DK172949B1 - Synergistinderivater, deres fremstilling og farmaceutiske præparater deraf - Google Patents

Description

i DK 172949 B1 •«p

Den foreliggende opfindelse angår synergistinderiva-ter, en fremgangsmåde til deres fremstilling samt farmaceutiske præparater deraf.

Europæisk patentansøgning nr. 133.097 beskriver syn-5 ergistinderivater substitueret i 5£-stilling, som har den fordel/ at de er opløselige.

Pristinamycin og virginiamycin er kendte forbindelser, se J. Preud'homme et al., Bull. Soc. Chim. Fr., 2_, s.

585-591 (1968).

10 Den foreliggende opfindelse angår hidtil ukendte syn- ergistinderivater med den almene formel \_y :x> o° .

2° O' deres salte, deres fremstilling og farmaceutiske præparater indeholdende dem.

I den almene formel I betyder Y et hydrogenatom eller en dimethylarninogruppe, og R betyder en 3- eller 4-quinucli- 25 dinyl-gruppe.

Det må forstås, at forbindelserne med den almene formel I kan foreligge i isomere former, og at disse isomere og deres blandinger er omfattet af den foreliggende opfindelse .

3 ft

Ifølge opfindelsen kan forbindelserne med den almene formel I, hvori Y og R har den ovennævnte betydning, fremstilles ved omsætning af en thiol med den almene formel R SH (II) 35 hvori R har den ovennævnte betydning, med en forbindelse med den almene formel

"W

V

DK 172949 B1

O

2 *» . ΧΛ30Χγ\ΧΛ„ (mi s 10 hvori Y har den ovennævnte betydning.

Der arbejdes sædvanligvis i et organisk opløsningsmiddel, f.eks. en alkohol, såsom methanol, eller en keton {f.eks. acetone), eller et chlorholdigt opløsningsmiddel, 15 såsom chloroform, eller en blanding af disse opløsningsmidler ved en temperatur mellem -78°C og reaktionsblandingens tilbagesvalingstemperatur, fortrinsvis ved en temperatur nær 20°C.

Når R betyder en 3-quinuclidinyl-gruppe, vil det 20 forstås, at thiolen med.(R)- eller (S)-konfiguration’f^ré'r'til synergistinderivatet med den almene formel I med den tilsvarende konfiguration.

Thiolen med den almene formel II, hvori R er en 3--quinuclidinyl-gruppe, kan fås ud fra en thioloester med 25 den almene formel R-S-COR' (IV) 1 hvori R har den ovennævnte betydning, og R' betyder en ] 30 alkylgruppe med 1-4 carbonatomer, fortrinsvis en methyl- gruppe, ved enhver kendt metode til dannelse af en thiol ud fra en thioloester, uden at resten af molekylet påvirkes.

Der arbejdes især ved alkoholyse i basisk miljø, f.eks. i en alkohol, såsom methanol, i nærværelse af natri-35 ummethylat eller natriumhydroxid ved en temperatur mellem 20°C og reaktionsblandingens tilbagesvalingstemperatur.

- Thioloesteren med den almene formel IV kan fremstilles

M

' i« *

O

DK 172949 B1 3 i analogi med metoden beskrevet af R.P. Volante, Tet. Let.

22 (33), s. 3119 (1981) ud fra en alkohol med den almene formel 5 R OH (V) hvori R har den ovennævnte betydning, og en thiocarboxyl-syre med den almene formel 10 R' CO SH (VI) hvori R' har den ovennævnte betydning, ved behandling med en blanding af triphenylphosphin og dialkylazodicarboxylat, f.eks. diisopropylazodicarboxylat.

15 Reaktionen gennemføres under betingelser, som er analoge med dem, der er beskrevet i det ovennævnte litteratursted.

Alkoholen med den almene formel V med (R)- eller (S)-konfiguration fører til thioloesteren med den 20 almene formel (IV) med (S)- hhv. (R)-konfiguration.

Alkoholen med den almene formel V med (R)- eller (S)-form kan fremstilles ifølge metoden beskrevet af B.

Ringdahl et al., Acta Pharm. Suec., llS, s. 281 (1979).

Thiolen med den almene formel II, hvori R er en 25 4-quinuclidinyl-gruppe, kan fremstilles ifølge metoden beskrevet af A. Grob, Helv. Chim. Acta, 5J7, s. 2339 (1974).

Forbindelserne med den almene formel III kan fremstilles som beskrevet i europæisk patentansøgning nr.

133.098.

30 Når forbindelserne med den almene formel I forelig ger i form af en blanding af isomere, er det muligt at adskille disse ved enhver kendt metode, som ikke påvirker resten af molekylet, f.eks. ved høj-ydelse-væskechromato-grafi.

35 De hidtil ukendte forbindelser med den almene formel I kan renses ved de sædvanlige kendte metoder, såsom krystallisation, chromatografi eller successive ekstraktioner i

O

DK 172949 B1 4 surt eller basisk miljø. For fagmanden, som kender synergistinernes følsomhed i basisk miljø, er det klart, at der med "basisk miljø" menes et miljø, som netop er tilstrækkeligt basisk til at frigøre forbindelsen fra dens 5 syreadditionssalt, dvs. et miljø, hvori pH-værdien ikke overstiger 7,5-8.

De hidtil ukendte forbindelser med den almene formel I kan omdannes til syreadditionssalte ved indvirkning af en syre i et organisk opløsningsmiddel, såsom en alkohol, 10 keton, ester eller et chlorholdigt opløsningsmiddel. Saltet udfældes, eventuelt efter koncentrering af dets opløsning.

Det fraskilles ved filtrering eller dekantering. Syreadditionssaltene kan ligeledes fås i form af vandige opløsninger ved tilsætning af en vandig opløsning af tilsvarende 15 syre til forbindelsen med den almene formel I.

Det er velkendt, at synergistiner fremstillet ved forgæring er meget efterspurgte produkter af læger til behandling af mange tilstande, som skyldes grampositive bakterier (f.eks. staphylokokker, streptokokker, pneumokok-20 ker °9 enterokokker) og gramnegative bakterier (f.eks.

Haemophilus, gonokokker og meningokokker). Imidlertid har disse forbindelser den ulempe, at de er uopløselige i vandigt miljø og derfor kun kan indgives oralt, sædvanligvis i form af piller, dragéer eller tabletter. I betragtning 25 af denne uopløselighed er det umuligt at anvende de kendte synergistiner, når en patient ikke er i stand til at synke; det er især tilfældet inden for pædiatrien og ved genoplivning, medens disse forbindelsers virkningsspektrum kunne være en værdifuld indikation i et stort antal tilfælde, 30 f.eks. i tilfælde af komatøs sepsis.

De hidtil ukendte forbindelser ifølge opfindelsen har den væsentlige fordel, at de kan gøres opløselige i vand, i form af salte, i terapeutisk anvendelige doser, samtidig med at de bevarer synergistinernes generelle virknings- 35 spektrum. De er især virksomme mod Staphylococcus aureus Smith in vitro i koncentrationer på mellem 1 og 125 pg/ml og in vivo i doser på mellem 5 og 50 mg/kg indgivet * o DK 172949 B1 5 subcutant til mus.

Endvidere er forbindelserne særligt interessante p& grund af deres ringe toksicitet.

Forbindelsernes LD5Q-værdi er sædvanligvis større 5 end 150 mg/kg hos mus ved subcutan indgivelse.

Forbindelserne ifølge den foreliggende opfindelse udviser endvidere et synergi-fænomen, når de kombineres med pristinamycin IIA eller et opløseligt derivat af pristi-namycin II0 med den almene formel

10 O

(VID

o O CHj ^γ°

15 CH .-kQ

CH, ° hvori betyder 20 1) en alkylgruppe med 1-5 carbonatomer, som er substitue ret med i) én eller to alkylamino- eller dialkylaminogrupper, hvor alkyldelene, som indeholder 1-5 carbonatomer, sammen med nitrogenatomet, hvortil de er knyttet, eventuelt kan 25 danne en mættet heterocyclisk gruppe valgt blandt 1-pyrro-lidinyl, piperidino, 1-azetidinyl, 1-azepinyl, morpholino, thiomorpholino og 1-piperazinyl (eventuelt substitueret med en alkylgruppe med 1-5 carbonatomer) eller ii) en 2- eller 3-pyrrolidinyl-gruppe, 2-, 3- eller 4-30 -piperidyl-gruppe, 2- eller 3-azetidinyl-gruppe eller 2-, 3- eller 4-azepinyl-gruppe, 2) en gruppe med den almene formel

Het-S (VIII) 35 hvori Het betyder en 3-pyrrolidinyl-gruppe, 3- eller 4--piperidyl-gruppe, 3-azetidinyl-gruppe eller 3- eller 4- v

O

DK 172949 B1 6 -azepinyl-gruppe, som eventuelt er substitueret med en alkyl-gruppe med 1-5 carbonatomer, 3) en dialkylaminogruppe, hvor alkyldelene, som indeholder 1-5 carbonatomer, sammen med nitrogenatomet, hvortil de 5 er knyttet, eventuelt kan danne en mættet heterocyclisk gruppe valgt blandt 1-pyrrolidinyl, piperidino, 1-azetidinyl, 1-azepinyl, morpholino, thiomorpholino og 1-piperazinyl (eventuelt substitueret med en alkylgruppe med 1-5 carbonatomer) , 10 4) en gruppe med den almene formel R~ - S - (IX) (O) n hvori R2 betyder 15 i) en nitrogenholdig heterocyclylgruppe med 4-7 ringled, der eventuelt indeholder ét eller flere andre heteroatomer valgt blandt nitrogen, oxygen eller svovl i form af sul-foxid eller sulfon, og eventuelt er substitueret med en alkylgruppe, eller 20 ii) en alkylkæde med 2-4 carbonatomer, som er substitue ret med 1 eller 2 grupper valgt blandt phenyl, cycloalkyl-amino eller N-alkyl-N-cycloalkyl-amino med 3-6 ringled, alkylamino, dialkylamino eller dialkylcarbamoyloxy (idet alkyldelene af disse to sidstnævnte grupper sammen med 25 nitrogenatomet, hvortil de er knyttet, eventuelt kan danne J en mættet eller umættet heterocyclisk gruppe med 4-7 ting led, som eventuelt indeholder et andet heteroatom valgt blandt nitrogen, oxygen eller svovl i form af sulfoxid eller sulfon, og eventuelt er substitueret med en alkylgrup-30 pe), eller er substitueret med én eller flere nitrogenhol-dige heterocycliske grupper med 4-7 ringled, som eventuelt indeholder 1 eller 2 andre heteroatomer valgt blandt nitrogen, oxygen eller svovl i form af sulfoxid eller sulfon, og eventuelt er substitueret med en alkylgruppe, idet de 35 nævnte heterocycliske grupper er knyttet til kæden, der bærer dem, via et carbonatom, med den forudsætning, at mindst én af substituenterne båret af alkylkæden ovenfor m Ί DK 172949 B1 o 7 * er en nitrogenholdig substituent, som kan danne salte, lii) en [l-methyl-2(S)-pyrrolidinyll-methylgruppe, og n er lig med 1 eller 2, med den forudsætning, at alkyl-grupperne og alkyldelene nævnt ovenfor er ligekædede eller 5 forgrenede og, medmindre andet er anført, indeholder 1-10 carbonatomer.

Pristinamycin Il^-derivaterne med den almene formel VII kan foreligge i isomere former. Det må forstås, at disse isomere former samt deres blandinger med fordel kan 10 kombineres med forbindelserne med den almene formel I.

Når ved definitionen af den almene formel VII, afsnit 4), - R2 betyder en heterocyclylgruppe, kan denne gruppe f.eks. være valgt blandt 3-azetidinyl, 3-pyrrolidinyl, 3- eller 15 4-piperidyl eller 3- eller 4-azepinyl, - R2 betyder en heterocyclylalkylgruppe, kan heterocyclyl- gruppen f.eks. være valgt blandt de ovennævnte grupper eller grupperne 2-azetidinyl, 2-pyrrolidinyl, 2-piperidyl, 2-azepinyl, piperazinyl, 4-alkyl-piperazinyl, quinolyl, 20 isoquinolyl eller imidazolyl, - R2 indeholder en dialkylamino- eller dialkylcarbamoyl-oxygruppe, hvor alkyldelene sammen med nitrogenatomet, hvortil de er knyttet, danner en heterocyclisk gruppe, kan denne f.eks. være valgt blandt 1-azetidinyl, 1-pyrro- 25 lidinyl, piperidino, 1-azepinyl, morpholino, thiomorpholi- no i form af sulfoxid eller sulfon, 1-piperazinyl, 4-alkyl--1-piperazinyl, N-alkyl-l-homopiperazinyl og 1-imidazolyl.

