EA020683B1 - Способ лечения или уменьшения риска возникновения симптомов или заболеваний у постменопаузных женщин, интравагинальная композиция и суппозиторий, применяемые в нем - Google Patents

Abstract

Обеспечены новые способы лечения и/или уменьшения вероятности приобретенных симптомов или заболеваний, выбранных из недержания мочи, вагинальной атрофии, атрофического вагинита, вагинальной сухости, диспареунии и сексуальной дисфункции у постменопаузных женщин, включающие интравагинальное введение эффективного количества предшественника половых стероидных гормонов, выбранного из группы, состоящей из дегидроэпиандростерона, сульфата дегидроэпиантростерона, андрост-5-ен-3β,17β-диола и 4-андростен-3,17-диона в дозе 0,5-13 мг/день. Кроме того, обеспечены интравагинальные композиции и вагинальные суппозитории, применяемые в способах по изобретению.

Description

Данное изобретение обеспечивает новые способы введения и дозирования дегидроэпиандростерона (ΌΗΕΆ) для использования положительных андрогенных действий (например, в вагинальных слоях 1ат1па ртор1а (собственной пластинке слизистой оболочки) и/или слое ти8си1аг18 (мышечной пластинке слизистой оболочки), без вызывания нежелательных системных эстрогенных эффектов. Кроме ΌΗΕΆ, могут быть использованы другие предшественники половых стероидных гормонов (например, сульфат дегидроэпиандростена, андрост-5-ен-3в,17в-диол и 4-андростен-3,17-дион).

Уровень техники

Известны многие связанные с гормонами терапии. Например, многие обеспечивают половой стероидный гормон эстроген или андроген системно и/или в ткань-мишень. Кроме прямого введения андрогенов и/или эстрогенов предшественники половых стероидных гормонов, которые могут превращаться в эстроген и/или андроген в конкретной ткани, также были использованы для многих состояний. Как андрогены, так и эстрогены могут быть полезными в некоторых контекстах и вредными в других. Это зависит 1п1ег айа от ткани-мишени, конкретных потребностей, представленных пациентом, и степенью, в которой может поражаться ткань, не являющаяся мишенью. Некоторые терапии, хотя они и являются нацеленными, все еще могут иметь нежелательную активность в другом участке в теле (например, локальное введение этого фармацевтического агента приводит, тем не менее, к увеличенному системному присутствию либо фармацевтического вещества, либо одного из его метаболитов. Механизм действия также не всегда является полностью понятным, особенно относительные вклады в него андрогенов и эстрогенов.

Сущность изобретения

Таким образом, целью данного изобретения является использование конкретных доз, композиций и способов введения для лучшего достижения полезных эффектов половых стероидных гормонов и лучшей элиминации их нежелательных побочных эффектов.

В одном аспекте это изобретение обеспечивает способ лечения или уменьшения вероятности возникновения симптомов или заболеваний, выбранных из недержания мочи, вагинальной атрофии, атрофического вагинита, вагинальной сухости, диспареунии и сексуальной дисфункции у постменопаузных женщин, включающий интравагинальное введение эффективного количества предшественника половых стероидных гормонов, выбранного из группы, состоящей из дегидроэпиандростерона, сульфата дегидроэпиандростерона, андрост-5-ен-3в,17в-диола и 4-андростен-3,17-диона в дозе 0,5-13 мг/день. Это терапевтическое количество предшественника половых стероидных гормонов составляет 0,5-6,5 мг/день и менее. Предшественник половых стероидных гормонов вводят посредством препарата интравагинальной рецептуры выбранного из группы, состоящей из крема, лосьона, геля, мази, вагинной овулы, суппозитория и кольца. Предшественник половых стероидных гормонов, при необходимости, комбинируют с селективным модулятором эстрогеновых рецепторов (8ΕΚΜ), чтобы доставлять их последовательно или одновременно.

В другом аспекте изобретение обеспечивает способ лечения или уменьшения вероятности возникновения симптомов или заболеваний, выбранных из группы, состоящей из недержания мочи, вагинальной атрофии, атрофического вагинита, вагинальной сухости, диспареунии и сексуальной дисфункции у постменопаузных женщин, включающий интравагинальное введение (а) предшественника половых стероидных гормонов, выбранного из группы, состоящей из дегидроэпиандростерона, сульфата дегидроэпиандростерона, андрост-5-ен-3в,17в-диола и 4-андростен-3,17-диона в дозе 0,5-13 мг/день, а также введение (Ь) терапевтически эффективного количества 8ΕΚΜ, причем указанный предшественник полового стероидного гормона и 8ΚΚΜ вводится последовательно или одновременно, как часть комбинированной терапии.

В этом аспекте 8ΕΚΜ имеет следующую химическую структуру:

Терапевтическое количество предшественника половых стероидных гормонов может составлять 0,5-6,5 мг/день, и предшественник половых стероидных гормонов вводят посредством препарата интравагинальной рецептуры, выбранного из группы, состоящей из крема, лосьона, геля, мази, вагинной овулы, суппозитория и кольца пластыря.

Предпочтительно предшественником в этих аспектах изобретения является дегидроэпиандростерон. Терапевтическое количество предшественника половых стероидных гормонов составляет 0,5-3,25 мг/день и менее.

В другом аспекте изобретение обеспечивает способ лечения или уменьшения вероятности возник- 1 020683 новения симптомов или заболеваний, выбранных из недержания мочи, вагинальной атрофии, атрофического вагинита, вагинальной сухости, диспареунии и сексуальной дисфункции у постменопаузных женщин, включающий интравагинальное введение предшественника половых стероидных гормонов дегидроэпиандротерона в дозе 0,5-13 мг/день.

Все указанные выше аспекты изобретения предусматривают, что предшественник половых стероидных гормонов вводят в форме единичной дозы, которая может содержать порцию крема, геля, раствора, лосьона или мази.

В другом аспекте изобретение обеспечивает интравагинальную фармацевтическую композицию для применения в способах по изобретению, содержащую 0,5-13 мг предшественника половых стероидных гормонов, выбранного из группы, состоящей из дегидроэпиандростерона, сульфата дегидроэпиандростерона, андрост-5-ен-3в,17в-диола и 4-андростен-3,17-диона и фармацевтически приемлемый эксципиент, применяемый для интравагинального введения, разбавитель или носитель.

В этой интравагинальной фармацевтической композиции количество предшественника половых стероидных гормонов составляет 3,0-13 мг и в ней эксципиент, разбавитель или носитель, выбраны из группы, состоящей из чистых или смешанных природных или полусинтетических три-, ди- или моноглицеридов насыщенных, ненасыщенных или гидрогенизированных жирных кислот; масла, пальмового, пальмоядрового масла, частично гидрогенизированного хлопкового и кокосового масла и их триглицеридных производных; гидрогенизированных жирных спиртов и эфиров; полиоксистеарата; перегруппированных гидрогенизированных растительных масел; эвтектических смесей моно-, ди-, триглицеридов, полученных из природных масел, сложных триглицеридных эфиров; Твина 61; масла какао, фармацевтически приемлемых жирноосновных эксципиентов и их комбинации.

Интравагинальную фармацевтическую композицию выполняют в форме крема, геля, раствора, лосьена или мази, и она адаптирована для разделения на одну или более порций, содержащих единичную дозу.

Интравагинальная фармацевтическая композиция может дополнительно содержать терапевтически эффективное количество 8ЕКМ.

В указанной интравагинальной фармацевтической композиции предшественник половых стероидных гормонов представляет собой предпочтительно дегидроэпиандростерон, а 8ЕКМ - аколбифен.

В другом аспекте изобретение обеспечивает вагинальный суппозиторий для применения в способах по изобретению, содержащий предшественник половых стероидных гормонов, выбранный из группы, состоящей из дегидроэпиандростерона, сульфата дегидроэпиандростерона, андрост-5-ен-3в,17в-диола и

4- андростен-3,17-диона, и фармацевтически приемлемый применимый для интравагинального введения эксципиент, причем указанный суппозиторий содержит 0,5-13 мг указанного предшественника половых стероидных гормонов.

Этот вагинальный суппозиторий предпочтительно содержит 6,5 мг предшественника половых стероидных гормонов, более предпочтительно 3,25 мг предшественника половых стероидных гормонов.

Содержание предшественника половых стероидных гормонов в вагинальном суппозитории находится в интервале 3-13 мг, а сам суппозиторий может содержать липофильный эксципиент.

Вагинальный суппозиторий, содержащий 3-13 мг предшественника половых стероидных гормонов и эксципиент, может содержать сложные эфиры насыщенных жирных кислот. Эксципиент предпочтительно является липофильным эксципиентом. Предпочтительно эксципиент содержит сложные эфиры насыщенных жирных кислот.

Предпочтительно, когда вагинальный суппозиторий содержит 6,5 мг предшественника половых стероидных гормонов и эксципиент, содержащий сложные эфиры насыщенных жирных кислот.

Изобретение обеспечивает вагинальный суппозиторий, содержащий 3,25 мг предшественника половых стероидных гормонов и эксципиент, содержащий сложные эфиры насыщенных жирных кислот. В частном варианте изобретения эксципиентом является ^νίίορδοί Н-15.

В другом аспекте изобретение обеспечивает 1,3 мл вагинального суппозитория для применения в способах по изобретению, содержащего 6,5 мг предшественника половых стероидных гормонов, выбранного из группы, состоящей из дегидроэпиандростерона, сульфата дегидроэпиандростерона, андрост5- ен-3в,17в-диола и 4-андростен-3,17-диона, и νίΐβρδοί Н-15 в качестве эксципиента.

В другом аспекте изобретение обеспечивает вагинальный суппозиторий для применения в способах по изобретению, содержащий дегидроэпиандростерон и фармацевтически приемлемый эксципиент, применимый для интравагинального введения, в котором содержание дегидроэпиандростерона составляет 0,5-13 мг.

Предпочтительно этот вагинальный суппозиторий содержит 6,5 мг дегидроэпиандростерона, особенно предпочтительно, когда содержание дегидроэпиандростерона составляет 3,25 мг.

Предпочтителен вагинальный суппозиторий, в котором содержание дегидроэпиандростерона составляет 3-13 мг, особенно предпочтительно, когда он содержит и липофильный эксципиент, в частности включающий сложные эфиры насыщенных жирных кислот.

Предпочтителен вагинальный суппозиторий, содержащий 6,5 мг дегидроэпиандростерона и эксци- 2 020683 пиент, содержащий сложные эфиры насыщенных жирных кислот.

Также предпочтителен вагинальный суппозиторий, содержащий 3,25 мг дегидроэпиандростерона и эксципиент, содержащий сложные эфиры насыщенных жирных кислот. В частном случае вагинальный суппозиторий содержит в качестве эксципиента ^νίίορκοί Н-15.

В другом аспекте изобретение обеспечивает вагинальный суппозиторий для применения в способах по изобретению, содержащий 6,5 мг дегидроэпиандростерона и νίΐβρδοί Н-15 в качестве эксципиента.

В другом аспекте изобретение обеспечивает 1,3 мл вагинальный суппозиторий для применения в способах по изобретению, содержащий 6,5 мг дегидроэпиандростерона и νίΐβρκοί Н-15 в качестве эксципиента.

В другом аспекте изобретение обеспечивает вагинальный суппозиторий для применения в способах по изобретению, содержащий 3,25 мг дегидроэпиандростерона и νίΐβρκοί Н-15 в качестве эксципиента.

В другом аспекте изобретение обеспечивает 1,3 мл вагинального суппозитория для применения в способах по изобретению, содержащего 3,25 мг дегидроэпиандростерона и νίΐβρκοί Н-15 в качестве эксципиента.

В другом аспекте изобретение обеспечивает вагинальный суппозиторий для применения в способах по изобретению, содержащий 3-13 мг дегидроэпиандростерона и νίΐβρκοί Н-15 в качестве эксципиента.

Краткое описание чертежей

Фиг. 1 показывает уровни в сыворотке ЭНЕЛ и 5-диола в день 1 или день 7 у 40-75-летних постменопаузных женщин после ежедневного введения вагинальных суппозиториев, содержащих 0, 0,5, 1,0 или 1,8% ЭНЕЛ. Данные выражены в виде средних величин ± §ЕМ (п=9 или 10).

Фиг. 2 показывает уровни в сыворотке Тесто и ЭНТ в день 1 или день 7 у 40-75-летних постменопаузных женщин после ежедневного введения вагинальных суппозиториев, содержащих 0, 0,5, 1,0 или 1,8% ЭНЕЛ (п=8). Данные выражены в виде средних величин ± §ЕМ (п=8-9). Уровни Тесто (тестостерона) из одного пациента в группе плацебо исключали вследствие необъяснимых высоких уровней Тесто, не отраженных в случае любого другого стероида.

Фиг. 3 показывает уровни в сыворотке Е₁ и Е₂ в день 1 или день 7 у 40-75-летних постменопаузных женщин после ежедневного введения вагинальных суппозиториев, содержащих 0, 0,5, 1,0 или 1,8% ЭНЕЛ. Данные выражены в виде средних величин ± §ЕМ (п=9 или 10).

Фиг. 4 показывает уровни в сыворотке Е₁-§ и ЭНЕЛ-§ в день 1 или день 7 у 40-75-летних постменопаузных женщин после ежедневного введения вагинальных суппозиториев, содержащих 0, 0,5, 1,0 или 1,8% ЭНЕЛ. Данные выражены в виде средних величин ± §ЕМ (п=9 или 10).

Фиг. 5 показывает уровни в сыворотке 4-диона и ΛΌΤ-0 в день 1 или день 7 у 40-75-летних постменопаузных женщин после ежедневного введения вагинальных суппозиториев, содержащих 0, 0,5, 1,0 или 1,8% ЭНЕЛ. Данные выражены в виде средних величин ± §ЕМ (п=9 или 10).

Фиг. 6 показывает уровни в сыворотке 3а-диол-30 и 3а-диол-170 в день 1 или день 7 у 40-75летних постменопаузных женщин после ежедневного введения вагинальных суппозиториев, содержащих 0, 0,5, 1,0 или 1,8% ЭНЕЛ (п=8). Данные выражены в виде средних величин ± §ЕМ (п=8-10).

Фиг. 7 показывает среднюю 24-часовую концентрацию в сыворотке (ЛИС_0-24ч/24) ЭНЕЛ. 5-диола, ПНЕЛ-§, 4-диона, Тесто и ЭНТ, измеренную в день 1 или день 7 у 40-75-летних постменопаузных женщин после ежедневного введения вагинальных суппозиториев, содержащих 0, 0,5, 1,0 или 1,8% ЭНЕЛ. Данные выражали в виде средних величин ± §ЕМ (п=8-10). Уровни Тесто из одного пациента в группе плацебо исключали (п=8 в этой группе). Концентрации стероидных гормонов в сыворотке, измеренные у 30-35-летних постменопаузных женщин, добавляли в качестве ссылки. Данные выражали в виде среднего (п=47) с указанием 5-го и 95-го процентилей (пунктирные линии). * р <0,05, ** р <0,01, экспериментальных данных (день 7) против плацебо (день 7).

Фиг. 8 показывает среднюю 24-часовую концентрацию в сыворотке (ЛИС_0-24ч/24) ΛΌΤ-0, 3а-диол30, 3а-диол-170, Е₁, Е₂ и Е₁-§, измеренную в день 1 или день 7 у 40-75-летних постменопаузных женщин после ежедневного введения вагинальных суппозиториев, содержащих 0, 0,5, 1,0 или 1,8% ЭНЕЛ. Данные выражали в виде средних величин ± §ЕМ (п=9 или 10). Концентрации стероидных гормонов в сыворотке, измеренные у 30-35-летних постменопаузных женщин, добавляли в качестве ссылки. Данные выражали в виде среднего (п=47) с указанием 5-го и 95-го процентилей (пунктирные линии). * р <0,05, ** р <0,01, экспериментальных данных (день 7) против плацебо (день 7).

Фиг. 9 показывает изменения уровней в сыворотке суммы андрогенных метаболитов ΛΌΤ-0, 3αΌίοΙ-170 у постменопаузных женщин с вагинальной атрофией после интравагинального введения увеличивающихся доз ЭНЕЛ. Эти данные выражены в виде процента уровней в сыворотке одних и тех же стероидных метаболитов, наблюдаемых у молодых взрослых (30-35-летних), имеющих менструальный цикл предменопаузных женщин. Уровень превращения получают делением суммы уровней в сыворотке ΛΌΤ0, 3а-диол-30 и 3а-диол-170 у женщин, которые получали дозы 0,5, 1,0 и 1,8% ПНЕЛ, на величины, обнаруживаемые у предменопаузных женщин (данные из ЬаЪйе с1 а1., 2006). Изменения ЭНЕЛ в сыворотке в сравнении со здоровыми предменопаузными женщинами показаны также в качестве сравнения для показа эффективности превращения и фоновых уровней андрогенных метаболитов и ЭНЕЛ соответ- 3 020683 ственно.

Фиг. 10 показывает индекс зрелости (А) вагинальный рН (В), измеренные в день 1 и день 2 у 40-75летних постменопаузных женщин после ежедневного введения вагинальных суппозиториев, содержащих 0, 0,5, 1,0 или 1,8% ΌΗΕΑ. Данные выражали в виде средних величин ± δΕΜ (п=9 или 10). * р <0,05, ** р <0,01, данных в день 7 против данных в день 1.

Фиг. 11 показывает временной ход в сыворотке дегидроэпиандростерона (ΌΗΕΑ) (А) и андрост-5ен-3в,17в-диола (5-диола) (В) после единственного перорального введения двух капсул по 50 мг ΌΗΕΑ или применения 4 г 10%-го крема или геля ΌΗΕΑ для постменопаузных женщин.

Фиг. 12 показывает временной ход в сыворотке андростендиона (4-диона) (А) и тестостерона (В) после единственного перорального введения двух капсул по 50 мг ΌΗΕΑ или применения 4 г 10%-го крема или геля ΌΗΕΑ для постменопаузных женщин.

Фиг. 13 показывает временной ход в сыворотке эстрона (Ε^ (А) и 17β-эстрадиола (Ε₂) (В) после единственного перорального введения двух капсул по 50 мг ΌΗΕΑ или применения 4 г 10%-го крема или геля ΌΗΕΑ для постменопаузных женщин.

Фиг. 14 показывает временной ход в сыворотке сульфата дегидроэпиандростерона (ΌΗΕΑ-δ) (А) и сульфата эстрона (Ε|-δ) (В) после единственного перорального введения двух капсул по 50 мг ΌΗΕΑ или применения 4 г 10%-го крема или геля ΌΗΕΑ для постменопаузных женщин.

Фиг. 15 показывает временной ход в сыворотке андростеронглюкуронида (ΑΌΤ-Ο) (А) и андростонЗа,17в-диолглюкуронида (3α-άίο1-Ο) (В) после ежедневного перорального введения двух капсул по 50 мг ΌΗΕΑ или применения 4 г 10%-го крема или геля ΌΗΕΑ для постменопаузных женщин.

Фиг. 16 показывает временной ход в сыворотке дегидроэпиандростерона (ΌΗΕΑ) (А) и андрост-5ен-3в,17в-диола (5-диола) (В) после ежедневного перорального введения двух капсул по 50 мг ΌΗΕΑ или применения 4 г 10%-го крема или геля ΌΗΕΑ для постменопаузных женщин. Измерения выполняли в день 14 введения доз.

Фиг. 17 показывает временной ход в сыворотке андростендиона (4-диона) (А) и тестостерона (В) после ежедневного перорального введения двух капсул по 50 мг ΌΗΕΑ или применения 4 г 10%-го крема или геля ΌΗΕΑ для постменопаузных женщин. Измерения выполняли в день 14 введения доз.

Фиг. 18 показывает временной ход в сыворотке эстрона (Е|) (А) и эстрадиола (Е₂) после ежедневного перорального введения двух капсул по 50 мг ΌΗΕΑ или применения 4 г 10%-го крема или геля ΌΗΕΑ для постменопаузных женщин. Измерения выполняли в день 14 введения доз.

Фиг. 19 показывает временной ход в сыворотке сульфата дегидроэпиандростерона (ΌΗΕΑ-δ) (А) и сульфата эстрона (Εχ-δ) (В) после ежедневного перорального введения двух капсул по 50 мг ΌΗΕΑ или применения 4 г 10%-го крема или геля ΌΗΕΑ для постменопаузных женщин. Измерения выполняли в день 14 введения доз.

Фиг. 20 показывает временной ход в сыворотке андростеронглюкуронида (ΑΌΤ-Ο) (А) и андрост-5ен-3в,17в-диол-О (3α-άίο1-Ο) (В) после ежедневного перорального введения двух капсул по 50 мг ΌΗΕΑ или применения 4 г 10%-го крема или геля ΌΗΕΑ для постменопаузных женщин. Измерения выполняли в день 14 введения доз.

Фиг. 21 показывает отношения величин ЛиС_0-2._1ч ΌΗΕΑ и его метаболитов в день 14 введения доз в сравнении с фоновыми величинами перед обработкой. Соответствующие численные величины можно найти в табл. 5.

Фиг. 22 показывает действие ежедневного интравагинального применения 0,0, 0,25, 0,5 и 1,0% ΌΗΕΑ (Рга§1егопе) в течение 2, 4, 8 и 12 недель на процент вагинальных парабазальных клеток у постменопаузных женщин. Данные выражены в виде средних величин ± δΕΜ.

Фиг. 23 показывает действие ежедневного интравагинального применения 0,0, 0,25, 0,5 и 1,0% ΌΗΕΑ (Рга§1егопе) в течение 2, 4, 8 и 12 недель на процент вагинальных поверхностных клеток у постменопаузных женщин. Данные выражены в виде средних величин ± δΕΜ.

Фиг. 24 показывает действие ежедневного интравагинального применения 0,0, 0,25, 0,5 и 1,0% ΌΗΕΑ (Рга§1егопе) в течение 2, 4, 8 и 12 недель на вагинальный рН у постменопаузных женщин. Данные выражены в виде средних величин ± δΕΜ.

Фиг. 25 показывает действие ежедневного интравагинального применения 0,0, 0,25, 0,5 и 1,0% ΌΗΕΑ (Рга§1егопе) в течение 2, 4, 8 и 12 недель на изменение тяжести симптома вагинальной атрофии, оцениваемого самими женщинами как наиболее беспокоящий симптом. Величины сравнивают относительно дня 1 и выражают в виде средних величин ± δΕΜ.

Фиг. 26 показывает действие ежедневного интравагинального применения 0,0, 0,25, 0,5 и 1,0% ΌΗΕΑ (Рга§1егопе) в течение 2, 4, 8 и 12 недель на изменение вагинальных секретов, оцениваемое при вагинальном обследовании. Данные выражены в виде средних величин ± δΕΜ.

Фиг. 27 показывает действие ежедневного интравагинального применения 0,0, 0,25, 0,5 и 1,0% ΌΗΕΑ (Рга§1егопе) в течение 2, 4, 8 и 12 недель на изменение цвета вагины, оцениваемое при вагинальном обследовании. Данные выражены в виде средних величин ± δΕΜ.

Фиг. 28 показывает действие ежедневного интравагинального применения 0,0, 0,25, 0,5 и 1,0%

- 4 020683

ΌΗΕΑ (Ргаз1егопе) в течение 2, 4, 8 и 12 недель на изменение целостности вагинального эпителия, оцениваемое при вагинальном обследовании. Данные выражены в виде средних величин ± 8ΕΜ.

Фиг. 29 показывает действие ежедневного интравагинального применения 0,0, 0,25, 0,5 и 1,0% ΌΗΕΑ (Ргаз1егопе) в течение 2, 4, 8 и 12 недель на изменение толщины вагинального эпителия, оцениваемое при вагинальном обследовании. Данные выражены в виде средних величин ± 8ΕΜ.

Фиг. 30 показывает средние 24-часовые концентрации в сыворотке (ЛИС_0-24ч/24) ΌΗΕΆ, 5-диола, ΌΗΕΑ-δ, Ε₁, Ε₂ и Ε₁-δ, измеряемые в дни 1 и 7 после введения один раз в день влагалищной овулы (лекарственной формы), содержащей 0,5% ΌΗΕΆ. Данные выражены в виде средних величин ± 8ΕΜ (п=10). Концентрации в сыворотке стероидных гормонов, измеренные у 30-35-летних предменопаузных женщин (п=47), а также у 55-65-летних постменопаузных женщин (п=369), добавляли в качестве ссылочных данных, которые выражали в виде средних величин и 5-го и 95-го процентилей (пунктирные линии). * р <0,05, ** р <0,01, экспериментальных данных против фона. (Данные из ЬаЪпе, Сизап е! а1. 2008).

Фиг. 31 показывает средние 24-часовые концентрации в сыворотке (ЛИС_0-24ч/24) 4-диона, тестостерона, ΌΗΤ ΑΌΤ-С, 3а-диол-3С и 3а-диол-17С, измеренные в дни 1 и 7 после введения один раз в день влагалищной овулы (лекарственной формы), содержащей 0,5% ΌΗΕΑ. Данные выражены в виде средних величин ± 8ΕΜ (п=10). Концентрации в сыворотке стероидных гормонов, измеренные у 30-35-летних предменопаузных женщин (п=47), и у 55-65-летних постменопаузных женщин (п=369), добавляли в качестве ссылочных данных, которые выражали в виде средних величин и 5-го, и 95-го процентилей (пунктирные линии). * р <0,05, ** р <0,01, экспериментальных данных против фона. (Данные из ЬаЪпе, Сизап е! а1. 2008).

Подробное описание изобретения

Ниже представлен перечень статей, обсуждаемых здесь в виде цитирования в краткой форме.

АПеп, Еоуд V Дг, ν/опДеп Ώεηηΐδ В, апд М1пк ВП1, ΐη Зиррозйопез, СЬар1ег 3 радез 27-49, РиЬИзЬед Ьу Ле РФагтасеиЕса! Ргезз, Ьопёоп, ТДК, 2008,

АгсЬег, ϋ. р, (2007). Огозрпепопе-соШашпд 1югтопе Легару Рог розйпепораиза1 ν/отеп. РегзресЕуе оп сиггеп! да!а. 1 Еергод Мед 52(2 8ирр1): 159-64.

АуТоп, К., А., О. М. ОагИп§, е! а1. (1996). А сотрагадуе з1иду οί заГе1у апд еРйсасу οί сопдпиоиз Ιον/ дозе оез!гадю1 ге!еазед Йот а уа§та! пп§ сотрагед ννίίΐι соп)и§а!ед едите оезггодеп уа§та1 сгеат ίη Ле 1геа1теп1 οί роз1тепораиза1 иго§еш1а1 а1горЬу. Вг I 0Ьз1е1 Оупаесо! 103(4); 351-8.

ВасЬтапп, О., К.. А. ЬоЬо, е! а1, (2008), ЕРПсасу οί Ιονζ-дозе ез1гад1о! уа§та11аЫе1з ΐη 1Ъе 1геа!теп1 οί а1гор!ис уа§тШз: а гапдоплгед соп!го11ед 1па1. ОЬз1е4 Оупесо1 111(1): 6776.

ВасЬтапп, О. А., Μ. Νοίοίονϊίζ, е! а1. (1992). Ьопд-1егт поп-Ьогтопа1 иеа1тепг οί уадта дгупезз. ί СЬп Ргас! Зех 8.

Вакег, V. Е. апд Е. В, 1а(Ге (1996), СНтса1 изез οί апйезПодепз. ОЬз!е! Оупесо!

Зигу 51:45-59.

Ε. Е. ВаиНеи, О. ТЬотаз, 3. Ьедгат, Ν. ЬаЫои, М. Ео§ег, В, ОеЪиие, V. Раисоипаи,

Е. СНгагд, М.Р, Негуу, Р. Еайиг, М.С. Ееаид, А, Мокгапе, Н. РНН-Репапд1, С. ТпуаНе, О, де ЕасЬатеге, 3, Иоиуеаи, В. ЕакоТо-Апзоп, ЕС. ЗоиЬегЫеПе, Е Еа^зоп, Υ. Ее Войс, А. Еаупаид, X. СНгегд апд Р. Рогеие, ОеЬудгоер1апдгоз1егопе (ЭНЕА), ЭНЕА зиНате, апд адтд: сопМЬидоп о£ Ле ЕНЕАде 81иду ίο а зосюЬютесНса! 1ззие, Ргос. №ΐ1. Асад. ЗсЕ Е1.5.А. 97

- 5 020683 (2000), рр. 4279-4284.

