DK153041B - Fremgangsmaade til adskillelse af acylerede phospholipider fra phosphatidylcholinprodukter indeholdende disse - Google Patents

Fremgangsmaade til adskillelse af acylerede phospholipider fra phosphatidylcholinprodukter indeholdende disse Download PDF

Info

Publication number
DK153041B
DK153041B DK551381A DK551381A DK153041B DK 153041 B DK153041 B DK 153041B DK 551381 A DK551381 A DK 551381A DK 551381 A DK551381 A DK 551381A DK 153041 B DK153041 B DK 153041B
Authority
DK
Denmark
Prior art keywords
phosphatidylcholine
separating
column
acylated
silica gel
Prior art date
Application number
DK551381A
Other languages
English (en)
Other versions
DK153041C (da
DK551381A (da
Inventor
Bernd-Rainer Guenther
Original Assignee
Nattermann A & Cie
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Nattermann A & Cie filed Critical Nattermann A & Cie
Publication of DK551381A publication Critical patent/DK551381A/da
Publication of DK153041B publication Critical patent/DK153041B/da
Application granted granted Critical
Publication of DK153041C publication Critical patent/DK153041C/da

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07FACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02Phosphorus compounds
    • C07F9/06Phosphorus compounds without P—C bonds
    • C07F9/08Esters of oxyacids of phosphorus
    • C07F9/09Esters of phosphoric acids
    • C07F9/10Phosphatides, e.g. lecithin
    • C07F9/103Extraction or purification by physical or chemical treatment of natural phosphatides; Preparation of compositions containing phosphatides of unknown structure
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23JPROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
    • A23J7/00Phosphatide compositions for foodstuffs, e.g. lecithin

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Fats And Perfumes (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Pyrane Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Description

