EA020136B1 - Производные пиколинамида в качестве ингибиторов киназы - Google Patents

Производные пиколинамида в качестве ингибиторов киназы Download PDF

Info

Publication number
EA020136B1
EA020136B1 EA201100425A EA201100425A EA020136B1 EA 020136 B1 EA020136 B1 EA 020136B1 EA 201100425 A EA201100425 A EA 201100425A EA 201100425 A EA201100425 A EA 201100425A EA 020136 B1 EA020136 B1 EA 020136B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
pyridin
amino
picolinamide
methylcyclohexyl
fluoro
Prior art date
Application number
EA201100425A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201100425A1 (ru
Inventor
Маттью Т. Бергер
Усок Хан
Цзион Лань
Джизель Нишигучи
Original Assignee
Новартис Аг
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=41228825&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=EA020136(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Новартис Аг filed Critical Новартис Аг
Publication of EA201100425A1 publication Critical patent/EA201100425A1/ru
Publication of EA020136B1 publication Critical patent/EA020136B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/78—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms, with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D213/81—Amides; Imides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4418—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof having a carbocyclic group directly attached to the heterocyclic ring, e.g. cyproheptadine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/444—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with nitrogen as a ring heteroatom, e.g. amrinone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4545—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pipamperone, anabasine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings

Abstract

Изобретение относится к новым соединениям, композициям и способам ингибирования активности провирусной интеграции киназы Мэлони (киназы PIM), связанным с онкогенезом у человека или животного. В некоторых вариантах осуществления соединения и композиции эффективны для ингибирования активности по меньшей мере одной киназы PIM. Новые соединения и композиции можно использовать по отдельности или в комбинации по меньшей мере с одним дополнительным средством, предназначенным для лечения нарушения, опосредуемого серин/треонинкиназой или рецепторной тирозинкиназой, такого как рак.

