EA016246B1 - Способ выделения секоизоларицирезинола и дигидрокверцетина из древесины - Google Patents
Способ выделения секоизоларицирезинола и дигидрокверцетина из древесины Download PDFInfo
- Publication number
- EA016246B1 EA016246B1 EA200901320A EA200901320A EA016246B1 EA 016246 B1 EA016246 B1 EA 016246B1 EA 200901320 A EA200901320 A EA 200901320A EA 200901320 A EA200901320 A EA 200901320A EA 016246 B1 EA016246 B1 EA 016246B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- dihydroquercetin
- mixture
- organic solvent
- secoisolaricresinol
- solvent
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/13—Coniferophyta (gymnosperms)
- A61K36/15—Pinaceae (Pine family), e.g. pine or cedar
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/075—Ethers or acetals
- A61K31/085—Ethers or acetals having an ether linkage to aromatic ring nuclear carbon
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
- A61K31/35—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom
- A61K31/352—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings, e.g. methantheline
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P39/00—General protective or antinoxious agents
- A61P39/06—Free radical scavengers or antioxidants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Botany (AREA)
- Mycology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Obesity (AREA)
- Hematology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Immunology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Extraction Or Liquid Replacement (AREA)
Abstract
Предложен способ выделения секоизоларицирезинола и дигидрокверцетина из древесины. В предложенном способе измельченную древесину сучковой зоны экстрагируют нерасслаивающейся смесью органического растворителя с водой при содержании растворителя 50-75%, с получением экстракта, содержащего секоизоларицирезинол и дигидрокверцетин, обрабатывают экстракт для удаления растворителя с получением конечной смеси, содержащей секоизоларицирезинол и дигидрокверцетин. В другом варианте выполнения измельченную древесину сучковой зоны экстрагируют нерасслаивающейся смесью органического растворителя с водой, при содержании растворителя 50-75%, с получением экстракта, содержащего секоизоларицирезинол и дигидрокверцетин, обрабатывают экстракт для удаления растворителя с получением смеси, содержащей секоизоларицирезинол и дигидрокверцетин, которую подвергают избирательной экстракции и кристаллизации с выделением секоизоларицирезинола и дигидрокверцетина. В еще одном варианте выполнения измельченную древесину сучковой зоны экстрагируют нерасслаивающейся смесью органического растворителя с водой, при содержании растворителя 50-75%, с получением экстракта, содержащего секоизоларицирезинол и дигидрокверцетин, затем экстракт обрабатывают для удаления неполярных компонентов, удаляют надосадочную жидкость, а полученный остаток хроматографируют на слое силикагеля с последующим удалением элюата, получая сухую смесь секоизоларицирезинола и дигидрокверцетина. Предлагается также применение секоизоларицирезинола и дигидрокверцетина в качестве компонентов биологически активных добавок и
Description
Настоящее изобретение относится к области высокотехнологичной лесохимической переработки древесины.
В изобретении предложен способ выделения из древесины деревьев ценных физиологически активных соединений, включая обогащенные лигнанами и флавоноидами экстракты (лигнан-флавоноидные комплексы), а также разделенных лигнанов и флавоноидов, предназначенных для последующего использования при получении биологически активных добавок и химико-фармацевтических изделий.
Уровень техники
Лигнаны и флавоноиды относятся к классу фенольных соединений, содержащихся в различных частях растений, например в древесине хвойных пород деревьев. Содержащие производные лигнанов и флавоноидов химические экстракты и изготавливаемые на их основе препараты находят широкое применение в медицине и косметике, пищевой промышленности, в качестве агрохимических препаратов при производстве растениеводческой продукции, а также в других областях.
Одним из представляющих интерес соединений, относящихся к лигнанам, является секоизоларицирезинол (СЕКО). В качестве представителя класса флавоноидов в способе по данному изобретению получают дигидрокверцетин (ДГК), для обозначения которого в литературе часто используют синоним таксифолин.
ДГК достаточно широко изучался в исследовательских лабораториях для выяснения областей его практического использования. В России ДГК наиболее широко применяется в составе целого ряда биологически активных препаратов (например, препараты Капилар, Флукол и др.) и некоторых продук тов питания, что связано с высокими антиоксидантным, гепатопротекторным, иммуностимулирующим, противомикробным и другими практически полезными свойствами этого соединения. Так, на основе ДГК, выделяемого из опилок лиственницы сибирской и даурской, создан регулятор роста и развития сельскохозяйственных культур, коммерциализация которого проводится под коммерческим обозначением Лариксин (патент РФ № 2229213; патент РФ № 2256328).
СЕКО также представляет собой весьма перспективный препарат для практического использования, особенно для производства лекарственных и биологически активных препаратов, а также функциональных продуктов питания, благодаря антиоксидантным, противовоспалительным, фитоэстрагенным, противомикробным и другим полезным свойствам этого соединения. Так, известна фармацевтическая композиция (\νϋ 03/020254) на основе СЕКО (выделен из растения МетеоБреттит регБоиаФт), а также функциональные продукты питания (νθ 02/080702), гепатопротекторные, противораковые препараты (И8 2006/0035964) и другие препараты, включающие СЕКО.
Известно, что сучковые зоны и ветки хвойных пород деревьев содержат значительные количества фенольных соединений [В. Но1тЬот, С. Ескегтап, Р. Ек1ииб, 1. Нетттд, Ь. №Би1а, М. Веипапеп, В. 8_)бйо1т, А. 8иибЬегд, К. 8ипбЬегд, 8. νίΐΐίοτ, Кпо1Б ш 1тееБ - А пе\\' г1сН Боигсе οί НдпаиБ, Рйу1оскет1Б1ту Ве\зе\\ъ 2: 331-340, 2003). Авторами настоящего изобретения, однако, было экспериментально установлено, что предпочтительным сырьем для выделения представляющих интерес соединений в промышленном производстве являются только так называемые белые сучки, то есть сучки, несущие живые ветки (см. пример 1 ниже).
Получение фенольных соединений из сучковых зон древесины известно [см. патентную публикацию и8 2004/0199032 от 7.10.2004]. В указанной публикации раскрыт способ выделения фенольных соединений из содержащей сучковые зоны древесины, в котором выполняют экстракцию измельченной древесины сучковой зоны полярным растворителем с последующим выделением веществ из экстракта.
К недостаткам описанного способа можно отнести следующие технические ограничения. Предложенные условия разработаны для выделения одного целевого продукта, представителя класса лигнанов 7-гидроксиматаирезинола (НМВ). Однако древесина хвойных деревьев содержит обычно не один компонент, относящийся к фенольным соединениям, причем такие компоненты относятся не только к классу лигнанов. Кроме них в древесине содержатся и представители класса флавоноидов, также как и производные лигнанов, имеющие большую практическую ценность. Экономическая целесообразность переработки указанного типа древесного сырья требует разработки способов одновременного извлечения соединений разных классов, например лигнанов и флавоноидов, для их дальнейшего использования. Однако оказалось, что указанный известный способ [И8 2004/0199032 от 7.10.2004] является малоэффективным для одновременного выделения лигнанов в смеси с флавоноидами, которые имеют отличный от лигнанов профиль растворимости в органических растворителях. Другим недостатком известного способа является необходимость подготовки древесины для экстракции, включающей стадии промывки алка ном для удаления летучих компонентов, а также последующую сушку, в том числе для удаления содер
- 1 016246 жащейся в древесине воды, присутствие которой видимо снижает экстрагирующую способность растворителя.
