CN101861152A - 治疗绝经期的deha组合物 - Google Patents

治疗绝经期的deha组合物 Download PDF

Info

Publication number
CN101861152A
CN101861152A CN200880110988A CN200880110988A CN101861152A CN 101861152 A CN101861152 A CN 101861152A CN 200880110988 A CN200880110988 A CN 200880110988A CN 200880110988 A CN200880110988 A CN 200880110988A CN 101861152 A CN101861152 A CN 101861152A
Authority
CN
China
Prior art keywords
dhea
people
day
sex steroid
steroid precursor
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN200880110988A
Other languages
English (en)
Inventor
F·拉布里
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Endorecherche Inc
Original Assignee
Endorecherche Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Endorecherche Inc filed Critical Endorecherche Inc
Priority to CN201910006969.2A priority Critical patent/CN109893526A/zh
Priority to CN201510736908.3A priority patent/CN105412121A/zh
Publication of CN101861152A publication Critical patent/CN101861152A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/453—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with oxygen as a ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
    • A61K31/565—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids not substituted in position 17 beta by a carbon atom, e.g. estrane, estradiol
    • A61K31/568—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids not substituted in position 17 beta by a carbon atom, e.g. estrane, estradiol substituted in positions 10 and 13 by a chain having at least one carbon atom, e.g. androstanes, e.g. testosterone
    • A61K31/5685—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids not substituted in position 17 beta by a carbon atom, e.g. estrane, estradiol substituted in positions 10 and 13 by a chain having at least one carbon atom, e.g. androstanes, e.g. testosterone having an oxo group in position 17, e.g. androsterone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0014—Skin, i.e. galenical aspects of topical compositions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0034—Urogenital system, e.g. vagina, uterus, cervix, penis, scrotum, urethra, bladder; Personal lubricants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/10—Drugs for disorders of the urinary system of the bladder
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A61P15/02—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for disorders of the vagina
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A61P15/10—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for impotence
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A61P15/12—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for climacteric disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A61P15/14—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for lactation disorders, e.g. galactorrhoea
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/04—Drugs for skeletal disorders for non-specific disorders of the connective tissue
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/06—Antihyperlipidemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/24—Drugs for disorders of the endocrine system of the sex hormones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/24—Drugs for disorders of the endocrine system of the sex hormones
    • A61P5/26—Androgens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/24—Drugs for disorders of the endocrine system of the sex hormones
    • A61P5/32—Antioestrogens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/48—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones
    • A61P5/50—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones for increasing or potentiating the activity of insulin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/12—Antidiuretics, e.g. drugs for diabetes insipidus

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Gynecology & Obstetrics (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Child & Adolescent Psychology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Pregnancy & Childbirth (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)

Abstract

本发明公开了在绝经后女性中治疗由于绝经期而产生的症状或疾病或降低获得其的可能性，尤其是在敏感的恒温动物(包括人)中的骨质疏松症，阴道萎缩和干燥，性腺机能减退，性欲降低，皮肤萎缩，结缔组织疾病，尿失禁，乳房、子宫内膜、卵巢和子宫癌，热潮红，肌块丧失，胰岛素耐受性，疲劳，精力丧失，老化，绝经期的身体症状，该方法包括给予性甾体前体物。所述方法包括新的给药方式和给予脱氢表雄酮(DHEA)，以便利用在阴道层固有膜和/或鞘肌层中的雄激素的积极效果，不会导致不希望有的全身性雌激素效果，以便避免乳房和子宫癌的危险。本发明还公开了递送本发明所使用活性组分的药物组合物。