Вахепбак, Ρ. Μ., М. б. йееб, е( а1. (1981). 1паЫШу οί Ьитап епботе!пит ог туотейбит ΐο аготабге апбгоз(спебюпе. I 3!его1б ВюсЬет 14(3): 305-6.

Векпдег, В. Сапбаз, А. Оироп!, В, Сизап, Р. О1атопб, б.Ь. Оотег апб Р. ЬаЬпе, СЬапдез ϊη зегит сопсеп!га!юпз οί соп)и§а!еб апб ипсогуидагеб з1его!бз ΐη 40- 1о 80- уеаг-о1б теп, 1, С1т. Епбосппок Ме!аЬ. 79 (1994), рр. 1086-1090.

Ве1апдег, О. РеИейег, Р. ЬаЬпе, О. ВагЬкг апб 3. СЬошпагб, 1пасйуа!юп οί апбгодепз Ьу иОР-д1исигопозу11гапз£егазе еп/утсз ΐη Ьитапз, Тгепбз Епбосппок МегаЬ. 14 (2003), рр. 473-479.

Вега1, V, (2003). Вгеаз! сапсег апб Ьотаюпе-гер1асетеп! (Ьегару ΐη (Ье МННоп ХУотеп 3(ибу. Ьапсе! 362(9382): 419-27.

Вега1, V., Ώ. ВиП, е1 ак (2005). Епботе!па1 сапсег апб Ьогтопе-гер1асетеп( Легару тЛе Μΐΐΐΐοη Ψοηιεη Злбу. Ьапсе! 365(9470): 1543-51.

Вегдег, Ь., М. Е1-А1Гу, е! ак (2005). Ейес!з οί беЬубгоер1апбгоз!егопе, Ргетапп апб Асо1Ы£епе оп ЛзЮтогрЬокду апб зех з!его«б гесер!огз ΐη Ле га! уадта. б 8(его1б ВюсЬет Μοί ΒίοΙ 96(2):201-15.

Ви1ип, 3. Ε., Ζ, Είη, е! а1. (2005). К.е§и1а!1оп οί агота!азе ехргеззюп ΐη езйодепгезропзАе Ьгеаз! апб и!еппе бгзеазе: £гот ЬепсЬ (о !геа!теп(. РЬагтасо! Кеу 57(3): 359-83.

ЬЕ. Виз!ег, Р.К.. Саззоп, А. В. ЗйаидЬп, ϋ. Эа1е, Е. 8. ЫтзЮ!, Ν. Скатол апб О. Е. АЪгаЬат, Роз!тепораиза1 з!его1б гер1асетеп! \νΐΛ писгошхеб беЬубгоер1апбгоз!егопе: ргеНттагу ога1 ЪюауаИаЪНЬу апб бозе ргорогй опаку з!ибкз, Ат. б. ОЬз!е!. Супесок 166 (1992), рр. 1163-1168 Лзсизяоп 1168-1170.

СЫеЬои'зкл, К. Т., 8. Ь. Непбпх, е! а1. (2003). ЬгЙиепсе οί езкодеп р1из ргодезбп оп Ьгеаз! сапсег апб таттодгарЬу ΐη ЬеаЬЬу роз!тепораиза1 ν/отеп: Ле ЗУотеп'з Неа1Л НпНаЙуе Капбогшгеб ТпаЬ баша 289(24): 3243-53.

Б. Ь. Со1етап, Е.Н, ЬеЬег апб КЛУ. ЗсЬтгег, ТЬегареибс еЙес(з οί беЬубгоергапбгоз!егопе (ϋΗΕΑ) ΐη б1аЪе!к тгсе, О1аЬе!ез 31 (1982), рр. 830-833.

Οοΐάΐΐζ, О. А., К. М. Едп, е! ак (1993). Ногтопе гер1асетеп! Лгару апб пзк οί Ьгеаз! сапсег: гезиНз £гот ергбетюкдк з!ибкз. Ат. б. ОЬз!е!. Супесок 168: 1473-1480.

ΰοΐάίΐζ, О. А., 8. Е. Напктзоп, е! ак (1995), ТЬе изе οί езйодепз апб ргодезйпз апб Ле пзк оЕЪгеаз! сапсег ΐη роз!тепораиза1 ^уотеп. Ν. Еп§1. б. Меб. 332: 1589-1593.

СоПаЪогабуе Огоир оп Ногтопа1 Рас!огз ΐη Вгеаз! Сапсег (1997), Вгеаз! сапсег апб Ьогтопе гер1асетеп! Легару: СоПаЪогабуе геапа1уз1з о£ ба!а £гот 51 ер1бетю1одка1 з!ибкз о£ 52,705 хуотеп \νϊΛ Ьгеаз! сапсег апб 108411 ууотеп ибЛои! Ьгеаз! сапсег. Ьапсе! 350(9084): 1047-59.

- 6 020683

Соггао, О., А. гашЬоп, е! ак (2008). Мепораизе Ногтопе гер1асетеп1 Легару апй сапсег пзк: ап НаПап гесогй Ппкаде туезНдаНоп. Апп Опсо1 19(1): 150-5.

СоидЫт, 8. 8., Α. Οΐυκίοζζΐ, е! а1. (2000). А те!а-апа1уз13 οί езкодеп гер1асетеп! Легару апс! пзк оГеркНеНа1 оуапап сапсег. 1 СНп ЕрЫетю1 53(4): 367-75,

ОеиксН, 8., К. Оззоусзк!, е! ак (1981). Сотрапзоп ЪеГлуееп йедгее οί зуз1еггпс аЪзогрНоп οί уадтаПу апД огаНу айгттзЛгей езкодепз а! йНГегеп! дозе 1еуе1з ΐη розкпепораиза! 'лютен. Ат ί ОЬз1е1 Оупесо! 139(8): 967-8.

Ое\у, I. Е., В. 0.1Угеп, е1 ак (2003). А соНог! зЛйу οί 1ор1са1 уадта! езкодеп Легару ΐη \уотеп ргеУ1оиз1у кеа!ей Гог Ъгеазг сапсег. СНтасЛпс 6(1): 45-52.

Р. Б1атопд, Ь. Сизап, IX. Оотег, А. Ве1апдег апй Р. ЬаЬпе, Ме1аЬоНс еГГес!з οί 12топЛ регси!апеоиз ΩΗΕΑ гер1асетеп1 Легару ΐη розкпепораиза1 \уотеп, ί. Епйосппок 150 (1996), рр. 343-850.

Оида1, К.., К. Нез1а, е1 ак (2000). Сотрапзоп οί изеГЛпезз οί езка<Но1 уадта11аЫе1з апй сз!по1 уадконез Гог кеа1тсп1 οί уадша1 акорНу. Ас1а ОЬзГе! Оупесо1 Зсапй 79(4): 293-7.

Епд1ипй, Ц. Е. апй Ε. Ω. 1оНапззоп (1978). Р1азта 1еуе1з οί оезкопе, оезкайю! апй допайокорЫпз ΐη розкпепораиза! ν/отеп апег ога1 апй уадта1 айпцшзкакоп οί соп)ида!ей ецшпе оезкодепз (Ргетапп). Вг I ОЬзГс! Оупаесо! 85(12): 957-64.

РаПолУЙеН, Ь., О. Се11а, е! ак (2004). РиаП1у οί НГе οί розкпепораиза! уготеп ΐη Ле Аппййех, Татох1&п, А1опе ог ΐη СотЫпакоп (АТАС) Лфиуап! Вгеаз1 Сапсег Тпак 1 СПп Опсо122(21):4261-71.

Рее1еу, К. М. апй М. )\⁷е11з (2001). Ногтопе гер1асетеп1 Легару апй Ле епйотекшт, Д СНп РаЛо1 54(6): 435-40.

РигиЬ]е1т, Μ,, Е. К.аг1дгеп, е! ак (1980). 1пкауадта1 айгтшзп-акоп οί соп)ида!ей езкодепз ΐη ргетепораиза! апй розкпепораиза! \уотеп. Ιηΐ ί Оупаесо1 ОЬз1е1 17(4): 335-9.

ОаЛагйо, С. к, λ М. Зоагез, к., ес ак (2006). Езкодеп ейесТз оп Ле уадта1 рН, Нога апй су(о1оду ΐη 1а1е роз!тепораизе айег а 1опд репой уйЛои! Ногтопе Легару. СИп Ехр ОЬзге! Оупесо1 33(2): 85-9.

ОатЬгеП, К. О , 1г., Ρ. М. Маззеу, εΐ ак (1980). Тке οί Ле ргодезЮдеп сЬаНепде 1ез1 ίο гейисе Ле пзк οί епйоте1па! сапсег. ОЬз1е( Оупесо1 55(6): 732-8.

Оагд, Ρ. Р., К. КегПко\узке, е! ак (1998). Ногтопе гер1асетепг Легару апй Ле пзк οί еркНеПа1 оуапап сагстота: а те1а-апа1уз1з. ОЬз1е( Оупесо1 92(3): 472-9.

Огайу, О., Т. ОеЪгекаЛк, е1 ак (1995). Ногтопе гер1асетеп! Легару апй епйотека! сапсег пзк: а те1а-апа1узк. ОЬзГе! Оупесо1 85(2): 304-13.

Оир1а, Р., В. Оге1, е! ак (2008). ТНе еГГес! οί Ггапзйегта1 апй уадта! езкодеп Легару оп тагкегз οί розНпепораиза! езкодеп зТаТиз. Мепораизе 15(1): 94-7.

- 7 020683

Но1тЬег§, Ь, апб Н. Апбегзоп (2004), ΉΑΒΙΤ8 (Еоипопа! гер1асетеЛ Легару айег Ьгеаз1 сапсег—13 ίί заГе?), агапбоплзеб сотрапзоп: 1па1 зЛрреб. Ьапсеб 363(9407): 453-5.

Но1тЬегд, Ь,, О. Е. кегзеп, е1 а1. (2008). 1псгеазеб пзк оГ гесиггепсе айег Еогтопе гсрксетегй Легару ΐη Ьгеаз! сапсег зигугуогз.” б Маб Сапсег 1пз1 100(7): 475-82.

Но1тетеп, Р. А., М. Ыпбзкод, βΐ ак (1989). Уадта1 ппдз Гог сопйпиоиз 1оте-бозе ге1еазе оГоез(габю1 ίη Ле 1геа1теп1 оГигодепЕа! аТгорЬу. МаГигЕаз 11(1): 55-63.

Ни11еу, 8. В. (2002). ЕГопсагбюуазси1аг б1зеазе оиЛотез биппд 6.8 уеагз оГЬогтопе Легару: НеаП апб езЕодеп/ргодезйп гер!асетеп1 з!ибу Го11оте-ир (НЕК.8 Η). 6АМА 288: 5866.

Лек, 8. 8., А. М. 9/а1кег, е1 ак (1993). ЕзЛодепз, ргодез(егопе, апб епботе1па1 сапсег. Ер1бетю1оду 4(1): 20-4,

С,С. боЬпзЮп бг., З.Ь. Нш, К..М. ΨΕί, К. Арр1ебот, КЗ. Вакег апб С. Ьопдсоре, Еаг1у тепораиза! сЬапдсз ΐη Ьопе тазз апб зех з1его1бз, б. СЕп. Епбосппок Ме1аЬ. 61 (1985), рр. 905-911.

Б, XV. Нит, А. Ве1апдег, Е, Ьеуезцие, О. ВагЫег, М, ВеаиНеи, С, А1Ьей, М. УаНее, С. ОшИетеЕе, А. ТсЕетоГ, Б, Тигдеоп апб 3. БиЬо13, СЬагасбепгаНоп οί ЦБРд1исигопозу1ЕапзГегазез асШе оп зТегснб Ьогтопез, б. 31его1б ВгосЕет. Мок Βίοί. 69 ¢1999), рр. 413-423.

Н. Катеапо, Н. Уазие, А. Кб1ада\уа, Ν. НЕак Т. УозЫба, Н. Зоерта, 3. АПуатою, М, Какапо апб Н. Одатеа, БеЬубгоер1апбгоз1егопе зирр1етеп1апоп Нпргоуез епбоЛеИа1 ГипсЕоп апб тзиИп зепзЕЫИу ίη теп, б. СЕп, Епбосппок Ме1аЬ. 88 (2003), рр. 3190-3195.

КепбаП, А., М. БотезеЕ, е! ак (2006). СаиЕоп: Уадта1 езлабю1 арреагз (о Ее соп(гатб1са1еб ϊη розГтепораиза! теотеп оп абруап! аготагазе ЫЫЬНогз. Апп Опсо1 17(4): 584-7.

Куогшпд, б. Б. Ν. апб Н. К, бепзеп (1986). РЬагтасеиЕса1 беуе1ортеп( оПозе-бозе езйабю! уадЕопез. 1п1егпаЕопа1 \9огкзЕор, СорепЕадеп.

ЬаЬпе, С, А. Ве1апдег, е1 ак (1988). Апбгодешс асЕуЕу оГ беЕубгоер]апбгоз(егопе апб апбгоз!епеб1опе ίη Ле га1 уеп1га! ргоз1а!е. Епбосппо1оду 123: 1412-1417.

ЬаЬпе, Р. (1991). ЫгасппоЛду. Мок СеИ. Епбосппок 78: С113-С118.

Р. ЬаЬпе, РиЕлге регзресЕуез оГ ЗЕКМз изеб а1опе апб ίη сотЫпаНоп теЕЕ БНЕА, Епбосг. К.е1а1, Сапсег 13 (2006), рр, 335-355.

ЬаЬпе, Р. (2007). Бгид 1пз1§ЬЕ Ьгеазб сапсег ргеуепЕоп апб Еззие-1агде1еб Еогтопе гер1асетеп! Легару.” ИаЛге С1ийса1 РгасЕсе, Епбосппо1оду & Ме1аЕоЕзт 3(8): 584-593.

Р. ЬаЬпе, А. Ве1апдег, б. 81тагб, V. Ьии-ТЬе апб С. ЬаЬпе, БНЕА апб репрЕега! апбгодеп апб езЛодеп ГогтаЕоп: 1п1гасппо1оду, Апп. Ν. У. Асаб. 36. 774 (1995), рр. 16-28.

- 8 020683

ЬаЪпе, Р., А. Ве1апдег, е( ак (2007). МеХаЪоНзт οί ϋΗΕΑ ΐη роз1тепораиза1 ν/отеп ίοΐΐον/тд регсиХапеоиз айпипхзХгабоп. 3 Зхегсйс! ВюсЬет Μοί ΒίοΙ 103(2): 178-88.

ЬаЪпе, Р., А. Ве1ап§ег, еХ аЬ (2007) ВюауаПаЪШХу апй тсХаЪоЬзт оГ ога! апй регсиХапеоиз йеЬуйгоер1апйгозХегопе ϊη розХтепораиза! ν/отсп 1 ЗХегохй ВюсЬет Μοί ΒίοΙ. ОсХ; 107(1-2):57-69.

ЬаЪпе, Р., А, Ве1ап§ег, еХ ак (2006). Апйгодеп дЬюигошйез, тзХеай оГ ХезХозХегопе, аз 1Ье печ/ тагкегз оГ апйгодетс асХМХу ίη ν/отеп. Шита! ЗХег ВюсЬет & Μοί Βίο! 99: 182188,

ЬаЪпе, Р., А. Ве!апдег, ех а1. (2005). ОпРН адошзХз ίη 1Ье ХгеаХтепХ оГ ргозХаХе сапсег. Епйосппе Вехчеу/з 26(3): 361-379.

ЬаЪпе, Р,, А. Ве1апдег, ех а1. (1997). Магкей йесНпе ίη зегит сопсепХгаНопз оГайгепа1 С19 зех зХегохй ргесигзогз апй сощидаХеЙ апйгодеп теХаЪо1Ьез Йилпд адтд, I СЬп Епйосппо1 МеХаЪ 82: 2396-2402.

ЬаЪпе, Р._} А, Ве1апдег, е1 ак (2007а). ВюауаПаЪПхХу апй теХаЪоНзт оГ ога! апй регсиХапеоиз йеЬуйгоер1апйгозХегопе ίη розХтепораиза1 ν/отсп. I ЗХегохй ВюсЬет Μοί ΒίοΙ 107(1-2): 57-69.

Р. ЬаЪпе, А. Ве1апдег, Р. Ве1апдег, К. ВегиЬе, С. Майе1, Ь. Сизап, 1. Оотег, В. Сапйаз, V. СЬаиззайе, I. Сазххе1, С. ОеШсЪе апй Ь Ьес1а1ге, МехаЪоЬзт οί' ϋΗΕΑ ίη розХтепораиза1 ν/отеп Γοΐΐον/тд регсиХапеоиз айгтшзХгаХюп, I. ЗхегоШ ВюсЬет. Μοί ΒίοΙ. 103 (2) (2007Ъ), рр. 178-188.

ЬаЪпе, Р., Ь. Сизап, еХ а1. (2008). ЕГГесХ оГ 1пХгауадта1 ϋΗΕΑ оп Зегит ϋΗΕΑ апй Е1еуеп οί хХз МеХаЪоШез ϊη РозХтепораиза1 Аотеп. 1оигпа1 5(ег ВюсЬет & Μοί ΒίοΙ: Ιη ргезз.

ЬаЪпе, Р., Ь. Сизап, ех ак (2008). ЕГГес! оГОпе-Аеек ТгеаХтепХ ν/χίΗ Уадта! ЕзХгодеп РгерагаХюпз оп Зегит ЕзХгодеп Ьеуе1з ίη РозХтепораиза! Аотеп. Мепораизе 1п ргезз.

ЬаЪпе, Р,, Ь. Сизап, еХ ак (2008). СЬапдез ΐη зегит ϋΗΕΑ апй е1е\^геп о£ ίΐ5 теХаЬоЬхез йилпд 12-топхЬ регсиХапеоиз айпитзХгаХюп оГ ϋΗΕΑ. I ЗХепнй ВюсЬет Мо! ΒίοΙ 110(1-2): 1-9.

ЬаЪпе, Ρ., Р. Охатопй, е! ак (1997). ЕГГесХ оГ 12-топХЬ йеЬуйгоер1апйгозХегопе гер1асетеп( хЬегару оп Ъопе, уадта, апй епйотеХлит ίη розхтепораиза1 ν/отеп. ί СЬп Епйосгто1 МеХаЬ 82(10): 3498-505.

ЬаЪпе, Р., А. ОиропХ, еХ ак (1985). Сотр1еХе апйгодеп Ыоскайе Гог хЬе ХгеаХтепХ оГ ргозХаХе сапсег. ЬпрогХапХ Айуапсез ίη ОпсоШду. V. Т. йе У1ха, 8. НеПтап апй 8. А. РозепЪегд. РЬх1айе1рЬха, ЬВ. ШрртсоХХ: 193-217.

Р. ЬаЪпе, V. Ьии-ТЬе, 8.Х. Ьхп, С. ЬаЪпе, Т. Зтагй, Н. ВгеХоп апй А. Ве1апдег, ТЬе

- 9 020683 кеу го1е οί 17β-Η8ϋ3 ίη зех зХего1б Ью1оду, 8Хего1бз 62 (1997), рр. 148-158.

ЬаЬпе, V. Ьии-ТЬе, 8.-Х. Ып, 1. Зипагб, С, ЬаЪпе, М, ЕЬА1Гу, О, РеИейег апб А. Ве1апдег, 1пХгасппо1оду: го1е οί ХЬе ГатПу οί 17р-ЬубгохузХего1б бекубгодепазез ΐη Ьитап рЬузю1оду апб сЬзеазе, I. Мок Епбосппок 25 (2000), рр. 1-16.

ЬаЪпе, Ρ., V, Ьии-ТЬе, е( ак (2005). 1з ϋΗΕΑ а Ьогтопе? ЗХагИпд Κονίαν, 1 Епбосппо1 187: 169-196.

ЬаЬпе, Ρ., V. Ьии-ТНе, еХ ак (2003). Епбосппе апб тхгасгте зоигсез οί апбгодепз ίη луотеп: 1п1иЬШоп οί ЬгеазХ сапсег апб оХЬег го!ез οί апбгодепз апб хЬегг ргесигзог беЬубгоер1апбгозХегопе. Епбосппе Кехчегоз 24(2): 152-182.

ЬаЬпе, Ρ., V. Ьии-ТЬе, еХ а1. (2006). ОеЬубгоер1апбгозХегопе (ОНЕА) ϊδ ап апаЬоНс зХекнб Ике б&убгоХезХозХегопе (ОНТ), хЬе шозХ роХепХ паХига1 апбгодеп, апб ХеХгаЪубгодезХппопе (ТНО). I ЗХегснб ВюсЬет ΜοΙ ΒΐοΙ 100(1-3): 52-8.

Р, ЬаЬпе, 1. ЕИтагб, V. Ьии-ТЬе, А. Ве1ап§ег, О. РеПеХдег, Υ. Могек Р. МеЬагИ, К. ЗапсЪег, Р. ОигосЬег, С. Тигдеоп, Υ. ЬаЬпе, Е. КЬеаите, С. ЬаЬпе апб Υ. ЬасЬапсе, ТЬе 3 βЬубгоху ЗХегснб беНубгодепазе/гзотегазе депе катПу: 1еззопз кгот хуре II 3β-Η5ϋ соп§ешХа1 бейаепсу. Ιη: V. Напззоп, Р.О, Ьеуу апб К. Тазкеп, ЕбЬогз, 5]§па1 ТгапзбисХюп ίη ТезХ1си1аг СеПз, ЕгпзХ ЗсЪеппд КезеагсЬ РоипбаХюп \УогкзЬор, νοί Зиррк 2, Зрппдег- Уег1ад, ВегЬп (1996), рр. 185-218.

ЬаЬпе, 1. ЗЬпагб, V. Ьии-ТЬе, А. Ве1апдег апб О. РеИейег, ЗХгисХиге, йтсйоп апб Х1ззие-зрес1Йс депе ехргеззюп οί 3β-Ηγ6Γθχγ3ΐβΓθί6 беЬубгодепазе/5-епе-4-епе 1зотегазе епгутез ΐη с1аззюа1 апб репрЬега! тХгасппе зХегсибодетс Х1ззиез, I. Зхепяб ВюсЬет. Мок ΒΐοΙ. 43 (1992), рр. 805-826.

Р. ЬаЬпе, К.. Роийп, 1. Зшагб, V. Ьии-ТЬе, С. ЬаЬпе апб А. Вс1апдег, Апбгодепз, ОНЕА апб ЬгеазХ сапсег. Ιη: Т. Ое1Г апб, ЕбхХог, Апбгодепз апб КергобисХ!уе Адтд, Тау1ог апб Ргапс15, ОхзкогбзЫге, иК (2006), рр, 113-135.

ЬаЬпе, Υ. Зидйпохо, V. Ьии-ТЬе, б. ЗЬпагб, Υ. ЬасЬапсе, ϋ. ВасЬуагоУ, С. ЬеЫапс, Р. ОигосЬег апб Ν. РациеХ, ЗХгисХиге οί Ьитап Хуре II 5*-гебисХазе, Епбосгто1оду 131 (1992), рр. 1571-1573.

Υ. ЬаЪпе, Р. ОигосЬег, Υ. ЬасЬапсе, С. Тигдеоп, I. Згаагб, С. ЬаЬпе апб Р. ЬаЬпе, ТЬе Ьитап Хуре II 17£-Ьубгоху зХеплб беЬубгодепазе депе епсобез Хгоо а1хетаХ1Уе!у-зрНсеб теззепдегКЫА зреаез, ϋΝΑ Се11 ΒΐοΙ. 14 (1995), рр. 849-861.

Ьасеу, б. V., Р. б. М1пк, ех ак (2002). Мепораиза1 Ьогтопе гер1асетепХ хЬегару апб пзк οί оуапап сапсег. 6АМА 288: 334-341,

Ьк Ь., 8. б. РЬиптег, ех ак (2008). А соттоп 8ц24 уапапХ апб ХЬе пзк οί со1оп сапсег: а рори1аХюп-Ьазеб сазе-сопХго! зХибу. Сапсег Ερΐ6εππο1 Вхотагкегз Ргеу 17(2): 339-42.

- 10 020683

С.Н. Пи, О.А. ЬаидЬПп, Ы.О. р1зсЬег апр 8.3. Υεη, МагкеР аХХепиаХюп оГикгасНап апР сксасНап гЬуХЬтз оГ РеЬуРгоер1апРгозХегопе ίη розХтепораиза1 ν/отеп: сугРспсс Гог а геРисеР 17,20-Резто1азе епгутаПс асЙУЙу, ί. СИп. ЕпРосппок МехаЬ. 71 (1990), рр. 900-906.

Ьопд. С. Υ., С. М. Пи, сХ ак (2006). А ΓβηΡοωίζβΡ сотрагаРуе зХиРу оГ ХЬе еГГесХз оГ ога1 апР 1ор1са1 езХгодеп хЬегару оп ХЬе уадта! уазси1апгаХюп апР зехиа1 ГипсХюп ίη ЬузХегесХогтгеР розХтепораиза1 ν/отеп. Мепораизе 13(5): 737-43.

V. Ьии-ТЬе, I. ОиГогХ, Ν. РациеХ, <3. ΚβΐηηηίΧζ апр Р. ЬаЬпе, 5ХгисХига1 сЬагасХепгаХюп апР ехргеззюп оГ ХЬе Ьитап РеЬуРгоер1апРгозХегопе зи1ГоХгапзГегазе §епе, ΌΝΑ СеП ΒίοΙ. 14 (1995), рр. 511-518.

V. Ьии-ТЬе, Υ. гЬапд, О. Ротег апР Р. ЬаЬпе, СЬагасХепзхюз оГ Ьитап Хурез 1, 2 апР 3 17Р-ЬуРгоху зХепнР РеЬуРгодепазе βοΐίνίΐίεϊ: охгРаХюп-геРисХюп апР тЫЫРоп, I. 8Хего1р ВюсЬет. Мок ΒίοΙ. 55 (1995), рр. 581-58.

Ьууйпеп, Η,, Е. Рикка1а, еХ ак (2006). ВгеазХ сапсег пзк ίη розХтепораиза1 \уотеп изпц* езХго§еп-оп1у хЬегару. ОЬзХеХ Оупесо1 108(6): 1354-60.

Е.О. Масклуеп апР ΙΌ. Киггтап, ОЪеРХу ίη ХЬе Ро§: го1е οί ХЬе аРгепа! зХегсйр РеЬуРгоер1апРгозХегопе (ΟΗΕΑ), I. ЫиХг. 121 (1991), рр. 851-855.

МапРек, Ρ. Ρ., Р. Ь. Оео1а, еХ ак (1983), Вю1о§1са1 еГГесХз оГуапоиз Розез оГуадтаПу аРппшзХегеР соп]идаХеР еците езХгодепз ίη розХтепораиза1 \уотеп. I СИп ЕпРосгто1 МеХаЪ 57(1): 133-9.

Мапопац 1., и. ТЬерр1за1, еХ ак (2001). ТЬе еГГесХ оГ езХгаРю! уадта1 ХаЫех апР согуи^ахер езхгодеп сгеат оп игодетха1 зутрХотз ίη розХтепораиза1 ν/отеп: а сотрагаХгуе зХиРу. I ОЬзХеХ Оупаесо1 К.ез 27(5): 255-60.

МагРп, Ρ. Ь., 5. 8. Уеп, еХ ак (1979). ЗузХепис аЪзогрХюп апР зизХатеР еГГесХз οί уадта! езХгодеп сгеатз. 1ата 242(24): 2699-700.

Магх, Р., О. 8сЬаРе, еХ ак (2004). Ео\у-Розе (0.3 т§) зупХЬеХю соп)ида1еР езХгодепз А 13 еГГесХПе Гог тапа§т§ аХгорЬю уадтЫз. МаХипХаз 47(1): 47-54.

МаХХзоп, Ь. А., О. Си1Ъег§, еХ ак (1989), Уа§та1 аРпйтзХгаХюп οΓ Ιον/ Розе езХгаРю!еГГесХз оп епРотеХпит апР уадта1 сухо1о§у. МаХипХаз 11: 217-222.

КВ. Магезз, Оп а§т§ Ьопе 1озз, СПп. ОгХЬор. 165 (1982), рр. 239-252.

Ме13е1з, А. (1967). ТЬе таХигаХюп уа1ие. АсХа СуХо1 11: 249.

Мегхепз, Η. к, Μ. 1. Нететап, еХ ак (1996), АпРгодеп гесерХог сопХепХ ίη Ьитап епРотеХпит, Еиг ί ОЬзХеХ Оупесо! КергоР ΒίοΙ 70(1): 11-3.

