EA000412B1 - Фармацевтические композиции, содержащие в качестве активного начала жизнеспособные лактобациллы, способы их применения и препарат из микроинкапсулированных лактобацилл - Google Patents

Фармацевтические композиции, содержащие в качестве активного начала жизнеспособные лактобациллы, способы их применения и препарат из микроинкапсулированных лактобацилл Download PDF

Info

Publication number
EA000412B1
EA000412B1 EA199700437A EA199700437A EA000412B1 EA 000412 B1 EA000412 B1 EA 000412B1 EA 199700437 A EA199700437 A EA 199700437A EA 199700437 A EA199700437 A EA 199700437A EA 000412 B1 EA000412 B1 EA 000412B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
bacteria
pharmaceutical composition
lactobacilli
viable
lactobacillus
Prior art date
Application number
EA199700437A
Other languages
English (en)
Other versions
EA199700437A1 (ru
Inventor
Лэрри С. Форд
Original Assignee
Лэфор Лэбараторис Лимитед
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Лэфор Лэбараторис Лимитед filed Critical Лэфор Лэбараторис Лимитед
Publication of EA199700437A1 publication Critical patent/EA199700437A1/ru
Publication of EA000412B1 publication Critical patent/EA000412B1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/741—Probiotics
    • A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
    • A61K35/747—Lactobacilli, e.g. L. acidophilus or L. brevis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0034—Urogenital system, e.g. vagina, uterus, cervix, penis, scrotum, urethra, bladder; Personal lubricants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/02—Suppositories; Bougies; Bases therefor; Ovules
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/1629—Organic macromolecular compounds
    • A61K9/1635—Organic macromolecular compounds obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyvinyl pyrrolidone, poly(meth)acrylates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/1629—Organic macromolecular compounds
    • A61K9/1652—Polysaccharides, e.g. alginate, cellulose derivatives; Cyclodextrin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/5005—Wall or coating material
    • A61K9/5021—Organic macromolecular compounds
    • A61K9/5026—Organic macromolecular compounds obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyvinyl pyrrolidone, poly(meth)acrylates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/5005—Wall or coating material
    • A61K9/5021—Organic macromolecular compounds
    • A61K9/5031—Organic macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyethylene glycol, poly(lactide-co-glycolide)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/12—Antidiarrhoeals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A61P15/02—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for disorders of the vagina
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S424/00—Drug, bio-affecting and body treating compositions
    • Y10S424/15—Suppositories
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
    • Y10S435/853—Lactobacillus
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
    • Y10S435/853—Lactobacillus
    • Y10S435/854—Lactobacillus acidophilus

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Gynecology & Obstetrics (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Manufacturing Of Micro-Capsules (AREA)