Description

治疗绝经期的DEHA组合物
发明领域
本发明提供了新的给药方式和给予脱氢表雄酮(DHEA)，以便利用雄激素的积极效果(例如在阴道层固有膜(lamina propia)和/或鞘肌层中)，不会导致不希望有的全身性雌激素效果。除了DHEA之外，可以使用其它性甾体前体物(例如，脱氢表雄酮-硫酸盐，雄-5-烯-3β，17β-二醇，和4-雄甾烯-3，17-二酮)。
相关技术的背景
许多激素相关的疗法是已知的。例如，许多方法全身性地和/或给靶组织提供性甾体雌激素或雄激素。除了直接给予雄激素和/或雌激素之外，可以在所给定组织中转变为雌激素和/或雄激素的性甾体前体物也用于许多症状。在一些环境下，雄激素和雌激素可能是有利的，但在其它环境下，可能是不利的。这尤其取决于靶向组织、患者呈现的具体需要和可以影响非靶向组织的程度。一些疗法尽管是靶向疗法，但在身体其它地方可能还具有不合需要的活性(例如，在局部给予药物的情况下，仍然导致药物或其一种代谢物出现系统性提高)。此外，始终还没有充分地理解作用机理，尤其是雄激素和雌激素的相对作用。
本发明概述
因此，本发明的目的是使用具体剂量、制剂和给药模式，以便更好地达到性甾体的有利效果，并且更好地避免其不合需要的副作用。
在一方面，本发明提供了治疗绝经后女性中与激素不平衡有关的阴道疾病或症状和/或降低获得其的可能性的方法，所述方法包括：给予需要所述治疗的患者选自脱氢表雄酮、脱氢表雄酮硫酸盐、雄-5-烯-3β，17β-二醇和4-雄甾烯-3，17-二酮的性甾体前体物，其中所述性甾体前体物以治疗数量给予，该治疗数量可以提高循环雄激素代谢物的水平，并且不会使雌二醇水平增加到高于在正常绝经后女性中所测定的值。
在另一个方面，本发明提供了治疗绝经后女性中由于绝经期所造成的症状或疾病和/或降低获得该症状或疾病的可能性的方法，所述方法包括：给予需要所述治疗的患者选自脱氢表雄酮、脱氢表雄酮硫酸盐、雄-5-烯-3β，17β-二醇和4-雄甾烯-3，17-二酮的性甾体前体物，其中所述性甾体前体物以治疗数量给予，该治疗数量可以提高循环雄激素代谢物的水平，并且不会使雌二醇循环水平增加到高于在正常绝经后女性中所测定的值，以便避免乳房和子宫癌的危险。
在另一个方面，本发明提供了治疗绝经后女性中由于绝经期所造成的症状或疾病和/或降低获得该症状或疾病的可能性的方法，所述方法包括：给予需要所述治疗的患者选自脱氢表雄酮、脱氢表雄酮硫酸盐、雄-5-烯-3β，17β-二醇和4-雄甾烯-3，17-二酮的性甾体前体物，其中所述性甾体前体物以治疗数量给予，该治疗数量可以提高循环雄激素代谢物的水平，并且进一步包括作为组合治疗的一部分给予治疗有效量的选择性雌激素受体调节剂，以便避免通常在绝经后女性中出现的乳房和子宫癌的危险，和防止骨骼损失、油脂积聚和II型糖尿病。
在另一个方面，本发明提供了治疗阴道固有层或鞘肌层的症状的方法，该方法包括给予阴道3-13mg日剂量的DHEA。
在另一个方面，本发明提供了药物组合物，其包含选自脱氢表雄酮、脱氢表雄酮-硫酸盐、雄-5-烯-3β，17β-二醇和4-雄甾烯-3，17-二酮的性甾体前体物，并且进一步包含选自下列的可药用赋形剂、稀释剂或载体：C12-C18饱和脂肪酸甘油三酯与可变部分相应偏甘油酯的(硬脂(hardfat)，Witepsol)，黄油，油酸、棕榈酸和硬脂酸的混合甘油三酸酯(可可脂)，部分氢化的棉子油(Cotomar)，氢化脂肪醇和酯(Dehydag Base I、Base II或Base III，还可以包含C12-C16饱和脂肪酸的甘油酯)，源于棕榈、棕仁、和椰油油剂的甘油三酯与自乳化单硬脂酸甘油酯和聚烃氧基硬脂酸甘油酯(Fattibase)，Hexaride Base 95，椰油和棕榈油的高熔点馏分(Hydrokote)，重排氢化植物油(S-70-XX95和S-070-XXA)，源于天然植物油的单-、二-、三酸甘油酯的低温共熔混合物(Suppocire)，Tegester甘油三酯，Tween 61，来源于椰子油的甘油三酯(Wecobee)，可可脂，半合成的甘油酯(Japocire，Ovucire)，饱和脂肪酸的甘油三-、二-和一酯的混合物(Massa Estarinum)，和上述的组合(参见Allen等人2008)。本发明还包括包含液体的任何赋形剂，其中液体能溶解DHEA及其它前体物。
在另一个方面，本发明提供了阴道栓剂，相对于栓剂的总重量，其包含0.25-2.00％重量的DHEA，更特别是0.5％重量DHEA，并且进一步包含亲脂性的赋形剂。特别合适的赋形剂是witepsol H-15。
通过提供所需要的雄激素效果(没有雌激素的全身性效果)，可以避免雌激素的全身性副作用例如增加乳房和子宫内膜癌的危险，这种危险存在于现行的、基于雌激素的局部疗法和全身性雌激素替代疗法(Labrie，Cusan等人，Menopause，in press)。
除了给予前体物的其它形式之外，本发明还提供了用优选的赋形剂和优选的前体物浓度配制的阴道栓剂和阴道乳膏剂。
优选阴道给药，这是因为局部作用可以对目标阴道层提供所需要的雄激素效果，而且剂量比其它方式给药时的剂量低得多。对于给药方法之间的已知的变化情况，通过改变上述剂量和浓度，还可以使用其它给药方式。临床医师应该按照各别患者的响应来恰当地改变剂量。
在优选实施方案中，性甾体前体物是DHEA。
附图的简要说明
图1显示了DHEA和5-二醇的血清水平，该血清水平是在40-75岁绝经后女性中每天给予包含0％、0.5％、1.0％或1.8％DHEA的阴道栓剂之后的第1天或第7天的血清水平。数据用平均值±SEM来表示(n＝9或10)。
图2显示了Testo和DHT的血清水平，该血清水平是在40-75岁绝经后女性中每天给予包含0％、0.5％、1.0％或1.8％DHEA的阴道栓剂之后的第1天或第7天的血清水平(n＝8)。数据用平均值±SEM来表示(n＝8至9)。在安慰剂组中，排除一个患者的Testo水平，这是因为无法解释的Testo的高水平(在任何其它甾体中没有反映)。
图3显示了E1和E2的血清水平，该血清水平是在40-75岁绝经后女性中每天给予包含0％、0.5％、1.0％或1.8％DHEA的阴道栓剂之后的第1天或第7天的血清水平。数据用平均值±SEM来表示(n＝9或10)。
图4显示了E1-S和DHEA-S的血清水平，该血清水平是在40-75岁绝经后女性中每天给予包含0％、0.5％、1.0％或1.8％DHEA的阴道栓剂之后的第1天或第7天的血清水平。数据用平均值±SEM来表示(n＝9或10)。
图5显示了4-二酮和ADT-G的血清水平，该血清水平是在40-75岁绝经后女性中每天给予包含0％、0.5％、1.0％或1.8％DHEA的阴道栓剂之后的第1天或第7天的血清水平。数据用平均值±SEM来表示(n＝9或10)。
图6显示了3α-二醇-3G和3α-二醇-17G的血清水平，该血清水平是在40-75岁绝经后女性中每天给予一次包含0％、0.5％、1.0％或1.8％DHEA的阴道栓剂之后的第1天或第7天的血清水平。数据用平均值±SEM来表示(n＝9或10)。
图7显示了DHEA、5-二醇、DHEA-S、4-二酮、Testo和DHT的平均24小时血清浓度(AUC0-24小时/24)，该浓度是在每天给予一次包含0％、0.5％、1.0％或1.8％DHEA的阴道栓剂之后的第1天或第7天测定的。数据用平均值±SEM来表示(n＝8至10)。在安慰剂组中，排除一个患者的Testo水平(该组的n＝8)。将在30-35岁绝经前女性中测定的血清甾体浓度加入作为参比。数据用平均值来表示(n＝47)，同时表示了5％和95％(虚线)。*，p＜0.05，**，p＜0.01，实验(第7天)对安慰剂(第7天)。
图8显示了ADT-G、3α-二醇-3G、3α-二醇-17G、E1、E2和E1-S的平均24小时血清浓度(AUC0-24小时/24)，该浓度是在每天给予包含0％、0.5％、1.0％或1.8％DHEA的阴道栓剂之后的第1天或第7天测定的。数据用平均值±SEM来表示(n＝9或10)。将在30-35岁绝经前女性中测定的血清甾体浓度加入作为参比。数据用平均值来表示(n＝47)，同时表示了5％和95％(虚线)。*，p＜0.05，**，p＜0.01，实验(第7天)对安慰剂(第7天)。
图9显示了雄激素代谢物ADT-G、3α-二醇-17G的总和的血清水平变化，是在阴道内给予增加剂量的DHEA之后的阴道萎缩的绝经后女性中测定的。数据用相同甾体代谢物的血清水平(在年轻的成年(30-35岁)循环的绝经前女性中观测)的百分比来表示。如下获得转化水平：接受0.5％、1.0％和1.8％DHEA剂量的女性中的ADT-G、3α-二醇-3G和3α-二醇-17G的血清水平总和，除以在绝经前女性中所测定的值(数据源于Labrie等人，2006)。还表示了作为对比相对于正常绝经前女性的血清DHEA变化，以便分别表示转化效率(0----0)..………….；和______雄激素代谢物和DHEA的基础水平。
图10显示了成熟指数(A)和阴道pH值(B)，是在每天给予40-75岁绝经后女性包含0％、0.5％、1.0％或1.8％DHEA的阴道栓剂之后第1天和第7天测定的。数据用平均值±SEM表示(n＝9或10)。*，p＜0.05，**，p＜0.01，第7天的数据对第1天的数据。
图11显示了给绝经后女性单一口服两个50mg DHEA胶囊或施用4g 10％DHEA乳膏剂或凝胶之后的血清脱氢表雄酮(DHEA)(A)和雄-5-烯-3β，17β-二醇(5-二醇)(B)的时间过程。
图12显示了给绝经后女性单一口服两个50mg DHEA胶囊或施用4g 10％DHEA乳膏剂或凝胶之后的血清雄烯二酮(4-二酮)(A)和睾酮(B)的时间过程。
图13显示了给绝经后女性单一口服两个50mg DHEA胶囊或施用4g 10％DHEA乳膏剂或凝胶之后的血清雌酮(E1)(A)和17β-雌二醇(E2)(B)的时间过程。
图14显示了给绝经后女性单一口服两个50mg DHEA胶囊或施用4g 10％DHEA乳膏剂或凝胶之后的血清脱氢表雄酮硫酸盐(DHEA-S)(A)和雌酮硫酸盐(E1-S)(B)的时间过程。
图15显示了给绝经后女性每天口服给予两个50mg DHEA胶囊或施用4g 10％DHEA乳膏剂或凝胶之后的血清雄酮葡糖苷酸(ADT-G)(A)和雄甾酮(androstone)3α，17β-二醇-葡糖苷酸(3α-二醇-G)(B)的时间过程。
图16显示了给绝经后女性每天口服给予两个50mg DHEA胶囊或施用4g 10％DHEA乳膏剂或凝胶之后的血清脱氢表雄酮(DHEA)(A)和雄-5-烯-3β，17β-二醇(5-二醇)(B)的时间过程。在给药的第14天进行测定。
图17显示了给绝经后女性每天口服给予两个50mg DHEA胶囊或施用4g 10％DHEA乳膏剂或凝胶之后的血清雄烯二酮(4-二酮)(A)和睾酮(B)的时间过程。在给药的第14天进行测定。
图18显示了给绝经后女性每天口服给予两个50mg DHEA胶囊或施用4g 10％DHEA乳膏剂或凝胶之后的血清雌酮(E1)(A)和雌二醇(E2)的时间过程。在给药的第14天进行测定。
图19显示了给绝经后女性每天口服给予两个50mg DHEA胶囊或施用4g 10％DHEA乳膏剂或凝胶之后的血清脱氢表雄酮硫酸盐(DHEA-S)(A)和雌酮硫酸盐(E1-S)(B)的时间过程。在给药的第14天进行测定。
图20显示了给绝经后女性每天口服给予两个50mg DHEA胶囊或施用4g 10％DHEA乳膏剂或凝胶之后的血清雄酮葡糖苷酸(ADT-G)(A)和雄甾烯-3α，17β-二醇-G(3α-二醇-G)(B)的时间过程。在给药的第14天进行测定。
图21显示了DHEA和它的代谢物(给药的第14天)的AUC0-24小时值与治疗前基本值的比例。相应的数值可以在表5中得到。
图22显示了在绝经后女性中每天阴道内施用0.0％、0.25％、0.5％和1.0％DHEA(脱氢表雄酮)(施用2、4、8和12周)对阴道基底旁层细胞的百分比的效果。数据用平均值±SEM来表示。
图23显示了在绝经后女性中每天阴道内施用0.0％、0.25％、0.5％和1.0％DHEA(脱氢表雄酮)(施用2、4、8和12周)对阴道表层细胞的百分比的效果。数据用平均值±SEM来表示。
图24显示了在绝经后女性中每天阴道内施用0.0％、0.25％、0.5％和1.0％DHEA(脱氢表雄酮)(施用2、4、8和12周)对阴道pH值的效果。数据用平均值±SEM来表示。
图25显示了每天阴道内施用0.0％、0.25％、0.5％和1.0％DHEA(脱氢表雄酮)(施用2、4、8和12周)对阴道萎缩症状(女性本身断定为最讨厌的的症状)的严重程度的变化的效果。将值与第1天的值进行比较，并用平均值±SEM来表示。
图26显示了每天阴道内施用0.0％、0.25％、0.5％和1.0％DHEA(脱氢表雄酮)(施用2、4、8和12周)对阴道分泌物的变化的效果(通过阴道检查进行评价)。数据用平均值±SEM来表示。
图27显示了每天阴道内施用0.0％、0.25％、0.5％和1.0％DHEA(脱氢表雄酮)(施用2、4、8和12周)对阴道色泽的变化的效果(通过阴道检查进行评价)。数据用平均值±SEM来表示。
图28显示了每天阴道内施用0.0％、0.25％、0.5％和1.0％DHEA(脱氢表雄酮)(施用2、4、8和12周)对阴道上皮完整性的变化的效果(通过阴道检查进行评价)。数据用平均值±SEM来表示。
图29显示了每天阴道内施用0.0％、0.25％、0.5％和1.0％DHEA(脱氢表雄酮)(施用2、4、8和12周)对阴道上皮厚度的变化的效果(通过阴道检查进行评价)。数据用平均值±SEM来表示。
图30显示了DHEA、5-二醇、DHEA-S、E1、E2和E1-S的平均24小时血清浓度(AUC0-24h/24)，是在每天给予一次包含0.5％DHEA的阴道卵型药丸之后的第1和7天测定的。数据用平均值±SEM来表示(n＝10)。将在30-35岁绝经前女性(n＝47)以及在55-65岁绝经后女性(n＝369)中测定的血清甾体浓度加入作为参考数据，其用平均值和5％和95％(虚线)来表示。*，p＜0.05，**，p＜0.01，实验对基线。(数据来源于Labrie，Cusan等人2008)。
图31显示了4-二酮、睾酮、DHT、ADT-G、3α-二醇-3G和3α-二醇-17G的平均24小时血清浓度(AUC0-24小时/24)，是在每天给予一次包含0.5％DHEA的阴道卵型药丸之后的第1和7天测定的。数据用平均值±SEM来表示(n＝10)。将在30-35岁绝经前女性(n＝47)和在55-65岁绝经后女性(n＝369)中测定的血清甾体浓度加入作为参考数据，其用平均值和5％和95％(虚线)来表示。*，p＜0.05，实验对基线。(数据来源于Labrie，Cusan等人2008)。
本发明的详细说明
下面列出的是用简易格式引用的、本文所讨论文章的列表：
Allen，Loyd V Jr，Worthen Dennis B，and Mink Bill，in Suppositories，第3章，27-49页，由Pharmaceutical Press，London，UK出版，2008。
Archer，D.F.(2007).″Drospirenone-containing hormone therapy forpostmenopausal women.Perspective on current data″J Reprod Med 52(2Suppl)：159-64.
Ayton，R.A.，G.M.Darling，等人(1996).″A comparative study ofsafety and efficacy of continuous low dose oestradiol released from avaginal ring compared with conjugated equine oestrogen vaginal cream inthe treatment of postmenopausal urogenital atrophy.″Br J Obstet Gynaecol103(4)：351-8。
Bachmann，G.，R.A.Lobo，等人(2008).″Efficacy of low-doseestradiol vaginal tablets in the treatment of atrophic vaginitis：a randomizedcontrolled trial.″Obstet Gynecol 111(1)：67-76。
Bachmann，G.A.，M.Notelovitz，等人(1992).″Long-termnon-hormonal treatment of vagina dryness.″J Clin Pract Sex 8。
Baker，V.L.and R.B.Jaffe(1996).″Clinical uses of antiestrogens.″Obstet Gynecol Surv 51：45-59。
E.E.Baulieu，G.Thomas，S.Legrain，N.Lahlou，M.Roger，B.Debuire，V.Faucounau，L.Girard，M.P.Hervy，F.Latour，M.C.Leaud，A.Mokrane，H.Pitti-Ferrandi，C.Trivalle，O.de Lacharriere，S.Nouveau，B.Rakoto-Arison，J.C.Souberbielle，J.Raison，Y.Le Bouc，A.Raynaud，X.Girerd and F.Forette，Dehydroepiandrosterone(DHEA)，DHEA sulfate，andaging：contribution of the DHEAge Study to a sociobiomedical issue，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.97(2000)，pp.4279-4284。
Baxendale，P.M.，M.J.Reed，等人(1981).″Inability of humanendometrium or myometrium to aromatize androstenedione.″J Steroid Biochem 14(3)：305-6。
Bélanger，B.Candas，A.Dupont，L.Cusan，P.Diamond，J.L.Gomezand F.Labrie，Changes in serum concentrations of conjugated andunconjugated steroids in 40-to 80-year-old men，J.Clin.Endocrinol.Metab.79(1994)，pp.1086-1090。
Bélanger，G.Pelletier，F.Labrie，O.Barbier and S.Chouinard，Inactivation of androgens by UDP-glucuronosyltransferase enzymes inhumans，Trends Endocrinol.Metab.14(2003)，pp.473-479。
Beral，V.(2003).″Breast cancer and hormone-replacement therapy inthe Million Women Study.″Lancet 362(9382)：419-27。
Beral，V.，D.Bull，等人(2005).″Endometrial cancer andhormone-replacement therapy in the Million Women Study.″Lancet365(9470)：1543-51。
Berger，L.，M.El-Alfy，等人(2005).″Effects ofdehydroepiandrosterone，Premarin and Acolbifene on histomorphology andsex steroid receptors in the rat vagina.″J Steroid Biochem Mol Biol 96(2)：201-15。
Bulun，S..E.，Z.Lin，等人(2005).″Regulation of aromataseexpression in estrogen-responsive breast and uterine disease：from bench totreatment.″Pharmacol Rev 57(3)：359-83。
J.E.Buster，P.R.Casson，A.B.Straughn，D.Dale，E.S.Umstot，N.Chiamori and G.E.Abraham，Postmenopausal steroid replacement withmicronized dehydroepiandrosterone：preliminary oral bioavailability anddose proportionality studies，Am.J.Obstet.Cynecol.166(1992)，pp.1163-1168 discussion 1168-1170。
Chlebowski，R.T.，S..L.Hendrix，等人(2003).″Influence of estrogenplus progestin on breast cancer and mammography in healthypostmenopausal women：the Women′s Health Initiative Randomized Trial.″Jama 289(24)：3243-53。
D.L.Coleman，E.H.Leiter and R.W.Schwizer，Therapeutic effects ofdehydroepiandrosterone(DHEA)in diabetic mice，Diabetes 31(1982)，pp.830-833。
Colditz，G.A.，K.M.Egn，等人(1993).″Hormone replacement thrapyand riks of breast cancer：results from epidemiologic studies.″Am.J.Obstet. Gynecol.168：1473-1480。
Colditz，G.A.，S.E.Hankinson，等人(1995).″The use of estrogensand progestins and the risk of breast cancer in postmenopausal women.″N. Engl.J.Med.332：1589-1593。
Collaborative Group on Hormonal Factors in Breast Cancer(1997).″Breast cancer and hormone replacement therapy：collaborative reanalysisof data from 51 epidemiological studies of 52,705 women with breastcancer and 108,411 women without breast cancer.″Lancet 350(9084)：1047-59。
Corrao，G.，A.Zambon，等人(2008).″Menopause hormonereplacement therapy and cancer risk：an Italian record linkageinvestigation.″Ann Oncol 19(1)：150-5。
Coughlin，S.S.，A.Giustozzi，等人(2000).″A meta-analysis ofestrogen replacement therapy and risk of epithelial ovarian cancer.″J Clin Epidemiol 53(4)：367-75。
Deutsch，S.，R.Ossowski，等人(1981).″Comparison between degreeof systemic absorption of vaginally and orally administered estrogens atdifferent dose levels in postmenopausal women.″Am J Obstet Gynecol139(8)：967-8。
Dew，J.E.，B.G.Wren，等人(2003).″A cohort study of topicalvaginal estrogen therapy in women previously treated for breast cancer.″Climacteric 6(1)：45-52。
P.Diamond，L.Cusan，J.L.Gomez，A.Bélanger and F.Labrie，Metabolic effects of 12-month percutaneous DHEA replacement therapy inpostmenopausal women，J.Endocrinol.150(1996)，pp.S43-S50。
Dugal，R.，K.Hesla，等人(2000).″Comparison of usefulness ofestradiol vaginal tablets and estriol vagitories for treatment of vaginalatrophy.″Acta Obstet Gynecol Scand 79(4)：293-7。
Englund，D.E.and E.D.Johansson(1978).″Plasma levels of oestrone，oestradiol and gonadotrophins in postmenopausal women after oral andvaginal administration of conjugated equine oestrogens(Premarin).″Br J Obstet Gynaecol 85(12)：957-64。
Fallowfield，L.，D.Cella，等人(2004).″Quality of life ofpostmenopausal women in the Arimidex，Tamoxifen，Alone or inCombination(ATAC)Adjuvant Breast Cancer Trial.″J Clin Oncol 22(21)：4261-71。
Feeley，K.M.and M.Wells(2001).″Hormone replacement therapy andthe endometrium.″J Clin Pathol 54(6)：435-40。
Furuhjelm，M.，E.Karlgren，等人(1980).″Intravaginal administrationof conjugated estrogens in premenopausal and postmenopausal women.″Int J Gynaecol Obstet 17(4)：335-9。
Galhardo，C.L.，J.M.Soares，Jr.，等人(2006).″Estrogen effects onthe vaginal pH，flora and cytology in late postmenopause after a long periodwithout hormone therapy.″Clin Exp Obstet Gynecol 33(2)：85-9。
Gambrell，R.D.，Jr.，F.M.Massey，等人(1980).″Use of theprogestogen challenge test to reduce the risk of endometrial cancer.″Obstet Gynecol 55(6)：732-8。
Garg，P.P.，K.Kerlikowske，等人(1998).″Hormone replacementtherapy and the risk of epithelial ovarian carcinoma：a meta-analysis.″Obstet Gynecol 92(3)：472-9。
Grady，D.，T.Gebretsadik，等人(1995).″Hormone replacementtherapy and endometrial cancer risk：a meta-analysis.″Obstet Gynecol 85(2)：304-13。
Gupta，P.，B.Ozel，等人(2008).″The effect of transdermal and vaginalestrogen therapy on markers of postmenopausal estrogen status.″Menopause 15(1)：94-7。
Holmberg，L.and H.Anderson(2004).″HABITS(hormonalreplacement therapy after breast cancer--is it safe)，a randomisedcomparison：trial stopped.″Lancet 363(9407)：453-5。
Holmberg，L.，O.E.Iversen，等人(2008).″Increased risk of recurrenceafter hormone replacement therapy in breast cancer survivors.″J Natl Cancer Inst 100(7)：475-82。
Holmgren，P.A.，M.Lindskog，等人(1989).″Vaginal rings forcontinuous low-dose release of oestradiol in the treatment of urogenitalatrophy.″Maturitas 11(1)：55-63。
Hulley，S.B.(2002).″Noncardiovascular disease outcomes during 6.8years of hormone therapy：Heart and estrogen/progestin replacement studyfollow-up(HERS II).″JAMA 288：58-66。
Jick，S.S.，A.M.Walker，等人(1993).″Estrogens，progesterone，andendometrial cancer.″Epidemiology 4(1)：20-4。
C.C.Johnston Jr.，S.L.Hui，R.M.Witt，R.Appledorn，R.S.Baker andC.Longcope，Early menopausal changes in bone mass and sex steroids，J.Clin.Endocrinol.Metab.61(1985)，pp.905-911。
D.W.Hum，A.Belanger，E.Levesque，O.Barbier，M.Beaulieu，C.Albert，M.Vallee，C.Guillemette，A.Tchernof，D.Turgeon and S.Dubois，Characterization of UDP-glucuronosyltransferases active on steroidhormones，J.Steroid Biochem.Mol.Biol.69(1999)，pp.413-423。
H.Kawano，H.Yasue，A.Kitagawa，N.Hirai，T.Yoshida，H.Soejima，S.Miyamoto，M.Nakano and H.Ogawa，Dehydroepiandrosteronesupplementation improves endothelial function and insulin sensitivity inmen，J.Clin.Endocrinol.Metab.88(2003)，pp.3190-3195。
Kendall，A.，M.Dowsett，等人(2006).″Caution：Vaginal estradiolappears to be contraindicated in postmenopausal women on adjuvantaromatase inhibitors.″Ann Oncol 17(4)：584-7。
Kvorning，J.D.N.and H.K.Jensen(1986).Pharmaceutical developmentof lose-doseestradiolvagitories.International Workshop，Copenhagen.
Labrie，C.，A.Bélanger，等人(1988).″Androgenic activity ofdehydroepiandrosterone and androstenedione in the rat ventral prostate.″Endocrinology 123：1412-1417。
Labrie，F.(1991).″Intracrinology.″Mol.Cell.Endocrinol.78：C113-C118。
F.Labrie，Future perspectives of SERMs used alone and incombination with DHEA，Endocr.Relat.Cancer 13(2006)，pp.335-355。
Labrie，F.(2007).″Drug Insight：breast cancer prevention andtissue-targeted hormone replacement therapy.″Nature Clinical Practice， Endocrinology & Metabolism 3(8)：584-593。
F.Labrie，A.Bélanger，J.Simard，V.Luu-The and C.Labrie，DHEAand peripheral androgen and estrogen formation：intracrinology，Ann.N.Y.Acad.Sci.774(1995)，pp.16-28。
Labrie，F.，A.Belanger，等人(2007).″Metabolism of DHEA inpostmenopausal women following percutaneous administration.″J Steroid Biochem Mol Biol 103(2)：178-88。
Labrie，F.，A.Belanger，等人(2007)″Bioavailability and metabolism oforal and percutaneous dehydroepiandrosterone in postmenopausal women″JSteroid Biochem Mol Biol.Oct；107(1-2)：57-69。
Labrie，F.，A.Bélanger，等人(2006).″Androgen glucuronides，insteadof testosterone，as the new markers of androgenic activity in women.″Journal Ster Biochem & Mol Biol 99：182-188。
Labrie，F.，A.Bélanger，等人(2005).″GnRH agonists in the treatmentof prostate cancer.″Endocrine Reviews 26(3)：361-379。
Labrie，F.，A.Belanger，等人(1997).″Marked decline in serumconcentrations of adrenal C19 sex steroid precursors and conjugatedandrogen metabolites during aging.″J Clin Endocrinol Metab 82：2396-2402。
Labrie，F.，A.Belanger，等人(2007a).″Bioavailability and metabolismof oral and percutaneous dehydroepiandrosterone in postmenopausalwomen.″J Steroid Biochem Mol Biol 107(1-2)：57-69。
F.Labrie，A.Bélanger，P.Bélanger，R.Bérubé，C.Martel，L.Cusan，J.Gomez，B.Candas，V.Chaussade，I.Castiel，C.Deloche and J.Leclaire，Metabolism of DHEA in postmenopausal women following percutaneousadministration，J.Steroid Biochem.Mol.Biol.103(2)(2007b)，pp.178-188。
Labrie，F.，L.Cusan，等人(2008).″Effect of Intravaginal DHEA onSerum DHEA and Eleven of its Metabolites in Postmenopausal Women.″Journal Ster Biochem & Mol Biol：In press。
Labrie，F.，L.Cusan，等人(2008).″Effect of One-Week Treatmentwith Vaginal Estrogen Preparations on Serum Estrogen Levels inPostmenopausal Women.″Menopause In press。
Labrie，F.，L.Cusan，等人(2008).″Changes in serum DHEA andeleven of its metabolites during 12-month percutaneous administration ofDHEA.″J Steroid Biochem Mol Biol 110(1-2)：1-9。
Labrie，F.，P.Diamond，等人(1997).″Effect of 12-monthdehydroepiandrosterone replacement therapy on bone，vagina，andendometrium in postmenopausal women.″J Clin Endocrinol Metab 82(10)：3498-505。
Labrie，F.，A.Dupont，等人(1985).Complete androgen blockade forthe treatment of prostate cancer.Important Advances in Oncology.V.T.de Vita，S.Hellman and S.A.Rosenberg.Philadelphia，J.B.Lippincott：193-217。
F.Labrie，V.Luu-The，S.X.Lin，C.Labrie，J.Simard，R.Breton and A.Bélanger，The key role of 17β-HSDs in sex steroid biology，Steroids62(1997)，pp.148-158。
Labrie，V.Luu-The，S.-X.Lin，J.Simard，C.Labrie，M.El-Alfy，G.Pelletier and A.Bélanger，Intracrinology：role  of the family of 17β-hydroxysteroid dehydrogenases in human physiology and disease，J.Mol.Endocrinol.25(2000)，pp.1-16。
Labrie，F.，V.Luu-The，等人(2005).″Is DHEA a hormone？StarlingReview″J Endocrinol 187：169-196。
Labrie，F.，V.Luu-The，等人(2003).″Endocrine and intracrine sourcesof androgens in women：inhibition of breast cancer and other roles ofandrogens and their precursor dehydroepiandrosterone.″Endocrine Reviews24(2)：152-182。
Labrie，F.，V.Luu-The，等人(2006).″Dehydroepiandrosterone(DHEA)is an anabolic steroid likedihydrotestosterone(DHT)，the most potent natural androgen，andtetrahydrogestrinone(THG).″J Steroid Biochem Mol Biol 100(1-3)：52-8。
F.Labrie，J.Simard，V.Luu-The，A.Bélanger，G.Pelletier，Y.Morel，F.Mebarki，R.Sanchez，F.Durocher，C.Turgeon，Y.Labrie，E.Rhéaume，C.Labrie and Y.Lachance，The 3β-hydroxysteroid dehydrogenase/isomerasegene family：lessons from type II 3β-HSD congenital deficiency.In：V.Hansson，F.O.Levy and K.Taskén，Editors，Signal Transduction inTesticular Cells..Ernst Schering Research Foundation Workshop，vol Suppl.2，Springer-Verlag，Berlin(1996)，pp.185-218。