Description

Настоящее изобретение относится к новым соединениям, их таутомерам и стереоизомерам и их фармацевтически приемлемым солям, сложным эфирам, метаболитам или пролекарствам, композициям новых соединений вместе с фармацевтически приемлемыми носителями и к применению новых соединений по отдельности или в комбинации по меньшей мере с одним дополнительным терапевтическим средством для профилактики или лечения рака.
Уровень техники
Инфицирование ретровирусом Мэлони и интеграция генома в геном клетки-хозяина приводят к развитию лимфом у мышей. Провирусная интеграция киназы Мэлони (киназы ΡΙΜ) идентифицирована как один из частых протоонкогенов, способный транскрипционно активироваться этим явлением ретровирусной интеграции (Сиурсге Н.Т. е! а1., Митше 1еикет1а упиз-шбисеб Т-се11 1ушрбошадеие818: 1п1сдгаΐίοη оГ ргоупизез ίη б18!тс! сбгошо8ота1 гедюи, Се11. 37(1):141-50 (1984); 8еЙеи О., е! а1., Ргоуба1 асбуабои о! 1Не рШабуе оисодеие Р1Ш-1 ίη МиЬУ шбисеб Т-се11 1ушрбоша8 ЕМВО. 1. 4(7):1793-8 (1985)), и тем самым установлена корреляция между сверхэкспрессированием этой киназы и ее онкогенным потенциалом. Анализ гомологии последовательностей показал, что существуют 3 сильно гомологичные киназы Р1Ш (Р1Ш 1, 2 и 3), Р1Ш 1 является протоонкогеном, впервые идентифицированным с помощью ретровирусной интеграции. Кроме того, у трансгенных мышей, сверхэкспрессирующих Р1Ш 1 или Р1Ш 2, обнаруживается повышенная частота Т-клеточных лимфом (Втеиет М. е! а1., Уету б1дб Ггецнеису о! 1ушрбоша тбисбои Ьу сбетюа1 сагс1иодеи ίη р1ш-1 ГОиъдешс тюе. ИаШге. 340(6228):61-3 (1989)), а сверхэкспрессирование в сочетании с с-тус связывают с частотой В-клеточных лимфом (УетЬеек 8. е! а1., Мюе Ьеапид !бе Е ти-тус и Е ши-р1ш-1 баи8деие8 беуе1ор рге-В-се11 1еикет1а ргена1а11у. Мо1. Се11. Вю1. 11(2):1176-9 (1991)). Таким образом, эти модели на животных приводят к сильной корреляции между сверхэкспрессированием Р1Ш и онкогенезом при гематопоэтических злокачественных новообразованиях. В дополнение к данным для этих моделей на животных сверхэкспрессирование Р1Ш обнаружено для многих других новообразований человека.
Сверхэкспрессирование Р1Ш 1, 2 и 3 часто наблюдается для многих гематопоэтических злокачественных новообразований (Аш8ои В. е! а1., Тбе Питан ргоШонсодене ргобис! р33р1ш 18 ехргеззеб битшд Ге!а1 Ьета1оро1е818 апб ίη бгуегзе 1еикет1а8, РИА8 И8А. 86(22):8857-61 (1989); Собеи А.М. е! а1., 1исгеа8еб ехргеззюи оГ !Пе бР1ш-2 деие ίη бишаи сбгошс 1ушрбосубс 1еикет1а аиб иои-Нобдкш 1утр1юта. Ьеик Ьушрб. 45(5):951-5 (2004), Нибтаии А. е! а1., Оеие ехргеззюи 81дна1нге8 8ерага!е В-се11 сбгошс 1ушрбосубс 1еикает1а ргодио8бс 8иЬдгоир8 бейиеб Ьу 2АР-70 и СО38 ехрте88юи 81а1и8, Ееикеш1а. 20:1774-1782 (2006)) и при раке предстательной железы (ΌΙΐΗΐτ^ΙίΗΠίη 8.М., е! а1., Оебиеабои оГ ргодио811с Ьютаткет8 ίη рго8!а!е саисег, №1!иге. 412(6849):822-6 (2001); С1Ьи11 Т.Ь., е! а1., Оуегехрге88юи оГ Р1Ш-1 бштид ргодге88юи оГ рго81аИс абеиосагс1иоша, 1. С1ш. Ра1бо1. 59(3):285-8 (2006)), а сверхэкспрессирование Р1ш 3 часто наблюдается при гепатоцеллюлярной карциноме (Еи)б С., е! а1., ЛЬеггаШ ехрте88юи оГ 8е^^ηе/ιΗ^еοη^ηе кша8е Р1Ш-3 ίη Пера1осе11и1аг сатсшоша беуе1оршей аиб ίΐ8 го1е ίη !Пе ргобГетабои оГ бишаи бера!оша се11 1ше8, Ιηΐ. ί. Саисег. 114:209-218 (2005)) и раке поджелудочной железы (Ь1 Υ.Υ. е! а1., Р1Ш3, ргоЮ-оисодеие \νί!Π 8е^^ие/ίб^еοη^ие кша8е асбуйу, 18 аЬеттаибу ехрге88еб ίη бишаи раистеабс саисег аиб р1ю8р1тогу1а!е8 Ьаб !о Ь1оск Ьаб-теб1а!еб арор!о818 ίη бишаи раистеабс саисег се11 1ше8, Саисег Ве8. 66(13):6741-7 (2006)).
Р1ш 1, 2 и 3 являются серин/треонинкиназами, нормально функционирующими при жизнедеятельности и пролиферации гематопоэтических клеток в ответ на факторы роста и цитокины. Сигналы цитокинов по пути 1ак/8!а! приводят к активации транскрипции генов Р1Ш и синтезу белков. Для обеспечения активности киназы Р1Ш не требуются дополнительные посттрансляционные модификации. Таким образом, передача сигналов в прямом направлении в первую очередь контролируется на уровне транскрипции/трансляции и метаболизма белков. Субстраты киназ Р1Ш включают регуляторы апоптоза, такие как Вс1-2, представитель семейства ВАЭ (Або Т. е! а1., Р1Ш-1 кша8е ргото!е8 шасбуабои оГ !бе рго-арор!обс Ваб рго1етЬу рбо8рбогу1абид ίί ои !бе 8ег112 да!екеерег 81!е: ЕЕВ8 Ьебег8. 571:43-49 (2004)), регуляторы клеточного цикла, такие как р21^ЕА1/С1р1 (^аид Ζ., е! а1., Рбо8рботу1абои оГ !бе се11 сус1е 1пН1Ь1!ог р21С1р1/^АЕ1 Ьу Р1Ш-1 кша8е, ВюсЫш. Вюрбу8 Ас!а. 1593:45-55 (2002)), СОС25А (1999), С-ТАК (Васбшаии М. е! а1., Тбе Оисодешс 8е^^ие/Тб^еοη^ие К1иа8е Р1Ш-1 Рбо8рбогу1а!е8 аиб ΙηΠίόί!8 !бе Асбуйу оГ Сбс25С-а88ос1а!еб Кша8е 1 (С-ТАК1). А поус1 го1е Гог Р1Ш-1 а! !бе О2/М се11 сус1е сбескрош!, ί. Вю1. Сбеш. 179:48319-48328 (2004)) и ИиМА (Вбабасбатуа Ν., е! а1., Р1Ш-1 а88ос1а!е8 \\ί!Η рго!еб1 сошр1ехе8 иесе88агу Гог тбо818, Сбгошо8оша. 111(2):80-95 (2002)) и регулятор синтеза белка 4ЕВР1 (Нашшегшаи Р.8. е! а1., Р1Ш аиб Ак! оисодеие8 аге шбереибеШ геди1а!ог8 оГ беша1оро1ебс се11 дтоМб аиб 8итугуа1, В1ооб. 105(11):4477-83 (2005)). Влияние киназ Р1Ш на эти регуляторы согласуется с ролью в защите от апоптоза и стимулировании пролиферации и роста клеток. Поэтому предполагается, что сверхэкспресси- 1 020136 рование киназ Р1т при раке играет роль при стимулировании выживаемости и пролиферации раковых клеток, и поэтому их ингибирование должно представлять собой эффективный путь лечения раковых заболеваний, при которых они сверхэкспрессируются. В действительности, в нескольких публикациях отмечают, что нарушение экспрессирования киназ Р1т с помощью κί-РНК приводит к ингибированию пролиферации и гибели клеток (Όηί 1.М., е! а1., Апйкепке о11добеохупис1ео!1бе8 !агде!шд !Ье кегшеЛЬгеошпе кшаке Р1т-2 1пЫЬйеб ргоПГегаОоп оГ Όυ-145 се11к, Лс1а РЬагтасо1. 8ίη. 26(3):364-8 (2005); ЕиЩ е! а1. 2005; Ь1 е! а1. 2006). Кроме того, полагают, что мутационная активация некоторых хорошо известных онкогенов при гематопоэтических злокачественных новообразованиях, по меньшей мере частично, оказывает свои воздействия посредством киназ Р1т. Например, направленная понижающая регуляция экспрессирования Р1т нарушает жизнедеятельность гематопоэтических клеток, трансформированных с помощью Е1!3 и ВСЯ/АВЬ (Абат е! а1. 2006). Таким образом, ингибиторы Р1т 1, 2 и 3 должны быть применимы для лечения этих злокачественных новообразований. В дополнение к потенциальной применимости для лечения рака и миелопролиферативных заболеваний, такой ингибитор должен быть полезен для регулирования распространения иммунных клеток при других патологических состояниях, таких как аутоиммунные заболевания, аллергические реакции и синдромы при отторжении трансплантатов органов. В пользу такого заключения свидетельствуют данные о том, что дифференциация ТЬ1 хелперных Т-клеток с помощью 1Ь-12 и ΙΕΝ-α приводит к индукции экспрессирования обеих Р1т 1 и 2 (АЬо Т е! а1., Ехргеккюп оГ Ьитап Р1т ГатПу депек 18 8е1есбуе1у ир-геди1а!еб Ьу су!октек рготобпд Т Ье1рег !уре 1, Ьи! по! Т Ье1рег !уре 2, се11 б!ГГегеп!1а!юп, 1ттипо1оду, 116:82-88 (2005)). Кроме того, экспрессирование киназ Р1т подавляется в обоих типах клеток иммуносупрессорными ТСЕ-(АЬо е! а1., 2005). Эти результаты показывают, что киназы Р1т участвуют в раннем процессе дифференциации хелперных Т-клеток, что координирует иммунные ответы при аутоиммунных заболеваниях, аллергических реакциях и отторжении трансплантатов тканей.
Сохраняется необходимость в соединениях, которые подавляют пролиферацию капилляров, подавляют рост опухолей, лечат рак, модулируют остановку клеточного цикла и/или ингибируют такие молекулы, как Р1т 1, Р1т 2, Р1т 3, и в фармацевтических препаратах и лекарственных средствах, которые содержат такие соединения. Также необходимы способы введения таких соединений, фармацевтических препаратов и лекарственных средств нуждающимся в них пациентам или субъектам.
Краткое изложение сущности изобретения
Настоящее изобретение относится к новым соединениям формулы ΙΙ и к их стереоизомерам, таутомерам и фармацевтически приемлемым солям
в которой Υ обозначает циклогексил, содержащий 1-3 заместителя, выбранных из гидроксилгруппы, аминогруппы, С1-С4-алкила и С1-С4-галогеналкила;
Я1 обозначает водород, ΝΗ2 или галоген;
Я12 в каждом случае независимо выбран из группы, включающей водород и галоген; и
Я5 выбран из группы, включающей циклогексил, фенил и пиридил, где указанный циклогексил, указанный фенил и указанный пиридил, каждый независимо, содержат до 3 заместителей, выбранных из группы, включающей галоген, гидроксигруппу, С1-С4-алкил и ОС1-С4-алкил.
В типичном варианте осуществления соединения формулы ΙΙ или их стереоизомер, таутомер или фармацевтически приемлемая соль выбраны из группы, включающей №(4-((1Я,3Я,4Я,58)-3-амино-4-гидрокси-5-метилциклогексил)пиридин-3-ил)-6-(2,6-дифторфенил)5-фторпиколинамид, №(4-((1Я,38,58)-3-амино-5-метилциклогексил)пиридин-3-ил)-6-(2,6-дифторфенил)-5фторпиколинамид, №(4-((3Я,4Я,58)-3-амино-4-гидрокси-5-метилпиперидин-1-ил)пиридин-3-ил)-6-(2,6-дифторфенил)5-фторпиколинамид,
3-амино-№(4-((3Я,4Я,58)-3 -амино-4-гидрокси-5-метилпиперидин-1-ил)пиридин-3-ил)-6-(2,6дифторфенил)-5-фторпиколинамид, №(4-((1Я,38)-3-аминоциклогексил)пиридин-3-ил)-6-(2,6-дифторфенил)-5-фторпиколинамид и 3-амино-№(4-((1Я,38)-3-аминоциклогексил)пиридин-3 -ил)-6-(2,6-дифторфенил)-5фторпиколинамид.
В других объектах настоящее изобретение относится к способам лечения нарушений, связанных с провирусной интеграцией киназы Мэлони (киназы Р1М), у человека или животного, нуждающегося в таком лечении, включающим введение указанному субъекту соединения формулы ΙΙ в количестве, эф
- 2 020136 фективном для ингибирования активности ΡΙΜ у субъекта.
В других объектах настоящее изобретение относится к способам лечения нарушений, связанных с ΡΙΜ, у человека или животного, нуждающегося в таком лечении, включающим введение указанному субъекту соединения формулы II в количестве, эффективном для уменьшения или предупреждения роста опухоли у субъекта.
В других объектах настоящее изобретение относится к способам лечения нарушений, связанных с ΡΙΜ, у человека или животного, нуждающегося в таком лечении, включающим введение указанному субъекту соединения формулы II в количестве, эффективном для уменьшения или предупреждения роста опухоли у субъекта, в комбинации по меньшей мере с одним дополнительным средством, предназначенным для лечения рака.
В других объектах настоящее изобретение относится к терапевтической композиции, содержащей по меньшей мере одно соединение формулы II в комбинации с одним или большим количеством дополнительных средств, предназначенных для лечения рака, которые обычно используются для лечения рака.
Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, применимы для лечения рака, включая гематопоэтические злокачественные новообразования, карциномы (например, легких, печени, поджелудочной железы, яичников, щитовидной железы, мочевого пузыря или толстой кишки), меланомы, миелоидные нарушения (например, миелолейкоза, множественной миеломы и эритролейкоза), аденомы (например, ворсинчатой аденомы толстой кишки), саркомы (например, остеосаркомы), аутоиммунных заболеваний, аллергических реакций и синдромов отторжения трансплантатов органов.
Настоящее изобретение также относится к композициям, способам применения и способам получения, описанным в подробном описании изобретения.
Описание чертежей
Указанные выше объекты и многие другие преимущества настоящего изобретения будет легче оценить, когда они будут лучше поняты из приведенного ниже подробного описания вместе с прилагаемыми чертежами, на которых представлено следующее.
На фиг. 1 - зависимость для эффективности соединения примера 99 по данным модели ксеротрансплантата КМ811-1ис, описанной в примере 144.
На фиг. 2 - зависимость для эффективности соединения примера 70 по данным модели ксеротрансплантата КМ811-1ис, описанной в примере 144.
На фиг. 3 - зависимость для эффективности соединения примера 96 по данным модели ксеротрансплантата КМ811-1ис, описанной в примере 144.
Подробное описание изобретения
Варианты осуществления относятся к новым соединениям и их стереоизомерам, таутомерам и фармацевтически приемлемым солям формулы II
в которой Υ обозначает циклогексил, содержащий 1-3 заместителя, выбранных из гидроксилгруппы, аминогруппы, С1-С4-алкила и С1-С4-галогеналкила;
В! обозначает водород, ΝΗ2 или галоген;
В12 в каждом случае независимо выбран из группы, включающей водород и галоген; и
В5 выбран из группы, включающей циклогексил, фенил и пиридил, где указанный циклогексил, указанный фенил и указанный пиридил каждый независимо содержит до 3 заместителей, выбранных из группы, включающей галоген, гидроксигруппу, С1-С4-алкил и ОС;-С4-алкил.
В типичном варианте осуществления предпочтительные соединения формулы II или их стереоизомер, таутомер или фармацевтически приемлемая соль выбраны из группы, включающей №(4-((38,58)-3-амино-5-метилциклогексил)пиридин-3-ил)-6-(2,6-дифторфенил)-5фторпиколинамид;
3-амино-№(4-((1К,3К,48,58)-3-амино-4-гидрокси-5-метилциклогексил)пиридин-3-ил)-6-(2,6дифторфенил)пиколинамид;
№(4-((3К,4К,58)-3-амино-4-гидрокси-5-метилпиперидин-1-ил)пиридин-3-ил)-6-(2,6-дифторфенил)5 -фторпиколинамид;
№(4-((3К,4К,58)-3-амино-4-гидрокси-5-метилпиперидин-1-ил)пиридин-3-ил)-6-(2,6-дифторфенил)5 -фторпиколинамид;
3-амино-№(4-((3К,4К,58)-3 -амино-4-гидрокси-5-метилпиперидин-1-ил)пиридин-3-ил)-6-(2,6дифторфенил)-5-фторпиколинамид;
№(4-((3К,4К,58)-3-амино-4-гидрокси-5-метилпиперидин-1-ил)пиридин-3-ил)-6-(2,6-дифтор-3метилфенил) -5 -фторпиколинамид;
- 3 020136
3-амино-Ы-(4-((1К,38)-3-аминоциклогексил)ииридин-3 -ил)-6-(2,6-дифторфенил)-5фторпиколинамид;
Ы-(4-((38)-3-аминоциклогексил)ииридин-3-ил)-6-(2,6-дифторфенил)-5-фторииколинамид;
М-(4-((1К,3К,4К,58)-3-амино-4-гидрокси-5-метилциклогексил)ииридин-3-ил)-6-(2,6-дифторфенил)5 -фторпиколинамид;
М-(4-((1К,38,5§)-3-амино-5-метилциклогексил)ииридин-3-ил)-6-(2,6-дифторфенил)-5фторпиколинамид;
М-(4-((3К,4К,5§)-3-амино-4-гидрокси-5-метилиииеридин-1-ил)ииридин-3-ил)-6-(2,6-дифторфенил)5 -фторииколинамид;
М-(4-((1К,38)-3-аминоциклогексил)ииридин-3-ил)-6-(2,6-дифторфенил)-5-фторииколинамид;
3-амино-Ы-(4-((3К,4К,58)-3 -амино-4-гидрокси-5-метилиииеридин-1-ил)ииридин-3-ил)-6-(2,6дифторфенил)-5-фторииколинамид и
3-амино-Ы-(4-((1К,38)-3-аминоциклогексил)ииридин-3 -ил)-6-(2,6-дифторфенил)-5фторииколинамид.
В других объектах настоящее изобретение относится к сиособам лечения нарушений, связанных с ировирусной интеграцией киназы Мэлони (киназы ΡΙΜ), у человека или животного, нуждающегося в таком лечении, включающим введение указанному субъекту соединения формулы II в количестве, эффективном для ингибирования активности ΡΙΜ у субъекта.
В других объектах настоящее изобретение относится к сиособам лечения нарушений, связанных с ΡΙΜ, у человека или животного, нуждающегося в таком лечении, включающим введение указанному субъекту соединения формулы II в количестве, эффективном для уменьшения или иредуиреждения роста оиухоли у субъекта. В других объектах настоящее изобретение относится к сиособам лечения нарушений, связанных с ΡΓΜ, у человека или животного, нуждающегося в таком лечении, включающим введение указанному субъекту соединения формулы I или II в количестве, эффективном для уменьшения или иредуиреждения роста оиухоли у субъекта, в комбинации ио меньшей мере с одним доиолнительным средством, иредназначенным для лечения рака.
В другом объекте настоящее изобретение относится к тераиевтической комиозиции, содержащей ио меньшей мере одно соединение формулы II в комбинации с одним или большим количеством доиолнительных средств, иредназначенных для лечения рака, которые обычно исиользуются для лечения рака. Таким образом, настоящее изобретение относится к фармацевтической комиозиции, содержащей соединение формулы II.
Предиочтительным вариантом осуществления этого объекта является фармацевтическая комиозиция, содержащая соединение, выбранное из груииы, включающей
М-(4-((38,5§)-3-амино-5-метилциклогексил)ииридин-3-ил)-6-(2,6-дифторфенил)-5фторииколинамид;
3-амино-Ы-(4-((1К,3К,4§,58)-3-амино-4-гидрокси-5-метилциклогексил)ииридин-3-ил)-6-(2,6дифторфенил)ииколинамид;
М-(4-((3К,4К,5§)-3-амино-4-гидрокси-5-метилиииеридин-1-ил)ииридин-3-ил)-6-(2,6-дифторфенил)5-фторииколинамид;
3-амино-Ы-(4-((1К,38)-3-аминоциклогексил)ииридин-3 -ил)-6-(2,6-дифторфенил)-5фторииколинамид;
М-(4-((38)-3-аминоциклогексил)ииридин-3-ил)-6-(2,6-дифторфенил)-5-фторииколинамид;
М-(4-((1К,3К,4К,58)-3-амино-4-гидрокси-5-метилциклогексил)ииридин-3-ил)-6-(2,6-дифторфенил)5-фторииколинамид;
М-(4-((1К,38,5§)-3-амино-5-метилциклогексил)ииридин-3-ил)-6-(2,6-дифторфенил)-5фторииколинамид;
М-(4-((3К,4К,5§)-3-амино-4-гидрокси-5-метилиииеридин-1-ил)ииридин-3-ил)-6-(2,6-дифторфенил)5-фторииколинамид;
М-(4-((1К,38)-3-аминоциклогексил)ииридин-3-ил)-6-(2,6-дифторфенил)-5-фторииколинамид;
3-амино-Ы-(4-((3К,4К,58)-3 -амино-4-гидрокси-5-метилиииеридин-1-ил)ииридин-3-ил)-6-(2,6дифторфенил)-5-фторииколинамид;
3-амино-Ы-(4-((1К,38)-3-аминоциклогексил)ииридин-3 -ил)-6-(2,6-дифторфенил)-5фторииколинамид;
М-(4-((3К,4К,5§)-3-амино-4-гидрокси-5-метилиииеридин-1-ил)ииридин-3-ил)-6-(2,6-дифторфенил)5-фторииколинамид;
3-амино-Ы-(4-((3К,4К,58)-3 -амино-4-гидрокси-5-метилиииеридин-1-ил)ииридин-3-ил)-6-(2,6дифторфенил)-5-фторииколинамид и
Ν-(4-((3Ε,4Κ,58)-3 -амино-4-гидрокси-5 -метилиииеридин-1 -ил)ииридин-3 -ил)-6-(2,6-дифтор-3 метилфенил)-5-фторииколинамид.
Другой иредиочтительный вариант осуществления относится к фармацевтической комиозиции, доиолнительно содержащей доиолнительное средство, иредназначенное для лечения рака, иричем иредиочтительное доиолнительное средство выбрано из груииы, включающей иринотекан, тоиотекан, гемци
- 4 020136 табин, 5-фторурацил, лейковорин карбоплатин, цисплатин, таксаны, тезацитабин, циклофосфамид, алкалоиды барвинка, иматиниб (Глеевек), антрациклины, ритуксимаб и трастузумаб.
Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, применимы для лечения рака, включая гематопоэтические злокачественные новообразования, карциномы (например, легких, печени, поджелудочной железы, яичников, щитовидной железы, мочевого пузыря или толстой кишки), меланомы, миелоидные нарушения (например, миелолейкоза, множественной миеломы и эритролейкоза), аденомы (например, ворсинчатой аденомы толстой кишки), саркомы (например, остеосаркомы), аутоиммунных заболеваний, аллергических реакций и синдромов отторжения трансплантатов органов.
В другом объекте настоящее изобретение относится к применению соединения формулы II для приготовления лекарственного средства, предназначенного для лечения патологического состояния путем модуляции активности провирусной интеграции киназы Мэлони (киназы ΡΙΜ). В предпочтительном варианте осуществления этого объекта настоящего изобретения патологическим состоянием является рак, выбранный из группы, включающей карциному легких, поджелудочной железы, щитовидной железы, яичников, мочевого пузыря, молочной железы, предстательной железы или толстой кишки, меланому, миелолейкоз, множественную миелому и эритролейкоз, ворсинчатую аденому толстой кишки и остеосаркому.
В другом объекте настоящее изобретение относится к способам ингибирования активности по меньшей мере одной киназы, выбранной из группы, включающей Р1т 1, Р1т 2 и Р1т 3, у субъекта или лечения биологического патологического состояния, опосредуемого по меньшей мере одной из Р1т 1, Р1т 2 и Р1т 3, у человека или животного, нуждающегося в таком лечении, включающим введение субъекту по меньшей мере одного соединения формулы I или II в количестве, эффективном для ингибирования киназы у субъекта. Терапевтические соединения применимы для лечения пациентов, нуждающихся в таких ингибиторах (например, страдающих от рака, опосредуемого аномальной передачей сигналов рецептора серин/треонинкиназы).
Определения.
Ингибитор Р!М используется в настоящем изобретении для обозначения соединения, которое обладает значением ГС50 для активности киназы Р[М. равным не более примерно 100 мкМ и чаще не более примерно 50 мкМ, полученным при исследованиях расходования при воздействии Р^, описанных ниже в настоящем изобретении.
Термин алкил означает алкильные группы, которые не содержат гетероатомы. Этот термин включает алкильные группы с линейной цепью, такие как метил, этил, пропил, бутил, пентил, гексил, гептил, октил, нонил, децил, ундецил, додецил и т.п. Термин также включает обладающие разветвленной цепью изомеры алкильные группы с линейной цепью, включая, но не ограничиваясь только ими, следующие, которые приведены в качестве примера: -СН(СН3)2, -СН(СН3)(СН2СН3), -СН(СН2СН3)2, -С(СН3)3, -С(СН2СНз)з, -СН2СН(СНз)2, -СН2СН(СНз)(СН2СНз), -СН2СН(СН2СНз)2, -СН2С(СНз)з, -СН2С(СН2СНз)з, -СН(СНз)СН(СНз)(СН2СНз), -СН2СН2СН(СНз)2, -СН2СН2СН(СНз)(СН2СНз), -СН2СН2СН(СН2СНз)2, -СН2СН2С(СНз)з, -СН2СН2С(СН2СНз)з, -СН(СНз)СН2СН(СНз)2, -СН(СНз)СН(СНз)СН(СНз)2,
-СН(СН2СН3)СН(СН3)СН(СН3)(СН2СН3) и др. Таким образом, выражение алкильные группы включает первичные алкильные группы, вторичные алкильные группы и третичные алкильные группы. Предпочтительные алкильные группы включают обладающие линейной и разветвленной цепью алкильные группы, содержащие от 1 до 12 атомов углерода. Предпочтительное определение алкила относится к обладающим линейной цепью С1-С4-алкильным группам, таким как метил, этил, н-пропил и н-бутил. Предпочтительное определение алкила также включает разветвленные С3-С5-алкильные группы, включая СН(СНз)2, СН2СН(СНз)2, СН(СНз)СН2СНз, С(СНз)з, СН(СНз)СН2СН2СНз, СН(СНз)СН(СНзЦ СН2СН(СНз)СН2СНз, СН2СН2СН(СНз)2, СН(СН2СНз)2 и т.п.
Термин алкенил означает алкильные группы, определенные выше, в которых содержится по меньшей мере один ненасыщенный фрагмент, т.е. в котором два соседних атома углерода связаны двойной связью. Термин алкинил означает алкильные группы, в которых два соседних атома углерода связаны тройной связью. Термин алкоксигруппа означает ОК, где Я обозначает алкил.
При использовании в настоящем изобретении термин галоген означает хлоридную, бромидную, фторидную и йодидную группы. Галогеналкил означает алкильный радикал, замещенный одним или большим количеством атомов галогенов. Таким образом, термин галогеналкил включает моногалогеналкил, дигалогеналкил, тригалогеналкил и т.п. Типичные моногалогеналкильные группы включают -СН2Р, -СН2С1, -СН2СН2Р, -СН2СН2С1, -СН(Р)СН3, -СН(С1)СН3; типичные дигалогеналкильные группы включают СНС12, -СНР2, -СС12СН3, -СН(С1)СН2С1, -СН2СНС12, -СН2СНР2; типичные тригалогеналкильные группы включают -СС13, -СР3, -СС12СН2С1, -СР2СН2Р, -СН(С1)СНС12, -СН(Р)СНР2 и типичные пергалогеналкильные группы включают -СС13, -СР3, -СС12СС13, -СР2СР3.
Аминогруппа в настоящем изобретении означает группу -ΝΉ2, которая может быть замещенной с образованием -ΝΚΚ'. Термин алкиламиногруппа в настоящем изобретении означает группу -ΝΚΚ', в которой Я и Я' все независимо выбраны из группы, включающей водород и низш. алкил. Термин ариламиногруппа в настоящем изобретении означает группу -ΝΚΚ', в которой Я обозначает арил и Я' обозначает водород, низш. алкил или арил. Термин арилалкиламиногруппа в настоящем изобретении
- 5 020136 означает группу -ΝΚΚ', в которой К обозначает низш. арилалкил и К' обозначает водород, низш. алкил, арил или низш. арилалкил. Термин цианогруппа означает группу -ΟΝ. Термин нитрогруппа означает группу -ΝΟ2.
Термин алкоксиалкил означает группу -а1к1-О-а1к2, в которой а1к| обозначает алкил или алкенил и а1к2 обозначает алкил или алкенил. Термин низш. алкоксиалкил означает алкоксиалкил, где а1к3 обозначает низш. алкил или низш. алкенил и а1к2 обозначает низш. алкил или низш. алкенил. Термин арилоксиалкил означает группу -алкил-О-арил. Термин арилалкоксиалкил означает группу алкиленил-О-арилалкил, в которой арилалкил означает низш. арилалкил.
Термин аминокарбонил в настоящем изобретении означает группу -ϋ(Ο)-ΝΗ2. Замещенный аминокарбонил в настоящем изобретении означает группу -ί.'(Ο)-ΝΡΡ'. в которой К обозначает низш. алкил и К' обозначает водород или низш. алкил. В некоторых вариантах осуществления К и К' вместе с присоединенным к ним атомом Ν могут образовать гетероциклоалкилкарбонильную группу. Термин ариламинокарбонил в настоящем изобретении означает группу С(О)-ПКК', в которой К обозначает арил и К' обозначает водород, низш. алкил или арил. арилалкиламинокарбонил в настоящем изобретении означает группу -С(О)-ПКК', в которой К обозначает низш. арилалкил и К' обозначает водород, низш. алкил, арил или низш. арилалкил.
Аминосульфонил в настоящем изобретении означает группу -8(Ο)2-ΝΗ2. Замещенный аминосульфонил в настоящем изобретении означает группу -8(О)2-ПКК', в которой К обозначает низш. алкил и К' обозначает водород или низш. алкил. Термин арилалкиламиносульфониларил в настоящем изобретении означает группу -арил-8(О)2-ПН-арилалкил, в которой арилалкил представляет собой низш. арилалкил.
Карбонил означает двухвалентную группу -С(О). Карбоксигруппа означает -С(=О)-ОН. Алкоксикарбонил означает сложный эфир -С(=О)-ОК, в котором К обозначает алкил. Низш. алкоксикарбонил означает сложный эфир -С(=О)-ОК, в котором К обозначает низш. алкил. Циклоалкоксикарбонил означает -С(=О)-ОК, в котором К обозначает циклоалкил.
Циклоалкил означает моно- или полициклический, гетероциклический или карбоциклический алкильный заместитель. Карбоциклоалкильные группы являются циклоалкильными группами, в которых все кольцевые атомы являются атомами углерода. Типичные циклоалкильные заместители содержат от З до 8 входящих в главную цепь (т.е. в кольцо) атомов, в которых каждый атом главной цепи является атомом углерода или гетероатомом. Термин гетероциклоалкил в настоящем изобретении означает циклоалкильные заместители, которые содержат в кольцевой структуре от 1 до 5 и чаще от 1 до 4 гетероатомов. Подходящими гетероатомами, использующимися в соединениях, предлагаемых в настоящем изобретении, являются азот, кислород и сера. Типичные гетероциклоалкильные фрагменты включают, например, морфолиновую группу, пиперазинил, пиперидинил и т.п. Карбоциклоалкильные группы представляют собой циклоалкильные группы, в которых все кольцевые атомы являются атомами углерода. При использовании в связи с циклоалкильными заместителями термин полициклический в настоящем изобретении означает конденсированные и неконденсированные циклоалкильные структуры. Термины частично ненасыщенный циклоалкил, частично насыщенный циклоалкил и циклоалкенил, все, означают циклоалкильную группу, в которой содержится по меньшей мере один ненасыщенный фрагмент, т.е. в которой два соседних атома углерода связаны двойной связью или тройной связью. Иллюстративные примеры включают циклогексенил, циклогексинил, циклопропенил, циклобутинил и т.п.
Термины замещенный гетероцикл, или гетероциклическая группа, или гетероцикл при использовании в настоящем изобретении означают любое 3- или 4-членное кольцо, содержащее гетероатом, выбранный из группы, включающей азот, кислород и серу, или 5- или 6-членное кольцо, содержащее от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из группы, включающей азот, кислород и серу; где 5-членное кольцо содержит 0-2 двойных связей и 6-членное кольцо содержит 0-3 двойных связей; где атомы азота и серы необязательно могут быть окислены; где атомы азота и серы необязательно могут кватернизованы; и включает любую бициклическую группу, в которой любое из указанных выше гетероциклических колец сконденсировано с бензольным кольцом или другим 5- или 6-членным гетероциклическим кольцом, независимо определенным выше.
Термин гетероциклоалкил при использовании в настоящем изобретении означает 5- или 6-членное кольцо, содержащее от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из группы, включающей азот, кислород и серу, причем кольцо не содержит двойных связей. Например, термин гетероцикло-С5-алкил означает 6-членное кольцо, содержащее 5 атомов углерода и гетероатом, такой как Ν. Таким образом, термин гетероцикл включает кольца, в которых азот является гетероатомом, а также частично и полностью насыщенные кольца. Предпочтительные гетероциклы включают, например, диазепинил, пиррил, пирролинил, пирролидинил, пиразолил, пиразолинил, пиразолидинил, имидазолил, имидазолинил, имидазолидинил, пиридил, пиперидинил, пиразинил, пиперазинил, Ν-метилпиперазинил, азетидинил, Ν-метилазетидинил, пиримидинил, пиридазинил, оксазолил, оксазолидинил, изоксазолил, изоазолидинил, морфолинил, тиазолил, тиазолидинил, изотиазолил, изотиазолидинил, индолил, хинолинил, изохинолинил, бензимидазолил, бензотиазолил, бензоксазолил, фурил, тиенил, триазолил и бензотиенил.
- 6 020136
Гетероциклические фрагменты могут быть незамещенными или монозамещенными или дизамещенными различными заместителями, независимо выбранными из группы, включающей гидроксигруппу, галоген, оксогруппу (С=О), алкилиминогруппу (ΚΝ=, в которой К обозначает низш. алкил или низш. алкоксигруппу), аминогруппу, алкиламиногруппу, диалкиламиногруппу, ациламиноалкил, алкоксигруппу, тиоалкоксигруппу, полиалкоксигруппу, низш. алкил, циклоалкил или галогеналкил.
Гетероциклические группы могут быть присоединены в разных положениях, как это должно быть очевидно специалистам в области органической и медицинской химии в связи с раскрытием в настоящем изобретении.
Типичные гетероциклилы включают, например, имидазолил, пиридил, пиперазинил, пиперидинил, азетидинил, тиазолил, фуранил, триазолил бензимидазолил, бензотиазолил, бензоксазолил, хинолинил, изохинолинил, хиназолинил, хиноксалинил, фталазинил, индолил, нафтпиридинил, индазолил и хинолизинил.
Арил означает необязательно замещенные моноциклические и полициклические ароматические группы, содержащие в главной цепи от 3 до 14 атомов углерода или гетероатомов и включают карбоциклические арильные группы и гетероциклические арильные группы. Карбоциклические арильные группы представляют собой арильные группы, в которых все кольцевые атомы ароматического кольца являются атомами углерода. Термин гетероарил в настоящем изобретении означает арильные группы, содержащие от 1 до 4 гетероатомов в качестве кольцевых атомов ароматического кольца, а остальные кольцевые атомы являются атомами углерода. При использовании в связи с арильными заместителями термин полициклический арил в настоящем изобретении означает конденсированные и неконденсированные циклические структуры, в которых по меньшей мере одна циклическая структура является ароматической, такой как, например, бензодиоксозоловая группа (которая содержит гетероциклическую структуру, сконденсированную с фенильной группой, т.е. нафтил и т.п). Типичные арильные фрагменты, использующиеся в качестве заместителей в соединениях, предлагаемых в настоящем изобретении, включают фенил, пиридил, пиримидинил, тиазолил, индолил, имидазолил, оксадиазолил, тетразолил, пиразинил, триазолил, тиофенил, фуранил, хинолинил, пуринил, нафтил, бензотиазолил, бензопиридил и бензимидазолил и т.п.
Необязательно замещенный или замещенный означает замещение одного или большего количества атомов водорода одновалентным или двухвалентным радикалом. Подходящие замещающие группы включают, например, гидроксигруппу, нитрогруппу, аминогруппу, иминогруппу, цианогруппу, галоген, тиогруппу, сульфонил, тиоамидную группу, амидиновую группу, имидино, оксогруппу, оксамидиновую группу, метоксамидиновую группу, имидино, гуанидиновую группу, сульфонамидную группу, карбоксигруппу, формил, низш. алкил, галоген-низш. алкил, низш. алкиламиногруппу, галоген-низш. алкиламиногруппу, низш. алкоксигруппу, галоген-низш. алкоксигруппу, низш. алкоксиалкил, алкилкарбонил, аминокарбонил, арилкарбонил, арилалкилкарбонил, гетероарилкарбонил, гетероарилалкилкарбонил, алкилтиогруппу, аминоалкил, цианоалкил, арил и т.п.
Замещающая группа сама может быть замещенной. Заместителем замещающей группы может быть карбоксигруппа, галоген, нитрогруппа, аминогруппа, цианогруппа, гидроксигруппа, низш. алкил, низш. алкоксигруппа, аминокарбонил, -8К, тиоамидная группа, -8О3Н, -8О2К или циклоалкил, в которых К обычно обозначает водород, гидроксигруппу или низш. алкил.
Если замещенный заместитель включает группу, обладающую линейной цепью, то замещение может происходить внутри цепи (например, 2-гидроксипропил, 2-аминобутил и т.п.) или в конце цепи (например, 2-гидроксиэтил, 3-цианопропил и т.п.). Замещенные заместители могут представлять собой обладающую линейной цепью, разветвленную или циклическую группировку ковалентно связанных атомов углерода или гетероатомов. Следует понимать, что приведенные выше определения не включают недопустимые схемы замещения (например, метил, замещенный 5 фторидными группами, или атом галогена, замещенный другим атомом галогена). Такие недопустимые схемы замещения хорошо известны специалисту в данной области техники.
Специалистам в данной области техники должно быть понятно, что соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, или их стереоизомеры, а также фармацевтически приемлемые соли, сложные эфиры, метаболиты и пролекарства любого из них могут подвергаться таутомерным превращениям и поэтому могут существовать в разных таутомерных формах, в которых протон одного атома молекулы перемещается к другому атому и химические связи между атомами молекулы соответствующим образом перестраиваются. См., например, Матей, Лбхапсеб Отдашс Сйет181ту: Кеасйопк, Месйашктк аиб 81гнсШгс5. Еоийй Εάίίίοη, 1ойи \УПеу & 8он5. радек 69-74 (1992). При использовании в настоящем изобретении термин таутомер означает соединения, образованные путем перемещения протона, и следует понимать, что все таутомерные формы, если они могут существовать, входят в объем настоящего изобретения.
Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, а также фармацевтически приемлемые соли, сложные эфиры, метаболиты и пролекарства любого из них могут содержать асимметрично замещенные атомы углерода. Такие асимметрично замещенные атомы углерода могут привести к соединениям, предлагаемым в настоящем изобретении, существующим в энантиомерных, диастереоизомерных и других стереоизомерных формах, которые с помощью обозначений абсолютных стереохимических конфигура
- 7 020136 ций можно обозначить как (К)- или (8)-формы. Поэтому все такие возможные изомеры, отдельные стереоизомеры в их оптически чистых формах, их смеси, рацемические смеси (или рацематы), смеси диастереоизомеров, а также отдельные диастереоизомеры соединений, предлагаемых в настоящем изобретении, входят в объем настоящего изобретения. Термины 8 и К конфигурация при использовании в настоящем изобретении обладают значениями, определенными в публикации ШРЛС 1974 Кесоттеибайоик Гог 8ес1юи Е, Еипбатеи1а1 81егеосйетщ1гу, Риге Арр1. С11ст. 45:13-30 (1976). Обозначения α и β используются для определения положений циклов в циклических соединениях. α-Положение в рассматриваемой плоскости является положением, в котором предпочтительный заместитель расположен в положении с меньшим номером. Заместители, расположенные с противоположной стороны рассматриваемой плоскости, отмечают символом β. Следует отметить, что эти обозначения отличаются от обозначений циклических стереоизомеров, для которых α означает ниже плоскости и обозначает абсолютную конфигурацию. Термины α- и β-конфигурация при использовании в настоящем изобретении обладают значениями, определенными в публикации Сйет1са1 АЬйгасй 1ибех Сшбе-Арреиб1х IV (1987), рагадгарй 203.
При использовании в настоящем изобретении термин фармацевтически приемлемые соли означает соли нетоксичной кислоты или соли нетоксичного щелочно-земельного металла соединений формулы I или II. Эти соли можно получить ίη 8Йи при окончательном выделении и очистке соединений формулы I или II или путем раздельных реакций основных или кислотных групп с подходящей органической или неорганической кислотой или основанием соответственно. Типичные соли включают, но не ограничиваются только ими, следующие: ацетат, адипат, альгинат, цитрат, аспартат, бензоат, бензолсульфонат, бисульфат, бутират, камфорат, камфорсульфонат, диглюконат, циклопентанпропионат, додецилсульфат, этансульфонат, глюкогептаноат, глицерофосфат, гемисульфат, гептаноат, гексаноат, фумарат, гидрохлорид, гидробромид, гидройодид, 2-гидроксиэтансульфонат, лактат, малеат, метансульфонат, никотинат, 2-нафталинсульфонат, оксалат, памоат, пектинат, персульфат, 3-фенилпропионат, пикрат, пивалат, пропионат, сукцинат, сульфат, тартрат, тиоцианат, п-толуолсульфонат и ундеканоат. Кроме того, основные азотсодержащие группы можно кватернизировать такими реагентами, как низш. алкилгалогениды, такие как метил-, этил-, пропил- и бутилхлориды, -бромиды и -йодиды; диалкилсульфаты, такие как диметил-, диэтил-, дибутил- и диамилсульфаты, галогениды с длинными цепями, такие как децил-, лаурил-, миристил- и стеарилхлориды, -бромиды и -йодиды, арилалкилгалогениды, такие как бензил- и фенетилбромиды и др. Таким образом, получают растворимые или диспергирующиеся в воде или масле продукты.
Примеры кислот, которые можно использовать для получения фармацевтически приемлемых солей присоединения с кислотами, включают такие неорганические кислоты, как хлористо-водородная, азотная, серная и фосфорная кислоты, и такие органические кислоты, как щавелевая, малеиновая, метансульфоновая, янтарная и лимонная кислоты. Соли присоединения с основаниями можно получить ίη δίΐιι при окончательном выделении и очистке соединений формулы (I) или путем раздельных реакций кислотных групп карбоновых кислот с подходящим основанием, таким как гидроксид, карбонат или бикарбонат фармацевтически приемлемого катиона металла, или с аммиаком или с первичным, вторичным или третичным органическим амином. Фармацевтически приемлемые соли включают, но не ограничиваются только ими, соли, содержащие катионы щелочных и щелочно-земельных металлов, такие как соли натрия, лития, калия, кальция, магния, алюминия и т.п., а также нетоксичные соли аммония, четвертичного аммония и аминов, включая, но не ограничиваясь только ими, соли аммония, тетраметиламмония, тетраэтиламмония, метиламина, диметиламина, триметиламина, триэтиламина, этиламина и т.п. Другие типичные органические амины, применяющиеся для получения солей присоединения с основаниями, включают диэтиламин, этилендиамин, этаноламин, диэтаноламин, пиперазин и т.п.
При использовании в настоящем изобретении термин фармацевтически приемлемый сложный эфир означает сложные эфиры, которые гидролизуются ίη у1уо, и включают такие, которые легко разрушаются в организме человека с высвобождением исходного соединения или его соли. Подходящие сложноэфирные группы включают, например, образованные из фармацевтически приемлемых алифатических карбоновых кислот, предпочтительно алканкарбоновых, алкенкарбоновых, циклоалканкарбоновых и алкандикарбоновых, в которых каждый алкильный или алкенильный фрагмент предпочтительно содержит не более 6 атомов углерода. Типичные примеры предпочтительных сложных эфиров включают, но не ограничиваются только ими, формиаты, ацетаты, пропионаты, бутираты, акрилаты и этилсукцинаты.
Термин фармацевтически приемлемые пролекарства при использовании в настоящем изобретении означает такие пролекарства соединений, предлагаемых в настоящем изобретении, которые с медицинской точки зрения применимы для взаимодействия с тканями человека и низших животных без проявления нежелательной токсичности, раздражения, аллергической реакции и т.п., характеризуются разумным соотношением польза/риск и эффективны для применения по назначению, а также, когда это возможно, цвиттерионные формы соединений, предлагаемых в настоящем изобретении. Термин пролекарство означает соединения, которые быстро подвергаются превращению ίη у1уо и образуют исходные соединения указанной выше формулы, например, путем гидролиза в крови. Подробное обсуждение при
- 8 020136 ведено в публикациях Т. Н1дисЫ апб V. 8Че11а, Рто-бтидк ак Νονοί ОеНуегу 8укЧетк, νοί. 14 οί И1е Л.С.8. 8утрок1ит 8епек и Еб\\дгб В. РосНе. еб., Вюгеуегк|Ые Сагпегк ίη Эгид Эе+дп. Лтепсап РЬагтасеийса1 Λδδοοίαΐίοη апб Регдатоп Ргекк, 1987, которые включены в настоящее изобретение в качестве ссылки.
Любая формула, приведенная в настоящем изобретении, также характеризует немеченые формы, а также изотопно-меченые формы соединений. Изотопно-меченые соединения обладают структурами, описывающимися формулами, приведенными в настоящем изобретении, за исключением того, что один или большее количество атомов заменены на атомы, обладающими указанными атомными массами или массовыми числами. Примеры изотопов, которые можно вводить в соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, включают изотопы водорода, углерода, азота, кислорода, фосфора, серы, фтора и хлора, такие как 2Н, 3Н, 11С, 13С, 14С, 15Ν, 18Р, 31Р, 32Р, 358, 36С1, 1251 соответственно. В объем настоящего изобретения входят различные изотопно-меченые соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, например, в которые включены радиоактивные изотопы, такие как 3Н, 13С и 14С. Такие изотопно-меченые соединения применимы для изучения метаболизма (предпочтительно содержащие 14С), кинетики реакций (содержащие, например, 2Н или 3Н), в методологиях детектирования и визуализации, таких как позитронная эмиссионная томография (ПЭТ) или однофотонная эмиссионная компьютерная томография (ОФЭКТ), включая исследование распределения лекарственного средства или субстрата в тканях или лучевую терапию пациентов. В частности, содержащее 18Р или меченое им соединение может быть особенно предпочтительным для исследований с помощью ПЭТ или ОФЭКТ. Изотопно-меченые соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, и их пролекарства обычно можно получить по методикам, раскрытым на схемах или в примерах и синтезах, описанных ниже, путем замены не содержащего изотопа реагента на легко доступный изотопно-меченый реагент.
Кроме того, замещение более тяжелыми изотопами, такими как дейтерий (т.е. 2Н или Ό), может обеспечить некоторые терапевтические преимущества, обусловленные их более высокой метаболической стабильностью, например увеличенной длительностью полувыведения ίη νίνο или возможностью использования меньших доз, или улучшением терапевтического индекса. Следует понимать, что в этом контексте дейтерий рассматривается в качестве заместителя в соединении формулы (I). Концентрацию такого более тяжелого изотопа, в частности дейтерия, можно определить с помощью коэффициента изотопного обогащения. Термин коэффициент изотопного обогащения при использовании в настоящем изобретении означает отношение содержания изотопа к содержанию конкретного изотопа в природе. Если заместитель в соединении, предлагаемом в настоящем изобретении, означает дейтерий, то такое соединение характеризуется коэффициентом изотопного обогащения для каждого обозначенного атома дейтерия, равным не менее 3500 (содержание дейтерия для каждого обозначенного атома дейтерия равно 52,5%), не менее 4000 (содержание дейтерия равно 60%), не менее 4500 (содержание дейтерия равно 67,5%), не менее 5000 (содержание дейтерия равно 75%), не менее 5500 (содержание дейтерия равно 82,5%), не менее 6000 (содержание дейтерия равно 90%), не менее 6333,3 (содержание дейтерия равно 95%), не менее 6466,7 (содержание дейтерия равно 97%), не менее 6600 (содержание дейтерия равно 99%) или не менее 6633,3 (содержание дейтерия равно 99,5%).
Изотопно-меченые соединения формулы (I) обычно можно получить по обычным методикам, известным специалистам в данной области техники, или по методикам, аналогичным описанным в прила гающихся примерах и синтезах с использованием изотопно-меченого реагента вместо использовавшего ся ранее немеченого реагента.
Специалистам в данной области техники должно быть очевидно, что соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, или их таутомеры, пролекарства и стереоизомеры, а также фармацевтически приемлемые соли, сложные эфиры и пролекарства любого из них могут подвергнуться преобразованиям ίη νίνο путем метаболизма в организме человека или животного или в клетке с образованием метаболитов. Термин метаболит при использовании в настоящем изобретении означает любое производное, образовавшееся в субъекте после введения исходного соединения. Производные могут образоваться из исходного соединения посредством различных биохимических превращений, происходящих в субъекте, таких как, например, окисление, восстановление, гидролиз или конъюгация, и включают, например, оксиды и деметилированные производные. Метаболиты соединения, предлагаемого в настяощем изобретении, можно идентифицировать по стандартным методикам, известным в данной области техники. См., например, ВейоНш, 6. е! а1., 1. Меб. СНет. 40:2011-2016 (1997); 8йап, Ό. е! а1., 1. РНагт. 8сЕ 86(7):765767; Вадкйа^е К., Эгид Эеу. Век. 54:220-230 (1995); Вобог, Ν., Абνаηсек ίη Эгид Век. 13:224-331 (1984); Випбдаагб, Н., οί Ргобгидк (Е1кеу1ег Ргекк 1985) и Еагкец 1.К., апб ΑρρίΒηΙίοη οί Ргобгидк,
Эгид Эе^ди апб ^еνе1οртеηΐ (К^οдкдаа^б-^а^кеη е! а1., ебк., Наптооб Асабетю РиЬНкйегк, 1991). Следует понимать, что индивидуальные химические соединения, которые представляют собой метаболиты соединений формулы I или II, или их таутомеры, пролекарства и стереоизомеры, а также фармацевтически приемлемые соли, сложные эфиры и пролекарства любого из них входят в объем настоящего изобрете ния.
Термин рак означает раковые заболевания, которые можно эффективно лечить путем ингибирования киназы Р1гп, включая, например, солидные раковые заболевания, такие как карциномы (например, легких, поджелудочной железы, щитовидной железы, яичников, мочевого пузыря, молочной железы,
- 9 020136 предстательной железы или толстой кишки), меланомы, миелоидные нарушения (например, миелолейкоз, множественную миелому и эритролейкоз), аденомы (например, ворсинчатую аденому толстой кишки) и саркомы (например, остеосаркому).
Методики синтеза.
Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, можно получить по методикам, известным специалистам в данной области техники. Например, как показано на схеме, циклогександионы через монотрифлаты можно превратить в соответствующие эфиры циклогексенонбороновой кислоты, которые при катализе палладием образуют связь с атомом углерода 4-хлор,3-нитропиридина с получением замещенных нитропиридином циклогексенонов I. Восстановление еноновой группы может дать циклогексенол II, который после защиты гидроксигруппы, восстановления нитрогруппы и алкена, реакции сочетания с образованием амида и удаления защитной группы может дать циклогексаноламиды III. Циклогексенол II также можно ввести в реакцию Мицунобу с фталимидом и получить защищенный аминоциклогексен IV. После восстановления нитрогруппы и алкена содержащий фталимидную защитную группу аминоциклогексилпиридиланилин να можно ввести в реакцию сочетания с образованием амида и удалить защитную группу и получить аминоциклогексанамиды VI. Соответствующий содержащий защитную группу Вос аминоциклогексанпиридиланилин № также можно получить из циклогексенола II следующим образом: защитить гидроксигруппу, восстановить алкен и нитрогруппу, ввести в пиридиламин защитную группу СЬх. удалить силильную защитную группу, провести окисление по Дессу-Мартину в циклогексанон, провести восстановительное аминирование бензиламином, удалить защитные группы СЬх и Вп и удалить защитную группу Вос из первичного алифатического амина. В случае амидов III и VI, если К2 обозначает галоген или трифлат, то амиды III и VI можно дополнительно модифицировать по стандартным методикам модификации путем введения замещенных арилов, алкилов и гетероарилов по К2. Например, если К2 обозначает Вг, то по реакции с бороновыми кислотами или металлоорганическими реагентами или путем превращения в соответствующий эфир бороновой кислоты и реакции с арил/гетероарилгалогенидами или трифлатами можно выполнить различные модификации К2.
Схема 1
КОАс, Рс1(с1ррЛСк
ЭДХ, ДМФ
25% ТРА/СН2С1г ИЛИ НСкдиоксан
ΡΟ(ΰρρΐ)ΟΙ2, диокса ч/2М Ыа2СОз 110°С
РРПз. ΟίΒΑυ фталимид ТГФ 0 *С , Ρά/С. АсОН
ТВ0М8С1 имидазол, ДМФ
Н2. Ρό/С, МеОН
Кислота, НО АТ
ΤΒΟΜδΟΙ, ' имидазол, ДМФ
Н2. МеОН СЬа-ОЗц ДМАП, ДХМ НС1 ЕЮН
Реагент Дееса-Мартина. ДХМ βπνη2 ивн4 а Н21Р0/С,МеОН
АскЗ, НОАТ, нгмын2, меон.
Альтернативно, как показано на схеме 2, циклогексенол II можно дегидратировать и получить циклогексадиен, который после эпоксидирования (путем образования бромгидрина и отщепления НВг или непосредственно из МХПБК (м-хлорпероксибензойная кислота)) и раскрытия эпоксидного кольца азидом дает циклогексенилазидоспирт VI. Циклогексенилазидоспирт VI можно превратить в трансзащищенный аминогидроксианилин путем восстановления азидной группы, защиты гидроксигруппы и восстановления алкена и нитрогруппы. Альтернативно, циклогексенилазидоспирт VI можно превратить в цис-защищенный аминогидроксианилин путем восстановления азидной группы и введения защитной группы Вос, мезилирования спирта и внутримолекулярной циклизации в цис-циклический карбамат, последующего введения защитной группы Вос и восстановления алкена и нитрогруппы. Полученные циклогексилпиридиланилины и можно превратить в соответствующие пиридинамиды ^Па и с помощью реакции сочетания с образованием амида, расщепления ацетата или циклического карбамата и удаления защитной группы Вос. Если К2 обозначает галоген или трифлат, то амиды ^Па и можно дополнительно модифицировать по стандартным методикам модификации путем
- 10 020136 введения замещенных арилов, алкилов и гетероарилов по К2 после образования амидной связи и до полного удаления защитных групп. Например, если К2 обозначает Вг, то по реакции с бороновыми кислотами или металлоорганическими реагентами или путем превращения в соответствующий эфир бороновой кислоты и реакции с арил/гетероарилгалогенидами или трифлатами можно выполнить различные модификации Κ2.
Схема 2
ИНВос
УПЬ
1) Кислота НОАТ ЭДХ ДМ
2) Сз3СО3 МеОН МН2 3) 25% ТФК/СН2С12
1) Кислота НОАТ
2) Са2СО3 МеОН
3) 25% ТФК/СН2С12
νΐΙΛ
