DK160764B - Analogifremgangsmaade til fremstilling af terapeutisk aktive heparinfragmenter - Google Patents
Analogifremgangsmaade til fremstilling af terapeutisk aktive heparinfragmenter Download PDFInfo
- Publication number
- DK160764B DK160764B DK380280A DK380280A DK160764B DK 160764 B DK160764 B DK 160764B DK 380280 A DK380280 A DK 380280A DK 380280 A DK380280 A DK 380280A DK 160764 B DK160764 B DK 160764B
- Authority
- DK
- Denmark
- Prior art keywords
- heparin
- fragments
- sulfate
- heparin fragments
- glucosamine
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/006—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof
- C08B37/0063—Glycosaminoglycans or mucopolysaccharides, e.g. keratan sulfate; Derivatives thereof, e.g. fucoidan
- C08B37/0075—Heparin; Heparan sulfate; Derivatives thereof, e.g. heparosan; Purification or extraction methods thereof
- C08B37/0078—Degradation products
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Materials For Medical Uses (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Orthopedics, Nursing, And Contraception (AREA)
- Detergent Compositions (AREA)
- Transition And Organic Metals Composition Catalysts For Addition Polymerization (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Description
i
DK 160764 B
Den foreliggende opfindelse angår en anal ogi fremgangsmåde til fremstilling af terapeutisk aktive herapinfragmenter, hvori disac-charidenheden L-iduronosyl-2-0-sulfat-N-sulfo-D-glucosamin-6-0-sul-fat er hovedbestanddelen, og hvor ikke-sul fateret L-iduronsyre 5 foreligger i en position 3-5 sukkerenheder fra den ikke-reducerede terminalgruppe og efterfølges af N-sulfo-D-glucosaminsul fat eller N-acetylglucosamin i sulfateret eller ikke-sul fateret form.
Heparin er et sulfatholdigt polysaccharid, som i stort omfang 10 isoleres fra tarmslim fra svin eller lunger fra kvæg. Det er i adskillige årtier blevet anvendt klinisk som et middel til behandling og forebyggelse af blodpropper. Selv om anvendelsen af heparin i thromboseprofylakse og -terapi er stadig stigende, er denne form for behandling langt fra uproblematisk. Et stort problem er, at 15 dosis må afbalanceres på en sådan måde, at der opnås en god throm-bosebeskyttelse samtidig med, at blødningskomplikationer undgås. En vanskelighed i denne sammenhæng er den store individuelle variation mellem forskellige patienter; dette skyldes sandsynligvis, at heparinet bindes i forskellig grad til andre komponenter i blod-20 plasmaet og derved neutraliseres. Et andet problem er, at den forebyggende heparinbehandling er en begrænset succes. Et tredie problem ved den foreliggende heparintype er dens svage virkning på arteriel thrombose. Ved denne thrombosetype er thrombocytaggrega-tionen et mere dominerede træk end ved den venøse thrombose, hvor 25 heparin giver en god virkning. Standardheparin stimulerer i en vis grad thrombocytaggregation og giver følgelig en negativ virkning i denne henseende.
Mekanismen bag heparins antikoagulationsaktivitet kendes nu i det 30 væsentlige. Blodkoagulationen er baseret på en kaskadelignende proces, hvor et antal proteolytiske enzymer aktiverer hinanden i en bestemt rækkefølge. I det sidste trin omdannes fibrinogen under indvirkning af det proteolytiske enzym thrombin til uopløselig fibrin, som er den fundamentale struktur i et blodkoagel. Heparin 35 danner et kompleks med et plasmaprotein, og dette kompleks hæmmer flertal let af enzymerne i koagulationskaskaden.
Det er for nylig påvist, at heparinfraktioner med forskellige molekylvægte påvirker koagulationsprocessen på forskellige måder (L.-0.
DK 160764 B
2
Andersson et al., Tromb. Res. 9, 575 (1976)). Dette initierede en undersøgelse af mulighederne for at udvikle heparinfraktioner, der har en mere selektiv virkning. Ved behandling af standardheparin med salpetersyrling i dimethoxyethan (glyme) ved lav temperatur og i en 5 nærmere bestemt tid har man opnået et specielt heparinfragment, der har en betydeligt større selektiv virkning end standardheparin.
Dette heparinderivat har en meget lille virkning på hæmningen af thrombin, medens hæmningen af aktiveret koagulationsfaktor X er meget forøget. Koagulationsfaktor X indtager en central position i 10 midten af koagulationskaskaden, og hæmningen deraf anses af mange for at være speciel vigtig til opnåelse af en effektiv thrombose- forebyggende virkning (S. Wessler, Thromb. Diath. Haemorrh. 33, 81 (1974)).
15 Det har endvidere helt overraskende vist sig, at denne type fragment ikke neutraliseres af blodkomponenterne i samme grad som standardheparin. Dette medfører bl.a., at man får en mere effektiv udnyttelse af antikoagulationsaktiviteten af denne fragmenttype sammenlignet med den nuværende kliniske anvendelse af heparinpræparater.
