EA018195B1 - Замещенные 2-[2-(фенил)этиламино]алканамидные производные и применение указанных соединений в качестве модуляторов натриевых и/или кальциевых каналов - Google Patents

Замещенные 2-[2-(фенил)этиламино]алканамидные производные и применение указанных соединений в качестве модуляторов натриевых и/или кальциевых каналов Download PDF

Info

Publication number
EA018195B1
EA018195B1 EA201070018A EA201070018A EA018195B1 EA 018195 B1 EA018195 B1 EA 018195B1 EA 201070018 A EA201070018 A EA 201070018A EA 201070018 A EA201070018 A EA 201070018A EA 018195 B1 EA018195 B1 EA 018195B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
ethylamino
butoxyphenyl
alkyl
hydrogen
dimethylacetamide
Prior art date
Application number
EA201070018A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201070018A1 (ru
Inventor
Пьеро Меллони
Алессандра Рэстиво
Эмануела Иццо
Симона Франчискони
Елена Коломбо
Чибэле Сабидо-Давид
Original Assignee
Ньюрон Фармасьютикалс С.П.А.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ньюрон Фармасьютикалс С.П.А. filed Critical Ньюрон Фармасьютикалс С.П.А.
Publication of EA201070018A1 publication Critical patent/EA201070018A1/ru
Publication of EA018195B1 publication Critical patent/EA018195B1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/38—Heterocyclic compounds having sulfur as a ring hetero atom
    • A61K31/381—Heterocyclic compounds having sulfur as a ring hetero atom having five-membered rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/13—Amines
    • A61K31/135—Amines having aromatic rings, e.g. ketamine, nortriptyline
    • A61K31/137—Arylalkylamines, e.g. amphetamine, epinephrine, salbutamol, ephedrine or methadone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
    • A61K31/165—Amides, e.g. hydroxamic acids having aromatic rings, e.g. colchicine, atenolol, progabide
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4515—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine having a butyrophenone group in position 1, e.g. haloperidol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
    • A61K31/551—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole having two nitrogen atoms, e.g. dilazep
    • A61K31/5513—1,4-Benzodiazepines, e.g. diazepam or clozapine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/06—Antimigraine agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/08—Antiepileptics; Anticonvulsants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/22—Anxiolytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/24—Antidepressants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/30—Drugs for disorders of the nervous system for treating abuse or dependence
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C237/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups
    • C07C237/02—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C237/04—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated
    • C07C237/06—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated having the nitrogen atoms of the carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C237/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups
    • C07C237/02—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C237/04—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated
    • C07C237/08—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to an acyclic carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by singly-bound oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C237/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups
    • C07C237/02—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C237/20—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton containing six-membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C317/00—Sulfones; Sulfoxides
    • C07C317/26—Sulfones; Sulfoxides having sulfone or sulfoxide groups and nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the same carbon skeleton
    • C07C317/28—Sulfones; Sulfoxides having sulfone or sulfoxide groups and nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the same carbon skeleton with sulfone or sulfoxide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C321/00—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides
    • C07C321/24—Thiols, sulfides, hydropolysulfides, or polysulfides having thio groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings
    • C07C321/26—Thiols
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C323/00—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups
    • C07C323/23—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the same carbon skeleton
    • C07C323/24—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C323/25—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C327/00—Thiocarboxylic acids
    • C07C327/38—Amides of thiocarboxylic acids
    • C07C327/40—Amides of thiocarboxylic acids having carbon atoms of thiocarboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C327/42—Amides of thiocarboxylic acids having carbon atoms of thiocarboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms to hydrogen atoms or to carbon atoms of a saturated carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C327/00—Thiocarboxylic acids
    • C07C327/38—Amides of thiocarboxylic acids
    • C07C327/40—Amides of thiocarboxylic acids having carbon atoms of thiocarboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C327/44—Amides of thiocarboxylic acids having carbon atoms of thiocarboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms to carbon atoms of an unsaturated carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/10—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/16—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D295/16—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms acylated on ring nitrogen atoms
    • C07D295/18—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms acylated on ring nitrogen atoms by radicals derived from carboxylic acids, or sulfur or nitrogen analogues thereof
    • C07D295/182—Radicals derived from carboxylic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D333/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom
    • C07D333/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D333/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom
    • C07D333/06—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D333/14—Radicals substituted by singly bound hetero atoms other than halogen
    • C07D333/20—Radicals substituted by singly bound hetero atoms other than halogen by nitrogen atoms

Abstract

Изобретение относится к замещенным 2-[2-(фенил)этиламино]алканамидным производным формулы (I), в которой X, Y, Z, R, R, R, R, R', R, R, R, Rимеют указанные в описании значения, и фармацевтически приемлемым солям указанных соединений, фармацевтическим композициям, содержащим такие соединения в качестве активного ингредиента, и применению указанных композиций в качестве модуляторов натриевых и/или кальциевых каналов, полезных для предупреждения, ослабления и излечивания широкого ряда патологий, включающих, но не в порядке ограничения, неврологические, когнитивные, психические, воспалительные, мочеполовые и желудочно-кишечные заболевания, для которых вышеуказанные механизмы установлены как выполняющие патологическую роль.