Альтернативно, как показано на схеме 3, можно получить тризамещенные 5-алкил-4-гидрокси-3аминопиперидины и их модифицировать и следующим образом получить тризамещенные 5-алкил-4гидрокси-3-аминопиперидинилпиридинамиды IX. Реакция Гарнера альдегида с (К)-4-бензил-3пропионилоксазолидин-2-оном, последующее ведение защитной группы ТВ8 в полученный спирт дает соединение X. Восстановление оксазолидинона, последующее введение азидной группы дает промежуточный продукт XI. Удаление защитной группы в кислой среде дает соответствующий аминоспирт, который после введения защитной группы Вос и последующего мезилирования первичного спирта дает промежуточный продукт XII. Восстановление азида позволяет получить пиперидин, который затем вводят в реакцию с 4-хлор-3-нитропиридином, восстанавливают в амин, вводят в реакцию сочетания с соответствующей карбоновой кислотой и удаляют защитную группу и получают тризамещенные 5-метил-4гидрокси-3-аминопиперидинилпиридинамиды IX. Если Κι обозначает галоген или трифлат, то амид IX можно дополнительно модифицировать по стандартным методикам модификации путем введения замещенных арилов, алкилов и гетероарилов по Κι после образования амидной связи и до полного удаления защитных групп. Например, если Κι обозначает Вг, то по реакции с бороновыми кислотами или металлоорганическими реагентами или путем превращения в соответствующий эфир бороновой кислоты и реакции с арил/гетероарилгалогенидами или трифлатами можно выполнить различные модификации Κ1.
Схема 3
Альтернативно, как показано на схеме 4, можно получить тризамещенные 5-метил-4-гидрокси-3аминопиперидины и их модифицировать и следующим образом получить тризамещенные 5-метил-4гидрокси-3-аминопиперидиниламиды XIII. Реакция кротиловых эфиров бороновой кислоты с альдегидом 8егОВи, последующее образование циклического карбамата, окислительное отщепление алкена и восстановление дает содержащее гидроксигруппу соединение XIV. Удаление бензильной защитной группы, последующее бистозилирование и реакция с п-метоксибензиламином и удаление защитной группы ами- 11 020136 на дает пиперидин XV. Реакция замещенного пиперидина XV с галогеннитрозамещенными аренами или гетероаренами, последующее введение карбаматной защитной группы, восстановление нитрогруппы, реакция сочетания с образованием амида, раскрытие циклического карбамата и удаление защитной группы дает тризамещенные 5-метил-4-гидрокси-3-аминопиперидиниламиды XIII. Если К3 обозначает галоген или трифлат, то амид XV можно дополнительно модифицировать по стандартным методикам модификации путем введения замещенных арилов, алкилов и гетероарилов по К3. Например, если К3 обозначает Вг, то по реакции с бороновыми кислотами или металлоорганическими реагентами или путем превращения в соответствующий эфир бороновой кислоты и реакции с арил/гетероарилгалогенидами или трифлатами можно выполнить различные модификации В3.
Схема 4
ОВп ,0 №1О4 ОзО4 (5 мол %) МеОН, Н,0
Н2, Рй/С. МеОН
ТэС!, пиридин
ИНЭРМВ. ДИЭА ,ΝΗ
ΝαΒΗ4. ЕЮН. 0*С
60% 2 стадии но'
ΌΒη
XIV
ΝΜΡ 100*С\2ч
Н2 20% Р0(ОН)2/С
МеОН, 2 ч
XV (а Не1-С1, ДИЭА.СНгС!; Ь Вос2О, ДМАП
XIII
Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, применимы ίη νίίτο или ίη νίνο для подавления роста раковых клеток. Соединения можно применять по отдельности или в композициях вместе с фармацевтически приемлемым носителем или инертным наполнителем. Подходящие фармацевтически приемлемые носители или инертные наполнители включают, например, технологические добавки и вещества, модифицирующие и улучшающие доставку лекарственного средства, такие как, например, фосфат кальция, стеарат магния, тальк, моносахариды, дисахариды, крахмал, желатин, целлюлоза, метилцеллюлоза, натриевая соль карбоксиметилцеллюлозы, декстроза, гидроксипропил-в-циклодекстрин, поливинилпирролидинон, низкоплавкие воски, ионообменные смолы и т.п., а также комбинации любых двух или большего количества из них. Другие подходящие фармацевтически приемлемые инертные наполнители описаны в публикации Всттд1оп'8 РЬагтасеи!1са1 Заспсск, Маск РиЬ. Со., Νο\ν 1сг5су (1991), которая включена в настоящее изобретение в качестве ссылки.
Эффективные количества соединений, предлагаемых в настоящем изобретении, обычно представляют собой любые количества, достаточные для регистрируемого ингибирования активности Р1т, обнаруживаемого с помощью любой из методик исследования, описанных в настоящем изобретении, с помощью других методик исследования активности киназы Р1т, известных специалистам с общей подготовкой в данной области техники, или обнаруживаемого по подавлению или ослаблению симптомов рака. Количество активного ингредиента, которое можно объединить с носителями с получением разовой дозированной формы, будет меняться в зависимости от подвергающегося лечению реципиента и конкретного пути введения. Однако следует понимать, что точная доза для любого конкретного пациента будет зависеть от множества факторов, включая активность конкретного использующегося соединения, возраст, массу тела, общее состояния здоровья, пол, диету, время введения, путь введения, скорость выведения, комбинацию лекарственных средств и тяжесть конкретного заболевания, подвергающегося лечению. В каждом случае терапевтически эффективное количество можно легко определить с помощью стандартных исследований, и на основании своей профессиональной подготовки решение принимает лечащий врач.
Для задач настоящего изобретения терапевтически эффективная доза обычно представляет собой полную суточную дозу, вводимую реципиенту в виде одной или разделенных доз в количествах, которые могут составлять, например, от 0,001 до 1000 мг/(кг массы тела) в сутки и более предпочтительно от 1,0 до 30 мг/(кг массы тела) в сутки. Разовая доза композиции может составлять доли таких количеств, так
- 12 020136 чтобы в сумме они образовывали суточную дозу.
Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, можно вводить перорально, парентерально, сублингвально, с помощью аэрозоля или ингаляции спрея, ректально или местно в виде разовых доз композиций, при необходимости содержащих обычные нетоксичные фармацевтически приемлемые носители, вспомогательные вещества и растворители. Местное введение также может включать применение средств чрескожного введения, таких как чрескожные пластыри или устройства для ионофореза. Термин парентерально при использовании в настоящем изобретении включает подкожные инъекции, внутривенные, внутримышечные, надчревные инъекции и вливание.
Препараты для инъекции, например стерильные водные или масляные суспензии для инъекции, можно приготовить с использованием известных в данной области техники подходящих диспергирующих или смачивающих агентов и суспендирующих агентов. Стерильный препарат для инъекции также может представлять собой стерильный раствор, суспензию или эмульсию для инъекции в нетоксичном парентерально приемлемом разбавителе или растворителе, например раствор в 1,3-пропандиоле. В число приемлемых носителей и разбавителей, которые можно использовать, входят вода, раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия. Кроме того, в качестве растворителя или суспендирующей среды обычно используют стерильные нелетучие масла. Для этой цели можно использовать любое жидкое нелетучее масло, включая синтетические моно- или диглицериды. Кроме того, для приготовления средств для инъекции используют жирные кислоты, такие как олеиновая кислота.
Суппозитории для ректального введения лекарственного средства можно приготовить путем смешивания лекарственного средства с подходящим не оказывающим раздражающее воздействие инертным наполнителем, таким как масло какао или полиэтиленгликоли, которые являются твердыми при температуре окружающей среды, но жидкими при температуре прямой кишки и поэтому плавятся в прямой кишке и высвобождают лекарственное средство.
Твердые дозированные формы для перорального введения могут включать капсулы, таблетки, пилюли, порошки и гранулы. В таких твердых дозированных формах активное соединение можно смешать по меньшей мере с одним инертным разбавителем, таким как сахароза, лактоза или крахмал. Такие твердые дозированные формы могут включать, что является обычной практикой, дополнительные вещества, не являющиеся инертными разбавителями, например смазывающие агенты, такие как стеарат магния. В случае капсул, таблеток и пилюль дозированные формы также могут включать буферные агенты. Таблетки и пилюли также можно изготовить с энтеросолюбильными покрытиями. Жидкие дозированные формы для перорального введения могут включать фармацевтически приемлемые эмульсии, растворы, суспензии, сиропы и эликсиры, содержащие инертные разбавители, обычно использующиеся в данной области техники, такие как вода. Такие композиции также могут содержать вспомогательные вещества, такие как смачивающие агенты, эмульгирующие и суспендирующие агенты, циклодекстрины и подсластители, вкусовые добавки и отдушки.
Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, также можно вводить в виде липосом. Как известно в данной области техники, липосомы обычно получают из фосфолипидов или других липидов. Липосомы формируются моно- или многослойными гидратированными жидкими кристаллами, которые диспергированы в водной среде. Можно использовать любой нетоксичный физиологически приемлемый и подвергающийся метаболизму липид, способный образовывать липосомы. Композиции, предлагаемые в настоящем изобретении, в липосомной форме в дополнение к соединению, предлагаемому в настоящем изобретении, могут содержать стабилизаторы, консерванты, инертные наполнители и т.п. Предпочтительными липидами являются фосфолипиды и фосфатидилхолины (лецитины), натуральные и синтетические. Методики приготовления липосом известны в данной области техники. См., например, публикацию Ргексой, Еб., Мебюбк ίη Се11 Βίοίοβν. Уо1ише XIV, Асабетю Ргекк, Νον Уотк, Ν.^., р. 33 с1 кед. (1976).
Хотя соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, можно вводить в качестве единственного лекарственного средства, их также можно применять в комбинации с одним или большим количеством других средств, применяющихся для лечения рака. Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, также применимы в комбинации с известными лекарственными средствами и противораковыми средствами и комбинации соединений, предлагаемых в настоящем изобретении, с другими противораковыми средствами или химиотерапевтическими средствами и входят в объем настоящего изобретения. Примеры таких средств приведены в публикации Сапсег Ргшс1р1ек апб Ргасбсе о£ Опсо1оду, ν.Τ. Оеуйа апб 8. Не11тап (ебйотк), 611' ебйюп (ЕеЬ. 15, 2001), Ь1рр1псой ХУббатк & ХУбкбъ РиЫщйетк. Специалист с общей подготовкой в данной области техники должен быть способен определить, какие комбинации средств будут применимы в соответствии с характеристиками конкретных лекарственных средств и подвергающимся лечению раком. Такие противораковые средства включают, но не ограничиваются только ими, следующие: модуляторы эстрогенного рецептора, модуляторы андрогенного рецептора, модуляторы ретиноидного рецептора, цитотоксические/цитостатические средства, антипролиферативные средства, ингибиторы пренилпротеинтрансферазы, ингибиторы НМС-СоА редуктазы и другие ингибиторы ангиогенеза, ингибиторы пролиферации клеток и передачи сигналов жизнеспособности, средства, индуцирующие апоптоз, и средства, которые оказывают мешающее воздействие на ключевых стадиях клеточно
- 13 020136 го цикла. Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, также применимы совместно с лучевой терапией.
Поэтому в одном варианте осуществления настоящего изобретения соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, также применяются в комбинации с известными противораковыми средствами, включая, например, модуляторы эстрогенного рецептора, модуляторы андрогенного рецептора, модуляторы ретиноидного рецептора, цитотоксические средства, антипролиферативные средства, ингибиторы пренилпротеинтрансферазы, ингибиторы НМС-СоЛ редуктазы, ингибиторы протеазы ВИЧ (вирус иммунодефицита человека), ингибиторы обратной транскриптазы и другие ингибиторы ангиогенеза.
В некоторых в настоящее время предпочтительных вариантах осуществления настоящего изобретения типичные средства, применимые в комбинации с соединениями, предлагаемыми в настоящем изобретении, для лечения рака включают, например, иринотекан, топотекан, гемцитабин, 5-фторурацил, лейковорин карбоплатин, цисплатин, таксаны, тезацитабин, циклофосфамид, алкалоиды барвинка, иматиниб (Глеевек), антрациклины, ритуксимаб, трастузумаб, а также противораковые химиотерапевтические средства.
Указанные выше соединения, применяющиеся в комбинации с соединениями, предлагаемыми в настоящем изобретении, можно использовать в терапевтических количествах, как это указано в публикации Рйу81С1аи8' Эсвк ВсГсгспес (ΡΌΒ) 47411 Εάίΐίοη (1993), которая включена в настоящее изобретение в качестве ссылки, или в таких терапевтически применимых количествах, которые должны быть известны специалисту с общей подготовкой в данной области техники.
Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, и другие противораковые средства можно вводить в рекомендованной максимальной клинической дозировке или в меньших дозах. Величины доз активных соединений в композициях, предлагаемых в настоящем изобретении, могут меняться так, чтобы обеспечить необходимое терапевтическое воздействие в соответствии с путем введения, тяжестью заболевания и реакцией пациента. Комбинацию можно вводить в виде отдельных композиций или в виде разовой дозированной формы, содержащей оба средства. При введении в виде комбинации лекарственные средства можно приготовить в виде отдельных композиций, которые вводят одновременно или в разные моменты времени, или лекарственные средства можно вводить в виде одной композиции.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу ингибирования Р1т 1, Р1т 2 или Р1т 3 у человека или животного. Способ включает введение нуждающемуся в нем субъекту соединения или его фармацевтически приемлемой соли, соответствующей любому из вариантов осуществления соединений формулы I или II, в эффективном количестве.
Настоящее изобретение будет легче понять с использованием приведенных ниже примеров, которые представлены только для иллюстрации и не предназначены для ограничения настоящего изобретения.
Примеры
В приведенных ниже примерах соединения, соответствующие предпочтительным вариантам осуществления, синтезировали по методикам, описанным в настоящем изобретении, или по другим методикам, которые известны в данной области техники.
Соединения и/или промежуточные продукты характеризовали с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием хроматографической системы \Уа1сг8 МШешит с модулем разделения 2695 (МИГогб, МА). Использовали аналитические колонки с обращенной фазой Р11спотспех Ьипа С18 - 5 мкм, 4,6x50 мм, выпускающиеся фирмой А111се11 (ПссгйсИ, 1Ь). Использовали элюирование в градиентном режиме (скорость потока 2,5 мл/мин), обычно начиная от смеси 5% ацетонитрил/95% вода и заканчивая 100% ацетонитрилом, в течение 10 мин. Все растворители содержали 0,1% трифторуксусной кислоты (ТФК). Соединения детектировали по поглощению в ультрафиолетовой (УФ) области спектра при длине волны 220 или 254 нм. Использовали растворители для ВЭЖХ, выпускающиеся фирмами ВшФек апб 1аекзоп (Мизксдап, М1) или Изйсг §с1спИДс (РШвЬигдй, РА).
В некоторых случаях чистоту определяли с помощью тонкослойной хроматографии (ТСХ) с использованием стеклянных или пластмассовых пластин, покрытых силикагелем, таких как, например, гибкие пластины Ваксг-Е1сх 8Шеа Сс1 1В2-Е. Данные ТСХ легко получали путем визуального детектирования при ультрафиолетовом освещении или путем использования хорошо известной методики окрашивания парами йода или различных других методик окрашивания.
Масс-спектрометрические исследования проводили на одном из трех приборов для ЖХМС (жидкостная хроматография-масс-спектроскопия): \Уа1сг8 8уз!ст (АШапес НТ НРЬС и М1егота88 Ζφ массспектрометр; колонка: ЕеНрзс ХЭВ-С18, 2,1x50 мм; градиентный режим: 5-95% (или 35-95%, или 65-95%, или 95-95%) ацетонитрил в воде с добавлением 0,05% ТФК в течение 4 мин; скорость потока 0,8 мл/мин; диапазон молекулярных масс 200-1500; разность потенциалов на конусе 20 В; температура колонки 40°С), другого \Уа1сг8 8уз!ст (АС’ОШТУ ИРЬС вуЧст и Ζφ 2000 вуЧст; колонка: АС’ОШТУ ИРЬС Н88-С18, 1,8 мкм, 2,1x50 мм; градиентный режим: 5-95% (или 35-95%, или 65-95%, или 95-95%) ацетонитрил в воде с добавлением 0,05% ТФК в течение 1,3 мин; скорость потока 1,2 мл/мин; диапазон молекулярных масс 150-850; разность потенциалов на конусе 20 В; температура колонки 50°С) или Нс\\
- 14 020136
1ей Раскагб 8у§1ет (8епе§ 1100 НРЬС; колонка: Есйрке ХЭВ-С18, 2,1x50 мм; градиентный режим: 5-95% ацетонитрил в воде с прибавлением 0,05% ТФК в течение 4 мин; скорость потока 0,8 мл/мин; диапазон молекулярных масс 150-850; разность потенциалов на конусе 50 В; температура колонки 30°С). Все приведенные массы относятся к протонированным исходным ионам.
Исследования с помощью ядерного магнитного резонанса (ЯМР) проводили для некоторых соединений на приборе Уапап 400 МГц ЯМР (Ра1о Л11о. СА). В качестве стандарта использовали ТМС (триметилсилан) или известный химический сдвиг растворителя.
Препаративные разделения проводили с помощью хроматографической системы Иакй 40 и КР811, 60А (Вю1аде, СйаЯойекуШе, УА), или с помощью колоночной флэш-хроматографии с использованием силикагеля (230-400 меш) в качестве насадки, или с помощью ВЭЖХ с использованием \Уа1ег5 2767 8атр1е Мападег, С-18 колонки с обращенной фазой, 30x50 мм, скорость потока 75 мл/мин. Типичными растворителями, использованными для системы Иакй 40 Вю1аде и колоночной флэш-хроматографии, являлись дихлорметан, метанол, этилацетат, гексан, ацетон, водный раствор аммиака (или гидроксид аммония) и триэтиламин. Типичными растворителями, использованными для ВЭЖХ с обращенной фазой, являлись ацетонитрил в разных концентрациях и вода с добавлением 0,1% трифторуксусной кислоты.
Следует понимать, что органические соединения, соответствующие предпочтительным вариантам осуществления, могут обладать таутомерией. Поскольку химические структуры в настоящем изобретении могут представлять только одну из возможных таутомерных форм, следует понимать, что предпочтительные варианты осуществления включают любую таутомерную форму изображенной структуры.
Следует понимать, что настоящее изобретение не ограничивается вариантами осуществления, представленными в настоящем изобретении для иллюстрации, а включает все его формы, соответствующие объему приведенного выше описания.
В примерах, приведенных ниже, а также во всем описании представленные ниже аббревиатуры обладают указанными значениями. Термины, для которых не приведены определения, обладают общепринятыми значениями.
- 15 020136
Аббревиатуры.
ДАТС (диэтиламино)трифторид серы
ДХМ дихлорметан
ДИЭА диизопропилэтиламин
ДМА диметилацетамид
ДМАП 4-диметиламинопиридин
ДМЭ 1,2-диметоксиэтан
ДМФ А.А-диметилформамид
ДФФФ 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен
эдх 1 -(З-диметиламинопропил)-З-этилкарбодиимидгидрохлорид
ЕЮАс этилацетат
ЕЮН этанол
НОАТ гидроксиазабензотриазол
К2СО3 карбонат калия
МеСИ ацетонитрил
М88О4 сульфат магния
МеОН метанол
Ν320Ο3 карбонат натрия
№С1 хлорид натрия
№НСО3 бикарбонат натрия
ΝΒ8 А-бромсукцинимид
ΝΜΡ А-метил-2-пирролидон
Рс12(аЬа)з трис(дибеизилиденацетон)дипалладий(0)
Ρά(ΡΡΚ3)4 тетракис(трифеннлфосфнн)палладий(0)
Рс1(с1ррОС12- аддукт дихлор-( 1,2-бис(дифенилфосфино)этан)-палладия(П) с
ДХМ дихлорметаном
КТ комнатная температура
ТВОМ5С1 трет-бутилдиметилсилилхлорид
ТЭА триэтиламин
ваг насыщенный раствор
ТГФ теграгидрофуран
Синтез 3 -оксоциклогекс-1 -енилтрифторметансульфоната
ΟΤΐ
К раствору циклогексан-1,3-диона (1 экв.) в ДХМ (0,4 М) добавляли МьС’О3 (1,0 экв.) и охлаждали до 0°С. По каплям в течение 1 ч при комнатной температуре в атмосфере азота добавляли ТГ2О (1,0 экв.) в ДХМ (5 М). После добавления реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч (темно-красный раствор). Раствор фильтровали и к фильтрату добавляли насыщенный раствор Ν;·ιΗίΌ3 (осторожно), затем экстрагировали органические вещества, промывали рассолом, затем сушили над №28О4 и концентрировали. Неочищенное вещество использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. 3Оксоциклогекс-1-енилтрифторметансульфонат получали с выходом 67%. Трифлат разлагается при хранении и его необходимо сразу использовать в следующей реакции.
ЖХ/МС=244,9/286,0 (М+Н и М+СН3СК); В 0.88 мин.
- 16 020136
Синтез 3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)циклогекс-2-енона
К раствору 3-оксоциклогекс-1-енилтрифторметансульфоната (1,0 экв.) в дегазированном диоксане (0,3 М) добавляли бис-(пинаколято)дибор (2,0 экв.), КОАс (3,0 экв.) и РЕ(Ерр£)С12-ДХМ (0,05 экв.). Реакционную смесь нагревали при 80°С в течение 2 ч, затем фильтровали. Раствор в диоксане использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
ЖХ/МС = 140,9 (М+Н бороновой кислоты).
Синтез 3 -(3 -нитропиридин-4-ил)циклогекс-2-енона ;О
К раствору 3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)циклогекс-2-енона (1,0 экв.) в дегазированном диоксане и 2 М №ьСО3 добавляли 4-хлор-3-нитропиридин (1,2 экв.) и РЕ(Ерр£)С12-ДХМ (0,05 экв.). Реакционную смесь нагревали на масляной бане при 110°С в течение 2 ч. Охлаждали до комнатной температуры, затем разбавляли с помощью ЕЮАс, добавляли Н2О - образовывался темный раствор, много эмульгированного вещества. Фильтровали для удаления твердых веществ, затем органическую фазу экстрагировали, сушили над Ыа28О4 и концентрировали. Неочищенное вещество очищали с помощью хроматографии на силикагеле при элюировании этилацетатом и гексанами (1:1) и получали 3-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-2-енон (55%, 2 стадии).
ЖХ/МС = 219 (М+Н), ЖХ = 2,294 мин.
Синтез 3 -(3 -нитропиридин-4-ил)циклогекс-2-енола он
К раствору 3-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-2-енона (1,0 экв.) добавляли ЕЮН (0,2 М) и СеС13-7Н2О (1,3 экв.). Реакционную смесь охлаждали до 0°С, затем порциями добавляли ЫаВН4 (1,3 экв.). Перемешивали в течение 2 ч при 0°С, затем реакцию останавливали путем добавления воды, концентрировали для удаления ЕЮН, добавляли ЕЮАс. экстрагировали органические вещества, промывали рассолом, затем сушили над Ыа28О4 и концентрировали и получали 3-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-2-енол (99%).
ЖХ/МС = 221,1 (М+Н), ЖХ = 2,235 мин.
Синтез 2-(3 -(3 -нитропиридин-4-ил)циклогекс-2-енил)изоиндолин-1,3-диона
К раствору 3-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-2-енола (1,0 экв.), трифенилфосфин (1,5 экв.) и фталимид (1,5 экв.) в ТГФ (0,3 М) при 0°С по каплям добавляли (Е)-ди-трет-бутилдиазен-1,2-дикарбоксилат (1,5 экв.). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч. Концентрировали досуха в вакууме, затем неочищенное вещество очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью ЕЮАс и гексанов (1:1 с добавлением 5% метанола) и получали 2-(3 -(3 -нитропиридин-4-ил)циклогекс-2-енил)изоиндолин- 1,3-дион (выход 63%).
ЖХ/МС = 350,3 (М+Н), ЖХ = 3,936 мин.
- 17 020136
Синтез 2-(3 -(3 -аминопиридин-4-ил)циклогекс-2-енил)изоиндолин-1,3-дион
К раствору 2-(3-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-2-енил)изоиндолин-1,3-диона (1,0 экв.) в АсОН (0,38 М) добавляли Ее (6,0 экв.) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Фильтровали, затем промывали метанолом и фильтрат концентрировали. К неочищенному веществу добавляли эгилацетат и насыщенный раствор МаНСО3, органические вещества сушили над Ыа28О4 и концентрировали и получали 2-(3-(3-аминопиридин-4-ил)циклогекс-2-енил)изоиндолин-1,3-дион в виде вязкой желтой смолы с выходом 96%.
ЖХ/МС = 320,0 (М+Н), ЖХ = 2,410 мин.
Синтез 2-(3 -(3 -аминопиридин-4-ил)циклогексил)изоиндолин- 1,3-диона
К раствору 2-(3-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-2-енил)изоиндолин-1,3-диона (1,0 экв.) в уксусной кислоте (0,1 М) добавляли 10% Рб/С (0,2 экв.) и реакционную смесь перемешивали в атмосфере Н2, подаваемого из баллона. Через 3 дня реакционную смесь фильтровали через целит, промывали этилацетатом и метанолом, фильтрат разбавляли этилацетатом и дважды промывали 2 М раствором Ыа2СО3. Органическую фазу сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали. Неочищенное вещество растирали с гексанами и этилацетатом и получали 2-(3-(3-аминопиридин-4ил)циклогексил)изоиндолин-1,3-дион с выходом 73%.
ЖХ/МС = 322,2 (М+Н), В=0,64 мин.
Синтез 5,5 -диметил-3 -оксоциклогекс-1 -енилтрифторметансульфоната
В 3-горлой круглодонной колбе 5,5-диметилциклогексан-1,3-дион (1,0 экв.) растворяли в ДХМ (0,2 М). Добавляли карбонат натрия (1,1 экв.) и смесь в атмосфере Ν2 при перемешивании магнитной мешалкой в бане лед/раствор соли охлаждали примерно до -5°С. Ангидрид трифторметансульфоновой кислоты (1,05 экв.), разбавленный с помощью ДХМ, по каплям добавляли через капельную воронку в течение 90 мин. После завершения добавления реакционную смесь перемешивали примерно при 0°С в течение 1 ч. По данным ЖХМС и ’Н ЯМР еще оставалось исходное вещество. Дополнительно добавляли карбонат натрия (0,51 экв.) и ангидрид трифторметансульфоновой кислоты (0,50 экв.). Через 2 ч смесь фильтровали через воронку с грубым фильтром из пористого стекла (осадок на фильтре промывали с помощью ДХМ), переносили в колбу Эрленмейера, реакционную смесь нейтрализовывали до рН 7 путем осторожного добавления насыщенного водного раствора бикарбоната натрия при энергичном перемешивании, переносили в делительную воронку и слои разделяли. Органический слой промывали рассолом, сушили над Мд8О4, фильтровали и концентрировали и получали 5,5-диметил-3-оксоциклогекс-1енилтрифторметансульфонат, который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
ЖХ/МС (т/ζ): МН+=273,1, К<=1,03.
Синтез 5,5-диметил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)циклогекс-2-енона
Все реагенты: 5,5-диметил-3-оксоциклогекс-1-енилтрифторметансульфонат (1,0 экв.), ацетат калия (3,0 экв.) и бис-(пинаколято)дибор (2,0 экв.) добавляли к 1,4-диоксану (0,2 М) в круглодонной колбе и дегазировали путем пропускания Ν2 через смесь в течение 10 мин. Добавляли аддукт РбС12(брр!) - ДХМ (0,03 экв.) и реакционную смесь нагревали в атмосфере Ν2 в течение ночи при 80°С на масляной бане в колбе, снабженной обратным холодильником. Смесь охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через воронку с грубым фильтром из пористого стекла, осадок на фильтре промывали 1,4-диоксаном и получали 5,5-диметил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)циклогекс-2-енон в
- 18 020136
1,4-диоксане, который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. ЖХ/МС (т/ζ): ΜΗ+ (бороновая кислота) = 169,1, К1=0,50.
Синтез 5,5-диметил-3-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-2-енона
N
Эфир бороновой кислоты 5,5-диметил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)циклогекс-2енона (1,0 экв.) растворяли в 1,4-диоксане в круглодонной колбе и дегазировали путем пропускания Ν2 через раствор в течение 30 мин. Добавляли 4-хлор-3-нитропиридин (1,3 экв.) и 2 М водный раствор карбоната натрия (2,0 экв.) и в течение 10 мин Ν2 пропускали и затем добавляли РбС12(брр£)-ДХМ (0,05 экв.). Реакционную смесь перемешивали при 110°С в течение 2 ч. Смесь добавляли к Е(ОАс и воде. Полученную смесь фильтровали через целит, осадок на фильтре промывали с помощью ЕЮ Ас. Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали с помощью ЕЮАс. Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили над Мд§О4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле (элюировали смесью ЕЮАс:гексаны = от 1:10 до 2:1) и получали 5,5-диметил-3-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-2-енон (46,7% за три стадии).
ЖХ/МС (т/ζ): ΜΗ+=247,2, К4=0,79.
Синтез 5,5-диметил-3-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-2-енола
К раствору 5,5-диметил-3-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-2-енона (1,0 экв.) и СеС13-7Н2О (1,2 экв.) в МеОН (0,2 М) при 0°С добавляли NаΒΗ4 (1,0 экв.). Раствор перемешивали в течение 1 ч и затем реакцию останавливали путем добавления 5 мл воды. Летучие вещества удаляли в вакууме и остаток подвергали распределению между ЕЮАс и Н2О. Органический слой отделяли и промывали рассолом. Объединенный водный слой подвергали обратной экстракции с помощью ЕЮАс и органическое вещество промывали рассолом. Объединенные органические вещества сушили над Мд§О4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали на колонке (5% метанола в смеси 1:1 этилацетата и гексанов) и получали 5,5-диметил-3-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-2-енол (74%).
ЖХ/МС (т/ζ): ΜΗ+=249,2, К4=0,76.
Синтез 2-(5,5-диметил-3-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-2-енил)изоиндолин-1,3-диона
N
К гомогенному раствору 5,5-диметил-3-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-2-енола (1,0 экв.) добавляли трифенилфосфин (1,5 экв.) и фталимид (1,5 экв.) в ТГФ (0,2 М), охлажденные до 0°С, к раствору добавляли ди-трет-бутилазодикарбоксилат (1,5 экв.) в ТГФ. Смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч. Реакционную смесь концентрировали в вакууме. Остаток очищали на колонке (5% метанола в смеси 1:1 этилацетата и гексанов) и получали 2-(5,5-диметил-3-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-2енил)изоиндолин-1,3-дион (99%).
ЖХ/МС (т/ζ): МН+=378,2, К4=1,10.
Синтез 2-(3-(3-аминопиридин-4-ил)-5,5-диметилциклогекс-2-енил)изоиндолин-1,3-диона
Раствор 2-(5,5-диметил-3-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-2-енил)изоиндолин-1,3-диона (1 экв.) в уксусной кислоте (0,1 М) продували азотом в течение 10 мин. Затем добавляли 10% Рб/С (0,10 экв.). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи в атмосфере водорода. Твердые вещества удаляли фильтрованием через целит, затем промывали с помощью ЕЮАс и МеОН.
- 19 020136
Фильтрат концентрировали, разбавляли с помощью ЕЮАс и 2х промывали 2 М водным раствором Ν;·ι2ΟΌ3. Органический слой сушили над Мд8О4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали на колонке (5% метанола в смеси 1:1 этилацетата и гексанов) и получали 2-(3-(3-аминопиридин-4-ил)-5,5диметилциклогекс-2-енил)изоиндолин- 1,3-дион (89%).
ЖХ/МС (т/ζ): МН+=348,3, К1=0,79.
Синтез 2-(5-(3 -аминопиридин-4-ил)-3,3 -диметилциклогексил)изоиндолин-1,3 -диона
Раствор 2-(3-(3-аминопиридин-4-ил)-5,5-диметилциклогекс-2-енил)изоиндолин-1,3-диона (1,0 экв.) в уксусной кислоте (0,1 М) продували азотом в течение 10 мин. Затем 10% Рб/С (0,1 экв.) добавляли. Реакционную смесь перемешивали при 45°С при давлении водорода, равном 300 фунт-сила/дюйм, в стальном автоклаве в течение ночи и при 65°С при 300 фунт-сила/дюйм в течение 5 ч. Твердые вещества удаляли фильтрованием через целит, затем промывали с помощью ЕЮАс и МеОН. Фильтрат концентрировали, разбавляли с помощью ЕЮАс и 2х промывали 2 М водным раствором №-ьСО3. Органический слой сушили над Мд8О4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали на колонке (5% метанола в смеси 1:1 этилацетата и гексанов) и получали 2-(5-(3-аминопиридин-4-ил)-3,3диметилциклогексил)изоиндолин-1,3-дион (53%).
ЖХ/МС (т/ζ): МН+=350,3, К1=0,78.
Энантиомерно чистые 2-((1К,5К)-5-(3 -аминопиридин-4-ил)-3,3-диметилциклогексил)изоиндолин1,3-дион и 2-((18,58)-5-(3-аминопиридин-4-ил)-3,3-диметилциклогексил)изоиндолин-1,3-дион выделяли с помощью хиральной ВЭЖХ (для анализа К=7,526 мин и 13,105 мин соответственно; гексаны:этанол= 80:20 (об.:об.), Сй1га1се1 О1-Н 100x4,6 мм при 1 мл/мин. Для препаративного разделения, гексаны:этанол = 80:20 (об.:об.), Сй1га1се1 О1-Н (250x20 мм при 20 мл/мин).
Ή ЯМР (СОС13): δ 8,04 (к, 1Н), 8,00 (б, 1Н), 7,82 (т, 2Н), 7,71 (т, 2Н), 7,06 (б, 1Н), 4,54 (т, 1Н), 3,71 (т, 2Н), 2,89 (т, 1Н), 2,23-2,44 (т, 2Н), 1,90 (т, 1Н), 1,20-1,60 (т, 3Н), 1,18 (к, 3Н), 1,07 (к,3Н).
Синтез 4-(циклогекса-1,3-диенил)-3 -нитропиридина
К раствору 3-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-2-енола (1,0 экв.) добавляли диоксан (0,18 М) и пТСК (п-толуолсульфоновая кислота) (1,1 экв.). Раствор нагревали при 100°С в течение 4 ч. Охлаждали до комнатной температуры, обрабатывали насыщенным раствором NаНСО3 и этилацетатом, органическую фазу сушили над №28О4 и концентрировали. Неочищенное вещество очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 100% ДХМ и получали 4-(циклогекса-1,3диенил)-3-нитропиридин в виде желтого масла (выход 27%).
ЖХМС (т/ζ): 203,1 (МН4), ЖХ К=3,53 мин, ’Н-ЯМР (СОС13): 9,02 (к, 1Н), 8,70 (б, 1=5,3 Гц, 1Н), 7,30 (б, 1=5,3 Гц, 1Н), 6,15-6,17 (т, 1Н), 6,026,11 (т, 2Н), 2,35-2,38 (т, 4Н).
Синтез (+/-)-2-азидо-4-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-3-енола
К раствору 4-(циклогекса-1,3-диенил)-3-нитропиридина (1,0 экв.) в ДХМ (0,1 М) добавляли NаНСО3 (1,2 экв.) и получали желтый раствор. Охлаждали до 0°С, затем к раствору одной порцией добавляли МХПБК (1,0 экв.) в виде твердого вещества. Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 3,5 ч. За протеканием реакции следили с помощью ТСХ и ЖХ/МС. Продукт ионизируется в виде М+Н = 237 (диол); ^=0,41 мин в ИРЬС. Реакцию останавливали насыщенным раствором ΝβΠ^^ затем экстрагировали с помощью ДХМ (3 раза). Органическую фазу дополнительно промывали рассолом, затем сушили над №28О4, фильтровали и концентрировали и получали неочищенный эпоксид в виде желтого масла, которое использовали без дополнительной очистки.
- 20 020136
К раствору полученного выше неочищенного вещества в Е!ОН и воде (3:1) (мутный желтый раствор) добавляли №Ν3 (2,0 экв.) и ΝΗ4Ο (2,0 экв.) и получали прозрачный оранжевый раствор. Реакционную смесь перемешивали в течение 16 ч, затем концентрировали. Е!ОАс и добавляли воду, органическую фазу дополнительно сушили над Мд8О4 и концентрировали и получали коричневое масло. Масло загружали в силикагель и очищали с помощью колоночной хроматографии (18СО, 0-50% Е!ОАс) и получали (+/-)-2-азидо-4-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-3-енол в виде желтого масла (44% за 2 стадии).
ЖХМС (т/ζ): 262 (МН+), ЖХ Я!=2,35 мин.
Синтез (+/-)-4-(3-азидо-4-(трет-бутилдиметилсилилокси)циклогекс-1-енил)-3-нитропиридина
К раствору (+/-)-2-азидо-4-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-3-енола (1,0 экв.) в ДХМ (0,15 М) при комнатной температуре добавляли ТВ8С1 (2,0 экв.), имидазол (2,0 экв.) и ДМАП (0,1 экв.). Через 18 ч добавляли воду, органические вещества промывали рассолом, затем сушили над №ь8О4 и концентрировали. Неочищенное вещество загружали в силикагель и очищали с помощью колоночной хроматографии (18СО) при элюировании этилацетатом и гексанами (20%). (+/-)-4-(3-Азидо-4-(третбутилдиметилсилилокси)циклогекс-1-енил)-3-нитропиридин получали в виде желтого масла с выходом 60%.
ЖХМС (т/ζ): 376,3 (МН+), ЖХ Я=5,848 мин.
Синтез (+/-)-трет-бутил-6-(трет-бутилдиметилсилилокси)-3-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-2енилкарбамата
В круглодонную колбу добавляли (+/-)-4-(3-азидо-4-(трет-бутилдиметилсилилокси)циклогекс-1енил)-3-нитропиридин (1,0 экв.) и пиридин (0,1 М) и получали желтый раствор. Добавляли гидроксид аммония (10:1 пиридин:гидроксид аммония), затем РМе3 (3,0 экв.). Через 10 мин реакционная смесь становилась темно-коричневой. Перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 ч. Реакцию останавливали путем добавления Е!ОН и концентрировали. Повторяли еще 2 раза. К неочищенному веществу добавляли насыщенный раствор NаΗСОз и диоксан (1:1, 0,1 М). Добавляли Вос2О (1,0 экв.). Перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре. Промывали с помощью Н2О и Е!ОАс, органическую фазу сушили над Мд8О4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (18СО, 5:1 Нех/Е!ОАс). Чистые фракции собирали и концентрировали и получали (+/-)-трет-бутил-6-(трет-бутилдиметилсилилокси)-3-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-2енилкарбамат в виде вспененного вещества.
ЖХМС (т/ζ): 450,3 (МН+), ЖХ Я!=5,83 мин.
Синтез (+/-)-трет-бутил-3-(3-аминопиридин-4-ил)-6-(трет-бутилдиметилсилилокси)циклогекс-2енилкарбамата
К раствору (+/-)-трет-бутил-6-(трет-бутилдиметилсилилокси)-3-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-2енилкарбамата (1,0 экв.) в АсОН (0,18 М) добавляли Ее (6,0 экв.) и реакционную смесь перемешивали в течение 20 ч. Обрабатывали путем разбавления реакционной смеси метанолом, фильтровали и фильтрат концентрировали. К неочищенному веществу добавляли этилацетат и насыщенный раствор NаΗСОз, органические вещества сушили над сульфатом натрия и концентрировали и получали (+/-)-трет-бутил-3(3-аминопиридин-4-ил)-6-(трет-бутилдиметилсилилокси)циклогекс-2-енилкарбамат в виде желтого масла с выходом 94%.
ЖХМС (т/ζ): 420,3 (МН+), ЖХ Я!=3,88 мин.
- 21 020136
Синтез (+/-)-трет-бутил-5-(3-аминопиридин-4-ил)-2-(трет-бутилдиметилсилилокси)циклогексилкарбамата
К раствору (+/-)-трет-бутил-3-(3-аминопиридин-4-ил)-6-(трет-бутилдиметилсилилокси)циклогекс-2енилкарбамата (1,0 экв.) в МеОН (0,1 М) добавляли Рб/С (20 мас.%) и реакционную смесь перемешивали в атмосфере водорода, подаваемого из баллона, в течение 18 ч. ЖХ/МС реакционной смеси указывала на наличие диастереоизомеров, реакционную смесь фильтровали, промывали с помощью Е!ОАс и фильтрат концентрировали. Неочищенное вещество очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (в ДМСО - диметилсульфоксид) и чистые фракции объединяли, нейтрализовывали твердым NаНСОз, экстрагировали этилацетатом, промывали рассолом, сушили над №г8О4 и концентрировали и получали продукт А (выход 8%) и продукт В (выход 51%).
Продукт А: ЖХМС (т/ζ): 422,4 (МН+), ЖХ Я1=3,75 мин.
Продукт В: ЖХМС (т/ζ): 422,4 (МН+), ЖХ Я1=3,94 мин.
Синтез 1,4-диоксаспиро [4,5]дец-7 -ен-8-илтрифторметансульфоната
1,4-Диоксаспиро[4,5]декан-8-он (1,0 экв.) растворяли в эфире (0,1 М) и перемешивали при -15°С затем добавляли 1 М NаНΜ^§ (1,05 экв.) и перемешивали в течение 70 мин, затем добавляли Т£2О (1,05 экв.) и реакционной смеси давали медленно нагреться до КТ. Смесь перемешивали в течение 28 ч, промывали насыщенным водным раствором NаНСОз и затем водой. Водные слои объединяли и экстрагировали эфиром. Органические слои объединяли, сушили над Мд§О4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали на колонке (этиловый эфир:гексаны = 1:4) и получали 1,4-диоксаспиро[4,5]дец-7-ен-8илтрифторметансульфонат (65%).
ЖХ/МС (т/ζ): МН+=289,0, Я4=0,97, ВЭЖХ Я4=3,77.
Синтез 4,4,5,5-тетраметил-2-(1,4-диоксаспиро[4,5]дец-7-ен-8-ил)-1,3,2-диоксаборолана
Раствор 1,4-диоксаспиро[4,5]дец-7-ен-8-илтрифторметансульфоната (1,0 экв.) в диоксане (0,5 М) продували азотом в течение 30 мин. Затем добавляли 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'-би(1,3,2диоксаборолан) (1,0 экв.), КОАс (3,0 экв.), Рб(брр£)С12-ДХМ (0,2 экв.) и раствор перемешивали в закры том автоклаве при 80°С. Реакционную смесь фильтровали через слой целита, затем к фильтрату добавляли этилацетат и промывали рассолом, сушили над Мд§О4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали на колонке (этилацетат:гексаны =1:1) и получали 4,4,5,5-тетраметил-2-(1,4диоксаспиро[4,5]дец-7-ен-8-ил)-1,3,2-диоксаборолан (95%).
ЖХ/МС (т/ζ): МН+=267,1, Я4=0,95.
Синтез 3 -нитро-4-( 1,4-диоксаспиро [4,5]дец-7 -ен-8-ил)пиридина Г~\
Раствор ДМЭ (0,2 М) и 2 М водный раствор карбоната натрия (1,7 экв.) продували азотом в течение 20 мин. Затем добавляли 4-хлор-3-нитропиридин (1,6 экв.), 4,4,5,5-тетраметил-2-(1,4диоксаспиро[4,5]дец-7-ен-8-ил)-1,3,2-диоксаборолан (1,0 экв.), Рб(брр£)С12-ДХМ (0,05 экв.) и перемешивали в закрытом автоклаве при 110°С. Реакционную смесь перемешивали при этой температуре в течение 3,5 ч. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом, промывали водой, сушили над Мд§О4, фильтро
- 22 020136 вали и концентрировали. Остаток очищали на колонке (этилацетат:гексаны = 1:1 с добавлением 10% метанола) и получали 3-нитро-4-(1,4-диоксаспиро[4,5]дец-7-ен-8-ил)пиридин (83%).
ЖХ/МС (т/ζ): МН+=263,2, К3=0,71.
Синтез 4-(3 -нитропиридин-4-ил)циклогекс-3 -енона
Смесь 3-нитро-4-(1,4-диоксаспиро[4,5]дец-7-ен-8-ил)пиридина (1,0 экв.) в 20% ТФК в СН2С12 (0,2 М) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Растворители удаляли при пониженном давлении. Остаток растворяли в этилацетате (200 мл) и промывали насыщенным раствором №1НСО3 (30 мл) и насыщенным раствором №1С1 (30 мл). Органические вещества сушили над Мд§О4, фильтровали и концентрировали и получали 4-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-3-енон (85%). Неочищенный продукт использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
ЖХ/МС (т/ζ): МН+=218,9, К- 0.60
Синтез 4-(3 -нитропиридин-4-ил)циклогекс-3 -енола он
К раствору 4-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-3-енона (1,0 экв.) в метаноле (0,2 М) при 0°С добавляли борогидрид натрия (1,8 экв.). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч. Метанол удаляли при пониженном давлении. Остаток растворяли в этилацетате (200 мл) и промывали насыщенным раствором ЫаС1 (30 мл). Органические вещества сушили над Мд§О4, фильтровали и концентрировали и получали 4-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-3-енол (85%). Неочищенный продукт использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
ЖХ/МС (т/ζ): МН+=221,0, К3=0,55.
Синтез 4-(3 -нитропиридин-4-ил)циклогекс-3 -енилметансульфоната
К раствору 4-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-3-енола (1,0 экв.) и ДИПЭА (диизопропилэтиламин) (2,5 экв.) в СН2С12 (0,15 М) при 0°С добавляли метансульфонилхлорид (1,8 экв.). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (200 мл) и промывали насыщенным раствором ЫаС1 (30 мл). Органические вещества сушили над Мд§О4, фильтровали и концентрировали и получали 4-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-3-енилметансульфонат (93%). Остаток использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
ЖХ/МС (т/ζ): МН+=299,0, К3=0,70.
Синтез 4-(циклогекса- 1,3-диенил)-3 -нитропиридина
К раствору 4-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-3-енилметансульфоната (1,0 экв.) в тетрагидрофуране (0,1 М) при комнатной температуре добавляли ДБУ (1,8-диазабикло[5.4.0]ундец-7-ен) (1,8 экв.). Реакционную смесь перемешивали при КТ в течение ночи. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (200 мл) и промывали насыщенным раствором ЫаС1 (30 мл). Органические вещества сушили над Мд§О4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали на колонке (5% метанола в смеси 1: 1 этилацетата и гексанов) и получали 4-(циклогекса-1,3-диенил)-3-нитропиридин.
ЖХ/МС (т/ζ): МН+=203,2, К3=0,85.
- 23 020136
Синтез (+/-)-трет-бутил-6-гидрокси-3 -(3 -нитропиридин-4-ил)циклогекс-2-енилкарбамата
К раствору (+/-)-2-азидо-4-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-3-енола (1,0 экв.) в пиридине и №Н4ОН (8:1, 0,23 М) при комнатной температуре добавляли триметилфосфин (3,0 экв.). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Растворители удаляли. К остатку добавляли этанол. Затем этанол удаляли в вакууме для обеспечения полного удаления аммиака. Остаток растворяли в 1,4-диоксане и к смеси добавляли насыщенный водный раствор бикарбоната натрия и затем Вос2О (1,0 экв.) в ТГФ. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом и промывали насыщенным раствором №С1. Органические вещества сушили над Мд§О4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали на колонке (5% метанола в смеси 1: 1 этилацетата и гексанов) и получали (+/-)-трет-бутил-6-гидрокси-3-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-2-енилкарбамат (82%).
ЖХ/МС (т/ζ): МН+=336,0, ^=0,71.
Синтез (+/-)-2-(трет-бутоксикарбониламино)-4-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-3енилметансульфоната
К раствору (+/-)-трет-бутил-6-гидрокси-3-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-2-енилкарбамата (1,0 экв.) и триэтиламина (1,5 экв.) в СН2С12 (0,2 М) при 0°С добавляли метансульфонилхлорид (1,2 экв.). Смесь перемешивали в течение 2 ч при этой температуре. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом и промывали насыщенным раствором ЫаС1. Органические вещества сушили над Мд§О4, фильтровали и концентрировали и получали (+/-)-2-(трет-бутоксикарбониламино)-4-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-3енилметансульфонат (85%), который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
ЖХ/МС (т/ζ): МН+=414,0, Κ4=0,82.
Синтез (+/-)-5-(3-нитропиридин-4-ил)-3,3а,7,7а-тетрагидробензо[Е]оксазол-2(6Н)-она
Смесь (+/-)-2-(трет-бутоксикарбониламино)-4-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-3енилметансульфоната (1,0 экв.) с пиридином (0,21 М) перемешивали в микроволновой печи при 110°С в течение 10 мин. Пиридин удаляли при пониженном давлении. Остаток растворяли в этилацетате и промывали насыщенным раствором ЫаС1. Органические вещества сушили над Мд§О4, фильтровали и концентрировали и получали (+/-)-5-(3-нитропиридин-4-ил)-3,3а,7,7а-тетрагидробензо[Е]оксазол-2(6Н)-он (85%), который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
ЖХ/МС (т/ζ): МН+=262,1, Κί=0,49.
Синтез (+/-)-трет-бутил-5-(3-нитропиридин-4-ил)-2-оксо-3а,6,7,7а-тетрагидробензо[Е]оксазол3 (2Н)-карбоксилата
К раствору (+/-)-5-(3-нитропиридин-4-ил)-3,3а,7,7а-тетрагидробензо[Е]оксазол-2(6Н)-она (1,0 экв.), ТЭА (1,8 экв.) и каталитического количества ДМАП в СН2С12 (0,19 М) при комнатной температуре добавляли ди-трет-бутилдикарбонат (1,2 экв.). Реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (100 мл) и промывали насыщенным раствором ЫаС1 (30 мл). Орга
- 24 020136 нические вещества сушили над Мд8О4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали на колонке (5% метанола в смеси 1:1 этилацетата и гексанов) и получали (+/-)-трет-бутил-5-(3-нитропиридин-4-ил)2-оксо-3а,6,7,7а-тетрагидробензо[б]оксазол-3(2Н)-карбоксилат (98%).
ЖХ/МС (т/ζ): МН+=306,0, К1=0,75.
Синтез (+/-)-трет-бутил-5-(3-аминопиридин-4-ил)-2-оксогексагидробензо[б]оксазол-3(2Н)карбоксилата
К раствору (+/-)-трет-бутил-5-(3-нитропиридин-4-ил)-2-оксо-3а,6,7,7а-тетрагидробензо[б]оксазол3(2Н)-карбоксилата (1,0 экв.) в метаноле и этилацетат (1:1, 0,1 М) добавляли 10% Рб/С (0,1 экв.). Полученную смесь перемешивали в атмосфере Н2 в течение 6 ч. Твердое вещество удаляли фильтрованием. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и получали (+/-)-трет-бутил-5-(3-аминопиридин4-ил)-2-оксогексагидробензо[б]оксазол-3(2Н)-карбоксилат (87%), который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
ЖХ/МС (т/ζ): МН+=334,1, К1=0,51.
Синтез 5-метил-3-оксоциклогекс-1-енилтрифторметансульфоната
К раствору 5-метилциклогексан-1,3-диона (1,0 экв.) в ДХМ (0,5 М) добавляли №-ьС.’О3 (1,1 экв.) и охлаждали до 0°С. В течение 1 ч при 0°С в атмосфере азота по каплям добавляли Т£2О (1,0 экв.) в ДХМ (5,0 М). После добавления реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре (темно-красный раствор). Раствор фильтровали и фильтрат нейтрализовывали до рН 7 путем осторожного добавления насыщенного раствора NаНСО3 при энергичном перемешивании. Раствор переносили в делительную воронку и слои разделяли. Органический слой промывали рассолом, сушили над №28О4, фильтровали, концентрировали в вакууме и сушили в высоком вакууме в течение 15 мин и получали 5-метил-3-оксоциклогекс-1-енилтрифторметансульфонат в виде светло-желтого масла с выходом 78%. Трифлат разлагается при хранении, и его необходимо сразу использовать в следующей реакции.
ЖХ/МС=259,1/300,1 (М+Н и М+СН3СЦ); К=0,86 мин, ЖХ = 3,84 мин.
Ή-ЯМР (400 МГц, СОС1;) δ част./млн: 6,05 (к, 1Н), 2,70 (бб, 1=17,2, 4,3 Гц, 1Н), 2,53 (бб, 1=16,6, 3,7 Гц, 1Н), 2,48-2,31 (т, 2Н), 2,16 (бб, 1=16,4, 11,7 Гц, 1Н), 1,16 (б, 1=5,9 Гц, 3Н).
Синтез 5-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)циклогекс-2-енона
К раствору 5-метил-3-оксоциклогекс-1-енилтрифторметансульфоната (1,0 экв.) в дегазированном диоксане (0,7 М) добавляли бис-(пинаколято)дибор (2,0 экв.), КОАс (3,0 экв.) и Рб(бррЦС12-ДХМ (0,03 экв.). Реакционную смесь нагревали при 80°С в течение 10 ч (сильное начальное нагревание приводит к образованию оранжевой пены в верхней части раствора с разогревом, нагревающую баню следует удалить до оседания пены, повторно нагреть до 80°С и при этой температуре пена не образуется), затем охлаждали до комнатной температуры и фильтровали через воронку с грубым фильтром из пористого стекла. Осадок на фильтре дополнительно промывали диоксаном и фильтрат использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
ЖХ/МС (жидкостная хроматография/масс-спектроскопия) = 155,1 (М+Н бороновой кислоты); К=0,41 мин, ЖХ = 1,37 мин.
Синтез 5-метил-3-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-2-енона
К раствору 5-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)циклогекс-2-енона (1,0 экв.) в дегазированном диоксане (0,5 М) и 2 М №-ьС.'О3 (2 экв.) добавляли 4-хлор-3-нитропиридин (1,3 экв.) и
- 25 020136
Рά(άρρί)С12-ΑXМ (0,05 экв.). Реакционную смесь помещали в колбу, снабженную обратным холодильником, и нагревали на масляной бане при 110°С в течение 1 ч. Охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через слой целита, слой промывали этилацетатом и фильтрат концентрировали в вакууме. Остаток дополнительно выпаривали при 80°С в роторном испарителе в течение 1 ч для удаления борсодержащих промежуточных продуктов (М+Н=101) путем возгонки. Остаток подвергали распределению между рассолом и этилацетатом и слои разделяли, водную фазу дополнительно экстрагировали этилаце татом (4х), органические вещества объединяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Неочищенное вещество очищали с помощью хроматографии на силикагеле в ДХМ и при элюировании смесью 2-50% этилацетата и гексанов. Чистые фракции концентрировали в вакууме и получали оранжевое масло. Масло выдерживали в высоком вакууме (~500 мторр) с затравочными кристаллами в течение ночи и получали оранжевое твердое вещество. Твердое вещество дополнительно очищали путем растирания с гексанами и получали 5-метил-3-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-2-енон (48%, 2 стадии).
ЖХ/МС = 233,2 (М+Н); К1=0,69 мин, ЖХ = 2,70 мин.