20 Endvidere bliver også doseringen lettere at gennemføre, da det bliver mindre vigtigt at tage hensyn til den individuelle variation i den heparin-neutral i serende virkning. En anden overraskende egenskab ved fragmentet er, at dets thrombocytaggregationsinduceren-de aktivitet er meget lavere, end den heparin sædvanligvis udviser.
25 Det er derfor sandsynligt, at denne fragmenttype er et bedre anti-koagulationsmiddel end standardheparin til forebyggende behandling og behandling af arteriel thrombose. Man kan også formode, at den nedsatte virkning på thrombocyterne kan reducere risikoen for blødni ngskompli kati oner.
30
Det bør endvidere bemærkes, at heparins evne til at frigøre enzymet lipoproteinlipase er stærkt afhængig af molekylvægten. Det lavmolekylære heparinfragment kan derfor formodes at have en yderligere værdifuld egenskab ved i mindre grad end standardheparin at forøge 35 indholdet af frie fedtsyrer i blodet.
Heparinfragmenter med de indledningsvis angivne karakteristika og med ovennævnte egenskaber fremstilles ved anal ogi fremgangsmåden ifølge opfindelsen, som er ejendommelig ved,
DK 160764 B
3 (a) at heparin behandles med salpetersyrling i dimethoxyethan, eller (b) at heparin oxideres med periodat ved lavt pH og lav temperatur, 5 behandles med alkali, neutraliseres og reduceres, eller (c) at heparin partielt depolymeriseres ved forestring af carboxyl -grupper, og det opnåede materiale derefter udsættes for alkalisk /J-eliminering, 10 og at det opnåede produkt oprenses til fremstilling af heparinfrag-menterne.
De ved nedbrydningen af heparinmolekyler frembragte heparinfragmen-15 ter består af aktive såvel som ikke-aktive fragmenter, og de aktive fragmenter oprenses, dvs. befries for ikke-aktive fragmenter, såsom ved affinitetskromatografi på matriks-bundet antithrombin III (Hook et al., FEBS Lett. 66, 90 (1976), Hopwood et al., FEBS Lett. 63, 51 (1976), L.-O. Andersson et al., Thromb. Res. 9, 575 (1976)). Meto-20 derne beskrives i eksemplerne.
De aktive fragmenter er ejendommelige ved, at de indeholder fra 14 til 18 sukkerenheder. Strukturanalyse viser samme hovedstrukturkomponenter som i standardheparin, dvs. L-iduronosyl-2-0-sulfat-(la-4)-25 N-sulfo-D-glucosamin-6-0-sulfat som den dominerende saccharid-enhed.
Mængden af ikke-sulfateret iduronsyre er imidlertid betragteligt større end i udgangsmaterialet. Ved periodatoxidation har det vist sig, at denne komponent har en bestemt position i molekylet, beliggende fra 3 til 5 sukkerenheder regnet fra den ikke-reducerende 30 terminal. De aktive fragmenter har strukturen (U-G)n-I-G-(U-G)m, hvor n er 1 eller 2, og m er 5 eller 6, I betegner i kke-sul fateret L-iduronsyre, U betegner L-iduronsyre-2-0-sulfat, og G betegner N-sulfo-D-glucosamin-6-0-sulfat. Nogle få U-enheder kan mangle O-sulfat eller kan være erstattet med D-glucuronsyre, ligesom nogle 35 få G-enheder kan mangle 0-sulfat eller kan være erstattet med N-acetyl-D-glucosaminenheder. Reducerende eller ikke-reducerende terminal enheder kan variere med den anvendte fremstillingsmetode; f.eks. fører deaminativ spaltning af heparin således til dannelsen af 2,5-anhydro-D-mannose i reducerende terminalposition. De aktive
DK 160764 B
4 fragmenter kan karakteriseres ved fysisk-kemi ske metoder, såsom bestemmelse af mobilitet i et elektrisk felt og ved UV-, IR- og NMR-spektre. De opnåede nummeriske værdier giver dog imidlertid ikke en fuldstændig information, eftersom endog koagulationsmæssigt 5 inaktive fragmenter udviser i alt væsentligt lignende egenskaber.
Dette beror på, at den biologiske aktivitet hidrører fra en specifik sekvens af sukkerresterne, hvor positionen af den ikke-sulfaterede uronsyre er specielt vigtig. En vis bruttosammensætning og størrelse garanterer således ikke, at komponenten er aktiv.
10
Opfindelsen illustreres yderligere ved følgende eksempler: EKSEMPEL 1 15 Fremstilling af heparinfraamenter ved depolvmerisering af standard-heparin med salpetersyrling.