Description

Настоящее изобретение относится к замещенным 2-[2-(фенил)этиламино]алканамидным производным, фармацевтически приемлемым солям указанных соединений, фармацевтическим композициям, содержащим указанные соединения, и применению указанных соединений в качестве модуляторов натриевых и/или кальциевых каналов.
Производные, являющиеся целью настоящего изобретения, активны в качестве модуляторов натриевых и/или кальциевых каналов и поэтому полезны для предупреждения, ослабления и излечивания широкого ряда патологий, включающих, но не в порядке ограничения, неврологические, когнитивные, психические, воспалительные, мочеполовые и желудочно-кишечные заболевания, при которых вышеуказанные механизмы считаются выполняющими патологическую роль.
Соединения по настоящему изобретению, по существу, не оказывают ингибирующего действия в отношении моноаминоксидазы (МАО), в особенности при дозах, терапевтически эффективных для предупреждения, ослабления и/или излечивания указанных болезней.
Уровень техники
Химическое обоснование.
Патент ОБ 586645 описывает синтез аминокислотных производных следующей общей формулы:
В частности, указанный патент описывает синтез Ν-гидроксиалкиламидов, обладающих стимулирующими свойствами в отношении гладкой мышцы матки.
Патентная заявка \¥О 90/14334 описывает монозамещенные производные Ν-фенилалкил-альфааминокарбоксамида следующей общей формулы:
где К означает (С1-С8)алкил, (С3-С8)циклоалкил, фурил, тиенил, пиридил или фенильный цикл, необязательно замещенный 1-4 заместителями, независимо выбираемыми из галогена, (С1-С6)алкила, (С1-С6)алкокси и трифторметила;
А означает -(СН2)т-, -(СН2)р-Х-(СН2)ч-группу, где т является целым числом от 1 до 4, один из р и с.| равен 0 и другой равен 0 или означает целое число от 1 до 4, X означает -О-, -8- или -ΝΚ4-, где К4 означает водород или (С1-С4)алкил, η равно 0 или 1;
каждый из К! и К2 независимо означает водород или (С1-С4)алкил;
К3 означает водород, (С1-С4)алкил, необязательно замещенный гидрокси, или фенил, необязательно замещенный, как указано выше;
К3' означает водород или
К3 и К3' вместе образуют (С3-С6)циклоалкильное кольцо;
каждый из К5 и Кб независимо означает водород или (С1-С6)алкил, при условии, что, когда К означает (С1-С8)алкил, А означает -(СН2)Р-Х-(СН2)Ч- группу, в которой р и с.|. оба, равны 0 и X означает -О-, -8- или -ΝΚ4-, где К4 означает водород или С1-С4-алкил, полезные для применения в качестве противоэпилептических средств, средств для лечения болезни Паркинсона, нейропротективных, антидепрессорных, антиспастических и/или снотворных средств.
Ни одно из производных, синтезированных согласно данной патентной заявке, не описано конкретно и не имеется данных о его получении в \УО 90/14334.
В других патентных заявках выбранные соединения, подпадающие под общую формулу \УО 90/14334, заявлены для применения в композициях, обладающих другими активностями, а именно:
\УО 99/35125 - альфа-аминоамидные производные, полезные в качестве аналгезирующих средств;
\УО 03/020273 - фармацевтическая композиция, включающая габапентин или соответствующие аналоги и альфа-аминоамид, и применение указанной композиции для обезболивания;
\УО 04/062655 - альфа-аминоамидные производные, полезные в качестве средств против мигрени;
\УО 05/018627 - альфа-аминоамидные производные, полезные в качестве противовоспалительных средств;
\УО 05/070405 - альфа-аминоамидные производные, полезные для лечения нарушений нижних мочевыводящих путей;
\УО 05/102300 - альфа-аминоамидные производные, полезные для лечения синдрома усталых ног и аддитивных нарушений;
\УО 06/027052 - применение (галогенбензилокси)бензиламинопропанамидов для производства лекарственных средств, активных в качестве селективных модуляторов натриевых и/или кальциевых каналов;
ЕР № 06012352.8 - α-аминоамидные производные, полезные для лечения когнитивных расстройств.
- 1 018195
В патентной заявке \¥О 98/35957 описаны амидные производные следующей общей формулы:
и заявлены как полезные против ожирения и расстройств пищевого поведения.
Ни одно из соединений, синтезированных согласно данной патентной заявке, не описано конкретно и не было фактически синтезировано или конкретно перечислено в указанной \УО 98/35957.
В \УО 2004/087125 описаны соединения следующей общей формулы:
Заявлены механизм блокирования натриевых каналов и многочисленные фармакологические активности, в частности противоболевые активности и действия против дисфункции мочевого пузыря.
Следует подчеркнуть, что когда Х2 означает алкилен, то алкилен не может представлять собой -СН2-СН2-, а только является -СН2-, таким образом, ни одно из 2-[2-(фенил)этиламино]алканамидных производных по настоящей заявке не подпадает под вышеуказанную общую формулу.
Е1еопога Οΐιίάίηί и др. в Вюогдашс & Меб1С1иа1 Сйеш181гу. 2006, 14, 3263-3274 описывают соединения следующей общей формулы:
Указанные соединения прошли испытание на противосудорожную активность.
Ни одно из соединений, описанных и синтезированных в данной патентной заявке, не подпадает под вышеуказанную общую формулу.
Совместно рассматриваемая заявка РСТ/ЕР 2006/011443 (\УО 2007/071311), поданная 29 ноября 2006 г., касается 2-фенилэтиламинопроизводных следующей общей формулы:
Ни одно из соединений, заявленных в данной патентной заявке, не подпадает под РСТ/ЕР 2006/011443 (№О 2007/071311).
Биологическое обоснование.
Натриевые каналы играют важную роль в нейронной сети, быстро передавая электрические импульсы через клетки и сети клеток, координируя, таким образом, высшие процессы, охватывающие диапазон от локомоции до когнитивности. Указанные каналы представляют собой крупные трансмембранные белки, способные переключаться в различные состояния, обеспечивающие избирательную проницаемость для натриевых ионов. Для такого процесса требуется потенциал действия, чтобы деполяризовать мембраны, и, следовательно, указанные каналы являются потенциалозависимыми. За последние несколько лет достигнуто значительно лучшее понимание роли натриевых каналов и взаимодействующих с указанными каналами лекарственных средств.
Потенциалозависимые натриевые каналы были первоначально классифицированы на основе чувствительности к тетродотоксину, от низкой наномолярной (чувствительные к тетродотоксину, ТТХ§) до высокой микромолярной (устойчивые к тетродотоксину, ТТХг). К настоящему времени идентифицированы 9 различных α-субъединиц натриевых каналов и классифицированы как Ναν1.1-Ναν1.9.
Ναν1.1-Ναν1.4, Ναν1.6 и Ναν1.7 являются ТТХ§, тогда как Ναν1.5, Ναν1.8 и Ναν.1.9 являются ТТХг, с различными степенями чувствительности.
Ναν1.1-Ναν1.3 и Ναν1.6 главным образом экспрессируются в ЦНС, тогда как Ναν1.4 и Ναν1.5 в основном экспрессируются в мышце (скелетной и сердечной соответственно), а Ναν1.7, Ναν1.8 и Ναν1.9 преимущественно экспрессируются в ΌΒΟ-сенсорных нейронах.
Выяснилось, что ряд лекарственных средств с неизученным механизмом действия фактически оказывает действие путем модулирования проводимости натриевых каналов, включая местные анестезирующие вещества, антиаритмические препараты класса I и противосудорожные средства. Нейронные блокаторы натриевых каналов нашли применение, включающее использование указанных блокаторов в лечении эпилепсии (фенитоин и карбамазепин), биполярного расстройства (ламотригин), предупреждении нейродегенерации и ослаблении невропатической боли. Различные противоэпилептические лекарственные средства, стабилизирующие нейронную возбудимость, эффективны при невропатической боли (например, карбамазепин).
- 2 018195
Кроме того, увеличение экспрессии или активности натриевых каналов наблюдается в ряде моделей воспалительной боли, что говорит о роли натриевых каналов в воспалительной боли.
Кальциевые каналы представляют собой перекрывающие мембрану белки из многих субъединиц, которые позволяют контролировать вход кальциевых ионов в клетки из внеклеточной жидкости. Вообще, кальциевые каналы являются зависимыми от потенциала и носят название потенциалозависимых кальциевых каналов (УССС). УССС найдены во всей нервной системе млекопитающих, где указанные каналы регулируют внутриклеточные уровни ионов кальция, которые важны для жизнеспособности и функционирования клеток. Внутриклеточные концентрации ионов кальция непосредственно вовлечены в ряд процессов жизнедеятельности животных, таких как высвобождение нейромедиатора, сокращение мышцы, пейсмейкерная активность и секреция гормонов. Все возбудимые клетки в организме животных, такие как нейроны центральной нервной системы (ЦНС), периферические нервные клетки и мышечные клетки, включая соответствующие клетки скелетных мышц, сердечных мышц и венозных и артериальных гладких мышц, имеют зависимые от напряжения кальциевые каналы.
Кальциевые каналы образуют большое семейство с множеством генетически, физиологически и фармакологически различных субтипов. На основании биофизических свойств кальциевых токов, регистрируемых на отдельных нейронах, охарактеризованы два суперсемейства: активируемые высоким напряжением (НУА) и активируемые низким напряжением (ЬУЛ) кальциевые каналы. Кальциевые токи, называемые Ь-типа, Р-типа, О-типа. Ν-типа, Я-типа, являются НУА, тогда как Т-типа относятся к ЬУЛ. На основании молекулярной идентичности установлено десять различных субтипов кальциевых каналов, клонированных, экспрессированных и подразделенных на три семейства: семейство Сау1 (Сау1.1, 1.2, 1.3, 1.4) функционально связано с Са-током Ь-типа; семейство Сау2 (Сау2.1, 2.2, 2.3) функционально связано с токами Р/р, Ν, Я-типа и семейство Сау3 (Сау3.1, 3.2, 3.3) функционально связано с токами Ттипа.
Считается, что кальциевые каналы имеют отношение к некоторым болезненным состояниям. Предполагается, что ряд соединений, полезных для лечения различных сердечно-сосудистых заболеваний у млекопитающих, включая людей, оказывает благоприятные воздействия посредством модулирования функций зависимых от потенциала кальциевых каналов, присутствующих в сердечной и/или сосудистой гладкой мышце. Соединения, обладающие активностью по отношению к кальциевым каналам, могут также быть привлечены в случае лечения боли. В частности, предполагается как по распределению в тканях, так и по результатам некоторых фармакологических исследований, что кальциевые каналы Νтипа (Сау2.2), отвечающие за регуляцию высвобождения нейромедиатора, играют существенную роль в ноцицептивной передаче. На моделях невропатической боли при телесном повреждении установлено, что кальциевые каналы Ν-типа являются активированными в ипсилатеральном заднем роге (Слхкоуа Ό., Магза1а 1., Ьпкасоуа Ν., Магза1а М,, 1егдоуа 8., Огепбасоуа 1., Уакзй Т.Ь. Ехр. Вташ. Яез. (2002), 147: 456463). Показано, что специфические блокаторы кальциевых каналов Ν-типа эффективны для ослабления болевых реакций в моделях невропатической боли (Майе^з Е.-А., Эккепзоп А.Н. Раш (2001), 92: 235246), на II фазе формалинового теста (Όίηζ А., Ьккепзоп А.Н. Раш (1997), 69: 93-100) и при гипералгезии, вызванной воспалением коленного сустава (№Ье I., Уапедаз Н., 8сйа1Ь1е Н.О. Ехр. Вташ. Яез. (1998), 120: 61-69). Обнаружено, что мутантные мыши, лишенные кальциевых каналов Ν-типа, обладают пониженной реакцией на постоянную боль, как видно из снижения болевой реакции на II фазе формалинового теста (К1ш С., 1ип К., Ьее Т., К1ш 8.8., Мсепегу М.У., СЫп Н., К1ш Н.Ь, Рагк 1.М., К1ш Ό.Κ., 1ипд 8.Ι., К1ш I., 81ιίιτ Н.8. Мо1. Се11 Шитозск (2001), 18: 235-245; На!акеуаша 8., Уакашоп М., Ию М., М1уашо1о Ν., ТакайазЫ Е., УозЫиада Т., 8а\таба К., Иною К., Тапака I., Уоз1пха\уа Т., №з1иха\уа Υ., Моп Υ., Мбоше Т., 81юр 8. кепгогерой (2001), 12: 2423-2427), а также на невропатическую боль, что оценено по снижению механической аллодинии и термической гипералгезии на модели лигатуры спинального нерва. Интересно, что такие мыши также характеризуются более низкими уровнями тревожности по сравнению с немутантным типом (8аедиза Н., Кштйата Т., 2опд 8., Кахипо А., Ма1зиба Υ., Шпака Т., Нап У., Топуаша Н., ТапаЬе Т., ЕМВО I. (2001), 20: 2349-2356). Вовлеченность кальциевых каналов Ν-типа в болевой синдром дополнительно подтверждена в клинике с помощью зиконотида, пептида, полученного из яда морской змеи, Сопиз Мадпиз. Ограничение в терапевтическом применении данного пептида состоит в том, что указанный пептид вводят человеку интратекально (Во^етзох 8.8. апб Ьи1йет Я. Тохкоп (1998), 36: 1651-1658).
Все вместе полученные данные указывают на то, что соединения, обеспечивающие блокаду натриевых и/или кальциевых каналов, обладают высоким терапевтическим потенциалом в отношении предупреждения, ослабления и излечивания широкого ряда патологий, включающих неврологические, психические, мочеполовые и желудочно-кишечные заболевания, для которых вышеуказанные механизмы установлены как выполняющие патологическую роль. Существуют многочисленные документы и патенты, описывающие модуляторы или антагонисты натриевых каналов и/или кальциевых каналов для лечения или модулирования множества заболеваний, так, например, применение указанных модуляторов или антагонистов в качестве местных анестезирующих веществ, антиманиакальных средств, антидепрессантов, средств для лечения таких нарушений, как униполярная депрессия, недержание мочи, диарея, воспаление, эпилепсия, нейродегенеративные состояния, гибель нервных клеток, невропатическая боль, миг
- 3 018195 рень, острые гипералгезия и воспаление, почечная недостаточность, аллергия, астма, бронхоспазм, дисменорея, спазм пищевода, глаукома, нарушения мочевыводящих путей, нарушения моторики желудочнокишечного тракта.
Неполный перечень таких документов и патентов/патентных заявок, описывающих блокаторы натриевых и/или кальциевых каналов и применение указанных блокаторов, включает приведенные ниже ссылки:
С. Акйетег описывает в Αάν. Ехр. Меб. ΒίοΙ. 2002, 513, 161-181 натриевые и кальциевые каналы как мишени для нейропротективных веществ.
Уапедак е 8сйа1Ые (Рат 2000, 85, 9-18) обсуждает влияние антагонистов кальциевых каналов на спинальные механизмы боли, гипералгезии и аллодинии.
\νϋ 03/057219 касается блокаторов натриевых каналов, полезных в качестве средств для лечения или модулирования расстройства центральной нервной системы, такого как невропатическая боль, воспалительная боль, родственная воспалительной боль или эпилепсия.
νθ 99/14199 описывает замещенные 1,2,3,4,5,6-гексагидро-2,6-метано-3-бензазоцины-10-олы в качестве эффективных блокаторов натриевых каналов, полезных для лечения некоторых заболеваний, таких как внезапный приступ, нейродегенеративные нарушения, болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона и сердечно-сосудистые нарушения.
νθ 01/74779 описывает новые аминопиридиновые блокаторы натриевых каналов и применение указанных блокаторов в качестве противосудорожных средств, местных анестезирующих веществ, в качестве антиаритмических средств, для лечения или предупреждения нейродегенеративных состояний, таких как боковой амиотрофический склероз (АЬ8), для лечения или предупреждения как острой, так и хронической боли и для лечения или предупреждения диабетической невропатии.
νθ 04/087125 описывает аминокислотные производные в качестве ингибиторов натриевых каналов млекопитающих, полезных для лечения таких нарушений, как хроническая и острая боль, тиннитус, заболевания кишечника, дисфункция мочевого пузыря и демиелинизирующие заболевания.
Патент США 5051403 касается способа ослабления нейронального нарушения, связанного с ишемическим состоянием, таким как внезапный приступ, путем введения связывающего/ингибирующего омега-конотоксин-пептида, где пептид отличается специфическим избирательным ингибированием токов потенциалозависимых кальциевых каналов в нейрональных тканях.
Патент США 5587454 касается композиций и способов создания аналгезии, в частности, при лечении боли и невропатической боли.
Патент США 5863952 касается антагонистов кальциевых каналов, предназначенных для лечения ишемического инсульта.
Патент США 6011035 касается блокаторов кальциевых каналов, полезных для лечения состояний, таких как внезапный приступ и боль.
Патент США 6117841 касается блокаторов кальциевых каналов и применения указанных блокаторов для лечения внезапного приступа, ишемии головного мозга, боли, травмы головы или эпилепсии.
Патент США 6362174 касается блокаторов кальциевых каналов Ν-типа, предназначенных для лечения внезапного приступа, ишемии головного мозга, боли, эпилепсии и травмы головы.
Патент США 6420383 и патент США 6472530 касаются новых блокаторов кальциевых каналов, полезных для лечения и предупреждения ряда нарушений, таких как гиперчувствительность, аллергия, астма, бронхоспазм, дисменорея, спазм пищевода, глаукома, преждевременные роды, нарушения мочевыводящих путей, нарушения моторики желудочно-кишечного тракта и сердечно-сосудистые нарушения.
Патент США 6458781 касается соединений, которые действуют путем блокирования кальциевых каналов, и применения указанных соединений для лечения внезапного приступа, ишемии головного мозга, боли, травмы головы или эпилепсии.
Патент США 6521647 касается применения блокаторов кальциевых каналов для лечения почечной недостаточности у животных, в особенности хронической почечной недостаточности.
νθ 97/10210 касается трициклических гетероциклических производных и применения указанных производных в терапии, в частности в качестве антагонистов кальциевых каналов, например, для лечения ишемии, в частности ишемического инсульта.
νθ 03/018561 касается хинолиновых соединений в качестве антагонистов кальциевых каналов Ν-типа и способов применения таких соединений для лечения или предупреждения боли или ноцицепции.
Моноаминоксидаза (МАО) является ферментом, присутствующим в наружной митохондриальной мембране нейронных и ненейронных клеток. Существуют две изоформы МАО: МАО-А и МАО-Β. Ферменты МАО отвечают за окислительное дезаминирование эндогенных и ксенобиотических аминов и характеризуются различным субстратным предпочтением, ингибиторной специфичностью и распределением в тканях. Серотонин, норадреналин и адреналин являются предпочтительными субстратами для МАО-А, и клоргилин является селективным ингибитором МАО-А; тогда как предпочтительным субстратом для МАО-Β является β-фенилэтиламин и ингибируется МАО-Β селегилином. Допамин, тирамин и триптамин окисляются как МАО-А, так и МАО-Β, в частности допамин в человеческом мозге дезамини- 4 018195 рован на 80% посредством МАО-В.
Ингибирование МАО позволяет аккумуляцию эндогенных и экзогенных субстратов и может, таким образом, при почти полном ингибировании (>90%) изменять динамики регулярных моноаминовых медиаторов. МАО регулируют концентрации в головном мозге наиболее важных нейромедиаторов, таких как норадреналин, серотонин и допамин, которые имеют отношение к эмоции, тревожности и движению. Таким образом, считается, что МАО тесно связаны с различными психическими и неврологическими нарушениями, такими как депрессия, тревожность и болезнь Паркинсона (РО).
Ингибиторы МАО-А в основном используют в психиатрии для лечения глубокой, рефракторной и атипичной депрессии вследствие способности указанных ингибиторов повышать пониженные уровни серотонина и норадреналина в головном мозге. Совсем недавно ингибиторы МАО-А были использованы для лечения пациентов с тревожными расстройствами, такими как социофобия, панические расстройства, посттравматические стрессовые расстройства и обсессивно-компульсивные расстройства.
Ингибиторы МАО-В в основном используют в неврологии для лечения ΡΌ.
Существуют также последние данные и интерес к роли МАО-В в других патологических состояниях, таких как болезнь Альцгеймера (АО). К настоящему времени отсутствуют данные по вовлеченности МАО-В в метаболизм сопутствующих медиаторов, таких как холецистокинин, субстанция Р, соматостатин и нейротензин, которые вовлечены в модуляцию болевого ощущения. Поэтому отсутствует научное обоснование для применения ингибиторов МАО-В при болевых синдромах.
Сообщается о неблагоприятных побочных реакциях при использовании в клинической практике ингибиторов МАО. Первое поколение неселективных и необратимо действующих ингибиторов МАО, таких как транилципромин и фенелзин, обладает рядом побочных эффектов, включающих гепатотоксичность, ортостатическую гипотензию и, что наиболее важно, гипертонический криз, возникающий после приема пищи, содержащей тирамин (Соорег АЛ. - Туташше аиб итеуегаЫе шопоашше ох1баве 1иЫЬйот5 ίη сйшса1 ртасйсе. - Вг. 1. РвусН. 8ирр1. 1989: 38-45).
При использовании указанных неселективных и необратимо действующих ингибиторов МАО следует соблюдать строгую диету с пониженным содержанием тирамина. Прессорная чувствительность к тирамину нормализуется за 4 недели после отмены транилципроминовой терапии и более чем за 11 недель после отмены фенелзиновой терапии.
Селегилин, необратимо действующий ингибитор МАО-В, в особенности, при использовании в комбинации с леводопой, может вызывать такие нарушения, как анорексия/тошнота, сухость во рту, дискинезия и ортостатическая гипотензия у пациентов с РО. последнее является наиболее проблематичным (Уо1х Н.Р. апб С1еПег С.Н. Мопоашше ох1баве шЫЬйотв. А ретвресйуе оп 1Не1г иве ίη (Не е1бег1у.- Отидв Адшд 13 (1998), р. 341-355).
При монотерапии, анорексия/тошнота, скелетно-мышечные повреждения и аритмии сердца возникают чаще у пациентов, принимающих селегилин, чем у пациентов, принимающих плацебо. Помимо указанных побочных действий, были отмечены возросшие соотношения повышенных сывороточных уровней А8Т и АТТ. Наиболее часто упоминаемыми побочными действиями моклобемида, селективного и обратимо действующего ингибитора МАО-А, являются нарушения сна, повышенная тревожность, возбужденное состояние и головная боль.
Комбинация селективных ингибиторов обратного захвата серотонина (88ΚΙ) и моклобемида обладает хорошей эффективностью в случаях рефракторной депрессии, но вызывает спор о том, действительно ли токсические побочные действия, такие как серотонинергический синдром, является следствием применения такой комбинации (Ваишапп Р. - Рйаттасокшейс-рйаттасобупашк те1айопвЫр о! (Не ве1ес1|уе ветоФпш геир(аке тЫЬкогв. С1ш РНагшасокше! 31 (1996), р. 444-469). По причине аритмии сердца и повышенных уровней фермента в печени следует регулярно контролировать электрокардиограмму и данные лабораторных анализов.
Многие типы физиологических изменений, возникающих с возрастом, оказывают влияние на фармакодинамику и фармакокинетику ингибиторов МАО. В самом деле, фармакокинетические параметры у пожилых людей заметно отличаются от соответствующих параметров для более молодых пациентов. Такие параметры, включающие всасывание, распределение, метаболизм и экскрецию, следует учитывать, чтобы исключить или свести к минимуму некоторые побочные действия и межлекарственные взаимодействия. Пожилые пациенты обычно больше, чем молодые, подвержены побочным действиям, включающим неблагоприятные побочные реакции на лекарства. Гипертонический криз может проявляться чаще у пожилых, чем у молодых пациентов, поскольку сердечно-сосудистая система пожилых уже нарушается с возрастом.
Применение симпатомиметических средств в комбинации с ингибиторами МАО может также повышать кровяное давление. К тому же, по сравнению с плацебо, фенелзин связан со значительно более высоким уровнем сонливости, тремора, дискинезии, диареи, трудностей с мочеиспусканием, ортостатических эффектов и неблагоприятных дерматологических эффектов. Интересно отметить, что при лечении моклобемидом у пожилых людей головная боль отмечается чаще, чем у молодых пациентов (Уо1х Н.Р. апб С1ебег С.Н. - Мопоашше ох1баве ййпЬбогв. А ретвресйуе оп 1Не1г иве ш (Не е1бег1у. Отидв
Адшд. 13 (1998), р. 341-355).
- 5 018195
Ингибиторы МАО (преимущественно, МАО-А, но также неселективные МАО-А/МАО-В) иногда прописывают от депрессии. По причине потенциального риска суицида неблагоприятные побочные реакции препарата и токсичность из-за передозировки являются важными факторами, которые следует учитывать при выборе антидепрессанта. Вдобавок, когда ингибиторы МАО применяют в высокой дозировке, неблагоприятные сердечно-сосудистые эффекты, по-видимому, существенно возрастают; и поскольку избирательность в отношении МАО утрачивается при таких больших дозах, тирамин может вызывать потенциально опасные гипертензивные реакции. Сильная передозировка ингибиторов МАО вызывает возбуждение, галлюцинации, гиперпирексию, гиперрефлексию и конвульсии. Аномальное кровяное давление также является токсическим признаком, так что могут потребоваться промывание желудка и поддержание сердечно-легочной деятельности. Передозировка традиционных неселективных и необратимо действующих ингибиторов МАО весьма опасна и иногда смертельна (Уашаба апб КтейеИоп, 1996. Рйагшасо1оду о£ апйбергеккайк ίη И1е е1бег1у. Ιη: Иау1б ТК, Бпубег Ь., ебйога. НапбЬоок о£ рйагшасо1оду о£ адшд. Воса Кйоп: СРС Рге§5. 1996).
При лечении болезней, в которых механизм(ы) натриевых и кальциевых каналов выполняет (выполняют) патологическую роль, ингибирование ферментов МАО не дает эффекта. Более того, побочные эффекты ингибирования МАО могут накладывать по меньшей мере два типа отрицательных ограничений:
1) диетарное: употребление пищи с высоким содержанием тирамина может вызвать серьезное, даже опасное для жизни увеличение системного кровяного давления (так называемый сырный эффект);
2) фармакологическое: например, боль часто лечат комбинацией лекарственных средств, таких как опиоидные производные и трициклический антидепрессант. С ингибиторами МАО такое сочетание является опасным, поскольку может вызвать серотонинергический синдром (возбуждение, тремор, галлюцинация, гипертермия и аритмия).
Таким образом, устранение или существенное снижение ингибирующего действия в отношении МАО в лекарственных препаратах, активных в качестве модуляторов натриевых и/или кальциевых каналов, полезных для предупреждения, ослабления и излечивания широкого ряда патологий, в которых указанный(ые) механизм(ы) выполняет (выполняют) патологическую роль, включающих неврологические, психические, воспалительные, мочеполовые и желудочно-кишечные заболевания, является неожиданным и существенным терапевтическим усовершенствованием против соединений подобной эффективности, но с вышеупомянутыми побочными эффектами.
С учетом полученных данных по ингибиторам МАО и, в частности, отсутствия каких-либо данных о роли МАО-В в патологических заболеваниях, таких как боль, мигрень, воспалительные, мочеполовые и желудочно-кишечные заболевания, можно предположить, что ингибирование МАО-В не должно являться существенным признаком для соединений, показанных для вышеупомянутых патологий, позволяющих избежать любых возможных побочных действий при постоянном и/или долговременном лечении.
Выгодное решение вышеуказанной проблемы состояло бы в обеспечении лекарственными средствами, являющимися избирательно активными в качестве модуляторов натриевых и/или кальциевых каналов или являющимися полезными для избирательного лечения болезней, нарушений или заболеваний, в которых механизм(ы) натриевых и кальциевых каналов выполняет (выполняют) патологическую роль. Под данным выражением подразумеваются лекарственные средства, которые при введении нуждающемуся в таком лечении пациенту в количествах, эффективных для лечения вышеупомянутых болезней, в которых вышеуказанный механизм(ы) натриевых и кальциевых каналов выполняет (выполняют) патологическую роль, не обладают какой бы то ни было ингибирующей активностью в отношении МАО или обладают существенно пониженной ингибирующей активностью, что приводит, таким образом, к предотвращению побочных действий, обусловленных аккумуляцией эндогенных и экзогенных моноаминовых медиаторов.
Исходная цель настоящего изобретения состояла в применении 2-[2-(фенил)этиламино]алканамидных производных для изготовления лекарственного средства, активного в качестве модулятора натриевых и/или кальциевых каналов, предназначенного для лечения патологий, в которых вышеуказанный механизм(ы) выполняет (выполняют) патологическую роль, таких как неврологические, когнитивные, психические, воспалительные, мочеполовые или желудочно-кишечные нарушения, указанные лекарственные средства, по существу, не обладают ингибирующей активностью в отношении МАО или обладают существенно пониженной ингибирующей активностью в отношении МАО и поэтому характеризуются пониженной потенциальной возможностью оказывать нежелательные побочные действия. Таким образом, основная цель настоящего изобретения состоит в получении 2-[2-(фенил)этиламино]алканамидных производных для применения в качестве лекарственных средств для лечения вышеуказанных патологий, отличающихся тем, что указанные лекарственные средства, по существу, не обладают ингибирующей активностью в отношении МАО или обладают существенно пониженной ингибирующей активностью в отношении МАО и поэтому характеризуются пониженной потенциальной возможностью оказывать нежелательные побочные действия.
Указанное применение обеспечивает улучшенный избирательный способ предупреждения, ослабления и/или излечивания вышеуказанных патологических болезней, в частности, у пациентов, особенно
- 6 018195 чувствительных к нежелательным побочным действиям, обусловленным ингибирующей активностью в отношении МАО, таким как перечисленные выше.
Дальнейший аспект настоящего изобретения состоит в разработке способа лечения пациента, страдающего нарушением, вызванным дисфункциями потенциалозависимых натриевых и/или кальциевых каналов, который включает введение указанному пациенту эффективного количества 2-[2-(фенил)этиламино]алканамидного производного.
Вышеуказанные неврологические нарушения включают боль обоих типов, как хроническую, так и острую, в частности невропатическую и воспалительную боль, головные боли, мигрень, спазмы; нейродегенеративные нарушения, такие как болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, эпилепсия, синдром усталых ног, внезапный приступ и ишемия головного мозга; когнитивные расстройства, такие как умеренные когнитивные нарушения (МС1), и психические расстройства, включающие депрессию, биполярное расстройство, манию, шизофрению, психоз, тревожность и зависимость. Вышеупомянутые воспалительные нарушения включают воспалительные процессы, поражающие все системы организма, например воспалительные процессы мышечно-скелетной системы, артритные состояния, нарушения, поражающие кожу и родственные ткани; нарушения дыхательной системы, а также нарушения иммунной и эндокринной системы. Более подробное разъяснение всех вышеупомянутых патологий приведено в этом документе ниже.
Описание изобретения
Целью настоящего изобретения является новый класс 2-[2-(фенил)этиламино]алканамидных производных, высокоэффективных в качестве модуляторов натриевых и/или кальциевых каналов и, по существу, не обладающих ингибирующей активностью в отношении МАО или обладающих существенно пониженной ингибирующей активностью в отношении МАО и поэтому характеризующихся пониженной потенциальной возможностью оказывать нежелательные побочные действия при предупреждении, ослаблении и излечивании широкого ряда патологий, включающих, но не в порядке ограничения, неврологические, когнитивные, психические, воспалительные, мочеполовые и желудочно-кишечные заболевания, в которых вышеуказанные механизмы, как установлено, выполняют патологическую роль.
В настоящем описании и формуле изобретения выражение модулятор(ы) натриевых и/или кальциевых каналов означает соединения, способные блокировать натриевые и/или кальциевые токи потенциалозависимым образом.
Таким образом, целью настоящего изобретения является соединение общей формулы (I)
(I) где X означает -О-, -8- или -8О2-;
Υ означает водород, ОН или О-(С1-С4)алкил;
Ζ означает =О или =8;
В означает (С3-С10)алкил, ш-трифтор(С3-С10)алкил;
В1 и В2 независимо означают водород, гидрокси, (С1-С8)алкокси, (С1-С8)алкилтио, галоген, трифторметил или 2,2,2-трифторэтил или один из В1 и В2 находится в орто-положении относительно В-Х- и вместе с указанным В-Х- образует о~ группу, в которой В0 означает (С2-С9)алкил;
В3 и В'3 независимо означают водород или (С1-С4)алкил;
В4 и В5 независимо означают водород, (С1-С4)алкил или
В4 означает водород и В5 означает группу, выбираемую из -СН2-ОН, -СН2-О-(С1-С6)алкила, -СН(СН3)-ОН, -(СН2)2-8-СН3, бензила и 4-гидроксибензила; или
В4 и В5 вместе со смежным атомом углерода образуют остаток (С3-С6)циклоалкил;
В6 и В7 независимо означают водород или (С1-С6)алкил или вместе со смежным атомом азота образуют 5-6-членный моноциклический насыщенный гетероцикл, необязательно содержащий один дополнительный гетероатом, выбираемый из -О-, -8- и - ЛВ8-, где В8 означает водород или (С1-С6)алкил; при условии, что, когда X означает -8- или -8О2-, Υ не может означать ОН или О-(С1-С4)алкил;
в зависимости от обстоятельств, либо в виде отдельного оптического изомера в изолированной форме, либо в виде смеси указанных изомеров в любом соотношении, и фармацевтически приемлемые соли указанных соединений.
Хотя некоторые соединения, конкретно указанные в данном описании, подпадают под общую формулу \¥О 90/14334, конкретное описание данных соединений в указанной заявке отсутствует. Ни одно из соединений, описываемых общей формулой (I) по данной заявке, конкретно не описано или не упомянуто в \УО 90/14334. Фактически, только незначительное количество 2-(2-фенилэтиламино)алканамидных производных идентифицировано в указанном предшествующем документе, которые, однако, содержат
- 7 018195 бензилокси-, бензиламино- или бензилзаместитель в 4-положении фенильной составляющей. Кроме того, следующие выбранные классы соединений формулы (I) по настоящему изобретению не подпадают под общую формулу \νϋ 90/14334:
a) соединения, в которых X означает -8О2-;
b) соединения, в которых Υ означает ОН или О-(С1-С4)алкил;
c) соединения, в которых Ζ означает =8;
б) соединения, в которых К означает (С9-С10)алкил или ш-трифтор(С3-С10)алкил;
е) соединения, в которых К1 и/или К2 отличны от водорода;
ί) соединения, в которых как К3, так и К'3 отличны от водорода;
д) соединения, в которых как К4, так и К5 отличны от водорода, но не образуют (С3-Сб)циклоалкильный остаток вместе со смежным атомом углерода;
11) соединения, в которых Кб и К7 вместе со смежным атомом азота образуют моноциклический 5-6членный насыщенный гетероцикл, необязательно содержащий один дополнительный гетероатом, выбираемый из -О-, -8- и -ΝΚ§-, где К означает водород или (С1-С6)алкил.
Термин алкил, используемый в настоящем описании и формуле изобретения, если не оговорено иное, означает линейный или разветвленный алкильный радикал; примеры указанных радикалов или составляющих групп включают метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, пентил, изопентил, гексил, гептил, октил, нонил, децил и соответствующие изомеры.
Термин алкокси, используемый в настоящем описании и формуле изобретения, означает линейный или разветвленный алкоксирадикал; примеры указанных радикалов включают метокси, этокси, пропокси, изопропокси, бутокси, изобутокси, трет-бутокси, пентилокси, изопентилокси, гексилокси, изогексилокси, гептилокси, октилокси и соответствующие изомеры.
Термин (С3-С6)циклоалкил означает циклоалифатический цикл; примеры указанных циклов включают циклопропил, циклобутил, циклопентил и циклогексил.