МеХХ1ег, Ь. апР Р. Сг. О1зеп (1991). Ьопд-Хегт ХгеаХтепХ оГ аХгорЫс уадтИз ννΐχΠ Ιον/Розе оезХгаРю1 уадта1 ХаЫеХз. МаХипХаз 14(1): 23-31.

Ск Μϊ^βοη, А. К КеПег, В, Ьа\угепсе апр Т.Н. ЗЬерагХ 1Ь, ОеЬуРгоер1апргозХегопе апР

- 11 020683 апйгоз!егопе 1еуе1з ΐη Нитап р1азта. Ейёс! οί аде апй зех: йау-1о-йау апй йшта1 уапайопз, Ь СНп. Епйосппок Ме1аЬ. 17 (1957), рр. 1051-1062.

АД. Мога1ез, и. 1\Го1ап, ЬС. Νείκοη апй 5.8. Усп, Ейес1з οί гер1асстеп! йозе οί йеЬуйгоер1апйгоз!егопе ΐη теп апй ν/отеп οί айуапстд аде, 1. СНп. Епйосппок Ме1аЬ. 78 (1994), рр. 1360-1367.

Мога1ез, Ь., Ρ. Νενεη, е! а1. (2004). Аси1е ейес!з οί 1атохйеп апй (Ыгй-депегаНоп аготаОзе ΐηΗϊΒΐίθΓ3 оп тепораиза! зутр!отз οί Ъгеаз! сапсег райепСз. Апйсапсег Огидз 15(8): 753-60.

Ν.Α.Μ.8. (2007). Ρθ3ΐΐΐοη 81а1етеп1 οί Ле ΝοήΗ Атепсап Мепораизе 8оае1у. Мепораизе 14: 357-69.

ИасЬНдаП, Ь. Е. (1995). СНшса11па1 οίΐΗε езйаЙ1о! уадта1 ппд ίη Ле и.8. Ма1игйаз 22 Зиррк 843-7.

Цаеззеп, Т., К. Койпдиег-Маааз, е! а1. (2001). 8егит Ιΐρίό. ргой1е тргоуей Ьу иНгаΙον/ йозез οί 17-Ъе1а-езйайю1 ίη е1йег1у хуотеп. 1 СНп Епйосппо1 Ме1аЬ 86(6): 2757- 62.

Νείβοη, Н. О., К. К. Уезсо, εΐ ак (2006). КопЬогтопа! Легар1ез Гог тепораиза1 Но! ЙазЬез: зуз!етайс Γενίεν/ апй тега-апа1уз1я. йата 295(17): 2057-71.

ЬЕ. Цезйег, СО. Вапазспй, ЬК. С1оге апй \У,О. ЕИаскагй, ОеНуйгоер1апйгоз1егопе гейисез зегит 1ο\ν йепзйу ΗρορΓοίείη 1еуе1з апй Ьойу £а! Ьи! йоез ηοΐ акег тзиНп зепз1ЙУЙу ίη погта! теп, 1, СНп. Епйосппок Ме1аЪ. 66 (1988), рр. 57-61.

№1ззоп, К. апй О. Негтег (1992). 'Έολν-йозе оезйаЙ1о1 ίη Фе йеа1теп! οί игодетш! оезйодеп йейаепсу—а рЬагтасоктейс апй рйагтасойупатга зшйу. МаШгйаз 15(2): 121-7.

Νοΐείονίΐζ, М., 5. Рипк, εΐ ак (2002). ЕзйаЙ1о1 аЪзогрйоп йот уадта1 !аЫе!з ΐη роз1тепораиза1 у/отеп. ОЬз1е! Оупесо1 99(4): 556-62.

ОгепйегаЬ, Ν., Ь Ь. Вппй, εΐ ак (1984). Аде сЬапдез апй зех ййГегепсез ίη зегит йеЬуйгоер1апйгоз!егапе зи1Га1е сопсепйайопз ЙпоидНои! айиННоой. 1. СНп. Епйосппок Ме1аЬ. 59: 551-555.

Рапйй, Ь. апй 1. С. Оиз1апйег (1997). Роз1тепораиза1 уадта1 айорЬу апй айорЫс уад1тйз. Ат 1 Мей δει 314(4): 228-31.

Регззоп, Ь, Н. О. Айагт, εΐ ак (1989). БЙзк οί епйотей1а1 сапсег айег йеайпеп! у/НН оезйодепз а1опе ог ίη согуипсйоп \νίίΗ ргодезЮдепз: гезийз оГ а ргозресйуе з1ийу. Впц 298(6667): 147-51.

Ропгопе, К.,, К. В1дНа, е! ак (2005). Уадта! оезйодеп Легару айег Ьгеаз! сапсег: Ϊ3 ίί заГе? Еиг 1 Сапсег 41(17): 2673-81.

Юдд, Е. А., Н. Негтапп, εΐ ак (1978). АЪзогрйоп οί езйодепз йот уадта! егеатз. N ЕпдП Мей 298(4): 195-7.

- 12 020683

В.Ь. КЗддз, Η.Ψ. ХУаЬпег, Ψ.Ε. ϋυηη, К.В. Магезз, Κ.Ρ. ΟίίοΜ апб Ь.3. МеЬоп, Ц1ЙегепХ1а1 сЬапдез ΐη Ьопе пппега1 бепз1Ху оГ Ле аррепбкгбаг апб ах1а1 зкекХоп ν/ΐχΗ адтд: гекбопзНр ίο зрта1 озХеорогоз13,1. СПп, 1пуезХ. 67 (1981), рр. 328-335.

Κίπωη, Τ., Ρ. XV. Окктап, εΐ а1. (2002). Ногтопе гер1асетеп( Легару апб Ле пзк οί туазке ερΐΛβΙΐβΙ оуапап саспег ίη Зу/еЛзЬ ν/отеп. 3 К^ТаХ1 Сапсег 1пзХ94: 497-504.

КтакИ, 5., Н. БесЬаиб, εΐ ак (2001), РеЬаЫНху апб уаНсШу οί соттегбаПу ауабаЫе, бпесх габДОттипоаззауз Гог теазигетепх оГЫооб апбгодепз апб езХгодепз ΐη розхтепораиза1 ж>теп. Сапсег Ергбетго! Вютагкегз Ргеу 10(7): 757-65.

Κίοιιχ, 3. Е., С. Οενίίη, еХ а1, (2000). 17ЪеХа-езХгабю1 уа§та1ХаЫеХ уегзиз сопщдаХеб едите езХгодеп уадта! сгеат ΐο геНеуе тепораиза! аХгорЫс уадттз. Мепораизе 7(3): 15661.

Кобпдиег, С, А. V. РаХе1, εΐ а1. (2002), ЕзХгодеп герксетепх Легару апй оуапап сапсег тогХаЬХу ΐη а 1агде ргозресДуе зХибу оГЗЗЗ хуотеп. ΙΑΜΑ 285: 1460-1465.

КозепЬегд, к. и., С. Мадпиззоп, еХ ак (2006). ”Мепораиза1 Ьогтопе Легару апб оЛег ЬгеазХ сапсег пзк ГасХогз ίη гекХюп ΐο Ле пзк οί ЛЙегеп! ЫзХо1одка1 зиЬ1урез οί ЬгеазХ сапсег: а сазе-соп!го1 зХибу. ВгеазХ Сапсег Кез 8(1): К11.

Коззоиу/, 3. Е., О. Ь. Апбегзоп, е1 а1. (2002). КЗзкз апб ЬепейХз οί езХгодеп р!из ргодезХт ΐη Ьеа1Лу розХтепораиза1 жгтеп: ргтара1 гезиКз Ргот Ле ν/отеп’з Неа1Л 1пЛайуе гапбогтгеб соп1го11ебХпак Зата 288(3): 321-33.

5а1пппеп, Н. 5., Μ. Е. ЗааГ, εΐ ак (2007), ТЬе еГГесХ οί Хгапзуадта1 ез(габю1 оп Ьопе ϊη адсб \уотеп: а гапбогшзеб сопХгоНеб Хпак МаХипХаз 57(4): 370-81.

5сЬЖ Ь, Ώ. ТикЬтзку, еХ ак (1977). Уад1па1 аЬзогрйоп οί езХгопе апб 17ЬеХаезХгабюк РегЫ 8Хеп1 28(10): 1063-6.

ЗсЬппбХ, О., 8. В. Апбегззоп, еХ а1. (1994). Кеказе οί 17-ЬеХа-оезХгабю1 Лот а уадта1 ппд ΐη розХтепораиза1 ν/отеп: рЬагтасоктехк еуакаХюп. Супесо1 ОЬзХеХ Ιηνββΐ 38(4): 25360.

Ε.Ό. ЗсЬпоск, СК. ВийтдХоп, ΟΌ. НиЬег!, В.К. Κιιτίζ, А.Е. ЮХаЬсЫ, З.Е, ВизХег апб ί. К. Спуепз, ΌΐνβΓ§βηΐ соггекХюпз оГ сксикхтд беЬубгоер!апбгозХегопе зи1ГаХе апб ХезХозХегопе \νΐΛ хпзиЬп 1еуе1з апб тзиЙп гесерХог Ьтбтд, 3. СНп. Епбосппок МеХаЬ. 66 (1988), рр. 1329-1331.

ЗШего-Агепаз, Μ., М. Ое1дабо-Кобпдиег, еХ ак (1992). ’'Мепораиза1 Ьогтопе герксетепх хЬегару апб ЬгеазХ сапсег: а теха-апа1уз15, ОЬзХеХ. Супесок 79: 286-294, δΐηιοη, 3. А., К. Ζ. Кеаре, еХ а1. (2007). Капбоппгеб, тиЫсепХег, боиЫе-Ытб, р1асеЬо-сопХго11еб Хпа1 Хо е'/а1иа(е Ле еГйсасу апб заГеХу оГ зупХЬеХю сопдидаХеб езХгодепз В ίοτ хЬе ХгеаХтепХ οί уикоуадта! аХгорЬу ΐη ЬеаЬу розХтепораиза! \уотеп. РегХб 8Хеп1 Ιη

- 13 020683 ргезз.

Е.К. Зйпрзоп, Ко1е οί аготахазе ίη зех Πετσιά асбоп, ί, Мок Епбосппок 25 (2000), рр. 149-156.

81тип1С, V., I. Вапохтс, εΐ а1. (2003). Ьоса1 езбодеп (теаЬпсгП ίη рабеп!з ννϊΐΗ игодеш!а1 зутрЮтз. ΙηΙ 1 Оупаесо! ОЪпе1 82(2): 187-97.

δαιίΐΗ, О. С, К. Ргепйсе, е1 ак (1975). Аззоаайоп οί еходепоиз енгодеп апб епботе!йа1 сагстота. Ν. Епдк1. Меб. 293: 1164-1167.

ЗткЬ, Ρ., О. ΗείιηεΓ, εΐ ак (1993). Оез1габю]-ге1еазтд уа§та1 ппд ίοτ Ιτεαΐτηεηί οί розОпепораиза1 игодеппа! а1горНу. МаЮгПаз 16(2): 145-54,

Зоиг1а, А., М. Р1атапб, εΐ ак (1998). ЕГГес1 οί беЬубгоер1апбгоз1егопе оп уадта1 апб и(еппе ЫзЮтогрЬоЮду ίηΰιε гак I. δΐετοίά ВюсЬет. Мок ΒίοΙ. 66(3): 137-149.

51етЬегд, К. К., 8, В. ТЬаскег, εΐ а!. (1991). А те1а-апа!уз1з о£ 1ке ейес! оГ езбодеп гер1асетеп1 хкегару оп Ше пзк оГЪгеаз! сапсег. ΙΑΜΑ 265: 1985-1990.

К.К. 81етЬегд, Ον. Ргеш-ТюДаег, Е.О. ОеРиеу, О.Т. МШег, 0,8. 8§ои1аз. С.Н. СогаШ, О. Ь. РЬПНрз, Τ.Ν, Кодегз апб Κ.ν, С1атк, Зех зЮгснбз апб Ьопе бепзйу ΐη ргетепораиза1 апб рептепораиза1 ννοιηεη, I. С11п. Епбосппок Ме1аЬ. 69 (1989), рр. 533-539.

ЗискПпд, ί., А. ЬеШаЪу, εΐ ак (2006). Ьоса1 оеИгодеп £ог уадта1 аЮорЬу ίη роз!тепораиза1 луотеп. СосЬгапе ЮаЮЬазе Зузхет Κεν 18(4): С0001500.

Зхуапзоп, Μ. Εοτεηΐζοη, О. Уапбепри!, О. МеИзПгот, Р. ЬаЬпе, А. Капе, I. 1акоЬззоп, С. ОЫззоп, ΌΟΤ2Β7 Η268Υ ро1утогрЫзт Ϊ3 аззос1а1еб χντΐΐι зегит зех Ξίετοϊά 1еуе1з апб согйса1 Ьопе ϊίζε ίη уохтд абик теп, ЮЕМ (2007), ίη ргезз.

ТсЬегпоГ, 1.Р. Оезртез, А. Векпдег, А. Ойрот, Ю. РгибЪоптте, 8, Мооцаш, Р.1. Ьиртеп апб Р. ЬаЬпе, Кебисеб 1езЮз1егопе апб абгепа1 С19 Πετσιά 1ενε1$ ίη оЪезе теп, Ме1аЬоЬзт 44 (1995), рр. 513-519.

Тигдеоп, 1.5. Сатег, Е. Оеуезцие, ϋ.ν. Нит апб А, Ве1апдег, ΚεΟΐίνε епгутабс асЙУЙу, ρτοίείη Б1аЬ1Н1у, апб бззие б15(пЬи1юп οί Ьитап з1его1б-те1аЬоПгтд 1ГОТ2В зиЬГатПу тетЬегз, Епбосппокду 142 (2001), рр. 778-787.

ийап, V. Н._} О. ЗЬоире, εί ак (2001). Κείίεί οί уазотоЮг зутрЮтз апб уадтпа1 а!горЬу ννϊΐΗ 1о\уег бозез оГ сощидаг.еб ецшпе езЮодепз апб тебгохургодез1егопе асе!а1е. Ρειΐίΐ 8(еп1 75(6): 1065-79.

Уегтеи1еп апб Ь. Уегбопск, К.абю1ттипоаззауз оГ 17р-Ьубгоху-5*-апбгоз1ап-3-опе, 4-апбгоз1епе-3,17-бюпе, беЬубгоер1апбгоз(егопе, 17р-Нубгохургодез1егопе апб ргодеНсгопе апб Из аррПсакюп ίο Ьитап та1е р1азта, 1. δίετοίά ВюсЬет. 7 (1976), рр. 1-10.

О.Т. Уз11агеа1 апб 1.О, НоПозгу, Ейес1 οίΟΗΕΑ оп аЪботта1 ка( апб тзиНп асбоп ίη е1бег1у ’Л'отсп апб теп: а гапбопбгеб сопЪоПеб 1па1, ΙΑΜΑ 292 (2004), рр. 2243-2248.

- 14 020683 νοί§ΐ, Ь, Ρ., N. 8. ΑεΪ33, е1 а!. (1991), Ргодез(адеп зирр1етеп!аНоп οί еходепоиз оезЛодепз апк пзк оГепкоте!па1 сапсег, Ьапсе! 338(8762): 274-7.

АеЬЬегд, Е., К. Ау!оп, е! аЬ (2005). Рпкотекга! апк уадта1 еГГес!з οί 1о%'-козе езНакю! кеНуегек Ьу уа§1па1 ппд ог уа§1па1 !аЫе1. СПтайелс 8(1): 83-92.

А1ек, О. Ь. (1993). 1пкиз!па1 кеуе1ортеп!з ίη аи!ота!ек су!о!оду аз зиЪпННек Ьу !ЬеН кеуекрегз. Апа! С)иап1 Су!о1 ΗϊβϊοΙ 15(5): 358-70.

Αίηεκ, Ν. апк Ε. Αΐ 11 Леек (2001). Мепораизе апк Ле зкт, Аиз1га1аз Ί Оегта!о1

42(3): 149-8; ςυίζ 159.

2апд, Н., Ь. 8аЫт. е! а1. (2007), ЕЙесй οί !ез!оз!егопе 1геа!теп! оп епкоте!па1 ргоНГегаНоп ίη роЛтепораиза1 ν/отеп. ί СЬп Епкосппо1 Ме!аЬ 92(6): 2169-75.

В. Ζιιπιοίϊ, О.А. 8Ггат, Ь.К. МШсг апк А. Розпег, Т\уепГу-Гоиг-Ьоиг теап р1азта

1ез!оз!егопе сопсепПакоп кесНпез νήΟι аде ίη погта1 ргетепораиза1 ν/отеп, I. СНп.

Епкосппок Ме!аЪ. 80(1995), рр. 1429-1430,

Вагинальная сухость обнаруживается у 75% постменопаузных женщин (Ашез апк АШЛеек 2001; Ν.Α.Μ.8. 2007). Вследствие различных причин, в частности опасности осложнений, вызываемых эстрогенами, только 20-25% симптоматических женщин с вагинальной атрофией стремятся к медицинскому лечению (РапкН апк Оиз1апкег 1997; Ν.Α.Μ.8. 2007). Таким образом, существует явная медицинская потребность и основная благоприятная возможность улучшения качества жизни большой популяции женщин, страдающих от вагинальной атрофии в течение большой части их продолжительности жизни. Можно упомянуть о том, что, хотя приступообразные ощущения жара (приливы) уменьшаются самопроизвольно со временем, симптомы вагинальной атрофии, а именно вагинальная сухость, вульвовагинальное раздражение/зуд и диспареуния со временем увеличиваются в их тяжести в отсутствие лечения.

На основе хорошо известного факта, что секреция эстрогена яичниками прекращается во время менопаузы, системные и локальные эстрогены были до сих пор единственным подходом для лечения вагинальной атрофии. Однако было показано, что системные эстрогены + прогестин (НРТ) и только эстрогены (ΕΡΤ) увеличивают риск рака молочной железы (8!ешЬегд, ТЬаскег е! а1. 1991; 8Шего-Агепа8, Эе1дакоРокпдие/ е! а1. 1992; Со1к11/. Εβπ е! а1. 1993; Со1кНх. Напкиъоп е! а1. 1995; Со11аЬогакуе Сгоир оп Ногтопа1 Рас!ог8 ш Вгеа8! Сапсег 1997; Ни11еу 2002; Вега1 2003; С’ЫеЬо\У8кк Непкпх е! а1. 2003; Но1тЬегд апк Апкегзоп 2004; ЬууНпеп, Рикка1а е! а1. 2006; Соггао, 2атЬоп е! а1. 2008; Но1тЬегд, Аегзеп е! а1. 2008; Ы, Р1иттег е! а1. 2008), рака яичника (Сагд, КегИкоу8ке е! а1. 1998; СоидЫт, Сн.18!о//1 е! а1. 2000; Ьасеу, Μίπ1< е! а1. 2002; Риман Эюктап е! а1. 2002; Рокпдие/, Ра!е1 е! а1. 2002; Роботу, Апкегзоп е! а1. 2002; ЬууНпеп, Рикка1а е! а1. 2006), а также эндометриального рака (только эстрогены) (СатЬге11, Μа88еу е! а1. 1980; Рег88оп, Акат1 е! а1. 1989; Уо1д1, Ае188 е! а1. 1991; Лск, Аа1кег е! а1. 1993; Сгаку, СеЬге!8афк е! а1. 1995; Вега1, ВиИ е! а1. 2005). Гласность с последующим инициативным исследованием здоровья женщины (Роззоиу, Апкегзоп е! а1. 2002) оказали сильнейшее действие, поставив под сомнение безопасность доступных способов лечения менопаузальных симптомов (АгсНег 2007).

Хотя были разработаны интравагинальные препараты для устранения системного подвергания действию эстрогенов, продолжительный ряд исследований единогласно продемонстрировал, что все интравагинальные препараты эстрогенов приводят к относительно высоким уровням эстрогенов, измеряемым непосредственно или посредством их системных эффектов ^пд1ипк апк 1оЬап88оп 1978; Р1дд/ Негтапп е! а1. 1978; Уеп е! а1. 1979; РигиН)е1т, Каг1дгеп е! а1. 1980; Пеи!8сЬ, О88о\У81к е! а1. 1981; Μапке1, Сео1а е! а1. 1983; №188оп апк Неипег 1992; №сЬНда11 1995; Ау!оп, ОагНпд е! а1. 1996; Эндак Не81а е! а1. 2000; Рюих, ЭеуПп е! а1. 2000; Уапопа,, ТЬерр18а1 е! а1. 2001; №!е1оу1!/, Рипк е! а1. 2002; Роп/опе, В1дНа е! а1. 2005; Ае18Ьегд, Ау!оп е! а1. 2005; Са1Ьагко, 8оаге8 е! а1. 2006; Кепка11, Эоу8е!! е! а1. 2006; Ьопд, Ьш е! а1. 2006; ВасЬтапп, ЬоЬо е! а1. 2008). Эти данные, показывающие значительное увеличение уровней эстрогена, ясно указывают на то, что применение интравагинальных препаратов эстрогена также потенциально ассоциировано с увеличенным риском рака молочной железы и рака матки (Куогтпд апк 1еп8еп 1986; Μа!!8оп, Си1Ьегд е! а1. 1989; Ро8епЬегд, Μадпи88оп е! а1. 2006; Ν.Α.Μ.8. 2007). Фактически была официально высказана обеспокоенность в отношении стимулирующих эффектов вагинальных препаратов эстрогена на эндометрии ((Ν.Α.Μ.8. 2007).

Наиболее ранние измерения уровней эстрадиола (Ε₂) сыворотки после интравагинального введения эстрогенов использовали радиоиммуноанализы, технологию, лишенную специфичности, точности, достоверности и чувствительности (Рта1к1, ОесЬаик е! а1. 2001). Авторы данного изобретения измеряли эстрогены сыворотки с использованием СЬР (Соок ЬаЬога!огу Ргас!юе)-валидизированные масс- 15 020683 спектрометрических анализов после интравагинального введения двух наиболее обычных препаратов эстрогенов (ЬаЬпс. Сикаи е! а1. 2008). Это исследование смогло окончательно показать, что как пилюля Е₂ (25 мкг Е₂/день), так и крем конъюгированных эстрогенов (1 г 0,625 мг-конъюгированных эстрогенов/день), после одной недели обработки один раз в день, вызывали приблизительно 5-кратное увеличение сывороточного Е₂ у постменопаузных женщин. Такие данные указывают на то, что действия эстрогенов, наносимых локально в вагину, вряд ли ограничиваются этой вагиной и что ожидается системное действие, как предполагалось ранее (Еид1иий апй 1оЬаи88ои 1978; Кгдд, Негтапп е! а1. 1978; Магйп, Уеп е! а1. 1979; РигиЬ)е1т, Каг1дгеп е! а1. 1980; ЭеиксЬ, О88о\У81п е! а1. 1981; Мапйе1, Сео1а е! а1. 1983; Νίΐδδοπ апй Неипег 1992; №-1сЬ0да11 1995; Ау!оп, ЭагЬпд е! а1. 1996; Эида1, Нек1а е! а1. 2000; Кюих, Эеу1т е! а1. 2000; Мапопар ТЬерр18а1 е! а1. 2001; Νο^1ονί!ζ, Рипк е! а1. 2002; Роп/опе, ЫдПа е! а1. 2005; Ае18Ьетд, Ау!оп е! а1. 2005; Са1Ьатйо, 8оаге8 е! а1. 2006; Кепйа11, Эо\У8еи е! а1. 2006; Ьопд, Пи е! а1. 2006; ВасЬтапп, ЬоЬо е! а1. 2008).

Кроме вышеуказанных озабоченностей в отношении безопасности эстрогенов, вводимых как системно, так и локально, недавние данные ясно продемонстрировали, что женщины не только имеют дефицит эстрогенов во время менопаузы, но что они также были прогрессирующим образом, начиная с тридцати лет, лишены андрогенов, производимых в специфических периферических тканях-мишенях посредством интракринного превращения дегидроэпиандростерона (ЭНЕА) в андрогены и/или эстрогены (ЬаЬпе, Ве1апдег е! а1. 1988; ЬаЬпе 1991; ЬаЬпе, Ьии-ТЬе е! а1. 2003; ЬаЬпе, Ьии-ТЬе е! а1. 2005). Действительно, ЭНЕЛ и ЭНЕА-сульфат сыворотки прогрессирующим образом уменьшаются от максимума, наблюдаемого в возрасте 30 лет (ОтейтеюЬ, Вппй е! а1. 1984; ЬаЬпе, Ве1апдег е! а1. 1997; ЬаЬпе, Ьии-ТЬе е! а1. 2003), до величины на 60% более низкой во время менопаузы (ЬаЬпе, Ве1апдег е! а1. 2006).

Что касается роли андрогенов у женщин, важно упомянуть, что женщины секретируют 50% андрогенов в сравнении с наблюдаемым уровнем у мужчин (ЬаЬпе, Ве1апдег е! а1. 1997; ЬаЬпе, Ьии-ТЬе е! а1. 2005). Поскольку ЭНЕА сыворотки является преобладающим источником андрогенов, которые выполняют ряд физиологических функций у женщин (ЬаЬпе, Ьии-ТЬе е! а1. 2003; ЬаЬпе 2007), 60% уменьшение циркулирующего ЭНЕА, обнаруживаемое уже по время менопаузы, приводит к сходному 60% увеличению общего пула андрогенов (ЬаЬпе, Ве1апдег е! а1. 2006) с получением потенциальных признаков и симптомов гипоандрогенности в кости, мышцах, молочной железе, вагине, головном мозге, а также в метаболизме глюкозы, инсулина и липидов (ЬаЬпе, Ьии-ТЬе е! а1. 2003; ЬаЬпе 2007). Недавние данные показали, что среди этих андрогенных тканей-мишеней вагина является чувствительной к андрогенам после введения ЭНЕА крысе с благоприятными действиями не только на поверхностный эпителиальный слой вагины, но также на коллагеновые волокна в 1ашта рторпа (собственной пластинке слизистой оболочки) и на ти8си1ат18 (мышечную пластинку слизистой оболочки) (Вегдег, Е1-АИу е! а1. 2005).

На основании результатов преклинических исследований авторов (8оит1а, Р1атапй е! а1. 1998; Вегдег, Е1-А11у е! а1. 2005) и клинических исследований авторов (ЬаЬпе, Э1атопй е! а1. 1997; ЬаЬпе, Си8ап е! а1. 2008), показывающих благоприятные действия на вагине ЭНЕА, вводимого подкожно или локально, данное клиническое исследование является поисковым (перспективным) рандомизированным и плацебоконтролируемым исследованием действия трех доз интравагинального ЭНЕА, вводимого один раз в день в течение 12 недель, на изменения поверхностных и парабазальных клеток, рН и наиболее беспокоящий симптом вагинальной атрофии в качестве первичных целей. Эти результаты ясно показывают, что локально вводимый ЭНЕА является очень эффективным и быстрым в коррекции всех признаков и симптомов вагинальной атрофии, причем почти максимальное действие достигается уже при 2 неделях при дозе ПНЕА, не вызывающей значимого изменения в эстрогенах или андрогенах, тогда как все другие стероидные гормоны остаются неизмененными или находящимися вполне в пределах диапазона, обнаруживаемого у здоровых постменопаузных женщин.

При введении ЭНЕА локально в вагину полезные действия эстрогенов и андрогенов, производимых локально в вагине, достигаются без какого-либо значимого высвобождения эстрадиола или тестостерона в кровь (ЬаЬпе, Си8ап е! а1. 1. 8!ег. ВюсЬет. Мо1. Вю1. 1п рге88). В образовании андрогенов и/или эстрогенов из ЭНЕА посредством процесса интракринологии любая ткань является непредсказуемой, так как эта реакция зависит от активности ферментативного аппарата, конкретно присутствующего в каждой клетке каждой ткани. Таким образом, невозможно предсказать из андрогенов и эстрогенов, которые продуцируются из ЭНЕА в одной ткани, степень, до которой сходные андрогены и эстрогены могут продуцироваться в другой ткани.

Результаты клинического исследования ЕКС-210 (пример 3) ясно демонстрируют впервые, что локальное введение ЭНЕА в качестве заместительной терапии с предшественником гормона (НРКТ) является высокоэффективным и быстрым в коррекции всех симптомов и признаков вагинальной атрофии у постменопаузных женщин. Наиболее важно, что это достигается при дозе (0,5%) ЭНЕА, которая не увеличивает уровни в сыворотке активных эстрогенов и андрогенов, и без изменений или с минимальными изменениями сывороточного ЭНЕА и каких-либо его метаболитов, все из которых остаются вполне в пределах диапазона величин, обнаруживаемых у здоровых постменопаузных женщин (ЬаЬпе, Си8ап е! а1. 2008).