Применяемый в указанном способе полярный растворитель определен обобщенно, посредством указания на константу диэлектрической проницаемости (которая должна быть больше 3 при 25°С). Указанным величинам диэлектрической проницаемости, например, отвечают такие технологически важные растворители, как диэтиловый эфир, хлороформ и хлористый метилен (их диэлектрические проницаемости 4.34, 4.70 и 8.9, соответственно), в которых ДГК очень мало растворим, что не позволяет использовать указанные растворители для экстракции ДГК.
В известном способе (И8 2004/0199032 от 7.10.2004) также отмечено, что в качестве полярного растворителя можно применять смесь ацетон:вода, однако выбранное соотношение (95:5 об.%) компонентов смеси не позволяет получить представляющий интерес ДГК с достаточным выходом (см. пример 2 ниже).
Задачей настоящего изобретения является разработка способа выделения фенольных соединений из древесины, лишенного указанных недостатков. Использование предложенного метода открывает широкие перспективы для производства широкого спектра биологически активных добавок, химикофармацевтических изделий и других продуктов.
Поставленная задача решается настоящим изобретением. В способе по изобретению измельченную древесину сучковой зоны экстрагируют нерасслаивающейся смесью органического растворителя с водой, при содержании органического растворителя 50-75%, с получением экстракта, содержащего СЕКО и ДГК, обрабатывают экстракт для удаления растворителя с получением конечной смеси, содержащей СЕКО и ДГК. Промывка измельченной древесины сучковой зоны алканом, как в известном способе [И8 2004/0199032 от 7.10.2004], или током СО2 (в т.ч. в условиях сверхкритической флюидной экстракции) позволяет только извлечь из древесной массы простейшие низкомолекулярные большей частью малополярные органические соединения, что не влияет на эффективность экстракции смеси ДГК и СЕКО в экспериментальных условиях настоящего изобретения.
В другом варианте выполнения изобретения полученную смесь, содержащую СЕКО и ДГК, дополнительно подвергают избирательной экстракции и кристаллизации с выделением очищенных целевых соединений.
В другом варианте выполнения изобретения экстракт, содержащий секоизоларицирезинол и дигидрокверцетин, дополнительно обрабатывают для удаления неполярных компонентов, удаляют надосадочную жидкость, а полученный остаток хроматографируют на слое силикагеля с последующим удалением элюата, получая сухую смесь секоизоларицирезинола и дигидрокверцетина.
При этом в способах по данному изобретению в качестве древесины можно использовать древесину хвойных пород деревьев, предпочтительно лиственницы (Ьапх), в частности лиственницы сибирской (Балх ыЬшса) и даурской (Ьапх Файипса) и пихты (ЛЫек), в частности пихты сибирской (ЛЫек ыЬшса), а в качестве сучковой зоны древесины используют белые сучки.
Как следует из данных, приведенных в примерах 2 и 3, наибольшая эффективность извлечения СЕКО и ДГК достигается при использовании смесей органического растворителя и воды, а в чистом органическом растворителе она ниже. Также, растворимость ниже и в чистой воде (не показано на фиг. 3-8), в которой целевые соединения имеют весьма ограниченную растворимость (растворение в воде требует нагревания). Поэтому важнейшим свойством используемого органического растворителя по данному изобретению является его способность смешиваться с водой в диапазоне указанных соотношений, давая гомогенную смесь с требуемой растворяющей активностью. Анализ растворителей по данному изобретению показывает, что их полярность характеризуется величиной константы диэлектрической проницаемости от 10 до 40 при 25-30°С.
В качестве органического растворителя могут использовать ацетон, при этом его содержание в смеси с водой составляет от 50 до 75%, предпочтительно от 60 до 70%.
В другом варианте выполнения в качестве органического растворителя могут использовать изопропиловый спирт, при этом его содержание в смеси с водой составляет от 50 до 75%, предпочтительно от 60 до 70%.
В других вариантах выполнения в качестве органического растворителя могут использовать и другие растворители, например этиловый спирт, удовлетворяющие указанным выше характеристикам, при этом содержание растворителя в смеси с водой составляет от 50 до 75%, предпочтительно от 60 до 70%.
Ключевым преимуществом настоящего изобретения является обеспечение эффективного одновременного извлечения из древесной массы как соединения ряда лигнанов, так и флавоноидного соединения, представляющих практический интерес для использования их в виде смеси или после разделения. Преимуществом перед известным способом является также и простота выделения целевых соединений по настоящему изобретению, не требующая специальной отсушки экстрагируемой древесины (в известном способе применяют лиофильную сушку), измельчения замороженной древесной массы и промывания алканом перед экстракцией водно-органической смесью.
Выходы ДГК в условиях данного изобретения соответствуют лучшим известным способам получе
- 2 016246 ния данного соединения из природных объектов (например, по способам, описанным в следующих источниках: Нифантьев Э.Е., Коротеев М.П., Казиев Г.З., Уминский А.А. Способ выделения дигидрокверцетина //Патент РФ № 2180566, 2001 г.; Нифантьев Э.Е., Коротеев М.П., Казиев Г.З., Волков Г.А., Гатаулин Р.Ш. Способ комплексной переработки древесины лиственницы //Патент РФ № 2233858, 2003 г.). Выход СЕКО в условиях данного изобретения существенно превышает таковой при экстракции из других известных природных источников, например из растений §1егео8регтит регаопа!ит - 0,03% (\УО 0з/020254), Салака еби118 - 0,0004% [Рйу1осйетщйу, 22 (1983) 749], ишрегик сЫпепкк - 0,00245% [Рйу1осйеткБу, 31 (1992)3659].
Ниже приведены примеры, не ограничивающие рамки изобретения, снабженные сопроводительными чертежами, на которых:
на фиг. 1 показана хроматограмма экстракта из опилок белых сучков лиственницы;
на фиг. 2 - хроматограмма экстракта из опилок черных сучков;
на фиг. 3 - результаты экстракции сучковой массы (белые сучки) лиственницы ацетоном и водноацетоновыми смесями, показаны весовые количества ДГК и СЕКО в экстрактах;
на фиг. 4 - результаты экстракции сучковой массы (белые сучки) лиственницы ацетоном и водноацетоновыми смесями, показан общий вес экстрактов после упаривания растворителя;
на фиг. 5 - результаты экстракции сучковой массы (белые сучки) лиственницы ацетоном и водноацетоновыми смесями, показано содержание ДГК и СЕКО в упаренных ацетоновом и водно-ацетоновых экстрактах;
на фиг. 6 - результаты экстракции сучковой массы (белые сучки) лиственницы изопропанолом и водно-изопропанольными смесями, показаны весовые количества ДГК и СЕКО в экстрактах;
на фиг. 7 - результаты экстракции сучковой массы (белые сучки) лиственницы изопропанолом и водно-изопропанольными смесями, показан общий вес экстрактов после упаривания растворителя;
на фиг. 8 - результаты экстракции сучковой массы (белые сучки) лиственницы изопропанолом и водно-изопропанольными смесями, показано содержание ДГК и СЕКО в упаренных изопропаноловом и водно-изопропаноловых экстрактах.