Labrie，J.Simard，V.Luu-The，A.Bélanger and G.Pelletier，Structure，function and tissue-specific gene expression of 3β-hydroxysteroiddehydrogenase/5-ene-4-ene isomerase enzymes in classical and peripheralintracrine steroidogenic tissues，J.Steroid Biochem.Mol.Biol.43(1992)，pp.805-826。
F.Labrie，R.Poulin，J.Simard，V.Luu-The，C.Labrie and A.Bélanger，Androgens，DHEA and breast cancer.In：T.Gelfand，Editor，Androgens andReproductive Aging，Taylor and Francis，Oxsfordshire，UK(2006)，pp.113-135。
Labrie，Y.Sugimoto，V.Luu-The，J.Simard，Y.Lachance，D.Bachvarov，G.Leblanc，F.Durocher and N.Paquet，Structure of human typeII 5*-reductase，Endocrinology 131(1992)，pp.1571-1573。
Y.Labrie，F.Durocher，Y.Lachance，C.Turgeon，J.Simard，C.Labrieand F.Labrie，The human type II 17β-hydroxysteroid dehydrogenase geneencodes two alternatively-spliced messenger RNA species，DNA Cell Biol.14(1995)，pp.849-861。
Lacey，J.V.，P.J.Mink，等人(2002).″Menopausal hormonereplacement therapy and risk of ovarian cancer.″JAMA 288：334-341。
Li，L.，S.J.Plummer，等人(2008).″A common 8q24 variant and therisk of colon cancer：a population-based case-control study.″Cancer Epidemiol Biomarkers Prev 17(2)：339-42。
C.H.Liu，G.A.Laughlin，U.G.Fischer and S.S.Yen，Markedattenuation of ultradian and circadian rhythms of dehydroepiandrosterone inpostmenopausal women：evidence for a reduced 17，20-desmolase enzymaticactivity，J.Clin.Endocrinol.Metab.71(1990)，pp.900-906。
Long，C.Y.，C.M.Liu，等人(2006).″A randomized comparative studyof the effects of oral and topical estrogen therapy on the vaginalvascularization and sexual function in hysterectomized postmenopausalwomen.″Menopause 13(5)：737-43。
V.Luu-The，I.Dufort，N.Paquet，G.Reimnitz and F.Labrie，Structuralcharacterization and expression of the human dehydroepiandrosteronesulfotransferase gene，DNA Cell Biol.14(1995)，pp.511-518。
V.Luu-The，Y.Zhang，D.Poirier and F.Labrie，Characteristics ofhuman types 1，2and 3 17β-hydroxysteroid dehydrogenase activities：oxidation-reduction and inhibition，J.Steroid Biochem.Mol.Biol.55(1995)，pp.581-58
Lyytinen，H.，E.Pukkala，等人(2006).″Breast cancer risk inpostmenopausal women using estrogen-only therapy.″Obstet  Gynecol108(6)：1354-60。
E.G.MacEwen and I.D.Kurzman，Obesity in the dog：role of theadrenal steroid dehydroepiandrosterone(DHEA)，J.Nutr.121(1991)，pp.S51-S55。
Mandel，F.P.，F.L.Geola，等人(1983).″Biological effects of variousdoses of vaginally administered conjugated equine estrogens inpostmenopausal women.″J Clin Endocrinol Metab 57(1)：133-9。
Manonai，J.，U.Theppisai，等人(2001).″The effect of estradiolvaginal tablet and conjugated estrogen cream on urogenital symptoms inpostmenopausal women：a comparative study.″J Obstet Gynaecol Res 27(5)：255-60。
Martin，P.L.，S.S.Yen，等人(1979).″Systemic absorption andsustained effects of vaginal estrogen creams.″Jama 242(24)：2699-700。
Marx，P.，G.Schade，等人(2004).″Low-dose(0.3mg)syntheticconjugated estrogens A is effective for managing atrophic vaginitis.″Maturitas 47(1)：47-54。
Mattson，L.A.，G.Culberg，等人(1989).″Vaginal administration oflow dose estradiol-effects on endometrium and vaginal cytology.″Maturitas11：217-222。
R.B.Mazess，On aging bone loss，Clin.Orthop.165(1982)，pp.239-252.
Meisels，A.(1967).″The maturation value.″Acta Cytol 11：249。
Mertens，H.J.，M.J.Heineman，等人(1996).″Androgen receptorcontent in human endometrium.″Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol 70(1)：11-3。
Mettler，L.and P.G.Olsen(1991).″Long-term treatment of atrophicvaginitis with low-dose oestradiol vaginal tablets.″Maturitas 14(1)：23-31。
C.J.Migeon，A.R.Keller，B.Lawrence and T.H.Shepart II.，Dehydroepiandrosterone and androsterone levels in human plasma.Effectof age and sex：day-to-day and diurnal variations，J.Clin.Endocrinol.Metab.17(1957)，pp.1051-1062。
A.J.Morales，J.J.Nolan，J.C.Nelson and S.S.Yen，Effects ofreplacement dose of dehydroepiandrosterone in men and women ofadvancing age，J.Clin.Endocrinol.Metab.78(1994)，pp.1360-1367。
Morales，L.，P.Neven，等人(2004).″Acute effects of tamoxifen andthird-generation aromatase inhibitors on menopausal symptoms of breastcancer patients.″Anticancer Drugs 15(8)：753-60
N.A.M.S.(2007).″Position Statement of the North AmericanMenopause Society.″Menopause 14：357-69。
Nachtigall，L.E..(1995).″Clinical trial of the estradi olvaginal ring inthe U.S.″Maturitas 22 Suppl：S43-7。
Naessen，T.，K.Rodriguez-Macias，等人(2001).″Serum lipid profileimproved by ultra-low doses of 17 beta-estradiol in elderly women.″J Clin Endocrinol Metab 86(6)：2757-62。
Nelson，H..D.，K.K.Vesco，等人(2006).″Nonhormonal therapies formenopausal hot flashes：systematic review and meta-analysis.″Jama295(17)：2057-71。
J.E.Nestler，C.O.Barlascini，J.N.Clore and W.G.Blackard，Dehydroepiandrosterone reduces serum low density lipoprotein levels andbody fat but does not alter insulin sensitivity in normal men，J.Clin.Endocrinol.Metab.66(1988)，pp.57-61。
Nilsson，K.and G.Heimer(1992).″Low-dose oestradiol in thetreatment of urogenital oestrogen deficiency--a pharmacokinetic andpharmacodynamic study.″Maturitas 15(2)：121-7。
Notelovitz，M.，S.Funk，等人(2002).″Estradiol absorption fromvaginal tablets in postmenopausal women.″Obstet Gynecol 99(4)：556-62。
Orentreich，N.，J.L.Brind，等人(1984).″Age changes and sexdifferences in serum dehydroepiandrosterone sulfate concentrationsthroughout adulthood.″J.Clin.Endocrinol.Metab.59：551-555。
Pandit，L.and J.G.Ouslander(1997).″Postmenopausal vaginal atrophyand atrophic vaginitis.″Am J Med Sci 314(4)：228-31。
Persson，I.，H.O.Adami，等人(1989).″Risk of endometrial cancerafter treatment with oestrogens alone or in conjunction with progestogens：results of a prospective study.″Bmj 298(6667)：147-51。
Ponzone，R.，N.Biglia，等人(2005).″Vaginal oestrogen therapy afterbreast cancer：is it safe？″Eur J Cancer 41(17)：2673-81。
Rigg，L.A.，H.Hermann，等人(1978).″Absorption of estrogens fromvaginal creams.″N Engl J Med 298(4)：195-7。
B.L.Riggs，H.W.Wahner，W.L.Dunn，R.B.Mazess，K.P.Offord andL.J.Melton，Differential changes in bone mineral density of theappendicular and axial skeleton with aging：relationship to spinalosteoporosis，J.Clin.Invest.67(1981)，pp.328-335。
Riman，T.，P.W.Dickman，等人(2002).″Hormone replacement therapyand the risk of invasive epithelial ovarian cacner in Swedish women.″J Natl Cancer Inst 94：497-504。
Rinaldi，S.，H.Dechaud，等人(2001).″Reliability and validity ofcommercially available，direct radioimmunoassays for measurement ofblood androgens and estrogens in postmenopausal women.″Cancer Epidemiol Biomarkers Prev 10(7)：757-65。
Rioux，J..E，C.Devlin，等人(2000).″17beta-estradiol vaginal tabletversus conjugated equine estrogen vaginal cream to relieve menopausalatrophic vaginitis.″Menopause 7(3)：156-61。
Rodriguez，C.，A.V.Patel，等人(2002).″Estrogen replacement therapyand ovarian cancer mortality in a large prospective study of US women.″JAMA 285：1460-1465。
Rosenberg，L.U.，C.Magnusson，等人(2006).″Menopausal hormonetherapy and other breast cancer risk factors in relation to the risk ofdifferent histological subtypes of breast cancer：a case-control study.″Breast Cancer Res 8(1)：R11。
Rossouw，J.E.，G.L.Anderson，等人(2002).″Risks and benefits ofestrogen plus progestin in healthy postmenopausal women：principal resultsFrom the Women′s Health Initiative randomized controlled trial.″Jama288(3)：321-33。
Salminen，H.S.，M.E.Saaf，等人(2007).″The effect of transvaginalestradiol on bone in aged women：a randomised controlled trial.″Maturitas57(4)：370-81。
Schiff，I.，D.Tulchinsky，等人(1977).″Vaginal absorption of estroneand 17beta-estradiol.″Fertil Steril 28(10)：1063-6。
Schmidt，G.，S.B.Andersson，等人(1994).″Release of17-beta-oestradiol from a vaginal ring in postmenopausal women：pharmacokinetic evaluation.″Gynecol Obstet Invest 38(4)：253-60。
E.D.Schriock，C.K.Buffington，G.D.Hubert，B.R.Kurtz，A.E.Kitabchi，J.E.Buster and J.R.Givens，Divergent correlations of circulatingdehydroepiandrosterone sulfate and testosterone with insulin levels andinsulin receptor binding，J.Clin.Endocrinol.Metab.66(1988)，pp.1329-1331。
Sillero-Arenas，M.，M.Delgado-Rodriguez，等人(1992).″Menopausalhormone replacement therapy and breast cancer：a meta-analysis.″Obstet. Gynecol.79：286-294。
Simon，J.A.，K.Z.Reape，等人(2007).″Randomized，multicenter，double-blind，placebo-controlled trial to evaluate the efficacy and safety ofsynthetic conjugated estrogens B for the treatment of vulvovaginal atrophyin healty postmenopausal women.″Fertil Steril In press。
E.R.Simpson，Role of aromatase in sex steroid action，J.Mol.Endocrinol.25(2000)，pp.149-156。
Simunic，V.，I.Banovic，等人(2003).″Local estrogen treatment inpatients with urogenital symptoms.″Int J Gynaecol Obstet 82(2)：187-97。
Smith，D.C.，R.Prentice，等人(1975).″Association of exogenousestrogen and endometrial carcinoma.″N.Engl.J.Med.293：1164-1167。
Smith，P.，G.Heimer，等人(1993).″Oestradiol-releasing vaginal ringfor treatment of postmenopausal urogenital atrophy.″Maturitas 16(2)：145-54。
Sourla，A.，M.Flamand，等人(1998).″Effect ofdehydroepiandrosterone on vaginal and uterine histomorphology in the rat.″J.Steroid Biochem.Mol.Biol.66(3)：137-149。
Steinberg，K.K.，S.B.Thacker，等人(1991).″A meta-analysis of theeffect of estrogen replacement therapy on the risk of breast cancer.″JAMA265：1985-1990。
K.K.Steinberg，L.W.Freni-Titulaer，E.G.DePuey，D.T.Miller，D.S.Sgoutas，C.H.Coralli，D.L.Phillips，T.N.Rogers and R.V.Clark，Sexsteroids and bone density in premenopausal and perimenopausal women，J.Clin.Endocrinol.Metab..69(1989)，pp.533-539。
Suckling，J.，A.Lethaby，等人(2006).″Local oestrogen for vaginalatrophy in postmenopausal women.″Cochrane Database System Rev 18(4)：CD001500。
Swanson，M.Lorentzon，L.Vandenput，D.
Figure GPA00001088707700191
，F.Labrie，A.Rane，J.Jakobsson，C.Ohlsson，UGT2B7 H268Y polymorphism isassociated with serum sex steroid levels and cortical bone size in youngadult men，JCEM(2007)，in press。
Tchernof，J.P.Després，A.Bélanger，A.Dupont，D.Prud’homme，S.Moorjani，P.J.Lupien and F.Labrie，Reduced testosterone and adrenal C 19steroid levels in obese men，Metabolism 44(1995)，pp.513-519。
Turgeon，J.S.Carrier，E.Levesque，D.W.Hum and A.Belanger，Relative enzymatic activity，protein stability，and tissue distribution ofhuman steroid-metabolizing UGT2B subfamily members，Endocrinology142(2001)，pp.778-787。
Utian，W.H.，D.Shoupe，等人(2001).″Relief of vasomotor symptomsand vaginal atrophy with lower doses of conjugated equine estrogens andmedroxyprogesterone acetate.″FertilSteril 75(6)：1065-79。
Vermeulen and L.Verdonck，Radioimmunoassays of 17β-hydroxy-5*-androstan-3-one，4-androstene-3，17-dione，dehydroepiandrosterone，17β-hydroxyprogesterone and progesterone and its application to human maleplasma，J.Steroid Biochem.7(1976)，pp.1-10。
D.T.Villareal and J.O.Holloszy，Effect of DHEA on abdominal fatand insulin action in elderly women and men：a randomized controlled trial，JAMA 292(2004)，pp.2243-2248。
Voigt，L.F.，N.S.Weiss，等人(1991).″Progestagen supplementationof exogenous oestrogens and risk of endometrial cancer.″Lancet 338(8762)：274-7。
Weisberg，E.，R.Ayton，等人(2005).″Endometrial and vaginal effectsof low-dose estradiol delivered by vaginal ring or vaginal tablet.″Climacteric 8(1)：83-92。
Wied，G.L.(1993).″Industrial developments in automated cytology assubmitted by their developers.″Anal Quant Cytol Histol 15(5)：358-70。
Wines，N.and E.Willsteed(2001).″Menopause and the skin.″Australas J Dermatol 42(3)：149-8；quiz 159。
Zang，H.，L.Sahlin，等人(2007).″Effects of testosterone treatment onendometrial proliferation in postmenopausal women.″J Clin Endocrinol Metab 92(6)：2169-75。
B.Zumoff，G.W.Strain，L.K.Miller and W.Rosner，Twenty-four-hourmean plasma testosterone concentration declines with age in normalpremenopausal women，J.Clin.Endocrinol.Metab.80(1995)，pp.1429-1430 B.Zumoff，G.W.Strain，B.Zumoff，G.W.Strain，L.K.Millerand W.Rosner，Twenty-four-hour mean plasma testosterone concentrationdeclines with age in normal premenopausal women，J.Clin.Endocrinol.Metab.80(1995)，pp.1429-1430。
在75％的绝经后女性中出现阴道干燥现象(Wines and Willsteed2001；N.A.M.S.2007)。因为种种原因，尤其是害怕雌激素并发症，只有20至25％患有阴道萎缩症状的女性寻求治疗(Pandit and Ouslander 1997；N.A.M.S.2007)。由此，对于改善在一生的大部分时间患有阴道萎缩的大量女性人群生活质量，有明确的医学需要和较大的可能。可以提及的是，尽管热潮红可以随时间而自然地缓解，但在没有治疗的情况下，阴道萎缩症状(即阴道干燥)、外阴发炎/白点病(iching)和性交疼痛的严重程度通常会随时间而增加。
基于在绝经期时卵巢结束雌激素分泌的众所周知的事实，系统和局部雌激素因此成为治疗阴道萎缩的唯一方法。然而，已经显示，系统雌激素+孕酮(HRT)和单独的雌激素(ERT)可以增加乳腺癌(Steinberg，Thacker等人1991；Sillero-Arenas，Delgado-Rodriguez等人1992；Colditz，Egn等人1993；Colditz，Hankinson等人1995；Collaborative Group onHormonal Factors in Breast Cancer 1997；Hulley 2002；Beral 2003；Chlebowski，Hendrix等人2003；Holmberg and Anderson 2004；Lyytinen，Pukkala等人2006；Corrao，Zambon等人2008；Holmberg，Iversen等人2008；Li，Plummer等人2008)、卵巢癌(Garg，Kerlikowske等人1998；Coughlin，Giustozzi等人2000；Lacey，Mink等人2002；Riman，Dickman等人2002；Rodriguez，Patel等人2002；Rossouw，Anderson等人2002；Lyytinen，Pukkala等人2006)以及子宫内膜癌(单独的雌激素)(Gambrell，Massey等人1980；Persson，Adami等人1989；Voigt，Weiss et al.1991；Jick，Walker等人1993；Grady，Gebretsadik等人1995；Beral，Bull等人2005)的危险。按照Women′s Health Initiative Study(Rossouw，Anderson等人2002)的公开内容具有最大的影响，由此对现有的绝经症状治疗的安全性产生了怀疑(Archer 2007)。
虽然开发了阴道内制剂，可以避免全身性接触雌激素，但长时间的系列研究已经一致地证明，所有阴道内雌激素制剂可以导致比较高的血清雌激素水平(直接测定或通过其系统效果测定)(Englund and Johansson1978；Rigg，Hermann等人1978；Martin，Yen等人1979；Furuhjelm，Karlgren等人1980；Deutsch，Ossows等人1981；Mandel，Geola等人1983；Nilsson and Heimer 1992；Nachtigall 1995；Ayton，Darling等人1996；Dugal，Hesla等人2000；Rioux，Devlin等人2000；Manonai，Theppisai等人2001；Notelovitz，Funk等人2002；Ponzone，Biglia等人2005；Weisberg，Ayton等人2005；Galhardo，Soares等人2006；Kendall，Dowsett等人2006；Long，Liu等人2006；Bachmann，Lobo等人2008)。证明血清雌激素水平显著提高的这些数据明显地表明，使用阴道内雌激素制剂还潜在地与增加乳房和子宫癌的危险有关(Kvorning and Jensen 1986；Mattson，Culberg等人1989；Rosenberg，Magnusson等人2006；N.A.M.S.2007)。事实上，关于阴道雌激素制剂对子宫内膜的刺激效应，受到的关注已经得到正式提高(N.A.M.S.2007)。
阴道内给予雌激素之后，大部分先前测定的血清雌二醇(E2)水平使用了放射免疫测定技术，其缺乏特异性、准确性、可靠性和敏感性(Rinaldi，Dechaud等人2001)。阴道内给予两种最通常使用的雌激素制剂之后，我们使用GLP(Good Laboratory Practice)-验证质谱试验来测定血清雌激素(Labrie，Cusan等人2008)。这种研究可以确切地表明，E2丸剂(25μg E2/天)和结合雌激素乳膏剂(1g(含有0.625mg结合雌激素)/天)(经过一周的每天治疗之后)，在绝经后女性中导致血清E2大约增加5倍。这种数据表明，在阴道中局部施加雌激素的效果未必会被限制在阴道中，而是具有先前所预期的系统作用(Englund and Johansson 1978；Rigg，Hermann等人1978；Martin，Yen等人1979；Furuhjelm，Karlgren等人1980；Deutsch，Ossowski等人1981；Mandel，Geola等人1983；Nilsson andHeimer 1992；Nachtigall 1995；Ayton，Darling等人1996；Dugal，Hesla等人2000；Rioux，Devlin等人2000；Manonai，Theppisai等人2001；Notelovitz，Funk等人2002；Ponzone，Biglia等人2005；Weisberg，Ayton等人2005；Galhardo，Soares等人2006；Kendall，Dowsett等人2006；Long，Liu等人2006；Bachmann，Lobo等人2008)。
除了上述指出的对全身和局部给予雌激素的安全性关注之外，最近的数据还明显地表明，女性不只是在绝经期时缺乏雌激素，而且雌激素还从30岁开始逐渐地被在特定的周围靶组织中产生的雄激素所剥夺，通过脱氢表雄酮(DHEA)胞内分泌转化为雄激素和/或雌激素(Labrie，Bélanger等人1988；Labrie 1991；Labrie，Luu-The等人2003；Labrie，Luu-The等人2005)。事实上，在30岁时可以看到，血清DHEA和DHEA-硫酸盐从峰值逐渐地降低(Orentreich，Brind等人1984；Labrie，Belanger等人1997；Labrie，Luu-The等人2003)，在绝经期时，降低到60％(Labrie，Bélanger等人2006)。
关于雄激素在女性中的作用，重要的是有关女性分泌的雄激素为在男性中所观察到的雄激素的50％的叙述(Labrie，Belanger等人1997；Labrie，Luu-The等人2005)。由于血清DHEA是主要的雄激素源，其在女性中起到一系列生理作用(Labrie，Luu-The等人2003；Labrie 2007)，所以，在绝经期时出现循环DHEA降低60％会导致总雄激素水平同样降低60％(Labrie，Bélanger等人2006)，结果在骨骼、肌肉、皮肤、乳腺阴道、脑中以及在葡萄糖、胰岛素和脂类代谢上出现低男化性能的潜在征和症状(Labrie，Luu-The等人2003；Labrie 2007)。在雄激素靶组织之中，最近的数据已经表明，在大鼠中给予DHEA之后，阴道对雄激素敏感，不但对阴道的表观上皮层具有有利效果，而且对固有层中和鞘肌上的胶原纤维具有有利的效果(Berger，El-Alfy等人2005)。
基于我们的临床前(Sourla，Flamand等人1998；Berger，El-Alfy等人2005)和临床(Labrie，Diamond等人1997；Labrie，Cusan等人2008)研究的数据，表明了经过皮肤或局部给予DHEA对阴道的有利效果，所提供的临床试验是预期的、随机化的和安慰剂-对照的研究，该研究每天阴道内三个剂量的DHEA(给予12周)，以对于表层和基底旁层细胞、阴道pH值和阴道萎缩的最讨厌症状的变化的效果作为主要目的。该数据明显地表明，在矫正阴道萎缩的所有体征和症状方面，局部给予DHEA是非常有效和快速的，在不会导致血清雌激素或雄激素显著变化的DHEA剂量下，在2周时，达到接近最大的效果，同时所有其它甾体无变化，或较好地在正常绝经后女性中所发现的范围之内。当在阴道中局部给予DHEA时，在阴道中达到局部产生的雌激素和雄激素的有利效果，同时不会将雌二醇或睾酮显著地释放到血液里(Labrie，Cusan等人J.Ster.Biochem.Mol.Biol.In press)。在通过胞内分泌过程由DHEA形成雄激素和/或雌激素的过程中，任何组织是不可预测的，这是因为响应依赖于特定存在于每个组织的每个细胞中的酶催机制的活性。由此，由DHEA在一个组织中产生的雄激素和雌激素不可能预知在另一个组织中可以产生类似雄激素和雌激素的程度。
临床试验ERC-210(实施例3)的结果第一次明显地表明，在绝经后女性中矫正阴道萎缩的所有症状和体征方面，局部给予DHEA(作为激素前体物代替治疗(HPRT))是高效和快速的。最重要的是，这种效果在0.5％DHEA的剂量时达到，而且不会提高活性雌激素或雄激素的血清水平，血清DHEA和其任何代谢物没有变化或变化最小(较好地保持在正常绝经后女性中所测定值的范围内)(Labrie，Cusan等人2008)。
尽管75％的绝经后女性患有阴道萎缩(Wines and Willsteed 2001；N.A.M.S.2007)，并由此在其一生的大部分时间期间影响她们的生活质量，但只有20％寻求治疗(Pandit and Ouslander 1997)。害怕与雌激素血液水平提高有关的乳腺癌是主要原因。由于分泌到系统循环中的雌激素仅仅来源于卵巢，并且在绝经期时结束，所以给予绝经后女性雌激素不大会出现生理问题。在WHI的结果中，科学挑战是探索替代性的激素疗法类型和制剂，要求其提供雌激素的所有绝经期优点，同时改善女性的生活质量，使危险最小化、益处最大化(Archer 2007)。由于基于非雌激素的治疗没有显现出有说服力的效果(Nelson，Vesco等人2006；Suckling，Lethaby等人2006)，女性和她们的医生仍然没有阴道萎缩的安全治疗方法。
各种形式的雌激素可有效治疗外阴阴道的萎缩(Pandit andOuslander 1997；Utian，Shoupe等人2001)。事实上，阴道E2片剂已经显现了与E2环(Weisberg，Ayton等人2005)以及结合雌激素乳膏剂(Rioux，Devlin等人2000；Manonai，Theppisai等人2001)相似的效果。
这种新HPRT与下述情况矛循，在用阴道内E2或结合雌激素治疗之后，通过质谱测定的血清E2增加5倍(Labrie，Cusan等人2008)。关于血清雌激素变化的这些最近数据证实了长系列的研究表明所有阴道内雌激素制剂可导致血清雌激素浓度提高(直接通过放射免疫分析测定或通过其系统效果测定)(Englund and Johansson 1978；Rigg，Hermann等人1978；Martin，Yen等人1979；Furuhjelm，Karlgren等人1980；Deutsch，Ossowski等人1981；Mandel，Geola等人1983；Nilsson and Heimer 1992；Nachtigall 1995；Ayton，Darling等人1996；Dugal，Hesla等人2000；Rioux，Devlin等人2000；Manonai，Theppisai等人2001；Notelovitz，Funk等人2002；Ponzone，Biglia等人2005；Weisberg，Ayton等人2005；Galhardo，Soares等人2006；Kendall，Dowsett等人2006；Long，Liu等人2006；Bachmann，Lobo等人2008)。
关于阴道雌激素的最常见的不利事件报道是阴道出血和乳房疼痛，两者都是血清雌激素提高的副作用(Suckling，Lethaby等人2006)。对于E2环、结合雌激素乳膏剂以及E2片剂，也已经报道了这些副作用(Ayton，Darling et al.1996；Weisberg，Ayton等人2005)。如上所述，还存在关于阴道雌激素对子宫内膜的刺激效应的关注(N.A.M.S.2007)。在9％采用阴道片剂24周的女性中报道出现了子宫出血、乳房疼痛和会阴疼痛，同时在阴道结合雌激素乳膏剂组中，有34％具有相同的症状(Rioux，Devlin等人2000)。(Suckling，Lethaby等人2006)报道，在不同的阴道雌激素制剂之间没有差别。
众所周知，在绝经后女性中，萎缩性阴道炎可以通过治疗乳腺癌的芳香酶抑制剂的使用而被恶化或诱导。事实上，这些药物通过降低E2在所有组织中的生物合成(由此提高绝经期症状的频率和严重程度)，可以对乳腺癌发挥它们的益处(Fallowfield，Cella等人2004；Morales，Neven等人2004)。在最近的研究中，使芳香酶抑制剂治疗的七个乳腺癌患者接受Vagifem(25μg的日剂量，接受2周，而后每周两次)，在2周时，血清E2从3pmol/l的中间值升高至72pmol/l(范围3至232)(Kendall，Dowsett等人2006)。虽然在7-10周测定的值是137和219pmol/l，但血清E2水平通常而后降低到40pmol/l的值，或更小。接受普雷马林乳膏剂的患者在2周时具有83pmol/l的血清E2水平。应该提及的是，在患者就诊时进行E2测定的血液取样，该时间不大可能与给予Vagifem之后的最高E2水平对应。由此，更可能的是，(Kendall，Dowsett等人2006)中报道的值低估了(甚至到了未知的程度)阴道内给予Vagifem丸剂或普雷马林乳膏剂之后的血清E2的真实升高程度。作者推断，与芳香酶抑制剂一起使用Vagifem是不恰当的。在用芳香酶抑制剂治疗的乳腺癌女性中获得的这些发现，提出了在绝经后女性中关于使用任何阴道以及任何口服或透皮雌激素制剂的严重问题。
用各种阴道雌激素制剂治疗之后，造成血清E2的比较高的上升，从而导致乳腺癌危险增加，这是一个已经充分认识的问题(Rosenberg，Magnusson等人2006)。尽管出现了少量状况并进行了少量随访(在1472个女性之中随访了4.7％的亚组)的研究，在使用阴道雌激素的女性亚组中的健康存活率没有发现统计上显著的差别(Dew，Wren等人2003)，但当芳香酶抑制剂的治疗目标精确地是达到E2生物合成的最大抑制时，在乳腺癌治疗期间升高血清E2水平似乎是不适当的或不可接受的。
在对于Vagifem的早期研究中，当以25μg剂量给予E2片剂时，导致80pmol/l的血清E2水平，在14小时和以后，该值低于50pmol/l(Kvorning and Jensen 1986)。在对于Vagifem的更近的研究中，对于25μg剂量，测定的最大和平均24小时血清E2浓度分别是180±99pmol/l和84pmol/l，而对于10μg剂量，测定该值分别为81±62pmol/l和40pmol/l(Notelovitz，Funk等人2002)。其它阴道雌激素片剂和乳膏剂已导致甚致更高的血清雌激素水平(Schiff，Tulchinsky等人1977；Rioux，Devlin等人2000)。
