EA020128B1 - Ингибиторы диацилглицеролацилтрансферазы и фармацевтическая композиция, включающая их - Google Patents

Abstract

Изобретение относится к соединению формулы (I)или ее фармацевтически приемлемой соли, где Rвыбран из группы, состоящей из Н, F, Cl, -CF, -CH, -ОН, -O(C-Cалкила) , -О-циклопропила, -O-СН-фенила, -OC(H)Fи -OCF, Rвыбран из группы, состоящей из Н и -СН, Rвыбран из группы, состоящей из Н и -СН, при условии что по меньшей мере один из группы, состоящей из Rи R, представляет собой Н, и n равен 1, 2 или 3, в качестве ингибиторов диацилглицеролацилтрансферазы 1 (DGAT-1). Также настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей данное соединение, и к применению соединения в качестве лекарственного средства для лечения диабета и/или ожирения.

Description

Соединения согласно настоящему изобретению являются высокоактивными ингибиторами ΌΟΑΤ1. Согласно настоящему изобретению предложен желаемый новый способ лечения, действующий через фармакологический механизм, являющийся уникальным по сравнению с коммерчески доступными способами лечения. Кроме того, некоторые соединения согласно настоящему изобретению селективно ингибируют ΌΟΑΤ-1 по сравнению с ΌΟΑΤ-2. Фармакологический профиль соединений согласно настоящему изобретению в качестве селективных ингибиторов ΌΟΑΤ-1 может являться особенно желательным для применения для лечения ожирения и/или улучшения чувствительности к инсулину.

Согласно настоящему изобретению предложены соединения формулы I

к² (I) или их фармацевтически приемлемая соль;

где К¹ выбран из группы, состоящей из Н, Т, С1, -СТ₃, -СН₃, -ОН, -О(С₁-С₄ алкила), -Оциклопропила, -О-СН₂-фенила, -ОС(Н)Т₂ и -ОСТ₃;

К² выбран из группы, состоящей из Н и -СН₃;

К³ выбран из группы, состоящей из Н и -СН₃; при условии что по меньшей мере один из группы, состоящей из К² и К³, представляет собой Н; и η равен 1, 2 или 3.

Предпочтительно согласно настоящему изобретению предложены соединения формулы I, где К¹ выбран из группы, состоящей из Н, Т, С1, -СТ₃, -СН₃, -ОН, -ОСН₃, -ОСН₂СН₃, -ОСН₂СН₂СН₃, -ОСН₂СН(СН₃)₂, -О-циклопропила, -О-СН₂-фенила, -ОС(Н)Т₂ и -ОСТ_3; η равен 1 или 3; и каждый из К² и К³ представляет собой Н.

Предпочтительно согласно настоящему изобретению предложены соединения формулы I или их фармацевтически приемлемые соли;

где К¹ выбран из группы, состоящей из Н, Т, С1, -СТ₃, -СН₃, -ОН, -ОСН₃, -ОСН₂СН₃, -ОСН₂СН₂СН₃, -ОСН₂СН(СН₃)₂, -О-циклопропила, -О-СН₂-фенила, -ОС(Н)Т₂ и -ОСТ₃; и η равен 1.

Предпочтительно согласно настоящему изобретению предложены соединения формулы I или их фармацевтически приемлемые соли;

где К¹ выбран из группы, состоящей из Н, Т, С1, -СТ₃, -СН₃, -ОН, -О(С₁-С₄ алкила), -Оциклопропила, -О-СН2-фенила, -ОС(Н)Т2 и -ОСТ3; и η равен 3.

Предпочтительно согласно настоящему изобретению предложено соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль;

где К¹ выбран из группы, состоящей из Н, Т, С1, -СТ₃, -СН₃, -ОН, -О(С₁-С₄ алкила), -Оциклопропила, -О-СН2-фенила, -ОС(Н)Т2 и -ОСТ3; η равен 3; и К³ представляет собой Н.

Предпочтительно согласно настоящему изобретению предложено соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль,

- 1 020128 где К¹ выбран из группы, состоящей из Н, Г, С1, -СГ₃, -СН₃, -ОН, -О(С1-С₄ алкила), -Оциклопропила, -О-СН₂-фенила, -ОС(Н)Г₂ и -ОСГ₃; η равен 1; и К³ представляет собой Н.

Следующее может являться предпочтительным:

соединения формулы I или их соли, где К³ представляет собой Н, являются предпочтительными; соединения формулы I или их соли, где η равен 1 или 3, являются предпочтительными; соединения формулы I или их соли, где η равен 1, являются предпочтительными;

соединения формулы I или их соли, где К² представляет собой Н, и К³ представляет собой Н, также являются предпочтительными.

Соединения формулы I или их соли, где соединение представляет собой К-изомер, являются предпочтительными.

Соединения формулы I или их соли, где К¹ выбран из группы, состоящей из Г, С1, -СГ₃, -СН₃, -ОН,

-ОСН₃, -ОСН₂СН₃, -ОСН₂СН₂СН₃, -ОСН₂СН(СН₃)₂, -О-циклопропила, -О-СН₂-фенила, -ОС(Н)Г₂ и -ОСГ₃, являются предпочтительными.

Соединения формулы I или их соли, где К¹ выбран из группы, состоящей из Г, С1 и -О(С₁-С₄ алкила), являются предпочтительными.

Соединения формулы I или их соли, где К¹ выбран из группы, состоящей из С1 и -О(С₁-С₄ алкила), являются предпочтительными.

Соединения формулы I или их соли, где К¹ представляет собой -ОСН₂СН₃, являются предпочтительными.

Соединения формулы I или их соли, где К¹ представляет собой С1, являются предпочтительными.

Соединения формулы I или их соли, где К² представляет собой СН₃, и К³ представляет собой Н, также являются предпочтительными.

Соединения, где η равен 3, являются предпочтительными.

Согласно предпочтительному варианту реализации изобретения предложено соединение формулы или его фармацевтически приемлемая соль.

Согласно предпочтительному варианту реализации изобретения предложено соединение формулы

С1· или его фармацевтически приемлемая соль.

Соединения формулы I могут находиться в форме рацемической смеси. Предпочтительный изомер представляет собой К-стереоформу, представленную далее в настоящей заявке формулой II.

Предпочтительно согласно настоящему изобретению предложены соединения формулы I, имеющие следующую изомерную конформацию, представленную формулой II

или их фармацевтически приемлемые соли.

Соединения формулы I можно синтезировать и затем разделить К- и 8- изомеры с помощью хиральной хроматографии. Соединения формулы I могут быть синтезированы с помощью хирального синтеза для специфичного синтеза предпочтительного К-изомера.

Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложено применение соединения, заявленного согласно настоящему изобретению, или его фармацевтически приемлемых солей для получения лекарственного средства для лечения диабета и/или ожирения. Согласно другому варианту реализации изобретения предложено соединение, заявленное согласно настоящему изобретению, или его соли для применения для лечения ожирения. Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложено соединение, заявленное в настоящей заявке, или его фармацевтически приемлемые соли для применения в терапии. Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложено соединение, заявленное согласно настоящему изобретению, или его фармацевтически приемлемые соли, для применения для лечения диабета. Кроме того, изобретение относится к соединению, заявленному согласно настоящему изобретению, для применения для улучшения чувствительности к инсулину у млекопитающего.

Согласно настоящему изобретению предложен способ лечения ожирения у млекопитающего, включающий этап введения указанному млекопитающему соединения, заявленного согласно настоящему изобретению, или его фармацевтически приемлемых солей. Согласно настоящему изобретению предложен

- 2 020128 способ лечения диабета и/или улучшения чувствительности к инсулину у млекопитающего, включающий этап введения указанному млекопитающему соединения, заявленного согласно настоящему изобретению, или его фармацевтически приемлемых солей. Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложен способ лечения дислипидермии у млекопитающего, включающий этап введения указанному млекопитающему соединения, заявленного согласно настоящему изобретению, или его фармацевтически приемлемых солей. Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложен способ лечения акне у млекопитающего, включающий этап введения указанному млекопитающему соединения, заявленного согласно настоящему изобретению, или его фармацевтически приемлемых солей. Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения, предложен способ лечения вирусного гепатита С (ВГС, НСУ), включающий этап введения указанному млекопитающему соединения, заявленного согласно настоящему изобретению, или его фармацевтически приемлемых солей.

Согласно другому варианту реализации настоящее изобретение также относится к фармацевтическим композициям, содержащим соединение согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемые соли и фармацевтически приемлемый носитель. Согласно другому варианту реализации предложена фармацевтическая композиция согласно настоящему изобретению, дополнительно содержащая второй фармацевтический агент.

Согласно другому варианту реализации настоящее изобретение относится к лекарственным формам, содержащим соединение, заявленное согласно настоящему изобретению, или его фармацевтически приемлемые соли, фармацевтически приемлемый носитель и гидроксипропилметилцеллюлозу. Согласно другому варианту реализации изобретения предложена фармацевтическая лекарственная форма, где гидроксипропилметилцеллюлоза представоляет собой ацетат сукцинат гидроксипропилметилцеллюлозы (НРМС-А8-Ь). Согласно другому варианту реализации изобретения предложен способ получения лекарственной формы, включающий приведение соединения, заявленного согласно настоящему изобретению, или его фармацевтически приемлемых солей, в контакт с гидроксипропилметилцеллюлозой. Согласно другому варианту реализации изобретения предложен способ получения фармацевтической лекарственной формы, где гидроксиметилцеллюлоза представляет собой ацетат сукцинат гидроксипропилметилцеллюлозы (НРМС-А8-Ь).

Термин фармацевтически приемлемая соль относится к солям соединений согласно настоящему изобретению, которые считаются приемлемыми для клинического применения и/или применения в области ветеринарии. Указанные соли могут быть получены с помощью способов, известных специалистам в данной области техники. Фармацевтически приемлемые соли и общий метод их получения хорошо известны в данной области техники. См., например, Р. 81аЫ, е! а1. , ΗΑΝΏΒΟΟΚ ОЕ РНАКМАСЕиТ1САЬ 8АЬТ8: РВОРЕКТ1Е8, 8Е1.ЕСТ1ОХ ΑΝΌ И8Е, (УСНА/№йеу-УСН, 2002); 8.М. Ветде, е! а1., Рйаттасеибса1 8а115. 1оигиа1 οί Рйаттасеибса1 Зшеисещ Уо1. 66, Νο. 1, Баииату 1977. Соединения согласно настоящему изобретению предпочтительно получают в виде фармацевтических композиций, вводимых различными способами. Термин фармацевтически приемлемый носитель означает, что указанный носитель, разбавитель, наполнители и соль является фармацевтически совместимой с другими ингредиентами композиции. Наиболее предпочтительно указанные композиции представляют собой композиции для перорального введения. Фармацевтически приемлемые композиции и способы их получения хорошо известны в данной области техники. См., например, КЕМкЫОТОК ТНЕ 8СIΕNСΕ ΑΝΏ РКАСТ1СЕ ОЕ РНАКМАСУ (А. Оеииато, е! а1. , еб§. , 19 111 еб., Маск РиЫкйшд Со., 1995).

Соединения согласно настоящему изобретению могут быть получены с помощью способов, показанных на схемах А, В, С, Ό, Е, Е, О, Н, I и 1, и так, как описано в примерах получения и примерах. Соединения в примерах получения и примерах названы с использованием программы 8утух® Ога\\·, версии 3,1.

Термины и аббревиатуры, используемые в схемах, примерах получения, примерах и способах в настоящей заявке, имеют общепринятые значения, если иное не указано.

Термины и аббревиатуры, используемые в настоящих схемах, примерах получения, примерах и способах, имеют общепринятые значения, если не указано иное. Например, при использовании в настоящей заявке следующие термины имеют указанные значения: Ν,Ν-диметилформамид (ДМФА); метил-трет-бутиловый эфир (МТБЭ); тетрагидрофуран (ТГФ); хроматография в псевдоожиженном слое (8МВ); метанол (МеОН); гидроксид лития (ЬЮН); Юметил-2-пирролидон (ЫМР); йодид меди (Си1); дихлорид [1,3-бис(2,6-диизопропилфенил)имидазол-2-илиден] (3-хлорпиридил) Рб (II): йодид Си(1) (РЕРР81™); Ν,Ν-диметилэтиламин (ДМЭА); и 1,3,5,2,4,6-триоксатрифосфоринан, 2,4,6-трипропил-2,4,6триоксид (Т3Р).

- 3 020128

На схеме выше К¹ предпочтительно выбран из группы, состоящей из Н, Е, С1, -СЕ3, -СН3, -ОН, -О(С1-С4 алкила), -О-циклопропила, -О-СН2-фенила, -ОС(Н)Р2 и -ОСЕ3. Более предпочтительно К¹ представляет собой -О(С1-С₄ алкил) или С1. Наиболее предпочтительно К¹ представляет собой -ОСН₂СН₃ или С1.

Пример получения 1. Этил-1-[(4-этоксибензоил)амино]циклопропанкарбоксилат

К 4-этоксибензойной кислоте (334,5 г, 1,99 моль) и Ν,Ν-диметилформамиду (1 мл) в дихлорметане (3 л) добавляли оксалилхлорид (189 мл, 2,17 моль). Через 1 ч при температуре 25-26°С смесь концентрировали при пониженном давлении до постоянной массы. Гидрохлорид этил-1-аминоциклопропанкарбоксилата (300 г, 1,81 моль) и дихлорметан (2,5 л) перемешивали на ледяной/водяной бане. Добавляли триэтиламин (631 мл, 4,53 моль) и затем добавляли раствор хлорангидрида (примерно 380 г) в дихлорметане (500 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение примерно 16 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь разбавляли 1н. водным раствором соляной кислоты (1 л). Водный слой экстрагировали дихлорметаном (1 л) . Органический слой промывали водой (2 л) и соляным раствором (2 л). Раствор сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Осадок суспендировали в гексанах и фильтровали с получением указанного в заголовке соединения (478 г, 95%) в виде порошка цвета слоновой кости: МС (масс-спектрометрия) (т/ζ): 278 (М+1).

Пример получения 2. 1-[(4-этоксибензоил)амино]циклопропанкарбоновая кислота.

Этил-1-[(4-этоксибензоил)амино]циклопропанкарбоксилат (478 г, 1,72 моль) добавляли к тетрагидрофурану (2 л) и метанолу (1 л). Гидроксид лития (МОН) растворяли (144,7 г, 3,45 моль) в воде (1 л) и добавляли его к полученной смеси. Реакционную смесь перемешивали по мере ее нагревания до 55°С. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали при пониженном давлении. После удаления 2,5 л растворителя смесь разбавляли водой (2 л) и помещали на ледяную/водяную баню. Значение рН доводили до 2 водным 5н. раствором соляной кислоты (750 мл). Осадок фильтровали, отфильтрованный осадок промывали водой (2x2 л) и сушили с получением указанного в заголовке соединения (425 г, 99%) в виде белого порошка: МС (т/ζ): 250 (М+1).

Пример получения 3. Этил-1-[(4-хлорбензоил)амино]циклопропанкарбоксилат

- 4 020128

К диизопропилэтиламину (187,86 мл, 1,08 моль) в дихлорметане (900 мл) добавляли этил-1аминоциклопропанкарбоксилат (89,2 г, 0,54 моль). Колбу помещали на ледяную/водяную баню и медленно добавляли хлорид 4-хлорбензойной кислоты (75,46 мл, 0,59 моль). После завершения добавления баню удаляли, температуре реакционной смеси позволяли установиться при 20°С и перемешивали в течение примерно 2 ч. Промывали 1н. раствором соляной кислоты (НС1) с последующей промывкой насыщенным раствором бикарбоната натрия (ПаНСО₃), водой и затем соляным раствором. Органический слой сушили над сульфатом натрия (Ж₂8О₄), фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Осадок суспендирвоали с гептаном, фильтровали и промывали гептаном с получением указанного в заголовке соединения (142 г, 98%) в виде белого порошка: МС (т/ζ): 268 (М+1).

Пример получения 4. 1-[(4-Хлорбензоил)амино]циклопропанкарбоновая кислота

К этил-1-[(4-хлорбензоил)амино]циклопропанкарбоксилату (157 г, 0,58 моль) в 1,4-диоксане (2,4 л) добавляли раствор гидроксида лития (123,05 г, 2,93 моль) в воде (1,2 л). Перемешивали реакционную смесь при комнатной температуре в течение 4 ч и затем указанную смесь концентрировали при пониженном давлении. Смесь разбавляли водой (1 л) и помещали указанную смесь на ледяную/водяную баню. Значение рН доводили до примерно 2 водным раствором 5н. НС1. Осадок фильтровали, отфильтрованный осадок промывали водой (3x1 л) и сушили (50°С, вакуумная печь) с получением (132 г, 94%) указанного в заголовке соединения в виде белого порошка: МС (т/ζ): 240 (М+1).

Пример получения 5. Бензил-П-[(3К)-2-оксо-1,3,4,5-тетрагидро-1-бензазепин-3-ил]карбамат

Метанол (5000 мл) объединяли с 5н. водным раствором соляной кислоты (1393 мл, 5,57 моль) и нагревали до 35°С в течение 15 мин. Добавляли порциями трет-бутил-Л-[(3К)-2-оксо-1,3,4,5-тетрагидро-1бензазепин-3-ил]карбамат (Агт§1гои§ III, 1о§ерй Ό., е! а1., Тейайебгои Ье1. 35(20) рр. 3239-3242 (1994) (77 0 г, ммоль, коммерчески доступный) в течение 1 ч. Смесь концентрировали при пониженном давлении до получения твердого вещества белого цвета. Указанное твердое вещество объединяли с дополнительной порцией (3К)-3-амино-1,3,4,5-тетрагидро-1-бензазепин-2-она (другая партия, такой же способ; 660 г, 3,78 моль) и растворяли в воде (2,5 л). К полученному раствору добавляли карбонат натрия (3,17 кг, 3,18 моль) и ацетонитрил (7,5 л). Добавляли по каплям бензилхлорформат (7,14 моль, 1,21 кг) в течение 2 ч. Через 2 ч добавляли этилацетат (8 л) при комнатной температуре и фильтровали. Влажный осадок промывали водой (4,0 л), ацетонитрилом (2,0 л) и этилацетатом (3,0 л). Твердое вещество сушили при пониженном давлении в течение 48 ч с получением указанного в заголовке соединения (2,14 кг, 105%): МС (т/ζ): 310,8 (М+1).

Пример получения 6. Бензил-П-(2-тиоксо-1,3,4,5-тетрагидро-1-бензазепин-3-ил)карбамат

К П-[(3К)-2-оксо-1,3,4,5-тетрагидро-1-бензазепин-3-ил]карбамату (2,13 кг, 6,88 моль) в 2-метилтетрагидрофуране (15 л) добавляли пентасульфид фосфора (1,68 кг, 7,57 моль) в течение 30 мин и нагревали до 50°С в течение 24 ч. Охлаждали до 29°С, добавляли силикагель (2,0 кг), фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Растворяли полученный осадок в хлороформе (4,0 л) и очищали с помощью хроматографии (смесь этилацетат/гексаны, 1:1) с получением указанного в заголовке соединения (1,65 кг, 73%) в виде твердого вещества красного цвета: МС (т/ζ): 327 (М+1).

Пример получения 7. Бензил-Л-[2-(2,2-диметоксиэтиламино)-4,5-дигидро-3Н-1-бензазепин-3-ил] карбамат

Бензил-Л-(2-тиоксо-1,3,4,5-тетрагидро-1-бензазепин-3-ил)карбамат (1,78 кг, 5,13 моль) и моногидрат пара-толуолсульфоновой кислоты (48,8 г, 256 ммоль) растворяли в дихлорметане (12 л). Диметилацеталь аминоацетальдегида (2,70 кг, 25 моль) добавляли по каплям в течение 1 ч и перемешивали в течение

- 5 020128 ч при комнатной температуре. Добавляли дополнительную порцию диметилацеталя аминоацетальдегида (1,40 кг, 13 моль) и перемешивали в течение 12 ч при комнатной температуре. Добавляли воду (5,0 л), отделяли органический слой и экстрагировали водным раствором дихлорметана (2,0 л). Органические слои объединяли и промывали водой, насыщенным раствором хлорида аммиака (6,0 л) и соляным раствором (4,0 л). Органическую фазу фильтровали через кизельгур и концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (2,30 кг, 118%) в виде желтого масла: МС (т/ζ): 398 (М+1).

Пример получения 8. Бензил-Ы-[(4В)-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-ил]карбамат

Смесь бензил-Ы-[2-(2,2-диметоксиэтиламино)-4,5-дигидро-ЗН-1-бензазепин-3-ил]карбамата (1,80 кг, 4,1 моль) и муравьиной кислоты (6,4 л) нагревали при 95°С в течение 80 мин. Смесь концентрировали при пониженном давлении с получением черного масла и распределяли указанную смесь между дихлорметаном (7,0 л) и водой (5 л). Добавляли карбонат натрия до достижения значения рН водного слоя, равного 7. Органический слой удаляли и промывали водой (3Х). Водные слои экстрагировали дихлорметаном. Органические слои объединяли и концентрировали при пониженном давлении с получением черного масла. 2,297 кг черного масла разделяли на части примерно по 250 г и каждую часть растворяли в дихлорметане (250 мл). Добавляли к 3,5 кг силикагеля (Мегск 9385, 60 А, 230-400 меш). Желаемое соединение вымывали смесью этилацетат/гептан (75:25), начиная с шести объемов колонки (более быстро элюирующиеся примеси вымываются первыми). Продолжали вымывать смесью метанол/этилацетат (5:95) для удаления оставшегося продукта (1082 г восстановленного продукта). Анализ смеси продукта проводили с использованием следующих условий хиральной ВЭЖХ: колонка СЫга1рак ΑΏ-Η, 4,6x150 мм, подвижная фаза ацетонитрил/3А этанол/диметилэтиламин (15:85:0,2), скорость потока 0,6 мл/мин, УФ-детекция на 250 нм. Наблюдали отношение желаемый/нежелаемый изомер 3:2 в указанных условиях. Смесь изомеров растворяли в концентрации 30 мг/мл в смеси ацетонитрил/3А этанол (20:80). Изомеры очищали с использованием следующих условий препаративной хиральной ВЭЖХ: колонка СЫга1рак ΑΏ (20 мкм), 8x40,5 см, подвижная фаза ацетонитрил/3А этанол/Ы,Ы-диметилэтиламин (ДМЭА) (20:80:0,2), скорость потока 490 мл/мин, УФ-детекция на 250 нм, ввод пробы 1,5 г (50 мл), время цикла/ввод пробы 4,6 мин с использованием технологии 81еабу 81а1е Весус1е (88В) (Ι.Η. Кеппебу, М.И. Веко, У.8. 8йагр, 5.0.Ш||||ат8, Сотрапзоп оГ зерагайоп еГйшепсу оГ еаг1у рйазе ас1ке рйагтасеийса1 1п1егтеб1а1е8 Ьу Пеабу 81а1е гесус1е апб Ьа!сК сйгота1о§гарЫс 1есйтцие8, 1оигпа1 оГ СКготаЮугарКу Α, 1046 р55-60 (2004)). Сбор изомера 1 проводили через 0,4 до 0,9 мин и сбор изомера 2 проводили через 2,4 до 4,2 мин. Желаемый изомер (изомер 2; В-изомер) являлся вторым вымывающимся изомером: бензил-Ы-[(4В)-5,6-дигидро-4Нимидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-ил]карбамат. Фракции, содержащие продукт, концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (615 г, 73%) в виде твердого вещества белого цвета: МС (т/ζ): 334 (М+1).

Пример получения 9. Дигидройодид (4В)-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-амина

2ΗΙ

К дихлорметану (800 мл) добавляли йодтриметилсилан (783 мл, 5,49 моль) и охлаждали на ледяной/водяной бане. Бензил-Ы-[(4В)-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-ил]карбамат (610 г, 1,83 моль) растворяли в дихлорметане (1 л) и добавляли к раствору йодтриметилсилана. После завершения добавления удаляли ледяную/водяную баню и позволяли реакционной смеси перемешиваться в течение примерно 16 ч при комнатной температуре. Смесь гексанов (6 л) и этанола (1 л) перемешивали на ледяной/водяной бане. К перемешиваемой смеси гексан/этанол осторожно добавляли реакционную смесь для избежания пенообразования. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин. Полученное твердое вещество извлекали посредством фильтрования, и отфильтрованный осадок промывали гексанами (3x2 л) с получением указанного в заголовке соединения (817,1 г, 98 %) в виде легкосыпучего твердого вещества оранжевого цвета: МС (т/ζ): 200 (М+1).

Пример получения 10. (4В)-5,6-Дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-амин

Бензил-Ы-[(4В)-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-ил]карбамат (120,0 г, 359,9 ммоль) объединяли с этанолом (2,0 л) в гидрогенизаторе ВисЫ и добавляли 10% палладий на углеродном носителе (Рб/С) (10,0 г, 9,4 ммоль), суспендированный в толуоле (200 мл). Смесь гидрогенизировали (60 фунтов/кв. дюйм, комнатная температура) в течение примерно 64 ч. Указанную смесь фильтровали через

- 6 020128 кизельгур и отфильтрованный осадок промывали ТГФ (300 мл). Фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (60 г, 84%) в виде белой пены: МС (т/ζ): 200 (М+1).

Пример 1. Ν-[1-[ [(4К)-5,6-Дигидро-4Н-имидазо [1,2-а][1] бензазепин-4-ил] карбамоил] циклопропила] -4-этоксибензамид

Дигидройодид (4К)-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-амина (650 г, 1,43 моль), 1-[(4этоксибензоил)амино]циклопропанкарбоновую кислоту (427 г, 1,71 моль) и гидрат 1-гидроксибензотриазола (262,5 г, 1,71 моль) добавляли к дихлорметану (3 л). Смесь перемешивали на ледяной/водяной бане и медленно добавляли диизопропилэтиламин (797 мл, 4,57 моль). Добавляли гидро хлорид 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида (333,6 г, 1,71 моль) в течение 10 мин. Ледяную/водяную баню удаляли и позволяли смеси перемешиваться в течение примерно 16 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь промывали водой (3x4 л). Органическую фазу сушили над сульфатом натрия. Смесь фильтровали и концентрировали при пониженном давлении до получения объема примерно 1 л. Осадок разбавляли этилацетатом (4 л). 2 л растворителя удаляли при пониженном давлении. Смеси позволяли отстаиваться 1 час при комнатной температуре. Полученный осадок отделяли посредством фильтрования и отфильтрованный осадок промывали гексанами (2x2 л) с получением указанного в заголовке соединения (569,9 г, 93%) в виде твердого вещества бледно-рыжеватого цвета: МС (т/ζ): 431 (М+1).

Н¹ ЯМР (399,81 МГц, ДМСО): 8,91 (с, 1Н), 7,95-7,93 (д, 1=7,5 Гц, 1Н), 7,87-7,83 (д, 1=8,7 Гц, 2Н), 7,49 (д, 1=1,4 Гц, 1Н), 7,44-7,43 (д, 1=7,6 Гц, 1Н), 7,38 (м, 2Н), 7,34-7,29 (м, 1Н), 7,00-6,96 (д, 1=8,7 Гц, 2Н), 6,95 (д, 1=1,3 Гц, 1Н), 4,65-4,60 (м, 1Н), 4,08 (кв., 1=7,0 Гц, 2Н), 2,70-2,65 (м, 1Н), 2,59-2,56 (м, 1Н), 2,33-2,28 (м, 1Н), 2,04-2,00 (м, 1Н), 1,34-1,31 (м, 4Н), 1,27-1,25 (м, 1Н), 1,03-0,98 (м, 1Н), 0,96-0,90 (м, 1Н).

Пример 2. 4-Хлор-И- [1-[ [(4К)-5,6-дигидро-4Н-имидазо [1,2-а][1] бензазепин-4-ил] карбамоил] циклопропила]бензамид

К суспензии (4К)-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-амина (30 г, 151 ммоль), 1-гидроксибензотриазола (20 г, 151 ммоль), триэтиламина (41,97 мл, 301 ммоль) и 1-[(4-хлорбензоил)амино] циклопропанкарбоновой кислоты (40 г, 166 ммоль) в ТГФ (300 мл) при температуре 10°С добавляли гидрохлорид 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида (29 г, 151 ммоль). Ледяную баню удаляли, смесь нагревали до комнатной температуры и указанную смесь перемешивали в течение 4 ч. Смесь выливали в воду (1,0 л) и экстрагировали этилацетатом (1,0 л). Органическую фазу промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия (500 мл), сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Осадок суспендировали в этилацетате (300 мл) и нагревали до 71°С. Охлаждали до комнатной температуры, осадок фильтровали и промывали этилацетатом (100 мл) с получением указанного в заголовке соединения (38,8 г, 61%): МС (т/ζ): 421 (М+1).

Способ хирального синтеза на схеме В приводил к получению К-изомера.

- 7 020128

Пример получения 11. Гидрохлорид (3К)-3-амино-1,3,4,5-тетрагидро-1-бензазепин-2-она

Трет-бутил-П-[(3К)-2-оксо-1,3,4,5-тетрагидро-1-бензазепин-3-ил]карбамат, (полученный, по существу, согласно способу, описанному в источнике Агт§1гопд III, 1о§ерй Ό., е! а1, Те1гайебгоп Ье1. 35(20) рр. 3239-3242 (1994), 15 г, 54,28 ммоль) суспендировали в 1,4-диоксане (100 мл, 1,17 моль) и охлаждали на ледяной бане. Быстро добавляли НС1 в диоксане (100 мл, 4,0 М) и после завершения добавления баню удаляли. Через 3 ч добавляли дополнительную порцию НС1 в диоксане (100 мл, 4,0 М). Реакционную смесь перемешивали в течение примерно 16 ч. Твердое вещество собирали посредством фильтрования, промывали малым объемом эфира и сушили указанное твердое вещество в печи с получением указанного в заголовке соединения (11,2 г, 99%) в виде твердого вещества белого цвета: МС (т/ζ): 177 (М+1).

Пример получения 12. Бензил-Л-[(3К)-2-оксо-1,3,4,5-тетрагидро-1-бензазепин-3-ил]карбамат

Карбонат калия (К₂СО₃) (19,50 г, 141,06 ммоль) растворяли в воде (36 мл) и добавляли к раствору НС1 соли 1-амино-1,3,4,5-тетрагидро-2Н-бензазепин-2-она (6 г, 28,21 ммоль) в дихлорметане (СН₂С1₂) (270 мл). Добавляли бензилхлорформат (6,24 мл, 42,32 ммоль) и реакционную смесь интенсивно перемешивали при комнатной температуре в течение примерно 16 ч. Осадок собирали посредством фильтрования, промывали водой и эфиром и сушили указанный осадок в вакуумной печи с получением указанного в заголовке соединения (7,2 г, 82%) в виде твердого вещества белого цвета: МС (т/ζ): 311 (М+1).

Пример получения 13. Бензил-Л-[(3К.)-2-тиоксо-1,3,4,5-тетрагидро-1-бензазепин-3-ил]карбамат

К раствору бензил-П-[(3К)-2-оксо-1,3,4,5-тетрагидро-1-бензазепин-3-ил]карбамата (9,4 г, 30,29 ммоль) в тетрагидрофуране (470 мл) добавляли реагент Лавессона (12,25 г, 30,29 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в атмосфере азота в течение примерно 16 ч при комнатной температуре. Осадок удаляли посредством фильтрования и сбрасывали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный осадок растворяли в этилацетате. Промывали водой и соляным раствором, сушили над сульфатом натрия и органический слой концентрировали при пониженном давлении с получением вязкого желтого масла. К указанному вязкому маслу добавляли эфир и соскребали его с образованием твердого вещества. Твердое вещество собирали посредством фильтрования и промывали эфиром. Указанное твердое вещество растирали с эфиром и собирали посредством фильтрования с получением указанного в заголовке соединения (7,28 г, 74%) в виде твердого вещества белого цвета: МС (т/ζ): 349 (М+23).

Пример получения 14. Бензил-Л-[(3К)-2-(2,2-диметоксиэтиламино)-4,5-дигидро-3Н-1-бензазепин-3ил]карбамат

Бензил-П-[(3К)-2-тиоксо-1,3,4,5-тетрагидро-1-бензазепин-3-ил]карбамат (8,71 г, 26,68 ммоль), дихлорид ртути (НдС1₂) (9,42 г, 34,69 ммоль) и диметилацеталь аминоацетальдегида (11,65 мл, 106,73 ммоль) объединяли в тетрагидрофуране (250 мл) и нагревали до 55°С в течение 20 мин. Смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали указанную смесь через кизельгур. Отфильтрованный осадок промывали ТГФ и этилацетатом и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученное масло растворяли в дихлорметане, промывали теплой водой (4х) и соляным раствором, сушили над сульфатом натрия и органический слой концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (9,78 г, 92%) в виде твердого вещества: МС (т/ζ): 398 (М+1).

Пример получения 15. Бензил-П-[(4К)-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а] [1]бензазепин-4-ил]карбамат

Бензил-Л-[(3К)-2-(2,2-диметоксиэтиламино)-4,5-дигидро-3Н-1-бензазепин-3-ил]карбамат (9,78 г, 24,61 ммоль) растворяли в муравьиной кислоте (60 мл, 96%) и нагревали при 100°С в течение 1,5 ч. Смеси позволяли охлаждаться и черный осадок удаляли посредством фильтрования через пробку из стекло

- 8 020128 ваты. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, выливали указанный фильтрат в воду и подщелачивали 1М №О11. К полученному осадку добавляли этилацетат и органический слой отделяли. Водный слой экстрагировали этилацетатом. Органические слои объединяли, промывали (соляным раствором), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (6,95 г, 85%): МС (т/ζ): 334 (М+1), энантиомерный избыток 97,8%, время удерживания для изомера 1 (К-изомера) - 4,58 мин; для изомера 2 (8-изомера) - 3,20 мин (колонка СЫга1рак ΆΌ-Н; 100% Е1ОН с 0,2% диметилэтиламином; скорость потока 1,0 мл/мин; 225 нм).

Пример получения 16. (4К)-5,6-Дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-амин

Бензил-^[(4К)-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-ил]карбамат (6,95 г, 20,85 ммоль) растворяли в абсолютном этаноле (375 мл, 6,44 моль) и добавляли 10% палладий на углеродном носителе (Ρά/С) (0,70 г, 6,57 ммоль). Смесь помещали на шейкер Рагг в атмосфере водорода (Н₂) на 7 ч (60 фунтов/кв. дюйм, комнатная температура). Катализатор удаляли посредством фильтрования и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (4,17 г, 100%) в виде твердого вещества желтого цвета: МС (т/ζ): 200 (М+1).

Способ синтеза на схеме С приводит к получению рацемической смеси.

Пример получения 17. Бензил-№(2-тиоксо-1,3,4,5-тетрагидро-1-бензазепин-3-ил)карбамат

К раствору бензил-^[(3К)-2-оксо-1,3,4,5-тетрагидро-1-бензазепин-3-ил]карбамата (10,0 г, 32,22 ммоль) в толуоле (120 мл) добавляли реагент Лавессона (6,52 г, 16,11 ммоль) и реакционную смесь нагревали в атмосфере азота при 100°С в течение 2,5 ч. Реакционной смеси позволяли охлаждаться и осадок собирали посредством фильтрования. Отфильтрованный осадок промывали (эфиром) и сушили в вакуумной печи с получением указанного в заголовке соединения (5,5 г, 16,8 ммоль). Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и очищали с помощью флэш-хроматографии (от 30% гексан/СН₂С1₂ до 100% СН₂С1₂) с получением указанного в заголовке соединения (3,48 г, 10,7 ммоль). Соединение являлось частично рацемизированным. Общий выход указанного в заголовке соединения составлял 85%: МС (т/ζ): 327 (М+1).

Пример получения 18. Бензил-№[2-(2,2-диметоксиэтиламино)-4,5-дигидро-3Н-1-бензазепин-3ил]карбамат

Использовали способ согласно примеру получения 14, где в качестве исходного вещества использовали бензил-№(2-тиоксо-1,3,4,5-тетрагидро-1-бензазепин-3-ил)карбамат (4,2 г, 12,87 ммоль), с получением указанного в заголовке соединения (4,68 г, 92%) в виде твердого вещества рыжеватого цвета: МС

- 9 020128 (т/ζ) : 398 (М+1).

Пример получения 19. Бензил-Л-(5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-ил)карбамат

Использовали способ примера получения 15, где в качестве исходного вещества использовали бензил-Л-[2-(2,2-диметоксиэтиламино)-4,5-дигидро-3Н-1-бензазепин-3-ил]карбамат (4,6 г, 11,57 ммоль), с получением указанного в заголовке соединения (3,8 г, 88%): МС (т/ζ): 334 (М+1).

Пример получения 20. 5,6-Дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-амин

Использовали способ примера получения 16, где в качестве исходного вещества использовали бензил-Л-(5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-ил)карбамат (3,36 г, 10,08 ммоль), с получением указанного в заголовке соединения (2,2 г, 100%) в виде желтого масла: МС (т/ζ): 200 (М+1).

Пример получения 21. Бензил-Л-[(3К)-1-ацетонил-2-оксо-4,5-дигидро-ЗН-1-бензазепин-3-ил]карбамат

К раствору бензил-Л-[(3К)-2-оксо-1,3,4,5-тетрагидро-1-бензазепин-3-ил]карбамата (2,0 г, 6,44 ммоль), хлорацетона (1,19 г, 12,89 ммоль) и фторида тетрабутиламмония (1,29 мл, 1,29 ммоль, 1М раствор в ТГФ) в тетрагидрофуране (65 мл) добавляли порошкообразный гидроксид калия (КОН) (0,72 г, 12,89 ммоль). Смесь перемешивали в течение примерно 16 ч при комнатной температуре. К реакционной смеси добавляли дополнительную порцию гидроксида калия (0,361 г, 6,44 ммоль), хлорацетона (0,59 г, 6,44 ммоль), фторида тетрабутиламмония (0,65 мл, 0,65 ммоль, 1М раствор в ТГФ) и ТГФ (20 мл) и перемешивали в течение примерно 48 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь фильтровали через кизельгур и концентрировали фильтрат при пониженном давлении. Осадок очищали с помощью флэш-хроматографии (смесь 10% этилацетат/гексан - 100% этилацетат) с получением указанного в заголовке соединения (1,64 г, 65%): МС (т/ζ): 389 (М+23).

Пример получения 22. Бензил-Л-(2-метил-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-ил)карбамат

Бензил-Л-[(3К)-1-ацетонил-2-оксо-4,5-дигидро-3Н-1-бензазепин-3-ил]карбамат (0,7 г, 1,91 ммоль) объединяли с ацетатом аммония (2,94 г, 38,2 ммоль) в уксусной кислоте (20,0 мл) и нагревали при 115°С в течение 24 ч и затем смесь перемешивали при комнатной температуре в течение примерно 16 ч. Реакционную смесь выливали в смесь лед/вода, ощелачивали гидроксидом аммония (28-30%) и экстрагировали дихлорметаном. Промывали водой и соляным раствором, сушили над сульфатом натрия и органический слой концентрировали при пониженном давлении. Осадок очищали с помощью флэшхроматографии (10% этилацетат/гексан - 50% этилацетат/гексан), затем с помощью сильной катионооб

- 10 020128 менной колонки (метанол, затем 10% 2н. раствор аммиака в смеси метанол/СН₂С1₂) с получением указанного в заголовке соединения (0,21 г, 32%) в виде твердого вещества белого цвета: МС (т/ζ): 348 (М+1). (По результатам анализа конечного соединения, полученного из указанного промежуточного соединения, указанное в заголовке соединение является частично рацемизированным).

Пример получения 23. 2-Метил-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-амин

Использовали способ из примера получения 16, где в качестве исходного вещества использовали бензил-И-(2-метил-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-ил)карбамат (0,19 г, 0,55 ммоль), с получением указанного в заголовке соединения (0,082 г, 69%): МС (т/ζ): 214 (М+1).

Пример получения 24. Бензил-И-[(3К)-2-метилсульфанил-4,5-дигидро-3Н-1-бензазепин-3-ил]карбамат

Бензил-Л-[(3К)-2-тиоксо-1,3,4,5-тетрагидро-1-бензазепин-3-ил]карбамат (1,5 г, 4,60 ммоль) растворяли в ТГФ (40 мл), охлаждали до 0°С и добавляли одной порцией гидрид натрия (ИаН) (192,9 мг, 4,83 ммоль, 60% в минеральном масле). Баню удаляли и реакционную смесь перемешивали в течение примерно 1 ч в атмосфере азота. Добавляли метилйодид (300 мкл, 4,83 ммоль) и перемешивали в течение примерно 1 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении для удаления основной части ТГФ, осадок разбавляли этилацетатом и промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия и соляным раствором, сушили над сульфатом натрия и органические слои концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (1,5 г, 96%) в виде твердого вещества белого цвета: МС (т/ζ): 341 (М+1).

Пример получения 25. Бензил-И-(1-метил-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-ил)карбамат

Бензил-И-[(3К)-2-метилсульфанил-4,5-дигидро-3Н-1-бензазепин-3-ил]карбамат (500 мг, 1,47 ммоль), пропаргиламин (197,28 мкл, 2,94 ммоль) и моногидрат п-толуолсульфоновой кислоты (30 мг, 157,71 мкмоль) объединяли в смеси фенилэфир/бифенил (2 мл, 6,53 ммоль) (1)о\\1Кегт А) и полученную смесь перемешивали в течение примерно 45 мин при 180°С. Реакционную смесь охлаждали и добавляли эфир (20 мл), затем 2М НС1 (20 мл). Перемешивали в течение нескольких минут, водный слой удаляли и органический слой экстрагировали 2н. раствором НС1 (2х). Водные слои объединяли и ощелачивали гидроксидом аммония (28%) до получения щелочного раствора. Осадок собирали посредством фильтрования, промывали водой и сушили в вакуумной печи. Указанный осадок очищали с помощью флэшхроматографии (от 50% 5% раствор аммиака/метанола (2М) в дихлорметане до 90% 5% раствора) с получением указанного в заголовке соединения (358 мг, 70%) в виде твердого вещества не совсем белого цвета: МС (т/ζ): 348 (М+1) . Время удерживания для изомера 1 (8-изомера)=3,3 мин; для изомера 2 (Кизомера)=3,7 мин.(колонка СЫга1рак АИ-Н; 100% ЕЮН с 0,2% диметилэтиламином; скорость потока 1,0

- 11 020128 мл/мин; 225 нм). По результатам хирального анализа показана рацемизация примерно на 20%. Пример получения 26. 1-Метил-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-амин

Бензил-Х-(1-метил-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-ил)карбамат (0,99 г, 2,85 ммоль) и 10% Рб/С (200 мг, 1,88 ммоль) объединяли в абсолютном этаноле (50 мл). Смесь помещали на шейкер Рагг на 7 ч (водород (Н₂), 60 фунтов/кв. дюйм, комнатная температура). Катализатор удаляли посредством фильтрования, к фильтрату добавляли 10% Рб/С (200 мг, 1,88 ммоль) и полученную смесь помещали на шейкер Рагг еще на 7 ч (60 фунтов/кв. дюйм, комнатная температура). Через 7 ч добавляли дополнительную порцию 10% Рб/С (189 мг, 1,78 ммоль) и встряхивали в течение еще 7 ч. Катализатор удаляли посредством фильтрования и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (0,53 г, 87%): МС (т/ζ): 214 (М+1).

На схеме Р К¹ выбран из группы, состоящей из Н, Р, С1, -СР3, -СН3, -ОН, -О(СГС4 алкила), -Оциклопропила, -О-СН2-фенила, -ОС(Н)Р2 и -ОСР3; К² выбран из группы, состоящей из Н и СН3; К³ выбран из группы, состоящей из Н и СН3, при условии что по меньшей мере один из группы, состоящей из К² и К³ представляет собой Н; п=1, 2 или 3; и К⁴ может представлять собой СН3 или СН₂СН₃. Предпочтительно, К⁴ представляет собой СН2СН3.

Пример получения 27. 1-Бром-4-винилоксибензол

К смеси 4-бромфенола (75 г, 433,5 ммоль), этенилового эфира уксусной кислоты (80,5 мл, 867,0 ммоль) и карбоната натрия (27,6 г, 260,10 ммоль) в толуоле (430 мл) добавляли ди-мю-хлорбис((1,2,5,6эта)-1,5-циклооктадиен)дииридий (2,9 г, 4,34 ммоль) и смесь нагревали при 100°С в течение 2,5 ч. Указанную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли этилацетатом (ЕЮАе) (300 мл) и промывали один раз водой (400 мл). Органическую фазу отделяли и промывали один раз солевым раствором (250 мл). Полученный материал сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенную смесь очищали с помощью флэш-хроматографии (от 0% до 5% ЕЮАе/Нех) с получением указанного в заголовке соединения (63,5 г, 74%): ГХ/МС (газовая хроматография/масс-спектрометрия): 198.

Пример получения 28. 1-Бром-4-(циклопропокси)бензол

К раствору 1-бром-4-винилокси-бензола (31,75 г, 159,51 ммоль) и хлорйодметана (101,3 г, 574,2 ммоль) в 1,2-дихлорэтане (410 мл) при температуре 0°С медленно добавляли диэтилцинк (1М раствор в гептане, 380 мл) в течение 1 ч при поддержании температуры ниже 5°С. Смесь белого цвета перемешивали при 0-5°С в течение 2 ч. Реакцию медленно гасили водным насыщенным раствором хлорида аммония (400 мл, выделение тепла) при 5°С и слои разделяли. Водный слой экстрагировали диэтиловым эфиром (2x200 мл). Органические слои объединяли, промывали насыщенным раствором хлорида аммония

- 12 020128 (400 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (33 г, 97%) в виде масла: ГХ/МС (газовая хроматография/масс-спектрометрия): 212.

Пример получения 29. 4-(Циклопропокси)бензойная кислота

о

К раствору (-78°С) 1-бром-4-(циклопропокси)бензола (33 г, 154,9 ммоль) в тетрагидрофуране (500 мл) добавляли 1,6 М раствор бутиллития в гексане (96,8 мл, 154,9 ммоль) при поддержании температуры ниже -70°С. Смесь перемешивали при -78°С в течение 20 мин после завершения добавления. Добавляли сухой лед (464,6 ммоль) 3 порциями с интервалом в 5 мин. Смесь перемешивали при -78°С в течение 30 мин. Охлаждающую баню удаляли и реакцию гасили 10% раствором гидросульфата натрия (№11ΒΟ₄) (200 мл). Смесь нагревали до комнатной температуры и экстрагировали 3Х ЕЮАс (300 мл). Органические фазы объединяли и промывали один раз соляным раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Осадок суспендировали в диэтиловом эфире и фильтровали. Твердое вещество сушили в вакуумной печи с получением указанного в заголовке соединения (12,9 г, 47%): МС (т/ζ): 179 (М+1).

Пример получения 30. Этил-1-[[4-(циклопропокси)бензоил]амино]циклопропанкарбоксилат

К суспензии (0°С) 4-циклопропоксибензойной кислоты (24,5 г, 137,3 ммоль) в дихлорметане (350 мл), содержащей 2 капли ДМФА, медленно добавляли оксалилхлорид (23,8 мл, 274,7 ммоль). После завершения добавления охлаждающую баню удаляли и полученную смесь перемешивали в течение 2 ч. Полученный материал концентрировали до высыхания при пониженном давлении. Осадок растворяли в дихлорметане (500 мл) и затем добавляли гидрохлорид этил-1-аминоциклопропанкарбоксилата (1пбойпе #04-265, 24,9 г, 150,5 ммоль) и триэтиламин (57,2 мл, 410,4 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение примерно 16 ч. Указанную смесь промывали один раз 10% раствором ΝαΗ8Θ₄ (250 мл). Органическую фазу отделяли и водную фазу экстрагировали 2Х дихлорметаном (200 мл). Органические фазы объединяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенную смесь очищали с помощью флэш-хроматографии (от 0 до 45% ЕЮАс/Нех) с получением указанного в заголовке соединения (33,7 г, 85%): МС (т/ζ): 290 (М+1).

Пример получения 31. Этил-1-[(4-этоксибензоил)амино]циклопропанкарбоксилат

4-Этоксибензойную кислоту (10,0 г, 60,18 ммоль), гидрохлорид этил-1-аминоциклопропанкарбоксилата (коммерчески доступный, 10,96 г, 66,19 ммоль), гидрохлорид 1-(3-диметиламинопропил)-3этилкарбодиимида (ΕΌΟ) (13,84 г, 72,21 ммоль) и 1-гидроксибензотриазол (НОВТ) (9,76 г, 72,21 ммоль) объединяли в тетрагидрофуране (500 мл). Добавляли диизопропилэтиламин (ΌΙΕΑ) (23,09 мл, 132,39 ммоль) в течение 3-5 мин и реакционную смесь перемешивали в течение примерно 16 ч при комнатной температуре в атмосфере азота. Смесь разбавляли этилацетатом, промывали разбавленным раствором НС1, разбавляли ΝαΙ 1СО₃ и затем соляным раствором, сушили над сульфатом натрия и органический слой концентрировали при пониженном давлении. Осадок очищали посредством перекристаллизации из этанола с получением указанного в заголовке соединения (13,93 г, 84%) в виде твердого вещества белого цвета: МС (т/ζ): 278 (М+1).

Соединения, представленные в табл. 1, могут быть получены, по существу, так же, как описано согласно способу в примере получения 31, с использованием реагента в 3 колонке вместо 4-этоксибензойной кислоты и затем могут использоваться без очистки или подвергаться очистке посредством перекристаллизации (из этанола или метанола) или флэш-хроматографии (ЕЮАс/гексаны, градиент в диапазоне 10-50%). Для примеров получения 36 и 37 использовали гидрохлорид метил-1-аминоциклопентанкарбоксилата (коммерчески доступный) вместо гидрохлорида этил-1-аминоциклопропанкарбоксилата. Соединения согласно примерам получения 32 и 35 очищали путем перекристаллизации из этанола. Соединения согласно примерам получения 33 и 34 очищали с помощью флэш-хроматографии. Соединение согласно примеру получения 36 может использоваться без очистки. Соединение согласно примеру получения 37 очищали путем перекристаллизации из метанола.

- 13 020128

Таблица 1

Пример получения	Структура и химическое название	Реагент	Физические данные МС (т/ζ):
32	этил-1-[(4хлорбензоил)амино] циклопропанкарбоксилат	О	268 (М+1)
33	О этил-1- бензамидоциклопропан карбоксилат	„А О	234 (М+1)
34	О этил-1-[(4- фторбензоил)амино] циклопропанкарбоксилат	ггр О	248 (М+1)
35	ρυ°+Ί н 9 о этил-1- [[4 - (дифторметокси)бензоил] амино] циклопропанкарбоксилат	Б О	300 (М+1)

36	' Ή?/”' метил-1-[[4- (дифторметокси)бензоил] амино] циклопентанкарбоксилат	Лг°гр О	314 (М+1)
	^Ο+Ί н й
37	метил-1-[(4 -	о	292 (М+1)
	этоксибензоил)амино]
	циклопентанкарбоксилат

Пример получения 38. 1-[[4-(Циклопропокси)бензоил]амино]циклопропанкарбоновая кислота

К раствору этил-1-(4-циклопропоксибензамидо)циклопропанкарбоксилата (33,7 г, 6,48 ммоль) в этаноле (380 мл) добавляли гидроксид натрия (174,7 мл, 174,7 ммоль) и смесь перемешивали при 65°С в течение 3 ч. Полученный материал охлаждали до комнатной температуры и концентрировали при пониженном давлении для удаления этанола. Осадок окисляли 10% раствором ΝαΗ8Θ₄. Полученное твердое вещество фильтровали и промывали водой (3Х) и диэтиловым эфиром (2Х). Полученный материал сушили в вакуумной печи с получением указанного в заголовке соединения (29,9 г, 98%) в виде твердого вещества белого цвета: МС (т/ζ): 262 (М+1).

Пример получения 39. 1-[(4-Этоксибензоил)амино]циклопропанкарбоновая кислота

- 14 020128

Этил-1-[(4-этоксибензоил)амино]циклопропанкарбоксилат (4,25 г, 15,33 ммоль) растворяли в 1,4диоксане (60 мл) и добавляли гидроксид лития (ЬЮН) (3,22 г, 76,63 ммоль), растворенный в воде (30 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение примерно 16 ч при комнатной температуре. Указанную смесь концентрировали при пониженном давлении, добавляли воду, окисляли 5н. раствором НС1 и осадок собирали посредством фильтрования с получением указанного в заголовке соединения (2,8 г, 73%) в виде твердого вещества белого цвета: МС (т/ζ): 248 (М+1).

Соединения согласно примерам получения, представленным в табл. 2, могут быть получены, по существу, так же, как описано согласно способу удаления защитной группы примера получения 39.

Таблица 2

Пример получения	Структура и химическое название	Физические данные МС (т/ζ):
40	о 1- [ (4-хлорбензоил)амино] циклопропанкарбоновая кислота	240 (М+1)
41	О 1-бензамидоциклопропан карбоновая кислота	240 (М-1)
42	Η ί о 1-[(4-фторбензоил)амино] циклопропанкарбоновая кислота	445 (2М-1)

43	γύ°υί н А О 1- [ [4- (дифторметокси)бензоил]амино] циклопропанкарбоновая кислота	272 (М+1)
44	ΓγΟη. н 5 р +λυναΛ°η 1-[ [4- (дифторметокси)бензоил]амино] циклопентанкарбоновая кислота	298 (М-1)
45	н а 1- [ (4-этоксибензоил)амино] циклопентанкарбоновая кислота	278 (М+1)

Пример 3. К-[1-[[(4К)-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-ил]карбамоил]циклопропил]4-этоксибензамид

(4К)-5,6-Дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-амин (0,50 г, 2,51 ммоль), 1-[(4-этоксибензоил) амино]циклопропанкарбоновую кислоту (0,75 мг, 3,01 ммоль), 1-гидроксибензотриазол (407 мг, 3,01 ммоль) и гидрохлорид 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида (577 мг, 3,01 ммоль) объединяли в тетрагидрофуране (40 мл). Добавляли диизопропилэтиламин (0,53 мл, 3,01 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение примерно 16 ч при комнатной температуре в атмосфере азота. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом, промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия и соляным раствором, сушили над сульфатом натрия и органический слой концентрировали при пониженном давлении. Осадок очищали с помощью флэш-хроматографии (от 25% ЕЮАс/гексаны до 100% ЕЮАе) с по

- 15 020128 лучением указанного в заголовке соединения (860 мг, 80%): МС (т/ζ): 431 (М+1).

Соединения согласно примерам, представленным в табл. 3, могут быть получены, по существу, так же, как описано согласно способу из примера 3.

Таблица 3

Пример	Структура и химическое название	Физические данные МС (ш/ζ):
4	4 -(дифторметокси)-Ν-[1-[[(4К)-5,6дигидро-4Н-имидазо[1,2- а][1]бензазепин-4- ил]карбамоил]циклопентил]бензамид	481(М+1)
5	0 4-хлор-Ы-[1-(5,6-дигидро-4Нимидазо[1,2-а] [1]бензазепин-4илкарбамоил)циклопропил]бензамид	421 (М+1)
б	с 0 °^θ Ν-[1-[(2-метил-5,б-дигидро-4Нимидазо[1,2-а][1]бензазепин-4ил)карбамоил]циклопропил]бензамид	401 (М+1)

7	4-φτορ-Ν-[1-[(2-метил-5,б-дигидро-4Нимидазо[1,2-а][ 1]бензазепин-4ил)карбамоил]циклопропил]бензамид	419 (М+1)
8	4-этокси-Ы-[1-[(2-метил-5,б-дигидро4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4ил)карбамоил]циклопропил]бензамид	445 (М+1)
9	4-хлор-Ц-[1-[(2-метил-5,б-дигидро-4Нимидазо[1,2-а][1]бензазепин-4ил)карбамоил]циклопропил]бензамид	435 (М+1)
10	у ' 4-(дифторметокси)-Ν-[1-[(2-метил-5,бдигидро-4Н-имидазо[1,2- а][1]бензазепин-4- ил)карбамоил]циклопропил]бензамид	467 (М+1)

- 16 020128

11	Ργ°Τ1 н 3 /-ν-ч, 0 4-(дифторметокси)-Ν-[1-[(1-метил-5,6дигидро-4Н-имидазо[1,2- а] [ 1]бензазепин-4- ил)карбамоил]циклопропил]бензамид	467 (М+1)
12	' 0 4-φτορ-Ν-[1- [ (1-метил-5,б-дигидро-4Нимидазо[1,2-а] [1 ]бензазепин-4ил)карбамоил]циклопропил]бензамид	419 (М+1)
13	0 0 4-этокси-Ν- [1- [ (1-метил-5,б-дигидро- 4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4- ил)карбамоил]циклопропил]бензамид	445 (М+1)
14	' 0 4-хлор-Ы- [1- [ (1-метил-5,б-дигидро-4Нимидазо[1,2-а][ 1]бензазепин-4- ил)карбамоил]циклопропил]бензамид	435 (М+1)
15	μ 0 о о Ν- [1-(5, б-дигидро-4Η-имидазо[1,2- а][1]бензазепин-4илкарбамоил)циклопентил]-4этоксибензамид	459 (М+1)

Пример получения 46. 4-(Циклопропокси)-П-[1-(5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4илкарбамоил)циклопропил] бензамид

К смеси 5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-амина (400 мг, 2,01 ммоль), 1-(4-циклопропоксибензамидо)циклопропанкарбоновой кислоты (577 мг, 2,21 ммоль), гидрохлорида 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида (462 мг, 2,41 ммоль) и гидрата 1-гидроксибензотриазола (369 мг, 2,41 ммоль) в дихлорметане (8 мл) добавляли триэтиламин (1,26 мл, 9,03 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение примерно 16 ч. Неочищенную смесь очищали с помощью флэшхроматографии (0-5% МеОН/дихлорметан) с получением указанного в заголовке соединения (791 мг, 89%) в виде пены желто-коричневого цвета: МС (т/ζ): 443 (М+1).

Пример 16. П-[1-[[(4К)-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-ил]карбамоил]циклопропил]4-фторбензамид

- 17 020128 (4К)-5,6-Дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-амин (95,0 мг, 0,48 ммоль), 1-[(4-фторбензоил) амино]циклопропанкарбоновую кислоту (128,0 мг, 0,57 ммоль) и гексафторфосфат О-(7-азабензотриазол-1-ил)-НН№,№-тетраметилурония (НАТИ) (218,0 мг, 0,57 ммоль) объединяли в Ν,Νдиметилформамиде (4 мл). Добавляли диизопропилэтиламин (0,21 мл, 1,19 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение примерно 16 ч при комнатной температуре в атмосфере азота. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом, промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия и соляным раствором, сушили над сульфатом натрия и органический слой концентрировали при пониженном давлении. Осадок очищали с помощью флэш-хроматографии (3% (2М) раствор аммиака в смеси метанол/дихлорметан) с получением указанного в заголовке соединения (131,0 мг, 68%): МС (т/ζ): 405 (М+1).

Пример 17. №[1-[[(4К)-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-ил]карбамоил]циклопропил] бензамид

Пример 17 может быть получен, по существу, так же, как описано согласно способу в примере 17. МС (т/ζ): 387 (М+1). Выход 63%.

В схеме О К¹ выбран из группы, состоящей из Н, Е, С1, -СЕ3, -СН3, -ОН, -О(С1-С4 алкила), -Оциклопропила, -О-СН2-фенила, ОС(Н)Е2 и -ОСЕ3; К² выбран из группы, состоящей из Н и СН3; К³ выбран из группы, состоящей из Н и СН₃, при условии, что по меньшей мере один из группы, состоящей из К² и К³, представляет собой Н; и п=1, 2 или 3.

Пример получения 47. Трет-бутил^-[1-[[(4К)-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4ил]карбамоил]циклопропила]карбамат

(4К)-5,6-Дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-амин (570 мг, 2,86 ммоль), 1-(трет-бутоксикарбониламино)циклопропанкарбоновую кислоту (коммерчески доступную, 633,19 мг, 3,15 ммоль), 1гидроксибензотриазол (464 мг, 3,43 ммоль) и гидрохлорид 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида (658 мг; 3,43 ммоль) объединяли в тетрагидрофуране (10 мл). Добавляли диизопропилэтиламин (599 мкл, 3,43 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение примерно 16 ч при комнатной температуре в атмосфере азота. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом, промывали разбавленным раствором бикарбоната натрия и соляным раствором, сушили над сульфатом натрия и органический слой концентрировали при пониженном давлении. Осадок очищали с помощью флэш-хроматографии (от 25% ЕЮАе/гексаны до 85% ЕЮ/Ае/гексаны) с получением указанного в заголовке соединения (860 мг, 79%) в виде твердого вещества белого цвета: МС (т/ζ): 383 (М+1).

- 18 020128

Пример получения 48. моил)циклопропил]карбамат трет-Бутил-Ν -[1-(5,6-дигидро-4Н-имидазо [1,2-а][1] бензазепин-4-илкарба-

Соединение согласно примеру получения 48 может быть получено, по существу, так же, как описано в способе из примера получения 47, но с использованием 5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а] [1]бензазепин-4-амина. Очистку проводили с помощью флэш-хроматографии с использованием градиента в диапазоне 30-95% этилацетат/гексан. МС (т/ζ): 383 (М+1).

Пример получения 49. трет-Бутил-№[1-(5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-илкарбамоил)циклопентил]карбамат

Соединение согласно примеру получения 49 может быть получено, по существу, так же, как описано в способе из примера получения 47, но с использованием 1-(трет-бутоксикарбониламино) циклопентанкарбоновой кислоты (коммерчески доступной). Очистку проводили с помощью флэш-хроматографии с использованием градиента в диапазоне 20-90% этилацетат/гексан. МС (т/ζ): 411 (М+1).

Пример получения 50. 1-Амино-№[(4К)-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-ил]циклопропанкарбоксамид

трет-Бутил №[1-[[(4К)-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-ил]карбамоил]циклопропил] карбамат (856 мг, 2,24 ммоль) растворяли в дихлорметане (20 мл) и охлаждали на ледяной бане. Добавляли трифторуксусную кислоту (10 мл, 132,25 ммоль). Баню удаляли и реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч. Указанную смесь концентрировали при пониженном давлении и добавляли этилацетат. Промывали 1н. раствором ΝαΟΗ и соляным раствором, сушили над сульфатом натрия и органический слой концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (470 мг, 74%) в виде твердого вещества белого цвета: МС (т/ζ): 283 (М+1).

Пример получения 51. 1-Амино-№(5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-ил)циклопентанкарбоксамид

Соединение согласно примеру получения 51 может быть получено, по существу, так же, как описано в способе из примера получения 50, но с использованием трет-бутил-№[1- (5,6-дигидро-4Нимидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-илкарбамоил)циклопентил]карбамата. МС (т/ζ): 311 (М-1).

Пример получения 52. 1-Амино-№(5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-ил)циклопропанкарбоксамид

Соединение согласно примеру получения 52 может быть получено, по существу, так же, как описано в способе из примера получения 50, но с использованием трет-бутил-№[1-(5,6-дигидро-4Нимидазо[1,2-а] [1]бензазепин-4-илкарбамоил)циклопропил]карбамата. МС (т/ζ): 283 (М+1).

Пример 18. 4-Х. юр-Ν - [ 1 -(5,6-дигидро-4Н-имидазо[ 1,2-а][1] бензазепин-4-илкарбамоил)циклопентил]бензамид

-амино-№(5,6-дигидро-4Н-имидазо [ 1,2-а] [ 1 ] бензазепин-4-ил)циклопентанкарбоксамид (158 мг, 509,02 мкмоль), 4-хлорбензойную кислоту (95,64 мг, 610,83 мкмоль), гидрохлорид 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида (117,10 мг, 610,83 мкмоль) и 1-гидроксибензотриазол (82,54 мг, 610,83 мкмоль) объединяли в тетрагидрофуране (12 мл). Добавляли диизопропилэтиламин (106,53 мкл, 610,83 мкмоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение примерно 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ЕЮАс, промывали разбавленным раствором бикарбоната натрия и

- 19 020128 соляным раствором, сушили над сульфатом натрия и органический слой концентрировали при пониженном давлении. Осадок очищали с помощью флэш-хроматографии (0-40% 5% раствор аммиака/метанол/дихлорметан (2н.)/дихлорметан) с получением указанного в заголовке соединения (101,0 мг, 44%): МС (т/ζ): 449 (М+1).

Соединения согласно примерам, представленным в табл. 4, могут быть получены, по существу, так же, как описано согласно способу из примера 18, но с использованием реагентов, перечисленных в колонке 3. Для очистки использовали флэш-хроматоргафию с использованием 5% раствора аммиака (2М) в метаноле с градиентом дихлорметан/дихлорметан в диапазоне 0-80%.

Таблица 4

Пример	Структура и химическое название	Реагенты	Физ. данные МС (т/ζ):
		1-амино-Ц-(5,6-
	О \ / /у*N
	м	дигидро-4Н-
	Ν- [1-(5,6-дигидро-4Н-	имидазо[1,2-	415
19	имидазо	а] [ 1]бензазепин-4-	(М+1)
	[1,2-а] [1]бензазепин-	ил)циклопентан-
	4 -ил	карбоксамид и
	карбамоил)циклопентил]	бензойная кислота
	бензамид
	0 ъ	1-амино-М-(5,6дигидро-4Нимидазо[1,2а] [ 1]бензазепин-4-	4 52
4-(дифторметокси)-Ν-
20	[1- (5,6-дигидро-4Н- имидазо [ 1,2-а] [1]	ил)циклопропан-	(М+1)
	карбоксамид и 4-
	бензазепин-4-	(дифторметокси)бен-
	илкарбамоил)	зойная кислота
	циклопропила]бензамид

Пример 21. 4-Хлор-Х-[1-[[(4К)-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-ил]карбамоил]циклопропила] бензамид

1-Амино-Х-[(4К)-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-ил]циклопропанкарбоксамид (160 мг, 0,57 ммоль), 4-хлорбензойную кислоту (106 мг, 0,68 ммоль) и гексафторфосфат О-(7азабензотриазол-1-ил)-НН№,№-тетраметилурония (ΗΆΤϋ) (259,0 мг, 0,68 ммоль) объединяли в Ν,Νдиметилформамиде (4 мл). Добавляли диизопропилэтиламин (ΌΙΕΑ) (0,25 мл, 1,42 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение примерно 5 ч в атмосфере азота. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом, промывали раствором бикарбоната натрия, водой (2Х) и соляным раствором, сушили над сульфатом натрия и органический слой концентрировали при пониженном давлении. Осадок очищали с помощью флэш-хроматографии (40% ЕЮАс/гексаны - 100% ЕЮАс) с получением указанного в заголовке соединения (190,0 мг, 80%): МС (т/ζ): 421 (М+1).

Соединения согласно примерам, представленным в табл. 5, могут быть получены, по существу, так же, как описано согласно способу из примера 21, при использовании реагента из 3 колонки вместо 4хлорбензойной кислоты и при времени реакции примерно 16 ч с использованием хиральных и рацемических аминов. Очищение осуществляли с помощью флэш-хроматографии с использованием либо (способ 1; примеры 22, 23, 24, 25, 27, 28, 29, 30, 31 и 32): 3-5% раствора аммиака (2М) в метаноле в градиенте дихлорметан/дихлорметан в диапазоне 0-100%, либо (способ 2; примеры 26): градиента этилацетат/гексан в диапазоне 25-90%.

- 20 020128

Таблица 5

Пример	Структура и химическое название	Реагент	Физические характеристики МС (т/ζ):
	ЛЛ-ОО АЛ Δ н
	2-хлор-
22	2-хлор-Ц- [1- [ [(4К)-5,6-	бензойная	421	(М+1)
	дигидро-4Н-имидазо[1,2- а] [ 1]бензазепин-4- ил]карбамоил]циклопропил] бензамид А!2-со	кислота
	3-хлор-
23	З-хлор-Ν- [1-[ [ (4К)-5,6-	бензойная	421	(М+1)
	дигидро-4Н-имидазо[1,2- а][1]бензазепин-4- ил]карбамоил]циклопропил] бензамид	кислота
	3-этокси-
24	Ν-[1-[[(4К)-5,6-дигидро-4Н-	бензойная	431	(М+1)
	имидазо[1,2-а][1]бензазепин-	кислота
	4-ил]карбамоил]циклопропил]-
	3-этоксибензамид

- 21 020128

25	Ν-[1-[[(4Κ)-5,6-дигидро-4Нимидазо[1,2-а] [ 1]бензазепин4-ил]карбамоил]циклопропил]- 3-фторбензамид	3-фтор- бензойная кислота	405 (М+1)
26	4-бензилокси-Ν-[1-[[(4К)- 5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2- а] [ 1]бензазепин-4- ил]карбамоил]циклопропил] бензамид	4- бензилокси -бензойная кислота	493 (М+1)
27	Х°<ЪЛ-ГП 0 ъ Ν-[1-(5,6-дигидро-4Нимидазо[1,2-а] [ 1]бензазепин4-илкарбамоил)циклопропил]- 4-изобутоксибензамид	4- изобутокси -бензойная кислота	459 (М+1)
28	0 Ν- [1- (5,6-дигидро-4Нимидазо[1,2-а] [ 1]бензазепин4-илкарбамоил)циклопропил]4-метоксибензамид	4-метоксибензойная кислота	417 (М+1)

- 22 020128

29	$ δ «-у ν Ν-[1-(5,6-дигидро-4Нимидазо[1,2-а] [1]бензазепин4-илкарбамоил)циклопропил]- 4-(трифторметил)бензамид	4-трифторметилбензойная кислота	455 (М+1)
30	0 ъ Ν-[1-(5,6-дигидро-4Нимидазо[1,2-а][ 1]бензазепин4-илкарбамоил)циклопропил]- 4-(трифторметокси)бензамид	4-трифторметоксибензойная кислота	471 (М+1)
31	° 0 Ν-[1-(5,6-дигидро-4Нимидазо[1,2-а] [ 1]бензазепин- 4-илкарбамоил)циклопропил]- 4-метилбензамид	4-метилбензойная кислота	401 (М+1)
32	° 0 Ν-[1-(5,6-дигидро-4Нимидазо[1,2-а][ 1]бензазепин4-илкарбамоил)циклопропил]- 4-пропоксибензамид	4- пропоксибензойная кислота	445 (М+1)

Схема Н

Можно разделять рацемические смеси и выделять отдельные изомеры в условиях хроматографии, описанных в способах А, В, С, Б, Е и Р.

Рацемические смеси можно разделять на К- и 8- изомеры. Условия хиральной хроматографии:

Способ А.

СФХ (сверхкритическая флюидная хроматография) - хиральная колонка: СЫга1рак АБ-Н.

Элюент: изократические условия в диапазоне от 20 до 30% этанола с 0,2% изопропиламиновым модификатором и СО₂.

Сигнал детектировали на длине волны 225 нм.

Способ В.

СФХ - хиральная колонка: СЫга1рак АБ-Н.

- 23 020128

Элюент: изократические условия в диапазоне от 25 до 40% изопропанола с 0,2% изопропиламиновым модификатором и СО₂.

Сигнал детектировали на длине волны 225 нм.

Способ С.

СФХ - хиральная колонка: СЫга1рак ОЭ-Н.

Элюент: изократические условия с 20% этанолом с 0,2% изопропиламиновым модификатором и СО2.

Сигнал детектировали на длине волны 225 мн.

Способ Ώ.

СФХ - хиральная колонка: СЫга1рак ОЭ-Н.

Элюент: изократические условия в диапазоне от 15 до 20%.

метанола с 0,2% изопропиламиновым модификатором и СО₂.

Сигнал детектировали на длине волны 225 нм.

Способ Е.

ЖХ - Хиральная колонка: СЫга1рак АЭ-Н.

Элюент: изократические условия с 100% метанолом с 0,2% изопропиламиновым модификатором.

Сигнал детектировали на длине волны 225 нм.

Способ Е.

СФХ (сверхкритическая флюидная хроматография) - хиральная колонка: СЫга1се1 ОЕН.

Элюент: изократические условия с 10% изопропанолом с 0,2% изопропиламиновым модификатором и СО₂.

Сигнал детектировали на длине волны 225 нм.

Соединения согласно примерам, приведенным в табл. 6 (вторая колонка), разделяли на изомеры 1 (К-изомер) и 2 (8-изомер) с использованием хроматографических способов А, В, С, Ώ, Е и Е. Соединения согласно примерам 29, 30, 20, 8 и 6 разделяли с использованием способа А; соединения согласно примерам 10, 13, 18, 19 и 15 разделяли с использованием способа В; соединения согласно примерам 14, 12 и 11 разделяли с использованием способа С; соединение согласно примеру 7 разделяли с использованием способа Ώ; пример 9 разделяли с использованием способа Е; соединение согласно примеру получения 47 разделяли с использованием способа Е. Изомеры 1 (К-изомер) и 2 (8-изомер), номера примеров указанных изомеров и время удерживания для указанных изомеров показаны в колонке 1.

Таблица 6

Изомеры,
номера	Номер
Примеров и	разделяе-
время	мого
удерживания	Примера
(мин.)
Изомер 1
(Пример 33)
= 1,63;	29
Изомер 2 =
1,15

Химическое название

Ν- [1- [ [(4Н)-5,6-дигидро4Н-имидазо[1,2а] [ 1]бензазепин-4ил]карбамоил]циклопропил] -4- (трифторметил)бензамид

Физ. данные

МС (т/ζ):

455 (М+1)

Изомер 1 (Пример 34) = 2,03

Изомер 2 =

1,47

Ν- [1- [ [ (4К)-5,6-дигидро4Н-имидазо[1,2а] [1]бензазепин-4ил]карбамоил]циклопропил]

-4(трифторметокси)бензамид

471 (М+1)

Изомер 1 (Пример 35) = 3,41

Изомер 2 =

2,32

4-(дифторметокси)-Ν-[ΙΕ [(4К)-5,6-дигидро-4Нимидазо[1,2а][1]бензазепин-4ил]карбамоил]циклопропил] бензамид

471 (М+1)

Изомер 1 (Пример 36) = 1,03

Изомер 2 =

1,49

4- (дифторметокси)-Ν- [ΙΕ [ (4К) -2-метил-5,6дигидро-4Н-имидазо[1,2а] [ 1]бензазепин-4ил]карбамоил]циклопропил] бензамид

467 (М+1)

- 24 020128

Изомер1 (Пример 37) =1,178

Изомер 2=

1,75

Изомер1 (Пример 38) =1,05б

Изомер 2=

1,71

Изомер1 (Пример 39) =2,409

Изомер 2=

2,88

Изомер1 (Пример 40) =1,367

Изомер 2=

2,27

Изомер 1 (Пример 41) = 1,34

Изомер 2 =

1,59

Изомер 1 (Пример 42) = 1,46

Изомер 2 =

1,83

4-этокси-Ы-[1-[[(4К)-2метил-5,6-дигидро-4Нимидазо[1,2а] [ 1]бензазепин-4ил]карбамоил]циклопропил] бензамид

Ν- [1- [ [ (4К)-2-метил-5,6дигидро-4Н-имидазо[1,2а][1]бензазепин-4ил]карбамоил]циклопропил] бензамид

4-χπορ-Ν-[1-[[(4К)-2метил-5,6-дигидро-4Нимидазо[1,2- ·

а] [1]бензазепин-4ил]карбамоил]циклопропил] бензамид

4-φτορ-Ν-[1-[[(4К)-2метил-5,6-дигидро-4Нимидазо[1,2а][1]бензазепин-4ил]карбамоил]циклопропил] бензамид

4-хлор-Ы-[1-[[(4К)-1метил-5,6-дигидро-4Нимидазо[1,2а] [1]бензазепин-4ил]карбамоил]циклопропил] бензамид

4-этокси-Ц-[1-[[(4Н)-1метил-5,6-дигидро-4Нимидазо[1,2а][1]бензазепин-4ил]карбамоил]циклопропил] бензамид

445 (М+1)

401 (М+1)

435 (М+1)

419 (М+1)

435 (М+1)

445 (М+1)

Изомер 1 (Пример 43) = 1,45

Изомер 2 =

1,84

4-φτορ-Ν-[1-[[(4К)-1метил-5,6-дигидро-4Нимидазо[1,2а] [ 1]бензазепин-4ил]карбамоил]циклопропил] бензамид

419 (М+1)

Изомер 1 (Пример 44) = 1,61

Изомер 2 =

1,97

Изомер 1 (Пример 45) = 0,83

Изомер 2 =

1,49

Изомер 1 (Пример 46) = 1,15

Изомер 2 =

1,87

Изомер 1 (Пример 47) = 1,00

Изомер 2 =

1,80

Изомер 1 (Пример 48) = 1,35

Изомер 2 =

1,76

Пример получения

4-(дифторметокси)-Ν-[ΙΕ [(4К)-1-метил-5,6дигидро-4Н-имидазо[1,2- 467

а] [1]бензазепин-4- (М+1) ил]карбамоил]циклопропил] бензамид

4-χπορ-Ν-[1-[[(4К)-5,6дигидро-4Н-имидазо[1,2а] [ 1]бензазепин-4ил]карбамоил]циклопентил] бензамид

Ν- [1-[[(4К)-5,6-дигидро4Н-имидазо[1,2а][1]бензазепин-4ил]карбамоил]циклопентил] бензамид

Ν- [1- [ [ (4К)-5,6-дигидро4Н-имидазо[1,2а] [ 1]бензазепин-4ил]карбамоил]циклопентил]

-4-этоксибензамид

4- (циклопропокси)-Ν- [1[ [(4К)-5,6-дигидро-4Нимидазо[1,2а] [ 1]бензазепин-4ил]карбамоил]циклопропил] бензамид

449 (М+1)

415 (М+1)

459 (М+1)

443 (М+1)

- 25 020128

Пример 49. 4-Хлор-Щ1-[[(4К)-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-ил]карбамоил] циклопропил]бензамид; 4-метилбензолсульфоновая кислота

4-Хлор-№-[1-[(4К)-(5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-илкарбамоил]циклопропил] бензамид (439 мг, 1,04 ммоль) растворяли в изопропиловом спирте (13,9 мл) и медленно добавляли моногидрат 4-метилбензолсульфоновой кислоты (198,40 мг, 1,04 ммоль) в изопропиловом спирте (1,60 мл) при комнатной температуре. Смесь перемешивали в течение примерно 2 ч и твердое вещество собирали посредством фильтрования. Указанное твердое вещество сушили в вакуумной печи с получением указанного в заголовке соединения (487 мг, 79%) в виде твердого вещества белого цвета: МС (т/ζ): 421 (М+23).

Примеры в табл. 7 могут быть получены, по существу, так же, как описано согласно способу примера 49.

Таблица 7

Пример	Номер Примера, используемого ДЛЯ образования СОЛИ	Химическое название	Физические данные МС (т/ζ):
50	35	4- (дифторметокси)-Ν-[1- [[(4К)-5,6-дигидро-4Н- имидазо[1,2- а] [ 1]бензазепин-4- ил]карбамоил]циклопропил] бензамид; 4- метилбензолсульфоновая кислота	471 (М+1)
51	4	4-(дифторметокси)-Ν- [1- [ [ (4К)-5,6-дигидро-4Н- имидазо[1,2- а] [1]бензазепин-4- ил]карбамоил]циклопентил] бензамид; 4- ме тилбензолсульфоновая кислота	481 (М+1)
52	34	Ν-[1-[[(4К)-5,6-дигидро- 4Н-имидазо[1,2- а] [ 1]бензазепин-4- ил]карбамоил]циклопропил] -4- (трифторметокси)бензамид; 4-метилбензолсульфоновая кислота	471 (М+1)

- 26 020128

53

48

4-(циклопропокси)-Ν- [Ι- Ε [(4К)-5,6-дигидро-4Н- имидазо[1,2- а][ 1]бензазепин-4- ил]карбамоил]циклопропил] бензамид; 4- метилбензолсульфоновая кислота

443 (М+1)

Пример 54. 4-Хлор-^[1-[[(4К)-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-ил]карбамоил]циклопропил]бензамид; гидрохлорид

4-Хлор^ -[1- [(4К)-(5,6-дигидро-4Н-имидазо [1,2-а][1] бензазепин-4-илкарбамоил]циклопропил] бензамид (350,0 мг, 0,83 ммоль) растворяли в метиловом спирте (12,0 мл) и полученный раствор охлаждали на ледяной бане. Добавляли по каплям раствор соляной кислоты (1н) в эфире (3,33 мл, 3,33 ммоль). Баню удаляли, смесь перемешивали в течение 30 мин и концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (323 мг, 85%) в виде твердого вещества белого цвета: МС (т/ζ): 421 (М+1).

Пример 55. Гидрохлорид 4-хлор-№[1-(5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-илкарбамоил) циклопропил] бензамида

Соединение согласно примеру 55 получали, по существу, так же, как описано согласно способу из примера 54. МС (т/ζ): 421 (М+1).

Пример 56. №[1-[[(4К)-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-ил]карбамоил]циклопропил]4-гидроксибензамид

4-Бензилокси-№[1-[[(4К)-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-ил]карбамоил]циклопропил]бензамид (145 мг, 294,37 мкмоль) растворяли в этаноле (20 мл) и гидрогенизировали на аппарате для встряхивани Рагг с 10% Ρά/С (22,8 мг, 10,71 мкмоль) в течение 18 ч (60 фунтов/кв. дюйм, комнатная температура). Катализатор отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (107 мг, 90%) в виде твердого вещества белого цвета: МС (т/ζ): 403 (М+1).

На схеме I показан альтернативный способ синтеза №[1-[[(4К)-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1] бензазепин-4-ил]карбамоил]циклопропил]-4-этоксибензамида.

- 27 020128

Пример получения 53. 5,6-Дигидроимидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-он

В реактор загружали 630 кг ДМФА и перемешивали содержимое в течение от 1 до 2 ч под током азота. Загружали 171 кг карбоната цезия и 45,0 кг 3-(2-бромфенил)пропионовой кислоты, полученную смесь перемешивали в течение от 1 до 2 ч при температуре от 80 до 85°С и затем снова охлаждали до температуры от 20 до 25°С. Реактор наполняли 27,0 кг имидазола и 4,4 кг йодида меди и полученную смесь перемешивали в течение от 1 до 2 ч под током азота при температуре от 20 до 25°С. Температуру доводили до температуры от 115 до 125°С и интенсивно перемешивали в течение от 20 до 24 ч, [ВЭЖХ < 3%, 3-(2-бромфенил)пропионовой кислоты]. Реакционную смесь охлаждали до 60°С и медленно загружали 181 кг этанола. Реакционную смесь охлаждали до температуры от 0 до 15°С и перемешивали в течение от 8 до 10 ч. Выделяли производное продукта в виде твердого вещества посредством центрифугирования. В реактор загружали влажный осадок, 184 кг этанола и 36 кг ДМФА и перемешивали в течение от 0,5 до 1 ч при температуре от 0 до 15°С. Выделяли производное продукта в виде твердого вещества посредством центрифугирования. Фильтраты объединяли и переносили в реактор с помощью трубчатого фильтра для удаления твердых частиц. Смесь концентрировали до объема от 675 до 720 л при пониженном давлении при поддержании внутренней температуры ниже 65°С. Охлаждали до температуры от 25 до 35°С и загружали в реактор 174 кг этанола. Перемешивали в течение от 10 до 15 мин и проверяли содержание воды в растворе (значение КР<0,5%).

В вышеуказанный раствор медленно загружали 95 кг тионилхлорида при поддержании внутренней температуры между 25 и 40°С. Смесь нагревали с обратным холодильником в течение от 7 до 10 ч [ВЭЖХ: < 3% 3-(2-имидазол-1-ил-фенила)-пропионовой кислоты]. Охлаждали до температуры от 20 до 35°С. Смесь фильтровали и отфильтрованный осадок промывали 189 кг этанола.

Объединенные фильтраты загружали в реактор и концентрировали при перемешивании при пониженном давлении до объема от 675 до 720 л при поддержании внутренней температуры при 65°С. Доводили температуру до 20-30°С. Медленно добавляли 450 кг воды при поддержании внутренней температуры при 20-30°С и перемешивали в течение 10-15 мин.

Полученную смесь промывали гептаном (3x153 кг) и доводили рН водного слоя до значения 8,0 с использованием 25% водного №-ьСО₃ (45 кг) при поддержании внутренней температуры менее 30°С. Полученную смесь экстрагировали МТБЭ (3x450 кг), объединенные слои промывали МТБЭ (1x369 кг 2% ΝΗ₄ΟΗ; 2x362 кг Н₂О). Органический слой концентрировали до объема от 90 до 180 л при пониженном давлении при поддержании внутренней температуры ниже 40°С. Через трубчатый фильтр загружали 220 кг 2-МеТГФ для удаления твердых частиц, концентрировали до объема от 90 до 180 л при пониженном давлении при поддержании внутренней температуры ниже 40°С. Загружали 214 кг 2-МеТГФ через трубчатый фильтр для удаления твердых частиц (в ходе процесса значение КТ<0,2%) и переносили раствор в чистые пластиковые пробирки с получением 195,8 кг раствора этил-3-(2-(1Н-имидазол-1-ил)фенил)пропаноата в 2-МеТГФ.

Реактор наполняли 281 кг 2-МеТГФ и 31 кг диизопропиламина. Охлаждали до температуры от -80 до -70°С и медленно загружали 86 кг н-бутиллития в н-гексане при поддержании температуры от -80 до 70°С и перемешивали в течение от 1 до 3 ч. В реактор медленно загружали 195,8 кг раствора этил-3-(2(1Н-имидазол-1-ил)фенила)пропаноата в 2-МеТГФ при температуре от -80 до -70°С и перемешивали в течение от 2 до 4 ч при от температуре -80 до -70°С (по результатам ВЭЖХ в ходе процесса наблюдали < 3% этил-3-(2-(1Н-имидазол-1-ил)фенила)пропаноата). В реактор медленно загружали 47,8 кг этанола при температуре от -80 до-70°С и перемешивали в течение от 0,5 до 2 ч при температуре от -80 до 70°С. В реактор медленно загружали 310 кг МТБЭ при поддержании внутренней температуры ниже -25°С. Доводили рН до 7,5 292 кг 10% водного раствора лимонной кислоты. Доводили температуру до примерно 0°С. Водный слой отделяли и органический слой промывали 202 кг 25% водным раствором №С1. Слои разделяли, органический слой концентрировали при пониженном давлении до объема от 41 до 82 л при поддержании внутренней температуры ниже 40°С. Водный слой экстрагировали 200 кг дихлорметана. Органические слои объединяли и перемешивали в течение от 0,5 до 1 ч при температуре от 15 до 25°С. Фильтровали через пластину с диоксидом кремния (20 кг) и промывали пластину 60 кг дихлорметана. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении до объема от 82 до 123 л при поддержании внутренней температуры ниже 40°С. 170 кг МТБЭ загружали к осадку и концентрировали при пониженном давлении до объема от 82 до 123 л при поддержании внутренней температуры ниже 50°С. Загружали 208 кг МТБЭ и перемешивали в течение от 10 до 15 мин (контроль в ходе процесса: 10,8% 2-МеТГФ и 4,6% ДХМ) . Загружали 279 кг МТБЭ и концентрировали при пониженном давлении до объема от 82 до 123 л при поддержании внутренней температуры ниже 50°С (остаточный 2-МеТГФ%=1,6%, остаточный ДХМ%=2,7%). 14,5 кг метилацетата загружали к осадку и смесь нагревали с обратным холодильником в течение от 30 до 60 мин. Указанную смесь охлаждали до температуры от 0 до 15°С и перемешивали в

- 28 020128 течение от 6 до 8 ч при температуре от 0 до 15°С. Твердое вещество выделяли посредством центрифугирования и отфильтрованнвый осадок промывали 35 кг МТБЭ. Полученное твердое вещество сушили с получением 15,8 кг 5,6-дигидроимидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-она. ЖХ-МС=199 (М+1), 419 (2М+23).

Пример получения 54. Оксим 5,6-дигидро-4Н-бензо[!]имидазо[1,2-а]азепин-4-она

НО-Ν^:

В реактор загружали в атмосфере азота 42 кг 5,6-дигидроимидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-она, 15,5 кг гидрохлорида гидроксиламина, 21,5 кг безводного ацетата натрия и 171 кг метанола. Полученную суспензию коричневого цвета нагревали до температуры от 60 до 70°С в течение 20 ч (с помощью ВЭЖХ в ходе процесса наблюдали <3% 5,6-дигидроимидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-она). Реакционную смесь охлаждали до температуры от 23 до 25°С и перемешивали в течение 8 ч. Твердое вещество выделяли посредством центрифугирования и промывали 33 кг холодного метанола. Полученное твердое вещество перемещали в реактор и суспендировали с 210 кг воды при температуре от 85 до 90°С в течение 2 ч. Твердое вещество выделяли посредством центрифугирования и промывали указанное твердое вещество 85 кг воды. Полученное твердое вещество сушили с получением 39,65 кг оксима 5,6-дигидро-4Нбензо[Е|имидазо[1,2-а]азепин-4-она. МС=214 (М+1).

Пример получения 55. Дигидрохлорид 5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-амина

2НС1

В реактор с инертной атмосферой загружали 153 кг метанола, 9,6 кг оксима 5,6-дигидро-4Нбензо[1]имидазо[1,2-а]азепин-4-она, 1,9 кг твердого гидроксида натрия, 10 кг воды и 10 кг никеля Ренея (διιζίιοιι ТаШба 8с1-1есй Со., Ь1б.). Закачивали в реактор газообразный водород до повышения давления до 58-65 фунтов/кв.дюйм и нагревали до температуры от 60 до 65°С. Через 40 ч охлаждали до 10-20°С и фильтровали через пластину с 8 кг диатомитовой земли для удаления никелевого катализатора, промывая 33 кг метанола. Фильтрат концентрировали в вакууме до достижения объема между 1 и 2 объемами при поддержании температуры реактора ниже 50°С. Загружали 130 кг дихлорметана и концентрировали до получения от 1 до 2 объемов, загружали дополнительные 130 кг дихлорметана и 104 кг воды. Перемешивали при температуре от 10 до 20°С в течение от 10 до 15 мин и оставляли без перемешивания в течение от 30 до 35 мин. Разделяли слои и органический и водный слой переносили в отдельные емкости. Органический слой промывали 104 кг очищенной воды и 104 кг 25% раствора хлорида натрия. Органический слой отделяли от водного слоя. Исходный реактор, используемый для разделения фаз, необходимо промывать минимальным количеством этанола (20 кг), и промывочную порцию этанола добавляли к органическому слою. Органический слой концентрировали в вакууме до объема от 1 до 2 объемов при поддержании внутренней температуры ниже 40°С. Загружали от 57 до 58 кг этанола и концентрировали от до объема от 1 до 2 объемов при поддержании внутренней температуры ниже 40°С и повторяли до тех пор, пока дихлорметан не переставал выявляться по результатам анализа остаточного растворителя (ГХ). Загружали 3 объема этанола и анализировали для выявления остаточного дихлорметана (ГХ). Если дихлормтан не выявлялся, раствор охлаждали до температуры от 10 до 15°С и медленно загружали 100 кг 4н. НС1 в этилацетате. Перемешивали в течение от 3 до 8 ч при температуре от 10 до 20°С, фильтровали и отфильтрованный осадок промывали 25 кг этанола. Указанный отфильтрованный осадок сушили при температуре от 50 до 55°С в течение от 12 до 16 ч с получением 11,1 кг рацемической соли бисНС1 амина (1,5-2,0 соль НС1 5,6-дигидро-4Н-бензо[!]имидазо[1,2-а]азепин-4-амина) МС=200 (М+1).

Пример получения 56. (4К)-5,6-Дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-амин

В реактор загружали 35,9 кг дигидрохлорида 5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-амина и 453 мл воды. Медленно добавляли 29,7 л 25% раствора NН₄ОН в течение 30 мин при поддержании температуры ниже 25°С. После завершения добавления рН составлял 9 и полученный раствор представлял собой чистый раствор коричневого цвета. Кристаллизацию вызывали путем добавления 31,5 г зародышей кристаллизации при температуре 22°С. Перемешивали суспензию в течение 8 ч и охлаждали до 5°С. Отфильтрованный осадок фильтровали и промывали 54 л холодной воды и сушили полученный отфильтрованный осадок в фильтре с использованием Ν/вакуума в течение 31 ч, что приводило к получению 5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-амина. 29 кг неочищенного отфильтрованного осадка порциями растворяли в 145 л этанола. Удаляли 73 л растворителя посредством перегонки в вакууме. Добавляли 108 л этанола и удаляли и перегоняли 133 л растворителя до тех пор, пока конечная концентрация не составляла 2 л/кг. Проводили анализ по методу Карла-Фишера в ходе процесса для выявления конечного содержания воды 0,1 мас.%.

- 29 020128

Проводили разделение на колонке СЫга1рак Αδ-У, 20 Ош, с использованием псевдодвижущегося слоя 5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-амина в качестве хиральной неподвижной фазы (ХНФ). Подвижная фаза представляла собой смесь этанол/метанол/М,Н-диэтилметиламин = 70:30:0,1 (по объему). Желаемый энантиомер (4К)-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-амина представлял собой второй вымывающийся энантиомер. Фракции экстрагируемого продукта, отвечающие необходимым условиям, объединяли и концентрировали при То <65°С и р = 300-79 мбар до остаточного объема ~20%. Фракции, загруженные для концентрирования, пропускали через угольный картридж 2е1аСагЬоп К558Р с последующей фильтрацией через встроенный фильтр Ро1усар НО (5,0 мкм). [СЫга1рак Αδ-У, 20 мкм; подвижная фаза: этанол/метанол/К,Н-диэтилметиламин=70:30:0,1 (по объему); подача: ~173 г неочищенного продукта/л элюента (подвижной фазы); экстракция: 220,60 мл/мин; очистка: 46,22 мл/мин; элюент: 245,03 мл/мин; подача: 21,80 мл/мин; рециклирование: 382,38 мл/мин; период: 1,00 мин; температура: комнатная температура; давление: ~42 бара].

	Очищенный продукт	Экстракт (целевой энантиомер)
Хиральная чистота [% а/а ВЭЖХ]	-92-99	>99,1
Концентрация [г/л]	-40,8	-8,5

Пример получения 57. Этил-1-[(4-этоксибензоил)амино]циклопропанкарбоксилат

О' затем ДХМ, ΕΕΝ

4-этоксибензойная кислота (СОС1)2, ДМФА, ДХМ

В реактор вместимостью 800 л загружали 4-этоксибензойную кислоту (11,0 кг) и дихлорметан (132,6 кг). Добавляли диметилформамид (34 мл) и затем добавляли оксалилхлорид (9,2 кг) в течение примерно 45 мин при поддержании температуры при 27+2°С. Содержимое реактора перемешивали при 27+2°С в течение 4,5 ч. По результатам анализа ВЭЖХ наблюдали 2,5% 4-этоксибензойной кислоты. Избыток оксалилхлорида удаляли посредством перегонки в вакууме. Маслянистый осадок растворяли в дихлорметане (55 кг). В реактор вместимостью 800 л загружали гидрохлорид этилового эфира 1аминоциклопропан-1-карбоновой кислоты (10 кг) и дихлорметан (110 кг). Загружали триэтиламин (15,3 кг) и поддерживали температуру при менее чем 10°С во время добавления. Добавляли раствор хлорангидрида в течение по меньшей мере 45 мин при поддержании температуры ниже 15°С. Полученную смесь перемешивали при 23°С в течение ночи (12 ч). Чистота по результатам анализа ВЭЖХ составляла примерно 85%. Суспензию продукта экстрагировали 1н. НС1 (33,4 л) и водный слой экстрагировали дихлорметаном (44,3 кг). Объединенные органические слои промывали 8% водным раствором КаНСО₃ (50,4 кг). Органический слой промывали водой (33,4 кг) и соляным раствором (33,4 кг). Дихлорметан отгоняли до тех пор, пока объем дистиллята не достигал примерно 70 л, затем добавляли гептаны (164 кг) при интенсивном суспендировании. Продолжали отгонять до тех пор, пока объем дистиллята не достигал дополнительных 70 л дихлорметана. Температура порции продукта во время перегонки в вакууме составляла 0°С. Суспензию продукта перемешивали при 20±5°С в течение 1 ч. Продукт фильтровали, промывали гептанами (2x20 кг), сушили в вакууме с получением этил-1-[(4-этоксибензоил)амино]циклпропанкарбоксилата (14,6 кг, 86% выход, 93,5% чистота по результатам ВЭЖХ).

Перекристаллизация этил-1-[(4-этоксибензоил)амино]циклопропанкарбоксилата.

В реактор вместимостью 800 л загружали неочищенный этил-1-[(4-этоксибензоил)амино]циклопропанкарбоксилат (14,19 кг) и дихлорметан (144 кг). Смесь перемешивали при 25+2°С в течение 30 мин с получением прозрачного раствора. В выше указанный раствор добавляли гексаны (191 кг) в течение 30 мин. Полученную суспензию продукта перемешивали при 25±2°С в течение 20 мин, затем удаляли дихлорметан посредством перегонки в вакууме при 20+5°С. Добавляли дополнительную порцию гексанов (29 кг) для хорошего перемешивания суспензии и перемешивали при 25±2°С в течение 1 ч. Твердое вещество фильтровали и промывали гексанами (19 кг, 38 кг, 29 кг и 19 кг). Во влажном осадке этил-1-[(4этоксибензоил)амино]циклопропанкарбоксилата с помощью анализа ВЭЖХ не выявлялись примеси (4этоксибензойный ангидрид). Сушили при 40°С в вакууме в течение 23 ч с получением этил-1-[(4этоксибензоил)амино]циклопропанкарбоксилата (12,21 кг, 86% выход восстановленного продукта, 99,9% чистота по результатам ВЭЖХ) в виде белого рассыпчатого порошка. Результаты протонного ЯМР согласуются со структурой.

Пример получения 58. 1-[(4-Этоксибензоил)амино]циклопропанкарбоновая кислота

В реактор вместимостью 800 л загружали этил-1-[(4-этоксибензоил)амино]циклопропанкарбоксилат (12,19 кг), ТГФ (45,5 кг) и МеОН (20,2 кг). В реактор добавляли раствор моногидрата МОН

- 30 020128 (2,49 кг) в воде (25,6 кг) при поддержании температуры менее 23°С во время добавления. Полученный раствор перемешивали при 20±3°С в течение ночи (19 ч). ТГФ и МеОН удаляли посредством перегонки в вакууме и затем в реактор добавляли воду (67 кг). Доводили рН реакционной смеси 5н. НС1 (примерно 12 л) до значения примерно 2,0 при 17±2°С. Полученную суспензию продукта перемешивали при 17±2°С в течение 50 мин. Твердое вещество собирали посредством фильтрования и промывали водой (3x40 кг). Влажный осадок сушили при 47°С в вакууме с получением 1-[(4-этоксибензоил)амино]циклопропанкарбоновой кислоты (10,74 кг, 98% выход, >99% чистота по результатам ВЭЖХ, 0,03% КГ) в виде твердого порошкообразного вещества белого цвета. ЖХ-МС (М+1=250).

Пример 57. Ν-[1-[ [(4К)-5,6-дигидро-4Н-имидазо [1,2-а][1] бензазепин-4-ил] карбамоил] циклопропил] 4-этоксибензамид

46,36 кг раствора (4К)-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-амина в этаноле пропускали несколькими порциями через угольный картридж /,с1а-СагЬоп К558Р с последующей фильтрацией через встроенный фильтр Ро1усар НО (5,0 мкм) в роторный вакуумный испаритель на 20 л и концентрировали при температуре от 55 до 58°С и р = от 130 до 0,79 мбар для получения в конечном итоге затвердевающего осадка. Полученный материал разделяли на две порции (4,524 кг и 4,468 кг).

Первую порцию растворяли в 11 кг дихлорметана и снова концентрировали при температуре 55°С и давлении от 600 до 200 мбар. После выпаривания до высыхания полученное твердое вещество растворяли в 11 кг дихлорметана и отбирали образец полученного раствора для определения с помощью ЯМР остаточнго этанола. Выпаривали до высыхания при 55°С и р = от 600 до 200 мбар. Повторно растворяли в 11 кг дихлорметана. Органический раствор перемещали в новую пробирку, роторный вакуумный испаритель промывали 5,5 кг дихлорметана и объединяли промывочный раствор с первым концентратом.

Вторую порцию растворяли в 11 кг дихлорметана, выпаривали при температуре 55°С и р = 600-200 мбар и заново растворяли в 11 кг дихлорметана. Выпаривали до высыхания. Заново растворяли в 11 кг дихлорметана и отбирали образец для определения этанола. Выпаривали при 55°С и р = 600-200 мбар и затем заново растворяли в 11 кг дихлорметана. Отбирали образец для определения остаточного этанола. Объединяли с первым концентратом. Роторный вакуумный испаритель промывали 5,5 кг дихлорметана и затем промывочный раствор объединяли с другими концентрированными растворами. Реактор вместимостью 160 л инертизировали и переносили полученный раствор в указанный реактор. Реактор наполняли при 20°С 34 л дихлорметана, 10,4 кг 1-[(4-этоксибензоил)амино]циклопропанкарбоновой кислоты и 17,5 л триэтиламина. Полученный раствор охлаждали до -20°С в течение 50 мин. К реакционной смеси медленно добавляли 27 л Т3Р через дополнительную емкость в течение 3 ч при -20°С. Реакционную смесь перемешивали в течение 9 ч при -18°С. Указанную реакционную смесь нагревали до -3°С в течение 40 мин. Добавляли 42 л воды в течение 45 мин, позволяя температуре повышаться до 6°С, с получением ярко-желтой суспензии. Через 45 мин при 20°С реакционная смесь все еще представляла собой суспензию. Добавляли 17 л дихлорметана для достижения полного растворения твердого вещества в течение 20 мин. После разделения фаз (25 мин) удаляли водный слой (рН 8) и органическую фазу дихлорметана промывали 43 л воды. После разделения фаз удаляли водный слой (рН 9). Органический слой дихлорметана промывали второй раз 42 л воды. После разделения фаз (15 мин) переносили органический слой в новую пробирку. Водные слои промывали, переносили в реактор и промывали два раза 21 л дихлорметана. Все органические экстрагированные фазы объединяли в реакторе и использовали или хранили при -10°С в течение ~5 дней. Реактор промывали метанолом и полученный раствор перемещали в указанный реактор, пропуская через встроенный фильтр. Раствор концентрировали до 7,0 л/кг (4К)-5,6дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-амина при 65°С и р = 1 бар до 700 мбар, удаляя 73 л растворителей. Полученный концентрат перемешивали при температуре 20°С в течение ночи с получением суспензии. Указанную суспензию разбавляли 66,5 л фильтрованного через встроенный фильтр изопропилацетата. Суспензию концентрировали при температуре 65°С и р = 1 бар и 300 мбар, удаляя 58 л растворителя. Суспензию разбавляли 67 л фильтрованного через встроенный фильтр изопропилацетата при температуре 65°С и снова концентрировали при температуре 65°С и р = 300-140 мбар, удаляя 67 л растворителей. Максимальная температура во время всех этапов перегонки составляла 50°С. Концентрированную суспензию нагревали до 65°С. в течение 45 мин. Добавляли 55 л фильтрованного через встроенный фильтр н-гептана в течение 35 мин при температуре от 65 до 62°С. В течение 12 ч перемешивали суспензию при средней скорости, охлаждая до 20°С. Фильтровали суспензию через нучфильтр (быстрая фильтрация: 16 мин). Реактор промывали 25 л фильтрованного через встроенный фильтр н-гептана и пропускали промывочную суспензию через отфильтрованный осадок. Отфильтрованный осадок просушивали в потоке воздуха и сушили в вакууме (р = 200-100 мбар) с получением 16,8 кг Ν-|1-||(4Ι<)-5.6дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-ил]карбамоил]циклопропил]-4-этоксибензамида. ЯМР материала.

- 31 020128

Примера 57 соответствует материалу примера 1.

Пример получения 59. 5,6-Дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-амин

В круглодонную колбу вместимостью 25 мл в воздушной атмосфере добавляли (48)-5,6-дигидро4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-амин (1,0 г, 5,02 ммоль), т-бутоксид натрия (492 мг, 5,12 ммоль), ΡΕΡΡ8Ι™ (37 мг, 0,054 ммоль) и магнитную мешалку. Закрывали колбу перегородкой и соединяли ее через иглу с двойным коллектором. Из колбы откачивали воздух и снова заполняли азотом три раза. Добавляли этанол (12 мл) с помощью шприца и нагревали на масляной бане при 60°С в течение 24 ч. Колбу убирали с масляной бани. Добавляли 1 г силикагеля и 400 мг δΐ-тиолового акцептора металлов и перемешивали в течение 140 мин. Смесь фильтровали через фильтровальную бумагу и фильтрат концентрировали посредством выпаривания на роторном испарителе. Осадок сушили при 75°С в вакууме с получением 1,0 г твердого вещества рыжеватого цвета. Хиральная ЖХ (10% этанол/90% гептан с 0,2% ДМЭА на колонке СЫга1се1 ΘΌ-Н)- 0,2% ее (энантиомерный избыток). ИЭР/МС т/ζ 200,2 [т+Н].

Пример 58. 4-Хлор-Х-[1-[[(4К)-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-ил]карбамоил]циклопропил] бензамид

Раствор (4К)-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-амина в этаноле концентрировали до высыхания перед использованием в реакции сочетания. 15,0 г (4К)-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1] бензазепин-4-амина и 18,03 г 1-[(4-хлорбензоил)амино]циклопропанкарбоновой кислоты растворяли в 120 мл дихлорметана и 32 мл триэтиламина. После охлаждения до -20°С добавляли 53,0 мл (1,2 экв.) Т3Р в течение 40 мин при поддержании температуры при -19°С. Реакционной смеси позволяли нагреваться до комнатной температуры в течение ночи. Проводили анализ с помощью ВЭЖХ на предмет полного расхода исходного вещества. После гашения реакции водой (75 мл воды) при температуре от 0 до 6°С и дальнейшего разбавления дихлорметаном (выпавшее в осадок твердое вещество растворялось после добавления дополнительных 180 мл дихлорметана) фазы разделяли. Органический слой промывали два раза 75 мл воды и затем объединенные водные слои снова экстрагировали один раз 75 мл дихлорметана. Органические экстрагированные фазы (420 мл) концентрировали, удаляя 290 мл растворителей (твердое вещество начинало выпадать в осадок). Добавляли 240 мл изопропилацетата и затем удаляли дополнительные 250 мл растворителя. Полученную густую суспензию нагревали до 70°С, добавляли 30 мл нгептана и суспензию медленно охлаждали до комнатной температуры в течение ночи. Суспензию фильтровали через стекловолоконный нучфильтр и отфильтрованный осадок промывали н-гептаном. Высушивание с помощью роторного вакуумного испарителя приводило к получению твердого вещества бледнокоричневого цвета, 29,65 г (93,58% выход, ВЭЖХ (ахиральная). ЖХ-МС (масс-спектрометрия) (т/ζ): 421.

Биологические анализы

Ферментативный анализ ΌΟΑΤ-1. Ингибиторы ΌΟΑΤ-1 выявляли с помощью ферментативного анализа ΐη νΐΐίο, в котором в качестве источника фермента использовали рекомбинантный человеческий фермент ΌΟΑΤ-1, экспрессируемый в клетках насекомых §19. Фермент ΌΟΑΤ-1 продуцировался клетками, инфицированными рекомбинантным бакуловирусом, содержащим вектор экспрессии ΌΟΑΤ-1. Через 48 ч инфицированные клетки собирали посредством центрифугирования, ресуспендирвали в холодном 20 мМ растворе №С1 и разрушали с помощью гомогенизатора Иоипсе. Пятнадцать миллилитров 20 мМ раствора ИаС1 добавляли к клеточному осадку на каждый литр суспензии инфицированных клеток. ДНК в гомогенате разрезали путем пропускания клеточного экстракта через иглу 25 калибра. Активность ΌΟΑΤ-1 в гомогенате клеток, инфицированных бакуловирусом, сравнивали с гомогенатом неинфицированных клеток для определения фоновой активности фермента, связанной с клетками §ί9.

Анализы проводили в 96-луночных планшетах с использованием модифицированного анализа, описанного Колеманом (Со1етап, МеФойз ΐη Епгуто1оду 209. рр98-102 (1992)). В общих чертах, соединения тестировали согласно схеме серийных разведений 1:3 от концентрации 100 мкМ до конечной концентрации 1,7 нМ. Реакционная смесь фермента содержала субстраты 250 мкМ 1,2-§п-диацилглицерол (Ανаηΐ^ Ро1аг Εΐρΐάδ), 5 мкМ ¹⁴С олеоил-СоА и 45 мкМ олеоил-СоА в водном буфере, содержащем 150 мМ буфера Нере§, рН 7,4, 0,7% по объему ΤπΐΌη® Х-100 и протеазные ингибиторы Сотр1е1е™. На реакционную лунку использовали два микрограмма гомогената §ί9. Общий реакционный объем составлял 50 мкл. Реакции проводили при комнатной температуре в течение 25 мин и затем останавливали путем добавления 50 мкл раствора, содержащего 58,8% изопропанола, 14,7% н-гептана, 11,5% воды, 12,5% этанола и 2,5% 1н. раствора гидроксида натрия. Затем добавляли сто микролитров сцинтилляционного коктейля и через 8 ч планшеты анализировали. Кривые зависимости эффекта от концентрации и значения 1С₅₀ для соединений получали из первичных данных с использованием программы анализа данных Αс1^ν^1уΒа§е (ΙΌΒ8).

- 32 020128

Все соединения согласно примерам, описанным в настоящей заявке, обладали активностью в ферментативном анализе ΌΟΑΤ-1, по существу, как описано в настоящей заявке, причем измеренное значение 1С₅₀ составляло менее 600 нМ. Для соединения №[1-[[(4В)-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-ил]карбамоил]циклопропил]-4-этоксибензамида (примеры 1, 3, 57) измеренная 1С₅₀ составляла 134+8,0 нМ (п=2; геометрическое среднее ± стандартная ошибка) и для соединения 4-хлор-Щ1-[[(4В)-

5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-ил]карбамоил]циклопропил]бензамид (примеры 2, 21, 58) измеренная 1С₅₀ составляла 89,0±0,98 нМ (п=3; геометрическое среднее ± стандартная ошибка).

Результаты ферментативного анализа ΌΟΆΤ-1 показали, что примеры, описанные в настоящей заявке, являются активными ингибиторами фермента ΌΟΆΤ-1.

Анализ синтеза триглицеридов в адипоцитах. Указанный анализ позволяет измерять способность соединений подавлять синтез триглицеридов в интактных мышиных адипоцитах линии 3Т3-Ь1. Недифференцированные клетки 3Т3-Ь1 культивировали в 96-луночных планшетах в плотности 25000 клеток на лунку с использованием стандартных условий для тканевых культур. Через два дня культивирования вызывали дифференцировку клеток в адипоциты путем помещения их в среду с добавлением 0,5 мМ 1метил-3-изобутилксантина (ΙΒΜΧ), 10 мкг/мл инсулина и 1 мкМ дексаметазона. Через пять дней культивирования клетки растили в среде с добавлением только 10 мкг/мл инсулина. Анализы проводили после культивирования клеток в течение 12 дней. Для начала проведения анализа от клеток удаляли культуральную среду и замещали 50 мкл среды ΟρΐίΜΕΜ®, содержащей 0,375 мкКи/лунку ¹⁴С ацетата. Затем клетки инкубировали при 37°С в 7,5% СО₂ в течение 4 ч. В конце периода указанной инкубации среду удаляли, клетки промывали один раз сбалансированным солевым раствором Хэнкса и добавляли в каждую лунку по 25 мкл 0,7% тритона Х-100 (ТпЮп® Χ-100) и позволяли экстрагировать клетки в течение 5 мин. В конце указанного периода в каждую лунку добавляли по 75 мкл раствора, содержащего 58,8% изопропанола, 14,7% н-гептана, 11,5% воды, 12,5% этанола и 2,5% 1н. раствора гидроксида натрия и планшеты встряхивали на орбитальном аппарате для встряхивания в течение 2 мин. Затем добавляли 100 мкл гептана и планшеты встряхивали в течение дополнительных 2 мин. Затем планшеты откручивали на низкоскоростной центрифуге для облегчения разделения фаз и 50 мкл гидрофобной фазы удаляли для проведения сцинтилляционного счета. Кривые зависимости эффекта от концентрации и значения ЕС₅₀ для соединений получали из исходных данных с использованием программы анализа данных ΑοΙίνίΙνВаке (ΙΌΒ8). Соединения тестировали, по существу, согласно способу анализа синтеза триглицеридов в адипоцитах, описанному в настоящей заявке.

Для соединения №[1-[[(4В)-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-ил]карбамоил]циклопропил]-4-этоксибензамида (примеры 1, 3, 57) измеренное значение ЕС₅0 составляло 175 нМ ± 94,0 (п=2; геометрическое среднее ± стандартная ошибка). Для соединения 4-хлор-№[1-[[(4К.)-5,6-дигидро-4Нимидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-ил]карбамоил]циклопропил]бензамид (примеры 2, 21, 58), значение ЕС₅₀ составляло 213 нМ ± 78,2 (п=4; геометрическое среднее ± стандартная ошибка).

Результаты анализа синтеза триглицеридов в адипоцитах показали, что соединения Ν-[1-[[(4Κ.)-5,6дигидро-4Н-имидазо[1,2-а] [1]бензазепин-4-ил]карбамоил]циклопропила]-4-этоксибензамид и 4-хлор-№ [1-[[(4К.)-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-ил]карбамоил]циклопропила]бензамид являются активными ингибиторами синтеза триглицеридов в интактных мышиных адипоцитах линии 3Т3-Ь1.

Модель абсорбции болюса масла. На основе экспериментов Бухмана (Вийтап е1 а1., 1онгпа1 о£ Βίο1ощса1 СйепнЧгу 277 ρρ25474-25479 (2002)), которые продемонстрировали, что ΌΟΑΤ-1 вовлечен в абсорбцию липидов из тонкого кишечника, была разработана модель ингибирования ΌΟΑΤ-1 ш νίνο, согласно которой измеряли уровень триглицеридов в плазме крови после перорального введения крысам болюса оливкового масла. Самцов крыс линии §ргадие-ОаМеу (280-320 г, п=6 на тестируемую группу), содержащихся на обычном кормлении, акклиматизировали к виварию для проведения исследования в течение по меньшей мере 1 недели до оценки соединений. До начала тестирования соединений крысы голодали в течение 16 ч. Соединения вводили путем принудительного кормления в составе плацебо (10% этанол/90% кукурузное масло) в объеме 1 мл/кг. Через четыре часа после введения соединения отбирали 0,5 мл образца крови из хвостовой вены. Непосредственно через 4 ч после сбора крови вводили 3,0 мл болюса оливкового масла путем принудительного кормления. Конечный образец крови собирали из хвостовой вены через 6 ч после введения соединения. Из образцов крови получали плазму посредством центрифугирования, которую исследовали на содержание триглицеридов с использованием клинического химического анализатора Нйасй1 912 и на уровень тестируемого соединения. Определяли эффективную дозу, которая приводит к уменьшению повышения уровня триглицеридов в плазме крови на 50% (ΕΌ₅₀) и 80% (ΕΌ₈₀) . Ингибирование ΌΟΑΤ-1 указывает на способность тестируемого соединения подавлять повышение триглицеридов в плазме, которое происходит между 4 и 6 ч исследования (между 14 и 16 ч в модифицированной модели) у получавших лечение плацебо (контрольных) животных. В модифицированной модели соединение вводили за 14 ч до первого отбора образца крови и введения болюса масла. Конечный образец крови собирали через 16 ч после дозирования. В этой более долгосрочной версии модели вводили плацебо (10% этанола/90% кукурузного масла) в отсутствии соединения через 10 ч после дозирования соединением для соответствия с более кратковременной версией модели. Соединения тес

- 33 020128 тировали по существу согласно способу в крысиной модели абсорбции болюса масла, описанному в настоящей заявке.

Для соединения №[1-[[(4К)-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-ил]карбамоил]циклопропил]-4-этоксибензамида (примеры 1, 3, 57) в трех экспериментах использовали дозы 1, 3, 10 и 30 мг/кг. Для соединения 4-хлор-№[1-[[(4К)-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-ил]карбамоил]циклопропил]бензамида (примеры 2, 21, 58) в 1 эксперименте использовали дозы 0,3, 1, 3, 10 и 30 мг/кг и во 2 и 3 экспериментах использовали дозы 0,1, 0,3, 1, 3 и 10 мг/кг. Результаты представлены в таблицах 8 и 9.

Таблица 8. Результаты для №[1-[[(4К)-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-ил]карбамоил] циклопропил]-4-этоксибензамида (примеры 1, 3, 57) в 16-часовом исследовании абсорбции болюса масла

Эксперимент	еп50 (мг/кг)	Стандартная ошибка Εϋ50	ЕЮдо (мг/кг)	Стандартная ошибка ЕЭ80
1	12,37	2,46	19,61	7,67
2	2,92	0,76	7,64	3,80
3	1,71	0,55	5,52	2,81

Таблица 9. Результаты для 4-хлор-№[1-[[(4К)-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4ил]карбамоил]циклопропил]бензамида (примеры 2, 21, 58) в 6-часовом исследовании абсорбции болюса масла

Эксперимент	ео50 (мг/кг)	Стандартная ошибка ЕЭ50	ΕΌ8ο (мг/кг)	Стандартная ошибка Εϋ30
1	0,73	0,24	2,22	1,15
2	0,57	4,52	НВ*	. НВ*
3	0,26	0,093	0,45	0,27

НВ: не выявлено.

Данные анализировали с использованием мета-анализа. Общую ΕΌ₅₀ (ΕΌ₈₀) оценивали как взвешенное среднее ΕΌ₅₀ (ΕΌ₈₀) от отдельных исследований, где весы представляли собой обратные значения оценок вариабельности ΕΌ₅₀ (ΕΌ₈₀) . Проводили О-тест однородности. Если уровень значимости теста составлял 0,10, использовали модель со смешанными эффектами для включения вариабельности как в пределах исследования, так и между отдельными исследованиями. Весы подводили к обратному суммы вариабельности ΕΌ₅₀ (ΕΌ₈₀) между исследованиями и вариабельности ΕΌ₅₀ (ΕΌ₈₀) в пределах отдельного исследования. Вариабельность между отдельными исследованиями оценивали с помощью алгоритма Пауля-Мандела. (Ссылки: 8и11оп, Л.Т, 1опез, Ό.Κ., АЬгатз, К.К., 8Ее1доп, Т.А., апд 8опд, Е., МеШодз £ог Ме1а-апа1уз1з ΐπ Мед1са1 КезеагеЕ Еопдоп, .1о1ш \\'Пеу, Ι8ΒΝ 0-471-49066-0 (2000). Оегзппошап К., апд Каскег, К., Капдот-е1Тес1з тоде1 £ог те1аапа1уз1з о£ сНшса1 1г1а!з: Ап ирда1е, СоЩетрогагу СНшса1 Тпа1з 28 р.105-114 (2007).

Таблица 10. Мета-анализ для ^[1-[[(4К)-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4ил]карбамоил]циклопропил]-4-этоксибензамида (примеры 1, 3, 57) в 16-часовом исследовании абсорбции болюса масла

ΕΌ50	Среднее (мг/кг)	Стандартная ошибка 3,27	0-тест (рзначение) 18,48 (р<0,001)
г 5,30
ЕР8о	7,34	2,17	2,98 (р=0,23)

Таблица 11. Мета-анализ для 4-хлор-^[1-[[(4К)-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4ил]карбамоил]циклопропил]бензамида (примеры 2, 21, 58) в 6-часовом исследовании абсорбции болюса масла

	Среднее (мг/кг)	Стандартная ошибка	«2-тест (р-значение)
Εϋ50	0,32	0,09	3,35 (р=0,19)
Εϋ8ο	0,54	0,27	2,11 (р=0,15)

Результаты показали, что ^[1-[[(4К)-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-ил]карбамоил] циклопропил]-4-этоксибензамид (примеры 1, 3, 57) и 4-хлор^-[1-[[(4К)-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а] [1]бензазепин-4-ил]карбамоил]циклопропил]бензамид (примеры 2, 21, 58) подавляют повышение уровня триглицеридов в плазме на крысиной модели абсорбции масляного болюса. Полученные результаты ука

- 34 020128 зывают на ингибирование ΌΟΑΤ-1.

Модель алиментарного ожирения на мышах: Для измерения действия на массу тела и потребление пищи соединения тестировали на мышах С57 В16, которых содержали на рационе с высоким содержанием жиров (Кезеагсй Ю1'с1э Ό12492). 14-недельных мышей, выращенных на рационе Ό12492, акклиматизировали к виварию для проведения исследования в течение 2 недель при 12-часовом светотемновом цикле. За семь дней до проведения тестирования соединений животных дозировали путем принудительного кормления либо один раз, либо два раза в день подходящим плацебо для привыкания мышей к проведению манипуляций. На 6 день дозирования плацебо измеряли композицию тела с помощью количественного ядерно-магнитного резонанса (ф-ЯМР) . На седьмой день дозирования плацебо животных рандомизировали по массе тела и сортировали в тестируемые группы (п=8). Через 7 дней дозирования плацебо начинали дозирование соединением два раза в день. Животным давали соединение за 30 мин до наступления темновой фазы светотемнового цикла и, при желании, снова через 5,5 ч во время темновой фазы. Дозирование соединением продолжали в течение от 15 до 22 дней, в течение которых ежедневно измеряли потребление пищи и массу тела. На 14 день эксперимента во второй раз определяли композицию тела с помощью количественного ЯМР. На 15 день собирали конечные образцы крови у двух животных из каждой тестируемой группы через 0, 2, 4 и 6 ч после конечного введения дозы для измерения уровня тестируемого соединения в плазме.

Данные анализировали с использованием мета-анализа. В случае процентного набора (потери) массы тела и процентного набора жировой массы (потери) оценка лечебного эффекта с помощью метаанализа представляла собой среднее отличие между лечебной и контрольной группой. В случае процентного суммарного изменения потребления пищи по сравнению с контролем (%СР1СРС), оценка лечебного эффекта представляла собой непосредственно %СР1СРС. Общий лечебный эффект оценивали как средневзвешенное значение лечебного эффекта в отдельных исследованиях, где весы представляли собой обратное значение вариабельности оценок лечебного эффекта отдельных исследований. Проводили фтест однородности. Если уровень значимости теста составлял 0,10, использовали модель со смешанными эффектами для включения вариабельности как в пределах исследования, так и между отдельными исследованиями. Весы подводили к обратному суммы вариабельности оценки лечебного эффекта между исследованиями и вариабельности оценки лечебного эффекта в пределах отдельного исследования. Вариабельность между отдельными исследованиями оценивали с помощью алгоритма Пауля-Мандела. (Ссылки: 8и11оп. АЗ., 1опез, Ό.Κ., АЬгатз, К.К., 8йе1доп, Τ.Α., апд. 8опд, Р., МеШодз 1ог Ме1а-апа1уз1з т Мед1са1 Кезеагсй Ьопдоп, .1о11п \\'Пеу. Ι8ΒΝ 0-471-49066-0 (2000). Оегатошап К., апд Каскег, К., Капдот-е1Гес1з тоде1 1ог те1а-апа1уз1з о£ с11шса1 1г1а1з: Ап ирда1е, Соп1етрогагу С11шса1 Тпа1з 28 р.105-114 (2007). Соединения тестировали, по существу, согласно способу, описанному в мышиной модели алиментарного ожирения в настоящей заявке.

Для исследования №[1-[[(4К)-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-ил]карбамоил]циклопропил]-4-этоксибензамида (примеры 1, 3, 57) проводили три эксперимента с использованием доз 1, 3, 10 и 30 мг/кг (два эксперимента) и 3 и 30 мг/кг (один эксперимент). Так как дозы 3 и 30 мг/кг являлись общими для всех экспериментов, указанные дозы использовали для сравнения результатов.

Для исследования 4-хлор-Щ1-[[(4К)-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-ил]карбамоил] циклопропил]бензамида (примеры 2, 21, 58) проводили два эксперимента с использванием доз 3, 10, 30 и 60 мг/кг и 0,3, 1, 3 и 10 мг/кг. В каждом из экспериментов дозы давали два раза в день. Так как дозы 3 и 10 мг/кг являлись общими для обоих экспериментов, указанные дозы использовали для сравнения результатов.

В табл. 12-14 показаны результаты по среднему процентному набору (положительные значения) или потери (отрицательные значения) массы тела, жировой массы и потребления пищи для Ν-[1-[[(4Κ)-

5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-ил]карбамоил]циклопропил]-4-этоксибензамида (примеры 1, 3, 57).

Таблица 12. Плацебо-контролируемое процентное изменение массы тела

Доза минус контроль	Среднее (процент)	Стандартная ошибка	0-тест (рзначение)
3 мг/кг - контроль	-4,74	0,92	0,61 (р=0,74)
30 мг/кг - контроль	-5,31	0,77	0,05 (р=0,98)

- 35 020128

Таблица 13. Плацебо-контролируемое процентное изменение жировой массы

Доза минус	Среднее	Стандартная	2-тест (р-
контроль	(процент)	ошибка	значение)
3 мг/кг -	-6,69	1,14	1,94 (р=0,38)
контроль
30 мг/кг -	-8,24	1,01	0,31 (р=0,85)
контроль

Таблица 14. Плацебо-контролируемое процентное изменение потребления , пищи

Доза минус контроль	Среднее (процент)	Стандартная ошибка	2-тест (рзначение) 5,82 (р=0,05) ~
3 мг/кг - контроль	-10,11	2,25
30 мг/кг - контроль	-11,35	1,50	3,53 (р=0,17)

В табл. 15-17 показаны результаты по среднему процентному набору (положительные значения) или потери (отрицательные значения) массы тела, жировой массы и потребления пищи для 4-хлор-№-[1[[(4К)-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-ил]карбамоил]циклопропил]бензамида (примеры 2, 21, 58).

Таблица 15. Плацебо-контролируемое процентное изменение массы тела

Таблица 16. Плацебо-контролируемое процентное изменение жировой массы

Доза минус контроль	Среднее (процент)	Стандартная ошибка	2-тест (рзначение)
3 мг/кг - контроль	-9,53	2,07	0,28 (р=0,60)
10 мг/кг - контроль	-8,41	2,16	0,23 (р=0,63)

Таблица 17. Плацебо-контролируемое процентное изменение потребления пищи

Доза минус контроль	Среднее (процент)	Стандартная ошибка
3 мг/кг контроль	-11,31	1,98
10 мг/кг - контроль	-8,43	2,31

Результаты показали, что №[1-[[(4К)-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-ил]карбамоил] циклопропил]-4-этоксибензамид (примеры 1, 3, 57) и 4-хлор-К-[1-[[(4К)-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а] [1]бензазепин-4-ил]карбамоил]циклопропил]бензамид (примеры 2, 21, 58) снижают массу тела, жировую массу и потребление пищи в мышиной модели алиментарного ожирения.

Лекарственная форма

Получение лекарственной формы с использованием ацетата сукцината гидроксипропилметилцеллюлозы (НРМС-А8-Ь), который растворяется при рН 5,5 и приводит к получению твердой дисперсии 30% Ν-[1-[ [(4К)-5,6-дигидро-4Н-имидазо [1,2-а][1] бензазепин-4-ил]карбамоил] циклопропил] -4-этоксибензамид/70% НРМС-АЗ-Ь.

Пленочное литье. Образец готовили с использованием 350,12 мг НРМС-А8-Ь, 150 мг Ν-[1-[[(4Κ)-

5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-ил]карбамоил]циклопропил]-4-этоксибензамида и 5 мл

- 36 020128 раствора МеОН/ацетон (50/50) в качестве растворителя. Порции раствора распределяли на чашках Петри с плоским дном, которые предварительно нагревали до температуры примерно 60°С. Пленки хранили в вакуумной печи при 55°С в течение 3,5 ч для полного удаления остаточного растворителя.

Образцы соскребали с чашек и измельчали частицы с помощью ступки и пестика. Полимеры НРМС формировали эластичную пленку, которая, несмотря на возможность ее легкого удаления, не позволяла получить порошок, поддающийся обработке, делая затруднительным дополнительное уменьшение размера частиц. Образцы измельчали с помощь ступки и пестика для получения одинакового размера агломератов.

Сушили распылением с использованием распылительной сушилки ОЕА ИЕКО 8ЭМ1СКО™: НРМС-А8-Ь (25,7 г); И-[1-[[(4К)-5,6-дигидро-4Н-имидазо[1,2-а][1]бензазепин-4-ил]карбамоил]циклопропил]-4-этоксибензамид (11,0 г); ток атомизирующего газа (~2,0 кг/ч); температура на выходе во время тока растворителя (52°С); и скорость потока раствора (~8-10 мл/мин). Использовали смесь ацетон:метанол (70:30) в качестве растворителя. Массовый расход азота на систему составлял 32,5 кг/ч для каждого цикла. В каждом цикле использовали раствор с содержанием примерно 4 мас.% твердого вещества. Может использоваться более высокий массовый процент твердого вещества.

Claims (9)

1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

   1. Соединение формулы или его фармацевтически приемлемая соль;

   где К¹ выбран из группы, состоящей из Н, Е, С1, -СЕ₃, -СН₃, -ОН, -О(С₁-С₄ алкила), -Оциклопропила, -О-СН₂-фенила, -ОС(Н)Е₂ и -ОСЕ₃;

   К² выбран из группы, состоящей из Н и -СН₃;

   К³ выбран из группы, состоящей из Н и -СН3, при условии, что по меньшей мере один из группы, состоящей из К² и К³, представляет собой Н; и η равен 1, 2 или 3.
2. 2. Соединение или его соль по п.1, где η равен 1.
3. 3. Соединение или его соль по любому из пп.1 или 2, где К² представляет собой Н и К³ представляет собой Н.
4. 4. Соединение или его соль по любому из пп.1-3, где К¹ выбран из группы, состоящей из С1 и -О(С1-С4 алкила).
5. 5. Соединение или его соль по любому из пп.1-4, где указанное соединение представляет собой Кизомер.
6. 6. Соединение по любому из пп.1-5 формулы или его фармацевтически приемлемая соль.
7. 7. Соединение по любому из пп.1-5 формулы или его фармацевтически приемлемая соль.
8. 8. Фармацевтическая композиция, ингибирующая диацилглицеролацилтрансферазу 1, содержащая соединение по любому из пп.1-7 или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемый носитель.
9. 9. Применение соединения по любому из пп.1-7 или его фармацевтически приемлемой соли в качестве лекарственного средства для лечения диабета и/или ожирения.

   Евразийская патентная организация, ЕАПВ

   Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2