Обогащенные лигнанами и флавоноидами экстракты (лигнан-флавоноидные комплексы), как и лигнаны и флавоноиды после разделения, имеют широкое применение для получения биологическиактивных добавок и химико-фармацевтических изделий разных типов. При этом соответствующая биологическая активность лигнан-флавоноидных комплексов определяется содержанием в них лигнанного и флавоноидного компонентов, что демонстрируют приведенные ниже примеры, не ограничивающие рамки изобретения.
Так, антиоксидантные свойства лигнан-флавоноидных комплексов определяются суммарным содержанием в них лигнанного (СЕКО) и флавоноидного (ДГК) компонентов. Табл. 1 демонстрирует антиоксидантные свойства ДГК, СЕКО, а также их комплексов, экстрагируемых из сучковой массы лиственницы согласно данному изобретению (описание эксперимента дано в примере 18). Из табл. 1 видно, что эквимолекулярные количества ДГК и СЕКО проявляют одинаковую антиоксидантную активность, как и лигнан-флавоноидные комплексы, содержащие то же суммарное количество в них лигнанного (СЕКО) и флавоноидного (ДГК) компонентов. Это позволяет использование лигнан-флавоноидных комплексов наряду с их разделёнными лигнанным (СЕКО) и флавоноидным (ДГК) компонентами при производстве антиоксидантных химико-фармацевтических изделий и биологически-активных добавок, связанных с лечением и профилактикой сердечно-сосудистых заболеваний и инфекционных поражений, корректировкой липидного обмена, укреплением иммунного статуса и других.
Важнейшая сфера применения образующихся по данному изобретению лигнан-флавоноидных комплексов и выделенного лигнанного компонента (СБКО) является использование при получении химикофармацевтических изделий и биологически-активных добавок, предназначенных для профилактики и лечения эстраген опосредованных процессов. При этом известно, что СЕКО, как и ДГК, обладают низкой эстрагенной активностью, однако под действием ферментативной системы микрофлоры СЕКО претерпевает превращение в энтеролактон (ΕΝΤ), обладающий эстрагенной активностью. Это и определяет применение содержащим СЕКО продуктам, как биологического предшественника ΕΝΕ, а также может использоваться для получения химико-фармацевтических изделий и биологически активных добавок, предназначенных для профилактики и лечения эстраген опосредованных процессов, связанных с онкологическими заболеваниями, развитием гиперплазии, нарушениями здоровья женщин, в том числе вызванных менопаузой.
В качестве примера, не ограничивающего рамки настоящего изобретения, в табл. 2 показана эстрагенная активность СЕКО, а также комплексов СЕКО и ДГК, экстрагируемых из сучковой массы лиственницы согласно данному изобретению (описание эксперимента дано в примере 19). При использовании препаратов, содержащих одинаковое количество СЕКО, наблюдается одинаковый пролиферативный эффект (эксперимент с клетками МСЕ-8), а также и способность конкурентно ингибировать аналогичный эффект природного гормона - эстрадиола.
- 3 016246
Пример 1.
Хроматографический анализ компонентов экстрактов массы белых сучков и черных сучков и хроматографический анализ компонентов экстрактов.
Экстракцию образцов измельченной массы (для корректного сопоставления экспериментальных данных в этом и последующих примерах приведены результаты экстракции частиц толщиной до 1 мм, проходящие через сито с размером каналов диаметром 3 мм) белых и черных сучков лиственницы сибирской (Балх ДЬшса, далее лиственницы), несущих живые и мертвые ветки, проводили 70%-водным ацетоном при комнатной температуре в течение 24 ч (соотношение образец - растворитель 1:10). Аликвоты растворов (10 мкл) анализировали посредством ВЭЖХ [Э.Е. Нифантьев, М.П. Коротеев, Г.З. Казиев, В.К. Бельский, А.И.Сташ, А.А. Грачев, В.М. Меньшов, Ю.Е. Цветков, Н.Э. Нифантьев, К вопросу об идентификации флавоноида дигидрокверцетина., ЖОХ, 16 (2006) 161-163] на колонке иИтакрйете ΘΌ8 (5 мкм, 4,6 мм х 25 см; Весктап) в системе ацетонитрил (20%) - вода, содержащей 1 мл/л трифторуксусной кислоты при скорости потока 0,8 мл/мин с использованием УФ-детектора (254 нм). Количественная характеристика содержания ДГК и СЕКО в экстрактах проводилась по калибровочным кривым, полученным при хроматографическом анализе аналитически чистых образцов ДГК и СЕКО.
Анализ хроматограмм экстрактов (фиг. 1, 2) свидетельствует о содержании ДГК и СЕКО в белых сучках в количестве 1,2 и 1,7% от общего веса, соответственно, а в черных сучках присутствуют только следы СЕКО, а содержание ДГК составляет лишь около 0,5% от общего веса. Эти данные указывают на то, что масса белых сучков является предпочтительным сырьем для выделения ДГК и СЕКО.
Пример 2.
Экстракция сучковой массы лиственницы ацетоном и водно-ацетоновыми смесями и хроматографический анализ компонентов экстрактов.
Стандартные порции (10 г) измельченной массы белых сучков лиственницы подвергали экстракции в 100 мл ацетона или водно-ацетоновых смесях разного состава при комнатной температуре в течение 24 ч. Экстракты отделяли фильтрованием через стеклянный фильтр (№ 3) и упаривали досуха. Навеску сухого остатка (25 мг) растворяли в 10 мл ацетонитрила и анализировали посредством ВЭЖХ, как описано выше в примере 1 для определения содержания ДГК и СЕКО в исходном образце сучковой массы с использованием хроматографических характеристик заведомо чистых образцов ДГК и СЕКО.
Результаты экспериментов суммированы на фиг. 3-5, на которых показаны весовые количества ДГК и СЕКО в экстрактах (фиг. 3), общий вес экстрактов после упаривания растворителя (фиг. 4), а также содержание ДГК и СЕКО в упаренных ацетоновом и водно-ацетоновых экстрактах (фиг. 5). Анализ хроматограмм свидетельствует о том, что при экстракции смесями при содержании ацетона в интервале от 50 до 75%, в особенности от 60 до 70% достигается наиболее эффективное экстрагирование ДГК и СЕКО. При увеличении содержания ацетона в экстрагенте свыше 75% либо при снижении ниже 50% содержание ДГК и СЕКО в экстракте снижается. Кроме этого при экстрагировании смесями с содержанием воды свыше 50% наблюдается увеличение общей массы экстракта за счет извлечения из сучковой массы нецелевых компонентов, в особенности хорошо растворимых в водных средах производных углеводов и других соединений, что в дальнейшем усложняет очистку ДГК и СЕКО.
Пример 3.
Экстракция сучковой массы лиственницы изопропиловым спиртом и водно-изопропанольными смесями и хроматографический анализ компонентов экстрактов.
Экстракцию стандартных порций (10 г) измельченной массы белых сучков лиственницы проводили в 100 мл изопропилового спирта или водно-изопропанольными смесями разного состава при комнатной температуре в течение 24 ч. Экстракты сначала обрабатывали, а затем анализировали с помощью ВЭЖХ, как описано в примере 2.
