DK171256B1

DK171256B1 - Analogifremgangsmåde til fremstilling af derivater af bicycliske aminosyrer eller fysiologisk acceptable salte deraf

Info

Publication number: DK171256B1
Application number: DK130683A
Authority: DK
Inventors: Hansjoerg Urbach; Rainer Henning; Volker Teetz; Hans Wissmann; Reinhard Becker
Original assignee: Hoechst Ag
Priority date: 1982-03-23
Filing date: 1983-03-22
Publication date: 1996-08-12
Also published as: FI830938L; PH22323A; CA1223868A; DE3366919D1; US4562202A; MA19753A1; DE3210496A1; AU1270483A; JPH0559104B2; GR78519B; NO162856B; FI76559C; ATE22883T1; FI830938A0; IL68199A; AR247199A1; NO162856C; ES8402270A1; ES520802A0; US4668797A

Description

DK 171256 B1

Opfindelsen angår en analogifremgangsmåde til fremstilling af hidtil ukendte derivater af bicycliske aminosyrer med den almene formel

5 H

L

10 # \* * C) CH - NH - CH - CH2“ CH2 I i I 2

R C02R

15 i hvilken R betyder hydrogen eller (0^-4)-alkyl, R1 betyder hydrogen, -alkyl, (C2 eller C3) -alkenyl, benzyl, phen- ethyl, 4-aminobutyl eller benzoylmethyl, og R2 betyder hydrogen, (C1_4)-alkyl eller benzyl, eller fysiologisk acceptable salte deraf. Disse forbindelser har nyttig blodtrykssænkende 20 virkning som nærmere omtalt i det følgende.

På tale som salte kommer især alkalimetal- og jord-alkalimetalsalte, salte med fysiologisk acceptable aminer og salte med uorganiske eller organiske syrer, såsom HCl, HBr, H2SO4, maleinsyre og fumarsyre.

25 De ovennævnte alkylgrupper kan være ligekædede eller forgrenede.

I den foretrukne konfiguration af H-atomerne ved C-3a og C-7a i den bicycliske ring kommer der to mulige konfigurationer af carboxygruppen i betragtning, carboxygruppens 30 exo-stilling (formelgruppe la) og endo-stilling (formelgruppe Ib) .

Carboxygruppens endo-stilling ved C-2 er defineret således, at carboxygruppen er vendt i retning af den bicycliske gruppes 6-ring, dvs. den konkave side af den bicycliske 35 ring (formelgruppe Ib) .

Tilsvarende er carboxygruppens exo-stilling ved C-2 DK 171256 B1 2 defineret således, at carboxygruppen er orienteret i retning af de pågældende brohoved-H-atomer (formelgruppe la) .

cfrx Cfck ^^i1'^C02R Μ^Γΐο,Η Η » H ^ 10 (I a) (I *>)

Forbindelserne med formlen (I) besidder chirale car-15 bonatomer i positionerne C-2, C-3a og C-7a samt i de med (*) markerede carbonatomer i sidekæden. Både R- og S-kon-figurationerne i alle centrene er omfattet af den foreliggende opfindelse. Forbindelserne med formlen (I) kan således foreligge som optiske isomere, som diastereomere, som race-20 mater eller som blandinger deraf. Der foretrækkes dog forbindelser med formlen (I) , hvori carbonatom nr. 2 i det bicycliske ringsystem samt de med en stjerne (*) markerede carbonatomer i sidekæden udviser S-konfiguration.

Særligt foretrukne forbindelser med formlen (I) er 25 sådanne, i hvilke R betyder hydrogen, og R1 betyder methyl, især forbindelser (I), i hvilke R betyder hydrogen, R1 betyder methyl, og R2 betyder hydrogen eller ethyl og specielt foretrækkes forbindelser (I), i hvilke carboxygruppen ved carbonatomet i 2-stillingen af hexahydroindolsystemet er 30 orienteret i endo-stilling til bicyclusen, og det nævnte carbonatom samt de med en stjerne markerede carbonatomer i sidekæden hver gang udviser S-konfiguration, R betyder hydrogen, R1 betyder methyl, og R2 betyder ethyl.

Fremgangsmåden ifølge opfindelsen er ejendommelig 35 ved, at DK 171256 B1 3 a) en forbindelse med formlen HO,C-CH-NH-CH - CH9-CH_-^3 (II) η · 2 z

5 RX C02RX

hvori R1 og R2 har de ovenfor angivne betydninger, omsættes med en forbindelse med formlen 10 (I1I>

15 W

hvori W betyder hydrogen eller en surt fraspaltelig gruppe, især er tert.butylgruppe,hvorefter eventuelt W og/eller R2 fraspaltes under dannelse af de frie carboxygrupper, eller 20 b) at en forbindelse med formlen

H

a3* (IV) ^Aco2w I 2 H CO-CH-NH0 I 2 R1 30 i hvilken R1 og W har den ovenfor angivne betydning, omsættes med en forbindelse med formlen 35 DK 171256 B1 4 C02R2 0 = CV (VIII) 5 CH2-CH2-<0> hvori R2 har den ovenfor angivne betydning, hvorpå den frem-10 stillede Schiff-base reduceres, og hvorefter eventuelt W og/eller R2 fraspaltes under dannelse af de frie carboxygrup-per, hvorpå ifølge a) eller b) fremstillede forbindelser med formlen (I) , hvori R betyder hydrogen, eventuelt omdannes til estere med formlen (I), hvori R betyder (0^.4)-alkyl, 15 og forbindelser med formlen (I) eventuelt omdannes til fysiologisk acceptable salte deraf.

Omsætningen ifølge b) af en forbindelse (IV) med en forbindelse (VIII) udføres som beskrevet i J.A.C.S. 93, 2897 (1971).

20 Forbindelserne med formlen (11ϊ> 2 5 ^ 1|S:o2w Η H 2 hvori hydrogenatomerne ved carbonatornerne 3a og 7a er cis-konfigureret i forhold til hinanden, og gruppen -CO2W ved 30 carbonatom 2 er orienteret i exo- eller endo-stilling i forhold til det bicycliske ringsystem, og hvori W betyder hydrogen eller en surt fraspaltelig gruppe, er som angivet udgangsforbindelser ved syntesen af forbindelser med formlen (I) og kan fremstilles ved følgende metode: 35

O

DK 171256 B1 5

Forbindelser med formlen N iIX) 5 2' co2r 2 1 hvori R betyder (C^-Cg)-alkyl eller (Cj-Cg)-aralkyl, omsættes med acyleringsmidler, son overfører gruppen -CO-R^, hvori gruppen R^ betyder (C^-Cg)-alkyl, (Cg-Cg)-cycloalkyl, (C2-Cg)-al-10 kenyl, (C^-Cg)-alkoxy, aryl, aryloxy, aryl- (C1-C4) -alkyl eller aryl-(C^-C^)-alkoxy, til dannelse af forbindelser med formlen c°2R2' 16 CH (X) COR-3 2' 3 hvori R og R har den ovenfor anførte betydning, hvorpå disse cycliseres til en blanding af stereoisomere forbindelser med formlen

20 H

I 2« <XI> n^Uc°2r

Η I 3 COR

21 3 25 hvori R og R har den ovenfor anførte betydning, og hydrogenatomerne ved brohoved-carbonatomet er cis-konfigureret, hvorefter denne stereoisomerblanding, hvori der, alt efter om der gås ud fra R-, S-konfigurerede eller racemiske forbindelser med formlen (IX), foreligger diastereomere par med form-30 lerne (Xlb) og (Xld) eller (Xla) og (XIc) eller blandinger med formlerne (Xla-d) o 35

O

6 DK 171256 B1

H

r^f—i . Cl—I

c°or2 '^^^^^^'''''/CO^R1 ' 6 I , 1 3

COR3 C0R

(XI a) (XI b)

10 H

C^r^top,2 Qt*'':''Co2rJ 1

COR3 COR

15 (XI c) (XI d) 2' 3 hvori R og R hver gang har den ovenfor anførte betydning, eventuelt efter forudgående opdeling i enantiomere, diastereo-mere par eller racemater, forsæbes til forbindelser med form-20 len (III) , hvori W betyder hydrogen, og disse eventuelt forestres til forbindelser med formlen (III), hvori W betyder en surt fraspaltelig gruppe.

