DK173642B1 - Fremgangsmåde til ekstrahering af rene fraktioner af lactoperoxidase og lactoferrin af mælkeserum - Google Patents
Fremgangsmåde til ekstrahering af rene fraktioner af lactoperoxidase og lactoferrin af mælkeserum Download PDFInfo
- Publication number
- DK173642B1 DK173642B1 DK199001245A DK124590A DK173642B1 DK 173642 B1 DK173642 B1 DK 173642B1 DK 199001245 A DK199001245 A DK 199001245A DK 124590 A DK124590 A DK 124590A DK 173642 B1 DK173642 B1 DK 173642B1
- Authority
- DK
- Denmark
- Prior art keywords
- lactoperoxidase
- lactoferrin
- milk serum
- milk
- whey
- Prior art date
Links
- 102000010445 Lactoferrin Human genes 0.000 title claims abstract description 37
- 108010063045 Lactoferrin Proteins 0.000 title claims abstract description 37
- CSSYQJWUGATIHM-IKGCZBKSSA-N l-phenylalanyl-l-lysyl-l-cysteinyl-l-arginyl-l-arginyl-l-tryptophyl-l-glutaminyl-l-tryptophyl-l-arginyl-l-methionyl-l-lysyl-l-lysyl-l-leucylglycyl-l-alanyl-l-prolyl-l-seryl-l-isoleucyl-l-threonyl-l-cysteinyl-l-valyl-l-arginyl-l-arginyl-l-alanyl-l-phenylal Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 CSSYQJWUGATIHM-IKGCZBKSSA-N 0.000 title claims abstract description 37
- 235000021242 lactoferrin Nutrition 0.000 title claims abstract description 37
- 229940078795 lactoferrin Drugs 0.000 title claims abstract description 37
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 37
- 108010023244 Lactoperoxidase Proteins 0.000 title claims abstract description 36
- 102000045576 Lactoperoxidases Human genes 0.000 title claims abstract description 36
- 229940057428 lactoperoxidase Drugs 0.000 title claims abstract description 36
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 title claims abstract description 31
- 239000008267 milk Substances 0.000 title claims abstract description 31
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 title claims abstract description 31
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 title claims abstract description 24
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 20
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 claims abstract description 11
- 239000011148 porous material Substances 0.000 claims description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 4
- 238000001471 micro-filtration Methods 0.000 claims description 3
- 239000003513 alkali Substances 0.000 claims description 2
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000012267 brine Substances 0.000 claims 1
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 abstract description 10
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 abstract description 7
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 description 26
- 239000005862 Whey Substances 0.000 description 25
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 description 25
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 22
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 22
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 22
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 12
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 11
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 10
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 9
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 5
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M sodium hydroxide Inorganic materials [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 5
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 4
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 3
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 3
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 3
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 2
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 235000010410 calcium alginate Nutrition 0.000 description 2
- 239000000648 calcium alginate Substances 0.000 description 2
- 229960002681 calcium alginate Drugs 0.000 description 2
- OKHHGHGGPDJQHR-YMOPUZKJSA-L calcium;(2s,3s,4s,5s,6r)-6-[(2r,3s,4r,5s,6r)-2-carboxy-6-[(2r,3s,4r,5s,6r)-2-carboxylato-4,5,6-trihydroxyoxan-3-yl]oxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylate Chemical compound [Ca+2].O[C@@H]1[C@H](O)[C@H](O)O[C@@H](C([O-])=O)[C@H]1O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O2)C([O-])=O)O)[C@H](C(O)=O)O1 OKHHGHGGPDJQHR-YMOPUZKJSA-L 0.000 description 2
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 2
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 2
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 2
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 2
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 2
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 2
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000007836 KH2PO4 Substances 0.000 description 1
- 102000004407 Lactalbumin Human genes 0.000 description 1
- 108090000942 Lactalbumin Proteins 0.000 description 1
- 102000008192 Lactoglobulins Human genes 0.000 description 1
- 108010060630 Lactoglobulins Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 102100033468 Lysozyme C Human genes 0.000 description 1
- 102000014171 Milk Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010011756 Milk Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 description 1
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 1
- XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N Silicon Chemical compound [Si] XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RTAQQCXQSZGOHL-UHFFFAOYSA-N Titanium Chemical compound [Ti] RTAQQCXQSZGOHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 1
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 239000013065 commercial product Substances 0.000 description 1