Результаты экспериментов суммированы на фиг. 6-8, на которых показаны весовые количества ДГК и СЕКО в экстрактах (фиг. 6), общий вес экстрактов после упаривания растворителя (фиг. 7), а также содержание ДГК и СЕКО в упаренных изопропанольном и водно-изопропанольных экстрактах (фиг. 8). Анализ хроматограмм и данных по общему весу экстрактов свидетельствует о том, что при экстракции смесями при содержании изопропанола в интервале от 50 до 75%, в особенности от 60 до 70%, достигается наиболее эффективное экстрагирование ДГК и СЕКО. При увеличении содержания изопропанола в экстрагенте свыше 75%, либо при снижении ниже 50%, содержание ДГК и СЕКО в экстракте снижается. Кроме этого, при экстрагировании смесями с содержанием воды свыше 50% наблюдается увеличение общей массы экстракта за счет извлечения из сучковой массы нецелевых компонентов, в особенности производных углеводов, что в дальнейшем усложняет очистку ДГК и СЕКО.
Пример 4. Исследование кавитационной дезинтеграции сучковой массы в воде с последующей экстракцией органическими растворителями
300 г измельченных сучков лиственницы подвергали кавитационной обработке в 10 л воды при 95°С по способу, описанному в патенте РФ № 2180566, опубликованном 20.03.2002, и патенте РФ № 2233858, опубликованном 10.08.2004. Образующуюся смесь охлаждали до комнатной температуры, нерастворимые компоненты отделяли фильтрованием или центрифугированием (2 ч при 2000 об/мин). По
- 4 016246 пытки проэкстрагировать фильтрат, представляющий собой устойчивую эмульсию, с помощью несмешивающихся с водой растворителей различной полярности (алканы, ароматические соединения, эфиры, хлорированные растворители) не привели к успеху, так как не достигалось образование слоев органической и водной фаз, даже при добавке в смеси растворов №1С1 и алифатических спиртов, что обычно способствует разделению слоев при экстракции водных растворов. Таким образом, способ выделения ДГК и СЕКО из сучковой массы, включающий на первом этапе кавитационную дезинтеграцию в воде, на практике не является эффективным.
Пример 5. Экстракция сучковой массы лиственницы 70%-ным водным ацетоном кг измельченных сучков лиственницы подвергали экстракции 5 л 70%-ного водного ацетона при комнатной температуре в течение 24 ч. Раствор отделяли фильтрованием и упаривали досуха, получая 87 г порошкообразного сырца смеси ДГК и СЕКО. По данным ВЭЖХ (анализ проводился в условиях, описанных в примере 1), в полученном продукте содержится 9,8 г ДГК и 14,3 г СЕКО.
Пример 6. Экстракция сучковой массы лиственницы
Экстракцию измельченных сучков лиственницы проводили 70%-ным водным ацетоном, как описано в примере 5. К образцу полученного продукта весом 5 г прибавляли 50 мл воды и кипятили 1 ч при перемешивании, горячий раствор отделяли от маслообразного остатка, упаривали досуха и получали 1,8 г обогащенного ДГК и СЕКО продукта-сырца, содержащего 23% ДГК (414 мг) и 32% СЕКО (576 мг) (по данным ВЭЖХ в условиях, описанных в примере 1).
Пример 7. Экстракция сучковой массы лиственницы 70%-ным водным изопропанолом кг измельченных сучков лиственницы подвергали экстракции 5 л 70%-ного водного изопропанола при комнатной температуре в течение 24 ч. Раствор отделяли фильтрованием и упаривали досуха, получая 83 г порошкообразного продукта-сырца, содержащего 7,4 г ДГК и 12,2 г СЕКО (по данным ВЭЖХ в условиях, описанных в примере 1).
Пример 8. Экстракция сучковой массы лиственницы 70%-ным водным этанолом.
0,1 кг измельченных сучков лиственницы подвергали экстракции 720 мл 70%-ного водного этилового спирта при комнатной температуре в течение 24 ч. Раствор отделяли фильтрованием и упаривали досуха, получая 7,12 г порошкообразного продукта-сырца, содержащего 655 мг ДГК и 810 мг СЕКО (по данным ВЭЖХ в условиях, описанных в примере 1).
Пример 9. Получение смеси СЕКО и ДГК в соотношении примерно 1:1 чистотой, равной 75% и более.
Экстракцию измельченных сучков лиственницы проводили 70%-ным водным ацетоном, как описано в примере 5. К образцу полученного продукта весом 5 г прибавляли смесь этилацетат-петролейный эфир (1:2, 10 мл) и перемешивали при 50°С, температуру доводили до комнатной и надосадочную жидкость отделяли декантацией (или фильтрованием через бумажный или стеклянный фильтр). Полученный остаток хроматографировали на слое силикагеля, элюируя смесь ДГК и СЕКО метилтретбутиловым эфиром (100 мл). Элюат упаривали досуха, получая 1,45 г порошка, представляющего по данным ВЭЖХ (в условиях, описанных в примере 1) смесь ДГК и СЕКО в соотношении примерно 1:1 чистотой, равной 75% или более. Аналогично проводили и выделения смесей СЕКО и ДГК указанной чистоты при обработке органических экстрактов сучковой массы другими водно-органическими смесями по данному изобретению, например, образующимися из продуктов, полученных в примерах 2, 7, 8 и 15-17. При этом соотношения СЕКО и ДГК в выделяемом продукте определяется их содержанием в исходном сырье.
Пример 10. Получение смеси СЕКО и ДГК в соотношении примерно 1:1 чистотой, равной 75% и более.
Экстракцию измельченных сучков лиственницы проводили 70%-ным водным ацетоном, как описано в примере 5. Образец полученного продукта весом 5 г перемешивали 10-120 мин при нагревании не выше 50°С с 10-30 мл смеси углеводородного растворителя и более полярного растворителя, взятых в таком соотношении, что при проведении тонкослойной хроматографии на стандартных пластинках с силикагелем величины хроматографической подвижности (ИГ) СЕКО и ДГК находятся в интервале 00,05. После окончания перемешивания температуру смеси доводили до комнатной, и надосадочную жидкость отделяли декантацией (или фильтрованием через бумажный или стеклянный фильтр). Полученный остаток хроматографировали на слое силикагеля, элюируя смесь ДГК и СЕКО метилтретбутиловым эфиром (100 мл). Элюат упаривали досуха, получая 1,45 г порошка, представляющего по данным ВЭЖХ (в условиях, описанных в примере 1) смесь ДГК и СЕКО в соотношении примерно 1:1 чистотой, равной 75% или более.
В качестве углеводородного растворителя могут использовать технологически доступные алифатические или ароматические соединения, например индивидуальные алканы, петролейный эфир, толуол и другие. В качестве полярного растворителя могут использовать органические соединения, характеризующиеся величиной константы диэлектрической проницаемости от 4 до 25 при 25-30°С. Например, можно использовать смесь этилацетата и петролейного эфира в соотношении 1:2.