Ved syntesen af forbindelser med formlen (IX) gås der ud fra en allylglycinester med formlen 25 NH2 „2· 1X11 >

CH2 C02R

hvori R betyder (C^-Cg)-alkyl eller (Cj eller Cg)-aralkyl, 30 fortrinsvis (C^-C^)-alkyl eller benzyl. Allylglycinesteren kan anvendes i syntesen som racemisk forbindelse eller som optisk ren R- eller S-form. Syntesen af den racemiske allyl-glycin er beskrevet i Monatshefte der Chemie 85^, 1071 (1954) , syntesen af S- og R-forbindelserne i J. Biol. Chem. 223, si-35 de 40 (1955). Forestringen sker ifølge kendte metoder inden

O

DK 171256 B1 7 for den organiske kemi. Fremstillingen af ethylesteren er beskrevet i artiklen i det ovenfor omtalte Monatshefte der Chemie.

Forbindelsen med formlen (XII) omsættes med crotonal-5 dehyd i et organisk opløsningsmiddel under vandudskillelse til Schiff-basen med formlen (IX). Reaktionen gennemføres ved temperaturer i området fra -40 til +80°C, fortrinsvis ved +20°C. Der anvendes aprotiske opløsningsmidler, såsom benzen, toluen, carbontetrachlorid eller chloroform. Reaktionsvan-10 det fjernes med et vandbindende middel, f.eks. MgS04, Na2S04, molekylarsigte eller et organisk hjælpestof, såsom orthomy-resyreester,eller ved hjælp af azeotrop vandudskillelse fra reaktionsligevægten.

Den Schiff'ske base acyleres fortrinsvis i et apro-15 tisk opløsningsmiddel, såsom methylenchlorid, chloroform, toluen eller dimethylformamid, i nærværelse af en base, såsom triethylamin, collidin, pyridin eller andre aminer, med et acyleringsmiddel, såsom et syrechlorid, til dannelse af dien-amidet med formlen (X). Reaktionen gennemføres ved temperatu-20 rer i området fra -80 til +40°C. Det foretrækkes at starte reaktionen ved -80°C og at føre den til ende ved 20°C.

3 I acyleringsmidlet, der overfører gruppen -CO-R , betyder 3 R fortrinsvis phenyl, tert.butoxy, methyl, methoxy eller ethoxy. Forbindelsen med formlen (X) opvarmes fortrinsvis i 25 et højtkogende organisk opløsningsmiddel og cycliseres i en intramolekylær Diels-Alder-reaktion til de bicycliske amino-syrederivater med formlen (Xla-d), der forekommer som stereo-isomerblanding.

Som opløsningsmidler kan der anvendes sådanne, der ko-30 ger inden for temperaturområdet mellem 80 og 250°C, såsom toluen, xylen og dichlorbenzen. Thermolysen er også mulig med et lavere kogende opløsningsmiddel i et trykapparat. Fortrinsvis gennemføres termolysen i temperaturområdet mellem 100 og 180°C ved normaltryk. Til desaktivering af reaktionsbeholde-35 rens glasoverflade tilsættes der eventuelt bistrimethylsilylaoet-

O

8 DK 171256 B1 amid eller gængse desaktiverende forbindelser eller syrefangere samt en radikalfanger, såsom tert.butylcatechol, til undertrykkelse af radikale sidereaktioner.

Endo-cis-forbindelserne (Xla) og (Xlb) og exo-cis-5 -forbindelserne (XIc) og (Xld) foreligger hver gang som racemater ved anvendelse af den racemiske allylglycinester (XII). Ved anvendelse af den S-konfigurerede allylglycinester som udgangsforbindelse fås aminosyrederivaterne (Xla) med cis-endo--S-konfiguration og (XIc) med cis-exo-konfiguration, hvorved 10 S-konfigurationen refererer til carbonatom 2. Ved anvendelse af den R-konfigurerede allylglycinester fås tilsvarende de ved carbonatom 2 R-konfigurerede aminosyrederivater (Xlb) og (Xld). Racematerne (Xla)/(Xlb) og (XIc)/(Xld) eller diastereo-merene (Xla) og (XIc) eller (Xlb) og (Xld) kan adskilles f.eks. 15 ved fraktioneret krystallisation eller ved søjlechromatografi på silicagel ifølge gængse metoder. I de videre reaktioner kan anvendes racematerne eller de optisk rene diastereomere.

Ved sur eller alkalisk forsæbning fås de aminosyrer med formlen (III), hvori W betyder hydrogen. Aminosyrerne kan 20 eventuelt forestres. De foretrukne tert.butylestere af aminosyrerne med formlen (III) (W = tert.butyl) fremstilles ifølge de inden for peptidkemien gængse metoder, såsom ved omsætning af syrerne med isobutylen i et indifferent organisk opløsningsmiddel (f.eks. dioxan) i nærværelse af syrer (såsom svovl-25 syre). Følgende metode har vist sig særlig fordelagtig:

En passende aminosyre acyleres ved nitrogenet med en basisk fraspaltelig gruppe, såsom methylsulfonylethoxycarbonyl-gruppen (= MSC), Tesser, Balvert-Geers, Int. J. Pept. Protein Res. 2/ 295 (1975). Carboxylsyren omsættes inden for det neutra-30 le til svagt basiske pH-område med tert.butanol i et organisk opløsningsmiddel, såsom pyridin, i nærværelse af propylphos-phonsyreanhydrid til den tilsvarende tert.butylester. Ved fra- spaltning af MSC-beskyttelsesgruppen inden for det stærkt alkaliske pH-område med alkali i et vandigt opløsningsmiddel fås tert.bu-35 tylesteren med formlen (III) (W = tert.butyl).

DK 171256 B1 9

De som udgangsforbindelser til fremstilling af forbindelserne med formlen (I) anvendte forbindelser med formlen (II) , hvor R1 betyder methyl, og R2 betyder methyl eller ethyl, er kendte (EP patentansøgning nr. 37.231). Forbindel-5 serne med formlen (II) kan fremstilles ved forskellige metoder. En syntesevariant går ud fra acetophenon, som ifølge kendte metoder omsættes ved en Mannich-reaktion med en forbindelse med formlen OCH-COOR2 (VI) sammen med aminosyreeste-re med formlen (XIII) 10 H2N - CH - C02w w o2c-ch-nh-ch-ch2-co-£) r1 R1 C02R2 15 (XIII) <XIV) hvori R1 har den ovenfor anførte betydning, og W betyder en hydrogenolytisk eller surt fraspaltelig gruppe, især en benzyl- eller en tert.butyl-gruppe, til dannelse af en for-20 bindelse med formlen (XIV) , hvori R1, R2 og W har de ovenfor anførte betydninger, bortset fra, at når W betyder en hydrogenolytisk fraspaltelig gruppe, især benzyl, må R2 ikke have sammen betydning som W. Såfremt gruppen W fraspaltes hydrogenolytisk ved hjælp af f.eks. palladium, fås der ved 25 en hydrogenoptagelse på 3 molækvivalenter forbindelser med formlen (II).