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 238000010612 desalination reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 230000006651 lactation Effects 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 description 1
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 description 1
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 description 1
- 235000021239 milk protein Nutrition 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010703 silicon Substances 0.000 description 1
- 239000010802 sludge Substances 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 229910052719 titanium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010936 titanium Substances 0.000 description 1
- 235000021119 whey protein Nutrition 0.000 description 1
- 229910052845 zircon Inorganic materials 0.000 description 1
- GFQYVLUOOAAOGM-UHFFFAOYSA-N zirconium(iv) silicate Chemical compound [Zr+4].[O-][Si]([O-])([O-])[O-] GFQYVLUOOAAOGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021241 α-lactalbumin Nutrition 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
- A23C9/14—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations in which the chemical composition of the milk is modified by non-chemical treatment
- A23C9/146—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations in which the chemical composition of the milk is modified by non-chemical treatment by ion-exchange
- A23C9/1465—Chromatographic separation of protein or lactose fraction; Adsorption of protein or lactose fraction followed by elution
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
- A23C9/14—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations in which the chemical composition of the milk is modified by non-chemical treatment
- A23C9/142—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations in which the chemical composition of the milk is modified by non-chemical treatment by dialysis, reverse osmosis or ultrafiltration
- A23C9/1425—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations in which the chemical composition of the milk is modified by non-chemical treatment by dialysis, reverse osmosis or ultrafiltration by ultrafiltration, microfiltration or diafiltration of whey, e.g. treatment of the UF permeate
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
- A23J1/00—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites
- A23J1/20—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites from milk, e.g. casein; from whey
- A23J1/205—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites from milk, e.g. casein; from whey from whey, e.g. lactalbumine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/814—Enzyme separation or purification
- Y10S435/815—Enzyme separation or purification by sorption
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Water Supply & Treatment (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Dairy Products (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
Description
1 DK 173642 B1
Opfindelsen angår en fremgangsmåde til ekstrahering af rene fraktioner af 5 lactoperoxidase og lactoferrin af mælkeserum. Ved mælkeserum forstås skummetmælk og valle.
Ved ostefremstilling får man en stor mængde valle som biprodukt. Valle har et indhold af tørne faste stoffer på ca. 6%, hvilke tørre faste stoffer er sammensat 10 omtrent som følger vægt%
Lactose 4,6
Protein 0,6 deraf 15 Lactoperoxidase 0,0020
Lactoferrin 0,0030
Fedt 0,05 (efter separation)
Salte_OZ_ 20 Indhold af tørre faste stoffer, ca. 6,0
Proteinfraktionen, der udgør ca. 10-12% af de tørre faste stoffer, er sammensat af 25 et antal forskellige proteinbestanddefe. De største proteinbestanddele er β- lactoglobulin, a- lactalbumin og bovint serumalbumin. Tillige tilhører et antal bioaktive bestanddele proteinfraktionen, for eksempel immunoglobuliner, lactoperoxidase, lactoferrin og lysozym.
30 Både lactoperoxidase og lactoferrin har antimikrobielle egenskaber. Der er stor interesse for at ekstrahere naturlige antimikrobielle stoffer med henblik på anvendelse i andre sammenhænge inden for levnedsmiddelteknologi samt på de kemisk- tekniske og medicinske områder.
35 2 DK 173642 B1
Der forefindes lave indhold af disse stoffer i skummetmælk og valle (også i den oprindelige mælk). Lactoperoxidase og lactoferrin er til stede i indhold, der ligger på 15-50 mg/liter, i afhængighed af koens laktationstilstand. Store mængder valle (mælk) skal følgelig filtreres for at gøre ekstraktion af kilogrammængder af disse 5 bioaktive bestanddele lettere.
De procestekniske betingelser for isolering af lactoperoxidase, henholdsvis lactoferrin af mælk/valle er baseret på det forhold, at det isoelektriske punkt (pi) for disse to proteiner er ca. 9,5, medens hoveddelen af valleproteineme har iso-10 elektriske punkter på omkring 5,1-5,4 og kaseinet på ca. 4,6. En fundamentalt set egnet proces til fraskillelse af lactoperoxidase og lactoferrin er derfor at bringe mælken/vallen i kontakt med en kationbytter ved et pH på < 6 til selektiv adsorption, og der gøres her brug af den positive nettoladning på lactoperoxidase og lactoferrin, hvilken positive nettoladning adskiller sig fra nettoladningen på andre 15 mælkeproteiner, der har en negativ ladning ved dette pH.
Den traditionelle måde til isolering af lactoperoxidase og lactoferrin i små mængder til forskningsformål er at anvende udfælningsteknikken og ionbytterchromatografi, hyppigt kombineret med gelfiltrering, se J. Biol. Chem., 20 bind 228, 1957, M. Morrison, H-B. Hamilton og E. Stotz, side 767 og J. Biol.
Chem., 238,1963, M. Morrison og P-E. Hultquist, 2847. Disse fremgangsmåder er ikke egnede til fremstilling af store mængder af de bioaktive bestanddele, der er under debat, på en økonomisk forsvarlig måde.
25 I US patentskrift 4 436 658 er adsorption af lactoferrin fra kaseinfrit mælkeserum (valle) ved hjælp af en silicakolonne gjort kendt. pH'et i mælkeserummet indstilles på 7,7-8,2 inden adsorption på kolonnen. Immunoglobuliner, lactoferrin og lactoperoxidase hænger fast ved kolonnen. Efter adsorptionsfasen finder eluering med en fortyndet saltopløsning sted ved et pH på < 4. Der opnås ikke nogen 30 selektiv eluering af de adsorbe rede proteiner, især ikke i henseende til lactoperoxidase. Med en kolonne, der rummer ca. 5 g silicasammensætning, kan man behandle 1 liter valle. Denne fremgangsmåde, der tilhører den kendte teknik, må betragtes som uegnet til anvendelse i industriel skala.
35 Zagulski et al. beskriver i Prace in Materialy Zootechniczne, bind 20,1979 side 87-103 en chargevis fremgangsmåde til at opnå lactoferrin, i hvilken fremgangsmåde 3 DK 173642 B1 der gøres brug af en svag kationbytter, der blandes med mælken. Efter at ligevægt har indstillet sig, anbringes ionbytteren i en kolonne til eluering af de adsorberede proteiner med en saltopløsning. Denne fremgangsmåde er baseret på en chargevis fremgangsmåde, og der må udføres en yderligere oprensning i et andet 5 ionbytningstrin for at opnå en høj renhed af lactoferrinet.
En lignende fremgangsmåde er beskrevet i BE patentskrift 901 672 (JP. Prieels and R. Peipper, Oleofina S.A.). Her gøres der brug af en ionbytter baseret på cal-ciumalginat, i hvilken ionbytterfunktionaliteten er opnået ved iblanding af oxider af 10 zircon, titan, silicium eller aluminium. Mælken/vallen bringes i kontakt med ionbytteren i en pakket kolonnen eller ved blanding i en tank, hvorved proteiner med isoelektrisk punkt på over 7,5 bliver adsorberet. Efter at ligevægt har indstillet sig, skilles gelen fra ad mekanisk vej og tilføres til et middel til vaskning og eluering med en calciumchloridopløsning. Alle væsker, der kommer i kontakt med 15 calciumalginatgelen, skal indeholde i det mindste 0,1% CaCI2 for at forhindre gelen i at blive opløst. Der opnås ingen fraktionering af lactoperoxidase og lactoferrin ved elueringen, men fraktioneringen må udføres i et særligt oprensningstrin.
20 Som en grund til ikke at arbejde med en kommercielt etableret ionbytningsteknik i en kolonnefremgangsmåde er der i det ovennævnte BE patentskrift omtalt de uoverstigelige vanskeligheder, der er forbundet med tilstopning af ionbytteren, hvilken tilstopning forårsages af forekomsten af partikler af kugleformigt fedt - også kaldet globulært fedt- og proteinaggregat i mediet.
25 I GB patentskrift 2 179 947 er en fremgangsmåde til ekstraktion af lactoferrin gjort kendt. Fremgangsmåden udføres på en sådan måde, at vallen bliver gjort til genstand for ultrafiltrering, hvorved proteinindholdet i vallen (inklusive lactoferrinet) bliver koncentreret ca. 5 gange. Det således behandlede mælkeserum bringes til 30 at passere ved en meget lav hastighed (ca. 0,03 af lejets rumfang pr. minut) gennem en ionbytterkolonne, fortrinsvis en svag kationbytter. Kolonnen elueres -stadigvæk ved en lav hastighed - med en opløsning med en ionstyrkegradient, der stiger op til 0,4 M, når lactoferrin elueres. Dette er en fremgangsmåde i en lille skala, hvilken fremgangsmåde ikke er egnet til industriel fremstilling af lactoferrin.
35 Brugen af en svag ionbytter resulterer i en ringe kapacitet. Valle i en mængde på 100 gange lejets rumfang - omdannet til et naturligt indhold af tørre faste stoffer - 4 DK 173642 B1 kan passere gennem ionbytterkolonnen mellem hver eluering. Problemet med tilstopning af ionbytterfiltret forårsaget af fedt- og proteinpartikler er ikke blevet løst med denne fremgangsmåde, der tilhører den kendte teknik.
5 De følgende krav kan stilles til en industrielt anvendelig fremgangsmåde til økonomisk udvinding af lactoperoxidase og lactoferrin af valle/skummetmælk: 1) Høj selektiv kapacitet af adsorptionsmassen. Eftersom de indeholdte mængder af lactoperoxidase/lactoferrin er lave i mælkeserum, må de 10 mængder mælkeserum, der kan behandles i én eluering, være store.
2) Høj strømningshastighed i adsorptionsfasen. (Normale chromatografiske processer gennemføres ved lave hastigheder, 0,01-0,10 af lejets rumfang pr. minut.) Grunden er, at på grund af den lille partikelstørrelse giver lejet 15 sædvanligvis store trykfald, og at reaktionskinetikken for adsorptions processen kræver en høj strømningshastighed.
3) Fremgangsmåden skal være hygiejnisk, hvilket betyder, at adsorptionsmassen skal kunne tåle en ludbehandling ved pH 13-14.
20
Opfindelsens formål er at opnå en fremgangsmåde, der opfylder de ovennævnte krav, til ekstraktion af rene fraktioner af lactoperoxidase og lactoferrin af mælkeserum (valle) i stor skala og med lave omkostninger.
25 Opfindelsen angår en fremgangsmåde til ekstrahering af rene fraktioner af lactoperoxidase og lactoferrin af mælkeserum, idet denne fremgangsmåde er ejendommelig ved, at man mikrofiltrerer mælkeserummet, at man bringer det til at passere gennem en stærk kationbytter ved en høj strømningshastighed på ca. 1- 1,5 gange lejets rumfang pr. minut til selektiv adsorption af lactoperoxidase og 30 lactoferrin, og at man successivt og selektivt eluerer lactoperoxidasen med en saltopløsning med en koncentration på 0,10-0,4 M ved et pH på ca. 6,5 og lactoferrinet med en saltopløsning med en koncentration på 0,5-2 M.
Ifølge opfindelsen er der tilvejebragt en fremgangsmåde til fremstilling af rene 35 fraktioner af to forskellige proteiner i et enkelt ionbytningstrin. Dette er ikke blevet opnået tidligere i industriel skala. Fremgangsmåder, der tilhører den kendte teknik, 5 DK 173642 B1 til ekstrahering af disse proteiner i industriel skala har krævet to eller tre oprensningstrin.
De ovennævnte problemer med tilstopning af ionbytteren, hvilken tilstopning er 5 forårsaget af forekomsten af partikler, såsom aggregater af kugleformigt fedt og aggregater af proteiner, i serummet eller vallen, er ifølge opfindelsen løst ved, at mælkeserummet (vallen) mikrofiltreres, for eksempel i en såkaldt tværstrømningsproces, inden det (den) bringes i kontakt med lejet af ionbytter.
Ved at vælge en egnet porestørrelse af mikrofiltret kan de aggregatpartikler af fedt 10 og de aggregatpartikler af protein, hvilke aggregatpartikler forår sager tilstopning, fjernes. Et egnet mikrofilter har en porediameter på 0,10-2 pm, fortrinsvis 0,4-1,5 pm.
Som udgangsmateriale til fremgangsmåden ifølge opfindelsen anvendes der 15 mælkeserum (valle), det vil sige mælk, der er befriet for fedt og kasein.
Mælkeserummet behandles først ved mikrofiltrering til fjernelse af rester af aggregatpartikler af fedt og aggregatpartikler af protein, fortrinsvis i en såkaldt tværstrømningsproces. Det mikrofiltrerede mælkeserum bringes dernæst til ved en høj hastighed (ca. 1-1,5 gange lejets rumfang pr. minut) at passere gennem en 20 kolonne pakket med en stærk kationbytter, der adsorberer lactoperoxidase og lactoferrin selektivt. Denne kationbytter har fortrinlige egenskaber i henseende til hastighed og reaktionskinetik og en kapacitet for mælkeserum på ca. 1.000 gange lejets rumfang. Dette betyder, at mælkesemm i en mængde på ca. 1.000 gange lejets rumfang kan passere, inden lactoperoxidase, som har den svageste binding, 25 bryder igennem, det vil sig, at ionbytteren er mættet med disse proteiner. Der indtræffer blot en ganske lille stigning i trykfaldet mellem begyndelsen og slutningen af adsorptionsfasen.
Elueringen af ionbyttermassen bliver påbegyndt med at vaske mælkeserummet ud 30 af kolonnen med en buffer, fortrinsvis en phosphatbuffer ved pH'et for mælkeserummet, 6,5. Dernæst elueres eventuelle urenheder med en bufferopløsning, der indeholder en svag saltopløsning, fortrinsvis et uorganisk alkali-, jordalkali- eller ammoniumsalt, foreksempel 0,075 M NaCI.
35 Efter denne forberedende eluering, elueres de ønskede proteiner med bufferopløsninger, der indeholder saltopløsninger, der er udvalgt blandt de 6 DK 173642 B1 ovennævnte salte, i forskellige koncentrationer. Således udføres elueringen af lactoperoxidase ved en saltkoncentration i området 0,10-0,4 M og af lactoferrin ved en saltkoncentration inden for 0,5-2 M.
5 Efter denne behandling er de pågældende proteiner blevet kon centreret ca. 500 gange.
De rene proteinfraktioner opsamles, og derpå gennemføres der en yderligere koncentrering, fortrinsvis ved hjælp af ultrafiltrering, efterfulgt af afsaltning og 10 frysetørring for på den måde at opnå et handelsprodukt, der består af ca. 90% rene proteinfraktioner.
Til fremstilling af 1 kg lactoperoxidase og 1 kg lactofemn kræves der 65, henholdsvis 45 m3 valle. Renheden af de ekstraherede bestanddele overstiger 15 90%. Dette opnås ved et egnet valg af ionbytter og et omhyggeligt valg af adsorptions- og elueringsbetingelser, i hvilke betingelser pH'et og saltkoncentrationerne er vigtige parametre.
Opfindelsen vil nu blive beskrevet indgående ved hjælp af eksemplet nedenfor og 20 den ledsagende tegning, på hvilken
Fig. 1 er et skematisk billede af en foretrukken udførelsesform for fremgangsmåden ifølge opfindelsen, 25 fig. 2 illustrerer UV absorptionsspektret ved eluering af lactoperoxidase og lactoferrin af en ionbytterkolonne, og fig. 3 er chromatogrammer, der viser renheden af lactoperoxidase og lactoferrin, efter at fraktioneringen ifølge opfindelsen er blevet udført.
30
Eksempel 100 liter pasteuriseret og slamcentrifugeret sød valle med et pH på 6,5 blev mikrofiltreret i en såkaldt tværstrømningsproces ved 50’C. Ved mikrofiltreringen 35 blev tilbageblevne rester af kugleformigt fedt fjernet sammen med forekommende proteinaggregater. Porestørrelsen af mikrofiltret var 1,4 pm.
7 DK 173642 B1
Efter afkøling blev vallen bragt til at passere gennem en ionbytterkolonne pakket med 80 ml specielt behandlet stærk kationbytter (S-Sepharose, hurtig strømning, Pharmacia) på basis af agarose. Højden af lejet var ca. 4,1 cm, og hastigheden gennem kolonnen var 100 ml/minut, hvilket svarer til en hastighed på 1,25 gange 5 lejets rumfang pr. minut. Trykfaldet før kolonnen var ved kørslens begyndelse 0,26 bar. 15 timer senere var hastigheden stadigvæk 100 ml/minut ved et trykfald på 0,28 bar. Lactoperoxidasens gennembrud indtraf, da ca. 80-90 liter valle var blevet bragt til at passere kolonnen, det vil sige ca. 1.000 gange lejets rumfang.
10 Dernæst blev strømmen af vallen afbrudt, og elueringsfasen blev påbegyndt med at vaske vallen ud af kolonnen med en phosphatbuffer, 0,01 Μ KH2PO4, pH 6,5, og efterfulgt af eluering af urenheder af ionbytteren med en phosphatbuffer, der indeholder 0,075 M NaCI (fig. 1). Lactoperoxidasen blev elueret med en phosphatbuffer, der indeholder 0,3 M NaCI, og derpå blev lactoferrinet elueret med 15 en phosphatbuffer, der indeholder 0,9 M NaCI (se fig. 2).
Efter at fraktionerne var blevet opsamlet, blev de afsaltet ved gelfiltrering i en Sephadex kolonne og blev til slut frysetørret.
20 lonbytningskolonnen blev gjort ren ved vaskning først med 2,0 M NaCI og derpå med 1,0 M NaOH, hvorpå kolonnen var klar til den næste kørsel.
8 DK 173642 B1 - Udbytte af lactoperoxidase efter ionbytning: 96,5% 5 - Renhed af den opsamlede fraktion efter eluering: A412/A280 = 0.84 - Totalt udbytte ved fremgangsmåden efter frysetørring, 10 beregnet som aktivitet: 90% - Renhed af det frysetørrede præparat: 15 A412/A28O = 0,87 20 *0,92 er maksimumskvotaen hørende til 100%.
25
Det tilsvarende udbytte og den tilsvarende renhed blev opnået for lactoferrin (se fig. 3).
Claims (5)
1. Fremgangsmåde til ekstrahering af rene fraktioner af lactoperoxidase og iactoferrin af mælkeserum, kendetegnet ved, at man mikrofiltrerer 5 mælkeserummet, at man bringer det til at passere gennem et leje af en stærk kationbytter ved en høj strømningshastighed på ca. 1-1,5 gange lejets rumfang pr. minut tii selektiv adsorption af lactoperoxidase og Iactoferrin, og at man successivt og selektivt eluerer lactoperoxidasen med en saltopløsning med en koncentration på 0,10-0,4 M ved et pH på ca. 6,5 og lactoferrinet med en saltopløsning med en 10 koncentration på 0,5-2 M.
2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at man - inden eiueringen af lactoperoxidase - eluerer kationbytteren med en saltopløsning med en koncentration på 0,01- 0,15 M, fortrinsvis en opløsning af et uorganisk alkali-, 15 jordalkali- eller ammoniumsalt.
3. Fremgangsmåde ifølge krav 1 eller 2, kendetegnet ved, at pH'et af mælkeserummet indstilles til 5,9-9,0, fortrinsvis ca. 6,5, inden det bringes til at passere gennem kationbytteren. 20
4. Fremgangsmåde ifølge et eller flere af de foregående krav, kendetegnet ved, at mikrofiltreringen udføres i et mikrofilter med en porediameter på 0,10-2 pm, fortrinsvis 0,4-1,5 pm.
5. Fremgangsmåde ifølge et eller flere af de foregående krav, kendetegnet ved, at saltopløsninger med elueret lactoperoxidase og Iactoferrin koncentreres, afsaltes og frysetørres.
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SE8704719 | 1987-11-27 | ||
| SE8704719A SE458818B (sv) | 1987-11-27 | 1987-11-27 | Foerfarande foer utvinning av rena fraktioner av laktoperoxidas och laktoferrin ur mjoelkserum |
| PCT/SE1988/000643 WO1989004608A1 (en) | 1987-11-27 | 1988-11-25 | Process for extracting pure fractions of lactoperoxidase and lactoferrin from milk serum |
| SE8800643 | 1988-11-25 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DK124590D0 DK124590D0 (da) | 1990-05-18 |
| DK124590A DK124590A (da) | 1990-05-25 |
| DK173642B1 true DK173642B1 (da) | 2001-05-14 |
Family
ID=20370415
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DK199001245A DK173642B1 (da) | 1987-11-27 | 1990-05-18 | Fremgangsmåde til ekstrahering af rene fraktioner af lactoperoxidase og lactoferrin af mælkeserum |
Country Status (12)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5149647A (da) |
| EP (1) | EP0390821B1 (da) |
| JP (1) | JP2553180B2 (da) |
| AT (1) | ATE89454T1 (da) |
| AU (1) | AU613688B2 (da) |
| DE (1) | DE3881217T2 (da) |
| DK (1) | DK173642B1 (da) |
| FI (1) | FI91032C (da) |
| NO (1) | NO177268C (da) |
| NZ (1) | NZ227097A (da) |
| SE (1) | SE458818B (da) |
| WO (1) | WO1989004608A1 (da) |
Families Citing this family (40)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4879110A (en) * | 1983-10-27 | 1989-11-07 | Stolle Research And Development Corporation | Antihypertensive hyperimmune milk, production, composition, and use |
| US5756333A (en) * | 1989-11-03 | 1998-05-26 | Incyte Pharmaceuticals, Inc. | Recombinant production of lactoperoxidase |
| ATE193324T1 (de) * | 1989-11-03 | 2000-06-15 | Incyte Pharma Inc | Rekombinante herstellung von laktoperoxidase |
| JP3035833B2 (ja) * | 1991-01-21 | 2000-04-24 | 雪印乳業株式会社 | シアル酸類含有組成物の製造方法 |
| JP3110078B2 (ja) * | 1991-06-21 | 2000-11-20 | 森永乳業株式会社 | 高純度抗菌性ペプチドの大量製造法 |
| JPH07502016A (ja) * | 1991-07-25 | 1995-03-02 | コモンウェルス・サイエンティフィック・アンド・インダストリアル・リサーチ・オーガニゼイション | 流体からの荷電粒子の単離 |
| EP0620709B1 (en) * | 1992-01-15 | 1995-10-18 | Campina Melkunie B.V. | Process for isolating lactoferrin and lactoperoxidase from milk and milk products |
| JPH05202098A (ja) * | 1992-01-29 | 1993-08-10 | Snow Brand Milk Prod Co Ltd | 乳質原料から生理活性物質の製造法 |
| SE470375B (sv) * | 1992-05-07 | 1994-02-07 | Alfa Laval Food Eng Ab | Sätt att erhålla högvärdiga proteinprodukter ur vassle |
| US5756680A (en) * | 1994-01-05 | 1998-05-26 | Sepragen Corporation | Sequential separation of whey proteins and formulations thereof |
| US5468844A (en) * | 1994-01-07 | 1995-11-21 | Protose Technologies Inc. | Process for the membrane-filtering of protein solutions |
| NZ330484A (en) * | 1994-02-16 | 1999-11-29 | Pharming Bv | Isolation of lactoferrin especially recombinant lactoferrin from milk |
| HUT77043A (hu) * | 1994-09-16 | 1998-03-02 | New Zealand Dairy Board | Kazein és savófehérjék fizikai elválasztása |
| JP3112637B2 (ja) * | 1994-09-30 | 2000-11-27 | 雪印乳業株式会社 | 骨強化剤 |
| JP2974604B2 (ja) * | 1996-01-23 | 1999-11-10 | 雪印乳業株式会社 | 塩基性タンパク質組成物、塩基性ペプチド組成物及びその利用 |
| JP3073439B2 (ja) * | 1996-02-08 | 2000-08-07 | 雪印乳業株式会社 | 骨形成促進及び骨吸収防止剤 |
| CA2197515A1 (en) * | 1996-07-15 | 1998-01-16 | Reyad Mahmoud | Methods of treating milk products |
| WO1998004922A1 (fr) * | 1996-07-30 | 1998-02-05 | Shionogi & Co., Ltd. | Procede permettant d'empecher l'adsorption de lactoferrine |
| NZ334502A (en) | 1996-09-06 | 2000-11-24 | Pall Corp | Shear separation method and system for process fluids |
| JP4082782B2 (ja) * | 1998-04-30 | 2008-04-30 | 雪印乳業株式会社 | 歯周病予防及び改善剤 |
| US20030040475A1 (en) † | 2001-01-16 | 2003-02-27 | Yasuhiro Toba | Agents for improving lipid metabolism and reducing high blood pressure |
| US6875459B2 (en) * | 2001-09-10 | 2005-04-05 | Henry B. Kopf | Method and apparatus for separation of milk, colostrum, and whey |
| FR2841747B1 (fr) | 2002-07-02 | 2004-08-20 | Cie Laitiere Europeenne | Isolat de proteines de lait et procede pour sa preparation |
| EP1585965A4 (en) * | 2002-08-29 | 2009-05-13 | Univ Massachusetts | USE OF EMULSION RESTRICTING TECHNOLOGY FOR GENERATING OXIDATIVELY STABLE LIPID DELIVERY SYSTEMS |
| ZA200502320B (en) * | 2002-09-20 | 2006-10-25 | Pharmacia Corp | Process for decreasing aggregate levels of pegylated protein |
| JP4263932B2 (ja) * | 2003-04-01 | 2009-05-13 | 雪印乳業株式会社 | ラクトフェリンの製造方法 |
| US20040259770A1 (en) * | 2003-06-19 | 2004-12-23 | Rush University Medical Center | Method for determining leukocyte activation |
| WO2005041680A2 (en) * | 2003-11-03 | 2005-05-12 | Advanced Protein Systems | A novel colostral fractionation process |
| CA2553733C (en) * | 2004-02-17 | 2011-02-22 | Morinaga Milk Industry Co., Ltd. | Process for producing lactoperoxidase |
| WO2005085287A1 (en) * | 2004-03-03 | 2005-09-15 | En-N-Tech, Inc. | Treatments for contaminant reduction in lactoferrin preparations and lactoferrin-containing compositions |
| US20070142629A1 (en) * | 2004-06-16 | 2007-06-21 | Ciphergen Biosystems, Inc. | Multichemistry fractionation |
| KR101496432B1 (ko) | 2005-05-10 | 2015-02-27 | 머레이 걸번 코-어퍼러티브 컴퍼니 리미티드 | 면역글로불린 분획 및 이것의 제조 방법 |
| FR2889068B1 (fr) * | 2005-07-29 | 2012-03-02 | Cie Laitiere Europeenne | Nouvelles fractions proteiques laitieres et leur utilisation pour la prevention ou le traitement des maladies inflammatoires chroniques |
| US20070212367A1 (en) * | 2006-03-13 | 2007-09-13 | Keech Andrew M | Novel immunologically active peptide fragments of a proline-rich polypeptide isolated from colostral mammalian fluids for treatment of viral and non-viral diseases or diseased conditions |
| AU2008274969B2 (en) | 2007-07-10 | 2014-04-24 | Glanbia Nutritionals | Method for removing endotoxin from proteins |
| CN101861332B (zh) * | 2007-11-01 | 2014-04-02 | 雪印惠乳业株式会社 | 用于促进成骨细胞分化和抑制破骨细胞分化的食品原材料 |
| US9055752B2 (en) * | 2008-11-06 | 2015-06-16 | Intercontinental Great Brands Llc | Shelf-stable concentrated dairy liquids and methods of forming thereof |
| UA112972C2 (uk) | 2010-09-08 | 2016-11-25 | Інтерконтінентал Грейт Брендс ЛЛС | Рідкий молочний концентрат з високим вмістом сухих речовин |
| CN104853612B (zh) | 2012-11-15 | 2019-05-31 | 阿拉食品公司 | 生产含有酪蛋白巨肽的组合物的方法 |
| CZ2013885A3 (cs) * | 2013-11-15 | 2015-08-19 | Univerzita PalackĂ©ho | Způsob separace syrovátkových proteinů z mléčného média a zařízení k provádění tohoto způsobu |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3896241A (en) * | 1971-09-01 | 1975-07-22 | Coca Cola Co | Preparation of a whey protein concentrate |
| FR2505615A1 (fr) * | 1981-05-15 | 1982-11-19 | Elf Aquitaine | Procede d'extraction de lactoferrine et d'immunoglobulines du lait |
| JPS61145200A (ja) * | 1984-12-19 | 1986-07-02 | Snow Brand Milk Prod Co Ltd | ウシラクトフェリンの分離精製法 |
| FR2584727B1 (fr) * | 1985-07-11 | 1988-06-17 | Roussel Uclaf | Procede d'extraction de proteines du lait, produits, application du procede, et compositions pharmaceutiques |