Heparin (0,5 g) isoleret fra svinetarm og opløst i 150 ml vand afkøles til +4°C og føres gennem en 3x7 cm søjle af Dowex®50 W-28 20 (H+ form), 200-400 mesh. Søjlen vaskes derefter med 100 ml vand, og vaskevæsken kombineres med prøven. Til prøven sættes 250 ml dimeth-oxyethan (glyme) afkølet til -20°C samt 10 ml isoamylnitrit, og blandingen, som har en temperatur på ca. +10°C, henstår i 2 minutter. Reaktionen afbrydes derefter ved tilsætning af 10 ml 10% 25 Na+-acetat. Efter tilsætning af 5,2 liter ethanol indvindes præcipi-teret kulhydrat (heparinderivater) ved centrifugering. Produktet opløses i 500 ml 0,05 M NaCL - 0,05 M Tris-HCl, pH 7,4. Denne opløsning fraktioneres, opdelt i 100 ml portioner, ved affinitetskromatografi på en søjle, der indeholder 75 ml antithrombin-Sepha-30 rose® (Phamacia Fine Chemicals, Uppsala, Sverige) (ca. 5 mg protein pr. ml gel). Søjlen elueres med en saltgradient (500 ml 0,05 M NaCl - 0,05 M Tris-HCl i blandingsbeholderen; 500 ml 3 M NaCl - 0,05 M Tris-HCl i reservoiret), hvorved hovedparten af det påførte materiale enten passerer uforsinket gennem søjlen eller bliver elueret ved 35 en lav ionstyrke (mindre end 0,4 M NaCl); dette materiale har ingen biologisk aktivitet. De aktive komponenter (rensede heparinderiva-ter) elueres i en bred top med 0,5 M NaCl og 3 M NaCl svarende til ca. 4% af udgangsmaterialet. Disse fraktioner samles og afsal tes ved gel kromatografi.
DK 160764 B
5
Heparinderivater, der er fremstillet og renset på nævnte måde, har en molekyl størrelse, som svarer til molekylstørrelsen for et tetra-deca-octadecasaccharid (molekylvægt 3600-4800). Strukturanalyse viser de samme strukturkomponenter som i udgangsmaterialet, med 5 L-iduronosyl-2-0-sulfat-(la-4)-N-sulfo-D-glucosamin-6-0-sulfat som den dominerende disaccharidenhed. Mængden af ikke-sul fateret iduron-syre er imidlertid steget fra ca. 6% i udgangsmaterialet til ca.
16%. Strukturen iøvrigt stemmer overens med beskrivelsen ovenfor.
10 EKSEMPEL 2
Partiel depolvmerisering af heparin eller heparinbi produkt ved periodat oxidation ved en pH-værdi på 3 og en temperatur på 4*C. efterfulgt af al kali behandling og reduktion.
15
Under disse betingelser spaltes polysaccharidkæden ved D-glucoron-syreenheder resulterende i kun moderat tab af antikoagulationsaktivitet (Fransson og Lewis, FEBS Letters, 1979). Standardheparin (0,5 g) opløses i 250 ml af en opløsning (4°C) indeholdende 0,02 M 20 NalO^, 0,2 M NaClO^ og 0,05 M Na+-citratpuffer, pH 3,0. Efter 3 timers inkubation i mørke ved 4*C afbrydes oxidationen ved tilsætningen af et molært overskud af D-mannitol, hvorefter opløsningen dialyseres og frysetørres. Spaltning af polysaccharidkæderne ved oxiderede D-glucoronsyreenheder udføres ved behandling af produktet 25 med alkali (5 mg/ml vandig opløsning indstillet til pH 12 med 1 M NaOH) ved stuetemperatur. Efter 10 minutter neutraliseres opløsningen med 1 M eddikesyre, og materialet afsaltes derefter ved gelkromatografi på dextranmateriale (Sephadex® G-25, Pharmacia Fine Chemicals, Uppsala, Sverige). Det opnåede produkt kan reduceres med 30 natriumborhydrid.
Heparin, der behandles på denne måde, er stærkt depolymeriseret sammenlignet med udgangsmaterialet; gel kromatografi viser, at de fremkomne fragmenter har en størrelse, der svarer til 10-25 sukker-35 enheder, og de er derfor noget større end de fragmenter, der isoleres efter behandling med salpetersyrling ifølge eksempel 1. I alt ødelægges ca. 20% af uronsyrerne i polysaccharidet under periodat-oxidationen (pH 3, 4°C, 3-6 timer). Rensning ved affinitetskromatografi af oxidationsprodukterne på antithrombin-agarose-Sepharose® 6
DK 160764 B
giver et udbytte på ca. 30% højaffinitetsmateriale efter 3 timer og et udbytte på 15% efter 6 timers oxidation. De således opnåede produkter havde en anti faktor X -pontentierende effekt bestemt ifølge eksempel B i plasma på mere end 1000 enheder/mg sammenlignet 5 med 3. Internationale Heparinstandard.
EKSEMPEL 3
Fremstilling af heparinfraamenter ved partiel deoolvmerisering af 10 heparin med forestrede carboxvlgrupper og alkalisk θ-eliminerina af det opnåede produkt.