Хотя 75% постменопаузных женщин страдают от вагинальной атрофии (Аше8 апй АПМеей 2001;

- 16 020683

Ν.Α.Μ.8. 2007), влияющей, следовательно, на качество их жизни во время большой части их продолжительности жизни, только 20% обращаются за лечением (Рапбб аиб Оик1апбег 1997). Боязнь рака молочной железы, связанного с увеличенными уровнями эстрогенов в крови, является основной предполагаемой причиной. Поскольку секреция эстрогена в системный кровоток происходит исключительно из яичников и прекращается при менопаузе, введение эстрогенов постменопаузным женщинам, по-видимому, не является физиологическим. После νΗΙ научной проблемой является исследование альтернативных типов и препаратов гормональной терапии, которые могли бы обеспечить все постменопаузные преимущества эстрогенов с улучшением качества жизни женщин, минимизацией рисков и максимизацией пользы (АгсЬег 2007). Поскольку терапии на основе неэстрогенов не показали убедительной эффективности (№1коп, Уексо е! а1. 2006; 8иск1шд, Бе1ЬаЬу е! а1. 2006), женщины и их врачи остались без безопасного способа лечения вагинальной атрофии.

Различные формы эстрогенов являются эффективными в лечении вульвовагинальной атрофии (РапбП апб Оик1апбег 1997; ИНап, 8Ьоире е! а1. 2001). Действительно, вагинальная таблетка Е₂ показала эффективность, подобную эффективности вагинального кольца Е₂ ^еЦЪегд, Ау!оп е! а1. 2005), а также крема конъюгированного эстрогена (Кюих, ЭеуПп е! а1. 2000; Мапопар ТЬеррХн е! а1. 2001).

Эта новая НРКТ находится в заметном контрасте с 5-кратным увеличением в сыворотке Е₂, измеряемого масс-спектрометрией после лечения интравагинальным Е₂ или конъюгированными эстрогенами (ЬаЪпе, Сикап е! а1. 2008). Эти недавние результаты в отношении сывороточных эстрогенов подтверждают длинный ряд исследований, показывающих, что все препараты интравагинального эстрогена приводят к повышенным концентрациям сывороточного эстрогена, измеряемого непосредственно радиоиммуноанализами или через их системные эффекты (Епд1ипб апб 1оЬапккоп 1978; Юдд, Негтапп е! а1. 1978; Магбп, Уеп е! а1. 1979; РигиЬ)е1т, Каг1дгеп е! а1. 1980; ОеШкск Окко\ук1л е! а1. 1981; Мапбе1, Оео1а е! а1. 1983; №1ккоп апб Неппег 1992; №сЬбда11 1995; Ау!оп, ЭагПпд е! а1. 1996; Оида1, Нек1а е! а1. 2000; Кюих, ЭеуПп е! а1. 2000; Мапопак ТЬеррХи е! а1. 2001; Ш^КуН/, Рипк е! а1. 2002; Роп/опе, В1дНа е! а1. 2005; Vе^κЪе^д, Ау!оп е! а1. 2005; Оа1Ьагбо, 8оагек е! а1. 2006; Кепба11, Ооуке!! е! а1. 2006; Ьопд, Ьт е! а1. 2006; ВасЬтапп, ЬоЪо е! а1. 2008).

Наиболее обычными вредными событиями, сообщенными при использовании вагинальных эстрогенов, являются вагинальное кровотечение и боль в молочных железах, оба из которых являются вторичными относительно увеличенных сывороточных эстрогенов (8искЬпд, Ье!ЬаЪу е! а1. 2006). Эти побочные эффекты сообщались для Е₂-кольца, крема конъюгированных эстрогенов, а также таблетки Е₂ (Ау!оп, ЭагЬпд е! а1. 1996; Vе^κЪе^д, Ау!оп е! а1. 2005). Как упоминалось выше, существует также озабоченность в отношении стимулирующих действий вагинальных эстрогенов на эндометрий (Ν.Α.Μ.8. 2007). Маточное кровотечение, боль в молочных железах и перинеальная боль наблюдались у 9% женщин, которые принимали вагинальную таблетку в течение 24 недель, тогда как 34% жаловались на эти же симптомы в группе с вагинальным кремом конъюгированного эстрогена (Кюих, ЭеуПп е! а1. 2000). 8иск1шд, ЬеШаЪу е! а1. 2006, сообщали об отсутствии различия между разными вагинальными препаратами эстрогенов.

Хорошо известно, что атрофический вагинит у постменопаузных женщин мог быть ухудшен или индуцирован применением ингибиторов ароматазы для лечения рака молочной железы. Действительно, эти лекарственные средства обнаруживают их преимущества в случае рака молочной железы уменьшением биосинтеза Е₂ во всех тканях с увеличением посредством этого частоты и тяжести климактерических симптомов (Ра11оуйе1б, Се11а е! а1. 2004; Мога1ек, №уеп е! а1. 2004). В недавнем исследовании, где семь пациенток с раком молочной железы, которых лечили ингибиторами ароматазы, получали Вагифем при суточной дозе 25 мкг в течение 2 недель и затем после этого два раза в неделю, сывороточный Е2 увеличивался с медианы 3 до 72 пмоль/л при 2 неделях (диапазон 3-232) (Кепба11, Эо\укеи е! а1. 2006). Сывороточные уровни Е2 обычно уменьшались после этого до величин 40 пмоль/л или менее, хотя при неделях 7-10 были обнаружены величины 137 и 219 пмоль/л. Пациентка, которая получала крем Премарин, имела сывороточные уровни Е2 83 пмоль/л при 2 неделях. Следует упомянуть, что взятие проб крови для измерения Е2 выполняли во время визита пациентки, так что тайминг, вероятно, не соответствовал наивысшим сывороточным уровням Е₂ после введения Вагифема. Следовательно, более вероятно, что величины, сообщенные в статье Кепба11, Эо\укеи е! а1. 2006, недооценивают, до неизвестной степени, истинное повышение сывороточного Е₂ после введения интравагинальной пилюли Вагифема или крема Премарина. Эти авторы сделали вывод, что применение Вагифема с ингибиторами ароматазы является противопоказанным. Эти открытия, полученные на женщинах, лечившихся ингибиторами ароматазы, поднимают серьезную проблему в отношении применения любого вагинального, а также любого перорального или трансдермального препарата эстрогена у постменопаузных женщин.

Относительно высокое повышение сывороточного Е₂ после лечения различными вагинальными препаратами эстрогенов, приводящее к увеличенному риску рака молочной железы, является широко признаваемой проблемой (КокепЪегд, Мадпиккоп е! а1. 2006). Хотя исследование, имеющее малое число событий и короткий мониторинг (подгруппа 4,7% среди 1472 женщин), не обнаружило статистически значимого различия в периоде ремиссии в подгруппе женщин, которые использовали вагинальный эстроген (Эеу, V^еη е! а1. 2003), не кажется разумным или приемлемым увеличение сывороточных уровней Е₂ во время терапии рака молочной железы, когда целью лечения ингибиторами ароматазы является

- 17 020683 именно достижение максимального ингибирования биосинтеза Е2.

В одном раннем исследовании с Вагифемом таблетка Е2 при введении в дозе 25 мкг приводила к сывороточным уровням Е₂ 80 пмоль/л с величинами, меньшими 50 пмоль/л при 14 ч и позже (Клюттд апй 1еп8еп 1986). В более недавнем исследовании с Вагифемом максимальные и средние сывороточные концентрации Е2 при 24 ч при измерении были равны 180±99 пмоль/л и 84 пмоль/л для дозы 25 мкг, тогда как величины 81±62 пмоль/л и 40 пмоль/л, соответственно, были обнаружены для дозы 10 мкг (№1еίονίΐζ, Риик е1 а1. 2002). Другие вагинальные таблетки и кремы эстрогенов приводили даже к более высоким уровням сывороточных эстрогенов (§ск|ГГ, Тйскпъку е1 а1. 1977; Ρίουχ, Οανίπι е1 а1. 2000).

С вагинальными таблетками 10 и 25 мкг Е₂ было обнаружено, что сывороточный Е₂ увеличивался до максимальных величин приблизительно 90 и 160 пмоль/л, соответственно, от фоновых величин приблизительно 35 пмоль/л (N^188οη апй Ненпег 1992). Сообщался сывороточный Е₂ с Вагифемом при С,,,_|кс 51±34 пг/мл в день 1, причем эта величина является практически неизмененной в дни 14 (47±21 пг/мл) и 84 (49±27 пг/мл) (УадГет, Ркуйшап Раскаде 1п8еп 1999).

В другом исследовании сообщалось, что после 52 недель лечения 25 мкг Вагифема сывороточные уровни Е₂ оставались неизмененными от 10,3±21,5 пг/мл - 9,9 пг/мл (Васктапп, Ε^ο е1 а1. 2008). Такие результаты могут объясняться тем фактом, что взятие проб крови выполняли, наиболее вероятно, спустя 3 или 4 дня после применения Вагифема. Важно также упомянуть, что повышенные сывороточные уровни Е2 в этом исследовании, наиболее вероятно, связаны с отсутствием специфичности используемых иммуноанализов, так как нормальные сывороточные уровни Е2, измеряемые масс-спектрометрией у постменопаузных женщин, являются в два-три раза более низкими (ЬаЪпе, Ве1апдег е1 а1. 2006).

В одном раннем исследовании пероральное и вагинальное введение 1,25 мг Премарина приводило к сывороточным уровням Е₂ и эстрона по меньшей мере до 100 пг/мл и 1000 пг/мл, соответственно, во время 24 ч после введения, причем эти уровни являются несколько более высокими после вагинального введения. Сывороточные уровни гонадотропина уменьшались у большинства субъектов (Епд1ипй апй •/οίκ-π^οι-ι 1978). Сходные результаты сообщались (Кгдд, Негтапп е1 а1. 1978). В одном недавнем исследовании после 3 месяцев ежедневного перорального или интравагинального введения 0,625 мг Премарина сывороточные уровни Е₂ увеличивались до 83,1 и 58,6 пг/мл соответственно (Бенд, Ыи е1 а1. 2006), иллюстрируя посредством этого очень важное системное воздействие как после интравагинального, так и после перорального введения эстрогена, так как сывороточный Е₂ был только на 36% более низким после интравагинального введения в сравнении с пероральным введением конъюгированных эстрогенов. В 12-недельном исследовании с вагинальным кремом Премарином при суточной дозе 2 г, три раза в неделю, 21% женщин испытывали кровотечение после теста прогестогена (№сккда11 1995). Кроме того, из этих женщин 12% показали увеличение толщины эндометрия при эхографии.

При применении вагинального кольца не сообщалось увеличение сывороточных уровней Е_ь Е₂ или Е₃ (Ыаскйда11 1995; 0ир1а, Οζе1 е1 а1. 2008), хотя значимые увеличения Е₁-§ и Е₂ наблюдали у женщин в возрасте более 60 лет (Nае88еи, Κοй^^диеζ-Мас^а8 е1 а1. 2001). В группе Е§Т-кольца недавнего исследования сывороточный Е₂ увеличивался от 16±22 пмоль/л до 49±64 пмоль/л при неделе 24 ^е18Ъегд, Лу&п е1 а1. 2005). В группе Вагифема, с другой стороны, сывороточный Е₂ увеличивался от 15±33 до 36±51 пмоль/л. Тем не менее, эти авторы сообщали, что сывороточный Е₂ оставался в пределах или вблизи величин, обнаруживаемых в здоровых постменопаузальных женщинах. При 48 неделях лечения с использованием Е§Т-кольца или УадГет, 30-32% жаловались на частоту мочеиспускания и 18-33% жаловались на диспареунию ^е18Ъегд, ЛуЮп е1 а1. 2005).

Три исследования документировали, что вагинальное кольцо Е2 делает возможным низкий сывороточный Е₂ во время 90-дневного периода, за исключением «вспышки» сывороточного эстрогена, который достигает более низкой области вспышек, наблюдаемых в женщинах с нормальным менструальным циклом, или 100-200 пмоль/л во время первых 0,5-8 ч после вставления кольца (НШтдгеп, ^^ηЙ8кοд е1 а1. 1989; §скт1Й1, Αпйе^88οп е1 а1. 1994) (Вакег апй йаГГе 1996). что суточная доставка 7,5 мкг Е₂ интравагинальным способом, имеет системные действия, показано наблюдением значимого увеличения плотности минеральных веществ в костях всего бедра и поясничной области позвоночника после 2 лет лечения такой интравагинальной дозой Е₂ (§а1тшеп, §ааГ е1 а1. 2007).

Как упоминалось выше, существует озабоченность в отношении стимуляторных действий вагинальных эстрогенов на эндометрий (Ы.Л.М.§. 2007). После 12 недель лечения 32 женщин 25 мкг интравагинального Е₂ (Вагифема), одна пациентка имела простую гиперплазию без атипии (Васктапп, Ε^ο е1 а1. 2008). В 24-недельном исследовании, включающем в себя 80 женщин, был обнаружен один случай пролиферативного эндометрия (Ρίοιιχ, ^еν1^п е1 а1. 2000), а в другом 52-недельном исследовании с 31 женщиной две имели пролиферативный эндометрий (МеЫег апй О18еп 1991).

В 12-недельном исследовании с вагинальным кремом Премарином в дозе 2 г, три раза в неделю, 21% женщин испытывали кровотечение после теста с прогестагеном (№скйда11 1995). Из них 12% обнаруживали увеличение толщины эндометрия согласно эхографии. Применение дозы 0,3 мг конъюгированных эстрогенов, вводимой интравагинально три раза в неделю, может индуцировать пролиферацию эндометрия, хотя и редко, так как пролиферацию эндометрия наблюдали только в одном из двадцати

- 18 020683 случаев (ЫасШдаЦ 1995).

Кольцо эстрадиола с пролонгированным высвобождением (ΕδΤ-кольцо) индуцировало пролиферацию эндометрия, сходную с вызываемой 0,625 мг крема Премарина (Лу1оп, ЭагПпд е! а1. 1996), но меньшую чем 1,25 мг крема Премарина (№сйгда11 1995). Фактически было показано, что как вагинальное кольцо (ΕδΤ-кольцо), так и крем с конъюгированными эстрогенами (крем Ргетапп) индуцируют пролиферацию эндометрия (№сЬ!1да11 1995; Αу!οη, ЭагПпд е! а1. 1996). Два случая умеренной пролиферации или гиперплазии эндометрия в эндометриальном полипе были обнаружены с кольцом Ε₂ (ЫасЬйдаП 1995), тогда как два случая гиперплазии (один простой и один сложный, без атипии) были обнаружены с кремом конъюгированных эстрогенов в испытании крема конъюгированных эстрогенов в сравнении с таблеткой Ε₂ (Ктоих, ЭеуПп е! а1. 2000). Вагинальная таблетка Ε₂ была ассоциирована с эндометриальной гиперплазией, подобно вагинальной таблетке эстрадиола (Оида1, Ие81а е! а1. 2000; Мапопац Τ1^ρρί8;·ιί е! а1. 2001), но в меньшей степени, чем крем конъюгированных эстрадиолов (Мапопац ΤЬерр^8а^ е! а1. 2001).

Хотя уровни эстрогена в сыворотке увеличиваются до более низкой степени после локального интравагинального применения в сравнении с пероральной или подкожной ΗΚΤ или ΕΚΤ, риск рака молочной железы остается проблемой, и безопасность интравагинальных эстрогенов является сомнительной (ЗискНпд, Ье!ЬаЬу е! а1. 2006; Ν.Α.Μ.δ. 2007). Действительно, хотя увеличение сывороточных эстрогенов является более низким после интравагинального способа введения в сравнении с пероральным или чрескожным способом введения, оно значимо повышается выше нормальных постменопаузных уровней для всех интравагинальных препаратов эстрогенов (Роп/опе, ВщПа е! а1. 2005).

Кроме увеличенного риска рака молочной железы, ассоциированного с введением эстрогенов, важно помнить о том, что истинное гормональное различие между постменопаузными женщинами, которые не страдают от вагинальной атрофии (оцениваемой при 25% постменопаузной популяции), и остальными 75% постменопаузных женщин, которые страдают от вагинальной атрофии (\Уте8 апй \УП181еей 2001; Ν.Α.Μ.δ. 2007), не связано с секрецией эстрогенов в системный кровоток, так как секреция эстрогенов яичниками прекращается у всех женщин во время менопаузы (климакса). Вследствие этого дефицит секреции эстрогенов не является достоверным объяснением наличия симптомов вагинальной атрофии у большинстве постменопаузных женщин.

Однако образование половых стероидных гормонов не останавливается с прекращением функции яичников в менопаузе. Недавний прогресс в понимании эндокринной физиологии у женщин показывает, что после менопаузы, ΌΗΕΑ, секретируемый надпочечниками, является единственным источником половых стероидных гормонов, производимых исключительно в тканях-мишенях (ЬаЬпе 1991). В отличие от эстрогенов яичникового происхождения, которые секретируются в общий кровоток, где они могут быть измерены, ΌΗΕΑ является неактивным предшественником, который превращается в периферических тканях при различных скоростях в соответствии с уровнем экспрессии стероидогенных ферментов в каждой ткани. Этот процесс интракринологии делает возможным локальное внутритканное образование активных половых стероидных гормонов без существенного высвобождения этих активных стероидов в кровоток (ЬаЬпе, Оироп! е! а1. 1985; ЬаЬпе, Ве1апдег е! а1. 1988; ЬаЬпе 1991; ЬаЬпе, Ειιιι-ΤΙκ е! а1. 2005).

Однако секреция ΌΗΕΑ уменьшается с возрастом, причем 60% уменьшение наблюдается уже к моменту менопаузы (ЬаЬпе, Ετιιι-ΤΙ^ е! а1. 2003; ЬаЬпе, Ве1апдег е! а1. 2005; ЬаЬпе, Ετιιι-ΤΙ^ е! а1. 2005; ЬаЬпе, Ве1апдег е! а1. 2006; ЬаЬпе, Ειιιι-ΤΙκ е! а1. 2006; ЬаЬпе 2007). Единственным различием между симптоматическими и асимптоматическими женщинами является количество ΌΗΕΑ, секретируемое надпочечниками, или чувствительность вагинальной ткани к ΌΗΕΑ. Это различие чувствительности различных женщин, связано, по-видимому, до неизвестной степени, с уровнем активности ферментативного аппарата, специфического для каждого типа ткани, в каждой ткани (ЬаЬпе 1991; ЬаЬпе, Ве1апдег е! а1. 2005). С этим пониманием ясно, что именно ΌΗΕΑ, а не эстрогены, является физиологической гормональной заместительной терапией для постменопаузных женщин.

Как хорошо продемонстрировано в предыдущих исследования авторов этого изобретения (ЬаЬпе 1991; ЬаЬпе, Ειιιι-ΤΙκ е! а1. 2003; ЬаЬпе, Ειιιι-ΤΙκ е! а1. 2005; ЬаЬпе, Ве1апдег е! а1. 2007), дополнение физиологическими количествами экзогенного ΌΗΕΑ делает возможным биосинтез андрогенов и/или эстрогенов только в подходящих тканях-мишенях, которые содержат требуемые стероидогенные ферменты интракринологии (ЬаЬпе, Ετιιι-ΤΙ^ е! а1. 2005). Активные андрогены и эстрогены, синтезированные локально из ΌΗΕΑ в периферических тканях-мишенях, проявляют их действие в тех же самых клетках, в которых происходит их образование. Наиболее важно, что имеет место очень небольшая утечка этих активных половых стероидных гормонов в кровоток, что объясняет заметные полезные эффекты, наблюдаемые в вагине, без значимого изменения в циркулирующих эстрогенах или андрогенах (ЬаЬпе, Си8ап е! а1. 2008). Этот локальный биосинтез, действие и инактивация эстрогенов и андрогенов в тканях-мишенях элиминирует подвергание других тканей действию избытка половых стероидов и, следовательно, элиминирует увеличенные риски нежелательных побочных действий от повышенного воздействия эстрогенов, в том числе рака молочной железы, рака яичников и рака матки (ОатЬге11, Μа88еу е! а1. 1980; Рег88оп, Αйат^ е! а1. 1989; δ!е^пЬе^д, ^аскег е! а1. 1991; Уощ1, \Уе188 е! а1. 1991; δΗ^ΐΌ-ΑΐΌ!'^, ЭеЦайо- Койгщие/ е! а1. 1992; СоИН/, Ε^ιι е! а1. 1993; Иск, \Уа1кег е! а1. 1993; Со1Й11/, Иапкш8оп е! а1. 1995; Огайу, ОеЬге!8аЙ1к е! а1. 1995; Со11аЬогайуе Огоир оп Иогтопа1 Рас!ог8 ш Вгеа8! Сапсег 1997; Оагд, КегПко\У8ке е! а1.

- 19 020683

1998; СоидЬЪп, Οίπδΐοζζί е! а1. 2000; Ни11еу 2002; Ьасеу, М1пк е! а1. 2002; Риман Июктап е! а1. 2002; КобΑικζ, Ра!е1 е! а1. 2002; Коззоите, Лпбегзоп е! а1. 2002; Вега1 2003; СЫеЬо\Узкк Непбпх е! а1. 2003; Но1тЬегд апб Лпбегзоп 2004; Вега1, Ви11 е! а1. 2005; Ьуубпеп, Рикка1а е! а1. 2006; Соггао, 2атЬоп е! а1. 2008; Но1тЬегд, кегзеп е! а1. 2008; Ы, Р1иттег е! а1. 2008).

Изменение рН признается теперь валидным (достоверным) параметром, который отражает полезное действие терапии вагинальной атрофии. После 12 недель интравагинального лечения 25 мкг Е₂, процент пациентов, имеющих рН менее 5,0, был равен 51% в сравнении с 21% в группе плацебо (ВасЬтапп, ЬоЬо е! а1. 2008). Однако при фоне 11,2% и 13% женщин имели рН ниже 5,0 в этих двух соответствующих группах. В клиническом исследовании ЕКС-210 (пример 3), ни один пациент не имел рН ниже 5,0 в начале терапии и 12, 36, 46 и 48% имели величины рН ниже 5,0 при 12 неделях в группах 0, 0,25, 0,5 и 1,0% ИНЕЛ соответственно.

В клиническом исследовании ЕКС-210 (пример 3) это действие ЭНЕЛ на созревание вагинальных эпителиальных клеток было особенно быстрым: с влагалищной овулой 0,5% ИНЕА, 79% максимального действия на парабазальные клетки наблюдали уже при 2 неделях, тогда как 48% максимального стимуляторного действия проявлялись на поверхностных клетках при том же самом временном интервале. С другой стороны, 85% максимальное стимуляторное действие 0,5% ИНЕЛ на процент поверхностных клеток достигалось при 4 неделях. Подобным образом, 63% максимального действия 0,5% ИНЕЛ на наиболее беспокоящий симптом наблюдали при 2 неделях и 87% достигали при 4 неделях. Кроме того, только 17,8% женщин сообщали об отсутствии изменений в их наиболее беспокоящем симптоме при 12 неделях в группе 0,5% ИНЕА в сравнении с 48,8% в группе плацебо.

Действие ЭНЕЛ на парабазальных клетках является быстрым, так как % парабазальных клеток уменьшался до менее 20% при одном месяце с тремя используемыми дозами ИНЕЛ. Действие на % поверхностных клеток является также очень быстрым с 100% эффектом, наблюдаемым при 2 неделях с высокой (1%) дозой ИНЕА. В исследовании с вагинальным кремом или таблеткой эстрогена приблизительно 50% эффекта, измеренного при 12 неделях, наблюдали при 2 неделях (Кюих, Иеу1ш е! а1. 2000). Такие результаты показывают, что скорость эффекта ЭНЕЛ не является худшей, а является, возможно, лучшей относительно эффекта вагинальных препаратов Е₂ и конъюгированных эстрогенов.

В одном исследовании действия пероральных эстрогенов в 71 постклимактерической женщине, суточное введение 0,3 мг пероральных синтетических конъюгированных эстрогенов уменьшало парабазальные клетки от 23 до 2,3%, в то время как поверхностные клетки увеличивались в количестве от 2,1 до 15,9% (Магх, ЗсЬабе е! а1. 2004). В одном исследовании, сравнивающем дозы 0,3 и 0,625 мг конъюгированных лошадиных эстрогенов (ИЬап, §Ьоире е! а1. 2001), доза 0,625 мг показала большее действие на % поверхностных клеток.

В одном недавнем исследовании, вагинальная величина зрелости (УМУ) увеличивалась с 27,45 при фоне до 56,85 (р<0,0001) в обработанной эстрогеном группе (81топ, Кеаре е! а1. 2007). Процент поверхностных клеток увеличивался на 17,15 от фона, тогда как процент парабазальных клеток уменьшался на 41,66% в обработанной эстрогеном группе. В том же самом исследовании вагинальный рН уменьшался от 6,64 при фоне до 5,05 (уменьшение 1,69 или 24%) в группе эстрогена. Тяжесть наиболее беспокоящих симптомов уменьшалась от 2,58 до 1,04 (-1,54) в группе эстрогена в сравнении с уменьшением от 2,59 до 1,84 (-0,75) в группе плацебо. Такие результаты, наблюдаемые с эстрогенами, сравнимы с уменьшением 1,56 тяжести наиболее беспокоящих симптомов при 12 неделях в группе 0,5% ИНЕА и уменьшением 0,67 в группе плацебо, наблюдаемой в клиническом исследовании ЕКС-210 (пример 3).

При неделе 12 11% субъектов группы Е§Т-кольца и 24% субъектов группы Вагифема имели стойкий атрофический эпителий. При неделе 48 соответствующие величины были равны 8 и 14% (^е1зЬетд, Ау!оп е! а1. 2005). При 48 неделях лечения с использованием Вагифема или Е§Т-кольца, сухость вагины все еще присутствовала у 33% женщин (^е1зЬетд, Ау!оп е! а1. 2005). С другой стороны, зуд вульвы присутствовал у 15 и 20% женщин после лечения с использованием Е§Т-кольца и Вагифема, соответственно, в то время как 33 и 28% женщин все еще имели диспареунию после лечения с использованием Е8Ткольца и Вагифема соответственно. Кровотечение после теста прогестагена было 7% в группе Вагифема и 0% в группе Е§Т-кольца.

После 3 месяцев ежедневного введения 0,625 мг Премарина перорально или интравагинально (в виде крема) наблюдали 70,6 и 75% улучшения диспареунии (Ьопд, Ыи е! а1. 2006). В этом исследовании был сделан вывод, что 1 г 0,625 мг Премарина был минимальной дозой для лечения половой дисфункции.

У женщин, которые получали 25 мкг Е₂ интравагинально, диспареуния сохранялась в 12,4% случаев после 12 месяцев лечения (Штишс, Вапоую е! а1. 2003). Степень успеха терапии локальными таблетками Е₂ 84.5%, согласно оцениванию пациентами, и 86,1%, согласно оцениванию врачами (Штишс, Вапоую е! а1. 2003). ВасЬтап е! а1., 1992 (ВасЬтапп, Ыо!е1оуЬ2 е! а1., 1992) сообщали, что 40-50% женщин, получающих пероральную заместительную терапию с использованием эстрогена, имели постоянные жалобы на сухость вагины.

Как сообщалось ранее, после 12 месяцев лечения ИНЕА (ЬаЬпе, И1атопб е! а1. 1997) клиническое исследование ЕКС-210 (пример 3) не обнаруживает действия на гистологию эндометрия после 3 месяцев

- 20 020683 интравагинального введения предшественника гормона ΌΗΕΑ, как показано гистопатологическим обследованием эндметриальных биопсий, полученных до и после 12 недель лечения. Эти открытия находятся в согласии с отсутствием ароматазной активности в эндометрии человека (Вахепда1е, Кеед е! а1. 1981; Ви1ип, Ып е! а1. 2005). Эти открытия в сильной степени поддерживаются широко признаваемым клиническим наблюдением, что эндометриальная атрофия является характеристикой постменопаузы, несмотря на непрерывную секрецию ΌΗΕΑ на протяжении жизни (ЬаЪпе, Ьии-ТЬе е! а1. 2005; ЬаЪпе, Ве1апдег е! а1. 2006). Отсутствие в эндометрии человека стероидогенных ферментов, необходимых для превращения ΌΗΕΑ в эстрогены, находится в согласии с физиологической ролью эндометрия, который является активным исключительно во время репродуктивных лет, когда его функция, по существу, контролируется гормонами, происходящими из яичников и плаценты. После наступления менопаузы нет физиологической роли эндометрия, которая могла бы корректировать любое продолжающееся действие эстрогенов после прекращения секреции эстрогенов яичниками. Таким образом, ферменты, необходимые для синтеза эстрогенов из ΌΗΕΑ, не экспрессируются в эндометрии, который является тканью, полностью зависимой от эстрогенов, происходящих из яичников.