Аналогично проводили и выделения смесей СЕКО и ДГК указанной чистоты при обработке органических экстрактов сучковой массы другими водно-органическими смесями по данному изобретению,
- 5 016246 например, образующимися из продуктов, полученных в примерах 2, 7, 8 и 15-17. При этом соотношения СЕКО и ДГК в выделяемом продукте определяется их содержанием в исходном сырье.
Пример 11. Получение смеси СЕКО и ДГК в соотношении примерно 1:1 чистотой, равной 75% и более.
Экстракцию измельченных сучков лиственницы проводили 70%-ным водным ацетоном, как описано в примере 5. Образец полученного продукта весом 5 г перемешивали 10-60 мин при нагревании не выше 50°С с 10-30 мл смеси углеводородного растворителя и более полярного растворителя с величиной константы диэлектрической проницаемости от 4 до 25 при 25-30°С. В качестве углеводородного растворителя могут использовать технологически доступные алифатические или ароматические соединения, например индивидуальные алканы, петролейный эфир, толуол и другие. Количества взятого полярного компонента зависит от величины его диэлектрической проницаемости. Так, при диэлектрической проницаемости от 20 до 25 берется 10 об.%, при диэлектрической проницаемости от 15 до 20 берется 20 об.%, при диэлектрической проницаемости от 10 до 15 берется 30 об.%, а при диэлектрической проницаемости от 4 до 10 берется 40 об.%. Например, в соответствии с указанными характеристиками растворителей можно использовать смесь этилацетата и петролейного эфира в соотношении 1:2.
После окончания перемешивания температуру смеси доводили до комнатной и надосадочную жидкость отделяли декантацией (или фильтрованием через бумажный или стеклянный фильтр). Полученный остаток хроматографировали на слое силикагеля, элюируя смесь ДГК и СЕКО метилтретбутиловым эфиром (100 мл). Элюат упаривали досуха, получая 1,45 г порошка, представляющего по данным ВЭЖХ (в условиях, описанных в примере 1) смесь ДГК и СЕКО в соотношении примерно 1:1 чистотой, равной или более 75%.
Аналогично проводили и выделения смесей СЕКО и ДГК указанной чистоты при обработке органических экстрактов сучковой массы другими водно-органическими смесями по данному изобретению, например, образующимися из продуктов, полученных в примерах 2, 7, 8 и 15-17. При этом соотношение СЕКО и ДГК в выделяемом продукте определяется их содержанием в исходном сырье.
Пример 12. Получение образцов СЕКО и ДГК чистотой, равной 75% и более
Экстракцию измельченных сучков лиственницы проводили 70%-ным водным ацетоном, как описано в примере 5. К образцу полученного продукта весом 5 г прибавляли 50 мл воды и кипятили 1 ч при перемешивании, горячий раствор отделяли от маслообразного остатка, температуру раствора доводили до комнатной и экстрагировали хлороформом (8x30 мл). Органическую фазу отделяли, сушили и упаривали досуха, получая 670 мг сырца СЕКО с чистотой, равной 75% или более (определено ВЭЖХ в условиях, описанных в примере 1). Оставшуюся после экстракции водную фазу экстрагировали этилацетатом (3x30 мл), экстракты объединяли, высушивали и упаривали досуха, получая 481 мг сырца ДГК с чистотой, равной 75% или более (определено ВЭЖХ в условиях, описанных в примере 1). Аналогично проводили и выделения смесей СЕКО и ДГК указанной чистоты при обработке органических экстрактов сучковой массы другими водно-органическими смесями по данному изобретению, например, образующимися из продуктов Примеров 2, 7, 8 и 15-17. При этом соотношения СЕКО и ДГК в выделяемом продукте определяется их содержанием в исходном сырье.
Пример 13. Получение ДГК чистотой 95-97% и более.
ДГК чистотой 95-97% и более получали перекристаллизацией сырца (пример 12). Например, образец ДГК (0,48 г), полученный в условиях примера 12, растворяли в 5 мл деаэрированной воды при 7080°С, охлаждали образующийся раствор до 4°С и выдерживали смесь до окончания кристаллизации. Выпавшие кристаллы отфильтровали и высушили в вакууме, получив 0.31 г ДГК указанной чистоты, контролируемой по данным ВЭЖХ в условиях, описанных в примере 1. Данные спектра 13С ЯМР (δ, м.д.; ΌΜ8Θ-ά6; Вгикег νΜ-250, 62,9 ΜΗζ): 71,6 (С3), 83,1 (С2), 95,0 (С8), 96,0 (С6), 100,5 (С10), 115,2 (С5'), 115,4 (С2'), 119,5 (С1'), 145,0 (С4'), 145,8 (С3'), 162,6 (С9), 163,4 (С5), 166,8 (С7), 197,9 (С4).
Пример 14. Получение СЕКО чистотой 95-97% и более.
СЕКО чистотой 95-97% и более получали перекристаллизацией сырца (пример 12). Например, образец СЕКО (660 мг), полученный в условиях примера 12, растворяли в 7 мл диэтилового эфира при 30°С, раствор охлаждали до 4°С и выдерживали смесь до окончания кристаллизации. Выпавшие кристаллы отфильтровали и высушили в вакууме, получив 405 мг СЕКО указанной чистоты, контролируемой по данным ВЭЖХ в условиях, описанных в примере 1. Данные спектра 13С ЯМР (δ, м.д.; ΌΜδΘ-ά6; Вгикег νΜ-250, 62,9 ΜΗζ): 34,0 (С3,3'), 42,5 (С2,2'), 55,5 (ΟΜе), 60,3 (С1,1'), 113,0 (С6,6'), 115,0 (С9,9'), 121,1 (С5,5'), 132,2 (С4,4'), 144,3 (С7,7'), 147,2 (С8,8').
Пример 15. Экстракция сучковой массы пихты сибирской (ЛЫек ыЬшса).
100 г измельченных сучков пихты подвергали экстракции 0.5 л 70%-ного водного ацетона при комнатной температуре в течение 24 ч. Раствор отделяли фильтрованием и упаривали досуха, получая 733 мг порошкообразного сырца смеси ДГК и СЕКО. По данным ВЭЖХ (анализ проводили в условиях, описанных в примере 1), в полученном продукте содержится 7 мг ДГК и 91 мг СЕКО.
Пример 16. Экстракция сучковой массы пихты сибирской (ЛЫек ыЬшса)
100 г измельченных сучков пихты подвергали экстракции 0.5 л 70%-ного водного изопропанола
- 6 016246 при комнатной температуре в течение 24 ч. Раствор отделяли фильтрованием и упаривали досуха, получая 655 мг порошкообразного сырца смеси ДГК и СЕКО. По данным ВЭЖХ (анализ проводили в условиях, описанных в примере 1), в полученном продукте содержится 6 мг ДГК и 77 мг СЕКО.
Пример 17. Экстракция сучковой массы пихты сибирской (АЫек 81Ьшса)
100 г измельченных сучков пихты подвергали экстракции 0,5 л 70%-ного водного этилового спирта при комнатной температуре в течение 24 ч. Раствор отделяли фильтрованием и упаривали досуха, получая 725 мг порошкообразного сырца смеси ДГК и СЕКО. По данным ВЭЖХ (анализ проводили в условиях, описанных в примере 1), в полученном продукте содержится 6 мг ДГК и 71 мг СЕКО.