Термин галоген означает радикал атома галогена, такого как фтор, хлор, бром и йод.
Примерами моноциклических 5- или 6-членных насыщенных гетероциклов, необязательно содержащих один дополнительный гетероатом, выбираемый из -О-, -8- или -ΝΚ8-, где К означает водород или (С1-С6)алкил, являются, например, пирролидин, пиразолидин, имидазолидин, оксазолидин, изоксазолидин, пиперидин, пиперазин, Ν-метилпиперазин, морфолин и тиоморфолин.
Когда соединения по настоящему изобретению содержат один или несколько асимметрических углеродных атомов и, кроме того, могут существовать в форме отдельных оптических изомеров или смеси указанных изомеров, в рамки изобретения входят все возможные отдельные оптические изомеры (например, энантиомеры, диастереоизомеры) указанных соединений в изолированной форме и смеси указанных изомеров в любом соотношении, включая рацемические смеси.
Примерами фармацевтически приемлемых солей соединений формулы (I) являются соли с органическими и неорганическими кислотами, такими как хлористо-водородная, бромисто-водородная, йодисто-водородная, азотная, серная, фосфорная, уксусная, пропионовая, винная, фумаровая, лимонная, бензойная, янтарная, коричная, миндальная, салициловая, гликолевая, молочная, щавелевая, яблочная, малеиновая, малоновая, п-толуолсульфоновая, метансульфоновая, глутаровая кислота и другие кислоты, которые, например, могут быть найдены в Р. Нешпсй 81аЫ, СашШе 6. ’№етти1й НапбЬоок οί рйаттасеиПса1 зайз: рторетбез, зе1есбоп апб изе, νΐΡΕΥ-УСН. 2002.
Соединения формулы (I) активны в качестве модуляторов натриевых и/или кальциевых каналов и поэтому полезны для предупреждения, ослабления и излечивания широкого ряда патологий, включающих, но не в порядке ограничения, неврологические, когнитивные, психические, воспалительные, мочеполовые и желудочно-кишечные заболевания, в которых вышеуказанные механизмы, как установлено, выполняют патологическую роль.
Предпочтительными соединениями формулы (I) являются соединения, в которых
X означает -О-, -8-;
Υ означает водород, ОН или О-(С1-С3)алкил;
Ζ означает =О или =8;
К означает (С4-С7)алкил, ш-трифтор(С4-С6)алкил;
К1 и К2 независимо означают водород, (С1-С4)алкокси, галоген, трифторметил или 2,2,2-трифторэтил или один из К1 и К2 находится в орто-положении относительно К-Х- и вместе с указанным К-Х- образует о~ группу, в которой Ко означает (С2-С5)алкил;
К3 и К'3 независимо означают водород или (С1-С3)алкил;
К4 и К5 независимо означают водород или (С1-С4)алкил или
К4 означает водород и К5 означает группу, выбираемую из -СН2-ОН, -СН2-О-(С1-С3)алкила, -(СН2)28-СН3, бензила и 4-гидроксибензила;
К6 и К7 независимо означают водород или (С1-С4)алкил или вместе со смежным атомом азота образуют 5-6-членный моноциклический насыщенный гетероцикл, необязательно содержащий один допол- 8 018195 нительный гетероатом, выбираемый из -О- и -ΝΚ§-, где К означает водород или (С1-С3)алкил;
при условии, что, когда X означает -δ-, Υ не может означать ОН или О-(С1-С4)алкил;
в зависимости от обстоятельств, либо в виде отдельных оптических изомеров в изолированной форме, либо в виде смеси указанных изомеров в любом соотношении, и фармацевтически приемлемые соли указанных соединений.
Более предпочтительными соединениями формулы (I) являются соединения, в которых
X означает -О-, -8-;
Υ означает водород или О-(С1-С3)алкил;
Ζ означает =О или =8;
К означает (С4-С7)алкил, ш-трифтор(С4-С6)алкил;
К1 и К2 независимо означают водород, (С1-С3)алкокси, фтор, хлор, трифторметил или 2,2,2-трифторэтил или один из К1 и К2 находится в орто-положении относительно К-Х- и вместе с указанным К-Х- образу0“ ет <о_ группу, в которой Ко означает (С3-С4)алкил;
К3 и К'3 независимо означают водород или (С1-С3)алкил;
К4 и К5 независимо означают водород или (С1 -С4)алкил или
К4 означает водород и К5 означает группу, выбираемую из -СН2-ОН, -СН2-О-(С1-С3)алкила, бензила и 4-гидроксибензила;
К6 и К7 независимо означают водород или (С1-С3)алкил или вместе со смежным атомом азота образуют 5-6-членный моноциклический насыщенный гетероцикл, необязательно содержащий один дополнительный гетероатом, выбираемый из -О- и -ΝΚ8-, где К8 означает водород или (С1-С3)алкил; при условии, что, когда X означает -8-, Υ не может означать О-(С1-С4)алкил;
в зависимости от обстоятельств, либо в виде отдельных оптических изомеров в изолированной форме, либо в виде смеси указанных изомеров в любом соотношении, и фармацевтически приемлемые соли указанных соединений.
Еще более предпочтительными соединениями формулы (I) являются соединения, в которых
X означает -О-;
Υ означает водород;
Ζ означает =О;
К означает (С4-С6)алкил;
К1 и К2 независимо означают водород или галоген, предпочтительно фтор;
К3, К'3, К4 и К5 означают водород;
К6 и К7 независимо означают водород или (С1-С3)алкил;
в зависимости от обстоятельств, либо в виде отдельных оптических изомеров в изолированной форме, либо в виде смеси указанных изомеров в любом соотношении, и фармацевтически приемлемые соли указанных соединений.
Наиболее предпочтительно соединение формулы (I) по настоящему изобретению выбирают из группы, включающей следующие соединения:
2-[2-(3-бутоксифенил)этиламино]ацетамид;
2-[2-(3-пентилоксифенил)этиламино]ацетамид;
2-[2-(3-гексилоксифенил)этиламино]ацетамид;
2-[2-(3-бутоксифенил)этиламино]-Ы-метилацетамид; 2-[2-(3-пентилоксифенил)этиламино]-Ы-метилацетамид;
2-[2-(3-гексилоксифенил)этиламино]-Ы-метилацетамид;
2-[2-(3 -бутоксифенил)этиламино] -Ν,Ν-диметилацетамид;
2-[2-(3-бутилтиофенил)этиламино]-Ы,№диметилацетамид;
2-[2-(3 -бутилсульфонилфенил)этиламино] -Ν,Ν-диметилацетамид;
2-[2-(3-бутоксифенил)-(№-гидрокси)этиламино]-Ы,№диметилацетамид;
2-[2-(3-бутоксифенил)-(№-метокси)этиламино]-Ы,№диметилацетамид; 2-[2-(3-бутоксифенил)-(№-пропокси)этиламино]-Ы,№диметилацетамид;
2-[2-(3 -бутоксифенил)этиламино] -Ν,Ν-диметилтиоацетамид;
2-[2-(3-бутоксифенил)-2-метилпропиламино]-Ы,№диметилацетамид; 2-{2-[3-(4,4,4-трифторбутокси)фенил]этиламино}-Ы,№диметилацетамид;
2-[2-(3-бутилтиофенил)этиламино]-Ы,№диметилацетамид;
2-[2-(3 -бутокси-2-хлорфенил)этиламино] -Ν,Ν-диметилацетамид;
2-[2-(3-бутокси-2-фторфенил)этиламино]-Ы,№диметилацетамид; 2-[2-(3-бутокси-4-метоксифенил)этиламино]-Ы,№диметилацетамид;
2-[2-(3 -бутоксифенил)этиламино] -Ν,Ν-диэтилацетамид;
2-[2-(3 -бутоксифенил)этиламино] -Ν,Ν-дипропилацетамид;
2-[2-(3 -бутоксифенил)этиламино] -Ν,Ν-дибутилацетамид;
2-[2-(3 -пентилоксифенил)этиламино] -Ν,Ν-диметилацетамид;
- 9 018195
2-[2-(3 -гексилоксифенил)этиламино] -Ν,Ν-диметилацетамид;
2-[2-(3 -бутоксифенил)этиламино]-1-пирролидин-1 -илэтан-1-он;
2-[2-(3 -пентилоксифенил)этиламино]-1-пирролидин-1 -илэтан-1-он;
2-[2-(3 -гексилоксифенил)этиламино]-1-пирролидин-1 -илэтан-1-он;
2-[2-(3 -бутоксифенил)этиламино] -Ν,Ν-диметилпропанамид;
2-[2-(3 -бутоксифенил)этиламино] -3 -гидрокси-Ы,№диметилпропанамид; 2-[2-(3-бутоксифенил)этиламино]-3-метокси-Ы,№диметилпропанамид;
2-[2-(3 -бутоксифенил)этиламино] -3 -пропокси-Ы,№диметилпропанамид; 2-[2-(3-бутоксифенил)этиламино]-2,^№триметилпропанамид;
2-[2-(3-пентилоксифенил)этиламино]-2,^№триметилпропанамид; 2-[2-(3-гексилоксифенил)этиламино]-2,^№триметилпропанамид;
(8)-2-[2-(3-бутоксифенил)этиламино]пропанамид; (8)-2-[2-(3-бутоксифенил)этиламино]-Ы-метилпропанамид;
(8)-2-[2-(3-бутоксифенил)этиламино]-Ы,№диметилпропанамид; (Я)-2-[2-(3-бутоксифенил)этиламино]пропанамид;
(Я)-2-[2-(3 -бутоксифенил)этиламино] -Ν-метилпропанамид; (К)-2-[2-(3-бутоксифенил)этиламино]-Ы,№диметилпропанамид;
2-[2-(3-бутокси-2-трифторметилфенил)этиламино]-Ы,№диметилацетамид;
2-[2-(3-бутокси-4-трифторметилфенил)этиламино]-Ы,№диметилацетамид; 2-[2-(3-бутокси-5-трифторметилфенил)этиламино]-Ы,№диметилацетамид, в зависимости от обстоятельств, либо в виде отдельных оптических изомеров в изолированной форме, либо в виде смеси указанных изомеров в любом соотношении, и фармацевтически приемлемые соли указанных соединений, предпочтительно соли с хлористо-водородной или метансульфоновой кислотой.
Соединения по настоящему изобретению получают по общепринятым методикам, описанным более подробно в экспериментальной части.
В частности, большинство соединений формулы (I), где X означает -О- и Υ означает водород, составляющих предмет изобретения, получают синтетическим способом, показанным на схеме I.
Схема I
где Я, К.1, Я2, Я3, Я'3, Я4, Я5, Я6 и Р- имеют те же значения, что указаны выше для формулы (I);
РЬ означает фенильный радикал;
Ьос означает трет-бутоксикарбонильную группу и
Е\УС означает электронно-акцепторную группу, такую как, например, галоген или мезилокси, или тозилокси, или трифторметансульфонатную группу.
Реагентом Лавессона является 2,4-бис-(4-метоксифенил)-1,3,2,4-дитиадифосфетан-2,4-дисульфид (ТЬе Мегск Мех, 13411 Еб., 5408, р. 966).
Согласно предпочтительному варианту осуществления изобретения реакции алкилирования с помощью Я-Е\УС проводят в присутствии основания и болеее предпочтительно указанное основание выбирают из группы, включающей К2СО3, триэтиламин и диизопропилэтиламин.
- 10 018195
Альтернативный способ получения соединений формулы (I), где В, Βμ В2, В3, В'3, В4, В5, В6 и В7 имеют те же значения, что для формулы (I), X означает О и Υ означает водород, состоит в том, что альдегид формулы
подвергают восстановительному алкилированию под действием α-аминоалканамида формулы о
К5 К,
Восстанавливающий агент может быть выбран из группы, включающей ΝαΒΗ4, ΝαΒΗ3ί.'Ν и цианоборгидрид (полистирилметил)триметиламмония.
Полученные 2-[2-(фенил)этиламино]алканамидные соединения формулы (I), где Ζ означает =О, могут быть превращены в соответствующие соединения, в которых Ζ означает =8, путем защиты -ΝΗгруппы с помощью Ьое2О, осуществления взаимодействия Ν-Ьое-защищенного производного с реагентом Лавессона и, наконец, снятием защиты с помощью НС1, как показано на схеме I.
В качестве дополнительной альтернативы указанных способов амин формулы
алкилируют, осуществляя взаимодействие с эфиром алкановой кислоты формулы
в присутствии основания (например, триэтиламина), и полученные производные алканового эфира, фор мулы
подвергают взаимодействию с амином формулы НПВ^В^ необязательно, в присутствии катализатора амидирования (например, триметилалюминия), получая соединение формулы (I), где Υ означает водо род.
Соединения формулы (I), где В5 означает водород, необязательно, можно превращать в соответствующие соединения формулы (I), где В5 означает (С1-С4)алкил, -СН2ОН, -СН2-О-(С1-С6)алкил, -СН(СН3)-ОН, -(СН2)2-8-СН3, бензил или 4-гидроксибензил, подвергая Ν-защищенное производное вышеуказанного соединения формулы (I) процедуре С-алкилирования с использованием алкилирующего агента формулы Е\УСВ5, в которой Е\УС имеет то же самое значение, что указано выше, В5 означает одну из вышеперечисленных групп. В данном случае, когда требуется конечное соединение формулы (I), в котором группа В5 содержит гидроксисоставляющую, обычно используют реагент Е\УСВ5, в котором соответствующую гидроксигруппу защищают, например, ацетилированием. Все защитные группы затем удаляют из полученных С-алкилированных соединений. По желанию, когда соединение формулы (I) получают в форме свободного основания, указанное соединение может быть превращено в соответствующую соль (например, с помощью хлористо-водородной кислоты) общепринятыми способами.
Соединения формулы (I), где X означает 8 или 8О2 и Υ означает водород, получают синтетическим способом, представленным на схеме II.
- 11 018195
Схема II
где Я, Κ1, Κ2, Я3, Κ'3, К4, Κ5, К6 и К7 имеют те же значения, что указаны для формулы (I);
Бое означает трет-бутоксикарбонильную группу;
Е\УС имеет то же значение, что указано выше;
оксон означает пероксимоносульфат калия и реагентом Лавессона является 2,4-бис-(4-метоксифенил)-1,3,2,4-дитиадифосфетан-2,4-дисульфид.
Соединения формулы (I), где X означает -О- и Υ означает ОН или О-(С1-С4)алкил, получают синтетическим способом, представленным на схеме III.
- 12 018195
где Я, К1, К2, К3, К'з, К4, К5, К6 и К7 имеют те же значения, что указаны выше для формулы (I);
Р11 означает фенильную группу;
Е\УС имеет то же значение, что указано выше; периодинан Десс-Мартина, см. Оезз, Ό.Β.; Майш, ЕС. 1. Ат. Сйет. §ос., 1991, 113, 7277. Промежуточные соединения, используемые в схемах Ι-ΙΙΙ, являются коммерчески доступными или могут быть получены из коммерчески доступных соединений по хорошо известным методикам. Оценка полезности необязательной защиты, равно как выбор подходящего защитного агента, в зависимости от взаимодействия, осуществляемого при получении соединений по изобретению и защищаемой функциональной группы, находятся в рамках компетенции квалифицированного специалиста.
Снятие необязательных защитных групп выполняют согласно общепринятым методикам.
Что касается общей ссылки по применению защитных групп в органической химии, см. ТНеобога
Стееие апб Ре1ег С.М. \Уи18 РгсИесбуе дгоирз ίη отдашс 8уп1йе818, ίοΐιη \Убеу & §опз, 1пс., II Еб., 1991. Получение солей соединений формулы (Ι) осуществляют в соответствии с известными методиками. Что касается получения отдельного оптического изомера соединения формулы (Ι), указанное соединение может быть получено путем стерически контролируемого синтеза или с применением реагентов, обладающих соответствующей хиральностью, или выделением требуемого изомера из энантиомерной смеси оптических изомеров согласно общепринятым методикам.
Фармакология.
Соединения по изобретению могут быть применены для изготовления лекарственного средства, активного в качестве модулятора натриевых и/или кальциевых каналов, против болезней, вызванных дисфункциями потенциалозависимых натриевых и/или кальциевых каналов.
Такие соединения являются зависимыми от потенциала блокаторами натриевых и/или кальциевых каналов с эффективностью в низком микромолярном диапазоне, как показано блокадой притока натрия и/или кальция (флуоресцентные анализы) и потенциалозависимой блокадой токов (методы пэтч-клампа).
Проведено сравнение активности соединений, представленных настоящим изобретением, с активностью соединений, известных из \¥О 90/14334, клинически одобренных для терапевтических применений, таких как ралфинамид (8)-(+)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамид и/или сафинамид (8)-(+)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамид.
Сафинамид (N^-1015, ЕСЕ-26743А, ΡΝυ-151774Ε) является блокатором натриевых каналов, модулятором кальциевых каналов, ингибитором моноаминооксидазы В (МАО-Β), ингибитором высвобождения глутамата и модулятором биотрансформации допамина.
Сафинамид полезен для лечения расстройств ЦНС, в частности эпилепсии, болезни Паркинсона, болезни Альцгеймера, синдрома усталых ног (\УО 90/14334, \УО 04/089353, \УО 05/102300) и когнитивных расстройств (ЕР 06/012352.8).
- 13 018195
Ралфинамид (Νν-1029, РСЕ-26742А, ΡΝυ-0154339Ε) является ингибитором натриевых и кальциевых каналов и модулятором ΝΜΌΑ-рецептора, полезным для лечения болевых состояний, включающих невропатическую и воспалительную боль обоих типов, как хроническую, так и острую, мигрень, депрессии, сердечно-сосудистые, воспалительные, мочеполовые, метаболические и желудочно-кишечные расстройства (νθ 99/35125, νθ 03/020273, νθ 04/062655, νθ 05/018627, νθ 05/070405, νθ 06/02705).
Активность в модулировании натриевых каналов для 2-[2-(фенил)этиламино]алканамидных производных оценивают основанным на флюоресценции анализом притока натрия на ΝΏ7/23 клеточной линии (табл. 1) и электрофизиологическим методом пэтч-клампа на кортикальных нейронах крыс (табл. 3) и на ΝΏ7/23 клеточной линии (табл. 4) соответственно.
Активность в модулировании кальциевых каналов для 2-[2-(фенил)этиламино]алканамидных производных оценивают основанным на флюоресценции анализом притока кальция (табл. 2) на А1Т20 клеточной линии.
Активность в отношении МАО-В вышеуказанных соединений оценивают, используя радиоферментативное исследование (табл. 5) на митохондриях головного мозга крыс.
Аналгетическую активность вышеуказанных соединений ίη νίνο исследуют посредством формалинового теста на мышах (табл. 6) и с помощью модели невропатической боли с лигатурой спинального нерва (δΝΣ) на крысах (фиг. 1). Активность против воспалительной боли оценивают, используя модель с введением полного адъюванта Фрейнда (СРА) на крысах.
Активность против висцеральной боли оценивают, используя модель вызванной уксусной кислотой висцеральной боли на мышах (фиг. 2).
Противосудорожную активность оценивают, используя тест максимального электрошока на мышах (табл. 7 и 8).
Противоманиакальную активность оценивают, используя модель гиперлокомоции, вызванной амфетамином и хлордиазепоксидом на мышах (фиг. 3) и в модели депривации парадоксального сна на крысах.
Антиамнестическую активность оценивают, используя тест водного лабиринта Морриса, в котором амнезию у крыс вызывают скополамином, и с помощью теста на распознавание нового объекта на крысах.
Для исследования антидепрессивной активности соединений используют тест подвешивания за хвост в модели на мышах.
Противошизофреническую активность оценивают, используя тест когнитивных нарушений при шизофрении и преимпульсное ингибирование реакции испуга (ΡΡΙ)'' на мышах и крысах (фиг. 4).
Тест на модели вызванной кокаином поведенческой сенсибилизации на крысах используют для оценки действий соединений против наркотической зависимости.
Тесты на острое раздражение мочевого пузыря под действием уксусной кислоты у крыс и на промежуточное раздражение мочевого пузыря под действием циклофосфамида у крыс используют в качестве моделей урологических заболеваний.
Активность против мигрени оценивают, используя тест на мигрень на крысах.
В электрофизиологических исследованиях по методу пэтч-клампа такие вещества характеризуются также зависимостью от использования и частоты, т.е. усилением блокирования во время высокочастотной стимуляции, когда существует высокая аккумуляция каналов в инактивированном состоянии, таком как при нейронных патологических состояниях. Функционально, зависимое от использования блокирование приводит к подавлению неврональной активности при высокочастотном возбуждении и меньшей блокирующей способности при нормальной частоте возбуждения, что указывает на способность соединений по настоящему изобретению селективно подавлять аномальную активность натриевых и/или кальциевых каналов, оставляя незатронутой физиологическую активность, оказывая, таким образом, ограниченное подавляющее действие на ЦНС (ТА. СайетаИ, Ттепбк Рйатшасо1. 8ск 1987, 8: 57-65).
Одним из наиболее характерных соединений по настоящему изобретению является 2-[2-(3бутоксифенил)этиламино]-ЮЮдиметилацетамидгидрохлорид (Νν-3509), который, как установлено, высокоактивен почти во всех экспериментальных моделях ίη νίΐτο и ίη νίνο.
Соединения по настоящему изобретению активны ίη νίνο при введении перорально, внутрибрюшинно или внутривенно, в диапазоне от 0,1 до 100 мг/кг, в различных описанных ниже моделях на животных.
Ввиду вышеописанных механизмов действия соединения по настоящему изобретению полезны для предупреждения или лечения невропатической боли. Синдромы невропатической боли включают, но не в порядке ограничения, такие нарушения, как диабетическая невропатия; ишиас; неспецифическая боль поясничного отдела спины; боль при рассеянном склерозе; фибромиалгия; связанная с ВИЧ невропатия; невралгия, такая как постгерпетическая невралгия и невралгия тройничного нерва, мортоновская метатарзальная невралгия, каузалгия; и боль, возникающая вследствие физической травмы, ампутации, при фантоме конечности, раке, токсинах или хронических воспалительных состояниях; центральная боль, такая как боль, наблюдаемая при таламических синдромах, смешанные центральные и периферические формы боли, такие как комплексные региональные болевые синдромы (СКР8), называемые также симпа
- 14 018195 тическими рефлекторными дистрофиями.
Соединения по изобретению также полезны для лечения хронической боли. Хроническая боль включает, но не в порядке ограничения, хроническую боль, вызванную воспалением или родственным воспалительному состоянием, таким как остеоартрит, ревматоидный артрит, острое повреждение или травма, боль верхней части спины или боль поясничного отдела спины (возникающую вследствие системного, регионарного или первичного заболевания позвоночника, такого как радикулопатия), боль в костях (в результате остеоартрита, остеопороза, костного метастаза или неизвестных причин), тазовую боль, боль, вызванную повреждением спинного мозга, кардиальную боль в груди, некардиальную боль в груди, центральную постинсультную боль, миофасциальный болевой синдром, серповидно-клеточную боль, раковую боль, болезнь Фабри, боль при СПИДе, гериатрическую боль или боль, вызванную головной болью, болевой синдром височно-нижнечелюстного сустава, подагрическую боль, фиброзный синдром или компрессионный синдром верхней апертуры грудной клетки, в особенности ревматоидный артрит и остеоартрит.
Соединения по изобретению также полезны для лечения острой боли (вызванной острым повреждением, болезнью, спортивными травмами, карпальным туннельным синдромом, ожогами, скелетномышечными вывихами и растяжениями, мышечно-сухожильным растяжением, шейно-плечевыми болевыми синдромами, диспепсиями, язвой желудка, язвой двенадцатиперстной кишки, дисменореей, эндометриозом или оперативным вмешательством (таким как операция на открытом сердце или операция шунтирования), послеоперационной боли, боли при почечных камнях, боли в желчном пузыре, боли при камнях желчного пузыря, родовой боли или зубной боли.
Соединения по изобретению также полезны для лечения головных болей: мигрени, головной боли при напряжении, трансформированной мигрени или эволютивной головной боли, кластерной головной боли, а также вторичной головной боли, вызванной такими нарушениями, как инфекции, нарушения обмена веществ или другие системные заболевания, и прочих острых головных болей, пароксизмальной гемикрании и т.п., возникающих как усложненные состояния вышеупомянутой первичной и вторичной головной боли.
Соединения по изобретению также полезны для лечения неврологических состояний, таких как эпилепсия, включая простой парциальный припадок, сложный парциальный припадок, вторичный генерализованный припадок, а также включая малый эпилептический припадок, миоклонический припадок, клонический припадок, тонический припадок, тонико-клонический припадок и атонический припадок. Соединения по изобретению также полезны для лечения нейродегенеративных нарушений различного генеза, включающих болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона и другие состояния слабоумия, такие как деменция с тельцами Леви, фронто-темпоральная деменция и таупатии; бокового амиотрофического склероза и других синдромов паркинсонизма; другой спинно-мозжечковой дегенерации и невропатии Шарко-Мари-Тута, травматического повреждения мозга, внезапного приступа и ишемии головного мозга.
Соединения по изобретению также полезны для лечения когнитивных расстройств, психических расстройств. Примерами когнитивных расстройств являются умеренные когнитивные нарушения (МС1) и соответствующие нарушения, вызванные аутизмом, дислексия, синдром дефицита внимания и гиперактивности, шизофрения, обсессивно-компульсивные расстройства, психоз, биполярные расстройства, депрессия, синдром Туретта и расстройство научения в детском, подростковом и взрослом возрасте, возрастное нарушение памяти, возрастное ухудшение когнитивной способности, болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, синдром Дауна, травматическое повреждение мозга, болезнь Хантингтона, синдром прогрессирующего супрануклеарного паралича (Р8Р), ВИЧ, внезапный приступ, сосудистые заболевания, болезнь Пика или Крейтцфельдта-Якоба, рассеянный склероз (М8) и другие нарушения белого вещества мозга и вызванное лекарственными средствами ухудшение когнитивной способности. Психические расстройства включают, но не в порядке ограничения, такие состояния, как глубокая депрессия, апатия, дистимия, мания, биполярное расстройство (такое как биполярное расстройство типа I, биполярное расстройство типа II), циклотимическое нарушение, быстрая цикличность, ультрадианная цикличность, мания, гипомания, шизофрения, шизофреноформные расстройства, шизоаффективные расстройства, личностные нарушения, расстройства внимания с гиперактивным поведением или без гиперактивного поведения, бредовые расстройства, кратковременные психические расстройства, совместные психические расстройства, психическое расстройство, вызванное общим состоянием здоровья, психические расстройства, вызванные злоупотреблением психоактивными веществами, психические расстройства без дополнительных уточнений, тревожные расстройства, такие как генерализованное тревожное расстройство, панические расстройства, посттравматическое стрессовое расстройство, расстройства контроля над побуждениями, фобическое расстройство, диссоциативные состояния и, помимо всего прочего, при злоупотреблении курением, психотропными средствами и алкоголем; в особенности, биполярные расстройства, шизофрения, психоз, тревожность и зависимость.
Соединения по изобретению ингибируют воспалительные процессы, поражающие все системы организма.
- 15 018195
Таким образом, соединения по изобретению полезны для лечения воспалительных процессов скелетно-мышечной системы, примеры которых, но не ограничивающие все мишеневые заболевания, приведены в следующем списке: артритные состояния, такие как анкилозирующий спондилит, цервикальный артрит, фибромиалгия, подагра, ювенильный ревматоидный артрит, пояснично-крестцовый артрит, остеоартрит, остеопороз, псориатический артрит, ревматизм; нарушения, поражающие кожу и родственные ткани: экзема, псориаз, дерматит и воспалительные состояния, такие как солнечный ожог; нарушения дыхательной системы: астма, аллергический ринит и респираторный дистресс-синдром, заболевания легких, в которые вовлечено воспаление, такие как астма и бронхит; хроническое обструктивное заболевание легких; нарушения иммунной и эндокринной систем: узелковый периартрит, тиреоидит, апластическая анемия, склеродома, миастения гравис, рассеянный склероз и другие демиелинизирующе нарушения, энцефаломиелит, саркоидоз, нефритический синдром, синдром Бехчета, полимиозит, гингивит.
Соединения по изобретению также полезны для лечения нарушений со стороны желудочнокишечного (С1) тракта, таких как воспалительные заболевания кишечника, включающие, но не в порядке ограничения, неспецифический язвенный колит, болезнь Крона, илеит, проктит, глютеиновая болезнь, энтеропатия, микроскопический или коллагенозный колит, эозинофильный гастроэнтерит или паучит, возникающий после проктоколэктомии и после илеоанального анастомоза, и синдром раздраженной толстой кишки, включая любые нарушения, связанные с болью в животе и/или желудочно-кишечным дискомфортом, такие как пилороспазм, нервная диспепсия, спастическая толстая кишка, спастический колит, спастический кишечник, невроз кишечника, функциональный колит, слизистый колит, лаксативный колит и функциональная диспепсия; а также для лечения таких нарушений, как атрофический гастрит, гастрит (уапа1о£огте), неспецифический язвенный колит, пептическая язва, пирезис и другие нарушения желудочно-кишечного тракта, например, под действием НейсоЬас1ег ру1оп. гастроэзофагеальная рефлюксная болезнь, гастропарез, такой как диабетический гастропарез; и других функциональных заболеваний кишечника, таких как неязвенная диспепсия (ΝυΌ); рвота, диарея и висцеральное воспаление.
Соединения по изобретению также полезны для лечения нарушений мочеполового тракта, таких как гиперактивный мочевой пузырь, простатит (хронический бактериальный и хронический не бактериальный простатит), простадиния, интерстициальный цистит, недержание мочи и доброкачественная гиперплазия предстательной железы, аднексит, пельвиоперитонит, бартолинит и вагинит; в особенности, гиперактивный мочевой пузырь и недержание мочи.
Следует учесть, что соединения по изобретению могут быть успешно использованы в сочетании с одним или несколькими другими терапевтическими средствами. Примеры подходящих средств для смежной терапии включают модулятор серотонинового рецептора, содержащий агонист 5ΗΤ1Β/1Ό, такой как триптан (например, суматриптан или наратриптан); А1-аденозиновый агонист; А2-аденозиновый агонист; Р2Х-пуринергический антагонист, ЕР-лиганд; ΝΜΌΑ-модулятор, такой как глициновый антагонист; АМРА-модулятор; антагонист субстанции Р (например, ΝΚΙ-антагонист); каннабиноид; агонист никотинового рецептора; альфа-1- или -2-адренергический агонист; ацетаминофен или фенацетин; 5-липоксигеназный ингибитор; антагонист лейкотриенового рецептора; ΌΜΆΚΌ (например, метотрексат); габапентин, прегабалин и родственные соединения; Ь-бора- и/или допаминовые агонисты; ингибитор катехол-О-метилтрансферазы; трициклический антидепрессант (например, амитриптилин); нейронстабилизирующие противоэпилептические лекарственные средства; ингибитор моноаминергического захвата (например, венлафаксин); ингибитор матриксной металлопротеиназы; ингибитор синтазы оксида азота (N08), такой как ίΝΘδ- или ηΝΘδ-ингибитор; поглотитель свободных радикалов; ингибитор альфа-синуклеиновой агрегации; ингибитор холинэстеразы, понижающий холестерин агент; модулятор альфа-секретазы; модулятор бета-секретазы; ингибитор бета-амилоидной агрегации; ингибитор высвобождения или действия, альфа-фактора некроза опухоли; терапия антителами, такая как терапия моноклональными антителами; противовирусный агент, такой как нуклеозидный ингибитор (например, ламивудин) или модулятор иммунной системы (например, интерферон); опиоидный аналгетик, такой как морфин; агонист и антагонист ваниллоидного рецептора; аналгетик, такой как ингибитор циклооксигеназы-1 и/или циклооксигеназы-2; анестезирующее средство местного действия, такое как лидокаин и соответствующие производные; стимулятор, включающий кофеин; Н2-антагонист (например, ранитидин); ингибитор протонного насоса (например, омепразол); антацидное средство (например, гидроксид алюминия или магния); ветрогонное средство (например, симетикон); противозастойное средство (например, фенилэфрин, фенилпропаноламин, псевдоэфедрин, оксиметазолин, эпинефрин, нафазолин, ксилометазолин, пропилгекседрин, или леводесоксиэфедрин, нафазолин, ксилометазолин, пропилгекседрин, или лево-десоксиэфедрин); средство против кашля (например, кодеин, гидрокодон, кармифен, карбетапентан или декстрометорфан); диуретик; или седативное или неседативное антигистаминное средство; антипсихотическое средство, включающее типичные и атипичные антипсихотические средства (например, галоперидол, рисперидон, клозапин); антидепрессант, такой как селективные ингибиторы обратного захвата серотонина, ингибиторы обратного захвата серотонина и норадреналина, ΜΑΘ-ингибиторы и трициклические антидепрессорные лекарственные средства; нормотимик (например, литий, ламотригин, вальпроат); анксиолитическое средство (например, бензодиазепины, буспирон, антагонисты бетаадренергических рецепторов); морфин или производные морфина; другие блокаторы кальциевых или
- 16 018195 натриевых каналов.
Считается, что настоящее изобретение охватывает применение соединения формулы (I) или соответствующей фармацевтически приемлемой соли в комбинации с одним или несколькими терапевтическими средствами.
Соединения по настоящему изобретению приемлемы в лекарственных препаратах, предназначенных для человека и животных. Следует понимать, что используемые в описании термины лечение или лечить, если не оговорено иное, включают предупреждение, ослабление и излечивание патологии, в частности указанные термины включают как лечение установленных симптомов, так и профилактическое лечение. Соединения по настоящему изобретению, в целях терапевтического или профилактического применения при вышеупомянутых патологиях, предпочтительно используют в качестве активных ингредиентов в фармацевтической композиции.
Следовательно, дальнейшей целью настоящего изобретения являются фармацевтические композиции, содержащие терапевтически эффективное количество соединения по изобретению, или соли указанного соединения в смеси с фармацевтически приемлемым носителем.
Таким образом, выражение терапевтически эффективное по отношению к количеству, дозе или дозировке соединений по настоящему изобретению следует понимать как количество, доза или дозировка любого указанного соединения, достаточные для применения как в случае лечения установленных симптомов, так и в случае профилактического лечения вышеуказанных патологических состояний.
Составляющие предмет настоящего изобретения фармацевтические композиции могут быть введены в разнообразных лекарственных формах с немедленным или замедленным высвобождением, например перорально, в форме таблеток, пастилок, капсул, таблеток с сахарной или пленочной оболочкой, жидких растворов, эмульсий или суспензий; ректально, в форме суппозиториев; парентерально, например, внутримышечно и/или с применением составов пролонгированного действия; внутривенной инъекцией или инфузией; местно и трансдермально в форме пластыря, геля и крема.
Подходящие фармацевтически приемлемые, терапевтически инертные органические и/или неорганические несущие материалы, полезные для получения такой композиции, включают, например, такие вещества, как вода, желатин, гуммиарабик, лактоза, крахмал, целлюлоза, стеарат магния, тальк, растительные масла, циклодекстрины, полиалкиленгликоли и т.п.
Композиция, содержащая фенилэтиламинопроизводные вышеуказанной формулы (I) может быть стерилизована и может также дополнительно содержать хорошо известные компоненты, такие как, например, консерванты, стабилизаторы, смачивающие или эмульгирующие средства, например парафиновое масло, маннидмоноолеат, соли для доведения до нужной величины осмотического давления, буферы и т.п.
Например, твердые формы для перорального приема могут содержать, вместе с активным ингредиентом, разбавители, например, такие как лактоза, декстроза, сахароза, целлюлоза, кукурузный крахмал или картофельный крахмал; смазывающие вещества, например, такие как диоксид кремния, тальк, стеариновая кислота, стеарат магния или кальция и/или полиэтиленгликоли; связывающие средства, например, такие как крахмалы, гуммиарабик, желатин, метилцеллюлоза, карбоксиметилцеллюлоза или поливинилпирролидон; дезагрегирующие средства, например, такие как крахмал, алгиновая кислота, альгинаты или натриевая соль гликолята крахмала; шипучие смеси; окрашивающие вещества; подсластители; смачивающие средства, такие как лецитин, полисорбаты, лаурилсульфаты; и, в общем, нетоксичные и фармакологически неактивные вещества, используемые в фармацевтических составах. Указанные фармацевтические препараты могут быть изготовлены известным способом, например путем смешивания, гранулирования, таблетирования, покрытия сахарной или пленочной оболочкой.
Получение составляющих предмет изобретения фармацевтических композиций может быть осуществлено общепринятыми способами.
Составы для перорального приема включают составы с замедленным высвобождением, которые могут быть получены общепринятым способом, например нанесением интеросолюбильного покрытия на таблетки и гранулы.