>'*Γι a DK 153041 Β ' i
Den foreliggende opfindelse angår en særlig fremgangsmåde til adskillelse af acylerede phospholipider, navnlig acyleret phosphat-idylethanolamin og eventuelt olie fra phosphatidylcholinprodukter indeholdende disse ved kromatografi på silicagel under fremstilling af 05 meget rent phosphatidylcholin.
Der kendes phosphatidylcholinprodukter, som indeholder acylerede phospholipider, navnlig acetyleret phosphatidylethanolamin, hvilke kan anvendes som emulgatorer (DE-OS 1 492 974, DE-OS 1 543 937). Disse produkter fås ved behandling af naturlige phospha-10 tidblandinger, der indeholder phosphatidylethanolaminer, med fx.
eddikesyreanhydrid ved forhøjet temperatur (jvf. fx. DE-PS 1 812 204, DE-OS 2 147 327, US-PS 3 359 201, US-PS 3 704 254). Acyle-ringen kan imidlertid også foretages med andre acyleringsmidler.
Phosphatidylcholin anvendes i betragteligt omfang i medicinal-15 industrien. Til dette anvendelsesformål· kræves meget rent phosphatidylcholin. Specielt må phosphatidylcholinet være fri for de i naturlige phosphatidblandinger tilstedeværende mono-, di- og triglycerider (olie) og også for de acylerede phosphatidylethanolaminer eller tilstedeværende, ikke acyleret phosphatidylethanolamin.
20 Acylering af phosphatidylethanolaminholdige, naturlige phospha tidblandinger er allerede blevet anvendte til adskillelse af olie og phosphatidylethanolamin fra phosphatidylcholin (jvf. Fette, Seifen, Anstrichmittel 73 (1971), s. 643-651). Herved udnyttes det forhold, at phosphatidylcholin og phosphatidylethanolamin er uopløselige i 25 acetone, mens olie og acetyleret phosphatidylethanolamin er opløseligt i acetone, således at olie og phosphatidylethanolamin i den ace-tylerede form kan ekstraheres fra uopløseligt phosphatidylcholin.
Ulempen ved denne fremgangsmåde består imidlertid i, at der ved disse processer som bekendt dannes ringe mængder acetonebiproduk-30 ter som mesityloxid, diacetoneaikohoi, phoron o.a. af acetone, hvilke produkter er toxiske og derfor må fjernes ved anvendelse af de på denne måde udvundne phosphatidylcholiner i den farmaceutiske sektor, og fjernelsen af disse toxiske og p.g.a. deres karakteristiske lugt forstyrrende virkende stoffer er meget bekostelig og til dels 35 endda umulig. Desuden er acetoneekstraktionen forbundet med en stigning i indholdet af peroxider, hvis uheldige fysiologiske indflydelse er velkendt. En yderligere ulempe ved denne fremgangsmåde består i, at
DK 153041B
2 reaktionen ved acetylering med eddikesyreanhydrid ikke forløber fuldstændigt p.g.a. phosphatidylethanolaminens tvitternatur og den ved reaktionen dannede eddikesyre, som under saltdannelse omdanner aminogruppen til ammoniumgruppen, mens den til sikring af 05 fuldstændig acetylering som proton acceptor tilsatte tertiære amin ikke er fysiologisk uskadelig. Desuden er også denne fremgangsmåde til adskillelse af phosphatidylcholinledsagestofferne meget bekostelig.
Den foreliggende opfindelse er baseret pi den opgave at tilvejebringe en forenklet fremgangsmåde til adskillelse af acetylerede 10 phospholipider, såsom acyleret phosphatidylethanolamin og eventuelt tilstedeværende uacyleret phosphatidylethanolamin og/eller olie fra phosphatidylcholinprodukter indeholdende disse under fremstilling af meget rent phosphatidylcholin.
Fremgangsmåden ifølge opfindelsen til adskillelse af acylerede 15 phospholipider og eventuelt tilstedeværende uacylerede phospholipider og/eller olie fra phosphatidylcholinprodukter indeholdende disse er ejendommelig ved, at man under fraskillelse af eventuelt tilstedeværende uopløselige bestanddele opløser phosphatidylcholinproduktet i en C.j_4 lavere alkanol, der kan indeholde op til 20 vol-% 20 vand, eller i en sådan blanding af flere lavere al kanoler, ved en forhøjet temperatur i området fra 60-90°C kommer denne opløsning på en søjle af silicagel, ved denne temperatur eluerer søjlen med en C^_4 lavere alkanol, der eventuelt indeholder indtil 20 vol-% vand, eller en sådan blanding af flere lavere al kanoler, og 25 derved opsamler et forløb med det acylerede phosphatidyllipid og eventuelt tilstedeværende uacylerede phospholipider og/eller olie, som skal fraskilles, og adskilt herfra restløbet, som indeholder det rene phosphatidylcholin, og adskiller opløsningsmidlet fra restløbet på sædvanlig måde.
30 Tilsætningen til silicagelsøjlen og elueringen af denne gennem føres fortrinsvis ved en temperatur fra 60 til 70°C. Som eluerings-middel foretrækkes det at anvende det benyttede opløsningsmiddel, hvilket gør fremgangsmåden særlig enkelt. Som lavere alkanol foretrækkes ethanol.
35 Mængden af forløbet afhænger af det anvendte phosphatidyl - cholinprodukt. Ved simple analytiske metoder lader det sig fastslå, fra hvilket tidspunkt eluatet er fri for phosphatidylcholinets led-
DK 153041B
3 sageprodukter, som skal fraskilles, og praktisk taget kun indeholder phosphatidylcholin. Erfaringsmæssigt udgør forløbet ca. 20 til 25% af eluatets samlede volumen. Om ønsket kan opløsningsmidlet også adskilles fra forløbet, og det således opnåede produkt eller forløbet 05 inklusive opløsningsmidlet videreforarbejdes.
Som silicagel kan der anvendes for kromatografi sædvanlige produkter af forskellig kornstørrelse eller også presset silicagel, som kan være aktiveret eller desaktiveret. Der anvendes fortrinsvis neutrale silicagelprodukter.
TO Fremgangsmåden ifølge opfindelsen kan gennemføres ved normal tryk eller også ved overtryk. En ganske særlig fordel ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen består i, at man stadig kan genanvende silicagelen efter udført kromatografi. Samtlige forureninger hhv. ledsagestoffer, der skal fraskilles, opfanges i forløbet, og efter 15 hovedløbet bliver der kun en ringe restbelægning af phosphatidylcholin tilbage.
En yderligere fordel ved silicagelen ligger i den meget høje belastning, dette sorptionsmiddel kan udsættes for. Således adskilles der ca. 60 dele faststof fra det alkoholopløselige udgangsprodukt 20 ved en søjlekromatografisk adskillelse med 100 dele silicagel.
Endelig har fremgangsmåden ifølge opfindelsen den fordel, at der også opnås meget rent phosphatidylcholin, når ikke hele den samlede mængde phosphatidylethanolamin er blevet acyleret ved acy-leringen og/eller det ved acyleringen opnåede produkt endnu inde-25 holder mono-, di- og/eller triglycerider (olie). Også disse ledsagestoffer adskilles helt fra phosphatidylcholinet ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen og forefindes i forløbet uden forlængelse af dette.
Eksempler 30
Analysemetode
Phosphatiderne analyseredes ved hjælp af tyndtlagskromatogra-fi. Olieindholdet blev sat lig med det dialyserbare. Vandet blev bestemt efter Karl Fischer og restethanolindholdet ved gaskromatografi.
35 Søjlekromatografi
Der anvendtes en doppeltkappekromatografisøjle (indvendig diameter 4,5 cm, højde 37 cm). Før søjlen var der tilsluttet en varme-
DK 153041B
4 veksler for at sikre en ensartet søjle- og tilsætningstemperatur. Søjlen fyldtes med en opslæmning af 200 g silicagel (Merck) i det til enhver tid angivne opløsningsmiddel. Efter udført kromatografi kan silicagelen anvendes igen.
05
Udgangsmateriale
Som udgangsmateriale anvendtes et sojaråphosphatid med 20% PC, 14% PE og 30% olie.
10 Eksempel 1 400 g sojaråphosphatid røres sammen med 24 g eddikesyreanhy-drid i 1 time ved 50°C. De flygtige bestanddele afdestilleres så i vakuum i en rotationsfordamper. Remanensen ekstraheres ved 50°C med 800 g 95 voi-%?g ethanol. Blandingen afkøles til stuetemperatur, 15 og den klare ethanoliske øvre fase fraskilles. Ethanolen fradestille-res i vakuum. Remanensen (92 g) analyseres.
Phosphatidylcholin (PC) 40 %
Phosphatidylethanolamin (PE) 1 % 20 N-acetyl-PE 12 %
Olie 20 %
Eksempel 2
Der gennemføres en søjlekromatografi ved 65°C.
25 Søjlepåfyldning: 90 g fast stof fra eksempel 1 i 810 g 95 vol-%ig ethanol
Elueringsmiddel: 95 vol-%ig ethanol til 4 I eluat 30 Efter et forløb på 1,4 I opsamles ialt 2,6 I restløb. Restløbet inddampes og analyseres.
Faststof udbytte 19 % d.Th.
PC-indhold 93 % 35 PE-indhold <1 % N-acetyl-PE-indhold <1 %
Olie-indhold <1 % PC-udbytte i forhold til udaanasfaststof 44 % d.Th.

