KR950001020B1

KR950001020B1 - 시네르지스틴 및 그 염의 제조방법

Info

Publication number: KR950001020B1
Application number: KR1019870005111A
Authority: KR
Inventors: 바리에르 쟝-끌로오드; 꼬트레 끌로오드; 파리 쟝-마르끄
Original assignee: 로오느-푸우랜크 상뜨; 로베르 고몽
Priority date: 1986-05-22
Filing date: 1987-05-21
Publication date: 1995-02-07
Also published as: IL82564A; DK172949B1; IE871317L; MX9203577A; PT84934B; DE10075012I2; US4798827A; EP0248703B1; DK258587A; GEP19960474B; LU90732I2; PT84934A; JP2558282B2; NZ220380A; FR2599036B1; IL82564A0; IE60656B1; AU601426B2; FI84355B; JP2659531B2

Abstract

내용 없음.

Description

시네르지스틴 및 그 염의 제조방법

본 발명은 시네르지스틴 유도체, 이들의 제조 및 이들을 포함하는 제약학적 조성물에 관한 것이다.

유럽 특허 출원 EP 133,097에는 용해성의 이점을 갖는 58-위치에 치환된 시네르지스틴 유도체가 기술되어 있다.

프리스티나마이신 및 버기니아마이신은 공지 화합물이다 : J. 프러이드 홈메 일행, Bull. Soc. Chim Fr. 2, 585-91(1968).

본 발명은 하기 식(Ⅰ)의 신규한 시네르지스틴 유도체 및 그들의 염을 제공한다 :

상기 식에서, Y는 수소 또는 디메틸아미노이고 R은 3- 또는 4- 퀴누클리디닐이다. 식(Ⅰ)의 화합물들은 이성체 형태로 존재하고 이 이성체들 및 그 혼합물은 본 발명의 범위내이다.

본 발명의 특징에 따라, Y와 R이 상기 정의한 바와 같은 식(Ⅰ)의 화합물들은 하기 식(Ⅱ)의 티올을 하기 식(Ⅲ)의 화합물과 반응시킴으로써 제조된다.

R-SH (Ⅱ)

상기 식에서, R은 상기 정의한 바와 같다.

상기 식에서 Y는 상기 정의한 바와 같다.

반응은 일반적으로 알코올(예를들면 메탄올), 케톤(예를들면, 아세톤) 또는 염소화된 용매(예를들면, 클로로포름)와 같은 유기 용매, 또는 그러한 용매들의 혼합물내에서 -78℃와 반응 혼합물의 환류온도 사이의 온도, 바람직하게는 약 20℃에서 수행한다.

기호 R이 3-퀴누클리디닐일 때, (R) 또는 (S) 배위를 갖는 식(Ⅱ)의 티올은 상응 배위를 갖는 식(Ⅰ)의 시네르지스틴 유도체를 유도한다는 것을 알아야 한다.

R이 3-퀴누클리디닐인 식(Ⅱ)의 티올은, 분자의 다른 부분에 영향을 미치지 않고 티올 에스테르로부터 티올을 얻는 임의의 공지 방법에 의해 하기 식(Ⅳ)의 티올 에스테르로부터 얻을 수 있다.

R-S-COR' (Ⅳ)

상기 식에서, R은 상기 정의한 바와 같고 R'은 탄소수 1-4의 알킬, 바람직하게는 메틸이다. 반응은 구체적으로 20℃ 내지 반응 매체의 환류 온도 사이의 온도에서 수산화나트륨 또는 소디움 메틸레이트 존재하에서, 알카리성 매체, 예를들면 메탄올과 같은 알코올내에서 가알코올 분해에 의해 수행될 수 있다.

식(Ⅳ)의 티올 에스테르는 R. P. Volante, Tet.Let. 22(33), 3119(1981)에 기술된 방법과 유사하게, 하기 식(Ⅴ)의 알코올과 하기 식(Ⅳ)의 티오카르복실산으로 출발하여 트리페닐포스핀 및 디알킬아조디카르복실레이트의 혼합물, 예를들면 디이소프로필 아조디카르복실레이트로 처리하여 제조할 수 있다.

R-OH (Ⅴ)

R'-CO-SH (Ⅵ)

상기 식들에서, R 및 R'는 상기 정의한 바와 같다. 반응은 상기에 기술된 것들을 참고로 유사한 조건하에서 수행한다.

(R) 또는 (S)형의 식(Ⅴ)의 알코올은 각각 (S) 또는 (R) 배위의 일반식(Ⅳ)의 티올에스테르를 유도한다.

(R) 또는 (S)형의 일반식(Ⅴ)의 알코올은 B. RINGDAHL 등의 Acta. Pharm. Suec. 16, 281(1979)에 기술된 방법에 따라 제조될 수 있다.

R이 4-퀴누클리디닐 라디칼인 일반식(Ⅱ)의 티올은 A. Grob. Helv. Chim. Acta, 57, 2339(1974)에 기술된 방법에 의해 얻을 수 있다.

식(Ⅲ)의 생성물은 유럽 특허 출원 제 133,098 호(USP 4617377)에 기술된 바와 같이 제조될 수 있다.

식(Ⅰ)의 생성물이 이성체들의 혼합물 형태를 취할 때, 예를들면 고성능 액체 크로마토그라피에 의해 분자에 역효과를 주지 않는 임의의 공지 방법으로 후자를 분리하는 것이 가능하다.

식(Ⅰ)의 생성물은 결정화, 크로마토그래피 또는 산성 및 염기성 매체내에서의 계속적인 추출과 같은 관례적인 공지방법에 의해 정제될 수 있다. 이 기술분야에 알려져 있는 바와 같이, 시네르지스틴은 알카리성 매체에 민감하기 때문에, 본 내용에서 사용된 "염기성 매체"라는 용어는 그 산부가염으로부터 모 물질을 방출하기에만 충분하게 알카리성인 매체, 즉 pH가 7.5-8를 넘지않는 매체를 의미한다.

식(Ⅰ)의 생성물은, 알코올, 케톤, 에스테르 또는 염소화 용매와 같은 유기 용매내에서 산의 작용에 의해 산부가염으로 전환될 수 있다. 염은 적당하게 그 용액을 농축시킨 후 침전된다. 이것은 여과하거나 기우려 따름으로써 분리할 수 있다. 산부가염들은 또한 관련 산의 수성용액을 식(Ⅰ)의 생성물에 첨가함으로써 수성용액으로 얻을 수 있다.

발효에 의해 얻어진 시네르지스틴은 그람-양성 세균(예를들면, 스타필로코커스(staphylococcus), 스트렙토코커스(Streptococcus), 뉴모코커스(Pneumococcus) 또는 엔테로코커스(Enterococcus)) 및 그람-음성세균(예를들면, 해모필러스(Haemophilus), 고노코커스(Gonococcus) 또는 메닌고코커스(Meningococcus))에 의해 야기된 여러 상태들의 치료를 위한 의학분야에 있어 수요가 크다. 그러나 그러한 시네르지스틴은 수성 매체에 불용성이라는 단점을 가지며 따라서 이들은 단지 경구적으로, 일반적으로 젤라틴 캡슐, 당의정, 또는 정제의 형태로 투여될 수 있다. 이 불용성의 결과로, 환자가 삼킬 수 없을때는 공지의 시네르지스틴을 사용하는 것은 불가능하다. 이는 특히 소아과 및 인공소생술의 경우이고 반면에 시네르지스틴의 활성 스펙트럼은 그들이 여러 경우, 예를들면 혼수 폐혈증의 경우에 매우 가치있는 약제로 표시된다.

본 발명에 따른 신규한 생성물은 그들의 염으로서 치료학적으로 유용한 투여량에서 물에 용해되는 상당한 장점을 갖는 한편 시네르지스틴의 일반적 활성 스펙트럼을 보존한다. 이들은 특히 시험관내 1-125㎍/㎖의 농도 및 생쥐에 피하주사된 생체내 5-50 ㎎/㎏의 투여량으로 스타필로코커스 아우레우스 스미스(Staphylococcus aureus smith)에 대해 활성적이다.

부가적으로, 이들은 그들의 저독성면에서 특히 가치있다. 그들의 LD50은 일반적으로 피하주사된 생쥐에서 150㎎/㎏보다 크다.

본 발명에 따른 생성물은 첨가적으로 하기 식(Ⅶ)의 프리스티나마이신 Ⅱ_B의 용해성 유도체 또는 프리스티나마이신 Ⅱ_A와 조합하여 사용될 때 상승적 현상을 나타낸다.

상기 식에서, R₁은 1) ⅰ) 그 알킬 부분들이 각각 탄소수 1-5를 포함하고, 이들이 부착된 질소원자와 함께, 1-피롤리디닐, 피페리디노, 1-아제티디닐, 1-아제피닐, 모르폴리노, 티오모르폴리노 및 1-피페라지닐(탄소수 1-5의 알킬에 의해 임의적으로 치환됨)로부터 선택된 포화된 헤테로시클릭계를 임의적으로 형성할 수 있는 하나 또는 둘의 알킬아미노 또는 디알킬아미노 라디칼 ; 또는 대신에 ⅱ) 2- 또는 3-피롤리디닐, 2-, 3- 또는 4-피페리딜, 2- 또는 3- 아제티디닐 또는 2-, 3- 또는 4-아제피닐 라디칼로 치환된 탄소수 1-5의 알킬디오 라디칼, 2) 하기 식(Ⅷ)의 라디칼

Het-S- (Ⅷ)

상기 식에서, Het는 탄소수 1-5의 알킬에 의해 임의적으로 치환된, 3-피롤리디닐, 3- 또는 4-피페리딜, 3-아제티디닐 또는 3- 또는 4-아제피닐 라디칼이다 ; 3) 알킬 부분들이 탄소수 1-5를 포함하고, 그들이 부착된 질소원자와 함께, 1-피롤리디닐, 피페리디노, 1-아제티디닐, 1-아제피닐, 모르폴리노, 티오모르폴리노 및 1-피페라지닐(탄소수 1-5의 알킬에 의해 임의로 치환됨)로부터 선택된 포화된 헤테로시클릭계를 임의로 형성할 수 있는 디알킬아미노 라디칼 ; 또는 4) 하기 일반식(Ⅸ)의 라디칼,

R₂-S-(O)n (Ⅸ)

상기 식에서 R₂는 ⅰ) 설폭사이드 또는 설폰 상태의, 황, 산소 및 질소로부터 선택된 하나 또는 그 이상의 다른 이종 원자를 임의로 함유하고, 알킬에 의해 임의로 치환되는 4- 내지 7- 각 질소-함유 헤테로시클릭 라디칼 ; 이나 ⅱ) 탄소수 2-4를 포함하고, 페닐, 시클로알킬아미노 및 3-6의 고리원자를 포함하는 N-알킬-N-시클로알킬아미노, 알킬아미노, 디알킬아미노 또는 디알킬카르바모일옥시(마지막 두 라디칼의 알킬 부분들은, 그들이 부착된 질소원자와 함께, 설폭사이드 또는 설폰 상태의 황, 산소 및 질소로부터 선택된 다른 이종원자를 임의로 포함하는 4- 내지 7- 각 포화 또는 불포화 헤테로시클릭계를 임의로 형성할 수 있고 알킬에 의해 임의로 치환될 수 있다)로부터 선택된 하나 또는 두 라디칼에 의해 치환되거나 또는 설폭사이드 또는 설폰 상태의 황, 산소 및 질소로부터 선택된 하나 또는 두개의 다른 이종원자들을 임의로 포함하는 하나 또는 그 이상의 4- 내지 7- 각 질소-함유 헤테로시클릭 라디칼(이 이 헤테로시클릭 라디칼은 알킬에 의해 임의로 치환되고 상기 헤테로시클릭 라디칼은 탄소원자를 통해 이들을 함유하는 사슬에 부착된다)로 치환된 알킬 사슬이되, 단 상기 알킬 사슬에 함유된 치환체들중 적어도 하나는 염을 형성할 수 있는 질소- 함유 치환체이거나 ((S)-1-메틸-2-피롤리디닐)메틸 라디칼이고 ; n은 1 또는 2이고, 상기한 알킬 라디칼들은 직쇄 또는 측쇄이고 다른 언급이 없는 한 각각 탄소수 1-10을 포함한다.