Natriumheparin fra svinetarmslimhinde (20 g) blev opløst i vand (100 ml) og under omrøring dråbevis sat til en opløsning af Hyamin® 1622 15 (diisobutylphenoxyethoxyethyl)-dimethylbenzylammoniumchlorid (100 g) i vand (500 ml). Blandingen blev omrørt i yderligere én time og derpå afkølet i et køleskab natten over. Supernatanten blev fraskilt, og præcipitatet blev vasket med vand (400 ml) og centrifugeret i ½ time. Præcipitatet blev tørret ved 60°C i vakuum natten 20 over. Den opnåede, klæbrige gummi blev opløst i dichlormethan (400 ml), og der blev tilsat a-bromotoluen (45 ml). Opløsningen blev omrørt i 72 timer ved 23°C. Den dannede benzyl ester blev derpå præcipi teret ved tilsætning af natriumacetat opløst i methanol (15 vægt/volumen, 500 ml). Præcipitatet blev centrifugeret i ½ time, 25 vasket med methanol (250 ml) og igen centrifugeret. Det opnåede præcipitat blev opløst i vand (50 ml) og methanol (50 ml). Der blev derpå tilsat natriumacetat (15 g). Efter omrøring i 1 time blev blandingen filtreret gennem Cel ite®, og til filtratet blev der sat methanol (500 ml). Præcipitatet blev til slut vasket med methanol, 30 centrifugeret og tørret i vakuum natten over. Udbyttet af heparin- benzylester var 14 g.
Heparinbenzylester (1,0 g) blev opløst i vand (5 ml) og opvarmet til 60®C. Natriumhydroxid (0,40 M, 5 ml) blev tilsat, og opløsningen 35 blev omrørt i 2 timer ved 60eC. Efter afkøling af blandingen til stuetemperatur blev der tilsat en kationbytter (Dowex® 50 W-X8 H) til neutralisering af den basiske opløsning. Harpiksen blev frafiltreret og vasket med vand (1 ml). pH af de forenede opløsninger (filtrat og vaskevand) blev justeret til pH 7 ved tilsætning af
DK 160764 B
7 fortyndet natriumhydroxid og derpå frysetørret. Udbyttet var 1,0 g.
Den gennemsnitlige molekylvægt for dette heparinfragment var 5000.
Undersøgelse af antikoaaulationsaktivitet.
5
Det ifølge eksempel 1 fremstillede heparinfragment blev undersøgt med hensyn til dets evne til: A) at fremme hæmningen af koagulationsenzymet thrombin; B) at fremme hæmningen af aktiveret koagulationsfaktor X; C) at forlænge koagulationstiden i blodplasma-10 koagulationsprøven APTT (Activated Partial Thromboplastine Time); D) at blive neutraliseret af blodplasmakomponenter og E) at påvirke aggregationen af trombocyter.
Eksempel A
15 Hæmning af thrombin.
Heparinfragmentets evne til at potentiere hæmningen af thrombin med antithrombin III analyseredes ifølge en modifikation af en metode af 20 Teien et al. (Thrombosis Research 11, s. 107-117, 1977). Heparin- fragmentet udviste en specifik aktivitet på mindre end 20 E/mg sammenlignet med 120-170 E/mg for standardheparin.
Eksempel B
25 Hæmning af aktiveret faktor X.
Heparinfragmentets evne til at potentiere hæmningen af aktiveret faktor X i plasma og i rent anti thrombin III undersøgtes ifølge en 30 modificeret version af en metode af Teien et al. (Thrombosis Re search 8, 413, 1977). Heparinfraktionen udviste en specifik aktivitet på 500 E/mg i et rent antithrombin Ill-system og 2100 E/mg i et plasmasystem sammenlignet med 120-170 E/mg for standardheparin.
35 Eksempel C
Forlængelse af koaoulationstiden.
Evnen til at forlænge koagulationstiden for blodplasma undersøgtes
DK 160764 B
8 ifølge APTT-metoden (Activated Partial Thromboplastine Time method) (Andersson et al., Thromb. Res. 9, 575, 1976)). Heparinfragmentet udviste en specifik aktivitet på mindre end 20 E/mg sammenlignet med 3. International Heparinstandard. Standardheparin viser en specifik 5 aktivitet i området 120-170 E/mg.
Eksempel D
Neutralisering af heparinfraomenter i blodplasma.
10
Plasmakomponenters heparinneutral iserende effekt undersøgtes ved at måle effekten af heparin og heparinfragmentet i plasma og i et rent antithrombinsystem. Dette udførtes ved at måle mængden af aktiveret faktor X, som hæmmedes i de to systemer i nærværelse af en vis 15 mængde heparin eller heparinfragment. Aktiviteten af heparinfragmentet blev 15% neutraliseret af plasmakomponenter, medens den tilsvarende værdi for standardheparin viste sig at være 75%.
Eksempel E
20
Thrombocvtpåvirkning.
Heparinfragmentets evne til at aggregere thrombocyter ved kritiske ADP-koncentrationer (ADP = adenosindiphosphat) blev undersøgt i alt 25 væsentligt ifølge Beck, E.A: (Thromb Haem Stuttg. 1977, 38, 578).
