KR101737556B1 - 법제 하수오 추출물을 유효성분으로 포함하는 산화적 스트레스 개선용 조성물 - Google Patents
법제 하수오 추출물을 유효성분으로 포함하는 산화적 스트레스 개선용 조성물 Download PDFInfo
- Publication number
- KR101737556B1 KR101737556B1 KR1020150071021A KR20150071021A KR101737556B1 KR 101737556 B1 KR101737556 B1 KR 101737556B1 KR 1020150071021 A KR1020150071021 A KR 1020150071021A KR 20150071021 A KR20150071021 A KR 20150071021A KR 101737556 B1 KR101737556 B1 KR 101737556B1
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- oxidative stress
- composition
- methanol
- present
- scavenging activity
- Prior art date
Links
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 title claims abstract description 45
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title abstract description 49
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims abstract description 21
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims abstract description 21
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 claims abstract description 10
- 230000036541 health Effects 0.000 claims abstract description 10
- 239000010865 sewage Substances 0.000 claims description 29
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- PDHAOJSHSJQANO-OWOJBTEDSA-N Oxyresveratrol Chemical compound OC1=CC(O)=CC=C1\C=C\C1=CC(O)=CC(O)=C1 PDHAOJSHSJQANO-OWOJBTEDSA-N 0.000 claims description 17
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims description 14
- 230000002000 scavenging effect Effects 0.000 claims description 14
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 claims description 12
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 11
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 9
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 7
- 230000006872 improvement Effects 0.000 claims description 3
- 239000008187 granular material Substances 0.000 claims description 2
- 239000006187 pill Substances 0.000 claims description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 claims description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 claims 1
- 239000012669 liquid formulation Substances 0.000 claims 1
- VASFLQKDXBAWEL-UHFFFAOYSA-N emodin Natural products OC1=C(OC2=C(C=CC(=C2C1=O)O)O)C1=CC=C(C=C1)O VASFLQKDXBAWEL-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 19
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 10
- WREAQMXXCUARJD-UHFFFAOYSA-N 6-[2-(4-hydroxyphenyl)ethenyl]benzene-1,2,4-triol Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C=CC1=CC(O)=CC(O)=C1O WREAQMXXCUARJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 7
- LQGUBLBATBMXHT-UHFFFAOYSA-N chrysophanol Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C3=CC(C)=CC(O)=C3C(=O)C2=C1O LQGUBLBATBMXHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 4
- JAYVHSBYKLLDJC-DSNJPTTOSA-N (E)-2,3,5,4'-tetrahydroxystilbene-2-O-beta-D-glucoside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=C(O)C=C(O)C=C1\C=C\C1=CC=C(O)C=C1 JAYVHSBYKLLDJC-DSNJPTTOSA-N 0.000 abstract description 2
- VWDXGKUTGQJJHJ-UHFFFAOYSA-N Catenarin Natural products C1=C(O)C=C2C(=O)C3=C(O)C(C)=CC(O)=C3C(=O)C2=C1O VWDXGKUTGQJJHJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 2
- 239000010282 Emodin Substances 0.000 abstract description 2
- RBLJKYCRSCQLRP-UHFFFAOYSA-N Emodin-dianthron Natural products O=C1C2=CC(C)=CC(O)=C2C(=O)C2=C1CC(=O)C=C2O RBLJKYCRSCQLRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 2
- YOOXNSPYGCZLAX-UHFFFAOYSA-N Helminthosporin Natural products C1=CC(O)=C2C(=O)C3=CC(C)=CC(O)=C3C(=O)C2=C1O YOOXNSPYGCZLAX-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 2
- NTGIIKCGBNGQAR-UHFFFAOYSA-N Rheoemodin Natural products C1=C(O)C=C2C(=O)C3=CC(O)=CC(O)=C3C(=O)C2=C1O NTGIIKCGBNGQAR-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 2
- NZPQWZZXRKZCDU-UHFFFAOYSA-N chrysophanol Natural products Cc1cc(O)c2C(=O)c3c(O)cccc3Oc2c1 NZPQWZZXRKZCDU-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 2
- RHMXXJGYXNZAPX-UHFFFAOYSA-N emodin Chemical compound C1=C(O)C=C2C(=O)C3=CC(C)=CC(O)=C3C(=O)C2=C1O RHMXXJGYXNZAPX-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 2
- PKUBGLYEOAJPEG-UHFFFAOYSA-N physcion Natural products C1=C(C)C=C2C(=O)C3=CC(C)=CC(O)=C3C(=O)C2=C1O PKUBGLYEOAJPEG-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 2
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 105
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 34
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N Nitric oxide Chemical compound O=[N] MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 22
- 230000002292 Radical scavenging effect Effects 0.000 description 21
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- VVEKCQAFOLKNKB-UHFFFAOYSA-N emodine Natural products C1=CC=C2C(=O)C3=CC(O)=CC(O)=C3C(=O)C2=C1O VVEKCQAFOLKNKB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 238000000034 method Methods 0.000 description 14
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 13
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 12
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 11
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 11
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 11
- WQGWDDDVZFFDIG-UHFFFAOYSA-N pyrogallol Chemical compound OC1=CC=CC(O)=C1O WQGWDDDVZFFDIG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 9
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 8
- TUJKJAMUKRIRHC-UHFFFAOYSA-N hydroxyl Chemical compound [OH] TUJKJAMUKRIRHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 235000021374 legumes Nutrition 0.000 description 8
- MGJZITXUQXWAKY-UHFFFAOYSA-N diphenyl-(2,4,6-trinitrophenyl)iminoazanium Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC([N+](=O)[O-])=CC([N+]([O-])=O)=C1N=[N+](C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 MGJZITXUQXWAKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 241000894007 species Species 0.000 description 7
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- LIKMAJRDDDTEIG-UHFFFAOYSA-N 1-hexene Chemical compound CCCCC=C LIKMAJRDDDTEIG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen sulfide Chemical compound S RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 5
- XEYBHCRIKKKOSS-UHFFFAOYSA-N disodium;azanylidyneoxidanium;iron(2+);pentacyanide Chemical compound [Na+].[Na+].[Fe+2].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-].[O+]#N XEYBHCRIKKKOSS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229910000037 hydrogen sulfide Inorganic materials 0.000 description 5
- -1 hydroxyl radicals Chemical class 0.000 description 5
- 239000002032 methanolic fraction Substances 0.000 description 5
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 5
- 229940079877 pyrogallol Drugs 0.000 description 5
- 239000003642 reactive oxygen metabolite Substances 0.000 description 5
- 229940083618 sodium nitroprusside Drugs 0.000 description 5
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 4
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 4
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 4
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 4
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 4
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 4
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 4
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010012289 Dementia Diseases 0.000 description 3
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 3
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 3
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 3
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 3
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N dpph Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC([N+](=O)[O-])=CC([N+]([O-])=O)=C1[N]N(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 3
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 3
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 3
- 238000004366 reverse phase liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 230000035882 stress Effects 0.000 description 3
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 2
- 241000238578 Daphnia Species 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000019197 Superoxide Dismutase Human genes 0.000 description 2
- 108010012715 Superoxide dismutase Proteins 0.000 description 2
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 2
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 2
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 2
- OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N azane;(2e)-3-ethyl-2-[(e)-(3-ethyl-6-sulfo-1,3-benzothiazol-2-ylidene)hydrazinylidene]-1,3-benzothiazole-6-sulfonic acid Chemical compound [NH4+].[NH4+].S/1C2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N(CC)C\1=N/N=C1/SC2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N1CC OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 2
- GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N d-alpha-tocopherol Natural products OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N methyl 1-acetylthieno[3,2-c]pyrazole-5-carboxylate Chemical compound CC(=O)N1N=CC2=C1C=C(C(=O)OC)S2 XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 2
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 description 2
