útil neste aspecto da invenção pode ser pode ser qualquer composto que conhecidamente inibe a enzima PDE4 ou que, como descoberto, atua como um inibidor de PDE4, e que são apenas inibidores de PDE4, não compostos que inibem outros membros da família de PED, tais como PDE3 e PDE5, e também PDE4.

[00157] Compostos incluem ácido cis-4-ciano-4-(3-ciclo-pentil-óxi-4- metóxi-fenil)-ciclo-hexan-1-carboxílico, 2-carbometóxi-4-ciano-4-(3-ciclo- propil-metóxi-4-difluoro-metóxi-fenil)-ciclo-hexan-1-ona e cis-[4-ciano-4-(3- ciclo-propil-metóxi-4-difluoro-metóxi-fenil)-ciclo-hexan-1-ol]. Também, ácido cis-4-ciano-4-[3-(ciclo-pentil-óxi}-4-metóxi-fenil]-ciclo-hexano-1- carboxílico (também conhecido como cilomilast) e seus sais, ésteres, pró- medicamentos ou formas físicas, que é descrito em Patente U.S. 5.552.438 publicada em 03 de setembro de 1996; esta patente e os compostos que ela divulga são aqui incorporados em sua totalidade como referências.

[00158] Outros compostos incluem AWD-12-281 de Elbion (Hofgen, N. et al., 15th EFMC Int. Symp. Med. Chem. (Sept 6-10, Edimburgh) 1998, Abst P.98; Número de referência do CAS de 247584020-9); um derivado de 9-benzil-adenina denominado de NCS-613 (INSERM); D-4418 de Chiroscience e Schering-Plough; um inibidor de benzodiazepina PDE4 identificado como CI-1018 (PD-168787) e atribuído à Pfizer; um derivado de benzodioxol divulgado por Kyowa Hakko em W099/16766; K-34 de Kyowa Hakko; V-11294A de Napp (Landells, L.J. et al., Eur. Resp. J. [Annu. Cong. Eur. Resp. Soc. (Sept 19-23, Genebra) 1998] 1998, 12 (Suppl. 28): Abst P2393); roflumilast (Número de referência do CAS de 162401-32-3) e uma ftalazinona (WO99/47505, cuja divulgação é por meio deste aqui incorporada como referência) de Byk-Gulden; Pumafentrina, (-)-p-[(4aR*,10bS*)-9-etóxi- 1,2,3,4,4a,10b-hexa-hidro-8-metóxi-2-metil-benzo[c][1,6]naftiridin-6-il]- N,N-diisopropil-benzamida que é um inibidor misto de PDE3/PDE4 que tem sido preparada e publicada por Byk-Gulden, agora Aitana; arofilline sob desenvolvimento por Almirall-Prodesfarma; VM554/UM565 de Vernalis; ou T-440 (Tanabe Seiyaku; Fuji, K. et al., J. Pharmacol. Exp. Ther.,1998, 284(1): 162), e T2585.

[00159] Outros compostos são divulgados no Pedido de Patente Internacional publicado WO04/024728 (Glaxo Group Ltd), WO04/056823 (Glaxo Group Ltd) e WO04/103998 (Glaxo Group Ltd) (por ex. Exemplo 399 ou 544 divulgado na mesma). Outros compostos também são divulgados em WO2005/058892, WO2005/090348, WO2005/090353, e WO2005/090354, todos em nome da Glaxo Group Limited.

[00160] Exemplos de agentes anticolinérgicos são aqueles compostos que atuam como antagonistas nos receptores muscarínicos, em especial aqueles compostos que são antagonistas dos receptores M1 ou M3, antagonistas duais dos receptores M1/M3 ou M2/M3, ou pan-antagonistas dos receptores M1/M2/M3. Compostos exemplares para administração via inalação incluem ipratrópio (por exemplo, como o brometo, CAS 22254-24-6, vendido sob o nome Atrovent), oxitrópio (por exemplo, como o brometo, CAS 3028675-0) e tiotrópio (por exemplo, como o brometo, CAS 136310-93-5, vendido sob o nome Spiriva). Também são de interesse revatropato (por exemplo, como o bromidrato, CAS 262586-79-8) e LAS-34273 que é divulgado em WO01/04118. Compostos exemplares para administração oral incluem pirenzepina (CAS 28797-61-7), darifenacina (CAS 133099-04-4, ou CAS 133099-07-7 para o bromidrato vendido sob o nome Enablex), oxibutinina (CAS 5633-20-5, vendida sob o nome Ditropan), terodilina (CAS 15793-405), tolterodina (CAS 124937-51-5, ou CAS 124937-52-6 para o tartarato, vendido sob o nome Detrol), otilônio (por exemplo, como o brometo, CAS 26095-59-0, vendido sob o nome Spasmomen), cloreto de tróspio (CAS 10405-02-4) e solifenacina (CAS 242478-37-1, ou CAS 242478-38-2 para o succinato também conhecido como YM-905 e vendido sob o nome Vesicare).

[00161] Compostos adicionais são divulgados em WO 2005/037280, WO 2005/046586 e WO 2005/104745, aqui incorporadas como referências. As presentes combinações incluem, mas não são limitadas a: iodeto de (3-endo)-3-(2,2-di-2-tienil-etenil)-8,8-dimetil-8- azonia-biciclo[3.2.1]octano; brometo de (3-endo)-3-(2-ciano-2,2-difenil-etil)-8,8-dimetil-8- azonia-biciclo[3.2.1]octano; brometo de 4-[hidróxi-(difenil)-metil]-1-{2-[(fenil-metil)-óxi]- etil}-1-azonia-biciclo[2.2.2]octano; e brometo de (1R,5S)-3-(2-ciano-2,2-difenil-etil)-8-metil-8-{2- [(fenil-metil)-óxi]-etil}-8-azonia-biciclo[3.2.1]octano.

[00162] Outros agentes anticolinérgicos incluem compostos que são divulgados em Pedido de Patente U.S. 60/487981 incluindo, por exemplo: brometo de (3-endo)-3-(2,2-di-2-tienil-etenil)-8,8-dimetil-8- azonia-biciclo[3.2.1]octano; brometo de (3-endo)-3-(2,2-difenil-etenil)-8,8- dimetil-8-azonia-biciclo[3.2.1]octano; 4-metil-benzeno-sulfonato de (3-endo)- 3-(2,2-difenil-etenil)-8,8-dimetil-8-azonia-biciclo[3.2.1]octano; brometo de (3-endo)-8,8-dimetil-3-[2-fenil-2-(2-tienil)-etenil]- 8-azonia-biciclo[3.2.1]octano; e/ou brometo de (3-endo)-8,8-dimetil-3-[2-fenil-2-(2-piridinil)- etenil]-8-azonia-biciclo[3.2.1]octano.

[00163] Outros agentes anticolinérgicos incluem compostos que são divulgados em Pedido de Patente U.S. 60/511009 incluindo, por exemplo: iodeto de (endo)-3-(2-metóxi-2,2-di-tiofen-2-il-etil)-8,8- dimetil-8-azonia-biciclo[3.2.1]octano; 3-((endo)-8-metil-8-aza-biciclo[3.2.1]oct-3-il)-2,2-difenil- propionitrila; (endo)-8-metil-3-(2,2,2-trifenil-etil)-8-aza- biciclo[3.2.1]octano; 3-((endo)-8-metil-8-aza-biciclo[3.2.1]oct-3-il)-2,2-difenil- propionamida; ácido 3-((endo)-8-metil-8-aza-biciclo[3.2.1]oct-3-il)-2,2- difenil-propiônico; iodeto de (endo)-3-(2-ciano-2,2-difenil-etil)-8,8-dimetil-8- azonia-biciclo[3.2.1]octano; brometo de (endo)-3-(2-ciano-2,2-difenil-etil)-8,8-dimetil-8- azonia-biciclo[3.2.1]octano; 3-((endo)-8-metil-8-aza-biciclo[3.2.1]oct-3-il)-2,2-difenil- propan-1-ol; N-benzil-3-((endo)-8-metil-8-aza-biciclo[3.2.1]oct-3-il)-2,2- difenil-propionamida; iodeto de (endo)-3-(2-carbamoil-2,2-difenil-etil)-8,8-dimetil-8- azonia-biciclo[3.2.1]octano; 1-benzil-3-[3-((endo)-8-metil-8-aza-biciclo[3.2.1]oct-3-il)-2,2- difenil-propil]-uréia; 1-etil-3-[3-((encfo)-8-metil-8-aza-biciclo[3.2.1]oct-3-il)-2,2- difenil-propil]-uréia; N-[3-((endo)-8-metil-8-aza-biciclo[3.2.1]oct-3-il)-2,2-difenil- propil]-acetamida; N-[3-((endo)-8-metil-8-aza-biciclo[3.2.1]oct-3-il)-2,2-difenil- propil]-benzamida; 3-((endo)-8-metil-8-aza-biciclo[3.2.1]oct-3-il)-2,2-di-tiofen-2- il-propionitrila; iodeto de (endo)-3-(2-ciano-2,2-di-tiofen-2-il-etil)-8,8-dimetil- 8-azonia-biciclo[3.2.1]octano; N-[3-((endo)-8-metil-8-aza-biciclo[3.2.1]oct-3-il)-2,2-difenil- propil]-benzeno-sulfonamida; [3-((endo)-8-metil-8-aza-biciclo[3.2.1]oct-3-il)-2,2-difenil- propil]-uréia; N-[3-((endo)-8-metil-8-aza-biciclo[3.2.1]oct-3-il)-2,2-difenil- propil]-metano-sulfonamida; e/ou brometo de (endo)-3-{2,2-difenil-3-[(1-fenil-metanoil)- amino]-propil}-8,8-dimetil-8-azonia-biciclo[3.2.1]octano.