일반식(Ⅶ)의 프리스티나마이신 Ⅱ_B유도체들은 이성체 형태로 존재할 수 있다. 이 이성체 형태 및 그 혼합물은 식(Ⅰ)의 생성물들과 이롭게 조합될 수 있다.

식(Ⅶ), 4) 부분에서 : -R₂가 헤테로시클릭 라디칼일 때, 이 라디칼은 예를들면 3-아제티디닐, 3-피롤리디닐, 3- 또는 4-피페리딜 또는 3- 또는 4-아제피닐일 수 있고 ; -R₂가 헤테로시클릭 치환제를 함유하는 알킬 라디칼일때, 헤테로시클릭 라디칼은 예를들면 상기한 라디칼 중 하나 또는 2-아제티디닐, 2-피롤리디닐, 2-피페리딜, 2-아제피닐, 피페라지닐, 4-알킬피페라지닐, 퀴놀릴, 이소퀴놀릴 또는 이미다졸릴일 수 있고 ; -R₂가 알킬 부분들이 그들이 부착된 질소 원자와 함께 헤테로시클릭계를 형성하는 디알킬아미노 또는 디알킬카르바모일옥시 라디칼을 포함할 때, 헤테로시클릭 라디칼은 예를들면, 1-아제티디닐, 1-피롤리디닐, 피페리디노, 1-아제피닐, 모르폴리노, 설폭사이드 또는 설폰상태의 티오모르폴리노, 1-피페라지닐, 4-알킬-1-피페라지닐, N-알킬-1-호모피페라지닐 또는 1-이니다졸린일 수 있다.

R₁이 상기 1), 2), 3) 부분에서 정의한 바와 같은 식(Ⅶ)의 생성물은 제 135,410 호로 공개된 유럽특허 출원(USP 4590004)의 주제이고 이 특허출원에 기술된 방법에 의해 프리스티나마이신 Ⅱ_A로부터 제조될 수 있다.

R₁이 상기 4) 부분에서 정의된 바와 같은 일반식(Ⅶ)의 생성물은 하기 식(Ⅹ)의, 프리스티나마이신 Ⅱ_B유도체, 그의 염 또는 보호된 유도체를 산화시킴으로써 제조될 수 있다 :

상기 식에서, R₂는 상기 정의한 바와 같되, 단 R₂가 황- 함유 헤테로시클릭계를 포함할때, 황은 설파이드, 설폭사이드 또는 설폰 상태일 수 있다.

반응은 일반적으로 수성 매체 또는 유기용매, 바람직하게는 염소화된 용매(예를들면 염화메틸렌, 1, 2-디클로로에탄 또는 클로로포름) 또는 알코올(예를들면, 메탄올 또는 3차-부탄올) 또는 이 용매들의 혼합물내에서, 현장에서 임의로 제조된 산화제에 의해 수행된다. 반응은 임의로 질소하에서 수행한다.

n=1인 식(Ⅶ)의 생성물을 얻기에 적당한 산화제에는, 과카르복실산 또는 과설폰산(예를들면, 과아세트산, 과트리플루오로아세트산, 과포름산, 과벤조산, m-클로로과벤조산, p-니트로 과벤조산, 과말레인산, 모노과프탈산, 과캄포르산 또는 p-톨루엔과설폰산)과 같은 유기과산 또는 무기과산(예를들면 과요오드산 또는 과황산)이 언급될 수 있다.

n=2인 식(Ⅶ)의 생성물을 얻는 것이 필요할 때, 반응은 유익하게는 식(Ⅹ) 화합물의 염에 과산화수소 및 이산화셀레늄을 작용시킴으로써 또는 상기한 것들과 같은 과산, 특히 과트리플루오로 아세트산 또는 m-클로로과벤조산을 작용시킴으로써 수행된다.

식(Ⅹ)의 프리스티나마이신 Ⅱ_B유도체를 염 형태로 사용할 때, 유기 또는 무기산으로 바람직하게는 트리플루오로아세트산, 타르타르산, 아세트산, 벤조산 또는 염산으로 형성된 염을 사용한다.

식(Ⅹ)의 화합물을 염 또는 보호된 유도체의 형태로 사용할 때, 반응은 -40 및 50℃ 사이의 온도에서 이롭게 수행된다.

n=1인 식(Ⅶ)의 생성물을 얻는 것이 필요할 때, -60 및 -40℃ 사이의 온도에서 중탄산알카리금속(예를들면, 중탄산나트륨) 존재하에서 식(Ⅹ)의 프리스티나마이신 Ⅱ_B유도체를 사용하는 것도 이롭다.

R₂가 알킬아미노 또는 시클로알킬아미노 치환체를 포함할 때, 식(Ⅹ) 생성물의 보호된 유도체를 사용하는 것도 가능하다. 후자는, 도입 및 제거에 의해 분자의 다른 부분에 영향을 미치지 않는 임의의 아민-보호기로 보호할 수 있다. 유익하게는, 트리플루오로아세틸기를 사용한다. 이는 수성 용액내에서 중탄산알카리 금속(예를들면, 중탄산 나트륨 또는 칼륨)으로 처리함으로써 반응 후 제거할 수 있다.

식(Ⅹ)의 생성물은 프리스티나마이신 Ⅱ_A에 하기 식(XI)의 티올을 작용시킴으로써 제 135,410 호로 공개된 유럽특허 출원에 기술된 방법과 유사하게 제조될 수 있다.

R₂-SH (XI)

상기 식에서, R₂는 상기 정의한 바와 같다.

n이 2인 식(Ⅶ)의 생성물은 또한 n이 1인 일반식(Ⅶ)의 생성물을 산화시킴으로써 제조할 수 있다. 반응은 일반식(Ⅹ)의 프리스티나마이신 Ⅱ_B유도체로 출발하여 n이 2인 식(Ⅶ)의 생성물을 얻기 위한 상기한 조건들과 유사한 조건하에서 수행된다.

일반식(XI)의 생성물들은 하기 실시예에 기술된 방법들과 유사하게 또는 그에 따라서, 특히 아래에 기술된 방법에 따라서 제조될 수 있다 : G. G. Urquart 등., Org. synth., 21, 36(1941) ; A. I. Vogel, J. Chem. Soc., 1822(1948) ; J. H. Chapman 및 L. N. Owen, J. Chem. Soc., 579(1950) ; H. R. Snyder 등., J. Am. Chem. Soc., 69, 2672(1947) ; D. D. Reynolds 등., J. Org. Chem., 26, 5125(1961) ; J. W. Haeffele 등., Proc. Sci. Toilet Goode Assoc., 32, 52(1959) ; H. Barrer 등., J. Org. Chem., 27, 641(1962) ; 및 J. H. Biel 등., J. Amer. Chem. Soc., 77, 2250(1955).

적당하다면, 식(Ⅶ)의 생성물의 이성체는 크로마토그라피에 의해 또는 고성능 액체 크로마토그라피에 의해 분리될 수 있다.

본 발명에 따른 시네르지스틴 유도체들은, 그들이 10-90%와 90-10% 사이의 비율로 조합될 때, 시험관내 0.1-10 ㎍/㏄의 투여량과 피하주사된 생쥐의 생체내 10-200 ㎎/㎏의 투여량에서 스타필로코커스 아우레우스 스미스에 대해 프리스티나마이신 Ⅱ_A의 항균적 작용에 상승 효과를 갖는다.

치료학적 적용에 있어서, 본 발명에 따른 새로운 생성물은 그들이 있는 그대로, 즉 염기 상태로 사용될 수 있으나, 수성 용액내에서 사용할 때는(이는 본 발명에 따른 생성물의 중요한 이점을 나타냄) 그들의 제약학적으로 수용가능한 염, 즉 사용된 투여량에서 무-독성인 염을, 바람직하게는 식(Ⅶ)의 프리스티나아마이신 Ⅱ_B의 용해성 유도체 또는 프리스티나마이신 Ⅱ_A와 조합하여 사용하는 것이 특히 이로우며, 이때 상기 프리스티나마이신은 제약학적으로 수용가능한 염으로서, 또는 적당하게는, 얻어진 용액에 대한 용해도가 치료학적으로 활성인 투여량과 적어도 같은 양으로 생성물을 포함시키기에 충분할 때 염기로서 그 자체가 용해된다.

제약학적으로 수용 가능한 염으로, 염산염, 브롬화수소산염, 황산염, 질산염 또는 인산염과 같은 무기산의 부가염, 또는 아세트산염, 프로피온산염, 숙신산염, 말레인산염, 푸마르산염, 메탄설폰산염, p-톨루엔설폰산염, 이세티온산염, 구연산염, 아디프산염, 락토비온산염과 같은 유기산의 부가염 또는 이 화합물들의 치환 유도체가 언급될 수 있다.

다음의 실시예들은 본 발명의 실행하는 방법을 보인다. 이 실시예들과 참고 실시예들에 나타낸 생성물의 NMR 스펙트럼은 일반식(Ⅰ) 또는 일반식(Ⅶ)의 모든 생성물에 공통되는 일반적 성질들과 그 치환제에 따른 생성물 각각에 특징적인 특정 성질들을 나타낸다.

하기 실시예에서는, 단지 여러가지 라디칼에 기인한 특정 성질들이 언급되었다. 모든 양자는 하기 일반식(XII)에 나타난 J. O. ANTEUNIS 등[Eur. J. Biochim. 58, 259(1975)]에 추천된 번호 붙이기에 따라 표시되었다.

일반식(Ⅶ)의 생성물에서, 모든 양자는 하기 식(XIII)에 나타난 번호에 따라 표시되었다.

다른 언급이 없는 한, 스펙트럼은 듀테로클로로포름내 250㎒에서 기록하고 ; 화학이동(chemical shift)은 테트라메틸실란 시그날에 대해 ppm으로 표시한다. 하기에 사용된 생략부는 다음과 같다 :

s=단일

d=이중

t=삼중

m=다중

c=복합

dd=이중의 이중

dt=삼중의 이중

ddd=이중의 이중의 이중

dddd=이중의 이중의 이중의 이중

서로 다른 이성체들은 NMR로 관찰된 화학이동에 따라 임의로 분류할 수 있다는 것을 알아야 한다.

R₁이 R₂S(O)n-라디칼(n=1)인 일반식(XIII)의 생성물의 이성체 A₁및 이성체 A₂는 다음의 특성들을 나타내는 이성체로 언급한다 : 거의 1.7(s, 33에서 -CH₃) ; 거의 3.8(s, 17에서

; 〈5(d, H₂₇) 이성체 A₂또는 〉5(d, H₂₇) 이성체 A₁; 거의 5.50(넓은 d, H₁₃) ; 거의 6.20(d, H₁₁) ; 거의 6.6(8에서

; ≥8(s, H₂₀).

R₁이 R₂S(O)n-라디칼(n=1)인 일반식(XIII)의 생성물의 이성체 B₁및 이성체 B₂는 다음의 특성들을 나타내는 이성체로 언급한다 : 거의 1.5(s, 33에서 -CH₃) ; 거의 3.7 및 3.9(2d, 17에서

; 거의 4.8(m, H₁₃) ; 〈5(d, H₂₇) 이성체 B₂또는 〉5(d, H₂₇) 이성체 B₁; 거의 5.70(한정 AB, H₁₁및 H₁₀) ; 거의 7.7(8에서

; 거의 7.8(s, H₂₀).

R₁이 R₂S(O)n-이 아닌 식(XIII)의 생성물의 이성체 A는 R₁이 R₂S(O)n-라디칼인 일반식(XIII)의 생성물의 이성체 A₁과 A₂에 대해 상기한 것들과 동일하나 단, 27에서 H는 거의 4.7(d, J≤1Hz)로 특징지워지는 NMR 특성을 보여주는 이성체로 언급한다.

