CN102666543B - 二酰基甘油酰基转移酶抑制剂 - Google Patents

二酰基甘油酰基转移酶抑制剂 Download PDF

Info

Publication number
CN102666543B
CN102666543B CN201080055334.9A CN201080055334A CN102666543B CN 102666543 B CN102666543 B CN 102666543B CN 201080055334 A CN201080055334 A CN 201080055334A CN 102666543 B CN102666543 B CN 102666543B
Authority
CN
China
Prior art keywords
benzo
aza
dihydro
imidazo
compound
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CN201080055334.9A
Other languages
English (en)
Other versions
CN102666543A (zh
Inventor
M·B·阿诺尔德
T·J·博尚
E·J·加纳达
E·J·亨布雷
J·陆
J·R·里佐
J·M·绍斯
Q·史
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Eli Lilly and Co
Original Assignee
Eli Lilly and Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Eli Lilly and Co filed Critical Eli Lilly and Co
Publication of CN102666543A publication Critical patent/CN102666543A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN102666543B publication Critical patent/CN102666543B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4164—1,3-Diazoles
    • A61K31/4188—1,3-Diazoles condensed with other heterocyclic ring systems, e.g. biotin, sorbinil
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Child & Adolescent Psychology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)

Abstract

本发明提供了式(I)化合物或其可药用盐，其是二酰基甘油酰基转移酶1(DGAT-1)；以及治疗肥胖症的方法、治疗糖尿病的方法和药物组合物。

Description

二酰基甘油酰基转移酶抑制剂
本发明提供了抑制二酰基甘油酰基转移酶1(DGAT-1)的化合物。
已提出抑制甘油三酯合成中的关键酶DGAT-1可以提供治疗肥胖症和/或改善胰岛素敏感性的新方法。尽管已报道DGAT是小分子抑制剂的优良靶点，但是仅已报道有限数量的化合物抑制DGAT-1活性。没有已知的DGAT-1抑制剂被批准用于药物用途。因此，需要抑制DGAT-1的更多的小分子。特别希望具有期望的药理学特性的DGAT-1抑制剂化合物。
US2008/0090876(Cheng等人)公开了报道为DGAT调节剂的化合物。Cheng公开的化合物是四氢噻喃酰胺(thianecarboxamides)。WO98/28268(We等人)中报道了作为β-淀粉样肽释放抑制剂的环烷基、内酰胺、内酯和相关化合物，其用于治疗阿尔茨海默病。美国专利5,696,111(Balwin等人)公开了酰基苯并氮杂作为可以用于治疗心率失常的化合物。相反，本文要求的咪唑并-苯并氮杂是与Cheng、We和Balwin的化合物在结构上不同的。此外，没有We或Balwin的化合物可以用作DGAT-1抑制剂的教导或启示。2010年5月20日公布的WO2010/056496中报道了氮杂酮化合物是DGAT的调节剂。WO2010/056496中报道的氮杂酮化合物与本文要求的咪唑并-苯并氮杂在结构上是不同的。
本发明化合物是潜在的DGAT-1的抑制剂。本发明提供了预期的新治疗选择，与商购可获得的治疗相比，其通过独特的药理学机制起作用。此外，与DGAT-2相比，本发明的某些化合物选择性抑制DGAT-1。作为选择性DGAT-1抑制剂，本发明化合物的药理学特征可以特别预期用于治疗肥胖症和/或改善胰岛素敏感性。
本发明提供了式I化合物或其可药用盐：
其中
R1选自H、F、Cl、-CF3、-CH3、-OH、-O(C1-C4烷基)、-O-环丙基、-O-CH2-苯基、-OC(H)F2和-OCF3；
R2选自H和-CH3；
R3选自H和-CH3；条件是基团R2和R3中至少一个是H；并且
n是1、2或3。
优选地，本发明提供了式I化合物或其可药用盐：
其中
R1选自H、F、Cl、-CF3、-CH3、-OH、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH2CH2CH3、-OCH2CH(CH3)2、-O-环丙基、-O-CH2-苯基、-OC(H)F2和-OCF3；n是1或3；并且R2和R3各自是H。
优选地，本发明提供了式I化合物或其可药用盐：
其中
R1选自H、F、Cl、-CF3、-CH3、-OH、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH2CH2CH3、-OCH2CH(CH3)2、-O-环丙基、-O-CH2-苯基、-OC(H)F2和-OCF3；并且
n是1。
优选地，本发明提供了式I化合物或其可药用盐：
其中
R1选自H、F、Cl、-CF3、-CH3、-OH、-O(C1-C4烷基)、-O-环丙基、-O-CH2-苯基、-OC(H)F2和-OCF3；并且n是3。
优选地，本发明提供了式I化合物或其可药用盐：
其中
R1选自H、F、Cl、-CF3、-CH3、-OH、-O(C1-C4烷基)、-O-环丙基、-O-CH2-苯基、-OC(H)F2和-OCF3；n是3；并且R3是H。
优选地，本发明提供了式I化合物或其可药用盐：
其中
R1选自H、F、Cl、-CF3、-CH3、-OH、-O(C1-C4烷基)、-O-环丙基、-O-CH2-苯基、-OC(H)F2和-OCF3；n是1；并且R3是H。
可以优选以下：
其中R3是H的式I化合物或其盐是优选的。
其中n是1或3的式I化合物或其盐是优选的。
其中n是1的式I化合物或其盐是优选的。
其中R2是H并且R3是H的式I化合物或其盐也是优选的。
其中化合物是R异构体的式I化合物或其盐是优选的。
其中R1选自F、Cl、-CF3、-CH3、-OH、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH2CH2CH3、-OCH2CH(CH3)2、-O-环丙基、-O-CH2-苯基、-OC(H)F2和-OCF3的式I化合物或其盐是优选的。
其中R1选自F、Cl和-O(C1-C4烷基)的式I化合物或其盐是优选的。
其中R1选自Cl和-O(C1-C4烷基)的式I化合物或其盐是优选的。
其中R1是-OCH2CH3的式I化合物或其盐是优选的。
其中R1是Cl的式I化合物或其盐是优选的。
其中R2是CH3并且R3是H的式I化合物或其盐也是优选的。
其中n是3的化合物是优选的。
优选的实施方案是下式化合物或其可药用盐：
优选的实施方案是下式化合物或其可药用盐：
式I化合物可以是外消旋混合物的形式。优选的异构体是“R”立体形式，如下文中式II所示的。
优选地，本发明提供了具有以下式II所示的异构体构象的式I化合物或其可药用盐：
可以合成式I化合物，然后可以通过手性色谱法分离R和S异构体。可以应用手性合成法来合成式I化合物，以特异性合成优选的R异构体。
本发明的进一步的实施方案提供了本发明要求的化合物或其可药用盐在制备用于治疗糖尿病和/或肥胖症的药物中的用途。本发明的另一个实施方案是本发明要求的化合物或其盐，其用于治疗肥胖症。本发明的进一步的实施方案是本文要求的化合物或其盐，其用于治疗。本发明的进一步的实施方案是本发明要求的化合物或其可药用盐，其用于治疗糖尿病。此外，本发明涉及本发明要求的化合物，其用于改善哺乳动物的胰岛素敏感性。
本发明提供了治疗哺乳动物肥胖症的方法，该方法包括给哺乳动物施用本发明要求的化合物或其可药用盐的步骤。本发明提供了治疗哺乳动物糖尿病和/或改善哺乳动物胰岛素敏感性的方法，该方法包括给哺乳动物施用本发明要求的化合物或其可药用盐的步骤。本发明的进一步的实施方案是治疗哺乳动物血脂异常的方法，该方法包括给哺乳动物施用本发明要求的化合物或其可药用盐的步骤。本发明的进一步的实施方案是治疗哺乳动物痤疮的方法，该方法包括给哺乳动物施用本发明要求的化合物或其可药用盐的步骤。本发明的进一步的实施方案是治疗丙型肝炎病毒(HCV)感染的方法，该方法包括给哺乳动物施用本发明要求的化合物或其可药用盐的步骤。
在另一个实施方案中，本发明还涉及包含本发明要求的化合物或其可药用盐和可药用载体的药物组合物。进一步的实施方案是进一步包含第二种药物活性剂的本发明的药物组合物。
在另一个实施方案中，本发明涉及包含本发明要求的化合物或其可药用盐、可药用载体和羟丙基甲基纤维素的制剂。进一步的实施方案是药物制剂，其中羟丙基甲基纤维素是羟丙基甲基纤维素乙酸琥珀酸酯(HPMC-AS-L)。进一步的实施方案是制备包含本发明要求的化合物或其可药用盐与羟丙基甲基纤维素接触的制剂的方法。进一步的实施方案是制备其中羟甲基纤维素是羟丙基甲基纤维素乙酸琥珀酸酯(HPMC-AS-L)的药物制剂的方法。
“可药用盐”指的是认为可接受用于临床和/或兽医用途的本发明化合物的盐。这些盐可以通过技术人员已知的方法制备。可药用盐和制备它们的常用方法是本领域众所周知的。参见，例如P.Stahl等人，HANDBOOKOF PHARMACEUTICAL SALTS：PROPERTIES，SELECTION ANDUSE(药用盐手册：性质、选择和用途)(VCHA/Wiley-VCH，2002)；S.M.Berge等人，“Pharmaceutical Salts(药用盐)”，Journal of PharmaceuticalSciences，第66卷，第1期，1977年1月。优选将本发明化合物制备为通过多种途径施用的药物组合物。术语“可药用载体”意指载体、稀释剂、赋形剂和盐与组合物的其它成分是药学上可配伍的。最优选地，这些组合物是用于口服施用的。可药用组合物及其制备方法是本领域众所周知的。参见，例如REMINGTON：THE SCIENCE AND PRACTICE OFPHARMACY(雷明顿：药学科学与实践)(A.Gennaro等人编，第19版，Mack Publishing Co.，1995)。
可应用流程图A、B、C、D、E、F、G、H、I和J中所述的方法并且如制备例和实施例所描述的来制备本发明的化合物。将制备例和实施例应用Draw Version 3.1命名。
本文的流程图、制备例、实施例和方法中所用的术语和缩略语具有它们的通常含义，除非另外指定。
该流程图、制备例、实施例和方法中所用的术语和缩略语具有它们的通常含义，除非另外指定。例如，本文所用的以下术语具有所示的含义：N，N-二甲基甲酰胺(DMF)；甲基叔丁基醚(MTBE)；四氢呋喃(THF)；模拟移动床(SMB)色谱；甲醇(MeOH)；氢氧化锂(LiOH)；N-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)；碘化亚铜(CuI)；[1，3-二(2，6-二异丙基苯基)咪唑-2-亚基](3-氯吡啶基)二氯化钯(II)：碘化亚铜(I)(PEPPSITM)；N，N-二甲基乙基胺(DMEA)；和1，3，5，2，4，6-三氧杂三磷杂环己烷，2，4，6-三丙基-2，4，6-三氧化物(T3P)。
流程图A
在以上流程图中，优选地，R1选自H、F、Cl、-CF3、-CH3、-OH、-O(C1-C4烷基)、-O-环丙基、-O-CH2-苯基、-OC(H)F2和-OCF3。更优选地，R1是-O(C1-C4烷基)或Cl。最优选地，R1是-OCH2CH3或Cl。
制备例1
1-[(4-乙氧基苯甲酰基)氨基]环丙烷甲酸乙酯
将草酰氯(189mL，2.17mol)加入到在二氯甲烷(3L)中的4-乙氧基苯甲酸(334.5g，1.99mol)和N，N-二甲基甲酰胺(1mL)中。在25-26℃下1小时后，减压浓缩混合物，直到获得恒重。在冰水浴中搅拌1-氨基环丙烷甲酸乙酯盐酸盐(300g，1.81mol)和二氯甲烷(2.5L)。加入三乙胺(631mL，4.53mol)，然后加入酰基氯(约380g)的二氯甲烷(500mL)溶液。将反应混合物在环境温度下搅拌约16小时。将反应用1N盐酸水溶液(1L)稀释。用二氯甲烷(1L)萃取水层。用水(2L)和盐水(2L)洗涤有机层。经硫酸钠干燥溶液，过滤并且减压浓缩。在己烷中使残留物成浆状(slurry)并且过滤，得到标题化合物(478g，95％)，为乳白色粉末：MS(质谱)(m/z)：278(M+1)。
制备例2
1-[(4-乙氧基苯甲酰基)氨基]环丙烷甲酸
将1-[(4-乙氧基苯甲酰基)氨基]环丙烷甲酸乙酯(478g，1.72mol)加入到四氢呋喃(2L)和甲醇(1L)中。将氢氧化锂(LiOH)(144.7g，3.45mol)溶于水(1L)中，并且将其加入至混合物中。搅拌反应混合物，同时加热至55℃。将反应冷却至环境温度并且减压浓缩。除去2.5L溶剂后，将混合物用水(2L)稀释，并且将其浸于冰水浴中。用5N盐酸水溶液(750mL)调至pH 2。过滤沉淀物，用水(2×2L)洗涤滤饼，并且干燥，得到标题化合物(425g，99％)，为白色粉末：MS(m/z)：250(M+1)。
制备例3
1-[(4-氯苯甲酰基)氨基]环丙烷甲酸乙酯
将1-氨基环丙烷甲酸乙酯(89.2g，0.54mol)加入到在二氯甲烷(900mL)中的二异丙基乙基胺(187.86mL，1.08mol)中。将烧瓶浸于冷水浴中，并且缓慢加入4-氯苯甲酰氯(75.46mL，0.59mol)。加入完成后，除去水浴，将反应保持平衡至20℃，并且搅拌约2小时。用1N盐酸(HCl)洗涤，然后用饱和碳酸氢钠(NaHCO3)、水洗涤，然后用盐水洗涤。经硫酸钠(Na2SO4)干燥有机层，过滤并且减压浓缩。用庚烷使残留物成浆状，过滤并且用庚烷冲洗，得到标题化合物(142g，98％)，为白色粉末：MS(m/z)：268(M+1)。
制备例4
1-[(4-氯苯甲酰基)氨基]环丙烷甲酸
向在1，4-二烷(2.4L)中的1-[(4-氯苯甲酰基)氨基]环丙烷甲酸乙酯(157g，0.58mol)中加入氢氧化锂(123.05g，2.93mol)的水(1.2L)溶液。将反应混合物在环境温度下搅拌4小时，然后将其减压浓缩。用水(1L)稀释混合物，并且将其浸于冰水浴中。用5N的HCI水溶液调节pH至约2。过滤沉淀物，用水(3×1L)洗涤滤饼，并且干燥(50℃，真空干燥箱)，得到(132g，94％)标题化合物，为白色粉末：MS(m/z)：240(M+1)。
制备例5
N-[(3R)-2-氧代-1，3，4，5-四氢-1-苯并氮杂-3-基]氨基甲酸苄酯
将甲醇(5000mL)和5N盐酸水溶液(1393mL，5.57mol)合并，并且加热至35℃达15分钟。历经1小时，分批加入N-[(3R)-2-氧代-1，3，4，5-四氢-1-苯并氮杂-3-基]氨基甲酸叔丁酯(Armstrong III，Joseph D等人，Tetrahedron Let.35(20)，第3239-3242页(1994)(770g，mmol，并且是商购可获得的)。将混合物减压浓缩成白色固体。将该固体与另外的(3R)-3-氨基-1，3，4，5-四氢-1-苯并氮杂-2-酮(不同批次，相同方法；660g，3.78mol)合并，并且溶于水(2.5L)中。在产生的溶液中加入碳酸钠(3.17kg，3.18mol)和乙腈(7.5L)。历经2小时滴加氯甲酸苄酯(7.14mol，1.21Kg)。在环境温度下2小时后，加入乙酸乙酯(8L)并且过滤。用水(4.0L)、乙腈(2.0L)和乙酸乙酯(3.0L)洗涤湿滤饼。将固体减压干燥48小时，得到标题化合物(2.14kg，105％)：MS(m/z)：310.8(M+1)。