- 238000004064 recycling Methods 0.000 description 2
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 2
- 239000010801 sewage sludge Substances 0.000 description 2
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 2
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 2
- HYIVKFQALWGHOH-UHFFFAOYSA-N 1-chloro-2,6-dimethylhepta-2,5-dien-4-one Chemical compound ClCC(C)=CC(C=C(C)C)=O HYIVKFQALWGHOH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ASJSAQIRZKANQN-CRCLSJGQSA-N 2-deoxy-D-ribose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)CC=O ASJSAQIRZKANQN-CRCLSJGQSA-N 0.000 description 1
- RVBUGGBMJDPOST-UHFFFAOYSA-N 2-thiobarbituric acid Chemical compound O=C1CC(=O)NC(=S)N1 RVBUGGBMJDPOST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000208340 Araliaceae Species 0.000 description 1
- 206010003210 Arteriosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 208000014644 Brain disease Diseases 0.000 description 1
- DKPFZGUDAPQIHT-UHFFFAOYSA-N Butyl acetate Natural products CCCCOC(C)=O DKPFZGUDAPQIHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 description 1
- ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N D-erythro-ascorbic acid Natural products OCC1OC(=O)C(O)=C1O ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N Ethene Chemical compound C=C VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005977 Ethylene Substances 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- 208000023105 Huntington disease Diseases 0.000 description 1
- 208000031226 Hyperlipidaemia Diseases 0.000 description 1
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 1
- 239000002211 L-ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 235000000069 L-ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 206010067125 Liver injury Diseases 0.000 description 1
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 1
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 1
- 235000005035 Panax pseudoginseng ssp. pseudoginseng Nutrition 0.000 description 1
- 235000003140 Panax quinquefolius Nutrition 0.000 description 1
- 208000018737 Parkinson disease Diseases 0.000 description 1
- 241000219050 Polygonaceae Species 0.000 description 1
- 240000005499 Sasa Species 0.000 description 1
- 208000013200 Stress disease Diseases 0.000 description 1
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-M Superoxide Chemical compound [O-][O] OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- GLEVLJDDWXEYCO-UHFFFAOYSA-N Trolox Chemical compound O1C(C)(C(O)=O)CCC2=C1C(C)=C(C)C(O)=C2C GLEVLJDDWXEYCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930003268 Vitamin C Natural products 0.000 description 1
- 229930003427 Vitamin E Natural products 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- OENHQHLEOONYIE-UKMVMLAPSA-N all-trans beta-carotene Natural products CC=1CCCC(C)(C)C=1/C=C/C(/C)=C/C=C/C(/C)=C/C=C/C=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C OENHQHLEOONYIE-UKMVMLAPSA-N 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- PYKYMHQGRFAEBM-UHFFFAOYSA-N anthraquinone Natural products CCC(=O)c1c(O)c2C(=O)C3C(C=CC=C3O)C(=O)c2cc1CC(=O)OC PYKYMHQGRFAEBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003276 anti-hypertensive effect Effects 0.000 description 1
- 230000003579 anti-obesity Effects 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 229910052785 arsenic Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000011775 arteriosclerosis disease Diseases 0.000 description 1
- 238000006701 autoxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 235000013734 beta-carotene Nutrition 0.000 description 1
- 239000011648 beta-carotene Substances 0.000 description 1
- TUPZEYHYWIEDIH-WAIFQNFQSA-N beta-carotene Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1=C(C)CCCC1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2=CCCCC2(C)C TUPZEYHYWIEDIH-WAIFQNFQSA-N 0.000 description 1
- 229960002747 betacarotene Drugs 0.000 description 1
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 1
- 230000003293 cardioprotective effect Effects 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 230000005779 cell damage Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000002036 chloroform fraction Substances 0.000 description 1
- 229940125904 compound 1 Drugs 0.000 description 1
- 229940125782 compound 2 Drugs 0.000 description 1
- 229940126214 compound 3 Drugs 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 238000004042 decolorization Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000003412 degenerative effect Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 230000001627 detrimental effect Effects 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 231100000676 disease causative agent Toxicity 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 1
- WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N gamma-tocopherol Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC1CCC2C(C)C(O)C(C)C(C)C2O1 WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000008434 ginseng Nutrition 0.000 description 1
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 1
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 1
- 235000013402 health food Nutrition 0.000 description 1
- 231100000234 hepatic damage Toxicity 0.000 description 1
- 239000002044 hexane fraction Substances 0.000 description 1
- FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N hexanoic acid Chemical compound CCCCCC(O)=O FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 description 1
- 210000001985 kidney epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- FKDHHVKWGRFRTG-UHFFFAOYSA-N linsidomine Chemical compound [N-]1OC(=N)C=[N+]1N1CCOCC1 FKDHHVKWGRFRTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 230000008818 liver damage Effects 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N n'-amino-n-iminomethanimidamide Chemical compound N\N=C\N=N VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N 0.000 description 1
- 210000000885 nephron Anatomy 0.000 description 1
- 230000000324 neuroprotective effect Effects 0.000 description 1
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 1
- 230000004768 organ dysfunction Effects 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000004792 oxidative damage Effects 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- CMFNMSMUKZHDEY-UHFFFAOYSA-N peroxynitrous acid Chemical compound OON=O CMFNMSMUKZHDEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 150000002989 phenols Chemical class 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 230000019612 pigmentation Effects 0.000 description 1
- 235000002378 plant sterols Nutrition 0.000 description 1
- 239000003495 polar organic solvent Substances 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 1
- 238000010298 pulverizing process Methods 0.000 description 1
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 239000012925 reference material Substances 0.000 description 1
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 1
- 239000007901 soft capsule Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 1
- 238000005728 strengthening Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- RLNWRDKVJSXXPP-UHFFFAOYSA-N tert-butyl 2-[(2-bromoanilino)methyl]piperidine-1-carboxylate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N1CCCCC1CNC1=CC=CC=C1Br RLNWRDKVJSXXPP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N trichloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)(Cl)Cl YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019154 vitamin C Nutrition 0.000 description 1
- 239000011718 vitamin C Substances 0.000 description 1
- 235000019165 vitamin E Nutrition 0.000 description 1
- 239000011709 vitamin E Substances 0.000 description 1
- OENHQHLEOONYIE-JLTXGRSLSA-N β-Carotene Chemical compound CC=1CCCC(C)(C)C=1\C=C\C(\C)=C\C=C\C(\C)=C\C=C\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C OENHQHLEOONYIE-JLTXGRSLSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23P—SHAPING OR WORKING OF FOODSTUFFS, NOT FULLY COVERED BY A SINGLE OTHER SUBCLASS
- A23P10/00—Shaping or working of foodstuffs characterised by the products
- A23P10/20—Agglomerating; Granulating; Tabletting
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23P—SHAPING OR WORKING OF FOODSTUFFS, NOT FULLY COVERED BY A SINGLE OTHER SUBCLASS
- A23P10/00—Shaping or working of foodstuffs characterised by the products
- A23P10/30—Encapsulation of particles, e.g. foodstuff additives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2200/00—Function of food ingredients
- A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
- A23V2200/31—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on comfort perception and well-being
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2250/00—Food ingredients
- A23V2250/20—Natural extracts
- A23V2250/21—Plant extracts
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2300/00—Processes
- A23V2300/14—Extraction
Abstract
본 발명에서는 법제 하수오(Polygoni Multiflori Radix) 추출물을 유효성분으로 포함하는 산화적 스트레스 개선용 조성물 및 그 제조방법이 제공된다. 또한 법제 하수오 추출물 유래의 2,3,5,4'-테트라하이드록시스틸벤 2-O-β-D-글루코사이드 (2,3,5,4'-tetrahydroxystilbene 2-O-β-D-glucoside), 레인 (rhein), 에모딘 (emodin) 및/또는 크리소파놀 (chrysophanol)을 활성성분으로 포함하는 산화적 스트레스 개선용 건강기능성 식품 조성물이 제공된다.
