DK164893B

DK164893B - Kombinationspraeparat paa enhedsdosisform indeholdende et xanthinderivat og o-acetylsalicylsyre eller dens farmakolgisk acceptable salte samt fremgangsmaade til dets fremstilling

Info

Publication number: DK164893B
Application number: DK330685A
Authority: DK
Inventors: Klaus Ulrich Weithmann; Dirk Seiffge
Original assignee: Hoechst Ag
Priority date: 1984-07-21
Filing date: 1985-07-19
Publication date: 1992-09-07
Also published as: IE58611B1; ATE51521T1; IL75851A; CA1247530A; NZ212796A; AU573866B2; HK81792A; PT80828A; DK330685A; EP0351885B1; PT80828B; PH22730A; EP0351885A1; IL75851A0; HUT38256A; EP0169466A3; EP0169466B1; DE3508097A1; IE851820L; AU4519385A

Description

DK 164893 B

1-(5-Oxohexyl)-3,7-dimethylxanthin (pentoxifyllin) anvendes som bekendt som farmaceutisk middel til forbedring af blodets strømmeevne. Årsagen hertil antages at være (Deutsche Mediz. Wochenschrift 107 (1982), 1674), at blodets 5 flydeforskydningsspænding aftager, fordi erythrocyternes derformerbarhed forbedres ved pentoxifyllinterapi. Også thrombocyternes aggregering in vitro kan inhiberes af pentoxifyllin, dog først i koncentrationer, som ligger over de til medicinsk terapi anvendte (IRCS (Med.Sci.) 8 (1980), 10 293, Thrombos. Haemostas. 46 (1981), 272).

Desuden er det beskrevet, at frigivelsen af et anti-aggregatorisk virksomt stof fra rotteaorta ex vivo kan forøges ved behandling af dyrene med pentoxifyllin. Det er ligeledes kendt, at frigivelsen af det således stimulerede, 15 antiaggregatorisk virksomme stof, formodentlig prostacyclin, kan undertrykkes ved behandling af rotterne med acetylsalicylsyre (Vasa 10 (1981), 249). Videregående forsøg har bekræftet dette, jfr. den følgende beskrivelse.

Ο-Acetylsalicylsyre er kendt som hæmmestof for ag-20 gregeringen af humane blodplader (f.eks. Br.J.Clin.Pharmac.

7 (1979), 283), og det er rapporteret, at denne syre med henblik på undgåelse af thromboser og slagtilfælde kan udvise værdifulde terapeutiske virkninger (Blood 52. (1978), 1073, N. Engl. J. Med. 299 (1978), 53). Som virkningsmekanisme er 25 beskrevet, at acetylsalicylsyre hæmmer det i blodpladerne lokaliserede enzym cyclooxygenase (J. Clin. Invest. 56 (1975), 624), og følgelig hæmmes biosyntesen af thromboxan A2, som fremmer aggregeringen. Imidlertid kan acetylsalicylsyre også hæmme den i karvæggen tilstedeværende cyclooxyge-30 nase og dermed syntesen af det aggregeringshæmmende prostacyclin. Da hæmningen af den vaskulære cyclooxygenase imidlertid først iagttages ved højere doser af acetylsalicylsyre (Pharmacol. Research Commun. 10 (1978), 759), er det konsekvent blevet anbefalet at nå en antithrombotisk virkning 35 med lave acetylsalicylsyredoseringer (Lancet, iii (1979), 1213, Prostaglandins and Medicine 4 (1980), 439). Det er 2

DK 164893 B

imidlertid også blevet beskrevet, at den antithrombotiske virkning af acetylsalicylsyre tiltager med voksende dosering, og at en optimal virkning opnås ved betingelser, ved hvilke såvel prostacyclin- som thromboxan-biosyntesen hæmmes vidt-5 gående (Prostaglandins, Leukotrienes and Medicine 12 (1983), 235) .

Det er også kendt at addere den gunstige virkning af på den ene side acetylsalicylsyre og på den anden side xan-thinderivatet 7-(2-diethylaminoethyl)-theophyllin, idet man 10 fremstiller syre-base-additionsproduktet ud fra de to enkeltstoffer og anvender additionsproduktet medicinsk (GB-of-fentliggørelsesskrift nr. 2.096.138). Også indflydelsen på overlevelsestiden af thrombocyter i patienter med kunstige hjerteklapper ved kombineret samtidig anvendelse af pen-15 toxifyllin og acetylsalicylsyre er kendt (Singapore Med.

Journal 20/ Suppl. 1 (1979), 30).

Det har nu vist sig, at en med tidsmæssig afstand fra hinanden følgende frigivelse af A) xanthinderivater på den ene side og B) O-acetylsalicylsyre eller dens farmakolo-20 gisk acceptable salte på den anden side i en bestemt rækkefølge muliggør en overordentlig stærk forbedring af terapien af sygdomme, som er forårsaget af eller kendetegnet ved ødelagte blodbestanddele, især thrombocyter eller erythrocy-ter, men også leukocyter. Den tidsmæssigt forskudte anvendel-25 se af xanthinderivaterne, især pentoxifyllin, som sker 10 minutter til 4 timer før anvendelsen af acetylsalicylsyren eller dens salt, fører til langt stærkere virkninger, end hvis kombinationen af de to enkeltstoffer anvendes samtidigt, hvor der endog indtræder en formindskelse af denne virkning.

30 Dette er så meget mere overraskende, som den samtidige indgivelse af xanthinderivater, såsom pentoxifyllin, og acetylsalicylsyre kun fører til antithrombotiske og antiaggregato-riske virkninger, som man også opnår ved en enkelt indgivelse af acetylsalicylsyre, jfr. tabel I og II i det følgende.

35 Den foreliggende opfindelse angår i overensstemmelse hermed et kombinationspræparat på enhedsdosisform, hvilket 3

DK 164893 B

præparat er ejendommeligt ved, at det indeholder A) på ene side et xanthinderivat med den almene formel 0 R3 ! 'iVi iTh" m *2 hvor den ene af grupperne R·*· og R3 er en ligekædet alkyl-, 10 (ω-l)-oxoalkyl- eller (ω-l-)-hydroxyalkylgruppe med 3-8 carbonatomer, og de to andre grupper R2 og R3 eller R1 og R2 er ligekædede eller forgrenede alkylgrupper med 1-8 carbonatomer i stillingerne R1 og R3 og med 1-4 carbonatomer i stillingen R2, hvorhos summen af carbonatomerne i disse to 15 alkylsubstituenter højst er 10, eller med den almene formel 0 CH2-C0-CH3 H3C-C0-lCH2)4-N-yY% (II)

20 OH

R

hvori R er en alkylgruppe med 1-4 carbonatomer, eller sådanne forstadieformer af oxoalkylxanthinerne med formlerne (I) og 25 (II) eller af hydroxyalkylxanthinerne med formel (I), fra hvilke forbindelserne med formlen (I) eller (II) frigives i organismen, og B) på den anden side O-acetylsalicylsyre eller dens farmakologisk acceptable salte, med eller uden C) et farmaceutisk bærestof, til tidsmæssigt forskudt anven-30 delse ved terapi af sygdomme, som er forårsaget af eller kendetegnet ved ødelagte blodbestanddele, især thrombocyter eller erythrocyter, men også leukocyter, formuleret på en sådan måde, at komponent A) frigives først, og at komponent B) frigives 10 minutter til 4 timer senere.

35 Med andre ord: det her omhandlede præparat egner sig på grund af dets synergistiske virkninger til antithrom- 4

DK 164893 B

botisk, blodstrømningsforøgende, betændelseshæmmende, smertestillende, antiaggregatorisk og cytostatisk terapi eller prophylaxe.

Den foreliggende opfindelse angår i overensstemmelse 5 hermed tillige anvendelsen af A) xanthinderivater med formel (I) eller (II) eller af forstadieformer af oxoalkylxanthiner med formel (I) eller (II) eller af hydroxyalkylxanthiner med formel (I) og B) O-acetylsalicylsyre eller dens farmakologisk acceptable salte, med eller uden C) farmaceutiske 10 bærestoffer, til fremstilling af de her omhandlede kombinationspræparater, som bevirker en tidsmæssigt forskudt frigivelse på en sådan måde, at komponent A) frigives først, og at komponent B) frigives 10 minutter til 4 timer senere, imod sygdomme, som er forårsaget af ødelagte blodbestanddele.

15 Den foreliggende opfindelse angår desuden en frem gangsmåde til fremstilling af de her omhandlede kombinationspræparater, hvilken fremgangsmåde er ejendommelig ved det i den kendetegnende del af krav 3 angivne.

Det her omhandlede kombinationspræparat på enhedsdo-20 sisform anvendes i human- eller veterinærmedicinen. Ved hjælp af dette kombinationspræparat bliver det muligt, at xanthinderivatet frigives, dvs. er biologisk tilgængeligt, før acetylsalicylsyren.

Det er en yderligere fordel, at de mængder af xan-25 thinderivat og acetylsalicylsyre, som skal anvendes, på grund af den synergistiske virkning ved den tidsmæssigt forskudte anvendelse kan nedsættes til sådanne mængder, som, hvis de var blevet indgivet alene, kun udviser en minimal farmakologisk virkning, således at samtidige bivirknin-30 ger, som fremkaldes af høje doser af disse lægemidler, formindskes. Dette er af stor betydning af den grund, at acetylsalicylsyre som bekendt i gængse doseringer kan fremkalde uønskede bivirkninger, såsom astma, allergisk urtikaria, analgetisk nephropati og mave- og tarmsår (se f.eks. British 35 Journal of Clinical Pharmacology 1980, 10, Suppl. 2, og

International Meeting on Side Effects of Antiinflammatory,

DK 164893B

5

Analgesic Drugs, Verona, 13.-15. september 1982, Abstracts).