制备例6
N-(2-硫代-1，3，4，5-四氢-1-苯并氮杂-3-基)氨基甲酸苄酯
历经30分钟，向在2-甲基-四氢呋喃(15L)中的N-[(3R)-2-氧代-1，3，4，5-四氢-1-苯并氮杂-3-基]氨基甲酸苄酯(2.13kg，6.88mol)中加入五硫化磷(1.68kg，7.57mol)并且加热至50℃达24小时。冷却至29℃，加入硅胶(2.0Kg)，过滤并且减压浓缩。将产生的残留物溶于氯仿(4.0L)中，并且通过色谱(1∶1乙酸乙酯∶己烷)纯化，得到标题化合物(1.65kg，73％)，为红色固体：MS(m/z)：327(M+1)。
制备例7
N-[2-(2，2-二甲氧基乙基氨基)-4，5-二氢-3H-1-苯并氮杂-3-基]氨基甲酸苄酯
将N-(2-硫代-1，3，4，5-四氢-1-苯并氮杂-3-基)氨基甲酸苄酯(1.78Kg，5.13mol)和对甲苯磺酸一水合物(48.8g，256mmol)溶于二氯甲烷(12L)中。历经1小时，滴加氨基乙醛二甲基缩醛(2.70Kg，25mol)，并且在环境温度下搅拌36小时。加入另外的氨基乙醛二甲基缩醛(1.40Kg，13mol)，并且在环境温度下搅拌12小时。加入水(5.0L)，分离有机层，并且用二氯甲烷(2.0L)萃取水层。合并有机层，并且用水、饱和氯化铵(6.0L)和盐水(4.0L)洗涤。通过硅藻土过滤有机层，并且减压浓缩，得到标题化合物(2.30kg，118％)，为黄色油状物：MS(m/z)：398(M+1)。
制备例8
N-[(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基]氨基甲酸苄酯
将N-[2-(2，2-二甲氧基乙基氨基)-4，5-二氢-3H-1-苯并氮杂-3-基]氨基甲酸苄酯(1.80kg，4.1mol)和甲酸(6.4L)在95℃下加热80分钟。将混合物减压浓缩，得到黑色油状物，并且将其在二氯甲烷(7.0L)和水(5L)之间分配。加入碳酸钠，直到水层的pH是7。除去有机层，并且用水(3×)洗涤。用二氯甲烷萃取水层。合并有机层，并且减压浓缩，得到黑色油状物。将2.297kg的黑色油状物分成约250g的等份，并且将各份溶于二氯甲烷(250mL)中。加入3.5kgMerck 9385，60A，230-400目的二氧化硅。用75∶25的乙酸乙酯/庚烷稀释目标化合物，从6个柱体积开始(更快流出的杂质首先流出)。随后用5∶95的甲醇/乙酸乙酯，以除去剩余的产物(回收1082g)。应用以下手性HPLC条件测试产物混合物：4.6×150mm Chiralpak AD-H柱，15∶85∶0.2乙腈/3A级乙醇/二甲基乙基胺流动相，0.6mL/分钟流速，250nm UV检测。在这些条件下观察到需要的/非需要的异构体比例3∶2。用20∶80乙腈/3A乙醇，以30mg/mL溶解异构体混合物。应用以下制备型手性HPLC纯化异构体：8×40.5cm Chiralpak AD(20微米)柱，20∶80∶0.2乙腈/3A乙醇/N，N-二甲基乙基胺(DMEA)流动相；490mL/分钟流速；250nmUV检测，1.5g(50mL)进样，应用Steady State Recycle(SSR)技术(J.H.Kennedy，M.D.Belvo，V.S.Sharp，J.D.Williams，Comparison ofseparationefficiency of ea rly phase active pharmaceutical intermediates by steadystate recycle and batch chromatographic techniques (比较利用稳态再循环和批次色谱技术的早期相活性药物中间体的分离效率)，Journal ofChromatography A，1046，第55-60页(2004))4.6分钟循环时间/进样。0.4-0.9分钟收集异构体1，并且2.4-4.2分钟收集异构体2。需要的异构体(异构体2；R异构体)是第二个流出物：N-[(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基]氨基甲酸苄酯。减压浓缩含有产物的级分，得到标题化合物(615g，73％)，为白色固体：MS(m/z)：334(M+1)。
制备例9
(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-胺二氢碘酸盐
将碘代三甲基硅烷(783mL，5.49mol)加入到二氯甲烷(800mL)中，并且在冰水浴中冷却。将N-[(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基]氨基甲酸苄酯(610g，1.83mol)溶于二氯甲烷(1L)中，并且加入到碘代三甲基硅烷溶液中。加入完成后，除去冰水浴，并且将反应在环境温度下搅拌约16小时。在冰水浴中搅拌己烷(6L)和乙醇(1L)的混合物。将反应混合物小心加入到搅拌的己烷/乙醇混合物中，以避免起泡。在环境温度下搅拌10分钟。通过过滤除去产生的固体，并且用己烷(3×2L)洗涤滤饼，得到标题化合物(817.1g，98％)，为橙色自由流动的固体：MS(m/z)：200(M+1)。
制备例10
(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-胺
将N-[(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基]氨基甲酸苄酯(120.0g，359.9mmol)和乙醇(2.0L)在Büchi氢化器中合并，并且加入在甲苯(200mL)中制成浆液的10％钯碳(Pd/C)(10.0g，9.4mmol)。将混合物氢化(60psi，环境温度)约64小时。将混合物通过硅藻土过滤，并且用THF(300mL)洗涤滤饼。减压浓缩滤液，得到标题化合物(60g，84％)，为白色泡沫状物：MS(m/z)：200(M+1)。
实施例1
N-[1-[[(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基]氨基甲酰基]环丙基]-4-乙氧基-苯甲酰胺
将(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-胺二氢碘酸盐(650g，1.43mol)、1-[(4-乙氧基苯甲酰基)氨基]环丙烷甲酸(427g，1.71mol)和1-羟基苯并三唑水合物(262.5g，1.71mol)加入到二氯甲烷(3L)中。在冰水浴中搅拌混合物，并且缓慢加入二异丙基乙基胺(797mL，4.57mol)。历经10分钟，加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(333.6g，1.71mol)。除去冰水浴，并且将混合物在环境温度下搅拌约16小时。用水(3×4L)洗涤反应混合物。将有机相经硫酸钠干燥。过滤并且将混合物减压浓缩至约1L的体积。用乙酸乙酯(4L)稀释残留物。减压除去2L溶剂。将混合物在环境温度下静置1小时。通过过滤分离产生的沉淀物，并且用己烷(2×2L)洗涤滤饼，得到标题化合物(569.9g，93％)，为浅黄褐色固体：MS(m/z)：431(M+1)。H1NMR(399.81MHz，DMSO)：8.91(s，1H)，7.95-7.93(d，J＝7.5Hz，1H)，7.87-7.83(d，J＝8.7Hz，2H)，7.49(d，J＝1.4Hz，1H)，7.44-7.43(d，J＝7.6Hz，1H)，7.38(m，2H)，7.34-7.29(m，1H)，7.00-6.96(d，J＝8.7Hz，2H)，6.95(d，J＝1.3Hz，1H)，4.65-4.60(m，1H)，4.08(q，J＝7.0Hz，2H)，2.70-2.65(m，1H)，2.59-2.56(m，1H)，2.33-2.28(m，1H)，2.04-2.00(m，1H)，1.34-1.31(m，4H)，1.27-1.25(m，1H)，1.03-0.98(m，1H)，0.96-0.90(m，1H)。
实施例2
4-氯-N-[1-[[(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基]氨基甲酰基]环丙基]苯甲酰胺
将1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(29g，151mmol)加入到(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-胺(30g，151mmol)、1-羟基苯并三唑(20g，151mmol)、三乙胺(41.97mL，301mmol)和1-[(4-氯苯甲酰基)氨基]环丙烷甲酸(40g，166mmol)在THF(300mL)中的10℃浆液中。除去冰浴，将混合物温至环境温度，并且将其搅拌4小时。将混合物倒入水(1.0L)中，并且用乙酸乙酯(1.0L)萃取。用饱和的碳酸氢钠(100mL)洗涤有机相，经硫酸镁干燥，过滤并且减压浓缩。在乙酸乙酯(300mL)中将残留物制成浆液，并且加热至71℃。冷却至环境温度，过滤沉淀物，并且用乙酸乙酯(100mL)洗涤，得到标题化合物(38.8g，61％)：MS(m/z)：421(M+1)。
流程图B
在流程图B中，手性合成方法产生“R”异构体。
制备例11
(3R)-3-氨基-1，3，4，5-四氢-1-苯并氮杂-2-酮盐酸盐
在1，4-二烷(100mL，1.17mol)中将N-[(3R)-2-氧代-1，3，4，5-四氢-1-苯并氮杂-3-基]氨基甲酸叔丁酯(基本上通过Armstrong III，Joseph D等人，Tetrahedron Let.35(20)，第3239-3242页(1994)中描述的方法制备，15g，54.28mmol)制备成浆液，并且将其在冰浴中冷却。迅速加入在二烷中的HCl(100mL，4.0M)，并且加入后除去冰浴。3小时后，加入更多的在二烷中的HCl(100mL，4.0M)。将反应搅拌约16小时。通过过滤收集固体，用少量的醚洗涤，并且在干燥箱中干燥，得到标题化合物(11.2g，99％)，为白色固体：MS(m/z)：177(M+1)。
制备例12
N-[(3R)-2-氧代-1，3，4，5-四氢-1-苯并氮杂-3-基]氨基甲酸苄酯
将碳酸钾(K2CO3)(19.50g，141.06mmol)溶于水(36mL)中，并且将其加入到1-氨基-1，3，4，5-四氢-2H-苯并氮杂-2-酮HCl盐(6g，28.21mmol)的二氯甲烷(CH2Cl2)(270mL)溶液中。加入氯甲酸苄酯(6.24mL，42.32mmol)，并且将反应混合物在环境温度下剧烈搅拌约16小时。通过过滤收集沉淀物，用水和醚洗涤，并且在真空干燥箱中干燥，得到标题化合物(7.2g，82％)，为白色固体：MS(m/z)：311(M+1)。
制备例13
N-[(3R)-2-硫代-1，3，4，5-四氢-1-苯并氮杂-3-基]氨基甲酸苄酯
将Lawesson试剂(12.25g，30.29mmol)加入到N-[(3R)-2-氧代-1，3，4，5-四氢-1-苯并氮杂-3-基]氨基甲酸苄酯(9.4g，30.29mmol)的四氢呋喃(470mL)溶液中，并且在氮气、环境温度下将反应搅拌约16小时。通过过滤除去沉淀物并且弃去。减压浓缩滤液，并且将残留物溶于乙酸乙酯中。用水和盐水洗涤，经硫酸钠干燥，并且减压浓缩有机层，得到浓稠的黄色油状物。将醚加入到浓稠油状物中并且搅拌(scratch)，以形成固体。通过过滤收集固体，并且用醚洗涤。用醚研磨固体，并且通过过滤收集，得到标题化合物(7.28g，74％)，为白色固体：MS(m/z)：349(M+23)。
制备例14
N-[(3R)-2-(2，2-二甲氧基乙基氨基)-4，5-二氢-3H-1-苯并氮杂-3-基]氨基甲酸苄酯
将N-[(3R)-2-硫代-1，3，4，5-四氢-1-苯并氮杂-3-基]氨基甲酸苄酯(8.71g，26.68mmol)、二氯化汞(HgCl2)(9.42g，34.69mmol)和氨基乙醛二甲基缩醛(11.65mL，106.73mmol)在四氢呋喃(250mL)中合并，并且加热至55℃达20分钟。将混合物冷却至环境温度，并且通过硅藻土过滤。用THF和乙酸乙酯洗涤滤饼，并且减压浓缩滤液。将产生的油状物溶于二氯甲烷中，用温水(4×)和盐水洗涤，经硫酸钠干燥，并且减压浓缩有机层，得到标题化合物(9.78g，92％)，为固体：MS(m/z)：398(M+1)。
制备例15
N-[(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基]氨基甲酸苄酯
将N-[(3R)-2-(2，2-二甲氧基乙基氨基)-4，5-二氢-3H-1-苯并氮杂-3-基]氨基甲酸苄酯(9.78g，24.61mmol)溶于甲酸(60mL，96％)中，并且在100℃下加热1.5小时。将混合物冷却，并且通过玻璃棉填料过滤而除去黑色沉淀物。减压浓缩滤液，将其倒入水中，并且用1M NaOH碱化。在产生的沉淀中加入乙酸乙酯，并且分离有机层。用乙酸乙酯萃取水层。合并，洗涤(盐水)，经硫酸钠干燥并且减压浓缩有机层，得到标题化合物(6.95g，85％)：MS(m/z)：334(M+1)，97.8％ee，异构体1(R异构体)的保留时间，4.58分钟；异构体2(S异构体)的保留时间，3.20分钟(Chiralpak AD-H柱；含有0.2％二甲基乙基胺的100％EtOH；流速1.0mL/分钟；225nM)。
制备例16
(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-胺
将N-[(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基]氨基甲酸苄酯(6.95g，20.85mmol)溶于无水乙醇(375mL，6.44mol)中，并且加入10％的钯碳(Pd/C)(0.70g，6.57mmol)。在氢气(H2)下，将混合物置于Parr振荡器上达7小时(60psi，环境温度)。通过过滤除去催化剂，并且减压浓缩滤液，得到标题化合物(4.17g，100％)，为黄色固体：MS(m/z)：200(M+1)。
流程图C
在流程图C中，合成方法产生外消旋混合物。
制备例17
N-(2-硫代-1，3，4，5-四氢-1-苯并氮杂-3-基)氨基甲酸苄酯
将Lawesson试剂(6.52g，16.11mmol)加入到N-[(3R)-2-氧代-1，3，4，5-四氢-1-苯并氮杂-3-基]氨基甲酸苄酯(10.0g，32.22mmol)的甲苯(120mL)溶液中，并且在氮气、100℃下，将反应加热2.5小时。将反应物冷却，并且通过过滤收集沉淀物。洗涤(醚)滤饼，并且将其在真空干燥箱中干燥，得到标题化合物(5.5g，16.8mmol)。减压浓缩滤液，并且将其通过快速色谱纯化(30％己烷/CH2Cl2至100％CH2Cl2)，得到标题化合物(3.48g，10.7mmol)。化合物是部分外消旋的。标题化合物的总产率是85％：MS(m/z)：327(M+1)。
制备例18
N-[2-(2，2-二甲氧基乙基氨基)-4，5-二氢-3H-1-苯并氮杂-3-基]氨基甲酸苄酯
用N-(2-硫代-1，3，4，5-四氢-1-苯并氮杂-3-基)氨基甲酸苄酯(4.2g，12.87mmol)作为原料，应用制备例14的方法，得到标题化合物(4.68g，92％)，为黄褐色固体：MS(m/z)：398(M+1)。
制备例19
N-(5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基)氨基甲酸苄酯
用N-[2-(2，2-二甲氧基乙基氨基)-4，5-二氢-3H-1-苯并氮杂-3-基]氨基甲酸苄酯(4.6g，11.57mmol)作为原料，应用制备例15的方法，得到标题化合物(3.8g，88％)：MS(m/z)：334(M+1)。
制备例20
5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-胺
用N-(5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基)氨基甲酸苄酯(3.36g，10.08mmol)作为原料，应用制备例16的方法，得到标题化合物(2.2g，100％)，为黄色油状物：MS(m/z)：200(M+1)。