Det påvistes, at heparinfragmentets thrombocytaggregerende evne var 10 gange lavere end standardheparins, beregnet på vægtbasis.
Heparinfragmenter fremstillet ved anal ogi fremgangsmåden ifølge 30 opfindelsen kan inkorporeres i farmaceutiske præparater til klinisk brug, fortrinsvis i vandige opløsninger til injektion eller i salvepræparater til indgivelse gennem hud og slimhinder.
35
Claims (1)
- DK 160764 B Patentkrav. Anal ogi fremgangsmåde til fremstilling af terapeutisk aktive herapin-fragmenter, hvori disaccharidenheden L-iduronosyl-2-0-sulfat-N-sul-fo-D-glucosamin-6-O-sulfat er hovedbestanddel en, og hvor ikke-sulfa-teret L-iduronsyre foreligger i en position 3-5 sukkerenheder fra 5 den ikke-reducerede terminal gruppe og efterfølges af N-sulfo-D-glu-cosaminsulfat eller N-acetylglucosamin i sulfateret eller ikke-sul-fateret form, kendetegnet ved, (a) at heparin behandles med salpetersyrling i dimethoxyethan, 10 eller (b) at heparin oxideres med periodat ved lavt pH og lav temperatur, behandles med alkali, neutraliseres og reduceres, eller 15 (c) at heparin partielt depolymeri seres ved forestring af carboxyl- grupper, og det opnåede materiale derefter udsættes for alkalisk ^-eliminering, og at det opnåede produkt oprenses til fremstilling af heparinfrag-20 menterne.
Applications Claiming Priority (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SE7900164 | 1979-01-08 | ||
SE7900164 | 1979-01-08 | ||
PCT/SE1980/000005 WO1980001383A1 (en) | 1979-01-08 | 1980-01-07 | Heparin fragments having selective anticoagulation activity |
SE8000005 | 1980-01-07 |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
DK380280A DK380280A (da) | 1980-09-05 |
DK160764B true DK160764B (da) | 1991-04-15 |
DK160764C DK160764C (da) | 1991-09-23 |
Family
ID=20336970
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
DK380280A DK160764C (da) | 1979-01-08 | 1980-09-05 | Analogifremgangsmaade til fremstilling af terapeutisk aktive heparinfragmenter |
Country Status (11)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US4303651A (da) |
EP (1) | EP0014184B2 (da) |
JP (1) | JPS6344764B2 (da) |
AT (1) | ATE8998T1 (da) |
CA (1) | CA1136620A (da) |
DE (1) | DE3068924D1 (da) |
DK (1) | DK160764C (da) |
NL (1) | NL930104I2 (da) |
NO (1) | NO150801C (da) |
SU (1) | SU1209033A3 (da) |
WO (1) | WO1980001383A1 (da) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
USRE38743E1 (en) | 1990-06-26 | 2005-06-14 | Aventis Pharma S.A. | Mixtures of particular LMW heparinic polysaccharides for the prophylaxis/treatment of acute thrombotic events |
Families Citing this family (65)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
SE449753B (sv) * | 1978-11-06 | 1987-05-18 | Choay Sa | Mukopolysackaridkomposition med reglerande verkan pa koagulation, lekemedel innehallande densamma samt forfarande for framstellning derav |
FR2440376A1 (fr) * | 1978-11-06 | 1980-05-30 | Choay Sa | Composition mucopolysaccharidique ayant une activite regulatrice de la coagulation, medicament la contenant et procede pour l'obtenir |
US4692435A (en) * | 1978-11-06 | 1987-09-08 | Choay, S.A. | Mucopolysaccharide composition having a regulatory action on coagulation, medicament containing same and process of preparation |
US4500519A (en) * | 1978-11-06 | 1985-02-19 | Choay S.A. | Mucopolysaccharides having biological properties, preparation and method of use |
FR2478646A2 (fr) * | 1980-03-20 | 1981-09-25 | Choay Sa | Composition mucopolysaccharidique ayant une activite regulatrice de la coagulation, medicament la contenant et procede pour l'obtenir |
FR2482611B1 (fr) * | 1980-05-14 | 1986-03-07 | Pharmindustrie | Nouveaux polysaccharides sulfates, procedes pour leur preparation et leur utilisation comme medicaments |
US4438261A (en) | 1980-05-19 | 1984-03-20 | Riker Laboratories, Inc. | Anticoagulant substance |
CA1171375A (en) * | 1980-09-15 | 1984-07-24 | Ulf P.F. Lindahl | Oligosaccharides having selective anticoagulation activity |
US4496653A (en) * | 1980-10-09 | 1985-01-29 | Boehringer Mannheim Gmbh | Process for the determination of antithrombin-BM |