Forbindelser med formlen (XIV) er også tilgængelige ved Michael-additioner af en forbindelse med formlen 30 R2OOC-CH=CH-CO-^ og en forbindelse med den ovenfor anførte formel (XIII) ifølge kendte metoder. Denne metode egnet sig især til fremstilling af sådanne forbindelser med formlen (XIV), hvori 35 R1 betyder methyl, og R2 betyder ethyl.

DK 171256 B1 10 o

Forbindelserne med formlen (XIV) fremkommer som diaste-reomerblandinger. Foretrukne diastereomere med formlen (XIV) er sådanne, hvori de med en stjerne markerede chirale carbon-atomer hver gang udviser S-konfiguration. Disse kan f.eks.

5 skilles fra ved krystallisation eller ved chromatografi, f.eks. på silicagel. Ved den efterfølgende fraspaltning af gruppen W bibeholdes konfigurationen af de chirale carbonatomer.

De som udgangsforbindelser til fremstilling af forbindelserne af formlen (I) anvendte forbindelser med den ovenfor 10 anførte formel (IV) fremstilles ifølge kendte metoder ud fra forbindelserne med den ovenfor anførte formel (III) ved omsætning med en N-beskyttet 2-aminocarboxylsyre med formlen V - HN - CH - CO~H (XV) 15 R1 hvori V betyder en beskyttelsesgruppe, og R1 har den ovenfor anførte betydning. På tale som beskyttelsesgruppe V, som efter endt reaktion igen spaltes fra, kommer f.eks. tert.butoxy-20 carbonyl.

Omsætningen af en forbindelse med formlen (II) med en forbindelse med formlen (III) til fremstilling af en forbindelse med formlen (I) sker ifølge en inden for peptidkemien kendt kondensationsreaktion, hvor der som kondensationsmiddel 25 tilsættes f.eks. dicyclohexylcarbodiimid og 1-hydroxybenzotria-zol. Ved den efterfølgende sure fraspaltning af gruppen W anvendes der som syrer fortrinsvis trifluoreddikesyre eller hy-drogenchlorid.

Ved de ovenfor beskrevne reaktioner til fremstilling af 30 forbindelserne med formlerne (III), (IV) og (I) bibeholdes hver gang konfigurationerne af mellemprodukterne ved brohoved-carbonatomerne 3a og 7a.

De ved den ovenfor beskrevne fremgangsmåde fremstil-35 DK 171256 B1 11 o lede forbindelser med formlen (III) fremkommer som blanding og kan f.eks. adskilles ved omkrystallisation eller ved chroma tograf i.

Forbindelserne med formlen (III) fremkommer som race-5 miske blandinger og kan anvendes som sådanne i de yderligere ovenfor beskrevne synteser. De kan imidlertid også anvendes som rene enantiomere efter opdeling af racematet efter gængse metoder, f.eks. via saltdannelse med optisk aktive baser eller syrer,i de optiske antipoder. Man kan også fremstille 10 de rene enantiomere.

Såfremt forbindelserne med formlen (I) fremkommer som racemater, kan disse også ifølge gængse metoder, såsom via saltdannelse med optisk aktive baser eller syrer, spaltes i deres enantiomere eller adskilles ved chromatografi.

15 De her omhandlede forbindelser med formlen (I) fore ligger som indre salte, såfremt R betyder hydrogen. Som am-photere forbindelser kan de danne salte med syrer eller baser. Disse salte fremstilles på gængs måde ved omsætning med et ækvivalent syre eller base.

20 Forbindelserne med formlen (I) og saltene heraf besid der en langvarig, intensiv blodtrykssænkende virkning. De virker som stærke hæmmere af angiotensin-omdannelsesenzymet (ACE-hæmmere). De kan anvendes til bekæmpelse af forhøjet blodtryk af forskellig genese. En kombination med andre blod-25 trykssænkende, karudvidende eller diuretisk virksomme forbin delser er også mulig. Typiske repræsentanter for denne klasse af aktive forbindelser er f.eks. beskrevet i Erhardt-Ruschig, Arzneimittel, 2. oplag, Weinheim, 1972. Anvendelsen kan ske intravenøst, subcutant eller peroralt.

30 Doseringen ved oral indgivelse ligger på 1-100 mg, for trinsvis på 1-40 mg pr. enkeltdosis ved en voksen patient med en normal vægt. Dette svarer til en dosis på 0,013 til 1,3 mg/-kg/dag, fortrinsvis 0,013-0,53 mg/kg/dag. Doseringen kan i alvorlige tilfælde desuden forhøjes, da der hidtil ikke er 35 iagttaget toksiske egenskaber. Også en nedsættelse af dosis-

O

12 DK 171256 B1 enheden er mulig og først og fremmest passende, når der indgives diuretika samtidig.

De her omhandlede forbindelser kan indgives oralt eller parenteralt i et passende farmaceutisk præparat. Til en oral 5 anvendelsesform blandes de aktive forbindelser med de hertil gængse tilsætningsstoffer, såsom bærestoffer, stabilisatorer eller indifferente fortyndingsmidler, og omdannes ifølge gængse metoder til egnede indgiveIsesformer, såsom tabletter, dragées, stikkapsler, vandige, alkoholiske eller olieagtige sus-10 pensioner eller vandige, alkoholiske eller olieagtige opløsninger. Som indifferente bærestoffer kan der anvendes f.eks. gummi arabicum, magnesiumcarbonat, kaliumphosphat, mælkesukker, glucose eller stivelse, især majsstivelse. I denne forbindelse kan præpareringen ske både som tør- og fugtgranulat.

15 På tale som olieagtige bærestoffer eller opløsningsmidler kommer f.eks. vegetabilske og animalske olier, såsom solsikkeolie eller levertran.

Til subcutan eller intravenøs indgivelse omdannes de aktive forbindelser eller de fysiologisk acceptable salte der-20 af, om ønsket med de dertil gængse substanser, såsom opløsningsformidlere, emulgatorer eller yderligere hjælpestoffer,til opløsninger, suspensioner eller emulsioner. På tale som opløsningsmidler til de her omhandlede aktive forbindelser og de tilsvarende fysiologisk accaptable salte kommer f.eks. vand, 25 fysiologiske kogsaltopløsninger eller alkoholer, såsom ethanol, propandiol eller glycerol, samt sukkeropløsninger, såsom glucose- eller mannitolopløsninger eller også en blanding af de forskellige nævnte opløsningsmidler.

Den overordentligt kraftige virkning af forbindelserne 30 med formlen (I) er eksemplificeret ved de farmakologiske data i den følgende tabel:

Intraduodenal indgivelse til en narkotiseret rotte, 50%'s hæmning af den ved 310 ng angiotensin i udløste pressorreaktion 30 minutter efter indgivelse i en dosis på 38 .......- EDS0!

O

DK 171256 B1 13

Tabel I

(Hydrogenatomerne ved C-3a og C-7a i formlen (I) har cis-konfiguration, carboxylgruppen ved C-2 har endo-konfigu-ration, og de med stjerne markerede carbonatomer og C-2 har 5 S-konfiguration, når der ikke er anført andet i tabellen. ) R2 R1 R ED5q(ug/kg) 10--- C2H5 CH3 H 40 15 H CII3 H 600 C2H CH- H 80 (R, S-Kon- ^ ^ Δ figuration ved C-2 med formlen 20 (I) 25 Symbolerne R, R1 og R2 refererer til forbindel serne med formlen (I)

Tabel II

(Hydrogenatomer ved C-3a og C-7a i formlen (I) har cis-30 -konfiguration, carboxylgruppen har exo-konfiguration, og de med stjerne markerede carbonatomer og C-2 har S-konfiguration.) 35 DK 171256 B1 14 R2 R1 R ED50 (/xg/kg) C2H5 CH3 H 70 5 H CH3 H 700

Symbolerne R, R1 og R2 refererer til forbindelserne med formlen (I) .