[00164] Outros compostos incluem: iodeto de (endo)-3-(2-metóxi-2,2-di-tiofen-2-il-etil)-8,8- dimetil-8-azonia-biciclo[3.2.1]octano; iodeto de (endo)-3-(2-ciano-2,2-difenil-etil)-8,8-dimetil-8- azonia-biciclo[3.2.1]octano; brometo de (endo)-3-(2-ciano-2,2-difenil-etil)-8,8-dimetil-8- azonia-biciclo[3.2.1]octano; iodeto de (endo)-3-(2-carbamoil-2,2-difenil-etil)-8,8-dimetil-8- azonia-biciclo[3.2.1]octano; iodeto de (endo)-3-(2-ciano-2,2-di-tiofen-2-il-etil)-8,8-dimetil- 8-azonia-biciclo[3.2.1]octano; e/ou brometo de (endo)-3-{2,2-difenil-3-[(1-fenil-metanoil)- amino]-propil}-8,8-dimetil-8-azonia-biciclo[3.2.1]octano.

[00165] Em uma modalidade a invenção fornece uma combinação compreendendo um polimorfo ou sal da invenção junto com um antagonista H1. Exemplos de antagonistas H1 incluem, sem limitação, amelexanox, astemizol, azatadina, azelastina, acrivastina, bronfeniramina, cetirizina, levocetirizina, efletirizina, clorfeniramina, clemastina, ciclizina, carebastina, ciproeptadina, carbinoxamina, descarboetoxiloratadina, doxilamina, dimetindeno, ebastina, epinastina, efletirizina, fexofenadina, hidroxizina, cetotifeno, loratadina, levocabastina, mizolastina, mequitazina, mianserina, noberastina, meclizina, norastemizol, olopatadina, picumast, pirilamina, prometazina, terfenadina, tripelenamina, temelastina, trimeprazina e triprolidina, especialmente cetirizina, levocetirizina, efletirizina e fexofenadina. Em uma outra modalidade a invenção fornece uma combinação compreendendo um polimorfo ou sal da invenção junto com um antagonista (e/ou agonista inverso) H3. Exemplos de antagonistas H3 incluem, por exemplo, aqueles compostos divulgados em WO2004/035556 e em WO2006/045416. Outros antagonista de receptor de histamina que podem ser usados em combinação com os polimorfos e sais da presente invenção incluem antagonistas (e/ou agonistas inversos) do receptor H4, por exemplo, os compostos divulgados em Jablonowski et al., J. Med. Chem. 46:3957-3960 (2003).

[00166] A invenção portanto fornece, em um outro aspecto, uma combinação compreendendo um polimorfo ou sal da invenção junto com um inibidor de PDE-4.

[00167] A invenção portanto fornece, em um outro aspecto, uma combinação compreendendo um polimorfo ou sal da invenção junto com um agonista de β2-adreno-receptor.

[00168] A invenção portanto fornece, em um outro aspecto, uma combinação compreendendo um polimorfo ou sal da invenção junto com um corticosteroide.

[00169] A invenção portanto fornece, em um outro aspecto, uma combinação compreendendo um polimorfo ou sal da invenção junto com um agonista GR não-esteroidal.

[00170] A invenção portanto fornece, em um outro aspecto, uma combinação compreendendo um polimorfo ou sal da invenção junto com um agente anticolinérgico.

[00171] A invenção portanto fornece, em um outro aspecto, uma combinação compreendendo um polimorfo ou sal da invenção junto com um anti-histamínico.

[00172] A invenção portanto fornece, em um outro aspecto, uma combinação compreendendo um polimorfo ou sal da invenção junto com um inibidor de PDE-4 e um agonista de β2-adreno-receptor.

[00173] A invenção portanto fornece, em um outro aspecto, uma combinação compreendendo um polimorfo ou sal da invenção junto com um agente anticolinérgico e um inibidor de PDE-4.

[00174] As combinações referidas acima podem ser convenientemente apresentadas na forma de uma composição farmacêutica e assim as composições farmacêuticas compreendendo uma combinação como definida acima junto com um veículo ou diluente farmaceuticamente aceitável representam um outro aspecto da invenção.

[00175] Os componentes individuais de tais combinações podem ser administrados quer sequencialmente quer simultaneamente em formulações farmacêuticas separadas ou combinadas. Em uma modalidade, os componentes individuais serão administrados simultaneamente em uma formulação farmacêutica combinada. Doses apropriadas de agentes terapêuticos conhecidos são prontamente reconhecidas por aquelas pessoas experientes na técnica.

[00176] A invenção portanto fornece, em um outro aspecto, uma composição farmacêutica compreendendo uma combinação de um polimorfo ou sal da invenção junto com outro agente terapeuticamente ativo.

[00177] A invenção portanto fornece, em um outro aspecto, uma composição farmacêutica compreendendo uma combinação de um polimorfo ou sal da invenção junto com um inibidor de PDE-4.

[00178] A invenção portanto fornece, em um outro aspecto, uma composição farmacêutica compreendendo uma combinação de um polimorfo ou sal da invenção junto com um agonista de β2-adreno-receptor.

[00179] A invenção portanto fornece, em um outro aspecto, uma composição farmacêutica compreendendo uma combinação de um polimorfo ou sal da invenção junto com um corticosteroide.

[00180] A invenção portanto fornece, em um outro aspecto, uma composição farmacêutica compreendendo uma combinação de um polimorfo ou sal da invenção junto com um agonista GR não-esteroidal.

[00181] A invenção portanto fornece, em um outro aspecto, uma composição farmacêutica compreendendo uma combinação de um polimorfo ou sal da invenção junto com um agente anticolinérgico.

[00182] A invenção portanto fornece, em um outro aspecto, uma composição farmacêutica compreendendo uma combinação de um polimorfo ou sal da invenção junto com um anti-histamínico.

[00183] A invenção portanto fornece, em um outro aspecto, uma composição farmacêutica compreendendo uma combinação de um polimorfo ou sal da invenção junto com um inibidor de PDE-4 e um agonista de β2- adreno-receptor.

[00184] A invenção portanto fornece, em um outro aspecto, uma composição farmacêutica compreendendo uma combinação de um polimorfo ou sal da invenção junto com um agente anticolinérgico e um inibidor de PDE-4.

[00185] A invenção agora será ilustrada por meio dos seguintes exemplos não-limitantes. EXEMPLOS

[00186] Os seguintes exemplos ilustram a invenção. Estes exemplos não são intencionados para limitarem o escopo da presente invenção, mas ao contrário, são intencionados para fornecerem orientação ao técnico experiente de como preparar e usar os polimorfos, sais, composições, e métodos da presente invenção. Embora modalidades específicas da presente invenção sejam descritas, o técnico experiente na técnica reconhecerá que várias mudanças e modificações podem ser feitas sem se desviarem do espírito e do escopo da invenção.

[00187] Quando o nome de um fornecedor comercial é dado após o nome de um composto ou de um reagente, por exemplo "composto X (Aldrich)" ou "composto X/Aldrich", isto significa que o composto X é obtenível de um fornecedor comercial, tal como o fornecedor comercial nomeado. Se não é feita aqui referência o composto ou reagente pode ser comprado de um fornecedor padrão tal como Sigma Aldrich, Lancaster, Fluorochem, TCI etc.

[00188] Os nomes dos compostos têm sido obtidos usando um programa de nomeação de compostos que combina a estrutura ao nome (por ex. ACD/Name Batch v 9.0). Detalhes experimentais gerais Métodos de cromatografia líquida - espectroscopia de massas (Liquid Chromatography Mass Spectroscopy, LCMS)

[00189] Análises por LCMS têm sido realizadas usando um dos métodos listados abaixo. Método A:

[00190] Instrumentação de LCMS consiste do seguinte:

[00191] Coluna: Acquity UPLC BEH C18 1,7 μm 2,1 mm x 50 mm. Forno da coluna ajustado a 40 graus centígrados

[00192] Solvente A: Água Ácido Fórmico 0,1% + Acetato de Amônio 10 mM

[00193] Solvente B: MeCN: Água 95:5 + Ácido Fórmico 0,05% Volume de injeção: 0,5 μL Técnica de injeção: sobreenchimento parcial da espiral de amostra Detecção UV: 220 nm a 330 nm Taxa de amostragem UV: 40 pontos por segundo Faixa de varredura de MS: 100 u.m.a. a 1.000 u.m.a. Taxa de varredura de MS: varredura de 0,2 segundo com um tempo de espera mínimo entre varreduras de 0,1 segundo Função de varredura de MS: Eletropulverização nos modos positivo e negativo de varredura alternados Templo de ciclo: 2 minutos e 30 segundos Gradiente:

Método B: Tempo (min) Taxa de Fluxo (mL/min) %A %B 0 3 97 3 0,1 3 97 3

[00194] A análise por HPLC foi conduzida em uma coluna Sunfire C18 (30 mm x d.i. de 4,6 mm, diâmetro de empacotamento 3,5 μm) a 30 graus centígrados. Solvente A = solução de Ácido Fórmico 0,1% v/v em Água. Solvente B = solução de Ácido Fórmico 0,1% v/v em Acetonitrila. O gradiente utilizado foi:

[00195] A detecção UV foi um sinal médio de comprimento de onda de 210 nm a 350 nm e espectros de massa foram registrados em um espectrômetro de massas usando ionização por eletropulverização nos modos positivo e negativo de varredura alternados. Método C:

[00196] A análise por HPLC foi conduzida em uma coluna Phenomenex Luma C18(2) (50 mm x d.i. de 2mm, diâmetro de empacotamento de 3 μm, ou equivalente validada) a 40 graus centígrados. Solvente A = solução de TFA 0,05% v/v em Água. Solvente B = solução de TFA 0,05% v/v em Acetonitrila. O gradiente utilizado foi:

[00197] O comprimento de onda de detecção UV foi dependente do analito e espectros de massa foram registrados em um espectrômetro de massas usando eletropulverização com ionização positiva. Método D:

[00198] A análise por HPLC foi conduzida em uma coluna Phenomenex Luma C18(2) (50 mm x d.i. de 2mm, diâmetro de empacotamento de 3μm, ou equivalente validada) a 60 graus centígrados. Solvente A = solução de TFA 0,05% v/v em Água. Solvente B = solução de TFA 0,05% v/v em Acetonitrila. O gradiente utilizado foi:

[00199] O comprimento de onda da detecção UV foi dependente do analito e espectros de massa foram registrados em um espectrômetro de massas usando eletropulverização com ionização positiva. Métodos de HPLC preparativa automatizada direcionada para espectrometria de massas

[00200] Os métodos para a HPLC preparativa automatizada direcionada para espectrometria de massas usados para a purificação dos compostos são descritos: Método A-High PH Detalhes da Coluna: coluna Waters_XBRIDGE Prep C18, 5μm OBD (30 mm x 150 mm)

[00201] Os solventes utilizados foram: A= Bicarbonato de Amônio 10 mM em água ajustado para pH 10 com solução aq. de Amônia B= Acetonitrila + Amônia aq. 0,1%

[00202] Coleta foi acionada por UV, MS ou uma combinação dos dois. A detecção UV foi um sinal médio de comprimento de onda de 210nm a 350nm. Espectros de massa foram registrados em um espectrômetro de massas usando uma ionização por eletropulverização nos modos positivo e negativo de varredura alternados. PREPARAÇÃO DE COMPOSTO A Intermediários e Exemplos Intermediário 1 6-Cloro-4-iodo-1-(fenil-sulfonil)-1H-indazol

Método A

[00203] 6-Cloro-4-iodo-1H-indazol (30 g, 108 mmol, disponível de Sinova) foi dissolvido em N,N-dimetil-formamida (300 mL) e esfriado em banho de água gelada sob nitrogênio. Hidreto de sódio (5,17 g, 129 mmol) foi adicionado em porções, mantendo a temperatura abaixo de 10°C. Após a adição total a mistura reacional foi agitada por 20 mins então cloreto de benzeno-sulfonila (16,5 mL, 129 mmol) foi adicionado em porções durante 15 mins. A reação foi deixada aquecer para RT durante a noite então derramada em água gelada (2 L). O produto precipitado foi coletado por filtração, lavado com água (ca. 400 mL) e seco em um forno a vácuo durante a noite para dar o composto do título (43,3 g). LCMS (Método A): Rt 1,38 mins, MH+419. Método B

[00204] Em uma solução agitada de 6-cloro-4-iodo-1H-indazol (633,6 g) em THF (5,7L) foi adicionado hidróxido de sódio (227,4 g) seguido por bissulfato de tetra-n-butil-amônio (38,0 g) a 20±3°C, sob uma atmosfera de nitrogênio. A mistura foi agitada a 20±3°C por 1 h 3 min, então cloreto de benzeno-sulfonila (319 mL) foi adicionado em uma tal velocidade para manter a temperatura interna a <25°C. Cloreto de benzeno-sulfonila residual foi adicionado por lavagem com THF (630 mL), então a mistura foi agitada por 1 h 10 min. A mistura foi esfriada para <5°C e água (12,7 L) adicionada em uma tal velocidade para manter a temperatura interna abaixo de 5±3°C, então a mistura foi agitada a 0-5°C por 1 h 20 min. Os sólidos foram coletados por filtração a vácuo, lavados com água (2x 1,9 L), secos por sucção então adicionalmente secos sob vácuo com um escape de nitrogênio a 40°C±3°C durante a noite para dar o composto do título (780,8 g). LCMS (Método C): Rt 6,28 min, MH+ 419. Método C

[00205] Todos os pesos, volumes e equivalentes são relativos ao 6- cloro-4-iodo-1H-indazol.

[00206] 6-Cloro-4-iodo-1H-indazol (1,0 eq., 1 parte em peso, 50 g), hidróxido de sódio (2,25 eq., 0,324 parte em peso, 16,16 g) e hidrogeno- sulfato de tetrabutil-amônio (0,05 eq., 0,061 parte em peso, 3,05 g) são agitados em THF (9,5 vols, 475 mL) a 20±3°C sob uma atmosfera de nitrogênio por 1 h. A mistura é esfriada para 15±3°C e cloreto de benzeno- sulfonila (1,10 eq., 0,51 vols, 25,5 mL) é adicionado em porções durante 20 mins mantendo a temperatura da reação a <25°C e cloreto de benzeno- sulfonila residual é adicionado por lavagem com THF (0,5 vols, 25 mL). A mistura resultante é então agitada sob uma atmosfera de nitrogênio a 20±3°C por pelo menos 1 h antes de checar a completitude por HPLC. A mistura reacional é então adicionada em solução de ácido clorídrico 0,25 M (18 vols, 900 mL) esfriada para 0±3°C durante 15 minutos mantendo a temperatura da suspensão aquosa a <20°C. A mistura reacional residual é adicionada por lavagem com solução de ácido clorídrico 0,25M (2 vols, 100 mL). A suspensão laranja resultante é então agitada a 2±3°C por pelo menos 1 h. O sólido é filtrado, lavado com água (2x3 vols, 2 x 150 mL) e seco por sucção por 20 mins, então seco sob vácuo alto a 40°C (±3°C) para temperatura de sonda constante para dar 6-cloro-4-iodo-1-(fenil-sulfonil)-1H-indazol como um sólido laranja. Intermediário 2 6-Cloro- 1-(fenil-sulfonil)-4-(trimetil-estanil)-1H-indazol

[00207] 6-Cloro-4-iodo-1-(fenil-sulfonil)-1H-indazol (30 g, 717 mmol), tetrakis(trifenil-fosfina)-paládio(0) (8,1 g, 7,01 mmol), xileno (200 mL), trietil-amina (19,98 mL, 143 mmol) e hexametil-diestanho (21,8 mL, 105 mmol) foram aquecidos a 150°C por 2 h. A mistura reacional foi filtrada quente através de Celite, lavando com mais xileno e o solvente foi evaporado em vácuo. O resíduo foi triturado com ciclo-hexano e o precipitado foi coletado por filtração e seco em um forno a vácuo para dar o composto do título (14,4 g).

[00208] LCMS (Método A): Rt 1,51 mins, MH+ 457. Intermediário 3a 2-[6-Cloro-1-(fenil-sulfonil)-1H-indazol-4-il]-1,3-oxazol-5- carboxilato de etila

[00209] Em 4 bateladas, tetrakis(trifenil-fosfina)-paládio(0) (3,37 g. 2,92 mmol), 2-cloro-1,3-oxazol-5-carboxilato de etila (6,65 g, 37,9 mmol, disponível de Apollo Scientific) e iodeto de cobre(I) (1,11 g, 5,83 mmol) foram adicionados em uma solução de 6-cloro-1-(fenil-sulfonil)-4-(trimetil- estanil)-1H-indazol (13,28 g, 29,2 mmol) em N,N-dimetil-formamida (52 mL). Em 3 das bateladas, tetrakis(trifenil-fosfina)-paládio(0) (1,03 g, 0,89 mmol), 2-cloro-1,3-oxazol-5-carboxilato de etila (2,03 g, 11,59 mmol) e iodeto de cobre(I) (0,34 g, 1,78 mmol) foram adicionados em uma solução de 6-cloro-1-(fenil-sulfonil)-4-(trimetil-estanil)-1H-indazol (4,06 g, 8,91 mmol) em N,N-dimetil-formamida (16 mL). Na quarta batelada, tetrakis(trifenil- fosfina)-paládio(0) (0,28 g, 0,24 mmol), 2-cloro-1,3-oxazol-5-carboxilato de etila (0,55 g, 3,14 mmol) e iodeto de cobre(I) (0,09 g, 0,48 mmol) foram adicionados em uma solução de 6-cloro-1-(fenil-sulfonil)-4-(trimetil-estanil)- 1H-indazol (1,10 g, 2,42 mmol) em N,N-dimetil-formamida (4 mL). Cada batelada foi aquecida e agitada a 100°C sob irradiação de microondas por 30 min. As misturas foram permitidas esfriar para RT e o produto precipitado combinado foi suspenso em dietil-éter e coletado por filtração, lavando com mais dietil-éter então secagem em um forno a vácuo por 72 h. Aproximadamente 5,2 g do sólido resultante foram dissolvidos em dicloro- metano e passados através de Celite, eluindo com mais dicloro-metano. O solvente foi evaporado em vácuo para dar o composto do título como um sólido laranja claro (4,95 g).