Ή-ЯМР (400 МГц, СаС13) δ част./млн: 9,31 (8, 1Н), 8,88 (ά, 1=5,1 Гц, 1Н), 7,30 (ά, 1=5,1 Гц, 1Н), 6,00 (ά, 1=2,4 Гц, 1Н), 2,62 (άά, 1=16,4, 3,5 Гц, 1Н), 2,53-2,34 (т, 3Н), 2,23 (άά, 1=16,1, 11,7 Гц, 1Н), 1,16 (ά,
1=6,3 Гц, 3Н).
Синтез цис-(+/-)-5-метил-3-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-2-енола
К раствору 5-метил-3-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-2-енона (1,0 экв.) в Е!ОН (0,3 М) добавляли СсС13-7Н2О (1,2 экв.). Реакционную смесь охлаждали до 0°С, затем порциями добавляли №-1ВН4 (1,2 экв.). Перемешивали в течение 1 ч при 0°С, затем реакцию останавливали путем добавления воды, концентрировали для удаления ЕЮН, добавляли ЕЮЛс, экстрагировали органические вещества, промывали рассолом, затем сушили над №28О4, фильтровали и концентрировали и получали цис-(+/-)-5-метил-3-(3нитропиридин-4-ил)циклогекс-2-енол (94%).
ЖХ/МС = 235,2 (М+Н), ЖХ = 2,62 мин.
Синтез 4-(3 -(трет-бутилдиметилсилилокси)-5 -метилциклогекс-1 -енил)-3 -нитропиридина
К раствору 5-метил-3-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-2-енола (1,0 экв.) в ДМФ (0,5 М) добавляли имидазол (4,0 экв.) и ТВОМ8С1 (2,5 экв.). После перемешивания в течение 18 ч раствор подвергали распределению между ЕЮЛс и Н2О и разделяли. После дополнительной промывки с помощью Н2О (2х) и №С1(8а1), сушки над Мд8О4, фильтрования и удаления растворителей получали 4-(3-(третбутилдиметилсилилокси)-5-метилциклогекс-1-енил)-3-нитропиридин (85%).
ЖХ/МС = 349,2 (М+Н), ЖХ = 5,99 мин.
Синтез 4-(3 -(трет-бутилдиметилсилилокси)-5 -метилциклогекс-1 -енил)пиридин-3 -амина
Г етерогенный раствор 4-(3 -(трет-бутилдиметилсилилокси)-5-метилциклогекс-1 -енил)-3 нитропиридина (1,0 экв.) и железо (6,0 экв.) в уксусной кислоте при концентрации, равной 0,4 М, энергично перемешивали в течение 2 ч. Смесь затем пропускали через слой целита, при элюировании с помощью МеОН. После удаления летучих веществ в вакууме остаток растворяли в ЕЮЛс, промывали с помощью №2СО3(8а1), №С1(8а1), сушили над Мд8О4, фильтровали и летучие вещества удаляли в вакууме и получали 4-(3-(трет-бутилдиметилсилилокси)-5-метилциклогекс-1-енил)пиридин-3-амин (78%).
ЖХМС (т/ζ): 319,3 (МН+); ЖХ К1=3,77 мин.
Синтез 4-(3 -(трет-бутилдиметилсилилокси)-5 -метилциклогексил)пиридин-3 -амина
ΧΤΉ
- 26 020136
К раствору 4-(3 -(трет-бутилдиметилсилилокси)-5 -метилциклогекс -1 -енил) -3 -нитропиридина (1,0 экв.) в метаноле при концентрации, равной 0,1 М, добавляли 10% палладий на угле (0,1 экв.). Полученный гетерогенный раствор помещали в атмосферу водорода и перемешивали в течение 15 ч. Затем смесь фильтровали через слой целита при элюировании метанолом. Летучие вещества удаляли в вакууме и получали 4-(3-(трет-бутилдиметилсилилокси)-5-метилциклогексил)пиридин-3-амин (90%).
ЖХМС (т/ζ): 321,3 (МН4); ЖХ К1=3,85 мин.
Синтез цис-(+/-)-бензил-4-(3-(трет-бутилдиметилсилилокси)-5-метилциклогексил)пиридин-3илкарбамата .ЮТВЦМ8
К раствору цис-(+/-)-4-(3-(трет-бутилдиметилсилилокси)-5-метилциклогексил)пиридин-3-амина в дихлорметане при концентрации, равной 0,5 М, добавляли бензил-2,5-диоксопирролидин-1-ил карбонат (1,1 экв.) и ДМАП (0,05 экв.). После перемешивания в течение 16 ч при КТ добавляли еще бензил-2,5диоксопирролидин-1-илкарбонат (0,55 экв.) и ДМАП (0,03 экв.). После перемешивания в течение еще 24 ч при КТ добавляли еще бензил-2,5-диоксопирролидин-1-илкарбонат (0,1 экв.) и ДМАП (0,03 экв.). После перемешивания в течение еще 18 ч раствор подвергали распределению между ЕЮАс и Ыа2СО3(8а1) и разделяли. После дополнительной промывки с помощью Ыа2СО3(8а1) (2х) и ЫаС1(8а1), сушки над Мд8О4, фильтрования и удаления растворителей получали цис-(+/-)-бензил-4-(3-(трет-бутилдиметилсилилокси)5-метилциклогексил)пиридин-3-илкарбамат. Неочищенное вещество использовали без обработки.
ЖХ/МС = 455,3 (М+Н), ЖХ = 4,39 мин.
Синтез цис-(+/-)бензил-4-(3-гидрокси-5-метилциклогексил)пиридин-3-илкарбамата
Раствор цис-(+/-)-бензил-4-(3-(трет-бутилдиметилсилилокси)-5-метилциклогексил)пиридин-3илкарбамата в смеси 1:2:1 6н. НС1/ТГФ/МеОН при концентрации, равной 0,1 М, перемешивали при КТ в течение 6 ч. Затем значение рН доводили до 7 путем добавления 6н. ЫаОН и летучие вещества удаляли в вакууме. Водный слой экстрагировали с помощью ЕЮАс и органическое вещество промывали с помощью КаС1(8а1), сушили над Мд8О4, фильтровали и после удаления летучих веществ в вакууме получали цис-(+/-)бензил-4-(3-гидрокси-5-метилциклогексил)пиридин-3-илкарбамат. Неочищенное вещество использовали без обработки.
ЖХ/МС = 341,2 (М+Н), ЖХ = 2,38 мин.
Синтез цис-(+/-)-бензил-4-(3-метил-5-оксоциклогексил)пиридин-3-илкарбамата
При 0°С к раствору цис-(+/-)-бензил-4-(3-гидрокси-5-метилциклогексил)пиридин-3-илкарбамата во влажном СН2С12 при концентрации, равной 0,16 М, добавляли перйодинан Десса-Мартина (1,5 экв.) и раствор перемешивали в течение 18 ч, пока он нагревался до КТ. Раствор подвергали распределению между ЕЮАс и 1:1 10% Ыа282О3/МаНСО3(8а1) и разделяли. После дополнительной промывки с помощью 1:1 10% Па282О3/ПаНСО3(8а1) (2х) и ЫаС1(8а1), сушки над Мд8О4, фильтрования, удаления растворителей и очистки с помощью хроматографии на силикагеле (75-100% ЕЮАс/гексаны) получали цис-(+/-)-бензил4-(3-метил-5-оксоциклогексил)пиридин-3-илкарбамат в виде белого твердого вещества (53%, 5 стадий).
ЖХ/МС = 339,2 (М+Н).
Синтез цис-(+/-)-бензил-4-(-3-(бензиламино)-5-метилциклогексил)пиридин-3-илкарбамата
ЦНСЬг
N
Раствор цис-(+/-)-бензил-4-(3-метил-5-оксоциклогексил)пиридин-3-илкарбамата (1,0 экв.) и бензиламина (3,0 экв.) в МеОН при концентрации, равной 0,25 М, перемешивали при КТ в течение 2 ч. При охлаждении в бане до -78°С добавляли Ь1ВН4 (1,1 экв., 2,0 М в ТГФ) и раствору при перемешивании
- 27 020136 давали нагреваться до КТ в течение 16 ч. Раствор подвергали распределению между ЕЮАс и №1НС’О3|· разделяли, дополнительно промывали с помощью ШНС’Озн,,,!, и №С1(8а1), сушили над Мд§О4, фильтровали и после удаления летучих веществ в вакууме получали цис-(+/-)-бензил-4-(3-(бензиламино)-5метилциклогексил)пиридин-3-илкарбамат в виде 4:1 смеси изомеров с преобладанием полностью цис изомера.
ЖХ/МС = 430,3 (М+Н), ЖХ = 0,62 мин.
Синтез цис-(+/-)-трет-бутил-(3-(3-аминопиридин-4-ил)-5-метилциклогексилкарбамата ^_.МНВос
N
К раствору цис-(+/-)-бензил-4-(3-(бензиламино)-5-метилциклогексил)пиридин-3-илкарбамата (1,0 экв.) в метаноле при концентрации, равной 0,07 М, добавляли 20% гидроксид палладия на угле (0,2 экв.). Полученный гетерогенный раствор помещали в атмосферу водорода и перемешивали в течение 14 ч. Затем реакционную смесь продували с помощью Аг, добавляли Вос2О (1,0 экв.) и раствор перемешивали в течение 8 ч. Добавляли еще Вос2О (1,0 экв.) и раствор перемешивали в течение еще 16 ч. Затем смесь фильтровали через слой целита при элюировании метанолом. После удаления летучих веществ в вакууме очистка с помощью хроматографии на силикагеле (2,5-2,5 МеОН/СН2С12 с добавлением 0,1% ДИЭА) и перекристаллизация из 10% ЕЮАс/гексаны давала цис-(+/-)-трет-бутил-(3-(3-аминопиридин-4ил)-5-метилциклогексилкарбамат (49%).
ЖХМС (т/ζ): 306,3 (МН+), ЖХ К=2,59 мин.
Чистые энантиомеры можно было получить с помощью хиральной хроматографии.
Синтез (+/-)-4-(5-метилциклогекса-1,3-диенил)-3-нитропиридина
К раствору (+/-)-5-метил-3-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-2-енола (1,0 экв.) в диоксане (0,1М) добавляли п-ТСК (1,0 экв.) и реакционную смесь перемешивали при 100°С в течение 3 ч. Раствор охлаждали до комнатной температуры, затем пропускали через слой нейтрального оксида алюминия при элюировании с помощью ЕЮАс и получали (+/-)-4-(5-метилциклогекса-1,3-диенил)-3-нитропиридин в виде желтого масла с выходом 68%.
ЖХ/МС = 217,1 (М+Н), ЖХ = 3,908 мин.
Синтез (+/-)-2-азидо-6-метил-4-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-3-енола он
К раствору (+/-)-4-(5-метилциклогекса-1,3-диенил)-3-нитропиридина (1,0 экв.) в ДХМ (0,1 М) при
0°С добавляли МХПБК (1,1 экв.) и реакционной смеси давали нагреться до комнатной температуры. Через 3 ч реакцию останавливали насыщенным раствором NаНСО3, экстрагировали с помощью ДХМ и органическую фазу сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали и получали желтое масло. Неочищенное вещество растворяли в этаноле и воде (3:1, 0,1 М) и добавляли азид натрия (2,0 экв.) и хлорид аммония (2,0 экв.). Реакционную смесь перемешивали в течение 4 ч, затем концентрировали в вакууме. К неочищенному веществу добавляли этилацетат и воду, органическую фазу промывали рассолом, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Неочищенное вещество очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании этилацетатом и гексанами (1:1) и получали (+/-)-2-азидо-6-метил-4-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-3-енол в виде масла с выходом 49%.
ЖХ/МС = 276,1 (М+Н), Κί=0,71 мин.
Синтез трет-бутил-(+/-)-6-гидрокси-5-метил-3-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-2-енилкарбамата
- 28 020136
К раствору (+/-)-2-азидо-6-метил-4-(3-нитроииридин-4-ил)циклогекс-3-енола (1,0 экв.) в ииридине и гидроксиде аммония (8:1, 0,08 М) добавляли триметилфосфин (3,0 экв.) и коричневый раствор иеремешивали ири комнатной темиературе в течение 2 ч. К смеси добавляли этанол и раствор концентрировали в вакууме (2х). Затем неочищенную смесь растворяли в диоксане и добавляли насыщенный раствор Ν;·ιΗί.Ό3 (1:1, 0,08 М) и Вос2О (1,0 экв.). Раствор иеремешивали ири комнатной темиературе в течение 2 ч, затем иодвергали расиределению между этилацетатом и водой. Органическую фазу сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали в вакууме. Неочищенный иродукт очищали с иомощью колоночной хроматографии на силикагеле ири элюировании этилацетатом и гексанами (1:1) и иолучали трет-бутил-(+/-)-6-гидрокси-5-метил-3-(3-нитроииридин-4-ил)циклогекс-2-енилкарбамат с выходом 69%.
ЖХ/МС = 350,1 (М+Н), 1+0.76 мин.
Синтез (+/-)-2-(трет-бутоксикарбониламино)-6-метил-4-(3-нитроииридин-4-ил)циклогекс-3енилметансульфоната
К раствору трет-бутил-(+/-)-6-гидрокси-5-метил-3-(3-нитроииридин-4-ил)циклогекс-2енилкарбамата (1,0 экв.) в ДХМ (0,09 М) добавляли триэтиламин (1,5 экв.). Реакционную смесь охлаждали до 0°С и к реакционной смеси добавляли М§С1 (1,2 экв.) и иеремешивали в течение 3 ч. К раствору добавляли воду, органическую фазу сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Неочищенное вещество очищали с иомощью колоночной хроматографии на силикагеле ири элюировании этилацетатом и гексанами (1:1) и иолучали (+/-)-2-(трет-бутоксикарбониламино)-6-метил-4-(3нитроииридин-4-ил)циклогекс-3-енилметансульфонат в виде белого всиененного вещества с выходом 65%.
ЖХ/МС = 428,2 (М+Н), К=0,88 мин.
Синтез тетрагидробензо[б]оксазол-3(2Н)-карбоксилата (+/-)-трет-бутил-7-метил-5-(3-нитроииридин-4-ил)-2-оксо-3а,6,7,7а-
Раствор (+/-)-2-(трет-бутоксикарбониламино)-6-метил-4-(3-нитроииридин-4-ил)циклогекс-3енилметансульфонат (1,0 экв.) в ииридине (0,2 М) в сосуде для микроволновой иечи нагревали ири 110°С в течение 10 мин. Затем оранжевый раствор концентрировали досуха и обрабатывали иутем расиределения между этилацетатом и водой. Органическую фазу сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Неочищенное вещество растворяли в ДХМ (0,2 М) и к реакционной смеси добавляли триэтиламин (1,8 экв.), затем Вос2О (1,2 экв.). После иеремешивания ири комнатной темиературе в течение 40 мин реакционную смесь концентрировали в вакууме и очищали с иомощью колоночной хроматографии на силикагеле ири элюировании этилацетатом и гексанами (1:1) и иолучали (+/-)-трет-бутил-7метил-5-(3-нитроииридин-4-ил)-2-оксо-3а,6,7,7а-тетрагидробензо[б]оксазол-3(2Н)-карбоксилат в виде белого всиененного вещества с выходом 66%.
ЖХ/МС = 376,0 (М+Н), И. 0.87 мин.
Синтез (+/-)-трет-бутил-5-(3-аминоииридин-4-ил)-7-метил-2-оксогексагидробензо[б]оксазол-3(2Н)карбоксилата
N
К раствору (+/-)-трет-бутил-7-метил-5-(3-нитроииридин-4-ил)-2-оксо-3а,6,7,7атетрагидробензо[б]оксазол-3(2Н)-карбоксилата (1,0 экв.) в МеОН и этилацетате (1:1, 0,07 М) добавляли 10% Ρά/С (0,1 экв.) и реакционную смесь иеремешивали ири комнатной темиературе в атмосфере водорода. После завершения реакции раствор фильтровали через слой целита, иромывали с иомощью МеОН
- 29 020136 и этилацетатом, фильтрат концентрировали досуха в вакууме и получали (+/-)-трет-бутил-5-(3аминопиридин-4-ил)-7-метил-2-оксогексагидробензо[б]оксазол-3(2Н)-карбоксилат в виде смеси диастереоизомеров с выходом >99%.
ЖХ/МС = 348,2 (М+Н), К1=0,50 мин.
Синтез (+/-)-6-бром-5-метил-3-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-2-енола
К раствору 4-(5-метилциклогекса-1,3-диенил)-3-нитропиридина (1,0 экв.) в ТГФ и воде (1:1, 0,13 М) добавляли ΝΒ8 (1,5 экв.) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. После завершения реакции к реакционной смеси добавляли этилацетат и воду, органическую фазу промывали рассолом, затем сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Неочищенное вещество очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании этилацетатом и гексанами (1:1) и получали (+/-)-6-бром-5-метил-3-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-2енол в виде желтого масла с выходом 80%.
ЖХ/МС = 315,0/313,0 (М+Н), ЖХ = 2,966 мин.
Синтез (+/-)-2-азидо-6-метил-4-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-3-енола он
N
К раствору (+/-)-6-бром-5-метил-3-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-2-енола (1,0 экв.) в ТГФ (0,1 М) добавляли трет-бутоксид калия (1,5 экв.). Реакционная смесь почти сразу из оранжевой становилась черной. По данным ТСХ через 30 мин образование продукта завершалось. Реакцию останавливали путем добавления насыщенного раствора хлорида аммония и этилацетата. Органическую фазу промывали рассолом, затем сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт растворяли в этаноле и воде (3:1, 0,1 М) и добавляли хлорид аммония (2,0 экв.) и азид натрия (2,0 экв.). Темно-оранжевую реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. По данным ЖХ/МС превращение в продукт завершалось. Реакционную смесь концентрировали для удаления этанола, добавляли этилацетат и воду и органическую фазу сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Неочищенное вещество очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании этилацетатом и гексанами (1:1) и получали (+/-)-2-азидо-6-метил-4(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-3-енол с выходом 55%.
ЖХ/МС = 276,0 (М+Н), ЖХ = 2,803 мин.
Синтез (+/-)-трет-бутил-6-гидрокси-5-метил-3-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-2-енилкарбамата он
N
К раствору (+/-)-2-азидо-6-метил-4-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-3-енола (1,0 экв.) в пиридине и гидроксиде аммония (8:1, 0,08 М) добавляли триметилфосфин (3,0 экв.) и коричневый раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. После завершения реакции добавляли Е(ОН и раствор концентрировали в вакууме. Добавляли еще этанол и реакционную смесь повторно концентрировали. К неочищенному веществу добавляли диоксан и насыщенный раствор NаΗСΟ3 (1:1, 0,08 М), затем Вос2О (1,0 экв.). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, затем добавляли воду и этилацетат. Органическую фазу сушили над Мд§О4 и концентрировали. Неочищенный продукт очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании этилацетатом и гексанами (1:1) и получали (+/-)-трет-бутил-6-гидрокси-5-метил-3-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-2енилкарбамат (59%).
ЖХ/МС = 350,1 (М+Н), К 0,76 мин.
- 30 020136
Синтез енилацетата (+/-)-2-(трет-бутоксикарбониламино)-6-метил-4-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-3-
К раствору (+/-)-трет-бутил-6-гидрокси-5-метил-3-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-2енилкарбамата (1,0 экв.) в пиридине (0,1 М) добавляли Ас2О (2,0 экв.) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После завершения реакции реакционную смесь концентрировали досуха, затем обрабатывали этилацетатом и водой. Органическую фазу промывали рассолом, затем сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали и получали (+/-)-2-(третбутоксикарбониламино)-6-метил-4-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-3-енилацетат с выходом 94%.
ЖХ/МС = 392,2 (М+Н), Я!=0,94 мин.
Синтез (+/-)-4-(3-аминопиридин-4-ил)-2-(трет-бутоксикарбониламино)-6-метилциклогексилацетата рАс
К дегазированному раствору (+/-)-2-(трет-бутоксикарбониламино)-6-метил-4-(3-нитропиридин-4ил)циклогекс-3-енилацетата (1,0 экв.) в МеОН и Е!ОАс (1:1, 0,1 М) добавляли 10% Рб/С (0,1 экв.) и реакционную смесь в течение 3 дней перемешивали при комнатной температуре в атмосфере водорода, подаваемого из баллона. После завершения реакции раствор фильтровали через слой целита, слой промывали этилацетатом и фильтрат концентрировали. Неочищенное вещество содержало примерно 10% нежелательного изомера. Неочищенное вещество растворяли в этилацетате (~20%) и гексанах и нагревали до растворения всех веществ. Раствор выдерживали при комнатной температуре в течение 2 дней. Затем осадок собирали и получали (+/-)-4-(3-аминопиридин-4-ил)-2-(трет-бутоксикарбониламино)-6метилциклогексилацетат в виде чистого продукта с выходом 59%.
ЖХ/МС = 364,3 (М+Н), Я!=0,63 мин.
Синтез енилметансульфоната
2-(трет-бутоксикарбониламино)-6-метил-4-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-3-
К раствору трет-бутил-6-гидрокси-5-метил-3-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-2-енилкарбамата (1,0 экв.) в ДХМ (0,09 М) добавляли триэтиламин (1,5 экв.) и реакционную смесь охлаждали до 0°С. К реакционной смеси добавляли МкС1 (1,2 экв.) и перемешивали в течение 3 ч. К реакционной смеси добавляли еще 1,0 экв. МкС1 и перемешивали в течение еще 2 ч. Реакционную смесь обрабатывали путем добавления воды, органическую фазу промывали рассолом, сушили над сульфатом натрия и концентрировали. Неочищенный продукт очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании этилацетатом и гексанами (1:1) и получали 2-(трет-бутоксикарбониламино)-6-метил-4-(3нитропиридин-4-ил)циклогекс-3-енилметансульфонат в виде белого вспененного вещества с выходом 65%.
ЖХ/МС = 428,2 (М+Н), ЖХ = 3,542 мин.
Синтез (+/-)-трет-бутил-7 -метил-5 -(3 -нитропиридин-4-ил)-2-оксо-3 а,6,7,7атетрагидробензо[б]оксазол-3(2Н)-карбоксилата
Раствор (+/-)-2-(трет-бутоксикарбониламино)-6-метил-4-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-3енилметансульфоната (1,0 экв.) в пиридине (0,2 М) нагревали в микроволновой печи при 110°С в течение
- 31 020136 мин. Затем оранжевую реакционную смесь концентрировали в вакууме, неочищенное вещество растворяли в этилацетате и воде, органическую фазу сушили над сульфатом натрия и концентрировали в вакууме. Неочищенное вещество растворяли в ДХМ (0,2 М), добавляли триэтиламин (1,8 экв.), затем Вос2О (1,2 экв.). Реакционную смесь перемешивали в течение 40 мин, затем концентрировали досуха. Неочищенное вещество очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании смесью гексана и этилацетата (1:1) и получали (+/-)-трет-бутил-7-метил-5-(3-нитропиридин-4-ил)-2оксо-3а,6,7,7а-тетрагидробензо[б]оксазол-3(2Н)-карбоксилат в виде белого вспененного вещества с выходом 66%.
ЖХ/МС = 376,0 (М+Н), ЖХ = 3,424 мин.
Синтез (+/-)-трет-бутил-5-(3-аминопиридин-4-ил)-7-метил-2-оксогексагидробензо[б]оксазол-3(2Н)карбоксилата
К дегазированному раствору (+/-)-трет-бутил-7-метил-5-(3-нитропиридин-4-ил)-2-оксо-3а,6,7,7атетрагидробензо[б]оксазол-3(2Н)-карбоксилата (1,0 экв.) в МеОН и ЕЮАе (1:1, 0,1 М) добавляли 10% Рб/С (0,1 экв.). Реакционную смесь в течение ночи перемешивали в атмосфере водорода, подаваемого из баллона. После завершения реакции раствор фильтровали через слой целита и слой промывали этилацетатом. Фильтрат концентрировали в вакууме и получали (+/-)-трет-бутил-5-(3-аминопиридин-4-ил)-7метил-2-оксогексагидробензо[б]оксазол-3(2Н)-карбоксилат в качестве искомого продукта в виде желтого вспененного вещества с выходом 93%.
ЖХ/МС = 348,1 (М+Н), 1+055 мин.
Синтез ((+/-)-(1Я,2К,68)-6-метил-4-(3 -нитропиридин-4-ил)циклогекс-3 -ен-1,2-диола и (+/-)-(1К,28,68)-6-метил-4-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-3-ен-1,2-диола)
N N
К раствору (+/-)-(18,5§,6§)-6-бром-5-метил-3-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-2-енола (1,0 экв.) в ТГФ (0,1 М) при комнатной температуре добавляли трет-бутоксид калия (1,5 экв.). Реакционную смесь перемешивали в течение 10 мин. Реакцию останавливали раствором ЫН4С1 и обрабатывали с помощью ЕЮАе и промывали водой и рассолом. Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и сушили в вакууме. Неочищенный продукт использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
КГ=0,5 (50% ЕЮАе/гексаны).
ЖХМС: МН+ 251,2 (в виде диола), К1=0,49 мин.
К раствору неочищенного (+/-)-4-((18,58)-5-метил-7-оксабицикло[4.1.0]гепт-2-ен-3-ил)-3нитропиридина (1,0 экв.) в смеси 2:1 СН3СЫ/Н2О (0,1 М) при комнатной температуре добавляли уксусную кислоту (0,3 экв.). Реакционную смесь перемешивали в течение 16 ч при комнатной температуре. Затем реакцию останавливали раствором ЫаНСО3, реакционную смесь концентрировали для удаления большей части СН3СЫ и остаток подвергали распределению между ЕЮАе и водой. Объединенный органический слой промывали водой и рассолом, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме. Смесь диолов ((+/-)-(1К,2К,68)-6-метил-4-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс3-ен-1,2-диола и (+/-)-(1К,28,68)-6-метил-4-(3-нитропиридин-4-ил)циклогекс-3-ен-1,2-диола) получали с помощью колоночной флэш-хроматографии в виде белого твердого вещества с выходом 33,1%.
КГ = 0,3 (100% ЕЮАе; диолы не разделялись с помощью ТСХ).
ЖХМС: МН+ = 251,2, =0,49 мин.
- 32 020136
Синтез (+/-)-4-((38,4В,58)-3,4-бис-(трет-бутилдиметилсилилокси)-5-метилциклогекс-1-енил)-3нитропиридина и (+/-)-4-((3В,4В,58)-3,4-бис-(трет-бутилдиметилсилилокси)-5-метилциклогекс-1-енил)3-нитропиридина
К раствору смеси диолов (1,0 экв.) в ДМФ (0,3 М) при комнатной температуре добавляли ТВЭМ8С1 (7,0 экв.) и имидазол (9 экв.). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Затем реакцию останавливали насыщенным раствором NаНСΟз. Реакционную смесь экстрагировали с помощью ЕЧОАс. Объединенный органический слой промывали водой и рассолом, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме. Смесь последовательно очищали с помощью автоматической колоночной хроматографии на диоксиде кремния (градиентный режим при элюировании с помощью ЕЧОАс и гексанов) и препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой (55-95% ацетонитрила в воде, затем 5-95% ацетонитрила в воде) и получали (+/-)-4-((38,4В,58)-3,4-бис-(третбутилдиметилсилилокси)-5-метилциклогекс-1-енил)-3-нитропиридин (27,2%) и (+/-)-4-((3В,4В,58)-3,4бис-(трет-бутилдиметилсилилокси)-5-метилциклогекс-1-енил)-3-нитропиридин (50,2%).
ЖХМС: МН+ = 479,2, Ηί =1,60 и 1,63 мин.
Синтез 4-((18,38,48,5В)-3,4-бис-(трет-бутилдиметилсилилокси)-5-метилциклогексил)пиридин-3амина и 4-((1В,3В,4В,58)-3,4-бис-(трет-бутилдиметилсилилокси)-5-метилциклогексил)пиридин-3-амина
К раствору (+/-)-4-((3К,4К,58)-3,4-бис-(трет-бутилдиметилсилилокси)-5-метилциклогекс-1 -енил)-3 нитропиридина (1,0 экв.) в смеси этанол/ЕЧОАс при концентрации, равной 0,1 М, добавляли 10% палладий на угле (0,1 экв.). Полученный гетерогенный раствор помещали в атмосферу водорода и перемешивали в течение 14 ч. Затем смесь фильтровали через слой целита при элюировании с помощью Е!ОАс. Летучие вещества удаляли в вакууме и неочищенное вещество очищали с помощью автоматической колоночной хроматографии на диоксиде кремния (В(=0,2, 40% ЕЧОАс в гептане) и получали чистый рацемический продукт.
ЖХМС: МН+ = 451,3, ВЧ=1,35 мин.
Рацемическое соединение разделяли с помощью хиральной хроматографии (колонка ГС, 1 мл/мин, 5% ИПС (изопропиловый спирт) в гептане) и получали 4-((18,38,48,5В)-3,4-бис-(третбутилдиметилсилилокси)-5-метилциклогексил)пиридин-3-амин (6,01 мин) и 4-((1В,3В,4В,58)-3,4-бис(трет-бутилдиметилсилилокси)-5-метилциклогексил)пиридин-3-амин (8,34 мин).
Синтез 4-((1В,3В,48,5В)-3,4-бис-(трет-бутилдиметилсилилокси)-5-метилциклогексил)пиридин-3амина и 4-((18,3 8,4В,58)-3,4-бис-(трет-бутилдиметилсилилокси)-5 -метилциклогексил)пиридин-3 -амина
отвомз ОТВОМЗ
твомзо^А^ ^ОТВОМЗ
+
У А хиральный
хиральный N
К раствору (+/-)-4-((3 8,4В,58)-3,4-бис-(трет-бутилдиметилсилилокси)-5-метилциклогекс-1 -енил)-3 нитропиридина (1,0 экв.) в этаноле при концентрации, равной 0,1 М, добавляли 10% палладий на угле (0,1 экв.). Полученный гетерогенный раствор помещали в атмосферу водорода и перемешивали в течение 14 ч. Затем смесь фильтровали через слой целита при элюировании этанолом. Летучие вещества удаляли в вакууме и неочищенное вещество очищали с помощью автоматической колоночной хроматографии на диоксиде кремния (ГС=0,2, 40% ЕЧОАс в гептане) и получали чистый рацемический продукт (50,4%).
ЖХМС: МН+ = 451,3, ВЧ=1,35 мин.
Рацемическое соединение разделяли с помощью хиральной хроматографии (колонка ГС, 1 мл/мин, 5% ИПС в гептане) и получали 4-((1В,3В,48,5В)-3,4-бис-(трет-бутилдиметилсилилокси)-5метилциклогексил)пиридин-3-амин (6,98 мин) и 4-((18,38,4В,58)-3,4-бис-(трет-бутилдиметилсилилокси)5-метилциклогексил)пиридин-3-амин (8,67 мин).
- 33 020136
Синтез б-(метоксикарбонил) -3 -оксо -5 -(трифторметил)циклогекс-1 -енолята натрия
К свежеприготовленному раствору натрия (1,0 экв.) в 1-ВиОН (1 М) по каплям добавляли этилацетоацетат (1,0 экв.) и смесь перемешивали в бане со льдом в течение еще 15 мин. По каплям добавляли этил-4,4,4-трифторкротонат (1,0 экв.) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение еще 30 мин. После кипячения с обратным холодильником в течение 2 ч смесь охлаждали и добавляли гексаны. Осадок отфильтровывали и без дополнительной очистки получали 6-(метоксикарбонил)-3-оксо-5(трифторметил)циклогекс-1-енолят натрия (46%).
ЖХ/МС (т/ζ): МН+ = 253,1, К=0,70 мин.
Синтез 5 -(трифторметил)циклогексан- 1,3-диона
6-(Метоксикарбонил)-3-оксо-5-(трифторметил)циклогекс-1-енолят (1,0 экв.) натрия растворяли в 1 М №1ОН (1,0 экв.) и смесь кипятили с обратным холодильником в течение 1 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь подкисляли с помощью 5 М серной кислоты. Смесь экстрагировали с помощью Е1ОАс. После промывки водой органический слой сушили над сульфатом магния, растворитель удаляли при пониженном давлении и получали 5-(трифторметил)циклогексан-1,3-дион, который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки (98%).
ЖХ/МС (т/ζ): МН+ = 181,1, К3=0,55 мин.
Синтез 3-оксо-5 -(трифторметил)циклогекс -1 -енилтрифторметансульфоната
К суспензии 5-(трифторметил)циклогексан-1,3-диона (1,0 экв.) в ДХМ (0,23 М) добавляли ТЭА (1,2 экв.) и получали прозрачный раствор. Смесь охлаждали до 0°С. Затем по каплям добавляли ТГ2О (1,05 экв.) в ДХМ. Реакционную смесь перемешивали при этой температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли с помощью ДХМ и промывали водой, водным раствором №1НСО3. рассолом и сушили над Мд§О4, фильтровали и концентрировали и получали 3-оксо-5-(трифторметил)циклогекс-1енилтрифторметансульфонат, который сразу использовали на следующей стадии.
ЖХ/МС (т/ζ): МН+ = 313,0, К3=1,02 мин.
Синтез 3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-5-(трифторметил)циклогекс-2-енон
Все реагенты: 3-оксо-5-(трифторметил)циклогекс-1-енилтрифторметансульфонат (1,0 экв.), ЫаОАс (3,0 экв.) и бис-(пинаколято)дибор (2,0 экв.) добавляли к 1,4-диоксану (0,23 М) в круглодонной колбе и дегазировали путем пропускания Ν2 через смесь в течение 10 мин. Добавляли аддукт РбС12(бррГ)-СН2С12 (0,1 экв.) и реакционную смесь нагревали в атмосфере Ν2 в течение 2 ч при 80°С на масляной бане в колбе, снабженной обратным холодильником. Смесь охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через воронку с грубым фильтром из пористого стекла, осадок на фильтре промывали с помощью ~10 мл 1,4-диоксана и получали 3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-5-(трифторметил)циклогекс-2енон в 1,4-диоксане, который сразу использовали на следующей стадии.
ЖХ/МС (т/ζ): МН+ = 209,1 (бороновая кислота), К4=0,60 мин.
Синтез 3-(3-нитропиридин-4-ил)-5-(трифторметил)циклогекс-2-енона
Эфир бороновой кислоты
3-(4,4,5,5 -тетраметил-1,3,2-дио ксаборолан-2 -ил) -5(трифторметил)циклогекс-2-енона (1,0 экв.) растворяли в 1,4-диоксане (0,14 М) в круглодонной колбе, дегазировали путем пропускания Ν2 через раствор в течение 30 мин. Добавляли 4-хлор-3-нитропиридин (1,3 экв.) и водный раствор №ьСО3 (2 М, 2,0 экв.) и Ν2 пропускали в течение 10 мин и затем добавляли аддукт РбС12(бррГ)-СН2С12 (0,1 экв.). Реакционную смесь перемешивали при 100°С в течение 2 ч. К смеси
- 34 020136 добавляли ЕЮАс и рассол. Полученную смесь фильтровали через целит, осадок на фильтре промывали с помощью ЕЮАс. Органический слой отделяли и промывали рассолом, сушили над Мд§О4 и фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали с помощью хроматографии на силикагеле (элюировали смесью ЕЮАс:гексаны = от 1:10 до 2:1) и получали 3-(3-нитропиридин-4-ил)-5(трифторметил)циклогекс-2-енон (73% из дикетона за три стадии).
ЖХ/МС (т/ζ): МН+ = 287,1, Я4=0,85 мин.
Синтез цис-3-(3-нитропиридин-4-ил)-5-(трифторметил)циклогекс-2-енола
3-(3-Нитропиридин-4-ил)-5-(трифторметил)циклогекс-2-енон (1,0 экв.) смешивали с гептагидратом хлорида церия(Ш) (1,0 экв.) и добавляли абсолютный этанол (0,17). Смесь перемешивали при температуре окружающей среды до растворения всех твердых веществ, смесь охлаждали в бане со льдом и порциями добавляли №1ВН4 (1,2 экв.). Реакционную смесь перемешивали в бане со льдом в течение 1 ч. Смесь разбавляли с помощью ЕЮАс, промывали водой, сушили над Мд§О4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали на колонке (1:1 этилацетат и гексаны) и получали цис-3-(3-нитропиридин-4ил)-5-(трифторметил)циклогекс-2-енол (66%).
ЖХ/МС (т/ζ): МН+ = 289,2, Я1=0,72 мин.
Синтез цис-4-(3-азидо-5-(трифторметил)циклогекс-1-енил)-3-нитропиридина
К раствору цис-3-(3-нитропиридин-4-ил)-5-(трифторметил)циклогекс-2-енола (1,0 экв.) в ДХМ (0,14 М) при комнатной температуре добавляли ТЭА (2,5 экв.) и затем М§С1 (1,8 экв.). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Растворитель удаляли. Остаток растворяли в ДМФ (0,19 М) и затем в смесь добавляли азид натрия (1,2 экв.). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Добавляли еще 1,2 экв. азида натрия. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом и гептаном и промывали насыщенным раствором №С1. Органические вещества сушили над Мд§О4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали на колонке (1:1 этилацетат и гексаны) и получали цис-4-(3-азидо-5(трифторметил)циклогекс-1-енил)-3-нитропиридин (58%).
ЖХ/МС (т/ζ): МН+ = 314,1, Я1=0,96 мин.
Синтез трет-бутил-(1Я,3Я,58)-3-(3-аминопиридин-4-ил)-5-(трифторметил)циклогексилкарбамата
Раствор цис-4-(3-азидо-5-(трифторметил)циклогекс-1-енил)-3-нитропиридина (1,0 экв.) в этаноле (0,13 М) продували с помощью Ν2 в течение 20 мин. Затем к реакционной смеси добавляли Вос-ангидрид (1,5 экв.) и Рб/С (0,2 экв.). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере Н2 в течение ночи. Твердое вещество удаляли фильтрованием через целит и промывали с помощью ЕЮН. Остаток очищали на колонке (5% метанола в смеси 1: 1 этилацетата и гексанов) и получали рацемический цис-3-(3-аминопиридин-4-ил)-5-(трифторметил)циклогексилкарбамат (57%).
ЖХ/МС (т/ζ): МН+ = 360,2, Я1=0,72 мин.
Энантиомерно чистые трет-бутил-(1Я,3Я,58)-3-(3-аминопиридин-4-ил)-5-(трифторметил)циклогексилкарбамат и №(4-((18,38,5Я)-3-амино-5-(1рифторметил)циклогексил)пиридин-3-ил)-6-(2,6дифторфенил)-5-фторпиколинамид выделяли с помощью хиральной ВЭЖХ (для анализа Я1=8,14 и 10,59 мин соответственно; гептан:изопропанол= 90:10 (об.:об.), СЫга1се1 1С 100x4,6 мм при 1 мл/мин. Для препаративного разделения, гептан:изопропанол = 90:10 (об.:об.), СЫга1се1 Ю 250x20 мм при 15 мл/мин).
- 35 020136
Синтез (К)-4-бензил-3 -((2К,3К)-3 -((К)-2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)-3 -гидрокси-2метилпропаноил)оксазолидин-2-она
(К)-4-Бензил-3 -((2К,3К)-3 -((К)-2,2-диметил- 1,3-диоксолан-4-ил)-3 -гидрокси-2метилпропаноил)оксазолидин-2-он получали по методике (Ргос. Асаб. 8с1епсек, 101, 33, 2004, р. 12042-12047), описанной для энантиомерного соединения с использованием в качестве исходного вещества (К)-4-бензил-3-пропионилоксазолидин-2-она и ацетонида К-глицеринового альдегида.
Синтез (К)-4-бензил-3-((2К,3К)-3-(трет-бутилдиметилсилилокси)-3-((К)-2,2-диметил-1,3-диоксолан4-ил)-2-метилпропаноил)оксазолидин-2-она
(К)-4-Бензил-3-((2К,3К)-3 -(трет-бутилдиметилсилилокси)-3-((К)-2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)2-метилпропаноил)оксазолидин-2-он получали по методике (Ргос. Асаб. 8аепсек, 101, 33, 2004, р. 12042-12047), описанной для энантиомерного соединения с использованием в качестве исходного вещества (К)-4-бензил-3-((2К,3К)-3-((К)-2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)-3-гидрокси-2-метилпропаноил)оксазолидин-2-она.
Синтез (28,3К)-3-(трет-бутилдиметилсилилокси)-3-((К)-2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)-2метилпропан-1 -ола
ОТВ8
К раствору (К)-4-бензил-3 -((2К,3К)-3 -(трет-бутилдиметилсилилокси)-3 -((К)-2,2-диметил-1,3диоксолан-4-ил)-2-метилпропаноил)оксазолидин-2-она (1,0 экв.) и этанола (3,0 экв.) в ТГФ (0,09 М) при 40°С добавляли Ь1ВН4 (1,0 экв.). Реакционной смеси давали медленно нагреться до КТ и перемешивали при этой температуре в течение 12 ч. Раствор повторно охлаждали до -40°С и добавляли еще Ь1ВН4 (0,3 экв.). После повторного нагревания до КТ и перемешивания в течение 2 ч раствор разбавляли диэтиловым эфиром и добавляли 1н. №ЮН. Полученную смесь экстрагировали этилацетатом, органический слой отделяли, промывали с помощью №С1(ка1), сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (10-30% ЕЮАс/нгептаны) и получали (28,3К)-3-(трет-бутилдиметилсилилокси)-3-((К)-2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)-2метилпропан-1-ол в (75%).
ЖХ/МС = 247,1 (М+Н-кеталь-Н2О), К. 0.64 мин.
Синтез ((1К,28)-3-азидо-1-((К)-2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)-2-метилпропокси)(третбутил)диметилсилана
0ТВ5
К раствору (28,3К)-3-(трет-бутилдиметилсилилокси)-3-((К)-2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)-2метилпропан-1-ола (1,0 экв.), ДИАД (диизопропилазодикарбоксилат) (2,0 экв.) и РРй3 (2,0 экв.) в ТГФ (0,18 М) добавляли ДФФА (дифенилфосфорилазид) (1,0 экв., 1 М раствор в ТГФ). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После удаления летучих веществ в вакууме остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (2-3-5% Е1ОАс/н-гептаны) и получали ((1К,28)-3-азидо-1-((К)-2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)-2-метилпропокси)(третбутил)диметилсилан (62%).
’Н-ЯМР (400 МГц, С1)С1;): δ 4,04-4,10 (т, 1Н), 3,94 (бб, 1=8,0, 6,4 Гц, 1Н), 3,72 (б, 1=1,2 Гц, 1Н), 3,53 (1, 1=8,0 Гц, 1Н), 3,36 (бб, 1=12, 8,0 Гц, 1Н), 3,19 (бб, 1=12,0, 6,7 Гц, 1Н), 1,52-1,60 (т, 1Н), 1,41 (к, 3Н), 1,34 (к, 3Н), 0,92 (б, 1=7,2, 3Н), 0,90 (к, 9Н), 0,12 (к, 3Н), 0,09 (к, 3Н).
- 36 020136
Синтез (2Я,3Я,48)-5-азидо-3-(трет-бутилдиметилсилилокси)-4-метилпентан-1,2-диола
ОТВЗ
К раствору ((1Я,28)-3-азидо-1-((Я)-2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)-2-метилпропокси)(третбутил)диметилсилана (1,0 экв.) в МеОН (0,1 М) добавляли ППТС (пиридиний-п-толуолсульфонат) (1,0 экв.) и смесь перемешивали при КТ в течение 14 ч, при 50°С в течение 2 ч и при 80°С в течение 1 ч. Летучие вещества удаляли в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (10-25% Е!ОАс/н-гептаны) и получали (2Я,3Я,48)-5-азидо-3-(трет-бутилдиметилсилилокси)-4метилпентан-1,2-диол (40%).
Синтез (2Я,3Я,48)-5-азидо-3 -(трет-бутилдиметилсилилокси)-2-гидрокси-4-метилпентил 4метилбензолсульфоната
ОТВЗ
К раствору трет-бутил-(2Я,3Я,48)-5 -азидо-3 -(трет-бутилдиметилсилилокси)-1 -гидрокси-4 метилпентан-2-илкарбамата (1,0 экв.) в пиридине (0,2 М) добавляли рТкС1 (1,3 экв.) при 0°С. Смесь выдерживали при этой же температуре в течение 16 ч. Летучие вещества удаляли в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (10-15-20% Е!ОАс/н-гептаны) и получали (2Я,3Я,48)-5-азидо-3-(трет-бутилдиметилсилилокси)-2-гидрокси-4-метилпентил 4-метилбензолсульфонат.
Синтез (2Я,3Я,48)-5-азидо-2,3-бис-(трет-бутилдиметилсилилокси)-4-метилпентил 4-метилбензолсульфоната
К раствору (2Я,3Я,48)-5-азидо-3 -(трет-бутилдиметилсилилокси)-2-гидрокси-4-метилпентил 4-метилбензолсульфоната (1,0 экв.) и 2,6-лутидина (3,4 экв.) при 0°С добавляли ТВЭМ8ОТГ (1,7 экв.). Раствор перемешивали в течение 7 ч, пока он нагревался до КТ. Раствор разбавляли с помощью Е!ОАс, промывали с помощью 10% Си§О4, Н2О, №ьСО3„·№С1(8а!), сушили над Мд§О4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (2,5-5-10-20% Е!ОАс/н-гептаны) и получали (2Я,3Я,48)-5-азидо-2,3-бис-(трет-бутилдиметилсилилокси)-4-метилпентил 4-метилбензолсульфонат (75%).
Синтез 4-((3Я,4Я,58)-3,4-бис-(трет-бутилдиметилсилилокси)-5 -метилпиперидин-1-ил)-3 нитропиридина
ОТВЗ
Раствор (2Я,3Я,48)-5-азидо-2,3-бис-(трет-бутилдиметилсилилокси)-4-метилпентил
4-метилбензолсульфоната в Е!ОН (0,05 М) дегазировали аргоном. Добавляли ДИЭА (1,5 экв.), затем 10% Рб/С (0,1 экв.). Реакционную смесь в течение 3 ч перемешивали в атмосфере водорода, подаваемого из баллона. Раствор дегазировали и продували аргоном и затем добавляли 4-хлор-3-нитропиридин (1,5 экв.) и еще ДИЭА (1,5 экв.). После перемешивания при КТ в течение 15 ч раствор фильтровали для удаления Рб/С и летучие вещества удаляли в вакууме. Остаток разбавляли этилацетатом и промывали с помощью №2СО3(8а!), №С1(8а!), сушили над Мд§О4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (10-15% Е!ОАс/н-гептаны) и получали 4-((3Я,4Я,58)-3,4-бис(трет-бутилдиметилсилилокси)-5 -метилпиперидин-1 -ил)-3 -нитропиридин (40%).
ЖХ/МС = 482,4 (М+Н), Я!=1,26 мин.
Синтез 4-((3Я,4Я,58)-3,4-бис-(трет-бутилдиметилсилилокси)-5 -метилпиперидин-1 -ил)пиридин-3 амина
К раствору 4-((3Я,4Я,58)-3,4-бис-(трет-бутилдиметилсилилокси)-5-метилпиперидин-1-ил)-3нитропиридина (1,0 экв.) в этаноле при концентрации, равной 0,05 М, добавляли 10% палладий на угле
- 37 020136 (0,1 экв.). Полученный гетерогенный раствор помещали в атмосферу водорода и перемешивали в течение 14 ч. Затем смесь фильтровали через слой целита при элюировании этанолом. Летучие вещества удаляли в вакууме и получали 4-((3К,4К,58)-3,4-бис-(трет-бутилдиметилсилилокси)-5-метилпиперидин-1ил)пиридин-3-амин.
ЖХ/МС = 452,4 (М+Н), Κ4=1,31 мин.
Синтез (К)-трет-бутил-4-((1К,2К)-3-((К)-4-бензил-2-оксооксазилидин-3-ил)-1-гидрокси-2-метил-3оксопропил)-2,2-диметилоксазилидин-3-карбоксилата
К раствору (К)-4-бензил-3-пропионилоксазолидин-2-она (1,0 экв.) в ДХМ (0,13 М) при -40°С добавляли Т1С14 (1,0 экв.). Смесь перемешивали при -40°С в течение 10 мин (желтая суспензия), затем добавляли ДИПЭА (2,5 экв.) (темно-красный раствор) и перемешивали при 0°С в течение 20 мин. Затем по каплям добавляли (К)-трет-бутил-4-формил-2,2-диметилоксазилидин-3-карбоксилат (1,0 экв.) в ДХМ (0,5 М) и полученную смесь перемешивали в течение 1,5 ч. Реакцию останавливали путем добавления водного раствора хлорида аммония и смесь экстрагировали этилацетатом. Органическую фазу отделяли, промывали рассолом, сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии при элюировании этилацетатом и гексанами (1:4) и получали (К)-трет-бутил-4-((1К,2К)-3 -((К)-4-бензил-2-оксооксазилидин-3 -ил)-1-гидрокси-2-метил-3 -оксопропил)2,2-диметилоксазилидин-3-карбоксилат в качестве основного продукта (5:2) с выходом 58%.
ЖХ/МС = 363,3 (М+Н-Вос), Κ=1,09 мин.
Синтез (К)-трет-бутил-4-((1К,2К)-3-((К)-4-бензил-2-оксооксазилидин-3-ил)-1-(третбутилдиметилсилилокси)-2-метил-3-оксопропил)-2,2-диметилоксазилидин-3-карбоксилата
К раствору (К)-трет-бутил-4-((1К,2К)-3-((К)-4-бензил-2-оксооксазилидин-3-ил)-1-гидрокси-2метил-3-оксопропил)-2,2-диметилоксазилидин-3-карбоксилата (1,0 экв.) и лутидина (1,8 экв.) в ДХМ (0,1 М) при -40°С добавляли ТВ8ОТГ (1,4 экв.). Реакционную смесь перемешивали при -40°С в течение 2 ч. Раствор разбавляли этилацетатом и промывали насыщенным раствором ЫаНСО3, насыщенным раствором №1С1, сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании этилацетатом и гексанами (1:4) и получали (К)-трет-бутил-4-((1К,2К)-3-((К)-4-бензил-2-оксооксазилидин-3-ил)-1-(третбутилдиметилсилилокси)-2-метил-3-оксопропил)-2,2-диметилоксазилидин-3-карбоксилат в качестве основного продукта (5:2) с выходом 83%.
ЖХ/МС = 577,3 (М+Н), Κί=1,33 мин (методика с отбором фракций 65-95%).
Синтез (К)-трет-бутил-4-((1К,28)-1-(трет-бутилдиметилсилилокси)-3-гидрокси-2-метилпропил)-2,2диметилоксазилидин-3 -карбоксилата
ОТВ5
К раствору (К)-трет-бутил-4-((1К,2К)-3 -((К)-4-бензил-2-оксооксазилидин-3 -ил)-1-(третбутилдиметилсилилокси)-2-метил-3-оксопропил)-2,2-диметилоксазилидин-3-карбоксилата (1,0 экв.) и этанола (3,0 экв.) в ТГФ (0,09 М) при -30°С добавляли Ь1ВН4 (3,0 экв.). Реакционной смеси давали нагреться до 0°С и перемешивали при этой температуре в течение 3 ч. Затем раствор разбавляли диэтиловым эфиром и добавляли 1н. ЫаОН. Полученную смесь экстрагировали этилацетатом, органический слой отделяли, промывали насыщенным раствором №1С1, сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании этилацетатом и гексанами (1:4) и получали (К)-трет-бутил-4-((1К,28)-1-(трет-бутилдиметилсилилокси)-3гидрокси-2-метилпропил)-2,2-диметилоксазилидин-3-карбоксилат в качестве основного продукта (соотношение 5:2) с выходом 71%.
ЖХ/МС = 304,3 (М+Н-Вос), ^,=0,95 мин (методика с отбором фракций 65-95%).
- 38 020136
Синтез (К)-трет-бутил-4-((1К,28)-3-азидо-1-(трет-бутилдиметилсилилокси)-2-метилпропил)-2,2диметилоксазилидин-3-карбоксилата
К раствору (К)-трет-бутил-4-((1К,28)-1-(трет-бутилдиметилсилилокси)-3-гидрокси-2-метилпропил)2,2-диметилоксазилидин-3-карбоксилата (1,0 экв.), ДИАД (2,0 экв.) и РРй3 (2,0 экв.) в ТГФ (0,18 М) добавляли ДФФА (2,0 экв., 1 М раствор в ТГФ). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После удаления летучих веществ в вакууме остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании этилацетатом и гексанами (1:6) и получали (К)трет-бутил-4-((1К,28)-3-азидо-1-(трет-бутилдиметилсилилокси)-2-метилпропил)-2,2диметилоксазилидин-3-карбоксилат в качестве основного продукта (5:2) с выходом 86%.
ЖХ/МС = 329,3 (М+Н-Вос), К1=1,40 мин (методика с отбором фракций 65-95%).
Синтез трет-бутил-(2К,3К,48)-5-азидо-3-(трет-бутилдиметилсилилокси)-1-гидрокси-4-метилпентан2-илкарбамата
К раствору (К)-трет-бутил-4-((1К,28)-3-азидо-1-(трет-бутилдиметилсилилокси)-2-метилпропил)-2,2диметилоксазилидин-3-карбоксилата (1,0 экв.) в Е(ОН (0,1 М) добавляли ППТС (1,3 экв.) и смесь кипятили с обратным холодильником в течение 2 дней. Летучие вещества удаляли в вакууме, остаток растворяли в ДХМ (0,1 М) и ДИЭА (1,5 экв.) и к реакционной смеси добавляли Вос2О (1,0 экв.). Раствор перемешивали в течение 3 ч при комнатной температуре. Растворители удаляли при пониженном давлении и остаток разбавляли этилацетатом, промывали водой, водным раствором НаНЗО.:, водным раствором NаΗСΟ3, насыщенным раствором №С1. Органическую фазу сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании этилацетатом и гексанами (1:3) и получали трет-бутил-(2К,3К,48)-5-азидо-3-(третбутилдиметилсилилокси)-1-гидрокси-4-метилпентан-2-илкарбамат в качестве основного изомера (5:2) с выходом 70%.
ЖХ/МС = 289,3 (М+Н-Вос), К1=0,76 мин (методика с отбором фракций 65-95%).
Синтез (2К,3К,48)-5-азидо-2-(трет-бутоксикарбониламино)-3-(трет-бутилдиметилсилилокси)-4метилпентилметансульфоната
К раствору трет-бутил-(2К,3К,48)-5 -азидо-3 -(трет-бутилдиметилсилилокси)-1 -гидрокси-4 метилпентан-2-илкарбамата (1,0 экв.) в пиридине (0,2 М) при 0°С добавляли М§С1 (1,3 экв.), затем ДМАП (каталитическое количество). Смесь перемешивали при этой температуре в течение 1 ч. Раствор разбавляли эфиром и этилацетатом (4:1), промывали водным раствором НаН^О.·!, насыщенным раствором NаΗСΟ3, рассолом, сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании этилацетатом и гексанами (1:3) и получали (2К,3К,48)-5-азидо-2-(трет-бутоксикарбониламино)-3-(трет-бутилдиметилсилилокси)-4метилпентилметансульфонат в качестве основного изомера (5:2) с выходом 90%.
ЖХ/МС = 367,3 (М+Н-Вос), К=0,81 мин (методика с отбором фракций 65-95%).
Синтез трет-бутил-(3К,4К,58)-4-(трет-бутилдиметилсилилокси)-5-метилпиперидин-3-илкарбамата
0ТВ5
ΒοοΗΝ
Раствор (2К,3К,48)-5-азидо-2-(трет-бутоксикарбониламино)-3-(трет-бутилдиметилсилилокси)-4метилпентилметансульфоната в МеОН (0,09 М) дегазировали азотом в течение 20 мин. Добавляли ДИЭА (2,5 экв.), затем 10% Рб/С (0,1 экв.). Реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч в атмосфере водорода, подаваемого из баллона. Раствор фильтровали и фильтрат концентрировали в вакууме и получали трет-бутил-(3К,4К,58)-4-(трет-бутилдиметилсилилокси)-5-метилпиперидин-3-илкарбамат в качестве основного изомера (5:2) с выходом >99%.
ЖХ/МС = 345,2 (М+Н-Вос), К=0,95 и 0,99 мин.
- 39 020136
Синтез трет-бутил-(3В,4В,58)-4-(трет-бутилдиметилсилилокси)-5-метил-1-(3-нитропиридин-4ил)пиперидин-3 -илкарбамата
К раствору трет-бутил-(3В,4В,58)-4-(трет-бутилдиметилсилилокси)-5-метилпиперидин-3илкарбамата (1,0 экв.) в ί-РгОН (0,09 М) добавляли ДИЭА (2,5 экв.) и 4-хлор-3-нитропиридин (1,5 экв.). Реакционную смесь перемешивали при 60°С в течение 2 ч. Летучие вещества удаляли в вакууме, остаток разбавляли эгилацетатом и промывали насыщенным раствором №С1. Органическую фазу сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали. Неочищенное вещество очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании этилацетатом и гексанами (1:2) и получали третбутил-(3В,4В,58)-4-(трет-бутилдиметилсилилокси)-5-метил-1 -(3 -нитропиридин-4-ил)пиперидин-3 илкарбамат с выходом 76%.
ЖХ/МС = 467,3 (М+Н), Ке=1,09 мин.
Синтез трет-бутил-(3В,4В,58)-1 -(3 -аминопиридин-4-ил)-4-(трет-бутилдиметилсилилокси)-5 метилпиперидин-3 -илкарбамата
Раствор трет-бутил-(3В,4В,58)-4-(трет-бутилдиметилсилилокси)-5-метил-1-(3-нитропиридин-4ил)пиперидин-3-илкарбамата (1,0 экв.) в МеОН (0,05 М) дегазировали азотом в течение 20 мин. К смеси добавляли 10% Рб/С (0,2 экв.) и раствор в течение 3 ч перемешивали в атмосфере водорода, подаваемого из баллона. Реакционную смесь фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении и получали трет-бутил-(3В,4В,58)-1-(3-аминопиридин-4-ил)-4-(трет-бутилдиметилсилилокси)-5метилпиперидин-3-илкарбамат в качестве искомого продукта с выходом 94%.
ЖХ/МС = 437,4 (М+Н), Ке=1,08 мин.
Ή-ЯМР (300 МГц, СИСЕ): δ 8,01 (к, 1Н), 7,95 (б, 1=6,0 Гц, 1Н), 6,76 (б, 1=6,0 Гц, 1Н), 4,44 (Ьг к, 1Н), 3,74 (Ьг к, 2Н), 3,59-3,55 (т, 1Н), 3,25-3,13 (т, 2Н), 2,47-2,35 (т, 2Н), 1,89 (Ьг к, 2Н), 1,44 (к, 9Н), 1,04 (б, 1=6,0 Гц, 3Н), 0,92 (к, 9Н), 0,13 (б, 1=9,0 Гц, 6Н).
Синтез трет-бутил-(2В)-1-(бензилокси)-3-гидрокси-4-метилгекс-5-ен-2-илкарбамата
К раствору Ν-Вос-О-бензил-Э-серинового альдегида (1,0 экв.) в ДХМ (0,1 М) при -78°С в атмосфере Аг добавляли (2)-2-(бут-2-енил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан (1,1 экв.) и прозрачный раствор перемешивали в течение 16 ч, пока он нагревался до КТ. Раствор добавляли к ЕЮАс и промывали с помощью Н2О (3х) и №С1(ка1), сушили над Мд§О4 и очищали с помощью хроматографии на силикагеле (15% ЕЮАс/гексаны) и по данным Ή ЯМР получали трет-бутил-(2К)-1-(бензилокси)-3-гидрокси-4метилгекс-5-ен-2-илкарбамат (54%) в виде смеси изомеров состава 3:1.
ЖХМС (т/ζ): 236,3 (МН+ -Вос); ЖХ ^=4,37 и 4,51 мин.
Синтез (4В)-4-(бензилоксиметил)-5-(бут-3-ен-2-ил)оксазолидин-2-она
К раствору (2К)-1-(бензилокси)-3-гидрокси-4-метилгекс-5-ен-2 в ТГФ (0,1 М) добавляли 60% гидрид натрия в минеральном масле (1,5 экв.). После перемешивания в течение 3 дней реакцию останавливали путем добавления МН4С1(КЕЙ) и раствор разбавляли с помощью ЕЮАс и промывали с помощью ΝΉ^^ и №С1(ка1), сушили над Мд§О4 и очищали с помощью хроматографии на силикагеле (50% ЕЮАс/гексаны) и получали (4К)-4-(бензилоксиметил)-5-(бут-3-ен-2-ил)оксазолидин-2-он (89%) в виде смеси состава 3:1.
ЖХМС (т/ζ): 262,2 (МН+); ЖХ К1=3,47 мин.
- 40 020136
Синтез (4В)-4-(бензилоксиметил)-5-(1-гидроксипропан-2-ил)оксазолидин-2-она
К раствору (4В)-4-(бензилоксиметил)-5-(бут-3-ен-2-ил)оксазолидин-2-она (1,0 экв.) в смеси 2:1 МеОН/Н2О (0,04 М) добавляли 4% тетраоксид осмия в Н2О (0,07 экв.) и перйодат натрия (3,0 экв.). После перемешивания в течение 3 ч белый осадок отфильтровывали и промывали с помощью ЕбОЛс. Объединенный фильтрат концентрировали в вакууме и остаток растворяли в ЕбОЛс, промывали с помощью №С1(8а1), сушили над Мд8О4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный альдегид растворяли в ЕЮН (0,08 М) и при охлаждении до 0°С добавляли борогидрид натрия (2,0 экв.). После перемешивания в течение 15 ч и нагревания до комнатной температуры реакцию останавливали путем добавления Н2О. После перемешивания в течение 20 мин ЕЮН удаляли в вакууме, добавляли ЕЮЛс и раствор промывали с помощью 1н. НС1, ШНСОз·,,,,,, и №С1(8а1), сушили над Мд8О4, фильтровали и концентрировали и после очистки с помощью хроматографии на силикагеле получали (4В)-4-(бензилоксиметил)-5-(1гидроксипропан-2-ил)оксазолидин-2-он в виде смеси изомеров состава 3:1 (60%).
ЖХМС (т/ζ): 266,1 (МН+); ЖХ К=2,28 мин.
Синтез (4В)-4 -(гидроксиметил) -5-(1 -гидроксипропан-2-ил)оксазолидин-2 -она
К раствору (4В)-4-(бензилоксиметил)-5-(1-гидроксипропан-2-ил)оксазолидин-2-она (1,0 экв.) в метаноле при концентрации, равной 0,1 М, добавляли 10% палладий на угле (0,1 экв.). Полученный гетерогенный раствор помещали в атмосферу водорода и перемешивали в течение 15 ч. Затем смесь фильтровали через слой целита при элюировании метанолом. Летучие вещества удаляли в вакууме и получали (4В)-4-(гидроксиметил)-5-(1-гидроксипропан-2-ил)оксазолидин-2-он (99%).
ЖХМС (т/ζ): 176,1 (МН+).
Синтез 2-((4В)-2-оксо-4-(тозилоксиметил)оксазолидин-5-ил)пропил 4-метилбензолсульфоната