Claims (4)

1. Fremgangsmåde til adskillelse af acylerede phospholipider fra phosphatidylcholinprodukter indeholdende disse, KENDETEGNET ved, at man under fraskillelse af eventuelt tilstedeværende uopløselige 05 bestanddele opløser phosphatidylcholinproduktet i en C^_4 lavere alkanol, der kan indeholde op til 20 vol-% vand, eller i en sådan blanding af flere ^ lavere alkanoler, ved en forhøjet temperatur i området fra 60-90°C kommer denne opløsning på en søjle af silica-gel, ved denne temperatur eluerer søjlen med en lavere alka- 10 nol, der eventuelt indeholder indtil 20 vol-% vand, eller en sådan blanding af flere lavere alkanoler, og derved opsamler et for løb med produkterne, som skal fraskilles, og adskilt herfra restløbet, som indeholder det rene phosphatidylcholin, og adskiller opløsningsmidlet fra restløbet på sædvanlig måde.
2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, KENDETEGNET ved, at til sætningen af opløsningen af phosphatidylcholinproduktet, som skal renses, til silicagelsøjlen og elueringen af denne gennemføres ved en temperatur i området fra 60-70°C.
3. Fremgangsmåde ifølge krav 1 eller 2, KENDETEGNET ved, 20 at man anvender samme opløsningsmiddel til opløsning af phosphatidylcholinproduktet, som skal renses, og til elueringen.
4. Fremgangsmåde ifølge krav 1-3, KENDETEGNET ved, at man som C-|_4 lavere alkanol anvender ethanol. 25 30 35
DK551381A 1980-12-13 1981-12-11 Fremgangsmaade til adskillelse af acylerede phospholipider fra phosphatidylcholinprodukter indeholdende disse DK153041C (da)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE3047012 1980-12-13
DE19803047012 DE3047012A1 (de) 1980-12-13 1980-12-13 Verfahren zur abtrennung von acylierten phospholipiden aus diese enthaltenden phosphatidylcholin-produkten

Publications (3)