Description

Область, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции в форме капсул, таблеток, кремов, пенообразующих средств, мазей, порошков, суппозиториев и т.д., содержащих микроинкапсулированные лактобациллы, для орального, местного и внутривагинального введения с целью лечения или профилактики спровоцированных антибиотиками диареи, кожных и вагинальных инфекций.
Краткое описание предшествующего уровня техники
Вызванная антибиотиками диарея представляет собой наиболее распространенный побочный эффект антибактериальной терапии широкого профиля и, по-видимому, является следствием изменения кишечной флоры, как результата лечения антибиотиками и, особенно, исчезновения лактобацилл из состава кишечной флоры. Это состояние может стать опасным для жизни пациента и очень трудноизлечимым, когда оно вызвано заражением бактериями Clostridium difficile.
До этого предпринимались попытки терапии вызванной антибиотиками диареи оральным введением лактобацилл. В патенте США № 4,332,790, а также в опубликованной французской заявке № 2 443 247 описаны различные микроорганизмы, в том числе лактобациллы в капсулах, оболочка которых состоит из маслянистых веществ. Маслянистые вещества по своей природе не разлагаются под воздействием влаги. Однако было доказано, что такой подход имеет ограниченный успех из-за двух основных причин. Первая заключается в том, что вводимые орально лактобациллы, как показали предшествующие исследования, подвергаются разрушающему воздействию желудочного сока. Поэтому только неадекватно малое количество жизнеспособных лактобацилл достигают нижних отделов кишечника, где они необходимы для восстановления здоровой флоры, содержащей лактобациллы. Вторая причина заключается в том, что у лиц, страдающих диареей, вызванной применением антибиотиков, часто обнаруживается временная непереносимость лактозы. (Временная лактозная непереносимость является по мнению специалистов результатом утраты ворсинок щеточной каемки на клетках кишечника, вызванной антибиотиками). Более того, указанный тип преходящей лактозной непереносимости встречается даже у лиц, которые в других случаях при нормальных условиях ею не страдают и не имеют предшествующего опыта непереносимости молочных продуктов или лактозы.
В соответствии с предшествующим уровнем техники препараты на основе молочнокислых бацилл обычно содержат следы питательной среды, в которой они выращивались, и потому включают лактозу, лактулозу и другие дисахариды. Они же, в свою очередь, достигая нижних отделов кишечника у лиц, страдающих диареей, вызванной антибиотиками, усугубляют преходящую лактозную непереносимость. В свете вышесказанного имеют место предпосылки для улучшения существующего положения. Более конкретно, имеются возможности для улучшения фармацевтических композиций и способов лечения диареи, вызванной антибиотиками, а также лечения и профилактики определенных кожных и вагинальных инфекций. Настоящее изобретение обеспечивает эти улучшения.
Краткое описание изобретения
В соответствии с одним аспектом настоящего изобретения более чем приблизительно 103 жизнеспособных микроинкапсулированных лактобацилл в каждой единичной дозе вводятся орально в качестве фармацевтической композиции или лекарственного средства лицам, страдающим вызванной антибиотиками диареей. Лактобациллы вводятся для терапии или профилактики диареи и такое лечение предпочтительно продолжается во время лечения антибиотиками и некоторое время спустя после лечения. Назначение микроинкапсулированных лактобацилл может сочетаться и с назначением метронидазола или других антибиотиков, уничтожающих Clostridium difficile. Микроинкапсулированные лактобациллы выживают в достаточных количествах при действии желудочного сока в процессе продвижения через желудок к нижним отделам кишечного тракта, где они помогают генерации и восстановлению здоровой бактериальной флоры и устраняют или смягчают симптомы диареи, вызванной антибиотиками.
Другой аспект настоящего изобретения заключается в том, что фармацевтическая композиция, содержащая микроинкапсулированные лактобациллы, применяется местно на коже для предотвращения или лечения кожных инфекций, а для предотвращения или лечения вагинальных инфекций применяются вагинальные кремы, пенообразующие средства, мази или суппозитории. Огромное число лекарственных форм, таких как желатиновые капсулы, таблетки или жидкие дозированные формы, могут использоваться для орального введения микроинкапсулированных лактобацилл. Аналогично, огромное количество лекарственных форм, таких как кремы, пенки, мази, суппозитории или смеси с инертными порошками, например, крахмалом или тальком, могут быть использованы для местного и/или вагинального введения микроинкапсулированных лактобацилл пригодным для этого способом.
Далее приводится подробное описание изобретения и обзор определенных экспериментов и результатов, которые демонстрируют эффективность изобретения.
Подробное описание изобретения.
Согласно изобретению, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus rhamnosus и другие виды молочнокислых бактерий, такие как L. bulgaricus, L. thermophilus и подобные им, используются для орального, местного (наружного) или вагинального применения для профилактики или лечения заболеваний или состояний, описанных ниже. Разнообразные виды лактобацилл в дальнейшем все вместе именуются именно таким образом, хотя, если конкретный вид описан, то далее он обозначается своим собственным, более определенным названием. В соответствии с настоящим изобретением установлено, что микроинкапсулированные бактерии обладают огромным преимуществом в плане терапевтического использования при сравнении в одних и тех же условиях с лечением или попытками лечения с помощью лактобацилл, не подвергнутых микроинкапсулированию. Вопервых, микроинкапсулирование существенно увеличивает время полужизни бактерий. Еще более важным, тем не менее, является то, что после применения по отношению к человеку или животному таких бактерий оральным, местным или внутривагинальным путем, оболочка микрокапсулы медленно растворяется и позволяет лактобациллам постепенно высвобождаться в окружающую среду, а именно, в нижние отделы кишечника, на кожу или в вагину, в зависимости от способа применения. Когда микроинкапсулированные лактобациллы используются для орального введения, микроинкапсулирование обеспечивает защиту лактобацилл от действия желудочного сока и позволяет жизнеспособным лактобациллам достигать нижних отделов кишечника, где они способны обеспечивать успешное лечебное воздействие.
Поскольку для доставки микроинкапсулированных лактобацилл к предполагаемому месту действия могут использоваться различные способы (оральный для доставки в нижние отделы кишечника, аппликации на кожу или интравагинальный способ), необходимо, вообще говоря, чтобы, по меньшей мере, приблизительно 103 жизнеспособных лактобацилл содержалось в каждой единичной дозированной форме, будь то желатиновая капсула, крем, мазь, порошок-присыпка для кожи или вагинальный суппозиторий. В целом это означает, что в каждом грамме или миллилитре заявленной фармацевтической композиции содержится, по меньшей мере, 1 03 жизнеспособных микроинкапсулированных лактобацилл. Более предпочтительно, чтобы концентрация лактобацилл в доставляемом лекарственном средстве или фармацевтической композиции составляла приблизительно 103-1012 жизнеспособных бактерий на грамм или на миллилитр фармацевтической композиции, причем пределы 105-1012 особенно предпочтительны. В этом отношении отмечается, что 1012 бактерий на грамм или миллилитр, по существу, является самым высоким значением количества лактобацилл, которое может содержаться в грамме или миллилитре материала. В настоящее время наиболее предпочтительная концентрация лактобацилл для местного или орального использования составляет приблизительно 106107 жизнеспособных микроинкапсулированных бактерий на миллилитр или грамм композиции.
В предпочтительных вариантах осуществления изобретения бактерии относятся к виду Lactobacillus rhamnosus. Хотя некоторые бактериологи относят Lacto bacillus rhamnosus к отдельному, но родственному виду по отношению к Lactobacillus acidophilus, L. rhamnosus все же следует считать простым вариантом L. аcidophilus. Как известно специалистам, и L. acidophilus, и Lactobacillus rhamnosus, а также и другие виды лактобацилл Lactobacillus являются симбиотическими и составляют нормальную интравагинальную бактериальную флору и также входят в состав здоровой кишечной флоры. Известно, что оба вида этих бактерий продуцируют бактерициды и перекись водорода, которые способствуют подавлению патогенных бактерий. Преимущества Lactobacillus rhamnosus перед вариантом L. acidophilus согласно настоящему изобретению заключаются в том, что вариант L. rhamnosus более плодовит (примерно в 8-10 раз) и способен к ферментированию большего числа углеводов (23 по сравнению с 1 2 у варианта L. acidophilus) и, кроме того, вариант L. rhamnosus продуцирует L+нмолочную кислоту вместо рацемата молочной кислоты, продуцируемого вариантом L. acidophilus. Указанное является преимуществом, так как способность варианта L. rhamnosus расти на большем количестве углеводов делает его более стойким и способным к выживанию. Продуцирование L+-молочной кислоты также является преимуществом из-за того, что она является L+энантиомером, который проявляет существенное противогрибковое действие.
Оба варианта бактерий, и Lactobacillus acidophilus, и Lactobacillus rhamnosus, используемые в предпочтительных вариантах осуществления настоящего изобретения, могут быть приобретены коммерческим путем, либо могут быть получены из лабораторных штаммов. Вариант Lactobacillus rhamnosus, используемый в описанном ниже предпочтительном варианте осуществления изобретения, получен из Института Розелла, Montreal, Quebec, Canada. Вариант Lactobacillus микроинкапсулируют в соответствии с настоящим изобретением и вводят в состав фармацевтической композиции, пригодной для орального, местного или вагинального применения. Некоторые способы или методики микроинкапсулирования указанных бактерий описываются ниже. Цель микроинкапсулирования бактерий - увеличить время их полужизни, гарантировать значительному числу жизнеспособных лактобацилл выживание, чтобы они могли достигнуть нижних отделов кишечника в случае орального введения, и обеспечить медленное и постепенное высвобождение в случае местного и интравагинального введения. Материал покрывающей бактерии капсулы выбирают, согласно настоящему изобретению, таким образом, что структура его теряет свою целостность пленки в кишечной или вагинальной среде или при применении на коже (с предварительным увлажнением) и высвобождает лактобациллы.
