KR880001007B1

KR880001007B1 - 비사이클릭 화합물의 제조 방법

Info

Publication number: KR880001007B1
Application number: KR1019860009085A
Authority: KR
Inventors: 오까요시까즈; 고헤이 니시가와; 아끼오 미야께
Original assignee: 다께다야꾸힝 고오교 가부시끼가이샤; 구라바야시 이꾸시로
Priority date: 1980-10-31
Filing date: 1986-10-29
Publication date: 1988-06-13

Abstract

내용 없음.

Description

[발명의 명칭]

비사이클릭 화합물의 제조 방법

[발명의 상세한 설명]

본 발명은 약제로서 유용한 신규의 비사이클릭 화합물의 제조방법에 관한 것이다.

안지오텐신 전환효소에 대한 억제활성에 기인하는 혈압강하 효과를 갖는 화합물로서, 각종 아미노상 유도체가 공지되어 있다 [예. 일본국 특허 미심사출원(고까이) 제77-116457호, 제77-136117호, 제79-12372호, 제80-38382호 및 제80-81845호, 이들은 각각 제 USP-4105776호, 제USP-4053651호, 영국 미심사 공고 제2000508호, 유럽 미심사 공고제 9183호 및 제12401호에 상응함]. 본 발명의 화합물들은 골격구조에 있어서 공지의 화합물들과 다르며, 더우기 안지오텐신 전환 효소 억제 및 혈압강하 작용이 우수하다. 그러므로 본 발명은 하기식(I)로 표시되는 신규의 비사이클릭 화합물 및 그의 염을 제공한다.

(상기식에서, R⁴는 수소 또는 저급일킬이고 ; R⁵는 수소, 저급알킬 또는 아르알킬이며 ; R⁶는 히드록실 또는 저급알콕시이다) R⁴로 나타내는 저급알킬 그룹은 탄소수 약 1내지 4의 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, 이소부틸, 2급-부틸 및 3급-부틸을 포함한다. R⁵와 관련하여, R⁵로 표시되는 저급 알킬 그룹에는 R⁴로 표시된 것과 유사한 저급알킬 그룹들이 속한다. R⁵와 표시되는 아르알킬 그룹에는 벤질, 펜에틸, 3-페닐프로필, α-메틸벤질, α-에틸벤질, α-메틸펜에틸, β-메틸펜에틸 및 β-에틸펜에틸과 같이 탄소수가 약 7내지 10인 페닐-저급(C₁-C₄)-알킬이 포함된다. R⁶에 대해서, R⁶로 표시되는 저급알콕시에는 메톡시, 에톡시, 프로폭시, 이소프로폭시, 부톡시, 이소부톡시, 2급-부톡시 및 3급-부톡시 등과 같이 탄소수가 약 1내지 4인 저급알콕시 그룹이 포함된다.

화합물(I)의 염에는 약학적으로 허용되는 염류, 예를들어 염산염, 브롬화수소산염, 황산염, 질산염 및 인산염과 같은 무기산염 ; 아세테이트, 타르트레이트, 시트레이트, 푸마레이트, 말리에이트, 톨루엔 술포네이트 및 메탄술포네이트와 같은 유기산염 ; 나트륨, 칼륨, 칼슘 및 알루미늄염과 같은 금속염류 ; 및 트리에틸아민, 구아니딘, 암모늄, 히드라진, 퀴닌 및 신코닌 염과 같은 염기와의 염 등이 속한다.

본 발명에서 바람직한 특정의 태양은 N-(1-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닐-N-(인단-2-일)글리신 및 약학적으로 허용되는 그의 염이다.

본 발명의 화합물(I)은 하기 일반식(II) 및 (III)의 화합물을 환원 조건하에서 축합하고 생성된 하기 일반식(I')의 화합물을 가수분해하여 제조할 수 있다.

(상기식에서, R⁴, R⁵및 R₆는 정의한 바와 같다)

상술한 환원 조건에는, 백금, 팔라듐, 라니니켈 또는 로듐 또는 이들의 적절한 담체와의 혼합물을 촉매로 사용하는 촉매적 환원 ; 수소화리튬 알루미늄, 수소화붕소리튬, 리튬 시아노보로하이드라이드, 수소화붕소나트륨 또는 나트륨 시아노보로하이드라이드와 같은 금속 수소화물 화합물에 의한 환원 ; 금속 나트륨 또는 금속마그네슘 및 알코올에 의한 환원 ; 철 또는 아연과 같은 금속 및 염산 또는 초산과 같은 산에 의한 환원 ; 전해 환원 및 환원효소에 의한 환원에 사용되는 반응 조건이 속한다.