R₁이 R₂S(O)n이 아닌 식(XIII)의 생성물의 이성체 B는 식(XIII)의 생성물의 이성체 B₁및 B₂에 대해 상기한 것들과 동일하나 단, 27에서 H는 거의 4.6(d, J≥2.5Hz)로 특징지워지는 NMR 특성을 나타내는 이성체로 언급한다.

하기 실시예에서, 프래쉬 크로마토그라피는 정제 기술로, 그 특성은 W. C. STILL, M. KAHN 및 A. MITRA[J. Org. Chem., 43, 2923(1978)]에 따라 입자 크기 40-53㎛의 실리카를 사용하여 적당한 압력(50㎪)에서 수행하는 것이다.

하기 실시예에서, 다른 언급이 없는 한, 모든 생성물은 적어도 2중량% 농도로 염산염으로 물에 용해될 수 있다.

[실시예 1]

메탄올(40㏄)와 클로로포름(20㏄)의 혼합물에 5δ-메틸렌프리스티나마이신 I_A(4.4g)를 녹인 용액에 3-메르캅토퀴누클리딘(2.8g)을 가하고, 이렇게 얻어진 용액을 20℃ 정도의 온도에서 44시간동안 휘저어 섞는다. 그후 이 반응 혼합물을 30℃의 감압(2.7㎪)하에서 건조 상태로 농축시킨다. 얻어진 잔류물을 에틸 에테르(100㏄)내에서 현탁시킨 뒤 여과분리 시킨다. 이렇게 하여 얻어진 고체를 에틸 에테르(3×10㏄)로 세척시킨 뒤, 플래쉬 크로마토그라피[용리제 : 염화 메틸렌/메탄올(부피로 90 : 10)]에 의해 정제하고 100-㏄의 유분(fractions)을 채집한다. 11부터 35까지의 유분을 조합한 뒤, 30℃의 감압(2.7㎪)하에서 건조상태로 농축시킨다. 잔류물을 에틸 에테르(120㏄)내에서 휘저어 섞는다. 얻어진 고체를 여과분리한 뒤 다시 플래쉬 크로마토그래피[용리제 : 염화 메틸렌/메탄올(부피로 85 : 15)]에 의해 정제하고 100-㏄의 유분을 채집한다. 3부터 7까지의 유분을 조합한 뒤 30℃의 감압(2.7㎪)하에서 건조상태로 농축시킨다. 잔류물을 에틸 에테르(50㏄)내에서 휘저어 섞은 뒤, 이렇게 얻어진 고체를 여과 분리하여, 에틸 에테르(3×5㏄)로 세척하고 20℃의 감압(27㎩)하에서 건조시킨다. 이렇게 하여 융점이 약 200℃이고, 엷은 황색 고체 형태의 5δ-[(3-퀴누클리디닐)티오메틸]프리스티나마이신 I_A(1.7g)을 얻었다.

NMR 스펙트럼 : 4개의 이성체 혼합물, 2.88 및 2.89(2s, 4-N(CH₃)₂), 3.21 및 3.22(2s, 4-CH₃), 6.51 및 6.53(2d, 2-NH-), 6.57 및 6.58(2d, 4ε), 7.82 및 7.85(m, 2개의 우세 이성체의 H₆), 7.95(m, 2개의 열세 이성체의 H₆), 8.78 및 8.81(2d, 2개의 우세 이성체의 6개의 -NH-), 8.98 및 9.0(2d, 2개의 열세 이성체의 6개의 -NH-), 5% 농도의 5δ-[(3-퀴누클리디닐)티오메틸]프리스티나마이신 I_A수용액이 아래와 같이 얻어졌다 :

생성물 …………………………………………………………… 100mg

0.1 …………………………………………………………… 0.98cc

증류수 …………………………………………………………… qs 2cc

3-머캡토퀴누클리딘은 다음과 같이 제조될 수 있다 ;

메탄올(150㏄)에 3-(아세틸티오)퀴누클리딘(14.5g)을 녹인 용액에 나트륨 메틸레이트(0.5g)을 가한다. 이 반응 혼합물을 환류하에 1시간동안 가열한다. 다시 나트륨 메틸레이트(0.5g)을 가하고 나서, 이 혼합물을 환류하에 2시간동안 가열한다. 반응 혼합물을 40℃의 감압(2.7㎪)하에서 건조 상태로 농축시킨다. 얻어진 잔류물에 증류수(40㏄)를 가하고, 뒤이어 아세트산(대략 1㏄)을 가해 8정도의 pH를 얻는다. 얻어진 혼합물을 염화 메틸렌(3×20㏄)으로 추출한다. 조합된 유기상(organic phases)을 황산나트륨 위에서 건조시키고 여과한 후, 30℃의 감압(2.7㎪)하에서 건조상태로 농축시킨다. 얻어진 갈색 오일을 감압(920㎩)하에서 증류시킨다 : 94℃에서 증류한 유분을 채집한다. 이렇게 하여 3-메르캅토퀴누클리딘(2.8g)을 얻었다.

3-(아세틸티오)퀴누클리딘은 다음과 같은 방식으로 얻을 수 있다 :

테트라하이드로퓨란(300㏄)에 트리페닐포스핀(42g)을 녹여 만든 용액을 질소분위기하에서 5℃로 유지시키고, 이 용액에 디이소프로필 아조디카복실레이트(31.6㏄)를 30분에 걸쳐 방울로 떨어뜨려 가한다. 얻어진 현탁액을 5℃에서 30분동안 휘저어 섞는다. 테트라하이드로퓨란(600㏄)에 3-하이드록시 퀴누클리딘(10.2g)과 티올아세트산(11.4㏄)을 녹여 만든 용액을 30분에 걸쳐 이 현탁액에 가하면서, 5℃로 유지시킨다. 반응 혼합물을 20℃ 정도의 온도에서 20시간 동안 휘저어 섞는다. 그후 이를 40℃의 감압(2.7㎪)하에서 건조상태로 농축시킨다. 얻어진 오일을 에틸 에테르(400㏄)에 용해시키고 나서 염산(3×160㏄)으로 세척한다. 조합된 수성 상(aqueous phases)을 에틸 에테르(100㏄)로 세척한 뒤, 중탄산 나트륨을 가하여 7정도의 pH로 중화시킨다. 그후 얻어진 용액의 pH를 10N의 수산화 나트륨 수용액을 몇방울 가하여 약 9로 조정한다. 이 혼합물을 염화 메틸렌(3×200㏄)으로 추출한다. 조합된 유기상을 황산 나트륨 위에서 건조시킨 뒤, 여과하여 30℃의 감압(2.7㎪)하에서 건조 상태로 농축한다. 이렇게 하여 갈색오일 형태의 3-(아세틸티오)퀴누클리딘(14.7g)을 얻는다[Rf=0.33 ; 용리제 : 염화 메틸렌/메탄올(부피로 90 : 10)].

[실시예 2]

실시예 1에서 설명한 것과 유사한 방식으로 실시하는데, 5δ-메틸렌프리스티나마이신 I_A(6.15g)과 (3S)-3-메르캅토퀴누클리딘(1.1g)으로 출발하여 플래쉬 크로마토그라피에 의한 두번의 정제를 거친 뒤, 50-㏄의 유분[1차 플래쉬 크로마토그라피 : 용리제 : 염화 메틸렌/메탄올(부피로 90 : 10), 12에서 36까지의 유분을 건조상태로 농축 ; 2차 플래쉬 크로마토그라피 : 용리제 : 염화 메틸렌/메탄올(부피로 90 : 10), 3에서 20까지의 유분을 건조상태로 농축]을 채집하여 엷은 황색 분말 형태의 5δ-{[(3S)-3-퀴누클리디닐]티오메틸}프리스티나마이신 I_A(2.6g)을 얻는다. 이 생성물은 다음의 방식에 의해 결정 상태로 얻을 수 있다 :

5δ-{[(3S)-3-퀴누클리디닐]티오메틸}프리스티나마이신 I_A(2.6g)을 메탄올(20㏄)에 녹인다. 황색 용액을 얻는다. 여과 및 30℃의 감압(27㎩)하에서의 건조를 거친 뒤, 하도하고 긁어보면 결정성 침전이 나타난다. 융점이 200℃ 정도이고, 백색 결정 형태의 5δ-{[(3S)-3-퀴누클리디닐]티오메틸}프리스티나마이신 I_A(1.2g)을 얻는다(메탄올과 조합된 결정생성물).

NMR 스펙트럼 : 1개의 이성체(5δ 탄소에 관한 이성체 추적) 0.62(dd, J=15 및 6, 1H, 5β₂)에서, 1.6에서 2.30(m, 6H

및 5δ), 2.4(d, J=15, 1H, 5β₁), 2.5에서 2.75(m, 5ε₂,

의 1H 및 -CH₂S-의 1H), 2.9에서 3.20

-CH₂S 및

의 1H), 3.30(m,

의 1H), 4.98(dd, J=14 및 7.5, 1H, 5ε₁), 5.30(m, 2H, 5α 및 4α), 7.90(dd, 1H, 1'H₆)

5δ-{[(3S)-3-퀴누클리디닐]티오메틸}프리스티나마이신 I_A는 또한 다음의 방식으로 결정화될 수 있다.

미리 환류되고 있는 아세톤(87㏄)에 5δ-{[(3S)-3-퀴누클리디닐]티오메틸}프리스티나마이신 I_A(17.4g)을 녹인다. 얻어진 용액을 여과하고, 녹지 않는 물질을 아세톤(10㏄)으로 헹군다. 20℃에서 3시간이 지난후, 얻어진 결정을 여과한 후, 건조시킨다. 얻어진 생성물(14.8g)을 똑같은 상황하에서 아세톤(75㏄)으로 재결정시키고 나서 여과한 후, 20℃의 감압(90㎩)하에서 건조시키면, 융점이 대략 185-190℃인 백색 결정(12.2g)이 얻어진다.

(3S)-3-메르캅토퀴누클리딘은 다음의 방식으로 얻을 수 있다.

메탄올(30㏄)에 (3S)-3-(아세틸티오)퀴누클리딘(29g)을 녹여 만든 용액을 대략 25℃로 유지시키면서, 이 용액에 10N의 수산화나트륨 수용액(30㏄)을 천천히 가한다. 이 반응 혼합물을 20℃ 정도의 온도에서 2시간 동안 휘저어 섞는다. 그후 반응 혼합물의 pH를 아세트산(대략 10㏄)을 가함으로써 9정도의 값이 되도록 조정한다. 얻어진 혼합물을 염화 메틸렌(3×100㏄)으로 추출한다. 조합된 유기 상을 황산 나트륨 위에서 건조시킨 후 여과하여 30℃의 감압(2.7㎪)하에서 건조 상태로 농축한다. 얻어진 잔류물을 감압(970㎩) 하에서 증류에 의해 정제한다. 이렇게 하여 (3S)-3-메르캅토퀴누클리딘(12g)이, 46℃에서 녹고 970㎩하에서 95℃에서 증류하는 백색 결정 형태로 얻어진다(α_D ²⁰=-118℃, C=1.1, 메탄올).

(3S)-3-(아세틸티오)퀴누클리딘은 실시예 1에서 설명된 것과 유사한 방식으로 얻어질 수 있는데, 트리페닐포스핀(104.8g), 디이소프로필 아조디카복실레이트(80.8g) 및 (3R)-3-하이드록시 퀴누클리딘(25.7g)으로 출발한다. 이렇게 하여 (3S)-3-(아세틸티오)퀴누클리딘(30g)이 황색 오일 형태로 얻어진다[Rf=0.2 ; 용리제 : 염화 메틸렌/메탄올(부피로 90 : 10)]. P. R. 볼란테, Tet. Let., 22(33), 3119(1981)에 따라서, (R) 원자 배열의 3탄소가 반응 동안에 (S) 원자 배열의 탄소로 바뀌어진다.

(3S)-3-하이드록시퀴누클리딘은 B. 링달, B. 리설 및 R. 다알봄, Acta Pharma. Suec. 16, 281(1979)에 의해 설명된 방법에 따라 제조된다.

[실시예 3]

실시예 1에서 설명한 것과 유사한 방식으로 실시하는데, 5δ-메틸렌프리스티나마이신 I_A(6.15g)과 (3R)-3-메르캅토퀴누클리딘(1g)으로 출발하여 플래쉬 크로마토그라피에 의한 정제를 거친 뒤, 40-㏄의 유분[용리제 : 염화 메틸렌/메탄올(부피로 85 : 15)]을 채집하고 20에서 30까지의 유분을 건조 상태로 농축하여, 5δ-{[(3R)-3-퀴누클리디닐]티오메틸}프리스티나마이신 I_A(2g)을 융점이 대략 200℃인 베이지색 분말 형태로 얻었다.

NMR 스펙트럼 : 0.58(dd, j=15 및 5.5, 1H, 5β₂), 1.5에서 2.2(c,

, 2.30(c, 1H, 5δ), 2.35(d, j=15, 1H, 5β₁), 2.50(dd, -CH₂S-의 1H), 2.60(dd, 1H, 5ε₂), 2.78(c,

의 1H), 2.90에서 3.10(c, -CH₂-S- 및

의 1H), 3.15(c, 1H, -S

3.48(c,

의 1H), 4.95(dd, 1H, 5ε₁), 5.28(c, 2H, 5α 및 4α), 7.87(c, 1H×0.85, 1차 이성체의 1'H₆), 7.93(c, 1H×0.15, 2차 이성체의 1'H₆)

5δ-{[(3R)-3-퀴누클리디닐]티오메틸}프리스티나마이신 I_A는 다음의 방식으로 재결정될 수 있다 :

5δ-{[(3R)-3-퀴누클리디닐]티오메틸}프리스티나마이신 I_A(14.15g)을 메탄올(75㏄)에 녹인다. 이 용액에 증류수(4㏄)를 가한 후, 4℃에서 결정이 생기도록 놓아둔다. 얻어진 결정을 여과하고 메탄올/물(부피로 95 : 5) 혼합물(4×10㏄)로 헹군다. 42℃의 감압(90㎩)하에서 건조시키면, 융점이 약 190℃인 백색 결정(10.22g)이 얻어진다.

(3R)-3-메르캅토퀴누클리딘은 실시예 2에서 설명한 것과 유사한 방식으로 얻을 수 있는데, (3R)-3-(아세틸티오)퀴누클리딘(32.5g)과 10N의 수산화나트륨 수용액(35㏄)으로 출발한다 ; (3R)-3-메르캅토퀴누클리딘(11.5g)이, 45℃에서 녹고 830㎩하에서 90℃에서 증류하는 백색 결정 형태로 얻어진다(α_D ²⁰=+121°,c=1.1, 메탄올).

(3R)-3-(아세틸티오)퀴누클리딘은 실시예 1에서 설명한 것과 유사한 방식으로 얻어질 수 있는데, 트리페닐포스핀(104.8g), 디이소프로필 아조디카복실레이트(80.8g) 및 (3S)-3-하이드록시퀴누클리딘(25.7g)으로 출발한다. 이렇게 하여 엷은 갈색 오일 형태의 (3R)-3-(아세틸티오)퀴누클리딘(33.8g)이 얻어진다[Rf=0.4 ; 용리제 : 염화 메틸렌/메탄올(부피로 80 : 20)].

(3S)-3-하이드록시퀴누클리딘은 B. 링달등, Acta Pharm. Suec. 16, 281(1979)에 의해 설명된 방법에 따라 제조된다.

[실시예 4]

실시예 1에서 설명한 것과 유사한 방식으로 실시하는데, 5δ-메틸렌프리스티나마이신 I_A(3.5g)와 4-메르캅토퀴누클리딘(0.6g)으로 출발하여 건조 상태로 농축시켜 얻어진 고체를 에틸에테르내에서 휘저어 섞었다. 여과하여, 베이지색 고체(3.6g)을 분리한 후, 플래쉬 크로마토그라피에 의해 정제하고 50-㏄ 유분[용리제 : 염화 메틸렌/메탄올(부피로 85 : 15)]을 채집한다. 19에서 35까지의 유분을 건조상태로 농축한 후에 에틸 에테르로 세척하여 여과하고, 20℃의 감압(2.7㎪)하에서 최종 고체를 건조시키고나면, 융점이 대략 200℃이고, 회색이 도는 흰색의 분말 형태인 5δ-[(4-퀴누클리디닐-티오메틸]프리스티나마이신 I_A(1.2g)을 얻는다.

NMR 스펙트럼(대략 85 : 15의 비율로서, 5δ 탄소에 관한 2개의 이성질체) : 0.62(dd, J=15 및 5.5, 1H, 5β₂), 1.87(t, 6H,

), 2.20(c, 1H, 5δ), 2.28(c, 1H, -CH₂-S-), 2.35(d, J=15, 1H, 5β₁), 2.47(dd, 1H, 5ε₂), 3.10(t, 6H,

), 3.22(dd, 1H, -CH₂-S-), 5.01(dd, 1H, 5ε₁), 5.29(넓은 d, J=5.5, 5α), 7.86(c, 0.85H, 우성 이성질체의 1'H₆), 7.92(c, 0.15H, 열세 이성질체의 1'H₆)

4-메르캅토퀴누클리딘은 A. GROB, Helv. Chim. Acta, 57, 2339(1974)에 의해 설명된 방법에 따라 얻어질 수 있다.

[실시예 5]

과정이 실시예 1에서 설명된 것과 유사한데, 메탄올(20㏄)에 녹인 5δ-메틸렌비르지니아마이신 S(1.2g)과 (3R)-3-메르캅토퀴누클리딘(0.21g)으로 출발한다. 플래쉬 크로마토그라피에 의해 정제한 후에, 10-㏄ 유분을 채집하고[용리제 : 유분 35까지는 염화 메틸렌/메탄올(부피로 95 : 5), 이후에는 염화 메틸렌/메탄올(부피로 80 : 20)], 47에서 55까지의 유분을 건조 상태로 농축시켜 30℃의 감압(2.7㎪)하에서 건조시키면, 5δ-{[(3R)-3-퀴누클리디닐]티오메틸}-비르지니아마이신 S(0.6g)가, 융점이 약 185℃이며 약간 회색이 도는 흰색의 분말 형태로 얻어진다.

NMR 스펙트럼(5δ탄소에 관한 2개의 이성질체, 대략 80 : 20의 비율) : 0.4(dd, J=15 및 5.5, 1H, 5β₂), 1.5에서 2.2(c, 5H,

, 5δ), 2(c, 1H,

), 2.34(d, J=15, 1H, 5β₁), 2.52(dd, -CH₂S-의 1H), 2.63(dd, 1H, 5ε₂), 2.78(dd,

의 1H) 2.85에서 3.15(c, -CH₂-S- 및

)의 1H), 3.48(c, 1H,

), 4.94(dd, 1H, 5ε₁), 5.27(넓은 d, J=5, 1H, 5α), 7.82(dd, J=4 및 1,1 차 이성체의 1'H₆), 7.9(dd, J=4 및 1,2차 이성체의 1'H₆)

[실시예 6]

과정이 실시예 1에서 설명된 것과 유사한데, 메탄올(20cc)에 녹인 5δ-메틸렌비르지니아마이신 S(1.1g)과 (3S)-3-메르캅토퀴누글리딘(0.19g)으로 출발한다. 플래쉬 크로마토그라피에 의해 정제한 후 10-cc유분[용리제 : 염화 메틸렌/메탄올(부피로 90 : 10)]을 채집하고, 19에서 32까지의 유분을 건조 상태로 농축시켜 30℃의 감압(2.7kPa)하에서 건조시키면, 5δ-[(3S)-3-퀴누클리디닐]티오메틸 비르지니아마이신 S(0.5g)가, 융점이 약 190℃이고 엷은 황색 분말 형태로 얻어진다.

NMR 스펙트럼(5δ탄소에 관한 2개의 이성체, 대략 85 : 15의 비율), 0.39(dd, J=15 및 5, 1H, 5β₂), 1.5에서 2.3(c, 5H,

, 5δ), 2.11(c, 1H,

), 2.34(d, J=15, 1H, 5β), 2.52(dd, -CH₂S- 의 1H), 2.64(dd, 1H, 5ε₂), 2.66(dd,

의 1H), 2.90에서 3.2(c, 6H, -CH₂-S-의 1H,

의 1H), 3.3에서 3.5(c,

의 1H), 4.95(dd, 1H, 5ε₁), 5.27(넓은 d, 1H, 5α), 7.80(dd, J=4와 1, 1H×0.85, 첫번째 이성체의 1'H₆), 7.90(dd, J=4와 1, 1H×0.15, 두번째 이성체의 1'H₆)

[실시예 7]

실험은, (3S)-3-메르캅토퀴누클리딘(1.62g)을 출발 물질로 그리고 -20℃에서 20시간동안 휘저어 섞는 것을 제외하고, 실시예 2에서 나타낸 방법과 비슷한 방법으로 실험을 하여, 베이지 색 머랭그(meringue)같은 생성물(11.4g)을 30℃에서 감압(2.7kPa)하에서 건조상태로 농축시킨 후에 얻으며, 이것을 디에틸 에테르(100cc)에서 휘저어 섞고 여과한후 같은 용매(3×20cc)로 헹군다. 이 생성물은 실시예 2에서 나타낸 바와 같이 아세톤 속에서 재결정화되어, 실시예 2에서 얻은 생성물의 특징과 비슷한 특징인 융점 약 198-200℃에서 얻은 흰색결정 형으로, HPLC에 의해 정량분석한 소수의 이성질체를 3% 함유하는 5δ-{[(3S)-3-퀴누클리디닐]티오메틸}프리스티나마이신 I_A(6.6g)을 얻을 수 있다.

[실시예 8]

-20℃에서 아세톤(5㏄)에 용해된(3S)-3-메르캅토퀴누클리딘(0.18g)을, 아세톤(20㏄)에 5δ-메틸렌프리스티나마이신 I_A(1g)을 함유한 용액에 1시간동안 첨가한다. -20℃에서 18시간동안 휘저어 섞은 후에, 반응혼합물을 여과하고 아세톤(3×2㏄)으로 고형물을 헹구었다. 공기속에서 건조시킨후에, HPLC에 의해 정량분석한 소수의 5δ-이성체를 3%함유하고, 실시예 2에서 얻은 생성물과 비슷한 특성인 융점 약 190℃의 흰색 결정형으로 5δ-{[(3S)-3-퀴누클리디닐]티오메틸}프리스티나마이신 I_A(0.6g)을 얻는다.

[실시예 9]

-78℃에서 아세톤(5㏄)에 용해된(3S)-3-메르캅토퀴누클리딘(0.16g)을, 아세톤(15㏄)에 5δ-메틸렌프리스티나마이신 I_A(1.22g)을 함유한 용액에 첨가하고, 획득한 용액을 -78℃에서 24시간 동안 질소하에 휘저어 섞는다. 이후 반응 혼합물을 30℃에서 감압(2.7㎪)하에 건조 상태로 농축시켜, HPLC에 의해 정량분석한 소수의 이성체를 5%를 가지며 실시예 2에서 얻은 생성물과 비슷한 특징을 갖는 크림-흰색 고형물 1.4g을 얻는다.

[참고 실시예 1]

트리플루오로아세트산(0.44㏄)를, 0℃에서 질소 분위기하에 디클로로메탄(40㏄)에 용해된 26-[(2-디이소프로필아미노에틸)티오]프리스티나마이신 Ⅱ_B(이성체 A)(3.59g)에 첨가하고, 뒤이어 0℃로 유지된 온도하에서 85%순수한 데타-클로로퍼클로로 퍼벤조산(1.06g)을 첨가한다. 25℃에서 20시간동안 휘저어 섞은후에, 반응혼합물을 포화 수성 중탄산나트륨 용액으로 처리한다. 유기상을 가만히 기우려 따른후 염화 메틸렌(3×100㏄)으로 수성상을 세척한다. 유기상을 조합하고, 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과 후 30℃에서 감압(2.7㎪)하에 건조상태로 농축하여 노란색 고형물(4.2g)을 얻는다. 이것을 플래쉬 크로마토그래피[용출제 : 클로로포름/메탄올(90 : 10부피에 의함)]로 정제하여 20-㏄유분을 수집한다. 유분 22에서 28을 조합하고, 30℃에서 감압하(2.7㎪)에 건조 상태로 농축시켜 옅은 노란색 고형물을 얻고, 이것을 에틸에테르(10㏄)속에서 휘저어 섞는다. 수득한 고형물을 여과에 의해 분리하여 융점 약 155℃의 노란색 가루 형태로 26-[(2-디이소프로필아미노에틸)설피닐]프리스티나마이신 Ⅱ_B(이성체 A₂)(0.62g)을 얻는다.

NMR 스펙트럼 :

0.90에서 1.15[m, 32, 31, 30에서 -CH₃,

1.76(s, 33에서 -CH₃), 2.75에서 3.15(m, 15에서

-H₄와

3.81(s, 17에서

4.76(d, -H₁₇), 5.51(d, -H₁₃), 6.20(d, -H₁₁), 6.48(c, 8에서

8.13(s, -H₂₀)

유분 35에서 45를 조합하고 30℃에서 감압하(2.7㎪)에 건조상태로 농축하여 옅은 노란색 고형물을 얻는다. 이것을 에틸 에테르(15㏄)속에서 휘저어 섞는다. 수득한 고형물을 여과에 의해 분리하여 융점 약 145℃의 옅은 노란색 가루 형태로 26-[(2-디이소프로필아미노에틸)설피닐]프리스티나마이신 Ⅱ_B(80% 이성체 A₁, 20%이성체 A₂)를 얻는다.

NMR 스펙트럼(이성체 A₁) : 1.72(s, 33에서 -CH₃), 2.70에서 3.15(m, 15에서

-H₄,

3.81(s, 17에서

5.26(d, -H₂₇), 5.46(d, -H₁₃), 6.15(d, -H₁₁), 8.11(s, -H₂₀), 26-[(2-디이소프로필아미노에틸)티오]프리스티나마이신 Ⅱ_B는 다음의 방법으로 제조할 수 있다 :

디클로로메탄(30cc)에 용해된 2-디이소프로필아미노에탄티올(16g)을 -30℃에서 질소분위기하에, 디클로메탄(260cc)와 메탄올(520cc)의 혼합물속에 용해된 프리스티나마이신 Ⅱ_A(52g)에 적가한다. 이 용액을 -20℃에서 20시간동안 휘저어 섞은후 30℃에서 감압(2.7㎪)하에 농축한다. 수득한 고형물을 에틸 에테르(2×1000cc)와 함께 휘저어 섞고, 여과에 의해 분리한 후 아세토니트릴(100cc)속에서 결정화한다. 여과에 의해 결정을 분리한 후, 40℃에서 감압(90㎩)하에 건조시킨다. 이로인하여 융점 약 122℃의 흰색 결정 상태로 26-[(2-디이소프로필아미노에틸)티오]프리스티나마이신 Ⅱ_B(이성체 A)(33.6g)을 수득한다.

NMR 스펙트럼 : 1에서 1.15(m, -CH₃이소프로필), 1.72(s, 33에서 -CH₃), 1.80에서 2.20(m, -H₂₅, -H₂₉), 2.50에서 3(m,

3.40(넓은 d, -H₂₆), 4.74(넓은 s, -H₂₇), 6.32(m, -NH₈), 8.15(s, -H₂₀), 2-디이소프로필아미노에탄티올은 D. D. REYNOLDS, D. L. FLELDS 및 D. L. JOHNSON, J. ORG, CHEM. 26, 5125(1961)에 기술된 방법에 따라 제조할 수 있다.

[참고 실시예 2]

중탄산 나트륨(1.22g)을, 클로로포름(300cc)에 용해된 26-[(2-디이소프로필아미노에틸)티오]프리스티나마이신 Ⅱ_B(이성체 A)(10g)에 첨가한다. 혼합물을 -50℃로 냉각하고 클로로포름(100cc)에 용해된 98% 순수한 메타-클로로퍼벤조산(2.9g)을 적가한다. 혼합물을 -50℃에서 2시간 15분동안 휘저어 섞은 후 포화 중탄산나트륨 수용액으로 처리한다. 25℃에서 15분간 휘저어 섞은 후에, 혼합물을 기우려 따르고 이후 디클로로메탄(3×200cc)으로 수성상을 세척한다. 유기상을 조합하고, 황산 마그네슘상에서 건조, 여과후-30℃에서 감압(2.7kPa)하에 건조상태로 농축하여 흰색 머랭 같은 생성물(10.62g)을 얻는다. 생성물을 초산 에틸(400cc)에 녹인후 0.1N 염산수용액(140cc)으로 처리한다. 이후 수용액의 pH는 4.2 완충용액(400cc)를 첨가하여 4.2로 조절한다. 수성상을 가만히 따르고 유기상은 pH 4.2완충용액(400cc)으로 세척한다. 수성상을 조합하고 초산에틸(2×150cc)로 세척한다. 가만히 기우려 따른 후, 수성상은 중탄산 나트륨을 첨가하여 pH 7-8로 조절한 후 디클로로메탄(3×300cc)으로 세척한다. 유기상을 조합한 후 pH 7.5완충 용액(2×200cc)으로 세척한다. 수성상은 디클로로메탄(50cc)으로 세척하고 이후 유기상을 조합, 황산 마그네슘상에서 건조, 여과하고 30℃에서 감압(2.7kPa)하에 건조상태로 농축하여 옅은 노란색 고형물(8.04g)을 얻는다. 이것을 에틸 에테르(100cc)로 휘저어 섞고, 여과에 의해 분리한 후 40℃에서 감압(90Pa)하에 건조시킨다. 이로인하여 융점, 약 158℃의 노란색 가루 형태로 26-[(2-디이소프로필아미노에틸)설피닐]프리스티나마이신 Ⅱ_B(이성체 A₂)(7.5g)을 얻는데, 이것의 NMR특성은 참고 실시예 1의 특징과 유사하다.

[참고 실시예 3]

실험은 출발 물질로 26-[(2-디에틸아미노프로필)티오]프리스티나마이신 Ⅱ_B(6.3g), 트리플루오로 아세트산(0.72cc)와 메타-클로로퍼벤조산(1.91g)을 사용하는 것을 제외하고, 참고 실시예 1에서 나타낸 방법과 비슷한 방식으로 실험한다. 플래쉬 크로마토그라피[용출제 : 클로로포름/메탄올(90 : 10 부피에 의한)]에 의해 정제한 후에, (60-cc) 유분을 얻고 30℃에서 감압(2.7kPa)하에 유분 7에서 9를 건조 상태로 농축하여, 융점 약 150℃의 노란색 가루 형태로 26-[(2-디에틸아미노프로필)설피닐]프리스티나마이신 Ⅱ_B(이성체 A₂)(0.99g)을 수득한다.

NMR 스펙트럼 : 1.03에서 1.20(m, -CH₂-CH(CH₃) N(CH₂CH₃)₂와 32에서 CH₃), 1.76(s, 33에서 -CH₃), 3.82(s, 17에서

4.79(c, -H₂₇), 5.53(d, -H₁₃), 6.20(d, -H₁₁), 6.42(c, 8에서

8.13(s, -H₂₀)

30℃에서 감압(2.7kPa)하에 유분 23에서 35를 건조상태로 농축한 후에, 융점 약 160-170℃의 베이지-노란색 가루 형태로 26-[(2-디에틸아미노프로필)설피닐]프리스티나마이신 Ⅱ_B(이성체 A₁)(0.64g)을 수득한다.

NMR 스펙트럼, 1.14(m, -N(CH₂CH₃)₂), 1.24(넓은 d,

1.73(s, 33에서 -CH₃), 3.81(한정 AB, 17에서

5.28(d, -H₂₇), 5.43(d, -H₁₃), 6.15(d, -H₁₁), 6.88(c, 8에서

8.10(s, -H₂₀)

26-[(2-디에틸아미노프로필)티오]프리스티나마이신 Ⅱ_B는 다음의 방법으로 제조할 수 있다 : 실험은 프리스티나마이신 Ⅱ(3.15g)과 2-디에틸아미노프로판디올(1.8g)을 출발물질로 하는 것을 제외하고, 유럽 특허 출원 EP 135,410 호의 실시예 Ⅰ에서 나타낸 방법과 비슷한 방법으로 실험한다. 플래쉬 프로마토그라피[용출제 : 염화 메틸렌/메탄올(90 : 10부피에 의함)]로 정제한 후에, 20-cc 유분을 얻고 30℃에서 감압(2.7kPa)하에 유분 3에서 5를 건조상태로 농축하여, 융점 약 160℃의 노란색 가루 형태로 26-[(2-디에틸아미노프로필)티오]프리스티나마이신 Ⅱ_B(1.4g)을 수득한다.

NMR 스펙트럼, 1(c, 9H : -H₃₂+-N(CH₂(CH₃)₂), 2.50(c, 6H :

3.30(c, 1H : -H₂₆), 4.70(d, 1H : -H₂₇), 8.12(s, 1H : -1H₂₀)

2-디에틸아미노프로판티올은 다음의 방식으로 제조할 수 있다 : 10N 수산화 나트륨수용액(25cc)를 증류수(150cc)에 1-(S-이소티오우레이도)-2-디에틸아미노프로판 디히드로클로라이드(29.5g)가 용해된 용액에 첨가한다. 혼합물을 1시간동안 100℃로 되게하고, 20℃로 냉각하여, 12N 염산수용액(8cc)를 첨가하여 pH 9로 조절한후 에틸 에테르(3×100cc)로 추출한다. 에테르상을 조합하고, 탄산 칼륨으로 건조, 여과후 30℃에서 감압(2.7kPa)하에 건조상태로 농축한다. 혼합물은 증류에 의해 정화시킨다. 무색 액체 형태로 2-디에틸아미노-1-프로판티올(5.8g)[융점(2.7kPa) 78℃]를 수득한다.

1-(S-이소티오우레이도)-2-디에틸아미노프로판 디히드로클로라이드는 다음 방식에 의해 제조할 수 있다 :

티오우레아(16.7g)는 디메틸 포름아미드(200cc)에 1-클로로-2-디에틸아미노프로판 히드로클로라이드(41g)이 용해된 용액에 첨가한다. 혼합물은 30분동안 100℃에 이르게 한후, 20℃로 냉각한다. 형성된 흰색 침전물은 여과에 의해 수집하고 디메틸포름아미드(3×20cc)로 이후 에틸 에테르(3×20cc)로 세척한다. 융점 247-249℃의 흰색 결정형으로 1-(S-이소티오우레이도)-2-디에틸 아미노프로판 디히드로클로라이드(29.6g)을 얻는다.

1-클로로-2-디에틸아미노프로판 히드로클로라이드는 다음과 같은 방법에 의해 얻을 수 있다 ;

2-디에틸아미노프로판올 히드로클라이드(45.2g)을 염화티오닐(100cc)에 15분동안 첨가한후, 혼합물을 80℃로 가열한다. 2시간동안 휘저어 섞은후에 과량의 염화티오닐을 증류한후, 잔류물은 에틸 에테르(200cc)로 흡수한다. 1-클로로-2-디에틸아미노프로판히드로 클로라이드가 결정화된다. 여과후에, 융점 112℃의 흰색 결정(48.2g)을 수득한다.

2-디에틸아미노프로판을 히드로클로라이드는 다음 방법으로 수득할 수 있다 :

20℃에서, 에틸 에테르(330cc)에 에틸 2-디에틸아미노프로피오네이트(66g)이 용해된 용액을, 에틸 에테르(1리터)의 수소화 알루미늄 리튬(10.6g) 현탁액(질소하에서 유지됨)에 천천히 첨가한다. 반응은 35℃의 온도에서 5시간동안 유지하고, 온도는 이후 0℃로 낮춘다. 0℃에서, 물(12.4cc), 5N 수산화 나트륨수용액(9.1cc)이후 물(41.3cc)를 적가한 후 30분동안 혼합물을 휘저어 섞는다. 신터드 유리 위에서 여과한 후 에틸 에테르로 세척한다. 에테르 상은 탄산 칼륨으로 건조, 여과후 30℃에서 감압(2.7kPa)하에 건조상태로 농축한다. 노란색 액체(43.8g)을 수득하고, 이것을 아세톤(200cc)에 녹이고 에틸 에테르에 염화수소 가스가 용해된 4.5N 용액(78cc)을 이후에 첨가한다. 2-디에틸아미노프로판올 히드로클로라이드가 결정화된다. 여과후에, 융점 97-100℃의 흰색 결정(45.2g)을 수득한다.

에틸 2-디에틸 아미노프로피오네이트는 BRAUN 일행, Beilstein, 61, 1425(1928)에 따라 수득할 수 있다.

[참고 실시예 4]

실험은 26-[(2-디에틸아미노프로필)티오]프리스티나마이신 Ⅱ_B(이성체 A)(4g), 98% 순수한 메타-클로로퍼벤조산(1.16g)과 고체중탄산나트륨(1g)을 출발물질로 하는 것을 제외하고, 참고 실시예 2에서 나타낸 방법과 비슷한 방법으로 실험한다. 플래쉬 크로마토그래피[용출제 : 클로로포름/메탄올(93 : 7 부피에 의함)]에 의해 정제하고 30℃에서 감압(2.7kPa)하에 유분 21에서 48을 건조상태로 농축한 후, 25-cc 유분을 수집하고, 참고 실시예 3에서 수득한 생성물의 특성과 비슷한 특성을 갖는 노란색 가루 형태의 26-[(2-디에틸아미노프로필)설피닐]프리스티나마이신 Ⅱ_B(이성체 A₂)(2.69g)을 수득한다.

실험은 프리스티나마이신 Ⅱ_A(15g)과 2-디에틸아미노프로판티올(4.62g)을 가지고 출발하는 것을 제외하고 참고 실시예 1에서 나타낸 방법과 비슷한 방법으로 실험하여, 26-[(2-디에틸아미노프로필)티오]프리스티나마이신 Ⅱ_B(이성체 A)를 수득할 수 있다. 플래쉬 크로마토그라피(용출제 : 클로로포름/메탄올(90 : 10 부피에 의함)]에 의해 정제하고 30℃에서 감압(2.7kPa)하에 유분 27에서 52를 건조상태로 농축시킨 후에, 40-cc 유분을 얻고 노란색 고형물(12g)을 수득한다. 이것을 에틸 에테르(60cc) 속에서 휘저어 섞고, 여과후 건조시킨다. 융점 약 122℃의 옅은 노란색 가루 형태로 26-[(2-디에틸아미노프로필)티오]프리스티나마이신 Ⅱ_B(이성체 A)(8.2g)을 수득한다.

NMR 스펙트럼 : 1에서 1.15(m, 에틸

1.70(s, 33에서 -CH₃), 2.35에서 2.60(m,

2.50에서 3.10(m,

2.75(m, -H₄),

[참고 실시예 5]

과정은 26-[(1-디에틸아미노-2-프로필)티오]프리스티나마이신 Ⅱ_B(이성체 A)(4.58g), 98% 순수한 메타클로로퍼벤조산(1.29g)과 고체 중탄산 나트륨(1.14g)을 출발물질로 하는 것을 제외하고, 참고 실시예 2에서 나타낸 과정과 비슷하다. 플래쉬 크로마토그라피[용출제 : 클로로포름/메탄올(97 : 3 부피에 의함)]에 의해 정제한 후에, 30℃에서 감압(2.7kPa)하에 각각 유분 59에서 77 및 유분 79에서 97을 건조상태로 농축시켜 다음 화합물을 수득한다 : 유분 79에서 97로부터, 융점 약 132℃의 옅은 노란색 고체형으로 26-[(1-디에틸아미노-2-프로필)티오]프리스티나마이신 Ⅱ_B(첫번째 이성체)(1.47g) ;

NMR 스펙트럼 : 1.02(t, 에틸-CH₃), 1.34(d, CH₃-CH-CH₂N(C₂H₅)₂), 1.72(s, 33에서 -CH₃), 2.5에서 2.7(m,

), 2.77(m, -H₄), 2.87과 3.09(2dd, 15에서

2.97(m,

3.72(m, -H₂₆), 3.80(s, 17에서

4.92(m, -H₂₇), 5.43(d, -H₁₃), 6.15(d, -H₁₁), 6.72(dd, 8에서

8.06(s, -H₂₀)

과 유분 59에서 77로부터, 융점 128℃의 옅은 노란색 고형물 형으로 26-[(1-디에틸아미노-2-프로필)설피닐]프리스티나마이신 Ⅱ_B(두번째 이성체)(1.07g)

NMR 스펙트럼 : 1.72(s, 33에서 CH₃), 3.4(m, -H₂₆), 3.76(s, 17에서 CH₂), 4.74(m, -H₂₇), 5.48(d, -H₁₃), 6.18(d, -H₁₁), 6.80(m, 8에서

8.09(s, -H₂₀)

실험은 프리스티나마이신 Ⅱ_A(13g)과 1-디에틸아미노-2-프로판티올(4g)을 출발물질로 하는 것을 제외하고, 실시예 1에서 나타낸 방법과 비슷한 방법으로 실험하여 26-[(1-디에틸아미노-2-프로필)티오]프리스티나마이신 Ⅱ_B(이성체 A)를 수득할 수 있다. 플래쉬 크로마토그라피[용출제 : 클로로포름/메탄올(90 : 10 부피에 의함)]에 의해 정제하고, 30℃에서 감압(2.7kPa)하에 유분 46에서 55를 건조상태로 농축시킨 후, 50-cc 유분을 수집하고, 옅은 노란색 고형물(8g)을 수득한다. 이것을 아세토니트릴(30cc)속에서 결정화한다. 여과 및 건조후에, 융점 136℃의 흰색 결정형으로 26-[(1-디에틸아미노-2-프로필)티오]프리스티나마이신 Ⅱ_B(이성체 A)(5.91g)을 수득한다.

NMR 스펙트럼 : 0.9에서 1.10(m, -N(CH₂CH₃)₂), 1.33에서 1.37(2d,

), 1.7(s, 33에서 -CH₃), 2.4에서 2.65(m,

, 2.76(m, -H₄), 3(m,

), 2.9에서 3.1(2dd, 15에서

3.52(m, -H₂₆), 3.81(s, 17에서

4.78(m, -H₂₇), 5.46(d, -H₁₃), 6.14(d, -H₁₁), 6.40(m, 8에서

8.09와 8.10(2s, -H₂₀)

1-디에틸아미노-2-프로판티올은 R. T. WRAGG, J. Chem. Soc.(C), 2087(1969)에 의해 나타낸 방법에 따라 수득할 수 있다.

[참고 실시예 6]

과정은, 26-{[(2R)-2-디메틸아미노부틸]티오}프리스티나마이신 Ⅱ_B(이성체 A)(1.7g), 중탄산나트륨(0.50g)과 98% 순수한 메타-클로로퍼벤조산(0.45g)을 출발물질로 하는 것을 제외하고, 참고 실시예 2에 나타낸 방법과 비슷하다. 플래쉬 크로마토그라피[용출제 : 초산에틸/메탄올(85 : 15 부피에 의함)]에 의해 정제하고 30℃에서 감압(2.7kPa)하에 유분 35에서 58을 건조상태로 농축시킨 후에, 흰색 고형물(1.1g)을 수득한다. 이것을 에틸에테르(30cc)에서 휘저어 섞는다. 여과 및 건조후에, 융점 약 126℃의 흰색 고형물 형태로 26-{[(2R)-2-디메틸아미노부틸]티오}프리스티나마이신 Ⅱ_B(이성체 A₂)(0.95g)을 수득한다.

NMR 스펙트럼 : 1(m,

1.45에서 1.75(m,

1.78(s, 33에서 -CH₃), 2.50에서 3.05(m,

와 -H₄), 2.93와 3.14(2dd, 15에서

3.31(m, -H₂₆), 3.84(s, 17에서

4.84(d, -H₂₇), 5.51(d, -H₁₃), 6.19(d, -H₁₁), 6.30(dd, 8에서

8.15(s, -H₂₀)

프리스티나마이신 Ⅱ_A(8g)과 (2R)-2-디메틸아미노부탄티올(2.3g)을 출발물질로 하는 것을 제외하고, 참고 실시예 1에서 나타낸 방법과 비슷한 방법으로 실험하여 26-{[(2R)-2-디메틸아미노부틸]티오}프리스티나마이신 Ⅱ_B(이성체 A)를 수득할 수 있다. 플래쉬 크로마토그라피[용출제 : 디클로로메탄/메탄올(90 : 10 부피에 의함)]에 의해 정제하고 30℃에서 감압(2.7kPa)하에 유분 36에서 55를 건조상태로 농축한 후에, 융점 약 120℃의 옅은 노란색 고형물 형태로 26-{[(2R)-2-디메틸아미노부틸]티오}프리스티나마이신 Ⅱ_B(이성체 A)(3g)을 수득한다.

여과에 의해 분리한 후에, 아세토니트릴(5cc)속에서 이 생성물 0.9g을 결정화하여 융점 122℃의 흰색 결정형으로 26-{[(2R)-2-디메틸아미노부틸]티오}프리스티나마이신 Ⅱ_B(이성체 A)(0.2g)을 이끌어낸다.

NMR 스펙트럼 : 1(m,

1.4에서 1.7(m,

1.72(s, 33에서 -CH₃), 2.30(s, -N(CH₃)₂), 2.5에서 2.85(m,

와 -H₄), 2.93와 3.10(2dd, 15에서

3.34(넓은 d, -H₂₆), 3.83(s, 17에서

4.76(넓은 s, -H₂₇), 5.48(d, -H₁₃), 6.14(d, -H₁₁), 6.26(dd, 8에서

8.13(s, -H₂₀)

실험은 트리페닐포스핀(52.4g), 디이소프로필 아조디카르복실레이트(40cc), (R)-2-디메틸아미노부탄올(12g)과 디올아세트산(15.2cc)를 출발물질로 하는 것을 제외하고, 하기 참고 실시예 7에서 나타낸 방법과 비슷한 방법으로 하여 (R)-2-디메틸아미노부탄티올을 수득할 수 있다(이 경우에, 중간체 티오에스테르는 실리카 겔 상에서 크로마토그라피하는 동안 직접적으로 가수분해된다).

플래쉬 크로마토그라피[용출제 : 디클로로메탄(1000cc), 이후 디클로로메탄/메탄올(85 : 15 부피에 의함 ; 2000cc), 이후 디클로로메탄/메탄올(80 : 20 부피에 의함 ; 4000cc)]에 의해 정제한 후에, 100-cc 유분을 얻고, 감압하에서 유분 42에서 60을 건조상태로 농축하여 노란색 오일(14g)을 수득한다. 이것을 증류에 의해 정제한다. 이로 인하여 무색액체형[융점(4kPa) 70-75℃]으로 (R)-2-디메틸아미노부탄티올(2.4g)을 수득한다.

M. WENGHOEFER 일행, J. Heterocycl. Chem., 1(6), 1407(1970)에 의해 나타낸 방법과 비슷한 방법으로 (R)-2-디메틸아미노-1-부탄올을 수득할 수 있다.

[참고 실시예 7]

실험은 26-{[(2S)-2-디메틸아미노-3-페닐프로필]티오}프리스티나마이신 Ⅱ_B(이성체 A)(2.67g), 중탄산 나트륨(1.7g)과 98% 순수한 메타-클로로퍼벤조산(0.7g)을 가지고 출발하는 것을 제외하고, 참고 실시예 2에서 나타낸 방법과 비슷한 방법으로 실험한다. 플래쉬 크로마토그라피[용출제 : 클로로포름/메탄올(90 : 10 부피에 의함)]에 의해 정제한 후에, 20-cc 유분을 수집하고 30℃에서 감압(2.7kPa)하에 유분 19에서 23을 건조상태로 농축하여 옅은 노란색 고형물(1.3g)을 수득한다. 이것을 에틸 에테르(50cc) 속에서 휘저어 섞고 여과에 의해 분리하여 융점 약 150℃의 옅은 노란색 고형물 형태로 26-{[(2S)-2-디메틸아미노-3-페닐프로필]티오}프리스티나마이신 Ⅱ_B(이성체 A₂)(1.18g)을 얻는다.

NMR 스펙트럼(400MHz, CDCL₃), 1.73(s, 33에서 -CH₃),

2.44(s, -N(CH₃)₂), 2.77(m, -H₄), 2.89와 3.1(2dd, 15에서

3.18(m, -H₂₆), 3.82(s, 17에서

4.68(d, -H₂₇), 5.51(d, -H₁₃), 6.19(d, -H₁₁), 6.50(dd, 8에서

7.18(d, 페닐의 오르토 -H), 7.23(t, 페닐의 파라 -H), 7.31(t, 페닐의 메타 -H), 8.13(s, -H₂₀), 26-{[(2S)-2-디메틸아미노-3-페닐프로필]설피닐}

프리스티나마이신 Ⅱ_B(이성체 A₂)의 1% 농도 수용액은 다음 화합물로 말미암아 수득된다 :

생성물................30㎎

0.1N염산..................0.45cc

증류수...............qs 3cc

실험은 프리스티나마이신 Ⅱ_A(7.13g)과 (S)-2-디메틸아미노-3-페닐프로판티올(2.65g)으로 출발하는 것을 제외하고, 출발물질의 제조를 위해 실시예 1에서 나타낸 방법과 비슷한 방법으로 실험하여 26-{[(2S)-2-디메틸아미노-3-페닐프로필]티오}프리스티나마이신 Ⅱ_B(이성체 A)를 제조할 수 있다. 플래쉬 크로마토그라피[용출제 : 초산 에틸/메탄올(80 : 20 부피에 의함)]로 정제한 후에, 60-cc 유분을 수집하고, 30℃에서 감압(2.7Pa)하에 유분 33을 43을 건조상태로 농축하여 옅은 노란색 고형물(4.6g)을 수득한다. 에틸 에테르(50cc)속에서 휘저어 섞고, 여과후 45℃에서 감압(90Pa)하에 건조시킨다.

이로 인하여 융점 약 110℃의 옅은 노란색 가루 형태로 26-{[(2S)-2-디메틸아미노-3-페닐프로필]티오}프리스티나마이신 Ⅱ_B(이성체 A)(3.6g)을 수득한다.

NMR 스펙트럼 : 1.69(s, 33에서 -CH₃), 2.38(s, -N(CH₃)₂) 2.35에서 3.05(m,

2.73(m, -H₄), 2.89에서 3.10(2dd, 15에서

3.26(넓은 d, -H₂₆), 3.81(s, 17에서

4.68(넓은 s, -H₂₇), 5.47(d, -H₁₃), 6.12(d, -H₁₁), 6.27(m, 8에서

7.18(d, 페닐의 오르토-H), 7.21(t, 페닐의 파라 -H), 7.30(t, 페닐의 메타 -H), 8.11(s, -H₂₀), (S)-2-디메틸아미노-3-페닐프로판티올은 다음의 방식으로 제조할 수 있다. 나트륨 메틸레이트(0.2g)을 질소 분위기하에서, 메탄올(50cc)에 용해된 조(粗), (S)-2-디메틸아미노-3-페닐프로판티올 아세테이트(20g)에 첨가하고, 2시간 동안 환류하에 혼합물을 가열한다. 이후 혼합물을 30℃에서 감압(2.7kPa)하에 건조상태로 농축시켜 증류에 의해 정제된 액체를 얻는다. 무색 액체형의 [융점 (14Pa)95℃](S)-2-디메틸아미노-3-페닐프로판티올(2.4g)을 수득하고 이것은 다음 반응에서와 같이 사용된다. (S)-2-디메틸아미노-3-페닐프로판티올 아세테이트는 다음의 방법으로 제조할 수 있다 :

질소분위기하에 0℃에서 트리페닐포스핀(41.97g)과 테트라히드로푸란(310cc)를 첨가한 후, 디이소프로필아조디카르복실레이트(31.5cc)을 적가하고, 0℃에서 30분동안 휘저어 섞으면서 혼합물을 방치한다. 테트라히드로푸란(160cc)에 (S)-2-디메틸 아미노-3-페닐프로판올(15g)과 티올아세트산(11.44cc)이 용해된 혼합물을, 수득한 흰색 현탁액에 적가한다. 0℃에서 1시간, 뒤이서 25℃에서 1시간 30분동안 휘저어 섞은 후에, 혼합물을 30℃에서 감압(2.7kPa)하에 건조상태로 농축시킨다. 수득한 오일을 메탄올(190cc)로 처리하고 여과에 의해 흰색 고형물인 침전물을 제거하여 여과물을 30℃에서 감압(2.7kPa)하에 건조상태로 농축시킨다.

이후 잔류물은 이소프로필 에테르(200cc)와 함께 휘저어 섞고, 또 한번 여과에 의해 흰색 고체 침전물을 제거한다. 여과물을 농축하여 노란색 오일(45g)을 얻고 플래쉬 크로마토 그라피[용출제 : 디클로로메탄/메탄올(90 : 10 부피에 의함)]에 의해 정제하고, 100-cc 유분을 수집한다. 30℃에서 감압(2.7kPa)하에 유분 37에서 55를 건조상태로 농축한 후에, 오렌지-노란색 오일형(트리페닐포스핀 옥사이드 함유)으로 (S)-2-디메틸아미노-3-페닐프로판티올 아세테이트(10.4g)을 수득한다.

(S)-2-디메틸아미노-3-페닐프로판올은 T. HAYASHI 일행, J. Org. Chem., 48, 2195(1983)에 의해 나타낸 방법과 비슷한 방법으로 제조할 수 있다.

[참고 실시예 8에서 26]

실험은 참고 실시예 2에서 나타낸 방법과 비슷한 방법으로 실험하여, 다음 생성물을 제조한다.

[참고 실시예 27]

실험은 26-{[(S)-1-메틸-2-피롤리디닐]메틸 티오}프리스티나마이신 Ⅱ_B(이성체 A)(7.8g), 트리플루오로아세트산(0.91cc)와 메타-클로로퍼벤조산(2.4g)을 출발물질로 하는 것을 제외하고, 참고 실시예 1에서 나타낸 방법과 비슷한 방법으로 실험한다.

플래쉬 크로마토그라피[용출제 : 클로로포름/메탄올(90 : 10 부피에 의함)]에 의해 정제한 후에 30℃에서 감압(2.7kPa)하에 유분 26에서 36을 건조상태로 농축하여, 융점 약 140℃의 옅은 노란색 가루형으로 26-{[(S)-1-메틸-2-피롤리디닐]메틸설피닐}프리스티나마이신 Ⅱ_B(이성체 A₂)(2.3g)을 수득한다.

NMR 스펙트럼 : 1.76(s, 33에서 -CH₃), 2.48(s,

1.70에서 2.60(m, -H₂₉와 25에서

2.75에서 3.25(m,

), 3.82(s, 17에서

4.81(d, -H₂₇), 5.22(d, -H₁₃), 6.20(d, -H₁₁), 6.42(dd, 8에서

8.14(s, -H₂₀) 30℃에서 감압(2.7kPa)하에 유분 46에서 59를 건조상태로 농축한 후에, 융점 약 148℃의 엷은 노란색 가루형으로 26-{[(S)-1-메틸-2-피롤리디닐]메틸설피닐}프리스티나마이신 Ⅱ_B(이성체 A₁)(1.1g)을 수득한다.

NMR 스펙트럼 : 1.73(s, 33에서 -CH₃), 1.70에서 2.50(m,

-H₂₉), 2.41(s,

2.65에서 3.25(m, 15에서

-H에서 4,

3.82(한정 AB, 17에서

5.45(d, -H₁₃), 6.17(d, -H₁₁), 8.11(s, -H₂₀), 26-{[1-메틸-2-피롤리디닐]메틸티오}프리스티나마이신 Ⅱ_B는 다음의 방법으로 제조할 수 있다.

실험은 프리스티나마이신 Ⅱ_A(10.5g)과 [(S)-1-메틸-2-피롤리디닐]메탄티올(3.14g)을 출발물질로 하는 것을 제외하고, 유럽 특허 출원 EP 135,410 호의 실시예 1에서 나타낸 방법과 비슷한 방법으로 실험한다. 플래쉬 크로마토그래피[용출제 : 클로로포름/메탄올(90 : 10 부피에 의함)]에 의해 정제하고 30℃에서 감압(2.7kPa)하에 유분 20에서 35를 건조 상태로 농축한 후에, 융점 약 120℃의 노란색 가루형으로 A이성체(7.8g)을 수득한다.

NMR 스펙트럼 : 1.70(s, 33에서 -CH₃), 2.38(s,

1.70에서 2.50(m, H₂₉, 25에서 CH₂와

), 2.6에서 3.20(m,

3.82(s, 17에서

4.73(d, -H₂₇), 5.45(d, -H₁₃), 6.15(d, -H₁₁), 6.41(dd, 8에서

8.11(s, -H₂₀)

4N 수산화 나트륨 수용액(100cc)를, 증류수(100cc)에 용해된 조(粗), S-[(S)-1-메틸-2-피롤리디닐메틸]이소티오우로늄 디히드로클로라이드(25g)에 첨가한 후, 90℃에서 질소분위기 하에 2시간동안 혼합물을 휘저어 섞는다. 반응 혼합물을 0℃로 냉각하고, 12N 염산 수용액(25cc)으로 처리후 염화 메틸렌(2×200cc)으로 추출한다. 유기상은 황산 나트륨을 가지고 건조, 여과후 30℃에서 감압(2.7kPa)하에 건조상태로 농축시킨다. 이로 인하여 엷은 노란색 오일형으로 [(S)-1-메틸-2-피롤리디닐]메탄티올(5.9g)을 수득하고 더 이상의 정제없이 다음 단계의 반응에서 사용한다.

Rf=0.15 : 실리카겔 크로마토그라피판 ; 용출제 : 클로로포름/메탄올(90 : 10 부피에 의함)

티오우레아(10.7g)를, 에탄올(50cc)에 용해된 [(S)-1-메틸-2-피롤리디닐]클로로메탄 히드로클로라이드(11.9g)에 첨가한 후 혼합물을 48시간동안 환류하에 휘저어 섞는다. 혼합물을 40℃에서 감압(2.7kPa)하에 건조상태로 농축시킨다. 잔류물은 뜨거운 에탄올(100cc)로 흡수한 후 활성화된 식물성 목탄상에서 여과한다. 40℃에서 감압(2.7kPa)하에 여과물을 건조상태로 농축한 후에, S-[(S)-1-메틸-2-피롤리디닐메틸]이소티오우로늄 디히드로클로라이드와 과량의 티오우레아로 구성된 엷은 노란색 오일(25g)을 수득한다.

Rf=0.1 ; 실리카겔 크로마토그라피판 ; 용출제 : 클로로포름/메탄올(90 : 10 부피에 의함)

[(S)-1-메틸-2-피롤리디닐]클로로메탄 히드로클로라이드는 T. HAYASHI 일행, J. Org. Chem., 48, 2195(1983)에 의해 나타낸 방법에 따라 제조할 수 있다.

[참고 실시예 28]

실험은 26-[(1-메틸-4-피페리딜)티오]프리스티나마이신 Ⅱ_B(2.6g), 트리플루오로아세트산(0.3cc)과 메타-클로로퍼벤조산(0.8g)을 가지고 출발하는 것을 제외하고 참고 실시예 1에서 나타낸 방법과 비슷한 방법으로 실험한다. 플래쉬 크로마토그라피[용출제 : 클로로포름/메탄올(90 : 10 부피에 의함)]에 의해 정제한 후에, 40-cc 유분을 수집하고 30℃에서 감압(2.7kPa)하에 유분 20에서 35를 건조상태로 농축하여, 융점 약 170℃의 노란 가루형으로 26-[(1-메틸-4-피페리딜)살피닐]프리스티나마이신 Ⅱ_B(이성체 A₂)(0.33g)을 수득한다.

NMR 스펙트럼 : 1.76(s, 33에서 -CH₃), 2.2에서 3.00(m,

), 2.32(s,

3.82(s, 17에서 CH₂), 4.85(d, -H₂₇), 5.50(d, -H₁₃), 6.19(d, -H₁₁), 6.37(dd, 8에서

8.15(s, -H₂₀)

26-[(1-메틸-4-피페리딜)티오]프리스티나마이신 Ⅱ_B는 다음의 방법으로 수득할 수 있다 :

실험은 트리에틸아민(0.6g)을 반응 혼합물에 첨가하고 동시에 프리스티나마이신 Ⅱ_A(3.15g)과 1-메틸-4-피페리딘티올(1.6g)을 출발물질로 하는 것을 제외하고, 유럽 특허 출원 EP 135,410 호의 실시예 1에서 나타낸 방법과 비슷한 방법을 실험한다. 플래쉬 크로마토그라피[용출제 : 염화 메틸렌 : 메탄올(92 : 8 부피에 의함)]에 의해 정제하고 30℃에서 감압(2.7kPa)하에 유분 4에서 20을 건조상태로 농축시킨후에, 융점 약 180℃의 노란색 가루 형으로 26-[(1-메틸-4-피페리딜)티오]프리스티나마이신 Ⅱ_B(0.9g)을 수득한다.

NMR 스펙트럼 : 2.10(c, 4H ;

), 2.25(s, 3H :

2.80(c, 4H ;

), 3.55(c, 1H : -H₂₆), 4.62(c, 1H : -H₂₇), 7.70(c, 1H : -H₈), 8.10(s, 1H : -H₂₀).

1-메틸-4-피페리딘티올은 H. BARRER과 R. E. LYLE, J. Org. Chem., 27, 641(1962)에 의해 나타낸 방법에 의해 제조할 수 있다.

[참고 실시예 29]

트리플루오로아세트산(0.92cc)를, 질소분위기하, 0℃에서 메탄올(60cc)에 용해된 26-[(2-디에틸아미노에틸)티오]프리스티나마이신 Ⅱ_B(7.8g)에 첨가한다. 0℃에서 15분후에, 온도는 15℃로 상승한 후 이산화셀레늄(1.37g)을 첨가한다. 모든 이산화셀레늄이 용해될 때, 25℃ 이하의 온도에서 30% 농도과산화수소 수용액(7cc)를 서서히 첨가한다. 25℃에서 1시간 동안 휘저어 섞은후에, 반응혼합물을 10℃로 냉각하고, 포화수성 중탄산 나트륨용액(50cc)으로 처리한후 염화메틸렌(4×50cc)으로 추출한다. 유기상을 조합하고, 황산 마그네슘으로 건조, 여과후 30℃에서 감압(2.7kPa)하에 건조상태로 농축한다. 수득한 노란색 고형물은 플래쉬 크로마토그라피[용출제 : 클로로포름/메탄올(90 : 10 부피에 의함)]으로 정제하고, 40-cc 유분을 수집한다. 30℃에서 감압(2.7kPa)하에 유분 31에서 38을 건조상태로 농축시킨후에, 노란색 고형물을 수득한다. 이것을 플래쉬 크로마토그라피[용출제 : 초산에틸/메탄올(80 : 20 부피에 의함)]에 의해 정제하고, 40-cc 유분을 수집한다. 감압하에서 유분 27에서 33을 건조상태로 농축시킨후에, 흰색 고형물을 수득한다. 이것을 에틸에테르(50cc)에서 휘저어섞고 여과에 의해 분리한 후 30℃에서 감압(90Pa)하에 건조시킨다. 그것에 의해 융점 약 150℃의 흰색 고형물 형태로 26-[(2-디에틸아미노에틸)설포닐]프리스티나마이신 Ⅱ_B(이성체 A)(0.5g)을 수득한다.

NMR 스펙트럼 : 0.97(d, 30과 31에서 -CH₃와 에틸의 -CH₃), 1.75(s, 33에서 -CH₃), 2.62(q,

), 3.00에서 3.40(m,

3.82(s, 17에서

5.34(d, -H₁₃), 5.43(d, -H₁₃), 6.16(d, -H₁₁), 6.54(dd, 8에서

8.10(s, -H₂₀).

[참고 실시예 30]

과정은 26-[(2-디이소프로필라미노에틸)티오]프리스티나마이신 Ⅱ_B(이성체 A)(6.86g), 트리플루오로아세트산(0.77cc), 이산화셀레늄(1.15g)과 30% 농도 과산화수소 수용액(6.33cc)을 출발물질로 하는 것을 제외하고, 참고 실시예 29에서 나타낸 과정과 비슷하다. 플래쉬 크로마토그라피[용출제 : 초산에틸/메탄올(80 : 20 부피에 의함)]에 의해 정제한후에, 40-cc 유분을 수집하고 30℃에서 감압(2.7kPa)하에 유분 28에서 31을 건조상태로 농축시켜 노란색 고형물(0.7g)을 수득한다. 이것을 또다시 플래쉬 크로마토그라피[용출제 : 초산 에틸/메탄올(85 : 15 부피에 의함)]로 정제하고, 30-cc 유분을 수집한다. 감압하에 유분 26에서 33을 건조상태로 농축시킨 후에, 노란색 고형물을 수득하고 이것을 에틸 에테르(30cc)속에서 휘저어 섞는다. 여과에 의해 분리한 후 30℃에서 감압(90Pa)하에 건조시킨다. 융점 140℃의 엷은 노란색 고형물 형태로 26-[(2-디이소프로필아미노에틸)설포닐]프리스티나마이신 Ⅱ_B(이성체 A)(0.6g)을 수득한다.

NMR 스펙트럼 : 1.06(d, CH₃이소프로필), 1.75(s, 33에서 -CH₃), 2.79(m, -H₄), 2.92와 3.10(2dd, 15에서

2.7에서 3.30(m,

3.52(넓은 d, -H₂₆), 3.82(s, 17에서

5.27(날카로운 d, -H₂₇), 5.47(d, -H₁₃), 6.17(d, -H₁₁), 6.42(m, 8에서

8.12(s, -H₂₀).

또한 본 발명은, (1) 생성물과 양립할 수 있고 제약학적으로 허용할 수 있는 하나 또는 그 이상의 희석제 혹은 보조제 ; 또는, (2) 프리스티나마이신 Ⅱ_A또는 바람직하게 일반식(Ⅶ)의 프리스티나마이신 Ⅱ_B의 용성 유도체중 어느 하나와 결합한, 유리 염기형 또는 제약학적으로 허용할 수 있는 산과의 부가염 형인, 일반식(Ⅰ)의 생성물로 이루어진 제약학적으로 조성물을 제공한다.

본 발명에 따른 약 조성물은 비경구적, 경구적, 직장 또는 경피적으로 사용할 수 있고, 만약 원한다면 다른 생리적 활성 성분을 포함할 수 있다.

비경구적 투여를 위한 멸균 조성물은 바람직하게 수성 또는 비수성 용액, 또는 현탁액 또는 에멀션이다. 용매 또는 부형제로, 물, 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 식물성 오일, 특히 올리브유, 주사용 유기 에스테르, 예를들면 에틸 올레에이트, 또는 다른 적당한 유기용매를 사용하는 것이 가능하다. 또한 이러한 조성물은 첨가제, 특히 습윤제, 삼투성 조절제, 에멀션화제, 분산제 및 안정제를 포함한다. 멸균은 몇가지 방법, 예를들면 무균 여과, 조성물속의 멸균제 혼입, 방사선 조사 또는 가열에 의해 수행할 수 있다. 또한 그것들은 주사용 멸균매질속에서 사용시에 용해될 수 있는 멸균 고체 조성물 형태로 제조할 수 있다.

직장 투여를 위한 조성물은 활성성분 이외의 코코아 버터, 반(半)합성 글리세라이드 또는 폴리에틸렌 글리콜과 같은 부형제를 포함하는 좌제 또는 직장 캡슐(capsule)이다.

경구 투여를 위한 고체 조성물로는 정제, 환제, 가루 또는 과립을 사용할 수 있다. 이러한 조성물에서, 본 발명에 따른 활성 생성물 적절하게, 또 다른 제약학적으로 양립할 수 있는 생성물과 조합함은 설탕, 유당 또는 녹말과 같은 첨가물, 또는 하나 또는 그 이상의 불활성 희석제와 혼합한다. 또한 조성물은 희석제 이외의 다른 물질, 예를들면 마그네슘 스테아레이트와 같은 윤활제를 포함할 수 있다.

경구 투여를 위한 액체 조성물로는, 제약학적으로 허용할 수 있는 에멀션 용액, 현탁액, 시럽과 물 또는 액체 파라핀과 같은 불활성 희석제를 포함한 엘릭시트를 사용할 수 있다. 또한 이 조성물은 희석제 이외의 다른 물질, 예를들면, 습윤제, 감미제 또는 향미제를 포함할 수 있다.

경피 투여를 위한 조성물은 예컨대, 크림, 연고제, 로션, 점안액, 양치질약, 점비약 또는 에어로졸일 수 있다.

인간의 치료에서, 본 발명에 따른 생성물은 세균 원인의 감염에 대한 치료에 특히 유용하다. 투여량은 조사된 효과 및 치료 기간에 의존한다. 성인의 경우, 투여량은 비경구적으로, 특히 정맥적으로 또는 느린 관류에 의해서, 하루에 2000 내지 4000㎎이 일반적이다.

다음 실시예는 본 발명에 따른 조성물을 예증한다.

[실시예 A]

활성 생성물 5g/l를 함유하고 다음의 조성을 갖는 관류를 위한 주사용 용액은 보통기술에 따라 제조된다 ;

5δ-[(3S)-3-퀴누클리디닐]티오메틸 5g

프리스티나마이신 I_A…

0.1N 염산 수용액… 49cc

증류수… qs 1000cc

[실시예 B]

활성 혼합물 1g/l를 함유하고 다음의 조성을 갖는 관류를 위한 주사용 용액은 보통 기술에 따라 제조한다 :

5δ-[(3S)-3-퀴누클리디닐]티오메틸 0.4g

프리스티나마이신 I_A…

26-[(2-디에틸아미노에틸)설포닐]-

프리스티나마이신 Ⅱ_B, 이성체 A… 0.6g

0.1N 염산 수용액… 12.6cc

증류수… qs 1000cc

[실시예 C]

활성 혼합물 1g/l를 함유하고 다음의 조성을 갖는 관류를 위한 주사용 용액은 보통기술에 따라 제조한다 :

5δ-[(3R)-3-퀴누클리디닐]티오메틸 0.4g

프리스티나마이신 I_A…

26-[(2-디이소프로필아미노에틸)설포닐]-

프리스티나마이신 Ⅱ_B, 이성체 A… 0.6g

0.1N 염산 수용액… 12.3cc

증류수… qs 1000cc

[실시예 D]

5δ-[(3-퀴누클리디닐]티오메틸 0.4g

프리스티나마이신 I_A…

26-[(2-디에틸아미노프로필)설피닐]-

프리스티나마이신 Ⅱ_B, 이성체 A… 0.6g

0.1N 염산 수용액… 12.7cc

증류수… qs 1000cc

Claims

하기식 (Ⅱ)의 티올을 하기식 (Ⅲ)의 화합물과 반응시키고, 임의로 그 이성체를 분리하고, 임의로 이를 제약학적으로 수용가능한 염으로 전환시키는 것으로 구성된, 이성체 또는 그 혼합물 형태로 하기식 (Ⅰ)의 시네르 지스틴 및 그 제약학적으로 수용가능한 염을 제조하는 방법.

R-SH

상기 식들에서, Y는 수소 또는 디메틸아미노이고, R은 3- 또는 4-퀴누클리디닐이다.