Жидкая дисперсия для перорального приема может представлять собой, например, сиропы, эмульсии и суспензии. Сиропы могут содержать в качестве носителя, например, сахарозу или сахарозу с глицерином, и/или маннитом, и/или сорбитом.
Суспензии и эмульсии могут содержать в качестве носителя, например, такие вещества, как природная камедь, агар, альгинат натрия, пектин, метилцеллюлоза, карбоксиметилцеллюлоза или поливиниловый спирт. Суспензии или растворы для внутримышечных инъекций могут содержать, наряду с активным соединением, фармацевтически приемлемый носитель, например, такой как стерильная вода, оливковое масло, этилолеат, гликоли, например пропиленгликоль, и, по желанию, целесообразное количество лидокаингидрохлорида. Растворы для внутривенных инъекций или инфузии могут содержать в качестве носителя, например, стерильную воду или предпочтительно могут быть в форме стерильных, водных, изотонических солевых растворов.
- 17 018195
Суппозитории могут содержать, наряду с активным соединением, фармацевтически приемлемый носитель, например, такой как масло какао, полиэтиленгликоль, поверхностно-активные вещества на основе полиоксиэтиленовых эфиров сорбита и жирной кислоты или лецитин.
Фармацевтические композиции, включающие фенилэтиламинопроизводные вышеуказанной формулы (I), должны содержать на единицу дозирования, например, капсулу, таблетку, порошок для инъекции, чайную ложку с верхом, суппозиторий и т.п., приблизительно от 0,1 до 500 мг одного или нескольких активных ингредиентов, наиболее предпочтительно от 1 до 10 мг.
Оптимальные терапевтически эффективные дозы для введения легко могут быть установлены специалистом в данной области и могут варьироваться в зависимости от эффективности препарата, способа введения и развития излечиваемого состояния или нарушения. Кроме того, факторы, связанные с конкретным излечиваемым субъектом, включающие возраст субъекта, вес, диету и время введения, приводят к необходимости регулирования дозы в пределах соответствующего терапевтически эффективного уровня.
Следует понимать, что, хотя изобретение раскрыто с помощью приведенных предпочтительных вариантов осуществления, специалисту в данной области известно, что может быть осуществлен иной вариант осуществления без отклонения от сущности изобретения.
Экспериментальная часть.
Спектр 1 Н-ЯМР снимают в растворе СЭС13 или ДМСО-б6 с помощью спектрометра Уапаи 6ет1и1 200 ΜΗζ. Химические сдвиги, обозначенные δ, определены с СЭС13 или ДМСО-б6 и Э2О в качестве внутреннего стандарта.
Анализы методом ВЭЖХ/МС проводят с помощью аппарата ΟίΚοη. используя колонку Х-Тегга ΚΡ 18 (5 мкм, 4,6x50 мм), соединенную с УФ-детектором (220 нм) и масс-спектрометром Бштадаи Ада (электрораспыление, режим ионизации положительными ионами). Условия, используемые для анализа: расход: 1,2 мл/мин; температура колонки: 50°С; А/В градиент элюирования (элюент А: 0,1% муравьиная кислота в воде; элюент В: 0,1% муравьиная кислота в ацетонитриле): 5-95% В от 0 до 8,0 мин, 95% В от 8,0 до 9,5 мин.
Для лучшей иллюстрации изобретения приводятся следующие примеры.
Пример 1. 2-[2-(3-Бутоксифенил)этиламино]-Х,Х-диметилацетамидгидрохлорид.
Соединение синтезируют согласно схеме I.
Стадия 1. 2-(3-Гидроксифенил)-(трет-бутоксикарбонил)этиламин.
Методика А.
К суспензии 2-(3-бензилоксифенил)этиламингидрохлорида (12,6 г, 47,7 ммоль) в Н2О (120 мл) и 1 М ΝηΟΗ (95 мл) добавляют по каплям раствор Ьос2О (15,6 г, 71,5 ммоль) в ТГФ (120 мл) и смесь перемешивают при комнатной температуре. Спустя 16 ч органический растворитель удаляют при пониженном давлении и смесь экстрагируют СН2С12 (2x100 мл). Собранные органические фазы сушат над №28О4, раствор фильтруют и растворитель выпаривают при пониженном давлении, получая сырой масляный продукт, который используют без дополнительной очистки.
Ή-ЯМР (300 МГц, СОС13): δ 7,47-7,28 (м, 5Н), 7,22 (м, 1Н), 6,87-6,77 (м, 3Н), 5,05 (с, 2Н), 4,52 (шир.с, 1Н), 3,38 (дт, 1=6,5 Гц, 1=6,5 Гц, 2Н), 2,77 (т, 1=7,1 Гц, 2Н), 1,44 (с, 9Н).
Е8ЕМ8: вычислено для С20Η25NΟ3: 327,43; найдено: 328,1 (МН+).
2-(3-Бензилоксифенил)-(трет-бутоксикарбонил)этиламин, полученный на стадии 1, и 10% Ρά/С (1,3 г) в МеОН (240 мл) гидрируют в аппарате Парра в течение 16 ч при 35 фунт/кв.дюйм (2,46074 кг/см2). Катализатор удаляют фильтрованием через рыхлый слой целита и растворитель выпаривают при пониженном давлении. Сырой маслянистый продукт используют без дополнительной очистки.
Ή-ЯМР (300 МГц, СОС13): δ 7,19 (дд, 1=7,8 Гц, 1=7,8 Гц, 1Н), 6,82-6,66 (м, 3Н), 4,56 (шир.с, 1Н), 3,39 (дт, 1=7,0 Гц, 1=6,3 Гц, 2Н), 2,76 (т, 1=7,0 Гц, 2Н), 1,46 (с, 9Н).
Е^^МБ: вычислено для С!3Н^О3: 237,30; найдено: 238,2 (МН+).
Методика В.
33% раствор НВг в уксусной кислоте (150 мл) охлаждают до 0°С и добавляют порциями 3-метоксифенетиламин (10,0 г, 66,0 ммоль). Смесь нагревают до 80°С и перемешивают в течение 16 ч. Растворитель выпаривают при пониженном давлении и остаток растворяют в воде (160 мл). Добавляют 4 М №ЮН (15 мл) с последующим добавлением 2 М №ЮН (130 мл). Добавляют по каплям раствор Ьос2О (15,8 г, 72,6 ммоль) в ТГФ (160 мл) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 16 ч. Верхний органический слой полученной смеси отделяют и водный слой экстрагируют СН2С12 (3x100 мл). Объединенные органические растворы сушат над №28О4, фильтруют и растворитель выпаривают при пониженном давлении. Сырое указанное в заголовке соединение (16,8 г) получают в виде коричневой смолы, которую используют на следующих стадиях без дополнительной очистки.
Е8ЕМ8: вычислено для С!3Н^О3: 237,3; найдено: 182,1 (МН+ - трет-бутил, основной фрагмент).
- 18 018195
Стадия 2. 2-(3-Бутоксифенил)-(трет-бутоксикарбонил)этиламин.
К раствору в ацетоне (240 мл) добавляют 2-(3-гидроксифенил)-(трет-бутоксикарбонил)этиламин, полученный на стадии 1, К2СО3 (19,8 г) и 1-бромбутан (15 мл). Суспензию нагревают до температуры кипения с обратным холодильником в течение 3 дней и растворитель выпаривают при пониженном давлении. Остаток растворяют в Н2О (200 мл) и экстрагируют СН2С12 (2x200 мл). Растворитель удаляют при пониженном давлении и остаток очищают флэш-хроматографией (смесь петролейный эфир/ЕЮАс 85:15), получая 1 (11,3 г, 81% за 3 стадии) указанное в заголовке соединение в виде бесцветного масла.
Ή-ЯМР (300 МГц, (ОСТ): δ 7,22 (дд, 1=7,6 Гц, 1=7,6 Гц, 1Н), 6,81-6,72 (м, 3Н), 4,55 (шир.с, 1Н), 3,97 (т, 1=6,3 Гц, 2Н), 3,39 (дт, 1=6,5 Гц, 1=6,5 Гц, 2Н), 2,78 (т, 1=7,1 Гц, 2Н), 1,78 (м, 2Н), 1,51 (м, 2Н), 1,45 (с, 9Н), 0,99 (т, 1=7,3 Гц, 3Н).
Е814М8: вычислено для С17Н27NО3: 293,41; найдено: 294,1 (МН4).
Стадия 3. 2-[2-(3-Бутоксифенил)-(трет-бутоксикарбонил)этиламино]-Ы,№диметилацетамид.
К суспензии NаН (60%, 2,0 г, 51 ммоль) в сухом ДМФА (125 мл), охлажденной до 0°С, добавляют по каплям раствор 2-(3-бутоксифенил)-(трет-бутоксикарбонил)этиламина (7,5 г, 25,5 ммоль) в сухом ДМФА (125 мл). После выдерживания в течение 1 ч при комнатной температуре добавляют 2-хлор-Ы,№ диметилацетамид (5,2 мл, 51 ммоль) и смесь перемешивают в течение 16 ч при комнатной температуре. Добавляют Н2О (10 мл) и растворитель выпаривают при пониженном давлении. Остаток растворяют в Н2О (150 мл) и экстрагируют СН2С12 (2x150 мл). Собранные органические фазы сушат над №28О4, фильтруют и упаривают. Сырой продукт очищают флэш-хроматографией (смесь петролейный эфир/Е1ОАс 4:6), получая указанное в заголовке соединение (7,2 г, 75%) в виде светло-желтого масла.
Ή-ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6): δ 7,1 (м, 1Н), 6,79-6,71 (м, 3Н), 3,97 (т, 1=6,0 Гц, 2Н), 3,96 (с, 2Н), 3,40 (дд, 1=8,7 Гц, 1=7,2 Гц, 2Н), 2,88 (с, 6Н), 2,76 (дд, 1=7,9 Гц, 1=6,4 Гц, 2Н), 1,76 (м, 2Н), 1,46 (м, 2Н), 1,37 (с, 9Н), 0,95 (т, 1=7,3 Гц, 3Н).
Е814М8: вычислено для С2’Н34Ы2О4: 378,52; найдено: 379,0 (МН+).
Стадия 4. 2-[2-(3-Бутоксифенил)этиламино]-Ы,№диметилацетамидгидрохлорид.
Раствор 2-[2-(3-бутоксифенил)-(трет-бутоксикарбонил)этиламино]-Ы,№диметилацетамида (9,6 г, 25,3 ммоль) в НС1/Е12О (127 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 16 ч. Растворитель выпаривают при пониженном давлении, остаток растирают со смесью Е12О/1Рг2О 50/50, фильтруют и промывают смесью Е12О/1Рг2О, получая указанное в заголовке соединение в виде белого твердого вещества (1,71 г, выход 95%).
’Н-ЯМР (300 МГц, СОС1;): δ 9,63 (шир.с, 1Н), 7,23 (дд, 1Н), 6,83-6,91 (м, 2Н), 6,80 (ддд, 1Н), 3,96 (с, 2Н), 3,96 (т, 2Н), 3,32-3,44 (м, 2Н), 3,22-3,32 (м, 2Н), 2,97 (с, 6Н), 1,70-1,83 (м, 2Н), 1,41-1,58 (м, 2Н), 0,99 (т, 3Н).
Е814М8: вычислено для С’6Н2&Ы2О2: 278,40; найдено: 279,3 (МН+).
Аналогично, исходя из соответствующих промежуточных соединений, получают следующие соединения.
2-{2-[3 -(4,4,4-Трифторбутокси)фенил]этиламино } -Ν,Ν-диметилацетамидгидрохлорид.
’Н-ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6): δ 9,00 (шир.с, 2Н), 7,17-7,32 (м, 1Н), 6,78-6,94 (м, 3Н), 4,04 (шир.с, 2Н), 3,91-4,20 (м, 2Н), 3,08-3,22 (м, 2Н), 2,93-3,00 (м, 2Н), 2,94 (с, 3Н), 2,90 (с, 3Н), 2,30-2,48 (м, 2Н), 1,782,05 (м, 2Н).
Е814М8: вычислено для С16Н23Р3^О2 (свободное основание): 332,27; найдено: 333,25 (МН+).
2-[2-(3 -Пентилоксифенил)этиламино] -Ν,Ν-диметилацетамидгидрохлорид.
’Н-ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6): δ 9,03 (шир.с, 2Н), 7,14-7,29 (м, 1Н), 6,70-6,88 (м, 3Н), 4,03 (с, 2Н),
3.95 (т, 2Н), 3,06-3,21 (м, 2Н), 2,94 (с, 3Н), 2,90 (с, 3Н), 2,81-3,02 (м, 2Н), 1,62-1,80 (м, 2Н), 1,23-1,48 (м, 4Н), 0,90 (т, 3Н).
Е8ЕМ8: вычислено для С17Н2^2О2 (свободное основание): 292,42; найдено: 293,25 (МН4).
2-[2-(3 -Г ексилоксифенил)этиламино] -Ν,Ν-диметилацетамидгидрохлорид.
’Н-ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6): δ 9,01 (шир.с, 2Н), 7,23 (дд, 1Н), 6,65-6,93 (м, 3Н), 4,03 (с, 2Н), 3,95 (т, 2Н), 3,05-3,24 (м, 2Н), 2,94 (с, 3Н), 2,91-3,01 (м, 2Н), 2,90 (с, 3Н), 1,57-1,84 (м, 2Н), 1,35-1,51 (м, 2Н), 1,22-1,36 (м, 4Н), 0,70-1,01 (м, 3Н).
Е814М8: вычислено для С’8Н30Ы2О2 (свободное основание): 306,45; найдено: 307,32 (МН4). 2-[2-(3-Бутоксифенил)этиламино]-Ы,№дипропилацетамидгидрохлорид.
’Н-ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6): δ 8,88 (шир.с, 2Н), 7,15-7,30 (м, 1Н), 6,68-6,88 (м, 3Н), 4,02 (с, 2Н),
3.96 (т, 2Н), 3,23-3,28 (м, 2Н), 3,09-3,22 (м, 4Н), 2,87-2,98 (м, 2Н), 1,62-1,75 (м, 2Н), 1,35-1,62 (м, 6Н), 0,94 (т, 3Н), 0,85 (дт, 6Н).
Е814М8: вычислено для С20Н34Ы2О2 (свободное основание): 334,50; найдено: 335,34 (МН4).
2-[2-(3-Бутоксифенил)этиламино]-Ы,№дибутилацетамидгидрохлорид.
’Н-ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6 4 ТРА): δ 8,85 (шир.с, 2Н), 7,19-7,28 (м, 1Н), 6,62-6,88 (м, 3Н), 4,01 (т, 2Н), 3,96 (т, 2Н), 3,30 (т, 2Н), 3,06-3,24 (м, 4Н), 2,85-3,00 (м, 2Н), 1,61-1,82 (м, 2Н), 1,40-1,55 (м, 6Н), 1,201,38 (м, 4Н), 0,94 (т, 6Н), 0,89 (т, 3Н).
Е814М8: вычислено для С20Н3^2О2 (свободное основание): 362,55; найдено: 363,35 (МН4).
- 19 018195
2-[2-(3-Пентилоксифенил)этиламино]-Ы,М-дипропилацетамидгидрохлорид.
Ή-ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6 + Ыа2СО3): δ 7,50 (шир.с, 1Н), 7,07-7,24 (м, 1Н), 6,62-6,83 (м, 3Н), 3,93 (т, 2Н), 3,06-3,22 (м, 5Н), 2,58-2,81 (м, 5Н), 1,62-1,78 (м, 2Н), 1,28-1,56 (м, 8Н), 0,68-0, 99 (м, 9Н).
Е81+М8: вычислено для С21Н36Ы2О2 (свободное основание): 348,53; найдено: 349,28 (МН+). 2-[2-(3-Бутоксифенил)этиламино]ацетамидгидрохлорид.
Ή-ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6): δ 8,96 (шир.с, 2Н), 7,87 (шир.с, 1Н), 7,54 (шир.с, 1Н), 7,23 (дд, 1Н), 6,58-6,83 (м, 3Н), 3,96 (т, 2Н), 3,70 (с, 2Н), 3,04-3,18 (м, 2Н), 2,82-3,01 (м, 2Н), 1,57-1,80 (м, 2Н), 1,32-1,54 (м, 2Н), 0,81-1,04 (м, 3Н).
Е81+М8: вычислено для С14Н22Ы2О2: 250,34; найдено: 251,1 (МН+).
2-[2-(3 -Бутоксифенил)этиламино] -Ν-метилацетамидгидрохлорид.
Ή-ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6): δ 8,99 (шир.с, 2Н), 8,39 (кв., 1Н), 7,08-7,37 (м, 1Н), 6,65-6,95 (м, 3Н),
3,96 (т, 2Н), 3,70 (с, 2Н), 3,04-3,25 (м, 2Н), 2,79-3,04 (м, 2Н), 2,67 (д, 3Н), 1,57-1,82 (м, 2Н), 1,44 (септ., 2Н), 0,94 (т, 3Н).
Е81+М8: вычислено для С15Н24^О2: 264,37; найдено: 265,2 (МН+).
2-[2-(3-Изопропоксифенил)этиламино]-Ч№диметилацетамидгидрохлорид.
Ή-ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6): δ 9,04 (шир.с, 2Н), 7,12-7,32 (м, 1Н), 6,70-6,81 (м, 3Н), 4,60 (септ., 1Н), 4,03 (с, 2Н), 3,04-3,21 (м, 2Н), 2,94 (с, 3Н), 2,91-3,01 (м, 2Н), 2,90 (с, 3Н), 1,26 (д, 6Н).
Е81+М8: вычислено для С15Н24^О2: 264,37; найдено: 265,2 (МН+).
2-[2-(3-Бутоксифенил)этиламино]-Ч№диэтилацетамидгидрохлорид.
Ή-ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6): δ 8,89 (шир.с, 2Н), 7,24 (дд, 1Н), 6,72-6,88 (м, 3Н), 4,03 (с, 2Н), 3,96 (т, 2Н), 3,34 (кв., 2Н), 3,26 (кв., 2Н), 3,08-3,21 (м, 2Н), 2,86-3,03 (м, 2Н), 1,59-1,78 (м, 2Н), 1,33-1,54 (м, 2Н), 1,13 (т, 3Н), 1,07 (т, 3Н), 0,94 (т, 3Н).
Е81+М8: вычислено для С18Н30^О2: 306,45; найдено: 307,2 (МН+).
2-[2-(3 -Бутоксифенил)этиламино] -1 -пирролидин-1-илэтанон.
Ή-ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6): δ 8,94 (с, 2Н), 7,14-7,33 (м, 1Н), 6,64-6,93 (м, 3Н), 4,00 (т, 2Н), 3,88 (с, 2Н), 3,33-3,45 (м, 4Н), 3,19-3,29 (м, 2Н), 2,96-3,05 (м, 2Н), 1,78-2,00 (м, 4Н), 1,65-1,78 (м, 2Н), 1,37-1,56 (м, 2Н), 0,96 (т, 3Н).
Е81+М8: вычислено для С!8Н28^О2: 304,44; найдено: 305,2 (МН+).
2-[2-(3-Бутокси-4-фторфенил)этиламино]-Ч№диметилацетамидгидрохлорид.
Ή-ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6): δ 8,91 (шир.с, 2Н), 7,15 (дд, 1Н), 7,05 (дд, 1Н), 6,79 (ддд, 1Н), 3,974,12 (м, 4Н), 3,09-3,21 (м, 2Н), 2,94 (с, 3Н), 2,92-2,99 (м, 2Н), 2,90 (с, 3Н), 1,65-1,82 (м, 2Н), 1,36-1,54 (м, 2Н), 0,87-1,01 (м, 3Н).
Е81+М8: вычислено для С16Н25Е^О2 (свободное основание): 296,38; найдено: 297,22 (МН+).
2-[2-(3-Бутокси-4-метоксифенил)этиламино]-Ч№диметилацетамидгидрохлорид.
Ή-ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6): δ 8,97 (шир.с, 2Н), 6,90 (д, 1Н), 6,84 (д, 1Н), 6,74 (дд, 1Н), 4,02 (шир.с, 2Н), 3,94 (т, 2Н), 3,73 (с, 3Н), 3,04-3,22 (м, 2Н), 2,94 (с, 3Н), 2,90 (с, 3Н), 2,84-2,92 (м, 2Н), 1,571,84 (м, 2Н), 1,44 (септ., 2Н), 0,94 (т, 3Н).
Е81+М8: вычислено для С|-Н78ЧО3 (свободное основание): 308,42; найдено: 309,21 (МН+).
Пример 2. 2-[2-(3-Бутоксифенил)этиламино]-2,Ч№триметилпропанамидгидрохлорид.
Стадия 1. Этиловый эфир 2-[2-(3-бутоксифенил)этиламино]-2-метилпропионовой кислоты.
К раствору 2-(3-бутоксифенил)этиламингидрохлорида (0,27 г, 1,42 ммоль; полученного из соединения со стадии 2 по примеру 1 согласно стандартной методике, описанной для стадии 4 примера 1) в ацетонитриле (8 мл) добавляют этиловый эфир 2-бром-2-метилпропионовой кислоты (0,27 мл, 1,85 ммоль) и триэтиламин (0,52 мл, 3,70 ммоль). Раствор нагревают при 100°С при микроволновом облучении в течение 3 ч. Смесь охлаждают до комнатной температуры и распределяют между водой и СН2С12. Органический слой отделяют, промывают насыщенным раствором соли, сушат над №28О4, фильтруют и растворитель выпаривают при пониженном давлении. Остаток очищают флэш-хроматографией (диоксид кремния, смесь СН2С12:МеОН от 100:0 до 95:5), получая указанное в заголовке соединение (0,17 г, 39% выход) в виде бесцветного масла.
Е81+М8: вычислено для С18Н29NО3: 307,44; найдено: 308,2 (МН+).
Стадия 2. 2-[2-(3-Бутоксифенил)этиламино]-2,Ч№триметилпропанамидгидрохлорид.
К раствору диметиламина, 2 М в ТГФ (0,6 мл, 1,1 ммоль) в толуоле (3 мл) добавляют триметилалюминий, 2 М в гексане (1,4 мл, 2,77 ммоль) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 15 мин. Добавляют этиловый эфир 2-[2-(3-бутоксифенил)этиламино]-2-метилпропионовой кислоты (0,17 г, 0,55 ммоль) в сухом толуоле (8 мл) и раствор нагревают до 90°С и перемешивают в течение 24 ч. Смесь охлаждают до комнатной температуры и растворитель удаляют при пониженном давлении. Остаток распределяют между водой и диэтиловым эфиром. Органический слой отделяют, промывают насыщенным раствором соли, сушат над №28О4, фильтруют и растворитель выпаривают при пониженном давлении. Остаток очищают флэш-хроматографией (первая очистка: диоксид кремния, смесь СН2С12:МеОН от 100:0 до 97:3; вторая очистка: диоксид кремния, ЕЮАс), получая указанное в заголовке соединение, которое растворяют в НС1/ЕьО и перемешивают в течение 20 мин. Полученную хлористо
- 20 018195 водородную соль фильтруют, промывают 1Рг2О и сушат при 40°С в вакууме. Чистое указанное в заголовке соединение (18,5 мг, 20% выход) получают в виде белого твердого вещества.
’Н-ЯМР (300 МГц, СОС13): δ 9,39 (шир.с, 2Н), 7,24 (т, 1Н), 6,71-6,97 (м, 3Н), 3,97 (т, 2Н), 3,13-3,36 (м, 4Н), 3,09 (с, 6Н), 1,90 (с, 6Н), 1,69-1,86 (м, 2Н), 1,51 (септ., 2Н), 0,99 (т, 3Н).
Е8ЙМ8: вычислено для С18Н30Ы2О3: 306,45; найдено: 307,32 (МН+).
Пример 3. 2-[2-(3-Бутоксифенил)этиламино]-Х№диметилпропанамидгидрохлорид.
Стадия 1. 2-[2-(3-Бутоксифенил)-(трет-бутоксикарбонил)этиламино]-Х№диметилпропанамид.
Раствор 2-[2-(3-бутоксифенил)-(трет-бутоксикарбонил)этиламино]-Х№диметилацетамида (0,410 г, 1,1 ммоль; полученного в соответствии со стадией 3 примера 1) в сухом ТГФ (5 мл) охлаждают до -78°С и добавляют по каплям ЫНМ08 (литийгексаметилдисилазид), 1 М в ТГФ (1,43 мл, 1,4 ммоль). Смесь перемешивают 30 мин, затем добавляют по каплям раствор метилиодида (0,187 г, 1,3 ммоль) в сухом ТГФ (1 мл). Смесь перемешивают в течение 2 ч до прекращения действия охлаждающей бани. Растворитель выпаривают при пониженном давлении и остаток растворяют в ЕЮАс (15 мл) и промывают водой (2x15 мл). Органическую фазу сушат над №ь8О4, фильтруют и растворитель выпаривают при пониженном давлении. Остаток очищают флэш-хроматографией (диоксид кремния, смесь петролейный эфир:ЕЮАс от 8:2 до 6:4), получая указанное в заголовке соединение (0,22 г, 52% выход) в виде бесцветного масла.
Е8ЕМ8: вычислено для С22Н36Ы2О4: 392,54; найдено: 393,3 (МН+).
Стадия 2. 2-[2-(3-Бутоксифенил)этиламино]-Х№диметилпропанамидгидрохлорид.
Указанное в заголовке соединение получают из 2-[2-(3-бутоксифенил)-(третбутоксикарбонил)этиламино]-Х№диметилпропанамида по стандартной методике, описанной для стадии 4 примера 1. Белый твердый продукт (47% выход).
’Н-ЯМР (300 МГц, ДМСО-й6): δ 9,16 (шир.с, 1Н), 8,82 (шир.с, 1Н), 7,14-7,31 (м, 1Н), 6,64-6,93 (м, 3Н), 4,39 (кв., 1Н), 3,96 (т, 2Н), 3,08-3,22 (м, 1Н), 3,00 (с, 3Н), 2,96-3,06 (м, 1Н), 2,87-2,96 (м, 2Н), 2,90 (с, 3Н), 1,59-1,82 (м, 2Н), 1,37-1,53 (м, 2Н), 1,38 (д, 3Н), 0,94 (т, 3Н).
Е8ЕМ8: вычислено для С17Н28Ы2О2 (свободное основание): 292,42; найдено: 293,25 (МН+).
Пример 4. 2-[2-(3-Бутоксифенил)этиламино]-3-гидрокси-Х№диметилпропанамидгидрохлорид.
Стадия 1. 2-[2-(3 -Бутоксифенил) -(трет-бутоксикарбонил)этиламино] -3 -ацетокси-Ν,Ν диметилпропанамид.
Указанное в заголовке соединение получают из [2-[2-(3-бутоксифенил)-(третбутоксикарбонил)этиламино]-М,М-диметилацетамида и бромметилового эфира уксусной кислоты согласно стадии 1 примера 3. Бесцветное масло (38% выход).
Е8ЕМ8: вычислено для С24Н38Ы2О6 (свободное основание): 450,58; найдено: 451,2 (МН+).
Стадия 2. 2-[2-(3-Бутоксифенил)-(трет-бутоксикарбонил)этиламино]-3-гидрокси-М,Мдиметилпропанамид.
2-[2-(3 -Бутоксифенил)-(трет-бутоксикарбонил)этиламино] -3 -ацетокси-ХЫ-диметилпропанамид (0,19 г, 0,42 ммоль) растворяют в смеси 3% ЫН4ОН/МеОН (15 мл) и перемешивают при комнатной температуре в течение 5 ч. Растворитель выпаривают при пониженном давлении и остаток очищают флэшхроматографией (диоксид кремния, смесь петролейный эфир:ЕЮАс от 7:3 до 3:7), получая указанное в заголовке соединение (0,13 г, 66% выход) в виде бесцветного масла.
Е8ЕМ8: вычислено для С22Н36М2О5: 408,54; найдено: 409,2 (МН+).
Стадия 3. 2-[2-(3-Бутоксифенил)этиламино]-3-гидрокси-М,М-диметилпропанамидгидрохлорид.
Указанное в заголовке соединение получают из 2-[2-(3-бутоксифенил)-(третбутоксикарбонил)этиламино]-3-ацетокси-Ы,М-диметилпропанамида по стандартной методике, описанной для стадии 4 примера 1. Получено в виде белого твердого вещества (76% выход).
’Н-ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6): δ 8,46-9,44 (м, 2Н), 7,10-7,33 (м, 1Н), 6,65-6,92 (м, 3Н), 5,54 (т, 1Н), 4,44 (т, 1Н), 3,95 (т, 2Н), 3,65-3,88 (м, 2Н), 3,11-3,22 (м, 1Н), 3,03-3,09 (м, 1Н), 3,02 (с, 3Н), 2,91-2,99 (м, 2Н), 2,90 (с, 3Н) 1,61-1,79 (м, 2Н), 1,35-1,53 (м, 2Н), 0,86-1,00 (м, 3Н).
Е8ЕМ8: вычислено для С17Н28Ы2О2 (свободное основание): 308,42; найдено: 309,21 (МН+).
Пример 5. 2-[2-(3-Бутокси-4-метилфенил)этиламино]-М,М-диметилацетамидгидрохлорид.
Стадия 1. (3-Гидрокси-4-метилфенил)ацетонитрил.
К раствору 3-метокси-4-метилфенилацетонитрила (2,0 г, 12,4 ммоль) в сухом СН2С12 (50 мл), охлажденному до -78°С, добавляют по каплям 1 М ВВг3 в СН2С12 (27 мл, 27 ммоль). Смесь перемешивают в течение ночи, до прекращения действия охлаждающей бани. Смесь медленно выливают в смесь лед/вода, при перемешивании. После того как лед растает, водную фазу экстрагируют ЕЮАс и органическую фазу сушат над №ь8О4, фильтруют и растворитель выпаривают при пониженном давлении. Сырое указанное в заголовке соединение (1,7 г, 93% выход) используют на следующей стадии без дополнительной очистки.
- 21 018195
Стадия 2. (3-Бутокси-4-метилфенил)ацетонитрил.
К раствору (3-гидрокси-4-метилфенил)ацетонитрила (1,7 г, 11,5 ммоль) в ацетоне (100 мл) добавляют К2СО3 (7,9 г, 57,5 ммоль) и 1-бромбутан (6,1 мл, 57,5 ммоль). Суспензию нагревают до температуры кипения с обратным холодильником в течение 24 ч и растворитель выпаривают при пониженном давлении. Остаток растворяют в СН2С12 и промывают водой и насыщенным раствором соли. Органический слой сушат над Ыа28О4, фильтруют и растворитель выпаривают при пониженном давлении. Сырой продукт очищают флэш-хроматографией (смесь петролейный эфир:ЕЮАс 9,5:0,5), получая указанное в заголовке соединение (1,43 г, 61% выход) в виде бесцветного масла.
Е814М8: вычислено для С13Н17КО: 203,29; найдено: 204,1 (МН+).
Стадия 3. трет-Бутиловый эфир Ы-[2-(3-бутокси-4-метилфенил)этил]карбаминовой кислоты.
К раствору (3-бутокси-4-метилфенил)ацетонитрила (0,94 г, 5,0 ммоль) в метаноле (38 мл) добавляют гексагидрат хлорида никеля (0,12 г, 0,5 ммоль) и Ьос2О (2,18 г, 10,0 ммоль). Раствор охлаждают до 0°С и добавляют порциями, за 30 мин, натрийборгидрид (1,32 г, 35,0 ммоль). Смесь перемешивают в течение ночи до прекращения действия охлаждающей бани. Реакцию гасят добавлением диэтилентриамина (0,54 мл, 5 ммоль) и реакционную смесь перемешивают в течение 30 мин. Растворитель удаляют при пониженном давлении и остаток повторно растворяют в ЕЮАс, промывают водой, сушат над Ыа28О4, фильтруют и растворитель выпаривают при пониженном давлении. Сырой продукт очищают флэшхроматографией (диоксид кремния, смесь петролейный эфир:ЕЮАс 90:10), получая указанное в заголовке соединение. Бесцветное масло (80% выход).
Е814М8: вычислено для С18Н29ЫО3: 307,44; найдено: 308,1 (МН4).
Стадия 4. 2-[2-(3-Бутокси-4-метилфенил)этиламино]-Ы,М-диметилацетамидгидрохлорид.
Указанное в заголовке соединение получают из трет-бутилового эфира [2-(3-бутокси-4метилфенил)этил]карбаминовой кислоты по стандартным методикам, описанным для стадий 3 и 4 примера 1. Получено в виде белого твердого вещества.
!Н-ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6): δ 8,93 (шир.с, 2Н), 7,08 (дд, 1Н), 6,79 (д, 1Н), 6,69 (дд, 1Н), 4,03 (с, 2Н), 3,97 (т, 2Н), 3,08-3,19 (м, 2Н), 2,93 (с, 3Н), 2,91-2,97 (м, 2Н), 2,90 (с, 3Н), 2,11 (с, 3Н), 1,65-1,79 (м, 2Н), 1,39-1,54 (м, 2Н), 0,95 (т, 3Н).
Е8ЕМ8: вычислено для С17Н28Ы2О2 (свободное основание): 292,42; найдено: 293,25 (МН4).
Аналогично, исходя из (2,6-дифтор-3-метоксифенил)ацетонитрила, получено следующее соединение:
2-[2-(3-бутокси-2,6-дифторфенил)этиламино]-Ы,М-диметилацетамидгидрохлорид.
'ίί-ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6): δ 9,16 (шир.с, 2Н), 7,07-7,18 (м, 1Н), 6,96-7,07 (м, 1Н), 4,07 (с, 2Н), 4,02 (т, 2Н), 3,08 (с, 4Н), 2,93 (с, 3Н), 2,90 (с, 3Н), 1,63-1,76 (м, 2Н), 1,36-1,51 (м, 2Н), 0,93 (т, 3Н).
Е814М8: вычислено для С16Н24Е2Ы2О2 (свободное основание): 314,37; найдено: 315,20 (МН4). Пример 6. 2-[2-(3-Бутоксифенил)-2-метилпропиламино]-Ы,М-диметилацетамидгидрохлорид. Стадия 1. 2-(3-Метоксифенил)-2-метилпропионитрил.
К раствору (3-метоксифенил)ацетонитрила (8,0 г, 0,054 моль) в ДМФА (25 мл), охлажденному до 0°С, добавляют ЫаН (1,3 г, 0,054 моль). Реакционную смесь перемешивают в течение 30 мин и добавляют Ме1 (3,3 мл, 0,054 моль). Реакционную смесь перемешивают I ч при комнатной температуре. По истечении указанного периода реакционную смесь вновь охлаждают до 0°С, добавляют ЫаН (1,3 г, 0,054 моль) с последующим добавлением Ме1 (3,3 мл, 0,054 моль), спустя 30 мин. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. ДМФА выпаривают и сырой продукт разбавляют насыщенным раствором соли и экстрагируют ЕьО. Органическую фазу промывают водой, сушат над №ь8О4. растворитель выпаривают при пониженном давлении и остаток очищают флэшхроматографией (смесь петролейный эфир:АсОЕ1 95:5), получая указанное в заголовке соединение (4 г, 42% выход) в виде бесцветного масла.
Е814М8: вычислено для СцН13Е2ЫО: 175,23; найдено: 176,1 (МН4).
Стадия 2. 2-[2-(3-Бутоксифенил)-2-метилпропиламино]-Ы,М-диметилацетамидгидрохлорид.
Указанное в заголовке соединение получают из 2-(3-метоксифенил)-2-метилпропионитрила по методике, описанной в примере 5.
!Н-ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6): δ 8,44 (шир.с, 2Н), 7,28 (т, 1Н), 6,90-7,04 (м, 2Н), 6,77-6,90 (м, 1Н), 3,99 (т, 2Н), 3,88 (с, 2Н), 3,16 (с, 2Н), 2,88 (с, 6Н), 1,64-1,78 (м, 2Н), 1,42-1,55 (м, 2Н), 1,36-1,42 (м, 6Н), 0,90-1,04 (м, 3Н).
Е814М8: вычислено для С18Н30Ы2О2 (свободное основание): 306,45; найдено: 307,26 (МН4).
Пример 7. 2-[2-(3-Бутилтиофенил)этиламино]-Ы,М-диметилацетамидгидрохлорид.
Стадия 1. (3-Бутилтиофенил)ацетонитрил.
К раствору (3-иодфенил)ацетонитрила (2,0 г, 8,2 ммоль) и втор-бутилового эфира уксусной кислоты (2,4 мл, 24,6 ммоль) в н-ВиОН (5 мл) добавляют Си1 (0,156 г, 0,8 ммоль), этиленгликоль (0,96 мл, 1,7 ммоль) и К2СО3 (2,4 г, 17,3 ммоль) и смесь нагревают при микроволновом облучении до 110°С в течение 1 ч. Реакционную смесь разбавляют АсОЕ1 и фильтруют через рыхлый слой целита. Органическую фазу промывают водой и насыщенным раствором соли, сушат над №ь8О4 и растворитель выпаривают
- 22 018195 при пониженном давлении. Сырой продукт очищают флэш-хроматографией (смесь петролейный эфир:АсОЕ1 от 10:0 до 9:1), получая чистое указанное в заголовке соединение в виде светло-желтого масла (1,0 г, 64% выход), используемое без дополнительной очистки на следующей стадии.
Е81+М8: вычислено для С12Н15К8: 205,32, масса не поддается обнаружению.
Стадия 2. 2-[2-(3-Бутилтиофенил)этиламино]-Ы,М-диметилацетамидгидрохлорид.
Указанное в заголовке соединение получают из (3-бутилтиофенил)ацетонитрила по методике, описанной в примере 5.
Ή-ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6): δ 9,08 (шир.с, 2Н), 7,23-7,36 (м, 1Н), 7,15-7,23 (м, 2Н), 6,95-7,11 (м, 1Н), 4,03 (с, 2Н), 3,08-3,21 (м, 2Н), 2,92-3,02 (м, 4Н), 2,94 (с, 3Н), 2,90 (с, 3Н), 1,49-1,67 (м, 2Н), 1,30-1,49 (м, 2Н), 0,89 (т, 3Н).
Е81+М8: вычислено для С16Н26Ы2О8 (свободное основание): 294,46; найдено: 295,20 (МН+).
Пример 8. 2-[2-(3-Бутилсулъфонилфенил)этиламино]-Ы,М-диметилацетамидгидрохлорид.
Стадия 1. 2-[2-(3-Бутилсулъфонилфенил)-(трет-бутоксикарбонил)этиламино]-N,Nдиметилацетамид.
К раствору 2-[2-(3-бутилтиофенил)-(трет-бутоксикарбонил)этиламино]-Ы,Мдиметилацетамидгидрохлорида (0,25 г, 0,62 ммоль; полученного из соединения со стадии 2 примера 7 при взаимодействии с Ьос2О по методике, описанной в первой части стадии 1 примера 1) в смеси ацетонитрил (20 мл)/вода (10 мл) добавляют порциями, за 5 мин, смесь оксона (0,92 г, 1,5 ммоль) и ЫаНСО3 (0,2 г, 2,3 ммоль). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч. Смесь распределяют между водой и СН2С12, органическую фазу промывают водой и насыщенным раствором соли, сушат над №ь8О4 и растворитель выпаривают при пониженном давлении. Сырой продукт очищают флэшхроматографией (смесь петролейный эфир:АсОЕ1 3:7), получая чистое указанное в заголовке соединение в виде бесцветного масла (0,20 г, 75% выход).
Е81+М8: вычислено для С21Н34Ы2О58: 426,58; найдено: 427,1 (МН+).
Стадия 2. 2-[2-(3-Бутилсульфонилфенил)этиламино]-Ы,М-диметилацетамидгидрохлорид.
Указанное в заголовке соединение получают из 2-[2-(3-бутилсульфонилфенил)-(третбутоксикарбонил)этиламино]-Ы,М-диметилацетамида по стандартной методике, описанной для стадии 4 примера 1.
Ή-ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6 + ТЕА): δ 8,84-9,10 (м, 2Н), 7,74-7,86 (м, 2Н), 7,57-7,71 (м, 2Н), 4,06 (т, 2Н), 3,03-3,34 (м, 6Н), 2,95 (с, 3Н), 2,91 (с, 3Н), 1,45-1,63 (м, 2Н), 1,24-1,42 (м, 2Н), 0,84 (с, 3Н).
Е81+М8: вычислено для С16Н26Ы2О8 (свободное основание): 294,46; найдено: 295,20 (МН+).
Пример 9. 2-[2-(3-Бутоксифенил)этиламино]-Ы,М-диметилтиоацетамидгидрохлорид.
Стадия 1. 2-[2-(3-Бутоксифенил)-(трет-бутоксикарбонил)этиламино]-Ы,М-диметилтиоацетамид.
К раствору 2-[2-(3-бутоксифенил)-(грет-бутоксикарбонил)этиламино]-Ы,М-диметилацетамида (0,38 г, 1,0 ммоль) в сухом толуоле (20 мл) добавляют одной порцией реагент Лавессона (0,58 г, 1,2 ммоль) и смесь нагревают до температуры кипения с обратным холодильником и перемешивают в течение 2 ч. Растворитель выпаривают при пониженном давлении и остаток очищают флэшхроматографией (смесь петролейный эфир:АсОЕ1 от 9:1 до 8:2), получая чистое указанное в заголовке соединение в виде бесцветного масла (0,11 г, 28% выход).
Е81+М8: вычислено для С21Н34Ы2О38: 394,58; найдено: 395,1 (МН+).
Стадия 2. 2 [2-(3-Бутоксифенил)этиламино]-Ы,М-диметилтиоацетамидгидрохлорид.
Указанное в заголовке соединение получают из 2-[2-(3-бутоксифенил)-(третбутоксикарбонил)этиламино]-Ы,М-диметилтиоацетамида по стандартной методике, описанной для стадии 4 примера 1. Получено в виде белого твердого вещества.
Ή-ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6): δ 8,88 (с, 2Н), 7,16-7,34 (м, 1Н), 6,73-6,88 (м, 3Н), 4,17 (с, 2Н), 3,96 (дд, 2Н), 3,43 (с, 3Н), 3,31 (с, 3Н), 3,16-3,26 (м, 2Н), 2,92-3,04 (м, 2Н), 1,62-1,76 (м, 2Н), 1,36-1,50 (м, 2Н), 0,94 (т, 3Н).
Е81+М8: вычислено для С16Н26Ы2О8 (свободное основание): 294,46; найдено: 295,22 (МН+).
Пример 10. 2-[2-(3-Бутоксифенил)-(М'-метокси)этиламино]-Ы,М-диметилацетамид.
Стадия 1. 2-(3-Бутоксифенил)ацетальдегид.
К раствору 2-(3-бутоксифенил)этанола (3,00 г, 15,4 ммоль; полученного из 2-(3-гидроксифенил)этанола по методике, описанной для стадии 2 примера 1) в СН2С12 (100 мл) добавляют периодинанреагент Десс-Мартина (8,5 г, 20,1 ммоль) и реакционную смесь оставляют при комнатной температуре на ночь. Раствор выливают в насыщенный раствор МаНСО3, содержащий Ыа282О3 (35 г) и смесь перемешивают в течение 30 мин. Органический слой отделяют, сушат над Ыа28О4, фильтруют и упаривают при пониженном давлении.
Остаток, содержащий указанное в заголовке соединение (2,9 г, 99% выход), используют на следующей стадии без дополнительной очистки.
- 23 018195
Стадия 2. 2-(3-Бутоксифенил)-(№метокси)этиламин.
К суспензии 2-(3-бутоксифенил)ацетальдегида (2,00 г, 10,4 ммоль) и О-метоксиамингидрохлорида (1,12 г, 13,4 ммоль) в воде (13 мл) добавляют по каплям, при перемешивании, при 0°С, раствор №ьСО3 (0,66 г, 6,2 ммоль) в воде (20 мл). Реакционную смесь оставляют при комнатной температуре на ночь и затем экстрагируют диэтиловым эфиром. Органический слой сушат над №28О4, фильтруют и упаривают при пониженном давлении.
Остаток, содержащий требуемое оксимовое промежуточное соединение (2,24 г, 10,2 ммоль), растворяют в метаноле (60 мл) и добавляют уксусную кислоту (8,8 мл, 153,0 ммоль). Раствор охлаждают до 0°С и добавляют порциями NаСNΒН3. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи, затем растворитель удаляют при пониженном давлении и остаток распределяют между 5% раствором NаНСО3 и этилацетатом. Органическую фазу сушат над №28О4, фильтруют и концентрируют досуха в вакууме. Сырой остаток очищают колоночной хроматографией (смесь петролейный эфир:этилацетат 9:1), получая 0,88 г (38% выход) указанного в заголовке соединения.
Стадия 3. 2-[2-(3-Бутоксифенил)-(№-метокси)этиламино]-Ы,№диметилацетамид.
2-(3-Бутоксифенил)-(№метокси)этиламин (0,5 г, 2,25 ммоль), полученный, как описано на стадии 2, растворяют в ацетонитриле (15 мл) и добавляют этилдиизопропиламин (1,95 мл, 11,25 ммоль), с последующим добавлением 2-хлор-Ы,№диметилацетамида (1,15 мл, 11,25 ммоль). Раствор нагревают при 130°С при микроволновом облучении в течение 6 ч. Смесь охлаждают до комнатной температуры, растворитель удаляют при пониженном давлении и остаток распределяют между 5% NаНСО3 и этилацетатом. Органическую фазу сушат над №ь8О+ фильтруют и концентрируют досуха в вакууме. Сырой остаток очищают колоночной хроматографией (смесь петролейный эфир:этилацетат 1:1), получая 0,25 г (36% выход) указанного в заголовке соединения.
Ή-ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6 + ТБА): δ 7,17 (т, 1Н), 6,61-6,89 (м, 3Н), 3,94 (т, 2Н), 3,56 (с, 2Н), 3,47 (с, 3Н), 2,98 (с, 3Н), 2,89-2,97 (м, 2Н), 2,80 (с, 3Н), 2,72-2,86 (м, 2Н), 1,58-1,77 (м, 2Н), 1,34-1,53 (м, 2Н), 0,93 (т, 3Н).
Е81+М8: вычислено для С|-Н28^О3 (свободное основание): 308,42; найдено: 309,18 (МН+).
Пример 11. Исследование притока ТТХ8-натриевых каналов.
Линия клеток ганглия заднего корешка крыс, ΝΌ7/23, эндогенно экспрессирует смешанную популяцию ТТХк-натриевых каналов. Указанные клетки не имеют ТТХг-натриевых каналов, что установлено по отсутствию соответствующих транскриптов.
Клетки ΝΏ7/23 выращивают в ИМЕМ, пополненной 10% БВ8 и 1 мМ пируватом натрия. Клетки высевают с плотностью 50000 клетка/лунка на 96-луночные планшеты с поли-Ь-лизиновым покрытием и затем инкубируют в течение 18-24 ч перед употреблением.
В данном исследовании используют аналитический набор для определения трансмембранного потенциала (Мо1еси1аг Όβνίοβδ), основанного на отрицательно заряженном флуоресцентном красителе, дающем возможность контролировать изменения в мембранном потенциале, вызванные притоком натрия из-за открытия канала.
Клетки инкубируют с нагрузочным красителем в течение 30 мин при 25°С. Затем добавляют еще в течение 15 мин 100 нМ токсина Апетоша 5и1са1а (используемого в качестве усилителя реакции на активатор каналов), в чистом виде или в присутствии ТТХ (в качестве эталона сравнения), или испытуемого соединения.
Флуоресценцию (длина волны, возбуждение: 530 нм, эмиссия: 565 нм) измеряют до и после (40-45 с) автоматического впрыскивания активатора натриевых каналов-вератридина (100 мкМ), используя спектрофотометр для прочтения планшетов УюЮг (Регкш Е1тег).
Кривые ингибирования рассчитывают из 5 концентраций, каждая в трипликате, и 1С50 определяют, применяя линейно-регрессионный анализ.
Соединения по настоящему изобретению ингибируют ТТХк-натриевые каналы при фармакологически значимых величинах 1С50.
Результаты, полученные с рядом соединений, являющихся характерными примерами всего класса соединений по изобретению, в сравнении с эталонными ралфинамидом и сафинамидом, приведены в табл. 1.
- 24 018195
Таблица 1
Соединение Ю50 притока Иа+, мкМ
2-[2-(З-Гексилоксифенил)этиламино]- Ν,Ν-диметилацетамидгидрохлорид 0, 5
2-[2-(З-Бутоксифенил)этиламино]-Ν,Νдипропилацетамидгидрохлорид 0, 5
2 - [2-(З-Пентилоксифенил)этиламино]- Ν,Ν-диметилацетамидгидрохлорид 0,5
2-[2-(З-Бутоксифенил)этиламино]-Ν,Νдиэтилацетамидгидрохлорид 0, 6
2- [2- {З-Бутоксифенил) этиламино] -2-Ν, Νтриметилпропанамидгидрохлорид 0,7
2- [ 2- (З-Пентилоксифенил)этиламино]- Ν,Ν-дипропилацетамидгидрохлорид 1,1
2-[2-{З-Бутоксифенил)этиламино]-Ν,Νдиметил пропанамидгидрохлорид 1,1