[00210] LCMS (Método A): Rt 1,38 mins, MH+ 432. Intermediário 3b 2-[6-Cloro-1 -(fenil-sulfonil)-1H-indazol-4-il]-1,3-oxazol-5- carboxilato de metila

[00211] Em uma solução agitada de 6-cloro-4-iodo-1-(fenil-sulfonil)- 1H-indazol (549,8 g) em tolueno (1,43 L) foi adicionada trietil-amina (380 mL) a 20±3°C sob uma atmosfera de nitrogênio. Hexametil-diestanho (385 mL) em tolueno (825 mL) foi adicionado, seguido por tolueno (275 mL) então tetrakis(trifenil-fosfina)-paládio (0) (154,7 g). A mistura reacional foi aquecida para 120°C e agitada nesta temperatura por 3 h. A mistura foi permitida esfriar para 20±3°C, filtrada, então lavada com tolueno (4,95 L). O filtrado foi transferido para um vaso limpo através de um filtro Dominick Hunter de 5 μm em linha, lavando com mais tolueno (550 mL). A batelada foi então lavada com solução aquosa de KF 50% (5,5 L), a pasta aquosa foi filtrada e o filtrado foi recombinado com a fase orgânica. A fase aquosa foi separada e a fase orgânica foi sucessivamente lavada com KF aquoso 50% (5,5 L), seguido por água (5,5 L). A camada orgânica foi diluída com DMPU (2,75 L) então concentrada por destilação a vácuo para ca. 5,4vols. Na solução resultante foi adicionado iodeto de cobre (I) (25,5 g) seguido por 2- cloro-1,3-oxazol-5-carboxilato de metila (279 g, disponível de Apollo Scientific) a 20±3°C. A solução foi desgaseificada via vácuo e purgas de nitrogênio (x3). Tetrakis(trifenil-fosfina)-paládio (0) (78 g) foi adicionado, a mistura foi desgaseificada (x3) e então aquecida para 85-90°C por 10h. A mistura foi diluída com DMSO (13,75 L) e esfriada para 20±3°C, então água (2,75 L) foi adicionada em porções de ca. de 1vol durante ca. 15 mins até que cristalização fosse iniciada. A solução resultante foi maturada a 20°C±3°C por 1,5 h. Os sólidos foram coletados por filtração a vácuo, lavados com água (2x 2,75 L), secos por sucção e então secos em vácuo com um escape de nitrogênio a 45°C±5°C durante a noite para dar o composto do título (341,1 g). LCMS (Método C): Rt 6,08 mins, MH+418 Intermediário 4 {2-[6-Cloro-1-(fenil-sulfonil)-1H-indazol-4-il]-1,3-oxazol-5- il}-metanol

Método A

[00212] Uma solução de 2-[6-cloro-1-(fenil-sulfonil)-1H-indazol-4-il]- 1,3-oxazol-5-carboxilato de etila (5,11 g, 11,8 mmol) em dicloro-metano (80 mL) foi esfriada para -25°C em um frasco de fundo redondo seco em forno. Hidreto de diisobutil-alumínio (25 mL, 37,5 mmol, solução 1,5 M em tolueno) foi adicionado em gotas e a reação foi agitada a -20°C por 3 h. Uma solução aquosa 10% de tartarato de sódio e potássio (80 mL) foi adicionada e a mistura reacional foi agitada por 5 min. O sólido precipitado foi filtrado e particionado entre acetato de etila (500 mL) e água (500 mL). As camadas foram separadas e a camada aquosa foi lavada com mais acetato de etila (3x 150 mL). As camadas orgânicas foram secas e evaporadas em vácuo para dar o composto do título como um sólido amarelo (1,1 g). LCMS (Método A): Rt 1,09 mins, MH+ 390.

[00213] O filtrado restante foi predominantemente concentrado em vácuo e o resíduo foi particionado entre acetato de etila (500 mL) e água (500 mL). As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extraída com mais acetato de etila (3x 150 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (2x 150 mL), secas sobre sulfato de sódio anidro e evaporadas para dar o composto do título como um sólido amarelo (1,9 g). LCMS (Método A): Rt 1,09 mins, MH+ 390. Método B

[00214] Em uma solução de 2-[6-cloro-1-(fenil-sulfonil)-1H-indazol-4- il]-1,3-oxazol-5-carboxilato de etila (1,15 g) em THF (17,25 mL), agitada sob nitrogênio em um banho de gelo foi adicionada uma solução de hidreto de diisobutil-alumínio (5,08 mL, 5,64 mmol) em tolueno. A mistura reacional foi agitada a 0°C por 2 h. Sulfato de sódio deca-hidratado (2,5 g) foi adicionado, a mistura foi agitada na RT por 1 h, então filtrada, lavada com THF (2x 5 vols) e concentrada sob pressão reduzida para dar o composto do título (0,98 g). LCMS (Método D): Rt 2,20 mins, MH+ 390. Método C

[00215] Em uma solução de 2-[6-cloro-1-(fenil-sulfonil)-1H-indazol-4- il]-1,3-oxazol-5-carboxilato de etila (604,5 g) em THF (8,7 L), agitada sob nitrogênio a 0±3°C foi adicionada uma solução de aproximadamente 1,3M de hidreto de diisobutil-alumínio (1,8 kg) em tolueno. A mistura reacional foi agitada a 0±3°C por 30 mins e então diluída com THF (3 L). Sulfato de sódio deca-hidratado (1,3 kg) foi adicionado, mantendo a temperatura abaixo de 5°C. A mistura foi agitada a 0±3°C por 10 mins e então foi aquecida para 20±3°C e mantida nesta temperatura por 1 h. A suspensão foi filtrada, lavada com THF (4 x 3 L) e concentrada sob pressão reduzida para dar o composto do título (529,6 g). LCMS (Método C): Rt 5,18 min, MH+ 390. Método D

[00216] Todos os pesos, volumes e equivalentes são relativos ao 6- cloro-4-iodo-1-(fenil-sulfonil)-1H-indazol.

[00217] Cloreto de zinco (3,6 eq, 1,17 partes em peso, 52,7 g) em tetra- hidro-furano (5 vols, 225 mL) é esfriada para 0 a 5°C. Uma solução do oxazol-5-carboxilato de etila (1,1 eq, 0,37 parte em peso, 18,1 g, corrigido de acordo com o ensaio de 92% em peso) em tetra-hidro-furano (5 vols, 225 mL) é adicionada no vaso. A suspensão é esfriada para -10°C (+/-5°C) sob uma atmosfera de nitrogênio e uma solução 1 M de bis-(trimetil-silil)-amida de lítio em tetra-hidro-furano (1,80 eq, 4,30 vols, 193 mL) é adicionada durante 15 minutos mantendo a temperatura em -10°C (+/-5°C). A solução resultante é agitada sob uma atmosfera de nitrogênio a -10°C (+/-5°C) por 1 hora. Na solução é adicionado 6-cloro-4-iodo-1-(fenil-sulfonil)-1H-indazol (1,0 eq, 1,0 partes em peso, 45,0 g) e tetrakis(trifenil-fosfina)-paládio (0,03 eq, 0,083 parte em peso, 3,73 g) (a mistura é desgaseificada 3 vezes com vácuo/nitrogênio) e então aquecida para 60°C (+/-3°C) por pelo menos 6 horas. A reação é então checada para a completitude por HPLC. A solução reacional é esfriada para 0°C (+/-3°C) e uma solução de hidreto de diisobutil- alumínio 25% p/p em tolueno (4,0 eq, 6,4 vols, 288 mL) é adicionada mantendo a temperatura em <5°C. A solução reacional é então agitada a 0°C (+/-3°C) por pelo menos 1 hora. A reação é então a reação é então checada para a completitude por HPLC (genérica). A mistura reacional é adicionada em porções em uma solução de ácido cítrico (4,0 eq, 2,0 partes em peso, 90 g) em água (10 vols, 450 mL) a 0°C (+/-5°C) durante ~1h. A solução resultante é agitada a 20°C por 15 minutos, extraída com acetato de etila (10 vols, 450 mL), a camada orgânica é lavada com água (2x3 vols, 2 x 135 mL) e filtrada através de um filtro sinterizado de porosidade 4. A camada orgânica é então evaporada sob pressão reduzida (45°C, 10,0 kPa) para 2 a 3 volumes, dimetil- sulfóxido (10 vols, 450 mL) é adicionado e a solução é evaporada sob pressão reduzida (45°C, 5,0 kPa) para remover todos os traços de outros solventes. Na solução a 45°C é adicionada água (5 vols, 225 mL) em gotas durante 30 minutos, a mistura reacional resultante é esfriada para 20°C durante 3 h e agitada a 20°C por pelo menos 15 h. O produto é filtrado, lavado com uma solução de dimetil-sulfóxido: água (1:2) (2 vols, 90 mL), então lavado com água (3 vols, 135 mL), então seco sob vácuo alto a 60°C (±3°C) para temperatura de sonda constante para dar (2-(6-cloro-1-(fenil-sulfonil)-1H- indazol-4-il)-oxazol-5-il)-metanol como um sólido bege. Intermediário 5 4-[5-(Bromo-metil)-1,3-oxazol-2-il]-6-cloro-1 -(fenil- sulfonil)-1H-indazol

Método A

[00218] {2-[6-Cloro-1-(fenil-sulfonil)-1H-indazol-4-il]-1,3-oxazol-5- il}-metanol (1,626 g, 4,17 mmol) foi dissolvido em dicloro-metano anidro (20 mL) e tetrabrometo de carbono (2,77 g, 8,34 mmol) foi adicionado. A mistura reacional foi esfriada para 0°C e uma solução de trifenil-fosfina (2,188 g, 8,34 mmol) em dicloro-metano (20 mL) foi adicionada em gotas. Após permitir aquecer para RT e agitar por mais 3 h, o solvente foi parcialmente removido em vácuo e a solução foi purificada diretamente por cromatografia em sílica- gel, eluindo com acetato de etila 0-100% em dicloro-metano. As frações apropriadas foram combinadas para dar o composto do título como um sólido creme (1,16 g).