Некоторые способы и процедуры микроинкапсулирования описываются ниже.
Способы инкапсулирования Для инкапсулирования используют жизнеспособные лиофилизированные лактобациллы, которые лиофилизированы после удаления среды. Бактерии могут быть приобретены коммерческим путем или могут быть получены из лабораторных штаммов. Предпочтительные для осуществления настоящего изобретения бактерии Lactobacillus rhamnosus были куплены у Института Розелла, Montreal, Quebec, Canada. Микроорганизмы выращивают на питательной среде до log-фазы. Пригодными средами являются среда Тейера-Мартина, триптиказный соевый бульон, экстракт мозга и сердца или любая другая обогащенная среда, пригодная для культивирования указанных микроорганизмов. Единственными важными факторами являются жизнеспособность и количество микроорганизмов, которые определяют стандартными клиническими лабораторными методами разбавления, такими как количественное разведение бактерий на чашках с кровяным агаром или другими обогащенными средами, инкубирование при 37°С в течение 24-48 ч в атмосфере с 5-10% двуокиси углерода с последующим подсчетом колоний. Удаление питательной среды осуществляют центрифугированием при 1 4 000 g и 0-4°С, после чего бактерии промывают стерильным сбалансированным раствором солей и 5%-ным раствором глюкозы, по меньшей мере, три раза. Затем бактерии немедленно замораживают жидким азотом и лиофилизируют в глубоком вакууме.
Способ инкапсулирования А Свежеприготовленные, промытые и лиофилизированные бактерии получают, как описано выше, и суспендируют в 10 мл 5% глюкозно-солевого раствора в таком объеме, который обеспечивает получение насыщенной бактериальной суспензии, содержащей от одного до десяти биллионов организмов в мл, при 0-4°С. Все указанные процедуры выполняют при 04°С, если не указано другое, для того, чтобы увеличить жизнеспособность лактобацилл, которые при комнатной температуре ее утрачивают. Суспензию бактерий быстро, но аккуратно перемешивают по мере добавления 0,2-0,4 мл раствора альгината натрия (1,5%, вес/объем).
Указанную смесь затем переносят в 4-литровую круглодонную колбу с помощью струи азота, выпускаемой через затупленную иглу 1 4-го калибра. 4-литровую круглодонную колбу предварительно промывают 5%-ным раствором альбумина и затем прогревают, по крайней мере, 1 0 ч при 65°С, при этом используемые иглу и трубку обрабатывают аналогичным образом. Затем указанную смесь под давлением пропускают через иглу 30-го калибра со многими скосами с использованием большого шприца и струи азота. На конце иглы образуются очень маленькие капельки, которые высыхают в струе азота и воздуха вокруг иглы 30-го калибра, и капельки собирают в водный раствор 1,3-2%ного хлорида кальция, где они переходят в гель. Затем капельки промывают, по крайней мере, три раза 0,08-0,13%-ным раствором 2-(Nциклогексиламино)этансульфоновой кислоты (CHES) и 1,01 ,5%-ным раствором хлорида кальция. Перешедшие в гель капельки или маленькие шарики затем промывают, по крайней мере, пятикратным избытком 0,1% CHES, 1,1%-ным хлоридом кальция и нормальным физиологическим раствором. Полученные в результате шарики затем мгновенно замораживают в жидком азоте и лиофилизируют. После этого инкапсулированные микроорганизмы могут быть использованы в составах, заявленных согласно данному изобретению.
Способ инкапсулирования В Как усовершенствование способа инкапсулирования А, выполняют следующие стадии для того, чтобы придать бактериям большую устойчивость по отношению к катионным антимикробным агентам. Процедуры выполняют при 04°С. Так, после промывания, описанного выше (Способ инкапсулирования А), материал подвергают взаимодействию с раствором поли-Lлизина (Sigma) (0,05%, вес/объем) в течение 10 мин. Затем шарики промывают нормальным физиологическим раствором, рН которого доводят до 4,5 молочной кислотой. Полученные в результате шарики подвергают мгновенному замораживанию в жидком азоте и затем лиофилизируют. После указанных процедур инкапсулированные микроорганизмы могут быть использованы в составах, заявленных согласно данному изобретению.
Способ инкапсулирования С При 0-4°С свежеполученные, промытые лиофилизированные бактерии перемешивают с гидроксипропилметилцеллюлозой до достижения весового отношения бактерий к гидроксипропилметилцеллюлозе 10/90, хотя оно может варьировать в пределах от 1/99 до 99/1 соответственно. Соотношение будет влиять на конечную массу и жизнеспособность инкапсулированных микроорганизмов.
Следует понимать, что более высокое содержание целлюлозы будет защищать бактерии в процессе инкапсулирования. Смесь лиофилизированных бактерий и гидроксипропилметилцеллюлозы инкапсулируют методом раппокрытия. Процесс осуществляют при использовании круглодонной колбы из нержавеющей стали, которую заранее покрывают 1%-ной суспензией стеарата магния в воде. Комбинация свободноводопроницаемого сополимера эфира акрилметакриловой кислоты и частично водопроницаемого сополимера эфира акрилметакриловой кислоты (EUDRAGIT RLTM и EUDRAGIT RSTM соответственно), полученную от фирмы Rohm Parm. Ltd., Germany, суспендируют при 5-10%-ной концентрации в ацетонизопропанольной смеси (1:1), содержащей 1% (вес/объем) касторового масла. Соотношение двух сополимеров может колебаться от 1 : 1 до 1 :1 0 и в предпочтительном случае составляет 1:2.
Суспензию помещают в круглодонную колбу из нержавеющей стали. Поскольку в суспензии сополимеров бактерии быстро погибают, процесс необходимо вести быстро при высоком содержании гидроксипропилметилцеллюлозы по отношению к бактериям. Таким образом, смесь бактерий и целлюлозы добавляют в колбу из нержавеющей стали небольшими порциями, тщательно перемешивая содержимое в течение 3-10 мин, пока материал не высушится над струёй азота.
Способ инкапсулирования D
Свежеполученные, промытые лиофилизированные бактерии добавляют при быстром, но осторожном перемешивании при 0-4°С к плотной суспензии поливинилпирролидона (коммерчески доступной от BASF, Germany), который может быть и может не быть перекрестносвязанным, в течение 2-1 2 ч с однопроцентным (1 %) раствором дивинилбензола (Bio-Rad) в сбалансированном солевом растворе, содержащем 5% глюкозы при рН 5,0 (пределы 4,5-8,0). Материал затем мгновенно замораживают и лиофилизируют.
Способ инкапсулирования Е
Свежеполученные, промытые, лиофилизированные бактерии добавляют при быстром, но аккуратном перемешивании к суспензии поливинилпирролидона (Crospovidone). B частности, десять граммов лиофилизированных бактерий добавляют к суспензии 50 г поливинилпирролидона (Crospovidone) при 0-4°С.
Инкапсулирование происходит при перемешивании в течение 30-60 мин, хотя можно использовать и более длительный период времени. Влагу удаляют из смеси под вакуумом в эксикаторе, либо материал мгновенно замораживают и лиофилизируют.
Оральное введение микроинкапсулированных лактобацилл
Микроинкапсулированные лактобациллы (согласно наиболее предпочтительному варианту осуществления изобретения Микроинкапсулированные Lactobacillus rhamnosus) назначают орально лицам, страдающим вызванной антибиотиками диареей или другими формами острой или хронической диареи и последовавшими за ней осложнениями. В соответствии с настоящим изобретением было установлено, что такое лечение микроинкапсулированными лактобациллами существенно корригирует или устраняет симптомы диареи, вызванной антибиотиками. Примеры антибиотиков, побочные эффекты при использовании которых, а именно диарея, были существенно снижены или устранены лечением, проведенным согласно настоящему изобретению, включают клиндамицин, ампициллин или тетрациклин. Специалистам будет понятно, что антибиотики вводили пациентам как средство, необходимое для лечения основной инфекции, и что лечение с помощью микроинкапсулированных лактобацилл, согласно изобретению, сопровождает лечение антибиотиками для устранения или снижения его побочных проявлений. В случае, если пациент страдает от инфекции, вызванной Clostridium difficile, рекомендуется лечение такими лекарственными средствами, как метронидазол, ванкомицин или другими пригодными для этого препаратами в соответствии с настоящим изобретением, поскольку эти лекарственные средства уничтожают бактерии Clostridium difficile.
Многочисленные средства, известные в данной области, как подходящие для орального введения лекарств и фармацевтических препаратов, могут также использоваться и для орального введения микроинкапсулированных лактобацилл в соответствии с настоящим изобретением. Вообще говоря, оральная доза микроинкапсулированных лактобацилл для взрослого больного, страдающего вызванной антибиотиками или другой формой острой или хронической диареи, составляет примерно от 4 х 103 до 4 х 1012 жизнеспособных лактобацилл ежедневно, что предпочтительно разделить на четыре примерно равные дозы в течение дня. Еще более предпочтительно вводить оральным путем приблизительно 105-1012 жизнеспособных микроинкапсулированных бактерий примерно четыре раза в день. Дозы принимаемых оральным путем бактерий могут быть смешаны с фармацевтическими наполнителями, хорошо известными из уровня техники, для приготовления таблеток, порошков, орально дозируемых жидких средств, капель или же микроинкапсулированные бактерии могут быть заключены в капсулы и вводиться в капсулах, например, желатиновых. Дозы жидких и капельных средств должны быть, однако, недавно приготовленными, иначе жидкость нарушит целостность микроинкапсулирующей оболочки и отрицательно повлияет на жизнеспособность бактерий при воздействии желудочного сока. Сейчас предпочтительной формой орального введения микроинкапсулированных лактобацилл являются капсулы. В соответствии с этим отмечается, что капсула, например желатиновая, служащая упаковкой для микроинкапсулированных лактобацилл для достижения целей данного изобретения, является, как установлено фармацевтически пригодным носителем, поскольку она служит для доставки орально принятых доз активного ингредиента, а именно, микроинкапсулированных лактобацилл. Другими фармацевтически пригодными носителями являются хорошо известные в данной области материалы, используемые для приготовления порошков, такие как крахмал, микрокристаллическая целлюлоза, поддерживающие рН, и ароматизирующие и вкусовые добавки. Другие носители указываются ниже при описании средств направленного транспорта при местном (кожном) и интравагинальном способах применения. Несмотря на то, что в настоящее время это не является особо предпочтительным частным случаем использования, микроинкапсулированные лактобациллы могут быть также объединены в составе для орального приема с антибиотиком или иным лекарственным средством, которое назначено больному. Эффективность орально применяемых микроинкапсулированных лактобацилл для существенного уменьшения или устранения побочного эффекта антибиотиков, выражающегося в диарее, показана с помощью нижеследующих клинических тестов.