对于10μg和25μg E2阴道片剂，血清E2从大约35pmol/l的基本值分别增至大约90和160pmol/l的最大值(Nilsson and Heimer 1992)。对于用Vagifem，已经报道血清E2在第1天具有51±34pg/ml的Cmax，该值实际上在第14天(47±21pg/ml)和84天(49±27pg/ml无变化(Vagifem，Physician Package Insert 1999)。
在另一个研究中，用25μg Vagifem治疗52周之后，报道的E2的血清水平保持无变化(从10.3±21.5pg/ml至9.9pg/ml)(Bachmann，Lobo等人2008)。这种数据可以通过最可能在应用Vagifem之后3或4天进行的血液取样的事实来解释。同样重要的是，在该研究中，治疗前血清E2水平提高最可能与所使用的基于免疫的试验缺乏特异性有关，这是由于在绝经后女性中通过质谱测定的正常E2血清水平低两至三倍(Labrie，Bélanger等人2006)。
在一个早期研究中，口服和阴道给予1.25mg普雷马林，在给药之后的24小时期间，可导致E2和雌酮的血清水平分别达到至少100pg/ml和1000pg/ml，该水平稍微高于阴道给药之后的水平。在大部分受试者中，血清促性腺激素水平降低(Englund and Johansson 1978)。(Rigg，Hermann等人1978)报道了类似的数据。在最近的研究中，每天口服或阴道内给予0.625mg普雷马林3个月之后，血清E2水平分别增至83.1和58.6pg/ml(Long，Liu等人2006)，由此说明，在阴道内和口服雌激素给药之后出现非常重要的系统接触，这是由于与口服组合的雌激素相比，阴道内给药之后血清E2只低了36％。在对普雷马林阴道乳膏剂的12周研究中，每天给予2g剂量，一周三次，孕激素试验之后，21％的女性有出血现象(Nachtigall 1995)。此外，在这些女性中，12％显现了子宫内膜厚度增加(利用回波描记术)。
已经报道，血清E1、E2或E1S水平没有增加(借助于阴道环)(Nachtigall 1995；Gupta，Ozel等人2008)，尽管在60岁以上的女性中观察到E1S和E2显著提高(Naessen，Rodriguez-Macias等人2001)。在最近研究的ESTring组中，在第24周，血清E2从16±22pmol/l升高至49±64pmol/l(Weisberg，Ayton等人2005)。另一方面，在Vagifem组中，血清E2从15±33pmol/l升高至36±51pmol/l。尽管如此，这些作者报道说，血清E2保持在正常绝经后女性中所测定值的范围之内，或接近该值。在用ESTring或Vagifem治疗48周时，30-32％的女性出现尿频症状，36-39％女性出现尿急，18-33％出现性交疼痛现象(Weisberg，Ayton等人2005)。
三个研究证明，在90天周期期间，除血清雌激素猝发之外，E2阴道环可以是低血清E2，达到在正常循环女性中所看到的较低区域，或在嵌入环之后的第一个0.5-8小时期间，达到100至200pmoles/L(Holmgren，Lindskog等人1989；Schmidt，Andersson等人1994)(Baker and Jaffe 1996)。每天通过阴道内途径递送7.5μg E2具有系统性效果，这可以通过整个臀部和腰脊椎的骨骼矿物质密度显著升高的观察结果得到证明(用这种E2的阴道内剂量治疗2年之后)(Salminen，Saaf等人2007)。
如上所述，还存在关于阴道雌激素对子宫内膜的刺激效应的关注(N.A.M.S.2007)。用25μg阴道内E2(Vagifem)治疗32个女性12周之后，一个患者出现简单的增生，但不是异型性增生(Bachmann，Lobo等人2008)。在涉及80个女性的24周研究中，发现一个子宫内膜增生的病例(Rioux，Devlin等人2000)，在另一个31个女性的52周研究中，两个出现子宫内膜增生(Mettler and Olsen 1991)。
在对于普雷马林阴道乳膏剂(2g的剂量，一周三次)的12周研究中，孕激素试验之后，21％的女性感受到出血现象(Nachtigall 1995)。这些女性中，12％显现了子宫内膜厚度增加(利用回波描记术)。使用0.3mg剂量的结合雌激素(阴道内给予，一周三次)可以导致子宫内膜增生，但很罕见，因为在20个病例中，只有一个出现子宫内膜增生(Nachtigall 1995)。
持续释放雌二醇环(ESTring)可导致与0.625mg普雷马林乳膏剂相似的子宫内膜增生(Ayton，Darling等人1996)，但比1.25mg普雷马林乳膏剂所造成的增生程度小(Nachtigall 1995)。事实上，已经证明，阴道环(ESTring)和结合雌激素乳膏剂(普雷马林乳膏剂)两者都可导致子宫内膜增生(Nachtigall 1995；Ayton，Darling等人1996)。对于E2环，发现两例中度子宫内膜增生或子宫内膜息肉增殖(Nachtigall 1995)，而对于结合雌激素乳膏剂，在结合雌激素乳膏剂相对于E2片剂的试验中，发现两例增生(一个是简单的增生一个是复杂的增生，没有异型性增生)(Rioux，Devlin等人2000)。与雌三醇阴道片剂相似，E2阴道片剂与子宫内膜增生有关(Dugal，Hesla等人2000；Manonai，Theppisai等人2001)，但程度小于结合雌激素乳膏剂(Manonai，Theppisai等人2001)。
与口服或经皮HRT或ERT相比，在局部阴道内用药之后，尽管血清雌激素水平升高程度较低，但乳腺癌的危险仍然是一个问题，并且怀疑阴道内雌激素的安全性(Suckling，Lethaby等人2006；N.A.M.S.2007)。事实上，阴道内给药之后，与口服或经皮给药途径相比，尽管血清雌激素升高程度较低，但显著地高于正常绝经后水平(对于所有的阴道内雌激素制剂)(Ponzone，Biglia等人2005)。
除了与给予雌激素有关的乳腺癌危险升高之外，重要的是，还应该记住，在没有阴道萎缩的绝经后女性(估计占绝经后人群的25％)和其余患有阴道萎缩的绝经后女性(占75％)之间的真实的激素差别(Wines andWillsteed 2001；N.A.M.S.2007)与系统循环中的雌激素分泌无关，这是因为在绝经期时，所有女性的卵巢雌激素分泌都已经停止。因此，在大部分绝经后女性中，缺乏雌激素分泌不是出现阴道萎缩症状的有效解释。
然而，随着绝经期时卵巢功能的终止，性甾体形成并没有停止。在我们所了解的女性内分泌生理学的最新进展表明，绝经期之后，肾上腺分泌的DHEA是仅仅在靶组织中产生的性甾体的唯一渠道(Labrie1991)。与卵巢来源的雌激素(在一般循环中分泌，此处可以测定)相反，DHEA是在周围组织中按照各个组织中睾丸类固醇合成酶的表达水平、以各种速率转化的非活性前体物。胞内分泌过程使活性性甾体在组织内部局部形成，同时在循环中不显著地释放活性甾体(Labrie，Dupont等人1985；Labrie，Bélanger等人1988；Labrie 1991；Labrie，Luu-The等人2005)。
然而，DHEA的分泌随着年龄的增长而降低，在绝经期时，观察到降低60％(Labrie，Luu-The等人2003；Labrie，Bélanger等人2005；Labrie，Luu-The等人2005；Labrie，Bélanger等人2006；Labrie，Luu-The等人2006；Labrie 2007)。在有症状和无症状的绝经后女性之间的唯一差别是通过肾上腺分泌的DHEA数量或阴道组织对DHEA的敏感性。不同女性的敏感性差别很可能与针对各个组织中各个细胞类型具有特异性的酶催组织的活性水平相关，达到的相关程度不详(Labrie 1991；Labrie，Bélanger等人2005)。由于有这种认识，DHEA、而不是雌激素是绝经后女性的生理激素代替治疗。
正如在我们先前研究(Labrie 1991；Labrie，Luu-The等人2003；Labrie，Luu-The等人2005；Labrie，Belanger等人2007)中所表明的那样，补充生理数量的外源DHEA可以使雄激素和/或雌激素的生物合成仅仅存在于合适的靶组织中，靶组织包含所需的胞内分泌的睾丸类固醇合成酶(Labrie，Luu-The等人2005)。在周围靶组织中，由DHEA局部合成的活性雄激素和雌激素在形成它们的相同细胞中发挥它们的作用。最重要的是，活性性甾体极少渗透到循环中，由此解释了在循环雌激素或雄激素没有显著变化的阴道中所观察到的明显有利效果(Labrie，Cusan等人2008)。在靶组织中，雌激素和雄激素的这种局部生物合成、发挥作用和失活，可以消除其它组织与过量性甾体的接触，由此消除了由于雌激素接触增加而产生提高的不合需要副作用的危险，包括乳房、卵巢和子宫癌(Gambrell，Massey等人1980；Persson，Adami等人1989；Steinberg，Thacker等人1991；Voigt，Weiss等人1991；Sillero-Arenas，Delgado-Rodriguez等人1992；Colditz，Egn等人1993；Jick，Walker等人1993；Colditz，Hankinson等人1995；Grady，Gebretsadik等人1995；Collaborative Group on Hormonal Factors in Breast Cancer 1997；Garg，Kerlikowske等人1998；Coughlin，Giustozzi等人2000；Hulley 2002；Lacey，Mink等人2002；Riman，Dickman等人2002；Rodriguez，Patel等人2002；Rossouw，Anderson等人2002；Beral 2003；Chlebowski，Hendrix等人2003；Holmberg and Anderson 2004；Beral，Bull等人2005；Lyytinen，Pukkala等人2006；Corrao，Zambon等人2008；Holmberg，Iversen等人2008；Li，Plummer等人2008)。
现在公认pH值变化是有效的参数，其反映了阴道萎缩治疗的有利效果。用25μgE2进行阴道内治疗12周之后，与安慰剂组的21％相比，pH值小于5.0的患者百分比是51％(Bachmann，Lobo等人2008)。然而，在基线时，两个相应组的11.2％和13％的女性具有低于5.0的pH值。在临床试验ERC-210(实施例3)中，在治疗开始的时候，没有患者具有低于5.0的pH值，在12周时，在0％、0.25％、0.5％和1.0％DHEA组中，分别有12％、36％、46％和48％的患者具有低于5.0的pH值。
在临床试验ERC-210(实施例3)中，DHEA对阴道上皮细胞的成熟的效果特别快速：用0.5％DHEA卵型药丸，在2周时，已经观察到对基底旁层细胞的最大效果的79％，而在相同的时间间隔，观察到对表层细胞所产生的最大刺激效果的48％。另一方面，在4周时，达到了0.5％DHEA对表层细胞百分比的最大效果的85％。类似地，在2周时，观察到了0.5％DHEA对最讨厌症状的最大效果的63％，在4周时达到87％。此外，与安慰剂组的48.8％相比，在12周时，在0.5％DHEA组中，仅仅报道17.8％的女性的最讨厌症状没有变化。
DHEA对基底旁层细胞的快速效果是因为：使用三个DHEA剂量治疗一个月时，基底旁层细胞的％减少到20％以内。对表层细胞的％的效果也非常快速，使用高(1％)DHEA剂量2周时，看到100％的效果。在对阴道雌激素乳膏剂或片剂的研究中，在2周时，观察到12周时所测定效果的大约50％(Rioux，Devlin等人2000)。这种数据表明，DHEA效果的快速性不次于、并且可能优于阴道E2和结合雌激素制剂的效果。
在口服雌激素的效果研究中，在71个绝经后女性中，每天给予0.3mg口服合成的结合雌激素，可以将基底旁层细胞从23％降低至2.3％，同时表层细胞从2.1％提高至15.9％(Marx，Schade等人2004)。在比较0.3mg与0.625mg剂量的结合马雌激素的研究中(Utian，Shoupe等人2001)，证明0.625mg剂量对表层细胞的％具有更大的效果。
在最近的研究中，在雌激素治疗组中，阴道成熟值(VMV)从27.45(在基线处)提高至56.85(p＜0.0001)(Simon，Reape等人2007)。在雌激素治疗组中，表层细胞的百分比增加17.15(相对于基线)，同时，基底旁层细胞的百分比减少41.66％。在相同的研究中，在雌激素组中，阴道pH值从基线处的6.74降低至5.05(降低1.69或24％)。与安慰剂组中的最讨厌症状的严重程度从2.59降低至1.84(-0.75)相比，在雌激素组中，从2.58降低至1.04(-1.54)。用雌激素所观察到的这种数据与下列可比：在临床试验ERC-210(实施例3)中，观察到在0.5％DHEA组中，在12周时，最讨厌症状的严重程度降低1.56，在安慰剂组降低0.67。
在12周时，11％的ESTring受试者和24％的Vagifem受试者保持萎缩性的上皮细胞。在48周时，相应的值是8％和14％(Weisberg，Ayton等人2005)。用Vagifem或ESTring治疗48周，在33％的女性中还存在阴道干燥(Weisberg，Ayton等人2005)。另一方面，用ESTring和Vagifem治疗之后，分别有15％和20％的女性仍然存在外阴搔痒，同时，用ESTring和Vagifem治疗之后，分别还有33％和28％的女性出现性交疼痛现象。孕激素试验之后，在Vagifem组中有7％出血现象，而在ESTring组中有0％。
每天给予0.625mg普雷马林(口服或阴道内(乳膏剂))，3个月之后，观察到性交疼痛分别改善了70.6％和75％(Long，Liu等人2006)。在该研究中可以推断，1g的0.625mg普雷马林是治疗性功能障碍的最小剂量。
在接受25μgE2(阴道内)的女性中，治疗12个月之后，性交疼痛占病例的12.4％(Simunic，Banovic等人2003)。根据患者判断的局部E2片剂的治疗成功率是84.5％，根据医生判断的是86.1％(Simunic，Banovic等人2003)。Bachman等人，1992(Bachmann，Notelovitz等人1992)已经报道，口服雌激素替代治疗的40-50％女性具有阴道干燥现象。
如先前所报道，用DHEA治疗12个月之后(Labrie，Diamond等人1997)，临床试验ERC-210(实施例3)证明，阴道内给予激素前体物DHEA3个月之后，对子宫内膜组织无效，如在治疗12周前后所获得的子宫内膜活检的组织病理试验所示。这些发现与人类子宫内膜中缺乏芳香酶活性的状况一致(Baxendale，Reed等人1981；Bulun，Lin等人2005)。通过充分了解临床观察，也强烈地支持这些发现：尽管整个一生连续分泌DHEA，但子宫内膜萎缩是绝经期后的特征(Labrie，Luu-The等人2005；Labrie，Bélanger等人2006)。在人类子宫内膜中，缺乏将DHEA转化为雌激素所必需的睾丸类固醇合成酶与子宫内膜的生理作用一致，当它的功能基本上由卵巢和胎盘源的激素控制时，其仅仅在生殖年龄期间是活性的。绝经期之后，子宫内膜没有生理作用，在卵巢的雌激素分泌终止之后，其可以调整雌激素的任何持续作用。相应地，由DHEA合成雌激素所需要的酶不在子宫内膜(该组织充分地取决于卵巢源的雌激素)中表达。
已经知道，长时间单独给予雌激素可以刺激子宫内膜增生(Smith，Prentice等人1975)，而与雌激素组合给予孕酮可以抑制雌激素的刺激效应(Feeley and Wells 2001)。因为雄激素受体在人类子宫内膜和基质中表达(Mertens，Heineman等人1996)，所以研究雄激素效果的临床研究证明，相对高剂量的睾酮在绝经后女性对子宫内膜无效(睾酮十一烷酸盐，40mg，每隔一天)(Zang，Sahlin等人2007)。在接受雌二醇戊酸酯(2mg/天)的女性中，治疗3个月时，Ki标志提高50％，而同时给予睾酮使增生降低至28％。Ki67标志仅仅在接受雌激素的两个组中提高，但通过在基质中加入睾酮，可以将其降低。尽管对女性的子宫内膜增生没有刺激效应，但睾酮似乎可以产生在子宫内膜中产生一些抗雌激素效果。
尽管FDA指南鼓励投资者开发雌激素和孕酮的最低剂量和接触量，但我们必须认识到，尽管雌激素在矫正阴道萎缩症状和血管收缩症状方面是有效的，但全身性雌激素不是可使25％绝经后女性避免中度到严重的阴道萎缩症状的生理性激素。这些女性在她们所有绝经后岁月中仍然保持相对的无症状。在绝经后女性(有症状的和无症状的)中，性甾体的唯一来源是由于肾上腺DHEA的局部雌激素和雄激素生物合成(通过胞内分泌学机理)。用DHEA替代是唯一可为患有绝经后症状的女性提供对她们的症状负责的不足数量的DHEA的生理学方法。利用称为激素前体物代替治疗(HPRT)的方法，阴道萎缩和血管收缩症状将得到矫正，不会比由于接触较高DHEA和通过胞内分泌过程所产生的性甾体而没有阴道萎缩症状的同样绝经后女性的危险更大。
优选，按照本发明给予的性甾体前体物以下列剂量范围给予：(1)当阴道内给予时，在每天0.5至100mg之间(优选每天3至50mg，最优选在每天3和13mg之间)；(2)当在皮肤上给药时，剂量范围在每天15至200mg之间(优选每天30mg至100mg)；(3)当口服给予时，剂量范围在每天10至200mg之间(优选每天25mg至100mg)，例如每天75mg；或(4)当肠胃外给药时(即肌内或皮下)，剂量范围在每天1.0至25mg之间(优选每天3.25至20mg)。
在用于阴道给予的药物组合物中，相对于组合物的总重量，优选，DHEA或其它前体物的浓度在0.1和10％重量之间，更优选在0.2和3.0％之间，尤其在0.25和2.0％之间。例如，每天给予一次含有0.5％DHEA(按全部组合物的重量)的1.3毫升(mL)阴道栓剂，优选提供6.5mg/天的DHEA。可以使用大或小的栓剂，浓度可以不同，同时使剂量保持在所需要的范围。
在用于皮肤上给药的药物组合物中，相对于组合物的总重量，优选，DHEA或其它前体物的浓度在0.1和10％重量之间，更优选在0.2和2.0％之间，尤其在0.3和1.5％之间。
在用于口服的药物组合物中，相对于组合物的总重量，优选，DHEA或其它前体物的浓度在5和98％重量之间，更优选在10和50％之间，尤其在15和40％之间。
在用于肠胃外给药(即肌内或皮下)的药物组合物中，优选，DHEA或其它前体物浓度在0.2mg/mL和25mg/mL之间，更优选在0.65和15mg/mL之间，尤其在2mg/mL和10mg/mL之间。
本发明效果的实施例
实施例1
临床试验ERC-213
在患有阴道一期萎缩的绝经期后女性中阴道栓剂给药之后的DHEA生物利用率，随机化的，安慰剂对照
每天给予DHEA栓剂(给予一周)的药物动力学和局部作用
该研究的主要目的是：在每天阴道内应用四个不同DHEA浓度的栓剂之后评价DHEA和其代谢物的系统生物利用率。该研究是随机化的、安慰剂对照的和双盲的试验，10个受试者/arm。由此，使四十个绝经后女性每天随机接受下列DHEA浓度的栓剂的剂量：0.0％、0.5％(6.5mgDHEA/栓剂)、1.0％(13mg DHEA/栓剂)或1.8％(23.4mg DHEA/栓剂)。
在治疗前以及治疗7天之后测定成熟指数以及阴道pH值，以便在短周期内获得DHEA的局部效果的指标。
如图1B、表1和表2所说明，每天阴道内应用1.3ml栓剂(包含0.5％、1.0％和1.8％DHEA)可导致血清DHEA的递增，分别具有下列AUC0-24小时值：24.8±4.8ng.h/ml，56.2±8.9ng.h/ml(p＜0.05)，76.2±10.3ng.h/ml(p＜0.01)和114.3±9.97ng.h/ml(p＜0.01)。由此，与对照物相比，在0.5％、1.0％和1.8％的DHEA剂量时，分别提高127％、207％和361％。如对所有其它甾体所观察的，在第1和7天，观察到类似的AUC0-24小时的值。
事实上，在用最高剂量治疗之后，DHEA的4.76±0.42ng/ml的平均血清值(表2)与四十七个(47)30-35岁绝经前正常女性中所测定的4.47±2.19ng/ml的值相似(Labrie，Bélanger等人2006)。在使用任何剂量DHEA之后的血清DHEA保持在正常绝经前女性的限度之内，如图7A所说明。
正如先前所观察的那样，在口服或经皮给予DHEA之后(Labrie，Bélanger等人2007)，血清5-二醇遵循几乎可与DHEA叠加的图象，虽然看到低得多的浓度。事实上，在第7天，在0.5％、1.0％和1.8％DHEA剂量下，AUC0-24小时值从安慰剂组中的5.60±0.60ng.h/ml分别增至9.83±1.14(p＜0.05)、13.8±1.87(p＜0.01)和21.0±1.66(p＜0.01)(1D，表1)。与对照组相比，这种变化与提高75％、147％和276％对应。每天阴道内给予DHEA之后(在24小时期间)，在第7天，只有1.8％DHEA剂量导致血清5-二醇的提高超过正常绝经前女性中所测定的值(图7B)。
在0.5％剂量时，血清Testo的AUC0-24小时值没有显著的变化(2.79±0.30ng.h/ml，相对于安慰剂组中的2.58±0.33ng.h/ml)(附图2B)。在1.0％和1.8％剂量时，测定的AUC0-24小时值为4.54±0.91ng.h/ml(p＜0.05)和5.97±0.69ng.h/ml(p＜0.01)(表1)。这些值分别转化为下列的平均血清Testo水平：0.11±0.01(N.S.)、0.12±0.01(N.S.)、0.19±0.04(p＜0.05)和0.25±0.03(p＜0.01)ng/ml。即使使用最高的1.8％DHEA剂量时，血清Testo水平保持在绝经前女性的正常范围(测定值为0.18±0.07ng/ml(0.06-0.31，5th-95th百分位))之内(Labrie，Bélanger等人2006)(图7E)。另一方面，1.0％剂量(0.18±0.07ng/ml)正好与正常绝经前女性中所测定的值(即0.19±0.4)对应(图7E)。
如图2C和D，在第7天，血清DHT从安慰剂组中的0.58±0.07ng.h/ml的AUC0-24小时值，分别升高至0.5％、1.0％和1.8％DHEA组中的0.93±0.11(N.S.)、1.31±0.26(p＜0.05)和1.93±0.23(p＜0.01)ng.h/ml。这些值与0.02±0.01、0.04±0.01、0.05±0.01和0.08±0.01ng/ml的平均血清DHT水平对应(表2)，由此，在最高DHEA剂量下，达到在绝经前女性中观察到的0.07±0.03ng/ml的正常血清DHT水平(Labrie，Bélanger等人2006)(图7F)。
在安慰剂组中，在第7天，测定平均血清E1水平为12.6±1.41ng/ml(表2)，而在0.5％DHEA剂量下时没有显著的变化(15.4±2.04ng/ml)。在1.0％和1.5％DHEA剂量时，观察到分别增至24.1±3.54ng/ml(p＜0.01)和25.0±2.85ng/ml(p＜0.01)。在3B中说明了对应的AUC0-24小时值，并且在表1中标明。
在安慰剂和0.5％DHEA组中，测定的平均血清E2水平分别为2.77±0.29pg/ml和4.04±0.69pg/ml(N.S.)(表2)。在接受1.0％和1.8％DHEA剂量的女性中，在第7天，测定平均血清E2浓度为6.01±1.31pg/ml(p＜0.05)和5.68±0.84pg/ml(p＜0.05)，与安慰剂相比，分别绝对提高3.18和2.85pg/ml。在安慰剂和0.5％DHEA组中，对于血清E1-S，观察到类似的测定值，分别具有0.12±0.02ng/ml和0.13ng/ml(N.S.)的平均血清水平(表2)。在1.0％和1.8％DHEA组中，测定的值分别为0.18±0.03ng/ml和0.25±0.25ng/ml。只有1.8％DHEA组显示了统计上的差别(p＜0.01)(相对于安慰剂组)。
正如在4B和D中看到的那样，对于E1-S和DHEA-S，也可以看到类似的模式。在安慰剂组中，测定的血清DHEA-S的AUC0-24值为8.35±2.22ng.h/ml，在0.5％DHEA组(N.S.)中，为13.3±3.16ng.h/ml。对于两个更高的DHEA剂量，测定的AUC0-24小时值分别为16.5±2.71ng.h/ml(N.S.)和19.3±3.59ng.h/ml(p＜0.05)(图4D，表1)。在所有的DHEA剂量下，这些DHEA-S的值低于在绝经前女性中所观察到的(平均1.27±0.62ng/ml)(7C)血清DHEA-S水平。
如图5B所说明，在给予DHEA之后第7天，在安慰剂和0.5％DHEA组中，测定的血清4-二酮的AUC0-24小时值分别为6.34±0.80和8.71±0.84ng.h/ml(N.S.)。在两个更高DHEA剂量下，4-二酮的AUC0-24小时值分别略微地升高至11.1±1.51(p＜0.01)和11.9±0.81(p＜0.01)ng.h/ml。如7D和表2所示，血清4-二酮的所有这些值远低于在正常绝经前女性中所观察到的平均血清4-二酮浓度。事实上，最高DHEA剂量导致0.50±0.03ng/ml的平均血清4-二酮浓度，而在30-35岁循环女性中的平均值是0.96±0.35ng/ml(Labrie，Bélanger等人2006)(附录2)，由此只达到在绝经前女性中所观察到的血清4-二酮水平的50％。
考虑到测定ADT-G、3α-二醇-3G和3α-二醇-17G的血清水平的关键作用(Labrie，Bélanger等人2006)，在5D和表2中可以看到，ADT-G的血清水平从安慰剂组中的6.97±1.20ng/ml的平均值升高至0.5％DHEA组中的19.2±3.99ng.h/ml(p＜0.01)。在1.0％和1.8％DHEA组中，测定的值分别为19.7±2.48和25.7±2.88ng.h/ml(对于两个DHEA治疗组，p＜0.01，相对于安慰剂)。对于次要的雄激素代谢物3α-二醇-3G和3α-二醇-17G，也可以看到类似的变化(6B、6D、8B和8C，表1和表2)。重要的是，如图8所示，应该表明，即使使用最高剂量的DHEA，ADT-G、3α-二醇-3G和3α-二醇-17G的平均血清水平仍然是36％、11％和6％，低于在绝经前女性中所测定的平均血清水平。
如表2所示，给予1.3ml栓剂(包含1.8％DHEA(23.4mg DHEA))的第7天，经过24小时周期测定的雄激素代谢物葡糖苷酸的和只有28.2ng/ml，而在30-35岁绝经前女性中，同样代谢物的平均血清浓度是42.8ng/ml(Labrie，Bélanger等人2006)(附录2)。相应地，使用最高DHEA剂量，导致相当于正常循环年轻女性中所测定的全部雄激素代谢物的值的仅仅65.7％。另一方面，0.5％和1.0％DHEA剂量分别导致21.02ng和21.53ng的雄激素代谢物的和，由此，仅仅与在绝经前女性中所观察到的值的49.0％和50.2％相当。我们先前已经发现，每天口服100mg DHEA会产生绝经前女性中所测定水平的74％(Labrie，Bélanger等人2007)。
我们先前已经注意到，口服或经皮给予DHEA之后，血清DHEA的变化大约是100％，高于对通过血清ADT-G、3α-二醇-3G和3α-二醇-17G的变化所反映的甾体形成中的变化的估计(Labrie，Bélanger等人2007)。如图9所示，平均血清DHEA水平从安慰剂组的绝经前女性中所观察值的23％分别达到接受0.5％、1.0％和1.8％DHEA剂量的女性中的52％、71％和106％。图9的数据表明，阴道内给予DHEA之后，血清中DHEA的变化也是对雄激素形成中的变化的过高估计，并且在雌激素形成中可能更高，这可以通过血清E1-S的甚至更小变化来说明(表1)。事实上，在1.0％剂量下，与绝经前女性中所测定的值相比，血清雄激素代谢物提高31.6％，而血清DHEA升高49.1％(过高估计了55％)。在最高DHEA剂量下，血清雄激素代谢物提高47.1％，而血清DHEA提高83.5％(过高估计了77％)。
表1：每天阴道内给予患有阴道萎缩的40-75岁绝经后女性DHEA栓剂的第1和7天，DHEA和它的11个代谢物的曲线下的面积值(AUC0-24小 时)
Figure GPA00001088707700372
a：一个患者的数据被排除
表2：每天阴道内给予患有阴道萎缩的40-75岁绝经后女性DHEA栓剂的第1和7天，DHEA和它的11个代谢物的平均血清甾体水平
如下获得该值：第1和7天测定的AUC0-24小时值除以24，由此得到在24小时周期内的各个甾体的平均血清浓度。加入在30-35岁绝经前女性中测定的血清甾体浓度作为参比。
Figure GPA00001088707700381
Figure GPA00001088707700382
Figure GPA00001088707700383
从该组中排除一个患者
(Labrie，Bélanger等人2006)
然而，应该提及的是，如表3所示，在安慰剂组中，存在许多甾体的治疗前的值更低的强烈倾向。这与安慰剂组中DHEA、DHEA-S、4-二酮、Testo、DHT、E2、ADT-G和3α-二醇-17G的特别低的值有关。因为在给予0.5％和1.0％剂量DHEA之后所观察到的所有平均血清甾体值保持在正常绝经前女性中所测定值的范围之内，或充分低于该值，所以对矫正这种明显的偏差没有进行尝试。有兴趣提及的是，在每天给予0.5％DHEA栓剂的第7天测定的所有甾体的平均24小时血清水平，几乎正好与正常55-至65-岁女性中所测定的值对应，而1.0％DHEA栓剂产生的值在55至65岁正常女性中所观察的范围之内(Labrie，Bélanger等人2006)。
因为雄激素代谢物是外源DHEA转化为活性雄激素的最可靠的测定方法，所以，所提供的数据表明，在目前研究中，使用最高剂量DHEA符合血清甾体水平的FDA要求，其在正常绝经前女性中所测定水平的正常范围之内。
表3：每天阴道内给予升高剂量的DHEA的第1和7天的基础血清甾体水平，数据用ng/ml表达(E1和E2(pg/ml)和DHEA-S(μg/ml)除外)
        甾体          安慰剂        DHEA 0.5％     DHEA 1.0％    DHEA 1.8％
DHEA         第1天    0.72±0.14    1.09±0.24     0.94±0.19    0.99±0.15
             第7天    0.69±0.14    1.29±0.26     1.43±0.19    1.83±0.13
5-二醇       第1天    0.22±0.02    0.26±0.03     0.26±0.05    0.25±0.02
             第7天    0.22±0.02    0.31±0.05     0.36±0.05    0.46±0.04
DHEA-S       第1天    0.372±0.10   20.543±0.157  0.572±0.144  0.447±0.094
             第7天    0.368±0.100  0.592±0.160   0.717±0.125  0.805±0.143
4-二酮       第1天    0.18±0.02    0.21±0.03     0.23±0.04    0.22±0.03
             第7天    0.16±0.02    0.25±0.03     0.34±0.06    0.38±0.03
睾酮         第1天    0.10±0.01    0.09±0.01     0.12±0.03    0.15±0.03
(Testo)
             第7天    0.09±0.01    0.10±0.01     0.18±0.03    0.23±0.03
DHT          第1天    0.024±0.003  0.026±0.003   0.037±0.010  0.029±0.002
             第7天    0.023±0.002  0.035±0.004   0.047±0.010  0.062±0.006
E1           第1天    11.98±1.65   11.83±1.28    14.72±2.79   13.59±1.88
             第7天    11.71±1.19   13.53±1.66    22.15±3.21   23.77±3.35
E2           第1天    3.00±0.44    3.13±0.37     4.30±1.38    3.42±0.62
             第7天    2.75±0.28    3.94±0.65     5.98±1.26    6.00±1.10
E1-S         第1天    0.137±0.024  0.133±0.029   0.117±0.016  0.164±0.033
             第7天    0.143±0.025  0.151±0.034   0.203±0.016  0.259±0.049
ADT-G        第1天    7.42±1.48    13.65±3.71    11.49±2.10   9.44±1.23
             第7天    6.72±1.17    17.02±4.39    16.34±2.30   19.26±1.96
3α-二醇-3G  第1天    0.50a         0.61±0.07     0.71±0.14    0.58±0.05
             第7天    0.50a         0.75±0.11     0.96±0.25    0.96±0.15
3α-二醇17G  第1天    0.50a         0.84±0.16     0.85±0.22    0.65±0.06
             第7天    0.50a         0.95±0.16     1.18±0.30    1.27±0.19
a：对于所有的受试者，甾体水平低于定量分析的限制(定量分析的限制＝0.50ng/mL)。
每天给予DHEA栓剂仅仅一周之后，在0.5％、1.0％和1.8％DHEA组中，成熟指数分别提高107％(p＜0.01)、75％(p＜0.05)和150％(p＜0.01)(图10A)。在第1天和第7天之间，在安慰剂组中没有观察到变化。另一方面，在0.5％、1.0％和1.8％DHEA组中，阴道pH值分别从6.29±0.21降低至5.75±0.27(p＜0.05)、从6.47±0.23降低至5.76±0.22(p＜0.01)和从6.53±0.25降低至5.86±0.28(p＜0.05)(图10B)。在安慰剂组中没有观察到阴道pH值的变化。
实施例2
在绝经后女性中，口服和经皮给予脱氢表雄酮的生物利用率和代谢
1.简介
在动物种中，人以及其它灵长类是独特的物种，具有可分泌大量非活性前体物甾体DHEA的肾上腺，尤其是DHEA-S，其可以在周围组织中转变为活性雄激素和/或雌激素(Labrie，1991；Labrie，Bélanger等人1995；Labrie，Luu-The等人1997；Labrie，Simard等人1996；Labrie，Luu-The等人2005；Labrie，Poulin等人2006 and Simpson 2000)。事实上，在成年男性和女性中，血浆DHEA-S水平比睾酮水平高100-500倍，比雌二醇的水平高1000-10,000倍，由此提供了大量的底物贮备，在周围胞内分泌组织(其具有将DHEA转化为活性性甾体所必需的酶催机构)中转化为雄激素和/或雌激素(Labrie 1991，and Labrie，Luu-The等人2005)。事实上，术语“胞内分泌”在1988年首先出现(Labrie，Bélanger等人，1988)，用于描述在相同细胞中所进行的活性甾体的合成，在细胞中，活性甾体发挥它们的作用，在失活之前，没有或极少释放到细胞外间隙和体(general)循环中(Labrie，1991)。
在老年化期间，通过肾上腺形成的DHEA-S明显减少(Bélanger等人，1994；Vermeulen and Verdonck，1976；Migeon等人，1957)，导致在周围靶组织中所形成的雄激素和雌激素显著下降，这种情况潜在地与年龄相关的疾病有关，例如胰岛素耐受性(Schriock等人1988和Coleman等人1982)和肥胖症(Nestler等人1988；MacEwen和Kurman，1991，Tchernof等人1995)。此外，更多的注意力已经开始考虑给予绝经后女性DHEA的益处，尤其是口服(Villareal and Holloszy，2004；Baulieu等人，2000；Morales，等人1994；Kawano等人2003)和经皮(Diamond等人，1996和Labrie Diamond等人1997)给药之后对骨骼、皮肤、阴道、葡萄糖和胰岛素代谢、油脂质量以及康乐的益处。由此，变得特别重要的是，获得更多关于这两种给药途径之后的DHEA的生物利用率、药物动力学和代谢的准确知识。
因为我们已经证明，使用药理学剂量的DHEA(经皮给予，给予2周)，测定的血清睾酮(testo)和雌二醇(E2)水平不能提供雄激素和雌激素的真实胞内汇聚成的可靠评价(Labrie，Bélanger等人，1997；Labrie，Bélanger等人，2006和Labrie，Bélanger，等人，2007b)，所以我们比较了DHEA的血清水平和与活性雄激素和雌激素和其代谢物最密切相关的九个甾体的血清水平。每天给予DHEA(口服途径以及经皮途径，DHEA乳膏剂或凝胶)的第一天和2周之后，进行血清甾体水平的24小时变化的详细分析。
2.受试者和方法
IRB批准之后，三十六个健康的60-70岁绝经后女性参与该研究，并且给予她们书面同意书。体重在正常体重的±20％范围之内(按照Metropolitan Life Tables)。
受试者不能患有显著的代谢性或内分泌病症、冠心病或高血压症。在筛选之前6个月之内，女性没有用雄激素或促蛋白合成类固醇进行治疗。在方案的筛选阶段期间，所有的参与人拥有医疗史、完整的身体检查和血清生物化学特性，包括脂质、全部血球数、尿分析和详细的血清激素测定。
3.研究设计、治疗和测定
该研究是随机化的、开放标记试验，12个受试者/arm。获得书面同意书并且发现女性合格之后，使每个受试者随机接受DHEA(乳膏剂、凝胶或口服)。每天早餐之前(14天)，在临床研究时，使受试者接受4g 10％DHEA凝胶或4g 10％DHEA乳膏剂(施加在总面积30cm×30cm的大腿上)，或在早餐之前口服两个50mg DHEA胶囊。
在筛选时和在应用DHEA之前，在给药的第一天，以及第2、4、7、10和14天，08:00-09:00进行采血。给予DHEA之后，在第一和第十四天，在0.5小时、1小时、1.5小时、2小时、3小时、4小时、5小时、6小时、7小时、8小时、12小时和24小时获得血样。
4.血清甾体分析
通过气相色谱/质谱(DHEA，5-二醇，4-二酮，睾酮，E1和E2)(使用电子轰击或化学电离)和通过液相色谱/串联质谱(使用电喷雾离子源)(DHEA-S，E1-S，ADT-G和3α-二醇-G)，测定DHEA、DHEA-S、雄-5-烯-3β，17β-二醇(5-二醇)、睾酮、雄烯二酮(4-二酮)、17β-雌二醇(E2)、雌酮(E1)、雌酮硫酸盐(E1-S)、雄酮葡糖苷酸(ADT-G)和雄甾烷-3*，17β-二醇葡糖苷酸(3α-二醇-G)，如(Labrie，Bélanger等人2006；Labrie，Bélanger，等人2007b和Swanson等人2007)所描述。
5.计算和统计分析
在第1和14天，在0小时和24小时之间，测定每个甾体的血清浓度曲线下面的面积(AUC0-24小时)。通过线型梯形法计算曲线下的面积(独立模型)。DHEA凝胶、DHEA乳膏剂和DHEA胶囊的相对生物利用率以log转化的AUC值中的均差为基准。用SAS软件(SAS Institute，Cary，NC，USA)进行所有的计算。
6.结果
口服两个50mg DHEA胶囊，导致血清DHEA从2.3±0.3ng/ml提高至1小时时的15.6±2.5ng/ml的最大值，而后逐渐降低至6小时时的5.7±0.5ng/ml，而后是直至24小时的平台期(图11A)。当将4g 10％DHEA凝胶或乳膏剂施加在30cm×30cm面积的大腿皮肤上时，血清DHEA水平仅仅在12小时才开始提高，在24小时时，分别达到8.2±2.0和8.0±1.2nmol/l的值(图11A)。在皮肤上第一次应用前体物甾体之后，在研究的任何时间间隔，直至24小时，对于DHEA的血清水平来说，在乳膏剂或凝胶之间没有显著差异。
当第一次口服给予DHEA之后测定血清5-二醇时，5-二醇的浓度从0.31±0.03ng/ml的治疗前浓度提高至1小时时的1.19±0.13ng/ml的最大值，而后缓慢且逐渐降低，在24小时时达到0.79±0.05ng/ml(图11B)。在同一图中可以看到，通过乳膏剂或凝胶经皮肤给予DHEA之后，5-二醇的血清水平的提高更加缓慢得多，在24小时时，达到第一个统计上显著不同的值：1.00±0.14ng/ml(对于乳膏剂)和0.72±0.14ng/ml(对于凝胶)。
口服DHEA之后，在1小时，血清4-二酮从0.6±0.1ng/ml提高至9.5±2.2ng/ml的最大值，而后快速降低，此后，在8小时和24小时之间，达到大约1.2ng/ml的平台期的值(图12A)。另一方面，在给予DHEA乳膏剂或凝胶之后，在24小时才观察到血清4-二酮的第一次显著提高，对于乳膏剂和凝胶的值分别为：0.9±0.1和0.8±0.1ng/ml。