Давно было известно, что эстрогены, вводимые отдельно, стимулируют пролиферацию эндометрия (διηίΐΐι. Ргепйсе е! а1. 1975), тогда как прогестины, вводимые в комбинации с эстрогенами, ингибируют стимулирующее действие эстрогенов (Рее1еу апд ^Уе11к 2001). Поскольку рецепторы андрогенов экспрессируются в эндометрии и строме человека (Μе^!еη5. Иешетап е! а1. 1996), интересно упомянуть, что клиническое исследование, которое исследовало действие андрогенов, не показало действия на эндометрий относительно высокой дозы тестостерона у постменопаузных женщин (ундеканоата тестостерона, 40 мг каждый второй день) (2ап§, §аЫш е! а1. 2007). У женщин, которые получали валерат эстрадиола (2 мг/день), Κί-мечение увеличивалось на 50% при 3 месяцах лечения, тогда как одновременное введение тестостерона уменьшало пролиферацию до 28%. К167-мечение увеличивалось только в двух группах, получающих эстроген, но уменьшалось добавлением тестостерона в строму. Хотя и не было стимулирующего действия на пролиферацию эндометрия у женщин, тестостерон, по-видимому, проявлял некоторое антиэстрогенное действие в эндометрии.

Хотя руководство ΡΌΑ поощряет спонсоров в отношении разработки самых низких доз и воздействий как для эстрогенов, так и для прогестинов, по мнению авторов этого изобретения, следует признать, что хотя эстрогены являются эффективными в коррекции симптомов вагинальной атрофии и вазомоторных симптомов, системные эстрогены не являются физиологическими гормонами, которые позволяют 25% постменопаузным женщинам избежать умеренных-тяжелых симптомов вагинальной атрофии. Эти женщины остаются относительно бессимптомными на протяжении всех их менопаузных лет, поскольку единственным источником половых стероидных гормонов у постменопаузных женщин как симптоматических, так и асимптоматических, является локальный биосинтез эстрогена и андрогена из ΌΗΕΑ надпочечников при помощи механизмов интракринологии. Заместительная терапия с использованием ΌΗΕΑ является единственным физиологическим подходом, который позволяет обеспечивать женщин, страдающих от постменопаузных симптомов, недостающим количеством ΌΗΕΑ, ответственным за их симптомы. С использованием этого подхода, называемого заместительной терапией с использованием предшественника гормона (ΗΡΚΤ), вагинальная атрофия и вазомоторные симптомы должны корректироваться с риском, не превышающим риск таких же постменопаузных женщин, которые не имеют симптомов вагинальной атрофии, вследствие более высокого подвергания действию ΌΗΕΑ и половых стероидных гормонов, производимых внутриклеточно процессом интракринологии.

Предшественники половых стероидных гормонов, вводимые в соответствии с этим изобретением, предпочтительно вводят в диапазоне доз (1) 0,5-100 мг в день (предпочтительно 3-50 мг в день и наиболее предпочтительно 3-13 мг в день) при интравагинальном введении; (2) в диапазоне доз 15-200 мг в день (предпочтительно 30-100 мг в день) при введении на кожу; (3) в диапазоне доз 1-200 мг в день (предпочтительно 25-100 мг в день), например 75 мг в день, при пероральном введении или (4) в диапазоне доз 1,0-25 мг в день (предпочтительно 3,25-20 мг в день) при парентеральном введении (т.е. внутримышечном или подкожном).

В фармацевтической композиции для вагинального введения ΌΗΕΑ или другой предшественник предпочтительно присутствует в концентрации 0,1-10 мас.% относительно общей массы этой композиции, более предпочтительно 0,2-3,0%, в частности 0,25-2,0%. Например, 1,3 мл вагинального суппозитория, имеющего 0,5 мас.% ΌΗΕΑ (относительно массы всей композиции), вводимые один раз в день, обеспечивают желательно 6,5 мг/день ΌΗΕΑ. Могут быть использованы большие или меньшие суппозитории, так же как и отличающиеся концентрации при сохранении дозы в этом желаемом диапазоне.

В фармацевтической композиции для введения на кожу ΌΗΕΑ или другой предшественник предпочтительно присутствует в концентрации 0,1-10 мас.% относительно общей массы этой композиции, более предпочтительно 0,2-2,0%, в частности 0,3-1,5%.

В фармацевтической композиции для перорального введения ΌΗΕΑ или другой предшественник предпочтительно присутствует в концентрации 5-98 мас.% относительно общей массы этой композиции, более предпочтительно 10-50%, в частности 15-40%.

В фармацевтической композиции для парентерального введения (т.е. внутримышечного или под- 21 020683 кожного), ВНЕА или другой предшественник предпочтительно присутствует в концентрации 0,2-25 мг/мл, более предпочтительно 0,65-15 мг/мл, в частности 2-10 мг/мл.

Пример эффективности изобретения

Пример 1. Клиническое исследование ЕКС-213: биодоступность ЭНЕА после введения вагинальных суппозиториев у постменопаузных женщин с вагинальной атрофией в рандомизированном, плацебоконтролируемом исследовании фазы I; фармакокинетика и локальное действие ежедневного введения вагинальных суппозиториев РНЕА в течение одной недели.

Первичной целью этого изобретения было оценивание системной биодоступности ВНЕА и его метаболитов после ежедневного интравагинального введения суппозиториев при четырех различных концентрациях ЭНЕА. Это исследование было рандомизированным, плацебоконтролируемым и двойным слепым исследованием с 10 субъектами на одну ветвь исследования. Таким образом, сорок постменопаузных женщин рандомизировали для получения суточной дозы одного суппозитория следующих концентраций ЭНЕА: 0,0%, 0,5% (6,5 мг ВНЕА/суппозиторий), 1,0% (13 мг ВНЕА/суппозиторий) или 1,8% (23,4 мг ВНЕА/суппозиторий).

Индекс зрелости, а также вагинальный рН измеряли при предобработке, а также после 7 дней лечения для получения указания на локальное действие ВНЕА во время короткого периода времени.

Как иллюстрируется на фиг. 1В, в табл. 1 и 2, ежедневное интравагинальное введение 1,3 мл суппозитория, содержащего 0,5, 1,0 и 1,8% ВНЕА, приводило к прогрессирующему увеличению сывороточного ВНЕА с величинами АИС_0-24ч 24,8±4,8 нг-ч/мл, 56,2±8,9 нг-ч/мл (р <0,05), 76,2±10,3 нг-ч/мл (р <0,01) и 114,3±9,97 нг-ч/мл (р <0,01) соответственно. Таким образом, имелись увеличения 127, 207 и 361% над контролем при дозах 0,5, 1,0 и 1,8% ВНЕА соответственно. Как наблюдалось для всех других стероидов, сходные величины АИС_0-24ч в дни 1 и 7.

Действительно, средняя величина 4,76±0,42 нг/мл ВНЕА после лечения самой высокой дозой (табл. 2) является сходной с величиной 4,47±2,19 нг/мл, обнаруженной у сорока семи (47) 30-35-летних предменопаузных здоровых женщин (ЬаЬпе, Ве1апдег е! а1. 2006). Этот сывороточный ВНЕА после любой из использованных доз ВНЕА остается в пределах границ здоровых предменопаузных женщин, как хорошо иллюстрировано на фиг. 7 А.

Как наблюдалось ранее после перорального или подкожного введения ВНЕА (ЬаЬпе, Ве1апдег е! а1. 2007), сывороточный 5-диол обнаруживает картину, почти совмещаемую с картиной ВНЕА, хотя наблюдаются гораздо более низкие концентрации. Действительно, величина АИС_0-24ч увеличивается от 5,60+ 0,60 нг-ч/мл в группе плацебо в день 7 до 9,83±1,14 (р <0,05), 13,8±1,87 (р <0,01) и 21,0±1,66 (р <0,01) при дозах 0,5, 1,0 и 1,8% ВНЕА соответственно (Ш, табл. 1). Такие изменения соответствуют 75, 147 и 276% увеличениям над контролем. Только доза 1,8% ВНЕА вызывает увеличения сывороточного 5-диола, превышающие величины, обнаруженные у здоровых предменопаузных женщин (фиг. 7В) во время 24 ч после ежедневного интравагинального введения ВНЕА в день 7.

Величина АИС_0-24ч сывороточного тестостерона (Тесто) не обнаруживала значимого изменения при дозе 0,5% (2,79±0,30 нг-ч/мл против 2,58±0,33 нг-ч/мл в группе плацебо) (фиг. 2В). При дозах 1,0 и 1,8% были обнаружены величины АИС_0-24ч 4,54±0,91 нг-ч/мл (р <0,05) и 5,97±0,69 нг-ч/мл (р <0,01) (табл. 1). Эти величины соответствуют средним сывороточным уровням Тесто 0,11±0,01 (Ν.8.), 0,12±0,01 (Ν.8.), 0,19±0,04 (р <0,05) и 0,25±0,03 (р <0,01) нг/мл соответственно. Даже при наивысшей использованной дозе 1,8% ВНЕА, уровни сывороточного Тесто оставались в пределах нормального диапазона предменопаузных женщин, измеренного при 0,18±0,07 нг/мл (0,06-0,31, 5-95-тый процентили) (ЬаЬпе, Ве1апдег е! а1. 2006) (фиг. 7Е). С другой стороны, доза 1,0% (0,18±0,07 нг/мл) соответствует точно величинам, обнаруженным у здоровых предменопаузных женщин, а именно 0,19±0,4 (фиг. 7Е).

На фиг. 2С и Б сывороточный БИТ увеличивался от величины АИС_0-24ч 0,58±0,07 нг-ч/мл в группе плацебо в день 7 до 0,93±0,11 (Ν.8.), 1,31±0,26 (р <0,05) и 1,93±0,23 (р <0,01) нг-ч/мл в группах 0,5, 1,0 и 1,8% ВНЕА соответственно (табл. 2). Эти величины соответствуют средним сывороточным уровням БНТ 0,02±0,01, 0,04±0,01, 0,05±0,01 и 0,08±0,01 нг/мл (табл. 2), достигая, следовательно, при наивысшей дозе ВНЕА, нормальных уровней сывороточного БНТ 0,07±0,03 нг/мл, наблюдаемых у предменопаузных женщинах (ЬаЬпе, Ве1апдег е! а1. 2006) (фиг. 7Р).

Средние уровни сывороточного Е₁ измеряли при 12,6±1,41 нг/мл в группе плацебо в день 7 (табл. 2), в то время как при дозе 0,5% ВНЕА не было значимого изменения (15,4±2,04 нг/мл). Увеличение до 24,1±3,54 нг/мл (р <0,01) и 25,0±2,85 нг/мл (р <0,01) наблюдали при дозах 1,0 и 1,5% ВНЕА соответственно. Соответствующие величины АИС_0-24ч показаны на фиг. 3В и указаны в табл. 1.

Средние уровни сывороточного Е₂ измеряли при 2,77±0,29 пг/мл и 4,04±0,69 пг/мл (Ν.8.) в группах плацебо и 0,5% ВНЕА соответственно (табл. 2). Средние сывороточные концентрации Е₂ 6,01±1,31 пг/мл (р <0,05) и 5,68±0,84 пг/мл (р <0,05) обнаруживали в день 7 у женщинах, которые получали дозы 1,0 и 1,8% ВНЕА, с абсолютными увеличениями 3,18 и 2,85 пг/мл над плацебо соответственно. Сравнимые открытия наблюдали для средних сывороточных уровней Е1-8 со средними сывороточными уровнями 0,12±0,02 нг/мл и 0,13 нг/мл (Ν.8.) в группе плацебо и группе 0,5% ВНЕА соответственно (табл. 2). Ве- 22 020683 личины 0,18±0,03 нг/мл и 0,25±0,25 нг/мл измеряли в группах 1,0 и 1,8% ЭНЕЛ соответственно. Только группа 1,8% ЭНЕА обнаруживает статистическое различие (р <0,01) с группой плацебо.

Как можно видеть в 4В и Ό, сравнимую картину наблюдали как для Е₁-§, так и для ЭНЕЛ-§. Величину ЛИС_0-24ч сывороточного ЭНЕЛ-§ измеряли при 8,35±2,22 нг-ч/мл в группе плацебо и 13,3±3,16 нг-ч/мл в группе 0,5% ЭНЕЛ дгоир (Ν.§.). С двумя более высокими дозами ЭНЕЛ, величины ЛИС_0-24ч измеряли при 16,5±2,71 нг-ч/мл (Ν.§.) и 19,3±3,59 нг-ч/мл (р <0,05) соответственно (фиг. 4Ό, табл. 1). Эти величины ЭНЕЛ-§ при всех дозах ЭНЕЛ остаются ниже уровней сывороточного ОНЕЛ-§, наблюдаемых у предменопаузных женщин, которые обнаруживают среднее 1,27±0,62 нг-ч/мл (7С).

Как иллюстрировано на фиг. 5В, величины ЛИС_0-24ч сывороточного 4-диона после введения ЭНЕЛ в день 7 измеряли при 6,34±0,80 и 8,71±0,84 нг-ч/мл (Ν.§.) в группе плацебо и группе 0,5% ЭНЕЛ соответственно. При этих двух более высоких дозах ОНЕЛ, величины ЛИС_0-24ч 4-диона слегка увеличивались до 11,1±1,51 (р <0,01) и 11,9±0,81 (р <0,01) нг-ч/мл соответственно. Как можно видеть в 7Ό и табл. 2, все эти величины сывороточного 4-диона оставались гораздо более низкими, чем средние концентрации сывороточного 4-диона, наблюдаемые у здоровых предменопаузных женщин. Действительно, наивысшая доза ЭНЕА приводила к средним концентрациям сывороточного 4-диона 0,50±0,03 нг/мл, тогда как средняя величина у 30-35-летних имеющих менструальный цикл женщин равна 0,96±0,35 нг/мл (ЬаЪпе, Ве1апдег е! а1. 2006) (АррепФх Т), достигая, следовательно, только 50% уровней сывороточного 4-диона, наблюдаемых у предменопаузных женщин.

С учетом решающей роли измерений сывороточных уровней АЭТ-0, 3а-диол-30 и 3а-диол-170 (ЬаЪпе, Ве1апдег е! а1. 2006) интересно отметить, что в 5Ό и табл. 2 сывороточные уровни АЭТ-0 увеличивались от средней величины 6,97±1,20 нг/мл в группе плацебо до 19,2+3,99 нг-ч/мл в группе 0,5% ЭНЕА (ρ <0,01). Величины 19,7±2,48 и 25,7±2,88 нг-ч/мл были измерены в группах 1,0 и 1,8% ЭНЕА соответственно (р <0,01 против групп плацебо для обеих ОНЕА-обработанных групп). Сходные изменения можно видеть для минорных метаболитов андрогена 3а-диол-30 и 3а-диол-170 (6В, 6Ό, 8В и 8С, табл. 1 и 2). Важно указать на то, что, как показано на фиг. 8, даже при наивысшей использованной дозе ЭНЕА средние сывороточные уровни ЛЭТ-О, 3а-диол-30 и 3а-диол-170 оставались 36, 11 и 6% ниже средних сывороточных уровней, обнаруженных у предменопаузных женщин.

Как показано в табл. 2, сумма глюкуронидов метаболитов андрогена, измеренная на протяжении 24часового периода в день 7 введения 1,3 мл суппозитория, содержащего 1,8% ЭНЕА (23,4 мг ЭНЕА), равна только 28,2 нг/мл, тогда как средняя сывороточная концентрация того же самого метаболита у 30-35летних предменопаузных женщин равна 42,8 нг/мл (ЬаЪпе, Ве1апдег е! а1. 2006) (приложение 2). Таким образом, наивысшая использованная доза ЭНЕА приводит только к 65,7% величины, соответствующей общим метаболитам андрогенов, обнаруживаемой у здоровых имеющих менструальный цикл женщин. С другой стороны, дозы 0,5 и 1,0% ЭНЕА приводят к суммам метаболитов андрогенов 21,02 и 21,53 нг/мл соответственно, что соответствует, следовательно, только 49,0 и 50,2% величин, наблюдаемых у предменопаузных женщин (фиг. 9). Авторы этого изобретения обнаружили ранее, что ежедневное пероральное введение 100 мг ЭНЕА приводит к 74% уровней, обнаруживаемых у предменопаузных женщин (ЬаЪпе, Ве1апдег е! а1. 2007).

Авторы этого изобретения наблюдали, что после перорального или подкожного введения ОНИА, изменения в сывороточном ЭНЕА являются приблизительно на 100% завышенной оценкой изменений в образовании стероидов, отражаемых изменениями в сывороточных АОТ-О, 3а-диол-3О и 3а-диол-17О (ЬаЪпе, Ве1апдег е! а1. 2007). Как можно видеть на фиг. 9, средние уровни сывороточного ЭНЕА менялись от 23% величины, наблюдаемой у предменопаузных женщин группы плацебо, до 52, 71 и 106% у женщин, которые получали дозы 0,5, 1,0 и 1,8% ЭНЕА соответственно. Данные фиг. 9 показывают, что изменения в сывороточном ЭНЕА после интравагинального введения ЭНЕА также являются завышенной оценкой изменений в образовании андрогенов и, возможно, даже более в образовании эстрогенов, как иллюстрируется даже еще более низкими количествами сывороточного Е₁-§ (табл. 1). Действительно, при дозе 1,0% сывороточные метаболиты андрогенов увеличивались на 31,6% величины, обнаруживаемой у предменопаузных женщин, тогда как сывороточный ЭНЕА увеличивался на 49,1% (превышение на 55%). При наивысшей дозе ЭНЕА сывороточные метаболиты андрогенов увеличивались на 47,1%, тогда как сывороточный ЭНЕА увеличивался на 83,5 (превышение 77%).

- 23 020683

Таблица 1

Величины площадей под кривой (АИС_{0-24 ч}) ЭНЕЛ и одиннадцати его метаболитов в дни 1 и 7 ежедневного введения интравагинальных суппозиториев 40-75-летним постменопаузным женщинам с вагинальной атрофией

Группа	Вели- чина	ϋΗΕΑ	5-ОЮЬ	ТЕ5ТО	ϋΗΤ	Е1	Е2
День 1 нг ч/мл	День 7 пг ч/мл	День I нг ч/мл	День 7 пгч/мл	День 1 нг ч/мл	День? пг ч/мл	День 1 нг ч/мл	День 7 пг ч/мл	День 1 нг ч/мл	День? пг ч/мл	День 1 нг ч/мл	День 7 пгч/мл
Плацебо	Среднее	24,47	24,82	5,55	5,60	2,71·	2,58'	0,61	0,58	305,58	301,92	69,51	66,49
	5ΕΝ	4,80	4,77	0,59	0,60	0,34	0,33	0,08	0,07	34,56	33,77	7,63	6,90
ϋΗΕΑ	Среднее	65,49	56,17	10,91	9,83	2,79	2,79	0,91	0,93	326,52	369,69	87,79	96,93
0 5%	БЕМ	7,50	8 94	1,03	1,14	0,29	0,30	0,10	0,11	37,96	48,86	11,34	16,46
ϋΗΕΑ	Среднее	74,82	76,22	12,09	13,84	3,79	4,54	1,11	1,31	418,08	578,59	101,57	144,34
1 0%	ЗЕМ	6,71	10,28	1,66	1,87	0,70	0,91	одз	0,26	70,91	84,90	22,97	31,47
ЬНЕа	Среднее	123,52	114,30	18,98	21,04	5,13	5,97	1,62	1,93	433,74	600,93	89,76	136,28
1 8%	ЗЕМ	9,43	9,96	1,05	1,66	0,72	0,69	0,19	0,23	37,68	68,35	11,65	20,27

Г руппа	Е1-5	ВНЕА-5	4 Ό1ΟΝΕ	АВТ-0	За-ОЮЬ-ЗО	Зв-0101.· 170
День 1 нг ч/мл	День 7 пгч/мл	День 1 мкг ч/мл	День? мкг ч/мл	День 1 нгч/мл	День 7 пг ч/мд	День 1 нг ч/мл	День 7 пг ч/мл	День 1 нгч/мл	День? пг ч/мл	День 1 нг ч/мл	День? пг ч/мл
Плацебо	3,15	2,93	8,71	8,35	6,23	6,34	176,53	167,39	12,00	12,00	12,53	12,20
	0,62	0,47	2,41	2,22	0,71	0,80	30,86	28,8?	0,00	0,00	0,53	0,20
ϋΗΕΑ	3,19	3,24	13,59	13,29	9,03	8,71	474,10	461,15	16,01	16,73	24,68	26,74
0 5%	0,60	0,63	3,42	3,16	0,98	0,84	126,99	95,77	2,02	1, 97	4,70	5,02
ГЗНЕА	3,14	4,37	14,42	16,49	10,28	11,06	417,73	471,54	17,12	20,14	20,88	24,94
10%	0,44	0,60	3,07	2,71	1,35	1,51	66,09	59,54	2,28	3,26	4,42	4,75
ИНЕА	423	5,93	14,99	19,33	10,61	11,94	510,77	617,73	20,36	26,02	22,00	32,23
1 8%	0,76	1,11	2 62	3,59	0,63	0,81	52,78	69,01	2,31	3,38	2,68	4,35

а данные одного пациента исключены.

Таблица 2

Средние уровни сывороточных стероидов ЭНЕА и одиннадцати его метаболитов в дни 1 и 7 ежедневного введения интравагинальных суппозиториев 40-75-летним постменопаузным женщинам с вагинальной атрофией

Эти величины получали делением величин АИС_0-24ч, измеренных в дни 1 и 7, на 24, с получением посредством этого средней сывороточной концентрации каждого стероида на протяжении 24-часового периода. Концетрации сывороточных стероидов, измеренные у 30-35-летних предменопаузных женщин добавляли в качестве ссылки.

Группа	Величина	ϋΗΕΑ	5-ШОЬ	ТЕ5ТО	внт	Е1	Е2
День 1 нг ч/мл	День ' пт ч/мл	День 1 нг ч/мл	День 7 пгч/мл	День 1 нгч/мл	День 7 пгч/мл	День 1 нг ч/мл	День 7 пг ч/мл	День 1 нг ч/мл	День 1 пг ч/ыл	День 1 нг ч/мл	День? иг ч/мл
Плацебо	Среднее	1,02	1,03	0,23	0,23	0,11·	0,11	0,026	0,024	12,73	12,58	2,90	2,77
	ЗЕМ	0,20	0,20	0,02	0,02	0,01	0,01	0,003	0,003	1,44	1,41	0,32	0,29
ВНЕА	Среднее	2,73	2,34	0,45	0,41	0,12	0,12	0,038	0,039	14,02	15,40	3,66	4,04
0 5%	ЗЕМ	0,33	0,37	0,04	0,05	0,01	0,01	0,004	0,004	1,58	2,04	0,47	0,69
ВНЕА	Среднее	3,12	3,18	0,50	0,58	0,16	0,19	0,046	0,055	17,42	24,11	4,23	6,01
10%	ЗЕМ	0,28	0,43	0,07	0,08	0,03	0,04	0,010	0,011	2,95	3,54	0,96	1,31
ВНЕА	Среднее	5,15	4,76	0,79	0,88	0,21	0,25	0,068	0,081	18,07	25,04	3,74	5.68
1 8%	ЗЕМ	0,39	0,42	0,04	0,07	0,03	0,03	0,008	0,010	1,57	2,85	0,49	0,84
30-35-	Среднее	4,47	0,49	0,18	0,07	53,96	82,05
летние	3Ό	2,19	0,20	0,07	0,03	23,28	42.19
предме- нопауза-	Медиана	4,14	0,44	0,17	0,07	49,47	71,38
льиые		1,53-9,14	0,25-0,84	0,06-0,31	0,03-0,14	23,74-87,46	22,0-159,97
женщины (п=7)	(мин макс)	(1,41-	10,37)	(0,25-0,96)	(0,09-0,32)	(0,03-0,17)	(79,23-123,50)	(17,71-181,14)

Группа	Величина	Е1-3	ЭНЕА-5	4-ΟΙΟΝΕ	АОТ-С	За-ШОЬ-ЗС	За-МОЬ-17С
День 1 нгч/мл	День 7 пг ч/мл	День 1 МКГ ч/мл	День 7 мкг ч/мл	День 1 нгч/ыл	День 7 пгч/мл	День 1 нг ч/мл	День 7 пгч/мл	День 1 НГ ч/мл	День 7 пгч/мл	День 1 нгч/мл	День? пгч/мл
Плацебо	Среднее	0,13	0,12	0,36	0,35	0,26	0,26	7,66	6,97	0,50	0,50	0,52	0,51
	ЗЕМ	0,03	0,02	0,10	0,09	0,03	0,03	1,29	1,20	0,00	0,00	0,02	0,01
ВНЕА	Среднее	0,13	0,13	0,57	0,55	0,38	0,36	19,75	19,21	0,67	0,70	1,03	1,11
0 5%	ЗЕМ	0,02	0,03	0,14	0,13	0,04	0,03	5,29	3,99	0,08	0,08	0,20	0,21
ВНЕА	Среднее	0,13	0,18	0,60	0,69	0,43	0,46	17,41	19,65	0,71	0,84	0,87	1,04
1 0%	ЗЕМ	0,02	0,03	0,13	0,11	0,06	0,06	2,76	2,48	0,10	0,14	0,18	0,20
ВНЕА	Среднее	0,18	0,25	0,62	0,81	0,44	0,50	21,28	25,74	0,85	1,08	0,92	1,34
1 8%	ЗЕМ	0,03	0,05	0,11	0,15	0,03	0,03	2,20	2,80	0,10	0,14	0,11	0,18
30-35-	Среднее	1,19	1,27	0,96	40,21	1,21	1,43
летние	5Ώ	0,93	0,62	0,35	29,31	0,83	0,93
предме- нопауза-	Медиана	0,87	1,04	0,92	31,62	1,06	1,35
льные		0,31-3,50	0,56-2,65	0,45-1,64	12,17-118,2	0,25-7,78	0,25-2,56
женщины (п-7)	(мин · макс)	(0,21-4,40)	(0,45-2,71)	(0,31	1,77)	(6,86-132,6)	(0,25-4,33)	(0,25-5,71)

данные одного пациента исключены (ЬаЪпе, Ве1ап§ег е! а1. 2006).

- 24 020683

Однако следует упомянуть, что, как показано в табл. 3, наблюдали сильную тенденцию в отношении более низких величин перед лечением многих стероидов в группе плацебо. Это относится, в частности, к низким величинам в группе плацебо для ΌΗΕΑ, ΌΗΕΑ-δ, 4-диона, Тесто (тестостерона), ΌΗΤ, Е₂, ΑΌΤ-0 и 3а-диол-17С. Поскольку все средние величины сывороточных стероидов, наблюдаемые после введения доз 0,5 и 1,0% ΌΗΕΆ, остаются в пределах или явно ниже величин, обнаруживаемых у здоровых предменопаузных женщин, попытки коррекции этого явного отклонения не предпринимались. Интересно упомянуть, что средние 24-часовые сывороточные уровни всех стероидов, измеренные в день 7 ежедневного введения суппозитория с 0,5% ΌΗΕΆ, соответствуют почти точно величинам, измеренным у здоровых 55-65-летних женщин, тогда как суппозиторий с 1,0% ΌΗΕΆ приводит к величинам в пределах диапазона, наблюдаемого у 55-65-летних здоровых женщин (ЬаЪпе, Вс1апдсг с( а1. 2006).

Поскольку метаболиты андрогенов являются наиболее надежным критерием превращения экзогенного ΌΗΕΆ в активные андрогены, представленные результаты показывают, что даже самая высокая доза ΌΗΕΆ, использованная в данном изобретении, удовлетворяет требованиям РИА в отношении сывороточных уровней стероидов, которые остаются в пределах нормального диапазона, обнаруживаемого у здоровых предменопаузных женщин.