流程图D
制备例21
N-[(3R)-1-丙酮基-2-氧代-4，5-二氢-3H-1-苯并氮杂-3-基]氨基甲酸苄酯
将粉末状的氢氧化钾(KOH)(0.72g，12.89mmol)加入到N-[(3R)-2-氧代-1，3，4，5-四氢-1-苯并氮杂-3-基]氨基甲酸苄酯(2.0g，6.44mmol)、氯丙酮(1.19g，12.89mmol)和四丁基氟化铵(1.29mL，1.29mmol，1M的THF溶液)的四氢呋喃(65mL)溶液中。将混合物在环境温度下搅拌约16小时。在反应中加入另外的氢氧化钾(0.361g，6.44mmol)、氯丙酮(0.59g，6.44mmol)、四丁基氟化铵(0.65mL，0.65mmol，1M的THF溶液)和THF(20mL)，并且在环境温度下搅拌约48小时。通过硅藻土过滤反应混合物，并且减压浓缩滤液。通过快速色谱纯化残留物(10％乙酸乙酯/己烷至100％乙酸乙酯)，得到标题化合物(1.64g，65％)：MS(m/z)：389(M+23)。
制备例22
N-(2-甲基-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基)氨基甲酸苄酯
将N-[(3R)-1-丙酮基-2-氧代-4，5-二氢-3H-1-苯并氮杂-3-基]氨基甲酸苄酯(0.7g，1.91mmol)和乙酸铵(2.94g，38.2mmol)合并于乙酸(20.0mL)中，并且在115℃下加热24小时，然后在环境温度下将混合物搅拌约16小时。将反应混合物倒入冰水中，用氢氧化铵碱化(28-30％)，并且用二氯甲烷萃取。用水和盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且减压浓缩有机层。通过快速色谱(10％乙酸乙酯/己烷至50％乙酸乙酯/己烷)，然后通过SCX柱(甲醇，然后10％在甲醇/CH2Cl2中的2N氨)纯化残留物，得到标题化合物(0.21g，32％)，为白色固体：MS(m/z)：348(M+1)。(基于从该中间体制备的最终化合物，标题化合物是部分外消旋的)。
制备例23
2-甲基-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-胺
用N-(2-甲基-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基)氨基甲酸苄酯(0.19g，0.55mmol)作为原料，应用制备例16中的方法，得到标题化合物(0.082g，69％)：MS(m/z)：214(M+1)。
流程图E
制备例24
N-[(3R)-2-甲硫基-4，5-二氢-3H-1-苯并氮杂-3-基]氨基甲酸苄酯
将N-[(3R)-2-硫代-1，3，4，5-四氢-1-苯并氮杂-3-基]氨基甲酸苄酯(1.5g，4.60mmol)溶于THF(40mL)中，冷却至0℃，并且将氢化钠(NaH)(192.9mg，4.83mmol，60％，在矿物油中)立刻全部加入。除去浴，并且将反应在氮气下搅拌约1小时。加入碘甲烷(300μL，4.83mmol)，并且在环境温度下搅拌约1小时。减压浓缩反应，以除去大部分THF，用乙酸乙酯稀释残留物，并且用饱和碳酸氢钠和盐水洗涤，经硫酸钠干燥，并且减压浓缩有机层，得到标题化合物(1.5g，96％)，为白色固体：MS(m/z)：341(M+1)。
制备例25
N-(1-甲基-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基)氨基甲酸苄酯
将N-[(3R)-2-甲硫基-4，5-二氢-3H-1-苯并氮杂-3-基]氨基甲酸苄酯(500mg，1.47mmol)、炔丙基胺(197.28μL，2.94mmol)和对甲苯磺酸一水合物(30mg，157.71μmol)合并于苯基醚-联苯混合物(2mL，6.53mmol)(Dowtherm A)中，并且将混合物在180℃下搅拌约45分钟。冷却反应，并且加入醚(20mL)，然后加入2M HCl(20mL)。搅拌几分钟，除去水层，并且用2N HCl(2×)萃取有机层。合并水层，并且用氢氧化铵(28％)碱化至碱性。通过过滤收集沉淀，将其用水洗涤，并且在真空干燥箱中干燥。通过快速色谱纯化沉淀(50％的5％氨/甲醇(2M)的二氯甲烷溶液至90％的所述5％溶液)，得到标题化合物(358mg，70％)，为类白色固体：MS(m/z)：348(M+1)。异构体1(S异构体)的保留时间＝3.3分钟；异构体2(R异构体)＝3.7分钟。(Chiralpak AD-H柱；含有0.2％二甲基乙基胺的100％EtOH；流速1.0mL/分钟；225nM)。手性分析表明约20％的外消旋化。
制备例26
1-甲基-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-胺
将N-(1-甲基-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基)氨基甲酸苄酯(0.99g，2.85mmol)和10％Pd/C(200mg，1.88mmol)合并于无水乙醇(50mL)中。将混合物置于Parr振荡器上达7小时(氢气(H2)，60psi，环境温度)。通过过滤除去催化剂，在滤液中加入10％Pd/C(200mg，1.88mmol)，并且再将混合物置于Parr振荡器上达7小时(60psi，环境温度)。7小时后，加入更多的10％Pd/C(189mg，1.78mmol)，并且再振摇7小时。通过过滤除去催化剂，并且减压浓缩滤液，得到标题化合物(0.53g，87％)：MS(m/z)：214(M+1)。
流程图F
在流程图F中，R1选自H、F、Cl、-CF3、-CH3、-OH、-O(C1-C4烷基)、-O-环丙基、-O-CH2-苯基、-OC(H)F2和-OCF3；R2选自H和CH3；R3选自H和CH3，条件是基团R2和R3中至少一个是H；n＝1、2或3；并且R4可以是CH3或CH2CH3。优选地，R4是CH2CH3。
制备例27
1-溴-4-乙烯基氧基-苯
在4-溴苯酚(75g，433.5mmol)、乙酸乙烯酯(80.5mL，867.0mmol)和碳酸钠(27.6g，260.10mmol)在甲苯(430mL)中的混合物中加入二-μ-氯双((1，2，5，6-η)-1，5-环辛二烯)二铱(2.9g，4.34mmol)，并且将混合物在100℃下加热2.5小时。将混合物冷却至环境温度，用乙酸乙酯(EtOAc)(300mL)稀释，并且用水(400mL)洗涤一次。分离有机部分，并且用盐水(250mL)洗涤一次。经硫酸钠干燥该物质，过滤并且减压浓缩。通过快速色谱纯化粗混合物(0％至5％EtOAc/Hex)，得到标题化合物(63.5g，74％)：GCMS：198。
制备例28
1-溴-4-(环丙氧基)苯
在1-溴-4-乙烯基氧基-苯(31.75g，159.51mmol)和氯碘甲烷(101.3g，574.2mmol)的1，2-二氯乙烷(410mL)的0℃溶液中，历经1小时缓慢加入二乙基锌(1M，在庚烷中，380mL)，同时温度保持在低于5℃。将白色混合物在0-5℃下搅拌2小时。用饱和氯化铵水溶液(400mL，放热的)在5℃下缓慢猝灭反应并且分离各层。用乙醚(2×200mL)萃取水层。合并有机层，用饱和氯化铵(400mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并且减压浓缩，得到标题化合物(33g，97％)，为油状物：GCMS：212。
制备例29
4-(环丙氧基)苯甲酸
在1-溴-4-(环丙氧基)苯(33g，154.9mmol)的四氢呋喃(500mL)的-78℃溶液中加入1.6M在己烷中的丁基锂(96.8mL，154.9mmol)，同时保持温度低于-70℃。加入后，将混合物在-78℃下搅拌20分钟。以5分钟间隔分3批加入干冰(464.6mmol)。将混合物在-78℃下搅拌30分钟。除去冷却浴，并且用10％硫酸氢钠(NaHSO4)(200mL)猝灭混合物。将混合物温至环境温度，并且用EtOAc(300mL)萃取3×。合并有机物，并且用盐水洗涤一次，经硫酸钠干燥，过滤并且减压浓缩。将残留物悬浮于乙醚中并且过滤。在真空干燥箱中干燥固体，得到标题化合物(12.9g，47％)：MS(m/z)：179(M+1)。
制备例30
1-[[4-(环丙氧基)苯甲酰基]氨基]环丙烷甲酸乙酯
在4-环丙氧基苯甲酸(24.5g，137.3mmol)的二氯甲烷(350mL，含有2滴DMF)的0℃悬浮液中，缓慢加入草酰氯(23.8mL，274.7mmol)。加入后，除去冷却浴，并且搅拌2小时。减压浓缩物质至干燥。将残留物溶于二氯甲烷(500mL)中，然后加入1-氨基环丙烷甲酸乙酯盐酸盐(Indofine#04-265，24.9g，150.5mmol)和三乙胺(57.2mL，410.4mmol)。将混合物在环境温度下搅拌约16小时。将混合物用10％NaHSO4(250mL)洗涤一次。分离有机部分，并且用二氯甲烷(200mL)萃取水部分2×。合并有机物，经硫酸钠干燥，过滤并且减压浓缩。通过快速色谱纯化粗混合物(0％至45％EtOAc/Hex)，得到标题化合物(33.7g，85％)：MS(m/z)：290(M+1)。
制备例31
1-[(4-乙氧基苯甲酰基)氨基]环丙烷甲酸乙酯
将4-乙氧基苯甲酸(10.0g，60.18mmol)、1-氨基环丙烷甲酸乙酯盐酸盐(商购可获得的，10.96g，66.19mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)(13.84g，72.21mmol)和1-羟基苯并三唑(HOBT)(9.76g，72.21mmol)合并于四氢呋喃(500mL)中。历经3-5分钟，加入二异丙基乙基胺(DIEA)(23.09mL，132.39mmol)，并且将反应在氮气、环境温度下搅拌约16小时。用乙酸乙酯稀释混合物，用稀HCl、稀NaHCO3洗涤，然后用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，并且减压浓缩有机层。通过在乙醇中重结晶来纯化残留物，得到标题化合物(13.93g，84％)，为白色固体：MS(m/z)：278(M+1)。
表1中的制备例可以基本如制备例31的方法所述，应用第3列的试剂代替4-乙氧基苯甲酸来制备，然后可未经纯化而使用或者经重结晶(乙醇或甲醇)或快速色谱(10-50％范围的EtOAc/己烷梯度)纯化。对于制备例36和37，应用1-氨基环戊烷甲酸甲酯盐酸盐(可商购获得的)代替1-氨基环丙烷甲酸乙酯盐酸盐。通过在乙醇中重结晶纯化制备例32和35。通过快速色谱纯化制备例33和34。制备例36可未经纯化而使用。通过在甲醇中重结晶纯化制备例37。
表1
制备例38
1-[[4-(环丙氧基)苯甲酰基]氨基]环丙烷甲酸
在1-(4-环丙氧基苯甲酰氨基)环丙烷甲酸乙酯(33.7g，6.48mmol)的乙醇(380mL)溶液中加入氢氧化钠(174.7mL，174.7mmol)，并且将混合物在65℃下搅拌3小时。将物质冷却至环境温度，并且减压浓缩以除去乙醇。用10％NaHSO4酸化残留物。过滤产生的固体，并且用水(3×)和乙醚(2×)洗涤。在真空干燥箱中干燥物质，得到标题化合物(29.9g，98％)，为白色固体：MS(m/z)：262(M+1)。
制备例39
1-[(4-乙氧基苯甲酰基)氨基]环丙烷甲酸
将1-[(4-乙氧基苯甲酰基)氨基]环丙烷甲酸乙酯(4.25g，15.33mmol)溶于1，4-二烷(60mL)中，并且加入溶于水(30mL)中的氢氧化锂(LiOH)(3.22g，76.63mmol)。将反应在环境温度下搅拌约16小时。减压浓缩混合物，加入水，用5N HCl酸化，并且通过过滤收集沉淀，得到标题化合物(2.8g，73％)，为白色固体：MS(m/z)：248(M+1)。
表2中的制备例可以基本如制备例39的脱保护方法中所述的制备。
表2
实施例3
N-[1-[[(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并]1，2-a][1]苯并氮杂-4-基]氨基甲酰基]环丙基]-4-乙氧基-苯甲酰胺
将(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-胺(0.50g，2.51mmol)、1-[(4-乙氧基苯甲酰基)氨基]环丙烷甲酸(0.75mg，3.01mmol)、1-羟基苯并三唑(407mg，3.01mmol)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(577mg，3.01mmol)合并于四氢呋喃(40mL)中。加入二异丙基乙基胺(0.53mL，3.01mmol)，并且将反应在氮气、环境温度下搅拌约16小时。用乙酸乙酯稀释反应，用饱和碳酸氢钠和盐水洗涤，经硫酸钠干燥，并且减压浓缩有机层。通过快速色谱纯化残留物(25％EtOAc/己烷至100％EtOAc)，得到标题化合物(860mg，80％)：MS(m/z)：431(M+1)。
表3中的实施例可以基本如实施例3的方法中所述的制备。
表3
制备例46
4-(环丙氧基)-N-[1-(5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基氨基甲酰基)环丙基]苯甲酰胺
在5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-胺(400mg，2.01mmol)、1-(4-环丙氧基苯甲酰氨基)环丙烷甲酸(577mg，2.21mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(462mg，2.41mmol)和1-羟基苯并三唑水合物(369mg，2.41mmol)在二氯甲烷(8mL)中的混合物中，加入三乙胺(1.26mL，9.03mmol)，并且将混合物在环境温度下搅拌约16小时。通过快速色谱纯化粗混合物(0％至5％MeOH/二氯甲烷)，得到标题化合物(791mg，89％)，为黄褐色泡沫状物：MS(m/z)：443(M+1)。
实施例16
N-[1-[[(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基]氨基甲酰基]环丙基]-4-氟-苯甲酰胺
将(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-胺(95.0mg，0.48mmol)、1-[(4-氟苯甲酰基)氨基]环丙烷甲酸(128.0mg，0.57mmol)和O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲六氟磷酸盐(HATU)(218.0mg，0.57mmol)合并于N，N-二甲基甲酰胺(4mL)中。加入二异丙基乙基胺(0.21mL，1.19mmol)，并且将反应在氮气、环境温度下搅拌约16小时。用乙酸乙酯稀释反应，用饱和碳酸氢钠和盐水洗涤，经硫酸钠干燥，并且减压浓缩有机层。通过快速色谱(3％氨(2M)的甲醇/二氯甲烷溶液)纯化残留物，得到标题化合物(131.0mg，68％)：MS(m/z)：405(M+1)。
实施例17
N-[1-[[(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基]氨基甲酰基]环丙基]苯甲酰胺
实施例17可以基本如实施例17中的方法所述的制备。MS(m/z)：387(M+1)。产率63％。
流程图G
在流程图G中，R1选自H、F、Cl、-CF3、-CH3、-OH、-O(C1-C4烷基)、-O-环丙基、-O-CH2-苯基、-OC(H)F2和-OCF3；R2选自H和CH3；R3选自H和CH3，条件是基团R2和R3中至少一个是H；并且n＝1、2或3。
制备例47
N-[1-[[(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基]氨基甲酰基]环丙基]氨基甲酸叔丁酯