FR2503714B1 (fr) * | 1981-04-10 | 1986-11-21 | Choay Sa | Procede d'obtention de mucopolysaccharides biologiquement actifs, de purete elevee, par depolymerisation de l'heparine |
FR2504535B1 (fr) * | 1981-04-28 | 1987-08-14 | Choay Sa | Disaccharides derives d'un acide uronique et d'une glucosamine et compositions pharmaceutiques les contenant pour le controle de la coagulation sanguine |
US4818816A (en) * | 1981-04-28 | 1989-04-04 | Choay, S.A. | Process for the organic synthesis of oligosaccharides and derivatives thereof |
FR2535324A1 (fr) * | 1982-10-27 | 1984-05-04 | Choay Sa | Station perfectionnee pour l'epuration d'eaux usees |
EP0066908B1 (en) | 1981-05-21 | 1985-08-28 | Akzo N.V. | New anti-thromboticum based on polysacharides, method for its preparation and pharmaceutical compositions |
US4396762A (en) * | 1981-08-24 | 1983-08-02 | Massachusetts Institute Of Technology | Heparinase derived anticoagulants |
CA1265132A (en) * | 1982-01-15 | 1990-01-30 | Mahmoud Nassr | Process for the organic synthesis of oligosaccharides and derivatives thereof |
AU563351C (en) * | 1982-01-15 | 2003-06-19 | Glaxo Group Limited | Synthesis of oligosaccharides |
US4539398A (en) * | 1982-01-22 | 1985-09-03 | Riker Laboratories, Inc. | Affinity fractionation of heparin on immobilized Concanavalin A |
ZA829463B (en) * | 1982-07-19 | 1983-10-26 | Hepar Ind Inc | Process for manufacturing low molecular weight heparins by depolymerization of normal heparin |
FR2538404B1 (da) * | 1982-12-28 | 1985-08-23 | Anic Spa | |
IT1195497B (it) * | 1983-03-08 | 1988-10-19 | Opocrin Spa | Procedimento per la preparazione di frazioni oligosaccaridiche dotate di proprieta' farmacologiche per degradazione chimica di eparina |
FR2548672A1 (fr) * | 1983-07-04 | 1985-01-11 | Pharmuka Lab | Oligosaccharides sulfates et leur utilisation comme medicaments |
GB8614189D0 (en) * | 1986-06-11 | 1986-07-16 | Leo Pharm Prod Ltd | Pharmaceutical composition |
US4942156A (en) * | 1986-08-20 | 1990-07-17 | Hepar Industries, Inc. | Low molecular weight heparin derivatives having improved anti-Xa specificity |
US4745106A (en) * | 1986-08-20 | 1988-05-17 | Griffin Charles C | Heparin derivatives having improved anti-Xa specificity |
IT1213384B (it) * | 1986-11-24 | 1989-12-20 | Lab Derivati Organici Mediolan | Processo per la preparazione controllata di gilcosaminoglicani a basso peso molecolare. |
FR2614026B1 (fr) * | 1987-04-16 | 1992-04-17 | Sanofi Sa | Heparines de bas poids moleculaire, a structure reguliere, leur preparation et leurs applications biologiques |
EP0337327A1 (en) * | 1988-04-09 | 1989-10-18 | Bioiberica, S.A. | Process for the preparation of new oligosaccharide fractions by controlled chemical depolimerization of heparin |
IT1230582B (it) | 1988-10-21 | 1991-10-28 | Opocrin S P A Lab Farmabiologi | Oliogosaccaridi di dermatan solfato ed eparina aventi attivita' antiaterosclerotica |
WO1991015217A1 (en) * | 1990-04-06 | 1991-10-17 | Washington University | Anticoagulant oligosaccharides |
US5665379A (en) * | 1990-09-28 | 1997-09-09 | Pharmacia & Upjohn Aktiebolag | Lipid particle forming matrix, preparation and use thereof |
NO921495L (no) * | 1991-04-16 | 1992-10-19 | Seikagaku Kogyo Co Ltd | Oligosakkarid og fremgangsmaate for dets fremstilling |
SE9101155D0 (sv) * | 1991-04-18 | 1991-04-18 | Kabi Pharmacia Ab | Novel heparin derivatives |
GB9206291D0 (en) * | 1992-03-23 | 1992-05-06 | Cancer Res Campaign Tech | Oligosaccharides having growth factor binding affinity |
DE4217916C2 (de) * | 1992-05-30 | 1995-05-18 | Job Prof Dr Med Harenberg | N-Alkylamin- und N-Arylalkylaminderivate von Heparin, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihrer Verwendung |
GB9306255D0 (en) * | 1993-03-25 | 1993-05-19 | Cancer Res Campaign Tech | Heparan sulphate oligosaccharides having hepatocyte growth factor binding affinity |
SE9302135D0 (sv) * | 1993-06-18 | 1993-06-18 | Kabi Pharmacia Ab | New pharmaceutical composition |