10 Den ene dobbeltbinding i den carbocycliske del af det bicycliske system i de her omhandede forbindelser fører til en uventet fordelagtig virkning af den ovenfor angivne art i forhold til virkningen af kendte, nært beslægtede forbindelser: 15 Det såkaldte "pressor-response" med hensyn til an giotensin I hos anæstetiserede rotter er således blevet undersøgt med følgende resultat:

For forbindelsen fremstillet ifølge opfindelsen med formlen 20

I I /--C00H

(s) (s) ' co-ch-nh-ch-ch2ch2 —u)) 25 CHj C00C2H5 fås der således en EDgQ-værdi ved intraduodenal indgivelse på ED50 = 80 μσ/kg. medens en kendt sammenligningsforbindelse 30 ifølge DK-C 159.419 (afdelt af DK-A 1482/81) med formlen —co-cV-NH-cV-CHjCHj — 35 <S^e00H CH5 COOCjH, DK 171256 B1 15 ved intraduodenal indgivelse viser ΕΡ5η = 160 aa/ka. og en kendt sammenligningsforbindelse ifølge DK-A 3835/81 med formlen

fp^pf-OOOH

ch3 cooc2h5 10 viser ED50 = ca. 300 ua/ka.

De følgende eksempler tjener til nærmere belysning 15 af fremgangsmåden ifølge opfindelsen.

De i de følgende eksempler anførte 1H-NMR-data er fremkommet ved måling i CDCI3 og er angivet i δ (ppm).

Eksempel 1 20 - - N-(l-S-Garbethoxy-3-phenyl-propyl)-S-alanyl-cis^2,3,3a,4,5,7a--hexahydro[IH]indol-2-R,S-endo-carboxylsyre a) N-Benzoyl-N-(butadien-1,3-yl)-R,S-allylglycinethylester 28,6 g R,S-allylglycinethylester opløses i 140 ml toluen, og der tilsættes 14,0 g crotonaldehyd. Efter tilsætning 2 5 af 30 g vandfrit magnesiumsulfat omrøres der i 3 timer ved stuetemperatur. Derefter fraskilles magnesiumsulfatet ved sugning, og toluenen fjernes under formindsket tryk. Remanens: 44,4 g olie.

750 ml methylenchlorid afkøles til -70°C, og der tilsættes 44,4 g triethylamin samt 28,1 g benzoylchlorid. Til denne blanding sættes den ovenfor fremkomne 44,4 g Schiff-base. Der omrøres i 2 timer ved -75°C. Derefter lader man opvarme til 35

O

16 DK 171256 B1 0°C. Opløsningsmidlet bortcentrifugeres ved stuetemperatur. Herpå optages remanensen i toluen, vaskes med vand, tørres, og toluenen bortcentrifugeres. Remanensen filtreres på en kort søjle med silicagel (500 ml). Elueringsmidlet er her methy-5 lenchlorid. Efter bortdampning af methylenchloridet fås der 49 g N-(benzoyl)-N-(butadien-1,3-yl)-R,S-allylglycinethyl-ester.

1N-NMR-data: 1,1 - 1,4 (t, 3H) , 10 2,7 - 3,1 (m, 2H) , 4,0 - 4,5 (m, 3H), 4,8-6,8 (m, 8H) 7,3 - 7,6 (s, 5H).

15 b) N-Benzoyl-cis-2,3,3a,4,5,7a-hexahydro[IH]indol-2-R,S-endo--carboxylsyreethylester 49 g N-(benzoyl)-N-(butadien-1,3-yl)-R,S-allylglycin-ethylester opløses i 1000 ml xylen, og der tilsættes 0,1 g tert.butylcatechol samt 5 dråber bistrimethylsilylacetamid.

20 Der opvarmes i 6 timer under nitrogen til tilbagesvaling, hvorved der efter 3 timer tilsættes yderligere 0,1 g tert.butylcatechol samt 5 dråber bistrimethylsilylacetamid. Xylenen skilles fra ved centrifugering, hvorved der fås 43 g olieagtig remanens .

25 70 g olie chromatograferes på silicagel med toluen/- ethylacetat (4:1). Der fås 53 g N-benzoyl-cis-2,3,3a,4,5,7a--hexahydro[IH]indol-2-R,S-endo-carboxylsyreethylester (R^: 0,18) som olie og 7,5 g N-benzoyl-cis-2,3,3a,4,5,7a-hexahydro-[1H]indol-2-R,S-exo-carboxylsyreethylester (R^: 0,26, smp.: 30 96-98°C). Begge forbindelser foreligger som racemat.

c) Cis-2,3,3a,4,5,7a-hexahydro[IH]indol-2-R,S-endo-carboxylsyre 1,5 g N-benzoyl-cis-2,3,3a,4,5,7a-hexahydro[lH]indol-2--endo-R,S-carboxylsyreethylester opløses i 10 ml ethanol. Der 35 tilsættes 0,35 g kaliumhydroxid opløst i 5 ml vand. Der omrøres

O

17 DK 171256 B1 i 2 1/2 time ved stuetemperatur, fortyndes med vand og ekstraheres med ethylacetat. Den vandige opløsning syrnes med 2 N saltsyre og ekstraheres endnu en gang med ethylacetat. Efter tørring og centrifugering fås der 0/9 g N-benzoyl-cis-5 -2,3,3a,4,5,7a-hexahydro[lH]indol-2-endo-carboxylsyre med smp.: 153-154°C.

13,4 g af N-benzoylcarboxylsyren opløses i en blanding af 200 ml 2 N saltsyre og 67 ml ethanol, og der opvarmes i 22 timer ved en badtemperatur på 110°C under nitrogen. Alkoholen 10 fjernes under formindsket tryk, og den vandige fase ekstraheres med methylenchlorid. Derefter indstilles opløsningen på pH-værdien 7,0 med koncentreret natriumhydroxidopløsning, og der inddampes til tørhed under formindsket tryk. Remanensen optages i methylenchlorid/methanol, saltet skilles fra ved 15 filtrering, og der koncentreres og omkrystalliseres fra etha-nol/ether. Udbytte: 7,0 g, smp.: 220°C (s).

d) N-(l-S-Carbethoxy-3-phenyl-propyl)-S-alanyl-cis-2,3,3a,4, 5,7a-hexahydro[IH]indol-2-R,S-endo-carboxylsyre 20 0,84 g N-(l-S-carbethoxy-3-phenylpropyl)-S-alanin, 0,69 g N-hydroxysuccinimid samt 0,66 g dicyclohexylcarbodi-imid opløses i 8 ml tørt dimethylformamid ved 0°C. Derefter omrøres der i 3 timer ved stuetemperatur. Der tilsættes nu en opløsning af 0,5 g cis-2,3,3a,4,5,7a-hexahydro[lH]indol-25 -2-R,S-endo-carboxylsyre i 10 ml dimethylformamid og 10 ml vand i nærværelse af 0,27 g koncentreret natriumhydroxidopløsning. Der omrøres i 12 timer ved stuetemperatur, hvorpå det dannede dicyclohexylurinstof skilles fra ved sugning, og der indstilles neutralt med 2 N saltsyre. Derpå koncentreres 30 der til tørhed under formindsket tryk, optages i ethylacetat, og uopløste rester skilles fra ved filtrering, hvorpå ethyl-acetatopløsningen koncentreres under formindsket tryk. Remanensen renses på silicagel med methylenchlorid/methanol (9:1) som elueringsmiddel. Udbytte: 0,13 g (R^: 0,74).