К раствору (4В)-4-(гидроксиметил)-5-(1-гидроксипропан-2-ил)оксазолидин-2-она (1,0 экв.) в пиридине (0,15 М) при 0°С добавляли п-толуолсульфонилхлорид (2,1 экв.). Раствору давали нагреться до КТ при перемешивании в течение 14 ч и затем добавляли ЕЮЛс и раствор промывали с помощью Н2О (3х), Си8О4(8а1) (2х), Н2О, №2СО3(8а1) и №С1(8а1), сушили над Мд8О4, фильтровали, концентрировали и очищали с помощью хроматографии на силикагеле (75% ЕЮЛс/гексаны элюент) и получали 2-((4В)-2-оксо-4(тозилоксиметил)оксазолидин-5-ил)пропил 4-метилбензолсульфонат (68%).
ЖХМС (т/ζ): 484,1 (МН+); ЖХ В=4,06 мин.
Синтез (3аК,7В,7а8)-5-(4-метоксибензил)-7-метилгексагидрооксазоло[4,5-с]пиридин-2(3Н)-она и (3аК,78,7аК)-5-(4-метоксибензил)-7-метилгексагидрооксазоло[4,5-с]пиридин-2(3Н)-она
Раствор 2-((4В)-2-оксо-4-(тозилоксиметил)оксазолидин-5-ил)пропил 4-метилбензолсульфоната (1,0 экв.), диизопропилэтиламина (3,0 экв.) и параметоксибензиламина (1,5 экв.) в ИМР (0,05 М) нагревали при 100°С в течение 14 ч. Раствор сразу очищали с помощью ОФ (обращенная фаза) ВЭЖХ. Фракции продукта обессоливали путем добавления к ЕЮЛс и №ьСОз,-8,. дополнительно промывали с помощью №С1(8а1), сушили над Мд8О4 и концентрировали и получали 2 отдельных изомера, (3аК,7В,7а8)-5-(4метоксибензил)-7-метилгексагидрооксазоло[4,5-с]пиридин-2(3Н)-он и (3аК,78,7аК)-5-(4-метоксибензил)7-метилгексагидрооксазоло[4,5-с]пиридин-2(3Н)-он (27 и 8%).
ЖХМС (т/ζ): 277,2 (МН+) при 0,40 и 0,42 мин.
- 41 020136
Синтез (3аК,7В,7а8)-7-метилгексагидрооксазоло[4,5-с]пиридин-2(3Н)-она
N Н
К раствору (3аК,7В,7а8)-5-(4-метоксибензил)-7-метилгексагидрооксазоло[4,5-с]пиридин-2(3Н)-она (1,0 экв.) в метаноле при концентрации, равной 0,1 М, добавляли 20% гидроксид палладия на угле (0,3 экв.). Полученный гетерогенный раствор помещали в атмосферу водорода и перемешивали в течение 2 ч. Затем смесь фильтровали через слой целита при элюировании метанолом. Летучие вещества удаляли в вакууме и получали (3аК,7В,7а8)-7-метилгексагидрооксазоло[4,5-с]пиридин-2(3Н)-он (99%).
ЖХМС (т/ζ): 157,1 (МН4) при 0,16 мин.
Синтез (3аК,7В,7а8)-трет-бутил-7-метил-5-(3-нитропиридин-4-ил)-2-оксогексагидрооксазоло[4,5с] пиридин-3 (2Н)-карбоксилата
Раствор 4-хлор-3-нитропиридина (1,3 экв.) и (3аК,7В,7а8)-7-метилгексагидрооксазоло[4,5с]пиридин-2(3Н)-она (1,5 экв.) в СН2С12 при концентрации, равной 0,1 М, перемешивали при КТ в течение 48 ч и затем добавляли пиперидин (0,4 экв.) для израсходования избытка 4-хлор-3-нитропиридина. После перемешивания в течение еще 2 ч добавляли ди-трет-бутилдикарбонат (2,0 экв.) и диметиламинопиридин (0,1 экв.). После перемешивания в течение 4 ч раствор подвергали распределению между ЕЮАс и NаНСОз(8а1.), дополнительно промывали с помощью ШНСОзн,,,, , и №С1(8а1), сушили над Мд8О4, фильтровали и очищали с помощью хроматографии на силикагеле и получали (3аК,7В,7а8)-трет-бутил-7метил-5-(3-нитропиридин-4-ил)-2-оксогексагидрооксазоло[4,5-с]пиридин-3(2Н)-карбоксилат (62%).
ЖХМС (т/ζ): 379,0 (МН4) при 0,58 мин.
Синтез (3аК,7В,7а8)-трет-бутил-5-(3-аминопиридин-4-ил)-7-метил-2-оксогексагидрооксазоло[4,5с] пиридин-3 (2Н)-карбоксилата
К раствору (3аК,7В,7а8)-трет-бутил-7-метил-5-(3-нитропиридин-4-ил)-2-оксогексагидрооксазоло[4,5-с]пиридин-3(2Н)-карбоксилата (1,0 экв.) в метаноле при концентрации, равной 0,1 М, добавляли 10% палладий на угле (0,1 экв.). Полученный гетерогенный раствор помещали в атмосферу водорода и перемешивали в течение 14 ч. Затем смесь фильтровали через слой целита при элюировании метанолом. Летучие вещества удаляли в вакууме и получали (3аВ,7В,7а8)-трет-бутил-5-(3-аминопиридин-4-ил)-7метил-2-оксогексагидрооксазоло[4,5-с]пиридин-3(2Н)-карбоксилат.
ЖХМС (т/ζ): 349,1 (МН+); ЖХ К<=2,06 мин.
Синтез (3аВ,78,7аК)-7-метилгексагидрооксазоло[4,5-с]пиридин-2(3Н)-она
N Н
К раствору (3аВ,78,7аК)-5-(4-метоксибензил)-7-метилгексагидрооксазоло[4,5-с]пиридин-2(3Н)-она (1,0 экв.) в метаноле при концентрации, равной 0,1 М, добавляли 20% гидроксид палладия на угле (0,3 экв.). Полученный гетерогенный раствор помещали в атмосферу водорода и перемешивали в течение 2 ч. Затем смесь фильтровали через слой целита при элюировании метанолом. Летучие вещества удаляли в вакууме и получали (3аВ,78,7аК)-7-метилгексагидрооксазоло[4,5-с]пиридин-2(3Н)-он (99%).
ЖХМС (т/ζ): 157,1 (МН+) при 0,17 мин.
- 42 020136
Синтез (3аК,7К,7аК)-трет-бутил-7-метил-5-(3-нитроииридин-4-ил)-2-оксогексагидрооксазоло[4,5с] ииридин-3 (2Н)-карбоксилата
Раствор 4-хлор-3-нитроииридина (1,3 экв.) и (3аК,78,7аК)-7-метилгексагидрооксазоло[4,5с]ииридин-2(3Н)-она (1,5 экв.) в СН2С12 ири концентрации, равной 0,1 М, иеремешивали ири КТ в течение 48 ч, затем добавляли иииеридин (0,4 экв.) для израсходования избытка 4-хлор-3-нитроииридина. После иеремешивания в течение еще 2 ч добавляли ди-трет-бутилдикарбонат (2,0 экв.) и диметиламиноииридин (0,1 экв.). После иеремешивания в течение 4 ч раствор иодвергали расиределению между ЕЮАс и МаНСОз, ,,,,). доиолнительно иромывали с иомощью каНСОз, ,,,,, и №С1(8а1), сушили над Мд8О4, фильтровали и очищали с иомощью хроматографии на силикагеле (элюент 75% ЕЮАс/гексаны) и иолучали (3аК,78,7аК)-трет-бутил-7-метил-5-(3-нитроииридин-4-ил)-2-оксогексагидрооксазоло[4,5-с]ииридин3(2Н)-карбоксилат (35%).
ЖХМС (т/ζ): 379,0 (МН+); ЖХ К=2,42 мин.
Синтез (3аК,7К,7а8)-трет-бутил-5-(3-аминоииридин-4-ил)-7-метил-2-оксогексагидрооксазоло[4,5с] ииридин-3 (2Н)-карбоксилата
К раствору (3аК,78,7аЕ)-трет-бутил-7-метил-5-(3-нитроииридин-4-ил)-2-оксогексагидрооксазоло[4,5-с]ииридин-3(2Н)-карбоксилата (1,0 экв.) в метаноле ири концентрации, равной 0,1 М, добавляли 10% иалладий на угле (0,1 экв.). Полученный гетерогенный раствор иомещали в атмосферу водорода и иеремешивали в течение 14 ч. Затем смесь фильтровали через слой целита ири элюировании метанолом. Летучие вещества удаляли в вакууме и иолучали (3аК,78,7аК)-грет-бутил-5-(3-аминоииридин-4-ил)-7метил-2-оксогексагидрооксазоло[4,5-с]ииридин-3(2Н)-карбоксилат.
ЖХМС (т/ζ): 349,1 (МН4); ЖХ ^=2,18 мин.
Методика 1.
Синтез метил-3-амино-6-(2,6-дифторфенил)ииколината
Раствор метил-3-амино-6-бромииколината (1,0 экв.), 2,6-дифторфенилбороновой кислоты (3,0 экв.) и Ρά(άρρ£)С12-ДХМ (0,1 экв.) в смеси 3:1 ДМЭ/2 М №-ьСО3, (0,5 М) нагревали микроволновым излучением ири 120°С с 15-минутными интервалами. Реакционную смесь фильтровали и иромывали с иомощью ЕЮАс. Органические вещества иодвергали расиределению с Н2О (25 мл), доиолнительно иромывали с иомощью №С1(8а1) (25 мл), сушили над Мд8О4 и летучие вещества удаляли в вакууме. Остаток разбавляли с иомощью ЕЮАс и ироиускали через слой силикагеля и летучие вещества удаляли в вакууме и иолучали метил-3-амино-6-(2,6-дифторфенил)ииколинат (47%).
ЖХМС (т/ζ): 265,1 (МН4); ЖХ Е4=2,70 мин
Синтез 6-(2,3-дифторфенил)-5-фторииколиновой кислоты
К раствору 6-бром-5-фторииколиновой кислоты (1,0 экв.) в ДМЭ и 2 М №-ьСО3 (3:1, 0,25 М) в сосуде для микроволновой иечи добавляли 2,3-дифторфенилбороновую кислоту (1,3 экв.) и Ρά(άρρί)Ο2-ΛΧΜ
- 43 020136 (0,05 экв.). Сосуд нагревали в микроволновой печи при 120°С в течение 30 мин. Смесь разбавляли этилацетатом и добавляли 1н. №ЮН. Органическую фазу отделяли и еще 3 раза экстрагировали с помощью 1н. №ЮН и 1 раз с помощью 6н. №ЮН. Объединенные водные фазы фильтровали и подкисляли до рН 1 путем добавления концентрированного НС1 и экстрагировали этилацетатом. Органический слой сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали и получали 6-(2,3-дифторфенил)-5фторпиколиновую кислоту с выходом 78%.
ЖХ/МС = 254,1 (М+Н), К1=0,75 мин.
Методика 2.
Синтез 3-амино-6-(2,6-дифторфенил)пиколиновой кислоты
К раствору метил-3-амино-6-(2,6-дифторфенил)пиколината (1,0 экв.) в ТГФ (0,5 М) добавляли 1 М ЫОН (4,0 экв.). После перемешивания в течение 4 ч при 60°С добавляли 1н. НС1 (4,0 экв.) и ТГФ удаляли в вакууме. Полученное твердое вещество фильтровали и промывали холодной Н2О (3х20 мл) и получали 3-амино-6-(2,6-дифторфенил)пиколиновую кислоту (90%).
ЖХМС (т/ζ): 251,1 (МН+); ЖХ К1=2,1 мин.
Синтез 3-амино-6-(2-фтор-5-пропоксифенил)пиколиновой кислоты
По методике 1 с использованием 3-амино-6-бромпиколиновой кислоты (1,0 экв.) и 2-фтор-5пропоксифенилбороновой кислоты (1,5 экв.) и Рά(άρρί)С12-ДХМ (0,05 экв.) получали 3-амино-6-(2-фтор5-пропоксифенил)пиколиновую кислоту с выходом 75%.
ЖХ/МС = 291,0 (М+Н), К1=0,81 мин.
Синтез 3-амино-5-фтор-6-(2-фтор-5-пропоксифенил)пиколиновой кислоты
По методике 1 с использованием 3-амино-6-бром-5-фторпиколиновой кислоты (1,0 экв.) и 2-фтор-5пропоксифенилбороновой кислоты (1,3 экв.) и Рά(άρρί)С12-ДХМ (0,05 экв.) получали 3-амино-5-фтор-6(2-фтор-5-пропоксифенил)пиколиновую кислоту с выходом 28%.
ЖХ/МС = 309,1 (М+Н), Κί=1,00 мин.
Синтез метил-3-амино-5-фтор-6-(2-фторфенил)пиколината
По методике 1 с использованием метил-3-амино-6-бром-5-фторпиколината (1,0 экв.) и 2-фторфенилбороновой кислоты (1,5 экв.) и Рά(άρρί)С12-ДХМ (0,05 экв.) получали метил-3-амино-5фтор-6-(2-фторфенил)пиколинат с выходом >99%.
ЖХ/МС = 265,0 (М+Н), К1=0,77 мин.
Синтез 3-амино-5-фтор-6-(2-фторфенил)пиколиновой кислоты
- 44 020136
По методике 2 с использованием 3-амино-5-фтор-6-(2-фторфенил)пиколината (1,0 экв.) и ЫОН (5,0 экв.) получали 3-амино-5-фтор-6-(2-фторфенил)пиколиновую кислоту с выходом 90%.
ЖХ/МС = 251,1 (М+Н), В 0,80 мин.
Синтез метил-3-амино-6-(2,6-дифторфенил)-5-фторпиколината
По методике 1 с использованием метил-3-амино-6-бром-5-фторпиколината (1,0 экв.) и
2,6-дифторфенилбороновой кислоты (1,3 экв.) и Рб(бррГ)С12-ДХМ (0,05 экв.) получали 3-амино-6-(2,6дифторфенил)-5-фторпиколинат с выходом 94%.
ЖХ/МС = 283,0 (М+Н), В!=0,76 мин.
Синтез 3-амино-6-(2,6-дифторфенил)-5-фторпиколиновой кислоты
о νη2
По методике 2 с использованием 3-амино-6-(2,6-дифторфенил)-5-фторпиколината (1,0 экв.) и ЫОН (1,0 экв.) получали 3-амино-6-(2,6-дифторфенил)-5-фторпиколиновую кислоту с выходом 79%.
ЖХ/МС = 269,0 (М+Н), В!=0,79 мин.
Синтез 5-фтор-6-(2-фторфенил)пиколиновой кислоты
По методике 1 с использованием 6-бром-5-фторпиколиновой кислоты (1,0 экв.) и 2-фторфенилбороновой кислоты (1,3 экв.) и Рб(бррГ)С12-ДХМ (0,05 экв.) получали 5-фтор-6-(2фторфенил)пиколиновую кислоту с выходом 43%.
ЖХ/МС = 236,1 (М+Н), В!=0,72 мин.
Синтез 6-(3,4-дифторфенил)-5-фторпиколиновой кислоты
Е
По методике 1 с использованием 6-бром-5-фторпиколиновой кислоты (1,0 экв.) и 3,4-дифторфенилбороновой кислоты (1,3 экв.) и Рб(бррГ)С12-ДХМ (0,05 экв.) получали 6-(3,4дифторфенил)-5-фторпиколиновую кислоту с выходом 70%.
ЖХ/МС = 254,1 (М+Н), В!=0,81 мин.
Синтез 6-(2,5-дифторфенил)-5-фторпиколиновой кислоты
По методике 1 с использованием 6-бром-5-фторпиколиновой кислоты (1,0 экв.) и
2,5-дифторфенилбороновой кислоты (1,3 экв.) и Рб(бррГ)С12-ДХМ (0,05 экв.) получали 6-(2,5дифторфенил)-5-фторпиколиновую кислоту с выходом 80%.
ЖХ/МС = 254,1 (М+Н), В!=0,74 мин.
- 45 020136
Синтез 6-(2,4-дифторфенил)-5-фторпиколиновой кислоты
По методике 1 с использованием 6-бром-5-фторпиколиновой кислоты (1,0 экв.) и 2,4-дифторфенилбороновой кислоты (1,3 экв.) и Рб(брр£)С12-ДХМ (0,05 экв.) получали 6-(2,4дифторфенил)-5-фторпиколиновую кислоту с выходом 79%.
ЖХ/МС = 254,1 (М+Н), К1=0,75 мин.
Синтез 5-фтор-6-(2-фтор-5-пропоксифенил)пиколиновой кислоты
По методике 1 с использованием 6-бром-5-фторпиколиновой кислоты (1,0 экв.) и 2-фтор-5пропоксифенилбороновой кислоты (1,5 экв.) и Рб(брр£)С12-ДХМ (0,05 экв.) получали 5-фтор-6-(2-фтор-5пропоксифенил)пиколиновую кислоту.
ЖХ/МС = 294,2 (М+Н), К1=0,95 мин.
Синтез 6-(2-фторфенил)пиколиновой кислоты
По методике 1 с использованием 6-бромпиколиновой кислоты (1,0 экв.) и 2-фторфенилбороновой кислоты (1,5 экв.) и Рб(брр£)С12-ДХМ (0,05 экв.) получали 6-(2-фторфенил)пиколиновую кислоту с выходом 93%.
ЖХ/МС = 218,0 (М+Н), К1=0,66 мин.
Синтез 6-(2,6-дифторфенил)пиколиновой кислоты
6-бромпиколиновой кислоты (1,0 экв.) и и Рб(брр£)С12-ДХМ (0,05 экв.) получали 6-(2,6По методике 1 с использованием
2,6-дифторфенилбороновой кислоты (1,5 экв.) дифторфенил)пиколиновую кислоту с выходом 38%.
ЖХ/МС = 236,0 (М+Н), К1=0,87 мин.
Синтез 6-(2-фтор-5-метоксифенил)пиколиновой кислоты
По методике 1 с использованием 6-бромпиколиновой кислоты (1,0 экв.) и 2-фтор-5метоксифенилбороновой кислоты (1,3 экв.) и Рб(брр£)С12-ДХМ (0,15 экв.) получали 6-(2-фтор-5метоксифенил)пиколиновую кислоту с выходом 95%.
ЖХ/МС = 248,2 (М+Н), К1=0,78 мин.
Синтез 6-(2-фтор-5-пропоксифенил)пиколиновой кислоты
- 46 020136
По методике 1 с использованием 6-бромпиколиновой кислоты (1,0 экв.) и 2-фтор-5пропоксифенилбороновой кислоты (1,5 экв.) и Рб(бррГ)С12-ДХМ (0,15 экв.) получали 6-(2-фтор-5пропоксифенил)пиколиновую кислоту с выходом 20%.
ЖХ/МС= 276,0 (М+Н), К1=0,87 мин.
Синтез 6-(2,6-дифтор-4-метоксифенил)пиколиновой кислоты
По методике 1 с использованием 6-бромпиколиновой кислоты (1,0 экв.) и 2,6-дифтор-4метоксифенилбороновой кислоты (1,3 экв.) и Рб(бррГ)С12-ДХМ (0,15 экв.) получали 6-(2,6-дифтор-4метоксифенил)пиколиновую кислоту с выходом 42%.
ЖХ/МС = 266,1 (М+Н), К1=0,75 мин.
Синтез 3-фтор-6-(2-фторфенил)пиколиновой кислоты
По методике 1 с использованием 6-бром-3-фторпиколиновой кислоты (1,0 экв.) и 2-фторфенилбороновой кислоты (1,5 экв.) и Рб(бррГ)С12-ДХМ (0,05 экв.) получали 3-фтор-6-(2фторфенил)пиколиновую кислоту с выходом 81%.
ЖХ/МС = 236,1 (М+Н), К 0,72 мин.
Синтез 3-фтор-6-(2-фтор-5-метоксифенил)пиколиновой кислоты
По методике 1 с использованием 6-бром-3-фторпиколиновой кислоты (1,0 экв.) и 2-фтор-5метоксифенилбороновой кислоты (1,3 экв.) и Рб(бррГ)С12-ДХМ (0,15 экв.) получали 3-фтор-6-(2-фтор-5метоксифенил)пиколиновую кислоту с выходом 89%.
ЖХ/МС = 266,1 (М+Н), К1=0,79 мин.
Синтез 5-фтор-6-(2-фтор-5-метоксифенил)пиколиновой кислоты
По методике 1 с использованием 6-бром-5-фторпиколиновой кислоты (1,0 экв.) и 2-фтор-5метоксифенилбороновой кислоты (1,3 экв.) и Рб(бррГ)С12-ДХМ (0,15 экв.) получали 5-фтор-6-(2-фтор-5метоксифенил)пиколиновую кислоту с выходом 86%.
ЖХ/МС = 266,1 (М+Н), К4=0,79 мин.
Синтез 6-(4-(бензилокси)-2-фторфенил)-5-фторпиколиновой кислоты
По методике 1 с использованием 6-бром-5-фторпиколиновой кислоты (1,0 экв.) и 4-(бензилокси)-2фторфенилбороновой кислоты (1,3 экв.) и Рб(бррГ)С12-ДХМ (0,15 экв.) получали 6-(4-(бензилокси)-2фторфенил)-5-фторпиколиновую кислоту с выходом 28%.
ЖХ/МС = 342,1 (М+Н), К=1,05 мин.
- 47 020136
Синтез 6-(4-(бензилокси)-2-фторфенил)-3-фторпиколиновой кислоты
По методике 1 с использованием 6-бром-3-фторпиколиновой кислоты (1,0 экв.) и 4-(бензилокси)-2фторфенилбороновой кислоты (1,3 экв.) и Рб(брр£)С12-ДХМ (0,15 экв.) получали 6-(4-(бензилокси)-2фторфенил)-3-фторпиколиновую кислоту с выходом 41%.
ЖХ/МС = 342,1 (М+Н), Я4=1,06 мин.
Синтез 6-(2,6-дифтор-4-метоксифенил)-3-фторпиколиновой кислоты
По методике 1 с использованием 6-бром-3-фторпиколиновой кислоты (1,0 экв.) и 2,6-дифтор-4метоксифенилбороновой кислоты (1,3 экв.) и Рб(брр£)С12-ДХМ (0,15 экв.) получали 6-(2,6-дифтор-4метоксифенил)-3-фторпиколиновую кислоту с выходом 9%.
ЖХ/МС = 284,0 (М+Н), Я1=0,74 мин.
Синтез 6-циклогексенил-5-фторпиколиновой кислоты
По методике 1 с использованием 6-бром-5-фторпиколиновой кислоты (1,0 экв.) и циклогексенилбороновой кислоты (1,3 экв.) и Рб(брр£)С12-ДХМ (0,15 экв.) получали 6-циклогексенил-5-фторпиколиновую кислоту с выходом 61%.
ЖХ/МС = 222,0 (М+Н), Я. 0,52 мин.
Методика 3.
Синтез 6-циклогексил-5-фторпиколиновой кислоты
К дегазированному раствору 6-циклогексенил-5-фторпиколиновой кислоты (1,0 экв.) в МеОН (0,07 М) добавляли 10% Рб/С (0,1 экв.) и реакционную смесь в течение ночи перемешивали в атмосфере водорода, подаваемого из баллона. Затем раствор фильтровали, промывали с помощью МеОН и фильтрат концентрировали и получали 6-циклогексил-5-фторпиколиновую кислоту с выходом 65%.
ЖХ/МС = 224,2 (М+Н), Я4=0,95 мин.
Синтез 5-фтор-6-( 1,4-диоксаспиро [4,5]дец-7 -ен-8-ил)пиколиновой кислоты
ГА
По методике 1 с использованием 6-бром-5-фторпиколиновой кислоты (1,0 экв.) и 4,4,5,5тетраметил-2-(1,4-диоксаспиро[4,5]дец-7-ен-8-ил)-1,3,2-диоксаборолана (2,0 экв.) и Рб(брр£)С12-ДХМ (0,2 экв.) получали 5-фтор-6-(1,4-диоксаспиро[4,5]дец-7-ен-8-ил)пиколиновую кислоту.
ЖХ/МС = 280,2 (М+Н), Я. 0,66 мин.
- 48 020136
Синтез метил-5-фтор-6-( 1,4-диоксаспиро [4,5]дец-7-ен-8-ил)пиколината
ГЛ
К раствору 5-фтор-6-(1,4-диоксаспиро[4,5]дец-7-ен-8-ил)пиколиновой кислоты (1,0 экв.) в ДХМ (0,3 М) добавляли ЭДХ-НС1 (1,0 экв.), ДМАП (1,0 экв.) и МеОН (10 экв.). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 дней, затем разбавляли этилацетатом, промывали водой, рассолом, сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 25-50% этилацетата в гексанах и получали метил-5-фтор-6-(1,4-диоксаспиро[4,5]дец-7-ен-8-ил)пиколинат в качестве искомого продукта с выходом 35%.
ЖХ/МС = 294,2 (М+Н), К.=0,79 мин.
Синтез метил-5-фтор-6-(1,4-диоксаспиро[4,5]декан-8-ил)пиколината
ГЛ
о
К дегазированному раствору метил-5-фтор-6-(1,4-диоксаспиро[4,5]дец-7-ен-8-ил)пиколината (1,0 экв.) в МеОН (0,07 М) добавляли 10% Рб/С (0,1 экв.) и реакционную смесь в течение ночи перемешивали в атмосфере водорода, подаваемого из баллона. Затем раствор фильтровали, промывали с помощью МеОН и фильтрат концентрировали и получали метил-5-фтор-6-(1,4-диоксаспиро[4,5]декан-8ил)пиколинат с выходом 91%.
ЖХ/МС = 296,2 (М+Н), К.=0,83 мин.
Синтез метил-5-фтор-6-(4-оксоциклогексил)пиколината
К раствору метил-5-фтор-6-(1,4-диоксаспиро[4,5]декан-8-ил)пиколината (1,0 экв.) в ацетоне и воде (1:1, 0,04 М) добавляли обезвоженную щавелевую кислоту (2,0 экв.) и реакционную смесь перемешивали в течение 3 дней. Затем раствор нейтрализовывали путем добавления твердого NаНСОз, смесь добавляли к этилацетату и рассолу, органическую фазу сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали. Метил-5-фтор-6-(4-оксоциклогексил)пиколинат получали с выходом 98%.
ЖХ/МС = 252,1 (М+Н), К.=0,68 мин.
Синтез метил-5-фтор-6-(4-гидроксициклогексил)пиколината
При 0°С к раствору метил-5-фтор-6-(4-оксоциклогексил)пиколината (1,0 экв.) в МеОН (0,08 М) добавляли NаВН4. Раствору давали нагреться до комнатной температуры в течение ночи, затем подвергали распределению между этилацетатом и рассолом, органическую фазу сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали и получали метил-5-фтор-6-(4-гидроксициклогексил)пиколинат в виде смеси двух изомеров (5:1).
ЖХ/МС = 254,2 (М+Н), К.=0,63 мин.
- 49 020136
Синтез метил-6-(4-(трет-бутилдиметилсилилокси)циклогексил)-5-фторпиколината
К раствору метил-5-фтор-6-(4-гидроксициклогексил)пиколината (1,0 экв.) в ДМФ (0,15 М) добавляли имидазол (4,0 экв.) и ТВЭМ8С1 (2,5 экв.). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 дней, затем добавляли к этилацетату, промывали водой, рассолом, сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали и получали метил-6-(4-(третбутилдиметилсилилокси)циклогексил)-5-фторпиколинат с выходом 97% в виде смеси изомеров (3:1).
ЖХ/МС = 368,3 (М+Н), В!=1,4 и 1,42 мин.
Синтез 6-(4-(трет-бутилдиметилсилилокси)циклогексил)-5-фторпиколиновой кислоты
К раствору метил-6-(4-(трет-бутилдиметилсилилокси)циклогексил)-5-фторпиколината (1,0 экв.) в ТГФ/МеОН (2:1, 0,09 М) добавляли ЫОН (1,5 экв.). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, затем добавляли 1н. НС1 и этилацетат, органическую фазу промывали рассолом, сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали и получали 6-(4-(третбутилдиметилсилилокси)циклогексил)-5-фторпиколиновую кислоту в виде смеси изомеров (3:1) с выходом 82%.
ЖХ/МС = 354,2 (М+Н), В!=1,38 и 1,41 мин.
Синтез 6-бром-5-фторпиколиновой кислоты
К 2-бром-3-фтор-6-метилпиридин (1,0 экв.) в Н2О (30 мл) добавляли перманганат калия (1,0 экв.). Раствор нагревали при 100°С в течение 5 ч и затем добавляли еще перманганат калия (1,0 экв.). После нагревания в течение еще 48 ч вещество фильтровали через целит (4 смх2 дюйма) и промывали с помощью Н2О (150 мл). Объединенный водный раствор подкисляли с помощью 1н. НС1 до рН 4, экстрагировали этилацетатом (200 мл), промывали с помощью сушили над Мд8О4, фильтровали и концентрировали и получали 6-бром-5фторпиколиновую кислоту (17%) в виде белого твердого вещества.
ЖХМС (т/ζ): 221,9 (МН+); ЖХ В!=2,05 мин.
Методика 4.
Синтез 2-(2,6-дифторфенил)-3 -фтор-6-метилпиридина
(1,0
К раствору 2-бром-3-фтор-6-метилпиридина экв.) в ТГФ и воде (10:1, 0,2 М) добавляли
2,6-дифторфенилбороновую кислоту (2,0 экв.) и фторид калия (3,3 экв.). Реакционную смесь дегазировали в течение 10 мин, затем добавляли Рб2(бЬа)з (0,05 экв.), затем три-трет-бутилфосфин (0,1 экв.). Реакционную смесь перемешивали при 60°С в течение 1 ч, затем по данным ЖХ/МС все исходные вещества были израсходованы. Реакционной смеси давали охладиться до комнатной температуры, ее подвергали распределению между этилацетатом и водой, органическую фазу сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Неочищенное вещество разбавляли в Е!ОН до 0,1 М и добавляли 0,5 экв. ИаВН4 для удаления бЬа. Реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре, затем реакцию останавливали водой и концентрировали в вакууме для удаления этанола. Продукт экстрагировали в эфире, промывали рассолом, органические вещества сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Неочищенное вещество загружали в силикагель и очищали с помощью колоночной хроматографии (18СО) при элюировании смесью гексанов и этилацетата (0-10% этилацетата). Чистые фракции объединяли, концентрировали и получали 2-(2,6-дифторфенил)-3-фтор-6-метилпиридин
- 50 020136 в виде светло-желтого масла с выходом 86%.
ЖХ/МС = 224,0 (М+Н), К1=0,84 мин.
Методика 5.
Синтез 6-(2,6-дифторфенил)-5-фторпиколиновой кислоты
К раствору 2-(2,6-дифторфенил)-3-фтор-6-метилпиридина (1,0 экв.) в воде (0,05 М) добавляли КМпО4 (2,0 экв.) и реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение ночи. Добавляли еще 2,0 экв. КМпО4 и перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение еще 8 ч. Раствор охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через целит и промывали водой. Фильтрат подкисляли с помощью 6н. НС1 до рН 3, белый осадок отфильтровывали. Фильтрат дополнительно подкисляли до рН 1 и повторно фильтровали. Фильтрат экстрагировали этилацетатом, пока из водного слоя не удалялся весь продукт. Органическую фазу промывали рассолом и сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали. Остаток растворяли в этилацетате, промывали с помощью 1н. №ЮН, водный слой подкисляли до рН 1 и белые кристаллы отфильтровывали. Продукты объединяли и получали 6-(2,6-дифторфенил)-5-фторпиколиновую кислоту с выходом 32% в виде белого твердого вещества.
ЖХ/МС = 254,0 (М+Н), К1=0,71 мин.
Синтез 6-(2,6-дифторфенил)-3 -фтор-2-метилпиридина
К раствору 6-бром-3-фтор-2-метилпиридина (1,0 экв.) в этаноле и толуоле (1:1, 0,2 М) добавляли
2,6-дифторфенилбороновую кислоту, ДИЭА (5 экв.) и Рά(РРЬз)4 (0,2 экв.). Реакционную смесь нагревали в микроволновой печи при 120°С в течение 30 мин. Раствор фильтровали и промывали этилацетатом. Летучие вещества удаляли в вакууме и неочищенное вещество очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании этилацетатом и гексанами (2,5-20% этилацетат). После концентрирования чистых фракций выделяли 6-(2,6-дифторфенил)-3-фтор-2-метилпиридин с выходом 88%.
ЖХ/МС = 224,1 (М+Н), К1=0,87 мин.
Синтез 6-(2,6-дифторфенил)-3-фторпиколиновой кислоты
По методике 5 с использованием 6-(2,6-дифторфенил)-3-фтор-2-метилпиридина (1,0 экв.) и перманганата калия (6,0 экв.) получали 6-(2,6-дифторфенил)-3-фторпиколиновую кислоту с выходом 30%.
ЖХ/МС = 254,1 (М+Н), К1=0,70 мин.
Синтез 2-(2,6-дифтор-3 -метоксифенил)-3 -фтор-6-метилпиридина
2-бром-3-фтор-6-метилпиридина (1,0 экв.) и 2,6-дифтор-3экв.) получали 2-(2,6-дифтор-3-метоксифенил)-3-фтор-6По методике 4 с использованием метоксифенилбороновой кислоты (2,0 метилпиридин с выходом 60%.
ЖХ/МС = 254,1 (М+Н), К1=0,85 мин.
Синтез 6-(2,6-дифтор-3-метоксифенил)-5-фторпиколиновой кислоты
- 51 020136
По методике 5 с использованием 2-(2,6-дифтор-3-метоксифенил)-3-фтор-6-метилпиридина (1,0 экв.) и перманганата калия (4,0 экв.) получали 6-(2,6-дифтор-3-метоксифенил)-5-фторпиколиновую кислоту с выходом 27%.
ЖХ/МС = 284,1 (М+Н), К1=0,75 мин.
Синтез 3 -фтор-6 -метил-2 -(2,3,5 -трифторфенил) пиридин
К раствору 2-бром-3-фтор-6-метилпиридина (1,0 экв.) в диоксане (0,2 М) добавляли 2,3,5-трифторфенилбороновую кислоту и Рб(брр£)С12-ДХМ (0,1 экв.) Добавляли водный раствор карбоната натрия (2 М раствор, 2,0 экв.) и реакционную смесь нагревали в микроволновой печи при 120°С в течение 15 мин. Раствор подвергали распределению между этилацетатом и насыщенным раствором №1НСО3, органическую фазу промывали рассолом, сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали. Неочищенное вещество очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании этилацетатом и гексанами (1:3) и получали 3-фтор-6-метил-2-(2,3,5трифторфенил)пиридин с выходом 87%.
ЖХ/МС = 242,1 (М+Н), К1=0,98 мин.
Синтез 5-фтор-6-(2,3,5-трифторфенил)пиколиновой кислоты
К раствору 3-фтор-6-метил-2-(2,3,5-трифторфенил)пиридина (1,0 экв.) в воде и ΐ-ВиОН (2:1, 0,06 М) добавляли перманганат калия (10 экв.) и раствор нагревали при 90°С в течение 5 ч. При охлаждении до комнатной температуры раствор фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении и получали 5-фтор-6-(2,3,5-трифторфенил)пиколиновую кислоту с выходом 89%.
ЖХ/МС = 272,0 (М+Н), К1=0,80 мин.
К раствору 6-бром-5-фторпиколиновой кислоты (1,0 экв.) в метаноле (0,2 М) добавляли Н28О4 (4,2 экв.) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. После завершения реакции по данным ЖХ/МС реакционную смесь разбавляли этилацетатом и реакцию медленно останавливали насыщенным водным раствором ЫаНСО3. Реакционную смесь выливали в делительную воронку и экстрагировали этилацетатом. Органическую фазу сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали в вакууме и получали метил-6-бром-5-фторпиколинат в виде белого твердого вещества (>99%).
ЖХ/МС = 233,9/235,9 (М+Н), К1=0,69 мин.
Методика 6.
Синтез метил-6-(3-(бензилокси)-2,6-дифторфенил)-5-фторпиколината
К раствору метил-6-бром-5-фторпиколината (1,0 экв.) в ТГФ и воде (10:1, 0,1 М) добавляли 3-(бензилокси)-2,6-дифторфенилбороновую кислоту (2,5 экв.) и фторид калия (3,3 экв.). Реакционную смесь дегазировали азотом, затем добавляли Рб2(бЬа)3 (0,25 экв.) и три-трет-бутилфосфин (0,5 экв.) и реакционную смесь нагревали при 80°С в течение 1 ч. Анализ с помощью ЖХ/МС указывал на полное превращение исходного вещества в продукт. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем концентрировали в вакууме и загружали в силикагель. Неочищенный продукт очищали с помощью флэш-хроматографии !8СО при элюировании этилацетатом и гексанами (от 0 до 30% этилацетата) и по
- 52 020136 лучали метил-6-(3-(бензилокси)-2,6-дифторфенил)-5-фторпиколинат в качестве искомого продукта в виде светло-желтого масла с выходом 96%.
ЖХ/МС = 374,0 (М+Н), К1=1,07 мин.
Синтез метил-6-(3 -(бензилокси)-2,6-дифторфенил)пиколината
о
По методике 6 с использованием метил-6-бромпиколината (1,0 экв.) и 3-(бензилокси)-2,6дифторфенилбороновой кислоты (2,5 экв.) получали метил-6-(3-(бензилокси)-2,6дифторфенил)пиколинат в виде светло-желтого твердого вещества с выходом 95%.
ЖХ/МС = 356,2 (М+Н), Κί=1,03 мин.
Синтез метил-6-(2,6-дифтор-4-метоксифенил)-5-фторпиколината
х.
По методике 6 с использованием метил-6-бромпиколината (1,0 экв.) и 2,6-дифтор-4метоксифенилбороновой кислоты (2,5 экв.) получали метил-6-(2,6-дифтор-4-метоксифенил)-5фторпиколинат в виде белого твердого вещества с выходом 85%.
ЖХ/МС = 298,0 (М+Н), К1=0,89 мин.
Синтез 6-(2,6-дифтор-4-метоксифенил)-5-фторпиколиновой кислоты №
К раствору метил-6-(2,6-дифтор-4-метоксифенил)-5-фторпиколината (1,0 экв.) в ТГФ/МеОН (2:1, 0,09 М) добавляли ООН (1,5 экв.) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакцию останавливали с помощью 1н. НС1, экстрагировали этилацетатом, промывали рассолом, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали и получали 6-(2,6-дифтор-4метоксифенил)-5-фторпиколиновую кислоту с выходом 84%.
ЖХ/МС = 284,1 (М+Н), К1=0,76 мин.
Методика 7.
Синтез метил-6-(2,6-дифтор-3-гидроксифенил)-5-фторпиколината
К раствору метил-6-(3-(бензилокси)-2,6-дифторфенил)-5-фторпиколината (1,0 экв.) в метаноле (0,1 М) добавляли 10% Рб/С (0,1 экв.) в этилацетате. Реакционную смесь помещали в атмосферу водорода и перемешивали в течение 2 ч. После завершения реакции раствор фильтровали через слой целита, слой промывали метанолом, фильтрат концентрировали в вакууме и получали метил-6-(2,6-дифтор-3гидроксифенил)-5-фторпиколинат в виде серого масла с выходом 86%.
ЖХ/МС = 284,0 (М+Н), К1=0,90 мин.
Синтез метил-6-(2,6-дифтор-3 -гидроксифенил)пиколината
- 53 020136
По методике 7 с использованием метил-6-(3-(бензилокси)-2,6-дифторфенил)пиколината (1,0 экв.) получали метил-6-(2,6-дифтор-3-гидроксифенил)пиколинат в виде светло-коричневого твердого вещества с выходом 96%.
ЖХ/МС = 266,0 (М+Н), К1=0,68 мин.
Синтез метил-6-(2-фтор-5 -формилфенил)пиколината
К раствору метил-6-бромпиколината (1,0 экв.) в ДМЭ (0,03 М) в сосуде для микроволновой печи добавляли Рб(бррГ)С12-ДХМ (0,05 экв.), 2-фтор-5-формилфенилбороновую кислоту (1,5 экв.) и 2 М №2СО3 (2 экв.). Реагенты нагревали при 120°С в течение 20 мин. С помощью ЖХ/МС обнаруживали смесь искомого продукта и соответствующей карбоновой кислоты, реакционную смесь разбавляли этилацетатом, промывали с помощью НС1 (рН 5), кислую фазу экстрагировали этилацетатом, объединенные органические слои сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали в вакууме и получали светло-коричневое твердое вещество. Твердое вещество растворяли в МеОН и при комнатной температуре обрабатывали с помощью 3 экв. ТМС-диазометана. После полного превращения карбоновой кислоты в соответствующий метиловый эфир реакционную смесь концентрировали в вакууме и неочищенное вещество очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле Ц8СО) при элюировании с помощью 30% этилацетата в гексанах и получали метил-6-(2-фтор-5-формилфенил)пиколинат в виде желтого твердого вещества с выходом 58%.
ЖХ/МС = 260,0 (М+Н), К3=0,70 мин.
Синтез (Е)-метил-6-(2-фтор-5-(проп-1-енил)фенил)пиколината
К раствору метил-6-(2-фтор-5-формилфенил)пиколината (1,0 экв.) в МеОН (0,17 М) добавляли этилтрифенилфосфонийбромид (1,0 экв.), затем метоксид натрия (1,5 экв.). Реакционную смесь нагревали при 65°С в течение 5 ч, затем охлаждали до комнатной температуры и концентрировали в вакууме. Неочищенное вещество очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (!8СО) при элюировании с помощью 50% этилацетата в гексанах и получали (Е)-метил-6-(2-фтор-5-(проп-1енил)фенил)пиколинат в виде белого твердого вещества с выходом 81%.
ЖХ/МС = 272,0 (М+Н), К1=0,73 мин.
Синтез метил-6-(2-фтор-5 -пропилфенил)пиколината
К раствору (Е)-метил-6-(2-фтор-5-(проп-1-енил)фенил)пиколината (1,0 экв.) в МеОН (0,04 М) добавляли 10% Рб/С (0,5 экв.) и реакционную смесь помещали в атмосферу водорода и перемешивали в течение ночи. Смесь фильтровали через слой целита и промывали с помощью МеОН. Фильтрат концентрировали в вакууме и получали метил-6-(2-фтор-5-пропилфенил)пиколинат в виде светло-серого масла с выходом 97%.
ЖХ/МС = 274,2 (М+Н), К3=0,61 мин.
Синтез 6-(2-фтор-5-пропилфенил)пиколиновой кислоты
К раствору метил-6-(2-фтор-5-пропилфенил)пиколината (1,0 экв.) в ТГФ добавляли гидроксид лития (10 экв.) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. ТГФ удаляли в вакууме и оставшуюся щелочную фазу подкисляли с помощью концентрированной НС1. Водный
- 54 020136 слой экстрагировали этилацетатом (2х), органическую фазу сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали и получали 6-(2-фтор-5-пропилфенил)пиколиновую кислоту с выходом 35%.
ЖХ/МС = 260,2 (М+Н), Я1=0,36 мин.
Методика 8.
Синтез метил-6-(2,6-дифтор-3-(трифторметилсульфонилокси)фенил)-5-фторпиколината
К раствору метил-6-(2,6-дифтор-3-гидроксифенил)-5-фторпиколината (1,0 экв.) в ДХМ (0,2 М) добавляли ДИЭА (2,0 экв.) и 1,1,1-трифтор-№фенил-№(трифторметилсульфонил)метансульфонамид (1,5 экв.). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакцию останавливали водой, органическую фазу сушили над сульфатом натрия и концентрировали. Неочищенное вещество очищали с помощью хроматографии РЗСО при элюировании этилацетатом и гексанами (0-30% этилацетата). Чистые фракции концентрировали и получали метил-6-(2,6-дифтор-3(трифторметилсульфонилокси)фенил)-5-фторпиколинат в качестве искомого продукта в виде прозрачного масла с выходом 68%.
ЖХ/МС = 416,1 (М+Н), Я4=1,08 мин.
Синтез метил-6-(2,6-дифтор-3-(трифторметилсульфонилокси)фенил)пиколината
По методике 8 с использованием метил-6-(2,6-дифтор-3-(трифторметилсульфонилокси)фенил)-5фторпиколината (1,0 экв.) получали метил-6-(2,6-дифтор-3-(трифторметилсульфонилокси)фенил)пиколинат в виде бесцветного масла с выходом >99%.
ЖХ/МС = 397,9 (М+Н), Я4=1,03 мин.
Синтез 6-(2,6-дифтор-3-метилфенил)-5-фторпиколиновой кислоты
К раствору метил-6-(2,6-дифтор-3-(трифторметилсульфонилокси)фенил)-5-фторпиколината (1,0 экв.) в диоксане и воде (10:1, 0,15 М) добавляли метилбороновую кислоту (3,0 экв.) и карбонат калия (3,0 экв.). Реакционную смесь дегазировали азотом в течение 10 мин, затем к раствору добавляли Рб(РРЬ3)4 (0,1 экв.) и нагревали при 100°С в течение 3 ч. В этот момент ЖХ/МС реакционной смеси указывала на полное превращение в карбоновую кислоту (М+Н = 268). Охлаждали до комнатной температуры и добавляли воду и этилацетат. Эти два слоя разделяли, водную фазу подкисляли с помощью концентрированной НС1 до рН 1 и экстрагировали этилацетатом. Органическую фазу сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме и получали 6-(2,6-дифтор-3-метилфенил)-5фторпиколиновую кислоту в виде прозрачного масла с выходом 97%.
ЖХ/МС = 268,1 (М+Н), Я1=0,82 мин.
Синтез метил-6-(2,6-дифтор-3 -метилфенил)пиколината
О
К раствору метил-6-(2,6-дифтор-3-(трифторметилсульфонилокси)фенил)пиколината (1,0 экв.) в толуоле добавляли Рб(брр£)С12-ДХМ (0,1 экв.), затем диметилцинк (3,0 экв.). Раствор из оранжевого пере ходил в ярко-желтый. Реакционную смесь нагревали при 80°С в течение 2 ч и затем анализ с помощью ЖХ/МС указывал на полное превращение в продукт. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли этилацетатом и промывали рассолом. Органический слой сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали в вакууме и получали метил-6-(2,6-дифтор-3
- 55 020136 метилфенил)пиколинат в виде коричневого масла с количественным выходом. ЖХ/МС = 264,0 (М+Н), К.=0,90 мин.
Синтез 6-(2,6-дифтор-3-метилфенил)пиколиновой кислоты
К раствору метил-6-(2,6-дифтор-3-метилфенил)пиколината (1,0 экв.) в ТГФ добавляли гидроксид натрия (10 экв.) и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч. Раствор разбавляли этилацетатом и промывали с помощью 1н. №ЮН (2х). Водные щелочные промывочные растворы объединяли и подкисляли с помощью концентрированной НС1. Кислую водную фазу экстрагировали этилацетатом (2х), объединенные органические слои сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали в вакууме и получали 6-(2,6-дифтор-3-метилфенил)пиколиновую кислоту в виде белого твердого вещества с выходом 85%.
ЖХ/МС = 250,0 (М+Н), К.=0,76 мин.
Синтез 6-(3-этил-2,6-дифторфенил)пиколиновой кислоты
К раствору метил-6-(2,6-дифтор-3-(трифторметилсульфонилокси)фенил)пиколината (1,0 экв.) в толуоле (0,15 М) добавляли Рб(бррГ)С12-ДХМ (0,1 экв.), затем диэтилцинк (3,0 экв.). Раствор из оранжевого переходил в ярко-желтый. Реакционную смесь нагревали при 70°С в течение 2 ч и затем анализ с помощью ЖХ/МС показывал наличие смеси состава 1:3:1 гидролизованного продукта, искомого продукта и неизвестного побочного продукта. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли этилацетатом и промывали с помощью 1н. №ЮН (2х). Органический слой сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали в вакууме и получали коричневое масло. Масло повторно растворяли в ТГФ и обрабатывали с помощью 1н. №ЮН в течение 1 ч. Затем реакционную смесь разбавляли этилацетатом и промывали с помощью 1н. №ЮН (2х). Щелочные промывочные растворы объединяли, подкисляли с помощью концентрированной НС1 и экстрагировали этилацетатом (3х). Органическую фазу сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали в вакууме и получали 6-(3-этил-2,6дифторфенил)пиколиновую кислоту в виде светло-коричневого масла с выходом >99%.
ЖХ/МС = 264,1 (М+Н), К.=0,88 мин.
Методика 9.
Гомогенный раствор 1 экв. каждого амина, карбоновой кислоты, НОАТ и ЭДХ в ДМФ при концентрации, равной 0,5 М, выдерживали в течение 24 ч и затем добавляли воду и этилацетат. Органическую фазу сушили над сульфатом натрия и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании этилацетатом и гексанами и получали искомый защищенный амид. Альтернативно, неочищенную реакционную смесь сразу очищали с помощью ВЭЖХ. После лиофилизации получали соль защищенного амида с ТФК. Альтернативно, полученные с помощью ВЭЖХ фракции можно было добавить к ЕЮАс и твердому №2СО3, разделить и промыть с помощью №С1(ка1). После сушки над Мд§О4, фильтрования и удаления летучих веществ в вакууме получали защищенный амид в виде свободного основания. Альтернативно, неочищенную реакционную смесь использовали на стадии удаления защитной группы без дополнительной очистки.
Если содержался защищенный с помощью Ν-Вос амин, его удаляли путем обработки избытком смеси 4 М НС1/диоксан в течение 14 ч или путем обработки с помощью 25% ТФК/СН2С12 в течение 2 ч. После удаления летучих веществ в вакууме вещество очищали с помощью ОФ ВЭЖХ и после лиофилизации получали амид в виде соли с ТФК. Альтернативно, полученные с помощью ВЭЖХ фракции можно было добавить к ЕЮАс и твердому №2СО3, разделить и промыть с помощью №С1(ка1). После сушки над Мд§О4, фильтрования и удаления летучих веществ в вакууме получали свободное основание. После растворения в смеси МеСЛ/НзО, добавления 1 экв. 1н. НС1 и лиофилизации получали соль амида с НС1.
Если содержался №Вос-1,2-аминогидроксициклический карбамат, то до удаления защитной группы Вос циклический карбамат можно было расщепить путем обработки с помощью Ск2СО3 (0,5 экв.) в этаноле при концентрации, равной 0,1 М, в течение 3 ч. После удаления летучих веществ в вакууме защитную группу Вос аминогруппы удаляли, как описано выше.
Если содержалась группа Ν-Вос, ОАс, то до удаления защитной группы Вос ацетатную группу можно было отщепить путем обработки с помощью К2СО3 (2,0 экв.) в этаноле при концентрации, равной
- 56 020136
0,1 М, в течение 24 ч.
Если содержалась Ν-фталимидная группа, то защитную группу аминогруппы удаляли путем обработки гидразином в МеОН при 65°С в течение 3 ч. После охлаждения и отфильтровывания белого осадка фильтрат концентрировали и очищали с помощью ОФ ВЭЖХ и получали аминоамид.
Если содержался ТВЭМ8 эфир, то защитную группу удаляли до удаления защитной группы Вос путем обработки с помощью смеси 6н. НС1, ТГФ, метанола (1:2:1) при комнатной температуре в течение 12 ч. После удаления летучих веществ в вакууме защитную группу Вос аминогруппы удаляли, как описано выше. Альтернативно, ТВЭМ8 эфир и группу Вос можно было удалить с помощью смеси 6н. НС1, ТГФ, метанола (1:2:1) путем выдерживания при КТ в течение 24 ч или нагревания при 60°С в течение 3 ч.
Если содержалась группа ОМе, то эту защитную группу удаляли путем обработки с помощью 1 М ВВг3 в ДХМ (2,0 экв.) в течение 24 ч. По каплям добавляли воду и летучие вещества удаляли в вакууме. Вещество очищали с помощью ВЭЖХ с обращенной фазой, как описано выше.
Если содержалась группа ОВп, то эту защитную группу удаляли путем обработки с помощью 10% РЕ/С (0,2 экв.) в атмосфере водорода в этилацетате и метаноле (1:2). После завершения реакции реакционную смесь фильтровали через целит, промывали метанолом и фильтрат концентрировали в вакууме.
Синтез (+/-)-3-амино-№(4-(3-амино-4-гидроксициклогекс-1-енил)пиридин-3-ил)-6-(2,6дифторфенил)пиколинамида
По методике 9 (+/-)-трет-бутил-3-(3-аминопиридин-4-ил)-6-(трет-бутилдиметилсилилокси)циклогекс-2-енилкарбамат и 3-амино-6-(2,6-дифторфенил)пиколиновую кислоту вводили в реакцию сочетания и удаляли защитную группу и получали (+/-)-3-амино-№(4-(3-амино-4-гидроксициклогекс-1енил)пиридин-3-ил)-6-(2,6-дифторфенил)пиколинамид в виде соли с ТФК.
ЖХМС (т/ζ): 438,2 (МН4), ЖХ Κ=2,00 мин.
Синтез (+/-)-3-амино-№(4-(3-амино-4-гидроксициклогексил)-пиридин-3-ил)-6-(2,6-дифторфенил)пиколинамида
По методике 9 (+/-)-трет-бутил-5-(3-аминопиридин-4-ил)-2-(трет-бутилдиметилсилилокси)циклогексилкарбамат и 3-амино-6-(2,6-дифторфенил)пиколиновую кислоту вводили в реакцию сочетания и удаляли защитную группу и получали (+/-)-3-амино-№(4-(3-амино-4гидроксициклогексил)пиридин-3-ил)-6-(2,6-дифторфенил)пиколинамид в виде соли с ТФК с выходом 18%.
ЖХМС (т/ζ): 440,3 (МН4), ЖХ Κ=2,04 мин.
По методике 9 получали следующие соединения.
- 57 020136
Таблица 1
Пример Структура ЖХ/МС ЖХ/МС Химическое название
№ (М+Н при (КГ при
ирсц ирсц
Хиральный
6-(2,6-дифторфенил)-5-
V АА φτορ-Ν-(4-((1Κ,38,58)-3-
1 АА 442,2 0,75 гидрокси-5метилци клогексил)пири
гЧ' о дин-3-ил )пиколинамид
ОН Хиральный Ν-(4-((3Κ,4Κ, 58)-3-
н с ϊν, А амино-4-гидрокси-5-·
О АА метилпиперидин-1-
2 (Уга 474,3 0,52 ил)пиридин-3-ил)-6- (2,6-дифтор-4гидроксифенил)-5фторпиколинамид
3-амино-Ы-(4-
((ЗКЛК,58)-3-амино-4- гидрокси-5-
3 7 н 7 ιΓ ЛмгА 473,3 0,55 метилпиперидин-1- ил)пиридин-3-ил )-6-
N ‘ (2.6-дифторфенил)-5фторпиколинамид
ОН Хиральный Ν-(4-((1Κ,3Κ,4Κ,58)-3-
он ГА н,с„ X ,™Др амино-4-гидрокси-5метил циклогекс и л)
4 ! Η Ή Т σΑ 473,3 0,52 пиридин-3-ил)-6-(2,6дифтор-4’ гидроксифенил )-5фторпиколинамид
ОНХиральный ОН η 'γ н,с,. Ν-(4-((1Κ,3Κ,4Κ,58)-3- амино-4-гидрокси-5метилциклогексил)
5 Т н Ч X 455,3 0,55 пиридин-3-нл)-5-фтор-6- (2-фтор-5-
х ° гидроксифенил)
пиколинамид
ОН Хнральный
ιΓί 14-(4-((1 К,38)-3-
'.у·. ЦАР аминоциклогексил)
6 АА А 407,2 0,52 пиридин-3-и л )-6-(2-
фтор-4-гидроксифенил)
V ° пиколинамид
НО^-^5^ Хиральный
Η,Νν^-.. Х+с Ν-(4-(( 1 К,38)-3-
О А аминоциклогексил)
7 I и ϊА 407,2 0,53 пиридин-3-ил)-6-(2-
{[Υ фтор-5-гидроксифенил)
V 0 пиколинамид
ОН Хиральньм 14-(4-(( 1 К, 38)-3-
аминоциклогексил)
8 х8А' 425,2 0,54 пиридин-3-ил )-6-(2,6- дифтор-4-
от гидроксифенил)
пиколинамид
ОН Хиральный 14-(4-((] К, 38)-3-
-. ΟίΑπ- аминоциклогексил)
9 О А 425,2 0,53 пиридин-3-ил)-5-фтор-6- (2-фтор’4-
ОА гидроксифенил)
пиколинамид
ОН Хиральный 14-(4-((1К,5К)-5-амино-
10 Н/уу Ν; Αχ А ГТ σΝιΑ 453,3 0.58 3,3-диметилциклогексил)пиридин-3-ил)-5фтор-6-(2-фтор-4гидроксифенил)
пиколинамид
- 58 020136
11 С Н 3Хи₽альныи Н,С.νη2 ΧΎ и н Уу σΧ 469,2 0,7 Ν-(4-((1Κ,5Κ)-5-3μηηο- 3,3-диметилциклогексил)пиридин-3-ил)-6(2,6-дифтор-Зметнлфенил)-5фторпиколинамид
12 СН^Хиральньм н,с.рунг XX X Η Λ сХ 451,1 0,69 К-(4-((1К,5К)-5-амино- 3,3-диметилциклогексил)пиридин-3-ил)-6(2,6-дифтор-Зметилфенил) пиколинамид
13 -СНХиральный ОН Г - -Λ- Хг о-х 454,2 0,58 Ν-(4-((3Κ, 4К, 55)-3амино-4-гидрокси-5метилпиперидин-1ил)пиридин-3-ил)-6(2,6-дифтор-Зметилфенил) пиколинамид
14 Е ч.-^^г^Хиральныи Λ,ΝΗ2 ХА ох сХ 445,2 0,62 N-(4-((1 К,35)-3- аминоциклогексил) пиридин-3-нл)-5-фтор-6(2,3,5-трифторфенил) пиколинамид
15 ОН (№Л(Ч*Я'* XX фХ 467,5 0,63 Ν-(4-((1Κ,3Κ,4Κ,58)-3амино-4-гидрокси-5метилциклогексил) пириднн-3-ил)-6-(3этил-2,6-дифторфенил) пиколинамид
16 + о АХ V ° 428,2 0,63 Ν-(4-((3Κ,4Κ, 55)-3- амино-4-гидрокси-5метилпиперидин-1ил)пиридин-3-ил)-6циклогексил-5фторпиколинамид
17 он н,с„ ,нн, /СДГ н 7 II ζΧ 467,3 0,64 Ν-(4-((1 К, ЗК, 45,58)-3амиио-4-гидрокси-5ме гилциклогексил) пнриди и-3-ил )-6-(3этил-2,6-дифторфенил) пиколинамид
- 59 020136
18 ОН ιί^ θ'ΝΗ2α Μ*5, Η I Ο'Ύ4' Ν Хиральныи г Έ ) 453,2 0,66 Ν-(4-((1Κ,3Κ,48)-3ам ино-4-ги д рокси цикл οΓεκεΗπίπΗρΗΛΗΗ^-ΗΗΐ-δ(З-этил-2,6дифторфенил) пиколинамид
*ΧρΜ Хиральныи
о Λ Ν-(4-((1Κ, 35)-3-
V Ε аминоциклогексил)
19 X κ. ό 437,2 0,67 пиридин-3-ил )-6-(3-
СУ X этил-2,6-дифторфенил)
ν' 0 пиколинамид
.СНт^ирэльныи
Η,Νκ/χ. V Ν-(4-((ΙΚ, 38)-3-
ΊΟ ^Ε аминоциклогексил)
20 3ί Ν Λ 441,2 0,64 пиридин-3-ил )-6-(2,6-
ητγ АО дифтор-3-метилфенил)-
Μ ° 5-фторпиколинамид
н,с. Ν; ο Η (ΓΎ Хиральнын СН, Ν-(4-((1Κ,38,58}-3-
21 м II Έ 451,2 0,7 амино-5метилциклогексил)
ςτΎ пиридин-3-ил)-6-(3этил-2,6-дифторфенил)
пиколинамид
ОН (Ρί СН^^рзльньм Ν-(4-((3Κ,4Κ,55)-3-
^ЬГ 1 Η ЛД Е амино-4-гидрокси-5-
X χΓ метилпиперидин-1 -
22 472,3 0,59 ил)пиридин-3-ил)-6-
(2,6-дифтор-З-
''Ν'' метил фенил )-5фторпиколинамид
он ΐΓ^Ί Хирапьнъш Ν-(4-((3Κ.4Κ,58)-3-
Ν гу ДО амино-4-гидрокси-5-
23 422,3 0,53 метилпиперидин-1-
1¼ Ό ил)пиридин-3-ил)-6-(2фторфенил)ликолин-
амид
он ιΠ Хирапьныи Ν-(4-((3Κ,4Κ,58)-3-
нгНк^у.с^ Ν н до А амино-4-гидрокси-5-
24 А 458,3 0,51 метилпиперидин-1-
ду ил )пири дин-3-ил)-6-
и о Ε (2,6-дифторфенил) 3-
Ν фторпиколинамид
- 60 020136
25 он Хиральиыи Н^у-уС^Д^ 7 Й Γ',Τ сУЕ7 440,3 0,54 Ν-(4-((3Κ, 4 К, 55)-3амин,о-4-гидрокси-5метилпиперидин-1ил)пиридин-3-ил)-5фтор-6-(2*фторфенил) пиколинамид
26 Хиральмыи Он ί| Ί н?1у--уОН|р.Л-Д..р όΎ^ Ν 440,2 0,53 Ν-(4-((3Κ, 4К, 53)-3амино-4-гидрокси-5метилпиперидин-1ил)пиридин-3-ил)-6(2,6-дифторфенил) пиколинамид
27 С Н ^иральныи Н2Му^ч,С»уАД.р !л* ' 455,3 0,66 Ν-(4-((1Κ,35,55)-3амнно-5метилциклогексил) пиридин-3-ил)-6-(2,6дифтор-3-метил фен ил)5-фторпиколинамид
28 ,л^^С1-ЦХиральнь1м '7%' V 0 423,2 0,61 Ν-(4-((ΙΚ,38)-3аминоциклогексил) пиридин-3-ил)-6-(2,6дифтор-3-метилфенил) пиколинамид
29 СН }Х*1ральньм Η,Ο„ρ...ΝΗ, СДр н Ϊ У О'» 437,2 0,64 N-(4-((1 К,35,55)-3амино-5метилциклогексил) п при дин-3-ил )-6-(2,6дифтор-З-метилфенил) пиколинамид
30 -»й^-СН,Хиральиыи ОН у 3 н,с..Л.ннг ЦАр - Η 7 11 ζτ№ 453,2 0,59 Ν-(4-((1Κ,3ΐΜΚ,58)-3амино-4-гидрокси-5метилциклогексил) пиридин-3*ил)-6-(2,6дифтор-3-метилфенил) пиколинамид
31 ^СН.Хиральныи ОН (| НА/Ч ^ААе н 7 || фг^ 453,2 0,6 Ν-(4-((ΙΚ,3Μ£,58)-3амино-4-ι идрокси-5метилциклогексил) пиридия-3-ил)-б-(2,6дифтор-3-метил фен ил) пиколинамид
- 61 020136
32 Η;Ν4 δ Ϋ он 'ί^' Хиральньй Е Е 443,2 0,55 Ν-(4-(( 1 К,35)-3аминоциклогексил) пириднн-3-ил)-6-(2,6дифтор-4гидроксифенил)-5фторпиколинамид
но Хиральный Ν-(4-(( 1 К,38)-3-
Η2Ν, ЦДР аминоциклогексил)
33 Ή А. . ,Е у 425,2 0,53 лиридин-3-ил)-5-фтор-6- (2φιορ-5-
С г ΐ гидроксифенил)
Ν пиколинамид
но Хиральный Ν-(4-((] К,35)-3-
Η,Ν, аминоциклогексил)
34 ν 6Г 425,2 0,52 пиридин-3-ил)-3-фтор-6-
?Νν А 1) (2-фтор-5-
С ( ϊ Е гидроксифенил)
пиколинамид
но Хиральный II 1 Ν-(4-((1Κ,35,55)-3-
Η..Ν, Υ'- ^сн·. Ά амино-5-
35 ν г н гА Ίι 421,1 0,56 метилциклогексил)
А- I) пиридин-3-ил)-6-(2-
0 Г ϊ фтор-5-гидроксифенил)
пиколинамид
ОН Хиральный Ν-(4-((1 К,35,55)-3-
Η,Ν* ο оуД Αΐ Έ амино-5метил циклогексил)
36 Ύ Η ΐ и 439,2 0,57 пиридин-3-ил)-6-(2,6-
Ο дифтор-4-
Ή-1 гидроксифенил)
пиколинамид
Он Хиральный Ν-(4-((1Κ,35,58)-3-
'Λ 1! V амино-5-
37 Ο 421,1 0,56 метилциклогексил)
υ о пиридин-3-ил )-6-(2-
о фтор-4’гидроксифенил)
пиколинамид
он Хиральный N-(4-((1 К,38,55)-3-
СН С ^1 амино-5-
ο Έ метилциклогексил)
38 γ Η ΐ Хг 439,2 0,57 пиридин-3-и л )-5-фтор-6-
и (2-фтор-4-
ν гидроксифенил)
пиколинамид
- 62 020136 .
39 СТА ОН χ СТ™3 I ρ X V ° ρ лрапьный 439,2 0,55 Ν-(4-((ΙΚ,38,58)-3амино-5метил циклогекс ил) пиридин-3-ил)-3-фтор-6(2-фтор-4гидроксифенил) пиколинамид
он Ц:'Т х СНуирапьный Ν-(4-((1Κ,3Κ,48,58)-3-
н3с, ΧΧΜ ^Е амино-4-гид рокси-5-
40 - н π αχ ^Е 471,2 0,62 метилциклогексил) пиридин-3-ил)-6-(2,6дифтор-3-метилфенил)-
Ν 5-фторпиколинамид
θΙ^Ι ст><,СН^-11Ра1',ь11ый Ν-(4-(( 1 К,ЗК,48)-3-
амино-4-
41 ) X и V II _,СТД-СТ 439,2 0,57 гидроксициклогексил) пиридин-3-ил)-6-(2,6-
и 5 дифтор-3-метил фен ил)
пиколинамид
ОН Хоральный Ν-(4-((1Κ,38,58)-3-
Нгг^ р-С^ХХ амино-5метилциклогексил)
42 Т Н 457,2 0,56 пиридин-3-и л )-6-(2,6-
хт Т ‘ дифтор-4-
М 0 р гидроксифенил)-3фторпиколинамид
нох Хирапьньм Ν-(4-((1 К.,38,58)-3-
Η,Ν. -Л>сн, ЦД •р амино-5-
V Л метилциклогексил)
43 ХдХ 439,2 0,56 пиридин-3-ил)-3-фтор-6-
(у у у (2-фтор-5-
Ή' ° Р гидроксифенил)
пиколинамид
он ХОг ,, С Н уиральный Ν-(4-((1Κ.,3 К,4Й,58)-3-
Η,Ν. 'р амино-4-гидрокси-5-
44 γ\ о 471,2 0,62 метилциклогексил)
ииридин-3-ил )-6-(2,6-
СТ Г дифтор-3-метилфенил)-
N 5-фторпиколинамид
Н>С'°Х Хиральпем Ν-(4-((1Ε,38,58)-3-
Η,Ν. ур>СН; ДД Т амино-5-
45 хш ЛР 453,1 0,61 метилциклогексил)пири дин-3-ил)-5-фтор-6-(2-
СУ X фтор-5-метоксифенил)
N пиколинамид
- 63 020136
46 но, Η2ΝγγΟΗ3 АУ V 0 ζν Хиральмый ТО У^у ыФ’У Уч 439,1 0,56 Ν-(44(ΙΚ,35,55)-3амино-5метилциклогексш|)пири дин-3-ил)-5-фтор-6-(2фтор-5-гидроксифенил) пиколинамид
он л, О Хоральный ιΓΥ сн> Ν-(4-((ΙΚ,3Κ,4Κ, 55)-3-
ψγ амино-4-гидрокси-5-
и φΎ метилциклогексил)
47 V 487,1 п ири ди н-3-ил )-6-(2,6дифтор-3-
метоксифен ил)-5фторпиколинамид
р. ^.рХиральный
Ν-(4-((1 К,35)-3-
Ώ аминоциклогексил)
48 У 427,2 0,59 пиридин-3-ил )-6-(2,3,5-
У трифторфенил)
Ιξ А О N пиколинамид
Хиральный (ί Ί 14-(4-(( 1К,5К)-5-амино-
49 кД.р мУ 455,2 0,63 3,3- ди метилциклогексил)
фа ЛД пиридин-3-ил)-6-(2,6- дифторфенил)-5-
фторпиколинамид
ОН Хиральный Ν-(4-((1 К,ЗК,4К,55)-3-
ндул У амино-4-гидрокси-5-
50 и Г¥Р 457,2 0,58 метилциклогексил)
ФУ ДТ п ири д ин-З-ил )-6-(2,6дифторфенил)-5-
фторпиколинамид
Хиральный 3-амино-14-(4-
Н2НууСНр У> ((1 К,35,58)-3-амино-5-
51 Ун Уг 456,1 0,58 метилциклогексил)
№υνυ пиридин-3-ил)-6-(2,6-
и у ΝΗ? дифторфенил)-5-
N фторпиколинам ид
ОН Хиральныи N-(4-(( 15,35,45,5К)-3-
52 ΗΑ ф МН|; Аг\ 1 р ами но-4-гидрокси-5-
У 439,! 0,68 метилциклогексил) пиридин-3-ил)-6-(2,6-
ГТ Ϊ дифторфенил)
пиколинамид
- 64 020136
53 Η,Ν* δ ОН Хиральный Ά 413,3 0,55 Ν-(4-((1Κ, 38)-3аминоциклогексил) пиридин-3-ил)-5-фтор-6- ((18,48)-4гидрокеициклогексил) пиколинамид
Η,ίΚ ο* ОН Хоральный сн, кА Ν-(4-((1Κ,38,58)-3амино-5мети л циклогекс и л)
54 γ н χΑ 427,3 0,59 пиридин-3-ил)-5-фтор-6-
Α ((15,45)-4-
Ύ гидрокси циклогексил)
пиколинамид
Η;Ν» Ο *?Н Хиральтй *СН3 кА Ν-(4-((1Κ,38,58)-3амино-5метилцикпогексил)
55 Υ N X / Р 427,3 0,55 пиридин-3-ил)-5-фтор-6-
ο γΆ ((1г,4г)-4-
'ν гидроксициклогексил)
пиколинамид
ОН Хнралыгый N-(4-((1 К, 38)-3-
56 Κ,Η, Ο £ 413,3 0,48 аминоциклогексил) п ири ди н-3-ил)-5-фтор-6-
Υ л АТ ((1г,4г)-4-
ο 0 гидрокси циклогексил)
пиколинамид
γ’Ύ. Хиральный Ν-(4-((1Κ,38,58)-3-
Η/ό Ύ'” гсц,ДД амино-5-
57 5 аА 423,3 0,64 метилциклогексил) пиридин-3-ил)-5-фтор-6-
ζ Г ί (2-фторфенил)
пиколинамид
Хирапвнв1й Ν-(4-((1Κ,38,58)-3-
Η,Κ, Υ усн, 1А амино-5-
58 \ 4! 9,3 0,67 метилциклогексил)
Α п и ридин-З-ил )-6-(2-
С Г фтор-5-м етилфенил)
пиколинамид
НаС^/5^ Хирэльныл Ν-(4-((1Κ,38,58)-3-
Η;Ν уСН, 1А амино-5-
59 Α ыАа 437,3 0,67 метилциклогексил)
Д η ΐ V γΝ,/.Υ пиридин-3-ил)-5-фтор-6-
ζ Ϊ Г (2-фтор-5-метилфен ил)