| IE61701B1 (en) * | 1986-07-17 | 1994-11-30 | Morinaga Milk Industry Co Ltd | Process for producing bovine lactoferrin in high purity |
| FR2616628B1 (fr) * | 1987-06-19 | 1989-09-29 | Entremont Sa | Procede pour extraire des proteines du lactoserum par adsorption et elution |
-
1987
- 1987-11-27 SE SE8704719A patent/SE458818B/sv not_active IP Right Cessation
-
1988
- 1988-11-25 AU AU27180/88A patent/AU613688B2/en not_active Ceased
- 1988-11-25 EP EP88910417A patent/EP0390821B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1988-11-25 AT AT88910417T patent/ATE89454T1/de not_active IP Right Cessation
- 1988-11-25 JP JP63509492A patent/JP2553180B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1988-11-25 WO PCT/SE1988/000643 patent/WO1989004608A1/en active IP Right Grant
- 1988-11-25 US US07/488,040 patent/US5149647A/en not_active Expired - Lifetime
- 1988-11-25 DE DE88910417T patent/DE3881217T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1988-11-28 NZ NZ227097A patent/NZ227097A/xx unknown
-
1990
- 1990-05-18 DK DK199001245A patent/DK173642B1/da not_active IP Right Cessation
- 1990-05-23 FI FI902562A patent/FI91032C/fi not_active IP Right Cessation
- 1990-05-25 NO NO902328A patent/NO177268C/no not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| NO902328L (no) | 1990-05-25 |
| NO177268B (no) | 1995-05-08 |
| EP0390821B1 (en) | 1993-05-19 |
| DE3881217D1 (de) | 1993-06-24 |
| JPH03502921A (ja) | 1991-07-04 |
| NZ227097A (en) | 1991-01-29 |
| NO902328D0 (no) | 1990-05-25 |
| FI91032B (fi) | 1994-01-31 |
| SE458818B (sv) | 1989-05-16 |
| DK124590A (da) | 1990-05-25 |
| FI902562A0 (fi) | 1990-05-23 |
| WO1989004608A1 (en) | 1989-06-01 |
| US5149647A (en) | 1992-09-22 |
| DE3881217T2 (de) | 1994-01-05 |
| JP2553180B2 (ja) | 1996-11-13 |
| FI91032C (fi) | 1994-05-10 |
| AU613688B2 (en) | 1991-08-08 |
| AU2718088A (en) | 1989-06-14 |
| EP0390821A1 (en) | 1990-10-10 |
| NO177268C (no) | 1995-08-16 |
| ATE89454T1 (de) | 1993-06-15 |
| DK124590D0 (da) | 1990-05-18 |
| SE8704719D0 (sv) | 1987-11-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DK173642B1 (da) | Fremgangsmåde til ekstrahering af rene fraktioner af lactoperoxidase og lactoferrin af mælkeserum | |
| US4791193A (en) | Process for producing bovine lactoferrin in high purity | |
| AU661090B2 (en) | Process for the production of biologically active substances from milk and related raw materials | |
| US6010698A (en) | Process for recovering growth factors, or a composition containing one or more growth factors, from milk or a milk derivative | |
| US4582580A (en) | Process for the separation of immunoglobulins from colostrum | |
| EP0226035A1 (en) | A process for the specific separation of lactose from milk | |
| US5986063A (en) | Isolating β-lactoglobulin and α-lactalbumin by eluting from a cation exchanger without sodium chloride | |
| GB2179947A (en) | Process for the extraction of proteins from milk | |
| CA1327676C (en) | Isolation of an immunoglobulin rich fraction from whey | |
| JPS6339545A (ja) | 牛乳ホエ−中のβ−ラクトグロブリンの除去方法 | |
| WO2002028194A1 (en) | Process for recovering proteins from whey protein containing feedstocks | |
| JP2004307344A (ja) | ラクトフェリンの製造方法 | |
| SU513595A3 (ru) | Способ выделени орготеина | |
| AU777698B2 (en) | Process for separation of whey proteins using a novel anion exchanger | |
| JP3161846B2 (ja) | 牛乳ホエ−中のシアル酸結合ペプタイドの分離法 | |
| JP2985158B2 (ja) | 活性の高いラクテニン画分の回収方法 | |
| JPH02104533A (ja) | 高純度牛免疫グロブリンの製造法 | |
| RU2211577C2 (ru) | Способ извлечения белка из молочной сыворотки | |
| JPH05207848A (ja) | 牛乳に含まれる非蛋白態窒素成分の精製法 及び精製物 | |
| JPH07105A (ja) | 非蛋白態窒素成分の精製法及び精製物 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| B1 | Patent granted (law 1993) | ||
| PBP | Patent lapsed |
Country of ref document: DK |