Description
본 발명은 법제 하수오(Polygoni Multiflori Radix) 추출물을 유효성분으로 포함하는 산화적 스트레스 개선용 조성물에 관한 것으로서, 더 상세하게는 법제 하수오 추출물 유래의 2,3,5,4'-테트라하이드록시스틸벤 2-O-β-D-글루코사이드 (2,3,5,4'-tetrahydroxystilbene 2-O-β-D-glucoside), 레인 (rhein), 에모딘 (emodin) 및/또는 크리소파놀 (chrysophanol)을 활성성분으로 포함하는 산화적 스트레스 개선용 건강기능성 식품 조성물에 관한 것이다.
21세기 생활수준의 향상과 의학기술의 눈부신 발전으로 인간의 평균수명이 증가된 고령화 사회로 접어들면서 건강하게 나이를 먹는 것에 대한 욕구가 강해지고 있다. 이러한 시대에 부응하여 건강기능식품 분야의 시장은 급속도록 성장하고 있다.
산화적 스트레스(Oxidative stress)는 활성산소 생산계 및 소거계의 균형에 의해 거의 일정하게 유지되고 있던 생체 산화수준이 약제, 방사선, 허혈, 노화 등 여러 가지 요인에 의해 이러한 균형이 무너진 상태를 가르키는 것으로, 과도한 자유 라디칼을 발생시켜 인체의 항산화 기전의 균형을 깨드리고, 산화적 스트레스 결과 세포상해(특히 세포막 지질과 산화), DNA염기 수식에 의한 돌연변이, 세포사(apotosis) 유도 등을 일으켜서 동맥경화증, 퇴행성 뇌질환, 중풍, 파킨슨병, 헌팅턴병, 당뇨, 암, 알쯔하이머, 치매, 노화 등의 다양한 질환의 원인이 되고 있다.
산화적 스트레스의 원인물질은 자유 라디칼인 활성산소종(reactive oxygen species, ROS)으로 O2 -(superoxide anion), H2O2(hydrogen peroxide) 및 ㆍOH(hydroxyl radical) 등과, 염증 반응과 관련된 활성질소종(reactive nitrogen species, RNS)인 NO(nitric oxide), NO2, ONOO-(peroxynitrite) 등이 있다. 특히 ONOO-는 생체 내에서 NO와 O2 -의 반응에 의해 생성되는 독성 세포손상(pathogenic cellular damage)와 기관 부전(organ dysfunction)의 주요인으로 알려져 있다. ONOO-는 단백질, 아미노산, DNA 등과 반응하여 세포 및 조직 손상을 야기할 뿐만 아니라 NO 신호화를 저해하여 다양한 만성질환 발생에 관여한다.
생체내에서 ROS와 RNS 등의 제거를 위하여 SOD (superoxide dismutase) 등의 효소 함유 식품이나 β-카로틴, 비타민 C와 E, 페놀성 화합물 등을 함유하는 식품의 섭취가 이루어져 왔으나 여전히 더 효과적인 대안의 개발이 요구되어 오고 있다.
최근에 다양한 질환의 원인이 되는 산화적 스트레스를 개선하기 위하여 천연물 유래의 활성성분에 대한 연구가 이루어지고 있는데, 등록특허 제10-0873222호에는 붉나무로부터 분리한 담마레인 트리테르펜 (dammarane triterpene) 화합물을 활성성분으로 하는 동맥경화증, 치매, 암 등의 산화적 스트레스성 질환의 예방, 개선 및 치료에 유용한 조성물이 개시되어 있으나, 여전히 다양한 천연물에서 산화적 스트레스 개선 활성을 갖는 신규한 활성성분의 분리 및 개발이 요망되고 있다.
하수오는 다년생 덩굴성 초본으로 길이 5 ~ 10 cm, 지름 3 ~ 10 cm의 여뀌과(Polygonaceae)의 방추형 덩이뿌리로서, 간, 신을 보익하고 혈을 자양하며 풍을 제거하는 효능이 있다고 알려져 있으며 장기 복용 시 혈압강화효과를 나타내어 예로부터 민간요법에 많이 이용되어 왔으며, 심보호 효과, 신경보호 효과 등이 알려져 있고, 모발의 색소 침착을 유도하고 모발의 성장 효과 등이 보고된 바 있다.
하수오의 생리적 활성은 하수오 중에 함유된 안트라퀴논 화합물, 식물성 스테롤, 각종 배당체화합물에서 유래할 것으로 추측되어 왔다. 또한 하수오의 장기 섭취 시 간 손상 등의 부작용이 있어 통상 법제 과정을 거쳐서 섭취되고 있다. 그러나 법제 과정에 의하여 상기 활성성분의 변화로 인하여 법제 하수오의 효능도 많은 변화가 있다고만 알려져 있을 뿐, 이에 대한 연구는 드문 실정이다.
특히 법제 하수오로부터 유래되는 기능성 활성성분 특히 산화적 스트레스 개선 효능을 갖는 활성성분에 대해서는 보고된 바는 없다.
종래 기술에서의 요구에 부응하기 위해 지속적으로 연구한 결과, 본 발명자들은 법제 하수오의 추출물이 생체(신장 근위 세뇨관 세포)에서 활성산소종 (O2 -, H2O2 및 ㆍOH)과 활성질소종(NO, ONOO-)의 우수한 제거활성에 의해 산화적 스트레스 개선 효과를 나타낸다는 것을 확인하고 아울러 활성성분이 테트라하이드록시스틸벤 2-O-β-D-글루코사이드, 레인, 에모딘 및 크리소파놀임을 확인하여 본 발명을 완성하게 되었다.
따라서 본 발명의 목적은 활성산소종 및 활성질소종의 소거활성을 갖는 법제 하수오 유래의 산화적 스트레스 개선용 조성물 및 이를 포함하는 건강기능성 식품을 제공하는 것이다.
또한 본 발명의 목적은 법제 하수오로부터 활성산소종 및 활성질소종의 소거 활성을 갖는 산화적 스트레스 개선용 조성물의 제조방법을 제공하는 것이다.
상기 본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 법제 하수오 유래의 테트라하이드록시스틸벤 2-O-β-D-글루코사이드, 레인, 에모딘 및/또는 크리소파놀을 활성성분으로 포함하는 산화적 스트레스 개선용 조성물을 제공한다.