Også xanthinderivaterne kan udvise uønskede bivirkninger.

Ved hjælp af det her omhandlede kombinationspræparat kan den nødvendige dosering af acetylsalicylsyre til mennesker 5 nu overraskende formindskes drastisk, og det samme gælder mængden af xanthinderivat, således at den almene toxikolo-giske accepterbarhed bliver yderligere forbedret, jfr. beskrivelsen i det følgende.

Foretrukne xanthinforbindelser med formel (I) er 10 sådanne, hvori R1 eller R3 betyder en alkyl-, (ω-ΐ)-oxoalkyl-eller (ω-l)-hydroxyalkylgruppe med 5 eller 6 carbonatomer, og de to alkylsubstituenter R2 og R3 eller R3· og R2 tilsammen indeholder 2-6 carbonatomer.

Blandt disse forbindelser foretrækkes igen især så-15 danne, som i stillingen R1 eller R3 indeholder en hexyl-, 5-oxohexyl- eller 5-hydroxyhexylgruppe. Til disse forbindelser hører især l-hexyl-3,7-dimethylxanthin, 1-(5-hydroxy-hexyl)-3,7-dimethylxanthin, 1-(5-oxohexyl)-3,7-dimethylxan-thin, 1,3-dimethyl-7-(5-hydroxyhexyl)-xanthin, 1,3-dime-20 thyl-7-(5-oxohexyl)-xanthin, 1-(5-hydroxyhexyl)-3-methyl-7--propylxanthin og 1-(5-oxohexyl)-3-methyl-7-propylxanthin.

En anden egnet xanthingruppe er forbindelserne med formel (II), hvori R betyder en alkylgruppe med 1-4 carbonatomer.

25 Oxoalkylxanthinerne med formel (I) og (II) og hydro- xyalkylxanthinerne med formel (I) behøver ikke at anvendes som sådanne, men kan også anvendes i forstadieform, fra hvilken de terapeutisk virksomme xanthinforbindelser med de i formlerne (I) og (II) definerede substituenter først kan 30 frigøres i organismen ved biotransformation. I betragtning hertil kommer fortrinsvis acetaliseret oxoalkylxanthin, hvor mindst én carbonylgruppe er erstattet med et strukturelement med den almene formel 35 'Al (III)

'4 U

! ϊ 6

DK 164893 B

eller en O-acyleret hydroxyalkylxanthin med et strukturelement med formlen R6-C0-0- (IV), hvor R4 og R5 hver især er en alkylgruppe med op til 4 carbonatomer eller sammen er en ethylen-, trimethylen- eller tetramethylengruppe, og R6 er 5 en alkylgruppe med op til 4 carbonatomer, phenyl, substitueret phenyl, pyridyl eller substitueret pyridyl.

Egnede farmakologisk acceptable salte af acetylsalicylsyre er sådanne med farmakologisk acceptable metalkatio-ner, ammonium, aminkationer eller kvaternære ammoniumkatio-10 ner. Foretrukket er salte med alkalimetaller, såsom lithium, natrium og kalium, og jordalkalimetaller, såsom magnesium og calcium, selv om også kationiske former af andre metaller, såsom aluminium, zink og jern, kan anvendes.

Farmakologisk acceptable aminkationer er sådanne af 15 primære, sekundære eller tertiære aminer, såsom alkylaminer, f.eks. methyl-, dimethyl-, trimethyl-, ethyl-, dibutyl-, triisopropyl-, N-methylhexyl-, benzyl-, /J-phenylethylamin, ethylendiamin, diethylentriamin, piperidin, morpholin, pipe-razin, mono-, di- eller triethanolamin, ethyldiethanolamin 20 og N-butylethanolamin. Egnede aminsalte er også de basiske aminsalte af lysin og arginin. Egnede farmakologisk acceptable kvaternære ammoniumkationer er f.eks. tetramethylammonium, tetraethylammonium og benzyltrimethylammonium.

Xanthinderivaterne på den ene side og acetylsalicyl-25 syrekomponenten på den anden side indgives til opnåelse af den synergistiske virkning i en egnet form, som muliggør en tidsmæssigt forskudt frigivelse. Dosisenhederne kan foreligge i form af faste lægemiddelformer, såsom kapsler (herunder mikrokapsler, som almindeligvis ikke indeholder et farmaceu-30 tisk bærestof), tabletter (herunder dragéer og piller) eller stikpiller, idet kapselmaterialet ved anvendelse af kapsler varetager bærestoffets funktion, og indeholdet deri kan foreligge f.eks. som pulver, gel, emulsion, dispersion eller opløsning. Særlig fordelagtigt og simpelt er det dog at 35 fremstille orale og perorale præparater med de to aktive stoffer, hvilke præparater indeholder de beregnede mængder 7

DK 164893 B

af de aktive stoffer sammen med ethvert ønsket farmaceutisk bærestof, og som er således beskafne, at frigivelsen af de aktive stoffer sker tidsmæssigt forskudt (sekventielt).

Også et tilsvarende præparat til rektal terapi (stikpille) 5 kan anvendes. Ligeledes er transdermal og parenteral (in- traperitoneal, intravenøs, subcutan, intramuskulær) injektion af opløsninger mulig, f.eks. ved hjælp af egnede flerkammer--injektionsenheder.

Sådanne kombina'tionspræparater kan fremstilles efter 10 gængse fremgangsmåder. Den ifølge opfindelsen sekventielle frigivelse (biotilgængelighed) af de aktive stoffer kan opnås ved, at man på gængs måde, f.eks. ifølge Sucker, Fuchst og Speiser, Pharmazeutische Technologie, Stuttgart 1978, side 424, overtrækker tabletter, piller eller granulatlege-15 mer, der som lægemiddel indeholder acetylsalicylsyre eller dens medicinsk acceptable salte, såsom D,L-lysin-monoacetyl-salicylat, med en kappe, der som aktivt stof indeholder f.eks. pentoxifyllin, med fordel i kombination med slimdan-nere, harpikser, såsom polystyren, eller andre gængse midler, 20 som forøger accepterbarheden. De som kerne anvendte tabletter, piller eller granulatlegemer kan fremstilles efter gængse metoder og indeholder bærestoffer og andre gængse hjælpestoffer, såsom stivelse, f.eks. kartoffel-, majseller hvedestivelse, cellulose eller derivater deraf, især 25 mikrokrystallinsk cellulose, siliciumdioxid, forskellige sukkerarter, såsom mælkesukker, magnesiumcarbonat og/eller calciumphosphater. Kappen, der f.eks. indeholder pentoxifyllin, kan f.eks. påføres på kernen ved hjælp af de i den farmaceutiske teknologi gængse metoder, såsom presse-, ned-30 dypnings- eller hvirvelmassemetoder, eller ved kedeldragée-ring. Drageeringsopløsningen består sædvanligvis af sukker-og/eller stivelsessirup, under tilsætning af gelatine, gummi arabicum, polyvinylpyrrolidon, syntetiske celluloseestere, overfladeaktive stoffer, blødgørere, pigmenter og lignende 35 tilsætningsstoffer svarende f il den kendte teknik.

DK 164893 B

8 ; o

Den sekventielle frigivelse af de aktive stoffer kan også opnås ved hjælp af lagdelte tabletter (hvorunder også forstås punkttabletter), ligeledes beskrevet i Sucker et al., l.c., hvori det lag, som skal resorberes hurtigst, 5 indeholder xanthinet, med fordel ligeledes i kombination med slimdannere eller andre gængse midler, som forøger accepter-barheden. Ved denne lægemiddelform kan frigivelsen af de aktive stoffer opnås ved hjælp af forskellige frigivelseshastigheder fra tabletlagene ved anvendelse af egnede, 10 gængse hjælpestoffer, f.eks. de ovenfor anførte. En forskudt frigivelse af de to aktive stoffer, f.eks. pentoxifyllin og acetylsalicylsyre, kan også opnås ved, at den komponent, som indeholder acetylsalicylsyren, indeholder retarderingsmidler, eventuelt også i form af permeable membraner, f.eks.

15 på cellulose- eller polystyrenharpiksbasis, eller ionbyttere eller anvendes i form af mikrokapsler, som er resistente imod mavesyren, eller som muliggør en forsinket frigivelse. Man kan imidlertid også forsyne kernen, som indeholder acetylsalicylsyren, med et overtræk, f.eks. bestående 20 af polymethacrylsyreestere ("Eudragit" ®), som muliggør en forsinket frigivelse.

Til fremstilling af lægemiddelformerne kan anvendes ethvert af de gængse strømmeregulerings-, smøre- eller glidemidler, såsom magnesiumstearat, og slipmidler.