상술한 반응은 보통 물 또는 유기 용매(예, 메탄올, 에탄올, 에틸에테르, 디옥산, 메틸렌클로라이드, 클로로포름, 벤젠, 톨루엔, 아세트산, 디메틸포름아미드, 디메틸아세트아미드)존재하에 수행된다. 반응 온도는 사용되는 환원 조건에 달려 있으나, 일반적으로 -20℃ 내지 +100℃범위의 온도가 바람직하다. 반응은 상압에서 만족스럽게 진행되나 환경에 따라 가압 또는 감압하에서도 수행될 수도 있다.

R⁶가 히드록실인 화합물(I)은 역시 상응하는 에스테르 화합물의 가수분해 또는 상응하는 벤질 에스테르 화합물의 촉매적 환원에 의하여 제조될 수 있다. 이와 같이 제조된 본 발명의 목적 화합물(I)은, 추출, 농축, 중화, 여과, 재결정, 컬럼 크로마토그래피 및/또는 박층 크로마토그래피와 같은 통상의 분리 및 정제 방법을 사용하여 반응 혼합물로 부터 분리될 수 있다. R⁴및 R⁵로 표시되는 치환체의 존재 또는 부재에 따라 2 내지 8개의 화합물(I)의 입체 이성체가 존재할 수 있다.

이들 각각의 이성체 및 그의 혼합물들은 본 발명의 범주내에 속한다. 그러한 이성체들은, 원한다면, 개별적으로 제조될 수 있다. 예를들어,(I)의 단일 광학 이성체는 출발물질(II)의 단일 이성체를 사용하여 상술한 반응을 수행함으로써 수득될 수 있다. 생성물이 2이상 이성체의 혼합물일 경우, 광학 활성산(예, 캄포르술폰산, 타르타르산 또는 디벤조일타르타르산)또는 광학활성 염기(예, 신코닌, 신코니딘, 퀴닌, 퀴니딘. 알파메틸벤질아민, 데히드로아비에틸 아민)을 사용하는 염 형성법, 각종 크로마토그래피 기술 또는 분별 증류와 같은 통상의 분리 기술에 의하여 개개의 이성체들로 분리될 수 있다. R⁴및 R⁵가 각각 수소 이외의 다른 것인 화합물(I)에 대해서 볼 때, 각각 S배위를 갖는 이성체들은, 일반적으로, R배위를 갖는 상응하는 화합물과 비교할때 더 바람직한 생리학적 활성을 갖는다.

본 발면의 화합물, 즉 식(I)로 표시되는 비사이클릭화합물 및 약학적으로허용되는 그의염은, 안지오텐신 전환효소, 브라디키닌 분해효소(키니나제) 및 동물, 특히 포유동물(예, 인간, 개, 고양이, 토끼, 기니아픽, 쥐)에 있어서 엔케팔리나제에 대한 억제작용을 나타내므로, 진단, 고혈압 예방 및 치료를 위한 약 및 진통제 및 진통-작용-강화제로서 유용하다. 본 발명의 화합물은 독성이 낮으며, 경구 투여시에도 흡수가 잘되며, 안정성이 높다. 그러므로, 그들이 상술한 약으로서 사용되는 경우, 그 자체로서 또는 분제, 입제, 정제, 캅살제, 주사 가능한 용액제와 같은 약학적 제제형으로 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제와의 혼합물로서 경구적으로 또는 비경구적으로 안전하게 투여될수 있다. 약용량 수준은 일반적으로 치료해야 할 질병의 상태뿐 아니라 투영경로에 따라 변화될 수 있는데, 예를들어, 성인 경우, 고혈압 치료에 있어서, 화합물은 약 0.02 내지 20mg/kg, 바람직하게는 약 0.2 내지 2mg/kg의 일회용량으로 경구 투여되거나, 약 0.002 내지 0.2mg/kg, 바람직하게는 약 0.02 내지 0.2mg/kg의 일회용량으로 상태에 따라서 1일 약 2내지 5회 투여할 수 있다.

본 발명의 출발물질(II)은 ; 예를들어, 하기 반응 공정도로 나타낸 방법에 의하여 용이하게 제조될 수 있다.

(상기식에서, R4는 상기 정의된 바와 동일하고, Cbz은 벤질옥시카보닐이다)

상기 반응 공정에 표시된 바와 같이 (II)를 제조하는 방법을 이제 더 상세히 설명하겠다. 첫째로(Ⅵ)→(Ⅶ) 단계에서, (Ⅵ) 및 (Ⅶ)은 쉬프 염기를 생성하기 위하여 적절한 용매중에서 반응 시킨 다음, 환원시킨다. 메탄올, 에탄올, 디옥산, 메틸렌클로라이드, 클로로포름, 벤젠 또는 톨루엔 같은 유기용매를 용매로서 사용하며, 반응은 일반적으로, 약 -10℃내지 +150℃이내의 온도에서 행한다. 반응을 유리하게 하기 위하여, 황산 또는 P-톨루엔술폰산과 같은 촉매, 또는 무수황산나트륨, 무수황산마그네슘 또는 염화칼슘 같은 탈수제를 반응 혼합물에 가할 수 있다. 또한, 물 분리장치(트랩)를 사용하므로써 반응을 유리하게 진행시킬 수 있다. 반응 혼합물의 형태로 또는 통상의 방법으로 분리한 후 수득된 쉬프 염기를 다시 용매에 가하고 환원 시킨다. 환원 방법에는 촉매로서 예를들어, 백금 또는 팔라듐-탄소를 사용하는 촉매 환원 및 수소화붕소나트륨 또는 나트륨 시아노보로하이드라이드와 같은 환원제를 사용하는 방법 등이 있다.

그것은 또한 쉬프 염기를 형성할 수 있으며, 처음부터(Ⅵ) 및 (Ⅶ)의 반응 혼합물중에 그러한 환원제를 공존시킴으로써 환원반응을 동시에 진행시킬 수 있다. (Ⅷ)→(X)단계에서, (Ⅷ)은 (Ⅸ)또는 그의 카르복실-유도작용 유도체와 반응한다. 화합물(Ⅸ)의 카르복실-유도 작용 유도체에는 그중에서도 특히, 산 염화물 및 산 브롬화물과 같은 산 할라이드류 ; (Ⅸ)중 2몰로부터 물 1몰을 제거하여 얻을 수 있는 산무수물 ; (Ⅸ)중 카르복실 그룹의 수소 원자를 에톡시카르보닐, 이소부틸옥시카르보닐, 벤질옥시카르보닐 등으로 치환함으로써 형성되는 혼합 무수물 ; 및 1-히드록시벤조트리아졸, N-히드록시 프탈이미드, N-히드록시숙신이미드 등으로 부터 유도된(Ⅸ)의 반응성 에스테르 등이 속한다. 일반적으로, 반응은 적절한 용매중에서 수행되는데, 반응을 방해하지 않는한 어떠한 종류이어도 무방하다. (Ⅸ)를 작용유도체로 전환시키지 않고 (Ⅸ)가 사용되는 경우, 반응은 디시클로헥실카르보디이미드 또는 카르보닐 디이미다졸과 같은 탈수제 존재하에 행하는 것이 바람직하다.

산할라이드가 작용 유도체로서 사용되는 경우, 반응은 또한 피리딘, 피콜린, 트리에틸아민, 수산화나트륨, 탄산수소나트륨 또는 탄산나트륨과 같은 염기 존재하에서 수행할 수 있다. 일반적으로, 반응 온도는 약 -20℃내지 +150℃범위 이내이다. 그러나, 대부분의 경우에 있어서, 반응은 상온에서 만족스럽게 진행될 수 있다. (X)→(II) 단계는 촉매 환원에 의해 N-보호기를 제거하는 것이다. 촉매 환원은 백금, 팔라듐-탄소 또는 라니니켈과 같은 적절한 촉매 존재하에 메탄올, 에탄올, 디옥산, 테트라히드로푸란 또는 아세트산과 같은 유기용매 또는 물중에서 수행된다. 이 반응은 상압 내지 약 150kg/cm³및 상온 내지 150℃에서 수행된다. 일반적으로, 반응은 상온에서 만족스럽게 진행할 수 있다. 본 발명은 하기의 참고예, 구체적인 실시예, 시험 실시예 및 약제형 실시예에 의하여 더 상세히 설명되나, 이들에 의해 한정되지 않는다.

[참고예 1]

2-인다논(40g)을 300㎖의 메탄올에 용해시키고, 78g의 글리신 3급-부틸 에스테르 포스파이트 및 150g의 물을 가한 후, 23g의 나트륨 시아노보로하이드라이드를 빙냉 교반하에서 15분에 걸쳐 가한다. 생성된 혼합물을 실온에서 4시간 더 교반시킨다. 반응 혼합물에 400㎖의 20%인산을 1시간에 걸쳐 나누어 가하고, 200㎖의 물을 가한 다음 혼합물을 30분간 교반시킨 후, 800㎖의 에틸에테르로 추출하고, 수성층은 20%수산화나트륨을 사용하여 pH를 10으로 조절하고, 클로로포름(총 500㎖)을 4회로 분할하여 추출한다. 추출물을 무수 황산나트륨상에서 건조시킨 다음, 감압하 증류시킨다. 수득된 오일에 50㎖의 에탄올, 그다음으로 150㎖의 물을 가하고, 혼합물을 냉각시킨다. 결정질 침전을 여과로 수집하여 에탄올 수용액으로 2회 재결정하면, 융점이 54내지 55℃인 무색프리즘상의 (인단-2-일)-글리신 3급-부틸 에스테르 47g이 수득된다.

[참고예 2]

N-카르보벤즈옥시-L-알라닌(21.8g) 및 12.3㎖의 트리에틸아민을 200㎖의 테트라히드로푸란에 용해시키고, 8.5g의 에틸 클로로카르보네이트를 교반하 -15℃에서 적가한다. 적가후, 15분간 교반시킨 다음, 100㎖의 클로로포름중의 22g의 (인단-2-일)-글리신 3급-부틸 에스테르 용액을 -10℃ 이하에서 적가한다. 실온에서 1시간 교반시킨후, 반응 혼합물을 500㎖의 물에 부어 넣고, 클로로포름층을 분리하여 클로로포름을 증류시켜 버린다. 잔류물을 300㎖의 에틸 아세테이트에 용해시키고, 그 용액을 1N 수산화나트륨 수용액 500㎖씩 2회, 물 50㎖, 20%인산수용액 50㎖씩 2회 순으로 세척한 다음, 무수황산마그네슘상에서 건조시키고 용매를 증류시켜 버리면, 유상의 N-카르보벤즈옥시-L-알라닐-N-(인단-2-일)글리신 3급-부틸 에스테르 35g이 수득된다.

이를 300㎖의 메탄올에 용해시키고, 7g의 옥살산 및 3.5g의 10%팔라듐-탄소(50%물 함유)를 가한후 상온 및 상압에서 촉매환원 시킨다. 반응후, 촉매를 여과하고, 여액을 감압하 증류시켜 버리고, 잔류물에 500㎖의 에탄올을 가한다. 냉각시키면 침전이 형성되는데, 이를 여과로 수집하여 건조시키면, 융점이 138 내지 141℃인 L-알라닐-N-(인단-2-일)글리신 3급-부틸 에스테르 옥살레이트 21.8g이 수득된다.

[참고예 3]

7g의 N-(인단-2-일)글리신3급-부틸에스테르를8.5g의 N-(카르보벤즈옥시)-L-류신과 반응시키고, 반응혼합물을 참고예 2에서와 같이 처리함으로써 무색 무정형 분말상의 L-류실-N-(인단-2-일)글리신3급-부틸 에스테르 3.5g이 수득된다.

[참고예 4]

143g의 에틸 3-페닐프로피오네이트, 234g의 에틸옥살 레이트 및 에탄올중의 28%나트륨 에톡사이드용액 154㎖의 혼합물을 감압하 에탄올을 증류시키면서, 60 내지 70℃의 수욕에서 1.5시간 동안 가열한다. 생성된 적색 시럽상의 잔류물에 15V/V%황산 1.3ℓ를 가한다. 혼합물을 교반 환류하 15시간 동안 끓이고 오일층을 분리하고, 10%수산화나트륨으로 중화하고, 에틸아세테이트로 추출한다. 수성층을 묽은 황산을 사용하여 산성화한다. 생성된 오일을 에틸아세테이트로 추출 하여 수세하고 건조시킨다. 에닐아세테이트를 감압하 증류로 제거하면 유상의 2-옥소-4-페닐부티르산 130g이 수득된다.

[참고예 5]

2-옥소-4-페닐부티르산(130g)을 650㎖의 에탄올 및 13㎖의 농황산의 혼합물에 가하고, 전체 혼합물을 5시간 동안 환류한다. 반응 혼합물이 원래부피의 대략 반이 될때까지 농축한 다음, 500㎖의 물로 희석한다. 생성된 오일을 수집하고, 수성층을 에틸 아세테이트로 추출한다. 추출물과 오일을 혼합하여 건조시키고, 용매는 감압하 증류시켜 버린다.

잔류물을 감압하 증류시키면, 비점이 135 내지 141℃/3mmHg인 무색유상의 에틸 2-옥소-4-페닐부티레이트 113g이 수득된다.

[참고예 6 내지 10]

표1에 기재된 화합물들은 참고예 19 내지 20과 유사한 방법에 의하여 각각 상승하는 출발 화합물로 부터 제조될 수 있다.

[표 1]

[실시예 1]

L-알라닐-N-(인단-2-일)글리신 3급-부틸 에스테르 옥살레이트(21g)을 200㎖의 에탄올에 용해시킨다. 이 용액에 4.1g의 나트륨아세테이트, 10㎖의 아세트산, 25g의 에틸 2-옥소-4-페닐부티레이트 및 25g의 분자체 3A를 차례로 가한다. 그후, 100㎖의 에탄올에 현탁시킨 30g의 라니니켈을 에탄올과 함께 첨가하고, 상온 및 상압에서 촉매 환원을 수행한다. 수소의 흡수가 끝났을때, 상등액을 경사로 분리하고, 침전을 에탄올로 2 또는 3회 세척한다. 상등액 및 세척액을 혼합하여 감압하 농축시킨다. 잔류물을 500㎖의 에틸 아세테이트에 용해시키고, 용액을 탄산수소나트륨 수용액으로 세척하고 30g의 규조토로 여과한다. 에틸아세테이트층을 여액으로부터 분리하여 수세하고 무수황산마그네슘상에서 건조시키고 용매를 감압하 증류하면, 연한 황색비스코스 유상의 N-(1-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닐-N-(인단-2-일)글리신 3급-부틸 에스테르 24g이 수득된다.

NMR 스팩트럼(CDC1₃)δ : 1.27(3H, t, CH₃), 1.40(9H,s, CH₃x 3), 1.8~2.2(3H, m, CH₃), 2.6~4.5(10H, m), 3.8~3.9(2H, m, CH₂), 4.2(2H, q, CH₂), 4.9(1H, t, CH), 7.1~7.4(9H, m, Ph).

[실시예 2]

실시1에서 수득한 N-(1-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닐-N-(인단-2-일)글리신 3급-부틸 에스테르를 700g의 실리카겔을 사용하여 컬럼 크로마토그래피하고, 벤젠, 벤제-아세톤(10 : 4 내지 4 : 1)및 메틴올-벤지(1 : 9)으로 용출하면 2획분이 수득된다. 각 획분을 400g의 실리카겔을 사용하여 컬럼 크로마토그래피하고 상기한 방법으로 정제한다. 첫번째 획분으로 부터 무색 비스코스 유상의 N-[1-(R)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필]-L-알라닐-N-(인단-2-일)글리신 3급-부틸 에스테르 2g이 수닥된다.

한편, 두번째 획분으로부터 무색 비스코스 유상의 N-[1-(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필]-L-알라닐-N-(인단-2-일)글리신 3급-부틸 에스테르 16.5g이 수득된다.

[실시예 3]

실시예 2에서 수득된 5g의 N-[1-(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필]-L-알라닐-N-(인단-2-일)글리신 3급-부틸 에스테르를 5㎖의 아세트산에 용해시키고, 이 용액에 아세트산중의 25%브롬화수소산 용액 20㎖를 가하고, 혼합물을 10분간 진탕한다. 300㎖의 에틸에테르를 부가하여 침전된 결정을 여과로 수집하며, 융점이 180 내지 183℃인 무색결정의 N-[1-(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필]-L-알라닐-N-(인단-2-일)글리신 브롬화수소산염 5g이 수득된다.

[실시예 4]

실시예 3에서 수득된 N-[1-(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필]-L-알라닐-N-(인단-2-일)글리신 3급- 부틸 에스테를 사용하고, 실시예 3과 같이 처리함으로서, 융점이 150 내지 155℃인 무색결정상의 N-[1-(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필]-L-알라닐-N-(인단-2-일)글리신 브롬화수소산염이 수득된다.

[실시예 5]

500㎖의 에틸 아세테이트, 33g의 탄산수소나트륨 및 500㎖의 물의 혼합물에, 실시예 3에서 제조된 N-[1-(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필]-L-알라닐-N-(인단-2-일)글리신 브롬화수소산염 16.2g을 가한다. 완전히 용해시키기 위하여 교반시킨 후, 1N 염산을 사용하여 용액의 pH를 4로 조절한다. 에틸아세테이트 층을 분리하고 수세하여 건조시키고, 20㎖의 7N 에탄올성 염산을 가한 후 감압하 농축시킨다. 잔류물에 250㎖의 에틸 에테르 및 250㎖의 석유 에테르를 가하여 생성된 침전을 여과로 수집하면, 무색 결정상의 N-[1-(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필]-L-알라닐-N-(인단-2-일)글리신 염산염 11g이 수득된다. 아세톤 및 1N 염산의 혼합물로 재결정하면, 166 내지 170℃에서 용융(분해)하는 무색판상의 물질이 수득된다.