Forbindelserne med den almene formel VII, hvori har den ovenfor under 1), 2) eller 3) angivne betydning, 30 er omhandlet i europæisk patentskrift nr. 135.410 og kan fremstilles ud fra pristinamycin IIA ifølge metoden beskrevet i dette patentskrift.

Forbindelserne med den almene formel VII, hvori Rj^ har den ovenfor under 4) angivne betydning, kan fremstil-35 les ved oxidation af et pristinamycin lig-derivat, dets salt eller et beskyttet derivat med den almene formel

V

O

DK 172949 B1 8

C

il ^ c»,Y c o CH> Y <«

cht R,-5^V

10 hvori R2 har den ovennævnte betydning, med den forudsætning, at når R2 indeholder en svovlholdig heterocyclisk gruppe, kan svovlatomet være i form af sulfid, sulfoxid eller sulfon.

ig Reaktionen gennemføres sædvanligvis ved hjælp af et oxidationsmiddel, der eventuelt er fremstillet in situ, i vandigt miljø eller i et organisk opløsningsmiddel, fortrinsvis et chlorholdigt opløsningsmiddel (f.eks. me-thylenchlorid, 1,2-dichlorethan eller chloroform) eller :: 20 en alkohol (f.eks. methanol eller tert.butanol) eller en blanding af disse opløsningsmidler. Eventuelt arbejdes der under nitrogen.

Blandt egnede oxidationsmidler til opnåelse af en forbindelse med den almene formel VII, hvori n = 25 1, kan nævnes organiske persyrer, dvs. percarboxyl- eller persulfonsyrer (f.eks. pereddikesyre, pertrifluoreddike-syre, permyresyre, perbenzoesyre, m-chlorperbenzoesyre, p-nitroperbenzoesyre, permaleinsyre, monoperphthalsyre, percamphersyre eller p-toluenpersulfonsyre) eller mine-30 ralske persyrer (f.eks. periodsyre eller persvovlsyre).

; Når der ønskes dannet en forbindelse med den almene formel VII, hvori n = 2, arbejdes der fordelagtigt i nærværelse af selendioxid og hydrogenperoxid med saltet af forbindelsen med den almene formel X eller i nærværelse 35 af en persyre, f.eks. dem der er nævnt ovenfor, især pertrifluoreddikesyre eller m-chlorperbenzoesyre.

Når pristinamycin Ilg-derivatet med den almene formel

H

3F2M· _ _

O

9 DK 172949 B1 X anvendes i form af salt, anvendes saltene dannet med organiske eller mineralske syrer, fortrinsvis med trifluor-eddikesyre, vinsyre, eddikesyre, benzoesyre eller saltsyre.

5 Når forbindelsen med den almene formel X anvendes i form af salt eller et beskyttet derivat, gennemføres reaktionen fordelagtigt ved en temperatur mellem -40 og +50°C.

Når der ønskes dannet en forbindelse med den almene 10 formel VII, hvori n = 1, er det ligeledes interessant at arbejde ud fra pristinamycin lig-derivatet med den almene formel X i nærværelse af et basisk hydrogencarbo-nat (f.eks. natriumhydrogencarbonat) ved en temperatur mellem -60 og -40°C.

15 Når R2 indeholder en alkylamino- eller cycloalkyl- amino-substituent, er det ligeledes muligt at anvende et beskyttet derivat af forbindelsen med den almene formel X, idet dette kan være beskyttet af enhver aminbe-skyttelsesgruppe, hvis indføring og fjernelse ikke påvir-20 ker resten af molekylet. Der anvendes fordelagtigt gruppen trifluoracetyl, som kan fjernes efter reaktionen ved behandling med et alkalimetalhydrogencarbonat (natrium- eller kaliumhydrogencarbonat) i vandig opløsning.

Forbindelserne med den almene formel X kan fremstil-25 les ved omsætning af en thiol med den almene formel R2-SH (XI) hvori R2 har den ovennævnte betydning, med pristinamycin 30 ii i analogi med metoden beskrevet i europæisk patentansøgning nr. 135.410.

Forbindelserne med den almene formel VII, hvori n er lig med 2, kan ligeledes fremstilles ved oxidation af en forbindelse med den almene formel VII, hvori n er lig 35 med 1.

Reaktionen gennemføres under betingelser, som er analoge med betingelserne beskrevet ovenfor for dannelse o 10 DK 172949 B1 af en forbindelse med den almene formel VII, hvori n = 2, ud fra et pristinamycin lig-derivat med den almene formel X.

Forbindelserne med den almene formel XI kan frem-5 stilles ifølge eller i analogi med metoderne beskrevet nedenfor i eksemplerne og især ifølge: G. G. Urquart et al., Org. Synth., 21* s* 36 (1941), A.I. Vogel, J. Chem. Soc., 1822 (1948), J.H. Chapman og L.N. Owen, J. Chem. Soc., s. 579 10 (1950), H. R. Snyder et al., J. Am. Chem. Soc., 69, s. 2672 ¢1947), D.D. Reynolds et al., J. Org. Chem. £6, s. 5125 (1961), 15 J.W. Haeffele et al., Proc. Sci. Toilet Goods

Assoc., 32, s. 52 (1959), H. Barrer et al., J. Org. Chem., 2T_, s. 641 (1962), J.H. Biel et al., J. Amer. Chem. Soc., 77, s. 2250 (1955).

20 I påkommende tilfælde kan isomerene af forbindelser ne med den almene formel VII adskilles ved chromatografi eller ved høj-ydelses-væskechromatografi.

Synergistinderivaterne ifølge den foreliggende opfindelse virker synergistisk på den antibakterielle 25 virkning af pristinamycin IIA på Staphylococcus aureus Smith in vitro i doser på mellem 0,1 og 10 pg/ml og in vivo hos mus i doser på mellem 10 og 200 mg/kg ved sub-cutan indgivelse, når de forenes i forhold, som varierer fra 10-90% til 90-10%.

30 Til terapeutisk anvendelse kan de hidtil ukendte forbindelser ifølge opfindelsen anvendes som sådanne, dvs. i form af base, men til anvendelse i vandig opløsning, som udgør den væsentligste fordel ved forbindelserne ifølge opfindelsen, er det særlig fordelagtigt at anvende deres 35 farmaceutisk acceptable salte, dvs. salte, som ikke er toksiske i anvendelsesmængderne, i forening med pristinamycin IIft eller med et opløseligt derivat af pristinamycin ΙΙβ med o DK 172949 B1 11 den almene formel VII, som selv er opløseliggjort, enten i form af farmaceutisk acceptabelt salt eller eventuelt i form af base, når opløseligheden er tilstrækkelig til, at den dannede opløsning indeholder en mængde forbindelse, 5 som mindst er lig med den terapeutisk aktive dosis.

Som farmaceutisk acceptable salte kan nævnes additionssalte med uorganiske syrer, såsom hydrochlorider, hydrobromider, sulfater, nitrater eller phosphater, eller organiske syrer, såsom acetater, propionater, succinater, 10 maleater, fumarater, methansulfonater, p-toluensulfonater, iséthionater, citrater, adipater, lactobionater eller substitutionsderivater af disse forbindelser.

De følgende eksempler viser, hvorledes opfindelsen kan udøves i praksis. NMR-Spektrene af de illustrerede 15 forbindelser i disse eksempler og i referenceeksemplerne udviser “generelle-' karakteristika, som er fælles for alle forbindelser med den almene formel I eller den almene formel VII, og særlige karakteristika, som er særegne for enhver af forbindelserne afhængigt af substituenterne.

20 I de følgende eksempler er kun nævnt de særlige karakteristika, som skyldes de variable grupper. Alle protonerne er angivet ifølge nummeringen vist i den almene formel XII og anbefalet af J.O. Anteunis et al., (Eur.

J. Biochim., 5j3, s. 259 (1975)).

25 *CH~ 36^ yB CHg .

>r~0~Y

30 --¾¾ O

0 ^T°N^J|^5S^0 XII} 0<sw"^HlNH °

35 O

ιή5 o 12 DK 172949 B1

For forbindelserne med den almene formel VII er alle protonerne angivet ifølge nummereringen vist i den følgende formel 0 5 JL X iii2 H 3 10 ΓΗ33 Ui CH3<·.^3 O O ’ y?6 <X1II> 10 CH3 ^Via

30 T 29 °2 1 \23 I

I /:6 W J—-— CH, ' 20 31 1 -5 15 Medmindre andet er anført, er spektrene taget ved 250 MHz i deuterochloroform. De kemiske forskydninger er udtrykt i ppm i forhold til tetramethylsilan-signalet. Forkortelserne anvendt i det følgende er: 20 s * singlet d = dublet t = triplet mt = multiplet m = massiv 25 dd = dublet-dublet dt = dublet-triplet ddd = dublet-dub let-dublet dddd = dublet-dublet-dublet-dublet.

Det skal forstås, at de forskellige isomere er 30 blevet klassificeret vilkårligt ifølge de kemiske forskydninger konstateret i NMR-spektret.

Som isomer A^ og isomer A2 af forbindelserne med den almene formel XIII, hvori Rx er en R2S(0)øgruppe, hvori n = 1, betegnes isomere, som har de følgende karakteris-35 tika: ca. 1,7 (s, -CH^ i 33); ca. 3,8 (s,^CH2 i 17); <5 (d, H^) isomer A2 eller ?5 (d, H^) isomer A^; ca. 5,50 (d bred, H13) ; ca. 6,20 (d, Ηχι) ; ca. 6,6 (>NH 18); >8 (s, H20).

o 13 DK 172949 B1

Som Isomer og isomer B2 af forbindelserne med den almene formel XIII, hvori R^ er en R2S(0)n~gruppe, hvori n * 1, betegnes isomerene, som har de følgende karakteristika: ca. 1,5 (s, -CH3 i 33); ca. 3,7 og 3,9 (2d,>CH2 5 i 17); ca. 4,8 (mt, H13); <5 (d, H27 (isomer B2 eller >5 (d, H27) isomer B^, ca. 5,70 (AB grænse, og H1Q); ca. 7,7 (^NH i 8); ca. 7,8 (s, H2()) .

Som isomer A af forbindelsen med den almene formel XIII, hvori R^ er forskellig fra R2S(0)n~, betegnes iso- 10 meren, som har de samme NMR-karakteristika som dem, der er nævnt ovenfor for isomer og A2 af forbindelserne med den almene formel XIII, hvori R^ er en R2S(0)n~gruppe, idet H i 27 er karakteriseret ved: ca. 4,7 (d, J^ 1 Hz).

Som isomer B af forbindelsen med den almene formel 15 XIII, hvori er forskellig fra R2S(0)n~, betegnes iso- meren, som har de samme NMR-karakteristika som dem, der er nævnt ovenfor for isomer B^ og B2 af forbindelserne med den almene formel XIII, idet H i 27 er karakteriseret ved: ca. 4,6 (d, J> 2,5 Hz) .

20 Flashchromatografi betegner i de følgende eksempler en rensningsteknik, som er karakteriseret ved, at der arbejdes under middeltryk (50 kPa) under anvendelse af sili-ciumdioxid med en partikelstørrelse på 40-53 pm, ifølge W.C. Still, M. Kahn og A. Mitra (J. Org. Chem., 4J3, s.

25 2923 (1978)).

I de efterfølgende eksempler kan alle forbindelserne, medmindre andet er anført, foreligge i mindst 2%'s vandig opløsning i form af hydrochloridet.

30 35

O

14 DK 172949 B1

Eksempel 1

Til en opløsning af 4,4 g 5S-methylen-pristinamycin IA i en blanding af 40 ml methanol og 20 ml chloroform sættes 2,8 g 3-mercapto-quinuclidin, hvorpå den dannede 5 opløsning omrøres i 44 timer ved en temperatur nær 20°C. Reaktionsblandingen koncentreres derpå til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C. Den dannede remanens suspenderes i 100 ml ethylether, hvorpå der fraskilles ved filtrering. Det således dannede faste stof vaskes 10 med 3 x 10 ml ethylether og renses derpå ved flashchroma-tografi (elueringsmiddel: methylenchlorid-methanol i volumenforholdet 90:10), idet der opsamles fraktioner på 100 ml. Fraktionerne 11-35 forenes og koncentreres derpå til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C.

15 Remanensen omrøres i 120 ml ethylether. Det dannede faste stof fraskilles ved filtrering og renses igen ved flash-chromatografi (elueringsmiddel: methylenchlorid-methanol i volumenforholdet 85:15), idet der opsamles fraktioner på 100 ml. Fraktionerne 3-7 forenes og koncentreres derpå 20 til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C.