25 Vægtforholdet mellem acetylsalicylsyren og xanthin- derivaterne, såsom pentoxifyllin, kan variere indenfor vide grænser. Det nøjagtige forhold, som skal anvendes til en bestemt kombination, kan let måles ved hjælp af de i det følgende beskrevne forsøgsmetoder. Almindeligvis andrager 30 vægtandelen af xanthinderivaterne, f.eks. pentoxifyllin, baseret på én vægtdel acetylsalicylsyre, mellem mindst ca. 0,1, fortrinsvis mindst ca. 0,3 til ca. 0,5 og især mindst ca. 2, og højst ca. 50, fortrinsvis højst ca. 10. Også den optimale tidsafstand mellem anvendelsen af xanthinderivatet og 35 acetylsalicylsyren eller den optimale frigivelseshastighed fra de galeniske præparater kan måles ved anvendelse af 9

DK 164893 B

O

denne forsøgsmetode. Først frigives xanthinderivatet, f.eks. pentoxifyllin, og fra 15 minutter til 4 timer senere ace-tylsalicylsyrekomponenten. Især foretrækkes en tidsafstand på mellem ca. 20 og ca. 90 minutter, især mellem 30 og 60 5 minutter. Den dosering, som skal anvendes, afhænger naturligvis af forskellige faktorer, såsom det levende væsen, som skal behandles (dvs. mennesker eller dyr, alder, vægt, almen sundhedstilstand), symptomernes sværhedsgrad, den sygdom, som skal behandles, arten af ledsagende behandling 10 med andre lægemidler (hvis den foretages) og hyppigheden af behandlingen. Doseringerne indgives almindeligvis fra 1-5 gange om dagen, fortrinsvis 1-3 gange om dagen. Vægtforholdet mellem de enkelte aktive stoffer skal ligge indenfor det ovenfor angivne område og mængden af bestandde-15 lene indenfor det virksomme doseringsområde, som kan tåles af det levende væsen, som skal behandles.

Hos mennesker andrager f.eks. den foretrukne dosis af acetylsalicylsyre ved indgivelse alene 2-3 gange dagligt 500-2000, især 1000, mg. Den foretrukne dosis pentoxifyl-20 lin andrager hos mennesker ved indgivelse alene 2-3 gange dagligt 200-800, især 300-600, mg. Ud fra disse vægtforhold kan for forholdet acetylsalicylsyre/pentoxifyllin de til enhver tid nødvendige mængder beregnes nøjagtigt. En egnet terapi består følgelig f.eks. i indgivelse af 1, 2 eller 25 flere, fortrinsvis 3-8, enkeltdoseringer af de her omhandlede kombinationspræparater på hver især 100-600, fortrinsvis mindst 200 og især op til 400, mg xanthinderivat, især pentoxifyllin, og 10-2000, f.eks. op til 400, mg acetylsalicylsyre eller den tilsvarende mængde af et salt, idet 30 mængden naturligvis afhænger af antallet af enkeltdoseringer og også af den sygdom, som skal behandles, og en enkelt dosering f.eks. kan bestå af flere, samtidigt indgivne tabletter. Den foreliggende opfindelse gør det dog muligt at opnå gode resultater også i de tilfælde, hvor der ønskes 35 indgivelse af særlig små acetylsalicylsyremængder (f.eks.

10-50 mg om dagen eller derunder), nemlig væsentligt bedre 10

DK 164893 B

o resultater end ved anvendelsen af samme mængde acetylsalicylsyre alene.

De her omhandlede præparater kan anvendes på samme måde som kendte, antithrombotiske og blodpladeaggrege-5 ringshæmmende midler. In vivo-anvendelser omfatter indgivelse til mennesker og dyr for at forhindre dannelsen af arterielle og venøse blodpropper, f.eks. til forhindring af forbigående ischaemiske anfald og ved langtidsprophylaxe efter hjerteinfarkter og slagtilfælde, samt ved arterio-10 sclerose, men også ved operationsefterbehandling til forhindring af postoperative thromboser samt ved efterbehandlingen af kræft til forhindring eller formindskelse af metastasevirkningen. Også anvendelsen ved patienter, som er tilsluttet hjerte-lunge-maskiner eller nyredialyse, er 15 mulig, ligeledes ved patienter med f.eks. kunstige hjerteklapper eller karproteser. Naturligvis er også anvendelsen til enkeltbestanddelenes egentlige indikationer, f.eks. blodgennemstrømningsforøgelse (Claudicatio intermittens) samt smertestillende og betændelseshæmmende virkning (også ved 20 kroniske betændelser) mulig. I betændelseshæmmende præparater ligger forholdet mellem xanthinderivat og komponent B almindeligvis mellem 0,1 og 1 og for andre præparater almindeligvis mellem 0,5 og 50.

25 In vivo-undersøgelser

En kombination af pentoxifyllin og acetylsalicylsyre bedømmes in vivo ved hjælp af en forsøgsanordning, ved hvilken en intravaskulær thrombose fremkaldes med en laser i arteriolerne i mesenteriet på en rotte. Denne ar-30 bejdsmåde er en egnet forsøgsmodel for det her omhandlede kombinationspræparat. Bedømmelsen sker ved hjælp af vitalmikroskopisk analyse (Nature, 218 (1968) , 887, og Haemostasis 13 (1983), 61, og IRCS Med. Sci. 12 (1984), 91).

35 Forsøgsstofferne indgives enten per os, intra- peritonealt eller intravenøst i en 0,9%'s natriumchlorid- 11

DK 164893 B

o opløsning (indeholder 1% carboxymethylcellulose (Serva, Heidelberg)). Kontroldyr behandles på tilsvarende måde, men uden forsøgsforbindelser. Som forsøgsdyr anvendes haneller hunrotter af stammen Sprague-Dawley eller Wistar.

5 Undersøgelsen med pentoxifyllin, andre xanthin- derivater og acetylsalicylsyre ved den laserfremkaldte thrombosemodel sker på Sprague-Dawley-hunrotter med en legemsvægt på ca. 200 g. De dyr, som skal undersøges, præ-medikeres subkutant med 0,1 mg atropinum sulf. sol. og 10 bedøves intraperitonealt med 100 mg ketamin-hydrochlorid og 4 mg xylazin pr. kg legemsvægt. Til undersøgelsen tjener arterioler og venoler fra det med for gas befriet paraffinolie overhældte mesenterium med en diameter på ca. 13 μπι. Strålen fra en 4 W argon-laser (firma Spectra Physics, 15 Darmstadt) ledes ved hjælp af et stråleadaptions- og -justeringsanlæg (firma BTG, Miinchen) koaksialt ind i den inverterede strålegang i et mikroskop (ICM 405, LD-Epip-land 40/0.60, firma Zeiss, Oberkochen). Den benyttede bølgelængde er 514,5 nanometer med en energi ovenover objek-20 tivet på 30,5 mW. Eksponeringstiden pr. enkeltskud er 1/15 sekund. Alle måleprocesser optages pr. videokamera (Trinicon-Rohre, Sony, Κδΐη) og oplagres på en recorder (Sony, U-matic 3/4"). Forsøgsforbindelserne indgives til forsøgsdyrene i forskellige doseringer oralt én time før 25 forsøgets begyndelse eller intravenøst 10 minutter før forsøgets begyndelse. Kontroldyrene får samme mængde placebo. Indgivelsen af stofferne sker: 1) som enkeltindgivelse, 2) sammen som kombination eller 3) først acetylsalicylsyre og efter 1 time pentoxifyllin eller et andet xan-30 thinderivat samt 4) først pentoxifyllin eller et andet xan-thinderivat og efter én time acetylsalicylsyre (tabel la).

Tabel Ib viser indflydelsen af forskellige tidsintervaller. Tabel Ic sammenfatter virkningerne af andre xanthinderivater.

35 12

DK 164893 B

O

Bedømmelse

Antallet af skud til fremkaldelse af en defineret thrombus tælles. Skudfrekvensen andrager en læsion hvert andet minut, idet alle under iagttagelsestidsrummet dannede 5 thromber med en mindstestørrelse på 1/4 karradius tælles og opmåles.

Den statistiske vurdering af forsøgsresultaterne 2 sker ved hjælp af X -forsøget (L. Cavalli-Sforza, Bio-metrie, Stuttgart, 1969, side 49 ff).

10

Resultater.

Resultaterne er dokumenteret i tabellerne Ia-c. Enkeltindgivelse af 5 mg/kg per os af acetylsalicylsyre eller pentoxifyllin er ikke signifikant virksom, idet dog 15 pentoxifyllin allerede viser en 20%'s hæmning af thrombus-dannelsen. I en dosis på 10 mg/kg per os har begge stoffer en signifikant virkning. Den samtidige indgivelse af pentoxifyllin og acetylsalicylsyre giver ingen virkning i lasermodellen. Dette er også tilfældet, når der først ind-20 gives acetylsalicylsyre og efter én time pentoxifyllin. I modsætning hertil har anvendelsen af først pentoxifyllin og efter én time acetylsalicylsyre en dosisafhængig, signifikant virkning i den laserfremkaldte thrombosemodel på arterioler og venoler fra rottemesenteriet. Den synergis-25 tiske virkning af denne tidsmæssigt forskudte anvendelse i sammenligning med enkeltindgivelsen er tydeligt dokumenteret ved den procentuelle ændring i forhold til kontrollen (tabel la).

De i tabel Ib viste resultater viser, at tidsrum-30 met mellem de to enkeltindgivelser kan vælges bredt, idet det optimale ligger mellem 15 og 180 minutter. Også med andre xanthinderivater kan de her omhandlede virkninger opnås, når de indgives tidsmæssigt forskudt sammen med acetylsalicylsyre. De antithrombotiske virkninger af et ud-35 valg af sådanne xanthinderivater er vist i tabel Ic.

13

DK 164893 B

©

O

rH

•Θ.