[00219] LCMS (Método B): Rt 3,70 mins, MH+ 454. Método B

[00220] Dibrometo de trifenil-fosfina (20,60 g, 48,8 mmol) foi adicionado em uma suspensão de {2-[6-cloro-1-(fenil-sulfonil)-1H-indazol-4- il]-1,3-oxazol-5-il}-metanol (9,06 g, 23,2 mmol) em dicloro-metano (181 mL) a 0°C. A mistura reacional foi agitada a 0°C até completitude. Água (91 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (91 mL) foram adicionadas e a mistura foi agitada, então separada. A camada aquosa foi extraída com mais dicloro-metano (45 mL) e as camadas orgânicas foram lavadas com água (91 mL). As camadas foram separadas e a camada orgânica foi concentrada até a secura então redissolvida em metanol (136 mL). Após agitar por 30 mins a suspensão branca resultante foi filtrada e o sólido foi seco sob vácuo para dar o composto do título como um sólido quase branco (9,58 g). LCMS (Método D): Rt 2,57min, MH+ 452/454. Método C

[00221] Dibrometo de trifenil-fosfina (1,2 kg) foi adicionado em uma suspensão de {2-[6-cloro-1-(fenil-sulfonil)-1H-indazol-4-il]-1,3-oxazol-5-il}- metanol (544,7 g) em dicloro-metano (3,8 L) agitada sob nitrogênio a 10±3°C. A mistura reacional foi agitada a 10±3°C por 20 min. Água (2,7 L) e solução de bicarbonato de sódio saturada (5,4 L) foram adicionadas e a mistura foi agitada, então separada. A camada aquosa foi extraída com mais dicloro-metano (2,7 L) e as camadas orgânicas foram lavadas com água (2,7 L). As camadas foram separadas e a camada orgânica foi concentrada até a secura então redissolvida em metanol (6,5 L). Após agitar por 5 horas a suspensão branca resultante foi filtrada, lavada com metanol (2 x 1,1 L) e o sólido foi seco sob vácuo a 40±5°C para dar o composto do título como um sólido quase branco (514,0 g). LCMS (Método C): Rt 6,40 min, MH+ 453/455. Método D

[00222] Todos os pesos, volumes e equivalentes são relativos ao (2-(6- cloro-1-(fenil-sulfonil)-1H-indazol-4-il)-oxazol-5-il)-metanol.

[00223] (2-(6-Cloro-1-(fenil-sulfonil)-1H-indazol-4-il)-oxazol-5-il)- metanol (1,0 eq., 1 parte em peso, 34,0 g) e dibrometo de trifenil-fosfina (1,3 eq., 1,32 partes em peso, 45,0 g) são agitados em dicloro-metano (15 vols, 510 mL) a 20 (±3°C) sob uma atmosfera de nitrogênio por 1 h. A reação é então checada para a completitude por HPLC. Assim que completa metanol (0,8 vols, 27,2 mL) é adicionado na reação, com agitação vigorosa solução aquosa de hidrogeno-carbonato de sódio 8% p/p (10 vols, 340 mL) é adicionada em gotas durante 15 minutos (checar pH aquoso >7). A mistura é aquecida para 30°C (±3°C) e agitada junta por 10 minutos, então separada, a camada aquosa é retro-extraída com dicloro-metano (5 vols, 170 mL) e as camadas de dicloro-metano combinadas são lavadas com água (5 vols, 170 mL). A solução de dicloro-metano é então evaporada sob pressão reduzida para um volume de aproximadamente 4 vols. Na solução é adicionado metanol (15 vols, 510 mL) e a solução é evaporada sob pressão reduzida a 26,0 kPa, 20°C para remover o dicloro-metano restante para ~15 vols. A suspensão é então agitada a 20°C por pelo menos 6 h. O sólido é filtrado, lavado com água metanol (2x 1 vols, 2 x 34 mL), seco por sucção por 20 minutos, então seco sob vácuo alto a 30°C (±3°C) para temperatura de sonda constante para dar 5-(bromo-metil)-2-(6-cloro-1-(fenil-sulfonil)-1H-indazol- 4-il)-oxazol como um sólido bege. Intermediário 6a 6-Cloro-4-(5-{[(2R,6S)-2,6-dimetil-4-morfolinil]-metil}-1,3- oxazol-2-il)-1-(fenil-sulfonil)-1H-indazol

[00224] 4-[5-(Bromo-metil)-1,3-oxazol-2-il]-6-cloro-1-(fenil-sulfonil)- 1H-indazol (0,580 g, 1,28 mmol) foi dissolvido em dicloro-metano (5 mL) e (2R,6S)-2,6-dimetil-morfolina (0,317 mL, 2,56 mmol) foi adicionada. A mistura reacional foi agitada na RT por 3 h então o solvente foi removido sob uma corrente de nitrogênio. O sólido amarelo resultante foi dissolvido em dicloro-metano (5 mL) e lavado com água (2x 2,5 mL). As camadas foram separadas (frita hidrofóbica) e a camada orgânica foi evaporada em vácuo para dar o composto do título como um sólido amarelo claro (0,60 g).

[00225] LCMS (Método A): Rt 0,86 mins, MH+ 487.

[00226] 1H NMR (400MHz,Clorofórmio-d) δ (ppm) 8,93 (d, J = 1,0Hz,1H), 8,33 (dd, J = 1,0, 1,5 Hz, 1H), 8,04 - 8,00 (m, 2 H), 7,98 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 7,62 (tt, J = 1,5, 7,5 Hz, 1H), 7,51 (t, J = 7,5 Hz, 2 H), 7,15 (s, 1H), 3,67 (s, 2 H), 3,75 - 3,66 (m, 2 H), 2,79 - 2,72 (m, 2 H), 1,86 (dd, J = 10,5, 11,0 Hz, 2 H), 1,16 (d, J = 6,5 Hz, 6 H).

[00227] Foi similarmente preparado usando a amina apropriada:

Intermediário 6b Método B

[00228] Isopropil-piperazina (165 mL) foi adicionada em uma suspensão de 4-[5-(bromo-metil)-1,3- oxazol-2-il]-6-cloro-1-(fenil-sulfonil)- 1H-indazol (250,1 g) em dicloro-metano (2,5 L) agitada sob nitrogênio a 22±3°C. A mistura reacional foi agitada a 22±3°C por 1,25 horas e então água (2,5 L) foi adicionada, a mistura foi agitada, então separada. A camada aquosa foi extraída com mais dicloro-metano (0,5 L) e as camadas orgânicas foram lavadas com água (2,5 L). As camadas foram separadas e a camada orgânica foi concentrada até a secura, sob vácuo, para dar o composto do título como um sólido amarelo (274,6 g).

[00229] LCMS (Método B): Rt 3,33 min, MH+ 500. Método C

[00230] Todos os pesos, volumes e equivalentes são relativos ao 5- (bromo-metil)-2-(6-cloro-1-(fenil-sulfonil)-1H-indazol-4-il)-oxazol (corrigido de acordo com o ensaio).

[00231] DMSO (7 vols, 70 mL) e isopropil-piperazina (1,5 eq, 0,387 parte em peso, 0,431 vol, 4,31 mL, 3,87 g) são carregados em um vaso limpo. 5-(Bromo-metil)-2-(6-cloro-1-(fenil-sulfonil)-1H-indazol-4-il)-oxazol (1,0 eq, 10 g (9,13 g corrigido de acordo com o ensaio), 1 parte em peso) é adicionado em 5 porções a 20°C durante 1 h e a mistura foi agitada por 1 h. A mistura é aquecida para 50°C e maturada por 1 h, então checada para o consumo de material inicial por HPLC. Trietil-amina (1,2 eq, 0,244 parte em peso, 0,336 vol, 2,44 g, 3,36 mL) é adicionada durante 10 mins e a mistura é maturada por 30 mins, então esfriada para 20°C durante 1 h e adicionalmente maturada por 2 h. A pasta espessa é filtrada e lavada com DMSO (2 x 1,5 vols, 2 x 15 mL) seguido por acetona: água 1:2 (3 x 2 vols, 3 x 20 mL). O sólido resultante é seco por sopro sobre o filtro e é seco a 60°C em vácuo para temperatura / peso constante para dar 2-(6-cloro-1-(fenil-sulfonil)-1H-indazol-4-il)-5-((4- isopropil-piperazin-1-il)-metil)-oxazol como um sólido quase branco.

[00232] Recristalização - Todos os pesos, volumes e equivalentes são relativos ao 2-(6-cloro-1-(fenil-sulfonil)-1H-indazol-4-il)-5-((4-isopropil- piperazin-1-il)-metil)-oxazol. DMSO (7,7 partes em peso, 231 g) é carregado em um vaso limpo seguido por 2-(6-cloro-1-(fenil-sulfonil)-1H-indazol-4-il)- 5-((4-isopropil-piperazin-1-il)-metil)-oxazol (1 parte em peso, 30 g). A batelada é aquecida para 75°C até dissolução completa ser observada e a mistura é filtrada e a linha é lavada com DMSO (1,1 partes em peso, 33 g, pré-aquecida para 75°C). A mistura é esfriada para 20°C durante 2 h, maturada por mais 2 h, e filtrada. O bolo é lavado com DMSO (2,2 partes em peso, 66 g) seguido por 3:1 água: acetona (3x2 vols, 3 x 60 mL). O produto é seco por sopro sobre o filtro e seco a 60°C em vácuo até temperatura / peso constante para dar 2-(6-cloro-1-(fenil-sulfonil)-1H-indazol-4-il)-5-((4- isopropil-piperazin-1-il)-metil)-oxazol como um sólido quase branco. Intermediário 7 6-(1H-lndol-4-il)-4-(5-{[4-(1-metil-etil)-1-piperazinil]- metil}-1,3-oxazol-2-il)-1-(fenil-sulfonil)-1H-indazol

Método A

[00233] Uma solução de bicarbonato de sódio (228,0 g) em água (2,7 L) foi adicionada em uma suspensão de 6-cloro-4-(5-{[4-(1-metil-etil)-1- piperazinil]-metil}-1,3-oxazol-2-il)-1-(fenil-sulfonil)-1H-indazol (271,2 g) e 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-indol (263,2 g, disponível de Apollo Scientific Limited) em isopropanol (2,7 L) agitada sob nitrogênio na temperatura ambiente. Após desgaseificação, via vácuo e passagem de fluxo de nitrogênio, complexo de dinorbornil-fosfina - cloreto de 2'-(dimetil- amino)-2-bifenilil-paládio (II) (29,83 g) foi adicionado. A mistura foi desgaseificada de novo e foi então aquecida para 90±3°C e mantida nesta temperatura por 2 horas. A mistura foi esfriada para 20±5°C durante 25 minutos e maturada nesta temperatura durante a noite. A suspensão resultante foi filtrada, lavada com água (1,35 L) e então transformada em pasta com tolueno (4x1,35 L). O sólido foi seco sob vácuo a 50°C para dar o composto do título como sólido cinza (302,7 g). LCMS (Método B): Rt 3,20 min, MH+ 581. Método B

[00234] Todos os pesos, volumes e equivalentes são relativos ao 2-(6- cloro-1-(fenil-sulfonil)-1H-indazol-4-il)-5-((4-isopropil-piperazin-1-il)-metil)- oxazol.