Remanensen omrøres i 50 ml ethylether, og det således dannede faste stof fraskilles ved filtrering, vaskes med 3. gan·-ge 5 ml ethylether og tørres derpå under formindsket tryk (27 Pa) ved 20°C. Der fås således 1,7 g 55-(3-quinuclidi-25 nyl)-thiomethyl-pristinamycin IA i form af et bleggult fast stof, som smelter nær 200°C.

NMR-Spektrum: (blanding af 4 isomere) 2,88 og 2,89 (2s, 4 -N(CH3)2) 3,21 og 3,22 (2s, 4 -CH3) 30 6,51 og 6,53 (2d, 2 -NH—) 6,57 og 6,58 (2d, 4 6) 7,82 og 7,85 (mt, l'Hg af de to hoved-isomere) 7,95 (mt, l’Hg af de to bi-isomere) 8,78 og 8,81 (2d, 6 -NH- af de to hoved-isomere) 35 8,98 og 9,0 (2d, 6 -NH- af de to bi-isomere).

O

15 DK 172949 B1

Der fås en 5%'s vandig opløsning af 55-(3-quinucli-dinyl)-thiomethyl-pristinamycin 1^ med: forbindelse ........................ 100 mg 0,IN saltsyre ...................... 0,98 ml 5 destilleret vand, op til ........... 2 ml 3-Mercapto-quinuclidinet kan fremstilles på den følgende måde:

Til en opløsning af 14,5 g 3-acetylthio-quinuclidin i 150 ml methanol sættes 0,5 g natriummethylat. Reaktionsto blandingen opvarmes derpå ved tilbagesvaling i 1 time.

Der tilsættes igen 0,5 g natriummethylat, hvorpå der opvarmes ved tilbagesvaling i 2 timer. Reaktionsblandingen koncentreres til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 40°C. Til den dannede remanens sættes 40 ml destille-15 ret vand og derpå ca. 1 ml eddikesyre til opnåelse af en pH-værdi på 8. Den dannede blanding ekstraheres med 3 x 20 ml methylenchlorid. De organiske faser forenes, tørres over natriumsulfat, filtreres og koncentreres derpå til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C. Den dan-20 nede brune olie destilleres under formindsket tryk (920 Pa), og fraktionen, som destillerer nær 94°C, opsamles.

Der fås således 2,8 g 3-mercapto-quinuclidin.

3-Acetylthio-quinuclidinet kan fremstilles på den følgende mådes 25 Til en opløsning af 42 g triphenylphosphin i 300 ml tetrahydrofuran holdt ved 5°C under nitrogenatmosfære sættes dråbevis i løbet af 30 minutter 31,6 ml diisopro-pylazodicarboxylat. Derpå omrøres den dannede suspension i 30 minutter ved 5°C. Til denne suspension holdt ved 5°C 30 sættes derpå i løbet af 30 minutter en opløsning af 10,2 g 3-hydroxy-quinuclidin og 11,4 ml thioleddikesyre i 600 ml tetrahydrofuran. Reaktionsblandingen omrøres derpå i 20 timer ved en temperatur nær 20°C. Blandingen koncentreres derpå til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 35 40°C. Den dannede olie opløses i 400 ml ethylether og vas kes derpå med 3 x 160 ml saltsyre. De forenede vandige faser vaskes med 100 ml ethylether og neutraliseres derpå %

O

16 DK 172949 B1 til en pH-værdi nær 7 ved tilsætning af natriumhydrogen-carbonat. Den dannede opløsnings pH-værdi indstilles derpå på ca. 9 ved tilsætning af nogle dråber vandig ION natri-umhydroxidopløsning. Der ekstraheres med 3 x 200 ml 5 methylenchlorid. De forenede organiske faser tørres over natriumsulfat, filtreres og koncentreres til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C. Der fås således 14,7 g 3-acetylthio-quinuclidin i form af en brun olie (Rf -0,33, elueringsmiddels methylenchlorid-methanol i volumen-10 forholdet 90:10).

Eksempel 2 Når der gås frem på samme måde som beskrevet i eksempel 1, men gås ud fra 6,15 g 5£-methylen-pristinamycin 15 og 1,1 g 3-mercapto-(S)-qulnuclidin og efter to rens ninger ved flashchromatografi under opsamling af fraktioner på 50 ml (1. flashchromatografi: elueringsmiddel: methylenchlorid-methanol i volumenforholdet 90:10, koncentrering til tørhed af fraktionerne 12-36; 2. flashchroma-20 tografi: elueringsmiddel: methylenchlorid-methanol i volu menforholdet 90:10, koncentrering til tørhed af fraktionerne 3-20), fås 2,6 g 56-[3(S)-quinuclidinylj-thiome-thyl-pristinamycin IA i form af et bleggult pulver. Denne forbindelse kan fås i krystallinsk form på den følgende 25 måde: 2,6 g 56-[3(S)-quinuclidinyl]-thiomethyl-pristina-mycin IA opløses i 20 ml methanol. Der fås en gul opløsning. Der dannes et krystallinsk bundfald efter podning ved skrabning, filtrering og tørring under formindsket tryk 30 (2,7 _Pa) ved 30°C. Der fås 1,2 g 56-[3(S)-quinuclidinyl]- -thiomethyl-pristinamycin i form af hvide krystaller, som smelter nær 200°C (forbindelse krystalliseret" i for-ening med methanol).

NMR-Spektrum; 1 isomer (spor af en isomer med hensyn 35 til 56-carbonatomet) 0,62 (dd, J = 15 og 6, IH, 5β2) i m o DK 172949 B1 17

/CHK

1,6 til 2,30 (mt, 6H, -// ΐΗ_ og 55)

Cv 5 2,4 (d, J - 15, IH, 58χ) 2,5 til 2,75 (mt, 5ε2, IH af og IH af -CH2 S-) 10 2,9 til 3,20 (mt, -S-CH , IH af -CH2S og ~/f\ ) 3.30 (mt, IH af ) 4,98 (dd, J = 14 og 7,5, IH, 5εχ) 5.30 (mt, 2H, 5a og 4a) 7,90 (dd, IH, ΓΗ6).

5S-[3(S)-quinuclidinyl-thiomethyl]-pristinamycin IA 20 kan ligeledes omkrystalliseres på den følgende måde:

17,4 g 5S-[3 (S)-quinuclidinyl-thiomethyl]-pristinamycin opløses i 87 ml acetone, som i forvejen er bragt til tilbagesvaling. Den dannede opløsning filtreres, hvorpå det uopløste stof skylles med 10 ml acetone. Efter 3 25 timer ved 20°C filtreres de dannede krystaller, hvorpå de tørres. Omkrystallisation af de dannede 14,8 g i 75 ml acetone under de samme betingelser giver efter filtrering og derpå tørring under formindsket tryk (90 Pa) ved 20°C

12,2 g hvide krystaller, som smelter nær 185-190°C.

30 3-Mercapto-(S)-quinuclidinet kan fås på den følgende måde:

Til en opløsning af 29 g 3-acetylthio-(S)-quinucli-din i 30 ml methanol, holdt ved ca. 25°C, sættes langsomt 30 ml vandig 10N natriumhydroxidopløsning. Reaktionsblan-35 dlngen omrøres i 2 timer ved en temperatur nær 20°C.

Reaktionsblandingens pH-værdi indstilles derpå til en værdi nær 9 ved tilsætning af ca. 10 ml eddikesyre. Den dannede o 18 DK 172949 B1 blanding ekstraheres med 3 x 100 ml methylenchlorid. De forenede organiske faser tørres over natriumsulfat, filtreres og koncentreres til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C. Den dannede remanens renses ved de-5 stillation under formindsket tryk (970 Pa). Der fås således 12 g 3-mercapto-(S)-quinuclidin i form af hvide krystaller, som smelter ved 46°C og destillerer ved 95°C under 970 Pa (aj^ = -118°, C = 1,1 methanol).

3-Acetylthio-(S)-quinuclidinet kan fås på samme 10 måde som beskrevet i eksempel 1, men ud fra 104,8 g tri-phenylphosphin, 80,8 g diisopropylazodicarboxylat og 25,7 g 3-hydroxy-(R)-quinuclidin. Der fås således 30 g 3-ace-tylthio-(S)-quinuclidin i form af en gul olie. (Rf = 0,2, elueringsmiddel: methylenchlorid-methanol i volumenforhol-15 det 90:10). Ifølge R.P. Volante, Tet. Let. 22^ (33), s.

3119 (1981), omdannes carbonet 3 med (R)-konfiguration til carbon med (S)-konfiguration under reaktionen.

3-Hydroxy-(R)-quinuclidinet fremstilles ifølge metoden beskrevet af B. Ringdahl, B. Resul og R. Dahlbom, 20 Acta Pharm. Suec. 1£, s. 281 (1979).

Eksempel 3 Når der gås frem på samme måde som beskrevet i eksempel 1, men gås ud fra 6,15 g 55-methylen-pristinamy-25 cin IA °g 1 g 3-mercapto-(R)-quinuclidin og efter rensning ved flashchromatografi under opsamling af fraktioner på 40 ml (elueringsmiddel: methylenchlorid-methanol i volumenforholdet 85:15) og koncentrering til tørhed af fraktionerne 20-30, fås 2 g 5S-[3(R)-quinuclidinyl]-30 -thiomethyl-pristinamycin IA i form af et beige pulver, som smelter nær 200°C.

NMR-Spektrum; 0,58 (dd, J = 15 og 5,5, IH, 532)

35 H

1,5 til 2,2 (m, -S .c. ) V/ >2 ly

O

19 DK 172949 B1 2,30 (in, IH, 5£) 2,35 (d, J = 15, IH, 5^) 2,50 (dd, IH af -CH2S-) 2,60 (dd, IH, 562) ‘ ........

2,90 til 3,10 (m, IH af -CH2-S- og _s ' T CH·? ' .0 3.15 (m, IH, _S-olf\ ' ) * Ψ 3,48 (m, IH af 4,95 (dd, IH, 5^) 5,28 (m, 2H, 5a og 4a) 7,87 (m, IH x 0,85, l'Hg af den 1, isomer) 20 7,93 (m, IH x 0,15, l'Hg af den 2. isomer).

5S- [3(R)-quinuclidinyl-thiomethyl]-pristinamycin XA kan omkrystalliseres på den følgende måde: 14.15 g 55-[3(R)-quinuclidinyl-thiomethyl]-pristinamycin IA opløses i 75 ml methanol. Til denne opløsning 25 sættes 4 ml destilleret vand, hvorpå blandingen henstilles til krystallisering ved 4°C. De dannede krystaller filtreres og skylles derpå med 4 x 10 ml af en blanding af methanol og vand (i volumenforholdet 95:5). Efter tørring under formindsket tryk (90 Pa) ved 42°C fås 10,22 30 g hvide krystaller, som smelter nær 190°C.

3-Mercapto-(R)-quinuclidinet kan fremstilles på samme måde som beskrevet i eksempel 2, med ud fra 32,5 g 3-acetylthio-(R)-quinuclidin og 35 ml 10N vandig natriumhydroxidopløsning. Der fås 11,5 g 3-mercapto-(R)-quinu-35 clidin i form af hvide krystaller, som smelter ved 45°C og destillerer ved 90°C under 830 Pa (α^° = +121°, C

1,1, methanol).

o 20 DK 172949 B1 3-Acetylthio-(R)-quinuclidinet kan fremstilles på den samme måde som beskrevet i eksempel 1, men ud fra 104,8 g triphenylphosphin, 80,8 g diisopropylazodicar-boxylat og 25,7 g 3-hydroxy-(S)-quinuclidin. Der fås 5 således 33,8 g 3-acetylthio-(R)-quinuclidin i form af en i lysebrun olie (Rf = 0,4, elueringsmiddel: methylenchlorid og methanol i volumenforholdet 80:20).

3-Hydroxy-(S)-quinuclidinet fremstilles ifølge metoden beskrevet af B. Ringdahl et al., Acta. Pharm. Suec.

10 16, s. 281 (1979).

Eksempel 4 Når der gås frem på samme måde som beskrevet i eksempel 1, men ud fra 3,5 g 5£-methylen-pristinamycin 15 IA og 0,6 g 4-mercapto-quinuclidin og efter koncentrering til tørhed,fås et fast stof, som omrøres i ethylether.

Efter filtrering isoleres 3,6 g af et beige fast stof, som renses ved flashchromatografi, idet der opsamles fraktioner på 50 ml (elueringsmiddel: methylenchlorid og me-20 thanol i volumenforholdet 85:15). Efter koncentrering til tørhed af fraktionerne 19-35, vaskning med ethylether, filtrering og derpå tørring af det dannede faste stof under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 20°C fås 1,2 g 5å--(4-quinuclidinyl)-thiomethyl-prlstlnamycln IA i form af 25 et brækket hvidt pulver, som smelter nær 200°C, NMR-Spektrum (2 isomere med hensyn til 5£-carbonatornet i et forhold på ca. 85:15): 0,62 (dd, J = 15 og 5,5, IH, 532) 30 ,CH2— 1,87 (t, 6H, -s-/ Λ* ) V c»2/

CK2-V

2,20 (m, IH, SS) 35 2,28 (m, IH, -CH2-S-) 2,35 (d, J = 15, IH, 5^) 2,47 (dd, IH, 5£2) m

O

21 DK 172949 B1 r~c\ 3,10 (t, 6H, -s-/ CH,— N }

5 \-CHZ

3,22 (dd, IH, -CH2-S-) 5,01 (dd, IH, 5εχ) 5,29 (bred d, J = 5,5, 5a) 10 7,86 (m, 0,85H, l'Hg af hoved-isomeren) 7,92 (m, 0,15 H, l'Hg af bi-isomeren).

4-Mercapto-quinuclidinet kan fremstilles ifølge metoden beskrevet af A. Grob, Helv. Chim. Acta, 5_7, s.

2339 (1974).

15

Eksempel 5

Der gås frem på samme måde som beskrevet i eksempel 1, men gås ud fra 1,2 g 5S,-methylen-virginiamycin S i 20 ml methanol og 0,21 g 3-mercapto-(R)-quinuclidin. Efter rensning 20 ved flashchromatogratl med opsamling af fraktioner på 10 ml (elueringsmiddel: methylenchlorid og methanol i volumenforholdet 95:5'indtil fraktion 35 og derpå methylenchlorid og methanol i volumenforholdet 80:20), koncentrering til tørhed af fraktionerne 47-55 og tørring under formind-25 sket tryk (2,7 kPa) ved 30°C fås 0,6 g 5S-[3(R)-quinu- clidinyl]-thiomethyl-virginiamycin S i form af et brækket hvidt pulver, som smelter nær 185°C.

NMR-Spektrum (2 isomere med hensyn til S^-carbonato-met i et forhold på ca. 80:20): 30 0,4 (dd, J * 15 og 5,5, IH, 5&2) 1,5 til 2,2 (m, 5H, -S^ .cv , 5£) V/ ch2 CH„

35 h l y-J

2 (m, IH, -s-//C\ ) N

v/ DK 172949 B1 o 22 2,34 (d, J = 15, IH, 53χ) 2,52 (dd, IH af -CH2S-) 2,63 (dd, IH, 5£2) 2,78 (dd, IH af >

JO

H _s 2,85 til 3,15 (m, IH af -CH--S og ~ )

Ut 10 3,48 (IB, IH, -S-VTfe } 4,94 (dd, IH, 56χ) 5,27 (bred d, J = 5, IH, 5a) 15 7,82 (dd, J = 4 og 1, l'Hg af den 1. isomer) 7,9 (dd, J = 4 og 1, l'Hg af den 2. isomer).

Eksempel 6

Der gås frem på samme måde som beskrevet i eksempel 20 1/ men gås ud fra 1/1 9 5S-methylen-virginiamycin Si 20 ml

methanol og 0,19'g 3-mercapto-(S)-quinuclidin. Efter rensning ved flashchromatografi med opsamling af fraktionér p5 10 ml (elueringsmiddel: methylenchlorid og methanol i volumenforholdet 90:10), koncentrering til tørhed af fraktionerne 25 19-32 og tørring under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C

fås 0,5 g 58-[3(S)-quimiclidinyl]-thiomethyl-virginia-mycin S i form af et bleggult pulver, som smelter nær 190°C.

NMR-Spektrum (2 isomere med hensyn til 5$-carbonatp-30 met i et forhold på ca, 85:15): 0,39 (dd, J = 15 og 5, IH, 5β2) 1,5 til 2,3 (m, 5H,“sv C. , 55) Y/ >2 fel 35 H.

2,11 (m, lH _s c T9 11

O

23 DK 172949 B1 2,34 (d, J - 15, IH, 5ρχ) 2,52 (dd, IH af -CH2S-) 2,64 (dd, IH, 5£2) 2,66 (dd, IH af ~S\/K ) 2.90 til 3,2 <m, 6H, IH af -CH2-S-, og -s ^ ) 10 3,3 til 3,5 (m, lH af ~S\Ak ) Xn/ H2Cs]/ 4,95 (dd, IH, 5£χ) 5,27 (bred d, IH, 5o) 15 7,80 (dd, J = 4 og 1, IH x 0,85, l'Hg af den 1. isomer) 7.90 (dd, J = 4 og 1, IH x 0,15,l'Hg af den 2. isomer).

Eksempel 7 Når der gås frem på samme måde som beskrevet i 20 eksempel 2, men gås ud fra 1,62 g 3-mercapto-(S)-quinu- clidin, og idet der omrøres ved -20°C i 20 timer, fås efter koncentrering til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C 11,4 g af en beige marengs, som omrøres i 100 ml diethylether, filtreres og derpå skylles med 3 x 20 ml 25 af det samme opløsningsmiddel. Denne forbindelse kan omkrystalliseres i acetone som beskrevet i eksempel 2 til dannelse af 6,6 g 5&- [3(S)-quinuclidinyl]-thiomethyl--pristinamycin i form af hvide krystaller, som smelter nær 198-200°C, hvis karakteristika er identiske med den 30 i eksempel 2 fremstillede forbindelses karakteristika, og som indeholder 3% bi-isomer, som bestemt ved højtryksvæske-chromatografi.

35 o 24 DK 172949 B1

Eksempel 8

Til en opløsning af 1 'g 55-methylen-pristinamycin IA i 20 ml acetone sættes ved -20°C i løbet af 1 time 0,16 g 3-mercapto-(S)-quinuclidin i opløsning i 5 ml 5 acetone. Efter 18 timers omrøring ved -20°C filtreres reaktionsblandingen, og det faste stof skylles med 3x2 ml acetone. Efter lufttørring fås 0,6 g 58-13(S)-quinu-clidinyl]-thiomethyl-pristinamycin i form af hvide krystaller, som smelter nær 190°C, hvis karakteristika 10 er de samme som den i eksempel 2 fremstillede forbindelses karakteristika, og som indeholder 3 % SJ-bi-i'somer, som bestemt ved højtryksvæskechromatografi.

Eksempel 9 15 Til en opløsning af 1,22 g 5S’-methylen-pristina- mycin IA i 15 ml acetone sættes ved -78°C 0,16 g 3-mer-capto-(S)-quinuclidin i opløsning i 5 ml acetone, hvorpå den dannede opløsning omrøres under nitrogen i 24 timer ved -78°C. Reaktionsblandingen koncentreres derpå til tør-20 hed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C, hvorved fås 1,4 g af et creme-hvidt fast stof, som indeholder 5% bi-isomer, bestemt ved højtryksvæskechromatografi, og som har de samme karakteristika som forbindelsen fremstillet i eksempel 2.

25

Referenceeksempel 1

Til 3,59 g 26-(2-diisopropylamino-ethyl)-thio-pri-stinamycin II,, (isomer A) i opløsning i 40 ml dichlor- D ^ methan sættes ved 0 C og under nitrogenatmosfære 0,4 ml 30 trifluoreddikesyre og derpå 1,06 g 85%’s metachlorperben-zoesyre, idet temperaturen holdes ved 0°C. Efter 20 timers omrøring ved 25°C sættes en mættet vandig natriumhydrogen-carbonatopløsning til reaktionsblandingen. Den organiske fase dekanteres, hvorpå den vandige fase vaskes med 3 x 100 35 ml methylenchlorid. De organiske faser forenes, tørres over magnesiumsulfat, filtreres og koncentreres derpå til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C, hvorved fås 4,2 g af et gult fast stof, som renses ved

O

25 DK 172949 B1 flashchromatografi (elueringsmiddel: chloroform og methanol i volumenforholdet 90:10), idet der opsamles fraktioner på 20 ml. Fraktionerne 22-28 forenes og koncentreres til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C til 5 dannelse af et lysegult fast stof, som omrøres i 10 ml ethylether. Det dannede faste stof fraskilles ved filtrering, hvorved fås 0,62 g 26-(2-diisopropylamino-ethyl)--sulfinyl-pristinamycin ΙΙβ (isomer A2) i form af et gult pulver, som smelter nar 155°C.

10 NMR-Spektrum: 0,90 til 1,15 (mt, -CH, i 32, 31, 30,>N(CHC j)_) ch3 2 1,76 (s, -CH3 i 33) 2.75 til 3,15 (mt, 1= CH2 i 15, -H4 og 15 /C-" q CH- 3,81 (s, CH2 i 17) 4.76 (d, -H27) 20 5,51 (d, -H13) 6,20 (d, -Ηχι) 6,48 (m,> NH i 8) 8,13 (s, -H20).

Fraktionerne 35-45 forenes og koncentreres til tør-25 hed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C til dannelse af et lysegult fast stof, som omrøres i 15 ml ethylether.

Det dannede faste stof fraskilles ved filtrering, hvorved fås 1,07 g 26-(2-diisopropylamino-ethyl)-sulfinyl-pristinamycin ΙΙβ (isomer A^ 80%, isomer A2 20%) i form af et lyse-30 gult pulver, som smelter nær 145°C.

NMR-Spektrum (isomer A3): 1,72 (s, -CH3 i 33) 2,70 til 3,15 (mt, ^:CH2 i 15, -H4, -|-CH2-CH2-N-CH<)

O CH

35 3,81 (s, > CH2 i 17) 5,26 (d, -H27)

O

26 DK 172949 B1 5,46 (d, -H13) 6.15 (d, -Ηη) 8,11 (s, -H20).

26-(2-Diisopropylamino-ethyl)-thio-pristinamycin ΙΙβ 5 kan fremstilles på den følgende måde;

Til 52 g pristinamycin IIA i opløsning i en blanding af 260 ml dichlormethan og 520 ml methanol sattes dråbevis under nitrogenatmosfære ved -30°C 16 g 2-diisopropylamino--ethanthiol i opløsning i 30 ml dichlormethan. Opløsningen 10 omrøres i 20 timer ved -20°C, hvorpå den koncentreres under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C. Det dannede faste stof omrøres med 2 x 1000 ml ethylether, fraskilles ved filtrering og krystalliseres derpå i 100 ml acetonitril. Krystallerne fraskilles ved filtrering og tørres derpå under for-15 mindsket tryk (90 Pa) ved 40°C. Der fås således 33,6 g 26- (2-diisopropylamino-ethyl)-thio-pristinamycin ΙΙβ (isomer A) i form af hvide krystaller, som smelter nær 122°C.

NMR-Spektrum: 1 til 1,15 (mt, -CHj isopropyl) 20 1,72 (s, -CH3 i 33) 1,80 til 2,20 (mt, -H25, -H29)

CHC

2,50 til 3 (mt, -SCH-CH--NC ) Δ CH^ 25 3,40 (bred d, -H2g) 4,74 (bred s, -H27) 6,32 (m, -NHg) 8.15 (s, -H20).

2-Diisopropylamin-ethanthiol kan fremstilles ifølge 30 metoden beskrevet af D.D. Reynolds, D.L. Fields og D.L.

Johnson, J. Org. Chem. 26, s. 5125 (1961).

Referenceeksempel 2

Til 10 g 26-(2-diisopropylamino-ethyl)-thio-pristina-35 mycin ΙΙβ (isomer A) i opløsning i 300 ml chloroform sættes 1,22 g natriumhydrogencarbonat. Der afkøles til -50°C og tilsættes dråbevis 2,98 g 98%'s metachlorperbenzoesyre Ϊ :i

O

27 DK 172949 B1 i opløsning i 100 ml chloroform. Blandingen omrøres i 2 timer og 15 minutter ved -50°C, hvorpå der tilsættes en mættet vandig natriumhydrogencarbonatopløsning. Efter 15 minutters omrøring ved 25°C dekanteres blandingen, hvorpå 5 den vandige fase vaskes med 3 x 200 ml dichlormethan. De organiske faser forenes, tørres over magnesiumsulfat, filtreres og koncentreres derpå til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C, hvorved fås 10,62 g af en hvidlig marengs. Denne opløses i 400 ml ethylacetat og behandles 10 derpå med 140 ml 0,1N saltsyre. Den vandige opløsnings pH-værdi indstilles på 4,2 ved tilsætning af 400 ml puffer med en pH-værdi på 4,2. Den vandige fase dekanteres, hvorpå den organiske fase vaskes med 400 ml puffer med en pH--værdi på 4,2. De vandige faser forenes og vaskes med 15 2 x 150 ml ethylacetat. Efter dekantering indstilles den vandige fase til en pH-værdi på 7-8 ved tilsætning af natriumhydrogencarbonat, hvorpå den vaskes med 3 x 300 ml dichlormethan. De organiske faser forenes og vaskes derpå med 2 x 200 ml puffer med en pH-værdi på 7,5. Den vandige 20 fase vaskes med 50 ml dichlormethan, hvorpå de organiske faser forenes, tørres over magnesiumsulfat, filtreres og koncentreres til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C, hvorved fås 8,04 g af et lysegult fast stof, som omrøres i 100 ml ethylether, fraskilles ved filtrering 25 og derpå tørres under formindsket tryk (90 Pa) ved 40°C.

Der fås således 7,5 g 26-(2-diisopropylamino-ethyl)-sulfi-nyl-pristinamycin IIQ (isomer A2) i form af et gult pulver, som smelter nær 158°C, og hvis NMR-karakteristika er identiske med dem, der er anført i referenceeksempel 1.

30

Referenceeksempel 3 Når der gås frem på samme måde som beskrevet i referenceeksempel 1, men gås ud fra 6,3 g 26-(2-diethyl-35 amino-propyl)-thio-pristinamycin ΙΙβ, 0,72 ml trifluor- eddikesyre og 1,91 g metachlorperbenzoesyre og efter rensning ved flashchromatografi (elueringsmiddel: chloroform

O

28 DK 172949 B1 og methanol i volumenforholdet 90:10), hvor der opsamles fraktioner på 60 ml, og koncentrering til tørhed af fraktionerne 7-9 under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C fås 0,99 g 26-(2-diethylamino-propyl)-sulfinyl-pristina-5 mycin ΙΙβ (isomer A2) i form af et gult pulver, som smelter nær 150°C.

NMR-Spektrum: 1,03 til 1,20 (mt, -CHj-CH (CH^) N (CH2CH3) 2 og CH-j i 32) 1,76 (s, -CH3 i 33) 10 3,82 (s, >CH2 i 17) 4,79 (m, -H27) 5,53 (d, -H13) 6,20 (d, -Η13_) 6.42 (πι,^ΝΗ i 8) 15 8,13 (s, -H20) ·

Efter koncentrering til tørhed af fraktionerne 23-35 under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C fås 0,64 g 26--(2-diethylamino-propyl)-sulfinyl-pristinamycin ΙΙβ (isomer Α^) i form af et beige-gult pulver, som smelter nær 20 160-170°C.

NMR-Spektrum: 1.14 (mt, -N(CH2CH3)2) 1,24 (bred d, CH-j-CH-NC) 1,73 (s, -CH3 i 33) 25 3,81 (AB-grænse, CH2 i 17) 5,28 (d, -H27) 5.43 (d, -H13) 6.15 (d, -Hn) 6,88 (m, ^NH i 8) 30 8,10 (s, -H2q).

26- (2-Diethylamino-propyl) -thio-pristinamycin Hg kan fremstilles på den følgende måde: Når der gås frem på samme måde som beskrevet i eksempel 1 i europæisk patentansøgning nr. 135.410, men gås ud 35 fra 3,15 g pristinamycin IIA og 1,8 g 2-diethylamino-pro-panthiol, og efter rensning ved flashchromatografi (elue-ringsmiddel: methylenchlorid og methanol i volumenforholdet i Λ ·

O

29 DK 172949 B1 90:10), hvor der opsamles fraktioner på 20 ml, og koncentrering til tørhed af fraktionerne 3-5 under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C fås 1,4 g 26-(2-diethylamin-pro-pyl)-thio-pristinamycin ΙΙβ i form af et gult pulver, som 5 smelter nær 160°C.

NMR-Spektrum: 1 (m, 9H ; -H32 + -N(CH2CH3)2) 2,50 (m, 6H : -S-CH2-CH-N(CH2CH3>2) 3,30 (m, IH : -H26) 10 4,70 (d, IH : -H27) 8,12 (s, IH : -H20) 2-Diethylamino-propanthiol kan f rems ti1les~på den følgende måde:

Til en opløsning af 29,5 g l-S-isothioureido-2-di-15 ethylamino-propan-dihydrochlorid i 150 ml destilleret vand sættes 25 ml vandig ION natriumhydroxidopløsning.

Blandingen opvarmes til 100°C i 1 time, afkøles til 20°C, indstilles til en pH-værdi på 9 ved tilsætning af 8 ml 12N saltsyre og ekstraheres derpå med 3 x 100 ml ethyl-2o ether. De etherholdige faser forenes, tørres over kalium-carbonat, filtreres og koncentreres derpå til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C. Blandingen renses ved destillation. Der fås 5,8 g 2-diethylamino-l-propanthiol i form af en farveløs-væske. (kp. (2,7 kPa) = 78°C) .

25 l-S-Isothioureido-2-diethylamino-propan-dihydro- chlorid kan fremstilles på den følgende måde.

Til en opløsning af 41 g l-chlor-2-diethylamino--propan-hydrochlorid i 200 ml dimethylformamid sættes 16,7 g thiourinstof. Blandingen opvarmes til 100°C i 30 minutter 30 og afkøles derpå til 20°C. Det dannede hvide bundfald opsamles ved filtrering, vaskes med 3 x 20 ml dimethylformamid og derpå med 3 x 20 ml ethylether. Der fås 29,6 g 1--S-isothioureido-2-diethylamino-propan-dihydrochlorid i form af hvide krystaller, som smelter ved 247-249°C.

35 l-Chlor-2-diethylamino-propan-hydrochlorid kan fremstilles på den følgende måde:

Til 100 ml thionylchlorid sættes i løbet af 15 minutter o DK 172949 B1 30 45/2 g 2-diethylamino-propanol-hydrochlorid, hvorpå der opvarmes til 80°C. Efter to timers omrøring destilleres det overskydende thionylchlorid, og remanensen optages med 200 ral ethylether. l-chlor-2-diethylamino-propan-hydro-5 chloridet krystalliserer. Der fås efter filtrering 48,2 g hvide krystaller, som smelter ved 112°C.

2-Diethylamino-propanol-hydrochlorid kan fremstilles på den følgende måde:

Til en suspension holdt under nitrogen af 10,6 g 10 lithiumaluminiumhydrid i 1 liter ethylether sættes langsomt ved 20°C en opløsning af 66 g ethyl-2-diethyl-amino-propionat i 330 ml ethylether. Reaktionsblandingen holdes ved en temperatur på 35°C i 5 timer, hvorpå temperaturen sænkes til 0°C. Derpå tilsættes dråbevis ved 0°C 12,4 15 ml vand, 9,1 ml vandig 5N natriumhydroxidopløsning og derpå 41,3 ml vand, der omrøres i 30 minutter, hvorpå blandingen filtreres på frittet glas og derpå vaskes med ethylether. Den etherholdige fase tørres over kaliumcarbonat, filtreres og koncentreres derpå til tørhed under formindsket 20 tryk (2,7 kPa) ved 30°C. Der fås 43,8 g af en gul væske, som opløses i 200 ml acetone, hvorpå der tilsættes 78 ml af en 4,5N opløsning af hydrogenchlorid i ethylether. 2--Diethylamino-propanol-hydrochloridet krystalliserer. Efter filtrering fås 45,2 g hvide krystaller, som smelter ved 25 97-100°C.

Ethyl-2-diethylamino"-propionat kan fremstilles ifølge Braun et al., Beilstein, 61, 1425 (1928).

1 Referenceekserapel 4 I 30 Der gås frem på samme måde som beskrevet i reference eksempel 2, men gås ud fra 4 g 26-(2-diethylamino-propyl)--thio-pristinamycin ΙΙβ (isomer A), 1,16 g 98%'s meta-chlorperbenzoesyre og 1 g fast natriumhydrogencarbonat.

Efter rensning ved flashchromatografi (elueringsmiddel: 35 chloroform og methanol i volumenforholdet 93:7) og koncentrering til tørhed af fraktionerne 21-48 under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C, idet der opsamles fraktioner

O

31 DK 172949 B1 på 25 ml, fås 2,69 g 26-(2-diethylamino-propyl)-sulfinyl--pristinamycin IIfi (isomer A2> i form af et gult pulver, som har de samme karakteristika som forbindelsen fremstillet i referenceeksempel 3.

5 26-(2-Diethylamino-propyl)-thio-pristinamycin ΙΙβ (isomer A) kan fremstilles ved at gå frem på samme måde som beskrevet i referenceeksempel 1, men gå ud fra 15 g pristinamycin IIA og 4,62 g 2-diethylamino-pro-panthiol. Efter rensning ved flashchromatografi (eluerings-10 middel: chloroform og methanol i volumenforholdet 90:10) og koncentrering til tørhed af fraktionerne 27-52 under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C, idet der opsamles fraktioner på 40 ml, fås 12 g af et gult fast stof, som omrøres i 60 ml ethylether, filtreres og derpå tørres.

15 Der fås 8,2 g 26-(2-diethylamino-propyl)-thio-pristinamycin Hg (isomer A) i form af et lysegult pulver, som smelter nær 122°C.

NMR-Spektrum: 1-1,15 (mt, -CH3 ethyl + CH^H-N (C^) 2) 20 1,70 (s, -CH3 i 33) CH0-CH, 2,35 til 2,60 (mt, -NC ^ ** ) ch2-ch3 2.50 til 3,10 (mt, -SCH2CH=) 25 2,75 (mt, -H4) 2,89 og 3,05 (2ddU ± 15) 2,92 og 3,08 (2ddj * 3,30 (mt) _H , 3,37 (mtj ^ 30 3,80 (s, ^CH2 i 17) 4'69 (d]-H27) 4,71 (dj 11 5,45 (d, -H13) 6'13 (d}-Hll) 35 6,14 (dj 6,4 til 6,60 (mt, >NH i 8) 6.51 (ddj 6,53 (ddj 3 o DK 172949 B1 32 8,09 (s, -H20).

Referenceeksempel 5

Der gås frem på samme måde som beskrevet i referen-5 ceeksempel 2, men gås ud fra 4,58 g 26-(l-diethylamino-2--propyl)-thio-pristinamycin ΙΙβ (isomer A), 1,29 g 98%'s metachlorperbenzoesyre og 1,14 g fast natriumhydrogencar-bonat. Efter rensning ved flashchromatografi (eluerings-middel: chloroform og methanol i volumenforholdet 97:3), 10 hvor der opsamles fraktioner på 20 ml, og koncentrering til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C af fraktionerne 59-77 hhv. fraktionerne 79-97 fås: ud fra fraktionerne 79-97 1,47 g 26-(l-diethylamino-2-propyl)--sulfinyl-pristinamycin ΙΙβ (første isomer) i form af et 15 lysegult fast stof, som smelter nær 132°C; NMR-Spektrum: 1,02 (t, -CH3 ethyl) 1,34 (d, CH^-CH-CH9N(C,H,)„) 1.72 (s, -CH3 i 33) 20 CH · 2,5-2,7 (mt, -CH--N<f 2 ) ch2- 2,77 (mt, -H4) 2,87 og 3,09 (2dd, ^CH2 i 15)

25 2,97 (mt, -g-CHO

O

3.72 (mt, -H26) 3,80 (s, >CH i 17) 4,92 (mt,· -H27) 30 5,43 (d, -H13) I 6,15 (d, -Hn) 6.72 (dd, ^NH i 8) 8,06 (s, -H20).

35 og ud fra fraktionerne 59-77 1,07 g 26-(l-diethylamino-2--propylj-sulfinyl-pristinaroycin ΙΙβ (anden isomer) i form af et lysegult fast stof, som smelter nær 128°C.

o DK 172949 B1 33 NMR-Spektrum: 1,72 (s, CH3 i 33) 3,4 (mt, “H2g) 3.79 (s, CH2 i 17) 5 4,74 (mt, -H27) 5,48 (d, -H13) 6,18 (d, -H11) 6.80 (mt, i 8) 8.09 (s, -H20).

io 26-(l-Diethylamino-2-propyl)-thio-pristinamycin 11^ (isomer A) kan fås ved at gå frem på samme måde som beskrevet i eksempel 1, men idet der gås ud fra 13 g pristi-namycin IIA og 4 g 1-diethylamino-2-propan-thiol. Efter rensning ved flashchromatografi (elueringsmiddel: chloro-15 form og methanol i volumenforholdet 90:10) og koncentrering til tørhed af fraktionerne 46-55 under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C, idet der opsamles fraktioner på 50 ml, fås 8 g af et bleggult fast stof, som krystalliseres i 30 ml acetonitril. Efter filtrering og tørring fås 5,91 20 g 26-(l-diethylamino-2-propyl)-thio-pristinamycin ΙΙβ (isomer A) i form af hvide krystaller, som smelter ved 136°C. NMR-Spektrum: 0,9-1,10 (mt, -N(CH2CH3)2) 1,33-1,37 (2d, C^-CH-CH^cT) 25 1,7 (s, -CH3 i 33) CH — 2,4-2,65 (mt, -CH0N^ 2 ch2- 2,76 (mt, -H4)

30 3 (mt, -S-CHO

2.9 og 3,1 (2dd,^CH2 i 15) 3,52 (mt, -H26) 3.81 (s, >CH2 i 17) 4,78 (mt, -H27) 35 5,46 (d, -H13) 6,14 (d, -Hu) 6,40 (mf,^NH i 8) 8.09 og 8,10 (2s, -H2Q).

DK 172949 B1 34 o _ l-Diethylamino-2-propan-thiol kan fremstilles ifølge metoden beskrevet af R.T. Wragg, J. Chem. Soc. (C), s.

2087 (1969) .

5 Referenceeksempel 6

Der gås frem på samme måde som beskrevet i referenceeksempel 2, men gås ud fra 1,7 g 26-[2-dimethylamino-2(R)--butyl]-thio-pristinamycin ΙΙβ (isomer A), 0,50 g natrium-hydrogencarbonat og 0,45 g 98%'s metachlorperbenzoesyre.

10 Efter rensning ved flashchromatografi (elueringsmiddel: ethylacetat og methanol i volumenforholdet 85:15) og koncentrering til tørhed af fraktionerne 35-58 under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C fås 1,1 g af et hvidt fast stof, som omrøres i 30 ml ethylether. Efter filtrering og 15 tørring fås 0,95 g 26-[2-dimethylamino-2(R)-butyl]-sulfi-nyl-pristinamycin ΙΙβ (isomer A2) i form af et hvidt fast stof, som smelter nær 126°C.

NMR-Spektrum: 1 (mt, >N-CH-CH2CH3) 20 1,45-1,75 (mt,^N-CH-CH2CH3) 1,78 (s, -CH3 i 33) 2,50-3,05 (mt, -S-CH2-CH^ og -H,)

O

2,93 og 3,14 (2dd,>CH2 i 15) 25 3,31 (mt, -H26) 3.84 (s,^:CH2 i 17) 4.84 (d, -H27) 5,51 (d, -H13) 6,19 (d, -Hi;l) 30 6,30 (dd,^NH i 8) 8,15 (s, -H20).

26- [2-Dimethylamino-2(R)-butyl]-thio-pristinamycin lig (isomer A) kan fås på samme måde som beskrevet i referenceeksempel 1, men idet der gås ud fra 8 g pristinamycin 35 og 2,3 g 2-dimethylamino-2 (R)-butanthiol. Efter rens ning ved flashchromatografi (elueringsmiddel: dichlorme-than og methanol i volumenforholdet 90:10) og koncentrering i j i

O

35 DK 172949 B1 til tørhed af fraktionerne 36-55 under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C fås 3 g 26-[2-dimethylamino-2(R)-butyl]--thio-pristinamycin ΙΙβ (isomer A) i form af et lysegult fast stof, som smelter nær 120°C.

5 Krystallisation af 0,9 g af denne forbindelse i 5 ml acetonitril giver efter fraskillelse ved filtrering 0,2 g 26-[2-dimethylamino-2(R)-butyl]-thio-pristinamycin lig (isomer A) i form af hvide krystaller, som smelter ved 122°C.

10 NMR-Spektrum: 1 (mt,>N-^H-CH2CH3) 1,4-1,7 (mt, >N-(j:H-CH2CH3) 1,72 (s, -CH3 i 33) 2,20 (s, -N(CH3)2) 15 2,5-2,85 (mt, -S-CH2~CH< og -H4) 2,93 og 3,10 {2dd,^CH2 i 15) 3,34 (bred d, -H2g) 3,83 (s,^CH2 i 17) 4,76 (bred s, -H^) 20 5,48 (d, -H13) 6,14 (d, -Hu) 6,26 (dd,>NH i 8) 8,13 (s, -H20).

2-Dimethylamino-(R)-butanthiolen kan fås på samme 25 måde som beskrevet nedenfor i referenceeksempel 7 ud fra 52,4 g triphenylphosphin, 40 ml diisopropylazodicarboxylat, 12 g 2-dimethylamino-(R)-butanol og 15,2 ml thioleddike-syre (i dette tilfælde hydrolyseres mellemstadie-thioesteren direkte, medens chromatografering på silicagel finder sted).

30 Efter rensning ved flashchromatografi (elueringsmid del: 1000 ml dichlormethan, derpå 2000 ml dichlormethan og methanol i volumenforholdet 85:15 og derpå 4000 ml dichlormethan og methanol i volumenforholdet 80:20), idet der opsamles fraktioner på 100 ml, og koncentrering til tørhed af 35 fraktionerne 42-60 fås 14 g af en gul olie, som renses ved destillation. Der fås således 2,4 g 2-dimethylamino-(R)--butanthiol i form af en farveløs væske. (Kp. (4 kPa) = 70-75°C).

O

36 DK 172949 B1 2-Dimethylamino-l (R) -butanol kanT ås 'på samme måde som beskrevet af M. Wenghoefer et al., J. Heterocycl. Chem., 7(6), s. 1407 (1970).

5 Referenceeksempel· 7 Når der gås frem på samme måde som beskrevet i referenceeksempel 2, men gås ud fra 2,67 g 26-[2-dimethyl-amino-3-phenyl-(2S)-propyl)-thio-pristinamycin ΙΙβ (isomer A), 0,7 g natriumhydrogencarbonat og 0,7 g 98%’s metachlor-10 perbenzoesyre, og efter rensning ved flashchromatografi (elueringsmiddel: chloroform og methanol i volumenforholdet 90:10), idet der opsamles fraktioner på 20 ml, og koncentrering til tørhed af fraktionerne 19-23 under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C fås 1,3 g af et lysegult 15 fast stof, som omrøres i 50 ml ethylether og fraskilles ved filtrering, hvorved fås 1,18 g 26-[2-dimethylamino--3-phenyl-(2S)-propyl]-sulfinyl-pristinamycin lig (isomer A2) i form af et lysegult fast stof, som smelter nær 150°C. NMR-Spektrum (400 MHz, CDCI3): 20 1,73 (s, -CH3 i 33) 2,4-2,6 (mt, \ _c_CH -c^H ) 2,8-3,15 (mtj £ CH2- 2,44 (s, -N(CH3)2) 2,77 (mt, -H4) 25 2,89 og 3,1 (2dd,^CH2 i 15) 3.18 (mt, -H26) 3,82 (s, >CH2 i 17) 30 4,68 (d, -h27) 5,51 (d, -H13) 6.19 (d, -Η1χ) 6,50 (dd, >NH i 8) 7,18 (d, -H i ortho-stilling af phenylgruppen) 35 7,23 (t, -H i para-stilling af phenylgruppen) 7,31 (t, -H i meta-stilling af phenylgruppen) 8,13 (s, -H20).

,1

O

37 DK 172949 B1

Der fås en vandig 1%'s opløsning af 26-[2-dimethyl-amino-3-phenyl-(2S)-propyl]-sulfinyl-pristinamycin ΙΙβ (isomer a2) med: forbindelse .......................... 30 mg 5 0,1N saltsyre ......................... 0,45 ml destilleret vand, op til .............. 3 ml 26-[2-Dimethylamino-3-phenyl-(2S)-propyl]-thio-pri-stinamycin ΙΙβ (isomer A) kan fremstilles ved at gå frem på samme måde som beskrevet i eksempel 1 til fremstilling 10 af udgangsmaterialet, men idet der gås ud fra 7,13 g pristinamycin IIA og 2,65 g 2-dimethylamino-3-phenyl-(S)--propanthiol. Efter rensning ved flashchromatografi (elue-ringsmiddel ethylacetat og methanol i volumenforholdet 80:20), hvor der opsamles fraktioner på 60 ml, og koncen-15 trering til tørhed af fraktionerne 33-43 under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C fås 4,6 g af et lysegult fast stof, som omrøres i 50 ml ethylether, filtreres og derpå tørres under formindsket tryk (90 Pa) ved 45°C. Der fås således 3,6 g 26-[2-dimethylamino-3-phenyl-(2S)-propan-20 -thio-pristlnamycin ΙΙβ (isomer A) i form af et bleggult pulver, som smelter nær 110°C.

NMR-Spektrums 1,69 (s, -CH3 i 33) 2,38 (s, -N(CH3)2)

25 H

2,35-3,05 (mt, -SCH_-C^ ) i 'CH2- /\ 2,73 (mt, -H4) 30 2,89 og 3,10 (2dd,>CH2 i 15) 3.26 (bred d, -H2g) 3,81 (s,^CH2 i 17) 4,68 (bred s, -H27) 5,47 (d, -H13) 35 6,12 (d, — 6.27 (mf,>NH i 8) 7,18 (d, -H i ortho-stilling af phenylgruppen) 7,21 (t, -H i para-stilling af phenylgruppen)

O

38 DK 172949 B1 7,30 (t, -H i meta-stilling af phenylgruppen) 8,11 (s, -H20).

2-Dimethylamino-3-phenyl-(S)-propanthiol kan fremstilles på den følgende måde: 5 Til 20 g 2-dimethylamino-3-phenyl-(S)-propanthiol- acetat~(råt) i opløsning i 50 ml methanol sættes under nitrogenatmosfære 0,2 g natriummethylat, og der opvarmes til tilbagesvaling i 2 timer. Blandingen koncentreres derpå til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C til dan-10 nelse af en væske, som renses ved destillation. Der fås 2,4 g 2-dimethylamino-3-phenyl-(S)-propanthiol i form af en farveløs væske (kp. (14 Pa) = 95°C), som anvendes som den er i den følgende reaktion.

2-Dimethylamino-3-phenyl-(S)-propanthiolacetat kan ; 15 fremstilles på den følgende måde:

Ved 0°C tilsættes under nitrogenatmosfære 41,97 g triphenylphosphin og 310 ml tetrahydrofuran, hvorpå der dråbevis tilsættes 31,5 ml diisopropylazodicarboxylat, og blandingen omrøres i 1/2 time ved 0°C. Til den dannede hvide 20 suspension sættes dråbevis en blanding af 15 g 2-dimethyl-amino-3-phenyl-(S)-propanol og 11,44 ml thioleddikesyre i opløsning i 160 ml tetrahydrofuran. Efter 1 times omrøring ved 0°C og derpå i 1 time og 30 minutter ved 25°C koncentreres blandingen til tørhed under formindsket tryk (2,7 25 kPa) ved 30°C. Til den dannede olie sættes 190 ml methanol, det hvide faste stof, som udfældes, fjernes ved filtrering, og filtratet koncentreres til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C. Remanensen omrøres derpå med 200 ml isopropylether, det hvide faste stof, som udfældes, 30 fjernes igen ved filtrering, og filtratet koncentreres, hvorved fås 45 g af en gul olie, som renses ved flashchro-matografi (elueringsmiddel: dichlormethan og methanol i I volumenforholdet 90:10), idet der opsamles fraktioner på 100 ml. Efter koncentrering til tørhed af fraktionerne 35 37-55 under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C fås 10,4 g 2-dimethylamino-3-phenyl-(S)-propanthiolacetat i form af en orange-gul olie (indeholdende triphenylphosphinoxid).

h5

O

39 DK 172949 B1 2-Dimethylamino-3-phenyl-(S)-propanol kan frem-stilles i analogi med metoden beskrevet af T. Hayashi et al., J. Org. Chem., 48, s. 2195 (1983).

5 Referenceeksempel 8-26

Idet der gås frem som beskrevet i referenceeksempel 2, fremstilles de følgende forbindelser: 10 Reference- R Isomer eksempel n 2) Smp.

8 -(ch,), n(c H_)_ 1 1) isomer A~

22252 2) ca. 172°C

1) isomer A2 70% isomer 15% 15 - . i isomer Βς- 7% 9 '( H2}2 n{CH3}2 isomer 8%

2) ca. 150°C

1) isomer A-

l0 -(ch2) n-c2h5 i 2) ca. 145°C

20 CH, ___ I — — -- " “ 1) isomer A2 45%

Π -(CH2)3 N(CH3)2 1 iJSSJ B2 III

2) ca. 165°C

1) isomer A, 60% 25 isomer a£ 25% fCH i 1 isomer Bi 15%

12 -<CV2"\_ 1 2 2) smp. 1750C

~ 1) isomer A2 75% isomer A? 5% 30 » -«“2>2-»Cn 1 SSSSim -1 2) ca. 1450c isomer A2 90% 1 isomer AT 10% 2

ca. 162°C

~ 1) Isomer A. 50% 35 » -<°yS"0 · 2, crs2Sa504 y—— n 1) isomer A2

16 -(CH^J^-N ! 1 2) ca. 170°C

“ * ___ DK 172949 B1 40

O

Reference- R 1)Isomer 5 eksempel _ n 2) Srnp._ π -<°V2-<~> 1 1) isomer A2 70% 18 HH c.Hq 1 isomer B1 15% 22 49 isomer B~ 15%

10 2) ca. 140°C

1) isomer A^ 85% . 19 HH <:Λ 1 2, 15% 1) Isomer B, 65% 15 20 -(ch2)2 nh c4hq 1 isomer B2 35% 2) ca. 140°c 1) isomer A~ 80% 2) ca. 128°c 21 -(ch2)2 nh c10h21 i 20 1) isomer A~ 50% isomer A^ 15% 22 -(ch,), nh c, h_ 1 1 isomer B. 20% 22 10 21 isomer B^ 15% 2) ca. 124°c -v. 1) isomer A~ 90% _1 2) ca. 166°3

Ol) isomer A_

1 2) ca. 126°C

__^______ 30 _ 1) isomer A-

25 -(CHJ-OCOH^ ^N-CH0 1 2) ca. 135°C

Z Z _y? J

---- - - ---- - - ----- -, . J-- - — 1) isomer A.

26 -(cH-J-Ocon'"’ ^n-ch, l 2) ca. 140°c z i* ^ 35 I_I_l_

O

41 DK 172949 B1

Referenceeksempel 27 Når der gås frem på samme måde som beskrevet i referenceeksempel 1, men gås ud fra 7,8 g 26-[l-methyl-2(S)--pyrrolidinyl]-methylthio-pristinamycin ΙΙβ (isomer A), 5 0,91 ml trifluoreddikesyre og 2,4 g metachlorperbenzoesyre, og efter rensning ved flashchromatografi (elueringsmiddel: chloroform og methanol i volumenforholdet 90:10), idet der opsamles fraktioner på 60 ml, og koncentrering til tørhed af fraktionerne 26-36 under formindsket tryk (2/7 kPa) ved io 30°C fås 2,3 g 26-[l-methyl-2(S)-pyrrolidinyl]-methylsulfi-nyl-pristinamycin ΙΙβ (Isomer A2) i form af et lysegult pulver, som smelter nær 140°C.

NMR-Spektrum: 1,76 (s, -CH3 i 33) 15 2, 48 (s,>NCH3) ~j — 1,70-2,60 (mt, -H29 og^CH, i 25 og ) < ch i t2 ca2—cb2

20 2,75-3,25 (mt, -S-CH2~CHO

O

3,82 (s, ^CH2 i 17) 4,81 (d, -H27) 5,52 (d, -H13) 25 6,20 (d, -H1;l) 6,42 (dd,^NH i 8) 8,14 (s, -H20).

Efter koncentrering til tørhed af fraktionerne 46-59 under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C fås 1,1 g 26-30 -[l-methyl-2(S)-pyrrolidinyl]-methylsulfinyl-pristinamycin lig (isomer A^) i form af et lysegult pulver, som smelter nær 148°C.

NMR-Spektrum: 1,73 (s, -CH3 i 33) 35

V

DK 172949 B1 42 o 1.70- 2,50 (mt, Nv -H,q f >

CH0-CH

u L

5 2.41 (s,^:N-CH3) 2,65-3,25 (mt, CH2 1 15, -H i 4, -S-CH2-CH<>

O

3.82 (AB-grænse,^-CH2 1 17) 10 5,45 (d, -H13) 6,17 (d, -Ηιχ) 8.11 (s, -H20).

26-(l-Methyl-2-pyrrolidinyl)-methylthio-pristinamycin lig kan fremstilles på den følgende måde: 15 Når der gås frem på samme måde som beskrevet i eksem pel 1 i europæisk patentansøgning nr. 135.410, men gås ud fra 10,5 g pristinamycin IIA og 3,14 g [l-methyl-2(S)-pyrroli-dinyl]-methanthiol, og efter rensning ved flashchromatogra-fi (elueringsmiddel: chloroform og methanol i volumenfor-20 holdet 90:10) og koncentrering til tørhed af fraktionerne 20-35 under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C fås 7,8 g af isomer A i form af et gult pulver, som smelter ved ca.

120°C.

NMR-Spektrum: 25 1,70 (s, -CH3 i 33) 2,38 (s, ^N-CH3) 1.70- 2,50 (mt, -H29, CH2 i 25 og i ) / CH, I I 2 30 CH2-CH2 2,6-3,20 (mt, -S-CH2-CHC) 3.82 (s,^CH2 i 17) 4,73 (d, -H27) 5,45 (d, -H13) 35 6,15 (d, -H^) 6.41 (dd,^NH i 8) 8.11 (s, -H20).

9

O

43 DK 172949 B1

Til 25 g råt S-[l-methyl-2(S)-pyrrolidinyl-methyl]--isothiouronium-dihydrochiorld 1 opløsning i 100 ml destilleret vand sættes 100 ml vandig 4N natriumhydroxidopløsning, hvorpå blandingen omrøres ved 90°C under nitrogenatmosfære 5 12 timer. Reaktionsblandingen afkøles til 0°C, der til sættes 25 ml 12N saltsyre, og derpå ekstraheres der med 2 x 200 ml methylenchlorid. Den organiske fase tørres over natriumsulfat, filtreres og koncentreres derpå til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C. Der fås således 10 5,9 g [l-methyl-2(S)-pyrrolidinyl]-methanthiol i form af en lysegul olie, som anvendes i den følgende reaktion uden yderligere rensning.

Rf = 0,15, chromatografi på silicagelplade, eluerings-middel: chloroform-methanol (i volumenforholdet 90;10) .

15 Til 11,9 g [l-methyl-2(S)-pyrrolidinyl]-chlormethan- -hydrochlorid i opløsning i 50 ml ethanol sættes 10,7 g thiourinstof, hvorpå der omrøres ved tilbagesvaling i 48 timer. Blandingen koncentreres til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 40°C. Remanensen optages med 100 ml varm 20 ethanol, hvorpå der filtreres gennem aktivt kul. Efter koncentrering til tørhed af filtratet under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 40°C fås 25 g af en lysegul olie, som består af S-[l-methyl-2(S)-pyrrolidinyl-methyl]-isothiouronium-di-hydrochlorid og overskydende thiourinstof.

25 Rf = 0,1, chromatografi på silicagelplade, eluerings- middel: chloroform-methanol (i volumenforholdet 90:10).

[l-Methyl-2(S)-pyrrolidinyl]-chlormethan-hydrochlorid kan fremstilles ifølge metoden beskrevet af T. Hayashi et al., J. Org. Chem. , _48, s. 2195 (1983).

30

Referenceeksempel 28 Når der gås frem på samme måde som beskrevet i referenceeksempel 1, men gås ud fra 2,6 g 26-(l-methyl-4-pipe-ridinyl)-thio-pristinamycin ΙΙβ, 0,3 ml trifluoreddikesyre 35 og 0,8 g metachlorperbenzoesyre, og efter rensning ved flash-chromatografi (elueringsmiddel: chloroform-methanol i volumenforholdet 90:10), hvor der opsamles fraktioner på 40 ml, i

O

44 DK 172949 B1 og koncentrering til tørhed af fraktionerne 20-35 under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C fås 0,33 g 26-(l-me-thyl-4-piperidinyl)-sulfinyl-pristinamycin ΙΙ„ (isomer A2) i form af et gult pulver, som smelter nar 170°C.

5 NMR-Spektrum: 1,76 (s, -CH3 i 33) yCH2-CH2^ 2,2-3,00 (mt, -CH B- ) 10 2,32 (s,^N-CH3) 3,82 (s, CH2 i 17) 4,85 (d, -H27) 15 5,50 (d, -H13) 6,19 (d, -Hn) 6,37 (dd,>NH i 8) 8,15 (s, -H20).

26-(l-Methyl-4-piperidinyl)-thio-pristinamycin lig 20 han fremstilles på den følgende måde: Når der gås frem på samme måde som beskrevet i eksempel 1 i europæisk patentskrift nr. 135.410, men gås ud fra 3,15 g pristinamycin IIA og 1,6 g l-methyl-4-piperidin-thiol, hvorpå 0,6 g triethylamin sættes til reaktionsblan-25 dingen, og efter rensning ved flashchromatografi (eluerings-middel: methylenchlorid og methanol i volumenforholdet 92:8) og koncentrering til tørhed af fraktionerne 4-20 under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C fås 0,9 g 26-(1-methyl--4-piperidinyl)-thio-pristinamycin ΙΙβ i form af et gult 30 pulver, som smelter nær 180°C.

NMR-Spektrum:

CH

2,10 (m, 4H : -S_/ ~2 ) %-^ 35 2,25 (s, 3H : nn-CH i \_/ "3

CH

DK 172949 B1 45

O

2,80 (m, 4H : -S-/"” "2vN- ) V_ch2^ 3,55 (m, IH : H26) 5 4,62 (m, IH : -H27) 7,70 (m, IH s -Hg) 8,10 (s, IH : -H20) l-Methyl-4-piperidinthiol kan fremstilles ved metoden beskrevet af H. Barrer og R.E. Lyle, J, Org. Chem., 10 27, s. 641 (1962).

Referenceeksempel 29

Til 7,8 g 26-(2-diethylamino-ethyl)-thio-pristinamycin lig i opløsning i 60 ml methanol sættes ved 0°C under nitro-15 genatmosfære 0,92 ml trifluoreddikesyre. Efter 15 minutter ved 0°C forhøjes temperaturen til 15°C, hvorpå der tilsættes 1,37 g selendioxid. Når alt selendioxidet er opløst tilsættes langsomt ved en temperatur på under 25°C 7 ml af en vandig 30%'s hydrogenperoxidopløsning. Efter 1 times omrøring ved 20 25°C afkøles reaktionsblandingen til 10°C, der tilsættes 50 ml mættet vandig natriumhydrogencarbonatopløsning, hvorpå der ekstraheres med 4 x 50 ml methylenchlorid. De organiske faser forenes, tørres over magnesiumsulfat, filtreres og koncentreres derpå til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 25 30°C. Det dannede gule faste stof renses ved flashchromato- grafi (elueringsmiddel: chloroform og methanol i volumenforholdet 90:10), hvor der opsamles fraktioner på 40 ml. Efter koncentrering til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C af fraktion 31-38 fås et gult fast stof, som renses 30 ved flashchromatografi (elueringsmiddel: ethylacetat-methanol i volumenforholdet 80:20), idet der opsamles fraktioner på 40 ml. Efter koncentrering til tørhed under formindsket tryk af fraktionerne 27-33 fås et hvidt fast stof, som omrøres i 50 ml ethylether, fraskilles ved filtrering og derpå tørres 35 under formindsket tryk (90 Pa) ved 30°C. Der fås således 0,5 g 26-(2-diethylamino-ethyl)-sulfonyl-pristinamycin ΙΙβ (isomer A) i form af et hvidt fast stof, som smelter nær 150°C.

NMR-Spektrum: 0,97 (d, -CHj i 30 og 31 og -CH^ af ethyl) 1,75 (s, -CH3 i 33)

O

46 DK 172949 B1

Ch2" 2,62 (q, -N^ * ) \ch2- 3,00-3,40 (rat, -S02CH2CH2N <) 5 3,82 (s,^:CH2 i 17) 5,34 (d, -H13) 5,43 (d, -H13) 6,16 (d, ~H1;l) 6,54 (dd,>NH 1 8) 10 8,10 (s, —H2q)·

Referenceeksempel 30

Der gås frem på samme måde som beskrevet i referenceeksempel 29, men gås ud fra 6,86 g 26-(2-diisopropyl-15 amino-ethyl)-thio-pristinamycin ΙΙβ (isomer A), 0,77 ml trifluoreddikesyre, 1,15 g selendioxid og 6,33 ml af en vandig 30%'s hydrogenperoxidopløsning. Efter rensning ved flashchromatografi (elueringsmiddel: ethylacetat og methanol i volumenforholdet 80:20), hvor der opsamles fraktioner 20 på 40 ml, og koncentrering til tørhed af fraktionerne 28-31 under formindsket tryk fås 0,7 g af et gult fast stof, som igen renses ved flashchromatografi (elueringsmiddel: ethylacetat og methanol i volumenforholdet 85:15), hvor der opsamles fraktioner på 30 ml. Efter koncentrering til tør-25 hed af fraktionerne 26-33 fås et gult fast stof, som omrøres i 30 ml ethylether, fraskilles ved filtrering og derpå tørres under formindsket tryk (90 Pa) ved 30°C. Der fås 0,6 g 26-(2-diisopropylamino-ethyl)-sulfonyl-pristina-mycin ΙΙβ (isomer A) i form af et lysegult fast stof, som 30 smelter nær 140°C, NMR-Spektrum: 1,06 (d, -CH3 isopropyl) 1,75 (s, -CH3 i 33) 2,79 (mt, -H4) 35 2,92 og 3,10 (2dd,^CH2 i 15) 2,7-3,30 (mt, -S-CH-CH-N(CHC )0) 0 o 3,52 (bred d, -H^)

O

47 DK 172949 B1 3,82 (s,pCH2 i 17) 5,27 (fin d, -H2?) 5,47 (d, -H13) 6,17 (d, -H-q) 5 6,42 (mt,^NH i 8) 8,12 (s, -H20).

Den foreliggende opfindelse angår ligeledes lægemidler bestående af en forbindelse med den almene formel i i fri form eller i form af farmaceutisk acceptabelt syre-10 additionssalt, i ren form eller i forening med pristinamycin IIA eller fortrinsvis med et opløseligt derivat af pristinamycin lig med den almene formel VII, idet præparatet desuden kan indeholde ethvert andet farmaceutisk acceptabelt produkt, som kan være indifferent eller fysiologisk aktivt.

15 Lægemidlerne Ifølge opfindelsen kan anvendes parenteralt, oralt, rectalt eller topisk.

De sterile præparater til parenteral indgivelse kan fortrinsvis være vandige eller ikke-vandige opløsninger, suspensioner eller emulsioner. Som opløsningsmiddel eller 20 bæremateriale kan der anvendes vand, propylenglycol, poly-ethylenglycol, vegetabilske olier, især olivenolie, inji-cerbare organiske estere, f.eks. ethyloleat, eller andre passende organiske opløsningsmidler. Disse præparater kan ligeledes indeholde hjælpestoffer, især blødgøringsmidler, 25 isotoniserende opløsninger, emulgeringsmidler, dispergerings-midler og stabiliseringsmidler. Steriliseringen kan ske på flere måder, f.eks. ved aseptisk filtrering, ved inkorporering i præparatet af steriliserende midler, ved bestråling eller ved opvarmning. De kan ligeledes fremstilles i form 30 af sterile faste præparater, som kan opløses på anvendelsestidspunktet i et injicerbart sterilt medium.

Præparaterne til rectal indgivelse er stikpiller eller rectalkapsler, som foruden den aktive forbindelse indeholder excipienser, såsom kakaosmør, semisyntetiske gly-35 cerider eller polyethylenglycoler.

Som faste præparater til oral indgivelse kan der anvendes tabletter, piller, pulvere eller granulater. I

DK 172949 B1 48 o disse præparater er den aktive forbindelse ifølge opfindelsen {eventuelt i forening med et andet farmaceutisk foreneligt produkt) blandet med ét eller flere indifferente fortyndingsmidler eller hjælpestoffer, såsom saccharose, 5 lactose eller stivelse'. Disse præparater kan ligeledes omfatte andre stoffer end fortyndingsmidler, f.eks. et smøremiddel, såsom magnesiumstearat.

Som flydende præparater til oral indgivelse kan der anvendes farmaceutisk acceptable emulsioner, opløsninger, 10 suspensioner, sirupper og eliksirer.indeholdende indifferente fortyndingsmidler, såsom vand eller paraffinolie. Disse præparater kan ligeledes omfatte andre stoffer end fortyndingsmidler, f.eks. blødgøringsmidler, sødemidler eller aromastoffer.

15 Præparaterne til topisk indgivelse kan f.eks. være cremer, pomader, lotioner, øjenvand, mundvand, næsedråber eller aerosoler.

Inden for humanterapien er forbindelserne ifølge opfindelsen særligt anvendelige ved behandling af infektioner 20 af bakteriel oprindelse. Doserne afhænger af den ønskede virkning og af behandlingens varighed. For en voksen ligger de sædvanligvis på mellem 2000 og 4000 mg pr. dag ved parenteral indgivelse, især ved intravenøs indgivelse med langsom perfusion.

25 Lægen vil på sædvanlig måde bestemme hvilken dosis, der er den mest hensigtsmæssige i forhold til alder, vægt og alle de andre faktorer, som er særegne for patienten, som skal behandles.

De følgende ikke-begrænsende eksempler illustrerer 30 præparaterne ifølge opfindelsen.

35

O

49 DK 172949 B1

Eksempel A

Der fremstilles ifølge den sædvanlige teknik en injicerbar opløsning til perfusion, der indeholder 5 g/liter aktiv forbindelse og har den følgende sammensætning: 5 5S-[3(S)-quinuclidinyl]-thiomethyl-pristinamycin IA . 5 g 0,IN saltsyre ...................................... 49 ml destilleret vand, op til ........................... 1000 ml

Eksempel B

10 Der fremstilles ifølge den sædvanlige teknik en injicerbar opløsning til perfusion, der indeholder 1 g/liter aktiv blanding og har den følgende sammensætning: 55-[3 (S)-quinuclidinyl]-thiomethyl-pristinamycin IA- 0,4 g 26-(2-diethylamino-ethyl)-sulfonyl-pristinamycin 11^, ,5 isomer A........................................... 0,6 g 0, IN saltsyre...................................... 12,6 ml destilleret vand, op til ........................... 1000 ml

Eksempel C

2o Der fremstilles ifølge den sædvanlige teknik en injicerbar opløsning til perfusion, der indeholder 1 g/liter aktiv blanding og har den følgende sammensætning: 55-[3(R)-quinuclidinyl]-thiomethyl-pristinamycin IA· 0,4 g 26- (2-diisopropylamino-ethyl)-sulfonyl-pristinamycin 25 lig, isomer A ...................................... 0,6 g 0,IN saltsyre ...................................... 12,3 ml destilleret vand, op til ........................... 1000 ml

Eksempel D

30 Der fremstilles ifølge den sædvanlige teknik en injicerbar opløsning til perfusion indeholdende 1 g/liter aktiv blanding og har den følgende sammensætning: 55-(3-quinuclidinyl)-thiomethyl-pristinamycin IA ... 0,4 g 26-(2-diethylamino-propy1)-sulfiny1-pristinamycin 35 IIB, isomer A ...................................... 0,6 g 0 , IN saltsyre ...................................... 12,7 ml destilleret vand, op til ........................... 1000 ml

Claims (4)

1. Synergistinderivat, kendetegnet ved, at det har den almene formel °ΓΤΥ'νΜ (I)

10 O U 15 hvori Y betyder et hydrogenatom eller en dimethylamino-gruppe, og R betyder en 3- eller 4-quinuclidinyl-gruppe, i dets isomere former eller blandinger deraf samt farmaceutisk acceptable salte deraf. 2. 55"- [3 (S)-Quinuclidinyl] -thiomethyl-pristinamycin 20 lA samt farmaceutisk acceptable salte deraf. 3. 55-- [3 (R) -Quinuclidinyl] -thiomethyl-pristinamycin 1^ samt farmaceutisk acceptable salte deraf. 4. 5F-[3(S)-Quinuclidinyl]-thiomethyl-virginiamycin S samt farmaceutisk acceptable salte deraf. 25 5. 5J-[3(R)-Quinuclidinyl]-thiomethyl-virginiamycin S samt farmaceutisk acceptable salte deraf.

6. Fremgangsmåde til fremstilling af en forbindelse ifølge krav 1, kendetegnet ved, at en thiol med den almene formel 30 R-SH UD hvori R har den i krav 1 anførte betydning, omsættes med en forbindelse med den almene formel 35 « j O 51 DK 172949 B1 07^X\CC :ώ ό° KJ hvori Y har den i krav 1 angivne betydning, hvorpå forbindelsen isoleres, dens isomere eventuelt adskilles, og forbindelsen eventuelt omdannes til et farmaceutisk accep-15 tabelt salt.

7. Farmaceutisk præparat, kendetegnet ved, at det indeholder mindst ét derivat ifølge krav 1 i ren form eller i forening med ét eller flere forenelige og farmaceutisk acceptable fortyndingsmidler eller hjælpestoffer 20 og/eller i forening med pristinamycin XIA eller et opløseligt derivat af pristinamycin ΙΙβ med den almene formel •ν/ϊ—XC 30 hvori betyder 1. en alkylthio-gruppe med 1-5 carbonatomer substitueret med i) én eller to alkylamino- eller dialkylamino-grupper, hvor 35 alkyldelene, som Indeholder 1-5 carbonatomer, sammen med nitrogenatomet, hvortil de er knyttet, eventuelt kan danne en mættet heterocyclisk gruppe valgt blandt 1-pyrrolidinyl, 52 DK 172949 B1 O piperidino, 1-azetidinyl, 1-azepinyl, morpholino, thiomor-pholino og 1-piperazinyl (eventuelt substitueret med en alkylgruppe med 1-5 carbonatomer) eller ii) en 2- eller 3-pyrrolidinyl-gruppe, 2-, 3- eller 4-5 -piperidyl-gruppe, 2- eller 3-azetidinyl-gruppe eller 2-, 3-eller 4-azepinyl-gruppe, 2. en gruppe med den almene formel Het-S- 10 hvori Het betyder en 3-pyrrolidinyl-gruppe, 3- eller 4--piperidyl-gruppe, 3-azetidinyl-gruppe eller 3- eller 4--azepinylgruppe, som eventuelt er substitueret med en alkylgruppe med 1-5 carbonatomer, 15 3) en dialkylaminogruppe, hvor alkyldelene sammen med nitro genatomet, hvortil de er knyttet, eventuelt kan danne en mættet heterocyclisk gruppe valgt blandt 1-pyrrolidinyl, piperidino, 1-azetidinyl, 1-azepinyl, morpholino, thiomor-pholino og 1-piperazinyl (eventuelt substitueret med en 20 alkylgruppe med 1-5 carbonatomer), 4. en gruppe med den almene formel R~ - S - <«n 25 hvori 1*2 betyder en nitrogenholdig heterocyclylgruppe med 4-7 ringled, der eventuelt indeholder 1 eller flere andre heteroatomer valgt blandt nitrogen, oxygen eller svovl i form af sulfoxid eller sulfon, og eventuelt er substitueret med en alkyl-30 gruppe, eller en alkylkæde med 2-4 carbonatomer, som er substitueret med 1 eller 2 grupper valgt blandt phenyl, cycloalkylamino eller N-alkyl-N-cycloalkyl-amino med 3-6 ringled, alkylamino, dialkylamino eller dialkylcarbamoyloxy (idet alkyldelene af 35 disse to sidstnævnte grupper sammen med nitrogenatomet, hvortil de er knyttet, eventuelt kan danne en mættet eller umættet heterocyclisk gruppe med 4-7 ringled, som eventuelt -a . a DK 172949 B1 53 o indeholder et andet heteroatom valgt blandt nitrogen, oxygen eller svovl i form af sulfoxid eller sulfon, og eventuelt er substitueret med en alkylgruppe), eller er substitueret med én eller flere nitrogenholdige heterocycliske 5 grupper med 4-7 ringled, som eventuelt indeholder 1 eller 2 andre heteroatomer valgt blandt nitrogen, oxygen eller svovl i form af sulfoxid eller sulfon, og eventuelt er substitueret med en alkylgruppe, idet de nævnte heterocycliske grupper er knyttet til kæden, der bærer dem, 10 via et carbonatom, med den forudsætning, at mindst én af substituenterne båret af den ovennævnte alkylkæde er en nitrogenholdig substituent, som kan danne salte, eller en [l-methyl-2(S)-pyrrolidinyl]-methyl-gruppe, og n er lig med 1 eller 2, 15 og idet de ovennævnte alkylgrupper er ligekædede eller forgrenede og, medmindre andet er anført, indeholder 1-10 carbonatomer, i påkommende tilfælde i form af en af dets isomere eller blandinger deraf og eventuelt i form af syreadditionssalt. 20 25 30 35