35 DK 171256 B1 18 o

Eksempel 2 N-(l-S-Carbethoxy-3-phenyl-propyl)-S-alanyl-cis-2,3,3a,4,5,7a--hexahydro[IH]indol-2-S-endo-carboxylsyre

Forbindelsen fremstilles/ idet diastereomerblandingen 5 fra eksempel ld adskilles på tilstrækkelig silicagel med me-thylenchlorid/methanol (9:1) som elueringsmiddel. R^: 0,65.

Eksempel 3 N-(l-S-Carbethoxy-3-phenyl-propyl)-S-alanyl-cis-2,3,3a,4,5,7a-10 -hexahydro[IH]indol-2-R-endo-carboxylsyre

Forbindelsen fremstilles ved, at diastereomerblandingen fra eksempel ld adskilles på tilstrækkelig silicagel med me-thylenchlorid/methanol (9:1) som elueringsmiddel. R^: 0,8.

15 Eksempel 4 (fremstilling af mellemprodukt)

Cis-2,3,3a,4,5,7a-hexahydro[IH]indol-2-R,S-endo-carboxylsyre--tert.butylester 3,35 g cis-2,3,3a,4,5,7a-hexahydro[lH]indol-2-R,S-endo--carboxylsyre opløses i 50 ml dimethylformamid, og der tilsæt-20 tes 5,3 g methylsulfonylethylsuccinimidocarbonat og 2,3 g ethylmorpholin. Blandingen henstilles i 12 timer ved stuetemperatur, og opløsningsmidlet bortdampes under formindsket tryk, hvorpå remanensen opløses i ethylacetat. Ethylacetatopløsningen udrystes med mættet natriumbicarbonatopløsning, justeres til en 25 pH-værdi på 3,5 med 2 N hydrogenchloridsyre, og der ekstraheres flere gange med ethylacetat. De forenede ethylacetatopløsninger koncentreres efter tørring. Der fås som remanens 8,5 g N-methyl-sulfonylethyloxycarbonyl-cis-2,3,3a,4,5,7a-hexahydro(IH)indol--2-R,S-endo-carboxylsyre,som opløses i 10 ml pyridin. Hertil 30 sættes ved 0°C 10 ml tert.butanol og 12 ml 50%'s opløsning af propylphosphonsyreanhydrid i methylenchlorid. Der omrøres i 6 timer ved 40°C, og der tilsættes 200 ml ethylacetat, og tilsættes kaliumhydrogensulfatopløsning, indtil der opnås en pH--værdi på 3,5. Der ekstraheres med ethylacetat, og ethylacetat-35 opløsningen vaskes med vand, tørres og koncentreres under for-

O

19 DK 171256 B1 mindsket tryk. Den tilbageblivende olie renses på silicagel med ethylacetat som elueringsmiddel. Tert.butylesteren fås som olie.

1H-NMR-data: 5 1,4 (s, 9H), 1.0 - 2,8 (m, IH), 2,9 (s, 3H), 3.1 - 3,5 (m, 2H), 3,7 - 4,8 (m, 4H), 10 5,6 - 5,9 (m, 2H).

1,35 g Tert.butylester opløses i 15 ml methanol og 1,5 ml vand. Der indstilles til en pH-værdi på 13 med 2 N natriumhydroxidopløsning, og omrøres i 2 timer ved stuetemperatur. Derefter neutraliseres der med 2 N saltsyre, methanolen 15 bortdampes under formindsket tryk, den vandige fase ekstrahe-res med ethylacetat, ethylacetatopløsningen vaskes med vand, tørres og koncentreres. Den olieagtige remanens renses på silicagel med ethylacetat som elueringsmiddel.

Der fås således 0,3 g cis-2,3,3a,4,5,7a-hexahydro[IH]in-20 dol-2-R,S-endo-carboxylsyre-tert.butylester som olie. 1H-NMR-data: 1,4 (s, 9H), 1,0 - 2,7 (m, 8H), 3,2-4,9 (m, 2H), 25 5,8 (d, 2H) .

Eksempel 5 N-(l-S-Carbethoxy-3-phenyl-propyl)-S-alanyl-cis-2,3,3a,4,5,7a--hexanydro[IH]indol-2-S-endo-carboxylsyre-tert.butylester 30 0,28 g N-(l-S-carbethoxy-3-phenylpropyl)-S-alanin oplø ses i 4 ml dimethylformamid. Herpå tilsættes der ved stuetemperatur 0,15 g hydroxybenzotriazol og 0,22 g dicyclohexylcar-bodiimid. Der omrøres i 4 timer ved stuetemperatur. Herpå tilsættes der 0,24 g tert.butylester fra eksempel 4 og omrøres i 35 20 timer ved stuetemperatur. Der fortyndes med ethylacetat, 0 DK 171256 B1 20 urinstoffet skilles fra ved sugning, og der inddampes under formindsket tryk. Remanensen optages i ethylacetat, ethyl-acetatopløsningen vaskes med bicarbonatopløsning, tørres og koncentreres. Den olieagtige remanens (0,6 g) adskilles i de 5 diastereomere på silicagel med ethylacetat/cyclohexan (2:1) som elueringsmiddel.

Der fås 0,24 g tert.butylester med 2-S-endo-konfigura-tion. (Rf: 0,45, m/e: 484).

1H-NMR-data: 10 1,4 (s, 9H) 0,8 - 3,8 (m, 20H) 3,9 - 4,6 (m, 4H) 5,4 - 6,0 (m, 2H) 7,2 (s, 5H).

15

Eksempel 6 N-(l-S-Carbethoxy-3-phenyl-propyl)-S-alanyl-cis-2,3,3a,4,5,7a--hexahydro[IH]indol-2-R-endo-carboxylsyre-tert.butylester

Denne ester fremstilles ved chromatografi af diastereo-20 merblandingen fra eksempel 5 på silicagel som beskrevet i eksempel 5. Der anvendes som elueringsmiddel ethylacetat/cyclohexan. Udbytte: 0,16 g (R^: 0,3, m/e = 484).

Eksempel 7 25 N-(l-S-Carbethoxy-3-phenyl-propyl)-S-alanyl-cis-2,3,3a,4,5,7a--hexahydro[IH]indol-2-R-endo-carboxylsyretrifluoracetat 0,16 g af tert.butylesteren, fremstillet i eksempel 6, opløses i 1 ml trifluoreddikesyre ved 0°C, og der omrøres i 3 timer ved denne temperatur. Trifluoreddikesyren bortdampes 30 under formindsket tryk, og remanensen krystalliseres fra di-isopropylether.

Udbytte af trifluoracetat: 0,08 g med smeltepunkt: 120-121°C.

Trifluoracetatet kan omdannes til aminosyren med ba-35 siske ionbyttere (OH -form) i methanol/vand (60:40).

O

21 DK 171256 B1

Eksempel 8 N-(l-S-Carbethoxy-3-phenyl-propyl)-S-alanyl-cls-2,3,3a,4,5,7a--hexahydro[IH]indol-2-S-endo-carboxylsyretrifluoracetat 0/24 g af tert.butylesteren fremstillet i eksempel 5, 5 opløses i 1,5 ml trifluoreddikesyre ved 0°C, og der omrøres i 5 timer ved denne temperatur. Derefter fjernes trifluored-dikesyren under formindsket tryk, og remanensen krystalliseres fra diisopropylether/petroleumsether. Udbytte: 0,1 g/m/e (efter silylering): 500.

10

Eksempel 9 N-(l-S-Carbethoxy-3-phenyl-propyl)-S-alanyl-cis-2,3,3a,4,5,7a--hexahydro[IH]indol-2-S-endo-carboxylsyre-hydrochlorid

En opløsning af 0,6 g tert.butylester fra eksempel 5 i 15 5 ml methylenchlorid mættes med tør hydrogenchloridgas og hen stilles i 16 timer ved 20-25°C. Opløsningen koncentreres under formindsket tryk. Remanensen udrives med diisopropylether og skilles fra ved sugning.