пиколинамид
- 65 020136
60 сн, Ι[ Η 7 Ν., -Ι: ? X* Ρ а ль н ы й т р ¢+-+ Т 441,2 0,70 Ν-(4-(( 1К,38,58)-3амино-5метилциклогексил) п иридии-3-ил )-6-(2,3 дифторфенил)-5фторпнколинамид
Ε^, γ Хиральный Ν-(4-((ΙΚ35,55)-3-
СН, 4 Аг амино-5-
61 V и Ν 441,2 0,68 метил цикло гекс ил)
Αγ ν . Α^. А пиридин-3-ил)-6-(2,5-
π 0 дифторфенил)-5-
Ν фторпиколинамид
Ιί Ό>. ''Хиральный N-(4-((1 К, 3 5,5 5)-3-
Η>Ν^γ ,с^,А амино-5-
62 V η 7 0 405,2 0,67 метилциклогексил)
II пиридин-3-ил )-6-(2-
ζΐ 0 фторфенил)
пиколинамид
ίί Хирапьнь1Й Ν-(4-((!Κ,3 8,58)-3-
Η2<.·-γ .сц,Л 1 р амино-5-
63 ν η 7 423,2 0,65 метилциклогексил)
ЙД а пиридин-3-ил )-6-( 2,6-
π 0 дифторфенил)
Ν пиколинамид
ОН ΓΎ Ο.γ'. Хиральный сна Ν-(4-((1 К, ЗК, 48)-3-
Α·ΝΗί ο амино-4-
υ Е гидроксициклогексил)
64 ζΛ XI 483,2 0,66 пиридин-3-и л )-5-фтор-6- (2-фтор-5-
пропоксифенил)
пиколинамид
он ιΓί 3-8μηηο-Ν-(4-
АГг /С-А Р ((1К,ЗК.,48)-3-амино-4-
65 Μ 7 η ,г 458,1 0,55 гидрокси циклогексил)
¢+ АЦ1 пи ридин-3-ил )-6-(2,6-
νη2 дифторфенил)-5-
фторпиколинамид
ОН ίί'+
АГ= ο 3-8μηηο-Ν-(4“
υ А Ν”τ ((1 К,ЗК,48)-3-амино-4-
66 Λτ νη2 440,1 0,55 гидрокеициклогексил) пиридин-3-ил)-5-фтор-6(2-фторфенил)
пиколинамид
- 66 020136
67 он .Α.ΝΗ, О ;Лг ГГгУ V 0 НН, 498,2 0,66 3-λμηηο-Ν-(4- ((1 К,ЗК,48)-3-амино-4гпдроксициклогексил) пиридин-3-ил)-5-фтор-6- (2-фтор-5пропоксифенил) пиколинамид
68 ОН [Хт’°х^'снз ό'ξ йгмт¥ Чс О ΝΗ, 480,2 0,65 3-амино-N-(4- ((1 К,ЗК,48)-3-амино-4ι идроксициклогексил) пиридин-3-ил)-6-(2фтор-5-пропокеифенил) пиколинамид
69 Хиральныи Н2Н^Ж>С1^Ду+.р ^ч-ν М о г 441,3 0,67 Ν-(4-((1Κ,38,58)-3- амино-5метилциклогексил) пиридин-3-ил)-6-(2,6дифторфенил)-3фторпиколинамид
70 Хиральнын 441,3 0,70 Ν-(4-((ΙΚ,38,55)-3- амино-5- метилциклогексил) пиридин-3-ил)-6-(2,6дифторфенил)-5фторпиколинамид
71 ,χ-'χγ Хиралы-ъм - Н V 11 +%ΝΊί^ι V ° г 441,3 0,66 Ν-(4-((18,3Κ,5Κ)-3- амино-5- метилциклогексил) пиридин-3-ил )-6-(2,6дифторфенил)-3фгорпиколинамид
72 Хирзльиыи Η,Ν,.^ ,<^Д1 ин X Ок·7 441,3 0,70 Ν-(4-((18,3Κ,5Κ)-3амино-5метилциклогексил) пиридин-3-ил)-б-(2,6дифторфенил)-5фторпиколинамид
73 01_1 Н.СХиральным н’сП'МНг 'тг ин +Υ 453,1 0,7 Ν-(4-((1Κ3Μ3>58Μамино-4-гидрокси*5* метил цикл огексил) пиридим-3-ил)-5-фтор-6(2-фтор-5-метилфенил) пиколинамид
- 67 020136
74 он н0 Ηι0, ст сЛ N Ό. ό Хиральныи 'Έ 435,0 0,6 Ν-(4-((1Κ.,3Κ,4ί>,55)-3амино-4-гидрокси-5метилциклогексил) пиридин-3-ил )-6-(2фтор-5-метилфенил) пиколинамид
ОН А Хиральныи Ν-(4-(( 1 К,ЗК,45,58)-3-
Н,С„|^\^Нг 0¾ ''Ε амино-4-гидрокси-5-
75 V ΧΕ 439,2 0,57 метилциклогексил) пиридин-3-ил )-5-фтор-6(2-фторфенил)
пиколинамид
он ιΓΊ Хиральныи Ν-(4-((ΙΚ,3Κ,45,55)-3-
Μ,θ'.θ .му τ амино-4-гидрокси-5-
76 Ύ 439,2 0,55 метилциклогексил)
ел -Μ пирндин-3-ил)-6-(2,6дифторфенил)
пиколинамид
Хоральный 'Зх Ν-(4-((ΙΚ, 38,55)-3-
Μ,Ν-Λ,ΟΗ, ί амино-5-
77 V Ν X Ή 441,3 0,62 метилциклогексил)
Т.В л г пиридин-3-ил )-6-( 2,4-
СУ 5 дифторфенил)-5-
N фторпиколинамид
ОН [ί '-Ί Ν-(4-((Ι К,ЗК,48)-3-
амино-4-
78 о (Ϋ т4- М ° 425,2 0,52 гидроксициклогексил) пиридин-3-ил )-6-(2,6дифторфенил)
пиколинамид
ρ Хоральный
ί 'Έ ρ N-(4-((] К,35)-3аминоциклогексил)
79 χ и А 427,2 0,58 пиридин-З-ил )-6-(2,3-
ΓιΓ 7 дифторфенил)-5-
м ° фторпиколинамид
Хиральныи
‘'ί'Χ.'·'-, г χ Д Ν-(4-((1 К,35)-3-
о Ε ам иноциклогексил)
80 | N Λ 427,2 0,54 пиридин-3-ил )-6-(2,6-
[X ΝΥ дифторфенил)-3-
V ° Γ фторпиколинамид
- 68 020136
81 Е Хиральныи Η’Υ') IX /А*' 427,2 0,57 N-(4-((1 К, 38)-3аминоциклогексил) пиридин-3-ил)-6-(2,5дифторфенил)-5фторпиколинамид
82 Е Киральньм X 427,2 0,58 14-(4-((1 К, 38)-3аминоциклогексил) пиридин-3-ил)-6-(2,4дифторфенил)-5фторпиколинамид
83 Хирапьныи ОН < ό'ΝΗ: 1 р У 407,1 0,51 Ν-(4-((]Β.,3Κ,45)-3- амино-4- гидроксициклогексил) пиридин-3-ил )-6-(2фторфенил) пиколииамид
84 о Хиралъмьк* он Γγ сн, 0'Х - Н 1 |1 σΧ 465,2 0,62 14-(4-((1 В,ЗВ,48)-3амино-4гидроксициклогексил) пиридин-3-ил)-6-(2фтор-5-пропоксифенил) пиколииамид
85 ли Хиральнын й,с‘0тХ; - Н '/ Г УМУХ V О 457,2 0,56 14-(4-((1В,ЗВ,48,58)-3амино-4-гидрокси-5мет ил циклогекс ил) пиридин-3-ил)-6-(2,6дифторфенил)-5фторпиколинамид
86 л|_| Хирапьныи Η,θκΧ>ΝΗ^ АХр X N ХУ У О 457,0 0,56 Ν-(4-((1Β,3Κ,48,58)-3амино-4-гидрокси-5метилциклогексил) пиридин-3-ил)-6-(2,6дифторфенил)-5фторпиколинамид
87 Хиральнын он ί| η О'МН! ¥ мн гу 425,1 0,52 14-(4-((1В,3 В.,48)-3- амино-4- гидроксициклогексил) пиридин-3-ил)-5-фтор-6(2-фторфенил) пиколииамид
- 69 020136
88 ОН СУ фг% XX д Хисальныи ЧР .Е 443,0 0,53 N-(4-(( 15,38,4К)-3амино-4- гидроксициклогексил) пиридин-3-ил)-6-(2,6дифторфенил)-5фторпиколинамид
ОН 1Ч-(4-(3-амино-4-
сн3 гидрокси-5-
89 V Н м ιΓ г 427,3 0,63 метилциклогексил)
Νπ' пиридин-3-ил)-6-
С X циклогексил-5-
фторпиколинамид
ОН З-амино-Ν-(4-(3-амино-
Η;Νγ'·γ сн3 4-гидрокси-5-
90 V н N !1 424,3 0,6 метил циклогексил)
Ду пиридин-3-ил )-6-
(X о νη2 циклогекснлпи колин-
N амид
сн3 Ц-(4-(3-амино-5-
угх метилциклогексил)
91 у н о 41 1,3 0,67 пиридин-3-ил)-6-
гг циклогексил-5-
0 фторпиколинамид
он А 3-амино-М-(4-(транс)-3-
Е' лу амино-4-
92 т н Λ 438,3 0,51 гидроксициклогекс-1 -
дм ау енил)пнридин-3-ил)-6-
о о ΝΗ (2,6-дифторфенил)
пиколинамид
он А 3-амино-!1-(4-(цис)-3-
Р АУ Р амино-4-
93 т н 7 У 438,3 0,51 гидроксициклогекс-1-
X у ,ν АУ енил)пиридин-3-ил)-6-
и о ΝΗ (2,6-дифторфенил)
пиколинамид
он ΝΗ? п З-амино-Ν-(4-(3 -амино-
'У да 4-гидрокси-5-
94 и N У] 454,1 0,54 мети л циклогексил)
гу аУ пиридин-3-ил)-6-(2,6-
инг дифторфенил)
пиколинамид
- 70 020136
95 он т н А ΓτΝτν СУ о νη2 454,3 0,54 3- ам ино-Ν-(4-(3-амино- 4- гидрокси-5метилциклогексил) пиридин-3-ил )-6-(2,6дифторфенил) пиколинамид
96 ОН 1<Х н.:· ХД 1 г Υ н А V о 458,1 0,54 Ν-(4-((3Κ,4Κ.,55)-3амино-4-гидрокси-5метилпиперидин-1ил )п и ридин-3-ил)-6(2,6-дифторфенил)-5фторпиколинамид
97 ОН (Ρη н,Су-< ЛН|.£ДР т н А АтА СУ О ΝΗ, 454,1 0,55 3- амино*М-(4*(3-амино- 4- гидрокси-5метилциклогексил) п иридин-3-ил )-6-(2,6дифторфенил) пиколинамид
98 Хирэпьйый он [Γη наСхг>'--т'|'^Д,Др и рл - н и 1 хА су о νη2 454,1 0,54 3- амино-Т4-(4-(3-амино- 4- гидрокси-5метилциклогексил) пиридин-3-ил )-6-(2,6дифторфенил) пиколинамид
99 Хирапьный Др су о 427,2 0,55 Ν-(4-((1 К,33)-3аминоциклогексил) пиридин-3-ил)-6-(2,6дифторфенил)-5фторпиколинамид
100 Хирапьньм оч : Н н Т χΑΥ ЧУ о ннг 442,2 0,59 3-амино-Ы-(4-((1К,35)- 3-аминоциклогексил) пиридин-3-ил)-6-(2,6дифторфенил)-5фторпиколинамид
ΙΟΙ сн, X Ачлх X Η ϊ II ГтХ СУ О ынг 482,2 0,56 2-амино-4-(3-(3-амино- 6-(2,6-дифторфенил) пиколинамидо)пиридин4-ил)ц,иклогексилацетат
- 71 020136
102 ОН 0'^ Γγνν 0 ΝΗ, Ν *· 440,3 0,52 3- амино-М-(4-(3-амино- 4- гидроксициклогексил)пиридин-3-ил )-6(2,6-дифторфенил) пиколинамид
103 θΗ Хиральныи ^ЬГ и /уМ? А А о ΝΗ, 455,3 0,53 3-амино-Ы-(4((ЗК,48,5К)-3-амино-4гидрокси-5метилпиперидин-1 ил)пиридин-3-ил)-6(2,6-дифторфенил) пиколинамид
104 он ιΤΑ ΗΑΆ е и о *нг 440,2 0,52 3-амино-Ы-(4((1К,38,48)-3-амино-4гидроксициклогекеил) пиридин-3-ил )-6-(2,6дифторфенил) пиколинамид
105 НЭС °Ч- ХаХ |= X ν дХ О мнг 438,2 2,92 3-амино-6-(2,6дифторфенил)-Ь1-(4-(3гидрокси-5метилциклогекс-1 енил)пиридин-3ил)пиколинамид
106 ΝΗ2 1Д N1'^% ί н Ί УЛ О ΝΗ2 394,3 0,74 3-амино-1М-(4-((1К,38)3-аминоциклогексил )пири дин-3-ил )-6циклогексилпиколинам ид
107 ΝΗη X Ν Ϊ А Ο ΝΗ; 421,9 0,59 3-амино-?Ч-(4-(3ам ИНОЦИКДО1 екс-1 енил)пиридин-3-ил)-6(2,6-дифторфенил) пиколинамид
108 ρ Ηι^νζΆ. Хиральным Г-Д ΝΗ, [I Ί θΧ' φΛΑ 473,3 0,67 Ν-(4-(( 1 К,ЗК,58)-3амино-5- (трифторметил)циклогек еил)пиридин-3-ил)-6-(2фтор-5-метилфенил) пиколинамид
- 72 020136
109 гЛ ΝΗ, 'О ' СУ , ОН 3 Хиральный ά, о 507,2 0,65 Ν-(4-(( 1К,ЗЙ,58)-3амино-5(трифторметил)циклогексил)пириднн-3-ил)-6(2,6-дифтор-4метоксифенил) пиколинамид
/У·. Хиральпый 3-амино-М-(4-
^ННг р УЧ ((1 К,ЗК,55)-3-амино-5-
НО и У 510,2 0,64 (трифтормстил)цикло-
- н гекс ил)пирид ин-3-ил )-6-
ςη (2,6-дифторфенил)-5-
ΝΗ2 фторпиколинамид
еЛ ΝΗ, 'О . Хиральный Ν-(4-((Ι К,ЗК,55)-3амино-5-
1 1 1 ,,Ху 465,3 0,72 (трифторметил)цикло-
н 1.У гексил)пиридин-3-ил)-6-
ЛА V о Ууу циклогексил-5· фторпиколинамид
Е 'У / УУ Хиральный 3-амино-М-(4-
УУ ((1 й,ЗК,55)-3-амино-5-
112 у У : Н ΐ Н 492,2 0,62 (трифторметил)цикло-
СУ X/ ннг гексил )пиридин-3-ил )-6- (2,6-дифторфенил)
пиколинамид
ОН ;Т У Хиральный Ν-(4-((35,48,58.)-3-
113 V”! СУ '|р амино-4-гидрокси-5-
458,2 0,55 метилпиперидин-1ил)пиридин-3-ил)-6(2,6-дифторфенил)-5фторпиколинамид
он (ГУ нх',Д,'он ХУ Хиральныи Ν-(4-«3Κ,4Κ,55)-3,4-
έ дигндрокси-5-
114 Ϊ н Λ ^.Е 441,1 0,61 метилпиперидин-1ил)пиридин-3-ил)-5-
ГУМ' фтор-6-(2-фторфенил)
0 пиколинамид
он Хиральный
Г η 6-(2,6-дифторфенил)-М-
чр (4-((ЗК,4К,55)-3,4-
115 4 н Ϊ3 441,1 0,6 дигидрокси-5-
Ϊ и метилпиперидин-1-
ГТ ил)пиридин-3-
и 0 ил)пиколинамид
- 73 020136
116 Хиральный ОН (Г н>с Α V н V ХА 459,1 0,61 6-(2,6-дифторфенил)-М- Ι (4-((ЗК,4К,58)-3,4дигидрокси-5метилпиперидин-1 ил)пиридин-3-ил)-5фторпиколинамид
117 _ СХиральный Оп г -1 н ΐ ί| (УГ N 458,2 0,62 6-(2,6-Дифторфеннл)-М- (4-(( 1 К,ЗК,4К,55)-3,4дцгидрокси-5метилциоогексил) яиридин-3-ил)-5фторпиколинамид
118 он .рн х“ральньй Н,С,,.А.лМНг СУ ΐ. н л 'Г А 423,2 0,32 Ν-(4-((3Κ,4Κ,55)-3амино-4-гидрокси-5метилпиперидин-1 ил )п и ридин-3-ил)-3 фтор-2,3'-бипиридин-6карбоксамид
119 '•сУ У; Ά о 441,2 0,46 Ν-(4-((3Κ,4Κ, 58)-3амино-4-гидрокси-5метнлпиперидин-1 ил)пиридин-3-ил)-3,3'дифтор-2,4'-бипиридин6-карбоксамид
120 А 9. N |ГР ЛА Ψ ° 423,1 0,3 Ν-(4-((3Κ,4Κ,58)-3амино-4-гидрокси-5метилпиперидин-1ил)пиридин-3-ил)-3фтор-2,4'-бипиридин-6карбоксамид
121 О|_| Хиральный АаХ А ° ΝΗ.· 473,1 0,68 3-амино-6-(2,6дифторфенил)-М-(4<(1К,ЗК,4К,58)-3,4дигидрокси-5мети л циклогекс ил) пиридин-3-ил)-5фторпиколинамид
Синтез 6-бром-№(4-(3 -(трет-бутилдиметилсилилокси)-5-метилциклогекс-1 -енил)пиридин-3 -ил)-5 фторпиколинамида
По методике 9 4-(3-(трет-бутилдиметилсилилокси)-5-метилциклогекс-1-енил)пиридин-3-амин и 6-бром-5-фторпиколиновую кислоту вводили в реакцию сочетания и после добавления Е!ОЛс и промывки с помощью Н2О, №С1(8а1) и сушки над Мд§О4 получали 6-бром-№(4-(3-(третбутилдиметилсилилокси)-5-метилциклогекс-1-енил)пиридин-3-ил)-5-фторпиколинамид.
ЖХМС (т/ζ): 455,3 (МН4); ЖХ Κί=2,09 мин.
Синтез 6-бром-№(4-((1К,3 8)-3 -(1,3-диоксоизоиндолин-2-ил)циклогексил)пиридин-3 -ил)-5фторпико линамида
По методике 9 2-(3-(3-аминопиридин-4-ил)циклогексил)изоиндолин-1,3-дион и 6-бром-5фторпиколиновую кислоту вводили в реакцию сочетания и после добавления Е!ОЛс и промывки с помощью Н2О, ΝοΟ,-,,,ι, и сушки над Мд§О4 получали 6-бром-№(4-((1К,38)-3-(1,3-диоксоизоиндолин-2ил)циклогексил)пиридин-3-ил)-5-фторпиколинамид.
ЖХМС (т/ζ): 523,2/525,2 (МН4); ЖХ К1=3,31 мин.
- 74 020136
Синтез 3-амино-6-бром-№(4-((1В,38)-3-(1,3-диоксоизоиндолин-2-ил)циклогексил)пиридин-3-ил)-5фторпиколинамида
По методике 9 2-(3-(3-аминопиридин-4-ил)циклогексил)изоиндолин-1,3-дион и 3-амино-6-бром-5фторпиколиновую кислоту вводили в реакцию сочетания и после добавления ЕЧОАс и промывки с помощью Н2О, №С1(каЧ) и сушки над Мд8О4 получали 3-амино-6-бром-№(4-((1В,38)-3-(1,3диоксоизоиндолин-2-ил)циклогексил)пиридин-3-ил)-5-фторпиколинамид.
ЖХМС (т/ζ): 538,1/540,1 (МН+); ЖХ ВЧ=3,46 мин.
Синтез трет-бутил-(18,3В,58)-3-(3-(6-бром-5-фторпиколинамидо)-пиридин-4-ил)-5метилциклогексилкарбамата
ΒοοΗΝ
По методике 9 трет-бутил-(18,3В,58)-3-(3-аминопиридин-4-ил)-5-метилциклогексилкарбамат и 6-бром-5-фторпиколиновую кислоту вводили в реакцию сочетания и после добавления ЕЧОАс и промывки с помощью Н2О, №С1(каЧ) и сушки над Мд8О4 получали трет-бутил-(18,3В,58)-3-(3-(6-бром-5фторпиколинамидо)пиридин-4-ил)-5-метилциклогексилкарбамат.
ЖХМС (т/ζ): 507,1/509,1 (МН+), ВЧ=0,90 мин.
Синтез (1В,2В,4В,68)-4-(3-(6-бром-5-фторпиколинамидо)пиридин-4-ил)-2-(третбутоксикарбониламино)-6-метилциклогексилацетата
По методике 9 (1В,2В,4В,68)-4-(3-аминопиридин-4-ил)-2-(трет-бутоксикарбониламино)-6метилциклогексилацетат и 6-бром-5-фторпиколиновую кислоту вводили в реакцию сочетания и после добавления ЕЧОАс и промывки с помощью Н2О, №С1(каЧ) и сушки над Мд8О4 получали (1В,2В,4В,68)-4(3-(6-бром-5-фторпиколинамидо)пиридин-4-ил)-2-(трет-бутоксикарбониламино)-6метилциклогексилацетат.
ЖХМС (т/ζ): 567,2 (МН+), ВЧ=0,82 мин.
Синтез (+/-)-трет-бутил-5-(3-(6-бром-5-фторпиколинамидо)пиридин-4-ил)-7-метил-2оксогексагидробензо[б]оксазол-3(2Н)-карбоксилата
По методике 9 (+/-)-трет-бутил-5-(3-аминопиридин-4-ил)-7-метил-2-оксогексагидробензо[б]оксазол-3(2Н)-карбоксилат и 6-бром-5-фторпиколиновую кислоту вводили в реакцию сочетания и после добавления ЕЧОАс и промывки с помощью Н2О, №С1(каЧ) и сушки над Мд8О4 получали (+/-)-третбутил-5-(3-(6-бром-5-фторпиколинамидо)пиридин-4-ил)-7-метил-2-оксогексагидробензо[б]оксазол3(2Н)-карбоксилат.
ЖХМС (т/ζ): 549,2/551,2 (МН+), ВЧ=0,78 мин.
Синтез трет-бутил-5-(3-(6-бром-5-фторпиколинамидо)пиридин-4-ил)-2оксогексагидробензо[б]оксазол-3(2Н)-карбоксилата
- 75 020136
По методике 9 трет-бутил-5-(3-аминопиридин-4-ил)-2-оксогексагидробензо[б]оксазол-3(2Н)карбоксилат и 6-бром-5-фторпиколиновую кислоту вводили в реакцию сочетания и после добавления ЕЧОАс и промывки с помощью Н2О, №С1(каЧ) и сушки над Мд8О4 получали трет-бутил-5-(3-(6-бром-5фторпиколинамидо)пиридин-4-ил)-2-оксогексагидробензо[б]оксазол-3(2Н)-карбоксилат.
ЖХМС (т/ζ): 537,1 (МН+); ЖХМС ВЧ=0,71 мин.
Синтез 6-бром-№(4-((1В,5В)-5-( 1,3-диоксоизоиндолин-2-ил)-3,3-диметилциклогексил)пиридин-3 ил)-5-фторпиколинамида
По методике 9 2-((1В,5В)-5-(3-аминопиридин-4-ил)-3,3-диметилциклогексил)изоиндолин-1,3-дион и 6-бром-5-фторпиколиновую кислоту вводили в реакцию сочетания и после добавления ЕЧОАс и промывки с помощью Н2О, №С1(каЧ) и сушки над Мд8О4 получали 6-бром-№(4-((1К,5В)-5-(1,3диоксоизоиндолин-2-ил)-3,3-диметилциклогексил)пиридин-3-ил)-5-фторпиколинамид.
ЖХМС (т/ζ): 551/553 (МН+), ВЧ=0,95 мин.
Синтез №(4-((1В,3В,48,5В)-3,4-бис-(трет-бутилдиметилсилилокси)-5-метилциклогексил)пиридин3 -ил)-6 -бром-5 -фторпиколинамида
0ТВ8
По методике 9 4-((1В,3В,48,5В)-3,4-бис-(трет-бутилдиметилсилилокси)-5-метилциклогексил)пиридин-3-амин и 6-бром-5-фторпиколиновую кислоту вводили в реакцию сочетания и после добавления ЕЧОАс и промывки с помощью Н2О, №С1(каЧ) и сушки над Мд8О4 получали Ν-(4-((1Β,3Η,48,5Β)-3,4бис-(трет-бутилдиметилсилилокси)-5-метилциклогексил)пиридин-3-ил)-6-бром-5-фторпиколинамид.
ЖХМС (т/ζ): 652,5, 652,4 (МН+); ЖХ ВЧ=5,82 мин.
Синтез №(4-((18,38,4К,58)-3,4-бис-(трет-бутилдиметилсилилокси)-5-метилциклогексил)пиридин-3ил)-6-бром-5-фторпиколинамид
ОТВ5
По методике 9 4-((18,38,4В,58)-3,4-бис-(трет-бутилдиметилсилилокси)-5-метилциклогексил)пиридин-3-амин и 6-бром-5-фторпиколиновую кислоту вводили в реакцию сочетания и после добавления ЕЧОАс и промывки с помощью Н2О, №С1(каЧ) и сушки над Мд8О4 получали Ν-(4-((18,38,4Η,58)-3,4бис-(трет-бутилдиметилсилилокси)-5-метилциклогексил)пиридин-3-ил)-6-бром-5-фторпиколинамид.
ЖХМС (т/ζ): 652,5, 652,4 (МН+); ЖХ ВЧ=5,83 мин
Методика 10.
Синтез 6-(2,6-дифторфенил)-5-фтор-№(4-(3-гидрокси-5-метилциклогекс-1-енил)пиридин-3ил)пиколинамида
Раствор 6-бром-№(4-(3 -(трет-бутилдиметилсилилокси)-5-метилциклогекс-1 -енил)пиридин-3 -ил)-5 фторпиколинамида (1,0 экв.), 2,6-дифторфенилбороновой кислоты (3,0 экв.), тетракис-трифенилфосфина (0,2 экв.) и триэтиламин (3,0 экв.) в смеси 1:1 ЕЧОН/толуол (0,1 М) нагревали при 120°С микроволновым излучением в течение 1200 с. При охлаждении летучие вещества удаляли в вакууме, продукт реакции Судзуки сразу очищали с помощью ВЭЖХ с обращенной фазой. Фракцию, содержащую продукт, лиофилизировали и из полученного ТВЭМ8 эфира удаляли защитную группу, как описано в методике 9, и
- 76 020136 после очистки с помощью ОФ ВЭЖХ и лиофилизации получали 6-(2,6-дифторфенил)-5-фтор-№(4-(3гидрокси-5-метилциклогекс-1-енил)пиридин-3-ил)пиколинамид в виде соли с ТФК.
ЖХМС (т/ζ): 438,2 (МН4); ЖХ Я!=2,00 мин.
Синтез №(4-((1Я,38)-3-аминоциклогексил)пиридин-3-ил)-6-(2,6-дифторфенил)-5-фторпиколинамида
Раствор 6-бром-№(4-((1Я,38)-3 -(1,3-диоксоизоиндолин-2-ил)циклогексил)пиридин-3 -ил)-5фторпиколинамида (1,0 экв.), 2,6-дифторфенилбороновой кислоты (3,0 экв.), тетракис-трифенилфосфина (0,2 экв.) и триэтиламина (3,0 экв.) в смеси 1:1 Е!ОН/толуол (0,1 М) нагревали при 120°С микроволновым излучением в течение 1200 с. При охлаждении летучие вещества удаляли в вакууме, продукт реакции Судзуки сразу очищали с помощью ВЭЖХ с обращенной фазой. Фракцию, содержащую продукт, лиофилизировали и защитную группу полученного фталимида удаляли, как описано в методике 9, и после очистки с помощью ОФ ВЭЖХ и лиофилизации получали №(4-((1Я,38)-3-аминоциклогексил)пиридин-3ил)-6-(2,6-дифторфенил)-5-фторпиколинамид в виде соли с ТФК.
ЖХМС (т/ζ): 427,2 (МН4); ЖХ Я!=2,26 мин.
Синтез 3-амино-№(4-((1Я,38)-3-аминоциклогексил)пиридин-3-ил)-6-(2,6-дифторфенил)-5фторпико линамид
Раствор 3-амино-6-бром-№(4-((1Я,38)-3-(1,3-диоксоизоиндолин-2-ил)циклогексил)пиридин-3-ил)5-фторпиколинамида (1,0 экв.), 2,6-дифторфенилбороновой кислоты (3,0 экв.), тетракистрифенилфосфина (0,2 экв.) и триэтиламина (3,0 экв.) в смеси 1:1 Е!ОН/толуол (0,1 М) нагревали при 120°С микроволновым излучением в течение 1200 с. При охлаждении летучие вещества удаляли в вакууме, продукт реакции Судзуки сразу очищали с помощью ВЭЖХ с обращенной фазой. Фракцию, содержащую продукт, лиофилизировали и защитную группу полученного фталимида удаляли, как описано в методике 9, и после очистки с помощью ОФ ВЭЖХ и лиофилизации получали 3-амино-№(4-((1Я,38)-3аминоциклогексил)пиридин-3-ил)-6-(2,6-дифторфенил)-5-фторпиколинамид в виде соли с ТФК.
ЖХМС (т/ζ): 442,2 (МН+); ЖХ Я!=2,24 мин.
Синтез №(4-(3-амино-4-гидроксициклогексил)пиридин-3-ил)-6-(2,6-дифторфенил)-5фторпико линамида
Раствор трет-бутил-5-(3-(6-бром-5-фторпиколинамидо)пиридин-4-ил)-2оксогексагидробензо[б]оксазол-3(2Н)-карбоксилата (1,0 экв.), 2,6-дифторфенилбороновой кислоты (3,0 экв.), тетракис-трифенилфосфина (0,2 экв.) и триэтиламина (3,0 экв.) в смеси 1:1 Е!ОН/толуол (0,1 М) нагревали при 120°С микроволновым излучением в течение 1200 с. При охлаждении летучие вещества удаляли в вакууме, продукт реакции Судзуки сразу очищали с помощью ВЭЖХ с обращенной фазой. Фракцию, содержащую продукт, лиофилизировали и из полученного циклического карбамата удаляли защитные группы Вос, как описано в методике 9, и после очистки с помощью ОФ ВЭЖХ и лиофилизации получали №(4-(3-амино-4-гидроксициклогексил)пиридин-3-ил)-6-(2,6-дифторфенил)-5фторпиколинамид в виде соли с ТФК.
ЖХМС (т/ζ): 443,2 (МН+); ЖХ Я!=2,11 мин.
- 77 020136
Синтез карбоксамида
5-аминоЧ-(4-((1К,38)-3-аминоциклогексил)пиридин-3-ил)-3,3'-дифтор-2,4'-бипиридин-6-
Раствор 3-амино-6-бром-Ы-(4-((1К,38)-3-(1,3-диоксоизоиндолин-2-ил)циклогексил)пиридин-3-ил)5-фторпиколинамида (1,0 экв.), 3-фторпиридин-4-илбороновой кислоты (3,0 экв.), тетракистрифенилфосфина (0,2 экв.) и триэтиламина (3,0 экв.) в смеси 1:1 ЕЮН/толуол (0,1 М) нагревали при
120°С микроволновым излучением в течение 1200 с. При охлаждении летучие вещества удаляли в вакууме, продукт реакции Судзуки сразу очищали с помощью ВЭЖХ с обращенной фазой. Фракцию, содержащую продукт, лиофилизировали и защитную группу полученного фталимида удаляли, как описано в методике 9, и после очистки с помощью ОФ ВЭЖХ и лиофилизации получали 5-амино-Ы-(4-((1К,38)-3аминоциклогексил)пиридин-3-ил)-3,3'-дифтор-2,4'-бипиридин-6-карбоксамид в виде соли с ТФК.
ЖХМС (т/ζ): 425,1 (МН4); ЖХ К1=2,08 мин.
Синтез Ν-(4-(( 1К,38,58)-3 -амино-5 -метилциклогексил)пиридин-3 -ил)-6-(2,6-дифтор-3 гидроксифенил)-5-фторпиколинамида
К раствору трет-бутил-( 18,3К,58)-3-(3-(6 -бром-5 -фторпиколинамидо)пиридин-4 -ил)-5 метилциклогексилкарбамата (1,0 экв.) в сосуде для микроволновой печи добавляли 2,6-дифтор-3гидроксифенилбороновую кислоту (5,0 экв.), К.Е (5,5 экв.) и Рб2(бЬа)3 (0,2 экв.), затем ТГФ и воду (10:1, 0,03 М). К этой смеси добавляли Р(!-Ви)3 (0,4 экв.) и реакционную смесь нагревали в микроволновой печи при 100°С в течение 30 мин. Затем органическую фазу отделяли, водный слой промывали этилацетатом и органические вещества объединяли и концентрировали в вакууме. Неочищенную смесь очищали с помощью препаративной ВЭЖХ, фракции продукта лиофилизировали и защитную группу ВОС удаляли, как описано в методике 9, и после очистки с помощью ОФ ВЭЖХ и лиофилизации получали Ν-(4((1К,38,58)-3-амино-5-метилциклогексил)пиридин-3-ил)-6-(2,6-дифтор-3-гидроксифенил)-5фторпиколинамид в виде соли с ТФК.
ЖХМС (т/ζ): 457,2 (МН+); ЖХ К=2,17 мин.
Следующие соединения получали по методике 10.
- 78 020136
Таблица 2
Пример №/идентификационный № ΝΫΡ Структура ЖХ/МС (Μ+Η при ирсь) ЖХ/М С (ЯГ при ирсь) Химическое название
ОН Кйральнкм Ν-(4-(( 1 Я,5Я)-5-амино-
и м ОН, I Д 3,3-диметилцикло-
122 471,2 0,58 гексил)пиридин-3-ил)-
Духи 6-(2,6-дифтор-4-
О а гидроксифенил)-5-
фторпиколинамид
-------------------------------------------------------------------------------------1-----------------------ί----------- Н3С% Хирапьный
Ы-(4-((1Я,5Я)-5-амино-
им СН1 1 3 3,3-диметилцикло-
123 ТХснРз ί : 485,2 0,65 гексил)пиридин-3-ил)-
I н ? |Г б-(2,6-ди фтор-4-
метоксифенил)-5-
М ° фторпиколинамид
ОНХмраж>н □1Й Ν-(4-((ΙΚ, 35)-3-
Η,Ν^ ГЛ.ХГ аминоциклогексил)
124 Ь ίΥ 443,2 0,54 пиридин-3-ил)-6-(2,6-
дифтор-3-
XX 0 гидроксифенил)-5-
фторпиколинамид
>|й Ν-(4-((1Κ, 38,58)-3-
амино-5-метилцикло-
125 Ψη X 457,2 0,57 гексил)пиридин-3-ил)-
Ατ·-νΑΥ 6-(2,6-ди фтор-3-
XX ° гидроксифенил)-5-
фторпиколинамид
ρ рХирапьны на ζγ χ ο χ^ Ν-(4-((1Κ,3Κ,4Κ,58)-3амино-4-гидрокси-5метилциклогексил)
126 οΆ 507,1 0,65 пиридин-3-ил)-5-фтор- 6-(2-фтор-5-
(трифторметил)фенил)
пиколинамид
_ ХЕХирапьны он Ауг Η Ν-(4-<(1 Я, ЗЯ, 4Я, 58)-3-
н3с„ X .νη2 Μ амино-4-гидрокси-5-
Υ X метилциклогексил)
127 ; Η 1 Τ ΡΓ-γΜ 'ν’ ο 507,1 0,65 пиридин-3-ил)-5-фтор- 6-(2-фтор-3- (трифторметил)фенил)
пиколинамид
он ДД, Γ Ν-(4-((1Κ, 38,58)-3амино-5метилциклогексил)
128 XX 457,2 0,58 пиридин-3-ил )-6-(2,6-
γ ° дифтор-4-
гидроксифенил)-5- |фторпиколинамид
- 79 020136
Е Хиральны» 14-(4-((1 К, 38,58)-3-
амино-5-
129 X Рх 459,2 0,62 метилциклогексил)
пиридин-3-ил)-5-фтор-
и ° 6-(2,3,6-грифторфенил)
пиколинамид
оп XX 3-амино-М-(4-(3-амино-
4-гидрокси-5-
130 Vн ?х 472,1 0,56 метилциклогексил)
Х-ХХ пиридин-3-ил )-6-(2,6-
X о ин2 дифторфенил)-5-
фторпиколинамид
он XX О”% 3- амино-М-(4-(3-амино- 4- гидроксицикло-
131 458,0 0,57 гексил)пиридин-3-ил)- 6-(2,6-дифторфенил)-5фторпиколинамид
άτ От X о нн2
ОН Н)С'Х'мн^'т^|= χΗ Ар 3- амино-Т4-(4-(3-амино- 4- гидрокси-5-
132 472,1 0,56 метилциклогексил)
гХмТт пиридин-3-ил )-6-(2,6-
ί У о ин2 дифторфенил)-5фторпиколинамид
Н,Нк 3-амино-М-(4-(3-амино-
ХГ р 1 5-метилцикло-
133 Т н ут 456,3 0,60 гексил)пиридин-3-ил)-
Су Τι 6-(2,6-дифторфенил)-5-
X О ын2 фторпиколинамид
ОН (<% Ы-(4-(-3-амино-4-
134 Н,С.СТ-АМНг г . Ό/Χ 457,1 0,57 гидрокси-5метилциклогексил)
фХ пиридин-3-ил )-6-(2,6- дифторфенил)-5-
фторпиколинамид
Он И-(4-(3-амино-4-
н,с5,---..|.г'|||’./Д;‘г гидрокси-5-
135 ЦС ΝΧΡ 457,1 0,55 метилциклогексил)
пиридин-3-ил )-6-(2,6-
,-Т о дифторфен и л)-5-
фторпиколинамид
.. ...... . ,-- —у - -
-Ыч Хиральный О'Х = Η μ Т хХ ΤΥ 5-амино-М-(4-(( 1 К,38)- 3-аминоцикло-
136 425,1 0,46 гексил)пиридин-3-ил)- 3,3'-дифтор-2,4'-
X о νη2 бипиридин-6карбоксамид
137 Τ^'-'-γ'^ΧΡ'-ρ 6-(2,6-дифторфенил)-5- фтор-М-(4-(3-гидрокси-
1^ н м'Ху 440,2 0,75 5-метилциклогекс-1-
енил)пиридин-3-
Ν ил)пиколинамид
он XX Хи₽альный 6-(2,6-дифторфенил)-М-
ΗΟγΧ .Χ^,χΙγΑ (4-((1К,ЗК,48,5К)-3,4-
138 X Ν<ΧΡ 458,2 0,64 дигидрокси-5-
ΧΝγΧ метилциклогексил)
пиридин-3-ил)-5-
фторпиколинамид
- 80 020136
Пример 139.
Синтез Ч(4-((1К,3К,48,5§)-3-амино-4-фтор-5-метилциклогексил)пиридин-3-ил)-6-(2,6дифторфенил)-5-фторпиколинамида
К раствору трет-бутил-(1К,2К,3§,5К)-5-(3-(6-(2,6-дифторфенил)-5-фторпиколинамидо)пиридин-4ил)-2-гидрокси-3-метилциклогексилкарбамата (1,0 экв.) в ДХМ (0,04 М) при 0°С добавляли ДАТС (1,0 экв.). Реакционную смесь перемешивали в течение 1,5 ч при 0°С, затем к реакционной смеси добавляли ТФК (10 экв.). Через 2 ч реакционную смесь концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью препаративной ВЭЖХ и получали Ч(4-((1К,3К,48,58)-3-амино-4-фтор-5метилциклогексил)пиридин-3-ил)-6-(2,6-дифторфенил)-5-фторпиколинамид в виде соли с ТФК.
ЖХМС (т/ζ): 459,3 (МН+); ЖХ К=2,39 мин.
В дополнение к определению характеристик с помощью ЖХ/МС и ЖХ типичные соединения анализировали с помощью 'Н-ЯМР. Ниже приведены типичные спектры соединений, предлагаемых в настоящем изобретении.
Пример № Данные 1 Н-ЯМР
50 Соль с НС1, 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-66): 6 10,54 (Ьз, 1Н), 8,80 (Ьв, 1Н), 8,55 (ά, 1Н), 8,34 (бб, 1Н), 8,20(1, 1Н), 8,00 (Ьз, 2Н), 7,69 (т, 1Н), 7,56 (б, 1Н), 7,34 (г, 2Н), 3,10-3,0 (т, 2Н), 2,83 (т, 1Н), 2,03 (б, 1Н), 1,76-1,59 (т, 2Н), 1,40 (т, 1Н), 1,31-1,21 (т, 1Н), 0,92 (б, ЗН).
52 Соль с НС1, 1Н-ЯМР (ДМСО-66): б 10,4 (з, 1Н), 8,71 (з, 1Н), 8,37 (б, 1Н), 8,14-8,20 (т, 2Н), 7,94 (Ьз, 2Н), 7,86-7,88 (т, 2Н), 7,54-7,58 (т, 1Н), 7,30 (ά, 1Н), 7,22-7,26 (т, 2Н), 2,09-3,02 (т, 2Н), 2,78 (т, 1Н), 1,96-1,99 (т, 1Н), 1,68-1,71 (т, 1Н), 1,60 (ς, 1Н), 1,37 (т, 1Н), 1,151,24 (т, 1Н), 0,88 (б, ЗН)
70 Соль с НС1, 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-66): б 10,59 (з, 1Н), 8,92 (в, 1Н), 8,62 (6, 1Н), 8,37 (бб, 1Н), 8,23 (1, !Н), 8,19 (Ьз, 2Н), 7,68-7,71 (т, 2Н), 7,36-7,40 (т, 2Н),3,01-3,10 (т, 2Н), 2,01-2,05 (т, 1Н), 1,94-1,97 (т, 1Н), 1,72-1,76 (т, 1Н), 1,46-1,53 (т, 2Н), 1,01-1,13 (т, 2Н), 0,89 (6, ЗН)
85 Соль с НС1, 1Н ЯМР (ДМСО-66): 6 10,37 ($, 1Н), 8,61 (з, 1Н), 8,41 (6, 1Н), 8,29 (66, 1Н), 8,13 (1, 1Н), 7,8 (Ьз, 2Н), 7,69-7,61 (т, 1Н), 7,347,28 (т, ЗН), 3,061 (т, 1Н), 2,86 (т, 1Н), 1,76-1,63 (т, 2Н), 1,53-1,47 (т, 1Н), 1,4-1,34 (т, 2Н), 0,82 (6, ЗН).
88 Соль с НС1, 1Н ЯМР (ДМСО-66): 6 10,42 (в, 1Н), 8,62 (з, 1Н), 8,46 (т, 1Н), 8,32 (т, 1Н), 8,18 (1, 1Н), 7,76 (т, 2Н), 7,67 (т, 1Н), 7,35 (т, ЗН), 5,33 (Ьгз, 1Н), 3,108 (т, 2Н), 2,88 (т, 2Н), 1,65 (т, 2Н), 1,48 (т, ЗН).
96 Соль с НС1, 1Н ЯМР (400 МГц, ΟϋϊΟϋ): 6 9,09 (з, 1 Н), 8,46 (66, 1 Н), 8,39 (66, 1 Н), 8,05 (ί, 1 Н), 7,57 - 7,67 (т, 1 Н), 7,53 (6, 1 Н), 7,16 7,25 (т, 2 Н), 4,03 - 4,12 (т, 1 Н), 3,85 - 3,94 (т, 1 Н), 3,20 (в, 3 Н), 2,70 - 2,80 (т, 1 Н), 1,67 - 1,79 (т, 1 Н), 0,83 (6, 3 Н).
99 100 102 116 Свободное основание, 1Н ЯМР (СОС13): 6 9,93(з, 1Н), 9,38(з, 1Н), 8,40-8,45(т,1Н), 8,40(6, 1Н), 7,74-7,80(т, 1Н), 7,47-7,55(т, 1Н), 7,19(6, 1Н), 7,06-7,13(т, 2Н), 2,68-2,83(т, 2Н), 1,97-2,05(т, 1Н), 1,651,95(т, 5Н), 1,22-1,40(т, ЗН), 1,04-1,15(т, 1Н). Соль с НС1, 1Н ЯМР (ДМСО-66): 6 10,13(5, 1Н), 8,82(5, 1Н), 8,41(6, 1Н), 7,94(Ьз, 2Н), 7,52-7,62(т, 1Н), 7,36(3, 1Н), 7,36 (Ьз, 2Н), 7,207,31(т, ЗН), 2,78-2,88(т, 2Н), 1,70-2,02(т, 4Н), 1,16-1,54(т, 4Н). Соль с НС1, 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-66): 6 10,59 (δ, 1Н), 9,30 (8, 1Н), 8,54 (6, 1Н) 8,08 (Ьг з, ЗН), 7,75 (6, 1Н), 7,65 (6, 1Н), 7,60-7,56 (т, 1Н), 7,49 (6, 1Н), 7,33 (ί, 2Н), 4,04 (Ьг з, 1Н), 3,16(Ьг 8, 2Н) 3,05 (Ьг ί, 1Н), 1,98-1,20 (т, 7Н) Соль с НС1, 1Н-ЯМР (400, 66-ДМСО): 6 10,47 (к, 1Н), 8,56 (з, 1Н), 8,33 (66, 1Н), 8,26 (66, 1Н), 8,20 (1, 1Н), 7,62-7,72 (т, 1Н), 7,30-7,35 (т, ЗН), 3,82-3,92 (т, 2Н), 3,18-3,22 (т, 1Н), 2,84-2,91 (т, 1Н), 2,69 (1, л-13.2. 1Н), 1,38-1,46 (т, 1Н), 0,69 (6, ЗН).
128 Соль с НС1, 1Н-ЯМР(400, 66-ДМСО): 6 11,00 (а, 1Н), 10,46(8, 1Н), 8,55 (6, 1Н), 8,29 (66, 1Н), 8,15 (1, 1Н), 8,05 (Ьз, 2Н), 7,54 (6, 1Н), 6,72 (6, 2Н), 3,04 - 3,10 (т, ΙΗ), 2,92-3,04 (т, 1Н), 2,01 (6, 1Н), 1,95 (6, 1 Н), 1,74 (б, 1Н), 1,42-1,52 (т, 2Н), 0,97-1,08 (т, 2 Н), 0,88 (б, ЗН).
- 81 020136
Пример 140.
Исследование расходования АТФ при воздействии Р1т 1.
Активность Р1т 1 определяют с использованием основанного на люциферазе-люциферине реагента для количественного определения расходования АТФ (аденозинтрифосфат), обусловленного катализируемым киназой переносом фосфорила к пептидному субстрату. Исследуемые соединения растворяют в 100% ДМСО и непосредственно помещают в 384-луночные планшеты по 0,5 мкл/лунка. Для инициирования реакции в каждую лунку добавляют 10 мкл 5 нМ киназы Р1т 1 и 80 мкМ пептида ΒΛΩ (К8КН88УРАСТ-ОН) в буфере для анализа (50 мМ НЕРЕ8 (№2-гидроксиэтилпиперазин-Ы-2-этансульфоновая кислота) рН 7,5, 5 мМ МдС12, 1 мМ ДТТ (дитиотреитол), 0,05% БСА (бычий сывороточный альбумин)). Через 15 мин добавляют 10 мкл 40 мкМ АТФ в буфере для анализа. Конечные концентрации при анализе равнялись 2,5 нМ Р1т 1, 20 мкМ АТФ, 40 мкМ пептида ВАО и 2,5% ДМСО. Реакцию проводят, пока не израсходуется примерно 50% АТФ, затем ее останавливают путем добавления 20 мкл раствора К1па§еС1о Р1и8 (Рготеда Согрогайоп). Смесь при остановленной реакции инкубируют в течение 10 мин и оставшийся АТФ определяют по люминесценции с помощью прибора Ую1ог2 (Регкт Е1тег). Соединения приведенных выше примеров изучают с помощью исследования расходования АТФ при воздействии Р1т 1 и обнаруживают, что они характеризуются значениями 1С50, приведенными ниже в табл. 3. 1С50, половинная максимальная ингибирующая концентрация, означает концентрацию исследуемого соединения, которая необходима для 50% ингибирования ее мишени ίη νίΙΐΌ.
Пример 141.
Исследование расходования АТФ при воздействии Р1т 2.
Активность Р1т 2 определяют с использованием основанного на люциферазе-люциферине реагента для количественного определения расходования АТФ, обусловленного катализируемым киназой переносом фосфорила к пептидному субстрату. Исследуемые соединения растворяют в 100% ДМСО и непосредственно помещают в белые 384-луночные планшеты по 0,5 мкл/лунка. Для инициирования реакции в каждую лунку добавляют 10 мкл 10 нМ киназы Р1т 2 и 20 мкМ пептида ВАО (КЖНББУРАСТ-ОН) в буфере для анализа (50 мМ НЕРЕ8 рН 7,5, 5 мМ МдС12, 1 мМ ДТТ, 0,05% БСА). Через 15 мин добавляют 10 мкл 8 мкМ АТФ в буфере для анализа. Конечные концентрации при анализе равнялись 5 нМ Р1т 2, 4 мкМ АТФ, 10 мкМ пептида ВАО и 2,5% ДМСО. Реакцию проводят, пока не израсходуется примерно 50% АТФ, затем ее останавливают путем добавления 20 мкл раствора К1па§еС1о Р1и5 (Рготеда Согрогайоп). Смесь при остановленной реакции инкубируют в течение 10 мин и оставшийся АТФ определяют по люминесценции с помощью прибора УюЮг2 (Регкт Е1тег). Соединения приведенных выше примеров изучают с помощью исследования расходования АТФ при воздействии Р1т 2 и обнаруживают, что они характеризуются значениями 1С50, приведенными в табл. 3.
Пример 142.
Исследование расходования АТФ при воздействии Р1т 3.
Активность Р1т 3 определяют с использованием основанного на люциферазе-люциферине реагента для количественного определения расходования АТФ, обусловленного катализируемым киназой переносом фосфорила к пептидному субстрату. Исследуемые соединения растворяют в 100% ДМСО и непосредственно помещают в белые 384-луночные планшеты по 0,5 мкл/лунка. Для инициирования реакции в каждую лунку добавляют 10 мкл 10 нМ киназы Р1т 3 и 200 мкМ пептида ВАО (КЖНББУРАСТ-ОН) в буфере для анализа (50 мМ НЕРЕ8 рН 7,5, 5 мМ МдС12, 1 мМ ДТТ, 0,05% БСА). Через 15 мин добавляют 10 мкл 80 мкМ АТФ в буфере для анализа. Конечные концентрации при анализе равнялись 5 нМ Р1т 3, 40 мкМ АТФ, 100 мкМ пептида ВАО и 2,5% ДМСО. Реакцию проводят, пока не израсходуется примерно 50% АТФ, затем ее останавливают путем добавления 20 мкл раствора К1па§еС1о Р1и5 (Рготеда Согрогайоп). Смесь при остановленной реакции инкубируют в течение 10 мин и оставшийся АТФ определяют по люминесценции с помощью прибора УюЮг2 (Регкт Е1тег). Соединения приведенных выше примеров изучают с помощью исследования расходования АТФ при воздействии Р1т 3 и обнаруживают, что они характеризуются значениями 1С50, приведенными в табл. 3.
Пример 143.
Исследование пролиферации клеток.
Клетки КМ811 (линии миеломы человека) выращивали в среде 1М0М (модифицированная Иглом среда Дульбекко), к которой добавляли 10% ФБС (фетальная бычья сыворотка), пируват натрия и антибиотики. В день проведения исследования клетки в той же среде при плотности, равной 2000 клеток/лунка, помещали в лунки в 96-луночных культуральных планшетов для тканей, так что наружные лунки были пустыми. Клетки ММ1.8 (линии миеломы человека) выращивали в среде КРМ11640, к которой добавляли 10% ФБС, пируват натрия и антибиотики. В день проведения исследования клетки в той же среде при плотности, равной 5000 клеток/лунка, помещали в лунки в 96-луночных культуральных планшетов для тканей, так что наружные лунки были пустыми.
Исследуемые соединения, полученные в ДМСО, разводили в ДМСО в 500 раз до необходимых конечных концентраций и затем разводили в культуральной среде в 2 раза до конечных концентраций. Одинаковые объемы 2х соединений добавляли в лунки 96-луночных планшетов и инкубировали при
- 82 020136
37°С в течение 3 дней.
Через 3 для планшеты приводили в равновесие при комнатной температуре и в лунки с культурами добавляли такие же объемы реагента Се11Т1!ег-С1оте (Рготеда). Планшеты кратковременно перемешивали и с помощью люминометра определяли сигнал люминесценции. По сигналам для клеток, обработанных с помощью только ДМСО, и клеток, обработанных с помощью исследуемого соединения, рассчитывали ингибирование в процентах и эти значения использовали для определения значений ЕС50 (т.е. концентраций исследуемого соединения, которая необходима для обеспечения в клетках эффекта, равного 50% от максимального) для исследуемых соединений, которые приведены в табл. 3.
По методикам, описанным в примерах 140 (исследование расходования АТФ при воздействии Р1т 1), 141 (исследование расходования АТФ при воздействии Р1т 2) и 142 (исследование расходования АТФ при воздействии Р1т 3), описанным выше, определяли концентрации 1С50 для соединений приведенных выше примеров, которые приведены в табл. 3.
По методикам, описанным в примере 143 (исследование пролиферации клеток), определяли концентрации ЕС50 для соединений приведенных выше примеров для клеток КМ811, которые приведены в табл. 3.
Таблица 3
Пример №/идентификационный № ΝνΡ Структура ΡϊγπΙ 1С50 мкМ Р1т2 1С50 мкМ ΡΪ1Τ13 1С50 мкМ КМ511 -1ис ЕС;о мкМ
1 ./-¾¾. Хиральный ХА’ гч Хмральньм 0,001 0,018 0,006 7,6
2 ОН С1мгв1 ОД ΐ н ? |ГР γΎ 14 Хирапьный 0,001 0,001 0,001 0,07
3 γ-ч. Сига· ОН А4] н,с.ΑΝΗ’ ДА ϊ Η Ϊ |Д А О ΝΗ2 0,001 0,001 0,001 0,01
4 ОН Хирапьмый он ίιΊ = н Ή А гдА 0,001 0,003 0,002 1,3
- 83 020136
5 0Н γ-Αγ^ΟΗ-кирапьчьм н3с,, зс ,νΝΗΡ3ΐα Ψ н V о 0,003 0,020 0,009 4,8
6 ОН Хиральный уг Χ,νΧΟ 0,002 0,012 0,003 4,1
7 Хиральный нам^л Т 'г Х\ й АО ^Ν' ° 0,001 0,008 0,002 0,33
8 ОН Хиральный Η,Νγ-γ РХА рС-ΝγΟ и ° 0,001 0,004 0,002 0,51
9 ОН Хирапьныи СХр Хахи О' ° 0,001 0,008 0,002 1,6
10 *?Н Хиральный н,сЛХ^чг О,Р и н ГТ +υνΆ V ° 0,001 0,012 0,006 2,9
1 1 СН^СХиральныи Η1ο£\-νν ΛΤ Т'ХσΑ 0,001 0,005 0,004 2,6
- 84 020136
12 С Н дХирал ьный н ΐ 11 фХ 0,001 0,010 0,004 2,4
13 0Р1 .-^.^.СНзХирапьныи н3с„ Λ ΝΗ; фХ У н V) и ° 0,001 0,004 0,003 0,67
14 Е Р Хирапьный ,·-.,..ΝΗ-· дХ X άΧ 0,006 0,040 0,012 8,5
15 Λ,. Хирапьный ?н 11 Ί сч> н,с,, ΑΛ ДА'р У Н ?|| СГХ N 0,003 0,027 0,006 5,5
16 Ά ν |Г'Г ΛΝΧ V 0 0,001 0,003 0,003 1,7
17 ОН АА^СИ*1’3”' μ,ο,.λ.νη, ФАС О X - н ϊ ! ч? ° 0,001 0,013 0,005 3,5
18 СГ чр фХ 0,003 0,062 0,007 6,3
- 85 020136
4.
19 -Ах/-\_и Хиральный Ιί Т сн> н.Нуф /у® Хдо Чг ° 0,003 0,054 0,007 4,5
20 СНАиралэный НгМчП Т н ГД Чг ° 0,001 0,007 0,003 1,5
21 Хиральный ίί Т смз н,<уун, ул σΧ Ν 0,002 0,013 0,006 3,3
22 СН Хиральный он Ι|Ί 4Νγ;γΟΗέΛΛτ ΐ н Αρ ύΤ 0,001 0,002 0,003 0,21
23 /¾. Хиральный и и π χί нуфснДА т н Λ АТ^ м ° 0,002 0,005 0,003 1,9
24 θμ Хиральный н^уАс^ДДр 1 н 11) ΑύΑ V ° р 0,001 0,002 0,001 0,62
25 Ф|_1 Хиральный наА/^ДЧ X ГТ Α'Ά1 V 0 0,001 0,002 0,002 0,37
- 86 020136
26 0Ι_Ι Η2ΝγΑ>ε^4ΉΑρ 1 н А Ν 0,001 0,002 0,002 0,29
27 СН^Хйрапькыи 4,Ν. Υ Η ϊχΑ 0 0,001 0,003 0,002 0,95
28 аХиральныи Η-Νγ·*·; /Аг Υ и ку Ν Ο 0,001 0,011 0,002 2,2
29 _^^_,СН_Хиральнь1й Π’^'γΎ2 /γ γ ζϊ“Α 0,001 0,004 0,003 1,4
30 φΙ_Ι ^л^ч^СНЛирапьныи Η0- ДΝΗ; ΑΑ 77 ν А> Η I 0 σ7 0,002 0,012 0,004 2,1
31 0Ι_Ι СН}Хиральныи ΗΑθ.^ΑΑρ - Η ΓΊ] σ7 0,002 0,007 0,004 1,1
32 *?Н Хиральныи Μ!Ν·γ^\ ίΎτ Μ ν7ρ ΐ η μ Τ ΛγΝγΑίΜ чу ° 0,001 0,004 0,003 0,39
- 87 020136
33 η2ν. С но Η Α.. 0 ч/Αν ХирвЛЬНЫЙ %ДГ X X 0,001 0,009 0,003 1,4
НО .^¾.. Хиральный
η2ν4
34 Η I ρ ? ιΙ 0,004 0,067 0,006 6,0
[Α .Ν ди*
|Ι X” 0 Ρ
но Хиральной
η2ν< -0Η3 Χ'Ε
35 ΐ II 0,001 0,006 0,003 0,67
г4 ΑΧ
ι ό
ОН Хирапьный
η2ν4 сНрД -А
36 γΎ η 7 0,001 0,003 0,003 0,24
Η ο
ОН Хиральный
< А.
η2ν4 »сна γλρ
37 η ΐ ν_α 1 0,002 0,007 0,005 1,5
к Η Ν ο
ОН Хиральный
а>.
η2ν* »снэ к
38 Η ? т р Х^р 0,001 0,004 0,003 0,73
ΓΎ
''ГТ 0
ОН Хирвльный
Ά>
Η2Ν4, .СН, ί
39 Аг Η ΐ х*кА I р V 0,007 0,028 0,012 6,6
Ν' ο Е
- 88 020136
40 ОН ηΑό ό , СН^Хиральньм 0,001 0,003 0,002 0,99
νη2 X ₽ Τ Η ί1 ιΓ ^Αν 0 Ε Ε
он х^^-СНуХнральныи
Χ.ΝΗ ЧА
С ί Ε Τ Ρ
41 ХА - Η ΐ 11 0,002 0,027 0,005 2,0
ΑΊΑ Ν
ОН КмральнЫи
ίίΊ
Η?ΝνΧ> “ΙΜε
42 πΥ Η Ο 0,001 0,002 0,002 3,0
11 Ν 0 Ρ
ΗΟΧ Хирэлььын
НгЫчХ^ ^сн, ΐίΑ А
43 η А 0,001 0,006 0,002 2,2
Λ χΝγν
Ν 0 Ρ
ОН Αυ СН^Хирапьный
ΗίΝ\ζ4 γΛΥ. Ρ
νΑΤ'· η Η Τ Ε
44 ίΐΊ 0,001 0,002 0,002 1,9
|Ι Ί Ν 0
Η,ο-θ'-Υ'·- Хиральньм
Η?Νχ·, ^сна А
45 Η ? | 0,001 0,002 0,002 1,3
А А>аА
и Ν 0
Хиральный
1'Αγ-'·- >СНа 14 А
46 η А ,Ρ 0,001 0,002 0,002 0,76
А _Ν уА
к Ν Ο
- 89 020136
47 ОН н * σΥ /¾¾^ Ο - 0|_| Хирапьный Τ ρ ! γ 0,001 0,004 0,003 1,3
Ρ, --+¾. γ Ρ Хирапьный
Υ--', г- у
48 I η о 0,007 0,076 0,009
άττ Ή
Хирапьный
Η,σ^Χ^,.ΝΗ^ ; Η лХ
49 π 0,001 0,003 0,002 1Л
ΟΥ ху
он /¾^ Хирапьный
ηαΑ-ν%. IX
50 кА : Η ГТ 0,001 0,003 0,002 1,2
(Ут Ί+ о ху
--+¾. Хирапьный
IX
51 1 н гХ 0,001 0,002 0,001 0,31
ΑτνΎ ху
V ο ΝΗ?
он Хирапьный
52 н,сΝΥ· - Η IX о 0,001 0,003 0,002 0,83
γχΝγ V ° -ЧУ
0*Н Хирапьный
53 γ η 7 Λ,Ρ 0,010 0,149 0,065 >10
ΑΫ
Μ °
- 90 020136
54 О*сн, к ОН у Хиральный ^Ρ 0,003 0,026 0,024 3,8
^|Г Άΐ 0
ОН Хиральный
Η?Ν* дСН,
55 Η ? Х-чХ Ρ 0,003 0,011 0,030 4,9
^Γ-Γ о
он Хиральный
Η?Ν*
56 ΓΪΙ Η 'ί II ^Ρ 0,011 0,081 0,102 >10
1 1] ο
X Хиральный
η2ν ί X
57 Η N -X; Д „Е 0,001 0,004 0,002 1,4
^Ν' 5 ο
1-ЦС X. Хиральный
Η-,Ν -СИ, I ΧΑ- чр
58 г' Η χ Α 0,001 0,008 0,003 1,8
Ί\ι 4 ο
н,с Хиральный
η2ν ·ν*0Ηι |ί Е
59 Г4 Η .Ш гХ Χΐ 5 ^Р 0,001 0,003 0,002 1,1
11 ο
X Хиральный
η2ν ч^СИ3 [ί X
60 Г Η N X 0,001 0,005 0,003 1,3
> 0
- 91 020136
61 Хиральный .СН, ХуХХ Аг 0 0,001 0,006 0,004 1,2
62 уу Хиральный Η,Νγ->Α γ т\й30 V ° 0,001 0,007 0,003 2,4
63 уу. Хиральный Η,Ν,γχχ^Ο^ΛγΑρ Х\кЗм АГ о 0,001 0,003 0,002 0,53
64 0 Хиральный ОН |<у ^ХН3 А .ΝΗ2 О О X - Η 1 II У 0,002 0,076 0,005 5,6
65 он <Ά, 0пу ΑγΝγΑγ> АГ О N11, 0,001 0,004 0,003 0,16
66 он (ГУ ό X' У о ннг 0,001 0,004 0,002 0,52
67 он 'Г:чТ°^'сн. у.мн= У Р„у άπ 0,001 0,007 0,003 1,2
- 92 020136
68 όΑ - н 1 Π χγΑν V Ο ΝΗ, 0,001 0,008 0,004 1,4
69 уТ Хиральныи ^у-усД,.^ Ан А) V ° р 0,003 0,007 0,006 1,0
70 уТ, Хиральный н/у-.у н, Ч1 у-, Ψл Ху V 0 0,001 0,002 0,002 0,48
71 у^«, Хиральныи «·* у, -су АДР - н 7 у УТ Ά О-8 ° р 0,662 1,947 1,05
72 уу. Хиральным у .С^ДД ин ГТ ζτ-У 0,095 0,522 0,369
73 0Н НУ· '•у'Чл Киральныи ΗΑΟΝΗίχ; Η 1 |Г ό'Ν Υσ М о 0,001 0,008 0,004 1,4
74 он ^з'^'-у^У. Хиральныи н.О.р -1; |1Д А« п ах 0,001 0,017 0,004 2,9
- 93 020136
75 ОН [<Ч ‘о · к - и 7 4 Хиральный ^•к -Е 0,001 0,008 0,003 2,1
ОН ιΟ Хиральнуй
ηα,,.λ.ν^·· О “Р
76 и : Н А 0,001 0,003 0,002 0,83
σι Уч
Хиральный
|И- У
Н2ГЧЧх-^СМэ Ч,
77 Τ Η Ϊ |ГР /γ'Ύν 0,001 0,013 0,003 3,9
V 0
υ’υ. Хирагъный ОН г|
78 7 н А 0,002 0,015 0,003 3,6
(УУ N
ГУ ^РХирапьный
о
79 Т н А ^.р 0,002 0,020 0,003 4,6
ΛΝΤ V о Уч1
(41 Хйральный
г. У
80 Т Н А 0,006 0,044 0,007 7,9
ΓΥΝΥ уу
ч Д 0 N и Е
Е, УЧ Хоральный
Η;Ν*4\ У Е
81 Т н п ^Е 0,002 0,025 0,005 5,940
У N
- 94 020136
82 Р 1 Η ? ν ° Хиральный А 0,003 0,080 0,009 >10
он ΐίΧ Хиральный
ΑΝΗΖ ψ. Έ
83 0,004 0,048 0,005 >10
σΑ
он ίΓ^Υ0 'СН ^ьньй
όΧτ
84 - 4. ΐ. 11 0,004 0,163 0,007 6,9
ΓΤ Μ ο
он κ ''Чл Хирапычыи
НэСуЧ.'^Л хр
85 Η Ν |[ 0,001 0,003 0,002 0,41
γυνΑ
Μ ο
ОН г '''Чх Хиральный
Η ,0^ ,1-. .ΜΗ )|; 2
86 I Η Ν О\. Η 0,031 0,124 0,106 6,1
Γτν-
Μ ο
он [ГСЧ Хиральный
Αγ νη2 ++ Ρ
87 τ η г υ 0,002 0,035 0,005 7,7
ατ
0Η εΓ^Ί Хиральньы
Έ ,Ε
88 = μ 1 ιΓ 0,001 0,011 0,005 0,79
и ο
- 95 020136
89 он Χί Τ Η Α 0,008 0,021 0,029
Αν Ι-Γ ο Ν
ОН
Η2Ν4νΛ^ΟΗ5
90 Τ Η м II 0,003 0,010 0,012
Αν
V ° ΝΗ3
Η2Ν*Α^ν>€Η3
91 ϊ Η Χρ 0,003 0,012 0,021 2,9
ΓΥν АД
кХ ο
Ν
он ίΤν
Α. ΛΛ
Τ Ί г АД
92 Τ η ι II 0,002 0,009 0,005
,ΧζΝν χχ
ч Д ο Ν νη2
ОН <Ά
Η,Ν*. Α. Λ Λ
1 1 Ρ '-/τ
93 Τ Η η 0,001 0,008 0,005
Ανύ χχ
11Χ ο Ν νη2
ОН
Н,С, ЛД
94 - Η ί ιΙ 0,001 0,003 0,005 0,239
СУ χχ νη2
он Γ''Ί
- Η Α
95 11) 0,001 0,005 0,006 0,537
νν -ЧЛ1
ί. -Д ο Ν ΝΗ;
- 96 020136
96 он (ίΎ Гн ГТ ήΧ Ν 0,001 0,001 0,001 0,03
97 0Ι_Ι Хиральный Η,ΐ:^ .'ΝΗ^ΛψΛ,ρ Ϋ я ίΊ Ιΐγ ο ΝΗ, 0,002 0,010 0,007 3,3
98 Хиральный он (11 X Α οΧ 0,002 0,005 0,005 0,81
99 Хиральньм Η,Νγ-η ΡΑΑΡ 1! <>Ι ο Ν 0,001 0,005 0,003 0,93
100 Хиральныи Ο'Χ ΟΓνΟ Χ,^1 Ο ΝΗ, Ν * 0,001 0,001 0,001 0,28
101 СН5 <Χ к'-.·1·!.!. Ο ρ λ ρ Η χ ΙΙΥ 0 ΝΗ, 0,002 0,007 0,005
102 ОН χφ ίΥΑΑ ; η ΪΩ X Ο ΝΗ, 0,001 0,004 0,004 0,87
- 97 020136
103 Хиральный ОН (Г '1 и мА ХА'т ί Э о ΝΗ, 0,002 0,008 0,004
104 он ΗιΝό р Ιρ ΊΤη тп и о ын2 0,003 0,013 0,005
105 н эс γ-'-'Ύ иих г М'Х ]_ Н д П V 0 ΝΗ2 0,001 0,006 0,004
106 .Хиральный <^γ14ΝΗ2 кА Х^АС Μ ° ΝΗ> 0,005 0,022 0,014
107 ^·γ.. МН,У_У,р А й 20 О о ын2 0,002 0,007 0,006 0,93
108 «-'Дж Хиральны ,_ Е Ь М Μ ΝΗ, 1 \ гО аХ 0,001 0,007 0,003
109 . СН2 сХирал»ный X ΝΗ, ί Д ’ о А И О ΓγΝΧ V ° 0,001 0,002 0,002
- 98 020136
110 ХирЭльныи Арр X ГрХ <У 0 νη2 0,001 0,001 0,001
111 Хиральный А' 2 όΎ 0,002 0,005 0,011
112 рУч, хоральный Γ-.Ι ΝΗ, £ Л 'О А чу о мн.„ 0,001 0,001 0,001
ИЗ ОН АА Хира«>ный н,с^р.мнг Дрр V н X ΛΧ V о 0,004 0,089 0,028
114 Хиральный он нзсх, Ду %он ΥΥρ У “ X ГТ'чгМ V ° 0,001 0,003 0,001 0,64
115 0|_| УА ^**РаПЬ+<Ь1Й «а.X .,о^ АДР 1 н А М о 0,001 0,002 0,001 0,59
116 Хиральный ΗΑ,ρ,,οΧ ΐ н О XX 0,001 0,001 0,001 0,29
- 99 020136
117 ф!_1 АХ Хиральныл ςΧ 0,001 0,006 0,002 2,5
118 ОН (рН Хира„ьньт АС,,Α. .мн2 ЦХ М н X XX V 0 0,004 0,029 0,009 4,6
1 19 0 А ΛΝ X ψ χ ΑνΧ 'А о 0,001 0,004 0,002 1,2
120 ° А X Υ кА X XX V 0 0,003 0,018 0,007 8,5
121 А,, Хирэльныи νΗ β № н=с' <ЧХ - Н У Т ΧγΝγ^χ V О мнг 0,001 0,001 0,002
122 ОН Хцральнуи χχγ Ύ ° 0,001 0,002 0,002 0,23
123 Н,С. Хирапьнъ1и О о N 0,001 0,004 0,002 0,49
- 100 020136
124 Τ Η Αν Ν ^и+^^-ОНХирапьныи СХ Αγ Μ 0,001 0,002 0,001 0,78
0 Η Хирапьный
125 Τ Η | 0,001 0,001 0,001 0,41
Αν Ч X ο
ОН ΗΆ“ν ; Η Ρ ρ Хирапьный (У
126 Αρ 0,002 0,068 0,017
αν
он Н,С„ Λ ,.ΝΗ, Η Ρ рХиральный СС
127 Α 0,011 0,131 0,027
αν
он
< Ύ
τ ρ
128 I Η V Α^ρ 0,001 0,001 0,001 0,26
ΑΤ Υ β ο Η ^1/
/Эч/ Ρ Хирапьный
лу
129 Αρ 0,001 0,003 0,002 1,2
Αν
и ιι ο
Ν
он Α
ΧΑρ
130 I η Αρ 0,002 0,007 0,008 Ι,ο
Αν ,ΛΥ
Ц. ο Ν ΝΗ; .
- 101 020136
131 ОН |<Ч оА - Η 7 н ГАДг Ч о мнг Ε Ε 0,002 0,007 0,006 0,43
ОН ίί' 4,
Н,С. А ,-^Д - Η β τ ρ Α ,Ε
132 4ζΓ 0,001 0,005 0,006 0,38
¢4 Τ νη2
Ά
Χτ
133 Τ Η ί1' ιΓ 0,00.1 0,004 0,007 0,24
Λ-Νγγ
Α ο Ν νη2
он (Γ τ.
Η Τ ί Γ
134 0,002 0.016 0,008 1,9
άΥ Ν
ОН ιβ Ά
,ΝΗ; Д ,. -ΐΑ
Ύι ρ τ ρ
135 Τ Η ΐ Ύ Γ 0,023 0,088 0,036
Ν Ά
Ν Хирапьныи
γγ,'ΝΗ; Τ
136 ΧΑ νΑ Η π ΐ 0,002 0,024 0,009 6,4
ГГ А? 4/ Ο νη2
4
γΤρ
137 Τη ϊ Лу 0,001 0,020 0,007
ΑΑ Τ ο Ν
.......-
ОН |Υ!' . Хирапьный
138 НО.Д.^СНр Ду X
τ η τ Ν . Ε ] 0,002 0,045 0,006
у Хиральный
139 Лр
1 Η Γ ΛΑ V ο 'γΤ Д 0,001 0,005 0,004 1,9
Пример 144.
Биологическая методика.
Модулирование фармакологической мишени и исследование эффективности для модели ксеротрансплантата множественной миеломы.
Раковые клетки множественной миеломы КМ811-1ис, взятые у 8^аппе ТгиЕе1 (Ишуегкйу НеаИБ №1\\огк, Тогойо, СапаЕа), которым с помощью ретровирусной трансфекции придана способность стабильно экспрессировать люциферазу, хранили в модифицированной по методике Дульбекко среде Игла с добавлением 10% инактивированной нагревом фетальной бычьей сыворотки и 1% глутамина (1пу|1годеп, 1пс.). Для всех фармакологических исследований ш νίνο использовали самок мышей 8СГО/Ьд (в возрасте 8-12 недель, 20-25 г, Сйаг1е8 Клуег). Мышей помещали в клетки и с ними обращались в соответствии с требованиями руководств штата и федеральных руководств по лечению людей и обращению с лабора
- 102 020136 торными животными и им в неограниченном количестве предоставляли пищу и воду. Раковые клетки собирали из культур в середине фазы логарифмического роста, количество жизнеспособных клеток определяли с помощью устройства для автоматического подсчета клеток (νί-СЕЬЬ, Весктап-СоиЙег) и клетки повторно суспендировали в равных частях сбалансированного солевого раствора Хенкса и Ма1пде1 (1пуйгодеп, 1пс.). В правый бок каждой мыши подкожно вводили по 10 млн клеток. Лечение соединениями начинали, когда объем опухоли становился равным 250-350 мм3 при исследованиях РК/РЭ и 150-250 мм3 при исследованиях эффективности, и объемы опухолей определяли с помощью программного обеспечения 8и.1буОйес1ог (81ибуЬод 8ук1етк, 1пс.). При лечении все соединения вводили перорально.
При исследовании ш у1уо модуляции мишени в случае изучения зависимости от времени для РК/ΓΌ мышам с опухолями перорально вводили одну дозу разбавителя или соединения в разных концентрациях. Через 1, 8 и 24 ч после введения у отдельных мышей брали пробы ткани опухоли и крови. Иссеченные ткани опухоли быстро замораживали и измельчали с помощью охлажденной жидким азотом криогенной ступки и пестика. Пробы крови отбирали с помощью пункции сердца и плазму отделяли с использованием пробирок для центрифуги, содержащих гепарин лития, в сепараторе плазмы (ΒΌ М1сго1ашег). Замороженные пробы плазмы в соответствии с инструкциями изготовителя подвергали лизису в холодном буфере (Меко 8са1е П1ксоуегу), к которому добавлен не содержащий этилендиаминтетрауксусную кислоту ингибитор протеазы (Косйе), ингибиторы фосфатазы 1 и 2 и 1 М NаΕ (81дта). После гомогенизации в аппарате Даунса или аппарате для лизиса Ма^А Ьукег (Косйе) и после центрифугирования при 300хд в течение 30 мин при 4°С получали прозрачную надосадочную жидкость и концентрацию белка определяли с помощью ВСА (ВюЯаб). Модулирование мишени оценивали с помощью двойного набора Меко 8са1е фосфо-Ваб8ег112/общий Ваб в соответствии с инструкциями изготовителя. Вкратце, методика заключалась в следующем: одинаковые количества белка помещали в каждую лунку двойного 96-луночного планшета Меко 8са1е фосфо-8егте112/общий Ваб (Меко 8са1е П1ксоуегу) и пробы при встряхивании инкубировали в течение 30 мин при комнатной температуре или в течение ночи при 4°С. Планшеты промывали 1х М8Э промывочным буфером и в лунки добавляли детектирующие антитела 8и1Го-Тад и при встряхивании инкубировали в течение 1 ч при комнатной температуре. Планшеты еще раз промывали и содержание связанного исследуемого вещества определяли после добавления в лунки буфера для считывания Т. Планшеты считывали с помощью прибора 8ЕСТОК 1тадег 6000 (Меко 8са1е О|ксоуегу). Отношение сигнала рВаб к сигналу общего Ваб использовали для коррекции выживаемости для разных проб. Данные, приведенные в представленной ниже таблице, характеризуют ингибирование типичными соединениями, предлагаемыми в настоящем изобретении, и представляют собой выраженное в процентах отношение степени фосфорилирования рВаб8ег112 к степени фосфорилирования общего Ваб, нормированное на животных контрольной группы, которым вводили разбавитель. Степень модулирования выражали в процентах по сравнению с животными контрольной группы, которым вводили разбавитель (НУ, не установлено).
Соединение примера № 1 ч 8 ч 24 ч
99 (50 мг/кг) 40 55 0
99 (100 мг/кг) 62 66 24
70 (25 мг/кг) 34 50 НУ
70 (50 мг/кг) 28 62 0
70 (100 мг/кг) 5 67 68
96 (25 мг/кг) 0 24 НУ
96 (50 мг/кг) 44 69 16
96 (100 мг/кг) 58 71 53
Для исследования эффективности мышей с опухолями рандомизировали в группы с эквивалентными колебаниями объемов опухолей в диапазоне 150-250 мм3 с использованием программного обеспечения 8и.1буОйес1ог (81ибуЬод 8ук1етк, 1пс.). После рандомизации мышам 1 или 2 раза в сутки перорально вводили соединения в 200 мкл разбавителя в разных концентрациях. Рост опухоли и массу тела животного определяли по меньшей мере 2 раза в неделю и ежедневно проводили клинический осмотр для изучения возможной токсичности препарата. Животных исключали из исследования, если объем опухоли превышал 2500 мм3 или уменьшение массы тела превышало 20% от начального значения.
Эффективность соединения примера 99 оценивали с помощью модели ксенотрансплантата КМ8111ис, когда мышам перорально вводили соединение примера 99 два раза в сутки по 50 и 100 мг/кг и один раз в сутки по 100 мг/кг в течение 14 дней. Введение начинали, когда объемы опухолей становились равными примерно 250 мм3. Как показано на фиг. 1, соединение примера 99 оказывает зависимое от дозы воздействие ш у1уо и подавление роста опухоли наблюдается при введении 50 мг/кг два раза в сутки (92%) и 100 мг/кг два раза в сутки (регрессия 4%). Введение один раз в сутки по 100 мг/кг было менее эффективным (65%), чем введение два раза в сутки. Эти результаты коррелируют со степенью и величи
- 103 020136 ной модулирования рВаб8ег112 и показывают, что для обеспечения максимальной эффективности необходимо значительное и продолжительное модулирование мишени.
Эффективность соединения примера 70 оценивали с помощью модели ксенотрансплантата КМ8111ис, когда мышам перорально вводили соединение примера 80 два раза в сутки по 25 и 50 мг/кг и один раз в сутки по 100 мг/кг в течение 14 дней. Введение начинали, когда объемы опухолей становились равными примерно 225 мм3. Как показано на фиг. 2, соединение примера 70 оказывает зависимое от дозы воздействие ίη у1уо и подавление роста опухоли наблюдалось при введении 25 мг/кг (65%) и 50 мг/кг (100%). Значительное подавление роста опухоли также наблюдалось при введении 100 мг/кг один раз в сутки (84%).
Эффективность соединения примера 96 оценивали с помощью модели ксенотрансплантата КМ8111ис, когда мышам перорально вводили соединение примера 96 два раза в сутки по 25 и 50 мг/кг и один раз в сутки по 100 мг/кг в течение 14 дней. Введение начинали, когда объемы опухолей становились равными примерно 225 мм3. Как показано на фиг. 3, соединение примера 96 оказывает зависимое от дозы воздействие ίη у1уо и подавление роста опухоли наблюдается при введении 25 мг/кг (67%) и 50 мг/кг (96%). Значительное подавление роста опухоли также наблюдалось при введении 100 мг/кг один раз в сутки (88%).
Хотя представлены и описаны иллюстративные варианты осуществления, следует понимать, что без отклонения от сущности и объема настоящего изобретения в него могут быть внесены различные изменения.

Claims (40)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Соединение формулы II или его стереоизомер, таутомер или фармацевтически приемлемая соль в которой Υ обозначает циклогексил, содержащий 1-3 заместителя, выбранных из гидроксилгруппы, аминогруппы, С1 -С4-алкила и С1 -С4-галогеналкила;
    К1 обозначает водород, ΝΗ2 или галоген;
    К12 в каждом случае независимо выбран из группы, включающей водород и галоген; и
    К5 выбран из группы, включающей циклогексил, фенил и пиридил, где указанный циклогексил, указанный фенил и указанный пиридил, каждый независимо, содержат до 3 заместителей, выбранных из группы, включающей галоген, гидроксигруппу, С1-С4-алкил и ОС1-С4-алкил.
  2. 2. Соединение по п.1, в котором Υ содержит 1-3 заместителя, выбранных из группы, включающей метил, гидроксигруппу, аминогруппу и СЕ3.
  3. 3. Соединение по п.1, в котором К1 обозначает водород, аминогруппу или фтор.
  4. 4. Соединение по п.3, в котором К1 обозначает аминогруппу.
  5. 5. Соединение по п.1, в котором К5 обозначает пиридил или фенил.
  6. 6. Соединение по п.5, в котором К5 обозначает фенил, содержащий до 3 заместителей, выбранных из группы, включающей галоген, гидроксигруппу, ОС1-С4-алкил и С1-С4-алкил.
  7. 7. Соединение по п.5, в котором
    Υ содержит 1-3 заместителя, выбранных из группы, включающей метил, гидроксигруппу, аминогруппу и СЕ3;
    К1 обозначает водород и
    К5 обозначает фенил, содержащий до 3 заместителей, выбранных из группы, включающей фтор, гидроксигруппу, метил, этил, метоксигруппу и пропоксигруппу.
  8. 8. Соединение по п.7, в котором К5 обозначает 2,6-дифторфенил.
  9. 9. Соединение по п.1, выбранное из группы, включающей №(4-((38,58)-3-амино-5-метилциклогексил)пиридин-3-ил)-6-(2,6-дифторфенил)-5- фторпиколинамид;
    3-амино-№(4-((1К,3К,48,58)-3-амино-4-гидрокси-5-метилциклогексил)пиридин-3-ил)-6-(2,6дифторфенил)пиколинамид;
    №(4-((3К,4К,58)-3-амино-4-гидрокси-5-метилпиперидин-1-ил)пиридин-3-ил)-6-(2,6-дифторфенил)5-фторпиколинамид;
    3-амино-№(4-((1К,38)-3-аминоциклогексил)пиридин-3 -ил)-6-(2,6-дифторфенил)-5фторпиколинамид и №(4-((38)-3-аминоциклогексил)пиридин-3-ил)-6-(2,6-дифторфенил)-5-фторпиколинамид, или его стереоизомер, таутомер или фармацевтически приемлемая соль.
    - 104 020136
  10. 10. Соединение по п.1, выбранное из группы, включающей
    Ν- (4- ( (1К,35)-3аминоциклогексил) пиридин-3-ил)-6-(2,6дифторфенил)-5-фторпиколинамид
    Ν- (4-((1К,33,53)-3-амино-5метилциклогексил)пиридин-3ил)-6-(2,б-дифторфенил)-5фторпиколинамид
    З-амино-Ν-(4-((1Е,33,55)-3амино-5-метилциклогексил) пиридин-3-ил)-6-(2,6дифторфенил)-5-фторпиколинамид
    Ν- (4-((1К,33,55)-3-амино-5 метилциклогексил) пиридин-3-ил)-6-(2,6дифторфенил)пиколинамид
    З-амино-Ν-(4-(З-амино-4гидрокси-5-метилциклогексил) пиридин-3-ил)-6-(2,6дифторфенил)пиколинамид
    З-амино-Ν-(4-((1К,35)-3аминоциклогексил)пиридин-3ил)-6-(2,6-дифторфенил}-5фторпиколинамид
    З-амино-Ν-(4-(З-амино-5метилцикло-гексил)пиридин-3ил)-6-(2,6-дифторфенил) - 5фторпиколинамид.
  11. 11. Соединение по
    п.1, формулы или его фармацевтически приемлемая соль.
  12. 12. Соединение по п.1 формулы или его фармацевтически приемлемая соль.
  13. 13. Соединение по п.1 формулы
    - 105 020136
    Хиральный или его фармацевтически приемлемая соль.
  14. 14. Соединение по п.1 формулы или его фармацевтически приемлемая соль.
  15. 15. Соединение по п.1 формулы или его фармацевтически приемлемая соль.
  16. 16. Соединение по п.1 формулы
    Хиральный или его фармацевтически приемлемая соль.
  17. 17. Соединение по п.1 формулы или его фармацевтически приемлемая соль.
  18. 18. Соединение по п.1, выбранное из группы, включающей
    - 106 020136
    - 107 020136
    - 108 020136
    - 109 020136 или его фармацевтически ириемлемая соль.
  19. 19. Фармацевтическая комиозиция, содержащая соединение ио любому из ии.1-18 и фармацевтически ириемлемый носитель или инертный наиолнитель.
  20. 20. Фармацевтическая комиозиция, содержащая соединение ио любому из ии.1-18 и фармацевтически ириемлемый носитель или инертный наиолнитель, где указанная фармацевтическая комиозиция со держит доиолнительное средство для лечения рака.
  21. 21. Фармацевтическая комиозиция ио и.20, в которой доиолнительное средство выбрано из груииы, включающей иринотекан, тоиотекан, гемцитабин, 5-фторурацил, лейковорин карбоилатин, цисилатин, таксаны, тезацитабин, циклофосфамид, алкалоиды барвинка, иматиниб (Глеевек), антрациклины, ритуксимаб и трастузумаб.
  22. 22. Применение соединения ио любому из ии.1-18 для ириготовления лекарственного средства, иредназначенного для лечения иатологического состояния иутем модуляции активности ировирусной интеграции киназы Мэлони (киназы ΡΙΜ).
  23. 23. Применение ио и.22, где иатологическим состоянием является рак, выбранный из груииы, включающей карциному легких, иоджелудочной железы, щитовидной железы, яичников, мочевого иузыря, молочной железы, иредстательной железы или толстой кишки, меланому, миелолейкоз, множественную миелому и эритролейкоз, ворсинчатую аденому толстой кишки и остеосаркому.
  24. 24. Применение соединения ио ии.1-18 для лечения иатологического состояния иутем модуляции активности ировирусной интеграции киназы Мэлони (киназы Ι4Μ).
  25. 25. Применение ио и.24, где иатологическим состоянием является рак, выбранный из груииы, включающей карциному легких, иоджелудочной железы, щитовидной железы, яичников, мочевого иузыря, молочной железы, иредстательной железы или толстой кишки, меланому, миелолейкоз, множественную миелому и эритролейкоз, ворсинчатую аденому толстой кишки и остеосаркому.
    - 110 020136
  26. 26. Соединение формулы II или его стереоизомер, таутомер или фармацевтически приемлемая соль
    Ν II в которой Υ обозначает пиперидинил, одновременно замещенный метилом, гидроксигруппой и аминогруппой;
    К выбран из группы, включающей водород, ΝΗ2 и фтор;
    К.|2 в каждом случае независимо выбран из группы, включающей водород и галоген; и
    В5 выбран из группы, включающей пиридил, фторпиридил, циклогексил и фенил, где указанный фенил содержит до 3 заместителей, выбранных из группы, включающей фтор, гидроксигруппу и метил.
  27. 27. Соединение по п.26, в котором Υ обозначает 3-амино-4-гидрокси-5-метилпиперидин-1-ил.
  28. 28. Соединение по п.26 или 27, в котором В! обозначает водород.
  29. 29. Соединение по п.28, в котором В5 обозначает дифторфенил.
  30. 30. Соединение по п.26 или 27, в котором В5 обозначает 2,6-дифторфенил.
  31. 31. Соединение по п.26, выбранное из группы, включающей №(4-((3В,4В,58)-3-амино-4-гидрокси-5-метилпиперидин-1-ил)пиридин-3-ил)-6-(2,6-дифторфенил)-
    5-фторпиколинамид,
    3-амино-№(4-((3В,4В,58)-3 -амино-4-гидрокси-5-метилпиперидин-1-ил)пиридин-3-ил)-6-(2,6дифторфенил)-5-фторпиколинамид и №(4-((3В,4В,58)-3-амино-4-гидрокси-5-метилпиперидин-1-ил)пиридин-3-ил)-6-(2,6-дифтор-3метилфенил)-5-фторпиколинамид.
  32. 32. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение по п.26 или 31 и фармацевтически приемлемый носитель или инертный наполнитель, где указанная фармацевтическая композиция содержит по меньшей мере одно дополнительное средство для лечения рака.
  33. 33. Фармацевтическая композиция по п.32, в которой дополнительное средство выбрано из группы, включающей иринотекан, топотекан, гемцитабин, 5-фторурацил, лейковорин карбоплатин, цисплатин, таксаны, тезацитабин, циклофосфамид, алкалоиды барвинка, иматиниб (Глеевек), антрациклины, ритуксимаб и трастузумаб.
  34. 34. Применение соединения по п.26 для приготовления лекарственного средства, предназначенного для лечения патологического состояния путем модуляции активности провирусной интеграции киназы Мэлони (киназы Р1М).
  35. 35. Применение по п.34, где патологическим состоянием является рак, выбранный из группы, включающей карциному легких, поджелудочной железы, щитовидной железы, яичников, мочевого пузыря, молочной железы, предстательной железы или толстой кишки, меланому, миелолейкоз, множественную миелому и эритролейкоз, ворсинчатую аденому толстой кишки и остеосаркому.
  36. 36. Применение по пп.26-31 для лечения патологического состояния путем модуляции активности провирусной интеграции киназы Мэлони (киназы Р1М).
  37. 37. Применение по п.36, где патологическим состоянием является рак, выбранный из группы, включающей карциному легких, поджелудочной железы, щитовидной железы, яичников, мочевого пузыря, молочной железы, предстательной железы или толстой кишки, меланому, миелолейкоз, множественную миелому и эритролейкоз, ворсинчатую аденому толстой кишки и остеосаркому.
  38. 38. Соединение формулы II, выбранное из группы, включающей
    - 111 020136
    6-(2,6-дифторфенил)-5-φτορ-Ν(4-((ΙΕ,33,53)- 3-гидрокси-5метилциклогексил)пиридин-3 ил)пиколинамид
    Ν-(4-((1Е,ЗЕ,4Е,53)-З-амино-4гидрокси-5-метилциклогексил) пиридин-3-ил)- 6 -(2,6-дифтор-4гидроксифенил)-5фторпиколинамид
    Ν-(4-((1Е,ЗК,4К,58)-3-амино-4гидрокси-5-метилциклогексил) пиридин-3-ил)-5-фтор-б-(2фтор-5-гидроксифенил) пиколинамид
    Ν-(4-((1Е,38)-3аминоциклогексил) пиридин-3-ил)-6-(2-фтор-4гидроксифенил) пиколинамид
    Ν-(4-((1Ε,33)-3аминоциклогексил) пиридин-3-ил)-6-(2-фтор-5гидроксифенил) пиколинамид
    Ν- (4- ((1Е,38)-3аминоциклогексил) пиридин-3-ил) - 6-(2,б-дифтор-4 гидроксифенил) пиколинамид
    Ν- (4- ( (1Е,33)-3аминоциклогексил) пиридин-3-ил)-5-фтор-6-(2фтор-4-гидроксифенил) пиколинамид
    Ν-(4-((ΙΕ,5Е)-5-амино-3,3диметилцикло-гексил)пиридин-3ил)-5-фтор-6-(2-фтор-4гидроксифенил) пиколинамид
    - 112 020136
    Ν- (4-((1Β,5Β)-5-амино-3,3диметилцикло-гексил)пиридин-3ил)-6-(2,б-дифтор-3метилфенил)-5-фторпиколинамид
    Ν- (4-((1В,5В)-5-амино-3,3диметилцикло-гексил)пиридин - 3 ил)-6-(2,6-дифтор-Зметилфенил) пиколинамид
    Ν- (4-((ЗВ,4К,58)-З-амино-4гидрокси- 5-метилпиперидин -1 ил)пиридин-3-ил)-6-(2,6дифтор-3-метилфенил) пиколинамид
    Ν- (4- ((1К,38)-3аминоциклогексил) пиридин-3-ил)-5-фтор-6-(2,3,5трифторфенил) пиколинамид
    Ν-(4-((1В,ЗВ,4В,58)-З-амино-4гидрокси-5-метилциклогексил) пиридин - 3-ил )-6-(3-этил-2,6 дифторфенил) пиколинамид
    Ν- (4 - ( (1К, ЗК,43, 53) - 3-аминов гидрокси-5-метил циклогексил ) пиридин-3-ил)- 6-(3-этил-2,6дифторфенил) пиколинамид
    Ν-(4-((1В,ЗВ,45)-3-амино-4гидроксицикло-гексил)пиридин3-ил)-6-(3-этил-2,6дифторфенил) пиколинамид
    Ν-(4-((1В,35)-3аминоциклогексил) пиридин-3-ил)-6 -(3-этил-2,6дифторфенил) пиколинамид
    - 113 020136
    Ν-(4-((1К,35)-3аминоциклогексил) пиридин-3-ил)-6-(2,6-дифтор-Зметилфенил)-5-фторпиколинамид аминоциклогексил) пиридин-3-ил)-б -(2,6-дифтор-4 гидроксифенил)-5фторпиколинамид пиридин-3-ил)-6-(3-этил-2,бдифторфенил) пиколинамид метилциклогексил)пиридин-3ил)-6-(2,6-дифтор-3 метилфенил)-5-фторпиколинамид аминоциклогексил) пиридин-3-ил)-б-(2,6-дифтор-3 метилфенил) пиколинамид пиридин-3-ил)- б -(2,6-дифтор-3 метилфенил) пиколинамид гидрокси-5-метилциклогексил) пиридин-3-ил)-6-(2,б-дифтор-3 метилфенил) пиколинамид пиридин-3-ил)-6-(2,б-дифтор-3 метилфенил) пиколинамид
    - 114 020136
    Ν-(4-((1К,35)-3аминоциклогексил) пиридин-3-ил)-5-фтор-6-(2фтор-5-гидроксифенил) пиколинамид
    Ν- (4- ( (1Е,35)-3аминоциклогексил) пиридин-3-ил)-З-фтор-6-(2фтор-5-гидроксифенил) пиколинамид
    Ν-(4-((ΙΕ,35,55)-З-амино-5метилциклогексил) пиридин-3-ил)-6-(2-фтор-5гидроксифенил) пиколинамид
    Ν-(4-((1Е,35,53)-З-амино-5метилциклогексил) пиридин-3-ил)-6-(2,6 - дифтор-4гидроксифенил) пиколинамид
    Ν - (4-( (1Е,35, 58)-З-амино-5метилциклогексил) пиридин-3-ил)-6-(2-фтор-4гидроксифенил) пиколинамид
    Ν-(4-((1Е,33,55)-З-амино-5метилциклогексил) пиридин-3-ил)-5-фтор-6-(2фтор-4-гидроксифенил) пиколинамид
    Ν- (4-( (1Е,3 3,55) -3-амино-5ыетилциклогексил} пиридин-3-ил}-З-фтор-6-(2фтор-4-гидроксифенил) пиколинамид
    Ν-(4-((1Е,ЗЕ,45,55)-З-амино-4гидрокси-5-метилциклогексил) пиридин-3-ил) - 6-(2,6-дифтор-3 метилфенил)-5-фторпиколинамид
    - 115 020136
    Ν- (4 - ( (1К,ЗК,43)-3-амино-4гидроксициклогексил) пиридин-3-ил)-6-(2,6-дифтор-Зметилфенил) пиколинамид метилциклогексил) пиридин-3-ил)-6-(2,6-дифтор-4гидроксифенил)-3фторпиколинамид метилциклогексил) пиридин-3-ил)-3-фтор-б-(2фтор-5-гидроксифенил) пиколинамид гидрокси-5-метилциклогексил) пиридин-3-ил)-б-(2,6-дифтор-3 метилфенил)-5-фторпиколинамид метоксифенил) пиколинамид метилциклогексил)пиридин-3ил)-5-фтор-б-(2-фтор-5гидроксифенил) пиколинамид
    -амино-4гидрокси-5-метилциклогексил) пиридин-3-ил)-6-(2, 6-дифтор-3метоксифенил)-5фторпиколинамид )
    пиридин-3-ил)-б-(2,3,5трифторфенил) пиколинамид
    - 116 020136
    ОН Хиральный метилциклогексил)пиридин - 3 ил)-5-фтор-б-((1г,4г)-4гидроксициклогексил) пиколинамид пиридин-3-ил)-б-(2,6дифторфенил) - 5-фторпиколинамид гидрокси- 5-метилциклогексил) пиридин-3-ил)-б-(2,6дифторфенил)- 5-фторпиколинамид амино-5-метилциклогексил) пиридин-3-ил)-6-(2,6дифторфенил)-5-фторпиколинамид гидрокси-5-метилциклогексил) пиридин-3-ил )-6-(2,6дифторфенил) пиколинамид
    Ν- (4-((1В,33)-3аминоциклогексил) пиридин-3-ил)-5-фтор-б( (1з,4з)-4гидроксициклогексил) пиколинамид метилциклогексил)пиридин-3 ил)-5-фтор-б-((1з,4в)-4гидроксициклогексил) пиколинамид
    Ν-(4-((1Κ,33)-3аминоциклогексил) пиридин-3-ил)-5-фтор-6( (1г,4г)-4гидроксициклогексил) пиколинамид
    - 117 020136
    Ν-(4-((1К,35,55)-З-амино-5метилциклогексил) пиридин-3-ил)-5-фтор-6-(2фторфенил) пиколинамид
    Ν-(4-((1К,33,53)-З-амино-5метилциклогексил) пиридин-3-ил)-6-(2-фтор-5метилфенил) пиколинамид
    Ν- (4- ( (1Й,35,53)-З-амино-5метилциклогексил) пиридин-3-ил)-5-фтор-6-(2фтор-5-метилфенил) пиколинамид
    Ν- (4- ( ЦК,35,53)-З-амиио-5метилциклогексил) пиридин-3-ил)-6-(2,3дифторфенил)-5-фторпиколинамид
    Ν- (4-((1К,38,58)- 3-амино-5метилциклогексил) пиридин-3-ил)-6 -(2,5дифторфенил)-5-фторпиколинамид
    Ν- (4-((1К,33,55)-З-амино-5метилциклогексил) пиридин-3-ил)-б-(2-фторфенил) пиколинамид
    Ν-(4-((1К,38,53)-3-амино-5метилциклогексил) пиридин - 3-ил )-6-(2,6дифторфенил) пиколинамид
    Ν- (4- ( (1К,ЗК,48)-З-амино-4гидроксициклогексил) пиридин-3-ил)-5-фтор-6-(2фтор-5-пропоксифенил) пиколинамид
    - 118 020136
    З-амино-Ν-(4-((1Ε,3Ε,43)-3амино-4-гидроксициклогексил) пиридин-3-ил)-6-(2,6дифторфенил)-5-фторпиколинамид
    З-амино-Ν-(4 - ( (1Е,ЗЕ,431-3амино- 4 -тидроксициклогексил) пиридин-3-ил)-5-фтор-б-(2фторфенил) пиколинамид
    З-амино-Ν-(4-((1Е,ЗЕ,43)-3амино-4-гидроксициклогексил) пиридин-3-ил)-5-фтор-б-(2фтор-5-пропоксифенил) пиколинамид
    - амино-5амино-4-гидроксициклогексил) пиридин-3-ил)-6-(2-фтор-5пропоксифенил) пиколинамид пиридин-3-ил)-6-(2,6дифторфенил)-3-фторпиколинамид метилциклогексил) пиридин-3-ил)-6-(2,6дифторфенил)-5-фторпиколинамид метилциклогексил} пиридин-3-ил)-6-(2,6дифторфенил)- 3-фторпиколинамид метилциклогексил) пиридин - 3-ил)-6-(2,6дифторфенил)-5-фторпиколинамид
    - 119 020136 амил аминоциклогексил) пиридин-3-ил)-6-(2,3дифторфенил)-5-фторпиколинамид
    Ν- (4 - ( (1К,ЗК,43,53)-3-амино-4гидрокси-5-метилциклогексил) дин-3-и
    - 5-мети пиколинамид гидрокси-5-метилциклогексил) пиридин - 3-ил)-6-(2-фтор-5метилфенил) пиколинамид гидрокси-5-метилциклогексил) пиридин - 3-ил)-5-фтор-6-(2фторфенил) пиколинамид гидрокси-5-метилциклогексил) пиридин-3-ил)-6-(2,6дифторфенил пиколинамид
    -амино-5метилциклогексил) пиридин-3-ил) -6 - (2,4 гидроксициклогексил} пиридин-3-ил)-6-(2,6дифторфенил) пиколинамид
    Ν-(4-((1К,33)-3аминоциклогексил) пиридин-3-ил)-6-(2,6дифторфенил)- 3-фторпиколинамид
    - 120 020136
    Ν- (4-( (ΙΗ,33)-3аминоциклогексил) пиридин-3-ил)-б -(2,5дифторфенил)-5-фторпиколинамид аминоциклогексил) пиридин-3-ил)-б-(2,4дифторфенил)- 5-фторпиколинамид гидроксициклогексил} пиридин -3-ил)-6-(2-фторфенил) пиколииамид гидроксициклогексил) пиридин-3-ил)-6-(2-фтор-5пропоксифенил) пиколииамид гидрокси-5-метилциклогексил) пиридин-3-ил)- 6- (2,6дифторфенил)-5-фторпиколинамид гидрокси - 5-метилциклогексил) пиридин-3-ил)-6-(2,6дифторфенил)-5-фторпиколинамид
    -амино-4гидроксициклогексил) пиридин-3-ил)-5-фтор-б-(2фторфенил) пиколииамид
    Ν-(4-((13,33,4К)-3-амино-4 гидроксициклогексил) пиридин-3-ил)-6-(2,6дифторфенил)-5-фторпиколинамид
    - 121 020136
    Ν- (4- ( 3-амино-4-гидрокси - 5 метилциклогексил) пиридин-3-ил)-б-циклогексил-5фторпиколинамид
    З-амино-Ν-(4-(З-амино-4гидрокси-5-метилциклогексил) пиридин-3-ил)-бциклогексилпиколин -амид
    Ν- (4- (З-амино-5метилциклогексил) пиридин-3-ил)-6-циклогексил-5фторпиколинамид
    З-амино-Ν-(4-(З-амино-4гидрокси-5-метилциклогексил) пиридин-3-ил)-б-(2,6дифторфенил) пиколинамид
    З-амино-Ν-(4-(З-амино-4гидрокси-5-метилциклогексил) пиридин-3-ил)-б-(2,бдифторфенил) пиколинамид
    З-амино-Ν-(4-(З-амино-4гидрокси-5-метилциклогексил) пиридин-3-ил)-6-(2,6дифторфенил) пиколинамид
    З-амино-Ν-(4-(З-амино-4гидрокси-5-метилциклогексил) пиридин-3-ил)-6-(2,6дифторфенил) пиколинамид
    - 122 020136
    Ν-(4-((1Κ,38)-3аминоциклогексил)пиридин-3-ил)6- (2,6-дифторфенил)-5фторпиколинамид
    3-амино-Ν-(4-((1Е,38)-3аминоциклогексил) пиридин-3-ил)-6-(2,6дифторфенил)- 5-фторпиколинамид
    2-амино-4 -(3 -(3-амино-6-(2,6дифторфенил) пиколинамидо)пиридин-4ил)циклогексилацетат
    З-амино-Ν-(4-(З-амино-4гидроксицикло-гексил)пиридин-
    3-ил)-6-(2,6-дифторфенил) пиколинамид
    З-амино-Ν-(4-((1К,38,48)-3амино-4-гидроксициклогексил) пиридин- 3-ил)-6-(2,6дифторфенил) пиколинамид
    З-амино-Ν-(4-((1К,33)-3аминоцикло-гексил)пиридин-3 ил)-6-циклогексилпиколин-амид
    Ν-(4-((1Е,ЗЕ,55) - 3-амино-5(трифторметил)циклогексил)пири дин-3-ил)-6-(2-фтор-5метилфенил) пиколинамид
    Ν- (4 - ( (1Е,ЗЕ,58)-3-амино-5(трифторметил)циклогексил) пиридин-3-ил)-6-(2,6дифтор-4-метоксифенил) пиколинамид
    - 123 020136
    110
    З-амино-Ν-(4-{(1К,ЗК,58)-3амино-5-(трифторметил)циклогексил) пиридин-3-ил)-6-(2,6дифторфенил)-5-фторпиколинамид
    111
    Ν-(4-((1К,ЗК,58)-З-амино-5{трифторметил)циклогексил) пиридин-3-ил) -6циклогексил- 5 -фторпиколинамид
    112
    З-амино-Ν-(4-((1К,ЗК,53)-3амино-5-(трифторметил)циклогексил) пиридин-3-ил)-6-(2 ,6дифторфенил) пиколинамид
    117
    6 - (2,6-Дифторфенил)-Ν-(4( (1К,ЗК,4К,53) -3 ,4-дигидрокси5-метилциклогексил) пиридин-3-ил)-5фторпиколинамид
    121
    З-амино-6-(2,6-дифторфенил)-Ν(4-((1К,ЗК,4К,53)-3,4дигидрокси- 5-метилциклогексил) пиридин - 3 -ил)-5 фторпиколинамид
    122
    Ν- (4-((1К,5Н)- 5-амино-3,3диметилцикло-гексил)пиридин-3ил)-6-(2,6-дифтор-4гидроксифенил)-5-фторпиколинамид
    123
    Хиральный
    Ν-(4-((1К,5К)-5-амино-З,3р диметилцикло-гексил)пиридин-3Р ил)-6-(2,б-дифтор-4метоксифенил)-5-фторпиколинамид
    - 124 020136 пиридин-3-ил}-5-фтор-6-(2 ,3,6 пиколинамид фторпиколинамид фторпиколинамид или его фармацевтически приемлемая соль.
  39. 39. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение по п.38 и фармацевтически приемлемый носитель.
  40. 40. Способ лечения рака, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения по п.38.
    пиридин-3-ил)-6-(2,6-дифтор-Згидроксифенил)- 5 -фторпиколинамид
    Ν-(4 - {-3-амино - 4 - гидрокси-5метилциклогексил пиридин-3-ил)-6-(2,6дифторфенил)-5-фторпиколинамид и
    З-амино-Ν-(4-(З-амино-4гидрокси- 5-метилциклогексил пиридин-3-ил)-6-(2,6дифторфенил)- 5-фторпиколинамид метилцикло-гексил)пиридин-3-ил)6- (2,6-дифтор-З-гидроксифенил)5 -фторпиколинамид метилциклогексил пиридин-3-ил)-6-(2,6-дифтор-4гидроксифенил)- 5-фторпиколинамид
    Ν-(4-(3-амино-4-гидрокси-5метилциклогексил пиридин-3-ил)-6-(2,6дифторфенил)- 5-фторпиколинамид
    З-амино-Ν-(4-(З-амино-5метилцикло-гексил)пиридин-3-ил)З-амино-Ν-(4-(З-амино-4гидрокси-5-метилциклогексил пиридин-3-ил) -5- (2,6дифторфенил)- 5-фторпиколинамид
    З-амино-Ν-(4- З-амино-4гидроксицикло-гексил)пиридин-3 - 125 020136
    Пример 99 (пероральное введение) > Разбавитель
    -ώ— 50 мг/кг 2 раза в сутки, пример 99
    -ф— 100 мг/кг 2 раза в сутки, пример 99 —О— 100 мг/кг 1 раз в сутки, пример 99
    Дней после имплантации
    Фиг. 1
    Пример 70 (пероральное введение)
    1000η
    Разбавитель
    Фиг. 2
    - 126 020136
EA201100425A 2008-09-02 2009-08-31 Производные пиколинамида в качестве ингибиторов киназы EA020136B1 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US9366608P 2008-09-02 2008-09-02
US22566009P 2009-07-15 2009-07-15
PCT/EP2009/061205 WO2010026124A1 (en) 2008-09-02 2009-08-31 Picolinamide derivatives as kinase inhibitors