对于血清睾酮，也可以观察到类似的模式。事实上，口服两个50mgDHEA胶囊之后，在1小时时，血清睾酮从0.38±0.03ng/ml提高至0.79±0.14ng/ml的最大值。这种升高之后，在6小时快速降低至0.30±0.08ng/ml，而后是直到24小时为止的平台期(图12B)。当施加DHEA乳膏剂或凝胶时，在24小时观察到第一次提高，值大约为0.45ng/ml。如图13A和B所示，通过口服或经皮途径第一次给予DHEA，在第一个24小时期间，对E1或E2的血清水平没有统计上显著的效果。
另一方面，在口服两个50mg DHEA胶囊之后，血清DHEA-S与DHEA和5-二醇相比，模式是类似的(尽管有略微延迟)(图14A)。由此，在1小时，血清DHEA-S从0.4±0.1μg/ml提高至7.7±1.0μg/ml，在2小时，达到8.4±0.6μg/ml的最大值，逐渐减少到24小时时的2.7±0.3μg/ml。给予DHEA乳膏剂或凝胶之后，在第一个24小时期间，没有观察到血清DHEA-S的显著变化。另一方面，在第一次给药之后，在第一个24小时期间，血清E1-S没有变化。
在1小时，血清ADT-G(雄激素的主要代谢物)从14±3ng/ml提高至760±150ng/ml，在2小时，提高至790±140ng/ml，然后逐渐降低至12小时时的92±5ng/ml和24小时时的70±5ng/ml(图15A)。另一方面，在2小时，血清3α-二醇-G从2.2±0.5ng/ml提高至14.5±2.0ng/ml(图15B)。然而，此后观察到3α-二醇-G的降低比ADT-G的降低慢得多，在口服DHEA之后2小时和24小时之间，仅仅观察到降低大约40％。在皮肤上施加4g 10％DHEA之后，血清ADT-G或3α-二醇-G直至24小时也没有显著的变化(图15B)。
当在每天给药的第14天重复测定相同动力学参数时，能够看出，给予两个50mg DHEA胶囊，在1小时，可以导致从4.2±0.4ng/ml的剂量前值达到14.8±4.4ng DHEA/ml的最大浓度，而后逐渐降低，在24小时达到4.5±0.4ng/ml(图16A)。另一方面，当给予DHEA乳膏剂或凝胶时，在24小时周期期间没有观察到显著的变化，在施加乳膏剂之后，血清DHEA保持在10ng/ml和15ng/ml之间，施加凝胶之后，血清DHEA保持在7ng/ml和11ng/ml之间。
类似地，当在治疗的第14天测定血清5-二醇时，在1小时，这种甾体的血清浓度从0.46±0.04ng/ml提高至1.37±0.21ng/ml，此后缓慢降低，达到24小时时的0.64±0.06ng/ml(图16B)。正如对DHEA所观察的那样，在24小时周期期间，血清5-二醇大致保持稳定在1.5-1.9ng/ml(施加乳膏剂之后)和1.0-1.3ng/ml(施加凝胶之后)。
当在给药的第14天测定血清4-二酮时，在1小时，这种甾体的血清浓度从1.3±0.2ng/ml提高至9.8±1.7ng/ml的最大值，而后在6小时时快速降低至1.5±0.1ng/ml，在24小时测定时，值为1.2±0.1ng/ml(图17A)。在皮肤上施加DHEA乳膏剂或凝胶之后，在2小时，血清4-二酮非显著性地提高至大致2.5ng/ml，此后，值保持在1.0-1.6ng/ml的平台期，直至24小时(图17A)。
在口服100mg DHEA之后的第14天，在1小时时，血清睾酮从0.31±0.04ng/ml提高至0.83±0.11ng/ml的最大值，而后逐渐降低至24小时时的0.37±0.04ng/ml(图17B)。在施加DHEA乳膏剂或凝胶之后，在24小时周期期间，睾酮的血清水平无变化(大约0.3ng/ml)，该值没有显著地不同于治疗前的值。正如第一天所观察的那样，在通过口服或经皮途径每天给予DHEA之后的第14天，在24小时期间，E1(图18A)或E2(图18B)的血清水平没有显著的变化。
在1小时，血清DHEA-S从1.95±0.15μg/ml的剂量前水平增至8.3±0.4μg/ml，在24小时时逐渐地降低至2.6±0.3μg/ml(图19A)。在皮肤上施用DHEA之后，没有观察到血清DHEA-S的显著变化。另一方面，在每天口服或经皮途径给予DHEA之后的第14天，在24小时期间，血清E1-S没有变化(图19B)。
与第1天相比，虽然在第14天以高水平开始，但在1小时时，血清ADT-G快速地从66±1ng/ml提高至996±105ng/ml，而后逐渐地降低至116ng/ml(在12小时)和91±15ng/ml(在24小时)(图20A)。在皮肤上施用DHEA之后，血清ADT-G水平没有出现显著的变化。另一方面，每天口服100mg DHEA之后的第14天，血清3α-二醇-G从12±2.5ng/ml提高至29.4±5.5ng/ml(在2小时)，而后慢慢地降低，达到13±3.0ng/ml(在24小时)。经皮给予DHEA之后，没有观察到血清3α-二醇-G的显著变化(图20B)。
为了获得更确切的DHEA和其代谢物的积聚的测定数据，我们接下来将在给药的第1和14天所测定的血清甾体浓度的曲线下的面积(AUC0-24小时值)进行比较。可以从图11、图12、图13、图14、图15、图16、图17、图18、图19和图20预知，由于这些甾体的一些积聚，在通过口服途径给予DHEA的第1天和第14天，所有甾体(除了雌激素的代谢物(E1-S)和雄激素的代谢物(ADT-G和3α-二醇-G)之外)的AUC0-24小时值是类似的(表4)。另一方面，在经皮给予DHEA之后，由于在给予乳膏剂或凝胶之后DHEA的吸收较慢，与给药的第一天相比，在第14天分别观察到高出155％和86％的DHEA AUC0-24小时值。除了E1、E2和睾酮(其表明没有)之外，对所有其它甾体也观察到了更高的值。表4.
在给药的第1天和第14天测定的AUC0-24小时值以及它们的比例
Figure GPA00001088707700461
在括号内的值表示％变化系数。通过口服途径给予DHEA(2×50mg胶囊)，或将4g 10％DHEA乳膏剂或4g 10％凝胶施加在皮肤上。
正如在表5和图21中所明显看到的那样，与剂量前水平相比，在给药的第14天测定的血清E1、E2或睾酮的AUC0-24小时值没有显著的变化。然而，对于两个其它甾体，观察到了显著的提高。由此，在每天口服给予100mg DHEA(给予2周)之后，与治疗前的值相比，在给予甾体之后的24小时期间所测定的DHEA的浓度曲线下面积提高167％，同时观察到5-二醇、4-二酮、DHEA-S、E1-S、ADT-G和3α-二醇-G相应提高138％、238％、873％、60％、1820％和874％。
表5.
治疗前和第14天，DHEA和其代谢物的AUC0-24小时值
Figure GPA00001088707700471
通过口服途径或经皮途径(乳膏剂或凝胶)给予DHEA。通过用包含筛选的治疗前基础血清甾体水平乘以24小时，计算基线AUC0-24小时值。
除DHEA和5-二醇之外，给予DHEA乳膏剂或凝胶之后，观察到较少的增加。事实上，和对照组相比，在施加DHEA乳膏剂之后，DHEA-S的AUC0-24小时值仅仅提高104％，而4-二酮、E1-S、ADT-G和3α-二醇-G的AUC0-24小时值分别提高了77％、72％、234％和145％。另一方面，DHEA和5-二醇的AUC值分别提高了406％和363％(表5，图21)。对于DHEA凝胶，观察到类似的但稍低一些的增加，与对照物相比，其中血清4-二酮、DHEA-S、E1-S、ADT-G和3α-二醇-G的AUC0-24小时值分别提高了65％、91％、96％、56％和30％，而DHEA和5-二醇的AUC0-24小时值分别提高了249％和238％。
我们的最新发现(Labrie，Bélanger等人，2007b)已经表明，在外原性给予DHEA之后，观察到的血清DHEA变化至少为性甾体形成中的真实变化的100％过高估计(overestimate)。作为这些数据的支持，图21表明，给予DHEA乳膏剂或凝胶之后，血清DHEA的变化明显是对所有测定甾体(除5-二醇(DHEA的直接代谢物)之外)的血清水平变化的过高估计。对于DHEA乳膏剂，与提高406％(相对于所观察的血清DHEA的治疗前水平)相比，血清4-二酮、DHEA-S、E1-S、ADT-G和3α-二醇-G的AUC0-24小时值的变化仅仅是77％、104％、72％、234％和145％。
对于雄激素，现在非常确实的是，在人类中，尿苷葡萄糖醛酸转移酶2B7(UGT 2B7)、UGT 2B15和UGT 2B17是对所有雄激素和其代谢物的葡萄糖醛酸化负责的三种酶(Bélanger等人2003)。所有人类UDT-葡萄糖醛酸转移酶的这种最新完成的鉴别和表征，在女性和男性中，可以使用雄激素的葡糖苷酸衍生物作为全部雄激素性活性的标记物(Labrie，Bélanger等人2006；Labrie，Bélanger，等人2007b  and Swanson等人2007)。相应地，由于全部雄激素代谢为ADT-G和3α-二醇-G，当在ADT-G和3a-diol-G中加入变化时，对经皮给予DHEA转化为活性雄激素的效果百分比的评价被估计为52％(与406％的DHEA变化相比，权重值为211％)。类似地，在给予DHEA凝胶之后，血清DHEA的249％提高仅仅分别转化为血清4-二酮、DHEA-S、E1-S1、ADT-G和3α-二醇-G的AUC0-24小时值的65％、91％、96％、56％和30％提高。
在口服DHEA之后，因为在肠管和肝脏中的高水平的葡萄糖醛酸化解释了ADT-G和3α-二醇-G的高血清水平(Bélanger等人2003)，口服DHEA之后，血清E1-S相对小的提高(60％)(与血清DHEA提高167％相比)表明了转化为雌激素的36％相对效果。如先前所示(Labrie，Bélanger等人，1997；Labrie，Bélanger等人，2006；Labrie，Bélanger，等人，2007b)，本数据表明，给予绝经后女性的DHEA主要转变成雄激素，而不是转变成雌激素。
讨论
所提供的数据明显地表明，在用DHEA乳膏剂或凝胶长期治疗期间，所有甾体的浓度快速地达到平台期，任何甾体的血清浓度没有可检测的变化(在每天给皮肤施加DHEA期间测定)。相应地，从第一次经皮给予DHEA之后24小时开始，所有甾体的浓度保持在相同水平，由此表明，每天给皮肤施加DHEA可以使DHEA和所有其代谢物保持稳定的血清水平。在绝经后女性中，已经知道，与通常Cycling绝经前女性中的情况相比，血清DHEA的24小时变化相对很小(Lui和Laughlin，1990)。
所提供的数据还表明，每天口服DHEA之后，DHEA或其代谢物没有显著积聚。此外，通过口服或经皮途径给予DHEA之后，它的代谢在数量上是类似的，数量上的差别可以通过口服之后的肠道-肝脏代谢来解释。
相对于经皮给药，在口服之后，血清DHEA-S、ADT-G和3α-二醇-G的AUC0-24小时值升高，同时DHEA和5-二醇的AUC0-24小时值降低，这表明：通过胃肠道和/或第一次通过肝的代谢，不但导致DHEA较高水平地转化为DHEA-S(通过DHEA-磺基转移酶的活性)(Luu-The等人，1995)，而且导致DHEA高水平地代谢为雄激素和导致它们的灭活(通过肝脏葡萄糖醛酸转移酶的活性)(Bélanger等人2003；Turgeon等人，2001和Hum等人，1999)。事实上，如表1所示，在口服100mg DHEA的第14天，接触144ng h/ml(AUC0-24小时)的DHEA可以分别导致ADT-G和3α-二醇-G的AUC0-24小时值为5607ng h/ml和453ng h/ml。另一方面，经皮给予10％DHEA乳膏剂之后，DHEA、ADT-G和3α-二醇-G的AUC值分别是273ng h/ml、977ng h/ml和114ng h/ml。由此，口服之后，1ngh/ml DHEA与雄激素的两个代谢物(ADT-G+3α-二醇-G)的组合的42.1ng h/ml的AUC值对应，而在施加DHEA乳膏剂之后，1ng h/ml DHEA暴露与两个雄激素代谢物的和的4.0ng h/ml对应。这种数据表明，与经皮给予之后相比，至少在使用剂量时，通过口服途径给予DHEA可以使DHEA以10倍高的水平转化为ADT-G和3α-二醇-G。当对给予DHEA凝胶之后所获得数据进行相同的计算时，接触1ng h/ml的DHEA伴随有2.7ng h/ml的AUC0-24小时值(对于ADT-G+3α-二醇-G)，由此表明，在口服和经皮给予DHEA之间具有甚至更高的比例。
如表4所示，口服DHEA之后，虽然1ng h/ml的DHEA AUC0-24小 时值导致DHEA-S的660ng h/ml的AUC0-24小时值，但在施加前体物甾体乳膏剂或凝胶之后，观察到73ng h/l和99ng h/l的对应值。由此，在试验条件下，在同样接触循环DHEA之后，与经皮给予DHEA相比，口服之后循环中的DHEA-S数量高6.7-9.0倍(血清AUC0-24小时值)。所提供的数据表明，通过胃肠道和肝的DHEA对血清DHEA-S、ADT-G和3α-二醇-G水平有类似的效应。
虽然差别较低，但与经皮给予前体物甾体相比，口服DHEA之后，还可以观察到比较高水平的血清4-二酮。由此，口服DHEA之后，DHEAAUC0-24小时的1ng h/ml值导致0.3ng h/ml的4-二酮的AUC0-24小时值，而给予DHEA乳膏剂和凝胶之后，分别观察到0.08ng h/ml和0.11ng h/ml的值。正如在循环中所测定的那样，与经皮给予DHEA相比，口服之后，DHEA转化为4-二酮的量高出2.70-3.76倍。
表5的数据表明，与治疗前基础水平相比，每天口服100mg DHEA之后，DHEA AUC0-24小时值比对照物提高了167％，而每天经皮给予4g10％DHEA乳膏剂和凝胶可以分别使血清DHEA水平提高406％和249％。因为400mg DHEA施加在皮肤上(与口服途径的100mg相比)，并且假定是线性的，所提供的数据表明，与使用DHEA乳膏剂和凝胶相比，口服途径的效果分别提高2.9和4.8倍。
在绝经后女性中所进行的又一个研究中，口服150mg和300mg微粉化DHEA，在300mg剂量之后，可分别导致大约1.5mg/ml、15ng/ml和2.75ng/ml的最大血清DHEA-S、DHEA和睾酮浓度，而在150mgDHEA剂量之后，分别导致10μg/ml、12μg/ml和1.6ng/ml的浓度(Buster等人1992)。这些早期试验结果表明，血清DHEA-S提高20倍仅仅导致血清睾酮提高6.9倍，而血清DHEA提高至11.6倍。此外，当将测定的血清睾酮值调节至三分之一时(考虑到放射免疫分析中的三分之二非特异性结合)，在给予150mg DHEA剂量之后的12小时期间，血清睾酮水平保持在生理学水平之内(Buster等人1992)。
对于5-二醇，也可以看到在口服和经皮途径之间所观察到的血清DHEA的类似差别，5-二醇由17β-羟甾醇脱氢酶直接从DHEA转化而来(Labrie，Luu-The，等人2000)。事实上，口服100mg DHEA之后，尽管5-二醇AUC0-24小时值提高了大约138％(与对照物相比)，但施加400mg DHEA乳膏剂和凝胶之后测定的值分别提高363％和218％。
如上所述，与其它灵长类相比，人是独特的，其具有可分泌大量前体物甾体DHEA和DHEA-S的肾上腺，DHEA和DHEA-S转变为4-二酮，然后在周围胞内分泌组织中转变为有效的雄激素和/或雌激素(Labrie，1991；Labrie，Bélanger，等人1995；Labrie等人1996；Labrie，Luu-The，等人1997；Simpson，2000；Labrie，Luu-the，等人2005；Labrie，Poulin，等人2006和Labrie，Bélanger，等人1998)。由此，显著的是，除了具有非常完善的内分泌和旁分泌系统之外，人类可以在周围组织中形成大量性甾体(Labrie，1991)和(Bélanger，等人，1998)。事实上，在低级哺乳动物中，尽管卵巢和睾丸是雄激素和雌激素的唯一渠道，但在人类和高级灵长类中的情况则非常不同，在人类和高级灵长类中，活性性甾体大部分或完全在周围组织中进行局部合成，由此给靶组织提供控制，针对局部要求来调整性甾体的形成和代谢。
在6-8岁的儿童中，在肾上腺机能初现期间，肾上腺分泌DHEA和DHEA-S增加，并且在20和30岁之间达到循环DHEA-S的最大值。此后，血清DHEA和DHEA-S水平显著地降低(Bélanger等人1994)。事实上，在70岁时，血清DHEA-S水平减少到其峰值的大约20％，而在85-90岁以前，可以减少95％(Bélanger等人1994)和(Migeon等人，1957)。在老年期间，通过肾上腺形成的DHEA和DHEA-S减少70-95％，这导致在周围靶组织中显著地降低了雄激素和雌激素的形成(Labrie，Bélanger等人，2006)。在周围组织中性甾体形成的这种明显降低可能与系列疾病的发病原理有关，这种疾病与老年化有关。
如前所述，在周围靶组织中，DHEA和DHEA-S转化为活性雄激素和/或雌激素取决于各个细胞类型中的各种睾丸类固醇合成与代谢酶的表达水平(Labrie，1991)。在该领域中，编码睾丸类固醇合成酶(其负责将DHEA和DHEA-S转化为雄激素和/或雌激素)的大部分组织特异性基因的结构解释已经得到了快速发展(Labrie，Bélanger等人1995；Labrie，Luu-The等人1997；Labrie，Simard等人1996；Labrie，Luu-The等人2005；Labrie，Poulin等人Labrie，Luu-The，等人2000，Labrie，Sugimoto，等人1992，Labrie，Simard等人1992；Luu-The，等人1995；和Labrie，Durocher等人1995)。
该数据表明，在正常女性中存在比较高水平的雄激素代谢物(Labrie，Bélanger，等人1997；Labrie，Bélanger等人，2006；Labrie，和Bélanger，等人，2007b)强烈地说明雄激素在女性中起到较大的生理作用，但还是低估了这种作用。在从20-30岁至40-50岁年龄的女性中，血清DHEA降低44.5％(Bélanger等人，2006)可以很好地解释在绝经期之前骨骼损失的现象。事实上，在四十年代就已经开始报道年龄相关的骨骼损失，在绝经期之前已经发现了骨骼更新的变化(Mazess 1982；Riggs，等人1981，和Johnston等人1985)。与这些发现相一致，与绝经前相比，在更年期女性的所有检验位点，骨骼密度降低(Steinberg，等人，1989)。与这些发现相一致，通过肾上腺的前体物雄激素分泌的变化比卵巢雌激素分泌(其在绝经期时突然停止)的减少提前了10-20年(Labrie，Bélanger，等人2006)。
重要的是应该认识到，在21岁和50岁之间，不但血清DHEA和DHEA-S降低50％，而且还观察到血清睾酮的类似降低(Zumoff等人1995)。这种数据可以充分说明，利用雄激素或其前体物的激素代替治疗应该在绝经期的早期开始，以便补偿雄激素前体物分泌(通过肾上腺)的早期降低和血清睾酮的平行降低(Labrie，2006)。
在周围靶组织中合成的活性雄激素和雌激素在起源细胞中发挥它们的活性，并且出现极少的活性性甾体的扩散，由此导致在循环中的极低水平。事实上，正如先前所观察的(Labrie，Bélanger等人，1997)和目前研究所证实的那样，给予DHEA的最显著效果可以在DHT代谢物的葡糖苷酸衍生物的循环水平上看到，即ADT-G和3α-二醇-G，同时，睾酮、E1或E2的血清水平没有显著的变化或仅仅具有微小的变化。这些活性甾体在周围胞内分泌组织中局部产生，该组织具有合适的睾丸类固醇合成酶，以便用肾上腺前体物DHEA和DHEA-S合成DHT，还具有将DHT转化为非活性的代谢物ADT和3α-二醇(它们通过葡萄糖醛酸化被进一步修饰)的酶(Bélanger等人2003)。
在最近的研究中，每天口服50mg DHEA对血清睾酮或DHT没有显著的效果，而DHEA和ADT-G提高至类似的程度(80-90％)(Arlt等人2001)。在另一个研究中，在绝经后女性中，每天口服25mg DHEA，口服6个月之后，DHEA-S的剂量前血清水平从0.55μg/ml提高至大约1.4μg/ml(Casson等人1998)。然而，最后给予DHEA之后23小时测定的血清DHEA和睾酮水平没有显著变化。另一个研究表明，DHEA的50mg日口服剂量可以使血清雄激素水平在绝经前范围内(Buster等人1992)。
所提供的数据明显表明，在特异性周围胞内分泌组织中，DHEA和DHEA-S转化为活性雄激素和/或雌激素，其可以在它们的合成位点发挥它们的生物学效果，没有或仅仅有少量活性甾体释放到循环中。相应地，睾酮、E1或E2的血清水平变化不能用作DHEA转化为雄激素或雌激素的参数(Labrie，Bélanger等人，2006)。事实上，活性甾体在相同的细胞中代谢，在其中将它们合成，并且对非活性的葡糖醛酸化和硫酸化的代谢物发挥它们的作用，该代谢物最后扩散在胞外腔隙中，并且可以在循环中测定(Labrie，Bélanger等人2006；Labrie，Bélanger等人1997和Labrie，Bélanger等人2007)。测定雄激素的结合代谢物是精确估计女性中全部雄激素水平的唯一方法。非常可能的是，雌激素也存在相似情况，尽管有待建立确切评价雌激素代谢的药物动力学的方法和其代谢物的鉴别法。
实施例3
临床实验ERC-210
阴道内DHEA、阴道萎缩的生理学治疗
受试者和方法
该研究是III期、预期的、多中心的、随机化的、安慰剂对照的和双盲的试验，50个受试者/arm(总共200个受试者)。由此，使200个绝经后女性随机每天接受下列DHEA浓度的卵型药丸：0.0％、0.25％(3.25mg DHEA)、0.5％(6.5mg DHEA)或1.0％(13mg DHEA)，用涂药器进行阴道内施加。该研究分为两个阶段，即筛选阶段和随后的12周期间的治疗周期。
下列是包括的标准：
-满足a或b或c的绝经后女性：
a.至少一年没有经血，或；
b.女性FSH水平≥40mlU/mL(在第1天前的60天内)，没有经血时间超过6个月，但少于12个月，或切除子宫的女性，其在子宫切除的时候处于绝经前；
c.双向卵巢切除术之后的六周或六周以上进行筛选观察。
-已经自我鉴定至少具有一种中度至严重的下列症状的女性：
·阴道干燥(没有、轻微的、中度或严重)。
·阴道和/或外阴发炎/发痒(没有、轻微的、中度或严重)。
·与性活动有关的阴道疼痛(没有、轻微的、中度或严重)。
在治疗开始的时候，女性应该鉴定哪一种症状是她最讨厌的症状。跟踪这种症状的变化，并且用来评价治疗效果。
-在40和75岁之间的女性。
-情愿参与该研究，并且签订知情同意书。
-具有低成熟指数的女性(在阴道涂片上，没有大于指南部分的5％的表层细胞)。
-阴道pH值高于5的女性。
-在研究开始的9个月之内进行正常的乳房造影术。
-正常乳房检查。
-在(第1天的)最近12个月之内具有正常PAP涂片(其包括炎性变化)。对于切除子宫的女性，PAP涂片由至少一个载物片组成。
-以前或目前没有麻醉品成瘾性或酒精中毒。
-按照体重指数(BMI)(WHO)，体重在理想体重的18.5至35范围内。
-肝脏或肾没有缺陷，或没有已知的影响药物或类固醇代谢的病症。
-正常基线血液病、临床化学和尿分析。
-HIV1/HIV2和乙型肝炎与丙型肝炎的血清为阴性。
排除的标准是：
-未确诊的异常生殖器出血。
-先前诊断的癌，皮肤癌除外(非黑素瘤)。
-在筛选阶段活检表现出的子宫内膜增生，或子宫内膜癌。
-实际的血栓栓塞性疾病或其历史。
-显著的代谢或内分泌病。
-临床上显著的胃肠、肝脏或胆囊疾病。
-通过常规治疗不能控制的周期性偏头痛。
-通过常规治疗不能控制的糖尿病。
-先前激素治疗的显著的并发症。
-在研究之前(筛选)3个月之内使用单独雌激素注射药物疗法或孕酮植入物。
-在研究之前6个月之内使用雌激素颗粒或孕酮注射药物。
-在基线评价之前8周内口服雌激素、孕酮或接触DHEA或进行子宫内的孕酮治疗。
-在基线评价之前4周内使用阴道激素制品(环、乳膏剂或凝胶剂)或单独的透皮雌激素或雌激素/孕酮制品。
患者可以如下进行廓清，但在所需的廓清周期之后，必须回答关于阴道萎缩的问卷：
·对于先前的口服雌激素、DHEA和/或孕酮治疗，至少八周的廓清周期。
·对于先前的透皮激素治疗，至少四周廓清周期。
·对于阴道干燥的局部递送激素代替治疗，至少四周廓清周期。
·对于先前的雌激素颗粒治疗或孕酮注射药物疗法，至少6个月。
·对于先前的子宫内孕酮治疗，需要八周或更长时间。
·对于先前的孕酮植入物和单独雌激素注射药物疗法，需要6个月或更长时间。
-在筛选之前3个月之内，用雄激素或促蛋白合成类固醇预先治疗。
-在研究开始的六周内口服皮质类甾醇治疗。
-没有长期使用皮质类甾醇(容许周期性鼻喷入或局部用于皮肤、眼睛或耳朵)。
-心力衰竭或明显的冠心病。
-等于或高于160/95mm Hg的高血压症，或不能通过标准治疗来控制。
-确定的临床上显著抑郁或确定的严重精神病历史。
-在筛选的30天之内，给予任何研究的药物。
-临床上相关的异常血清生物化学或血液学。
-基线子宫颈细胞学表明的轻度鳞状上皮内病变(LGISIL)或恶化病变。
-一天吸烟超过10支。
-妨碍雌激素代谢的药物(例如，酮康唑，甾体形成或作用抑制剂)。
-与甾体受体相互作用的SERMs或药物。
-已知存在子宫纤维瘤或在妇科检验中能够触摸到。
-凝血病症或使用抗凝血剂药物疗法。
实验室试验
对所有的受调查者进行常规实验室试验，即血液病学(包括全部血球数和凝血)、血液化学和尿分析试验。只在没有经血(＞6个月，但＜12个月)或在子宫切除的时候处于绝经前的女性中必须测定血清FSH。在分子内分泌学的实验室(CHUL研究中心)，利用质谱测定DHEA、DHEA-S、雄-5-烯-3β，17β-二醇(5-二醇)、二氢睾丸酮(DHT)、睾酮(testo)、雄烯二酮(4-二酮)、雌酮(E1)、雌二醇(E2)、E1-S、雄酮葡糖苷酸(ADT-G)、雄甾烷-3α，17β-二醇-3G(3α-二醇-3G)和3α-二醇-17G的血清甾体水平，如下所述：(Labrie，Bélanger等人2006；Labrie，Belanger等人2007；Labrie，Cusan等人2008)。
阴道pH值和细胞学
对于成熟指数和Papanicolaou(PAP)涂片，由对治疗方案不知情的相同细胞病理学家(Dr.Robert Dubé，Department ofcytology-pathology，Enfant-Jésus Hospital，Quebec City，Canada)来检验所有样品。完成100个细胞计数，以便将细胞归类为表层(S)、中间层(I)和基底旁层(P)鳞状细胞类型(Meisels 1967；Wied 1993)。
用Ayre刮勺的圆头来刮阴道侧壁的中间三分之一，获得阴道涂片。然后将物质施加于载玻片上，并立即用Spray-Cyte固定。将这些样品送到中心实验室，测定成熟指数。
如下测定阴道pH值：用钳子将pH值指标条直接施加于阴道的侧壁。对于Papanicolaou涂片-如果在最后12个月没有完成，从子宫颈内膜、外宫颈和阴道穹窿获得样品，并立即用细胞喷涂器(cytospray)固定。用Ayre刮勺收集样品。
子宫内膜活体检查
在筛选时和在研究终止的当月完成子宫内膜活组织检查。所有活检是在中心实验室中由相同病理学家检验的(Dr.Robert Dubé，Departmentof cytology-pathology，Enfant-Jésus Hospital，Quebec City，Canada)。
阴道检查
在2、4、8和12周的相同时间间隔，在各个位点负责该研究的妇科医生或医生进行阴道检验，以便评价阴道萎缩主要症状的严重程度(没有，轻微，中度或严重，分别使用0、1、2和3的值进行分析)，即阴道分泌物、阴道色泽、阴道上皮细胞的完整性和阴道上皮表面的厚度。正如在图26至29中所看到的那样，可以看到阴道萎缩的所有四种症状的时间依赖性、剂量相关性和统计上显著的改善。事实上，妇科医生和/或医生观察的有利效果几乎可以与女性对其最讨厌症状的自我记录的效果相重叠。
在筛选时和然后在第1天和在2、4、8和12周进行阴道检查。按照下列严重程度评价阴道分泌物、阴道色泽、阴道上皮完整性和阴道上皮表面厚度：没有，轻微，中度或严重。严重程度的定义如下：
a)阴道分泌物
没有萎缩：在阴道壁上注意到正常清洁的分泌物。
轻微：分泌物的表层发硬，用窥镜嵌入困难。
中度：没有充分覆盖整个阴道穹窿，窥镜嵌入时需要润滑，以防止疼痛。
严重：没有分泌物，发炎，溃烂，窥镜嵌入时需要润滑，以防止疼痛。
b)阴道上皮完整性
没有萎缩：正常。
轻微：刮擦时，阴道表面出血。
中度：轻轻触摸时，阴道表面出血。
严重：在触摸之前，阴道表面具有出血斑，并且轻轻触摸时出血。
c)阴道上皮面厚度
没有萎缩：穹窿规则并且有弹性。
轻微：阴道穹窿的规则性差，具有一些弹性。
中度：阴道穹窿平滑，具有一些弹性。
严重：平滑，没有弹性，阴道的上部1/3收缩，或阴道弹性丧失(膀胱突出和直肠突出)。
d)阴道色泽
没有萎缩：粉红色。
轻微：色泽较浅。
中度：色泽发淡。
严重：透明，没有色泽，或发炎。
统计
制作概要表格，其可以表明观察次数，平均值或几何平均值(视情况而定)，标准偏差，标准平均误差，95％双侧置信区间(CI)，连续变量的中间值、最低值和最大值，和每个类型分类数据的百分比。在0.05的双侧显著性水平下进行统计分析，除非另有说明。概要的类型通常由DHEA治疗的剂量水平、0％(安慰剂)、0.25％、0.5％和1.0％DHEA组成。
分析的主要端点由下列组成：
在中度至严重症状(作为受试者最讨厌的症状，由受试者鉴定)中，具有统计上显著的改善。症状严重程度基于严重程度渐增的症状：没有，轻微，中度或严重。分别使用值0、1、2和3来分析这些额定值；所有的受试者必须具有至少一种基准症状，即2或3等级的症状。研究中的症状是阴道干燥、阴道和/或外阴发炎/发痒和与性活动有关的阴道疼痛。
基底旁层细胞统计上显著地减少，表层细胞统计上显著地增加。以百分比来测定数据。还计算成熟值。
阴道pH值统计上显著地降低。
分析人群
意向-治疗(ITT)人群由治疗的受试者组成，其具有基线和至少一种基线后效果评价。可能接受错误治疗的受试者以随机化的形式进行分析。认为这种分析人群是主要的分析人群。在这种人群中，错过基线后观察的受试者具有转入效果分析的最后的值。
符合方案(PP)人群由治疗人群组成，这种治疗人群在整个12周的时点完成了研究，并且没有损害效果数据的主要方案违规。主要方案违规可以在不知情的研究中断之前来确定，基于数据列表的评述和方案偏差的监控记录。在PP人群中，受试者必须在对该受试者的方案规定期间内接受至少90％的所需数量的研究治疗，基于受试者每天的数据。在PP人群中，受试者必须依从探访窗口计划：14天的±3天，和4、8和12周的±7天。在治疗的PP人群中，分析受试者(接受错误治疗，但可以明确地确定所接受的治疗)，条件是：它们没有损害其数据的其它违规。对于效果数据分析来说，PP人群是支持性的人群。
安全人群定义为：接受试验制品(任何剂量的DHEA或安慰剂)给予的所有受试者，和可提供任何安全信息的所有受试者。所有的安全数据分析基于这种人群。分析基于实际上接受的治疗。
效果评价
主要对ITT人群进行效果分析，符合方案人群将提供支持性的效果分析。主要研究目的是：在患有阴道萎缩的绝经后女性中，评价阴道粘膜参数对DHEA局部作用的剂量-反应，具体测定可对滑液鞘产生最大效果的DHEA的最小剂量。致力于该目标的共同主要效果端点是：基底旁层细胞的减少，阴道pH值的降低，表层细胞增加(总的来说，这些端点可以表示为生理参数)和受试者自我记录的最讨厌的症状，包括阴道干燥，阴道和/或外阴发痒/发炎，和与性活动有关的阴道疼痛(总的来说，这些端点可以表示为生理参数)。除了这些主要端点之外，还计算成熟值。自我记录的症状分数采用下列值：没有，轻微，中度或严重，分别使用0、1、2或3的值进行分析。所有的端点相对于安慰剂必须显示统计上显著的效果，因此，对于多个端点，不需要统计上的调节。
分析的主要时点是12周评价，同时提供2、4和8周的额外数据。基线至基线后评价的变化以及与安慰剂的差别将用于分析。
结果
因为基底旁层细胞通常是在患有至少一种中度至严重阴道萎缩症状的绝经后女性的阴道涂片中的主要类型，所以，可以在图22和表6中看到，在治疗的2周，最低剂量的DHEA(0.25％)将基底旁层的％降低29.5±0.51％(从56.0至26.5％)，而对于0.5％和1.0％DHEA剂量，在相同的时间间隔，分别观察到降低37.8±0.46％和36.6％。在12周治疗的标准期间，对于0.25％、0.5％和1.0％DHEA剂量，分别观察到39.5±0.57％(p＜0.000001)、45.6±0.55％(p＜0.000001)和45.2±0.53％(p＜0.000001)的降低，而在安慰剂组中，在任何时间间隔，没有观察到显著的效果。
尽管在12周时在安慰剂组中没有看到对表层细胞％变化的显著效果(表6)，但在0.25％、0.5％和1.0％DHEA组中，分别提高了3.96±0.10％(p＝0.0002)、6.71±0.14％(p＝0.00001)和5.92±0.12％(p＝0.00001)。还可以看到，在0.5％DHEA剂量时，在2周时达到48.0％的最大效果，同时在4和8周，达到84.8％和99.0％的最大效果。在1.0％DHEA剂量时，在2周已经达到最大效果。图23说明了在不同DHEA剂量和时间间隔时的表层细胞的％的绝对值。
在安慰剂组中，在12周时，阴道pH值从6.52±0.13单位降低了0.47±0.11(表6，图24)，同时，在0.25％、0.50％和1.0％DHEA治疗组中，观察到分别从6.49±0.12单位降低了1.12±0.11(p＝0.0005)，从6.56±0.13pH单位降低了1.35±0.3，从6.56±0.13pH单位降低了1.35±0.13，和从6.34±0.3pH单位降低了1.39±0.14(表7)。在相同的表中还可以看到，在0.5％DHEA剂量时，治疗2和4周，对pH值分别达到最大效果的70.6％和94.1％(降低1.36个pH单位)。另一方面，低的0.25％DHEA剂量在12周时只达到0.5％DHEA的最大效果的83.0％。在0.50％和1.0％DHEA剂量之间，在4、8和12周时，没有观察到pH值变化的显著差异(表7)。图24说明了在不同DHEA剂量和时间间隔时的绝对pH值。
所有的女性在登记时必须具有一或多种阴道萎缩的下列症状(自己评价为中度至严重)：干燥，阴道或外阴发炎/发痒或性活动时阴道疼痛。自我鉴定的症状记录为：没有，轻微，中度或严重，分别使用0、1、2和3的值进行分析。正如在表8中所说明的那样，在12周间隔时，在安慰剂组中，最讨厌症状的严重程度降低了0.67±0.15，在0.25％DHEA组中降低1.27±0.16(p＝0.004，相对于安慰剂)，在接受0.5％DHEA的组中降低1.56±0.15(p＜0.0001，相对于安慰剂)，在接受更高的1.0DHEA剂量的组中降低1.37±0.14(p＝0.0008，相对于安慰剂)。图25说明了在不同DHEA剂量和时间间隔时的最讨厌症状的改善程度。将阴道干燥、与性活动有关的疼痛和阴道和/或外阴发炎/发痒确定为基线时的最讨厌症状。在安慰剂组中，阴道干燥解释说明了由参与人所记录的改善％。
如图25所说明，在0.25％DHEA剂量时，最讨厌症状的改善已经高度显著地有了差别(p＝0.004)。在0.25％、0.5％和1.0％组中，在12周时，分数1没有变化或恶化的女性的百分比从安慰剂组中的53.5％分别降至27.5％、17.8％和19.6％(表9)。在安慰剂所治疗女性的21.8％当中，观察到严重程度的类型改善了2或3个类别，而接受0.25％、0.5％和1.0％DHEA制剂的女性中的50.0％、53.3％和47.9％报告了这种重要的改善。与相同DHEA治疗组中的7.5％、20％和10.9％相比较，在安慰剂组中，只有4.6％的女性从严重降低至没有。
在2、4、8和12周的相同时间间隔，在各个研究位点负责该临床试验的妇科医生或医生进行阴道检验，以便评价阴道萎缩症状的严重程度(没有，轻微，中度或严重，分别使用0、1、2和3的值进行分析)，即阴道分泌物、阴道色泽、阴道上皮细胞的完整性和阴道上皮表面的厚度。正如在图26至29中所看到的那样，可以看到阴道萎缩的所有四种症状的时间依赖性和剂量相关性以及高度统计上显著的改善。事实上，妇科医生或医生观察的有利效果几乎可以与女性对其最讨厌症状的自我记录的效果、对阴道基底旁层和表层细胞和pH值(其是DHEA作用的目标参数)的效果相重叠。
图30和31说明了DHEA和其11种代谢物的平均24小时血清甾体水平(由治疗的第1和7天所测定的AUC0-24小时值来计算)(得自于最近的研究)(Labrie，Cusan等人2008)。能够看出，只有血清DHEA和5-二醇(和4-二酮，在第1天)显著地提高，但仍显然在绝经后女性中所测定的极限值范围内(Labrie，Bélanger等人2006)。没有显著地影响血清雌激素(E1、E2和E1S)以及血清雄激素(testo和DHT)。
表6
在用提高剂量的DHEA进行局部治疗期间，
从第1天开始，基底旁层和表层细胞的％变化*
  2周   4周   8周   12周
  基底旁层细胞
  0.0％DHEA   +3.6±0.32   +0.02±0.32   -1.17±0.37   +1.04±0.35
  0.25％″   -29.5±0.51   -38.4±0.51   -40.3±0.55   -39.5±0.57
  0.50％″   -37.8±0.46   -43.4±0.50   -47.8±0.49   -45.6±0.55
  1.0％″   -36.6±0.50   -42.5±051   -43.7±0.50   -45.2±0.53
  2周   4周   8周   12周
  表层细胞
  0.0％DHEA   0.10±0.03   0.37±0.03   0.40±0.03   0.53±0.05
  025％″   2.32±0.07   3.38±008   3.42±0.09   3.96±0.10
  0.50％″   3.22±0.05   5.69±0.09   6.64±0.11   6.71±0.14
  1.0％″   6.26±0.16   6.64±0.14   6.88±0.16   5.92±0.12
＊平均值±SEM    FL270608-1
表7
在用提高剂量的DHEA进行局部治疗期间，
从第1天开始，阴道PH值的变化*
  DHEA剂量   2周   4周   8周   12周
  0.0％DHEA   -0.23±0.08   -0.37±0.09   -0.51±0.10   -0.47±0.11
  0.25％″   -0.76±0.12   -0.93±0.12   -1.09±0.10   -1.12±011
  0.50％″   -0.96±0.14   -1.28±0.12   -1.36±0.12   -1.35±0.13
  1.0％″   -1.13±0.12   -1.30±0.12   -1.41±0.12   -1.39±0.14
＊平均值±SEM    FL270608-2
表8
在用提高剂量的DHEA进行局部治疗期间，
从第1天开始，阴道萎缩的最讨厌症状的变化*
  DHEA剂量   2周   4周   8周   12周
  0.0％ DHEA   -0.49±0.16   -0.79±0.16   -0.61±0.16   -0.67±0.15
  0.25％″   -0.70±0.17   -1.11±0.16   -1.19±0.16   -1.27±0.16
  0.50％″   -0.98±0.15   -1.36±0.15   -1.37±0.17   -1.56±0.15
  DHEA剂量   2周   4周   8周   12周
  1.0％″   -1.00±0.15   -1.29±0.14   -1.38±0.17   -1.37±0.14
＊平均值±SEM    FL270608-3
表9
用％(安慰剂)、0.25％、0.50％和1.0％DHEA治疗12周，从第1天开始的最讨厌症状的变化*。类型(严重→中度→轻微→没有)1的变化定为-1，而类型2的变化定为-2，等等......
Figure GPA00001088707700621
                                       FL270608-4
药物组合物实施例
下面列出的(举例而非限制)是一些药物组合物，其使用优选的活性性甾体前体物DHEA。按照本文所讨论的内容，活性组分的浓度可以在宽范围内变化。可以包括的其它组分的数量和类型在本领域是众所周知的。
实施例A
阴道或口服片剂
  组分   重量％(按全部组合物的重量计算)
  DHEA   5.0
  凝胶   6.5
  乳糖   70.5
  淀粉   18.0
实施例B
1.3ml阴道栓剂
  组分   重量％(按全部组合物的重量计算)
  DHEA   0.50
  Whitepsol H-15基料   99.50
DHEA栓剂是使用Whitepsol H-15基料(得自于Medisca，Montreal，Canada)制作的。可以使用任何其它亲脂性的基料，例如但不限于：黄油，可可脂，Cotomar，Dehydag基料，Fattibase，Hexaride Base 95，Hydrokote，Suppocire，Wecobee，可可脂，Japocire，Ovucire，Massa Estarinum或上述的其它组合。
实施例C
阴道或局部乳膏剂
 组分   重量％(按全部组合物的重量计算)
 DHEA   1.0
 乳化蜡，NF   18.0
 轻质矿物油，NF   12.0
 苯甲醇   1.0
 乙醇，95％，USP   34.0
 纯净水，USP   34.0
阴道或口服胶囊
在上述制剂中，其它性甾体前体物可以代替DHEA。可以包含一种以上的前体物，在这样的情况下，优选，组合的重量百分数是上面实施例中所给出的单一前体物的重量百分数。
已经按照优选实施方案和实施例描述了本发明，但本发明不受此限制。本领域技术人员很容易认识本发明的广泛实用性和范围，其仅仅由本文的专利权利要求来限制。