본 발명에서 법제 하수오 유래의 테트라하이드록시스틸벤 2-O-β-D-글루코사이드, 레인, 에모딘 및 크리소파놀은 테트라하이드록시스틸벤 2-O-β-D-글루코사이드, 레인, 에모딘 및 크리소파놀을 함유하는 추출물 또는 분획물, 또는 이들로부터 정제된 테트라하이드록시스틸벤 2-O-β-D-글루코사이드, 레인, 에모딘 및 크리소파놀을 모두 포함하는 개념이다.
법제 하수오 추출물은 다양한 추출법을 이용하여 추출할 수 있으며, 바람직하게는 에탄올, 메탄올 및 이소프로판올 등의 유기 극성용매를 이용하여 추출할 수 있고, 가장 바람직하게는 메탄올을 이용하여 추출할 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다.
법제 하수오 분획물은 상기 법제 하수오 추출물을 부탄올, 에틸렌, 아세톤, 헥센(hexane), 에테르, 클로로포름, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트 및 디클로로메탄으로 이루어진 군으로 부터 선택되는 하나 이상의 유기용매와 물을 이용하여 분획하여 얻을 수 있으며, 바람직하게는 유기용매로 헥센, 클로로포롬 및 메탄올을 이용하여 분획할 수 있으며, 이에 제한되지 않는다.
바람직하게는 본 발명의 산화적 스트레스 개선용 조성물의 활성성분인 법제 하수오 유래의 테트라하이드록시스틸벤 2-O-β-D-글루코사이드, 레인, 에모딘 및 크리소파놀은 법제 하수오 분말을 메탄올로 추출한 후, 추출물을 물에 현탁한 후 헥센(hexane), 클로로포름 및 메탄올 로 분획한 후, 메탄올 분획물을 메탄올, 클로로포름, 헥센, 부탄올, 및 아세토니트릴로 순차적으로 분획한 후, 다시 각각의 분획물을 물과 메탄올의 농도구배 분획, 메탄올과 클로로포름의 농도구배 분획, 메탄올과 헥센의 농도구배 분획, 메탄올과 부탄올의 농도구배 분획 및 물과 아세토니트릴의 농도구배 분획을 순차적으로 하여 분획물을 얻는다. 활성성분인 4 종의 테트라하이드록시스틸벤 2-O-β-D-글루코사이드, 레인, 에모딘 및 크리소파놀의 분리, 정제는 통상의 정제방법을 이용할 수 있으며, 바람직하게는 정제 순환고압액체크로마토그래피(Prep-recycling High Press Liquid Chromatograph, RHPLC), 역상크로마토그래피, 실리카 겔 프래시 CC 크로마토그래피 또는 세파덱스 LH-20 크로마토그래피를 이용할 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에서는 핵자기공명기 등의 분광학적 기기분석법를 이용하여 테트라하이드록시스틸벤 2-O-β-D-글루코사이드, 레인, 에모딘 및 크리소파놀의 구조를 하기와 같이 동정하였다 (제조예 1, 2 참조):
본 발명의 법제 하수오 추출물/분획물은 활성산소종 및 활성질소종의 소거 활성을 가져서 (시험예 1 ~ 4 참조) 산화적 스트레스 개선 효과를 나타내며, 산화적 스트레스 관련 질환 개선용, 항산화, 항당뇨, 항비만, 항고혈압 건강기능성 식품 조성물로써 사용할 수 있다.
본 발명에 따른 산화적 스트레스 개선용 조성물은 건강식품 분야에서 공지의 방법의 의해 건강기능식품 조성물로 제제화될 수 있고, 법제 하수오 추출물 분말 자체 또는 건강기능식품으로 허용되는 담체, 부형제 등과 혼합하여 건강식품으로 통상으로 허용되는 제제, 예를 들면 환, 과립, 타블렛, 액상음료, 시럽, 연질캡슐 등으로 제제화될 수 있으며, 건강기능식품으로 섭취할 수 있다.
본 발명의 또 다른 목적에 따라서, 본 발명은
ⅰ) 법제 하수오 분말을 제공하는 단계;
ⅱ) 법제 하수오 분말에 20 ~ 30 부피배의 메탄올, 에탄올, 클로로포롬 및 이소프로판올로 이루어지는 군에서 선택되는 1종 이상의 유기용매로 추출하는 단계;
ⅲ) 유기용매 추출물을 물에 현탁한 후, 헥센, 클로로포름 및 메탄올로 분획한 후, 메탄올 분획물을 메탄올, 클로로포름, 헥센, 부탄올, 및 아세토니트릴로 순차적으로 분획한 후, 다시 각각의 분획물을 물과 메탄올의 농도구배 분획, 메탄올과 클로로포름의 농도구배 분획, 메탄올과 헥센의 농도구배 분획, 메탄올과 부탄올의 농도구배 분획 및 물과 아세토니트릴의 농도구배 분획을 순차적으로 하여 분획물을 얻는 단계; 및
ⅳ) 결과의 분획물로부터 2,3,5,4'-테트라하이드록시스틸벤 2-O-β-D-글루코사이드, 레인, 에모딘 및 크리소파놀을 분리하는 단계를 포함하여 이루어지는 산화적 스트레스 개선용 조성물의 제조방법을 제공한다.
필요에 따라서, 본 발명의 산화적 스트레스 개선용 조성물의 제조방법은, 단계 ⅳ) 후에, 2,3,5,4'-테트라하이드록시스틸벤 2-O-β-D-글루코사이드, 레인, 에모딘 및 크리소파놀을 정제하는 단계를 추가로 포함할 수 있다.
단계 ⅰ): 법제 하수오 분말 제공
법제 하수오 분말은 건조된 법제 하수오를 분쇄기로 분쇄하여, 약 80 메쉬 체로 걸러 제조할 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다.
하수오의 법제화는 통상의 방법에 의해 수행될 수 있다. 구체적으로는 하수오를 95 ~ 100℃에서 30 ~ 60 분간 증자한 후 자연 건조하거나 45 ~ 55℃로 유지된 열풍건조기에 넣고 2 ~ 3일 건조하여 법제 하수오를 제조할 수도 있고, 또는 건조 하수오를 생막걸리에 하루 정도 침지시킨 후 이를 다시 건조하고 다시 검정콩물에 하루 정도 침지시킨 후 건조하여 법제 하수오를 제조할 수도 있다.
하수오는 3년 이상인 것을 사용하는 것이 바람직하며 3년 이하의 경우 생리활성물질 함량이 적으며, 수확량(무게)가 적은 단점이 있고, 하수오 뿌리 부분을 사용하는 것이 좋다.
단계 ⅱ): 유기용매 추출
법제 하수오 분말에 20 ~ 30 부피배의 메탄올, 에탄올, 클로로포롬 및 이소프로판올로 이루어지는 군에서 선택되는 1종 이상의 유기용매로 추출한다.
추출은 통상의 방식에 따라 행할 수 있으며, 바람직하게는 추출은 12시간 동안 3회 혹은 50℃에서 5시간 동안 2회 등으로 수행될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
단계 ⅲ): 분획
분획은 통상의 방식에 따라 단계 ⅱ)의 유기용매 추출물을 유기용매의 극성에 따라 물에 현탁하여 헥센, 클로로포름 및 메탄올로 분획한 후, 메탄올 분획물을 메탄올, 클로로포름, 헥센, 부탄올, 및 아세토니트릴로 순차적으로 분획한 후, 다시 각각의 분획물을 물과 메탄올의 농도구배 분획, 메탄올과 클로로포름의 농도구배 분획, 메탄올과 엑센의 농도구배 분획, 메탄올과 부탄올의 농도구배 분획 및 물과 아세토니트릴의 농도구배 분획을 순차적으로 하여 분획한다.