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201100425A1 EA201100425A1 (ru) 2011-10-31
EA020136B1 true EA020136B1 (ru) 2014-08-29

Family

ID=41228825

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201100425A EA020136B1 (ru) 2008-09-02 2009-08-31 Производные пиколинамида в качестве ингибиторов киназы

Country Status (39)

Country Link
US (4) US8329732B2 (ru)
EP (1) EP2344474B1 (ru)
JP (2) JP5412519B2 (ru)
KR (1) KR101345920B1 (ru)
CN (3) CN104311480A (ru)
AU (1) AU2009289319C1 (ru)
BR (1) BRPI0918268B1 (ru)
CA (1) CA2734415C (ru)
CL (1) CL2011000454A1 (ru)
CO (1) CO6351725A2 (ru)
CR (1) CR20110114A (ru)
DK (1) DK2344474T3 (ru)
DO (1) DOP2011000067A (ru)
EA (1) EA020136B1 (ru)
EC (1) ECSP11010859A (ru)
ES (1) ES2551900T3 (ru)
GE (1) GEP20135849B (ru)
HK (2) HK1156627A1 (ru)
HN (1) HN2011000629A (ru)
HR (1) HRP20151410T1 (ru)
HU (1) HUE026381T2 (ru)
IL (1) IL211291A (ru)
MA (1) MA32684B1 (ru)
ME (1) ME01291A (ru)
MX (1) MX2011002365A (ru)
MY (1) MY150136A (ru)
NI (1) NI201100052A (ru)
NZ (1) NZ591449A (ru)
PE (1) PE20110298A1 (ru)
PL (1) PL2344474T3 (ru)
PT (1) PT2344474E (ru)
RS (1) RS54506B1 (ru)
SI (1) SI2344474T1 (ru)
SM (1) SMT201600005B (ru)
SV (1) SV2011003849A (ru)
TW (1) TWI434843B (ru)
UY (1) UY32085A (ru)
WO (1) WO2010026124A1 (ru)
ZA (1) ZA201101118B (ru)

Families Citing this family (84)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2348023B9 (en) 2005-12-13 2017-03-08 Incyte Holdings Corporation Heteroaryl substituted pyrrolo[2,3-b]pyridines and pyrrolo[2,3-b]pyrimidines as Janus kinase inhibitors
US20140249135A1 (en) * 2007-03-01 2014-09-04 Novartis Ag Pim kinase inhibitors and methods of their use
CN101932582B (zh) 2007-06-13 2013-09-25 因塞特公司 詹纳斯激酶抑制剂(R)-3-(4-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基)-3-环戊基丙腈的盐
AU2009289316A1 (en) * 2008-09-02 2010-03-11 Novartis Ag Bicyclic kinase inhibitors
EP2344474B1 (en) 2008-09-02 2015-09-23 Novartis AG Picolinamide derivatives as kinase inhibitors
SG176111A1 (en) 2009-05-22 2011-12-29 Incyte Corp 3-[4-(7h-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)-1h-pyrazol-1-yl]octane- or heptane-nitrile as jak inhibitors
CN102458581B (zh) 2009-05-22 2016-03-30 因塞特控股公司 作为JANUS激酶抑制剂的吡唑-4-基-吡咯并[2，3-d]嘧啶和吡咯-3-基-吡咯并[2，3-d]嘧啶的N-(杂)芳基-吡咯烷衍生物
US9249145B2 (en) 2009-09-01 2016-02-02 Incyte Holdings Corporation Heterocyclic derivatives of pyrazol-4-yl-pyrrolo[2,3-d]pyrimidines as janus kinase inhibitors
ME02386B (me) 2010-03-10 2016-09-20 Incyte Holdings Corp Derivati piperidin-4-il azetidina kao inhibitori jak1
PE20130405A1 (es) * 2010-04-07 2013-04-10 Hoffmann La Roche Compuestos de pirazol-4-il-heterociclil-carboxamida y metodos de uso
KR102303885B1 (ko) 2010-05-21 2021-09-24 인사이트 홀딩스 코포레이션 Ｊａｋ 저해제에 대한 국소 제형
US20130109682A1 (en) * 2010-07-06 2013-05-02 Novartis Ag Cyclic ether compounds useful as kinase inhibitors
US9034884B2 (en) 2010-11-19 2015-05-19 Incyte Corporation Heterocyclic-substituted pyrrolopyridines and pyrrolopyrimidines as JAK inhibitors
EP2640723A1 (en) 2010-11-19 2013-09-25 Incyte Corporation Cyclobutyl substituted pyrrolopyridine and pyrrolopyrimidine derivatives as jak inhibitors
US9284270B2 (en) 2011-02-14 2016-03-15 The Governers Of The University Of Alberta Boronic acid catalysts and methods of use thereof for activation and transformation of carboxylic acids
UY33929A (es) * 2011-03-04 2012-10-31 Novartis Ag Compuestos de ciclohexilo tetrasustituido como inhibidores de quinasas
UY33930A (es) * 2011-03-04 2012-10-31 Novartis Ag Inhibidores novedosos de quinasas
US9187486B2 (en) 2011-04-29 2015-11-17 Amgen Inc. Bicyclic pyridazine compounds as Pim inhibitors
US8691807B2 (en) 2011-06-20 2014-04-08 Incyte Corporation Azetidinyl phenyl, pyridyl or pyrazinyl carboxamide derivatives as JAK inhibitors
US9416132B2 (en) 2011-07-21 2016-08-16 Tolero Pharmaceuticals, Inc. Substituted imidazo[1,2-b]pyridazines as protein kinase inhibitors
US9453003B2 (en) * 2011-08-11 2016-09-27 Jikai Biosciences, Inc. Pyrimidine derivatives as PIM kinase inhibitors and preparation methods and use in medicinal manufacture thereof
US9458151B2 (en) * 2011-08-11 2016-10-04 Jikai Biosciences, Inc. Isothiazole derivatives as PIM kinase inhibitors and preparation methods and use in medicinal manufacture thereof
TW201313721A (zh) 2011-08-18 2013-04-01 Incyte Corp 作為ｊａｋ抑制劑之環己基氮雜環丁烷衍生物
UA111854C2 (uk) 2011-09-07 2016-06-24 Інсайт Холдінгс Корпорейшн Способи і проміжні сполуки для отримання інгібіторів jak
TW201406761A (zh) 2012-05-18 2014-02-16 Incyte Corp 做爲ｊａｋ抑制劑之哌啶基環丁基取代之吡咯并吡啶及吡咯并嘧啶衍生物
AU2013264831B2 (en) * 2012-05-21 2016-04-21 Novartis Ag Novel ring-substituted N-pyridinyl amides as kinase inhibitors
WO2014033630A1 (en) 2012-08-31 2014-03-06 Novartis Ag Novel aminothiazole carboxamides as kinase inhibitors
WO2014033631A1 (en) 2012-08-31 2014-03-06 Novartis Ag N-(3-pyridyl) biarylamides as kinase inhibitors
HUE049611T2 (hu) 2012-09-26 2020-09-28 Hoffmann La Roche Ciklikus éter-pirazol-4-il-heterociklil-karboxamid vegyületek és felhasználási módszerek
CN103724301A (zh) * 2012-10-10 2014-04-16 上海特化医药科技有限公司 (2r)-2-脱氧-2,2-二取代-1,4-核糖内酯及其制备方法和用途
EA201590930A1 (ru) 2012-11-15 2015-08-31 Инсайт Корпорейшн Лекарственные формы руксолитиниба с замедленным высвобождением
US20150336960A1 (en) 2012-12-19 2015-11-26 Novartis Ag Aryl-substituted fused bicyclic pyridazine compounds
WO2014110574A1 (en) 2013-01-14 2014-07-17 Incyte Corporation Bicyclic aromatic carboxamide compounds useful as pim kinase inhibitors
SG11201505347VA (en) 2013-01-15 2015-08-28 Incyte Corp Thiazolecarboxamides and pyridinecarboxamide compounds useful as pim kinase inhibitors
JP6397831B2 (ja) 2013-03-06 2018-09-26 インサイト・ホールディングス・コーポレイションＩｎｃｙｔｅ Ｈｏｌｄｉｎｇｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ Ｊａｋ阻害剤の製造方法及びその中間体
US9113629B2 (en) * 2013-03-15 2015-08-25 Dow Agrosciences Llc 4-amino-6-(4-substituted-phenyl)-picolinates and 6-amino-2-(4-substituted-phenyl)-pyrimidine-4-carboxylates and their use as herbicides
MY195091A (en) 2013-08-07 2023-01-10 Incyte Corp Sustained Release Dosage Forms for a JAK1 Inhibitor
CN105611928A (zh) 2013-08-08 2016-05-25 诺华股份有限公司 Pim激酶抑制剂组合
US9556197B2 (en) 2013-08-23 2017-01-31 Incyte Corporation Furo- and thieno-pyridine carboxamide compounds useful as pim kinase inhibitors
EP3757130A1 (en) 2013-09-26 2020-12-30 Costim Pharmaceuticals Inc. Methods for treating hematologic cancers
EP3074043A1 (en) * 2013-11-27 2016-10-05 Novartis AG Combination therapy comprising an inhibitor of jak, cdk and pim
JOP20200094A1 (ar) 2014-01-24 2017-06-16 Dana Farber Cancer Inst Inc جزيئات جسم مضاد لـ pd-1 واستخداماتها
JOP20200096A1 (ar) 2014-01-31 2017-06-16 Children’S Medical Center Corp جزيئات جسم مضاد لـ tim-3 واستخداماتها
KR20220126813A (ko) 2014-03-14 2022-09-16 노파르티스 아게 Lag-3에 대한 항체 분자 및 그의 용도
RU2016137761A (ru) 2014-03-18 2018-04-18 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Оксепан-2-ил-пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамиды и способы их применения
WO2015184305A1 (en) 2014-05-30 2015-12-03 Incyte Corporation TREATMENT OF CHRONIC NEUTROPHILIC LEUKEMIA (CNL) AND ATYPICAL CHRONIC MYELOID LEUKEMIA (aCML) BY INHIBITORS OF JAK1
US9580418B2 (en) 2014-07-14 2017-02-28 Incyte Corporation Bicyclic aromatic carboxamide compounds useful as Pim kinase inhibitors
WO2016010897A1 (en) 2014-07-14 2016-01-21 Incyte Corporation Bicyclic heteroaromatic carboxamide compounds useful as pim kinase inhibitors
JO3589B1 (ar) 2014-08-06 2020-07-05 Novartis Ag مثبطات كيناز البروتين c وطرق استخداماتها
EP3659621A1 (en) 2014-09-13 2020-06-03 Novartis AG Combination therapies for cancer
BR112017006664A2 (pt) 2014-10-03 2017-12-26 Novartis Ag terapias de combinação
MA41044A (fr) 2014-10-08 2017-08-15 Novartis Ag Compositions et procédés d'utilisation pour une réponse immunitaire accrue et traitement contre le cancer
US9988452B2 (en) 2014-10-14 2018-06-05 Novartis Ag Antibody molecules to PD-L1 and uses thereof
JP6692826B2 (ja) 2015-03-10 2020-05-13 アドゥロ バイオテック，インク． 「インターフェロン遺伝子刺激因子」依存性シグナル伝達の活性化のための組成物及び方法
US9540347B2 (en) 2015-05-29 2017-01-10 Incyte Corporation Pyridineamine compounds useful as Pim kinase inhibitors
EP3878465A1 (en) 2015-07-29 2021-09-15 Novartis AG Combination therapies comprising antibody molecules to tim-3
PL3317301T3 (pl) 2015-07-29 2021-11-15 Novartis Ag Terapie skojarzone zawierające cząsteczki przeciwciał przeciw lag-3
AR105967A1 (es) 2015-09-09 2017-11-29 Incyte Corp Sales de un inhibidor de pim quinasa
CN105254624B (zh) * 2015-09-18 2019-08-09 上海吉铠医药科技有限公司 异噻唑衍生物pim激酶抑制剂及其制备方法与在制药中的应用
CN105130959B (zh) * 2015-09-18 2018-08-03 上海吉铠医药科技有限公司 嘧啶衍生物pim激酶抑制剂及其制备方法与在制药中的应用
WO2017059251A1 (en) 2015-10-02 2017-04-06 Incyte Corporation Heterocyclic compounds useful as pim kinase inhibitors
RS63125B1 (sr) 2015-11-03 2022-05-31 Janssen Biotech Inc Antitela koja se specifično vezuju za pd-1 i njihova upotreba
AU2016369537B2 (en) 2015-12-17 2024-03-14 Novartis Ag Antibody molecules to PD-1 and uses thereof
CN107522695B (zh) * 2016-06-21 2018-09-14 上海方予健康医药科技有限公司 一种pim激酶抑制剂的盐酸盐及其制备方法和用途
CN107522696B (zh) * 2016-06-21 2019-02-19 上海方予健康医药科技有限公司 一种嘧啶类化合物的盐酸盐及其制备方法和用途
CN107519175A (zh) * 2016-06-21 2017-12-29 上海方予健康医药科技有限公司 一种嘧啶化合物或其盐在制备用于预防和/或治疗与flt3相关的疾病或障碍的药物中的应用
WO2018009466A1 (en) 2016-07-05 2018-01-11 Aduro Biotech, Inc. Locked nucleic acid cyclic dinucleotide compounds and uses thereof
UY37695A (es) 2017-04-28 2018-11-30 Novartis Ag Compuesto dinucleótido cíclico bis 2’-5’-rr-(3’f-a)(3’f-a) y usos del mismo
WO2018237173A1 (en) 2017-06-22 2018-12-27 Novartis Ag ANTIBODY MOLECULES DIRECTED AGAINST CD73 AND CORRESPONDING USES
SG11201911936YA (en) * 2017-06-30 2020-01-30 Bristol Myers Squibb Co Substituted quinolinycyclohexylpropanamide compounds and improved methods for their preparation
WO2019113487A1 (en) 2017-12-08 2019-06-13 Incyte Corporation Low dose combination therapy for treatment of myeloproliferative neoplasms
CR20200379A (es) 2018-01-30 2021-03-05 Incyte Corp Procesos e intermedio para elaborar un inhibidor de jak campo técnico
PT3762368T (pt) 2018-03-08 2022-05-06 Incyte Corp Compostos de aminopirazina diol como inibidores de pi3k-y
CA3095487A1 (en) 2018-03-30 2019-10-03 Incyte Corporation Treatment of hidradenitis suppurativa using jak inhibitors
CA3095580A1 (en) 2018-04-13 2019-10-17 Sumitomo Dainippon Pharma Oncology, Inc. Pim kinase inhibitors for treatment of myeloproliferative neoplasms and fibrosis associated with cancer
TW202015726A (zh) 2018-05-30 2020-05-01 瑞士商諾華公司 Ｅｎｔｐｄ２抗體、組合療法、及使用該等抗體和組合療法之方法
WO2020010003A1 (en) 2018-07-02 2020-01-09 Incyte Corporation AMINOPYRAZINE DERIVATIVES AS PI3K-γ INHIBITORS
CA3127502A1 (en) 2019-02-12 2020-08-20 Sumitomo Dainippon Pharma Oncology, Inc. Formulations comprising heterocyclic protein kinase inhibitors
CN110078706B (zh) * 2019-05-31 2022-02-01 浙江师范大学 一种伊马替尼衍生物及其制备方法和用途
CN110452164B (zh) * 2019-09-10 2022-07-22 上海皓鸿生物医药科技有限公司 Pim447关键中间体的制备方法
US20220348651A1 (en) 2019-09-18 2022-11-03 Novartis Ag Entpd2 antibodies, combination therapies, and methods of using the antibodies and combination therapies
EP4054583A4 (en) * 2019-11-07 2023-10-25 Crinetics Pharmaceuticals, Inc. MELANOCORTIN SUBTYPE 2 RECEPTOR (MC2R) ANTAGONISTS AND THEIR USES
US11833155B2 (en) 2020-06-03 2023-12-05 Incyte Corporation Combination therapy for treatment of myeloproliferative neoplasms
CN112915086B (zh) * 2021-01-27 2022-04-12 广州市力鑫药业有限公司 一种含有Akt靶向激酶抑制剂的药物组合物

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2001055115A1 (en) * 2000-01-27 2001-08-02 Cytovia, Inc. Substituted nicotinamides and analogs as activators of caspases and inducers of apoptosis and the use thereof
WO2008054749A1 (en) * 2006-10-31 2008-05-08 Schering Corporation 2-aminothiazole-4-carboxylic amides as protein kinase inhibitors
WO2008054702A1 (en) * 2006-10-31 2008-05-08 Schering Corporation Anilinopiperazine derivatives and methods of use thereof
WO2008106692A1 (en) * 2007-03-01 2008-09-04 Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. Pim kinase inhibitors and methods of their use
WO2009014637A2 (en) * 2007-07-19 2009-01-29 Schering Corporation Heterocyclic amide compounds as protein kinase inhibitors

Family Cites Families (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2398478A1 (en) 2000-01-26 2001-08-02 Kunio Atsumi Novel quaternary salt-type carbapenem derivatives
US8618085B2 (en) 2000-04-28 2013-12-31 Koasn Biosciences Incorporated Therapeutic formulations of desoxyepothilones
MXPA03008560A (es) 2001-03-22 2004-06-30 Abbot Gmbh & Co Kg Pirazolopirimidinas como agentes terapeuticos.
KR100557093B1 (ko) 2003-10-07 2006-03-03 한미약품 주식회사 다약제 내성 저해 활성을 갖는 테트라졸 유도체 및 그의제조방법
PE20050444A1 (es) 2003-10-31 2005-08-09 Takeda Pharmaceutical Compuestos de piridina como inhibidores de la peptidasa
US7592340B2 (en) 2003-12-04 2009-09-22 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Quinoxalines useful as inhibitors of protein kinases
US7459562B2 (en) 2004-04-23 2008-12-02 Bristol-Myers Squibb Company Monocyclic heterocycles as kinase inhibitors
US20060004197A1 (en) 2004-07-02 2006-01-05 Thomas Thrash Sulfonamide-based compounds as protein tyrosine kinase inhibitors
CR9465A (es) 2005-03-25 2008-06-19 Surface Logix Inc Compuestos mejorados farmacocineticamente
EP1909910A1 (en) 2005-08-04 2008-04-16 Sirtris Pharmaceuticals, Inc. Benzimidazole derivatives as sirtuin modulators
WO2007044724A2 (en) 2005-10-06 2007-04-19 Exelixis, Inc. Aminopyrimidine, aminopyridine and aniline derivatives inhibitors of pim-i and/or pim-3
GB0520657D0 (en) * 2005-10-11 2005-11-16 Ludwig Inst Cancer Res Pharmaceutical compounds
HRPK20050957B3 (en) * 2005-11-11 2008-09-30 Džanko Nikša Collapsible hanger
NZ583790A (en) 2007-09-10 2012-04-27 Cipla Ltd Process for the preparation the raf kinase inhibitor sorafenib and intermediates for use in the process
PE20091577A1 (es) * 2008-03-03 2009-11-05 Novartis Ag Inhibidores de cinasa pim y metodos para su uso
EP2344474B1 (en) 2008-09-02 2015-09-23 Novartis AG Picolinamide derivatives as kinase inhibitors
WO2011016234A1 (en) 2009-08-04 2011-02-10 Raqualia Pharma Inc. Picolinamide derivatives as ttx-s blockers
US8859546B2 (en) 2011-01-21 2014-10-14 Abbvie Inc. Picolinamide inhibitors of kinases

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2001055115A1 (en) * 2000-01-27 2001-08-02 Cytovia, Inc. Substituted nicotinamides and analogs as activators of caspases and inducers of apoptosis and the use thereof
WO2008054749A1 (en) * 2006-10-31 2008-05-08 Schering Corporation 2-aminothiazole-4-carboxylic amides as protein kinase inhibitors
WO2008054702A1 (en) * 2006-10-31 2008-05-08 Schering Corporation Anilinopiperazine derivatives and methods of use thereof
WO2008106692A1 (en) * 2007-03-01 2008-09-04 Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. Pim kinase inhibitors and methods of their use
WO2009014637A2 (en) * 2007-07-19 2009-01-29 Schering Corporation Heterocyclic amide compounds as protein kinase inhibitors

Also Published As

Publication number Publication date
MX2011002365A (es) 2011-04-04
PL2344474T3 (pl) 2016-03-31
AU2009289319A1 (en) 2010-03-11
HK1156627A1 (en) 2012-06-15
US8329732B2 (en) 2012-12-11
NZ591449A (en) 2012-12-21
JP2013231049A (ja) 2013-11-14
CN104311480A (zh) 2015-01-28
HN2011000629A (es) 2015-08-10
CN103333157A (zh) 2013-10-02
EP2344474B1 (en) 2015-09-23
JP5813701B2 (ja) 2015-11-17
US20140079693A1 (en) 2014-03-20
DK2344474T3 (en) 2015-12-14
BRPI0918268B1 (pt) 2021-08-03
CN102203079B (zh) 2014-12-10
ECSP11010859A (es) 2011-04-29
IL211291A0 (en) 2011-04-28
CR20110114A (es) 2011-05-10
CA2734415C (en) 2016-07-26
US20100056576A1 (en) 2010-03-04
TWI434843B (zh) 2014-04-21
PT2344474E (pt) 2015-12-28
ES2551900T3 (es) 2015-11-24
IL211291A (en) 2014-05-28
BRPI0918268A2 (pt) 2020-11-17
HUE026381T2 (en) 2016-06-28
UY32085A (es) 2010-03-26
ZA201101118B (en) 2011-09-28
MY150136A (en) 2013-11-29
EP2344474A1 (en) 2011-07-20
JP5412519B2 (ja) 2014-02-12
SV2011003849A (es) 2011-07-07
AU2009289319B2 (en) 2011-10-27
TW201028393A (en) 2010-08-01
US9079889B2 (en) 2015-07-14
AU2009289319C1 (en) 2013-12-05
GEP20135849B (en) 2013-06-10
EA201100425A1 (ru) 2011-10-31
SMT201600005B (it) 2016-02-25
KR101345920B1 (ko) 2014-02-06
DOP2011000067A (es) 2017-01-15
NI201100052A (es) 2011-09-03
CA2734415A1 (en) 2010-03-11
CL2011000454A1 (es) 2011-09-30
KR20110048585A (ko) 2011-05-11
ME01291A (me) 2013-06-20
CO6351725A2 (es) 2011-12-20
HK1162022A1 (en) 2012-08-17
MA32684B1 (fr) 2011-10-02
PE20110298A1 (es) 2011-05-21
HRP20151410T1 (hr) 2016-01-15
CN102203079A (zh) 2011-09-28
RS54506B1 (en) 2016-06-30
SI2344474T1 (sl) 2015-12-31
WO2010026124A1 (en) 2010-03-11
US20150315150A1 (en) 2015-11-05
JP2012501314A (ja) 2012-01-19
US20120134987A1 (en) 2012-05-31
US8592455B2 (en) 2013-11-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA020136B1 (ru) Производные пиколинамида в качестве ингибиторов киназы
JP5564045B2 (ja) 二環式キナーゼ阻害剤
EP2861585B1 (en) Novel ring-substituted n-pyridinyl amides as kinase inhibitors
EA028869B1 (ru) Модуляторы рецептора андрогенов и их применение
WO2014033631A1 (en) N-(3-pyridyl) biarylamides as kinase inhibitors
JP2014506915A (ja) キナーゼ阻害剤としての四置換シクロヘキシル化合物
JP2014506917A (ja) 新規キナーゼ阻害剤
WO2014033630A1 (en) Novel aminothiazole carboxamides as kinase inhibitors
KR20150095928A (ko) 아릴-치환된 융합된 비시클릭 피리다진 화합물
CN114828959B (zh) 3-(5-甲氧基-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮衍生物及其用途
AU2011265439B2 (en) Picolinamide derivatives as kinase inhibitors

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ MD

MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): TJ TM

TK4A Corrections in published eurasian patents
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): KG

MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): BY KZ