IR 스팩트럼 ν

1740(COOC₂H₅), 1705(COOH), 1640(CO-N).

[실시예 6]

L-알라닐-N-(인단-2-일)글리신3급-부틸에스테르옥살레이트(4.1g)을 40㎖의 에탄올에 용해시킨다음, 0.85g의 나트륨아세테이트, 2㎖의 아세트산, 5g의 프로필 2-옥소-4-페닐부티레이트 및 5g의 분자체 3A를 가한후, 6g의 라니 니켈을 20㎖의 에탄올에 현탁시킨 액을 가하고, 상온 및 상압에서촉매환원을 행한다. 수소 흡수가 끝났을때, 상등액을 경사로 분리한다. 침전을 에탄올로 2또는 3회 세척한다. 상등액 및 세척액을 혼합하고, 용매를 감압하 증류시켜 버린다. 잔류물을 100㎖의 에틸 아세테이트와 탄소수소나트륨수용액과 함께 진탕한다. 10g의 규조토로 여과하고, 에틸아세테이트 층을 여액과 분리하고 수세하여 건조시키고 용매를 증류로 제거하면, 연한 황색 비스코스 유상의 N-(1-프록폭시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닐-N-(인단-2-일)-글리신 3급-부틸에스테르가 생성된다. 여기에 3㎖의 아세트산 및 아세트산중의 25%브롬화수소산 용액 12㎖를 가하고, 반응을 진행시키기 위햐여 혼합물을 15분동안 때때로 진탕시킨다. 150㎖의 에틸에테르를 가하면, 결정질 침전이 형성되는데 이를 여과로 수집하면, 무색 결정상의 N-(1-프록폭시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌-N-(인단-2-일)글리신 브롬화수소산염 3.4g이 수득된다.

이를 70㎖의 물 및 70㎖의 에틸아세테이트의 혼합물에 가하고, 혼합물을 교반시키고, 탄산수소나트륨으로 중화한 후, 10%염산을 사용하여 pH를 3 내지 4로 조절한다. 에틸 아세테이트 층을 분리하여 무수황산마그네슘상에서 건조시키고, 에탄올성 염산으로 산성화한다. 용매를 증류시켜 버리고, 잔류물에 150㎖의 에틸에테르를 가한다. 혼합물을 10분간 방치한후, 생성된 결정질 침전을 여과로 수집하면, 147 내지 150℃에서 용융(분해)되는 N-(1-프로폭시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닐-N-(인단-2-일)글리신 염산염 1.7g이 수득된다.

IR 스펙트럼 ν

1740(에스테르), 1710, (COOH), 1640(CO-N).

[실시예 7]

프로필 2-옥소-4-페닐부티레이트 대신 부틸 2-옥소-4-페닐부티레이트를 사용하는 것만 제외하고 실시예 6과 동일한 과정을 진행시키면, 154 내지 156℃에서 용융(분해)하는 N-(1-부톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닐-N-(인단-2-일)글리신 염산염이 수득된다.

스펙트럼 ν

1740(에스테르), 1700, (COOH), 1640(CO-N).

[실시예 8]

프로필 2-옥소-4-페닐 부티레이트 대신 이소프로필 2-옥소-4-페닐부티레이트를 사용하는 것만 제외하고 실시예 6의 과정을 진행시키면 150 내지 153℃에서 용융(분해)하는 N-(1-이소프로폭시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닐-N-(인단-2-일)글리신 염산염이 수득된다.

[실시예 9]

프로필 2-옥소-4-페닐부티레이트 대신 이소부틸 2-옥소-4-페닐부티레이트를 사용하는 것만 제외하고 실시예6과 동일한 과정을 진행시키면 148 내지 149℃에서 용융(분해)하는 N-(1-이소부톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닐-N-(인단-2-일)글리신 염산염이 수득된다.

[실시예 10]

프로필 2-옥소-4-페닐부티레이트 대신 메틸 2-옥소-4-페닐부티레이트를 사용하고 용매로서 에탄올 대신 메탄올을 사용하는 것만 제외하고 실시예 6과 동일한 과정을 진행시키면 163 내지 165℃에서 용융(분해)하는 무색침상의 N-(1-메톡카키르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닐-N-(인단-2-일)글리신 염산염이 수득된다.

IR 스펙트럽ν

1750(COOCH₃), 1705(COOH), 1640(CO-N).