Claims (38)

1.治疗绝经后女性中由于绝经期所造成的症状或疾病和/或降低获得所述症状或疾病的可能性的方法，所述方法包括：给予需要所述治疗的患者选自脱氢表雄酮、脱氢表雄酮硫酸盐、雄-5-烯-3β，17β-二醇和4-雄甾烯-3，17-二酮的性甾体前体物，其中所述性甾体前体物以治疗数量给予，该治疗数量可以提高循环雄激素代谢物的水平，并且不会使雌二醇的循环水平增加到高于正常绝经后女性中所测定的值，以便避免乳房和子宫癌的危险。
2.权利要求1的方法，其中将性甾体前体物给予到皮肤上。
3.权利要求1的方法，其中阴道内给予性甾体前体物。
4.权利要求1的方法，其中口服给予性甾体前体物。
5.权利要求2的方法，其中性甾体前体物的治疗数量是每天200mg或更少。
6.权利要求2的方法，其中性甾体前体物的治疗数量是每天100mg或更少。
7.权利要求2的方法，其中性甾体前体物的治疗数量是每天30mg或更少。
8.权利要求2的方法，其中性甾体前体物的治疗数量是每天15mg或更少。
9.权利要求3的方法，其中性甾体前体物的治疗数量是每天50mg或更少。
10.权利要求3的方法，其中性甾体前体物的治疗数量是每天25mg或更少。
11.权利要求3的方法，其中性甾体前体物的治疗数量是每天13mg或更少。
12.权利要求3的方法，其中性甾体前体物的治疗数量是每天6.5mg或更少。
13.权利要求4的方法，其中性甾体前体物的治疗数量是每天200mg或更少。
14.权利要求4的方法，其中性甾体前体物的治疗数量是每天100mg或更少。
15.权利要求4的方法，其中性甾体前体物的治疗数量是每天50mg或更少。
16.权利要求1、2、3和4的方法，其中循环雌二醇的平均24小时水平低于10pg/mL。
17.权利要求2的方法，其中借助于选自乳膏剂、洗剂、凝胶、软膏剂、持续释放贴片等等的局部制剂来给予性甾体前体物的治疗数量，和其中所述制剂包含10％的性甾体前体物或包含更少。
18.权利要求2的方法，其中借助于选自乳膏剂、洗剂、凝胶、软膏剂、持续释放贴片等等的局部制剂来给予性甾体前体物的治疗数量，和其中所述制剂包含2.0％的性甾体前体物或包含更少。
19.权利要求3的方法，其中借助于选自乳膏剂、洗剂、凝胶、软膏剂、卵型药丸、栓剂、环等等的阴道内制剂来给予性甾体前体物的治疗数量，和其中所述制剂包含10％的性甾体前体物或包含更少。
20.权利要求3的方法，其中借助于选自乳膏剂、洗剂、凝胶、软膏剂、卵型药丸、栓剂、环等等的阴道内制剂来给予性甾体前体物的治疗数量，和其中所述制剂包含2.0％的性甾体前体物或包含更少。
21.权利要求4的方法，其中借助于选自胶囊、栓塞型胶囊、丸剂、片剂、糖浆剂的口服制剂来给予性甾体前体物的治疗数量。
22.权利要求1的方法，进一步包括给予作为组合治疗一部分的治疗有效量的选择性雌激素受体调节剂。
23.治疗绝经后女性中由于绝经期所造成的症状或疾病和/或降低获得所述症状或疾病的可能性的方法，所述方法包括：给予需要所述治疗的患者选自脱氢表雄酮、脱氢表雄酮硫酸盐、雄-5-烯-3β，17β-二醇和4-雄甾烯-3，17-二酮的性甾体前体物，其中所述性甾体前体物以治疗数量给予，该治疗数量可以提高循环雄激素代谢物的水平，并且进一步包括：给予作为组合治疗一部分的治疗有效量的选择性雌激素受体调节剂，以便降低通常存在于绝经后女性中的乳房和子宫癌的危险，和防止骨骼损失、油脂积聚和II型糖尿病。
24.权利要求21和22的方法，其中选择性的雌激素受体调节剂具有下列化学结构：
Acolbifene(EM-652.HCl；EM-1538)
Figure FPA00001088707600031
25.权利要求1和23的方法，其中由于绝经期所造成的症状或疾病选自：骨质疏松症，阴道萎缩，外阴-阴道干燥，性腺机能减退，性欲降低，皮肤萎缩，结缔组织疾病，尿失禁，乳房、子宫内膜、卵巢和子宫癌，热潮红，肌肉质量损失，胰岛素耐受性，疲劳，精力丧失，衰老，和绝经期的身体症状与迹象
26.治疗绝经后女性中阴道疾病或问题和/或降低获得所述疾病或问题的可能性的方法，所述方法包括：给予需要所述治疗的患者选自脱氢表雄酮、脱氢表雄酮硫酸盐、雄-5-烯-3β，17β-二醇和4-雄甾烯-3，17-二酮的性甾体前体物，其中所述性甾体前体物以治疗数量给予，该治疗数量可以提高循环雄激素代谢物的水平，并且不会使雌二醇水平增加到高于正常绝经后女性中所测定的值。
27.权利要求26的方法，其中阴道内给予性甾体前体物。
28.权利要求27的方法，其中性甾体前体物的治疗数量是每天25mg或更少。
29.权利要求27的方法，其中性甾体前体物的治疗数量是每天13mg或更少。
30.权利要求27的方法，其中性甾体前体物的治疗数量是每天6.5mg或更少。
31.权利要求26的方法，其中阴道疾病选自：阴道干燥，外阴-阴道干燥，阴道瘙痒，阴道萎缩，萎缩性阴道炎，性交疼痛，性活动时阴道出血，性功能障碍，性欲降低，阴道壁的胶原纤维的紧密性丧失，和阴道壁的鞘肌厚度降低。
32.药物组合物，其包含：选自脱氢表雄酮、脱氢表雄酮-硫酸盐、雄-5-烯-3β，17β-二醇和4-雄甾烯-3，17-二酮的性甾体前体物，和进一步包含可药用赋形剂、稀释剂或载体，可药用赋形剂、稀释剂或载体选自：纯或混合的天然或半合成的、饱和、不饱和或氢化脂肪酸的甘油三酯、甘油二酯或甘油一酯；黄油；棕榈油、棕仁油、部分氢化的棉籽油和椰油和其三酸甘油酯衍生物；氢化的脂肪醇和酯；聚烃氧基硬脂酸酯；重排的氢化植物油；衍生自天然植物油的单-、二-、三酸甘油酯的低共熔混合物；三酸甘油酯；Tween 61；可可油；和上述的组合。
33.权利要求31的药物组合物，其中药物组合物是栓剂或卵型药丸，其中可药用赋形剂、稀释剂或载体是Witepsol H-15。
34.权利要求33的药物组合物，其中前体物是DHEA。
35.治疗阴道固有膜层或鞘肌层的症状的方法，该方法包括给予阴道3-13mg日剂量的DHEA。
36.阴道栓剂，相对于栓剂的总重量，其包含0.25-2.00％重量的DHEA，并且进一步包含亲脂性的赋形剂。
37.阴道栓剂，其包含大约0.5％DHEA(按重量计算，相对于栓剂的总重量)，并且进一步包含饱和脂肪酸酯。
38.阴道栓剂，其包含大约0.5％DHEA(按重量计算，相对于栓剂的总重量)和witepsol H-15。
CN200880110988A 2007-08-10 2008-08-08 治疗绝经期的deha组合物 Pending CN101861152A (zh)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910006969.2A CN109893526A (zh) 2007-08-10 2008-08-08 治疗绝经期的deha组合物
CN201510736908.3A CN105412121A (zh) 2007-08-10 2008-08-08 治疗绝经期的deha组合物