Пример 18. Антиоксидантные свойства ДГК, СЕКО и их комплексов
Антиоксидантная активность ДГК, СЕКО, а также их комплексов, полученных в условиях примеров 6 и 7, проводилась по известному методу [Ό.Ε 1аш1С5оп ЗассНагошусек есгсчыас как άίδΐίηοΐ айарйче гекропкек 1о Ьо(П Нуйгодеп регох1йе апй шеиайюпе 1. Вас1егю1., 174 (1992) 6678-6681] на дрожжах 8ассНагошусек сегеч181ае ВКМ Υ-1173. Дрожжи выращивались до середины логарифмической стадии роста на среде Ридер, содержащей 2% глюкозы, дрожжевой экстракт и минеральные соли. Клетки дрожжей отделяли от среды центрифугированием, два раза промывали водой и инкубировали с перекисью водорода и антиоксидантами в водной суспензии (ОЭ600 0,1-0,15) в течение 1 ч при периодическом встряхивании. Затем делались соответствующие разведения и дрожжи высевали на агаризованную глюкозопептонную среду, культивировали в течение 2 сут при 30°С, а затем подсчитывали число выросших колоний и выживаемость клеток 8.сегеч181ае (табл. 1).
Таблица 1. Влияние антиоксидантов на выживаемость клеток 8.сегеч181ае при воздействии перекиси водорода
Оксидант | Выживаемость, % от контроля | ||||
Без антиоксиданта | дтк (Пример 13, 5 мг/мл | СЕКО (Пример 14), 5 мг/мл | ДГК+СЕКО (Пример 6), 5 мг/мл** | ДГК+СЕКО (Пример 7), 5 мг/мл** | |
Контроль (без Н2О2) | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 |
5мМ Н2О2 | 7±2 | 35±5 | 35±5 | 35±5 | 35±5 |
ЮмМ Н2О2 | 1* | 9±2 | 9±1 | 9±2 | 9±2 |
* Порог точности счета колоний - 1%.
** Указана суммарная концентрация ДГК и СЕКО в растворе.
Пример 19. Сравнительное исследование пролифирации клеток рака молочной железы человека МСЕ-7 при воздействии эстрадиола, СЕКО и СЕКО содержащих экстрактов.
Сравнительное исследование пролифирации клеток рака молочной железы человека МСЕ-7 при воздействием эстрадиолом, СЕКО и СЕКО содержащих экстрактов проводили по известному методу [Н. Ай1егсгеи17, Υ. Мои8ач1, Еп1его1ас1оие апй е81гайю1 ίηΙιίΝι еасН о1Нег'к рго11Гега1гче еГГес! оп МСЕ-7 Ьгеай сапсег се11к ш сиНиге, 1. 81егснй. Вюсйеш. Мо1. Вю1. 41 (1992) 615-619]. Для оценки эстрогенной активности препаратов, содержащих СЕКО, 1М растворы последних в этаноле (концентрация указана на содержащийся в растворе СЕКО) добавлялись к культуре клеток с достижением 1 мкМ конечной концентрации по СЕКО. В каждом опыте по пролиферации 17в-эстрадиол использовался в качестве позитивного стандарта для оценки эстрогенной активности и добавлялся также в виде этанольного раствора для достижения конечной 1 нМ концентрации.
Для оценки антиэстрогенной активности растворы 17в-эстрадиола и тестируемого препарата СЕКО, среди которых использовались препараты, полученные в условиях примеров 6, 7 и 14, добавлялись к клеточной культуре одновременно. Клеточная пролиферация оценивалась путем подсчета количества клеток на счетчике Колтера, полученные результаты суммированы в табл. 2. В контрольном эксперименте (см. опыт 1 в табл. 2) добавлялся этанол, но без лигнана. В каждых условиях проводились 5 измерений.
- 7 016246
Таблица 2. Исследование эстрогенной и антиэстрогенной активности препаратов, содержащих СЕКО, на культуре клеток МСЕ-7 (см. пример 19)
Опыт | Препарат | Пролиферация клеток МСГ-7, % |
1 | Контрольный опыт в присутствии этанола | 100± 10 |
2 | Раствор 17Р-эстрадиола в этаноле | 140 ± 15 |
3 | Раствор СЕКО (Пример 6) в этаноле | 115± 15 |
4 | Раствор СЕКО (Пример 7) в этаноле | 120 ± 15 |
5 | Раствор СЕКО (Пример 14) в этаноле | 115± 10 |
6 | Раствор 17р-эстрадиола и СЕКО (Пример 6) в этаноле | 115± 15 |
7 | Раствор 17Р~эстрадиола и СЕКО (Пример 7) в этаноле | 120± 15 |
8 | Раствор 17р-эстрадиола и СЕКО (Пример 14) в этаноле | 115± 10 |
Показанные примеры приведены лишь с целью иллюстрации и не ограничивают рамки настоящего изобретения.
Claims (21)
- ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ1. Способ выделения секоизоларицирезинола и дигидрокверцетина из древесины, в котором измельченную древесину сучковой зоны лиственницы (Балх) или пихты (АЫек) экстрагируют нерасслаивающейся смесью органического растворителя с водой, при содержании растворителя 50-75%, с получением экстракта, содержащего секоизоларицирезинол и дигидрокверцетин, обрабатывают экстракт для удаления растворителя с получением конечной смеси, содержащей секоизоларицирезинол и дигидрокверцетин.
- 2. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве сучковой зоны древесины используют белые сучки.
- 3. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве органического растворителя используют ацетон.
- 4. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве органического растворителя используют изопропиловый спирт.
- 5. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве органического растворителя используют этиловый спирт.
- 6. Способ по любому из пп.1, 3-5, отличающийся тем, что содержание органического растворителя в смеси с водой составляет от 60 до 70%.
- 7. Способ выделения секоизоларицирезинола и дигидрокверцетина из древесины, в котором измельченную древесину сучковой зоны лиственницы (Ьапх) или пихты (АЫек) экстрагируют нерасслаивающейся смесью органического растворителя с водой, при содержании растворителя 50-75%, с получением экстракта, содержащего секоизоларицирезинол и дигидрокверцетин, обрабатывают экстракт для удаления растворителя с получением смеси, содержащей секоизоларицирезинол и дигидрокверцетин, которую подвергают избирательной экстракции и кристаллизации с выделением секоизоларицирезинола и дигидрокверцетина.
- 8. Способ по п.7, отличающийся тем, что в качестве сучковой зоны древесины используют белые сучки.
- 9. Способ по п.7, отличающийся тем, что в качестве органического растворителя используют ацетон.
- 10. Способ по п.7, отличающийся тем, что в качестве органического растворителя используют изопропиловый спирт.
- 11. Способ по п.7, отличающийся тем, что в качестве органического растворителя используют этиловый спирт.
- 12. Способ по любому из пп.7, 9-11, отличающийся тем, что содержание органического растворителя в смеси с водой составляет от 60 до 70%.