2-[2-(З-Бутоксифенил)этиламино]-Ν,Νдибутилацетамидгидрохлорид 1,2
2-[2-(З-Бутоксифенил)этиламино]-Ν,Νдиметил тиоацетамидгидрохлорид 1,2
2-[2-(З-Бутоксифенил)этиламино]-Ν,Νдиметилацетамидгидрохлорид 1, 5
2-[2-(З-Бутоксифенил)этиламино]-1пирролидин-1-илэтанонгидрохлорид 2, 1
2-[2-(3-Бутокси-2,6- дифторфенил)этиламино]-Ν,Ν- диметилацетамидгидрохлорид 2, 6
(5)-( + )-2-[4-(2- Фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (ралфинамид)* 9,5
(3)-(+)-2-[4-(З-Фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (сафинамид)* 7,4
* В виде соли с метансульфоновой кислотой.
Пример 12. Исследование притока кальциевых каналов.
Линия опухолевых клеток гипофиза мышей ΑΐΤ20/Ό16ν-Ε2 преимущественно экспрессирует кальциевые каналы Ь-типа.
ΑΐΤ20 клетки выращивают в ИМЕМ с 10% ΕΒ8, 4 мМ глутамина. Клетки высевают с плотностью 200000 клетка/лунка на 96-луночные планшеты с поли-Ь-лизиновым покрытием и затем инкубируют в течение 18-24 ч, перед употреблением.
В данном исследовании используют аналитический набор для определения Са++ (Мо1еси1аг Ое^'Кез), основанного на флуоресцентном кальциевом индикаторе для регистрации притока кальция, определяемого в условиях деполяризации.
Клетки инкубируют с нагрузочным красящим веществом для кальция в течение 30 мин при 37°С. Затем добавляют еще в течение 15 мин ω-конотоксин в чистом виде (1 мкМ) или в присутствии нифедипина (в качестве эталона сравнения) или испытуемого соединения.
Флуоресценцию (длина волны, возбуждение: 485 - эмиссия: 535 нм) измеряют до и после (30-40 с) автоматического впрыскивания 100 мМ КС1-деполяризующего раствора, используя спектрофотометр для прочтения планшетов УюЮг (Реткш Е1шег).
Кривые ингибирования рассчитывают из 5 концентраций, каждая в трипликате, и 1С50 определяют, применяя линейно-регрессионный анализ.
Результаты, полученные с рядом соединений, являющихся характерными примерами всего класса соединений по изобретению, в сравнении с эталонными ралфинамидом и сафинамидом, приведены в табл. 2.
- 25 018195
Таблица 2
Соединение 1С50 притока Са+ + , мкМ
2-[2-(З-Бутоксифенил)этиламино]-Ν,Νдипропилацетамид гидрохлорид 1,1
2-[2-(З-Бутоксифенил)этиламино]-Ν, Νдибутилацетамидгидрохлорид 1,8
2-[2-(З-Гексилсксифенил)этиламино]-Ν,Νдиметилацетамидгидрохлорид 4,0
2-[2-(З-Бутоксифенил)этиламино]-Ν,Νдиэтилацетамидгидрохлорид 6,7
2-[2-(3-Пентилоксифенил)этиламино]-Ν,Ν- дипропилацетамидгидрохлорид 6,9
2-[2-(З-Бутилтиофенил)этиламино]-Ν,Νдиметилацетамидгидрохлорид 7,2
2-[2-(З-Бутоксифенил)этиламино]-Ν,Νдиметилтиоацетамидгидрохлорид 7,6
2-(2-(З’Пентилоксифенил)этиламино]-Ν,Νдиметилацетамидгидрохлорид 8, 3
2-(2-(3-(4,4,4- Трифторбутокси)фенил]этиламино}-Ν,Ν- диметила це т амидгидр о хлорид 9,3
(2)-(+)-2-[4-(2-Фторбензилокси)- бензиламино]пропанамид (ралфинамид)* 26,0
(3)-(+)-2-[4-(З-Фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (сафинамид)* 33,0
* В виде соли с метансульфоновой кислотой.
Пример 13. Оценка блокады Νη'-токов в кортикальных нейронах крыс методом пэтч-клампа.
Клеточный препарат и культивирование.
Процедуры, касающиеся животных и содержания таких животных, осуществляют в соответствии с установленными руководящими принципами в согласии с государственным правом (И.Ь. п. 116, С.И., зирр1. 40, РеЬ. 18, 1992) и международными правами и политикой (ЕЕС Соипсй бкесйме 86/609, О1Ь358.1, Эес. 12 1987; 6шбе £от Не Саге апб Изе о£ ЬаЬога1огу Лшта1з, и.8. №1(юпа1 Кезеагск Соипсй, 1996).
Кортикальные нейроны получают препарированием эмбриональных крыс V^зΐа^ (Е17-Е19).
Самок крыс на сроке беременности 17-19 недель анестезируют и забивают. Иссекают эмбрионы (п=4-5) и помещают в охлажденный льдом раствор Ханка (раствор Ханка (Ь1£е Теск 14170-088) + 30% глюкоза + Реп-8(тер 100 х (Ь1£е Теск. 15140-122) 100 Ед-100 мкг/мл и Нерез-№1ОН 5 мМ). Удаляют матку и плаценту, эмбрионы декапитируют и головы помещают в охлажденный льдом раствор Ханка.
Удаляют кожу головы, используя пинцет, скальп вскрывают, выполняя боковой разрез от затылка до глаз, и извлекают мозг, используя изогнутый пинцет.
Мозг разрезают на две половины, наружную соединительно-тканную оболочку удаляют пинцетом и, удерживая мозг перевернутым, используя изогнутый пинцет, извлекают мозжечок, ствол мозга и промежуточный мозг, стараясь максимально очистить внутреннюю часть кортекса.
Каждый кортекс нарезают на небольшие кусочки ножницами, кусочки переносят в центрифужную пробирку на 15 мл, используя пипетку на 5 мл, и дважды промывают раствором Ханка.
Раствор удаляют, за исключением 1-2 мл, и ткань сначала диссоциируют пипеткой на 5 мл, затем двумя пастеровскими пипетками с огневой полировкой (среднее и малое отверстия соответственно). После механической диссоциации добавляют 5 мл полной ИМЕМ (модифицированной по способу Дульбекко среды Игла) (С1Ьсо 41966-029) + 10% РВ8 (Нус1опе) + 2 мМ глутамин (Ь1£е Теск. 25030-024) + Реп8(тер 100 Ед-100 мкг/мл и клеточную суспензию центрифугируют в течение 5 мин при 1000 об/мин. Супернатант удаляют и добавляют 5 мл полной нейробазальной среды (ΝΒ среды) (Ь1£е Теск. 21103-049) + 2% В27 (Ь1£е Теск. 17504-044) + 2 мМ глутамин + Реп-8(гер 100 Ед-100 мкг/мл.
Клетки подсчитывают и разбавляют нейробазальной средой до концентрации 400000 клеток на чашку Петри, обработанную 5 мкг/мл поли-И-лизина.
- 26 018195
Кортикальные нейроны используют с 6-го по 11-й день после посева на чашках Петри и один раз в неделю заменяют нейробазальную среду.
Регистрация по методу пэтч-клампа всей клетки.
Эксперименты на кортикальных нейронах выполняют, используя стандартные методики пэтчклампа всей клетки (НашШ с1 а1., РЕИОНЕВЗ ЛКСН., 1981 Аид, 391(12), 85-100).). Мембранные токи регистрируют и фильтруют при 5 кГц с помощью усилителя Ахоп АхораКй 200В и данные оцифровывают с помощью Ахоп ΩίβίάαΙα 1322А (Ахоп 1п51гнтсп15. СА, И8А). Выполнение протокола и сбор информации контролируют онлайн с помощью программного обеспечения Ахоп рС1атр8. Измерительными и эталонными электродами являются электроды АдС1-Ад. Устройство для продвижения 8ийег 1н51гнтсп1 Р-87 Ри11ег (СА, И8А) используют в целях выведения пэтч-кламп-пипеток с сопротивлением 2-3 МОм из пробирок Напхагй'а боросиликатного стекла. Клетки непрерывно омывают внеклеточными растворами, используя устройство для смены раствора Вю1одю В8С-200.
Протоколы замеров напряжения и анализ данных.
Для исследования влияния соединений на натриевые токи в кортикальных нейронах клетки фиксируют при -90 мВ, затем двухстадийный протокол используют для определения потенциалозависимости блока. Натриевые токи активируют ступенчатым импульсом в 30 мс до -10 мВ (пробный импульс) от преобусловленного потенциала -110 мВ (состояние покоя) и до потенциала примерно -50 мВ (полумаксимальное стационарное состояние), 2000 мс.
Тонический блок токов покоя и деполяризованных токов при данной концентрации лекарственного препарата вычисляют по разнице между пиковым Иа+-током в контрольном внешнем омывающем растворе и пиковыми токами с испытуемым веществом, разделенной на пик контроля.
Кривые концентрация лекарственного средства - ингибирование получают, строя график зависимости тонических блоков в состоянии покоя и деполяризованном состоянии от концентраций лекарственных средств. Выполняют подгонку кривых доза-эффект к данным тонического блока согласно логистическому уравнению: у=А2 + (А1-А2)/[1 + (х/1С50)р], где А1 и А2 являются фиксированными величинами 0 и 1, соответствующими 0 и 100% ингибированию тока; х равно концентрации лекарственного средства; 1С50 равно концентрации лекарственного средства, приводящей к 50% ингибированию тока; и р равно соответствующему угловому коэффициенту.
Кажущееся сродство лекарственного средства для инактивированного состояния (Κι) рассчитывают по уравнению 1/1<йер=11/Кг + (1-1)/Κί, где Кг означает сродство лекарственного средства для состояния покоя/закрытого состояния; Кйер равно 1С50 в деполяризованном состоянии; 11 и (1-й) означают доли каналов, имеющие потенциалы покоя и деп. соответственно.
Растворы и лекарственные средства.
Контрольный внешний омывающий раствор содержит (мМ): ИаС1 - 60, Холин С1 - 60, СаС12 - 1,3, МдС12 - 2, КС1 -2, СйС12 - 0,4, №Сд2 - 0,3, ТЕАС1 - 20, Нерек - 10, глюкозы - 10.
Внутренний пипеточный раствор содержит (мМ): СкГ - 65, СкС1 - 65, ИаС1 - 10, СаС12 - 1,3, МдС12 - 2, Нерек - 10, ЕСТА - 10, МдАТР - 1.
Соединения растворяют для получения исходных растворов (20 мМ) в ДМСО. Исходные растворы разбавляют до конечных концентраций внешним раствором.
Результаты.
Соединения по настоящему изобретению обладают способностью блокировать №'-токи в кортикальных нейронах крыс. Результаты, полученные с 2-[2-(3-бутоксифенил)этиламино]-Ы,И-диметилацетамидгидрохлоридом (ΝΑ-3509), характерным соединением для химического класса по настоящему изобретению, в сравнении с эталонными сафинамидом и ралфинамидом, приведены в табл. 3.
Таблица 3
СОЕДИНЕНИЕ 1С50 покоя (Кг) (мкМ) 1С60 деполяриз. (мкМ) ΚΪ
2-[2-(З-Бутоксифенил)этиламино]-Ν,Ν- диметилацетамидгидрохлорид 25 0,8 0,4
(3} - ( + >-2-[4-(3- Фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (сафинамид)* >100 (180) 7,0 3,6
(5)-( + )-2-[4-(2- Фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (ралфинамид)* >100 1 (213) 9,0 4,7
* В виде соли с метансульфоновой кислотой.
Данные, выраженные через значение 1С50 при мкМ-концентрации, а также через сродство в отношении инактивированного состояния (Κι), демонстрируют, что соединение по настоящему изобретению является высокоэффективным и потенциалозависимым блокатором натриевых каналов.
- 27 018195
Пример 14. Оценка блокады №1'-токов в ΝΏ7/23 клеточной линии методом пэтч-клампа.
Поддержание клеточной линии.
ΝΏ7/23 (ЕСАСС Ш 92090903 от 8ЮМА) представляет собой гибридную клеточную линию, полученную из ЭЯС неонатальных крыс, слившуюся с Ю8Тд2 мышиной нейробластомы (Уооб е1 а1., Ргос. В1о1. 8сь, 1990 8ер1., 241(1302), 187-194). ΝΏ7/23 клетки обладают подобными сенсорному нейрону свойствами и экспрессируют тетродотоксин-чувствительные (ТТХз), но не тетродотоксин-устойчивые (ТТХ-г) токи (2йои е1 а1.; I. Рйагшасо1. Ехр. Тйег., 2003 Аид., 306(2), 498-504; 1ойп е1 а1., №игорйагшасо1оду, 2004 Маг, 46(3), 425-438). Отсутствие ТТХг токов соответствует отсутствию транскриптов ТТХг каналов в указанных клетках.
Молекулярная идентичность каналов, ответственных за ТТХз проводимость, неизвестна, но исходят из того, что, по всей видимости, указанная проводимость является результатом активности смешанной популяции натриевых каналов.
Клетки поддерживают обычным образом в ЭМЕМ с 10% ЕВ8, 4 мМ глутамина, 1 мМ пирувата натрия. За один день до эксперимента по методу пэтч-клампа клетки отделяют и высевают с плотностью 100000 клетка/35-мм чашка Петри с полилизиновым покрытием.
Регистрация по методу пэтч-клампа всей клетки.
Эксперименты на ΝΌ7/23 клетках выполняют, используя стандартные методики пэтч-клампа всей клетки (Нашй1 е1 а1., РЕИСНЕЯ8 АЯСН., 1981 Аид, 391(12), 85-100), как описано в предыдущем разделе.
Протоколы замеров напряжения и анализ данных.
Для исследования влияния соединений на натриевые токи в ΝΏ7/23 клетках исходный трансмембранный потенциал устанавливают на -90 мВ, затем двухстадийный протокол используют для определения потенциалозависимости блока. Натриевые токи активируют ступенчатым импульсом в 30 мс до 0 мВ (пробный импульс) от преобусловленного потенциала -110 мВ (состояние покоя) и до потенциала примерно -70 мВ (полумаксимальное стационарное состояние), 2000 мс.
Тонический блок токов покоя и деполяризованных токов при данной концентрации лекарственного препарата вычисляют по разнице между пиковым №1'-током в контрольном внешнем омывающем растворе и пиковыми токами с испытуемым веществом, разделенной на пик контроля.
Кривые концентрация лекарственного средства - ингибирование получают, строя график зависимости тонических блоков в состоянии покоя и деполяризованном состоянии от концентраций лекарственных средств. Выполняют подгонку кривых доза-эффект к данным тонического блока согласно логистическому уравнению: у=А2 + (А1-А2)/[1 + (хЛС50)р], где А1 и А2 являются фиксированными величинами 0 и 1, соответствующими 0 и 100% ингибированию тока; х равно концентрации лекарственного средства; ГС50 равно концентрации лекарственного средства, приводящей к 50% ингибированию тока; и р равно соответствующему угловому коэффициенту.
Кажущееся сродство лекарственного средства для инактивированного состояния (К1) рассчитывают по уравнению 1/Кбер=й/Кг + (1-й)/К1, где Кг означает сродство лекарственного средства для состояния покоя/закрытого состояния; Кбер равно Κ\0 в деполяризованном состоянии; й и (1-й) означают доли каналов, имеющие потенциалы покоя и деп. соответственно.
Растворы и лекарственные средства.
Контрольный внешний омывающий раствор содержит (мМ): №1С1 - 80, Холин НС1 - 40, СаС12 - 1,3, МдС12 - 2, КС1 - 2, СбС12 - 0,4, №С12 - 0,3, ТЕАС1 - 20, Нерез - 10, глюкозы - 10.
Внутренний пипеточный раствор содержит (мМ): СзЕ - 65, СзС1 - 65, №1С1 - 10, СаС12 - 1,3, МдС12 - 2, Нерез - 10, ЕСТА - 10, МдАТР - 1.
Соединения растворяют для получения исходных растворов (20 мМ) в ДМСО. Исходные растворы разбавляют до конечных концентраций внешним раствором.
Результаты.
Соединения по настоящему изобретению обладают способностью блокировать №1'-токи в ΝΏ7/23 клетках. Результаты, полученные с 2-[2-(3-пентилоксифенил)этиламино]-Ы,№диметилацетамидгидрохлоридом, Ν\ν-3525, и 2-[2-(3-бутокси-2-фторфенил)этиламино]-Н,№диэтилацетамидом, характерными соединениями для химического класса по настоящему изобретению, в сравнении с эталонным ралфинамидом, приведены в табл. 4.
- 28 018195
Таблица 4
СОЕДИНЕНИЕ 1С&0 покоя (Кг) (мкМ) деполяриз. (мкМ) Κί
2-[2-(З-Пентилоксифенил)этиламино]- Ν,Ν-диметилацетамидгидрохлорид 2, 9 0,7 0,5
2- [2-(З-Бутокси-2фторфенил}этиламино]-Ν,Νдиметилацетамид 13 1,7 1
(3)-( + )-2-(4-(2- Фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (ралфинамид)* 149,0 15, 0 8,3
* В виде соли с метансульфоновой кислотой.
Данные, выраженные через значение Κ'\0 при мкМ-концентрации, а также через сродство в отношении инактивированного состояния (К1), демонстрируют, что два соединения по настоящему изобретению являются высокоэффективными и потенциалозависимыми блокаторами натриевых каналов.
Пример 15. Исследование ферментативной активности в отношении МАО-В ίη νίΙΐΌ.
Мембранный препарат (сырая митохондриальная фракция).
Самцов крыс \У151аг (Наг1аи, На1у. весящих 175-200 г) забивают при легкой анестезии, быстро извлекают головной мозг и гомогенизируют в 8 объемах охлажденного льдом 0,32 М сахарозного буфера, содержащего 0,1 М ЕИТА, рН 7,4. Сырой гомогенат центрифугируют при 2220 об/мин в течение 10 мин и извлекают супернатант. Осадок в пробирке после центрифугирования гомогенизируют и вновь центрифугируют. Два супернатанта объединяют и центрифугируют при 9250 об/мин в течение 10 мин при 4°С. Осадок в пробирке после центрифугирования ресуспендируют в свежем буфере и центрифугируют при 11250 об/мин в течение 10 мин при 4°С. Полученный осадок в пробирке после центрифугирования хранят при -80°С.
Исследование ферментативной активности ίη νίίΐΌ.
Ферментативную активность оценивают радиоферментативным исследованием, используя субстрат 14С-фенилэтиламин (РЕА), специфический для МАО-В.
Митохондриальный осадок в пробирке после центрифугирования (500 мкг белка) ресуспендируют в 0,1 М фосфатном буфере (рН 7,4). 200 мкл суспензии добавляют к 50 мкл раствора испытуемого соединения или буфера и инкубируют 30 мин при 37°С (преинкубация), затем добавляют субстрат (50 мкл). Инкубацию проводят в течение 10 мин при 37°С (14С-РЕА, 0,5 мкМ).
Взаимодействие прекращают добавлением 0,2 мл перхлорной кислоты. После центрифугирования дезаминированные метаболиты экстрагируют 3 мл толуола и измеряют радиоактивную органическую фазу, содержащую нейтральные и/или кислотные метаболиты, образующиеся в результате активности в отношении МАО-В, жидкостной сцинтилляционной спектрометрией с эффективностью 90%.
Активность в отношении МАО-В выражают через нмоли трансформированного субстрата/мг белка/мин.
Соединения, являющиеся характерными примерами всего химического класса по настоящему изобретению, не обнаруживают ингибирования МАО-В, при рассматриваемых концентрациях, как показано в табл. 5 через значения КА, (концентрацию соединения, способную ингибировать 50% ферментативной активности МАО-В).
На самом деле, ингибирование МАО-В считается значимым, когда значения КА, находятся в субмолекулярном диапазоне, таком как для стандартных сафинамида и ралфинамида.
- 29 018195
Таблица 5
Соединение МАО-В 1С50 мкМ
2-(2-(З-Бутоксифенил)этиламино]-Ν-метилацетамид 110
2-ί 2-(3-Бутоксифенил)этиламино]-Ν, Ν- диметилацетамидгидрохлорид 231
2-[2-(З-Бутокси-2,6-дифторфенил)этиламино]-ΝΓΝ- диметилацетамидгидрохлорид >300
2-ΐ 2-ί З-Бутокси-4-метоксифенил)этиламино]-Ν,Ν- диметилацетамид >300
2- [2-(3-Бутоксифенил)этиламино]-Ν,Ν- диметилпропанамидгидрохлорид >300
(3)-(+)-2-(4-(3- Фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (сафинаыид)* 0,1
(5)-(+)-2-(4-(2- Фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (ралфинамид)* 0, 2
* В виде соли с метансульфоновой кислотой.
Пример 16. Формалиновый тест.
Согласно модифицированному протоколу Ко§1апб с1 а1. (КоПапб ЕН., Т|о1зеп А., МаеЫе В., Но1е К. Ραίη (1990), 42: 235-242) мышам вводят подкожно (п.к.) 20 мкл 2,7% раствора формалина в подошвенную поверхность левой задней лапы и тотчас помещают в камеры для наблюдения из чистого ПВХ (23x12x13 см). Болевое поведение оценивают количественно, измеряя общее время облизывания инъецированной лапы. Измерения производят на ранней фазе (0-5 мин) и поздней фазе (20-40 мин) после формалиновой инъекции (Т|о1зеп А., Вегде О.С., Нипзкаат 8., КоПапб ЕН., Но1е К. Раш (1992), 51: 5-17).
Испытуемое соединение вводят группам из 10 мышей п.о. или п.к. за 5-45 мин до формалиновой инъекции в объеме 10 мл/кг веса тела на дозу. Контрольную группу обрабатывают растворителем.
Перорально и подкожно введенные соединения по изобретению могут быть признаны активными в данной экспериментальной модели.
Результаты, выраженные через значение ΕΌ50, полученные с одним соединением, введенным при 0,6-20 мг/кг п.о. и п.к., являющимся характерным для всего класса соединений по изобретению, и приведенные в табл. 6, демонстрируют, что данное соединение обладает хорошей аналгетической активностью.
Таблица 6
Соединение ΕΌ50 (мг/кг) п.о.
2- [2- (З-Бутоксифенил)этиламино]-Ν,Νдиметилацетамидгидрохлорид 14, 9
(3)-(+)-2-(4-(2- Фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (ралфинамид)* 29, 3
(5)-(+)-2-(4-(3- Фторбензилокси)бенэиламино)пропанамид (сафинамид)* 69,4
* В виде соли с метансульфоновой кислотой.
Пример 17. Модель невропатической боли с лигатурой спинального нерва.
Воздействия на невропатическую боль исследуют на модели лигатуры спинального нерва (8ΝΕ) (К1т 8.Н. апб СЬипд ЕМ. Раш (1992), 50: 355-363).
Животные: используют взрослых самцов крыс ΑίδΙηΓ. весящих 175-200 г. Всех животных размещают по группам из 8/10 в контролируемые камеры с температурой (22±0,5°С) и относительной влажностью (60-70%), при 12-часовом цикле свет/темнота (свет на период с 6:00 утра до 6:00 вечера) и обеспечивают свободный доступ к воде и стандартный рацион для грызунов.
Лекарственные средства: после измерения основного аллодинического порога испытуемые соединения растворяют в дистиллированной воде и вводят перорально при дозах 0,5-100 мг/кг в объеме
- 30 018195 мл/кг. Контрольных крыс обрабатывают растворителем.
Лигатура спинального нерва: невропатию вызывают по видоизмененной методике, описанной авторами К1т 8.Н. и С1шп§ ТМ. (Ρηίη (1992), 50: 355-363). Вкратце, животных анестезируют тиопенталом натрия, 35 мг/кг, и.п. (плюс дополнительная доза, если требуется) и после открытия спинного позвоночного столба от Ь4 до 82 обнаженные Ь5 и Ь6 спинальные нервы туго перевязывают шелковой хирургической нитью 4-0 и разрез закрывают. Перед исследованием крысам дают около 5-14 для восстановления после операции.
Механическая аллодиния: пороги механической аллодинии определяют по методу СНарБт е1 а1. (СНарБт 8.К., Вас1 Ρ.ν., Ροβίνΐ ΐν., Οιι.ιη§ ТМ. аиб Уаккй Т.Ь. 1. №иго8С1. Ме11юб. (1994), 53: 55-63). Крыс помещают в отдельные пластиковые боксы 24x10x15 см на сетчатое металлическое дно и дают акклиматизироваться примерно в течение 30 мин перед началом исследования. Определяют пороги отдергивания лапы для задних лап крыс в ответ на раздражение, вызываемое 8 калиброванными нитями фон Фрея (8^1ΐίη§, νοο6 Иа1е, 1Ь) с логарифмически возрастающей жесткостью в пределах от 0,41 до 15 г (4-150 мН). Каждую нить накладывают перпендикулярно к подошвенной поверхности лигированных лап крыс. Предел максимальной используемой жесткости составляет 15 г. Пороги отдергивания определяют, последовательно повышая и понижая раздражающее усилие (метод вверх-вниз), анализируют с помощью непараметрического критерия Диксона и выражают через средний порог отдергивания (Όίχοη ν. ί. Ат. 81а1. Акюс. (1965), 60: 967-978). Пороги механической аллодинии животных с имитацией операции и оперированных измеряют до начала (перед введением лекарственного средства) и на 15, 30, 60, 90, 120, 180, 240, 300, 360 и 420 мин после п.о. введения. 24-часовой порог также измеряют для обеих схем лечения. Испытание проводят между 9:00 утра и 6:00 вечера. Исследование представляет собой слепой эксперимент в отношении экспериментальных условий и условий лекарственной обработки.
Термическая гипералгезия: термическую гипералгезию оценивают, используя подошвенный тест (υ§ο ВаШе, Уагеке, Йа1у). Крыс помещают в клетки из оргстекла на прозрачный стеклянный лист. При стоящей относительно спокойно крысе источник теплового излучения, находящийся под стеклянным полом, направляют на подошвенную поверхность задней лапы и измеряют латентный период отдергивания. Перед оценкой термической гипералгезии интенсивность теплоты излучения приводят к величине, соответствующей начальному латентному периоду около 20 с, исходя из автоматически установленного предельного латентного периода в 30 с для не использовавшихся ранее в опытах крыс, чтобы избежать повреждения ткани.
Обнаружено, что перорально введенные характерные соединения по настоящему изобретению являются активными в приведенной экспериментальной модели.
Фиг. 1. Влияние 2-[2-(3-бутоксифенил)этиламино]-ЮЮдиметилацетамидгидрохлорида (Νν-3509), перорально вводимого при термической гипералгезии 8ИБ-крыс. ΕΌ50=10,58 мг/кг (6,7-16,6). Значения представлены средней величиной ± 8ЕМ для 10 животных на группу.
Пример 18. Модель хронической воспалительной боли, индуцированной полным адъювантом Фрейнда.
Моноартрит вызывают у крыс (весом 200 г) путем внутриподошвенной инъекции в левую заднюю лапу 100 мкл полного адъюванта Фрейнда (СРА, 81дта), содержащего убитые нагреванием и высушенные туберкулезные микобактерии МусοЬасΐе^^ит Ιιι^ΐΐοίοδίδ в смеси парафинового масла и эмульгирующего вещества, моноолеата маннида. В качестве контроля применяют не использовавшихся ранее в опытах крыс. Инъекция СРА приводит к образованию области ограниченного отека и воспаления, начиная с нескольких часов после введения, с постепенным сокращением порога механического отдергивания.
Дают возможность развития артрита у каждого животного за период 8-9 дней до начала испытания.
Механическая аллодиния: пороги механической аллодинии определяют по методу СНарк-т е1 а1. (Οιηρίπη 8.К., Вас1 Ρ.ν., Ροβίνΐ ΐν., Οιι.ιη§ ТМ. амб Уаккй Т.Ь. I. №иго8с1. Ме11юб. (1994), 53: 55-63). Крыс помещают в отдельные пластиковые боксы 24x10x15 см на сетчатое металлическое дно и дают акклиматизироваться примерно в течение 30 мин перед началом исследования. Определяют пороги отдергивания лапы для задних лап крыс в ответ на раздражение, вызываемое 8 калиброванными нитями фон Фрея (8^1ύη§, νοο6 Иа1е, 1Ь) с логарифмически возрастающей жесткостью в пределах от 0,41 до 15 г (4-150 мН). Каждую нить накладывают перпендикулярно к подошвенной поверхности лигированных лап крыс. Предел максимальной используемой жесткости составляет 15 г. Пороги отдергивания определяют, последовательно повышая и понижая раздражающее усилие (метод вверх-вниз), анализируют с помощью непараметрического критерия Диксона и выражают через средний порог отдергивания (Όίχοη ν. ί. Ат. 81а1. Акюс. (1965), 60: 967-978). Пороги механической аллодинии животных с имитацией операции и оперированных измеряют до начала (перед введением лекарственного средства) и на 15, 30, 60, 90, 120, 180, 240, 300, 360 и 420 мин после п.о. введения. 24-часовой порог также измеряют для обеих схем лечения. Испытание проводят между 9:00 утра и 6:00 вечера. Исследование представляет собой слепой эксперимент в отношении экспериментальных условий и условий лекарственной обработки.
- 31 018195
Обнаружено, что перорально введенные характерные соединения по настоящему изобретению являются активными в приведенной экспериментальной модели.
Пример 19. Модель вызванной уксусной кислотой висцеральной боли на мышах.
Висцеральная боль по-прежнему является одной из наиболее общих форм боли, требующих медицинской помощи. Несмотря на общепринятое представление, что висцеральная боль является вариантом соматической боли, висцеральная боль отличается неврологическими механизмами и путями передачи. Висцеральная боль характеризуется требующей рекомендации специалиста гипералгезией, а также не всегда связана с повреждением ткани.
Модель вызванной уксусной кислотой висцеральной боли широко используется в экспериментальном исследовании с целью вызвать сокращения в брюшной полости (КогЫег В. е1 а1,. Реб. Рго. (1959), 18: 412; Рбеке Ν. е! а1., Ь1Ре 8с1. (1997), 60: 625-634). Модель включает интраперитонеальную (и.п.) инъекцию раздражителя, вызывающего так называемый синдром корчей, который состоит из сокращений в брюшной полости, скручивания и поворачивания торса, выгибания спины и вытягивания задних конечностей.
Животные и методика: используют самцов СЭ1 мышей, весящих 25-33 г. Каждой подвергаемой обработке группе дают 30 мин для привыкания к лабораторным условиям в отдельных полипропиленовых прозрачных боксах. Висцеральную боль оценивают, подсчитывая число корчей в течение 10 мин после и.п. инъекции 0,6% уксусной кислоты (10 мл/кг веса тела). Определяют число корчей после введения уксусной кислоты. Подсчитывают как полное разгибание тела (полная корча), так и частичное разгибание с явным сокращением в брюшной полости (частичная корча).
Раздельным группам из 10 мышей в каждой вводят перорально растворитель (10 мл/кг) или различные дозы испытуемого соединения, растворенного в растворителе (10 мл/кг), за 5 мин до инъекции уксусной кислоты. Данные выражают через среднее число корчей за 10-минутный период наблюдения.
Установлено, что перорально введенные характерные соединения по настоящему изобретению активны в описанной экспериментальной модели для снижения числа корчей, вызванных уксусной кислотой.
Фиг. 2. Влияние 2-[2-(3-бутоксифенил)этиламино]-^№диметилацетамидгидрохлорида (Νν-3509), перорально вводимого при 20 мг/кг п.о., в исследовании вызванной уксусной кислотой висцеральной боли. ***р<0,01 ΐ-критерий против растворителя. Приведены средние значения ± 8ΕΜ для η=10 животных на группу; ***р<0,01 критерий Даннета.
Пример 20. Тест максимального электрошока (ΜΕ8) на мышах.
Тест максимального электрошока (ΜΕ8) используют обычно в скрининге противоэпилептических лекарственных средств в моделях на грызунах.
Животные и аппаратура: используют самцов СЭ1 мышей, весящих 25 г. Метод, описанный νΐιίΚ е! а1. (νΐιίΚ Η.8., \Vооб11еаб ΡΗ., Ргапкйп М.В., 8\\тпуагб Ε.Α., апб Vо1£ Η.Η. Апбербербс Эгид5 (1995), 4‘ь еб: 99-110, Вауеп Рге§8, Ь1б., Νον Уогк), представляет собой следующее. Электрошоковый генератор идо Вакбе (Мобе1 ЕСТ υΝΙΤ 7801) используют для подачи электрического стимула, достаточного, чтобы вызвать тоническую разгибательную реакцию задних конечностей по меньшей мере у 97% контрольных животных. Стимулы подаются внутрь уха через ушные электроды у мышей (0,7 с шока в 40 мА, с серией импульсов в 80 Гц, имеющих длительность импульса 0,4 мс). Исследуют острое воздействие соединений, вводимых интраперитонеально (и.п.), подкожно (п.к.), внутривенно (в.в.) или перорально (п.о.) за 5-120 мин до МЕ8-индукции, и сопоставляют с контрольной группой с растворителем. Оценивают десять мышей на группу. Полное подавление тонического компонента разгибающей мышцы задних конечностей, сопровождающего припадки, принимается за доказательство противосудорожной активности.
Соединения по изобретению вводят п.о. или в.в. при дозах 0,1-100 мг/кг.
Результаты, выраженные через значения ЕИ50, полученные с рядом соединений, являющихся характерными примерами всего класса соединений по изобретению, приведенные в табл. 7 и 8, свидетельствуют, что данные соединения являются активными в качестве противосудорожных лекарственных средств.
- 32 018195
Таблица 7
Соединение / % защиты 10 мг/кг, п. о. ЕО50 (мг/кг, п.о. )
2-[2-(З-Бутоксифенил)этиламино]-Ν,Ν- диметилацетамидгидрохлорид _ 4,3
2-[2-(З-Бутоксифенил)этиламино]-Ν- метилацетамидгидрохлорид 30 12,1
2-[2-(З-Бутокси-2,6- дифторфенил)этиламино]-Ν,Ν- ’ диметилацетамидгидрохлорид 100 2,0
2-[2-(З-Пентилоксифенил)этиламино]- Ν,Ν-диметиланетамидгидрохлорид 100 2,8
2 - [2 - (З-Бутоксифенил)этиламино]-Ν,Νдиметилпропанамидгидрохлорид 60 6,5
2-[2-(З-Гексилоксифенил)этиламино]- Ν, Ν-диметилацетамидгидрохлорид 100 4,6
Таблица 8
Соединение ЕО$о мг/кг, в . в .
2- [2- (З-Бутоксифенил) этиламино] -Ν, Ν- диметилацетамидгидрохлорид 0,2
(3)-(+)-2-(4-(2- Фторбензилокси)бензиламино)пропанамид (ралфинамид)* 2,7
(3)-(+)-2-(4-(3- Фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (сафинамид)* 4,0
* В виде соли с метансульфоновой кислотой.
Пример 21. Вызванная амфетамином и хлордиазепоксидом гиперлокомоция у мышей.
В данной модели мышей обрабатывают смесью б-амфетамин плюс анксиолитическая доза бензодиазепина, хлордиазепоксида (Яикйоп Κ., 81етЬегд Н. СотЬтеб ейес18 оГ сЫο^б^аζерοx^бе апб б-атрйе1атте оп асбуйу оГ га(5 ίη ап ипГатШаг епуйоптепР №11иге. 1966; 211: 1312-3; Κ. АгЬап, Ο. Мага1а, К. ВгаскепЬогоидй, Ь. ^туагб, А. ^1коп Ρ. Сеггагб, С. Ьагде,. Еуа1иа1юп оГ (Не еГГесй оГ 1ато!пдте, уа1ргоа1е апб сагЬанииерте т а гобей тобе1 оГ тайа Вейауюига1 Вгат Кекеагсй, 158: 123132). Модель заявлена как имитирующая некоторые аспекты мании в биполярном расстройстве. Важно, что гиперактивность, вызываемая смесью б-амфетамина и хлордиазепоксида, может быть предупреждена предварительным введением общепринятого нормотимика, лития, а также других лекарственных средств - стабилизаторов настроения (например, таких как вальпроат магния и карбамазепин). Таким образом, данная модель имеет прогностическую ценность и представляет собой модель биполярного расстройства и является ценным инструментом для определения, может ли испытуемое соединение являться потенциальным лекарственным средством-нормотимиком.
Амфетамин (АМР) (2,5 мг/кг) плюс хлордиазепоксидгидрохлорид (ί,ΌΖ) (3 мг/кг/и.п.) вводят самцам домовых мышей-альбиносов А1Ьто 8^155 (25-32 г) в объеме 10 мл/кг. Локомоторную активность регистрируют, используя систему ОрЮ-М3 (Со1итЬи8 Шкйитейз), представляющую собой многоканальный монитор контроля активности. Система Ор(о-М3 имеет 10 источников инфракрасного излучения и соответствующее количество приемников (расстояние между лучами 0,5), соединенных с персональным компьютером и учитывающих как амбулаторную активность, так и общий счет. Таким образом, система отличает раннюю локомоцию (способность передвигаться после операции) от движения стереотипного типа (общий счет). Мышей предварительно обрабатывают испытуемым соединением (0,5-20 мг/кг) и спустя 10 мин - АМР (2,5 мг/кг) или АМР совместно с ί,ΌΖ (3 мг/кг). Спустя последующие 30 мин мышей вновь обрабатывают той же самой дозой испытуемого соединения и помещают отдельно в камеры для определения моторной активности. Локомоторную активность (способность передвигаться после операции и общий счет активности) оценивают в течение 30 мин. Каждая группа состоит из 8-10 мышей.
- 33 018195
Статистический анализ: данные оценивают методом дисперсионного анализа (АNОVА), с последующим, когда это целесообразно, индивидуальным сопоставлением с контролем, используя критерий Даннета.
Результаты показывают, что введение амфетамина и амфетамин-хлордиазепоксида (ί'ΌΖ) вызывает существенное увеличение локомоторной активности.
Установлено, что перорально вводимые характерные соединения по настоящему изобретению являются активными в данной экспериментальной модели, снижающими вызванную амфетамином и амфетамин-хлордиазепоксидом гиперактивность.
Фиг. 3. Способность передвигаться после операции за период 30 мин:
a) хлордиазепоксид (3,0 мг/кг, и.п.);
b) 2-[2-(3-бутоксифенил)этиламино]-Ы,№диметилацетамидгидрохлорид (Νν-3509) (20,0 мг/кг, п.о.);
c) амфетамин (2,5 мг/кг, и.п.).
Амфетамин, сам по себе, и смесь амфетамин 4 хлордиазепоксид существенно повышают локомоторную активность **р<0,001 критерий Даннета против растворителя.
2-[2-(3-Бутоксифенил)этиламино]-Ы,№диметилацетамидгидрохлорид (Νν-3509) понижает гиперактивность, вызванную как самим амфетамином, так и смесью амфетамина и хлордиазепоксида статистически значимым образом ##р<0,001 критерий Даннета против амфетамина или амфетамина 4 хлордиазепоксида. Данные представлены как среднее значение ± 8ЕМ для п=10 мышей на группу).
Пример 22. Тест водного лабиринта Морриса (вызванная скополамином амнезия у крыс).
Способ регистрации антиамнестической активности соответствует способу, описанному Моррисом (Ъеагп. Мойт., 12, 239-260, 1981). Лабиринт Морриса состоит из круглого бассейна для воды (диаметр=150 см), наполненного водой и выдерживаемого при 26-28°С, имеющего спасательную платформу (диаметр=15 см) на расстоянии 18 см от периметра и всегда в одном и том же положении, на глубине 1,5 см от поверхности воды. Воду замутняют добавлением нетоксичного красящего вещества (например, сухого молока), делающего платформу невидимой.
С животными проводят 4 тренировочных сессии в течение 4 последовательных дней (день 1 - день 4). Каждая тренировочная сессия состоит из 4 испытаний в лабиринте Морриса, разделяющихся периодом в 1 мин. Для каждого испытания животное помещают в лабиринт в одну из четырех отправных точек, одинаково распределенных по окружности лабиринта, и позволяют найти спасательную платформу. Животное оставляют на спасательной платформе на 60 с, прежде чем возвращают обратно в клетку для содержания. Если животное не находит платформу за 120 с, экспериментатор извлекает данное животное из воды и помещает на платформу на 60 с, прежде чем переместить в клетку для содержания. Во время этих 4 испытаний животные начинают прохождение лабиринта один раз с каждой отправной точки в произвольно выбранной для животного последовательности.
Производят видеозапись испытаний и поведение животных анализируют, используя систему видеослежения (Рап1аЬ: 8МАКТ). За основной показатель берется латентный период спасения при каждом испытании. Дополнительными критериями являются скорость плавания и пройденное расстояние.