DE69623840D1 (de) * | 1995-03-31 | 2002-10-31 | Hamilton Civic Hospitals Res | Zusammensetzung zur Hemmung der Thromboseentstehung |
DK0946185T4 (da) * | 1996-11-27 | 2010-08-30 | Aventis Pharma Inc | Farmaceutisk præparat, som omfatter en forbindelse med anti-Xa-aktivitet og en blodpladeaggregations antagonistforbindelse |
EP0986581A1 (en) * | 1997-06-06 | 2000-03-22 | Hamilton Civic Hospitals Research Development, Inc. | Modified low molecular weight heparin that inhibits clot associated coagulation factors |
EP1190364A2 (en) | 1999-04-23 | 2002-03-27 | Massachusetts Institute Of Technology | System and method for polymer notation |
MXPA02000142A (es) * | 1999-06-30 | 2003-07-21 | Hamilton Civic Hospitals Res | Composiciones de heparina que inhiben los factores de coagulacion asociados con el coagulo. |
JP2002097143A (ja) * | 2000-07-18 | 2002-04-02 | Koyo Chemical Kk | 血流改善剤及び血栓予防治療剤または食品 |
CN1473061A (zh) * | 2000-09-08 | 2004-02-04 | ���ܶ�����ҽԺ�о���չ����˾ | 抗血栓形成的组合物 |
JP2006096668A (ja) * | 2002-11-08 | 2006-04-13 | Ono Pharmaceut Co Ltd | エラスターゼ阻害剤と血液凝固系および/または線溶系酵素阻害剤との組み合わせからなる医薬 |
US6933372B2 (en) | 2003-03-07 | 2005-08-23 | Warner-Lambert Company | Method to produce a solid form of heparin |
BRPI0410844A (pt) * | 2003-06-05 | 2006-06-27 | Centelion | fator de crescimento de fibroblasto de codificação de plasmìdeo para o tratamento de defeitos angiogênicos associados com hipercolesterolemia ou diabetes |
ITMI20031679A1 (it) * | 2003-08-29 | 2005-02-28 | Opocrin Spa | Processo per la produzione di eparine a basso peso |
US20050096294A1 (en) * | 2003-10-31 | 2005-05-05 | Takashi Komai | Novel anti-coagulant |
EP1582531A1 (en) * | 2004-03-24 | 2005-10-05 | Aventis Pharma S.A. | Process for oxidizing unfractionated heparins and detecting presence or absence of glycoserine in heparin and heparin products |
ATE552004T1 (de) | 2005-11-30 | 2012-04-15 | Istituto G Ronzoni | Oral verabreichbare heparinderivate |
US8569262B2 (en) | 2007-11-02 | 2013-10-29 | Momenta Pharmaceuticals, Inc. | Polysaccharide compositions and methods of use for the treatment and prevention of disorders associated with progenitor cell mobilization |
WO2009059284A2 (en) * | 2007-11-02 | 2009-05-07 | Momenta Pharmaceuticals, Inc. | Non-anticoagulant polysaccharide compositions |
US8592393B2 (en) | 2007-11-02 | 2013-11-26 | Momenta Pharmaceuticals, Inc. | Polysaccharide compositions and methods of use for the treatment and prevention of disorders associated with progenitor cell mobilization |
AU2009250803A1 (en) * | 2008-05-20 | 2009-11-26 | Crystal Clear Partnership | Separation of polysaccharides by charge density gradient |
ES2340902B1 (es) * | 2008-07-01 | 2011-05-03 | Laboratorios Farmaceuticos Rovi, S.A. | Composicion farmaceutica con glicosaminoglicanos y su uso en tratamiento de ulceras cronicas. |
EP2558506B1 (en) | 2010-04-16 | 2019-06-26 | Momenta Pharmaceuticals, Inc. | Tissue targeting |
WO2011159770A2 (en) | 2010-06-17 | 2011-12-22 | Momenta Pharmaceuticals, Inc. | Methods and compositions for modulating hair growth |
WO2013095215A1 (en) | 2011-12-19 | 2013-06-27 | Dilaforette Ab | Low anticoagulant heparins |
US9475888B2 (en) * | 2011-12-19 | 2016-10-25 | Dilafor Ab | Non anti-coagulative glycosaminoglycans comprising repeating disaccharide unit and their medical use |
JP2016520613A (ja) | 2013-05-28 | 2016-07-14 | モメンタ ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド | 薬学的組成物 |
RU2612813C1 (ru) * | 2015-12-07 | 2017-03-13 | Павел Андреевич Канаев | Способ получения гепарина |
US11492421B2 (en) | 2018-02-14 | 2022-11-08 | Biological E Limited | Process for the preparation of Dalteparin sodium |
WO2022015794A1 (en) | 2020-07-14 | 2022-01-20 | Optimvia, Llc | Methods for synthesizing non-anticoagulant heparan sulfate |
EP3997238A1 (en) | 2019-07-09 | 2022-05-18 | Optimvia, LLC | Methods for synthesizing anticoagulant polysaccharides |
Family Cites Families (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3135660A (en) * | 1956-11-09 | 1964-06-02 | Riker Laboratories Inc | Method for purifying sulfated carbohydrates with oxidizing agents |