- 13. Способ выделения секоизоларицирезинола и дигидрокверцетина из древесины, в котором измельченную древесину сучковой зоны лиственницы (Ьапх) или пихты (АЫек) экстрагируют нерасслаи- 8 016246 вающейся смесью органического растворителя с водой, при содержании растворителя 50-75%, с получением экстракта, содержащего секоизоларицирезинол и дигидрокверцетин, затем экстракт обрабатывают для удаления неполярных компонентов, удаляют надосадочную жидкость, а полученный остаток хроматографируют на слое силикагеля с последующим удалением элюата, получая сухую смесь секоизоларицирезинола и дигидрокверцетина.
- 14. Способ по п.13, отличающийся тем, что в качестве сучковой зоны древесины используют белые сучки.
- 15. Способ по п.13, отличающийся тем, что в качестве органического растворителя используют ацетон.
- 16. Способ по п.13, отличающийся тем, что в качестве органического растворителя используют изопропиловый спирт.
- 17. Способ по п.13, отличающийся тем, что в качестве органического растворителя используют этиловый спирт.
- 18. Способ по любому из пп.13, 15-17, отличающийся тем, что содержание органического растворителя в смеси с водой составляет от 60 до 70%.
- 19. Применение секоизоларицирезинола и дигидрокверцетина, полученных экстракцией измельченной древесины сучковой зоны лиственницы (Ьапх) или пихты (ЛЫек) нерасслаивающейся смесью органического растворителя с водой, при содержании растворителя 50-75%, с получением экстракта, содержащего секоизоларицирезинол и дигидрокверцетин, обработкой экстракта для удаления растворителя с получением конечной смеси, содержащей секоизоларицирезинол и дигидрокверцетин, в качестве компонентов биологически активных добавок и химико-фармацевтических изделий.
- 20. Применение секоизоларицирезинола и дигидрокверцетина, полученных экстракцией измельченной древесины сучковой зоны лиственницы (Ьапх) или пихты (ЛЫек) нерасслаивающейся смесью органического растворителя с водой, при содержании растворителя 50-75%, с получением экстракта, содержащего секоизоларицирезинол и дигидрокверцетин, обработкой экстракта для удаления растворителя с получением смеси, содержащей секоизоларицирезинол и дигидрокверцетин, которую подвергают избирательной экстракции и кристаллизации с выделением секоизоларицирезинола и дигидрокверцетина, в качестве компонентов биологически активных добавок и химико-фармацевтических изделий.
- 21. Применение секоизоларицирезинола и дигидрокверцетина, полученных экстракцией измельченной древесины сучковой зоны лиственницы (Ьапх) или пихты (ЛЫек) нерасслаивающейся смесью органического растворителя с водой, при содержании растворителя 50-75%, с получением экстракта, содержащего секоизоларицирезинол и дигидрокверцетин, затем обработкой экстракта для удаления неполярных компонентов, удалением надосадочной жидкости, хроматографированием полученного остатка на слое силикагеля с последующим удалением элюата, получением сухой смеси секоизоларицирезинола и дигидрокверцетина, в качестве компонентов биологически активных добавок и химикофармацевтических изделий.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2007111534/15A RU2359666C2 (ru) | 2007-03-29 | 2007-03-29 | Способ выделения секоизоларицирезинола и дигидрокверцетина из древесины (варианты) |
PCT/RU2008/000176 WO2008121021A1 (ru) | 2007-03-29 | 2008-03-26 | Способ выделения секоизоларицирезинола и дигидрокверцетина из древесины |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
EA200901320A1 EA200901320A1 (ru) | 2010-02-26 |
EA016246B1 true EA016246B1 (ru) | 2012-03-30 |
Family
ID=39808511
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
EA200901320A EA016246B1 (ru) | 2007-03-29 | 2008-03-26 | Способ выделения секоизоларицирезинола и дигидрокверцетина из древесины |
Country Status (8)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20100286255A1 (ru) |
EP (1) | EP2143435B1 (ru) |
CN (1) | CN101678057A (ru) |
AT (1) | ATE552840T1 (ru) |
CA (1) | CA2682143C (ru) |
EA (1) | EA016246B1 (ru) |
RU (1) | RU2359666C2 (ru) |
WO (1) | WO2008121021A1 (ru) |
Families Citing this family (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2454410C1 (ru) * | 2011-05-24 | 2012-06-27 | Учреждение Российской академии наук Институт химии и химической технологии Сибирского отделения РАН (ИХХТ СО РАН) | Способ получения дигидрокверцетина |
RU2536241C2 (ru) * | 2011-07-05 | 2014-12-20 | Общество с ограниченной ответственностью "СуперАгро" | Способ выделения полифенольных соединений класса стильбенов пиносильвина и метилпиносильвина из отходов переработки сосны |
US9073889B2 (en) | 2012-02-02 | 2015-07-07 | Lda Ag | Process for the manufacture of taxifolin from wood |
US20130245251A1 (en) * | 2012-03-17 | 2013-09-19 | Flavitpure, Inc. | Method for isolating dietary fiber arabinogalactan and arabinogalactan in combination with flavonoid dihydroquercetin (taxifolin) from conifer wood species or hardwood including butt logs and bark |
RU2510268C1 (ru) * | 2012-11-14 | 2014-03-27 | ОБЩЕСТВО С ОГРАНИЧЕННОЙ ОТВЕТСТВЕННОСТЬЮ "Медресурс" | Средство для лечения эстрогензависимых опухолей |
WO2014083171A1 (en) * | 2012-11-30 | 2014-06-05 | Harmonic Pharma | Natural compounds for use in the treatment of beta-2 adrenergic receptor related diseases |
CZ306700B6 (cs) * | 2014-12-05 | 2017-05-17 | Výzkumný ústav potravinářský Praha, v.v.i. | Způsob výroby lignanů pro potravinářské účely extrakcí ze suků jehličnanů |
CZ2015262A3 (cs) * | 2015-04-20 | 2016-03-16 | Výzkumný ústav potravinářský Praha, v.v.i. | Způsob úpravy dřevních suků s přesně regulovanou strukturou drtě pro výrobu lignanů a zařízení k provádění tohoto způsobu, s využitím v potravinářské výrobě |
US20190117555A1 (en) * | 2016-03-11 | 2019-04-25 | Harmonic Pharma | Sublingual compositions comprising natural extracts and uses thereof |
CN113185485B (zh) | 2021-05-10 | 2022-03-04 | 合肥立方制药股份有限公司 | 一种二氢槲皮素的半合成方法 |
CN113214210B (zh) * | 2021-05-10 | 2022-03-04 | 合肥立方制药股份有限公司 | 一种二氢槲皮素的制备方法 |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2088256C1 (ru) * | 1996-12-02 | 1997-08-27 | Тюкавкина Нонна Арсеньевна | Средство для комплексной терапии заболеваний "диквертин" и способ его получения |