[00235] Uma mistura de 2-(6-cloro-1-(fenil-sulfonil)-1H-indazol-4-il)- 5-((4-isopropil-piperazin-1-il)-metil)-oxazol (1,0 eq., 1 parte em peso, 10,0 g), 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-indol (1,1 eq., 0,535 parte em peso, 5,35 g) e K3PO4 (1,2 eq., 0,509 parte em peso, 5,09 g) são carregados sequencialmente em um vaso agitado contendo IPA (5 vols, 50 mL) e água (5 vols, 50 mL). KHF2 (2,2 eq., 0,344 parte em peso, 3,44 g) é então adicionado e a mistura aquecida para 75-80°C sob um fluxo de N2 por pelo menos 1 h para desgaseificar. Entrementes, IPA (5 vols, 50 mL) é carregada em um vaso separado e aquecida para refluxar por 1 h sob uma corrente de N2 para desgaseificar. A IPA é esfriada para 20°C e Pd(OAc)2 (0,02 eq., 0,0090 parte em peso, 90,0 mg) e triciclo-hexil-fosfina (0,04 eq., 0,0224 parte em peso, 224 mg) são adicionados sequencialmente e maturados por 1 h até que seja observada uma solução amarela. A solução amarela é então adicionada durante 10 mins no primeiro vaso mantendo a temperatura em 75-80°C e agitada por pelo menos 4 horas. A mistura é esfriada para 20°C e maturada por pelo menos 1 h. A pasta é então maturada e lavada com 1:1 IPA: água (2 vols, 20 mL) seguido por água (2x2 vols, 2 x 20 mL) e seca em vácuo a 60+3°C para temperatura constante para dar 2-(6-(1H-indol-4-il)-1- (fenil-sulfonil)-1H-indazol-4-il)-5-((4-isopropil-piperazin-1-il)-metil)-oxazol como um sólido amarelo. Intermediário 8 Oxazol-5-carboxilato de etila

[00236] Todos os pesos, volumes e equivalentes são relativos ao isocianeto de tolueno-sulfonil-metila.

[00237] Isocianeto de tolueno-sulfonil-metila (TosMIc) (12,31 g, 1 parte em peso, 1 eq) é dissolvido em DCM (61,6 mL, 5 vols) a 0°C sob N2. Em um vaso separado, glioxalato de etila (solução 50% em peso em tolueno, 20,6 g, 20,0 mL, 1,67 partes em peso) é diluído com DCM (61,6 mL, 5 vols) sob N2 e DBU (12,48 g, 12,35 mL, 1,3 eq, 1,01 partes em peso) é adicionada resultando em uma solução púrpura. A segunda solução é adicionada na solução de TosMIc durante 1 h, mantendo a temperatura a 0°C, então checar para completitude por HPLC após mais 20 mins. A reação é inativada pela adição lenta de HCl 2M (10 vols, 123 mL) e a camada de DCM é separada. A camada aquosa é reextraída com DCM (5 vols, 61,6 mL), e as camadas orgânicas combinadas são secas Na2SO4, então evaporadas em Büchi, 25°C, 10,0 kPa para remover DCM e tolueno. Destilada a 1,2 kPa, temperatura de camisa de 105°C, temperatura de vapor de 60-80°C para dar oxazol-5- carboxilato de etila como um óleo incolor. Intermediário 9 4-(4,4,5,5-Tetrametil-1!3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-indol

[00238] Todos os pesos, volumes e equivalentes são relativos ao 4- bromo-indol.

[00239] Bis(pinacolato)-diboro (1,555 partes em peso, 1,20 eq, 31,1 g), acetato de potássio (1,00 parte em peso, 2,0 eq, 20,0 g) e 4-bromo-indol (1,00 parte em peso, 0,64 vols, 1,00 eq, 20,0 g), são carregados sequencialmente sob N2 em um vaso limpo, seco contendo tolueno (5 vols, 100 mL) e lavados para dentro com tolueno (2 vols, 40 mL). A mistura é desgaseificada por vácuo / purga de N2 x3 e aquecida para 100°C. Em um vaso separado limpo, seco, tris(benzilideno-acetona)-dipaládio (0,0234 parte em peso, 0,005 eq, 0,467 g) e triciclo-hexil-fosfina (0,0286 parte em peso, 0,02 eq, 0,572 g) são combinados sob N2 e tolueno (1 vol, 20 mL) é adicionado. A mistura é desgaseificada por vácuo / purga de N2 x3 e agitada por 30 mins. A solução de catalisador é adicionada no vaso de reação e a mistura é aquecida a 95-100°C por pelo menos 3 h, até que todo o 4-bromo-indol seja consumido como indicado pela análise por HPLC. A mistura é esfriada para 60°C e filtrada para remover compostos inorgânicos. O bolo é lavado com tolueno (2x2 vols, 2 x 40 mL). A solução escura é então destilada para 4 vols (80 mL) sob vácuo (50-60°C, 10,0 kPa) e maturada a 60°C por 1 h. A pasta resultante é esfriada para 20°C durante 2 h e heptano (12 vols, 240 mL) é adicionado durante 1 h. A mistura é maturada por pelo menos 1 h e filtrada. O bolo é lavado com tolueno: heptano (1:4, 2 vols, 40 mL) seguido por heptano (2 vols, 40 mL) e seco em vácuo a 50-60°C para temperatura de sonda constante para dar 4- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-indol como um sólido bege.

[00240] Recristalização - Todos os pesos, volumes e equivalentes são relativos ao 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-indol. Isopropanol (6 vols, 4,72 partes em peso, 54,3 kg) é carregado em um vaso limpo seguido por 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-indol (1 parte em peso, 11,5 Kg) e a mistura foi agitada e aquecida para refluxar (82°C) por 40 mins. A batelada é esfriada para 70 ± 3°C e água (6 vols, 6 partes em peso, 69 Kg) é adicionada via bomba peristáltica durante 1 hora mantendo a temperatura a 70 ± 3°C. O conteúdo é maturado a 70 ± 3°C por 60 mins e esfriado para 20°C durante 2 horas. A pasta é maturada a 20°C por pelo menos 6 h e filtrada. O bolo é lavado com 1:1 IPA: água (2 vols, 23 L) e IPA: água 1:3(2 vols, 23 L) e seco em vácuo a 60°C para temperatura constante para dar 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-indol como um sólido branco. Exemplo 1 6-(1H-lndol-4-il)-4-(5-{[4-(1-metil-etil)-1-piperazinil]- metil}-1,3-oxazol-2-il)-1H-indazol

Método A

[00241] 6-Cloro-4-(5-{[4-(1-metil-etil)-1-piperazinil]-metil}-1,3- oxazol-2-il)-1-(fenil-sulfonil)-1H-indazol (97 mg, 0,194 mmol), 4-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-indol (61,3 mg, 0,252 mmol, disponível de Frontier Scientific Europe), cloro-[2'-(dimetil-amino)-2- bifenilil]-paládio-(1R,4S)-biciclo[2.2.1]hept-2-il-[(1S,4R)-biciclo[2.2.1]hept- 2-il]-fosfano (10,87 mg, 0,019 mmol) e fosfato de potássio tribásico (124 mg, 0,582 mmol) foram dissolvidos em 1,4-dioxano (1 mL) e água (0,1 mL) e aquecidos em um reator de microondas Biotage Initiator a 100°C por 30 min. Mais 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxabotolan-2-il)-1H-indol (61,3 mg, 0,252 mmol) e cloro[2'-(dimetil-amino)-2-bifenilil]-paládio-(1R,4S)-biciclo[2.2.1] hept-2-il-[(1S,4R)-biciclo[2.2.1]hept-2-il]-fosfano (5 mg) foram adicionadas e a reação foi aquecida a 110°C por 30 min, então a 140°C por 30 min. O solvente foi removido em vácuo e o resíduo foi purificado por cromatografia em sílica-gel, eluindo com metanol 0-25% em dicloro-metano. As frações apropriadas foram combinadas e concentradas para dar um sólido marrom que foi dissolvido em MeOH: DMSO (1ml, 1:1, v/v) e purificado por MDAP (método A). As frações apropriadas foram concentradas em vácuo para dar o composto do título como um sólido branco (30 mg).

[00242] LCMS (Método A): Rt 0,57 mins, MH+441. Método B

[00243] 6-Cloro-4-(5-{[4-(1-metil-etil)-1-piperazinil]-metil}-1,3- oxazol-2-il)-1-(fenil-sulfonil)-1H-indazol (75,17 g, 150 mmol), 4-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-indol (73,1 g, 301 mmol), bicarbonato de sódio (37,9 g, 451 mmol), e cloro[2'-(dimetil-amino)-2-bifenilil]-paládio- (1R,4S)-biciclo[2.2.1]hept-2-il-[(1S,4R)-biciclo[2.2.1]hept-2-il]-fosfano (8,43 g, 15,03 mmol) foram suspensos em 1,4-dioxano purgado com nitrogênio (1.200 mL) e água (300 mL). O vaso de reação foi posto sob nitrogênio e vácuo alternados cinco vezes com agitação por agitador suspenso, então finalmente posto sob uma atmosfera de nitrogênio e aquecido para 120°C por 2,5 h.

