FI91032B - Menetelmä laktoperoksidaasin ja laktoferriinin puhtaiden fraktioiden talteenottamiseksi maitoseerumista - Google Patents
Menetelmä laktoperoksidaasin ja laktoferriinin puhtaiden fraktioiden talteenottamiseksi maitoseerumista Download PDFInfo
- Publication number
- FI91032B FI91032B FI902562A FI902562A FI91032B FI 91032 B FI91032 B FI 91032B FI 902562 A FI902562 A FI 902562A FI 902562 A FI902562 A FI 902562A FI 91032 B FI91032 B FI 91032B
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- lactoperoxidase
- lactoferrin
- milk serum
- milk
- whey
- Prior art date
Links
- 108010063045 Lactoferrin Proteins 0.000 title claims abstract description 37
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 36
- 102000010445 Lactoferrin Human genes 0.000 title claims abstract description 34
- CSSYQJWUGATIHM-IKGCZBKSSA-N l-phenylalanyl-l-lysyl-l-cysteinyl-l-arginyl-l-arginyl-l-tryptophyl-l-glutaminyl-l-tryptophyl-l-arginyl-l-methionyl-l-lysyl-l-lysyl-l-leucylglycyl-l-alanyl-l-prolyl-l-seryl-l-isoleucyl-l-threonyl-l-cysteinyl-l-valyl-l-arginyl-l-arginyl-l-alanyl-l-phenylal Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 CSSYQJWUGATIHM-IKGCZBKSSA-N 0.000 title claims abstract description 34
- 235000021242 lactoferrin Nutrition 0.000 title claims abstract description 34
- 229940078795 lactoferrin Drugs 0.000 title claims abstract description 34
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 title claims abstract description 34
- 239000008267 milk Substances 0.000 title claims abstract description 34
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 title claims abstract description 34
- 108010023244 Lactoperoxidase Proteins 0.000 title claims abstract description 33
- 102000045576 Lactoperoxidases Human genes 0.000 title claims abstract description 33
- 229940057428 lactoperoxidase Drugs 0.000 title claims abstract description 33
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 title claims abstract description 27
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 15
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 claims abstract description 13
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims abstract description 10
- 239000012267 brine Substances 0.000 claims description 5
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 5
- 239000011148 porous material Substances 0.000 claims description 4
- 238000001471 micro-filtration Methods 0.000 claims description 3
- 239000003513 alkali Substances 0.000 claims description 2
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 claims description 2
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 claims 1
- 150000001342 alkaline earth metals Chemical class 0.000 claims 1
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 claims 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 abstract description 11
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 description 25
- 239000005862 Whey Substances 0.000 description 24
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 description 24
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 19
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 19
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 19
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 15
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 11
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 7
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 5
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 5
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 5
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M sodium hydroxide Inorganic materials [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 4
- 102000012174 Lactotransferrin Human genes 0.000 description 3
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 3
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 3
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 235000010410 calcium alginate Nutrition 0.000 description 2
- 239000000648 calcium alginate Substances 0.000 description 2
- 229960002681 calcium alginate Drugs 0.000 description 2
- OKHHGHGGPDJQHR-YMOPUZKJSA-L calcium;(2s,3s,4s,5s,6r)-6-[(2r,3s,4r,5s,6r)-2-carboxy-6-[(2r,3s,4r,5s,6r)-2-carboxylato-4,5,6-trihydroxyoxan-3-yl]oxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylate Chemical compound [Ca+2].O[C@@H]1[C@H](O)[C@H](O)O[C@@H](C([O-])=O)[C@H]1O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O2)C([O-])=O)O)[C@H](C(O)=O)O1 OKHHGHGGPDJQHR-YMOPUZKJSA-L 0.000 description 2
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 2
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 2
- 238000010924 continuous production Methods 0.000 description 2
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 2
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 2
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 2
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 2
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 2
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000004407 Lactalbumin Human genes 0.000 description 1
- 108090000942 Lactalbumin Proteins 0.000 description 1
- 102000008192 Lactoglobulins Human genes 0.000 description 1
- 108010060630 Lactoglobulins Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 102100033468 Lysozyme C Human genes 0.000 description 1
- 102000014171 Milk Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010011756 Milk Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 description 1
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 description 1
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 1
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 1
- RTAQQCXQSZGOHL-UHFFFAOYSA-N Titanium Chemical compound [Ti] RTAQQCXQSZGOHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QCWXUUIWCKQGHC-UHFFFAOYSA-N Zirconium Chemical compound [Zr] QCWXUUIWCKQGHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N aluminium oxide Inorganic materials [O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3] PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 1
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 1
- 238000003889 chemical engineering Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 238000011033 desalting Methods 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000011067 equilibration Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000006651 lactation Effects 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 description 1
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 description 1
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 description 1
- 235000021239 milk protein Nutrition 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 description 1
- 239000010453 quartz Substances 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 150000003377 silicon compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 229910052719 titanium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010936 titanium Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 235000021119 whey protein Nutrition 0.000 description 1
- 229910052726 zirconium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000021241 α-lactalbumin Nutrition 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
- A23C9/14—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations in which the chemical composition of the milk is modified by non-chemical treatment
- A23C9/146—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations in which the chemical composition of the milk is modified by non-chemical treatment by ion-exchange
- A23C9/1465—Chromatographic separation of protein or lactose fraction; Adsorption of protein or lactose fraction followed by elution
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
- A23C9/14—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations in which the chemical composition of the milk is modified by non-chemical treatment
- A23C9/142—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations in which the chemical composition of the milk is modified by non-chemical treatment by dialysis, reverse osmosis or ultrafiltration
- A23C9/1425—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations in which the chemical composition of the milk is modified by non-chemical treatment by dialysis, reverse osmosis or ultrafiltration by ultrafiltration, microfiltration or diafiltration of whey, e.g. treatment of the UF permeate
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
- A23J1/00—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites
- A23J1/20—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites from milk, e.g. casein; from whey
- A23J1/205—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites from milk, e.g. casein; from whey from whey, e.g. lactalbumine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/814—Enzyme separation or purification
- Y10S435/815—Enzyme separation or purification by sorption
Description
91032
Menetelmä laktoperoksidaasin ja laktoferriinin puhtaiden fraktioiden talteenottamiseksi maitoseerumista Förfarande för utvinning av rena fraktioner av laktoper-5 oxidas och laktoferrin ur mjölkserum 10
Esillä oleva keksintö koskee menetelmää laktoperoksidaasin ja laktoferriinin puhtaiden fraktioiden talteenottamiseksi maitoseerumista. Maitoseerumilla tarkoitetaan sekä kuorittua maitoa että heraa.
15 Juuston valmistuksessa saadaan suuria määriä heraa sivutuotteena. Heran kuiva-ainepitoisuus on noin 6 %, jonka kuiva-aineen koostumus on suunnilleen seuraava: paino-%
Laktoosia 4,6 20 Proteiinia 0,6 josta
Laktoperoksidaasia 0,0020
Laktoferriinia 0,0030
Rasvaa 0,05 (erotuksen jälkeen) 2^ Suoloja 0,7
Kuiva-aine noin 6,0
Proteiinifraktio, joka on noin 10-12 % KA-pitoisuudesta, koostuu joukosta erilaisia proteiinikomponentteja. Suurimmat ovat B-laktoglobuliini, α-laktalbumiini ja 30 häränseerumialbumiini. Proteiinifraktioon kuuluu myös joukko bioaktiivisia komponentteja, esim. immunoglobuliineja, laktoperoksidaasia, laktoferriiniä ja lysotsyy-miä.
Sekä laktoperoksidaasilla että laktoferriinillä on mikrobin vastaisia ominaisuuk- 2 siä. Suurta kiinnostusta esiintyy luonnollisten mikrobivastaisten aineiden talteenotta-miseksi näiden käyttämiseksi uusissa yhteyksissä elintarviketekniikan, kemian tekniikan ja lääketieteen alueilla.
5 Näiden aineiden pitoisuudet kuoritussa maidossa vast, herassa (myös alkuperäisessä maidossa) ovat pienet. Laktoperoksidaasia ja laktoferriiniä esiintyy pitoisuuksissa 15-50 mg/1, riippuen lehmän laktaatiovaiheesta. Suuria määriä heraa (maitoa) on siis suodatettava, jotta voitaisiin talteenottaa kilogrammamääriä näistä bioaktiivisista komponenteista.
10
Laktoperoksidaasin, vastaavasti laktoferriinin eristämisen prosessitekniset edellytykset maidosta/herasta perustuvat siihen, että näiden molempien proteiinien isoelektrinen piste (pl) on noin 9,5, kun taas heraproteiinien pääosan isoelektriset pisteet on noin 5,1-5,4 ja kaseiinin noin 4,6. Periaatteessa sopiva menetelmä laktoperoksidaasin, 15 vastaavasti laktoferriinin eristämiseksi on siksi saattaa maito/hera kontaktiin kat-jonivaihtajan kanssa pH-arvossa >6 selektiivisesti adsorptioksi, jolloin käytetään hyväksi laktoperoksidaasin ja laktoferriinin positiivista nettolatausta, joka erottuu muista maitoproteiineista, joiden lataus on negatiivinen tässä pH-arvossa.
20 Perinteinen tapa eristää pieniä määriä laktoperoksidaasia ja laktoferriinia tutkimustarkoituksiin on käyttää saostustekniikkaa ja jonivaihtokromatografiaa, usein yhdistettynä geelisuodatukseen, kts. Morrison, M., Hamilton, H-B, Stotz, E., J. Biol. Chem. 228; 767 (1957); ja Morrison, M., Hultquist, P-E., J. Biol. Chem. 238-2847 (1963). Nämä menetelmät eivät ole tarkoitettu kyseisten bioaktiivisten komponenttien suurien 25 määrien esiinottamiseksi taloudellisesti puolustettavalla tavalla.
US-patenttijulkaisusta 4 436 658 (Pevrouset) on tunnettua adsorboida laktoferriiniä kaseiinittomasta maitoseerumista (herasta) piikolonnin avulla. Maitoseeru-min pH-arvo säädetään alueelle 7,7-8,2 ennen kolonnilla tapahtuvaa adsorptiota. 30 Kolonniin tarttuu immunoglobuliineja, laktoferriiniä ja laktoperoksidaasia. Adsorptiovaiheen jälkeen eluoidaan laimealla suolaliuoksella pH-arvossa <4. Adsorboitujen proteiinien selektiivistä eluointia ei saada, varsinkaan laktoperok- li 91032 3 sidaasin suhteen. Kolonni, johon mahtuu noin 5 g piiyhdistettä, voi käsitellä 1 litran heraa. Tätä tunnettua menetelmää voidaan pitää vähemmän sopivana sovellettavaksi teollisuusmittakaavassa.
5 Zagulski et ai. julkaisussa Prace i Materialy Zootechniczne 20, s. 87-103 (1979) kuvaa ei-jatkuvaa menetelmää laktoferriinin esiinottamiseksi, jolloin käytetään heikkoa katjonivaihtajaa, joka sekoitetaan maitoon. Kun tasapaino on saavutettu, jonivaihtaja siirretään kolonniin adsorboitujen proteiinien eluoimiseksi suolaliuoksella. Menetelmä perustuu siis ei-jatkuvaan menetelmään ja jotta saataisiin hyvin puhdasta 10 laktoferriinia, se pitää puhdistaa vielä toisessa jonivaihtovaiheessa.
Samantapaista menetelmää kuvataan BE-patenttijulkaisussa 901 672 (J.P. Prieels ja R. Peipper, Oleofma S.A.). Tämän patenttijulkaisun mukaan käytetään kalsiumalginaat-tiin perustuvaa joninvaihtajaa, jossa joninvaihtotoiminta on saatu sekoittamalla 15 zirkonium-, titaani-, kvartsi- tai alumiinioksideja. Maito/hera saatetaan kontaktiin jonivaihtajan kanssa tiiviissä kolonnissa tai sekoittamalla säiliössä, jolloin ne proteiinit, joiden isoelektrinen piste on >7,5 adsorboituu. Tasapainon jälkeen geeli erotetaan mekaanisesti ja siirretään laitteeseen pesua ja eluointia varten kalsiumklori-diliuoksella. Kaikkien nesteiden, jotka tulevat kontaktiin kalsiumalginaattigeelin 20 kanssa, on sisällettävä ainakin 0,1 % CaCl2, jotta geeli ei liukenisi. Laktoperoksidaa-sin ja laktoferriinin fraktiointia ei saada eluoinnissa, vaan tämä tehdään erillisessä puhdistusvaiheessa.
Syyksi siihen, että ei käytetä kaupallisesti tunnettua jonivaihtotekniikkaa kolonni-25 menetelmällä ilmoitetaan mainitussa BE-patenttijulkaisussa ne voittamattomat vaikeudet, jotka liittyvät jonivaihtajan lataukseen riippuen kaikkialla esiintyvistä rasvahiukkasista ja proteiiniaggregaateista väliaineessa.
GB-patenttijulkaisusta 2 179 947 on tunnettu menetelmä laktotransferriinin uuttami-30 seksi maidosta. Menetelmä tapahtuu niin, että hera läpikäy ultrasuodattamisen, jolloin heran proteiinisisältö (mukaanlukien laktotransferriini) väkevöidään noin 5 kertaa, jonka jälkeen sen pH-arvo ja jonivahvuus säädetään. Näin käsitelty maitoseerumi saa 4 kulkea hyvin pienenä virtana (noin 0,03 petitilavuutta/min) joninvaihtokolonnin läpi, ensisijaisesti heikon katjonivaihtajan läpi. Kolonni eluoidaan, yhä käyttämällä pientä virtaa, liuoksella, jonka jonivaihtogradientti saavuttaa arvon 0,4 M, kun laktotransfer-riinia eluoidaan. Tämä on pienen mittakaavan menetelmä, joka ei sovellu laktoferrii-5 nin teolliseksi valmistamiseksi. Käyttämällä heikkoa katjoninvaihtajaa saadaan huono kapasiteetti. Suuruusluokkaa 100 petitilavuutta heraa, laskettuna luonnollisena kuiva-ainepitoisuutena, voi kulkea jonivaihtokolonnin läpi jokaisen eluoinnin välissä. Joni-vaihtosuodattimentukkeutumisongelmaa, joka johtuu rasva-ja proteiinihiukkasista, ei ole ratkaistu tässä tunnetussa menetelmässä.
10
Seuraavia vaatimuksia voidaan asettaa teollisesti käytettävälle menetelmälle laktope-roksidaasin ja laktoferriinin taloudelliseksi talteenottamiseksi herasta /kuoritusta maidosta: 15 1) Adsorptiomassan korkea selektiivinen kapasiteetti. Koska laktoperoksidaasin /laktoferriinin pitoisuudet ovat pieniä maitoseerumissa, pitää käsiteltävän maitoseerumin tilavuudet jokaista eluointia kohden olla suuret.
2) Suuri virtaus adsorptiovaiheessa. (Normaaleissa kromatografiamenetelmissä 20 käytetään tavallisimmin pieniä virtoja, 0,01-0,10 petitilavuutta/min. Syy tähän on osittain se, että peti aiheuttaa pienen raekoon seurauksena suuria paineenpudotuksia ja osittain se, että adsorptiomenetelmän reaktiokinetiikka asettaa tämän vaatimuksen.) 25 3) Prosessin on oltava hyvin hygieeninen, mikä tarkoittaa sitä, että adsorp tiomassan on siedettävä ainakin yhden lipeäkäsittelyn pH-arvossa 13-14.
Esillä olevan keksinnön tavoitteena on aikaansaada menetelmä, joka täyttää edellä olevat vaatimukset laktoperoksidaasin ja laktoferriinin puhtaiden fraktioiden talteenot-30 tamiseksi maitoseerumista (herasta) suuressa mittakaavassa ja alhaisilla kustannuksilla.
Esillä olevan keksinnön kohteena on menetelmä laktoperoksidaasin ja laktoferriinin 91032 5 puhtaiden fraktioiden talteenottamiseksi maitoseerumista, joka menetelmä on tunnettu siitä, että maitoseerumi mikrosuodatetaan, saatetaan kulkemaan vahvan katjonivaihta-jan läpi suurena virtana laktoperoksidaasin ja laktoferriinin selektiiviseksi adsorboimi-seksi ja laktoperoksidaasi ja laktoferriini eluoidaan peräkkäin selektiivisesti suolali-5 uoksilla, joiden pitoisuudet ovat erilaiset.
Keksinnön ansiosta aikaansaadaan menetelmä kahden eri seerumiproteiinin puhtaiden fraktioiden esiinottamiseksi yhdessä ainoassa joni vaihto vaiheessa. Tätä ei aikaisemmin ole saatu aikaan teollisessa mittakaavassa. Aikaisemmin tunnetut menetelmät näiden 10 proteiinien talteenottamiseksi teollisessa mittakaavassa on tarkoittanut kahta tai kolmea puhdistusvaihetta.
Edellä mainitut jonivaihtajan tukkeutumisongelmat, kuten sellaisten hiukkasten esiintyminen, kuten rasvapallot ja proteiiniaggregaatit, seerumissa tai herassa ratkais-1S taan keksinnön avulla niin, että maitoseerumi (hera) mikrosuodatetaan, esimerkiksi ns.
cross-flow -menetelmällä, ennen kontaktia jonivaihtopetiin. Mikrosuodattimen huokoskoon sopivalla valinnalla tukkeutumista aiheuttavia rasva- ja proteiiniaggre-gaattihiukkasia voidaan eliminoida. Sopivan mikrosuodattimen huokoshalkaisija on 0,10-2 pm, ensisijaisesti 0,4-1,5 pm.
20 Lähtökohtana keksinnön mukaiselle menetelmälle käytetään maitoseerumia (heraa), ts. maitoa, josta rasva ja kaseiini on poistettu. Maitoseerumi käsitellään ensin mik-rosuodattamalla rasva- ja proteiiniaggregaattihiukkasten jäännösten poistamiseksi, sopivimmin nk. cross-flow -menetelmällä. Mikrosuodatettu maitoseerumi johdetaan 25 sen jälkeen suurena virtana (noin 1-1,5 petitilavuutta /min) kolonnin läpi, joka on ladattu vahvalla katjonivaihtajalla, joka selektiivisesti adsorboi laktoperoksidaasia ja laktoferriinia. Tämän katjonivaihtajan virtaus- ja adsorptiokineettiset ominaisuudet ovat äärimmäisen hyvät ja sen kapasiteetti on noin 1000 petitilavuutta maitoseerumia. Tämä tarkoittaa sitä, että noin 1000 petitilavuutta maitoseerumia voi kulkea ennen-30 kuin laktoperoksidaasi, joka on heikoimmin sidottu pääsee läpi, ts. joninvaihtomassa on kyllästetty näillä proteiineilla. Ainoastaan merkityksetön paineenalennuksen lisäys tapahtuu adsorptiovaiheen alun ja lopun välillä.
____ L·____ 6
Jonivaihtomassan eluointi aloitetaan kolonnissa olevan maitoseerumin uloshuuh-telemisella puskurilla, joka sopivimmin on fosfaattipuskuri maitoseerumin omassa pH-arvossa, 6,5. Sen jälkeen mahdolliset epäpuhtaudet eluoidaan puskuriliuoksen avulla, joka sisältää heikon suolaliuoksen, sopivasti epäorgaanisen alkali-, maa-alkali- tai 5 ammoniumsuolan suolaliuos, esim. 0,0075 M NaCl.
Tämän valmistavan eluoinnin jälkeen eluoidaan sitten halutut proteiinit selektiivisesti puskuriliuoksilla, jotka sisältävät suolaliuoksia, jotka on valittu edellä olevista suoloista ja joiden konsentraatio on erilainen. Laktoperoksidaasin eluointi tapahtuu 10 siis suolapitoisuudessa, joka on alueella 0,10-0,4 M ja laktoferriinin suolapitoisuudessa 0,5-2 M.
Tämän käsittelyn jälkeen kyseiset proteiinit on väkevöity noin 500 kertaa.
15 Puhtaat proteiinifraktiot kerätään ja sen jälkeen suoritetaan sopivimmin vielä yksi väkevöiminen ultrasuodattamalla, jonka jälkeen seuraa suolanpoisto ja kylmäkuivaus kauppatavaran aikaansaamiseksi, joka koostuu noin 90 %:sen puhtaista proteiinifraktioista.
20 Yhden kilon laktoperoksidaasin ja yhden kilogramman laktoferriinin tuotantoon kuluu 65 vastaavasti 45 m3 heraa.Talteenotettujen komponenttien puhtaus on yli 90 %. Tämä aikaansaadaan jonivaihtajan sopivalla valinnalla ja adsorptio- ja eluointiolosuh-teiden tarkalla valinnalla, jossa pH-arvo ja suolan konsentraatiot ovat tärkeitä tekijöitä.
25
Keksintöä kuvataan nyt lähemmin alla olevien esimerkkien ja oheisten piirustusten avulla.
Kuvio 1 esittää kaaviollisesti keksinnön mukaisen menetelmän edullista suoritus-30 muotoa.
Kuvio 2 esittää UV-adsorptiospektrin laktoperoksidaasin ja laktoferriinin eluoimiseksi 91032 7 jonivaihtokolonnista.
Kuvio 3 esittää kromatogrammia, joka esittää laktoperoksidaasin vast, laktoferriinin puhtauden keksinnön mukaisen fraktioinnin jälkeen.
5 8
Esimerkki 100 1 pastörisoitua ja lietesentrifugoitua makeata heraa, jonka pH 6,5, mik-rosuodatettiin "cross-flow" -menetelmällä lämpötilassa 50 °C. Mikrosuodatuksen 5 avulla poistettiin rasvapallojen jäännöksiä yhdessä esiintyvien proteiiniaggregaat-tien kanssa. Mikrosuodattimen huokoskoko oli 1,4 μπι.
Jäähdytyksen jälkeen hera sai kulkea jonivaihtokolonnin läpi, joka oli täytetty 80 ml erikoiskäsiteltyä vahvaa katjonivaihtajaa (S-Sepharose, nopea virta, Pharma-10 cia) agaroosiin perustuen. Pedin korkeus oli noin 4,1 cm ja virtaus kolonnin läpi 100 ml/min, joka vastaa virtausta 1,25 petitilavuutta/min. Paineenalennus ennen kolonnia oli ajon alussa 0,26 baaria. 15 h myöhemmin virtaus oli yhä 100 ml/min ja paineenalennus 0,28 baaria. Laktoperoksidaasin läpimurto tuli, kun noin 80-90 1 heraa oli kulkenut kolonnin läpi, ts. noin 1000 petitilavuutta.
15
Sen jälkeen heravirtaus keskeytettiin ja eluointivaihe aloitettiin huuhtomalla pois hera kolonnista fosfaattipuskurilla, 0,01 M KH2P04, pH 6,5, jonka jälkeen seurasi epäpuhtauksien eluointi jonivaihtajasta fosfaattipuskurin avulla, joka sisälsi 0,07 M NaCl (kuvio 1). Laktoperoksidaasi eluoitiin fosfaattipuskurilla, 20 joka sisälsi 0,3 M NaCl ja sen jälkeen laktoferriini fosfaattipuskurilla, joka sisälsi 0,9 M NaCl (kts kuvio 2).
Fraktioiden keräämisen jälkeen näistä poistettiin suola geelisuodattamalla Sephadex-kolonnissa ja kylmäkuivattiin lopulta.
25
Jonivaihtokolonni puhdistettiin läpihuuhtoamalla ensin 2,0 M NaCl liuoksella ja sen jälkeen 1,0 M NaOH liuoksella, jonka jälkeen se oli valmis seuraavaa ajoa varten.
30 - Laktoperoksidaasin saanti jonivaihdon jälkeen: 96,5 %.
- Kerätyn fraktion puhtaus eluoinnin jälkeen: A412/A280= 0,84* - Prosessin kokonaissaanti kylmäkuivauksen jälkeen aktiivisuutena laskettuna: 90 % 91032 9 - Kylmäkuivatun valmisteen puhtaus: ΑΑ412/Α2Θ0 = 0,87* * 0,92 on maksimaalinen jako 100 %:n puhtaudelle.
Vastaava saanti ja puhtaus saatiin laktoferriinin tapauksessa (kts kuvio 3).
5
Claims (5)
1. Menetelmä laktoperoksidaasin ja laktoferriinin puhtaiden fraktioiden tal-teenottamiseksi maitoseerumista, tunnettu siitä, että maitoseerumi 5 mikrosuodatetaan, sen annetaan kulkea vahvan katjonivaihtajan pedin läpi suurella virtausnopeudella noin 1-1,5 petitilavuutta/min laktoperoksidaasin ja laktoferriinin selektiiviseksi adsorboimiseksi, ja sen jälkeen selektiivisesti eluoidaan peräkkäin laktoperoksidaasi suolaliuoksella, jonka konsentraatio on 0,10-0,4 M pH:ssa noin 6,5 ja laktoferriini suolaliuoksella, jonka konsentraatio 10 on 0,5-2 M.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että ennen laktoperoksidaasin eluoimista katjonivaihtaja eluoidaan suolaliuoksella, jonka konsentraatio on 0,01-0,15 M, edullisesti epäorgaanisella alkali-, maa-alkali- tai 15 ammoniumsuolaliuoksella.
3. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että maitoseerumin pH säädetään arvoksi 5,9-9,0, edullisesti noin 6,5, ennenkuin sen annetaan kulkea katjonivaihtajan läpi. 20
4. Yhden tai useamman edellisen patenttivaatimuksen mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että mikrosuodatus suoritetaan mikrosuodattimella, jonka huokoshalkaisija on 0,10-2 μπι, edullisesti 0,4-1,5 Mm.
5. Yhden tai useamman edellä olevan patenttivaatimuksen mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että suolaliuokset yhdessä eluoidun laktoperoksidaasin ja laktoferriinin kanssa väkevöidään, niistä poistetaan suola ja ne kylmäkuivataan. 91032
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SE8704719A SE458818B (sv) | 1987-11-27 | 1987-11-27 | Foerfarande foer utvinning av rena fraktioner av laktoperoxidas och laktoferrin ur mjoelkserum |
| SE8704719 | 1987-11-27 | ||
| SE8800643 | 1988-11-25 | ||
| PCT/SE1988/000643 WO1989004608A1 (en) | 1987-11-27 | 1988-11-25 | Process for extracting pure fractions of lactoperoxidase and lactoferrin from milk serum |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI902562A0 FI902562A0 (fi) | 1990-05-23 |
| FI91032B true FI91032B (fi) | 1994-01-31 |
| FI91032C FI91032C (fi) | 1994-05-10 |
Family
ID=20370415
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI902562A FI91032C (fi) | 1987-11-27 | 1990-05-23 | Menetelmä laktoperoksidaasin ja laktoferriinin puhtaiden fraktioiden talteenottamiseksi maitoseerumista |
Country Status (12)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5149647A (fi) |
| EP (1) | EP0390821B1 (fi) |
| JP (1) | JP2553180B2 (fi) |
| AT (1) | ATE89454T1 (fi) |
| AU (1) | AU613688B2 (fi) |
| DE (1) | DE3881217T2 (fi) |
| DK (1) | DK173642B1 (fi) |
| FI (1) | FI91032C (fi) |
| NO (1) | NO177268C (fi) |
| NZ (1) | NZ227097A (fi) |
| SE (1) | SE458818B (fi) |
| WO (1) | WO1989004608A1 (fi) |
Families Citing this family (40)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4879110A (en) * | 1983-10-27 | 1989-11-07 | Stolle Research And Development Corporation | Antihypertensive hyperimmune milk, production, composition, and use |
| US5756333A (en) * | 1989-11-03 | 1998-05-26 | Incyte Pharmaceuticals, Inc. | Recombinant production of lactoperoxidase |
| ATE193324T1 (de) * | 1989-11-03 | 2000-06-15 | Incyte Pharma Inc | Rekombinante herstellung von laktoperoxidase |
| JP3035833B2 (ja) * | 1991-01-21 | 2000-04-24 | 雪印乳業株式会社 | シアル酸類含有組成物の製造方法 |
| JP3110078B2 (ja) * | 1991-06-21 | 2000-11-20 | 森永乳業株式会社 | 高純度抗菌性ペプチドの大量製造法 |
| EP0595993A4 (en) * | 1991-07-25 | 1994-08-17 | Commw Scient Ind Res Org | Isolation of charged particles from fluids |
| ATE129125T1 (de) * | 1992-01-15 | 1995-11-15 | Campina Melkunie Bv | Verfahren zur isolierung von lactoferrin und lactoperoxidase aus milch und milchprodukten. |
| JPH05202098A (ja) * | 1992-01-29 | 1993-08-10 | Snow Brand Milk Prod Co Ltd | 乳質原料から生理活性物質の製造法 |
| SE470375B (sv) * | 1992-05-07 | 1994-02-07 | Alfa Laval Food Eng Ab | Sätt att erhålla högvärdiga proteinprodukter ur vassle |
| US5756680A (en) * | 1994-01-05 | 1998-05-26 | Sepragen Corporation | Sequential separation of whey proteins and formulations thereof |
| US5468844A (en) * | 1994-01-07 | 1995-11-21 | Protose Technologies Inc. | Process for the membrane-filtering of protein solutions |
| AU1809895A (en) * | 1994-02-16 | 1995-09-04 | Pharming Bv | Isolation of lactoferrin from milk |
| WO1996008155A1 (en) * | 1994-09-16 | 1996-03-21 | New Zealand Dairy Board | Physical separation of casein and whey proteins |
| JP3112637B2 (ja) * | 1994-09-30 | 2000-11-27 | 雪印乳業株式会社 | 骨強化剤 |
| JP2974604B2 (ja) * | 1996-01-23 | 1999-11-10 | 雪印乳業株式会社 | 塩基性タンパク質組成物、塩基性ペプチド組成物及びその利用 |
| JP3073439B2 (ja) * | 1996-02-08 | 2000-08-07 | 雪印乳業株式会社 | 骨形成促進及び骨吸収防止剤 |
| CA2197515A1 (en) * | 1996-07-15 | 1998-01-16 | Reyad Mahmoud | Methods of treating milk products |
| EP0926499A4 (en) * | 1996-07-30 | 2000-08-16 | Shionogi & Co | METHOD TO PREVENT LACTOFERRINE ADSORPTION |
| US6478969B2 (en) | 1996-09-06 | 2002-11-12 | Pall Corporation | Shear separation method and system |
| JP4082782B2 (ja) * | 1998-04-30 | 2008-04-30 | 雪印乳業株式会社 | 歯周病予防及び改善剤 |
| US20030040475A1 (en) † | 2001-01-16 | 2003-02-27 | Yasuhiro Toba | Agents for improving lipid metabolism and reducing high blood pressure |
| US6875459B2 (en) * | 2001-09-10 | 2005-04-05 | Henry B. Kopf | Method and apparatus for separation of milk, colostrum, and whey |
| FR2841747B1 (fr) * | 2002-07-02 | 2004-08-20 | Cie Laitiere Europeenne | Isolat de proteines de lait et procede pour sa preparation |
| US8017170B2 (en) * | 2002-08-29 | 2011-09-13 | University Of Massachusetts | Utilization of emulsion interface engineering to produce oxidatively stable lipid delivery systems |
| CN1703421B (zh) * | 2002-09-20 | 2010-06-23 | 法玛西亚公司 | 降低peg化蛋白的聚集体水平的方法 |
| JP4263932B2 (ja) * | 2003-04-01 | 2009-05-13 | 雪印乳業株式会社 | ラクトフェリンの製造方法 |
| US20040259770A1 (en) * | 2003-06-19 | 2004-12-23 | Rush University Medical Center | Method for determining leukocyte activation |
| US7547770B2 (en) * | 2003-11-03 | 2009-06-16 | Advanced Protein Systems | Colostral fractionation process |
| CN100480378C (zh) * | 2004-02-17 | 2009-04-22 | 森永乳业株式会社 | 生产乳过氧化物酶的方法 |
| US7125963B2 (en) * | 2004-03-03 | 2006-10-24 | En N Tech Inc | Treatments for contaminant reduction in lactoferrin preparations and lactoferrin containing compositions |
| EP1781778A4 (en) * | 2004-06-16 | 2007-09-12 | Ciphergen Biosystems Inc | FRACTIONATION OF CHEMICAL COMPLEXES |
| WO2006119560A1 (en) | 2005-05-10 | 2006-11-16 | Murray Goulburn Co-Operative Co Limited | Immunoglobulin fraction and process therefor |
| FR2889068B1 (fr) * | 2005-07-29 | 2012-03-02 | Cie Laitiere Europeenne | Nouvelles fractions proteiques laitieres et leur utilisation pour la prevention ou le traitement des maladies inflammatoires chroniques |
| US20070212367A1 (en) * | 2006-03-13 | 2007-09-13 | Keech Andrew M | Novel immunologically active peptide fragments of a proline-rich polypeptide isolated from colostral mammalian fluids for treatment of viral and non-viral diseases or diseased conditions |
| DK2902409T3 (en) | 2007-07-10 | 2018-04-16 | Glanbia Nutritionals Ireland Ltd | PROCEDURE FOR REMOVAL OF ENDOTOXIN FROM PROTEINS |
| WO2009057281A1 (ja) * | 2007-11-01 | 2009-05-07 | Snow Brand Milk Products Co., Ltd. | 骨芽細胞分化促進及び破骨細胞分化抑制用食品素材 |
| US9055752B2 (en) * | 2008-11-06 | 2015-06-16 | Intercontinental Great Brands Llc | Shelf-stable concentrated dairy liquids and methods of forming thereof |
| UA112972C2 (uk) | 2010-09-08 | 2016-11-25 | Інтерконтінентал Грейт Брендс ЛЛС | Рідкий молочний концентрат з високим вмістом сухих речовин |
| KR102204142B1 (ko) | 2012-11-15 | 2021-01-18 | 아를라 푸즈 에이엠비에이 | 카세이노매크로펩티드를 함유하는 조성물을 생성하는 방법 |
| CZ305371B6 (cs) * | 2013-11-15 | 2015-08-19 | Univerzita PalackĂ©ho | Způsob separace syrovátkových proteinů z mléčného média a zařízení k provádění tohoto způsobu |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3896241A (en) * | 1971-09-01 | 1975-07-22 | Coca Cola Co | Preparation of a whey protein concentrate |
| FR2505615A1 (fr) * | 1981-05-15 | 1982-11-19 | Elf Aquitaine | Procede d'extraction de lactoferrine et d'immunoglobulines du lait |
| JPS61145200A (ja) * | 1984-12-19 | 1986-07-02 | Snow Brand Milk Prod Co Ltd | ウシラクトフェリンの分離精製法 |
| FR2584727B1 (fr) * | 1985-07-11 | 1988-06-17 | Roussel Uclaf | Procede d'extraction de proteines du lait, produits, application du procede, et compositions pharmaceutiques |
| IE61701B1 (en) * | 1986-07-17 | 1994-11-30 | Morinaga Milk Industry Co Ltd | Process for producing bovine lactoferrin in high purity |
| FR2616628B1 (fr) * | 1987-06-19 | 1989-09-29 | Entremont Sa | Procede pour extraire des proteines du lactoserum par adsorption et elution |
-
1987
- 1987-11-27 SE SE8704719A patent/SE458818B/sv not_active IP Right Cessation
-
1988
- 1988-11-25 EP EP88910417A patent/EP0390821B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1988-11-25 DE DE88910417T patent/DE3881217T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1988-11-25 WO PCT/SE1988/000643 patent/WO1989004608A1/en active IP Right Grant
- 1988-11-25 US US07/488,040 patent/US5149647A/en not_active Expired - Lifetime
- 1988-11-25 AU AU27180/88A patent/AU613688B2/en not_active Ceased
- 1988-11-25 AT AT88910417T patent/ATE89454T1/de not_active IP Right Cessation
- 1988-11-25 JP JP63509492A patent/JP2553180B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1988-11-28 NZ NZ227097A patent/NZ227097A/xx unknown
-
1990
- 1990-05-18 DK DK199001245A patent/DK173642B1/da not_active IP Right Cessation
- 1990-05-23 FI FI902562A patent/FI91032C/fi not_active IP Right Cessation
- 1990-05-25 NO NO902328A patent/NO177268C/no not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| AU613688B2 (en) | 1991-08-08 |
| SE458818B (sv) | 1989-05-16 |
| NO177268B (no) | 1995-05-08 |
| JPH03502921A (ja) | 1991-07-04 |
| NO902328L (no) | 1990-05-25 |
| SE8704719D0 (sv) | 1987-11-27 |
| US5149647A (en) | 1992-09-22 |
| FI902562A0 (fi) | 1990-05-23 |
| DE3881217D1 (de) | 1993-06-24 |
| JP2553180B2 (ja) | 1996-11-13 |
| DK173642B1 (da) | 2001-05-14 |
| EP0390821A1 (en) | 1990-10-10 |
| AU2718088A (en) | 1989-06-14 |
| FI91032C (fi) | 1994-05-10 |
| DK124590D0 (da) | 1990-05-18 |
| EP0390821B1 (en) | 1993-05-19 |
| DE3881217T2 (de) | 1994-01-05 |
| NO902328D0 (no) | 1990-05-25 |
| DK124590A (da) | 1990-05-25 |
| WO1989004608A1 (en) | 1989-06-01 |
| NZ227097A (en) | 1991-01-29 |
| ATE89454T1 (de) | 1993-06-15 |
| NO177268C (no) | 1995-08-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI91032B (fi) | Menetelmä laktoperoksidaasin ja laktoferriinin puhtaiden fraktioiden talteenottamiseksi maitoseerumista | |
| US6010698A (en) | Process for recovering growth factors, or a composition containing one or more growth factors, from milk or a milk derivative | |
| El-Sayed et al. | Trends in whey protein fractionation | |
| US4582580A (en) | Process for the separation of immunoglobulins from colostrum | |
| US5986063A (en) | Isolating β-lactoglobulin and α-lactalbumin by eluting from a cation exchanger without sodium chloride | |
| GB2179947A (en) | Process for the extraction of proteins from milk | |
| EP0620709A1 (en) | METHOD FOR INSULATING LACTOFERRIN AND LACTOPEROXIDASE FROM MILK AND DAIRY PRODUCTS, AND PRODUCTS CONTAINED BY THIS METHOD. | |
| Yaguchi et al. | Chromatography of milk proteins on anion-exchange cellulose | |
| US5194591A (en) | Isolation of an immunoglobulin rich fracton from whey | |
| US6001974A (en) | Method of separating albumin from serum by ion-exchange chromatography with membrane adsorbers | |
| Fweja et al. | Isolation of lactoperoxidase using different cation exchange resins by batch and column procedures | |
| WO1997027757A1 (en) | Production of an immunoglobulin enriched fraction from whey protein solutions | |
| Aslam et al. | Recent Developments in Purifi cation Techniques for Whey Valorization | |
| WO2005078078A1 (ja) | ラクトパーオキシダーゼの製造方法 | |
| JP2004307344A (ja) | ラクトフェリンの製造方法 | |
| DK3097788T3 (en) | PROCEDURE FOR EXPLORING LACTOFERRIN FROM MILK | |
| Wu et al. | Isolation and purification of bioactive proteins from bovine colostrum | |
| NZ243727A (en) | Isolation of charged particles from fluids by ion exchange where the ion exchange medium is disposed on a porous membrane | |
| Stanic et al. | Application of ion exchanger in the separation of whey proteins and lactin from milk whey | |
| JP3347819B2 (ja) | 抗菌性ペプチドの精製方法 | |
| WO2001030168A1 (en) | Method of obtaining immunoglobulins from colostrum and dairy sources | |
| Nath et al. | Emerging purification and isolation | |
| WO2024056840A1 (en) | Isolation of osteopontin and glycomacropeptide from whey | |
| JPH02104533A (ja) | 高純度牛免疫グロブリンの製造法 | |
| Jung et al. | Mobile phase composition for resolving whey proteins in reversed-phase high performance liquid chromatography |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| BB | Publication of examined application | ||
| MM | Patent lapsed |
Owner name: CAMPINA MELKUNIE B.V. |