RU2154967C1 (ru) * | 1999-01-27 | 2000-08-27 | Шачнев Юрий Дмитриевич | Биологически активная добавка "биоскан-с" и способ ее получения |
WO2003020254A1 (en) * | 2001-07-27 | 2003-03-13 | Council Of Scientific And Industrial Research | Pharmaceutical composition comprising (-)-secoisolariciresinol |
US20040199032A1 (en) * | 2001-06-06 | 2004-10-07 | Bjarne Holmbom | Method for isolating phenolic substances or javabiones from wood comprising knotwood |
RU2288582C2 (ru) * | 2002-05-14 | 2006-12-10 | Общество с ограниченной ответственностью "Алсико-Агропром" (ООО "Алсико-Агропром") | Способ получения биологически активного препарата |
Family Cites Families (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2180566C1 (ru) | 2001-01-18 | 2002-03-20 | Нифантьев Эдуард Евгеньевич | Способ выделения дигидрокверцетина |
WO2002080702A1 (en) | 2001-04-04 | 2002-10-17 | Unilever N.V. | Use of lignans in foods |
CN1553887A (zh) * | 2001-06-06 | 2004-12-08 | �����ᡤ����ķ��ķ | 从包含有节木的木材中分离酚类物质或保幼酮的方法 |
RU2229213C2 (ru) | 2002-07-09 | 2004-05-27 | Чекуров Виктор Михайлович | Способ регулирования роста зерновых культур |
KR100639273B1 (ko) * | 2002-07-24 | 2006-10-31 | 가부시끼가이샤 고또스기 | 홍두삼 유래 리그난류를 포함하는 혈당 강하제 |
RU2233858C1 (ru) | 2003-01-23 | 2004-08-10 | Нифантьев Эдуард Евгеньевич | Способ комплексной переработки древесины лиственницы |
FI116727B (sv) * | 2003-11-12 | 2006-02-15 | Arbonova Ab Oy | Ny användning för kvistnötsextrakt |
RU2256328C1 (ru) | 2004-02-04 | 2005-07-20 | Красноярский государственный аграрный университет | Способ обработки зерновых культур препаратом лариксин |
-
2007
- 2007-03-29 RU RU2007111534/15A patent/RU2359666C2/ru active
-
2008
- 2008-03-26 EA EA200901320A patent/EA016246B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2008-03-26 CA CA2682143A patent/CA2682143C/en not_active Expired - Fee Related
- 2008-03-26 US US12/450,417 patent/US20100286255A1/en not_active Abandoned
- 2008-03-26 CN CN200880010627A patent/CN101678057A/zh active Pending
- 2008-03-26 AT AT08753884T patent/ATE552840T1/de active
- 2008-03-26 EP EP08753884A patent/EP2143435B1/en active Active
- 2008-03-26 WO PCT/RU2008/000176 patent/WO2008121021A1/ru active Application Filing
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2088256C1 (ru) * | 1996-12-02 | 1997-08-27 | Тюкавкина Нонна Арсеньевна | Средство для комплексной терапии заболеваний "диквертин" и способ его получения |
RU2154967C1 (ru) * | 1999-01-27 | 2000-08-27 | Шачнев Юрий Дмитриевич | Биологически активная добавка "биоскан-с" и способ ее получения |
US20040199032A1 (en) * | 2001-06-06 | 2004-10-07 | Bjarne Holmbom | Method for isolating phenolic substances or javabiones from wood comprising knotwood |
WO2003020254A1 (en) * | 2001-07-27 | 2003-03-13 | Council Of Scientific And Industrial Research | Pharmaceutical composition comprising (-)-secoisolariciresinol |
RU2288582C2 (ru) * | 2002-05-14 | 2006-12-10 | Общество с ограниченной ответственностью "Алсико-Агропром" (ООО "Алсико-Агропром") | Способ получения биологически активного препарата |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CA2682143C (en) | 2012-10-09 |
EP2143435A1 (en) | 2010-01-13 |
EP2143435A4 (en) | 2010-09-01 |
US20100286255A1 (en) | 2010-11-11 |
CN101678057A (zh) | 2010-03-24 |
EA200901320A1 (ru) | 2010-02-26 |
EP2143435B1 (en) | 2012-04-11 |
RU2007111534A (ru) | 2008-10-10 |
RU2359666C2 (ru) | 2009-06-27 |
ATE552840T1 (de) | 2012-04-15 |
CA2682143A1 (en) | 2008-10-09 |
WO2008121021A1 (ru) | 2008-10-09 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
EA016246B1 (ru) | Способ выделения секоизоларицирезинола и дигидрокверцетина из древесины | |
Zengin et al. | Chemical profile, antioxidant, antimicrobial, enzyme inhibitory, and cytotoxicity of seven Apiaceae species from Turkey: A comparative study | |
Lau et al. | Identification and quantification of glycoside flavonoids in the energy crop Albizia julibrissin | |
Ouis et al. | Phytochemical analysis and antioxidant activity of the flavonoids extracts from pods of Ceratonia siliqua L. | |
Abdallah et al. | Determination of phenolics and flavonoids of some useful medicinal plants and bioassay-guided fractionation substances of Sclerocarya birrea (A. Rich) Hochst stem (bark) extract and their efficacy against Salmonella typhi | |
KR20110048401A (ko) | 신선초 녹즙 부산물로부터 칼콘 고함유 추출물 제조방법 | |
WO2009107959A2 (ko) | 상동나무 지상부로부터 유용 플라보노이드 다량 함유 획분과 신규 플라보노이드 물질의 분리 방법 | |
CN110724121B (zh) | 铁皮石斛叶中的一种联苄类衍生物及其制备方法和用途 | |
KR101737556B1 (ko) | 법제 하수오 추출물을 유효성분으로 포함하는 산화적 스트레스 개선용 조성물 | |
Songca et al. | A biflavonoid and a carotenoid from Rhus leptodictya: isolation, characterization and antibacterial properties | |
KR20150075047A (ko) | 여주 유래 프로토카테큐산을 활성성분으로 함유하는 인지기능 개선용 조성물 | |
KR20070078167A (ko) | 감귤에서 나리루틴을 분리하는 방법 | |
Fuad et al. | Total phenolic, total flavonoids content and antioxidant activity of Mangifera sp. leaf extracts | |
CN112174848B (zh) | 一种桑寄生中具有抗菌活性的油酰乙醇胺化合物、制备方法及其应用 | |
Issa et al. | Antiplasmodial and DPPH radical scavenging effects in extracts from Acacia macrostachya (Mimosaceae) DC | |
US11647710B2 (en) | Method for preparation of soybean leaf having high content of isoflavone derivative in dark condition and soybean leaf having high content of isoflavone derivative prepared thereby | |
KR102171201B1 (ko) | 에우오니무스 포르피레우스 추출물을 포함하는 항산화 또는 항암용 조성물 | |
KR101431868B1 (ko) | 신선초 뿌리로부터 칼콘 고함유 추출물 제조방법 | |
Christiya et al. | Screening of Physicochemical properties and In Vitro free radical scavenging activity of Delonix elata L. leaf extracts | |
KR100416120B1 (ko) | 천연물로부터 분리한 신규 리그난계통의 항종양 물질 | |
JP2004256426A (ja) | 抗腫瘍剤 | |
Fathiazad et al. | Phytochemical Analysis of Danae Racemosa L. Moench Leaves | |
Osman et al. | THE EFFECT OF EXTRACTION CONDITIONS ON ANTIOXIDANT ACTIVITY OF Bougainvillea PLANT | |
GR1010597B (el) | Μεθοδος και προϊον εκχυλισης φυλλων συκιας | |
RU2068269C1 (ru) | Способ получения средства, обладающего антисклеротической и желчегонной активностью |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s) |
Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM |