FI91032C - Menetelmä laktoperoksidaasin ja laktoferriinin puhtaiden fraktioiden talteenottamiseksi maitoseerumista - Google Patents
Menetelmä laktoperoksidaasin ja laktoferriinin puhtaiden fraktioiden talteenottamiseksi maitoseerumista Download PDFInfo
- Publication number
- FI91032C FI91032C FI902562A FI902562A FI91032C FI 91032 C FI91032 C FI 91032C FI 902562 A FI902562 A FI 902562A FI 902562 A FI902562 A FI 902562A FI 91032 C FI91032 C FI 91032C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- lactoperoxidase
- lactoferrin
- milk serum
- milk
- whey
- Prior art date
Links
- 108010063045 Lactoferrin Proteins 0.000 title claims abstract description 37
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 35
- 102000010445 Lactoferrin Human genes 0.000 title claims abstract description 34
- CSSYQJWUGATIHM-IKGCZBKSSA-N l-phenylalanyl-l-lysyl-l-cysteinyl-l-arginyl-l-arginyl-l-tryptophyl-l-glutaminyl-l-tryptophyl-l-arginyl-l-methionyl-l-lysyl-l-lysyl-l-leucylglycyl-l-alanyl-l-prolyl-l-seryl-l-isoleucyl-l-threonyl-l-cysteinyl-l-valyl-l-arginyl-l-arginyl-l-alanyl-l-phenylal Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 CSSYQJWUGATIHM-IKGCZBKSSA-N 0.000 title claims abstract description 34
- 235000021242 lactoferrin Nutrition 0.000 title claims abstract description 34
- 229940078795 lactoferrin Drugs 0.000 title claims abstract description 34
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 title claims abstract description 34
- 239000008267 milk Substances 0.000 title claims abstract description 34
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 title claims abstract description 34
- 229940057428 lactoperoxidase Drugs 0.000 title claims abstract description 33
- 108010023244 Lactoperoxidase Proteins 0.000 title claims abstract description 32
- 102000045576 Lactoperoxidases Human genes 0.000 title claims abstract description 32
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 title claims abstract description 26
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 15
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 claims abstract description 12
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims abstract description 10
- 239000012267 brine Substances 0.000 claims description 5
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 5
- 239000011148 porous material Substances 0.000 claims description 4
- 238000001471 micro-filtration Methods 0.000 claims description 3
- 239000003513 alkali Substances 0.000 claims description 2
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 claims 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 abstract description 10
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 description 25
- 239000005862 Whey Substances 0.000 description 24
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 description 24
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 19
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 19
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 19
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 15
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 11
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 7
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 5
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 5
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 5
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M sodium hydroxide Inorganic materials [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 102000012174 Lactotransferrin Human genes 0.000 description 3
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 3
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 3
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 3
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 3
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 235000010410 calcium alginate Nutrition 0.000 description 2
- 239000000648 calcium alginate Substances 0.000 description 2
- 229960002681 calcium alginate Drugs 0.000 description 2
- OKHHGHGGPDJQHR-YMOPUZKJSA-L calcium;(2s,3s,4s,5s,6r)-6-[(2r,3s,4r,5s,6r)-2-carboxy-6-[(2r,3s,4r,5s,6r)-2-carboxylato-4,5,6-trihydroxyoxan-3-yl]oxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylate Chemical compound [Ca+2].O[C@@H]1[C@H](O)[C@H](O)O[C@@H](C([O-])=O)[C@H]1O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O2)C([O-])=O)O)[C@H](C(O)=O)O1 OKHHGHGGPDJQHR-YMOPUZKJSA-L 0.000 description 2
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 2
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 2
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 2
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 2
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 2
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 2
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 102000004407 Lactalbumin Human genes 0.000 description 1
- 108090000942 Lactalbumin Proteins 0.000 description 1
- 102000008192 Lactoglobulins Human genes 0.000 description 1
- 108010060630 Lactoglobulins Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 102100033468 Lysozyme C Human genes 0.000 description 1
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 description 1
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 description 1
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 1
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 1
- RTAQQCXQSZGOHL-UHFFFAOYSA-N Titanium Chemical compound [Ti] RTAQQCXQSZGOHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QCWXUUIWCKQGHC-UHFFFAOYSA-N Zirconium Chemical compound [Zr] QCWXUUIWCKQGHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N aluminium oxide Inorganic materials [O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3] PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 1
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 1
- 238000003889 chemical engineering Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 1
- 238000010924 continuous production Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 238000011033 desalting Methods 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000011067 equilibration Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000006651 lactation Effects 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 108010004902 lactose oxidase Proteins 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 description 1
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 description 1
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 description 1
- 239000010453 quartz Substances 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000004460 silage Substances 0.000 description 1
- 150000003377 silicon compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 229910052719 titanium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010936 titanium Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 235000021119 whey protein Nutrition 0.000 description 1
- 229910052726 zirconium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000021241 α-lactalbumin Nutrition 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
- A23C9/14—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations in which the chemical composition of the milk is modified by non-chemical treatment
- A23C9/146—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations in which the chemical composition of the milk is modified by non-chemical treatment by ion-exchange
- A23C9/1465—Chromatographic separation of protein or lactose fraction; Adsorption of protein or lactose fraction followed by elution
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
- A23C9/14—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations in which the chemical composition of the milk is modified by non-chemical treatment
- A23C9/142—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations in which the chemical composition of the milk is modified by non-chemical treatment by dialysis, reverse osmosis or ultrafiltration
- A23C9/1425—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations in which the chemical composition of the milk is modified by non-chemical treatment by dialysis, reverse osmosis or ultrafiltration by ultrafiltration, microfiltration or diafiltration of whey, e.g. treatment of the UF permeate
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
- A23J1/00—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites
- A23J1/20—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites from milk, e.g. casein; from whey
- A23J1/205—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites from milk, e.g. casein; from whey from whey, e.g. lactalbumine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/814—Enzyme separation or purification
- Y10S435/815—Enzyme separation or purification by sorption
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Water Supply & Treatment (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
- Dairy Products (AREA)
Description
91032
Menetelmå laktoperoksidaasin ja laktoferriinin puhtaiden fraktioiden talteenottamiseksi maitoseerumista Forfarande for utvinning av rena fraktioner av laktoper-5 oxidas och laktoferrin ur mjolkserum 10
Esillå oleva keksinto koskee menetelmåå laktoperoksidaasin ja laktoferriinin puhtaiden fraktioiden talteenottamiseksi maitoseerumista. Maitoseerumilla tarkoitetaan sekå kuorittua maitoa etta heraa.
15 Juuston valmistuksessa saadaan suuria maaria heraa sivutuotteena. Heran kuiva-ainepitoisuus on noin 6 %, jonka kuiva-aineen koostumus on suunnilleen seuraava: paino-%
Laktoosia 4,6 20 Proteiinia 0,6 josta
Laktoperoksidaasia 0,0020
Laktoferriinia 0,0030
Rasvaa 0,05 (erotuksen jålkeen) 2^ Suoloja 0,7
Kuiva-aine noin 6,0
Proteiinifraktio, joka on noin 10-12 % KA-pitoisuudesta, koostuu joukosta erilaisia proteiinikomponentteja. Suurimmat ovat B-laktoglobuliini, α-laktalbumiini ja 30 harånseerumialbumiini. Proteiinifraktioon kuuluu myos joukko bioaktiivisia kom-ponentteja, esim. immunoglobuliineja, laktoperoksidaasia, laktoferriinia ja lysotsyy-mia.
Sekå laktoperoksidaasilla ettå laktoferriinillå on mikrobin vastaisia ominaisuuk- 2 sia. Suurta kiinnostusta esiintyy luonnollisten mikrobivastaisten aineiden talteenotta-miseksi nåiden kåyttåmiseksi uusissa yhteyksissa elintarviketekniikan, kemian tekniikan ja låaketieteen alueilla.
5 Nåiden aineiden pitoisuudet kuoritussa maidossa vast, herassa (myos alkuperåisesså maidossa) ovat pienet. Laktoperoksidaasia ja laktoferriiniå esiintyy pitoisuuksissa 15-50 mg/1, riippuen lehmån laktaatiovaiheesta. Suuria mååriå heraa (maitoa) on siis suodatettava, jotta voitaisiin talteenottaa kilogrammamååriå nåistå bioaktiivisista komponenteista.
10
Laktoperoksidaasin, vastaavasti laktoferriinin eriståmisen prosessitekniset edellytykset maidosta/herasta perustuvat siihen, ettå nåiden molempien proteiinien isoelektrinen piste (pi) on noin 9,5, kun taas heraproteiinien pååosan isoelektriset pisteet on noin 5,1-5,4 ja kaseiinin noin 4,6. Periaatteessa sopiva menetelmå laktoperoksidaasin, 15 vastaavasti laktoferriinin eriståmiseksi on siksi saattaa maito/hera kontaktiin kat-jonivaihtajan kanssa pH-arvossa >6 selektiivisesti adsorptioksi, jolloin kåytetåån hyvåksi laktoperoksidaasin ja laktoferriinin positiivista nettolatausta, joka erottuu muista maitoproteiineista, joiden lataus on negatiivinen tåsså pH-arvossa.
20 Perinteinen tapa eriståå pieniå mååriå laktoperoksidaasia ja laktoferriinia tutkimustar-koituksiin on kåyttåå saostustekniikkaa ja jonivaihtokromatografiaa, usein yhdistettynå geelisuodatukseen, kts. Morrison, M., Hamilton, H-B, Stotz, E., J. Biol. Chem. 228; 767 (1957); ja Morrison, M., Hultquist, P-E., J. Biol. Chem. 238-2847 (1963). Nåmå menetelmåt eivåt ole tarkoitettu kyseisten bioaktiivisten komponenttien suurien 25 måårien esiinottamiseksi taloudellisesti puolustettavalla tavalla.
US-patenttijulkaisusta 4 436 658 (Pevrouset) on tunnettua adsorboida laktoferriiniå kaseiinittomasta maitoseerumista (herasta) piikolonnin avulla. Maitoseeru-min pH-arvo såådetåån alueelle 7,7-8,2 ennen kolonnilla tapahtuvaa adsorptiota. 30 Kolonniin tarttuu immunoglobuliineja, laktoferriiniå ja laktoperoksidaasia. Adsorptiovaiheen jålkeen eluoidaan laimealla suolaliuoksella pH-arvossa <4. Adsorboitujen proteiinien selektiivistå eluointia ei saada, varsinkaan laktoperok- li 3 91032 sidaasin suhteen. Kolonni, johon mahtuu noin 5 g piiyhdistetta, voi kåsitella 1 litran heraa. Tåtå tunnettua meneteimåa voidaan pitaa våhemman sopivana sovellettavaksi teollisuusmittakaavassa.
5 Zagulski et al. julkaisussa Prace i Materialy Zootechniczne 20, s. 87-103 (1979) kuvaa ei-jatkuvaa meneteimåa laktoferriinin esiinottamiseksi, jolloin kåytetaan heikkoa katjonivaihtajaa, joka sekoitetaan maitoon. Kun tasapaino on saavutettu, jonivaihtaja siirretåån kolonniin adsorboitujen proteiinien eluoimiseksi suolaliuoksella. Menetelmå perustuu siis ei-jatkuvaan menetelmåån ja jotta saataisiin hyvin puhdasta 10 laktoferriinia, se pitåå puhdistaa vielå toisessa jonivaihtovaiheessa.
Samantapaista menetelmåå kuvataan BE-patenttijulkaisussa 901 672 (J.P. Prieels ja R. Peipper, Oleofma S.A.). Tåmån patenttijulkaisun mukaan kåytetåån kalsiumalginaat-tiin perustuvaa joninvaihtajaa, jossa joninvaihtotoiminta on saatu sekoittamalla 15 zirkonium-, titaani-, kvartsi- tai alumiinioksideja. Maito/hera saatetaan kontaktiin jonivaihtajan kanssa tiiviisså kolonnissa tai sekoittamalla såilidsså, jolloin ne prote-iinit, joiden isoelektrinen piste on >7,5 adsorboituu. Tasapainon jålkeen geeli erote-taan mekaanisesti ja siirretåån laitteeseen pesua ja eluointia vårten kalsiumklori-diliuoksella. Kaikkien nesteiden, jotka tulevat kontaktiin kalsiumalginaattigeelin 20 kanssa, on sisållettåvå ainakin 0,1 % CaCl2, jotta geeli ei liukenisi. Laktoperoksidaa-sin ja laktoferriinin fraktiointia ei saada eluoinnissa, vaan tåmå tehdåan erillisessa puhdistusvaiheessa.
Syyksi siihen, etta ei kåytetå kaupallisesti tunnettua jonivaihtotekniikkaa kolonni-25 menetelmållå ilmoitetaan mainitussa BE-patenttijulkaisussa ne voittamattomat vaikeudet, jotka liittyvåt jonivaihtajan lataukseen riippuen kaikkialla esiintyvista rasvahiukkasista ja proteiiniaggregaateista våliaineessa.
GB-patenttijulkaisusta 2 179 947 on tunnettu menetelmå laktotransferriinin uuttami-30 seksi maidosta. Menetelmå tapahtuu niin, ettå hera låpikåy ultrasuodattamisen, jolloin heran proteiinisisalto (mukaanlukien laktotransferriini) våkevoidåån noin 5 kertaa, jonka jålkeen sen pH-arvo ja jonivahvuus såådetåån. Nåin kåsitelty maitoseerumi saa
___ _ HT
4 kulkea hyvin pienenå virtana (noin 0,03 petitilavuutta/min) joninvaihtokolonnin låpi, ensisijaisesti heikon katjonivaihtajan låpi. Kolonni eluoidaan, yhå kåyttåmållå pientå virtaa, liuoksella, jonka jonivaihtogradientti saavuttaa arvon 0,4 M, kun laktotransfer-riinia eluoidaan. Tåmå on pienen mittakaavan menetelmå, joka ei sovellu laktoferrii-5 nin teolliseksi valmistamiseksi. Kåyttåmållå heikkoa katjoninvaihtajaa saadaan huono kapasiteetti. Suuruusluokkaa 100 petitilavuutta heraa, laskettuna luonnollisena kuiva-ainepitoisuutena, voi kulkea jonivaihtokolonnin låpi jokaisen eluoinnin vålisså. Joni-vaihtosuodattimentukkeutumisongelmaa, jokajohtuu rasva- ja proteiinihiukkasista, ei ole ratkaistu tåsså tunnetussa menetelmåsså.
10
Seuraavia vaatimuksia voidaan asettaa teollisesti kåytettåvålle menetelmålle laktope-roksidaasin ja laktoferriinin taloudelliseksi talteenottamiseksi herasta /kuoritusta maidosta: 15 1) Adsorptiomassan korkea selektiivinen kapasiteetti. Koska laktoperoksidaasin /laktoferriinin pitoisuudet ovat pieniå maitoseerumissa, pitåå kåsiteltåvån maitoseerumin tilavuudet jokaista eluointia kohden olla suuret.
2) Suuri virtaus adsorptiovaiheessa. (Normaaleissa kromatografiamenetelmisså 20 kåytetåån tavallisimmin pieniå virtoja, 0,01-0,10 petitilavuutta/min. Syy tåhån on osittain se, ettå peti aiheuttaa pienen raekoon seurauksena suuria paineenpudotuksia ja osittain se, ettå adsorptiomenetelmån reaktiokinetiikka asettaa tåmån vaatimuksen.) 25 3) Prosessin on oltava hyvin hygieeninen, mikå tarkoittaa sitå, ettå adsorp tiomassan on siedettåvå ainakin yhden lipeåkåsittelyn pH-arvossa 13-14.
Esillå olevan keksinnon tavoitteena on aikaansaada menetelmå, joka tåyttåå edellå olevat vaatimukset laktoperoksidaasin ja laktoferriinin puhtaiden fraktioiden talteenot-30 tamiseksi maitoseerumista (herasta) suuressa mittakaavassa ja alhaisilla kustannuksilla.
Esillå olevan keksinnon kohteena on menetelmå laktoperoksidaasin ja laktoferriinin 5 91032 puhtaiden fraktioiden talteenottamiseksi maitoseerumista, joka menetelma on tunnettu siitå, ettå maitoseerumi mikrosuodatetaan, saatetaan kulkemaan vahvan katjonivaihta-jan lapi suurena virtana laktoperoksidaasin ja laktoferriinin selektiiviseksi adsorboimi-seksi ja laktoperoksidaasi ja laktoferriini eluoidaan peråkkåin selektiivisesti suolali-5 uoksilla, joiden pitoisuudet ovat erilaiset.
Keksinnon ansiosta aikaansaadaan menetelma kahden eri seerumiproteiinin puhtaiden fraktioiden esiinottamiseksi yhdesså ainoassa jonivaihtovaiheessa. Tata ei aikaisemmin ole saatu aikaan teollisessa mittakaavassa. Aikaisemmin tunnetut menetelmat naiden 10 proteiinien talteenottamiseksi teollisessa mittakaavassa on tarkoittanut kahta tai kolmea puhdistusvaihetta.
Edelia mainitut jonivaihtajan tukkeutumisongelmat, kuten sellaisten hiukkasten esiintyminen, kuten rasvapallot ja proteiiniaggregaatit, seerumissa tai herassa ratkais-1S taan keksinnon avulla niin, etta maitoseerumi (hera) mikrosuodatetaan, esimerkiksi ns.
cross-flow -menetelmålla, ennen kontaktia jonivaihtopetiin. Mikrosuodattimen huokoskoon sopivalla valinnalla tukkeutumista aiheuttavia rasva- ja proteiiniaggre-gaattihiukkasia voidaan eliminoida. Sopivan mikrosuodattimen huokoshalkaisija on 0,10-2 pm, ensisijaisesti 0,4-1,5 pm.
20 Låhtokohtana keksinnon mukaiselle menetelmalle kåytetåån maitoseerumia (heraa), ts. maitoa, josta rasva ja kaseiini on poistettu. Maitoseerumi kåsitellåån ensin mik-rosuodattamalla rasva- ja proteiiniaggregaattihiukkasten jåannosten poistamiseksi, sopivimmin nk. cross-flow -menetelmålla. Mikrosuodatettu maitoseerumi johdetaan 25 sen jålkeen suurena virtana (noin 1-1,5 petitilavuutta /min) kolonnin lapi, joka on ladattu vahvalla katjonivaihtajalla, joka selektiivisesti adsorboi laktoperoksidaasia ja laktoferriinia. Tåmån katjonivaihtajan virtaus- ja adsorptiokineettiset ominaisuudet ovat åarimmåisen hyvåt ja sen kapasiteetti on noin 1000 petitilavuutta maitoseerumia. Tåmå tarkoittaa sitå, etta noin 1000 petitilavuutta maitoseerumia voi kulkea ennen-30 kuin laktoperoksidaasi, joka on heikoimmin sidottu pååsee låpi, ts. joninvaihtomassa on kyllåstetty nåillå proteiineilla. Ainoastaan merkitykseton paineenalennuksen lisåys tapahtuu adsorptiovaiheen alun ja lopun vålillå.
____ τζ.___ 6
Jonivaihtomassan eluointi aloitetaan kolonnissa olevan maitoseerumin uloshuuh-telemisella puskurilla, joka sopivimmin on fosfaattipuskuri maitoseerumin omassa pH-arvossa, 6,5. Sen jålkeen mahdolliset epåpuhtaudet eluoidaan puskuriliuoksen avulla, joka sisaltaa heikon suolaliuoksen, sopivasti epaorgaanisen alkali-, maa-alkali- tai 5 ammoniumsuolan suolaliuos, esim. 0,0075 M NaCl.
Tåmån valmistavan eluoinnin jålkeen eluoidaan sitten halutut proteiinit selektiivisesti puskuriliuoksilla, jotka sisåltåvåt suolaliuoksia, jotka on valittu edellå olevista suoloista ja joiden konsentraatio on erilainen. Laktoperoksidaasin eluointi tapahtuu 10 siis suolapitoisuudessa, joka on alueella 0,10-0,4 M ja laktoferriinin suolapitoisuudes-sa 0,5-2 M.
Tåmån kåsittelyn jålkeen kyseiset proteiinit on våkevoity noin 500 kertaa.
15 Puhtaat proteiinifraktiot keråtåån ja sen jålkeen suoritetaan sopivimmin vielå yksi vakevoiminen ultrasuodattamalla, jonka jålkeen seuraa suolanpoisto ja kylmåkuivaus kauppatavaran aikaansaamiseksi, joka koostuu noin 90 %:sen puhtaista proteiinifrakti-oista.
20 Yhden kilon laktoperoksidaasin j a yhden kilogramman laktoferriinin tuotantoon kuluu 65 vastaavasti 45 m3 heraa.Talteenotettujen komponenttien puhtaus on yli 90 %. Tåmå aikaansaadaan jonivaihtajan sopivalla valinnalla ja adsorptio- ja eluointiolosuh-teiden tarkalla valinnalla, jossa pH-arvo ja suolan konsentraatiot ovat tårkeitå tekijoita.
25
Keksintoå kuvataan nyt låhemmin alia olevien esimerkkien ja oheisten piirustusten avulla.
Kuvio 1 esittåå kaaviollisesti keksinnon mukaisen menetelmån edullista suoritus-30 muotoa.
Kuvio 2 esittåå UV-adsorptiospektrin laktoperoksidaasin ja laktoferriinin eluoimiseksi 7 91032 jonivaihtokolonnista.
Kuvio 3 esittaa kromatogrammia, joka esittaa laktoperoksidaasin vast, laktoferriinin puhtauden keksinnon mukaisen fraktioinnin jalkeen.
5 8
Esimerkki 100 1 pastorisoitua ja lietesentrifugoitua makeata heraa, jonka pH 6,5, mik-rosuodatettiin "cross-flow" -menetelmållå låmpotilassa 50 °C. Mikrosuodatuksen 5 avulla poistettiin rasvapallojen jåånnoksiå yhdesså esiintyvien proteiiniaggregaat-tien kanssa. Mikrosuodattimen huokoskoko oli 1,4 μιη.
Jååhdytyksen jålkeen hera sai kulkea jonivaihtokolonnin låpi, joka oli tåytetty 80 ml erikoiskåsiteltyå vahvaa katjonivaihtajaa (S-Sepharose, nopea virta, Pharma-10 cia) agaroosiin perustuen. Pedin korkeus oli noin 4,1 cm ja virtaus kolonnin låpi 100 ml/min, joka vastaa virtausta 1,25 petitilavuutta/min. Paineenalennus ennen kolonnia oli ajon alussa 0,26 baaria. 15 h myohemmin virtaus oli yhå 100 ml/min ja paineenalennus 0,28 baaria. Laktoperoksidaasin låpimurto tuli, kun noin 80-90 1 heraa oli kulkenut kolonnin låpi, ts. noin 1000 petitilavuutta.
15
Sen jålkeen heravirtaus keskeytettiin ja eluointivaihe aloitettiin huuhtomalla pois hera kolonnista fosfaattipuskurilla, 0,01 M KH2P04, pH 6,5, jonka jålkeen seurasi epåpuhtauksien eluointi jonivaihtajasta fosfaattipuskurin avulla, joka sisålsi 0,07 M NaCl (kuvio 1). Laktoperoksidaasi eluoitiin fosfaattipuskurilla, 20 joka sisålsi 0,3 M NaCl ja sen jålkeen laktoferriini fosfaattipuskurilla, joka sisålsi 0,9 M NaCl (kts kuvio 2).
Fraktioiden kerååmisen jålkeen nåistå poistettiin suola geelisuodattamalla Sephadex-kolonnissa ja kylmåkuivattiin lopulta.
25
Jonivaihtokolonni puhdistettiin låpihuuhtoamalla ensin 2,0 M NaCl liuoksella ja sen jålkeen 1,0 M NaOH liuoksella, jonka jålkeen se oli valmis seuraavaa ajoa vårten.
30 - Laktoperoksidaasin saanti jonivaihdon jålkeen: 96,5 %.
- Keråtyn fraktion puhtaus eluoinnin jålkeen: Α412/Α2β0= 0,84* - Prosessin kokonaissaanti kylmåkuivauksen jålkeen aktiivisuutena laskettuna: 90 % 9 91032 - Kylmåkuivatun valmisteen puhtaus: ΑΑ412/Α2Θ0 = 0,87* * 0,92 on maksimaalinen jako 100 %:n puhtaudelle.
Vastaava saanti ja puhtaus saatiin laktoferriinin tapauksessa (kts kuvio 3).
5
Claims (5)
1. Menetelmå laktoperoksidaasin ja laktoferriinin puhtaiden fraktioiden tal-teenottamiseksi maitoseerumista, tunnettu siitå, ettå maitoseerumi 5 mikrosuodatetaan, sen annetaan kulkea vahvan katjonivaihtajan pedin låpi suurella virtausnopeudella noin 1-1,5 petitilavuutta/min laktoperoksidaasin ja laktoferriinin selektiiviseksi adsorboimiseksi, ja sen jålkeen selektiivisesti eluoidaan peråkkåin laktoperoksidaasi suolaliuoksella, jonka konsentraatio on 0,10-0,4 M pH:ssa noin 6,5 ja laktoferriini suolaliuoksella, jonka konsentraatio 10 on 0,5-2 M.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmå, tunnettu siitå, ettå ennen laktoperoksidaasin eluoimista katjonivaihtaja eluoidaan suolaliuoksella, jonka konsentraatio on 0,01-0,15 M, edullisesti epåorgaanisella alkali-, maa-alkali- tai 15 ammoniumsuolaliuoksella.
3. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukainen menetelmå, tunnettu siitå, ettå maitoseerumin pH såådetåån arvoksi 5,9-9,0, edullisesti noin 6,5, ennenkuin sen annetaan kulkea katjonivaihtajan låpi. 20
4. Yhden tai useamman edellisen patenttivaatimuksen mukainen menetelmå, tunnettu siitå, ettå mikrosuodatus suoritetaan mikrosuodattimella, jonka huokoshalkaisija on 0,10-2 μπι, edullisesti 0,4-1,5 Mm.
5. Yhden tai useamman edellå olevan patenttivaatimuksen mukainen menetelmå, tunnettu siitå, ettå suolaliuokset yhdesså eluoidun laktoperoksidaasin ja laktoferriinin kanssa våkevoidåån, mistå poistetaan suola ja ne kylmåkuivataan. 91032
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SE8704719 | 1987-11-27 | ||
| SE8704719A SE458818B (sv) | 1987-11-27 | 1987-11-27 | Foerfarande foer utvinning av rena fraktioner av laktoperoxidas och laktoferrin ur mjoelkserum |
| PCT/SE1988/000643 WO1989004608A1 (en) | 1987-11-27 | 1988-11-25 | Process for extracting pure fractions of lactoperoxidase and lactoferrin from milk serum |
| SE8800643 | 1988-11-25 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI902562A0 FI902562A0 (fi) | 1990-05-23 |
| FI91032B FI91032B (fi) | 1994-01-31 |
| FI91032C true FI91032C (fi) | 1994-05-10 |
Family
ID=20370415
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI902562A FI91032C (fi) | 1987-11-27 | 1990-05-23 | Menetelmä laktoperoksidaasin ja laktoferriinin puhtaiden fraktioiden talteenottamiseksi maitoseerumista |
Country Status (12)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5149647A (fi) |
| EP (1) | EP0390821B1 (fi) |
| JP (1) | JP2553180B2 (fi) |
| AT (1) | ATE89454T1 (fi) |
| AU (1) | AU613688B2 (fi) |
| DE (1) | DE3881217T2 (fi) |
| DK (1) | DK173642B1 (fi) |
| FI (1) | FI91032C (fi) |
| NO (1) | NO177268C (fi) |
| NZ (1) | NZ227097A (fi) |
| SE (1) | SE458818B (fi) |
| WO (1) | WO1989004608A1 (fi) |
Families Citing this family (40)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4879110A (en) * | 1983-10-27 | 1989-11-07 | Stolle Research And Development Corporation | Antihypertensive hyperimmune milk, production, composition, and use |
| CA2067334C (en) * | 1989-11-03 | 2001-02-13 | Jeffrey J. Seilhamer | Recombinant production of lactoperoxidase |
| US5756333A (en) * | 1989-11-03 | 1998-05-26 | Incyte Pharmaceuticals, Inc. | Recombinant production of lactoperoxidase |
| JP3035833B2 (ja) * | 1991-01-21 | 2000-04-24 | 雪印乳業株式会社 | シアル酸類含有組成物の製造方法 |
| JP3110078B2 (ja) * | 1991-06-21 | 2000-11-20 | 森永乳業株式会社 | 高純度抗菌性ペプチドの大量製造法 |
| JPH07502016A (ja) * | 1991-07-25 | 1995-03-02 | コモンウェルス・サイエンティフィック・アンド・インダストリアル・リサーチ・オーガニゼイション | 流体からの荷電粒子の単離 |
| DE69300674T2 (de) * | 1992-01-15 | 1996-05-15 | Campina Melkunie Bv | Verfahren zur isolierung von lactoferrin und lactoperoxidase aus milch und milchprodukten. |
| JPH05202098A (ja) * | 1992-01-29 | 1993-08-10 | Snow Brand Milk Prod Co Ltd | 乳質原料から生理活性物質の製造法 |
| SE470375B (sv) * | 1992-05-07 | 1994-02-07 | Alfa Laval Food Eng Ab | Sätt att erhålla högvärdiga proteinprodukter ur vassle |
| US5756680A (en) * | 1994-01-05 | 1998-05-26 | Sepragen Corporation | Sequential separation of whey proteins and formulations thereof |
| US5468844A (en) * | 1994-01-07 | 1995-11-21 | Protose Technologies Inc. | Process for the membrane-filtering of protein solutions |
| EP0744901B1 (en) * | 1994-02-16 | 2001-12-05 | Pharming Intellectual Property BV | Isolation of lactoferrin from milk |
| EP0788313A4 (en) * | 1994-09-16 | 1998-05-27 | New Zealand Dairy Board | PHYSICAL SEPARATION OF CASEIN AND WHEY PROTEINS |
| JP3112637B2 (ja) * | 1994-09-30 | 2000-11-27 | 雪印乳業株式会社 | 骨強化剤 |
| JP2974604B2 (ja) * | 1996-01-23 | 1999-11-10 | 雪印乳業株式会社 | 塩基性タンパク質組成物、塩基性ペプチド組成物及びその利用 |
| JP3073439B2 (ja) * | 1996-02-08 | 2000-08-07 | 雪印乳業株式会社 | 骨形成促進及び骨吸収防止剤 |
| CA2197515A1 (en) * | 1996-07-15 | 1998-01-16 | Reyad Mahmoud | Methods of treating milk products |
| AU3634597A (en) * | 1996-07-30 | 1998-02-20 | Shionogi & Co., Ltd. | Method for preventing adsorption of lactoferrin |
| JP4509224B2 (ja) | 1996-09-06 | 2010-07-21 | ポール・コーポレーション | 剪断分離方法及びシステム |
| JP4082782B2 (ja) * | 1998-04-30 | 2008-04-30 | 雪印乳業株式会社 | 歯周病予防及び改善剤 |
| US20030040475A1 (en) † | 2001-01-16 | 2003-02-27 | Yasuhiro Toba | Agents for improving lipid metabolism and reducing high blood pressure |
| US6875459B2 (en) * | 2001-09-10 | 2005-04-05 | Henry B. Kopf | Method and apparatus for separation of milk, colostrum, and whey |
| FR2841747B1 (fr) * | 2002-07-02 | 2004-08-20 | Cie Laitiere Europeenne | Isolat de proteines de lait et procede pour sa preparation |
| US8017170B2 (en) * | 2002-08-29 | 2011-09-13 | University Of Massachusetts | Utilization of emulsion interface engineering to produce oxidatively stable lipid delivery systems |
| ZA200502320B (en) * | 2002-09-20 | 2006-10-25 | Pharmacia Corp | Process for decreasing aggregate levels of pegylated protein |
| JP4263932B2 (ja) * | 2003-04-01 | 2009-05-13 | 雪印乳業株式会社 | ラクトフェリンの製造方法 |
| US20040259770A1 (en) * | 2003-06-19 | 2004-12-23 | Rush University Medical Center | Method for determining leukocyte activation |
| WO2005041680A2 (en) * | 2003-11-03 | 2005-05-12 | Advanced Protein Systems | A novel colostral fractionation process |
| EP1717311B1 (en) | 2004-02-17 | 2012-09-19 | Morinaga Milk Industry Co., Ltd. | Process for producing lactoperoxidase |
| WO2005085287A1 (en) * | 2004-03-03 | 2005-09-15 | En-N-Tech, Inc. | Treatments for contaminant reduction in lactoferrin preparations and lactoferrin-containing compositions |
| WO2006007429A1 (en) * | 2004-06-16 | 2006-01-19 | Ciphergen Biosystems, Inc. | Multichemistry fractionation |
| KR20080013903A (ko) | 2005-05-10 | 2008-02-13 | 머레이 걸번 코-어퍼러티브 컴퍼니 리미티드 | 면역글로불린 분획 및 이것의 제조 방법 |
| FR2889068B1 (fr) * | 2005-07-29 | 2012-03-02 | Cie Laitiere Europeenne | Nouvelles fractions proteiques laitieres et leur utilisation pour la prevention ou le traitement des maladies inflammatoires chroniques |
| US20070212367A1 (en) * | 2006-03-13 | 2007-09-13 | Keech Andrew M | Novel immunologically active peptide fragments of a proline-rich polypeptide isolated from colostral mammalian fluids for treatment of viral and non-viral diseases or diseased conditions |
| EP2173770B1 (en) | 2007-07-10 | 2015-05-27 | Glanbia Nutritionals (Ireland) Limited | Method for removing endotoxin from proteins |
| CN101861332B (zh) * | 2007-11-01 | 2014-04-02 | 雪印惠乳业株式会社 | 用于促进成骨细胞分化和抑制破骨细胞分化的食品原材料 |
| US9055752B2 (en) * | 2008-11-06 | 2015-06-16 | Intercontinental Great Brands Llc | Shelf-stable concentrated dairy liquids and methods of forming thereof |
| UA112972C2 (uk) | 2010-09-08 | 2016-11-25 | Інтерконтінентал Грейт Брендс ЛЛС | Рідкий молочний концентрат з високим вмістом сухих речовин |
| US9955705B2 (en) | 2012-11-15 | 2018-05-01 | Arla Foods Amba | Method of producing a composition containing caseinomacropeptide |
| CZ305371B6 (cs) * | 2013-11-15 | 2015-08-19 | Univerzita PalackĂ©ho | Způsob separace syrovátkových proteinů z mléčného média a zařízení k provádění tohoto způsobu |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3896241A (en) * | 1971-09-01 | 1975-07-22 | Coca Cola Co | Preparation of a whey protein concentrate |
| FR2505615A1 (fr) * | 1981-05-15 | 1982-11-19 | Elf Aquitaine | Procede d'extraction de lactoferrine et d'immunoglobulines du lait |
| JPS61145200A (ja) * | 1984-12-19 | 1986-07-02 | Snow Brand Milk Prod Co Ltd | ウシラクトフェリンの分離精製法 |
| FR2584727B1 (fr) * | 1985-07-11 | 1988-06-17 | Roussel Uclaf | Procede d'extraction de proteines du lait, produits, application du procede, et compositions pharmaceutiques |
| IE61701B1 (en) * | 1986-07-17 | 1994-11-30 | Morinaga Milk Industry Co Ltd | Process for producing bovine lactoferrin in high purity |
| FR2616628B1 (fr) * | 1987-06-19 | 1989-09-29 | Entremont Sa | Procede pour extraire des proteines du lactoserum par adsorption et elution |
-
1987
- 1987-11-27 SE SE8704719A patent/SE458818B/sv not_active IP Right Cessation
-
1988