Publication Number Publication Date
DK551381A DK551381A (da) 1982-06-14
DK153041B true DK153041B (da) 1988-06-13
DK153041C DK153041C (da) 1988-11-07

Family

ID=6119082

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DK551381A DK153041C (da) 1980-12-13 1981-12-11 Fremgangsmaade til adskillelse af acylerede phospholipider fra phosphatidylcholinprodukter indeholdende disse

Country Status (15)

Country Link
US (1) US4443378A (da)
EP (1) EP0054768B1 (da)
JP (1) JPS57123195A (da)
AT (1) ATE12163T1 (da)
BR (1) BR8108064A (da)
CA (1) CA1164477A (da)
DE (1) DE3047012A1 (da)
DK (1) DK153041C (da)
ES (1) ES507888A0 (da)
FI (1) FI68159C (da)
GR (1) GR76943B (da)
HU (1) HU195827B (da)
IE (1) IE52381B1 (da)
PL (1) PL130573B1 (da)
ZA (1) ZA818408B (da)

Families Citing this family (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3218028A1 (de) * 1982-05-13 1983-11-17 A. Nattermann & Cie GmbH, 5000 Köln Blattduengemittel
DE3346526C2 (de) * 1983-12-22 1986-12-11 A. Nattermann & Cie GmbH, 5000 Köln Pharmazeutisches Präparat zur therapeutischen Behandlung von rheumatischen Erkrankungen
DE3346525A1 (de) * 1983-12-22 1985-07-04 A. Nattermann & Cie GmbH, 5000 Köln Pharmazeutische zubereitung mit speziellen 1,2-diacyl-glycero-3-phosphocholinen zur behandlung von erkrankungen im magen-darmbereich
DE3445950A1 (de) * 1984-12-17 1986-06-19 A. Nattermann & Cie GmbH, 5000 Köln Verfahren zur isolierung von lysophosphatidylcholin-freiem phosphatidylcholin aus ei-pulver
DE3445949A1 (de) * 1984-12-17 1986-06-19 A. Nattermann & Cie GmbH, 5000 Köln Verfahren zur isolierung eines begleitphospholipid-freien phosphatidylcholins
US5176935A (en) * 1986-05-16 1993-01-05 Vereinigte Kunstmuhlen Ag Baking agent for breakfast roll doughs
US5183680A (en) * 1986-05-16 1993-02-02 A. Nattermann & Cie. Gmbh Corporation Of The Federal Republic Of Germany Baking agent for leavened dough
JP2793317B2 (ja) * 1990-01-31 1998-09-03 株式会社ワイエムシィ ホスファチジルコリン或いはホスファチジルエタノールアミンの分離方法
US5120561A (en) * 1991-04-25 1992-06-09 American Lecithin Company Food composition and method
US10561674B2 (en) 2012-12-02 2020-02-18 Lipogen Ltd. Processes for the preparation of phospholipid-enriched dairy products as neutraceuticals for the formulation of functional foods
US9353137B2 (en) 2014-02-07 2016-05-31 Ghassem Amoabediny Method for separation and purification of phosphatidylcholine employing magnetic nanoparticles and compositions so produced
CN114403224A (zh) * 2021-12-20 2022-04-29 蚌埠市和平乳业有限责任公司 一种高稳定性调制乳及其制备方法

Family Cites Families (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB860888A (en) * 1956-04-30 1961-02-15 Upjohn Co Soya phosphatides and therapeutic compositions containing them
US3031478A (en) * 1957-07-09 1962-04-24 Nattermann A & Cie Process for the production of natural phospholipids and substances produced thereby
US3359201A (en) * 1962-08-13 1967-12-19 Eichberg Joseph Lecithin product and method
DE1492974A1 (de) * 1965-07-29 1969-03-06 Unilever Nv Verfahren zur Herstellung eines als Emulgator fuer OEl-in-Wasser-Emulsionen besonders geeigneten Pflanzenphosphatids
DE1543937C3 (de) * 1966-01-14 1982-12-09 Unilever N.V., 3000 Rotterdam Verwendung modifizierter kephalinhaltiger Phosphatidgemische als Emulgatoren für O/W-Emulsionen und Verfahren zur Herstellung solcher Emulgatoren
GB1217846A (en) * 1967-12-01 1970-12-31 Unilever Ltd Process for separating phosphatides
US3704254A (en) * 1968-11-27 1972-11-28 Lever Brothers Ltd Process for separating phosphatides
GB1350390A (en) * 1970-09-23 1974-04-18 Unilever Ltd Phosphatide separation
DE2345059C3 (de) * 1973-09-06 1982-05-13 Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V., 3400 Göttingen 1,2-Diacylglycerin-3-phosphoryl a) äthanolamin b) N-methyläthanolamin c) N,N-dimethyläthanolamin d) cholin und Verfahren zu deren Herstellung
US4163748A (en) * 1973-09-06 1979-08-07 Max-Planck-Gesellschaft Zur Forderung Der Wissenschaften E.V. Propane-1,3-diol phosphatides and method of preparing the same
DE2461798A1 (de) * 1974-01-12 1975-07-17 Dainippon Pharmaceutical Co Neue alkylphosphorylamine, verfahren zu deren herstellung und diese enthaltende pharmazeutische praeparate
JPS5191213A (en) * 1975-02-04 1976-08-10 Jiashiru ll3** guriserohosuhorirukorinruino seizoho
US4086257A (en) * 1976-10-12 1978-04-25 Sears Barry D Phosphatidyl quaternary ammonium compounds
JPS5562010A (en) * 1978-10-31 1980-05-10 Ajinomoto Co Inc Fat emulsion for intravenous injection
DE2915614A1 (de) * 1979-04-18 1980-10-30 Guenter Dr Heidemann Verfahren zur gewinnung von reinen phosphatiden

Also Published As

Publication number Publication date
IE52381B1 (en) 1987-10-14
PL130573B1 (en) 1984-08-31
PL234218A1 (da) 1982-08-02
ES8207186A1 (es) 1982-09-01
BR8108064A (pt) 1982-09-21
JPS57123195A (en) 1982-07-31
FI68159C (fi) 1985-08-12
DE3047012C2 (da) 1989-03-02
ZA818408B (en) 1982-10-27
US4443378A (en) 1984-04-17
DE3047012A1 (de) 1982-07-22
EP0054768A2 (de) 1982-06-30
DK153041C (da) 1988-11-07
JPH0244317B2 (da) 1990-10-03
CA1164477A (en) 1984-03-27
EP0054768B1 (de) 1985-03-20
FI813929L (fi) 1982-06-14
DK551381A (da) 1982-06-14
ES507888A0 (es) 1982-09-01
FI68159B (fi) 1985-04-30
IE812832L (en) 1982-06-13
GR76943B (da) 1984-09-04
ATE12163T1 (de) 1985-04-15
HU195827B (en) 1988-07-28
EP0054768A3 (en) 1982-08-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
FI68158C (fi) Foerfarande foer avskiljning av olja och/eller fosfatidyletanolamin fraon alkoholloesliga fosfatidylkolinprodukter innehaollande dessa
Rouser et al. The separation of phosphatidyl ethanolamine and phosphatidyl serine by column chromatography
Broekhuyse Quantitative two-dimensional thin-layer chromatography of blood phospholipids
DK155490B (da) Fremgangsmaade til adskillelse af olie og/eller phosphatidylethanolamin fra alkoholoploeselige phosphatidylcholinprodukter indeholdende disse
DK153041B (da) Fremgangsmaade til adskillelse af acylerede phospholipider fra phosphatidylcholinprodukter indeholdende disse
Gjone et al. The isolation and identification of lysolecithin from lipid extracts of normal human serum
DK166363B (da) Fremgangsmaade til isolering af lysophospholipidfrit phosphatidylcholin fra aeggepulver
CA2155950A1 (en) Method of extracting an enriched fraction of sphingomyelin from fat concentrates
Kögl et al. Metabolism and functions of phosphatides: The preparation of a series of L‐α‐lecithins
Ramesh et al. Selective extraction of phospholipids from egg yolk
DK166364B (da) Fremgangsmaade til isolering af ledsagephospholipidfrit phosphatidylcholin fra en vegetabilsk lipidblanding
Zvezdina et al. Effect of lysolecithin and lecithin of blood serum on the sensitivity of heart to acetylcholine
Talipova Lipids of Helianthus tuberosus
Kiselev Preparative isolation of polyphosphoinositide fractions from ox brain
US3840592A (en) Separation of dioxin and 2,4,5-t from dioxin and 2,4,5-t-contaminated silvex
Chernenko et al. Lipids of Eminium Lehmannii Leaves and Tubers.
PL183194B1 (pl) Sposób oczyszczania surowej lecytyny otrzymywanej z żółtek jaj, zwłaszcza kurzych

Legal Events

Date Code Title Description
PUP Patent expired