이온크로마토그래피법 컬럼을 이용하여 순차적으로 분획하여 분획물을 얻는다.
단계 ⅳ): 테트라하이드록시스틸벤 2-O-β-D-글루코사이드, 레인, 에모딘 및 크리소파놀 분리
단계 ⅲ)으로부터의 분획물에서 테트라하이드록시스틸벤 2-O-β-D-글루코사이드, 레인, 에모딘 및 크리소파놀을 분리한다.
분리는 통상의 방식으로 수행할 수 있으며, 바람직하게는 정제 순환고압액체크로마토그래피(Prep-recycling High Press Liquid Chromatograph, RHPLC), 역상크로마토그래피, 실리카 겔 프래시 CC 크로마토그래피 또는 세파덱스 LH-20 크로마토그래피를 이용하여 분리할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
필요에 따라서, 단계 ⅲ) 및 ⅳ)를 대체하여, 단계 ⅱ)로부터의 유기용매 추출물을 역상 크로마토그래피법을 이용하여 극성별 유기용매 조성물을 순차적으로 통과하여 분획물을 제조하여 고압액체크로마토그래(HPLC)로 확인하여 이로부터 테트라하이드록시스틸벤 2-O-β-D-글루코사이드, 레인, 에모딘 및 크리소파놀을 분리할 수 있다.
단계 ⅴ): 추가 정제
단계 ⅳ) 후에, 테트라하이드록시스틸벤 2-O-β-D-글루코사이드, 레인, 에모딘 및 크리소파놀을 정제하는 단계를 추가로 포함할 수 있다.
정제는 통상의 방법으로 행할 수 있다.
본 발명에 따른 제조방법의 일례가 도 1에 도시되어 있으며, 본 발명에 따라 제조되고 동정된 법제 하수오 유래의 테트라하이드록시스틸벤 2-O-β-D-글루코사이드, 레인, 에모딘 및 크리소파놀의 구조식은 도 3에 나타내었다.
본 발명에 따라 제조된 법제 하수오 유래 테트라하이드록시스틸벤 2-O-β-D-글루코사이드, 레인, 에모딘 및/또는 크리소파놀을 함유하는 조성물은 생체내 활성산소종 및 활성질소종의 소거 활성을 가져서 (시험예 1 ~ 4 참조) 우수한 산화적 스트레스 개선용 조성물이다.
본 발명에 따른 법제 하수오 유래의 테트라하이드록시스틸벤 2-O--D-글루코사이드, 레인, 에모딘 및/또는 크리소파놀을 유효성분으로 함유하는 산화적 스트레스 개선용 조성물은 생체내 세포에서 활성산소종 및 활성질소종의 소거 활성이 탁월하다.
또한 본 발명에 따른 산화적 스트레스 개선용 조성물은 산화적 스트레스로 인한 질환인 알쯔하이머, 치매, 노화, 비만, 당뇨, 고지혈증, 고혈압의 증상 개선용 건강기능성 식품으로 활용될 수 있다.
도 1은 본 발명에 따른 법제 하수오 유래 테트라하이드록시스틸벤 2-O-β-D-글루코사이드, 레인, 에모딘 및/또는 크리소파놀을 함유하는 산화적 스트레스 개선용 조성물의 제조하는 공정의 일례이다.
도 2는 법제 하수오 추출물의 HPLC 크로마토그램이다. 왼쪽부터 2,3,5,4' -테트라하이드록시스틸벤2-O-β-D-글루코사이드, 레인, 에모딘 및 크리소파놀 순이다.
도 3은 법제 하수오 추출물 및 분획물에서 분리 및 정제되어 구조가 동정된 테트라하이드록시스틸벤 2-O-β-D-글루코사이드, 레인, 에모딘 및 크리소파놀의 화학구조식을 나타내는 도면이다.
도 4는 본 발명에 따른 4종 활성성분을 포함하는 법제 하수오 추출물의 DPPH 라디칼 소거 활성을 나타낸 그래프이다.
도 5는 본 발명에 따른 4 종 활성성분을 포함하는 법제 하수오 추출물의 ABTS 라디칼 소거 활성을 나타낸 그래프이다.
도 6은 본 발명에 따른 4 종 활성성분을 포함하는 법제 하수오 추출물의 하이드록실 라디칼 소거 활성을 나타낸 그래프이다.
도 2는 법제 하수오 추출물의 HPLC 크로마토그램이다. 왼쪽부터 2,3,5,4' -테트라하이드록시스틸벤2-O-β-D-글루코사이드, 레인, 에모딘 및 크리소파놀 순이다.
도 3은 법제 하수오 추출물 및 분획물에서 분리 및 정제되어 구조가 동정된 테트라하이드록시스틸벤 2-O-β-D-글루코사이드, 레인, 에모딘 및 크리소파놀의 화학구조식을 나타내는 도면이다.
도 4는 본 발명에 따른 4종 활성성분을 포함하는 법제 하수오 추출물의 DPPH 라디칼 소거 활성을 나타낸 그래프이다.
도 5는 본 발명에 따른 4 종 활성성분을 포함하는 법제 하수오 추출물의 ABTS 라디칼 소거 활성을 나타낸 그래프이다.
도 6은 본 발명에 따른 4 종 활성성분을 포함하는 법제 하수오 추출물의 하이드록실 라디칼 소거 활성을 나타낸 그래프이다.
다음의 실시예들에 의해 본 발명이 더 상세히 설명된다. 이들 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것이며, 본 발명의 범위가 이들에 의해 제한되어서는 안된다.
실 시 예
제조예 1: 법제 하수오 추출물 제조
스트레인서 추출기에 3년산 법제 하수오 건조 분말 (지리산하수오 영농조합법인) 10 kg과 메탄올 20 L를 첨가하여 320 rpm에서 12시간 추출하는 과정을 3회 반복하고 0.45 μm 여과 필터로 여과하여 모은 후 여과액을 감압농축기(EYELA, Tokyo, Rikakikai Co., Tokyo, Japan)를 이용하여 50 ℃에서 감압 농축하여 법제 하수오 추출물 380 g을 얻었다.
제조예 2: 법제 하수오 유래의 활성물질 제조 및 구조 동정
제조예 1에서 제조된 법제 하수오 추출물 건조물 100 g을 정제수에 현탁한 후, 도 1에 도시된 바와 같이, 분핵깔대기를 이용하여 헥센 분획물, 클로로포롬 분획물 및 메탄올 분획물로 분획한 후, 메탄올 분획물을 다시 분획물 A(메탄올), B(클로로포롬), C(핵센), D(부탄올), E(아세토니트릴)로 순차적으로 분획한 후, 다시 분획물 A1(물 : 메탄올 = 100 : 0) ~ A9(물 : 메탄올 = 0 : 100), B1(메탄올 : 클로로포롬 = 100 : 0) ~ B7(메탄올 : 클로로포롬 = 0 : 100), C1(메탄올 : 헥센 = 100 : 0) ~ C7(메탄올 : 헥센 = 0 : 100), D1(메탄올 : 부탄올 = 100 : 0) ~ D5(메탄올 : 부탄올 = 0 : 100), E1(물 : 아세토니트릴 = 100 : 0) ~ E4(물 : 아세토니트릴 = 0 : 100)로 농도구배 분획을 하였다 (도 1).