将(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-胺(570mg，2.86mmol)、1-(叔丁氧基羰基氨基)环丙烷甲酸(可商购获得的，633.19mg，3.15mmol)、1-羟基苯并三唑(464mg，3.43mmol)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(658mg，3.43mmol)合并于四氢呋喃(10mL)中。加入二异丙基乙基胺(599μL，3.43mmol)，并且将反应在氮气、环境温度下搅拌约16小时。用乙酸乙酯稀释反应，用稀碳酸氢钠和盐水洗涤，经硫酸钠干燥，并且减压浓缩有机层。通过快速色谱(25％EtOAc/己烷至85％EtOAc/己烷)纯化残留物，得到标题化合物(860mg，79％)，为白色固体：MS(m/z)：383(M+1)。
制备例48
N-[1-(5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基氨基甲酰基)环丙基]氨基甲酸叔丁酯
制备例48可以基本如制备例47的方法所述的制备，但是应用5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-胺。通过应用30-95％梯度范围的乙酸乙酯/己烷的快速色谱纯化。MS(m/z)：383(M+1)。
制备例49
N-[1-(5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基氨基甲酰基)环戊基]氨基甲酸叔丁酯
制备例49可以基本如制备例47的方法所述的制备，但是应用1-(叔丁氧基羰基氨基)环戊烷甲酸(商购可获得的)。通过应用20-90％梯度范围的乙酸乙酯/己烷的快速色谱纯化。MS(m/z)：411(M+1)。
制备例50
1-氨基-N-[(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基]环丙烷甲酰胺
将N-[1-[[(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基]氨基甲酰基]环丙基]氨基甲酸叔丁酯(856mg，2.24mmol)溶于二氯甲烷(20mL)中，并且在冰浴中冷却。加入三氟乙酸(10mL，132.25mmol)。除去冰浴，并且将反应搅拌1小时。减压浓缩混合物，并且加入乙酸乙酯。用1N NaOH和盐水洗涤，经硫酸钠干燥，并且减压浓缩有机层，得到标题化合物(470mg，74％)，为白色固体：MS(m/z)：283(M+1)。
制备例51
1-氨基-N-(5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基)环戊烷甲酰胺
制备例51可以基本如制备例50的方法所述的制备，但是应用N-[1-(5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基氨基甲酰基)环戊基]氨基甲酸叔丁酯。MS(m/z)：311(M-1)。
制备例52
1-氨基-N-(5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基)环丙烷甲酰胺
制备例52可以基本如制备例50的方法所述的制备，但是应用N-[1-(5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基氨基甲酰基)环丙基]氨基甲酸叔丁酯。MS(m/z)：283(M+1)。
实施例18
4-氯-N-[1-(5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基氨基甲酰基)环戊基]苯甲酰胺
将1-氨基-N-(5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基)环戊烷甲酰胺(158mg，509.02μmol)、4-氯苯甲酸(95.64mg，610.83μmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(117.10mg，610.83μmol)和1-羟基苯并三唑(82.54mg，610.83μmol)合并于四氢呋喃(12mL)中。加入二异丙基乙基胺(106.53μL，610.83μmol)，并且将反应在环境温度下搅拌约16小时。用EtOAc稀释反应，用稀碳酸氢钠和盐水洗涤，经硫酸钠干燥，并且减压浓缩有机层。通过快速色谱(0-40％的5％氨/甲醇/二氯甲烷溶液(2N)/二氯甲烷)纯化残留物，得到标题化合物(101.0mg，44％)：MS(m/z)：449(M+1)。
表4中的实施例可以基本如实施例18的方法所述，但是应用第3列所列的试剂来制备。对于纯化，应用快速色谱(用0-80％梯度范围的5％氨(2M)的甲醇(在二氯甲烷中)溶液/二氯甲烷)。
表4
实施例21
4-氯-N-[1-[[(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基]氨基甲酰基]环丙基]苯甲酰胺
将1-氨基-N-[(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基]环丙烷甲酰胺(160mg，0.57mmol)、4-氯苯甲酸(106mg，0.68mmol)和O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲六氟磷酸盐(HATU)(259.0mg，0.68mmol)合并于N，N-二甲基甲酰胺(4mL)中。加入二异丙基乙基胺(DIEA)(0.25mL，1.42mmol)，并且将反应在氮气、环境温度下搅拌约5小时。用乙酸乙酯稀释反应，用碳酸氢钠、水(2×)和盐水洗涤，经硫酸钠干燥，并且减压浓缩有机层。通过快速色谱(40％EtOAc/己烷至100％EtOAc)纯化残留物，得到标题化合物(190.0mg，80％)：MS(m/z)：421(M+1)。
表5中的实施例可以基本上如实施例21的方法所述，应用第3列的试剂代替4-氯苯甲酸，并且用约16小时反应时间，使用手性和外消旋胺来制备。通过快速色谱进行纯化，应用(方法1；实施例22、23、24、25、27、28、29、30、31和32)：0-100％梯度范围的3-5％氨(2M)的甲醇(在二氯甲烷中)溶液/二氯甲烷，或者(方法2；实施例26)：25-90％梯度范围的乙酸乙酯/己烷。
表5
流程图H
可通过方法A、B、C、D、E和F中所列的色谱条件拆分外消旋混合物和分离异构体。
可以将外消旋混合物拆分成R和S异构体。手性色谱条件：
方法A
SFC-手性柱：Chiralpak AD-H
洗脱剂：含有0.2％异丙胺修饰剂和CO2的范围为20-30％乙醇的等度条件。
在225nM波长检测信号。
方法B
SFC-手性柱：Chiralpak AD-H
洗脱剂：含有0.2％异丙胺修饰剂和CO2的范围为25-40％异丙醇的等度条件。
在225nM波长检测信号。
方法C
SFC-手性柱：Chiralpak OD-H
洗脱剂：含有0.2％异丙胺修饰剂和CO2的20％乙醇的等度条件。
在225nM波长检测信号。
方法D
SFC-手性柱：Chiralpak OD-H
洗脱剂：含有0.2％异丙胺修饰剂和CO2的范围为15-20％甲醇的等度条件。
在225nM波长检测信号。
方法E
LC-手性柱：Chiralpak AD-H
洗脱剂：含有0.2％异丙胺修饰剂的100％甲醇的等度条件。
在225nM波长检测信号。
方法F
SFC-手性柱：Chiralpak OJ-H
洗脱剂：含有0.2％异丙胺修饰剂和CO2的10％异丙醇的等度条件。
在225nM波长检测信号。
在表6中，应用色谱方法A、B、C、D、E和F将实施例(第二列)分离为异构体1(R异构体)和2(S异构体)。应用方法A分离实施例29、30、20、8和6；应用方法B分离实施例10、13、18、19和15；应用方法C分离实施例14、12和11；应用方法D分离实施例7；应用方法E分离实施例9；应用方法F分离制备例47。第一列列出了异构体1(R异构体)和2(S异构体)、异构体的实施例号和异构体的保留时间。
表6
流程图I
实施例49
4-氯-N-[1-[[(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基]氨基甲酰基]环丙基]苯甲酰胺；4-甲基苯磺酸
将4-氯-N-[1-[[(4R)-(5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基氨基甲酰基]环丙基]苯甲酰胺(439mg，1.04mmol)溶于异丙醇(13.9mL)中，并且在环境温度下缓慢加入在异丙醇(1.60mL)中的4-甲基苯磺酸一水合物(198.40mg，1.04mmol)。将混合物搅拌约2小时，并且通过过滤收集固体。将其在真空干燥箱中干燥，得到标题化合物(487mg，79％)，为白色固体：MS(m/z)：421(M+23)。
表7中的实施例可以基本如实施例49中的方法所述制备。
表7
实施例54
4-氯-N-[1-[[(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基]氨基甲酰基]环丙基]苯甲酰胺；盐酸盐
将4-氯-N-[1[[(4R)-(5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基氨基甲酰基]环丙基]苯甲酰胺(350.0mg，0.83mmol)溶于甲醇(12.0mL)中，并且在冰浴中冷却溶液。滴加在醚中的氯化氢(1N)(3.33mL，3.33mmol)。除去冰浴，将混合物搅拌30分钟，并且将其减压浓缩，产生标题化合物(323mg，85％)，为白色固体：MS(m/z)：421(M+1)。
实施例55
4-氯-N-[1-(5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基氨基甲酰基)环丙基]苯甲酰胺盐酸盐
可以基本如实施例54中的方法所述制备实施例55。MS(m/z)：421(M+1)。
实施例56
N-[1-[[(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基]氨基甲酰基]环丙基]-4-羟基-苯甲酰胺
将4-苄基氧基-N-[1-[[(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基]氨基甲酰基]环丙基]苯甲酰胺(145mg，294.37μmol)溶于乙醇(20mL)中，并且在Parr振荡器上用10％Pd/C(22.8mg，10.71μmol)氢化18小时(60psi，环境温度)。过滤除去催化剂，并且减压浓缩滤液，得到标题化合物(107mg，90％)，为白色固体：MS(m/z)：403(M+1)。
流程图J描述用于合成N-[1-[[(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基]氨基甲酰基]环丙基]-4-乙氧基-苯甲酰胺的可选择的方法。
流程图J
制备例53
5，6-二氢咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-酮
在反应器中填充630kg DMF，并且在氮气流下搅拌1至2小时。填充171kg碳酸铯和45.0kg 3-(2-溴苯基)丙酸，将混合物在80至85℃下搅拌1至2小时，然后冷却至20至25℃。在反应器中填充27.0kg咪唑和4.4kg碘化亚铜，并且将混合物在氮气流、20至25℃下搅拌1至2小时。将温度调至115至125℃，并且剧烈搅拌20至24小时[HPLC＜3％，3-(2-溴苯基)丙酸]。将反应冷却至60℃，并且缓慢填充181kg乙醇。将反应冷却至0至15℃，并且将混合物搅拌8至10小时。通过离心分离固体两种产物(bi-products)。将湿滤饼、184kg乙醇和36kgDMF填充到反应器中，并且在0至15℃下搅拌0.5至1小时。通过离心分离固体两种产物。合并滤液，并且通过管式过滤器转移至反应器中，以除去颗粒。将混合物减压浓缩至675至720L，保持内部温度低于65℃。冷却至25至35℃，并且向反应器中填充174kg乙醇。搅拌10至15分钟，并且检查溶液的含水量(KF值＜0.5％)。
在上述溶液中缓慢填充95kg亚硫酰氯，将内部温度保持在25至40℃。将混合物加热至回流达7至10小时[HPLC＜3％，3-(2-咪唑-1-基-苯基)-丙酸]。冷却至20至35℃。过滤混合物，并且用189kg乙醇洗涤滤饼。
将合并的滤液填充到反应器中，并且在搅拌下减压浓缩至675至720L，将内部温度保持在65℃。将温度调至20～30℃。缓慢填充450kg水，将内部温度保持在20～30℃，并且搅拌10～15分钟。
用庚烷(3×153kg)洗涤产生的混合物，并且用25％Na2CO3(45kg)水溶液将水层的pH调至pH 8.0，保持内部温度低于30℃。用MTBE(3×450kg)萃取产生的混合物，洗涤合并的MTBE层(1×369kg的2％NH4OH；2×362kg的H2O)。将有机层减压浓缩至90至180L，保持内部温度低于40℃。通过管式过滤器填充220kg 2-MeTHF，以除去颗粒，减压浓缩至90至180L，保持内部温度低于40℃。通过管式过滤器填充214kg2-MeTHF，以除去颗粒(期间KF值＜0.2％)，并且将溶液转移至干净的塑料圆筒中，得到195.8kg的3-(2-(1H-咪唑-1-基)苯基)丙酸乙酯的2-MeTHF溶液。
在反应器中填充281kg2-MeTHF和31kg二异丙基胺。冷却至-80至-70℃，并且缓慢填充在正己烷中的86kg正丁基锂，将温度保持在-80至-70℃，并且搅拌1至3小时。在-80至-70℃下，在反应器中缓慢填充195.8kg3-(2-(1H-咪唑-1-基)苯基)丙酸乙酯的2-MeTHF溶液，并且在-80至-70℃下搅拌2至4小时(期间HPLC＜3％，3-(2-(1H-咪唑-1-基)苯基)丙酸乙酯)。在-80至-70℃下，在反应器中缓慢填充47.8kg乙醇，并且在-80至-70℃下搅拌0.5至2小时。在反应器中缓慢填充310kg MTBE，保持内部温度低于-25℃。用292kg 10％的柠檬酸水溶液调pH至7.5。将温度调至约0℃。分离出水层，并且用202kg25％NaCl水溶液洗涤有机层。分离各层，减压浓缩有机层至41至82L，保持内部温度低于40℃。用200kg二氯甲烷萃取水层。合并有机层，并且在15至25℃下搅拌0.5至1小时。通过二氧化硅(20kg)垫过滤，并且用60kg二氯甲烷洗涤该垫。将滤液减压浓缩至82至123L，保持内部温度低于40℃。在残留物中填充170kgMTBE，并且减压浓缩至82至123L，保持内部温度低于50℃。填充208kg MTBE，并且搅拌10至15分钟(期间控制设定的10.8％2-MeTHF和4.6％DCM)。填充279kgMTBE，并且减压浓缩至82至123L，保持内部温度低于50℃(残留的2-MeTHF％＝1.6％，残留的DCM％＝2.7％)。在残留物中填充14.5kg乙酸甲酯，并且将混合物加热至回流达30至60分钟。将混合物冷却至0至15℃，并且在0至15℃下搅拌6至8小时。通过离心分离固体，并且用35kgMTBE洗涤滤饼。干燥产生的固体，得到15.8kg的5，6-二氢咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-酮。LC/MS＝199(M+1)，419(2M+23)。
制备例54
5，6-氢-4H-苯并[f]咪唑并[1，2-a]氮杂-4-酮肟
在氮气气氛下，在反应器中填充42kg(5，6-二氢咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-酮)、15.5kg盐酸羟胺、21.5kg无水乙酸钠和171kg甲醇。将产生的棕色悬浮液加热至60至70℃达20小时(期间HPLC＜3％，5，6-二氢咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-酮)。将反应冷却至23至25℃，并且搅拌8小时。通过离心分离固体，用33kg冷甲醇冲洗。将产生的固体转移至反应器中，并且用210kg水在85至90℃下制成浆液达2小时。通过离心分离固体，用85kg水冲洗固体。干燥产生的固体，得到39.65kg的5，6-二氢-4H-苯并[f]咪唑并[1，2-a]氮杂-4-酮肟。MS＝214(M+1)。
制备例55
5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-胺二盐酸盐