Таблица 3

Фоновые сывороточные уровни стероидов в дни 1 и 7 ежедневного введения интравагинальных увеличивающихся доз ΌΗΕΑ выражены в нг/мл, за исключением Е₁ и Е₂ (пг/мл) и ΌΗΕΑ-δ (мкг/мл)

Стероид	Плацебо	ΌΗΕΑ 0.5%	ОНЕА 1.0%	ΌΗΕΑ 1.8%
ΌΗΕΑ	День 1	0,72 + 0,14	1,09 + 0,24	0,94 ±0,19	0,99+0,15
	День 7	0,69 + 0,14	1,29 ±0,26	1,43 ±0,19	1,83 ±0,13
5-диол	День 1	0,22 + 0,02	0,26 ±0,03	0,26 ± 0,05	0,25 ± 0,02
	День 7	0,22 + 0,02	0,31 +0,05	0,36 ± 0,05	0,46 ± 0,04
ΌΗΕΑ-8	День 1	0,372 + 0,102	0,543 + 0,157	0,572 ±0,144	0,447 ± 0,094
	День?	0,368 ±0,100	0,592 ±0,160	0,717 ±0,125	0,805 ±0,143
4-дион	День 1	0,18 + 0,02	0,21 + 0,03	0,23 ± 0,04	0,22 ± 0,03
	День 7	0,16 + 0,02	0,25 + 0,03	0,34 ± 0,06	0,38 ±0,03
Те$Ф	День 1	0,10 + 0,01	0,09 ± 0,01	0,12 ±0,03	0,15 ±0,03
	День 7	0,09 ±0,01	0,10 ±0,01	0,18 ± 0,03	0,23 ± 0,03
ΌΗΤ	День 1	0,024 ± 0,003	0,026 ± 0,003	0,037 ±0,010	0,029 + 0,002
	День 7	0,023 + 0,002	0,035 ± 0,004	0,047 ± 0,010	0,062 ± 0,006
Е,	День 1	11,98 + 1,65	11,83+1,28	14,72 ± 2,79	13,59± 1,88
	День 7	11,71+1,19	13,53 ±1,66	22,15 ±3,21	23,77 + 3,35
е2	День 1	3,00 ± 0,44	3,13 ±0,37	4,30 ±1,38	3,42 ±0,62
	День 7	2,75 + 0,28	3,94 ±0,65	5,98 ±1,26	6,00+1,10
Е,8	День 1	0,137 + 0,024	0,133 ±0,029	0,117 ± 0,016	0,164 ±0,033
	День 7	0,143 +0,025	0,151 ±0,034	0,203 ±0,016	0,259 ± 0,049
ΑΌΤ-0	День 1	7,42 + 1,48	13,65 ±3,71	11,49 + 2,10	9,44 ± 1,23
	День 7	6,72+ 1,17	17,02+4,39	16,34 + 2,30	19,26 ±1,96
За-диол-3 О	День 1	0,50’	0,61+0,07	0,71 +0,14	0,58 ±0,05
	День 7	0,50“	0,75 ±0,11	0,96 ± 0,25	0,96 ±0,15
За-диол-	День 1	0.50“	0,84 + 0,16	0,85 ± 0,22	0,65 ± 0,06
170	День 7	0.50’	0,95 ±0,16	1,18 ±0,30	1,27 ±0,19

^а уровни стероидов находятся ниже предела количественного определения для всех субъектов (предел количественного определения = 0,50 нг/мл).

После всего лишь одной недели ежедневного введения суппозиториев ΌΗΕΑ индекс зрелости увеличивался на 107% (р <0,01), 75% (р <0,05) и 150% (р <0,1) в группах 0,5, 1,0 и 1,8% ΌΗΕΑ соответственно (фиг. 10А). Изменений не наблюдали в группе плацебо между днем 1 и днем 7. С другой стороны, вагинальный рН уменьшался от 6,29±0,21 до 5,75±0,27 (р <0,05), от 6,47±0,23 до 5,76±0,22 (р <0,01) и от 6,53±0,25 до 5,86±0,28 (р <0,05), соответственно, в группах 0,5, 1,0 и 1,8% ΌΗΕΑ (фиг. 10В). В группе

- 25 020683 плацебо не наблюдали изменения вагинального рН.

Пример 2. Биодоступность и метаболизм перорального и подкожного дегидроэпиандростерона у постменопаузных женщин.

1. Введение.

Люди, вместе с другими приматами, являются уникальными среди видов животных в том отношении, что они имеют надпочечники, которые секретируют большие количества неактивных предшественников стероидов ΌΗΕΑ и, в частности, ΌΗΕΑ-δ, которые превращаются в активные андрогены и/или эстрогены в периферических тканях (БаЬпе, 1991; ЬаЪпе, Ве1аидет е! а1., 1995; БаЬпе, Ьии-ТЬе е! а1., 1997; ЬаЪпе, Зпнагй е! а1., 1996; ЬаЪпе, Ьии-ТЬе е! а1., 2005; ЬаЪпе, РоиЬп е! а1., 2006 аий Зпнрзоп 2000). Действительно, уровни ΌΗΕΑ-δ в плазме у взрослых мужчин и женщин являются в 100-500 раз более высокими, чем уровни тестостерона, и в 1000-10000 раз более высокими, чем уровни эстрадиола, что обеспечивает большой запас субстрата для превращения в андрогены и/или эстрогены в периферических интракринных тканях, которые имеют ферментативный аппарат, необходимый для превращения ΌΗΕΑ в активные половые стероидные гормоны (ЬаЪпе 1991 и БаЬпе, Ьии-ТЬе е! а1., 2005). Действительно, термин интракринология был впервые придуман в 1988 г. (ЬаЪпе, Ве1аидег е! а1., 1988) для описания синтеза активных стероидов, производимых в тех же самых клетках, в которых они проявляют их действие, с отсутствием высвобождения или с минимальным высвобождением во внеклеточное пространство и общий кровоток перед их инактивацией (ЬаЪпе, 1991).

Заметное уменьшение образования ΌΗΕΑ-δ надпочечниками во время старения (Ве1ап§ет е! а1., 1994; Уегтеи1еп апй Уегйопск, 1976; апй М1деоп е! а1., 1957) приводит к разительному снижению образования андрогенов и эстрогенов в периферических тканях-мишенях, к ситуации, потенциально ассоциированной со связанными с возрастом заболеваниями, такими как инсулинорезистентность (8сЬтюск е! а1. 1988 апй Со1етап е! а1. 1982) и ожирение (ЫезДет е! а1. 1988; МасБ^еи апй Кигтап, 1991, апй ТсЬегпоГ е! а1. 1995). Кроме того, большое внимание уделялось преимуществам ΌΗΕΆ, вводимого постменопаузным женщинам, особенно в отношении кости, кожи, вагины, метаболизма глюкозы и инсулина, массы жира, а также самочувствия после перорального (УШатеа1 апй МоИоз/у, 2004; ВаиПеи е! а1., 2000; Мога1ез, е! а1. 1994; и Ка\уапо е! а1. 2003) и подкожного (О1атопй е! а1., 1996 и ЬаЪпе О1атопй е! а1. 1997) введения. Таким образом, становилось особенно важным получение более точного знания о биодоступности, фармакокинетике и метаболизме ΌΗΕΆ после этих двух способов введения.

Поскольку авторы этого изобретения уже показали с использованием фармакологической дозы ΌΗΕΆ, вводимой чрескожно в течение 2 недель, что измерения уровней сывороточного тестостерона (тесто) и эстрадиола (Ε₂) не обеспечивают надежной оценки истинного внутриклеточного пула андрогенов и эстрогенов (ЬаЪпе, Ве1апдег е! а1., 1997; ЬаЪпе, Ве1апдег е! а1., 2006 и ЬаЪпе, Ве1апдег, е! а1, 2007Ъ), авторы этого изобретения сравнили сывороточные уровни ΌΗΕΆ и девяти стероидов, о которых известно, что они наиболее тесно ассоциированы с активными андрогенами и эстрогенами и их метаболитами. Подробный анализ 24-часовых изменений сывороточных уровней стероидов выполняли в первый день и после 2 недель ежедневного введения ΌΗΕΆ пероральным способом, а также чрескожно с использованием крема или геля ΌΗΕΆ.

2. Субъекты и способы.

Тридцать шесть здоровых 60-70-летних постменопаузных женщин участвовали в этом исследовании после одобрения 1КВ и предоставления их письменного информированного согласия. Масса тела была в пределах ±20% нормальной массы тела в соответствии с МекороШап ЬКе ТаЪ1ез.

Ни один субъект не страдал от существенного метаболического или эндокринного нарушения, коронарной болезни или гипертензии. Ни одна женщина не лечилась андрогенами или анаболическими стероидами в пределах 6 месяцев перед визитом для участия в скрининге. Все участники имели медицинскую историю, полное физическое обследование и биохимический профиль сыворотки, включающий в себя липиды, клинический анализ крови, анализ мочи и подробные определения сывороточных гормонов во время фазы скрининга этого протокола.

3. Программа исследования, лечение и измерения.

Это исследование было рандомизированным, открытым исследованием из 12 субъектов на ветвь исследования. После получения письменного информированного согласия и установления, что женщины являются подходящими для исследования, каждого субъекта рандомизировали для получения ΌΗΕΆ посредством крема, геля или перорально. Ежедневно перед завтраком, в течение 14 дней, субъекты получали в этой исследовательской клинике либо 4 г 10% ΌΗΕΆ-крема, наносимого на общую площадь 30 х 30 см бедра, либо две капсулы по 50 мг ΌΗΕΆ перорально.

Взятие проб крови выполняли при 08:00-09:00 ч при скрининге и перед применением ΌΗΕΆ, в первый день принятия доз, а также в дни 2, 4, 7, 10 и 14. В первый и 14-й дни пробы крови получали при 0,5, 1, 1,5, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 12 и 24 ч после введения ΌΗΕΆ.

4. Анализ сывороточных стероидов.

ΌΗΕΆ, ΌΗΕΑ-δ, андрост-5-ен-3в,17в-диол (5-диол), тестостерон, андростендион (4-дион), 17βэстрадиол (Ε₂), эстрон (Ει), сульфат эстрона (Ε₁-δ), глюкуронид андростерона (АОТ-С) и глюкуронид

- 26 020683 андростан-3в,17в-диола (3а-диол-С) измеряли газовой хроматографией/масс-спектрометрией (БНЕА, 5диол, 4-дион, тестостерон, Е₁ и Е₂) с использованием электронной ионизации (удара электронов) или химической ионизации и жидкостной хроматографии/тандемной масс-спектрометрии с использованием турбоионспрея (БНЕА-δ, Е₁-8, АБТ-С и 3а-диол-С), как описано (ЬаЬпе. Ве1апдег с1 а1., 2006; ЬаЬпе. Ве1апдег, е1 а1, 2007Ь и Зтеапзоп е1 а1. 2007).

5. Расчеты и статистический анализ.

В дни 1 и 14 измеряли площадь под кривой концентрации в сыворотке каждого стероида между 0 и 24 ч (АиС_0-24ч). Эти площади под кривыми рассчитывали линейным трапецеидальным способом (независимым от модели). Относительную биодоступность геля БНЕА, крема БНЕА и капсул БНЕА рассчитывали на основе среднего различия в ^-трансформированных величинах АИС. Все расчеты выполняли с использованием программы §А§ (§А§ 1п51йи1е, Сагу, N0 И8А).

6. Результаты.

Пероральное введение двух капсул 50 мг БНЕА приводило к увеличению сывороточного БНЕА от 2,3±0,3 нг/мл до максимальной величины 15,6±2,5 нг/мл при 1 ч с прогрессирующим уменьшением после этого до 5,7±0,5 нг/мл при 6 ч с последующим плато до 24 ч (фиг. 11А). При нанесении 4 г 10% геля или крема БНЕА на площадь 30 х 30 см кожи бедер, сывороточные уровни БНЕА начинали увеличиваться только при 12 ч, достигая величин 8,2±2,0 и 8,0±1,2 нмоль/л, соответственно, при 24 ч (фиг. 11А). Не было значимого различия между кремом или гелем в сывороточных уровнях БНЕА при любом из исследованных временных интервалов до 24 ч после первого нанесения этого стероида-предшественника на кожу.

При измерении сывороточного 5-диола после перорального введения БНЕА, концентрация 5-диола увеличивалась от концентрации перед лечением 0,31±0,03 нг/мл до максимальной величины 1,19±0,13 нг/мл при 1 ч с последующим прогрессирующим уменьшением после этого с достижением 0,79±0,05 нг/мл при 24 ч (фиг. 11В). На той же самой фигуре можно видеть, что сывороточные уровни 5-диола увеличивались гораздо более медленно после введения БНЕА чрескожно посредством крема или геля с достижением первых статистически различных величин 1,00±0,14 нг/мл для крема и 0,72±0,14 нг/мл для геля при 24 ч.

После перорально введенного БНЕА, сывороточный 4-дион увеличивался от 0,6±0,1 нг/мл до максимальной величины 9,5±2,2 нг/мл при 1 ч с последующим быстрым уменьшением до величин, которые оставались на плато приблизительно 1,2 нг/мл между 8 и 24 ч (фиг. 12А). С другой стороны, после введения БНЕА посредством крема или геля первое значимое увеличение сывороточного 4-диона наблюдали только при 24 ч при величинах 0,9±0,1 и 0,8±0,1 нг/мл для крема и геля соответственно.

Сравнимую картину наблюдали для сывороточного тестостерона. Действительно, после перорального введения двух капсул по 50 мг БНЕА, сывороточный тестостерон увеличивался от 0,38±0,03 нг/мл до максимальной величины 0,79±0,14 нг/мл при 1 ч. После этого увеличения следовало быстрое уменьшение до 0,30±0,08 нг/мл при 6 ч с последующим плато после этого до 24 ч (фиг. 12В). При нанесении БНЕА в виде крема или геля первое увеличение наблюдали при 24 ч при величине приблизительно 0,45 нг/мл. Как можно видеть на фиг. 13А и В, первое введение БНЕА пероральным или чрескожным способом не имело статистически значимого действия на сывороточные уровни Е₁ или Е₂ во время первых 24 ч.

С другой стороны, сывороточный БНЕА-δ имел картину, хотя слегка задержанную, сравнимую с БНЕА и 5-диолом после перорального введения двух капсул по 50 мг (фиг. 14А). Таким образом, сывороточный БНЕА-δ увеличивался от 0,4±0,1 до 7,7±1,0 мкг/мл при 1 ч и до максимальной величины 8,4±0,6 мкг/мл при 2 ч с прогрессирующим уменьшением до 2,7±0,3 мкг/мл при 24 ч. Не наблюдали значимого изменения сывороточного БНЕА-δ во время первых 24 ч после введения БНЕА в виде крема или геля.

Сывороточный АБТ-С, основной метаболит андрогенов, увеличивался от 14±3 до 760±150 нг/мл при 1 ч и 790±140 нг/мл при 2 ч с последующим прогрессирующим уменьшением до 92±5 нг/мл при 12 ч и до 70±5 нг/мл при 24 ч (фиг. 15А). С другой стороны, сывороточный 3а-диол-С увеличивался от 2,2± 0,5 до 14,5±2,0 нг/мл при 2 ч (фиг. 15В). Однако наблюдаемое после этого уменьшение для 3а-диол-С было гораздо более медленным, чем уменьшение АБТ-С, причем наблюдается уменьшение только приблизительно 40% между 2 и 24 ч после перорального введения БНЕА. После нанесения 4 г 10% БНЕА на кожу не было значимого изменения сывороточного АБТ-С или 3а-диол-С до 24 ч (фиг. 15В).

При повторении измерений тех же самых кинетических параметров на 14-й день ежедневного введения доз можно было видеть, что введение двух каспул по 50 мг БНЕА приводило от величины перед введением доз 4,2±0,4 нг/мл к максимальной концентрации 14,8±4,4 нг/мл БНЕА при 1 ч с последующим прогрессирующим уменьшением после этого до 4,5±0,4 нг/мл при 24 ч (фиг. 16А). С другой стороны, при введении БНЕА посредством крема или геля не наблюдали значимого изменения во время 24часового периода, и сывороточный БНЕА оставался между 10 и 15 нг/мл после нанесения крема и между 7 и 11 нг/мл после нанесения геля.

Подобным образом, при измерении сывороточного 5-диола на 14-й день лечения сывороточная

- 27 020683 концентрация этого стероида увеличивалась от 0,46±0,04 до 1,37±0,21 нг/мл при 1 ч с медленным уменьшением после этого до достижения 0,64±0,06 нг/мл при 24 ч (фиг. 16В). Как наблюдали для ΌΗΕΑ, сывороточный 5-диол оставался постоянным во время 24-часового периода при приблизительно 1,5-1,9 нг/мл после нанесения крема и 1,0-1,3 нг/мл после нанесения геля.

При измерении сывороточного 4-диона на 14-й день введения доз сывороточная концентрация этого стероида увеличивалась от 1,3±0,2 нг/мл до максимальной величины 9,8±1,7 нг/мл при 1 ч с последующим быстрым уменьшением до 1,5±0,1 нг/мл при 6 ч с величиной 1,2±0,1 нг/мл, измеренной при 24 ч (фиг. 17А). После нанесения ΌΗΕΑ на кожу в виде крема или геля было незначимое увеличение сывороточного 4-диона до приблизительно 2,5 нг/мл при 2 ч с величинами, после этого остающимися на плато при 1,0-1,6 нг/мл до 24 ч (фиг. 17А).

Сывороточный тестостерон увеличивался на 14-й день введения доз после перорального введения 100 мг ΌΗΕΑ от 0,31±0,04 нг/мл до максимальной величины 0,83±0,11 нг/мл при 1 ч с последующим прогрессирующим уменьшением до величины 0,37±0,04 нг/мл при 24 ч (фиг. 17В). После нанесения ΌΗΕΑ в виде крема или геля сывороточные уровни тестостерона оставались неизмененными во время 24-часового периода при приблизительно 0,3 нг/мл, причем эта величина не отличалась значимо от величины перед лечением. Как наблюдали в первый день, не было значимого изменения в сывороточных уровнях Е₁ (фиг. 18А) или Е₂ (фиг. 18В) во время 24 ч после 14-дневного введения ΌΗΕΑ пероральным или чрескожным способом.

Сывороточный ΌΗΕΑ-δ увеличивался от уровня перед введением доз 1,95±0,15 до 8,3±0,4 мкг/мл при 1 ч с последующим прогрессирующим уменьшением до 2,6±0,3 мкг/мл при 24 ч (фиг. 19А). Не наблюдали значимого изменения сывороточного ΌΗΕΑ-δ после нанесения ΌΗΕΑ на кожу. С другой стороны, сывороточный Ε₁-δ не изменялся во время 24 ч после 14-дневного введения ΌΗΕΑ пероральным или чрескожным способом.

При исходном более высоком уровне в день 14, чем в день 1, сывороточный ΛΌΤ-0 увеличивался быстро от 66±1 до 996±105 нг/мл при 1 ч с быстрым уменьшением после этого до 116 нг/мл при 12 ч и 91±15 нг/мл при 24 ч (фиг. 20А). После нанесения ΌΗΕΑ на кожу не наблюдали значимого изменения сывороточных уровней ΑΌΤ-Ο. С другой стороны, сывороточный 3а-диол-С увеличивался от 12±2,5 до 29,4±5,5 нг/мл при 2 ч с медленным уменьшением после этого до достижения 13±3,0 нг/мл при 24 ч после 14-дневного перорального введения 100 мг ΌΗΕΑ. После чрескожного введения ΌΗΕΑ не наблюдали значимого изменения сывороточного 3а-диол-С (фиг. 20В).

Затем для получения более точного критерия накапливания ΌΗΕΑ и его метаболитов авторы этого изобретения сравнивали площади под кривыми концентраций сывороточных стероидов (величины ΑυΟ^), измеренных в 1-й и 14-й дни введения доз. Как может быть предсказано из фиг. 11-20, эти величины ΑυΟο^ всех стероидов, за исключением метаболитов эстрогенов (Ε₃-δ) и андрогенов (ΑΌΤ-С и 3а-диол-О), вследствие некоторого накапливания этих стероидов, являются сходными в 1-й и 14-й дни введения ΌΗΕΑ пероральным способом (табл. 4). С другой стороны, после чрескожного введения вследствие более медленной абсорбции ΌΗΕΑ после введения в виде крема или геля на 155 и 86% более высокие величины ΑυΟ^ ΌΗΕΑ наблюдаются на 14-й день в сравнении с первым днем введения доз соответственно. Более высокие величины наблюдаются также для всех других стероидов, за исключением величин для Ε₁, Ε₂ и тестостерона, которые не обнаруживали.

Таблица 4

Величины Αυθ_0-244, измеренные в 1-й и 14-й дни введения доз, а также их отношение

Стероид	ϋΗΕΑ (нг.ч/мл)	5-диол (нг.ч/мл)	4-дион (нг.ч/мл)	Тесто- стерон (нг.ч/мл)	Е1 (пг.ч/мл)	Е2 (пг.ч/мл)	ЭНЕА-5 (мкг.ч/мл)	Е1-5 (пг.ч/мл)	ΑϋΤ-0 (нг.ч/мл)	За-диол- О (нг.ч/мл)
2 капсулы по 50 мг
1-й день введения доз	153 (19)	19,0 (20)	40,2 (39)	9,47 (31)	745 (30)	136(20)	108(20)	4,81 (39)	4112(24)	259 (44)

- 28 020683

14-ый день введения доз	144 (26)	20,4 (25)	43,6(27)	9,72 (23)	910(23)	165 (25)	95,0(16)	7,44 (36)	5607(28)	453 (41)
14-ый день/ 1-ый день	0,94	1,07	1,08	1,03	1,22	3,21	0,88	1,55	1,36	1,75
4 г 10% крема
1-й день введения доз	107 (33)	13,7 (31)	12,3 (43)	8,35(16)	680 (48)	147 (50)	30,7(45)	4,83 (58)	404 (62)	50,6 (93)
14-ый день введе-ния доз	273 (36)	39,7(31)	22,8(33)	8,77(16)	847 (22)	175(27)	19,9(34)	7,96 (39)	977 (66)	114(104)
14-ый день/ 1-ый день	2,55	2,90	1,85	1,00	1,24	1,19	1,86	1,65	2,42	2,25
4 г 10% геля
1-й день введения доз	101 (49)	10,3 (55)	13,3(45)	8,76(16)	620 (31)	214(137)	11,2(35)	5,53 (84)	254(30)	38,3 (86)
14-ый день введе-ния доз	188(30)	27,2 (32)	21,3 (51)	8,04 (22)	785 (40)	152(24)	18,6(34)	9,11(106)	455 (23)	60,3 (85)
14-ый день/ 1-ый день	1,86	2,64	1,60	0,96	1,27	0,71	1,66	1,65	1,79	1,57

Величины в скобках обозначают %-ный коэффициент вариации.

ΌΗΕΆ вводили пероральным способом (2 капсулы по 50 мг) или нанесением на кожу 4 г 10% крема или геля ΌΗΕΆ.

Как можно ясно видеть в табл. 5 и на фиг. 21, не было значимого изменения величин ЛИС_0-24ч сывороточных Ε₁, Ε₂ или тестостерона, измеренных на 14-й день введения доз в сравнении с уровнями перед введением доз. Однако значимые увеличения наблюдали для двух других стероидов. Так, после ежедневного перорального введения 100 мг ΌΗΕΆ в течение 2 недель площадь под кривой концентрации ΌΗΕΆ, измеренная во время 24 ч после введения этого стероида, увеличивалась на 167% относительно величины перед лечением, тогда как для 5-диола, 4-диона, ΌΗΕΆ-δ, Ε₁-δ, ΆΌΤ-С и 3а-диол-С наблюдали соответствующие увеличения 138, 238, 873, 60, 1820 и 874%.

Таблица 5

Величины ЛИС_0-24ч ΌΗΕΆ и его метаболитов перед лечением и в 14-й день

Стероид _______	ϋΗΕΑ (нг.ч/мл)	5-диол (нг.ч/мл)	4-дион (нг.ч/мл)	Тесто- стерон (нг.ч/мл)	Е1 (пг.ч/мл)	Е2 (пг.ч/мл)	ϋΗΕΑ-5 (мкгч/мл)	Е1-5 (пг.ч/мл)	ΑϋΤ-С (нг.ч/мл)	За-диол- С (нг.ч/мл)
Фон (перед обработ- кой)	53,9	8,56	12,9	8,72	717	135	9,76	4,64	292	46,6
(А) 2 капсулы по 50 мг
14-й день введения доз	144	20,4	43,6	9,72	910	165	95,0	7,44	5607	453
14-ый лень/ 1-ЫЙ день	2,67	2,38	3,38	1,11	1,27	1,22	9,73	1,60	19,2	9,74
(В) 4 г 10% крема
14-Й день введения доз	5,06	4,63	1,77	1,01	1,18	1,30	2,04	1,72	3,34	2,45
14-ый день/ 1-ый день	1,86	2,64	1,60	0,96	1,27	0,71	1,66	1,65	1,79	1,57
(С) 4 г 10% геля
14-й день введения доз	188	27,2	21,3	8,04	785	152	18,6	9,11	455	60,3
14-ый день/ 1-ый лень	3,49	3,18	1,65	092	1,09	1,13	1,91	1,96	1,56	1,30

ΌΗΕΆ вводили пероральным способом или чрескожно посредством крема или геля. Фоновые величины ЛИС_0-24ч рассчитывали умножением уровней сывороточных стероидов перед обработкой, вклю- 29 020683 чающей в себя скрининг, на 24 ч.

За исключением ΌΗΕΆ и 5-диола, более низкие увеличения наблюдали после введения крема или геля ΌΗΕΆ. Действительно, после нанесения крема ΌΗΕΆ величина АиС_0-24ч ΌΗΕΆ-δ увеличивалась только на 104%, в то время как величины АИС_0-24ч 4-диона, Ε₁-δ, ΆΌΤ-0 и 3а-диол-О увеличивались на 77, 72, 234 и 145% выше контроля соответственно. С другой стороны, величины АИС для ΌΗΕΆ и 5диола увеличивались на 406 и 363% соответственно (табл. 5, фиг. 21). Сравнимые, но несколько более низкие увеличения наблюдали с гелем ΌΗΕΆ, где величины АИС_0-24ч сывороточных 4-диона, ΌΗΕΆ-δ, Ει-δ, АОТ-О и 3а-диол-О увеличивались на 65, 91, 96, 56 и 30% выше контроля, тогда как величины ^Аи^С0-24ч для ΩΗΕΛ и 5-диола увеличивались на 249 и 238% соответственно.

Недавние открытия авторов этого изобретения (ЬаЬпе. Ве1апдег с1 а1., 2007Ь) показали, что изменения сывороточного ОИНА, наблюдаемые после введения экзогенного ^ΗΕА, являются завышенной по меньшей мере на 100% оценкой истинных изменений в образовании половых стероидных гормонов. В поддержку этих данных фиг. 21 показывает, что после введения ОИНА посредством крема или геля изменения сывороточного ПИБА являются заметным завышением изменений сывороточных уровней всех измеренных стероидов, за исключением 5-диола, непосредственного метаболита ^ΗΕА. Для крема ^ΗΕА, изменения величин АИС_{0-24 ч} сывороточных 4-диона, ^ΗΕА-δ, Ε₁-δ, АЭТ-О и 3а-диол-О составляют только 77, 104, 72, 234 и 145% в сравнении с увеличением 406% относительно уровней перед обработкой, наблюдаемых для сывороточного ОКНА.

Для андрогенов теперь хорошо установлено, что уридинглюкуронозилтрансфераза 2В7 (ИОТ 2В7), ИОТ 2В15 и иОТ 2В17 являются тремя ферментами, ответственными за глюкуронидирование всех андрогенов и их метаболитов в человеке (Ве1апдег е1 а1. 2003). Это недавнее завершение идентификации и характеристики всех ИЭТ-глюкуронозилтрансфераз делает возможным применение глюкуронидных производных андрогенов в качестве маркеров общей андрогенной активности как в женщинах, так и в мужчинах (ЬаЬпе, Ве1апдег еХ а1., 2006; ЬаЬпе, Ве1апдег, еХ а1, 2007Ь и δ\ν;πΐ5οη еХ а1. 2007). Таким образом, поскольку все андрогены метаболизируются в АЭТ-О и 3а-диол-О, эта оценка процента эффективности чрескожного ^ΗΕА в отношении превращения в активные андрогены оценивается, следовательно, как 52% при добавлении изменений в АЭТ-О и 3а-диол-О (взвешенная величина 211% в сравнении с изменениями 19(0 406%). Подобным образом, после введения геля БЖА, увеличение 249% сывороточного ^ΗΕА переводится в увеличения только 65, 91, 96, 56 и 30% в величинах АИС_0-24ч сывороточного 4-диона, ЖА-в, Ε₄-δ1, АЭТ-О и 3а-диол-О соответственно.