A1 ~ E4 분획물을 정제 순환 고압액체크로마토그래피를 이용하여 2,3,5,4' -테트라하이드록시스틸벤 2-O-β-D-글루코사이드, 레인, 에모딘 및 크리소파놀을 분리하여 정제하였다: 분석 칼럼은 Lichrophore 100 RP C18 column(4.6×250 mm, 5 μm, Merck & Co., Kenilworth, NJ, USA)을 사용하였고, 이동상 용매는 1.0% 글라시알 아세트산(solution A)와 100% 아세토니트릴(solution B)로 분석하였고, 이동상 조건은 solution B 기준으로 각각 20, 10, 10 및 10분 동안 10%, 20%, 25% 및 35%로 유지시켰다. 분획물 시료는 20 μL를 주입하였고 이동상의 속도는 30℃에서 1 mL/min로 유지하였고 생리활성물질은 diode array UV detector(Agilent 1200 series, Agilent Co.)의 흡광도 280 nm에서 정량하였다.
HPLC 분석 결과, 2,3,5,4'-테트라하이드록시스틸벤 2-O-β-D-글루코사이드 (화합물 1), 레인 (화합물 2), 에모딘 (화합물 3) 및 크리소파놀 (화합물 4)이 확인되었으며 (도 2), 정량된 각각의 성분의 함량을 환산하여 표 1에 나타냈다.
| 화합물 | 함량 (mg/kg) |
| 2,3,5,4' -테트라하이드록시스틸벤 2-0-β-D-글루코사이드 (1) | 121.11±3.6 |
| 레인 (2) | 0.08±0.00 |
| 에모딘 (3) | 2.28±0.02 |
| 크리소파놀 (4) | 0.73±0.01 |
시험예: 법제 하수오 유래 조성물의 산화적 스트레스 개선효과 시험
상기 제조예 1에서 제조된 본 발명에 따른 4종 활성성분을 포함하는 법제 하수오 추출물을 농축하여 분말을 제조하고 메탄올에 각각 10, 25 및 50 μg/mL 농도로 용해시켜 하기 시험예들의 법제 하수오 유래 조성물 시료로 사용하였다.
시험예 1: 법제 하수오 유래 조성물의 활성산소종 (라디칼) 소거 활성
본 발명에 따른 법제 하수오 유래 조성물의 산화적 스트레스 개선 효과를 활성산소종 (라디칼) 소거 활성 즉, DPPH, ABTS 및 하드록실 (ㆍOH) 라디칼 소거 활성을 측정하여 검정하였다.
<DPPH 라디칼 소거활성>
DPPH 라디칼 소거활성을 측정하여 산화적 스트레스 개선효과를 확인하였다. DPPH(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl, sigma D9132, FW 393.4 C18H12N5O6)는 매우 안정한 라디칼로서 525nm에서 특정 흡광도를 나타내는 보라색 화합물이다.
에탄올로 1.5×10-4 M 농도가 되게 한 DPPH 용액 0.8 ㎖과 상기에서 준비된 법제 하수오 유래 조성물 시료 (10, 25 및 50 μg/mL 농도) 각각의 0.2 mL을 10 초간 보텍스(vortex)로 균일하게 혼합한 후, 실온에서 30분 방치한 후 분광광도계(Spectronic 2D, Thermo Electron Co., Marietta, OH, USA)를 이용하여 525 nm에서 흡광도를 측정하였다. 음성 대조군은 시료 대신에 메탄올을 0.2 mL를 취하여 실험하였고 양성 대조군은 아스코르빅 애스드(L-ascorbic acid)를 사용하여 실험하였다. DPPH 라디칼 소거활성은 아래와 같은 식으로 계산하여 백분율(%)로 표시했으며, 그 결과를 도 4에 나타냈다:
DPPH 라디칼 소거활성(%) =
[1-(음성 대조구 흡광도 ÷ 실험구 흡광도)] × 100
도 4에 나타난 바와 같이, 본 발명에 따른 법제 하수오 유래 조성물의 농도가 증가할수록 DPPH 라디칼 소거활성이 유의적으로 증가하였으며 50 μg/mL의 농도 시료에서 48.4% 까지의 우수한 DPPH 라디칼 소거활성을 나타냈다.
<ABTs 라디칼 소거활성>
ABTs 라디칼 소거활성을 측정하여 산화적 스트레스 개선효과를 확인하였다.
ABTs 라디칼(2,2`-azino-bis-3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid 양이온) 소거활성은 2-아지노-비소의 색을 띤 라디칼의 감소 정도에 따라 검사하는 방법이다. 즉 이 방법은 시료와 표준물질 (trolox, 6-hydroxy-2,5,7,8-tetramethylchroman-2-carboxylic acid)의 값과 비교하여 소거활성을 측정하는 방법으로서, ABTs 양이온(ABTs+)이 소거되어 청록색으로 탈색되는데, 이때 ABTs 양이온(ABTs+)의 제거 정도를 흡광도를 측정함으로써 알 수 있고, 탈색반응이 1분 내에 종료되므로 짧은 시간에 측정이 가능하다.
구체적으로 7 mM ABTs 시약(sigma 1888) 5㎖과 2.45 mM K2S2O8 (FW 270.3, sigma 9392) 5 ㎖을 섞어 어두운 곳에 12 ~ 16시간 방치시켜 보관하여 ABTs 라디칼을 생성시킨 후, 732 nm에서 흡광도가 0.7±0.02가 되도록 메탄올로 희석하여 사용하였다.
상기와 같이 희석된 ABTs 용액 0.9 mL과 상기에서 준비된 법제 하수오 유래 조성물 시료 (10, 25 및 50 μg/mL 농도) 각각의 0.1 mL를 혼합하고 정확히 3분 후 분광광도계(Spectronic 2D)를 이용하여 732 nm에서 흡광도를 측정하였다. 음성 대조군은 시료 대신에 메탄올을 0.1 mL를 취하여 실험하였고 양성 대조군은 아스코르빅 애스드를 사용하여 실험하였다.
ABTs 라디칼 소거활성은 아래와 같은 식으로 계산하여 백분율(%)로 표시하였으며, 그 결과를 도 5에 나타냈다:
ABTs 라디칼 소거활성(%)
= [1-(음성 대조구 흡광도 ÷ 실험구 흡광도)] × 100
도 5에 나타낸 바와 같이, 본 발명에 따른 법제 하수오 유래 조성물의 농도가 증가할수록 ABTs 라디칼 소거활성이 유의적으로 증가하였으며 50 μg/mL의 농도 시료에서 57.9% 까지의 우수한 ABTs 라디칼 소거활성을 나타냈다.
<하이드록실 라디칼 소거 활성>
하이드록실(OH) 라디칼 소거활성 측정하여 산화적 스트레스 개선효과를 검정하였다.
구체적으로는 10 mM FeSO47H20-EDTA 0.2 ㎖, 10 mM 2-데옥시리보스 0.2 ㎖, 10 mM H2O2 0.2 ㎖, 상기에서 준비된 법제 하수오 유래 조성물 시료 (10, 25 및 50 μg/㎖농도) 각각의 1 ㎖를 혼합한 후 37 ℃에서 4시간 동안 반응시켜 혼합액을 만든 후, 이 혼합액에 1% 티오바르비투르산(thiobarbituric acid)/증류수와 2.8% 트리클로로아세트산 /증류수를 각각 1 ㎖를 가하여 100 ℃에서 20분간 가열하고 냉각시킨 후 520 nm에서 흡광도를 측정하여 행하였다.