Udbytte: 0,4 g.

20 1H-NMR-data: 0,9 - 3,0 (m, 17H) 3,4 - 4,9 (m, 6H) 5.2 - 6,0 (m, 2H) 7.2 (s, 5H).

25 Hydrochloridet kan også fremstilles ved omsætning af trifluoracetat fra eksempel 8 med svagt basiske ionbyttere (acetatform) på pH-værdien 4,0 og efterfølgende behandling med ethanolisk saltsyre og inddampning og udrivning med diisopropylether .

30

Eksempel 10 N-(l-S-Carboxy-3-phenyl-propyl)-S-alanyl-cis-2,3,3a,4,5,7a--hexahydro[IH]indol-2-R,S-endo-carboxylsyre

En opløsning af 1 g N-(l-S-carbethoxy-3-phenylpropyl)-35 -S-alanyl-cis-2,3,3a,4,5,7a-hexahydro[IH]indol-2-R,S-endo-

O

22 DK 171256 B1 -carboxylsyre i 10 ral vand tilsættes et ækvivalent kaliumhydroxid og et 10%'s overskud af 4 N kaliumhydroxidopløsning. Efter 8 timers omrøring ved 20-25°C indstilles reaktionsopløsningen til en pH-værdi på 4 med 2 N saltsyre, og der kon-5 centreres under formindsket tryk. Remanensen optages i ethyl-acetat, og det udskilte salt skilles fra ved filtrering. Ethyl-acetatopløsningen koncentreres, remanensen udrives med diiso-propylether, og der skilles fra ved sugning.

Udbytte: 0,5 g.

10 1H-NMR-data: (efter H/D-bytning) 1.5 (d, 3H) 1,0 - 3,2 (m, 11H) 3.9 - 4,7 (m, 4H) 15 5,4 - 6,0 (m, 2H) 7.2 (s, 5H).

Eksempel 11 N-(l-S-Carboxy-3-phenyl-propyl)-S-alanyl-cis-2,3,3a,4,5,7a-20 -hexahydro[IH]indol-2-S-endo-carboxylsyre

Denne forbindelse fremstilles ud fra forbindelsen ifølge eksempel 8 analogt med den i eksempel 10 beskrevne metode. 1N-NMR-data: 1.5 (d, 3H) 25 1,0 - 3,2 (m, 4H) 3.9 - 4,7 (m, 4H) 5,4 - 6,0 (m, 2H) 7.2 (s, 5H) . 1 2 3 4 5 6

Eksempel 12 2 N-(l-S-Carbethoxy-3-phenyl-propyl)-S-alanyl-cis-2,3,3a,4,5,7a- 3 -hexahydro[IH]indol-2-R,S-exo-carboxylsyre 4 a) cis-2,3,3a,4,5,7a-hexahydro[IH]indol-2-R,S-exo-carboxylsyre 5

Denne forbindelse fremstilles ud fra N-benzoyl-cis- 6 -2,3,3a,4,5,7a-hexahydro[IH]indol-2-R,S-exo-carboxylsyreethyl-

O

23 DK 171256 B1 ester, der er beskrevet i eksempel lb/ analogt med den i eksempel lc beskrevne metode.

1H-NMR-sata: (efter H/D-bytning) 5 1,6-2,,5 (m, 3H) 4.4 (s, IH) 4.8 (m, IH) 5.4 (m, IH) 5.8 (m, IH).

10 b) N-(l-S-Carbethoxy-3-phenyl-propyl)-S-alanyl-cis-2,3,3a,r 4,5,7a-hexahydro [IH] Indol^-RfS-exo-carboxylsyre

Denne forbindelse fremstilles ud fra forbindelsen ifølge eksempel 12a og N-(l-S-carbethoxy-3-phenylpropyl)-S-ala-15 nin analogt med den i eksempel ld beskrevne metode.

LH-NMR-data: (efter H/D-bytning) 1.0 - 1,5 (m, 5H) 1.6 - 3,4 (m, 13H) 20 3,5 - 4,8 (m, 5H) 5.2 - 6,0 (m, 2H) 7.2 (s, 5H).

Eksempel 13 25 N-(l-S-Carbethoxy-3-phenyl-propyl)-S-alanyl-cis-2,3,3a,4,5,7a- -hexahydro[IH]indol-2-S-exo-carboxylsyre

Denne forbindelse fremstilles ved søjlechromatografi af diastereomerblandingen fra eksempel 12b på silicagel med methylenchlorid/methanol (9:1) som elueringsmiddel (R^: 0,6). 30 1-NMR-data: (efter H/D-bytning) 1.0 - 1,5 (d,t 5H) 1.6 - 3,5 (m, 13H) 3.5 - 4,8 (m, 5H) 35 5,3 - 6,0 (m, 2H) 7.2 (s, 5H).

O

24 DK 171256 B1

Eksempel 14 (fremstilling af mellemprodukt) cis-2,3,3a,4,5,7a-hexahydro[IH]indol-2-R,S-exo-carboxylsyre- -tert.butylester

Denne forbindelse fremstilles ud fra forbindelsen iføl-5 ge eksempel 12a analogt med den i eksempel 4 beskrevne fremgangsmåde ^H-NMR-data: 1/1 - 2/8 (m/ 8H) 1/4 (S/ 9H) 10 3/3 - 4/9 (m, 2H) 5,8 (m, 2H).

Eksempel 15 N-(l-S-Carbethoxy-3-phenyl-propyl)-S-alanyl-cls-2,3,3a,4,5,7a-15 -hexahydro[IH]indol-2-S-exo-carboxylsyre-tert.butylester

Denne forbindelse fremstilles ud fra forbindelsen ifølge eksempel 14 og N-(l-S-carbethoxy-3-phenylpropyl)-S-alanin analogt med den i eksempel 5 beskrevne metode. Diastereomerblan-dingen adskilles på silicagel med ethylacetat/cyclohexan (2:1).

20 2-S-exo-tert.butylester (R^: 0,5) 2-R-exo-tert.butylester (R^: 0,4).

Eksempel 16 N-(l-S-carbethoxy-3-phenyl-propyl·)-S-alanyl-cis-2,3,3a,4,5,7a-25 -hexahydro[IH]indol-2-S-exo-carboxylsyrehydrochlorid

En opløsning af 0,8 g tert.butylester ifølge eksempel 15 i 5 ml methylenchlorid mættes med tør hydrogenchloridgas og henstilles i 16 timer ved 20-25°C. Opløsningen koncentreres under formindsket tryk, og remanensen udrives med diisopropylether, 30 hvorpå der skilles fra ved sugning.

Udbytte: 600 mg.

1H-NMR-data: 0,8 - 3,1 (m, 17H) 3,5 - 4,8 (m, 6H) 35 5,3 - 6,0 (m, 2H) 7,2 (s, 5H).

25 DK 171256 B1

O

Eksempel 17 N-(l-S-carboxy-3-phenyl-propvl)-S-alanyl-cis-2,3,3a,4,5,7a--hexahydro[IH]indol-2-S-exo-carboxylsyre

Denne forbindelse fremstilles ud fra forbindelsen iføl-5 ge eksempel 16 analogt med den i eksempel 10 beskrevne metode. 1H-NMR-data: 1/5 (d, 3H) 0/9 - 3/4 (m, 11H) 3,9 - 4,8 (m, 4H) 10 5,2 - 5,9 (m, 2H) 7.2 (s, 5H) .