Клиническое испытание орального применения Во время указанного эксперимента пяти пациентам с периодически возобновляющейся вызванной антибиотиками диареей были назначены инкапсулированные лактобациллы для предотвращения диареи, связанной с применением антибиотиков. Инкапсулированные лактобациллы были назначены четыре раза в день в начале антимикробной терапии и прием их продолжался спустя три дня после окончания лечения антибиотиками. Всем пациентам давали антибиотики по соответствующим медицинским показаниям, которые совершенно не зависели от данного эксперимента. Было получено устное согласие и детально разъяснены потенциальный риск и преимущества данного исследования.
Пациенты получали по 106 инкапсулированных лактобацилл на дозу, приготовленных согласно способу инкапсулирования В на полилизиновой основе, которая безопасна с точки зрения орального использования. Препарат давали в желатиновой капсуле, заполненной инкапсулированными микроорганизмами в вышеуказанной дозе (приблизительно 106 жизнеспособных бактерий на капсулу).
Таблица 1. Краткая характеристика пациентов с вызванной антибиотиками диареей
Па- ци- ент N Пол Воз- раст Обычная продолж. диареи, вызванной антибиот. согласно истории болезни Антибиотик Доза антибиотика
1 ж 29 6-7 дней Клиндамицин 300 мг q.i.d2
2 ж 33 4-5 дней Клиндамицин 300 мг q.i.d
3 ж 42 4-5 дней Ампициллин 500 мг q.i.d
4 ж 45 3-4 дня Ампициллин 500 мг q.i.d
5 м 40 4-5 дней Тетрациклин 500 мг q.i.d
q.i.d. - 4 раза в день.
Результаты оральной терапии инкапсулированными лактобациллами
У всех наблюдавшихся пациентов не было проблем с диареей или другими изменениями состояния кишечника или симптомами. В этой группе пациентов не выявляли никаких неблагоприятных эффектов, связанных с терапией. Такой благоприятный результат лечения в этой группе мог единственно быть связан с оральной терапией инкапсулированными лактобациллами. Оральное введение микроинкапсулированных лактобацилл, согласно изобретению, можно применять для лечения не только людей, но и других млекопитающих.
Клиническое испытание местного применения микроинкапсулированных лактобацилл для предотвращения кожных инфекций
В этом опыте пяти пациентам с постоянно возобновляющимися кожными инфекционными заболеваниями назначали местное применение инкапсулированных лактобацилл для предотвращения кожных инфекций. Эти больные были отобраны потому, что они все находились в состоянии предрасположенности к хроническим, возобновляющимся заражениям кожи. От каждого из больных было получено устное согласие и подробно разъяснены риск и преимущества этого исследования. Микроинкапсулированные лактобациллы были местно применены на пораженном участке кожи трижды в день в течение шести месяцев. При каждой обработке использовали 1 06 инкапсулированных лактобацилл, которые получали спообом инкапсулирования D. Инкапсулированные микроорганизмы перемешивали с тальком для получения гомогенного порошка для использования на предназначенном участке кожи. Концентрация жизнеспособных бактерий в составе, который наносили на кожу, составляла приблизительно 1 06 бактерий на грамм, и в зависимости от обрабатываемой площади использовали от 1/2 до 1 грамма.
Таблица 2. Местное использование инкапсулированных лактобацилл для подавления возобновляющихся грибковых инфекций кожи
Паци- ент Воз- раст Предраспол. факторы Пол и раса Место зараже- ния Выделенные грибковые организмы
1 31 Неправильное употребление анабол. стероидов Белый мужчина Пах Т. r., T.v.
2 33 Неправильное употребление анабол. стероидов Черно- кожая женщи- на Пах Т.г., T.v.
3 27 Неправильное употребление анабол. стероидов Белый мужчина Пах Т.г., Т.ш.
4 59 Патологическая полнота, связанная с сахарным диабетом Белая женщи- на Абдо- миналь- ный паннус C.8.
5 39 Сахарный диабет Белая женщи- на Абдо- миналь- ный паннус С.а.
С.а. - Candida albicans, T.r. - Trichophyton rubrum, T.v. - Trichophyton verrucosum, T.m. - Trichophyton mentagrophytes.
Результаты местного применения инкапсулированных лактобацилл
При исследовании больных, которым назначалось применение микроинкапсулированных лактобацилл местным путем трижды в день, ни у одного из них не наблюдалось заражений дрожжеподобными грибами в течение всего периода исследований. Не наблюдалось также никаких неблагоприятных реакций ни у одного из больных. В этом отношении следует понимать, что местное применение микроинкапсулированных лактобацилл, в соответствии с настоящим изобретением, не ограничивается участками кожи, которые были обработаны у пяти пациентов в вышеописанном тесте. Скорее, фармацевтическая композиция, полученная в соответствии с данным изобретением пригодна для лечения и профилактики кожных инфекционных заболеваний на практически любых участках кожи у людей и млекопитающих животных.
Клиническое испытание интравагинального применения микроинкапсулированных лактобацилл для уменьшения опасности заражения
Как единодушно полагают практикующие врачи и ученые (что отражено в обширной научной литературе), естественная вагинальная флора должна содержать соответствующие лактобациллы как доминирующий вид. Более того, желательно, чтобы лактобациллы этой флоры продуцировали и перекись водорода, и микробиоциды. Для того, чтобы продемонстрировать полезность местного вагинального применения микроинкапсулированных лактобацилл для предотвращения вагинальных инфекций, для вагинальной терапии с использованием микроинкапсулированных лактобацилл было отобрано пятеро больных с более чем шестикратно возобновляющимися инфекциями и с предрасполагающими к этому факторами. Ото всех пациенток было получено устное согласие и подробно разъяснены потенциальный риск и преимущества этого опыта. Микроинкапсулированные лактобациллы применяли местно один раз в день, на ночь, в течение 6 месяцев. По этическим соображениям этот эксперимент проводили без плацебо, а в качестве контроля использовали предшествующую историю болезни пациенток. Всех пациенток в этом тесте лечили клотримазолом (торговая марка Mycelex-G 500, один 500-мг суппозиторий) на ночь в течение одной недели до начала данного исследования. Указанная терапия была необходима потому, что у этих больных были выявлены симптомы грибковых заболеваний, идентифицированные ниже в таблице 3, которые необходимо было элиминировать до начала исследования. Пациентки получили дозы по 106 инкапсулированных лактобацилл, приготовленных способом инкапсулирования С, который включает использование целлюлозной основы. Продукт, полученный согласно способу инкапсулирования С, может быть сформован в твердый или наполовину твердый объект, напоминающий по форме суппозиторий, который может быть легко помещен в вагину. Если необходимо, в состав суппозитория могут быть добавлены целлюлоза или лактоза или другие стандартные ингредиенты.
В этом отношении следует отметить, что, вообще говоря, для местного и интравагинального путей применения могут использоваться различные средства доставки (составы), известные из уровня техники. Например, микроинкапсулированные лактобациллы могут быть смешаны с кукурузным крахмалом, тальком или другими пригодными порошкообразными материалами. Могут быть приготовлены кремы, мыло и мази, а также обычные суппозитории, в которых помимо активного ингредиента микроинкапсулированных лактобацилл, могут использоваться наполнители, такие как микрокристаллическая целлюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, стеарат С/магния, диоксид силикона и лактоза. Кроме того, другие необязательные компоненты или ингредиенты, которые могут быть включены в суппозитории, кремы, мыло, мази, порошки и другие составы, согласно изобретению, представляют собой отдушки, ментол, эвкалиптовое масло, метилсалицилат или аналогичные салицилаты в качестве местных успокаивающих агентов;
гидрокортизон или родственные ему стероиды противовоспалительного действия (1-500 мг на суппозиторий) как противовоспалительные агенты; ЭДТА как увлажняющий и умеренно антимикробный агент; пропиленгликоль или другие фармацевтически приемлемые гликоли, метилпарабен или родственные парабеновые производные как увлажняющие и текстурирующие агенты; пара-ди-изо-бутилфеноксиполиэтоксиэтанол, ноноксинол-9 или монолаурат додекаэтиленгликоля как спермицидные и умеренно антимикробные агенты; тритионы и менфегол как спермицидные, умеренно антимикробные и увлажняющие агенты.
Таблица 3. Интравагинальное использование инкапсулированных лактобацилл для уничтожения вагинальных инфекций
Пациент, № и возраст Предраспол. факторы Кол-во ваги- нальных заражений в год до лечения Домини- рующие микроор- ганизмы до лечения Домини- рующие микроор- ганизмы после лечения
1 33 г. Диабет, тучность 9 С.а. L.a., L.r.
2 45л. Диабет, тучность 10 С.а. La., L.r.
3 29л. Тучность, цитотоксическая терапия 8 C.g. L.a., L.r.
4 41 г. Диабет, тучность, цитотоксическая терапия, аутоиммунное заболевание 11 C.a., С.р. La., L.r.
5 37л. Диабет, тучность цитотоксическая терапия 10 C.t. L.a., L.r
C.a. - Candida albicans, C.g. - Candida glabrata, C.t. Candida tropicalis, C.p.- Candida parapsilosis, L.a. - Lactobacillus acidophylus, L.r. - Lactobacillus rhamnosus.
Результаты вагинального применения инкапсулированных лактобацилл
При исследовании больных, принимавших микроинкапсулированные лактобациллы на ночь местным, интравагинальным путем ни у одной из пациенток не наблюдалось заражений дрожжеподобными грибами в течение всего периода наблюдений. Не наблюдалось также никаких неблагоприятных реакций ни у одной из пациенток и после лечения было установлено, что доминирующими в вагинальной флоре микроорганизмами являются бактерии Lactobacillus acidophylus или Lactobacillus rhamnosus.