[00244] A mistura reacional foi esfriada para 45°C e então tratada com hidróxido de sódio aquoso 2 M (376 mL, 752 mmol). Após agitar a 45°C durante a noite (~ 13h), a mistura foi esfriada para RT e DCM (600 mL) e água (400 mL) foram adicionadas. As camadas foram separadas e a camada aquosa foi reextraída com DCM: 1,4-dioxano (1:1). Salmoura foi adicionada e a mistura filtrada através Celite, lavando com DCM:1,4-dioxano (1:1). As camadas foram separadas e HCl 2M (1.000 mL) foi adicionado na camada orgânica. A mistura foi de novo filtrada através de Celite lavando com 500 mL de HCl 2M mantendo as lavagens separadas. As camadas de filtrado foram então separadas e a camada orgânica foi lavada com as lavagens ácidas da Celite. As camadas foram separadas e a camada aquosa ácida foi combinada. Esta então foi retro-lavada com 2x500 mL de DCM; cada lavagem exigindo uma filtração através de Celite. A camada aquosa ácida foi então submetida a uma filtração final através de Celite lavando a camada de Celite com 150 mL de HCl 2M.

[00245] A camada aquosa ácida foi transferida para um bécher (5.000 mL) e com agitação vigorosa NaOH 2M foi adicionado para basificar a mistura para pH 10-11. A mistura foi então extraída usando 1,4-dioxano: DCM (1:1) (5 x 500 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre sulfato de magnésio, filtradas para dar uma espuma marrom que foi seca em vácuo a 50°C durante a noite.

[00246] Este material foi dividido em três bateladas e cada uma foi purificada por cromatografia em coluna de fase reversa (3x coluna C18 de 1,9 kg), carregamento em DMF/TFA (1:1, 30 mL) então eluindo com MeCN 340% em Água + TFA 0,25% (Nota: Colunas 2 & 3 usadas em um gradiente diferente começando com MeCN 10%).

[00247] Frações apropriadas foram combinadas, a acetonitrila foi removida em vácuo e a camada aquosa ácida foi basificada para pH10 pela adição de solução aquosa saturada de carbonato de sódio na solução agitada. O sólido resultante foi colhido por filtração, lavado com água então seco em vácuo a 65°C durante a noite para dar o composto do título (28,82 g) como uma espuma marrom clara.

[00248] LCMS (Método A): Rt 0,68 mins, MH+ 441.

[00249] 1H NMR (400MHz,DMSO-d6) δ = 13,41 (br. s., 1H), 11,35 (br. s., 1H), 8,59 (br. s., 1H), 8,07 (d, J= 1,5 Hz, 1H), 7,90 (br. s., 1H), 7,51 - 7,44 (m, 2 H), 7,32 (s, 1H), 7,27 - 7,21 (m, 2 H), 6,61 - 6,58 (m, 1H), 3,73 (br. s., 2 H), 2,64 - 2,36 (m, 9 H), 0,97 - 0,90 (m, 6 H) Método C

[00250] Hidróxido de potássio (145,6 g) foi adicionado em uma suspensão de 6-(1H-indol-4-il)-4-(5-{[4-(1-metil-etil)-1-piperazinil]-metil}- 1,3-oxazol-2-il)-1-(fenil-sulfonil)-1H-indazol (300,7 g) e brometo de cetil- trimetil-amônio (9,3 g) em tetra-hidro-furano (6,0 L) e água (30 mL) agitando sob nitrogênio na temperatura ambiente. A mistura foi aquecida sob refluxo por 17 horas e então foi esfriada para 20-25°C. Acetato de etila (3,0 L) e água (3,0 L) foram adicionadas, agitados por 10 minutos e então separados. A camada orgânica foi extraída com ácido clorídrico (1M, 1 x 3,0 L, 2 x 1,5L) e os extratos ácidos foram combinados e basificados para ~pH 8 pela adição de solução saturada de carbonato de sódio (2,1 L). Após maturar por 30 minutos a suspensão resultante foi filtrada, lavada com água (300 mL) e o sólido foi seco sob vácuo a 65°C para dar o composto do título como um sólido amarelo claro (127,9 g).

[00251] LCMS (Método B): Rt 2,44 min, MH+ 441. Método D

[00252] Todos os pesos, volumes e equivalentes são relativos ao 2-(6- (1H-indol-4-il)-1-(fenil-sulfonil)-1H-indazol-4-il)-5-((4-isopropil-piperazin-1- il)-metil)-oxazol.

[00253] Hidróxido de potássio (0,483 parte em peso, 5 eq, 242 g) é adicionado em uma suspensão de 2-(6-(1H-indol-4-il)-1-(fenil-sulfonil)-1H- indazol-4-il)-5-((4-isopropil-piperazin-1-il)-metil)-oxazol (1 parte em peso, 1 eq, 501 g), e CTAB (cetiltrimetilammonium bromide, brometo de cetil- trimetil-amônio) (0,031 parte em peso, 0,05 eq, 15,5 g) em 2-metil-tetra- hidro-furano (10 vols, 5,01 L) então aquecida sob refluxo (79°C) por pelo menos 4 h até a completitude da reação. A mistura é esfriada para 50°C e lavada a 50°C com água (2x10 vols, 2 x 5 L). A solução é diluída com 2-metil tetra-hidro-furano (5 vols, 2,5 L) e filtrada enquanto a 50°C para remover resíduos de paládio precipitados. A solução orgânica é então destilada (10,0 kPa, 20°C) para 2 vols (1 L), diluída com 2-metil tetra-hidro-furano (1 vol, 0,5 L) e 3-pentanona (3 vols, 1,5 L) e destilada (10,0 kPa, 30°C) para 2 vols (1 L). A solução é de novo diluída com 3-pentanona (3 vols, 1,5 L) e destilada (8,0 kPa, 25°C) para 2 vol (1 L). A solução é de novo diluída com 3- pentanona (3 vols (1,5 L) e destilada (10,0 kPa, 30°C) para 3 vols (1,5 L). A suspensão é esfriada para 20°C durante 1 h e maturada a 20°C por pelo menos 2 h. O produto é filtrado sob vácuo, lavado com 3-pentanona (1 vol, 0,5 L) e seco sob vácuo a 60°C para dar 2-(6-(1H-indol-4-il)-1H-indazol-4-il)-5-((4- isopropil-piperazin-1-il)-metil)-oxazol como um sólido castanho-amarelado. PREPARAÇÃO DO POLIMORFO DE COMPOSTO A

[00254] 6-(1H-lndol-4-il)-4-(5-{[4-(1-metil-etil)-1-piperazinil]-metil}- 1,3-oxazol-2-il)-1H-indazol (25g) foi dissolvido em dimetil-formamida (DMF, 240ml) e filtrado (filtro de porosidade 4). DMF (10ml) foi usada como uma lavagem da linha para lavar a vidraria e filtrada. O material foi cromatografado em 14 x injeções de 17-18 ml e uma injeção final de ca. 10 ml. Frações contendo 6-(1H-indol-4-il)-4-(5-{[4-(1-metil-etil)-1-piperazinil]- metil}-1,3-oxazol-2-il)-1H-indazol foram evaporadas sob vácuo em temperaturas de até 40°C. O sólido resultante foi filtrado, lavado com água (100ml) e seco a 60°C sob vácuo durante a noite.

[00255] Condições da cromatografia: HPLC system Varian SD-1 Coluna: Phenomenex Luna C18 (II), 50 mm x 243 mm Eluente A: acetato de amônio 0,1 M ajustado para pH 8,0 com amônia 0,88 Eluente B: Acetonitrila Detector: 350 nm faixa 12 Injeção: aproximadamente 17-18mL de solução em DMF (1g por 10 mL de DMF)

[00256] NMR concordante com o espectro previsto: NMR (400MHz, DMSO-d6): 13,42 (br s, 1H), 11,35 (br s, 1H), 8,60 (s, 1H), 8,08 (d J = 1,2Hz, 1H), 7,91 (s, 1H), 7,48 (m, 2H), 7,32 (s, 1H), 7,24 (m, 2H), 6,61 (s, 1H), 3,73 (s, 1H), 2,58 (m, 1H), 2,45 (br s, 4H), 0,94 (d J = 6,6Hz, 6H) Singlete largo a 2,45 ppm provavelmente contém um pouco dos prótons alifáticos restantes; contudo a integração provavelmente é inacurada devido à sobreposição com o pico de DMSO (d5). Os prótons alifáticos restantes provavelmente estão sob o pico de DMSO (d5). PREPARAÇÃO DOS SAIS DE COMPOSTO A E SEUS POLIMORFOS Tosilato

[00257] 6-(1H-lndol-4-il)-4-(5-{[4-(1-metil-etil)-1-piperazinil]-metil}- 1,3-oxazol-2-il)-1H-indazol (1,5013 g) foi suspenso em acetonitrila (10ml) e agitado. Separadamente, ácido p-tolueno-sulfônico mono-hidratado (679,5mg, 1,05eq) foi dissolvido em acetonitrila (5ml) e adicionado. Imediatamente um precipitado gomoso formou e foi sonificado e triturado para mobilizar a massa sólida. A suspensão foi semeada com sal de tosilato cristalino e permitida agitar durante a noite. Os sólidos foram isolados e secos sob vácuo a 50°C. NMR concordante com o espectro previsto: NMR (400MHz, DMSO-d6): 13,45 (br s, 1H), 11,37 (br s, 1H), 8,92 (br s, 1H), 8,64 (s, 1H), 8,11 (s, 1H), 7,94 (s, 1H), 7,48 (m, 4H), 7,43 (s, 1H), 7,24 (m, 2H), 7,12 (d J = 8,1Hz, 2H), 6,61 (s, 1H), 3,97 (s, 2H), 3,42 (m, 3H), 3,13 (m, 4H), 2,54 (m, 1H), 2,28 (s, 3H), 1,23 (d J = 6,4Hz, 6H) Os prótons alifáticos não vistos aqui provavelmente estão residindo sob o pico de DMSO (d5).