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US96427007P 2007-08-10 2007-08-10
US60/964,270 2007-08-10
US96467307P 2007-08-13 2007-08-13
US60/964,673 2007-08-13
PCT/CA2008/001444 WO2009021323A1 (en) 2007-08-10 2008-08-08 Dhea compositions for treating menopause

Related Child Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201910006969.2A Division CN109893526A (zh) 2007-08-10 2008-08-08 治疗绝经期的deha组合物
CN201510736908.3A Division CN105412121A (zh) 2007-08-10 2008-08-08 治疗绝经期的deha组合物
CN2012101093907A Division CN102861335A (zh) 2007-08-10 2008-08-08 治疗绝经期的deha组合物

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN101861152A true CN101861152A (zh) 2010-10-13

Family

ID=40350317

Family Applications (4)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201510736908.3A Pending CN105412121A (zh) 2007-08-10 2008-08-08 治疗绝经期的deha组合物
CN2012101093907A Pending CN102861335A (zh) 2007-08-10 2008-08-08 治疗绝经期的deha组合物
CN201910006969.2A Pending CN109893526A (zh) 2007-08-10 2008-08-08 治疗绝经期的deha组合物
CN200880110988A Pending CN101861152A (zh) 2007-08-10 2008-08-08 治疗绝经期的deha组合物

Family Applications Before (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201510736908.3A Pending CN105412121A (zh) 2007-08-10 2008-08-08 治疗绝经期的deha组合物
CN2012101093907A Pending CN102861335A (zh) 2007-08-10 2008-08-08 治疗绝经期的deha组合物
CN201910006969.2A Pending CN109893526A (zh) 2007-08-10 2008-08-08 治疗绝经期的deha组合物

Country Status (28)

Country Link
US (5) US8268806B2 (zh)
EP (2) EP2185157B1 (zh)
JP (2) JP5725283B2 (zh)
KR (3) KR101850125B1 (zh)
CN (4) CN105412121A (zh)
AR (2) AR068702A1 (zh)
AU (1) AU2008286651B2 (zh)
BR (1) BRPI0815353A2 (zh)
CA (2) CA2696127C (zh)
CO (1) CO6260084A2 (zh)
DK (1) DK2185157T3 (zh)
EA (2) EA020683B1 (zh)
EC (1) ECSP10010016A (zh)
ES (1) ES2888104T3 (zh)
HK (1) HK1217639A1 (zh)
IL (1) IL203747A (zh)
MA (1) MA31694B1 (zh)
MX (1) MX2010001627A (zh)
NO (1) NO20100300L (zh)
NZ (2) NZ583147A (zh)
PE (2) PE20090945A1 (zh)
PH (1) PH12013502291A1 (zh)
PT (1) PT2185157T (zh)
SA (2) SA08290494B1 (zh)
SG (3) SG10201601242TA (zh)
TN (1) TN2010000065A1 (zh)
TW (3) TWI388328B (zh)
WO (1) WO2009021323A1 (zh)

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104271084A (zh) * 2011-12-29 2015-01-07 智利大学 包含dhea或硫酸dhea和任选地包含调节该活性成分的释放的试剂的阴道环,其可用于增加女性中的卵巢储量和用于减轻与绝经相关的症状
CN104540511A (zh) * 2012-07-25 2015-04-22 恩多研究公司 未经受或未患有性交不适或其他外阴阴道萎缩症状的妇女中在阴道内施用普拉酮睾(dhea)后性唤起、性需求、性高潮和/或快感的改善
CN109350624A (zh) * 2018-05-25 2019-02-19 泓博元生命科技（深圳）有限公司 含有nmn和dhea的女性保健组合物、制剂及其制备方法与应用
CN109364171A (zh) * 2018-05-25 2019-02-22 泓博元生命科技（深圳）有限公司 含有nadh和dhea的卵巢保养组合物、制剂及其制备方法
CN114126551A (zh) * 2019-03-29 2022-03-01 B·马特尔 分段式eva阴道内环