US3066076A (en) * | 1958-12-15 | 1962-11-27 | Fo We Forschungs Und Verwertun | Soluble heparin product and process for preparing same |
US3835112A (en) * | 1970-06-08 | 1974-09-10 | Etude Et D Exploit De Marques | Heparin esters |
DE2148011C3 (de) * | 1970-10-05 | 1978-11-09 | Aminkemi Ab | Verfahren zum Herstellen nichtthrombogener Kunststoffoberflächen |
US3766167A (en) * | 1971-03-26 | 1973-10-16 | Research Corp | Orally active anticoagulant |
GB1399824A (en) * | 1971-08-16 | 1975-07-02 | Mar Pha Etu Expl Marques | Heparin esters |
IT1083903B (it) * | 1977-08-09 | 1985-05-25 | Lobo Srl | Oligo-eteropolisaccaridi con attivita' eparinosimili,procedimento per il loro ottenimento e relative composizioni terapeutiche |
-
1980
- 1980-01-03 CA CA000343014A patent/CA1136620A/en not_active Expired
- 1980-01-04 US US06/109,936 patent/US4303651A/en not_active Expired - Lifetime
- 1980-01-07 DE DE8080850002T patent/DE3068924D1/de not_active Expired
- 1980-01-07 JP JP55500234A patent/JPS6344764B2/ja not_active Expired
- 1980-01-07 EP EP80850002A patent/EP0014184B2/en not_active Expired
- 1980-01-07 AT AT80850002T patent/ATE8998T1/de active
- 1980-01-07 WO PCT/SE1980/000005 patent/WO1980001383A1/en unknown
- 1980-09-05 DK DK380280A patent/DK160764C/da not_active IP Right Cessation
- 1980-09-05 NO NO802626A patent/NO150801C/no unknown
-
1981
- 1981-02-06 SU SU813244902A patent/SU1209033A3/ru active
-
1993
- 1993-01-28 NL NL930104C patent/NL930104I2/nl unknown
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
USRE38743E1 (en) | 1990-06-26 | 2005-06-14 | Aventis Pharma S.A. | Mixtures of particular LMW heparinic polysaccharides for the prophylaxis/treatment of acute thrombotic events |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JPS56500066A (da) | 1981-01-22 |
US4303651A (en) | 1981-12-01 |
EP0014184B1 (en) | 1984-08-15 |
EP0014184A3 (en) | 1980-10-01 |
DE3068924D1 (en) | 1984-09-20 |
ATE8998T1 (de) | 1984-09-15 |
WO1980001383A1 (en) | 1980-07-10 |
SU1209033A3 (ru) | 1986-01-30 |
NO150801C (no) | 1984-12-27 |
NL930104I1 (nl) | 1993-10-01 |
NO802626L (no) | 1980-09-05 |
NO150801B (no) | 1984-09-10 |
NL930104I2 (nl) | 1997-02-03 |
EP0014184A2 (en) | 1980-08-06 |
JPS6344764B2 (da) | 1988-09-06 |
DK160764C (da) | 1991-09-23 |
CA1136620A (en) | 1982-11-30 |
EP0014184B2 (en) | 1989-10-18 |
DK380280A (da) | 1980-09-05 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
DK160764B (da) | Analogifremgangsmaade til fremstilling af terapeutisk aktive heparinfragmenter | |
US4496550A (en) | Oligosaccharides having selective anticoagulation activity | |
KR910008329B1 (ko) | 해중합된 과황산염 헤파린의 제조방법 | |
US4981955A (en) | Depolymerization method of heparin | |
NO304991B1 (no) | FremgangsmÕte for fremstilling av blandinger av sulfaterte polysakkarider | |
JPH0739442B2 (ja) | 新規ヘパリン誘導体およびその製造法 | |
EP0337327A1 (en) | Process for the preparation of new oligosaccharide fractions by controlled chemical depolimerization of heparin | |
US6150342A (en) | Heparin derivatives for treatment of angina pectoris | |
JP4267916B2 (ja) | 多糖体k5から誘導された高度のアンチトロンビン活性を有するグリコサミノグリカン及びその製法 | |
WO1992002232A1 (en) | Heparin fragment showing complement inhibition activity | |
HU206222B (en) | Process for producing selectively o-acylated glycosaminoglycans and pharmaceutical compositions comprising same | |
AU2003240190B2 (en) | Epimerized derivatives of K5 polysaccharide with a very high degree of sulfation | |
EP1694714B1 (en) | Low molecular weight polysaccharides having antithrombotic activity | |
Vijayabaskar et al. | Low-molecular weight molluscan glycosaminoglycan from bivalve Katelysia opima (Gmelin) | |
RU2333222C2 (ru) | Эпимеризованные производные полисахарида к5 с высокой степенью сульфатирования | |
NO157580B (no) | Fremgangsmaate ved fremstilling av oligosakkarider med selektiv antikoaguleringsaktivitet. | |
JPH02124902A (ja) | 血液凝固抑制剤 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PUP | Patent expired |