Claims (31)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Фармацевтическая композиция, содержащая в качестве активного начала жизнеспособные лактобациллы и фармацевтически приемлемый носитель для целенаправленной доставки лактобацилл, отличающаяся тем, что единичная доза указанной композиции содержит, по крайней мере, 103 лактобацилл, причем указанные лактобациллы микроинкапсулированы и в результате этого сохраняют жизнеспособность в течение всего срока хранения композиции, а вещество, составляющее оболочку капсулы, обеспечивает высвобождение лактобацилл при продолжительном контактировании с влажной средой.
  2. 2. Фармацевтическая композиция по п. 1, отличающаяся тем, что единичная доза композиции содержит, по крайней мере, около 105 жизнеспособных лактобацилл вида Lactobacillus acidophylus или его варианта Lactobacillus rhamnosus.
  3. 3. Фармацевтическая композиция по п. 1 , отличающаяся тем, что лактобациллы представляют собой вариант Lactobacillus rhamnosus.
  4. 4. Фармацевтическая композиция по п. 1, отличающаяся тем, что фармацевтически приемлемый носитель обеспечивает оральное введение микроинкапсулированных лактобацилл человеку.
  5. 5. Фармацевтическая композиция по п.4, отличающаяся тем, что фармацевтически приемлемый носитель представлет собой желатиновую капсулу.
  6. 6. Фармацевтическая композиция по п.5, отличающаяся тем, что единичная доза композиции в составе капсулы содержит, по крайней мере, около 1 05 жизнеспособных лактобацилл вида Lactobacillus acidophylus или его варианта Lactobacillus rhamnosus.
  7. 7. Фармацевтическая композиция по п. 1, отличающаяся тем, что фармацевтически приемлемый носитель обеспечивает местное применение микроинкапсулированных лактобацилл на коже человека.
  8. 8. Фармацевтическая композиция по п.7, отличающаяся тем, что 1 г или 1 мл данной композиции содержит, по крайней мере, около 1 06 жизнеспособных лактобацилл вида Lactobacillus acidophilus или его варианта Lactobacillus rhamnosus.
  9. 9. Фармацевтическая композиция по п.8, отличающаяся тем, что указанная фармацевтическая композиция представляет собой порошок.
  10. 1 0. Фармацевтическая композиция по п. 1 , отличающаяся тем, что фармацевтически приемлемый носитель обеспечивает интравагинальное введение микроинкапсулированных лактобацилл человеку.
  11. 11. Фармацевтическая композиция по п. 1 0, отличающаяся тем, что представляет собой вагинальный суппозиторий.
  12. 1 2. Фармацевтическая композиция по п. 11, отличающаяся тем, что каждый суппозиторий содержит, по крайней мере, около 1 06 жизнеспособных лактобацилл вида Lactobacillus acidophilus или его варианта Lactobacillus rhamnosus.
  13. 1 3. Фармацевтическая композиция, содержащая в качестве активного начала жизнеспособные лактобациллы и фармацевтически при15 емлемый носитель для целенаправленной доставки лактобацилл, приспособленная для орального введения человеку, отличающаяся тем, что единичная доза указанной композиции содержит, по крайней мере, 103 лактобацилл, причем указанные лактобациллы микроинкапсулированы и в результате этого сохраняют жизнеспособность в течение всего срока хранения композиции, а вещество, составляющее оболочку микрокапсулы, обеспечивает высвобождение лактобацилл при продолжительном контактировании с влажной средой, преимущественно с влажной средой нижних отделов кишечника.
  14. 14. Фармацевтическая композиция по п.13, отличающаяся тем, что единичная доза композиции заключена в желатиновую капсулу.
  15. 15. Фармацевтическая композиция по п.14, отличающаяся тем, что желатиновая капсула содержит, по крайней мере, около 1 05 жизнеспособных лактобацилл вида Lactobacillus acidophylus или его варианта Lactobacillus rhamnosus.
  16. 16. Фармацевтическая композиция, которая приспособлена для местного применения на коже человека, причем единичная доза композиции содержит, по крайней мере, 1 03 лактобацилл, которые микроинкапсулированы и в результате этого сохраняют жизнеспособность в течение всего срока хранения композиции, а вещество, составляющее оболочку микрокапсулы, обеспечивает высвобождение лактобацилл при продолжительном контактировании с влажной средой.
  17. 17. Фармацевтическая композиция по п.16, отличающаяся тем, что 1 г или 1 мл данной композиции содержит, по крайней мере, около 1 06 жизнеспособных лактобацилл вида Lactobacillus acidophilus или его варианта Lactobacillus rhamnosus.
  18. 18. Фармацевтическая композиция, которая приспособлена для внутривагинального введения человеку, причем единичная доза композиции содержит, по крайней мере, 1 03 лактобацилл, которые микроинкапсулированы и в результате этого сохраняют жизнеспособность в течение всего срока хранения композиции, а вещество, составляющее оболочку микрокапсулы, обеспечивает высвобождение лактобацилл при продолжительном контактировании с влажной средой влагалища.
  19. 19. Фармацевтическая композиция по п.18, отличающаяся тем, что представляет собой вагинальный суппозиторий.
  20. 20. Фармацевтическая композиция по п.19, отличающаяся тем, что каждый суппозиторий содержит, по крайней мере, около 1 05 жизнеспособных лактобацилл вида Lactobacillus acidophilus или его варианта Lactobacillus rhamnosus.
  21. 21. Способ лечения или предотвращения обусловленной приемом антибиотиков или другой причиной острой или хронической диареи у млекопитающих, в том числе у человека, путем орального введения фармацевтической композиции, содержащей в качестве активного начала жизнеспособные лактобациллы, отличающийся тем, что указанному млекопитающему вводят фармацевтическую композицию по любому из пп.13-15.
  22. 22. Способ по п.21 , отличающийся тем, что человеку вводят, по крайней мере, около 4 х 1 03 жизнеспособных лактобацилл вида Lactobacillus acidophilus или его варианта Lactobacillus rhamnosus ежедневно.
  23. 23. Способ по п.21, отличающийся тем, что жизнеспособные микроинкапсулированные лактобациллы заключены в желатиновую капсулу.
  24. 24. Способ по п.23, отличающийся тем, что каждая капсула содержит, по крайней мере, около 1 05 жизнеспособных лактобацилл вида Lactobacillus acidophilus или его варианта Lactobacillus rhamnosus и человеку ежедневно вводят приблизительно 4 капсулы.
  25. 25. Способ лечения или предотвращения кожных инфекций у млекопитающих, в том числе у человека, на участке кожи с возобновляющимися инфекционными поражениями, заключающийся в том, что указанный участок локально обрабатывают фармацевтической композицией по любому из пп. 1 6-1 7.
  26. 26. Способ по п.25, отличающийся тем, что в случае лечения или предотвращения кожных инфекций у человека единичная доза указанной композиции содержит, по крайней мере, около 1 05 жизнеспособных лактобацилл вида Lactobacillus acidophilus или его варианта Lactobacillus rhamnosus.
  27. 27. Способ по п.26, отличающийся тем, что указанная композиция представляет собой порошок.
  28. 28. Способ лечения или предотвращения заражения дрожжеподобными грибами млекопитающих женского пола, в том числе человека, заключающийся в интравагинальном введении фармацевтической композиции по любому из пп.18-20.
  29. 29. Способ по п.28, отличающийся тем, что фармацевтическая композиция представляет собой вагинальный суппозиторий, содержащий, по крайней мере, около 1 05 жизнеспособных лактобацилл вида Lactobacillus acidophilus.
  30. 30. Препарат из микроинкапсулированных лактобацилл, содержащий, по крайней мере, около 1 03 жизнеспособных лактобацилл, причем вещество, составляющее оболочку микрокапсулы, обеспечивает высвобождение лактобацилл при продолжительном контактировании с влажной средой.
  31. 31. Препарат по п.30, отличающийся тем, что лактобациллы относятся к виду Lactobacillus acidophilus или его варианту Lactobacillus rhamnosus.
EA199700437A 1995-06-02 1996-05-31 Фармацевтические композиции, содержащие в качестве активного начала жизнеспособные лактобациллы, способы их применения и препарат из микроинкапсулированных лактобацилл EA000412B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US08/459,058 US5733568A (en) 1993-12-03 1995-06-02 Micro-encapsulated lactobacilli for medical applications
PCT/US1996/008260 WO1996038159A1 (en) 1995-06-02 1996-05-31 Micro-encapsulated lactobacilli for medical applications

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA199700437A1 EA199700437A1 (ru) 1998-08-27
EA000412B1 true EA000412B1 (ru) 1999-06-24

Family

ID=23823243

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA199700437A EA000412B1 (ru) 1995-06-02 1996-05-31 Фармацевтические композиции, содержащие в качестве активного начала жизнеспособные лактобациллы, способы их применения и препарат из микроинкапсулированных лактобацилл

Country Status (21)

Country Link
US (4) US5733568A (ru)
EP (1) EP0828499B1 (ru)
JP (1) JPH11506451A (ru)
KR (1) KR100478326B1 (ru)
CN (1) CN1100546C (ru)
AR (1) AR002754A1 (ru)
AT (1) ATE286737T1 (ru)
AU (1) AU702799B2 (ru)
BR (1) BR9609460A (ru)
CA (1) CA2222642C (ru)
DE (1) DE69634171T2 (ru)
EA (1) EA000412B1 (ru)
HU (1) HUP9900682A3 (ru)
IL (1) IL118304A (ru)
MX (1) MX9709318A (ru)
MY (1) MY120501A (ru)
NZ (1) NZ309456A (ru)
PL (1) PL323748A1 (ru)
TW (1) TW480174B (ru)
WO (1) WO1996038159A1 (ru)
ZA (1) ZA963810B (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2758109C2 (ru) * 2015-06-29 2021-10-26 Ферринг Б.В. Бактерия lactobacillus rhamnosus для лечения, например, бактериального вагиноза

Families Citing this family (89)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5741525A (en) * 1995-10-24 1998-04-21 Marshall University Research Corporation Vaginal pharmaceutical hydrogen peroxide composition
GB2310375A (en) * 1996-02-21 1997-08-27 Vanessa Clare Mcclafferty Pessaries for treating vaginal infections
US8563522B2 (en) 1997-07-08 2013-10-22 The Iams Company Method of maintaining and/or attenuating a decline in quality of life
RO113114B1 (ro) * 1997-08-05 1998-04-30 Rodica Teodorescu Produs eubiotic natural, pentru intretinerea si tratamentul tegumentelor
US7135191B2 (en) * 1997-09-04 2006-11-14 Zsolt Istvan Hertelendy Urogenital or anorectal transmucosal vaccine delivery system
DE69802260T2 (de) 1998-04-30 2002-07-04 Renata Maria Anna Cavaliere Vesely Pharmazeutische Zusammensetzungen enthaltend Lactobacillus brevis und Lactobacillus salivarius zur Behandlung von Vaginainfektionen
ID30071A (id) * 1998-12-11 2001-11-01 Urex Biotech Inc Pemberian oral lactobacillus untuk pengobatan dan pencegahan infeksi urogental
US7998470B2 (en) * 1999-04-30 2011-08-16 Kibow Biotech, Inc. Compositions and methods improving renal function
US20040197352A1 (en) * 1999-04-30 2004-10-07 Natarajan Ranganathan Methods of improving or augmenting kidney function
US6706287B2 (en) * 2001-05-15 2004-03-16 Kibow Biotech Inc. Prebiotic and probiotic compositions and methods for their use in gut-based therapies
US6555139B2 (en) 1999-06-28 2003-04-29 Wockhardt Europe Limited Preparation of micron-size pharmaceutical particles by microfluidization
US6696057B1 (en) 1999-09-22 2004-02-24 Lacpro Industries, Inc. Composition and method for treatment of gastrointestinal disorders and hyperlipidemia
US20020044926A1 (en) * 1999-12-10 2002-04-18 Gregor Reid Oral administration of lactobacillus for the treatment and prevention of urogenital infection
EP1110555A1 (fr) 1999-12-22 2001-06-27 Societe Des Produits Nestle S.A. Agent anti-adhesion de la flore pathogene de la peau
US6767537B2 (en) 2000-05-26 2004-07-27 Phil Arnold Nicolay Composition and method for the treatment of sinusitis
US8225414B2 (en) * 2000-08-28 2012-07-17 Contentguard Holdings, Inc. Method and apparatus for identifying installed software and regulating access to content
US20030091540A1 (en) * 2001-10-16 2003-05-15 Nawaz Ahmad Compositions and methods for delivering antibacterial, antifungal and antiviral ointments to the oral, nasal or vaginal cavity
EP1319410A1 (en) * 2001-12-11 2003-06-18 Société des Produits Nestlé S.A. Use of micro-organisms for a directed delivery of substances to specific parts of the gut
US20050266069A1 (en) * 2002-09-06 2005-12-01 Simmons Donald L Stable probiotic microsphere compositions and their methods of preparation
RU2006108554A (ru) * 2003-08-18 2007-09-27 Дзе Байо Бэлэнс Корпорейшн (Us) Устойчивая жидкая пробиотическая композиция, ее получение и применения
US7132102B2 (en) * 2003-08-21 2006-11-07 The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture Bacteriocins and novel bacterial strains
JP5723080B2 (ja) 2003-09-30 2015-05-27 キボー バイオテック、インクＫｉｂｏｗ Ｂｉｏｔｅｃｈ， Ｉｎｃ． 腎臓機能を増大させるための組成物および方法
WO2005034861A2 (en) * 2003-10-02 2005-04-21 The Bio Balance Corporation A dried biotherapeutic composition, uses, and device and methods for administration thereof
US20070009490A1 (en) * 2003-10-02 2007-01-11 Conte Anthony E Dried biotherapeutic composition, uses, and device and methods for administration thereof
IE20030773A1 (en) * 2003-10-17 2005-04-20 Teagasc Agric Food Dev Authori Use of probiotic bacteria in the treatment of infection
US20050100559A1 (en) * 2003-11-07 2005-05-12 The Procter & Gamble Company Stabilized compositions comprising a probiotic
US8877178B2 (en) 2003-12-19 2014-11-04 The Iams Company Methods of use of probiotic bifidobacteria for companion animals
US20050158294A1 (en) 2003-12-19 2005-07-21 The Procter & Gamble Company Canine probiotic Bifidobacteria pseudolongum
US7785635B1 (en) 2003-12-19 2010-08-31 The Procter & Gamble Company Methods of use of probiotic lactobacilli for companion animals
US20050152884A1 (en) 2003-12-19 2005-07-14 The Procter & Gamble Company Canine probiotic Bifidobacteria globosum
US8894991B2 (en) 2003-12-19 2014-11-25 The Iams Company Canine probiotic Lactobacilli
US20050208034A1 (en) * 2004-03-17 2005-09-22 Jordan Lazonia V Natural vaginal yeast infection control
MXPA06015184A (es) * 2004-06-23 2007-11-22 Nestec Sa Procedimiento y composiciones utiles para prevenir y/o tratar pieles sensibles y/o secas.
US20060003454A1 (en) * 2004-07-02 2006-01-05 Conjugon, Inc. Non-dividing donor cells for gene transfer
JP5112069B2 (ja) * 2004-10-04 2013-01-09 ロレアル 敏感肌のための化粧品及び／または皮膚科組成物
US20060270040A1 (en) * 2005-05-26 2006-11-30 Conjugon, Inc. Compositions and methods for treating tissue
EP1885383B1 (en) 2005-05-31 2016-09-21 IAMS Europe B.V. Feline probiotic bifidobacteria
DK1880001T3 (da) 2005-05-31 2011-09-12 Iams Company Feline probiotiske lactobacilli
AU2006273842B2 (en) 2005-07-28 2012-02-02 University Of Hull Topical formulations containing sporopollenin
FR2889057B1 (fr) * 2005-08-01 2008-07-18 Oreal Composition cosmetique et/ou dermatologique pour la prevention et/ou le traitement des peaux sensibles ou seches
CN100382792C (zh) * 2005-09-12 2008-04-23 大连三仪动物药品有限公司 药用水溶性微胶囊及生产方法
US20070166295A1 (en) * 2006-01-13 2007-07-19 Vet Solutions L.P. Anti-Diarrhea Preparations for Small Domestic Animals
US20070286813A1 (en) * 2006-06-09 2007-12-13 Toutounghi Camille Nasal formulation
US9084434B2 (en) 2006-09-27 2015-07-21 Little Calumet Holdings Llc Probiotic oral dosage forms
RU2435576C2 (ru) * 2006-10-13 2011-12-10 Компани Жервэ Данон Новая композиция для улучшения качества кожи и способ получения композиции
CN101711158A (zh) 2007-02-01 2010-05-19 爱默思公司 使用葡萄糖抗代谢物、鳄梨或鳄梨提取物减轻哺乳动物炎症和应激反应的方法
ES2322116B1 (es) 2007-03-12 2010-03-29 Consejo Superior Investig. Cientificas Microorganismo productor de anticuerpos, elementos necesarios para su obtencion, anticuerpos asi producidos, composiciones terapeuticas y sus aplicaciones.
FR2919501B1 (fr) * 2007-08-02 2010-12-31 Oreal Utilisation d'hesperidine ou de l'un de ses derives pour la prevention et/ou le traitement des peaux relachees
FR2920304B1 (fr) * 2007-09-04 2010-06-25 Oreal Utilisation cosmetique de lysat bifidobacterium species pour le traitement de la secheresse.
BRPI0816214B8 (pt) * 2007-09-04 2017-12-26 Oreal uso cosmético, composição cosmética e/ou dermatológica, e, métodos para o tratamento cosmético da pele, para o tratamento cosmético de sinais cutâneos de envelhecimento e/ou fotoenvelhecimento e para o tratamento cosmético para prevenir e/ou tratar substâncias queratinosas secas
FR2920305B1 (fr) * 2007-09-04 2010-07-30 Oreal Utilisation d'un lysat de bifidobacterium species pour le traitement de peaux sensibles.
US8236297B2 (en) * 2007-10-11 2012-08-07 Kenneth Manzo Method of treating lactose intolerance using genetically engineered bacteria
WO2009123982A2 (en) * 2008-03-31 2009-10-08 Osel, Inc. Transiently buffered lactobacillus preparations and use thereof
US9771199B2 (en) 2008-07-07 2017-09-26 Mars, Incorporated Probiotic supplement, process for making, and packaging
KR100990765B1 (ko) 2008-06-13 2010-10-29 롯데쇼핑주식회사 락토바실러스 펜토서스 3090의 배양상등액을 함유하는항균제 조성물
GB0812513D0 (en) 2008-07-09 2008-08-13 Univ Hull Delivery vehicle
EP2158916A1 (en) * 2008-08-27 2010-03-03 Ellen Aktiebolag Administration unit comprising lactic acid bacteria
FR2942719B1 (fr) * 2009-03-04 2011-08-19 Oreal Utilisation de microorganismes probiotiques pour limiter les irritations cutanees
EP2243487A1 (en) 2009-04-23 2010-10-27 Actogenix N.V. Enteric coated formulation
CL2009001505A1 (es) * 2009-07-01 2009-09-25 Univ Concepcion Formulacion prebiotica de uso topico que comprende microesferas con composicion matricial a base de gelatina natural reticulada y una cepa probiotica viable de lactobacillus spp; proceso para generar dicha formulacion; uso de dicha formulacion para tratar lesiones de la piel.
US10104903B2 (en) 2009-07-31 2018-10-23 Mars, Incorporated Animal food and its appearance
GB0916335D0 (en) * 2009-09-17 2009-10-28 Martin W J Medicaments
US20110070334A1 (en) * 2009-09-20 2011-03-24 Nagendra Rangavajla Probiotic Stabilization
PT2338476E (pt) * 2009-12-02 2012-09-28 Bettina Heil Supositório para administração rectal, vaginal ou uretral contendo um probiótico, um antibiótico e um ácido adiposo insaturado não esterificado
US8771669B1 (en) 2010-02-09 2014-07-08 David Gordon Bermudes Immunization and/or treatment of parasites and infectious agents by live bacteria
US8524220B1 (en) 2010-02-09 2013-09-03 David Gordon Bermudes Protease inhibitor: protease sensitivity expression system composition and methods improving the therapeutic activity and specificity of proteins delivered by bacteria
US9597379B1 (en) 2010-02-09 2017-03-21 David Gordon Bermudes Protease inhibitor combination with therapeutic proteins including antibodies
NL2004520C2 (en) * 2010-04-07 2011-10-11 Univ Delft Tech HEALING AGENT FOR SELF-HEALING CEMENTIOUS MATERIALS.
SG192017A1 (en) 2011-01-25 2013-08-30 Austrianova Singapore Pte Ltd Protection of microbial cells from acidic degradation
DE102011009798B4 (de) 2011-01-31 2015-03-05 Merz Pharma Gmbh & Co. Kgaa Balneologische lipidhaltige probiotische Zubereitungen für kosmetische / dermatologische / medizinische Anwendungen
CN104302278B (zh) 2012-03-29 2018-08-21 塞拉拜姆有限责任公司 在回肠和阑尾上有活性的胃肠位点特异性口服接种疫苗制剂
CN102613458B (zh) * 2012-04-16 2013-12-18 广东仙乐制药有限公司 一种益生菌软胶囊及其制备方法
WO2013171515A1 (en) 2012-05-18 2013-11-21 Genome Research Limited Methods and groups
FR2999601B1 (fr) 2012-12-17 2015-01-30 Urgo Lab Methode pour prevenir et/ou traiter les infections, colonisations ou maladies liees a staphylococcus aureus, pseudomonas aeruginosa, streptococcus pyogenes, enterococcus faecium, enterobacter cloacae, proteus mirabilis et/ou bacteroides fragilis
EP2968187A4 (en) 2013-03-14 2016-08-17 Therabiome Llc TARGETED ADMINISTRATION OF PROBIOTIC ORGANISMS AND / OR THERAPEUTIC AGENTS IN THE GASTROINTESTINAL TRACT
US9737592B1 (en) 2014-02-14 2017-08-22 David Gordon Bermudes Topical and orally administered protease inhibitors and bacterial vectors for the treatment of disorders and methods of treatment
KR101640744B1 (ko) 2014-05-07 2016-07-19 일동제약주식회사 고분자 다당 바인더에 컨쥬게이트된 락토바실러스 람노서스 rht-3201, 및 이의 아토피 예방 및 치료 용도
US10632157B2 (en) 2016-04-15 2020-04-28 Ascus Biosciences, Inc. Microbial compositions and methods of use for improving fowl production
US10851399B2 (en) 2015-06-25 2020-12-01 Native Microbials, Inc. Methods, apparatuses, and systems for microorganism strain analysis of complex heterogeneous communities, predicting and identifying functional relationships and interactions thereof, and selecting and synthesizing microbial ensembles based thereon
TW201713775A (zh) 2015-06-25 2017-04-16 亞斯科生物科學公司 用於自複雜的異源群集中分析微生物品系、預測及識別其機能性關係及交互作用，且依據前述選擇並合成微生物系集之方法、裝置及系統
US9938558B2 (en) 2015-06-25 2018-04-10 Ascus Biosciences, Inc. Methods, apparatuses, and systems for analyzing microorganism strains from complex heterogeneous communities, predicting and identifying functional relationships and interactions thereof, and selecting and synthesizing microbial ensembles based thereon
CN109757107A (zh) 2016-01-07 2019-05-14 埃斯库斯生物科技股份公司 用于通过施用微生物聚生体来提高乳产量的方法
US10617134B2 (en) 2016-04-15 2020-04-14 Ascus Biosciences, Inc. Methods for improving agricultural production of fowl by administration of microbial compositions or purified strains thereof
US11180535B1 (en) 2016-12-07 2021-11-23 David Gordon Bermudes Saccharide binding, tumor penetration, and cytotoxic antitumor chimeric peptides from therapeutic bacteria
WO2018126036A1 (en) 2016-12-28 2018-07-05 Ascus Biosciences, Inc. Methods, apparatuses, and systems for microorganism strain analysis of complex heterogeneous communities with tracer analytics, determination of functional relationships and interactions thereof, and synthesis of microbial ensembles including dosed microbial ensembles and inoculative microbial ensembles
JP2020504620A (ja) 2016-12-28 2020-02-13 アスカス バイオサイエンシーズ， インコーポレイテッド 複雑な不均一コミュニティの完全微生物株の解析、その機能的関連性及び相互作用の決定、ならびにそれに基づく生物反応性の改変剤の同定及び合成、のための方法、装置、及びシステム
WO2018201049A1 (en) 2017-04-28 2018-11-01 Ascus Biosciences, Inc. Methods for supporting grain intensive and/or energy intensive diets in ruminants with a synthetic bioensemble of microbes
AR113371A1 (es) 2017-10-18 2020-04-22 Ascus Biosciences Inc Aumento de la producción de aves de corral mediante la administración de un bioensamblaje sintético de microbios o cepas purificadas de los mismos
RU2744839C1 (ru) * 2020-02-02 2021-03-16 Михаил Викторович Комаров Микроконтейнеры для защиты микроорганизмов, применяемые в сельском хозяйстве