Обработанные скополамином животные (0,5 мг/кг, и т.п., вводимым за 30 мин до каждой сессии) проявляют амнезию в данном исследовании, на что указывает неспособность к снижению латентных периодов спасения от испытания к испытанию и от сессии к сессии. Пробный тест выполняют на день 5. Платформу удаляют из лабиринта и животному позволяют свободно плавать в лабиринте в течение 60 с. За основной показатель берут время, проведенное в заданном секторе (т.е. секторе, ранее содержащем платформу), которое сравнивают с временем, проведенным в других секторах, и с учетом случайной ожидаемой величины (т.е. 25% от длительности пробного теста). Изучают двенадцать обработанных скополамином крыс на группу. Эксперимент также включает нормальную контрольную группу, получающую физиологический раствор вместо скополамина. Испытуемое вещество оценивают при 3 дозах, вводимых п.о. за 5-60 мин перед каждой тренировочной сессией и перед пробным испытанием, т.е. за 30 мин до скополамина, и сравнивают с контрольной группой, получающей растворитель. Таким образом, эксперимент включает 5 групп.
Данные анализируют, сопоставляя группы, обработанные скополамином, и контрольные, используя непарный критерий Стьюдента.
Установлено, что перорально введенные характерные соединения по настоящему изобретению являются активными в данной экспериментальной модели.
Пример 23. Модель исследования когнитивности - тест на распознавание нового объекта.
Тест на распознавание объекта состоит из испытания на выбор по образцу и испытания на выбор, разделенных интервалом между пробами (ΙΤΙ). В испытании на выбор по образцу присутствует два идентичных объекта. В испытании на выбор один из объектов, присутствовавших в испытании на выбор по образцу (называемых знакомые объекты), заменяют новым объектом. Крысы обладают способностью различать между знакомым объектом и новым объектом, когда ΙΤΙ составляет 1 ч или меньше, но не при ΙΤΙ 24 ч (ИексЕаих О., е! а1., 1997, №иго8сг Ьей. 222, 159-162; Еппасеиг А., е! а1., 1989. ЕеНат. Βηίη Кек. 33, 197-207; Рита С., Βίζοΐ ЕС., 1998, №иго8сг ЬеН. 248, 183-186). Таким образом, задача на распознава
- 34 018195 ние объекта с 1Т1 в 1 ч позволяет выявить амнестическое действие лекарственного средства и выяснить, будет ли указанное амнестическое действие снижаться под действием другого лекарственного средства. Тест на распознавание объекта с 1Т1 в 24 ч позволяет определить вызванное лекарственным средством улучшение памяти. Были проведены многочисленные исследования с целью оценки влияния лекарственных средств на память. Например, прошлые исследования показали, что никотин улучшает память в условиях 24-часового 1Т1 и снижает вызванную скополамином амнезию в условиях 1-часового 1Т1.
Методики: задачу на распознавание объекта выполняют, как описано в Βίζοΐ ТС., е1 а1., 2005, Ргод. №игор8усйорйагтасо1. Βίο1. РкусЫаРу. 29:928-935.
Субъекты: берут не использовавшихся ранее в опытах самцов крыс ХУМаг возрастом 8-недель.
Аппаратура: аппаратура для задачи на распознавание объекта представляет собой открытый бокс, изготовленный из серого непрозрачного плексигласа (40x40x40 см). Различаемые объекты (длина 3,5 см, высота 6, см) отличаются как по цвету, так и по форме. Объектами являются белая дверная кнопка круглой формы и серая дверная кнопка в форме звезды. Очевидно, данные объекты не имеют никакой естественной значимости для крыс и никогда не связывались с подкреплением. Для исключения возможности малейшего запаха, оставшегося на объектах, и, таким образом, зависимости способности распознавания крыс от сигнала органов обоняния объекты и дно коробки моют чистой водой и сушат между каждым испытанием. Видеокамеру устанавливают на потолке над коробкой, чтобы следить за активностью животных.
Эксперименты занимают 2 дня (вызванная скополамином амнезия) или 3 дня (естественное забывание). Исследование состоит из 15-минутного испытания на привыкание (день 1), 3-минутного испытания на выбор по образцу (день 2) и 3-минутного испытания на выбор (день 2 или день 3).
Эксперимент с вызванной скополамином амнезией.
Данный эксперимент проводят на крысах, произвольно подразделенных на различные группы (п=12/группа), получавших:
контрольная группа: одну интраперитонеальную (1Р) инъекцию физиологического раствора за 30 мин до испытания (испытание на выбор по образцу), одну пероральную (РО) инъекцию за 15 мин до испытания;
группа с обработкой скополамином: одну 1Р инъекцию скополамина (0,1 мг/кг) за 30 мин до испытания и одну РО инъекцию физиологического раствора за 15 мин до испытания (испытание на выбор по образцу);
группа с обработкой скополамин + никотин: одну 1Р инъекцию скополамина (0,1 мг/кг) за 30 мин до испытания и одну 1Р инъекцию никотина (0,4 мг/кг) за 20 мин до испытания (испытание на выбор по образцу);
группы с обработкой скополамин + характерные испытуемые соединения: одну 1Р инъекцию скополамина (0,1 мг/кг) за 30 мин до испытания (испытание на выбор по образцу) и одну РО инъекцию различных доз испытуемого соединения за 15 мин до испытания (испытание на выбор по образцу).
На день 1. Крысе позволяют изучать аппарат в течение 15 мин (испытание на привыкание). На день 2 крысу помещают в аппарат с двумя идентичными объектами, представленными в двух углах коробки, на 3 мин (испытание на выбор по образцу). Спустя 1 ч крысу помещают в аппарат с двумя объектами; один из объектов, представленный в испытании на выбор по образцу (называемых знакомые объекты), заменен новым объектом. (Испытание на выбор).
Эксперимент на естественное забывание.
Данный эксперимент проводят на крысах, произвольно подразделенных на различные группы (п=12/группа), получавших:
контрольная группа: 1 интраперитонеальную (1Р) инъекцию физиологического раствора за 20 мин до испытания и 1 пероральную (РО) инъекцию физиологического раствора за 15 мин до испытания;
группа с обработкой никотином: 1 1Р инъекцию никотина (0,2 мг/кг) за 20 мин до испытания и 1 РО инъекцию физиологического раствора за 15 мин до испытания;
группа с обработкой характерным испытуемым соединением: 1 1Р инъекцию физиологического раствора за 20 мин до испытания и 1 РО инъекцию испытуемого соединения в различных дозах за 15 мин до испытания.
На день 1. Крысе позволяют изучать аппарат в течение 15 мин (испытание на привыкание). На день 2 крысу помещают в аппарат с двумя идентичными объектами, представленными в двух углах коробки, на 3 мин (испытание на выбор по образцу). Спустя 24 ч (день 3) крысу помещают в аппарат с двумя объектами; один из объектов, представленный в испытании на выбор по образцу (называемых знакомые объекты), заменен новым объектом.
- 35 018195
Данные: основным показателем является время, проведенное крысами в изучении объектов при испытании на выбор по образцу и при испытании на выбор. Показатели задачи на распознавание объекта включают следующие параметры:
общее время изучения в испытании на выбор по образцу;
общее время изучения в испытании на выбор;
разница во времени изучения между новым объектом и знакомым объектом в испытании на выбор (Ν-Е);
индекс различения, равный 100χ(Ν-Ε), деленное на общее время изучения в испытании на выбор.
Данные анализируют с помощью АNОVА и критерия Стьюдента.
Установлено, что перорально вводимые характерные соединения по настоящему изобретению являются активными в данной экспериментальной модели, ослабляя вызванную скополамином амнезию в задаче на распознавание объекта с 1-часовым интервалом между пробами (ΙΤΙ 1 ч) и улучшая память в ситуации естественного забывания, т.е. в задаче на распознавание объекта с 24-часовым интервалом между пробами (ΙΤΙ 24 ч).
Пример 24. Испытание на депрессию: тест подвешивания за хвост на мышах.
Тест подвешивания за хвост является одной из так называемых моделей поведенческого отчаяния и используется для скрининга антидепрессорных лекарственных средств. Указанные модели основаны на общем явлении: нормальное животное, попавшее в неразрешимую, вызывающую отвращение ситуацию, поочередно находится в состоянии возбуждения и неподвижности. Причиной возбуждения является поиск, требующий высоких затрат энергии, тогда как цель неподвижности состоит в сохранении энергии. Животные после антидепрессорной обработки борются еще больше в отчаянной ситуации и меньше проводят времени в неподвижности. Некоторые аспекты невротической депрессии могут быть изучены при помощи таких моделей.
Приведенный метод обнаруживает антидепрессорную и анксиолитическую активность и соответствует методу, описанному в 81еш е1 а1. (Р8усйорйагтасо1о§у, 85, 367-370, 1985). Грызуны, подвешенные за хвост, быстро становятся неподвижными. Антидепрессанты снижают длительность неподвижности, тогда как транквилизирующие средства увеличивают длительность неподвижности. Поведение животного регистрируют в течение 6 мин автоматически, используя компьютеризированное устройство (ИетаБс-Т8Т), разработанное 8!ет е1 а1. (Ргод. №игор8усйорйагтасо1. Ехр. РкусЫайу, 11, 659-671, 1987). Изучают одновременно 6 мышей. Регистрируют два параметра:
длительность неподвижности: данный параметр аналогичен параметру, используемому в тесте на поведенческое отчаяние (Агсй. Ιπΐ. Рйагтасоауп. ТНег.. 229, 327-336, 1977);
силу движений: данный параметр, основанный на энергии, израсходованной животным, независим от продолжительности движения.
Изучают 10 мышей за группу. Выполняется не слепой тест, но случайная схема, создаваемая Иета11с-Т8Т, гарантирует однородное распределение обработок как во времени, так и в положении каждого животного в аппарате. Испытуемое вещество оценивают в 3 дозах, вводимых п.о. за 5-60 мин до испытания, и сопоставляют с контрольной группой, обрабатываемой растворителем. Имипрамин (128 мг/кг, п.о.) и диазепам (8 мг/кг, п.о.), введенные в тех же экспериментальных условиях, используют в качестве эталонных веществ.
Таким образом, эксперимент включает 6 групп. Данные анализируют, сопоставляя обработанные группы и контроль с растворителем, используя непарный критерий Стьюдента.
Установлено, что перорально введенные характерные соединения по настоящему изобретению являются активными в данной экспериментальной модели.
Пример 25. Метод исследования когнитивных нарушений при шизофрении.
Когнитивные нарушения часто связаны с шизофренией и признаны в качестве основного элемента расстройства, имеющего отношение к восстановлению пациента и реинтеграции в общество. Особый интерес в последнее время вызывает фармакологическая модель когнитивных нарушений при шизофрении, основанная на действиях антагонистов рецепторов глутамат^МЭА, таких как фенциклидин (РСР) и кетамин (ίηνίΙΙ е1 а1., Ат. ί. РкусЫайу, 1991 Ос!., 148(10), 1301-1308)), которые ослабляют внимание и усиливают импульсивность и компульсивную персеверацию у мышей, выполняющих комплексную задачу (Сгесо е! а1., Р8усйорйагтасо1оду (Вег1), 2005 Арг., 179(1), 68-76)).
Материалы и методики.
Животные: используют самцов мышей линии ΩΒΛ/2Ν (Сйаг1е8 В1уег, Иа1у). Мышей, весящих 25-30 г к началу экспериментов, содержат в условиях с контролируемой температурой (21°С) при цикле 12 ч свет, 12 ч темнота (свет на период 7:00 утра-7:00 вечера). Доступ к корму (В1ерег, Иа1у) неограниченный. Животные имеют 2-часовой доступ к воде в конце каждого дня тестирования.
Аппарат для решения задачи на время реакции с пятью выборами: аппарат для испытания состоит из четырех камер 21,6x17,8x12,7 см (Меа А88ос1а!е8 Шс. И8А), как описано ранее [Сгесо е! а1., Р8усйорйагтасо1о§у (Вег1), 2005 Арг., 179(1), 68-76)]. Стимулы и регистрация ответов управляются пакетом программ 8тайС!г1™ Раскаде 8 Ιη/16 Ои! (Меа А88ос1а!е8 !пс. И8А) с дополнительным согласовани
- 36 018195 ем МЕЭ-РС для \Утбо\\'з (Меб Аззоаа1ез Шс. И8А). Управляющая программа для 5-С8ЯТ-задачи записана по заказу.
Поведенческие процедуры: привыкание к жидкому подкрепляющему стимулу и тыканию носом в отверстия. За мышами ухаживают в течение недели и регистрируют вес тела. Затем мышей лишают воды, позволяя 2-часовой доступ к воде ранним вечером до стабилизации веса тела (8 дней). Затем в течение следующих двух дней мышей приучают в клетке для содержания к подкрепляющему стимулу (10% раствор сахарозы), используемому затем в оперантных процедурах. В течение следующих двух дней мышей приучают к оперантным боксам. На данной стадии 10% раствор сахарозы помещают в небольшую миску, размещаемую под приемным отверстием бокса. Сначала мышей учат, что каждые 5 с жидкая награда доступна в небольшой миске в приемном отверстии. Во время данного периода регистрируют головные входные данные. Во время следующего периода мышей учат тыкать носами в освещенные отверстия. Сразу же после тыкания в сосуд с водой включают светодиод ЬЕЭ позади одного из отверстий. Тыкание носом в освещенное отверстие гасит световой стимул, и дозатор жидкости обеспечивает 0,01 мл жидкой награды в приемном отверстии. Любая реакция на одно из других четырех отверстий не является значимой и не регистрируется. Световой стимул появляется во всех пяти отверстиях в произвольной последовательности. Мышь подключают к 5-С8ЯТ-задаче по меньшей мере после 50 награжденных испытаний по тыканию носом в течение одной 30-минутной сессии.
Задача на время реакции с пятью выборами. Начало сессии сигнализируется освещением камеры и отпуском 0,01 мл жидкой награды. С тыкания носом в приемное отверстие начинается первое испытание. После фиксированной задержки (интервала между пробами, ΠΊ) ИЕЭ позади одного из отверстий появляется на короткий период. За время полной сессии ЬЕО-стимул появляется одинаковое число раз в каждом отверстии, с порядком подачи, рандомизированным компьютером. В то время как идет свет и в течение короткого периода впоследствии (ограниченное ожидание), реакции на отверстие, которое было освещено (правильный ответ), приводят к жидкой награде. Реакции на отверстия, которые не были освещены (неправильные ответы), или неспособность ответить в пределах ограниченного ожидания (пропуски) являются причиной для выключения освещения камеры на короткий период (короткий перерыв). Реакции на отверстия, в то время как освещение камеры было выключено, возобновляют короткий перерыв. После отпуска жидкой награды или в конце короткого перерыва мышь начинает следующее испытание, тыкая носом в приемное отверстие. Реакции на отверстия, произведенные после правильного ответа (персеверативные ответы) или по окончанию короткого перерыва перед тыканием носа в приемное отверстие, приводят к периоду короткого перерыва. Реакции на отверстия во время ΠΊ (предвосхищающие ответы) также приводят к периоду короткого перерыва. После предвосхищающих ответов, тыкания носом в приемное отверстие, перезапускают текущее испытание. Ежедневная сессия состоит из 100 испытаний или 30 мин тестирования, что бы ни закончилось скорее, после чего все освещение выключают и дальнейшие реакции не имеют никакого значения. Во время первой сессии по графику испытаний и стимул, и ограниченное ожидание длятся по 1 мин и, в зависимости от индивидуального исполнения, постепенно уменьшаются до 1 с. Продолжительность стимула снижается в следующей последовательности: 60, 30, 10, 5, 2,5, 2, 1,5 и 1 с (исходный уровень). Как ΠΊ, так и короткий перерыв длятся 2 с во время первой сессии, и ΠΊ увеличивают до 5 с в последующих сессиях; короткий перерыв не изменяют. Везде полный период обучения и экспериментов для каждой мыши составляет одну сессию в день на 5-С8ЯТзадачу.
Лекарственные средства и схемы лечения. Испытуемое соединение растворяют в воде и вводят интраперитонеально (и.п.) в дозе 10 мг/кг. Спустя 5 мин после обработки мышам впрыскивают растворитель (физиологический раствор) или РСР (1,5 мг/кг) и через 10 мин начинают тестирование. В каждом эксперименте вводят различную комбинацию испытуемого соединения с растворителем или РСР, согласно плану опыта по схеме латинского квадрата. По меньшей мере 48 ч оставляют между днями тестирования лекарственных средств. На протяжении промежуточных дней мышей тестируют на 8-С8ЯТзадачу для восстановления исходной работоспособности и проверяют на любые остаточные эффекты лекарственных средств.
Статистический анализ: основными зависимыми переменными, отбираемыми для анализа, являются:
(a) процент правильных ответов (суммарные правильные ответы/суммарные правильные + суммарные неправильные ответы х 100);
(b) процент пропусков (суммарные пропуски/суммарные правильные ответы + суммарные неправильные ответы + суммарные пропуски х 100);
(c) число предвосхищающих ответов на отверстия во время ΠΊ;
(б) число персеверативных ответов на отверстия после правильного ответа. Правильные ответы и пропуски, в процентах, преобразуют по формуле 2атсзт(8рЯТ (%Х/100)), для нормализации распределений согласно модели АЫОУА (Утет, 1971).
Влияния испытуемого соединения (п=12) на вызванные РСР нарушения в выполнении 5-С8ЯТзадачи независимо анализируют методом АNОУА 2х2 с факторами: лекарственное средство (испытуемое соединение) и РСР. Впоследствии средние значения для обработанной группы сопоставляют, ис
- 37 018195 пользуя критерий Тьюки-Крамера роЧ-Нос. Работу со статистическим программным обеспечением (8А8 [и8111и1е Ичс., И8А) выполняют с помощью микрокомпьютера М1сго УАХ 3500 (Όίβίΐηΐ, И8А).
РСР оказывает сильное действие на способность внимательного исполнения мышами линии ЭВА/2К, увеличивая предвосхищающие и персеверативные ответы.
Характерные соединения по настоящему изобретению, вводимые при 10 мг/кг, и.п., реверсируют вызванное РСР увеличение предвосхищающих и персеверативных ответов, что служит доказательством возможного применения указанного типа соединений для лечения психических расстройств.
Пример 26. Преимпульсное ингибирование реакции испуга у мышей и крыс.
Преимпульсное ингибирование (РРР является межвидовым феноменом (т.е. присутствует у млекопитающих от мышей до людей), но все же отсутствует, в целом, у пациентов с шизофренией. Предполагается, что пониженная способность отфильтровывать из нерелевантного слухового раздражения способствует некоторым проявлениям состояний, включающих невнимание, рассеянность и когнитивные расстройства. Процедуру РРI используют для оценки способности субъекта к воротам или фильтрации окружающей информации. В модели (акустическая реакция испуга) сенсомоторной фильтрации слабый акустический стимул (преимпульс) уменьшает рефлекторный ответ вздрагивания (реакция испуга), вызываемый вторым, более интенсивным, стимулом (импульс). Лекарственные средства, подобные дизоцилпину (МК-801) или амфетамину, нарушают РРЬ позволяя создавать модель шизофрении на животных. Антипсихотические лекарственные средства обладают способностью предупреждать дефицит РРТ Тест весьма полезен для скрининга потенциальных антипсихотических лекарственных средств.
Подобным образом, некоторые штаммы мышей, таких как ЭВА/Р обнаруживают спонтанное нарушение РРЬ которое может быть реверсировано антипсихотическими лекарственными средствами, и также применяются в качестве модели шизофрении на животных.
РРI у крысы: используют крыс линии ^У181аг или 8ргадие Оа\\'1еу (весящих 200-300 г) или мышей линии ЭВА/2.1 возрастом 3-недели. Аппарат (8аи О|едо ИгЛгитепК СА) для изучения реакции испуга состоит из 12 пластиковых прозрачных клеток, помещенных по отдельности в звуконепроницаемые камеры, оборудованные движущимся дном-платформой, соединенным с датчиком, регистрирующим вертикальные движения платформы. Реакцию испуга вызывают акустическими стимулами, подаваемыми громкоговорителем, подвешенным над клетками и соединенным с акустическим генератором. Переходная сила, возникающая вследствие движений платформы, вызванных реакцией испуга, регистрируется ПС компьютером с окном регистрации в 200 мс, измеряемым от момента появления акустического стимула, оцифровывается и хранится в компьютере для дальнейшей оценки. Амплитуду реакции испуга измеряют на протяжении всего окна регистрации (200 мс) и для дальнейшей оценки берут среднюю величину амплитуды. Контрольных и обработанных крыс помещают по отдельности в клетки для испытания. После 5 мин привыкания (фоновый белый шум, 65 дБ) используют два типа акустических стимулов в произвольном порядке: только акустический стимул [120 дБ, 40 мс, (Р)] или стимул, подаваемый с преимпульсом [75 дБ, 20 мс (РР)], применяемым за 100 мс до стимула. Во время каждой экспериментальной сессии 20 испытаний каждого типа проводят с интервалом между стимулами 20 с. Амплитуды усредняют для каждого отдельного животного раздельно для обоих типов испытаний (только стимул или стимул с предшествующим преимпульсом). Процент РРI рассчитывают по следующей формуле:
100 - [(средняя амплитуда реакции испуга для испытаний преимпульс + импульс/средняя амплитуда реакции испуга для испытаний только с импульсом) х 100], т.е. 100 - (РР/Р) х 100.
Высокое значение рассчитанного процента РРI указывает на то, что преимпульс ингибирует реакцию на стимул импульса, тогда как низкое значение указывает на более слабое ингибирование преимпульсом. Дефициты сенсомоторной фильтрации вызывают МК-801 (0,2 мг/кг), вводимым и.п. за 5 мин до испытания или амфетамином (2,5 мг/кг), вводимым п.к. за 10 мин до испытания. Установлено, что перорально вводимые характерные соединения по настоящему изобретению являются активными в данной экспериментальной модели, реверсируя дефицит РРЬ вызванный МК-801 (фиг. 4) или амфетамином.
РРI у мышей ЭВА: используют самцов мышей ОВА/21 и С57ВЬ/61 возрастом 3 недели.
Регистрацию акустической реакции испуга и РРI выполняют, как описано в Вог1о1аЮ е1 а1., РкусйорЬагтасо1о§у, 2007, Ос1; 194(3):361-9.
В каждом эксперименте мышам назначают введение либо соединений по изобретению, либо растворителя и тестируют в РРРсессии, используя межсубъектный план.
Процент РРI рассчитывают по следующей формуле:
100 - [(средняя амплитуда реакции испуга для испытаний преимпульс + импульс/средняя амплитуда реакции испуга для испытаний только с импульсом) х 100], т.е. 100 - (РР/Р) х 100.
Магнитуду акустической реакции испуга рассчитывают как среднюю реакцию на все испытания только с импульсом, исключая первый и последний блоки из пяти представленных испытаний только с импульсом.
Установлено, что перорально введенные характерные соединения по настоящему изобретению являются активными в данной экспериментальной модели ослабления дефицита РРI ВЭА/2 ί мышей.
- 38 018195
Фиг. 4. Влияние 2-[2-(3-бутоксифенил)этиламино]-Ы,М-диметилацетамидгидрохлорида (Νν-3509) на МК-801-РР1 нарушение у крыс. Данные выражают через среднее значение ± 8ЕМ для п=10 животных. р<0,01 указывает на статистически значимое отличие от растворителя и МК-801. *р<0,05, **р<0,01 указывают на статистически значимые отличия для животных, обработанных растворителем 4 МК-801, и животных, обработанных 2-[2-(3-бутоксифенил)этиламино]-^№диметилацетамидгидрохлоридом (Νν3509). Анализ отклонения осуществляют согласно критерию Даннета.
Пример 27. Депривация парадоксального сна у крыс.
Психопатологические и нейробиологические взаимосвязи между сном и психотическим явлением подтверждаются рядом классических клинических наблюдений и отчетов по психологии. Больные шизофренией страдают тяжелой асомнией, вместе с рядом структурных изменений архитектуры сна, таких как сокращение латентного периода и длительности КЕМ сна, а также сокращение времени δνδ (медленноволнового сна). Многочисленные исследования доказывают, что депривация пролонгированного сна, безусловно, ведет к ряду переходных психологических нарушений, включающих такие как нарушенные словесные конструкции, дезорганизованное мышление, деперсонализация и перцептивные изменения в диапазоне от незначительных нарушений и аномальных телесных ощущений до комплексных слуховых и зрительных галлюцинаций. Как правило, такие нарушения неотличимы от психотического явления, но обычно гасятся после продолжительного восстанавливающего сна. Некоторыми исследованиями документально подтверждается, что после периода принудительной депривации сна крысы характеризуются, в течение ограниченного отрезка времени, парадоксальным множеством поведенческих изменений, таких как стереотипное поведение и гиперактивность. Кроме того, депривация сна у крыс усиливает реакцию испуга и нарушает РР1, такой эффект является зависимым от времени и реверсируемым антипсихотическими средствами (Секка, С.Ь. е1 а1. (1995), Еигореап №игоркусйорйагтасо1оду, 5, 89-93). Такие явления обычно истолковываются, как имеющие отношение к психозу, поскольку также, как правило, вызываются психотомиметическими средствами у крыс. Модель депривации сна у крыс может рассматриваться как модель маниакального синдрома.
Животные: используют крыс линии 8ргадие Эа\\!еу (весящих от 200 до 300 г).
Методики: методика индуцирования депривации парадоксального сна (8Ό) у крыс основана на методе платформ (видоизмененная 1оиуе1, е1 а1. (1964), 1оигпа1 о£ Рйуйо1оду (Рапк), 56, 381). Крыс содержат на небольшой платформе из плексигласа (7 см в диаметре) в глубоком резервуаре, заполненном водой. Каждая платформа окружена водой, находящейся на 1 см ниже поверхности. Шарики еды и бутылки с водой расположены на сетке вверху резервуара. На протяжении всего исследования 8Ό температуру экспериментальной комнаты и воды внутри резервуара поддерживают при 23±1°С. Контрольных крыс размещают в экспериментальной комнате, либо в клетках для содержания, либо в резервуарах с водой, эквивалентных используемым для 8Ό, но с платформой диаметром 12 см, что позволяет крысам достигать КЕМ сна, не падая в воду. По окончании 8Ό периода (72 ч), крыс моментально высушивают и помещают либо в камеру для исследования реакции испуга (для измерения методом РР1), либо в обеспечивающие активность клетки (гиперактивность) для поведенческого тестирования. Воду в резервуаре меняют ежедневно в течение всего 8Ό периода. Контрольных крыс содержат в той же самой комнате, что и крыс с дефицитом сна в течение 8Ό. Тестируемые соединения дают перед РР1 или поведенческим тестированием.
Данные анализа: для каждого животного средние амплитуды реакции испуга для первого и второй половины второго периода сессии (блоки, каждый по шесть испытаний только с импульсом) анализируют двухфакторным или трехфакторным дисперсионным анализом (АNОVА), с предварительной обработкой (когда присутствует) и обработкой в качестве межсубъектных факторов и блоками в качестве повторяющихся показателей. Процент РР1 рассчитывают по следующей формуле:
100 - [(средняя амплитуда реакции испуга для испытаний преимпульс 4 импульс/средняя амплитуда реакции испуга для испытаний только с импульсом) х 100], т.е. 100 - (РР/Р) х 100, и анализируют многофакторными АNОVА (со специфическим планом и сравнениями, указанными ниже для каждого эксперимента) с различными комбинациями инъекций для предварительной обработки и обработки в качестве межсубъектных факторов и типами испытаний в качестве повторяющихся показателей. Рой-йос анализы осуществляют, используя критерий Тьюки.
Данные по локомоторной активности анализируют, используя одно- или двухфакторный дисперсионный анализ (АNОVА) для повторяющихся показателей, когда целесообразно, с последующими роййос анализами с использованием критерия Тьюки.
Установлено, что перорально, внутрибрюшинно или подкожно введенные характерные соединения по настоящему изобретению являются активными в данной экспериментальной модели ослабления дефицита РР1 и гиперактивности, вызванных депривацией сна.
Пример 28. Тест на модели вызванной кокаином поведенческой сенсибилизации.
Наркотическая зависимость является патологическим поведением, характеризуемым навязчивым поиском и потреблением препарата. Одной из моделей таких поведенческих изменений на животных является длительное увеличение локомоторной активности, вызываемое повторным введением психостимулирующих средств у грызунов (КоЬткоп Т.Е. апб Вегпбде К.С. Вгат Кек. Вгат Кек. Кеу. (1993), 18,
- 39 018195
247-91), известное как вызванная наркотиками поведенческая сенсибилизация. Действие испытуемых соединений оценивают на модели вызванной кокаином поведенческой сенсибилизации у крыс.
Аппаратура для оценки локомоторной активности: используют самцов крыс \У1к1аг, весящих при поступлении 200-250 г. Локомоторную активность оценивают в шестнадцати идентичных висящих клетках из металлической проволоки, каждая размером 36 см (длина)х25 см (ширина)х20 см (высота). Каждая клетка содержит два набора фотоэлементов датчика инфракрасного излучения, помещенных вдоль продольной оси на 1 см выше решетчатого пола и на расстоянии 8 см от передней и задней стенок клетки. Фоновый шум обеспечивается генератором белого шума. Движение в пределах клеток приводит к прерыванию луча фотоэлемента, которое автоматически регистрируется ГВМ-совместимым компьютером.
Процедура сенсибилизации и обработка: животных приучают к камере локомоторной активности в течение 2-3 последовательных дней перед экспериментом. Крысы получают 5 ежедневных и.п. инъекций кокаина (15 мг/кг), или физиологического раствора и/или испытуемого соединения (0,1-100 мг/кг), или растворителя, и локомоторную активность регистрируют в течение 3 ч. Спустя десять дней после последней инъекции кокаина или физиологического раствора (день 15), животным вводят провокационную пробу кокаина, 15 мг/кг, в отсутствие испытуемого соединения и вновь регистрируют локомоторную активность в течение 3 ч.
К пятому дню обработки кокаином животные, предварительно обработанные и.п. растворителем, проявляют повышенную локомоторную реакцию (на 20% выше, чем в первый день, р<0,05). Спустя десять дней после последней инъекции кокаина или физиологического раствора, животным вводят провокационную пробу кокаина 15 мг/кг в отсутствие испытуемого соединения и вновь осуществляют мониторинг локомоторной активности в течение 3 ч. Ожидается, что крысы, предварительно обработанные кокаином и не получавшие испытуемого соединения, должны проявлять повышенную реакцию локомоторной активности на кокаин (на 30% выше, чем в первый день, р<0,05). Если крысы, предварительно обработанные испытуемым соединением в течение 5-дневной обработки кокаином, не характеризуются возрастанием локомоторной активности, считается, что испытуемое соединение оказывает предупреждающее действие на зависимость от психостимулирующих средств. (КооЬ С.Е., 8аппа Р.Р., В1оот Е.Е. №игои (1998), 21: 467-476; ВоЫикои Т.Е., Ветйде К.С. Вгат Век Вгат Век Веу (1993), 18: 247-291).
Статистический анализ: данные (общее число прерываний луча за 3 ч) анализируют, используя двухфакторный АЯОУА с повторяющимися показателями по одному фактору, включающему четыре экспериментальные группы (т.е. физиологический раствор/растворитель, физиологический раствор/испытуемое соединение, кокаин/растворитель и кокаин/испытуемое соединение) и две временные точки (день 1 и день 5), с последующим анализом простых эффектов. Второй двухфакторный АЫОУА с повторяющимися показателями по одному фактору используют для сопоставления дня 1 и дня провокационной пробы согласно критерию Ньюмана-Кейлса рок1-1юс.
Установлено, что перорально вводимые характерные соединения по настоящему изобретению являются активными в данной экспериментальной модели.
Пример 29. Острое раздражение мочевого пузыря под действием уксусной кислоты у крыс.
Эксперименты выполняют, используя взрослых анестезированных самок крыс 8ргадие Эа\\'1еу (170200 г). Катетер (РЕ-50) вводят посредством срединного абдоминального разреза в мочевой пузырь через купол пузыря и затем измеряют интравезикальное давление для мониторинга активности мочевого пузыря при непрерывной инфузии 0,15% уксусной кислоты. Непрерывная интравезикальная инфузия уксусной кислоты раздражает мочевой пузырь и сокращает интервалы интерконтракции (ЮТ) у анестезированных крыс. Ю, максимальное давление при сокращении и пороги давления, включая рефлекторное сокращение мочевого пузыря, измеряют до и после интравезикальной инфузии уксусной кислоты у крыс, обработанных соединениями по изобретению.
Установлено, что внутрибрюшинно или внутривенно вводимые характерные соединения по настоящему изобретению являются активными в описанной экспериментальной модели.
Пример 30. Промежуточное раздражение мочевого пузыря под действием циклофосфамида ^ΥΡ) у крыс.
Эксперименты выполняют, используя взрослых как бодрствующих, так и анестезированных самок крыс 8ргадие Эа\\'1еу (170-200 г). Химический цистит вызывают СΥΡ, который превращается в процессе обмена веществ в акролеин, раздражитель, выводимый с мочой. СΥΡ (150 мг/кг/и.п.) вводят за один день до эксперимента. Предварительная обработка с помощью СТР вызывает раздражение мочевого пузыря и очень частые мочеиспускания с Ю порядка 150-200 с между мочеиспусканиями.
Внутрибрюшинно или внутривенно вводимые характерные соединения по настоящему изобретению увеличивают Ю! как у бодрствующих, так и анестезированных крыс, используемых в данной экспериментальной модели.
- 40 018195
Пример 31. Тест на мигрень у крыс.
Животные и хирургия: самцов крыс ΧνίδΐΗΓ (250-350 г) анестезируют пентобарбиталом натрия (50 мг/кг, и.п.), растворенным в физиологическом растворе.
Трахею и левую бедренную артерию канюлируют для искусственной вентиляции (55 удар/мин) и для измерения артериального среднего давления (МВР) соответственно. Бедренную вену канюлируют для внутривенного введения испытуемого средства.
Температуру тела поддерживают при 37-38°С путем автоматического регулирования электрогрелки. Животных помещают в стереотаксическую раму и выполняют продольный разрез скальпа. Трепанационное отверстие сверлят в черепе и биполярный электрод из нержавеющей стали (Р1а8бс 0пе Μ8 306) опускают в левую глазничную ветвь ганглия тройничного нерва (3,8 мм дорсально до брегмы, 2,5 мм латерально от срединной линии и на 9,5 мм ниже дуральной поверхности) и скрепляют зубным цементом. Правильное размещение электрода подтверждают кратковременной электростимуляцией, которая вызывает движение челюсти из-за активации волокна тройничного нерва. После удаления мозга правильное положение электрода в волокне контролируют визуально в конце каждого эксперимента.
Второе отверстие сверлят ипсилатерально относительно электрода (1,5 мм рострально до брегмы и 1,5 мм латерально от сагиттального шва) и зонд-иглу (диаметр наконечника 0,8 мм) лазерного доплеровского расходомера фиксируют так, чтобы наконечник указывал на ветвь средней мозговой артерии (МСА), и изменение церебрального кровотока (СВР) регистрируют онлайн с помощью лазерной доплеровской системы РепИих 4001.
Артефакты лазера Иорр1ег, считывающего во время электростимуляции ганглия тройничного нерва благодаря мышечным движениям, предупреждают болюсом в.в. инъекции блокатора нервно-мышечного проведения, панкуронийбромида (0,6 мг/кг, в.в.).
Анестезию и нервно-мышечную блокаду поддерживают на всем протяжении эксперимента путем вливания натрийпентобарбитала и панкурония (12,5 мг/кг/ч + 2,4 мг/кг/ч соответственно).
Экспериментальный протокол: По окончании хирургического вмешательства выдерживают 30-минутную паузу в целях стабилизации измеряемых параметров.
СВР покоя увеличивают электрическим стимулом с прямоугольным импульсом длиной 0,5 мс, 1-10 Гц, 0,5-1 мА за периоды в 30 с. После двух усредненных пролекарственных стимулов вводят растворитель или лекарственные средства.
Вводимые внутривенно характерные соединения по настоящему изобретению снижают повышенный кровоток, вызванный стимуляцией тройничного нерва.