IH

<D

Μ +)

M W r-i H

ft} <D O O

Lj O ' - to I I O o © (N . y y W ><? Oj Ch rH ©

100010.-)^010^000 CJl H rH O <N O rH rH rH

Ό ·γΗ rH t)P I I I 1 c: -h

-Η H +J

rH HXJ+JO ro ro Γ' Μ1 rH CN Γ0 O tN tH

M ? O O i I O O O O .Η O O O o O O

03 K! *H JSi (0 II 1 H O m

rrj Ό rHinOO'fOOOVDOO H

ijj 5 g O ro CN OJ 03 ro O] CM CM Ή ^ 01

Vj M ^ *» ^ *· ^ ** ** "* ** V ^ ** MW ooooooo o O o o o 0) ^ © r-cooi'JorocMrdOOor'

(¢5) 4J .h co r- o o o in <n o ro rH

H >1 rflX OJr-)r-)<NCM(OCN 03 03 -H CNJ 03

J U

W -H

§H

03 H

ti tn i >i >, 'Ϊΰ-Η'ν. æ ^ ^ ro ^ æ +j -ptflH ·3* cn o) oi oj oj oj oi oi oi ^ ^ tu C flj di o < η c <d

U

tu rH 0)

i—I tø r~J

\R +JM 03 O O O O O O O O O O' o

OS C >i C rH

0 0 < Ό

SH

c x:

•rH +J

ιΗ l rH Φ tø & 0) ' - 1Η*Τ3 B N. U tJ1 O I .—) uo O in O in UO O H C> O UOLfO “I O 22 •H H OOOffi· 1 I *-1 + rH + rH rH + X (d Q g Sh > CH + + +

R -¾ C C C

d ω "Η Ή -rH

S” 3 3 3 ati >i >1 >1 lu 5 HH «Η l·)

m -Η -Η -H

10 Ϊ XXX

m 5 0 0 0

0)0)03 (U Φ © © -P © O © O

.ir. H)hM M )-) MMCJMGMfi r· m + ^1+t>l4"r>1.>1©i5'1©rN© 5 ,S tnmtn tn tn m u ft æ ft tu ft

H rHrHrHCCCrHCHCHH f-l rH

•H .(rt >1 >1 >1 Ή Ή -H >1 -H >1 -H >1 >1 © >1 © >1 ©

5 S, OOOrHHHOrHDrHOOgOeuS

^ -H -rH -H rH rH .-) ·Η rH -H rH -Η ·Η -Η ·Η ·Η ·Η -Η

rH rH rH >1 >! >ί Ή >1 r) >Ί Ή rH+) H D ^ -P

m Dl Di lilHlHtHId'HId'HUl β <0 ©

d rH tn tn tn-H-H-Hin-Htn-Htn tnrH tnrH tnrH

(O OrHrHrHXXXrHXrHXrHrH r-l r-l JJ Η>ι>ι>ιΟΟΟ>ιΟ>ιΟ>ι>η!η>ιΗ>ιΗ m -p X) 4J 4-3 )J 4-1 4-3-U -P -P -P -P P © 4-3© 4-J©

n C0)(u©ficc;©c;©pt©©-i->©+J cu4J

d ooou©©©o©o©oohhopop ό) ^<qri5<cH(ilpJioeH(t30)td<;©<c©<© 14

DK 164893 B

0) ty

rH

·& m a) i-i rH i—I i—I (H a

,¾ W OOO O O O

Sid) - «·

p 4-1 OOO O O O

tn I V V V V V V

ojcM, Oi&ft a a a m

H

ø >

•H

cn co σι co co -cp co in w Ό a a dp "3* r~ a oo^cm cm a oo c a a a a a p a 0 ty ty ό a p a c a o 2 a a ο p a -3* a ^ ^ <y 0 co co a ni 4J 0 0 i> in 0000 0 co r-

0 'OMCw * * *- ·. ».V

λ; c ο ο ΰ a a cm aacN cm oa m 1¾ a m 0

P

p 0 w rg rg a co m ’cr r~- r- cm

Pm 3S CM CO CO CO CM CO CO CM CO

M> χ & - - - 0 U) to 0 000000 00 Ή 0 p a >, 0 a co a a vo m om øm a cm oo r-· 0 cm cd co mo hh a - - - >, <! K co co ’d« 0 co <} 'vP cmco PI u K a S3 a

s si P

Bra 1 >i a a 0 'b >1 ιί a n ^ ^ ^ ^

+J a 0] p CM CM CM CM CM CM CM CMCM

0 R B 0 o < a a 0 p 0 a 0 aw a 000

\ Λ P P

tyg c >, e co vo vo vovovo vo vovo 0 0 >=11 Ό

P

C 02 a P

a 1 a 0 in ty 0 ^ >1 P a ,¾ p P · p a m\p iy 0 “i ‘n oaoooooaoo cm o cm a a o & o 8 * + a+aacococo+coa a + X 0 Q S p > (¾ + + 0 £ P s C 0 0 p 0 0 0 0 0 o, p p p p p p VI tP >1 >Ί >i >1 a 0 tn to ω tn to 0 tn a a a a a 0 P >1 P >1 P >1 P >1 P >1 da 0 o øoøo øuøo s a a P a p a 0 p a P a 0 0 ac p h p a p a p p a p a p p e 0 øø 0000 >10000 >1 ~ + >1^ birt tn tn in tn tn in tn.^>.

vi a a cacasafiaca a(oi) c afai) a «0 a >1 a >1 a >1 a >i a >1 a >i >i—^ a >1^^ > π. aP apapaoapapo=ao = aø aøaøaaaøaøaxaax >ιϋ >ιθ >1 0 tpa >ιθ ><oaø >iaø

tn Pø PøPøPøPøPøø'dPøO

c a a a a tn a a tn 0 a in 0 0 X 0 xøxøxaxøxøa,exa,c! a oS osoeo>iogos>i&o>iai m a a aaaaaapaaaPøPPø o sRP cPdPøøCPøPøtncøcn 3 0 0 0 0 o 0 0 0=00= μ & a cuaftaoiriiAiaaiaiiC^ciiø·^ 15

DK 164893 B

<D

&\ \ |—1 Q. p Φ

A P

λ: to « φ ^ £ M P o o to i *· ' φ CN , o o co γ<ί y χ p Ωι Q< Φ > ‘ο» θ' Γ" σι m

Ό Ρ P <*> CN O CN CN

c η ^ •Η M +-· 0) O' O' Ό Ρ Ρ

P fi Η Ο S

Ρ Ρ Ο U Η ι—I Μ Λ Ρ Ο CN Ρ ^ ^ φ Ό Μ G 01 CD Ρ ι£)Γ~ y β Ο Ο ΰ > *· * *· to 63 ρ Α <d ο cn ο cn Μ ο Ρ jj τ) Ό id φ ο S cn cn ο ιη

Μ > A W pro CNrO

Ρ in ω *- *· λ· n φ ο ο ο ο Ο Μ Ρ ϊ· ω1 ρ σι co οο ω ρ c f- CN Γ·- 00

id >ι ri! I Χ - ' JT

HO CN ·53· CN ^ •Η Ω Ρ Μ Id n cq co ι >ι < Ρ Ρ Ο Ό ^ρΰω'νί νι< νρ νρ ντ

φ C « φ CN CN CN CN

O < P G

Id J-l Φ Ρ Φ

rH CO i-H

0) 0 \ O IJ u

O' E G >i G coco COCO

OO < Ό u G Λ

P P

P I

Ρ Φ to O' Φ *· s- η -Η M *U ·Ρ * ρ Ό to \ p O' 0 oo co ooo ρ ρ 0 O' 0 fB · pp p ppm X(dQEH>a + ρ ί r Γ

φ 2 Q Q

a co oo ι ι ρ φ a s ι -j ι -j idtn = ' oh oh n< v—' ^ s-ι id M id O' p a to A ω fH φ φ Ή ι—i P 1—! PC ,, J-I M S>i^· £>1-^ 3 p ο φ φ to οομοο'ΦΩ O' φ Ω

ft u Ρ Ρ Ρ ρ c p P P PPUO CPUO

ρ eid id Pto>iPP(fl>i ns Pidco ρ p id co >0. c ΡΦαϋ g co φ s ρ φ , a (Omtoidp PtoidP id p co P r p to P : •s a ρ >t & a p s tu ^ >ι ® φ w

m p ρ Ρ Ό nj Ρ Ρ T5 Id PPPP pPP

c Ιβ (U a C to P Q, G 10 id Φ Qi 01 Φ p Q| 01 φ

£ H ft ° P X Ο Ρ P l·) 6Ό ftH XOQ.M

p id ε 13 P >1 0 3 Ο >ι ιί E 3 It) >1 0 3 Iti >,

m Q, φ Φ Μ p Ρ Φ H Ρ Οι Φ Φ A t0 Ρ φ A CO

p tø Μ *-< A φ G ^ A Φ tø 10 S-i Ό Ρ G Μ Ό Ρ 3 H A ρ ‘ri U φ >i P O H A >ι G >, Φ >i G >ι ft φ W £ tf ft CO g Id ft φ ΙΟ P O ft 01 Ρ Ο 16

DK 164893 B

Tabel Ib

Virkning af pentoxifyllin og acetylsalicylsyre på laserfremkaldt thrombose.

Indflydelse af tidsintervallet mellem indgivelsen af substanserne.

Dosering hver gang 10 mg/kg pentoxifyllin p.o., derefter 1 mg/kg acetylsalicylsyre p.o. efter det angivne tidsrum.

_ 2

Substans Antal Antal læ- X SEM % Ændring i X, -Test dyr sioner forhold til __kontrol_

Kontrol (placebo) 8 32 2,19 0,02 -

Pentoxifyllin, 9 36 3,27 0,32 + 49 p -<0,05 uden acetylsalicylsyre

Acetylsalicylsyre 9 36 1,90 0,34 - 13 uden pentoxifyllin 0 min 9 36 2,18 0,13 0 15 min 5 20 3,42 0,21 +56 p <0,05 30 min 5 20 3,59 0,17 +64 p <0,01 45 min 5 20 3,68 0,19 +69 p <0,01 60 min 7 28 3,71 0,18 +76 p <0,01 90 min 4 16 3,33 0,23 +52 p <0,01 120 min 4 16 2,91 0,21 +33 p <0,01 180 min 8 32 2,63 0,21 +20 p <0,05 300 min 8 32 2,25 0,17 +3 17

DK 164893 B

Tabel Ic

Antithrombotisk virkning af xanthinderivater (hver især 10 mg/kg p.o., n = 3) (spalte a) eller konsekutiv anvendelse ifølge opfindelsen (10 mg/kg xan-thinderivat, 1 time senere 1 mg/kg acetylsalicylsyre p.o., n = 3) (spalte b) i lasermodellen på rotter. Angivet er den procentvise forbedring i forhold til placebo-kontrollerne.

Substans_a_b_

Kontrol (kun acetylsalicylsyre) - - 10% 1-(5-Oxohexyl) -3-methyl~7-pro- pylxanthin 42% 56% 1-(5-Hydroxyhexyl)-3-methyl- -7-propylxanthin 40% 53% 1-(5-Hydroxyhexyl)-3,7-dime- thylxanthin 52% 68% l-Propyl-3-methyl-7-(5-hydroxy- hexyl)-xanthin 35% 42% l-Hexyl-3,7-dimethylxanthin 39% 46% l-Ethyl-3-ethyl-7-(5-oxohexyl)- xanthin 41% 48% l-n-Butyl-3-n-butyl-7-(2-oxopro- pyl)-xanthin 33% 50% 1-(5-Hydroxyhexyl)-3-methyl-7-(2- -methylpropyl)-xanthin 23% 34% 1-(2-Methylpropyl)-3-methyl-7- -(5-oxohexyl)-xanthin 28% 39% 1-(5-Oxohexyl)-3-methyl-7-(2-me- thylpropyl)-xanthin 28% 39% 1-(2-Methylpropyl)-3-methyl-7- -(5-hydroxyhe‘xyl)-xanthin 29% 39% 1-(Isopropyl)-3-methyl-7-(5-hy- droxyhexyl)-xanthin 31% 36% 1-(3-Methylbutyl)-3-methyl-7-(5- -oxohexyl)-xanthin 26% 35% 1-(3-Methylbutyl)-3-methyl-7-(5- -hydroxyhexyl)-xanthin 28% 37% 1-(3-0xobutyl)-3-methyl-7-propyl- xanthin 40% 49%

O

18

DK 164893 B

Den tidsmæssigt forskudte anvendelse kan gennemføres ved hjælp af en i handelen gængs perfusorenhed med to adskilt styrbare kamre (f.eks. fra firma Braun, Melsungen, med over et tidsomstillingsur adskilt udformet motorfrem-5 drevning). De to kamre i perfusorenheden fyldes med pentoxi- fyllinopløsning (svarende til 10 mg pentoxifyllin/kg rotte) og med acetylsalicylsyreopløsning (svarende til 1 mg/kg) (opløsningsmiddel som ovenfor angivet). 20 minutter efter injektionen af pentoxifyllinopløsningen i halevenen sker 10 den over omstillingsuret styrede injektion af acetylsalicyl-syreopløsningen. Ved sammenligningsforsøget injiceres de to kamre samtidigt. Resultaterne svarer til de efter oral indgivelse opnåede måleværdier, dvs. ved den tidsmæssigt forskudte anvendelse opnås der virkninger, som ligger langt 15 over de ved samtidig indgivelse opnåede virkninger.

Ex vivo undersøgelser.

Thrombocytaggregeringen bestemmes ved en kendt metode. Hankaniner (eget opdræt, BASK, SPF Wiga, ca. 2,5 til 20 3,5 kg) behandles intravenøst (ørevene) med pentoxifyllin og/eller DL-lysinmonoacetylsalicylat, opløst i fysiologisk kogsaltopløsning. Blod udtages herefter fra ørevenen, blandes med en 3,8%'s trinatriumcitratopløsning i forholdet 9:1 og inkuberes 45 minutter ved stuetemperatur. Derefter 25 centrifugeres 10 minutter ved 1000 omdr./min. Det øverste lag, som udgør det pladerige plasma, skilles fra, og det nederste lag centrifugeres 10 minutter ved 28.000 omdr./min.

Nu indeholder det øverste lag det pladefattige plasma, som ligeledes skilles fra. Det pladerige plasma fortyndes ved 30 hjælp af det pladefattige plasma til fra ca. 6 til 7 gange g 10 plader/ml (Coulter Counter, Coulter Electronics, Kre-feld). Pladeaggregeringen følges optisk ved måling af lystransmissionen i et Born'sk aggregometer (firma Labor GmbH, Hamburg). Volumen af forsøgsblandingen er 0,25 ml, tempera-35 turen 37°C. Aggregeringen sættes igang med 2*10 4M arachi-donsyre (Serva, Heidelberg), renset under beskyttelsesgas

O

19

DK 164893 B

(argon) ved præparativ højtryksvæskechromatografi (HPLC Reversed Phase C-18-søjle). Tilvæksten i thrombocytaggre-gering følges ved hjælp af lystransmissionen. Målestørrelse i dette system er den maksimale aggregeringsamplitude 5 E. Resultaterne er vist i tabel II.

TABEL II

Tidsforløb for virkningen af pentoxifyllin og/eller DL--lysinmonoacetylsalicylat på thrombocytaggregeringen 10 Substans Tidsfor- Dosis i.v. Aggregeringsløb amplitude _(min)_mg/kg_E ex vivo_ I. Ingen, kontrol 0 - 27,5 DL-Lysinmono- 15 acetylsalicylat 15 1,5 30 23,5 DL-Lysinmono- acetylsalicylat 35 0,5 45 19,5

Pentoxifyllin 90 20 150 20 20 II. Ingen, kontrol 0 - 26

Pentoxifyllin 15 20 DL-Lysinmono- acetylsalicylat 45 1,5 25 110 0,5 III. Ingen, kontrol 0 23

Pentoxifyllin 15 10 45 22 30 Pentoxifyllin 60 10 120 20

Hunrotter (Hoe Wiskf, ca. 180 g) behandles ved oral 35 indgivelse med følgende medikamenter (i polyethylenglycol (PEG), molekylvægt 400, svarende til 1 ml/kg):

• O

20

DK 164893 B

Forsøg 1.) 30 mg/kg pentoxifyllin, 30 minutter senere 3 mg/-kg acetylsalicylsyre.

Forsøg 2.) 30 mg/kg pentoxifyllin, 30 minutter senere 10 mg/-kg acetylsalicylsyre.

5 Forsøg 3.) 30 mg/kg acetylsalicylsyre, 30 minutter senere 30 mg/kg pentoxifyllin.

Forsøg 4.) 10 mg/kg acetylsalicylsyre, 30 minutter senere 30 mg/kg pentoxifyllin.

Forsøg 5.) 30 mg/kg pentoxifyllin, 30 minutter senere kun 10 opløsningsmiddel.

Kontrolforsøg 6.) 1 ml/kg PEG 400 uden medikamenter.

18 timer senere gentages disse procedurer, og derefter aflives rotterne 1 time efter sidste indgivelse under ethernarkose, og den thorakale aorta udtages. Aorta-15 segmenter inkuberes straks i 30 minutter ved 24°C i 3 ml pufret 0,09 M NaCl-opløsning, pH-værdi 7,5. Portioner af de ovenstående aorta-væsker anvendes derefter som hæmningsstoffer for den med adenosindiphosphat fremkaldte aggregering af humanthrombocyter på følgende måde: Fra sundt 20 udseende mandlige og kvindlige frivillige, som i det forudgående tidsrum på 10 dage ikke har indtaget nogen form for medikamenter, udtages blod ved forsigtig kanylering af antekubitalvenen, og blodet stabiliseres straks med natriumcitrat (til 0,38%). Efter 15 minutters centrifuge-25 ring ved 140 g fås i den ovenstående væske pladerigt plasma (PRP), hvis thrombocytindhold ligger i området 2,5- g -3,5*10 /ml (Coulter Counter). Pladeaggregeringen følges optisk ved måling af lystransmissionen i et Born1sk aggre- gometer (firma Labor GmbH, Hamburg). Det samlede volumen 30 af forsøgsblandingen er 0,25 ml. Plasmaet forinkuberes med de ovenstående aorta-væsker i 5 minutter ved 37°C, og “ 6 derefter sættes aggregeringen igang med 2*10 M adenosindiphosphat. Ud fra de enkelte maksimale aggregeringsamplituder opstilles dosis-virkning-kurver i afhængighed af 35 aortavægten og derudfra måles grafisk den antiaggregatoriske aktivitet i den ovenstående væske fra 0,1 mg aorta. Aorta-

DK 164893B

O

21 vægtene bestemmes ved vejning af den i 20 timer ved 60°C tørrede aorta. Aggregeringsmålingerne sker i tidsrummet fra 1-2 timer efter blodudtagningen.

Nedenstående tabel III viser en analyse af frigø-5 reisen af antiaggregatorisk aktivitet fra rotteaorta efter oral indgivelse af pentoxifyllin og forskellige mængder acetylsalicylsyre. Det har især vist sig, at rækkefølgen af medikationen ikke har nogen indflydelse på hæmningen af frigivelsen af den antiaggregatoriske aktivitet.

10

TABEL III

Forsøg 1 2 3 4 5 6 15 _

Aggregeringsamplitude E 0,15 0,6 0,15 0,6 0,15 0,45 (x 102) 20 __________

Differens -0,3 +0,15 -0,3 +0,15 -0,3 - til kontrolforsøg 25 _„

Toksicitetsafprøvning. Metode:

Rotter behandles oralt, som ovenfor beskrevet, dog med stigende dosering. Den ene gruppe får pentoxifyllin, 30 og en anden gruppe får pentoxifyllin og desuden acetylsalicylsyre i vægtforholdet 10:1. Den dødelige dosis beregnes efter gængse standardmetoder (Litchfield og Wilcoxon, 1949) som LD5q: LDj_0 (Pentoxifyllin) = 1400 mg/kg 35 LD50 (Pentoxifyllin/acetylsalicylsyre) = 1400 mg/kg

O

22

DK 164893 B

Resultat.

Den toksikologiske accepterbarhed er den samme for de to grupper. Dette betyder, at forholdet mellem den farmaceutiske dosering og den dødelige dosering er langt mindre 5 ved den her omhandlede kombination pentoxifyllin/acetylsalicylsyre og dermed væsentligt gunstigere end ved indgivelse af pentoxifyllin eller acetylsalicylsyre alene.

Afprøvning for maveaccepterbarhed.

10 Metode:

Fastende hanrotter (Sprague-Dawley) på 200-300 g behandles oralt som ovenfor beskrevet med pentoxifyllin og 1 time senere med acetylsalicylsyre, eller de behandles kun med acetylsalicylsyre. 24 timer efter sidste medikation 15 skæres maven op langs med den lille kurvatur, renses under rindende vand og inspiceres for slimhudslæsioner. Som ul-cera gælder alle makroskopisk synlige læsioner af mucosa i kirtelmaven.

20 25 30 35

O

23

DK 164893 B

TABEL IV

Ulceroqen virkning af lægemidler

Substans Acetylsali- Antal Antal cylsyre dyr dyr 5 mg/kg n med p.o. ulcera n

Acetyl- 1,25 10 1 1ø salicyl- 12,50 10 2 syre 25 10 5 50 10 7 _100_10_9_

Konsekutiv 1,25 10 1 indgivelse, 15 dvs.

100 mg/kg 12,5 10 2 pentoxifyllin 1 time før acetyl- 25 10 5 salicyl-20 syre 50 10 7 100 10 8 25 Resultat.

Tabel IV viser, at forbehandling med pentoxifyllin ikke har indflydelse på den gastrale ulcerogenitet af acetylsalicylsyre. Dette betyder, at forholdet mellem farmaceutisk dosering og den dosering, som maven ikke kan accep-30 tere, ved den her omhandlede kombination (indgivelse af pentoxifyllin før acetylsalicylsyre) er væsentligt mindre og gunstigere end ved indgivelse af acetylsalicylsyre alene, da det ifølge tabel I er nødvendigt med væsentligt større mængder acetylsalicylsyre til opnåelse af samme antithrom-35 botiske effekt.

O

24

DK 164893 B

Undersøgelser i en model med kronisk betændelse

De her omhandlede kombinationer er ved den patholo-giske rottemodel for adjuvans-arthritits (fremkaldt med Mycobacterium butyricum) ifølge Clinical Hemorheology 3^ 5 (1983), 469-480, blevet undersøgt med henblik på deres blod- rheologiske, antithrombotiske, antiaggregatoriske og anti-inflammatoriske virkning efter 21 dages oral indgivelse og sammenlignet med de tilsvarende enkeltsubstanser. Blodudtagelsen fra den thorakale aorta sker 1 time efter sidste 10 indgivelse af forbindelser. Den blodrheologiske virkning er i alle enkeltheder blevet bestemt, som det er beskrevet i Clinical Hemorheology 4^ (1984), 263-273. Erythrocytdeformer-barheden i et filtrometer (MF 4, firma Myrenne, Roetgen, Tyskland) måles ved bedømmelse af begyndelsesstigningen i 15 strømningskurven. Tabel V viser (spalte a), at den, sammenlignet med sunde kontrolrotter, i arthritisrotter nedsatte erythrocytfiltrerbarhed igen kan sættes op med acetylsalicylsyre og pentoxifyllin. Allerede den samtidige kombination af de to stoffer, men især den konsekutive anven-2o delse (pentoxifyllin 1 time før acetylsalicylsyre) viser synergistiske virkninger.

25 30 35 25

DK 164893 B

Tabel V

Indflydelse af forskellige medikamenter på blodparametre i arthri-tiske rotter (n = 8 pr. gruppe)

Arthritisrotte Erythrocyt- Thrombosetil- Fremkaldt filtrerbarhed bøjelighed thrombocyt- (Antal skud) aggregering _a_b_c_ ubehandlet 59% 46% 100% 10 mg acetylsalicylsyre 63% 47% 62% 180 mg acetylsalicylsyre 68% 91% 35% 30 mg pentoxifyllin 79% 87% 94% 30 mg pentoxifyllin - samtidig 84% 57% 93% 10 mg acetylsalicylsyre 30 mg pentoxifyllin - samtidig 86% 91% 43% 180 mg acetylsalicylsyre 30 mg pentoxifyllin, 1 time senere 90% 109% 22% 10 mg acetylsalicylsyre 30 mg pentoxifyllin, 1 time senere 96% 104% 30,5% 180 mg acetylsalicylsyre feunde kontrolrotter 100% 100% 0%)

O

26

DK 164893 B

Den antithrombotiske virkning er blevet målt i lasermodellen som ovenfor beskrevet. Tabel V, spalte b, viser resultaterne. Medens der i de sunde kontroldyr gennemsnitligt skal anvendes 2,173 (=100%) laserskud til opnåelse 5 af en thrombe, er det i arthritis-dyrene tilstrækkeligt med 0,99 (=46%) skud, dvs. thrombosetilbøjeligheden er forhøjet i de syge dyr. Tabel V, spalte b, viser, at thrombosetilbøjeligheden nedsættes ved behandlingen med medikamenterne, og at man især ved anvendelse af de her omhandlede 10 kombinationer nærmer sig de i de sunde dyr fundne værdier.

Målingerne til thrombocytaggregeringen er sket som ovenfor udførligt beskrevet. I stedet for arachidonsyre er der dog blevet anvendt 0,04 mg collagen til fremkaldelse af thrombocytaggregeringen i 1 ml pladerigt plasma (Aggrego-15 meter PA II, firma Myrenne, Roetgen). Aggregeringsamplituden (aggregeringstilbøjeligheden) er højst ved de ubehandlede, arthritiske rotter (=100%), medens der ved sunde rotter ikke optræder aggregering med 0,04 mg collagen, jfr. tabel V, spalte c. De anførte resultater viser, at den 20 patologisk forhøjede aggregeringstilbøjelighed i arthritiske rotter kan nedsættes med de nævnte medikamenter. I-gen viser konsekutiv anvendelse (pentoxifyllin, 1 time senere acetylsalicylsyre) synergistiske virkninger.

Den antiinflammatoriske virkning er som ovenfor 25 citeret blevet målt ved hjælp af volumenet af poteødemer og standardnekroseindekset. Ved behandling med medikamenterne aftager nekrose- og ødemdannelsen tydeligt. Tabel VI viser den relative forbedring af symptomerne i de behandlede dyr sammenlignet med de ubehandlede Arthritis-rotter.

30 Igen viser den her omhandlede konsekutive anvendelse (pentoxifyllin, 1 time senere acetylsalicylsyre) synergistiske virkninger.

35 27

DK 164893 B

Tabel VI

Procentvis forbedring hos de med forskellige medikamenter behandlede arthritiske rotter i forhold til ubehandlede arthri-tiske rotter (n = 8 pr. gruppe)

Poteoedem volumen Nekrose- index venstre højre pote 10 mg acetylsalicyl- 23 8 syre 180 mg acetylsali- 28 26 28 cylsyre 30 mg pentoxifyllin 30 7 30 mg pentoxifyllin/ 30 4 10 mg acetylsalicyl syre 30 mg pentoxifyllin 10 13 28 180 mg acetylsalicylsyre 30 mg pentoxifyllin/ 9 12 19 1 time senere 10 mg acetylsalicylsyre 30 mg pentoxifyllin/ 34 32 34 1 time senere 180 mg acetylsalicylsyre .

O

DK 164893B

28

Farmaceutiske præparater I stedet for den ovenfor beskrevne intravenøse injektion ved hjælp af en perfusorenhed kan der til opnåelse af synergistiske virkninger også anvendes suspensioner 5 og faste præparater, som er egnede til oral, peroral og rektal indgift.

Eksempler på sådanne præparater til anvendelse på mennesker indeholder x mg pentoxifyllin eller andre xanthin-derivater som angivet i de følgende eksempler 1-17 som det 10 rene stof og/eller som i handelen værende færdigpræparat ("Trental"®, firma Albert Roussel Pharma GmbH, Wiesbaden, eller "Rentylin" ®, firma Dr. Rentschler Arzneimittel GmbH & Co., Laupheim, i det følgende forkortet til hhv.

T og R) eller dele af disse færdigpræparater kombineret med 15 y mg acetylsalicylsyre, som også kan være bundet til basiske ionbyttere ("Dowex" ® 1 x 8 og "QAE-Sephadex" ®) (Serva, Heidelberg) eller til adsorberharpiks ("Amber-lite ® XAD 2"), eller som kan foreligge i form af i handelen værende mikrokapsler ("Colfarit" ®, Bayer AG, Lever-20 kusen, forkortet til C) eller krystaller ("R 95 D" og "M 80 D" fra firma Rohm Pharma GmbH, Weiterstadt, Tyskland).

De farmaceutiske bærestoffer i disse kombinationer er geler, som er gjort faste ved opvarmning: (a) 20 vægtprocent gelatine/1 vægtprocent glycerol i vand samt (b) 1 vægtpro-25 cent agarose i vand samt (c) 10 vægtprocent ethylcellulose T50 (Hercules GmbH, Hamburg) i acetone/vand (80:20 vægtprocent) , hver især med eller uden 8 vægtprocent indrørt pentoxifyllin eller et andet xanthinderivat, eller i handelen værende gelatinekapsler (til anvendelse på mennesker 30 og store dyr, størrelse 0, firma Kapsugel, Basel) .

De farmaceutiske præparater ifølge eksempel 1-17 blandes med 10 ml mavesaft fra hunde eller 10 ml 0,1 N HC1 og holdes under skånende omrøring in vitro ved 37°C. Portioner af den ovenstående væske udtages med visse tidsin-35 tervaller og opdeles ved hjælp af højtryksvæskechromatogra-fi (søjle: Rad Pak C18 (Waters GmbH, Eschborn, Tyskland),

O

29

DK 164893 B

100 x 8 mm, 10 Mm, elueringsmiddel: 300 ml methanol/1 ml eddikesyre, 700 ml vand, strømmehastighed: 1,5 ml/min.), og bestanddelene bestemmes med UV-detektion ved 280 nanometer.

På analog måde anvendes de farmaceutiske præparater i 5 duodenalvæske (fra hunde) eller natriumhydrogencarbonat-opløsning (pH-værdi = 7,4).

Til anvendelsen på små dyr (se tabel I, rotter) reduceres bestanddelene i de i eksemplerne 1-17 anførte præparater i hvert enkelt tilfælde til 1/200 af væg-70 ten, eller der anvendes kapsler af størrelse 4 og 5.

15 20 25 30 35 co 3 0

DK 164893 B

I—I

-μ

(d *iH

> Ό a μ μ > 'Οι „ — r- -r r, r- o in —.oino in o o o G B lo o in o in o in ri ri in ri riio rim id co •rift a n An ri m — — — ---— — — -- —

,C ------ — — W

μ Ό m in co ιο a ιη ιο o o o o GØ Γ^σι (Ti co cncri ' ri « οι n r- a cm 'd· n ø > r^cri r^cn r- <n cm

X

0\0 G

s ø · M — >1 01 μ A dl >< -μ ϋ M-l •ri φ 1 I rr r, r. rv « -o x x x r. x x οι di m A > „ „ „ „ r- .T — A ~ r-O -r rr -r „ i>H *ri tn o o in o in o — o — r,o in m in o o o -P 0> η m σι An An in ri i/iHri — η η o vo (1) ·|—I s_y> »w* V_^ V—»'· Nw·* W vy v-/ s^> u μ - cm (<m O O CM OO OO O O CM O O 'C !M ooo o c\° I C I I II C c I I Η I ·Η >1 A S Η A ·Η

Ό O >1 Γ- r-l X >, X >1 ι 1 A

G μ +-> *· G Η ΟΛ Οί Α A

η A G η ·μ >< μ -μ μ -μ >ι >ι I Ο Λ I ,G Α Ό 0 ΤΟ 0 Α ιμ

+J XI A 4-> A >1 s >1 S -Η A

•ο Ο C >ι G X Λ -μ Λ -μ X X

> -μ 11 X id 0 ΙΌ ΙΌ ο ο

-μΗ(\ι·μ 0JX+J ιηι ιηι +J +J

μ 0 ^ -a Æic -(-- — r- c c 0 +> I I i < i dl i- i - d) di Ό O Γ- CO i—1 (>i Qj r—I O A O Dj Dj c -μ - c x! i c ic

-μ — tr> α -μ ο-μ o O rs a tn r—μ O O

•S „ ε i .c ε ø ε ε a .c ε a .g ε ε

p Ό ^ -μ g >,+1 >1+J

GA oag oa o in x c ιη χ g o o øOtn^øoOo ooiid cndiid o i> X .C η Di X Α l -d< (Μ Λ x μ Λ X -d* -d* Λ Τ' =" ρ q q >i_QQD m o =

ΟΌΟΟΟ (Ti CO Q

A A CO COCO r- « 2 o -HOS 22 U = = 00

<d;£= = = — — -- S

ø Ό — — — — μ c o o o >!·μο g1»' ε ε ε g> ΐ» α> ε ε ε ε οι μ ο t n co ϋ>ιοο om ο ο ο ιη < in in m-d- ιη -μ -¾1 οο d) r. Or, I = dl C .5 C Ί Q 0) Q 01

Μ Α μ A 2 Ό O 0 G

οι +jd>ii pø-hin c co μ ø a •μ ø Ό - id Ό t! <71 0> ·μ s d Ό X :

μ a g 5 a g 5 = &CPQ

c dioiH øøSojrH^pirtjøcioe; οιή oid) -α ø co go a ^ a ^ .. c -o - · a x s ·· (d 4J ri ri ri .. O S’ - "Off" Ο’-μβΟ CHO = C7 goi αί ø ø øxjfcø ø β o) ø+Jøø id^tn id μο m ø tn cmo ^ AQ) c μ id ό μ riøgøri

ιΰμ a Dj a a Ό tn μ ΟιΌ m n μ μ τ3 G

ΛΚ 0 0 0 0 G Ο 0 0 G (Τι 0 ·0Ο· -GOrl·

AcQ ^ X ϊ4 -ri csi $4 ι^-μΗ^ Α ·μ r^· ftN

μ ε c

øtCNo-d· ιη iO

ø A M X 0 W A

® 31

DK 164893 B

1—I

p (O ft > Ό ft M M W Φ >

G 33 ίηοίη in o in iri λ o m ft O mooO

Ή Οι f—-4 i—J ^ ft ft ^ η π >— h tN i C!· £· Ρ Ό C dj <r co h ro co in -si o m «τ o tn o o ro ώ nj> Η (η ft ro CN Π (ΝΓΟ rH 0Ί ro <·

X

<#> "c •r4

E

1) · u ^ co u H Q)

>i +J

υ m H ® 9 '

(C 4J

CO d) __ ^ ^ ^ _(l^s ^ ,»—* -·—> r'*'*. y*··* ft > ιηοιη inoin ro in o ro ro o mooo >t ft ft ft w ft ft Η M '— i—1 CN Η n ID ro 4J tjl ______ ___*__ W '__ ______ <U -ri „ OM oom omo oom o o cm o o o o O, ft ro de

I I

i r~ c

I r-1 I ft C

I >1 >1 I I Ή Λ Ρ Ό XI χ Η Η I >ι Ρ Ρ C or' φ ϊμ >ι ^ x: c -π ft Ml χ; a Χ3 Ρ Ρ Φ >1 I -Ο Ρ C 00^ Ρ >ι ΟΧ Ή Ρ >ι>ι·Η XS-) ΟΧ gi rj 5τί χ: χ: χ: oa go p ^ > ρ ιρρ ιι ρ χ: ό <π ο

ρ ι—ι ιή η) C ftp' *0 >ι ι>ι P

Mid wgio ι IX rox C

(UP lix IP roo '0 o *00 ft ro | ft >i 'MS M S ft CP IP X C 1 I d Ί o ft ^ tj> O' P P >i X3 O' X O' Λ gpft g φ x: o> χ; p go g Ρ Ό >,0 g P glC I _

G ft OXM OIC inro O in O

Id 0 CnaJQj coroin O — X O - CO

X X3 ρχ;ι cm ι χ m ι ι pi p

ft ^ Q

>1 Γ = o

Ο Ό 00 0) CO

P P x PS

POP P =

Id xt — p —

Μ Ό x = M

H C φ O' D 0) O'

So ft ni 5 O' go O' Λ g Ρ a> g 0 g CO gg ^ ium q os <! o O >i CM : O ros m= 01 rtj 03 VD '—' ro in O'- ro

I P I

P g p

I ' ρ O' P

to ι = <u id pc ο id p = ο ctncx C Gin p G c 03 X 03 ρ p 3 0) p P p ft G O' P ft Ρ Ό Ρ Μ ο οι x >ιΛ s p (u xi >i « ffl O rS -fi rf Ξ

P vjP+j+j o d Ό p p "& (dOPPGP

p (d G C 0) ' D ft G G Φ CP-' ft G C φ XI M

3 øi<uidO(U= cjoiido OftP φφιΰο φ

Oft < Ό X < M U Ό X < POg Ο Ό X < ' Λ 00 P >, ft Ρ Φ in G \ P og

Id Ρ ·· ο O' ’ 0) ft ·· 0 O' ·· Μ C Ρ O' = ·. ο O' ·· Μ < Ρ gen φ χ: g φ ρ ρ φ χΐ g φ >ι φ χ: g Q φ λ g ο >< = φ μφ ao g>i ao gw ftp o a® gw w

Id M a Ό O Μ O P a Ό O M p UICOCO aOOMPP ft Æffi οασιΦΡΦ idccoo>i 3 id in ϊ td g o <u >i p id

0, X X ft ft X ft Ό id Ρ N !ι! O COX'-: X Ρ ft X W Ρ X

m'

g G

Φ oo o op ni tn ρ ρ ρ p X Φ W ft ® 32

DK 164893 B

i-1 +j (O -ni

> 43 Η M

φ > o oo oom oo oo Ό i ud no nor-- no no c sc — — — — — — ~ — — —

•H

.c co co σ> όσιό oco ni cn •U 43 h cm η h w n cm n nn G ω (d >

X

<» Ή

*H

s Φ · M — >1 01 i-l H 0) >1 4-1 0 44 +> Η Φ — > h , x xxx x 'ri Φ +i -u 01Φ ^ ^ ~ h > o o o o o tn oo oo -y >i-h o nonot--- no no -η

P &l ^ — V- V- — — — — — -U

Φ -.4 c OM o ooooo OO OO [? ^ >

dP

01 Φ , C G G G G G ® 1 ·Η *rl -Η ·Η Ή Ή TJH rH rH h h t—i r}

CirH »—i i—I *—i «“I I—i £* H >1 >1 >i >1 >1 ,>1 0 i o-i 44 44 44 4-i m *H *H ·Η *H Ή Ή 7~\ 5ttX xxx x κ « > -U 0 OOO O O o •Η Η -M +J+J+J -u -G 2 G (d g C — G G ^ G G ^

Φ-U φ ΦΕ-ιΦΦΕ-ι Φ <D

-σ o a 04-- Di a — a a u *h -— c? iyao» cp a ® -c s see e s 3 -U Ό ^ c h m ooo ο o ®

•o o o ooo o o +J

X ,ΰ nog -¾1 in ™ >*

G

X

Φ , £ t 5 Ο Ό >1

-Η Η O

ho -y

id ,C ,-. — — — H

οι Ό = = = = = $ H G O' P QQ P-Q “ >i-i-i go ao ao O' o O' o h U Φ CO g co g oo goo go >1 OMCOS £ £ £ , £ -¾ 0 >1 o = in= cm = cm = h = ψ «col h — η — o — oo— h— y to

I R

φ H = 1 1 1 51 C >1 I Q H G -u -Jj X -H 44 O' ·· C φ Ο 1 ~ -U Φ q · 01 -P Φ H g Φ -H 1(¾ OCO PPilitlllliJi ® ^ •H id 43 X G H -U — O' C £ G — HHaO ® ~ -u H C 0 O G H G Η = Φ Φ 0 Γ-

3 φ Φ -U Ο Φ >1 Φ3Η (¾ fi O Æ O' C H

Φ4-Ι Ο Ό C H ^ <4 ^ a-H - Φ -Η Φ g -H tl DO Η φ HH H ·· φ Ό ·· Η ·· Ό H g tu -U .. o a a = x — η h ·· h o' w g o> π o> c ο h = g h g 01 φχ; ΟΡΟ Φ Φ O' >ι id Ο Φ td >ι (d Η Οι >, Ρ 1-43 Μ Φ a Φ θ' Ο -G 01 01 id 4-1 Π Μ Ό Η 44 Η Η440 G S4 tdM a Ό e oo α a a H-η Id ri h -hco Λ ffi id C in Η £ Φ td (d . X · O' Ο · X · φ Φ X £ ® > a λ μ η ο η = a X Μ HocNidx; η ο cm c 43 ο = Pi Ρ* hrt a • 43 I Μ Φ Φ g C Ρ > Φ n id1 in ο r- -~·

01 Η Η Η Η Η Η X

,Χ Φ w a

Claims

1. Kombinationspræparat på enhedsdosisform, kendetegnet ved, at det indeholder A) på den ene side et xanthinderivat med almene formel 5

0 R3 (I) λΧ-1

0 N * 2

10 K hvor den ene af grupperne R1 og R3 er en ligekædet alkyl-, (ω-l)-oxoalkyl- eller (ω-l-)-hydroxyalkylgruppe med 3-8 carbonatomer, og de to andre grupper R2 og R3 eller R1 og 15 R2 er ligekædede eller forgrenede alkylgrupper med 1-8 carbonatomer i stillingerne R1 og R3 og med 1-4 carbonatomer i stillingen R2, hvorhos summen af carbonatomerne i disse to alkylsubstituenter højst er 10, eller med den almene formel

20. CH2-C0-CH3 H3C-C0-(CH2)4-HJlVNf| Js JLB (11)

0 N i R 25 hvori R er en alkylgruppe med 1-4 carbonatomer, eller sådanne forstadieformer af oxoalkylxanthinerne med formlerne (I), og (II) eller af hydroxyalkylxanthinerne med formel (I), 30 fra hvilke forbindelserne med formel (I) eller (II) frigives i organismen, og B) på den anden side O-acetylsalicylsyre eller dens farmakologisk acceptable salte, med eller uden C) et farmaceutisk bærestof, til tidsmæssigt forskudt anvendelse ved terapi af sygdomme, som er forårsaget af eller 35 karakteriseret ved ødelagte blodbestanddele, især thrombo-cyter eller erythrocyter, men også leukocyter, formuleret DK 164893 B på en sådan måde, at komponent A) frigives først, og at komponent B) frigives 10 minutter til 4 timer senere.

2. Anvendelse af A) xanthinderivater med formel (I) eller (II) eller sådanne forstadieformer af oxoalkylxanthiner 5 med formel (I) eller (II) eller hydroxyalkylxanthiner med formel (I), fra hvilke forbindelserne med formlen (I) eller (II) frigives i organismen, og B) O-acetylsalicylsyre eller dens farmakologisk acceptable salte, med eller uden C) farmaceutisk bærestof, til fremstilling af kombinationspræparater 10 ifølge krav 1, som bevirker en tidsmæssig forskudt frigivelse på en sådan måde, at komponent A) frigives først, og at komponent B frigives 10 minutter til 4 timer senere, imod sygdomme, som er forårsaget af ødelagte blodbestanddele.

3. Fremgangsmåde til fremstilling af kombinationspræ-15 parater ifølge krav 1, kendetegnet ved, at man forarbejder A) et xanthinderivat med formel (I) eller (II) ifølge krav 1 eller en sådan forstadieform af et oxoalkylxan-thin med formel (I) eller (II) eller et hydroxyalkylxanthin med formel (I), fra hvilken forbindelsen med formel (I) 20 eller (II) frigives i organismen, og B) O-acetylsalicylsyre eller dens farmakologisk acceptable salte, med eller uden C) farmaceutisk bærestof, på gængs måde til kappe- eller lagtabletter eller stikpiller med xanthinderivatet A) i det yderste lag og komponent B) i kernen eller i det andet lag 25 eller kombinerer dem i kapsler.

4. Kombinationspræparat ifølge krav 1, kendetegnet ved, at xanthinforbindelserne med formel (i) er sådanne, hvor R1 eller R3 er en alkyl-, (ω-l)-oxoalkyl-eller (ω-l)-hydroxyalkylgruppe med 5 eller 6 carbonatomer, 30 og de to alkylsubstituenter R2 og R3 eller R1 og R2 tilsammen indeholder 2-6 carbonatomer.

5. Kombinationspræparat ifølge krav 4, kendetegnet ved, at xanthinderivatet i stillingen R1 eller R3 indeholder en hexyl-, 5-oxohexyl- eller 5-hydroxyhexyl- 35 gruppe og fortrinsvis er l-hexyl-3,7-dimethylxanthin, l-(5--hydroxyhexyl)-3,7-dimethylxanthin, 1-(5-oxohexyl)-3,7-di- DK 164893 B methylxanthin, 1,3-dimethyl-7-(5-hydroxyhexyl)-xanthin, 1,3-dimethyl-7-(5-oxohexyl)-xanthin, 1-(5-hydroxyhexyl)-3--methyl-7-propylxanthin eller 1-(5-oxohexyl)-3-methyl-7-pro-pylxanthin.

6. Kombinationspræparat ifølge krav 1, 4 eller 5, kendetegnet ved, at xanthinderivatet er til stede i forstadieform som acetaliseret oxoalkylxanthin, hvor mindst én carbonylgruppe er erstattet med et strukturelement med den almene formel

10. C - / \ 0 0 14 I c R4 R5 (III i i 15 eller som en O-acyleret hydroxyalkylxanthin med et strukturelement med formlen R6-C0-0- (IV), hvor R4 og R5 hver især er en alkylgruppe med op til 4 carbonatomer eller sammen er en ethylen-, trimethylen- eller tetramethylengruppe, og R6 er en alkylgruppe med op til 4 carbonatomer, phenyl, 20 substitueret phenyl, pyridyl eller substitueret pyridyl.

7. Kombinationspræparat ifølge et hvilket som helst af kravene 1 eller 4-6, kendetegnet ved, at præparatet foreligger i en dosisenhed, som skal indgives oralt, peroralt eller rektalt, fortrinsvis en sådan, som indeholder 25 100-600, fortrinsvis 200-400, mg pentoxifyllin og 10-2000 mg O-acetylsalicylsyre eller en tilsvarende mængde af et salt deraf.

8. Kombinationspræparat ifølge et hvilket som helst af kravene 1 eller 4-7, kendetegnet ved, at vægt- 30 andelen af xanthinderivatet, baseret på 1 vægtdel acetylsalicylsyre, ligger mellem ca. 0,1 og ca. 50, fortrinsvis mellem ca. 0,5 og ca. 50, især mellem ca. 2 og ca. 10, og/-eller at bærematerialet for acetylsalicylsyrekomponenten indeholder retarderingsmidler.

9. Kombinationspræparat ifølge et hvilket som helst af kravene 1 eller 4-8, kendetegnet ved, at præ- DK 164893B paratet foreligger i form af mikrokapsler, hvori kapselmaterialet for acetylsalicylsyrekomponenten er mavesaftresistent eller muliggør en forsinket frigivelse, eller at præparatet foreligger i form af en kappe- eller lagtablet, 5 hvori xanthinderivatet er indeholdt i det lag, som skal resorberes hurtigst.