- 1988-11-25 DE DE88910417T patent/DE3881217T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1988-11-25 EP EP88910417A patent/EP0390821B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1988-11-25 JP JP63509492A patent/JP2553180B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1988-11-25 US US07/488,040 patent/US5149647A/en not_active Expired - Lifetime
- 1988-11-25 AU AU27180/88A patent/AU613688B2/en not_active Ceased
- 1988-11-25 AT AT88910417T patent/ATE89454T1/de not_active IP Right Cessation
- 1988-11-25 WO PCT/SE1988/000643 patent/WO1989004608A1/en active IP Right Grant
- 1988-11-28 NZ NZ227097A patent/NZ227097A/xx unknown
-
1990
- 1990-05-18 DK DK199001245A patent/DK173642B1/da not_active IP Right Cessation
- 1990-05-23 FI FI902562A patent/FI91032C/fi not_active IP Right Cessation
- 1990-05-25 NO NO902328A patent/NO177268C/no not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| NO902328L (no) | 1990-05-25 |
| NO177268C (no) | 1995-08-16 |
| EP0390821A1 (en) | 1990-10-10 |
| ATE89454T1 (de) | 1993-06-15 |
| NZ227097A (en) | 1991-01-29 |
| US5149647A (en) | 1992-09-22 |
| FI902562A0 (fi) | 1990-05-23 |
| DK173642B1 (da) | 2001-05-14 |
| JPH03502921A (ja) | 1991-07-04 |
| AU2718088A (en) | 1989-06-14 |
| DK124590A (da) | 1990-05-25 |
| AU613688B2 (en) | 1991-08-08 |
| JP2553180B2 (ja) | 1996-11-13 |
| FI91032B (fi) | 1994-01-31 |
| SE8704719D0 (sv) | 1987-11-27 |
| DE3881217T2 (de) | 1994-01-05 |
| DE3881217D1 (de) | 1993-06-24 |
| SE458818B (sv) | 1989-05-16 |
| WO1989004608A1 (en) | 1989-06-01 |
| NO177268B (no) | 1995-05-08 |
| EP0390821B1 (en) | 1993-05-19 |
| DK124590D0 (da) | 1990-05-18 |
| NO902328D0 (no) | 1990-05-25 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI91032C (fi) | Menetelmä laktoperoksidaasin ja laktoferriinin puhtaiden fraktioiden talteenottamiseksi maitoseerumista | |
| El-Sayed et al. | Trends in whey protein fractionation | |
| US6010698A (en) | Process for recovering growth factors, or a composition containing one or more growth factors, from milk or a milk derivative | |
| US5986063A (en) | Isolating β-lactoglobulin and α-lactalbumin by eluting from a cation exchanger without sodium chloride | |
| GB2179947A (en) | Process for the extraction of proteins from milk | |
| US5194591A (en) | Isolation of an immunoglobulin rich fracton from whey | |
| Konecny et al. | Chromatographic purification of immunoglobulin G from bovine milk whey | |
| US6001974A (en) | Method of separating albumin from serum by ion-exchange chromatography with membrane adsorbers | |
| US6555659B1 (en) | Process for isolating glycomacropeptide from dairy products with a phenylalanine impurity of 0.5% w/w | |
| Fweja et al. | Isolation of lactoperoxidase using different cation exchange resins by batch and column procedures | |
| JP3946747B2 (ja) | ラクトパーオキシダーゼの製造方法 | |
| Aslam et al. | Recent Developments in Purifi cation Techniques for Whey Valorization | |
| WO1997027757A1 (en) | Production of an immunoglobulin enriched fraction from whey protein solutions | |
| CN104513305B (zh) | 一种乳清蛋白的纯化方法 | |
| JP2004307344A (ja) | ラクトフェリンの製造方法 | |
| Wu et al. | Isolation and purification of bioactive proteins from bovine colostrum | |
| DK3097788T3 (en) | PROCEDURE FOR EXPLORING LACTOFERRIN FROM MILK | |
| Stanic et al. | Application of ion exchanger in the separation of whey proteins and lactin from milk whey | |
| NZ243727A (en) | Isolation of charged particles from fluids by ion exchange where the ion exchange medium is disposed on a porous membrane | |
| Nath et al. | Emerging purification and isolation | |
| JP2985158B2 (ja) | 活性の高いラクテニン画分の回収方法 | |
| WO2024056840A1 (en) | Isolation of osteopontin and glycomacropeptide from whey | |
| JP2963081B2 (ja) | 乳およびその副生物からラクトフェリンを分離、 精製する方法 | |
| Jung et al. | Mobile phase composition for resolving whey proteins in reversed-phase high performance liquid chromatography | |
| CN113105542A (zh) | 一种乳铁蛋白制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| BB | Publication of examined application | ||
| MM | Patent lapsed |
Owner name: CAMPINA MELKUNIE B.V. |