[실시예 11]

N-[1-(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필]-L-알라닐-N-(인단-2-일)글리신 염산염(1.2g)을 30㎖의 메탄올에 용해시킨다. 이 용액에 2N 수산화나트륨 수용액 5㎖를 가한다. 실온에서 철야 교반시킨후 반응 혼합물을 감압하 농축시키고, 30㎖의 물을 가한다. 묽은 염산을 사용한 pH를 5 내지 6으로 조절하면, 오일이 분리되는데, 이를 에틸아세테이트로 추출한다. 에틸아세테이트 층을 수세하여 건조시키고, 용매를 감압하 증류시켜 버린다. 잔류물에 메탄올(5㎖)을 가하고, 용액을 방치한다. 융점이 140내지 142℃인 결정상의 N-[1-(S)-카르복실-3-페닐프로필]-L-알라닐-N-(인단-2-일)글리신 0.6g이 수득된다.

[실시예 12]

L-류실-N-(인단-2-일)글리신 3급-부틸에스테르(3.5g)을 50㎖의 에탄올에 용해시키고, 3.5g의 에틸-2-옥소-4-페닐부티레이트, 1.5g의 나트륨 아세테이트, 3.5g의 아세트산, 7.0g의 분자체 3A 및 5.0g의 라니니켈을 가하고, 상온 및 상압에서 촉매 환원을 수행한다. 수소 이론적인 양을 흡수시킨 후, 촉매를 여과하고 여액을 감압하 농축한다. 잔류물에 100㎖의 물 및 2g의 탄산수소나트륨을 가하고, 혼합물을 200㎖의 에틸아세테이트로 추출한다. 추출물을 수세하여 건조시킨 후, 에틸아세테이트를 감압하 증류시켜 버리고, 20㎖의 아세트산 및 아세트산중의 25%브롬화수소산 5㎖를 잔류물에 가한다. 실온에서 10분간 교반시킨 후, 100㎖의 에테르를 가하고, 생성된 오일층을 분리하여 에틸 에테르로 세척하면, N-(1-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-류실-N-(인단-2-일)-글리신 브롬화수소산염이 수득된다. 이것을 10㎖의 물에 현탁하고, 그 현탁액을 탄산수소나트륨을 사용하여 알칼리성화하고, 볼용물을 에틸에테르로 추출한다. 10%염산을 사용하여 수성층의 pH를 4.0으로 조절하고, 200㎖의 에틸아세테이트로 추출한다. 추출물을 수세하여 황산마그네슘상에서 건조시키고, 1㎖의 에탄올성 염산을 가하고, 에틸아세테이트를 감압하 증류시켜 버린다. 잔류물에 200㎖의 에틸에테르를 가하고 혼합물을 실온에서 방치하면, 무색 무정형 분말상의 N-(1-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-류실-N-(인단-2-일)글리신 염산염 0.8g이 수득된다.

NMR 스펙트럼(d₆-DMSO)δ : 0.93(6H, d, J=3Hz, CH(CH₃)₂), 1.30(3H, t, J=7Hz, CH₃), 2.90~3.20(4H, m, CH₂), 3.90(2H, s, CH₂), 4.00~4.35(3H, m), 7.20(4H, s, Ph), 7.30(5H, s, Ph). 질량 스펙트럼 m/e : 476, 431, 361, 315, 171.

[실시예 13]

실시예 12와 유사한 절차로 N-(1-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)글리실-N-(인단-2-일)글리신 3급-부틸 에스테르로부터, 무색 무정형 분말상의 N-(1-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)글리신-N-(인단-2-일)글리신 염산염이 수득된다. NMR 스펙트럼(d₆-DMSO)δ : 1.30(3H, t, J=6Hz, CH₃), 2.25(2H, m, CH₂), 2.70(2H, m, CH₂), 2.90~3.20(4H, m, CH₂), 4.00~4.60(5H, m), 4.80~5.10(1H, m), 7.30(4H, s), 7.35(5H, s, Ph).

[실험 1]

본 발명의 화합물에 의한 안지오텐신 I전환 효소(ACE)의 억제.

실험 방법

쿠쉬만(Cusbman)등 [생화학적 약학(Biochemical Pharmacology, Vol. 20, 1637(1971)]에 기술된 방법의 변형에 따라 실험을 행한다. 즉, 기질로서 히푸릴-1-히스티, 딜-L-류실(HHL)을 사용하여, ACE 억제활성을, 본 화합물을 첨가하였을때 ACE에 의해 생성되는 히푸르산의 양에 대한 억제 퍼센트로 특정한다. 본 발명 화합물을 0.02 내지 2% 디메틸 술폭시드-100mM 인산칼륨 완충 용액(pH)8.3, 300mM 염화나트륨 함유)에 녹인 용액을 100μℓ의 ACE(단백질 농도, 20mg/㎖) 및 100μℓ의 1,25mM HHL에 가한다. 이 실험에서 시험 용액과 같은 농도로 디메틸 술폭시이드를 함유하는 인산칼륨 완충 용액을 대조용으로서 사용한다. 용액 37℃에서 1시간 동안 보존한 후, 용액에 150μℓ의 1N 염산을 가하여 반응을 종결시킨다. 1㎖의 에틸아세테이트를 가한후, 용액 3000r. p. m.으로 10분간 원심분리한다. 분취량 0.5㎖를 에틸아세테이트 층으로부터 분리하여, 질소 기류하 50℃이하에서 건조시킨다. 잔류물을 5㎖의 1M 염화나트륨 수용액과 혼합하고, 혼합물을 228nm의 파장에서 색측정(colorimetry)한다.