[00258] A semente de sal de tosilato cristalino pode ser preparada pelo seguinte método: 6-(1H-lndol-4-il)-4-(5-{[4-(1-metil-etil)-1-piperazinil]- metil}-1,3-oxazol-2-il)-1H-indazol (0,1003g) foi suspenso em acetonitrila (1,5ml) e agitado. Separadamente, ácido tolueno-sulfônico mono-hidratado (45,6mg, 1,05eq) foi dissolvido em acetonitrila (0,5ml) e adicionado na suspensão de 6-(1H-indol-4-il)-4-(5-{[4-(1-metil-etil)-1-piperazinil]-metil}- 1,3-oxazol-2-il)-1H-indazol. Um precipitado gomoso formou o qual foi permitido agitar por 10mins. A amostra foi aquecida para aproximadamente 50°C e sonificada com pouco efeito visual. Os sólidos foram manualmente agitados com uma espátula para mobilizá-los e agitados por 4 dias na temperatura ambiente. Os sólidos foram filtrados e secos por sucção. Hemi-fumarato

[00259] 6-(1H-lndol-4-il)-4-(5-{[4-(1-metil-etil)-1-piperazinil]-metil}- 1,3-oxazol-2-il)-1H-indazol (1,5014g) e ácido fumárico (217,2mg, 0,56eq) foram suspensos em IMS (15ml) e agitados na temperatura ambiente durante a noite. A pasta foi filtrada e seca por sucção antes de ser seca sob vácuo a 50°C durante a noite.

[00260] NMR concordante com o espectro previsto: NMR (400MHz, DMSO-d6): 13,47 (br s, 1H), 11,37 (br s, 1H), 8,60 (s, 1H), 8,08 (s, 1H), 7,92 (s. 1H), 7,48 (m, 2H), 7,34 (s, 1H), 7,24 (m, 2H), 6,61 (s. 1H), 6,56 (s, 1H), 3,76 (s, 2H), 2,74 (m, 1H), 2,58 (br s, 7H), 1,00 (d J = 6,6Hz, 6H)

[00261] Singlete largo a 2,58 ppm provavelmente contém prótons alifáticos restantes; contido a integração provavelmente é inacurada devido à sobreposição com o pico de DMSO (d5). Hemi-succinato Método A

[00262] Álcool metilado industrial (IMS, 1ml) foi adicionado em 6- (1H-indol-4-il)-4-(5-{[4-(1- metil-etil)-1-piperazinil]-metil}-1,3-oxazol-2-il)- 1H-indazol (0,1006g) e agitado. Separadamente ácido succínico (28,3mg, 1,05eq) foi dissolvido em IMS (1ml) e então adicionado na suspensão de 6- (1H-indol-4-il)-4-(5-{[4-(1-metil-etil)-piperazinil]-metil}-1,3-oxazol-2-il)- 1H- indazol e agitado na temperatura ambiente durante o fim de semana (ca. 72 h). Os sólidos foram isolados por filtração e lavados com IMS (ca. 1ml) antes de serem secos sob vácuo a 50°C.

[00263] NMR concordante com o espectro previsto: NMR (400MHz, DMSO-d6): 13,42 (br s, 1H), 11,36 (br s, 1H), 8,61 (s, 1H), 8,09 (d J = 1,2Hz, 1H), 7,92 (s, 1H), 7,48 (m, 2H), 7,34 (s, 1H), 7,25 (m, 2H), 6,62 (s, 1H), 3,76 (s, 2H), 2,67 (m, 1H), 2,40 (s, 2H), 0,98 (d J = 6,6Hz, 6H)

[00264] Prótons alifáticos não são vistos aqui porque provavelmente estão residindo sob o pico de DMSO (d5). Método B

[00265] Todos os pesos, volumes e equivalentes são relativos ao 2-(6- (1H-indol-4-il)-1H-indazol-4-il)-5-((4-isopropil-piperazin-1-il)-metil)-oxazol.

[00266] Uma mistura de 2-(6-(1H-indol-4-il)-1H-indazol-4-il)-5-((4- isopropil-piperazin-1-il)-metil)-oxazol (1 parte em peso, 440 g) e ácido succínico (0,14 parte em peso, 0,52 eq, 61,6 g) é agitada em DMSO (2,9 vol, 1,28 L) a 20-25°C. A solução transparente resultante é transferida para um vaso de cristalização via um filtro Domnick Hunter de 5 μm em linha, então a linha é lavada com mais DMSO (0,1 vol, 44 mL). Na solução é adicionado metanol (1 vol, 440 mL) durante 10 mins via o filtro prévio, seguido por uma pasta de hemi-succinato de 2-(6-(1H-indol-4-il)-1H-indazol-4-il)-5-((4- isopropil-piperazin-1-il)-metil)-oxazol (0,005 parte em peso, 2,2 g) em metanol (0,05 vol, 22 mL). A suspensão é maturada a 20-25°C por 3 h, então metanol (3 vols, 1,32 L) é adicionado via o filtro prévio durante ca de 1 h e a pasta é depois maturada nesta temperatura por pelo menos 16 h. Os sólidos resultantes são filtrados, lavados com metanol pré-filtrado (2x10 vols, 2 x 4,4 L) antes de serem secos por sucção por 0,5 h. A batelada é seca em vácuo a 50-55°C para temperatura de sonda constante para dar 2-(6-(1H-indol-4-il)- 1H-indazol-4-il)-5-((4-isopropil-piperazin-1-il)-metil)-oxazol, sal de ácido hemi-succínico, como um sólido quase branco. Teor de água

[00267] O teor de água do sal de hemi-succinato foi determinado por um método de titulação columétrica por Karl Fischer de acordo com USP <921> Water Determination (Method 1c), BP Determination of Water (Method III), Ph. Eur. Water: Micro Determination (Method 2.5.32) e JP Water Determination (Karl Fischer Method). Com base na média de 2 medições, foi observado um teor de água de 1,8% p/p usando a técnica columétrica sólida (forno) com reagente Hydranal Coulomat AK e em uma temperatura de forno de 110°C. DIFRAÇÃO DE RAIOS-X EM PÓ (XRPD) PARA O POLIMORFO DE COMPOSTO A E OS POLIMORFOS DOS SAIS DE COMPOSTO A

[00268] Os dados foram adquiridos em um difratômetro de pó PANalytical X'Pert Pro, modelo PW3040/60 usando um detector X'Celerator. As condições de aquisição foram: radiação: Cu Kα, tensão do gerador: 40 kV, corrente do gerador: 45 mA, ângulo inicial: 2,0° 2θ, ângulo final: 40,0° 2θ, tamanho de degrau: 0,0167° 2θ, tempo por degrau: 31,75 segundos. A amostra foi preparada por montagem de uns poucos miligramas de amostra sobre uma placa de bolacha de silício (sinal de fundo zero), resultando em uma camada fina de pó. Polimorfo de Composto A

[00269] Os dados de XRPD são em Figura 1.

[00270] Os ângulos e espaçamentos-d de XRPD característicos para a forma de estado sólido são resumidos em Tabela 1. as posições de picos foram medidas usando o programa de computador Highscore.

Tabela 1 Polimorfo de o sal de tosilato de Composto A

[00271] Os dados de XRPD são mostrados em Figura 2.

[00272] Os ângulos e espaçamentos-d de XRPD característicos para a forma de estado sólido são resumidos em Tabela 2. As posições de picos foram medidas usando o programa de computador Highscore.

Tabela 2 Polimorfo de o sal de hemi-fumarato de Composto A

[00273] Os dados de XRPD são mostrados em Figura 3.

[00274] Os ângulos e espaçamentos-d de XRPD característicos para a forma de estado sólido são resumidos em Tabela 3. As posições de picos foram medidas usando o programa de computador Highscore.

Tabela 3 Polimorfo de o sal de hemi-succinato de Composto A

[00275] Os dados de XRPD são mostrados em Figura 4.

[00276] Os ângulos e espaçamentos-d de XRPD característicos para a forma de estado sólido são resumidos em Tabela 4. As posições de picos foram medidas usando o programa de computador Highscore.

Tabela 4

Claims

1. Composto, caracterizado pelo fato de ser hemi-succinato de 6-(1H-indol-4-il)-4-(5-{[4-(1-metil-etil)-1-piperazinil]-metil}-1,3-oxazol-2- il)-1H-indazol.

2. Polimorfo do sal de hemi-succinato de 6-(1H-indol-4-il)-4- (5-{[4-(1-metil-etil}-1-piperazinil]-metil}-1,3-oxazol-2-il)-1H-indazol, caracterizado pelo fato de que ele fornece um padrão de XRPD usando Cu Kα como a fonte de radiação compreendendo picos (°2θ) a 7,2 ± 0,2, 13,2 ± 0,2 e/ou 14,0 ± 0,2.

3. Polimorfo de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo de que fornece um padrão de XRPD compreendendo picos substancialmente apresentados como:

4. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de compreender o polimorfo ou sal como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 3 e um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis.

5. Uso do polimorfo ou sal como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato do uso ser na manufatura de um medicamento para utilização no tratamento de um distúrbio mediado pela atividade inapropriada de PI3-cinase, em que o distúrbio é selecionado do grupo consistindo de doenças respiratórias; infecções virais; infecções respiratórias não-virais; doenças alérgicas; doenças autoimunes; doenças inflamatórias; doenças cardiovasculares; malignidades hematológicas; doenças neurodegenerativas; pancreatite; falência múltipla de órgãos; doenças renais; agregação de plaquetas; câncer; motilidade de esperma; rejeição de transplante; rejeição de enxerto; lesões pulmonares; e dor.