Поскольку высокий уровень глюкуронидирования в кишечнике и печени объясняет высокий сывороточный уровень АЭТ-О и 3а-диол-О (Ве1апдег еХ а1. 2003) после перорального введения БЖА, относительно малое увеличение сывороточного Ε₁-δ (60%) в сравнении с увеличением 167% сывороточного ^ΗΕА после введения перорального ^ΗΕА указывает на 36% относительную эффективность превращения в эстрогены. Как показано ранее (ЬаЬпе, Ве1апдег еХ а1., 1997; ЬаЬпе, Ве1апдег еХ а1., 2006; ЬаЬпе, Ве1апдег, еХ а1, 2007Ь), эти результаты указывают на то, что БЖА, вводимый постменопаузным женщинам, превращается преимущественно в андрогены, а не в эстрогены.

Обсуждение.

Представленные результаты ясно показывают, что во время продолжительного лечения с использованием ^ΗΕА в виде крема или геля концентрация всех стероидов быстро достигает плато без детектируемого изменения сывороточной концентрации любого из стероидов, измеренной во время ежедневного нанесения ^ΗΕА на кожу. Таким образом, от 24 ч после первого введения ^ΗΕА чрескожно концентрация всех стероидов остается на одном и том же уровне, свидетельствуя о том, что ежедневное нанесение ^ΗΕА на кожу поддерживает постоянные сывороточные уровни ^ΗΕА и всех его метаболитов. У постменопаузных женщин, как уже известно, циркадное варьирование сывороточного ^ΗΕА является относительно малым в сравнении с ситуацией у имеющих нормальный менструальный цикл предменопаузных женщин (Ьш аир ЬаидЬЪп, 1990).

Представленные результаты показывают также, что после ежедневного перорального введения ^ΗΕА нет значимого накапливания ^ΗΕА или его метаболитов. Кроме того, метаболизм ^ΗΕА после его введения пероральным или чрескожным способом является количественно сходным, причем качественные различия объясняются кишечно-печеночным метаболизмом после перорального введения.

Более высокие величины АИС_0-24ч сывороточных ^ΗΕА-δ, АЭТ-О и 3а-диол-О, объединенные с более низкими величинами АИС_0-24ч ^ΗΕА и 5-диола после пероального введения в противоположность чрескожному введению, показывают, что метаболизм через желудочно-кишечный тракт и/или первое прохождение через печень приводит не только к более высокому уровню превращения ^ΗΕА в ^ΗΕА-δ вследствие активности ^ΗΕА-сульфотрансферазы (Ьии-ТЬе еХ а1, 1995), но также к увеличенному метаболизму ^ΗΕА в андрогены и их инактивации вследствие активности печеночных глюкуронозилтрансфераз (Ве1апдег еХ а1. 2003; Тигдеоп еХ а1., 2001 и Ηαιιι еХ а1., 1999). Действительно, как показано в табл. 1, подвергание действию БЖА 144 нг-ч/мл (АИС_0-24ч) на 14-й день перорального введения 100 мг БЖА приводит к величинам АИС_0-24ч 5607 нг-ч/мл и 453 нг-ч/мл для АБТ-О и 3а-диол-О соответственно. С другой стороны, после чрескожного введения 10% крема БЖА величины АИС для БЖА, АБТ-О и 3α- 30 020683 диол-С равны 273 нг.ч/мл, 977 нг.ч/мл и 114 нг.ч/мл, соответственно. Таким образом, после перорального введения, 1 нг-ч/мл ΌΒΕΑ соответствует величине АИС 42,1 нг-ч/мл для комбинации двух метаболитов андрогенов (ΑΌΤ-С + 3а-диол-С), тогда как после нанесения крема, подвергание 1 нг-ч/мл ΌΒΕΑ соответствует 4,0 нг.ч/мл для этой суммы двух метаболитов андрогена. Такие данные показывают, что введение ΌΒΕΑ пероральным способом приводит к приблизительно в 10 раз более высокому уровню превращения ΌΒΕΑ в ΑΌΤ-С и 3а-диол-С, чем после чрескожного введения, по меньшей мере, при используемых дозах. При выполнении тех же самых расчетов для результатов, полученных после введения ПНБА посредством геля, подвергание 1 нг-ч/мл ΌΒΕΑ сопровождается величиной АИС_0-24ч 2,7 нг-ч/мл для ΑΌΤ-С + 3а-диол-С, что указывает даже на более высокое соотношение между пероральным и чрескожным введением ΌΒΕΑ.

Как показано в табл. 4, в то время как величина ΑΌΌ_0-244 ΌΒΕΑ 1 нг-ч/мл приводит к величине Аи^С0-24ч 660 нг-ч/мл для ΌΒΕΑ-8 после перорального введения ΌΒΕΑ, соответствующие величины 73 и 99 нг-ч/л наблюдаются после нанесения стероида-предшественника посредством крема или геля. Таким образом, имеется в 6,7-9,0 раз более высокое количество ΌΒΕΑ-8 в кровотоке после того же самого подвергания действию циркулирующего ΌΒΕΑ (сывороточная величина Αυ^_-24Η) после перорального введения в сравнении с чрескожным введением ΌΒΕΑ при испытанных условиях. Эти результаты показывают сравнимое влияние прохождения ΌΒΕΑ через желудочно-кишечный тракт и печень на сывороточные уровни ΜΑ-δ, ΑΌΤ-С и 3а-диол-С.

Хотя можно видеть более низкое различие, относительно более высокие уровни сывороточного 4диона наблюдаются после перорального введения ΌΒΕΑ в сравнении с чрескожным введением стероидапредшественника. Так, после перорального введения ΌΒΕΑ величина Αυ©_0-24Η 1 нг-ч/мл приводит к величине ΑυΟ,^ 0,3 нг-ч/мл 4-диона, в то время как величины 0,08 и 0,11 нг-ч/мл наблюдаются после введения ΌΒΕΑ посредством крема и геля соответственно. Как измерено в кровотоке, превращение ΌΒΕΑ в 4-дион является, следовательно, в 2,70-3,76 раз более высоким после перорального введения в сравнении с чрескожным введением ΌΒΕΑ.

Результаты табл. 5 показывают, что величина Αυ^_-24Η ΌΒΕΑ увеличивается на 167% над контролем после ежедневного перорального введения 100 мг ΌΒΕΑ в сравнении с фоновыми уровнями перед обработкой, тогда как ежедневное чрескожное введение 4 г 10% крема и геля ΌΒΕΑ увеличивает сывороточные уровни ΌΒΕΑ на 406 и 249% соответственно. Поскольку на кожу наносили 400 мг ΌΒΕΑ в сравнении с 100 мг в случае перорального способа и при предположении линейности представленные данные указывают на то, что пероральный способ является в 2,9 и в 4,8 раза более эффективным в сравнении с препаратом, используемым для крема или геля ΌΒΕΑ соответственно.

В одном исследовании, также выполняемом у постменопаузных женщин, пероральное введение 150 и 300 мг измельченного на микронной коллоидной мельнице ΌΒΕΑ приводило к максимальным сывороточным уровням Ό^Α^, ΌΒΕΑ и тестостерона приблизительно 1,5, 15 и 2,75 нг/мл после дозы 300 мг и 10, 12 и 1,6 нг/мл после дозы 150 мг ΌΒΕΑ соответственно (Ви8!ег е! а1. 1992). Исследование этих ранних результатов показывает, что 20-кратное увеличение сывороточного ΌΒΕΑ-8 приводило лишь к 6,9кратному увеличению сывороточного тестостерона, в то время как сывороточный ΌΒΕΑ увеличивался 11,6-кратно. Кроме того, коррекции измеренных величин сывороточного тестостерона до одной трети с учетом двух третей неспецифического связывания в радиоиммуноанализе, эти сывороточные уровни тестостерона остаются в пределах физиологических уровней на протяжении 12 ч после введения дозы 150 мг ΟΕΕΑ (Ви8!ег е! а1. 1992).

Сходные различия, наблюдаемые между пероральным и чрескожным способами введения для сывороточного ΌΒΕΑ, наблюдаются для 5-диола, который превращается непосредственно из ΌΒΕΑ 17βгидроксистероидцегидрогеназой (ЬаЬпе, Επί-ΐ-ΤΙ^, е! а1. 2000). Действительно, величина Αυ^_-24ΐ! 5-диола увеличивается на приблизительно 138% выше контроля после перорального введения 100 мг ΌΒΕΑ, и увеличения 363 и 218% измерены после нанесения 400 мг крема и геля ΌΒΕΑ соответственно.

Как упоминалось выше, человек является уникальным, с некоторыми другими приматами, в том, что он имеет надпочечники, которые секретируют большие количества стероидов-предшественников ΌΒΕΑ и Ό^Α©, которые превращаются в 4-дион и затем в активные андрогены и/или эстрогены в периферических интракринных тканях (ЬаЬпе, 1991; ЬаЬпе, Ве1апдег, е! а1, 1995; ЬаЬпе е! а1. 1996; ЬаЬпе, Ελκι-ΤΙ^, е! а1, 1997; 81тр8оп, 2000; ЬаЬпе, Ьии-!Ье, е! а1. 2005; ЬаЬпе, РоиНп, е! а1., 2006 апк ЬаЬпе, Ве1апдег, е! а1., 1998). Удивительно также, что человек, наряду с наличием в нем очень сложных эндокринной и паракринной систем, щедро наделен образованием половых стероидных гормонов в периферических тканях (ЬаЬпе, 1991) и (Ве1апдег, е! а1., 1998). Действительно, в то время как яичники и яички являются единственными источниками андрогенов и эстрогенов у низших млекопитающих, ситуация очень отличается у человека и высших приматов, где активные половые стероидные гормоны синтезируются в значительной части или полностью локально в периферических тканях, обеспечивая тем самым тканимишени контролями, которые корректируют образование и метаболизм половых стероидных гормонов для локальных потребностей.

Секреция надпочечниками ΌΒΕΑ и ΌΒΕΑ-8 увеличивается во время физиологического полового

- 31 020683 созревания в детях в возрасте 6-8 лет, и максимальные величины циркулирующего ΌΗΕΑ-δ достигаются между возрастом 20 лет и возрастом 30 лет. После этого сывороточные уровни ΌΗΕΑ и ΌΗΕΑ-δ заметно уменьшаются (Ве1апдег е! а1. 1994). Фактически, при возрасте 70 лет сывороточные уровни ΌΗΕΑ-δ уменьшаются до приблизительно 20% их максимальных величин, в то время как они могут иметь уменьшение на 95% при возрасте 85-90 лет (Ве1апдег е! а1. 1994) и ^щеоп е! а1., 1957). Это 70-95% уменьшение в образовании ΌΗΕΑ и ΌΗΕΑ-δ надпочечниками во время старения приводит к разительному уменьшению образования андрогенов и эстрогенов в периферических тканях-мишенях (ЬаЬпе, Ве1апдег е! а1., 2006). Такое ярковыраженное уменьшение в образовании половых стероидных гормонов в периферических тканях может, вероятно, участвовать в патогенезе ряда ассоциированных со старением заболеваний.

Как упоминалось ранее, трансформация (превращение) ΌΗΕΑ и ΌΗΕΑ-δ в активные андрогены и/или эстрогены в периферических тканях-мишенях зависит от уровня экспрессии различных стероидогенных и метаболизирующих ферментов в каждом типе клеток (ЬаЬпе, 1991). Выяснение структуры большинства этих тканеспецифических генов, которые кодируют стероидогенные ферменты, ответственные за превращение ΌΗΕΑ и ΌΗΕΑ-δ в андрогены и/или эстрогены, позволило достичь быстрого прогресса в этой области (ЬаЬпе, Ве1апдег е! а1, 1995; ЬаЬпе, Κινι-ΤΙ^ е! а1., 1997; ЬаЬпе, δίιηηι^ е! а1., 1996; ЬаЬпе, Κινι-ΤΙ^ е! а1., 2005; ЬаЬпе, РоиПп е! а1., ЬаЬпе, Τυυ-Τ^, е! а1. 2000, ЬаЬпе, δυд^тο!ο, е! а1. 1992, ЬаЬпе, δίιηηι^ е! а1, 1992; Τυυ-Τ^, е! а1. 1995; и ЬаЬпе, ОигосПег е! а1. 1995).

Результаты, показывающие присутствие относительно высоких уровней метаболитов андрогенов у здоровых женщин (ЪаЬпе, Ве1апдег, е! а1. 1997; ЬаЬпе, Ве1апдег е! а1., 2006; ЬаЬпе, апй Ве1апдег, е! а1, 2007Ь), в сильной степени предполагает, что андрогены играют главную физиологическиую, но все еще недооцениваемую роль у женщин. 44,5%-ное уменьшение, которое имеет место в сывороточном ΌΗΕΑ в возрасте от 20-30 лет до возраста 40-50 лет у женщин (Ве1апдег е! а1., 2006) могло бы вполне приемлемо объяснить разрежение кости, которое предшествует менопаузе. Действительно, сообщалось, что связанное с возрастом разрежение кости (остеопороз) начинается на четвертом десятке, и изменения в метаболизме костной ткани были обнаружены задолго перед менопаузой (Μаζе88 1 982; Ρί§§8, е! а1. 1981, апй 1оПп8!оп е! а1. 1985). В соответствии с этими открытиями, плотность костной ткани была более низкой при всех участках, испытанных у женщин, классифицируемых как перименопаузные (околоклимактерические) ^!ешЬегд, е! а1., 1989). В соответствии с этими открытиями, изменения секреции предшественника андрогена надпочечниками предшествуют на 10-20 лет уменьшению секреции эстрогена яичников, которая резко прекращается при менопаузе (ЬаЬпе, Ве1апдег, е! а1. 2006).

Важно понять, что происходит уменьшение не только сывороточных ΌΗΕΑ и ΌΗΕΑ-δ на 50% между возрастом 21 год и возрастом 50 лет, но и подобное уменьшение сывороточного тестостерона (Ζυто£Т е! а1. 1995). Такие данные могли бы вполне предполагать, что гормональная заместительная терапия с использованием андрогенов или их предшественника (предшественников) должна начинаться рано в менопаузе для компенсации этого раннего уменьшения секреции предшественников андрогенов надпочечниками и параллельного уменьшения в сывороточном тестостероне (ЬаЬпе, 2006).

Активные андрогены и эстрогены, синтезируемые в периферических тканях, проявляют их активность в клетках их происхождения, и происходит очень малая диффузия этих активных половых стероидных гормонов, что приводит к очень низким уровням в кровообращении (кровотоке). Действительно, как наблюдалось ранее (ЬаЬпе, Ве1апдег е! а1, 1997) и подтверждается в данном изобретении, наиболее поразительные действия введения ΌΗΕΑ наблюдаются на циркулирующих уровнях глюкуронидных производных метаболитов ΌΗΤ, а именно ΑΌΤ-О и 3а-диол-О, в то время как не наблюдаются значимые изменения или наблюдаются только минорные изменения в сывороточных уровнях тестостерона, Е₁ или Е2. Эти активные стероиды продуцируются локально в периферических интракринных тканях, которые имеют подходящие стероидогенные ферменты для синтеза ΌΗΤ из присутствующих в надпочечниках ΌΗΕΑ и ΌΗΕΑ-δ, а также ферменты, которые превращают ΌΗΤ в неактивные метаболиты ΑΌΤ и 3 αдиол, которые дополнительно модифицируются глюкуронидированием (Ве1апдег е! а1. 2003).

В одном недавнем исследовании ежедневное пероральное введение 50 мг ΌΗΕΑ не оказывало значимого действия на сывороточные тестостерон или ΌΗΤ, тогда как ΌΗΕΑ и ΑΌΤ-О увеличивались до сходной степени (80-90%) (Ατ1! е! а1. 2001). В другом исследовании сывороточные уровни ΌΗΕΑ-δ перед введением доз в постменопаузальных женщинах увеличивались от 0,55 до приблизительно 1,4 мкг/мл (Са88оп е! а1. 1998) после перорального введения 25 мг ΌΗΕΑ в течение 6 месяцев. Однако сывороточные уровни ΌΗΕΑ и тестостерона, измеренные спустя 23 ч после последнего введения ΌΗΕΑ, не изменялись значимо. Другое исследование показало, что ежедневная доза 50 мг ΌΗΕΑ приводит к сывороточным уровням андрогена в предменопаузном диапазоне (Ви8!ег е! а1. 1992).

Представленные данные ясно демонстируют, что ΌΗΕΑ и ΌΗΕΑ-δ превращаются в специфических периферических интракринных тканях в активные андрогены и/или эстрогены, которые могут проявлять их биологические действия в месте их синтеза без высвобождения или только с малым высвобождением активных стероидов в кровоток. Таким образом, изменения сывороточных уровней тестостерона, Е1 или Е₂ не могут быть использованы в качестве параметров превращения ΌΗΕΑ в андрогены или эстрогены

- 32 020683 (ЬаЪпе, Ве1апдег е! а1., 2006). Действительно, активные стероиды метаболизируются в тех же самых клетках, в которых они были синтезированы, и проявляют их действие в неактивных глюкуронидированных и сульфатированных метаболитах, которые в конечном счете диффундируют во внеклеточное пространство и могут быть измерены в кровотоке (ЬаЪпе, Ве1апдег е! а1., 2006; ЬаЪпе, Ве1апдег е! а1., 1997 и ЬаЪпе, Ве1апдег е! а1. 2007). Измерение конъюгированных метаболитов андрогенов является единственным подходом, который позволяет точно оценить общий пул андрогенов у женщин. Наиболее вероятно, что подобная ситуация существует и для эстрогенов, хотя точная оценка фармакокинетики метаболизма эстрогенов и идентификация их метаболитов еще требуют установления.

Пример 3. Клиническое исследование ΕΡί'.'-210: интравагинальный ΌΗΕΑ, физиологическое лечение вагинальной атрофии.

Объекты и способы.

Это исследование является исследованием фазы III, перспективным, многоцентровьм, рандомизированным, плацебоконтролируемым и двойным слепым исследованием с 50 субъектами на каждую ветвь исследования (всего 200 субъектов). Таким образом, двести постменопаузных женщин рандомизировали для получения ежедневной влагалищной овулы следующих концентраций ΌΗΕΑ: 0,0%, 0,25% (3,25 мг ΌΗΕΑ), 0,5% (6,5 мг ΌΗΕΑ) или 1,0% (13 мг ΌΗΕΑ), вводимой интравагинально при помощи инструмента для локального применения лекарственного средства. Это исследование делили на две фазы, а именно, скрининг с последующим периодом лечения (обработки) с продолжительностью 12 недель.

Критерии включения (в исследование) были следующими: постменопаузные женщины, которые удовлетворяют а) или Ъ) или с):

a) отсутствие менструальных циклов в течение по меньшей мере одного года; или

b) уровни ΡδΗ > 40 т1и/мл (в пределах 60 дней перед днем 1) у женщин без менструального цикла в течение >6 месяцев, но <12 месяцев, или женщин, подвергнутых гистерэктомии, которые были предменопаузными в момент гистерэктомии; или

c) шесть недель или более (визит в скрининге) после билатеральной оофороэктомии.

Женщины, которые сами обнаружили по меньшей мере один умеренный - тяжелый симптом из следующих симптомов:

вагинальной сухости (отсутствующей, легкой, умеренной или тяжелой), вагинального и/или бульбарного раздражения/зуда (отсутствующего, легкого, умеренного или тяжелого), вагинальной боли, ассоциированной с половой активностью (отсутствующей, легкой, умеренной или тяжелой).

Женщины должны идентифицировать, какой симптом является наиболее беспокоящим для них в начале лечения. Изменение этого симптома будет прослеживаться и будет служить для оценивания эффекта лечения.

Женщины в возрасте между 40 и 75 годами.

Готовые участвовать и подписавшие информированное согласие.

Женщины, имеющие низкий индекс зрелости (не более, чем 5% поверхностных клеток на вагинальном мазке).

Женщины, имеющие вагинальный рН выше 5.

Нормальная маммография в пределах 9 месяцев от начала исследования.

Нормальное исследование молочной железы.

Нормальный мазок РАР (который включает в себя воспалительные изменения) в пределах последних 12 месяцев (день 1). Для женщин, подвергнутых гистерэктомии, мазок будет состоять по меньшей мере из одного предметного стекла.

Отсутствие прежних или имеющихся к данному моменту наркотической аддикции или алкоголизма.

Масса тела в пределах 18,5-35 идеальной массы тела в соответствии с индексом массы тела (ΕΜΙ) (№ΗΘ).

Отсутствие гепатического или ренального нарушения или состояния, о котором известно, что оно влияет на метаболизм лекарственных средств или стероидов.

Нормальные фоновая гематология, клиническая химия и анализ мочи.

Отрицательная серология на ВИЧ1/ВИЧ2 и гепатит В и С.

Критериями исключения были недиагностированное атипичное генитальное кровотечение, прежняя диагностика рака, за исключением рака кожи (не меланомы), эндометриальная гиперплазия при биопсии, выполняемой при скрининге, или рак эндометрия, активное или анамнестическое тромбоэмболическое заболевание, существенное метаболическое или эндокринное заболевание, клинически значимое желудочно-кишечное заболевание, заболевание печени или желчного пузыря, рекуррентная головная боль (мигрень), не контролируемая общепринятой терапией, сахарный диабет, не контролируемый общепринятой терапией, существенное осложнение при предыдущей гормональной терапии,

- 33 020683 применение только эстрогена в качестве инъекционной лекарственной терапии или имплантата прогестина в пределах 3 месяцев перед вступлением в исследование (визит в скрининге), применение шарика эстрогена или инъецируемого прогестинового лекарственного в пределах 6 месяцев перед вступлением в исследование, подвергание пероральному введению эстрогена, прогестина или подвергание действию ΌΗΕΆ или внутриматочной прогестиновой терапии в течение восьми недель перед оцениваниями фона, вагинальные гормональные продукты (кольца, кремы или гели) или трансдермальный эстроген один или продукты эстроген/прогестин в пределах 4 недель перед оцениваниями фона. Пациенты могут быть подвергнуты вымыванию следующим образом, но после необходимого периода вымывания они должны ответить на вопросы опросника по вагинальной атрофии.

По меньшей мере восьминедельный период вымывания для прежней пероральной терапии с использованием эстрогена, ΌΗΕΆ и/или прогестина.

По меньшей мере четырехнедельный период вымывания для прежней трансдермальной гормональной терапии.

По меньшей мере четырехнедельный период вымывания для доставляемой локально гормональной заместительной терапии для вагинальной сухости.

По меньшей мере 6 месяцев для прежней терапии инъекционной лекарственной терапии с использованием шарика эстрогена или прогестина.

Восемь недель или более для прежней внутриматочной терапии с использованием прогестина.

Шесть месяцев или более для прежних имплантатов прогестина и инъекционной лекарственной терапии с использованием только эстрогена.

Прежнее лечение андрогенами или анаболическими стероидами в пределах 3 месяцев перед визитом для скрининга.

Пероральное лечение кортикостероидами в пределах шести недель от начала исследования.

Не позволяется продолжительное применение кортикостероидов (разрешается периодический назальный спрей или местное нанесения на кожу, в глаза или уши).

Сердечная недостаточность или проявление коронарной болезни сердца.

Гипертензия, равная или превышающая 160/95 мм рт. столба или не контролируемая стандартной терапией.

Подтвержденная клинически значимая депрессия или подтвержденная история тяжелого психиатрического расстройства.

Введение любого исследуемого лекарственного средства в пределах 30 дней визита в скрининге.

Клинически релевантная атипичная биохимия сыворотки или гематология.

Фоновая цервикальная цитология, показывающая повреждения плоскоклеточного эпителия низкой степени (ЬО131Ь) или худшую картину.

Курение более чем 10 сигарет в день.

Лекарственные средства, которые мешают метаболизму эстрогенов (например, кетоконазол, ингибиторы образования или действия стероидов).

3ΕΚΜ или лекарственное средство, взаимодействующее с рецепторами стероидов.

Известное или пальпируемое присутствие фибромы матки при гинекологическом обследовании.

Нарушение свертывания крови или антикоагулянтная лекарственная терапия.

Лабораторные тесты.

Обычные лабораторные тесты, а именно, гематология (в том числе клинический анализ крови и коагуляцию), химию крови и анализ мочи выполняли при всех визитах. Сывороточный Ρ3Η должен был измеряться только у женщин, которые не имели менструального цикла в течение >6 месяцев, но <12 месяцев, или которые были предменопаузальными в момент гистерэктомии. Сывороточные уровни стероидов ΌΗΕΆ, ΌΗΕΆ-δ, андрост-5-ен-3в,17в-диола (5-диола), дигидротестостерона (ИНТ), тестостерона (тесто), андростендиона (4-диона), эстрона (Ε₁), эстрадиола (Е₂), Ε₁-3, глюкуронида андростерона (ΆΩΤΟ), андростан-3а,17в-диол-30 (За-диол-ЗО) и За-диол-170 измеряли в Лаборатории молекулярной эндокринологии исследовательского Центра ΟΗΠΕ масс-спектрометрией, как описано (ЬаЪпс, Вс1апдсг с! а1. 2006; ЬаЪпе, Вс1апдсг с! а1. 2007; ЬаЪпе, Сизап с! а1. 2008).

Вагинальный рН и вагинальная цитология.

Для индекса зрелости и мазка Папаниколау (РАР), все пробы были исследованы цитопатологоанатомом (Ότ. РоЬсП ИиЪс, ОсраПтсЩ о£ су1о1оду-ра1Но1оду. Εη0ιηΙ-.Κ5ΐΐ5 Ηθ3ρίίΗ1, ЦисЪсс Сбу, Сапаба), которому не были известны схемы лечения. Счет 100 клеток выполняли для классификации клеток как поверхностные (3), промежуточные (I) и парабазальные (Р) типы клеток плоского эпителия (Мс1зс1з 1967; Юсб 1993).

Вагинальные мазки получали соскобом средней трети боковой стенки вагины округленным концом шпателя Аугс. Затем этот материал наносили на стеклянное предметное стекло и немедленно фиксировали Зртау-СуЮ. Эти пробы отсылали в центральную лабораторию для определения индекса зрелости.

Вагинальный рН измеряли прикладыванием индикаторной полоски рН непосредственно к боковой

- 34 020683 стенке вагины пинцетом. Для мазка Папниколау - если его не выполняли в течение последних 12 месяцев, образцы получали из эндоцервикса (слизистой оболочки канала шейки матки), экзоцервикса и свода вагины и немедленно фиксировали цитоспреем. Эти образцы собирали шпателем Ауге.

Эндометриальная биопсия.

Эндометриальную биопсию выполняли в скрининге и при месяце 3 в конце исследования. Все биопсии обследовались одним и тем же патологоанатомом в центральной лаборатории (Όγ. КоЬей ВиЬе, ОераПтеШ оГ су!о1оду-ра!Ьо1оду, ЕпГап1-1е8и8 Но8рЬа1, ОиеЬес СЬу, Сапайа). Вагинальное обследование.

При тех же самых временных интервалах 2, 4, 8 и 12 недель, гинеколог или врач, отвечающий за это исследование в каждом участке, выполняли обследование вагины для оценивания степени тяжести (отсутствующей, легкой, умеренной или тяжелой, анализируемой с использованием величин 0, 1, 2 и 3, соответственно) на основные симптомы вагинальной атрофии, а именно вагинальные секреты, цвет вагины, целостность вагинального эпителия и толщина поверхности вагинального эпителия. Как можно видеть на фиг. 26-29, наблюдалось зависимое от времени, зависимое от дозы и статистически значимое улучшение всех четырех признаков вагинальной атрофии. Действительно, благоприятные эффекты, наблюдаемые гинекологом и/или врачом, являются почти совмещаемыми с эффектами, сообщаемыми женщинами в отношении их наиболее беспокоящих симптомов.

Вагинальное обследование выполняли в скрининге и затем в день 1 и в недели 2, 4, 8 и 12. Вагинальные секреты, цвет вагины, целостность вагинального эпителия и толщину поверхности вагинального эпителия оценивали в соответствии со следующими степенями тяжести: отсутствующая, легкая, умеренная или тяжелая. Эти определения тяжести были следующими:

a) Вагинальные секреты.

Отсутствие атрофии: нормальные прозрачные секреты, отмеченные на вагинальных стенках.

Легкая: поверхностное покрытие секретов, трудность вставления зеркала.

Умеренная: недостаточный секрет, не покрывающий весь свод вагины, может требоваться смазывание при вставлении зеркала для предотвращения боли.

Тяжелая: отсутствие секрета, воспаленная вагина с заметным изъязвлением, требуется смазывание при вставлении зеркала для предотвращения боли.

b) Целостность вагинального эпителия.

Отсутствие атрофии: нормальная.