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CH637297A5 (fr) * 1978-12-05 1983-07-29 Nestle Sa Microbille comprenant un microorganisme et son procede de fabrication.
US4983163A (en) * 1981-10-09 1991-01-08 Science Research Center, Inc. Method, compositions and articles for prevention and treatment of herpes simplex virus infections
JPS5911177A (ja) * 1982-07-12 1984-01-20 Seikenkai 新規乳酸桿菌
CN1057446C (zh) * 1993-02-02 2000-10-18 西安华誉技术发展有限公司 活性乳酸杆菌胶囊
UA39965C2 (uk) * 1993-12-03 2001-07-16 Лайфор Леборетріз Лтд Вірусоцидний, бактерицидний та руйнуючий сперматозоїди вагінальний засіб і вагінальний супозиторій ( варіанти )
ZA942302B (en) * 1993-12-03 1995-09-29 Lafor Lab Ltd Viracidal bactericidal and spermicidal vaginal suppository

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2758109C2 (ru) * 2015-06-29 2021-10-26 Ферринг Б.В. Бактерия lactobacillus rhamnosus для лечения, например, бактериального вагиноза

Also Published As

Publication number Publication date
IL118304A (en) 2000-08-13
EA199700437A1 (ru) 1998-08-27
NZ309456A (en) 2001-02-23
EP0828499A1 (en) 1998-03-18
AU5963196A (en) 1996-12-18
HUP9900682A2 (hu) 1999-06-28
EP0828499B1 (en) 2005-01-12
KR19990022220A (ko) 1999-03-25
CN1192151A (zh) 1998-09-02
CN1100546C (zh) 2003-02-05
ZA963810B (en) 1997-01-03
MX9709318A (es) 1998-02-28
US5635202A (en) 1997-06-03
WO1996038159A1 (en) 1996-12-05
HUP9900682A3 (en) 2000-10-30
CA2222642A1 (en) 1996-12-05
AR002754A1 (es) 1998-04-29
US5733568A (en) 1998-03-31
PL323748A1 (en) 1998-04-14
AU702799B2 (en) 1999-03-04
JPH11506451A (ja) 1999-06-08
DE69634171D1 (de) 2005-02-17
ATE286737T1 (de) 2005-01-15
IL118304A0 (en) 1996-09-12
KR100478326B1 (ko) 2005-07-28
US5633012A (en) 1997-05-27
US5614209A (en) 1997-03-25
TW480174B (en) 2002-03-21
MY120501A (en) 2005-11-30
US5614209B1 (en) 1998-08-04
CA2222642C (en) 2004-09-07
DE69634171T2 (de) 2006-01-19
BR9609460A (pt) 1999-03-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA000412B1 (ru) Фармацевтические композиции, содержащие в качестве активного начала жизнеспособные лактобациллы, способы их применения и препарат из микроинкапсулированных лактобацилл
MXPA97009318A (en) Lactobacilos micro-encapsulados para aplicacionesmedi
JP4678896B2 (ja) 微生物感染を予防または制御するための共生Ｂａｃｉｌｌｕｓ芽胞の局所的使用
JP2834951B2 (ja) 細菌性腟症用予防および治療剤
US7507402B1 (en) Topical use of probiotic Bacillus spores to prevent or control microbial infections
JP2003507428A (ja) 共生バクテリア、芽胞および細胞外産物を含む、改良された局所用組成物、ならびにそれらの使用
EP1212093A2 (en) Use of emu oil as a carrier for antifungal, antibacterial and antiviral medications
RU2147431C1 (ru) Вироцидный, бактерицидный и сперматоцидный суппозиторий
JPH02503800A (ja) 炎症過程及びアレルギー性疾患の予防及び治療のための細菌性製剤
JPH07118169A (ja) 抗菌製剤及び抗真菌製剤
GB2412317A (en) Solid dosage form for treatment of infections of a body cavity, especially bacterial and fungal infections of the vaginal cavity
EP4210720B1 (en) Probiotic compositions for the treatment of acne
JP2000256212A (ja) 良性間葉系腫瘍の治療剤
AU783905B2 (en) Use of emu oil carrier for antifungal, antibacterial, and antiviral medications
EP0356272B1 (fr) Médicaments destinés à regulariser les sécrétions hormonales et à traiter la stérilité chez la femme et les animaux femelles

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM RU