Claims (31)

1. Соединение общей формулы (I)
Υ означает водород или 0-(С1-С4)алкил;
Ζ означает =0 или =8;
В означает (С3-С8)алкил или ш-трифтор(С3-С8)алкил;
В1 и В2 независимо означают водород, (С1-С4)алкокси или галоген;
В3 и В'3 независимо означают водород или (С1-С4)алкил;
В4 и В5 независимо означают водород, (С1-С4)алкил или
В4 означает водород и В5 означает -ί.’Η2-0Η;
В·, и В7 независимо означают водород или (С1-С6)алкил или вместе со смежным атомом азота образуют 5-6-членный моноциклический насыщенный гетероцикл, необязательно содержащий один дополнительный гетероатом, выбранный из -О- и -ΝΚ^-, выбранный из пирролидина, пиперидина, морфолина и пиперазина, где дополнительный гетероатом представляет собой группу -Ν^-, где В8 означает водород или (С1-С4)алкил, при условии, что, когда X означает -8- или -802-, Υ не может означать 0-(С1-С4)алкил;
в зависимости от обстоятельств, либо в виде отдельного оптического изомера в изолированной форме, либо в виде смеси указанных изомеров в любом соотношении, и его фармацевтически приемлемые соли.
2. Соединение по п.1, в котором
X означает -0-, -8-;
Υ означает водород или 0-(С1-С3)алкил;
Ζ означает =0 или =8;
В означает (С4-С6)алкил или ш-трифтор(С4-С6)алкил;
- 41 018195
Κι и К2 независимо означают водород, (С1-С4)алкокси или галоген;
К3 и К'3 независимо означают водород или (С1-С3)алкил;
К4 и К5 независимо означают водород или (С1-С3)алкил или
К4 означает водород и К5 означает -СН2-ОН;
Кб и К7 независимо означают водород или (С1 -С4)алкил или вместе со смежным атомом азота образуют 5-6-членный моноциклический насыщенный гетероцикл, необязательно содержащий один дополнительный гетероатом, выбранный из -О- и -ΝΚ8-, пирролидина, пиперидина, морфолина и пиперазина, где дополнительный гетероатом представляет собой группу -ΝΚ8-, где К8 означает водород или (С1-С4)алкил, при условии, что, когда X означает -8-, Υ не может означать О-(С1-С3)алкил;
в зависимости от обстоятельств, либо в виде отдельного оптического изомера в изолированной форме, либо в виде смеси указанных изомеров в любом соотношении, и его фармацевтически приемлемые соли.
3. Соединение по п.1, в котором
X означает -О- или -8-;
Υ означает водород или метокси;
Ζ означает =О или =8;
К означает (С4-С6)алкил или ω-трифторбутил;
К! и К2 независимо означают водород, метокси или фтор;
К3 и К'3 независимо означают водород или метил;
К4 и К5 независимо означают водород или метил или
К4 означает водород и К5 означает группу -СН2-ОН;
Кб и К7 независимо означают водород или (С1 -С4)алкил или вместе со смежным атомом азота образуют 5-6-членный моноциклический насыщенный гетероцикл, выбранный из пирролидина, пиперидина, морфолина и Ν-метилпиперазина, при условии, что, когда X означает -8-, Υ не может означать метокси;
в зависимости от обстоятельств, либо в виде отдельного оптического изомера в изолированной форме, либо в виде смеси указанных изомеров в любом соотношении, и его фармацевтически приемлемые соли.
4. Соединение по п.1, в котором
X означает -О-;
Υ означает водород;
Ζ означает =О;
К означает (С4-С6)алкил;
К1 и К2 независимо означают водород или фтор;
К3, К'3, К4 и К5 означают водород;
К6 и К7 независимо означают водород или (С1-С3)алкил;
в зависимости от обстоятельств, либо в виде отдельного оптического изомера в изолированной форме, либо в виде смеси указанных изомеров в любом соотношении, и его фармацевтически приемлемые соли.
5. Соединение по п.1, выбираемое из
2-[2-(3-бутоксифенил)этиламино]-Ы,№диметилацетамида; 2-{2-[3-(4,4,4-трифторбутокси)фенил]этиламино}-Ы^-диметилацетамида;
2-[2-(3 -пентилоксифенил)этиламино] -Ν,Ν-диметилацетамида;
2-[2-(3 -гексилоксифенил)этиламино] -Ν,Ν-диметилацетамида;
2-[2-(3 -бутоксифенил)этиламино] -Ν,Ν-дипропилацетамида;
2-[2-(3 -бутоксифенил)этиламино] -Ν,Ν-дибутилацетамида;
2-[2-(3-пентилоксифенил)этиламино]-Ы,№дипропилацетамида;
2-[2-(3-бутоксифенил)этиламино]ацетамида;
2-[2-(3-бутоксифенил)этиламино]-Ы-метилацетамида;
2-[2-(3-изопропоксифенил)этиламино]-Ы,№диметилацетамида; 2-[2-(3-бутоксифенил)этиламино]-Ы,№диэтилацетамида;
2-[2-(3 -бутоксифенил)этиламино] -1 -пирролидин-1 -илэтан- 1-она;
2-[2-(3-бутокси-4-фторфенил)этиламино]-Ы^-диэтилацетамида; 2-[2-(3-бутокси-4-метоксифенил)этиламино]-Ы^-диметилацетамида;
2-[2-(3-бутоксифенил)этиламино]-2,^№триметилпропанамида; 2-[2-(3-бутоксифенил)этиламино]-Ы,№диметилпропанамида;
2-[2-(3-бутоксифенил)этиламино]-3-гидрокси-Ы,№диметилпропанамида; 2-[2-(3-бутокси-2,6-дифторфенил)этиламино]-Ы,№диметилацетамида; 2-[2-(3-бутоксифенил)-2-метилпропиламино]-Ы,№диметилацетамида; 2-[2-(3-бутилтиофенил)этиламино]-Ы,№диметилацетамида;
2-[2-(3-бутилсульфонилфенил)этиламино]-Ы,№диметилацетамида;
- 42 018195
2-[2-(3 -бутоксифенил)этиламино] -Ν,Ν-диметилтиоацетамида;
2-[2-(3-бутоксифенил)-(№-метокси)этиламино]-ЮЮдиметилацетамида, в зависимости от обстоятельств, либо в виде отдельного оптического изомера в изолированной форме, либо в виде смеси указанных изомеров в любом соотношении, и фармацевтически приемлемые соли указанных соединений, предпочтительно соли с хлористоводородной или метансульфоновой кислотой.
6. Соединение по п.1, которым является
2-[2-(3 -бутоксифенил)этиламино] -Ν,Ν-диметилацетамид;
2-[2-(3-бутокси-2,6-дифторфенил)этиламино]-ЮЮдиметилацетамид;
2-[2-(3 -пентилоксифенил)этиламино] -Ν,Ν-диметилацетамид;
2-[2-(3 -гексилоксифенил)этиламино] -Ν,Ν-диметилацетамид;
2-[2-(3-бутоксифенил)этиламино]-Юметилацетамид;
2-[2-(3-бутокси-4-метоксифенил)этиламино]-Н,Юдиметилацетамид;
2-[2-(3 -бутоксифенил)этиламино] -Ν,Ν-диметилпропанамид;
2-[2-(3 -бутоксифенил)этиламино]-1-пирролидин-1 -илэтан-1-он;
2-[2-(3-бутоксифенил)-2-метилпропиламино]-Н,Юдиметилацетамид;
2-[2-(3 -бутоксифенил)-(№-метокси)этиламино] -Ν,Ν-диметилацетамид или 2-[2-(3-бутокси-4-фторфенил)этиламино]-Н,Юдиэтилацетамид, и фармацевтически приемлемые соли указанных соединений, предпочтительно соли с хлористоводородной или метансульфоновой кислотой.
7. Соединение по п.6, которым является 2-[2-(3-бутоксифенил)этиламино]-Ы,Юдиметилацетамид или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения, предпочтительно гидрохлорид или метансульфонат.
8. Соединение по п.1, в котором
X означает -8О2-; или
Υ означает О-(С1-С4)алкил; или
Ζ означает =8; или
К означает ш-трифтор(С3-С8)алкил; или
К! и/или К2 отличны от водорода; или как К3, так и К'3 отличны от водорода; или как К4, так и К5 отличны от водорода; или
Кб и К7 вместе со смежным атомом азота образуют моноциклический 5-6-членный насыщенный гетероцикл, необязательно содержащий один дополнительный гетероатом, выбранный из -О- и -ΝΒ8-, где К8 означает водород или (С1-С4)алкил, выбранный из пирролидина, пиперидина, морфолина и пиперазина, где дополнительный гетероатом представляет собой группу -ΝΚ^-, где К8 означает водород или (С1-С4)алкил, при условии, что, когда X означает -8- или -8О2-, Υ не может означать О-(С1-С4)алкил;
в зависимости от обстоятельств, либо в виде отдельного оптического изомера в изолированной форме, либо в виде смеси указанных изомеров в любом соотношении, и его фармацевтически приемлемые соли.
9. Применение соединения по любому из пп.1-8 в качестве лекарственного средства, активного в качестве модулятора натриевых и/или кальциевых каналов.
10. Применение соединения по п.1 в качестве лекарственного средства, активного в качестве модулятора натриевых и/или кальциевых каналов, для лечения патологий, при которых вышеуказанный(ые) механизм(ы) считается(ются) выполняющим(ими) патологическую роль, таких как неврологические, когнитивные, психические, воспалительные, мочеполовые или желудочно-кишечные нарушения, указанное лекарственное средство, по существу, не обладает ингибирующей активностью в отношении МАО или обладает существенно пониженной ингибирующей активностью в отношении МАО.
11. Применение по п.10, где соединением является соединение по любому из пп.2-4.
12. Применение по п.10, где соединением является соединение по п.5.
13. Применение по п.10, где соединением является соединение по п.6.
14. Применение по п.10, где соединением является соединение по п.7.
15. Применение по п.10, где нарушением является неврологическое нарушение, выбираемое из боли и мигрени.
16. Применение по п.15, где боль представляет собой синдром невропатической боли или синдром воспалительной боли.
17. Применение по п.15, где боль является острой или хронической болью.
18. Применение по п.10, где нарушение является неврологическим нарушением, выбираемым из болезни Альцгеймера, болезни Паркинсона, эпилепсии, синдрома усталых ног, внезапного приступа или ишемии головного мозга.
19. Применение по п.10, где нарушение представляет собой воспалительный процесс, затрагивающий все системы организма, такие как скелетно-мышечная система, артритическое состояние, такое как
- 43 018195 анкилозирующий спондилит, цервикальный артрит, фибромиалгия, подагра, ювенильный ревматоидный артрит, пояснично-крестцовый артрит, остеоартрит, остеопороз, псориатический артрит и ревматизм, нарушение, затрагивающее кожу и родственные ткани, нарушение дыхательной системы или нарушение иммунной и эндокринной системы.
20. Применение по п.10, где нарушение представляет собой когнитивное и/или психическое нарушение, выбираемое из умеренного когнитивного нарушения, депрессии, биполярного расстройства, мании, шизофрении, психоза, тревожности и зависимости.
21. Применение по п.10, где нарушение представляет собой мочеполовое расстройство.
22. Применение по п.10, где нарушение представляет собой желудочно-кишечное расстройство.
23. Применение по любому из пп.10 и 15-22, где указанное соединение используется в сочетании с одним или несколькими другими терапевтическими средствами.
24. Применение соединения по любому из пп.1-8 для изготовления лекарственного средства, активного в качестве модулятора натриевых и/или кальциевых каналов, для лечения патологий, в которых вышеуказанный(ые) механизм(ы) играет(ют) патологическую роль, таких как неврологические, когнитивные, психические, воспалительные, мочеполовые или желудочно-кишечные нарушения, указанное лекарственное средство, по существу, не обладает ингибирующей активностью в отношении МАО или обладает существенно пониженной ингибирующей активностью в отношении МАО.
25. Применение по п.24, где нарушение представляет собой любое нарушение по пп.15-22.
26. Фармацевтическая композиция, содержащая в качестве активного ингредиента соединение по любому из пп.1-8 вместе с фармацевтически приемлемыми терапевтически инертными органическими или неорганическими веществами-носителями.
27. Применение по п.20, где указанное соединение используют в сочетании с одним или несколькими другими терапевтическими средствами по п.23, где другим терапевтическим средством является антипсихотическое средство.
28. Применение по п.20, где указанное соединение используют в сочетании с одним или несколькими другими терапевтическими средствами по п.23, где указанным соединением является 2-[2-(3-бутоксифенил)этиламино]-Ы,№диметилацетамид или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения и антипсихотическое средство выбирают из галоперидола, рисперидона и клозапина.
29. Применение по п.20, где указанное соединение используют в сочетании с одним или несколькими терапевтическими средствами по п.23, где указанным соединением является гидрохлорид или метансульфонат 2-[2-(3-бутоксифенил)этиламино]-Ы,№диметилацетамида и антипсихотическим средством является галоперидол или рисперидон.
30. Применение по п.19, где нарушением является нарушение иммунной системы, такое как рассеянный склероз или другие демиелинизирующие нарушения.
31. Применение по любому из пп.10-25, 27-30, где пациенты, страдающие нарушением (нарушениями), особенно чувствительны к неблагоприятным побочным действиям, обусловленным ингибирующей активностью в отношении МАО.
EA201070018A 2007-06-15 2008-05-14 Замещенные 2-[2-(фенил)этиламино]алканамидные производные и применение указанных соединений в качестве модуляторов натриевых и/или кальциевых каналов EA018195B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP07011766 2007-06-15
PCT/EP2008/003848 WO2008151702A1 (en) 2007-06-15 2008-05-14 Substituted 2- [2- (phenyl) ethylamino] alkaneamide derivatives and their use as sodium and/or calcium channel modulators