在具有惰性气体的反应器中，填充153kg甲醇、9.6kg5，6-二氢-4H-苯并[f]咪唑并[1，2-a]氮杂-4-酮肟、1.9kg氢氧化钠固体、10kg水和10kg的raney镍(苏州泰力达科技有限公司)。用氢气加压反应器至58至65psi，并且加热至60至65℃。40小时后，冷却至10-20℃，并且通过8kg硅藻土垫过滤，除去镍催化剂，用33kg甲醇冲洗。在真空下，将滤液浓缩至1至2体积，保持反应器温度低于50℃。填充130kg二氯甲烷，并且浓缩至1至2体积，填充另外的130kg二氯甲烷和104kg水。在10至20℃下搅拌10至15分钟，并且在不搅拌下，保持30至35分钟。分离各层，并且将有机层和水层转移至单独的容器中。用104kg纯化水和104kg25％的氯化钠溶液洗涤有机层。从水层中分离有机层。将用于相分离的初始反应器应用少量的乙醇(20kg)冲洗，并且将乙醇冲洗液加入到有机层中。在真空下，将有机层浓缩至1至2体积，保持内部温度低于40℃。填充57至58kg乙醇，并且浓缩至1至2体积，保持内部温度低于40℃，并且重复直至通过残留溶剂分析(GC)检测不到二氯甲烷。填充3体积乙醇，并且测试残留的二氯甲烷(GC)。如果未检测到，那么冷却至10至15℃，并且缓慢填充100kg在乙酸乙酯中的4N HCl。在10至20℃下搅拌3至8小时，过滤并且用25kg乙醇冲洗滤饼。将滤饼在50至55℃下干燥12至16小时，得到11.1kg外消旋胺的二HCl盐(5，6-二氢-4H-苯并[f]咪唑并[1，2-a]氮杂-4-胺1.5-2.0HCl盐)MS＝200(M+1)。
制备例56
(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-胺
在反应器中，填充35.9kg5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-胺二盐酸盐和453mL水。30分钟内，缓慢加入29.7L NH4OH 25％，保持温度低于25℃。加入后，pH是9，并且是澄清的棕色溶液。在22℃下，加入31.5克晶种诱导结晶。将悬浮液搅拌8小时，并且冷却至5℃。过滤，并且用54L冷水洗涤滤饼，并且用N2/真空，将过滤器中产生的滤饼干燥31小时，其产生5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-胺。将29kg粗滤饼分批溶于145L乙醇中。通过真空蒸馏除去73L溶剂。加入108L乙醇并且除去，并且蒸馏133L溶剂，直到终浓度为2L/kg。进行期间的Karl Fischer分析，以测定最终含水量≤0.1％w/w。
在作为手性固定相(CSP)的Chiralpak AS-V，20Qm上进行5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-胺的SMB分离。流动相是乙醇/甲醇/N，N-二乙基甲基胺＝70∶30∶0.1v∶v∶v。目标对映异构体(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-胺是第二个流出的对映异构体。收集提取物流出液的规定级分，并且在To≤65℃和p＝300至79mbar下浓缩至～20％的残留体积。使控制浓度的收集物通过具有下游线内(inline)滤器polycap HD(5.0μm)的碳滤筒ZetaCarbon R55SP。[Chiralpak AS-V，20μm；流动相：乙醇/甲醇/N，N-二乙基甲基胺＝70∶30∶0.1v∶v∶v；进样：～173g粗品/L，在洗脱液(流动相)中；提取物：220.60mL/分钟；萃余液：46.22mL/分钟；洗脱液：245.03mL/分钟；进样量：21.80mL/分钟；循环量：382.38mL/分钟；周期：1.00分钟；温度：室温；压力：～42bar]。
制备例57
1-[(4-乙氧基苯甲酰基)氨基]环丙烷甲酸乙酯
在800L反应器中填充4-乙氧基苯甲酸(11.0kg)和二氯甲烷(132.6kg)。加入二甲基甲酰胺(34mL)，然后历经约45分钟加入草酰氯(9.2kg)，将温度保持在27±2℃。在27±2℃下，将反应器的内容物搅拌4.5小时。HPLC分析显示2.5％的4-乙氧基苯甲酸。经真空蒸馏除去过量的草酰氯。将油状残留物溶于二氯甲烷(55kg)中。在800L反应器中填充1-氨基环丙烷-1-甲酸乙酯盐酸盐(10kg)和二氯甲烷(110kg)。填充三乙胺(15.3kg)，并且在填加期间，保持温度低于10℃。历经至少45分钟，加入酰氯溶液，保持温度低于15℃。在23℃下，将产生的混合物搅拌过夜(12小时)。HPLC分析显示约85％纯度。用1N HCl (33.4L)萃取产物浆液，并且用二氯甲烷(44.3kg)萃取水层。用8％NaHCO3水溶液(50.4kg)洗涤合并的有机层。用水(33.4kg)和盐水(33.4kg)洗涤有机层。蒸馏除去二氯甲烷，直到馏出物体积达到约70L，然后加入具有良好浆液的庚烷(164kg)。继续蒸馏直至馏出物体积达到另外的70L二氯甲烷。真空蒸馏期间的批次温度低至0℃。将产物浆液在20±5℃下搅拌1小时。过滤产物，用庚烷(2×20kg)洗涤，真空干燥，得到1-[(4-乙氧基苯甲酰基)氨基]环丙烷甲酸乙酯(14.6kg，86％产率，93.5％纯度(经HPLC))。
1-[(4-乙氧基苯甲酰基)氨基]环丙烷甲酸乙酯的重结晶：
在800L反应器中，填充粗1-[(4-乙氧基苯甲酰基)氨基]环丙烷甲酸乙酯(14.19kg)和二氯甲烷(144kg)。将混合物在25±2℃下搅拌30分钟，得到澄清溶液。历经30分钟的时间在上述溶液中加入己烷(191kg)。将产生的产物浆液在25±2℃下搅拌20分钟，然后通过在20±5℃下真空蒸馏除去二氯甲烷。加入另外的己烷(29kg)，用于良好的浆液搅拌，并且在25±2℃下搅拌1小时。过滤固体，并且用己烷(19kg、38kg、29kg和19kg)洗涤。如HPLC分析检测的，1-[(4-乙氧基苯甲酰基)氨基]环丙烷甲酸乙酯的湿滤饼未显示杂质(4-乙氧基苯甲酸酐)。在40℃下真空干燥23小时，得到1-[(4-乙氧基苯甲酰基)氨基]环丙烷甲酸乙酯(12.21kg，86％回收率，99.9％纯度(经HPLC))，为白色蓬松粉末。质子NMR与结构一致。
制备例58
1-[(4-乙氧基苯甲酰基)氨基]环丙烷甲酸
在800L反应器中，填充1-[(4-乙氧基苯甲酰基)氨基]环丙烷甲酸乙酯(12.19kg)、THF(45.5kg)和MeOH(20.2kg)。在反应器中加入LiOH一水合物(2.49kg)的水(25.6kg)溶液，转移期间，保持温度低于23℃。将产生的溶液在20±3℃下搅拌过夜(19小时)。通过真空蒸馏除去THF和MeOH，然后在反应器中加入水(67kg)。在17±2℃下，用5N HCl (约12L)调节反应的pH至pH约2.0。将产生的产物浆液在17±2℃下搅拌50分钟。通过过滤收集固体，并且用水(3×40Kg)洗涤。在47℃下，真空干燥湿滤饼，得到1-[(4-乙氧基苯甲酰基)氨基]环丙烷甲酸(10.74kg，98％产率，＞99％纯度(经HPLC)，0.03％KF)，白色粉末状固体。LC-MS(M+1＝250)。
实施例57
N-[1-[[(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基]氨基甲酰基]环丙基]-4-乙氧基-苯甲酰胺
经具有下游线内滤器polycap HD(5.0μm)的Zeta-Carbon R55SP碳滤筒，分数批将46.36kg(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-胺的乙醇溶液转移至20L rotavap中，并且在55至58℃和p＝130至079mbar下浓缩，以最终得到固化残留物。将物质分成两批(4.524kg和4.468kg)。
将第一批溶于11kg二氯甲烷中，并且在55℃和600至200mbar下再次浓缩。蒸发至干燥后，将产生的固体溶于11kg二氯甲烷中，并且将产生的溶液采样，用于残留乙醇的NMR检测。在55℃和p＝600至200mbar下蒸发至干燥。再溶于11kg二氯甲烷中。将有机溶液转移至新容器中，用5.5kg二氯甲烷冲洗rotavap，并且将冲洗液与第一次的浓缩液合并。
将第二部分溶于11kg二氯甲烷中，在55℃和p＝600-200mbar下蒸发，并且再溶于11kg二氯甲烷中。蒸发至干燥。再溶于11kg二氯甲烷中，并且针对乙醇采样。在55℃和p＝600至200bar下蒸发，然后再溶于11kg二氯甲烷中。针对残留乙醇采样。与第一次浓缩液合并。用5.5kg二氯甲烷冲洗rotovap；然后与其它浓缩溶液合并。将160L反应器惰性化，并且转移至反应器中。在20℃下向反应器填充34L二氯甲烷、10.4kg1-[(4-乙氧基苯甲酰基)氨基]环丙烷甲酸和17.5L三乙胺。50分钟内，将产生的溶液冷却至-20℃。在-20℃下，3小时内通过加入器(addition tank)向反应混合物中缓慢加入27L的T3P。将反应在-18℃下搅拌9小时。40分钟内，将反应温至-3℃。在45分钟内，加入42L水，使温度升至6℃，形成淡黄色悬浮液。在20℃下45分钟后，反应混合物仍然是悬浮液。加入17L二氯甲烷，以在20分钟后实现固体完全溶解。相分离后(25分钟)，除去水层(pH 8)，并且用43L水洗涤有机二氯甲烷相。相分离后，除去水层(pH 9)。用42L水第二次洗涤有机二氯甲烷层。相分离后(15分钟)，将有机层转移至新的容器中。洗涤水层，并且转移至反应器中，并且用21L二氯甲烷洗涤两次。在反应器中，合并所有的有机萃取相，并且使用或贮存在-10℃达～5天。用甲醇冲洗反应器，并且通过线内滤器转移至反应器中。在65℃和p＝1bar至700mbar下，将溶液浓缩至7.0L/kg的(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-胺，除去73L溶剂。将产生的浓缩物在20℃下搅拌过夜，形成悬浮液。用66.5L线内过滤的乙酸异丙酯稀释悬浮液。将悬浮液在65℃和p＝1bar和300mbar下浓缩，除去58L溶剂。在65℃下，用67L线内过滤的乙酸异丙酯稀释悬浮液，并且再在65℃和p＝300-140mbar下浓缩，除去67L溶剂。所有蒸馏步骤中的最高(maximum)温度是50℃。在45分钟内，将浓缩的悬浮液加热至65℃。在65至62℃下，35分钟内加入55L线内过滤的正庚烷。12小时内，以中等速度搅拌悬浮液，冷却至20℃。通过吸滤器过滤悬浮液(快速过滤：16分钟)。用25L线内过滤的正庚烷冲洗反应器，并且使冲洗的悬浮液经过滤饼。吹干滤饼，并且在真空(p＝200-100mbar)下干燥，产生16.8kgN-[1-[[(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基]氨基甲酰基]环丙基]-4-乙氧基-苯甲酰胺。实施例57的物质的NMR与实施例1的物质一致。
制备例59
5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-胺
在空气中，在25mL圆底烧瓶中，加入(4S)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-胺(1.0g，5.02mmol)、叔丁醇钠(492mg，5.12mmol)、PEPPSITM(37mg，0.054mmol)和搅拌棒。用隔膜密封烧瓶，并且将其通过针头与双歧管(double manifold)连接。排空烧瓶，并且反充氮气3次。通过注射器加入乙醇(12mL)，并且在60℃油浴中加热24小时。从油浴中移出烧瓶。加入1g硅胶和400mg Si-硫醇金属清除剂，并且搅拌140分钟。通过滤纸过滤混合物，并且通过旋转蒸发浓缩滤液。在75℃下真空干燥残留物，得到1.0g黄褐色固体。手性LC(含有0.2％DMEA的10％乙醇/90％庚烷，Chiralcel OD-H柱)-0.2％ee。ES/MS m/z 200.2[m+H]。
实施例58
4-氯-N-[1-[[(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基]氨基甲酰基]环丙基]苯甲酰胺
在偶联反应应用之前，将(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-胺的乙醇溶液浓缩至干燥。将15.0g(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-胺和18.03g 1-[(4-氯苯甲酰基)氨基]环丙烷甲酸溶于120mL二氯甲烷和32mL三乙胺中。冷却至-20℃后，在40分钟内加入53.0mL(1.2当量)T3P，保持温度在-19℃。使反应温至室温，过夜。对于原料完全消耗，通过HPLC测试。在0至6℃下水(75mL水)猝灭后，进一步用二氯甲烷稀释(加入另外的180mL二氯甲烷后，沉淀溶解的固体)，分离各相。用75mL水洗涤有机层两次，然后用75mL二氯甲烷反萃取合并的水层一次。浓缩有机萃取(420mL)，除去290mL溶剂(固体开始沉淀)。加入240mL乙酸异丙酯，然后除去进一步的250mL溶剂。将产生的浓稠悬浮液温至70℃，加入30mL正庚烷，并且缓慢冷却悬浮液至室温，过夜。通过玻璃吸滤器(glass filter nutsch)过滤悬浮液，并且用正庚烷洗涤滤饼。用rotavap干燥后，产生浅棕色固体，29.65g(93.58％产率，HPLC(非手性的))。LC-MS(质谱)(m/z)：421。
生物学试验
DGAT-1酶试验：将DGAT-1抑制剂用体外酶试验进行测定，该试验应用sf9昆虫细胞中表达的重组人DGAT-1作为酶来源。DGAT-1酶是通过含有DGAT-1表达载体的重组杆状病毒感染细胞产生的。48小时感染后，通过离心收集细胞，再悬浮于冷的20mM NaCl中，并且用Dounce匀浆器破裂。对于每升感染的细胞悬浮液，将15毫升20mM NaCl加入至细胞小团中。通过推细胞提取物通过25计量注射器而剪切匀浆中的DNA。将杆状病毒感染的细胞匀浆中的DGAT-1活性与未感染的细胞匀浆相比较，以评价与sf9细胞相关的背景酶活性。
该试验在96孔板上进行，应用Coleman(Methods in Enzymology 209，第98-102页(1992))描述的试验的修饰方法。简而言之，以1∶3系列稀释方案测定化合物，从100μM至1.7nM的终浓度。酶反应混合物包含底物250μM 1，2-sn-二酰基甘油(Avanti Polar Lipids)、5μM14C油酰基CoA和45μM油酰基CoA，在水缓冲液中，所述的缓冲液含有150mM Hepes缓冲液pH 7.4、0.7％vol/volX-100和CompleteTM蛋白酶抑制剂。将2微克sf9匀浆用于每个反应孔。总反应体积是50μL。在室温下将反应温育25分钟，然后通过加入50μL溶液终止，所述的溶液含有58.8％异丙醇、14.7％正庚烷、11.5％水、12.5％乙醇和2.5％1N氢氧化钠。然后，加入100微升闪烁液混合物，并且8小时后，将板计数。应用ActivityBase(IDBS)数据分析软件，从原始数据得出化合物的浓度响应曲线和IC50值。
在基本如本文所述的DGAT-1酶试验中，本文公开的所有实施例化合物显示活性，测得的IC50小于600nM。对于化合物N-[1-[[(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基]氨基甲酰基]环丙基]-4-乙氧基-苯甲酰胺(实施例1、3、57)，测得的IC50为134±8.0nM(n＝2；几何平均值±标准误)，并且对于化合物4-氯-N-[1-[[(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基]氨基甲酰基]环丙基]苯甲酰胺(实施例2、21、58)，测得的IC50为89.0±0.98nM(n＝3；几何平均值±标准误)。
DGAT-1酶试验结果表明本文公开的实施例是有效的DGAT-1酶抑制剂。