Eksempel 18 N-(l-S-carboxy-3-phenyl-propyl)-S-alanyl-cls-2,3,3a,4,5,7a-15 -hexahydro[IH]indol^-R/S-exo-carboxylsyre

Denne forbindelse fremstilles ud fra forbindelsen ifølge eksempel 12 analogt med den i eksempel 10 beskrevne metode. 1H-NMR-data: 1,5 (d, 3H) 20 0,9 - 3,4 (m, 11H) 3,8 - 4,8 (m, 4H) 5.2 - 6,0 (m, 2H) 7.2 (s, 5H).

25 Eksempel 19 N-(l-S-Carbethoxy-3-phenyl-propyl)-S-alanyl-cis-2,3,3a,4,5,7a--hexahydro[IH]indol-2-S-endo-carboxylsyre

Denne forbindelse er identisk med den i eksempel 2 beskrevne forbindelse.

30 a) S-Allylglycinethylester

Fremstillingen sker som beskrevet i Monatshefte der Chemie 85, 1071 (1954).

35

O

26 DK 171256 B1 b) N-(Benzoyl)-N-(butadien-1,3-yl)-S-allylglycinethylester

Denne forbindelse fremstilles analogt med den i eksempel la beskrevne metode.

1H-NMR-data: 5 1,1 - 1,4 (tr, 3H) 2.7 - 3,1 (m, 2H) 4.0 - 4,5 (m, 3H) 4.8 - 6,8 (m, 8H) 7.3 - 7,6 (s, 5H) 10 c) N-Benzoyl-cls-2,3,3a,4,5,7a-hexahydro[IH]indol-2-S-endo--carboxylsyreethylester og N-benzoyl-cis-2,3,3a,4,5,7a--hexahydro[IH]indol-2-S-exo-carboxylsyreethylester

Denne diastereomerblanding fremstilles ud fra forbin-15 delsen ifølge eksempel 19b analogt med den i eksempel lb beskrevne metode. Blandingen adskilles på silicagel med toluen/-ethylacetat (4:1). R^-værdi for endo-forbindelsen: 0,18, R^--værdi for exo-forbindelsen: 0,26.

1H-NMR-data: 20 0,8 - 2,8 (m, 10H) 3.8 - 4,8 (m, 4H) 5,5 - 5,9 (bred s, 2H) 7.4 (s, 5H).

25 d) cis-2,3,3a,4,5,7a-hexahydro[IH]indol-2-S-endo-carboxylsyre

Denne forbindelse fremstilles ud fra forbindelsen ifølge eksempel 19c analogt med den i eksempel lc beskrevne metode .

30 1H-NMR-data: (D20) 1.1 - 2,9 (m, 7H) 3.9 - 4,4 (m, 2H) 5.5 - 6,4 (m, 2H) .

35

O

27 DK 171256 B1 e) N-(l-S-Carbethoxy-3-phenyl-propyl)-S-alanyl-cis-2,3,3a,-4,5,7a-hexahydroIIH]indol-2-S-endo-carboxylsyre

Denne forbindelse fremstilles ud fra forbindelsen ifølge eksempel 19d og N-(l-S-carbethoxy-3-phenylpropyl)-S-alanin 5 analogt med den i eksempel ld beskrevne metode.

1H-NMR-data: (efter H/D-bytning) 1.0 - 2,9 (m, 17H) 3.0 - 4,6 (m, 6H) 10 5,2 - 6,0 (m, 2H) 7.2 (s, 5H).

Eksempel 20 (fremstilling af mellemprodukt) cis-2,3,3a,4,5,7a-hyxahydro[IH]indol-2-S-endo-carboxylsyre-15 -tert.butylester

Denne forbindelse fremstilles ud fra forbindelsen ifølge eksempel 19d analogt med den i eksempel 4 beskrevne metode. 1H-NMR-data: 1.4 (s, 9H) 20 1,0 - 2,7 (m, 8H) 3.2 - 4,9 (m, 2H) 5.8 (d, 2H).

Eksempel 21 25 N-(1-S-Carbethoxy-3-phenyl-propyl)-S-alanyl-cis-2,3,3a,4,5,7a- -hexahydro[IH]indol-2-S-endo-carboxylsyre-tert.butylester

Denne forbindelse fremstilles ud fra forbindelsen ifølge eksempel 20 og N-(l-S-carbethoxy-3-phenylpropyl)-S-alanin analogt med den i eksempel 5 beskrevne metode.

30 ^H-NMR-data: 1.4 (s, 9H) 0,8 - 3,8 (m, 20H) 3.9 - 4,6 (m, 4H) 5.4 - 6,0 (m, 2H) 35 7,2 (s, 5H).

DK 171256 B1 28 o

Eksempel 22 N-(l-S-Carbethoxy-3-phenyl-propyl)-S-alanyl-cis-2,3,3a,4,5, 7a--hexahydro[IH]indol-2-S-exo-carboxylsyre a) cis-2/3,38/4,5,7a-hexahydro[lH]indol-2-S-exo-carboxylsyre 5 Denne forbindelse fremstilles ud fra exo-forbindelsen ifølge eksempel 19c analogt med den i eksempel lc beskrevne metode.

1H-NMR-data: (d2o) 10 1,0 - 2,8 (m, IH) 3,6-4,4 (m, 2H) 5,5 - 6,4 (m, 2H).

b) N-(l-S-Carbethoxy-3-phenyl-propyl)-S-alanyl-cis-2/3,3a,4, 15 5,7a-hexahydro[IH]indol-2-S-exo-carboxylsyre

Denne forbindelse fremstilles ud fra forbindelsen ifølge eksempel 22a og N-(l-S-carbethoxy-3-phenylpropyl)-S-alanin analogt med den i eksempel Id beskrevne metode.

1H-NMR-data: 20 (efter H/D-bytning) 1.0 - 2,9 (m, 17H) 3.0 - 4,6 (m, 6H) 5.2 - 6,0 (m, 2H) 7.2 (s, 5H) .

25

Eksempel 23 (fremstilling af mellemprodukt) cis-2,3,3a,4,5,7a-hexahydro[lH]indol-2-S-exo-carboxylsyre- -tert.butylester

Denne forbindelse fremstilles ud fra forbindelsen iføl-30 ge eksempel 22a analogt med den i eksempel 4 beskrevne metode. 1H-NMR-data: 1,4 (s, 9H) 0,9 - 2,8 (m, 8H) 3.3 - 4,9 (m, 2H) 35 5,4-5,8 (m, 2H).

29 DK 171256 B1

O

Eksempel 24 N-(l-S-Carbethoxy-3-phenyl-propyl)-S-alanyl-cis-2,3,3a,4,5,7a--hexahydro[IH]indol-2-S-exo-carboxylsyre-tert.butylester 5 Denne forbindelse fremstilles ud fra forbindelsen iføl ge eksempel 23 og N-(l-S-carbethoxy-3-phenylpropyl)-S-alanin analogt med den i eksempel 5 beskrevne metode.

1H-NMR-data: 1/3 (s, 9H) 10 0,9 - 3,7 (m, 20H) 3/8 - 4,7 (m, 4H) 5,4 - 6,0 (m, 2H) 7,2 (s, 5H).

15

Eksempel 25 (fremstilling af mellemprodukt) S-Alanyl-cis-2,3,3a,4,5,7a-hexahydro[IH]indol-2-S-endo-carb-oxylsyre-tert.butylester a) N-Methylsulfonylethyloxycarbonyl(MSC)-S-alanyl-cis-2,3,3a,- 20 4,5,7a-hexahydro[IH]indol-2-S-endo-carboxylsyre-tert.butylester

Til en opløsning af 10 g MSC-Ala-OH i 50 ml dimethyl- formamid sættes 6,7 g 1-hydroxy-benztriazol og 14,7 g cis- -2,3,3a,4,5,7a-hexahydro[IH]indol-2-S-endo-carboxylsyre-tert.-25 butylester. pH-værdien indstilles til 8,0 med N-ethylmorpho-lin. Blandingen afkøles i et isbad, og der tilsættes 10,5 g dicyclohexylcarbodiimid. Der omrøres i 15 timer ved 20-25°C.