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201070018A1 EA201070018A1 (ru) 2010-08-30
EA018195B1 true EA018195B1 (ru) 2013-06-28

Family

ID=38658156

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201070018A EA018195B1 (ru) 2007-06-15 2008-05-14 Замещенные 2-[2-(фенил)этиламино]алканамидные производные и применение указанных соединений в качестве модуляторов натриевых и/или кальциевых каналов

Country Status (28)

Country Link
US (8) US8519000B2 (ru)
EP (1) EP2155663B1 (ru)
JP (1) JP5440496B2 (ru)
KR (1) KR101545124B1 (ru)
CN (1) CN101687773B (ru)
AR (1) AR068976A1 (ru)
AU (1) AU2008261325B2 (ru)
BR (1) BRPI0813363B8 (ru)
CA (1) CA2689561C (ru)
CY (1) CY1119787T1 (ru)
DK (1) DK2155663T3 (ru)
EA (1) EA018195B1 (ru)
ES (1) ES2655704T3 (ru)
HK (1) HK1138566A1 (ru)
HR (1) HRP20180324T8 (ru)
HU (1) HUE038113T2 (ru)
IL (1) IL202235A (ru)
LT (1) LT2155663T (ru)
MX (1) MX2009013119A (ru)
NO (1) NO2155663T3 (ru)
NZ (1) NZ581288A (ru)
PL (1) PL2155663T3 (ru)
PT (1) PT2155663T (ru)
RS (1) RS56780B1 (ru)
SI (1) SI2155663T1 (ru)
TR (1) TR201802576T4 (ru)
TW (1) TWI400071B (ru)
WO (1) WO2008151702A1 (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2746188C2 (ru) * 2015-11-12 2021-04-08 Афаски, Инк. Ингибиторы ионного канала, фармацевтические составы и применение

Families Citing this family (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE602004025586D1 (de) * 2003-08-25 2010-04-01 Newron Pharm Spa Alpha-aminoamid derivate zur verwendung als anti-inflammatorische wirkstoffe
JP5213265B2 (ja) * 2009-10-08 2013-06-19 花王株式会社 Ｌｏｘ−１発現調節剤の評価又は選択方法
EP2723710B1 (en) * 2011-06-27 2016-08-10 Newron Pharmaceuticals S.p.A. Fluorinated arylalkylaminocarboxamide derivatives
CN103804341B (zh) * 2012-11-13 2018-04-10 中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所 酰胺衍生物及其医药用途
CN104761531B (zh) * 2014-01-03 2017-12-01 中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所 镇痛活性化合物及其医药用途
CN106316824B (zh) * 2016-08-18 2018-10-19 广州康瑞泰药业有限公司 一种合成2-氟环丙烷甲酸的新方法
WO2019205147A1 (zh) * 2018-04-28 2019-10-31 上海璃道医药科技有限公司 包含苯并含氧脂肪环结构的氨基乙酰胺类化合物及其用途
US20210162380A1 (en) * 2018-08-30 2021-06-03 Sabic Global Technologies B.V. Aromatization catalyst with improved isomerization, process of making and using thereof
EP3725768A1 (en) 2019-04-17 2020-10-21 Newron Pharmaceuticals S.p.A. Process for the production of substituted 2-[2-(phenyl) ethylamino]alkaneamide derivatives
EP3725769A1 (en) * 2019-04-17 2020-10-21 Newron Pharmaceuticals S.p.A. Process for the production of substituted 2-[2-(phenyl) ethylamino]alkaneamide derivatives

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB586645A (en) * 1944-07-19 1947-03-26 Burroughs Wellcome Co Improvements relating to the synthesis of amino acid derivatives and salts thereof
DE2006978A1 (de) * 1969-02-27 1970-09-17 Science Union et Cie. Societe Francaise de Recherche Medicale, Suresnes (Frankreich) Neue Aminosäuren, ihre Derivate und ihr Herstellungsverfahren
WO1990014334A1 (en) * 1989-05-25 1990-11-29 Farmitalia Carlo Erba S.R.L. N-PHENYLALKYL SUBSTITUTED α-AMINO CARBOXAMIDE DERIVATIVES AND PROCESS FOR THEIR PREPARATION
WO2004087125A1 (en) * 2003-04-02 2004-10-14 Ionix Pharmaceuticals Limited Amino acid derivatives as inhibitors of mammalian sodium channels
WO2004089353A2 (en) * 2003-04-11 2004-10-21 Newron Pharmaceuticals, S.P.A. Methods for treatment of parkinson's disease
WO2005018627A1 (en) * 2003-08-25 2005-03-03 Newron Pharmaceuticals, Spa Alpha-aminoamide derivatives useful as anti-inflammatory agents
WO2007071311A1 (en) * 2005-12-22 2007-06-28 Newron Pharmaceuticals S.P.A. 2 -phenylethylamino derivatives as calcium and/or sodium channel modulators

Family Cites Families (25)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5051403A (en) * 1989-11-22 1991-09-24 Neurex Corporation Method of treating ischemia-related neuronal damage
WO1993013128A1 (en) * 1991-12-30 1993-07-08 Neurex Corporation Methods of producing analgesia and enhancing opiate analgesia
GB9500691D0 (en) * 1995-01-13 1995-03-08 Smithkline Beecham Plc Compounds
GB9515412D0 (en) 1995-07-27 1995-09-27 Pharmacia Spa 2-(4-substituted)-benzylamino-2-methyl-propanamide derivatives
GB9518572D0 (en) 1995-09-12 1995-11-15 Smithkline Beecham Plc Compounds
US5845454A (en) * 1996-04-23 1998-12-08 Malizia; John T. Drop ceiling hanging system
CA2251368A1 (en) 1997-02-14 1998-08-20 Bayer Corporation Amide derivatives as selective neuropeptide y receptor antagonists
US6117841A (en) * 1997-05-30 2000-09-12 Warner-Lambert Company Substituted peptidylamine calcium channel blockers
DE19740110A1 (de) 1997-09-12 1999-03-18 Boehringer Ingelheim Pharma Substituierte 1,2,3,4,5,6-Hexahydro-2,6-methano-3-benzazocin-10-ole, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel
GB9727523D0 (en) 1997-12-31 1998-02-25 Pharmacia & Upjohn Spa Alpha-aminoamide derivatives useful as analgesic agents
AU3459999A (en) * 1998-04-27 1999-11-16 Warner-Lambert Company Substituted diarylalkyl amides as calcium channel antagonists
US6011035A (en) * 1998-06-30 2000-01-04 Neuromed Technologies Inc. Calcium channel blockers
US6316440B1 (en) * 1998-07-30 2001-11-13 Warner-Lambert Company Reduced dipeptide analogues as calcium channel antagonists
AU7102700A (en) * 1999-09-22 2001-04-24 Ortho-Mcneil Pharmaceutical, Inc. Benzo-fused dithiepino[6,5-b]pyridines, and related compositions and methods
MXPA02009354A (es) * 2000-03-23 2004-05-14 Johnson & Johnson Tiepino[3,2-b]dihidropiridinas y composiciones y metodos relacionados.
IL151952A0 (en) 2000-03-31 2003-04-10 Euro Celtique Sa Aminopyridine derivatives and pharmaceutical compositions containing the same
US6521647B2 (en) * 2000-04-04 2003-02-18 Pfizer Inc. Treatment of renal disorders
SE0102858D0 (sv) 2001-08-27 2001-08-27 Astrazeneca Ab N-type calcium channel antagonists for the treatment of pain
PT1423168E (pt) 2001-09-03 2006-05-31 Newron Pharm Spa Composicao farmaceutica que compreende gabapentina ou um seu analogo e uma x-aminoamida e a sua utilizacao como analgesico
PT1458386E (pt) 2001-12-27 2007-06-04 Ortho Mcneil Pharm Inc ''aroilpirrole-heteroarilo e metanóis úteis para o tratamento de um distúrbio do sistema nervoso central''
EP1438956A1 (en) 2003-01-16 2004-07-21 Newron Pharmaceuticals S.p.A. Alpha-aminoamide derivatives useful as antimigraine agents
EP1557166A1 (en) 2004-01-21 2005-07-27 Newron Pharmaceuticals S.p.A. Alpha-aminoamide derivatives useful in the treatment of lower urinary tract disorders
EP1588704A1 (en) * 2004-04-22 2005-10-26 Newron Pharmaceuticals S.p.A. Alpha-aminoamide derivatives useful in the treatment of restless legs syndrome and addictive disorders
RU2391973C2 (ru) 2004-09-10 2010-06-20 Ньюрон Фармасьютикалс С.П.А. Применение (галобензилокси)бензиламино-пропанамидов для производства лекарственных средств, действующих как селективные модуляторы натриевых и/или кальциевых каналов
EP1870097A1 (en) 2006-06-15 2007-12-26 Newron Pharmaceuticals S.p.A. Alpha-aminoamide derivatives useful in the treatment of cognitive disorders

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB586645A (en) * 1944-07-19 1947-03-26 Burroughs Wellcome Co Improvements relating to the synthesis of amino acid derivatives and salts thereof
DE2006978A1 (de) * 1969-02-27 1970-09-17 Science Union et Cie. Societe Francaise de Recherche Medicale, Suresnes (Frankreich) Neue Aminosäuren, ihre Derivate und ihr Herstellungsverfahren
WO1990014334A1 (en) * 1989-05-25 1990-11-29 Farmitalia Carlo Erba S.R.L. N-PHENYLALKYL SUBSTITUTED α-AMINO CARBOXAMIDE DERIVATIVES AND PROCESS FOR THEIR PREPARATION
WO2004087125A1 (en) * 2003-04-02 2004-10-14 Ionix Pharmaceuticals Limited Amino acid derivatives as inhibitors of mammalian sodium channels
WO2004089353A2 (en) * 2003-04-11 2004-10-21 Newron Pharmaceuticals, S.P.A. Methods for treatment of parkinson's disease
WO2005018627A1 (en) * 2003-08-25 2005-03-03 Newron Pharmaceuticals, Spa Alpha-aminoamide derivatives useful as anti-inflammatory agents
WO2007071311A1 (en) * 2005-12-22 2007-06-28 Newron Pharmaceuticals S.P.A. 2 -phenylethylamino derivatives as calcium and/or sodium channel modulators

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2746188C2 (ru) * 2015-11-12 2021-04-08 Афаски, Инк. Ингибиторы ионного канала, фармацевтические составы и применение

Also Published As

Publication number Publication date
US9474738B2 (en) 2016-10-25
CN101687773B (zh) 2014-07-30
BRPI0813363B1 (pt) 2019-11-12
US20150157602A1 (en) 2015-06-11
US8519000B2 (en) 2013-08-27
BRPI0813363B8 (pt) 2021-05-25
MX2009013119A (es) 2010-03-04
TWI400071B (zh) 2013-07-01
CN101687773A (zh) 2010-03-31
HRP20180324T1 (hr) 2018-04-06
US9585869B2 (en) 2017-03-07
EP2155663A1 (en) 2010-02-24
AU2008261325B2 (en) 2012-12-06
IL202235A (en) 2015-03-31
TR201802576T4 (tr) 2018-03-21
DK2155663T3 (en) 2018-01-22
US9051240B2 (en) 2015-06-09
US20150157599A1 (en) 2015-06-11
HK1138566A1 (en) 2010-08-27
WO2008151702A1 (en) 2008-12-18
US9474737B2 (en) 2016-10-25
HUE038113T2 (hu) 2018-09-28
LT2155663T (lt) 2018-02-12
CA2689561A1 (en) 2008-12-18
AU2008261325A1 (en) 2008-12-18
US9603832B2 (en) 2017-03-28
KR101545124B1 (ko) 2015-08-18
EP2155663B1 (en) 2017-11-29
US9474739B2 (en) 2016-10-25
NO2155663T3 (ru) 2018-04-28
US20150157598A1 (en) 2015-06-11
EA201070018A1 (ru) 2010-08-30
PL2155663T3 (pl) 2018-06-29
RS56780B1 (sr) 2018-04-30
US20150157600A1 (en) 2015-06-11
US20130274249A1 (en) 2013-10-17
PT2155663T (pt) 2018-01-16
US20100210631A1 (en) 2010-08-19
BRPI0813363A2 (pt) 2014-12-30
SI2155663T1 (en) 2018-03-30
JP5440496B2 (ja) 2014-03-12
CY1119787T1 (el) 2018-06-27
AU2008261325A2 (en) 2010-04-08
KR20100039848A (ko) 2010-04-16
US20130289122A1 (en) 2013-10-31
US9248116B2 (en) 2016-02-02
HRP20180324T8 (hr) 2019-03-08
JP2010529969A (ja) 2010-09-02
CA2689561C (en) 2015-11-17
IL202235A0 (en) 2010-06-16
NZ581288A (en) 2011-08-26
ES2655704T3 (es) 2018-02-21
AR068976A1 (es) 2009-12-23
TW200908956A (en) 2009-03-01
US20150157601A1 (en) 2015-06-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA018195B1 (ru) Замещенные 2-[2-(фенил)этиламино]алканамидные производные и применение указанных соединений в качестве модуляторов натриевых и/или кальциевых каналов
ES2556937T3 (es) Derivados de 2-feniletilamino como moduladores de los canales de calcio y/o sodio
US9211279B2 (en) Proline sulfonamide derivatives as orexin receptor antagonists
CA2828831C (en) Compounds and methods for the treatment of pain and other disorders