음성 대조군은 시료 대신에 메탄올을 사용하였고 양성 대조군은 아스코르빅 애스드를 사용하여 실험하였다. 하이드록실 라디칼 소거활성은 시료 용액의 첨가군과 무첨가군 사이의 흡광도의 차이를 백분율(%)로 나타내었으며, 그 결과를 도 6에 나타냈다.
도 6에 나타낸 바와 같이, 본 발명에 따른 법제 하수오 유래 조성물의 농도가 증가할수록 하이드록실 라디칼 소거활성이 유의적으로 증가하였으며, 특히 10 μg/mL의 낮은 농도 시료에서도 70% 이상의 우수한 하이드록실 라디칼 소거활성을 나타냈다.
따라서 본 발명에 따른 2,3,5,4'-테트라하이드록시스틸벤 2-O-β-D-글루코사이드, 에모딘, 크리소파놀 및/또는 레인을 활성성분으로 함유하는 법제 하수오 유래 조성물은 활성산소종(라디칼) 소거 활성이 우수하여 산화적 스트레스 개선 효과를 가짐을 확인할 수 있다.
시험예 2~4: 법제 하수오 유래 조성물의 돼지 신장 세뇨관 세포 모델
(
LLC-PK
1
세포 모델)에서 산화적 스트레스 개선 효과
LLC-PK1 세포 모델을 사용하여 본 발명의 법제 하수오 유래 조성물의 산화적 스트레스 개선 효과를 분석하였다.
<LLC-PK1 세포 모델 시험>
신장 근위 세뇨관 세포는 자유 라디칼에 매우 민감한 세포로 특히 LLC-PK1, 돼지 신장 세뇨관 세포는 네프론에서 유도된 MDCK 다비 개 신장 상피 세포보다 산화적 스트레스에 더욱 민감한 세포이다. LLC-PK1 세포에 자유 라디칼 생성물질로 라디칼 생성을 유도하여 산화적 손상(스트레스)을 일으킨 후에 이에 대한 개선 효과를 살펴봄으로써 시료의 산화적 스트레스 개선 효과를 살펴볼 수 있다.
구체적으로는 LLC-PK1 세포가 컨플루언스(confluence) 상태가 되면 96-웰 배양 플레이트에 LLC-PK1 세포를 1×104 cells/mL로 분주하여 2시간 배양한 후 산화적 스트레스 유발물질인 250 μM 피로갈롤(pyrogallol), 500 μM 소디움 니트로프루시드(sodium nitroprusside; SNP) 및 1 mM 3-모르폴리노시드노니미드(morpholinosydnonimide; SIN-1)를 각각 처리하여 24시간 배양하였다. 그리고 나서 상기에서 준비된 법제 하수오 유래 조성물 시료 (10, 25 및 50 μg/mL 농도) 각각을 처리하여 다시 24시간 배양한 후, 5 mg/mL의 MTT 용액을 각 웰에 주입하여 37℃에서 4시간 동안 재배양한 후 생성된 포르마잔 (formazan) 결정을 빛을 차단한 상태에서 DMSO에 녹여 540 nm에서 흡광도를 측정하였다.
시험예 2: 피로갈롤 유발 산화적 스트레스 개선 효과
피로갈롤(Pyrogallol)은 H2O2의 전구체로 수용액 상태일 때 빠른 자동 산화과정을 통해 활성산소종인 O2 -를 생성하고 이렇게 생성된 활성산소종은 동맥경화 및 혈관-관련 여러 질환의 병리적 매개 물질로 작용하게 된다.
상기에서 시험된 피로갈롤에 의해 산화적 스트레스가 유발된 LLC-PK1 세포 모델에서 본 발명의 법제 하수오 유래 조성물의 보호효과 즉 세포 생존율을 표 2에 나타냈다.
| 본 발명의 법제 하수오 조성물 처리농도 (μg/mL) | 세포 생존율(%) |
| 10 | 74.8±1.4 |
| 25 | 75.7±4.2 |
| 50 | 82.1±1.9 |
| 0 (대조군) | 69.4±3.2 |
| 정상군 | 100.0±2.8 |
표 2에 나타낸 바와 같이, 피로갈롤(Pyrogallol)만을 처리한 대조군은 유발된 O2 -에 의해 산화적 스트레스로 인하여 69.4%의 세포 생존율을 보인 반면에, 본 발명의 법제 하수오 조성물 시료를 처리한 경우는 농도가 증가할수록 세포 생존율이 증가하였고, 특히 50 μg/mL 농도 시료 처리의 경우는 80% 이상의 세포 생존율을 보였다. 따라서 본 발명의 법제 하수오 조성물은 활성산소종 O2 - 소거활성이 우수하여 산화적 스트레스로부터 세포 보호 효과가 뛰어난 것을 알 수 있다.
시험예 3: SNP 유발 산화적 스트레스 개선 효과
SNP는 니트로소디움 이온(nitrosodium ion)을 함유해 가시광선에 노출될 때 NO를 생성하는 화합물로 이에 의해 생성된 NO는 인체에서 중요한 생리적 조절인자로 작용하지만 고농도의 NO는 반응성 산화물질로 전환되어 세포에 병적인 손상을 유발한다. NO가 세포 생존에 미치는 영향은 농도와 세포 종류에 따라 다르게 나타나는 것으로 알려져 있으며, 일반적으로 고농도에서는 세포 생존율에 해로운 영향을 미치는 것으로 알려져 있다.
상기에서 시험된 SNP에 의해 산화적 스트레스가 유발된 LLC-PK1 세포 모델에서 본 발명의 법제 하수오 유래 조성물의 보호효과 즉 세포 생존율을 표 3에 나타냈다.
| 본 발명의 법제 하수오 조성물 처리농도 (μg/mL) | 세포 생존율(%) |
| 10 | 75.1±2.3 |
| 25 | 85.3±2.8 |
| 50 | 89.1±3.1 |
| 0 (대조군) | 68.3±2.2 |
| 정상군 | 100.0±1.8 |
표 3에 나타낸 바와 같이, SNP만을 처리한 대조군은 세포 생존율이 68.3%로 감소하였던바, 유발된 NO에 의한 산화적 스트레스로 인하여 세포가 손상되었음을 확인할 수 있고, 반면에 본 발명의 법제 하수오 조성물 시료를 처리한 경우는 농도가 증가할수록 세포 생존율이 증가하였고, 특히 25 μg/mL 이상의 농도 시료 처리군에서는 모두 85% 이상의 세포 생존율을 나타내었다. 따라서 본 발명의 법제 하수오 조성물은 활성질소종 NO 소거활성이 우수하여 산화적 스트레스로부터 세포 보호 효과가 뛰어난 것을 알 수 있다.
시험예 4: SIN-1 유발 산화적 스트레스 개선 효과
SIN-1은 NO와 O2 -를 생성하고 이들은 급속히 반응하여 ONOO-를 형성하며 이것은 강력한 세포독성 산화물(cytotoxic oxidants)로 분해되기 때문에 독성효과를 나타내게 된다.
상기에서 시험된 SIN-1에 의해(ONOO-에 의한) 산화적 스트레스가 유발된 LLC-PK1 세포 모델에서 본 발명의 법제 하수오 유래 조성물의 보호효과 즉 세포 생존율을 표 4에 나타냈다.
| 본 발명의 법제 하수오 조성물 처리농도 (μg/mL) | 세포 생존율(%) |
| 10 | 64.6±1.8 |
| 25 | 72.5±3.9 |
| 50 | 77.6±2.4 |
| 0 (대조군) | 60.4±3.5 |
| 정상군 | 100.0±2.2 |
표 4에 나타낸 바와 같이, SIN-1만을 처리한 대조군은 60.4%로 세포 생존율이 감소하였던바, 유발된 ONOO-에 의한 산화적 스트레스로 인하여 세포가 손상되었음을 확인할 수 있고, 반면에 본 발명의 법제 하수오 조성물 시료를 처리한 경우는 농도 의존적으로 세포 생존율이 증가하였고, 특히 25 및 50 μg/mL 농도 시료 처리군에서는 각각 72.5%와 77.6%의 세포 생존율을 나타냈다. 따라서 본 발명의 법제 하수오 조성물은 활성질소종 ONOO- 소거활성이 우수하여 산화적 스트레스로부터 세포 보호 효과가 뛰어난 것을 알 수 있다.
상기 시험 결과로부터 본 발명의 법제 하수오 조성물은 산화적 스트레스 개선 효과에 우수하다는 것을 확인할 수 있다.
Claims (11)
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 법제 하수오의 유기용매 추출물 또는 분획물으로 이루어지는 산화적 스트레스 개선용 건강기능성 식품으로,
상기 추출물 또는 분획물은 활성성분으로 테트라하이드록시스틸벤 2-O-β-D-글루코사이드를 121mg/kg 이상 포함하고, O2 -, H2O2 및 ㆍOH의 활성산소종 소거활성과 NO 및 ONOO- 의 활성질소종 소거활성을 갖는 것인 건강기능성 식품.
- 삭제
- 삭제
- 제 6항에 있어서, 정제, 캅셀제, 분말제, 과립제, 액상제 및 환제로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나의 형태로 가공된 것을 특징으로 하는 산화적 스트레스 개선용 건강기능성 식품.
- 삭제
- 삭제
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020150071021A KR101737556B1 (ko) | 2015-05-21 | 2015-05-21 | 법제 하수오 추출물을 유효성분으로 포함하는 산화적 스트레스 개선용 조성물 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020150071021A KR101737556B1 (ko) | 2015-05-21 | 2015-05-21 | 법제 하수오 추출물을 유효성분으로 포함하는 산화적 스트레스 개선용 조성물 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20160136867A KR20160136867A (ko) | 2016-11-30 |
| KR101737556B1 true KR101737556B1 (ko) | 2017-05-18 |
Family
ID=57707816
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020150071021A KR101737556B1 (ko) | 2015-05-21 | 2015-05-21 | 법제 하수오 추출물을 유효성분으로 포함하는 산화적 스트레스 개선용 조성물 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR101737556B1 (ko) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR102074314B1 (ko) * | 2018-10-22 | 2020-03-17 | 주식회사 엘지생활건강 | 탈모방지 또는 모발성장 촉진용 조성물 |
| CN110693773A (zh) * | 2018-07-09 | 2020-01-17 | 株式会社Lg生活健康 | 防脱发或毛发生长促进用组合物 |
| CN114509507B (zh) * | 2020-11-16 | 2024-03-12 | 上海新亚药业邗江有限公司 | 一种同时测定黄精赞育胶囊中多种指标的定量方法 |
-
2015
- 2015-05-21 KR KR1020150071021A patent/KR101737556B1/ko active IP Right Grant
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| International Journal of Radiation Biology, 제90권제4호, 275~283쪽, 온라인공개일: 2014년 03월 7일.* |
| 한국한의학연구원 논문집 제13권제3호, 157~163쪽, 2007년 12월.* |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| KR20160136867A (ko) | 2016-11-30 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR101366187B1 (ko) | 프로안토시아니딘 올리고머의 제조방법 | |
| JP5615966B2 (ja) | ピセアタンノール含有組成物 | |
| US20080152734A1 (en) | Anti-Inflammatory Agent | |
| JP4571081B2 (ja) | ライチポリフェノール含有組成物、その製造方法及び用途 | |
| CN114376952B (zh) | 一种芍药花提取物及其制备方法和应用 | |
| Abri et al. | Isolation and identification of gallic acid from the Elaeagnus angustifolia leaves and determination of total phenolic, flavonoids contents and investigation of antioxidant activity | |
| CN102850416A (zh) | 一种油橄榄叶提取物的制备方法及所用装置 | |
| KR101603733B1 (ko) | 옥수수수염 유래 메이신을 포함하는 유효물질의 고수율 추출방법 | |
| KR101737556B1 (ko) | 법제 하수오 추출물을 유효성분으로 포함하는 산화적 스트레스 개선용 조성물 | |
| KR101404286B1 (ko) | 신선초 녹즙 부산물로부터 칼콘 고함유 추출물 제조방법 | |
| ITRM20060233A1 (it) | Metodo per la preparazione e l uso di un estratto arricchito in cianidina 3 o beta glucopiranoside e suoi derivati da frutti e vegetali conenti detta antocianina e per la purificazione e l uso di cianidina 3 o beta glucopiranoside e suoi derivati da | |
| KR20110068949A (ko) | 매실나무 추출물 및 그 제조방법과 용도 | |
| KR101453609B1 (ko) | 조팝나무잎으로부터 분리된 신규 헤미테르펜 글루코사이드 화합물 및 이의 항산화 및 항염 용도 | |
| EP4321518A1 (en) | Novel polyphenol compound | |
| KR101387631B1 (ko) | 참당귀 잎으로부터 데쿠시놀안젤레이트 함유 추출물을 제조하는 방법 | |
| KR101396059B1 (ko) | 소귀나무잎으로부터 분리된 신규 황산염 페놀성 화합물 및 이의 항산화 및 항염 용도 | |
| KR101603490B1 (ko) | 초임계 추출을 이용한 식물 유래 β-시토스테롤의 분리방법 | |
| KR101372458B1 (ko) | 신강 감초로부터 유용성분의 추출방법 및 그 추출물의 용도 | |
| WO2022254867A1 (ja) | 新規フェニルプロパノイド化合物 | |
| JP5946698B2 (ja) | 美白剤及び皮膚化粧料 | |
| Verotta et al. | Complete characterization of extracts of Onopordum illyricum L.(Asteraceae) by HPLC/PDA/ESIMS and NMR | |
| KR20200016101A (ko) | 에틸 락테이트를 이용한 천연물질 추출물의 제조방법 | |
| KR101890725B1 (ko) | 나도풍란 추출물을 함유하는 항산화용 조성물 | |
| KR20100057460A (ko) | 동백꽃봉오리 추출물을 유효성분으로 하는 비만억제 및 항산화 조성물 | |
| KR20070039409A (ko) | 천문동 내 ｈｍｆ의 함량 증강방법 및 상기 방법에 의하여함량이 증강된 ｈｍｆ의 정제방법 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A201 | Request for examination | ||
| E902 | Notification of reason for refusal | ||
| E701 | Decision to grant or registration of patent right | ||
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20200226 Year of fee payment: 4 |