Det udfældede urinstof skilles fra ved sugning, filtratet koncentreres under formindsket tryk og optages i ethylacetat. Den 30 organiske fase vaskes med i den nævnte rækkefølge kaliumhydro- gensulfat-, kaliumhydrogencarbonat- og natriumchloridopløsning, tørres og koncentreres. Remanensen chromatograferes på silica- gel med ethylacetat/cyclohexan (1:1).

Udbytte: 10 g.

35 30 DK 171256 B1

O

1H-NMR-data: 1.4 (s, 9H) 1.3 (d, 3H) 1.1 - 2,6 (m, 7H) 5 3,0 (s, 3H) 3.2 - 3,5 (m, 2H) 3.5 - 4,9 (m, 5H) 5.6 -5,9 (m, 2H).

10 b) S-Alanyl-cis-2,3,3a,4,5,7a-hexahydro[IH]indol-2-S-endo--carboxy1syre-tert.butylester 2.0 g af forbindelsen ifølge eksempel 25a opløses i 15 ml methanol og 1,5 ml vand. Opløsningen indstilles til en pH-værdi på 13 med 2 N natriumhydroxidopløsning, og der om-15 røres i 2 timer ved stuetemperatur. Derefter neutraliseres der med 2 N saltsyre, methanolen bortdampes under formindsket tryk, den vandige fase ekstraheres med ethylacetat, ethyl-acetatopløsningen vaskes med vand, tørres og koncentreres. Remanensen filtreres på silicagel med ethylacetat som eluerings- 20 middel.

Udbytte: 0,8 g.

1H-NMR-data: 1.4 (s, 9H) 1.3 (d, 3H) 25 1.0 - 2,4 (m, 7H) 3.5 - 4,8 (m, 3H) 5.5 - 5,9 (m, 2H).

Eksempel 26 (fremstilling af mellemprodukt) S-Alanvl-cis-2,3,3a,4,5,7a-hexahydro[IH]indol-2-S-exo-carb-oxylsyre-tert.butylester

Denne forbindelse fremstilles ud fra forbindelsen ifølge eksempel 23 analogt med den i eksempel 25 beskrevne metode.

1H-NMR-data: 35 31 DK 171256 B1

O

1,2 (d, 3H) 1.4 (s, 9H) 0,9 - 2,3 (m, 7H) 3.4 - 4,7 (m, 3H) 5 5,6 - 5,9 (m, 2H).

Eksempel 27 N-(l-S-Carbethoxy-3-phenyl-propyl)-S-alanyl-cis-2,3,3a,4,5,7a-1 q -hexahydro[IH]indol-2-S-endo-carboxylsyre-tert.butylester 5 mmol S-alanyl-cis-2,3,3a,4,5,7a-hexahydro[IH]indol-2--S-endo-carboxylsyre-tert.butylester opløses i 15 ml vandfri ethanol. Opløsningen indstilles til en pH-værdi på 7,0 med ethanolisk kaliumhydroxid, og der tilsættes 0,7 g pulverise-15 ret molekylarsigte (4Å) og derefter 5 mmol 2-keto-4-phenyl--smørsyreethylester. Der tildryppes langsomt en opløsning af 0,6 g natriumcyanoborhydrid i 6 ml vandfri ethanol. Efter en reaktionstid på 20 timer ved 20-25°C filtreres opløsningen, og opløsningsmidlet bortdestilleres. Remanensen optages i 20 ethylacetat/vand. Efter inddampning af ethylacetatfasen chro-matograferes remanensen på silicagel med ethylacetat/cyclo-hexan (1:4) .

1H-NMR-dataene stemmer overens med dataene for forbindelsen ifølge eksempel 21.

25

Eksempel 28 N-(l-S-Carbethoxy-3-phenyl-propyl)-S-alanyl-cis-2,3,3a,4,5,7a--hexahydro[IH]indol-2-S-exo-carboxylsyre-tert.butylester

Denne forbindelse fremstilles ud fra forbindelsen iføl-30 ge eksempel 26 og 2-keto-4-phenyl-smørsyreethylester analogt med den i eksempel 27 beskrevne metode.

^H-NMR-dataene stemmer overens med dataene for forbindelsen ifølge eksempel 24.

35

Claims

1. Analogifremgangsmåde til fremstilling af derivater af bicycliske aminosyrer med den almene formel H I c. 10 # \* * /T\ O CH - NH - CH - CH2- CH2 il I 2 R C02R i hvilken R betyder hydrogen eller (C]__4) -alkyl, R1 betyder 15 hydrogen, (0^3) -alkyl, (C2 eller C3) -alkenyl, benzyl, phen-ethyl, 4-aminobutyl eller benzoylmethyl, og R2 betyder hydrogen, (¢2.4)-alkyl eller benzyl, eller fysiologisk acceptable salte deraf, kendetegnet ved, at a) en forbindelse med formlen 20 ho2c-ch-nh-ch - ch2-ch2-<£> (ii) R C02r2 25 hvori R1 og R2 har de ovenfor angivne betydninger, omsættes med en forbindelse med formlen H 30 (HI> Η H 2 hvori W betyder hydrogen eller en surt fraspaltelig gruppe, hvorefter eventuelt W og/eller R2 fraspaltes under dannelse 35 af de frie carboxygrupper, eller b) at en forbindelse med formlen DK 171256 B1 33 oh 5 (IV) I 2 H CO-CH-NH^ I 2 R1 10 i hvilken R1 og W har den ovenfor angivne betydning, omsættes med en forbindelse med formlen c°2r2 is o = cr (vin) Xch2-ch2-<^ hvori R2 har den ovenfor angivne betydning, hvorpå den frem- 20 stillede Schiff-base reduceres, og hvorefter eventuelt W og/eller R2 fraspaltes under dannelse af de frie carboxygrup-per, hvorpå ifølge a) eller b) fremstillede forbindelser med formlen (I), hvori R betyder hydrogen, eventuelt omdannes til estere med formlen (I), hvori R betyder (0^.4)-alkyl, 25 og forbindelser med formlen (I) eventuelt omdannes til fysiologisk acceptable salte deraf.

2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegne t ved, at der fremstilles forbindelser (I) , i hvilke carbonatomet i 2-stillingen i hexahydroindolsysternet samt 30 de med en stjerne markerede carbonatomer i sidekæden hver gang udviser S-konfiguration.

3. Fremgangsmåde ifølge krav 1 eller 2, kende -tegnet ved, at der fremstilles forbindelser (I), i hvilke R betyder hydrogen, og R1 betyder methyl.

4. Fremgangsmåde ifølge krav 1-3, kendeteg net ved, at der fremstilles forbindelser (I) , i hvilke R DK 171256 B1 34 betyder hydrogen, R1 betyder methyl, og R2 betyder hydrogen eller ethyl.

5. Fremgangsmåde ifølge krav 1-4, kendetegnet ved, at der fremstilles forbindelser (I), i hvilke 5 carboxygruppen ved carbonatomet i 2-stillingen af hexahydro-indolsystemet er orienteret i endo-stilling til bicyclusen, og det nævnte carbonatom samt de med en stjerne markerede carbonatomer i sidekæden hver gang udviser S-konfiguration, R betyder hydrogen, R1 betyder methyl, og R2 betyder ethyl. 10 15 20 25 30