脂肪细胞甘油三酯合成试验：该试验测量化合物抑制完整小鼠3T3-L1脂肪细胞中甘油三酯合成的能力。应用标准的组织培养条件，将未分化的3T3-L1细胞以25,000个细胞/孔的密度在96孔板中培养。培养2天后，通过将其置于培养基中使细胞分化成脂肪细胞，所述培养基补充有0.5mM 1-甲基-3-异丁基黄嘌呤(IBMX)、10μg/mL胰岛素和1μM地塞米松。培养5天后，细胞在仅补充有10μg/mL胰岛素的培养基中生长。细胞培养12天后，进行试验。为了开始试验，将培养基从细胞中除去，并且用含有0.375μCi/孔14C乙酸酯的50μL培养基代替。然后，将细胞在37℃、7.5％CO2中培养4小时。培养结束时，除去培养基，将细胞用Hank平衡盐洗涤一次，并且将25μL 0.7％X-100加入到每孔中，并且提取细胞5分钟。在该阶段结束时，在每孔中加入75μL含有58.8％异丙醇、14.7％正庚烷、11.5％水、12.5％乙醇和2.5％1N氢氧化钠的溶液，并且将板在定轨振荡器上振摇2分钟。然后，加入100μL庚烷，并且将板再振摇2分钟。然后，将板在低速离心机中旋转，以便于相分离，并且为了闪烁计数，除去50μL疏水相。应用ActivityBase(IDBS)数据分析软件，从原始数据得出化合物的浓度响应曲线和EC50值。基本上通过本文描述的脂肪细胞甘油三酯合成试验方法测定化合物。
对于化合物N-[1-[[(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基]氨基甲酰基]环丙基]-4-乙氧基-苯甲酰胺(实施例1、3、57)，测得的EC50为175nM±94.0(n＝2；几何平均值±标准误)。对于化合物4-氯-N-[1-[[(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基]氨基甲酰基]环丙基]苯甲酰胺(实施例2、21、58)，EC50为213nM±78.2(n＝4；几何平均值±标准误)。
脂肪细胞甘油三酯合成试验的结果显示化合物N-[1-[[(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基]氨基甲酰基]环丙基]-4-乙氧基-苯甲酰胺和4-氯-N-[1-[[(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基]氨基甲酰基]环丙基]苯甲酰胺是完整小鼠3T3-L1脂肪细胞中甘油三酯合成的有效抑制剂。
油团(Oil bolus)吸收模型：基于Buhman等人的试验(Journal ofBiological Chemistry 277，第25474-25479页(2002))，该试验显示DGAT-1参与小肠的脂质吸收，开发了DGAT-1抑制的体内模型，其测量将橄榄油丸口服施用于大鼠后，血浆甘油三酯水平。化合物评价前，让食用规定饮食的雄性Sprague-Dawley大鼠(280-320g，n＝6/试验组)适应试验动物饲养所至少1周。化合物试验前，将大鼠禁食16小时。将10％乙醇/90％玉米油溶媒中的化合物以1mL/kg的体积经口服管饲法施用。施用化合物4小时后，通过尾静脉收集0.5mL血液样品。4小时采血后，立即将3.0mL橄榄油丸通过口服管饲法施用。施用化合物6小时后，从尾静脉收集最终的血液样品。通过离心由血液样品制备血浆，并且应用Hitachi 912临床化学分析仪分析甘油三酯含量和试验化合物水平。测定降低血浆甘油三酯增加50％(ED50)和80％(ED80)的有效剂量。DGAT-1抑制是试验化合物抑制血浆甘油三酯增加能力的指示，所述增加发生于溶媒处理(对照)动物中研究的第4小时至第6小时(修饰模型的14小时至16小时)。在模型的修饰中，在第一次血液样品采集和油丸施用之前14小时，施用化合物。在给药后16小时采集最终血液样品。在该模型的更长持续时间情况中，施用10％乙醇/90％玉米油溶媒，无化合物，在化合物施用10小时后，与该模型的更短持续时间情况是一致的。基本通过本文所述的油丸吸收大鼠模型试验化合物。
对于化合物N-[1-[[(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基]氨基甲酰基]环丙基]-4-乙氧基-苯甲酰胺(实施例1、3、57)，三次试验应用1、3、10和30mg/kg的剂量。对于化合物4-氯-N-[1-[[(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基]氨基甲酰基]环丙基]苯甲酰胺(实施例2、21、58)，试验1应用0.3、1、3、10和30mg/kg的剂量，并且对于试验2和3，所用的剂量是0.1、0.3、1、3和10mg/kg。表8和9中提供了结果。
表8：在16小时油丸研究中N-[1-][(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基]氨基甲酰基]环丙基]-4-乙氧基-苯甲酰胺(实施例1、3、57)的结果
  试验   ED50(mg/kg)   ED50的标准误  ED80(mg/kg)   ED80的标准误
  1   12.37   2.46  19.61   7.67
  2   2.92   0.76  7.64   3.80
  3   1.71   0.55  5.52   2.81
表9：在6小时油丸研究中4-氯-N-[1-[[(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基]氨基甲酰基]环丙基]苯甲酰胺(实施例2、21、58)的结果
  试验   ED50(mg/kg)   ED50的标准误   ED80(mg/kg)   ED80的标准误
  1   0.73   0.24   2.22   1.15
  2   0.57   4.52   ND＊   ND＊
  3   0.26   0.093   0.45   0.27
ND：未测试
应用元分析(meta-analysis)分析该数据。根据各次研究的ED50(ED80)的加权平均值评价整体ED50(ED80)，其中权重是ED50(ED80)预算值方差的倒数。进行齐性Q-检验。如果该检验在0.10水平是显著的，那么将混合效果模型用于包括交叉研究和内部研究的变异性。将权重调节为各次研究的ED50(ED80)的交叉研究方差和内部研究方差的和的倒数。通过Paule-Mandel估计量评价交叉研究方差(参考文献：Sutton，A.J.，Jones，D.R.，Abrams，K.R.，Sheldon，T.A.和Song，F.，Methods for Meta-analysisin Medical Research(医学研究中的元分析方法)，伦敦，John Wiley，ISBN0-471-49066-0(2000)。Dersimonian R.和Kacker，R.，Random-effects modelfor meta-analysis of clinical trials：An update(用于临床试验元分析的随机效应模型：更新)，Contemporary Clinical Trials，28，第105-114页(2007))。
表10：在16小时油丸研究中N-[1-[[(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基]氨基甲酰基]环丙基]-4-乙氧基-苯甲酰胺(实施例1、3、57)的元分析
  平均值(mg/kg)   标准误   Q-检验(p-值)
  ED50   5.30   3.27   18.48(p＜0.001)
  ED80   7.34   2.17   2.98(p＝0.23)
表11：在6小时油丸研究中4-氯-N-[1-[[(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基]氨基甲酰基]环丙基]苯甲酰胺(实施例2、21、58)的元分析
  平均值(mg/kg)   标准误   Q-检验(p-值)
  ED50   0.32   0.09   3.35(p＝0.19)
  ED80   0.54   0.27   2.11(p＝0.15)
该结果表明N-[1-[[(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基]氨基甲酰基]环丙基]-4-乙氧基-苯甲酰胺(实施例1、3、57)和4-氯-N-[1-[[(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基]氨基甲酰基]环丙基]苯甲酰胺(实施例2、21、58)在油丸吸收大鼠模型中抑制血浆甘油三酯的增加。这些结果是DGAT-1抑制的指示。
饮食诱导的肥胖小鼠模型：为了测量对体重和食物摄入的作用，在喂养高脂肪饮食(Research Diets D12492)的C57Bl6小鼠中试验化合物。使用D12492饲养的14周龄的小鼠适应12小时照明/黑暗周期的试验动物饲养所2周。化合物试验之前7天，将动物每天1次或2次用适合的溶媒通过口服管饲法给药，以使小鼠习惯于操作。在溶媒给药的第6天，通过定量核磁共振(QNMR)测量身体组合物。在溶媒给药的第7天，将动物根据体重随机分配，并且分成试验组(n＝8)。溶媒给药7天后，开始化合物给药，每天两次。在黑暗/照明周期的黑暗期之前30分钟，给动物施用化合物；如果需要，再向黑暗期增加5.5小时。将化合物给药持续15至22天，该期限内每天测量食物摄入和体重。在试验的第14天，用QNMR第二次测量身体组合物。在第15天，在最终给药后的0、2、4和6小时采集每试验组两只动物的最终血液，用于测量血浆中的试验化合物水平。
应用元分析来分析数据。对于体重增加(减轻)百分数和脂肪质量增加(减轻)百分数，元分析中测量的治疗效果是治疗组和对照组的组平均值差。对于与对照相比的蓄积食物摄入变化百分数(％CFICFC)，治疗效果的测量是％CFICFC本身。将整体治疗效果用各研究的治疗效果的加权平均值评价，其中权重是个体研究治疗效果预算值的方差的倒数。进行齐性Q-检验。如果该检验在0.10水平是显著的，那么将混合效果模型用于包括交叉研究和内部研究的变异性。将权重调节为各次研究的治疗效果预算值的交叉研究方差和内部研究方差的和的倒数。通过Paule-Mandel估计量评价交叉研究方差(参考文献：Sutton，A.J.，Jones，D.R.，Abrams，K.R.，Sheldon，T.A.和Song，F.，Methods for Meta-analysis in Medical Research(医学研究中的元分析方法)，伦敦，John Wiley，ISBN 0-471-49066-0(2000)。Dersimonian R.和Kacker，R.，Random-effects model for meta-analysis ofclinical trials：An update(用于临床试验元分析的随机效应模型)，Contemporary Clinical Trials，28，第105-114页(2007))。基本通过本文中描述的饮食诱导的肥胖小鼠模型试验化合物。
对于N-[1-[[(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基]氨基甲酰基]环丙基]-4-乙氧基-苯甲酰胺(实施例1、3、57)，在1、3、10和30mg/kg(两次试验)与3和30mg/kg(一次试验)剂量进行3次试验。因为3和30mg/kg剂量是试验共有的，将这些剂量用于比较结果。
对于4-氯-N-[1-[[(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基]氨基甲酰基]环丙基]苯甲酰胺(实施例2、21、58)，在3、10、30和60mg/kg与在0.3、1、3和10mg/kg剂量进行两次试验。对于每次试验，该剂量每天给两次。因为3和10mg/kg剂量是试验共有的，将这些剂量用于比较结果。
表12、13和14显示对于N-[1-[[(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基]氨基甲酰基]环丙基]-4-乙氧基-苯甲酰胺(实施例1、3、57)，体重、脂肪量和食物摄入的增加(正数)或减轻(负数)的百分数的平均值结果。
表12：溶媒对照的体重变化百分数
  剂量减对照   平均值(百分数)   标准误   Q-检验(p-值)
  3mg/kg-对照   -4.74   0.92   0.61(p＝0.74)
  30mg/kg-对照   -5.31   0.77   0.05(p＝0.98)
表13：溶媒对照的脂肪量变化百分数
  剂量减对照   平均值(百分数)   标准误   Q-检验(p-值)
  3mg/kg-对照   -6.69   1.14   1.94(p＝0.38)
  30mg/kg-对照   -8.24   1.01   0.31(p＝0.85)
表14：溶媒对照的食物摄入变化百分数
  剂量减对照   平均值(百分数)   标准误   Q-检验(p-值)
  3mg/kg-对照   -10.11   2.25   5.82(p＝0.05)
  30mg/kg-对照   -11.35   1.50   3.53(p＝0.17)
表15、16和17显示对于4-氯-N-[1-[[(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基]氨基甲酰基]环丙基]苯甲酰胺(实施例2、21、58)，体重、脂肪量和食物摄入增加(正数)或减轻(负数)的百分数的平均值结果。
表15：溶媒对照的体重变化百分数
  剂量减对照   平均值(百分数)   标准误   Q-检验(p-值)
  3mg/kg-对照   -4.65   1.09   0.34(p＝0.56)
  10mg/kg-对照   -4.54   1.87   2.82(p＝0.09)
表16：溶媒对照的脂肪量变化百分数
  剂量减对照   平均值(百分数)   标准误   Q-检验(p-值)
  3mg/kg-对照   -9.53   2.07   0.28(p＝0.60)
  10mg/kg-对照   -8.41   2.16   0.23(p＝0.63)
表17：溶媒对照的食物摄入变化百分数
  剂量减对照   平均值(百分数)   标准误   Q-检验(p-值)
  3mg/kg-对照   -11.31   1.98   4.83(p＝0.03)
  10mg/kg-对照   -8.43   2.31   0.08(p＝0.77)
结果显示N-[1-[[(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基]氨基甲酰基]环丙基]-4-乙氧基-苯甲酰胺(实施例1、3、57)和4-氯-N-[1-[[(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基]氨基甲酰基]环丙基]苯甲酰胺(实施例2、21、58)降低饮食诱导的肥胖小鼠模型的体重、脂肪量和食物摄入。
制剂
应用羟丙基甲基纤维素乙酸琥珀酸酯(HPMC-AS-L)的制剂的制备，所述HPMC-AS-L在pH 5.5溶解并且产生30％N-[1-[[(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基]氨基甲酰基]环丙基]-4-乙氧基-苯甲酰胺/70％HPMC-AS-L固体分散液的级别。
薄膜包衣(casting)：应用350.12mg HPMC-AS-L、150mgN-[1-[[(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基]氨基甲酰基]环丙基]-4-乙氧基-苯甲酰胺和作为溶剂的5mL 50/50MeOH/丙酮溶液制备样品。在已预热至约60℃的平底Petri盘中分配各部分溶液。将薄膜贮存在55℃的真空干燥箱中达3.5小时，以除去所有残留的溶剂。
从盘中刮出样品，并且应用研钵和研棒降低颗粒的大小。HPMC聚合物形成弹性薄膜，尽管容易移出，该薄膜不形成可处理的粉末，这使再减小颗粒大小变得困难。用研钵和研棒研磨样品，以形成均匀大小的团块。
应用GEA NERO SDMICROTM喷雾干燥器进行喷雾干燥：HPMC-AS-L(25.7g)；N-[1-[[(4R)-5，6-二氢-4H-咪唑并[1，2-a][1]苯并氮杂-4-基]氨基甲酰基]环丙基]-4-乙氧基-苯甲酰胺(11.0g)；雾化气流(～2.0kg/h)；溶剂流动期间的出口温度(52℃)；并且溶液流速(～8至10mL/分钟)。应用70∶30丙酮∶甲醇混合物作为溶剂。流向系统的氮气质量流为每次运行32.5kg/h。每次运行应用约4重量％固体的溶液。可以应用更高重量百分数的固体。

Claims (9)

1.下式化合物或其可药用盐：
其中
R1选自H、F、Cl、-CF3、-CH3、-OH、-O(C1-C4烷基)、-O-环丙基、-O-CH2-苯基、-OC(H)F2和-OCF3；
R2选自H和-CH3；
R3选自H和-CH3；条件是基团R2和R3中至少一个是H；并且
n是1、2或3。
2.权利要求1要求的化合物或其盐，其中n是1。
3.权利要求1或2要求的化合物或其盐，其中R2是H，并且R3是H。
4.权利要求3要求的化合物或其盐，其中R1选自Cl和-O-(C1-C4烷基)。
5.权利要求4要求的化合物或其盐，其中化合物是R异构体。
6.权利要求5要求的化合物，其是下式化合物或其可药用盐
7.权利要求5要求的化合物，其是下式化合物或其可药用盐
8.药物组合物，该药物组合物包含可药用载体和权利要求1至7中任意一项要求的化合物或其可药用盐。
9.权利要求1至7中任意一项要求的化合物或其可药用盐在制备用于治疗肥胖症或糖尿病的药物中的用途。
CN201080055334.9A 2009-12-10 2010-12-07 二酰基甘油酰基转移酶抑制剂 Expired - Fee Related CN102666543B (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US28531709P 2009-12-10 2009-12-10
US61/285,317 2009-12-10
PCT/US2010/059158 WO2011071840A1 (en) 2009-12-10 2010-12-07 Inhibitors of diacylglycerol acyltransferase

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN102666543A CN102666543A (zh) 2012-09-12
CN102666543B true CN102666543B (zh) 2014-12-24

Family

ID=43569741

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201080055334.9A Expired - Fee Related CN102666543B (zh) 2009-12-10 2010-12-07 二酰基甘油酰基转移酶抑制剂

Country Status (14)

Country Link
US (1) US8299061B2 (zh)
EP (1) EP2509981B1 (zh)
JP (1) JP5631411B2 (zh)
KR (1) KR101395428B1 (zh)
CN (1) CN102666543B (zh)
AR (1) AR079170A1 (zh)
AU (1) AU2010328410B2 (zh)
BR (1) BR112012013918A2 (zh)
CA (1) CA2783684C (zh)
EA (1) EA020128B1 (zh)
ES (1) ES2509922T3 (zh)
MX (1) MX2012006646A (zh)
TW (1) TWI392680B (zh)
WO (1) WO2011071840A1 (zh)

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9255074B2 (en) 2010-07-16 2016-02-09 Abbvie Inc. Process for preparing antiviral compounds
PE20131095A1 (es) 2010-07-16 2013-10-27 Abbvie Bahamas Ltd Ligandos fosfina para reacciones cataliticas
US8975443B2 (en) 2010-07-16 2015-03-10 Abbvie Inc. Phosphine ligands for catalytic reactions
JP5819959B2 (ja) 2010-07-16 2015-11-24 アッヴィ・バハマズ・リミテッド 抗ウイルス性化合物を調製するための方法
WO2015120610A1 (en) * 2014-02-14 2015-08-20 Eli Lilly And Company Gpr142 agonist compound
CN105153195B (zh) * 2015-09-01 2017-09-26 汤文建 一种三环吡唑[1,5‑d][1,4]苯并氧氮杂卓酮衍生物及其制备方法与用途
WO2020239074A1 (zh) * 2019-05-31 2020-12-03 南京明德新药研发有限公司 作为rip-1激酶抑制剂的双并环类化合物及其应用

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1995014671A1 (en) * 1993-11-22 1995-06-01 Merck & Co., Inc. 3-acylaminobenzazepines
WO2006020959A2 (en) * 2004-08-13 2006-02-23 Amgen Inc. Substituted benzofused heterocycles
CN101171231A (zh) * 2005-05-10 2008-04-30 霍夫曼-拉罗奇有限公司 二酰基甘油酰基转移酶抑制剂
WO2010056496A1 (en) * 2008-11-14 2010-05-20 Merck Sharp & Dohme Corp. Azepinone derivatives

Family Cites Families (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4847248A (en) * 1986-12-23 1989-07-11 Merck & Co., Inc. 1,4-Benzodiazepines with 5- and 6-membered heterocyclic rings and their use as cholecystokinins and gastrin antagonists
US4735941A (en) * 1986-12-23 1988-04-05 Merck & Co., Inc. 1,4-benzodiazepines with 5- and 6-membered heterocyclic rings, useful as gastrointestinal and CNS agents
EP0272866A1 (en) 1986-12-23 1988-06-29 Merck & Co. Inc. 1,4-Benzodiazepines with 5-membered heterocyclic rings
IL101850A (en) * 1991-06-13 1996-01-31 Janssen Pharmaceutica Nv History 11-) 4-Pipridinyl (-Imidazo] B-1, 2 [] 3 [Benzazepine, their preparation and pharmaceutical preparations containing them
EP0523846A3 (en) 1991-06-14 1993-03-17 Merck & Co. Inc. 1,4-benzodiazepines with 5-membered heterocyclic rings
EP0730596A4 (en) * 1993-11-22 1997-07-30 Merck & Co Inc BENZODIAZEPINES
US5439906A (en) * 1993-11-22 1995-08-08 Merck & Co., Inc. Antiarrhythmic benzodiazepines
US5834464A (en) * 1994-11-18 1998-11-10 Merck & Co., Inc. Imidazolinobenzodiazepines
EA002100B1 (ru) 1996-12-23 2001-12-24 Элан Фармасьютикалз, Инк. ЦИКЛОАЛКИЛЬНЫЕ СОЕДИНЕНИЯ, ЛАКТАМЫ, ЛАКТОНЫ И РОДСТВЕННЫЕ СОЕДИНЕНИЯ, СОДЕРЖАЩИЕ ИХ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ КОМПОЗИЦИИ И СПОСОБЫ ИНГИБИРОВАНИЯ ВЫСВОБОЖДЕНИЯ И/ИЛИ СИНТЕЗА β-АМИЛОИДНОГО ПЕПТИДА С ПОМОЩЬЮ УКАЗАННЫХ СОЕДИНЕНИЙ
GB0012671D0 (en) * 2000-05-24 2000-07-19 Merck Sharp & Dohme Therapeutic agents
CN101232887A (zh) 2005-07-29 2008-07-30 默克公司 杂环苯并二氮杂䓬cgrp受体拮抗剂
US7569590B2 (en) 2006-09-19 2009-08-04 Bristol-Myers Squibb Company Use of thianecarboxamides as dgat inhibitors
WO2009126624A1 (en) 2008-04-11 2009-10-15 Bristol-Myers Squibb Company Triazolo compounds useful as dgat1 inhibitors
WO2009126861A2 (en) 2008-04-11 2009-10-15 Bristol-Myers Squibb Company Triazolopyridine compounds useful as dgat1 inhibitors
WO2010084979A1 (en) 2009-01-23 2010-07-29 Banyu Pharmaceutical Co.,Ltd. Benzodiazepin-2-on derivatives
CA2752739A1 (en) 2009-02-17 2010-08-26 Msd K.K. 1,4-benzodiazepin-2-on derivatives

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1995014671A1 (en) * 1993-11-22 1995-06-01 Merck & Co., Inc. 3-acylaminobenzazepines
WO2006020959A2 (en) * 2004-08-13 2006-02-23 Amgen Inc. Substituted benzofused heterocycles
CN101171231A (zh) * 2005-05-10 2008-04-30 霍夫曼-拉罗奇有限公司 二酰基甘油酰基转移酶抑制剂
WO2010056496A1 (en) * 2008-11-14 2010-05-20 Merck Sharp & Dohme Corp. Azepinone derivatives

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Gang Zhao,等.Validation of Diacyl Glycerolacyltransferase I as a Novel Target for the Treatment of Obesity and Dyslipidemia Using a Potent and Selective Small Molecule Inhibitor.《J. Med. Chem.》.2008,第51卷(第3期),第380-383页,参见全文. *

Also Published As

Publication number Publication date
KR101395428B1 (ko) 2014-05-14
CA2783684C (en) 2014-02-25
KR20120099457A (ko) 2012-09-10
US20110144091A1 (en) 2011-06-16
EA020128B1 (ru) 2014-08-29
CN102666543A (zh) 2012-09-12
BR112012013918A2 (pt) 2016-04-26
AU2010328410B2 (en) 2014-02-06
MX2012006646A (es) 2012-06-25
US8299061B2 (en) 2012-10-30
WO2011071840A1 (en) 2011-06-16
EP2509981A1 (en) 2012-10-17
AU2010328410A1 (en) 2012-07-26
TWI392680B (zh) 2013-04-11
JP2013513607A (ja) 2013-04-22
AR079170A1 (es) 2011-12-28
ES2509922T3 (es) 2014-10-20
TW201130844A (en) 2011-09-16
EA201200868A1 (ru) 2012-12-28
JP5631411B2 (ja) 2014-11-26
EP2509981B1 (en) 2014-08-06
CA2783684A1 (en) 2011-06-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN102666543B (zh) 二酰基甘油酰基转移酶抑制剂
CN106795111B (zh) Nr2b的负别构调节剂n-烷基芳基-5-氧基芳基-八氢-环戊二烯并[c]吡咯
CN105263927B (zh) 谷氨酰胺酰环化酶抑制剂
JP2007517056A (ja) ピロール及びピラゾールｄａａｏ阻害剤
CN104080784B (zh) 用作卵泡刺激素调节剂的苯甲酰胺衍生物
KR20170033314A (ko) Ｆｓｈｒ의 조절제로서의 피라졸 화합물 및 이의 용도
CN103980151A (zh) 作为阿片样物质受体的拮抗剂或反向激动剂的新型化合物
CN103415521A (zh) 用作β分泌酶（BACE）抑制剂的3,4-二氢-吡咯并[1,2-a]吡嗪-1-基胺衍生物
TWI395582B (zh) 氮雜雙環烷類衍生物、其製備方法及其在醫藥上的用途
CN110092779B (zh) 一种取代的苯基化合物及其应用
CN101888840A (zh) 使用脑酰胺衍生物治疗多囊性肾疾病的方法
KR101863708B1 (ko) 고혈압 및/또는 섬유증 치료용 조성물
JP7086075B2 (ja) Ｃｃｒ２／ｃｃｒ５受容体拮抗剤としてのビフェニル化合物
JP7300552B2 (ja) 縮合環ピリミジンアミノ化合物、その調製方法、医薬組成物及び使用
JP7083436B2 (ja) ピロリジニル尿素誘導体とＴｒｋＡ関連疾患への使用
WO2020027225A1 (ja) 複素環化合物
CN101096346B (zh) 萘化合物、其制备方法及其药物组合物
TW201536794A (zh) Ｄｇａｔ１抑制劑及其製備方法和用途
CN116082259B (zh) 氨基甲酸酯基或氨甲酰基取代的5-ht2b拮抗剂
CN102007121B (zh) 作为cb-1配体的1，5-二苯基-吡咯烷-2-酮化合物
CN107174586B (zh) 以芦竹碱衍生物为活性成分的药物组合物及其应用
CN107586269B (zh) 一类用于治疗神经系统疾病的新化合物
CN101163660A (zh) (-)-卤芬酯的结晶固体形式和非晶态形式
WO2023163140A1 (ja) インダゾール化合物及びその医薬用途
KR101247010B1 (ko) ３-인다졸릴-４-피리딜이소티아졸

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20141224

Termination date: 20151207

EXPY Termination of patent right or utility model