Families Citing this family (35)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU7258996A (en) * 1995-10-06 1997-04-28 Arch Development Corporation Methods and compositions for viral enhancement of cell killing
US6465445B1 (en) * 1998-06-11 2002-10-15 Endorecherche, Inc. Medical uses of a selective estrogen receptor modulator in combination with sex steroid precursors
WO2006042409A1 (en) 2004-10-20 2006-04-27 Endorecherche, Inc. Sex steroid precursors alone or in combination with a selective estrogen receptor modulator and/or with estrogens and/or a type 5 cgmp phosphodiesterase inhibitor for the prevention and treatment of vaginal dryness and sexual dysfunction in postmenopausal women
EP2034984A4 (en) 2006-06-02 2013-03-06 Pear Tree Women S Health Care PROCESS FOR TREATING ATROPHIC VAGINITIS
US9284345B2 (en) * 2007-04-12 2016-03-15 Endorecherche, Inc. 17alpha-substituted steroids as systemic antiandrogens and selective androgen receptor modulators
US8268806B2 (en) * 2007-08-10 2012-09-18 Endorecherche, Inc. Pharmaceutical compositions
JP2012523434A (ja) * 2009-04-10 2012-10-04 アミリン・ファーマシューティカルズ，インコーポレイテッド エストロゲン欠乏哺乳類のためのアミリンアゴニスト化合物
US20100317635A1 (en) * 2009-06-16 2010-12-16 Endorecherche, Inc. Treatment of hot flushes, vasomotor symptoms, and night sweats with sex steroid precursors in combination with selective estrogen receptor modulators
US8580294B2 (en) 2010-10-19 2013-11-12 International Partnership For Microbicides Platinum-catalyzed intravaginal rings
US9301920B2 (en) 2012-06-18 2016-04-05 Therapeuticsmd, Inc. Natural combination hormone replacement formulations and therapies
ES2885523T3 (es) 2011-11-23 2021-12-14 Therapeuticsmd Inc Formulaciones y terapias de reposición hormonal de combinación naturales
US20150196640A1 (en) 2012-06-18 2015-07-16 Therapeuticsmd, Inc. Progesterone formulations having a desirable pk profile
US10806740B2 (en) 2012-06-18 2020-10-20 Therapeuticsmd, Inc. Natural combination hormone replacement formulations and therapies
US10806697B2 (en) 2012-12-21 2020-10-20 Therapeuticsmd, Inc. Vaginal inserted estradiol pharmaceutical compositions and methods
US20130338122A1 (en) 2012-06-18 2013-12-19 Therapeuticsmd, Inc. Transdermal hormone replacement therapies
US10568891B2 (en) 2012-12-21 2020-02-25 Therapeuticsmd, Inc. Vaginal inserted estradiol pharmaceutical compositions and methods
US11246875B2 (en) 2012-12-21 2022-02-15 Therapeuticsmd, Inc. Vaginal inserted estradiol pharmaceutical compositions and methods
US10537581B2 (en) 2012-12-21 2020-01-21 Therapeuticsmd, Inc. Vaginal inserted estradiol pharmaceutical compositions and methods
US11266661B2 (en) 2012-12-21 2022-03-08 Therapeuticsmd, Inc. Vaginal inserted estradiol pharmaceutical compositions and methods
US10471072B2 (en) 2012-12-21 2019-11-12 Therapeuticsmd, Inc. Vaginal inserted estradiol pharmaceutical compositions and methods
US9180091B2 (en) 2012-12-21 2015-11-10 Therapeuticsmd, Inc. Soluble estradiol capsule for vaginal insertion
US10137031B2 (en) 2013-11-14 2018-11-27 International Partnership For Microbicides, Inc. Combination therapy intravaginal rings
US9744177B2 (en) 2014-03-10 2017-08-29 Endorecherche, Inc. Treatment of male androgen deficiency symptoms or diseases with sex steroid precursor combined with SERM
RU2016143081A (ru) 2014-05-22 2018-06-26 Терапьютиксмд, Инк. Натуральные комбинированные гормонозаместительные составы и терапии
JP2017523138A (ja) 2014-07-29 2017-08-17 セラピューティックスエムディー インコーポレーテッドＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓｍｄ， Ｉｎｃ． 経皮クリーム
RU2691652C2 (ru) * 2014-10-16 2019-06-17 ДжиТиИкс, ИНК. Способы лечения урологических нарушений с применением селективных модуляторов андрогеновых рецепторов
US10328087B2 (en) 2015-07-23 2019-06-25 Therapeuticsmd, Inc. Formulations for solubilizing hormones
US9862101B2 (en) 2015-12-22 2018-01-09 Varian Semiconductor Equipment Associats, Inc. Self-damping end effector
RU2618428C1 (ru) * 2016-03-24 2017-05-03 Общество с ограниченной ответственностью "Научно-производственное предприятие Лаборатория Матрикс" Комплексное косметическое средство
US9931349B2 (en) 2016-04-01 2018-04-03 Therapeuticsmd, Inc. Steroid hormone pharmaceutical composition
US10286077B2 (en) 2016-04-01 2019-05-14 Therapeuticsmd, Inc. Steroid hormone compositions in medium chain oils
US10285998B1 (en) 2018-04-04 2019-05-14 The Menopause Method, Inc. Composition and method to aid in hormone replacement therapy
JP6945874B2 (ja) * 2019-12-24 2021-10-06 一般財団法人バイオダイナミックス研究所 経口投与用医薬組成物
US11633405B2 (en) 2020-02-07 2023-04-25 Therapeuticsmd, Inc. Steroid hormone pharmaceutical formulations
WO2024068968A1 (en) * 2022-09-29 2024-04-04 Rigshospitalet Inhibition of luteinizing hormone (lh) action as treatment of perimenopausal and postmenopausal symptoms and complications

Family Cites Families (81)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS63104924A (ja) * 1986-10-20 1988-05-10 Kanebo Ltd 膣坐剤
US4835147A (en) 1987-05-06 1989-05-30 City Of Hope Dehydroepiandrosterone therapy for ameleoration of prostate hypertrophy and sexual dysfunction
US5395842A (en) * 1988-10-31 1995-03-07 Endorecherche Inc. Anti-estrogenic compounds and compositions
US5407684A (en) * 1988-12-30 1995-04-18 Virginia Commonwealth University Use of DHEA as a medicinal
US5246704A (en) * 1989-01-23 1993-09-21 Kanebo, Ltd. Vaginal suppository
HU221589B (hu) 1989-03-10 2002-11-28 Endorecherche Inc. Emlő- és méhrák kezelésére alkalmas kombinációs gyógyszerkészítmény és eljárás előállítására
WO1991000731A1 (en) 1989-07-07 1991-01-24 Endorecherche Inc. Combination therapy for prophylaxis and/or treatment of benign prostatic hyperplasia
CA2062792C (en) 1989-07-07 2006-03-21 Fernard Labrie Treatment of androgen-related diseases
HU222501B1 (hu) 1991-06-28 2003-07-28 Endorecherche Inc. MPA-t vagy MGA-t tartalmazó nyújtott hatóanyag-felszabadulású gyógyászati készítmény és eljárás előállítására
US6060503A (en) 1991-12-02 2000-05-09 Endorecherche, Inc. Benzopyran-containing compounds and method for their use
US5776923A (en) * 1993-01-19 1998-07-07 Endorecherche, Inc. Method of treating or preventing osteoporosis by adminstering dehydropiandrosterone
NZ512334A (en) * 1993-01-19 2005-05-27 Endorech Inc Therapeutic methods and delivery systems utilizing sex steroid precursors
JP2698865B2 (ja) * 1994-08-08 1998-01-19 仲昭 大澤 筋緊張性ジストロフィー症治療剤
US5660835A (en) * 1995-02-24 1997-08-26 East Carolina University Method of treating adenosine depletion
US20020032160A1 (en) * 1995-02-24 2002-03-14 Nyce Jonathan W. Compositions & formulations with an epiandrosterone or a ubiquinone & kits & their use for treatment of asthma symptoms & for reducing adenosine/adenosine receptor levels
US5883118A (en) 1996-01-11 1999-03-16 Nova Nordisk A/S Prostatic carcinoma
CA2241623A1 (en) 1996-01-11 1997-07-17 Novo Nordisk A/S Use of 3,4-diphenyl chromans for the manufacture of a pharmaceutical composition for the treatment or prophylaxis of menopausal symptoms
US5726202A (en) 1996-01-11 1998-03-10 Novo Nordisk A/S Benign prostatic hypertrophy
US5747059A (en) 1996-01-11 1998-05-05 Novo Nordisk A/S Atrophy of skin/mucous membrane
BR9706966A (pt) 1996-01-11 1999-05-04 Novo Nordisk As Utilização do enanciômero-l de um composto e processo para tratamento ou profilaxia de câncer da mama
TW397821B (en) 1996-04-19 2000-07-11 American Home Produits Corp 3-[4-(2-phenyl-indole-1-ylmethyl)-phenyl]-acrylamides and 2-phenyl-1-[4-(amino-1-yl-alk-1-ynyl)-benzyl]-1H-indol-5-ol as well as pharmaceutical compositions of estrogenic agents thereof
DE69707189T2 (de) 1996-04-19 2002-06-20 American Home Prod Östrogene Verbindungen
US20040044080A1 (en) * 1997-10-28 2004-03-04 Place Virgil A. Treatment of dyspareunia with topically administered nitroglycerin formulations
US20020099003A1 (en) * 1997-10-28 2002-07-25 Wilson Leland F. Treatment of female sexual dysfunction with vasoactive agents, particularly vasoactive intestinal polypeptide and agonists thereof
US20040014761A1 (en) * 1997-10-28 2004-01-22 Place Virgil A. Treatment of female sexual dysfunction with phosphodiesterase inhibitors
EP1027057A4 (en) 1997-10-28 2003-01-02 Vivus Inc TREATMENT OF FEMALE SEXUAL DISORDERS
US20050070516A1 (en) * 1997-10-28 2005-03-31 Vivus Inc. As-needed administration of an androgenic agent to enhance female desire and responsiveness
US20020013304A1 (en) * 1997-10-28 2002-01-31 Wilson Leland F. As-needed administration of an androgenic agent to enhance female sexual desire and responsiveness
US6013665A (en) * 1997-12-16 2000-01-11 Abbott Laboratories Method for enhancing the absorption and transport of lipid soluble compounds using structured glycerides
CN1879630A (zh) 1998-06-11 2006-12-20 内部研究股份有限公司 雄－5－烯－3β,17β－二醇的药物组合物及其用途
US7005428B1 (en) * 1998-06-11 2006-02-28 Endorecherche, Inc. Medical uses of a selective estrogen receptor modulator in combination with sex steroid precursors
US6465445B1 (en) * 1998-06-11 2002-10-15 Endorecherche, Inc. Medical uses of a selective estrogen receptor modulator in combination with sex steroid precursors
US6007824A (en) 1998-07-09 1999-12-28 Duckett; Melvin J. Natural composition and method for the treatment of sexual dysfunction
US20030181353A1 (en) * 1998-08-03 2003-09-25 Nyce Jonathan W. Composition & use as analgesic, anti-inflammatory, wound healing agent, for treatment of heart conditions, assessment of heart function & tissue & cell protection & healing & reperfusion, mood disorders & symptoms & sequelae of menopause & for inducing unconsciousness, sleep & anesthesia
IT1304190B1 (it) * 1998-12-18 2001-03-08 Euphar Group Srl Clatrati di deidroepiandrosterone e relative composizionifarmaceutiche
US6248363B1 (en) * 1999-11-23 2001-06-19 Lipocine, Inc. Solid carriers for improved delivery of active ingredients in pharmaceutical compositions
US6087362A (en) * 1999-03-16 2000-07-11 Pentech Pharmaceuticals, Inc. Apomorphine and sildenafil composition
US7045513B1 (en) * 1999-03-18 2006-05-16 Genelabs Technologies, Inc. DHEA composition and method
PE20010404A1 (es) * 1999-06-11 2001-04-09 Watson Pharmaceuticals Inc Combinacion de esteroides androgenicos no orales y compuestos estrogenicos y su uso en mujeres
US7452545B2 (en) * 2001-11-13 2008-11-18 Yu Ruey J Oligosaccharide aldonic acids and their topical use
US6335023B1 (en) * 1999-06-30 2002-01-01 Ruey J. Yu Oligosaccharide aldonic acids and their topical use
US20070042060A1 (en) * 1999-07-01 2007-02-22 Thompson Ronald J Methods to treat one or all of the defined etiologies of female sexual Dysfunction
US20050245494A1 (en) * 1999-07-01 2005-11-03 40 J's Llc Methods to treat one or all of the defined etiologies of female sexual dysfunction
US20020165429A1 (en) * 1999-07-01 2002-11-07 40 J's Llc Clitoral sensitizing arrangements
AU5957500A (en) 1999-07-06 2001-01-22 Endorecherche Inc. Methods of treating and/or suppressing weight gain
WO2001054699A1 (en) 2000-01-28 2001-08-02 Endorecherche, Inc. Selective estrogen receptor modulators in combination with estrogens
US20020022052A1 (en) * 2000-04-06 2002-02-21 Dransfield Charles William Transdermal delivery system
US20040198706A1 (en) * 2003-03-11 2004-10-07 Carrara Dario Norberto R. Methods and formulations for transdermal or transmucosal application of active agents
IL145838A (en) 2000-10-16 2008-11-03 Pfizer Prod Inc Use of an estrogen agonist / antagonist to produce a drug for the treatment of vaginitis
US20020107230A1 (en) * 2000-12-22 2002-08-08 Waldon R. Forrest Methods and formulations for the treatment of female sexual dysfunction
US20040092583A1 (en) * 2001-01-02 2004-05-13 Elizabeth Shanahan-Prendergast Treatment for inhibiting neoplastic lesions
AU2002303427A1 (en) * 2001-04-24 2002-11-05 East Carolina University Compositions and formulations with a non-glucocorticoid steroid and/or a ubiquinone and kit for treatment of respiratory and lung disease
AU2002256359A1 (en) 2001-04-24 2002-11-05 Epigenesis Pharmaceuticals, Inc. Antisense and anti-inflammatory based compositions to treat respiratory disorders
AU2002303425A1 (en) * 2001-04-24 2002-11-05 Epigenesis Pharmaceuticals, Inc. Composition, formulations and kit for treatment of respiratory and lung disease with non-glucocorticoid steroids and/or ubiquinone and a bronchodilating agent
US20030216329A1 (en) * 2001-04-24 2003-11-20 Robinson Cynthia B. Composition, formulations & kit for treatment of respiratory & lung disease with dehydroepiandrosterone(s) steroid & an anti-muscarinic agent(s)
WO2002092102A2 (en) 2001-05-16 2002-11-21 Endeavor Pharmaceuticals Treatment of conditions relating to hormone deficiencies by administration of progestins
US20030022875A1 (en) 2001-07-27 2003-01-30 Wilson Leland F. As-needed administration of orally active androgenic agents to enhance female sexual desire and responsiveness
FR2828100B1 (fr) 2001-08-02 2004-09-24 Galderma Res & Dev Composition de type emulsion inverse contenant de la dhea et/ou ses precurseurs ou derives, et ses utilisations en cosmetique et en dermatologie
US20030138434A1 (en) * 2001-08-13 2003-07-24 Campbell Robert L. Agents for enhancing the immune response
US7348352B2 (en) * 2001-10-23 2008-03-25 Bioresponse L.L.C. Diindolylmethane for the treatment of HPV infection
US20040259850A1 (en) * 2001-10-31 2004-12-23 Alves Stephen E. Method for treating or preventing symptoms of hormonal variation including hot flashes
US6824786B2 (en) * 2001-11-27 2004-11-30 Ruey J. Yu Compositions comprising phenyl-glycine derivatives
US20040214898A1 (en) * 2001-11-29 2004-10-28 Steiner Mitchell S. Methods for treating hot flashes
FR2834212B1 (fr) * 2001-12-27 2004-07-09 Besins Int Belgique Utilisation d'une poudre a liberation immediate dans des compositions pharmaceutiques et nutraceutiques
US20040033963A1 (en) * 2002-04-10 2004-02-19 Yu Ruey J. Urea composition
US20060018937A1 (en) * 2002-10-25 2006-01-26 Foamix Ltd. Steroid kit and foamable composition and uses thereof
US20080206161A1 (en) 2002-10-25 2008-08-28 Dov Tamarkin Quiescent foamable compositions, steroids, kits and uses thereof
US20050020552A1 (en) * 2003-07-16 2005-01-27 Chaim Aschkenasy Pharmaceutical composition and method for transdermal drug delivery
CN1930181A (zh) 2004-01-07 2007-03-14 恩多研究公司 螺旋12定向的甾族药品
US20050181057A1 (en) * 2004-02-13 2005-08-18 Rosenberg Paul K. Vaginal lubricant
US20080119445A1 (en) * 2004-09-08 2008-05-22 Woodward John R Methods of female sexual enhancement
US20060276442A1 (en) * 2004-09-08 2006-12-07 Woodward John R Methods of female sexual enhancement
US20060252734A1 (en) * 2004-09-08 2006-11-09 Woodward John R Methods of female sexual enhancement
WO2006042409A1 (en) 2004-10-20 2006-04-27 Endorecherche, Inc. Sex steroid precursors alone or in combination with a selective estrogen receptor modulator and/or with estrogens and/or a type 5 cgmp phosphodiesterase inhibitor for the prevention and treatment of vaginal dryness and sexual dysfunction in postmenopausal women
JP2008517952A (ja) 2004-11-01 2008-05-29 アンドルシェルシュ・インコーポレイテッド 皮膚老化となる可能性を低下させるための、または皮膚老化を処置するためのアンドロゲンの使用
US7709516B2 (en) 2005-06-17 2010-05-04 Endorecherche, Inc. Helix 12 directed non-steroidal antiandrogens
EP1890704A1 (en) 2005-12-16 2008-02-27 Lyle Corporate Development, Inc. Regeneration of vaginal tissue with non-systemic vaginal administration of estrogen
US8021659B2 (en) * 2006-04-28 2011-09-20 Naidu Lp Coenzyme Q10, lactoferrin and angiogenin compositions and uses thereof
JP4179624B2 (ja) * 2006-07-18 2008-11-12 ヒロセ電機株式会社 平型導体用電気コネクタ
US8268806B2 (en) 2007-08-10 2012-09-18 Endorecherche, Inc. Pharmaceutical compositions
US20100317635A1 (en) 2009-06-16 2010-12-16 Endorecherche, Inc. Treatment of hot flushes, vasomotor symptoms, and night sweats with sex steroid precursors in combination with selective estrogen receptor modulators

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104271084A (zh) * 2011-12-29 2015-01-07 智利大学 包含dhea或硫酸dhea和任选地包含调节该活性成分的释放的试剂的阴道环,其可用于增加女性中的卵巢储量和用于减轻与绝经相关的症状
CN104271084B (zh) * 2011-12-29 2017-03-01 智利大学 包含dhea或硫酸dhea和任选地包含调节该活性成分的释放的试剂的阴道环
CN104540511A (zh) * 2012-07-25 2015-04-22 恩多研究公司 未经受或未患有性交不适或其他外阴阴道萎缩症状的妇女中在阴道内施用普拉酮睾(dhea)后性唤起、性需求、性高潮和/或快感的改善
CN111529536A (zh) * 2012-07-25 2020-08-14 恩多研究公司 在阴道内施用普拉酮睾（dhea）后性唤起、性需求、性高潮和/或快感的改善
CN109350624A (zh) * 2018-05-25 2019-02-19 泓博元生命科技（深圳）有限公司 含有nmn和dhea的女性保健组合物、制剂及其制备方法与应用
CN109364171A (zh) * 2018-05-25 2019-02-22 泓博元生命科技（深圳）有限公司 含有nadh和dhea的卵巢保养组合物、制剂及其制备方法
CN114126551A (zh) * 2019-03-29 2022-03-01 B·马特尔 分段式eva阴道内环

Also Published As

Publication number Publication date
AR068702A1 (es) 2009-12-02
TWI388328B (zh) 2013-03-11
PH12013502291B1 (en) 2015-09-07
TW200927136A (en) 2009-07-01
JP5725283B2 (ja) 2015-05-27
EA201000312A1 (ru) 2010-08-30
JP6197292B2 (ja) 2017-09-20
SG10201601242TA (en) 2016-03-30
AU2008286651B2 (en) 2012-11-22
TWI609688B (zh) 2018-01-01
CO6260084A2 (es) 2011-03-22
KR20100061671A (ko) 2010-06-08
KR101638130B1 (ko) 2016-07-08
PE20140925A1 (es) 2014-08-09
JP2013060475A (ja) 2013-04-04
EA020683B1 (ru) 2015-01-30
EP2185157A4 (en) 2010-11-03
US20130005700A1 (en) 2013-01-03
AR114051A2 (es) 2020-07-15
KR20160032257A (ko) 2016-03-23
KR20130103805A (ko) 2013-09-24
NZ583147A (en) 2012-04-27
US8268806B2 (en) 2012-09-18
SA111320726B1 (ar) 2015-08-10
CA2696127C (en) 2017-06-06
CN109893526A (zh) 2019-06-18
BRPI0815353A2 (pt) 2015-06-16
SG183702A1 (en) 2012-09-27
US8957054B2 (en) 2015-02-17
JP2010535717A (ja) 2010-11-25
PT2185157T (pt) 2021-03-15
ES2888104T3 (es) 2021-12-30
US10881650B2 (en) 2021-01-05
TWI565468B (zh) 2017-01-11
US20120283230A1 (en) 2012-11-08
MA31694B1 (fr) 2010-09-01
PH12013502291A1 (en) 2015-09-07
EP2441456A1 (en) 2012-04-18
MX2010001627A (es) 2010-09-14
CA2820566C (en) 2016-09-13
KR101850125B1 (ko) 2018-04-19
US20120322778A1 (en) 2012-12-20
EA201200369A1 (ru) 2012-09-28
KR101680287B1 (ko) 2016-11-28
WO2009021323A1 (en) 2009-02-19
CA2696127A1 (en) 2009-02-19
ECSP10010016A (es) 2010-07-30
SG10201902375XA (en) 2019-04-29
CN105412121A (zh) 2016-03-23
NO20100300L (no) 2010-04-29
NZ598270A (en) 2013-08-30
US20090054383A1 (en) 2009-02-26
US8629129B2 (en) 2014-01-14
EP2185157B1 (en) 2020-12-16
US20210069169A1 (en) 2021-03-11
DK2185157T3 (da) 2021-03-08
CN102861335A (zh) 2013-01-09
IL203747A (en) 2016-09-29
SA08290494B1 (ar) 2013-04-20
AU2008286651A1 (en) 2009-02-19
EP2185157A1 (en) 2010-05-19
TN2010000065A1 (en) 2011-09-26
TW201634051A (zh) 2016-10-01
TW201212922A (en) 2012-04-01
EP2441456B1 (en) 2021-10-06
HK1217639A1 (zh) 2017-01-20
PE20090945A1 (es) 2009-07-08
CA2820566A1 (en) 2009-02-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20210069169A1 (en) Pharmaceutical compositions
AU2012204083C1 (en) DHEA compositions for treating menopause
EA041509B1 (ru) Применение предшественников половых стероидных гормонов в комбинации с селективным модулятором эстрогеновых рецепторов для лечения заболеваний и состояний у постменопаузных женщин

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
REG Reference to a national code

Ref country code: HK

Ref legal event code: DE

Ref document number: 1146472

Country of ref document: HK

RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20101013

RJ01 Rejection of invention patent application after publication
REG Reference to a national code

Ref country code: HK

Ref legal event code: WD

Ref document number: 1146472

Country of ref document: HK