시험 결과

실시예 6, 7, 8 및 11의 화합물에 대해 수득된 시험 결과가 하기표 2에 나타나 있다.

[표 2]

[실험 2]

안지오텐신 I의 고혈압 활성에 대한 본 화합물의 효과.

실험 방법

물 및 먹이를 자유로이 먹게하면서 사육한 체중 250g 내지 350g의 수컷쥐(스프레그-돌리)를 실험 동물로서 사용한다. 테스트 하루전에 펜토바비탈 나트륨(50mg/kg)을 쥐에 복강내투여하여 마취시키고, 혈압 측정을 위하여 대퇴 동맥에, 아지오텐신 I 및 II를 주사하기 위하여 대퇴 정맥에 각각 폴리에틸렌관을 주입한다. 그런다음, 관을 고정시킨다.

시험일에, 조절상 내 평균혈압이 전기 혈액 동력 측정기(MP-4T 모델, 닛뽕 고덴사 제품, 일본)상에 기록되는 데 그후, 안지오텐신 I, 다음 안지오텐신 II을 각각 300ng/kg 및 100ng/kg의 양으로 대퇴 정맥에 주사하여 고혈압 활성을 측정한다. 그런다음, 본 발명 화합물의 13.8μM/kg을 수용액 또는 수성 아라비아 고무현탁액으로 경구 투여하고, 20, 60 및 120분이 경과한 후, 고혈압 반응을 추적하기 위하여 안지오텐신 I 및 II를 반복하여 주사한다. 안지오텐신 I의 고혈압 활성에 대한 억제 페센트를 계산 했을때, 억제 퍼센트 값은 안지오텐신 II의 고혈압 반응에 있어서, 시간과의 변차를 기준으로 할때 정확 하다.

시험 결과

실시예 6 및 8의 화합물에 대하여 얻어진 시험 결과가 하기표 3에 나타나 있다.

[표 3]

[제형화 실시예]

본 발명의 화합물(I)은 예를들어, 하기의 제제형의 예에서 고혈압 치료에 사용된다.

1. 정제

상기 성분(1),(2) 및 17g의 옥수수 전분을 혼합하고, 7g의 옥수수 전분으로부터 제조된 페이스트를 사용하여 입제화 한다. 5g의 옥수수 전분 및 성분(4)를 만들어진 입자에 가하고, 혼합물을 타정기로 압축하여 활성(I)을 각 10mg씩 함유하는 직경 7mm의 정제 1000정을 제조한다.

2. 캅설제

상기의 성분들을 모두 혼합하여 젤라틴 캅셀 제3호(IX일본 약전)로 캅셀화 하여 활성 성분(I)을 각 10mg씩 함유하는 캅셀 1000개를 제조한다.

3. 주사용액

(1) N-[1-(S)-카르복시-3-페닐프로필]-L-알라닐-N-(인단-2-일)글리신 나트륨염 10g

(2) 염화나트륨 9g

(3) 콜로로부탄올 5g

(4)중탄산나트륨 1g

상기의 모든 성분들을 1000㎖의 증류수에 용해시키고, 1000개의 갈색 앰푸울들을 각각 1㎖씩의 용액으롤 채운다. 앰푸울을 질소 기체로 대체하고 밀봉한다. 전 제조과정은 멸균 조건하에서 수행한다.

Claims

(a)하기 일반식(II)의 화합물과 일반식(III)의 화합물을 환원 조건하에 축합시키고, (b)수득된 하기 일반식(I')의 화합물을 가수분해시켜 하기 일반식(I)의 비사이클릭 화합물 또는 약학적으로 허용되는 그의 염을 제조하는 방법.

상기식에서, R⁴는 수소 또는 C_1~4알킬이고, R⁵는 수소, C_1~4알킬 또는 페닐 - C_1~4알킬이며, R⁶는 히드록실 또는 C_1~4알콕시이다.