Легкая: вагинальная поверхность кровоточит при соскобе.

Умеренная: вагинальная поверхность кровоточит при легком контакте.

Тяжелая: вагинальная поверхность имеет капиллярные кровоизлияния (петехии) перед контактом и кровоточит при легком контакте.

c) Толщина вагинальной эпителиальной поверхности.

Отсутствие атрофии: складчатость и эластичность свода вагины.

Мягкая: слабая складчатость с отмеченной некоторой эластичностью свода вагины.

Умеренная: гладкая, некоторая эластичность свода вагины.

Тяжелая: гладкая, с отсутствием эластичности, сжатия верхней 1/3 вагины или потеря вагинального тонуса (грыжа мочевого пузыря и ректоцеле (выпадение прямой кишки)).

й) Цвет вагины.

Отсутствие атрофии: розовый.

Легкая: светлее по цвету.

Умеренная: бледнее по цвету.

Тяжелая: прозрачная, либо бесцветная, либо воспаленная.

Статисника.

Будут производиться суммарные табулирования (сведения в таблицы), которые представляют ряд наблюдений, среднее или геометрическое среднее, как будет целесообразно, стандартное отклонение, стандартную ошибку среднего, 95% двусторонний доверительный интервал (С1), медиану, минимум и максимум для непрерывных переменных и количество и процент на категорию для категорических данных. Статистические анализы выполняют при двустороннем уровне значимости 0,05, если нет другого указания. Эти категории для суммирования будут в основном состоять из уровней доз ВНЕА-обработок, 0% плацебо, 0,25%, 0,5% и 1,0% ВНЕА.

Первичные конечные точки для анализа будут состоять из следующего.

Статистически значимого улучшения умеренного - тяжелого симптома, идентифицированного женщиной-субъектом как наиболее беспокоящего для нее. Эта тяжесть симптомов основана на симптомах увеличивающейся тяжести: отсутствующей, легкой, умеренной или тяжелой. Эти оценки будут анализироваться с использованием величин 0, 1, 2 и 3 соответственно; все субъекты должны иметь по меньшей мере один фоновый симптом, который классифицируется как 2 или 3. Представляющими интерес симптомами являются сухость вагины, вагинальное и/или вульварное раздражение/зуд и вагинальная боль, ассоциированная с половой активностью.

Статистически значимое уменьшение количества парабазальных клеток и статистически значимое увеличение количества поверхностных клеток. Эти данные измеряют в процентах. Будет также рассчи- 35 020683 тываться величина зрелости.

Статистически значимое снижение вагинального рН.

Анализ популяций.

Предназначенная для лечения (1пХеиХ-Хо-ТгеаХ (ΙΤΤ)) популяция будет состоять из подвергаемых лечению субъектов с оцениванием фона и по меньшей мере одним оцениванием эффективности после фона. Субъекты, которые получали неправильное лечение, будут анализироваться как рандомизированные. Этот анализ популяции должен рассматриваться как первичный анализ популяции. Субъекты в этой популяции, которые лишены наблюдений после фона, будут иметь эту последнюю величину, продвинутую для анализов эффективности.

Популяция на протокол (РР) состоит из субпопуляции этой обработанной популяции, которая завершает это исследование через временную точку 12 недель без нарушений основного протокола, которые, как считается, нарушают данные эффективности. Главные нарушения протокола будут определяться перед раскрытием слепого исследования, на основе обзора перечней данных и мониторинга сообщений об отклонениях от протокола. Субъекты в РР-популяции должны получать по меньшей мере 90% требуемого количества применений обработки исследования в указанной протоколом продолжительности для этого субъекта, на основе данных дневника этого субъекта. Субъекты в РР-популяции должны точно соблюдать схему окон визитов: ±3 дня для дня 14 и ±7 дней для недель 4, 8 и 12. Субъекты, которые получали неправильное лечение, но для которых это получаемое лечение может быть недвусмысленно подтверждено, будут анализироваться в РР-популяции, как лечившиеся, при условии, что они не имеют других нарушений, которые компрометируют эти данные. РР-популяция будет поддерживающей популяцией для анализа данных эффективности.

Популяция надежности будет определяться как все субъекты, которые получают введение любого тест-изделия (ΌΗΕΑ в любой дозе или плацебо) и которые имеют доступную информацию надежности. Все анализы данных надежности будут основываться на этой популяции. Анализ будет основываться на фактически полученном лечении.

Оценивание эффективности.

Анализы эффективности будут выполняться первично на популяции ΙΤΤ, и популяция Рег-РгоХосо1 будет обеспечивать поддерживающие анализы эффективности. Целью этого первичного исследования является оценивание реакции доза-ответ параметров слизистой оболочки вагины для локального действия ΌΗΕΑ у постменопаузных женщин, страдающих от вагинальной атрофии, в частности определением минимальной дозы ΌΗΕΑ, которая производит максимальное действие на слизистую оболочку вагины. Этими копервичными конечными точками для достижения этой цели являются уменьшение парабазальных клеток, уменьшение вагинального рН, увеличение поверхностных клеток (вместе, эти конечные точки будут называться физиологическими параметрами) и сообщенный самим субъектом наиболее беспокоящий симптом, включающий в себя вагинальную сухость, вагинальный и/или вульварный зуд/раздражение и вагинальную боль, ассоциированную с половой активностью (вместе, эти конечные точки будут называться параметрами-баллами симптома). Кроме этих первичных конечных точек, будет также рассчитываться величина зрелости. Сообщаемые субъектом оценки симптома будут следующими величинами: отсутствие симптома, легкий, умеренный или тяжелый, с использованием при анализе величин 0, 1, 2 или 3 соответственно. Все конечные точки должны демонстрировать статистически значимые эффекты относительно плацебо, и, следовательно, для множественных конечных точек не требуется статистическая коррекция.

Первичной временной точкой для анализа будет 12-недельное оценивание с дополнительными представлениями данных для 2, 4 и 8 недель. Изменение от фона до оценки после фона будет использоваться для анализа, так же как это различие с плацебо.

Результаты.

Поскольку парабазальные клетки являются обычно преобладающей категорией в вагинальном мазке постменопаузных женщин, страдающих по меньшей мере от одного умеренного-тяжелого симптома вагинальной атрофии, на фиг. 22 и в табл. 6 можно видеть, что уже при 2 неделях лечения самая низкая доза ΌΗΕΑ (0,25%) уменьшала % парабазальных клеток на 29,5±0,51% от 56,0 до 26,5%, тогда как уменьшения 37,8±0,46% и 36,6% наблюдали, соответственно, с дозами 0,5 и 1,0% ΌΗΕΑ при том же самом временном интервале. При стандартной продолжительности 12 недель лечения наблюдали уменьшения 39,5±0,57% (р<0,000001), 45,6±0,55% (р<0,000001) и 45,2±0,53% (р<0,000001) с дозами ΌΗΕΑ 0,25, 0,5 и 1,0% ΌΗΕΑ, соответственно, в то время как не наблюдали значимого действия в группе плацебо при любом временном интервале.

В то время как не наблюдали значимого действия при 12 неделях в группе плацебо на %-ное изменение поверхностных клеток (табл. 6), были измерены увеличения 3,96±0,10% (р=0,0002), 6,71±0,14% (р=0,00001) и 5,92±0,12% (р=0,00001) в группах 0,25, 0,5 и 1,0% ΌΗΕΑ соответственно. Можно также видеть, что при дозе 0,5% ΌΗΕΑ, 48,0% максимальный эффект достигался при 2 неделях, в то время как при 4 и 8 неделях достигался максимальный эффект 84,8 и 99,0%. При дозе 1,0% ΌΗΕΑ максимальный эффект достигался уже при 2 неделях.

- 36 020683

Фиг. 23 иллюстрирует абсолютные величины % поверхностных клеток при различных дозах ЭНЕА и временных интервалах.

Вагинальный рН уменьшался при 12 неделях на 0,47±0,11 от 6,52±0,13 единиц рН в группе плацебо (табл. 6, фиг. 24), в то время как наблюдали уменьшения 1,12±0,11 (р=0,0005) от 6,49±0,12, 1,35±0,3 от 6,56±0,13, 1,35±0,13 от единиц рН 6,56±0,13 единиц рН и 1,39±0,14 от 6,34±0,3 единиц рН в обработанных 0,25, 0,50 и 1,0 ЭНЕА группах соответственно (табл. 7). В той же самой таблице можно видеть, что при дозе 0,5% ЭНЕА максимальное действие на рН 70,6 и 94,1% (уменьшение 1,36 единиц рН) достигалось при 2 и 4 неделях лечения соответственно. С другой стороны, низкая доза 0,25% ЭНЕА давала только 83,0% максимального действия дозы 0,5% ЭНЕА при 12 неделях. Не наблюдали значимого различия в изменении рН между дозами 0,50 и 1,0% ЭНЕА при 4, 8 и 12 неделях (табл. 7).

Фиг. 24 иллюстрирует абсолютные величины рН при различных дозах ЭНЕА и временных интервалах.

Все женщины должны были при вступлении в исследование иметь один или несколько из следующих симптомов вагинальной атрофии, оцениваемых ими самими как умеренные-тяжелые: сухость вагины, вагинальное или вульварное раздражении/зуд или вагинальная боль при половой активности. Самостоятельно идентифицированные женщинами симптомы, сообщаемые как отсутствующие, умеренные или тяжелые, анализировали с использованием величин 0, 1, 2 и 3 соответственно. Как показано в табл. 8, при 12-недельном интервале тяжесть наиболее беспокоящего симптома уменьшалась на 0,67±0,15 в группе плацебо, 1,27±0,16 в группе 0,25% ЭНЕА (ρ=0,004 против плацебо), 1,56±0,15 в группе, получающей 0,5% ЭНЕА (ρ<0,0001 против плацебо) и 1,37±0,14 в группе, получающей более высокую 1,0% дозу ЭНЕА (ρ=0,0008 против плацебо).

Фиг. 25 иллюстрирует степень участия наиболее беспокоящего симптома при различных дозах ЭНЕА и временных интервалах. Вагинальная сухость, боль, ассоциированная с половой активностью и вагинальное и/или вульварное раздражение/зуд были идентифицированы при фоне как наиболее беспокоящий симптом. В группе плацебо вагинальная сухость составляла % улучшений, отмечаемых участниками.

Как показано на фиг. 25, улучшение этого наиболее беспокоящего симптома было уже с высокой значимостью отличающимся (р=0,004) при дозе 0,25% ЭНЕА. Процент женщин с отсутствием изменения или с ухудшением оценки (в баллах) 1 при 12 неделях изменялся от 53,5% в группе плацебо до 27,5, 17,8 и 19,6% в группах 0,25, 0,5 и 1,0% соответственно (табл. 9). Улучшения на 2 или 3 категории тяжести наблюдали у 21,8% женщин, обработанных плацебо, тогда как 50,0, 53,3 и 47,9% женщин, которые получали 0,25, 0,5 и 1,0% препараты ЭНЕА, сообщали такое важное улучшение. Только 4,6% женщин обнаруживали уменьшение от тяжелого до отсутствующего в группе плацебо в сравнении с 7,5, 20 и 10,9% в тех же самых обработанных ЭНЕА группах.

При тех же самых временных интервалах 2, 4, 8 и 12 недель гинеколог или врач, ответственные за это клиническое исследование, в каждой точке исследования выполняли вагинальное обследование для оценивания степени тяжести (отсутствующей, легкой, умеренной или тяжелой, анализируемой с использованием величин 0, 1, 2 и 3 соответственно) на основные признаки вагинальной атрофии, а именно, вагинальные секреты, цвет вагины, целостность эпителия вагины и толщину эпителиальной поверхности вагины. Как можно видеть на фиг. 26-29, наблюдали зависимое от времени и зависящее от дозы, а также высоко статистически значимое улучшение всех четырех симптомов вагинальной атрофии. Действительно, благоприятные действия, наблюдаемые гинекологом или лечащим врачом, являются почти совмещаемыми с этими самостоятельно сообщенными женщинами действиями на их наиболее беспокоящие симптомы, а также с действиями на вагинальные парабазальные и поверхностные клетки и рН, которые являются объективными параметрами действия ЭНЕА.

Фиг. 30 и 31 иллюстрируют средние 24-часовые (рассчитанные из величин ЛυС_0-24ч, измеренных в дни 1 и 7 лечения) уровни сывороточных стероидов ЭНЕА и одиннадцати его метаболитов, взятые из недавнего исследования (ЬаЪпе, Си8ап е! а1. 2008). Можно видеть, что только сывороточные ЭНЕА и 5диол (и 4-дион в день 1) увеличиваются значимо, но в пределах границ величин, обнаруживаемых у постменопаузных женщинах (ЬаЪпе, Ве1апдег е! а1. 2006). Отсутствует значимое действие на сывороточные эстрогены (Е₁, Е₂ и ЕД а также на сывороточные андрогены (тесто и ЭНТ).

- 37 020683

Таблица 6

Изменение со дня 1 в % парабазальных и поверхностных клеток во время локального лечения увеличивающимися дозами ЭНЕЛ*

	2 недели	4 недели	8 недель	12 недель
Парабазальные клетки
0.0% ЭНЕЛ	+ 3,6 ±0,32	+ 0,02 ± 0,32	-1,17±0,37	+ 1,04 ±0,35
0.25%	-29,5 ±0,51	-38,4 ±0,51	- 40,3 ± 0,55	- 39,5 ± 0,57
0.50%	- 37,8 ± 0,46	-43,4 ±0,50	-47,8 ±0,49	- 45,6 ± 0,55
1.0%	-36,6 ±0,50	-42,5 ±0,51	-43,7 ±0,50	-45,2 ±0,53
Поверхностные клетки

0.0% ПТТЕА.	0,10 ±0,03	0,37 ±0,03	0,40 ± 0,03	0,53 ± 0,05
0.25%	2,32 ±0,07	3,38 ± 0,08	3,42 ± 0,09	3,96 ±0,10
0.50%	3,22 ±0,05	5,69 ± 0,09	6,64 ±0,11	6,71 ±0,14
1.0%	6,26 ±0,16	6,64 + 0,14	6,88 ±0,16	5,92 ±0,12

* среднее ± 8ЕМ

Таблица 7

Изменение со дня 1 в вагинальном рН во время локального лечения увеличивающимися дозами ЭНЕЛ*

Доза Ι3ΗΕΑ	2 недели	4 недели	8 недель	12 недель
0.0% ϋΗΕΑ	-0,23 ± 0,08	-0,37 ± 0,09	-0,51 ±0,10	-0,47 ±0,11
0.25% 11	-0,76 ±0,12	-0,93 + 0,12	-1,09 ±0,10	-1,12 ± 0,11
0.50%	-0,96 + 0,14	-1,28 + 0,12	-1,36 + 0,12	-1,35 ±0,13
1.0%	-1,13 ±0,12	-1,30 ±0,12	-1,41 ±0,12	-1,39 ±0,14

* среднее ± 8ЕМ

Таблица 8

Изменение со дня 1 в наиболее беспокоящих симптомах вагинальной атрофии во время локального лечения увеличивающимися дозами ЭНЕЛ*

Доза ОНЕА	2 недели	4 недели	8 недель	12 недель
0.0% ОНЕА	-0,49 ±0,16	-0,79 ±0,16	-0,61 ±0,16	-0,67 ±0,15
0.25%	-0,70 ±0,17	-1,11 ±0,16	-1,19±0,16	-1,27 ±0,16
0.50%	-0,98 ±0,15	-1,36 ±0,15	-1,37±0,17	-1,56 ±0,15
1.0%	-1,00 ±0,15	-1,29 ±0,14	-1,38 ±0,17	-1,37 ±0,14

* среднее ± 8ЕМ

Таблица 9

Изменение со дня 1 в наиболее беспокоящих симптомах при 12 неделях лечения 0% (плацебо),

0,25, 0,50 и 1,0% ЭНЕЛ. Изменение от одной категории (тяжелая умеренная легкая отсутствующая) берется за -1, тогда как изменение на 2 категории было равно -2, и т.д.

Изменение категории	-3	-2	-1	0	+ 1
Дозы	% женщин
0.0% ЭНЕА	4,65	16,3	25,6	48,8	4,65
0.25%	7,50	42,5	22,5	25,0	2,50
0.50%	20,0	33,3	28,9	17,8	0,0
1.0%	10,9	37,0	32,6	17,4	2,17

* среднее ± 8ЕМ

Примеры фармацевтических композиций.

Ниже представлены, в качестве примера, а не в качестве ограничения, несколько фармацевтических композиций, использующих предпочтительный предшественник активных половых стероидных гормонов ЭНЕЛ. Концентрация активного ингредиента может варьироваться на протяжении большого диапазона, как обсуждалось здесь. Количества и типы других ингредиентов, которые могут быть включены, хорошо известны в данной области.

- 38 020683

Пример А. Вагинальная или пероральная таблетка.

Ингредиент	Масса в % (в расчете на массу всей композиции)
ΌΗΕΑ	5,0
Желатин	6,5
Лактоза	70,5
Крахмал	18,0

Пример В. ί ,3 мл-Вагинальный суппозиторий

Ингредиент	Масса в % (в расчете на массу всей композиции)
ϋΗΕΑ	0.50
ХУНКерзо! Н-15 Базе	99,50

Суппозитории ΌΗΕΑ готовили с использованием в качестве основы ^ЫХсрко1 Η-15 Ъакс (доступного из Мсб1кса, МопХгса1, Сапаба). Может быть использована любая другая липофильная основа, такая как, но не только, масло, какао-масло, СоХотаг, ОсНубад Вакс, РаХБЪакс, Исхаибс Вакс 95, Иубгоко1с. §ирроС1гс, ХУссоЪсс, масло какао, баросис, Оуисис, Макка ΕкХа^^ηит или другие комбинации предыдущих компонентов.

Пример С. Вагинальный или наносимый локально крем.

Ингредиент	Масса в % (в расчете на массу всей композиции)
ΌΗΕΑ	1.0
Эмульгирующий воск	18.0
Легкое минеральное масло	12.0
Бензиловый спирт	1.0
Этанол 95% иЗР	34.0
Очищенная вода, ИЗР	34.0

Вагинальная или пероральная желатиновая капсула.

Другие предшественники половых стероидных гормонов могут быть использованы вместо ΌΗΕΑ в вышеуказанных препаратах. Могут быть включены несколько предшественников, причем в этом случае комбинированным мас.% является предпочтительно мас.% для отдельного предшественника, указанный в приведенных выше примерах.

Это изобретение было описано в виде предпочтительных вариантов осуществления и примеров, но не ограничивается ими. Квалифицированным в данной области специалистам будут понятны более широкая применимость и объем этого изобретения, который ограничивается только приведенной далее формулой изобретения.

Claims (45)

1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

   1. Способ лечения или уменьшения вероятности возникновения симптомов или заболеваний, выбранных из недержания мочи, вагинальной атрофии, атрофического вагинита, вагинальной сухости, диспареунии и сексуальной дисфункции у постменопаузных женщин, включающий интравагинальное введение эффективного количества предшественника половых стероидных гормонов, выбранного из группы, состоящей из дегидроэпиандростерона, сульфата дегидроэпиандростерона, андрост-5-ен-3в,17вдиола и 4-андростен-3,17-диона в дозе 0,5-13 мг/день.
2. 2. Способ по п.1, где указанное терапевтическое количество предшественника половых стероидных гормонов составляет 0,5-6,5 мг/день и менее.
3. 3. Способ по п.1, где предшественник половых стероидных гормонов вводят посредством препарата интравагинальной рецептуры, выбранного из группы, состоящей из крема, лосьона, геля, мази, вагинной овулы, суппозитория и кольца.
4. 4. Способ по п.1, где предшественник половых стероидных гормонов, при необходимости, комбинируют с селективным модулятором эстрогеновых рецепторов (8ΕΚΜ), чтобы доставлять их последовательно или одновременно.
5. 5. Способ лечения или уменьшения вероятности возникновения симптомов или заболеваний, выбранных из группы, состоящей из недержания мочи, вагинальной атрофии, атрофического вагинита, вагинальной сухости, диспареунии и сексуальной дисфункции у постменопаузных женщин, включающий интравагинальное введение (а) предшественника половых стероидных гормонов, выбранного из группы, состоящей из дегидроэпиандростерона, сульфата дегидроэпиандростерона, андрост-5-ен-3в,17в-диола и 4-андростен-3,17-диона в дозе 0,5-13 мг/день, а также введение (Ъ) терапевтически эффективного коли- 39 020683 чества 8ЕКМ, причем указанный предшественник полового стероидного гормона и §ЕКМ вводятся последовательно или одновременно, как части комбинированной терапии.
6. 6. Способ по п.4 или 5, где §ЕКМ имеет следующую химическую структуру:
7. 7. Способ по п.5, где указанное терапевтическое количество предшественника половых стероидных гормонов составляет 0,5-6,5 мг/день.
8. 8. Способ по п.5, где предшественник половых стероидных гормонов вводят посредством препарата интравагинальной рецептуры, выбранного из группы, состоящей из крема, лосьона, геля, мази, вагинной овулы, суппозитория и кольца пластыря.
9. 9. Способ по п.1 или 5, где предшественником является дегидроэпиандростерон.
10. 10. Способ по п.1 или 5, где указанное терапевтическое количество предшественника половых стероидных гормонов составляет 0,5-3,25 мг/день и менее.
11. 11. Способ лечения или уменьшения вероятности возникновения симптомов или заболеваний, выбранных из недержания мочи, вагинальной атрофии, атрофического вагинита, вагинальной сухости, диспареунии и сексуальной дисфункции у постменопаузных женщин, включающий интравагинальное введение предшественника половых стероидных гормонов дегидроэпиандростерона в дозе 0,5-13 мг/день.
12. 12. Способ по пп.1, 5 или 11, где предшественник половых стероидных гормонов вводят в форме единичной дозы.
13. 13. Способ по п.12, где единичная доза содержит порцию крема, геля, раствора, лосьона или мази.
14. 14. Интравагинальная фармацевтическая композиция для применения в способе по пп.1-13, содержащая 0,5-13 мг предшественника половых стероидных гормонов, выбранного из группы, состоящей из дегидроэпиандростерона, сульфата дегидроэпиандростерона, андрост-5-ен-3в,17в-диола и 4-андростен3,17-диона, и фармацевтически приемлемый эксципиент, применяемый для интравагинального введения, разбавитель или носитель.
15. 15. Интравагинальная фармацевтическая композиция по п.14, в которой количество предшественника половых стероидных гормонов составляет 3,0-13 мг.
16. 16. Интравагинальная фармацевтическая композиция по п.14, в которой эксципиент, разбавитель или носитель, выбраны из группы, состоящей из чистых или смешанных природных или полусинтетических три-, ди- или моноглицеридов насыщенных, ненасыщенных или гидрогенизированных жирных кислот; масла, пальмового, пальмоядрового масла, частично гидрогенизированного хлопкового и кокосового масла и их триглицеридных производных; гидрогенизированных жирных спиртов и эфиров; полиоксистеарата; перегруппированных гидрогенизированных растительных масел; эвтектических смесей моно-, ди-, триглицеридов, полученных из природных масел, сложных триглицеридных эфиров; Твина 61; масла какао, фармацевтически приемлемых жирноосновных эксципиентов и их комбинации.
17. 17. Интравагинальная фармацевтическая композиция по п.14, которая выполнена в форме крема, геля, раствора, лосьона или мази и адаптирована для разделения на одну или более порций, содержащих единичную дозу.
18. 18. Интравагинальная фармацевтическая композиция по п.14, которая дополнительно содержит терапевтически эффективное количество 8ЕКМ.
19. 19. Интравагинальная фармацевтическая композиция по п.18, в которой предшественник половых стероидных гормонов представляет собой дегидроэпиандростерон, а §ЕКМ представляет собой аколбифен.
20. 20. Вагинальный суппозиторий для применения в способе по любому из пп.1-5 и 11, содержащий предшественник половых стероидных гормонов, выбранный из группы, состоящей из дегидроэпиандростерона, сульфата дегидроэпиандростерона, андрост-5-ен-3в,17в-диола и 4-андростен-3,17-диона, и фармацевтически приемлемый применимый для интравагинального введения эксципиент, причем указанный суппозиторий содержит 0,5-13 мг указанного предшественника половых стероидных гормонов.
21. 21. Вагинальный суппозиторий по п.20, содержащий 6,5 мг предшественника половых стероидных гормонов.
22. 22. Вагинальный суппозиторий по п.20, содержащий 3,25 мг предшественника половых стероидных гормонов.
23. 23. Вагинальный суппозиторий по п.20, содержащий 3-13 мг предшественника половых стероидных гормонов.
24. 24. Вагинальный суппозиторий по п.20, содержащий 3-13 мг предшественника половых стероидных гормонов и липофильный эксципиент.

    - 40 020683
25. 25. Вагинальный суппозиторий по п.20, содержащий 3-13 мг предшественника половых стероидных гормонов и эксципиент, содержащий сложные эфиры насыщенных жирных кислот.
26. 26. Вагинальный суппозиторий по п.20, содержащий липофильный эксципиент.
27. 27. Вагинальный суппозиторий по п.20, включающий эксципиент, содержащий сложные эфиры насыщенных жирных кислот.
28. 28. Вагинальный суппозиторий по п.20, содержащий 6,5 мг предшественника половых стероидных гормонов и эксципиент, содержащий сложные эфиры насыщенных жирных кислот.
29. 29. Вагинальный суппозиторий по п.20, содержащий 3,25 мг предшественника половых стероидных гормонов и эксципиент, содержащий сложные эфиры насыщенных жирных кислот.
30. 30. Вагинальный суппозиторий по п.20, в котором эксципиентом является \Уйер5о1 Н-15.
31. 31. 1,3 мл вагинальный суппозиторий для применения в способе по любому из пп.1-5 и 11, содержащий 6,5 мг предшественника половых стероидных гормонов, выбранного из группы, состоящей из дегидроэпиандростерона, сульфата дегидроэпиандростерона, андрост-5-ен-3в,17в-диола и 4-андростен3,17-диона, и \Уйер5о1 Н-15 в качестве эксципиента.
32. 32. Вагинальный суппозиторий для применения в способе по любому из пп.1-5 и 11, содержащий дегидроэпиандростерон, и фармацевтически приемлемый эксципиент, применимый для интравагинального введения, в котором содержание дегидроэпиандростерона составляет 0,5-13 мг.
33. 33. Вагинальный суппозиторий по п.32, в котором содержание дегидроэпиандростерона составляет 6,5 мг.
34. 34. Вагинальный суппозиторий по п.32, в котором содержание дегидроэпиандростерона составляет

    3,25 мг.
35. 35. Вагинальный суппозиторий по п.32, в котором содержание дегидроэпиандростерона составляет 3-13 мг.
36. 36. Вагинальный суппозиторий по п.32, содержащий 3-13 мг дегидроэпиандростерона и липофильный эксципиент.
37. 37. Вагинальный суппозиторий по п.32, содержащий 3-13 мг дегидроэпиандростерона и эксципиент, содержащий сложные эфиры насыщенных жирных кислот.
38. 38. Вагинальный суппозиторий по п.32, содержащий 6,5 мг дегидроэпиандростерона и эксципиент, содержащий сложные эфиры насыщенных жирных кислот.
39. 39. Вагинальный суппозиторий по п.32, содержащий 3,25 мг дегидроэпиандростерона и эксципиент, содержащий сложные эфиры насыщенных жирных кислот.
40. 40. Вагинальный суппозиторий по п.32, в котором эксципиентом является \Уйер5о1 Н-15.
41. 41. Вагинальный суппозиторий для применения в способе по любому из пп.1-5 и 11, содержащий 6,5 мг дегидроэпиандростерона и \Уйер5о1 Н-15 в качестве эксципиента.
42. 42. 1,3 мл вагинальный суппозиторий для применения в способе по любому из пп.1-5 и 11, содержащий 6,5 мг дегидроэпиандростерона и \УПер5о1 Н-15 в качестве эксципиента.
43. 43. Вагинальный суппозиторий для применения в способе по любому из пп.1-5 и 11, содержащий

    3,25 мг дегидроэпиандростерона и \Уйер5о1 Н-15 в качестве эксципиента.
44. 44. 1,3 мл вагинальный суппозиторий для применения в способе по любому из пп.1-5 и 11, содержащий 3,25 мг дегидроэпиандростерона и \Уйер5о1 Н-15 в качестве эксципиента.
45. 45. Вагинальный суппозиторий для применения в способе по любому из пп.1-5 и 11, содержащий 313 мг дегидроэпиандростерона и \УПер5о1 Н-15 в качестве эксципиента.